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THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

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27（ 27 ）岐阜県下および愛知県北部における肺炎球菌の疫学解析 〜2009 年〜
中部耐性菌フォーラムワーキンググループ
山岸由佳・三鴨廣繁・澤村治樹・末松寛之

森田恵理

愛知医科大学病院感染制御部

岐阜赤十字病院検査部微生物検査室

波多野正和

土屋洋子

岐阜県厚生農業協同組合連合会中濃厚生病院

一宮市立市民病院

検査科微生物検査室

臨床検査科細菌検査室

太田浩敏

宮木祐輝

岐阜大学医学部附属病院検査部

小牧市民病院臨床検査科細菌検査室

浅野裕子・石郷潮美

毛利哲夫

大垣市民病院診療検査部

春日井市民病院技術部臨床検査技術室

松原茂規

秋田茂樹

松原耳鼻いんこう科医院

秋田耳鼻咽喉科医院

松川洋子・佐伯浩和

岡田雅子

岐阜県立多治見病院臨床検査科

佐藤外科・小児科

武藤敏弘

佐久間

孝

岐阜市民病院中央検査部

さくまクリニック

寺地眞弓

宮本直哉

ファルコバイオシステムズ飛騨ラボラトリー

宮本ファミリー耳鼻科

川原佑貴

山田幸治

高山赤十字病院検査部

きっずクリニック山田小児科

宮部高典

山岡一清

公立学校共済組合東海中央病院臨床検査科

岐阜医療科学大学保健科学部

寺田浩史

田中香お里・渡邉邦友

岐阜県厚生農業協同組合連合会

岐阜大学生命科学総合研究支援センター

西美濃厚生病院検査科細菌検査室

嫌気性菌研究分野（2011 年 11 月 2 日受付）

28（ 28 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

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肺炎球菌（Streptococcus pneumoniae）は，その高い病原性と薬剤耐性菌が大きな問題となっている。我々は，1999 年から定期的に中部地域における肺炎球菌の疫学解析を行ってきた。今回は，2009 年の疫学解析結果を報告する。

2009 年に岐阜県および愛知県北部の 21 の医療施設において分離された肺炎球菌
308 株を対象とした。自己融解酵素の autolysin を作る遺伝子である lyt-A の存在がPCR（polymerase chain reaction）で確認された肺炎球菌のみを対象とし，pbp 変異に基づいた薬剤耐性分類に加えて，マクロライド耐性遺伝子 ermB 遺伝子，mefA 遺伝子の有無も調査した。血清型の解析は，型別用抗血清を用いた膨化試験により実施した。
肺炎球菌が分離された患者の年齢は平均 23.4±30.1 歳で，15 歳以下の小児が 66%であった。gPSSP（genotype penicillin-susceptible Streptococcus pneumoniae）が 22 株
（7.1%），gPISP（genotype penicillin-intermediate S. pneumoniae）が 131 株（42.5%），

gPRSP（genotype penicillin-resistant S. pneumoniae）が 155 株（50.3%）であった。mefAのみ保有が 80 株（26.0%），ermB のみ保有が 153 株（49.7%），mefA と ermB の両方を保有している株が 47 株（15.3%）であった。経口薬の薬剤感受性は，tebipenem（TBPM）の MIC90 が 0.06 ȝg/mL，faropenem の MIC90 が 0.5 ȝg/mL の順に良好で，特にgPRSP で は TBPM が 最 も 高 い 抗 菌 力 を 示 し て い た。静 注 薬 の 薬 剤 感 受 性 は
panipenem，biapenem の抗菌力が優れていた。キノロン耐性株は 10 株（3.2%）分離され，65 歳以上の高齢者では 5 例（7.9%），小児では 3 例（1.5%）を占めていた。分
，6 型 60 株（19.5%），23 型 44 株
離された肺炎球菌の血清型は，19 型 62 株（20.1%）（14.3%）の順であった。
肺炎球菌に関しては，薬剤感受性をはじめとする継続的な疫学解析が重要であり，
今後は血清型と薬剤耐性の関係などについても調査する必要がある。

肺炎球菌（Streptococcus pneumoniae）は，全年てきた 3〜6）。今回は，岐阜県に加え，愛知県北部

齢層において，呼吸器科領域，耳鼻科領域，髄膜の医療機関も参加した調査を実施したので報告す

炎，敗血症などの全身感染症の原因菌として非常る。

に重要な細菌の一つである。本菌はペニシリン耐性株のみならず，その他のȕ-ラクタム系薬やマク

対象と方法

ロライド系薬，キノロン系薬の耐性株の出現も問題視されている 1,2）。一方，肺炎球菌感染症の予防

1. 対象菌株および収集施設の一つとして肺炎球菌ワクチンがあり，日本で菌株は，2009 年 5 月 1 日から 2009 年 7 月 31 日のは，23 価多糖体ワクチンが 2 歳以上で，7 価結合

間に，岐阜県内の 16 施設および愛知県北部の 5 つ型ワクチンが乳幼児で使用可能である。

の施設の計 21 施設において臨床材料から分離さ岐阜県では，1999 年から経年的に肺炎球菌の疫れた S. pneumoniae 308 株を対象とした。同一患

学解析を行い，施設や地域ごとの分離状況や感受者からの重複検体は収集検体から除外した。肺炎性に関するデータを提供し臨床医の治療に貢献し球菌の菌種同定は，自己融解酵素の autolysin を作Feb. 2012

THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

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29（ 29 ）る遺伝子である lyt-A の存在が PCR（polymerase

つの変異を有する株を gPISP（genotype penicillin-

chain reaction）で確認されたもののみとした。

intermediate S. pneumoniae），変異を 3 つ有する株を収集施設は地域における二次・三次医療機関， gPRSP （genotype penicillin-resistant S. pneumoniae）
一次医療機関，検査センターを対象とした。収集とした。また，マクロライド耐性遺伝子の解析で施設と分離菌株数の内訳は，岐阜県下は，二次・は，アデニンメチラーゼの ermB 遺伝子と，排出機

