2015 MAY
No. 5922015 年（平成 27 年）5 月号

第 61 巻 第 3 号（通巻 592 号）

挨拶・巻頭言選択. ....................................杉 浦 勝 明（ 2 ）獣医病理学研修会
第 54 回 No. 1114 ニワトリの眼球......................................... 日 生

研（ 3 )

第 54 回 No. 1116 イルカの背部皮膚腫瘤..................................... 大阪府立大学（ 4 ）レビュー

馬の感染症...........................辻 村 行 司（ 5 ）論文紹介
豚の呼吸器における生体防御について........................................ 手 島 香 保（11）日生研たより

2（26）

選択
杉浦勝明
私事ではございますが、今年還暦を迎えるに当たり、今までの人生を少しばかり振り返っては、残りの人生をどう生きようか考える今日この頃です。人並みの成功と失敗を経験してきて思うのは、人生というのは選択の連続だということです。そこで、今日は「選択」というテーマについて、書こうと思います。
今年 1 月末、イスラム国の人質となっていた後藤健二さんが殺害されました。イスラム国が後藤さんと湯川さんの映像を公開してからお二人が殺害されるまで、その救出を巡って世間が論ずるときに自己責任という言葉が飛び交いました。危険とわかっている地域に、自らの選択で出向いたのだから、覚悟はできていたはずであるし、万一助からなかったとしても仕方がないのではないか、という議論です。これに関しては、様々な意見があると思いますが、結果的には後藤さんも湯川さんも最悪の形でご自分の選択の責任を取ることになったわけです。文字通り、命を賭してジャーナリストとしての職を全うされた後藤さんには多くの人が敬服の意を抱かれたことと思います。私もその一人です。
しかし一方で、イスラム国に捕らえられたジャーナリストの中には、イスラム国の宣伝係になることで死を免れている人もいるようです。とあるニュースコメンテーターは、そのよ
うなジャーナリストに関して、「魂を売って」生き延びている、という言い方をしていました。
そこには非難めいた響きがあり、大変厳しい指摘のように私には思えました。しかし、そのジャーナリストも、後藤さんと同じように大きな決断をしたのではないでしょうか。生き延びるために、自分が最も正しいと思う道を選んだのだと思います。彼は「魂を売った」のではなく、彼なりの信念に従ったのだと思います。
このように、自分の命とジャーナリストとして社会に果たすべき使命を天秤にかけなければならないような難しい決断を迫られることはほとんどありませんが、研究開発の分野においても当然、自分の決断が自分だけでなく、社会、ひいては次世代に直接的、間接的に大きな影響を及ぼすこともあるでしょう。世代ごとに価値観は変わっていくので、次世代のための決断をするというのは難しいことですが、負の遺産を残さないように決断をしていかなけ
ればなりません。
自分の価値観を確立し、他人に批判されても揺るがない強さを持つことは、年に関係なく難しいことですが、人生折り返し地点を過ぎた今、自分にとって、そして社会にとって本当に大切なことは何であるかを自らに問いかけながら、日々ますます精進を重ねていきたいと
思います。
（評議員）

61（3）
、2015

3（27）

ニワトリの眼球第 54 回獣医病理学研修会 No. 1114

日生研

動物：ニワトリ、GSP/pe 系、雄、52 週齢。

脈絡膜、軟骨層を含む強膜が認められた（図 2）。これ

臨床事項：本症例はファヨウミ種由来の近交系である

らの骨組織は海綿骨様の形態を示し、骨髄腔を形成し、GSP 系ニワトリに出現した不完全アルビノ様個体であその中には破骨細胞および造血細胞が観察された（図る。起源種に比較して羽装の黒色部の淡明化がみられ、3）。骨組織の表層あるいは内部にはチュブリン抗体陽性

成長とともに眼球の突出、白濁を示してくることから、の神経網膜断片が観察された（図 4 および挿入図）。

眼球の病態を検索するために送付され、剖検に供され診断：GSP/pe 系ニワトリにおける眼内骨形成（網膜色た。

素上皮の分化転換を疑う）

肉眼所見：外観において、両側の眼球は軽度に腫大およ考察：眼内における骨の形成はヒトおよび動物でも報告

び突出し、水晶体が混濁していた。眼球は高度に硬化しがあり、ヒトでは慢性眼内疾患に関連して認められていており、固定後の割断ができなかったため、EDTA 脱灰る。網膜色素上皮細胞は神経外胚葉由来であるが、培養後に割断した。眼球内部には灰白色充実性硬組織が充満条件によって上皮 – 間葉転換を起こすことが知られてし、眼内組織の判別ができなかった。

いる。本症例も組織学的にその発生母体として網膜色素

組織所見：角膜に異常所見はなく、虹彩および毛様体は上皮が疑われた。

形態の変形、色素細胞における色素の減少、軽度の炎症

参考文献：

性細胞の浸潤が認められた。水晶体では水晶体線維の融1. Yoon, Y. D., Aaber g, T. M. Sr., Wojno, T. H.,

解・消失がみられ、水晶体嚢を残すのみであった（図Grossniklaus, H. E., Am. J. Ophthalmol., 1998, 125 : 5581）。眼内には硝子体、網膜および櫛膜を巻き込んで骨組– 559.

織が増生し、充満していた（図 2）。眼底部において、

2. Vemuganti, G .K., Honavar, S. G., Jalali, S., Indian J.

網膜色素上皮は認められず、骨組織の外側にはブルッフ

Ophthalmol. 2002, 50 : 183 – 188.

