粘菌の新培養法と迷路・今後の展開
4 年 B 組 天野 桃花
4 年 B 組 松本 純子
指導教員 櫻井昭

１.要約
私たちの班は以前、真性粘菌キイロモジホコリを培養していたが失敗してしまった。そこで新しい方法で真性粘菌イタモジホコリを培養したところ成功した。また、培養した粘菌を使って迷路実験を行ったところ失敗してしまったため、改善を行い再実験することを計画している。さらに、今後新たな実験も予定している。
キーワード 真性粘菌、変形体、イタモジホコリ、植え継ぎ、粘菌迷路、pH、カルシウム、ナトリウム、カリウム

２.研究背景粘菌とは、アメーボゾア門コノーサ網変でふやすことができる。植え継ぎとは、粘菌を殖やすための操作である。

形菌亜網に属する単細胞生物で、真性粘菌

私たちは、粘菌の生態を知るために、まと細胞性粘菌の 2 種類がある。一般的に暗ずイタモジホコリの変形体の安定的な培養

くてじめじめしたところを好み、森や藪、を試みた。次に、粘菌の生態の内の 1 つを花壇などに生息している。そして、環境に知るための粘菌迷路実験を行った。さらに、合わせて、胞子、細胞、変形体、子実体と粘菌の別の生態を知るべく研究計画を立て様々な形態になる(図 1)。

た。

粘菌は自由自在にからだを伸ばしたり、縮めたりできる。また好き嫌いがあり、オ

３.研究内容①新しい植え継ぎ方法ートミールなどの好物には近づき、光など

３.１ 研究の目的の嫌いなものからは遠ざかる。オートミー
ルは別名えん麦とも言い、シリアルなどに入れて食べる穀物であり、粘菌のエサになる。

以下、「イタモジホコリの変形体」を「粘菌」と表記する。
私たちは以前、キイロモジホコリという真性粘菌の変形体を培養していたが、カビさらに、粘菌にはタマゴルリホコリやシに侵され全滅させてしまった。その当時行ロウツボホコリなどの様々な種類がある。っていたキイロモジホコリの植え継ぎの方

私たちが培養しているのは真性粘菌イタモ法を以下に示す。

ジホコリ(学名 Physarum rigidum)の変形①大型シャーレ、ピンセット、ろ紙数枚、体(図 2)である。

こまごめピペットのガラス部分、小型のビイタモジホコリは、植え継ぎという操作ーカーに入れたひとつまみのオートミール

(図 3)を 100℃で 2 時間乾熱滅菌して無菌状

オートミールも一緒に保管しておく)態にする。

⑤1～2 日置いて、インキュベータからシャ②クリーンベンチ内でシャーレにピンセッーレ、タッパー、ミネラルウォーター、オトでろ紙を敷きつめ、こまごめピペットをートミールを取り出す。

使って蒸留水(滅菌していない)で湿らせる。

⑥蓋を開け、エサの周りに広がった粘菌の③その上にピンセットでオートミールをシ一部をペーパータオルごとメスで切り取り、ャーレ全体にまんべんなく撒き、キイロモ小さめのシャーレの中にそれぞれ移す。

ジホコリの変形体の一部を移植し、シャー⑦粘菌を保管していたタッパーとシャーレレに蓋をする。

を中性洗剤でよく洗い、ペーパータオルで④クリーンベンチの外でシャーレにビニー水滴が残らないように拭く。

ルテープを一周巻いて密閉し、22℃の暗所この①～⑦の作業を繰り返し行う。また、(ガムテープで密閉したダンボール箱の中)

長い時間同じペーパータオルで飼っているで保存する。とカビが生えたりするので、毎回新しいも⑤1 週間ほど経ったら、①～④を再び繰りのと交換する。

返す。

３.４ 実験結果

このようにキイロモジホコリを培養して粘菌を、カビ等に侵されることなく殖やいたのだが、クロカビなどのカビにたびたすことができた。

び侵食され、最終的には全滅してしまった。

３.５ 実験考察

そこで、新しくイタモジホコリの変形体を以前の方法から大きく変更した点は、粘譲り受ける際に、粘菌の新たな育て方を教菌を植え継ぎする頻度を、一週間に一度かえて頂くことができたので、実践しようとら 1、2 日に一度にしたことである。今回の考えた。

方法できちんと育てられるようになったと

３.２ 仮説いう事は、植え継ぎは頻繁に行う方が良い

粘菌は、次の「3.3 実験方法」で示す方法という事が分かった。

で植え継ぎすると、殖やすことが出来る。
３.３ 実験方法

４.研究内容②粘菌迷路実験①タッパー3 個とシャーレ 8 個それぞれに

４.１ 研究の目的

ペーパータオルを敷き、水で湿らせる。(ウェットティッシュくらいの水分)「4.1 研究の目的」においてのみ、全種類の粘菌の総称を「粘菌」と表記する。

②送られてきた変形菌(寒天培地の上にい粘菌には、餌があると自身と餌の最短ルる)の一部をメスで切り、ペーパータオルにートを通り餌までたどり着くという習性が乗せる。

ある。粘菌のその習性を確かめる為に粘菌③オートミールの粒を一つまみほどペーパ迷路実験を行った。

ータオルの上に置く。(図 4，図 5)

