水研センター研報，第41号，1－43，平成28年
Bull. Fish. Res. Agen. No. 41, 1-43, 2016

博士論文

1

クロマグロ Thunnus orientalis およびスジアラPlectropomus leopardus の種苗生産でみられる成長差に関する研究＊１
武部

孝行＊２

Study on the onset of individual growth differencein larviculture of Pacific bluefin tuna Thunnus orientalis andleopard coral grouper Plectropomus leopardus
Takayuki TAKEBE ＊２

目
第1章

次

第1章

緒

言

緒言

第1節

飼育環境下における成長差の発現に関する
研究史

第2節

第1節

飼育環境下における成長差の発現に関する研
究史

本研究の対象となる魚類の研究史と問題点

第 1 項クロマグロ Thunnus orientalis

我が国における魚類養殖の歴史は，1615 年に淡水魚

第 2 項スジアラ Plectropomus leopardusのコイ Cyprinus carpio で行われていたのが文献とし

第3節
第2章

本研究の構成クロマグロの成長差の発現

第1節
第2節

て残る最古のものであり，海産魚では 1899 年にクロ
ダイ Acanthopagrus schlegelii などを用いたのが始ま雌親魚 1 個体から得られた受精卵を使用しりとされている（大島 1994）。人工種苗生産技術につた種苗生産過程での成長差の発現いては，1922 年にアユ Plecoglossus altivelis altivelis

複数雌親魚から得られた受精卵を使用したでふ化仔魚から稚魚までの飼育成功例が本邦で初めて種苗生産過程での成長差の発現で（大島 1994），海産魚では 1930 年にマダイ Pagrus

スジアラの成長差の発現

major とクロダイで試験的な成功をみたが（梶山，西（複数雌親魚から得られた受精卵を使用した


岡 1936），本格的な人工種苗量産を目指して研究が行種苗生産過程での成長差の発現）

われるようになったのは，1960 年以降のことであり（大総合考察

島 1994），2008 年現在，全国で 31 魚種の種苗生産技

第3章

第4章
第1節

開口時の成長差発現

第2節

飼餌料環境による成長差発現

第3節減耗現象を起因とする成長差発現

成長差が生じることが知られており，成長の優良な第4節

発育段階移行後の成長差発現

個体を「トビ」，逆に，成長の著しく劣る個体を「ビ第5節

遺伝的影響による成長差発現リ」と称している。このような成長差は，同一親魚か

第6節

総

括

ら得られたふ化仔魚を同一環境，同一飼育技術によっ謝辞て飼育した場合にも見られる。この問題を扱った研究

引用文献

は古くから行われており，魚種の相違，飼育技術およ術の開発がなされている（藤田 2011）。
魚類の養殖および種苗生産の過程では同一水槽内でび餌料の良否等によって大きな差を生じさせることもある。しかし，単なる環境変異由来の体サイズの変2016年１月29日受理（Received on January 29, 2016）＊１
長崎大学審査学位論文（掲載するに際し投稿規定に沿って一部修正した）＊２
水産総合研究センター研究推進部交流協力課 〒220-6115 神奈川県横浜市西区みなとみらい2-3-3 クイーンズタワー B棟15階（Collaborative
Research Section, Research Management Department, Fisheries Research Agency 15F Queen's Tower B, 2-3-3 Minato Mirai, Nishi-ku,
Yokohama, Kanagawa 220-6115, Japan）

2

Takayuki TAKEBE

化では説明できない場合があり，生物学的に興味深と安定化，さらには人工種苗による天然資源の代替がい現象である上，養殖魚の品種改良という見地から望まれている。このような背景を受け，現在，日本国も考慮されるべき問題と捉えられてきた（吉田実習内では独立行政法人水産総合研究センター（以下，水場 1936）。また，昭和 20 年代における食料問題によ研センターと略す）を始め，都道府県の公設試験研究

り，養魚技術上有利になる優良品を選定すべきという機関，大学などにおいてクロマグロ仔稚魚の量産技見地から研究が行われ，得られた知見が産業上種苗選術の研究が積極的に実施されている（Masuma et al.

別について有効に利用され，将来，品種改良の基本と2011）。

なるものと位置づけられた（松井 1949 a，b）。さら

クロマグロの増養殖については，1970 年より「大に，養殖業においては生産性および採算性の向上が基

規模海中養殖実験事業」として，初めて取り組みが開

本的課題となるため，飼育技術の改善と種苗特性の遺始され，当時の遠洋海区水産研究所（現 水研センター

伝的改良について強い関心が向けられようになった。

国際水産資源研究所）を中心に「マグロ類養殖技術開

その結果，コイではトビ個体の形態的特徴，成長度お発試験」に，静岡県，三重県，長崎県，鹿児島県，東よび出現時期などについて調査が行われている（山田海大学，近畿大学が参加し，マグロの収容および養成，

1938，松井 1949 b，1950，中村ら 1955）。また，マダ

人工授精等について試験が進められた。さらに，1971

イ（谷口，岡田 1980，谷口ら 1988，1995），ニジマス

年から高知県が単県事業として「沖合漁場養殖技術

Oncorhynchus mykiss（Danzmann et al. 1995）およ開発に関する研究（くろまぐろ養殖試験）」を実施し，びヒラメ Paralichthys olivaceus（Sekino et al. 2003）

1976 年から水産庁がこの試験を「沖合漁場利用養殖では遺伝的影響が，コイ（中村ら 1956）およびホッ

技術開発企業化試験」として継続させ，この成果を受

キョクイワナ Salvelinus alpinus（Petursdottir 2002）

けて，民間企業による事業も行われるようになった。

においては餌料による影響が，マダイ（Umino et al.

このような事業を経て，1979 年に近畿大学において1993）では体成分の特徴について報告されている。さ

世界で初めて養成クロマグロ 5 歳魚が生簀網内で自然らには，大西洋サケ Salmo salar（Adams et al. 2000）

産卵を行い，その受精卵を用いて種苗生産試験を実施

およびブリ Seriola quinqueradiata（Sakakura et al.

し，ふ化後 47 日目（稚魚，全長 59.4 mm）までの飼

1996）およびヒラマサ S. lalandi（Moran 2007）で育を成功させた（Kumai 1997）。

は，成長差および攻撃行動の発現状況，それに伴うクロマグロの種苗生産が不安定な原因として仔魚期発育状況が調査されている。また，シロチョウザメ

における飼育初期の減耗が激しいことが挙げられておAcipenser trnsmontanus（Georgiadis et al. 2000）では，り（宮下 2006，Tanaka et al. 2009），その対策を講

ビリ個体だけを選抜飼育し，その後の死亡状況や成長じた飼育技術に関する研究が多い（Katoh et al. 2008，の回復状況が調査されている。

Masuma et al. 2011）。また，種苗生産期間における至適餌料環境（Sawada et al. 2000）や餌料種（宮下第2節

本研究の対象となる魚類の研究史と問題点

2002，Seoka et al. 2007）について報告がなされている。
さらに，本種は成長が速く，魚食性を示すため，成長第1項

クロマグロ Thunnus orientalisに伴う攻撃行動の発現状況（Sabate et al. 2009 a）やクロマグロ Thunnus orientalis は日本近海をはじ共食い行動（Sawada et al. 2005，2010）についてもめ太平洋，大西洋，地中海など，全世界の熱帯から温知見が得られてきており，それに伴い，量産化に繋が帯海域に棲息する高度回遊魚でマグロ類 7 種（Fig. 1）

る成果が挙げられている。

の中では最も大型種である（Fig. 2，岩井ら 1965，藤

水研センターではクロマグロの親魚養成技術およ田 1998）。日本では商品価値が非常に高く，世界各国

び種苗生産技術開発は，西海区水産研究所亜熱帯研から輸入され全漁獲量 55,000 トン（2007 年実績：大究センター八重山庁舎（当時は社団法人 日本栽培漁

西洋 35,000 トン，太平洋 20,000 トン）の 50％以上を業協会 八重山事業場）で 1985 年から開始されたもの

消費していると言われている（出村 2010）。さらに近の，養成海面水温の高温化や天候条件に左右されやす

年，天然クロマグロ幼魚（ヨコワ）を捕獲し，それらい海域の環境条件により採卵が困難であると判断さを利用した養殖が盛んとなっており，その国内生産量

れ，1994 年から技術開発の主体は水研センター奄美

は約 4,000 トンにも及んでいる（出村 2010）。そのた

栽培漁業センター（当時は社団法人 日本栽培漁業協

め，乱獲によるクロマグロの資源枯渇が懸念されてお会 奄美事業場）に移された（日本栽培漁業協会 40 年り（FAO 2006），本種は漁業対象に加えて重要な増養史 2003）。

殖対象種となり，種苗放流などによる天然資源の増大

1997 年に自然産卵が成功したことから本格的に種クロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究

3

Fig. 1. Classification of the Genus Thunnus (from FAO 1984)
苗生産の技術開発に取り組むこととなり，1998 年に
約 1.2 万尾の種苗生産に成功し（升間 2008），2010 年には 2.9 万尾を取り揚げるようになった。
しかし，それでもなお，クロマグロでは飼育初期の減耗率が高く，その減耗要因の解明と対策が望まれてきた。さらに，ウイルス性神経壊死症などの疾病問題（Nishioka et al. 2010），水槽壁などへの衝突による死亡（Sawada et al. 2005），種苗生産過程で生じる個体の成長差による共食い（Sabate et al. 2010）など，ク
ロマグロ種苗生産および養殖技術開発においては数多くの問題点が残されており，依然として安定的な技術が確立されていないのが現状である。

Fig. 2. A broodstock of Pacific bluefin
tuna Thunnus orientalis (Total length
287 cm, body weight 454 kg)

4Takayuki TAKEBE
スジアラ Plectropomus leopardusている（照屋 2009）。スジアラが「アカジン」と呼ばハタ科魚類（Fig. 3）は太平洋，インド洋，アラビ

れるのには二つの説があり，一つ目は沖縄の方言で着ア海，紅海および大西洋の温帯海域から熱帯・亜熱帯物を意味する「チン」が変形して「ジン」となり「赤海域に広く分布しており，日本のみならず東南アジ

い衣を纏った魚」という説と，二つ目は沖縄の方言

ア諸国においても高値で取引されている（Liao 2001，

で「ジン」はお金を意味することから「赤い銭になる

Silva 2007）。そのため，養殖が盛んに行われている種魚」という説である。スジアラは沖縄県では夜間の潜もあり，これまでに計 14 種類のハタ科魚類で，採卵

水による銛突き漁業と一本釣り等で漁獲されており，や初期飼育に関する研究が報告されている。しかし，高級魚として取り引きされている重要な沿岸資源であ

これらのうちで種苗生産技術が確立されたものは非常る（海老沢 1998，1999）。しかし近年，漁業者の間でに少ない。産業的に種苗が量産化されたものはマハ

は漁獲量の減少が懸念されており，南西諸島海域で本タ Epinephelus septemfasciatus（照屋 2004），クエ E.

種に対して，種苗放流などによる天然資源の増大と安第2項

bruneus（照屋，與世田 2006），キジハタ E. akaara

定化，さらには新規養殖対象種としての期待が大きい。

（南部ら 2006）およびヤイトハタ E. malabaricus（金ハタ科魚類の種苗生産が不安定な原因としては，ク城， 中 村 2009） の 4 種 に す ぎ ず， ハ タ 科 魚 類 は 種

ロマグロと同様に，飼育初期の減耗が激しいことが苗生産技術の難易度が高い。スジアラ Plectropomus

挙げられており（照屋 2006，Sakakura et al. 2006，

leopardus は， 南 日 本 か ら オ ー ス ト ラ リ ア の グ レ ー

與世田 2008），これまでの報告も初期減耗を解決す

トバリアリーフおよびインド洋まで広く分布するハるための初期飼育に関する研究が多い（Kohno et al.

タ科スジアラ属（Fig. 4）の魚類である（片山 1984，

1997，Toledo et al. 2002，土橋ら 2003，照屋 2008）。

Randall and Hoese 1986）。日本近海に生息するスジ

特に，ハタ科魚類の仔魚は体表に粘液細胞が多く，エアラ属は 3 種が確認されており，沖縄の方言名では，

アーなどの物理的刺激により粘液の分泌が促進される

スジアラを「アカジン」または「マアカジン」と呼び，ため，飼育水の表面張力に捕捉されやすい。そのた

他の 2 種では，コクハンアラ P. laevis を「クルバニー

め，いわゆる「浮上死」が発生しやすく，ハタ科魚類

アカジン」または「チンスアカジン」，オオアオノメ

では大きな問題とされている（Yamaoka et al. 2000）。

アラ P. areolatus を「ヤーラアカジン」と呼び区別しこれらの諸問題を解決するために，飼育水槽の通気や注水方法（Sakakura et al. 2006，2007 a），水槽の形状（Ruttanapornvareesakul et al. 2007），水面で波を形成する飼育方法（Sakakura et al. 2007 b），フィー
ドオイルの添加（Yamaoka et al. 2000，土橋ら 2003）などの効果が検討され，浮上死による大量減耗を軽減する試みがなされ，量産化に繋がる成果が上げられている。また，クロマグロと同様に，ハタ科魚類においても種苗生産過程で生じる成長差によって助長される共食いが大きな問題であり，チャイロマルハタ E.
coioides（Hseu 2002，Hseu et al. 2003，Takeshitaand
Soyano 2009），タマカイ E. lanceolatus（Hseu et al.
2004，2007 a），アカマダラハタ E. fuscoguttatus（Hseu
et al. 2007 b），マハタなどで（Sabate et al. 2009 b），
その発生状況等について報告がなされている。
スジアラの種苗生産技術開発は，水研センター西海区水産研究所亜熱帯研究センター八重山庁舎（当時は社団法人 日本栽培漁業協会 八重山事業場）で 1984
年から実施され，1997 年に約 12 万尾の生産に成功しているものの（照屋 2010），本種はマハタ属魚類よりも初期減耗が極めて大きく，安定的な種苗生産には至っていない。そのため，スジアラ仔魚の初期飼育

Fig. 3. Classification of the Family Serranidae (fromFAO 1993)

における至適日周条件（與世田ら 2003 a）や照度条件（Yosedaet al. 2008），餌料サイズの検討（升間らクロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究

5

Fig. 4. Classification of the Genus Plectropomus (The illustrations from FAO 1993)2001，
與世田ら 2003 b）とそれが生残に及ぼす影響（與

第3節

本研究の構成世田ら 2003 a），さらには初回摂餌の成否による成長・本研究で対象とした 2 魚種は，第 2 節に詳述した通生残への影響（與世田ら 2006）などについて様々なり，いずれも飼育初期の減耗を軽減することに重きが研究がなされ，知見も多く集積されてきている。しか置かれてきた。しかし，初期飼育技術が向上して仔魚し，それでもなお，スジアラを含めて多くのハタ類での生残率が高くなれば，次の大きな減耗要因は共食い

未だに初期減耗率が高く，安定した種苗生産技術が確となる。クロマグロとスジアラはいずれも，成長が進立されてはいないのが現状である。

むと魚食性を示す魚種であり，種苗生産過程では共食6

Takayuki TAKEBE

いがみられ，特にクロマグロでは共食いによって全滅

討されていない。そこでクロマグロの「成長差」といに近い飼育事例も経験的に知られている。さらに，種う現象を調べるにあたって，まず産卵雌親魚ごとに由苗生産過程でみられる共食いは，種苗の体サイズ差に来する遺伝的影響を極力排除できる，雌 1 個体の親魚

よってその強度が増すことが知られている（Sakakuraから得られた受精卵を使って仔稚魚飼育を行い，飼育and Tsukamoto 1996，Sabate et al. 2009 b）。そのた

期間中の仔稚魚の成長過程を精査することにより，成め，成長差がいつ，どのようにして生じるのかを調べ長差の発現機構を明らかにできると思われる。そこでることは，生物学上の興味のみならず，種苗生産技術