膜様構造が認められ、その外周には線維化して増生した（渋谷一元）

日生研たより

4（28）

イルカの背部皮膚腫瘤
第 54 回獣医病理学研修会 No. 1116

大阪府立大学動物：バンドウイルカ（Tursiops truncatus）、雄、推定

診断：表皮の乳頭状増殖を伴う真菌性肉芽腫性皮膚炎（ラ17 歳齢。

カジオーシス様 疾 患）Fungal granulomatous dermatitis

臨床事項：捕獲後、水族館で飼育されていた個体で、搬with papillar y epidermal hyperplasia （Lacaziosis-like

入時より背部皮膚に創痕が認められていた。背部皮膚disease）の膨隆が急速に拡大し、約 25 × 25 cm に及ぶカリフラ

考察：本症例で認められた肉眼および組織所見は、ヒト

ワー状腫瘤を形成した（図 1）。フルコナゾール等によとイルカにおいて報告されているラカジオーシス（原因る治療を行うも、病変は拡大傾向を示し、急速に元気消

真菌：Lacazia loboi）のものと一致した。ラカジオーシ

失と呼吸速迫を呈して死亡した。

スは、アマゾン川流域の風土病として知られていた慢性

肉眼所見：背部皮膚には、灰白色カリフラワー状腫瘤が肉芽腫性皮膚真菌症である。本症例の原因真菌の遺伝子多数形成されていた。ホルマリン固定後の割面では、表

配列は既報の L. loboi と完全には一致しなかったが（84

皮の乳頭状増殖が認められ、表皮直下から真皮では黄白％の相同性）、イルカではヒトの症例とは異なった遺伝

色〜黄色の結節性病巣が多発していた（図 2）。

型の菌種が原因である可能性もあり、発生地域や動物種

組織所見：肉眼的に乳頭状を呈していた部分では、表皮を考慮した上での今後の解析が待たれる。

の乳頭状過形成と過角化が認められ、真皮・皮下組織で（田中美有・山手丈至）

は、主に多核巨細胞からなる肉芽腫性炎症の像を呈して参考文献：いた（図 3）。また、巨細胞やマクロファージの細胞質

Ueda et al. T wo Cases of Lacaziosis in Bottlenose

内に、多数の厚い壁を有する酵母様細胞（直径 10μm

Dolphins（Tursiops truncatus）in Japan. Case Reports in前後）が孤在もしくは細い頸管によって連鎖して認めら

Veterinary Medicine. vol. 2013, Article ID 318548, 9 pages,

れた（図 4、挿入図はグロコット染色）
。

2013.

61（3）
、2015

5（29）

レビュー

馬の感染症
辻 村 行 司（日本中央競馬会競走馬総合研究所栃木支所）

1. 日本脳炎：法定伝染病

はじめに
家畜伝染病予防法で定められた監視伝染病のうち、家畜の流行性脳炎の病原体としては、フラビウイ

馬を対象とするのは、家畜伝染病の 8 疾病、届出伝

ルス科フラビウイルス属の日本脳炎ウイルス、ウエ

染病の 13 疾病である（表 1）。これらのうち、平成

ストナイルウイルス、トガウイルス科アルファウイ

10 年以降に日本国内で発生報告のある疾病は、流ルス属の東部馬脳炎ウイルス、西部馬脳炎ウイルス、

行性脳炎（日本脳炎）、馬伝染性貧血、破傷風、馬ベネズエラ馬脳炎ウイルスなどが知られる。ただし、インフルエンザ、馬鼻肺炎、馬伝染性子宮炎、馬パ

現在までに日本国内で発生報告がある疾病は日本脳ラチフスの 7 疾病である。また、監視伝染病には含炎のみである。馬はヒトとともに、日本脳炎ウイル

まれないが、国内で発生が問題となる感染症としてスに対して感受性が高いとされるが、その発症率はは、ゲタウイルス感染症 ､ ウマロタウイルス病など

1％未満と推定されている。日本脳炎ウイルスは主が挙げられる。一方、馬ウイルス性動脈炎は、これに水田地域に生息するコガタアカイエカによって媒まで日本国内で発生はないが、世界各地で発生が認介され、豚が増幅動物である。感染豚は通常発症しめられ、日本への侵入が警戒される感染症の一つでないが、妊娠豚では早死産が認められる場合がある。

ある。これらの感染症は、馬産業に大きな経済的損

一方で、豚の体内でウイルスはよく増殖し、蚊を感失を与えることから、予防法、診断法および治療法

染させるのに十分な高いウイルス血症が比較的長期の研究が行われ、ワクチンや診断液が開発されてき間維持される。馬やヒトは、感受性が高い一方で、た。本稿では、馬産業にとって重要な感染症のうち、 体内でウイルスがあまり増殖せず、蚊を感染させる
筆者が研究対象とするウイルス感染症について紹介ことはないと考えられるため、終末宿主とされていしていきたい。

る。日 本 に お け る 馬 の 日 本 脳 炎 の 大 き な 流 行 は
表1

馬の感染症

監視伝染病

監視伝染病以外

家畜伝染病

届出伝染病

流行性脳炎*類鼻疽ゲタウイルス感染症*

狂犬病

破傷風*

ウマロタウイルス病*

水胞性口炎

トリパノソーマ病

炭疽 *ニパウイルス感染症

ピロプラズマ病

馬インフルエンザ*

鼻疽

馬ウイルス性動脈炎

馬伝染性貧血馬鼻肺炎*

アフリカ馬疫馬モルビリウイルス肺炎
馬痘
野兎病
馬伝染性子宮炎馬パラチフス
仮性皮疽1）平成 10 年以降に日本国内で発生報告のある疾病を下線で示した（輸入検疫での摘発を除く）。
2）*：日本国内でワクチンが市販されている疾病

日生研たより

6（30）1947 年と 1948 年に認められ、このことを契機に日属し、終生持続感染するため感染馬の淘汰が必要と本脳炎ワクチンの接種が開始された（図 1）。ワク

なる。特徴的な症状は、回帰熱と貧血であり、急性チンが有効であったこと、また、衛生環境の改善や型では数日の経過で斃死する。一方、慢性型では感

水田・養豚場が郊外に移ったことから、日本脳炎の染当初は 1 か月に 1、2 回の再発を繰り返すが、そ発生数は大幅に減少し、馬における発生は近年ほぼの間隔は次第に長くなり、多くは初感染後 1 年以内認められない（図 2）。しかしながら、国立感染症に臨床症状が消失する。ただし、低レベルでのウイ研究所の調査では、日本各地で飼養されている豚にルス増殖が続いて、他馬への感染源となる。馬伝染

