2015 年（平成 27 年）1 月号

第 61 巻 第 1 号（通巻 590 号）

2015 JANUARY No. 590

挨拶・巻頭言年頭のご挨拶
.........................................長 井 伸 也（ 2 ）獣医病理学研修会
第 54 回 No. 1106 ネコの小腸腫瘤............................................ 岩手大学（ 3 )文献紹介
Infectious bursal disease（IBD）に対する現在のワクチンの状況.........................................魚 谷 勇 介（ 4 ）文献紹介Pasteurella multocida に対する免疫法の発展...............................大 嶋
篤（ 7 ）

日生研たより

2（2）

年頭のご挨拶
長井伸也
謹んで新年のお慶びを申し上げます。皆様にはご健勝にて輝かしい新年をお迎えのことと存じます。2015 年が実り多い年となりますことを心よりお祈り申し上げます。
さて、昨年は地球温暖化に伴う水循環の変調の影響か、降雨、降雪に伴う災害が多発しました。
2 月には関東甲信地方を中心に 2 週連続で大雪となり、交通機関がマヒするとともに、多数の怪
我人が出ました。梅雨から夏場にかけては各地で大雨による災害が発生し、7 月には長野県南木曽町の木曽川支流で、8 月には広島市北部で大規模な土石流が発生し、痛ましい惨事となりました。河川が多い我が国において治水には細心の注意と対策が講じられていたにも拘わらず、過去の経験からは予測できない事象に見舞われたものと思われます。
感染症につきましては、昨年 8 月から 9 月にかけ我が国において 69 年ぶりにデング熱が発生し、それも東京の真ん中の代々木公園でとは誰も予想できないものでございました。エボラ出血
熱につきましては、一昨年の 12 月に今回のアウトブレイクの最初の患者が発見されて以来、ギ
ニア、リベリア、シエラレオネ他の西アフリカ諸国に広がり、10 月には国連の対策チーフのアンソニー・バーバリー氏をもって「エボラ出血熱をいま止められなかったら、世界は未曽有の事態に陥る」と言わしめるなど、現在も世界に不安と混乱をもたらしています。
動物の感染症につきましては、米国で一昨年 4 月に豚流行性下痢（PED）が初発し、瞬く間に全米に拡がり、1 年間で肉豚の 5 〜 7％が失われたとされます。我が国でも一昨年秋に沖縄と茨城での散発的な発生に始まり、その後、宮崎、鹿児島の畜産地帯での発生を経て全国に蔓延し、昨年の養豚業界に多大な損害をもたらしました。鳥インフルエンザにつきましては、昨年 4 月に熊本県のブロイラー農場で H5 亜型のウイルスが検出され、11 万羽が殺処分されました。幸い迅
速な対応によりこれ以上の発生には至りませんでしたが、現在、再び多発期に入り、予断を許さない状況が続いています。
このように、昨年 1 年間を振り返りましても、最初に記載しました気候変動と後半の感染症の発生との間に因果関係があるのかどうかは不明ですが、素人目にはいずれも地球規模の変調と関係しているように見えます。もしもそれらが人類の文明がもたらした副作用によるものなら、地
球温暖化防止策も、感染症の制御につきましても、人類が自らその叡智を結集して解決しなければならない喫緊の課題でありましょう。
弊所は動物用ワクチンの研究開発、製造という狭い領域での活動ではございますが、感染症の予防、撲滅に向け、微力ながら貢献できれば本望でございます。本年も当研究所に対する皆様方の温かいご指導、ご鞭撻をお願い申し上げますとともに、益々のご健勝とご多幸を祈念致しまして、ご挨拶とさせて頂きます。
（理事長）

61（1）、2015

3（3）ネコの小腸腫瘤
第 54 回獣医病理学研修会 No. 1106

岩手大学

動物：ネコ、アメリカンショートヘアー、避妊雌、10 歳。

ずかに認められるのみであった。グラム染色では有意な臨床事項：2013 年 10 月に毎日嘔吐しているとの主訴で細菌は認められなかった。

開業医を受診した。触診で腹部中央に 5 cm 大の腫瘤が

診 断：猫 消 化 管 硬 化 性 肥 満 細 胞 腫

触知され、超音波検査でも 5.2 × 2.8 cm に至る腫瘤がsclerosing mast cell tumor

Feline intestinal

確認された。試験開腹では、小腸壁や腸間膜において多考察：本症例では、異型性を示す肥満細胞の筋線維間や発性の腫瘤が認められ、その一部が当研究室へ送付され神経叢への浸潤が特徴であり、一部で Ki – 67 に陽性をた。術後、プレドニゾロンによる治療が行われたが一般示すことから腫瘍性病変であると考えられた。さらに、状態が悪化し、12 月に安楽殺処置がなされた。

小柱状の膠原線維増生を伴う特徴的な組織像を示すこと

肉眼所見：摘出された腫瘤は 1.8 × 1.5 × 0.9 cm をはじから、Halsey らの報告する猫消化管硬化性肥満細胞腫

めとする乳白色硬結腫瘤であり、小腸の割面では腸管壁と一致するものと考えられた。猫消化管硬化性肥満細胞の顕著な肥厚も認められた（図 1）。

腫は猫に特異的な消化管腫瘍と考えられており、密な膠組織所見：漿膜部腫瘤（図 2）および小腸の粘膜下組織

原線維性小柱間における円形から多角形の腫瘍細胞増において、膠原線維の網目状の増生が認められた。膠原

殖、好酸球浸潤などの特徴的な組織像を示す。本症と類線維間では、細胞質が微細顆粒状を呈する円形から多角似した組織像を示す疾患として、猫消化管好酸球性硬化

形、紡錘形を呈する異型細胞や好酸球、線維芽細胞など性線維増殖症が知られているが、この疾患は細菌感染やの増殖が認められた（図 3）。筋層の筋線維間において異物などに対する肉芽腫性反応に起因すると考えられても、異型性を示して微細顆粒を有する細胞の浸潤性増殖おり、本症例ではグラム染色で細菌等は検出されず、肉がみられ、筋層間神経叢への浸潤像も認められた。トル

芽腫性病変なども認められなかった。

イジンブルー染色により微細顆粒を有する細胞が異染性（藤井 知世・佐々木 淳）を示したことから、それらは肥満細胞と考えられた（図参考文献：4）。免疫組織化学的染色では、一部の肥満細胞や線維芽細胞が Ki – 67 に陽性を示した。CD3、CD20、Lysozyme

1. Craig, L. E., et al 2009. Vet. Pathol., 46 : 63 – 70.
2. Halsey, C. H. C, et al. 2010. Vet. Comp. Oncol., 8 : 72 –に陽性を示すそれぞれの細胞は、病変部においてごくわ

79.

