Trace Nutrients Research 36 : 21−28（2019）

原著

カキ肉エキスの給餌がマウスの糞中細菌叢および短鎖脂肪酸組成に及ぼす影響
中 村 潤 平1），池 田 祐 生1），細 見 亮 太†, 1），石 田 達 也2），
松 井 博 之2），松 田 芳 和2），下 埜 敬 紀3），神 田 靖 士3），
西 山 利 正3），吉 田 宗 弘1），福 永 健 治1）（1）関西大学化学生命工学部栄養化学・食品化学研究室＊，2）日本クリニック株式会社中央研究所＊＊，
3）

関西医科大学医学部衛生・公衆衛生学講座＊＊＊）（受付 2019 年 8 月 28 日，受理 2019 年 10 月 11 日）

Effects of Dietary Oyster-Extract on the Composition of the Microbiota andShort-Chain Fatty Acids in the Feces of Mice
Junpei Nakamura1）, Yuki Ikeda1), Ryota Hosomi1）, Tatsuya Ishida2）, Hiroyuki Matsui2）,
Yoshikazu Matsuda2）, Takaki Shimono3）, Seiji Kanda3）, Toshimasa Nishiyama3）,
Munehiro Yoshida1）, Kenji Fukunaga1）
1）
Department of Life Science and Biotechnology, Kansai University
2）
Central Research Institute, Japan Clinic Co., Ltd.
3）
Department of Public Health, Kansai Medical University

Summary
Oyster (Crassostrea gigas) extract (OE) contains many nutritional and functional components, including glycogen,taurine, and zinc. Our previous study showed that dietary OE increased the relative composition of Lactobacillus in
cecal contents of rats. However, it was not clear whether this increase in Lactobacillus following the addition of
dietary OE also occurs in mice. The present study demonstrated the effects of dietary OE on the composition of the
microbiota and short-chain fatty acids in the feces of mice. Male C57BL/6J mice were divided into four groups andfed an AIN-93G diet (LF diet), AIN-93G modified high-fat diet (HF diet), LF diet containing 5% (w/w) OE (LFOE
diet), and 5% (w/w) HF diet containing OE (HFOE diet) for 56 days. The composition of the fecal microbiota wascompared between groups following high-throughput 16S rRNA gene amplicon sequencing using the Ion PGM system.
The relative abundance of Lactobacillus in the feces of OE fed mice was significantly higher than in mice fed an
OE free diet. These results suggest that dietary OE increased the relative composition of Lactobacillus not only inrats but also in mice.

カキ（Crassostrea gigas）には，亜鉛，グリコーゲン，に対するカキ肉エキス摂取の有益な効果を報告している。

タウリンなどの様々な栄養・機能性成分が含まれている。

近年，宿主の健康と腸内細菌叢の密接な関係が次々に明

この栄養・機能性成分を抽出・濃縮したカキ肉エキスが健らかにされてきている。ヒトの消化管には 1013 個以上も

康食品の原料として用いられている。これまでにカキ肉エの多種多様な細菌が在住しており，複雑な微生物生態系をキス中の亜鉛の生体利用性に関する研究報告が数多くなさ形成している。これまで，腸内に存在する多くの嫌気性細

1-3）

れている

。また，カキ肉エキスの摂取による生体調節4）

機 能 に つ い て は， 血 小 板 凝 集 抑 制 効果 や 肝 臓 保 護 効

菌は培養することができなかったために，大半が機能未知であった。しかし，ゲノム分析技術の発展によって，16S

果5）が報告されている。また，われわれの研究グループも， リボソーム RNA（rRNA）系統解析やメタゲノム解析が薬物により惹起した大腸前癌病変6）と腎障害7）モデル動物
可能になったことで，著しい腸内細菌研究の進展が見られ

所在地：大阪府吹田市山手町3-3-35（〒564-8680）
所在地：京都市北区大将軍西町1（〒603-8331）＊＊＊所在地：大阪府枚方市新町2-5-1（〒573-1010）†
連絡先（Corresponding Author），Tel: 06-6368-1765, E-mail: hryotan@kansai-u.ac.jp＊＊＊― 21 ―

