2021 年度

卒業論文
2022 年 3 月 4 日

モロヘイヤ中に含まれる抗酸化物質の評価及び栽培方法による比較

甲南大学
理工学部

機能分子化学科

環境分析・計測化学研究室
11863057

前川

泰成

目次
第1章

緒言

1.1

活性酸素・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・1

1.2

抗酸化作用・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・2

1.3

実験の目的・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・2

第2章

原理

2.1

吸光光度法・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・3

2.2

マイクロプレートリーダー・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・4

第3章

実験

3.1

試薬・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・5

3.2

装置・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・5

3.3

溶液調整・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・5

3.4

実験操作・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・6

3.5

測定条件・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・7

3.6

抗酸化物質の抗酸化活性評価方法・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・8

第4章

結果と考察

4.1

乾燥チップの測定及び解析結果・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・10

4.2

抗酸化能についての考察・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・11

第5章

まとめ ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・13

第6章

参考文献 ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・14

謝辞 ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・15

第1章
1－1

緒言
活性酸素

人が呼吸をすることは、生活していく上で必要不可欠である。その呼吸の際に取り入れられた酸素の一部は、通常よりも活性化されたスーパーオキシドや過酸化水素などの活性酸素に変化する。通常は体内に取り込まれた酸素のうち、約２％が活性酸素に変化すると考えられる。これらの活性酸素は酸化力が高く、一般的には細菌やウイルスを撃退する役割がある。そのため、体内には一定量必要なものである。しかし、活性酸素が過剰に発生すると、酸化力が高いため正常な細胞や遺伝子にまで攻撃をしてしまい、糖尿病や高血圧、がんなどの様々な疾患や老化現象を促進させる。そのため、活性酸素は体に必要ではあるが、過剰な発生は逆に体に害を与える。このことから、活性酸素の過剰な発生及び働きを抑える必要がある。
次に活性酸素が過剰に発生する原因だが、活性酸素はタバコやストレス、過度な運動、紫外線など生活習慣による影響が大きく関係しており、それらによって過剰に発生する。そのため、活性酸素の過剰な発生を抑え、病気や老化を防ぎ、健康に長生きするためには、生活習慣を見直すことが大切である。現在の日本では、医療技術の発展、充実が進んでいる。他にも、伝統的な食文化により、男性が 80.98 年、女性が 87.14 年であり、世界でも平均寿命が長い国である。しかしながら、健康寿命は平均寿命よりも短く、男性が 72.14 年で女性が74.79 年である。つまり健康寿命は平均寿命よりも 8 年以上も短いことが分かる。健康寿命とは、「日常生活に制限のない期間」と定義されており、つまりは健康上の問題で日常生活に影響を受けず、健康に生活できる期間である。健康寿命は、対象となる集団の各個人について、その生存期間を「健康な期間」と「不健康な期間」に分け、「健康な期間」の平均値を求めることによって算出したものである。健康寿命が短いと、長生きできたとしても様々な病気の影響により、寝たきりの生活や、家族の介護がなければ生活できなくなる期間が生じてしまう。そのため、近年は平均寿命を延ばすだけでなく、共に健康寿命も延ばすことが重要視されている。ではどのようにして平均寿命と健康寿命の差を縮めることができるのか考えてみる。まず平均寿命と健康寿命に差が生じる理由として、生活習慣の乱れや、遺伝など様々な要因からなる病気や老化が理由として考えられる。つまり、上記で説明したような生活習慣の乱れによって過剰に発生する活性酸素も、その理由の一つである。活性酸素は、ストレスなどの影響によって過剰に発生すると説明したが、現在の日本は深刻なストレス社会である。そのため日本人の体内では活性酸素を過剰に発生する恐れがある。ストレス社
会は日本全体の問題であり、各個人が解決できるような問題ではない。そのため、禁煙や禁酒、無理のない運動など、自分自身で対策をする必要がある。これにより活性酸素の過剰な発生を抑え、健康寿命と平均寿命の差を縮めることができる。

