2018 年 12 月
お客様各位
日本チャールス・リバー株式会社
品質保証部 マネジャー 川西 正彦

弊社マウス・ラットにおける微生物モニタリングシステム変更のご案内
拝啓時下ますますご盛栄のこととお慶び申し上げます。平素は格別のご高配を賜り、厚く御礼申し上げます。
さて、弊社では定期微生物モニタリングの更なる精度向上を目指すとともに、世界各国のチャールス・リバーグループ内における微生物モニタリングのハーモナイゼーションを実現するため、従来のモニタリングシステムについて見直しを行いました。2019 年 4 月より新しい微生物モニタリングシステムにて国内生産動物の微生物学的な品質確認を実施して参ります。その内容の詳細につきまして、以下にご案内申し上げます。
弊社ではこれまで通り、お客様に安心してご使用頂けるマウス・ラットを提供できるよう尽力して参ります。今後とも旧倍のご愛顧を賜りますようお願い申し上げます。
敬具記<見直し内容>１．概要
１）バリア生産施設


生体供試による微生物モニタリング頻度および供試数の変更

抗体試験による微生物モニタリング実施月の新設



環境ふき取りサンプルの PCR 試験追加年 1 回、生体供試による微生物モニタリング時に PRIA（PCR Rodent Infectious Agents）追加

現在

実施内容 実施頻度
年12回
年4回

生体HM *1
生体HM *1

試験実施日
実施月の前半
実施月の前半使用動物
8-12週齢 + 退役動物
若週齢 (上記に追加)

年4回実施月の前半 8-12週齢 + 退役動物 + 若週齢
生体HM *1
年1回
実施月の前半 8-12週齢 + 退役動物 + 若週齢
PRIA *2
見直し後
抗体試験
年8回
実施月の前半
8-12週齢 + 退役動物
PCR試験
年12回
実施月の後半- （環境のふき取りサンプル）*1 HM: 微生物モニタリング*2 PRIA: PCR Rodent Infectious Agents、11月の生体HM時に供試動物よりサンプル採取

実施数
各週齢 4匹 (計 8匹)/部屋4匹 (上記に追加、計 12匹)/部屋各週齢 5匹 (計 15匹)/部屋各週齢 5匹 (計 15匹)/部屋
各週齢 8匹 (計 16匹)/部屋10箇所/部屋

２）アイソレータ生産施設


生体供試による微生物モニタリング頻度および供試数の変更、免疫正常動物の囮飼育廃止

環境サンプルによる培養試験への採取内容追加

環境サンプルによる PCR 実施月の新設

現在

実施内容 実施頻度
年4回

生体HM *1

使用動物
退役動物

年1回
退役動物
生体HM *1
見直し後 培養試験
年11回
環境サンプル
PCR試験
年3回
環境サンプル*1 HM: 微生物モニタリング、PRIAを含む

実施数
免疫不全動物 2匹 + 免疫正常囮動物 1匹(計 3匹)/アイソレータ

免疫不全動物 4匹/アイソレータ
アイソレータ内拭き取り1本、飲水1本、糞便10個/アイソレータ
アイソレータ内拭き取り（排気ダスト）1本/アイソレータ

２．詳細内容１）目的 PCR 手法採用による病原微生物検出の早期化、効率化、コスト削減
実験動物を取り巻く昨今の状況はめまぐるしく変化しており、それに伴い管理を行うべき微生物やその微生物を検出するための手法も変化してきております。このような状況の中、弊社では国内生産施設の微生物モニタリングシステムに PCR 手法を導入し、これまで以上に高品質な動物をお客様に提供することを可能といたします。PCR 手法の特徴、効果を以下に示します。
① 微量な病原微生物も検出が可能② 弊社従来手法と比較し、試験結果までの期間の削減が可能③ 生体供試頻度を減らし、輸送費、試験費のコスト削減が可能
この見直しにより、感染の初期段階から検出が可能となり、また生体供試数の削減にも寄与致しますので、動物福祉上の観点からも優れた内容と考えられます。

