日本家禽学会誌，56 : J 47-J 54，2019
Copyright Ⓒ 2019, Japan Poultry Science Association

大豆代替飼料原料としてのユーグレナの給与がニワトリの成長および腸管粘液に及ぼす効果
伊藤

謙1・笹渡

翔2・安部瑠利香2・藤盛和子2・渡邉翔太3・

鈴木健吾3・朝山雄太3・南1

一郎4・西向めぐみ2・喜多一美2

秋田県立大学生物資源科学部，秋田県秋田市下新城中野街道端西 241-438 010-0195
2
岩手大学農学部，盛岡市上田 3 丁目 18-8 020-8550
3
株式会社ユーグレナ，東京都港区芝五丁目 29 番 11 号 108-0014
4
株式会社ミナミ食品，岩手県九戸郡洋野町大野第 55 地割 38-8 028-8802

日本の飼料穀物のほとんどは海外からの輸入に頼っており，畜産物における生産コストの増大に繋がっている。そこで国内における未利用資源を飼料原料として活用し，国内飼料自給率を向上させることが課題となっている。鞭毛虫の一つであるユーグレナ（E. gracilis）は培養が容易であり，各種栄養素に富むことからヒトのサプリメント等に利用されている。また飼料としての活用も期待されているが，E. gracilis をニワトリへ給与した際の影響については不明な点が多い。
そこで本研究では，E. gracilis の給与がニワトリの成長成績に及ぼす影響を調査した。その結果，飼料中の大豆粕を全てE. gracilis と代替しても，ニワトリの成長成績に影響を及ぼさなかった。また，E. gracilis は食物繊維様作用を示すパラ
ミロンを豊富に含むことが知られていることから，飼料中の繊維を全てパラミロンと代替した飼料をニワトリに給与した。その結果，E. gracilis 含量の増加に伴って腸管におけるムチンおよびリゾチームの mRNA 発現量が上昇し，飼料中繊維のパラミロンとの代替はリゾチームの mRNA 発現量を上昇させた。
以上より，飼料中の大豆を全て E. gracilis と代替しても成長成績に影響を及ぼすことは無く，腸管免疫を向上させる可能性が示唆された。
キーワード : ユーグレナ，ニワトリ，成長成績，パラミロン，ムチン，リゾチーム
──────────────────────────緒

特に Euglena gracilis はユーグレナの中でも培養が比較的容易で言あり，アミノ酸やアラキドン酸，ドコサヘキサエン酸，エイコサ

日本で消費される飼料穀物（濃厚飼料）のほとんどは，米国やペンタエン酸，リノール酸，リノレン酸，オレイン酸等の不飽和

オーストラリアなど海外からの輸入に頼っており，平成 28 年度

脂 肪 酸 を 豊 富 に 含 む（Hulanicka et al., 1964 ; Korn, 1964 :の国内自給率は約 14% である（農林水産省，2018）。また，コー

Barsanti et al., 2000 ; Schwarzhans et al., 2015）。さらに，光合成ンベルトにおける干ばつの影響やバイオエタノール生産などによの過程で難消化性の澱粉顆粒であり食物繊維様作用を持つパラミ

るトウモロコシ価格の高騰により，生産者の実質負担額は年々増。以上の特性から，
ロンを生成する（北岡，1989 ; 宮武ら，1995）

加傾向にある。さらに飼料原料の異常な価格高騰時には，国およ

E. gracilis の乾燥粉末は一般食品への添加物，健康食品，化粧品

び企業から「異常補填基金」が畜産経営者へ分配されており，飼や飼料の原料として活用されている。農林水産業の分野では，マ

料価格の高騰は生産者だけではなく国の負担にもなっている。そダイにおける体内ドコサヘキサエン酸増加試験やニジマス用飼料

こで，国内飼料自給率向上のため，飼料用米の普及や食品残渣等としての栄養評価が行われている（佐藤ら，1984 ; 林ら，1993）。

から成るエコフィードや未利用資源の利用が進められている。

ウシにおいては，飼料中 E. gracilis 添加量が 100 g/kg まではメタン排出量の減少や飼料消化率が向上したとの報告がなされていユーグレナは鞭毛虫の一種で，水溜り，池や湖に生息し 250 種
類以上が確認されている。さらにユーグレナは遺伝的に安定で突る（Aemiro et al., 2016）。ニワトリにも給与例はあるが（高井ら，

