2010 SEPTEMBER
No. 564

2010 年（平成 22 年）9 月号

第 56 巻 第 5 号（通巻 564 号）

挨拶・巻頭言個体発生は系統発生を繰り返す........................................長谷川篤彦（ 2 ）獣医病理学研修会
第 49 回 No. 990 コアラの椎体部腫瘤................ 日本大学獣医病理学研究室（ 3 ）第 49 回 No. 983 イヌの精巣腫瘤............... 東京農工大学獣医病理学教室（ 4 ）レビュー
動物実験の適正化 ―基準や指針の制定とこれからの課題― ..........八 神 健 一（ 5 ）発表論文紹介豚トルクテノウイルス....................................... 平

http://nibs.lin.gr.jp/

修（10）2（58）

日生研たより個体発生は系統発生を繰り返す
長谷川篤彦
確か最初に耳にしたのは中学校の理科の時間かなにかのように思われるが，その後高校の生物の時間に有名な生物学者であり，哲学者である Ernst Haeckel（1834‒1919）の言葉であることを知った。個体発生は系
統発生の過程を辿ると言う，発生と系統との関連が反復説として一世を風靡した。しかし，受精から出生までの間に系統発生を辿ることへの疑問もあり，実証もないようである。このことに関して，科学的検討がどの程度行われ追究されてきたかについては寡聞にして知らないが，そのことをここで問題にする心算はない。
反復説についてはそれほど気にも留めていなかったが，大学で教育･研究に従事するようになって，時に触れて Haeckel のこの言葉が頭を過ぎるようになった。
例えば，研究について言えば，当然自分の仕事がその研究分野における歴史と言う座標軸においてどの位置にあるかを明確にしておく必要がある。したがって，先人の業績を反芻し，その研究分野の発展の一里塚を十分理解して研究を遂行しなければならない。この過程を短期間のうちに上手く把握出来るか否かが系統発生に相当し，個体発生に相当する研究者の将来が左右されることになるものと思うようになった。
一方，教育においても当然のことであるが，特に大学院生を指導する立場にあって，将に上述した通り，系統発生を支えることが重要であると思い努めようとしてきた。難しいことは，自発的に系統発生を体験することが重要であり，画期的な業績を羅列して外部から強制したのでは逆効果になりかねない。学部教育においても，この系統発生に相当する部分の伝達が困難である。なぜなら，講義する内容は多岐にわたり，しかも加速度的に膨張の一途を辿っており，講義時間の制約と相まって知識集積の軌跡を要領よくまとめて紹介するのは至難の業であると考えてしまっていた。
このような問題は，どうやら教育そのものに内包されている課題のように考えられる。一般的に言って，現在の教育の状況を窺見すると，概して系統発生に相当する部分に関する教育は軽視されているように感じられ，寧ろ欠落しているのではないかと憶測される。それでは本質的な教育とは言えないように思われ，このような状況が続くと早晩大学教育は通俗的に陥り，大学の存在意義も消滅するのではと危惧される。このような危機感が杞憂に終わる事を願うのみである。免疫学を例にとれば Chemokine とか，Toll‒like receptor
とか，その遺伝子などの話から講義が始められると，学生にはその背景が十分理解されていないことが多い
ように思われる。割愛されている伝染病と対峙してきた人類の苦闘の歴史について，以前の学生なら基礎知識もあり，不明の点があれば自らも勉強したであろうが，情報化社会と言われる昨今の学生の多くは寧ろ無頓着である。仄聞するところ，Edward Jenner，Louis Pasteur，Robert Koch の名前も知らない高校生が少なくないとか，このようなことはどの分野でもあるように思われる。各領域において系統発生に相当することへ配慮した教育体制が構築されて，教導の成果が上げられることを期待している。
歴史と聞くと，奈良時代がどうの，幕藩体制がどうの，明治維新がどうであったかなどと考えてしまうが，実は日常の事象の継続性とか，隔絶性とかを見極める視点を体得することが必要である。歴史的観点で物事に対処する習慣を身につけることが肝要であり，系統発生を上手に体験することこそ個体発生を成功させる
鍵であり，自己実現を達成する要点であると愚考される。
（日本生物科学研究所監事）

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コアラの椎体部腫瘤
日本大学獣医病理学研究室

第 49 回獣医病理学研修会 No. 990

動物：コアラ（クインズランドコアラ），雄，10 歳，体どの臓器の血管内に腫瘍細胞が存在。核は小から中型，

重 7 kg

円形で中等度の好酸性細胞質を有し，ラッセル小体様の臨床事項：症例は動物園の展示動物。2007 年 8 月に痙攣，運動麻痺などの神経症状が認められ，感染症を疑い細胞も散在。メチルグリーンピロニン染色で胞体が赤染。
免疫染色では Oct‒2（図 3），Vimentin に陽性，Kappa 鎖，治療したところ，3 週間ほどで症状は改善。その後，

CD79b，CD138 に弱陽性，PAX5，Lambda 鎖に陰性を2008 年 2 月に後肢麻痺により木から落下。椎間板ヘル示した。電顕では拡張した粗面小胞体（図 4）を多数確

ニアを考慮して治療を開始。半月後，CT，MRI 検査を認できたが，層板構造は認められなかった。また Dense

行ったが，撮影終了間際に心室細動に陥り死亡した。

body，細線維束，ゴルジ装置が発達していた。

剖検所見：第 11 から 13 胸椎椎体部左側に出血を伴う扁診断：形質細胞への分化を示すリンパ腫

平な腫瘤（図 1）が存在。腫瘤の大きさは 3 cm × 2 cm， 考察：コアラのリンパ腫・白血病の原因であるコアラレ
椎体から肋骨頚に及び，骨に固着。腫瘤割面は灰白色，

