2024 JULY
No. 632

第 70 巻 第 3 号（通巻 632 号）2024 年（令和 6 年）7 月

挨拶・巻頭言リスク..................................... 安齊

了（ 2 ）

レビューの宿主感染機構の解明..................................... 角田 勤（ 3 ）鶏伝染性喉頭気管炎（ILT）の現状と近年の研究傾向について.................................. 貫 井 涼 平（ 8 ）おしらせ
研修者・見学者受入状況 ..................（13）2024 年度定時評議員会開催 ............（14）日生研たより 70（3），2024

2（38）

リスク
安齊

了

機能性表示食品による健康被害が大きな問題となっています。この原稿を書いている時点では「製薬会社が製造した機能性表示食品の一部製品を摂取した複数の人に死亡例や入院例を含む腎炎が認められ、原材料である紅麴の製造過程で腎炎をもたらす物質が混入もしくは生合成されたことが疑われている」と報道されています。真の原因は未だ不明ではあるものの、疫学的な観点からは特定の製品ロットと腎炎との間には因果関係がある様です。
消費者庁の HP によると、機能性表示食品の安全性は「安全性の評価」「衛生管理体制の整備」「連絡先の表示」により確保されているとのことです。しかしながら、国は事業者から提出された書類の体裁や表示を確認するだけであり、製品自体の検査は行っていません。この事件を受けて、国も機能性表示
食品の安全性について再検討を行うとのことですが、時すでに遅し、被害に遭った方やそのご親族にとっては命や健康が奪われた許し難い事件になってしまいました。製薬会社にとっても、企業としての信頼性が大きく傷つき、莫大な額の補償も待ち受けていることでしょう。私を含めた多くの消費者は、
この “錠剤の形をしたサプリメント” について、効果はともかく安全性は保障されているものと思っていたはずです。
リスクという言葉は、“将来のいずれかの時において何か悪い事象が起こる可能性” という意味で、ビジネスをはじめ一般的に広く使われています。将来起こる可能性ですから、そのことへの対応は予防的であり、想定される事象の大きさに加えて起こる確率を含めて考えることになります。難しいのは、“一旦起これば重大なことになるかもしれないが起こる可能性は極めて低いと考えるリスク” への対応です。滅多に起こらないであろうリスクに手間や資金をかけることが人間の心理として難しいのは、残念ながら東京電力福島第一原子力発電所の津波対策がその例でしょう。今回の紅麴問題もまた、そのひ
とつの例になってしまうのかもしれません。しかしながら、人の命や健康にかかわることは一旦起こればその後どれだけの対応をしても取り返しはつきません、事後に責任を果たすことの出来ないリスクは確実に存在しています。重大なリスクは発生頻度の高低に係わらず見逃さないようにし、起こるはずな
いと思い込むことなく、その対応策を講じることが、リスク管理上きわめて重要と思われます。それが社会全体に及ぶものであれば、なおさらです。
一方で、“リスクを取る” ことが必要な場面にも私たちはしばしば遭遇します。特に研究や開発の仕事をしている人にとって、リスクを取るという考え方は避けて通れないのではないでしょうか。大きな目標に向かおうとする時、その過程には大小様々の何かしら不確定要素が存在するものです。それは無駄や遠回りだけではなく、自分自身や組織に悪い事をもたらす可能性なのかも知れません。それでもリスクを覚悟して思い切って挑むことは、時に必要です。それが自分だけで解決可能であれば、なおさらです。そうすることで、想像した以上の成果がもたらされ、成功の大きな喜びにも繫がるでしょう。もし上手く行かなかったとしても、そこからの学びや経験が次のステップへと導いてくれるはずです。
リスクを取って挑戦するためには、リスクへの備えが大切です。想定されるリスクを前もって十分に分析し、特に重大なあるいは取り返しのつかないリスクはそれを回避し、予防や対応が考えられるリス
クには予めその策を講じておき、その上で何かしらのリスクを敢えて取って果敢に挑戦する、後で悔いない為には欠かせない考え方だと、私は思っています。
（評議員）

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レビュー

Rhodococcus equi の宿主感染機構の解明
かく だ つとむ

角田 勤 （北里大学獣医学部獣医衛生学研究室）
環境性のロドコッカス属の菌種（7〜10 Mb）とはじめに比較して、R. equi のゲノムサイズ（5 Mb）はかな

Rhodococcus equi は、マクロファージ内に寄生す

り小さいものの、転写制御関連の遺伝子や分泌蛋白

る細胞内寄生菌である。異物を排除する機能を有すをコードする遺伝子の割合が高く、そのことは、環るマクロファージにおいて、菌が直面する環境は極境から宿主体内といった多様な環境への適応を反映

めて過酷であると言える。土壌細菌である R. equi

するものと考えられている［2］。R. equi は、炭水がこの過酷な環境を克服し病原性細菌となったのは、 化物輸送系を有しておらず、炭素源として糖を利用
病原性プラスミドの獲得というイベントを抜きにしすることができない。遺伝子と表現型の解析により、て語ることはできない。しかし、単にそのことが R.