然変異が起きにくく，無機塩と炭酸ガスだけで生育可能である。

2008），飼料中への添加量は 5% までであり，より高い添加レベル
における給与試験は行われていない。以上から，E. gracilis は未2018 年 7 月 10 日受付，2018 年 12 月 17 日受理
連絡者 : 喜多一美
〒020-8550 盛岡市上田 3 丁目 18-8
Tel : 019-621-6163
Fax : 019-621-6163
E-mail : kitak@iwate-u.ac.jp

利用資源として着目されており，畜産動物への利用も進められているが，ニワトリに関する報告は少ない。また，E.gracilis は生育環境により栄養成分が変動し，2000 lux の光条件下では CP 含量が 54.81%，粗脂肪 15.19% となり，暗黒中では CP 含量が 31.75%，粗脂肪が 8.71% となる（北岡ら，1997）。

J47

日 本 家 禽 学 会 誌

56 巻

J 2 号（2019）

そこで，本研究で用いる E. gracilis の一般成分分析を行った験終了後，飼料摂取量および体重を測定した。ニワトリは，イソ後，飼料原料である大豆粕を E. gracilis と大量に代替した際の成フルランを用いて過麻酔処理した後，心臓から全量採血を行ない

長成績に及ぼす影響を調査するとともに，E. gracilis の機能性成安楽死させた。血液は 4℃，3,000 x g で 20 分間遠心分離し，上清分であるパラミロンの効果を調査することを目的とした。

を回収後−20℃で凍結保存した。心臓，肝臓，筋胃，浅胸筋，深胸筋および大腿二頭筋を採取し，組織重量を測定した。本実験は材 料 と 方 法

岩手大学動物実験委員会の承認（承認番号 : A201727）を得て実施した。

1． E. gracillis の一般成分分析および総アミノ酸含量測定

3． 飼料中繊維のパラミロンへの代替がニワトリの成長成績に

E. gracillis の乾燥粉末を株式会社ユーグレナ（東京）から入手

及ぼす影響（実験 2）した。CP 含量，粗脂肪および粗灰分は公定法に従って行った（日本飼養標準成分表（2009 年版））。CP 含量は，自動ケルダール

単冠白色レグホン種初生雄ヒナ 100 羽を小岩井農牧株式会社

装置（Kjeltec TM 2300, FOSS Co., Ltd., Hillerød, Denmark）を用（雫石，岩手）から搬入後，8 日齢まで育雛機で平飼いにした。飼いて分析を行った。粗脂肪含量はソックスレー法を用い，ジエチ

料と水は自由摂取とし，飼料は市販幼雛用飼料（アジャスト幼雛，

ルエーテルで 16 時間抽出を行なった。粗灰分含量は乾式灰化法

CP 20.0%，ME 2,900 kcal/kg，豊橋飼料株式会社，愛知）を用いを用い，サンプルを 600℃で 4 時間加熱した。E. gracilis 中の総た。8 日齢のヒナを 1 区画あたり 2 羽ずつケージに入れ 2 日間環

