つくば生物ジャーナル
Tsukuba Journal of Biology
Vol.13 No.1 January 2014www.biol.tsukuba.ac.jp/tjb

平成 25 年度

生物学類卒業研究発表会要旨集
平成 26 年 2 月 8 日

筑波大学
生物学類

第一会場

2C410教室

8:55 - 9:10

持齋

峻矢

ナメクジウオの体節形質を基に脊椎の発生起源を探る

2

9:10 - 9:25

澤田朋実

軟体動物腹足類におけるbrachyury遺伝子の発現・機能の解析

3

9:25 - 9:40

生田将之

日本産ナミコムカデ Hanseniella caldaria (Hansen, 1903) の分類学的研究

49:40 - 9:55

遠藤愛

ヨツアナカシパン自然集団に見る、進化のプロセス

5

10:10 - 10:25

吉村光司

脊索起源の探索-ギボシムシのpygochordからの考察-

6

10:25 - 10:40

飯尾

直子

唇脚類における歩脚の自切構造

7

10:40 - 10:55

梅谷絵梨香 コムカデ類における卵巣の形態学的研究

810:55 - 11:10

木村翔

真正クモ類における歩脚の自切位置

9

11:10 - 11:25

時安紘平

日本産アカムカデ類の系統地理学的研究

10

12:15 - 12:30

阿閉耕平

ハプト藻特有のオルガネラ、ハプトネマの生理学的研究

11

12:30 - 12:45

加藤孝一朗 新規寄生性ミドリムシの系統分類学的研究及び寄生様式の解明

1212:45 - 13:00

福田

あずみ 新奇 Heliozoa SRT127株の分類学的研究

1313:00 - 13:15

村山拓未

パラオ産無色ストラメノパイルSRT167株の分類学的研究

14

13:15 - 13:30

岩本祥明

菅平高原におけるプロトステリウム類の分布と餌資源の嗜好性

15

13:45 - 14:00

大沢和広

キクセラ目菌類の昆虫腸内への適応と進化に迫る

16

14:00 - 14:15

山田宗樹

シロキクラゲ目における菌寄生性の解明に向けて－Sirobasidium属の分類学的再検討と培養系の確立

17

14:15 - 14:30

沈腸管寄生虫Giardia intestinalisのスプライソソーム構成因子同定の試み

18

14:30 - 14:45

内山珠希

ペディノ藻におけるグリセルアルデヒド-３-リン酸脱水素酵素遺伝子の探索

19

14:45 - 15:00

森田幸之介 新奇緑色渦鞭毛藻TRD株の葉緑体ゲノムシーケンス

20

15:15 - 15:30

伊藤清香

ユーグレノゾア生物群におけるピリミジン生合成酵素の進化と多様性

21

15:30 - 15:45

高林

舜

Carpediemonas-like Organismsと培地中バクテリアShewanella sp.との二者
培養系の確立22

15:45 - 16:00

松橋潤哉

アナナスショウジョウバエ類における異種由来染色体の分離比

2316:00 - 16:15

坪田康平

下田鍋田湾に生息するヨコエビ類の分類学的研究

24

茹菁

第二会場

2C404教室

8:55 - 9:10

髙橋 果歩

アサガオ花成ホルモン遺伝子PnFT1の発現制御機構の解析

25

9:10 - 9:25

山本 高広

アサガオにおける光周性花成誘導の分子基盤に関する研究26

9:25 - 9:40

遠藤 司

酵母ワンハイブリッド法によるジャガイモ環境ストレス応答性転写因子
StDREB1の単離27

9:40 - 9:55

増田 崇人

コリンオキシダーゼ遺伝子導入ユーカリ(E.globulus)の特定網室における耐塩性評価と生物多様性影響評価

28

10:10 - 10:25

岡澤 梨沙

花粉症治療に向けたスギ・ブタクサ花粉アレルゲン生産系に関する研究29

10:25 - 10:40

三村 琢磨

南米アンデス山系の氷河後退域における微地形に着目した植生の発達30

10:40 - 10:55

上原 明菜

高山植物ガンコウランの温暖化処理による生理特性の変化

31

10:55 - 11:10

神谷 なつみ 死んだ木はいつなくなる？ー三宅島噴火後の枯死木分解に関する研究ー

32

11:10 - 11:25

杉山 涼太

温度条件に着目した共生菌の有無によるレンゲツツジの成長の違い

33

12:15 - 12:30

萱苗 友梨

カジメ(Ecklonia cava)起源溶存態有機物の光化学的反応特性34

12:30 - 12:45

小嶋 佑果

海洋表層における蛍光性溶存態有機物の動態に関する実験的研究

35

12:45 - 13:00

市川 雄太

渡りを行なうウスバキトンボの産卵戦略と我が国への定着可能性

36

13:00 - 13:15

髙橋 玄ナミアメンボに出現する短翅型雌と長翅型雌の卵生産と産卵パターン

37

13:15 - 13:30

得田 奈央子 ムラサキツメクサの花茎屈曲による送粉者への見せ花効果

38

13:45 - 14:00

朝山 寛太郎 新天地では鶏口となるな、牛後となれ～インゲンマメゾウムシの場合～

39

14:00 - 14:15

佐藤 まどか 肉食系女子は草食系男子の何に魅せられるのか？	
 	
 ～インゲンマメゾウ
ムシの場合～

40

14:15 - 14:30

鈴木 萌

長すぎたるは及ばざるがごとし？：花形態の組み合わせが口吻長の異なるマルハナバチの採餌効率におよぼす影響

41

14:30 - 14:45

岸野 友子

漂着海藻は餌資源として砂浜生物の群集構造に影響するのか？

42

14:45 - 15:00

玉川 茜

イソクズガニTiarinia cornigeraのデコレーティング行動による藻類への影響

43

15:15 - 15:30

戸祭 森彦

イボニシThais (Reishia) clavigeraの食性から食物網の持続性を探る

44

第三会場

2B411教室

8:55 - 9:10

鎌田

志保美 イネの発達過程におけるペクチンメチルエステル化制御に関する研究

45

9:10 - 9:25

菊田

遼

ヘミセルロース改変イネを用いた塩ストレス応答に関する研究

46

9:25 - 9:40

齋藤史織

シロイヌナズナのXTH過剰発現株を用いたサリチル酸応答と細胞壁構造変化に関する研究47

9:40 - 9:55

髙見るり子 塩ストレス条件下のトマト果実成熟過程におけるペクチン分解酵素の解析

10:10 - 10:25

HU	
 QING

Ca欠乏条件下のトマト果実成熟過程における細胞壁合成遺伝子の組織別
発現解析

49

10:25 - 10:40

土屋

結実

トマトの落花と落果で異なる離層細胞壁の制御メカニズムに関する研究50

10:40 - 10:55

河野裕之

キンクロラックと合成オーキシン剤のシロイヌナズナでの作用性比較51

10:55 - 11:10

中村真之

メタチロシンによるレタス根部における活性酸素発生機構

52

11:10 - 11:25

西村彰紘

オクチルアセテートによる植物生育抑制機構の解析

53

12:15 - 12:30

神田祐輔

Tight junction開口物質のスクリーニング系の構築と探索

54

12:30 - 12:45

佐藤功宗

Terpendole EのKSP阻害機構解析

55

12:45 - 13:00

吉田圭佑

AID systemを用いたミトコンドリア分裂阻害剤のスクリーニング

56

13:00 - 13:15

山宮大幹

新規酵素のスクリーニング研究57

13:15 - 13:30

栗崎誠

微生物による芳香環化合物の分解に関する研究

58

13:45 - 14:00

瀧下友理

植物生理活性物質代謝微生物の探索

59

14:00 - 14:15

森谷直輝

多環化合物変換酵素に関する研究60

14:15 - 14:30

細山田 舜

枯草菌においてファージ不稔感染経路に関与するNonAの解析

61

14:30 - 14:45

櫻澤遼太

老化モデルマウスのミトコンドリア DNA 多型が造腫瘍性に与える影響

62

14:45 - 15:00

三井祥宏

代謝ストレスによるマウス多型突然変異型mtDNAの病原性誘導63

15:15 - 15:30

DANAPORNSARAPRUG

Effect of the fermented-bean product on anti-aging and health64

15:30 - 15:45

栗野

線虫の寿命及びストレス耐性に対する生理活性物質の作用の研究

65

15:45 - 16:00

劉マウスcryptdin4遺伝子プロモーター配列のdefensin14ノックアウトと野生型マウスでの比較

66

16:00 - 16:15

福本

赤ぶどう抽出物とレスベラトロールによるアンチエイジング作用の
比較解析

67

智帆
笑舒
隼平

48

第四会場

2B412教室

8:55 - 9:10

大津拓紘

9:10 - 9:25

小池

紫央里 イモリ桿体・錐体視細胞の電気生理学的解析

69

9:25 - 9:40

靍田奈津希 イモリ嗅細胞における匂い応答の電気生理学的解析

70

9:40 - 9:55

荒木広大

ゾウリムシの個体間相互作用を引き起こす要因；機械刺激により放出される化学物質の検討

71

10:10 - 10:25

佐賀友則

ゾウリムシのイオン刺激受容機構に関する行動学的研究

72

10:25 - 10:40

座小田 俊亮 ショウジョウバエを使用した統合失調症リスク因子の遺伝学的解析

73

10:40 - 10:55

吉村

由祐子 ショウジョウバエを用いた統合失調症脆弱遺伝子のスクリーニング：
DISC1とNrx-1の遺伝的相互作用による神経発生異常74

10:55 - 11:10

平野

陽太

母親から子に伝播されるステロール類が初期発生過程に与える影響：
ショウジョウバエを用いた研究

75

11:10 - 11:25

諸橋香奈

線虫C. elegansの寿命の制御におけるグルタチオンS-転移酵素ファミリーの関与の検討76

12:15 - 12:30

藤澤

空見子 Large Maf群転写因子MafB臓器特異的遺伝子欠損マウスの作製；膵内分泌細胞における機能解析

77

12:30 - 12:45

板倉晃希

骨格筋における脂肪酸伸長酵素Elovl6の役割

78

12:45 - 13:00

石井亮

蛍光live imagingによる睡眠覚醒機構の解明

79

13:00 - 13:15

本田拓之

喘息を抑制するAllergy Inhibitory Receptor (Allergin-1)の抗原提示細胞における機能の解明

80

13:15 - 13:30

北條梢

高温環境下におけるペパーミントの香りがラットのストレス応答に
与える影響

81

13:45 - 14:00

葛西裕亮

ヒト乳腺上皮細胞シートのイオン透過性に対するヒスタミン受容体阻害剤の影響82

14:00 - 14:15

村上

生馬

筋損傷後の早期運動介入が治癒過程に及ぼす影響83

14:15 - 14:30

安田剛

細胞質分裂の分子機構の異種間分裂酵母における相違性とその考察

84

14:30 - 14:45

遠藤智之

網膜色素変性症原因遺伝子産物KLHL7の標的分子の探索85

14:45 - 15:00

前野優太

神経系における脱ユビキチン化酵素の機能解析

86

イモリ松果体におけるレチナール代謝経路の解析

68平成 25 年度卒業研究発表会準備委員会
生物学類
戸祭

森彦

阿保

賢二

岡島

智美

小黒

和也

倉持

大地

斉藤

美佳

森田

陸離

遠藤

愛

表紙画

表紙画の解説：私たちが薬剤処理したり、データに変換したりして、いじくりまわしている生物。
毎日食べているのも、その辺に咲いているのも、私たち自身だって生物。
そんなすぐ隣の“研究のはじまるところ”を、エッシャーの「滝」をモチーフに描きました。
日常と地続きの“ちょっと不思議”と日々向き合っていることを忘れないでいたいものです。

つくば生物ジャーナルⒸ2014 筑波大学生物学類

Tsukuba Journal of Biology (2014) 13, 1

平成 25 年度卒業研究発表会要旨集の巻頭にあたって
戸祭

森彦（筑波大学 生物学類 4 年）

思えば初めて筑波山に登ったのは高校 1 年生の時でした。まだ生き物に触る経験もそう多くなかった私は一心不乱に山に登り、頂上から見る景色にただ圧倒されていました。
筑波大学に入学してからは、生物学にどっぷり浸かった 4 年間でした。1 年生から研究室に出入りして寄生蜂の研究に没頭し、4 年生の卒研ではつくばの地を離れ、下田臨海実験センターの美しい海洋生物の世界に触れました。
1 年生のころは全てが手探りでした。指導していただいた先輩から「まずは虫を飼育する事から始めよう」と言われた時にはどうなる事かと不安になったものです。それから 2 年生、3 年生と経験を重ねるうちに研究にも肉がつき、徐々に自分からどんな実験が必要なのかを考えられるようになっていきました。
これ
こそ研究の醍醐味だと思うのですが、仮説を立てて「どうやらそれらしい」結果を導くような実験をしている時には、毎日ワクワ
クしていました。仮説を裏切るような結果も出ましたが、生物の営みの奥深さを感じるいい機会となりました。3 年生の終わりに海洋生態学に魅せられて研究室を離れる際には自分がしてきた研究が名残惜しく、
なんとか論文にしようと奔走したのを覚えています。卒研もまた、期間半ばまでは慌ただしく過ぎていきました。実験そのものが立ち消えになった事もあり、データが出そろった時の感激はひとしおでした。
そんな研究に月日を捧げた生物学類生の汗と涙の結晶がこの要旨集です。ぱらぱらとめくってみると、卒研生の苦悩と喜びの声が聞こえてくるかもしれません。そして、卒研発表会は後輩のみなさんにとって多様な生物分野の話を聞く事ができるまたとない機会です。是非たくさんの発表を聞いて、深淵な生物学の一端を覗いてみてください。
その後の研究室選択に影響するような、
刺激的な発表が聞けることと思います。
卒研発表会を用意する立場の 2·3 年生には、授業などで忙し
い中、準備 · 運営への尽力に感謝しています。また、私を含め多くの学生が 1 年生から各研究室で生物学に触れる機会を得、4 年生では一年間という短い期間で発表に足る研究ができたのはひとえにご指導いただいた生物学類の先生方と先輩方のおかげです。本当にありがとうございました。
それから、その陰には毎日のように愚痴にも近い話を聞いてくれた友人たちや事あるごとに私を頼ってくれたかわいい後輩たちの協力がありました。言い尽くせぬ心からの感謝を送ります。
卒研発表という大学生活の最も大きな山を超えようとしている今、改めて筑波山を思います。山道を埋め尽くす草本類やコケ類、菌類の数々。ふと目線をあげるとひらひらと目の前を舞う鱗翅目。高校生の時は躍起になって踏みしめた道の片隅にも、生物はひっそり、時に優雅にダイナミックな生態系を形成しています。
再び足を踏み入れた山中で、
あの時は気がつかなかった生き物たちの小宇宙に目を奪われました。このような時、生物学を学んでいて本当によかったと実感できます。
講義を聞いて知識を得るだけでなく、折角緑の多い筑波大学、
是非虫取り網を片手に外へ出かけてみてください。
Communicated by Mitsuru Hirota, Received January 5, 2014.

1

'%

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 2        2014 +"'%1

,/.!)'0$2 *3+" '%14  ĤÒeĀþĨÜñ$Ó.ò¼þ"¹Ĺ%ĨÜŚ(shÜŚ)3
ÜŚ$ô»#02ĨÜñ%02Įœ"y6»3 ÜŚ62¡,Ďģ6ýņ3 ś ńħ6»3
  $ÜŚô»$ĤÒ#3¬þ§%iÏ"í© 1)
QH9O?Ř6őĨÜñ%ýøŅĈĨĔ6ýņ
3ÂŌ.#ĨĔ$2#ļŚ¾3 %ĄŚ¾$ÜŚýņĨĔ%$j#2ľ*43ÜŚýņñ
%
ĨĔ%ÜŎÙ$ŒÛ &43üĻþ"Ýł  !*3$+Ây%4.ç«3 2)
p±řzùO\@E9;Ř%¨ıŜŘ#w
3ĨÜñ#%­£3Ŗň$kį¿Ĳ3ŝeĂeĢ
#³½3ÝłÜŚ6Å" -ŜŘ%" 2)
O\@E9;Ř%õ£$Řyē%ĨĔñō$j$ŖĔ
ñnō#Ř43ĨÜñō6ÝÂ3ñ#Ł3¹Àþò¼%øè.%gÐþ#|Ô43ĨĔ ĨĔ$
Ĥ~#xğ3jĊ$ĆęĔ2
41%Ýł ŕ·#¯° 3
O\@E9;Ř$ĨĔ%y$Č*v' 3$ò¼þ$1ŖĔñ &43ĨĔ%ýø$ŕ·#Î ÐÕ#y$Č*ņ34%r$ñ#%+14" ò¼3
ÜŚ$ýø\<PF[# $ăĉ#%
õø$ĨÜñ$ª6-3ŗŘù 14 3ĨÜñ%ª 2 $AbfXŗŘ îŗŘ#143ŗŘ$ĥýø#yđ%ĭÿ~ 1ĨĔ# ÿđĎđĄđ#
3$ yđjĥĪ 1øĄđĕĦĠĨĔ/
ĆęĐ6İ 
41ļŚ#Óėþ#ĄŚ#ğÈ53
$ļŚ%ļŚ¤Ĺ(C`fBd)6CfN3 Col2a1Ňu¬$ýõ#02¹Â43
îŗŘ$^K\9O?# 3
ÜŚýø%ýøÐÕ4 3.$$ŗŘ Þ$\<PF[*2ŗŘ îŗŘµ3s#ÜŚýø$\<PF[6ô»  Çë4 3 1)
 ĨÜñ#Ŀĝ"îĨÜñ$O\@E9;%
C`fBd6CfN3 Fcol1 $ýõyđĭÿ~ı143
4%śč"ĨÜñ3ŗŘ àĽ3 $ýø\<PF[īû" 3$-îĨÜñ ĨÜñ$ŎàĽýø®þ8XcfI 1ÜŚ$ÕŃ6Æ3$% Ŕ3 ġ 143Öăĉ%O\@E9;$yđ$Þ¬6ĘĞ®þÃá#
02ĳ²3Ĭăĉ#02ĨÜñ3^K\9O?$8d]DfM¸ø#C`fBdŇu¬ÿđ$+ýõĄđ%§ÀÕ# "  ąĶ4 3 1)gÍîĨÜñ3O\@E9;%yđ!$0 #ĺ 3 iÏ"í© 
46ĴÏ3 Öăĉ$Āþ3
O\@E9;$yđ#.C`fBdýõ
3 %Ï 3$Ďģ $ā³þ"xğŏ{6ĵĕ#5( #3+" '&-4
ķ(3O\@E9;# 3C`fBd Ďģ$xğŏ{0wyđÝł6.^K\9O?$4 àĽ3 ÜŚ$ýøĺì6Æ3
×ÌeÍá
 Branchiostoma belcheli Gray, 1847 U=DO\@E9;(Ēº 18,22,24,26,36 ÐŎĥ)
 In situ hybridization #02O\@E9;ĥ$ Fcol1(Ĝě¾C`fBdŇu¬)"1'# MHC(Z;DdŉŋŇu¬)$ýõ6ĳ²
In situ hybridization $Íá ö ¢°é+$U=DO\@E9;ĥ6 PBST ãåProK ö#02ĚĘĞ6Ĵ$º4%T`Yb[8bLUN¢°0.1M Ma:HRfb8Zd
8GIb£¾$ AP $ä¾6«ß#XcfW$
æŀ¾6ś-3-# 55ĥ6SJV7f#Á1º
UfMD_J@ö RNA ¬6)!hybridization 6
ĬXcfW$SJV7f6ĥ# 55 1 Ñğ XcfW6ãåºÄy$ŕòûþĚ6ê1
-#WcJ>dAö6ĬAnti-Dig Äy AP 6 
4 1 Ñğ PBST ãåºNBT/BCIP ýĩĚÚeġ² Ēº 18,22,24,26,36 ÐŎĥ# 3 Fcol ' MHC $ýõ
6ķ(46Ěï#ýõ6àĽĵĕ%ăĉ
ýĭt#Ėq3ġËó 1) úÊ¦(2012)
^K\9O?$ĨÜŚ¹Â#ŏ3Ńýø®þăĉďâª®ª®Őø÷¥ć®ăĉćøñć®´É}¦(ö®)®xĸË 2) ¯mŊleċ¶3(2005)O\@E9;ŞŖĔñ$øñ®Øoª® ðt

2'$

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

0$-/2

13, 3        brachyury 1)% 2014 *!'$2,.

#( 3*! '$24  5( "3*! '&+4
12 ¯ĉ14 ¯ĉ$ã-z$Ùä$A>GRÜ¨32 Ñô

â° ÎÌbrachyury Ąa%1927 #M9C$ÕÃÊ$ĄaËð31990 #m,=TWHU>3`Č½
"rÄLOT>tď3ËÇIDWU.¾åĊĀĄa# ÐÔ3¶æ»rÄ#brachyury %æØoĕÙäËÇÜ¨3
æØ.­[ãì$ls#ćï"p6§  Ï03 2ĒØrÄ2GN=B9;
-æ»rÄ }/ " brachyury $ËÇIDWUÑô
3 2)ØrÄ2LPtď3 brachyury$LOT>%æØÙä$*ËÇæØ6ls2Ď$M
CDW?UFTWRĄa2 á 03 2[1]
æØrÄ6~+¬zrÄ ®zrÄ6Àü2 dn.£¤#Ċ52  $ĄaËÇâèûþú 2
Ï03 2®zrÄ$ 1 >RWJ2ùdrÄ%
èøĔ$ Patella vulgata #ègîÍ$¿[ÝZbrachyury $ËÇò3 2[2]$ËÇđčh
2 3&
YæØrÄ$æØ âèûþúbàĊe#2ùdrÄ$ brachyury ËÇđ!$/ "¼ÿ¤32$ ùdrÄ$ brachyury #!$/ "¾å2
ö'2 brachyury Ąa$¾åÌ"ās$¦ 16
2 2_$ÐÔ%èøĔ2=@8
T7;<8 Nipponacmea fuscoviridis 6É ùdrÄ#2 brachyury $ËÇ $¾å6ó·2 6ÎÌ 1Ěy× 0 10 ¯ĉ$ã$ brachyury $ËÇ2ębrachyury $¾åó· 1g/l ]´Ĉ RNA ¾åċã#ËÇċ$q¸6 in situ hybridization Ñ , 4id$ 3 pÓbrachyury $ËÇSKRë2\Ñô3ą£$ò%1g/l ]´Ĉ RNA ¾åċã
6òy× 16 ¯ĉã6 23 fd18 ¯ĉã6 33 fd25 ¯ĉã6 80 fdò33$ control ã À' 4¾åċãÅ±$ą£$Ê6ð2 %" 
Phalloidin ¹ê%1g/l ]´Ĉ RNA ¾åċã
6y× 27.5 ¯ĉV¹ê31 fd6ò¿"ÖÞÜ6¨ãÑô3p|- control 50"0#1.5g/l ]´Ĉ RNA -¾åċ6í 24¯ĉ#V¹êò32 fd6ò¥$
|-¿"ÖÞÜ6¨ãÑô3p|- control
50" /ÖÞÜ$ËăVĆà#Ċ-brachyury $¾åċ#ĊĀËÈÊ6ð2 %
" µ« ­ÁĖµ«Ě=@8T7;<8 Nipponacmea fuscoviridis 6É^©×#/ã6 Ėk
1. brachyury $ËÇIDWU$öº y× 0 2.5 ¯ĉ8 ¯ĉ10 ¯ĉ12 ¯ĉ14 ¯
ĉ#33ã6É in situ hybridization 6í brachyury $ËÇIDWU6ö'
2. brachyury $¾åó·ĚRNAi Á ]´Ĉ RNA 6|¤³y×u#8UB:=AQU2 brachyury $¾åċĖ6ícontrol GFP$]´Ĉ RNA 6É  y× 0 24ě27 ¯ĉ#ã6control ÀüÅÊÌ"ą£$sð03"ò)ø$Ö
ÞÜ6 phalloidin ¹ê2 #/1ÖÞÜ$Ëăj|.
Ćà$½6{ñsbrachyury $¾åċ$ĐÖÞÜ$½#Ê"
ò

_$õē
_$Ė#
N. fuscoviridis $ brachyury $ËÇID
WU%P. vulgata 3ËÇIDWU Xé2 Ñô3brachyury $¾åċĖ#Ċ%ą£VÖÚß$òÂ 0ÅÊÌ"÷$s6Ëð2 %"$
0ùdrÄ# brachyury %vçč
h¯$£¤ĂrÖÞÜ$Ćà#%Đ6x(" {å¢Ò32 brachyury $¾åċq¸cËÇ6i#ë " ã$p|  _$Ė# 2õē2_%/1²$CEWBãbrachyury $ËÇIDWU6öºËÇ$Ü¨32Ùä#/!$/ "¼¤32$ ö'í¡ Û¸
1. brachyury $ËÇIDWU$öº y× 0 2.5 ¯ĉ$ã%A>GRò3" y× 8 ¯ĉ10 ¯ĉ$ã%ègZÍ$¿[ÝZz$ýÙäąą$ÙäA>GRò3ė 1Ę)

wáªÆ
[1]Peter W. H. Holland et al (1995) Development 121:4283-91[2]Lartilot N. et al. (2002) Development 129(6): 1411-123つくば生物ジャーナル

Tsukuba Journal of Biology (2014)Ⓒ2014 筑波大学生物学類

13, 4

日本産ナミコムカデ Hanseniella caldaria (Hansen, 1903) の分類学的研究
生田 将之（筑波大学 生物学類）

指導教員：和田 洋（筑波大学 生命環境系）

背景・目的
コムカデは、節足動物門多足亜門結合綱の土壌動物で、歩脚数と背板数が対応していないこと、
尾部に１対の出糸突起を持っていることによって特徴づけられる。
全世界に広く分布するとされ、14 属およそ 200 種が記載されている。
日本においては、Rochaix(1954) により、ナミコムカデ科のナミコムカデとミゾコムカデ、
ヤサコムカデ科のヤサコムカデの計２科３属３種が分布すると
された。
しかし、
日本産コムカデの分類には多数の問題点が挙げられる。
唯一の研究である Rochaix (1954) では主にヨーロッパの既知種をもとに同定を行っており、それ以降分類学的研究が全く行われていない。また、原記載論文が古く、標徴形質の記述が曖昧であるばかりでなく、種内の変異についても殆ど言及されていない。
さらに種の分布という基本的な事項でさえ、論文として殆ど公表されていない。
そこで、日本産のコムカデのうち、ナミコムカデ科のナミコム
カデ Hanseniella caldaria (Hansen 1903) を対象として、同定の妥当性を評価し、これまで評価されていなかった形態的変異やそれらの分布を調べることで、
日本産ナミコムカデの多様性を明らかにすることを目的に研究を行った。

結果・考察属の同定を行った結果、第２背板の後縁が丸く、前側部の長い棘が斜め前に生える、第 15 背板の後縁に溝はないという特徴が今回観察した全ての個体で共通して見られた。これらの形質はHanseniella 属の標徴形質であるので、全ての個体は本属に属すると判断した。
種分類については、今回調べた全ての個体は、第１歩脚の爪の形質状態がデンマークを基準産地とする H. caldaria とは異なり、むしろインドネシアを基準産地とする H. orientalis に類似していた。さらに、他の形質の組み合わせによって、３タイプが観察された。
各タイプの分布を調べたところ、単一のタイプのみ分布する産地と同所的に複数のタイプが分布する産地があった。
単一タイプ
のみが分布する地点では、
タイプ２またはタイプ３が確認されたが、タイプ１のみの産地は確認されなかった。
したがって、日本のナミコムカデの分類に関する Rochaix(1954) の見解については、再検討の必要性が強く示唆された。
いずれにせよ、今回の結果は国内での Hanseniella 属は従来考えられていたよりも多様性があると考えられる。
今後のさらなる検証のため、
より多くの産地からのより多くの個体に対する形態観察と同時に、系統遺伝学的な分析が必要だと考えられる。

材料・方法
日本各地で採集した Hanseniella 属のコムカデのうち、東北から九州までの 27 地点 80 個体を実体顕微鏡及び光学顕微鏡を用いて観察した。
観察は、まず現行の属分類の確認を行うため、属の表徴形質として、第２背板、第 15 背板の形状を観察した。次に、種の表徴形質として、出糸突起の形と棘数、触角の節数、触角第 13 節の棘、第１歩脚先端の爪、第 12 歩脚の爪及び付近の棘の計７形質を観察した。

＜分類学的な見解を含むため、詳細については当日発表する。＞

4*(

 Tsukuba Journal of Biology (2014)
2/ "5,%

13, 5         2014 ,%*(4

.'301
*(46  #!$7+ &5,%

*)-6ĮÞgĎČÚõ ā£í&ÀÊ(ăû 9()ŉ(ZdML#Ù¥ÀÊ éčûœAUĤ(_P?TBJYfŦPeronella japonicaŧ=ą "tk(Ėě=Ķ ũŨŏ¢ř(Ïř ÛâôµŬùŦĕ·đİċ¶ĴđŢ³ś´đkĆ½¶đ¶óĨđâ¶ŧ' "J^WhFafE)łçĲ
#(ScOKÏř=Ķ 
ŪŨ_P?TBJYf(ř(Ðġ jĽ(Ŭ({xĪ'! "[RHfSa?èGW\(
COIèGW\(¼ăŤÀË'ŕ<9ōv§alx1(@fRdfŞ=ą "§ğģļä=Ķ }(_P?TBJYf(řìň(ÌÓ=ŀ1ūŨřŔ#(ĊăŊĘ(¡Ĉ(Ðġ ř(_P?TBJYf=¬ţ­}#Šĭ9$#ĊăĂ=Ò$'q¸ÎĞ=Ķ ¼ăŤÀË'Ŏ
Ĺ&Ýá=lÅ'ĞÃØÝŔ'«į=yĸgĻ¯


ĢågĬ¯

=ÿÄ"7# 9#)(Ù¥ÀÊ)%(6 '"ă0:9(; (ŎĹ&îì(i!$" Ċă(57 ő# 9$Ĭ7:" 9ĊăŊĘ')£±(ōvČ¡Ĉ4Ă¡&%(Ön')ð»&ÀÊ=y8~Ħķyąē7:" 9(2ĊăŊĘ)Ëx(ŋÆ¾'Á
ŝ=/' "¡ĈĵĚ9$=ľ®" 9$9(Ħķyą(Ąû$"ĊăŊĘ)57(}7Ù¥ÀÊ=8~Ċăîì(¡ă9$ŉ(ZdML:0#Ĭ7:" #âĖě) Ċă(57 )¨9 9$:*(¬Ê)%>&3(=êĿ9$=ĎČ$_P?T
BJYfPeronella japonica 'ĒĎ9AU(uŔ)įÕyĶ 4 $7Ċă©ČĖě=ý¿"âę)AU#(Ċă©Čēĺ=ą#9(' lŔďÑĊă$þü(ăö'ćã9o!(ù# Ċă(57 (êĿ'ŋ" 9
 i!)
Z`fDRfÇ#ăÈ=½9ñŗ# 9¼ăáŇħę'ò-"Ĕ $# 9ŔÑĊă(AU(¼ăáØ
Bß# 9('°âę(ďÑĊă¼ă) 3 Û3 :*¡Ê"0 6 "ę}#(ŒńŚ(p÷Ŗ:92
ř(¨áÂ:9
 o!')
¼ăÀÊ'9ŌÍòņČw $Ĭ7:9
$# 9âę) 2 ı(ZbQAL¼ăŦŧ=!9
¼ăá'Ôš9$)ú 
m'ÏšĀ=j92(ª# 9ZbQALı=Ôš& '3ŕ<7ĉŅČ'ÀË" 9($Ĭ7:" 9
6 "¼ăı(¨Éī)w $Ĭ7:
ü'¼ăıÀË'ŕ<9ōv§Ċā&%'¡Ĉ=ĵĚ
" 9(#)& $áÂ:9

 [RHfSa?GW\ COI )ę}#ť¾'z¨:" 
alx1 @fRdf')XZdN@Z$ĺ7:9ŪŦS/Lŧ¨" XZdN@Zò)óĨ#) L ĺ7:s)óĨ'Ň .% L (¤ |ĺ7: ĊăŊĘ(Ļ¯7
âę(¼ăÀÊ)+%¦×# 9$ "
ı(Ø ø96 &¡Ĉxĺ! "" 9:)_P?TBJYf¼ăÀÊ,(ŌÍwĊă(57 (êĿ'ŋ" 9$=ė93(# 9
rÃ(Łşg²à rÃ[RHfSa?(ŜHhSŞ=°Ń' "§ğģ
ļä=ŉ2"  ōvČŘŚă" 9ř=Ō«ïĝ
:7(«
į'! "¼ăŤÀË'ŕ<9ōv§(ĊāYNhf=ł-9¼ăŤÀËōv§)?]aB\`ICAU#m'Ėěŉ27:Ġ  3(ōv§7&9VORehDÜ7'&8ōv§(îİļä:" 9âĖě#)_P?TBJYf#
:7$Đ&ōv§(ĊāYNhf=řŔ#òņ9ōv§(ÝĜŔČĊāYNhf'! ") In situ hybridization
õ=ą mRNA (º=æĳĻ¯9ōv§(ĊāŐ'! ")R`fLDaZRh\ļä=Ķ ¼ăŤÀË'ŎĹ&LQhK#Ċā" 9 RNA =ĥĩČ'òņ9

_P?TBJYf(ËxŦ¹ŧ$ĞÃ 48 ÝŔ( 2 ı(Zb
QAL¼ăscale bar 200 µmŦŧ âĖě(ĎČ) Ċă(57 =«ŐČ'êĿ9$#
9ëĖě#)m'rÃĊăŊĘ=òņ9('ŋ"
9ōvČŘŚ(ă" 9ř(Ō«=ŀ1

5%#

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 6         2014 '

%#-

 pygochord *-+),")- .'

 %#-/  0& !.' %$(/+P. flava #¢ç¬|#14ÆÆčľŅ`§Àč8ıģ8Ţġtó%hª8vÈ4_#1`§ö#ľ£

ĢÍVøö Ħď{í8î±4sÐ­ń ăĒĊĦďŨĳ"! ¿254¸HE/+54Ħď{í$Ņé# 
52$Ýō !$1#ŏ| $ % 2Ī8
/5 " /^ØăĒĎ áĥ4ăĒĊ 58ľ£4Ħď$ŏ|öŅé%ŦŘ²8Ŝ. $ĽĐ%aÊ/Ë2 #5"
 52$­ń !$1#ð°5  8ÿ4.#%
58/"Î/Ŋę"{í Ħď{í 8ãň4_ ³
Ķ#"4Ŋ©$uĎĕ$õ¦#13}ď{í Û÷{íĞ8­·5 Ħď{í#Î/Ŋę"?J=RWK4_ Ë2"" /}ď{í$<L@O@%·h/¨ ûĄ´8Ę½įĮÞ$hxĦď{í$ŏ|öŅé8Ã4 ŔĶ"gĝ8~.4}ď{í%YĻ¿Ħď{í$sÐ­ń$Ũĳ%/4 ăĒĊ 1'Ħď ãňĥ"Ýō8/ #%łŁ ė4
 }ď{í$h%  3 $œg#u25yÉ 2ĵ
hª 1&54ĵ$Ģm#%ùĊ 1&54æĤ# ,ăĒď ħĊ$ŗ#4Ýō 4
Ħď{í$Ģm#4Ħ
ď%ăĒĊ ħĊ$ŗ#æĤ# 94.ùĊ
Ħď$šf´  2¾Å5  ùĊ%Ħď$NBCW>TESWRŒd4 brachyury $õñ " 0EMSAW$ë
Ħď$úÄö"Ņé %ğ 25
"¨ ûĄ{í# 4ĢĨŇGCWFT=Œd$õñãň"!#13
Ħď{íĎĕ$ÚoĢĨŇ$Ōņ ŅĿ Ðzĸ5 4.
/}ď{í#Ħď$Ņé ğ 254œg 4 5&
5%ħĊ$Ģm"Ĩ
m#gĝ46
 $1"Õc8è/$ 
<L@O@$ pygochord
4pygochord %<L@O@$hª$^/®É$¥#ħĊ ĨmăĒď$ŗ#4 5æĤ# -ďïÝō 75 /$4  pygochord #Ř%
Œdõñ% 6 õóöđĜöÿķ * 9!"$ñï4Ôāć%pygochord 4ËĂ"ş0$Ýō$î±813Ëþ#4_8øö đĜöºå#14:KSWD8ı+­·Ì#õñ4Œd8ŀ)4.#`§Àč#1
<L@O@$ģ8qºŢġ °25ģ ¤Ç.
Ì]ı·h$đĜtóĥz8wôāć8ıģõó# !$1# pygochord  4$ ºÁ 38°255& ğ 4ē×Vğ¡Ŏėvì$iĴ#13P. flava $ pygochord 4ş%
¥$" / "3®É$Óĉ#Ŋċ$,#Ś5
4_ 7 ¯Ö$Ļŋ%¥$®É [Ëþ"ċ Ļ5"  ş8Ĕ3ŉ. õóŐą8Ĺ¡4ś#ýº0"+pygochord
Þ#ħĊ ăĒď$ŗ#4b$Ýō $đĜöő
/13Ëþ "hª$13yÉ%ħĊ ĢĨ$ăĒ
ď$ŗ$â^ş#İĊ 4 5 pygochord æĤ# 9ĐĤŜ 2·4$#¢İĊ%$1"ĐĤ%r,25\Ġ$ő ŧË "pygochord $áĥöm
Ş%Ò[Ë"$a®Ë2 # 
P. flava % 3ũ6 UÏ$«óÑŗ$®µ8Ē·h#·Ŗ4_ ÿ2542013 © 9 ÏÓ#člh$Ţġ
8Ėė4 Ò#µ"Ť "4ĭš8
4 «óÑŗ Āěpıāć 4.
Ĉòāć¹(
ĭš$uŃjŠ8ñŕţ#3đ94
<L@O@$tó#Ř%
yÉ($tó%4 
®É($tó#%[$·%»Ć0āćĠ#1u 54a P. flava 8ôťpıāćÞyÉ$tó%1Ĺ¡  ®É($tó%hªĩ
h y®($eě´# -´ń 4.
Ŗ#14tó·$ļk ŝhĲ$Čæ#ř+5óhÙĬ/ı ".
Ĳ÷$Ĭ0Ĺ8¾ß#¶Ŕ#Üĺ4_  1. P. flava ¥$àÈŞºåäĚünêHP<L@O@ Ptychodera flava 8ÂŜ
5 2GQI;Tvì8iĴÙĬ%Xīö" HE ÙĬ$bEVG ÙĬ8ıđĜ$Ĺ¡8
 2. Y$Zœpygochord $¼

6

"



 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 7        '+
, $-% " 

2014 %"+'(*

+.  /# )-% "!&.
´ 21 À: 1/2 j (®²)´ 22, 23 À: 1 j (®²)
 6=J9C¬
88J9C¬*!Á`#À"Íµ]Ë.b"À"ÀÁ`ÔU!#Ó Ç-0Á`Ï!#!¤20+0/"À" ;A;L"PÐ¹Ï"¶n s ®²!,a)- !  ®²#Á`Ï"(!¬®²3Ã Á`Ï
W-0/Ò°+À"^§!*hÁ`Ï W-0/"
'|V*Á`Ï3*"3Ê%/!,
lÀÞ"Á`!Ø/¦É '/0/¾¬ª Á`#D9< "¿d¢"SµÌd¢+«d¢  "_Þ¼¥³!Ñe§v©/Frdricq(1883) !,/Á`#£x"ÔU!vq/Á`ÏË.Ùc /0/Fleming (2007) !,/Á`Ü}#Á`Ï+Á`ÔU"s "Æm!~Û3g/ X $lÀÞ (J9CÞ) ! #Matsui and Yahata(2012) !,/ZÃ®²!,Á`Ü}Á`Ï"ØÐri0/"ZÃ®²#(1) À"Íµ]!;A;L"PÐ¹Ï (o 1) vq/(2) ;A;L"PÐ¹Ï"¶n <>¬à6=J9C¬à88J9C¬", !¬"Á`Ü}z/ ri0 6=
J9C¬88J9C¬! #"À! /Èy0 
 ' Fleming (2007) #s¬³¤20+À&Á`Ü} ß3¯k/lÀÞ! *"À"(3uÕ§"YV $$(-0 (o 2)"t×À&Á`Ü} ß, !20/lÀÞ#YV! /b"À"Á`Ü};A;L"P
Ð¹Ï"¶n!*ØÐ /"#  R ®²
#
6=J9C¬88J9C¬! /"À"Á`
Ï3Éb"ÀÎ/Á`Ü};A;L"PÐ¹Ï"¶n"ØÐ3- !/3¬ª 6=J9C¬"6B?NJ9C{± Bothropolys spp.8
8J9C¬"@?>49J9C Scolopocryptops rubiginosus
K?>49J9C S. quadristriatus 3
 3G4NpxELF5NÐ¹`¡3WÅ`¡#HID:=MN-78=NÂ[wÝÖ3¨Èy

o 1. ;A;L"PÐ¹Ï (­f).

¸½y 6=J9C¬
88J9C¬"Á`b""À"·»`¡
3Èy1Q¬! Íµ]!;A;L"PÐ¹Ï
(-0 (o 1)'Á`"À"·»`¡3Èy1
Q¬! ;A;L"PÐ¹Ï!Á` Ë/ _ '."À*;A;L"PÐ¹Ï Á`Ú / ¯0 ®²"¸Q¬! /;A;L"PÐ¹Ï"¶n#T
O", !')-0/ (Ä 1)
1. 6=J9C¬ (À : \ 15 z)´ 2, 3 À: 2/3 j (Matsui and Yahata, 2012)´ 1113 À: 3/4 j (®²)´ 14, 15 À: 4/5 j (®²)
2. 88J9C¬ (49J9CÞ"À : \ 23 z)´ 4, 11 À: 1/2 j (Matsui and Yahata, 2012)o 2. "À3Á`6=J9CÞ.
Ä 1. ;A;L"PÐ¹Ï"¶n.

<>¬

b



1

1

2/3
3/4, 4/5
6=J9C¬(2, 3rd)(1113th) (14, 15th)
1/2
1/2, 1
88J9C¬(4, 11th)(21st) (22, 23rd)º] ®²É0Ô_.

7'%

 Tsukuba Journal of Biology (2014)



13, 8        

2



 

2014 ,$'%2#1)*+!0 ."34,$ '%25  
ù¹ÞÜv$Ú!3sÖ" }ĕÒ7.ß}2
Êė ¨Ü!ēĒ"ģ#&3íĖsÖ#v
$vÉïú#©īd÷#×¤ 1 2 #F;Q"q4  (Makioka 1988)ĩčĹF;Q ( 1a) $vÉïú$v47Ĉª3ÿ"¬*4Ø¨©īÛĢ ġ,výl"­v43ķĹF;Q ( 1b) $
vÉïú$ðvýl©ī3 Ěbr$ķĹF;Qø14ĖĹ#v"ë 3 #F;Q ( 1c)
3 ~4 (Miyachi & Yahata 2012)#F;
Q$
vÉïú$©ī#ĝ_v\ÝĠôÓú\Ý"t*4Óú#lĥ$v#i*2ąeý"! 3Ôa# 2 F;Q$Ú!3! #vÉïú#0
"v#i"n3# * #0"vl"­v43# $6 ! ĖĹ$TDIĹAS>IĹ=GN@SCĹS>IĹ#4 #õÃ©43TDIĹS>IĹ$rě#ë
3 #F;Q åđ43 (Kubrakiewicz 1991, Miyachi &Yahata 2012)AS>IĹ=GN@SCĹ#[ĥ.Óú\Ýv\Ý#¯â ~4 2 (Tiegs 1940, 1947)TDIĹS>IĹ#vÃğ"Ě ¨°Ñ43.ë 3#vF;Q ĖĹ#?U<XJQUX4%a#ĩčĹF;Q/ķĹF;Q#vÊė3íĖsÖ#v#ġuÜĤ#ēĒ zû"!3
¾äé$=GN@SCĹ02.B;E ®ı/AS>IĹ7Ĕ"äé7Ć
AS>IĹ#vÃğ"$4*" Tiegs (1940) "03 Hanseniellaagilis "Į3~ 3 #~"$/má )8! * 1 è#+7Ĕ3-AS>IĹ"kĞ×¤$¼]·3¾äé$q#è}
Ä#Č7ĆAS>IĹ"kĞvÃğ7·1 "ø
¾äé$AS>IĹ#vÃğ7ñöÜ"Ď·3."`¡¦Ċ!3ĳĸ£Ī#Č" #0!
BXQW ģ3 7Âď6( /4,$ '&-5óÀø
KRAS>I#v$ùi"3Ïuìþiæòî#ĭ"
1 {44#v$ïīćØ½ê$
#**ęvì"! vl"$ĉ²# ©ïú
ùi#v\Ý"¯â ©ïú"$v
xïú ²ăvÉïú$Óú\Ý"t*4Óú\Ý$[ĥv\Ýó| 2#ĥo$w !v"$**!ÛĢÈİ#vÉïú Č4 º.ÛĢvÉïú$Óú\Ý$Ï*ÛĢÈİ#Ú!3vÉïú$©īĵ$! UXGS"í#Êė 1¸ 1" ®ı4he$ÛĢvÉïú7«ç"$ăvÉï
ú#+7«he# ·1 "!¾äé¢14óÀ$ #Ô Tiegs (1940)
Hanseniella agilis ĐĘ×¤[ā41$AS>IĹ"kĞ×¤ .4!
[µ ©ïú#d÷©ī¡#vÉïú Óú\Ý7
v ©#íÏī$¾äé¢14AS>IĹ#´!ãċ3
¾äé#óÀ7íĖsÖ# 3 #F;Q#vÊė3Óú\Ý v\Ý"¯â3Ô$ë 3 #F;Q"Ĺc3 #¯âĴ ąeý"Ĭy!
4%,5ķĹF;Q"Ĺc3"!2AS>IĹ#v$^F;Q#_ĭÜ!×¤7Ç3zû§.
3
¾äé$AS>IĹ#vÉïú#©īd÷"ÍÜ!óĒ7¢3"Ā1!  `#óÀ7(*`¡$ĳĸ£Ī"03Č7Ć¿³µÎ
 ¾äé$ 2013  4 » 1 11 »" Ą àl®
ıKRAS>I Hanseniella caldaria 7¿³gÙ®ıKRAS>I#©eĲ7ħĨ=HWĺĦĶĥĥ7pįP9XËÐÅ¾$=FLYWPFLYWCVYEüÌ 0'Ĝ¥7Ć¡
MUO:X"tw 5 Z #ĠôpÕ7f©Haematoxylin and
Eosin Á Ă  Alcian Blue-Periodic Acid-SCHIFF reaction(PAS)-Haematoxylin ÁĂ7¶jĸ£ĪČ7Ć 1. íĖsÖ#vÆ.
ĩčĹF;Q 0'ķĹF;Q: Makioka (1988) 7±.
ë 3 #F;Q: Kubrakiewicz (1991)
0' Miyachi &Yahata (2012) 7±.

8$"

 Tsukuba Journal of Biology (2014)&

13, 9        

.



 

2014 '!$".

+,)

 */'! $".0  1% -/'! $#(0

õª"×Ö

í±"ó

 F<@6* /"2"
F<@'6h1Ē
*&/%lÊ oģ 0Č6 2,%^&Tę6
ÍË%2Ïć'ýh"v(32 (Frederick 1883)3'÷´lÊ&) éĉlÊ.č^lÊ$#lÊÒ&**$ê
îò!ā032ÐÓ!2
 ýh62lÊ'h¤%/2RC>6ďÆ2,Ęh$]ñ!h¤61
ÃÕ6§,12,&Ìj&µĔ6" Ý03 2 (Fleming et al. 2007)
êîò"%h1
 2ę].ýh%ğ52µĔ%'ė ā03ýh'3
3&êîò!Îå%Ėmºµ"ó 03 2 (McVean
1975) ąßä $3 2&'Tę&êîò%Ġ
03 2¯ßä!ć"Ú¼>PĨ%  -p 0½ø6ýh2" Ý03 2 &]ñ.µĔ%ğ2Ýā'*Vng!1
¡$bĀßä&Ąđ%'ÜØ ā032 Ú¼>PĨ&½ø'~ęa 0~éĎéûéüéùéċéĊé%gé 2 (x 1)ýh'~é"Ďé&Ğ!
Ĉ2"u3 2 (Bonnet 1930; Parry 1957)Parry(1957) %/3(DH?Pâ& Tegenaria atrica !'~é
0Ďé%t  9 ¯&çô&1 ¯&+ Ďé6¹¤1¾1& 8 ¯'Ďé&~éa&®æ% Û 2&
bĀßä!'ýh%/ ~é"Ďé6¹¤2 1 ¯&çô&+ h32"Ąđ3 2 ~é"Ďé&Ğ!ýh Ĉ
2"3(~é 0& 9 ¯&çô&eh¤32'!
1&È%ÜØ 2 ¯ßä!'bĀßä%ā032ÜØ6ăÂÚ¼>PĨ%2½ø&ýh]ñ6ìðÖ¥Ä%/ ă¨ ĩ³·¯&Ă!'bĀßä"s¶%~é"Ďé&Ğ!ý
h Ĉ
2/%ā  Ďé'½ø&W!-«ë Þé!2,ĩ³·¯&Ă&+%~ ýh]ñ6¼à%¤2"'ĥ"i¤3
 »%
ýh6 $½ø"ýh&½ø&33&ìðhÉ&¿ĐĂ6 $Ďé&úa%'~éa"ûéa& 2 è%çô&[ÛÈ"$2ĩ³&ĢdµĔ {ýh&½ø!'30 2 &ĢdµĔ&~é
a& 1  h¤ę/1^a%¾ 2" 5 &" 0ýh'Ďé!Ĉ1Ďé%ā032~éa&ĢdµĔ/1-®æa%ýh]ñ 2" ¨0 %$Īx 2ī&]ñ!ýh Ĉ rĎé~ęa% Û2&çô'h¤32"'$Parry (1957) &çô%ğ2Ąđ"¢r2 Parry (1957) 'ýh&]ñ6āĆ qö
2
Y&­
 Ú¼>PĨ!-ã%/ ýhĦ Ô$2" Ý03
2YZ&ã%  -s¶$Ă6Ā¿Đ2"!
Ú¼>PĨ&½ø&ýh% 2?Q9SGLQS6ă¨!
24

°£"Ä

x 1. Ú¼>PĨ&½ø&gé6á¸x.

2013  6 ¬ 0 11 ¬%  ÿ}Ù(f!ĤAPR?Pâ&<QAPR?P Pardosa hedini 6°£"Ñ¯ã'X"wz6ġ¦¯ez&ě 0|%
 g2©ēã!1
Ĝ!-½ø6ýh`^ Ă32" 0¯ßä&°£" Ę 2"ó  ¯ã&ýhk&`^6\U& 2 &Ä6Ñ Ă¿Đ1) ĩ³·¯Ä
1% ÁĚm<R9OÁÇÅ6Ñ fęìð6Ç >E>Qĩ³&·¯6_ &µĔ6^ħĝ!Ă2) ìðhÉÄ
 °£6K7SÀÅ!yÄ%/1IQJ8SĕïhÉ6_hÉ'MNF=BRS:;BSÄ!²þcħĝ!Ă

x 2. ¯ßä!¨0 %$<QAPR?P  % 2½ø&ýh]ñ6á¸x.

9

#





 Tsukuba Journal of Biology (2014)$ +/) #13, 10        





 

2014 )#.