本菌の主要な炭素源は有機酸や脂肪酸であることがequi を厄介な病原体たらしめているのではないこ

示されている。特に、R. equi のゲノムには、リパーとが少しずつ明らかになってきている。本稿では、

ゼ、脂肪酸β酸化酵素、アシル – CoA 合成酵素、

R. equi の菌としての特性から始めて、病原性プラ

エノイル – CoA ヒドラターゼ/イソメラーゼをコー

スミドの疫学、感染のメカニズム等において現在まドする遺伝子がそれぞれ 20〜50 個見られることか

でに得られている知見を紹介し、疾病制御のためにら、主に脂質代謝を通してエネルギー産生や有機化

何をすべきかを考えていきたい。

合物の合成を行っているものと考えられる。R. equi
は、環境性ロドコッカス属細菌が保有していない硝酸還元酵素遺伝子（narGHIJ）や一酸化窒素還元酵

Rhodococcus equi という細菌素遺伝子を保有しており、嫌気呼吸の一つである硝

ロドコッカス属は、アクチノマイセス目ノカルジ

酸呼吸を行う可能性が示唆されているが、嫌気的環

ア科に属するグラム陽性、非運動性の細菌で、土壌境下での R. equi の増殖は実験的に証明されていなや河川、海洋などの様々な環境に広く分布している。 い。
ロドコッカス属の細菌は、複雑な分子を代謝する能力を有することで知られており、医薬品として利用されるステロイドの前駆体やアクリルアミドなど有R. equi による感染症

用な物質を産生し、また、環境汚染により人間の健馬の R. equi 感染の最も一般的な臨床症状は、膿

康へのリスクが懸念される多環芳香族炭化水素や瘍を伴う化膿性肉芽腫性気管支肺炎である。通常、フェノール類などの生物分解、化石燃料の生物脱硫、 ほとんどの子馬は生後 16 週目までに症状を示し、重金属や色素の生物吸着を通したバイオ環境浄化に

生後 6 ヶ月以上の馬で発症することは稀である。化

利用可能な菌種を多数含んでいる［1］。ロドコッカ

膿性肉芽腫性腸炎、腸間膜または結腸リンパ節の化

ス属は、医学・獣医学上重要な病原性細菌を含むマ

膿性肉芽腫性リンパ節炎、滑膜炎、骨髄炎などの肺イコバクテリウム属やコリネバクテリウム属、ノカ炎以外の疾患は、肺炎と同時にまたはそれとは関係

ルジア属に近縁で、これまでに 60 種を越える菌種なく発生することがある。空気中に浮遊する菌によが報告されているが、病原性を示すのは動物の病原る経気道感染が主要な感染経路であるとされている体である R. equi と植物の病原体である R. fasciansが、病変が消化管に限局した症例もあることや、のみである。従って、R. equi は同属の細菌種の中

3 ヶ月齢までの無症候の子馬でも糞便 1 グラム当たではかなり「異端な」菌種であるといえる。

り 103〜105 CFU もの菌を排出することから、経口

日生研たより 70（3），20244（40）感染も通常起きていると考えられる（図 1）。含ま

原性関連蛋白（V ir ulence – associated protein ;れる菌数から類推すれば、糞便中の菌は宿主体内でVap）をコードする遺伝子群があり、これらの遺伝

増殖しているものと考えられるが、R. equi が偏性子を含む領域の GC 含量は、プラスミドの他の領域

好気性の細菌であるとすれば、腸管内腔の低酸素環

あるいは染色体の GC 含量と明らかに異なっており、境で増殖するとは考え難いことから、消化管におけ

pathogenicity island（PAI）として水平伝播したもる感染様式にはまだ不明な点が残されている。

のと思われる［5］。PAI に含まれる遺伝子産物の中馬以外の動物では、古くから豚の下顎リンパ節ので、VapA と呼ばれる蛋白は病原性の発現において肉芽腫病変部から R. equi が分離されることが知ら最も重要であり、vapA の単独欠損でプラスミドのれている。山羊では、肝臓、肺、脾臓、腸間膜リン脱落と同程度の弱毒化が生じる［6］。PAI 上には、

パ節等に播種性の膿瘍が形成されることが報告されvapA と類似した複数のパラログがコードされておている。筆者らは、牛においてもリンパ節炎に加えり、それらの遺伝子は vap ファミリーと総称される。

て、山羊のように多臓器において膿瘍形成が見られしかし、vapA 以外のパラログを欠損させても病原た症例を報告した［3］。反芻獣での R. equi 感染症

性に明確な影響は見られない［7］。一方、豚・猪のは、疾病の発生が散発的かつ限定的であることから、 病変部から分離される菌株は、pVAPA とは異なる
病態の増悪化には宿主の免疫状態の低下などの何ら

Vap ファミリーをコードするプラスミド（pVAPB）

かの素因が関与するものと考えられる。その他の動を保有しており、牛や山羊の分離株はそのいずれと物では、犬、猫、ラクダ、リャマ、アルパカ等で感も異なる Vap ファミリーをコードする線状プラス染が見られる。人では HIV 感染などの免疫不全時

ミド（pVAPN）を保有する［8, 9］。興味深いことに、に感染が生じ、化膿性肺炎や様々な臓器での膿瘍形

これら 3 種類の病原性プラスミドを保有する株は宿成、菌血症などの症例が報告されている。

主域において疫学的に「棲み分け」が見られ（図 2）、それぞれの病原性プラスミドの相違は宿主への適応を反映しているものと考えられている。しかし、病原性プラスミド獲得による宿主への適応

