No.84.qx 06.8.24 19:56 ページ 1

One Step qPCR Kit

RNA-directTM Realtime PCR Master Mix
1酵素・1ステップ系による迅速・高性能なリアルタイムPCR用試薬です。
RNA-direct TM Realtime PCR Master Mix は、Tth DNA polymerase

一口メモがMn 2＋存在下において強い逆転写活性を示すことを利用した、単一酵素系によるワンステップリアルタイムPCR用2×マスターミックスです。逆転写反応とPCRとを同一の反応系で連続的に行うため、試薬の分注操作が1回で済み、ハイスループット化に適しています。TaqMan®アッセイ・プ
ローブアッセイ用、及びSYBR® Green用キットから選択いただけます。

Tth DNA polymearseは 好 熱 細 菌 ： Thermus
Thermophilusから分離されたpolⅠ型DNA
polymeraseです。Mnイオン存在下で、逆転写活性を示すユニークな性質を有しています。
（参考文献）
Biochemistry, 30, : 7661-7666 （1991）※本酵素の基本特許は弊社が有しています。

特長1 高性能かつハイスループット
・逆転写反応とPCRとを同一の反応系で連続的に行う『1酵素・1ステップ系』
であり、RTaseとTaqを用いた『2酵素1ステップ』系などに比べ、効果的にハイスループット実験を構築することができます。さらに、酵素反応条件を最適化することにより、飛躍的な性能の向上を実現しています。
※1ステップ系における逆転写反応にはPCR用のリバースプライマーを使用します。

特長2 難しい配列にも対応
・逆転写反応を高温で実施できるため、立体構造をとりやすい鋳型RNAの検出に適しています。また本酵素はGC-richな鋳型の増幅に有効であることが知られています。

特長3 高い特異性
・抗体を用いたホットスタートシステムを採用しており、非特異反応を抑制します。本システムでの酵素の再活性化は短時間で完了するため、鋳型RNAや酵素への高温によるダメージを最小限に抑えられます。

特長4 様々な装置に対応
・汎用PCRチューブ（プレート）、およびガラスキャピラリーを用いるタイプのリアルタイムPCR機器に対応します。また、
本試薬はパッシブリファレンス色素が混合されており、蛍光色素での補正が必要な機器へも対応いたします。

実施例1 TaqMan®アッセイによる他社品との性能比較（装置：BioFlux社 Line Gene使用）
RNA-direct TM VS 2酵素・1ステップ
ヒ ト 培 養 細 胞 由 来 m R N A （ 10 n 倍 希 釈 系 列（n=2））を鋳型とし、TaqMan®アッセイによるβアクチンmRNAの検出を行いました（10 0希釈の＋反応液20μlに5ngのPoly（A）
RNAが含まれるように希釈）。Taq＋RTase混合型であるA社試薬と比較して、 RNA-direct TM Realtime PCR
Master Mixによる反応では、A社試薬推奨の反応
条件においても、立ち上がりの早さと直線性において優れた結果を示しました。

1

No.84.qx 06.8.24 19:56 ページ 2

実施例2 SYBR® Greenアッセイによる直線性検討（装置：ABI 社 PRISM 7900HT使用）®

RNA-direct TM VS 2酵素・1ステップ
HeLa細胞由来のTotal RNA（10n倍希釈系列（n=2））を鋳型とし、
SYBR ® GreenアッセイによるβアクチンmRNAの検出を行いました（100希釈の反応液20μlに75ngのTotal RNAが含まれるように希釈）。
その結果、Taq＋RTase混合型であるB社キットと比較して、 RNA-

direct TM SYBR® Green Realtime PCR Master Mixによる反応では、少なくとも7オーダーの希釈系列において、高い相関性を示しました。

（Taq＋RTase）

実施例3 SYBR® Greenアッセイによる他社品との性能比較（装置：Roche社 LightCycler 使用）
TM

RNA-direct TM VS 1酵素・1ステップ＋
ヒト培養細胞由来Poly（A）
RNA（10n倍希釈系列（n=2））を鋳型とし、SYBR® GreenアッセイによりG3PDH mRNAの検出を行いC＋ました（100希釈の反応液20μlに5ngのPoly（A）
RNAが含まれるように希釈）。
その結果、同じくTth DNA Polymeraseを使用したC社試薬と比較して、RNA-direct TM SYBR® Green Realtime PCR Master Mixによる検出では、立ち上がりの早さ、シグナルの強度、及び低濃度の鋳型に対する検出感度、何れにおいても大きく上回る性能を示しました。

品

名

格＊＊

Code No.

価

40回用（0.5ml×2）
100回用（0.5ml×5）-20℃

QRT-101T
QRT-101￥17,000￥33,000

40回用（0.5ml×2）
One-step qPCR Kit（SYBR Greenアッセイ用）
RNA-direct TM SYBR® Green Realtime PCR Master Mix 100回用（0.5ml×5）-20℃

QRT-201T
QRT-201￥17,000￥33,000

One-step qPCR Kit（TaqMan アッセイ・プローブアッセイ用）

RNA-direct TM Realtime PCR Master Mix

包

装＊

保存温度

®

®

＊1反応50μlとした場合の使用回数を記載しています。
＊＊QRT-101もしくはQRT-201を5本セットでお買い上げの場合、￥150,000となります。
※RNA-direct TM Realtime PCR Master Mixおよび RNA-direct TM SYBR® Green Realtime PCR Master Mixには、Passive Reference色
素があらかじめ混合されています。プレートタイプのPCR機器にそのままご使用いただけますが、Passive Reference色素を使用しないPCR機器への影響もありません。
※RNA-direct TM Realtime PCR Master Mixおよび RNA-direct TM SYBR® Green Realtime PCR Master Mixには、必要量の酢酸マンガン溶液が別チューブで添付されます。
※PCR（Polymerase Chain Reaction）は、F. Hoffman-La Roche社が米国特許（特許番号4,683,195および4,683,202）を有しています。PCRの実施に当たっては許可が必要となります。本品はF. Hoffman-La Roche社が有するPCRに関する特許の使用許可を示唆するものではありません。
※LightCyclerTMは、Idaho Technology Inc.並びにRoche Molecular Systems Inc.の商標です。
※SYBR®は、Molecular Probes Inc.の登録商標です。
※ABI PRISM®は、The Perkin-Elmer Corporationの登録商標です。

2

No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 3

SYBR® Green Realtime PCR Master Mix
SYBR® Green Realtime PCR Master Mix -PlusSYBR® Green リアルタイムPCR用試薬に新たなるラインアップの登場です。
SYBR ® Green Realtime PCR Master Mixシリーズ はTaq DNA
polymeraseをベースとして開発した、SYBR® GreenⅠを含む汎用性の高いリアルタイムPCR用2×マスターミックスです。
この度、バッファー組成を最適化することにより、リアルタイムPCRのリライアビリティー（信頼性）をより向上させることに成功いたしました。

一口メモ
2酵素・2ステップ系の良さ
は、RT産物（cDNA）を小分けして、一度に様々なターゲッ
トのリアルタイムPCRに用いることがができる点です。

特長1 高い特異性
・非特異反応を抑えるため、抗Taq抗体を採用しております。
・化学修飾法に比べTaq DNA polymeraseが迅速に再活性化するため、アッセイ時間の短縮が可能です。

特長2 広い汎用性
・パッシブリファレンスを含有していますので、ABI PRISM®シリーズ（Applied Biosystems社）等にも対応可能です。
・BSAを含有していますので、ガラスキャピラリーを用いるLightCyclerTM（Roche Diagnostics社）等にも対応可能です。

特長3 1step RT-PCRに対応

SYBR® Green Realtime PCR Master Mix

・逆転写酵素（ReverTra Ace®、Code No.:TRT-101）とRNase inhibitor（Code No.:SIN-101）の組み合わせにより、
1 step RT-PCRを行うことができます。

特長4 高いリライアビリティ（⇒UPLOAD Vol.83 p.15・16参照）

SYBR® Green Realtime PCR Master Mix -Plus-・バッファー組成を最適化することにより、プライマーダイマーなどの非特異反応を低減させることに成功しました。PCR
反応の特異性と再現性が向上したため、より信頼性の高いリアルタイムPCR解析が可能となりました。
※逆転写反応には、1stストランドcDNA合成キット『ReverTra Ace -α-®』をお薦めします。

実施例1 SYBR® Greeenアッセイによる他社品との性能比較（装置：BioFlux社 LineGene使用）
げっ歯類由来ゲノムDNA（10n倍希釈系列、10ng、1ng、0.1ng、0.01ng（n=2））を鋳型とし、SYBR ®Greenアッセイ
によるターゲット遺伝子（約80bp）の検出を行いました。その結果、A社試薬では、非特異的増幅、及びプライマーダイマーの生成が認められましたが、
SYBR® Green Realtime PCR
Master Mix -Plus-では、良好な増幅が確認できました。また、
Ct値の間隔も、等間隔であり、測定可能範囲も広い傾向が認めら
図1．リアルタイムPCR用試薬（SYBR® Greenアッセイ用）の性能比較例（装置：LineGene使用）

れました。

品

名

包

装＊

保存温度

Code No.

SYBR® Green Realtime PCR Master Mix

200回用（1ml×5本）
40回用（1ml×1本）-20℃

QPK-201
QPK-201T￥37,000￥10,000SYBR® Green Realtime PCR Master Mix -Plus-

200回用（1ml×5本）
40回用（1ml×1本）-20℃

QPK-211
QPK-211T￥37,000￥10,000＊本製品は2倍濃度に調製されています。上記回数は50μL反応系での回数です。装置などによって推奨容量は異なります。

3

価

格

No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 4

一口メモ
●主な仕様

核酸増幅リアルタイムモニタリング装置「LineGene」はこんな装置です。
（⇒詳細は総合カタログ 8−5・6をご参照ください）

サンプル容量：0.2ml×33本
励起波長： 470nm

温度精度（設定温度）：≦±0.5℃（95℃）≦±0.3℃（72℃）≦±0.2℃（55℃）
温度均一性（設定温度）：≦±1.0℃（95℃）≦±0.5℃（72℃）≦±0.3℃（55℃）

検出波長： 530nm 640nm 710nm
励起用光源： Blue LED
蛍光検出器： フォトマルチプライヤーチューブ（PMT）

電源：
100V 50/60Hz
最大消費電力：1000W
外形寸法：
W514×D456×H292（mm）

温度制御範囲： 30℃〜99℃
温度変化率： 最大4℃/sec

重量：（2ステップ，45サイクルの反応=約90分）

23㎏※製品の性能および仕様、外観は改良のため予告なく変更することがある。

￥1,890,000（本体＋ソフトウェア）

訪問デ

モ実施

中

Realtime PCR Master Mix
TaqMan®アッセイ・プローブアッセイを用いるリアルタイムPCRに最適。汎用性の高いスタンダードタイプ。
Realtime PCR Master Mixは汎用性の高いTaq DNA polymeraseをベースとして開発されたリアルタイムPCR用試薬です。
2×マスターミックスであり、各種プローブ、プライマー、蒸留水、及びサンプルを加えるだけで、簡単にリアルタイムPCRを行うことができます。

特長1 高い特異性
・非特異反応を抑えるため、抗Taq抗体を採用しております。
・化学修飾法に比べTaq DNA polymeraseが迅速に再活性化するため、アッセイ時間の短縮が可能です。

特長2 広い汎用性
・TaqMan®アッセイや、プローブアッセイに広く対応します。
品

名

各種プローブを用いたリアルタイムPCR用のマスターミックス

Realtime PCR Master Mix

包

装

保存温度

Code No.