日生研たより

4（4）

文献紹介

Infectious bursal disease
（IBD）
に対する
現在のワクチンの状況
魚谷勇介
Current status of vaccines against infectious bursal disease
Hermann Müller, Egbert Mundt, Nicolas Eterradossi and M. Rafiqul Islam
Avian Pathology. 2012, 41, 133 – 139.
紙面の都合上要旨については割愛致しました。

序論
IBDV は弱齢の鶏に対して急性で伝染性の強い疾
病を引き起こす病原体で、最初にこの疾病が報告されたアメリカのデラウェア州ガンボロに由来してガンボロ病とも呼ばれ、当初は腎疾患を示す病態だと考えられた。しかし後に、F 嚢（the bursa of Fabricious）の萎縮や変性が見られることから Infectious
bursal disease（IBD）と呼ばれるようになった。3– 6 週齢の鶏が IBDV に感染した場合、F 嚢の萎縮とともに最も高い致死率が認められるが、3 週齢より前に感染した場合、通常ではほとんど症状は無い。
IBDV の感染によって免疫抑制が引き起こされると他の感染症にかかりやすくなる上に、ワクチンへの免疫応答が弱くなってしまうため、IBD が経済的に重 要 な 疾 病 で あ る と 世 界 中 で 認 識 さ れ て い る。
IBDV は鶏舎内で 122 日間、飼料と飲水の中では 52
日間に渡りその感染性を維持したというデータがあり、IBD 防除のために養鶏場では厳密な衛生管理を行うとともに、生ワクチンと不活化ワクチンを使用している。
IBDV はビルナウイルス科の 2 本鎖 RNA をゲノムとして 2 つのセグメント（A、B）を持つ、直径60 nm の正 20 面体構造をしたエンベロープを保有しない RNA ウイルスである。一般的に RNA ウイ
ル ス は ゲ ノ ム 校 正 能 が 低 い た め 変 異 性 が 高 く、
IBDV も同様に高い変異性がある。この変異性が高い こ と や 野 外 環 境 で の 未 知 の 選 択 圧 に よ り、
1980 年代前半にはそれまでの株とは抗原性の異なる IBDV が発見され、又 1980 年代後半には非常に病原性の強い IBDV（vvIBDV）が発見された。近年のヨーロッパでは病原性の強い IBDV の別の野外株が報告されたため、他の地域でも発生が危惧されており、IBD の状況は複雑化してきていると言える。
抗原性や病原性に変化が起こっていることから、ワクチンによる IBD のコントロールはより一層複雑なものになった。
鶏の体内に入った IBDV はまず感染した腸管組織

内のマクロファージの中で複製され、F 嚢に移動して B 細胞内で増殖する。鶏の免疫機構において、F
嚢はリンパ球系幹細胞が免疫応答性の B 細胞に分化・成熟する場である。F 嚢の発達が未熟な 1 週齢未満の鶏が最も IBDV に感受性が高く、孵化後すぐに能動的な免疫が必要になる。親鶏由来の移行抗体の存在は能動的な免疫を獲得するまでの間雛を守るためにはとても重要であるが、早期のワクチネー
ションに影響を与えてしまう。IBDV に対する移行抗体の半減期はレイヤーでは 6 – 7 日、ブロイラー
では更に短く 3 日程度と考えられており、これを考慮してワクチネーションプログラムを組む必要がある。しかしながら野外の農場では、移行抗体が非常に高いこと、孵化日の違いにより抗体に差があることから、最適なワクチネーションの時期を決めるのは難しく、移行抗体と生ワクチンの干渉はいまでも
大きな課題である。そこで、より効果的に IBD を防除するために、新しい技術を用いた次世代型のワクチンが開発されてきた。

従来型の IBD 生ワクチン、不活化ワクチン
生ワクチンは標的とする組織に感染することによって細胞性免疫と液性免疫を誘導し、アジュバン
トを必要とせず大規模な鶏群への投与に適しているが、時には水平感染や病原性の復帰などにより生産成績の低下を招いてしまう。ただ、一般的に IBD
生ワクチンは卵や鶏胚での継代を繰り返すことにより、元の親ウイルスの免疫原性を維持しつつ、重篤な発症や免疫抑制を引き起こす能力は減弱している。
商業的に最も利用されている IBD 生ワクチンは“mild” に分類される従来型病原性株で、通常レベルの移行抗体下においてワクチンの効果は乏しく、
また vvIBDV に対しても十分な効果は得られない。
“intermediate”、“intermediate plus” お よ び “hot”に分類されるワクチン株は、“mild” に分類されるワクチン株より免疫原性が強く、高いレベルの移行抗体下でもワクチンをテイクさせることができる一

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方、F 嚢へのダメージも大きく、免疫抑制を引き起こす恐れもある。これらのタイプの生ワクチンによる免疫は vvIBDV のような病原性の高いものや抗原性の異なる変異株に対して完璧とは言えないが、安全性と有効性は十分に魅力あるものである。農場で多くの鶏に生ワクチンを均一に投与することは非常に高度な技術を必要とする。それは農場ごとに鶏の状態や環境、あるいは人によってワクチン投与の技
術が異なるためであり、ワクチネーションプログラ
ムの結果を考察する際、この違いを過小評価してはならない。
不活化ワクチン、サブユニットワクチン、ウイル
ス抗原の組換えタンパク質などの非増殖性の抗原は、アジュバントとの混合や複数回の注射、あるいは生ワクチンによる免疫後のブースターとして使用しなければ十分な免疫効果を得ることができない。繰り返して免疫をする分ワクチンコストも増大するため、
通常、これらのワクチンの利用は雛に高いレベルの移行抗体を持たせることを目的として種鶏に限定される。しかしながら、病原性の強い株に高度に汚染されている地域では 10 日齢前後の雛にも用いられている。
不 活 化 IBD ワ ク チ ン の 大 部 分 は water – in – oil（WO）エマルジョン化されたもので、他の抗原も
含 む 多 価 混 合 ワ ク チ ン が 一 般 的 で あ る。不 活 化
IBD ワクチンを投与すると IBDV 特異的 T 細胞や、炎症反応が誘導される。野外感染から雛を守るのに十分なレベルの移行抗体を産生させるためには、生ワクチンで免疫後に不活化ワクチンをブースターとして用いる組み合わせが最も効果的である。

遺伝子組換え IBD 生ワクチン
ゲノムのセグメント A にコードされているウイ
ルスのカプシドタンパク質 VP2 は、抗体依存性の中和や防御に関係する免疫原性を保有しており、前駆体である VP0 が分解される過程で生成される。
これまで IBDV ゲノムの 2 つのセグメントの塩基配列が解読され、リバースジェネティクスの研究が進められてきた。この技術により、vvIBDV の VP2 をコードしている領域に部位特異的な変異を誘発した
組換え IBDV が作成されている。しかし、その組換え IBDV を感染させた鶏から病原性復帰した IBDVが分離されたため、安全な生ワクチン株を作るためには複数の変異をゲノムに入れる必要があると考えられる。リバースジェネティクスの技術により作られた組換え IBDV は、従来型の株および変異株に対しても同様に効果が見られる。病原性を持つ IBDV
血清型 1 のあるゲノム上の領域を非病原性である
IBDV 血清型 2 の領域と置き換えたキメラウイルス
では、血清型 1 の特徴である F 嚢濾胞へのダメー

