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日本家禽学会誌,42:e/94Tﾉ98,2005

岐阜地鶏における抱卵中絶後の血漿プロラクチン，黄体形成ホルモン，卵胞刺激ホルモン及びエストラジオール儂度の推移
桑山岳人l,勝又瑞穂l,岩澤淳2！東京農業大学農学部畜産学科，神奈川246‑OO63

2岐阜大学応用生物科学部生物資源生産学科，岐阜501‑1193

抱卵行動が確認された鶏を抱卵開始3日目から3日間ケージに移し，その後元の場所に戻すという抱卵中絶処理を行ない，抱卵開始31=1[￨から15日間毎日採血し,lill漿のプロラクチン，黄体形成ホルモン，卵胞刺激ホルモンの各濃度をラジオイムノアッセイにより測定し，また血漿エストラジオール176濃度を時￨II1分解蛍光免疫illl1定法で測定した。

抱卵行動はケージに移すとI丘ちに中止し，その後元の場所に戻しても再び抱卵ｲj動を示すことはなかった。

血漿プロラクチン機度はケージに移すと急激に低下し，その後も低いレベルのまま帷移した。
黄体形成ホルモン膿度はケージに移すと急激に上昇し，その後も緩やかに増"l1した。
卵胞刺激ホルモン淵隻は頤著な変化を示さなかった。

エストラジオール17β膿度ケージに移すと急激に上昇し，その後も緩やかに増加した。
以上の結果より。抱卵行動を'￨‑!絶させると卵巣機能が速やかに回復の方向へ向かい産卵のi恥N始が早められることが示唆される。

キーワード：抱卵中絶，フ・ロラクチン，黄休形成ホルモン，卵胞刺激ホルモン，エストラジオール

一一一一目緒と考えられている。抱卵行動の発現・維持には巣箱の存
在，卵の存在，暗い場所，暖かい環境温度が要因となっ抱卵行動は，脳下垂体からのプロラクチン(PRL)のているといわれている。しかし，これが不可欠な要因で分泌が増加することによって発現するとみなされていあるとは考えられていない。抱卵（抱卵）の中絶処即は，る。このことは，抱卵行動がPRLの投与により発現す

古く頭部電気刺激(Nakajyo,1952)や夜間電灯照￨ﾘ1(中ること(RiddleaaJ"1935;NakajyoandTanaka,条,1953)などの方法が報告された。その後，ケージに1956),抱卵'￨:1の脳下垂体11ii葉'l'のPRL含量(Saeki

移動することが抱卵の中絶に有効であるといわれるよう

andTanabe,1955;NakajyoandTanaka,1956)や血になった。しかし，ケージに移動して抱卵が一｣̲LII'絶し漿PRL濃度(Sharpe"/.,1979;1988;Lea"(zJ.,1981;

た鶏を巣箱がある状態にしても再び抱卵することが一部

Talbotaaj"1991)がI害jいことにもとづいている。一のブロイラーで確認されているが(Richard‑Yris"".,方，抱卵行助が発現しているときは,IⅢ漿I‑￨'の黄体形成1998)地鶏の場合,￨￨月らかにされていない。また，もしホルモン(LI‑I)(Sharpαα/.,1979;1988;Lea"".,

再び抱卵することはないとすれば，抱卵の''1絶によって1981;Zadworny"".,1988;KLIwayamaem/.,1992)

産卵が早く開始する筈であると』I&!われるがlifかめられてやエストラジオール膿度(Zadwo'‑nyemj.,1988;Kuwa‑

いない。抱卵の中絶によって,PRLの分泌は既に報告さyama"".,1992)はPRLとは逆に低下していることがれているように(ElHalawani"".,198();Talbot"知られている。従って，抱卵に伴う産卵の停止は，それ

aI.,1991;Richard‑Yrisaaｲ.,1998;RameshaaJ.,

らのホルンモン分泌の変化によって引き起こされている

2001）速やかに減少するであろうが，産卵を促す'Wlill泉刺2004年12)122II受付.,2005年1月28日受理

激ホルモンである卵胞刺激ホルモン(FSH)や黄体形成連絡者：桑山岳人(Email:takehito@nodai.ac.jp,ホルモン(LH)の分泌が増加するかどうかは1ﾘlらかでな