アミノ酸含量を測定するため，サンプルを 6N HCl，110℃で 24 時

境馴致を行った。10 日齢時に各処理区の平均体重が等しくなる

間加水分解した後，減圧下で乾固し，0.02N HCl で再溶解した。

ように 32 羽選抜し，1 処理区あたり 8 羽ずつ 4 処理区に振り分け再溶解したサンプルを全自動アミノ酸分析装置（JLC-500/V2, 日

た（平均体重 91.0±0.4（標準誤差）g）。ケージに 1 羽ずつ入れ，

本電子株式会社，東京）により E. gracilis 中の総アミノ酸含量を

各処理区用の実験飼料を水と共に自由摂取で 2 週間給与した。照測定した。

明は明期 24 時間とした。実験試料は，飼料中含量 5，10 および2． 飼料中大豆粕の E. gracillis への代替がニワトリの成長成

20% の大豆粕を E. gracillis と代替した飼料と，セルロースを全績および血中遊離アミノ酸濃度に及ぼす影響（実験 1）

量パラミロンと代替した飼料を用いた（表 2）。パラミロンは株式

単冠白色レグホン種初生雄ヒナ 100 羽を小岩井農牧株式会社

会社ユーグレナから入手した。試験終了後，飼料摂取量および体（雫石，岩手）から購入し，8 日齢まで育雛器内で平飼いにした。

重を測定した。イソフルランを用いてニワトリを過麻酔処理し，飼料および水は自由摂取とし，飼料は市販幼雛用飼料（アジャス

心臓から全量採血を行ない安楽死させた。血液は 4℃，3,000 x g，ト幼雛，CP 20.0%，ME 2,900 kJ/g，豊橋飼料株式会社，愛知）を

20 分間で遠心分離し，上清を回収した後，−20℃で凍結保存し用いた。8 日齢のヒナを 1 区画あたり 2 羽ずつケージに入れ，2た。心臓，肝臓，筋胃，浅胸筋，深胸筋，大腿二頭筋および小腸

日間環境馴致を行った。10 日齢時に各処理区の平均体重が等しを採取し，組織重量を測定した。また，小腸から粘膜上皮を採取

くなるように 42 羽を選抜し，1 処理区あたり 6 羽ずつ計 7 処理区

し，液体窒素で凍結後，−80℃で凍結保存した。本実験は岩手大に振り分けた（平均体重 99.6±2.3（標準誤差）g）。ケージに 1 羽

学動物実験委員会の承認（承認番号 : A201550）を得て実施した。

ずつ入れ，各処理区用の実験飼料を水と共に自由摂取で 2 週間給4． 血中遊離アミノ酸濃度測定

与し，照明は明期 24 時間とした。実験飼料は日本飼養標準・家禽

血清を 3% スルホサリチル酸と 1 : 1 の割合で混合した後，1 晩（2011 年版）を満たすように飼料中含量 2, 4, 10, 20, 30 および4℃下で静置した。静置したサンプルを 13,000 x g，4℃，20 分間

40% の大豆粕を E. gracilis と代替した飼料を用いた（表 1）。試

遠心分離し，上清を 0.22 μm メンブレンフィルターに通した後，表 1． 実験飼料組成（g/kg）（実験 1）E. gracilis 添加区

E. gracilis
大豆粕
圧片トウモロコシ
ミネラル混合物
ビタミン混合物
コーン油
セルロース
CP（%）
ME (Mcal/kg)

対照区

2%

4%

10%

20%

30%

40%

0
400
400
60
2
40
98
19.8
2.96

20
380
400
60
2
40
98
19.6
2.99

40
360
400
60
2
40
98
19.4
3.01

100
300
400
60
2
40
98
18.8
3.09

200
200
400
60
2
40
98
17.8
3.23

300
100
400
60
2
40
98
16.9
3.36

400
0
400
60
2
40
98
15.9
3.49

対照区の飼料組成を基本とし，E. gracilis と大豆粕を置換した。対照区飼料は日本飼養標準・家禽（2011）
を満たすように飼料設計を行った。ミネラル混合物およびビタミン混合物の組成は Kita ら（1996）の組成を参考に調整した。

J48

伊藤ら : ユーグレナ添加飼料と腸管粘液
表 2． 実験飼料組成（g/kg）（実験 2）E. gracilis 添加区

パラミロン添加区

対照区

5%

10%

20%

E. gracilis

0

50

100

200

0

パラミロン

0

0

0

0

98

大豆粕
圧片トウモロコシ

400
400

350
400

300
400

200
400

400
400

ミネラル混合物

60

60

60

60

60

ビタミン混合物
コーン油

2
40

2
40

2
40

2
40

2
40

セルロース

98

98

98

98

0

CP（%）
ME（Mcal/kg）

19.8
2.96

19.3
3.03

18.8
3.09

17.8
3.23

19.8
2.96

対照区の飼料組成を基本とし，E. gracilis またはパラミロンを大豆粕と置換した。対照区飼
料は日本飼養標準・家禽（2011）を満たすように飼料設計を行った。ミネラル混合物およびビタミン混合物の組成は Kita ら（1996）の組成を参考に調整した。

表 3． プライマー配列
Gene name

Transcript ID

Left primer (5′→ 3′)

