牛乳・乳製品摂取に対する生体反応に関する研究
国立健康・栄養研究所特別客員研究員板倉弘

重はじめに手L
脂肪摂取後に血清トリグリセリド値の上昇が認められるが、その変動の程度には個人差がみられる。食後高脂血症は動脈硬化の危険因子であり、高レムナント血症では冠動脈疾患による死亡率が高率であることが知られている。乳脂肪摂取後にみられる高脂血症の個人差の要因を明らかにして、動脈硬化予防のための食事指導に役立てることを目的に研究を行った。

方 法
対象者は健常女子学生26名(年齢21.2土 2.
0)および女性高齢者20名(年齢60.
4:t4.
7)である。検査前

2時間絶食とし、翌朝空腹時に体表面積あたり脂肪30g/m2に相当する生クリームを経口摂日夕食より 1取させた。採血は負荷前および負荷後 l待問ごとに 6時間までー行った。
Iを用いた全血試料より得られた白血球ベレットで分析を行った。白血球を遺伝子多型は、抗凝固斉J含む分画に細胞溶解緩衝液を加え援持後遠心分離にて上清を分離した。沈殿物にクロロホルム、フェ試料を得た。
ノール処理を行いDNA試料を PCR法で増幅し、 PCR法で増幅された DNA断片が制限酵
制限酵素断片長多型 (RFLP)はDNA素で切断されているか否か、ポリアクリルアミドゲル電気泳動でフラグメントの大きさを検討し決定
st‑1、Msp‑1、Xba‑1を用いた。
した。制限酵素として S

アポ Egenotypeはアレル特異的オリゴヌクレオチドプローブ法で行った。

結 果

乳脂肪負荷後の血清トリグリセリド値の変動を若年者と高齢者に分けて遺伝子型の違いで比較検討した。
Iタイプ、 B タイプ、 DDタイプに分けられる。今回の対アポBシグナルペプチド領域の遺伝子型は I
Iタイプと IDタイプの 2型が認められた。これらのタイプにおける生クリーム摂取後の血清象者では IIタイプに比して B タイプで高値を示す傾向が認められたが、トリグリセリドの変動を図 lに示す。 IP<0.
05)が認められたのは高齢者の空腹時およぴ 1時間値、若年層の 3待問値であっ河群で有意差 (fこ。
高齢者と若年者とでは空腹時トリグリセリド値にも違いが認められ、高齢者で高値であった。また70

生クリ]ム摂取後の血清トリグリセリド値でも高齢者で高値でありピークに達する時聞が遅くなる傾向が認められた。
'近傍に位置するミニサテライト領域で検出される。多くのタ
アポB遺伝子の VNTRがアポB遺伝子3個の繰り返し配列を有する場合が多く、対象者を 35ホモ型、 35ヘイプに分けられるが、日本人では 35例中 15例、 35ヘテロ型は 23
例その他は 8例でテロ型およびその他のタイプに分類した。 35ホモ型は46あった。若年層は 3型とも変わらなかったが、高齢者ではその他のタイプが高い傾向がみられた(図2)。
アポB遺伝子Xba‑1多型は X1X1、X1X2、X2X2、に分けられる。日本人では X1X1が多く、 46f7U中39例カ渓1X1であった。高齢女性ではX2X2は認められなかった(図 3)。各タイプ聞の変動は若年層より、高齢者の方が差が大きくなる傾向がみられた。 XIX1より X1X2の方が高い傾向がみられた。生クリー
ム摂取後の血清トリグリセリド値は 6時間後に X1x2で有意に X1X1より高値であった。
st‑1多型は若年層、高齢者ともに有意差は認められなかった(図 4)0 S2S2タイプは若アポB遺伝子S年層のみにみられ、3時間値がやや高い傾向がみられた。

