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日本家禽学会誌45：<ﾉ6Z‑J65,2008

マイクロサテライトDNA多型による会津地鶏の遺伝的多様性と遺伝的位置
岡孝夫｣・井野靖子[・野村こう！・花田博文!・天野卓 ・山内克彦2

小林雄治2．泉田和子2．西堀正英3．山本義雄3．秋篠宮文仁4！東京農業大学農学部畜産学科神奈川県厚木市船子243−0034

2福島県農業総合センター畜産研究所養鶏分場福島県郡山市富田町満水田963‑8041
3広島大学大学院生物圏科学研究科東広島市鏡山739‑8528'総合研究大学院大学葉山高等研究センター神奈川県三浦郡葉ll̲1町240‑0193

日本鶏の一部の品種は遺伝資源として保存が図られる一方，各地域の特産鶏肉の素材鶏としても保存が￨XIられている。
会津地鶏もそのような品種の一つである。本研究では2006年,2004年および1989年に採血された純系会津地鶏3集団および大型会津地鶏肉用会津地鶏について,ISAG/FAO推奨の30のマイクロサテライトマーカーを用いて遺伝的多様性の経時的な比較と他の日本鶏品種との遺伝的類縁関係を明らかにすることを目的とした。平均対立遺伝子数において，純系会津地鶏3集団間に差は認められなかったが，平均へテロ接合体率の観察値(Ho)および期待値(HE)では経時的な減少傾向がみられた。1989年の純系会津地鶏集団は2004年および2006年集団に比べHoが有意に高く，これは遺伝的に多様な個体を増やすために会津地鶏飼育集団間の人為的な交配があったものと推察された。一方，商用品種を交配して作出された大型会津地鶏および肉用会津地鶏の"Eはいずれも純系会津地鶏よりも高い値を示した。純系会津地鶏3集団のFSTは0.052であり，同一品種でありながら1989年から2006年にかけてわずかながら遺伝的差異が生じたものと考えられた。DAs遺伝距離にもとづくNJ系統樹においても1989年集団は純系会津地鶏集団内でサブクラスターを形成し,FSTの値を支持する結果となったoDA遺伝距離にもとづくNJ系統樹では，会津地鶏は大型会津地鶏肉用会津地鶏を含めて他の品種からやや離れて位置する結果となった。

キーワード：会津地鶏，遺伝資源，遺伝的多様性，集団構造

一一一一国緒日本鶏の一部の品種は遺伝資源として系統的に保存が図られる地鶏を作出し，さらに大型会津地鶏にロードアイランドレッドを交配したものが肉用会津地鶏として流通している（会津地鶏振興会,2001)｡

一方，各地域の特産鶏肉の素材鶏としても保存が図られている。

純系の会津地鶏は他品種との交配を避け，小集団で維持されて福島県農業総合センター畜産研究所養鶏分場にて維持されているきたと考えられている。血液タンパク型の解析からも他の日本鶏会津地鶏（図1)もそのような品種の一つである。およそ1200年品種とは遺伝的に異なることが判明し，会津地方に固有の品種であるとされた（天野ら,1990)｡また，発見当初の個体数は数羽と前，源平の合戦に敗れた平家ゆかりの人々が会津地方に流れ着いた際，愛玩鶏を持ち込んだ。それが会津地鶏の起源となったと考きわめて少なく，その集団を母集団として成立した事実がある。

えられている。会津地鶏は愛玩目的だけでなく，会津彼岸獅子の本研究ではマイクロサテライトDNA多型から会津地鶏の遺伝的飾羽に用いられ，会津地方の文化と共に歴史を歩んできた（猪狩，多様性の経時的な比較と他の日本鶏品種との遺伝的類縁関係を明1999)。しかしながら戦後の高度経済成長にともなう人々の嗜好らかにすることを目的とした。の変化により，牛津腓の低い会津地鶏はほぼ途絶えたものと考え材料と方法られていた。昭和62年(1987年),会津の民家で保存されていた
1．供試鶏ものを当時の福島県養鶏試験場にて保護，繁殖し，現在では純系会津地鶏として維持されている。一方，純系会津地鶏と商用品種