価-20℃

QPK-101
QPK-101T￥37,000￥10,000

200回用（1ml×5本）
40回用（1ml×1本）

格＊本製品は2倍濃度に調製されています。上記回数は50μL反応系での回数です。装置などによって推奨容量は異なります。

品

名

包

装

保存温度

Code No.

価

100回用

-20℃

FSK-101￥53,000

10,000U×1本
10,000U×5本-20℃

TRT-101
TRT-102￥15,000￥60,000

RNase Inhibitor（Native type）

2,500U×1本
2,500U×5本-20℃

SIN-101
SIN-102￥9,000￥36,000

RNase Inhibitor（Recombinant type）

2,500U×1本
2,500U×5本-20℃

SIN-201
SIN-202￥9,000￥36,000

1式−

BFFQD-33A

1stストランドcDNA合成キット

ReverTra Ace -α-®（逆転写酵素＋dNTPs他）
逆転写酵素

ReverTra Ace®

核酸増幅リアルタイムモニタリング装置

LineGene（本体＋ソフトウェア）

Realtime PCR Master Mixシリーズまとめ品

名☆☆☆：Good

Code No.

用途

格￥1,890,000☆☆☆☆：Excellent

パッシブリファ キャピラリ 1 step＊ リアイアビ
レンス対応
ー対応
RT-PCR リティーSYBR® Green Realtime PCR Master Mix

QPK-201
QPK-201T

SYBR® Green

○

○

○

☆☆☆

SYBR® Green Realtime PCR Master Mix -Plus-

QPK-211
QPK-211TSYBR® Green

○

○

−

☆☆☆☆

○

○

○

☆☆☆

Realtime PCR Master Mix

QPK-101
QPK-101T®

TaqMan アッセイ
プローブアッセイ＊ 別途、逆転写酵素（ReverTra Ace®、Code No.:TRT-101）、及びRNase inhibitor（Code No.：SIN-101）をご準備いただく必要があります。
※本製品は、F. Hoffmann-La Roche Ltd.、Roche Molecular Systems Inc.並びにThe Perkin-Elmer Corporationとのライセンス契約に基づき販売されるものです。
※LightCyclerTMは、Idaho Technology Inc.並びにRoche Molecular Systems Inc.の商標です。
※SYBR®は、Molecular Probes Inc.の登録商標です。 ※TaqMan®は、Roche Molecular Systems Inc.の登録商標です。
※ABI PRISM®は、The Perkin-Elmer Corporationの登録商標です。

4

No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 5細胞・抗体関連特集
今回は『細胞・抗体関連製品』を特集いたします。
最近の研究の傾向として、in vitroでの実験に加え、細胞などを用いるin vivo 実験が確実に増えてきているようです。ただ、その手法は様々です。今回はその中から主だったものをピックア
ップしてみました。また、試薬セレクションガイドにおいても、細胞・抗体解析に関連する内容を取り上げております。

本製品はすでに販売を中止しております。

Products

ニワトリポリクローナル抗体受託サービス
マウス・ラビット等の免疫でお困りの方に朗報。
免疫したニワトリの「抗血清」および「卵」をご提供いたします（精製のオプションもございます）。「cDNAクローニング、または人口遺伝子合成⇒タンパク質発現⇒タンパク質精製⇒抗体作製」の一連の作業の受託もお受けいたします。

特長1 哺乳動物由来タンパク質での抗体価が上がらない場合に有効・抗原とするタンパク質のアミノ酸配列が、免疫動物由来のホモログ遺伝子と高いホモロジーを有しているために抗体価が上昇しない場合に有効です。

特長2 大量の抗体の取得が可能です。
・大量の抗体の取得を目的とされる場合には、採卵コースとのセットお薦めします。免疫されたニワ
トリ固体の卵黄には、卵1個あたり 数10mgのIgYが分泌されます。

受託フロー●弊社ホームページ受託サービスコーナー（http://www.toyobo.co.jp/seihin/xr/product/custom/index.html）から
オーダーシートをダウンロードしていただき、抗原の情報やその他詳細をご記入の上、弊社までお問い合わせください。
↓●抗原タンパク質およびペプチド（0.5mg/ml以上の濃度で2.5mg以上）を代理店にお渡しください。
※送付方法の詳細につきましては、ご相談させていただきます。
↓●「ポリクローナル抗体（抗体価の評価結果報告書： ELISAデータを添付）」をお送りいたします。

サービスの内容
項

目

内

容

納期

ニワトリポリクローナル抗体 免疫数2羽、免疫5回（2週間ピッチ）
3回目免疫終了後 ELISA測定
血清＋採卵コース
4回目終了後、採卵を開始
5回目終了後、1羽について全採血
ニワトリポリクローナル抗体 免疫数2羽、免疫4回（2週間ピッチ）
3回目免疫終了後 ELISAデータをお客様にお送
血清コース
りし、全採血する個体を選択していただきます。
4回目終了後、1羽について全採血

備

考

価格

11週間〜 納品：抗血清15mL、卵（4回免疫後に採取され ￥220,000たもの1個〜5個まで）（どちらか1羽分になります）
どちらの個体も1産卵しなかった場合で、5回目
免疫終了後飼育延長せずに打ち切る場合、21万円となります。
9週間〜 納品：抗血清15mL（どちらか1羽分になります） ￥200,000〈オプション〉
延長飼育

1羽、10日単位で承ります。

ニワトリ抗血清精製

DEAEカラムによる精製を行います。

3週間〜

卵黄IgG精製（卵1個分）

卵黄処理、硫安分画込み。

2週間〜￥75,000

卵黄IgY精製（卵2〜5個分） 卵黄処理、硫安分画込み。

2週間〜￥150,000

追加の抗原をお願いする場合があります。

※免疫途中でニワトリが2羽とも死亡した場合、半額のご請求とさせていただきます。
※抗血清を1,000倍希釈しELISAの測定値が2羽ともOD0.5以下の場合、半額のご請求とさせていただきます。

5￥10,000￥140,000

No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 6

本製品はすでに販売を中止して
おります。
ーン
キャンペ

Products

f20%of

β-Amyloid related products

2006年9月19日〜11月30日の期間中、β-Amyloid関連商品を20%offでご購入いただけます。

β-Amyloid関連研究に最適な、高純度ペプチドです。
AnaSpec社は、様々なペプチド関連試薬を扱っている米国のペプチドカンパニーです。今回紹介させていただくβ-Amyloid研
究試薬以外にも、種々の商品を扱っております（⇒http://www.anaspec.com/）。また、この度、Anaspec社の商品の価格を全面的に見直し、よりお求め安い価格へ変更いたしております。この機会に一度お試しください。

特長1 様々なβ-Amyloid関連ペプチドから選択可能
・非ラベルペプチドから、ビオチン化ペプチド、蛍光ペプチドまで様々な種類のβ-Amyloid関連ペプチドを揃えています。

特長2 Secretaseの活性測定用、及び阻害実験用ペプチドを豊富にラインアップ

一口メモ
脳へのβアミロイドの沈着はアルツハイマー病の発病初期にみられます。老人斑の核となるβアミロイドはヘテロな長さを持つペプチドの混合物ですが、1-40と1-42が主要成分であることが知られています。βアミロ
イドをコードする遺伝子は21番染色体上にあり、最初は、膜貫通タンパク質であるアミロイド前駆タンパク質(APP)として翻訳されます。その後、
βセクレターゼにより、Met671で切断を受けた後、γセクレターゼにより更に切断を受け、βアミロイドペプチドが生成されます。
図2．Amyloid βpeptideの輸送機構

図1．Amyloid βpeptideの生成機構

価格
改
しまし 定
た

※種の記載のないものはHumanの配列です。
包装

Code No.

価

β-Amyloid(1-11)

1mg

AS22819¥12,000¥9,600β-Amyloid(1-16)

1mg

AS24225¥14,000¥11,200−

β-Amyloid(1-28)

0.5mg

AS24231¥17,000¥13,600−

β-Amyloid(1-33)

0.5mg AS60250-05 ¥42,000¥33,600−

J. Med. Biol. Res. 30, 1153 (1997)

β-Amyloid(1-39)

0.5mg

AS24295¥24,000−

Biochem. 32, 4693 (1993)(1-42)と共にAlzheimer病の脳における老人斑生成時における主要なコア物質であるPNAS 82, 4245 (1985)
Neuron 16, 921 (1996)
Nat. Med. 4, 827 (1998)
J. Neurosci.17, 8187 (1997)
Acta Cytol. 40, 873 (2000)

品名及び内容格

保存温度：-20℃
キャンペーン
価 格¥30,000

備考

C1q binding site

β-Amyloid(1-40)

0.5mg

AS24235¥24,000¥19,200

β-Amyloid(1-40)･HCl

0.5mg

AS23211¥30,000¥24,000

Biotin-β-Amyloid(1-40)

0.1mg AS23512-01 ¥18,000¥14,400

β-Amyloid(40-1)・HCl

0.5mg

AS21795¥40,000¥32,000

コントロール配列

β-Amyloid(1-40), mouse, rat

0.5mg

AS25380¥44,000¥35,200

マウス、ラット配列に対応

β-Amyloid(1-42)

0.5mg

AS24224¥32,000¥25,600(1-40)に比べ高い凝集性を示す

β-Amyloid(1-42)･HCl

0.5mg

AS21791¥44,000¥35,200

Biotin-Amyloid(1-42)

0.1mg AS23524-01 ¥24,000¥19,200

β-Amyloid(42-1)

0.1mg AS27276-01 ¥18,000¥14,400

β-Amyloid(42-1)･HCl

0.1mg AS60291-01 ¥24,000¥19,200

β-Amyloid(1-42), mouse, rat

0.5mg

AS25381¥44,800¥56,000

6

コントロール配列
マウス、ラット配列に対応

参考文献
Alzheimers Dis. 7, 37 (2005)
JBC. 280, 16601 (2005)−−

Neurosci. 110, 199 (2002)
JBC. 272, 21037 (1997)

J. Pharmacol. Exp. Ther.
10.1124/jpet.105.083543 (2005).

−

No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 7

価格
改
しまし 定
た

格

保存温度：-20℃
キャンペーン
価 格

包装

Code No.