Tel:046‑270‑6589,Fax:046‑270‑6226)

く，また性腺刺激ホルモンによって促される卵l1世ホルモ

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桑lllら：抱卵'￨'絶後のホルモン分泌J95ン（主としてEstradiol‑178:E2)の分泌も増加するかどた。その後，巣箱を設置した元の平飼いケージ戻しても，うかも明らかでない。そこで水実験では，3111川巣絹の抱卵行動を示す個体は見られなかった。尚，抱卵行動中ないケージに転居させることによって抱卵行動を人為的絶処蠅開始後から次期産卵が開始されるまでのu数はに中断させたとき，母鶏の卵巣機能が速やかに回復の方15.8±2.5日であった。

向に向かうのか内分泌学的に検討を加えた。

材料及び方法
供試鶏には，岐阜地鶏の成鶏(1〜2年鶏）で抱卵を開プロラクチン(PRL)IⅡ漿PRL濃度は，抱卵中絶処理開始時では314±96n9/mjであったが，処理開始翌日には,15±7n9/mlまで低 ドした。その後，低い値のまま推移した。

始したもの4羽を用いた。これらの供試鶏は,14L:10

黄体形成ホルモン(LH)

D(5時点灯）照明(30‑4,0001ux)条件 ドで，自由採餌，血漿LH濃度は，処理開始時では1.050.35n9/m/で自由飲水とし，床面の一端に巣箱（幅21cm×奥行き41あったが，翌日には,2.21=tO.42n9/mjまで上昇した。

cm×高さ41cm)を設置したケージ(11357cm×奥行き

その後も，徐々に上昇して,14日目では4.65±2.61n9/57cm×高さ57cm)に1羽ずつ収容して飼育した。抱卵m/であった。の開始日は，抱卵行動を発現しているII*I体の最終産卵LIの翌日と定義した。

卵胞刺激ホルモン(FSH)

血漿FSH濃度は，処理開始時では42.0±12.4n9/mZ

抱卵行動の中絶処理は，予備実験において抱卵行動をであったが，61」口で若干増加しており667±27.7n9/発現して3R目に採卵用単飼ケージ(IIIM45cm×奥行きm/であった。その後は顕著な変動は示さず50n9/mj前20cm×高さ40cm)'､l日間あるいは2日間移動した後の値で推移した。

後，元のケージに戻した場合，それぞれ5>l>11￨‑12>l>1,9>I>l

エストラジオール176(E2)巾2羽が抱卵行動を再発現したため，その移助期￨H1は31m漿E2濃度は，処理開始時では19±2pg/m/であっ日間とした。

たが，翌日には,7825pg/m/まで上昇した。その後血液の採取は，採卵川単飼ケージに移したllとその後14日間毎日正午に実施した。採取したllll液は￨￨'[ちに速心も，徐々に￨冤昇して,141」目で155=tl5pg/mjまで上昇していたハ

分離して血漿を得た後，‑30℃の冷蔵l'li内で保存し，考 察

PRL,LH,FSH,E2の各ホルモン膿l"!1ll定に仙川した。
PRLの測定には,Parlow博士から提供されたPRLの抱卵を開始した鶇を抱卵開始3日目から3日間単飼標準品(cPRLI‑eferencepreparationAFP‑lO328B)おケージに移すと巣箱のある元の場所に戻しても再び抱卵よび1次抗体(rabbitaniti‑cPRLAFP‑l51040789)を川することはないことが明らかとなった。この場合，31］

い,LIIの測定には,ProL'dmanl'¥̲lから捉供された鷺ル￨H1という移動期間が抱卵中絶に絶対的に必要であるかど

LHの標準品(USDA‑cLH‑K‑3)および1次仇休うかは充分に砿かめられていないが,1日又は2日間で(USDA‑AcLH‑5)を用い,FSHの測定には,Proudman

は元の場lﾘTに戻すと再び抱卵することがあることを予め博士から提供された鶏FSHの標準品(USDA‑cFSII‑K認めているので全ての鶏で抱卵を中断させるためには3I)および1次抗体(USDA‑AcFSH‑16)を，いずれの場