おいて、未だウイルスが広く分布していることが示

貧血ウイルスは、主にサシバエやアブなどの節足動されている。実際に 2003 年には鳥取県において、物の媒介によって伝播するが、垂直感染や医原性感ワクチン未接種馬 1 頭で日本脳炎の発生が報告され染も知られる。過去に報告のある汚染注射針の使いた。したがって、今後も定期的なワクチン接種や馬回しによる感染は、最近はほとんど認められないが、の飼養環境を衛生的に保つことが重要である。

その一方で問題となるのが汚染血液や血漿の投与で、2006 年にアイルランドでは汚染血漿の投与が原因の発生が起きている。日本国内では、過去には数千

2. 馬伝染性貧血：法定伝染病

頭の発生が認められていたが（図 3）、馬の飼養頭本病の病原体の馬伝染性貧血ウイルスは、ヒト免数の減少と徹底した摘発淘汰のおかげで近年ではほ疫不全ウイルス（HIV）と同じレンチウイルス属にとんど発生がない（図 4）。このように日本国内は

3678

4,000
3,500
3,000
発生頭数

2,500
2,000
1,500

1209

1,000

414

500
0

1947

669

1949

318

1951

126

1953

不活化ワクチン（マウス脳由来）導入

図1

263

68

427
124
1955

98
1957

74

22
1959

222

123
1961

年度

日本における馬の日本脳炎の発生状況（1947-1961）※農林水産省の家畜衛生統計を元に作成した。

25
22
20

発生頭数

15

18

13

不活化ワクチン（組織培養由来）導入

11
10

5

0
1962

5
2

3

3
111
1970

1
1978

1

1

1986

1994

2002

2010

年度

図2

日本における馬の日本脳炎の発生状況（1962-2013）※農林水産省の家畜衛生統計を元に作成した。

61（3）
、2015

7（31）

10,000
9,000

9029
8366

8286

8,000
7,000
発生頭数

6009

6,000

5441 5531

5,000

4038

4,000

3369

3,000

2804

2364

2,000

2038

1686

1359
763 560
485 466 347
239 194

1,000
0

1951

1953

1955

1957

1959

1961

1963

1965

1967

1969

年度

図3

300

270
232

250

198

発生頭数

200 175150

日本における馬伝染性貧血の発生状況（1951-1970）※農林水産省の家畜衛生統計を元に作成した。

139

100
50

104

89
54

29

0
1971

43
15
1979

図4

5 4

2
1987

年度

2
1995

2003

2011

日本における馬伝染性貧血の発生状況（1971-2013）※農林水産省の家畜衛生統計を元に作成した。

ほぼ清浄化されたと考えられていた馬伝染性貧血で介して空気感染するために伝染力が極めて強いといあるが、2011 年に日本在来馬（宮崎県・御崎馬）

う点で、そのことを示す例として、2007 年の日本由来の馬で発生が認められた。長年の定期的な検査

国内での流行時の一施設における発生概況を紹介すで、競走馬や乗馬など日本の軽種馬については馬伝る。日本中央競馬会の美浦（茨城県）および栗東

染性貧血の清浄性がほぼ確認されているが、今後は（滋賀県）トレーニング・センターでは、それぞれ一部の日本在来馬など未検査の馬群の調査を進める

約 2,000 頭の競走馬が飼養され、レースに向けた調必要があると考えられている。また、アメリカ、カ教が行われている。2007 年 8 月 15 日に美浦、栗東

ナダ、ヨーロッパ各国などで近年も発生が続いていの両トレーニング・センターで馬インフルエンザのることから、海外からの侵入防止も重要である。

発生が認められ、その後の栗東トレーニング・セン
ターにおけるウイルス伝播は以下に示す通りであった。翌 16 日の時点で全 119 厩舎のうち 14 厩舎で陽

3. 馬インフルエンザ：届出伝染病性馬が認められたが、17 日はそれが 62 厩舎に拡大

世界各地で現在流行している馬インフルエンザウ

し、最終的には陽性馬を確認した厩舎は 92 厩舎にイルスは、H3N8 亜型の A 型インフルエンザウイル

ま で 及 ん だ（8 月 28 日 時 点）。ま た、ト レ ーニ ンスである。発熱を伴う急性呼吸器疾患で、発症馬はグ・センター内で発熱馬が多くなるのは通常は冬期頚を延ばして非常に苦しそうな咳をする。馬インフの 3 か月間（1 〜 3 月）であるが、2007 年の流行でルエンザの最も重要な特徴は、このような咳などをは 1 か月足らずで、冬期の平均発熱頭数の倍以上の

8（32）

日生研たより600

であることから、ヒト用の簡易検査キットが臨床応用されている。なお、2008 年 7 月の北海道での発500

生以降は日本国内で馬インフルエンザの発生はなく、

発熱頭 数

400

清浄性が保たれている状況である。しかしながら、海外では頻繁に発生が認められることから、その侵300入防止が重要となる。

200
100
0

4. 馬ウイルス性動脈炎：届出伝染病
1‑3月の過去3年間の平均

2007年8月15日〜9月3日

馬ウイルス性動脈炎は、日本国内でこれまでに発冬期発熱頭数と馬インフルエンザ流行時の発熱
頭数の比較※ Y amanaka, T. et al. 2008. J. Vet. Med. Sci.
70 : 623-625 のデータを元に作成した。

生のない疾病である。本病の病原体である馬動脈炎

図5

ウイルスはアルテリウイルス科に属する。臨床症状
は発熱、結膜炎、陰嚢の腫大など多様であるが、妊娠馬の流産が最も大きな問題となる。呼吸器症状を発熱馬が認められた（図 5）。このように強い伝染示す馬からの飛沫感染でウイルスが伝播するが、感力を持つことから、馬産業において馬インフルエン

染した雄馬の一部がウイルスキャリアーとなって精ザは防疫上最も重要な感染症の一つと考えられてい液中にウイルスを排出し、交配時に雌馬に感染させる。日本国内では、前述の 2007 年に加えて 1971 年