トロウイルスはオーストラリアのみならず，国内の動物充実性。その他の所見として，血様腹水 30 mL 貯留。

園でも蔓延していることが知られている。免疫組織化学

腸間膜，下顎，頚部リンパ節が軽度に髄様腫脹。心臓はおよび電子顕微鏡学的検索により形質細胞への分化が示

血様の心嚢液充満，心内膜出血，心筋退色。脾臓はややされ形質細胞骨髄腫と診断し，Nonsecretory multiple

柔軟，割面から血液流出なし。肺は全体に暗赤色水腫状。 myeloma（非分泌型多発性骨髄腫）の可能性を示唆した
胃粘膜，特に胃底から幽門にかけて 1 から 2 cm 大の糜が，骨髄腫の臨床的な特徴である高ガンマグロブリン血

爛多数存在。腸管粘膜に点状あるいは斑状の出血が散在。 症，骨融解，尿中ベンス・ジョーンズ蛋白，M 蛋白が組織所見：リンパ球様の腫瘍細胞がび漫性，シート状に増殖（図 2）。椎体部腫瘍は近接する筋組織内，骨髄また脊髄硬膜外まで浸潤。肺，横隔膜，胃，腸間膜リンパ節，下顎リンパ節，肝，脾に転移巣が認められ，ほとん

確認できなかったことより，診断をリンパ腫に改めた。
（渋谷久）

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日生研たよりイヌの精巣腫瘤
東京農工大学獣医病理学教室

第 49 回獣医病理学研修会 No. 983

動物：イヌ，ウェスティ，雄，8 歳。

性セミノーマ

臨床事項： 2008 年 5 月，左側精巣腫大（陰睾，3.5 × 2

考察：研修会では，本症例は WHO 分類に沿って Mixedcm）を主訴に来院。右側精巣は陰嚢内にあり萎縮してgerm cell–sex cord stromal tumor と診断するべきといういた。血液学的検査に著変なし。同月内に去勢手術が行ご指摘を頂いた。しかし，悪性セルトリ細胞腫との境界

われ，摘出された左右精巣のホルマリン固定材料が当研は明瞭であり，＊結節内の一部にみられた悪性セルトリ究室に送付された。

細胞腫成分は片側の腫瘍からの浸潤像とみなし，衝突癌

肉眼所見：左側精巣の腫瘤割面では，灰白色と赤褐色充と判断された。また，イヌのセミノーマはその組織発生

実性の腫瘤がそれぞれ隣接して認められた。

から雄性生殖細胞由来の古典的セミノーマと成熟精母細組織所見：左側精巣内に 2 個の大型結節が認められた胞由来の精母細胞性セミノーマの 2 タイプに分類され，（図 1）。提出標本は肉眼的にヘマトキシリン濃染部（＊

構成細胞の形態学的差異に加え，後者は PAS 陰性と報領域）を対象とし，他方は悪性セルトリ細胞腫と診断さ告されている。本症例は以上の分類から精母細胞性セミれた。＊領域では，精細管由来の管腔内に小型〜大型多ノーマと考えられ，それに神経系マーカーに陽性を示す

角形の精母細胞様細胞の腫瘍性増殖が認められ（図 2），

PNET の成分を伴う腫瘍と考えられた。

増殖巣内には大型核と明瞭な核仁を 1 〜数個有する奇怪（三枝由紀恵，渋谷淳）

な形態の巨細胞や多核巨細胞が散見された（図 3 矢印，参考文献：矢頭）。これらの像に加え，ヘマトキシリンに濃染する

1. Grieco, V., Riccardi, E., Rondena, M., Ciampi, V. and類円形核を有する小型細胞の増殖，更にロゼット及び偽Finazzi, M. 2007. Classical and spermatocytic seminoma

ロゼット様構造が散見された（図 4）。精母細胞様細胞

in the dog : histochemical and immunohistochemical ﬁnd-

は PAS 陰性（図 5），異型性は高く，クロマチンは細線

ings. J. Comp. Pathol. 137 : 41–46.

維状で有糸分裂像も散見された。ロゼット形成部位の小2. Maiolino, P., Restucci, B., Papparella, S., Paciello, O.

型細胞は S–100（図 6），NSE（図 7），synaptophysin（図and De Vico, G. 2004. Correlation of nuclear morphomet-8），neuroﬁlament（図 9），MAP–2 及び vimentin に陽性

ric features with animal and human world health organiza-

を示し，nestin 及び GFAP に陰性であった。

tion international histological classifications of canine

診断：原始神経外胚葉性腫瘍（PNET）を伴う精母細胞

spontaneous seminomas. Vet. Pathol. 41 : 608–611.

