Trace Nutrients Research 35 : 1−5（2018）

原著

カニクイザルを用いたカキ肉エキスのストレスに対する影響（予備的検討）
安 田山之内仁1）†，光 岡 ちほみ1），山 崎 則 之1），岡 林 佐 知1），櫻 庭智 彦1），田 原 宏 輔1），石 田 達 也2），松 井 博 之2），松 田峻1），
芳 和2）（1）株式会社新薬リサーチセンター＊，2）日本クリニック株式会社＊＊）
（受付 2018 年 8 月 30 日，受理 2018 年 10 月 16 日）

Pilot study for the effect of oyster extract on light-stress responsein cynomolgus monkeys (Macaca fascicularis)
Hitoshi Yasuda1）, Chihomi Mistuoka1）, Noriyuki Yamazaki1）, Sachi Okabayashi1）, Takashi Sakuraba1）,Tomohiko Yamanouchi1）, Kosuke Tahara1）, Tatsuya Ishida2）, Hiroyuki Matsuda2）, Yoshikazu Matsuda2）
1）
New Drug Research Center, Inc.
2）
Central Research Institute, Japan Clinic Co, Ltd.

Summary
Oyster (Crassostrea gigas) contains abundant nutrients, including glycogen, vitamins, zinc and taurine. It is reported that Oyster extract exhibited anti-oxidative effect, anxiolytic-like effects and several physiological activities in mice.
In this pilot study using three male cynomolgus monkeys (Macaca fascicularis), we reported evaluation of effect ofoyster extract on stress in cynomolgus monkey by analysis of blood glucose, serum cortisol, serum DHEA and serum
adrenalin levels.
Oyster extract administrated. After 7 days of administration of test substance, light-stress was induced and thestress marker was measured.
The number of monkeys used for the experiment was three and the statistical inference was not performed. There
were no difference in blood glucose and DHEA level between control group and oyster extract. Oyster extract group
had lower serum cortisol level in the endocrine system of the stress transmission, than control group. In serum
adrenaline level in the autonomic nervous system of the stress transmission pathway, control group rapidly increased
2 hours after administration. However, oyster extract had only a moderate rise.
Because the outcomes of the study were tentative and exploratory, any conclusion cannot be advocated until furtherconfirmatory study.

真牡蠣（学名：Crassostrea gigas）は，グリコーゲン，て，サルを用いて予備的に検討を行った。

脂溶性・水溶性ビタミン，亜鉛およびタウリンなどを多く

全ての動物実験は，株式会社新薬リサーチセンターの動含有しており，全世界の浅い海に分布し，古くから食され物倫理委員会の審議・承認を得た後に実施した（承認番

1）ている 。カキ抽出エキスに関しては，肝障害抑制作用2-4）， 号：171219A）。

抗酸化作用3-8），血清亜鉛濃度増加作用9），学習・記憶障害

実験方法およびパーキンソニズムに対する作用10），抗不安作用11），グルタチオン増加作用4, 12, 13）などが報告されている。
増澤ら11）は，カキ肉エキスの抗不安作用について，マ1．カキ抽出エキスおよび投与方法

ウスを用いたホールボード法により評価を行っており，カカキ抽出エキスは，薄茶色～茶色の粉末を使用した。粉

キ肉エキスの 5 日間投与で抗不安作用を示すことを確認し末は 60 mg/mL の濃度で蒸留水に溶解しカキ抽出エキスている。そこで今回は，カキ肉エキスの抗不安作用についとした。カキ抽出エキスの投与量は 300 mg/kg/day を 1



所在地：神戸市中央区港島南町7-1-14（〒650-0047）
所在地：京都市北区大将軍西町1（〒603-8331）†連絡先（Corresponding author），Tel; 078-306-0554, Email; h-yasuda@ndrcenter.co.jp
＊＊＊

― 1 ―

回 / 日，経口投与した。対照群は蒸留水を同量・回数投与した。残りの血液は，室温で約 30 分以上放置した後，遠した。

心処理して血清を分取し，血清コルチゾール（一般社団法人 予防衛生協会），血清デヒドロエピアンドロステロ

2．使用動物ン（Dehydroepiandrosterone、 略 称 DHEA，LC-MS/

3 歳の雄性カニクイザル 3 頭を用い，細菌検査（サルモMS システム，Thermo Scientific）および血清アドレナネラ，赤痢，ツベルクリン），ウイルス検査（B-VIRUS）