るようになった。腸内細菌の多様性の減少や偏った菌種の61.0 g/100 g， 粗 タ ン パ ク 質 28.1 g/100 g， 粗 脂 肪

異常な増加による腸内細菌叢の乱れ（dysbiosis）は，腸2.0 g/100 g，水分 3.9 g/100 g，灰分 15.4 g/100 g であった。

管免疫を起点とする恒常性維持システムに異常を起こし，また，カキ肉エキスには NaCl が 8.24 g/100 g 含まれてい8）

疾患の原因となる 。例えば，偏った食事や栄養は，腸内た。餌料は，AIN-93G 組成11）の NaCl 量を改変した低脂肪

細菌叢の変化を介して宿主の健康状態に影響を及ぼしてい餌料（LF，大豆油 7％，w/w）と，この LF 餌料を 20％る。 こ れ ま で に， 高 脂 肪 摂 取 に よ っ て， マ ウ ス の高脂肪（大豆油 7％＋ラード 13％，w/w）に改変した高Firmicutes 門の増加および Bacteroidetes 門の減少ととも

脂肪餌料（HF）を調製した。さらに，LF および HF 餌料に，腸内細菌叢の多様性が失われることが報告されていに 5％（w/w）カキ肉エキスを添加し，糖質，タンパク質，

9）る 。これまでに私たちは，カキ肉エキスの摂取には盲腸

脂肪および NaCl 量が LF または HF 群と同等になるよう

内 Lactobacillus 属の構成比率を増加させることを，高脂に LFOE および HFOE 餌料を調製した。各餌料の組成を，

10）

肪餌料を与えたラット試験によって観察している 。そこ

Table 1 に示した。

で本研究では，カキ肉エキスの給餌による Lactobacillus
属の構成比率の増加が，ラット以外の種，または低脂肪餌

2．動物実験

料の給餌においても同様に起きる現象であるのか明らかに

本実験は関西大学動物実験委員会の承認を受けて実施しすることを目的とし，カキ肉エキスを添加した 2 種の餌料た（ 承 認 番 号：1819）。 実 験 動 物 に は 4 週 齢 雄 性（低脂肪および高脂肪）餌料をマウスに給餌し，糞中細菌

C57BL/6J マウス（日本エスエルシー株式会社，静岡）を叢およびその代謝物である短鎖脂肪酸組成に及ぼす影響を用い，24 匹を 6 匹ずつ平均体重が同等になるように 4 群評価した。

に分けた。マウスは室温 22℃ ± 1℃，明暗 12 時間サイクル（8：00 〜 20：00）の条件下で飼育した。実験餌料およ

実験方法

び水は自由摂取とし，56 日間飼育した。飼育期間終了後，イソフルラン（共立製薬株式会社，東京）による深麻酔下1．餌料調製で下大静脈より採血し，肝臓，盲腸および白色脂肪組織

カキ肉エキスは，日本クリニック株式会社（京都）より（WAT）を採取した。血清は，血液を 2,000 × g，15 分間供与された。カキ肉エキスの一般成分組成は，炭水化物

遠心分離して得た。肝臓および盲腸は液体窒素にて急速凍

Table 1 Composition of experimental diets
LF
Dextrinized corn starch

LFOE

HF

HFOE

132

132

92.1

92.1

397.486366.486277.386

246.386

Sucrose

98.47

100

98.47

100

Cellulose

50

50

50

50

Casein

200

182.3

230

212.3

3

3

3

3

Choline bitartrate

2.5

2.5

2.5

2.5

AIN-93G mineral mixture

35

-

35

-

-

35

-

35

AIN-93 vitamin mixture

10

10

10

10

Soybean oil

70

68.7

70

68.7

Lard

-

-

130

130

Oyster-extract

-

50

-

50

NaCl

1.53

-

1.53

-

tert-Butylhydroquinone

0.014

0.014

0.014

0.014

Corn starchl-Cystine

NaCl-free AIN-93G mineral mixture†Oyster-extract was provided by Japan Clinic Co., Ltd. (Kyoto, Japan). The composition of oyster-extract was as follows (% w/w): carbohydrate, 49.1; protein, 28.1; fat, 2.0; moisture, 3.9; ash, 15.4; NaCl,
8.24.
AIN, American Institute of Nutrition; HF, high-fat; HFOE, high-fat diet containing oyster-extract; LF,
low-fat; LFOE, low-fat diet containing oyster-extract.
― 22 ―