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レビュー

動物実験の適正化―基準や指針の制定とこれからの課題―
八 神 健 一（筑波大学大学院人間総合科学研究科 生命科学動物資源センター）た。しかし，実現には至らず，昭和 62 年に文部省
1．はじめにから局長通知として「大学等における動物実験の実

国際的な環境保護団体シー・シェパードとわが国施について」が出されたのみであった。それでも，の調査捕鯨団体との攻防，ワシントン条約会議での国立大学の医学部には動物実験施設が整備されていクロマグロの国際取引規制に関する採決のニュースたことから，ほとんどの大学（特に医学部）では，等，動物の利用と社会的な合意は国家，文化，宗教

この行政指導を受けて動物実験指針が定められ，動等の要因も含み解決への道は険しい。動物実験を行

物実験計画を委員会で審査する体制が普及した。まう研究者とそれに反対する動物愛護家の攻防も，19

た，製薬企業等においても同様な指針や委員会の設

世紀末にクロード・ベルナールが実験医学の手法と置が進んでいった。大学でも農学部，理学部，薬学

して動物実験を体系化した頃より続く果てしない問部などではこの通知も十分に浸透せず，公的研究機題である。1970 年代末から始まった動物権（アニ関でも対応は遅れていた。

マルライツ）運動は，反動物実験の過激な非合法活

一方，動物愛護の問題は，平成 9 年に起きた児童

動にまでエスカレートし，多くの国で深刻な問題を連続殺人事件で加害者の少年に動物の虐待歴があっ引き起こしている。そのような中で，わが国ではたことに関連し，動物虐待などの生命を軽視する行

1980 年頃より実験動物や動物実験に関する法規制為を抑止することに社会的関心が高まり，動物保管がなされていたが，最近，大きな改革が相次ぎ，実法の改正論議が再燃した。そして，改正に向けた検験動物や動物実験の法令や指針による規制が格段に討作業は，平成 10 年 1 月に自由民主党環境部会に進行した。その経緯と今後の課題について，私見を「動物の愛護と管理に関する小委員会」が設置され交えて紹介する。

たことで開始され，同年 1 月〜 6 月まで 6 回にわたり日本獣医師会，日本動物福祉協会などの愛護団体，
日本動物園水族館協会，日本鳥獣商組合連合会，東2．動物愛護法の改正から基本指針の制定の経緯

京都衛生局等の関連団体の関係者からヒアリングを

昭和 48 年に議員立法で制定された「動物の保護行った上で進められた。特に，獣医師会は「わが国及び管理に関する法律（動物保管法）」は，わが国の動物福祉法制のあり方」に関する要請書を小委員の動物愛護施策の遅れに対する海外からの圧力とそ会に提出する等，盛んにロビー活動を進めた。また，れに呼応した動物愛護団体の要望から，動物愛護や動物愛護団体は「動物の法律を考える連絡会」を結

生命尊重の情操の涵養を謳い，動物への虐待の防止

成し，「改正の骨子案」を同年 10 月に提出した。こや適正な飼養への飼い主の責任を努力義務として規の案の中には，①実験動物生産業者を動物取扱業に定した。そして，動物の利用区分に応じて各種動物

含め許認可制として，1 年毎の更新と立入り調査をを対象とした飼養保管基準が定められ，実験動物に行うこと，②動物実験に対して，ライセンス制（プついては，昭和 55 年に「実験動物の飼養及び保管

ロジェクト，個人，施設に対して），民間委員を含等に関する基準」が定められた。一方で，この基準

む審査委員会による査察制度の導入，が盛り込まれには動物実験の実施方法については規定されておらていた。このため，同年 10 月に，急遽，動物実験ず，日本学術会議は当時の内閣総理大臣に対してを実施する側に対するヒアリングが行われ，当時の「動物実験ガイドラインの策定について（勧告）」を千葉大学医学部長が対応した。その際，前述したよ

出し，国による統一的なガイドラインの策定を求め

うな日本学術会議による動物実験ガイドラインの制

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日生研たより定に関する勧告，それを受けた文部省通知により大は動物実験の廃止を求める過激な団体が別行動を学医学部では動物実験指針の制定や委員会の設置がとったこともあり，動物実験関係者と穏健な動物愛進んでおり，研究者側の自主的管理で適正に動物実

護団体の関係者との真摯な議論を経て，実験動物の験が行われていることの説明が効を呈し，動物実験

適正管理と動物実験の倫理原則を法令で定め，動物についてはこのときの改正の論点からは外れること

実験の具体的な実施手順や方法は指針で定め，機関となった [1]。しかし，率直に言って，研究者や実の責任で自主自律的な管理体制とすることで議論は

験動物生産業者もこの問題に対する危機感は極めて収束した。そして，動物実験の国際的な倫理原則で希薄だったと言わざるを得ない。

ある3R（Replacement, Reduction, Reﬁnement）が動こうして，平成 11 年に動物保管法は改正され，

物愛護管理法に明記され，実験動物飼養保管基準で「動物の愛護及び管理に関する法律（動物愛護管理

は動物の順化や検疫等の実験動物の飼養保管に加え法）」となって公布された。動物愛護管理法では，て，動物実験の際の麻酔，術後管理，人道的エンド

ペットショップやペットブリーダー，動物園などをポイント等，苦痛の軽減に関する記述が盛り込まれ動物取扱業とし規制が強化されたが，動物実験の問た。こうして 3R の理念を明記した改正動物愛護管

題が動物愛護法改正に反映されなかったことに対し

理 法 は 平 成 17 年 6 月 に 施 行 さ れ，18 年 4 月 に はて，動物実験に反対する動物愛護団体（特に，アニ「実験動物の飼養及び保管並びに苦痛の軽減に関す

マルライト運動に呼応する団体）は，情報開示請求る基準（実験動物飼養保管基準）」が制定された。

や内部告発による情報を使いさまざまなキャンペー

一方，平成 18 年 6 月には文部科学省，厚生労働省，ン活動を繰り広げ，海外の過激活動家を日本に招き農林水産省が動物実験の実施に関する統一ガイドラ

非合法活動を行う者も出てきた。このことを憂慮しインとして，基本指針を制定した。このとき，基本た日本学術会議は，平成 16 年に「動物実験に対す指針の制定をリードしたのは文部科学省であり，科る社会的理解を促進するために（提言）」を公表し，