る可能性がある。日本は現在までのところ本病の清にも流行があり、当時はワクチン接種が行われてい浄国であるが、国内の生産地に広がった場合に重大なかったため、発生規模が大きく、発症馬の臨床症

な被害の発生が予測される。海外では、アメリカ、状も比較的重かった。その結果、延べ 9 週間にわた

ヨーロッパ、オセアニアなどで発生が報告されており関東地方での中央競馬開催が中止となった。一方、 り、過去 10 年の間に輸入検疫で摘発も行われてい2007 年はワクチン接種馬群での発生であったためる（表 2）。したがって、海外からの本病の侵入に発熱頭数が抑えられ、その臨床症状も軽度であった

ついては今後も警戒する必要がある。なお、侵入時ことから、競馬開催の中止は 2 日間にとどめることに使用するために、日本国内で不活化ワクチンが備ができた。このように、馬インフルエンザへの防疫蓄されている。

対策として、ワクチン接種が非常に重要であるが、ヒトのインフルエンザと同様に変異株が常に出現するため、定期的なワクチン組成の変更が必要である。 5. 馬鼻肺炎：届出伝染病
また、発生時の蔓延防止のために迅速な診断が必要
表2

本病の病原体は、ウマヘルペスウイルス 1 型およ輸入検疫における馬ウイルス性動脈炎摘発状況（2004-2013）

年

輸入頭数

陽性頭数

仕出国

2004

5,478

1

カナダ

2005

5,492

0

—

2006

6,423

0

—

2007

5,987

1

アイルランド

2008

4,688

111

カナダ

2009

4,482

2

カナダ

2010

5,294

0

—

2011

3,710

1

ドイツ

2012

2,954

0

—

2013

3,683

0

—
※農林水産省の動物検疫年報を元に作成した。

61（3）
、2015

9（33）

び 4 型（EHV – 1 および 4）である。呼吸器疾患は胎盤の適切な処理、汚染場所の消毒、発症馬の隔離

EHV – 1 と EHV – 4 のいずれによっても引き起こさ等を行うことが重要となる。ワクチンについては、れるが、流産の原因となるのは主として EHV – 1 で一定の効果が認められているため、妊娠馬等への接ある。加えて、EHV – 1 は神経麻痺を引き起こす場

種が行われている。ただし、ワクチン接種馬群にお合もある。感染馬の鼻汁、流産胎仔・胎盤には多量

いても、前述の外部からの侵入阻止、発生時の蔓延のウイルスが含まれ、これらの飛沫を介して感染が防止対策を確実に実施することが必要である。

広がる。また、道具やヒトの手を介した間接的な感染も問題となる。ウイルスは鼻腔粘膜での増殖後、6. ゲタウイルス感染症：監視伝染病以外

リンパ球に感染して全身に伝播する。その後、子宮に達すると流産、中枢神経系に達すると神経麻痺をゲタウイルスは、トガウイルス科アルファウイル

引き起こす。また、リンパ球内のウイルスは、一定

ス属に属する。発熱、発疹および下肢部の浮腫が特期間を経過すると、潜伏状態となり、生涯体内から徴的な症状である。発疹や浮腫は、通常発熱後 1 週

排除されることはない。その後、ストレス等により間程度で観察される。ゲタウイルスは日本脳炎ウイ

免疫機能が低下すると、ウイルスが再活性化し、鼻ルスと同様に蚊によって媒介され、豚が重要な増幅

汁中に排出されたウイルスが環境中にばらまかれる。 動物である。ただし、日本脳炎ウイルスとは異なり、生産地での馬鼻肺炎流産の発生は年間 30 件前後と馬の体内でもウイルスが比較的よく増殖し、馬も増多くはないが（図 6）、発生した際の経済的損失が幅動物になりうると考えられている。日本国内で馬大きいことから、最も警戒されているウイルス感染での発生が最初に確認されたのは 1978 年で、この症の一つである。また、EHV – 1 は冬期の競走馬の年は美浦トレーニング・センター（茨城県）の開場

集団発熱の原因としても重要である。馬鼻肺炎の防の年にあたる。美浦トレーニング・センターの周辺

疫対策として重要なことは、外部からのウイルスのには豚舎が多く存在しゲタウイルスが分布していた侵入阻止と発生時の蔓延防止措置である。まず、輸と考えられ、そのような環境にナイーブな馬群が移送や環境変化のストレスから潜伏ウイルスを再活性動してきたことが発生の原因と推察される。この期化させるリスクの高い新規導入馬は、一定期間隔離

間中の発熱馬は 571 頭に上った（図 7）。そこで、する必要がある。また、生産牧場では、繁殖雌馬群

直ちにワクチン開発が進められ、翌年から接種が始と他の馬群を可能な限り分けて飼養することが望ままった。その後、長年にわたり散発例を除いて発生れる。特に、EHV – 1 に対してナイーブな若齢の育はなかったが、2014 年に美浦トレーニング・セン

成馬群にウイルスが侵入した場合、同馬群でウイル

ターで流行が起こった（図 8）。本流行はワクチン

スが増幅する可能性が高いことから注意が必要であ

接種馬群での発生であったため、発熱馬が 33 頭にる。次に、発生時には蔓延防止のため、流産胎仔・抑えられたと推察されるが、30 年以上にわたって
44

45
40

36

34

35

36

34 35

33

発生頭数

30
25
19

20
15
10

22

10

21
15

12

24

10

16

25

22
15

13 13
9

12 12 13

23

27

26
21

23

16

14

10

5
0

1981

1985

1989

1993

1997

2001

2005

2009

2013

年度

図6

日本における馬鼻肺炎（流産）の発生状況（1981-2013）※軽種馬防疫協議会資料を元に作成した。

日生研たより10（34）

図7

美浦トレーニング・センターにおけるゲタウイルス感染症の発生状況（1978 年）※公益社団法人中央畜産会発行『馬の感染症（第 4 版）』より引用した。

発熱頭数

20

発症馬

15
頭数

10

5

0

9/14‑20

9/21‑27 9/28‑10/4 10/5‑11 10/12‑18

10/19‑25 10/26‑11/1 11/2‑8期間
図 8 美浦トレーニング・センターにおけるゲタウイルス感染症の発生状況（2014 年）

流行のなかった本病が再発した原因について今後解する防疫対策で重要なことは、発生時の蔓延防止措析が必要と考えられる。なお、予防対策としては、置である。感染馬の下痢便中には大量のウイルスが日本脳炎と同様に、定期的なワクチン接種や馬の飼含まれ、かつ排出されたウイルスは環境中において養環境を衛生的に保つことが重要である。

