No.118

高性能 AFC カラム TSKgel® FcR-IIIA-NPR について
─目次─ページ
1. はじめに1

2. 基本的性質

12 - 1. 充塡剤の性質

12 - 2. 標準的分離条件

12 - 3. 溶離液組成の影響

32 - 4. 試料負荷量の影響

42 - 5. 耐久性

42 - 6. 洗浄法

52 - 7. 充塡剤のロット間差

52 - 8. 保存安定性63. 応用例

63 - 1. 抗体の測定例

63 - 2. 抗体糖鎖構造と保持力の関係

73 - 3. 細胞培養液中の抗体測定

74. 使用上の注意点

8

5. おわりに

8

東ソー株式会社

1．はじめに

2．基本的性質
2-1．充塡剤の性質

ガンや自己免疫疾患などの治療薬として、抗体医薬品の需要が増大しています。それに伴い、世界各地で抗体

TSKgel FcR-IIIA-NPR は、非多孔性の親水性ポリマー

医薬品の生産設備の新設や増強が行われています。抗体

基材に、遺伝子組換え FcγRIIIA をリガンドとして導入

医薬品は主に動物細胞培養により生産されますが、近年のした充塡剤を PEEK カラムに充塡した AFC カラムです。

研究で Fc 領域に存在する糖鎖の構造が薬効に大きく影響

本カラムのリガンドには、天然型のアミノ酸配列に対しすることが判明してきました。これは、糖鎖構造の違いがて複数のアミノ酸置換を施して物理化学的安定性を向上

免疫反応を担うエフェクター細胞上の Fc 受容体（Fc レさせた分子を設計後、遺伝子組換え大腸菌により生産しセプター）への結合性と、それに伴う免疫反応の惹起にた FcγRIIIA を使用しています。

影響するためと理解されています。そのため、抗体医薬品

FcγRIIIA は抗体 Fc のヒンジ領域に特異的に吸着すを生産する際には糖鎖構造の厳密な制御が求められているため、夾雑物を含む細胞培養上清などを直接試料とします。今回、Fc 受容体の一つである FcγRIIIA への親和て抗体のみを吸着、分離することが可能です。また、非性に基づく分離が可能となる高性能アフィニティークロマ

多孔性の基材を用いることで、分離性能が大幅に向上し

トグラフィー（AFC）カラム TSKgel FcR-IIIA-NPR を商ています。
表 1 に本カラムの仕様を示します。

品化いたしました。本稿では、TSKgel FcR-IIIA-NPR の基本的性質と応用例を紹介いたします。
表 1 TSKgel FcR-IIIA-NPR カラムの仕様品
充塡剤カラム

使用条件

番0023513

基材

非多孔性の親水性ポリマー

平均粒子径5 μm

リガンド

改変型ヒト FcγRIIIA（大腸菌生産）

サイズ

4.6 mm I.D. × 7.5 cm

材質PEEK

出荷溶媒0.025 % ProClin® 300 + 0.65 mmol/L クエン酸 + 9.35 mmol/L クエン酸三ナトリウム（pH 6.5）

pH 範囲

pH 4.0 ～ pH 8.0（短期）、pH 5.0 ～ pH 7.0（長期）温度

15 ℃ ～ 25 ℃

適正流速

1.0 mL/min

最大圧力損失9.0 MPa

保管条件

出荷溶媒に置換し、冷蔵（2 ℃ ～ 8 ℃）
"ProClin" は Rohm and Haas Company の登録商標です。

2-2．標準的分離条件

ナトリウム緩衝液（pH 4.5）が標準的な溶離液となりま

多くの抗体は中性付近（pH 6.0 ～ 7.5）で FcγRIIIA にす。溶離液 A で予めカラムを平衡化後（カラム容量の吸 着し、酸 性 条 件 下（pH 4.0 ～ 5.0）で溶出するため、5 倍以上送液）、試料を注入して抗体を結合させます。

TSKgel FcR-IIIA-NPR による抗体の分離は、pH の異なる

その後、リニアグラジエントにて溶離液 B に切り替え

2 液によるpHグラジエント溶出法が一般的に用いられます。

ることで、抗体を溶出させます。最後に、溶離液 A に

溶離液には、種々の緩衝液が使用できますが、幅広いて再平衡化することで、次の測定をスムーズに行うこと

pH 範囲で緩衝能を有するクエン酸ナトリウム緩衝液がが可能です。本カラムに使用される FcγRIIIA リガンド適しています。特に、一般的な CHO 細胞で作製したヒは一定の酸耐性を有していますが、酸性緩衝液への長時

