8 号（8 月）2024〕

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実験動物飼料の選択がデータ解釈を混乱させる
Lack of knowledge about laboratory rodent diets confuses data interpretation

成長期を過ぎた成熟期に適した AIN-93M 飼料があり，はじめにAIN-93G 飼料は AIN-93M 飼料に比べてタンパク質，げっ歯類の動物実験用飼料には，非精製飼料と精製脂質，ミネラルの含量が多い．栄養学研究では成長期飼料がある．市販の非精製飼料は，タンパク質源，脂のげっ歯類を用いる場合が多いため，AIN-93G 飼料の質源，炭水化物源である動物性や植物性の天然原料に，使用頻度が圧倒的に高い．そこで本稿では，AIN-93G不足するビタミン類やミネラル類を添加した飼料であ飼料を便宜的に AIN-93 飼料と記述することとする．

る．注意すべきは，用いられているタンパク質，脂質，炭水化物の具体的な種類が公表されておらず，詳細な

AIN-93 飼料の組成

成分が不明であるばかりか，製造時期によって成分やAIN-93 飼料は，全米科学アカデミーおよび全米研究含量が異なる点である．このように，非精製飼料は中会議（NAS-NRC）が発表したげっ歯類の栄養素必要量

身の分からない「ブラックボックス」であるため，栄養をもとに，AIN が，1977 年発表の AIN-76 飼料と 1980

素に対する生体応答の解析には適さない．一方，動物年発表の AIN-76A 飼料の飼料組成を改良し，成長，妊実験用飼料のゴールドスタンダードとして世界中で使娠，授乳などが良好となる飼料組成を定めたものであ用されている精製飼料は，1993 年に American Instituteる．AIN-93 飼料は，カゼイン（牛乳タンパク質），L-of Nutrition（AIN）が 発 表 し た AIN-93 飼 料1）で あ り，シスチン，コーンスターチ，スクロース，粉末セルロー

タンパク質，脂質，炭水化物，ビタミン類，ミネラル

ス，精製大豆油，第 3 ブチルヒドロキノン（TBHQ，酸類の種類と量が明確に定められている．AIN-93 飼料に化防止剤），ミネラル混合物，ビタミン混合物，重酒は，成長期・妊娠期・授乳期に適した AIN-93G 飼料と，石酸コリンから構成されている（表 1）1）．

表1AIN-93G 飼料組成

栄養素成分含量（％）

タンパク質

カゼイン
L-シスチン

20.0
0.3

炭水化物

コーンスターチ
デキストリン化コーンスターチ
スクロース
粉末セルロース

39.7486
13.2
10.0
5.0

脂質

精製大豆油
第 3 ブチルヒドロキノン

7.00.0014

ミネラル

ミネラル混合物（AIN-93G-MX）

3.5

ビタミン

ビタミン混合物（AIN-93-VX）

1.0

その他

重酒石酸コリン（41.1％コリン含有）

0.25
4030

エネルギー量（kcal/kg）
PFC 比（％エネルギー）

タンパク質
脂質
糖質

201664400〔ビタミン 98 巻トピックス

市販 AIN-93 飼料のビタミン組成の実際

AIN-93 飼料のビタミン K

AIN-93 飼料は研究者が自作する他，複数の市販品が上述の Joshi と Fiorotto の研究において，ビタミン K存在する．Joshi と Fiorotto は，日本，アメリカ，ヨーロッが正しく配合された製品は 15 製品中わずかに 5 製品

パ，オーストラリア，中国，ブラジルで販売されていであった．AIN-93 飼料ではビタミン K（フィロキノン）
12）

る AIN-93 飼料 15 製品の飼料組成を調査している ．

を使用することが定められているが，4 製品ではビタ調査された市販品のうち，ビタミン含量が公表されているものが 11 〜 12 製品，ミネラル含量が公表されてが使用されていた．以前の AINミン K（メナジオン）
376 飼料にはビタミン K としてビタミン K3 が 50 ȝg/kgいるものが 7 〜 13 製品，その他の栄養素含量が公表

飼料添加されていたが，ビタミン K 依存性出血が生じされているものが 9 〜 11 製品であり，栄養素含量がたため，その改良版である AIN-76A 飼料ではビタミンK3 500 ȝg/kg 飼料に増量された．次いで，ビタミン K3全ての製品で公表されているわけではない．ビタミン含量の公表数が 11 〜 12 製品という記述は，ビタミン12 種類のうち，あるビタミンは 11 製品で公表され，は過剰摂取による毒性が懸念されたため，AIN-93 飼料
ではビタミン K1 750 ȝg/kg 飼料に変更された．このよ

別のビタミンでは 12 製品で公表されていることを示

うな科学的経緯があるにもかかわらず，ビタミン K3

す．

を含む AIN-93 飼料が 4 製品も存在することは驚きでビタミン含量が公表されている製品のビタミン E，ある．

，ビタミン B（リビタミン K，ビタミン B（チアミン）
12

ビタミン混合物のビタミン K1 含量は，タンパク質ボフラビン），ビタミン B12 の含量は，AIN-93 飼料組源としてカゼインを飼料中に 200 g/kg 添加した時，ビタミン K1 がカゼイン 200 g 当たり 160 ȝg 含まれると成 の 数 値 と 比 較 し て， そ れ ぞ れ 55 〜 100 ％，83 〜533％，100 〜 240％，100 〜 267％，100 〜 412％であり，想定して定められているが，タンパク質源として用い製品間の差が大きいことに驚く（表 2）．100％を上回られるカゼインのビタミン K1 含量は製品によって大る製品は飼料保存中のビタミン分解を考慮したとも考きく異なる．大豆油にも比較的多量のビタミン K1 がえられるが，下回る製品については不足が懸念される．