純系会津地鶏2()06年採血集団(AIZ'06:32羽),2004年採血との交配を試み，肉用品種としての利用も図られている。すなわ集団(AIZ'04:20羽),1989年採血集団(AIZ'89:45羽）および

ち，純系会津地鶏と白色プリマスロックとの交配により大型会津大型会津地鶏(AZL:27羽)．肉用会津地鶏(AZM:28羽）の5集団を用いた。供試サンフ°ルは福島県農業総合センター畜産研究2008年2月7日受付,2008年3月4日受理
連絡者：天野卓〒243‑0034神奈川県厚木市船子l737

所養鶏分場（2004年以降，福島県養鶏試験場より改名）にて採血されたものを用いた。また，遺伝的類縁関係の解析のために岐阜

地鶏（32羽)，土佐地鶏(14羽),小国(15羽）を加えた。供試鶏

Tel：046‑270‑6571
Fax：046‑27()−6571の詳細は表lに示した。DNAは血液からフェノールークロロフォ

E‑mail:amano@nodai.ac.jp

ルム法(SambrookandRussell,2001)にて抽出し，以下の実験
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日本家禽学会誌45巻J2号(2008)に供した。

MicrosatelliteToolkit3､1,DAはDISPANソフトウエア(Ohta,2．マイクロサテライトDNA多型解析1993）を用いてそれぞれ算出した。系統樹は得られた遺伝距離を木研究ではISAG/FAO推奨のマイクロサテライトマーカー

もとにPHYLIPパッケージ3.67(Felsenstein,1985)のNeigh‑30座位(Ho廿mane"J.,2004)を用いた。プライマーはForwardborう．口グラムを用いて近隣結合(NJ)法にて作成した。

鎖が蛍光色素(6‑FAM,HEX,NED)で標識された蛍光プライ

結果および考察マー(AppliedBiosystems,FosterCity,CA,USA)を用いた。

PCRはGenAmpPCRSystem9700(AppliedBiosystems,各集団の遺伝的多様性を比較するためMNA,HoおよびHEをFosterCity,CA,USA)を用いてTemplateDNA20ng,MgCl2算出し，表2に示した。MNAは純系会津地鶏集団(AIZ'89,AIZ

l.5mM,dNTPs各200"M,プライマーペア各0.05"M,TQ9DNA'04,AIZ'06)においては2.67から2.73と各集団間で有意差は認Polymerase(Promega,Madison,WI,USA)1U,1×MgFree

められなかった(P>005)。白色プリマスロックを交配して作出

PCRBuffel‑(Promega,Madison,WI,USA),合計1O皿の反応された大型会津地鶏集団のMNAは3.07,さらにロードアイラン系で行なった。予備変性94℃5分の後，94℃30秒,60℃1分，ドレッドを交配して作出された肉用会津地鶏集団のMNAは68℃1分を30サイクル，次いで72℃1O分の伸長反応で行なっ4.00と純系会津地鶏集団よりも有意に高い値を示した(AZL:P

た。目的領域の増'l1吊後，オートキャピラリーシークエンサーABI<0.05,AZM:P<0.01)。純系会津地鶏集団のHoと〃EはAIZ'89

PRISM3100‑A"α疵GeneticAnalyzel‑(AppliedBiosystems,集団がそれぞれ0.532,0.420で最も高い値を示した。AIZ'04集団