ト IgG1 抗体を分析する場合、吸着用溶離液（溶離液 A）間暴露はカラム寿命を縮める原因となりますので、ご注として 50 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液（pH 6.5）、意ください。

溶出用溶離液（溶離液 B）として 50 mmol/L クエン酸

また、一部の抗体や試料に含まれる夾雑物質では、充─1─

塡剤に対する非特異的な吸着が生じ、徐々に保持時間が離例と pH の変化を示します。

短くなることがあります。多くの場合、この様な吸着は分析時のカラム温度に関して、FcγRIIIA リガンドの抗イオン的な相互作用に起因しているため、溶離液 A 及体親和性は温度の影響を受けることがわかっています。

び B に 150 mmol/L 程度の NaCl を添加することで抑制安定した結果を得るために測定時のカラム温度を制御すすることが可能です。

るカラムオーブンの使用を強く推奨します。図 2 にカラ

表 2 に代表的な溶離液の例を示します。抗体によっムオーブン温度を 15、20 及び 25 ℃の条件で測定した際ては最適条件が異なる場合がありますので、条件検討のの保持力変化を示します。このように、温度が高くなる実施をお勧めします。図 1 にクエン酸ナトリウム緩衝ことで抗体への親和性が低下し、抗体の保持時間が短く液（表 2 の例 1 に示した条件）を用いた際の抗体の分なることがわかります。

表2

測定条件の例
例1

溶離液

例2

例3

A：50 mmol/L クエン酸ナトリウ A：50 mmol/L クエン酸ナトリウ A：50 mmol/L クエン酸ナトリウ
ム緩衝液 + 150 mmol/L NaCl
ム緩衝液 + 150 mmol/L NaCl
ム緩衝液（pH 6.5）
（pH 6.5）（pH 6.5）
B：50 mmol/L クエン酸ナトリウ B：50 mmol/L クエン酸ナトリウ B：50 mmol/L クエン酸ナトリウ
ム緩衝液 + 150 mmol/L NaCl
ム緩衝液 + 150 mmol/L NaCl
ム緩衝液（pH 4.5）
（pH 4.0）（pH 4.0）

0－2分 B 0 %2 － 20 分 B 0 % → 100 %,グラジエントリニアグラジエントプログラム
20 － 25 分 B 100 %25 － 30 分 B 0 %0－2分 B 0 %2 － 20 分 B 0 % → 100 %,リニアグラジエント20 － 25 分 B 100 %25 － 30 分 B 0 %0－7分 B 0 %7 － 25 分 B 0 % → 100 %,リニアグラジエント
25 － 30 分 B 100 %30 － 35 分 B 0 %流速

1.0 mL/min

1.0 mL/min

1.0 mL/min

検出

UV 280 nm

UV 280 nm

UV 280 nm

試料注入量 1 ～ 100 μL

1 ～ 100 μL

1 ～ 100 μL

試料負荷量 5 ～ 50 μg

5 ～ 50 μg

5 ～ 50 μg

吸着が強いサンプルに適します

培養液等、不純物を含むサンプルに適します

考

標準的な測定条件

8B%

pH, UV 280 nm7

図１〈測定条件〉

100カラム：TSKgel FcR-IIIA-NPR（4.6 mm I.D. × 7.5 cm）
溶離液 A：50 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液（pH 6.5）

80

pH6605404

B：50 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液（pH 4.5）
グラジエント：0 － 2 分 B 0 %B%（破線）

備

20302-20min

0510152025

標準分析条件における抗体の分離例と pH 変化

─2─

2 － 20 分 B 0 % → 100 %, リニアグラジエント
20 － 25 分 B 100 %25 － 30 分 B 0 %流速：1.0 mL/min

検出：UV 280 nm

温度：25 ℃

試，10 μg料：ヒト IgG1（シグマ - アルドリッチ社製）

〈測定条件〉
カラム：TSKgel FcR-IIIA-NPR（4.6 mm I.D. × 7.5 cm）
溶離液 A：50 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液（pH 6.5）