pVAPA 保有株と pVAPB 保有株を、馬マクロファー

R. equi 感染症に罹患した馬由来の分離株は、接ジまたは豚マクロファージに感染させた実験では、

合伝達能を持つ病原性プラスミド（pVAPA）を保有

両者ともどちらの細胞でも増殖し、増殖性に差が見しており、このプラスミドを失うと菌の宿主におけられなかった。また、接合伝達を利用して、病原性

る病原性はほぼ消失する［4］。一般的な環境の土壌

プラスミドを相互に交換した株でも同様の結果でから分離される R. equi は、大抵病原性プラスミド

あった［10］。よって、病原性プラスミドによる宿を保有していないが、R. equi 感染症が常在する牧主指向性もプラスミドと染色体の共進化による宿主

場の土壌からは病原性プラスミドを保有する株が分適応も実験的にはまだ証明されていない。人はこれ離され、高率に分離される牧場ほど疾病発生の頻度

らの動物とは異なり、これまでに臨床分離株から全が高い傾向が見られる。病原性プラスミド上には病ての病原性プラスミドが検出されており、免疫力が

図1

R. equi 感染症の感染源と感染経路

図2

病原性プラスミドの種類と宿主域

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図3

5（41）

R. equi のマクロファージ内生存機構低下した易感染状態が反映されているものと考えられ る。同 様 の 状 況 が、犬 で も 報 告 さ れ て お り、
pVAPA と pVAPN 保有株が分離されている。

Vap 蛋白の機能
R. equi は、近 縁 の Mycobacterium tuberculosis と同様にマクロファージ内で増殖可能な細胞内寄生菌である。vapA を欠損させると、この能力は失われ、プラスミド脱落株と同じようにファゴリソソーム内で速やかに殺菌される。マクロファージ内での R.
equi の増殖機構は以下のように説明される（図 3）。
R. equi を 貪 食 し た マ ク ロ フ ァージ に お い て、R.
equi を含有する小胞（RCV）は速やかに vATPaseを獲得しながら内腔の pH を低下させる。RCV は
その後リソソームと融合し、内腔の pH のさらなる

図 4 R. equi のマクロファージ内増殖における VapAの作用
緑色蛍光タンパクを発現する R. equi をマクロファー
ジ に 感 染 さ せ、24 時 間 後 に 観 察 し た。vapA 欠 損 株（TKR255）やプラスミド脱落株（ATCC33701P︲）はマクロファージ内で増殖できないが、培養時に GST 融合 VapA を培養上清中に添加すると増殖できるようになる。一方、大腸菌は GST︲VapA を添加しても増殖できない。

低下が生じる。しかし、この段階で病原性プラスミ

ロドコッカス属の他の種でも、VapA の存在下で細ドを保有する R. equi は VapA を産生し、分泌され胞内増殖が調べられたが、増殖性が見られたのは R.

た VapA は RCV 膜に移行して、まだ明らかにはさequi と最も近縁の R. defluvii でのみであったと報告れていないメカニズムでプロトンを透過・排出する

さ れ て い る［11］。こ れ ら の こ と は、R. equi はことで内腔の pH を中性域まで回復させる。RCVVapA を分泌し、その作用で食胞における殺菌機構

はその後さらにオートファゴソームやリソソームとを無効化するが、それでも菌が増殖するのには依然融合し、獲得された物質を利用しながら小胞内の R.

過酷な環境であり、さらなる適応が必要とされるこ

equi は増殖する［11］。

とを示している。R. equi の宿主細胞内での増殖に

筆者らは、大腸菌組み換え VapA を細胞培養液に必要とされる VapA 以外の遺伝子を見出すために、加えると、vapA 欠損株がマクロファージ内で増殖

私たちは PCR により同定可能なタグを持つトランすることを見出した［12］。さらに、病原性プラス

スポゾン変異株ライブラリーを作製し、ネガティブ

ミドを脱落させた株においても同様に細胞内増殖がスクリーニングによりマウスにおいて感染能の低下

VapA の添加によりレスキューされた。VapA の作用した株を選抜することで、感染に関与する遺伝子のにより食胞内の抗菌性の環境が失われた可能性が考同定を行った［13］。その結果、物質輸送、脂質やえられたため、大腸菌を用いて実験を行ったところ、 アミノ酸・有機酸の代謝、DNA 修復、鉄の獲得な大腸菌の細胞内増殖は観察されなかった（図 4）。

どに関与する遺伝子が R. equi の宿主感染時に必要

6（42）

図5

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VapA の温度と pH による制御とそのメカニズムとされる遺伝子として同定されたが、動物に感染す

要 以 上 に VapA を 産 生 し な い こ と で 感 染 マ ク ロ

る能力において R. equi と近縁の他の種とを分かつ

ファージの生存性を高め、液性免疫や好中球からの要因を同定するには至らなかった。また、トランス

隠れ家としてマクロファージを利用しているものとポゾンの挿入部位に偏りが見られたことから、まだ

考 え ら れ る。筆 者 ら は、VapA の 発 現 が PAI 内 に十分な規模のスクリーニングが行えていないことがコードされる VirR と VirS により制御されているこ予想された。私たちは現在、トランスポゾン挿入部とを明らかにした［14, 15］。VirR と VirS は共に転位 の 偏 り が 小 さ く、よ り ハ イ ス ル ープ ット な in

写制御因子であるが、VirR は VirS の発現量を調節

vivo スクリーニング法を開発し、感染を成立させるすることで VapA の発現を間接的に制御する（図 5）。

遺伝子の同定を目的とした研究を継続している。そVirR は LysR 型の転写制御因子（LTTR）で、このの研究成果を基に、マクロファージ内での増殖が適ファミリーの転写制御因子は転写を活性化するため度に減少した変異株を作出することにより、弱毒生にインデューサーとの結合を必要とする。しかし、ワクチン開発へと繫げていけるものと考えている。

インデューサーの産生に関与する遺伝子は病原性プ
ラスミド上にはコードされておらず、おそらく染色体にある遺伝子がそれに関与するものと思われる。

VapA の発現制御機構

したがって、VapA の合理的な発現調節は染色体とVapA の発現は、菌を取り巻く環境の温度と pHの協調により可能となったと言える。このことは、により調節される。最大の発現は、37〜38℃、pH 6

病原性細菌の進化を考える上で興味深い例を提示し〜6.5 で生じ、32℃ 以下では発現は見られない。こている。前述した感染性に影響を与える遺伝子の網のことは、VapA の発現は、菌が環境から宿主体内羅的な解析研究から、インデューサーの産生に関与に侵入し、マクロファージに取り込まれて食胞のする遺伝子が同定されることが期待される。他の細pH が低下した際に最大となるよう調節されている

菌感染症同様、薬剤耐性化の問題は R. equi 感染症ということを示している。また、in vitro の実験で、においても懸念されており、抗生物質に代わる R.