Right primer (5′→ 3′)

Product size

MUC2

NM_001318434.1

TGCTCACACTTGGAAGTCAGCAGCC

TCCATGGAGTCTGCAGGAGCACTGG

LYZ C
ACTB

NM_205281.1
NM_205518.1

TCCAGGAACCTGTGCAACATCCCGT
CACAGAGGCTCCCCTGAACCCCAAACGCTGACGATCTTCTTCGCGCAGTTACGACCAGAGGCATACAGGGACAGC

96
137
127

GAPDH

NM_204305.1

CTTTGATGCGGGTGCTGGCATTGC

TGTGTGCCTGGCTCACTCCTTGGA100

Primer 3 plus を用いてプライマーの設計を行った。MUC2 : Mucin 2. LYZ C : Lysozyme C. ACTB : Actin beta. GAPDH : Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase.

全自動アミノ酸分析装置により血中遊離アミノ酸含量を測定しグノスティックス株式会社）を用いてインターカレーション法にた。

よる RT-qPCR を行った。初期変性を 95℃ 60 秒間で行った後，5． 総 RNA 抽出および qRT-PCR による遺伝子発現の測定

95℃ 15 秒間，60℃ 30 秒間，72℃ 30 秒間で 40 サイクル反応させMUC2（Mucin 2），LYZ C（Lysozyme C），ACTB（Actin beta）

た。Ct 値を算出した後，PCR 効率補正モデルによる相対定量法

および GAPDH（Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase）

を用いて定量を行った。内在性コントロールは，複数の候補の中をターゲットとしたプライマーを作成し，RT-qPCR を行った。

から安定している遺伝子である ACTB を用いた。

ターゲットとなる遺伝子を Ensemble genome browser 92（Zerbino

6． 統計解析

et al., 2018）上で参照し，エクソンジャンクションを含む，または

結果は平均値および Pooled SE で表した。統計処理はフリー統

イントロンが 500 bp 以上含むように Primer3Plus（Untergasser,

計ソフト「R」の lme4 パッケージを用いて一般線形混合モデル

2007）を用いてプライマーを設計した（表 3）。総 RNA は，TRI（GLMM）により解析をおこない，モデルの適合度は AIC を基準®

Reagent （シグマ アルドリッチ ジャパン合同会社，東京）を用とした（R Core Team，2017）。成長成績，血中遊離アミノ酸濃度

いて抽出し，精製した RNA ペレットを Nuclease-free water 中でおよび遺伝子発現量は最終体重をランダム要因として指定し，組溶解した。総 RNA の濃度は Nanodrop（サーモフィッシャーサ