学技術・学術審議会の下におかれたライフサイエン

わが国では学術研究，試験研究の不可欠な手段であス委員会動物実験指針検討作業部会で案が作られ，る動物実験を法律で規制するのでなく自主管理体制

この案をもとにして厚生労働省や農林水産省は一部により適正化することを改めて強調した。同時に，を修正してそれぞれの基本指針とした。また，基本

現状では諸外国のような統一ガイドラインがないた

指針案の作成と平行して，文部科学省と厚生労働省

め規制の具体性が分かりにくいこと，各機関におけは日本学術会議に対して，動物実験実施機関が規程

る自主管理体制を客観的に評価・検証する仕組みがを策定する際に参考となる詳細なガイドラインの作ないことを問題点としてあげ，統一ガイドラインの成を依頼した。日本学術会議は第 2 部会の中に WG

策定と第三者評価システムの構築の必要性を示したを設置し，「動物実験の適正化に向けたガイドライ[2]。

ン」を各省の基本指針の公表と同時に 18 年 6 月 1

動物愛護管理法には 5 年毎の見直し条項があり，日に公表した [3]。これは，国際的なガイドラインに

平成 16 年頃にはその議論が活発に行われており，匹敵する内容であり，ここにわが国における動物実

日本学術会議の提言はこの問題についてわが国の進験の新たな管理体制が構築されたのである（表 1）。

路を明確にする絶好のタイミングで公表された。動物愛護管理法を所管する環境省は，中央環境審議会
動物愛護部会の下に実験動物小委員会を設置し，こ3．新たな法令･指針の枠組み

こには獣医師会，動物愛護団体，行政関係者だけで平成 17 年の動物愛護管理法の改正と 18 年の各種

なく，動物実験を行う研究者，動物実験施設の管理指針の制定により，わが国における動物実験に関す者，製薬企業や実験動物生産業の関係者も加わり，る法令･指針の枠組みが明確になった。動物愛護管

4 回にわたる審議や関係団体のヒアリングを経て，理法では，動物実験の国際的な倫理原則である 3R

動物愛護管理法および飼養保管基準の改正案が作成が第 41 条に謳われ，同条に基づき制定された実験された。動物愛護団体は「動物との共生を考える連

動物飼養保管基準で，実験動物を適正飼育するため絡会議」を介してロビー活動を続けたが，このとき

あるいは動物実験における動物の苦痛軽減のため具56（5）
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表１．実験動物および動物実験に関する規制の経過
実験動物の適正管理（法令による規制）

動物実験の適正化（指針による規制）

昭和48 年：動物の保護及び管理に関する法律（所管 55 年：動物実験ガイドラインの策定について（日総理府）
本学術会議勧告）
55 年：実験動物の飼養及び保管等に関する基準 62 年：大学等における動物実験について（文部省
（総理府）
通知）

平成

12 年：動物の愛護及び管理に関する法律（動物 16 年：動物実験に対する社会的理解を促進するた
愛護管理法）の改正めに（提言）（日本学術会議第 7 部会）
13 年：動物愛護管理法の所管が総理府から環境 18 年：研究機関等における動物実験等の実施に関省へする基本指針（文部科学省）
17 年：動物愛護管理法改正
18 年：厚生労働省の所管する研究機関等における18 年：実験動物の飼養及び保管並びに苦痛の軽動物実験等の実施に関する基本指針（厚生労働省）
減に関する基準
18 年：農林水産省の所管する研究機関等における動物実験等の実施に関する基本指針（厚生労働省）
18 年：「動物実験の適正な実施に向けたガイドライン」（日本学術会議第 2 部会）

体的基準が定められた。これらは環境省所管の法令る。動物愛護団体の中には，わが国も EU 諸国の方であるため，当然，違反の事実が動物の虐待や動物式をとるべきであるとの主張を続ける者もいるが，の遺棄等とみなされれば，告発，刑罰の対象となる。 EU 諸国の方式であっても研究者と動物愛護団体と一方で，動物実験は科学技術の進展や医療技術の開の対立は果てしなく続いているのが現状である。わ

発のために不可欠であり，これらの事業を推進するが国は，実験動物と動物実験の管理についてアメリ立場にある文部科学省，厚生労働省，農林水産省は， カ方式を選択し，動物実験を科学的にも動物愛護の動物実験を実施する研究機関等が機関の長の責任に視点からも適正に進めるために，国が定めた指針の

おいて動物実験の管理体制を明確化するよう基本指もとで研究機関の管理体制の強化を徹底することと針を定めた。そして，同時に公表された日本学術会

した。

議のガイドラインを参考にして，各研究機関等が動物実験の規程を定め，動物実験計画の審査，承認，動物実験実施者の教育訓練，動物実験実施施設等について，自主自律的な管理体制を構築するというものである。

4．動物実験関係者に求められること
法令や指針が制定されて 4 年，大学や研究機関での管理体制は確実に浸透し，3R を考慮した動物実

こうしたわが国の方式は，大まかに言えば，実験験計画の立案，審査，動物実験実施者等の教育訓練，

動物の適正管理と動物実験の適正化をそれぞれ法令

実験動物管理者等による動物の飼育管理や飼育施設と指針に区分して規制するものであるが，これは政の衛生管理が，指針や実験動物飼養保管基準に則し府や自治体が動物実験実施施設を指定し，実施者のて進められつつある。しかし，動物実験を行う分野