三次医療機関が，県立多治見病院 25 株，大垣市民

構に関わる，mefA 遺伝子の有無を調査した。

病院 24 株，岐阜市民病院 20 株，中濃厚生病院 20

なお，いずれも涌永製薬「ペニシリン耐性肺炎株，岐阜大学医学部付属病院 15 株，高山赤十字病

球菌（PRSP）遺伝子検出試薬 ver. 2.0」を使用し，

院 15 株，多治見市民病院 15 株，西美濃厚生病院 9

能書に従い PCR を実施した。

株，東 海 中 央 病 院 6 株，岐 阜 赤 十 字 病 院 1 株 であった。一次医療機関は，きっずクリニック山田

3. 薬剤感受性試験

小児科 16 株，松原耳鼻いんこう科医院 15 株，佐S. pneumoniae の薬剤感受性試験は，日本化学

藤外科・小児科 11 株，秋田耳鼻咽喉科医院 10 株， 療法学会に準拠した微量液体希釈法であるフロー
さくまクリニック 1 株であった。検査センターはズンプレート 栄研 （栄研化学）を使用して最小

飛騨臨床センター 10 株であった。愛知県北部地

発育阻止濃度（Minimum inhibitory concentration:

域は，二次・三次医療機関が，春日井市民病院 30

MIC）（ȝg/mL） を 測 定 し た。 測 定 薬 剤 は，株，小牧市民病院 29 株，愛知医科大学病院 16 株， benzylpenicillin （PCG）， piperacillin （PIPC），
一宮市立市民病院 10 株，一次医療機関である宮ampicillin （ABPC）， clavulanic acid/amoxicillin

本ファミリー耳鼻科 10 株であった（Fig. 1）。

（1：14 CVA/AMPC）， cefaclor （CCL）， cefdinir

岐阜県は 5 つの医療圏に分けられるが，各施設 （ CFDN ）， cefpodoxime （ CPDX ）， cefteram
は岐阜大学医学部付属病院，岐阜市民病院，東海 （CFTM），cefcapene（CFPN），cefditoren（CDTR），
中央病院，岐阜赤十字病院，秋田耳鼻咽喉科医院， f a r o p e n e m （ F R P M ）， i m i p e n e m （ I P M ），佐藤外科 ･ 小児科が岐阜圏域に，大垣市民病院とmeropenem （ MEPM ）， panipenem （ PAPM ），西美濃厚生病院が西濃圏域，中濃厚生病院と松原

biapenem （ BIPM ）， doripenem （ DRPM ），耳鼻いんこう科医院，きっずクリニック山田小児

tebipenem （ TBPM ）， levofloxacin （ LVFX ），科が中濃圏域，県立多治見病院と多治見市民病院

ulifloxacin （ UFX ）， ciprofloxacin （ CPFX ），は東濃圏域に，そして高山赤十字病院と飛騨臨床

tosufloxacin （TFLX）， clarithromycin （CAM），

センターは飛騨圏域に位置しており，岐阜県内のazithromycin（AZM），minocycline（MINO）の 24

全圏域から菌株を収集した。

薬剤を用いた。PCG を基準とする肺炎球菌に対するブレイクポイントは，本研究においては CLSI

2. 耐性遺伝子検索（ Clinical and Laboratory Standards Institute ）ペ ニ シ リ ン 結 合 蛋 白（penicillin binding protein;

M100-S178）のブレイクポイントに従った。

PBP）遺伝子である pbp1a, pbp2b, pbp2x の 3 つの遺伝子の変異を検索した。そして，生方らが提唱され
7）

4. 血清型の解析に従い，PBP の遺伝子変異によって，肺炎球菌の血清型は，莢膜型別用免疫血清（デ変 異 が な い も の を gPSSP （genotype penicillin-

ンカ生研，東京）を用い，能書に従い使用した。

susceptible Streptococcus pneumoniae），1 つまたは 2

血清型 19 のサブタイプの解析は，型別用抗血清ている方法

30（ 30 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

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Fig. 1. MIC values of Streptococcus pneumoniae for PCG and pbp gene mutation（308 isolates）.

MIC: minimum inhibitory concentration, PBP: penicillin binding protein, PSSP: penicillin-susceptible
Streptococcus pneumoniae（Statens Serum Institute, Copenhagen, Denmark） 歳，0 歳〜97 歳であった。内訳は，0 歳 11%，1〜を入手し，添付された能書にしたがって莢膜膨化

3 歳 34%， 4〜6 歳 15%， 7〜15 歳 6%， 16〜39 歳試験を実施した。

6%，40〜59 歳 4%，60〜74 歳 15%，75 歳以上 9%で，15 歳以下の小児が 66%，16 歳以上の成人が結果34% であった。
診療科は，小児科が最も多く 42%，次いで耳鼻

1. 被検菌株の背景

咽喉科 26%，呼吸器内科 14%，呼吸器内科以外の

前述した各施設から収集された菌株のうち，発内科 12%，その他 6% の順であった。

育を認めなかった 2 株，S. pneumoniae が検出され

検 体 材 料 は，喀 痰 81 株（26.3%），鼻 漏 80 株なかった 1 株，S. sanguinis の 1 株を除外した 308 （26.0%），咽頭擦過 54 株（17.5%），鼻咽腔＋鼻前株を解析した。岐阜県下は 213 株（69.2%）で，二庭 36 株（11.7%），耳漏 23 株（7.5%），吸引痰・気次・三 次 医 療 機 関 150 株，一 次 医 療 機 関 53 株， 管分泌液 9 株（2.9%），血液 7 株（2.3%），髄液 2
検 査 セ ン タ ー 10 株，愛 知 県 北 部 地 域 は 95 株

