水研センター研報，第16号，15−18，平成18年
Bull. Fish. Res. Agen. No. 16, 15‑18, 2006

短報

胎盤性生殖腺刺激ホルモンによるマアジの成熟・排卵促進＊1＊2

依田真里 ・水田浩二 ・松山倫也＊3

Induction of Ovarian Maturation and Ovulation in Jack Mackerel
by Human Chorionic Gonadotropin
Mari YODA＊1, Koji MIZUTA＊2and Michiya MATSUYAMA＊3

Abstract This study examined final oocyte maturation and ovulation of jack mackerel（）treated with human chorionic gonadotropin（HCG）in the laboratory.
Female fish with fully yolk-accumulated oocytes were selected by ovarian biopsy, performed
just before the experiment. Oocytes at the migratory nucleus stage first appeared 24 hours
after HCG injection. Between 48 and 60 hours, ovulated eggs were observed. Final oocyte
maturation and ovulation occurred within 36 hours and at around 48 hours after HCG treatment, respectively.
Key words: jack mackerel, maturation, ovulation, HCG

マアジの成熟雌魚では卵巣内に複数の発達段階の卵母細胞が同時に存在することが知られており，期に少なくともが指摘されており，採集時刻や使用する漁具によって産卵は推定した産卵頻度に大きな偏りを生じるおそれがあ回以上は産卵すると推定されている

る。現在のところマアジの産卵時間帯は明らかになっ（三渕ら，1958；山田，1958）。このように産卵期間中ておらず，漁具による採集親魚の偏りについても検討に繰り返し産卵を行う魚種がどのくらいの頻度で産卵されていないため，吸水卵を持つ個体の出現頻度からするかは，繁殖生態を明らかにする上で不可欠な情報

産卵頻度を推定する場合には誤差がかなり大きくなるである。産卵頻度の推定には，現在のところ二つの方可能性がある。従ってマアジの産卵頻度をより正確に法が有効であるとされている。一つは，卵巣が最終成推定するためには，排卵後濾胞に基づく方法を検討す熟段階に達した結果，透明化した卵巣卵（吸水卵）をる必要がある。排卵後濾胞に基づく産卵頻度の推定に持つ個体の出現頻度に基づく方法で，もう一つは排卵は，あらかじめ実験室内で産卵を行わせ，排卵後の経後濾胞を排卵後の経過時間にともなう組織学的形態の過時間がはっきりした排卵後濾胞の形態を組織学的に変化に基づいて分類し，産卵時刻や産卵日を推定する観察し，その退行過程を分類しておくことが必要であ方法（Hunter and Macewicz，
1985a）である。吸水卵る。養殖マアジについては，落合ら（1980，1983）にを持つ個体の出現頻度による方法では，比較的簡便によって水槽内で人工産卵を行わせる試みがなされてお産卵頻度が推定できるという利点がある。しかし，吸り，生殖腺が発達したマアジにヒト胎盤性生殖腺刺激

水卵を持つ個体は時間帯によって出現が集中する可能ホルモン（HCG）の投与を行って，産卵が誘発され性があることや，産卵直前の個体は他の個体とは異なたことが報告されているが，バッチ産卵数やホルモンる行動をとるために，採集効率に差異を生じる可能性

投与後の時間経過に伴う卵母細胞の成熟過程について

2005年12月9日 受理（Received on December 9, 2005）＊1
西海区水産研究所（Seikai National Fisheries Research Institute, Fisheries Research Agency, 1551-8, Taira, Nagasaki, 851‑2213, Japan）＊2
長崎県総合水産試験場（Nagasaki Prefectural Institute of Fisheries, 1551‑4, Taira, Nagasaki, 851‑2213, Japan）＊3
九州大学農学研究院動物資源科学部門海洋生物生産学（Kyushu University, Department of Animal and Marine Bioresource Sciences, Faculty ofAgriculture, 6‑10‑1, Hakozaki, Higashi-ku, Fukuoka 812-8581, Japan）

依田真里・水田浩二・松山倫也
は言及されていない。

最も発達した卵母細胞の成熟段階で表した。今回の研実験室内において安定して産卵を誘起できるように

究では，卵黄形成前の卵母細胞で占められる前卵黄蓄なれば，将来，マアジの産卵頻度を推定する際に有効積期（pre-vitellogenic stage），卵黄形成がほぼ終了しな情報になりうる。そこで，本研究では卵黄形成がほた第三次卵黄球期（tertiary yolk stage），卵成熟が始ぼ終了した雌魚に HCG の投与を行い，時間経過にとまり，核が動物極へ移動中の胚胞移動期（migratory

もなう卵母細胞の成熟過程を把握すること，さらに得nucleus stage）および，核膜の消失が起こり，卵成られた成熟雌魚については吸水卵を計数し，バッチ産熟が完了した吸水期（hydration stage）の計卵数を求めることを目的とした。

