ナス科作物の土壌病害に対する
Bacillus 属等微生物の効果的活用
マニュアル

独立行政法人農業環境技術研究所

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8――ĭȈȞȈᓨϳ၏ȷȊǹ᩷ௗ၏ƴ‫ݣ‬Ƣǔ Bacillus thuringiensis

serovar fukuokaensis B88-82 ఇƷМဇ9――1）Bacillus thuringiensis serovar fukuokaensis B88-82 株について
Bacillus thuringiensis serovar fukuokaensis B88-82 株は、グラム陽性の芽胞を形成する桿菌で、北海道大学で保存されています。本菌株は、BT 毒素を生産し、鱗翅目昆虫に対する殺虫活性を有することが確認されています。その一方で、トマト青枯病菌に対して抗菌活性は無いことが確認されています 2）。
図１１. Bacillus thuringiensis serovar
fukuokaensis B88-82 株のコロニー（岐阜大学）

2）B88-82 株の培養条件、接種源の調製法
B88-82 株の培養は、以下のいずれかの方法で行います。
（方法 1）

・B88-82 株の凍結ストック（40%グリセロール）を１白金耳分掻き取り、300ml の改変 NB 培地（ペプトン 3g，肉エキス 1g，K2HPO4 1g をイオン交換水 1000ml に混合後、高圧滅菌したもの）に懸濁
して、24 時間振とう培養する。
・培養後に、B88-82 株の培養液を遠心分離（3000rpm，10 分間）した後、上清を棄て、ペレットを滅菌水で 2 回洗浄し、分光光度計で OD600=0.5 に調製したものを接種源とする。
（方法 2）
・B88-82 株を 9 cm シャーレに作成した 1/3NA 平板培地（組成：1% (w/v) 乾燥ブイヨン、2 % (w/v) アガロース、121℃、20 分間高圧蒸気滅菌）で暗黒下、28℃で 2 日間培養後、滅菌水 20 ml をそのシャーレに入れ、懸濁後に分光光度計で計測し、OD600=0.5 に調製したものを接種源とする。
（岐阜大学・東京農工大学）

３）植物体への処理法
ナス、トマト苗に対する B88-82 株の処理は、次の手順で行うのが効果的です。
・鉢上げしたナスまたはトマト苗に対し、定植 5 日前に、B88-82 株の接種源をポットサイズの 1/12 量分を灌注する（例：直径 9cm ポット［360 ml 容量］の場合は 30ml 灌注）。
・苗の圃場への定植後は、その効果の持続を期待するために、10-14 日毎に接種源を OD600=0.2 に希釈したものを株あたり 100ml 灌注する。
（岐阜大学・埼玉県農林総合研究センター）・トマト萎凋病に対しては、土壌改良資材（カルシウム資材：商品名、ミネカル）との併用処理により、防除効果が向上することがポットおよび圃場試験で確認されています。
・土壌改良資材は、定植前に圃場に 2.5t/10a の割合で混和する。
（奈良県農業総合センター・東京農工大学）

10ᲮᲣ‫ئב‬ưƷ᧸ᨊјௐƷ౨᚛Ȋǹ᩷ௗ၏
B88-82 ᰴࡢฎ⌮࡟ࡼࡿࢼࢫ㟷ᯤ⑓࡟ᑐࡍࡿ㜵㝖ຠᯝࢆᅡሙ᳨࡛ウࡋࡓ஦౛ࢆ⤂௓ࡋࡲࡍࠋᅡሙヨ㦂౛ࡢᴫせࡣ௨ୗࡢ㏻ࡾ࡛ࡍࠋ
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T1ᰴᇵ㣴ୖΎฎ⌮࢖ࣔࢳ⑓⳦ᇵ㣴ୖΎฎ⌮㸦ᑐ↷㸧40

LePR-1 (P4, P6)┦ᑐ㑇ఏᏊⓎ⌧㔞┦ᑐ㑇ఏᏊⓎ⌧㔞㑇ఏᏊࡢ┦ᑐⓎ⌧㔞㸦ࢤࣥࢱ࣐࢖ࢩࣥฎ⌮ࡋࡓ෇ᙧࢁ⣬࡛ࡣࠊ㟷ᯤ

30
20

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27― 28 ―

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㸬Bacillus thuringiensis ࡟ࡼࡿࢺ࣐ࢺ㟷ᯤ⑓ࡢ⏕≀㜵㝖ᶵᵓࡢゎᯒ㸬᪥᳜⑓ሗ

77: 252-253.

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3) ᳃ᮏᬗ࣭ᫍ㔝㸦㧗⏣㸧⿱Ꮚ㸦2008㸧㸬PCR-DGGE ἲ࡟ࡼࡿᅵተ⏕≀⩌㞟ゎᯒἲ㸦1㸧: ୍⯡⣽⳦࣭⣒≧⳦┦ࡢゎᯒ㸦ᐇ㦂ἲ㸧㸬ᅵ࡜ᚤ⏕≀ 62㸸63-68㸬4) 㥖⏣᪦࣭ᑠᕝዋ࣭㟷ᮌᏕஅ㸦2011㸧㸬ࣇࢨ࣒ࣜ࢘㸫ศ㢮࡜⏕ែ࣭㜵㝖㸫㸬pp. 576-577.඲㎰༠㸪ᮾி㸬5) Takahashi, H., Nakaho, K., Ishihara, T., Ando, S., Wada, T., Kanayama, Y., Asano, S., Yoshida, S.,
Tsushima, S. and Hyakumachi, M. (2014). Transcriptional profile of tomato roots exhibiting
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6) ୸ᒣጾ࣭᪂⏣ⱥ஧࣭ᮌᮧ᫴ஓ࣭㧗ᓥ႐ᶞ࣭ᯇᮧ㈼ྖ࣭ฟཱྀ៞ே㸦2009㸧㸬᪂つᚤ⏕≀ẅ⹸๣ࢦࢵࢶ A®ࡢ㛤Ⓨ㸬ఫ཭໬Ꮫ 2009(1) : 24-33㸬
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8) Enya, J., Shinohara, H., Yoshida, S., Tsukiboshi, T., Negishi, H., Suyama, K. and Tsushima, S.
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9) ᒾᮏ㇏࣭ᯇᾆඞᡂ࣭బ⸨⫱⏨࣭ྜྷ⏣㔜ಙ࣭ᑞ㤿ㄔஓ࣭┦㔝බᏕ㸦2013㸧㸬Paenibacillus ᒓ⣽⳦ࡢࢺ࣐ࢺ᰿⭉ⴎ෼⑓࡟ᑐࡍࡿ࡯ሙ࡟࠾ࡅࡿ㜵㝖ຠᯝ㸬㛵す⑓⹸◊ሗ 55: 67-69.

28― 29 ―

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