リン（LC-MS/MS システム，Thermo Scientific）濃度

結果に異常のない動物を使用した。

を測定しストレス誘発前を 100 とした変化率で評価した。
なお，今回の検討は 3 頭 / 群での評価であることから，3．飼育条件

統計処理は行わなかった。

温度 25±3 ℃，相対湿度 55±15％，換気回数 1 時間 6

実験結果

～ 20 回，照明時間 1 日 12 時間（07:00 〜 19:00）の動物飼
育 室 で 金 属 製 個 別 ケ ー ジ（W450 × D600 × H800 mm）にて飼育した。ケージは毎日洗浄し，動物飼育室床は毎日1．一般状態観察

清掃後，消毒液を週 3 回以上の割合で散布した。

実験期間中，全ての動物の全身状態は良好であった。ま

サル用固型飼料 CMK-2（日本クレア㈱）約 100 g を 1

た，動物の体重に変化は認められなかった。

日 1 回，飲料水は水道水を自動給水装置により自由に摂取
2．ストレスマーカーさせた。

血糖値を Fig. 1 に，血清コルチゾールを Fig. 2 に，血清4．ストレス誘発方法

DHEA を Fig. 3 に，血清アドレナリンを Fig. 4 に示した。

最終投与翌日，給餌を行い，その 15 分後に動物をモンキーチェアに保定し，外部から仲間の声や音，刺激等がな

血糖値は，対照およびカキ肉エキスを投与した全てにおいて大きな差はみられなかった。

いように 1 頭 / 室で，8 時間継続して実験室に配置した。

血清コルチゾールは，対照群は誘発後 8 時間まで増加し動物は，モンキーチェアによる固定および採血に対してた。カキ肉エキス群は誘発後 2 時間を最大として誘発後 4十分に馴化された個体を用いた。

時間からは減少した。

5．群分け

カキ肉エキス群は誘発後 6 時間から減少した。

血清 DHEA は，対照群は誘発後 4 時間から減少した。
すべての動物を使用し，対照群およびカキ肉エキス群をクロスオーバーにて実施した。

血清アドレナリンは，対照群は誘発後 2 時間で最大値を示した。カキ肉エキス群は誘発後 4 時間で最大であったが，群構成表を Table 1 に示す。

対照群に比べると緩やかな上昇であった。

考6．検査項目察1）一般状態観察
毛並み，元気さなどの全身状態の観察を毎日行った。
2）体重測定真牡蠣（学名：Crassostrea gigas）は，グリコーゲン，脂溶性・水溶性ビタミン，亜鉛およびタウリンなどを多く

体重は，投与期間中 1 回 / 週の頻度で測定を行った。
3）採血含有している1）。その真牡蠣を原材料としたカキ抽出エキ
スは，これまでに，様々な機能性を有することが報告されストレス誘発前，誘発開始後 2，4，6 および 8 時間ている。
増澤ら11）は，ストレスを負荷しないマウスおよびホー（計 5 時点）に無麻酔下で橈側皮静脈又は伏在静脈より血液を採取した。

ルボード法によりストレスを負荷したマウスのいずれにつ4）ストレスマーカー

いても，カキ肉エキスの 5 日間投与により，抗不安作用を採血後の血液については一部全血で血糖値測定器（ニ示すことを報告している。そこで，今回，サルにカキ肉エプロスタットストリップ XP3）を用いて血糖値を測定

キスを 7 日間投与して，ストレスに対する作用の検討を

Table 1  Test group of experiments.
GroupDose (mg/kg/day)

Administrated period (day)No. of animals

AControl (distilled water)

073a)

BOyster extract

30073a)a) : Crossover trial.
― 2 ―

60

50
Control-after administration40

Oystar-after administration%Change (DHEA)%Change (Glucose)

Oystar-after administration30
20
100-10Control-after administration40
200-20-40-60

B.F.

2

46-80

8B.F.

Time of after triggering (hr)2468Time of after triggering (hr)Fig. 1  Effect of Oyster extract on light stress in cynomolgus
monkeys - Glucose – Each points represents mean value
from 3 animals.

Fig. 3  Effect of Oyster on light stress in cynomolgus monkeys DHEA – Each points represents mean value from 3 animals.

300

140
Control-after administration

250

Oystar-after administration%Change (Adrenalin)%Change (Cortisol)

120
100
80
6040

Oystar-after administration

150
100
500

200

Control-after administration

200

B.F.

2

46-50

8

Time after feeding (hr)

B.F.

2

468

Time of after triggering (hr)Fig. 2  Effect of Oyster extract on light stress in cynomolgus
monkeys - Cortisol – Each points represents mean valuefrom 3 animals.

