日本香粧品学会誌

Vol. 43, No. 4, pp. 303–308（2019）〈一般論文〉

培養ヒト皮膚由来線維芽細胞の石灰化に対する UVA の影響
山 田 勝 久 1, *，柴 田 雄 次 1，山 本樹 1，野 村 道 康 1，今 田 千 秋 2

Inﬂuence of UVA Irradiation on Calciﬁcation of Normal Human Dermal Fibroblasts
Katsuhisa YAMADA1, *, Yuji SHIBATA1, Tatsuki YAMAMOTO1, Michiyasu NOMURA1, Chiaki IMADA2(Accepted: August 20, 2019)

Abstract
It is well known that ultraviolet rays cause photo-aging. Ultraviolet A (UVA) is the most important factor in photo-aging, especially in human dermis. As investigation of photo-aging in vitro, we previously reported that normal human dermalﬁbroblast (NHDF) was calciﬁed by UVA irradiation. In this study, NHDF was cultured for one day after 0.8 J/cm2 UVA irradiation to investigate the inﬂuence of UVA irradiation, which calciﬁes cells. In addition, physiological and molecular biological changes on UVA irradiated NHDF were investigated. As a result, it was suggested that a signiﬁcant oxidative stress
was given to UVA irradiated NHDF, because accumulation of carbonylated proteins were observed in the cell. Moreover, it
was elucidated that the intracellular Ca2+ mobilization indicated that an induction of inﬂammation was accelerating becauseof Ca2+ accumulation in the cell. Furthermore, it was suggested that calciﬁcation of UVA irradiated NHDF was involved in adecrease in cell survival rate. In molecular biological analysis, gene expression of PiT-1, Runx2, OCN and OPN which werewell-known as osteogenesis marker on vascular smooth muscle cell (VSMC), were investigated on UVA irradiated NHDF
using molecular biological method. As a result, increasing gene expression of PiT-1 and OPN was observed on UVA irradiated NHDF, although gene expression of Runx2 and OCN was not observed in the cell. From the results in this study, it waselucidated that NHDF calciﬁed by UVA irradiation was involved in some signiﬁcant damages, oxidation stress, calcium accumulation indicated inﬂammatory inducement in cells and decreased cell survival rate. On UVA irradiated NHDF, furtherinvestigation of physiological, biochemical, and molecular biological approach are required to determine the relationshipbetween these physiological changes and calciﬁcation.
Key words: calciﬁcation, ﬁbroblast, photo-aging, UVA.
1.

緒のが多い。光老化においては結合組織を構成する主要成言分であるコラーゲン量は生理的老化に比べて著しく減少

皮膚は，外的環境から生体を保護する最前線にある軟することが知られている 8）。また光老化した皮膚の真皮部組織である。その外的環境の中でも特に紫外線は，光内の変性したエラスチンの蓄積 9）等数多くの研究報告が老化を引き起こすことが知られている 。紫外線に長期あり，真皮結合組織を構成する成分の変化によりシワの間さらされた皮膚には深いシワが形成され，弾力性が低形成や弾力性の低下現象が導かれることが広く知られて下するうえに皮膚が硬化することが知られている 2）。典いる。一方，光老化に伴う皮膚の硬化の原因に言及した型的な光老化皮膚における真皮結合組織では，コラー報告としては，酸化ストレスによるコラーゲンの糖化にゲンの減少や異常なエラスチンの蓄積が認められてい起因するという報告 10）があるだけである。そこで本研る 3, 4）。こうした皮膚の光老化機序に関する調査につい

究では，日光暴露部位における皮膚硬化現象に着目し，ては，実験動物を用いた研究 5）や正常ヒト皮膚由来培養

皮膚と同様，軟部組織である血管の動脈硬化現象を参考線維芽細胞（以後，NHDF）に紫外線 A 波（以後，UVA）にして調査したところ，動脈硬化を起こす血管の中膜をを照射した研究が数多くあり 6, 7），その調査対象は真皮構成する細胞外マトリックス成分が皮膚の真皮結合組織結合組織を構成する成分の質的・量的な変化に基づくもを構成する細胞外マトリックス成分と酷似しているこ

1）

12

株式会社ディーエイチシー 海洋深層水研究所
国立大学法人 東京海洋大学

1* Corresponding author：株式会社ディーエイチシー 海洋深層水研究所，〒106–0047 東京都港区南麻布 2–8–21
ビル 7F（E-mail: k-yamada@dhc.co.jp）

南麻布 MIC

Deep Sea Water Laboratories, DHC Co., Ltd. (2– 8 – 21 MinamiAzabu, Minato-ku, Tokyo 106–0047, Japan)
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Tokyo University of Marine Science and Technology