ごあいさつ
コスメトロジ ー 研究振興財団も設立8年目を迎えますが、年々助成応募の研究テ ー マも増加し、 設立から昨年までの応募総数は386件、 助成研究は115件と3桁の大台に乗せる歩みをしてきています。このようななか、今回第5号の研究報告を発行できる運びとなりました。 このことは当財団の設立趣旨が広く認知されてきた結果であると共に、 多くの方々のご協力とご支援の賜物であると惑謝しております。
最近の話題として脳死をめぐる人の死の国会論議や体細胞クロ ー ンであるクロ ー ン羊「ドリ ー 」の成功を受けて人への応用可否問題が取り沙汰されるなど、 自然科学（特に生命科学）の発展が人の倫理問題と葛藤する状
況になりつつあります。 このことは、 人間そのものの研究と自然科学の研究との調和・融合（人間科学）が必要な時代の流れにあることを示唆しており、 当財団で自然科学から人文科学まで幅広い研究領域、 並びに学際的な研究を助成する活動をしてきたことは、 時代の流れにも適合したものであったと改めて惑じている次第です。
今後とも幅広い学問領域とその接点を対象とした化粧品学の究明が「人間科学」の観点で結実し、 身体の健康と合わせて、 人の喜び、 心の充実の本質に迫る学問領域として確立される事を期待して、 研究助成活動を続けていきたいと考えております。
当財団の活動に対し、皆様方の益々のご支援、ご協力をお願い致します。
平成9年8月
財団法人

コスメトロジ ー 研究振興財団

理事長 小林 橙次郎

次

一目

曇

ごあいさつ
● 研究報告I. 素材、 物性に関する分野· 植物組織培簑法を用いた クチナシ植物(Gardenia jasminoides Ellis)からの橙黄色色素crocinと青色色素イリドイド配糖体の生成に関する 研究• 水の熱輸送メカニズムと電磁波の影響……… 2

東京理科大学総合研究所 生田安喜良
・・・・・・・・································································ 9

静岡県立大学薬学部片山 誠二
水析• 生体膜構造をもつ高分子中の の構造解 と生体反応の解明に関する 研究 •••………………15
東京医科歯科大学医用器材研究所 石原 ー彦• 両親媒性分子が構築する超分子の構造と機能性に関する研究 …•…………•……………………·22
名古屋大学大学院理学研究科• 光学活性化合物合成を目的とする新規不斉触媒
及び新規不斉触媒サイクルの開発研究

今栄東洋子・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・·28

早稲田大学理工学部 中田 雅久
II . 生体作用、 安全性に関する分野
・ ヒト皮肉移植SCIDマウスを用しヽた新ししヽコスメトロジ ー研究．接触皮閲炎におけるマスト細胞活性化反応の解析•・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・··36

大阪大学医学部 野村 大成•••.•••.••.•.••.•..••..•••.•••.•••••.•.•.•••••.•••••••43
一

昭和大学薬学部 工藤郎
・皮肉表皮細胞におけるリピド／ゞイオファクタ ーの機能発現機構 ・・・... ………………... ・・・·… ··48
新渇大学医学部 藤井博.
•• ……… ···58• 炎症後色素沈着におけるエイコサノイドによるメラノサイト活性化機構の解明
京都大学大学院医学研究科井階• 細胞内小器官ペルオキシソ ー ム：エ ーテルリン脂質の生合成と酸索ラジカルスカベンジャ ー機能及び欠損症

幸一………………………67

九州大学理学部 藤木 幸夫
作
ムの有効性及び• 多成分油性皮廣透過促進システ用機構に関する研究 ••………………………·72
城西大学薬学部 杉林

堅次

皿精神、 文化に関する分野• 化 粧と痴呆老人に関する碁礎研究 ..............................................................................32
産業医科大学 松岡 成明
影響の研究 ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・……·90
・対人魅力の形成にかかわる顔の構造的特徴と化粧行動の北星学園大学文学部 大坊

郁夫

次ー一

目
■ 記念講演平成8年度記念講演 コスメティ ックとコスミック

・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ・ ··109

大阪大学文学部■ コスメトロジー研究雑感

鷲田

清

一

............................................................................................. 11 5

■ 付 録
平成8年度事業報告 ································································································127：：;:課扇三覧 ：．．．． ．・・::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::::�::

．
．

I .

素材、 物性に関する分野

II .
III .

生体作用、 安全性に関する分野
精神、 文化に関する分野

I . 素材、 物性に関する分野

植物組織培養法を用いたクチナシ植物(Gardenia jasm加泣les Ellis)
からの橙黄色色素crocinと青色色素イリドイド配愧附刃生成に関する研究
東京理科大学総合研究所

生田

基礎科学研究部l"J

安喜良

Callus tissues were induced from the fruit of Gardeniajasminoides Ellis on basal MS medium suplimented
with 2,4--D (3 mg/ e) -K (0.1 mg/ e) and N (3 mg/ e) -K (0.1 mg/ e). Callus on subcultured onto MS medium
supplemented with N (3 mg/ e) -K (0.1 mg/ e) induced yellowish pigmented callus. The MeOH extract ofyellowish callus tissues showed the presence of crocin when analysed by HPLC. However, crocin was at low
levels in callus as compared to fruit. It have maintained the crosin producibility through subcultures over
Omonth. Further, triterpene, phytosterol and their glycosides were also identified from the MeOH extract of}he callus tissues

目い、クチナシ(Gardenia jasmonoides Ellis 、 アカ的ネ科）の植物から誘導したカルスを使い、色素生

化粧品あるいは食品の着色に用いられる色素素成の条件検討を行い、安定した水溶性のカロチノ

材は、現在化学合成品に依存している部分が多イド系橙黄色色素の crocin及びイリドイド配糖

い。しかし、最近化学合成系色素に発ガン性など

体を植物組織培養法により、季節に関係なく供給の副作用の危険が指摘されるようになり、それに代る危険性の少ない天然物由来の色素素材が再認識されてきた。植物天然色素は、色調が合成品に比べ鮮やかで、けばけばしさがなく、しかも人体への安全性が一般に高いと考えられている。しかし、植物を原料として製造する場合、自然環境による制約、或いは、資源の枯渇などの問題があり、原料確保の面から も不安定さがある。
この最近の天然物指向による消費者の要求に答えるべく、安定した供給法として最近注目されている植物組織培養法を用いて大量に供給が出来るようになれば、現在使われている天然色素は植物由来の色素が多いことから大きな期待がもたれる。現在これらの色素の内、代表的な橙黄色系色
素はクチナシの果実から得られるcrocinがある。
(Plant、Fig. 1)、本研究は植物組織培養法を使Studies on pigments and monoterpene
glucosides from culturedtissues of
Gardeniajasminoides Ellis (Rubiaceae)
駆ra Ikuta
Research Institutes for science andtechnology,lnstitute Fundamental
Science, Science University of Tokyo-2-