安定で消毒薬への抵抗性も比較的強い。したがって、発生時には簡易キットを用いて迅速診断を行い、速やかに発症馬の隔離、適切な薬剤を用いた消毒を実

7. ウマロタウイルス病：監視伝染病以外施する必要がある。また、治療については、脱水補ウマロタウイルスは A 群ロタウイルスに分類さ正のための輸液、抗胃潰瘍薬の予防的投与を行う。

れる。子馬の急性下痢症が主な臨床症状である。ウ

ワクチンは妊娠馬に接種して、初乳を介して子馬にイルスは糞口感染で伝播し、小腸の絨毛上皮細胞に抗体を付与することを狙ったもので、一定の予防効

感染して、感染細胞を破壊することで吸収不良を引果があると考えられている。ただし、現在日本国内

き起こす。1 〜 3 か月齢の子馬に多発し、5 月〜 8

では G3 と G14 の 2 種類遺伝子型が流行しているが月にかけて発生が増加する。ウマロタウイルスに対（表 3）、ワクチンに含まれるウイルスは G3 型のみ

61（3）、2015

11（35）
表3

日本国内におけるウマロタウイルスの各遺伝子型の分布（2003-2008）

年

検体数

陽性数

2003

426

2004

各 G 遺伝子型陽性数
G3（％）

G14（％）

G3, G14 両陽性（％）

210

65（30.9）140（66.7）5（2.4）

476

219

152（69.4）47（21.5）20（9.1）

2005

362

231

81（35.1）

111（48.0）39（16.9）

2006

318

184

94（51.1）

56（30.4）

34（18.5）

2007

260

157

54（34.4）

60（38.2）

43（27.4）

2008

176

148

16（10.8）

88（59.5）44（29.7）

合計

2018

1149

462（40.2）502（43.7）185（16.1）※ Nemoto, M. et al. 2011. Vet. Microbiol. 152: 67-73 より引用、一部改編である。G14 型をワクチンに加える必要があるかど

同 テ キ ス ト は 軽 種 馬 防 疫 協 議 会 の ホ ーム ペ ージ

うかについては、今後の検討課題である。

（http://keibokyo.com）で閲覧可能であるので、ごなお、本稿は公益社団法人中央畜産会発行の馬感参照いただきたい。

染症テキストの情報を元に作成されたものである。

誤記がございましたので下記のとおり修正いたしました。
P5L3：12疾病→13疾病
表1：差し替え2018年（平成30年）6月日生研たより編集室

論文紹介

豚の呼吸器における生体防御について
手島香保
動物の体は、皮膚と粘膜によって外界と接し、これらは絶えず様々な異物に暴露されている。その中クチンと関連する免疫学的防御と物理的防御について論文を 2 報紹介する。

でも気道は吸入された抗原に絶えず暴露されており、侵入した抗原に対する生体防御機構が存在する。気道における防御機構は、線毛運動による物理的防御、リゾチームなどによる化学的防御、抗体や貪食細胞紹介論文１
投与法の違いによる豚 Mycoplasma hyopnumoniae

による免疫学的防御に大別される。近年、呼吸器が168 株弱毒ワクチンの免疫原性の比較重要な器官として注目され、粘膜ワクチンの可能性

Comparison of immune responses to intranasal andを含めその重要性が認識されている。また、豚におintrapulmonar y vaccination with the attenuated

ける呼吸器感染症罹患率は増加していることから、

Mycoplasma hyopneumoniae 168 strain in pigs.

その有用性は注目すべきであると考える。今回はワPengcheng LI et.al., The Journal of Veterinary Medical

日生研たより12（36）

投与する群、生理食塩水を鼻腔内に 7 日齢時と 10

Science Jan 30, 2015

日齢時に 2 回投与する群（対照群）に分け、それぞれ免疫した。
1. 背景

なお、今回行われた肺内投与は、2010 年に Zhi –Mycoplasma hyopnumoniae（Mhp）は、二 次 感 染

Xing Feng らが報告した弱毒 Mhp168 株を肺内投与症として多発するマイコプラズマ肺炎の原因菌であ後に攻撃を実施した論文を引用し、8 – 15 日齢の新り、世界各国で頻発し、養豚業に大きな経済的損失

生豚に右肩甲骨後縁の第 2 肋骨と第 3 肋骨間に投与を与えている。Mhp の主な感染経路である気管支する方法を用いた。

には、咽頭扁桃や耳管扁桃といったリンパ組織が存投与法によって免疫後のサイトカイン（IFN – γ、在し、経鼻ワクチンによってこれらのリンパ組織かIL – 6、IL – 10）の産生量と Mhp 特異的 sIgA 産生量らサイトカインや抗体産生を誘導できると考えられに相違が見られるかを調べる為に、初回投与から 0、ており、2011 年には PRRSV に対して経鼻投与によ3、5、7、14、21、28、35、42 日後に鼻腔スワブをる感染防御効果が報告されている。近年、中国では採取した。採取した鼻腔スワブを 1ml の PBS で洗Mhp168 株の筋肉内注射によるワクチンが広く普及浄し、その洗浄液を遠心後、上清を回収した。そのしているが、病原体は気管支上皮で増殖するため、上清を用いて、サイトカイン（IFN – γ、IL – 6、IL –筋肉内投与では十分な効果が得られないことが問題