.*,!&'(.0  1% -/) #"*0

õ¸!àß

69I9A
ĞcNĝâĕzd¡ĕz¿VNÅĕz§ĕzė}ĕzĕzĝâ  ĕzÄNĜĕzĝâ  ĕz% 9 %Ĉ[ßĕzþ+/2 µ¼ ¹h$ĕz%fÜ%&S!¼.'y}%Ď
1!äw2
 y}!R}´$&ú²%ĕz0%$ĝ É¨% 1!¶/$#~#"%Ďē$ÜÓ1lÙ&Pø$ålöj\ !
â/2 1 %+Ď%Ĉ[ßUÔ%Ě \#0Ĉ[ßfmÜ- !ô /21 %Ĉ[ßfm&Ü
Ù%ålöj$k %đĂ-Ð£¬#"%Úß7GMB$,¤Ę4r1+Ĉ[ß$fmĕz!%Úßď^4¶/$1! ā!1ÜÙ%f­-Ém%Ë
s4â1! 1 ą) ~lÙ4ā!îñÚßãè& )0ć5#
69I9Aě&ëălÙčx÷ò88I9Aà69I
9A$fě21~lÙ ]Č& 4~7 cm
23 %Ê
÷4® 6;6-ní#"%ÛÒ$fµ¼ &¼y}R}SÏó%/) % ì{$Ü© 1 Á%~R-½»%RÆ»ċ%Q-L?O%Ö)a×#" Ďē¨%ÜÓ4 1!/%69
I9Aě,)ålöj\ !ô /21 Ĕ$69I
9Aě²ç$ çe$Ã%Úßv2 1(Ogawa 1966) %bùãè/,69I9Aě$&Ĉ[ß#Úßfm1!Tª21¼ãè &
69I9Aě4Ý îñÚßãè4ù +%éPÌĒ!
µ¼$Ü©169I9Aě%Ĉ[ßĕz"%. $f 1%4ÇýJ<;69I9AûÀ_]²# +
!%Ĉ[ß#)!)0$ Āÿ1%$of#ðÂ4¦1! #=<;69I9A
Spĉĕz!ď¿!Đá«âá«á4u*Òaĕz% 2 %ĕzþ+/2 ĕz%qîñ¨4±®1
EOB<BK@F`&\ µ¼Õa!Snĉ$22i%ĕz%äw2 %ðÂ/¼!y}$ &Òa!µ¼ÕaS$ &nĉ!pĉ$Ĉ[ß$fmĕz1!äw2
¼ãè.0
69I9A!=<;69I9A$&!$Ĉ[ß$fmĕz1!¶/$# )Ĉ
[ßfm%æ Þ#1!/22%ç%f­%Ë
sßõ¸&Þ#1!äw2

¾³!´Ñ
W¥%º
¼ãè &69I9Aě%R ,¼y}S%
ì { $ Ü ©  1 3 ç  6 9 I 9 A Scolopocryptops
sexspinosus (21 Ø 62 _])  =<;69I9A S.
rubiginosus (33 Ø 64 _])  J<;69I9A S.
quadristriatus (7 Ø 14 _]) 4¾³!Ý  (|)
HB:MCL6 16S rDNA %ĉfĊg 523 4ÎîñûÀ>DB MEGA 4Ý ¹Ñ (ML Ñ) $.1îñûÀ4ù

W¥_]²!¯ĕ²4-!t·$Ã DNA ę%ûÀ4ć+
çe%Ĉ[ßĕz%ÚßÈĆ!ĕzĎ%ď^4¶/$
%ðÂ/fY°4ù 69I9Aě%f­!µ¼g£¬%Ës%ď^$ ô

 69I9A
 J<;69I9A
 =<;69I9A

ðÂ!ôML Ñ$.1îñûÀ%ðÂ3 ç%69I9Aě22%qîñ¨¢±®2 çe%Ĉ[ßĄĖ% (P distance) 4üêðÂ69I9Aï 0.05J<;69
I9A!=<;69I9A&22ï 0.01 !# %ðÂ.069I9A%çe%Ĉ[ßfm%æ &X% 2 ç$Í( !3
ZQ$ 3 ç22$ çe%Ĉ[ßĕz!%f$ ä

|. ¼ãè$Ý 69I9Aě 3 ç%¯ĕ.

10&"

 Tsukuba Journal of Biology (2014)



-#



13, 11        







 

2014 *!&"0

&$'()

/. ,1*!&"02  31*!&%+2
ĈÈZíì
MOHČ%a#ÜÛ#ç¸4´ĀČĳ80 ¨ 300 ÷ö
ñ254 (Jordan et al. 2004; Worden et al. 2004)ÜÛ
â#Û# 4ĥĐ"çèć4
$óø#13
õ5  (Liu et al. 2009)MOHČ#%MOHKQ &54
ďÄ$û´¤û 573-¤ĉi 2Ñº54âêì"İØÒ;V=KT 4
MOHKQ#%ĀĉĨ
$ 10 mf]$Ĩ$/$ 4\ÆÄ µm $8Ðã$/$0q#Ĝ~ëĚì"/$+4
MOHKQ /ÕĊ#%Ö$1"/$ ¿254(1) eïĺMOHKQ%ģ#eï4 4(2) B:UY@ĺhĨã¹$MOHKQ% 5~10 ms į¬#òÇĩ$#B:V
ã#« ą.4 4(3) ĴjéĎ|ĺMOHKQ#1
3Àĭ5Ķü Ĵĉ#Ğ&54Ò Ã°54(Kawachi and Inouye 1991; 1995)
očóø#13MOHKQ$Ğ}w³#% Ca2+ Īl4 + calcium-induced calcium release (CICR) &5
4 Ca2+$D@IV7­4ÕÑ MOHKQ#
4
õ54 (Kawachi and Inouye 1994) Ĭ#
MOHČ#%CICR #Īl4Ĺ÷ĳ$ ¢i (RYR,IP3R) $Ģg 4
ôĖ54 (Gerald 2013)+
RYR ī¡x4OX<:Y7MOHČ#Þ{4 MOHKQ$B:UY@ \Çì#¼w5
&2±#MOHKQ$, 54 äĘ 54 (Kawachi and Inouye
1994)$±MOHKQ#Úíóø%) 8!"5
2eïB:UY@Ĵjé ğö,254
MOHKQ$Ò"Ğ}S<JFR$åē%ĝ8"$
2+.Ëóø%Ca
1' CICR #°ı7^ 4ĕċ7Þ{
MOHKQ0Āĉ$Ò7Ē£4 MOHKQ /ÕÑ 1'$çåìâ·#$ñđ70 7í
ì 4

ĂÎZĆ£
18S rDNA Ĥu$D[AYDY@#13²Ĥu7éjºþăÔ#13ĦÁĭÏ%55A8 Ï
Chrysochromulina simplexD1 Ï Haptolina sp.3
NIES-1333 Ï A8 ÏNIES-741 Ï D1 Ï ¨v÷$Īl4 s  Chrysochromulina ¨
Haptolina ¨%þăì#00Į5ĕċ7Þ{4 ķ$ĂÎEGTA %B:UY@$¼w,25 MOHKQ$, 54¶%,25" 
RYR ī¡x$OX<:YU9LEY% /#B:UY@$¼w$±MOHKQ$, 54¶ ,25IP3R ī¡
x$ 2-APB %)*q$Āĉ$MOHKQ B:UY@++5MOHKQ$, 54¶% 2-APB /¯ę5 Chrysochromulina ¨Haptolina ¨¶$ö®#ª ,25$ Ć 254ĸ# 2 ¨ĩ
$MOHKQ$Ĩ$Ġ 254
55$Ĩ#6
MOHKQ7Ą¾4 IP3R $%2
ê"4 /5"
RYR ī¡x IP3R ī¡x$_ÆMOHKQ$ã¹#~ 
2
5+Ģg$#1$,õ
5 RYR
IP3R
Ĭ#ÕĊ4õ5
RYR ī¡x IP3R ī¡xB:UY@0MOHKQ 54¶#Ġ 2
Ĺ$ ¢i# ¶#Ī6
4āě#Ġ 4
Ć 254
MOHKQ$, 54¶%áÝ`$ Ca2+$ß¥%"CICR $ī¡ Īl4 +MOHKQ$Ą¾#% CICR µĐ4õ5d±$§Ê %2 $ ¢i$MOH
KQ 54¶āě$ĠĹ−APB $¶#,25Ġ$MOHKQ t54}z7ù ×.

ÌÅZÆÙËóø7č#3NISE-741 Ï (Haptolina hirta)7úæóø»13NISE-1333 Ï (Chrysochromulina sp.)7Ó©
bÿ13Âk
+ÍcàCYOUY@7čýĵ Q:?XNPGHÙ#13ôú10 Ï$MOHČĮÏ$â#ĨMOHKQ7/ A8 Ï
D1 Ï76Ĕ 4 Ï7éóø7č ķ#é4Ï
ĩ$þăĪl7ė(4.18S rDNA Ĥu$D[AYDY@#13²Ĥu7/ # RAxML 7éÉ¦þăÔ7jºMOHKQ$ CICR #Ī4çåìâ·7ė(4.
Ca2+ ġ½ì#>W[H7çº4 EGTACICR $ RYR ī¡
x$OX<:YU9LEYIP3R ī¡x$ 2-APB 7Þ{±núĲ´ħ#13MOHKQ$ã¹ 1'MOHKQ7/Āĉ$y$~7Ē£

 1 D1 Ï$pĲ´ħrî (ðĺMOHKQ) 2 A8 Ï$pĲ´ħrî (ðĺMOHKQ)

11+)



 Tsukuba Journal of Biology (2014)

$3+!



13, 12        015,-.+' 

2014 /(+)5

4% 

2 &6/( +)57  "#8 6/( +*07
ĖÇ"ø÷

£%02^Ì&ŌÛ\jğ&PW>X\uļÕĴ&KVSZ[
ć\2.2ķ|$#Å1 $U]?YJĝ&é² ĥ£
4úå Ăī4"Åü$ěďj7º$" 1
dØ÷%ěďj7
¢î%03Òőîá78!3î
è!3" ă4,wĈčĦÍ&ČÎ% .r¸´!3U]?YJøu%iđ3" ă4œN]HCHVFOp%02¿º4 U]?YJøu%  '4&Ą".œ¿º&~ĈčĒ7¬¸$ ĸ&¢î´U]?YJŏ&Ĩı%  e&0$=:
SB[@%¢î3Ą'41
¬·÷é² 1.^ę3ÄýĄ'$g`&ČÎ 1ÌĄ'U]?YJø&ÂĄ!3"ČĬ3¢îÖ«&ĦÅ =:SB[@&ju!&îĕ\Å1 $ojÀ&{ Ăī!
"TEM %03ĥ£ 1ÌĄ'=:SB[@&Ú&uļ/ju&ċĐa%.3"Œ+ c1ÌĄ'=:SB[@%¢î 3" Å1 %$^Ã!=:SB[@&&a%$ "j!'ŌÛ%03ĶàĞ| ģ14" 1ÌĄ'ù÷$h¾!'$¡b&ju!Ù®%j*v Üa7àf&=:SB[@&ju*ms3" ă4,fĄ&=:SB[@\Üî|è 1'öģ4$ " 1ÌĄ'é&Ą&=:SB[@%¢î îá 3Ę´ 3

 ĝŏ" (Üô&Őèĵł% 3îïĔ!2^Øâ
ĮĔ%»Ő43.&"īĭ ^Ě÷!5 Ň'ĝŏ&a%'êĆÒő´Ą!'$r¸"»Ő#
1.ĞäÒő´Ą/
^ªë°r¸Ę7dØ÷%»Ő´/¢î´&¯¦Òő´Ą,!3 ¢î´&ĝŏ'òÚŏ/ŔŏLH 1.ģ  3
$ 1&0$ĝŏ'^Ě%¡b&ju!îá 3
-ģĸ4 !2
Ë%öģ4 $Ą.À 3"ē 143
ĝŏ&Ö´7Å1 % `!|è&ju"í%ûø Â&ĝŏ7½ĉ 
"'ŋ¨%x!3 Ìþą%  rŎ±Ń7ð ,,$Üî|è7ĥ£ ûî\¢îĝŏ7½ĉ"5ĲĻ&Üñ%îµ3=:SB[@&^Ą 1¢î´SIWTA"³643ĝŏ
7öģ!Ìĝŏ&Ĉčwŏ÷iđ)=:SB[@*&¢îÖ«&ĦÅ7ø÷"þą7ĞÃÞÜñŕ(§ì 2 _øŖ02¼ň=:SB[@ 1¶Ïoj7Ĺz^ļ'Āÿ Ìĝŏ7¼r
Ŏ±Ń%02ÌĄ&¬·7ĥ£3"".%
=:SB[@*&¢îÆ&Ö7ĵĎ! 60 ÆŅĥ£,ÌĄ&¢î ¡béõ÷!3 7Ă -3-¹%îá3f&Üî|è&ju 1.ÌĄ&½ĉ7Ğ1%įÑŊŎ±Ń
ŕSEMŖ"ĳĸŊŎ±ŃŕTEMŖ%02ÌĄ&¬·)±ĊÕĴ&ĥ£7Ğ&Ň SEM ĩÁ) TEM ĩÁkĠ!
' 5%?XE]X9XGLI" 1%Ŀ}<CS;T%03dŀ7Ğ,ÌĄ&¢î¹7Å1 %3-ÌĄŁ%¢î 3=:SB[@ju&±ĊÕĴĥ£7Ğ&Ň%'N9[ãŕM>W[ĿŗQXRW[ŗľĿŘ15ŗ5ŗ1Ŗ" 1%Ŀ}<CS;T&dŀ%02 TEM ĩ
Á7kĠĥ£7Ğ^Ø!N9[ã7lð&'ā=:SB[@&Ú7Ð1 İĜxç7k2/3-!3wĈčĦÍ!'¼ÌĄ 1 Ċė7R:>ZMPFHÞ
%02~ŉ 1 18S rDNA Ľy&tń28S rDNA Ľy&^ļ7©Ľy7Ý 18S rDNA28S
rDNA &ġÀĺhG]EDFH7k¸RAxML (ver7.2.6)%02È¤Ĉč×7k¸N]HCHVFOĦÍ.Ğe®&¥ÊÌþą!'SIWTA =:SB[@%¢î3"tÂ¢îņn7öģ! 4 1.|è&ju%ßøĝŏ7½ĉ " ŀĢ!3,ÌĄ&Ó&ĂĆ¡béõ´&Éæ%ņ3ĪĊ$þą¢î%03¡b*&­ō&Ôħ Ê,43ČÎ"ē£Ĉčwŏ÷þą rŎ±Ń%03¬·ĥ£SEM\TEM %03±ĊÕĴĥÂĤ¢î´SIWTA&įÑŊŎ±Ń(SEM)óq

12

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 13         2014 &) Heliozoa SRT127 )!#%$ *& )+  ,"ġÑZĀÿ
 Heliozoa # ĖĢ Æ§ó!h$µ©đº"Œ
axopodiumşĿēŠ3ĮÇÓ/²»ÿò¶3Àúúñ3(zŚĞ Řřµőı¤¾ī ýŇzĔĘ¡ÿĲ× ¨p0ėØHeliozoa #@GVRJL
5X+<X=A4 f"zŚĞ!p/*"Ì "zŚĞ!
« ôĎ"ĔĘĞ -ß¼0 Î- ÷#"ôĎ"ĔĘĞ"' HeliozoaşŖĨœŠķĺ0/Heliozoa # extrusomeş§yĭĝŠ3À
 axopodium 3Óò¶ÿ ßŅĖĢ"a·! /ø²" centrosomeşa·ĒŠ3À£ğ0/÷
2 Ě 4 Ā 9 ĉ 19 « ĴŁ0/ " #²»²Ļ"'!*".
zĔĘ¡ÿ Ąİ3ÏzŚ"uÝĳ ¸į/,zŚ"äĆ Ýĳ")!#z
²»`Ê!ŕ,.ĶĖ F[B ç)-0/
Heliozoa " 2
Ě"" 1  Centrohelea Ě/"Ě#PG=YH
W4:W@E ÖóĖĢĬ"ò¶$ axopodium 3ß¼
/µ©đ"ßŅ!,^jzŚĞ"zŚ Ī20/ SRT127 Ü#2011 ¯!Õeŉí é­ -Đë¡úùĉ¡ąČĉúñĉ¡¦Å"þŞ®¹æ!,ŗ0
³«Ûśºúúñ"śÜ/cmÿ ²»ı¤!,.
Ôúñ# Heliozoa !ò¶ÿ axopodium 3À-!
Centrohelea Ě!ò¶ÿ centorosome ĖĢ"a·! / Ćķ0 ÌĄċ"ÎĆ Śiº#Ćķ0 -Ôúñ#É"Óa·ĒŖĨ/Âì0ÔąČ#SRT127 Ü"zŚ¡ÿjĝ"è£3Āÿ18S rDNA 3ûzĔĘĲ×$o¡řµőŘřµőĩořµő3ûĶĖ ²»ı¤3ĪÊê zĔĘĲ×#& SRT127 Ü" 18S rDNA Ŋ|3è£ĝÃSFX! GTRGAMMA 3û RAxML !,/ÒªêĔĘá"k¼$Òªê! N[G@GVDOÝ£3Īo¡řµőı¤#ZEISS AXIO Imager. A2 3ûś 510 ÍĀ"ĖĢ"ň²»"ı¤3Īı¤0ŝ
ð"¼z3ĸ%/)">W9ĩoÙĤ# Lyso Tracker
Yellow-HCK-123 3¿_SRT127 Ü¥Ċúñöħ Coscinodiscus sp.ěħ Cosmarium sp.3 48 ÐŔśĵÈ3ûĪ,.ĶĖ ŝð²»"ı¤3Ī)"ļÚŘřµ (SEM) ı¤#;XB[X4XFMHŌ8@P6Qdō£3ĪĖĢ!NCXwėbï3ËþŎLV?6Q3ĥăĵÈ3ûĪ&ĩořµőı¤"ėØ3ľ& 
L5OUID>T3ûÓâĻ
3îĲĵÈ"ı¤*ĪŃņŘřµő (TEM) !
,/ĽĦ{ðı¤#
;XB[X4XFMHŌ8@P6Q!,/dō£3ĪĖĢ3áģ~ĽĦ{ð3k¼
0-3ŋŌ6VY:7YŌŐÙĤĵÈ3ûĪ (*& '+

B
A

C

Figure 1: SRT127 Ü(A) o¡řµővĂ (B),(C) ļÚŘřµővĂ(ŝðŠėØ 18S rDNA Ŋ|3ûĔĘ×"ėØÔÜ# CentroheleaĚAcanthocystidaĀ!«/ Marophrys marina N[G@G
VDOl 100 %°ÄÀĔĘĞ3²¼&ÔÜ3)Acanthocystida Ā"ĔĘº#N[G@GVDO
l 79 %¢q# *""åŀÿŜÄÀ3´-0 ę o¡řµőı¤$>W9ĩoÙĤ"ėØSRT127 Ü#ĖĢĬöŌĻ"ŝð3À Î-  
"ŝð! SEM 3ûĶĖ ²»ı¤3Ī1
2 ċŚ"ŝð"  Î-  1 #K[G"ň
nď!Ė/}ó"Ŀň - /ŝð* 1 #"^¬ĖĢ!Á/,! /Þt²"Öóŝð}ó"Ŀň#Œĕ 3 µm ač&Öóŝð#a!x' .3ĖĜ&0 TEM !,/ĖĢsň"ĽµĖßŅı¤"ėØĖĢ"a·!
ø²" centrosome 1 Ćķ0&PG=YHW4:
W@E#ÖóĖĢsÉ ŝð ²¼0/à ı¤0Ġ¤ 18S rDNA Ŋ|!,/ĔĘĲ× - SRT127 Ü#
Marophrys marina !Ò*łĜ/ ć0&
TEM 3ûı¤ -Öó"PG=YHW4:W@E+
centrosome ò¶ÿ ßŅ Ćķ0\Ê
M. marina "ŝð#öŌĻ#"²ó*Ăā ŏó/ nĪąČ,.Î- !  .
ÔÜ"ò¶
#Î- !ü /g]3ľ& SRT127 Ü# Heliozoa
Centrohelea Ě Acanthocystida Ā" Marophrys «!łĜ É«Éċ½ ±/ėĹ &
0-"ėØ -zŚ²Ļ" 1 /öŌĻŝð#
Acanthocystida Ā"rńĈnõ´0M. marina ôĎã Â¤0

13

'% Tsukuba Journal of Biology (2014)

($0
! 

13, 14        





 

2014 .#'%2 SRT167 "2*,- (.# '%2)  :+) 1 (.# '&/)<ĉÁ\íì> CHWVKM9Y&Ĕđ/ãđ#"%t³5,đĺ
/¹Ļ±%ķÕĒ}Ïà% çĒ#"! Ò#Ëļ
ª²%çà5,ïÍçà%dĕþĂć%^ 3t
³±/Čç±%CHWVKM9Y%Ò±&óøĦ6
3^½ ¹Ļ±%çàć%Ò±&a¿ð#Ý C
HWVKM9Yuo%yþĂÓ5Ė3!¹Ļ±%çàć
&02ÎÇiģ Ė14t³±%çàć$Ô)02õsì 3!Ĉ 143-¹Ļ±%CHWVKM9Y%
Ò±5åĘ3!&t³±%CHWVKM9Y%Ħ5åĘ3_ įĕ 3
 SRT167 Ì&üÙçæöóøö%ëľ¥°Ö$
02MW<%Û×Ü 1ĵ4¹Ļ±%ķÕĒ%ļÌ318S rDNA %īyĬ{5é  BLAST Ðÿ%āÉÇ
Ì&CHWVKM9Y$¤3!ô4 Çóø & 18S rDNA Ĭ{5é yþĂĘÈ!tĹ®ı(ĶĹ®ı5é ª²ė¡$02SRT167 Ì%þ
Ă\yĺìnĆ5¿1 $3!5íì!
<½Ø> SRT167 Ì520¿Æ 14 ÀĳÂÆ 10 Àĳ%æ`$50%Û×% ESM  ļ.%5óø$é Ç
Ì% DNA 5¶xPCR Ø$0 18S rDNA 5¦
čď$ªĞġº45PCR Ø$0Ã$¦¬
B]@[B[?5ē ! ÇÌ% 18S rDNA %īyĬ{5­18S rDNA &^§%B]@[B[? &uĲ5Ĝ+4# -µ 3cĳīy%Ĭ{5QW9S]5 
1$B]@[B[?5ē ­14uĬ{5ą3! Ç
Ì% 18S rDNA Ĭ{!yþĂĘÈ$é yþĂĘ
È & RAxML 5qéÄ£Ø5é þĂÓp³5ē !
!.$P]HCHWEQ(BP)ĘÈ5ēĤĩĶĹ®ı$ R]YS:[H %ĤĩĶĹ®ıė¡%āÉSRT167
Ì$CHWVKM9YáÅ%ýâ¢Õ&ė¡ # ( 2)
*ķÕsú$7>ZJSÑĥė¡4ğĐzß$03®ĀÑĥė¡ &^%Í!%vī$¿ð#Í¢oýâ>
XCF%THA[IX7ė¡4( 2)
<Ĉ¡> 18S rDNA Ĭ{$yþĂĘÈ 1SRT167 Ì&C
HWVKM9Y%QWBG87ă!þĂć5ª³3^½
ă%¾ò% 2 ÷!%ĪkìĠĵ& !ô4
 QWBG87ă&2 ¤ 2 ÷ Placidia cafeteriopsis !
Wobblia lunata ęĢ4 3Ûè%¹Ļ±ķÕĒ 3
2 Ç%aûĲķÕ5·|ķÕ$&CHWVKM9YáÅ%ý
â¢Õ3¬ķÕ5é Ğ%_5Ĩ}3ġħÚ5ē Ĵ&|ķÕ5|$l'gė¡4ÇÌ%ª²ìá¯(Ĩ}Ò¨ýâ¢Õ%ÅÞ7>ZJSÑĥ#")&QWB
G87ă%ª²ìá¯!ê#3.% 2 Ç%fûĲķÕ 7>ZJSÑĥ5·ýâ¢Õ5·# !
Ýĺ m   3 C H W V K M 9 Y !   Adriamonas
peritocrescens ! Cyathobodo petersen ¸143 A.
peritocrescens &yþĂĘÈ$02OA;=ă$¤3
!ô4ĀĊ%Ĳ 7  9 m¦ 3  5 m !Ç
Ì02 !ħÚÀ$|ķÕ5|½$l'!Ľß5·!! á¯ 1ÇÌ!&ê#3C. petersen &Ío3!
Ý ÇÌ!ê#3
 j_%yþĂĘÈĹ®ıė¡%āÉ 1 SRT167 Ì&Q
WBG87ă%¾ò%¤$&©&*1*ÞĎCHWVK
M9Y!ęĢ4 3h%çà$.ě©3÷# ! 1
QWBG87ă%¼¤¼÷!´ !© 3!āĝ

03ė¡ &?YD]Y7YGNI!Į<CT:U eį5ēĀĊ5é ĭĮ:W[ ÊĎĚ»5R]YS:[Hė¡*eį5ēĀĊ5Óċ~ğĐzß
5p³¬$ĭĮ:W[!>;[Įİ ÊĎĚ»5ė¡<āÉ>\yþĂĘÈ
 CHWVKM9Yv % SRT167 Ì%þĂìnĆ5ò3-
18S rDNA Ĭ{5é yþĂĘÈ5ēāÉSRT167
Ì&QWBG87ă% 2 ¤ 2 ÷ Placidia cafeteriopsis !
Wobblia lunata (41$ģĄ#Ĭ{! BP r 100 þĂ
5ª³
\Ĺ®ıė¡ tĹ®ı$03ª²ė¡%āÉSRT167 Ì%ĀĊ&î«
2  8 mäª ķÕīùxª²5 ( 1)fûĲ%ķÕ5 2 ÇÅ Çì$ħÚ± d$ġħÚ5ē Ĩ}&Ė14# ħÚÀ&bķÕ5¬½$l' 

14

Fig. 1. SRT167 Ì%tĹ®ıwïC@]YL] : 10 mñĸ : ķÕ

Fig. 2. SRT167 Ì%ĶĹ®ıwïC@]YL] : 500 nmñ : 7>ZJSÑĥ
N : Ín : Í¢o



20

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

6':
$, 3+;4-13, 15        





º¯±Ë
1) Ï ĮË ğ +¬ĨÂÖęg0ĆÝÉ! 40 pĥÎwMY   (0.02 g malt extract, 0.02 g yeast extract 0.75 g
K2HPO4, 15.0 g agar, 1.0 L deionized water) !­ë2 ĕĥĤÔÒĬ¡ģĊ0÷2) ġĄË ăıxİ?XAZn¬{ 3 ëĭ"ē (==7ê,26OCÆá, P>FSÆá) "2 mm ±"°Õ08 jG
BE!l.?XAZn 4 Ò (==7Ăx, 26OC¼, P>
FS¼, ³ç"Ñ) "TAZ\!ďú:XKU# 8 ¶ 7²10 ¶ 18 ²" 2 ďú3 ĕĥ!zz:
XKU#ĆÝÉ! 40 pĥÎwMY  !­ë2 ĕĥĤÔÒĬ¡ģĊ0÷.."Òē!K
VE=DT4Qĭ"g oÙē"°Õ®0ĎĢ3) ĮÀ"åîįĒÐ"¤Đİ 1) Ï ĮË 2) ġĄËoÙKVE=DT4Qĭ"g0 \"H8DT2m!pĩñ Įñ Į\¨g +ÿ0pĩ
.."ñ Į +pĩóð ĮH8DT2m!a Į0ćÿ"ßāg¨0«Å
KVE=DT4Qĭ"įĒÐ"¤0Ċ%pĩH8DT2! 16S rRNAęe"Ěpěq0Êęeċ»!*,~

15

2014 4-"20"8

8&97/!(" 20"8<  )#*=% .;4-

þ´Yâà òĄ#ÜÍÛ"_g0h-2RZH"ùéÁvôÿ"g0h-Ąĭ)
2RZH Ĩ}ô
ÿ"kg)g0h-AOM9T6Iĭ!dĈ.-
K
VE=DT4Qĭ#"_(µ(xà òĄü+.
 ,¾ 1Ĵ4 j"ÿ + -vó g0h-ĄĭAOM9T6IĭKVE=DT4Qĭ#2RZN@2!
©"_µ(xà g0h-KVE=DT4Qĭ
#òĄ"Ėt0Úċ-\Ğĉ ÜÖû-
KVE=DT
4Qĭ!#ÙKVE=DT4Qø1 â 4 è 16  36
ë ã+. ,ÜÍÛ! -ėÌôÿ)g"·Óg)2RZH"§!pĭ.- ²¹#Ąĭ)AOM9T6Iĭ"Ä¤!"đ¿#ć/.  KVE=DT4Qĭ!"%%
đ¿#ć/.
%[Ě"Ąĭ)KVE=D
T4Qĭ
58=6HZA!©-ôÿ¤òĄ"28S;=ĭ
#į -H8DT2)ĜÈ!¤ - ã+.
- KVE=DT4Qĭ!Ħ-įĒÐ"¤#Į]"ħ+.º¯!Ãč.!Ę Ü§àđ¿#ć/.¹äì#ăıx! -KV
E=DT4Qĭ"Ä¤0ċ³-(!.+"Ü¥įĒÐ"Ħi0³+ !-0âà " 215<

õ½1) Ï ĮË 2<:3¸~"yąĂ¹WSI"í_TAZ*,KV
E=DT4Qĭ"a ĮÀ0åî"saý ++.À#öd
WSI"í_TAZ + +.
 1 À #g"§à×¢ *$ÜÍÛ!g0ª+ Schizoplasmodiopsis pseudoendospora ~.
2) ġĄË
 |Ò!ďúē\!oÙKVE=DT4Qĭ"ī#==7Ăx! c" 3 Ò*,(·¦!ı==7
ê\#P>FSÆá\*,(·¦!f  (Fisher "ÇååØÃ ; p<0.05 ; Table 1)
 ġĄË!*, 4 ĮÀ åî==7Ăx!ďú
P>FSÆá*, +. 2 À# Protostelium arachisporum
³ç"Ñ!ďúP>FSÆá*, +. 1 À# S.
pseudoendospora ~.³ç"Ñ!ďú26O
CÆá*, +. 1 À#up Ġ"Ąg0 +.~3) ĮÀ"åîįĒÐ"¤Đİ Ï ĮË +. 1 ÀġĄË +. 4 À_ 3 À#==7Ăx!ďúP>FSÆá*, +.H8DT2
Rhizobium sp.!*,ġĄË +. 4 _ 1 À#³ç"Ñ*, +.H8DT2 Sphingobium sp.!*,a ĮįĒÐ"¤Đİ"õ½!#â]đ¿_-ü ġĄË!*-ēYÜ¥r"īïo"õ½==7Ăx"KVE=DT4Qĭ"oÙī µ(ı .#==7Ăx*, +. Rhizobium sp.!*, Į À [Ā-'w==7Ăx!#KVE=DT4Q
ĭ &H8DT2 'ċĝ.-b|Ò!Ü
¥-įĒÐ KVE=DT4Qĭ"p!^-Ī0įĒ
Ð!-¤0Ĕ³+ ! %==7
ê +"oÙī#P>FSÆá*,( įĒÐ H8DT2"ē"¤!(bđ¿ £ĉ-
Table 1. ăıxİ?XAZn 4 ©!ďú 3 ëĭ"ē"KVE=DT4Qĭ"g oÙē°Õ®
ē
==7ê 26OCÆá P>FSÆá
Č
==7Ăx
3
6
12
21 a
26OC¼
1
0
1
2b
P>FS¼
0
2
1
3b
³ç"Ñ
0
2
2
4b
Č
4b
10 ab
16 a
30
Þ -2UJ1LBEĥ#ēĥ©ĥ·¦!oÙī!
 -`0..æĲFisher "ÇååØÃ ; p < 0.05 ĳ©

)'

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 16        

*.3#/-2 2014 +%)'3

10 $ 4+% )'35  !"6 &4+% )(,5ęÊ"÷õŏ;<DR÷&rŉõęÊġŉ'à]!īñŁ[%Ĳq ĐÖ7ĳÀġĽ'Ł[%Ĳq Ìt%¹Ă}õ$ġĒ!àñÈĢ&ĝn%mñ4GS?P=Cď"&cÀġď"&őď%r
25 įª&rĈĎĦÑ%13±Ė%©;<DR
÷"vĖ%©ITMR÷"'{ĈĎĒ7¹" uÉï!'52';<DRbĽ" Y%Ď5 
ê0àñÈĢĝnmñġ!4&%¤;<DR÷ġ&+"8#'Ĝñġ!3&ñäÚ¬'ló$452'#&1 %Ĳz¹Ă &6Œ_iĬÕ%13
őĀ&;<DR÷&ġŉ 
I@PQA÷ÈĢ&ć13ōŇ«%qï
4"7ôĤØħ&čÒ52';<DR÷&ĲzĴþ7Ħĺ7Á 4" uÉ&!%4Æâ"čÒŏI@PQA÷ÈĢ&¿ł"Ō×&üĂ
aĀ&I@PQA÷ÈĢŎIOLI@PQAJ>BVI@P
QAŏ7Ġø!¿łć7Ċ¢Ŏºñëĭk3ŏ%ÀĀæ!ĉ 1 ıĿŌć[!Ě Ô°¹
üĪ5%'Ě7 MEYE Ŏ¡ÖŌŏ%{Ń Ō×7üĂň³Ļ7ò ĥ£ 
ÈĢ&ĦwWåząnķ&ĥ£
52&ġ ÈĢ&åząn%ñ·4ě¶ _¸5" 2ÈĢ7Ħw åzą7Âqn7jň³Ļ
1( SEM %13ĆÕ åzą&#&ķgŎvĝW]ĝW
±ĝŏ%ġ #&1 %¼y 4& 7ĥ£rĈĎĦÑ
rŃġ×% SSULSU (D1/D2) rDNA ņ&ĸs
7árĈĎĦÑŎÌ§âŏ%13ITMR÷;<DR
÷&cĀ"ÞĮ 
52&ĈĎrŉõgđ7É2 %čÒŏ
I@PQA÷ÈĢ&ć13²25;<DR÷ġŉ

I@PQA÷ÈĢ&ć13{Ń5;<DR÷ġŉ7
Ő%ý
5&ġ/;<DR÷ġŉ&ē7çÐõ$ÙİŎŐCŏ7Í IOLI@PQA&ć 2&ġ'CNV<RF:9 Ĕí%ĸs¦Ě Ě&Ïăķ%ì´õ$píÙİ7»" 2ÇúĀ Pinnaticoemansia
coronantispora "5J>BVI@PQA&ć 2&

16

ġ'CNV<RF:9&\ă13Ã¥í%f(ŀ©Ó¦Ě Ě&Ïăķ%ĞíÙİ7»é!
;<DR÷&5&
ÇúĀ%/Ĩ¯Å©ÅĀ!4"uÄ5\Ė&¦Ě Ě%Ĥ254hŋÙİ'c&;<DR÷ġ%'ú25$ã÷*Ùİ!4ŎŐBŏ¦Ě Ě'hŋÙİ%13vĝ%dù Ýåząn7ĥ£čÒ5&ġ/¦Ě Ě &hŋÙİ&ķr%13I@PQA÷ÈĢ&vĝŎŊĵWWvĘŏń%Ņ®%dù4" uÉIOLI@P
QA&ĝn!'Zÿ°&hŋÙİ&èķr!vĘ% ñ4
xß7½-1 % dù &%¤J>BVI@PQ
A!'Ğí&hŋÙİ ¨ľ  ģń%oöí%­3d Ŏőŏ,\Ā"/%dù¦Ě Ě'ĝ
n!ôğ¹ļ&ĝnĚ7°¹4Ú üĪ5
&ĝnĚ ć""/%¾q54"!ć[!Å$¦Ě Ě7ñ4" ñäð É2 %$I@PQA÷ÈĢaĀ 2&ġ';<DR÷&ķ%gđrĈĎĦÑ&čÒ
52aĀ';<DR÷n&ķ%55îĂ&<UXH7$|÷n!Ì/tÎ%rz
¹ĂrŉĒ"uÄ54ĕ£ŏàñÈĢmñ¶&ITMR÷ġ'^&±ĝW]ĝ%dù4 
Ðûā!É2 %$I@PQA÷ÈĢ&;<DR÷ġ'vĝ%dù Ĝñ¶"ĕ 25 ;<DR÷ġ&]%ÈĢ&vĝ%dùÝ4CEXB7»Ā " `'l&ÅúĤ!4,ĈĎĦÑ
%13
52&ġ';<DR÷n!Ì/}õ$rŉĒ!4
" uÉe[&" 2;<DR÷ġ'ITMR÷
ġ13ĝn"Ł[~Æ!&ñėCEXB7Í4ĀĒ7Č 
ÛĄ%Ł[!&ñä%Ķµ7 ¹Ă "ĦĹ!4
Ðûā!ĦÉ5ő÷&]Ŀõ$¶ĭ7Í;<DR÷ġ'åząn)&dù&.%¦Ě ĚÏăķ&Ùİ7ì
Ü%rz  52&ġĒ"àñÈĢ&ĝą%dùñä74ITMR÷&¦Ě Ě&nķ&³ċÙİ7Þ
ĮØħ4"!Ë%ĩċ$ĲzKVDC7ĦÉ4" ě"ĕ ï TEM 7ò Øħ]!4





20 Tsukuba Journal of Biology (2014)5 :#2(
&3 "-?8.

13, 17        ;+ASirobasidium %

 

!20!=

=!4,<>9! 20!=@  )$*B' /?8.

Ľâ5*ěĚ
Ó±ŅŷS\OFqŷ) :48CRH(¯¨(±µ});ÉÑ8Ņž(k#2ä2uŊĚ&E^dX# 8
(òƀÚúÆ)ŅõÉÑ3§ŉĩ(đ(t'tđČ(ū};œ8ŀđ3tđČ,(¸đĩø1"®ú# 7
đÐĮ' "
űŎ&Ê;Ó " 8
çqŷ(k#)K`CD\GķĮĵ
Ě'ä2ªŮ'|ĺ8$9"7(Hibbett et al., 2007)qŷk#¡eĜiuŰÿč(E^dX# 8
çķ(¯Ů;18K`CD\Gě3V=`TKL?[ěŅ)¢čî(haustorial filament)$
ùŦ#tŅ'¸đ8Ņ¸đŅ$Ļ69" 8.Ņ¸đŅ)Ó±ŅŷIUCbqŷ#2D_dQ(ĀţĚªŮ'|ĺ81
Ó±Ņŷ#)Ņ¸đŅ6ď¦Ő698®ú&òƀÚúÆđ(#)$
wŝ
Ĩ"69" 8(Weiss et al., 2004; Oberwinkler, 2012)(wŝ(÷Ř' 7
K`CD\Gě(Ņ¸đ'Ÿ8Śİ&ğŐÎŎ
ňĠĦ~»&.(ž2ćn" 8
#çĠĦ#) Flegel(1976, 1981) '57µƁ¶#đĆ
Đ;³ũ#8$Ģ9 Sirobasidium magnum ;ē Ņ¸đ%(5 'š" 8;Ş-81'
rů'58Ņ
ĭÉÑ5*·lŋŅ$(p ©ƀ;ň .ç¾Ņ$"ŗŤ9 1962 Ä(ŗŤvŹ«~Ż©ƀ~$2'&CD\Gě'¾(#)$Ę:9" S. japonicum '! "ž²Ě÷Ŗ;ň ©ƀĮ(ġĨ;ěÕ

2014 8.

67

! 219@ĳí
 Ì69 S. magnum (Űÿč(Ņó;růĳí !
(ı/:#D\bX;æİľk' 2 !(ô;0pôŅĭ(ÉÑś169©§k6ħk'{*Ņĭ)
ç¾'¨Ě&ŧŵÓ±¢ņgÏ( epibasidiaÓ±ľ±;ÉÑ
Ď©ƀg#(¢čî(ÉÑ)Ő69&.ÉÑ9Ó±ľ±)ęń"Űÿč'­þÒĚ'ęđ" ±£Ņ)VbOYAUķD`I>a>OFě
( Whalleya microplaca (DMR<JHWOF)$´9jļ(p ©ƀ;ř/ď¦.#'¨Ě&K`CD\G¨(¢čî)Œ¹9" &  S. japonicum 'Ÿ")ªĉûçĒ§ƅ½mÀƆ#)Ì69& ĄĹĝ( 2 ĪÒ#×ź9ûç(±µ}5*
Ó±ľ±Ó±¢(ÉÐŗŤ(Kobayasi, 1962)$eŁçĥ$´9çĥ(Ó±ľ±ĕë(Ņó2Űÿč#Ì69 32 Ņó "rů;Ĳ'D\bX( 8pôŅĭ;ÉÑ(Ņĭ) SGA f#)Ó±¢;ÉÑ& Ņĭ;7" CMAwMYA 'ĤöĳíwMYA
f#Ó±¢epibasidiaÓ±ľ±(ÉÑŐ69(Ó±ľ±)Űÿčęń;Ģ.ŗŤá')ŕ9" &çŅ2±£Ņ(eĥ$ÒĚ'ęđ" 8ú±Œ¹99)D`I>a>OFě( Biscogniauxia capnodes $´9ď¦.#'jļ(p ©ƀg#(¢čî(ÉÑ)Œ¹9" & ±Įĵœì(ĳíçĥ)K`CD\Gě'¾
ě#(ž²Ě|ĺ'! ")ã&8÷Ŗ;ŎèÝ$Þą (1)×ź$´
S. magnum )ģ°ÁĝŢïgŭĞƂĖ5*ĝŴÂ#2013 Ä 6 å 23 ß'±µ};×źS. japonicum )ªĉûçĒ§# 8ƃÀĝ½mÀĖĂĔ; 10 å 56 ß'.ĄĹĝ¥żŭ¥żéhŬŏ¿$éōų¿;99 10 å 13
14 ß'Şñ±µ})ſo"ÔÃ7²ŽÍŶ#Œ¹ĥ´;ň (2)Ņó(ġĨ$ŅĭÉÑ±µ};ĊŅā#ÅĈ6ľ±ņgą'57Ƅń@CM©§(MEA)f'Ó±ľ±ĕë(Ņó;ŌÜġĨÌ69
Űÿč(Ņó; 2 ó!N>PbcWQ?Ĭ©§(SGA)f#ćrů'58ŅĭÉÑŜº;ř/.řÝ; DAPI#ðŃŇŽÍŶŒ¹'57Ņĭ(ôĜ;÷Ŗ(3)·lŋ(Ņ(Ż$p ©ƀ(Ņ$ÒĚ'ęđ" ·l$Ù´98±£Ņ;´±£í(±£ľ±;Ż"Ņó;ÌŅó;99(2)#ÌŅĭ}$$2'SGAHdbZd^©§(CMA)ÈƄń@CM©§(wMYA)f#p ©ƀjļ(ØŔá(Ö;²ŽÍŶŒ¹(4)S. japonicum (Įĵ²Ě|ĺă´(2)#Ì69Ņó;ē "28S rRNA ūy±(Ů¬ªů
;ă´ä¼ą'57Įĵü;ùī

Ļ¹
 S. magnum (ŰÿčŅó(rů'57ŅĭÉÑ5*ýi
u(Ŝº#Flegel(1976, 1981)(ĳíď9eÞ
S. japonicum ) Kobayasi(1962)'58ŗŤvŹį 50 Ä+7(ęŐ$&7
çĠĦ'571"©ƀg#ŅĭÉÑŜº
9
Ó±ľ±Űÿč'ęń8$©ƀÒŐ3±Įĵœì(ĳí6çĥ)K`CD\Gě# 8$àCD\Gě'ťĸ(Dmon & Hausknecht, 2002)$(ŝ)´9
S. japonicum ) S. magnum 'Ā-şòƀ&wMYA f#(/Ó±ľ±;ÉÑ1
jŅ#Ó±ľ±ÉÑ(P]Bd$&8òƀêxė&8ĿÏ 8sË©§(êx$Ó±ľ±ÉÑ(æċ;Āţ"(Ū ;đ0Ŏ¤(÷Ŗ;Ũ1 
çě( Tremella mesenterica )Ď©ƀ 8 )·l$(p ©ƀg#2¢čî;ÉÑ8(Wong et al., 1985;
Zugmaier et al., 1994)çĠĦ#)jŅ$2 9(©ƀê
xg#2(ÉÑ)ś169& sË)©ƀêx(Ûłĩ'57ÇĶ(ÉÑŜº;ř/8$$2'¢čî;z:& ¸đ(ĿÏ2őŲ'9
jŅ(ØŔŮ#¢čî'Ő6985 &ÉŠŧĴš" 8;ÍİùŦ(Œ¹'57ġ1 

17'% Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 18        -+'0 Giardia intestinalis # ./3*$ '%24 







 

2014 *$'%2"1!5) (3*$ '&,4
AN N9C_#%"C:0SF TAP tag 9\_I]:=6G$ 5t#0$C:3Ì0 Õ°þ 
R6ZH"·m?UEZ$¢ê$"Ûè å0$
C:3kC]K9ñ ÒhrÌ03ÞàÐ#Û
è0
0

ê®
Ë£Ó¼ËÇ Giardia intestinalisąlb Giardia ØĆ%j$Ó¼ËÇ#%).1"ÈÀ"GX]@@MX6>]:#-`ø$÷n$¥Å mRNA Ë¥10Ô.
10$GX]@@MX6>]:3ç *#Giardia$@MX6BB_T#%ÈÎÐ"½¥ 0 â .
10 " .@MX6BB_T$½¥¥{#%in silico ì¸#-1`ø$l%& 4!c¯0Giardia $@MX6BB_T3Ûè$½¥¥{3¯. #0 3ÑÐ ÖÚ3ç0
Ó¼
ËÇ$@MX6BB_T#s10 3 ÙĂ$C]K9ñSmD1, SmD3, Lsm3 #ÄÑ1.#C:3k
Giardia Üäy#ÏÊ11 ÒhrÌ303Þ
àÐ#0*$Ą3íÍÊ1. 3 ÙĂ$÷n3ÏÊMX@SH#w<]@GX9G$r¥3
gGiardia $ñó©3ç0

2. ¶« ­Ã
Ã#  Giardia 3ă (4) ;JT DNA 3¦z
PCR $û @MX6BB_T3½¥0Small nuclear
ribonucleo ploteins (SnRNPs) $e¡ø#pßÓ¼ËÇxqs10 Sm proteins $ SmD1, SmD3,
Lsm3 #C:30SmD1, SmD3, Lsm3 $÷n (ORF) $xý$ 5'´t# BamHI
3'´t# NotI $ù}3k DNA ¬Æ3 PCR #-/^Ûè13
BamHI NotI |¬ AN N9C_#X6;_>W]0 #-/ 3 ÙĂ$<]@GX9G3r¥¨w¬Æ$
ù}3×ð

1. %*#
Ë£Ó¼ËÇ Giardia # HSP90 ,D6I]αü"!
$÷n$79B]ā%ºæqa$Ā#ÿ1ā#{~1<_H1 /1#o6]G\]+{~1
0 (1) ¥Å mRNA 3Ë¥0*#{~6]G\]3i
GX]@@MX6>]: ç210 
${¾½$
ïÜ%³c¯0
j$Ó¼ËÇ%ë1"$ÈÀ"GX]@@MX6>]:3ç *#Giardia $@MX6
BB_T#%ÈÎÐ"½¥ 0 â .10
 Ó¼ËÇxqs10@MX6BB_T½¥#%# in silico ì¸#-1.$OV\: È
10 (2) GX]@@MX6>]:ÈÎÐ3*Giardia @MX6BB_T$xqv%c¯013¯.
#GX]@@MX6>]:${¾½3ì¯0*#%
C]K9ñ^RNA é q0@MX6A8B_T3ËÐ#Ûè$½¥¥{3ì¸0¢ê 01#-/
Giardia §GX]@@MX6>]: >@@MX6>]:d­3ç @MX6BB_T3
LG,úÁ"! §>@@M
X6>]:3f#ç @MX6BB_TGYKJB_R (3)"! §&'GX]@@MX6>]:3ç @MX6BB_
T Âô0å#"/
@MX6BB_T$õÐ¤á$ì¯,½¥C]K9ñ$u3±#Û»00+$ ²101( Giardia # %YPB_T (4) 
M\F5B_T (5) "!$ò{é q Ûè10
#ã%Giardia #C]K9ñ3ÏÊ0MX@SHN
9C_3Ì½¥¥{$È$C]K9ñ#C:3k0#-/M\F5B_Txq3ÛèMS ì¸#-$½¥¥{3¯. #0µÖÚ%$M\F5B_T$Ûè#¥MX@SHN9C_ąAN N9C_Ć3Ì
@MX6BB_T$Ûè ½¥¥{$ì¸3î)0


3. Ý¹
¿¨w¬Æ3+ 3 ÙĂ$<]@GX9G$r¥#¥ù}3×ðÝ¹þö ë1" *Ê1.$<]@GX9G3Ì Giardia 3ñó©
C:kC]K9ñ3ÏÊ0*#
7[9G\Q[_>W]$Ą3õ*0âªÉ(1) Kamikawa et al. (2011) Curr. Biol. 21: 311315(2) Bujnicki et al. (2012) Nucleic Acids Res. 40(15):7046-7065(3) Shulamit et al. (2010) J. Biol. Chem. 285: 27982-27999(4) Shirakura et al. (2001) Mol. Biochem. Parasitol.112:
153–156(5) Svärd et al. (2012) Eukaryot Cell. Jul;11(7): 864-73

18

/,

 Tsukuba Journal of Biology (2014)



7



13, 19         2014 2+!#/,#;

->-:6*4948"(5% -&<2+!# /,#;=  '$)?1 0<2+!# /.