織重量は飼料効率をランダム要因として指定した。その後，

イエンティフィック株式会社，東京）を用いて測定し，A260/

Tukey HSD の多重比較検定を行い，p＜0.05 を有意差とした。

A280 比が 1.65 以上であることを確認した。総 RNA は DNase I

結（タカラバイオ株式会社，滋賀）を用いて DNase I 処理を行い，続果

いて ReverTra Ace®（東洋紡株式会社，大阪）を用いて cDNA を

E. gracillis の一般成分分析合成した。サイクルは 37℃ 30 分間，98℃ 5 分間, 12℃ 5 分間で

E. gracilis 中の CP 含量，粗脂肪含量および粗灰分含量はそれ行った。最終濃度が，cDNA 100 ng，10 pmol Left primer，10 pmol

ぞれ，34.4%，13.8% および 4.8% であった。これに対して大豆粕

Right primer となるように THUNDERBIRD SYBR qPCR Mix

は 51.1%，2.2% および 7.3% であった（表 4）。E.gracilis 中のグル

（東 洋 紡 株 式 会 社）へ 添 加 し，Applied Biosystems® StepOne

タミンおよびグルタミン酸含量は大豆粕と比較して低いものの，

PlusTM リアルタイム PCR システム（サーモフィッシャーダイア

アラニン含量は E. gracilis で高値を示した。ニワトリにおける

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日 本 家 禽 学 会 誌

56 巻

J 2 号（2019）

表 4． E. gracilis の一般成分分析およびアミノ酸含量
E. gracilis* 大豆粕* 圧片トウモロコシ

アミノ酸（g/100 g）
Ala

4.74

2.21

0.65

Asn + Asp
Arg

4.43
3.86

5.73
3.64

0.58
0.43

Gln + Glu

6.31

8.90

1.55

Gly
His

2.55
1.21

2.19
1.32

0.35
0.25

Ile

1.80

2.20

0.27

Leu
Phe
Pro
Ser

4.22
2.34
3.51
1.61

4.03
2.57
2.51
2.55

1.09
0.45

Thr

2.94

1.99

0.33

Tyr
Lys
Val

1.70
3.34
2.87

1.62
3.29
2.31

0.27
0.29
0.42

34.4
13.8
4.8

51.1
2.2
7.3

8.8
4.4
1.4

0.75
0.43

一般成分
CP（%）
粗脂肪（%）
粗灰分（%）* 日本標準飼料成分表（2009）参照値。太字はニワトリにおける必須アミノ酸を示す（National Research Council, 1994）。

表 5． 飼料中大豆粕の E. gracillis への代替がニワトリの成長成績に及ぼす影響（実験 1）E. gracilis 添加区

増体量 (g)
飼料摂取量 (g)
飼料効率
組織重量（g/100 g 体重）
肝臓
心臓
筋胃
浅胸筋
深胸筋
大腿二頭筋

対照区

2%

4%

10%

20%

30%

40%

Pooled SE

170.67429.67175.67433.00164.17403.50178.83421.83172.83409.50171.67409.83162.67389.00

7.26
15.51

0.40

0.41

0.41

0.42

0.42

0.42

0.42

0.02

2.70b
0.76
2.19c
3.19
1.01
5.71

2.84ab
0.69
2.18c
3.30
1.10
5.50

3.02ab0.68
2.30bc
3.06
0.99
4.82

3.06ab
0.75
2.44abc
3.18
0.99
5.20

3.06ab0.68
2.29bc
3.07
0.94
4.98

3.12a
0.68
2.68ab
3.05
0.98
4.86

3.18a
0.70
2.83a
3.05
0.97
4.80

0.10
0.03
0.12
0.12
0.06
0.34

それぞれの数値は平均値で表し，標準誤差を pooled SE として表記した。反復数 n＝6。a〜c ; 異なる符号間に 5% 水準の有意差あり。

必須アミノ酸に関しては大豆粕とほぼ同値を示しており，大豆粕

ロイシンおよびメチオニン濃度が有意に上昇し，30% 区ではメチとの代替が可能であることが示唆された。

オニンおよびスレオニン含量が有意に上昇した（表 6）。

飼料中大豆粕の E. gracillis への代替がニワトリの成長成績お飼料中繊維のパラミロンへの代替がニワトリの成長成績に及ぼよび血中遊離アミノ酸濃度に及ぼす影響（実験 1）

す影響がニワトリの成長成績に及ぼす影響（実験 2）

増体量，飼料摂取量および飼料効率において，全処理区間にお増体量，飼料摂取量および飼料効率では，いずれの処理区間にいて有意差は認められなかった（表 5）。飼料中ユーグレナ含量おいても有意差は認められなかった（表 7）。対照区と比較して30% および 40% 区で 100 g 体重当たりの肝臓および筋胃重量がE. gracillis 5% 添加区において浅胸筋および深胸筋重量が有意に有意に増加した。

増加し，パラミロン添加区における浅胸筋重量が対照区よりも低値を示した。

血中遊離アミノ酸含量は，飼料中 E. gracillis 含量 2% 区でイソ

J50

伊藤ら : ユーグレナ添加飼料と腸管粘液
表 6． 飼料中大豆粕の E. gracillis への代替がニワトリの血中アミノ酸濃度に及ぼす影響（μM）（実験 1）E. gracilis 添加区
対照区