Plant and Fruit of Gardenia jasmonoides Ellis

植物組織培養法を用いたクチナシ植物(Gardenia jasminoides Ellis)からの橙黄色色素crocinと青色色素イリドイド配糖体の生成に関する研究する事を目的とする研究である。 この方法によりの種々の植物生長調節物質の組み合わせてcrocin

季節に関係なく植物色素の原料供給が容易になりの生成を目的に検討を行った。

化粧品、 食品添加色素の分野で四季折々の自然のその結果 N(3 mg/.e) -K(O.lmg/.e) のホル色が人工的に得られるようになるなら、 色彩豊か

モン組成を添加した M&S 培地で継代培養したな文化生活が約束されるであろう。

所、 一部に橙黄色に色づくカルスの生成が観察さ植物組織培養法による植物色素の生成の報告例れた。 このカルス細胞がcrocinを生成しているこは現在アントシアニン系、 フラボノイド系化合物とが推測され、 色素生成の多い細胞部分を選抜しについて生成した報告例はある。 しかし、 工業的て繰り返し継代培養を行った。 その結果 、 濃い橙なレベルでの色素生成の例はムラサキの培養組織

黄色callus細胞が得られた(Fig.2)。 しかしcallus！）

からシコニンの生成の報告例以外にない 。 クチの成長が遅く、 しかも約10 カ月間繰り返し継代

ナシのカルスから色素の生成の成功例は今のとこ培養を行ったが急速に色素生成が減少し始めた。

ろcrocin様化合物の生成、 あるいは微量のcrocin

た め に、 その時点で カ ル ス を収穫し（生重量の生成が報告されている。2. 3. 1) 又、 微量成分

0.85g 、 乾燥重量 0.02 g)、 MeOHで徹底的に抽出として 、 青色色素を生成するモノテルペン系のイを行った。 その濃縮エキスについてHPLC(60%リドイド化合物の生成及びその構造解析について

MeOH) を用いて crocinの標品との比較によりの報告はある。sJ(Fig. 1 ) このクチナシの果実

crocin と同定した(tR: 3 .0lmin.)。 さらに HPLC

は、 生薬名山栃子と呼ばれ古来より飲食物の黄色を用いて定量を行った結果 crocinは 0 .22 X 10-6g

着色料として使用され、 貴重な黄色天然着色料と(D ry wt. 0.001%)を得た。 原植物の果実では、 最して現在でも使用されている。 クチナシ黄色色素

大乾燥重量あたり約10%程度の crocinが生成すは、 色調が鮮やかで、 耐熱、 対光性に優れたるたることが報告されており 7 )、 それに比べると今回

め、 その利用分野は広範囲である。 又、 漢方ではの定量結果は非常に低かった。

重要な生薬として使われ、 その薬効としては潟下、 解毒、 消炎、 解熱鎖痛、 利胆作用などが知ら

2 . 2

れ、 特に充血、 吐血、 黄疸、 不眠を治す目的で用の構造
mo noterpene系配糖体を検索のためにcallusのいられている。 日本では年間300tが中国、 韓国か

成長の良い2 , 4 - D(1 mg/.e) -K(0.1 mg/.e)

ら輸入されている。 6)

2
2 . 1

Triterpene,phytosterol及びその配糖体

結のホルモン組成を含むM&S培地用いて培養を行

果

い生重量約4 kgをMeOH抽出を行い、 そのエキ

黄色色素crocinの同定及び定量スについて、 CHCh、 n-BuOHにより分配を行い

NAA(N)、1AA 、 K inetin(K)、 B enzyl a denine

得られたそれぞれのエキスについて 、 カラムクロ

ご

RO-oc·vvvvvv�

.CO-OR

マトにより精製を繰り返し 、 CHCb層から5種(c o m p o u n d s 1 - 5)、 B u O H層から4種(compounds 6 - 9) の化合物が得られた(Fig.

croconR: gentioboo沢3)。 これらの化合物について機器('H 、 13CNMR、

crocetin

R: HMS)デ ー タをもとに構造を解析した。

HO

2 . 2

R= I』
gcmpm
geniposide R = Gk

Fig. 1 Main Compounds from Gradenia jasminoides

1

Ulsolic acid.

C ompound 1は白色粉末、1LC上で 10%H心01
を噴霧後加熱する と赤紫色を呈しL ieberma n-3-

Fig. 2

Production of Crocin from Callus tissueIweight 4012 ·14 g
Callus Tissue of Gardenia jasminoides Ellis (fresh
dry weight 86. 90 g)
txld. withヽ1,011

hot MrOJI / ArOEt
hot Ar〇Et

Eヽlra<I
add. H20I

CIICIJ laJ·tr，〗�『1『勺�utd. with CHCl3

I:,:、

冒戸□��I�こtS,.lnntFI

Compound 4(Soh·cnt D)

lbOI●)·,r

lluOH I●�·er
JHP-20 column chroma!

�leOH layer

I

SIU? column chrnmat.

IIP-20 column rlu omat

(Soh-.nt G)

MeOH layer

Compound 5(Solnut I)

Lll-20 column
rhromat.

(Solnnt Iう）

Compound I Compound 2

Solヽ·,nl B; CIICll: �1,011 = I : I

extd. ,vltJ1 n-BuOII:.::':�"�:·;『:0�!,0H a 10·I

Compound 3
Lll-lO(Solvent II)
SK'1 ,olumn
dorumat.

Soh·rnt ,\; CIIC'll: M,011 =JO; I

1110 la)"tl"

Compound 6

Solrn1t ll; 11,xan,; MOEi =I : I

Solヽ•,nlE: ll<X●11<: Act>Et; Cll,CN =2: 10; 0.5

So�-.nl C; lltx●nt; A,OEI =20; 1 Solヽ·,nt F: lltx●m: AcOEI: C'l l,C'N = J: 10; 0.5
Fig. 3Compow1d 7

Compound 8

Solnnt G; CIICI�: �lrOH: 1110 = 20: 10: I
Solヽ·rnt II; 1120: Cll:JCN = S.5: 4.5

Solnnt I ; 1120: Cil:JCN = S.8: 4.2

Extraction of Gardenia jasminoides Ellis callus tissue-4-

Com 11ound 9

植物組織培養法を用いたクチナシ植物 (Gardenia jasminoides Ellis) からの
橙黄色色素 crocin と青色色素イリドイド配糖体の生成に関する研究

較から同定した(Fig. 5)。 8)

B ur c h a r d 反応に より赤紫を呈する事から、triterpene化合物が推定され、 MSよりm/z 45 6にBrassica sterol, stigmasterol, f3[M汀を示し、 レトロディ ー ルスアルダ ー 開裂に2 . 2 . 3z 24 8,203が更に、 m/z 207にA/B環由来のフラC o m p o u n d 4、 5 は淡黄色の粉末で、よ るDIE環由来 のフラグメン トイオンml
グメントが観察された。

- sitosterol

1 HNMRにより、 2個分

Liebermann-Burchard反応により深緑色を示し、
M S より、 糖鎖 脱離のフラグメントイオンmlの2級Meを含む7個のMe基更に、12位のオ

レフィニックプロトンがo5 .47(1H、t、J=3.3Hz)に観察される事から、 ulsolic acidが推定され、 標
品 との比較により同定した(Fig. 4)。
2 . 2 . 2

z 398、 396、 382 (Fig. 6 - 8)が観測され 、 3種の混合物と 推定された。 同時にsterol化合物に特

徴的な側錐と糖鎖の脱離によるフラグメントイオ

ンm/z 255が観察された。 又、 文献値との比較か

Stigmasterol.