価

β-Amyloid(1-43)

0.5mg

AS25356¥55,000¥44,000

最もfibrillogenicな微少繊維を形成することが知られている

β-Amyloid(2-42)0.1mg AS29909-01 ¥15,000¥12,000−[pGlu(Pyr3)]- β-Amyloid(3-40)

0.1mg AS29906-01 ¥13,000¥10,400

トリガーの一つJBC. 280, 34186 (2005)
Neurobiology Nature 405, 531 (2000)

品名及び内容備考参考文献
Biopolymers 50, 733 (1999)
Biochem. 32, 4693 (1993)
JBC. 276, 42645 (2001)[pGlu(Pyr3)]- β-Amyloid(3-42)0.1mg AS29907-01 ¥15,000¥12,000

Alzheimer病、Down症で脳への堆積を確認

β-Amyloid(4-10)

1mg

AS60226-1¥12,000¥9,600−BBRC. 321, 324 (2004);

β-Amyloid(4-42)

0.1mg AS29908-01 ¥15,000¥12,000−

JBC. 271, 33623 (1996)

β-Amyloid(8-42)

0.1mg AS60085-01 ¥20,000¥16,000−

JBC. 271, 33623 (1996)

β-Amyloid(10-20)

1mg

AS25365¥12,000¥9,600−β-Amyloid(12-20)

1mg

AS61102¥12,000¥9,600−PNAS. 88, 3363 (1991)

β-Amyloid(12-28)

0.5mg

AS24229¥14,000¥11,200−

Am. J. Pathol. 165, 937 (2004)

β-Amyloid(15-21)

1mg

AS60228-1¥12,000¥9,600−JBC. 279, 52781 (2004)

β-Amyloid(16-20)

1mg

AS60229-1¥12,000¥9,600−JBC. 271, 8545 (1996)

β-Amyloid(17-21)

1mg

AS60230-1¥12,000¥9,600−Nat. Med. 4, 822 (1998)

AS60618[Pro18, Asp21]β-Amyloid (17-21), iAb5

1mg

¥17,000¥13,600

Biotin-β-Amyloid(17-40)

0.1mg AS23541-01 ¥19,000¥15,200

β-Amyloid(18-28)

1mg

AS61133¥12,000

Fibrillogenesis inhibitor
Beta-sheet breaker−

J. Neuropathol. Exp. Neurol. 59, 11 (2000)−

Biochem. 39, 12284 (2000)¥9,600−PNAS. 88, 3363 (1991).
−

β-Amyloid/A4 Protein Precursor (APP)(96-110) 0.5mg

AS25372¥16,000¥12,800

Ac-NWCKRGRKQCKTHPH-NH2(Disulfide bond: 3-10)β-Amyloid/A4 Protein Precursor (657-676) 0.5mg

AS25378¥16,000¥12,800

HHGVVEVDAAVTPEERHLSK−

α-Secretase Substrate 1

1mg

AS60271¥42,000¥33,600

MCA-HQKLVFFAK(DNP)−

β-Secretase Substrate 1

1mg

AS60268¥42,000¥33,600

MCA-EVKVDAEFK(DNP)−

β-Secretase Substrate 2

1mg

AS60269¥42,000¥33,600

MCA-EVKMDAEFK(DNP)

β-Secretase Substrate 3

1mg

AS60270¥42,000¥33,600

MCA-EVNLDAEFK(DNP)

β-Secretase Substrate 40.1mg

AS60267¥30,000¥24,000

β-Secretase Inhibitor 1

1mg

AS23958¥30,000¥24,000

β-Secretase Inhibitor 2

1mg

AS23960¥30,000¥24,000

FAM-EVNLDAFK(QXL・520)
KTEEISEVN-Sta-VAEF(Sta = statine)
KTEEISEVN-Sta-VAEF-NH2(Sta=Statine)−

J. Neurochem. 81, 237 (2002);−

Nature 402, 537 (1999)−※詳細に関しましては、http://www.anaspec.com/をご参照ください。
※上記以外にも対象商品がございます。弊社webサイトにてご確認ください。

Products

マウス・ラット神経幹細胞
細胞分化研究、再生治療研究などに利用できます。
マウス及びラット胎児の大脳線条体と中脳より分離された第1継代細胞（マウス）、及び初代細胞（ラット）です。最適化された専用の培地を用いることで、マウス神経幹細胞（MNSC）で3回、及びラット神経幹細胞（RNSC）で2回まで、未分化な状態（ニューロスフェアの状態）で分裂させることが可能です。特に、再生研究に適しています。

特長1 分化・再生実験に最適
・多分化能があり、神経細胞、アストロサイト、オリゴデンドロサイトへの分化が可能です。

特長2 確実・分化した細胞はβ-tubulin Ⅲ、GFAP、及びオリゴデンドロサイトマーカーO4陽性であることを確認しています。

7

No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 8

価格を変更しております。
現在の情報は、お問い合わせいただきますようお願いいたします。

実施例
MNSCとRNSCを分化後、β-tubulin染色を行いました。その結果、チューブ
リンの繊維が鮮明に染色され、分化が正常に誘導されたことを確認することができました。

未分化状態でのMNSC

品

分化後β-tubulin染色した
MNSC

名

包

装

未分化状態でのRNSC

Code No.

分化後β-tubulin染色した
RNSC

価

格

2×106 cells/バイアルCAMS82020f¥120,000

マウス神経幹細胞 MNSC total kit, fetal

1キット

CAMS820K20f¥144,000

マウス神経幹細胞増殖培地

500ml

CAM813500¥25,000

マウス神経幹細胞分化培地

250ml

CAM813D250¥14,000

マウス神経幹細胞 MNSC, fetal

ラット神経幹細胞 RNSC, adult6

2×10 cells/バイアルCARS82020a¥120,000

ラット神経幹細胞 RNSC total kit, adult

1キット

CARS820K20a¥144,000

ラット神経幹細胞 RNSC, fetal

6

2×10 cells/バイアルCARS82020f¥120,000

ラット神経幹細胞 RNSC total kit, fetal

1キット

CARS820K20f¥144,000

ラット神経幹細胞増殖培地

500ml

CAR813500¥25,000

ラット神経幹細胞分化培地

250ml

CAR813D250¥14,000

25ml

CA12725¥4,500包

Code No.

ポリオルニチンコート溶液＊＊マウス・ラット神経幹細胞を分化させる際のプレートコート剤として使用します。

品名

イヌ骨格筋細胞 CnSkMC

格

CACn15005¥100,000

1キット

CACn150K05¥135,000

500ml

CACn151500¥25,000

イヌ骨格筋細胞増殖培地

5×105 cells/バイアルCACn30205¥95,000

1キット

CACn302K05¥130,000

イヌ肺動脈内皮細胞 CnPAEC total kit
イヌ大動脈内皮細胞 CnAOEC

価

5×10 cells/バイアル

イヌ骨格筋細胞 CnCkMC total kit

イヌ肺動脈内皮細胞 CnPAEC

装

55×105 cells/バイアルCACn30405¥95,000

1キット

CACn304K05¥130,000

イヌ大動脈内皮細胞 CnAOEC total kit
イヌ内皮細胞増殖培地

500ml

CACn211500¥22,000

5×105 cells/バイアルCACn35205¥85,000

イヌ肺動脈平滑筋細胞 CnPASMC total kit

1キット

CACn352K05¥118,000

イヌ平滑筋細胞増殖培地

500ml

CACn311500¥23,000

イヌ肺動脈平滑筋細胞 CnPASMC

イヌ骨芽細胞 CnOb

5

5×10 cells/バイアルCACn40605¥100,000

イヌ骨芽細胞 CnOb total kit

1キット

CACn406K05¥135,000

イヌ骨芽細胞増殖培地

500ml

CACn417500¥25,000

イヌ間葉系幹細胞 CnMSC

5×10 cells/バイアルCACn49205¥100,000

ラット脳微小血管内皮細胞 RBMVEC

5×105 cells/バイアルCAR84005¥127,000

ラット脳微小血管内皮細胞 RBMVEC total kit

1キット

CAR840K05¥165,000

ラット脳微小血管内皮細胞増殖培地

500ml

CAR811500¥22,000

ヒト末梢血単核球細胞 HPBMC, adult57

5×10 cells/バイアルCA690100a¥45,000

ヒト末梢血単核球細胞 HPBMC total kit adult

1キット

CA690K2100a¥58,000

ヒト赤血球 HRBC, adult8

5×10 cells/バイアルCA6941000a¥45,000

ヒト赤血球 HRBC total kit, adult

1キット

CA694K21000a¥58,000

ヒト血球系細胞増殖培地

250ml

CA615250¥15,000＊イヌ間葉系幹細胞の培養に最適です。
品 名 及 び 内 容

包間葉系幹細胞増殖培地 MF-medium®

装

500ml

8

Code No.
TMMFM-001

価

格¥35,000

No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 9

本製品はすでに販売を中止しております。

Products

ExactaCruzTM IP/Western Blot Reagents
免疫沈降（IP）実験に朗報。IP抗体やProtein A/Gなどに由来するノイズをカット。
免疫沈降実験において、沈降させたターゲットタンパク質をウェスタンブロッティング（WB）で検出する際、マトリックスから遊離したProtein A/GやIP抗体が検出されてしまい、目的タンパク質の検出が困難になることがありました。ExactaCruzTMはそれらの問題を解決するために開発された免疫沈降及び検出試薬です。用いるIP及びWB抗体の組み合わせから使用する試薬を選択することができます。

特 長 IP抗体のH鎖とL鎖や、ProteinA/G等に由来するバンドを検出しません。
・WB抗体とIP抗体との組み合わせに応じてキットを選択することにより、IP抗体に起因するノイズを検出せずに、目的バンドを高感度に検出することができます。
※マトリックスへの非特異吸着を回避するために、サンプルを必要に応じてPreclearing Matrixで処理すると良い場合があります。

A
B

図1．ExactaCruzTMの原理及び実施例
A, B: HeLa細胞ライゼート中のアクチンをIP後、ウェスタンブロッティングにより検出した例（ExactaCruzTM D使用）
aでは、IP抗体のHeavy chainとLight chainが検出されている。
【A:実験フロー、B:実験結果】

品 名 及 び 内 容

毒

毒

WB抗体の免疫動物種

図2．ExactaCruzTM実施例
U-937細胞ライゼート中のBcl-2を検出した例（a: マトリックスとしてProtein
A/G使用、b. ExactaCruzTM C使用）
aでは、Protein Gと思われるバンドが出現。（IP抗体：Code No.:SASC509,
WE: SASC492使用）

IP抗体の免疫動物種 包装 保存温度

Code No.

価格

ExactaCruzTM A
・免疫沈降マトリックス（25％V/V） 2ml
・WB用HRP標識プローブ（ExactaCruzTM probe）

Goat

Rabbit or Mouse

1kit

4℃

SASC45038¥29,000

ExactaCruzTM B

Mouse

Goat or Rabbit

1kit

4℃

SASC45039¥29,000

毒ExactaCruz

C

RabbitGoat or Mouse

1kit

4℃

SASC45040¥29,000

毒ExactaCruzTM D

Goat

Goat

1kit

4℃

SASC45041¥29,000

毒ExactaCruzTM E

Mouse

Mouse

1kit

4℃

SASC45042¥29,000

毒ExactaCruzTM F

RabbitRabbit

1kit

4℃

SASC45043¥29,000

TM

毒：本キットのパーツは、有機水銀化合物であるチメロサールが防腐剤として含まれます。ご注意ください。

品

名使用キットとIP抗体の種類

包

装

保存温度

Code No.

