A2014年 2月 作 成

HISTOFINE

研究用試薬

ヒストファイン製造販売元‑rJ（ヤオサイエンス第一抗体

株式会社ニチレ

杭洲ウサギモノクローナ）店菰体（ヒストステイナー月）（動物種： ウサギ ）〒104‑8402
東 京 都 中 央 区 築 地 6‑19‑20
TE
L.03(3248)2208F
以 03(3248)2243

包装： 60テスト (12ml)

Code: 718111■本品は、自動染色装置ヒストステイナー用の試薬 第一抗体である。
■特異性および抗原分布：ヒト ERG(Ets・relatedgene;ETS関連遺伝子）タンパクと特異的に反応する。 ERGは、DNA結合転写因子で、 41kDa の核タンパクである。細胞の発生、分化、増殖、アポト ーシス、組織の再構築などにおいて重要な役割を果たす ETS(erythroblasttransformation・specific)転写因子ファミリーのメンバーである。 ERG を含むいくつかの ETS転写因子ファミリー遺伝子の転座は、腫瘍の発生と進行に関連していることが報告されている (1)(2)。正常組織では、多くの組織の血管内皮細胞やリンパ球、骨髄前駆細胞などの核に反応がみられるが腺上皮には反応はみられない。腫瘍組織では、前立腺癌(3)・(9)(14)(15)（欧米では全体の 50％程度(10)(13)、日本では全体の 16・28％程度）、高度異型前立腺上皮内腫瘍 (higegradeprostaticintraepithelialneoplasio;
HGPIN)(10・20%）等の腫瘍細胞の核に反応がみられる。また、多種の血管腫瘍等の腫瘍細胞の核にもみられる(12)。良性前立腺過形成 (benignprostatichyperplasia;BPH)や増殖性炎症性萎縮(
proliferativ
einflammatoryatrophy;
PIA)では反応はみられない。 前立腺癌において TMPRSS2‑ERG遺伝子融合が確認されている場合、より悪性度の高い前立腺癌に関連しているとの報告がある。
クローン名： EPlll抗体のサブクラス： R
abbitIgG
免疫原：ヒト ERGタンパクの C末端残基に対応する合成ペプチド
製法：アフィニティ ー精製して得ている。

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1.内容第一抗体・・・抗 ERGウサギモノクローナル抗体（動物種：ウサギ）。
液状。
ウシ血清アルブミン (BSA)と、 0.1％アジ化ナトリウムを含むリン酸緩衝生理食塩水(PBS)中にて、即時使用可能な抗体濃度に希釈済み。
1バイアル中に 12mLを含む。
2．使用目的組織・細胞中のヒト ERGの染色。
3．切片の準備前処理（抗原賦活化）としてヒストファイン抗原賦活化液 pH9(Code:415201または Code:415211)を用いたオートクレーブ処理が必要である（裏面参照）。
4．使用方法パラフィン包埋切片の免疫組織化学および免疫細胞化学染色に使用できる第一抗体である。
l) 他の試薬とともに試薬ラック（ヒストステイナー用）にセットし、染色を開始する。
2) 染色終了後、すみやかに 2‑8℃に保存する。
5．染色方法の設定反応時間を 30分間とする。
試薬バーコードラベルを使用する場合は、自動染色装置ヒストステイナーのプログラムにバーコードラベル情報を入力する必要がある 。本製品が未登録の場合は、下記データを入力（漢字のみ全角、他半角入力）し、登録すること 。
専用ボトルに貼付されているバーコードラベル内の情報悶こ称(10文字） IドGE‑RRGMウサがモ）ク ーナル抗体
P

バーコード
時間（分）

ERG‑RM306．
貯法および使用上の注意
1. 2‑8℃保存。
2.有効期限はラベルに記載されて いるので使用前に確認すること。
3.使用前に室温に戻すこと 。
4.使用後は速やかに冷蔵保存すること。
5.異なるロットの試薬や他製品の試薬を混ぜた りしない こと。

7．取扱上 （危 険 防 止）の 注 意
1.有効期限の過ぎた試薬は使用しないこと 。

2.本製品に関する安全情報はMSDSを参照すること。
3. 本品を吸い込んだり、眼、口、皮膚、衣類などへの接触を避けること 。
4. 本製品の廃棄の際には、各施設や地域および国のルールに従い、適切に廃棄すること 。
5. 本品は、動物由来成分を含むので、取扱に注意が必要である。
6. アジ化ナトリウムは有毒化学薬品である 。本製品の含有最は危険なものとして分類されないが、蓄積されたアジ化ナトリウ