本章では，雌 1 個体のクロマグロ親魚から得られた受開発においても重要な意義を持つと考える。そこで本精卵を用いて種苗生産を行い，成長差の著しい個体群

研究では，生活史初期に明瞭な変態期を有するスジア

における耳石日周輪紋を観察し，その個体毎の成長過ラと，魚類の中でも急激な成長を示す一方で明瞭な変程を精査し，成長差の発現時期を特定することとした。

態期を持たないクロマグロについて，その飼育過程において発生する成長差の発現機構を個体レベルで解明

材料と方法

し，2 魚種の比較を通じて魚類の初期生活史で見られる個体の成長差の発現機構の解明を目的とした。

受精卵

2006 年 5 月 27 日に水研センター奄美栽培漁

魚類の「成長差」という現象を調べるにあたって，

業センター（現 水研センター西海区水産研究所まぐまず産卵雌親魚ごとに由来する遺伝的影響を出来るだ

ろ増養殖研究センター奄美庁舎）仕切網内（Fig. 5）

け排除することが必要である。そのため，クロマグロで養成されていたクロマグロ親魚（7，10 および 13において雌 1 個体の親魚から得られた受精卵を使用し歳混合親魚群，n = 25 個体）から自然産卵で得られたて種苗生産を行い，その成長差の著しい個体群におけ受精卵（卵径 1.0 ± 0.02 mm，平均±標準偏差，n =る耳石日輪紋を観察し，その個体毎の成長過程を精査し，成長差の発現時期を明らかにした（第 2 章第 1 節）。
次に複数のクロマグロ雌親魚から得られた受精卵を使用した種苗生産を行い，雌 1 個体での事例との発現状況の違いについて検証した（第 2 章第 2 節）
さらに，クロマグロとは成長様式および生息環境も異なるスジアラで，複数雌親魚から得られた受精卵を用いて仔稚魚飼育を行い，同様な調査を実施した（第3 章）。
最後に，本研究で得られた結果から本研究対象魚類の成長差発現機構を明らかにし，その知見をもとに種苗生産現場での成長差の発現の抑制および軽減手法について提言し，残された課題を整理し，今後取り組むべき研究について言及した（第 4 章）
。
第2章
第1節

クロマグロの成長差の発現

雌親魚 1 個体から得られた受精卵を使用した種苗生産過程での成長差の発現

コイでは「トビ」個体の形態的特徴，成長度および出現時期などについて調査が行われている（松井1949b，1950，中村ら 1955）。また，マダイ（谷口，岡田 1980，谷口ら 1988，1995），ニジマス（Danzmann
et al. 1995）およびヒラメ（Sekino et al. 2003）では成長差の発現について遺伝的影響が議論されている。
コイでは同腹仔の成長差について報告があるが（松井1950），海産魚を用いた同腹仔の成長差については検Fig. 5. Photograph (a) and Schematic drawings (b)of the barrier-net closed cove for Pacific bluefin
tuna broodstock at the Research Center for Tuna
Aquaculture (RCTA), Seikai National Fisheries
Research Institute (SNF), Fisheries Research Agency(FRA), Japan.

クロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究100）を採卵し，種苗生産試験に供した。

7

ワムシは 5 ～ 10 個体 /mL を維持するよう給餌を行い，水槽内のクロマグロ仔魚の最小個体が 12 ～ 13 mm に

飼育には八角形 50 kL コンクリート水槽（底達するまで与え続けた。また，アルテミア Artemia

面積：19  m2，水深：266  cm）を使用し，仔魚（ 1 日齢）

franciscana 幼生は，クロマグロ仔魚の平均全長が 7を 1.1 万個体 /kL の密度で収容した。クロマグロ仔魚～ 8 mm に達した時点で 0.2 ～ 0.5 個体 /mL を維持すは 10 日齢までの間に沈降現象を起こしやすいことがるように給餌を開始し，ワムシと同様にクロマグロ稚知られているが（Takashi et al. 2006），これを防除す

魚の最小個体が 17 ～ 19  mm に達するまで給餌を行っるために飼育水槽内に水中ポンプ（CSL-100，寺田ポ

た。ワムシは，先ず冷凍濃縮ナンノクロロプシス（マンプ製作所）を設置し，飼育水の流動を調整する飼育リンクロレラ，メルシャン株式会社）で 6 時間，栄養手法で飼育を行った（Fig. 6，7）
。開口直後（ 3 日齢）強化を施した。その後，DHA 強化剤（ハイパーグロス，の仔魚にシオミズツボワムシ Brachionus plicatilis L

日清マリンテック株式会社）で 16 時間栄養強化した型近大株（以下，ワムシ）の給餌を開始すると共に，後に給餌した。アルテミアの栄養強化には，すじこ乳

水質を安定させるために市販の冷蔵濃縮ナンノクロロ

化油（日清マリンテック株式会社）を使用し，給餌のプシス Nannochloropsis oculata（マリンフレッシュ，

2 時間前に栄養強化した。

種苗生産

メルシャン株式会社）を 200 万細胞 /mL になるよう

なお，飼育水温は自然水温とした（25.4 ± 0.9℃，に添加した。4 日齢まで止水飼育を行い，5 日齢より平均±標準偏差，23.2 ～ 27.2℃，n  =  40）。仔魚の生残ウイルス性神経壊死症（VNN）防除対策のため電解尾数を推定するため，直径 50  mm の塩化ビニル製パ

殺菌処理海水のみを注水し，注水量は仔稚魚の成長にイプを用いて，夜間（20 : 00 ～ 21 : 00）に飼育水槽の 7

合わせて適宜増加した。餌料の給餌方法については，定点から 20 ～ 30 L の飼育水を採取した。採水した飼Fig. 6. The rearing tank for mass-culture of Pacificbluefin tuna I n the Amami Station, RCTA, SNF,
FRA using the water pump system. “P” indicateswater pump.

Fig. 7. Horizontal (a) and lateral views (b) of therearing tank for mass-culture of Pacific bluefin tunain the Amami Station, RCTA, SNF, FRA using thewater pump system.

8

Takayuki TAKEBE

育水中の仔魚数から容積法で水槽全体の生残尾数を算ている。特に，ヒラマサでは【TLPR = 0.54 TLCA - 2.45】

出した。また，10 日齢まで全長とワムシ摂餌数を測（蛭子，立原 1993），ブリで【TLPR = 0.49 TLCA + 0.30】

定するために，クロマグロ仔魚を毎日 14:00 に飼育水

（Sakakura and Tsukamoto 1996）という関係式が得

槽から 30 個体採取した。仔魚を 5  ppm に調整した m-

られている。そのため，本研究におけるクロマグロでアミノ安息香酸エチルメタンスルホネート（ナカライ

は，回遊魚であり，その食性が比較的似ているヒラマ

テスク株式会社）で麻酔後，スライドグラスに乗せ，サおよびブリの値を参考にして，19 日齢のクロマグ

万能投影機（V12-A，Nikon）で 20 ～ 50 倍に拡大し，

ロ供試魚において最小全長個体の 2 倍以上の全長を有

デジタルノギス（Absolute DIGIMATIC，Mitutoyo）

する個体をトビ」（LARGE）とした。また，全サンプ

を用いて全長を 0.1 mm 単位で測定した。ワムシ摂餌

ル中の小型個体の 20％を「ビリ」とし，供試魚全体数を確認するために，スライドグラス上で仔魚を軽くを「LARGE：トビ」「INTERMEDIATE：モード（最押し潰し，仔魚の消化管内のワムシの口器（咀嚼器）頻値）」「SMALL：ビリ」の 3 群に分けた。各個体のの数を光学顕微鏡（YS2-H，Nikon）下で計数した。

耳石（扁平石）を摘出し，耳石日輪紋測定システム（RATOC 社）を用いて各日齢の輪紋の増加幅および飼育試験期間耳石径（OR）を測定した（Fig. 9）。推定全長は，得中，1，3，5，10 お よ び 15 日 齢 に 無 作 為 に 各 30 個られた各耳石測定値から Back-calculation 法を用いて体を飼育水槽から採取した。また，15 日齢（全長 6.6

求めた。全長を推定するための Back-calculation には，± 0.8 mm，平均±標準偏差，5.55 ～ 8.50 mm）から実測値との残差が最も少ない Campana 法（Campana

つつき合い行動および共食い行動が観察され，さら1990）を用いた。なお，Campana 法は下記の式で表に 19 日齢に個体の成長差が目視によっても明確とされる。

耳石輪紋観察および成長履歴調査なったため仔稚魚を 100 個体採取した（Fig. 8）。採取したサンプルは，99.5％エタノールで保存し，後Li =
｛（Lc - La）×（Oi - Oc）／（Oc - Oa）｝+ Lc

日， 耳 石 輪 紋 観 察 に 供 し た。 共 食 い に お け る 被 食

Li：i 日令の推定全長（自然対数）

魚（Prey：PR） と 捕 食 魚（Cannibal：CA） と の 全長の関係式が，様々な海産魚（カタクチイワシの一Oi：i 日令 0.3 mm）の耳石長径
Lc：飼育終了時の全長（自然対数）

種 Engraulis capensis; Brownell 1985，バラマンディ

Oc：飼育終了時の耳石長径Lates calcarifer; Parazo et al. 1991，ヒラマサ，カサLa：ある時点 a での全長（自然対数）

ゴ Sebastiscus marmoratus; 蛭 子， 立 原 1993， ス ケ

Oa：ある時点 a での耳石長径 DNA

トウダラ Theragra chalcogramma; Sogard and Olla
Niwa et al.（2003）の方法を改変し，ク

1994，ブリ ; Sakakura and Tsukamoto 1996，チャイ

mtDNA 分析

ロマルハタ ; Hseu et al. 2003，タマカイ ; Hseu et al.

ロマグロのミトコンドリア DNA の RFLP による多型解

2004，アカマダラハタ ; Hseu et al. 2007）で算出され析を実施し，産卵に関与した雌クロマグロ親魚が 1 個

Fig. 8. Pacific bluefin tuna larvae at 19 dph (Upper:
LARGE [TL 27.2 mm], lower: SMALL [TL 11.6 mm]).

Fig. 9. Sagittal otolith of Pacific bluefin
tuna larva (19 dph, TL10.3 mm).

クロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究

9体である確認を行った。クロマグロ受精卵からの DNA

La Roche Ltd., Germany］，Tai I［FERMENTAS

抽出は市販のキット（SepaGene，三光純薬株式会社）

INTERNATIONAL Inc., CANADA］）を用いて，添を用いて行い，抽出した DNA は 40 µL の TE buffer

付されている処方に従い処理した PCR サンプルを，で溶解し，PCR まで冷蔵保存した。抽出した DNA

2.5％アガロースゲル電気泳動を 1 ～ 2.5 時間程度施し

か ら mtDNA の D-loop 領 域 を 増 幅 す る た め nested

た後，臭化エチジウム染色を行い，泳動像を撮影し切PCR 法を用いた。なお，DNA の増幅にはサーマル

断片長多型を調べた。

サイクラー

GeneAmp PCR system 9700（Applied

Biosystems Inc., U.S.A）を用いた。1st PCR で用い

統計処理

たプライマーは 5’ -TAGCACTATTCTCCCCTAAC-

ルについて，19 日齢の全長の実測値および逆算推定

3’（CB3R-LL， タ カ ラ バ イ オ 株 式 会 社 ） と 5’された同一日齢の全長に Kruskal Wallis test により有-TCTAGAACAGGCTCCTCTAG-3’（12SAR-HL， タ

意差が検出された場合（p<0.05），Steel-Dwass test で

カラバイオ株式会社）である（升間ら 2003）。PCR 反検定した。

19 日齢で 3 グループに分けられたサンプ

応液は，10 × PCR buffer 0.5 µL，Tap polymerase（Applied Biosystems Inc., U.S.A）0.025 µL，dNTP

結果（Amersham Biosciences., U.S.A），0.1 µL，12SAR-HL
0.1 µL，CB3R-LL 2.4 µL， 抽 出 DNA サ ン プ ル 0.5 µL

mtDNA 分 析を混合し，そして蒸留水で総量 5.5 µL にしたもので

Niwa et al.
（2003）の報告と同様に約 2000 bp であった。

ある。この反応液を 95℃で 3 分間初期加熱変性し，

RFLP 分析の結果，クロマグロ種苗飼育実験のために

その後 30 サイクルの増幅反応（50℃ 30 秒，72℃ 1

使用された受精卵は，雌 1 個体に由来するものと確認

分，95℃ 1 分）後，72℃ 5 分で最後の DNA 鎖の伸された（Table 1，Fig. 10）。

PCR 法 で 増 幅 し た D-Loop 領 域 は，

長反応を行った。2nd PCR 反応に用いたプライマー
は 5’ -CACATTAAACCTGAATGATA-3’（CB3R-

種苗生産

LT，タカラバイオ株式会社，Niwa et al. 2003）と 5’減少を示し，5 日齢からワムシを摂餌しているにも関-ATAGTGGGGTATCTAATCCC-3’（12SAR-H3L，わらず死亡する個体が観察され始めた。10 日齢まで

タカラバイオ株式会社，Palumbi et al. 1991 を改変）の生残率は 26.9％であった（Fig. 11a）。3 日齢の仔魚であり，最後の伸長反応時間を 6 分間に変更した以外の全長は 4.0 ± 0.1 mm（3.6 ～ 4.2）であり，6 日齢かの PCR 反応は 1st PCR と同様に行った。1st PCR のら指数関数的な成長を示し（Fig. 11b），19 日齢には 7.8

PCR 産物を蒸留水 50 µL 加え希釈し，そのうち 1.5 µL± 2.1 mm（5.2 ～ 18.7）となった。3 日齢でクロマグが 2nd PCR に供された。PCR 反応液は，10 × PCR

ロ仔魚のワムシ摂餌個体率は 100％であった。しかし，

buffer 2 µL，Tap polymerase 0.1 µL，dNTP 0.4 µL，摂餌された消化管内のワムシ数は仔魚によっては 10

CB3R-LT 0.4 µL，12SAR-H3L 0.4 µL，1st PCR DNA

個体以上の差があり，その後，最小摂餌数と最大摂餌

サンプル希釈液 1.5 µL を混合し，そして蒸留水で総数の差は，より大きくなる傾向を示した（Fig. 11c）。

クロマグロ仔魚は，収容翌日から個体数の量 21.5 µL までにしたものである。PCR サンプルを
2.5 ％ ア ガ ロ ー ス ゲ ル（Biogel，BIO101 Inc., U.S.A）

成長履歴と逆算推定 19 日齢に採集したクロマグロ

で電気泳動，臭化エチジウム染色により DNA の増

供試魚の全長組成を Fig. 12 に示した（n = 100，7.8 ± 1.8幅を確認した。増幅が確認されたサンプルについて

mm，5.2 ～ 18.7）。
【最小個体の全長の 2 倍以上の全長

10 種類の制限酵素（Alu I，BsaJ I，Dde I，Msp I，を有する個体をトビ（LARGE）】と定義し，これを基

Dpn II，Hha I，Rsa I，Tsp509 I［NEW ENGLANDに 3 群に分けた結果，19 日齢において最小全長個体

Biolads Inc., U.S.A］，Mse III［Roche Molecularは 5.2mm であったことから，「トビ」は 21 個体（10.9Biochemicals, Roche Diagnostics GmbH, F. Hoffmann-± 1.9 mm），「ビリ」は 15 個体（5.7 ± 0.3 mm），これTable 1. Composition of genotypes among the eggs spawned by Pacific bluefin tunabroodstock10

Takayuki TAKEBE

Fig. 10. RFLP profiles of mtDNA D-loop region of Pacific bluefin tunadigested by ten restrictionendonucleases.

クロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究

11

ら以外は「モード」とし，64 個体（7.4 ± 1.1 mm）に分けられた。なお，これら 3 グループの全長は互いに有意に異なっていた（p<0.01）。
飼育水槽から 1 ～ 5 日おきに採取したクロマグロ
仔魚 250 個体から，Fig. 13 のような全長（TL）と耳石径（OR）の関係が観測された。耳石径が 12.5，20
および 45 µm 付近で変曲点が存在した。全長から体長（SL）への変換式 TL = 1.15 SL - 0.23（Y. Tanaka,
unpublished data, 2011）を基に，クロマグロの発育に つ い て Miyashitaet al.（2001） お よ び Tanaka etal.（2006）の報告と照らし合わせた結果，耳石径が12.5 µm の場合，preflexion 期から flexion 期へ移行す
る時期に一致していた。また，耳石径が 20 µm の場合，
flexion 期から postflexion 期へ移行する時期に一致していた。さらに，耳石径が 45 µm の場合，鰭条数が成魚と同じになる時期と一致していた。
全長を推定するために，3 日齢では単回帰式 TL=0.075 OR + 3.26（r 2 = 0.23）を，そして成長曲線が指数関数的になった 6 日齢以降は，Campana 法（1990）
を 用 い た。Campana 法 で は ふ 化 時 に お け る 全 長 と耳 石 径 を La お よ び Oa と し て 用 い る。 し か し， 耳
石径と全長との関係に変曲点が 3 ヵ所存在したため（Fig.13），本研究では，以下の 4 区間における最小の耳石径および全長の値を La および Oa に用いた。
① 耳石径が 12.5 µm 未満の場合
La =ln（3.6 mm），Oa = 9.8 µm
Fig. 11. Changes in (a) survival rate, (b) total length,and (c) the number of rotifers in the gut of Pacificbluefin tuna larvae ( n = 30) in the rearing experiment.
Bar indicates standard deviation② 耳石径が 12.5 µm 以上 20 µm 未満の場合
La =ln（4.0 mm），Oa = 12.6 µm③ 耳石径が 20 µm 以上 45 µm 未満の場合
La =ln（4.9 mm），Oa = 20.0 µm④ 耳石径が 45 µm 以上の場合

Fig. 12. Frequency distribution of total length ofPacific bluefin tuna sampled at 19 dph ( n = 100, 7.8 ±1.8 mm, mean ± SD).

Fig. 13. Relationship between sagittal otolith radius
and total length of Pacific bluefin tuna larvae.

12

Takayuki TAKEBE
La =ln（8.2 mm），Oa = 47.0 µm

生物の発生状況により仔魚の成長速度に違いが出ること，また，Masuda et al.（2002）はマサバ Scomber

その結果，逆算推定された全長を基に，Fig. 14 のjaponicus において異なる餌料条件下で飼育した場合

通り 3 グループに分けられた 19 日齢の供試魚の成に稚魚の遊泳能力に違いが出ることを指摘している。

長履歴が得られた。
「ビリ」の全長は 3 日齢から飼

Sawada et al.（2000）は，種苗生産現場においてクロ育期間を通して他の 2 グループより 3 日齢から有意

マグロ仔魚へのワムシのに 小 さ く（p<0.01）， 同 様 に「 ト ビ 」 の 全 長 は 他 の

体 /mL と報告しており，今回の飼育期間中の飼育水

2 グループよりも大きかった（p<0.01 for SMALL，のワムシ密度は 10 個体 /mL 以上を維持していたこと

p<0.05 at 3 dph and p<0.01 between 6 ～ 19 dph forから，本研究における種苗生産過程において成長差のINTERMEDIATE）。そして，「トビ」は 8 日齢以降発現に対して餌料密度および餌料種類に関する影響は急激に成長速度が速くなった（p<0.01）。

無かったものと考えられた。また，飼育クロマグロ

最適給餌密度は 10 ～ 30 個の開口は水温 24℃の飼育条件下で 2 ～ 3 日齢であり，
考察

摂餌開始は 3 日齢であることが知られており（宮下ら2000 a），さらに，耳石日輪紋の第 1 輪の形成は飼育

今回供試したクロマグロ仔魚は遺伝マーカー調査に

水温 23 ～ 28℃では 3 日齢であることが報告されていよって，雌 1 個体のクロマグロ親魚から得られたもの

る（Itoh et al. 2000）。今回の飼育試験での飼育水温はであることが明らかになった。そのため，本研究にお23 ～ 27℃で，耳石日輪紋の形成および摂餌開始は 3

いては成長差の発現に関して産卵雌親魚に由来する遺日齢であり，3 日齢での摂餌個体率は 100％あった。

伝的影響の少ない条件であるといえる。

耳石径から全長を逆算推定できることが知られて中村（1955）は同一の池に同サイズのコイとギンブいるが（Campana 1990，Campana and Jones 1992），

ナ Carassius auratus langsdorfi を同個体数収容して，本実験の標本の場合，逆算推定された全長と実際の測

1 ヶ月間飼育し，その成長を比較した。その結果，ギ

定全長値は合致していた。その結果，19 日齢においンブナにはトビは生じず，コイにはトビが生じていて 3 グループに分けられた供試魚は，15 日齢からつつた。これは，コイとギンブナの食性上の相違によるき合いまたは共食い行動，成長差が明らかに観察されものであり，ギンブナの餌料となる植物プランクト

たが，成長差は 3 日齢（開口時）から生じ，以降は拡ンが潤沢であったのに対して，コイの主餌料が少な大する傾向を示した（Fig. 14）。Tanaka et al.（2006）

かったためとされている。Shoji et al.（1999）はサワ

は，天然水域のクロマグロは 6 日齢の体長が 4 mm 以

ラ Scomberomorus niphonius について天然海域の餌下の個体は成長が遅れること，さらに，形態および生態的変化が約 5 mm で生じ，それに対応して摂餌内容の変化に成功した個体が早く成長し，postflexion 期まで達することを報告している。また，中村ら（1955）
は，コイを用いてトビの出現時期を調査しており，卵，
ふ化仔魚および 8 日間無給餌条件で飼育された仔魚では，いわゆる，トビ現象の兆候は見られず，外部栄養を摂るようになって，しかも，摂餌後の初期に決定されると報告している。マダイは 10 ～ 30 日齢の間に好成長を示した場合，その後の成長も著しい成長を示す（横川，谷口 1988）。さらに，キジハタにおいて初期摂餌の可否で成長および生残に影響が出ることが報告されている（與世田ら 2006）。クロマグロの場合，「ト

Fig. 14. Growth history of Pacific bluefin tuna from
3 dph (mouth opening) to 19 dph (juvenile stage)
determined by the otolith back-calculation. Plotsand vertical bars indicate average and standard
deviations, respectively. Total length of three sizegroups divided at 19 dph were significantly different
among each other in the same age ( p<0.05, SteelDwass test). Data indicate mean ± SD.

ビ」の成長が「モード」と比較して 8 日齢から急激に増しているが，この段階で「トビ」は preflexion 期から flexion 期へ移行していた。また，3 ～ 8 日齢の仔
魚のワムシ摂餌個体率は 100％であったが，消化管内のワムシ摂餌数については，3 日齢の段階で最大摂餌数と最小摂餌数の差が 10 個体以上となり，4 ～ 7 日
齢には 15 ～ 20 個体までに広がり，8 日齢以降は，そクロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究

13の差が急激に増加した（Fig. 10c）
。これらのことから，に劣っていることや（Toledo et al. 1999），至適なも3 日齢（開口時）の段階で成長差が発現する可能性がのでないこと（Seoka et al. 2007）も成長が劣る要因

秘められており，成長差は外部栄養の摂取状況によっであると考えられる。しかし，Fujimoto et al.（2008）て助長されることが推察された。宮下ら（2000 a）はは異なる水温条件での飼育試験において，クロマグロ

受精卵のふ化水温が 24 ～ 29℃の間では，ふ化開始かは飼育水温によって成長速度が著しく変化すること，

らふ化完了までの所要時間が 30 分から 2 時間 30 分のそして飼育水温 27℃で飼育した場合，20 日齢で体長範囲であったことを報告しており，本研究においても，が 20 mm 以上に達することを報告している。この成その状況が観察された。そのため，ふ化が同調してい長速度は天然魚に匹敵することから，本研究で実施しないことにより，開口までの発育速度にもタイムラグ

た飼育方法，栄養強化方法および餌料系列等について，が生じ，その結果，開口段階で成長差が発現したこと

今後，再考する必要があると思われる。さらに，天然が考えられた。

水域では成長の悪いクロマグロ仔魚は淘汰されること

また，Tanaka et al.（2009）は沈降現象が 2 日齢よが示唆されているが（Itoh et al. 2000, Tanaka et al.

り観察されることを報告している。本研究でも 2 日齢

2006），種苗生産ではこういった個体も生き残ることから 8 日齢まで次第に生残率が低下していることからが考えられ，そのため，相対的に人工魚の成長が劣る（Fig. 11a）
，沈降現象が発生したものと推察された。

といった結果となったと思われた。

仔魚の沈降現象と死亡について，直接的な因果関係は以上のことから，クロマグロの成長差は摂餌が始ま解明されていないが，水槽底との接触で生じる外傷やる 3 日齢（開口時）の段階で発現する可能性があり，病原細菌の感染（照屋 2003，宮下 2006）あるいは水成長差はクロマグロ仔魚の外部栄養の摂餌状況によっ

槽底の水流が弱い環境で仔魚のガス交換の効率が著して助長されることが考えられた。

く劣ること（萱場ら 2003）などが原因として考えら

本研究では，遺伝的影響を最小限少なくするためにれている。また，仔魚は沈降状態から回復するために一腹子での成長差の発現機構について調査を行った。

遊泳行動をとることになるが，その頻繁な上下移動がしかし，3 倍体ギンブナにおいて一腹子でもアイソザ

過剰な運動となって個体のエネルギー消費をもたらす

イムパターンの相違が観察されており，遺伝的変異こととなり，これが初期減耗の大きな要因になっていが報告されている（大沢ら 1984，Zhang et al. 1992）。

るとも考えられている（坂本ら 2005）。これらのこと

また，クロマグロの産卵には，雌 1 個体に対して複数から，本研究における 8 日齢以降のワムシ摂餌数の最の雄個体が関与すること（宮下ら 2000 b）が報告さ

大値と最小値の差が 20 個以上に拡大した要因の一つれているが，本研究で使用した受精卵の父系側の関与

として沈降現象が関与したものと考えられた。

について調査を実施していない。そのため，今後は成また，Tanaka et al.（2006）が逆算推定した天然魚

長差の発現における卵質および父・母系の遺伝的影響と本研究のトビの成長を比較すると，6 日齢までほぼについて検討を行うとともに，複数親魚群から得られ同等もしくはそれ以上の成長を示しているものの，7た受精卵を用いた種苗生産過程における成長差の発現

日齢以降の成長は人工種苗の高い成長を示した個体で状況を調査することとしたい。

さえ，天然における成長の低い個体と同じ成長を示しており，全体的に天然魚よりも成長が遅い結果となった（Fig. 12）。 ブリ（Sakakura et al. 1997，荒 川 ら

第2節

複数雌親魚から得られた受精卵を使用した種苗生産過程での成長差の発現2001）やサワラ（Shoji et al. 1999）では，人工種苗の方が天然魚より成長が優れるという報告があるが，こ第 2 章第 1 節で雌 1 個体から得られた受精卵を使れについては飼育環境下で与えられる餌の量が天然海用して仔稚魚飼育を行い，そこで発生する成長差の域よりも潤沢であることによる影響と考えられる。

発現機構を明らかにした。一方，成長および生残に一方，Itoh et al.（2000）はクロマグロ仔稚魚の成おける遺伝的影響については，マダイ（谷口，岡田長は人工飼育下よりも天然の方が，成長が速いことを

1980，谷口ら 1988，1995），ニジマス（Danzmann et示唆している。Uotani et al.（1990）は，全長 2.28 ～al. 1995）およびヒラメ（Sekino et al. 2003），甲殻類

14.60  mm の天然クロマグロ仔魚の食性について調査

ではクルマエビ Marsupenaeus japonicus（虫明 2010）

を行っているが，カイアシ類および枝角類などが主餌で議論がなされ，少なからず影響していることが報告

料生物であると報告している。種苗生産現場で使用さされている。そこで本章では，複数雌クロマグロ親魚

れている餌はワムシおよびアルテミアであり，栄養強から得られた受精卵を用いて種苗生産を行い，雌 1 個化レベルなど含めて天然のカイアシ類と比べて栄養的体で種苗生産を実施した場合の事例との成長差の発現14Takayuki TAKEBE

状況について比較するとともに，雌親魚に由来する成多重比較した。また，ハプロタイプ頻度組成の統計

長への遺伝的影響について検証した。

的有意差は，モンテカルロシミュレーションの 10 万回試行による χ2 検定で検討した（Roff and Bentzen

材料と方法

1989）
。さらに，ハプロタイプ別に分けた後，逆算推定された同一日齢の全長についても Kruskal Wallis

受精卵2006 年 7 月 6 日および 19 日に㈲奄美養魚でtest（p<0.05）の後，Steel-Dwass test で検定した。

養成されていたクロマグロ親魚から自然産卵で得られた受精卵を採卵し，水研センター奄美栽培漁業セン

結果ター（現 水研センター西海区水産研究所マグロ増養PCR 法 で 増 幅 し た D-Loop 領 域 は，

殖研究センター奄美庁舎）に搬入し，それぞれを飼育

mtDNA 分 析試験（以下，試験 1［卵径 1.0 ± 0.02 mm，n = 100］，

Niwa et al.（2003）の報告と同様に約 2000 bp であっ

試験 2［卵径 1.0 ± 0.03 mm，n = 100］）に供試した。

た。また，RFLP 分析の結果，試験 1 では 12 種類（ハなお，これら 2 回の飼育試験に供した親魚は同一親魚

プロタイプ No.1 ～ 12），試験 2 では 22 種類（ハプロ群であり，2002 年に高知県沖で漁獲されたクロマグ

タイプ No.1 ～ 22）の家系が観察され，試験 1 およびロ幼魚を，鹿児島県奄美大島久根津湾内に設置した試験 2 で観察された共通の家系は 12 種類（ハプロタ

48 m × 32 m の長円形浮子式生簀に収容し，親魚まで

イプ No.1 ～ 12）であった（Table 2）。

育成した 5 年魚群である。また，生簀網内の親魚数は約 100 個体であり，性比は不明であった。

試験 1 においてサンプリングが行われた日齢全てに観察されたハプロタイプは「1」，「5」，「9」および「10」の 4 種類であり，試験 2 では「4」，
「5」，
「6」，
「7」
，
「8」

種苗生産

飼育水槽へのクロマグロ仔魚（1 日齢）の収容密度は，試験 1 では 0.6 万個体 /kL，試験 2 で 1.0

および「9」の 6 種類で，その他のハプロタイプは日齢によっては観察されなかった（Table 3，4）。

万個体 /kL とした。なお，飼育水温は自然水温（試験 1：28.5 ± 0.4℃，27.6 ～ 29.6℃，試験 2：28.8 ± 0.5℃，
27.9 ～ 29.8℃）とした以外，前節の方法に同じである。
耳石輪紋観察および成長履歴調査 2 回の飼育試験共Table 2. Composition of genotypes in the eggs spawned
by Pacific bluefin tuna broodstock in EXP 1 & 2に，飼育試験期間中，3，5，10 および 15 日齢に無作為に各 15 個体を採取した。また，それぞれ 12 日齢（試
験 1：全長 6.5 ± 0.5 mm［5.1 ～ 7.3］
，試験 2：全長 7.0± 0.6 mm ［5.7 ～ 7.9］
）からつつき合い行動および共食い行動が観察され，さらに 21 日齢に個体の成長差が明確となったため仔稚魚を各 100 個体採取した。採取したサンプルは，99.5％エタノールで保存後，後日，
耳石日輪紋観察および mtDNA 分析用に供した。なお，
21 日齢の供試魚における「トビ」
「ビリ」
「モード」
の 3 群の定義とグループ分け，耳石観察方法，全長の推定方法は前節の方法と同じである。
mtDNA 分析

前節と同様の方法で受精卵に加えて，

1，3，5，10 お よ び 21 日 齢 の ク ロ マ グ ロ 仔 稚 魚 の
mtDNA 分析によって，各々の個体の母系列別を行った。
統計処理

21 日齢で 3 グループに分けられたサンプルにおいて，21 日齢の全長の実測値および逆算推定された同一日齢の全長は Kruskal Wallis test で有意差が検出された場合（p<0.05），Steel-Dwass test でTable 3. Occurence of the mtDNA haplotypes among
Pacific bluefin tuna at each sampling date in EXP 1

クロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究
Table 4. Occurence of the mtDNA haplotypes among
Pacific bluefin tuna at each sampling date in EXP 2

種苗生産

15

試験 1 におけるクロマグロ仔魚は 5 日齢までの減耗が著しく，生残率が 20％まで落ち込み，10
日齢までには 2.8％となった（Fig. 15a）。3 日齢の仔
魚 の 全 長 は 3.8 ± 0.1 mm（ 平 均 ± 標 準 偏 差，3.6 ～4.0）であり，5 日齢から指数関数的な成長を示し（Fig.
15b），21 日齢には 14.8 ± 4.4 mm（9.3 ～ 26.2）となった。
ワムシの摂餌状況については，3 日齢でのクロマグロ
仔魚のワムシ Table 2 Composition of genotypes inthe eggs spawned by Pacific bluefin tuna broodstockin EXP 1 & 2 摂餌個体率は 100％であった。しかし，摂餌された消化管内のワムシ個体数は仔魚によっては 10 個体以上の差があり，4 日齢には 20 個体以上，5 日齢には 30 個体以上と，その差はより大きくなり，
消化管内のワムシ摂餌数が最も多い個体と最も少ない個体の差が顕著になった（Fig. 15c）。
試験 2 の仔魚の生残率は，4 日齢（66.9％）から 5
日齢（22.6％）の間に急落し，10 日齢では 10.9％にまで減少した。
（Fig. 16a）
。成長については，3 日齢のFig. 15. Changes in (a) survival rate, (b) total length,and (c) the number of rotifers in the gut of Pacificbluefin tuna larvae ( n = 30) in EXP 1. Bar indicatesstandard deviation.