10）産生量については、市販の ELISA キットで測であった。筋肉内注射に代わって、肺内投与が検討定した。また Mhp 特異的 sIgA 産生量については、

さ れ て い る。2008 年 に は Wee ら に よ っ て、

Mhp P67R1 タンパクを抗原とした indirect ELISA に15μg のインフルエンザ抗原を皮下に投与した場合て測定した。

と同等の血中抗体価を、0.04μg の肺内投与によっさらに、投与法によって免疫後の CD4陽性T 細て得られることが報告されている。この実験の投与

胞数と CD8 陽性 T 細胞数、IgA 産生細胞数と IgG法を調べてみたところ、保定した羊に対して気管支産生細胞数に違いが見られるかを調べる為に、初回鏡を用いていた。このように手技的な問題から肺内投与から 6 週後に全頭を安楽殺し鼻腔組織（鼻腔後投与に関する報告は依然少ない。

部、咽頭扁桃、耳管扁桃）、気管、気管分岐部、肺経鼻投与と肺内投与により、それぞれ上部気道とおよび肺門リンパ節を採取した。CD4 陽性 T 細胞

下部気道の免疫が誘導されたが、弱毒 Mhp168 株ワ

数と CD8 陽性 T 細胞数については、採取した肺おクチンによってどのような免疫が誘導されるかは明

よび肺門リンパ節をブアン固定後、抗豚 CD4 マウ

ら か で な い。本 研 究 で は、豚 を 用 い て、弱 毒ス抗体、抗豚 CD8 マウス抗体による免疫組織化学

Mhp168 株ワクチンを経鼻投与、肺内投与、筋肉内染色を実施した。また IgA 産生細胞数と IgG 産生投与し、投与方法によって誘導される免疫に違いが細胞数については、採取した鼻腔組織（鼻腔後部、見られるかを比較した。なお著者は、局所粘膜免疫

咽頭扁桃、耳管扁桃）、気管、気管分岐部をブアンの指標として Mhp 特異的 sIgA 抗体産生量、液性免

固定後、抗豚 IgA ウサギ抗体、抗豚 IgG ウサギ抗疫の指標として IL – 6、IL – 10、IFN – γ産生量と IgA、体による免疫組織化学染色を実施した。それぞれ免IgG 抗体産生細胞数、細胞性免疫の指標として CD4

疫組織化学染色した後、各組織につき 10 カ所の陽

陽性 T 細胞数と CD8 陽性 T 細胞数を設定し、これ性細胞の割合を算出した。

らを指標とした。
3. 結果
3. 1 サ イト カ イ ン 産 生 量（IL‑6、IL‑10 お よ び

2. 方法
24 頭の健康な新生豚を 4 群に分けて試験に用い

IFN‑γ）の比較た。弱 毒 Mhp168 株 1ml（10 CCU）を 筋 肉 内 に 7

免疫 5 日後の鼻腔スワブ中のサイトカイン量を比

日齢時に 1 回投与する群、鼻腔内に 7 日齢時と 10

較したところ、筋肉内投与群では IFN – γが対照群

日齢時に 2 回投与する群、肺胞内に 7 日齢時に 1 回に比べて有意に上昇していた。経鼻投与群では IL –6

61（3）、2015

13（37）

6 産生量が対照群に比べて有意に上昇していた。肺

IgG 産生細胞は経鼻投与した群と筋肉内投与した群

内投与群では、IL – 6、IL – 10 および IFN – γ産生量が対照群に比べて優位に上昇したのに対し、肺内投が対照群に比べて有意に上昇していた。

与した群は対照群と同等であった。

3. 2 T 細胞数（CD4、CD8）の比較

3. 4 Mhp 特異的 sIgA 産生量の比較

CD4陽性T 細胞数と CD8 陽性 T 細胞数は、肺に初回免疫 7、14、21、28 日後の鼻腔スワブ中のおいては肺胞壁に広く認められ、肺門リンパ節におMhp 特異的 sIgA 生産量は、肺内投与群、経鼻投与

いては、リンパ小節に多く認められ、皮質ではわず

群、筋肉内投与群全てが対照群に比べて有意に上昇かであった。投与法で比較した場合、肺においては、 していた。また肺内投与した群では、初回免疫 7、筋肉内投与した群と肺内投与した群が他の群に比べ21、35 日後の鼻腔スワブ中の Mhp 特異的 sIgA 産て有意に CD4陽性T 細胞数と CD8 陽性 T 細胞数が生量は、経鼻投与した群、筋肉内投与した群、対照

上昇していた。また肺門リンパ節においては、肺内群に比べて有意に上昇していた。

投与した群が他の群に比べて CD8 陽性 T 細胞の数が有意に上昇していた。経鼻投与した群においては、
肺、肺門リンパ節中の CD4陽性T 細胞数と CD8 陽

4. 考察

性 T 細胞数は対照群と同等であった。

本研究より、経鼻投与は呼吸器における局所での3. 3 IgA および IgG 産生細胞数の比較

細胞性免疫と液性免疫を上昇させ、更に肺内投与で鼻腔粘膜や気管の IgA 産生細胞と IgG 産生細胞は経鼻投与に比べてより強い免疫誘導が起こること

は、粘膜固有層および気管腺の周囲に分布し、気管が明らかとなった。これは鼻腔粘膜の表面積がヒト上皮細胞の外側面には特に多く存在した。投与法ででは 150 cm2 であるのに対して肺の表面積が 140 m2

比較した場合、気管においては、肺内投与した群、であるという報告や、豚における肺中のリンパ球数

経鼻投与した群、筋肉内投与した群が対照群に比べはパイエル板のリンパ球数と同等であるという報告て IgA 産生細胞および IgG 産生細胞数共に有意にから、肺に抗原が入った場合、多くのリンパ球を含上昇していた。鼻腔粘膜においては、IgA 産生細胞