１1－2抗酸化作用

次に実際どのようにして活性酸素の発生、及び働きを抑制するのかを考える。活性酸素の発生の原因は、タバコやストレスの他にも多量飲酒や食品添加物、紫外線などもあり生活習慣に起因するものだと説明した。つまり生活習慣を見直すことによって活性酸素の過剰発生を抑制することができる。しかし生活をしていく上で避けられないものも多い。よって本実験では発生の抑制よりも、発生した活性酸素の働きをどのようにして抑制するのかについて考えた。
そのために、まず抗酸化作用について説明する。抗酸化作用とは活性酸素の働きを抑制することである。これは抗酸化作用のあるものは酸化がされやすく、活性酸素による酸化から体を守ってくれる。この抗酸化作用の働きがあるものにも種類がある。まず 1 つ目が抗酸化酵素である。抗酸化酵素は、体内で生成されるものであり、グルタチオンペルオキダーゼやカタラーゼなどがある。これらは体内で生成されているので、活性酸素から体を守るために、人間の体に元から備わっているものである。しかし、体内で生成される活性酸素にもいくつかの種類があり、数種類の活性酸素はこの抗酸化酵素と呼ばれる酵素で抑制することができるが、その他の活性酸素は抑制できない。そのため別の方法も加えて活性酸素の働きを抑制する必要がある。その別の方法として食材から抗酸化作用のある物質を体内に取り入れるものがある。元々体内に備わっている内因性の抗酸化酵素に対して、体外から取り入れる外因性のものに抗酸化物質がある。抗酸化物質の代表例には、ビタミン E やβ-カロテンなどがある。これらの抗酸化物質は、食材の中でも特に緑黄色野菜などに多く含まれることが分かっており、モロヘイヤやホウレンソウ、ニンジンなどに多く含まれている。その他の食べ物にも抗酸化物質は含まれているため、最近では酸化防止を目的とした健康食品もたくさんでてきている。このことから抗酸化物質を摂取することは意外と容易である。普段の食事のバランスに少し気を使うことで活性酸素を抑制し、健康寿命を延ばすことができる。
1.3

実験の目的

本実験ではビタミン E の誘導体である Trolox®(6-hydroxy-2,5,7,8-tetrametylchroman-2carboxylic acid)と野菜の測定試料との比較によって抗酸化能の評価を行った。野菜の測定試料は株式会社青粒よりご提供いただいたモロヘイヤの乾燥チップを使用し、モロヘイヤの生育環境の違いによって抗酸化能にどのような変化があるのかを調べた。そこからモロヘイヤに含まれる抗酸化物質は、どのような生育環境の違いによって変化するのか関係性を考察した。

２第2章
2.1

原理
吸光光度法

吸光光度法は測定試料溶液に光を当て、吸光度を測定することによって、その物質の濃度を定量的に分析する方法です。溶媒を通過する際の光の強度の減少は、ランバートベールの法則により、定式化されている。まず、強さ I₀ の入射角が溶媒を距離ℓ(cm)進んだ時の透過光の強さ I は式(1)で表される。また、溶媒が均一または距離ℓ(cm)が一定の時、光を吸収する分子の数は濃度ｃに比例する。よって(1)式は(2)式で表される。ここでｃをモル濃度𝐼(mol・L⁻¹)で表した時には、a の代わりにモル吸光係数εを用いる。さらに log(𝐼 0)ウを吸光度 A とし、式(3)に表す。

𝐼-log( )＝aℓ(1)𝐼(2)𝐼₀I₀ｃ-log( )＝βc𝐼₀I

ただしβc＝aℓA＝εcℓ(3)ℓFig. 1 光学セルを透過する光の強度(3)式より、濃度が異なる同じ種類の試料中の吸光度 A は、光路長および濃度に比例することが分かる。このランバートベールの法則が成り立つためには、入射角が単色光であること、溶液界面における反射や光度計内部の迷光がないこと、溶液濃度が変化しても溶質の溶存状態が一定で分子の解離や会合の平衡が移動しないことなどが必要となる。以上より、試料溶液を選択された波長で吸光度を時間ごとに測定し、試料溶液の吸光度経時変化を求めることが可能である。

３

2.2

マイクロプレートリーダー

マイクロプレートリーダーは生物学や化学など様々な分野で広く用いられている装置であり、吸光度測定、蛍光測定、化学発光測定、偏光蛍光測定の測定をすることができる。測定時に用いるプレートの穴の数は様々あり一度に多くの試料を測定することが可能である。
また、測定温度や、波長、攪拌時間など任意で設定することができる。本実験では、マイクロプレート内の溶液に任意の波長で一定量の光を当て、透過した光の量を測定することによって吸光度測定を行った。