ら¢ — sitosterol (3 D
- - glycopyranoside, stigmasterol(3 - D- glycopyranoside, brassicastrol (3 - D­

Com p ound 2は無色粉末でLieberm a n n -，glycopyranosideの混合物と 同定した。 8)

Burchad反応により深緑色を呈し、 MSより、 mlz

412、[M汀を示した。 更に 1

H,13CNMR から

stigmasterolが推定され、 標品のデ/3 ー D- glycopyranoside.

ー タ ー

これらの化合物は原植物からまだ報告の無い

triterpeneあるいはphytosterol及びその配糖体で

との比

□

十

弓

→；良。 →�0�

HO

m/z 248m/z 203、批

虚Ursolic acidHOm/z 207

Fig. 4 Mass fragmentation of Ursolic acid
R

21

22
+

'.!7

HO

LM ]

HO
6

Stigmasterol

Fig. 5 Mass spectrum and fragmentation of stigmasterol-5-[M-(R+H20)]
255

：

}8

2-1

+ 560

[M ]

26
25

[M - (R+180)]
255

A

ー

8

2

/
l
9-

[M-glc]g

glc-0
Brassicasterol f3 -D-glycopyranoside

Fig. 6 Mass spectrum and fragmentation of Brassicaterol /3 -D-glycopyranoside+[M ] 574[M-glc]27[M ・ (R+180)]
255

glc-0
Stigmasterol f3 -0-glycopyranoside
Fig. 7 Mass spectrum and fragmentation of /3 -0-glycopyranoside[M打. 576[M-gk127[M・(R+180]
255
6

glc-0

13 - Sitosterol /3 -D-glycopyranoside
Fig. 8 Mass spectrum and fragmentation of /3 -Sitosterol /3 -0-glycopyranoside
あった。compounds 6 - 9は構造は検討中であ形成が観察され、 そのshoot の部分を光照射下る。

(12/12hr 、 6000L)継代培接を行った所、 葉が緑化して、 地上部、 及び地下部を形成した小植物が

2. 3

callusからの再分化による植物体の生成得られた(Fig. 9)。 今回は移植は行なわなかっN(3 mg/£) - K (0.1 mg/£)ホルモン組成でたがこの再分化植物が種苗として使用出来る可能

色素生成を検討中に色素生成と同時に 、 shootの性を示した。
-6-

植物組織培養法を用いたクチナシ植物(Gardenia jasminoides Ellis)からの橙黄色色素crocinと青色色素イリドイド配糖体の生成に関する研究

生成について time course を取り 、・カルスの収穫時期を設定したい。しかしながら、クチナシのカルスから、カルス化後、約1年近くcrocinを生成していたが、10カ月目位から急激に色素形成能が低下する事が観察された。この様に色素生成が継続しないため、カルスがcrocinを生成する能力
を持続及び生産性の向上する条件を検討する必要がある。この色素形成能力の維持が今後の課題となろう。現在 、 再度同じ条件でカルスを誘導して、色素形成株を大量に選択中である。
更に、一般的 に カルス培養において酵母エキス、あるいは重金属などエリシタ ー 処理を行うことにより、二次代謝産物の生成量を増加する事が知られいる。今後、このクチナシのカルスについFig. 9 Differenciation from Gardenia jasminoides
Callus Tissueても、このようなエリシタ ー 処理を加え 、 目的の色素化合物が生成されるかどうかについても検討3

考を加える。一方 、 原植物で生成するmonoterpene

察系iridoid配糖体類が得られず、原植物から報告さ色素生成の少ない原因として、今回カルスの収れていないtriterpeneあるいはphytosterol類が得穫時期を逸し 、 色が薄くなり始めた時期に抽出られた事は、著者等9)が既にボタン科のカルスのし、定量を行ったことが考えられる。現在 、 前回

生 成 成分の 検索の結果、 原 植 物 で 主成分のと同じ条件でクチナシの果実からN(3mg/.e)­monoterpene配糖体の paeonifloin類が生成されK(O.lmg/.e) を用いてカルスを誘導したところ 、ず 、 triterpene類を主生成成分として生成した現

callus化の過程で特に色素生成細胞を選抜する事

象に類似しており、カルスにおける terpenene生

なく色素生成が観察された。そこで今後は 、 色素合成の能力の観点から興味ある(Fig. 10)。

HMG-CoA

Acelyl-CoA／

GPP (C10)量MVA

PP(C5)/

臭FPP(C15)FPP synthasemonoterpene
paeoniflorin

I
I
•
.
9

FPP synthase_, diterpene
Aibberellin

IPP isomerase
ー→�I

IPP

IPP

，

DMAPP(Cs)

HMG-CoA
reductasc

GGPP(C2o)

GG p p synt ase

triterpcne

Fig. 10 Biosynthesis of Terpenoids

ーー ＇

�

steroleiridoid-7-

IPP... —・・

carotinoid

4
4. 1

実

BuOH で分配し n-BuOH可溶画分を得た。 これ

験ら画分について順相•逆相のオ ー プン、 中圧カラムクロマトグラフィ ー およびセファデックスカラ

カルス誘導及び継代培養

ムクロマトグラフィ ー を繰り返し行い 、 Compound

カルスは、 結実後の果実及び茎を水道水で良く

1 - 5を CHCJ3可溶画分から、 Compound 6 -洗った後、 Tween20を数滴たらした蒸留水中で、撹拌しながら徐菌後、 20% Na0Cl により数分間

9をBuOH可溶画分から単離した。

をM&S培地上に置床し、 25士l ℃ 、 暗所下で

文 献1 ) Fukui H, Yoshikawa N, TabataM, Phytochem­
istry, 22, 241 - 2453,1983.