株（0.6%），関節液 1 株（0.3%），腟分泌物液 1 株（30.8%）で，二次・三次医療機関 85 株，一次医療 （0.3%），その他 4 株（1.3%），不明 10 株（3.2%）
機関 10 株，であった。全体では，二次・三次医療であった。血液由来 7 株の年齢層は，1 歳未満が 1

機関 235株（76.3%），一次医療機関 63株（20.5%）， 株，1〜3 歳が 2 株，16〜59 歳が 1 株，60〜74 歳が検査センター 10 株（3.2%）であった。
対象の男女比は男性 173 例（56%），女性 135 例（44%）であった。
年齢は，平均 23.4±標準偏差 30.1 歳，中央値 4.0

2 株，75 歳以上が 1 株と，幅広い年齢層であった。
髄液 2 株の年齢層は 1 歳未満が 1 株，60〜74 歳が 1
株で，関節液は 60〜74 歳が 1 株であった。

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31（ 31 ）2. 耐性遺伝子検索の認められない gPSSP が 22 株（7.1%），gPISP が1）ペニシリン耐性肺炎球菌の検出状況

131 株（42.5%），gPRSP（1a＋2x＋2b）が 155 株

PCG に対する MIC 分布は，0.03〜0.06 ȝg/mL に （50.3%）であった。gPISP の内訳は，pbp2b 変異がピークと，1〜2 ȝg/mL にピークの 2 峰性を認めた

2 株（1.5%），pbp2x 変異が 90 株（68.7%），pbp1a＋

8）
のブレイク
（Fig. 1）。従来の CLSI（M100-S17）

pbp2x 変異が 21 株（16.0%），pbp2x＋pbp2b が 18

ポ イ ン ト に 基 づ く 分 類 で は， PSSP （MIC≦

株（13.7%）であった。PBP 遺伝子の変異状況に0.06 ȝg/mL）116 株（37.7%），PISP（MIC 0.125〜

ついて 2002 年 4），2004 年 5），2006 年 6）と今回の1.0 ȝg/mL ） 135 株 （ 43.8% ）， PRSP （ MIC ≧2009 年とを比較すると，gPSSP の分離率は，2002

3）

2.0 ȝg/mL）57 株（18.5%）であった。1999 年 ， 年 4）10.4%（24/230）であったが，2004 年 5）5.6%
2004 年 5），2006 年 6）の収集株と比較すると，PSSP （9/160）に 減 少 し， 2006 年 6） 7.2% （25/345），の割合は 1999 年 36.7%（47/128），2004 年 30.0%

2009 年（今回）7.1%（22/308）は横ばいであっ（48/160）， 2006 年 36.8% （127/345）， 2009 年

た。一方，gPISP は，2002 年 4）47.4%（109/230），

37.7%（116/308）と大きな変動は認めなかった。 2004 年 5）が 43.8%（70/160）であったのが，2006
し か し PISP の 割 合 は， 1999 年 に は PISP 39.8%

年 6）に 53.3%（184/345）に増加し，2009 年（今（51/128）であったのが，2004 年 50.6%（81/160）， 回）には 42.5%（131/308）とやや減少した。一方2006 年 51.0%（176/345）に増加し，一方で PRSP

gPRSP の分離率は，2002 年 4）52.6%（121/230），

は 1999 年 23.4% （ 30/128 ）， 2004 年 19.4%

2004 年 5）に 50.6%（81/160）が 2006 年 6）に 39.4%（31/160），2006 年 12.2%（42/345）と漸減してい （136/345）に減少したが，2009 年（今回）にはたが，今回の 2009 年では 18.5%（57/308）に微増。
した。（Fig. 2）

50.3%（155/308）と再び増加に転じた（Fig. 3）。
施設別にみた PCG 耐性率は，gPSSP の検出が遺伝子学的に解析した分類では，遺伝子変異

認められなかったのが 6 施設，10% 未満が 7 施設，Fig. 2. Changes of the percentage of penicillin resistant Streptococci.

32（ 32 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

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Fig. 3. Penicillin-resistant genes for clinical isolates of Streptococcus pneumoniae.

10% 台が 8 施設であった（Table 1）。一方 gPRSPの調査と比較すると，gPRSP の分離頻度は 1 歳未の割合は，検出株全てが gPRSP であった施設は， 満では 42% から 47.1% へ（＋5.1%），1〜3 歳では岐阜赤十字病院 1 株とさくまクリニック 1 株の 2

50.0% か ら 66.0% へ（＋16.0%）， 4〜6 歳 で は施設あり，施設毎の gPRSP の割合は 52.1±24.7%

40.0% から 63.0% へ（＋23.0%），7〜15 歳では 7%（0〜100%）であった。西美濃厚生病院は gPRSPから 26.3% へ（＋19.3%），16〜59 歳では 26.0% かの検出は認めず，pbp2x が 88.9% をしめた（Table

ら 37.5% へ（＋11.5%），75 歳以上では 24.0% から

1）。

27.6% へ（＋3.6%）と，60〜74 歳の年齢層以外の材料別では，pbp 変異を認めない gPSSP の割合

全年齢層で増加しており，特に 4〜6 歳の年齢層

は，血液 14.3%（1/7），喀痰 12.2%（11/90）の順ににおける増加が 23.0% と著明であった（Table 3）。

多かった。gPRSP の割合は，咽頭 74.1%（40/54），2）マクロライド耐性遺伝子検索

血液 71.4%（5/7），鼻漏 61.3%（49/80）の順に多く

全体では，mefA, ermB いずれも有さない株が9.1% （28 株）， mefA の み 保 有 が 26.0% （80 株），

認めた（Table 2）。
年 齢 層 別 で は， gPSSP は 1 歳 未 満 が 2.9% （1ermB のみ保有が 49.7%（153 株），mefA と ermB の株），1〜3 歳が 3.9%（4 株），4〜6 歳が 4.3%（2 株） 両方を保有している株が 15.3%（47 株）であった。
と，6 歳以下の年齢ではいずれも 5% 未満であった。しかし，2006 年の調査