卵巣が認められた。卵成熟の完了した，即ち，第長崎県野母崎沖のまき網で漁獲された尾叉長255〜350mm のマアジを2001年月27日，2002年段階の減

数分裂中期で細胞周期が停止した卵では，卵黄タンパ

月15日

クの限定分解に由来する浸透圧上昇に伴う吸水によっに長崎県総合水産試験場の室内水槽に搬入した。コンて卵径が増大すると同時に，卵黄球の膜融合と透明化

クリート製円形流水式が進行する。本研究では，透明化が進行中の卵，あるトン水槽に収容し，自然日長，自然水温下（2001年15 7℃，2002年15 3℃）で日間

いは透明化が完了した卵をすべて，吸水卵（hydrated馴致した。給餌は行なわなかった。フェノキシエタノegg）として取り扱った。吸水卵を持つ卵巣についてール（100ppm）で麻酔し，カニューラにより生殖腺は，卵巣の一部分（400〜600mg）を取り出し，吸水の一部を採取して性を判別した。雌については採取し卵の数を数えて単位重量あたりの吸水卵数を求めたのた卵母細胞の卵径を測定し，卵黄形成がほぼ完了した

ち，卵巣全体の重量を乗じて一尾あたりのバッチ産卵とみられる卵径500μm 以上の卵母細胞を持つ雌親魚数を算定した。また，卵巣の一部を取り出して200μを選別した。
実験に供したマアジは2001年は計41尾（体m 以上の卵母細胞について400個〜600個の卵径を計

重260〜565g），2002年は68尾（体重200〜575g）であ測し，卵径頻度分布を調べた。卵巣の各部位（前・中・った。さらに個体識別のために背筋部に磁気タグを挿後）間で卵母細胞の成熟段階には違いが見られなかっ

入した後，HCG（200IU/ 尾）を背筋部に注射投与した。

たため，卵巣の中央部から組織の一部を採取し，卵巣2001年はホルモン投与から時間後に試供魚をルモン投与から，12，24，36および48〜10尾ずつ取り上げ，2002年はホ，12，24，30，36，42，48，60，72

時間後に試供魚を〜尾ずつ取り上げて，卵巣の採取を行った。卵巣は重量測定後，一部は組織標本作成熟度，卵径，吸水卵数の解析に使用した。
ホルモン投与後の時間経過に伴う卵巣成熟度の変化を Table 1，2に示した。
HCG 投与後時間の標本では，2001年には尾中尾が第三次卵黄球期の段階にあったが，残る尾は製のためにブアン液で，残りは10％ホルマリン液で固卵黄蓄積した卵母細胞の退行が進み，成熟段階が後退定した。その後，メタクリル樹脂に包埋し，厚さしていた。HCG 投与後24時間になると，胚胞移動期〜μm の切片を作成してトルイジンブルーで染色の個体が出現した。さらに，36時間後には吸水卵を持後，光学顕微鏡で観察した。卵巣成熟度は卵巣内でつ個体が出現した。卵巣腔内に吸水卵が排卵された個

Table 1. Changes in developmental stages of the largest oocytes injack mackerel ovary after injection of HCG. Results for experiments
conducted in 2001

Figures in parentheses indicate the number of fish which haveovaries with atretic oocytes. Prv, pre‑vitellogenic stage；Ty, tertiary
yolk stage；Mn, migratory nucleus stage；Hy, hydration stage；Ov,ovulation.

胎盤性生殖腺刺激ホルモンによるマアジの成熟・排卵促進
Table 2. Changes in developmental stages of the largest
oocytes in jack mackerel ovary after injection of HCG.
Results for experiments conducted in 2002

Figures in parentheses indicate the number of fish whichhave ovaries with atretic oocytes. Prv, pre‑vitellogenicstage；Ty, tertiary yolk stage；Mn, migratory nucleus
stage；Hy, hydration stage；Ov, ovulation.

体は48時間後に観察された。2002年には HCG 投与後時間の標本では尾中いては今後の課題であろう。

尾に退行卵を持つ個体がみ

ホルモンを用いた成熟促進において，ホルモン投与られたものの，いずれも第三次卵黄球期の段階であっ直前の親魚の成熟状態は極めて重要な要素であり，一た。HCG 投与後24時間では胚胞移動期の個体が出現

般に卵巣卵の卵黄蓄積が完了した段階に達しているこ

し，36時間後には吸水卵を持つ個体が出現した。一方，とが前提となる。本実験では，開始に先立って卵巣卵HCG 投与後48時間では吸水卵を持つ個体は見られたの一部を採取し，卵黄形成がほぼ完了したと見られるものの，排卵はみられず，60時間後に排卵個体が観察卵径（500μm）に達した個体を選んで HCG の投与をされた。

行った。しかし，2001年に行った実験では HCG 投与

卵径組成の解析結果によると，吸水卵は900μm に時（時間）ですでに卵母細胞の退行が進んだ個体がモードをもつ卵群を形成し，500〜600μm にモード観察された。Shiraishi ら（2005）は HCG を用いてマをもつ卵群は第三次卵黄球期に相当していた。吸水卵