5（5）ジを認めずに高い中和抗体価が誘導されたため、有力なワクチン株候補として考えられている。しかし他の IBDV 生ワクチン同様、これらの組換えワクチ
ンには移行抗体との干渉という課題があり、未だ商品化に至っていない。

サブユニットワクチン
近年、IBDV の主要な防御抗原である VP2 を組換えタンパク質として発現させる多くの研究が報告されている。VP2 の中和エピトープは立体構造に依存しており、VP2 を変性させると鶏に防御免疫を誘導することはできない。また、変性後に立体構造を復元させた VP2 も鶏体内で中和抗体を誘導することができない。これまでに、VP2 を発現させるために大腸菌、酵母、鶏痘ウイルスおよびバキュロウイ
ルスなど様々な組換えタンパク質発現系が用いられてきた。組換えには VP2 をコードしている領域のみ、あるいはポリプロテインの遺伝子領域が用いられ、効率的なタンパク質精製のためにポリヒスチジ
ンタグが用いられている。バキュロウイルスで発現した後に管状構造をとらせるよりも、カプシド構造をとらせた方がより免疫効果が高いこともわかっている。免疫効果を高める目的で、VP2 と鶏由来のイ
ンターロイキン 2 を融合して発現させた組換えタン
パ ク 質 も ワ ク チ ン 候 補 と し て 試 験 さ れ て い る。
IBDV 特異的なモノクローナル抗体と結合性を示す
ペプチドを含むように設計されたマルチミモトープ
タンパク質 r5EPIS が、新しい IBDV のミモトープ
ワクチン、サブユニットワクチン候補として考えられている。現在では 3 種類の VP2 サブユニットワクチン（バキュロウイルス、大腸菌もしくは酵母により発現）がいくつかの国で販売されているが、サブユニットワクチンは非増殖性の抗原であり、注射による投与や追加免疫が必要となるため使用は限定
さ れ て い る。VP2 の み を 利 用 し た 組 換 え サ ブ ユ
ニットワクチンは、野外株感染とは異なり IBDV の
VP3 に対する抗体を誘導しないため、ワクチン鶏群と野外株感染鶏群を識別する DIVA（Differentiating
infected from vaccinated animal) システムの構築にも有用である。

IBDV 免疫複合ワクチン
新しいコンセプトのワクチンとして免疫複合ワクチン（Icx）がある。Icx は IBDV に対して非常に強い免疫を示す鶏の血清から抽出した抗体と、IBD 生ワクチンを組み合わせて構成されている。このワクチンは移行抗体の存在下でも有効であり、マレック
病や鶏痘のワクチンを in ovo で投与する時期に同様に投与できる、あるいは孵化後すぐに皮下投与で6（6）きることが大きな利点である。有効性を攻撃試験で確認したところ、IBD 生ワクチンと同等以上の効果が認められた。作用メカニズムを調べるために Icxと生ワクチンを in ovo 投与後から定期的に調べて比較したところ、両方のワクチンで IBDV は F 嚢と脾臓の B リンパ球、マクロファージおよび濾胞
樹状細胞内に認められたが、Icx の方では 5 日ほど遅れてウイルスが検出された。他の研究では、SPF鶏を用いた場合 14 日齢の F 嚢で最初にウイルスが検出され、移行抗体を持つブロイラーを用いた場合
17 から 21 日齢で検出された。Icx で免疫すると、F嚢と脾臓の B リンパ球へのダメージが少ないにも関わらず、多量の IBDV が脾臓と F 嚢の濾胞樹状細胞内に認められた。近年では、IBDV に対する組換え中和抗体が開発されており、実験的に Icx に用いられている。

DNA ワクチン
外来性の抗原に対する免疫反応は、目的とする抗原遺伝子をコードした DNA を宿主細胞に導入することによって可能になる。この方法によって宿主細胞内で抗原を発現すると、その抗原に対してもともと存在する特異抗体の悪影響を受けずに、新たな特異抗体と細胞傷害性 T 細胞の誘導を促進できる。
DNA ワクチンについて非常に多くの研究が行われてきたが、鶏体内で十分な免疫反応を誘導した成功例は少ない。IBDV のポリプロテイン領域をコードした cDNA は VP2 領域をコードした cDNA よりも効果的であり、IBDV 特異的 cDNA とインターロイ
キン 2 あるいはインターロイキン 6 をコードした
cDNA を同時投与することでワクチン効果が上昇する。DNA ワクチンを in ovo 投与あるいは 1 日齢で投与後、不活化またはベクターワクチンで追加免疫をしたところ、攻撃試験で防御できる免疫が誘導された。DNA ワクチンのみを in ovo 投与する検討も行われてきたが、追加免疫無しでは防御に十分な免疫を誘導することができていない。Lactococcus lactis、Salmonella Typhimurium および E. coli を IBDVの cDNA ワクチンのベクターとして用いた試験では、発現した IBDV タンパク質が細菌の細胞壁を透過することが難しいためか、良い結果は得られていない。

ウイルスベクターワクチン
ベクターワクチンとはドナーである目的とする生物の遺伝子を、ベクターとなる他の生物のゲノムへ挿入することで両者への免疫反応を引き起こせるように設計された遺伝子組換えワクチンである。鶏痘
ウ イ ル ス（FPV）、ニ ューカ ッス ル 病 ウ イ ル ス

日生研たより（NDV）、七面鳥ヘルペスウイルス（HVT）、マレッ
ク病ウイルス（MDV）、鶏アデノウイルス（AAV）
や T4 バクテリオファージが IBDV の VP2 を発現させるベクターとして用いられている。HVT は移行抗体の影響をほとんど受けないため、長い間マレッ
ク病に対する安全で効果的なワクチンとして用いられており、IBD や他の疾病のベクターとして有力視されている。既にいくつかの HVT + IBDV – VP2 ベ
クターワクチンが in ovo、あるいは 1 日齢時の皮下投与用に開発されて諸外国で承認を得ている。野外での有効性については、移行抗体の影響を受けることなくワクチンテイクし、30 日齢に vvIBDV で攻撃したところ 93％の鶏で防御したと報告されている。さらに、ベクターワクチンは抗原性の異なる
IBDV に対しても防御効果があることもわかっている。サブユニットワクチンと同様に、VP2 のみを発現するベクターワクチンであれば DIVA システムの構築に有用である。

