No.84.qx 06.8.24 19:56 ページ 1

One Step qPCR Kit

RNA-directTM Realtime PCR Master Mix
1酵素・1ステップ系による迅速・高性能なリアルタイムPCR用試薬です。
RNA-direct TM Realtime PCR Master Mix は、Tth DNA polymerase

一口メモがMn 2＋存在下において強い逆転写活性を示すことを利用した、単一酵素系によるワンステップリアルタイムPCR用2×マスターミックスです。逆転写反応とPCRとを同一の反応系で連続的に行うため、試薬の分注操作が1回で済み、ハイスループット化に適しています。TaqMan®アッセイ・プ
ローブアッセイ用、及びSYBR® Green用キットから選択いただけます。

Tth DNA polymearseは 好 熱 細 菌 ： Thermus
Thermophilusから分離されたpolⅠ型DNApolymeraseです。Mnイオン存在下で、逆転写活性を示すユニークな性質を有しています。
（参考文献）
Biochemistry, 30, : 7661-7666 （1991）※本酵素の基本特許は弊社が有しています。

特長1 高性能かつハイスループット
・逆転写反応とPCRとを同一の反応系で連続的に行う『1酵素・1ステップ系』であり、RTaseとTaqを用いた『2酵素1ステップ』系などに比べ、効果的にハイスループット実験を構築することができます。さらに、酵素反応条件を最適化することにより、飛躍的な性能の向上を実現しています。
※1ステップ系における逆転写反応にはPCR用のリバースプライマーを使用します。

特長2 難しい配列にも対応
・逆転写反応を高温で実施できるため、立体構造をとりやすい鋳型RNAの検出に適しています。また本酵素はGC-richな鋳型の増幅に有効であることが知られています。

特長3 高い特異性
・抗体を用いたホットスタートシステムを採用しており、非特異反応を抑制します。本システムでの酵素の再活性化は短時間で完了するため、鋳型RNAや酵素への高温によるダメージを最小限に抑えられます。

特長4 様々な装置に対応
・汎用PCRチューブ（プレート）、およびガラスキャピラリーを用いるタイプのリアルタイムPCR機器に対応します。また、
本試薬はパッシブリファレンス色素が混合されており、蛍光色素での補正が必要な機器へも対応いたします。

実施例1 TaqMan®アッセイによる他社品との性能比較（装置：BioFlux社 Line Gene使用）
RNA-direct TM VS 2酵素・1ステップ
ヒ ト 培 養 細 胞 由 来 m R N A （ 10 n 倍 希 釈 系 列（n=2））を鋳型とし、TaqMan®アッセイによるβアクチンmRNAの検出を行いました（10 0希釈の＋反応液20μlに5ngのPoly（A）RNAが含まれるように希釈）。Taq＋RTase混合型であるA社試薬と比較して、 RNA-direct TM Realtime PCR
Master Mixによる反応では、A社試薬推奨の反応条件においても、立ち上がりの早さと直線性において優れた結果を示しました。

1

No.84.qx 06.8.24 19:56 ページ 2

実施例2 SYBR® Greenアッセイによる直線性検討（装置：ABI 社 PRISM 7900HT使用）®

RNA-direct TM VS 2酵素・1ステップ
HeLa細胞由来のTotal RNA（10n倍希釈系列（n=2））を鋳型とし、SYBR ® GreenアッセイによるβアクチンmRNAの検出を行いました（100希釈の反応液20μlに75ngのTotal RNAが含まれるように希釈）。
その結果、Taq＋RTase混合型であるB社キットと比較して、 RNA-

direct TM SYBR® Green Realtime PCR Master Mixによる反応では、少なくとも7オーダーの希釈系列において、高い相関性を示しました。

（Taq＋RTase）

実施例3 SYBR® Greenアッセイによる他社品との性能比較（装置：Roche社 LightCycler 使用）
TM

RNA-direct TM VS 1酵素・1ステップ＋
ヒト培養細胞由来Poly（A）
RNA（10n倍希釈系列（n=2））を鋳型とし、SYBR® GreenアッセイによりG3PDH mRNAの検出を行いC＋ました（100希釈の反応液20μlに5ngのPoly（A）
RNAが含まれるように希釈）。
その結果、同じくTth DNA Polymeraseを使用したC社試薬と比較して、RNA-direct TM SYBR® Green Realtime PCR Master Mixによる検出では、立ち上がりの早さ、シグナルの強度、及び低濃度の鋳型に対する検出感度、何れにおいても大きく上回る性能を示しました。

品名格＊＊

Code No.

価

40回用（0.5ml×2）
100回用（0.5ml×5）-20℃

QRT-101T
QRT-101￥17,000￥33,000

40回用（0.5ml×2）
One-step qPCR Kit（SYBR Greenアッセイ用）
RNA-direct TM SYBR® Green Realtime PCR Master Mix 100回用（0.5ml×5）-20℃

QRT-201T
QRT-201￥17,000￥33,000

One-step qPCR Kit（TaqMan アッセイ・プローブアッセイ用）

RNA-direct TM Realtime PCR Master Mix

包装＊

保存温度®

®

＊1反応50μlとした場合の使用回数を記載しています。
＊＊QRT-101もしくはQRT-201を5本セットでお買い上げの場合、￥150,000となります。
※RNA-direct TM Realtime PCR Master Mixおよび RNA-direct TM SYBR® Green Realtime PCR Master Mixには、Passive Reference色素があらかじめ混合されています。プレートタイプのPCR機器にそのままご使用いただけますが、Passive Reference色素を使用しないPCR機器への影響もありません。
※RNA-direct TM Realtime PCR Master Mixおよび RNA-direct TM SYBR® Green Realtime PCR Master Mixには、必要量の酢酸マンガン溶液が別チューブで添付されます。
※PCR（Polymerase Chain Reaction）は、F. Hoffman-La Roche社が米国特許（特許番号4,683,195および4,683,202）を有しています。PCRの実施に当たっては許可が必要となります。本品はF. Hoffman-La Roche社が有するPCRに関する特許の使用許可を示唆するものではありません。
※LightCyclerTMは、Idaho Technology Inc.並びにRoche Molecular Systems Inc.の商標です。
※SYBR®は、Molecular Probes Inc.の登録商標です。
※ABI PRISM®は、The Perkin-Elmer Corporationの登録商標です。

2