FosterCity,CA,USA)を用いてフラグメント解析を行なった。のHoとHEはそれぞれ0.383と0.415,AIZ'06集団は0.374とフラグメント解析により決定した遺伝子型をもとに,Micro‑0.405であった。純系会津地鶏集団においてはHo,HEともに経ll#satelliteToolkit31(Park,2001)を用いて各集団の平均対立遺的な減少傾向がみられた。特にHoはAIZ'89とAIZ'04集団間の伝子数(MNA),ヘテロ接合体率の観察値(H())およびその期待減少が有意に認められた(P<0.01)。これは，会津地鶏が発見さ値(HE)を算出した。集団間のペアワイズFSTの算出にはれた当初(1988年),数羽しか残っていなかった会津地鶏を維持FSTAT2.9.3.2ソフトウエア(Goudet,2001),遺伝距離DAsはするため，遺伝的に多様な個体を増やすために会津地鶏飼育集団間の人為的な交配の結果であろうと推察された。MNAと同様にAZL,AZM両集団はHO,"Eともに純系会津地鶏集団よりも高くなる傾向が認められた。

次に，集団間の遺伝的分化の程度を推定するために各集団間のベアワイズFSTを算出した（表3)。純系会津地鶏3集団全体のFsTは0.052,AIZ'89とAIZ'04集団間,AIZ'89とAIZ'06集団間のF,sTはそれぞれ0.069,0.083であった｡FSTが0．05から0.15では遺伝的分化の程度が中程度とされ(BallouxandLugon‑Moulil]、2002),￨司じ品種ではあるが1989年から2004年,2006
年にかけてわずかに遺伝的差異が生じたと考えられた。しかし
AIZ'04とAIZ'06集団間ではFSTが0.004と遺伝的分化の程度は低かった。このことから，純系会津地鶏集団間に認められた遺伝的分化は約15年にわたる集団の維持によって生じたものであると考えられた。商用品種の遺伝的影響を受けたAZL集団,AZM
図1.福島県農業総合センター畜産研究所養鶏分場で飼育されている会津地鶏集団と純系会津地鶏集団間のFSTは0.220から0.282と高い値を示した。

表1．本研究に用いた会津地鶏5集団および日本鶏3集団
品種略号>1>l数20()6年純系会津地鶏AIZ'0632
AIZ'04

1989年純系会津地鶏

AIZ'89大型会津地鶏AZL

肉用会津地鶏AZM
Ｏム４４二︲ａ小国

福島県農業総合センター畜産研究所養鶏分場(￨日福島県養鶏試験場）
福島県養鶏試験場
福島県養鶏試験場

福島県農業総合センター畜産研究所養鶏分場
福島県農業総合センター畜産研究所養鶏分場

ｎｄ君１勺Ｉ

岐阜地鶏
土佐地鶏

０４５２７２８２

2004年純系会津地鶏

採取地

東京農業大学
高知県畜産試験場

東京農業大学・進化生物学研究所

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岡ら：会津地鶏の遺伝的多様性
表2．会津地鶏各集団の平均対立遺伝子数および平均へテロ接合体卑集団

平均へテロ接合体卑平均対立遺伝子数(MNA=tSD.)＋｜士十一士十一

４３８３９３２２１
４０００００００００００１
５０５７３８４２４４４４５０００００士士十一十一士

AZL

４０６８６１０２０１０１０１００００００AIZ，O4AIZ'06２８３７４６０７３３５３３４６０００００８１２０５７８４６０１１１０１＋｜士十一十一士
３６７７３０７００７２２２３４AIZ'89

観察値(Ho±S.D.)期待値(HE±S.D)