２）バリア生産施設の微生物モニタリングシステム見直し（評価対象および匹数の変更）


現在、月毎に実施しております生体供試による微生物モニタリングを、3 ヶ月毎の年 4 回に変更いたします。

生体供試による微生物モニタリングを行わない月は抗体試験を実施いたします。

環境ふき取りサンプルの PCR 試験を毎月実施し、各室の微生物学的ステータスを確認いたします。



年 1 回、生体供試による微生物モニタリング時に、SPF 項目のうち実施可能な全項目の PCR
試験（PRIA＝PCR Rodent Infectious Agents）を追加いたします。



生体および抗体試験の実施数を、従来の 8 匹から 15～16 匹に変更いたします（詳細は添付資料 1 をご参照ください）。

３）アイソレータ生産施設の微生物モニタリングシステム見直し（評価対象および匹数の変更）


現在、年 4 回実施しております生体供試による微生物モニタリングを、年 1 回に変更いたします。



生体供試による微生物モニタリングを行わない月は、飲水、糞便、および環境ふき取りサンプルを用いた培養試験を実施いたします。

アイソレータ内排気ダストの拭き取りサンプルによる PCR を年 3 回実施いたします。



生体供試数につきまして、現行の 3 匹から 4 匹に変更いたします。また、免疫正常動物による囮飼育を廃止し、全て免疫不全動物供試といたします。免疫正常動物で現在行っております抗体試験項目は、PCR 試験に置き換えて実施いたします（詳細は添付資料 2 をご参照ください）。

４）試験項目の変更について
昨今の日本国内の汚染状況、およびチャールス・リバーグループの各国サイトにおける実施項目を踏まえ、下記 2 項目を SPF 項目に追加いたします（変更後の実施項目一覧につきましては添付資料 3、4 をご参照ください）。
Corynebacterium bovis

免疫不全動物の粉ふき・掻痒の原因となる細菌で、国内の SPF 施設で散見されます。免疫不全動物の SPF 項目と致しますが、免疫正常動物でも実施いたします。
Lactate Dehydrogenase Elevating Virus

マウスに感染すると臨床症状がないままマクロファージ内でウイルスが増殖し、免疫学的な研究に影響を及ぼします。感染動物は血清中 LDH が高値となります。国内動物からの検出は稀ですが、汚染された生物製剤の使用により施設に汚染が拡がることがあります。

追加項目

実施頻度
Corynebacterium bovis
年4回
Lactate Dehydrogenase Elevating Virus
年4回*3: MFIA = Multiplexed Fluorometric ImmunoAssay

手法
PCR
MFIA *3

対象動物種
マウス、ラット
マウス<報告書>
１． 報告書フォーム：
微生物モニタリングシステムの一環としまして、微生物報告書のフォームも従来のスポット内容記載のものから、過去の試験履歴を併記したチャールス・リバーグループのグローバルフォームに変更いたします（詳細は添付資料 5 をご参照ください）。
２．報告書発行タイミング：現行より一週間程度早く発行致します。実施月下旬から翌月初旬にかけてメールあるいは郵送にてお届けいたします。

<切替時期>
１． 実施時期：2019 年 4 月より実施いたします。
２． 移行期間：2018 年 11 月より、従来の微生物モニタリングに加え、環境サンプルを用いたPCR を並行して実施いたします。

<お問い合わせ先>
営業部 TEL: 045(474)9340

FAX: 045(474)9341
以上資料 1：バリア生産施設の微生物モニタリング概要

生体HM (年4回)
血清試験

剖検培養
PCR *1
Assessment *2 寄生虫所見Plus
3-5週齢
555552、5、8、118-12週齢555555退役動物
555555*1 11月は生体からのサンプル（口腔、体表、糞便、および免疫不全動物は肺）採取によるPRIAを実施*2 セット項目名。項目詳細は添付資料3参照。
週齢