む広範囲の粘膜表面と長く接することで、より強い

数は肺内投与した群、経鼻投与した群、筋肉内投与

免疫誘導が起こったと推察された。

した群が対照群に比べて有意に上昇していた。一方

また興味深い点として、肺内投与は経鼻投与に比概要図

筋肉内投与（IM）
初回免疫6週間後
鼻腔スワブ採取後、ELISA法にてIL‑6, IL‑10, IFN‑γ, sIgAを測定

経鼻投与（IN）

剖検後、免疫組織染色にて測定

肺内投与（IP）《投与法による免疫誘導の比較》→：対照群と同等、↑：対照群から有意に上昇

IM
IN
IP

IL‑6

IL‑10

IFN‑γ

スワブ

スワブ スワブ

CD4

CD8

IgA

IgG

sIgA

肺

肺門リンパ

肺

肺門リンパ

鼻粘膜

気管

鼻粘膜

気管

スワブ
3w ↑
5w →
3w ↑
5w →
3w ↑
5w ↑

→

→

↑

↑

→

↑

→

↑

↑

↑

↑

↑

→

→

→

→

→

→

↑

↑

↑

↑

↑

↑

↑

↑

→

↑

↑

↑

↑

→

↑

日生研たより14（38）

べて鼻腔や気管と離れているにもかかわらず、IFN

テフロン粒子の動向を気管支鏡にて観察する方法や、– γ産生量や sIgA 産生量が高かった。これは、腸管

X 線で撮影する方法がとられていたが、肺の複雑なにおける免疫誘導が乳腺に影響を及ぼしたという報構造からこれらの方法では限界があった。また、こ告や、豚において PRRSV を用いて経鼻免疫した際れまでヒトの代替モデルとして、マウスや犬が用いに、肺の特異抗体量と Th1 型サイトカイン産生量られていたが、新生マウスにおいては線毛細胞がなが上昇したという報告から、経鼻・経口投与で感作

く、成マウスにおいては咽頭と上部気管に少し粘液されたリンパ球が遠隔の腸管や生殖器などへも到達腺が存在するが、肺小葉内では欠落しているといっし、全身の粘膜が防御されるという粘膜免疫循環帰た構造の違いが明らかとなり、他の代替動物で経時巣（CMIS）によると推察した。

的に観察撮影できる方法が必要であった。著者らは、結論として、著者らは、弱毒 Mhp168 株を肺内投

粘液腺の増殖や成熟パターンがヒトと類似している与した場合、呼吸器において細胞性免疫と液性免疫ことやマウスよりヒトの呼吸器の大きさに近いことを誘導することを示した。

から豚を代替モデルとして採用し、肺内の個々の粒子の 3 次元の位置変化を、MDCT を用いて経時的に撮影することで、気管から肺内にかけての粒子の5. 所感

動向を捉えた。

細胞性免疫と直接作用する局所での粘膜免疫が鍵とされるマイコプラズマ感染において、サイトカインと免疫細胞を指標として、投与法による免疫原性の違いを評価した論文である。著者の行った肺内投2. 方法
新生豚を試験に用いた。タンタル箔より型抜きし、与によってワクチンが肺にまで達しているのかとい直 径 350μm x 厚 さ 25μm の 大 き さ、平 均 質 量

う点が論文には示されていなかったが、同量の抗原55μg のタンタル粒子を作製した。タンタル粒子をを用いて投与法を比較しているという点で興味深い投与する為に、新生豚は、アセプロマジンとケタミ論文であった。

ンおよびプロポフォールを併用して全身静脈麻酔を行い、自発呼吸できる状態を維持した。麻酔後、気紹介論文 2
気道中の粒子は腹側に集まり排除される

管にカテーテルを挿管し、パフを用いてカテーテルから 15 – 30 個のタンタル粒子を気管へ投与した。
粒子を観察する為に、投与後すぐにカテーテルを

Assessing mucociliary transport of single particles in

抜 去 し、128 列 の マ ル チ ス ラ イ ス CT（Siemens

vivo shows variable speed and preference for theSomatom）を使用して、仰臥位にて頭部から胸部

ventral trachea in newborn pigs.

にかけて 10 分間（15 秒間隔にて 40 スライス）撮Mark J. Hoegger et.al., Proc Natl Acad Sci USA. Feb

影した。画像再構成条件は、スライス厚：0.6 mm、

11, 2014 ; 111（6）: 2355 – 60

再構成間隔：0.3 mm とし、体軸方向に連続した横断像を取得した。取得した画像から３ D 像を再構成した後、Image J を用いて、個々のタンタル粒子

1. 背景
肺の粘膜線毛輸送（MCT）は、異物を排除するの経時的な位置変化をトレースした。なお、水を 0
HU として相対値で表される X 線吸収値は、組織が役割を果たし、この輸送機構が破綻することで喘息、 200 HU 以下であったのに対して、タンタル粒子は慢性気管支炎、嚢胞性線維症といった呼吸器病を引500 HU と高値を示し、容易に検出可能であった。

き起こすと考えられている。しかし、MCT の破綻

粒子がどのくらいの速さで排除されるのかを調べによってこれらの呼吸器病が引き起こされるのか、る為に、トレースした位置を XYZ 座標（X : 左 – 右、呼吸器病によって MCT が破綻し病状を悪化させる

Y : 背側 – 腹側、Z : 吻側 – 尾側）にて表記し、各のかは明らかになっていなかった。これまで MCT

点とその 60 秒後の点との距離から各点毎の分速をによる異物の排除経路を探る為に、気管支に入れた算出した。

61（3）、2015

15（39）

粒子の速度（mm/min）の走行に極性があるかを調べた。

＝√（（Xn＋4−Xn）＋（Yn+4−Yn）＋（Zn＋4−Zn））（/ tn＋4−tn）
2

2

2

n : スキャン番号、X・Y・Z : 各点間の距離
（mm）
、
3. 結果

t : 時間（min）
なお、自発呼吸により生じたノイズを排除する為

まず粒子の輸送速度について、7 頭の豚に投与しに、3 点（右前葉起始部、気管支分岐部、肺尖）のた 57 個の粒子の平均を算出したところ、平均 6.9

平均位置を算出し、平均値から 1 mm 以上のずれが± 0.7 mm/min であった。しかし個々の粒子の最高生じた画像は排除した。

速度の平均は最低速度の平均の 4 倍あり、10 分間

また粒子が管腔の腹側と背側のどちらを通過するの運動時間の割合毎の粒子数を算出したところ、のかを調べる為に、著者らは撮影した横断像上に、100％が 35 個 /57 個であったのに対して、90 – 0％

