Imaging Vascular Anatomy in Nude Mice HarboringLung Carcinoma in Flank	  This	  case	  study	  provides	  guidance	  and	  recommendations	  for	  vascular	  imaging	  in	  nude	  mice	  with	  implanted	  tumors	  using	  SCANCO	  Medical’s	
  vivaCT	  40	  microCT	  scanner.	  You	  should	
  note	  that	  the	  133	  uA	  setting	  was	  only	  available	  on	  some	  older	  SCANCO	  vivaCTs	
  which	  had	  lower	  powered	  x-­‐ray	
  tubes.	
  On	  newer	  vivaCT	  models	  the	  177	  uA	  setting	
  should	  be	  used	  instead	  as	  it	  gives	  more	  signal	  and	  results	  in	  a	  better	
  signal	
  to	
  noise.	  If	  you	  want	  to	  have	  the	  same	  signal	
  level	  and	  same	
  dose,	  you	  may	  reduce	  the	  integration	  time	  to	  750	  ms.	  Other	  examples	  of	  the	
  capabilities	  of	  Fenestra	  and	  a	  selection	  of	  additional	  case	  studies	  are	  available	  on	  MediLumine's	  website	  at	  medilumine.com/resources	  	  	  Fenestra®	  VC	  provides	  flexible,	  long-­‐lasting	  contrast	
  enhancement	  for	  a	  wide	
  range	  of	  computed	  tomography	  imaging	  applications,	  including	  vascular	  and	  hepatobiliary	  anatomy	  and	  function.	  	  Animal	  Model	  StrainNude	  mice	  ModelNude	  mice	
  with	  lung	  carcinomas	  implanted	  in	  the	  flank.	  

MediLumine  Inc.    

medilumine.com     5795  De  Gaspe  Avenue,  Suite  #112  CTS  Healthcare  Campus  Montreal  (Quebec),  Canada  H2S  2X3  	      	  Tel:  514.360.1574    Toll  free:  1.844.360.1574    Cell:  514.929.9744  Fax:  514.360.6014  	  	  	  Animal	
  Preparation	  Fasting/GI preparationMicroCT	  imaging	  is	  best	  performed	  in	  mice	  that	  have	  been	  maintained	  on	  a	  non-­‐chow,	  soft	  (vegetable	  or	  liquid)	
  diet	  for	  24-­‐48	  hours	
  prior	  to	  study.	  	  Though	  not	  absolutely	  required,	
  the	  soft	  diet	
  preparation	  protocol	
  serves	  to	  minimize	  imaging	  artifacts	  due	  to	  minerals	
  that	  are	
  found	  in	  rodent	  chow.	  	  While	  fasting	  is	  an	  alternative	  to	  the	  soft	  diet,	  clearance	  of	  digested	  chow	
  and	  fecal	  pellets	
  from	  the	  GI	  tract	  may	  be	  incomplete	  using	  fasting	  alone.

AnesthesiaFor	  the	  imaging	  component	  of	  this	  study,	
  mice	  were	  anesthetized	  via	  inhalation	  of	  1-­‐2%	
  isoflurane.	  	
  Maintenance	  of	  anesthesia	  was	  achieved	
  over	  the	  duration	  of	  the	
  study	  by	  fitting	  the	  animal	  with	  a	  nose	  cone	  apparatus	
  linked	  to	  a	  supply	  of	  isoflurane.	  	  	  AdministrationFenestra®	  VC	  was	  injected	  intravenously	
  into	  the	  lateral	
  tail	  vein	  of	  un-­‐anesthetized	  mice	  at	  a	  dose	  of	  0.4	  ml	  per	  20	  g	  body	  weight	  over	
  a	
  period	  of	  15	  to	  30	  seconds.	
  A	  1	  ml	  disposable	  syringe	  fitted	  with	  a	  30-­‐gauge	  needle	
  was	  used	
  to	  inject	  the	  contrast	  agent.	
  Prior	  to	  injection	  of	  Fenestra,	  animals	  were	  placed	  under	  a	  heat	  lamp	  for	  several	  minutes	  in	  increase	  blood	  flow	  to	  the	
  tail	  and	  dilate	  the	  vessels.	  	
  	  NOTE:	
   Refer	  to	  the	  MediLumine’s	
  Publication	  ‘Optimal	
  Usage	  of	  Fenestra	  Nanoemulsions’	  for	  recommendations	  and	  detailed	
  instructions	  related	  to	  dosage,	  animal	
  preparation,	  and	  administration	  at	  medilumine.com/resources/user-­‐guides.	  	  	  	  	  MediLumine  Inc.    