VapA はマクロファージに対して細胞傷害活性を示

equi 治療薬の開発が望まれている。他の細菌では、すことが観察されている。R. equi は pH の上昇につLTTR のインデューサーのアナログがアンタゴスト

れて VapA の発現量を低下させる応答を起こし、必として作用する例が報告されており、VirR の活性日生研たより 70（3）
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7（43）

化機構とそのインデューサーの解明は、アンタゴス

5. Takai, S., et al., 2000. DNA sequence and comparison

トによる転写活性化阻害を作用原理とした抗 R.

of virulence plasmids from Rhodococcus equi ATCC

equi 病 原 性 薬 の 開 発 に 資 す る も の と 期 待 さ れ る

33701 and 103. Infect. Immun. 68（12）: 6840 – 6847.

［16］。

6. Jain, S., et al., 2003. Deletion of vapA encoding Virulence Associated Protein A attenuates the intracellular actinomycete Rhodococcus equi. Mol. Microbiol.

終わりに50（1）: 115 – 128.

これまでの研究で、R. equi の病原性発現メカニ

7. Coulson, G. B., et al., 2010. Characterization of the

ズムは次第に解明されつつある。しかし、依然としrole of the pathogenicity island and vapG in the viru-て R. equi 感染症のコントールは実現されていない。

lence of the intracellular actinomycete pathogen Rho-

ワクチン開発の数々の試みが報告されているが、実dococcus equi. Infect. Immun. 78（8）: 3323 – 3334.

用的なレベルで効果のあるワクチンはまだない。そ8. Takai, S., et al., 1996. Identiﬁcation of intermediately

れには、R. equi 感染症が免疫能の未発達な子馬をvirulent Rhodococcus equi isolates from pigs. J. Clin.

防御する必要があることと R. equi が液性免疫の作

Microbiol. 34（4）: 1034 – 1037.

用し難い細胞内に寄生する菌であることが大きく関9. Valero – Rello, A., et al., 2015. An Invertron – Like Lin-係している。将来、それらの障壁を乗り越えたワク

ear Plasmid Mediates Intracellular Survival and Viru-

チンの開発が期待されるが、それ以外にも私達が直lence in Bovine Isolates of Rhodococcus equi. Infect.

面する課題は、感染源となる環境中の菌の数を低減

Immun. 83（7）: 2725 – 2737.

することや、効果があるとされる高度免疫馬血漿の10. Willingham – Lane, J. M., et al., 2016. Influence of

作用機序の解明、感染の早期発見のための診断法とPlasmid Type on the Replication of Rhodococcus equi

有効な治療法の開発、薬剤耐性化に対する備え等多in Host Macrophages. mSphere. 1（5）: e00186 – 16.

岐にわたる。筆者らの研究室においても現在、それ11. Haubenthal, T., et al., 2023. Speciﬁc preadaptations of

らに対する基礎研究（ワクチン・診断法の開発、バ

Rhodococcus equi cooperate with its Virulence – asso-

クテリオファージの予防・治療への応用等）が進行

ciated protein A during macrophage infection. Mol.

中であり、近い将来その成果をご紹介できればと考Microbiol. 119（3）: 285 – 301.

えている。

12. Sangkanjanavanich, N., et al., 2017. Rescue of an intracellular avirulent Rhodococcus equi replication defect by the extracellular addition of virulence – associ-

引用文献

ated protein A. J. Vet. Med. Sci. 79（8）: 1323 – 1326.

1. Nazari, M. T., et al., 2022. Rhodococcus : A promising

13. Sangkanjanavanich, N., et al., 2021. Identification of

genus of actinomycetes for the bioremediation of or-

genes required for the fitness of Rhodococcus equiganic and inorganic contaminants. J. Environ. Man-

during the infection of mice via signature – tagged

age. 323 : 116220.

transposon mutagenesis. J. Vet. Med. Sci. 83

2. Letek, M., et al., 2010. The genome of a pathogenic
rhodococcus : cooptive virulence underpinned by key（8）: 1182 – 1190.
14. Kakuda, T., et al., 2014. VirS, an OmpR/PhoB subfam-

gene acquisitions. PLoS Genet. 6（9）: e1001145.

ily response regulator, is required for activation of

3. Nakagawa, R., et al., 2018. A case report on dissemi-

vapA gene expression in Rhodococcus equi. BMC Mi-

nated Rhodococcus equi infection in a Japanese black
heifer. J. Vet. Med. Sci. 80（5）: 819 – 822.

crobiol. 14 : 243.
15. Kakuda, T., et al., 2015. Transcriptional regulation by

4. Takai, S., et al., 1991. Association between a large

VirR and VirS of members of the Rhodococcus equiplasmid and 15 – to 17 – kilodalton antigens in virulent

virulence – associated protein multigene family. Mi-

Rhodococcus equi. Infect. Immun. 59（11）: 4056 –crobiol. Immunol. 59（8）: 495 – 499.

4060.

16. Ilangovan, A., et al., 2013. Structural basis for native日生研たより 70（3），20248（44）agonist and synthetic inhibitor recognition by thePqsR（MvfR）. PLoS Pathog. 9（7）: e1003508.