まとめ
IBDV が発見されて 40 年以上経つが、いまだに世界中の養鶏産業において脅威となっている。1980
年代前半に抗原性の異なるウイルスが出現した後、1980 年代後半には vvIBDV が顕在化してワクチンによる制御をより困難なものにしている。さらには、
近年では早期の生ワクチン投与における移行抗体との干渉が重要な問題となっている。現在は in ovo
投与やベクターワクチン等の新しい技術を用いることにより、高い移行抗体下でも効果的に免疫を付与できるようになってきた。多くの国で in ovo 投与のシステムが普及しつつあり、マレック病や IBD等の疾病に対してより自動化された大規模なワクチン投与ができるようになってきている。ベクターワ
クチンは近い将来、IBD の防御と制御を持続的で効果的なものにする可能性がある。しかしながら、厳しく規制される組換えワクチンでは MDV や IBDVの非常に病原性の強い株が新たに発生した時に簡単には対応できないため、その有効性を今後も維持していくことは難しいのではないかと考えられる。病
原性の強い新しい IBDV がどのように発生するのかについて、疫学的な観点からはまだ解明されていない。将来、新しい IBDV が発生した時には、従来通りの方法で弱毒化するよりも、既存のワクチン株と新しい IBDV の VP2 遺伝子を入れ替えた方がより早く有効なワクチン株を作出できる可能性がある。
当然のことながらこういう自体に備えて迅速な対応をとるためには、今後も野外ウイルスと疾病の発生状況について常にモニタリングしておく必要がある。

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、2015

7（7）

文献紹介

Pasteurella multocida に対する免疫法の発展
大嶋篤Development of immunization trials against Pasteurella multocida.
Ahmad TA, Rammah SS, Sheweita SA, Haroun M, El – Sayed LH.
Vaccine 2014, 12 ; 32（8）: 909 – 17.
紙面の都合上要旨及び一部文章については割愛致しました。
肉牛産業において、毎年北アメリカだけで一億ドルの損失がある。さらに P. multocida は養豚、養鶏及
1. 序論
家畜動物は我々の生活に非常に重要である。家畜
びチンパンジーに大きな経済的損失をもたらす。
Pasteurella 属はかつて Mannheimia 属に分類されは、タンパク質、ビタミン、日用品、卵、毛皮類の様な多くの必需品の主原料である。動物も人間と同ていた。P. multocida は非運動性の莢膜を持つ通性様に病気に罹患し、獣医師による適切な治療を必要
嫌気性のグラム陰性球桿菌である。CPS に基づく P.
multocida の血清型別によると、最も病原性を有すとする。動物の感染症は、特に家畜間で急速に伝播る血清型は A1、A3、A1,3、A4、B2 及び D1 である。
する微生物に起因する場合は深刻な大発生を引き起多くの動物の鼻咽頭、呼吸器及び消化管に感染し、こす。
抗生物質はこの様な微生物感染をコントロールすパスツレラ症と呼ばれる病気を引き起こす。ストレる主な手段であるが、動物における感染を制御する
ス条件下において、片利共生菌である P. multocida
ためには、新しく効能のある薬物を見つけなければは宿主の免疫系を抑え、鼻咽頭で増殖し、肺に広がならないという欠点がある。さらに畜産物への抗生る。鳥類の家禽コレラ（FC）、水牛の出血性敗血症
物質の残留は、間接的に人間の健康に影響を及ぼす。 （HS）
、豚の萎縮性鼻炎（AR）及びウサギの化膿性鼻炎（スナッフル）の原因となる日和見性の病原体
家畜動物の感染症をコントロールするには、第一にである。
防疫対策が重要である。ワクチンは感染する前に疾パスツレラ症は重篤であり、家畜に悪影響を与え病による臨床症状を押さえるために用いられるのと同時に、集団レベルでの感染をコントロールするたる伝染性の高い疾病である。そのコントロール方法
めに用いられる。動物用のワクチンは、伴侶動物のは複雑で治療は高額であり、長期に渡り、効果的で健康と福祉の改善及び家畜動物と野生動物双方からはない。抗生物質の使用はパスツレラ感染を制御す
る た め に 有 効 な 方 法 で あ る。し か し な が ら、約人間への伝染病を防ぐのに重要な役割を果たす。
80.5％の P. multocida が薬剤耐性を示し、抗生物質
呼吸器感染症は羊、ヤギ、ウサギ、トリ及びそのの使用には限界がある。薬剤耐性菌をコントロール
他の家畜動物において、著しい経済的損失の原因となる。それは主に有害な生理的ストレスあるいはウするための新しい抗生物質の開発が行われてきたが、製薬会社はグラム陰性菌に特異的な少数の抗生物質
イルスと細菌の複合感染によって起こる。これらの感染症は、感染した動物において 50％に届く様なを生み出せただけであり、感染を予防することが疾
高い死亡率に達することもある。家畜における呼吸病制御の有効な手段と考えられた。
器 感 染 症 の 主 な 原 因 の 一 つ と し て Pasteurella
multocida がある。この病原体は肺炎、性器感染症、2. 予防及び免疫療法
膿瘍及び敗血症を発症し、生産性の低下と高い死亡
科学者達は安全で有効な制御システムが早急に必率につながるため、深刻な経済的損失を引き起こす。
P. multocida は夏期には家兎全体の 20％に認められ、 要であったため、この疾病を防止するために防疫対
9 月から 10 月には 50 – 60％に到達し、3 月から 4 月
策を用いた。防疫対策が感染の拡大を最小限にし、には他の病気が増加して徐々に減少し、7 月から 8損失を抑える優れた方法であることが証明されたが、月の間が最低となる。一方、子羊では生後 10 – 12
これらの方法は疾病の拡大を管理するには十分に効
時間後に高い死亡率を示し、そして 3 ヵ月齢以上の果的ではなかった。免疫療法は野生動物の感染症に対する予防と治療について革新的な変化をもたらし
羊では 5 月、6 月及び 7 月に発生が認められる。呼吸器感染症は全世界の牛の死亡原因の 30％を占め、 た。免疫促進物質はナチュラルキラー細胞の数ある

8（8）いは機能を増強する物質であり、免疫反応を増加させる。T リンパ球から分泌されるマクロファージ活性化因子によって、鶏の細胞性免疫が活性化された。
弱毒化された P. multocida のいくつかの構成物及び菌体そのものは、鶏の呼吸器における食細胞の活性を 増 加 さ せ た。し か し、著 者 の 知 る 限 り、P.
multocida に対する非特異的な免疫反応を増強する
特定の製品はない。