滅菌し洗浄した後 、 1 -1.Scmに切り分けたもの

2週間D (3mg/E)-K (O.lmg/E), N (3mg/E)-K (O.lmg/E)のホルモン組成のそれぞれの組
み合わせを 含むM&S培地を用いて培養を行い力2)奈女良、 田田中、 小山、 ほか1名、 クチナシ

ルスを誘導した。 継代培養はD(lmg/E)-K(0.1培養細胞による有用色素生産、 生薬学雑誌 、
42、 252 - 255 (1988)梅谷、 福井、 田端、 薬mg/E) 、 N (3 mg/ E)- K (0.1mg/ E)の組み合
わせを用いて行った。
4.2

誌、 100, 920 - 924, 1980.

3) Nawa Y, Ohtani T,: Induction of callus fromcrocinの同定及び定量

3NKで培養したクチナシのカルスから燈黄色

Flesh of Gardenia jasminoides ELIS Fruit andFormation of Yellow Pigment in the callus,に色づいたものを特に選抜してメタノ ー ルで乳鉢

Biosci. Biotech. Biochem., 56, 1732 - 1736,（検量線の作製）

4) George P. S, Ravishamkar G. A,: Induction ofを用いて抽出を行った。

メタノ ー に溶かして 0.125 mg/ meに調整した

crocinの標品を用いて 、 HPLCにより検量線を作製した。crocinを 、 2.5、 5.0、 10.0µeの3種類の濃度について測定し、 最小二乗法により回帰方程式を算出した。

〈HPLCの条件〉

1992.

crocin and crocetins in callus cultures of Garde­niajasminoides ELUS. Food Biotecnology, 9, 29-38, 1995.

5 ) Ueda S, Kobayashi K, Muramatsu T, 他l名：

Studies on monoterpene glycosides and related

natural products. Planta Medica, 41, 186-91,(UV) 382nm、（流速） l.Ome/min、（温度） 30℃、19981.

6) 日本薬局方第二部広川書店、 東京、 1991, D（移動相溶媒系） 60%MeOH

クチナシのカルスからの成分抽出及び構- 389- D- 392.
7) 梅谷、 福井、 田端、 クチナシ果実の発育にとを用いてカルスの大量培養を行いクチナシのカル

924,1980.
8)児島：ウツボグサ(Purunella vulgaris L.var.

中ポリトロンにより磨砕し 、 吸引ろ過後、 残漆にド成分に関する研究 ． 博士論文pp39- 48,1983.

4.2

造決定
D (1mg//!)-K (0.1 mg//!) のホルモン組成ス(fr. wt. 4.1kg、 dry、 wt. 86.9g)を収穫し、MeOH

もなう成分含量 の変化、 薬学雑誌 、 100,920 -

lilacina Nakai)のトリテルペノイド及びステロイ

MeOHを加え同様の操作を3回繰り返した。 更に

9) Ikuta A, Kamiya K, Satake T, そのた1名 ：エキスを水に懸濁した後、 CHCI 3 で分配してPaeonia species.Phytochemistry,38,1203-1207,

その後、 MeOHで還流抽出を3回行い、 その濃縮

CHCl:i可溶画分を得た。 水層は更に水飽和n-8-

Triterpenoids from callus tissue cultures of1995.

水の熱輸送メカニズムと電磁波の影響
静岡県立大学

片

山

誠

薬学部

二、 小

沢

一

夫

During continuous irradiation far or near infrared (FIR,NIR) on water in cylindrical cell, time courses oftemperature rise of water at both the irradiated and opposite ends of the cell were observed by using athermometer with high precision of 1/1000 deg, taking into account radiation of heat from the sample water.
Under an experimental condition without radiation of heat from sample system, the transport process ofthermal energy obtained from FIR, namely, the time course of temperature rise, was mostly in accord withthat from NIR, while a little but certain difference was observed in the beginning of both irradiations. Thissuggested that non-equilibrium lattice vibration of water (equivalent to internal energy) was induced
temporarily in the beginning of FIR or NIR irradiation, but it eventually approached to an equilibrium one,because of cross-relaxation between energy levels of various intramolecular motions. The difference appearedin the beginning of the irradiations could be taken as a characteristic of FIR.

緒ら研究されている。 FIRを強く照射して用いた場

言

合は加熱効果であり、 この場合熱的効果が大きく

近年、 遠赤外線 (FIR) は近縁波長の電磁波に作用するため、 FIR固有の特異的効果が打ち消さ

較べて極めて特異な性質を有するとして注目されれて検証するのが難しいと考えられる。 一方、 微ている。 照射により水や食品の味を良くすること

弱な FIR 照射の場合は、 熱的効果が小さいため、から、 様々な浄水器や家庭用調理器具が市販されこれを常温効果というが、 波長由来の固有の効果ている。 さらに 、 血行をよくしたりガンの治療にの検出が期待される。 FIR波長は水の振動·回転用いられたりと、 ヒトの健康と密接に関わりを持

エネルギーとして吸収され、 遷移エネルギ ー の高っている。 又、 酵素や生体分子などの活性に著しい状態に移る。 即ち、 分子内運動が高い状態に変い影響を与えるとして分子レベルからの研究も活化し温度が上がる。 この時の温度上昇が吸収 した発となってきた。 このようなFIRの様々な分野にFIR固有の波長を記憶し保存されているとするな

於ける効果はいずれも究極的には、 FIRが水の構

らば、 これはFIRの 一つの大きな特異的な性質に

造と物性に影響を及ぼすためと理解されている。

なってもよいと考えられる。 即ち、 同じ温度であしかし 、 これらの特異な効果が本当に存在するのっても熱エネルギ ー の源である様々な分子内熱運か否かは必ずしも明確とはなっていない。 今これ

動のモ ー ドの構成に違いがあってもよいと先験的らの効果を学術的に検証することがこの領域の緊に考えられる。 もしこのような仮定に立つなら急の課題となっている。 筆者らはこのような点にば、 FIRで得た熱エネルギ ー は他の波長の吸収に焦点を当てて研究を開始した。

よって得た熱エネルギ ー とは性質が異なってもよ

このFIRの効果は加熱効果と常温効果の二面かいことが予測される。 したがって 、 この場合、 熱

Mechanism of Thermal Transport of
Bulk Water Absorbed Far or Near In­
frared wave

転の各エネルギ ー 間のエネルギ ー 移動（交差緩Seiji Katayama and Kazuo Kozawa

そこで、 本研究では 、 水の熱伝導に焦点をあててSchool of Pharmaceutical Sciences,
University of Shizuoka

実験を開始した。 まず、 セル中に水を満たしそのの伝導や熱の放熱の仕方 、 並びに並進、 振動、 回和）等にその特徴が現われてもよいと思われる。

一端に電磁波を照射し、 吸収された熱エネルギ ー-9-

が他端へと伝幡する様子を調べた。 両端での昇温

他端(B)の温度変化を観測し昇温曲線を作製し曲線を作成し熱輸送のメカニズムを検証することた。 なお、 セルは図2に示すように径 、 長さの異によって 、 FIR の水に及ぼす特異な性質を議論すなる三種類セル1 (ゅ；50 mm, f ;800 mm)、 セル2ることとした。 さらに 、 熱輸送の過程に於いて熱（ゅ；50mm, f ;400mm)、 セル3 (¢;lOmrn, f ;800mm)の放出の効果が昇温曲線に著しい影響を用いた。 照射線源は 、 遠赤外線として日本軽金を与えるため、 セル周辺への放熱に関わる種々の属（林）製遠赤外線ヒ ー タ ー（セラコンボR) を 、 近