Pseudomonas aeruginosa quorum sensing regulator

レビュー

鶏伝染性喉頭気管炎（ILT）の現状と近年の研究傾向について
ぬく い りょう へい

貫井 涼 平（図 2）の排泄が見られる。また滲出物が気管に詰はじめにまることで窒息死する場合もある。剖検所見では気鶏伝染性喉頭気管炎（Infectious Laryngotracheitis,

管粘膜の顕著な充出血、水腫性肥厚が認められ、病ILT）は ヘ ル ペ ス ウ イ ル ス 科 に 属 す る Gallid

態の進行とともに気管内に黄褐色の粘液が貯留しalphaherpesvirus 1（GaHV – 1, 通称「伝染性喉頭気

チーズ様の凝固物（図 3）となる。病理組織学的検

管炎ウイルス（ILTV）」の感染によって引き起こさ

査では喉頭や気管の粘膜上皮細胞に核内封入体や合れる鶏の急性呼吸器感染症である。鶏の病因となる胞体の形成がみられる（図 4）。ILT は疫学調査やヘルペスウイルスには本ウイルスの他にマレック病

臨床検査に加え、発育鶏卵や培養細胞によるウイル（Marekʼs Disease, MD）を引き起こすマレック病ウ

ス分離又は病理組織学的検査によって診断される。

イルス（MDV, GaHV – 2）もあるが、ILTV は MDV

また、ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）による ILTVに比べて細胞随伴性が弱く、細胞外に成熟粒子が多に特異的な遺伝子の検出や PCR 産物の制限酵素断く産生される特徴がある。本病は家畜伝染病予防法

片長多型（ R e s t r i c t i o n F r a g m e n t L e n g t h

において監視伝染病（届出伝染病）に指定されておPolymorphism, RFLP）による野外株とワクチン由り、近年の発生件数をみると集計開始当初に比べ大来株の識別も行われている［14］。しかしながらきく減少している（図 1）［11］。しかしながら、発ILTV の遺伝子は 70 以上あり、どの遺伝子を標的と生がなくなったわけではなく、現在においても西日して識別するのが適当なのか現在も議論されており、本を中心に散発していることが分かる（表 1）。発複数の遺伝子領域に対して PCR が実施されている

生件数・羽数が急速に減少した要因として、1981のが実情である［8］。

年に実用化された接種反応と病原性を軽減した改良型の ILT 弱毒生ワクチンの普及と飼養衛生管理の向上による成果が大きいと考えられている［10, 13］。 ILT ワクチンの現状と課題
本稿では、ILT とワクチンの現状について、ワクチ

我が国で生ワクチンの使用が開始された 1970 年

ンのメリット及びデメリット並びに海外のワクチン

代は、ワクチンの使用は免疫を賦与する一方で、投事情を交えて解説する。

与鶏に結膜炎や喉頭気管炎が見られるなどワクチン
株に病原性がかなり残っていることが問題視されていた。そのため、1979 年に鶏病研究会から発表さ

ILT の症状と診断れた「伝染性喉頭気管炎の防疫指針」において、ワILT の 症 状 は 特 有 の「キ ャッ」と い う 奇 声、くク チ ン の使 用範 囲 や使 用上 の 注 意 が提 言 さ れた

しゃみ、重度の開口呼吸などであり、ときに血痰

［12］。現在、我が国で使用されている ILT 弱毒生

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9（45）

年
図1

我が国における ILT の発生羽数

表 1 2019～2023 年の ILT 発生府県と発生戸数及び羽数

おいて CEO – ILT 弱毒生ワクチンは認可されていな
い。
TCO – ILT 弱毒生ワクチンにおける最大の課題は投与方法である。多くの鶏用生ワクチンは飲水ある
いは噴霧投与など省力的な投与方法が承認されているが、当該ワクチンでは個体毎の保定が必要な点眼及び点鼻投与法のみが用法となっている。特に大型化が進む近代養鶏においては点眼又は点鼻投与によるワクチン接種は作業者にかかる負担が非常に大きく、生産性のコストに大きく影響する。さらに、従来から ILT による被害の多くは採卵鶏であったが、近年は肉用鶏における発生も懸念されている。平飼
い環境で飼育されている肉用鶏を対象にワクチンを点眼又は点鼻投与することは実質不可能であるため、実用的な投与方法の確立が強く求められている。

近年の国内における発生事例
近年における ILT は散発的な発生に止まっているものの、一度発生すると斃死率の上昇等による被ワ ク チ ン は 培 養 細 胞 馴 化 由 来（tissue – culture –害のほか農場の清浄化に時間がかかるなど農場にorigin, TCO）であり、その病原性の減弱から初期とって大きな損害をもたらすことから、現在でも対に使用されていたワクチンと比較して安全なワクチ

策を怠ってはならない鶏病の 1 つである。近年の発ンと考えられている。海外では TCO – ILT 弱毒生ワ

生例として岩手県での ILT 発症事例（岩手県県北クチンの他に鶏胚馴化由来（chick – embryo – origin,

家畜保健衛生所より提供）を紹介する。

CEO）ILT 弱毒生ワクチンが市販されており、飲水

2022 年 9 月、約 23 万羽を飼養する採卵鶏の育成やスプレーによる投与が可能であるなどのメリット

農場において、12 棟中 1 棟の鶏群（88 日齢）で開があるため ILT 流行地で使用されている。しかし口呼吸などの呼吸器症状の発現とともに死亡羽数がながら CEO – ILT 弱毒生ワクチンには病原性復帰の増加したため、同日、管轄の家畜保健衛生所により可能性を疑う事例が報告されており［6］、我が国に病性鑑定が実施された。当該農場では通常 ILT 弱日生研たより 70（3），2024