４

第3章

実験

3.1

使用試薬

標準物質として、和光純薬工業株式会社の細胞生物学用 Trolox を使用した。酸化分解による吸光度減少測定のための色素として和光純薬工業株式会社の和光特級フルオレセインを使用した。ラジカル開始剤として和光純薬工業株式会社の和光一級 2.2 アゾビス(2-メチルプロピオンアミジン)二塩酸塩(以下では AAPH と表記する)を使用した。溶媒として、和光純薬工業株式会社の組織洗浄用 0.01mol/L リン酸緩衝生理食塩水(以下では PBS と表記する)及び試薬特級ジメチルスルホキシド(DMSO)を使用した。測定試料として、株式会社
青粒よりご提供いただいた育成環境の異なるモロヘイヤを使用した。
3.2

装置測定装置としてモレキュラーデバイス社製 VERSA max マイクロプレートリーダーを使用した。マイクロプレートは、AGC テクノグラス株式会社製 96well マイクロプレートを使用した。
3.3溶液調製(1) 100µmol/L Trolox®

Trolox®を 0.1 ml の DMSO で溶解させ、PBS で 100 µmol/L に希釈した。
(2) 100µmol/L フルオレセイン

フルオレセインを 1ml の DMSO に溶解させ、PBS を用いて 100 µmol/L に希釈した。
(3) 500mmol/L AAPH

AAPH を PBS で溶解させた。AAPH は反応性が高く、温度によって反応活性が異なるた
め、測定の直前に調製した。
(4) 測定試料
株式会社青粒様よりご提供いただいたモロヘイヤのチップを秤量し、それぞれに 99 倍のPBS を加えてミキサーにかけ、ろ過して 1％ジュースを調製した。この 1％ジュースを PBSを用いてさらに希釈し、0.1％のモロヘイヤジュースを調製した。

５

調整した試薬の構造を以下の Fig. 2 に示した。

Trolox®

AAPH

フルオレセインFig.2 調整した試薬の構造
3.4

実験操作

96 well マイクロプレートに測定試料の濃度が変化するように、3.3 で調製した試薬を全容が 200 µL になるように、Table1 のように加える。また、ブランク(BL)として、PBS 200µL を測定した。マイクロプレートリーダーで自動攪拌をするように設定し、測定を開始した。Table 1 のように調整したプレートを、波長 494 nm に設定した。波長を 494 nm としたのは、フルオレセインの極大吸収波長が 494 nm であるからである。測定時間は 30 秒ごとの測定を 100 分間行った。攪拌時間は、測定前の自動攪拌を 15 秒、測定間の自動攪拌を 10 秒、温度は 37 ℃となるように設定した。
Table 1 測定試料の調整時の加えた試料の体積
フルオレセイン(µL)

測定試料(µL)

AAPH(µL)

PBS(µL)

全量(µL)

BL000200200

No.120020160200

No.2202020140200

No.3204020120200

No.4206020100200

No.520802080200

No.620100

2060200

６3.5

サンプル試料

1.B-①-1

5 月定植、青粒の種、畝あり、黒マルチ

2.B-①-2

5 月定植、青粒の種、畝あり、シルバーマルチ

3.B-①-3

5 月定植、青粒の種、畝あり、黒マルチ、炭入牛糞肥料

4.B-①-4

5 月直まき、青粒の種、畝あり、黒マルチ、モロヘイヤ粉末肥料

5.B-2

5 月直まき、青粒の種、畝あり、黒マルチ

6.B-3

5 月直まき、青粒の種、畝なし、マルチなし

7.C-1(摘芯部)

5 月定植、畝あり、マルチあり、縦に伸びるタイプ8.C-1(収穫分)

5 月定植、畝あり、マルチあり、縦に伸びるタイプ

9.C-2

6 月定植、畝あり、マルチあり、横に伸びるタイプ

10.フィリピン産
マルチ、畝、定植、直まき、摘芯部についての説明は以下に記す。
マルチ：ビニールで土壌を覆うことで、土壌の水分を保つ。他にも、地温の調節や、雑草の抑制、乾燥防止、病気予防の効果がある。
畝：保水や、地温の調節の役割がある。

定植：植物を苗まで育ててから、畑に移し植えること。

直まき：植物を苗まで育てずに、種を直接畑にまくこと。
摘芯部：摘芯とは、野菜や草花などの植物の生育の際、人為的に先端を切断することにより、枝の数を増加させる栽培方法である。そのため、野菜などは収穫量を増やすことができる。