×¢ ³ñ¯Ýó#2 ¤"ñ¯3sÐØÝó.«+½²«3"³ñ¯Ýó#ÐØmk½
ÎÝó!À¦/àÛ"ÜÓgöOUF5IYÜÓg÷3 ]!#-!ÓÝ3ÐØmk½OUF5I
YÜÓg3ÓÝÀ¦"ÜÓg!ÕÓÛ³ñ¯Ý*
~/0'"ÇË! ÓÝÀ¦ÜÓg&"Õ#³ñ¯Ý"ÍÒmß|ç  È{0/ 
0-"ÜÓg"ç´ "#sÐØÓÝOF5JÝ!éÔ ½·/këµ3OUF5IYÜÓg3lÂ ³ñ¯Ýó";JR!#ÐØæ, % Ü Ó g  " GAPDHöglyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase÷ <[H
0 .00 GapC2GapC1-p z$0/
0'"ÇË -ß"ÍÒ"ÓÛ³ñ¯Ýó ÐØæ
 GAPDHöGapC2÷"a!KNGÝó!â-0/ÜÓg
GAPDHöGapC1-fd÷!ófBYM9æ3 ¡-   ." GapC1-fd ÜÓg¬Ù/Ö -0/"#0-ß"ÓÛ³ñ¯Ý! ÜÓg"À¦ ÓÝ GapC1-fd 3v2
uÙ3È\Ú!ÓÝó#?4JL9EU4!À¦/ GAPDHöGapA÷3ÜÓg GAPDH h¿ .
GapC1-fd 3*ÓÝó#y0  ÓÛ³ñ¯Ýó"ÜÓg"Éi!éÔ0/OF5JÝ ", GAPDH 3/ #£Æ/¤ÇË#
OF5JÝ;JR! / GAPDH ìe"Ï3ÞÓÛ³ñ¯Ý!â-0/, GapC1-fd ~/ x 3ªã
¥Z±
 OF5JÝ Pedinomonas minor [ NIES–363 ] ÐØ j RNA 3o4CNB[b8U=ödT÷NT6P[3¿êèn3Þ-0 cDNA 3EYNW[GGAPDH "SIL[>VNT6P[ADGöFast et al.,2001÷GapC1 !¸ÁÂ NT6P[ADG ,%ÐØæGapcC2!¸ÁÂ NT6P[ADG003¿
PCR 3ÞGAPDH ìeîp"3ä(ÃÂ"ð" DNA ¶ 0v"¾·39X[IY:?[97Y@3Þ 






19

3=

Ñ§Ö
OF5JÝ P. minor "ÐØ -j RNA 3o8U=
ödT÷NT6P[3¿êèn3Þ cDNA 3
" cDNA 3ï« GAPDH ìeîp
3/)!' GAPDH "SIL[>VNT6P[
ADG3¿ PCR 3ÞÃÂ"ð" DNA ¶
0)"¾·"9X[IY:3Þ23 9X[
Y3?[97Y@-0îp397U BlastX!,/ÄwªÏ3Þ1" 1 9X[Y ÓÝó" GapA !õÄw3È ®. 22 9X[
Y#ô¨!<YBQL9EU4" GAPDH +'Á /BYM9æ"<[Hò/ È{0­!} îp"3ír»Â! GAPDH ìe3Ï/) GapC1 !¸ÁÂ NT6P[ADG,% GapC2 !¸ÁÂ NT6P[ADG003¿ PCR 3Þ"Ñ§GapC1 !¸ÁÂ NT6P[
ADG!,/ PCR # DNA ¶" å)-0\GapC2 ¸ÁÂNT6P[ADG3¿ PCR #^0/ð" DNA ¶ 0"¾·" 
îp3°12 Êó"îp -0-0
2 Êó"îp3¿ BlastX !,/ÄwªÏ3Þ Ñ§\"îp#Å©½·"ÐØæ GAPDHöGapC2÷
õÄw3È*\"îp# !t0 GapA !ófîpw\.0#NT6P["
Q@4I[UY:!,0*"Ö -0/0-"Ñ§ -P. minor ";JR!#\ÚÂ ÓÝw«!ÜÓg GapA ìe ,%ÐØæ GapC2 ìe<[H0/Ö -0/q GapC1 ¸ÁÂ
NT6P[ADG3¿ PCR !  DNA " ç -P. minor # GapC1-fd 3  ^0/*ß"ÓÛ³ñ¯ÝÍÒ"ÜÓgÉi½· P. minor ",!GapC1-fd3
d/¼"ÓÛ³ñ¯ÝÍÒ#¹Ì!
GapC1-fd 3º_ / GapC1-fd 3O
F5JÝ P. minor c!~", ÍÒ ÓÛ³ñ¯Ý"ÜÓgÉi uÙ*/")`"ÇË! # P. minor "( -a"OF5JÝ!
/ GAPDH Ï á/Ö -0/)'

 Tsukuba Journal of Biology (2014)13, 20        !/0&3$2 TRD "1/#* 5-% )'46   

2014 -%)'47, +5-% )(.6

ìª

á±ë

 ÀĐ»ñ$wßí#Ï´ÆÃ#,#$ÜñÉ¯#ð
æjĕU]J7M_ðæjĖ5¢)ðæj5¢ÀĐ»ñ#f"$PTKñ-æñ"É¯1ðæj5¢,#,12/$U]J7M_ðæj5¢ÀĐ»ñ «"
PTKñ-æñ5ßíqpÆ
2/59^;N\v1
".0ðæj5é¤ ,#ë /21#Åþ$c¸pÆ}%2
#c¸pÆ#Z:MDY5ø©1$Å¶!Ï´nyÆÃ ¢ðæj#Ąv¶5ÒØ1dď"Ċõ1 ĂÓÙ2ÀĐ»ñ TRD ³$æï#ðæj5¢2)#ÒØ" TRD ³#ðæj?OY"@aL2
PsaA Ći .&AS[MHK]VFaY RNA Ći5ÈÚâø° ó42®ÀĐ»ñ#ðæj$wßíæñUJ7
Oñ"Ăç1 ©/ "!# /TRD³$UJ7Oñ#c¸pÆ".ðæj5é¤,#ë /21®ÒØ" $ÀĐ»ñ TRD ³#ðæj
?OYBa>_C5ó"Ĉt ¼21UJ7O
ñ# Pedinomonas minor #ðæj?OYºāø°5ó ".
c¸pÆ#Z:MDY5ðæj?OY#÷Á /ø©15Í· ÎzµÞ#á±ÀĐ»ñ TRD ³#K\_C<]TKaY
JaG#f / 33 l#ðæj?OYćsĈtĕå ¥Û 45.7
kbpĖ µr2Å#32/ðæj?OYĈt#Û 15 kbp "$ TRD ³ /¡r total-DNA 5
È PCR .&Ba>_C1Óü1K\_
C<]TKaYJaG /Ëö2ðæj?OYćsĈt"1ĈtĎĒ#bć$ PCR ".x2
¬àÌ" 30l#ðæj?OYćsĈt5ø°á±2/#ćs
Ĉtd"$55 l#Ći @aL21 Ô~2µr2Ći$]VFaYG_R<ÿĆinvÚ.&AS[MHKĆiATP yĉÝĆiAS[M
HK .&AS[MHK]VFaY RNA Ći! 02/$'UJ7Oñ Pedinomonas minor #ðæj?OY",@aL21Ćiðæj?OY" 1¬#B_IMaĒ1]VFaYG_R<ÿĆi<\
CGa5 P. minor ðæj?OYºā3
TRD ³"
#*ô¥#Ći" @aJ7_=Ē#9aQa\
HT ü+/2) rps8 "$à¹@L_ ö/2
e¾# rpl36 òy1 Ô~2/"#Ć
i<\CGa" 1ĆiĎĒ$ P. minor "  30
ė320 bp ( 1#"
TRD ³$ 10ė50 bp ÖºāÌÑ Ô2 )3 #nvÚAS[MHKĆi psbTpsbN
psbH $ TRD ³#ðæj?OYd"#đÊ@aL2 # psbT .& psbH #ÇÃ$zb#ý*²"@
aL2 0psbT "$©Ó!CKHT@L_$Óü2!
#+2/ 2 #Ći$ rps8-rpl36 z¶"òyĆi!1ë /21 Å#3TRD ³#ðæjo?OYĈt#øý"$î /?OYA8D`?OYoj" 1 GC |ċ`@aL21Ći¥! ojÌ!Ä$©/ $! gø°Ē"ö/21
@aJ7_=Ē#9aQa\H
T-òyG_R<ÿ#ºāÌÑĆiĎĒ! #Ä$
TRD ³#ðæj?OY èă15Ô~1
2$ TRD ³"UJ7Oñ c¸pÆ".ðæ
j?OY"è
+ë /21ãðæj?OY#Ba>_Cø°5ãTRD ³#ðæj
?OY"Ä­#Ä)$TRD³#ðæj?OY#ojÌ!m{5©/ "ē§½
 Õ ÒØ5č1hu" ÒØ$ÀĐ»ñ TRD ³# mRNA 5äêÌ"Ĉt¼K\_C<]TKaYJa
G5x2)ø°2×ÆÃ#K\_C<]
TKaYø° /JaGf"$ mRNA !XK@_L]6-ðæj?OY¦Â,¿1 4 1
)#K\_C<]TKaY" Blastx ".1ÎzµÞ5óæñ#ðæj?OY@aLG_R<ÿ)$B6OQ<I]6#G_R<ÿ"ĔÎz5ÔĈt5ąr2/5 TRD ³" 1ðæj?OY¦Â1/2
Ĉt"¨Ð#æñĆiºāø°5óĆiĒ5£
K\_C<]TKaYJaG /xðæj?O
Y#ćsĈt XC6HE_S]"Ā1,#$!
5Ó +1+"#Ĉt /T\8Wa5kTRD ³/¡r total-DNA 5Č PCR 5óPCR ÇÃ#Ba>_C5ó)/2ðæj?OYćsĈt
T\8Wa5úùćsĈtĎ# PCR 5û*

20



+)



 Tsukuba Journal of Biology (2014)

Euglenozoa +)



13, 21        2014 .'+)4

+- 59- 6 306&#2$1 (57.' +)48 

!:%" ,7.' +*/8
RAxML Uc<_Z3uêÇ¬Û#,/ÿĈĖÎ3ē
10 y$ÇýĀÿĈÔ3ÉÔ²!¿ĂĿ¬¯Ç¡!"/*$3Ç¬ÿĈÔ!¾ê
4YNĪĊÀ\Ha!
% LGľΓľF 3ê Ç¬ÿĈÔ$xķ·3Ěw/)#Ŀ100 $`>dU`d<HfC#*!TfI@I_FUĖÎ3ē
}íÚİ3ê CdP;Ğðltê$Ñ D. papillatum OPRT cDNA 3îçêU_@YJ pET28aļNovagenĽ#ĿD. papillatum OMPDC cDNA 3 pET151ļInvitrogenĽ#00ĄÀ ĿhU_@YJ3ê ¡ĎďBL21 (DE3) Star 3²ĞĢÀkīîçÿ3Òþîçĝ«% 37 OD600=1.0 ' ĹďÝ# IPTG 3ăà¯
0.5mM  Ŀ25 1 ÆĮē"Ĳď³ĿĠĴÜè3
ē"´-0gÞļß·ëĽ# ĿĄÀ OPRT#n0 T7etag #ãìï"X7@\N;cfKa»s'
%7>:» OMPDC »s3¶ĿUcG6d G ĆôØ
QfA3ê »sĔs3
0CdP;Ğ3
SDS-PAGE ĳĿãì»s3ê 78@CdTcFI3
ē 3« ~ R`Y?d%DNA +RNA $ĺs!µĶ$és¹
.Ŀ>aVf?ąġ!é¹ąġ#,vć0/R`Y?dé¹ąġ%6 ×ı$ĩā¶3m7`?aĪļUMPĽ
3é¹/ąġ
/ñÐéâ %Ëąġ$× 3 ĩā ,&Çă 2 ĩā#ħp¤ĒĜ)-0ĿéĒĩā%Ğ$E]M`d<ü#È#Õč/!Č -0/ û 5 ĩā orotate phosphoribosyltransferaseļOPRTĽ,û 6
ĩā orotidine 5´-monophosphate decarboxylaseļOMPDCĽ$¤Ħ#į/0' $òø-ĿOPRT–OMPDC Ē%ñÐéâ$Ĥö| éĿ$³y$éâÿĈ äù#ħp¤ĉ¹ğĆÏĿäùĩā+ģĒļOMPDC–OPRTĽ
kÖï#é!Å-!" 1'ĿĒħp¤$ĉ¹%ħp¤Ù®Ģ÷ļLGTĽ3q !-ħp¤Ē
$Ħ$! LGT ;cfA4FU0 / ñÐéâ$@fPf<afU Excavata %ÿĈ$éâċ
Euglenozoa 3(Ŀ0%­ĵ#^f<bKĸĿH5UcM
XĸĿ ,&9MIU_@EDĸ Ò¹0/ļĽEuglenozoa# / OMPDCOPRT ħp¤$Òĥ%Đ Ó·#¨(Ŀ^f<bKĸ % OPRT–OMPDC ĿH5UcMXĸ %ä
ù  OMPDC  Ŀ 9 M I U _ @ E D ĸ % ģ Ē 
OMPDC–OPRT ¥/ 2 Ëòø %Ŀ0' Ê¦H5UcMXĸ$ OPRT 3;cfLd<$ğ3Å-#/!!*#ĿĒĩā¹ù$×ı!ĔsÒĥ3!/č·# ÑĘĆÏ ,&Č©
 OPRT $¤ÿĈĖÎ$ĆÏĿH5UcMXĸ!9MIU_@EDĸì"/ÿĈċ#rĊĿH5UcMX OPRT  LGTğ/!°õ0H5UcMX OMPDC ^
f<bKĸ OPRT–OMPDC $ OMPDC J[6d!ÿĈ3²¹/ 2 !!2/!ĿH5UcMXĸ$­³# LGT 3m OPRT 3æ´Ŀ$³ OPRT–OMPDC $ĳ ,&OPRT $ĊÀğ!Č -0/'Ŀ9MIU_@ED
ĸ% BP z$Ļ >WfI3Ðéâ
/ Chloroflexi!£¢ċ/!õ0ĿChloroflexi -9MIU_@E
Dĸ# OMPDC–OPRT $ LGT ğč·õ0 ¡Ďď îçH5UcMXhĩā$ðltê#Ŀĩā$ãì»s3ê 78@CdTcFI3ē"!
1 OPRT $}íÚİâi# OMPDC Ñ0'Ŀ
OMPDC $Úİâi# OPRT Ñ0OPRT ,&OMPDC$j¸¤Ĭ%0024kDa ,&44kDa.Ŀ}íÚİâ$ SDS-PAGE #*hCdP;#ð±/
¤Ĭ$OdJóĜ 0-$ĆÏ%Ŀäùĩā/
D. papillatum $ OPRT ,& OMPDC Ĕs!Õč /!3°õ /
äù$R`Y?dé¹×3
ŀEuglenozoa éâ!R`Y?dé¹û Ŀû  ĩā$Òĥŀ 3 ĩā*ðltê3½ !32Č /!Ŀħp¤Ē$Ħ#äùĩāĮ$Õčï"Ĕs²¹ĒĩāÌÂ ,&ÃÛ
$¹ù$µĕÍo!" /č·õ0
Diplonema papillatum $ OPRT ħp¤$¦ H5UcMX Diplonema papillatum $J_SI=NZ#ªČÁå BLAST ÑĂ3ē" ĿOPRT ħp¤3´áďĹ
1. Makiuchi T, et al., Gene 394: 78–86, 2007
2. Makiuchi T, et al., Protist 159: 459–470, 2008 D. papillatum ,. TRIZOL®ěđ3ê  RNA 3¼Ŀ
3. Nara T, et al., BBRC 418: 140143, 2012
cDNA 3¹³Ŀ=NZĨ 3{#ęė 5’-ú ,& 3’-úãìï"U_6Xf3ê PCR 3ē" Ŀ
cDNA $ĭ3´¤ÿĈĖÎ
 D. papillatum OPRT $4YNĪĨ 3;8`!BLASTÑĂ3§ÄĿ´-0Ĩ $4_6[dI3 MUSCLE Uc<_Z&º ē" HfCBFI3t¹03*!#

21

$"

 Tsukuba Journal of Biology (2014)13, 22        

Carpedemonas -like organisms 



R9]L;`E (Fornicata) #ÝÂ×Ó"uĠð"%/"uĠð# fĠ"öå×ø/ Giardia ĥB
5]B5Ħ3( diplomonads + retortamonads
Carpediemonas -like organisms (CLOs) -Ã¯0/|çìð/
R9]L;`E!/×Ó#=8_Ēą+Ĝ
mčç!Ę2/rÛ VI?_J\53 .
"j2.!VI?_J\5 íĈñ -0/VI?_J\5Ęĉ:]<M[ (mitochondrion-related organelleMRO) 3*
MRO #R9]L;`E!ü-0/*"# ÝÂ×Ó" ¢çìÚü0 .
R9]L;`Eð3¦¯
/Q[P@\5 (Parabasalia) *×ø/
trichomonadsĥI\?XKCĦ!/B5]B5" MRO#U6ID`WI\?XKC" MRO #O6J^B7ND`
W$0/Ć¡0-"uéô×ÓÛÞã# Ċ .U6ID`W#O6J^B7ND`W,.*ÅõÛ¦­Û!íĈ"¤ ¥ ¸- ! /
R9]L;`E!/ CLOs "!* MRO ñ -0/:]<M[ ßĂ0 .0-" #U6ID`W,.  2 /-! CLOs çìÛ!I\?XKC"uB5]B5"u"dė!nï-0/ ýÄuçìÿ¿!,.³°0/0-" - CLOs "° MRO #U6ID`WO6J^B7N
D`W"dėÛ íĈÈę!/g¬0CLOs #:]<M["íĈĊ{"Čá3Þã/bēû ×Ó/ñ 0/iÞãĄ/ CLOs "aâ/ Kipferlia
bialata "ĢÍd!#ú´â"P=G\5 /)âÿ¿¨-0/H`E!#P=G\5"*" Ĕ!'0
'Ğ /  K. bialata #P=G\53±ġ/)|Õ"Ģ#c~õ/¼Þã#0-"ÿ¿"æ¤xÖ3b/)!
aâĠ"P=G\5
"hòĢç3ßä/3ÜÛ½¶·Ê

K. bialata NY0173 Á3 20Ģ800 g2015 min"Ďªuě!,.éô3}
}éô3¤zđo¯Øā÷/ OptiprepTM (Axis-Shield à) 3Ø®Ð 0Ĥ
10Ĥ20Ĥ - /ÈęÛ ¤zđ3R4]?_FY`Ss!o¯20ĤR[=AZ_"£Đ! 40Ĥ!Ñ¤ăµ@_T]3Ëq03 800 g2020 min ĎªÑ¤sĐ ,&Ùĝ"Ā 7 R[=AZ_ -@_T\_>pğ©ĕ3ØþK. bialata '0/R[=AZ_
3}§ 75ĤOptiprep Ñ¤ăµt&a"¤zđ3Ø¾lĎªĀ 3 "¤zđĎª3ù»êÛ!

22

 

2014 (!$", Shewanella sp.*-)&'. +/(! $",0  1
óºÜÛ



 %/(! $#)0¨-0 K. bialata "R[=AZ_3d!/P=G\5"aâ/ Shewanella sp."ĢÍ!Îqkb"²o3´î.ćëÀéô}v"ĢÍ 1 L d! K. bialata # 3.1108 cells "!P=G\5# 1.31011 cells "@_T]3éô}")"Ďªuě! 1 K. bialata 32.2
108 cells
P=G\532.21010 cells }/  Optiprep 3Ø¤zđĎª#00"Ñ¤"Ùĝ
!P_J ü-0
0Ĥ 10Ĥ"Ùĝ!# K. bialata "Çģ´"P=G\510Ĥ 20Ĥ"Ùĝ#ÌÚ!ċy/
K. bialata ü-020Ĥ 40Ĥ"Ùĝ!#P=G\5
e!ü-0× /Ô­" K. bialata 3}/«û/)10Ĥ20Ĥ"Ùĝ"P_J3}Æ"Ďª!Ø
¤zđĎª" 1 Ü# K. bialata 3 1.9108 cells }
/  P=G\5# 7.2108 cells 2 Ü# K. bialata 3 7.8107 cells }"!P=G\5#
3.6107 cells 2 Ü3ê ¹Ò K. bialata "éô´ P=G\5"´3b/ëÀ! 3 Ü"Ďªuě§# K .bialata 5.9107 cells .P=G\5# 2.2
107 cells »êÛ!}  K. bialata "éô´#Ė¹"è 19Ĥa·P=G\5"´3Ė¹"è 0.017Ĥ!'Ï!¯w K. bialata P=G\5"ÉÖ3 , 1ħ1 !
'!/  i§Ě!ĢÍd!'0/P=G\5 Shewanella sp.
! /  3 16S rRNA ďm"A`=8_Cÿ¿!,ßĂ/g/つくば生物ジャーナル	
  Tsukuba Journal of Biology (2014)13, 23 	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
  	
 

	
 

	
  	
 

Ⓒ2014 筑波大学生物学類

アナナスショウジョウバエ類における異種由来染色体の分離比松橋	
  潤哉（筑波大学 生物学類）	
  	
  指導教員：澤村	  京一（筑波大学 生命環境科学研究科）
	
 【背景と目的】	
 アナナスショウジョウバエ類の Drosophila ananassae は東南アジアが起源とされ、アジア・オセアニアにはこの種に交配可
能な近縁種がいくつか存在している。近縁種の一つである
Drosophila parapallidosa は、1971 年以降ボルネオ島のコタキ
ナバル（マレーシア）で D. ananassae と同所的に見つかっている（Matsuda et al., 2009）。D. ananassae	
 と D. parapallidosaは形態的には雄の性櫛の剛毛数によって区別が可能であるが、類似する点も多く識別が難しい。しかし、第 4 染色体（組換えが起こらない）に位置するミトコンドリア由来の偽遺伝子 ψCOI
により、種の区別が可能である（Sawamura et al., 2008）。	
 2012 年から 2013 年に、マレーシアのペナン島において採集されたアナナスショウジョウバエ類の大部分は形態的に D.
parapallidosa であったが、その多くが D. ananassae の第 4 染色体を有していた（416 個体）。そして、採集個体およびそれらから作製した単一雌系統には、第 4 染色体が D. parapallidosaのホモ（para/para）であるものは 1 個体も見つからず、一部ヘテロ（ana/para）の個体が存在するだけであった（野外採集において 10 個体）。ペナン島では雑種形成を通じて D. ananassae
から D. parapallidosa へと第 4 染色体が浸透していると考えられる。そこで、なぜ para/para ホモ個体が見つからなかったのかを議論するため、第 4 染色体の ana/para の分離比およびpara/para の生存力を調べた。	
 	
 【材料と方法】	
 ペナン島において採集された D. parapallidosa の単一雌系統
から、第 4 染色体が ana/para の多型であるものを選んだ。その中から雌雄 1 匹ずつを交配させた。産卵後に、掛け合わせた雌雄（P）の第 4 染色体を調べた。また、次世代（F1）の第 4 染
色体も調べた。この方法により、分離比のデータを集めた。P の組み合わせは以下の 3 パターンで検討した。	
 
	
 
交配 1	
 :（ana/ana）♀	  ×	
 （ana/para）♂	 交配 2	
 :（ana/para）♀	  ×	
  (ana/ana）♂	 交配 3	
 :（ana/para）♀	  ×	 （ana/para）♂	 	 	  第 4 染色体の由来は以下の PCR-RFLP 法により調べた。	
 ・プライマー	  	  	
  5’ -CAAGCGGACTGCGACTCAAC-3’	 	
  5’ -GTGGTTGGCCACTGGATAGG-3’
	 ・PCR 条件	  	  	
  95℃4 分、（95℃30 秒、60℃30 秒、72℃30 秒）×30 回、
	
  	
  	
  72℃7 分【結果】	  データを表 1 に示す。交配 1 より、雄における ana/para の分離比は正常であった。交配 2 より、雌における分離比も正常であった。交配 3 より、para/para ホモ個体の生存力は正常であった。
表 1：次世代における第 4 染色体の分離比	
 交配	
  ana/ana

ana/para

para/para合計	 χ2 検定	
 

1

19

29

-	
 

48

n.s.

2

21

27

-	
 

48

n.s.

3

12

24

12

48

n.s.

※n.s.は有意差なし	 	
 【考察と展望】
第 4 染色体の分離比および para/para ホモ個体の生存力は正常であり、para/para が見つからなかった理由とはならない。したがって、野外において para/para が少ない理由として、anaに対して para の頻度が少ないため、確率的に para/para は生じにくくなっているということが考えられる。
採集データから頻度を算出すると、ana＝0.988、para＝0.012 となる。よって、para/para の出現頻度は、426 匹採集した場合 0.06 匹と非常に少なく、1 匹見つけることが困難であることが分かる。このように、第 4 染色体において ana から para への遺伝子浸透が見られるが、なぜここまでpara が減少してしまったのかは不明であり、今後の研究課題である。
【引用文献】
Matsuda	  M., Ng C. S., Doi M., Kopp A., Tobari Y. N.,(2009)
Evolution in the Drosophila ananassae species subgroup.
Fly 3: 157-169
Sawamura K., Koganebuchi K., Sato H., Kamiya K., Matsuda
M., Oguma Y., (2008) Potential gene flow in natural
populations of the Drosophila ananasae species cluster
inferred from a nuclear mitochondrial pseudogene. Mol
Phylogenet. Evol. 48: 1087-1093	 ・制限酵素	
  	  SspⅠ、XspⅠ、MflⅠ

23&$

 Tsukuba Journal of Biology (2014)13, 24        

'.'#&' 1+" &$/2  2014 +"&$///()*

!30- 1+" &%,2
Ĺ$×ê~Û{ 2 {Ŀłŀā 5 ĐĎ$ăÃĊ$Ĭ¡0# 2-4 Ë$ı~Û ì 1ĿŃŀĚė$Ċd~Û$sĀ ĭçê"* ğ­Ĥ é²ñ1Ŀłŀ$­Ĥ% Tae & Seong (2013)$ġĮ P. (B.) triangulata #,1
ĿŁŀĿŃŀ$­Ĥ%," -P. (B.) shimodensis#%"­Ĥ ©ĸė$Ùêÿĥ 7 Ë¤ăÎ$p
Ãö~Û"!4, #.0|} đ1
$kÄõ$ Boreohyale %2,ĿŁŀĿłŀĿŃŀ$­Ĥ4,"+P. (B.) shimodensis Âý1đ·%ľ ğ 1ďÈ
Y@8S %îÚjĲaħîĈaĀĒòaY@8Sjò#¥1ìè$ĉü1ĴĴÜ /ãâ¦#1*ªÔ¸ 0LM[GCļč hoı% ¿ mm /1cm ¯1fïñ#%ĀĒòuo 7000 ýĦ$ý ġĨ
21 $zĻ#ĳ%ĄćzĻñ"6T^bH( 5!2 /CbQb=\bT$Ģ"!# øþč$¹ě z 2 0Æ¶#zĻoĄ$wÕĠ41´ę 1
ÅË# % 300 ýmd ġĨa21 h#æ»vâi¨Ĭ$Ý§ĴÜ"! g³$k$%()¼l $êº0éð·$¬Y@8Só%()ĝÇ2" ğ 1Ëøþ%Y@8Só$zĻñ ( 5!"2"ĂßeíĔâ ĽE`Gblĩ$įíåv# Y@8SĻ$½ĶaģÒ4Ę,$1*2/$g#ÉġĨý µ321,$,+ 1 ý#ġĨ$+$LbG4Ķ+ÌÁ ÃÞĿŁŀú#ì 1RB;ĿSargassum fusiformeŀ4âÜáĖY@8S4½ĶĿłŀú$÷4½'1÷
g$Y@8S4½ĶĿŃŀâ« /N]IB&8<U`PbB½à½÷àg /$½Ķ$ 3 Ī0$ÃÞ½Ķ4Ę½ĶY@8S% 70%8GOb\¯ oĺ±İeFbK7`=ĿŁŀ$ÃÞ#.0°/2A`
T\$g#
ÉġĨý1đ· ľ,$ 2 ý°/2
v 1 ý% oĺ±İeĝìèĺ±İ#0l
LBG\9WZQbJ $xô4¾®24r#C>IH 1 Iphiplateia sp.

ĆÏ Č¢Øù"zĻ yÍ" ,$,+1 ą 32 ý ġĮ
2$vý*ä5,$ 8 û 12 ýÉġĨý$đ· ľ,$% 2 ýě ÉġĨý$đ· ľ,$$v 1 ýĿŁŀ% PhliantidaeĿVO:AY@8SŀûIphiplateia ¥$é²4q 1cÃÅË,$1
Iphiplateia whiteleggiĿVO:AY@8Sŀ %ð"1é²4
 ,  ČÀët¼$ķ /ġĨ%ě3
1, 1 ýProtohyale (Boreohyale) shimodensis Ŀń_;?X<Dŀ n#,$Ŀłŀ#%25 ă
md$ā 2 ĞĜ5-6 Ë$Ùêÿĥ4,©Ĺė3 #zÐ1Ĺėăaă#ėêÖī4,"ĵā 1Ē¯ÃĊ#Ùêÿĥ4,"ā 1 ēăpÎÐ$ 3 z$1(!$ı$ā1¤ĎÑĬÊĀÓ"!$­Ĥ HyalidaeĿX<DY@8Sŀû Protohyale ¥ Boreohyale j¥$ċ cĕ
1ĿBousfield & Hendrycks, 2002ŀ ĿŁŀā 1 £ 2 Protohyale ( Boreohyale ) shimodensis Ŀnŀ24+(

 Tsukuba Journal of Biology (2014)



/



13, 25         2014 -'+(42 PnFT1 ,)%#0!

5$ "&6-' +(47  83 16-' +*.7(4) PnTOE1 ©ġĥ¶i#jė Violet #]ċ2é ©ġĥ¶i#jė2ĕĊÁYðî Òá$ĎĤ°ĸ0ÑŅ°ĸ .2×çØ°ĸ(ùĕ0#°ĸò#ùĕ2Đ°'Đ°$Ô!tçç#æ|ß .#Ęľ!@<FUgĮĀģ2Ā{¬1
 0Đ°2Ğ¢0îæę#[n Æ (¼ĸ)/n Æ"-/{¬10Đ°2n ­Đ°'b¼
n ­Đ°Ã,¿. ! 0#$@W4HFBF0Êfîĸ¼Òáó.1 0Çõûé 
3?97 (Pharbitis nil)$ň# 12 Àĺe\#ÂÆ2^ 0
Đ°2Ğ¢İ! n Æ$Đ°2Ğ¢! ă¡îô¼Òáó.1 0
#â­ .n ­Đ°õû"Äé!Òá0
 @W4HFBF" 0n ­Đ°$ēn Æ2¯Đ°lĬ0 GIGANTIA (GI)CONSTANS (CO)Ń"íäĐ°MURXĲg0 FLOWERING LOCUS T(FT)#íälĬ10FT $ē"ýĳąüÉŁ"âëî"íäç FT CXK;ġýü2Ī/Ēł(ù~Đđ©°Ĳg#ĥu FLOWERING LOCUS D (FD)2Ý­0Đ°2§ĢFT $n Æe",Ô!ę"-/íä0+
Đ°#@<FUgĮĀģ" 0ĂĲg,ÖČ0FT LWRZCZ$Đ°#ÚÖÓ#ÃĵęN4XE! 0
 @W4HFBF FT LWRZCZñµòajé0ĥu±{   TARGET OF EAT1 (TOE1)  CYCLING DOF
FACTOR1 (CDF1)#3?97òĲg PnTOE1PnCDF1$
Đ°2lĬ0¼ĸÊfíä\¾0 .Đ°lĬÖČ0Ĉ .1 0*@W4HFBF
TOE1 mRNA$°ĸò#ùĕ"íä0micro RNA172(miR172)#Õîĳh2²miR172 "-/yĜĞí1āÍ
Đ°lĬ10
miR172 $Òá"m­Ň3?97"
, miR172 $ PnTOE1 mRNA #yĜ2Ğí0Ĉ .10 Çõû$3?97Đ°MURXĲg PnFT1 #íä{¬Ö
Ó#ĜÌ2ðîíäń -&íä{¬2ğ)0+#[ī#ņ2ĕ»ÜYāÍ(1) 3?97 PnFT1 LWRZCZĴz#ĜÌ Violet # PnFT1 LS4OZ-/VioletY031Q65#=IP DNA 2é  PCR ¦¦ DNA ºà#@Z;6XA2ĕ ÙĦ @Z;6XA#āÍ3 þĂ# PnFT1 LWRZCZĴz$qò­Ň  Violet "CA ć/ĩĴz#¸ Y031 " TA ć/ĩ
Ĵz#¸ ! #į Ě.1 *3 þĂ" 16 Àĺ#ÂÆwå2 1 ĕ PnFT1#íäTBP2ğ)0 RT-PCR 2ĕ s"Đđ©°¸#ğÐ2ĕ
(2) PnFT1 pro:: GUS-GFP ©ġĥ¶i# GFP Ĕn GUS Ï
ď#ěPnFT1 pro:: GUS-GFP ©ġĥ¶i" 16 Àĺ#ÂÆwå
2 3 ĕ PnFT1 #íä2Ğ¢GFP Ĕně $ē#ēčēÎ#ąüÉ"Ĕně 1GUS Ïď$ēqiĿÏ*0s"ēčēÎ#ąüÉ¨Ïďě 1(3)PnCDF1-RNAi ©ġĥ¶i" 0Đđ©°¸ğÐ PnCDF1-RNAi ©ġĥ¶iŀ©ġĥ¶i(Violet)" 12
Àĺ#ÂÆwå2 1 ĕ Đđ©°¸#ğÐ2ĕ(4)PnTOE1 ©ġĥ¶i#jė miR172 # PnTOE1 āń#Ĵz"ë2¢pLS4OZ2é  PCR 2ĕ 
miR172 yĜĉ­2² PnTOE1 # cDNA 2;WZGX<*PnTOE1 #òajéĲgń2ğ)0+"oìÛļ"é 0C< 3FLAG 2 PnTOE1 "c} cDNA ,;WZGX<1.23<WJ;DT5P"¢p
Violet #]ċ"¯ÏÈ¹(1) 3?97 PnFT1 LWRZCZĴz#ĜÌ ¼Ç#Ëú#_ .n ­#ņþĂı%1
PS?: (Violet)Q:@>è#ĶçþĂ0 Y031
."3QT8è½2÷ĨĆú3QT83?97#¥þĂ Q65 (Ipomoea hederacea)2é (2) PnFT1 pro:: GUS-GFP ©ġĥ¶i# GFP Ĕn GUS Ï
ď#ě Violet # PnFT1 LWRZCZ"VNZCZĲg0
GUS (  -glucuronidase) " GFP (Green FluorescentProtein)2c}©ġĥ¶i (PnFT1 pro:: GUS-GFP)2
é #©ġĥ¶i$ PnFT1 #íäń2 GUS Ïď-& GFP Ĕně öĝ0xË0
(3) PnCDF1-RNAi ©ġĥ¶i" 0Đđ©°¸ğÐ Violet # CDF1 íä±{#©ġĥ¶i (PnCDF1-RNAi)
2é 

25

bª#¤Å(1) 3?97 PnFT1 LWRZCZĴz#ĜÌ PnFT1 LWRZCZĴz#ĜÌ . 3 þĂ" 0Đđ©°¸ĹĐÀÆ! #Ļk2ğ)0
(2) PnFT1 pro:: GUS-GFP # GFP Ĕn GUS Ïď#ě  §Ą GFP Ĕn GUS Ïď#ě 2ĕ (3) PnCDF1-RNAi ©ġĥ¶i" 0Đđ©°¸ğÐ §Ąņ2ĕ s"RT-PCR 2ĕ PnCDF1 #íä2ğ)0
(4) PnTOE1 ©ġĥ¶i#jė §Ą©ġĥ¶i#ã«#+¯Ï -&Ņ2Ĭ+0Ġħ Çõû2ĕ "/*ÿ³¢ł*ÇĽçæøõûø#ķê·´£Ķĭ`v·´£Ķrdõû#ïÔ"Þ¯Ġ#®2Ė*+) Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 26        #1$2,5

!' 7"8/( +)69  %&:Ĝ×dĂĀåó&Ŀ#ÖÜ2àr9ð!äŏÄŉ 4øëÄŉ)ċĢ¦¨ęä%0$ğ9µÄ6%Äŉă%ċĢ9ğ
Ä!'Ôŉ%¡%ÂĄ$36ğÄ%Į®9ô$x¾ğÄĮ®!(ÞĆč &Ė­ĀąÔåó 6:E?>(Pharbitis nil)9
ĆčßÑ!k$ù åó§%Ćč ³ù 476Fb<QPHP(Arabidopsis thaliana)&àrĀŉÔåó 5xq£%Ħ1ğÄ$·ō2 7$­:E?>&ŉÔàr &+,ğÄ9Ģ81 %ąÔ~ö$3ğÄĮ
® 6! 4x¾ğÄĮ®%ĩá$35Ŀ 6ÞĆč &:E?>%¦ā96!mÀ76Łs¦$ĩáx¾ğÄĮ®%ÞĀ#öĩ!Ò#Ąħ9¹6
!9ĂĀ!(1)çÔÖĪ%kĦ¦ 6 PnLHY '
PnTOC1 %ĹŁs§Ā#éĞæī(2)ğÄ%j»Āº¦
6 PnCO %ŅøČ'ĸĘČ$ 6±þ%ĩá(3) PnCO%ĩ9Ģ !mÀ76PnCOP1 %éĞæī%0%Fb<
QPHP¡þu%ăĤ¾ĬŐ$ %ĩá9Ĭ. 2014 /(+)6-.

4 38/( +*09ÓíŔ(1)PnLHY-OXPnLHY-RNAiPnTOC1-OXPnTOC1-RNAi%DcGN_AN9vĥŃ9ćĭ%¸74%D
cGN_AN9:BbTAM`=[9ù :E?>Ýòĝ)Łs¦®y9Ģ%¸
ŀÇg h©ĝ%Į®ŀÇŏ9Ģ
(2)VioletY031Q65 %CS[ DNA 9Ň!ù  CO
Łs¦9 PCR ²Ń9ìĶ-3 Đĕ%Ġ
ø $ 1 % 16 ÖŊØÜ9 1 i PnCO %ÿõ`H[9į*6 RT-PCR 9Ģ !!1$ğĠµÄÐ%įã9Ģ(3)wĢĆč ¹47Č¦9ù ŀÇg ăĤu%ŀÇ9Ģ PnCOP1 ăĤ!½876Z]_<c9¹
%ăĤu%Z]_<cWTcop1-4 ¡þu9ù 7 ÔŊ
ØÅ$Ěĝĵtŉ9ï©%¸3 ÔŊÕÅ$Ěė9Ĩ¬ăĤu % PnCOP1 %ÿõņ9ćĭ60$ RT-PCR $36ÿõĩá9Ģ4$ăĤuZ]_<cWTcop1-4 ¡þu9ù ğÄÖÜ9įã(1)x¾ğÄ9Ģ åó&çÔÖĪ9º6¦$36{
ø%ÖŊ¿!£ý 4%x%Ùñ%¿9Ē.8
Ŀ#
ÖÜ %ğÄĮ®9Ģ 
Fb<QPHP &ÛÓŁs¦ LATEELONGATED HYPOCOTYL (LHY)!¢ÓŁs¦ TIMINGOF CAB EXPRESSION1 (TOC1)Łs¦ÿõ%R?M;X
W;eOTLAaeY9µÄfÔ%Ü9/çÔÖĪ%j»!7 6ÞĆč &74%ăŁs¦ 6
PnLHY ' PnTOC1 $ Ļ ÿõu(over-expression:
OX)!Æu(RNAi)%µĲĴÎu9vĥÖĪ%Ì9ê0$
ğĠµÄÐ2ğÄºŁs¦%ÜĀĴ|ÿõ%¡
9į*6! 1 %ąÔ~ö$36ğÄĮ®"%3 #·ō96 $ ĩá6!9ĂĀ!6Ĕâdě¬do¸%°Ú(1)DcGN_AN9vĥŃ9ćĭDcGN_
AN9:BbTAM`=[9ù :E?>Ýòĝ)Łs¦®
y9ĢŀÇg h©ĝ9Į®ŀÈŏj 6¹47µĲĴÎåóu9ù  1 %ąÔ~ö$36ğĠµÄÐ%įã2 RT-PCR $36ČŁs¦%ÿõĩá9Ģ Īü674%Łs¦%éĞĩÕ!:E?>$ 6ąÔ¾ğÄ%çÔÖĪ%è´$ ĩá6Īü 6(2)VioletY031Q65 $  PnCO %Ń9ćĭĔâ%ă¾& 3 ĐĕŊ ő 1 % 16 ÖŊØÜ~ö¸% PnCO %RT-PCR $36ÿõĩá'ğĠµÄÐ%įã9Ģ Īü 6(2)CONSTANS (CO)&çÔÖĪ 4ğÄºēĳ)¿9
6kĦ#¦ 5ğÄZa]cŁs¦ FLOWERING
LOCUS T (FT)%ÿõ9º6ÞĆč &PnCO Łs¦%Ń2Ĵ|ÿõ%UJec%ľ !1 %ąÔ~ö$36ğĠµÄÐ%ľ #"9ŅøČ!ĸĘČ9ù ìĶĩá6
!9ĂĀ!6(3)ØÅÿĠªŐ9ĢĔâăĤu WT !è%ĝĵtŉ2ė¼9Ĉ!8 %! 4xµÃµÄ$ PnCOP1 & COP1 !Ď%éĞ9Ê!ćĭ7
RT-PCR $36 PnCOP1 %ÿõņĩá%Ĕâ!ğÄÖÜ!%ŋĺ9ĩá6Īü 6(3)CONSTITUTIVE PHOTOMORPHOGENESIS1 (COP1)&E3 ^V@Kc`?eI! CO JcUAĲ9ĩ6
! FT %ÿõ9įď6COP1 &xFBPasĽ$
1j»Ā#Æ%įď¦ 5
ĝĵtŉ#"%Ŀ#xµÃµÄ$ńĦ#¦!# 6ÞĆč &PnCOP1 cDNA
9ù Fb<QPHP% cop1-4 ¡þu%ăĤ¾ĬŐ9Ģ 
PnCOP1 %éĞ9Õ4 $6!9ĂĀ!6İķ
Fb<QPHP cop1-4 ¡þu9ı -nł¤§%ÉëĄ¶}ÏÍ$ºĉûg-ÞĆč9Ģ $5đ¥Ë®Ŏ-Þ¤§Ōø÷Ċ§ĆčĊ%ňúÏÍ¯Ņļl}ÏÍ¯Ņzp Ćč«%Ó$îÂİ%Á9ģ-ßÑdÓíßÑŔ
:E?>Č[_E@(cv. Violet) '\@FDŅøČ Y031
ĸĘČ Q65(Ipomoea hederacea)Fb<QPHPŅø(WT:
ecotype Columbia)' cop1-4 ¡þu cop1-4 $ PnCOP1-OX
9®yµĲĴÎuŒĸġ 2012œ26

1/

 Tsukuba Journal of Biology (2014)9+ -

13, 27        

0! 



'3(7

 

2014 2."$1/$;# StDREB1 :86 <2."$ 1/$;=  )%*>5, &<2."$ 10!4=¡q. cDNA !*Ğ²ëĈÍr DRE ýéê."ĈÍ# GAL4 ęsÙ®Į"o!*, AbA ³±®ğe"ìæ Ĕ¡.AbA Ă®0äª- AbA 0& Library ¦Ęę¹Í0ı-!*,nčğe"?9TZGY: ą -Ğ²!
*,ª+.ĈÍ!¡q. cDNA "Ġv0ĐÊ
BRAST Òû!*,DZ@OZ?\"Ġv¯"ï®0đ
jęs"nč0ªĄÄîíě£)Ön}!*-Ěhá"éêĤ"Ü¢ Ûy į -
Ěhá"|åí éê#İúį"ÏÈ0¼-ģď ĕį->S73R (Solanum tuberosum L.)#3H;Q8E4RW;=!_1ģď Ěhá,p.Ìıj +İúįĀ$"ėã ¥Ç¨.-%
>S73R#İú# Þù¿(wë.-' ĩď - )Ī#>S73R"éă! §Ĭ0^ Ĥ"f]0µ'è?EV?]"éêĤ"ÿ· ĕį-éê{" \)>S73R"Ð ą -īõ0¶-'!
è?EV?!¥>S73R"hu Æ%.-|Ëí!îí¦Ę0c^-!# Ėhá"ğeíéçíâ®!ħ-¯ ¬ď-
Ñá#è?EV?! ğeìæVOU­ø ,
?EV?!*Ĕ¡.-ğ
e"#?EV?­ø®ęs!*x«.-"Ĳ÷Ñáôl.-è?EV?­ø®ęsDehydration Responsive Element Binding protein 1(DREB1) L2PTZ ð+.-DREB1 #=?
- Dehydration Responsive Element (DRE) ïahë]Úğe"ìæ0x«- Â+   ,.+]Úğe#è?EV?Ă®"ìº!ħ/-Ôą0·("¾.-%DREB1 ĝzìæÑá#è
?EV?Ă®" \ . ,
>S73R! (
DREB1 ĝzìæ!*-è?EV?Ă®" \ òē.
->S73Rr®" DREB1 (StDREB1) " ó.-StDREB1 "~ĨÔąĐÊ#>S73R"è?EV?­øÔÓ"ĐÂ!
-(!*,|åíô½Ć! -ģď KYE ,ª- DRE ý® ó. StDREB1 "~Ĩi#ßÈñö#è?EV?]Ĕ¡.- StDREB1 "~Ĩ0îí-

 : ġÕXYI3MTCFØ

É¿ÀØ ġÕXYI3MTCFØ!*,DRE ïahë-@YJ
9Ę0;ZF- cDNA "Ğ²0ċ '%ġÕ(Saccharomyces cerevisiae) ! DRE  Aureobasidin A(AbA) ³±®ğe0&Ğ²O9@Z (pDRE-AbAr) 0¡q
DRE ý0Ğ²-'"ĈÍ0hĎ[À>S73R"ô Desiree !`à (-1.8 MPa PEG) fÝ (4) ?EV? (200 mM NaCl) tç0.. 4 mgÁ2 ÃĦ©!ćĭcě"ĉ + RNA 0´u
+!Ĝęs­!*, cDNA 0°GAL4 ęsÙ®
Į0&O9@Z!¡q- cDNA library 0hĎ
.+0Ğ²ëĈÍ!¡qLibrary ¦Ęę¹Í#Library @YJ9Ę GAL4 ęsÙ®Į"Ċ@YJ9Ę éê.-27

ýËā
 AbA (100 ng/ml, 150 ng/ml) 0&! Library ¦Ęę¹Í0»ª+.ĈÍ" 562 <YNU" cDNA 3Y<ZEB5C90ċ¡q. cDNA "ĥ +ĠvĐÊ0ċ <YNU0×200 bp d\" cDNA ¸q.
 61 <YNU" cDNA Ġv0A3V9E=Z96Y?!*,ĐÊª+.Ġv0 BRAST Òû! "ýË`à?EV?­ø®)ÎĢýÙ®0·Ġ
v ª+." +bë cDNA library #è
?EV?!*Ĕ¡.ğe %.- ó.- ¡q. cDNA !*ġÕréê.-@YJ9Ę#GAL4 ęsÙ®Į"Ċ@YJ9Ę-'ìæ
@YJ9Ę áçí! pDRE-AbAr !ý- AbAĂ®ğe ìæĞ²ëĈÍ# AbA Ă®0äª- ęsÙ®Į"Åß!ħk pDRE-AbAr $"ý®0· cDNA ~Ĩ.ā +.-ÈìČ!ñö"Ēü¤þ Libray ¦Ęę¹Í"cDNA 3Y<ZEB5C9ĠvĐÊ0ċýË0-63 Tsukuba Journal of Biology (2014)

>%)

13, 28         (E. globulus)4':(2014 82$&63&@

;

-=

63#0-,?=
"7 *A82$& 63&@B  .)/C<1 +A82$& 65!9B
ĥÎćĆ
Ŀª
ÿıã!āv+āč ,.àû ĂĤ 
 ½/
^ŕîv ,/!ŕŏĒ*!Ue-/ċôw!y */ā¶wæå)3 /»è!UŕŏĒ*ĂĤ{ħģµàû!āàÙ ¿-0/ÔČĔ"ŅaĜÃ¼Į3ăģµNT9O!ŋą ,#Ķg»í ō/ČĔ z.Ĝ4/Ă´ĂûśArthrobacter globiformisŜ
Ą×!<OS8:>AT@ŅaścodAŜ!àû$!¤m"
ń}óļĉ-0/;O>SKA7SśGBŜ3t/ģµ X/ ĉ-0 .
ÔČĔ*ÊNH:BSJRMTAT codA 3ąþĺ¤ĜÃ
Eucalyptus globulus ś Ubi-p::codA Ŝ , # Eucalyptus
camaldulensis
/ģµV3ĎĹ/ÔČĔ"Ç dp CaMV35S JRMTAT codA 3ąþĺ¤ E. globulusś35S-p::codAŜ üġ/ģµ ,#Ăûâµ¯Ŕ ō/ĶgķŘ3ÉÕÆÈí
1. àûÕÆŝ [àû"NT9OśE. globulusŜ
35S-p::codA 4 ĘĞśN3-1, N3-15, N3-26, N6-9ŜUbi-p::codA
5 ĘĞśP1-12, P1-9, P2-1, P12-1, P105-2Ŝ ,#ŒĜÃc2 ĘĞśAu1, M001Ŝ!Ŗĩ"n~ČĔl!ËÔİęśÝŜ
-Âf0Ŗĩ"ĳŉLCD Đàßŗw
²üġĈ° 10.5 cm !ŚZLCD Đà10 Ł
Ō!ŗw3ĭŗw²ř3ò ŀ¨øììoĀ!
2 !;PTJ qģµĶgķŘ f
2. ģµĶgķŘŝ oĀ"Ìª¬Ċ¥ E. camaldulensis
3ăŋąÈíś75 mM NaCl ìóï3Ł 3 LCD«œ -ìŜ ³ìłì3«œì*!3¢ùxķŘ "|ĘĞ 4Ş15 ic3foĀ"2013 ª 5
Ñ 21 Ë - 2013 ª 7 Ñ 19 Ë' 9 ŁŌÉoĀÓŌě]²- 7 ŁŌìłì ,/ŀ¨õì r.ÐĲ¡
3ğĠķŘÓŌY" , 1 ŁŌé àû!®Ĳ¡
äř ,#ņĈ°!Ĵñìé !őëa¤¬śEC jŜ
!ñ3
3. Ăûâµ¯ŔĶgŝ =SE7CBí ,/6QRG>Tá©ØŖí ,/´ĂûĻÜ3É=SE7
CBí" 6 ēJQTD!|ē \úNT9Oī ,# 3m0|ē!|įœ áàûQA?đ 5 ė3ÄđðÏºŖ3 Ë²!ąĨýĦĽŊ ,#ÞŊ -Ķg©ØŖí"NT9O3ßLCDY!3ÀzOSŇFCI5T ¸ö¸öï3 OGYE  ,#PTYG  §00 3 Ë ,# 5 ËŌðÏºŖĂĪÅ3Ĵñ/ĶgĝÚĢ¡
1. ģµķŘŝ oĀŋ²2 ŁŌEC j8 mS/cm Ń!²ķŘÓŌY EC j 8Ş10 mS/cm !Ė h¾0! -ÔoĀÈí"ŊÓŌ 2.U!?DQ?Ö`!ā3ã! ń/ ĎĹ0oĀŋ 7 Ł²ŒĜÃĘĞ"%Ûç ĜÃĘĞ"Ă
/*! Ĺ)-0ü 35S-p::codA ĘĞ" !ĘĞ ĂśŜ35S-p::codA ĘĞ!řĂý" codA !řąþ,.Ubi-p::codA ĘĞ,.* GB  ĬĒ)Ģ
-0/
 
¢ùŒĜÃĘĞ %Ûç!3")
 !ic Ûç)¹Ŋň ,/êľ"  0"ÔoĀÈí sđ!NT9O!ĝÚ ĵĴ0
*!.ÔķŘ ă E. globulus $!?DQ?
"­  Ģ¡0E. globulus ¢?DQ?W!¹Ŋň ,/ģµĶg3ĭ ",.b÷¬!ì ,/ķŘ ÒuĢ-0/ oĀě]Í!Ăý
2. Ăûâµ¯ŔĶgŝ 6QRG>Tá ,#´Ăû$!¯Ŕ"ĜÃcś35S-p::codAŜŒĜÃc!ŌÒ·¦"Ĺ)-0 UÈ6QRG>Tá"oĀx¢ùx!ŌÒ·¦ (-0á ăī
! Na+78Sň3ñ1oĀx!ī!ň¢ùx,.ř  -ī '0/ áàû!ĂĤ
¯Ŕ*!Á¡') CaMV35SJRMTAT ,.³×ĘĞ,.* codA 3řąþ/,. ! GB 3ĬĒÇĘĞ"³×
codA ąþĘĞ,.*k0ģµ3ď'Ăûâµ¢/¯Ŕ"¢ùŒĜÃc~ĕ/3ĎĹ_²
ÔČĔ!ĝÚ3* ĸĚģµĶg+ŎŐ&ķŘĕ
É0
£×!ÔĜÃNT9O!ŕŏĒ$!āàÙ$ /3Ó±/

28-+ Tsukuba Journal of Biology (2014)13, 29        

64/'0 "* %&:3(

-+

64



2014 3( -.58

9;  #!$<) 7':3(ĎÇaùø :]\Bbó´$j/ĔĂô%WHXb5
è#ÅÌ
É/ IBĔĂ$ĔĂô´Č% 2500 dl#/ 'ºPIJ
U_0º^<FL[>_"!$Ę 5 
63%cÆø
#ôé8Ċ5#" ģ©â¶s#25ÑÞÞö ÀÒ6 5â¶söß %:]\Bb$çġĴ:]\E_ĵ8q#®#h zòD^R[_$²³8«.
zò¢¡Äß5ĔĂô$ĔĂ:]\E_8¹h5
$Äß%¯Îà¤#2:]\E_>AI¹h6 r©/¹hĉ"%"3õ,8nà¤%´Č($Ġ¼ sï"!$İ/ēfâ¶sößÄß ÀÒ6
$Äß%ĔĂ:]\E_8ú¾ēf#¹h5.
à¤24/´Č($Ġ¼/¦" +ēf%[_Ođ#ģ Ĩo4ăĒ($êø" ď "5WHOĴiñux×Ĭĵ/$ēfâ¶söß Ë |"Þöß ¿ 5 $Äß8Ħï5#%à¤#Û) 5Ķ10 w$:]\E_8±ě 5ë$Þöß%ĔĂ>AI8ï 
5Þö#±ě"ĔĂ:]\E_8ĝĀ5 ´Č 10 dl#£ 1 ©ī}Ä5ĔĂĪ#ÁĀ 2 t /±ě 
5  ĭ#$Ī$ĔĂ8Į.5$%į 
$İ8ĜÜ5.
ĔĂ:]\E_$ĪğĚ%6+
/ûþ6 ĐĖ0ĩÚ"! 3°36J_OCġ%:]\Bbá³ "gä+ ĄĚ į
J_OCvı ÓçðÎ6&:]\Bb³8/ĔĂ:]\E_$ĪğĚ ď "5$%"ċ 36
Óçq$ĔĂ:]\E_$ğÂ$ûþ%#<Mę76 5<M$Óç$e§Ĩ# ā
3" .|q$N<?TI8ċ·5 ê µ +<MðÎ$:]\Bb ÷í5ď³ 56#£]
JI%Óç¨Ī#íî5
ď4
]JIðÎ
$:]\Bbôé%* 9!" Ìûþ%]JI8t
:]\E_8ğĚ  8ùø 

 

-+

9

12

-,5;]JI$ĔĂ:]\E_$cĥ³÷ë$Äß%
+Õ#
ÖøJ_OCġ8÷ë5¥{SCJb8sĚ
:D^NCK[=V($¬ġĢÁ8ę
:D^NCK[=V8-#]JI8åNAYbVâ¶Ð3 ÅīĲ$]JI$ė84'üÝÙ8ę ĤÏ# $­ýC^TLDZQ;b#25J_OCġ$ĄĚ8ęm­$k
IBaRJCGðÎĔĂ:]\E_$ĄĚĆª8e5.
Õ"C^TLDZQ;b8ć,75k5ÍÃaÄßÌûþ%ĔĂ:]\E_8÷ë5]JI¬ġĢÁq$s
Ě]JI$ĔĂ:]\E_$cĥ³÷ë ĄĚÄß$ÔĞ8ę¬ġĢÁq$sĚ%
+ÖøJ_OCġ8÷ë5¥{S
CJb8sĚ:D^NCK[=V#¬ġĢÁ8ę:D
^NCK[=V8-8sĚ÷ĕ]JI$ė$yÿ8#{6¶Ðėæ8ą 1 `ÊĲ
ĉ@\I ~/$8ħ»Ø#gĕagÑ ~5+Ĳ8Ĉĉgĕ0gÑ "/$%#Ó È pãª$ì#14 ĳ3$­/ý
½5+¬ġĢÁq$č¸8ĉ

29



1.