Fig. 16. Changes in (a) survival rate, (b) total length,and (c) the number of rotifers in the gut of Pacificbluefin tuna larvae ( n = 30) in EXP 2. Bar indicatesstandard deviation.

16

Takayuki TAKEBE

全長は 3.8 ± 0.1 mm（3.6 ～ 4.0）であり，以降，直線

9.3 mm であったことから，「トビ」は 22 個体（21.7

的な成長を示し，21 日齢には 21.3 ± 6.5 mm（13.1 ～± 2.2 mm），「ビリ」は 18 個体（10.0 ± 0.4 mm），こ42.0）となった（Fig. 16b）
。3 日齢での仔魚のワムシ

れら以外の「モード」は 60 個体（13.7 ± 2.2 mm）に

摂餌個体率は試験 1 と同様に 100％であった。摂餌さ分けられた（Fig. 17）。試験 2 においては 21 日齢におれた消化管内のワムシ個体数は試験 1 と同様に，仔魚いて最小全長個体は 13.1 mm であったことから，「トによっては 10 個体以上の差があり，その後，その差ビ」は 29 個体（30.0 ± 3.1 mm），
「ビリ」は 14 個体（14.1はより大きくなる傾向を示した。また，ワムシ摂餌数± 0.6 mm），これら以外は「モード」とし，57 個体の少ない仔魚は 8 日齢まで 10 個体以下であった（Fig.

（18.6 ± 3.1 mm）に分けられた（Fig. 18）。なお，各々16c）。

の試験において，これら 3 グループの全長は互いに有意に異なっていた 1 & 2（p<0.01）。飼育水槽から 1 ～
試験 1 および試験 2 の 21 日齢

5 日おきに採取したクロマグロ仔魚 160 個体から，各におけるクロマグロ供試魚の全長組成を，それぞれ試験において Fig. 19 および Fig. 20 のような全長（TL）

Fig. 17（ n = 100，14.8 ± 4.4 mm，平均±標準偏差，と耳石径（OR）の関係が観測された。なお，21 日齢

9.3 ～ 26.2）および Fig. 18（n = 100，21.3 ± 6.5 mm，の供試魚では耳石日周輪が明瞭に観察できたのは，試13.1 ～ 42.0）に示した。
【最小個体の全長の 2 倍以上

験 1 では全 100 個体であったが，試験 2 では 100 個体の全長を有する個体をトビ（LARGE）】と定義し，こ中 82 個体（82.0％）であった。全長と耳石径の関係

成長履歴と逆算推定

れを基にそれぞれ 3 群に分けた。

において，試験 1 では耳石径が 12.5，20 および 65 µm

試験 1 においては 21 日齢において最小全長個体は付近で変曲点が存在し，試験 2 では耳石径が 12.5，45

Fig. 17. Frequency distribution of total length ofPacific bluefin tuna sampled at 21 dph in EXP 1( n = 100, 14.8 ± 4.4 mm, mean ± SD).

Fig. 18. Frequency distribution of total length ofPacific bluefin tuna sampled at 21 dph in EXP 2( n = 100, 21.3 ± 6.5 mm, mean ± SD).

Fig. 19. Relationship between sagittal otolith radius andtotal length of Pacific bluefin tuna larvae

Fig. 20. Relationship between sagittal otolith radius
and total length of Pacific bluefin tuna larvae in EXP 2.

クロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究および 65 µm 付近で変曲点が存在した。

17

適合状況を検討した結果， 1 では，耳石と全長の関係

また，前節で用いた全長から体長（SL）への変換

図（Fig. 19）で表された 160 個体中のクロマグロ供試式 TL = 1.15 SL - 0.23（Y. Tanaka, unpublished data,

魚中，最小全長個体魚の数値 La = ln（3.7 mm），Oa

2011） を 基 に， 同 様 に ク ロ マ グ ロ の 発 育 に つ い て= 9.5 µm を，耳石径の大きさに関わらず使用した。試Miyashita et al.（2001）および Tanaka et al.（2006）

験 2 では，試験 1 と同様に耳石と全長の関係図（Fig.20）の報告と照らし合わせた結果，耳石径が 12.5 µm の場で表された 160 個体中のクロマグロ供試魚中，合，preflexion 期から flexion 期へ移行する時期に一① 耳石径が 45 µm 未満の場合は，La = ln（3.9 mm），

致していた。また，耳石径が 20 µm の場合，flexion

Oa = 11.1 µm（耳石径 12.5 µm 未満区間の平均値）

期から postflexion 期へ移行する時期に一致していた。

②耳
 石径が 45 µm 以上の場合は，La = ln（8.5 mm）

さらに，耳石径が 45 µm の場合，鰭条数が成魚と同じ

Oa = 52.0 µm（耳石径が 45 µm 以上 60 µm 未満になる時期と一致していた。

区間の平均値）を，それぞれ La および Oa に用

各試験ともに全長を推定するために，前節と同様にいた。

Campana 法（1990）を用いた。Campana 法では，ふ

その結果，逆算推定された全長を基に，Fig. 21 お化時における全長と耳石径を La および Oa として用

よび Fig. 22 の通り 3 グループに分けられた 21 日齢いる。しかし，前節と同様に 2 回の試験ともに耳石径の供試魚の成長履歴が得られた。試験 1 では，「ビと全長との関係に変曲点が 3 ヵ所存在したため（Fig.

リ」の全長は 8 日齢から飼育期間を通して，他の 2 グ

19，20），変曲点ごとに La および Oa の値を代入した

ループよりも小さく（p<0.05 at 8 dph，p<0.01 after

が，実測値との適合状況が悪かったため，実測値とのdph），同様に「トビ」の全長は 8 日齢から飼育期間をFig. 21. Growth history of Pacific bluefin tunain EXP 1, (a) from 3 dph (mouth opening) to 21
dph (juvenile stage), and (b) from 3 dph to 10 dph
determined by the otolith back-calculation. Plotsand vertical bars indicate average and standard
deviations, respectively. Total length of three sizegroups divided at 21 dph were significantly different
each other in the same age (p<0.05, Steel-Dwass test).

Fig. 22. Growth history of Pacific bluefin tunain EXP 2, (a) from 3 dph (mouth opening) to 21
dph (juvenile stage), and (b) from 3 dph to 10 dph
determined by the otolith back-calculation. Plotsand vertical bars indicate average and standard
deviations, respectively. Total length of three sizegroups divided at 21 dph were significantly different
each other in the same age (p<0.05, Steel-Dwass test).

18

Takayuki TAKEBE

通して，他の 2 グループよりも大きかった（p<0.05 at

p<0.01 between 7 ～ 10 and 17 ～ 21 dph），ハプロタ

p<0.01 between 9 ～ 21 dph for SMALL，

イプ間の明確な成長差は検出されなかった（Table 6）。

8dph and

p<0.05 Between 8 ～ 9 dph and p<0.01 between 10 ～21 dph for INTERMEDIATE）。また，
試験 2 では，「ト考察ビ」の全長は 4 日齢から飼育期間を通じて，他の 2 グループよりも大きかった（p<0.05 at 4 dph，p<0.01

本節では，複数雌親魚から得られた受精卵を用いて，after 5 dph）
。 ま た，「 ビ リ 」 と「 モ ー ド 」 の 全 長

同一飼育環境下における種苗生産試験に供試し，そのは 14 日齢以降に有意差が生じた（p<0.05 at 14 dph，

成長差の発現状況について検討を行った。飼育試験はp<0.01 after 15 dph）。

2 回実施し，供試したクロマグロ受精卵および仔稚魚の遺伝マーカー調査によって，試験 1 は 12 個体，試

成長への遺伝的影響

試験 1 および試験 2 の 21 日齢における供試魚を「トビ」「モード」「ビリ」の 3 群に

験 2 では 22 個体の雌親魚に由来する受精卵を用いて種苗生産試験を実施したことが分かった。

分けたが（Fig. 17，18），各々のグループに出現する

Sawada et al.（2000）は，クロマグロ種苗生産現場

ハプロタイプの状況を Fig. 23 および Fig. 24 に示しにおいて飼育水中のワムシの最適給餌密度は 10 ～ 30た。試験 1 および試験 2 それぞれの供試魚について，個体報告している。本研究にの 2 回の種苗生産試験に

ハプロタイプ頻度組成の均質性検定では，試験 1 はおいて前節と同様に，飼育水中のワムシ密度は 10 個

2

体 /mL 以上を維持しており，餌料密度による成長へ

値 =30.2，P = 0.055），試験 2 では出現に偏りが認めの影響は無かったものと考えられた。また，飼育水温

ハプロタイプの出現は均等と判断されたのに対し（χ2。 ま た， 各 々 の ハ プ
ら れ た（χ 値 = 44.2，P = 0.001）

は，試験 1 で 27.6 ～ 29.6℃（28.5 ± 0.4，平均±標準

ロタイプ毎の成長についてみると（Fig. 25，26），試

偏差），試験 2 では 27.9 ～ 29.8℃（28.8 ± 0.5）であり，

験ハプロタイプ間の明確な成長差は検出されなかっ耳石紋の形成（Itoh et al. 2000）および摂餌開始（宮た（Table 5）。試験 2 でも 5 日齢から成長差が検出

下ら 2000 a）は，いずれも 3 日齢にみられ，3 日齢でされたが（p<0.05 between 5 ～ 6 and 11 ～ 16 dph，の摂餌個体率は 100％であった。

Fig. 23. Frequency distribution of haplotypes of Pacificbluefin tuna sampled at 21 dph of EXP 1 ( n = 100).

Fig. 24. requency distribution of haplotypes of Pacificbluefin tuna sampled at 21 dph of EXP 2 ( n = 100).

クロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究

19

日輪耳石経から逆算推定した全長は，両試験ともにして考えられている。また，仔魚は沈降状態から回復

実測値のものと合致していた。21 日齢において 3 グするために遊泳行動をとることになるが，その頻繁なループに分けられた供試魚は，すでに 12 日齢からつ上下移動が過剰な運動となって個体のエネルギー消費

つき合いまたは共食い行動が観察され，成長差も明らをもたらすこととなり，これが初期減耗の大きな要因

かに認められた。

になっていることも考えられている（坂本ら 2005）。

逆算推定から見た成長履歴からは，成長差は試験 1

試験 1 では，これらの要因が重なり，7 日齢で活力

では 8 日齢から，試験 2 では 4 日齢から生じていた。

を取り戻した個体とそうでない個体の間に摂餌状況のこれらの結果は，前節の雌親魚 1 尾由来の仔魚群に比差が生じて，8 日齢に成長差が発現した可能性がある

べて 1 ～ 5 日遅れて成長差が発現したということを示と考えた。

している。しかし，3 グループそれぞれに対して成長試験 2 でも 4 日齢の深夜に沈降現象が発生し，その差が発現した後は，その差が拡大する傾向は前節の結ため，仔魚の活力の状況によって 5 日齢にワムシ摂餌果と同じであった。

数にバラツキが生じるとともに，その夜に生残率が落試験 1 は，5 日齢で仔魚の生残率が落ち込み，さら

ち込んだものと考えた。しかし，試験 2 では 4 日齢かに消化管内のワムシ摂餌個体数の差が 30 個体以上にら 3 グループ間で成長差が発現していることから，2広がっている。翌日の 6 日齢には全長の大小差が大

日齢もしくは 3 日齢での沈降現象の影響による可能性

きくなり，7 日齢にワムシ摂餌個体数の差も拡大するも否定できない。これらのことから，両試験区ともに傾向をした。クロマグロ仔魚は夜間に水槽底に沈降

仔魚の活力に関わる飼育環境要因によって摂餌行動にすることが知られている（宮下 2006，Takashi et al.

影響が出たことによって成長差が発現したものと推察

2006）
。

された。その結果，その後の成長差も収束することなその現象は 2 日齢から発生し 5 日齢にピークが認めく，外部栄養の摂餌状況により助長されたと考えられられ，また日の入り 4 時間後（午前 0:00 前後）からた。また，試験 1 および試験 2 それぞれの供試魚につ水槽底に沈んでいるクロマグロ仔魚が観察されること

いて，21 日齢において 3 グループにおけるハプロタイが報告されている（Tanaka et al. 2009）。試験 1 では，

プ頻度組成の均質性検定では，試験 1 はハプロタイプ

4 日齢に甚大な沈降現象が起こり，そのため，翌日のの出現について均等と判断されたが（χ 値 = 30.2，P =日齢には仔魚の活力に支障を来す結果になったものと0.055），試験 2 ではハプロタイプの出現に偏りが認め推察された。仔魚の沈降現象と死亡について，直接的られた（χ2 値 = 44.2，P = 0.001）。また，逆算推定されな因果関係は解明されていないが，水槽底との接触でた成長についてみると，試験 1 ではハプロタイプ間で生じる外傷や病原細菌の感染（照屋 2003，宮下 2006）

13 日齢より有意差が検出されたが（Fig. 25，p<0.05），

あるいは水槽底の水流が弱い環境で仔魚のガス交換の日齢間では明確な差が検出されなかった（Table 5）。

効率が著しく劣ること（萱場ら 2003）などが原因と試験 2 でもハプロタイプ間で 5 日齢から有意差が検出

Fig. 25. Growth history of Pacific bluefin tuna in EXP
1, from 3 dph (mouth opening) to 21 dph (juvenilestage) determined by the otolith back-calculation
about each haplotype. Plots and vertical bars indicate
average and standard deviations, respectively ( n = 100)

Fig. 26. Growth history of Pacific bluefin tuna in EXP
2, from 3 dph (mouth opening) to 21 dph (juvenilestage) determined by the otolith back-calculation
about each haplotype. Plots and vertical bars indicate
average and standard deviations, respectively

220

Takayuki TAKEBEされたが（Fig. 26，p<0.05 between 5 ～ 6 and 11 ～16 dph，p<0.01 between 7 ～ 10 and 17 ～ 21 dph），
日齢間では試験 1 と同様に明確な差は検出されなかった（Table 6）。Sekino et al.（2003）はヒラメの放流

Table 5. Results of Kruskal Wallis Steel-Dwass
test for comparison of growth in EXP 1 among
haplotypes of Pacific bluefin tuna in the same age(*; p<0.05, **; p<0.01)