10（46）

肉用鶏、同年 12 月に 47 日齢肉用鶏及び 99 日齢採卵鶏）がみられた。聞き取り調査により、12 月に発生した採卵鶏以外の農場はいずれも ILT 弱毒生
ワクチンは未接種であることが判明した。発症鶏の病性鑑定により、多くの事例に共通して気管内に血痰及び粘液の貯留（図 2）やチーズ様物の貯留（図3）などの肉眼所見が認められた。病理組織学的検
査では、喉頭、気管、肺に核内封入体を伴う粘膜上皮細胞の合胞体が認められた（図 4）。ウイルス学的検査では、発症鶏及び死亡鶏の全羽の気管から
図2

ILTV 感染鶏にみられた気管内の血痰

ILTV 遺伝子が検出され、数羽から ILTV が分離された。分離された ILTV に対して ICP4 遺伝子に特異的なプライマーを用いた PCR を行い、得られた増幅 DNA について 3 種類の制限酵素 HaeⅢ、MspⅠ、HhaⅠによる RFLP 解析行った。その結果、分離ウ
イルスは市販ワクチン株と同様の切断パターンを示し、ワクチン株に近縁な野外株であると推測された。
最初に発生した採卵育成農場では一部の鶏群でワクチンが未接種であったことから、今回の発生要因としては、何らかの原因で侵入したウイルスが免疫を持たない鶏群の間で増幅し発症に至ったものと考え
ら れ た。ま た、4 農 場 か ら 分 離 さ れ た ILTV の

図3ILTV 感染鶏にみられた気管内のチーズ様貯留物

RFLP は全て同じ切断パターンを示したことから、これらは同一起源のウイルスが野生動物等により伝播したものと推察された。今回の事例では、ILT 弱
毒生ワクチンで免疫されていない鶏群で継続的な発生がみられたことから、本病の予防には適切なワクチン接種が重要であることが改めて認識された。

近年の ILT 研究の傾向
世界的な近年の ILT に対する研究は、組換え（ベクター）ワクチンに関する報告が多い［3］。その理由としてやはり ILT ワクチンの投与方法にあると考えられる。肉用鶏における ILT の発生は世界的
図 4 ILTV 感染鶏にみられた気管粘膜の核内封入体及び合胞体形成にも問題であり［2, 9］、その対策として既存ワクチ

毒生ワクチンを使用していたが、発症鶏群は未接種

内接種（In ovo）若しくは初生ひなへの皮下接種であった。緊急的に当該鶏群に ILT 弱毒ワクチン（s.c.）が可能なベクターワクチンの研究及び開発がを点眼接種した結果、発生から約 2 週間後に本病は盛んに行われている［5］。

ンの点眼投与による予防は現実的ではないため、卵沈静化した。その後、当該農場から 10 km 圏内のILTV 遺伝子を組込むベクターウイルスとして鶏周辺農場においても 5 例の発生（同年 10 月に 55 日

痘ウイルス（Fowl Poxvirus, FPV）又は七面鳥ヘル

齢肉用鶏、同年 11 月に 445 日齢採卵鶏及び 41 日齢

ペスウイルス（turkey herpesvirus, HVT）が使用さ日生研たより 70（3），2024

11（47）れている。ILTV のゲノムは unique long 領域（UL）

各々のワクチンのデメリットを補うため、ワクチと unique short 領域（US）という逆向き点対称なンの併用に関する研究も行われている。CEO – ILT

配列を有する［7］。UL32 遺伝子はウイルス膜関連

弱 毒 生 ワ ク チ ン は 国 内 で 用 い ら れ て い な い が、

タ ン パ ク 質 を コ ード し て い る 領 域 で あ り、

TCO – ILT 弱毒生ワクチンと比較して免疫原性が高glycoprotein（糖 タ ン パ ク 質）で あ る gB、gD、gIいという特徴がある。SPF の初生ひなに rHVT/ILT

はそれぞれ UL27、US6、US7 遺伝子によりコード

ワクチンを皮下投与し、その後 6 週齢で CEO – ILTされている。これらの遺伝子がベクターウイルスに

弱毒生ワクチンを接種すると、生ワクチンウイルス

挿入された組換えベクターワクチンが、現在海外での伝播が抑制され、rHVT/ILT ワクチンを単独で接は実用化されている。

種した場合よりも、臨床症状及びウイルス排出に対第 1 世代のベクターワクチンは rFPV/ILT（ILTVする防御効果が向上した［4］。また、肉用鶏の初生

遺伝子を挿入した遺伝子組換え FPV）ワクチンでひなに rFPV/ILT ワクチンと rHVT/ILT ワクチンをあり、第 2 世代の rHVT/ILT（ILTV 遺伝子を挿入

皮下接種したところ、CEO – ILT 弱毒生ワクチンとした遺伝子組換え HVT）ワクチンは 2000 年代初頭

同様に減耗率や増体などの生産成績が向上し、攻撃に導入された。SPF 鶏に rHVT/ILT ワクチンを卵

試験時の臨床症状、気管病変、及びウイルス増殖の内接種又は初生時に皮下接種したところ、4、7 及抑制が認められた［3］。

び 10 週齢において攻撃後の臨床症状発現に対するベクターワクチンによる免疫の持続性については、防御効果が認められた。また、rHVT/ILT ワクチン

SPF 鶏における rHVT/ILT ワクチンの初生皮下接を卵内接種した肉用鶏においても、21 日齢時攻撃種で 60 週齢（420 日齢）まで抗体の産生が認めらで 67％、35 日齢時攻撃で 87％ の防御効果が認められている。rHVT/ILT ワクチンを採卵鶏の初生ひな