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 30        

7 "8+,%9) /5;6-

1.

2014 6-&$43*1:<  '!(=#2 ;6-ù¸Sãâ ]´"ÜÑ¹q"¡ĚÖĞ! 1§Ó ÌÍ£ď /2(IPCC AR5, 2013)ÌÍ£ď"© n 0
1(A. Rabatel et al. 2013) ÌÍ£ď č"Þ©
ñ!y'¡Ě!#tn!n  ÌÍ£ď#
ÄÞ4Z¦Þ©ñha4 °1{ú¨ Ğ
24µ/ !1#Å+ĔĂ1¶ /´¾@TI!.1ÖĞ1vð6RA=ñ"ÌÍ£ď! 1
ĊÃ4Ė2("ĊÃ /ċ! 1Ä×"mÛì-ÌÍ£ď£!»o!mÛ1gĝì(Senecio
rufescens)"(nÙÎ  µ/ ! 1
½!Ĉò nÙÎ#.n  ê#
24µ/ !%ÌÍ£ď!Ø¼"KPTRğÌÍëp
!. ª21"lk |xÕĠ!äã(1)§Đ!ÌÍ £ď1vð6RA=ñ"ÄÞ"ÛÙ¬¯"Ø¥(2)gĝì S. rufescens "Ĉò n"¬¯4ãâæí4  Ø!2/KPTR^Ď"l5ÔğKPTRēĠ4ċ¤ ÄÞ"Ęb!
Ċ%

 

1.

:



108<

2 /ÄÞ"áĒ! #KPTR"WēēÝ.0ÈĞ"¡Ě   n (º!
H:Q ĄÔă~e  «ğ10 Ġ#Äÿ
Ú 2 d`WĞe ă/22#ÄÞ /! "¡Ě,z1{ú¨4é1 o"ĊÃKPTRWĜö!çĉ2fwì,
 S. rufescens #]"ĊÃ#&5áă" /S. rufescens #KPTRWē"Ý4*Ä×1 é2"ca<7>!#ÈĞ 
1,!ûV 70cm /20cm&!Ð1e )/2Ê0"ěã!#áþ·!1\1

³Ï
 ĊÃ#GND6"6RA=ñ"@LO9Bğ5392mĠā
8TOýğ|ĠĊÃ#[!èÌÍ 1mÛì»è<7>ğcmĠeğvġrāġ¿ĠĠ
2. S. rufescens "ÄÞnĊÃ ā8TOi"à 1ÈĞ"KPTRWğèĠ" 10 ï«K
PTR"ėğåĠ" 6 ï«!u¢ 10mğUēu¢ 5mĠ"js4ć÷
ĊÃsi!mÛgĝì S. rufescens "ca±ûV(cm)4Ò(ā8TOi"à 1ÈĞ 5 ï«
ğ4300m-4900mĠ<RFNR;4ýtn!ªĕü"²ęÇđ"ąüõa DNA 4ßñônÀ4ýóÁSø ÄÿÚ#ÈĞ"Ğ&$ Ðe )/2(;ME)T3 M7Rğ4600mĠ4 1ÄÿÚ#(0Ð  
ì±,ÈĞ"ĞÔ&
 1e )/2 "Ð#ÄÿÚ.0,ĞÈĞ"M7
R)/2
(¶ý32KPTRWē"ĊÃóÁËČ
1
}KPTR"ÄÿÚ-ì±"q!# ă/

ÄÿÚ(%)

KPTR ±(13 c) 1`X!ěã4­1
1. KPTRē"ÄÞĊÃ ā8TOi"ÈĞªî_ à 1Ć13 c"KPTR /"KPTRē!Yý1³!ĕ 40m "M7R4 5 ¾ć÷ğT1Ģ4530mT2Ģ4570mT3Ģ4612mT4Ģ4650m
T5Ģ4889mĠÉ!22"M7R! 2m ÷ ! 2m
x 2m "³ Â4ć÷Âi"}CMJT?4ÒCM
JT?i#`X","1ğÄÿÚğ%ĠĀÚğ%Ġ

M7R
30

WĢĊÃ"ÆĂ XĢM7R"ÄÿÚì±"®ë-)

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

3&)



13, 31         2014 /'-)2

(%+-+*! $14/' -)25  "#6
Ć·JçæĝĠď.}ÞÒ¸l +-Ë! 100 Pä!~ÍÒ 1.0 , 3.5 M´.v/.ĸHoughton
et al. 1996ĹÛ ķ*ķĂ}"Ò¸l!İ ³¿ĳČl*Ą ,/.(á.ÇÚ!¤ô! l ī¢ ķ&.
_ďëò +-Ò¸lc
ß +¼`r§Ħ Ñ.ĸShen et al. 2009Ĺð+§Ĩ*6;T«ğ!¤ô å.ĸShi et al. 2010Ĺ`Ĭ0ìwuĦ i.ĸHeskel et al. 2013Ĺ v/.  ,/,!üÅ"Ĩ)¯ï!Ò¸lcß +.)! %1.

cß¯ +¤ô å.)v/.
!(ÇÚ!Ò¸l$!¤ô0. "Ĩ¿æÒ¸lcßĶcß+.ÇÚ!¤ô!¨¬)OqÊ.
Áëò!ĘÆ}.ĨĥèÀ»ĵ8ıVĝ "
5KD
I@?D>FIAKĸWN OTCĹ0ãÒ¸lcßm ė,/.1995  ,Ý| ĉ.&ýþÿ©õß/
.(
Ĩ¿æÒ¸lcß +.İ0ĕ.! ¼Ģ:2@ .
UxéçķÇÚ!6I93GIî6I
93GI Empetrum nigrum " OTC ėă i^o
.! ,E. nigrum 0ęÇÚÁëò"ķÇÚ6I93GI!Ĩ¿Ò¸lcß$!Ģ¤Û §Ĩġï
êĔ0Ďñ.0çæÙmÒ¸lcßm!å.àá.ÇÚ!áßÛ¥!ÌĜ0ď±ÏĘÆ}
 ĘÆ"ĨĥèÀ»ĵ8ıVĝĸ2960 mĹďÒ¸ljÅ0), OTC "!aģ!ÍÒ ģ+-)÷
2 ķ.+
ėĖ/nĩħö!Ò.ķ
ÇÚ!Ráą¿Ī. 2013  8 ½ OTC a^o.6I93GI E. nigrum 0ę`r§ +#č®
ğ, OTC a!¡à0ÓE. nigrum "ċ!
:2< È(Ğ!`r§Jč®ğÓđăÓ0ď  dÃ (í"ķà)[ãqć
!Óđă0ĒZ2013  8 ½ 4 ²!²!dh ,²Î&!Ī sđă0ãE. nigrum !`r§ +#č®ğ0ÓÁæ "ĈØ`NÓ0ď``r§º
ā0 .( £ē ¤bù*¹0gã`ÂX0
 ,Ó0ď¡à!Ó"ÒÔH6K
!`Ħ=I:K0ã. 4/' -,05

Đ 3 !7GCĸz 1 NĹ!aQ!B;@7GE ĝS¦/.!Ò¸lcßmÙm!`r§ğĳČ"Ĕ,/ L±~ÍÒ+-)ķÒÂX"`!Ĳ ķ.(`N)`r§ğ Ùm!ÇÚ ¾g. ì/&cßma!f¿kĤ"Ùm! 3 \ ,`0×Ĵgã.  e  ĘÆÝ} E. nigrum !ċ0ªpğ*{Ķ © !­Z0ûċ!°įĕ§eĸÖúJóúÕĹeÄ0ďüÅJĄĘÆ}Vĝ! 8 ½~ÍÒ" 14 ĸĵ8HKD342 HP+-Ĺ. Ó¶!~æ`ÂX"`Ĳ031

LĊæÇÚ"øáâĦĸGrossĹ!÷ne0wuĸRdĹ
ÐĚ.Ą ,/.Ùm"LĊæÇÚsÉ!Û¥ . ì/
ĸĐ 1Ĺ

ĀáâĦ
ĸNetĹ
0GrossĭáâjÜ0'.
cßm"Ùm!÷1/6
ïÈ(YjÜ. µ,/"
ķwuĦ ěy.)!.Ò¸lcß Ģ¤6
I93GI"`0×Ĵgã. Ùmsï!áâÚ0á'd . ķwuĦ0ì( §Ĩ$!eĤ Į.]t.ì/+) Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 32         2014 0'+)5&$ 9(!

%&$24

.3 

60' +)57  "#8, 60' +*17Ý=ÉÈ ¦¯#Ê 10 cm I@"K©¨Ò¦13ª¤ÃÖ!½"+"
0"¦¯#Àsûq!H"®¼!±&¦¯ .Sé10(
!Ă~!ü ý3æ0ª¤ÃÖ"¼òÂ!
®¼"ïâą »×ïÅ®ß3¥
 0Û .1 0ćMaser et al. 1988Ĉ(¦¯#{ºE,i¹/Ó"}r D!rûÇÃáiÃ0Ã¼!"ðú ÃÜl0#ñ¸  0ćHarmon et al. 1986Ĉ.!gn"²SÂm!+qr ă3B  0cº+}r D">/
2000 !cº?t|!#rû"¦¯sh0"¦¯"Y! #2  ÍÑ#À¾"?t|!
¦¯"Séõ -%"Vÿæe"é.!#¦¯"oZû"u(/”Gsh0¦¯#   0
ĉ”3ÉÈµ
 ÍÑ#£Fù?t|?t¡3î§i!cºåwÐÆ 0 8 "fuî§[ć10 m10 mĈ3ìÚAë 4 ĄÉ"î§3ã
1. fuî§O"¦¯"î§=T/R¦¯5<8;"ìÚ·u2012  4 ^î§[O!sh ¦¯">ø
3ü 20cm Ð!T/RUúû -%5463ê·"Àl!ìÚ>" 2013  4
!Pê·"¶y¿3Ä ¦¯"Séõu3ÔR
 =fuî§[O!sh0N¦¯"546·u2012  10  2013  10 !
^î§[O!sh0N¦¯"Êü3·u2 dS"ê·Ø¥.¦¯"NJÈ oZû"î§[O! 
0N¦¯"òû"Ùû3ÔR
2. fuî§["î§ =gn²S¿"·u^î§["C!gn²Sê3kìäzgn"`²¿3 2012  4  . 2013  4 (15 S! 1 d"ýā·u=î§[p!0¤Q"ÞąÊ"·ucºW"«Ã¾´3u0*!^î§[p"aô!sh0¤Q .:<79! 20 ÷%ÞąÊ3·uØ¥=Ûx
1. ¦¯"shû! 
2012 ! 0¦¯shû#Y1 +q
N1 +y
>î§[p!0¤Q-/"ÞąÊ"rÊËþ).1ćFigure1Ĉ" .¦¯"shû#"ª1"
D3\ # ++"ª"è­,¤Ć!-³(0]ßÏb1
2. ¦¯"Séõ!  ^î§[ýr"$.#+""NJà °Ā@0'Séõõ 0
M_ç.1(^î§["jSéõ#gn`²¿Ëþç.1ćFigure2Ĉ".Séõ#"l"gn`²¿"ă3\ 0Ïb1
3. ¦¯"oZû!  2012 "¦¯shûSéõu3Ä ê
Ô@" 2013  "¦¯shû3íÔ"íÔL 2013 "v·L3±óØ¥ Y1 +è"¦¯q+y
"# IG7 .!2012 !sh¦¯&Sé
10(!
0ý3î&Ø¥+ü ý
3æ0î§["¦¯# OY8 " 112.5 +Ì ýSé10+"# IG8 " 19.2 
 I@"Ø¥-/?t|! 0¦¯#õ +" 20 Ðö +" 110 ÐSé10S Gd"Ø¥#¬ÔL#0+""
Gsh0¦¯# 
 0 ĉ3Î!R¢#ª¤"¼òÂ,ª¤ÕÁ">X! 0210

32



.,

 Tsukuba Journal of Biology (2014)*

13, 33        '10.4%+







 

2014 2(.,7

"65   & )82( .,79  #$:!/ 82( .-39ç¥ '!ÏÎ
ëđEĀ °Ã¯[Ç*ë¯-°Ã[ÇĉS-Ý*~ykĂ}Æz ð×ë °Ã[Ç*[ÇĉS ~°ÃÓö+ )°ÃąTýc­Û *å (+*[ÇĉS ĔÛfÆzÇæ*99
3Õ°Ã &R} 993Õ°Ãykà¯®*/@2.;ë¯ë [ÇĉS*å(+*+(993Õ°Ã fÆzGÇæ
*-å *ë¯ë[ÇĉS ±%āña*iè ĔČAB1993(Rhododendron
japonicum)à¯®*/@2.;ë¯äčĉS÷"XïÒÙ'*/@2.;ë¯äču'R. japonicum Çą {b* ¤(ĖĔ´Ę2012ėÒÙ ·øÎP³Ĕ×t|-ÈxĒē-ï )')Ĕ³Ĕ */@2.;ë¯äčc­ ¤( +')Ĕ
³Ĕ#)P¼ÆzG +(c­ Ì*iè&å (+*Ô ÇæĊËĖ³ĔÞ 2000ĠėKú R. japonicum ÇlvÀt|-ÈxĒē-ïP¼ÆzG/@2.;ëĖ[Çëėäč R.
japonicum ąH *ď÷"¡º ąĂÑFÉêĔeOã*¯ 
R. japonicum
³Ĕ 2000ĠKú-FĊ_*©ÒÙ 2013 4 §¯ *ÇæĊËKú R. japonicum ×oùt|-hh× Íé`Áë^Å-¢ht|EĀ&Áë^Å-¢+ĕ¹t-b &-xĒēÈxĒē ÿNē5B7D*¼÷ wxĒp-È1520
2530ě¼ªM-õj¼ªMë
*t|Áët|-ÈxĒ8?B<D-jĚôĜõã8?B<D R. japonicum Ç-ĝUQ
° xĒ-ć2013  6 § 17 £ć12 § 2 £# 168 £ĈxĒxĒć (Þ 100 £Ï#Ĉ1 üĈ 1 qÖĐÏó'*ì¬- #2 üĈęqÖĐj8?B<D-ïÊW^Å6=:-È
jUQ¦ìĎØ-xĒ 100 £Ï ĆĄ8
?B<D-ÈYk '!îû-½Yk'!îû½EĀUQ-qgvFĀvG
Ā_IÂāă-ô½(ì¿ßÚßn¨ă-_«xĒáJ µ)UQqg-ï]
IÂāă-½

â­Cå
 100 £ÏvFĀIÂāăĉ
20LF [ÇëuG ą{b Óö+ 15 [Çë¨Á'*Ì $(+ (figureę)vGĀĉ Z¼ªM [Çë¨Á'* ò(+168 £ÏvFĀIÂāă&100 £Ï¶ċl²â­ (+E¡vGĀIÂāăĉ 100 £Ïâ­Ì)20LFªM [ÇëuGą{b Óö+ ì¿ßÚßn¨ăĉì\Úß '!¿ß¾
 [ÇëuG+&»*Vm $(+ì¿ßÚß·ÄĞğ·$*20L}¼+&[ÇëuG [ÇëuG
<.0>4í{bk,å *Yk's+¿¸dÃăÐÎÚßă  ñrå (+*
 Ykûĉ25 30·øÎĔ¼ªM
[ÇëuGYkû  *Vm $(+E¡îû [Çë u*¡ *Vm $(+ ([ÇëuG ')
ă¸Yk-ï  ¸-ÜÞ *å(+*
LFâ­')P¼ÆzGÇæ* R. japonicum &x
Ē¼'Ö Ì*&[Çëäču'ą Tý+* , ©ÒÙ [Çë¨Á'¦&ąk $(+
25ªMP¼ªMĖ15ė CN ½â­[Çë¨Á'*þ $(+&ąĉ  þ $(+ 33)& Tsukuba Journal of Biology (2014)


.- 

13, 34         2014 +")&0(Ecklonia cava)/#$!&*'

1+" )&02  3%Đ½
×Õ%Þ¬ÁÊå(Dissolved organic matter: DOM)&èĖX$ 3¿ā%ÁÊáĂR?VHV 3
%áĂī
& 0 685GtC !³44&ÎZ%\ĪtáĂà$.uµ31$Ñê¬þ$
. DOM &ăĉ%x/
¤êå(%ÆĶbć! Ç#¡o7¯!
õ14 3 Ĕĵ&Ñ$[ě#WËêëĎ 2
f}­ê
ëå% 0 20ļ40Ĺ7 DOM !´l 3! õ1
4 3 Ĕĵ%ê­3 DOM %æ¥!ÁĒîm(Colored DOM: CDOM)7~,! ±143*¤êå$03mĝ$ĸ ď§7.! º1 $42 ĔĵĢÝ DOM ĬÂ$62áĂ7c¯3!
ø4 3 # 1ftð#w¦$į3©&õ14 # Ã÷ú & ĔĵĢÝ% CDOM %Z .æ$f«z§ĸ ĕf§ DOM(Fluorescent DOM: FDOM)$ôñ;AP(Ecklonia cava) êë DOM $3fãķ7¸%ı%ĕfæ§%t!Þ¬ÁÊáĂ(DOC)à%
t 1 ĔĵĢÝ DOM %×ÕZ %r¬$ č

1+" )(,2ĆÅUč(1) DOC àfã¼Į Ĭ#3$4 DOC à&Ú7ø24 ¼
Į%fã£$&
DOC à&ķĭ¼%ÿ 23Ĺ* Ú%! 1f$0 DOM %âÊt ê3 Úç ` ! 1;AP ê­3 DIC %WĨ%+ f$»mĝ 2Ì2%Ĩm&ĳmĝ§ 3!č 143(2) ĕfæ§fãn£ ĕfĄ­ ï#(Fig.1, 2)ãn&
JV= Ex/Em=280/355, 400/500, 280/500 % 3 ®$  ã£& Ex/Em=250/450, 355/465 % 2 ®$#
ĥZ%¼Įï%Ç 1 Ex/Em=280/355 %JV=%Øfãn%JV= Ex/Em=400/500, 280/500 %@KEv'ĕf
%p Ģ 2fã$0 FDOM %Ą­ 
6!7ø 3(3) fæ§mī%°È!#3 SR %e&ã¼Į Ĭ )"#4&fã$02 DOM %`mīt Ħ8!7ø 3
(4);APĢÝ% DOM %Ì§;AP ê­3 DOM &fã$02WĨ%»mĝ§îm mĝ43 f7x3!$02%Ą­ t
ÁÊå%&×ÏZ$c¯43|đ§7ø 3·Ò(1)DOM ²Ĳķ2013  5 À 27 ¹ 1 28 ¹$ ĴóYíÖÜ$ê¨3ĚĔĵ>TLñ;AP(Ecklonia cava) 1 DOM 7²
Ĳ
C:HV ßÏ;APda$²Ï{^IFVSė
7Ę%ò£! 1 ¹ąħ£$Ôû7ì ėh%ĠÏ7²y²yĠÏ&äké<QBċĈ5Ā
(Whatman, GF/F) 5ħ£OR;VNGVENES$
4fãķ* ¾® Ļ20 ijc(2)fãķ*ĠÏ7 0.2m ¢% Polycap 150TC(Whatman) 5ħH=DR97İ %£5Ù7öēIT$ù]
fãęČ7ì f7ããf% & 765Wm-2 $ğã¼Į& 0ĺ2ĺ4ĺ7ĺ12ĺ24 ¼Į!¼Į!
$Ġ¶7xãķ!44%¼Į ¾Ä_Ġ¶.ìª
DOC à&gÁÊáĂĞ(Shimadzu, TOC-V)7ì Ûĕfæ§&ĕfmffĞ(Hitachi, F-4500)7ì ÛÛý&qĢÓĬ(Ex)240ļ500nmĕfÓĬ(Em)280
ļ550nm ! Milli-Q Ï7LQT=!fæ§&|ĜăĤġmffĞ(Shimadzu, UV-3100PC)7ì ÓĬý
 200 ļ700nm
Û1$f 275-296nm,
350-400nm Į%BM=ESsĩ744Ð-%Í SR 7ül

Figure 1 fãn%ĕfæ§(Éģ&qĢÓĬĊģ&ĕfÓĬ)Figure 2 fã 24 ¼Į£%ĕfæ§

34



.,



 Tsukuba Journal of Biology (2014))(5

13, 35        4 *!$&,!6 2014 2'.,7

8/01

 %92' .,7:  "#;+ 92' .-3:ċ¿ ÜÚg$â²ÃÏè(DOM)%ĳcÊï f(ìĔ£Á$åĀ[AaMa 3-DOM Ã3åĀ(DOC)%
ìĔ£åĀ¯í#"ĭĕ±7´$ÜÚ DOM $
5-25%7y-3 43Ēo±â²ÃÏè(FDOM)%ĸtĘ
± 2
ÜÚ$åĀĵķÏč#Ĳe 3 Ċ 14
3$ FDOM $Ēoª¨%ÜÚ$Ĕ£#"3)!©"
34% FDOM $ĒoĴoç#02Ýo3oĤĐ
é°7Ã31 3$-ÜÚĔ£ DOM R
a\# 3 FDOM $e% Ċ 14Ķ$ÜÚ#ïèÛv#i FDOM $Ēo$ï³/oç#03Ýo#Ĳ3Ľòöú%ē64 " Åöú%ÜÓ$ļĽ#02ÜÚĎÊÌ FDOM$Ēoª¨$w7ģĠFDOM ï³ħ¨FDOM Ēo$Ýoħ¨$ýs7Ĝ,º×ÅĽ%UV ĥĪëþ20%$U[;aTLaJ(PC) )* 100ľ$ UV ĥĪë7Ã3õđî(QU) 7kð
1. 20 L ļĽĜ¹¶}% 2013 § 5 Â 13 »1 19 »#Ĺ¤ôdñÕ#ē100 µ XGBY7ĦdñÕĔĺÓ7 20 L $U[;aTLaJ(PC)#pÉļßu­ûØdñďÜĽD_Ear$¢ĽÔ#ļ" Į$Ĝ¹¶}%»$s »Ö7ó#Ñ» 6:00
18:00 #ē
2. FDOM ï³Ľ
20 L ļİ­3 »ó(Ľ) 5 »ó(Ľ)$ļÜÓ
7250 ml $ PC
QU 44 8 Å#tÙ
$x¸78\VüīoÀîÐ2%¼î ­q$
î7 18:00 #ĽÔ#ĚĈĉ»$ 6:00
18:00 #
$¼î Àî7 2 Å||î1}2sĜ¹%bĬ7<ZCćą5ÿäĪ5ÿ#Ð=^^Q9\ a ã¨ 5Þ#g$
FDOM Ēoª¨{' DOC ã¨7àFDOM Ēoª¨$
ĄÈ7įĘÇ(PARAFAC)7ēÐ2%zÞ$++>\
E\8\IOKM=H[8ĂČ¸ę¸#kð+ĽÄıg$~ėoUV $çį7ęàĄÈ`Ċ(1)â²ÃÏåĀ(DOC)ã¨$ă¾òw
20 L ļĽ FDOM ï³Ľ$Ĝ¹#  DOC ã¨$à 5
¾ıăĪ#i ã¨$v%)*Î& $ 11 ĩıù¨$E:WC?a\% DOC ã¨#"v"  Ċ 143(2) FDOM $@_UaL_JÑ$v²@_UaL_J(c)#t1420 L ļĽ$Ĝ¹$ c1
c2 # %"Ēoª¨$w%Ė14"c3%½ı#¦ 0.00179 R.U./12h $ħ¨u $ 1āĆ$¬Ļ¡" í% c3 % 1 ĩıù¨$
E:WC?a\.u3n# 3 Ċ 143(3)oç$¬Ļ
Ēo$é°1c1 %ÜÚĎÊÌèĞ Ċ 14M=H[8#03ï³hj 3c2 %ĳcğá$ĎÊÌèĞ Ċ
14 Ģ§M=H[8ï³3 ÷ĝ4
c3 %F^B_ÌE_N=Ğ 3
 `c1 # 
c1 %½ı$¼î#ÝoĖ140 c1 #+43M=H[8#02ï³4 3ÜÚĎÊÌèĞ%oĤĐ7ğ/Ċ 1431# PC # 3Ý
oħ¨% 0.0012 R.U./12hQU # 3Ýoħ¨% 0.0024
R.U./12h  $Ýoħ¨$¥% UV $ç$Ãæ#
03.$ Ċ 143+Ķ$ÜÚ%ı# 3
ï³ ½ı# 3Ýo#0 c1 $ã¨%)*bį#m4 3 ·à43
`c2 c3 # 
o#03ĤĐ%,14"c2 7Ë³3ĎÊÌèĞ{' c3 $F^B_ÌE_N=Ğ%oĤĐ#Ċ 1
43(4)FDOM $oĤĐ­$ËĨ ÝoĖ14Ĝ¹ Àî$ DOM ã¨7Òġ."¥%Ė14"4%Ýo FDOM %æÏè]S\+tĘ43$%"Ēo7ÃÏè $Ë
Ĩ7m 3 ĕ·à43Ēoª¨
7ÃÏèį$µÍ  ®Æ$öú%ĿĒo7ê²
ÜÓg#Ð3ÃÏè7ěl "  ø43
ĿÜÚĔ£#% FDOM »o$¬ĻĒo7« 3 Ċ 143Figure 1. FDOMï³Ľ(day5-6)# 3c1Ēoª¨$
w

PARAFAC #02FDOM $Ēoª¨$Pa= 3 $350. Tsukuba Journal of Biology (2014)

 &% 9713, 36         2014 4,!0.!:1)2( #36';4,! 0.!:<  *$+=-8 ";4,! 0/5<¬İQ÷$ì¥#«l¤æ16ĥ" ć Ā03
8=A:?IC%½# Í#"2 zÉ 0æ¼Ģ ĩ3,QY6ē1ĳ" 0xNą#%Ći#+ĺ2 Õć%#°,ą ä+2#3gê½
%j6ı
"3#50Ý©/ #æ16ĥ" 0ą# a\È%¸Ø"ßõ{2ð$ñçÏ
w6ė 2 Õć$l¤%x'À3%½#ÿ+-3"ÕĂĉ%Õć  0ą#a\È6¸2ăûħ ė 032õ{¾ø{úô#ł52ßç6į(½'$ÿ$}ě¹6ėÎ$Ņ$í»"5Ņ õ{r\i#$¼ë{6`Ñ õ{ýµ`Ñ2¼ë{"  
#/`Ñ{È ù" 04 
30$
ďÖ 0¼ëýµ$ M $Ûń$Ņ%Óë{ U¼ë{¼
ë{65č 30000 a${6`Ñ2l 
Âîýµ$ M $¼ëÛń$Ņ6Æ{2 čōl$Ł#
640 a${6ÆkÆ{µ$Ņ6Īs 4`Ñ
2¼ë{$) 7!g6Æk
{$ÆkĐđÎŁ
0{ÆkĶ­6ċk`Ñ¼ë{È $ł_6į(4`Ñ¼ë{$Ņ)!ÆkĶ­%Ķ""5¼ë{6-Ņ)!õ{Ħu%Ŋ  / Ĥģü$Ņ$õ{#Ê¹ Į,032ľÂî
Ņ$Îqo`Ñ¼ë{È#õ{ÎŁ¥ |Ì32"5
õ{ÎŁ¥/1r"0µ"0 "RĘ$£#/Ê1õO{È6Ä2 -2 8=A:?I
C$ÂîÎq `Ñ¼ë{È#%]$d-Į,03""58=A:?IC%ÊT-õ{6ĥ"}ě¹ Ŋ ė 03õO3{%F;BJCJHíŀ´ 0.5 Kā´
0.38 K\Ĉ% 0.038 K īċ330${%35. 30 ßç%ŐÊZiw ßç$[Oh#{ÒŁ%ŀ"115$ßç%{úô ĸ+{%w" Éâ
ŒÐ 0 10 Ð# MĽþ.ºĀþyĠþğþ"!ÊÕ~Ņ¼Ģ6Âî8=A:?IC$/ #ķď¿ßõ{  õ{Ø¯6Ãö2Ĥģü%
Ĝļ$ÔĊ6
ó#f3ß#G>D9H#¿.2 
\i$¼ë{6±pû#Æk22ÂîŅ#$Éâý#{6Æk{$È.ÆkĐđÎŁ6į($µ30$Ņ6i#Á¦1\Ň¶ĿOĪs{¢i${¢Č6È {¢ČN#%{ŋ³¼r.{ŋ³¼ĴT${ĎĚ Ōm#S72${ŋ e3"{6Óë{{ŋ e32 {Ü$³¼3"{
6U¼ë{
õO{ )*.³{Ü#v+32{6¼ë{ Ĕ33${6È Æ{{$\Ĉ
6èµ35 0 15+$ŐÛń#ĭßçOŉę{ÒŁ.wï6į(Lĝ#ĕwýµ$Ĥģü%
ĒÚãu6ĥ"5¹û#¼ë2 \Ğ Ğ' wW¡.õ{"!6ĥ" / #"2ÂîŅ¼
Ģ$\Ğ.Ė$àÅí» 0ÓëÒ6 TIIIP $ŏÛń¼ëÒ6 MMMMMM $ŎÛń ¼ëÛń6ŒÛń#lňġ{È6×ĬėXË0 #"Õć$õ{¾ø6
õ{¾ø Ë0 #
32PĖUü$@<E?IC ÞĲ2 
8=A:?I
C%{õd$±ć2
l 
`Ñ¼ë{È
#Êw$Ĩ03"Õć%á+õ{ÎŁ¥6-Ļ²"ß#ĺ3&-õ{2/ #éc6 ė 032õO{ ŊßçOĶúô6Ą %
½$ 0ną# $ò#Ļ·û1
ĕwa\È
6¸2  /  ą$ä+1 h#
ßç%[O2$
30$a\$õO{$úô%Ĺ®w" 1wªĢ ÙV1230$ďÖ
0^©ĵ1$j .2Ń1½'$Õć$ÿ%ņ ė 03ďÖĕwýµ$ T $Ûń$Ņ%č 450 Õ${¢Č6`Ñ ¼ë2#3{¢Č$È%t¼ë2 č
1100 Õ${¢Č6`Ñ${¢Č#ĕwýµ%33č 14 a$Óë{ ĩ3 ¼ëÛń$ĸĥ
h#$È%t¼ëŅ%{¢Č1č 22 a$Óë{6`Ñ2/ #"U¼ë{% P  ¼ëýr$
Ûń#" 0Į,032/ #"1$µ{¢Č
1čŏa$U¼ë{6§#`Ñ¼ë{% M $¼ëÛ
ń#" 0Į,03¨ 520 a6È  MM $Ņč 220 aMMM $Ņőa ¼ëÛń$ĸĥ h#å 
33$`Ñ¼ë{È$¨b$lÇ% Âî36)%

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 37          ' +.10.1)**
3" &4,# )%25 2014 ,#)%2

!6$/ 4,# )(-5

« Ġ

Ā Õ

 &ÙÞ%èà 6KS;TWQ%  òĈ"ĬĈ"Ĉc Í%Y&Ć7&_%è6" 
6ĬĈ'ÞĮ9õ|! Ć7&£¬ Ľ 5Þé%Ī$ 5 f&Þ*õ| é96"87
&3$ĸĊ9ĕ$0%'yĈ"²
Ĉ&&/$4
ĸĊú9îĨĂ¾ $7($4&>LV@Xã" ªĔÑ%³Öĺ"»ĔÑ%³Öĺ xê7 6YÈòĈ&ĳ'ĸĊ&0&°»2&Ă¾9´Ė"$ÂÖĺ9èé%À5t6" Ď!6 òĈ"ĬĈ 77#&3$ħö!9èéé[ 6& 'ot%ğ+47
$  Óóù!'¡q!^&ĳ9ć}Òe§&..×$
Éľ!ěz9ĕ$mÐÆ&ÿÍï}9ğ+.Òe§&ĳ e§9p76Éľ9ğ+·ï»å&¿Ø"e§ĳ'nw%ĹČ éÉ¯5é[Æ9âļI ^&ĳ"1ć}ñ²%8 $Òå9ėsņÉľ%$6Ĵ%' 50 n,#9Æ 63%$&²Éľĥ:!1^&ÒåÆ% $}'$ òĈ&ĳ'
ŃÉľ 4d»å&èé Ğ047 ĬĈ&ĳ'ŅÉľ
9ħ$"èé'ĭ7$ 3!6òĈ!'ņ
Éľ 4ĬĈ!'ňÉľ 4mÐ 6d»å 30 nö¬%$5&Æ Zį"$òĈ&ĳ'1 Éľ 4»å&èé9ĭ
5
13 Éľ%' 70 nĢ.!ēø
7YÈĬĈ'ņÉľ%$4$"»å Ě¤! 
13 Éľ%$ 1 25 ö¬ ēø $  òĈ'ĬĈ"Ý+ Ê 4é[! 691 
" 6ļ II
 e§9¢63%$&'òĈ1ĬĈ1 10 Éľ!7.!'^&ĳ"1e§9ĝ/6Ĳ 4Ĥ
5Ĳ%`547 1ģ59 Ĳ9À5,#Ĳ%
36R=WJ9¢ĳ'č_%`Ĳ&e§&Áp9p7e§ÍĮ'^"130ŉ40 té' 13
Éľ 4.6& )!e§²ŅÉð 4" 6e§
4é9ĭ6.!&ÑĮ!
^%©'$  
vÑ%é[7C<F'òĈ&È Ðº%
^"1e§ñ²&ņÉĮ%ńé[&!
Ïv&ņÉĮ
&é[Æ'òĈ!ü 60 nĬĈ!ü 30 n%$6
&²&&é[Ķ¬'^"1,-×!
C<F%1
$ĩ'Ğ047$ ŃŁKS;TWQ&òĈĳĿ¨ŀ"ĬĈĳĿŀÈ ßļI òĈ"ĬĈ&^È9ć}6ðï!
¡q!}
KS;TWQ&ªĔ9 14L10D !ĹČć}ĳ'
%<GBNHA%p7 nwĹČ9ĭĻ" #&nj%1łÉľ 4ŃÉ%Ńĵ&OID?WM>9] āłÉľ" 1 ÉľŅÉľņÉľŇÉľňÉľ13 Éľ17 Éľ21 Éľ29 Éľ&Òe§&ĳ9ězmÐ
9Æ mÐ '»å"d»åÒå
&ŅÛı%tļ II
 ĳ&e§¢Éľ9ğ+60%
ņĵ&·ï%»åĲ&pñ± 30 cm &r°PUEGHA¢q%Òe§&ĳ9Ńĵp7
ņtgq%Ĳ ĳ%R=WJ e§ e§þa.!Äą e§ÍĮ9Ĝīĳ9p7
4ņ
t&Į%Ĳ ĳ9äĘā5ĳ e§½ĕ|9ô
5 &ĳ'5s&Ãk9ć}ĉÉ 4ĳe§9p763%$6.!ÜÉĄ5ģe§9
nj'nw%ĹČ Đë%éÉ¯5é[Æ9
Æ 

37

ċ ¤
 % 6KS;TWQ&ăÚ¼í%'ĬÉ! 1Ĉc è 6Yđ%Ĉc9sæ6¼í91ËĔ
ķ!'è¸ç ¶Ī! %òĈ2äĈ9è
¹}6"ĬĈ2ÐĈ%u5Î6÷ 
$8
¹}è¸ç 4&ďs"ðï ®
&Í&ç"'÷q&£¬&{2Ļġã&á¦û}$#!6ĬĈ ĸĊ²%èé9ĭ6&'&0!5Óóù!
1èé&Ħ­ Ğ047 6 KS;TWQ& 
Ì4 $ç&¹}%36ĬĈ&sæ!'$ è¸!
6ĭÄÞ&'
õ|9ĝ/6KS;TWQ%" 'bâ\Ď" 
% 6ĬĈ&õ|%'Ç$è¸9
îė! $"İ i 6YÈ&Þ%ì.
6òĈ%'7£¬&{"¹Ôh 2 6  &Ó÷%sæ6Ĉc'~ý$£¬l%
361&!'$ĳę%36&tÅ"mİï$º ®"ċ 47èé17%¥µ òĈ'çÔh Ē%é! 63%Ê 4èé9ĭĬĈ'õ|²%é60%èé9Ħ4 " 3,*

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 38        

51#. 12!&"- 7/( ,*68  $æ úØ¬µ-+&) êËÓ/Ð¯hDü9@R*òÝ,u*? >Dä@ð¹.Ìª+) Â+.Ø.
;× |.{­·@+Ò>A)# Øøp)|,ØD@U* êËÓ2.äkªDü9@.
:".Q\*@ ë Øa.Ø/ -õØ)<#
9 õØ#Ø.,õØe¥.°÷/ êËÓ-+&)/ýgº*/,:A, LNÀ.l¬µ*@MOG
EJNFGĀ     */ Ø.wñ.Ø> -õØ~6@:.. õØe¥>{.ÛãØ)
@ .¡ RÅ>Ø.wñVé.ØÞ),A
0 äkª/YS@$B #&) MOGEJNFG/õØe¥.ØD»Æ#!@#9-[>.¹D¸)
@nÔ@ ¦¾Ä*/ õØ¥ö-@Ø.äkª
D >-@#9 õØ°÷-WØ.^.zl+ õØ°÷+.õØ#Ø.ØÉô.ï õØØ=1ØR.çñc.ùÃ.zlDá³# §+²
 MOGEJNFG-/ Ø.wñ-|ā© '.Ú? Ø.õØ/|Ú]>õ~A@ Ø.õØ°÷í8-'A) Ú].ØõØ £-Ø.T}Vé.ØõØ@+* Øa`).ØõØ´õ+,@ õØ°÷/ ØD½R>Þ#¡-õØ#Ø+
ç×(#'57.ñc.fp-=&) ą'.IKPH-c
# Øa.Ø3)'57.¶DIKPH>
õØ#Ø.fp-=&)> ´õ.¶D+ «®#Ø.fp*> Dc# .% IKPH
>6*DõØ¥ö+#  Ø.^þ ¢ÿDIKPHö*±è@#9- ?
.Öx*õØ)#ØDm Ïr-Ă'-d?
ØÙ.ô+Ø_Ç>ÜjÎ6*.ôD³? ÜjÎ-@àDÊb#þtāÿ  

2014 /(,*631'%9)4 7/( ,+08.|D³@#9- oIKPH*õØ#Ø.ØÉô
+ ØD½R>Þ#¡-ç×(#'57+õØØD
C!#çñc.ùÃD³# Ìª Ø. ¢/ IKPH>.ö/ ØÕZ,?^)# õØ°÷í8-'A) ¢/,?
.°÷*/Ø45v¼-,&#þtĂR°ÿ . ¢=&) IKPH*õØ#Ø+ç×(#'57/ Ø
.wñé-@-:C> Ø.Þ.Rñ-XÑ)#þtĂS°ÿ 
花序の断面図見かけ上の頂点

大きな小葉

小さな小葉

ステージⅢ

ステージⅣ

ステージⅤ

花序を真上から見た図
小さな小葉

大きな小葉

ステージⅤ
ステージⅣ

ステージⅢ
開花した小花ステージⅣ
赤く色づいたつぼみ

ステージⅤ
つぼみ

花序の頂点

花茎

t2ĆõØIKPH+.Ø.^+ØR.çñc.ùÃ.zl õØ°÷.,*£:¥öô./IKPH*Ąö*? IKPH+.¥ö/6?zC> Ă>ă*
&# oIKPH*õØ#Ø.ØÉô-/ IKPHö*¤,/7>A,&# oIKPH*õØ#Ø/ IKPH.¡£:{ IKPH+/,&# '57+õØØDC!#çñc.ùÃ/ IKPH+.ö*|,ï/,&# Ò IKPH*/õØØ, ×(#'57:C!@+ IKPH*.yic+qÈ.çùÃØR-u
@+ >-,&# >- õØe¥-ØÙ ¢@+* ½R>ØDÞ#¡-/ Ø.wñ-XÑ)@çñc|»Æ&)# A-=? õØ°÷-W&) õØØyi Ø`Z/ç×( Ø.R
ñ-/õØ¥öDë)-çñcu@+-,@ ,C%MOGEJNFG/ õØe¥>ô¥ö-C#&) çØDãØÛ-Þ!'@¹D+&)@+Ò>A@   tāĆØ.à³
 õØIKPH+.Ø.õØØ+ ØR.çñc.
ùÃzlDå3@#9 Øa.Ø'57.¶> õØ@îÁDìÍß oIKPH.¥ö õØØDâó# 6# RÅ>û¨@Û-)s¿)@Ø

38





75 Tsukuba Journal of Biology (2014)

0$ 

<

13, 39        

4, 

2014 83#&75&;!1) '%:=83#& 75&;>  .(/?-2 *+=83#& 76"9>

39



31 Tsukuba Journal of Biology (2014)

7;6&'
9

8;64' <

13, 40        





 

2014 50%(31(:@ # 

=50%( 31(:>  -)."?,/ *+=50%( 3!2$6>ò»(ÛÚ ½«ÕÇ;öÒ+ &ĔtÝ°,Ó©- íÇ¯ +(#&ĕø' 8 ,â'-çµµ;-8+d8
3 ě'Ĝ;38åhĊ ě-Ĝ+ ãÃÚ+É®
ö;ö Đ+ĜãÃÚ*É®ö;àâ4 8 96,â'Ĝ6,É®öÕ8Ü³Ú*ø(& ě6,s6,u 8(ñ «S@_Za-Ĕtö+ & ĔtÝ°;¤$ 7â×«,ĄĈ+Ö 69 7
(ĕø*§;Á (6 ě,«S@_ZaĜ,É®ö;¤Ċø+*8(g¬ 9;ÂĂ

8-q(Ĥ) ,Ĝ-¨ó;ċ7d8 ĉ78*)&ě6ĝ98ĢĤģ ,¨ě{/É®ö;384 8(Ĥ) ěĜ;ď **8({/Ĝě+č%É®ö;ö (Ĥ) Ĝ,É®ö;
 ě-{/É®ö;Ę8( ö(Ĥ);î7Ď
¼èÚ+ 23 U<'ºęz+k¢+ô# Ġ¿¶(&G?N[?ÛRXHáWYL?XHjá>aFaWYL?XHĢAcanthoscedius obtectusģ;Ö
>aFaWYL?XH'-ě«S@_Za;±"¾k¢Ĝ;ą¤8(Þ69& 8 Ĕtö+$ &wößä-ö:9& *' æc+Ĕtöyr,Ì9;¹6+ Ĝ6,ãÃÚ*É®öú698;ć0ĢĠĤģ Å+ Ĝ,É®öě,«S@_Za+5#&¤Ċ9& 8(;ÂĂ ĢĠĥģĠĥ Ĝě,Ær+É®ö;ö# ºę;C\IB^
?A]IÂ,ĕÈČ+5#&þÀ êÁ É®ö,ºę-³ÿS@_Za 8½­+ė#  «S@_Za,½Ñ+5#&-½­*£ú69*#' ,QbM+-ĜÉ®ö;yö:* QbM198(6 J_ēV`KaZQ^;Ö &É®ö,½Ñ(ëìºę( i$,ø+ĝ&þÀ;ö# Ĝ,É®ö,½Ñ
+$ &,êÁ;ĥ+à ĥ,Ĥ(ĥ,ÈČ+57Ĝ,É®öĘ+-³ÿS@_Za & 8( ĥ(Ħ,ÈČ57Õr68«S@_Za,·57ÁÚ' 8(Ħ(ħ,ÈČ57Ær68«S@_Za' #&4É®ö;Ę8Á;±$(¹6+*# 6+ Ĥ(ĥ,£+È0ĥ(ħĦ(ħ,£ (6 É®ö,Ę+-³ÿ
S@_Za57«S@_Za,Á (ñ6
98 É®öÕ ,ëìºę+$ &- C\IB^?A]IÂ(Ä+³ÿS@_Za
8,2vp+ė*#¿¶(·Ê ĠĤ ð¨1-10¸,¾k¢ě(¾k¢Ĝ1$;30 x
30 x 10 mm ,T\INOCEbI+x9 2 ,³ÿĊ#&6 10 ę,Ĝě ,ö;ü ě(Ĝ,É®ö,½Ñ(k¢+ô81',ö;āĖ Ġĥ «S@_ZaĜ,É®ö+¦Ğ;f8,'
9. «S@_Za;Ě ě+ &ĜÉ®ö;ö:**8(g¬98 WYL?XH-«S@_Za!'*r÷+³ÿS@_Za;±$ lâ+ &³ÿS@_Za-É®
ö+ĕø' 8(:#& 8 3 «S@_Za(³ÿS@_Za,¦Ğ;&ñ Ġ+-|}~Ô+5#&©
ě,ÆrĢĥĨÐõģ( ,Ær;ÏÍ~ÔS@_Za;Ë Ì 4,ĢĥĨÙģ ¾k¢ěĢĥĨġģ;Ö96,ě;H^CPbT'ù ,d+ě,ÆrĢÐõ/Ùģ;ï H^CPbTd,ě,Ær+r8Ĝ,É®ö;ü Ĝ-H^CPbTe,ě(-³ÿ*
3H^CPbTe,ě,³ÿS@_Za,¦Ğ-Ñû'8 ´Ø«,«S@_Za-H^PbT;đ&o:8 ð¨ 3 ¸Û,¾k¢Ĝ
12 +$ & H^CPbTde,ě,ħđ7,é2:,Ġ;ö
ĜÉ®ö;ö# Āºę;ĀÎñ 96,êÁ6 ě,«S@_Za-Ĝ;ą¤Ĝ,É®ö;¤Ċ 6+ě,³ÿS@_ZaĜ,É®ö-ëì8( Ĝ,É®öě,É®ö;¤Ċ(:# ě,«S@_ZaĜ,É®ö;¤Ċ( nĆ >aFaWYL?XH+ &-¥&-18(Ă¹9,nĆ ĜÉ®ö;²¡8lâ+4 &-18 6+ÂĂ;Ē3êÁĠĤ Ĝě(4+ k¢+ÿý;deÝ°,r÷;öĢantenna-tappingģğí+ú69 me9;É®
ö(2*
54 U<," 50 U<'Ĝě,³ÿÕ " 38 U<'-Ĝ3+É®ö;ö#Ĝ,É®ö; ě,-Ü"+Ĝ+ªÉ®ö;3(Ĥ) Ĝ,ò¨+1:7W?aP=aD k¢;ă28 k¢+ô40

:7

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

B
H?-/>%



13, 41        

# 2014 <6*+:7+DI

$&B;1E"8.C

A4 @F<6*+ :7+DG  0,2(H*5 !3F<6*+ :'9)=GäºdÔÓ é+ë= UN+mă),11(ā+=¯"Ûĉ : À)UNò;:é511(Å+éß=5"ā =5"UN,Ä é85Å é85ë=
&%:Ø =5"UN,Å é8ë= &),79+¹ă:ĎRanta and Lundberg 1980,
Harder 1983ď
7!$fèÓ),ā +UN+¶Ø+UN795²ċ)»y% :&jÇ;:ā
+UNÄ é%²ċ:&%,
é 9+²ċ)
:¹ăā(:4Ø +UN795²ċ|Íª(:&5 :ĎPlowright & Plowright 1997ď
+7(ā )7:Q\`OR(Î:+1'+7(&)Î:+=·8)tìÙÜ,( %¼ÙÜ%,ā =5"&)7:²ċ+Q\`
OR'+7 (§«+é)$1òé8ë1%+'+Áą%Î:=·8):&=ÔÓ&Ê)ā,é+§«)7!$=°u;6<:&%²ċ|Í<:+%,( &ã p -é+Ăý+¢¤ é%,ā %5á~)°u%:4ā UN%5²ċ|Í,ª(8( &ã 8;:$Ăý+¢Ë é%,
ā %,é)°u:&)­#8 4²ċ|Íª(:&ã 8;:é+ýn)" $éßāĎ ß+āĐË ß+āďĂý+¢éß+¢Ď ß+¢ 7.Ë ß+¢ď
4/d /+ā=QJMaTDK%ñÇâ½dãĂý¤ AAVDZ?I+é%,ā qo0'²
ċ¹ăØ(:r !²ċ¹ă+zù¹ă
ë¹ăĆæ¹ă+;;)" $5ā(:0'Ø(:r !
;8+â½,AAVDZ?I%,é+Ăý¤ g
ö!9$ $é)"196 4ā %5é)=°u;6 &=Ú:+7 (é%,ā ¶é)Å591)ë
Ćæ%:4²ċ¹ăØ$Æ3&\`OR+2 :&ð :f¶ĂýË >BP\EH+é)$,+ā)7:²ċ¹ă+ú ,î8;(!²ċ¹ă+ë¹ă,
ā(:0'Ø(:f¶zù¹ă,
ā(:0'ā:r !;,ā +UN=é)°u;:&)
=u;³*9o}=9$ 4% !Ćæ¹ă,+ā)7:ú ,î8;(!;8+â½,>BP\EH%,ā ¶ë¹ăØ$Æ3&\`OR :f¶é+ĂýË gé)"19) 4ā =é)°u;:&)¬ă
9
zù¹ă79ā:&Q\`ORÎ$ :&=Ú:+7 )>BP\EH%,ā +Q\`OR\`OR)7!$ÕÂ;$ :&ã 8;: lg8
tìÙÜ%;$ ā =5"&)7:²ċ+Q\`OR,
=é)°u;:&)ā ­ #8(:4ëÈ)zù:1%)79¹ă:
&%Î:&·8)(!8)ā )7:+
7 (Q\`OR,ā %5=°u;6 Ăý+¤ §«=é%,Î( &·8)(!¶ÃāĀÖgÐ¡ê£Čć¡TČ 7.ôòüîÑuÞ)$Āó¾=ì!õ&$ā+ÛvÒ 7.ÛăÒ+ [aUSVN=Ï ¿ÉÛ,Ăý+¤ é&$AAVDZ?IĂý+Ë é&
$>BP\EH=Ï ;;+éÛ)" $lh+ó¾=ì!
đď²ċ):¹ă
òé:UN=ø XQAB\_=Ï $´¨+©¸s=WLGc)9÷2Kbe]eI^cwÎ)7!$fé 9+²ċ):¹ăĎ²ċ¹ăď=KROY?
@ON=Ï $ñÇ²ċ¹ă,UNé)Ą9Ý!$8é)=u;$ëÈ)zù:1%+¹ăĎzù¹ăď
ë= ¹ăĎë¹ăď=¦® $é8Ċ.Ý
"1%+¹ăĎĆæ¹ăď+ēÁą)x$ñÇĒďā´¨©)+qo=±ÌCO2 čþ)7!$×8U
N+āĎiçāĐh{àāď+k+ýnĎĈāĈ¢å¢('ď=QJMaTDK=Ï $ñÇf¥ñÇqo, qo+ïÿí=û:4[eCcF=$8µēďé§«ĔĎ ďĂýË é+ĎďĂý¤ é+

41



*( Tsukuba Journal of Biology (2014)'+%013, 42        

71&,$*(3 8-# *(69 

/4"2



 

5

2014 -#*(6;

!: 8-# *).9

ď¿Xòñ

:Ę 
5 Á 4+ 9ň10 Á'}ĤÈ#±Ļ8ù×êå è['7Í&ê©ą)
åĩ3êå(þw:a"ĀÂÐåªàÂÐåê¦ćĕĿ 4+ÞöÙĕ:áĆX²'įé" 7
(4 &ï&7ê©ą5(åĩ3êåăĆegtÆ'i85(m:Óī(ĺá(þw)ZĒ'ï§Ör$*8
**|­n(ê©ąĆegÓ)ŀåÝ(¯ÎăĆegÓ)ÉŁÒĹ('&¢Ľ:z.Ĭ#)ï§ÖrêåČĻ(ÌĮ¯Î$"uì