6）では 1 歳未満では

gPSSP が 0%（0 株），1〜3 歳が 0.8%（1 株）であっmefA と ermB の両方を有する株の割合は 2002 年
12.5%4），2006 年 8%6），今回 15.3% であった。
施設別では，mefA，ermB いずれも有さない株たのと比較すると，やや増加傾向であった。一方， が 1 株も検出されなかった施設が 8 施設（38.1%）

pbp 遺伝子の 3 つともに変異のある gPRSP の分離認めた。一方，西美濃厚生病院では 88.9%（8/9）

頻度は，1〜3 歳で 66.0%（68 株），4〜6 歳で 63.0%

が，東海中央病院では 33.3%（2/6）が mefA, ermB

（29 株）と乳幼児で高い傾向を認めた。2006 年 6）

いずれも有さない株であり，施設間によりばらつTable 1. Collection facilities of strains and prevalence of PBP gene mutation of clinical isolates for each institution.

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33（ 33 ）34（ 34 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

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Table 2. Prevalence of PBP gene mutations in isolates by sample.

Table 3. Prevalence of PBP gene mutations in isolates by age.

きがみられた（Table 4）。

を Table 6 に 示 す。 PCG の 抗 菌 活 性 は， MIC90 が年 齢 層 別 で は， 7〜15 歳 の 57.9%， 1〜3 歳 の

2 ȝg/mL，MIC50 が 0.25 ȝg/mL であった。経口ȕ-ラク57.3% が マ ク ロ ラ イ ド 系 薬 に 高 度 耐 性 を 示 す

タム系薬全体では，TBPM の MIC90 が 0.06 ȝg/mL，mefA（−），ermB（＋）であった。一方で 7〜15

FRPM の MIC90 が 0.5 ȝg/mL，次 い で CVA/AMPC，

歳では mefA，ermB どちらも保有していない株がCDTR，CFPN の MIC90 が 1 ȝg/mL，CFTM の MIC90

26.3% と全年齢層に比べ高い割合を示していた。 が 2 ȝg/mL の順に抗菌力が強かった。CCL は MIC90
1 歳未満では 23.5%（8 株）が mefA と ermB の両遺が＞32 ȝg/mL であった。gPRSP についても同様に伝子を保有しており，全年齢層において，最も保TBPM が最も高い抗菌力を示していた。静注用ȕ-有率が高かった（Table 5）。

ラ ク タ ム 系 薬 で は，カ ル バ ペ ネ ム 系 薬，特 にPAPM，BIPM の抗菌力が優れていた。キノロン系
3. 各種抗菌薬感受性薬，マクロライド系薬，テトラサイクリン系薬のS. pneumoniae の pbp 遺伝子変異とȕ-ラクタム系

比較では，TFLX がもっとも抗菌力が高く，次い薬， キノロン系薬の MIC分布およびMIC50， MIC90

で，LVFX の順であった。PRSP155 株に対する経Feb. 2012

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35（ 35 ）Table 4. Prevalence of macrolide-resistant genes in clinical isolates for each institution.

Table 5. Prevalence of macrolide-resistant genes in isolates by age.

口セフェム系薬の抗菌力は，S. pneumoniae 全体

あった。

よりも MIC 値分布が上昇にシフトしているが，また，過去の 3 回（2002 年 4），2004 年 5），2006

CDTR は MIC90 値 が 1 ȝg/mL と 良 好 な 抗 菌 力 で年 6））の解析との比較では，MIC90 値でみるとペTable 6. MICs of ȕ-lactams and quinolones for Streptococcus pneumoniae isolates distributed by PBP genes.

36（ 36 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS
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Feb. 2012Table 6. （Continued）

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37（ 37 ）Table 6. （Continued）

38（ 38 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

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Feb. 2012Table 6. （Continued）

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39（ 39 ）40（ 40 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

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ニシリン系薬はほぼ変化はみられず，セフェム系薬 は CFTM と CPDX の MIC90 値 が 2006 年 に 1 管ずつ上昇してその後は横ばい，カルバペネム系薬
は，経年的にほぼ横ばいであった。キノロン系薬
では，TFLX の抗菌活性に変化はみられなかった。

LVFX の MIC90 値 の 経 年 変 化 は 2006 年 ま で は
1 ȝg/mL であったが，今回の調査では 2 ȝg/mL と上昇していた（Table 7）。全菌株中，LVFX 中等度
耐性株（MIC 値 4 ȝg/mL）は 0 株，LVFX 高度耐性株（MIC 値≧8 ȝg/mL）は 3.2%（10 株）認められた。高度耐性株の内訳は，MIC 値 8 ȝg/mL が 1 株（90 歳；喀痰），16 ȝg/mL が 1 株（63 歳；気管分布液），32 ȝg/mL が 3 株（13 歳；鼻腔，80 歳；喀痰，82 歳；喀痰），＞32 ȝg/mL が 5 株（0 歳；鼻咽腔，
Table 6. （Continued）

13 歳；鼻咽腔，52 歳；喀痰，82 歳；喀痰，89 歳；喀痰）であった。LVFX 耐性 10 株のうち PCG のMIC は 0.06 ȝg/mL が 8 株， 0.125 ȝg/mL が 1 株，
2 ȝg/mL が 1 株と良好な抗菌活性が保たれていた。
マ ク ロ ラ イ ド 系 薬 で は， CAM の MIC は 0.06

ȝg/mL が 1 株， 0.125 ȝg/mL が 7 株， 1 ȝg/mL が 1
株，＞32 ȝg/mL が 1 株，AZM の MIC は 0.5 ȝg/mL
が 8 株，2 ȝg/mL が 1 株，＞16 ȝg/mL が 1 株と，1株（CAM＞32 ȝg/mL，AZM＞16 ȝg/mL）以 外 は良好な抗菌活性が保たれていた。LVFX の MIC 値