Fig. 4  Effect of Oyster extract on light stress in cynomolgus
monkeys - Adrenalin – Each points represents mean value from 3 animals.

行った。投与量については，マウスのホールボード法を用

今回，SAM 系のバイオマーカーである血清アドレナリ

いた 5 日間投与による評価で効果が認められた 300 mg/ンについては，対照群では誘発後顕著に増加し，2 時間でkg/day と設定した。

最大値を示した。これに対し，カキ肉エキス群では誘発後カニクイザルは，野生では群をなして生活をしており，に顕著な増加は認められなかった。HPA 系のバイオマー

当研究室においてもお互いの姿が見えるようにして，コカーである血清コルチゾールに注目すると，対照群の血清ミュニケーションが取れる状態で飼育をしている。そのよ

コルチゾールは誘発後 8 時間まで経時的に増加したものの。

うな状態から，1 頭 / 室になるように実験室に隔離して，カキ肉エキス群では，誘発 4 時間後より減少が認められた。

モンキーチェアにて保定することにより，軽度な心理的なまた，ストレスにより分泌されるアドレナリンやコルチゾーストレスおよび肉体的なストレスを誘発させた。このサル

ルは，分泌が継続すると組織に対して負の影響を誘発するの軽ストレスモデルを用いて，カキ肉エキスを 1 日 1 回，ことも知られている。DHEA は，障害を受けた組織の修7 日間連続で経口投与を行い，経時的に採血することによ復に機能する物質として，その役割が期待されている15）。

りストレスマーカーを測定した。対照群として，蒸留水を今回，対照群では，誘発後に DHEA が減少したのに対し投与した群を設定し，カキ肉エキス群とクロスオーバーでて，カキ肉エキス投与群では減少は認められなかった。

行った。

以上の結果より，サルの軽ストレスモデルでは，対照群投与期間中に病理学的変化は認められなかった。血糖値では，ストレス誘発後に，血中アドレナリンおよびコルチは，対照およびカキ肉エキスを投与した全てにおいて大きゾールのいずれも増加傾向を示し，また，血清 DHEA 値な差はみられなかった。

は減少傾向を示したこれに対して，カキ肉エキスの投与群

ストレスは，大脳皮質や大脳辺縁系を経由して視床下部では，血清アドレナリンおよびコルチゾールの増加を抑制に情報が伝達され，視床下部－交感神経－副腎髄質系し，DHEA に対しては，減少は認められなかった。これ（SAM 系）と視床下部－下垂体前葉－副腎皮質系（HPA 系）

らの結果は，カキ肉エキスが，サルにおいても抗ストレスを活性化させることが知られている14）。SAM 系が活性化作用を有する可能性がある。
増澤ら11）は，マウスで認められた抗ストレス作用につされるとアドレナリンが分泌され，HPA 系が活性化されるとコルチゾールが分泌される。

いて，カキ肉エキスに含有する亜鉛の機能について着目し― 3 ―ている。評価に用いたマウスのモデルが，ベンゾジアゼピ

S Nakagawa, N Yoshida, M Kondo (1997), Freeンにより抑制されること，ベンゾジアゼピンの抑制作用が，radical-scavenging activity of Crassosfrea gigas ex-グルタミン酸，GABA 系に関与すること，また，亜鉛は，tract (JCOE), Biomed Pharmacother, 51, 328-332.

アルツハイマー型認知症，統合失調症，パーキンソン病な6）Gate L, Schultz M, Walsh E, Dhalluin S, Nguyen

どの脳の疾患に関与しており16），亜鉛の抗不安作用は，グBa G, Tapiero H, Tew KD (1998), Impact of di-ルタミン酸，GABA のシステムを調節していると報告さ

etary supplement of Crassosfrea gigas extract17）

れている(JCOE) on glutathione levels and glutathione

ことから，亜鉛の関与を示唆している。また，

橋本18）は，アルツハイマー病の発症と亜鉛との関連につS-transferase activity in rat tissue., In vivo 12,299-303.

いて，亜鉛が，グルタミン酸作動性神経のシナプスに関与

7）Tapiero H, Gate l, Dhalluin S, Nguyen Ba G,

して，グルタミン酸の異常興奮を抑制することを報告してSoupramanien V, kouyate J, Tew KD (1998), Theいる。
19）

は，マウスの社会的ストレス負荷モデルを用い

antioxidant effects of Crassosfrea gigas extractて，テアニンの抗ストレス作用を評価している。社会的ス(JCOE) on human volunteers., In vivo 12, 305-309.