3w©:Ô¥7$¯µ8ê©ñ'ĳě&çĦ#
7$ģĥ8" 7ĉÇï§Ör(¢Ľ)ê©ą(î' 7þĘ#ľĔ

. @<AWMSYĤÈ

'ę87$ ĸ$Ù(þĘ# 7ù×ßĶ)(h# 6Í&bê§ĨÝÞö7(?SCDYĝÆ(ĉÇÿĈ«(Ŀd )Ě$ÙĕĶ#¾

ù×

÷'ï& " Ùĕ#)HEOWCGJPFLQBpy)ZĒ'đê§ĨÝ(êëĴ_ $871ZÑêëJI=?Bý3>QBý&%(½ĖĿ2ûģ8Z»(Ĳt:ÞöÙĕ(ÂÐå'j7$ü8" 7

Ě'


qĘúā#)ÙĕÃñ'ĴÞö7æï&ù×

TQBpy" /t¸tÆ(ĉÇù×êå(lg:^&Ħ$" 6
(4 &ĴÞöĜ58& (¹)Ě'Ó"Ùĕ#Â¨' oģ158

ù×#(øĜ)Ë1"_ 

. Ļ~§Ń

#Äúā#)ÙĕÞö(ĴÞöĭĜ58& ù×'")HEOWCGJPFLQB'Ñ #KRCGNt¸tÆ(ĉÇù×êå(lg¹)Ï¶ÙĕxXĚx'Ó"1ŇÞöÙĕ(Âã#ù×êå(ČĻÌĮ:Óī,ÞöÙĕx#Â¨' 

2ŇĻ~§Ń'"ĨÝuìÍ¡:ÊĠ5'3Ň

. egtÆegtÆ'4 "ù×êå(ŀåÝ:³7$#
ÞöÙĕs"(ĤÈ'"ĤÈÃĶ:ĭ"-.s"(ù×êåù×êå(ČĻÌĮ'] 7¢Ľ:Ģk7$:òñ$$ÞöÙĕ(áĆegÓ)Ŀd" KRCGNTQB#)ï&7m:üÞöÙĕ'Ó"f&
7oģ158ăĆegÓ'! ")ù×êåÅº$»Õ

ÞöÙĕ46ńæ'JI=?BýÀ2ń m:ü

. @<AWMSYĤÈ
ÞöÙĕ(Âã'47ù×êåČĻÌĮ(ôİ:ÊĠ7č

12013  5 Á 4+ 9ň10 Á'88 2 !ğ 4 (@<AWMSYĤÈ(ĉÇ
KRCGNTQB:ķù×êå@<AWMSYĤÈ:Ę ĤÈ)ļõ\í( 4 ¬ÞöÙĕ'ėĻ7$ü8$69Ė$&(ù×ņĵíð×íäØŇ$}ĤÈ(ßĶ[c(½ĖĿ)Ùĕ(0#ûģ8Ùĕ$ĚĶ(ÿĈĲ'«(ôİ)Ùĕ#lg¹ $'v "½ĖĿ(þr"ÞöÙĕ(7âņc\ÙĕŇ$& âņc\ĚŇ:ĤÈâ$"ı}â#@'Ī 7$č 587<AWMSYņó£ 10 cmŇ:ì "Û 10 cm (ù 4+ùĻ~§Ń(ĉÇÞöÙĕxù×êå'ı8" 6[(ÞöÙĕ:±ĻĄ tÕ'"ù×êå:{Ļù×êå)łĨÝ$"ÞöÙĕ:uì" 7$³

ņn=10Ň
¥58êå)ÿ$'lg¹$`ĳĴ:ğÜ

8ĺ'áĆegÓ(ĉÇ5(ù×êåÞğÜ¤ÿĈ«'! "?SCDYĝÆ:ù×êå(lg¹öÙĕ:łĨÝ$"uì" 7$ü8" 6Ļ~'! "âĶ#t¸tÆ:Ę §Ń(ĉÇ·®8" 7Z»KRCGNTQB#)Þ

. Ļ~§Ń

öÙĕ'j7o)ģ158
(1Ě(pyÿ'«ù×êå'47ÞöÙĕ(uìÍ¡ņłĨÝ/)ĂĶĨÝ$6¥$č 587/ăĆegÓ(ĉÇù×êå"(uìŇ:ÊĠ71Ļ~§Ń:Ę ĵí'()ÞöÙĕ:ó²´ł
JI=?Bý)(°ŀĎ#"±ĻÙĕ:ġċÞöÙĕxÙĕ:ÏŅēLH7$³87&9ńÑÚħĎ2ÞöÙĕ'j

YU:ġċÏ¶Ùĕx 4+@WFVYU$"Ěx:

ŀåĊ'" 6
ÞöÙĕ(¢Ľ)Í&êå'z;#ġġċ¤ 1357 ¼¤'88(Ńx'

7$Ğ 7

"ù×êå:±Ļņn=5Ňlg¹$`ĳĴ(ğÜ:Ę ğc[($5ÞöÙĕ)łĨÝ$"ÐĐ7$#ùÜ¤ù×êå(lg¹'! "ŃxĶ#t¸tÆ:Ę 

×êå(ČĻÌĮ'&¢Ľ:] " 7$ü8. egtÆ
ù×êå(ŀåÝ:³71áĆXăĆegtÆ42

.+ Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 43        

 Tiarinia cornigera 



3 

2014 /*!#.+#5

25&4,% 16/*!# .+#57  ($)8 "'6/*!# .-07Ł 1 &ğĕÂ%AZIY\W" ĔĽ&-&Ł~8ĜØĨ%ð  m¶ĩ­&á%'ĮĄÜ8ð ¬ T OZ%åī
ßÚ""0%66&ĔĽ8¡3 ÂĴ&ÁËgł3LŃ°3 ÂĴ&ÄËgł3DŃ!ŀ&ĸŁw3L °
3D °&åīßÚ&äĮĄİ8á5"!m¶ĩ­8Ăsá'Ł 1 &ĳwÀŁ 1 &ąbċÀ7 À°
fĶ 1 ĪĴ"% 5 ĪĴ°,!ĕ ãįİ&á%ĵ ×ĔĽ'Ł 1 &ĳwÀ
Ł 1 &ąb°m¶ĩ­áÆąÀ%ĞİHAX\DUZĔĽ%
'Ł 1 ąb°m¶ĩ­áÆąÀ%
Ğİ8ĕďÃ[øö
 HAX\G:Z@ĕ|"'hĖ%ïêé$#8eú5ĕ|!ăĦ|ê1Ï÷|ê$#%2ę3656%'Ēħ&8»Ęėľ8n65ÓĐ$#5"65 HAX\G:Z@ĕ|'"47?S>Jþ!õĬ "Č 365Éþ%§5&=JĽ'ďò1Õđ%ıì&xÙ8¢ï6%ĔĽ1QT=;RZ$#&úïê8eú5
63&ĕ|'qö$¤¸ľč·ó!5"6lĕûĀ!'¸ľč&_!HAX\DUZİ8
5"1
HAX\DUZ%ð 5ïêÿ%¤ ë&ĭ´8ý"65d¿ HAX\G:Z@ĕ|'
HAX\DUZ65ïê*0¯Ļ8+²5
"cá65$7?S>Jþ'¸ľč%³ HA
X\G:Z@ĕ|8 ö%}3% ĕ|}'
HAX\DUZ¤Ĥïê*&¯Ļ80Å5"cę65&2 $Ðĝ'$6$  !ÉûĀ!'¸ľč_!&HAX\DUZ¤Ĥïê*&ĭ´&} 2(HAX\G:Z@ĕ|%25¤Ĥïê*&¯Ļ8Ðĝ5"8øö"Ê½[¿Ü Ł%'?S>Jþ&;F?E>J Tiarinia cornigera 8ð
HAX\DUZ%ið5úïê%'Éÿļĉ%v
ð5 2 ÿ&ĔĽPVNL Corallina pilulifera 2(9<S@C Boodlea coacta 8ð ,¸ľč%'Éÿ8¸ľ5"65=CB Sebastiscus marmoratus 8ið$ 
;F?E>JĔĽ 2(¸ľč' 60ĺ¨ù_ñ«Þâ&©ü!ºĹŁ 1ń¸ľč_!&HAX\G:Z@ĕ|&} ¸ľč&Çç!HAX\DUZ%ð 5ĔĽ*&ĭ´}5  8Ðĝ5/ rŁ8ĕŁ%'ÝÚ8ĜMKW!t%~u 4 &9?VWÚÒł34
4530 cmŃ8ð 63']¿ 3ßÚ8¥oł^ÝŃd¿ 3¹s5ł_ÝŃÝßÚ_%Ċ 66&ÚÒ&^Ý% 1Ń=CB2Ń;F?E>J&)3Ń$
4Ń=CB";F?E>J&)8o6Ě 4 &Ł~8Ĝ_Ý%'ĔĽ 2 ÿ"HAX\DUZ8p 4ķ
;F?E>J8 1 jh¡638¡
3 48 Â
Ĵ°=J&ďò"Õđ%eú
5ĔĽ8yĔĽ&ÿ
"%ãįİ8á HAX\DUZ6ĔĽ&z
8ØĨ;F?E>JĭĔĽ8Û/Ł 2ńĔĽ&m¶ĩ­"ãįİ} HAX\G:Z@ĕ|%25ĔĽ*&¯Ļ8Ðĝ5/
Ł 1 !=J&ďò"Õđ 3yĔĽłHAX\DUZĔĽŃ"HAX\DUZ6%ÚÒ%×ĔĽł×ĔĽŃ&m¶ĩ­ 2(ãįİ&}8á×ĔĽ%ĵ 43ćÍ Ł 1 %;F?E>J'pŁ~!9<S@C8ĭ
PVNL8eú
5jh'k !,H
AX\DUZ&İ%Ł~Ĵ!Çµ$ª'ġ/36$  Ł 2 %m¶ĩ­'PVNL×ĔĽ'Ł~
Ĵ!Çµª'$ĆÂ}0ę36$ ]¿9<S@C×ĔĽ'pŁ~Ĵ!ÂĴĆī%± à¦HAX\DUZĔĽ%
'ÈĴa&ĆÂ}'ġ/36$  ãįİ'PVNL×ĔĽ!'Ł~Ĵ[À¼Ĵ!ªô'ġ/36$ 9<S@C%
×ĔĽ' 6&Ł
~!0 5 ĪĴ°%à¦]¿!HAX\DUZĔĽ' 5
ĪĴ°%{Č£ Ł 1 &ćÍ;F?E>J'¸ľč&Çç%ĵ739<
S@C8ĭ6';F?E>J rĿĎî_!P
VNL249<S@C8."Sato et al, 2000 &"]ē5
lĕûĀ'¸ľč8,$ î_!&Ðě!
ÉûĀ%24
9<S@C%¤5ĭ´'¸ľč&¯Ļ8% "ý6 Ł 2 &ćÍ9<S@C&×ĔĽ'pŁ~Ĵ!m¶ĩ­"ãįİ"0%à¦ AZIY\W~!
0Ñ&à¦ï/
×ĔĽ%¤ HAX\G:
Z@ĕ|',4¯Ļ8+$ "Č 365]¿!9<
S@C&HAX\DUZĔĽ'
ÂĴĆī""0%ãįİ{&"'HAX\DUZĔĽÎÖ5"$ïĲĈ5"8ý
4
HAX\G:Z@ĕ|%2ĔĽ=J&ďò"¾$¶Ĳĥ8í²²5"8ý
56,!®Ġĕ|%ĵ5ûĀ'ĕ|&}1Ó
Đā%èæ8®
4
HAX\DUZ"$5ïêÿ%¤5¯Ļ'ģĢ6 Ì$  Éÿ&2 %»Ę8øö
" HAX\G:Z@5ÿ!'ĔĽ%Ô&¯Ļ8` ²5"ý6'%

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 44         Thais (Reishia) clavigera ..%,+( #/)$ '%-0 2014 )$'%-!"1 /)$ '&*0

1 ĚÌ
ŇïĔ'ôïĽ&¼Ň-ĞŇľp7Ĕñ%āüľ!3ôïĖł&Ąď·%²°¶7·Ĳ­!'ĢÜÃ`%14Ą&ÞÂ (Wootton et al. 1996)0^k¼ŇĘ"$4Ó
Ą&ot%14Ą&ĕÁ (Arayama 2012, Morton 2008)$#Ņø4"!Ąď·Í5((¼Ň-ĞŇľp%|ô
4 ŇïĔ&|%1 n (OJI
&1 $¼ŇĘ 3Ŀ 5Ē4"ð&ĞŇĘr4
Č$ĖłÚĴ*Ä54 (Pain 1966) Ä5
ŇïĔ#&1 $Ķă7Đ |4& 'ĨĎ$þąĝ65
2&U:LDT&ģÉâ.25
4
9SLA Thais (Reishia) clavigera '¨ĀêĽ¬%®ô´
4ãŇ³&^k¼ŇĘ!4ÑĄ']ŊĄ!ļÐňę5
4b!&ŊĄ*&ķ³7Ō.4bý25
3 (Abe1994)&"'ıó&Ąď·%² Öį%Ň³7|
±4b7aġ42%&1 $²ĉ'sĳ&Ąď·&ÄôŁ Ň³7 4b!¼Ň-ĞŇľp7wÚċ
ŇïĔ7|[ºĒ4Ýě7º±4b/Ë%ā
4$6ŇïĔ&ºĒ³'9SLA&Ň³|7c ēº54ě³Ō &1 $Ùħn'$ Ñþą!'
ŇïĔ&ºĒ³&zÀ"$4Ň³|%íì7.¨ĀêĽ¬!'9SLA&Ň³ô´&Ąď·%1
|4"
gĪ7Ùħ4"7ûú"
2 ÒÆ"Çä
2.1 P8\XKī×ī×" iĬ~©ĸ%kĕ4 3 :¸ (ùæ[Ļö[ńª)&¨ĀêĽ¬7ķ55&ī×%11 m&Ç°}7õ
Ąď·7Ċx
2.2 ¤ĭôï
ŋ%'¼ŇĘ" 9SLA7ŊĄ" TV@<9;9 Mytilus galloprovincialis ( f _ 9 ; 9 )  : U M H
Capitulum mitella 1)>YPBGS Tetraclita japonica(f_PBGS) 7õ ¦ńª!'TV@<9;9%e6 rĂ&RJJ=C;9 Musculista senhousia
7õ 
2.3 ¼Ň ŋÑ ŋ!'
ī×Ľ!&9SLA%14¼Ňò&üĵ7ÙĤ ŋ%'åá7Ħv°QVCEF>¡ (>W\
Z:FQ PAPM3854 cm8 cm)7ňę?\C" õ 
57NFJ%¡ çá7½å
9SLA"hµ&ŊĄ 2 Ą7 1 qlňę?\C%t5 2 ÈĽŃĕ¼Ň
5Ą7ĥĺ
2.4 ķ¹ ŋÑ ŋ!'
ī×Ľ!9SLA&ŊĄ*¤4ķ¹ĝ{&üĵ7ÙĤ ŋ%'QVCEF>Ġ Y  ŋğĕ7õ
çá7½å^ć 2 ¸*÷$4ŊĄ7 1 ĄĹ44ĕ
_ć*Ĺĕ9SLA 5&ŊĄ7Ħĕy§*ă{& 7ĥĺ
2.5 klyÔÑyÔ!'Ļö% 4¤ĭôï%
 Ł&¼Ň-ĞŇľp7ÙĤĻö!¾łĄ%
klyÔğĕ (Flash 2000,ConFlo IV,DELTA V Advantage)7mõëč[Ćčklà7â.
9SLA&Ňïé7¿
3 đÕ
P8\XKī×&đÕĻö"ùæ'ńª%à+Ąď·ņj qlÅ&£!'ùæ!&-PBGS
d&ŊĄ%à+Ïµ% bÿĩ5
¼Ň ŋ!'u &ī×!:UMH*&ķ³Î/Ōķ¹ ŋ!'u &ī×!9;9*&ķ³Î/Ō ùæ!'Ç& ŋ%PBGS*&ķ³52"Ĉ%Ō 
Ļö% 4kl&yÔ 2
9SLA'9;9"à+Øŉßŀ&»Û"$4ĆčklàŌëčklà'Ĉ!
4 ė¢
Ąď·&÷$4Ļö"ńªùæ"ńª7àİ4"¼Ňŋ[ķ¹ ŋ%ŊĄ*&ķ³%«'ĩ.25$ &" 2ô´&Ąď·%129SLA&Ň³%'ô
±ú$ķ³4"ā54
 PBGS&qlÅÏµ% ùæ!'
PBGS*&ķ³Ō,4"ÿĩ5.
ŊĄ&qlÅ&£%1 ķ³|4ě³'!$ 
&" 2
9SLA&Ň³|ü¤ú$Ąď·&üĵ!
'$ŊĄ&£%1 ¯Į54"ā54klyÔ&đÕ 2
9SLA'9;97¥Ň
4"¿¢5
5'ķ¹ ŋ!±25ķ³"]Ĝ3îñ¶!&ķ³7Ê
4&'ķ¹ ŋ&đÕ"
4
Ñþą&đÕ 2
9SLA&Ň³%'ô±ú$ķ³4/&&ô´&£Ą%1 |±4"ā5
&" 2¨ĀêĽ¬%Ú·Ą&èô
9SLA&Ň³|7c ŇïĔºĒú%Ē4ě³
ā54., Tsukuba Journal of Biology (2014)

0872 13, 45        





 

&:

)2014 4+!".,";

13

9/ '6<4+!" .,";=  ($)>% #*<4+!" .ĲæCēĒŠģóćF1.Aīĳ¸HćčĒõŇGĮÜ>6BE5ĻĬįGĮÜSķ³¿Ð×C.?=đĎFőĽEÒ¡ZÛ?A.W+īĳ¸F®NXWºĩŝGIC@B-W|coH*ïŞ×œSĎú×œGīĳÞĖFRŖ9A.W7C3ě±8XA.W+|
coH<G~o`jq¥ÏZ¹¥8;W7CBīĳ¸ĈÕFÈ9A»45ÑŚ:W+Š~o¥ĉÖG|coHĂ¤Õ
3Š.3*
~o¥ĉÖG|coHah^}Cĭ¬:W7
C3ªĴCEVe¥9ħÏZÜ@T/FEW+|coHgiBĎ¬×8XWŘF*|co~osj{_lFTV~o¥8X=ĉÖBīĳ¸Fá8XW+īĳ¸
BH*|co~o`jqlFT?Aĵ~o¥
8X*ah^}ìöZÐ×:W7CBėUXA.W+¨¾Ĺó
ćBH*|coG~o¥ÏGŁĥFT?Aīĳ¸GÕńZÔ9*īĳ¸GęÏSÞĖÕF»45ÑŚ:W7C3ėUXA.
W+h]vtktG¹ĐZď.=ĘĠBH  3ķĦGđŋ
F1.AőĽE4Z:W7CS  GīĳÞĖJGŖ3ě
±8XA.W+929*ŅFºŒG|coZ®P¨¾Ĺóć
BH|coG÷ĴøàFTV»4EÑŚZ§M9AĶùFE
W7C3º.Ć3²ŜĆB-W+<7B*óćG¡¬C9AH*LC[D|coZ®NE.3*ĻĬįSĎúĬįC.
?=óćGđŋFőĽEĬįFËØĒFºŒG|coZ®P¦¾ĹóćG]wZď.A*«đŋŊĜF16W|coG~o¥Ô÷ĴFĀē9AÁşZĺ?=+éĘĠBH¥GŔ½Ć
B-WĻĬįS©Ħ ©ĨŊĜF16WíśCķĦ*ķĦCŋĬįEDGīĳÞĖZþQUXWĎúĬįF1.A*7XUĬ
įGÐ×SđŋF16W~o¥ÏŁĥG÷ĴGĢZåU2
F:W7CZēĒC9A.W+
êâCãÿ
êâ]wŢOryza sativa °Ğ:Hwayoung, Dongjin, Nipponbareţ
Zď.=+äéGĽEğćB-W]wHex}ŏ3ľŀ8
XA1V*
mj3łÅEDG~ps3-W=Q¦¾ĹGróćC9AĘĠFT5ď8XA.W+ãÿéĘĠÂBHČ´NBFĕ­ÕôĪFTV  Ý¹Đð TVjcud9=  *   F@.A
|coG~o¥ÏG3ĚĿ8XA1V*
7XUHAGóćĞF1.Aè­ÀB-W  ō¾GļB-WCİ0A.W+<7B*7XU  @Gō¾F@.Azb\Őû   Zď.AĬß0nycńZ×9* āÕZŁî
:W=QF*fjscsG×Zĺ?=+ N = * ņ Î  G ŗ Ã B - W 7 C 3 · ¯ 8 X = (%!""$& !#""&Z]wGķCñFÚ9=+ķH* 'G   Z®P šÆ¼Z*ŔķGķGŎFĔÞÚ9=+ÚHüäĺ.*ŤňŕÓFķGÐÖCĝÁ

45

5=

ċZŁî9=+ñH ' G   Z®P šGÆ¼¶µF1.
AđĸċZŁK=+N=* ' G   Z®P   ¶µZď.Aýıò¶Zĺ.*ŤňŕÓFµŎSµŎGĎœŒZŁ
î9=+

ĭë
* GāÕąÀďĬß0nycńZđČ:W=QF
zb\ŐûFÉ:WďGfjscsZ×9=+Č´*Ĭß0nycńGđČZĺ?A.W+   ZĄ¢9=ýıăZď.Aò¶9=ĭë*µŎGĎœ
Œ3Ù8X=3*µŎFHÌ3OUXE2?=+ķF  Z , ňŕÚ9=C7Y*
ĝÁċGŌ.HĚĿ8XE2?=+


İÇ

~o¥Ï3.ĉÖB-WSBHïŞ×œJG
ÑŚHOUXE2?=3*Ďú×œZÙ:W7C32?A.
W+éĘĠBď.=  ŗÃ B-W   GÚH*~o¥ÏZŠ5ĮÜ:W£ë3-WCİ0UXW+ ZŠ~o¥ÏĉÖF:WCïŞ×œZÙ:W3Ďú×œJGÑŚHOUX
E2?=+|coG~o¥Ï35Ă¤Õ3Ê8.ĉÖBH
Ďú×œFĐÍZR=U9*~o¥Ï3Š5Ă¤Õ3»4.ĉ
ÖBHïŞ×œFÑŚZR=U:7C3.0W+ïŞ×œçF1.A|co3łÅB-WĻĬįF1.AH*
ĵ~o¥:W
7CB*|coCah^}GìöZ9*Š.īĳÞĖÕZ
ĮÜ:W7CBđĎđŋFÄ9A.WCİ0UXW+N=*Ďú×œçF1.A|co3º.ķĬįBH*~o¥ÏZŠ5
ĮÜ:W7CBĂ¤ÕG-Wīĳ¸ġŕZŁĥ9*
ř9KGZ
ķĦĤ3œ:WEDG÷ĴFŃĊ9A.WªĴÕ3-WCİ
0UXW+
ÓH×9=fjscsZď.A  GnycńZđČ8;AāÕZąÀ:W7CC   FTW  ÙÁşZŉQA.5ÀB-W+,*

 Tsukuba Journal of Biology (2014)
4. 581)

&,*

13, 46        

-





$26

79  %"':# !(81)

ĽôAf\ħĦ :2014 1)

,*

7

/0

,+39yUú¡ĄŎlńRO<ĊYzyìÊolġ>T;ú¡ĄŎUâgjOėÛZÆyyú¡UºćYčĻĂÃl
ńRO<zyìÊoY[;sx{ś¯ĥĜ£;sxx}{ś¯ĥĜ£;n  x}{ś¯ĥĜ£
lġ>O<ăę[ËĢZĞÇBgÆdĘV>ROyyl·F;=geiğĝğ²ÑĦXµålğKi<ĚYÆyyZÅ¹;ÌE
[ăęZğţdéļYßũl´_J;ŖąZĜÅYA>TcĕĠ
lÜDœHLĔ­Xň¿VXRT>i<ÆyyYfhĲľË
Z "ėÛCÈ±LiVĲľ©Y "Cđ§J;ĲľŒYAFi
"ŭėÛCòLi<ŬėÛZ "[ăęYVRT÷ÔU=h;
HZ "lĲľË]Vë«`O[Ēľ©YŧŨLiObŇíZ
"ŕŘ£CĐæ²Li<HZĐæY[;
! Âŝ¢Ðd"+2
3%0+5%-1)2)3%ŝ¢ÐV>ROĚÒZŝ¢ÐZĥĜCäňU
=iHVCkBRT>i<ĚY  YťJT;ĲľŅÙYØÀ
Li  nr|tlvJT>iHVCógBYI
j;ĲľÉĆŚYŠňX #()2)-"1%+)*%/0.2%)-2 CÆ
yyYŠňU=iHVCĩIji<`O;ĲľÉZt~
VrxpoqZĴ¹CÆyyYfhÏGgj;ĲľÉĆŚYÊ²CğKiV>?Ä¼cIjT>i<
HZf?YÆy
yåĭZŞCĲľÉĆŚVť¤JT>i¸ĿæCĩ¾I
jT>iC;
ĲľÉĆŚVÆyyVZť¤[^VmWĝŌI
jT>X>ZCĜěU=i<NHUøĨīU[;Æyyú¡UĲľÉĆŚZÊ²lőÿ
LiZU[XE;
ĲľÉìÊăęlġ>TÆyyú¡UZğĝÑĦŌûlń?HVU;ĲľÉĆŚCÆyyåĭYA>TüOLà°lőÿLiHVlńRO<NJT;ĲľÉZūā
U=izyãķĶZŤlýĈLiÌĮŪZU;öcň
U=izyYďħJTĨīlńRO<zyV[;zyãķĶdt~VVcYĲľÉlĆéLiňXÌĮŪU=h;³ÐŃăęZăęU=ioZĲľÉZzy[;sxurd    6 ur;sxYfhĆéIji<ĚYsxCzyãķĶl
ýĈJĲľÉZÝÛYť¤JT>iVĹ@gjT>i<ĜÀ`UY;øĨīÓYA>TzyìÊoYA>T;ĲľÉ
ĆéCÊ²LiHVU;
ęĝĦÝÛdĤÔåĭæCÊ²LiHVCkBRT>i<HjgZzyìÊolġ>T;Æ
yyú¡UZåĭlőÿLiHVU;
ĲľÉĆŚCÆyyYÖJTüOLà°lógBYLiHVløĨīZħĦV
JT>i<ĴüAf\ĹÕ
čĻĂÃYfiÆyyªĝlń?Y=ORT;ĺÆæZÊ²
JOcZlytuLiėÛZőÿlńRO< ,"+U[;, ZcZVÍDEÊkgX>ğţŢlĩJ; ,YXiV^_ŁċæYXRTJ`RO<NZOb;ÆyyYÖJTĺælêS;êOX>VIjiįĵZğļZŜ>lőÿ
LiÆėÛVJT ,"+ lŏÒJO<sx{ś¯ĥĜ£YA>T;šğÂZÁŞU[;Ń¦Cč¬lÎ>łcēEXh;ğŠŢCyyªĝ®VČŔJT
®áU=RO<Hj[ŀčXWZğĝ¥ÔCÆyyYf
hAHh;éţCŦÔIjT>iHVCĩIjO<ðU;sx{ś¯ĥĜ£ZÁŞU[ddéţCŉgj;Ĭ  Ń[č¬lÎRT>icZZ;
ģïJ>ĬŮŃ[éţJT>ićÐCŉgjO<ÁŞYťJT[;šğÂ[ğŠŢCy
yªĝ®VČŔJTéţC^_ŉgjX>C;ś¯ĥĜ£U[Æyyú¡U=RTcİ ZéţÈ±CŉgjO<ºKE;sxx}{ś¯ĥĜ£YA>Tc;Æyyú¡
Ucč¬CÎkjiHVXEfEéţJ;İ ZéţÈ±CŉgjO<ÁŞYťJTcºćZĴüCâgjO<n  x}{ś¯ĥĜ£YťJT[;šğÂVČŔJTĺÆæC
CiV>@i÷çXÚ[âgjXBRO< øĨīYfh;zyìÊYfiĲľÉĆŚZÊ²J
OoU[;ĺÆæC»LiV>?HVCógBVXRO<ĲľÉĆŚCĺÆæYÖJTĉĿl÷JT>i¸ĿæCĹ@gji<sx{;sxx}{;n  x}{[zylĆéJT>isxl¬ŌLişıU=i<zyìÊoU=iHjgZś¯ĥĜ£U[;¨řJ
TzyŢCĕ×J;ðUzyŢCÈ±JT>
iHVCkBRT>i<JBJ;øĨīZĴüBgzyŢPFCĺÆæl»IMiV[ō@X>HVCĩ¾IjO<
á
[;7ÆĺæC»JOw;ĚYĀZ¬ņĳĸZĲľÞè

ŐîAf\ðĎ
ĨīùîY[;ăęU=io   ů½Ī ñøõlġ>TčĻĂÃYAFiÆyyú¡ZĄŎlńRO<čĻĂÃ[os|©U  ñŤń>;?Q ñŤÆyyªĝlńRO<Æyyªĝ®áZolwuJÁŞVÁŞZğŠŢ&0%1(4%)'(2 VĘŠŢ$05
4%)'(2 ZĖÒlńRO<   , ZÆy46

ŋÕ;8þłYfi "ZĲľŒ©=i>[Ēľ©]Z¶hŗaZ¸Ŋ²;9ĺÆæYŠňU=i "ŕŘ£XWZĥĜŌûlń
RT>DO>VĹ@T>i<

2/ Tsukuba Journal of Biology (2014) 

XTH ?40,

13, 47         2014 7.#$2/$B

3@(8:<!->"A

C= ;D7.#$ 2/$BE  )&*F'%+D7.#$ 2156

9Eúă^QcNBIä~9¬-lÚúă%£ 50
mM Na2CO3, 1M KOH, 4M KOH %25~¶}9ċ \B
Mg°ä~[_KdfiIä~ 1 2) 2KdfiIä~%~@IBf^QCbX<i9ãÌ³ö~Æ9ċĂÁhêè ËÜ'jâ9Ě lÚIQeI1IQeItØIQeI$#&á%25IQeIÜh¾Ċ%25ĳ¡2)æĆ&x{%25IQeI$#
&IQeI%3
65&"ËÜ'Í$¯õ95"%2463*&µ´°9ï&jw" ËÜ'æĆ%±È5"®â
Ü±Èģs&4&úă9-Ð$5"%2 æĆ*&ÉĴĎý9»43%o&ģs*&x{9ĭ &ĭ­ÏÌ&v  "$ &ËÜ'ËÜu|u9Ě ñĲ&æĆ%£5µ´°9·2 %$469¹½ī·þ5"!5|ėÞ¬µ´°"(65&ßĕ'ËÜ]dag&jñ!5FcMdĦ&GCSd%2 ¨Ė65"ā 365
&FcMdĦ&ĉò'ËÜ%æĆ%£5µ´°"`cNQ903j¼!ËÜ&³Ī 2)çĠ&Ğ69â5ËÜ&³Ī%'ËÜÝÂ&Ìě!5úăĬ8
5"ā 365
6-!&"7úă&"FcMdĦ$#&æ¡¯õ°]dag"&Ĭy%
',":#8 $ 
 FcMdĦ9ĉò5"!ćÿ5Gf=TSJSåÊ& 1 % siz1 5& siz1 !' XTH8 2) XTH31 &çß×¤>gRAGfCd?gĘðĥùĺÓ~ĒĥùĸXTHĹ'úăr¥°9­5ħĐ$ĥù!4G
f=TSJS%'33 z&ĢqX;_ci
5&ĥù'Ó~ĒÖ°(XEH)"$Ö°(XET)& 2
&Ö°9·"ì36
5siz1 %çß×¤ XTH31 '&  XEH Ö°&.9·ÝÑ$ĥù!5"ę§&íó!ï6
5(Kaewthai N et al.
2013)3%& XTH31 9Gf=TSJS%ğçßåÊ9vď5"
&ËÜu$5"ï6
5!Ãíó!'& XTH31 ğçßÊ9ãĒèđ¢ 2)âàèĒÆ9ċ "! XTH "úăÌě&Ĭy 2)FcMdĦ&ĉò03úăÌě9¿3 %5"9êè"5

3. SA ĮÀ& XTH31 çßģs
 XTH31::GUS 9ã
4 Ĝê%FcMdĦ(1mM, 1week)
Įzu"
$ zu& GUS Èą°&ġ %
đ¢9ċ
üÇ
1. XTH31 ğçßÊ&©²èđ¢Čéúă9đ¢5"WT "Ò+ ¿3 % XTH31 ğçßÊ!'&úăF=J "~ Ĉ»İ&ûĀ
đ¢%'ßĝċk!5
WT 2) XTH31 ğçßÊ&úăÌ³ö~Æ
WT%Ò+ XTH31 ğçßÊ!'lÚúăĩâħĩ%£ ø 60ķ¤$ "¿3 %$-úă^Q
cNBIä~% 5k°öĩø 60ķ "0¿3 %$3%[_KdfiI°ä~%ëê5"Ý%CdEi
Iø 81ķAGfiIø 77ķ 
2.

3. SA ĮÀ& XTH31 çßģs ßĝċk!5ā¢XTH31 ğçßÊ&Čß÷ XTH31 ğçßÊ' WT %Ò+ úăF=J$5%083
&âħĩ%£5lÚúăĩ'¤$ 
" 3XTH31 ğçßÊ&úă'Ó~ĩį¦%Ķ "ā 365
hXTH31 &ğçß03ªı%
 XTH31 ğçßÊ' WT %Ò+ [_KdfiIk&AG
fiI"CdEiIĩį¦% XTH &LiDNQ"$5AGfCd?g5"¸Ù65XTH31 'AG
fCd?g9Ó~Ē5ĥù!5%0
83
AGfC
d?gĩ
"'
X<iRVNB%25AGfC
d?g³â/!$
"ā5n«AGfC
d?g³Ģq&çß9îē5m!5

Äºh¼Õ aPdËÜ" ì36
5Gf=TSJS(Arabidopsis
thaliana)&ĨâÊ(WT:Columbia) 2)6% XTH31 9ğçßåÊ9ã
ĵ9ċ
1. XTH31 ğçßÊ&©²èđ¢ 4 Ĝê& WT 2) XTH31 ğçßÊ&ô 5 Ĉ&Č"č&Čéúă9
PHLd^=BfIEiZ9ã
đ¢
-
Åp&Ĉ9 FAA(]d^cg:ÔĤĦ:50%>LUid=5:5:90)!OBUWNQÎĄ%ûĀÛ9v³Qd=HgYdi%24ÈąĈ»İ&ûĀđ¢9ċ
2. WT 2) XTH31 ğçßÊ&úăÌ³ö~Æ 4 Ĝê& WT 2) XTH31 ğçßÊĸ 20 zuĹ&lÚúă9Ĕď&lÚúă92M TFA !Ó~Ē4720 Tsukuba Journal of Biology (2014)





<7

13, 48        +-$'/93
!=4.





 

"20";

8:68," 20";>  (%)?&#*=4.

9Ľò¸YĞĜ:ÌvvXĆŕÅvv6knþähÜBőEH6úĐWĖļ`ŏVêŨhBNJË»AÐ<7H@H6Ìvv÷¡WRùÈHNRX6rsv`svĭWİŪ`62 jŝşĭWjşWŃĩAőBdESR6
ÃÁ¦ªWŭ<øÔAĖėRBdESAĠbeQ<d7
H@HM
WîR6Ìvv÷¡RWùÈX6øÔtkwWĈÙSĢ
ÛWïAňbe6[NøÔìAĈÙJd~{_ĖIQ<d7øÔWtkwSĢÛVX6ĵľÍWûŗAÑBCţgOQ<dESAĠbeQ<d7H@H6ÌvvV?DdĵľÍû
ŗVğĞHQġīGeNÊ¿XZSiTU<7 øÔæďŚħV?DdøÔœ·X6øÔĵľÍVĲŶŲŮS
ÐC½[edES@b6ĵľÍæ´WR_qzW´ŊVĄĞHNġīAńgeQBN7
qzW´ŊX[Kqzhŀ
z·Jdqzzmv}xůŰA¬B6MW
üVŀz·qzh´ŊH6oq|xA¬CESR6qzX£´Ò·AřńJd7EW  XúĐ
R;dmzVaOQōØGedESAĠbeQ<d7ĔÆ[RVĥśWġīÕRX6øÔWæďűœ·ŚħV?<Q6ķĹFSVęUdĵľÍW´ŊS±ûæAĖIdES
1+#+$.!(  6MHQ6øÔtkwAĂÓJdøÔÝ
æŚħRXqzWŃĩSŀz·AŠŇR;dES
ů$-!+$.!(  ŰhÊ¿HQBN7MER6EebhŒ
[>öġīRX6
Ìvv÷¡V?DdøÔWÑBG
SĢÛWÎ·A6
qzWz·ŎįS´ŊSTWa=Uţ§V;dW@hðb@VJdEShĞĜVġīhńON7
MWEShŖHQ6ÌvvVaOQøÔWūåVÎ·AőEdķ\WĬAðb@VRBdEShõßHQ<d79îă: WāĻùÈ?aYÌvv²ĕŋíźÁĨ&"-++)h6 3Wkpy°

42014 4.

" 215>ŞĴćSHQ6Ůz·qzhÉŐSH  ĦŢ;Nc
V£Jd¾­Ûh  ąäSHQĉÓHN7  ąäĉÓWt @bè³HNĵľÍWyqŐhŞĴćSH
Q6
qzhÉŐVĘ<  ´Ţ;NcVë³Gedoq|şšh  ąäSHQĉÓhńON79ĸøSĺ×:
5øÔWĖŠšøÞøŭWĉÓsSÿŔH6Ìvv²ĕhHN 0$--&,$ v}
uWøÔRX6ĖŠšXĲŴŸŮ6øÞXųŹŮ6øŭXųŷŮ
WĈÙAģŌGeN7EWđâX6Ìvv÷¡RĖļGLN
Ĩ8WøÔV¯ŖVĖIQ<dŅĔÇR;d7
HNAOQöÔŬıWøÔA6
ģ@VÌvvVadĚĒhĤHQ
<dESAĤÂGeN7
5qz´ŊŞĴąäsSÿŔH6Ì²ĕhHNøÔRX6))!./-$%-$$*
!./-$%-$$* S<ONøÔWÑBGhĂÓJdæďµõWv}uV?<Q6Ïøĝ6°øĝ6ŦÍW  ąäWïAňbe
N7ąäWqX !./-$-$$* Rŉ×Ge6đVÏøĝV?
<QX6sSÿŔHĲųŶŶïHQ<N7pSĨÒVP<QX6sSÌvv²ĕW_W
R6v}u®¤hŖHQąä£C6ÑBUÚXňbeU@ON7 ąäVP<QX6ĔÆřńR;d7ąäWïVP<QX6
ÌvvVadvvãĮRmzAÐCěĖH6
EWm
zA  hąä·GLNºĿäA;d7 î6đVøÔWĢGWÎ·AĖIœ·AřńJd /-*&*%v}u ŤV?<Q6Ìvv²ĕVadķĹV?Ddqz´ŊŞĴąäWŜ<AňbeN7ÏøĝV?<QX6đVœ
·AřńJd$#-&,$0$--&,$ v}uV?Dd ąäA6Ìvv²ĕVacĲŶŲŮĈÙHQ<N7GbV6ÔŧV£´Ò·hń=  Wąä_ĲŵŲŮħÛĈÙHQ<N7H@H6°øĝV?<QX66 WîWqz´ŊŞĴąäAïJd«¼AģŌGeN7EWĸø@b6øÔæďWàõRXÏ
øĝV?<QX6qzW´Ŋ?aY£´Ò·Aç¶Ge6°
øĝV?<QX¨řGeQ<dESAĤÂGeN7ÏøĝX6
SHQøÔhê>6øÔĢÛVţŘJdķĹR;dN^6
Ìvv÷¡V?DdøÔĢÛWïX6
ÏøĝV?Ddqz´ŊWç¶AÖHQ<dºĿäAĺ>bed7î6°ø
ĝV?Ddœ·X6]Hf¨řGeQ<dºĿäAĤGeN7

R &*$.!(  WîăhĘ<QāĻùÈhńON7āVċbHNfĳVĨÒhéĨH6
ÒłA³Nà{qlVú>ó>hńON7ÌvvXŁAÀBMfONñČR
@D6!( ĊÛWŎįXũĀ¢ØēĉÓÄhĘ<Qá8VĊÛhïGLôĶĜV  ) RùÈhńON7 t r VaOQļQNøÔhæďýťR v}uů))!./-$%-$$*!./-$%-$$*-$!'$-/-*&*%$#-&,$0$--&,$Ű
6øÔWķĹh PůÏøĝ6°øĝ6ŦÍ6p6ĨÒŰV´DQÔŬhńON7 øÔWĖŠšøÞøŭWĉÓÌvv²ĕ6s÷¡W 0$--&,$ v}uWøÔhĎ¥čVņì©¤VP<Q¹ĪH6MWĖŠš6øÞ6MH
QøŭWĉÓhńON7  ąäĉÓ48

.+

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

Ca (%

13, 49        '"*90 HU QING<1) .+;=    #*ùÃ0NHäâ+ È¤G(ÌÙEB>@Gë FĄM½«F=KEĐüDÞÐ
¢A,Q)4FÈ¤AG·ØE-(È¤2ĆO14DQ6
B2æOR@-Q)6FÈ¤ĆFÜąGòúFþ2ĕ9@-QBö/OR@-Q)919(<FÈ¤ĎAGë ®·2ÂEĊû9@-Q6B1O(òúFþFJAD4·MÉÎ®·L´üA,P(òúFGóõ7BEàDQFAGD-1Bö/ORQ)ÜIAE(eleÈ¤·ØċêE0-@(È¤FòúF|·A,QkYctăGóõ7BEàDQĂ
ï2D8R@-Q6B(I=(2kYctBFòúñBFĔFôµEĐüA,Q6BTé8R@-Q)I=È¤2ĆO
14D>@L(<FÝÛF®¶T?=KEGþFJAD4·MÉÎ®·L´üA,QBö/ORQ)òúĚÊA,Qar
sv_BFÉÎ·A,Qimarsv_µñĘFX]sZr
Wt(X]ptG(BLEÈ¤FĆċêE0-@(þFJA
D4·L8R@-Q6B2é8R(ÈãBÈãFĈďĎ
AGÈ¤F®ÛT?=KòúFÚ³âDÍð2ûSR@-Q6B2é8R@-Q)I=(6Fimarsv_µñĘBÉÎTû.kYctAG(ÚE(ÈãE0-@(kYctÉÎMĒTº?kYct2ě§­E¡9@-=6B1O(6ROFkYct2ÈãFòúĔ(óõĔF»åEĐüA,QB
ö/OR@-Q)ÄçìAG(Ï}ÆyAË9=eleĜë !ĝTß-@(Ï}2È¤·ØE.Ú³âDòúFÍðECFN.E¯ė:QF1EÖä9(ÈãóõĜÈã({Èã(ÈãĝE05QX]sZrWt(X]pt(<9@kYctF·čFáÜþÇTû.)6F6BENP(È¤·ØċêFòúÍðċêE05QBòúBFÉÎFG=O
3FwíTÁO1B:Q6BTäâB9@-Q)
*Ā¾+
 çìÅ¾EG(eleĜ     ëġ !ĝTß-@(&FUtXojvbvAÓ÷ËENPË9=)ĉ¬ËÆA,Q[tesvrB  Ï}ÆyAÞø9=È¤TĠ?F·ØÑĖĜ "#! !(
!!(#!( ĝ
E5@\thqtZTû-(È¤TĠ?FóõĜÈã({Èã(Èã( ¥óõĝE5@(ÿ  \thrAğF
²¤ęTû>=)
*¿Õ+

\thrF   T¹9(  E·°(kYct·čF %(X]sZrWt·č
F  FhpU


49



 

'2014 1).+;36":45/,8&$>7 !<1) .-2=

lvTß-@([tesvrB  Ï}ÆyE05QeleF
óõ7BFáÜþÇT  ENPû>=)

*ôÈ0NHö¨+
ukYct·čġ %
[tesvrBÒć9@(Wr]VnÏ}ÆE0-@(È¤·ØċêE05QáÜfbvtEG(
3DČ-GýORD1>=)
919(ÚEÈãM ¥óõE0-@(áÜđF×©2èā8R=)6RG(Wr]VnÏ}ÆyAòú{FkYctđ2×©9@-QôÈT¼º9@-Q)xFôÈ1O(Wr]VnÏ}ÆyAG(kYct·2¸8RQ6B2(kYctđ
F×©E¦z9@-QLFBö/ORQ)


uX]sZrWt·čġ[tesvr2(È¤\U`FÔ£2ûSRQ_dv^A,Q
"#! ! BÈ¤ĆFĐüD_dv^A,Q #! E0-@(ÈãBÈãA?FáÜgvYTé9@-=)w¿(
Wr]VnÏ}ÆAG(ÈãE0-@GáÜFgvY2À_dv^E;R@ !! AFĞ?FgvYTé9=)
ÈãE
0-@G(
áÜđ2×©9@0P(w£FáÜfbvtTé9=)xFôÈ1O(Wr]VnÏ}ÆyAG(imarsv_·2ÈãAàD>@0P(ÚEÈãE0-@¸8R@-Q
6B2é8R=)
*°Fªē+ ÄçìENP(Wr]VnÏ}ÆyE05Qòú·2(
óõ7BEàD>=±T5(ÚEÈãE0-@kYct(
imarsv_BLE¸8R@-Q6B2S1>=)°G(
L>BÀ-·ØÑĖA,Q "#! ! BĆ2Ċû9=_dv^A,Q$! F_dv^F\thqtZTû.BBL
E(X]ptîFFòú·FáÜþÇLû.~£A,Q)




-+

 Tsukuba Journal of Biology (2014)878).

# 5!<1*

-+13, 50        

:$46

&



)2014 1*9;=  '"(>% 3<1*ĝß¨NĂāêùK1.FēĞ«¶3Ŋ]\ûĲLĨK*¯¿ğŊ39Z]\+
úKĤĢWĤå_ĨH>\¯¿ğŊMĵëW°ģ½
K1.FŋÈKŀĪJûĲLEG-\+¸6LêùGM*ĥæWĢæL²ľKŊÆLÍÔ_/+ŊÆľKMúñK¦<BÄ
;JĩĔěēĞ3¼±<*ęė3¼±<F.J.BU*îéā
KVÊ.:H3ĄZ]F.\+©Đ3Ô£<J2DBH4*ĢMŊÆ2ZĤĢ>\+:LÞ*ĢMŊÆ2ZğŊ>\:H3ĄZ]F.\+r}rGM©ĐÔ£ÎLåÁÍÔĺĉGŊÆ_¬TÄĢ
æ_ĀĻ;?Ĥå_ņ7Ú*¾ø<BåÁGMŊÆKď§J¡
÷_0\C8GĤå>\3ĬÃ;]F.\+:LY/Kr}rGM©Đ¨NåÁÔø_<BòňL¯¿ğŊ Ð3ħ^
]F.\:H3ć®;]F.\3*
û±RGK@L ÐîìLļ
.MY6^2DF.J.+@<F*:LòňLğŊG*ēĞµìÔ¸đKÇāŁā·¦3ĳ:DF.\3*ÿĔě¦½çġGÜZ2KJDF.\'&   +ĢLğŊK1.F*ŊÆ_ÍÔ>\ēĞÆM²ľG*eo{ìķ_ìÔ>\+:Leo{ìķKM*eig cH`xvdfn
3Ħċ<*Ù<.ēĞµLĘÔ3ĆĮ;]F.\+åÁLğŊK1.FV*:Leo{ìķ3ĆĮ;]F.\3*ĤåGMguKY\ēĞµĘ3;]\:H32DF.\+
 :LY/K¯¿ğŊGMēĞµĘ3ħ^]*RBĤĢHĤå
GþJ\ēĞµ Ð3;]\3ć®;]F.\+<2<û±RGMğŊ¢*
ğŊ3ü=\ŒkpjLSLĬÃ3ħ^]BC8G*©Đ3ħ^]J2DBăÎ2ZğŊ3ü=\kpjRGLĺĉK1.F*
ILY/KēĞµĘL·¦3ü=F.\2KE.F6^2DF.J.+RB*@LēĞµĘKŅ^\ēĞµŅĸĿĒL¥ÓKE.FVáĄG-\+@:GâąČGM*ĤĢHĤåLŊÆK18\ēĞµ¸đŌHēĞµŅĸĿĒLĕÞā
·¦_ĬÃ<*@L ÐculKE.FÜZ2H>\:H_ĂāKÁō_ħDB+ ēĞµĘKŅ^\ĿĒH<F*eig cĴĈĿĒ¤óĭĿĒŏŐHbfkwi*ïēĞµªÔKŅ^\m kªÔĿĒ%KõĂ<B+ Meig c
LEJ520ő¤óĭ_ħ/ĿĒG-[*ēĞł_M=UH<BēĞµĘK¹46Ņ^DF.\:H3ĄZ]F.\+bfkwiMeig cHm kńLĖªLØ_>\HHVK*¯¿ğŊÞLŊÆēĞLĠËKŅ<F.\H;]
F.\+RB*% Mėčä¦ĀĻL}cĽ»G\+:]ZŅĸĿĒ_įO\:HG*ēĞµĘLculKE.Fįè_ħDB+






 

-+

;

/0

-,2=ã×¨NÚôąČã×KMr}rŏ    Ő_ý.*­ĊMr}råÁąČLq ­ĊG-\ $##! _ý.B+ĢLkpj_ŃĢÎÛÖH<F (#%&"&%% GĨ<B+Ģ
K1.FM*
  LŊÆ*©Đ<BĢ
ŏğŊ<J.Ő
L   *©Đ<F.J.ĢŏğŊ>\ŐL©ĐŇðÎ    LŊÆ_h{g<B+RB*©ĐŇð<BĢL¯¿ğŊ3ÂÝK
ü=\kpjG-\ÄĢæ3Ŏġ6JDF.\ŊÆL  E_
h{g<B+:L  ELh{ GÕ  Õ*ÕbfkwiÕ*Õeig cÕŏ Ő*Õ`xtÕŏ Ő_ý.BÿĔě¦½çġ_ħ.*@]A]LĦċL
ĕÞā·¦_ĬÃ<B+åÁK1.FM*û±ĹħG-\3*áøJåÁŏğŊ<J.ŐH*¾ø<BåÁŏğŊ>\ŐLŊÆ_h{g<*Õ  Õ*ÕbfkwiÕ*Õ %Õ_ý.FsorzorKY\igt ÌÉL«À_ħ/ÀG-\+ĖåHĜÃ
ĤĢLŉLŊÆľGM*ŃĢÎ2Z ÛĂK28F*|~m kÒ¸đŌG-\eig c*`xt3*ğŊ>\kpj_yfK©ĐŇðăÎ2ZÏ,KĦċ<F.6í»3ĬÃ;]B+RB*ēĞµLX\SKŀĪJbfkwiM*:L|~m kÒ¸đŌHPQ«íLwnGigt
L´¤3ĬÃ;]B+ <2<* M©ĐŇð<BăÎ2Z´0ºU*ÛĂGĦċ
Lyf_Ķ0*@LÎigt MöÅ<B+Ú*:LY/J|~m kHbfkwi* L´¤M*ĤĢ3ü=J.©Đ_ħDB³ªMĬÃ;]J2DB:H2Z*:]ZL·¦M¯¿ğŊ3ĳ:\ĢLŊÆKúàG-\:H3ć®;]B+ M©ĐŇð<BăÎ2Zeig cLªÔWİKŅ^[*:L  LēĞµĘL43*@LÎLeig cL´¤_Ĺ<.F.\HĜ0Z]B:H2Z*¯¿ğŊÞLeo{ìķLìĎM*©Đ3ü=J2DBăÎ2Zħ^]F.\:H3ć®;]B+
RBbfkwi3ÛÖLĕĺKE]´¤<*ğŊ3ħ^]\na~gGyf_Ķ0\LM*bfkw
iKY\ēĞLĠË3*¯¿ğŊLÁħLòňGÑĪG-\BUCHĜ0Z]\+
RBbfkwiL4Geig c
3m k2ZØ;]B:H3*
ÕKY[Įı;]\eig cL´¤KĚ3DBHĜ0Z]\+:LY/KĤĢL
ŉKM*ēĞµŅĸĿĒ34*@LĖåēĞµ¸đŌLÇK
V·¦3û]F.\:H3ć;]B+åÁGLÿĔě¦½çġ
Mû±ĹħG-\3*Õ % ÕKY\çġG*ïēĞµªÔĺĉ_ÎīF.6ÀG-\+

50



31 Tsukuba Journal of Biology (2014)( 13, 51        



 

4'-8

. =/9 7;50#$ 31$:<  )&*!=,+ %;50#$ 3

2"6< MS Ðç<T3FD>D0GR50 Å!8
U9TPB9 +# 2,4-D Ã¿, PEO-IAAČTIR1/AFB{e2U@;E=Cč0Áu MS  Õ´7©ăÌâ!³Ă0ësyÉoËx2U@;E=
CÀ~oËxºûã¬VÒÑ
8U9TPB9"6W8<U Ćés qĉ/.»×VæÍ!ës.¯s0ê´Æ oË.6W8
<U·!ÏÈ ò/. ,
6W8<Usqĉ/.  ,3GÔ´Æ!ÏÈ*fÍ"`!
~¢6W8<UsX*
`!6W8<Us"Î-3GÔ´Æă ć ċþ¤ 0­. ,
8U9
TPB9!3GÔ´Æ!fÍ¸¶"6W8<UsX|ä
á,/.
 6W8<U"transport inhibitor response 1ČTIR1č
/auxin-related F-box proteinsČAFBč
 +#6W8<UÞ~@UI9ù 1ČABP1č +{/.TIR1/AFB {e"
6W8<U Þ~.OJ8AUQ7W?î~e ún£r auxin/indole-3-acetic acidČAUX/IAAč!qó0iü6W8<UÚ Ê/.~¢6W8<Us TIR1/AFB {eà!]!/ñċ "
w~Æ Î. ¹Ù ª,  .<T3FD>D0ÍõĊ"K9TPM
Č6W8<U Ćésč" AFB4 * AFB5 !Þ~ Ćé½!fÍÐÊ Ąh. /. 8U
9TPB9 "fÍÐÊ
. TIR1/AFB {e!
t "Zª&¯ÓØ!kìÓØ
2,4-DČ6W8<U Ćésč"C4NT:<!6W8<UÞ~@UI9ùČABPsčÞ~½ċ! 
8U9TPB9"%1Þ~½
  ,8U9TPB9!6W8<U{e!ñ
 "`!~¢6W8<UsÎ. á,/¯ÓØ"&<T3FD>D0Í8U9TP
B9!fÍÇ fÍÐÊ. TIR1/AFB {e!taíÑ~¢6W8<Us. 2,4-D ºû ,µô.0ÒÑ

3. 6W8<Uø SLW@WÿcČDR5::GUS +#BA3::GUSč0l<T3FD>Dùú¥e!ësoË
! GUS ²å //!<T3FD>Dùú¥e0MS 10 ©ăÌâ8U9TPB9Ã¿Č0550100500 µMč+# 2,4-D Ã¿Č0550 µMč ³Ā0 7h ¾Ä.oË0ì
!GUS ²å¿ X«¾Ä70%5@HWR´
Æe!åÜ0z-Ć Ĉā0Í DR5::GUS +#BA3::GUS !ÐÊI@WU0ò
Þ±Vá
1. ës!Ìâą½ 2U@;E=C!Áuv± ës0Áu MS  Ìâ<T3FD>D! GR50 j"8U9TPB9 25 µM2,4-D  0.05 µM -¡{ ý ÷(,/ &8U9TPB9 +# 2,4-D !/)yÉoËx
÷(,/³Ā!Ìâ£r TIR1/AFB {e2U@;
E=C!Áu + ,8U9TPB9
2,4-D !\ës!<T3FD>D!fÍÐÊ "TIR1/AFB{e$!Þ~ Ą[.)!á,/
2. 6W8<Uø SLW@Wÿc0l<T3FD>
Dùú¥e!ësoË! GUS ²å
 DR5::GUS 0l<T3FD>Dùú¥e"2,4-D
oË" 5 µ bY³Āme +#Ù 2 ê
 GUS !Ð
Ê ð,/ 8U9TPB9oË" 500 µM !ċÅ+* Ù 2 ê!' GUS !ÐÊ ð,/! ,
8U9TPB9!6W8<U!^fÍĀd"2,4-D "Î-³Ā" êĀ.á,// 2,4-D ! ¡{  ß .)!á,/&
BA3::GUS 0l<T3FD>Dùú¥e"2,4-D "5 µM bYèêĀ GUS !ÐÊ ð,/ 8U
9TPB9oË"500 µM !ċÅ)GUS !ÐÊø"ð,/ 
! ,\ësÞ~.{e X"|ä )á,/ ,.µô ï.