M2の 3型に分けられるが、生ク')‑
アポ AI‑cm遺伝子群の Msp‑1多型をみると M1M1、M1M2、M2

ム摂取後の血清トリグリセリド値の上昇に有意差はみられなかった(図 5)。若年層では 3つのタイプ
M2タイプ
で反応に差がみられないが、高齢者では 3時間以降に、 M1M2タイプで高値傾向となりM2で低値傾向がみられた。
enotypeをみると、高齢者ではE3/3、E3/4ともにほぼ同一パターンを示したが、若年層ではアポE gE2/3の例が 2例あり、生クリーム摂取 4時間後に有意に高値を示した(図 6)0 E3/3、E3/4は高齢者と同様、若年者でもほぼ同程度の変化であった。
Iタイプ、 IDタイプ、 DDタイプに分けられる(図7)。
アンジオテンシン変換酵素遺伝子多型として I

高齢者では DDタイプがみられなかった。若年者では 5例がDDタイプであった。高齢者では有意差はないがP タイプの方がやや高値傾向がみられる。若年者では各タイプに大きな差はない古ぎDDタイプに比してB タイプが有意に低値で日夕イプは中間の値を示した。

考 案

乳脂肪として生クリームを摂取し、血中トリグリセリド変動に及ぼす年齢および遺伝子素因の影響について観察した。若年女性と高齢女性を比較したところ、高齢女性の方が血清トリグリセリド値が高値であり、生クリーム摂取後も高値を示した。このことから加齢によりカイロミクロンレムナントの異化が遅延していると考えられる。インスリン抵抗性症候群ではレムナント代謝障害が起こりやすいことが知られており、高齢者の生クリーム摂取後の高トリグリセリド値の持続にインスワン抵抗性が関与している可能性も考えられる。
脂肪摂取後の高トリグリセリド血症はリポ蛋白リバーゼ、アポ CII、アポEあるいはアポB48の生成lniなどの関与が考えられる。今回はアポB遺伝子、 アポE遺伝子、 アポAI遺伝子、 ACE遺伝子などについて解析した。アポB遺伝子多型はカイロミクロンや VLDLの生成あるいは異化との関連が予想される。
領域多型、 Xba‑I多型について一部にわずかな差は認
今回検討を加えたシグナルペプチド多型、 VNTRめられたが顕著なものでなく今後さらに検討を要すると思われた。
アポE変異体のなかでも E2は受容体結合活性が低く、 レムナント粒子の停滞を起こすことが予想される。今回の調査で高齢者に E2を有するものがなく、若年者で 2例あり、その例では生クリーム摂取4時間後に有意に血清トリグリセリド値が高値であった。
アンジオテンシン変換酵素は動脈硬化との関連が示唆されており、その遺伝子型と脂肪摂取後の高トリグリセリド血症との関連を調べた。今回の検討では一定の傾向が認められなかった。

結56a
田生クリーム摂取後の生体反応の lつとして血清トリグリセリド値の変動を調べた。加齢により異化が遅延することが示された。遺伝子多型で反応に違いが認められたが、そこに関与する要因が多いた
め例数を増やして分析をすすめる必要があると考えられる。

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図 1 アポBシグナルペプチド多型による脂肪負荷後の血清トリグリセライド値の変動

72

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5

図 2 アポB遺伝子VNTR領域多型により脂肪負荷後の血清トリグリセライド値の変動
Young(F)Elderly(F)320ー@炉・"X
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図 3 アポB遺伝子Xba‑
I多型による脂肪負荷後の血清トリグリセライド値の変動

Elderly(F)Young(F)200‑ー・一割引い・ 12){一司︑回ε)@沼﹄@oh一回官ト

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図 4 アポB遺伝子Sst‑
I多型による脂肪負荷後の血清トリグリセライドイ直の変動

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図 5 アポA
I‑
C1
11遺伝子群 Msp‑
I多型による脂肪負荷後の血清トリグリセライド値の変動
Elderly(F)Young(F)200て3b言明‑cQ)oき 1∞』

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2345。

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図 6 アポE遺伝子変異体による脂肪負荷後の血清トリグリセライド値の変動

Young(F)Elderly(F)∞216012080*

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40日

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23456 駒山田)

図 7 アンジオテンシン変換酵素遺伝子の D
I多型による脂肪負荷後の血清トリグリ
セライド値の変動

A斗 A

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