AZM

集団の略名は表lを参照

表3．会津地鶏集団間のペアワイズFs,I･AIZ'89AIZ'04AIZ'06AZL

AZL

４４９２｜詔型
００AIZ，O6

３４８００４㈹沁塑
０００AIZ，O4１３４１９１８９｜帖肥 昭
００００AIZ'89

AZM

0．1116

AZM

集団の略名は表lを参照

上佐地鶏
0．05

AZM︑岐阜地鶏

炭●◆↑

AZL

AIZ'89AIZ'04
AIZ'06

肉川会小国
１大型会｝
ﾉ

純系会津地
図2

会津地鶏5集団全152個体間の遺伝距離DAsにも純系会津地鶏(2006）とづいて作成されたNJ系統樹
図中のスケールバーはDAS造伝距離を示す。各集団

図3の略名は表lを参照。

会津地鶏5集団に岐阜地鶏土佐地鶏小国を加えて算出された遺伝距離D.,にもとづいて作成された
NJ系統樹

図中のスケールバーはDA遺伝距離を，図中の数字は分岐の信頼性を示すブートストラップ°値。

純系会津地鶏3集団，大型会津地鶏，肉用会津地鶏の遺伝的類縁関係を明らかにするため，各個体間の遺伝距離DAsにもとづいて作出されたNJ系統樹を図2に示した。純系会津地鶏AIZ'89,AIZ'04およびAIZ'06集団は1つのクラスターを形成したものと純系会津地鶏集団間のDA遺伝的距離は他の日本鶏品種間とのの,AIZ'89集団のみ単独でサブクラスターを形成した。一方．商距離よりも小さなものであった。すなわち会津地鶏は大型会津地用品種の遺伝的影響を受けたAZL集団,AZM集団は純系会津鶏，肉用会津地鶏も含めて他の品種とは遺伝的にやや離れて位置地鶏集団とは明確に分かれた。

する結果となった。ミトコンドリアDNAD‑loop領域の解析か

次に日本鶏品種内における会津地鶏の遺伝的な位置をIﾘl確にすら，会津地鶏は岐阜地鶏や小国とともに中国，朝鮮半島を起源とるために，岐阜地鶏，土佐地鶏小国の解析結果を加えて遺伝距する地鶏小国系のグループに含まれることが明らかにされてい離DAを算出し,NJ系統樹を作成した（図3)。図2よりAZL,る(Oka"""2007)。一方，マイクロサテライトDNA多型の解AZM両集団は純系会津地鶏集団とは明確に分かれたが，それら析を行なったTakahashi""(1998)とOsman"".(2006)のT 〆 、 nJOO

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日本家禽学会誌45巻J2号(2008)
報告において，会津地鶏は前者では岩手地鶏や佐渡篝地鶏など，Hoffmanl,MarsanPA,BarkerSF,CothranEG,HanotteO,他の地鶏系品種とは近縁とならず，後者では小国ともっとも近縁

LenstraJA,MilanD,WeigendSandSimianerH.Newとなっている。本研究結果では，会津地鶏各集団との間では岐阜

MoDADmarkersetstobeusedindiversitystudiesforthe
majorfarmanimalspecies:recommendationsofaioint

地鶏がもっとも小さいD八遺伝距離を示したものの，明確なクラISAG/FAOworkinggroup･In:Proceedingsofthe29th
InternationalConferenceonAnimalGenetics,Septemberll

スターは認められず，いずれの集団とも遺伝的に異なる結果となった。このことから会津地鶏集団は大型，肉用会津地鶏集団を‑16th2004,MeijiUniversity,Tokyo,Japan､2004．

猪狩勉.400年の伝統が究極の鶏肉として蘇る会津地鶏養鶏

含めて他の日本鶏集団とは異なる，会津地方に固有の遺伝資源での友,444:16‑21.1999.

ある可能性が示唆された。

OhtaT.DISPAN:GeneticDistanceandPhylogeneticAnaly‑

謝 辞

sis.Availableat:http://www.bio.psu.edu/People/Facul‑

比較に用いた日本鶏のサンプルを提供していただきました，東OkaT,InoY,NomuraK,KuwayamaT,KawaShimaS,
HanadaH,AmanoT,TakadaM,TakahataN,HayashiY
andAkishinonomiyaF・AnalysisofmtDNAsequencesshowsJapanesenativechickenshavemultipleorigins.

ty/Nei/Lab/dispan2・htm､1993．

京農業大学農学部桑lll岳人教授，高知県畜産試験場大動物科

山崎清人科長（財)進化生物学研究所白石幸司博士に厚く征l1礼申しあげます。本研究の一部は平成16‑18年度東京農業大学農学研究所プロジェクト研究費および科学研究費基盤研究(A:No.