免 許（personal license）や 実 験 計 画 の 審 査，承 認は極めて幅広い。大学等においても，医学部には従（project license）を行う EU 諸国のシステムとは異来から動物実験施設が設置され専任の教職員が配置なる。わが国の方式はアメリカのそれに類似しておされてきたこと，医学･医療分野では対社会的な意

り，動物愛護管理法に相当するものがアメリカの動識が高く生命倫理の諸問題を抱えていること，臨床物福祉法（Animal Welfare Act）であり，日本学術

研究やヒト組織の利用研究等に関する指針の遵守が

会 議 の ガ イ ド ラ イ ン は 米 国 科 学 ア カ デ ミ ー下 の進んでいることから，動物実験に関しても法令，指ILAR (Institute for Laboratory Animal Research) に針の規制に対して抵抗なく受け入れられている。一

よる実験動物の管理と使用に関する指針 Guide for方で，理学系，農学系では従来から委員会の設置や

the Care and Use of Laboratory Animals に 相 当 す

動物実験計画の審査等が普及していなかったため，

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日生研たよりやや意識が低い傾向や具体的な手続き等での戸惑いを守るのは人である。私は，動物実験に携わる研究も見られるが，ほとんどの大学等で自主管理体制が者や技術者に対して，敢えてプロフェッショナルと構築されているようである。

しての誇りと覚悟を求めたい。スポーツの世界では，では，今後，動物実験関係者に何が求められるのだろうか？

フェアプレーが大原則であり，アスリートは肉体と各機関が定めた動物実験の規程に従っ

精神を鍛錬し，一定のルールの中で戦うことが許さて，正規の手続きを経て動物実験を行うこと，実験れる。ルールを守るのは当然であり，アンフェアなの実施に当たっては 3R を実践すること，そして，

プレーは恥ずべき行為であり，それを繰り返せば引動物実験の実施結果や動物の飼育状態を自ら点検･退を勧告されたり，スポーツ界から追放されること評価することである。動物実験の実施過程では，事もあるだろう。動物実験を行う者は，社会的な必要

前に必要な実験技術を習得し，動物への苦痛の程度

性の中で，動物の命を絶つという特別な仕事を託さを予想し可能な限りの苦痛緩和策をとること，苦痛れたプロフェッショナルである。重い責任に応えるの程度の高い実験においては人道的エンドポイント

だけの覚悟と動物の身体を傷つけるあるいは命を絶を設定し，それに沿った安楽死を施すことは，特につ作法（スキル）を身につけなければならない。

重要なポイントである。苦痛緩和策としても，適切な麻酔はもちろん，大規模手術では術後管理として鎮痛薬の投与や補液管理も必須となるだろう。動物

5．動物実験の実施機関に求められることの健康管理，特に霊長類やイヌ，ブタ等の健康管理

平成 18 年以来，動物実験を実施する大学や研究においては獣医学的な管理の重要性も再認識され，機関では，機関内の動物実験委員会（IACUC: Insti-

実験動物の専門知識や経験を有する獣医師の認定制

tutional Animal Care and Use Committee）や実験動度（日本実験動物医学会による実験動物医学専門医

物管理者の活動を通じて，自主管理体制が強化されの認定）も拡がりつつある。

つつある。次の課題として，動物実験の実施状況やさて，動物実験の適正化のために法令や指針，

実験動物の飼養保管状況について自己点検･評価を様々な手続きやマニュアル類が整備されても，それ行い，さらに外部の者による検証が求められている。

＊
図 1．PDS（PDCA）
サイクルと自己点検・評価，外部検証

組織あるいはその構成部局や構成員が，「達成目標の設定」「実行」「点検・評価」を経て，結果を次の達成目標に反映させる。このサイクルが機能することで，段階的改善，継続的な発展が可能である。動物実験の管理体制においても，自己点検･評価の結果を次の目標設定に反映させることが重要で，外部検証（第三者評価）には，このサイクルが機能していることを専門家のピアレビューにより確認する意義がある。
＊ PDS：Plan‑Do‑See, PDCA：Plan‑Do‑Check‑Action

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自己点検･評価とは，決して実験動物の福祉や動物者，動物実験実施者，飼育担当者のすべてを兼ね，実験の適正化に限った問題ではなく，組織の改善，

劣悪な環境で非衛生的な管理に陥りかねない点であ活性化のために有効な PDS(PDCA) サイクルの考える。機関長の責任で，これらの小規模施設の存廃を方が基本である（図 1）。動物実験について各機関含めた再編・集約化が求められるであろう。また，の中で PDS サイクルが回転し機能していることを，科学的根拠に基づく飼育管理方法や飼育環境の改善

外部の者により検証すると考えてもよいだろう。こ（環境エンリッチメント）は，飼育スペース，床材，こでいう検証とは，日本学術会議による提言で指摘

シェルターや巣材の要否等，研究目的や動物の状況された第三者評価と同義であり，現在，国内の 3 団に合わせて適用することになるだろう。こうした流体が評価制度を確立し，第三者評価を開始している

れは実験動物に限らず展示動物や産業動物でも同様[4]。大学等では，国立大学法人動物実験施設協議

であり，国際獣疫事務局（OIE）による実験動物の会（国動協）と公私立大学実験動物施設協議会（公福祉綱領の検討も進んでおり，今後，国内への影響私動協）が合同事業として「動物実験に関する相互も考えられるため，OIE の動向には注意が必要であ検証プログラム」による検証を平成 21 年より開始