種苗において，体サイズに基づく選別が家系構成に大きな影響を与える可能性を示した。すなわち，家系によって初期の成長に差があり，結果として放流時に特定の大きさを選ぶことになったと推察している。また，
Nakamura et al.（2008）は脊椎動物中で唯一自家受精をするマングローブ・キリフィッシュ（Kryptolebias
marmoratus）を用いて，2 系統のクローン魚を交配させ，その交雑魚と元の 2 系統の魚の F2 世代の成長を比較した。その結果，交雑魚の成長は元の 2 系統のクローン魚の成長の中間を推移することを報告している。魚類以外でクルマエビにおいて，由来する雌親によって生残率および成長に有意な差が出ることが報告されている（虫明 2010）。また，谷口ら（1988）はマ
ダイにおいて半きょうだい間でも成長率や生残率が明らかに異なることを示し，特に，ふ化後 65 日までは
雌親魚間成長差が -17.2 ～ +16.8％と，かなり大きいことを明らかにし，雌親魚の遺伝的な違いにより，稚魚の成長差は生じたと報告している。また，飼育成績の良否は，飼育環境要因によって大きく左右されることを前提としながらも，親間での成長因子や生残因子といった遺伝的差異が潜在的に関与していることも示唆している。一方，自然産卵法による種苗生産では，親魚の種苗生産への貢献度や著しい家系構成の歪みまで予測することは不可能であることが指摘されている（Sekino et al. 2003）。
本研究においても，ハプロタイプ間での成長速度が異なることが示唆された（Fig. 25，26）。また，両試験において 21 日齢の体サイズ差に基づく 3 グループのハプロタイプ頻度組成の均質性検定をしたところ，
試験 2 では偏りが認められ（χ2 値 = 44.2，P = 0.001），
試験 1 でも有意ではないが偏る傾向（χ2 値 = 30.2，P= 0.055）が見られた。これらのことから，クロマグロの成長差にも少なからず遺伝的影響があるものと考えられた。しかし，前述の通り，本研究における成長差の発現には飼育環境による影響も反映されてしまったことから，今後，更なる飼育試験の実施と使用する
受精卵または仔魚の収容密度の均一化を図り，試験精度を高めることが必要であろう。
また，試験 1 および試験 2 では同一親魚群から得られた受精卵を用いて種苗生産試験を実施したが，21
日齢における両試験に共通したハプロタイプ出現状況
P ≒ 0.000），について規則性が認められず（χ2 値 = 88.8，
3 グループのサイズ毎に見ても同様な結果であった（トTable 6. Results of Kruskal Wallis Steel-Dwass test
in EXP2 for comparison of growth among haplotypesof Pacific bluefin tuna in the same age (*; p<0.05, **;p<0.01)

クロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究

21

ビ：χ2 値 = 27.1，P ≒ 0.000，モード：χ2 値 = 52.7，PP ≒ 0.023）。長倉ら（2003）≒ 0.000，
ビリ：χ2 値 = 14.0，
は，ブリの種苗生産で産卵に関与した親魚と得られた種苗の遺伝子組成についてマイクロサテライト DNAを用いて精査した。その結果，産卵への雌親魚の関与
率は 77.8 ～ 87.5％であった。また，69 ～ 231 日齢で取り揚げたブリ稚魚には，ハプロタイプの出現頻度に偏りがみられたものの，産卵に関与した全ての雌親魚に由来する種苗が生き残っていることが明らかになった（長倉ら 2003）。本研究で使用したクロマグロ親魚は約 100 個体で，その雌雄比は不明であるが，半数が雌親魚と仮定すると，雌の産卵への関与率は 24.0 ～
44.0％と試算される。この値は，ブリの場合（長倉らFig. 27. Comparison of diameter of fertilized eggs
used in EXP 1 and EXP 2 (**, ANOVA, p<0.01). Datais expressed mean ± SD.

2003）と比べて約半分程度と低い。クロマグロからの受精卵の確保は不安定で難しいことが指摘されている

イズを大きくすることで仔魚の初期摂餌に有利に働く（升間 2008）。この原因には，本研究の結果から，クことが，いくつかの魚種での飼育実験で示されているロマグロ雌親魚の中で実際に産卵している個体が少な（Theilacker 1981，Knutsen and Tilseth 1985，今井，いということも挙げられるだろう。

田中 1966）。さらに，仔魚の活力判定に用いられる本研究で行った 2 回の種苗生産試験で，受精卵から無給餌生残指数（Survival Activity Index：SAI，新21 日齢の間に認められた全ハプロタイプ数は，試験 1間，辻ヶ堂 1981）は産卵初期に高く，群として産卵で 12 タイプ（Table 3），試験 2 では 22 タイプ（Table

回数が増えるに従って低下する傾向が，シマアジ（虫4）であった。その後 21 日齢に取り揚げたクロマグロ

明，関谷 1993，Watanabe et al. 1998），ブリ（虫明ら

種苗のハプロタイプ数は，それぞれ 11 タイプ（91.7％）

1993，Mushiake et al. 1994，虫明ら 1995）およびキと 13 タイプ（59.1％）と受精卵の時よりも少なくなっジハタ（萱野，尾田 1990，萱野ら 1998）で報告された。これらの結果は，クロマグロでは種苗生産の過程ている。これらのことから，クロマグロの雌親魚毎でで消失するハプロタイプがあるということ，すなわの卵径および産卵回数の違いによって，得られた仔魚

ち，雌親魚によっては仔魚が死滅していることを示しの種苗生産成績が左右されるという可能性を挙げる。

ている。この原因については雌親から卵・仔魚への遺しかし，本研究の 21 日齢において両試験に共通して伝的な影響も否定できないものの，現時点ではむしろ出現しているハプロタイプ「2」，「3」および「4」は飼育手法と飼育環境に起因する仔魚の健康状態の方が比較的成長が優れたグループに出現したのに対して，大きな影響があったのではないかと考えている。特にハプロタイプ「1」と「8」は両試験共に「トビ」に出飼育水温を見ると，試験 1 では 28.5 ± 0.4℃（27.6 ～現しない傾向が見られていることから（Fig. 23，24），

29.6）， 試 験 2 は 28.8 ± 0.5 ℃（27.9 ～ 29.8） で あ り，

単純に卵径やふ化仔魚の活力の問題では結論を導くこ

試験 2 は試験 1 より有意に水温が高かった（p<0.01）。

とは難しく，遺伝的影響も考慮しなければならないとヒラメを用いた温度耐性の育種研究において，温度耐思われた。

性を有する個体は，単純に感受性がある個体および温以上のことから，複数の雌親魚から得られた受精卵度耐性が無い個体と比べて，生残率が有意に高い傾向を用いた事例におけるクロマグロの成長差には，少なを示すことが報告されている（Chi et al. 2007）。そのからず遺伝的影響があることが示唆された。そして，ため，クロマグロにも家系毎に飼育水温耐性に違いが成長差は仔魚の活力に悪影響を及ぼす事象に起因するあり，それが生残または成長に影響を及ぼしたものと摂餌状態の良否によって助長されると考えられた。今推察した。

後は，試験精度を高めるために種苗生産試験におけるさらに，この 2 回の種苗生産試験で使用した受精卵

雌親魚毎に由来するふ化仔魚の収容密度を均一化したの採卵日には 2 週間の間隔があり，卵径は 2 回目の試

上での事象把握が必要であり，また，使用する雌親魚

験の方が小さくなっていた（Fig. 27）。クロマグロでの産卵履歴や卵径データと種苗生産試験結果を照らしは，卵径と水温の関係において水温の変化に伴い卵径合わせることが必要であり，さらに，父系効果の検討が変化し，両者には負の相関関係があることが報告さも必要であると考えられた。

れている（宮下ら 2000 a，升間ら 2006）。一方，卵サ22

Takayuki TAKEBE
制に実績のある飼育水を水中ポンプ（CSL-100，寺田
第3章

スジアラの成長差の発現ポンプ製作所）で攪拌する方式を改良し実施した（Fig.

（複数雌親魚から得られた受精卵を使用した種苗

28，29）。なお，クロマグロで実施していた方式に対生産過程での成長差の発現）して改良した点は，6 日齢まで 24 時間の照明を施し（Yoseda et al. 2008），水槽底に配された直径 13 mm

クロマグロは，その種苗飼育試験期間は約 30 日間の塩化ビニル製パイプについて，水の吐出方向が 1 本であり，養殖魚として一般的なマダイと比較すると成は水槽の底面から表面への垂直方向に設置され，残り長が非常に速く（村田 2005），その成長様式が特異での 1 本が水槽の底面と平行に向けられた点である（Fig.

ある可能性が否めない。一方，ハタ科魚類においても6，7）。水中ポンプからの水の吐出量を 1.5 kL/ 時とし，成長差による共食いが問題となっており，チャイロマ

仔魚が排水ネットに接触するのを防ぐために，通気がルハタ（Hseu 2002，Hseu et al. 2003，Takeshita and排水ネットを挟むように隣接して設置した 2 個のエア

Soyano 2009），タマカイ（Hseu et al. 2004，2007a），

ストーンからの通気量は 0.5  L/ 分とした。なお，2 個

アカマダラハタ（Hseu et al. 2007b），マハタ（Sabateの角形エアストーン（50 × 50 × 170 mm）のうち 1 個

et al. 2009b）などで，その研究がなされている。そのからは酸素通気を施した。また，24 時間照明を止めため，本研究では供試魚にハタ科魚類に属するスジア

た夜間にスジアラ仔魚の沈降現象が起きると想定し，

ラを用いて，クロマグロで実施したように複数雌親魚から得られた受精卵を用いて種苗生産を行い，スジア
ラにおいて成長差の発現状況および発現時期を調査すると共に，成長への遺伝的影響について検証した。
材料と方法
親魚および受精卵2009 年 5 月 19 日に水研センター

西海区水産研究所石垣支所八重山栽培技術開発センター（現 水研センター西海区水産研究所亜熱帯研究センター八重山庁舎）で養成されていたスジアラ親魚から得られた受精卵（卵径 0.9 ± 0.02 mm，平均±標準偏差，n = 100）を採卵し，種苗生産試験に供した。
なお，スジアラ親魚は雌 43 個体（体重 4.9 ～ 6.8 kg，
全長 61.0 ～ 67.4 cm），雄 9 個体（6.8 ～ 7.4 kg，67.0 ～73.4 cm）を 200 kL コンクリート水槽 2 基にそれぞれ
雌 21 ～ 22 個体，雄 4 ～ 5 個体で収容し，これらの親
魚から自然産卵によって得られた受精卵を産卵翌日に回収した。回収した受精卵は紫外線処理海水で洗卵後，200  L アルテミアふ化水槽に一時的に収容した。収容後は約 5 分間静置し，水槽底面に沈下した卵を取り除いた。アルテミアふ化水槽には中央に 2 個のエアス
トーンを垂下して通気を施し，クッパー氏胞形成まで
流水（1.5 ～ 2.0 L/ 分）で 4 ～ 6 時間の卵管理を行った。
その後，それぞれの試験の条件に合わせて，試験水槽
へ卵収容するか，別のふ化水槽でふ化させた後に試験水槽に収容した。
容量 60 kL のコンクリート製八角形水槽（底種苗生産2

実効水量：50 kL）を使用し，仔魚（1 日齢，2.5
面積 25 m ，
± 0.08 mm，n = 30）を 1.2 万個体 /kL の密度で収容した。飼育管理手法については，クロマグロの沈降死抑Fig. 28. Horizontal (A) and lateral views (B) of therearing tank for mass culture in Yaeyama Station,
the Research Center for Subtropical Fisheries andAquaculture, SNF, FRA using the water pumpsystem.“P”indicates water pump. White and blackarrows indicate directions of water current. Angle ofwhite arrow is set 0 degree, and 90 degree for blackarrow against the tank bottom.

クロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究

23

Fig. 29. The rearing tank for mass-culture of leopard coral Center for Subtropical Fisheries and grouper
in the Yaeyama Station, the Research Aquaculture, SNF, FRA using the water pump system.

消灯後に沈降現象を抑制する操作を加えるようにし生を与え，25 日齢より取り上げまでは配合飼料を給た。沈降現象抑制操作として，水中ポンプからの水の与した。ワムシはマリンフレッシュ（200 mL/ 億個体）

吐出量を 1.5 kL/ 時から 2.2 kL/ 時に増加させるととで 6 時間の栄養強化後，DHA 強化剤（ハイパーグロ

もに，散気ホース（直径 13 mm × 長さ 50 cm，以下，ス，日清マリンテック株式会社）を 200 mL/ 億個体

エアブロック）によるエアブロック 4 箇所（0.5 L/ 分・の割合で添加し，16 時間栄養強化した。アルテミアは，箇所）を稼働させ，
7 日齢から 0.5 L/ 分・日の割合で 2.0

HUFA 強化ユーグレナ（ドコサユーグレナ・ドライ，

L/ 分までに，またエアストーンからの通気量も，そ秋田十條化成社株式会社）を 20 g/ 億個体となるよう

れぞれ 0.5 L/ 分から 1.0 L/ 分までに増加させた。なお，

添加し，16 時間栄養強化した。

量産飼育試験の開始水温が 25℃台であったため，0.5℃

また，10 日齢まで成長，生残およびワムシ摂餌個/ 日の割合で飼育適正水温といわれている 28℃まで昇体数を調べた。まず，仔魚の生残尾数を推定するため，温させた（照屋 1998）。

24 時間照明を止めた 7 日齢より直径 50 mm の塩化ビ

その結果，試験水温は収容から試験終了まで 25.6 ～

ニル製パイプを用いて，夜間（20 : 00 ～ 21 : 00）に飼

29.3℃（28.2 ± 0.6℃，平均±標準偏差）の範囲であっ

育水槽の 7 定点から 20 ～ 30 L の飼育水を採水した。

た。また，水質状況および溶存酸素量の観測値を見な採水した飼育水中の仔魚数から容積法で水槽全体の生がら注水量を除々に増加させた。

残尾数を推定した。さらに，全長およびワムシ摂餌個

2 日齢より市販の冷蔵濃縮ナンノクロロプシス

体数を測定するために，スジアラ仔魚を毎日 14:00 にNannochloropsis oculata（マリンフレッシュ，
メルシャ

飼育水槽から 30 個体採取した。仔魚を 5 ppm に調整ン株式会社）を飼育水中の密度が 50 万細胞 /mL となした m- アミノ安息香酸エチルメタンスルホネート（ナるように添加した。同じ 2 日齢（仔魚が開口し摂餌をカライテスク株式会社）で麻酔後，スライドグラス

始める前日）には，いわゆる SS 型ワムシ Brachionusに乗せ，万能投影機（V12-A，Nikon）で 20 ～ 50 倍

rotundiformis タイ株（以下ワムシ）の給餌を開始し，に拡大し，デジタルノギス（Absolute DIGIMATIC，

5 日齢まで飼育水中のワムシ密度が 20 個体 /mL とな

Mitutoyo）を用いて全長を 0.1 mm 単位で測定した。

るよう調整した。また，5 ～ 22 日齢にはいわゆる S

ワムシ摂餌個体数の確認は，スライドグラス上で仔魚型ワムシ小浜株（以下ワムシ）を 20 個体 /mL の密度を軽く押し潰し，仔魚の消化管内のワムシの口器（咀

で与えた。

嚼器）の数を光学顕微鏡（YS2-H，Nikon）下で計数

さらに，仔魚の平均全長が 6 mm に達した 17 日齢から 41 日齢まではアルテミア Artemia franciscana 幼した。なお，平均全長 20 mm に達した 42 日齢に分槽
を行った。

24
耳石輪紋観察および成長履歴調査

Takayuki TAKEBE
飼育試験期間中，

5，10，20，30 および 40 日齢に飼育水槽から無作為に各 15 個体を採取した。個体の成長差が明確となった 50 日齢には仔稚魚を 50 個体採取した（Fig. 30）。
採取したサンプルは，99.5％エタノールで保存後，後日，耳石輪紋観察およびマイクロサテライト DNA
析に供した。40 日齢過ぎから，共食い行動が観察され始め，「共倒れ現象」（Fig. 31）も見られるようになった。共倒れした標本の被食魚（Prey：PR）および捕食魚（Cannibal：CA）の全長の関係式（TLPR = 0.41。
TLCA + 8.57，r 2 = 0.57）が得られた（Fig. 32）
捕食魚と被食魚の全長比を見ると 1.54 ± 0.12（1.27

Fig. 32. Relationship between cannibal and prey total
lengths in suffocation of leopard coral grouper.