ムは爆発性の金属アジ化物として形成され、水道管に含まれる銅、鉛と反応する可能性がある 。そのようなリスクを避けるために大量の水とともに洗い流すこと 。
7.ヒト由来の検体は、取扱者に感染をひき起こす危険性がある 。従って 、適切な取扱および廃棄法を用いるとともに、この免疫組織（細胞）化学染色法を施行するに際し、関連技術および操作法に充分習熟しておかなければならない。

8.主 要 文 献
(1) ReddyES.,
etal:Proc.N
atl.Acad.Sc
i.USA34:6131‑
6135,1987(2) OkikawaT.:
CancerSCIENCE95:
626‑
633,2004(3)FitzGeraldLM.,etal:BMCCancers:230,2008(4) Mumer‑SinhaC.
,etal:NATUREREVIEWS:Cancers:497‑
511,2008(5) LeongM.,etal:PathologyandLaborator
yMedicineInternational:13‑
21,2009(6) BFurusato,
etal:Prostat
eCancerandProstaticDiseases13:228‑
237,2010(7) SarahM.,etal:ClinCancerREs
earch1T 5878‑
5888,2011(8) FalzaranoSM,.etal:Virchows紅 ch459:441‑
447,2011(9)AlcidesC.
,etal:A mJSurgPathol3
5:1014‑1020,2011(10) KyungP.,
etal:NEOPLASIA12(7):590‑598,2010(11)Lill
anH.
,etal:IntJC
linPathol4(7):644‑
650,2011(12)MiettinenM.
,etal:A mJSurgPathol3
5:432‑
441,2011(13) RosenP.,etal:NATUREREVIEWSUROLOGY9:131‑137,2012(14)M.Braun,etal:ProstateCancerandProstati
cDiseases:1‑5,2012(15) A MHoogland,etal:ModernPathology25:471‑479,2012■研 究 用 と し て の み 使 用 す る こ と 。

免疫
染色におt
Iる
操
作
手順
および
前処
理（杭原賦活it)■

操作手順［切片の準備］
1.50℃で十分に湯伸ばしした切片 (3‑4μm厚）をシランなどのコーティングスライド上に貼り付け、 37℃の恒温器内で 16時間以上乾燥させる 。
2.脱パラフィン → 親水化 → PBS
3.前処理（抗原賦活化） ：オートクレープ処理①緩衝液（下記記載）を耐熱性バットに入れ、切片を浸す。
②バットに蓋をする 。蓋が取れないように輪ゴムでとめる 。
③ 120℃、 20分間オー トクレープ処理する 。
④圧力が十分下がった後、バットごと切片を取り出す。
⑤バットの蓋をはずし、バットごと切片を常温に 20分間以上放置し、ゆっくり熱を冷ます。
※オー トクレープ処理後は、バットおよび緩衝液等が高温になっている。これらを取り扱う際は、手袋等を使用し火傷に注意する。
⑥スライドを緩衝液から取り出 し、PBSでよくすすぐ (3分間ずつ容器を 2度かえるか、または洗浄ビンを使用する）。
［染 色 手 順 ］ ＜ ヒ ス ト フ ァイ ン シ ン プ ル ス テ イ ン M心 <‑PO(R)使用の場合＞
4.内因性ペルオキシダーゼの除去 10 15分間／常温 → PBS洗浄
5.第一抗体の添加 ・反応 30分〜 1時間／常温 → PBS
洗浄
6.シンプルステインM心 <‑PO(R)の添加 ・反応30分間／常温 → PBS
洗浄
7.基質溶液の添加・反応
DAB
発色 → 水洗
8.対比染色 核染（ヘマトキシリン） → 封 入 → 乾燥 → 検 鏡■注 意• 「PBS洗浄」はPBSに浸し、 5分間ずつ 3回放置する 。
• 4．の プロセスは 3．の前に行ってもよい。
・ヒストフ ァイ ンSABキットを使用する場合は上記 l. 4
ま で 行 い SABキ ッ トの操作方法に従 って染色を行う 。
．抗原賦活化液pH9の作り方

・Code:415201 抗原賦活化液pH9 （調製済）は、 その まま用いる 。
・Code:415211 抗原賦活化液pH9(10倍濃縮）は、精製水で 10倍希釈する 。