1̲1間という移動期間は必用最小限の期間であろうと思わ合も2次抗体としては若林博士より提供されたHAC‐れる。

RBA2‑03‑GTP86を用いてた。尚，標準｢II尚のヨード化は抱卵鶏を単飼ケージに移すと血漿PRL濃度は忽ち減

ラクトペルオキシターゼ法で行なった。ラジオイムノ

少し，以後内び上昇することはなかった（図1)。このよ

アッセイの測定内変動係数および#ll1定間変動係数は，

うなPRL濃度の速やかな減少はSharp"".(1988)及

PRL:9.5%,13.8%,FSH:11.2%,13.2%,LH:7.5%,

UfRichard‑Yris"".(1988)が報告した巣箱剥奪の場88％であった。血漿E2濃度の測定は,Wallac社の＃{l1合と良く似ている。Sharp"".(1988)は巣箱を剥奪す

定キット(RO56‑101J)を用いて時間分解蛍光i1lll定法でるとIm漿PRL濃度は一旦は減少するが,2日後に巣箱測定した。尚，測定内変動係数および測定間変動係数は，に戻すとPRL濃度は再び上昇すると報告している。本6.0%および5.9%であった。

結 果

実験では3日間経過後に巣箱のある場所に戻しているが血漿PRL儂度は減少したままであった｡PRLは抱卵を発現させ，これを維持する作用を有するホルモンである抱卵行動から,PRL分泌が低下したままであることは抱卵が巾

抱卵行動は，単飼ケージに移動すると直ちに1'1断し絶したままで再現しないことの原因であろうと思われCopyright ©2005, Japan Poultry Science Association
12号(2005)[l本家禽学会誌42巻

J96

100

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含日瓦ｇ入卜やトロ瓶

400

ミ戸昌︑昌一〆弓︑﹄ 入 中 ミ 拾 義 一 雲 呈 二500

0 5 1 0 1 50 5 1 0 1 5

11‑1絶処理からの日数

中絶処理からの｜￨数￨叉l1

抱卵行動中絶処理後の血漿プロラクチン濃図3

抱ﾘ'1行動LI‑1絶処理後の血漿卵胞刺激ホルモ

値は平均値±SE(n=4)

を1＊

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寺小〒︲１人︑︾

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８７６５４３２１０−1〒 ｜ ｜含日勘ｅ逗昌ミー振筑い〃｜ＫＨに入っている

０００５０００５１０２１

SE(縦棒）が示されていないものは黒点￨ﾉ1〆ン濃度の推移値は平均値±SE(n=4)

度の推移

妻

5 1 015

1￨'絶処理からの口数
0 5 1 0 1 5

中絶処理からのll"

図4抱卵ｲｰ]動''1絶処｣1ll後の血漿エストラジオー

ル17β椴度の￨1I:移￨xl2

抱卵行動巾絶処理後の血漿批休形成ホルモ

値は平均仙士SE(n=4)

ン濃度の推移値は平均値±SE(n=4)*:0日の値と有意差あり(P<0.05,Student's*,*＊：()日のIIIIIと有意差あり(*:P<0.05,**
P<0.01､Cochran‑coxtest)

t‑test)1948)を促すものとして知られている。
る。

血漿LHとE2濃度の上昇は，育雛行動をしている母抱卵鯛を単飼ケージに移すと血漿LHは急激に￨弓昇

鶏から雛を隔離した場合(Kuwayama"""1992)と￨｢1し，その後元の場所に戻してもLH膿度は上昇を続けた様の傾向を示したが，抱卵期ではliI漿PRLが高く育雛(lu<12)｡LHはFSHとともに卵巣に作川し，その機能を期では血漿PRLが低いことから，それらのホルモンのIIIIWiするものであるから,LH分泌の｜昇は卵巣機能の抑制機構は異なるものと考えられる。また，抱卵期の鶏

浦 ￨￨曽化を促しているものと考えられる。LH分泌の急上の脳下垂体は黄体形I戊ホルモン放出ホルモン

昇とﾄ￨￨俟ってIm漿E2濃度も単飼ケージ移動後急激に上(cLH‑RH)の投与によってLHを分泌し，更にそのLII昇した（図4)。その後,LH濃度の上昇変化と同様に上の分泌により卵巣からのE2の分泌も促進されることが昇し続けたoE2は肝臓における卵黄物質の生産(Chap‑

報告されていることから(KLIwayama"(z/.,1997),今man,1980),卵管の発達(OkaandSchimke,1969)｣P

回の抱卵の中断処FMによって視床ド部からのcLH‑RH

卵￨' 1生成機能(O'MalleyandSchrader,1976),その他の分泌が促進された結果，血漿LHおよびE2濃度が急産卵と密接に関連する血液成分の変化(Jacksonaα/.