～ 1.82）であった。そのため本研究においては，この比の最小値 1.27 を使用し，50 日齢の供試魚において33）。推定全長は，得られた各耳石測定値から Back-

最小全長個体の 1.27 倍以上の全長を有する個体を「トcalculation 法を用いて求めた。全長を推定するためのビ」（LARGE）とし，供試魚全体を「トビ；LARGE」

Back-calculation には，基本的に実測値との残差が最「モード；INTERMEDIATE」「ビリ；SMALL」の 3も少ない Campana 法（Campana1990）を用いた。

群に分けた。各個体の耳石（礫石）を摘出し，耳石
日輪紋測定システム（RATOC 社）を用いて各日齢の親子判別（マイクロサテライト DNA 解析） Fujii et

輪紋の増加幅および耳石径（OR）を測定した（Fig.

al.（2010）の方法を改変し，スジアラのマイクロサ
テライト DNA 解析を行った。スジアラ親魚（n = 43）の鰭および 50 日齢のスジアラ種苗（n = 50）の筋肉
から Agencort DNAdvance genomic DNA isolation
kit（Beckman Coulter, Inc）を用いて，プロトコルに従ってゲノム DNA を抽出した。なお，DNA の増幅には MJ PTC-100（Bio-Rad Laboratories, Inc., U.S.A）を用いて行った。全サンプル個体について，マイクロFig. 30. Leopard coral grouper at 60 dph (Upper:
LARGE TL 43.2 mm, lower: SMALL TL 23.3 mm).

Fig. 31. A cannibal died from suffocation with theprey in its mouth at 60 dph (Cannibal: TL 47.2 mm,
Prey: TL 27.2 mm).

Fig. 33. Lapillus otolith of leopard coral grouper(20 dph, TL 9.0 mm).

クロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究

25

サ テ ラ イ ト 7 遺 伝 子 座（E10，E190，E153，STR8，
STR36，STR29，STR35）をポリメラーゼ連鎖 反 応（PCR）で増幅し，遺伝子型を決定した（Ozaki et al.
投稿準備中）。PCR 反応は，PCR 反応液 10 µL 中に 0.5
pmoL/ µL 未標識プライマーと 0.05 pmol/ µL 蛍光エ
ンドプライマー（with [5'-TET]），1 × PCR buffer，2.0
mM MgCl2，0.2 mM dNTP，1% BSA，0.025 unit の
Taq DNA polymerase（Ex-Taq，タカラバイオ株式
会社），鋳型 DNA 25 ng を加えて行った。なお，アニー
リング温度は，各マイクロサテライトマーカーの至適温度を使用した。この反応液を 95℃で 2 分間初期加熱変性し，95℃ で 30 秒の変性，56 ～ 58℃ で 1 分のアニーリング，72℃で 1 分の伸長を 35 サイクル繰り返し，最後に 72℃で 3 分の伸長反応を行った。PCR
産物は同等量の Loading buffer（98% formamide，10mM EDTA [pH 8.0]，0.05% bromophenol blue）と混合し，95℃で 5 分間加熱した後，直ちに氷で冷却し た。7 M urea と 0.5 × TBE buffer を 含 ん だ 6 %PAGE-PLUS ゲル（AMRESCO Inc., U.S.A）で電気泳動（1800 V，1.5 時間）を行い，終了後，FMBIO III
Multi-View fluorescenceimage analyser（株式会社 日立ソリューションズ）を用いて泳動像を調べた。
統計処理

50 日齢で 3 グループに分けられたサンプ

Fig. 34. Electrophoresis of the PCR products
amplified using seven primer pairs

ルにおいて，50 日齢の全長の実測値および逆算推定された同一日齢の全長は Kruskal Wallis test（p<0.05）の後，Steel-Dwass test で検定した。また，産卵雌親
魚頻度組成の統計的有意差は，モンテカルロシミュ
レーションの 10 万回試行による χ 検定で検討した
2

Table 7. Appearance distributions in each parent of
leopard d coral grouper larvae at 50 dph (F; female
parent, M; male parent)（Roff and Bentzen 1989）。さらに，親子判別後，雌毎に逆算推定された同一日齢の全長についても Kruskal
Wallis test
（p<0.05）の後，Steel-Dwass test で検定した。
結果

親子判別（マイクロサテライト DNA 解析） マイクロサテライト解析で得られた多型情報により，実験に使用した受精卵は雌 9 個体に由来し，産卵には雄が 5 個

ため 7 日齢より実施した。7 日齢の生残率は 47.7％で体関与していたものと確認された（Fig. 34）。親子鑑あり，以降，ほぼ横ばいに推移し，10 日齢の生残率定の結果から 50 日齢のスジアラ種苗には，14 通りのは 45.1％であった（Fig. 35a）。3 日齢の全長は 2.6 ±雌雄の組合せが確認された（Table 7）。最も出現頻度

0.1 mm（平均±標準偏差，2.4 ～ 2.8）であり，以降はが高いのは，雌親魚では F1 の 15 個体であり，次いで指数関数的な成長を示し（Fig. 35b），23 日齢には平F2 の 12 個体と，
この 2 個体で半数以上を占めた。一方，

均全長が 10 mm を超え（10.9 ± 0.4 mm，9.9 ～ 11.5），

雄親魚では M1 が 40 個体と 8 割を占めていた。

40 日 齢 で 平 均 19.8 ± 2.3 mm（12.5 ～ 23.6），50 日 齢
で平均 25.46 ± 2.56 mm（21.6 ～ 32.4）となり，56 日

スジアラ仔魚の初期減耗状況を把握するた齢で平均全長が 306.6）となった。なお，20 日齢過ぎ

めの夜間計数は，24 時間照明を 6 日齢まで施していたより背鰭および腹鰭の伸長鰭条が収縮して稚魚期へ移

種苗生産

26

Takayuki TAKEBE

Fig. 36. Frequency distribution of total length of
leopard coral grouper sampled at 50 dph ( n = 50, 25.8
± 2.7 mm, mean ± SD).

体（29.9 ± 1.7 mm），「ビリ」は 11 個体（22.7 ± 0.5mm），これら以外は「モード」とし，28 個体（25.4 ± 1.1mm）に分けられた。なお，これら 3 グループの全長は互いに有意に異なっていた（p<0.01）。
飼育水槽から 5 ～ 10 日おきに採取したスジアラ仔
魚 140 個体から，各試験において Fig. 37 のような全長（TL）と耳石径（OR）の関係が観測された。なお，耳石の日周輪紋は外部摂餌の始まった 4 日齢から形成され，1 日に 1 本増加していた。全長と耳石径の関係において，耳石径が 80 µm 付近で変曲点が存在した（Fig. 37）。スジアラの発育について Masuma etal.（1993）の報告と照らし合わせた結果，耳石径が80 µm 付近の場合，postlarva 期から juvenile 期へ移Fig. 35. Changes in (a) survival rate, (b) total
length, and (c) the number of rotifers in the gut of
leopard coral grouper larvae ( n = 30) in the rearing
experiment. Bar indicates standard deviation.

行する時期に一致していた。
全長を想定するために，前章と同様に Campana 法（1990）を試行したが，実測値との適合状況が悪かったため，実測値との適合状況を検討した結果，本研究では，耳石径が 80 µm 以下の場合は，回帰式 TL = 1.35

行し始める個体が確認され，個体による発育の違いがOR0.538（r 2 = 0.95）を，耳石径が 80 µm より大きいの認められた。
摂餌状況をみると，3 日齢でスジアラ仔魚のワムシ
摂餌個体率は 100％であった。4 日齢より摂餌された
消化管内のワムシ個体数は仔魚によっては 20 個体以上の差があり，その後，8 日齢では 30 個体以上，9 日
齢で 40 個体以上，10 日齢では 60 個体以上と，その差がより大きくなる傾向を示した（Fig. 35c）。
成長履歴と逆算推定

50 日齢におけるスジアラ供試

魚の全長組成を Fig. 36 に示した（n = 50，25.8 ± 2.7mm，21.6 ～ 32.4）。
【最小個体の全長の 1.27 倍以上の全長を有する個体をトビ（LARGE）】と定義した。これを基に 3 群に分けた結果，50 日齢において最小全長個体は 21.6 mm であったことから，「トビ」は 11 個

Fig. 37. Relationship between lapillus otolith radius
and total length of leopard coral grouper larvae.

クロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究

27

場 合 は Campana 法 に よ り，La お よ び Oa に は， この区間での最小値である，La = ln（17.6 mm），Oa =今回供試したスジアラ種苗は遺伝マーカー調査によって，雌 9 個体，雄 5 個体のスジアラ親魚から得ら

82.4 µm を用いた。
その結果，逆算推定された全長を基に，Fig. 38 の通れたものであることが明らかになった。

り 3 グループに分けられた 50 日齢の供試魚の成長履

照 屋（1998） は ス ジ ア ラ 仔 魚 の 至 適 飼 育 水 温 は歴が得られた。「ビリ」の全長は，「トビ」と 24 日齢

28℃と報告している。また，Yoseda et al.（2006）は，から（p<0.05 between 24 ～ 25 dph，p<0.01 after 26

スジアラ仔魚は 28℃では 52 時間後に開口し，その後，

dph），「モード」とは 31 日齢から（p<0.05 between

初回摂餌が開口から 6 時間遅れると，5 日齢での成長

31 ～ 34 dph，p<0.01 after 35 dph）
，より小さかった。

および生残に影響を及ぼすことを報告している。また，同様に「トビ」の全長は 27 日齢から「モード」より

同じハタ科魚類のクエでは，飼育水へのワムシの至適も大きかった（p<0.05 between 27 ～ 30 dph，p<0.01

給餌密度は 20 ～ 30 個体 /mL と報告されているが（照after 31 dph）。

屋，與世田 2006），今回のスジアラ飼育期間中も飼育
水のワムシ密度は 20 個体 /mLi 以上を維持していた。
供試魚を「トビ」
「モード」
「ビリ」

ま た， 飼 育 水 温 は 26.5 ～ 28.7 ℃（28.1 ± 0.3 ℃） で，の 3 群に分けたが（Fig. 36），各々のグループに出現

摂餌開始は 3 日齢であり，3 日齢での摂餌率は 100％する雌親魚の状況を Fig. 39 に示した。50 日齢におけあった。そのため，本研究におけるスジアラ種苗生産

る雌親魚出現頻度組成の均質性検定では有意差は認め過程においても，クロマグロと同様に餌料密度およびP = 0.373），
また成長についても，られず（χ2 値 = 17.4，

飼育水温に関する影響は無かったものと考えられた。

雌親魚毎による有意差は検出されなかった（Fig. 40）。

雌家系毎の遺伝的影響による成長については，試験

成長への遺伝的影響

期間を通じて有意差が検出されなかった（Fig. 40）。
考察また，50 日齢における雌親魚出現頻度組成の均質性検定でも，有意差は認められなかった（Fig. 39，χ2

Fig. 38. Growth history of leopard coral grouper (a)from 4 dph to 50 dph (juvenile stage), and (b) from
20 dph to 40 dph determined by the otolith backcalculation. Plots and vertical bars indicate averageand standard deviations, respectively. Total length of
three size groups divided at 50 dph were significantly
different each other (p<0.05, Steel-Dwass test).

Fig. 39. Frequency distribution of each female of leopard
coral grouper larvae sampled at 50 dph ( n = 50).

28

Takayuki TAKEBE
齢に平均全長が 11.8 mm 以上に達した（Fig. 38b）。
これは，「モード」との全長に有意差が検出された日齢と符合した。
これらのことから，スジアラは，成長差の早い個体
ほど変態開始時期が早くなり，その結果，食性が変わる変態以降に成長差が明らかになるものと推察された。
また，谷口ら（1988）は，飼育成績の良否は飼育環境要因によって大きく左右されることを前提としながらも，親間での成長因子や生残因子といった遺伝的差
異が潜在的に関与していることを示唆している。そのため，本研究において，統計処理上では遺伝的影響は認められなかったものの，変態開始時期のズレは少な
からず遺伝的影響が関与していることは否定出来ない。その一方，自然産卵法による種苗生産では，親魚の種苗生産への貢献度や著しい家系構成の歪みまで予測することは不可能に近い（Sekino et al. 2003）。そのため，今後は更なる飼育試験の実施と使用する受精
卵または仔魚の収容密度の均一化を図り，試験精度を高めることが必要であろう。

Fig. 40. Growth history of leopard coral grouper (a)from 4 dph to 50 dph (juvenile stage), and (b) from
4 dph to 20 dph determined by the otolith backcalculation about each parental female. Plots indicate
average ( n = 50). Data was mean.

さらに，この飼育試験においてワムシは 22 日齢まで給餌され，アルテミア幼生は 17 日齢，配合飼料は25 日齢から給餌を開始した。逆算推定した成長履歴から全長の有意差が認められたのは「トビ」と「ビリ」の間では 24 日齢からである。また，その後，「ビリ」が他の 2 グループに対して有意に小さくなり始め

値 = 17.4，P = 0.373）。しかし，本研究の 50 日齢にたのは，配合飼料を給餌し始めた後である。これにつおける 3 グループに分けられた供試魚は，20 日齢過いては，この時点における「ビリ」は未だ配合飼料をぎから一部の個体に最大伸長期の背鰭および腹鰭棘が摂餌することが出来ないか，摂餌出来たとしても消化収縮して稚魚期へ移行し始める個体が確認され，発育吸収機能の能力が乏しく，アルテミア幼生などの生の違いが認められた。仔魚期と稚魚期で形態の異なる

物餌料に依存していたためと考えられた。Masuda et

ウナギでは，成長の良い個体ほど早く変態が起こるこal.（2002）はマサバにおいて異なる餌料条件下で飼育とが報告されている（塚本 1994）。また，カレイの一した場合に仔魚の遊泳能力に違いが出ることを指摘し

種 Scophthalmus maximus の仔魚では，同一日齢でている。また，ヒラマサでは給餌する餌料種の変更に

体長が大きい個体はその後の成長が良く，逆に，体長より成長差が増加すること（Moran 2007），大西洋マの小さい個体は成長も良くないことが報告されている

ダラ Gadus morhua では短い仔魚期段階に至適餌料を（Rosenberg and Haugen 1982）。本研究では，全長で摂餌することにより，その後の仔稚魚期の成長が改善

分けた 3 グループの変態前における全長には明確な成されることが報告されている（Koedijk et al. 2010）。

長差が検出されなかった。Masuma et al.（1993）はこれらのことから，成長差はクロマグロと同様に餌料

スジアラの飼育で全長 11.8 mm で稚魚期に移行してい環境（種類，密度および物性など）によって発現し助る個体を報告している。

長されることが考えられた。

本研究における「トビ」個体群において逆算推定し以上のことから，スジアラの成長差は少なくとも雌た全長を見ると，Masuma et al.（1993）が報告して親魚に由来する遺伝的影響は小さく，仔魚期から稚魚いる全長 11.8 mm に達している個体が 22 日齢には出期へ早く変態完了後（着底完了後）に明らかになり，

現し，27 日齢には「トビ」の平均全長が 11.8 mm サさらに餌環境によって助長されるものと考えられた。

イズに達している（Fig. 38b）
。また，「モード」個体

今後は，クロマグロと同様に試験精度を高めるために群には 25 日齢に全長 11.8 mm の個体が出現し，29 日

種苗生産試験における雌親魚毎に由来するふ化仔魚のクロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究

29

収容密度を均一化した上での事象把握が必要であり，

大西洋マダラでは，卵径サイズに対して孵化仔魚

また，使用する雌親魚の産卵履歴や卵径データと種苗の体サイズが正比例するが，得られた小型の仔魚は生産試験結果を照らし合わせることが必要であり，さ同一環境において大型の仔魚よりも生残率が低いこと

らに，父系効果の検討も必要であると考えられた。

が報告されている（Marteinsdottir and Steinarsson
1998）。また，卵サイズが大きくなると，仔魚の初期

第4章

総合考察

摂餌の成功に有利に働くことが飼育実験によって明らかにされている（大西洋マダラ ; Knutsen and Tilseth

本研究で取り扱ったクロマグロは，養殖産業界で注

1985，カタクチイワシ ; 今井，田中 1996，アジの一種

目度が高く，世界的にも資源減少の危機が指摘されてTrachurus symmetricus; Theilacker 1981）。本研究でおり，世界の関係機関で増養殖に関する試験研究の対使用したクロマグロおよびスジアラ受精卵のサイズ組象となっている。また，スジアラが属するハタ科魚類