2%

4%

10%

20%

30%

40%

Pooled SE

Ala

520

620

541

594

615

642

623

48

Arg

349

321

293

341

273

267

252

31

Asn
Asp

281
91

Cys
Gln
Glu

48ab
1144
233

314
95
61a

346
70
49ab

324
88
56ab

349
76
50ab

280
116
46b

267
99
46ab

53
30
4

1193
226

1219
224

11268
265

1215
223

1403
290

1345
245

115
45

Gly

471

564

460

478

508

526

491

34

His
Ile
Leu
Lys
Met
Phe
Pro

98
148b
261ab
564b
51b
110ab
322

106
194a
318a
968ab

101
147b
271ab
906ab

97
138b
257ab
663ab

112
139b
265ab
925ab

113
129b
261ab
1105a

102
98b
222b
644ab

9
13
19
124

69a
128a
371

61ab
124ab
310

58ab
114ab
308

63ab
106ab
326

69a
115ab
311

66a
101b
283

4
7
32

Ser
Thr
Tyr
Trp

822
472b
125ab
82

982
549ab
168a
90

1002
561ab
143ab
88

1001
462b
121b
87

1057
616ab
142ab
96

1118
751a
162ab
91

1069
667ab
146ab
103

78
55
12
12

Val

287

323

274

270

285

276

242

21

a〜c

それぞれの数値は平均値で表し，標準誤差を pooled SE として表記した。反復数 n＝6。
水準の有意差あり。

; 異なる符号間に 5%

表 7． 飼料中繊維のパラミロンへの代替がニワトリの成長成績に及ぼす影響（実験 2）
飼料中 E. gracilis 添加区

増体量（g）
飼料摂取量（g）
飼料効率
組織重量（g/100 g 体重）
心臓
肝臓
筋胃
浅胸筋
深胸筋
大腿二頭筋

対照区

5%

10%

20%

173.67426.170.41

182.67435.670.42

185.50442.830.42

180.50434.83
0.42

0.64
2.69
2.75a
3.35b
1.16bc5.59ab

0.62
2.73
2.48b
3.66a
1.28a
5.68ab

0.60
2.88
2.55ab3.45b
1.22ab
5.76a

パラミロン添加区

Pooled SE

182.67453.50
0.40

6.01
13.52
0.01

0.64
2.68
2.64ab3.29bc1.15bc
5.33b

0.65
2.72
2.64ab
3.09c
1.12c
5.44b

0.01
0.07
0.07
0.05
0.03
0.12

それぞれの数値は平均値で表し，標準誤差を pooled SE として表記した。反復数 n＝6。a〜c ; 異なる符号間に 5% 水準の有意差あり。

飼料中繊維のパラミロンへの代替が小腸における免疫関連遺伝が認められた（P＝0.069）（表 8）。

子発現量に及ぼす影響

考

小腸における MUC2 の mRNA 発現量は E. gracilis 10% 添加

察区よりも 20% およびパラミロン添加区で有意に増加した。LYZ

一般成分分析から，E. gracilis の CP 含量は大豆粕よりも低い

C の mRNA 発現量は対照区および E. gracillis 5% 添加区と比較

ものの 34.4% と高く，粗脂肪含量は圧片トウモロコシより高くしてパラミロン区で有意に上昇した。また，E. gracilis 10% 添加

4.4% であった（表 1）。また，E. gracilis のアミノ酸組成が大豆粕

区よりも 20% 添加区の LYZ C の mRNA 発現量が上昇する傾向に近い組成となっていたため（表 4），実験 1 では E. gracilis を大J51

日 本 家 禽 学 会 誌

56 巻

J 2 号（2019）

表 8． 飼料中繊維のパラミロンへの代替が小腸における免疫関連遺伝子発現量に及ぼす影響
飼料中 E. gracilis 添加区
標的遺伝子
MUC2
LYZ C

対照区
ab

1.00 *
1.00b*

5%

10%
ab

1.62
2.50b

b

パラミロン添加区

Pooled SE

2.85a
12.56a

0.87
2.30

20%

0.98
3.34ab

4.34a
7.22ab

それぞれの数値は平均値で表し，標準誤差を pooled SE として表記した。反復数 n＝6。a, b ; 異なる符号間に 5% 水準の有意差あり。
* 一つの欠損値を示す。

体を抑制させ，消化管内滞留時間および排泄量を増加させること

豆粕と段階的に置換し，ニワトリの成長成績および組織重量に及ぼす影響を調査した。その結果，全処理区間における増体量，飼が示されている（河野ら，1987）。実験 2 では，対照区と比較して料摂取量および飼料効率における有意差は認められなかった。マ