れ、ベクターワクチンであっても防御能を賦与できに皮下接種した場合においても、産卵ピークを過ぎることが確認された。rHVT/ILT ワクチンは、臨床た 35 週齢時での攻撃に対して防御効果が認められ症状の軽減、体重増加の維持、ウイルス排出の軽減た。さらに、rHVT/ILT ワクチン初生接種後の 4 週において、rFPV/ILT ワクチンよりも有効であるこ

齢で TCO – ILT 弱毒生ワクチンを接種した場合、防とが示されており、これは rFPV が種鶏からの移行

御効果は 74 週齢まで延長したことが報告されてい抗体の影響を受けやすいことが原因だと考えられて

る［3］。

いる［3］
。

最近、ベクターワクチンと国内でも使用されてい一方、rHVT/ILT ワクチンにはデメリットも存在す

る TCO – ILT 弱毒生ワクチンの併用による防御効果

る。ILT 弱毒生ワクチンは投与後まもなく細胞性免に関する論文が発表された［1］。初生時の rHVT –疫を惹起するが、rHVT/ILT ワクチンによる防御能ND – ILT（ILTV 遺伝子と NDV（ニューカッスル病の賦与は生ワクチンと比較して数週間遅れることがウイルス）遺伝子を挿入した遺伝子組換え HVT）

報告されている。この場合、前述の岩手県の発生事ワクチンの接種に続き、10 週齢で TCO – ILT 弱毒

例のような ILT 発生後の緊急的なワクチン投与の生ワクチンを点眼接種し、rHVT – ND – ILT ワクチ

実 施 は 困 難 に な る。ま た、rHVT/ILT ワ ク チ ン はン及び TCO – ILT 弱毒生ワクチンをそれぞれ単独でCEO – ILT 弱毒生ワクチンと比較して攻撃ウイルス

接種した群とともに 15 週齢で強毒 ILTV による攻の排出を減少させるが、気管内におけるウイルス複撃 試 験 を 行 っ た。攻 撃 後 の 斃 死 の 阻 止 は rHVT –製を抑制できなかったとの報告もある。肉用鶏を用

ND – ILT ワクチンと TCO – ILT 弱毒生ワクチンの併いた研究では、rHVT/ILT ワクチン接種により攻撃用群でのみ認められ、臨床症状及び気管におけるウILTV の複製は減少したものの、ウイルスを排出しイルスの増殖は、併用群と TCO – ILT 弱毒生ワクチ

非免疫の同居鶏に感染させていたことが実証されてン単独接種群で有意に減少した。攻撃ウイルスの増いる。このことから、流行地域では rHVT/ILT ワク

殖を評価するため、攻撃後の各群に健康鶏を導入しチンを接種された鶏群が不顕性感染となりウイルス

ウイルス伝播の有無を調べたところ、rHVT – ND –を環境中に排出し、それが野外ウイルスの循環に寄ILT ワクチン単独接種群及び TCO – ILT 弱毒生ワク

与している可能性が示唆された［3］。

チン単独接種群の導入鶏では感染が認められたのに日生研たより 70（3），2024

12（48）

対し、両ワクチン併用群の導入鶏では感染が確認さ

2. Crespo, R., Woolcock, P. R., Chin, R. P., Shivaprasad,

れなかった。これらの結果から、rHVT – ND – ILT

H. L., and García, M. 2007. Comparison of Diagnos-

ワクチン及び TCO – ILT 弱毒生ワクチンを併用する

tics Techniques in an Outbreak of Infectious Laryn-

ことにより ILTV に対する防御効果が増強され、野gotracheitis from Meat Chickens. Avian Dis. 51

外ウイルスの排出を阻止できる可能性が示された。

（4）: 858 – 862.
3. Hein, R., Koopman, R., García, M., Armour, N., Dunn,
J. R., Barbosa, T., and Martinez, A. 2021. Review of

おわりに
我が国では「遺伝子組換え生物等の使用等の規制

Poultry Recombinant Vector Vaccines. Avian Dis. 65（3）: 438 – 452.

による生物の多様性の確保に関する法律（カルタヘ

4. Maekawa, D., Riblet, S. M., Newman, L., Koopman, R.,ナ法）」により遺伝子組換え生物や遺伝子組換え技

Barbosa, T., and García, M. 2019. Evaluation of vacci-術を用いたワクチンの製造及び使用は厳密な管理がnation against infectious laryngotracheitis（ILT）with

必要であるため、当該ワクチンの一般化へのハード

recombinant herpesvirus of turkey（rHVT – LT）and

ルは未だ高い。また、ベクターワクチンの使用対象

chicken embryo origin（CEO）vaccines applied alone

は最終的に畜産製品となることから、生産者はもとor in combination. Avian Pathol. 48（6）: 573 – 581.

より販売業者や消費者の理解を得ることも必要であ

5. Maekawa, D., Riblet, S. M., Whang, P., Alvarado, I.,

る。さらに、ワクチンの開発費や製造コストがかかand García, M. 2021. A Cell Line Adapted Infectious

るような場合はワクチン価格が高騰し、かえって現

Laryngotracheitis Virus Strain（BΔORFC）for in ovo

場で採用しにくくなる可能性も考えられる。このよand Hatchery Spray Vaccination Alone or in Combina-

うな問題が克服され、ベクターワクチンが適正に使tion with a Recombinant HVT – LT Vaccine. Avian

用可能となれば ILT ワクチンの課題である「接種Dis. 65（3）: 500 – 507.