成を見ると，Fig. 41，42 の通りとなった（クロマグは，日本国内はもとより中国，東南アジア諸国およびロ，第 2 章第 1 節：卵径 0.97 ± 0.02 mm, 平均±標準

オセアニアで増養殖技術開発研究が盛んに行われてい偏差，n = 100，変動係数 CV = 0.0200），第 2 章第 2 節：

る魚種である。この 2 魚種はいずれも，成長が進むとExp 1［卵径 1.01 ± 0.02 mm，n = 100，CV = 0.0201］，

魚食性を示す魚種である。種苗生産過程でみられる共Exp 2［卵径 1.00 ± 0.03 mm，n = 100，CV = 0.0312］，

食いは，種苗の体サイズ差によってその強度が増すこス ジ ア ラ， 第 3 章： 卵 径 0.88 ± 0.02 mm，n = 100，とが知られている（Sakakura and Tsukamoto 1996，

CV = 0.0189）。卵径組成について，各々の変動係数

Sabate et al. 2009 b）。そのため，種苗生産過程において成長差が生じた場合，共食いによって種苗の生産数を低下させ，生産性を損なうこととなる。そのため，成長差がいつ，どのようにして生じるのかを調べることは，生物学上の興味のみならず，種苗生産技術開発においても重要な意義を持つと考える。よって，本研
究ではこれらの魚種における成長差の発現機構について調査を行った。
その結果，クロマグロの成長差は，① 開口時の発現，② 飼餌料環境による発現，③ 減耗現象を起因とする発現，④ 特定の発育段階に移行後の発現，⑤ 遺伝的影響の 5 つの要因によるものと考えられた。スジアラの場合は，① 変態後（発育段階移行後）の発現，②飼餌料環境による発現，③ 遺伝的影響の 3 つの要因によって成長差が生じると考えられた。ここで，成長差に関わる両種に共通の 3 要因と，クロマグロに認められた開口時および初期減耗の 2 要因に大きく分けられる。しかしながら，後者の 2 要因もまたスジアラの種苗生産過程の中で起こり得る現象であることから，
クロマグロで挙げられた成長差の 5 要因を，本研究の対象とした 2 魚種に共通した要因であると捉えることにした。そして，本研究で得られた知見を基に，成長差発現の軽減策ならびに発現後の種苗生産現場における生産性向上のための対応策，さらには残された課題について考察した。
第1節

開口時の成長差発現

開口時の成長差の発現の原因には，卵径の大きさやふ化のタイミングの違いなどが考えられる。

Fig. 41. Frequency distribution of egg diameter of
fertilized eggs used in each rearing experiment,
Pacific bluefin tuna in (a) Chapter 2, Section 1 [n =100, Ave. 0.97 ± 0.02 mm, CV = 0.02], (b) Exp 1 [ n =100, Ave. 1.01 ± 0.02 mm, CV = 0.02] and (c) Exp 2 [ n= 100, Ave. 1.00 ± 0.03 mm, CV = 0.03] in Chapter 2,
Section 2

30

Takayuki TAKEBE間の差が原因で，開口時において成長差が発現する場合があることが考えられた。
以上のように開口時に成長差が発現する事例については，種苗生産開始前に卵径測定やふ化状況を調べる
ことにより，成長差の発現状況を予測することが可能となると考えられた。そのため，得られた受精卵の卵
径選別やふ化の同調を促すといった対処を施すことにより，成長差の発現を抑制または軽減されるものと考えらる。また，このような受精卵を使用した場合，仔Fig. 42. Frequency distribution of egg diameterof fertilized eggs used in rearing experiment of
Leopard coral grouper in chapter 3 [ n = 100, Ave.
0.88 ± 0.02 mm, CV = 0.02].

稚魚がハンドリングに強くなった段階でのサイズ選別を徹底的に行うことも一つの方法であり，種苗生産に使用しないことを検討する必要もあるだろう。
第2節

飼餌料環境による成長差発現（CV） を 見 る と，0.0200，0.0201，0.0312，0.0189 となり，クロマグロの 1 例（クロマグロ複数親魚：Fig.
40c）
を除き，
約 0.02 の範囲であった。本研究において，飼餌料環境による成長差の発現の原因には，餌密度
餌量，物性および種類の違いなどが考えられる。

開口時から成長差が生じた事例は，クロマグロの一腹

クロマグロ種苗生産現場において，飼育水中のワム

子における事例（Fig. 40a）のみであった。そのため，シの最適給餌密度は 10 ～ 30 個体 /mL（Sawada et al.

開口時に成長差が生じた原因として，卵径に起因する

2000）であることが，ハタ科魚類のクエでは，20 ～影響は少なかったものと推察された。

30 個体 /mL であることがそれぞれ報告されている（照また，本研究で使用されたクロマグロの受精卵は，屋，與世田 2006）。また，餌の量によって成長差が生じ，複数の親魚が混在する生簀網内で自然産卵されたもの「トビ」の出現状況に違いが出てくること（コイ・ギ

をプランクトンネットで回収して，これを陸上飼育

ンブナ ; 中村 1955）や成長速度が速くなることも報告

施設に移し，ふ化管理された。このような採卵およびされている（サワラ ; Shoji et al. 1999）。本研究におふ化管理条件下において，宮下ら（2000  a）は，受精けるクロマグロの種苗生産試験においては，飼育水中

卵ふ化水温が 24 ～ 29℃の間では，ふ化開始からふ化のワムシ密度は 10 個体 /mL 以上を維持しており，ス

完了までの所要時間が 30 分から 2 時間 30 分の範囲でジアラでは 20 個体 /mL 以上を維持していた。このこあったことを報告している。ふ化が早く完了した仔魚とからも，本研究において餌料密度による成長への影

ほど外部栄養への移行は早く，逆に孵化が遅い仔魚は響は無かったものと考えられた。

外部栄養への移行が遅くなる。

また，マサバ（Masuda et al. 2002）では，ワムシしたがって，日中に開口が起こった場合，ふ化時刻

およびアルテミア幼生などの動物プランクトン以外にの早い仔魚ほど早く摂餌を開始し，より多くの時間を

マダイ仔魚を与えることにより，遊泳能力の発達過程

摂餌に費やすことができるようになる。一方，仔魚はが異なることが報告されている。これはマダイ仔魚が基本的に visual feeder であるから，夜間には摂餌をワムシやアルテミア幼生と比べて，マサバの発育，特しない（Sabate et al. 2009 a）。したがって，夜間に仔に筋肉形成に適したエネルギー源になりやすいためと魚の開口が始まった場合には，夜明けに近い時間，すされいる。また，ヒラマサでは給餌餌料の変更によ

なわちより遅く孵化をした仔魚ほど，内部栄養を消費

り成長差が増加すること（Moran 2007），大西洋マダが少ない状態で外部栄養に移行する機会が増すことに

ラでは短い仔魚期段階に至適餌料を摂餌することによなる。以上のように，卵径とふ化時刻は仔魚の初期摂り，その後の仔稚魚期の成長が改善されることが報告

餌に影響を及ぼすことになる。実際，キジハタにおいされている（Koedijk et al. 2010）。本研究において，て初期摂餌の可否で，その後の成長および生残に影響

クロマグロでは 15 日齢からアルテミア幼生の給餌をが出ることが報告されている（Yoseda et al. 2006）。

開始し，スジアラでは 17 日齢からアルテミア幼生，

本研究のクロマグロおよびスジアラの種苗生産に使用

25 日齢から配合飼料を給餌した。そのため，これらした受精卵において，ふ化管理水槽での目視観察でも，新たに給餌された飼餌料により骨格または筋肉などのふ化開始およびふ化完了時間に 1 ～ 2 時間程度の間隔発育が促進されたことが考えられた。その結果，クロが生じているのが確認された。そのため，このふ化時マグロでは 15 日齢（第 2 章第 2 節），スジアラで 25

クロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究

31

日齢から統計学的に成長差が拡大する結果となったと

浮上死による甚大な減耗は認められなかった。しかし，考えられた。

種苗生産期間中の仔魚観察に注意を払い，浮上死を発

これらのことから，与える飼餌料の量および物性な現させるような要因の排除（照度変化，エアレーショ

どを改善すると共に，発育状況に合わせた飼餌料を給ン量変化など）し，安定的に飼育が行えるような技術

餌することにより，成長差を軽減させることが可能での高度化は必要である。

あると考えられた。

さらに，本研究の魚種において共通かつ重大な疾病としてウイルス性神経壊死症（VNN）が挙げられる

第3節

減耗現象を起因とする成長差発現（スジアラ ; 狩俣ら 2005，クロマグロ ; 西岡ら 2010）。
VNN の防除方法については，ELISA 法または PCR

種苗生産過程に生じる減耗現象としては，浮上死，法を用いたウイルス陰性親魚の選別（シマアジ ; 室賀沈降死，疾病および飼育環境の変化が知られている。

ら 1998，マツカワ ; 渡辺ら 1998 マハタ ; 照屋 2004），

特に，本研究においてクロマグロで発生した沈降

受精卵の消毒方法（シマアジ ; 室賀ら 1998，ヒラメ ;現象（Tanaka et al. 2009，Masuma et al. 2010）は，三村ら 1998a，1998b，マツカワ ; 渡辺，吉水 2000），

主な減耗原因の一つであり，他魚種（クロダイ ; 北

飼育器具の消毒（マツカワ ; 渡辺，吉水 1998）およ島ら 1997，ブリ ; 山崎ら 2002，クエ ; 照屋 20003，

び飼育に使用する殺菌水の検討（クロマグロ ; 手塚ら

マツカワ Verasper moseri; 萱場ら 2003，キハダ T.

2004）など様々な知見が得られてきた。その結果，近albacares; 木村ら 2004，カンパチ ; Papandroulakis et

年 VNN の発生事例が減少してきており，これらの防al. 2005，照屋ら 2009，キジハタ ; 南部ら 2006，スジ

疫対策を毎年継続的に施すことにより，VNN の発生

アラ ; 武部ら 2010）でも報告されている。Tanaka et

事例は低下するものと考えられる。

al.（2009）は沈降現象が 2 日齢より観察され，5 日齢

飼育環境の変化については，飼育水槽への新鮮海水にピークがあることを報告している。本研究でも，クの注水手法の改善（ヒラメ ; 阪本ら 1998，クエ ; 照屋

ロマグロでは全飼育試験において 2 日齢から 8 日齢ま2003，ブリ ; 山本ら 2004）および貝化石の添加（クエ ;での間に沈降現象が発生したものと推察された。また，

本藤ら 2003，小金，兼松 2004）などにより生残率がスジアラにも小型水槽を用いた実験で 3 日齢以降の仔高まること，もしくは安定することが報告されている。

魚に沈降現象が生じることが報告されているが（武クロマグロおよびスジアラの種苗生産においても，こ部ら 2010），本研究において採られた飼育手法によれらの手法は試みられているが，その効果は判然とはり，沈降現象による減耗を抑制できたものと考えられしていない。しかし，他魚種において効果が得られてた。そのため，スジアラでは沈降現象を切っ掛けとすいることから，積極的に試行することは無駄ではない

る成長差の発現は認められなかった。一方，クロマグと考える。

ロについては，夜間の通気量の調整（宮下 2006，田

本研究においてクロマグロの事例では，沈降現象を中ら 2010）や夜間照明（石丸ら 2010 口頭発表，久門切っ掛けに成長差が発現することが確認された。そのら 2010 口頭発表）によって，沈降現象が軽減されるため，不本意ながらも種苗生産過程において，これらことが報告されている。今後，安定的に沈降現象を軽の減耗現象が発生した場合，それを引き金に成長差が減・抑制できる飼育技術の開発が急務であると考えら生じるため，仔稚魚がハンドリングに強くなった段階れた。

でのサイズ選別を徹底的に行うことにより共食い現象

また，仔魚の減耗要因として浮上死（キジハタ ;による減耗が軽減されるものと考えられた。しかし，

Yomaoka et al. 2000，マハタ ; 塩谷ら 2003，クロマ

VNN などの疾病による減耗後の飼育の継続は，飼育

グロ ; 宮下 2006，スジアラ ; Yoseda et al. 2008）が知施設への病原体の蔓延または常在を招くことになりかられているが，その軽減・抑制方法に関する研究報告

ねないので，細心の注意を払う必要がある。また，飼は多く，通気および注水方法（Sakakura et al. 2006，

育を中止することを検討することも必要であると考え2007 a），水槽の形状（Ruttanapornvareesakul et al.

る。

2007）
，水面で波を形成する飼育方法（Sakakura etal. 2007 b），フィードオイルの添加（Yomaoka et al.

第4節

発育段階移行後の成長差発現

2000，土橋ら 2003）などの効果が検討され，浮上死による大量減耗を軽減する試みがなされ，量産化に繋前述した種苗生産を行う以前の要因，すなわち卵径

がる成果が挙げられてきている。本研究で扱った 2 魚およびふ化タイミング，そして，餌料環境および各種種においても，浮上死の報告があるが，実験期間中に減耗要因による成長差発現要因が抑制・軽減され，初32

Takayuki TAKEBE

期飼育手法が高度化された場合，普遍的に成長差が発マサ（Moran 2007）および大西洋マダラ（Koedijk et

現する時期は，魚種毎の成長・発育特性（個性）が発

al. 2010）で報告されている事例のように，成長が改揮される時期・体サイズということになる。

善されることが考えられた。

本研究においてクロマグロでは，まず沈降現象を切っ掛けに成長差が発現した。そして，flexion 期か

第5節

遺伝的影響による成長差発現

ら postflexion 期に移行した後，成長差が拡大する傾向が認められた。Miyashita et al.（2001）はクロマグ
ロは postflexion 期から上顎および下顎に歯が生えて残された問題として遺伝的影響による成長差の発現について考察する。

くることを報告している。また，Sabate et al.（2010）

クロマグロ（第 2 章第 2 節）では，21 日齢でサンは本種が flexion 期から稚魚期にかけて，遊泳速度がプリングした稚魚において，各サイズに出現する雌速くなり，つつき合い行動が増加すること，そして，家系に由来する遺伝子の組成均一性について統計処理

この行動は摂餌能力の発達であることを報告していを行った。その結果，試験 1 では家系の組成は均一る。さらに，つつき合い行動は共食い（摂餌）行動にで（Fig. 23，χ 値 = 30.2，P = 0.055），試験 2 では家

直接関連があるとしている。また，スジアラと同じハ系による偏りが認められた（Fig. 24，χ2 値 = 44.2，P

タ科のマハタ（北島ら 1991）やチャイロマルハタと= 0.001）。スジアラの場合は，50 日齢時点では均一性

タマカイの交雑魚（Koh et al. 2010）では，仔魚期かについて有意差は検出されなかった（Fig. 39，χ2 値 =ら稚魚期への変態が完了した後から共食い行動が観察

17.4，P = 0.373）。しかし，クロマグロの 2 試験においされる。本研究におけるスジアラの事例でも 22 日齢て，P 値が試験 1 で【0.055】，試験 2 では【0.001】とから稚魚段階に移行した個体が出現し，つつき合い行

いう値であり，成長差の発現には，少なからず遺伝的動が観察されるようになった。そして，24 日齢に成影響があることが示唆されるものであった。また，逆長差が生じるという結果となった。このように，形態算推定された成長過程についてハプロタイプ別（Fig.

変化に伴う食性の変化が起こることによって，その後

25, 26, 40）にみると，いずれの事例においても，ハプの成長は，飼餌料環境に左右され，そして，それに適ロタイプ間での明確な差は検出されなかった（Table

応できた個体が良好な成長を示すことが考えられた。

5, 6）。しかし，統計的有意差が検出されないまでも，それゆえ，発育状況に応じた餌料系列を構築すること逆算推定された全長は，サンプリング時にクロマグロが肝要であろう。

（Fig. 25, 26）では最小と最大で 2 倍以上（10 mm 以2

また，発育段階が稚魚期に移行してから成長差が明上）の開きが，スジアラ（Fig. 40）では 5 mm 以上の瞭になるという現象は，ブリ（長倉ら 2003）やヒラ差が生じていた。これら全長差（成長差）は，飼育現

メ（Sakakura et al. 2004）で報告されている。これら

場の担当者の目視観察感覚からすると【成長差が生じ2 魚種は種苗生産技術が確立されている種であり，飼ている】という印象である。さらに，クロマグロおよ

育初期の生残率は 50 ～ 90％と高いものである。本研

びスジアラにおいて，成長差が明らかになった時点で究におけるスジアラの事例でも，変態以前には明らサンプリングを行った個体で，全サンプルに対する「トかな成長差は発現していない。また，10 日齢までのビ」への出現割合を見てみると（Fig. 43-45），「トビ」

生残率も既存の飼育方法（照屋 1998，Yoseda et al.