Preclearing Matrix A-Rabbit

ExactaCruzTM AでRabbit使用

1ml（25%V/V）

4℃

SASC45052¥12,000

Preclearing Matrix A-Mouse

ExactaCruzTM AでMouse使用

1ml（25%V/V）

4℃

SASC45058¥12,000

Preclearing Matrix B-Goat

ExactaCruzTM BでGoat使用

1ml（25%V/V）

4℃

SASC45053¥12,000

TM

価格Preclearing Matrix B-Rabbit

ExactaCruz

1ml（25%V/V）

4℃

SASC45059¥12,000

Preclearing Matrix C-Goat

ExactaCruzTM CでGoat使用

1ml（25%V/V）

4℃

SASC45054¥12,000

Preclearing Matrix C-Mouse

ExactaCruzTM CでMouse使用

1ml（25%V/V）

4℃

SASC45060¥12,000

Preclearing Matrix D

ExactaCruzTM DでGoat使用

1ml（25%V/V）

4℃

SASC45055¥12,000

Preclearing Matrix E

ExactaCruzTM EでMouse使用

1ml（25%V/V）

4℃

SASC45056¥12,000

1ml（25%V/V）

4℃

SASC45057¥12,000

Preclearing Matrix F

ExactaCruz

TM

BでRabbit使用

FでRabbit使用

9No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 10

本製品はすでに販売を中止しております。

Products

Monoclonal antibodies for infectious disease(Matched-pair components)

ウィルスの検出系構築に最適な抗体のペアをご提供いたします。
Fitzgerald社は高性能かつ高品質な抗体を数多く取扱っているメーカーです。下記リスト中の抗体は、Capture用、およびDetection用として相性の良さが確認されている組み合わせを示しています。

特長1 アッセイ系の構築に最適
・あらかじめ至適化された組み合わせの抗体をペアで用いることにより、簡便・高効率にアッセイ系を組み立てることができます。

特長2 高品質
・全てのクローンは高純度に精製されたマウス由来のモノクローナル抗体であり、様々なアッセイに安心してご使用いただ
けます。

Catalog#(Clone#)
FG10A02-C(M0111149)

格

製品・クローン情報¥48,000

容量：100μg
Immunogen: Adenovirus
Subclass: IgG2a
親和定数: N/A

Adenovirus
MAB

HBsAg(Ad/Ay) FG10H05-H
MAB(M701077)¥42,000

容量：1mgImmunogen: Highly purified
Hepatitis B Surface Antigen
Subclass: IgG2b
親和定数: 3.0×1010 L/M
交差性: AY＋AD specific

HBsAg MAB

HBcAg MAB

FG10H50-B(M41058)¥98,000

容量：1mgImmunogen: Purified HBcAg
Subclass: IgG2a
親和定数: 〜6×109 L/M
交差性: HBcAg 100%
HBsAg 0%, HBeAg 0%

HBcAq MAB

Influenza A
MAB

FG10I50¥56,000(M2110169＊)

容量：1mgImmunogen: Influenza A
from A/Texas strain
Subclass: IgG
親和定数: 〜1.2×1010 L/M
交差性: Recognizes thenucleoprotein. Reacts withall subtypes.

Influenza A
MAB

Influenza B
MAB

FG10I55-B(M2110171)

容量：1mgImmunogen: Influenza B
from B/Singapore strain
Subclass: IgG2
親和定数: 1.2×1010 L/M
交差性: Recognizes thenucleoprotein.

Competitive
ELISA

Capture antibody
Adenovirus
MAB

価¥71,000

Detection antibody

Catalog#(Clone#)
FG10A02-D(M0111148)

格

製品・クローン情報¥48,000価

容量：100μg
Immunogen: Adenovirus
Subclass: IgG2a
親和定数: N/A

FG10H05-G(M701079)¥42,000

容量：1mgImmunogen: Highly purified
Hepatitis B Surface Antigen
Subclass: IgG1
親和定数: 8.0×109 L/M
交差性: AY＋AD specific

FG10H50(M41059)¥98,000

容量：1mgImmunogen: Purified HBcAg
Subclass: IgG2b
親和定数: 〜3.3×109 L/M
交差性: HBcAg 100%
HBsAg 0%, HBeAg 0%

FG10I50¥56,000(M2110169*)(Multiple epitopes)

N/A

N/A

容量：1mgImmunogen: Influenza A
from A/Texas strain
Subclass: IgG
親和定数: 〜1.2×1010 L/M
交差性: Recognizes thenucleoprotein. Reacts withall subtypes.

N/A

Parvovirus
MAB

FG10P59-B(M1102914)¥70,000

容量：1mgImmunogen: canine
parvovirus
Subclass: IgG2a
親和定数: N/A
交差性: This clone is reactive
to canine parvovirus.

Parvovirus
MAB

FG10P59¥70,000(M01102913)

容量：1mgImmunogen: canine
parvovirus
Subclass: IgG2a
親和定数: N/A
交差性: This clone is reactive
to canine parvovirus.

Rotavirus
MAB

FG10R30(M29301＊)¥54,000

容量：200μg
Immunogen: Purified
Rotavirus
Subclass: IgG
親和定数: N/A
交差性: Specific to human,monkey & porcine p41
capsid protein.

Rotavirus
MAB

FG10R30¥54,000(M29301*)(Multiple epitopes)

容量：200μg
Immunogen: Purified
Rotavirus
Subclass: IgG
親和定数: N/A
交差性: Specific to human,monkey & porcine p41
capsid protein.

＊これらの抗体はCapture用およびDetection用の両方にご使用いただけます。
＊＊これらの抗体以外にも様々なcloneに由来する抗体もご用意しております。詳しくは、http://www.fitzgerald-fii.com/をご参照ください。

10

No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 11

本製品はすでに販売を中止しております。

Genomic DNA Purification System
品質に自信あり。確かな品質と工夫で様々な用途の核酸抽出を簡便・確実にサポート。

GENE ALLTM Genomic DNA Purification Systemは、スピンカラムを用いるGenomic DNA抽出試薬です。それぞれのサン
プルに適した核酸吸着用シリカメンブレン、及びスピンカラムを開発することにより、従来法に比べ高効率かつ簡便な抽出が可能となりました。

■GENE ALLTM Blood SV mini・Tissue SV mini・Cell SV mini
ヒト・動物組織・バクテリアなどからの高効率にDNAを抽出するためのキットです。
●GENE ALLTM Blood SV mini

●GENE ALLTM Tissue SV mini

サンプル：ヒト及び動物全血・血清など 〜200μl

サンプル：各種組織 〜25mg

抽出時間：20〜30min

抽出時間：25〜220min （溶解時間による）収

収量：4〜20μg（200μlサンプル）●GENE ALLTM Cell SV mini

●方式：
Spin/Vacuum●溶出液量：
30〜400μl

量：20〜60μg

A社

サンプル：各種バクテリア、酵母、培養細胞 1〜2ml培
養液から回収した細胞（グラム陽性菌や酵母などは別途細胞壁分解酵素を準備していただく必要があります）

GENE
GENE
ALLTM A社 ALLTM

M

抽出時間：30〜120min収

M：λ Hin dⅢマーカー
1〜4：Rat liver
5〜8：Rat kidney

量：10〜50μg

図1．Tissue SVを用いた組織由来DNA抽出例■GENE ALLTM Plant SV mini
植物組織から高効率に高純度のDNAを抽出するために開発されたスピンカラムキットです。シリカメンブレンカラムと試薬の改良で、さらに高効率な抽出が可能になりました。GMOサンプルなどにも対応可能です。
●GENE ALLTM Plant SV mini

GENE ALLTM

A社キット

サンプル：植物組織 〜100mg（Wet weight）

M 1 2

3 4 5

M 1 2

3 4 5

抽出時間：<40 min
収量：4〜40μg

溶出液量：30〜400μl
方式：Spin/Vacuum

M：λ Hin dⅢマーカー
図2．Plant SVを用いた植物ゲノムDNA抽出例
サンプル：シロイヌナズナ※Vacuumと表示したスピンカラムは市販のVacuum

品 名包

manifoldを用いるプロトコールにも対応可能です。

装

価

格

価格
改
しまし 定
た
1サンプル単価

保存温度

Code No.

危GENE ALLTM Blood SV mini

100回用
250回用

室温、-20℃

GB105101
GB105152¥30,000¥65,000

¥300
¥260

危

GENE ALLTM Tissue SV mini

100回用
250回用

室温、-20℃

GB104101
GB104152¥32,000¥65,000

¥320
¥260

危

GENE ALLTM Cell SV mini

100回用
250回用

室温、-20℃

GB106101
GB106152¥34,000¥68,000

¥340
¥272

危

GENE ALLTM Plant SV mini

100回用
250回用

室温、-20℃

GB117101
GB117152¥40,000¥78,000¥400¥312

危：本製品には、危険物第4類、アルコール類（等級Ⅱ）であるエタノールが含まれます。可燃性がございますので、お取扱いにはご注意ください。
※詳細に関しましては、http://www.generalbiosystem.com/english/index.htmlをご参照ください。

11No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 12

DNA fragment/Plasmid
Purification System

本製品はすでに販売を中止しております。

新発想のスピンカラム式核酸抽出試薬です。高効率に高品質な核酸を抽出することができます。
従来技術に様々な改良を加えたスピンカラム式DNA抽出キットです。用途に応じて最適なキットを選択できます。

■GENE ALLTM PCR・Gel・CleanUp SV mini

様々なDNAフラグメントを迅速かつ効率的に精製できます。

ダイマーやバッファー成分などを約6分で除去 アガロースゲルからの迅速・高効率回収

バッファー成分を約6分で除去。40bpから回収●GENE ALLTM PCR SV mini

●GENE ALLTM CleanUP SV mini

●GENE ALLTM Gel SV mini

サンプル：PCR溶液（〜100μl）
方
式： Spin/Vacuum
抽出時間：約6min
収率：〜90%

サンプル：アガロースゲルスライス（〜100mg）
方式： Spin/Vacuum
抽出時間：約15min
収率：約70〜90%

GENE
A社 ≦ ALLTM ＞ B社

GENE
A社 ≦ ALLTM ＞ B社

サンプル：酵素反応溶液等（〜50μl）
方
式： Spin/Vacuum
抽出時間：約6min
収率：〜90%

GENE
A社 ≦ ALLTM ＞ B社
Lane 1〜6：176bp DNAフラグメント
Lane 7〜12：757bp DNAフラグメント
Lane 13〜18：1.5kb DNAフラグメント
図2．Gel SV kitを用いたアガロース
ゲルからのDNA抽出効率比較

図1．回収可能な核酸分子サイズ■GENE ALLTM Plasmid SV mini・Quick・SV Midi シーケンス、制限酵素処理、in vitro転写、形質転換用の鋳型調製に最適です。
約10分間で作業完了

高性能なスタンダードタイプ●GENE ALLTM Plasmid Quick●GENE ALLTM Plasmid SV mini
Culture volume： 〜10ml
方
式： Spin/Vacuum
デブリス除去：遠心
抽出時間：約25min
収量：〜40μg
溶出液量：30〜200μl

Culture volume： 〜3ml
方
式： Spin
デブリス除去：EasyClearTM（吸着と並行）
抽出時間：約10min
収量：〜30μg
溶出液量：30〜200μl
デブリス除去カラムと核酸抽出カラムを重ねて使用可能

GENE
GENE
GENE
GENE
ALLTM ＞ A社 ALLTM ＞ A社 ALLTM ＝ A社 ALLTM ≧ A社

アルコール沈殿不要・遠心対応●GENE ALLTM Plasmid SV Midi
Culture volume： 〜100ml
方
式： Spin/Vacuum
デブリス除去：EasyClearTM
抽出時間：約50min
収量：〜300μg
溶出液量：400-2000μl※カラムは市販の50mlチューブにフィットするように設計されています。
※スイング式の遠心機が必要です。

品 名

装

図3．Plasmid SV mini kitを用いた抽出効率比較

価

格

価格
改
しまし 定
た
1サンプル単価

保存温度

Code No.