る。

し，厚生省所管の研究機関や製薬企業に対しては実験動物や動物実験に関する法改正や指針の制定

ヒューマンサイエンス振興財団が「動物実験の外部が続き，新たな制度による体制を整備した機関は評価・検証事業」を 20 年より開始した。また，日着々と増えている。次は，新制度による管理を確実

本実験動物協会は，実験動物生産企業等を対象としに履行することが求められ，各機関は施設や設備のた評価制度を 16 年より試行的に開始し，20 年より整備，改修等の中長期的な計画を真剣に考えなけれ本格的な評価制度に移行した。海外でも同様な実験ばならない時期に差しかかっている。

動物施設の認証評価を行う団体（AAALAC interna-（本レビューは平成 21 年 12 月に（財）日本生物科

tional）があり，わが国でも製薬企業等の 7 施設が学研究所において講演した内容に加筆したものであ認証されている。これらの評価制度は，評価項目やる。
）

手順に多少の違いがあるものの，各機関における動物実験の状況を専門家が行うピアレビューとして評価するもので，評価により社会的透明性を高めるば

参考文献

かりでなく，評価を通じて関係者の意識を向上させ，

1. 動物愛護管理法研究会編（2001）．改正動物愛護

継続的な改善につなげる手段として極めて有効と考えられる。
大学や研究機関において規程の制定や動物実験委

管理法

解説と法令･資料．3–32．青林書院

2. 日本学術会議（2004）．第 7 部報告

動物実験に対する社会的理解を促進するために（提言）．

員会の設置などソフト面の体制整備は順調に進んでhttp://www.scj.go.jp/ja/info/kohyo/pdf/kohyo–

おり，次に求められることは，施設・設備の整備等

19–t1015.pdfのハード面の改善と実験動物の飼養保管の標準化で3. 日本学術会議（2006）．動物実験の適正な実施にあろう。多くの実験動物飼育施設では，実験動物管向けたガイドライン．

理者を中心に飼養管理の手順を定めたマニュアルやhttp://www.scj.go.jp/ja/info/kohyo/pdf/kohyo–

SOP により，日常的な動物の飼育管理や健康管理，

20–k16–2.pdf．動物実験の第三者評価（外部施設の衛生管理が進められている。問題となるのは， 4. 佐神文郎（2010）
一部の小規模施設では，研究者自身が実験動物管理検証）制度．日本薬理学雑誌 135: 71–75.

10（66）日生研たより発表論文紹介豚トルクテノウイルス
平修[2, 17]。TTV は環境中に常在すると考えられており，
1. はじめに豚におけるウイルス感染症のうち，古典的な急性感染症である豚コレラ，オーエスキー病，豚伝染性

糞便あるいは汚水処理場水から検出されることなどから，その伝搬様式として水平伝搬の可能性が考えられている [4, 12]。

胃腸炎等はワクチンの普及によって効果的に防御さ

TTV はヒト以外にウシ，ブタ，ヒツジ，イヌ，

れてきたが，近年，豚サーコウイルス 2 型感染症

ネコ，および鳥類など多数の動物種から検出されて（PCV2）や 豚 繁 殖・呼 吸 障 害 症 候 群 ウ イ ル ス

おり，その検出部位は肝臓を主に，脾臓，腎臓，肺，（PRRSV）等のように単独感染では重篤な病気を起

骨髄，リンパ節，扁桃，および空回腸など多岐にわこさないものの他のウイルスやマイコプラズマ，細たる [14]。TTV のゲノム構造は動物種によって異菌などとの複合感染により大きな経済的損耗を与えなり，ヒトで 3.8 kb，ブタで 2.8 kb，またネコではる複合感染症が重要となっている。豚呼吸器複合病

2.1 kb となっており，動物種に特異的なウイルスが（PRDC）や 離 乳 後 多 臓 器 性 発 育 不 良 症 候 群

存在している [14]。豚トルクテノウイルス（Swine（PMWS）等がその例である。これらのウイルス感

torque tenovirus; sTTV）はゲノム全長の解析によ染症は従来のように単一のウイルスワクチンのみでり 2 種の遺伝子型（sTTV1 and sTTV2）の存在が確防御することは困難であり，衛生対策と同時に考慮認されており，日本を始めアメリカ，カナダ，中国，することが重要となってきている。こうした急性転

タイ，韓国，イタリア，フランス，およびスペイン

帰をとらないウイルス感染症が豚に蔓延する中，豚などの養豚場調査で 24–100% の検出率が報告されサーコウイルス関連疾病 PCVAD（PMWS，豚皮膚ている [1, 9, 10, 14]。Segalés らによるレトロスペ炎腎症症候群 PDNS，PRDC 等の PCV2 を起因とす

クティブな調査報告によると，スペインでは sTTVる一連の疾患）の増悪因子として豚トルクテノウイの豚群への侵入は 1985 年に遡り，既に養豚場に広ルスが注目されはじめてきた。本稿では筆者らが最く常在していたことが示唆されている [16]。sTTV

近調査を実施した「国内養豚農場における豚トルクと PMWS との関連性は上記の国々においても多数

テノウイルスの浸潤状況」[18] を元に，本ウイルス

報告されており，PMWS 豚における sTTV 検出率

に関する最近の文献的知見を交えて概説する。

の統計的解析から，PMWS の増悪因子の一つとして浮上してきている。特にスペインでは sTTV2 がより PMWS に関与しているとの報告もある [6]。

2. 背景

こうした背景の中，sTTV が PMWS の増悪因子にトルクテノウイルス（TTV）は 1997 年，我が国なり得る可能性を実験的に調べた報告がカナダ，アにおいて人の輸血後肝炎患者から起因ウイルスを同メリカで発表された [3, 7, 8]。これらの報告による定する過程で発見された [11]。TTV は 30–32 nm のと，無菌子豚に PRRSV と sTTV1 を同時接種するこ