結し，−80℃で保管した。また，解剖前日の 1 日分の糞を短鎖脂肪酸（SCFA）組成は，2- エチル酪酸を内部標準と採取し，臓器と同様の方法で凍結・保管した。

して，ガスクロマトグラフ（GC）を用いて分析した14）。
凍結乾燥した糞をミルで粉末化し，蒸留水を加え，十分に

3．16S リボソーム RNA アンプリコンシークエンス

ボルテックスした。次に，2- エチル酪酸，塩酸およびジ各 個 体 の 1 日 分 の 糞 か ら，QIAamp DNA Stool Mini

エチルエーテルをそれぞれ添加し，撹拌した。その後，遠Kit（Qiagen, Venlo, Netherlands） を 用 い て Total DNA

心分離（10 分，16,000 rpm，4℃）し，上清を回収し，ナを抽出した。抽出した Total DNA から細菌の同定を行う

イロンフィルター（0.45 µm）でろ過した。NukolTM キャ

ために，16S rRNA 遺伝子の V2-4-8，V3-6 および V7-9

ピ ラ リ ー カ ラ ム（30 m × 0.25 mm i.d. × 0.25 µm d.f.,

領 域 を，Ion 16S Metagenomics Kit（Thermo Fisher

Merck KGaA, Darmstadt, Germany）を備えた水素炎イ

Scientific, Massachusetts, USA）を用いて PCR 法によりオン化検出器 GC（GC-2014，株式会社島津製作所，京都）増幅させた。PCR 産物は AMPure XP ビーズ（Beckmanを用いて SCFA を分析した。カラムオーブン温度プログ

Coulter, California, USA）を用いて精製した。精製したラムは，初期温度は 40℃に設定し，その後，180℃に達す

PCR 産 物 は，Ion Plus Fragment Library kit お よ び Ion

るまで温度を 20℃/ 分上昇させ，180℃で 15 分間放置した。

Xpress Barcode Adaptors 1-16 kit（ と も に Thermo

キャリアガスはヘリウムで 1 mL/ 分の流量とした。各Fisher Scientific）を用いて，Ion PGM system での解析

SCFA 成分は Volatile Free Acid Mix certified referenceに必要なアダプター配列および個体識別のためのバーコー

material（Merck KGaA）を用いて同定した。

ド配列を付加させ，DNA ライブラリを作製した。再び
AMPure XP ビーズを用いて DNA ライブラリを精製し，5．統計処理次 い で 各 DNA ラ イ ブ ラ リ 濃 度 を バ イ オ ア ナ ラ イ ザ ー得られた測定値は平均値±標準誤差で示した。餌料中脂（Agilent 2100: Agilent Technologies, California, USA）に肪濃度および餌料中のカキ肉エキスの有無を因子として二より定量した。各 DNA ライブラリを 10 pM に希釈し，

元 配 置 分 散 分 析 を 行 っ た。 有 意 水 準 は P < 0.05 と し，

エマルジョン PCR およびエンリッチメント処理をそれぞ

0.05 ≤ P < 0.15 の場合は傾向があるとした。二元配置分散れ Ion OneTouch 2 と Ion OneTouch ES systems（ と も分析において，相互作用に有意差が認められた場合は，に Thermo Fisher Scientific） で 行 っ た。 調 製 し た 16S

Tukey’s multiple comparisons test に よ る 多 群 間 比 較 をrRNA 遺伝子フラグメントライブラリのシークエンス解析

行 っ た。 統 計 解 析 は GraphPad Prism ver. 7.0dに は，Ion PGM System，Ion PGM 400 sequencing re-（GraphPad Software, California, USA）を用いて行った。

agents，Ion 318 v2 chips お よ び Torrent Suit Software

結果と考察

ver.5.6（すべて Thermo Fisher Scientific）を用いた。
得 ら れ た 配 列 デ ー タ は，MicroSEQ 16S Reference
Library v2013.1（Thermo Fisher Scientific）とTable 2 に成長パラメーターおよび解剖時臓器重量を示Greengenes v13.5（The Greengenes Database

した。終体重および体重増加量において，餌料中脂肪濃度

Consortium, http://greengenes.secondgenome.com/） をが影響する傾向がみられた（それぞれ P = 0.135 および参る Ion Reporter Software 16S