危GENE ALLTM Gel SV

50回用
200回用

室温

GB102150
GB102102¥10,000¥32,000

¥200
¥160

危

GENE ALLTM PCR SV

50回用
200回用

室温

GB103150
GB103102¥9,500¥27,000

¥190
¥135

危

GENE ALLTM CleanUP SV

50回用
200回用

室温

GB113150
GB113102¥9,500¥27,000

¥190
¥135

危

GENE ALLTM Plasmid SV mini

50回用
200回用

室温、-20℃

GB101150
GB101102¥9,000¥27,000

¥180
¥135

危

GENE ALLTM Plasmid Quick

50回用
200回用

室温、-20℃

GB101050
GB101002¥9,000¥27,000

¥180
¥135

危

¥26,000¥1,000GB101226¥45,000¥900
GB101250
危：本製品には、危険物第4類、アルコール類（等級Ⅱ）であるエタノールが含まれます。可燃性がございますので、お取扱いにはご注意ください。
※詳細に関しましては、http://www.generalbiosystem.com/english/index.htmlをご参照ください。
GENE ALLTM Plasmid SV Midi

包Lane 1〜4：pUC18、Lane 5〜8：pQE30、Lane 9〜12：pET22h、Lane 13〜16：pACYC184

26回用
50回用

室温、-20℃

12

No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 13

自己組織化単分子層（SAMs）形成試薬

本製品はすでに販売を中止しております。

金表面のSAMs研究や、相互作用研究のための金表面への官能基導入に有用なアルカンチオール試薬です。
PEG(ポリエチレングリコール)分子を有する試薬は非特異的吸着を低減する効果が期待できます。PEGを介して官能基を導入できる試薬も取り揃えています。

特長1 金表面への非特異吸着を軽減
・ポリエチレングリコール(PEG)を含む自己組織化単分子層(SAMs)形成試薬は、金表面にSAMsを形成し、非特異吸着を抑制します。（下図に示すように、数多くの論文で使用されている実績があります。）

特長2 センサー表面への様々な物質の固定に最適
・表面プラズモン共鳴、水晶発振子、金電極、金ナノ粒子などの表面改質、及び核酸・金表面上の自己組織化単分子層

蛋白・抗体・糖の固定化に好適です。

特長3 作成したいSAMsに合った試薬を選択することが可能
・芳香環型、三芳香環型ジチオール試薬は、より剛直なSAMsを形成し、二つのチオール基で強固に金表面に結合します。

［製品の紹介（一部）］

装

保存温度

Code No.

PEG3-OH alkanethiol

100mg

-20℃

SPSPT0011¥45,000

PEG6-COOH alkanethiol

100mg

-20℃

SPSPT0012¥65,000

PEG6-hydrazide alkanethiol

100mg

-20℃

SPSPT0012b¥72,000

PEG6-NHS ester alkanethiol

100mg

-20℃

SPSPT0012c¥72,000

Biotinylated PEG alkanethiol

100mg

-20℃

SPSPT0012d¥75,000

PEG3-OH aromatic dialkanethiol

100mg

-20℃

SPSPT0013¥45,000

mPEG3-bis-phenol A dialkanethiol

100mg

-20℃

SPSPT0004¥50,000

品 名 及 び 内 容

包ここで示した製品は一部であり、さまざまな自己組織化単分子層形成試薬が数多くあります。
取扱い全商品はhttp://www.toyobo.co.jp/seihin/xr/product̲feature/multisprinter/img/sensopath.pdf または
http://www.sensopath.com/を参照下さい

13

価

格

No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 14

SensoPath自己組織化単分子層形成試薬のSPRイメージングへの応用
東洋紡績（株）

バイオ開発部 京 基樹

はじめ に

使 用 し た 機 器・試 薬

表面プラズモン共鳴（SPR）や水晶発振子（QCM）などのラSPRイメージング装置：MultiSPRinter ®（TOYOBO：Codeベルフリー測定において、非特異的吸着と特異的吸着を見分ける

No.:SPR-203）、チップ：MultiSPRinter ® Auチップ（TOYO

決定的な手段がないのが現状です。よって、いかに非特異的吸着

BO:Code No.:SPR-200）、anti-actin抗体（Chemicon）、を低減させるかが重要となります。ポリエチレングリコール

SAMs形成試薬：PEG 3 -OH alkanethiol（HS-PEG-OH:（PEG）は生体材料（バイオマテリアル）研究の分野で蛋白質やSensoPath）、PEG6-COOH alkanethiol（HS-PEG-COOH:

細胞の吸着を抑制することが以前より知られています。

SensoPath）11-CDT（同仁化学）、架橋剤：EDC（Pierce）、

SensoPath社のPEGを有する自己組織化単分子層（SAMs）形

NHS（Pierce）、ブロッキング剤：Amino-dPEG 4TM alcohol

成試薬を用いて抗体を金表面に固定化することで、SPRイメージ（H2N-PEG-OH：Quanta Biodesign）、リン酸緩衝液（PBS：

ング測定における非特異的吸着を抑制できた例を紹介します。

10mM Phosphate, 150mM NaCl, pH7.4）、SPR測定用緩衝液（20mM HEPES, 150mM NaCl, 2.5% BSA, pH7.2）

ア レ イ 作 製 方 法 （図1）（a）カルボキシル基の導入
HS-PEG-OHのエタノール溶液（1mM）にAuチップを18時間浸漬し、チップ全面にPEGを導入しました。次にスポット部分に312nmの紫外光を2時間照射し、照射部分のアルカンチオールを除去し、以下の、三種類の方法でカルボキシル基を導入しました。
Scheme A……疎水性アルカン鎖のみを有する11-CDTを導入
Scheme B……PEG鎖を有するHS-PEG-COOHを導入
Scheme C……HS-PEG-COOHとHS-PEG-OH とを1:9の割合で導入
いずれの場合においてもアルカンチオールのエタノール溶液の濃度を1mMとし、紫外線照射処理したチップを2時間浸漬しました。
（b）抗体の固定化
カルボキシル基を導入した金チップに0.2M EDC/0.05M NHSを2時

図1．金表面への抗体固定化方法

間反応させ、カルボキシル基をスクシンイミド化した後、0.2mg/mlの
anti-actin抗体溶液をMultiSPRinter ®スポッターをスポッティングし、抗体を固定化しました（室温・2時間）。未反応のスクシンイミド基は2mg/mlのAmino-dPEG4TM alcoholにてブロッキングしました（室温・1時間）。

測 定 と 結 果 （図2）ラット脳ライゼート200μlをSPRイメージング装置に還流し、抗アクチン抗体のスポットと、
ブランクスポットにおけるシグナル変化をモニターしました。Scheme Aの場合、ブランクスポ
ットへの非特異的吸着が顕著でした。これは11-CDTの疎水性が高かったためと考えられました。
親水性の高いPEGを介して抗体を固定化したScheme Bの場合、非特異的吸着は緩和されましたが、まだ不十分であり、これは表面の電荷によるもと考えられました。PEG鎖を有し、かつ表面の陰電荷を低減したScheme Cにおいては、非特異的吸着はほぼ抑制され、抗アクチン抗体への結合のみが観察できました。このように、PEG鎖を有するアルカンチオールを用い、表面のチャージを制御することで、SPRセンサー表面への非特異的吸着を抑制することに成功しました。
図2．抗アクチン抗体とブランクのSPR
測定結果

参考文献

1）Kyo, M., Usui-Aoki, K., Koga, H. Analytical Chemistry 77, 7115-7121 （2005）2）Usui-Aoki, K., Kyo, M., Kawai, M, Murakami, M., Imai, K., Shimada, K., Koga, H. Frontiers in Drug Design &Discovery, 2, 23-22 （2006）
3）京基樹, 表面プラズモン共鳴イメージングの生体分子解析への応用, 化学工業（化学工業社）2006年7月号, vol. 57, No.7,
p547-552, ISSN: 0451-2014
SPRイメージング装置：MultiSPRinter ®の詳細に関しましては、弊社ホームページ（http://www.toyobo.co.jp/bio）
でご覧頂くことができます。

14

No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 15

KOD-Plus-/
KOD-Plus- Ver.2

品名

包装

Code No.