25 ℃

B：50 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液（pH 4.5）

UV 280 nm

グラジエント：0 － 2 分 B 0 %2 － 20 分 B 0 % → 100 %, リニアグラジエント

20 ℃

20 － 25 分 B 100 %25 － 30 分 B 0 %

15 ℃

0

図２5101520

流速：1.0 mL/min

検出：UV 280 nm

温度：図中に記載

試料：ヒトγ - グロブリン，20 μgmin

カラム温度が測定に与える影響

2-3．溶離液組成の影響

和性は pH や温度の他にイオン強度の影響も受け、多くFc 受容体への結合性が大きく異なる抗体を分析するの場合、高イオン強度条件では保持時間が短くなります。

際には、測定条件の最適化が必要です。溶離液の緩衝液

一方、極端に溶出力の弱い溶離液で分析を行うとカラム濃度や NaCl 濃度を変えた場合のモノクローナル抗体のへ抗体が残存し、次の測定に影響する可能性があるので分離例を図 3 に示します。FcγRIIIA リガンドの抗体親注意が必要です。

10050 mmol/L
クエン酸ナトリウム緩衝液

05101540

図３60150 mmol/L NaCl

40500 mmol/L NaCl

20200min

200 mmol/L NaCl

05101520min

B%（破線）

6040 mmol/L
クエン酸ナトリウム緩衝液

8080

UV 280 nm

UV 280 nm

20 mmol/L
クエン酸ナトリウム緩衝液

100B)

B%（破線）

A)0

溶離液組成が測定に与える影響〈測定条件〉〈測定条件〉

カラム：TSKgel FcR-IIIA-NPR（4.6 mm I.D. × 7.5 cm）

カラム：TSKgel FcR-IIIA-NPR（4.6 mm I.D. × 7.5 cm）

溶離液 A：クエン酸ナトリウム緩衝液（pH 6.5）溶離液 A：50 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液 +B：クエン酸ナトリウム緩衝液（pH 4.5）

NaCl（pH 6.5）

（緩衝液濃度は図中に記載）

B：50 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液 +グラジエント：0 － 2 分 B 0 %NaCl（pH 4.5）

2 － 20 分 B 0 % → 100 %, リニアグラジエント（NaCl 濃度は図中に記載）

20 － 25 分 B 100 %グラジエント：0 － 2 分 B 0 %25 － 30 分 B 0 %2 － 20 分 B 0 % → 100 %, リニアグラジエント

流

速：1.0 mL/min

検出：UV 280 nm

温度：25 ℃

流速：1.0 mL/min

検出：UV 280 nm

試料：モノクローナル抗体

温度：25 ℃

試料：モノクローナル抗体

20 － 25 分 B 100 %25 － 30 分 B 0 %─3─

2-4．試料負荷量の影響

は 1 回の測定の抗体負荷量は 5 μg から 50 μg が適当でTSKgel FcR-IIIA-NPR は非多孔性の基材を使用してす。図 4 に抗体負荷量を変化させた際のクロマトグラいるため、良好な分離性能を示す一方で、一般的な充塡ムを示します。ピークの分離度はいずれも同等ですが、剤と比較して最大試料負荷量が制限されます。検出器の抗体負荷量の増加とともに抗体保持力が低下していま

感度にも依りますが、流速 1.0 mL/min で通液する場合す。
〈測定条件〉
カラム：TSKgel FcR-IIIA-NPR（4.6 mm I.D. × 7.5 cm）
溶離液 A：50 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液（pH 6.5）
B：50 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液（pH 4.5）
グラジエント：0 － 2 分 B 0 %UV 280 nm

2 － 20 分 B 0 % → 100 %, リニアグラジエント
20 － 25 分 B 100 %50 μg

25 － 30 分 B 0 %25 μg

流速：1.0 mL/min

10 μg

検出：UV 280 nm

温度：25 ℃

試料：ヒト IgG1（シグマ - アルドリッチ社製）

5 μg0
図４51015min

試料負荷量が測定に与える影響

2-5．耐久性ナトリウム緩衝液はカビ等の微生物が発生し易く、カラモノクローナル抗体を含む CHO 細胞培養上清を試料ムが閉塞することによって圧力が急上昇することがありとして 200 回の連続測定を行いました。不純物などの非ます。微生物の発生を抑制するために、溶離液を 0.2 μm