P = 0.104）。餌料摂取量は，餌料中脂肪濃度の影響がみら

Metagenomics Workflow ver.5.10（Thermo Fisher

照

配

列

と

す

れた。体重増加量を餌料摂取量で除して算出した餌料効率

Scientific）を用いて解析した。Ion Reporter Software には，餌料中脂肪濃度の影響が認められた。初体重は，各群よって，各サンプルの門および属の分類階級で同定された間で有意差は見られなかった。一方，解剖時臓器重量にお細菌とそのリード数のデータを得た。得られたリード数をいて，肝臓重量は餌料中脂肪濃度およびカキ肉エキスの影用いて，各分類階級での細菌の構成比率を求めた。

響が認められた。精巣上体周囲 WAT 重量では，餌料中

レアファクション解析（chao1 推定量および simpson 指

脂肪濃度の影響が認められた。また，腎臓周囲 WAT 重数 ） は，QIIME を 用 い た Ion Reporter Software 16S

量 で は， 餌 料 中 脂 肪 濃 度 が 影 響 す る 傾 向 が み ら れ た

Metagenomics Workflow ver.5.10 により求めた。また，（P = 0.057）。腸間膜 WAT および鼠径部 WAT 重量には，各群の門および属レベルの構成比率をもとに，R12）を用い

各群間で有意な変化は見られなかった。本実験で用いたて階層的クラスタリングを行った。さらに，Linear dis-

C57BL/6J マウスに長期的に高脂肪餌料を給餌すると，低criminant analysis effect size（LEfSe）分析（http://hut-

脂肪餌料と比較して，体重が増加し，肥満が誘導されるこ13）
tenhower.sph.harvard.edu/galaxy/）
を 行 っ て， 各 群 のとが知られている15）。本実験において，高脂肪餌料給餌群

腸内細菌叢のバイオマーカーを調べた。

は，精巣上体周囲 WAT 重量の有意な増加，および終体
重と腎臓周囲 WAT 重量の増加傾向がみられたことから，

4．盲腸内容物の pH および糞中短鎖脂肪酸組成

若干肥満が誘導された状態であると判断した。また，カキ

盲腸内容物を蒸留水に懸濁し，pH メーター（F-21，株

肉エキスの給餌によって，体重 100 g あたりの肝臓重量の式会社堀場製作所，京都）を用いて pH を測定した。糞中有意な増大がみられた（P = 0.006）。ラットにカキ肉エキ― 23 ―

スを給餌した前報10）においても同様に，肝臓重量が増大

指数のレアファクション解析結果を示した。両指数においする傾向がみられたが，重量増加に関与すると考えられるて，各群間で有意な変化は見られなかった。そのため，餌

肝臓総脂質濃度には影響はみられなかった。今後，カキ肉料中脂肪濃度およびカキ肉エキスは，腸内細菌叢の多様性

エキスの給餌による齧歯類の肝臓重量増大の原因を明らかには影響を与えなかったと考えられる。さらに，両指数とにする必要がある。

もに 3 万リードまでで飽和に達し，実質的に十分なリード

糞より Total DNA を抽出し，これを鋳型に 16S rRNA数が解析に供されたと考えられる。Fig. 2 に門（A）およ

遺 伝 子 の 超 可 変 領 域 を PCR で 増 幅 さ せ，Ion PGM

び属（B）レベルの分類階級別の細菌叢の構成比率と階層

System でシークエンスした。その結果，各個体の試料か的クラスタリングを示した。門および属ともに，LF 群にら 457,437±33,647 リードの配列データが得られ，低品質おいて構成比率の高いものから示し，構成比率 0.5％未満のデータを除いた 349,163±25,547 リードの配列データをの細菌は Others にまとめた。門レベルの構成比率を見る

解析に用いた。また，各群の平均リード数には有意差はなと，Firmicutes，Bacteroidetes，Actinobacteria お よ び

かった。Fig. 1 に属レベルの Chao1 推定量および Simpson

Proteobacteria 門で 98％が構成されていた。クラスタリ

Table 2 Growth parameters and organ weights
GroupsTwo-way ANOVA (P value)
Diet
OE
Diet x OE