７3.6

抗酸化物質の抗酸化活性評価方法

ラジカル開始剤 AAPH を添加することにより、蛍光プローブ試薬であるフルオレセインが徐々に酸化されて分解する。酸化されることによりフルオレセインが退色し、吸光度が減少し始める。フリーラジカルとは、不対電子を持つ原子や分子のことであり、周りの物質から電子を奪う。電子を奪うので周りの物質を酸化させる。そのため、体内に取り込まれた酸素によって生成される活性酸素と似ている。しかしフリーラジカルは不対電子を持つ物質であるため、酸素が活性化された活性酸素のみがフリーラジカルではない。加えて活性酸素のすべてがフリーラジカルではなく、スーパーオキシドと、ヒドロキシラジカルのみがフリーラジカルである。このような酸化させる働きのあるフリーラジカルはフルオレセインに対する反応性が低い。そのため抗酸化物質を添加すると、ラジカル開始剤である AAPH によって発生するフリーラジカルと、抗酸化物質が優先的に反応する。つまり、抗酸化物質が反応し終えてからフルオレセインと反応する。その結果フルオレセインの酸化の開始時間が遅延する。これにより、フルオレセインの吸光度の減少に遅延が生じ、明確な酸化遅延時間が観察できる。抗酸化物質の濃度を高くすると酸化遅延時間が長くなる。
実験によって得られた結果から、フルオレセインの酸化時の吸光度経時変化の測定を行った。そこから酸化開始時間を算出し、検量線を引き、傾きを導いた。Fig. 3 を見てわかる
ように、測定開始後はフルオレセインは酸化されず、吸光度が安定していることが分かる。
まず最初に、吸光度が減少し始める前のフルオレセインの吸光度の平均を算出した。次に、抗酸化物質の酸化が終わり、次にフルオレセインの吸光度が減少する。このフルオレセインの吸光度はゆっくりと減少始め、徐々に傾きが安定する。その傾きが安定したところの近似直線をとり、最初に算出した酸化される前の吸光度の値を直線とし、交点を求めた。この交点を酸化遅延時間とした。これを各サンプル、濃度ごとに求め、酸化遅延時間との関係を Fig.
4 のようにプロットし、検量線を引いた。Fig. 4 では、横軸に抗酸化物質の濃度、縦軸に酸化遅延時間をプッロトし、グラフから検量線を作成し、傾きを求めた。

Fig. 3 Trolox®の経時変化

Fig. 4 Trolox®の検量線
８

Trolox®も同じ方法で検量線を引き、傾きを求めた。その後、標準物質である Trolox は、抗酸化能の理論値を 4.00 とし、各サンプルの測定試料の傾きを用いて、抗酸化能(R)を以下の式で算出した。以下の式より算出された抗酸化能(R)の値は、式を見てわかるように、値が大きければ抗酸化物質の含有量が多く、小さければ含有量が少ないと分かる。

4.00×試料の検量線の傾き

R＝𝑇𝑟𝑜𝑙𝑜𝑥の検量線の傾き

９

第4章
4.1

結果と考察
乾燥チップの測定及び解析結果

3.6 より算出したモロヘイヤの乾燥チップの検量線の傾きと、その際に測定した Trolox®の吸光度によって出した検量線の傾きを以下の Table 2 に示す。
Table 2 各サンプルと Trolox®の傾きと抗酸化能
測定試料

B-①-1

B-①-2

B-①-3

B-①-4

Ｂ2

B3

C1 摘芯部

C1 収穫分

C2

Trolox の傾き
30.9
32.8
30.9
32.9
29.4
30.2
29.4
30.2
27.1
28.0
27.1
28.0
22.723.1
22.7
23.1
25.3
25.2

Trolox の傾
きき
31.9

31.9

29.8

29.8

27.5

27.5

22.9

22.89

25.3

29.2
フィリピン産

チップの傾

13.6
13.6
21.1
20.3
23.2
23.2
18.6
19.4
27.7
27.4
28.4
25.4
34.4
34.4
20.2
21.0
35.1
35.1