特異的な吸着を抑制するために、表 2 の条件 3 を用いのフィルターでろ過する、定期的に新しい溶離液に交換ました。図 5 に 20 回注入ごとのクロマトグラムを示しするなどの対策を考慮する必要があります。また、ポンますが、抗体保持時間や分離度に顕著な変化は認められプとインジェクターの間にラインフィルターを設置するず良好な耐久性を示しました。しかしながら、クエン酸ことも有効です。
〈測定条件〉
カラム：TSKgel FcR-IIIA-NPR（4.6 mm I.D. × 7.5 cm）

測定

1 回目

溶離液 A：50 mmol/L ク エ ン 酸 ナ ト リ ウ ム 緩 衝 液 +150 mmol/L NaCl（pH 6.5）

測定 20 回目

B：50 mmol/L ク エ ン 酸 ナ ト リ ウ ム 緩 衝 液 +測定 40 回目

UV 280 nm

測定 60 回目
測定 80 回目

25 － 30 分 B 100 %測定 120 回目

測定 160 回目
測定 180 回目
測定 200 回目

図５7 － 25 分 B 0 % → 100 %, リニアグラジエント

測定 100 回目

測定 140 回目

0150 mmol/L NaCl（pH 4.0）
グラジエント：0 － 7 分 B 0 %510152025min

耐久性試験時のクロマトグラム
─4─

30 － 35 分 B 0 %流速：1.0 mL/min

検出：UV 280 nm

温度：20 ℃

試料：抗体含有細胞培養上清2-6．洗浄法

衝液や 20 vol% のエタノールを含む緩衝液をインジェク

溶出力が十分でない緩衝液を溶離液として用いた際にターから注入することで、保持力が回復することがありは充塡剤の表面が汚染され、次の測定に影響を与える可ます。図 6 に、カラム汚染による保持時間の低下と洗能性があります。例えば、モノクローナル抗体を含む浄による保持時間回復を表すクロマトグラムを示しまCHO 細胞培養上清を試料として、40 mmol/L のクエンす。

酸ナトリウム緩衝液（溶離液 A：pH 6.5、溶離液 B：

本商品に使用される FcγRIIIA リガンドは、十分なアpH 4.5）を用いた場合では、カラム内に試料が残存し、ルカリ耐性を有していないため、洗浄液として水酸化ナ測定を繰り返すことで保持力が低下します。このようなトリウム水溶液等のアルカリ溶液は使用できませんので現象が発生した際には、500 mmol/L の NaCl を含む緩ご注意ください。
〈測定条件〉
カラム：TSKgel FcR-IIIA-NPR（4.6 mm I.D. × 7.5 cm）
溶離液 A：40 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液（pH 6.5）
B：40 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液（pH 4.5）

測定 1 回目

UV 280 nm

グラジエント：0 － 7 分 B 0 %7 － 25 分 B 0 % → 100 %, リニアグラジエント

測定10 回目

25 － 30 分 B 100 %30 － 35 分 B 0 %測定20 回目
測定30 回目カラム洗浄後、測定 31 回目

0

図６5101520

流速：1.0 mL/min

検出：UV 280 nm

温度：20 ℃

試

料：抗体含有細胞培養上清

洗浄液：40 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液 +min

500 mmol/L NaCl（pH 4.5）
洗浄法：溶 離液 A を通液しながら、洗浄液 50 μL を溶出不良による保持力低下とカラム洗浄の効果

3 回注入

2-7．充塡剤のロット間差

溶出位置に大きな差は見られず、良好な再現性が得られ

図 7 に 3 ロットの充塡剤を用いて IgG1 を測定した際ました。のクロマトグラムを示します。ロット間でピーク形状、〈測定条件〉
カラム：TSKgel FcR-IIIA-NPR（4.6 mm I.D. × 7.5 cm）
溶離液 A：50 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液（pH 6.5）
B：50 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液（pH 4.5）
グラジエント：0 － 2 分 B 0 %UV 280 nm

20 － 25 分 B 100 %25 － 30 分 B 0 %Lot. B
Lot. C0

図７2 － 20 分 B 0 % → 100 %, リニアグラジエント

Lot. A

51015min充塡剤のロット間差の比較
─5─

流速：1.0 mL/min

検出：UV 280 nm

温度：25 ℃

試，10 μg料：ヒト IgG1（シグマ - アルドリッチ社製）

2-8．保存安定性ていることがわかります。しかしながら、本商品のリガ

図 8 に TSKgel FcR-IIIA-NPR を冷蔵、出荷溶媒で保ンドはたんぱく質であるため、各種プロテアーゼや微生管した際の抗体保持時間維持率と理論段数維持率を示し物の作用による性能の劣化が予見されますので、保管時ます。いずれも 12 カ月間に亘って大きな変化は認めらには適切な管理が必要です。