エンベロープを持たない小型球形粒子で，マイナスとにより PDNS の特徴病変を，さらに sTTV1 を無一本鎖環状 DNA を持つ [5, 14]。TTV は健常者から菌子豚に単独接種し PDNS 関連病変の一つである検出されるほか，HIV 患者，血友病患者（67–75%）， 膜性糸球体腎症をそれぞれ再現できたとしている。
薬物常用者（40%），および透析患者（46%）等で高しかしながら，これらの研究で用いた sTTV は分離

い検出率が報告されている [13, 19]。本ウイルスのウイルスではなく遺伝子陽性の血清をウイルス材料

病原性に関しては不明なところが多いが，これらのとしていることなどから，PCVAD との関連性に関疾病との間に何らかの因果関係が示唆されている

しては更に検討の余地がある。これまでの sTTV に56（5），2010

11（67）

関する研究報告では sTTV の PMWS への関与が強ペイン，アメリカ，カナダなどの報告にあるように，

く示唆されているものの，豚その他の動物種におけsTTV の検出率は国によって 24–100% と開きがある。

る TTV の生物学的性状・病原性に関する明確な知

今回の調査では，我が国における豚群は表 1 に示す

見は全く得られていない。大きな理由として，これように 51% が sTTV1 または sTTV2 の何れかに感染

ら解析に必要不可欠である sTTV の分離に必要な細していた。遺伝子型での検出率の差異は sTTV1 単胞培養系が樹立されていないためであり，今後の進独が 30%，sTTV2 が 31% となり，同等の結果となっ展が期待される。

た。諸外国では sTTV2 検出率が高い傾向となって
おり今回の結果とは異なっていたが，この結果が我が国の現状を正確に反映しているかどうかは定かで

3. 国内養豚場における TTV の浸潤状況はない。地域毎の検出率の差異に関しても両遺伝子

上述のように sTTV に関する知見は世界各国で報型で有意な差は認められなかった。また，共感染し告されてきたが，我が国の養豚場における浸潤状況ている個体も 10% 認められたことより，sTTV は同に関しては詳細な解析がなされていなかった。そこ

一農場に遺伝子型を問わず広く浸潤していることがで筆者らは 2008 年に弊所にて病性鑑定を実施した

明らかとなった。得られた PCR 産物のシークエン

臨床的 PMWS 豚の検体（血清）を用いて sTTV のスからも地域による検出率の差異は認められなかっ浸潤状況を nPCR により解析した。

た（図 1）。

16 都道県 16 農場より 153 検体の血清から DNA

また，日齢による sTTV の検出率に関しては 30を抽出後，sTTV 非構造タンパクをコードする領域

日齢の豚を除いた全てのステージで両遺伝子型が検を既報のプライマーを用いて nPCR に供した [6]。

出 さ れ た（表 2）。 sTTV1 は 30（11%）お よ び 90

表 1 は都道県毎の，表 2 は日齢毎の結果を示す。ス日 齢（5%）の 検 出 率 と 比 較 し て，60（36%），120

表１．日本における地域毎の豚トルクテノウイルス検出率
Prevalence of swine TTV genogroups
都道県
genogroup 1 or 2

genogroup 1

genogroup 2

genogroups 1 and 2

北海道（n=2）

0/ 2（

0%）*

0/ 2（ 0%）0/ 2（ 0%）0/

群

馬（n=12）

8/ 12（ 67%）

4/ 12（33%）

6/ 12（50%）

2/ 12（17%）

栃木（n=10）

4/ 10（ 40%）

1/ 10（10%）

3/ 10（30%）

0/ 10（ 0%）茨城（n=10）8/ 10（ 80%）

3/ 10（30%）

8/ 10（80%）

3/ 10（30%）

千葉（n=8）

5/ 8（ 63%）

3/ 8（38%）

2/ 8（25%）0/

東京（n=12）

5/ 12（ 42%）

4/ 12（33%）

1/ 12（ 8%）0/ 12（ 0%）長野（n=12）

6/ 12（ 50%）

5/ 12（42%）

2/ 12（17%）

1/ 12（ 8%）静岡（n=6）

0/ 6（

0%）

0/ 6（ 0%）0/ 6（ 0%）0/6（ 0%）

愛知（n=6）

6/ 26（100%）

4/ 6（67%）

3/ 6（50%）1/

6（17%）

広島（n=12）

7/ 12（ 58%）

5/ 12（42%）

3/ 12（25%）

1/ 12（ 8%）徳島（n=8）

4/ 8（ 50%）

2/ 8（38%）

2/ 8（13%）0/

愛媛（n=12）

2/ 12（ 17%）

1/ 12（ 8%）1/ 12（ 8%）0/ 12（ 0%）大分（n=10）7/ 10（ 70%）

5/ 10（50%）

5/ 10（50%）

3/ 10（30%）

熊本（n=12）

6/ 12（ 50%）

5/ 12（42%）

4/ 12（33%）

3/ 12（25%）

宮崎（n=9）

3/ 9（ 33%）

2/ 9（22%）

1/ 9（11%）0/

鹿児島（n=12）

7/ 12（ 58%）

2/ 12（25%）

6/ 12（42%）

1/ 12（ 8%）

Total（n=153）

78/153（ 51%）

46/153（30%）

47/153（31%）

15/153（10%）* 陽性個体 / 検査個体（%）

2（ 0%）

8（ 0%）

8（ 0%）

9（ 0%）

12（68）日生研たより表 2. 日齢毎の豚トルクテノウイルス検出率
Prevalence of swine TTV genogroups
Age（day）
genogroup 1 or 2