パラミロン添加区で浅胸筋重量が有意に減少していることから，

ウスやヒツジを対象としてユーグレナを給餌した際，タンパク質

パラミロンにより本来吸収される脂質量が減り，摂取するエネルの消化率が向上させることが報告されている（細谷ら，1977 ;ギー量が減った結果，浅胸筋重量の低下が生じたと推測された。

Aemiro et al., 2017）。Ameiro ら（2017）の報告では，ヒツジへの前述の通り，パラミロンは食物繊維作用を持つことから，腸にユーグレナ給与試験において，対照区の CP 消化率が 0.69 となおける整腸作用が期待された。食物繊維の給与は腸内細菌の変化

り，飼料中 E. gracilis 添加量 15% の飼料では 0.72 と有意に上昇を引き起こし，腸管内の杯細胞の細胞数を増加させ，腸管の粘液したことを示している。本研究において，E. gracilis の CP 含量であるムチンの分泌量を増加させることが報告されているが大豆粕より低値を示したにも関わらず，実験 1 で成長成績に対（Satchithanandam et al., 1990 ; McCullough et al.，1998）。そ こ

照区と E. gracilis 添加区の間に有意な差が認められなかったこ

で，実験 2 では小腸を採取し，腸管粘液の成分であるムチンの遺とから，ニワトリにおいても哺乳類と同様に，飼料中 E. gracilis

伝子 MUC2 の発現量を RT-qPCR で定量し，パラミロンおよび添加量の増加とともに CP の消化率向上作用が働いたと推察され

E. gracilis が腸管粘液に及ぼす影響を調査した。その結果，パラた。

ミロン区で小腸における MUC2 の遺伝子発現量が上昇し，さら実験 1 では対照区と E. gracilis 添加区の間に飼料効率の変化に飼料中 E. gracilis 含量の増加に伴って小腸における MUC2 のは認められなかったものの，100 g 体重当たりの筋胃重量が有意

遺伝子発現量が上昇することが明らかとなった（表 8）。ムチンに増加した（表 5）。紙や木の削りクズ，オーツ麦の外皮等の不溶は，腸管上皮の杯細胞から分泌され細胞表面を覆うことで細菌感性繊維をニワトリの飼料に添加することで筋胃重量が有意に増加染を防ぐことが知られている（Kim and Ho, 2010）。以上より，E.

することが報告されている（Hetland et al., 2005 ; Sacranie et al.,gracilis 中のパラミロンの食物繊維作用が，ニワトリ腸管内の杯

2012）。Euglena 属は細胞壁を持たないが，不溶性食物繊維と同細胞を増加させ，その結果としてムチン分泌量を増加させた可能様の生理機能を示すパラミロンを細胞内に蓄積している。パラミ性が示唆された。また，飼料中への E. gracilis 添加によりムチン

ロンは Euglena 属に特有の難消化性の多糖類であり，3 本の直鎖の分泌量増加を介して腸管免疫機能の向上に貢献している可能性

β-1,3-グルカンがねじれ合った螺旋構造を持ち，どの生物起源のが示された。

β-1,3-グルカナーゼを用いても加水分解されない（Marchessault

ム チ ン と 同 様，腸 管 免 疫 を 支 え る リ ゾ チ ー ム（LYZ C）のand Deslandes, 1979 ; 宮 武 ら，1995）。本 研 究 で は，飼 料 中 E.

mRNA 発現量についても測定を行った。その結果，パラミロン

gracilis 添加量が 30% 以上になると筋胃重量が増加したことから添加区で有意に小腸における LYZ C の mRNA 発現量が上昇し，（表 5），飼料中の E. gracilis 添加が増加するとともにパラミロン

飼 料 中 E. gracilis 含 量 の 増 加 に 伴 い 小 腸 に お け る LYZ C の含量が増加することで不溶性食物繊維作用が強まった結果，筋胃mRNA 発現量が上昇した（表 8）。リゾチームはクロストリジウ

重量が増加した可能性が示唆された。

ム属やスタフィロコッカス属等のグラム陽性細菌に対して抗菌性そこで，実験 2 では飼料中のセルロースとパラミロンを置換を 示 す こ と か ら（Elphick and Mahida, 2005），飼 料 中 へ の E.