medilumine.com     5795  De  Gaspe  Avenue,  Suite  #112  CTS  Healthcare  Campus  Montreal  (Quebec),  Canada  H2S  2X3  	      	  Tel:  514.360.1574    Toll  free:  1.844.360.1574    Cell:  514.929.9744  Fax:  514.360.6014  	  	  	  Image	
  Acquisition	  EquipmentSCANCO	  Medical	  vivaCT	  40	  microCT	  scanner.	  

Animal PlacementAnesthetized	
  mice	  were	  placed	  on	  the	  imaging	
  table	  in	  the	  prone	  position.	  Use	  of	  gas	  anesthesia	  and	  its	  associated	  tubing	  for	  gas	  supply	  required	  the	  animals	  to	  be	  positioned	  with	  their	  tails	  toward	  the	  gantry.	  
The	  desired	  body	  region	  was	  selected	
  from	  the	  scout	  view	  as	  the	  anatomic	  landmark	
  for	  image	  acquisition.	  

SettingsImage	  quality,	
  which	  can	  be	  defined	  by	  the	  signal-­‐to-­‐noise	
  ratio,	  is	  directly	  related	  to	  the	  selected	  scan	  parameters.	  To	  improve	  the	  contrast	  and	  quality	  of	  an	  image,	  the	  integration	  time	
  should	  be	  set	  as	  long	  as	  possible	  and	  the	  resolution	  as	  low	  as	  possible.	  The	  settings	  selected	
  for	
  this	  high	  resolution	  (38	  mm)	  contrast-­‐enhanced	
  study	  are	
  shown	  in	  the	  following	  screen	  capture.	  You	  should	
  note	  that	  the	  parameters	  can	  be	  modified	  to	  achieve	  the	  desired	  imaging	  results	  	  	  	  	  	  	  	  	  	  MediLumine  Inc.    

medilumine.com     5795  De  Gaspe  Avenue,  Suite  #112  CTS  Healthcare  Campus  Montreal  (Quebec),  Canada  H2S  2X3  	      	  Tel:  514.360.1574    Toll  free:  1.844.360.1574    Cell:  514.929.9744  Fax:  514.360.6014  	  	  	  	  The	  custom	  parameters	  selected	
  for	  this	  study	  were	  as	  follows:	  	  	  ParameterSetting

Number	  of	
  Samples512

Number	  of	  Projections3072Integration	
  Time200	  
You	  should	
  note	  that	  changes	
  in	  these	  parameters	  can	  influence	  both	  total	  image	
  acquisition	  time	  and	  image	  quality.	  The	  average	
  time	  for	  image	
  acquisition	  for	  vascular	  imaging	  with	  Fenestra	  VC	  was	  approximately	  eight	  minutes	  for	  acquiring	
  the	  scout	
  view	  and	  the	  250	  step	  study	
  with	  the	  vivaCT	  40	  scanner.	  To	  save	
  time,	  you	  can	  “pre-­‐calibrate”	  the	  scanner	  so	  that	  the	  scans	
  begin	  as	  soon	  as	  the	  animal	  is	  inserted.	  
Images	  were	  obtained	
  immediately	  after	  administration,	
  T=0,	  with	  subsequent	  scans	  acquired	  at	  several	  time	  points.	  Beginning	  at	  T=0,	  vascular	  contrast	  rapidly	  increased	  to	  a	  level	
  that	  was	  sustained	  for	  the	  remainder	  of	  the	  study.	
  The	  liver	
  showed	
  a	  slight	  increase	  in	  CT	  density	  due	  to	  its	  significant	  vascular	  supply,	
  while	  the	  highly	  vascular	  structure	  of	  the	  spleen	  resulted	  in	  a	  high	  level	  of	  contrast	
  enhancement	
  in	  that	  organ.	  Beyond	  the	  6-­‐hour	  time	  point,	  vascular	  contrast	
  enhancement	  declined	  gradually	  as	  Fenestra	
  VC	
  began	  to	  undergo	  hepatobiliary	
  elimination.	  You	  should	
  note	  that	
  the	  gray	
  scale	  may	  have	  to	  be	  adjusted	  to	  display	  low	  contrast	  regions.	  