価格

KOD-Plus-

200U× 1本
200U× 5本
200U×11本

KOD-201
KOD-202
KOD-203￥30,000￥120,000￥230,000

KOD-Plus- Ver.2

200U× 1本

KOD-211￥32,000

高正確性PCR酵素にありがちな「増えない」を解消。広いターゲットに対して確実な増幅をお約束します。

上記特長に加えて

上記特長に加えて

はじめ に
KOD-Plus-は、最高水準のFidelity（正確性・忠実性）を持つ
図1．KOD関連試薬の進化

KOD DNA Polymeraseをベースとして開発された高正確性
PCR用酵素です。本酵素は、Taq DNA Polymeraseの約82倍となります（ホットスタート）。

の正確性を有し、クローニングなどの正確性を要する用途に適します。また、本酵素には2種類のモノクローナル中和抗体が混合

KOD-Plus-Ver.2は、KOD-Plus-の反応bufferをさらに改良されており、購入いただいた段階でKOD DNA Polymeraseのすることにより、KOD-Plus-の長所はそのままに、高いリライ

DNA Polymerase活性と3'→5'Exonuclease（Proofreading）

アビリティーを付与したDNA polymeraseです。PCRの確実活性は完全に抑えられた状態になっています。これらの抗体は最性・成功率は、KOD-Plus-に比べ確実に向上しており、更に初の変性段階（94℃・2min）で失活し、PCRに影響は及ぼし

様々な用途で力を発揮します。

ません。この改善により、非特異反応の主要因である｢PCRの適

今回は、本酵素を用いてRT-PCRを実施した実験例をもとに、温に達するまでの副反応｣を大幅に抑えることができ、その結果、

本酵素をご使用いただく上でのコツ・注意点をご紹介させていた

高い特異性と優れたPCRパフォーマンスを実現することが可能

だきます。

方

法

RT反応は、HeLa Total RNAの希釈系列（10、50、100、200、300、400、500ng/μl）をサンプルとして、弊社の以下となっていますが、今回は、PCR反応におけるRNAの許容量をみるために50ng〜2.5μgのRNAを使用しました。

1st ストランドcDNA合成キットReverTra Ace -α-®（CodePCR反応については、KOD-Plus-、KOD-Plus- Ver.2を以下

No: FSK-101）を用いて、以下のように実施しました。なお、の条件にて使用しました。また、PCR性能の比較のため、他社の本キットの取扱い説明書では、Total RNAの推奨使用量は1μg

High Fidelity PCR酵素を取扱い説明書に従って使用しました。

〈RT反応〉HeLa Total RNAの希釈系列
5（μl）
Oligo（dT）20 primer（10 pmol/μl）
5
RNase Free H2O
2
Total
12μl
↓ 65℃, 5min後、on iceにて急冷↓ （以下の試薬を追加）
4（μl）
5×RT Buffer
2
10mM dNTPs
1
RNase Inhibitor〈逆転写酵素〉 1
ReverTra Ace®（10U/μl）
20μl
Total
↓42℃, 60min → 85℃, 5min →（4℃,∞）↓〈PCR反応〉

KOD-PlusKOD-Plus- Ver.2
D.W.
32（μl）
31（μl）
10×Buffer for KOD-Plus5
10×Buffer for KOD-Plus- Ver.2
52mM dNTPs
5
525mM MgSO4
2
3
Primer F（10μM）
1.5
1.5Primer R（10μM）
1.5
1.5
逆転写反応溶液
22
KOD-Plus-（1.0U/μl）
1
1
Total
50μl
50μl
（サイクルは、KOD-Plus-、KOD-Plus-Ver.2共通で実施）
94℃, 2min.
98℃, 10sec.
（Tm-5）℃, 30sec. ×25〜35cycles（X：ターゲット鎖長1kbあたり1min.で設定）
68℃, Xmin

15

No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 16

結果及び考察Transferrin recepter（3.5kb）

Polymerase ε（6.8kb）

M 1 2 3 4 5 6 7 8

M 1 2 3 4 5 6 7 8

RT反応
HeLa total RNA 50ng〜2500ngをサンプルとして20ulの系で実施↓
PCR反応
逆転写反応液 2μlを鋳型に50μlの系で実施

KOD-Plus-

KOD-PlusVer.2

Lane M : 1kb DNA ラダーマーカー
1 : Negative Control
2 : HeLa total RNA
50ng（ 5ng）
3 : HeLa total RNA 250ng（ 25ng）
4 : HeLa total RNA 500ng（ 50ng）
5 : HeLa total RNA 1000ng（100ng）
6 : HeLa total RNA 1500ng（150ng）
7 : HeLa total RNA 2000ng（200ng）
8 : HeLa total RNA 2500ng（250ng）

A社 High-Fidelity
PCR Enzyme（）内はPCR反応への持込量

図2．RT-PCRにおけるRNAサンプル量の検討

今回、3.5kbと6.8kbの2種類の遺伝子をターゲットとしてが有効な対策であると考えられます。また、発現量の少ない遺伝

RT-PCRを試みました。その結果、KOD-Plus-、及びKOD-

子をターゲットとする場合や、cDNAライブラリーの調製等で、Plus- Ver.2のいずれにおいても、エキストラバンドのない明瞭

やむを得ず大量のRNAを使用しなければならない場合には、なバンドを得ることができました。特に、KOD-Plus- Ver.2でTotal RNAではなくpoly（A）＋RNAを使用する、もしくはRT反は、より広いRNAの濃度幅で増幅が得られており、PCRが応後に過剰の鋳型RNAをアルカリ加水分解等により除去する、かことが有効であると思われます。

かる 範囲が確実に広がっていることが確認できました（図2）。
一方、本結果から、過剰のRNAを用いて合成したcDNA溶液

また、RNAによるPCR阻害は、図3の例のように、DNA鋳型を鋳型とした場合、増幅産物が得られにくくなることも明らかとに大量のRNAが混入している場合にも起こり得ますので、ゲノなりました。ターゲットにより若干の差はありますが、KOD-

ムDNAを鋳型とする場合においても、同様の注意が必要です。

Plus-では〜100ng、KOD-Plus- Ver.2では〜150ng相当以下

クローニング用のRT-PCRも、コツさえつかめばそれほど難しのRNAから得られたcDNA溶液を鋳型にした場合にのみ良好な

い実験ではありません。これを機に、一度プロトコールを見直さ増幅が得られました。この原因としては、PCR反応に持ち越されてみてはいかがでしょうか？

れた過剰のRNAによるPCR反応の阻害が疑われました（逆転写反応が阻害されていないことは別途確認済みで

KOD-Plus- Ver.2

KOD-Plus-す）。

1 2 3 4 5 6 7 8 M 1 2 3 4 5 6 7 8

図3は、ヒトゲノムDNAを鋳型としたPCRにおいて様々な濃度のTotal RNAを添加した場合の影響を示しています。この結果から、cDNA合成溶液に含まれる過剰のターゲット:
ヒトゲノムDNA上のMyosin h.c.
（5.2kb）

RNAはPCR効率に明らかに影響することが示唆されます。
過剰なRNAによるPCR阻害の原因としては、RNAがLane M : 1kb DNA ラダーマーカー
1 : ヒトゲノムDNA
0ng + HeLa Total RNA
0ng
2 : ヒトゲノムDNA
0ng + HeLa Total RNA 50ng
3 : ヒトゲノムDNA 50ng + HeLa Total RNA
0ng
4 : ヒトゲノムDNA 50ng + HeLa Total RNA 50ng
5 : ヒトゲノムDNA 50ng + HeLa Total RNA 100ng
6 : ヒトゲノムDNA 50ng + HeLa Total RNA 150ng
7 : ヒトゲノムDNA 50ng + HeLa Total RNA 200ng
8 : ヒトゲノムDNA 50ng + HeLa Total RNA 250ng

PCR反応に必要なMg2+をキレートするためと考えられま
2+す（RT反応は比較的高濃度のMg を含むbufferが使用されるため阻害は受けません）。
RT-PCR時に増幅が見られないことは良く見かけるトラ
ブルの一つです。今回の結果から、そのような場合には、RNA濃度やcDNA溶液の持ち込み量を増やすより、むし

図3．ヒトゲノムDNAを鋳型としたPCRにおけるコンタミRNAの影響

ろ、RT反応液の添加量を減らすか、Mg濃度を上げること

品

名

逆転写酵素

ReverTra Ace®（100U/μl）
1stストランドcDNA合成キット

ReverTra Ace -α-®
High‐Fidelity RT-PCRキット

ReverTra -Plus-TM
KOD/KOD-Plus-用TAクローニングキット

TArget CloneTM -Plus-

包

装

保存温度

Code No.

価10,000U
50,000U-20℃

TRT-101
TRT-102￥15,000￥60,000

100回用

-20℃

FSK-101￥53,000

20回用
100回用

-20℃

PCR-501T
PCR-501￥19,000￥70,000

10回用

-20℃

TAK-201￥16,000

16

格No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 17

本コーナーでは、シリーズで販売している試薬・キットを取り上げ、各用途に最も適した試薬の組み合わせ、使用方法、及びコツなどについて解説いたします。

Can Get Signal ®シリーズを用いる
各種免疫アッセイ
免疫反応におけるシグナルの増強、及び特異性アップに効果があります。
はじめ に
Can Get Signal ®シリーズは、ウェスタンブロッティングやELISA、免疫組織染色（IHC）、及び蛍光免疫染色など、抗原抗体反応を用いる解析でしばしば問題となる「感度不足」や「高いバックグラウンド」を改善するために開発された免疫アッセイ用の反応促進試薬です。本試薬は、特異性を保ちつつ、抗原-抗体反応を促進する効果があります。また、特に反応性が低い抗体ほど顕著な改善効果を示す傾向があることが確認されています。ご使用方法は、従来のTBS-Tなどの抗体反応用のバッファーを、本製品のバッファーに変更
するだけです。

試薬の選択
ウェスタンブロッティングやドットブロッティング、ELISA等のアッセイ系では、Can Get Signal ® を使用します。Can Get

Signal ® は1次抗体用のSolution 1と2次抗体用のSolution 2の2種類の溶液のセットとなっています。それぞれ1次抗体、2次、
5%BSA / TBS-Tなど)抗体の反応液として使用します。標識酵素や色素を結合した一次
抗 体 を 用 い る 場 合（ 直 接 法 ）は 、 S o l u t i o n 2 を 用 い ま す 。
Solution 2は標識体に由来する非特異凝集を起こりにくくする組成となっています。ただし、抗体や抗原の種類によっては、

1

1

2

2

Solution 1を使用した方が良い結果を得られる場合もあります
ので、一度ご検討いただくことをお薦めします。また、サンドイ
ッチELISAにおける固相抗体と抗原との反応時には、抗原の反応液としてSolution 1を使用します。
Solution 1とSolution 2は単品で購入することも可能です。

Can Get Signal ® immunostain は、組織、細胞などの免疫染色において、より鮮明な染色像が得られるように最適化した姉妹品です。本品はSolution AとSolution Bの2種類の溶液からなります。これらの溶液は、それぞれが1次抗体用、および2次抗体用として使用可能です（それぞれ単品で使用します）。それ
ぞれの溶液は、抗体や染色をするサンプルに対する反応性が異なります。実験により適した方を選択の上ご使用いただくようになっています。初回のご使用では、2種類の溶液がセットになった

Can Get Signal ®使用

従来法

Starter Set(NKB-401)を用いて予備検討を行うことをお薦め

図1．Can Get Signal ®を使用したウェスタンブロッティングのフローします。
表1. 試薬選択の指標

商品名

Can Get Signal ®

用途ウエスタンブロッティング
ドットブロッティング
ELISA等

使用可能な検出系
発色、化学発光、蛍光等

使

用

法

■ウェスタンブロッティング・ドットブロット（2種類の抗体を使用する場合）
1次抗体反応 ⇒ Solution 1
2次（標識）抗体反応 ⇒ Solution 2■サンドイッチELISA
固相抗体 ⇒ 炭酸バッファーなどで固定化
抗原反応 ⇒ Solution 1
1次抗体反応 ⇒ Solution 1
2次（標識）抗体反応 ⇒ Solution 2※直接標識抗体を使用する場合
標識抗体反応 ⇒ Solution 2（場合によってSolution 1）

Can Get Signal ®
immunostain

免疫染色（組織・細胞等）

発色、化学発光、蛍光等

17●パターン１
1次抗体反応 ⇒ Solution A
2次抗体反応 ⇒ Solution A●パターン2
1次抗体反応 ⇒ Solution B
2次抗体反応 ⇒ Solution B※初回使用時に両方の試薬をテストするNo.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 18