実施月

供試数

抗体試験 (年8回)
週齢

実施月

供試数

血清試験

Tracking *2
8-12週齢88
1、3、4、6、7、9、10、12退役動物
88*2 セット項目名。項目詳細は添付資料3参照。

環境サンプルPCR (年12 回)
実施月
供試数
毎月10（プール）手法

供試サンプル
排気ダストの集積しやすい箇所、および出荷の際に動物が接する箇所の拭き取り（排気口、ラック、ケージ表面、体重計など）

PCR

バリア生産施設の微生物モニタリングスケジュール
内容
生体HM (年4回)
PRIA (1回)抗体試験 (年8回)
環境PCR (年12回)

実施月
1◆◆

2◆◆

3◆
◆

4◆◆

5◆
◆

6◆
◆

7◆
◆

8◆◆

9◆◆10◆
◆

11◆
◆
◆

12
◆
◆

資料 2：アイソレータ生産施設の微生物モニタリング概要

生体HM (年1 回)
対象

週齢

免疫不全動物

退役動物

環境サンプル培養 (年1 1 回)
実施月
供試数
生体HM実施月を3（プール）除く毎月

環境サンプルPCR (年3 回)実施月
供試数
生体HM実施月を1起点に3ヶ月毎実施月
アイソレータ毎に設定

供試数

寄生虫培養

PCR

剖検所見

44444

手法

供試サンプル

培養・飲水：1ケージ・糞便：10ケージ
・拭き取り：アイソレータ床面、ラック、ケージ外表面など

手法

供試サンプルPCR

アイソレータ内排気口付近のダスト拭き取りアイソレータ生産施設の微生物モニタリングスケジュール
実施月 (生体HMを4月に実施するアイソレータの例)
内容
12
345678910
生体HM (年1回)◆
環境培養 (年11回)
◆◆
◆
◆◆◆◆
◆
◆
環境PCR (年3回)◆◆◆

11
◆
-12
◆
-

資料 3：バリア生産動物の試験項目および手法一覧
生体(4回/年)

実施項目
ウイルス項目
Sendai Virus (SEND) a
Sialodacryoadenitis Virus (SDAV) a
Pneumonia Virus of Mice (PVM) a
Mouse Hepatitis Virus (MHV) a
Minute Virus of Mice (MVM) a
Mouse Parvovirus (MPV, 1- 5) a
Rat Minute Virus (RMV) a
Rat Parvovirus (RPV) a
Toolan's H-1 Virus (H-1) a
Kilham Rat Virus (KRV) a
Murine Norovirus (MNV) a
Theiler's Murine Encephalomyelitis Virus (TMEV) a
Rat Theilovirus a
Reovirus (REO) a
Epizootic Diarrhea of Infant Mice Virus (EDIM) a
Lymphocytic Choriomeningitis Virus (LCMV) b
Ectromelia Virus (ECTRO) b
Mouse Adenovirus (MAV, 1- 2) b
Mouse Cytomegalovirus (MCMV) b
Mouse Pneumonitis Virus (K) b
Polyoma Virus (POLY) b
Hantaan Virus (HANT) b
Mouse Thymic Virus (MTLV) b
Lactate Dehydrogenase-elevating Virus (LDV) b
細菌項目

Bordetella bronchiseptica
Citrobacter rodentium
Corynebacterium kutscheri
Corynebacterium bovis
Pasteurella pneumotropica
Pseudomonas aeruginosa
Salmonella spp.
Streptococcus pneumoniae
Staphylococcus aureus
Helicobacter hepaticusHelicobacter bilis
Helicobacter spp.
Streptobacillus moniliformis
Mycoplasma pulmonis a
Clostridium piliforme (Tyzzer's Disease) ab