°§gõ´ÆĎ
<T3FD>DČArabidopsis thaliana L. Heynhč
gõësĎ
8U9TPB9Č3,7-Dichloro-8-quinolinecarboxylic acidč
2,4-DČ2,4-Dichlorophenoxyacetic acidčĊ¨¼
1. ës!Ìâą½
MS  8U9TPB9 +# 2,4-D Ã¿0Áu<
T3FD>D0¦Ö 10 ©ăÌâ³Ă0Â}ës! 50%ÌâąÅČGR50 jč0Ûp
2. ÌâąfÍuv±

2014 50#$31$:_!®
 8U9TPB9!Ćé½ !fÍÐÊ Ą[.
TIR1/AFB {e!öÝ!µôABP1 !Ą[ )µô.

.TIR1/AFB {e2U@;E=C!Á

51-+

 Tsukuba Journal of Biology (2014)









13, 52        

&3

*



 

2014 0)-+542.-('

$ /60) -+57  !"8%# 60) -,17à© *$ÍË
 Æ%"ăÇÃ%"m0Þ Ûzá ò±"(!fåúu­Ć÷Ćqé"Āäs·(+. -
Â!-Ãï#Æ¦!qé.
-ª.-(Āäs"üÊ¹Í. ,"jçÃïÝ]"¯Ãā.Çº -c"¯Ã!
ă0_ -Äî"wÃï1XY9Q5W -«ÏÖ!
¯Ã´0)1XY9Q5W - LDOPA 
Ąe"²ô0)v{øÃ! °êÚ­
R@BY;Z!)¯Ã´ -Ó.!R@BY;Z#
fescue ¯Ã"®+Ápc"¯Ã!ă-/,
1XY9Q5W -ìí.-* ! &
R@BY;Z"¯Ã´"hÈ³²#LDOPA É -zá)Ó. -.&! LDOPA !*-¯Ã´1=:WKZù!*ð¿.-Ñì.
RUGZ{
`ýgćE\J6HZ/E\JQZ6HZĈÇ¨!ÊÇ-ºùÙ LDOPA !*-¯Ã´!þ_ -záÓ. -¯Ãg! -E\J6HZ/E\JQZ6
HZÇ!#PVL3H\W46;A\?(PPO)¼þ_ -Î+. - «ÏÖ#kæÏÖR@BY;Z!y.X@=0È 
R@BY;Z!*-¯Ã´%"ºùÙ"þ_0°ê
+!ºùÙ"ÊÇ³²!ó-0ÍË

[TBARS ëą åsoÅ 3 ¤Í"¯Ã"®ø0¡x»g×Ù0È ÒÐ.! 0.1% TCA 0t NS<F2>10,000 
g[4 20 qýö^¾ 500 l ! 0.5% TBA 0}' 20%
TCA 1 ml 0t 98 30 qýĂÜ"¶^ 5 qýĂÜn 10,000  g[4 5 qýö532 nm
 600 nm "~l+ TBARS ú0Øp¬¢ië¯Ã  X@=(Lactuca sativa L. cv. Great Lakes 366)iëås
  R@BY;Z(3-hydroxy-L-phenylalanine)  LDOPA(3,4-dihydroxy-L-phenylalanine)  L3GW1UGZ  1=:WKZù  92Ìù(3-phenyl-2-propenoic acid)[TBSRS ëą R@BY;Z!y.X@=!

R@BY;ZoÅ 3 ¤Í! TBARS ú" tè+.&X@=!
L3GW1UGZ0|¨oÅ- TBARS ú!:ZDY\W
"è+.  "Ú­#R@BY;ZoÅ!*X@=®ø! -õùvâï t -
L3GW
1UGZR@BY;ZoÅ¨! -õùvâï" t0r -0Ó -

[PVL3H\W46;A\?ÿs"½t
 ÊãÕ0MUZDOC7=!h 0.5%
0.1 mM R@BY;Z0}' 0.5%0.1 mM R@
BY;Z 100 M 1=:WKZù0}' 0.5%0.1
mM R@BY;Z92Ìù 0}' 0.5%!..
Ô¯8Y\=BTZI\(§/ĉ 12h/12h, 25/20)!
ÇßoÅ 3 ¤Í"®øû0ÀÚ­ *$Þ[ÇÃëą
 X@="®ø#R@BY;ZLDOPA oÅ!*,Çßr.
&R@BY;ZL3GW1UGZ0|¨oÅ®û!:ZDY\W"è+.  "Ú­#L
3GW1UGZR@BY;ZoÅ¨! -Çßr"ð¿-hÈ0)0Ó -]£ LDOPA L3
GW1UGZ0|¨oÅ)L3GW1UGZ0|¨oÅ{®û!#è+. [PVL3H\W46;A\?ÿs"½t
 R@BY;Z1=:WKZù *$R@BY;Z92Ì
ù0|¨oÅ)
.+0|¨oÅ {®û!
#è+. "Ú­#R@BY;Z!*-ºùÙÊÇRUGZ{`ýgÇþ_zá0Ó
-

ą£¸
[ÇÃëą
 ÊãÕ0MUZDOC7=!h 0.5%
0.1 mM R@BY;Z0}' 0.5%0.1 mM R@
BY;Z 1 mM L3GW1UGZ0}' 0.5%0.1
mM LDOPA 0}' 0.5%0.1 mM LDOPA  1
mM L3GW1UGZ0}' 0.5%!..Ô¯
8Y\=BTZI\(§/ĉ 12h/12h, 25/20)!
ÇßoÅ 3 ¤Í"®øû0Àb"a
 LDOPA PVL3H\W46;A\?ÿs0|¨oÅ
{! -R@BY;Z"hÈµñ0æ +!
RUGZ{`ýgÇd"ºùÙÊÇ³²"°ê0æR@BY;Z"¯Ã´hÈ"é¥!ó-

52+)

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 53         2014 ,(+)2%)+/'&1$0" .3,( +)24  

5#! 3,( +*-4
 1. Û"ûę·Ö#ħ,/¦ĴØô0ąĄ5 ml
V31lúv¤§25 ËÓ| 24 ÉŉŐėV3
1lú# [KPD]rD ,9DH3OBkpC0ý â~
0¼9D<n`O=jYĶńÕī(GC-MS)Õ
¾ÿ´ôĶ0¡ĚÊqāĀ ōĠ$ŏĠ#ŋō0Ľô#ûü´0t."!ĵõ0 . s#ōĠ0Ė-ļýĔ.#"¦º¸´0»ŏĠ÷.
.(ÃĨ#ōĠňÿ#²Ħ´$ŕ sÄù%#®ő0Ę .
ÃĨ#ōĠ"$ùv#ÈĪ´)ŃĦ
-Ļª#ĩñ ,1mn>a8läā/ .
1mn>a8l$Øôûü{#ûô"Ō£Ā.
$ĿĀ!ý0ćôĶòô.("ùv#Ī´ŕ )#ōĠ%#³ýÎ¯/ .1mn>a8l0ûü.Øô~ ,#¿Ēĸ"$w"
× ,#îġ*kHr ,#íĞġ!
,#¾À# 3 .

¾À"+¿/.ôĶ"$'-Ăā/ ! (#ăĊ)áĺĀ©!  Ļª¾ÿ´ôĶØô#ûę"®ő0u .ć/.+ "!-'ØôþÔ#¾ÿ´ôĶ. d-kdSp! $¢Ŏ"ōĠĥ/ .
ÑăĊ$
Øôûę·*Ŀå´0Í.¾ÿ´ô
Ķ#½Đ#å´ôĶ#ýÝÚ0ĪÇ.0āĀ.'xóØô~$Ù.¾ÿ´ôĶ#Á*ńê©. ,ÑăĊ$Ðxó#ÃŖØô~)ý.

3.

¡/ôĶ#ÜìôĶ0ý Øôûę·å´ĮŔ 30 ml V31lú"mHD#ÿğĈ 5 č0é}µ#ð¬"Ĳĥ¾ÿ´ôĶ0§25 ËÓ| 3 Æŉûę«×ņěĹņ0ë¡?pOnrláĺ¶
ņöGR50 0Č
4.

7<Jl1FMrO"+.ßđĜå´łďÿû#ı¨
ý#ÙĬ 30 ml V31lú"ûę2 Æā#mHD#Øô~05 ~ŐėGR30 GR50 GR80 #ð¬#7<Jl1FMrO0§
25 ËÓ| 24 Éŉûę#°Øô~#×Ł# ċ , 5 mm 0--Yl7nF3pqC1FMrOZnXC4b37I3PŗFDA-PIŘ#èíç'$C
WPn6JC4bŗDHEŘíç"æïģŒ±Ņ0ý
×Ł0ĩ¥ÒÂēÖqĘ¥qz°#y¡Ù¡ØôřmHD (Lactuca sativa L. cv. Great Lakes)
26 Ĉ#ØôĈ# 8fLk=@8pQ:eK@V
?TM9BoRg4?4CgRjUDfr?pÏ<m
7GrO# 9 ĈmHD#ûę·Öİ(,/ tĭ 9 Ĉ#v ,Å"ăĊ#Rjfr?p0ō 7 Ĉ"  GC-MS "Õ0ĤēÖ20 Ĉ#¾ÿ
´ôĶ¡/'Rg4?4Cg , -XSpkdSp
7<Jl^lcrO
7<Jl1FMrOÙ/ 'ÜìôĶ0ý ĮŔ"7<Jl1FMrO*
Y5TrlĎ#ô$
mHD"¦ûę·Ö0ćĆİ/
7<Jl1FMrO$Øô#ûę"¦.®ő/ ! (Þ"7<Jl1FMrO#Øô"¦.ý´0Ĳ&#ēÖ7<Jl1FMrOø°#m
HD×Ł$ßđĜÁ# O2 ÿûı¨­ķ/ .ĝ´ć/#(7<Jl1FMrO#mH
D"¦.ûę·ý"$ O2#ÿûŊ .ĝ´
./0ēĳ.("$Ì!.ÙĬ²Ħ.
Ę  .
 z°$
7<Jl1FMrO#Øôûę·#ýÝÚ#įđ#ÙĬ0Ĥ )"7<Jl1FMrO#ŀ¹ý´#ÙĬ*Úľœĕ~#ý´áĺ0Ĥ y¡.

¦ĴØôř 3OWcU;4L_=@6pCg7aQ6B8aLm
8fLk=@8pQ:UI;bS`qBl\DH:eK@V:h474<`?>dd<aD<Jp?TM9Bo
Cp?4Gc3iBTH3@p_<HpCpO4Cgn
Rg4?4CgRjT1AaUDaEW:fr?p
Ï<m7GrOÄã
1.

Øô#ûęŌ£*Ŀå´0Í.¾ÿ´ôĶ0¿.
ØôĈ#D<krRp=¦ĴØô#×'$ġ0ąĄs¡ńŗxô : 1 g ÃŖØ
ô~ : 10 gŘ0`lJN2KBg#s#ĉ"éà-#
ĉ"$mHD#ÿğĈ 0/Ģ0¤Ň25 ËÓ| 3 Æŉûę«×ņěĹņ0ë¡?pOnrl
áĺ¶ņö0Č
2.

ûęŌ£*Ŀå´0Í.¾ÿ´ôĶ#¡

53

"



 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 54        

Tight Junction . + %# $,0& " 

2014 &"/

(')

/1  2* -0& "!(1
3EJM> 2. Ca2+ assay
#zā"ā(gÒ-0 /7E:4;KêÙOÍÝæG?IÛ!
TJ1sĂÌ!Čr/1ø
f"µ±1¨- !0'"ú® -7E
:4;K!,/sĂÌ TJ Čr!Ýæc&" Ca2+ »bĊ÷/¨- !  / 2) OÍÝæ! Ca2+ »b1ĀktÀ1 Ü/§¸m MDCKII Ýæ (4BéíÝÙOÍÝæ) ! Ca2+ indicator " Fluo-8 1q.'Ęðh¾i*! Fluo-8 "ña1ß©û¿
Capsaicin uÕ" Ca2+ »b1Āº1³!ktÀ<8HMAK91òåª ,%ÏÌ
ėØÐ°ÆÀ#!É -ÆÀ+54I<·ktÀ"Ćb!,.Æxè 0 /")nĐ Àÿ"Æ\c&"Ćb1ď¶/² CH3µ±~/"N! Tight Junction (TJ) w$0/Ýæč¡Ñ±ą/
TJ #U !Ñ;M@Â"±ą1Ē¡Ýæ
č1¡Ñ/OÍÝæč"đč1WÀÿ"îÈÔj1ĎÉ"« Àÿ"`b1ď¶ /N§lÊgċ#\+:4@74K =KD8ÿS\"C46lðy"ČËL^ÇÎ2!  / 
C46lðy#Nï!Æ\ìăĈ[¹ `öÌQ¸!ĕ-/1 TJ 1sĂÌ!ČrOÍÝæčđ1WĔ`öÌðhQ (Figure 1) sç! 0$ä" QOL (Quality of Life ; Æº"ÿ)£{/ã-0/, TJ ČrÀÿ" Ü1ò à¯ ,%V"¬üÝ#ËôY!ÞW/oã¤Ã1) K. Kubota, M. Furuse, H. Sasaki, N. Sonoda, K. Fujita, A.
Nagafuchi, and S. Tsukita. “Ca2+-independent celladhesion activity of claudins, a family of integral
membrane proteins localized at tight junctions” Curr
Biol. , 9, 1035ę1038 (1999)
2) T. Shiobara, T. Usui, J. Han, H. Isoda and Y. Nagumo. “The reversible increase in tight junction permeability
induced by capsaicin is mediated via cofilin-actin
cytoskeletal dynamics and decreased level of occludin”
PLoS ONE, 8, e79954 (2013)

Figure 1. sĂÌ TJ Čr!,/ðhQ´}­¥ ,%§¸¦ùsĂÌ TJ ČrÀÿ1<8HMAK9/!.XP"TÖĖ"3EJM>1Ç 
3EJM> 1. Aggregation assay
 TJ "CH3µç!#
S! claudin w$0/Nâ" 4 |þĄì=KD8ÿĒ¡/Ýæ" claudin àtÑ/Ċ÷/Á! claudin-1 #Íë+êÚì ðhvp!Ċ÷ ĉZ"ËÄÓý0 /, claudin-1 u"àt1ď /ktÀ TJ ČrÀÿ! ./ã 
claudin-1 "àtº1ď /ktÀ1 Ü/§¸ TJ ±ą1
F5< L Ýæ! claudin-1 1bclaudin-1 ËÄÝæ1]õ"Ýæ1 trypsineÅáó½R¼ć×+ !¢/claudin-1 ËÄ_Ì Ýædē/ 1)" claudin-1 _ÌÝædē
"ď 1³!ktÀ<8HMAK91ò

54

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 55        



 

2014

'Terpendole E  KSP &$# (

 ')  *"%( !) 6 ^âh ],EGÞß. Malachite Green .
¯uß+KSP y¼Xtµ ATPase §w
+Ëaävd.ÓÄ (!·µ¬nÉ~( W-,+ /ay¼V¯Ë +µ^s+y¼ ¿Å^Ï¾àU.+ 
y¼V¯Ë(*¾àU±| ®oi¾àU;2<6B1G= §f¿ÅmÜÍ Y +
¡|¿Å ¿ÅmÜÍ Y $$+ 
p Ç³
¿Å 
¾àU;2<6B1G= §f+&¿Å^ÏÜÍ
' 0B=H89(*Ç³¿Å«±µ¿Å¢Õx,+Iy¼V¯Ë ¿Å[ªÖÙÚây¼Æ&äv$%
¹Á²bV¯.
 × ¸),+%^Ï«±µy¼ävaá´ ¥%),+ KSP (Kinesin Spindle Protein`k Eg5) 2 NU)Û}ÍS!+y¼.é»l"ºe+4?8
G:1ADH:H:G@6Ö+^ÏNUçê»è)y¼Z»çé»è"y¼J.ºe+(*2
NU.^å¡| 2 ¾àU.+ 1)
% KSP .äv+NU ^å]. 1  
±|¾àU çg¾àUè V),+Â (!O{ Ô¿ ´ÎRÀP+Referenceg¾àU y¼äva.\­¿Å¾àUj¾àU;2<6B1G=.§f
Ç³¿Å«µ0B=H82)
9.Õx+ ) KSP ^Ï«±µ§f+%
ây¼Æ #/æ.MÃ),
+QJ ) KSP äva ty¼V¯Ë£ØbV¯z /a+Ã), *¶/á´Í-,+Terpendole E r©ª° KSP äva_%´Ñ,fiª+ 3)  )ËaÂiÝT'ävã L$$+ terpendole E  KSP äv.) +.·µ (!¦1. KSP DH:H>C1G ½Ð
GST :7.Ìi KSP DH:H>C1G.qÈÊ´¬
Glutathione Sepharose .¯½Ð
2. KSP  ATPase §¨u
 KSP
ATP c¤^Ò(+3?F5H.¯y¼J.é»l"ºe+% KSP DH:H§ ATP^Ò(®EGÞß.ußf+¨u+ +ËatnKKSPATPy¼. 30°C

55

1)

LC. Kapitein, EJ. Peterman, BH. Kwok, JH. Kim, TM.
Kapoor and CF. Schmidt “The bipolar mitotic kinesin
Eg5 moves on both microtubules that it crosslinks.”
Nature, 435, 114-118 (2005)

2)

W. Tao, VJ. South, Y. Zhang, JP. Davide, L. Farrell,
NE. Kohl, L. Sepp-Lorenzino and RB. Lobell“Induction of apoptosis by an inhibitor of the mitotic
kinesin KSP requires both activation of the spindle
assembly checkpoint and mitotic slippage.” Cancer
Cell, 8, 49-59 (2005)

3)

J. Nakazawa, J. Yajima, T. Usui, M. Ueki, A.
Takatsuki, M. Imoto, YY. Toyoshima and H. Osada “A
novel action of terpendole E on the motor activity of
mitotic kinesin Eg5.” Chem. Biol., 10, 131-137 (2003)

,*

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

AID system -

13, 56        . !6/)#$ ,*$57  '&(í«UØÖ LB9TCP2#!óyoö1ê-ą¹(tÖ 4
Q5FO-ATP ÏÎ1(.æîl"» ½ï!
đ0 .
LB9TCP2"#óyoö"GOT;!
+é / -óyÃu.F@BSV7»"L
B9TCP2oöÃu.¦ÈuLB9TCP2
/."óyoö"GOT;oö!i.
¿~|!c ÃČä!+ē1wLB9TCP
2 DNA 1g.n³  ."(¿~|½ï
dY^ĀÓ*Þç Ó "» Ó1ĂÙ,/ .
" ,LB9TCP2oöĒr#®Z© Ç" LB9TCP2oö"o½º"û©%"âx1[ .$ - ^ĀÓ*Þç Ó"ÁÔñ .­/.

24% 

2014 /)#$,*$5



81 36/)#$ ,+"07±¥
TIR1p ÕÌrăwċ¾ dTC090ėMATa his3Δ1 leu2Δ0

met15Δ0 ura3Δ0 pdr3Δ0 pdr8Δ0 pdr1Δ0 yrr1Δ0 snq2Δ0
pdr5Δ0 pdr10Δ0 yor1Δ0 pdr15Δ0 pdr11Δ0 pdr12Δ0 aus1Δ0
RME1(ins-308A) tub3Δ::OsTIR1 Ę§Â
1. FZO1-AID ¶"eø
 TIR1p ÕÌrăwċ¾1ù¶Fzo1p " C ¯
à!AID >8óyFZO1-AID ¶1cassette PCR Â!eøeø¶# IAA fÖ! FZO1-AIDpoû/8P<RVQ"ÎìĒ/.
1Üþ

 ċ¾LB9TCP2óy!đ0.>TH7ā"W! Fzo1p
.fzo1 ĉb1Ûċ¾"LB9TCP2#óy
n³¿~|Ã1 "(ûáã1pÐ.čċė8Q9V;ĘÎì.)""8P<RVQ "ĔčċÆäÅ"#Îìn³  .W§LB9T
CP2oö!đ0. Fis1p "ĉb1fzo1 ĉbzª!Û.LB9TCP2"óyoö"GOT;
¿~|Ãé /ĔčċÎìn³.+ ! .1)Ù,/ . " ,Ĕčċ#Îìn³
Fzo1p Û¶)LB9TCP2oöĒr1Äs.Îì.\/.
 _X"í«"jFzo1p ²`fÖ!ÛUoû/.
Ò¶1Ð LB9TCP2oöĒr";7PVET81ô!]Fzo1p 1Ê"²`Y!oû.§Â AID system 2)1Ð " system #·É"4V6:T:8DQbĈçĄ1pÐ>TH7āoûã-·ÉÑ³" F-box >TH7ā TIR1p 3TCVQĊČėIAAĘY
AID >81óyØÖ>TH7ā#KPNI6?Tu/JRA2=VMãĆ* !oû/.
°Úß#ñr£å1
ô  ,ÚßďÕrăwċ¾ 3)1ù¶Ð LB9TCP2oöĒr"£å1ô

2.

ñr;7PVET8 FZO1-AID ¶1uyÉ1{' IAA {¬&#Z{"
8P<RVQ 3 ¨Đ¢×ĖIAA {¬8P<
RVQ"Îì1¡¼!LB9TCP2oöĒÃ1ÝuyÉ1£å

3.

LB9TCP2ú LB9TCP2oöĒrY#LB9TCP2
oö.²`Y)oöĂ,ë ,/.
LB9TCP2ú* HeLa æî1Ð h÷uyÉ"oöĒÃ1¸üh÷ñr1 1 ªĐqmÍLB9TCP2oö1ÿ.ćČuÀä1 4ªĐmÍLB9TCP2# MitoRed 1Ð µðòkĕĎ1úè´Uë ýæ#Õõa!}.
vë¤Ë1) AD. Mozdy, JM. McCaffery, JM. Shaw. Dnm1p
GTPase-mediated mitochondrial fission is a multi-stepprocess requiring the novel integral membranecomponent Fis1p. J. Cell Biol., 151, 367-380 (2000)
2) K. Nishimura, T. Fukagawa, H. Takisawa, T. Kakimoto,
M. Kanemaki. An auxin-based degron system for the
rapid depletion of proteins in nonplant cells. Nature

Methods, 6, 917-922 (2009)3) T. Chinen, Y. Ota, Y. Nagumo, H. Masumoto, T. Usui.
Construction of multidrug sensitive yeast with highsporulation eficiency. Biosci. Biotechnol. Biochem., 75,
1588-1593 (2011)56

#!

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 57        

)*(





 -& #!,.  /ÂP¯®
 ©¤ )i¤ Æ+$©¤"×½-©ª *,) (©\bÒ+x·xÊÙj{mÍy, +XÚ",$ ,)!U )x!«
×½-¾!Ð Ñ-Ì+& ~ fØg«o +^BN=.Q:!R· +M
O?O"!cV]« )<Q9!ÉÔ « ), +$°¿Ç!¿Ãv-+x¼-hfÌ+K;<QG"ÇP£]«-¶%>NQ<'µ¹ Öp, + ,$ q|,×½"k· &l#©j{!­}& !"uhÁ + ±!×½Zw& Ñ)  ×½xzs+"5@GBN713>!À ))  + ±!×½-¾¥ -Î_ Ë!a,×½-¦+nÄ  +
 !Â!T²¸"i¤¬!Ë×½-83K
Q?O4!Ä-Ì+-¯® +PÀ i¤¬!·Ú!År-EK>NO (*[¢´³d¨Õ!S¡-º×½6OBL!º×½ jp¤- h 370O2ICQ> h·!jp¤! º×½!me,&!-tÑ!`È§s,)!jp¤º×½!mª¤-ÛÓ\3
NF>4JA/QHPLC'F88D3>NH>KQ« Ï¿ Ì +Y!W|
 º×½ )m-Íy +×½-»É×½{®
Ð Ñ-Ì+

57



 

2014 &#!,$%+ -& #"'.

#!

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

#!
 */&

13, 58        (."!), #!-0  1 +/&

½E«ª
 !;@>:/8g°gÁÞ¡V\.¢£+ (Í I!yÂP¤yÕVP¤$!y0DP¤§¨JØE©# U É%),¿uÜ_'WÃ_´S¤,+& &GÓ+ ,) Í I
!¯P¤q!&(*,) LÌERÇ!
) ,& &n ¬²!¥ÁÞ¡V\.RÇ+s¢.pÀ¦(*62AF9D3ÁÞ¡V\ RÇ£'RÇ¹Ï.Ç+&RÇ×-+Ô¶ ("ÒNi.]j+.«ªEº ¥ÁÞ¡V\.XG¶$!XG³¶Oba.¤v[x )~Z`f5D<B.T }
bÝ.ÄÂO e Æ),& !]G ba »Ù±bÝ.Ä)Oba]¸w lhbaHdo¢¼ 4C9F.lhba »Â.XÚ¥ÁÞ¡V\.RÇ +s¢ 62AF9D3.Ä XÚÂLÌu.Ð+kß.ÄXÚ[Â.bÝÎÛ®­·¾|Q.ÊÅ,) ·¾|QcÍ+¥ÁÞ¡V\.
\28/D1?=F7/D1?=F7rYt
. HPLC (*RcÍ nÖ.¯É62AF
9D3Â I ) ¥ÁÞ¡V\m+RÇ¿ àÂ.Ñ{Kr Jj Ñz¥ÁÞ¡V\ RÇ¿ àÂ.¤bÝ M.ÈRÇu.)^H+¥ÁÞ¡V\ RÇ×-+Ô¶ µÅ.ÄÔ¶ ËuÍ.Ç+58

 

2014 &$%
 #"'0

#!-

#





 Tsukuba Journal of Biology (2014)!+$ #13, 59         2014 $##! ( '# &
*,  - )+$ #"%,´A¤£  bªbÆ,)t¿ f\)
Ñ
ZFt¿ H .8>0BN+*(ÃLuuP()& #rÐÒ¬  wÊSM, #)¶ ¤,Í#Ål49=;@6N+*)$$)
*'¿F J½AP»Ì)¥¾EÁ'©Mn ' $$b ¦«  t¿J½,z)q,m·¡&(51=B7@2t¿J½%J½¯Â,»)$J½Ì+)É¬ &!ÈKe,Yg),¤£~A°  t¿,TC¬L^]
Wv'|V[a4@9>,R {^Ò,¹'
L^]Y®uid^]D`k
³ 3?7B,}id^] ±¸,TÎ t¿,J½ )q51=B7@2,¹ TÎ¸J½t,Ä)hÓ,¹TÎW¸,^ÒÀÏ¨§­µyO,¼º
*'­µyO_¿) t¿,X28-@/<:B6-@/<:B6oUs, HPLC &(_¿gË,¹51=B7@2¸F '_¿J½¶QÔ¸" ¢J½,¹¸,ÇxIohÓ) ¦«&( t¿j)*"¥'* J½É¬,$¸,p)  )²
'*)
IoGg
 51=B7@2&Çx¸,cË^Ò¤£t¿J½Ì+)É¬YgA¶»,¹

59

*!

 Tsukuba Journal of Biology (2014)



13, 60         2014 %!-+',#$( ").% !-/  0 *.% !
¯{<¡ n¼a¤a ¾*|&Aa ¾*|'""dZ'(%PVq²HqÁPHq,;HBÄ<O¸!%(±nÆX#Q³X¦L('""' (%PVz£Hi"$&(%
D»<K¶
}z% (""g  ~¢¥n*taPV
D»#D»«½*¶z'"D»Ã)'À¨ºn¼*¶'*¡ y<¬ a ¾*tPV*R>¨G\[Up %uTY_0;59*N\Ç*´k%(²G\Ç*G\[Wªofc\[?^h® /:3=*xfc\[­ ²*RÅaPV*D» 'l1-8=3;.*´ RÅU²*F²GSm#©°sJ$'Sm*´Sm* HPLC I']¼aPVgÂ*eÂA %aP
VD»±MÈ²*¿r %
aPV`v±*t²*e\ÇE@bÂ\Çk%(²G %Z~PVD»Ã)'À¨*U¤-:62.74+=wH$&§µ'CjBe §µaPVD»Ã)'À¨ºn¼*¹'·'

60

&/



)'

 Tsukuba Journal of Biology (2014)#12

13, 61         +$/45.* 07,& )'68  (Û¦SÉÈ)
D8AN6&F5T>­$1²°!nÿeĄÓCRISPR/Cas =?ALXÐ­²°#"4!Ì/2
 1nÿeĄÓ- CRISPR/Cas =?AL&F5T>­Ê$F5T>;CL4k¢1! F5T>%~µú
21%4ý
1U£F5T>­F5T>%~µ<78Oú21$,ü3/F5T>%~µS4n 1²°XÐ­²° 1XÐ­²° &
F5T>%~µ<78O$ 1âáðiØé$ 1Á
%<78O4þ1@RE8î%ÇÃ$.0
ßcg$ 1
F5T>%~µ4 0
ßc$¶4@RE8îÇÃ1! ­ÔÜ%ÔÜ´4ï¾ß$.1F
5T>% 4n0 1©ÍÒ$
&¬Þß
%XÐ­$üY1 NonA %ÍÒ4à¬Þß Marburg ®& SP10 F5T>$4
(Saito et al, Mol Gen Genet ,1979)Marburg ®$4,/ô`!SPGQF5T>ă{$z1 nonA ô`1) nonA ô`%ði$ĀSP10 F5T>%=9Jy nonA ô`%ði$ã 1+SP10 F5
T>­¥$%* NonA %ÇÃï1(Yamamoto et al, J
Bacteriol, in press)
SPP1 F5T>q'29 F5T>&SP10 F5T>%y%IMQ94# +2/%F5T>%­$.0
NonA &ÇÃ# )SPO1 F5T>&SP10 F5T>
%y%IMQ94Ëtbt±$ NonA 4
ÇÃ# )F5T>ā­¥$ IPTG ì$.0NonA%ÇÃ4ì1!¬Þß%ÄÚ4þvu¹bW
1!¤/ !# 1%¿ /1 %_í!
SP10 F5T>­¥$ NonA ÇÃ¬Þß%~µ4þ1!$.0SP10 F5T>%~µ4n 1% &#!
!Ù /21 NonA %ÇÃ$.0SP10
F5T>%~µ4n 1% ¯ê(£¸SÕ«) nonA ô`& SP10 F5T>­¥ ÇÃ# +
SPO1SPP129 F5T>­Ā$ NonA %ÇÃ$.
0"%. #ĂÄ1 4å1!& # nonA ô`% ORF Vº$z1GQMT@Tõa4­¨$ÇÃ1F5T>ô`%GQMT@Tõa$× ®4d1!$.0SP10 F5T>^%F5T>­Ā$,NonA %ÇÃrÝ$#1!Ù 2)$ 2 1 SPO1SPP1 %­¥$ÇÃ1GQMT@T(Stewart et al, J Mol Biol,2009ćJuan C.Alonso et al,Gene ,2004)%Wº$ His @9] nonA ô`4òÕ%¢À4 SP
GQF5T>ă{!nÿeĄÓ4³¬Þß
ASK3002 ®% amyE ô`$f)29 F5T>$ü& $^o29 GQMT@T! nonA ô`4òÕ¢À4f®%dà32 1+
\x&à

61

 

NonA

2014 ,&)'63"

9! %7,& )(-8
3# GQMT@T! nonA ô`% DNA öl4=T:
R=R9Õ«F5T>GQMT@T õa- nonA %ORFHis @9õj$ 2,¿Æ-6KC÷%FPTL=FBÆÄnonA ô`&¬Þß$!¶4! /F5T>ā­¥$,%GQMT@T²
Ý1!$.0ÆÄ 1rÝÙ /2
SP10 F5T>4 SPO1 F5T>!t¥$­1!$.0NonA  SP10 F5T> #SPO1 F5T>%~µ,þ1% ¯ê¡~µ¨Z¨) |ą ASK3002 ®% amyE ô`$ nonA ô`4f TAY3210 ®$SP10 F5T>
q' SPO1 F5T>4Æ#1»s· t¥$­
­ 5 ¥û) % OD600 422ç½SP10 F5T>%*4­}s$&¬Þß%¾ß&ï# U
£F5T>­30 j!90 j%OD600 %p4·ñ1!
SP10 F5T>! SPO1 F5T>4ø­}s$&­ 21 %%¼ä/2%$SPO1 F5T>%*4­}s89 %%¼ä/2%Õ«.0SP10! SPO1 4ø­¥$&SPO1 %*­¥$·(¬Þß%¾ßÂ¼! /SP10 F5T>­¥$ÇÃ1 NonA $.0SP10 F5T> #SPO1
F5T>%~µ4þ1!Ïw2
%Õ«$üÃzhÃ41+$Ć4Ö 1(§)\F5T>%ø­Ć$
&SPO1 F5T>!
SP10 F5T>Ā$ø­ 1% !
¿4¯è1ã0)F5T>ø­¥$ 1 OD600 %p NonA %ÇÃ$.1!4¤/ $1+NonA āÇÃ®4Å t±%Ć4à  !Ù  1SPO1 !
SP10 %t¥­ &¾ßÂ %ó ä/2SPP1
29 ! m%F5T>4Å Ā$"%. #pä
/21 \¯è1[
12$ÖOD600 %p$üF5T>ô`% mRNA -@RE8î%ÇÃù%p4ÎëF5T>ø­$.0ô`ÇÃPHO "%.
#pÄ 1% $ æª  !Ù 1)\xàø­Ć&2 Ñ%F5T>4t¥­F5T>û%­¥¨$4Y 1Ć$.0Ä1p$ ,æª  !Ù  11/

 Tsukuba Journal of Biology (2014)6



13, 62        



DNA "



 

2014 3-#%1/%;

872(

':,. 9$<3-#% 1/%;=  )&*>+ 5<3-#% 10!4=
Ü NÅÄ
 G?8M@K1!úgÄKMúg(»Y4BL6O
+ ATP ¼»/äÔÝr}*aáNxá Uûá)ª,+G?8M@K1!¨ DNA !·Îº¶U¥ý DNA (mtDNA) /PÔÝ*Ã~h8DO¢+
 mtDNA !
pnùÓèlY/ª+ 13 Ë <MC7ñj" Ùëé 2 Ë rRNA  22 Ë tRNA 8O@
, *,) øW{Íµw¿ »+pn­Þ/<MC7ñ¿ »pn­ÞXQ'±úÓË(ROS) ÷e¼» it+ b+ pn­ÞXQ/ò+ mtDNA Íµw¿(ÁiÍµw¿)!G?8M@K1Á y«Á/ ò
vo,+Ppn­ÞXQ/ò mtDNAÍµw¿(yuÍµw¿) »¹ÄØ!R³ y¡+©ì é,+ pnùÓèlY!¨ DNA ¾¦ <MC7ñ mtDNA ¾¦<MC7ñ )ª,+ mtDNA Íµw¿ Ā/ÒÐ©ì+´!¨ DNA Ā/ÿ+é + ÇÌ~!mtDNA /²zÔÝ (0 ÔÝ)ß¨
Z/äÔÝñY/ãl+(*¨/ÖP
mtDNA #/×ÔÝ (92EK=@)/Z+å/ÈÎ+(*dõ qā/ê¯+ ÇÌ~ ]äÇÌ! 0ÔÝ ¨mË¿ÑÖ F
3: mtDNA /_92EK=@/ZöàÂ/©ì+ Õ§mtDNA yuÍµw¿!àÂæ¸u/wg+ ) + ¥ÇÌ!¤ÚgJ>LF3:ÆÅ mtDNA
yuÍµw¿ öàÂS +ĀîÔI5A;Hê/ÅÄ©ì/äÀ­Þ/®F3:/½©ì/äÕ§âµ^ÀöàÂ ²zþS+ ) 3) îÔI5A;H ê àÂ c,+I5A;H/) +%âµ^ÀÏ t{+NK ÔÝ¬¶ÔÝ þS/©ìÕ§¤ÚgJ>LF3: mtDNA /_92EK=@ NK ÔÝ!ÔÝ\/É¬¶ÔÝ!92?
52M/÷e¼» ),) ÔÝ þS+ ) ÛN £ ÇÌ~ ]äÇÌ ROS/÷e¼»+ 0ÔÝóÊÞ Ă vo, Vs ÇÌ ROS /÷e¼»& mtDNA yuÍµw¿(!àÂ c,+ )  ¥ÇÌ!âµ^ÀÑ(+ïð I5A;H|`ê %V¡+©ì/ä °NÕ§1) 92EK=@ Zç ("öàÂ Èï
 0ÔÝ ¨¤ÚgJ>LF3: mtDNA /_
92EK=@/Zñí[/ä Õ§¤Ú
gJ>LF3: mtDNA/_92EK=@!ROS/÷e¼»f ü»uF3:92EK=@/ô$(*àÂæ¸u/©ì-¤ÚgJ>LF
3: mtDNA /_92EK=@!öàÂ z.,+ b2) ^À­Þ þS ©ì ¤ÚgJ>LF3: mtDNA/_92EK=@ öàÂ/z+itT+ü»uF3: ^À­Þ(ÿ,+kÞ Û ),^62

,*

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

6





13, 63        2014 3(!",*"72). mtDNA /%5$

 1#83(!" ,*"79  &$':- 83(!" ,+4/"049» A95H:D/#"±¼!oc*±¼v`p)
±¼ |Æ*2;E3J"kÐX-*
A95H:
D/!#4<B#*¿"4<BÚA95H:D/DNAÝmtDNAÛ oc)2;E3J!|Õ 13 ¬"ÎÏRn+-·È*"!|Æ 22 ¬" tRNA2 ¬"mRNA -5J:*"$mtDNA !T( "¯i*2;E3J LV )´¥!j¢-z Ë §(+*Qrq"¢Z}¯i Ú2;E3JLV-z Ë¯i Û-*
mtDNA "Á­#A95H:D/¢-#$°w¢«³i}¡~ .¸Y "Za! *,+* KÑd mtDNA !#¢Z}-¤  ,
A95H:D/"2;E3JLV-Êu jd¯i )
+(!'Å "=?G70?!XÖ*  *À^!q" mtDNA "=?G70?-%>9"Ôb °w¢&Lm£"¤£{¦Ó*
 f]+*"' >9" mtDNA "=?
G70?Ò!*jd¯i"'!¢-Êu
*" #X  
 "' "Ox¨®s"C8E@16-e©
¨®! °w¢g ¢Z}ld mtDNA "¢Z}(!h* X "´-¨®#
°w¢SW69F6g!'jd¯i dmtDNA ¢Z}-¤*" [ -ÉrØI´ Ñd@16ÚB6 ÜB6mtDNAÛ!tjd@16ÚB6
Üjd mtDNAÛ-UÄ!Ñd@16jd@
16C8E!Ù¾º×-M °w¢-Êu"N¹"A
95H:D/½-ÌÇ*%!
Ñd@16jd@16!Íy×-M ¶"ÌÇ%Â ¤Ã#Ù¾º×-M jd@16"²µ! *A9
5H:D/_\}!Ó*´!ª*Pq*

63!

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 64          2014 "!$

Effect of fermented-bean product on anti-aging and health 



%"!$&  ' %"!

#&

Introduction

plate(NGM plate containing 50 µg/mL FUDR to prevent

Fermented foods are made by taking advantage of
the workings of microorganisms and enzymes in foodingredients. The Japanese have a long history of making
fermented foods and this become Japan’s unique foodculture.
Not only delicious flavor that came out but also therich in health benefits nutrition. The functional effects ofJapanese style fermented-bean product have beenstudied. It possesses antimicrobial activity against
bacteria such as Staphylococcus aureus, Shigella flexneri,
Vibrio choler. It also contains an angiotensin I-converting
enzyme inhibitor having antihypertensive effects. The
active compound is identified as nicotianamine, whichcomes from soybeans.
The fermented-bean also product exhibits anti
cancer effects. The flavor components of the product, suchas 4-hydroxy-2-ethyl-5-methyl-3-furanone, which is acharacteristic flavor component of Japanese stylefermented-bean product and 4-hydroxy-2,5-dimethyl-3furanone and 4-hydroxy-5-methyl-3-furanone exhibit
antioxidant activities and anticarcinogenic effects.
Fermented-bean product contains three tartaric isoflavone
derivatives called shoyuflavones. These shoyuflavones
inhibit histidine decarboxylase, which produces histamine,a mediator of inflammation, allergy and gastric acidsecretion.
There were many studies about benefit offermented-bean product. However, little is known about
whether and how it promotes longevity and health in any
organism.

the growth of progeny) were used for each assay. All the
assays were carried out in triplicates, and a minimum of
three independent trials were performed. The dead worms
were counted every 2 days and exploding, protruding,bagging or contaminated worms were censored if
applicable. The day L4/young adult worms weretransferred was defined as day 0 of adult age.
Heat stress assay
Adult worms were put into 37 °C for 3 hrs in incubatorand using same method as life span assay to get theresult.
Gene expression assay
Total RNA was extracted from adult worms. And cDNA
was produced with reverse transcriptase and Real-time
PCR was performed.
Result and discussion
The result showed increasing of longevity in C.
elegans and also increased tolerance of C. elegans to heatstress. In addition, hsp12.6 and SOD-3 gene expression
level in fermented-bean product given C. elegans also
higher than control group. To study involved gene andmechanism, further experiments and discussions are need
to be made.
References- Sujay, G., Min, C., Ryan, M.K., Anthony, M.S., Sige, Z.
(2013). Thelongevity effect of cranberry extract inCaenorhebditis elegans is modulated by daf-16 andosr-1. Age 35, 1559-1574.
- Kataoka, S. (2005). Functional effects of Japanese stylefermented soy sauce (shoyu) and its components. Journalof bioscience and bioengineering 100, 227-234

Materials and Method
Stains and growth conditions
All strains were maintained at 20 °C on nematode growth
medium (NGM) seeded with Escherichia coli OP50
feeding strain. One hundred microliters of OP50 was
dropped on the center of the 60-mm NGM plates, whichwere allowed to dry overnight before the culture assays
were carried out. Strains used in this study were: N2.
Lifespan assay
All lifespan assays were carried out at 20 °C. The eggs
were obtained by using NaClO treatment. The eggs wereallowed to hatch and 30 L4/young adult worms per64+(

 Tsukuba Journal of Biology (2014)13

 2

13, 65        



+)'



 

2014 /&+(6(4,-.

%5 #7/& +(68  !"9$ 7/& +*08
 ĒËb÷õ
 S;=OFXA]*Öíi(¢6 ë)ðïáºíħ$6)*ÀĲtò:Ĭ#ďè2Ă©ó'&)jķb
Å(ðïõ Ô 6%7# 6
ī°$*Ø 'S;=O
FXA]HU\Y`O2y²ÚĔĻ%#­(#5
ðáċ¼ó)jķ2Č)ķÛ% !ê$Ïµŀ.!#6S;=OFXA])Æ*ė$ 5) ÔġÉ7)*dı(
4'6S;=OFXA])ÚĔġÓß047# 6 ĉĜ(C.elegans)Â" Daf-16 * FoxO )VZ_E$ 6
7*ĭõ(u¢7ĩ}¡$ĄēÏDNA v·Ă
oĦ'&Ø 'tò(Ķ9!# 6%ø47#5S;=
OFXA])dı*) FoxO :áº6%$ðïáºÚĔ:14%É4('!# 6 ÑùĀ¥){ĝùĀ( #ÖíÁí[=T[\c)i
4 Daf-16 :áº61):JD\cP`EąÔW`G
JM`%+76Ò<I<ñ)@OC\K>üDC«(«6¯ĈŀÐ)¤Ì1 Ô:ûDaf-16 ĩ}¡áºÙõİp¡:ôî60(*Daf-16 Õ(ýbª6%¹Ğ%'6W`GJM`:¿gĉĜ$*n)ÖíÁí:¿g1)%ÝĪ#kxþ±)Õªúģ7.Áí:¿gws(§#sĵç£:ĝ!
%8W`GJM`,W`GJM`¿g)ws$q,
¾76zû7ńDaf-16 áº6%½ĵ)Į³Ĩ6%É4('!#5sĵ)q,)¾*
Daf-16 )áº461)%č 476.W>J
3T3-L1 ľĕĐĄē:ò ġÓ$*W`GJM`ÔöÁí(35ĕĐĚÿĺę(¾7 1
 ÑùĀ$*
W`GJM`)ÔöÁí)4'6ðïtò)ġÓ%ÚĔ½)£:÷õ%#ĉĜ:ò ¤Ŀ:ĝ!

Łńł¨ç£ ĉĜ:ĥ~ï¶ 94h ĽNGM U^cO(Ģě%ĖĘ)åä:®1)$daÍþ±ĽU^cO:ńÈĊ
(lÄ""ç£RNB`E:ĝ!ĸ1*ðïĻÞ(ãĸ(& :ÃÙ%#ðÜ£:ĝ!
ŁŅłìJO^J¶)¨ç£ ĉĜ:ĥ~ï¶ 94h ĽĢě(§Æ)ĉĜ:NGM U^cO(Ģě%ĖĘ)åä:®1)(ý35)ìJO^J: 3.5h g )È:ŃÈ÷%#¨)ç£:ĝ!U^cO* 3 ÈĊ(lÄÃÙ*(1)%Ø$ 6ŁņłìJO^J¶)įº) ĉĜ:ĥ~ï¶ 94h Ľ)Êê$ĉĜ:ðïĻÞ(â-#¤sĺ¸Ĵf$Ġ¦15sec 5) thrashing įÆ:ç£)¶35)ìJO^J: 1h g # thrashing įÆ:ç£ìJO^J:g ¶$)įº(" #ÝĪ ąÔŁńł W`GJM`Áí,W`GJM`)¨³ĵ
z*ğ47'!
ŁŅł W`GJM`Áí,W`GJM`)ìJO^JĎº(36¨³ĵ)z*ğ47'!
Łņł W`GJM`¿gws( #įº)ćÂû
7 č¦,ĤĹ ąÔ4W`GJM`Áí*¨³ĵtò:Â"1)$*' %û7dÇ$ìJO^JĎº(36įº)
$*Î»'¬/47%4W`GJM`(*įºrf¾tò 6%Ïµ76 m¶*
İp¡ôî)ġÓ'&(35tòÚ×)ġÉ:ĝ!#.W>JľĕĐĄē( #ĕĐĚÿ¾76
%4ĉĜ( #1ĕĐĚÿĳ)ç£:ĝ ) Ô:É
4(# j£$ 6 Çà
 W`GJM`ÔöÁí,ÁíiÌÎíħ$ 6
-W`GJM`:ĉĜ(æôî´ħ(" #ġÓ:ĝ! 7)Ģě1 DMSOŁġÓ(1)(2)ł.*?LQc]Łġ
Ó(1)(3)ł(é#¤Ŀ(ò  ĉĜ*Ñõ( 20$Ľĥ~ï4 72h ¶( FUdR:æ6%$ho)ĉĜ)/:¤Ŀ(ò ĥ~ï
4 94h *NGM U^cO(Ģě%ĖĘ)åä:®1))e$Ľ½Ĝ.$ļđ.ò ĉĜ*|# N2
ăĆ$ 6
 (2)ìJO^J¶)¨ç£(Ķ#*Ģě:¿gġÓ:ĝ '4¤Ŀă)ā e:ĝ!

 Reference
1.Eri Obata (2013) Tsukuba Journal of Biology 12, 55

65

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 66         2014 

Comparison of the promoter sequence of cryptdin4 from defensin14 knock out micewith wild type mice  !  "Introduction 

!

5’-GGCAGAGAGGAGGACAAGTG-3’, set two: forward
primer 5’- GGTCCACACTAGAGAAGGC-3’ and reverse
primer
5’TGTGTGTGTGTGTGTGTAGT-3’)
for
Cryptdin4 DNA amplification are designed using primer3
website (http://primer3.ut.ee/)
Cryptdin4 DNA amplification and selection
Using mouse ear punch DNA extraction and amplify
cryptin4 gene region by PCR, select desired DNA byelectrophoresis and extract from gel.
Ligation to the vector
Ligate cryptidin4 DNA product to PgemT-vector which
including an A-tailing procedure.
Transformation
Introduce vector to alpha select chemically competent cells(bacteria), and identify the success of transformation by
Blue-white selection using X-gal and IPTG.
Colony PCR
Pick the positive colony from blue-white selection using T7(5’-TAATACGACTCACTATAGGG-3’)
andSP6(5’-TAATTAGGTGACACTATAG-3’) primers. Examine
positive colonies by electrophoresis.
Mini prep and sequencing
Mini prep the positive colony using QIAprep Spin
Miniprep Kit and send to sequencing.
Sequence analysis
Compare the obtained WT and defensin14 KO cryptdin4
sequence with database using blast website(http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi?CMD=Web&PAG
E_TYPE=BlastHome)
Search transcriptional factor binding site inside thesequence that include possible mutation using website
TFSEARCH( http://www.cbrc.jp/research/db/TFSEARCH.
html).