AnimalGenetics,38:287‑293.2007．

OsmanSAM,SekinoM,NishihataA,KobayashiY,Takenaka

17200015,2005‑2007),家禽資源研究会の補助を受けて実施されW,KinoshitaK,KuwayamaT,NishiboriM,YamamotoYたものである。

andTsudzukiM.Thegeneticvariabilityandrelationships
ofJapaneseandforeignchickensassessedbymicrosatellite

引 用 文 献DNAprofling.Asian‑AustralasianJournalofAnimalSci‑
ence,19:1369‑1378.2006.

会津地鶏振興会．手間をかけて育てたい−会津400年の系譜・会ParkSDETrypanotoleranceinWestAfricanCattleandthe

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岡ら：会津地鶏の遺伝的多様性

GeneticDiv
ersityandP
hylogeneticClass
if
icat
ionof
Aizu
JidoriBasedonMicrosatelliteDNAPolymorphisms
TakaoOka',Yasukolno',KohNomura',HirofilmiHanada',TakashiAmano',

KatsuhikoYamauchi2,YuujiKobayashi2,Kazukolzumida2,MasahideNishibori3,
YoshioYamamoto3andAkishinonomiyaFumihito4'DepartmentofAnimalScience,FacultyofAgriculture,TokyoUniversityofAgriculture,
Funako1737．Atsugi‑Shi,Kanagawa243‑0034

2FukushimaAgriculturalTechnologyCentre,Mansuiden2,Tomita‑Cho,Koriyama‑Shi,Fukushima963‑8041

3
Departmentof
B
ioresourceandTechnology,
GraduateSchoolofBiosphereScience,
HiroshimaUniv
ersity,Kagamiyamal‑4‑4・HigashiHiroshima‑Shi・Hiroshima739‑8528

4HayamaCenterforAdvancedStudies,TheGraduateUniversityforAdvancedStudies,
Hayama‑Cho,Miura‑Gun,Kanagawa240‑0193

SomeJapanesenativechickenbreedsarepreservedasgeneticresourcesandareusedtoestablishnew
commercialmeat‑typechickens.Aizu‑Jidoriisoneofthesebreeds.Inthisstudy,ISAG/FAOrecommended30

microsatellitemarkerswereusedtoinvestigatetemporalchangeingeneticdiversityandexplorephylogenetic
relationshipsamongAizu‑JidoriandotherJapanesenativechickenbreeds.Aizu‑Jidorisampleswerecollectedin

1989,2004and2006,respectively・LargetypeandmeattypeAizu‑Jidoriwerealsosampled・Signincantdiference
inmeannumberofalleleswasnotobservedamongthethreeAizu‑Jidoripopulations.However,atemporaldecreaseovertimeintheobservedandexpectedheterozygositywasobserved.Forinstance,ahighvalueofob‑
servedheterozygositywasobservedinthel989Aizu‑Jidoripopulation.Itissuggestedthatthel･ewasartificial
crossingwithinAizu‑Jidoripopulationinsteadofincreaseinpopulationsize.FsTvalueacrossthe3populations
was0.052indicatingamiddlelevelofgeneticdiferentiation.Therefore,inspiteofthese3populationsbeingof
thesamebreed,geneticdiHerelltiationwasobservedbetweenl989‑2006.OntheNJ‑treebasedonDAsdistance,

Aizu‑Jidoripopulationcollectedinl989wasgroupedseparatelyfromthosesampledin2004and2006.Onthe
NJ‑treebasedonDAgeneticdistance,thenveAizu‑JidoripopulationsincludelargeandmeattypeAizu‑Jidoriwere
separatedfromotherbreeds,Gifil‑Jidori,Tosa‑JidoriandShokoku.Therefbre,itissuggestedthatAizu‑Jidoriis
uniqueandvaluablegeneticresourceforFukushimaprefecture.
(Jqpa"eseJoz""αIQ/PoM/")ﾉS℃ie"ce,45:J6/‑J",2008)

Keywords:Aizu‑Jidori,geneticdiversity,geneticresource,populationstmcture

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