genogroup 1

genogroup 2

genogroups 1 and 230（n=37）

4/ 37（11%）*

4/ 37（11%）

0/ 37（ 0%）0/ 37（ 0%）60（n=22）

12/ 22（55%）

8/ 22（36%）

6/ 22（27%）

2/ 22（ 9%）90（n=22）

15/ 22（68%）

1/ 22（ 5%）

14/ 22（64%）

0/ 22（ 0%）120（n=24）

15/ 24（63%）

10/ 24（42%）

11/ 24（46%）

6/ 24（25%）

150（n=22）

18/ 22（82%）

11/ 22（50%）

14/ 22（64%）

7/ 22（32%）

sows（n=26）

14/ 26（54%）

12/ 26（46%）

2/ 26（ 8%）0/ 26（ 0%）Total（n=153）

78/153（51%）

46/153（30%）

47/153（31%）

15/153（10%）* 陽性個体 / 検査個体（%）

Hiroshima/AB480219
Ehime/AB480217
Ibaraki/AB480220
Tokyo/AB480224
60

Tochigi/AB480223
Gunma/AB480218

54.8

TTV1

Chiba/AB480216
77.2

AY823991
Nagano/AB480222
Aichi/AB480215
Kagoshima/AB480221
100

Gunma/AB480208

85.9

Chiba/AB480206
Tochigi/AB480213
Aichi/AB480205
Hiroshima/AB480209
97.1

AB076001
Tokyo/AB480214
Nagano/AB480212
73.7

0.05

Ehime/AB480207
Kumamoto/AB480211

69.6 Ibaraki/AB480210

図1

豚トルクテノウイルス非構造領域の分子系統樹。
日本におけるプロトタイプは太字で示した。

TTV2

56（5），2010

13（69）（42%），150 日齢（50%），および母豚（46%）で高い

4. Haramoto, E., Katayama, H. and Ohgaki, S. 2008.

検出率となった。一方，sTTV2 に関しては 60 日齢

Quantiﬁcation and genotyping of torque teno virus at a（27%）および母豚（8%）の検出率と比較して，90

wastewater treatment plant in Japan. Appl. Environ.

（64%），120（46%），および 150 日齢（64%）で高い

Microbiol. 74 : 7434–6.

検出率となった。ヒトの TTV では検出率の差異に

5. Itoh, Y., Takahashi, M., Fukuda, M., Shibayama, T.,

年齢が関与しているとの報告もあるが [15]，今回のIshikawa, T., Tsuda, F., Tanaka, T., Nishizawa, T. and

結果からはそのような知見は得られなかった。しかOkamoto, H. 2000. Visualization of TT virus particles

しながら，30 日齢での低い検出率を考慮すると，

recovered from the sera and feces of infected humans.

sTTV は離乳後比較的早期の段階で豚群に侵入してBiochem. Biophys. Res. Commun. 279 : 718–24.

いるのかもしれない。

6. Kekarainen, T., Sibila, M. and Segalés, J. 2006.
Prevalence of swine Torque teno virus in post–weaning–affected
multisystemic wasting syndrome（PMWS）
and non–PMWS–affected pigs in Spain. J. Gen. Virol.

4. おわりに
今回の調査では，臨床的に PMWS が疑われる個

87 : 833–7.

体から sTTV の検出を行ったため，疫学的な解析と7. Krakowka, S. and Ellis, J. A. 2008. Evaluation of the

し て は 不 充 分 で は あ る が，国 内 農 場 に お い て もeffects of porcine genogroup 1 torque teno virus insTTV の存在が明らかとなり，今後はその病原性を

gnotobiotic swine. Am. J. Vet. Res. 69 : 1623–9.

含めてさらなる調査・研究が必要と考えられた。ま

8. Krakowka, S., Hartunian, C., Hamberg, A., Shoup, D.,

た，最近では TTV のほかにボカウイルスというパ

Rings, M., Zhang, Y., Allan, G. and Ellis, J. A. 2008.

ルボウイルス科に属する DNA ウイルスが PMWS

Evaluation of induction of porcine dermatitis andに関与しているとの報告もあるため [20]，今後の動nephropathy syndrome in gnotobiotic pigs with

向に留意しつつ PMWS 全貌の解明が期待される。

negative results for porcine circovirus type 2. Am. J.

（本稿は , Veterinary Microbiology（2009）139（3–4）.

Vet. Res. 69 : 1615–22.

347–350. doi:10.1016/j.vetmic.2009.06.010 に 掲 載 された論文を訳し，一部加筆したものです。
）（研究員）

9. Mar telli, F., Caprioli, A., Di Bar tolo, I., Cibin, V.,
Pezzotti, G., Ruggeri, F. M. and Ostanello, F. 2006.
Detection of swine torque teno virus in Italian pig
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Fukai, K., Muramatsu, U., Naito, Y. and Yoshikawa, A.

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suspected post – weaning multisystemic wasting（TTVs）in pigs, cats and dogs and their relatedness

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日生研たより昭和 30 年 9 月 1 日創刊（隔月 1 回発行）

（通巻 564 号） 平成 22 年 8 月 25 日印刷
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