32 ȝg/mL の 3 株と＞32 ȝg/mL の 5 株はすべて西美濃 厚 生 病 院 か ら の 検 体 で，こ れ ら MIC 値 が 32

ȝg/mL 以 上 の 8 株 は，す べ て CPFX＞32 ȝg/mL，
TFLX 8 ȝg/mL，UFX＞32 ȝg/mL と他のキノロン系薬にも耐性であった。LVFX 耐性率を年齢層別にみると，15 歳以下が 1.5%（3/202），16〜64 歳
が 4.7%（2/43），65 歳以上が 7.9%（5/63）であった。15 歳以下の 3 例はいずれも同一施設の症例で，年齢は 0 歳が 1 株，13 歳が 2 株，採取部位はいず れ も 鼻 咽 腔 で， pbp 遺 伝 子 は pbp2x 変 異 株，

mefA および ermB のいずれも有していなかった。
マクロライド系薬と MINO の薬剤感受性を Table

8 に示す。CAM の MIC 値が 1 ȝg/mL 以上の耐性株の

Feb. 2012

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41（ 41 ）Table 7. MIC90 of ȕ-lactams and quinolones against Streptococcus pneumoniae.

N.D.: not done, N.R.: not reported

年齢層別検出割合は，15 歳以下が 90.1%（182/202）， mefA と ermB ともに保有が 17.4%（8/46）であった。

16〜64 歳 が 81.4% （35/43）， 65 歳 以 上 が 73.0%（46/63）であった。これら計 263 株は全株が何らか

4. 血清型のマクロライド耐性遺伝子を有していた。その内訳

S. pneumoniae 308 株の血清型の内訳は，19 型

は，15 歳以下 182 株では，mefA のみ保有が 23.1%

20.1% （62 株）， 6 型 19.5% （60 株）， 23 型 14.3%（42/182），ermB のみ保有が 57.1%（104/182），mefA （44 株）の順であった。年齢層別では，15 歳以下と ermB ともに保有が 19.8%（36/182），16〜64 歳の

202 株 は， 19 型 22.8% （46/202）， 6 型 21.3%

35 株では，mefA のみ保有が 22.9%（8/35），ermB の （ 43/202 ）， NT18.3% （ 37/202 ）， 23 型 17.8%
み保有が 68.6%（24/35），mefA と ermB ともに保有 （36/202）の順に多かった。16 歳〜64 歳の 43 株は，が 8.6%（3/35），65 歳以上の 46 株では，mefA のみ保

NT25.6%（11/43），19 型 16.3%（7/43），6 型 14.0%

有が 32.6%（15/46），ermB のみ保有が 50.0%（23/46）， （6/43）の順に多かった。65 歳以上の 63 株では

42（ 42 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

65—1

Feb. 2012

NT25.4% （16/63）， 6 型 17.5% （11/63）， 19 型
14.3%（9/63），15 型 9.5%（6/63）の順に多かった。19 型 62 株 の 内 訳 は，19F が 88.7%（55 株），

19A が 11.3%（7 株）であった。19A はすべて 15
Table 8. MICs of macrolides for Streptococcus pneumoniae isolates distributed by macrolide-resistant genes.

歳以下の小児であった。gPSSP の 22 株ではさま
ざまな血清型が分離されたのに対し，gPRSP の155 株では 19 型が 32.3%（50/155），6 型が 29.0%（45/155），23 型が 26.5%（41/155）の順に多く検出され，19 型，6 型，23 型の 3 つの型で gPRSP の87.7%（136/155）をしめた（Table 9）。gPISP131
株の pbp 変異別の血清型の内訳は，pbp2b 変異株 2株はいずれも 12 型（100%）であった。pbp2x 変異
株 90 株は，6 型が 13.3%（12/90），19 型が 12.2%（11/90）の順に多かった。pbp1a＋2x 変異株 21 株
は，15 型 28.6%（6/21），14 型 19.0%（4/21）が多く，pbp2x＋2b 変異株 18 株は 14 型 33.3%（6/18），

23 型 16.7%（3/18）の順に多かった。血清型と検体部位に特徴はみられなかった。無菌部位由来株
では，血液由来 7 株の血清型の内訳は 6 型 42.9%（3/7）が 最 多 で， 1 型 14.3% （1/7）， 19 型 14.3%（1/7），23 型 14.3%（1/7），NT14.3%（1/7）であった。髄液由来の 2 株は 19 型 50%（1/2）と，NT50%（1/2），関節液由来の 1 株は 12 型であった。
ムコイド型の検討では，S. pneumoniae 308 株
中，6.5%（20 株）がムコイド型であった。由来検体の内訳は，ムコイド型は咽頭 25.0%（5/20），耳漏 25.0%（5/20），痰 25.0%（5/20），次 い で 鼻 汁

10%（2/20）の順に多かった。非ムコイド型 288
株の由来検体の内訳は，痰 29.5%（85/288），鼻汁

27.1% （78/288），咽 頭 17.0% （49/288），鼻 咽 腔
12.2%（35/288），の順に多かった。ムコイド型における耳漏の割合が 25.0% であり，非ムコイド型

6.3%（18/288）に比べて，多い特徴を認めた。pbp
遺伝子型の内訳は，ムコイド型 20 株は，gPSSP（pbp 変異無し） 20.0% （4/20）， pbp2x が 75.0%（15/20），pbp1a＋2x が 5.0%（1/20）であった。非ムコイド型 288 株は，gPSSP（pbp 変異無し）6.3%

Feb. 2012

THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

65—1

43（ 43 ）Table 9. Distribution of capsular serotypes of Streptococcus pneumoniae.