実験条件の寄与についても検討を行った。

赤外線 (NIR) として松下寿電子工業（初製赤外線

2ランプを用いた。 なお 、 それぞれの波長領域は図

エネルギ

ー

実

験

実験は 、 全て室温23.0士0.1

3に示した。 また温度測定には、1/1000℃の精度℃にコントロ ール

された恒温室内にて実施した。 恒温室内では可視にて温度測定が可能なテクノセブン（恥製精密温度測定装置を用いた。

光線その他の迷光の影響をなくすために、 全ての実験は以下の実験条件に於いて実施した。

照明を切って実施した。 さらに電磁波等の影響を①熱伝導に及ぼすセルの形状（径及び長さ）の検除くため、 図lに示すようなアルミ版にて2部屋

討 、 ②熱伝導に及ぼす照射線源の波長依存性の検に仕切られた箱を作製し 、 その内部に水を満たし

討 、 及び、 ③熱伝導に及ぼすセルからの放熱の影

たパイレックス製の円筒形セルを設置した。 セル

響（セル周辺の環境） についての検討。

3内の水が恒温室内の温度と平衡になるま で放置し、 平衡後セルの一 端より垂直に遠赤外線又は近結果と考察

図4は径50 (mm)、 長さ800 (mm) のセル1を赤外線を照射した。 照射直後からの照射端(A)、用いて遠赤外線を照射した場合の照射端 (A)及
因出波線ぽ

1

2

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-Ill俎尽体··-··-…セラコンポR／�,,.砂.. ··-c .,
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電磁波照射システム

0
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1

図1

)
I
．

（
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邑 班 溢庶I廿4i+H面函米ホ

アルミ製箱

L

J 4 5 6

20 30

8 10

波長(µm)

-j

100

0
8

A端

B鈷
L

----1

セル1 ; R;50

r =50

／L=800(mm)

セル2 : R=50

r=SO

L=400

(mm)

セル3 : R=50

r=10

L=BOO

(mm)

図2

0
2

ピ

0
4

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06

―

-,-

。。

4

波長(,,rn)6

I 0

赤外線分光放射符社

ガラスセルの形状及びサイズ

図3

-10-

遠赤外線源及び近赤外線ランプの放射波長特性

水の熱輪送メカニズムと電磁波の影響

び他端(B)の昇温曲線の結果を示したものであれる。 なお、 熱輸送の経路（セルの竿の部分）にる。 A端の温度は 、 FIRJ哨射直後から上昇し、 120

於ける放熱のためA端よりB端の方が低いレベル

分前後に変曲点を持ち、 その後0.3 に漸近するよに現われ曲線の曲率が大きくなった。 又、 変曲点

うな昇温カ

ー

ブを描いた。 一方、 他端Bの温度が現われた理由については、 熱輸送の定常状態

は 、 30 分までは全く温度上昇はみられなかった（熱勾配）に達するまでの時間に関連するものと推が45分後から僅かな温度上昇が始まり、 120分後定 されたが今のところ不明である。

ーブを描

図5は径50 (mm)、 長 さ 400 (mm) のセル2をいた。 この場合も120分前後に於いて小さな変曲用いた場合の A,B 端に おける昇温曲線の結果をからやはり0.2 に漸近するような昇温カ点が見られた。 A端の昇温曲線はFIRの直接的吸示したものである。 A端の温度上昇は やはり、収によ ってもたらされたもの 、 B端の昇温曲線は120分前後に変曲点が現れ 、 セル1よりも高いレ

A端からの熱エネルギ ー の輸送によ ってもたらさ

ベルの温度上昇カ ー ブを示した。 B端の温度はれたものとみることができる。 従って、 A端とB

15 分までは温度上昇がみられなかったものの 30

端の温度差は、 熱輸送に依存して決まると考えら

分頃から僅かに昇温を始め 、 やはり120分前後に変曲点を持ち0.7に漸近するような昇温カ ー ブを0.4示した。 又、 A端とB端の昇温カ ー ブの差は、 僅
゜か (< 0.2 K)であり、 この差は前のセルlの結果に於ける差よりも小さいものとなった。 これら

0.3

゜

ギ ー 供給量が常に 一定であるのに対してサンプル

2

(
x.
)
」＜割 螂 鴫の結果は 、 セル長が短くなれば熱源からのエネル
量が少なくなるため、 相対的にA端の昇温カ ー ブ

0.1

が高いレベルに移ったと解された。 又、 セル長が---0ー 遠A●
遠B

短くなればB 端への熱エネルギ ー の到達量も多くなり AB 間の温度差が相対的に小さくなったと解

100

200

300

400

500

された。

600

時間（分）

図6は径10 (mm )、 長 さ800 (mm)のセル3を

図4 セルを用いた場合の遠赤外線照射によるA端B端
の昇温曲線

〗

500

Aro
/o|
d

400

遠A
迫B

400

500

1
2

300

ー
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200

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遠A
遠B

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）

1.4

5

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1.0

0.0

600

0

100

200

300

600

時間（分）

時間（分）

図5 セル2を用いた場合の遠赤外線によるA端B端の昇温曲線

図6 セル3を用いた場合の遠赤外線によるA端B端の昇温曲線- 11 -

用いた場合の昇温曲線の結果を示したものであて比較検討した。 なお、 線源の波長特性は図3をる。 A端の温度上昇はセル l 、 セル 2 を用いた時参照。 遠赤外線源（セラコンポR)は表面温度67の結果と比べて昇温曲線は極めて大きいレベルに℃で用しヽたため8µmあたりにピ ー クトップを持っ現われた。 これはサンプルの絶対量が少なくなった波長域に於いて実験したことになる。 一方、 近たため 、 及び、 竿部の径が細いため、 後方への熱赤外線ランプは1µmあたりにピ ー クトップを持っの移動量が少なくなり滞留効果が顕著になったた

た波長域に於いて実験したことになる。 これら二めと考えらる。 一方 、 B端は照射直後から極めて種の線源を用いた熱伝導の実験結果は次のように低いレベルの昇温がみられた。 これは、 速い水のなった。