Vertebrate animals’ epithelial cells secret several
kind of antimicrobial peptides, which are effective
molecules against invading pathogens and this ability
belongs to innate immune system. Among all theantimicrobial peptide, beta defensin family is most wellknown. It has antimicrobial ability against Gram-negative
bacteria but not Gram positive ones.
Mouse beta defensin14 (mBD14) is an ortholog ofhuman beta defensin3 because they share structural andfunctional similarities. Like defensin14, most of these
antimicrobial molecules are similar in mice and human,
including cryptdin family which resemble human alphadefensins. Cryptdin4 belongs to the family and isexpressed by paneth cells of the small intestine. Cryptdin4
gene has two exons, transcriptional start site, intron, and3’ flanking sequences, which is very similar to otherpaneth cell alpha defensin genes and only has a repeated
130 bp unique region of itself.
Recent study by W.Muller’s group (unpublisheddata) suggested that the expression of gene cryptidin4 has
a tendency to increase in the beta defensin14 knock out
mouse compared to wild type mice.
To identify any regulative relationship between thetwo genes, I compared of the cryptdin4 promoter sequenceof defensin14 knock out mice with wild type mice andfound the find possible mutation site in defensin14 knockout mice, which may occurred on transcriptional bindingsite on the promoter of cryptdin4. The mBD14 knock out
mouse is generated from 129 background mouse and backcrossed several generations with C57BL6 mouse, which isused as the wild type mouse in this study. Here I
sequenced the promoter region of mice gene cryptdin4 ofboth wild type and defensin14 knock out mouse andcompared them with published sequence data to examine
the possible mutation.

Result and discussion
Through the comparison of defensin14 KO and WT
DNA sequences, transcriptional factors which bind totranscriptional binding sites that contain possible
mutations are CdxA, Skn-1, and HSF. Direct relationshipbetween these factors and Cryptdin4 gene is still not clear
and further discussions should be made.

MethodMouse DNA extraction
DNA is extracted from mouse ear using Extract-N-Amptm
Tissue PCR Kit.
Primer design
Two sets of primers(set one: forward primer
5’-GCAGCCTAGCATACGACTCA-3’ and reverse primer

66

31 Tsukuba Journal of Biology (2014)



9

*

13, 67        1 

2014 60&'31'<4/:8.

5- ;)=60&' 31'<>  +(,#?$- "=60&' 3!2%7>põóm RT-PCRâ«WÍËò# 
!±Ì "JRG5EXS!YÕ.T=IQB+zÕ=BT=àùe!Ê

Åû0ï$

UXSð |%/ .lèÎÖ +-T=IQBUXS"Üç*;P4<P4F6!NASÇÃ Û±

SIR2(silent information regulator 2)G1KRXă:X?O3

T=IQBUXS GE "Üç!Ýu*Á=BT= +.÷VĄ0c}f!2V?63<V9s±.

t!gZ0q.iÈ0Ò]ß ¬ø "&,©, .ąĄ !ÇÆ¹iÈ  "[/ Y§}½

Ñ ¿
Û±,/ ÿë/"GE 0\ 9SXH!§ØêT=IQBUXS0\ 9SXH ¶$
Üç!

ĆĄ

. "ØêT=IQBUXST=IQBUXS0|}f

'ò# ! pÃăGEćredgrape extractĄ0//Üç\/,!2V?63<V9iÈ!¶ôì°0èÞ

}½!Û±+-GE "T=IQBUXS!d ­{!ÝuÃñ|%/ .yãÒ~/.b"öè^!ùeÊÅì°!Û±0) ùe³¢! Éh0È GE !2V?63<V9iÈ!M7D>L!ì©0ö
(.

¯¦W§·
NASÇÃ
®ā" C.elegans var. Bristol (N2 ²)0jÈÜç"äå OP50 ²0£Õ NGM(Nematod Growth Medium)
HTXBĀáĀá¼" 20è
{ïoÆ

wÞ¥Ä

Üç!éÌ0´aÙúCBR4L¾ºÐçv!&0

1. Wood,G.J. Sirtuin activators mimic caloric restriction andx18 ªýW203V8OIXB0è Ă!¡

delay ageing in metazoans. Nature 430, 686-689 (2004)
2. Kenyon,J.C. The genetics of ageing. Nature 464,ç(L1ćlavae 1)þ0

504-512(2010)ÚªË÷t! u{ïoÆ ,18 ªý!Üç0OP50 0£ÕNGM HTX
B Ô72 ªýĀá!UV Àµ OP50

T=IQBUXS%" GE 0»r NGM HTXB Üç
0Ô3 ¨ Üç! 15 Óý!¸÷t¤0í½
Á=BT=à{ïoÆ ,18 ªý!Üç0UV ÀµOP50 zîæ0»r NGM HTXB Ô 72 ªýĀáÁā"ç

35W4 ªý!Á=BT=0\ 12 ªýÜç!¸÷t¤0í½
Á=BT=0\  9S
XH¶ô
}½{ïoÆ ,18 ªý!Üç0OP50 0£ÕNGM HTX
B Ô72 ªýĀá!UV À OP50 zîæ0»r NGM HTXB Üç0Ô`¨ Üç!Çkh¤0í½
ùeÊÅì°{ïoÆ ,18 ªý!Üç0OP50 0£ÕNGM HTX
B Ô72 ªýĀá!UV À OP50 zîæ0»r NGM HTXB Üç0Ô3 ¨ýĀáĀáÜç0_ü Ôºh×Ù +-nÛÐÏÐÏÂ
+-RNA

p8@B(iso-PLUS TAKARA)0È  RNA 0

67(&

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 68        

!#



ðºuÍĊñígaë&&¶¸cIRNU)rÅ&lrÅ& ]Ĕ`ðºuÍh}ï)´&!%
h#MP>AUrÅ)t£¼²Q8Lċ\&ì$'&h}ï)´&¶¸c¤éÂøäî  % ÖÏ
&h}c h}ï)«&h}c9UD3þĆ
&/H6UÖó S:@WRĘF9KU A *R=E?
ücę½¨'& h}cÖó  11 67h|#%k>PU7Ô§w'&h}ï)
h}c mh}ï)Î¢&k>PU7)
11 67Ô§w&{¦çā ¥÷& gÚ óãZØäî"KOPW4Q*äîçā &'&¶¸cÖÒąßgÚ Ċñ Čÿ ¨
'& "h}äî!gÚ¾½ă)¬  $¶¸c!gÚ&S:@WR_ýçā¾¿½ 
&  Þ'& gÚÁ¶¸ch}
M0A8L"S:@WR_ýâ# r  µÛà
,NQ¶¸c)ÓS:@WR_ýçāċĄ&rú·)öĕ°ÆViÕæêw
¨c,NQ)ÄZbËĖć¯Ē¡ÚÐñò)xč
~æê4%DPIRL*R=E?/PBS  4å
15ėz 30ė73TW7/PBS ĐÀë­¡Tissue-Tek
v-80oè3Q/79;>)ÓoèsÌ)d¨sÌM9BWRpÑ)±¡5%72LK
R3/PBS GT;2U4XÀ©cÉ^À©cÉ{¦XÀ©c©cyÉ) 5%72LKR3/PBS  300 !
1000fĈ^À©cÉ200fĈ!)eÓ©cÉ{¦¡0CW1P7jôhē¤ĉù)ö
V-.79UGT;<+U4,NQ)bËĖć¯Ē¡ÚÐñò)xčæêÝÜÉj'ĀďÇÝÜû® SDS JQ*3QR*K?5RĎÃÈu)ö¡PVDF MUGSUĂnMUG
SU) 2%-6õÊ*RGKU/PBS GT;2U4¡X
À©cV^À©c{¦)öwÖh#%64@R)»q

è¸Vì

68

 

2014 )$(&1.,0-"% +2)$(&13  4/
í³VÙ×



2)$('*3

S:@WR_ýċĄ9UD3þ&©c)ÓñsÌæê¹ó)ö (¶¸c[Ćaë&áYñXĆ64@R ù' h}ċĄ&9UD3
þ& Transducin  Gustducin &©c)Ó(¶¸c #ñđ 64@R»q' 
-.79UGT;<+U4è¸ÚÐñªqÍS:@WR_ýċĄ9UD3þCU? »q'`Zè¸ $¶¸c !gÚ¾S:@WR_ýçā Þ'$!

 Tsukuba Journal of Biology (2014) (-1&

13, 69         2014 &

$!0.)*/$"%+ $!02  3, 1&

 $#'2

±ĉĔ)×lĉĔ(Ć$ĹlĉĔ(Ć# 3&Q9<YMPHJ({µ)×lĉĔ#) 7.3 ~ 8.7 mĹlĉĔ#) 4.0~ 5.3 m (/(6môªy x6ù#§3$'0 "þ)î6Ġ3$#3ù)Û &Ċđ#½2ă " 3ĕØî#)ýċĉĔ# 3čė(ġĉĔŌ×lĉĔ[ĹlĉĔōx6§łár'Ã3´ 6Á " 3Ōx¸ĄōġĉĔ#Ã
4łár)čė{(Ŋßýċ#º}ò4ĖbÖýċ
ć'hĲ43(0 &ĸğ&w6Á ġĉĔ(×lĉĔ)Í¾#c'wĹlĉĔ)É¾#c'w " 3w(ö&341 2 !(ĉĔ(łáóò£øúĂ#)ĉĔ(?9C 
čė'.3ĹlĉĔ( àĭø .ê¤
§Ê# 3$òõ1
?VQZF\¥ŉî$"0
ô 14" 3 ?VQZF\$Ð«aóņ'¬39SW(ġĉĔ)
×
lĉĔ( e(î02/ ĹlĉĔ( / .łáóò£øúĂ'ĳ" 31'Į¯8:KV
9SW(Cynops pyrrhogaster)' "Ĵh¡ªyÀěûă
4$1d¶(îġĉĔ(úĂ'$ "Þ&¥ŉî$&3$Ē 143&19SW(×l[ĹlĉĔ(łáóò£øĤÔ)4,#Ě54" & 
#ÑúĂ#)¥ŉî$"8:KV9SW6ô ]ĉĔj#×lĉĔ$ĹlĉĔ(łáóò£øĤÔ6Ě "(ï¹6É1'3$6Ĩ-ÒÆ[ÈåîÙē1Īy8:KV9SW(Cynops pyrrhogaster)6Łŀô ]ÌÍŃ¸9SW6ã^#kéŋĶÇń¶²īx_#aù6Ä~ß'īĎ
9R\A>ZL\E\6v ¥¼Ņ·Ļ_#0.7PBSŌW
ZķďĜóòŇâō'çùñ(ģė$XZC62ľ "eyecup ð'MZDHJ#čė6Ä~Ä~čė)
9SWRinger èŌĊ½ŎNaCl 110 mM
KCl 2.5 mM
MgCl21.6
mMCaCl21.0 mMNa-HEPES 5.0 mMD-Glucose 10 mM
EDTA 0.02 mMBSA 0.1 mg/ml, pHŎ7.8ōb#ħĺ'Ę3,#Í¾#q¢ħĺ#)1/8 čėí6ĉ27(tăŅ·ĻBI\A^(GTZL\'ĀĉĔ)
CMOS :RV6į"Ģ¨±łÚå'02x¸Ą6ê¤ì)×lĉĔ() 520 nmīĹlĉĔ()620 nm (ęx6ìËļ6 10 ms (Óf#` ¥ŉb)GTZL\'9SW Ringer ëè6ĵæħĺ)¦é#Ě &9SW(Ĥ1¥Ŀ(ĉĔ¸Ąħĺ'Ę3]İ
(ıā)z"Í¦{#Ě ČÕ[Ē¨ 9SW×lĉĔ$9SWīĹlĉĔ'xì6` 3$łæ÷óŌłáø¸ĄĢ¨4ō¸Ą( )ňłæ RmaxŌĉĔ'3Ï ¸Ąuō'Ĳ3,#ìx(³°Ō1 NVH@U 2(x¡Åj) photons m-2ō'o¢" Ģ¨444(ĉĔ( Rmax (®u)9SW×lĉĔŌn = 11ō#) 21.6 pA9SWīĹlĉĔ
Ōn = 12ō#) 3.68 pA # 12 'Ģ¨9SW
×lĉĔ(x¸Ą$9SWīĹlĉĔ(x¸Ą(]n6ü ß'ĉĔ(x»°6Ħąx»°)ĉĔ'3¸Ą(Ï u(Ō1/2 Rmaxō6` 3x³°ŌI0ō6ÂÜ$
ìx³°Ōphotons m-2ōÝĬ¸Ą( ŌpAōĐ
Ĭ(=VN'OYHJê¤u'©ĽÅ y = a(1  e-bx)[a :Rmaxb : ¤Å]6ô ĮiÎĎ1¸Ą(Ï u'&3Ë(x³°ŌI0ō6ä.(ČÕI0 (®u)9SW
×lĉĔŌn = 11ō#) 0.34 photons m-29SWīĹlĉĔ
Ōn = 12ō#) 2010 photons m-2 $& (ČÕ)9S
W×lĉĔ(+ 9SWĹlĉĔ'à*"Ĉ 5900 sx»°Ŋ $6ü" 3×lĉĔ)c'Í¾#ĹlĉĔ)c'É¾#w$ĥ54"
39SW(łáóò£ø'/($ĥ 3,9
SW(×lĉĔ)e(î02/»°Ŋ 4')9SW(ĉĔ( &%Ľp" 3$Ē 143ĩ Ē¨)÷ĝg'"3Ō­ō 1 9SW×lĉĔ(x¸ĄŌRmaxŎ39.0I0Ŏ0.31ōŌō 2 9SWīĹlĉĔ(x¸ĄŌRmaxŎ5.29I0Ŏ1640ō
 12ŎĐĬ)44(ìx³°'3¸ĄŌæ43
łæō( 6üÝĬ)ċıËļ# 2xì)Ëļ 1
ÿ(Ë` Ď)44ìx³°#Ĉ 10 ħĺ¸Ą6®/(|n)ìx(³°±łÚå$)
;VBĞ(Q9<YMPHJb'ĉĔ6±ĉĔė6æ43łæ6ħĺ3¿å($# 3d

69



)&



 Tsukuba Journal of Biology (2014)

/0

13, 70         2014 ,$)&5-3#)'+1"

4* %6,$ )&57  

82 !6,$ )(.7

³
ĆÓ!ĉ±
ĕ&ªëĞ7¯¾ö4¾ĕ 4čÔë%
gó$© 4ăċ (olfactory cell neuron) &1 %ă
ċ$ 1 üĹ%ĕ¯w (olfactory receptor) ñî4!
65 3ëĞ Ć4!$13ăċ ĵÜò»Ă ï4 čÔë &fĐò$İgïá7Ē lĹ#" &ÿÜk%Æñ¼ªëĞ7Ýkïá7Ē ĻĹ#"&Ýè¼ëĞľ9
ZRĨ#"Ŀ7¯4jïĹ 3İg /Ýk /ïá4;\`&
52jË7¯4! Ē÷þ$13Í
2 $5 
9ZRĨ¯$ 4ăċ %DAPasĦ
ÚØ%ěă&+6 # n&;\`ăċ
%9ZRĨ¯%oĄ,7Í2 $4ôò Ĵăċ
%ĵÜ»Ă 1(ĵÜòì¼$ėÒ7Ē

YeaGa7¸Àăċ$-70 mV 2+70 mV + 10
mV Ûıò$FMKWĵu7i ĵâ7Ęĩ 1&ĵu$²4ĵâ7ùĵu7gÌ4!fĥ¼%
ĵâ%¹$Äć¼%¦ĵâ Ė±5
%1 #fĥ¼%ĵâ!Äć¼%¦ĵâ$
i ĵ$²ïĵâ%§7WbKOI  V =eV7xÀľdata not shownĿĵâ%§&ĵ%gÌ$t£0 mV pģ Ue@$Ħ¹ä´+70 mV
ĵâ 0 $ģ ġĵu$&Ħ# ¦ĵâ&-40 mV pģ 2ĵ%gÌ!$£%!
2fĥ¼%ĵâ&ĵuz©¼ Na+ĵâ 3Äć¼%¦ĵâ&ĵuz©¼ K+ĵâ 4!Åæ54ćăċ$ 4»Ă$%ėÒ7ĒÐ¬ĺ&î ĤĒk 3ĆÓ%ěă(ĉ±$&Ö÷þñēr ¡4ÑÉ!ËÞ
 ëÖĊ 2ğ;\` (Cynops pyrrhogaster) 7ĳĲ
4!#yð+våļħ;\`7Êķ
2 {;<c (Ca2+Mg2+) free Ringer çJ]cSe$3đ!ķ7ú¬wĸºĪh &,7yðĽ¨ 2
3Ģ,75gó7Ķ¹57ÇÇ
gó&=ZI` ă ê$0.1 %C_BPeH7
8m{;<c free Ringer k$ú­å 10 ĬÈĈ
%¹ Ringer èã 3 `cFTFLeaUXKO
30~50ûUXKM:cA4!$1ăċ7Ĵ
%ÎÜß ăċ7¤#1 $à½
Ĵ
ăċ7-èã7Cc=PS`c A CeOĘĩðN:KD^$ 5'2ÈĈ¶$«õ¹N:KD^w7 Ringer ã ç57|ĀĸºĪFMeE$ęĈ ăċ 2%ĵÜDAPa%Ęĩ&
YeaGaTKJ@_cWÞ7ðĸºĪh ĒTKJð>_Fĵ×&micropipette puller (Sutter instrumentP-97) 7ðxĔĵ×$& K+ pipette solution 7~¢¬ĺ$&ĵ×ÃÂ
8ł15 *"%ĵ×7yðĸºĪ7%# 2ĵ×%ā7ăċ$ģ¹į7i ăċď!ĵ×7°õďÃÂ} ?><e[qg$#í¿ľ?>dDeaĿ·į0TaF7i 
ăċď$ý7īYeaGa7¸À YeaGaTKJ &ăċw7â54ĵâ%æ« Č4
YeaGa7¸À¹
-70 mV 2+70 mV+ 10 mV
FMKW%Ď ×TaF7i é #í¿ %;\`Ĵăċ%ĵÜòì¼7ĝ)+FMKWĵu7iĵuz©¼%»Ă7øĜ¹
ëĞ7UCFW`KL9e7ðÁiĵu«hľ-60 mVĿ %»Ă7ėÒ

70

n¹%µÏ
 Æñ¼%ëĞ%¯&
9NQaĨD@_eH ĭi4DAPaąĠ$1Ē654! Í2 $#4
9ZRĨ¯$&+#n¹&;\`
ăċ%9ZRĨ$²4»Ă%
ăċDAPasĦąĠ7Í
2 $4! ôÙ 4%.$9ZRĨ$²4ĵÜ»Ă 1(ĵÜòì¼$ėÒ7Ē
2$üĮ®
7xðÎ%¥$ÕĚ

Łŀ;\`Ĵăċ%ĵuz©¼ĵâ75 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 71         B98+A>%G20

4



 

-

2014 :3'(75(C"(5@ 1?

=/ *'D:3'( 75(CE  ,).$F'< !D:3'( 7#6&;Eo ÝÚ#íĜkeĜ Æ ä]gÞ0èÝÚ"ä]gÞ#õýPDO)¢Č(,/õýzÚ"EOIQ*éöcĖÚĐ "{á ¯Ì0hõýĜ"9GKA8S:LQ#zÚ!Å(Ěą ¥w0²
 ê#keĜ*õýĜ"9GKA8S:LQ!Ā0²
"çï#}ô et0)}õýÝÚ" íp"keĜä]gÞ0½, !.0âá
ĩòzÚ!Í
$}õýÝÚ!+.keĜõýĜä]gÞ"ċõ#½, !
/ /&!ê"çï"năçï!+-ġĕÏ.=4NH: v»!.ĠÚ0\v!æĘ.ăz ½, !/."ăz#=4NH:
í"`ke!f, "j0r÷Â.
Ĉę/ -{ÚĐ" ¬/. "e#½, # "+ ü¿ ,ê#=4NH:"keĜä]gÞ"Tñ0½, !.(!`ke"ăz0t¨.j"!åâĨ0ăÁºR»Î
=4NH:ĬParamecium caudatumĭ#ĪĂ"°rÑ0ÞħÇÔÕÑĬ1mM KCl1mM CaCl21mM Tris-HCl
pH7.4ĭÐ¦Ĩ!Þ=4NH: `ke!.j0·r.ąû,/."#ĠÚ!Ąðğ"ÈÃá u×.ÿßĕÏ.=4NH:!ěá!t¨/ÈÃu×0W .
#ģ."Ĩ#=4NH:"ġ!
F7B?@6;>SMS"µ±0Þěá ÈÃu×0W 
CS5S!=4NH:"£0Ď¹ÇÔÕÑ0o/µ±0ĒÈÃu×µ±"ĒĔ£0 .
!+-u×¤£0{ÈÃá u×0W ¦ÕÑ
Y"=4NH:#ė©qÜ!+-"ÕÑ ,ĞËÕÑ0bV!è{ġ"2@<3óÄ"2@<3ó#ıíĦ"ÑÖÇÔÖĊĨÖ ³.ĨÖ , .ıÑÖ##(ĢÞ­
=4NH:#ÇÔÖY!"'!o/ĊĨÖ!#ĊĨÑ0Ó/,"ÑÖ0³ĉXĨÖ Tùä³.ĨÖ÷ÂĬİĭ #(!:JSP"Y!=4NH:ĠÚ0o/ĠÚaē! .=4NH:"ĕÏăz0ćĠÚ0o/ã¦#
%1"=4NH: ĠÚ!ĄðĘª0èĠÚ0o/¸s.ğ!#ĠÚ!Ąð!ĠÚ"¯vĘª0èke Û/"ĘăzĬÙĄðĭ
0èke"w#¾Ĝ)!  + 30 sÀ /#năçï"÷Â0¶².
Ĭıĭ É!=4NH:ġ!ÈÃáu×0W ¦=4N
H:0-ĞÕÑ =4NH:"ăz!"+ yÂ071² 0ıÑÖ , .ĨÖĎ$
=4NH:0ĳįį|Įml o/ÈÃu×0W ¦"ÕÑ!=4NH:#
ď"ġ0è"÷Â#=4NH:0-Ğ
)=4NH: ÈÃu×0ÕÑY!ď"ġ0),yÂ .0èĬĲĭ ĊĨÑĎ¹¾"=4NH:"£0 "yÂ0Ď$=4NH:"ď"ġ#"£ ĩì¤ Ĭĳĭ ÈÃu×0W .¤=4NH:"ġ"ĝi!
Ď$ÈÃu×0W =4NH:"s¡!#ıÑÖĜl-#Ć,/ÈÃu×0W .µ±"Ē0İĮë!.=4NH:#ď"ġ0è+-¤È
Ãu×0x .
=4NH:"ď"ġ"£#d ĬĴĭ ÇÔÖĊĨÖ"=4NH:"ĕÏĔ£!Ď$/"ÑÖ)=4NH:"£ U .ĕÏĔ£ĊĨÑĎ¹¾"=4NH:"£ ĩ¾!#ÇÔÖY"=4NH:!Í$=4NH:"ĕÏĔ£ d Ĭĵĭ ÇÔÖĊĨÖ"à"=4NH:"Ęª"Ĥ£0Ď$
=4NH:#ÇÔÖ ,ĊĨÖ! ¾!Ęª0Ĥú!èĬÀĴįīĭT»ĊĨÖ ,ÇÔÖ!
=4NH:#Ęª0%1è&ĊĨÑĎ¹¾"=4NH:"ke¸ %
Ęª"Ĥ£ U¼=4NH:!ÈÃu×0W ÕÑ!.=4NH:"ď"ġ#àÝ.Ęª Z ~û ,/.û ^"Ĩ-UĘªĬÙĄðĭ#}ô et"ÝÚ ĠÚ"0[ĆĄðbv!Ę.\0è.
=4NH:#"ăzª!+-ĠÚ!Ąð.
ğ!Ý.õý"ÚÜá ´m0Ò,ġ"Ý"
þ«0U.û ,/."+ ÈÃu×!+,ÚÜáĠÚ"Ę#=4NH:keĜ"ä]gÞ!+. è/  "ċõ#½, # ^"Ĩ ,
=4NH:!ğ!ÈÃu×0W ÕÑ!
=4NH: ď"ġ0è è/ď"ġ#Z!ÕÑ"àÝ.Ęª!đ."ď"ġ#=4NH:"£ ĩ .!§¤ /,"÷Â#ĠÚ!Ąð=4NH: ÈÃáu×!ªf, "j0r
"j!`ke ăzª0đ.\0è.j"Êe#Ëāî.«Đ* ®á!gÞ.Ø ,{ÚĐ. [¬/.§ÕÑ"àÝ.=4NH:"Ęª#ÿß!ĕ
Ï.=4NH:"ĘªĬÙĄðĭ!ª.û ,/.¬/.{ÚĐ"e!#^¦"čĥ.
 =4NH: ġĠÚ0\v!æ
/0Ę
.ăz#
ğ!Ąð0öĨ=4NH: ,¦ø"ke!
.{ÚĐ0_9GKA8S:LQ0è.û,/.,*

 Tsukuba Journal of Biology (2014)4 70(



13, 72         2014 0(!,*!6)"'&53!-./! ,*!68  $#%92 70(! ,+18

KHB& NaĞ%6ëim' NaĞ9 NaCl &!S ¨!1KNO3 &!S ¨!1r¯!  C=KHB9 5 mM BaCl2 9t/e¿»%`76"5üýă¸9ë&m'Pą!'$č¨Ď à5üÈ6ýă¸&Ė2 à¨Ď'BaCl2 9
Ba(NO3) %ã¡Ě 1~k$ C=KHB9°½¾»4 20mM CaCl2 9t/e¿»%Õ"fĂă¸Ā&}gï47e¿»T& CaCl2 9rÀ
& Ca(NO3) 2 !ã¡ 6"C=KHB&ëim'CaCl2
T!ï471&",":#~84$ YQëim&ÃË$6¥×Ę&Á±đ<>N%6
C=KHB&ëim'%$6Đ<>N" Cl9É ¨"NO39É ¨!$Ć $&ßª'
C=KHB&ëim% 
Đ<>N'$ĕ91$"
7.!&õ9¢ 
6V4%Ë$6Đ
<>N×%1­ò&hª9ö+6î 6
 ²%
ç9ÿą$ ©±<>N" Ï476{kAKN%
6C=KHB&ëim9­ò
C=KHB9°½¾»
4{kAKNĜ10 mM, 20 mMĝ9t/e¿»%ÕC=KHB'e¿»T!ėê$ýă¸'Ò$10 Ô%ğvÖ&¦sù¡9Ò .NH4Cl 9t/¾»%C=KHB9`7ëim9ïC=KHB' NH4Cl 9t/e¿»T!°½¾»T"r¯&fĂă¸9à r¯%C=KHB9 KHPO4 9t/e¿»%`7¨&ëim9ö+!'e¿%[ KĞ%6ëimÈ6020 mM KCl &zq9ANFMOL" 10 mM
KHPO4 9t/e¿»!&m"³úC=KHB'
KHPO4 9t/e¿»%Õ" àÍ$ýă¸& "vùĄi9&fĂă¸%74&ëim' KCl&zq"r¯ýă¸& à¨Ď'éÐ _s Ġäġ Vv& Ě4
C=KHB'¤%Ù6đ<>N%³+
Đ<>N% ',":#Ù$ "8
C=K
HB&ă¸ëi'çĔ\%35d7
6"8
5
çĔ\'ç9W<>N&ÀjĊ"p×<>NDIN
GL&@OE;N?%35d7
67.!%Ï47
6çĔ\ÌÈ%ď86<>N×',":#đ<>N! 6&3 %
C=KHB&ëid%ċî$Á±đ<>N%

C=KHB¤$nÚ91"'C=KHB&È&
0%qÎÍÍ! 6P¦!C=KHBĐ<>N%ėê$m9Ò$ U '
Đ<>NçĔµÅ÷%ď8
$ U %øw617$  4%¯$<>N×%6ëim9ö+
C=KHB
1<>NnÚ& 9ñ§6î 6Ġ`ġ lÜåÈÂ&C=KHB']ì%¥x6â´%35ºÌ$ă¸ëi96
C=KHB&ă¸ëi'¯$Ê&e¿%35~k6"Ï47
6^ (fĂă¸T&C=
KHBĒÂ%*5ÜåfØĉb%±«e¿9n6"ºiĔ\%3 ZW7â´þùÈýă¸9ë 
&3 $ëim%35
C=KHB'È%ćÇ|9Ĉ
6"oæ%$6
¼¶%È6C=KHB%" »T&kÇ|'80 ċî$Ç|îw! 6
C=KHB'
KĞ2 Ca2+$#9'0"6»<>N"58đ<>NÀ
&~k% ėê$ëim9Ò"Ï475

74&m'ÈÆÍ$n±®9W È6 Ó'¶¬&lÛ$ÈÂÊ&Ç|" ċî$p×<>N9#&3 % n m6%
èu9 
7.!%p×đ<>N%6­ò%³+
Đ<>N&hª%ď6óû'$ & Ě!'c0%Ê&kÇ|"&Đ<>N&hª%
­ô4%íē$®ā91
<>N×2&Xp×<>NC=KHB&#&3 $ëim
9ø%
­ò
Ġ¦·ġ
 C=KHBĜParamecium caudatumĝ'J<ě&a»9Éyę Ě%É °½¾»&Ý' 1 mM KCl1
mM CaCl21 mM Tris-HClĜpH 7.4ĝ! 6C=KHB' 4&°½¾»! 4 v¹ 30 bYQ£ã Ě%É 
C=KHB&ëim' ]ėČR!ð
 VvÉ đ<>N' KĞNaĞCa2+Ba2+& 4 ×Ę! 6
77{kÂ"ÑkÂ9É&hª9³ú X% NH4ClKHPO4³úÍíē$©±<>N" {kAKN9Ĉ)C=KHB&ëi%6hª9ö+Ġßªġ
 7.!%
C=KHB'»T&đ<>N% ¯$ëim9Ò"Ï47
6 ĚÍ%'p×đ<>N'e¿9S 6¾»%{&!¾ñ60
đ<>N&À9l
Ä!~ 6"'!
%$6Đ<>N&À1~k
6"%$6»T& Cl&hª9ö+60e¿»T&
Cl9 NO3!ã¡ &hª9ö+ C=KHB9°½¾»Ĝ1mM KClĝ4 20mM KCl 9t/e¿»%Õ" àÍ$ýă¸Ā2%È&ýă¸' 3 30 ÔàC=KHB'Õi9[8$ vùĄi%Õë4%¨ĎÞ"C=KHB'á2%fĂă
¸%
e¿»T& 20mM KCl 9 20mM KNO3 %~r¯& Ě9ë "C=KHB' KCl 9É zq",-r¯&ëim9Òýă¸& à¨Ď' 3 30
Ô! ýă¸ĀvùĄi& à¨Ď%
1
~84$ C=KHB9°½¾»4 20mM NaCl 9t/e¿»%Õ"fĂă¸T%5ü¦sù¡6ëimÈC=72

20 Tsukuba Journal of Biology (2014) 13, 73        

3:$<6

)(4 ?8/#& 20&>@  +',Ö¥ÃÂ Ðr~æÀ#cYp"Ï 1% Ò,â.-,ÍÉ¿,"À¸#}ôÀ¸óÀ¸!f*-,ôÀ¸!#ß(óÀ¸!#°(Ôj"]S t%-,%ën!Pmo»b/ç!Û.-ÇË!)+Ðr~æÀ"ÁÀ!#í\ÂÝvºzÂÝv"U¢ òT , .  +
*!í\ÂÝv! #éÐr~æÀÕ/çGWAS "í\Âæ­!)+|"L;4í\ `ÜL;?1>H- , ¦'§j L;4í\"$ DISC1(Disrupted in
Schizophrenia 1) *-,DISC1 #;7>?KN@"Ð
r~æÀÕ ¹-( Î"í\Âá«!)+ÁÞí\+® =NE4èÄX_¼,q× Èu
- , ÇË#F? DISC1 /hÁ¹9J2:J2D3/¼ "Ûk("á«/Û ,
9J2:J2D3#"c6CIyxîg áå- +%F?"ñ!'|"Äs í\/ Æ*- ,*!ën"ÇË *9J2:J2D3"Ø DISC1 /Á¹,Ó(äÛk!¾ ¹-, £* !  9J2:J2D3" NMJ(Neuromuscular Junction)!
 DISC1 /Á¹,9AH;öÊ ³, .
 ,©ÇË# DISC1 ÄX_¼,L;4í\"·/ÃÂ{¾í\"'! DISC1 /Á¹9J2:J2D3!
" NMJ "/à á« 2014 8/#&20&>!%=&7;-A-*. 5?8/#& 21"9@3. ^¬Ù2 m 116-120 ¤ñ" 3 úÚ/ái[S"^/¼ ¬Ù
Primary Antibody
Mouse anti-Synaptotagmin 1 : 3
Secondary Antibody
anti-HRP FITC
1 : 50anti-mouse 633
1 : 504. à á«¬Ù8NHM/d¶µùð!
à 
eÅ/½aá«<G?Image J /¼  NMJ "9AH;
øw"öÊ/ã´Z"¨ ©ÇË#L;?1>H-í\" ÌQ¬Ù^R"'" *  ì0;4LOBN5/ÛZ#±+"`Üí\";4LOBN5/ê&ën"ÇË.
DISC1 ÄX_¼,í\! #"¯×(÷/ÇË V,ª¡¢²
1. {¾^"DKN;l
: mutant / mutant or mutant / balancer (III): w / w ; Sp / CyO Act-GFP ; Pr Dr / TM6B Ubi-GFP-w / Y ; + / CyO Act-GFP ; mutant / TM6B Ubi-GFP
2. {¾^ DISC1 "Wï{¾^"_
DISC1 in heterozygous mutant background: w / Y ; + / CyO Act-GFP ; mutant / TM6B Ubi-GFP
: w / w ; UAS-DISC1(CS10)6-6(II); tubP-GAL4 / TM6B ubi-GFP-w / w or w / Y ; + / UAS-DISC1(CS10)6-6(II); mutant / tubP-GAL4
Control
: w / Y ; + / CyO Act-GFP ; mutant / TM6B Ubi-GFP
: w/ w ; +(CS10) ; tubP-GAL4 / TM6B ubi-GFP

Figure 1. d¶µùð!),9J2:J2D3Ú" NMJ ½aanti-HRP(Ñ)anti-Synaptotagmin(õ)

-w / w or w / Y ; + / +(CS10) ; mutant / tubP-GAL4

73



97 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 74        :G%+I>H0J

NDISC1  Nrx-1

J @A!: 2014 D6*-97-K, 
CF?9=/

&4;B,LD6*-97-KM  2.3(N$"15#<LD6*-9'8)EMù¾_ÞÝ óċÛ$ug#ï 1%"ÜÛ/íæÚ«/c!ÛÒĆ+¬! #ğªÛÒ­ÉÌĒ! #ĞªÛÒ"x0/ÔĄĖjÝĄ#» ĝa/÷ -0/ 
ÜÛĕç#U8JBT"$ ÀĈ
¼/
đ
OG;KT]5HĖjĈÂĖjÝäé",.óċÛû¢Ėj ºYAG4FR0/!
*DISC1ĦDisrupted in Schizophrenia 1ħ$A<FGX^
H#óċÛÜî#ĖjÝĈÂ",.ą ĖjóċÛÜÛ"£¦Ģ|3*º#D^N9ČßflÖæñÜÕ3ċì/ w /¤äé
$?W6@W6M73ÖæñÜÕ+ĉ¯ö" /
DISC1 #Çú3ĈÂ L7#ü"OG DISC1 3£yÜÓ/
ö+âà"Ø Ó0/ ¼- "!/ óċÛ3$)íæÚ«$ăº#ĖjÝĄ ĝa/÷ -0 .
ăº#û¢ĖjĜ#ßflÖ3Ĉ¼
/©Ą /Áäé$óċÛYA9Ĝ#ĖjÝßflÖ3Ĉ¼/3ÞÝ"óċÛû¢Ėjz ´ /OGĖjß Ý!L7Ėj3YAG
4FRDISC1 ßflÖ/Ėj#A9Y`J^:3Ā?W6@W6M7#æñë¸ėĦNMJħ#¥®Ý}3³ÆDISC1 YA9Ėj#Ø NMJ ¥°" #,!¦Ģ3& ć -"¤äé#rĀäé",.ýěÛû¢Ėj#SV\:#% DISC1 £ĖjÝßflÖ3åNMJ "¥®Ý}3& ¼- "0
0$óċÛ#
ÜÛU8JBT"ýěÛ3$)/i#íæÚ«#YA9 ĝa/úª3å/2$ÁäéA9Y`J^:Ėj#Nrx-1ĦNeurexin-1ħ"áÞ?W6@W6M7 * Nrx-1 $ýěÛû¢Ėjã-0/OG NRXN1 #ß Ėj.
Nrx-1 Øk$öĠ ¡ č0/ 2 /Nrx-1 Øk#ć3Ďµ .''!íæÚ«#ÜÛÇ "vē/U8JBT3·/3Ċ(2Ĩ¶~_Ĉ{_²kÄþ ¶~ - 116−120 ½Ĝ§# 3 ĥÿ3Ĉ{sÙ²k3
mÖNMJ 3ÑØÝ"Äþ»Ë
1ĨĈÂÖØk#lĂ '
YA9oāĖj#Ø3*nk3EQZMX^=`îóµ2Øk3MX^A}
 È"L7#Äþk"OG DISC1 Ø t0/eĘØk3lĂDISC1 #ĖjÝßflÖ3ĈÂ/)#ØkmÖh§#¿
 -!/oāĖj#A9Y`J^:3Ĕ) ½"
ăº#Nrx-1 Øk"DISC1 3£yÜÓeĘØk"/ NMJ #¥®Ý}#ć3ôõ/Nrx-1 
DISC1 #ĖjÝßflÖ3ĈÂ/d/ÓÅ!
Nrx-1 #Øk3YAG4FRĈÂÖØk3lĂb/

3Ĩć_×qĈÂ vÏÎ[`>`ģ¨Ě=^RZ3¹¦×qĈÂCPG
ImageJ 3Ö NMJ #¥®Ý}3ćĈÂ$?IRAġè?IRAºďð#wº3Í
òÃ_÷
 L7#ê2 Äþk"OGDISC1 3£yÜÓ1?IRAġè Ì03ęÕDISC1 oāĖj#eĘØkÊĐòÃęÕ Å"?I
RAġè#Ì (-0 Neutral Type ?IRAġè
#Ì ±y0 Suppressor Type #ĩD5R"x
0DISC1  Nrx-1 #eĘØk$§ø"wĤ0 -Ħ:XPÐħDISC1  Nrx-1 ",/ĖjÝßfl
Ö ?IRA¥°ĕç"p÷ -0/7442 Tsukuba Journal of Biology (2014)0=

'13, 75        - C!/64>8





 

2014 :1%(42(C+BF579*? @&D:1%( 42(CE  ,).#F< AD:1%( 4"3$;E
.Û°?BFGJY=L!7 20ŊQLYAE?
BFHZň20EŋEnzo Ğŉ'Ö¦ðéÄ%&ĕs&á©
R\B"$7ÄÇ%µ`(4) üGJY\W;¹TG³ě ê<&ðé&Ģc£Þ/TG³ě ê<ą; 24 ÄĹÇ!®
ĸ&GJY\W .$?D!Ńē ðé;Ģ ĔÅ[óñr &ĈĖéä'ą 5ðé .7ą Ĳw%
ĕðé;İĝ71%'Ù°"(87Ô$äĪÙġ 5ňąŉ%lČ87" ķğ!7­Ì&÷þ 5Ù°" 'īu385;C\L7mRNA $#&ðéĨĂ 4ö58 7 é
Û|%  46ÑÊñ$Ïńv  %Ùġ 5lČ87& .&ÙġìÌ&Ïńv Õae&ðé%  #&4$ķğ°;2& % 'ÈģÂ$Ĵv &î%Ā 71%ú'ðééäñöĠ ĩ$A=
YEV>FV>O? Drosophila melanogasterňf_EV>F
V>O?ŉ;Ë½" Ùġ 5lČ87Ïń³v& 1 !7GJY\W%õó÷þ;ĝ
EV>FV>O?;0Áě%  GJY\W'ðéıû&įĝ;ĨĂ7G
JY=LSWUZ!7?BFGJY=L&xŅäĪ!7[1]
?BFGJY=L'ĕðé%¯Ł!7 
ĕ?BFGJY=L
é³% 7Ù°GJY\W&±Đ'8.!,"<#Òĥ8 $]¿!=?O? Musca domestica ;ëoĝ÷þ%  
GJY\W;¹ $³ě ê<&}ç ęi"  7[2]&ċÍ 5ġ&
GJY\WÏńå² &ðé%«ŀ;` 7" ù8
7Ê÷þ!'EV>FV>O?;ë &oĝ÷þ&s;tÒĥ
Ùġ 5*lČ87Ù°GJY\W&ĕðé 4)ĕ?BFGJY=Lé³% 7ķğ°;ĬþċÍ
TG³ě&ê»%ĺ '?Db&CXGJY\W&Æâ%4 ę¥'Ġ58$ ]¿!}ç%ĺ 'zñ$¥ Ġ58CXGJY\W;` TG³ě&ê<ą&}ç' 90%x¬! CXGJY\W;`$TG³ě&ê<ą&}ç'c£¬ 2 ÀófĻ!
10%f_!CXGJY\W;`$TG³ě ê<c£¬ 3~5
À&ą&ĕðéıû;Ģ "9
ĕ°ė×;ùĕňN = 315ŉ&Ć 40%'?BFGJY=Lé³ĵćĳg&ÿãíÐ"Ķhª²í¦;ù85&ĕ% 20E ;µ`7"%4 ª²í¦;ùĕ&y'ß¢
&ċÍ'Ùġ 5%lČ87GJY\W'ĕðéıû
% 7?BFGJY=Lé³%ķğ!7";ù7.ú' üGJY\W;~v%` TG³ě ê<
ą;iGJY\Wè!Ńē&¬&ðéıû;Ĩ+&ċÍ}¬%GJY\W;~v%¹ $%2:5]Ĵ&nj 2 Ň§ě.!įĝ5%]Ĵ'Ĝ3³ě.!įĝ7" Â5 %$&ċÍ'Ùġ
5lČ87GJY\W'&ðé;ĕðéıûfĻ% 
27û©mĦ7";ù7¿Ú(1) ?D&ĨĞ"EV>FV>O?&ŃēÊ÷þ!'
TG³ě%` 7?Db&GJY\Wĸ;ºk
7" ķğ"$7!ú'®ĸ&GJY\W .$ĵÙĄÉňSigma Yeast Autolysateŉ[3]!k?D 4)
8%GJY\W;Ý{?D;ņ%ëđ}ô¬&TG³ě;ľ1]&GJY\Wĸ;Æ?D ¹ł!$è!Èc£å²&.. 7 ÀĹŃē¬@G"c£ą&;1c£¬2GJY\Wè'č·G
JY\W" CXGJY\W 4) 7ŊKQLYCXGJY\Wň82 Sigma Ğŉ.Ď6ĵÙ%88;Ü2&;ë
(2)ê»}ç&Ĥà@G"&c£¬ 24 ÄĹÇ!ą;88&?
D!ŃēTG³ě&ê»;Ĥà¸¬ 24 ÄĹf^Ċ5}§ě&»;Ĥà}ç;Ĥā(3)ĕ&ðéØļ&Ģc£Þ/TG% 3 ÄĹê ą;&ą%¡ ¶FasIII UNBY\MW¶j7G10ňDevelopmental
Studies Hybridoma Bank 46q´ŉ%47pïĉď}ÎĘ;ĝFasIII "'^òÓĮ%¤7IZPBĪ!7[4]
8%46ĕ&ªĢ ;Ã%
ĕ&ðéØļ&y;ĤàĒd&ċÍ 5Ùġ 5*"lČ87CXGJY\W?BFGJY=L&Ë½"$6ĕðé;įĝ7&%¯ğ!
7"Ē 587d¬'CXGJY\W;` ³ě"`
$³ě&88 ê<ą%
Ľ%#&û©&C
XGJY\W Ěý 7& ;Ĩ+7¯ğ 7.d&ú&÷þ 5EV>FV>O?'Ùġ 5l
Č87GJY\W&/!
ĕðé&/$5}¬&ðé;2
7û©įĝ7" øħ8&"'Ù°" &Ïń'ðéıû;ĭ ¨ă$ðéØļ%«ŀ;-";ù 7&ðĠ'Ù°&¾$]Ŀ;Â5%2&!6ðééäñ%ķğ!7Ē¼æ
[1] Spindler et al. (2009) Cell Mol Life Sci 66: 3837-3850.
[2] Monroe R.E. (1959) Nature 4697: 1213.
[3] Carvalho et al. (2010) Development 137: 3675-3685.
[4] Patel et al. (1987) Cell 48: 975-988

75

,*

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13 C. elegans "$5( ;13, 76         S-6-70 2014 .)!,*!:

8'4

<.)!,*!:=  %#&>2 9<.)!,+/=ĴïmĚę Ù [S9¥.,#:$+!(Ď(ĘĔ#Øş!|ŉ(ŇĤ1ÕÅÔ(ĭÝ&Ċš! 5ĔēĈÔĎŌ#!JQk>Taiel2Ĝ36! 5JQk>Taiel)GjJQkni9Ęöæ#!ü %ŚĦ&25µăţÓ9Ī!Ĕ¢Ø65òőĞÚÄ5ĝġ¿& !
EiMOAl-S-ŏğŚĦŭGSTŮ\;chn&Ä5¹
Noppera-bo ëĺJQk>TaielĔ¢Ø&ÒŨ(ŚĦ#!¤½61GST )EiMOAl#
Sh`^OT
9®Ō&{5ĈÔ9Ý ŚĦ" 4ëĺ"%©uĎ(JQk>TaielĔ¢ØŕĠ& !0¬ÔtŠ(ĔØ&šr5#¯¦6! 52oèŕ 10 ÆŠ(ĝġ3JQk>TaielĔ¢Ø&
š85ŚĦ\;chn(µ)
ĎĖ9œ!œ! 5#ì3&6! 5(#3Ğ)GST \;chn0ĎĖ"º6!4ëĺ#©uĎ}´(Ď& !
0JQk>TaielĔ¢ØŕĠ&šr5#¡ĶÔ&š
Ñ9Ý"Ğ)įĺ Caenorhabditis elegans 9¾ū
öæ#!įĺJQk>Taiel" 5N\;Dklś
(DA(Ĕ¢ØĪō&0GSTšr5(9ŒĆŭ«1ŮĻĝġ& !DA )įĺ(Â¨&šr5#Ĝ36! 5- DA &25Â¨(Ð& !)ĔĂĨĵĥ(ĩİŜĿ%šr95#¯¦6! 53][4]ĔĂĨĵ9·įĺ)ŝĔ­#ĄŐ!Â¨(Êŀ365(Ê) DA Ĕ¢ØĪō"Ř¹9ÿá5#Ûĉ65 Ļĝġ(īù)ĔĂĨĵ3(Â¨ÊH
EUi(ùįĺ"Ĕ¢Ø65 DA 9ÒĿ#5#9Ö§5Ğ)(w¾9Ŏ-  5ď½( gst Ř¹(þĶ9q#&ĔĂĨĵ9·įĺ(Â¨(ÊÛĉ66*( gst Ř¹ DA (Ĕ¢ØĪō&š85ĽŘ¹#Ń 5#Ĳ "ŢċÉq"ĔĂĸĀÅ&ĘĔ"% ĥĬ" 5ċÉ× Ô³ėú glp-1(ts) 9ĕ DA
ºę%Â¨(ŇĤ&Ìŧ9r 5 gst Ř¹(JDhnVl
E9Ļ
öæmèć
(1)RNAi ē RNAi (ņÃ&)įĺ¾ū"Èĕ 36! 5\=nR=lE RNAi ć9ĕ5RNAi (MnFPSŘ¹9ŗÜ5Ť&]nSJSgP^ć&2!Hf?If?Y@#[S
!įĺ(GST MlZDŌ(<cXśř"ĥĬý9Ø#7ìě%AnLkEº¬%"Ğ)
DA Ĕ¢ØĪō&š85 gst Ř¹(Ľ9àħ5/&+!(įĺ gst Ř¹9Áŋ#Įıę%ļĒ­łø9Ļ
#&įĺFXd&º¬5 49 ( gst Ř¹( 
34 (Ř¹&Á5xŜŞ RNA ĘĒĕ^gJcT)õ»
TARA KlMn(Ċąí£ãß3r  ā4 15 76(Ř¹( 12 (Ř¹&Á5xŜŞ RNA ^gJcT)ç&ľxŜŞ RNA 9ĘĒ5/(¶ķĹú#!HT115 9ĕ (2)Â¨Č½
įĺ9¤ŇēÎ46 ( gst Ř¹&Á5xŜŞ
RNA ^gJcT9Ã66( HT115 9Ampicilin# IPTG 9  LB ^jnS(ļŦ&°4
(p" glp-1(ts)9ůŬÇĺ3Ūĳ(ŤŢċÉ" 5 25" 36îŠŪĳÎ20" 15 îŠŪĳ!Øĺ&2 ê& 1 ªĔºä9B?lSWCQ=]GlSkni#!Ģ_DMnŭL4440ŮÃ¶ķĹ9âũ glp-1(ts) (Â¨9Č½
bIQ=]GlSkni#!)DA Ĕ¢ØŚĦŘ¹
daf-9 &Á5 RNAi 9ņÃ glp-1(ts) (Â¨9Č½īùmĲÀ įĺ(ĔºĪō9 RNAi "(Â¨<PK>)sĖ"0-4 % yªĞ)Â¨<PK>&Ŗ÷~9ûŅRNAi ē9¸/5M>clE9 1 ŬÇĺ3#Ĭo5#"
ťÅ&¼½ĒÔ(2 Â¨ðįÏ365#9ì
3&!įĺ(FXd&º¬5Đģ 49 (
gst Ř¹( 46 ( gst Ř¹&š5Â¨<PK>9¾
éDA Ĕ¢ØĪō&š85ó%ĽŘ¹9ŀ
(z&ŀ daf-9 (þĶq#Þ)ė%5þĶq&2!Â¨&³ŀ36 gst Ř¹#&yÎñ%5ûń9Ŝ'5v½" 5 yª DA Ĕ¢ØĪō&š85ó%ĽŘ¹Ï36
#&24JQk>TaielĔ¢ØĪō& !GST \;chn0ĎĖ9œ!Ŕę&º6! 5#ËôÍ65-Ğ(ĝġØù)JQk>TaielĔ¢Ø&š
85ŚĦ\;chn(ç%ŔęºÔ9ì3&Ĕ"þĶ5aiel(þĶ#Ŕ&Áç%Łč9r 50
(" 5
Ĳåđ
[1] ±Ŋ(2012) ²ňå[2] Johansson et al. (2001) J. Biol. Chem., 276, 33061-33065[3] Hsin et al. (1999) Nature, 399, 362-366[4] Rottiers et al. (2006) Dev. Cell, 10, 473–482[5] Fraser et al. (2000) Nature, 408, 325–330« 1. N\;DklśŭDAŮĔ¢ØĪō,*

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 77        

Large Maf 4= MafB 8+-/>&





 

2014 1(,*?

