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高効率リアルタイムPCR用マスターミックス
サンダーバード

THUNDERBIRD® qPCR Mix
特異性、ダイナミックレンジ、コストパフォーマンスに優れたリアルタイムPCR試薬です。
THUNDERBIRD® qPCR Mixは、Taq DNA polymeraseをベースとして開発された、高効率リアルタイムPCR用マスターミックス（2×濃度）です。
本製品は、新規エンハンサーの採用を含め、組成を根本的に見直すことによって、反応特異性とPCR効率が飛躍的に向上しています。これらの改良によって、幅広い定量可能域（ダイナミックレンジ）を実現しました。また、実験のランニングコストを大幅におさえることが可能になりました。

特長1 高い特異性（プライマーダイマーの低減）
・組成の最適化により、PCRの特異性が向上。非特異反応の低減によって、
SYBR® GreenⅠ、およびTaqMan®アッセイにおいて、低コピー数のターゲットの検出感度が向上しました。

【増幅曲線】【融解曲線】
THUNDERBIRD®
SYBR® qPCR Mix（Code No. QPS-201）

100希釈

10-3

プライマーダイ
マーは認められませんでした。

A社リアルタイムPCR試薬
100希釈
図1．SYBR® GreenⅠ検出系による反応特異性の比較（Roche Diagnostics LightCycler ® 1.1使用）

10-3

プライマーダイマーが発生しやすいプライマーセットを用いて、各リアルタイムPCR試薬による反応特異性の比較を行いました。
プライマーセットは、
ヒトβ-Actin cDNAに対するもの、鋳型には弊社の高性能逆転写反応用試薬「ReverTra Ace® qPCR RT Kit（CodeNo. FSQ-101）」により合成したHeLa細胞Total RNA由来cDNAを用い、cDNAの10倍段階希釈液(4段階)と、no-template control（NTC）について、それぞれduplicateにて反応を実施しました。

プライマーダイマー

no template control

特長2 様々なターゲットを均一に検出・ターゲットごとのPCR効率のばらつきを最小限に抑える効果のある新規エンハンサーを採用。＊THUNDERBIRD®
Probe qPCR Mix〔PCR効率＊〕THUNDERBIRD ®
SYBR ® qPCR Mix
A社試薬

10-4

100希釈

93%

B社試薬＞＞

100希釈

85%＊標準曲線の傾きより算出
理想値100%図2．SYBR® Green Ⅰ検出系によるノロウイルスGI cDNAの検出（縮合プライマー使用）（Roche Diagnostics LightCycler ® 1.1使用）

10-4

図3．TaqMan® 検出系によるGAPDH cDNAの定量（Roche Diagnostics LightCycler ® 1.1使用）

特長3 広いレンジで検出可能
・特異的（特長1）、かつ高効率（特長2）な増幅により、広い測定レンジでの解析が可能になりました。

2010＊特許出願中9

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特長4 様々な機器に対応
・一般的なブロックタイプの機器（Fast Modeにも対応）のほか、ガラスキャピラリーを用いる高速サイクラーにも対応しています。
また、50× ROX reference dyeが別添付されているため、パッシブリファレンスを使用する機器（Applied Biosystems社製機器、Stratagene社製機器など）においても、各機種の特性に応じた最適なROX濃度でご使用いただけます。
表 代表的な対応機器

AppliedBiosystems

Roche
Diagnostics

Bio-Rad/MJ

ABI PRISM 7000
ABI PRISM 7700
Applied Biosystems 7300
Applied Biosystems 7500
Applied Biosystems 7500 Fast
Applied Biosystems 7900HT
Applied Biosystems Step OneTM
LightCycler 1.x
LightCycler 2.0
LightCycler 480

iCycler iQ
Mx3000P
Mx3005P
Thermal Cycler DiceLine Gene

Stratagene
TaKaRaBioFlux※リスト中Applied Biosystems 7500, 7500 Fast, Stratagene Mx3000P,Mx3005Pをご使用の場合のROX reference dyeの最適濃度は、最終濃度0.1×（1/500量添加）となります。その他は1×（1/50）濃度を推奨します。

特長5 高速ホットスタート

特長6 高いコストパフォーマンス

・抗Taqポリメラーゼ抗体を用いるホットスタートシステムを採用

・実験のランニングコストを大幅におさえるこしています。抗体は加熱により速やかに失活するため、最初の変とが可能になりました。

性時間を短時間に設定できます。

Roche LightCycler ® 480での使用例

実施例

HeLa細胞のTotal RNAから調製したcDNA を鋳型として、ヒト【反応条件】
・Template：cDNA from HeLa total RNA（ReverTra Ace® qPCR RT Kit [FSQ-GAPDH遺伝子（85bp）の増幅を101] 使用 5倍希釈系列 5水準 N＝2）

Roche LightCycler ® 480で実施

・Targetしました。その結果、弊社条件で使・使用機器 ：LightCycler ® 480 System Ⅱ

用することで、良好な結果を得るこ・反応液量 ：20μlとができました。

・反応サイクル：弊社推奨条件：95℃, 1min.→（95℃, 15sec.→60℃, 1min.）×45cycles（：GAPDH（85bp）※本機器の使用につきましては、以下のサイクル条件は推奨いたしません。
95℃, 5min.→（95℃, 10sec.→60℃, 20sec.→72℃, 30sec.）×45cycles【増幅曲線】）【融解曲線】

50希釈
5-4

図4．GAPDHをターゲットとした5倍希釈系列の検出

品名および内容
TaqMan® アッセイ用

THUNDERBIRD® Probe qPCR Mix
・THUNDERBIRD® Probe qPCR Mix
・50× ROX reference dye
SYBR® GreenⅠアッセイ用

THUNDERBIRD® SYBR® qPCR Mix
・THUNDERBIRD® SYBR® qPCR Mix
・50× ROX reference dye

包装保存温度

Code No.

価格

1ml×1本〔40回用〕-20℃

QPS-101T¥8,5001.67ml×3本〔200回用〕-20℃

QPS-101¥29,000（1.67ml×3本）
×5〔1000回用〕-20℃

QPS-101X5¥133,000

1ml×1本〔40回用〕-20℃

QPS-201T¥8,5001.67ml×3本〔200回用〕-20℃

QPS-201¥29,000-20℃

QPS-201X5¥133,000（1.67ml×3本）
×5〔1000回用〕※50× ROX reference dyeがマスターミックスとは別容器で供給されます。 ※包装の欄に記載の反応回数は、50μl反応時のものです。容量はqPCR Mixのみ示しています。
※大包装品（QPS-101X5およびQPS-201X5）は、QPS-101もしくはQPS-201の5セット組です。
※TaqMan®は、Roche Molecular Systems Inc.の登録商標です。 ※SYBR®は、Molecular Probes Inc.の登録商標です。
※QPS-101とQPS-201につきましては、高効率リアルタイムPCR用cDNA合成キット「ReverTra Ace® qPCR RT Kit」
（Code No. FSQ-101）との以下のセット販売品もあります。
THUNDERBIRD® Probe qPCR/RT Set（Code No.QPS101/FSQ101、1セット、￥63,000）
THUNDERBIRD® SYBR® qPCR/RT Set（Code No.QPS201/FSQ101、1セット、￥63,000）

102010