トレス負荷が視床下部のグルタミン酸の分泌を促進して，

8）Tapiero H, Tew KD (1996), Increased glutathione

HPA 系を活性化し，CRH，ACTH，コルチゾールの分泌exin cells induced by Crassosfrea gigas extractを誘発することに対して，テアニンがグルタミン酸の分泌(JCOE). Biomed Pharmacother, 50, 149-153.

海野を調節することで，抗ストレス作用を示すことを報告して

9）安部麻美子，松田芳和，小邨奈美，吉田宗弘（2010），いる。この報告から，カキ肉エキスについても，テアニン

カキ肉エキスを投与したラットの血清亜鉛濃度の変化，と同様に，亜鉛がグルタミン酸の分泌を調節することで，微量栄養素研究，27，56-59．
10）鈴木孝太郎，野々村徹，山崎則之，高橋尚彰，松井博

抗ストレス作用を示すことが考えられる。
SAM 系のマーカーである血中アドレナリンの増加抑制之，松田芳和，マウスを用いたカキ肉エキス抽出物の作用については，カキエキスが，α 受容体の拮抗作用によ学習・記憶能力およびパーキンソニズムに対する作用の評価，微量栄養素研究，30，48-51．

る血管の収縮抑制作用を介して，高血圧，心血管径疾患の発症抑制に関与するという報告20）もあることから，アドレ11）増澤徹，松井博之，松田芳和，朝戸めぐみ，池田弘子，亀井淳三（2012），マウスを用いたカキ肉エキス含有

ナリン受容体などに関する今後の解析が期待される。

食品の抗不安作用に関する評価，微量栄養素学会誌，今回の予備的検討の結果は，マウスを用いた実験で示さ29，7-12．

れたカキ肉エキスの抗ストレス作用がサルにおいても存在する可能性を否定するものではなかった。以前の報告から，

12）西堀頼史，鈴木陽子，岸浪昌礼，藤澤紘，永岡茂樹，その作用には，カキ肉エキスに含まれる亜鉛が関与してい山崎則之，松井博之，松田芳和（2011），カキ抽出エるものと想定される。なお，今回の検討は，3 頭 / 群でのキスパウダーの安全性および機能性に関する報告，微量栄養素学会誌，28，40-44．

評価であり，統計学的な評価も行っていないことから，今13）福田卓，春松慎，松井博之，松田芳和（2012），カキ後，更なる検討を行う予定である。

肉エキスによるラット海馬中総グルタチオン増強効果，参考文献

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14）田中喜秀，脇田慎一（2011），ストレスと疲労のバイ
オマーカー，日本薬理学雑誌，137，185-188．

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典，医歯薬出版株式会社，東京：pp. 415-416（2008）．

15）西風脩，古屋悦子（1998），ストレスと抗コルチゾー

2）久保道徳，松田秀秋，田村崇子，高津正雄（1980），

ルホルモン ― 組織修復マーカーとしての 17- ケトス

バランスター［カキ Crassosfrea gigas（THUNBERG）

テロイド硫酸抱合体 ― 産業医科大学雑誌，20（4），の肉エキス］の実験的肝障害に対する予防および肝機

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16）Stuart D. Portbury and Paul A. Adlard (2017), Zinc3）藤澤紘，竹原功，西堀頼史，矢野夕幾，山崎則之，松Signal in Brain Diseases, Int. J. Mol. Sci. 18, 2506-井博之，松田芳和，福原育夫（2012），カキ肉エキス

2518.

12 週間摂取の軽度アルコール性肝障害をもつヒトボ

17）Partyka A, Jastrzebska-Wiesek M, Szewczyk B,ランティアの肝機能への影響，微量栄養素研究，29，

Stachowicz K, Slawinska A, Peleszak E, Dobosz-

13-17．

eska L, Pilc A, Nowak G (2011), Anxiolytic-like ac-4）春松慎，福田卓，松井博之，松田芳和（2013）カキ肉

tivity of zinc in rodent test, Pharmacol, Rep., 63,

エキスのアセトアミノフェンによる肝障害抑制作用の検討，30，41-43．

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18）橋本道男（2008），アルツハイマー病と食事栄養 ―

5）T Yoshikawa, Y Naito, K Masui, T Fujii, Y Boku,― 4 ―とくに銅・亜鉛とドコサヘキサエン酸，微量栄養素学

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Alpha-adrenoceptor antagonism by Crassostrea gi-19）海野けい子（2011），社会心理的ストレスによる老化

gas oyster extract inhibits noradrenalineinducedの促進とテアニンの抗ストレス作用，35（4），9-15．

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20）Kylie C, Douglas J, Candice P, Andrew F (2015),― 5 ―

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