労力」及び「肉用鶏での使用」をクリアできるので

6. Oldoni, I., and García, M. 2007. Characterization of in-はないかと考えられる。現在、国内における ILT は

fectious laryngotracheitis virus isolates from the US

TCO – ILT 弱毒生ワクチンの使用等によって抑えらby polymerase chain reaction and restriction frag-

れており、その発生報告は少ない。しかしながら、

ment length polymorphism of multiple genome re-

いつ流行してもおかしくない状況であり、一度発生

gions. Avian Pathol. 36（2）: 167 – 176.

すると被害が甚大となる疾病の一つであることを決して忘れてはならない。

7. Spatz, S. J., Volkening, J. D., Keeler, C. L., Kutish, G. F.,
Riblet, S. M., Boettger, C. M., Clark, K. F., Zsak, L.,
Afonso, C. L., Mundt, E. S., Rock, D. L., and Garcia,
M. 2012. Comparative full genome analysis of four in-

謝辞
ILT 発症事例の写真等資料をご提供いただきました岩手県県北家畜保健衛生所に深く御礼申し上げます。

fectious lar yngotracheitis virus（Gallid herpesvirus – 1）virulent isolates from the United States. Virus
Genes. 44（2）: 273 – 285.
8. Thureen, D. R., and Keeler, C. L., Jr. 2006. Psittacid
Herpesvirus 1 and Infectious Lar yngotracheitis Virus: Comparative Genome Sequence Analysis of Two

引用文献

Avian Alphaherpesviruses. J Virol. 80（16）: 7863 –1. Becerra, R., Maekawa, D., and García, M. 2023. Pro-

7872.

tection Efficacy of Recombinant HVT – ND – LT and9. Vagnozzi, A., Zavala, G., Riblet, S. M., Mundt, A., andthe Live Attenuated Tissue Culture Origin Vaccines

García, M. 2012. Protection induced by commercially

Against Infectious Laryngotracheitis Virus When Ad-

available live – attenuated and recombinant viral vec-

ministered Individually or in Combination. Avian Dis.

tor vaccines against infectious laryngotracheitis virus

67（23）: 145 – 152.

in broiler chickens. Avian Pathol. 41（1）: 21 – 31.

日生研たより 70（3），2024

13（49）

10. 井圡俊郎．2009．伝染性喉頭気管炎とその予防対策

13. 中井正久．1982．新たに開発した ILT ワクチンの性における問題点．鶏病研報 ，45（2）: 65 – 72.
11. 監視伝染病の発生状況、農林水産省消費・安全局動格とその応用．鶏病研報 ，18（増）: 43 – 49.
14. 山﨑憲一，永井寿宗，太田秀幸，河合透，本田隆．

物衛生課

2010．2005〜2008 年に九州 5 県の鶏伝染性喉頭気（https://www.maf f.go.jp/j/syouan/douei/kansi_

管炎（ILT）発症鶏から分離された ILT ウイルスのdensen/kansi_densen.html）

性状．鶏病研報 ，46（2）: 100 – 106.

12. 鶏病研究会．1979．伝染性喉頭気管炎の防疫指針．

（日生研株式会社）

鶏病研報 ，15（3）: 95 – 96.

おしらせ

研修者・見学者受入状況 （2023 年 4 月から 2024 年 3 月）
来所日・期間

所属機関・人数

研修・見学内容

7月7日

JICA 研修員及び同行者

7名

施設見学

9 月 19 日

農研機構・動物衛生研究部門

1名

施設見学

12 月 12 日

KAICO 株式会社

3名

施設見学

12 月 18 日

順天堂大学大学院スポーツ健康科学
研究科

2名

施設見学

1 月 11 日

日本大学生物資源科学部獣医学科

1名

施設見学

1 月 16 日

東京農工大学獣医学科

1名

施設見学

2 月 19 日

日本獣医生命科学大学獣医学科

1名

施設見学

3 月 11 日～15 日

VPcamp（岩手大学共同獣医学科 1 名、岐阜大学共同獣医学科 2 名、宮崎大学農学部獣医学科 2 名）

5名

インターンシップ

2023 年

2024 年

日生研たより 70（3），2024

14（50）

2024 年度定時評議員会開催
当研究所の 2024 年度定時評議員会が、去る 2024 年 6 月 20 日に開催され、2023 年度の事業報告及び決算報告が承認されると共に、次期の評議員、理事及び監事が選任されました。現在の評議員、理事及び監事は下記のとおりです。
1．
評議員
安齊 了

芳賀 猛

重金 堅治

山岨

達也

岡田

信彦

2．
理事・監事
氏

名

役

職

長井

伸也

理事長

経営統括

杉浦

勝明

所長

研究及び検査

土屋

耕太郎

常務理事

経営企画

林

志鋒

常務理事

管理

唯木

誠

監事

朱通

市次郎

監事

日生研たより担当昭和 30 年 9 月 1 日創刊（年 4 回発行）

（通巻 632 号） 令和 6 年 6 月 25 日印刷
発行所
生命の「共生・調和」を理念とし、生命体の豊かな明日と、研究の永続性を願う
気持ちを快いリズムに整え、視覚化したものです。カラーは生命の源、水を表す「青」としています。
表紙題字は故中村稕治博士による揮毫です。

令和 6 年 7 月 1 日発行（第 70 巻第 3 号）

一般財団法人日本生物科学研究所〒 198 – 0024 東京都青梅市新町 9 丁目 2221 番地の 1

TEL：0428（33）1520（経営企画部） FAX：0428（31）6166
URL：https://nibs.or.jp
発行人
編集室
印刷所

土屋耕太郎

委

員／髙井亮輔（委員長）、河島奈悠、伊藤宗磨

事務／経営企画部

株式会社 精案社（無断転載を禁ず）