熱伝導係数〔": 612 X 10-JW ・

m

―I

(300

図7はセル1 (径 50 mm、 長さ800 mm) を用い 、

゜K)〕から考えて照射直後から直ちにB端に熱量

近赤外線を照射し、 A端とB 端の昇温曲線を作成が到達していることを意味し、 太い管(50mm)のしたものである。 その結果、 近赤外線を吸収した

場合はB点に到達した熱がさらに拡散してしま

昇温曲線は遠赤外線の結果とほぼ同じカ ー ププロ

い 、 わずかな昇温カ ー ブさえも検出できなくなっファイルを示した。 しかし、 B端の昇温曲線は 、てしまったと考えられる。 又、 A端の温度が高い

遠赤外線による昇温曲線よりも相対的に高いレベレベルにあればB端との温度差が大きくなりB端ルに現われ、 AB 間の温度差が小さいものとなっの昇温曲線が初期の段階から応答したものと解さた。 この結果は、 見かけ上遠赤外線を吸収した熱ブが終始緩慢なレベエネルギ ー よりも近赤外線を吸収した熱エネルギ

ルに保たれたことは 、 管が細いためト ー タルの到一の方が1)熱の移動が多い、 2)経路での熱の達する熱量が少ないこと、 及び 、 管が細いため空放熱が少ない等のことが考えられた。 なお 、 近赤

気への放熱の量が無視出来ない程大きいことなど

外線及び遠赤外線の各線源の波長域，出力及び水のためだと考えられた。

への吸収効率等が異なるため 、 比較に供した昇温れる。 一方、 B端の昇温カ

ー

. ゜K

→

以上の結果は遠赤外帯域の線源を用いた場合の熱輸送であった。 次に近赤外線帯域の線源を用いた場合の熱輸送について調べ、 FIRの結果と併せして作成した。
電磁波を吸収して変換された熱エネルギ ー は照射端(A端） から熱流の流れとして他端 (B端）に順次伝幡されていくが、 この途中の過程に於い0.6てセルから空気層へ熱が逃げる （放熱）。 この放0.5

熱の効果はA端、 B端の昇温曲線に著しく影響を

4
3
2
0
0
0
子し L V割 磁吼（

与えることが予測される。 そこでセル周辺への放熱効果が熱伝導に及ぼす影響について検証を行った。
--0-遠A

図8はセル1を黒フェルトで覆い遠赤外線照射

一---0--近A●
近B

した場合の A端、 B 端の昇温曲線を調べたもので

•

0.1
0.0

曲線はA端の近赤外線の昇温曲線を基準に規格化

i,;;Bある。 フェルト巻のA端は巻かない場合に較べて
0

100

200

300

400

500

大きな昇温曲線を示した。 しかし B 端の昇温曲線

600は額著な差異がみられなかった。 このことからフ時間（分）図7 セル1を用い 、 近赤外線照射後のA端 、 B端の昇温曲線。 遠赤外線の結果と比較するために 、 遠赤外線のデ ー タは近赤外線のA端の昇温曲線に規格化して表示した。

ェルト巻の方が AB 間の温度差が大きいことが明らかとなった。 この結果 、 フェルトは遠赤外線の吸収をよくするように働くこと、 及び、 フェルト- 12 -

水の熱輪送メカニズムと電磁波の影響は試料セルから熱伝導で熱を吸収し、 空気層へ放効果が大きいと判断された。 しかし、 近赤を吸収熱する可能性が高いことなどが推測された。

した熱エネルギ ー は遠赤吸収の場合に較べて、 フ

図9はセルlを黒フェルトで覆い近赤外線照射
した場合のA端、 B端の昇温曲線を調べたものでェルトからの熱の放熱が小さいことが推測された。

ある。 フェルト巻のA端の昇温曲線は巻かない場

図10は発泡スチロ ー ルにてセル1の竿部を覆合のものとほぼ同じレベルのものとなった。 しかって断熱し、 A端、 B端の昇温曲線に及ぼす放熱

し、 B端の昇温曲線は、 フェルト巻の方が巻かなの効果をみたものである。 遠赤外線、 近赤外線いい場合に較べて低いレベルに現われた。 この結ずれの線源による昇温曲線も、 断熱しない場合及果、 フェルト巻きの方が途中の竿部に於ける放熱

びフェルト巻の場合の結果に較べて、 昇温カ ー ブ

0.5

1.0

0.4

0.8
6
4
0
0
X)E V副 佃 鴨
(

2
3
ci
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1JLV割 磁 阿
(
→ー 遠A
●
迅B
王迫Aフ
一遠Bフ

0,1

0.0

0

100

200

400

300

500

--0一 辺A
●
遠B
ー→ 近A
●
近B

0.2

0.0

600

0

100

200

時間（分）

図8 黒いフェルト巻きのセル1を用い、 遠赤外線照射
した場合のA端 、 B端の昇温曲線を示したものである。 比較のため黒フェルトを巻かない場合の結果と併せて表示した。

400

500

600

図10 発泡スチロ ー ルで覆われたセル1を用い 、 遠赤
外線及び近赤外線照射後の昇温曲線。

1.0

0.6

0.5

0.8

200

300

400

4

100

6

子ピ く 割 艇呵
（

0

゜゜

4
3
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fli
〗JlV:,';(---0ー 近A●
近B--0-近A7
● 近Bフ

0.1

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300
峙問（分）

--0ー 遠A●
遠B-D---近A
● 近B

0.2

500

0.0

600

0

1 00

200

300

400

500

600

時間（分）

時間（分）

図9 黒いフェルト巻きのセル1を用い 、 近赤外線照射
した場合のA端 、 B端の昇温曲線を示したものである。 比較のため黒フェルトを巻かない場合の結果と併せて表示した。

図11 発泡スチロ ー ルで覆われた場合の遠赤外線 、 近赤外線照射による昇温曲線の比較。 両曲線は比較のため規格化して表示した。

-13 -の曲率は小さくなり直線に近いものとなった。 こ

分子内運動の遷移によって熱エネルギ ー を得た場のことは、 途中経路に於ける放熱の効果が少くな

合 、 一時的に非平衡な格子振動状態になる。 このったと考えられる。

偏った分子内運動のエネルギーは、 交差緩和し平

図11は近赤のA端の昇温曲線を基準に規格化

衡な格子振動状態へと移行する。 このように考えして描かれたものである。 遠赤外線及び近赤外線

れば、 電磁波照射初期の波長の違いによる昇温曲ーブは初期段階を除き時間線の違いが理解される。 又、 時間の経過ととも

経過とともに次第に 致するようになった。 このに、 系は平衡な格子振動状態に移行するため 、 完

ことは断熱状態では遠赤外線を吸収した熱エネル

全な断熱状態のもとでは初期の異なった励起の仕のA端、 B端の昇温カ一

ギー

も近赤外線を吸収した熱エネルギ

ー

も最終的

には同じ熱輸送状態に到達すると考えられた。 し方には無関係に同じ様式の熱の輸送状態に到達すると理解される。

かし 、 変曲点までの初期過程に於いては遠赤と近4赤との結果に顕著な差異が認められた。 この差異は遠赤の方が近赤によって得た熱エネルギ ー より
熱エネルギ

ー

総

括

以上の結果 、 現段階に於いては 、 必ずしも遠赤の輸送効率が良いことを示唆した。

外線の特界な効果の決定的な検証がなされたとは以上の結果は 、 次のような分子内熱エネルギ ー のいえないが、 周辺の基礎固めがなされたものとしシステムが予測された。 まず 、 ある熱平衡にあるて評価されよう。 今後もこれらの結果をベ ー スに系は 、 熱の源である分子内運動（振動 、 回転、 並