:D7'35

%6<#9) 0;A1( ,*?B  !C@$ "A1( .2BčÃTðï bÀÀÇ! /üëªĊ¼#þ 250 Wa÷¡ęø*-0/üë#\! 1  2 !s-000"|#1 #mêÐ !,/đĀď"ôTÛ2 
#5S>OSs×+±¯©!Ĳ1/ė¼"ĩg!ČÜ+>BQ>æÚĈ­ú"åĘ x1/0/ª
Ċ¼# 2  kï!Öí#Ĺ^íØĦzí
Ø!x Ï ĂĔüĳXē5S>OSÙÂ!đöÍ ç-0/ hp"Ĕülá¬!¨5S>
OSį"Ġû2Ī -ħt!ĕ #ķ'öÍ*³Ą~¨ ÑÝ .
Öí»"i Ô0/äá/ Çóù#Large Maf ćģq" 1 / Mafb !ò
ðMafb #Ï āĆîä/ ps×Āďs{! *ĭĘ ¤w2ÌĀď£®! # - ĩg"ļ/"Āď"s{®ßK8C?J#Æo!#s  -ěÁ ĥ)$üëÖíØİî!ą /Đ© /0'"ěË!,.oĢ©" Mafb ĩgÑºI6># Ķ!,.æ¥¼ÂıÓ_/^ Á- !
 .®â! / Mafb ĩg"ÐĐěË#ķÇóù#®â! /ĀďÐĐ"ěË2ĕ )!Mafb 2đĀďàéï!Ñº/ÉfcĩgÑºI6>"jĖ2ĝ(ăÌ PCR Ø!,
9KNI6>ĮæI6>"F1 Zd!floxed Mafb ĩg2Ä/^2õğæÕýu&"öĕ2õğ-!" F1 I6>2 ES Āď"Ĩ°"ĵ!çD7I5=Sċ©ĩg2Ĵ}/)!Flpe I6>`ī/^F2 Zd2jĖD7I5=Sċ©ĩgĴ}
F2 Zd#D7I5=Sċ©ĩg"ÑºD7I5=Sċ
©ĩgĴ}")!¶n Flp ĩg floxed Mafb
"õğ!,G@RI6> (Flox/+I6>)/2õğ-!flox/+; Ayu1-Cre I6>2jĖMafb ĩgÑº4OPàéï PCR !,Mafb ĩg G@R¸©/^2õğloxP īu Äy! Cre ā¹ Ĭÿ!,/ğġ2/ Á-  ä-!G@RI6>"`ī2ĕ floxed allele 2HL´I6>(flox/fox I6>)2jĖ[/ V¿Āďàéï! Cre ā¹ Ĭÿ2îäĐ
Ins1-Cre I6>flox/+I6>2`ī/^
flox/+; Ins1-Cre
I6>2¦

È½T¿Ø(1)9KNI6>"jĖñā(¹ !,Mafb ĩgĸ2 loxP īuµ3ĩg» ES ĀďĺC57BL/6J I6>èÊĻ2jĖ" ES Āď ICR I6>" 8 ĀďÅĎ"4:O;U=MS9KNĎ2jĖ"¥eĚ"!ö
Í(2)flox/+I6>"jĖ¦-09KNI6>2ĮæC57BL/6
I6>`ī/æÕýu&"öĕ2õğflox/+I
6>"jĖ2ĕ"¥Flpe I6>`īD7I5=Sċ©ĩg"·Ĵ2ĕ(3)Cre ā¹ Ĭÿ!,/ flox Mafb 4OP"t.r¦-0
flox/+I6>" floxed Mafb 4OP Cre ā¹ Ĭÿ!,Äy!t.r0/ õğ2ĕflox/+; Ayu1-Cre I6>2
jĖI6>;EJ2²rMafB Ñº4OP2àéï!ğġ
Đ FN5IU2ç PCR 2ĕMafb ĩg Ñº/ v2ĕ(4) flox/+; Ins1-Cre I6>"jĖV¿Āďàéï! Creā¹ Ĭÿ2îäĐ Ins1-Cre I6> flox/+I6>2`ī/Āďàéï Mafb ĩgÑºI6> yãĒ¦-0/`ī!§Ę I6>2ç«
0-"I6>`ī!#o C57BL/6J I6>2ç'`īæ'0I6>#PCR !,ĩg"v2ĕĞ¢/*""(2Ò"`ī!çĉ F1 I6>"ěË -» ES Āď#æÕýu!öĕ.D7I5=Sċ©ĩg"Ĵ}*Đ -
flox/flox I6>"jĖĐ ^ õ Flox/+;Ayu1-Cre I6>"ěË -¶n loxP īu#Cre Ĭÿ!ħt!ğġt¾2 .A<5SĤ.!ÐĐ/Á-  b¥flox/flox I6> ,% flox/+; Ins1-Cre
I6>"`ī2ĕĀďàéï MafB ĩgÑºI6>2¦/]/ 0'"oĢ© Mafb ĩgÑºI6>"ěË!,
Mafb ĩg Āďs{!ĭĘ ¤w2Ä/^ Á- /b¥Āďàéï Mafb ĩgÑºI6>"ěË
2ĕ ^Āď®ß&"ĲY'üëîì"ÄÞ2ÎĜ
/

77

"!

 Tsukuba Journal of Biology (2014)/$
 0%13, 78         2014 %

"!.

)(+-*' Elovl6  "!.1  2, 0% #&1

2. ĕÙMYWaDa%Û7ŉ9 ĬŇ% flox -' MKO T6B(Ŀľg¾) ìó¶ĕ3
Ė ©.1{ĕ.ĕÙ3ŀĕ÷x`TG`ý?\B
F]a[(T-Cho)`HDL ?\BF]a[(HDL-Cho)`GOT`GPT%Û(zøĔ:EH)3ĖĆÅ-'ëê
ħ¦ä×ÿ±ç®āº&%bĩ3"/Á¬$
Ç #kĺ`ÕèÖÔ*.1 0ä×ÿ±ç%$5^
BZ^µ´­ę.1
%!&Ĉą%ĭēñ$-0ĈąÒ­§Ĵ!#/
5^BZ^@=J[3Ļ0!Ā.1 01.%!.+ä×ÿ±ç%¹$&ēñ
0ĈĢ% ĳ %íë1ĈĢ% Ģ %
$& (/íë1#Èîò &ĈąıHZ=ZCZI(TG)?\BF]a[(Cho)%²3ª0Ħ}
0 Sterol regulatory
element-binding protein (SREBP)%ÐêĮr!Ĉąıtķİù Elongation of very long chain fatty acids member6(Elovl6) 3<]aK^=ÈİùÞùº 12-16 %ń`bweńĈąı3Ģ!0ķĵĈąıt¨İù/Þùº
18 qc%ķĵĈąı%²$ĲĘ#ZSA7KE<İù
0!3Â.$[ 1 ]  Elovl6 {ĥÑ·T6B%vė`ěÊ$-/Ñ·T6
B &Þùº 16 qd%Ĉąı%Þùº 18 qc%Ĉąı%Ú£eń/ńĈąıÓ%#"Ï#Ĉąıú²%ę.1%üË8L[;apĠĹīĮr%éâŃlġđ,ĄÜXG[T6B ( ob/ob T6B) !%mį$-/ĄÜ,Ĉąăä0ď#Ă÷ć`5^BZ^°­ð10!3Â.$[ 2 ] ăĎàæê Elovl6 Ñ·T6B%vė`ěÊ$-/Ñ·T6B &Þùº 16 qd%
Ĉąı%Þùº 18 qc%Ĉąı%Ú£#"Ĉąıú²%&ę.10
Ńlġđ$-05^BZ^µ´­%¹ð1# !.n%úþ$0 Elovl6 %y5^BZ^µ´­%¹$Ĺ2 0ć­ð1 Èîò &5^BZ^µ´­$Ĺ20i#úþ%ċ`ăĎ`ņÍô%h +ņÍô$íëņÍô$0
Elovl6 %y3ěÂ0!3ëê!ěÊ3Ė

3. 5^BZ^ġđĞŅ û=[?aBġđĞŅ
 8ŉ10 ĬŇ%flox -'MKO T6B(Ŀľg¾)$5^BZ^3čČ|³f0, 15, 30, 60, 90, 120 $¤Łĉ.ĕØ3¶öÃĕ÷Û Û3Ė
12 ĬŇ% flox -' MKO T6B(Ŀľg¾)$=[?aB
3û³f0, 15, 30, 60, 90, 120  ìó¶ĕ3Ė ©.
1ĕÙ3å  2 !Ï$ĕ÷x3Û
4. ]aD]EIFBH H\EIU[FBH 8 ĬŇ% flox -' MKO T6B(Ŀľg¾)3Ī0]E
I%c$jĒd0( %Äĸ3Û13 1 ĞĖ!1 À 3 ĞĖ3 3 ÀĸĖ Ĝ 9 ĞĖ%Û3Ė8ŉ10 ĬŇ%flox -'MKO T6B(Ŀľg¾)3Ī0
Q[H?^Q4%c$j
BNaI$Ĩ o##0( %Äĸ3Û
ģĖĤŀ3õ~ľ$Ĺ& 16 ĬŇ% flox
-' MKO T6B +Û3ĖüË-'Ā¡1. ĕÙÛ-'çãĝ½.+Elovl6$-0ôĽ&ïğ
1Ň$s ôĽ+ïğ1#
2. Ŀľg¾%{%ĕÙMYWaDa$  floxMKO T6Bĸ Ç¯¥&ïğ1#(t ÎÖ$-0)
3. `Ŀľg¾%{%ÛÄĸ$  floxMKO T6Bĸ Ç¯¥&ïğ1#(t ÎÖ$-0)

É¼-'¾Ö
T6B
 Human alpha skeletal actin (Acta1) 3O]XaDa!
Cre recombinase 3éâ0 Acta1-Cre Tg T6B! Elovl6
floxed T6B3mįņÍôàæê$ Elovl6 Ñ·
Elovl6 flox / flox, Acta1-Cre+/ňT6B(qļ MKO T6B)3vė%¢ß!Elovl6 flox / flox, Acta1-Creň/ňT6B(qļflox T6B)3å Ņ3Ė

4. Ŀľg¾%{%ĞĖ$  floxMKO T6Bĸ Ç¯¥&ïğ1#(t ÎÖ$-0)
3. Ŀľg¾%ģĖĤŀ$  floxMKO T6Bĸ Ç¯¥&ïğ1#(t ÎÖ$-0)
1.%!.ņÍô$  Elovl6 Ĺf 0ć­&u !ð1n%úþ % Elovl6 %yĲĘ
0!Ā.10

1. Elovl6 $-0ôĽ%ïğ
6 ĬŇ-' 6 _ÆŇ% flox -' MKO T6B(Ŀľg¾)
ìó¶ĕ3Ė ©.1{ĕ.ĕÙ3ŀ CPK Û(
IY5>V)3ĖľT6B%)ěĊņô3¸~R[TZ^ÝØ PTH:@Z^`89A^ÌĐ(HE ÌĐ)3¿ł«Ķ Ě¡3Ė§å»á
[1] Matsuzaka et al. (2002) J Lipid Res. 43:911-920[2] Matsuzaka et al. (2007) Nat Med. 13:1193-1202

78

!

 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 79         2014 &!

,( live imaging $#)+*% -& !

,.  / -& "'.
#Ę» 2 mm $ģ (Cranial window)7ĕŗ$ 200~400µm (ħ 2/3 ¶) ŧw$O[c`a 9EM`B:M7­4
.#9EM`B:MćĒĔVc<c4łŀĭ(sulforhodamine 101, SR101)
Ca2+ Ç  Ã ŀ ĭ (oregon
green-488 BAPTA-1 AM, OGB1)7©ĻØĕŗdòšū#¿ŬûCranial window 7<Qc=\Eŉ
1-2. Ca2+ÇÃ8&ŗV;EźŁſ#Ę» 0.2 mm $ģ7©ĻØĕŗ$100~400 µm $ŧw#Ca2+ÇÃ8&ŗƂGCaMP5Gƃ
7ēċ49LPŵu;:^E(AAV-EF1α-GCaMP5G)7¿
ŬûEEG/EMG Îń7ŃV;E$¾ ;:^E$ēċãŲ7ĶÊÎń¼ 2 ŠŲqeįţV;E7ď1-1 î# Cranial window 7{Íĸß ėĔ Ěę%)$Ć#Ŋ254ÞŢĔ"ĎčċŖ3
Śy$sÄ$-"2ŐË$ºÍ0ğįĬ$ðĺ$ĲÑ#/ų64Ğ54 $ðĺĔÆĵ0êåĔ"Y<
OFX%|ąäŎÛ"Ą ¨ċ¡ĕŗf#´¡4Ěęb
Ōũ$ŕĩ#ųh4ğįé$ðĺ%Û2 #"34/
$$52$ğįé$O[c`a$Ð²3Ěę$ēĎň/3á©$Ėķ/4©ĻØĕŗ# 4ĚęŌ
ũ#u ğįü%gÛ",,4
//Ěę%©Ļĕŗ$ğįü7Ü4Ļú#13­ĵ5 3
$Ļú#1
3Ļ$ĈÈ%Ōũrapid eye movement (REM)Ěęnon-REM(NREM)Ěę#Ž54
Ěę %z
 êĂĔ"Ż$Ŏø#%ĚębŌũ#u ©ĻØĕŗ$ğįü7œĮ#ŕ)4Áňgñ4ĚębŌũ%Ļy$ĈÈťġ3¨Ö$O[c`a$Ò4
ľ7ÝŏĀ4Áň 42#©ĻØĕŗ%¨Ģ¨î"O[c`a ¶íş7ÍŷO[c`aĮĹ49EM`B:M/¨«¡4
$.ěĤ#%G^H:T$­ ņÖ$ĮĹ$ÝŐŮ Áň4 Ěę%ƁŨ %vŷ"4/$3Ľą"Ěę ŌũB:>^ŏĀ7Ń â,l®ƁŨf%ğįü REM/NREM Ěę$ć
À7/ĽąĈÈ$Ěę %©Ē"4
5#/ų62©ĻØĕŗ$ğįü$ěĤ%ƁŨf$/$ * 8!3
Ľą"ĚęÝ# 4·Ī$©ĻØĕŗ$G^H:T7­ĈÈ$ğįü$ŐŮ%5,#¥ "åěĤ%mªřż¿ůf$V;E$Ľą"ĚębŌũ7®ċĻú/ĨŶ7ÝĀ­" 2Ľą"ĚęÝ$O[c`a 9EM`B:M$ü7ł Ca2+:YcDa?
#1ō°4 7ĺ 4ĉĽ$ŏĀCEKX$Ħe7ėĔ mªřż¿ů%ŰúŰ$ŝŘ§7ď
4.ĮĹ($IYcD7śþ,ĮĹ7íÍ48&ŗ0÷#14 ³".ĕŗý¶,x}Ň xöÃærŰÝŲō°44
2#ŦtªAcN¢
2+
ł Ca :aD@cHc7Óď4 G^H:T7­ in vivo $ü7]9^H:X:YcDa?4ĺ4åěĤ%527ďĽąĚęÝ'ŌũÝ$ĕ
ŗ$ü7ƀī¸:YcDa?ěĤÎù
1. Cranial window ' EEG/EMG Îń
1-1. Ca2+ÇÃŀĭĚęŌũ$×¤ă "4Ļú/ĨŶ(EEG/EMG)Ā­7
Ń .ūĎ¢V;E(C57BL/6J)$źĕ7 űĜļ#
EEG ďŶì7ŸŧĨ# EMG ďŶì73p2#mªřż¿ůfźŧ7 ­4.$UJNT_cM7
źŁſ#őĳ$V;E7ČºM_JNW^e 1 Ú 6
ÝŲ 1 ŠŲ#ÿÉ2M_JNW^eĽąĈÈ#ŝĚę7ō°41 #ō°Ú#ôĠďN]^źŁſ

2. Ca2+ imaging
 Ca2+ÇÃŀĭ7û,% Ca2+ÇÃ8&ŗ7ēċV;E7mªřż¿ůf$ČºM_JNW^#j
U
JNT_cMźŧ7 ­EEG/EMG $Ŷì7Ā­ð#Ôı¼©ĻØĕŗħ 2/3 ¶7mª:YcDa?
EEG/EMG/#O[c`a 9EM`B:M$OGB1'
GCaMP5G $ł¹¸7įÝŐŮü7ZOHcİè®žĬ$ĝŔ$.ŭyĮĹ# YFP ēċŦtªÕ¦
V;E Thy1-YFP V;E$ĕŗ$ŌũÝ$mª:YcDa?
7ŃŅ¶$ïĈĥř0ER:a©ĻØĕŗ 5 ¶$ĮĹy łō°©"ÌÂŋūS_/*+Ŋ25"
ò# SR101
OGB1 $ÝûV;E$mª:Y
cDa?7Ń9EM`B:M O[c`a7 SR101 Û
ĝ#4ç OGB1 $3Ŝ-Ċ Å Ż 2# AAV û#14 GCaMP5G $O[c`a$ Ca2+:YcDa?7ŃOGB1 Ē"3ĮĹy"¿Įíş#,ł8&ŗ7āç4.O[c`a$ïĈĥř$ Ca2+¦ ō°ĺ "
Ķ° µâ
åěĤ%iđ#Ž7Ŋ"ŏĀĬ$Ħe#¨$ÝŲ7ÏńĔŻ±Ć_aFf$Ľą"Ěę Ōũ$®ċ7ČºM_JNW^$Óď#13ŤÍŌũÝ#/ų62ŋūS_$³"ƀīĮ$Đ~7½4

OGB1 û#ų%ûÙù7ÕĊĿĮĹ7ō°
4Áň 4AAV-EF1α-GCaMP5G %ûŹ£$ĮĹ#
ŷćĒĔ#,3#ƀ¯#ēċ, .
ĮĹy7óĝ#ë"Ż n¼%T`ZcH7 synapsin 0
CaMKIIα #¦à AAV 7ŒŃ4ċĈ%ŌũÝ$ğįü
7ĝŔõŴ3
n¼%Ľą"ĚęÝ$ğįü7ō°4k­4O[c`a 9EM`B:MŭyĮĹ o¡ğį"!¨Ģ¨î"ĮĹĴ$ü Ōũ~NREM Ěę~REMĚę  ĻĈÈ$ťġÝ#!$1 #¦4 7œĮ#¬ŏĀ©ĻØĕŗ# 4Ěę$ŪňÃ#Ş4

79



('





 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 80        Allergy Inhibitory Receptor (Allergin-1)

 

2014 ,%('3+./

$01"

#)4,%('35  !6&24,%*-5sĆğ 2 ³ç 70%5 ³ç 100%!ğÍ2k0¸ 7 ³ç ñ÷2v!ñ÷2 BMDCs 
00!L8BÞ»! BMDCs 2© CD11c ©c¾þĆø2JSV?7FNFPVÉ2Ý¿ă
HDM 100 µg/ml'" LPS 1 µg/ml oÓ 16 ¶ĖğBMDCs !ğXÏ[ ÜÛ0Ôã?7F97T
ĥTNFIL-6Ħ!ÜÛĕ2 ELISA É2ÝÐĔÛL
8B ,$ Allergin-1 ĐbÄ°L8BÞ»! BMDCs/Ôã?7F97TÜÛø2ÆĈ
2ħc-Kit !äÙ!ÆĈ
1ħzÀ ĆĔÛL8B ,$ Allergin-1 ĐbÄ
°L8BÞ»! BMDCs 2 HDM 100 µg/ml'" LPS 1µg/ml oÓ14 ¶Ėğñ÷
/ñ÷ĀĜX!
c-Kit !äÙ2JSV?7FNFPVÉ ,.Ă¼
ò½
1ħAllergin-1 ĐbÄ°L8B ,$ĔÛL8BÞ»!
BMDCs " CD11c+ñ÷ *, 70%.ĆqØ" 0-!ñ÷2 LPS '" HDM oÓĚ! TNFIL-6 !ÜÛø"00]Č ÜÛĕ"TNFIL-6 * Allergin-1 ĐbÄ°L8B!² ĔÛ!
L8B Æ&¹¤ ]Č2ħÙ Ă¼[ôºHDM'" LPS oÓ  Allergin-1 ĐbÄ°L8BÞ»! BMDCs ĔÛL8BÞ»! BMDCs Æ&Ôã
?7F97T/ TNFIL-6 !ÜÛ2]ČÔã?
7F97T"âtc ÌÒĚ Û/ÛcĘu/Ôãu2fČ/ñ÷Ė!£bď ė1/3# ć!W/Â×ñ÷!Ê2ê¬ÁÔã?7F
97T!ÜÛ2]Č/ |0/!)!
ò½" Allergin-1 BMDCs !Ê2§n/2ê/
HDM oÓ"Â×ñ÷c-Kit !P:TG/SCF !äÙ2fČ/ |0 .c-Kit -!@>
HQ" IL-6 !mÈ2fČ/' IL-6 " Th2 í2fČ/+c-Kit ß2«L8B"ĔÛ!L8B Æ&
HDM oÓ ,/Th2ms §n0/*|0 .
Â×ñ÷X! c-Kit " T ñ÷í!n ēā/ĥKrishnamoorthy N et al. Nat Med 2008Ħ?7F97TÜÛø!ÆĈ!Ġ - Allergin-1 IL-6 !Ü
Û2§n/ ê0c-Kit " IL-6 !ÜÛ2fČ/ - Allergin-1 " c-Kit !äÙ* " c-Kit -!@>HQ §nå h !" ®Ð0/!
)HDM ,$ LPS oÓ ,/ Allergin-1 ĐbÄ°L8
BĔÛ!L8BÞ»! BMDCs X! c-Kit !äÙ2ÆĈ¿ă/\/ö·Uçå "¦åÇĎÔãÇËnęÇĎč±!]Č2â¥!æäd!}{ěģ~!}{ã×2ó.Ċá¡!.ēã!¢"Å ü/*/ !â¥ ėċ/" 1/ Ö 5RQ<Vu ,/ "Wýå/5RQ<Vu " T ñ÷ Î ė1 .
5RQ<V! "©t¯êñ÷ H
7VK T ñ÷ ©t2¯ê/ ,.Th2 ñ÷ ms/ ,äã/ !N9ICM"'YµÕ* ĄñN9ICM!Ăµ"r/ èì"õÑñ÷  äÙ
5HJ6O;@V2§n/m/ Allergy inhibitory receptorĥAllergin-1Ħ2z
0"mĕ~60kDa !ûxcñ÷lĝ
Immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motifĥITIMĦ2¹
 .Allergin-1 " SHP-1SHP-2 ES@TùPTĒsđðay/õÑñ÷
Allergin-1 " IgExc!@>HQ2^ùĞî2§n/5HJ6O;@V2§n/ĥHitomi K et al. Nat Immunol 2010Ħ Allergin-1 "õÑñ÷!_ *Â×ñ÷+L=SJ4VA
[Ú äÙ/ |0/èì!i!Ġ Allergin-1 ĐbÄ°L8B DI©tĥHDMĦ2Ý
2Ć/ĔÛ!L8B Æ&ÇĎª©!X´'ĒÚ!p+ IgE ©ce!¢ (-05RQ<V!
!¢s2éą'HDM oÓ Allergin-1 Đb
Ä°L8B!ġĢÞ»Â×ñ÷ĥBone Marrow-derived
Dendritic Cells, BMDCsĦ2ĔÛL8B Ĥúl¨Z/zÀ ĔÛL8BÞ»! BMDCs 2¨ZL8B Æ&
5RQ<V!
¢s
Â×ñ÷"©t¯êñ÷Ãø/jàñ÷!Wë/
©t2w.ĉ3Â×ñ÷"Ês©tÖßåH7VK T ñ÷ ©t2¯ê/0-! -Allergin-1 " HDM ,/Â×ñ÷!Ê2§
n/ Th2 í2§n/ ê0`X! - Allergin-1 !Â×ñ÷
/Ãø!Ąñ2µ/) Allergin-1 ĐbÄ°L8B2Ý in vitro !
ï BMDCs 2ĆoÓĂ¼2ÿ²É Â×ñ÷
/ Allergin-1 !ÃøĂµ!) ġĢñ÷- BMDCs 2ĆHDM oÓ ,/ Allergin-1 ĐbÄ°
L8B ,$ĔÛL8BÞ»! BMDCs !Ê2ÆĈ¿ă' HDM ©t!W/ Der p2 " TLR4 2^Ês@>HQ2bď/ |0/ĥTrompette A
et al. Nature 2009Ħ
! -TLR4!P:TG/LPS*oÓBMDCs !Ê2Ð
1ħ?7F97TÜÛø!ÆĈ
ĔÛL8B (n=3) Allergin-1 ĐbÄ°L8B (n=3)Þ
»!ġĢ2­wġĢñ÷ 1107 g2 GM-CSF 10 ng/ml
IL-4 10 ng/ml 2p ğÍ 10 ml ğÂ×ñ÷%m

80



0.

 Tsukuba Journal of Biology (2014):-/"



13, 81        

9





 

'3* +;2,#$ 0.$8<  (%)!=6 4;2,#$ĵåcĜĚĐ­&ňćŵ`[b]TbHdŀ$#&Ű0Ŷ&°ÖëEL`E4ŒŁ2]JL&EL`EËĥ4Ó1"£21)ųăĒ¤e&ÖëEL`EŒŁ!'·ÒÌ&lăćÛğ%.0EL`EËĥĂ¿1"ğ2
12/&i®4-"%êĞĢ!'UQdZ
bLŰ4É. Ű0ŵňŶ.(zÎćŵmÌÎňŶ"Ø
&°ųăĒ¤e!&EL`E4/1&!'$
"Ĳ®ű4Ń
EL`EËĥ4ń{1gïöó'
Ň¼eŞŸe mŸĻěœŖŵHPAŶ! 1ēm'EL`E41"Ň¼eŞ
&¯tñO\dab÷gŦŕ/ĻěœćV_[bÞ{V_[b4Þ{e mł&ĻěœćV_[b&|ú4pŝçīĚ%Ļěœ/ħœ@_I@7Mŵ]JL!
'@_I@EKabŶÞ{21¯tñ'ĠĭóĦĚ%'¨ĪĶÌjñŵpmŶ"µĪĶÌjñ%¨~2Åĳ'÷gŦŕ%Ô³HPA &Æ%Ť31ysµĪĶÌjñĵsŞ
ŵmpdŶ"ĺ».(ĸŲ%Ô³ ĽÄĠĭü 4Æ1
ysµĪĶÌjñļsŞŵmpvŶ"ĵsµĪĶÌjñŵdpŶ%Ī|21)ÖëEL`EŒŁ%.0¯tñO\dabľ©EL`EŐ´ÌĠĭüÌYd:dGbQ=œ& c-Fos
4ęđ1".ĝ/21êĞĢ!'EL`EËĥ
%²1UQdZbLŰ&Ûğî%
¯tñx¢"jñ%1 c-Fos ęđO\dabß4ŊĄ­ŠÂÏ¬Ě%ŉì2014 2,#$0.$8

$

&7

15<

vĘĬİ¬ðĿ8A<X^=aNd_ÕmŵBiolegend San DiegoŷCAŶ4Ĕ5RDbŸR9IbŸU_9;CHdFŅmû%.0
c-Fos &vĘðĿ4Ń¯tñĬİ&ūÇšĖu4ÝÃ
Photoshop 4Ĕ
PJ=>]8bM4õą "
Image
JŵNational Institutes of HealthŷBethesdaŷMDŶ4Ĕ
c-Fos ťÌĪĶß4Ľ ŊĄ1 qmÁ0ŧÚ}Ď 2 í4ŊĄºr4Ōo%Ĕ Įî ²ČıŵFig.1 ¸Ŷ"ňćÛğıŵFig.1 Ŷ&fĳ!
¯tñµĪĶÌjñ& dpmpd .( mpv %
c-Fos ťÌĪĶŏ,/2
ĪĶß'ĳ&á¶$ ő ÂÏŊĄ%.0¯tñxm.( mpd &ťÌĪĶ²Čı.
0ňćÛğı!èÍ%§ "ğ2ŵFig.2Ŷ
Figure 1ź¯tñ%1 c-Fos &vĘðĿŵ¸ź²ČıźňćÛğıŶ

áûSprague-Dawley ĨÐčŨ]JLŵ7 ŜŴâê=`5Ŷ4Ŕ
wĩ 1 Ŝţř¹&ůĴĒ¤ŵ¯ăĩ 2312Ź12 äţãæéŵ08:00 ċĊ20:00 þĊŶĽĕÜŭcŮùŶ%ũ "ê®ű%Ĕ ®űä&mş' 270-310 g ! ÖëEL`Ee!&Ű0Ûğ®ű]JL4 2 ı%|qm%¯ă 33.01.0&Ē¤! 30|ţÖëEL`E4ŒŁ1"ä%ģøWbT/øýŵý
Ś 4L/minŶ4ÛğňćÛğıŵn=5Ŷ%'UQdZ
bLŵ50 l ùĆÿŶ&Ű04+ģø4²Čıŵn=5Ŷ%'ģø&*4Ûğ®űīhÅůĴ?dD%Ñ®ű'
08:00Ÿ10:00 &ţ%ŃÖëEL`EŒŁ'Sanada /
(2013)&áû4Ĳ%Ĥō,á¾!Ń

Figure 2ź¯tñ%1 c-Fos ťÌĪĶßĲ±
 UQdZbLŰ&Ûğ%.1ťÌĪĶß&¥'
&Ű0]JL!EL`EËĥ4¥À1î4×"4ğ1)¯tñ%'ÖëEL`E"'ė$1ġŬ&EL`E
ņ%Ëĥ1O\dab«1"4ğ
1
k&®ű!'Ű0À"!]JL āĀÎ 4Î1
"$
ňćŗ%EL`Eņ" nĔķÌĲ/21kÅ'Ûğ1 ďœ&Ĉ½%Ť .0ŎĪ$òŋ4Ń ô&®ű4Ń Êņ 1

Ĭİ&­"}ĎnÐÖëEL`EŢª 120 |Å%BbWO¦ûÿ%.1ĭÉÌĉý­4Ń ĺ4ÙŇ¼eŞ4}0{ĹùcŘÈÅQ]S6b¡¯tñ4+ 5 m &Ūàśį}Ď
4nÐ

81

-,

 Tsukuba Journal of Biology (2014)5/34
68 7?1+


 -,

13, 82       

9:'#óê4ëĆźĴľ­Ű4łřşÔ8Č¹Ż
hMEC I 12 Ĭ Transwell™fmq_ŵ5%CO2, 37Ę°t3úÔ­Ű)/ŶsĢĴľVq_8MOořşÔ9ŵEVOM2Iě2Č¹)/sĢłŬăÝÛųTEERŴIâü4)/Ŷźū»Żŷ¬cXZjo ¼ųH1Ŵū» trans-triprolidineŵH2ū» rantidineŵH3/H4 ū» thioperamide,cXZjoĴľ
 ¼ųHICŴū» DPPE IŵĵđÊ 100 µM 3®É­«7Ċ)/Ŷp38MAPK ū» SB203580 9ĵđÊ 3 µM 3®
É­«7Ċ)2Ň60/ŶźTJ ZobRŖ8ùŻ­ŰĴľ7 SDS ĎĈI 2ĴľIĎŎ)ŵZobRŖI
5Ų>/9 15ŲTl8 SDS-PAGE 3ĝŵPVDF ł<8Ř)ŵ
TJ ŪŜZobRŖIğen\]LoSĆ7CEù)/ŶNUQÛ hCldn1 Ûų1:1000Ŵ658rÿÛ4ÓÏŵKl
PkhXdJZqYüŔzÿÛ!C;BM Purple 7CEĠŅù)/Ŷź¹Ŧġ PCRŻ
­ŰĴľI Isogen 7×Đ)ŵ RNA IÞ)/ŶReverTra
Ace !C;Thunderbird SYBR qPCR Kit Iě2cDNA ¢Ø
!C;.8±ÇI)ŵRps15 Ţ·ĚĔI®č4)/ ΔΔCT Ć
7CE mRNA ĠĖŦIä¹)/Ŷ2014 1+

-,

 

.2@

ĸö4ļ¿
 hMEC IúÔ­Ű)/ĸöŵ­ŰŨ¶"D 2 ŝũĪ3 TEER#±)¶@ŵ4 ŝũĪ3 TJ #ÌØ(G/ hMEC Vq_IÐ
F'4#3$/'8ĴľIě2>,ŵŸīů8cXZjoĴ
ľł ¼ mRNA 712ŵhMEC 7!&FĠĖ8ðēI
qPCR Ć3Œ=/Ŷ.8ĸöŵ+=28īů8 ¼8ĠĖ#ħŐ(G/Ŷ HDC 8 mRNA 8ĠĖAŐ@DGŵyŁsĢ7!&
FcXZjoŃÅąı8¸ªIçá+Fĸö#ÐDG/Ŷ ÿ7 hMEC IŸīů8šÜġcXZjo ¼ū»3 72
îũė)2ŵTEER 8²IŒ=/Ŷ.8ĸöŵH1 !C;
HIC ū»7CE TEER #ðÖ7 t)/Ŷ(D7ŵ'8ū»ėÏŵū»ŭĊ8­«3­ŰIĹ&F4 TEER 9¨Ñ)/Ŷ'8'4"DŵH1 !C; HIC 9 hMEC Vq_8MOořşÔ8 t7½v)2F'4#Ĩ§(G/Ŷ ''3ō¿(G/MOořşÔ8²9ŵTJ 8ûØ65#²
)//@396"4ļ ŵTJ ÌØ;.8Œİ7Ūv+F¯¥8FĲ 50 īů8ZobRŖ mRNA 8ĠĖ712ŵ
HIC
ū»ė7CF²IŒ=/Ŷ.8ĸöŵTjp1 mRNA 8ĠĖ
Ŧ±4 Cldn1 mRNA 8ĠĖŦ t#Ő@DGF65ŵHIC ū»7CFÍŮ#Ő@DG/Ŷ'8'49ŵTJ ŪŜŢ·8ĠĖ
7 HIC I})/cXZjoVSal#ÍŮIA02F'4
IĨ+A83FŶ (D7ŵňġ6 TJ ûØZobRŖ3F Cldn1ŵOcldnŵ
Tjp1 712ŵZobRŖmgl38ĠĖ7À+F HIC ū»ė8ÍŮIŒ=/Ŷ.8ĸöTjp1 4 Cldn1 8ĠĖ t#Ő
@DG/.'8ĸö9ŵHIC ýĿ# Tjp1 4 Cldn1 8ĠĖĺá7ŕĕ)2F'4IĨ§)2FŶ(D79ŵcXZjo#.GI
Ś*2TJ7CFsĢMOořşÔ8ċÃ7½v)2FA84
ñÎ(GFŶ Tjp1 39ŵHIC ū»7CF mRNA 8±4ZobRŖ8ċÃ#£î7ō¿(G/'4"DTjp1 ZobRŖ8œ¨Ř#ś%602F¡ĿÔ#ļ DGFŶ yŁ Tjp1 ZobRŖ8ĠĖ79 p38MAPK #Ūv)2F
48¯¥#F/@ŵ|¨8 HIC ū»7CF Tjp1 ZobRŖ
8ĠĖ t4TEER t<8p38MAPK 8ŪvIŒ=/Ŷ>,ŵ
HIC ū»ė7CE p38MAPK 8koŤ#{Ş+F'4I
íD"7)/Ŷÿ7ŵp38MAPK 8ū»¸ªt39ŵHIC ū»
#Tjp1 ZobRŖ8ĠĖŦ7ÍŮIv 6'4#H"0/Ŷ(D7ŵp38MAPK 8ū»¸ªt39ŵHIC ū»9 TEERtěIĨ(6'4#í)/Ŷ'GD8ĸö9ŵHIC ū»
# p38MAPK 8ćÔI})2 Tjp1 ZobRŖ8ŦIċÃ(-ŵhMEC Vq_8MOořşÔI±µ(-F'4IĨ§+FA83FŶ òĦĭ"DcXZjo# H1 !C; HIC ¼I})2yŁ
sĢĴľ7Ĥãě)ŵTJ 8ÌØ4MOořşÔ8Œİ7Ūv
)2F'4#ŵË%Ĩ§(G/Ŷ>/ŵHIC ¼I})/c
XZjoVSal#ŵCldn1 B Tjp1 8ZobRŖ8ĠĖIç
2F'44ŵ.8ĠĖŒİ8Ķ?8rĮ#íD"460/ŶyŁsĢ79ŵ
cXZjo7CFÄÚVSalŠýû#ýĿ)2!EŵTJ ÌØIŚ*2jlRXZVXIç 2FA84ñ
Î(GF.
ļéĕŹ

             82>

"<!&= >@  ($)A%* 0;?1+

Ľï4ģġ
~8èBØŧ7Ó*/ąyŦ8Œİ9ŵ¦yĔ8ęĀÙĞ
8øÈ46FĶ?8:413FŶ'8Oop^io`6jl
RXZVXųąyĺáýûŴ9ŵæyď<8ĩķąġ6Ó
į3FÁyÁýû7C02őí(GF'4#´Ŷ)")
yŁÄÚ7!&FÕ¯ėAjlRXZVX7ťŊ6$Iß
02FéĕŷŶcXZjo9.)/yŁÄÚ3%Õ¯©·8ðŉ8:413Féĕ Ŷ cXZjo¢ØIßcX[WoŀĒŤţĳųHDCŴ8Ţ·þåiNX39āŌ8ąyu#©3~7ņ)ØŧuńIę*FŶ%1"8ŏà"DyŁŃ8
HDC !C;cXZjo#ŵjlRXZVXųąyĺáýûŴ7Ūv)2F¡ĿÔ#Ĩ§(G2FŶrëHDC þåiNX
8yĄØ8Ŏõ"DK/Na MOoĂ#Â('4#H"0/ŶŚÆ9ĚÏ7yŁsĢ8¾ĥĸ¢ųTJŴ8Ļĸ7ŵyĄ
w K/Na MOoĂ8±µ4yŁsĢ8ąćÔ#ŗ'FŶTJ
9MOo8řşÔIŒİ+F'4"DŵHDC þåyŁ39 TJ
ÌØu#ąyu8©4602F¡ĿÔ#ļ DGF.
­ŰıIě/Ħĭ39ŵcXZjo ¼8ū»7CEŵy
ŁsĢ8MOořşÔ#sì+F'4#H"EŵyŁŃ8cXZjoÕ¯Š#yŁęė7ťŊ6$Iß02F¡ĿÔ#Ĩ§(G/Ŷ)")ŵ'8ºűı39ĉ)/yŁsĢ³8Ĵ
ľ8ÍŮI¤¹3$6"0/Ŷ.'3òĦĭ39ŵ
ų1ŴyŁsĢ7cXZjo8ŃÅą
7ÒŊ6·#ĠĖ)2F"ŵų2Ŵ'8cXZjoÕ¯Šı#yŁsĢ TJ 8ýĿŒİ7ÍŮIá02F"ŵIħ"@F'4Ix6ģġ4)2ŵ
8ĴľØ8ÍŮIēŋ3$F÷(G/c_yŁsĢĜôĴľųhMECŴIě/ºűı3cX
Zjo ¼8ĠĖBMOořşÔBTJÌØ7À+FcXZj
o ¼ū»8ÍŮIŒ=/Ŷ (&

 Tsukuba Journal of Biology (2014),

13, 83         !/#*0+

1

2014 -%(&2" (34-%(&25  6$) #4-%('.5
è¤l"ÔÓ (çč-Qï-,ÜY!¥'ē Ė yY Ġ5=H8Æv + ,yY , Yà È,°éÓY_Yĕ¬ÜíããÌÏ ) ÍÓÎÅ!
ßª  ×È»(5=H8 ÛÈ»đ/ùO,%Iĕ¬Ü YÈ, }^q!rĎ +_Ò ēĖ ô.- +´ûçč-!_Ò ēÄĖ Õ*- , Yĕ¬Ü!ÀÎx_È Ģ ³Ċ/Ē±Ąð*·Ñÿî,%Ą ÜY vo!âákěfibrosisĜÈ,Õ*- ,ÜYYÜÜÞå)+[-,/_ÈßoÞåNu4AH3F)+X-,/âák âák!üYÞå óe|Óýà!q,°é q!K}^ÇÓ·Ñ!ô  %+ âák ßªÈßoÞå!
YÜäá/ ,&{t, Þå āfw²!Üäá _ÈĆ/cĉ,( Ė âáÞåÜ gKú/_Yù+( Õ*- , &ÜY ·ÐĈ,ÖÚ! âák/ _È/Wÿ,ñÁÖÚÿ0 , ë ÆvTÉnéÜY ·ÐU¡§ĀjP] ,ÜYďµd¿),¡§ĀjP]/î âák *-,
\îÖÚ{t,I ěJi Hye
Hwang et al., 2006Ĝċ Āj),¡§ĀjP]·ÑāØl$đ!¢*   ¨Ĕ!
çč-Ĕ@9C/É ë ÆvTÉ
né¡§ĀjP]ě¶ºĜYÜ ·ÑāØl$đ ­õ/îĤĞó©
G ÞåbÂ«ì `ßbÂ/SbÂ/ HE «ì>76F:B
2EH?«ì)+«ì«ìÊZ/É ò_ÈÜ ÜäáĐÙ¾~âákĐÙ ¾~/
G ~ą RT-PCR
 ~ą RT-PCR )+âák ¯ collagen1
2  collagen53 ÒÆ/_È ¯myogenin ÒÆ/ø#¸ĠĞĔjÃ ICR Ý>15ČĥþĘġĞĔæ
 Control æěn=8Ĝ  ĦÜY Sedentary æěn=10ĜĦÜYĀjP]
 Exercise æěn=10Ĝ ĦÜYĀjP] +ĢĞÜY ¸ ďµd¿ěp¹Ħ150 Hzď¼Ħ10 mAd¿£ćĦ
1 £ćĜ)+JêĐ Üç/ËiĤaďµd¿ěp¹Ħ200 Hzď¼Ħ10 mAmãq 100 qĜ)+Ămã/mã ÜYěçč-Ĝ/÷ÒěsĠĜģĞĀj;E:4C
 ĀjP]ÜYĠþć*ºĀjĠ£ćěRĀjĜ/î.

controlfibrosissĠĦçč-Ĕ &   sġĦÜYâák   ďµd¿/L        ,ÜÞå   ,®z        ěė ăaâák/ïĜâákĐÙğÜĐÙěĚĜßª âák öV
bÂ/>76F:B2EH?«ìÊ
Zó©/îěsġĜ ßªControl æ´#ÜYæ!¦âákĐÙwh ěsĢĜ%Y¡§ĀjP]/îExercise æP]/î.Sedentary æ/´ûvoExercise æ âákĐÙ!¦½ _È öVbÂ/ HE «ìÊZ/ó©_ÈÜ ÜäáĐÙ/¾~ßªSedentary æ´# Exercise
æ ÜäáĐÙ!¦wh  Æt~ą RT-PCR )+ mRNA ÒÆD<C ó©M
,

20
15

ĝ
ĝę

10
5
0
Control Sedentary Exercise*:p<0.05 vs Con, #:p<0.05 vs SedsĢĦÜY ĀjP]âákĐÙL ,đ

83



'%



 Tsukuba Journal of Biology (2014)

13, 84         .031 "! )+816# *4(:,$'%9;  

2014 ,$'%9/

<725:,$'&-;èí äâúÀ òûĎuĄ­ć3:?TK7<T æ^hÞ ¿îĞâx«!/,1c`.v ÿáĎ m 1­ć.ê çä3CPT!C ÄïlGR:=APTæB
M4T (PH)1Â/b Ĥ1`3:?Töõ*K
7<Tå¹ô.
 Íü1µx~Øòû!uĄ×
čp Y-òûĎuĄ¼* þĥ!3CPTÌÿáĎ Ęd1) 
uĄěÐ!/1Â. Ęd1éuĄěÐĩP ëĪ!Çýguę
by uĄ[Ã¨³/.3:AK7<TPT; ¨³ uĄ©Ã$Ė/, ¨³f÷*ę °ß¦ Ý.nĂèí ,P ë 3CPTÌÿáĎ!a ÿáĎ1`3:?Töõ*K7<T1]uĄģġì.N@Q º/._¤aë uĄěÐĩJ ëĪ1Þ3C
PTÌÿáĎ òûÍü1èíP ë èí³Æđ%.ëĞ òûĎuĄ uÍË k°æė°øôÆßëĞuĄěÐ 3CPTÌĘd Íüæą° P ë 3CPTÌĘdéÉ! 25 !Ýùü 
36 !òûĎuĄ ß¦ <F3-Ýù 
òû1J ë 3CPTÌĘd cDNA 1àÛH:>Uó'Ē2) ¨ĎĐ»Íüæą°1Č% ôÆP
ë 3CPTÌĘdéÉ Ö§²°Ï!J ë 3CP
TÌĘd àÛ+!ą0/ 0 Āo>;1ā J ë 3CPTÌ>TE:Ď P ë .òûs£!ÛČ%.J ë òûsĀo>;1
ā3CPTÌ>TE:Ď!Ês*òûĎ£
£°!P ë 3CPTÌÿáĎ òûs£ĥebW+-P ë J ë 3CPTÌ>TE:Ď òûs·~!eē. Íü!q!k/ø ,/ħ½Ôòû ĦĘd p: Ħ!ÈĦ YE &!Á¢
SD 1ÞSD !­ć®3KDĜ*1Õ|ÈĦćÒ°É °Ď1wÞÅĘd1ÈĦJU8Urk¶.(iÞ Ęd p!6R:ASIRU<OTÔ+-ĂP ë!ĚĜP?5LÔ)ÞĘdéÉ hĆ: X +JU8UĘd1äâ Ędæó» .ĘdéÉ1hĆĘd
>9T;)Ì ´Ô1Þ: òûăģġì3CPTÌ>TE:Ď uĄģ1Ó.
3CPTÌĘd Íüé
 3CPTÌĘd1é J ë òû!Â±Ġ¨³\©uĢòû z |DNA 3:?Töõ#¬¡ð1 3 ĝÇýĊòĈôÆJ ë
òû!ē¦Çýguę ©ÃuĄģ¨³/.3:?TPT;ËĔ ¨Ù  ĘdéÉß¦.
""ċ(,/ø ]uĄģ$ 3:AK7<TPT; ¨³! P ë!Çý
guęy. J ë!~ØòûÌÇýguĢ©. >4KT; æė!3CPTÌÿáĎ Íüėď.ü° .&- P ë!3CPTÌ
ÿáĎ K7<T1uĄģġì. ZĂ
3:?Tĝ
 m 1jV½J ë 3CPTÌÿáĎ! ¾
Ã 3:?Tĝ1jü{ Î.
)/òû ¡ P ë!+-xğ/îĞsĩī]uĄģĪ
3:?TPT; Ë³³u1}Úâġì.(uĕ+-3CPTÌÿáĎ Ĩ3:?TĝjĕhÞ1ªü° ø ,/._©/, 3CPTÌÿáĎ ÍüB
M4T ¸ñÑđ1Ă
/, ¥ß1Ý'tuã Üĉ .¯0/.

84#!

 Tsukuba Journal of Biology (2014)+,-)%1
0/ 

3'

13, 85       $! KLHL7 & #!24  5. 3'ä¬t"ÎÍ
 RH3;X!Ð¸ÄÁĈe*9XF4ø(»Í9XF4øm­Þw)âôfĆo)
RH3;
XfĆÙ!Üæ{¯% DNA fæúüØÄ|Â÷Ă[) Ñ'*)
RH3;X&)âôfĆ!
RH3;XÀ¡rĀÚ(E1)RH3;XÞwĀÚ(E2)RH3;
XT2Y7(E3) 3  ĀÚ §
RH3;XT2Y7 ø E2RH3;X \ªÞw)øý¦¡,Õ
 RH3;XfĆÙ Óà!FY3X8XÊ%.U=E0MYÊºÖÝ¡É¢ s~)
z*)
ßêëÚ¡Ë!ñÜæ èì&(ñq +*)Ö
Ý¡É¢(*# s~þb ð )
ûBTB 9XF4ø) KLHL7 Ç h¡Ç ßêëÚ¡Ë s~)
z*BTB 9XF4øI-NTY!Cul3RH3;XT2Y7îwc ø,
T4UY@).:K9Y¼ç) Ñ'*)
Ò× iíÒ×&(KLHL7 a BTB 9XF4øxº Cul3 RH3;XT2Y7îwc,¤ (Ês¡Ç RH3;XT2Y7À¡,ANBX@D2>/J¥p) Õ**'  'KLHL7 Ç!»Í9XF4ø RH3;Xr,¥p)&(ßêëÚ¡Ë Z~) ã '* KLHL7 &(RH3;Xr*)ø!°«' 
±Ò×!KLHL7 &)RH3;Xr »Í)9XF4ø,x),ÎÍKLHL7 Þw)9XF4ø¨Û,í

[ 1] Cul3KLHL7 îwc Q?Uª¿
Ā½ øù©Ą¡4WYX ý¦ ÿāT;1O¿&(PJ69-4a · Bait  Prey vÌÂ
KS6NA,l)øù©c,u'
SCLWA ³ Ade2 VLY9þb,ÌÂ)øù©c,ý¦85

 2014 '

#!2* #"(41. Ā½=YE0JT<A¿&)64TYCX5
 G@åkéÆ² cDNA S0JSTY(Dualsystems biotech),ÅĀ½=YE0JT<A¿&( KLHL7 Ï_dÅ)9XF4ø 64TYCX5,í
2. Ā½=YE0JT<A¿&)ÞwAP0X ó´
 64TYCX5'*~ KLHL7  AP0XÞw) ,¹õ)$Ā½=YE0JT<A¿&)ó´,í
Þµt"®
 Ā½=YE0JT<A¿,Å64TYCX5 Þµ
KLHL7 Ï_dÅ)~,uĀ½=YE0JT<A¿&)64TYCX5'*~!gĄ¡ y#*)
a ÄrÍó´,í  Ï_dÅ,¹õ)ï )Â}]ąćÜæ(HEK293T) 64T
YCX5'*~ KLHL7 ,ÌÂjÈ¾ă¿&(Ï_dÅ,¹õ)#jÈ¶ë¿&(Üæn),ò) `!KLHL7  Þw Ôö*9XF4ø Cul3
KLHL7 îwc&(RH3;Xr*) ,¹õ)# RH3;Xr ÄÃÍ£á«' )^)KLHL7 &)RH3;XfĆÙ ó´!ßêëÚ¡ËÉ¢¼ ó« )¯*)

(&

 Tsukuba Journal of Biology (2014))-+

13, 86        

/



 

2014 *%(&42,$.1"

3 5*% (&46  
oVâª
ALS (Amyotrophic Lateral Sclerosis : ÖêÞiÚÐyÈ) ¡_ç (åĎ.þÖáè*%YZdSMA
(Spinal Muscular Atrophy : åĎÖêÞÈ) \n¬gåĎ (Öá*%ZdāxEOWTU.ēæë* pþÈÀÎ(+*%ALS  TDP-43  FUSSMA   SMN1  !+*Ąc zĄc(+*
+(zĄcÉ
Á@UG9ø +&±q gem  !+*³ÿe )RNA <KR1;U:Ĉ-*ä Ñ+*
gem  gemin1(SMN1)@UG9ø.[* gemin
family @UG9ø(gemin2-8)¶ät* snRNA Ý snRNP ïe ċ*³ÿe*(Ô
@UG9ø ċ%*snRNA hČ.<KR1??WM#É  Î(+*
<KR1??WM ĒRNA vùe (1UDTU.Ċ ¡¾ RNA *¶ä.¤ )
<KR1;U:}[*³ÿ
e*
USP15 @UG9ø tĆØ 110KDa æPH8AUyąÙ)
PH8AUyąÙ*PH8AUS7W>¥¢j  Î(+*ďđ{½ĐPH8AUy ă£Ê@
UG9øtðôöLW6W*PH8AU.µÊ@UG9øÝ*})üDNA húr±qÓíßòõ×Ûã¬7UyÒÜÇ ´ÂÁ÷Ĉ-* ¨(  ÏÕkíÏÕUSP15 FB902DL2< āxÒÜõ´ÈÀ.Ñ ¨( %USP15 Ì^fÄ*@UG9ø.KTC5WMð®,RNA <KR1;U:ĈĀ@UG9ø./* u¨+%¡¯ALSSMA āxÒÜÇ zĄcÃ¿ RNA <KR1;U:Ĉ-*USP15 FB902DL2<āxõ´ÈÀ '"USP15  RNA <K
R1;U:ĈĀ@UG9 Ì^fÄ* (USP15
RNA <KR1;U:.`āxÒÜÇ Ĉ-*äà(+* USP15 āxÒÜÇ zĄcÃ¿
'Ĉ-* USP15 '<KR1;U:Ĉ-* N6E=M ¨( 
­ÏÕ 
TDP-43
FUS  SMN * gem ÍË
USP15
gem |$fÄ. gem ³¡@UG9ø*
gemin1ďSMN1Đ.LW6WčÛã.Äð®

70 !#5*% ('+6§º
1.USP15 ĂwÉÁ©Ûãq gem ¦yHela ÛãSHSY5Y Ûã USP15  WT% Åe. GFP pDRU<I39;QU24 ©ćgemin1GFP X·¢e.ÄìlmÆ°é.í±q gem ¦y  ¸û
2.USP15  gemin1 @UG9øÌ^fÄð®
HEK293T Ûã FLAG @:a USP15 .DRU<I39;QU24 ©ćÛã.~@UG9ø.»sFLAG ¢e.ÄmÆ¹ĉ.X·¢e gemin1 ¢e.Ä24<@WUJTBD')
gemin1 ²s.íUSP15  gemin1 Ì^fÄ«¼.²ñÝ¯VàóÛÝ¯ Éîb ]*đ.PH8AUyý86