日生研たよりら作製されている。Heddleston 及び Hall は、ホルマリン不活化した P. multocida を用いて鶏を免疫することで、元株の感染に対して有効性が高いことを証明した。Heddleston 及び Rebers らによって、宿主を通過させ、in vivo で増殖させた P. multocida をホルマリン不活化したワクチンについて研究が行われた。彼らは製造したバクテリンが細菌による攻撃
に対して高い交差免疫を誘導することを明らかにした。後に、その細菌の安全性と有効性は子羊を用い
2.1. 受動免疫て検証された。しかしながら、2004 年に、Dowling1975 年から 1990 年の間のいくつかの研究によっら は 肺 に 投 与 さ れ た ホ ル マ リ ン で 不 活 化 し た P.
multocida ワクチンが、同じ菌株の攻撃に対して子て、Clemson 大 学 の P. multocida ワ ク チ ン（CU ワ
ク チ ン）、チ オ シ ア ン 酸 カ リ ウ ム 抽 出 し た
牛に防御免疫を誘導することを証明できなかった。
Pasteurella 抗原及び加熱死菌に対する抗血清の上昇
ホルマリンで不活化した P. multocida から製造さによって、七面鳥の幼雛、ウサギ及びマウスそれぞれた、油中水滴型エマルジョン細菌ワクチンは、同れに免疫を付与することが証明された。1991 年のじ菌株の攻撃から家禽を防御し、弱毒ワクチンより
multocida
研究では、P.
の外膜タンパク質（OMP）
七面鳥の感染数を減少させ、全身性の抗体のみを誘に対するモノクローナル抗体（mAbs）はウサギと導した。ベルギーの獣医学部の科学者たちは、1980
マウスのパスツレラ症に対して有効な免疫を付与し、 年から 1987 年の間、ホルマリンで不活化したオイ
肺での菌の増殖を抑制した。さらに、1997 年から
ルアジュバント P. multocida ワクチン（OAV）に挑
2007 年の間に始まった研究によると、P. multocida
戦し続けた。彼らはそのワクチンが与えた免疫応答の硫酸アンモニウムタンパク質分画（PSAP）、外膜が弱く、結果としてマウスに局所の炎症と病変が認タンパク質 H（OmpH）、Omp87、OMPs の混合物は、 められたことを明らかにした。しかしながら、他の
マウス、ウサギ及びウシにおいて同じ菌株の感染に科学者達が加熱殺菌した Pasteurella を用いて、ア対して有効である事が証明された。細菌の糖タンパ
ヒル、子ウシ及びマウスにおける有効性を証明した。
ク質に対する抗血清は、血清型の異なる菌での攻撃
加熱殺菌された OAV は家禽における局所反応を減に対する交差防御を鶏に付与した。リポポリサッカ
弱し、同じ菌株による攻撃に対してマウスに 60％
ライド（LPS）に対する mAbs が上昇しても防御のの交差防御を付与した。
有効性が認められない、あるいは部分的であるにも異なるアジュバントの有用性を評価するためにいかかわらず、P. multocida の LPS を模倣したタンパ
くつかの研究が実施された。ウサギに P. multocida
ク質に対するポリクローナルな抗イディオタイプ抗感染に対する免疫を付与するためにエジプトの蜜蝋体は同じ菌株で攻撃されたマウスを P. multocida のを用いてホルマリン不活化 P. multocida が製造され、感染から防御した。
ワクチンの有効性が改善されることを証明した。さらに、サポニンを含む OAV は、マウス及び子ウシ
2.2. 能動免疫において出血性敗血症に対する強力な液性及び細胞
ワクチン投与は Pasteurella に対する防御を動物
性免疫を惹起した。
に与える最も効果的かつ経済的な方法であり、パス
OAV を等量の Tween 80 で再乳化して作製されたツレラ症の症状を最小限にする。以下の段落では、
多価エマルジョンワクチン（MEV）は、バッファ
Pasteurella spp. に対する有効なワクチンを製造する
ローの出血性敗血症を 6 ヵ月以上防御する有用な製ための試みをたどる。
剤であり、ウサギ及び子ウシにおいては 1 年間持続した。トキソイドを含有する子ウシ用 P. multocida
2.2.1. 全菌体ワクチン
菌体ワクチンは高い免疫応答を惹起した。ミョウバ
このワクチンは第一世代ワクチンと呼ばれる。望ン沈殿抗原を用いたワクチンで免疫されたバッファ
ましい免疫応答を引き出すために、全菌体を不活化
ローは 6 ヵ月間の防御効果を得られるが、OAV 及あるいは殺菌したもの、生きたまま弱毒化したもの
び二重エマルジョンワクチンで免疫された場合、出あるいは細菌ライセートが用いられる。
血性敗血症に対して 12 ヵ月に及ぶ長期間持続する免疫が成立した。Pasteurella 不活化ワクチンを改善
2.2.1.1. 死菌ワクチンする他の方法は、多価ワクチンを作製することであ
不活化ワクチン（バクテリン）は様々な方法、例る。2 つの血清型から成る Pasteurella 2 価ワクチン
えば熱、乾燥、ホルマリン、フェノールあるいはアはウサギをパスツレラ症から防御するのに効果的でジ化ナトリウムによって殺菌された Pasteurella かあり、5 価ワクチンは子ウシの症状を軽減するが、

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トリの家禽コレラには効果が無かった。
鉄制限下で培養した Pasteurella のバクテリンは家禽あるいはウサギにおける交差防御の誘導に失敗した。
バクテリンを用いたワクチン投与には多くの弱点がある。例えば血清型間の交差防御を上昇させる能力を欠いており、その結果として効果が不十分で免疫の持続が短く、病気が発生することもある。さらに、バクテリンは投与部位の炎症を引き起こす。