さらに研究を進める予定であり 、 遠赤外線の特異進など）が平衡な格子振動状態にあると考える。

な効果の決定的な検証がなされる日も近いと期待

そこで遠赤外線などの電磁波の吸収により偏った

している。

__/

- 14 -．．

生体膜構造をもつ高分子中の水の構造解析と生体反応の解明に関する研究東京医科歯科大学 医ff! 附材研究所

石

原

一

彦

The amount of plasma proteins adsorbed on a phospholipid polymer having a 2-methacryloyloxyethyl
phosphorylcholine (MPC) moiety was reduced compared to poly (2-hydroxyethyl methacrylate (HEMA)],
poly [n-butyl methacrylate (BMA)J, and BMA copolymers with acrylamide (AA.in) or N-vinyl pyrrolidone
0/Py) moieties having a hydrophilic fraction. To clarify the reason for the reduced protein adsorption on the
MPC polymer, the water structure in the hydrated polymer was examined with attention to the free water
fraction. Hydration of the polymers occurred when they were immersed in water. The differential scanningcalorimetric analysis of these hydrated polymers revealed that the free water fractions in the poly (MPC-co­
BMA) and poly (MPC-co-n-dodecyl methacrylate (DMA)) with a 0.30 MPC mole fraction were above 0.70. On
the other hand, the free water fractions in the poly (HEMA), poly (Ai油1-co-BMA) and poly 0/Py-co-BMA)
were below 0.42. The conformational change in proteins adsorbed on the MPC polymers and poly (HEMA)
was determined using ultraviolet and circular dichroism spectroscopic measurements. Proteins adsorbed onpoly (HEMA) changed considerably but those on poly (MPC-co-BMA) with a 0.30 MPC mole fraction were
almost the same as in the native state. We concluded from these results that little proteins are adsorbed anddo not change their original conformation on the polymer surfaces which possess a high free water fraction.

緒

水の動態や構造を解析することは、 生体反応さら言には生体そのものを理解する上で有効な手段であー

本研究では生体膜類似表面を持つポリマ 材料

る。 一方、 生体を対象とした場合における系の複を用いて、 その周囲に存在する水の構造を解析す雑さがこれらの研究の大きな障害となっているこるとともに 、 タンパク質の吸着、 活性化あるいはとも事実である。 ここでは単純な生体膜のモデル

構造変化の過程を詳細に追跡することにより、 生として、 細胞表面に多いホスファチジルコリンを体分子と材料との反応を理解することを目的とし

極性碁として有する両親媒性の合成高分子を用ている。

い、 その膜内及び近傍の水の状態とタンパク質の生体膜はリン脂質 、 糖質及び細胞に情報を与え機能、 構造変化との相関を見いだす。

ているタンパク質で構成されている非共有結合性

医用デバイスを生体内あるいは生体と接触させの分子集合体であり、 この構造維持には周囲に存て使用する場合 、 血栓形成や炎症反応などデバイ

在する水の状態が極めて重要な役割を果たしていスが生体に与える影響はもとより、 生体がデバイる。 生体膜の表面は細胞の機能発現 、 制御を中心スに与える影響についても充分に考慮しなければとした反応場となっており、 この特異的な生体反ならない。 タンパク質は生体内においで情報伝達

応も水を媒体として進行していることは言うまで及び生理活性物質の産生や運搬など生命の維持にもない。 すなわち、 生体を取り巻く環境において欠かせない重要な役割を担っているが、 一方、 医用デバイスを使用する際には、 タンパク質の吸着

Studies on water sはte in polymer withbiomembrane-like structure andbioreactions on the polymer

ば、 タンパク質の不可逆的な吸着はクロマトグラ

Kazuhiko Ishihara

フィ ー カラムやコンタクトレンズにおける汚れのInstitute for Medical and Dental
Enginnering
Tokyo Medical and Dental University

原因となり、 また血液透析膜や血液ろ過膜などでにより大きな問題が発生することが多い。 たとえは本来の膜透過性が著しく低減し、 物質交換など- 15 -

の機能が充分に発揮されなくなる。 さらに 、 細胞

ニトリルより再結晶して用いた I )o n-プチルメの活性化や好ましくない免疫反応を誘起し、 たち

タクリレ ー ト(BMA)、 n— ドデシルメタクリレ ー

まちデバイスが異物認識を受けることになる。

ト(DMA)、 N ー ビニルピロリドン ( VPy)及び2

従来の医用デバイス材料が血液や血漿と接触すーヒドロキシエチルメタクリレ ー ト (HEMA)は

ると必ずタンパク質の吸着が生じる。 タンパク質

市販試薬を減圧蒸留により精製して用いた。 アク

分子はアミノ酸の重合物であり、 分子内で のアミリルアミド(Mm)は市販品をベンゼンより再結

ノ酸残基の相互作用により血液や緩衝溶液など水晶して用しヽた。 2,2' ー アゾピスイソブチロニト

一定のコンホメ ー ションを維リル(AIBN)はメタノ ー ルより再結晶して用い持しているが 、 界面活性剤や 変性剤の添加によりた。 タンパク質類は市販品をそのまま用いた。 そを溶媒とした系ではの他の溶媒は常法により生成し用いた。

ー

そのコンホメ ションが変化することが知られている。 また、 油ー

水界面に吸着（接触）した場合においても、 著しいコンホメ ー ション変化を起こ2 . 2

ポリマ ー の合成

す。 前者はタンパク質分子内の水素結合の破壊 、MPC とBMA との共重合体(PMB)は対応す

後者はタンパク質分子内の疎水性アミノ酸残基にるモノマ ー をエタノ ー ル中 AIBN を開始剤とし起因する疎水性相互作用のパランスの変化に対応

60℃で反応することにより得た。 反応液を大凪のする。 すなわち、 タンパク質分子を取り巻く環境

ジエチルエ ー テル中に滴下してポリマ ー を再沈殴

が僅かに変化するだけで 、 微妙な分子間力のバラ精製した。 MPCとOMAの共重合体(PMD)、 AAm

ンスで規定されているコンホメ ションの変化が(PAB)あるいは VPy (PVB) とBMA の共重合体生じるのである。 このコンホメ ー ション変化が不も同様な方法で 合成した。 またHEMAを2 ー プロ