使用法と結果（1）ウェスタンブロッティング、ELISA等
電気泳動、膜へのトランスファー、及びブロッキングは、

従来法（TBS-T）Can Get Signal ®

一般的なプロトコールに従います。（特に変える必要はあ

EGFRりません）。抗原抗体反応に、Can Get Signal ® を用います。（Can Get Signal ®はブロッキングや洗浄には使用できませんので、ご注意ください）。具体的な使用方法は、
表１の組み合わせに従います。図2に実施例を示しますが、Can Get Signal ®を用いて抗体を希釈したものでは、非特図2．ウェスタンブロッティング
によるEGFRの検出例

異的な反応が非常に低く抑えられた上、ターゲットのバンドのシグナルも非常に明瞭で、高いS/N比でEGFRを検出することができました。
また、従来法でも十分にシグナルが得られていた系においても、Can Get Signal ®と組み合わせることで、使用す

従来法（TBS-T）

Can Get Signal ®

1：10001：5000る抗体量を節約しつつ従来と同等以上のシグナルを得ることも可能です（図3）。また、非特異反応が特に出やすい実験系などでは、抗体反応時にCan Get Signal ®にブロッキ
ング剤を混合して使用することもできます。
（2）免疫染色サンプルとして、ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)切片や、凍結切片、固定化した細胞など、さまざ
まな種類のものを用いることができます。固定化、賦活化、及びブロッキング等は従来と同じ方法で行います。また、
ABC法などでのアビジン-ビオチン反応時も従来法に従います。

図3．His-ERK2タンパク質のウェスタンブロッティングによる検出例（抗Hisタグ抗体使用）
従来法（1次抗体濃度 1:1000）では、特異的なバンドの出現は認められますが、バッ
クグラウンドが高く、非特異バンドの出現や、マーカーへの強い非特異反応も見られます。一方、Can Get Signal ®（1次抗体濃度 1：5000）使用時は、抗体量を1/5に減らすことで、同等の感度で、高いS/N比の結果を得ることができました。

Can Get Signal ® immunostain は抗体反応時の溶液としてのみ使用します。抗体濃度は、従来と同じ、もしくは薄めに設定します。更に、蛍光・発光による検出系におい従来法（normal serum/PBS）

Can Get Signal ®
immunostainては、露光時間を短縮することによって、高いS/N比の像を効果的に得ることができることもあります(図4)。
従来、低い抗体力価による検出感度不足の問題は、添加する抗体濃度を高めることにより補われてきましたが、バックグラウンドや非特異染色が増加する原因ともなっていました。本製品の使用で抗原抗体反応を促進することにより、抗体量を増やすことなく従来より感度を上げることが可能です。今までご使用になられたことのない方、是非一度お試しください。

品 名 及 び 内 容

Can Get Signal ®
Solution 1（for primary antibody）
Solution 2（for secondary antibody）

図4．Swiss 3T3細胞におけるPaxillinの蛍光染色
従来法と比べ、Can Get Signal ® immunostainにおいては、シグナルが増強され、露光時間を短縮（3秒→1秒）することで、バックグラウンドの増加を抑えたS/N比の高い像を得ることができました。データ提供: 東京工業大学・原田伊知郎先生。

包

装

保存温度

各250mlCode No.

価

格NKB-101¥30,000

NKB-101T¥10,000

4℃
各50ml

®

Can Get Signal
Solution 1（for primary antibody）

250ml

4℃

NKB-201¥17,000

Can Get Signal
Solution 2（for secondary antibody）

250ml

4℃

NKB-301¥17,000

Can Get Signal ® immunostain
Starter Set Solution A
Solution B

各5ml

4℃

NKB-401¥12,000

NKB-501¥30,000

NKB-502¥70,000

NKB-601¥30,000

NKB-602¥70,000®

Can Get Signal
Solution A®

Can Get Signal
Solution B®

immunostain

20ml×1本

4℃

20ml×4本

immunostain

20ml×1本
20ml×4本

18

4℃

No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 19

本製品はすでに販売を中止しております。

SNAP-tagTM■詳細な実施例等はcovalys社のホームページ：
http://www.covalys.com/でご覧いただけます。

一つのタグで様々な用途に用いることのできる万能タグです。様々な可能性を是非一度お試しください。
はじめ に
TM

6

SNAP-tag とは、Human 0 -alkylguanine-DNA alkyltransferase（hAGT）を遺伝子工学的手法により改良した約20kDaの酵素タグであり、ベンジルグアニン（BG）やクロロベンジルピリミジン基を有する人工基質と共有結合を介して結合する性質を有します。よって、人工の蛍光基質やリンカーを反応させることで目的タン
パク質に蛍光を付加したり（図1）、固相へ固定化する（図2）ことができます。実験手法はいたってシンプルです（図3）。また、このタグはダイマー等を形成せず、また溶解性にも優れる特長を有しています。

※目的遺伝子のサブクローニングには、
KOD-Plus-等の高正確性polymeraseのご使用をお薦めいたします。

培養動物細胞

図1．蛍光基質との特異的結合
SNAP-tagTM（金色）を融合したタンパク質（青色）と蛍光基質（緑色）との反応

図2．固相への特異的結合
SNAP-tag TM（金色）を結合したタンパク質（青色）のBG-Linkerを介した固定化。

図3．実験フローin vivo イ メ ー ジ ン グ ・ パ ル チ ェ ー ス 実 験
人工基質のうち、細胞への浸透性（permeability）の良いものは細胞のin vivoイメージングやパルスチェース実験等に用いることができます（SNAP-cellTM kit）。細胞を用いたイメージング実験例を図4に示します。まず、培地中に基質を添加し、SNAP-tagTMと酵素
反応させます。その後、培地交換を行うことで未反応の蛍光基質を除去した後、目的のタンパク質に結合した基質を検出します。この反応で、その時点で発現していたSNAP-tagTM融合タンパク質のみがラベルされます。
よって、そのラベルを追跡するような実験に向きます（パルスチェース実験）。このような実験は、蛍光タンパク質を用いる実験では、恒常的にタンパク質発現がみられるため困難です。さらに、蛍光タンパク質と違って有機溶媒等で蛍光を失わない特長もあります。
図5にミトコンドリア局在タンパク質をBG-505（緑）、及びBG-430（青）にて検出した例を示します。さらに、例えば膜タンパク質の細胞外ドメインにSNAP-tag TMを融合したような場合では、細胞浸透性が低い
SNAP-vitroTM用の基質であるBG-488（緑）などを用いて染色することも可能です（図6）。この例では、GPCRの一種であるNK1リセプターを蛍光ラベルしておき、リガンド刺激によりインタナリゼーションを観察しています。SNAP-vitroTM kit用の基質は細胞浸透性が低いので、さらにバックグラウンドを抑えることが可能でした。

a

b

a

図4．in vivo イメージングの実験フロー（核局在タンパク質検出例）※各キットは、蛍光強度・光耐性に優れた蛍光色素を使用しています。

b
細 胞：COS-7
ターゲットタンパク質：
SNAP/NK1 receptor
基 質：BG-488 (SNAP-vitroTM kit)

細 胞：COS-7
ターゲットタンパク質：TOM20/SNAP（a）、
COX-8-2/SNAP（b）
基 質：BG-505（SNAP-cellTM 505 kit）
（a）、
（b）
BG-430（SNAP-cellTM 430 kit）

cda. BG-488によるSNAP/NK1 R染色（Green channel）
b. TMRラベルSPリガンド添加後（Green channel）
c. TMRラベルSPリガンド添加後（Red channel）
d. Over lay of b and c

図6．GPCRのinternalization検出例

図5．ミトコンドリア局在タンパク質検出例

19No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 20

in vitro ラ ベ リ ン グ
細胞浸透性のない基質は、 in vitro ラベル用の基質として使用されます。
（SNAP-vitroTM Kit）現在、短波長から赤外域まで13種類の波長の基質が入手可能です。in vitro ラベル用の基質のうち、2種類はラベル後にSDS-PAGEなどで融合タンパク質を検出する際に有用であり、別途 SNAP-vistaTM kit として販売されています。SNAP-tagTMの活性のチェックなどにも有効です。
これらのキットを用いた蛍光タンパク質の作製フローを図7に示します。ラ
ベルされたタンパク質は、相互作用解析など、様々な用途に用いることが可能です。また、BG-Biotin Kit を用いてビオチン標識することも可能です。
図7．蛍光タンパク質作製フロー

固定化
種々のリンカーを用いることにより、タンパク質を固相に固定化することが可能です。この方法を用いて、表面プラズモン共鳴センサーなどでのタンパク質の固定化などに応用することができます。図8は、カルボキシル基を有する金チップの表面にアミノカップリ
ング法を用いてBG-PEG-NH2を結合させ、使用した例を示しています。この実験では、この表面に種々のSNAP融合タンパク質を反応させ固定化した後に、それぞれ抗体を用いて検出を行いました。その結果、それぞれ特異的、かつ高感度に反応を検出することができました（図8）。Covalys社では、ここでご紹介した以外にも様々なリンカーを揃えており、webサイトでご参照いただけます。
さらに、BGリンカーを結合させたセファロースビーズ（SNAP-Capture Resin-S）を用いることで、固定化酵素実験や、プルダウ
ン実験を行うことも可能ですanti Flag
100

80

80

SPR signal

100 Purified Flag-SNAP-6xH

60

（図9）
。

anti Flag

SNAP-tagTMは、1種類のタ

60

Lysate Flag-SNAP-6xH

40

40

20

20

0

グで様々なアッセイが可能となる様々な可能性を秘めたユニー
Purified Flag-SNAP-6xH

クなタグといえます。是非一度、

0
PEG-BG surface

-20
0

200

-20

400
600
Time(sec)

800

1000

お試しください。

PEG-COOH surface
0

500

1000
Time(sec)

1500

図9．SNAP-Capture Resin-Sの構造〈イメージ画像〉
SNAP(L)SNAP6xH(L)

Flag-SNAP6xH(L)SNAP6xH(P)Flag-SNAP6xH(P)
L: Lysate、P: Purified

参考文献
PEG-BG

1）Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101(27): 99559959(2004)〈イメージング〉
2）Bio Techniques, 39(6): 809-812 (2005)〈イメージング〉
3）Anal. Biochem. 333(2): 280-288 (2004)〈SPR〉

PEG-COOH(Control)

図8．表面プラズモン共鳴センサーを用いた解析例
表面プラズモン共鳴センサー（MultiSPRinter®（SRP-101））を使用して、SNAPtagTM融合タンパク質と抗体との特異的反応を検出しました。

2006年9月19日〜12月29日までにSNAP-cell TM Trial kitを購入いただいた方全てに、SNAP-express
Mammalian Stable Expression kitを無償添付いたします。
¡2006年9月19日より、SNAP-cellTM TMR kit添付基質量及び推奨濃度が変更されます。
¡SNAP-blockTM kitにさらに効果の期待できるSNAP blockTM cell kitが追加されます。このキットは全てのSNAP-cellTMシ
リーズに添付されます。従来のSNAP-blockTM kitはSNAP-blockTM vitro kitという名称に変わります。

価

価格
改
しまし 定
た
格

包装

Code No.