Data	  Reconstruction	  and	  Visualization	  Data ReconstructionParameter	  SettingNumber	
  of	
  Voxels	  in	  Volume1024	  x	  1024	  or	  User-­‐defined	  values	  (Custom	  Protocol)

Voxel	  Size

FOV	  divided	  by	  the	  number	  of	  samples

Reconstruction	  Filter	  	  	  Reconstruction	  Algorithm	
  	  

None	
  Cone-­‐beam	  MediLumine  Inc.    

medilumine.com     5795  De  Gaspe  Avenue,  Suite  #112  CTS  Healthcare  Campus  Montreal  (Quebec),  Canada  H2S  2X3  	      	  Tel:  514.360.1574    Toll  free:  1.844.360.1574    Cell:  514.929.9744  Fax:  514.360.6014  	  	  	  Data VisualizationAcquired	  images	  can	  be	  visualized	  in	  the	  evaluation	  window.	  You	  should	
  note	  that	  low	  contrast	  images	  may	
  be	  viewed	  better	  with	  a	  black	  background	
  than	  the	  standard	
  blue.	  You	  can	  toggle	  between	
  backgrounds	  by	  clicking	  on	  the	  scalar	  on	  the	  right	  side	  of	  the	  window	  or	  by	  choosing	  the	  LUT	  option	  and	  then	  selecting	  the	  correct	  LUT	  and	  optimizing	  the	  contrast.	  
In	  addition	  to	  exporting	  AIM	  and	  ISQ	  files,	  images	
  can	  also	  be	  exported	  as	  TIFF	  files.	  You	  should	  note	
  that	  AIM	
  files	  can	  be	  converted	  to	  the	  DICOM	  file	  format	  for	  export.	
  Any	  data	  visualization	  program	  capable	  of	  reading	  and	  displaying	  TIFF	
  or	  DICOM	  file	  formats	  can	  be	  used	  to	  display	
  the	
  data.	  	  Representative	  Images	  	  Representative	  images	  from	  studies	  conducted	
  in	  normal	  mice	  with	  Fenestra	  VC,	  and	
  that	  were	  obtained	  with	  SCANCO	  Medical’s	
  vivaCT	  40	  scanner,	  are	  provided	  in	  the	  figures	  below.	  

Pre-contrast Exam	  Figure	  1.	  Non-­‐contrast	  axial	  scan	  of	  a	  mouse.	
  Poor	  soft	  tissue	  contrast	  is	  evident	  in	  the	  thoracic	  cavity	  and	  heart	  chambers.	  

MediLumine  Inc.    

medilumine.com     5795  De  Gaspe  Avenue,  Suite  #112  CTS  Healthcare  Campus  Montreal  (Quebec),  Canada  H2S  2X3  	      	  Tel:  514.360.1574    Toll  free:  1.844.360.1574    Cell:  514.929.9744  Fax:  514.360.6014  	  	  	  Fenestra VC Exam	  Figure	
  2.	  Axial	
  views	  of	  a	  mouse	  2	  hours	
  after	  IV	  injection	  of	  Fenestra	  VC.	
  Images	  a	  and	
  b	  depict	  both	
  ventricles	  of	  the	  heart,	  as	  well	  as	  several	  major	  vessels	  in	  the	  thoracic	  cavity.	  Image	  c	  also	  shows	  both	  cardiac	  chambers,	  as	  well	  as	  additional	  thoracic	
  vasculature	  near	  the	  bottom	  of	  the	  heart.	  	  Figure	  3.	  Coronal	  view	  of	  a	  mouse	  2	  hours	  after	  IV	  injection	  of	  Fenestra	  VC.	
  The	  image	  shows	  both	  cardiac	  chambers,	  as	  well	
  as	  small	  hepatic	  vessels	  	  	  MediLumine  Inc.    

medilumine.com     5795  De  Gaspe  Avenue,  Suite  #112  CTS  Healthcare  Campus  Montreal  (Quebec),  Canada  H2S  2X3  	      	  Tel:  514.360.1574    Toll  free:  1.844.360.1574    Cell:  514.929.9744  Fax:  514.360.6014