LF

LFOE

HF

HFOE

Initial body weight (g)15.3 ± 0.4

15.3 ± 0.3

15.3 ± 0.5

15.3 ± 0.3

0.961

0.961

Final body weight (g)28.9 ± 0.8

28.6 ± 0.8

30.1 ± 0.4

30.0 ± 1.1

0.135

0.788

Body weight gain (g/day)

0.24 ± 0.01

0.23 ± 0.01

0.26 ± 0.01

0.26 ± 0.02

0.104

0.791

Food intake (g/day)

3.00 ± 0.06

2.94 ± 0.06

2.86 ± 0.10

2.72 ± 0.08

0.030

0.211

0.987
0.929
0.917
0.630

0.080 ± 0.004

0.079 ± 0.003

0.091 ± 0.003

0.094 ± 0.005

0.002

0.718

0.617

Liver

4.25 ± 0.10

4.56 ± 0.14

3.73 ± 0.17

4.16 ± 0.04

0.001

0.006

Epididymal WAT

2.55 ± 0.23

2.76 ± 0.23

3.59 ± 0.20

3.52 ± 0.37

0.002

0.796

0.611
0.607

Perirenal andretroperitoneal WAT

1.08 ± 0.13

1.14 ± 0.14

1.47 ± 0.10

1.28 ± 0.15

0.057

0.648

0.366

Mesentery WAT

1.82 ± 0.09

1.80 ± 0.09

1.88 ± 0.12

1.95 ± 0.15

0.348

0.828

Inguinal WAT

0.82 ± 0.08

0.85 ± 0.17

1.07 ± 0.10

0.74 ± 0.12

0.535

0.233

0.696
0.152

Growth parameters†Food efficiency (g/kcal)
Organ weights (g/100g BW)

Data represent means ± SEM. Values in the same row not sharing a common superscript are significantly different at p < 0.05 using
Tukey’s multiple comparison test.
†Food efficiency (g/g) = BW gain (g/day) / food intake (g/day).
ANOVA, analysis of variance; BW, body weight; HF, high-fat; HFOE, high-fat diet containing oyster-extract; LF, low-fat; LFOE, low-fat
diet containing oyster-extract; OE, oyster-extract, WAT, white adipose tissue.

(A)

LF
LFOE

1.0

HF
HFOE

Rarefaction measure: simpson

30
20
10

Simpson
LF
LFOE

HF
HFOE

0.6
0.4
0.2

00
15
00

00
10
00

50
0

00
15
00

00
10
00

00
50
0

00

0.0

0
0

0.8

0

Rarefaction measure: chao1

40

(B)

Chao1

Sequences per Sample

Sequences per Sample

Fig. 1 Bacterial rarefaction curves based on Chao 1 (A) and Simpson (B) in genus level
The data are shown as mean value ± SEM.
HF, high-fat; HFOE, high-fat diet containing oyster-extract; LF, low-fat; LFOE, low-fat dietcontaining oyster-extract.
― 24 ―

Fig. 2 Relative abundance of fecal microbiota on the phylum (A) and genus (B) levels
Graphs are stacked from higher relative abundance in LF groups, and those with less than
0.5% of the relative abundance are summarized as Others.
HF, high-fat; HFOE, high-fat diet containing oyster-extract; LF, low-fat; LFOE, low-fat dietcontaining oyster-extract.

Firmicutes

60
40
20
0

(B)

LF LFOE HF HFOE

40
30
20
10
0

Two-way ANOVA
Diet
OE
Diet x OE
0.218
0.378
0.207

50
40
30
20

b

10
0

P value

LF LFOE HF HFOE

10
50

LF LFOE HF HFOE

a

30
20

ab

ab

b
b

10
0

LF LFOE HF HFOE

Bacteroides

Two-way ANOVA
Diet
OE
Diet x OE
P value < 0.001
0.001
0.319

30
20
10
0

b

LF LFOE HF HFOE

Lactobacillus

Relative abundance (%)

Relative abundance (%)

15

Two-way ANOVA
Diet
OE
Diet x OE
0.013
0.628
0.013

40

Lactococcus

20

LF LFOE HF HFOE

Biﬁdobacterium

Clostridium

P value

Relative abundance (%)

Two-way ANOVA
Diet
OE
Diet x OE
P value < 0.001
0.002
0.132

Relative abundance (%)