n (%), NT: not typable（18/288），pbp2b 変 異 が 0.7%（2/288），pbp2x 変

20 株は，NT95.0%（19/20），1 型 5.0%（1/20），非異が 26.0%（75/288），pbp1a＋pbp2x 変異が 6.9%

ムコイド型 288 株の血清型の内訳は，19 型 21.9%（20/288）， pbp2x＋pbp2b 変 異 が 6.3% （18/288）， （63/288）， 6 型 20.5% （59/288）， 23 型 15.3%

pbp1a＋2x＋2b 変異が 53.8%（155/288）であった。 （44/288）， 15 型 6.9% （20/288）， 14 型 3.8%
マクロライド耐性遺伝子の内訳は，ムコイド型 20 （11/288），その他の型 15.6%（45/288），型別不能
株 は， mefA （−）， ermB （−）が 20.0% （4/20）， 16.0%（46/288）であった。

mefA（−），ermB（＋）が 80.0%（16/20），非 ム
コイド型 288 株は，mefA（−），ermB（−）が 8.3%

5. 無菌部位由来株の検討（ 24/288 ）， mefA （＋）， ermB （−）が 27.8%

血液由来の 7 株は，男女比は，男 5 名，女 2 名で，（ 80/288 ）， mefA （−）， ermB （＋）が 47.6%

診療科は，小児科 3 株，呼吸器内科 1 株，血液内科 1（137/288）， mefA （＋）， ermB （＋）が 16.3%

株，その他の内科 1 名，ICU1 株であった。PCG に対（47/288）であった。血清型の内訳は，ムコイド型

する MIC 値は≦0.125 ȝg/mL が 1 株，0.03 ȝg/mL が 1

44（ 44 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

株，0.25 ȝg/mL が 1 株，0.5 ȝg/mL が 1 株，2 ȝg/mL が65—1

Feb. 2012

注意が必要である。

3 株であったが，MIC 値≦0.125 ȝg/mL 以外はすべ各薬剤感受性は，全体的には大きく耐性化が進て pbp 変異を有しており，MIC 値 0.03 ȝg/mL 株ではん で い る と は い え な か っ た が，セ フ ェ ム 系 薬

pbp2x 変異を，それ以外の 5 株はすべて pbp1a＋2x＋ （CFTM, CPDX）とキノロン系薬（LVFX）におい
2b 変異株であった。マクロライド耐性遺伝子は耐て MIC90 値が 1 管程度上昇しており，今後も経年性なしが 1 株，ermB のみが 4 株，mefA のみが 1 株， 的な疫学調査が必要と思われる。

ermB＋mefA が 2 株 で あ っ た。髄 液 由 来 の 2 株 のレスピラトリ−キノロン系薬の中で最も使用頻

PCG に 対 す る MIC 値 は そ れ ぞ れ 0.03 ȝg/mL， 度の高い LVFX に注目すると，LVFX の MIC 値が0.06 ȝg/mL で あ っ た が，い ず れ も pbp2x 変 異 株 で

8 ȝg/mL 以上の耐性と判定された株は全菌株中あった。関節液由来の 1 株の PCG に対する MIC は3.2% （10/308）に 認 め ら れ，特 に MIC 値 が0.125 ȝg/mL で pbp2b 変異株であった。

16 ȝg/mL が 1 株，32 ȝg/mL が 3 株，32 ȝg/mL を超える株が 5 株も認められた。われわれの過去の報
告では，2004 年 5）には LVFX 8 ȝg/mL を超える株考察は認められなかったが，2006 年 6）には，345 株中
本研究は，これまで岐阜県下 5 地域の医療機関を対象におこなった S. pneumoniae の疫学解析

LVFX の MIC 値 が 8 ȝg/mL を 超 え る 耐 性 株 は

3〜6）

1.7% （6 株）（MIC 値 16 ȝg/mL；2 株， MIC 値に，あらたに愛知県北部の 5 施設が参加した疫学

32 ȝg/mL；4 株）であり，今回 3.2% と大幅に耐性

3〜6）と比べ，診療科，材株が増加していることは特筆すべきことである。

料，年齢などの背景に大きな違いは認めず，これ全国 103 の医療施設における 2003 年と 2004 年のまでの報告と比較検討しても遜色ない背景といえS. pneumoniae の LVFX 耐性率はそれぞれ 1.1% とる。

1.0% と 報 告 さ れ て い る 10）。ま た，2006 年 か ら解析である。過去の解析

CLSI の旧基準 8）に基づいたペニシリン耐性肺2008 年に全国の医療機関から分離された成人の炎球菌の割合は PISP と PRSP を合わせた耐性肺

呼吸器感染症患者由来の肺炎球菌 668 株のキノロ炎球菌は 1999 年からこれまでの報告

3〜6）

で大き

ン系薬感受性調査では，LVFX 耐性菌（MIC 値≧

な変化を認めなかった。他の経年変化を比較した

8 ȝg/mL）は全体の 2.1% であり，経年変化は 2006

報告においても，ペニシリンの薬剤感受性に分離

年 2.5%，2007 年 3.1%，2008 年 2.4% と，増加傾向

9）

年度による差は明確ではなかった 。また，ペニは認められなかったと報告されている 11）。また高シリン結合蛋白質遺伝子による耐性肺炎球菌の割齢者に注目すると，今回の自験例では，全体では合も過去の報告 3〜6）で大きな変化は認めなかっ