9（9）CU ワクチンによる七面鳥の繁殖雌の経口免疫及び肉用鶏の経口ならびに翼膜穿刺法は軽度な副反応はあるものの、25 – 30 週続く高い免疫応答を誘導した。
しかし、七面鳥における翼膜穿刺法を介した高濃度ワクチンによる免疫は翼に重度の障害を引き起こした。上記と同様の防御期間は鶏の皮下免疫及び七面
鳥の経口免疫によっても達成された。また、トリの週齢及び種類といった要因が有効性に影響を与えた。
七面鳥及び繁殖雌において生 CU ワクチンの有効性が明確に証明されたが、鶏は家禽コレラから効率的
2.2.1.2. 弱毒生ワクチンに防御されず、生 CU ワクチンで免疫されたブロイ
非病原性 P. multocida はパスツレラ症に対する生ラーは、免疫された鶏の週齢の経過に伴って抗体価
ワクチンの材料として頻繁に用いられていた。例え及び免疫応答が増加した。
ば P. multocida 血清型 A3（P1059）B3、B4 である。
弱毒化導入のさらなる方法にはストレプトマイシ
これらはウシに 13 ヶ月間の高い免疫を付与するが、 ン の 利 用 が あ る。ス ト レ プ ト マ イ シ ン 依 存 性 P.
multocida ワクチンはウサギにおける親株の攻撃に
母牛では有効性が認められなかった。さらに、マウPasteurellaスは豚由来ので免疫された際に耐性を対して完全な防御を与え、七面鳥の家禽コレラを防示した。鉄制限下で培養された P. multocida 血清型
いだ。しかしながら、ストレプトマイシン依存性 P.
multocida A3 変異株は同じ株及び異なる菌株の攻撃B2 はウシ及びウサギにおける親株での攻撃に対して高い防御能を付与した。無莢膜型 P. multocida はによるパスツレラ症からウサギを防御したが、A12
マウス及び幼雛において同じ菌株ならびに異なる菌株では防御が認められなかった。ストレプトマイシ株に対する防御を誘導した。例えば N – メチル – N'
ン依存性 P. multocida A3 及び B の生ワクチンは副– ニトロ – N – ニトロソグアニジンの様な変異原物作用がなく、ウシの出血性敗血症を防御した。
P. multocida 毒素遺伝子欠損株を用いた弱毒生ワ質によって誘導された変異は、有効な弱毒ワクチンを作製する有望な手段であった。非病原性変異型
クチンはマウスの萎縮性鼻炎に対して有効であった。
–
P. multocida 血清型 B2 の aroA 欠損株は出血性敗血の P. multocida M 8283 株及び M3G 株は、飲水投与によって、親株及び異なる株の家禽コレラによ症に対する子ウシ及びマウスのワクチンに用いられる攻撃に対して、高い交差防御を七面鳥に付与した。 た。この安全な製剤は親株の攻撃に対して防御を誘
Clemson 大 学 の 非 病 原 性 P. multocida（CU ワ ク
導した。P. multocida のマーカーフリー aroA 欠損株
チン）を用いた弱毒ワクチンは広く研究されていた。 は異なる菌株に対する交差防御免疫を誘導した。同高度な防御免疫反応が CU ワクチンで免疫された七様 に、鶏 を 家 禽 コ レ ラ か ら 防 御 す る た め に P.
multocida 血清型 1 と 3、両方の aroA 変異株生ワク
面鳥及び鶏に誘導された。1978 年には、生 CU ワク
チンによる七面鳥の経口免疫は、バクテリンとは異チンを使用することによって交差防御が誘導された。
P. multocida 血清型 B2 由来の aroA 欠損株を用いたなり有害な影響がなく、呼吸器における家禽コレラに対する細胞性及び液性免疫を 4 から 6 週間誘導し弱毒ワクチンはマウスの出血性敗血症を防御した。
た。生 CU ワクチンを投与された雌の七面鳥では副温度感受性 P. multocida 変異株生ワクチンで免疫反応もなく、生存率は 92％に達し、鶏では 95％かされた豚は親株の感染に対して液性免疫が誘導されら 97.5％の間であった。さらに、Bierer と Eleazer、 た。一 方、高 濃 度 の P. multocida cexA 変 異 株
後に Heddleston は、家禽コレラを防ぐため七面鳥 （PBA875）を用いたマウスの免疫は P. multocida のへの飲水投与による生ワクチンの使用を推奨した。
感染に対して高度な防御を示した。さらに、莢膜欠1977 年、Bierer は飲水中の CU ワクチンの投与
損型 P. multocida（AL18）を用いたマウスへのワク
濃度を上げることによって、七面鳥でのワクチンにチン投与は野外株の感染に対して高度な防御免疫をよる防御率が増加することを証明した。同じ年、ス誘導した。しかしながら、不活化野外株あるいは不ルファジメトキシン及びオルメトプリムまたはラバ
活化 AL18 株を用いたワクチンは免疫を誘導するこミゾールとの混合給餌によって七面鳥での CU ワクとができなかった。子牛の弱毒 P. multocida 生ワク
チ ン の 有 効 性 が 増 加 す る こ と が 証 明 さ れ た。
チンは抗体価を上昇させる可能性を示したが、動物
1980 年代の後期、免疫回数が CU ワクチンの有効の健康状態あるいは生産性は改善しなかった。他の性を増加させる明確な要因であることが証明された。 例としては N 末端短縮断片型 P. multocida 毒素（N– PMT）を発現した P. multocida 弱毒生ワクチンが鶏において、CU ワクチンによる 2 回あるいは 3 回の免疫が 1 回免疫よりも高い防御能を付与した。同ある。これは豚の野外株の攻撃に対する強力なワク様に免疫の経路は免疫の有効性に影響を与えた。
チンとして有用である。2012 年、N – PMT のみを

日生研たより10（10）

発現する弱毒 P. multocida がマウスでの高い抗体誘導能を示したことで、萎縮性鼻炎を防御するワクチ
ンとして用いられた。
弱毒生ワクチンの主な利点は、不活化ワクチンに比較して血清型間の交差防御と高い細胞性免疫を誘導する点である。しかしながら、全身感染及び病気の発症を引き起こすことがある。