粘菌迷路実験とは、粘菌の変形体が全体④蓋で密閉し、20℃のインキュベータの中に広がった迷路のスタートとゴールに餌をに入れて保管する。(ミネラルウォーターと置くと、粘菌はどのような行動をとるのかを見るという実験である。
４.２ 仮説粘菌が通路の全体に広がった迷路を用意

粘菌迷路実験からは、粘菌は自身の嫌いな物質がない場合、高低差(12 ㎜ほど)を乗り越えることがわかった。

し、スタートとゴールにオートミールを置
くと、粘菌が迷路のスタートとゴールを結

６.今後の課題・予定

ぶ。

６.１ 今後の課題

４.３ 実験方法

まず、粘菌迷路実験を、粘菌が迷路の通①水に寒天を 1.8％加えオートクレーブに路を無視することがないようにコントローかけ、ろ紙をひいた 9 ㎝径シャーレ 8 枚にルした上で再度行いたい。
「4.5 実験考察」

分注してから固める。

で述べたように、迷路の通路以外の部分に②迷路の通路となる部分の寒天をくり抜く。

粘菌が嫌いな物質を付着させ再度粘菌迷路③迷路のスタートに粘菌を置き(図 6)、1 日実験を行う予定である。

放置して迷路の通路全体に粘菌を広げる。

さらに、以下「6.2 今後の予定」に述べ④迷路のゴールにオートミールを置き、1る実験を予定している。

日放置して粘菌の様子を観察する。

６.２ 今後の予定

４.４ 実験結果
手順③で粘菌を迷路に置いて一日放置したところ、8 枚のシャーレ全てで迷路の通私たちは以下の実験を計画している。
6.2-1 実験の目的
変形菌を育てている中で、私たちは、変路の外に粘菌が出てしまった(図 7)。

形菌に様々な物質を与えると、どのような４.５ 実験考察動きをするのか、という疑問を持った。そ粘菌がきちんと迷路の通路のみを通るようにコントロールする必要があった。迷路こで、今後以下の様な実験を行おうと思う。
6.2-2 実験仮説の通路以外の部分に粘菌が嫌いな物質(例粘菌は好まない物質を与えられると、そえばクエン酸など)を付着させればそれがれを避けるように動く。また、粘菌が避け可能ではないかと考えている。

るように動く(またはその逆)物質の pH は近くなる。

５.考察
粘菌の新しい方法での植え継ぎからは、

6.2-3 実験方法
①シャーレに寒天培地を作る。

粘菌を頻繁に植え継ぐことで粘菌をカビ等②育てておいた変形菌の一部を、培地内にから守りながら殖やすことができるとわか置く。(培地内には変形菌が動くことのできった。以前の植え継ぎ方法では、一度植えるスペースを残しておく)

継ぎの操作を行ってから一週間放置するこ③オートミールと、さまざまな pH の化学とで、放置している間にろ紙にカビが繁殖物質、さらにカルシウム・ナトリウム・カしてしまっており、そのためにキイロモジリウム等を、培地内の、粘菌に直接かける。

ホコリの変形体がカビに侵されてしまって④1 日インキュベータ内で放置する。

いたのだと考えられる。

6.2-4 実験結果の予想
この実験では、粘菌が引き寄せられるように移動した物質と避けるように移動した物質それぞれで、pH に共通点が見つかるのではないかと予想している。また、カルシ
ウム・ナトリウム・カリウムは粘菌の細胞をとかすと言われているため、粘菌の細胞がとけると予想している。
図 2 イタモジホコリの変形体

７.参考文献(黄色いものがイタモジホコリの変形体。

粘菌の疑問を解決しよう！～粘菌の足跡に白っぽいものはオートミール)

発生した白い物質の正体を調べる～ 天野
桃花・杉山絢・松本純子

８.謝辞
この研究を進めるにあたり、日本変形菌研究会の今村知世子さん、顧問の櫻井先生、岡田絢さんを始め様々な方にご協力いただきました。この場を借りて深く感謝申し上げます。

図 3 オートミール

変形体

図 1 粘菌の一生
図 4 新しい植え継ぎ(タッパー)

図 5 新しい植え継ぎ(15 ㎝径シャーレ)

図 6 粘菌迷路(粘菌配置直後)

図 7 粘菌迷路(粘菌配置後約 1 日が経過)