に出現しやすい家系として認識されてしまうものがあ2008，與世田 2008）で 5％程度であったのに対して，る。本研究において，特にクロマグロの 2 事例では種本研究で採られた種苗生産手法では 10 日齢での 40％苗生産に供試した受精卵の由来は同一親魚群であっ以上を示したことから，スジアラにとっては有効な飼た。その中でハプロタイプ No. 2 および No. 3 は，両育方法であると考えられた。このことから，クロマグ

試験ともに「トビ」に出現する確率が高いもの（60％

ロでは飼育手法の改善により減耗要因，特に沈降現象

以上）として認識されるであろう。ヒラメにおいて家が抑制または軽減された場合，成長差が flexion 期か系間によって初期の成長に差があることが推察されて

ら postflexion 期の間に発現することが予想される。

いる（Sekino et al. 2003）。さらに，マダイ（谷口ら

以上のように，飼育技術が高度化された場合，魚種

1995），コイ（Brodya et al. 1976，1980）およびグッピー

毎に成長差の生じる発育段階にターゲットを絞り，共Poecilia reticulata（Nakajima and Fujio 1993）では，食いなどを起こす魚種ではサイズ選別を施すことによ

成長に係る選択育種において一定の遺伝的な選抜の効り，減耗が軽減され生産性が向上することになる。ま果があることが報告されている。これらのことから，た，共食いをしない魚種においてもサイズ選別を施し，魚類の成長差の発現には少なからず遺伝的な影響が作

適正な飼餌料を与えることにより，魚食性であるヒラ用していることが示唆された。しかし，本研究で使用

クロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究

Fig. 43. Appearance of haplotypes of Pacific bluefin
tuna sampled at 21 dph of EXP 1 ( n = 100)

33

Fig. 44 Appearance of haplotypes of Pacific bluefin
tuna sampled at 21 dph of EXP 2 ( n = 100).

した受精卵はいずれも自然産卵によるものである。自然産卵法による種苗生産では，親魚の種苗生産への貢献度や著しい家系構成の歪みまで予測することは不可能であることが指摘されている（Sekino et al. 2003）。
これは開口時の成長差発現（第 4 章第 1 節）で述べた
要因にも直接関わることであり，産卵に関与した雌によって，産卵したタイミングや産出された卵の卵径の大きさも考慮されるべきことであり，一概には【遺伝的影響】として結論づけられない。また，本研究におけるクロマグロ受精卵については，雄親魚の関与状況が把握されていない状況である。クロマグロの産卵には，
雌 1 個体に対して複数の雄個体が関与すること（宮下ら 2000 b）が報告されている。また，本研究におけるスジアラの事例においても，複数の雄親魚の産卵への関与が確認された。そのため，育種研究的観点による成長形質の母性効果ならびに父性効果の判定について試験精度を高めるためには，クロマグロ以外の魚種においても人工採卵技術などによって受精タイミン
グを同調させたり，卵径選別を施したりするなどの種苗生産開始前において，条件を均一化する必要がある。
また，水温や餌料環境による影響もあることから，試験区を多数設定したり，飼育試験を反復的に行うなど

Fig. 45. Appearance of each female of leopard coralgrouper larvae sampled at 50 dph ( n = 50).

34

Takayuki TAKEBE

したりすることで，成長差の発現傾向を把握すること（蛭子ら 1993）では 20 日齢から 35 日齢までに 80％以が必要であると考える。しかし，親魚間での成長因子

上，チャイロマルハタ（Takeshita and Soyano 2009）

や生残因子といった遺伝的差異が潜在的に関与していでは全長 30 mm サイズにおける減耗割合は 28.3 ～ることを示唆されているが（谷口ら 1988），飼育成績36.1％であることが報告されている。クロマグロではの良否は飼育環境要因によって大きく左右されること共食いによって全滅に近い飼育事例も経験的に知られからも，種苗生産技術の安定化および高度化が必須でている。そのため，あるクロマグロ種苗生産研究機関あると考える。

では，仔稚魚がつつき合い行動が観察される段階で選別作業を専属的に行う臨時職員を雇い，つつき合い行

第6節

総括

動する個体または共食いにおける補食魚を徹底的に選別し，生産性を向上させるような努力をしている。ま

本研究ではクロマグロおよびスジアラの成長差発現

た，マハタ（Sabate et al. 2009 b）では後期仔魚期か機構を解明した。主な発現時期は，① 開口時の発現，ら攻撃行動が観察されるようになり，着底生活に移っ② 飼餌料環境による発現，③ 減耗現象を起因とするた稚魚期から増加することが報告されている。他のハ

発現，④ 特定の発育段階に移行後の発現，⑤ 遺伝的タ科魚類において着底生活に移行する全長は，ヤイト

影響の 5 つの要因によるものと考えられた。これらのハタ 44 mm（濱本ら 1986），キジハタ 30 mm（水戸要因において，① 開口時の発現，③ 減耗現象を起因ら 1967，Fukuhara and Fushimi 1988），クエ 30 mmとする発現，④ 特定の発育段階に移行後の発現につ（真鍋，春日 1989），マハタ 30.8 mm（北島ら 1991），

いては，いずれも成長差発現の予測が可能であり，そスジアラ 35 mm（Masuma et al. 1993）である。また，のため，それぞれに対応が可能な選別作業などを施す

ブリ（Sakakura and Tsukamoto 1998 a）でも稚魚期ことにより，共食いによる減耗を軽減させられると考に攻撃行動が増加すること，ヒラメ（Sakakura 2006）

えられた。また，② 飼餌料環境による発現については，

では着底生活に移った稚魚期から増加することが報告

その魚種にあった給餌方法および餌料系列の再検討すされている。チャイロマルハタでは，サイズ選別によっることで対応が可能であると考える。

て共食いによる減耗を抑制するには限界があることも種苗生産過程でみられる共食いは，種苗の体サイ報告されているが（Takeshita and Soyano 2009），ク

ズ差によってその強度が増すことが知られている

エ，マハタやキジハタでは，共食い現象が激しくなる（Sakakura and Tsukamoto 1996，Sabate et al. 2009

以前に取り揚げ，サイズ選別を施すことが，種苗の生b）。他魚種における「トビ」の出現割合は，コイ（吉産数を高めるのに有効であるとされ（照屋 私信），ハ

田 実 習 場 1936， 山 田 1936）， ブ リ（Sakakura andタ科魚類の種苗生産機関では実施されている。また，

Tsukamoto 1998 a）およびヒラメ（Sakakura 2006）

ブリでもサイズ選別を施すことにより，サイズ選別をで報告がある。コイにおける吉田実習場の事例では，行わないものより，生残数に 3 倍の開きが生じるこ

全取り揚げ個体の最小体長個体の 1.5 倍以上の体長をとが報告されている（Sakakura and Tsukamoto 1998

有する個体の出現割合は 5％，
2 倍以上のものでは 0.1%b）
。これらのことから，特定の発育段階に移行後（クであった。また，山田（1936）の事例では，試験終了

ロマグロ ; 稚魚期に移行後，スジアラ ; 着底生活に移時の取り揚げ個体数が 839 個体であり，これらの体長行後）にサイズ選別を行い，分別飼育を行うことで種は 6.459 ± 2.868 cm（平均±標準偏差，2.25 ～ 22.5）

苗の生産数を向上させることが可能になると考える。

であった。そして，全サンプルの平均体長の 1.5 倍以

また，つつき合い行動または共食い行動が，何に起上の稚魚の出現割合は 13.8％，2 倍以上の大きさの個因して発現するのかを精査することにより，その対応

体の出現割合は 4.4％であった。また，
ブリ（Sakakura

策も考えられることになる。クロマグロでは，攻撃行

and Tsukamoto 1998 a） お よ び ヒ ラ メ（Sakakura

動または共食い行動は，空腹時に観察されることが報2006）では，社会的ランクでクラス分けされているが，告されている（Sabate et al. 2009 a，2010）。そのた

それらは基本的にサイズ差を反映していた。これら 2め，給餌手法を工夫し改善することにより，クロマグ種の稚魚の社会的ランクが最上位のもの，
すなわち「トロ仔稚魚の空腹時間を短縮することで共食い行動は軽ビ」の出現割合は，ブリで 10 ～ 20％，ヒラメでは約減できるものと考えられる。また，マハタの攻撃行動

37％であった。共食いによる種苗の損失状況は，ブリは縄張り行動に起因することが知られている（Sabateの種苗生産において，共食いが確認されてから 2 週

et al. 2009 b）。また，ブリではパッチ内の個体間干渉

間の間に 60％以上が死亡することが報告されているを軽減するために，稚魚期に攻撃行動が増加すること（Sakakura and Tsukamoto 1998 b）。また，ヒラマサが報告されている（Sakakura and Tsukamoto 1998 a）。

クロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究

35

そのため，種苗生産現場では飼育水槽内の種苗密度を殖技術部）および塩澤 聡グループ長には，ご支援と下げるように分槽を施すことが肝要である。また，ハご協力を賜りました。ここに厚くお礼申し上げます。

タ科魚類は visual feeder であることが知られている

さらにクロマグロ受精卵の回収や海上飼育を補助して（Yoseda et al. 2008）。ヒラメではナンノクロロプシス

戴いた川上栄一嘱託職員，PCR-RFLP 分析とデータの（100 万細胞 /mL）を飼育水に添加して飼育した場合取り纏めを手伝って戴いた富岡江利嘱託職員，人生のと添加しないで飼育した場合では，添加しない水槽で転機を与えてくれた徳田かおり元契約職員を始め奄美は共食いによる「トビ」が出現することが報告されて栽培漁業センター職員の方々に感謝の気持ちを表しまいる（岡内 2005）。これは，飼育水中にナンノクロロ

す。

プシスが添加されたことにより，飼育環境が暗黒状態

スジアラの種苗生産技術開発に当たり，西海区水産に保たれ，視覚情報が低下し，共食い行動が緩和され研究所亜熱帯研究センターにおいて，様々なアドバイたためとしている。そのため，共食いをする魚種におスやご助力を戴いた奥澤公一博士（現 増養殖研究所

いては，飼育水へのナンノクロロプシスなどの微細藻養殖技術部），小林真人博士，佐藤 琢博士，浅見公雄

類の添加により濁度を調整し，魚の視覚を鈍らせると研究員（現 瀬戸内海区水産研究所増養殖部），照屋和

いった手法も共食い行動を抑制・軽減させるためには

久博士，スジアラ種苗生産業務全般においてアシスト

必要な試みではないかと考えられた。

をして戴いた津波愛子契約職員および小村正彦嘱託職

以上のことから，本研究で得られたクロマグロおよ員，文献整理やプレゼン資料作成を忙しい中，手伝っびスジアラでの知見は基本的に他の養殖対象魚種におて戴いた志鷹真理子契約職員を始め亜熱帯研究セン

いて共通な問題項目であり，その成果は他魚種にも広ター八重山庁舎の方々に感謝の気持ちを表します。

く活用されるものと考えられた。その結果，魚類養殖

さらに，本稿をまとめるに当たり，遺伝子解析の実業において，生残率を高め生産尾数も増加させること

施および助言して戴いた鈴木伸明博士（西海区水産研から，生産性および採算性の向上に寄与するものであ究所亜熱帯研究センター石垣庁舎），尾崎照遵博士（増る。また，育種研究を進めていく上で重要な知見であ養殖研究所養殖技術部），宇治 督研究員（増養殖研究り，魚類養殖業に貢献する重要な成果であると考える。

所養殖技術部），統計処理においてアドバイスを戴いた栗原健夫博士（現 西海区水産研究所有明海・八代謝辞

海漁場環境研究センター），耳石観察においてアドバ
イスを戴いた山田秀秋博士（西海区水産研究所亜熱帯

本研究をまとめる機会を与えられ，常に懇切丁寧な研究センター石垣庁舎）に感謝の気持ちを表します。

指導と校閲を賜り，また魚類飼育においても様々なごまた，当方に種苗生産技術を始めとする栽培漁業技助言を賜り，その結果に一喜一憂して下さった長崎大

術開発業務に対する心構えを教授して戴いた町田雅

学 阪倉良孝教授に謹んで深謝の意を表します。さら春主任研究員（現 日本海区水産研究所資源生産部），に，同 萩原篤志教授，征矢野 清教授には論文全体に

藤本 宏グループ長（現 日本海区水産研究所資源生産

亘って有益なご助言を戴き深謝の意を表します。

部），白井重行氏（元（社）日本栽培漁業協会 技術員），

日本海水産研究所資源生産部部長 升間主計博士に

尾野 久氏（元（社）日本栽培漁業協会 技術員）に，は，クロマグロの種苗生産技術開発に取り組む機会を

この場を借りて心から感謝の意を表します。また，（社）

与えて戴き，また本論文をまとめる契機と激励を，そ

日本栽培漁業協会屋島事業場（現 瀬戸内海区水産研して，特に良き人達との出会いを与えて戴き，感謝の究所屋島庁舎）に赴任中，淺岡春実元契約職員および念に堪えない。ここに改めて深謝いたします。

ご家族の方々には，支援，激励を下さいました。ここ

また，クロマグロの種苗生産技術開発に取り組むにに厚くお礼申し上げます。

当たり，（独）水産総合研究センター奄美栽培漁業セ

日本大学 廣瀬一美名誉教授には，学生時代から今

ンター（現 西海区水産研究所まぐろ増養殖研究セン

日に至るまで公私共々に，並々ならぬご高配を賜った。

ター奄美庁舎）において，一緒に仕事をして戴いた手

特に，この水産研究分野に対して道筋を示してくれた

塚信弘主任研究員（現 日本海区水産研究所資源生産

ことについては，当方が持ちうる全ての感謝の気持ち部），二階堂英城主任研究員，また，本研究を進めるをもってしても表現できないものである。この場を借に当たり，井手健太郎研究員（現 増養殖研究所養殖

りて心から深謝の意を表します。

技術部），久門一紀主任研究員，田中庸介博士，西 明

最後に，このような激務に耐えられるように健常な

文研究員，尾花博幸係員（現 水産総合研究センター

身体に産み育ててくれた父・總順，母・芳枝に，この本部総務部），今泉 均主任研究員（現 増養殖研究所養場を借りて心から感謝の意を表します。さらに，妻・

36

Takayuki TAKEBE

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友田

努・小磯雅彦・桑田博・陳昭能・竹内俊郎

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友田

努・小磯雅彦・桑田均（2004）ブ

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ンター技報 2: 44-50（2005）増殖ステージが異なるシオミズツボワム

山下浩史・藤田慶之・高木基裕（2010）マイクロサテ

シのヒラメ仔魚に対する餌料価値．日本水産学会

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22 年度日本水産学会春季大会講演要旨集，p82

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山崎英樹・塩澤聡・藤本宏（2002）日本栽培漁業

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Watanabe T, Koizumi T, Suzuki H, Satoh S,

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Takeuchi T, Yoshida N, Kitada T, Tsukishima Y

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渡辺研一・鈴木重則・西澤豊彦・鈴木香代・吉水

初回摂餌の遅れがキジハタ Epinephelus akaara 仔
守・

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渡辺研一・吉水

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與世田兼三・照屋和久・菅谷琢磨・関谷幸生（2006）

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米田道夫（2010）繁殖特性の変異が加入量に及ぼす影クロマグロThunnus orientalisおよびスジアラPlectropomus leopardusの種苗生産でみられる成長差に関する研究

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synapsis and recombination during meiotic

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division in gynogenetic triploid ginbuna,

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