び粘膜免疫を誘導した。

2.2.2. サブユニットワクチン「第二世代のワクチン」とよく呼ばれるサブユ
ニットワクチンは免疫を誘導する病原体のタンパク
質や多糖類の様な病原体の単一の免疫原性成分から成る。1972 年、Bapat 及び Sawhney はウサギのワクチン候補として Pasteurella の莢膜抗原について
2.2.1.3. 細菌ライセートの利用研究を行った。P. multocida の高濃度の莢膜抗原は1968 年、科学者達は不活化した微生物のライセー
HS に対して 14 ヵ月続く防御を家畜牛に与えるこ
トから調製された P. multocida を経口投与することとが後に証明された。P. multocida の LPS はパスツ
によって、同じ菌株の攻撃に対して鶏及び七面鳥にレラ症からマウスを、家禽コレラから七面鳥を守る
高 い 防 御 能 を 誘 導 す る こ と を 発 見 し た。P.
ために有効なツールであった。Escherichia coli（J5）multocida のチオシアン酸カリウム抽出物（PTE）のコア領域の LPS 変異株がウサギのパスツレラ症
は鶏に対して高い免疫を付与し、家禽コレラに対すに対して交差反応を示す有用な予防薬となることがる感受性を低減した。この防御は主に抽出物の LPS
明らかとなった。P. multocida 毒素（PMT）を含む
及 び タ ン パ ク 成 分 に よ る も の で あ る。1996 年、ワクチンによる免疫は鼻炎から豚を防御し、そのホ
Suckow ら は P. multocida の PTE が コ レ ラ 毒 素
ルマリン不活化トキソイドは母豚でも有効性を保持（CT）と共に元株の攻撃に対する免疫応答を強化すしていた。熱処理によって不活化された PMT はパることを発見した。
スツレラ症からウサギを防御した。P. multocida D
P. multocida の無細胞培養ろ過液は七面鳥のパス型の皮膚壊死毒素（DNT）で免疫された豚は高度ツレラ症に対して高い免疫を与えるが、無ろ過でなな液性免疫が惹起され、ラットでは元株による攻撃
ければ家禽コレラに対する七面鳥への交差防御を誘を防御した。さらに、P. multocida バクテリントキ
導しなかった。この防御は主にエンドトキシンによソイド（BT）は、ウサギにおいて、PMT 単独で誘る も の で あ っ た。56℃、1 時 間 熱 処 理 し た P.
導されるより高い相乗的な防御免疫を誘導した。
multocida の全菌体ライセートは七面鳥に完全な交ワクチンにおける Pasteurella の外膜タンパク質
差防御を与え、一方トリプシン処理したライセート （OMP）の利用は 1991 年に始まった。ウサギにおは 50％の交差防御、ペプシン処理したライセート
いて、P. multocida OMP のワクチンは元株の攻撃には交差防御を示さなかった。超音波処理されたライ対して肺炎の症状を軽減する能力を持ち、ウサギ及
セートは熱処理されたものより高い防御を付与した。 び子ウシでの白血球の貪食能を高めたが、マウスで
P. multocida 様 グ ラ ム 陰 性 細 菌 で の PhiX174
はアジュバントと共に投与されなければ効果がな
geneE の 発 現 は 溶 菌 を 引 き 起 こ し、
「the
かった。鉄制限外膜タンパク質（IROMP）を基にしたワクチンはウサギ及び子ウシに免疫を与えた。
recombinant ghost system」と呼ばれる非生ワクチ
P. multocida の OmpH タンパク質は、高い抗体価をンである細菌ゴーストを形成させた。P. multocida
誘導し、T 細胞の増殖能力を高め、マウスに元株ののゴーストで免疫されたウサギ及びマウスは元株の攻撃に対して高い免疫応答を示した。このワクチン攻撃に対する免疫を付与する有効なワクチンとしてには簡便な製造方法、安全性及び有効性といった多用いられた。最近では、熱変性可能な OmpA ファ
ミリーが P. multocida に対する細胞性免疫を強化すくの利点がある。
P. multocida ライセートの上清分画にアジュバン
るのに重要な役割を果たしていることが証明された。
OMP に加えて、分子量 39 kDa を示す細菌のアドトを追加すると、七面鳥において、元株及び異なる
ヘシン（Cp39）は元株に対する交差防御を付与した。
株での攻撃に対して、その防御能力を高めた。しか2002 年、鳥類及びその他の動物は、グラム陰性菌
しながら、このアジュバントを用いた全菌体ライ
セートでは防御において同様の効果を与えなかった。 に対して、Pasteurella spp. より産生された精製シデ
2 年後、P. multocida の全上清を可溶化して得られロフォア受容体タンパク質を含むワクチンを投与さmultocida
れ た。2008 年、Pasteurella の リ ポ タ ン パ ク 質 Eた膜小胞は、P.
で攻撃された七面鳥に防御能を賦与した。P. multocida に対する最も最近の （PlpE）を含むサブユニットワクチンの利用（リポタンパク質 B を除く）は、その時点では、副作用
ワクチンは外膜タンパク小胞（OMV）を基にしてがなく、革命的発見であった。
いる。これらはグラム陰性菌の外膜から突き出た小球体である。これは LPS やリン脂質のような異な
2.2.3. 組換えワクチン
る膜タンパク質から成っている。OMV によるマウスの鼻腔内免疫は異なる株に対しても顕著な液性及組換えワクチンあるいは第三世代と呼ばれるワク

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チンの利用は P. multocida に対するワクチン開発において注目すべき役割を果たした。最初の研究は1994 年 か ら 開 始 さ れ、無 毒 変 異 型 組 換 え P.
multocida 毒素（rPMT）は豚の鼻炎に対する高い免
疫応答を誘導した。これは、P. multocida 毒素の組
換え N 末端（rPMT – N）の 3 つの断片から成り、高い抗体価及び初乳中への高レベルの移行抗体を付与するワクチンであった。rPMT とバクテリンから成る新規混合ワクチンの利用は豚における疾病の防御に成功した。しかしながら、1997 年に、組換え
P6 様タンパク質で免疫された七面鳥は家禽コレラに対する防御能力を欠いていた。10 年後、韓国において、Kim らは不完全な組換え OmpH が豚及びマウスのパスツレラ症を防御することを明らかにした。加えて、組換え OmpA はマウスにおいて、強力なしかし防御に有効ではない免疫を誘導した。
2008 年、P. multocida A3 の OmpH を発現する遺伝
子組換えタバコは、植物を利用した家禽コレラに対するワクチンを開発するための担体として利用可能であることが証明された。
鶏及びマウスにおいて、組換え接着タンパク質（rCp39）を用いることによってパスツレラ症を防御した。遺伝子組換え繊維状赤血球凝集素ペプチド（rFHAB2）は、七面鳥における家禽コレラ及びヤギにおける HS に対して高い免疫応答と交差防御を付 与 し た。組 換 え P. multocida リ ポ タ ン パ ク 質（PlpE）はマウス及び鶏に異なる株の攻撃に対する交差免疫を誘導した。組換え PlpE あるいは OmpHとリポタンパク質 E（PlpE）の融合遺伝子（PlpE –OmpH）は、P. multocida による子牛の輸送熱に対するワクチンとして利用され、高い有用性を示した。
2011 年、Hussaini ら は P. multocida 血 清 型 B 由 来の組換え ABA392 クローンが、マウスの出血性敗血症に対して 83％の免疫を付与することを証明した。
同グループは後に、P. multocida 血清型 B のサブク
ローン CSI57J がマウスの HS に対するワクチンとして有用なツールとなることを証明した。
2.2.4. DNA ワクチンこれらのワクチンは第四世代のワクチンとして知られている。P. multocida 毒素（PMT）遺伝子由来の DNA ワクチンは、マウス及びブタ由来株の感染に対する防御能力を有していた。2011 年、インド
では、外膜タンパク質の DNA ワクチンが、子ウシ及びバッファローの出血性敗血症に対する有用なワクチンとして利用可能か研究が行われた。2011 年、
中 国 で は、P. multocida の pOmpH 及 び pOmpA の様な OMP – DNA ワクチンが鶏のパスツレラ症に対して、部分的な防御を誘導可能なことが証明され、一方、pOmpHA 融合ワクチンが弱毒ワクチンより高い防御能を付与することが明らかとなった。201211（11）

年、OmpH、PlpEN 及 び PlpEC か ら 成 る 3 つ のDNA ワクチンの可能性について研究が行われた。
上記の研究により、これらの製剤はマウスにおいて免疫原性を有しているものの、P. multocida に対する防御能を持たないことが明らかとなった。1 年後、pcDNA –OmpH + pcDNA –OmpA、pOmpH +pOmpA 及び融合 DNA などの 2 価の混合ワクチン
は、鶏の家禽コレラに対して有効であった。しかし、単味の DNA ワクチンの有効性は限定的であることが明らかにされた。