80

Bacteroidetes

Relative abundance (%)

Relative abundance (%)

P value

Two-way ANOVA
Diet
OE
Diet x OE
0.001
0.064
0.188

Relative abundance (%)

(A)

20
15
10
5
0

LF LFOE HF HFOE

Fig. 3 Relative abundance of predominant microbes on the genus level
Data represent mean ± SEM. Different letters indicate significant differences at P < 0.05 using
Tukey’s multiple comparison test.
ANOVA, analysis of variance; BW, body weight; HF, high-fat; HFOE, high-fat diet containing
oyster-extract; LF, low-fat; LFOE, low-fat diet containing oyster-extract; OE, oyster-extract,― 25 ―

ング解析の結果，LF 群および LFOE 群，また HE 群およめ属レベルの構成比率では，低脂肪餌料にカキ肉エキスを

び HFOE 群が同一のクラスターとなり，餌料中脂肪濃度

添加することによって，高脂肪餌料給餌群でみられる細菌の違いによって分類された。これまでに高脂肪餌料をマウ

叢 の 構 成 に 近 づ く 可 能 性 が 示 さ れ た。Fig. 3B にスに給餌すると，Firmicutes 門に分類される細菌が増加

Clostridium，Bifidobacterium，Bacteroides，Lactococcus

し，Bacteroidetes 門に分類される細菌が減少することがおよび Lactobacillus 属の構成比率を示した。Clostridium

16）

報 告 さ れ て いる 。Fig. 3A に Firmicutes 門 お よ び

属 は 各 群 間 で 有 意 な 変 化 は み ら れ な か っ た。

Bacteroidetes 門の構成比率を示した。Firmicutes 門の構

Bifidobacterium 属は，餌料中脂肪濃度の影響が認められ，成比率は，餌料中脂肪濃度の影響が認められた。一方，

LF 群と比較して，HF 群で有意な増加が確認された。

Bacteroidetes 門の構成比率は，餌料中脂肪濃度およびカ

Bacteroides 属は，餌料中脂肪濃度およびカキ肉エキスの

キ肉エキスの影響が認められた。これまでの報告16）と同影響が認められた。Lactococcus 属は，カキ肉エキスの影

様 に， 本 実 験 に お い て も 高 脂 肪 餌 料 の 給 餌 に よ っ て

響が認められた。また，Lactobacillus 属は，カキ肉エキ

Firmicutes 門の構成比率が増加し，Bacteroidetes 門の構スの影響が認められた。これまでに私たちはラットにカキ成比率が減少する結果が得られた。一方，属における構成

肉エキスを給餌すると，盲腸内の Lactobacillus 属の構成

比 率 を み る と，Clostridium，Bifidobacterium，比率が上昇することを報告している10）。そのためカキ肉エ

Bacteroides，Lactococcus お よ び Lactobacillus 属 で 90 ％キ ス の 給 餌 は， ラ ッ ト だ け で な く マ ウ ス に お い て も以上が構成されていた（Fig. 2B）。階層的クラスタリング

Lactobacillus 属の構成比率を増加させると考えられる。

解析の結果，LFOE 群が HF 群と同一のクラスターに分類

各群に特徴的な細菌を同定するため，LEfSe 解析を行っされ，LF 群とは異なるクラスターに分類された。そのたた（Fig. 4）。その結果，計 33 の系統が同定された。LF

Fig. 4 Comparisons of gut bacteria using linear discriminant analysis effect size (LEfSe)
HF, high-fat; HFOE, high-fat diet containing oyster-extract; LF, low-fat; LFOE, low-fat dietcontaining oyster-extract.
― 26 ―

(A)

(B)

2000

µg/dayµg/day

3000

1000
0

Propionic
acid

3000
2000
1000

Two-way ANOVA:
Diet

Aceticacid

4000

Butyric
acid

LF

0

Others

LFOE

HF

Total SCFA

HFOE

Fig. 5 Fecal short-chain fatty acid (SCFA) composition(A) SCFA composition in feces, (B) Total SCFA content in feces.
Data represent mean ± SEM. Different letters indicate significant differences at P < 0.05 using
Tukey’s multiple comparison test.
ANOVA, analysis of variance; HF, high-fat; HFOE, high-fat diet containing oyster-extract; LF,
low-fat; LFOE, low-fat diet containing oyster-extract; SCFA, Short-chain fatty acid.