120120100100

理論段数維持率（％）

抗体保持時間維持率（％）

れず、充塡剤上に固定した FcγRIIIA リガンドが安定し

8060

Lot.A
Lot.B

40
20Lot.C
0246810
保管期間（月）12

図８8060

Lot.A
Lot.B

40

Lot.C

20140246810
保管期間（月）

1214カラムの保存安定性〈抗体保持時間の測定条件〉〈理論段数の測定条件〉

カラム：TSKgel FcR-IIIA-NPR（4.6 mm I.D. × 7.5 cm）

カラム：TSKgel FcR-IIIA-NPR（4.6 mm I.D. × 7.5 cm）

溶離液：50 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液（pH 5.1）

溶離液：100 mmol/L リン酸ナトリウム酸緩衝液

流速：0.3 mL/min

検出：UV 280 nm

流速：1.0 mL/min

温度：25 ℃

検出：UV 280 nm

試料：ヒトγ - グロブリン，20 μg

温度：25 ℃

試料：1 % アセトン水溶液，10 μL+ 100 mmol/L 硫酸ナトリウム（pH 6.7）

※第 3 ピークの保持時間を比較

3．応用例

セプチン・バイオシミラーのクロマトグラムを比較する

3-1．抗体の測定例と、脱フコース型の方が保持時間が長い成分の量比が多種々の抗体を測定した結果を図 9 に示します。CHO

くなる傾向が明らかとなりました。一般的に、脱フコー細胞にて調製した標準的なモノクローナル抗体では、多ス型糖鎖を有する抗体は強い ADCC 活性を有している

くの場合、3 つのメインピークが溶出しました。また、ことが報告されており、知見と一致する結果が得られて抗体サンプルによってピーク面積比が大きく異なることいます。

もわかりました。フコース付加型と脱フコース型のハー─6─〈測定条件〉

100カラム：TSKgel FcR-IIIA-NPR（4.6 mm I.D. × 7.5 cm）
溶離液 A：50 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液（pH 6.5）

市販抗体医薬品80

B：50 mmol/L クエン酸ナトリウム緩衝液（pH 4.5）
グラジエント：0 － 2 分 B 0 %UV 280 nm

60
モノクローナル抗体2
ハーセプチンバイオシミラー（フコース付加型）

40B%（破線）

モノクローナル抗体1

ハーセプチンバイオシミラー 20（脱フコース型）

0

図９5

101520min

2 － 20 分 B 0 % → 100 %, リニアグラジエント
20 － 25 分 B 100 %25 － 30 分 B 0 %流

速：1.0 mL/min

検出：UV 280 nm

温度：25 ℃

試料：各種モノクローナル抗体，各 10 μg0

各種モノクローナル抗体の測定例

3-2．抗体糖鎖構造と保持力の関係ます。この結果より、TSKgel FcR-IIIA-NPR が抗体のCHO 細胞で調製したモノクローナル抗体測定時に溶糖鎖を認識し、その構造に基づいて分離していることが出する 3 つのピークについて、大型の FcγRIIIA 固定化わかりました。また、特に糖鎖末端に付加したガラクカラムを試作し、それぞれ 80 % 以上の純度で単離しま

トースの有無が親和性に大きく影響していることもわかした。得られた分画成分の糖鎖構造を解析し、糖鎖構造りました。

毎に保持力の傾向を検証しました。結果を表 3 に示し
表３抗体糖鎖構造と保持力の関係

糖鎖構造

略号

保持力

G0F

糖鎖構造略号

保持力

弱い

Ma n 5

弱い

G1F

強い

SG2F

強い

G1'F

弱い

S2G2F

強い

G2F

強い

(α1, 6)(α1, 3)3-3．細胞培養液中の抗体測定

GlcNAc;Fuc;

Man;
NeuNAcGal;体の分離例を示します。精製抗体の分離例と比較する

抗体以外の成分は TSKgel FcR-IIIA-NPR に結合しなと、多量の不純物が含まれていても同等の結果が得られいため、適切な測定条件を設定することで、細胞培養液ることがわかりました。このような培養液中の抗体を直の様な不純物を多量に含むサンプルにおいても抗体を直接分離する技術は、抗体医薬品製造の培養工程における接測定することが可能です。図 10 に細胞培養液中の抗モニタリング技術として有用と考えられます。
─7─