管腔の中心を円の中心、管腔壁の最腹側点を 0 度、も 23 個 /57 個であったことから、粒子によって速管腔壁の最背側点を 180 度とする動径座標を設定し度が異なることが示唆された。

た。更に管腔の中心点を（Xc、Yc）、管腔壁の最腹次に粒子の輸送経路について、輸送開始時（0 分

側点を（Xa、Ya）、粒子のある管腔壁の点を（Xp、時）の横断面像と輸送終了時（観察終了地点の咽頭Yp）とし、粒子の位置を余弦定理により管腔壁の最到達時、または 10 分後）の横断面像を画像解析し、腹側点からの角度として算出した。

7 頭の豚に投与した 55 個の粒子の腹側からの角度

腹側からの角度を算出した。輸送開始時と輸送終了時の角度を比較（θ）=Arccos（（a ＋b −c ）/（2ab））

したところ、輸送開始時には 0 度から 180 度まで均

a= √（（Xc−Xa）＋（Yc−Ya））

一に位置していたが、輸送終了時にはほぼ 90 度以

b= √（（Xc−Xp）＋（Yc−Yp））

下に位置していた。このことから輸送によって粒子c= √（（Xa−Xp）＋（Ya−Yp））

は腹側に集積されることが示唆された。著者らは重

2

2

2

2

2

2

2

2

2

力による影響を否定する為に、伏臥位にて同様の実更に管腔壁上の線毛の走行に偏りがあるかを調べ験を行ったところ、やはり粒子は腹側に集積された。

る為に、右前葉起始部近位の気管を分離し氷上リン

更に、著者らは粒子が腹側を通過するという要因とゲル液中に静置した。1 – 4 時間後、矢状面断にて左して、線毛の走行に注目した。線毛の走行について、右に二分し、平面に広げて 37℃のリンゲル液に浸気管の最腹側を 0 度として時計回りに – 45 度、 – 90

した。二つの気管腔壁上の線毛運動を、CCD カメ

度、 – 135 度、 – 180 度の地点、半時計周りに 45 度、ラを搭載した落射型顕微鏡（Nikon、A1R）を用い

90 度、135 度、180 度の地点の全 9 箇所に分けて、て撮影した。撮影した 1 秒間の動画を用いて、線毛それぞれの区画内の 7 – 16 個の線毛細胞から走行を運動の基軸と吻尾軸の角度（ω）と線毛運動による調べた。0 度の地点では、吻尾軸と平行に走行して区画毎の光強度の変化周期（Hz）を算出し、線毛

いたのに対して、 – 45 度、 – 90 度、 – 135 度、45 度、

概要図
仰臥位にて麻酔下で気管チューブを挿管→Tantalum diskを気道内に吹き込む

右⇔左

腹側⇔背側

マルチスライスCTを用いて胸部を撮影

腹側に集積後、排除される

日生研たより

16（40）

90 度、135 度の地点では、全ての線毛が指向的に最今回の方法の欠点について、放射性物質であるた腹側へと走行していた。また、線毛運動の頻度につめヒトへの応用が困難である点、線毛に対する鎮静

いて、同様に 9 箇所に分けた後、それぞれの区画内剤の影響が否定できない点、disk の大きさによるの 15 – 30 個の線毛細胞について運動頻度を調べた。

影響、3 次気管支以降で同様かは不明である点を挙どの地点においても、10 – 15 Hz の周期で光が反射げていた。

していた。これらのことから、粒子は、気管の円周

結論として、著者らは、豚を用いて気管中の粒子上のどの位置からでも、線毛の走行によって腹側には線毛運動の向きによって気管の腹側へ集積し咽頭

集積し咽頭へと輸送されることが示唆された。

へと輸送されることを示した。この結果は、喘息や遺伝性の嚢胞性線維症の機序解明に有用であると考
えられた。

4. 考察
本研究において、気管中の粒子は線毛運動の向き
5. 所感

によって気管の腹側へ集積し、その後咽頭へと輸送されることが示された。これは、豚において粘液腺

気管支と肺胞上皮には多くの線毛が存在し病原体の数が気管の背側に多く分布しているという報告もが侵入を効率よく排除する働きをしていることは知あることから、背側から分泌された粘液が粒子を捕られていたが、実際にどのような経路を通ってどのらえながら腹側へ集約することで、広範囲に分散しくらいの速さで輸送されるのか明らかではなかった。

ている場合と比べて咳による空気圧を効率よく活用

今回明らかになった特徴的な経路、線毛運動の指向

して排除できる為ではないかと推測した。著者らは性の研究の中で、細菌、ウイルスの物理的排除因子

この経路を、車が高速道路の入り口から本線に入るに関しても明らかになってくるのか、今後の発展に動きの様であると表現していた。しかし高速道路の注目したい。

車とは違い、気管中の粒子の速度はそれぞれが独立している点が異なる。

日生研たより昭和 30 年 9 月 1 日創刊（隔月 1 回発行）

（通巻 592 号） 平成 27 年 4 月 25 日印刷
発行所〒 198–0024

生命の「共生・調和」を理念とし、生命体の豊かな明日と、研究の永続性を願う
気持ちを快いリズムに整え、視覚化したものです。カラーは生命の源、水を表す「青」としています。

編集室

表紙題字は故中村稕治博士の揮毫

印刷所

平成 27 年 5 月 1 日発行（第 61 巻第 3 号）

一般財団法人 日本生物科学研究所
東京都青梅市新町 9 丁目 2221 番地の 1

TEL：0428（33）1520（企画学術部） FAX：0428（33）1036
http://nibs.lin.gr.jp/
発行人

草薙公一

委

員／今井孝彦（委員長）、大嶋 篤、手島香保

事務／企画学術部

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