CAR bacillus
寄生虫・真菌項目
Ectoparasites
Pinworms
Gastrointestinal protozoa

Encephalitozoon cuniculi b
Pneumocystis carinii a
Pneumocystis spp.
*1: C = 培養、E = 鏡検、G = 病理、P = PCR、S = 抗体試験
*2: 動物より採取した材料を用いて年1回PRIAを実施*3: 免疫不全動物のみSPF項目（免疫正常動物も実施）*4: マウスは年4回、ラットは年1回、PCR（PRIA)を実施*5: 免疫不全動物のみ実施

抗体試験(8回/年)

環境PCR(12回/年)

マウス

ラット

手法*1マウス

ラットマウスラット◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆-◆◆◆◆◆◆◆◆◆-◆◆◆◆◆◆◆◆◆-◆◆-◆-◆-

S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2S/P*2----◆◆◆◆◆◆*3◆◆*3◆◆◆*5◆◆◆◆◆◆◆*3◆◆◆◆◆◆◆◆◆*5◆◆◆-◆*3◆◆◆◆◆◆-◆◆

G/S/P*2S/P*2◆◆◆◆◆*3◆◆◆◆◆◆◆*3◆

C/P*2C/P*2C/P*2P----◆◆
◆
◆
-◆◆
◆◆◆

E/P*2E/P*2E/P*2S/P*2S-

◆◆
◆
◆
-

◆◆
◆
-

◆*4,5

◆*4

P
a: MFIA Tracking項目
a+b: MFIA Assessment Plus項目-*2C/PC/P*2C/P*2C/P*2C/P*2PP
PPS/P

◆*5◆◆

資料 4：アイソレータ生産動物の試験項目および手法一覧
生体(1回/年)

実施項目
ウイルス項目
Sendai Virus (SEND)
Pneumonia Virus of Mice (PVM)
Mouse Hepatitis Virus (MHV)
Minute Virus of Mice (MVM)
Mouse Parvovirus (MPV, 1- 5)
Murine Norovirus (MNV)
Theiler's Murine Encephalomyelitis Virus (TMEV)
Reovirus (REO)
Epizootic Diarrhea of Infant Mice Virus (EDIM)
Lymphocytic Choriomeningitis Virus (LCMV)
Ectromelia Virus (ECTRO)
Mouse Adenovirus (MAV, 1- 2)
Mouse Cytomegalovirus (MCMV)
Mouse Pneumonitis Virus (K)Polyoma Virus (POLY)
Hantaan Virus (HANT)
Mouse Thymic Virus (MTLV)
Lactate Dehydrogenase-elevating Virus (LDV)
細菌項目Bordetella bronchiseptica
Citrobacter rodentiumCorynebacterium kutscheri
Corynebacterium bovis
Pasteurella pneumotropica
Pseudomonas aeruginosa
Salmonella spp.
Streptococcus pneumoniae
Staphylococcus aureus
Helicobacter hepaticus
Helicobacter bilis
Helicobacter spp.
Streptobacillus moniliformis
Beta- Hemolytic Streptococcus spp.
Mycoplasma pulmonis
Clostridium piliforme (Tyzzer's Disease)
CAR bacillus
寄生虫・真菌項目
Ectoparasites
Pinworms
Gastrointestinal protozoa

Encephalitozoon cuniculi
Pneumocystis spp.
*1: C = 培養、E = 鏡検、G = 病理、P = PCR

*1

環境培養
（11回/年）

環境PCR(3回/年)

マウス

マウス

マウス

手法◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆PPPPPPPPPPPPPPPPPP-◆◆◆◆◆◆◆◆◆-◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆◆

C/PC/PC/PP
C/PC/PC/PC/PC/PP
PP
PC/PP
G/PP

◆
◆
◆
◆
◆
◆
◆
◆-◆◆◆◆
◆
◆
◆◆
◆
◆
◆◆
◆
◆
-

◆◆◆
◆
◆

E/PE/PE/PP
P-◆

資料 5：微生物モニタリング報告書（案 : 若干の変更が加わる可能性がございます）
施設名
微生物モニタリング手法
最新の試験実施期日
最新の試験結果
過去 18 ヶ月の試験結果