3. 結論
いくつかの病原微生物は畜産業界に深刻な損失をもたらす。呼吸器感染症は集団内で急速に拡大し、さらに他の集団に拡散し、結果として大規模な発生を引き起こす。パスツレラ症は小規模な局所感染か
ら致命的な敗血症まで様々な症状を引き起こす。パ
スツレラ症は、通常ある種の病原体では拡大が制限される様な低湿度及び低温度の地域でさえ発生し、最も広範囲に起こる疾病の一つである。この疾病は、
特にバッファロー、家禽及びウサギといった家畜に悪影響を及ぼす伝染性の高い疾病である。化学療法
は、薬物を投与された家畜の肉を食べる消費者にとって、健康を害する可能性があり、また、生産者にとっても薬物の投与が有効でない場合、治療の長期化と経費の増加を招くため効果的ではない。防疫対策は病原体の拡散を抑える助けとなるだろうが、免疫療法が疾病を防ぐのに最も有用な方法である。
細菌の抽出物及び OMP に対する抗血清が感染の抑制に明らかに有効であることが示され、ワクチンの投与が病原体に対する防御に最も重要であった。
Pasteurella に対する最も古いワクチンは 1950 年
代中頃から利用されていた。in vitro で培養した細菌のホルマリン不活化ワクチンは現在も利用されており、未だに主要な市販ワクチンである。これらのワクチンは、様々な動物種において 6 – 8 週の間、元株の攻撃に対して明確な防御を付与することが証明されている。熱殺菌された病原体はホルマリンに比べて半分程度の防御能を付与することが確認された（Pasteurella の主なエピトープが、例えばタンパ
ク質のように、熱に不安定な物質であることが示唆される）。宿主を通過させて分離した菌株を用いて製造されたワクチンは、細菌の攻撃に対して高い交差免疫を誘導したが、それは、宿主特異的な製剤という理由で長期間防御が継続せず、以前の in vitroで培養したものと比べた場合、半分程度の防御能しか誘導しなかった。さらに、in vitro での鉄制限培養によって製造されたバクテリンは、完全な交差防御を達成できないワクチンであり、失敗であった。
オイルアジュバント製剤は、ウシにおいてはバクテ

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リンの効果を 250 日間に延長し、ヒツジには効果がなく、カモ、鶏、七面鳥及びウサギには一様ではない効果を示し、サポニンの追加はその働きに相乗的であった。防御能は、オイルアジュバントによって影響を受けず、ワクチンの投与回数に相関していた。
ミョウバン、フロイントの不完全アジュバント、PMT トキソイド、DNA 及び蜜蝋は、バクテリンの効果を強化するために用いられた。一般的に、不活化されたバクテリンは、交差防御及び長期間の免疫持続を付与する能力がなく、投与部位での局所的な炎症を誘導する。変異原、ストレプトマイシンあるいは病原性のない株を作出するための遺伝子欠損によって P. multocida は弱毒化された。これらから作られたワクチンはバクテリンと比べて安全ではないが、交差防御と細胞性免疫を誘導した。また、バクテリンとは異なり、感染した動物にとって治療に使える可能性もあった。弱毒ワクチンは七面鳥に 30
週間、バッファローに 13 ヵ月間、防御能を与え、家禽に経口的に投与された場合には、顕著な有効性を示した。従って、1 回目の不活化ワクチンに対するブースターとしての弱毒ワクチンの利用が試みられた。1977 年の初め、チオシアン酸カリウムによって溶解された細菌は、特にコレラ毒素をアジュバン
トとして用い、腹腔内投与された場合に、元株による攻撃に対して防御能を有する液性免疫を引き出す
ことが明らかにされた。ペプシンで処理されたライセートと異なり、熱処理された細菌及び細菌ゴース
トの両方は、適度な防御を付与した。この結果から、
この細菌の主要な病原性因子が細胞壁のタンパク質であることが確認された。
CPS、LPS、シ デ ロ フ ォア、PMT、DNT 及 び リ
ポタンパク質 E といった安全な候補物質の利用に道を示したサブユニットワクチンは、元株の攻撃に対して有効な防御能を付寄した。同時に、PMT は
バクテリン及び PTE のアジュバントとして頻繁に利用されている。PMT トキソイド、OMP – A/H 及
び B2 及び B6 株の IROMP は高い液性及び細胞性免疫を誘導することが可能であった。しかしながら、これらのサブユニットから得られた防御能は元株に対してのみであり、これらの抽出物の解析は難しい。
従って、OmpA、OmpH、接着タンパク質（Cp39）、
繊維状赤血球凝集素ペプチド（FHAB2）、線毛タン
パク質、PMT の N 末端及びリポタンパク質 E を製造する試みは 1997 以来継続されている。これらは妊娠動物で有効であり、そしてこの病原体の元株による攻撃に対して高い抗体価を付与した。大規模な獣医学的利用にとっては比較的安価であったため、Pasteurella と闘うために DNA ワクチンが取り入れられた。その目的のため PMT、OmpA、OmpH 及
びリポタンパク質 E をコードする DNA について研究された。この製剤が液性及び細胞性免疫の両方を誘導したにもかかわらず、2 価の OMPs 製剤として紹介したもの以外は、防御能を有していなかった。
しかし、DNA ワクチンは将来有望である。なぜな
ら、コストに制限されず、技術的限界がないためである。
それぞれのワクチンには長所と短所があるが、理想的なワクチンは、元株及び異なる株の攻撃に対して長期間の交差防御をもたらし、強力な細胞性及び液性免疫を誘導し、治療的な働きがあり、細菌による敗血性ショックを抑制し、同時に反応性がなく、動物に投与するのが簡便で、製造が簡単で、安定性が あ り、完 全 に 安 全 で 安 価 な も の だ ろ う。P.
multocida に対する弱毒ワクチンは安全ではないが、異なる株に対する防御能及び治療活性を与える唯一のものである。これらは DNA ワクチンと同様に、
液性応答と共に細胞性免疫を付与するという利点がある。さらに、経口的に投与された場合、ほぼ 1 年
間防御は継続し、安価で製造が容易である。一方、ほかのすべてのワクチンではこの決定的な条件を欠いている。従って、有害性を軽減することで、弱毒ワクチンの利用を発展させるという試みは正しい狙いである。いくつかの物質は不活化ワクチンの能力を強化することが明らかにされ、特にサポニンを添加された場合あるいは特定の間隔で投与された場合に顕著であった。以上の治療方法は更なる進化のために価値ある挑戦である。

日生研たより昭和 30 年 9 月 1 日創刊（隔月 1 回発行）

（通巻 590 号） 平成 26 年 10 月 25 日印刷
発行所〒 198–0024

生命の「共生・調和」を理念とし、生命

平成 27 年 1 月 1 日発行（第 61 巻第 1 号）

一般財団法人 日本生物科学研究所
東京都青梅市新町 9 丁目 2221 番地の 1

TEL：0428（33）1056（企画学術部） FAX：0428（33）1036

体の豊かな明日と、研究の永続性を願う
気持ちを快いリズムに整え、視覚化したものです。カラーは生命の源、水を表す「青」としています。

編集室

表紙題字は故中村稕治博士の揮毫

印刷所

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員／大嶋 篤（委員長）、川原史也、今井孝彦

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