3.2% と 全 国 平 均 並 で あ っ た が，15 歳 以 下 で はた。今回の検討では，PCG 感受性と pbp 遺伝子変

1.5%，16 歳から 64 歳が 4.7%，65 歳以上の高齢者

8）

異との関連をみると，CLSI の MIC 分類で MIC

では 7.9% と，特に高齢者で高い割合となってお値≦0.06 ȝg/mL の PSSP 116 株のうち，75.0%（87

り，引き続き今後の動向に注意が必要といえる。

株）は pbp 遺伝子 1 つの変異，6.0%（7 株）は 2 つ

ま た，今 回 の 自 験 例 で は， LVFX の MIC 値 がの 変 異 が 認 め ら れ た。ま た， MIC 値 0.125〜

32 ȝg/mL の 3 株と 32 ȝg/mL を超える株が 5 株はい

1.0 ȝg/mL の PISP 135 株のうち 72.6%（98 株）にはずれも同一施設からの検出であり，市中や施設内

3 遺伝子の変異が認められており，表現形によるでの水平感染の可能性は否めない。施設毎の疫学

耐性と遺伝子レベルの耐性には乖離があることにの 今 後 の 動 向 に 注 意 が 必 要 で あ る。小 児 で はFeb. 2012

THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

65—1

45（ 45 ）LVFX 耐性を 1.5%（3 例）認めたが，いずれも同種有無に関する調査を行っていないため，ワクチ

一施設の症例で，0 歳が 1 例と 13 歳が 2 例であっ

ン接種と血清型の関連や，他の疫学調査との単純た。この 3 例の株は，マクロライド耐性遺伝子は， な比較は困難であった。しかし，ワクチン接種に

mefA, ermB とも陰性であった。また pbp 遺伝子はよる血清型の変化の可能性は十分に考えられ，今

いずれも pbp2x で，ȕ-ラクタム系薬やマクロライ

後はワクチン接種の有無と血清型の関連について

ド系薬には感性であった。小児では肺炎球菌感染も検討が必要である。また，19 型に関しては 19A症の第一選択治療抗菌薬としてキノロン系薬が選が 7 株ありいずれも小児であった。現在日本では択される頻度は稀であるが，2010 年に小児用キノ

小児の肺炎球菌ワクチンは 7 価（莢膜結合型 4，ロン系薬として TFLX が上市されたことは，今後

6B，9V，14，18C，19F，23F 型）が接種可能でのキノロン耐性肺炎球菌の増加に注意が必要でああるが，諸外国でもワクチン導入によりワクチンる。われわれは集団保育を契機とした家族内感染

株以外の血清型（15，19A，30 型）による感染が6）を経験しており ，今後も小児のキノロン耐性増加したという報告 13）もあり，今後日本においてS. pneumoniae の疫学調査は引き続き必要である。 も動向に注意が必要である。
また，今回は，キノロン耐性遺伝子の変異の有無

近年肺炎球菌による中耳炎は難治性，反復化がに関する検討は行っていないが，キノロン耐性肺問題視されている 14）。今回のムコイド型，非ムコ炎球菌が増加傾向にあることから，今後の検討課

イド型の比較では，非ムコイド型に比べムコイド

題としたい。

型では耳漏由来検体が多い特徴があった。また，

今 回 の 血 清 型 検 討 で は， 19 型 20.1%， 6 型

ムコイド型ではマクロライド系薬を高度耐性化さ

19.5%，23 型 14.3% の順であったが，過去に三鴨せる ermB 遺伝子保有株が 80% と，非ムコイド型が検討した岐阜県内の単施設から分離した

288 株中 ermB 保有株（ermB 単独または mefA とと

S. pneumoniae 55 株 の 血 清 型 解 析 で は， 6 型

もに保有している株）が 63.9% に比べ高率であっ30.9%，40 型 14.5%，9 型 10.9% の順に多かったとた。これらのことから，ムコイド型株の中耳炎と報告しており，今回の検討とは異なる疫学であっの関係についてはさらなる検討が必要と考えられた。その理由としては，S. pneumoniae の流行株の

た。

ら

4）

存在などが示唆される。したがって経年的に血清

今回の疫学調査からキノロン系薬の耐性化が進型を調査することは重要と思われる。一方，年齢んでいる可能性が示唆された一方，経口カルバペ

別 に み る と， 15 歳 以 下 で は 19 型 22.8%， 6 型

ネム薬 TBPM に対する感受性は良好であった。今12）後は，血清型と薬剤耐性の関係などについても疫

21.3%，23 型 17.8% の順に多かったが，石黒らは小児 143 株の検討で，6 型，23 型，19 型の順に学調査を継続する必要があると考えられた。

多かったと報告しており，今回の疫学も同様の結果であった。また，65 歳以上の年齢層では，23 型
が石黒ら

12）

の成人 41 例の報告では 4 番目に多く

14.6% とあるが，自験例では 23 型は 7.9% と少なかった。日本では従来から成人を対象とした 23
価肺炎球菌ワクチンが，2010 年から乳児を対象とした 7 価肺炎球菌ワクチンが接種可能となったが，今回の疫学調査では，肺炎球菌ワクチンの接文献
1）山口恵三，大野 章，石井良和，他：2007 年に全国 27 施設から分離された臨床分離株 12,919
株の各種抗菌薬に対する感受性サーベイラン
ス。Jpn. J. Antibiotics 62: 346〜370, 20092）相馬真恵美，横澤郁代，金子心学，他：レボ
フロキサシン耐性肺炎球菌の疫学調査。感染症学雑誌 83: 113〜118, 2009

46（ 46 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

3）石郷潮美，玉舎輝彦，松原茂規，他：岐阜県下における肺炎球菌の検出状況と各種抗菌薬に対する感受性サーベイランス。Jpn. J. Antibiotics
53: 652〜659, 2000
4）三鴨廣繁，田中香お里，渡邉邦友，他：岐阜
県下における肺炎球菌の疫学的解析（2002年）。Jpn. J. Antibiotics 57: 172〜186, 2004
5）満山順一，橋渡彦典，山岡一清，他：岐阜県下における肺炎球菌の各種抗菌薬に対する感受性
サーベイランス―2004 年―。Jpn. J. Antibiotics
59: 137〜151, 20066）松川洋子，山岸由佳，三鴨廣繁，他：岐阜県
下 に お け る 肺 炎 球 菌 の 疫 学 解 析。 Jpn. J.
Antibiotics 63: 224〜241, 2010
7）UBUKATA, K.; T. MURAKI, A. IGARASHI, et al.:Working group for penicillin-resistant S.
pneumoniae: Identi¿cation of penicillin andother betalactam resistance in Streptococcus
pneumoniae by polymerase chain reaction. J.
Infect. Chemother. 3: 190〜197, 19978）Clinical and Laboratory Standards Institute:
Performance standards for antimicrobial
susceptibility testing; Eighteenth Informational
Supplement. CLSI document, Clinical andLaboratory Standards Institute, Wayne, PA
2008; M100-S17

