水研センター研報，第１号，35 ― 37，平成１３年
Bull. Fish. Res. Agen., No.１, 35 ― 37, ２００１

短 報

ジャワメダカ（Oryzias javanicus）における生殖腺の発達と雌雄判定
角埜彰＊１・藤井一則＊１・小山次朗＊２

Histological studies on the gonadal development
in Java medaka（Oryzias javanicus）
Akira KAKUNO＊１, Kazunori FUJII＊１, and Jiro KOYAMA＊２
Abstract Sexual differentiation and maturation in Java medaka（Oryzias javanicus ）were examinedhistologically. At １４ days after hatching, the oocyte at the perinucleolus stage was observed infry. In the male gonad, the primary spermatocyte was observed in testis at １８ days after hatching. The urino-genital papillae in female and the longer dorsal fin in male, which are constituted secondary sexual characters，were observed at ６０ days after hatching. At １００ days afterhatching, spawning was observed. These results suggest that the sexes in fry of Java medaka
were identified histologically at １４ days after hatching，and externally at ６０ days after hatching.
Key word: Java medaka，sexual differentiation，maturation，secondary sexual characters

環境エストロゲンの魚類への影響を調べるための実験魚として，孵化仔魚が成熟・産卵に至るまでの期間出現時期などを調べ，同属のヒメダカに関する吉岡・島谷（１９７６）と比較した結果を以下に述べる。

が 短 く，小 型 水 槽 中 で 再 生 産 が 可 能 な ヒ メ ダ カ

ジャワメダカ受精卵は，水温２６ で孵化までに１４日（Oryzias latipes ）がよく利用されている。ヒメダカを要した。孵化直後の仔魚は，全長が約４．
４ ，魚体は淡水魚であるが，海水魚でこのヒメダカに準じた実重は約５験魚はこれまでは見当たらなかった。そこで我々は，は，卵母細胞（oocyte），精母細胞（spermatocyte）とOryzias 属の海産メダカであるマレーシアペナン島原産ジャワメダカ（Oryzias javanicus ）に着目し，孵もに確認できず，雌雄の判定は困難であった（Fig. 1. A）。

化〜成熟・産卵までの全生活環を調べる毒性試験の実であった。孵化後５日目（全長５．３）で孵化後１４日目（全長８．
３）に，長径約２８，短径１７の周辺仁期（perinucleolus stage）の卵母細胞が認

瀬戸内海区水産研究所で１０世代以上継代飼育した

められたが（Fig. 1. B），染色仁期（chromatin-nucleolusstage）の卵母細胞は特定できなかった。卵母細胞数は孵化後７０日頃（全長２０ ）まで徐々に増加し（Fig.
1. D），また，一対の卵巣が融合し一つの器官をなしジャワメダカ成魚から得た受精卵を産卵日ごとに分ていた。孵化後７７日目（全長２２ ）以降で，卵黄形成

け，アルテミアを投餌し水温２６ で孵化後１００日目まが開始され（Fig. 1. E），卵巣周辺部には卵原細胞験魚とするための基礎資料として，生殖腺の発達過程および雌雄判別に関する知見を得たのでここに報告する。

で飼育した。仔稚魚は５〜１０日ごとに１０％ホルマリン（oogonium）が卵巣後背部には卵巣腔がそれぞれ認め−リン酸緩衝液（pH７．
４）で固定し，体重および全長られ，また，輸卵管（oviduct）も開口していた。産を測定後，常法により連続組織切片を作製し，ヘマト

卵は孵化後１００日目（全長２４ ）に確認された。

キシリン・エオシン染色を施した。山本（１９７０）の分ヒメダカでは，体長５．
０−５．
５ で染色仁期および周類に従って，光学顕微鏡により生殖細胞を観察すると辺仁期の卵母細胞が現れて卵巣が分化し，体長１１−１３

ともに，仔稚魚の生殖腺の発達過程および二次性徴ので卵母細胞に卵黄核が認められ，体長１６−１８では２００１年８月２０日受理（Accepted on August ２０, ２００１）
水産総合研究センター業績 A 第４号（Contribution No.A ４ from Fisheries Research Agency）＊１
瀬戸内海区水産研究所 〒７３９-０４５２ 広島県佐伯郡大野町丸石２-１７-５（National Research Institute of Fisheries and Environment ofInland Sea，Maruishi ２-１７-５，Ohno, Hiroshima, ７３９-０４５２, Japan）＊２
鹿児島大学水産学部 〒８９０-００５６ 鹿児島県鹿児島市下荒田４-５０-２０（Faculty of Fisheries, Kagoshima University, ４-５０-２０, Simoarata，Kagoshima-shi, Kagoshima, ８９０-００５６, Japan）