激に上昇し，卵巣機能が速やかに回復の方向に向かった

1976;IIealdandRookledge,1964;HellerandThayer,

ものと考えられる。

Copyright ©2005, Japan Poultry Science Associationz￨￨Iら：抱卵抱'
卵‑1￨‑‑￨'‑1絶後の トルモン分泌以上のように抱卵中絶処理を行なった場合，約2週間で産卵が再開始することを認めた。このような産卵のlil.
開始は通常の抱卵終了後の産卵再￨刑始のll寺101(育雛しない場合約1ヶ月）よりも遙かに早い。従って，木実験で実施した3日間の単飼ケージヘの移動による抱卵の'l1絶TQ7｣ J 1l)roodinessoIchickens.PoultryScience,31:337‑
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NakaivoSandTanakaK.Prolactinpotencvofthe
ツ ーは産卵の開始を早める効果があるとみなされる。

cGphalicandcaudallobeoftheantel‑iorpituitarv
lnrelaliontobroodinessmthedomesticfowl･

謝 辞
実験の遂行にあたり鶏PRLの標準品を御提供頂いた
Parlow博士，鶏LHおよび鶏FSHの標準品を榧ll提供頂PoLlltryScience.35:990‑994.1956.

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いたProudman博｣一並びにLHとFSH測症の2次抗0'MalleyBWandSchradel‑WT.Thereceptorsof

体を御提供頂いた若林博士に深く感謝の意を表します。

steroidhormones.ScientincAmerican,234:32‑43.

また，終始懇切1章なる御指導を賜りました岐阜大学名誉教授田中克英先生に深く感謝致します。

1976．

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日本家禽学会誌42巻J2号(2005)

J98

ChangesinPlasmaConcentrationsofProlactin,Luteinizing
Hormone,FollicleStimulatingHormoneand

Estradiol‑176afterlnterruptionof
IncubatingBehaviorin
GifujidoriHens
TakehitoKuwayama',MizuhoKatsumata'andAtushilwasawa2'DepartmentofAnimalScience,TokyoUniversityofAgricultul･e,AtsugiKanagawa246‑0063

zDepartmentofBiologicalDiversityandResollrces,GifuUniversity,Gifu501‑1193

IncubatinghensofGifujidoribreedweretransferredtoanothercageonthethirddayof
incubationfor3daysandthenretumedtotheoriginalplacewhereanestwasprovided.BIoodwasobtainedevervdavforl5davsfromthethirddavofincubation.Plasmaconcentrationsof
ダダごprolactin(PRL),luteinizinghormone(LH)andfollicle‑stimulatinghormone(FSH)weremeasuredbyahomologousradioimmunoassay,andplasmaconccntrationsofcstradiol‑17B(E2)weremeasuredbvtime‑resolvediluoroimmunoassaV.
ご

Theincubatingbehaviorwasceasedpromptlyandneverappearedaftertheretul･ntothe
originalplace.

TheplasmaPRLconcentrationdecreasedsharplyafterthetransferenceandmaintaineda
lowleveluntilthenextegglaying.

TheplasmaLHandE2concentrationincreasedsharplyafterthetransferenceandthen
graduallyincreaseduntilthenextegglaying.
TheplasmaFSHconcentrationdidnotshowanyappreciableincrease.

Egglayingwasstartedatl6'hdayafterthetransference.
Theresultssuggestthattheinterruptionofincubationmaycausetherecrudescenceof
ovarianfi'nctionleadingtoanearlierstartofegg‑layinginGifiljidorihens.
(WIeJupα"gseJoz""α/QfPo"/"Sc/e"ce,ギ2:J94‑J9&2005)

Keywords:incubation,prOlactin、LH,FSH,estradiOl