群 で は，Bacteroides，Lactococcus，Subdoligranulum，

含まれているタウリンは，腸内細菌叢の多様性やその構成

Alistipes，Ruminococcus お よ び Akkermansia，LFOE 群

比率に影響を与えないことが，培養系ヒト腸内細菌叢モデ

では Lactobaccilus および Stomatobaculum，HF 群では，

ルを利用した in vitro 試験において報告されている20）。そBifidobacterium，Parvibacter お よ び Dorea，HFOE 群 でのため，カキ肉エキス中のグリコーゲンによって，糞中は Lachnoclostridium が属レベルとして同定された。

Lactobacillus の構成比率が増加したと考えられる。
以上のことから，カキ肉エキスの給餌は，前報10）で報Fig. 5 に糞へ排泄された短鎖脂肪酸量を示した。糞プロ

ピオン酸量において，餌料中脂肪濃度の影響が認められた。 告 し た ラ ッ ト だ け で な く， マ ウ ス に お い て もプ ロ ピ オ ン 酸 は， 主 に Clostridia，Desulfovibrio，Lactobacillus 属の構成比率を増加させた。さらにカキ肉

Propionibacterium や Bacteroides によって生成されるこエキスの給餌は，高脂肪食条件だけでなく，低脂肪食給餌とが知られている17）。低脂肪群（LF および LFOE 群）でにおいても Lactobacillus 属の構成比率を増加させる効果

Bacteroides の構成比率が増加していた（Fig. 3B）。一方，を有することが示唆された。今後，カキ肉エキス給餌によDesulfovibrio および Propionibacterium は本実験では検出る Lactobacillus 属の構成比率の増加が宿主の健康状態にさ れ ず，Clostridia は 各群 間 で 変 化 は 見 ら れ な か っ た

及ぼす影響について明らかにしていく必要があると考えら（data not shown）。そのため，低脂肪群で観察された糞プれる。

ロピオン酸の増加は，Bacteroides の構成比率の増加が関謝係していると考えられる。腸内細菌により生成された辞

SCFA は，大腸の粘膜細胞により腸内容物中の水分吸収の際のエネルギー源として利用されることが明らかにされており，この吸収作用のため，盲腸内容物と糞の SCFA

本研究をおこなうにあたり，動物実験に協力してくれた
関西大学化学生命工学部の永井千尋氏に感謝致します。

量に差が出ることが報告されている。一方で，盲腸内容物

参考文献と糞の細菌叢の構成はほとんど同じことが報告されてい18）

る 。そのため，腸内細菌叢の違いによる SCFA 組成の変化を検証するためには，糞 SCFA のみではなく，盲腸

1）松田芳和（2008）牡蠣亜鉛の性質とその栄養有効性．

内容物の SCFA 組成も合わせて測定する必要があると考

ミネラルの科学と最新応用技術（糸川嘉則）．シーエ

えられる。一方，糞総 SCFA，酢酸，酪酸，Others（イムシー出版，東京：pp. 124-135．

ソ酪酸，吉草酸およびイソ吉草酸の総量）に各群間に有意

2）吉田宗弘，平田登，木谷祥子，松田芳和（2002）牡蠣

な差はみられなかった。また，盲腸内容物の pH にも各群から調製した亜鉛濃縮物の性質．微量栄養素 研究間で有意な変化はみられなかった（data not shown）。

19：43-46.

Lactobacillus の構成比率の上昇といった腸内細菌叢の3）辻貴之，菊池祐子，中塚千晶，木谷祥子，福永健治，

変化を引き起こしたカキ肉エキス中の成分として，カキ肉

西山利正，松田芳和，吉田宗弘（2001）牡蠣の酸可溶

エキスの約半分を占めるグリコーゲンが第一に考えられる。

性画分に含有される亜鉛の栄養有効性．微量栄養素研

これまでに，グリコーゲンをラットに給餌すると，糞の究

18：63-66.

Bifidobacterium や Lactobacillus といった有用菌が顕著に

4）久保道徳，松田秀秋，田村崇子，高津政雄（1980）バ

増加することが報告されている19）。一方，カキ肉エキスにランスター［カキ Crassostrea gigas（THUNBERG）― 27 ―

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