保存温度

Ex357nm, Em437nm（DAPI filter）
〈青〉

1kit

CVSK094-20℃¥95,000

SNAP-cellTM 430 Starter Kit

Ex421nm, Em444, 487nm（Blue laser filter用）
〈青〉

1kit

CVSK072-20℃¥95,000

SNAP-cellTM 505 Starter Kit

Ex504nm, Em532nm（fluorescen filter用）
〈緑〉

1kit

CVSK003-20℃¥95,000

品 名 及 び 内 容

危SNAP-cellTM 360 Starter Kit

危
危

TM

危

SNAP-cell危SNAP-cellTM Trial kit

TMR-Star Starter Kit

TM

危

SNAP-block危

BG-Biotin 100-Kit
TMcell Kit

危

SNAP-vitro

危SNAP-vitroTM 488 Starter Kit

425 Starter Kit

備考Ex554nm, Em580nm（rhodamine filter用）
〈赤〉

1kit

CVSK039-20℃¥95,000

505、TMRキット含有、
コントロールプラスミド付＊

1kit

CVLK097-20℃¥25,000

BTP（Bromothenly Pteridine）

1kit

CVBK096-20℃¥35,000−

1kit

CVLK034-20℃¥73,000

Ex438nm, Em489nm（405nm or 440nm laser用）

1kit

CVSK103-20℃¥78,000

Ex506nm, Em526nm（flurorescein filter 用）

1kit

CVSK005-20℃¥78,000

20

No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 21

価

価格
改
しまし 定
た
格

包装

Code No.

保存温度

Ex536nm, Em554nm（rhodamine filter 用）

1kit

CVSK007-20℃¥78,000

SNAP-vitroTM 547 Starter Kit

Ex554nm, Em568nm（TAMRA or Cy3 filter用）

1kit

CVSK041-20℃¥78,000

SNAP-vitroTM 600 Starter Kit

Ex606nm, Em626nm（Texas red filter 用）

1kit

CVSK013-20℃¥78,000

品 名 及 び 内 容

危SNAP-vitroTM 532 Starter Kit

危
危

TM

備

考

危

SNAP-vitro

632 Starter Kit

Ex637nm, Em657nm（635nm diode laser用 ）1kit

CVSK015-20℃¥78,000

危

SNAP-vitroTM 647 Starter Kit

Ex660nm, Em673nm（650nm diode laser用 ）1kit

CVSK043-20℃¥78,000

TM

危

SNAP-vitro

Ex693nm, Em708nm（680nm diode laser用）

1kit

CVSK098-20℃¥78,000

危

SNAP-vitroTM 732 Starter Kit

Ex732nm, Em747nm（Cy7 filter用）

1kit

CVSK074-20℃¥78,000

危

SNAP-vitroTM 747 Starter Kit

Ex752nm, Em763nm（Cy7 filter用）

1kit

CVSK076-20℃¥78,000

Ex782nm, Em789nm（780nm laser用）

1kit

CVSK100-20℃¥78,000

今までのSNAP-blockTM Kitに相当します

1kit

CVBK021-20℃¥35,000

Ex390nm, Em470nnm（UV transilluminator）

1kit

CVLK011-20℃¥25,000

Ex500nm, Em524nm（488nm fluorescence scanner） 1kit

CVLK012-20℃¥25,000TM

682 Starter Kit

危SNAP-vitro

危SNAP-blockTM vitro Kit
TM

782 Starter Kit

危SNAP-vista

危SNAP-vistaTM Green 50-Kit

Blue 50-Kit

TM

SNAP-sourse plasmid pSS26b

SNAP-tag 配列切り出し用（バクテリア細胞用）

5μg

CVPL022-20℃¥21,000

SNAP-sourse plasmid pSS26m

SNAP-tagTM配列切り出し用（哺乳類細胞用）

5μg

CVPL023-20℃¥21,000＊＊

SNAP-expression plasmid pSET7-26b

バクテリア細胞用発現プラスミド

5μg

CVPL024-20℃¥52,000

SNAP-express Mammalian Transient Expression kit＊＊＊
哺乳類細胞用発現プラスミド（コントロール付）

1kit

CVPL038-20℃¥52,000＊＊＊＊

SNAP-express Mammalian Stable Expression kit

哺乳類細胞用発現プラスミド（コントロール付）

1kit

CVPL059-20℃¥52,000

SNAP Capture Resin-S

プルダウンアッセイ、固定化酵素用

1ml

CVSK048-4℃¥35,000

SNAP Capture Resin-S

同上

2.5ml CVIM049-4℃¥78,000※本キットのパーツには、消防法における第4類第3石油類（等級Ⅲ）であるジメチルスルホキシド（DMSO）が含まれます。可燃性がございますので、お取扱いにはご注意ください。
※それぞれ大容量キットを準備しております。また、別のリンカー類：BG-NH2、BG-PEG-Maleimide、BG-GLA、BG-PYN、BG-N3、BG-PEG-N3も取り揃えております。別途ごお問い合わせください。
※SNAP-tagTMの研究用途での使用に際しましては書面での契約等は一切必要ありません。研究用途以外で使用する場合は弊社までお問い合わせください。
※使用する基質・リガンドをCovalys社以外で作製、入手する場合は別途ライセンス契約の必要があります。詳細につきましては弊社までお問い合わせください。
＊本製品にはコントロールプラスミドとして、pSEMS1-Cox8A-26mが供給されます。このプラスミドはSNAP-TagTMにミトコンドリア局在シグナルが付加されたタンパク質を発現します。コントロール実験に使用することが可能です。
＊＊SNAP-tagTMの下流にマルチクローニングサイトがあり、N末端側にSNAP-tagTMを融合することができます。本プラスミドの発現は、T7 RNA polymerase遺伝子を保有する大腸菌株を用いて行ってください。SNAP-tagTMのcodon usageはバクテリア型になっています。
＊＊＊SNAP-tagTMの上流および下流にマルチクローニングサイトがあり、N末およびC末にSNAP-TagTMを融合することができます。CMVプロモーターを有しており、一過性発現用にお使いいただけます。SNAP-tagTMのcodon usageは哺乳類型になっています。また、本製品にはコントロールプラスミドとして、pSEMXT-26m-CaaXが供給されます。このプラスミドはSNAP-tagTMに膜局在シグナルが付加されたタンパク質（SNAP/CaaX）を発現します。コントロール実験に使用することが可能です。
（9/19より内容が変更になりました）
TM
TM＊＊＊＊SNAP-tag の上流および下流にマルチクローニングサイトがあり、N末およびC末にSNAP-tag を融合することができます。安定発現用にお使いいただけます。SNAPtagTMのcodon usageは哺乳類型になっています。また、本製品にはコントロールプラスミドとして、pSEMS1-H2B 2mとpSEMS1-Cox8A-26mが供給されます。このプラスミドはSNAP-tagTMに核局在シグナル、およびミトコンドリア局在シグナルが付加されたタンパク質を発現します。コントロール実験に使用することが可能です。

実験のコツ、成功・失敗例を募集し掲載する、お客様とのコミュニケーションのコーナーです。

Reports
タンパクさん、ご冥福をお祈りいたします
匿名希望CKさん
2、3年前の話です。私が凝集傾向にあるタンパク質の精製を行っていた時にその事件は起こりました。ある日突然、精製の途中のタンパク質が姿を消したのです。本当にマジックのようでした。原因は不明。
翌日、考えられる全ての原因について考えました。そしてプロトコールに記載されている文字のうちの一文字、しかし、とても大切な一文字を見落としていたことが判明しました。その文字は"m"。なんと、1mMではなく"1M"のメルカプトエタノールを使ってクロマト前のタンパク質を処理していたのでした。当然、通常では考えられないミスです。しかし、追い詰められていた私は、朦朧とした意識の中でその恐ろしいバッファーを調製し、無意識のうちに私のタンパク質にとどめをさしていたのでした。おそらく私のタンパク質は、還元剤の作用というよりも、強烈な有機溶媒としての作用で死んでいったに違いありません。
皆さん、桁の間違いより、単位の間違いは格段に致命的ですよ！パソコンの変換ミスで、μがmになったりすることも多いかと思います。くれぐれもご注意を。

受付は終了
しております募集要項が同封のアンケートの裏面にございます。奮ってご応募ください。
21

No.84.qx 06.8.24 19:57 ページ 22●株式会社TMセルリサーチ商品に関してのご案内
弊社では再生医療及び細胞関連の開発を目的に子会社として株式会社TMセルリサーチを設立し、商品の開発・製造を行っておりましたが、諸事情により、今回、株式会社TMセルリサーチを解散、清算することとなりました。
これに伴い、2006年8月1日より、その事業を東洋紡が引継ぎ、商品の供給を行っております。品質及び価格も従来どおり変わりなくご提供をさせていただきますので、皆様におかれましてはこれまでと変わりなく、ご愛顧の程、お願いいたします。
※該当商品につきましては、弊社2006/2007総合カタログ11-119をご参照願います。

●リコンビナントRNase inhibitor発売
ご好評いただいておりますRNase inhibitor（ Native type）に加えまして、この度、RNase inhibitor（Recombinant type）の販売を開

保存：−20℃

始いたしました（2006/7/10〜）。

品名及び内容従来品とあわせまして、宜しくおRNase Inhibitor (Recombinant)2,500U×1本

SIN-201¥9,000

願い申し上げます。

RNase Inhibitor (Recombinant)2,500U×5本

SIN-202¥36,000

包装

Code No.

価格●私にもできた！Vol.3『ウェスタンブロッティング・
免疫組織染色編』発刊●AnaSpec社品の価格を全面
改訂

ご好評いただいております本シリーズですが、『PCRを用いる

ペプチド関連商品でご好評いただい遺伝子クローニング編』（2005年12月発刊）、『遺伝子発現解析ておりますAnaSpec社品の価格を全編（前編）』（2006年4月発刊）に加えまして、この度、『ウェス面的に改定いたしました。さらにお求

タンブロッティング･免疫組織染色編』を発刊いたしました。本

め安くなりましたので、これを機に是シリーズは、弊社ホームページ：http://www.toyoco.co.jp/bio

非一度お試しください。詳しくは弊社の「実験お助けコーナー」でご覧いただけます。

ホームページをご参照ください。

●本ページ掲載の試薬類は全て一般研究用の目的にのみ販売しており、医薬品、診断用医薬品、化粧品、食品用等には使用できませんので、十分ご注意ください。誤用による事故については、当社は一切の責任を負いません。
●本ページ掲載商品にには消費税は含まれておりません。実際のご購入価格については弊社代理店へお問い合わせください。
●本ページ中の略号：毒 印は毒物および劇物取締法に基づく医薬用外毒物です。
劇 印は毒物および劇物取締法に基づく医薬用外劇物です。
危 印は消防法に基づく危険物です。

22