チップの傾き

抗酸化能

13.6

1.70

20.7

2.60

23.2

3.11

19.0

2.55

27.6

4.00

26.9

3.91

34.4

5.95

20.8

3.55

35.1

5.55

57.6

7.68

57.4

30.0
30.7

57.7

10

4.2

抗酸化能についての考察

モロヘイヤの抗酸化能は以前当研究室で測定した多くの野菜や果物よりも 10 倍程度の大きい抗酸化能を示し、他の野菜に比べ活性酸素を抑え老化等の発現を遅らせる効果が高いことが分かった。測定したモロヘイヤは乾燥されており、水分が蒸発している。そのため、抗酸化物質が濃縮されている。それにより抗酸化能が高くなったと考えられる。。そんなモロヘイヤだが、本実験ではそれぞれ異なる生育環境で育てられたモロヘイヤをサンプルとし、実験を行った。その結果、モロヘイヤの抗酸化能は生育環境の違いにより変化することが判明した。では 3.4 サンプルで示したような、異なった生育環境によって育てられたモロヘイヤの抗酸化能は、どのような要因で変化するのかを考察した。以下のグラフは、それぞれ異なる生育環境で育てられたモロヘイヤと、その抗酸化能との関係を示したものである。

Fig. 5(1)マルチによる変化
まず最初に、マルチの違いによってどのような変化があるのかを考察する。今回は、黒色マルチと、シルバーマルチ、マルチなしの 3 つの方法で育てられたモロヘイヤを比べた。マルチをすることによって、保温効果や、保湿効果など様々な効果があると説明したが、ここでは保湿効果を取り上げる。保湿効果の違いによってどのような変化があるのかは、黒色マ
ルチとシルバーマルチで育ったサンプルを比べることによって考察できる。そのため B-①-1 と B-①-2 を比較する。Fig. 5 を見てわかるように、B-①-1 よりも B-①-2 で育てられたモロヘイヤのほうが抗酸化能が高い。これは、シルバーマルチには光を反射する働きがあり、地温上昇を抑える働きがある。そのため土壌に適度な湿度が保たれ、保湿の効果に優れてい11

る。土壌が保湿されることによって、β-カロテンの増加が期待できる。β-カロテンも抗酸化物質であるため、抗酸化能の値が高くなったと考えられる。マルチの有無についてはサンプルの生育環境の関係上後程考察する。
(2) 肥料による変化
次に肥料によって抗酸化能にどのような変化をもたらすのかを考察する。肥料について
は、B-①-3 の酒ろ過炭いり牛糞肥料と、B-①-4 のモロヘイヤ粉末肥料を取り上げる。B-①-3 はシルバーマルチの B-①-2 よりも抗酸化能が高かったため、酒ろ過炭いり牛糞肥料による影響だと考えられる。しかしながら本実験では、モロヘイヤに含まれるすべての水溶性抗酸化物質のみの測定である。そのため酒ろ過炭いり牛糞肥料で、どの抗酸化物質が増加されるのかは不明である。したがって水溶性の抗酸化物質の内どの物質が変化したのかの測定と、モロヘイヤに含まれる脂溶性の抗酸化物質の測定、この 2 つの測定を行う必要がある。
それらの結果を比較することによって、酒ろ過炭いり牛糞肥料と抗酸化能との関係性を見つけることができると考えられる。次にモロヘイヤ粉末肥料については、B-①-4 と B-2 を比較することで考察できる。モロヘイヤ粉末肥料は抗酸化物質の増加が期待されていた。しかし、B-①-4 よりも B-2 の抗酸化能の数値が高い。そのため、モロヘイヤ粉末肥料には抗酸化物質を増加させる効果はなく、逆に減少させている可能性も考えられる。
(3) 植え方による変化
次に定植と直まきの違いにより、抗酸化能が変化するのかを考察する。そのため、ここでは B-①-1 と B-2 を比較する。B-2 のほうが B-①-1 よりも高い抗酸化能を示したため、直まきのほうが抗酸化物質の量が増加することが分かる。
(4) マルチ及び畝の有無による変化
次にマルチと畝の有無によって、抗酸化能に変化があるのかを考察する。これは B-2 とB-3 を比較することによって考察できる。B-2 と B-3 では、モロヘイヤに含まれる抗酸化能に特に違いが見られなかった。そのため、マルチと畝の両方ありと、両方なしとでは抗酸化能に変化がないことが分かる。本実験では、シルバーマルチに抗酸化物質を増加させる働きがあると考察したため、ここでは黒マルチとマルチなしとで比較を行っている。マルチの有無によっては、マルチの様々な効果による抗酸化物質の増加が期待されたが、黒マルチは、シルバーマルチと違って、抗酸化能に変化が見られなかった。これは黒色マルチが、地温を上昇させる効果があることが原因だと考えられる。シルバーマルチは、地温の上昇を抑制することにより、抗酸化物質が増加すると考察した。黒色マルチは、それとは真逆の効果があるからである。このことにより、マルチの効果が打ち消されて、抗酸化物質が増加しなかっ12たと考えられる。次に畝の有無については、畝には保湿や地温の調整の役割があるので、抗酸化物質の増加が期待できたが、本実験のモロヘイヤサンプルだけで判断することは難しい。これらのことから、マルチと畝、両方の有無で考察した。
(5) 摘芯による変化
次に摘芯部と収穫分とでは、抗酸化能にどのような変化があるのかを考察する。これは、C-1 と C-2 を比較することにより分かる。結果を見てみると、摘芯部のモロヘイヤに含まれる抗酸化物質が、収穫分に含まれる抗酸化物質よりも多いことが分かる。摘芯部は先端の部分であるので、日光が最も当たりやすい部分である。そのため光合成が起きやすく、栄養素、つまりは抗酸化物質が増加すると考えられる。さらに C-1 の抗酸化能は、国内サンプルでは最も高い値である。このことから、日光の当たり具合は、抗酸化物質の量に大きく影響すると考えられる。
(6) 種による変化
次に種の種類について考察する。C-1 (収穫分と摘芯部)と C-2 だけ青粒の種ではない。この 2 種類の種は、青粒の種よりも全体的に抗酸化能が高い。C-1 の種は縦に伸びるタイプで、C-2 は横に伸びるタイプである。それにより、この 2 種類の種は日光に当たる面積が広くなる。(5)の結果より日光が当たりやすいと、抗酸化物質の量が増加すると考えられた。
C-1、C-2 の種は青粒の種よりも表面積が大きくなり、日光が当たりやすい。そのため、抗酸化物質が増加したと考えられる。種の種類が異なると何が違うのかを丁寧に説明(7) 気候による変化
最後にフィリピン産のモロヘイヤの抗酸化能について考察する。フィリピン産の抗酸化能は、すべてのサンプルの中で最も高い。これはフィリピンの気候が大きく関係すると考えられる。フィリピンは日本と違ってはっきりとした四季が存在しない。加えて 1 年を通して気温が高い。この気温の高さがモロヘイヤに含まれる抗酸化能に変化を与えると考えられる。
第5章