65—1

Feb. 20129）河元宏史，野村伸彦，満山順一，他：岐阜県下より分離された streptococci に対する各種抗菌薬の感受性サーベイランス（2005 年〜2007年）。Jpn. J. Antibiotics 62: 509〜524, 200910）長沢光章，佐藤智明，郡 美夫，他：臨床分離株の薬剤感受性成績調査および薬剤感受性
検査の変動因子と精度管理に関する研究。医学検査 54: 1431〜1459, 200511） 二木芳人，吉田耕一郎，詫間隆博，他：肺炎球菌におけるキノロン耐性の現状―薬剤感受性および耐性遺伝子解析による評価―。化療の領域 26: 117〜123, 201012）石黒千晶，東川正宗，小野里かおり，他：三重県伊勢地区における肺炎球菌の抗菌薬剤感受性および莢膜血清型の検討。小児科臨床 62:2369〜2377, 200913）KAPLAN, S. L.; E. O. MASON, E. R. JR. WALD, etal.: Decrease of invasive pneumococcal
infections in children among 8 childrenʼshospitals in the United States after the
introduction of the 7-valent pneumococcal
conjugate vaccine. Pediatrics 113: 443〜449,
200414）山中 昇，保富宗城：難治化する急性中耳炎。
感染症学雑誌 77: 595〜605, 2003

Epidemiological analysis of Streptococcus pneumoniae in Gifu
prefecture and the northern district of Aichi prefecture — 2009 —Working group of forum on microbial resistance in Chubu
YUKA YAMAGISHI, HIROSHIGE MIKAMO,HARUKI SAWAMURA and HIROYUKI SUEMATSU
Department of Infection Control andPrevention, Aichi Medical University Hospital
MASAKAZU HATANO
Clinical Laboratories,
Chuno Kosei Hospital
HIROTOSHI OHTA
Clinical Laboratory of Internal Medicine,
Gifu University of Medicine

YUKO ASANO and SHIOMI ISHIGO
Department of Clinical Laboratory Medicine,
Ogaki Municipal Hospital
SHIGENORI MATSUBARA
Matsubara Otorhinolaryngology Clinic
YOKO MATSUKAWA and HIROKAZU SAEKI
Clinical Laboratories,
Gifu Prefectual Tajimi Hospital
TOSHIHIRO MUTOU
Clinical Laboratories, Gifu Municipal HospitalFeb. 2012

THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICSMAYUMI TERAJI
Hida Medical Laboratory
YUKI KAWAHARAClinical Laboratories,
Takayama Red Cross Hospital

65—1

TETSUO MOURI
Clinical Laboratories,
Kasugai Municipal Hospital
SHIGEKI AKITA
Akita Otorhinolaryngology Clinic

TAKANORI MIYABEClinical Laboratories, Tokai Central ClinicalLaboratories, Tokai Central Hospital

MASAKO OKADASatou Geka Shounika Clinic

HIROSHI TERADA
Clinical Laboratories,
Nishimino Kosei Hospital

TAKASHI SAKUMA
Sakuma Clinic

ERI MORITA
Clinical Laboratories,
Gifu Red Cross Hospital47（ 47 ）NAOYA MIYAMOTO
Miyamoto Family ENT Clinic
YUKIJI YAMADA
Kids Clinic Yamada Shounika

YOKO TUCHIYA
Clinical Laboratories,
Ichinomiya Municipal Hospital

KAZUKIYO YAMAOKA
Gifu University of Medical Science

YUKI MIYAKI
Clinical Laboratories,
Komaki Municipal Hospital

KAORI TANAKA and KUNITOMO WATANABE
Division of Anaerobe Research, Life Science
Research Center, Gifu University

High pathogenicity and drug resistance of Streptococcus pneumoniae are serious problem inclinical practice. Since 1999, we have conducted epidemiologic analyses of S. pneumoniae in
Chubu district. We report the results of the analysis conducted in 2009.
Three hundred and eight（308）S. pneumoniae isolates with a gene coding for autolysin lytA, which had been isolated from patients at 21 medical institutions in Gifu prefecture and thenorthern part of Aichi prefecture in 2009, were enrolled in this study. The strains were classi¿edaccording to their drug resistance based on the presence of the pbp mutation, and examined forthe presence of the two macrolide-resistance genes, ermB and mefA. Moreover, they were
serotyped using type-speci¿c antisera.
The mean age of the patients from whom these S. pneumoniae strains were isolated, was
23.4±30.1 years old, and children aged 15 years old or less accounted for 66% of all the patients.
Genotype penicillin-susceptible S. pneumoniae（gPSSP）, genotype penicillin-intermediate
S. pneumoniae（gPISP）and genotype penicillin-resistant S. pneumoniae（gPRSP）were 22（7.1%）, 131（42.5%）and 155（50.3%）, respectively. The strains with mefA positive and ermB
negative, mefA negative and ermB positive, and mefA positive and ermB positive were 80（26.0%）, 153（49.7%）, and 47（15.3%）, respectively. The MIC90 values of tebipenem（TBPM）
and faropenem were 0.06 ȝg/mL and 0.5 ȝg/mL, respectively. TBPM showed the high bactericidal
activity against gPRSP. In carbapenems, panipenem and biapenem exhibited higher bactericidal
activities. Quinolone-resistant S. pneumoniae（QRSP）were isolated from 10（3.2%）. QRSP
dominated 5（7.9%）and 3（1.5%）among the elderly（over 65 years old ）and children,
respectively.（As for the serotype, serotypes 6, 19 and 23 were 60（19.5%）, 62（20.1%）, and 44（14.3%）, respectively.
Further epidemiologic studies on S. pneumoniae might be required also in the future,including the relationship between the serotype and drug resistance.