サバの最終成熟を促進しているが，あらかじめ卵径のを持つ個体は同時に第三次卵黄球期とみられる卵母細みでなく，胚胞（核）も確認する必要があると指摘し胞を有しており，マアジにおいては排卵前にすでに次ている。卵黄形成中の卵母細胞中に胚胞が見えないとの産卵にむけて卵黄蓄積をほぼ完了した第三次卵黄球いうことは，退行の初期段階を示し，このような個体期の卵母細胞が準備されていると考えられた。に HCG を投与しても最終成熟は引き起こせないと報一尾あたりの吸水卵数は29 000±22 000個（平均±告している。今後は，卵径のみでなく，卵母細胞中の標準偏差）であった。最近の知見ではマアジのバッ胚胞についても事前にチェックする必要があると思わ

チ産卵数は尾叉長220〜260mm のれる。

230〜290mm の歳魚で21 000粒，歳魚で約31 000粒との報告が あ る

本実験では HCG 投与から36時間を経過すると吸水（西田，2004）。本実験で求めたバッチ産卵数は最大卵を持つ雌が出現し，2001年には48時間後に，2002で54 000粒（尾叉長291mm），最小で4 500粒（尾叉長年には60時間後に排卵する個体がみられた。落合ら

265mm）と個体によるばらつきが大きかった。西田（1980）は（2004）はバッチ産卵数にどのくらいの幅があったの投与を行い，投与後35〜36時間後に産卵を開始したと月に歳および歳の養成マアジに HCGかについては言及しておらず，今回の結果との比較は報告している。また，養殖マアジから人工採卵して得難しい。HCG 投与によるバッチ産卵数への影響につた仔稚魚を水槽内で年間飼育したマアジ歳魚に，

依田真里・水田浩二・松山倫也
文月に HCG を投与した際には，投与後32 5時間で産卵を開始したと報告している（落合ら献1983）。いずれも今回の実験に比べると，HCG 投与から排卵に至Hunter, J. R. and B. J. Macewicz, 1985a：Measurement

るまでに要した時間は短い。落合ら（1980，1983）がof spawning frequency in multiple spawning

月に実験を行なった際の水温は20〜21℃，

月の水温は20〜23℃と，本実験に比べると高かった。また，
本実験においても2001年は月下旬に，2002年は, 36, 79‑94.

fishes.

Hunter, J. R. and B. J. Macewicz, 1985b：Rates of月

atresia in the ovary of captive and wild northern

中旬に実験を行なっており，2002年は2001年に比べてanchovy,

水温はやや低く，水温条件が HCG 投与から排卵に至83：119‑136.

るまでの時間に影響を与えた可能性があるが，この検三渕英弘 , 岸本源治 , 塩見元晶 , 相川広秋 , 1958：マ討は今後の課題である。

アジの年齢，成長および成熟，対馬暖流開発調査
報告 4，133‑144

今回，卵黄蓄積が完了した500μm 以上の卵母細胞を有するマアジを選別して，HCG を投与することに

山田鉄雄，1958：アジに関する研究．対馬暖流開発調
査報告 4，145‑176.

より最終成熟が誘起され，HCG 投与後48〜60時間で排卵することが明らかとなった。しかし，全個体が成中嶋純子，1982：西日本海域におけるマアジの成長と年齢について．西水研研報 57，47‑57.

熟を促進された訳ではなく，卵巣内に退行卵を持つ個体も多く観察された。これは，供試魚が捕獲直後の天西田宏，2004：マアジの産卵特性．「マアジの産卵然魚であり，長期間馴致された養成親魚でないため，と加入機構−東シナ海から日本沿岸へ−」（原

個々の生理状態や栄養状態が異なることによると考え一郎・東海正編），恒星社厚生閣，東京，pp.

られた。飢餓状態は卵巣卵の再吸収を引き起こすことが知られている（Hunter and Macewicz，1985b）。実11‑18.
落合明，楳田晋，長谷川泉，睦谷一馬，1980：

験中，マアジは無給餌で飼育されていたことなども退

マアジの採卵とふ化仔魚の成長について．栽培技

行卵が多く出現する要因になったと考えられる。最近研 9，47‑52.

Shiraishi ら（2005）は，養成したマサバを卵径と胚胞の有無で選抜することにより，供試魚の100% で成熟，排卵を誘導している。今後，マアジにおいても，養成親魚を用いた，再現性の高い成熟，排卵誘導の実験系が確立されることが期待される。

落合明，睦谷一馬，楳田

晋，1983：養殖

歳マア

ジの成長，成熟および人工採卵について．
., 49, 541‑545.
Shiraishi, T., K. Ohta, A. Yamaguchi, M. Yoda, H.
Chuda, M. Matsuyama, 2005：Reproductive
parameters of the chub mackerel,, estimated from hCG-induced final
oocyte maturation and ovulation in captivity.
. 71, 531-542.