〈測定条件〉
カラム：TSKgel FcR-IIIA-NPR（4.6 mm I.D. × 7.5 cm）
溶離液 A：50 mmol/L ク エ ン 酸 ナ ト リ ウ ム 緩 衝 液 +150 mmol/L NaCl（pH 6.5）
UV 280 nm

B：50 mmol/L ク エ ン 酸 ナ ト リ ウ ム 緩 衝 液 +抗体含有細胞培養上清グラジエント：0 － 7 分 B 0 %7 － 25 分 B 0 % → 100 %, リニアグラジエント
25 － 30 分 B 100 %30 － 35 分 B 0 %

精製抗体

0

図 10150 mmol/L NaCl（pH 4.5）1020min

流速：1.0 mL/min

検出：UV 280 nm

温度：20 ℃

試

料：抗体含有細胞培養上清、精製抗体

抗体含有細胞培養上清及び精製抗体の分離比較

4．使用上の注意点
表 4 に使用上の注意点を記します。
表4

使用上の注意点

１．使用前の系内洗浄（カラムを接続するする前に実施）
１）十分に系内洗浄がなされているシステム
0.1 mol/L クエン酸水溶液を 1.0 mL/min で約 30 分送液し系内洗浄を実施。
２）古いシステム、系内洗浄が不十分なシステム① 0.1 mol/L 水酸化ナトリウム水溶液を 1.0 mL/min で約 30 分送液。
② 純水を 1.0 mL/min で約 30 分送液。
③ 0.1 mol/L クエン酸水溶液を 1.0 mL/min で約 30 分送液。
１）、２）とも上記の洗浄を実施した後、溶離液 A に置換し 1.0 mL/min で約 15 分送液後、ブランクグ
HPLC シ ス テ ム
ラジエントを実施して下さい。
その後、カラムを接続し平衡化、ブランクグラジエントを実施してから測定を開始して下さい。
２．ラインフィルター
ポンプとインジェクターの間に、ラインフィルターを装着することをお勧めします。
・ラインフィルターキット PEEK（品番：0018014）
３．冷却機能付きカラムオーブン
カラムの使用温度は 15 ～ 25 ℃です。試料の溶出時間は温度の影響を受けますので、冷却機能付きカラムオーブンで一定の温度に保ち測定することをお勧めします。

溶試

本検討では溶離液としてクエン酸塩緩衝液を用いております。本溶離液は微生物が発生しやすいので、使用時に調製することをお勧めします。また、クエン酸塩緩衝液に限らず、溶離液は調製後細孔径 2 μm の液 フィルターでろ過をしてから使用することをお勧めします。
尚、本検討で使用したクエン酸塩緩衝液は、クエン酸を純水に溶解後、水酸化ナトリウム水溶液で pH を調整し作製しました。

離料

溶液 試料溶液は細孔径 0.2 μm のフィルターでろ過し注入することをお勧めします。

カ ラ ム の 洗 浄 インジェクターから 0.5 mol/L NaCl を含む溶離液、または 20 % エタノールを含む溶離液を数回注入して下さい。
カラムの保管

出荷溶媒（0.025 % ProCline® 300 + 0.65 mmol/L クエン酸 + 9.35 mmol/L クエン酸三ナトリウム（pH 6.5））に置換後、冷蔵保存して下さい（2 ～ 8 ℃）。

カラムの使用期限

カラムには使用期限が有ります。使用期限はカラム化粧箱及びカラムに添付されている Analysis report に記載されています。

5．おわりに非常に簡便かつ短時間で再現性の良い結果を得ることが可

以上、抗体医薬品向け新規 AFC カラムである TSKgel能です。また、本カラムは抗体医薬品の品質管理だけでなく、FcR-IIIA-NPR について概説しました。従来、抗体医薬品の生産用細胞株のスクリーニングや細胞培養液組成の最適化、糖鎖構造解析や活性評価を行うためには高価な装置や煩雑培養工程の工程解析などにも利用可能です。

な作業が必要でしたが、本カラムを用いた新規測定法は、

─8─

※ “TSKgel”は東ソー株式会社の登録商標です。

本製品の研究開発の一部は国立研究開発法人日本医療研究開発機構（AMED）の「次世代医療・診断実現のための創薬基盤技術開発事業」の支援によって行われました。
課題番号：2017年度：JP17ae0101003

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