含まれるが 3），大豆油由来のビタミン K1 含量は考慮

このように，「AIN-93 飼料」と謳った製品であっても製されていない．このように，飼料中ビタミン K 含量は，造業者による差が存在し，論文に “AIN-93 飼料を用い飼料のタンパク質源や脂質源の量や種類の影響を強くた” と記載されていたとしても，AIN が定めた AIN-93受けることに注意を払うべきである．

飼料と同一組成であるとは限らない．市販 AIN-93 飼料の組成の差が実験結果に影響を与える可能性を考慮する必要がある．

表2

市販 AIN-93G 飼料のビタミン含量（文献 2 より抜粋）

ビタミンビタミン A
ビタミン D3ビタミン E
ビタミン K
チアミン
リボフラビンニコチン酸
ピリドキシン
ビタミン B12
葉酸
D-ビオチン
パントテン酸塩

含量（AIN-93 組成に対する割合（％））

AIN-93 組成と一致した
製品数※

100–104
100–125
55–100
83–533
100–240
100–267
97–100
97–117
100–412100
100
100–110

11/12
11/12
10/11
5/11
7/12
10/12
11/12
8/12
10/12
12/12
11/1110/12※分母は調査した 15 製品のうち各ビタミン含量を公表している製品数を，分子はAIN-93 組成と一致した製品数を示す．

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AIN-93G 飼料のビタミン E

確なビタミン含量を読み取ることは不可能である．このように，データの解釈と再現性に大きな影響を及ぼ

私たちが摂取する野菜や植物油に含まれる天然の Į-す因子が，栄養学研究の根幹をなす実験飼料に潜在しトコフェロールは，RRR-Į-トコフェロールである．一方，AIN-93 飼料のビタミン混合物に含まれる Į-トコていることを念頭において，研究を進めるべきである．

フェロールは，コストと酸化安定性に優れた合成型のしてみてはいかがだろうか．

all-rac-Į-ト コ フ ェ ロ ー ル 酢 酸 エ ス テ ル で あ る．allrac-Į-トコフェロールは，RRR-Į-トコフェロールを含Key words: AIN-93 diet, dietary composition, rodent diet

動物実験に携わる方は，実験飼料の成分・含量を確認

む 8 種類の立体異性体の混合物であり，RRR-Į-トコフェ
ロール単独に比べて代謝されやすくビタミン E 活性が1低い．また，大豆油には，試薬として販売されている2

精製大豆油であっても，大豆由来のビタミン E 同族体（主に Ȗ-，į-トコフェロール）が無視できないほどの量3で含まれている上に，食用の大豆油には酸化防止剤として合成型の Į-トコフェロールやその誘導体も添加さ

Dong-Ho Kim3, Shigeru Saeki3

Nagoya University of Arts and Sciences
College of Nagoya Women's University
Osaka Metropolitan University

Saiko Ikeda1, Misato Kobayashi1, Tomoko Banno2,
1

名古屋学芸大学，2 名古屋女子大学短期大学部，れている．そのため，飼料中の脂質の種類や量を変更

3

大阪公立大学すると，それに連動して飼料中のビタミン E 同族体の池田彩子 1，小林

含量も大きく変動する 4）．

佐伯茂3

また，AIN-93 飼料では，不飽和脂肪酸欠乏の予防のために，脂質源が AIN-76A のコーン油から Į-リノレ

開示すべき利益相反なし

美里 1，阪野朋子 2，金東浩 3，ン酸に富む大豆油に，含量が 5％から 7％に変更され，（2024.5.7 受付）

飼料中の脂質の酸化防止のために，大豆油に対して0.02％（w/w）の TBHQ が添加された．TBHQ は，ビタミン E と同様に体内において抗酸化性を発揮し，両者の生体内での生理作用を区別することは困難である．

文

このように，飼料のビタミン混合物中の Į-トコフェ

献

ロール異性体，油脂源に夾雑するビタミン E 同族体，

1）Reeves PG, Nielsen FH, Fahey GC Jr. (1993) AIN-93 purified

酸化防止剤 TBHQ の存在が，Į-トコフェロール代謝やdiets for laboratory rodents: final report of the American Instituteビタミン E 活性，脂質代謝に影響を与えることを忘れof Nutrition ad hoc writing committee on the reformulation of theてはならない．

おわりにAIN-76A rodent diet. J Nutr 123, 1939–1951
2）Joshi TP, Fiorotto ML. (2021) Variation in AIN-93G/M Diets
across different commercial manufacturers: not all AIN-93 diets
are created equal. J Nutr 151, 3271–3275

AIN-93 飼料は世界中どこでも同一であると信じられ

3）文部科学省科学技術・学術審議会資源調査分科会報告（2021）てきたが，市販 AIN-93 飼料の中には看過できない相

日本食品標準成分表 2020 年版（八訂），pp.213，全国官報販

違のある製品が存在することが明らかになった．AINが定めた組成どおりに調製された AIN-93 飼料であっても，タンパク質源や油脂源に少なからぬ量のビタミン類が含まれるため，表 1 のような飼料組成表から正売協同組合，東京
4）池田彩子，小林美里，田路莉子，金東浩（2024）ビタミン E
研究における実験飼料選択の注意点，化学と生物 62，62–63