まとめ

抗酸化能は生育環境の違いによって、抗酸化能に変化が現れることが分かった。フィリピン産の抗酸化能および、国内サンプルの抗酸化能から、気温が高いことと、日光が当たりやすい環境で育てられたモロヘイヤが、抗酸化能が高いことが分かった。そのため、日光がよく当たり、気温が高い環境は、抗酸化能に最も変化が現れる理由として考えられる。この傾向は、過去の当実験室の実験結果からも見られた。そのため、本実験では、暖かく、日光がよく当たる環境で育てることで、高い抗酸化能を示すモロヘイヤを育てることができると
13

結論づける。
第６章

参考文献と参考にした HP

1）田中靖貴、「モロヘイヤ中に含まれる抗酸化物質の評価と栽培地域と部位による比較」
甲南大学

理工学部

機能分子化学科

環境・計測化学研究室

卒業論文

令和元年度
2）大橋紗也香 「モロヘイヤの抗酸化能の比較、及び ICP 発光分光分析を用いたミネラル含有量の測定及び比較」 甲南大学

理工学部

機能分子化学科

環境・計測化学研究室

卒業論文 令和 2 年度
3）細川純嗣「食品中の健康機能性成分の分析法マニュアル 」産業技術総合研究所

四国センター
4）辻一郎

健康工学研究部門

平成 24 年

5）佐藤敏彦「健康寿命のあり方に関する有識者研究会」健康寿命の定義と算出方法

e-ヘルスネット

14

報告書

平成 31 年

厚生労働省

令和 4 年

謝辞
本研究を行うにあたってご指導いただきました、甲南大学

理工学部

機能分子化学科

茶山健二教授ならびにモロヘイヤの乾燥チップのサンプルをご提供いただき、ご指導くださいました株式会社青粒社長

永原豊大様、部長に心より感謝申し上げます。

15

近江信夫様、皆様、ならびに多くの方々