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角 埜・藤 井・小 山

Fig. 1. Germ cells of Java medaka.
A ：Primordial germ cell or gonium（arrow）were observed in fry at ５ days after hatching.
B ：Oocyte at perinucleolus stage（arrow）was observed in fry at １４ days after hatching.
C ：Oocytes（arrow）were observed in fry at ２８ days after hatching.
D ：The number of oocyte in the ovary was increased at ７０ days after hatching.
E ：Oocyte at perivitellogenic or vitellogenic stage were observed maturing female at ７７ days after hatching
F ：The matured ovray was observed in maturing female at １００ days after hatching.
G ：Primary spermatocyte（arrow）was observed in testis of fry at １８ days after hatching.
H ：Primary spermatocyte and secondary spermatocyte（arrow）were observed in the testis at ３５ days afterhatching.
I ：Spermatid and serum（arrow）were observed in maturing male at（４９ days）after hatching.
J ：More matured testis was observed in maturing male at ６３ days after hatching.
K ：Completely matured testis was observed in maturing male at １００ days after hatching.

−２３ で輸卵管が開口することが吉岡・島谷（１９７６）

spermatocyte）も出現し（Fig. 1. H），孵化後４９日目（全により報告されている。以上のことから，性分化は，

長１９ ）には，第一次精母細胞，第二次精母細胞，精ジャワメダカ（体長８）に比較して，より成長した段階で生じ，輸卵管の細胞（spermatid）さらには精子（sperm）が認められ開口はヒメダカとほぼ同体長であること，卵巣はヒメ速に増大し，精子の占める割合も増加した（Fig. 1.

ダカと同様に１つの器官をなしていることなどが明らJ, K）。

卵巣腔が拡大し輸卵管が０．
３ 以上に伸張し，体長２０程度）ではヒメダカ（体長５かとなった。

次精母細胞のほか第二次精母細胞（secondary

た（Fig. 1. I）。孵化後４９日目以降に精巣断面積が急

ヒメダカの精巣は，孵化後１８日目（体長６）まで）には精原細胞（spermatogonium）がまだ包嚢（cyst）を第一次精母細胞（primary spermatocyte）が認められ形成せずに精巣中に一様に分布し，体長７−１０ で精（Fig. 1. G），孵化後３５日目（全長１１ ）で は，第 一原細胞を含む包嚢が認められ，体長１８ では精母細胞

ジャワメダカの精巣は，孵化後１８日（全長９ジャワメダカ（Oryzias javanicus ）における生殖腺の発達と雌雄判定

37は出現せず，体長２０−２３ で精巣内包嚢中に種々の発により雄雌判定が可能となるのは孵化後１４日目以降，達段階の精細胞が，精小腔および輸精管には精子がそ第一次精母細胞の出現は孵化後１８日以降，泌尿生殖突れぞれ認められることが吉岡・島谷（１９７６）により報起の有無，背鰭および臀鰭の形状などの二次性徴によ告されている。従って，ジャワメダカでは，精巣の発る雌雄判定は孵化後６０日以降で可能となることが明ら

達初期の状況はヒメダカに類似し，精子変態がヒメダかとなった。以上の結果から，ジャワメダカを用いたカとほぼ同じ体長の２０ 程度で認められることが明ら

全生活環毒性試験では，受精卵からの２〜３週間程度かとなった。の暴露試験により孵化仔魚の性比への影響が，受精卵ジャワメダカ雌の二次性徴（岩松，１９９３）として，の１００日間暴露により成熟した孵化仔魚の産卵数への泌尿生殖突起（urino-genital-papillae）が孵化後６０日影響がそれぞれ把握できることが明らかとなった。

（全長１９ ）以降で確認され，また，雄と異なり臀鰭軟条の先端が最後部を除き分岐していた。一方，雄で文献は，孵化後６０日以降で背鰭が雌よりも長くなっていた。これらの二次性徴により，孵化後６０日以降では外部形態からの雌雄判別が可能となった。
このように，ジャワメダカはヒメダカに比較して，やや成長が進んでから卵母細胞が出現し，精子変態はほぼ同様な体長で認められた。また，卵母細胞の出現

岩松鷹司，１９９３：メダカ学，初版，サイエンティスト社，
東京，pp.７−４２．
山本喜一郎，１９７０：生殖，魚類生理（川本信之 編），
恒星社厚生閣，東京，pp２４５−２８６．
吉岡 寛・島谷征一，１９７６：メダカ（Oryzias latipes ）の生殖巣形成に関する研究．生物教材，１１，５−１８．