し，パラミロン給与によるニワトリの成長成績および組織重量に

gracilis はニワトリにおけるグラム陽性細菌に対する抗菌性を高及ぼす影響を調査した。E. gracilis 中のパラミロンは最大限乾燥

める可能性が示唆された。

，本試験では E. gracilis
重量の 50% 程度であり（宮武ら，1995）

本研究では，E. gracilis を大豆粕と完全に置き換えても飼料効

20% 添加区がパラミロン添加区と同等のパラミロン含量となっ率に影響を及ぼさず，さらに飼料中 E. gracilis 添加量を 5% にすている。実験 2 における給与試験の結果，筋胃重量については，ることで骨格筋重量を有意に増加させることが示された。しか全処理区間に有意な差は認められなかった（表 7）。以上より，飼し，飼料中 E. gracilis 添加量を増加させても骨格筋重量を増加さ

料中パラミロン含量が 10% よりも高くなければ E. gracilis の持

せ る 効 果 は 認 め ら れ な か っ た。興 味 深 い こ と に，飼 料 中 E.

つ不溶性食物繊維作用を示さないことが示唆された。

gracilis 添加量を 20% にすることで腸管免疫を向上させる可能性

また，パラミロンは食物繊維作用によりコレステロール吸収自が示唆された。このように，E. gracilis は大豆粕と同様にタンパ

J52伊藤ら : ユーグレナ添加飼料と腸管粘液
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ク質供給源としては優秀であり，腸管免疫賦活化効果も期待できるが，E. gracilis の食物繊維作用は生体へのエネルギー供給を抑制する可能性があるため，使用する際には添加量に十分留意することが必要である。今後は，E. gracilis の整腸作用および腸内細菌叢に及ぼす影響を調査する必要がある.

引

用

文

献

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J53

日 本 家 禽 学 会 誌

56 巻

J 2 号（2019）

Effects of the Feeding of Euglena Replaced with Dietary Soybean
on the Growth and Intestinal Mucus of Chickens
Ken Ito1, Kakeru Sasawatari2, Rurika Abe2, Wako Fujimori2, Shota Watanabe3, Kengo Suzuki3,
Yuta Asayama3, Ichiro Minami4, Megumi Nishimukai2 and Kazumi Kita2
1

Faculty of Bioresource Sciences, Akita Prefectural University,

2-2 Aza Minami Ogata Village, Minamiakita-gun, Akita 010-0444 Japan
2

Faculty of Agriculture, Iwate University, 3-18-8 Ueda, Morioka 020-8550, Japan
3

4

Euglena Co, Ltd., 5-29-11 Shiba, Minato-ku, Tokyo 108-0014, Japan

Minami Food’s Inc., 55-38-8 Ohno, Hirono-cho, Kunohe-gun, Iwate 028-8802, Iwate

Ministry of Agriculture, Forestry and Fisheries in Japan reported that the self-sufficiency rate of feedstuffs wasapproximately 25%. Most of grains for feedstuffs like corn, soybean and wheat are imported from overseas to Japan,
which results in a sharp increase in prices of commercial animal feeds because of various incidents like the climatechange, also called global warming. To solve this problem, it is important to increase the domestic supply of unused
resources which can be alternative to feed grains. Recently, Euglena, which is a genus of single-celled flagellate eukaryotes, has been used to be a material of dietary supplements, cosmetics and feedstuffs because it has a plenty ofnutrients. But the dietary effect of Euglena gracilis has not been elucidated so far. In the present study, the influence ofE. gracilis replaced with soybean in diets on the growth of chickens was examined. E. gracilis replaced with all ofsoybean did not showed any adverse effects on the growth of chickens. The mRNA expression levels of MUC2 and LYZ
C were increased along with the increase in dietary E. gracilis content. When most dietary fiber was replaced withparamylon, which is a resistant carbohydrate and made in E. gracilis, the mRNA expression level of LYZ C was elevatedcompared to the control. These results suggest that all of soybean can be replaced with E. gracilis, and dietary E.
gracilis could enhance intestinal immunity of chickens.
(Japanese Journal of Poultry Science, 56 : J47-J54, 2019)
Key words : chicken, E. gracilis, growth performance, lysozyme, mucin, paramylon

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