可逆的な材料表面へのタンパク質吸着という現象

パノ ー ル中で単独重合した (Poly (HEMA))。 共につながる。 したがって、 本質的にタンパク質と重合体中のモノマ ー ユニット組成は元素分析によの相互作用の弱く、 吸着させない材料により医用り求めた。 ポリマ ー の構造を図lに 、 合成結果をデパイスを作成するか、 表面をこのような材料で表lに示す。

ー

修飾したデパイスを用いなければならない。
研究代表者 らは、 新しい血液適合性高分 子 と し て生 体
膜表面に着目し、 リン脂質構造を有するポリマ

ーを合成した I) 。 このポリマ ー の血液適
合性 を細胞及びタンパク質、脂質などの生体分子レベルで解析していくと 、 優れたタンパク質吸着抑制効果を見いだ
した Z)oTHJ一(CH2-C)3I
9=0

Homopolymer system

Hydrophobic unit

- - - - - -r+
OCH2CH20POCH2CH2N(CH3)3t

THJ

CH2-C后I
C=O
I
O(CH2)nCH3

n=3: BMA
n=ll: OMA

MPC
ーにH2-Cffla­
I
C=O
I
NH2

実

験

試薬の調製

MPCは研究代表者 が確立した方法により合成し 、 アセト

�CH2-CH后

心

CJ:=o

VPy
図1

St「ucture of amphiphilic polymers.

- 16 -

伊3---iCH2-C柑一

AAm

2
2 . 1

一

Amphiphilic copolymer system
Hydrophilic unit

C=O
I
OCH2CH20H

Poly(HEMA)

生体膜構造をもつ高分子中の水の構造解析と生体反応の解明に関する研究

表1

Synthetic results of polymers used in this study

Hydrophilic
monomer

Hydrophobic
monome『

PMBIO

MPC

PMB30

Code

Mole fraction ofhydrophilic unit

Time a)Conversion b)c)
Mw

in feedin polymer

(h)

（％）

Io5

BMA

0.10

0.07

10

40.1

1.3

MPC

BMA

0.30

0.28

10

52.6

2.1

PMDIO

MPC

DMA

0.10

0.12

6

41.)

2.0

PMD30

MPC

OMA

0.30

0.31

6

51.7

3.1

PAB70

AAm

BMA

0.70

0.58

4

30.7

1.8

PVB90

VPy

BMA

0.90

0.81

7

22.9

1.1

Poly(HEMA)

HEMA

1.0

1.0

2

18.7

4.2

a) [Monomer]= 1.0 M, [AIBN] = 5 mM at 60 °C.
b) Polymerization was carried out in ethanol for PMBIO, PMB30 and PMD30, in chloroform/ethanol(3n)for PMDIO, in DMF for PAB70 and PVB90, and in 2-propanol『or poly(HEMA).
c) Determined by gel permeation chromatography with polyoxyethylene standard for the MPC polymers,
with polystyrene standards for PAB70, PVB90 and poly(HEMA).

ポリマ ー 膜の調製と含水膜中の水の解析

牛血漿フィブリノ ー ゲン(BPF)を用 い た。 これ

ボリマ ー を溶媒に溶解して 10wt% 溶液を調製

らをリン酸緩衝液 (PBS 、 pH7.4) に溶解して生2.3した。 これをポリエチレン板上に流延し、 溶媒を蒸発させてポリマ
マ

ー

膜を

一

ー

膜を調製した。 得られたポリ

定重量秤量（乾燥祖量）し、 25 ℃にて体濃度の 1 /10 の溶液を調製した。

図 2 にタンパク質の吸着量と吸着したタンパク質の構造を解析する、 紫外(UV) 一 円偏光二色スペクトル法の測定手順を示す。 ポリ

純水中に浸漬した。 膜を取りだし表面の水分を軽性＜濾紙で拭い直ちに重量（膨潤重量）を測定しマ ー を石英板にスピンコ ー トした。 これをタンパた。 含水率を重量増加を膨潤重量で除することにク質溶液に浸漬し、 37 ℃にて 60分間放置した後、より算出した。

PBS でリンスした。

(CD)

直ちに 350nm から 205nmの範平衡膨潤に達した膜を 定重量熱分析用のアル囲で CD スペクトル測定（日本分光、 J-720W) を

ミニウム容器に入れ、 示差走査熱量計 (DSC、 セ行った。 測定は5回繰り返した。 その後、 石英板

一

イコ

ー

電子、 DSC-100) にて一

50 ℃より 50 ℃までの範囲で冷却速度 2.5 ℃／分にて熱量の変化を測定した。

nm の吸光度を測定した。

0 ℃付近の熱量変化を純水の値と比較の含水率を 0.36 に一ー

平均分子楕円率は CD スペクトル及びUVスペ

膜

クトル測定の結果より算出し、 タンパク質の二次定とし、 同様の測定を行っ構造の尺度となるa — ヘリックス含量はポリ(L

して自由水の分率を求めた。 さらに、 ポリマーリジン） の値を参考にして計算した。

た。
2.4をUV分光計（日本分光、 V-560) にセットし 280

3タンパク質吸着量の測定と吸着したタン

結果

表 2 にポリマ ー 膜の含水率を示す。 MPC ポリ

パク質の二次構造の解析
タンパク質として牛血清アルブミン(BSA)及び

マ ー の場合、 MPC ユニットの増加にともない含- 17 -

Polymer coatingby solvent
evaporation method

Proteinadsorption

Rinse withbufferedsolution

Measurement with
spectroscopy
Amount of adsorbed
protein

□巴］
□王］

↑

Conformation ofadsorbed protein

Test polymer
Buffered solution\
Quartz plate
Protein solution(40 x 9 x 1 mm3)
図2

Procedure for measurement of amount and conformation of protein adsorbed on polymer surface by UV-CD method
表2 Characteristics of hydration state of polymers and protein adsorption on polymer surfaces.

Poly(HEMA)

PMD

PMB

PAB70

PVB90

0.70

0.36

0.41

0.70

0.42

0.39

0.62

0.42

0.31

10

30

10

0.40 c)(0.39)

0.23

0.84

0.19

0.34 c)(0.34)
0.28

0.25

0.84

0.22

BSA

1.7士0.7

0.50士0.2*

0.22土0.1:. 0.51士0.2*

0.3 5士0.1:. 1.3士0.2 **1.8士0.3 **BPF

3.4士0.1

2.0士0.5*l.l 士0.2:* 2.0 士0.4*

1.2 士0.3:* 23士0.4*

2.6士0.3 *

Heq3)

30

Free water fraction
at Heqat H =0.36

0.69

Equilibrium amount ofadsorbed protein (µg/cm2)b)a) Heq = (weight o『water in the polymer membrane)/ (weight or polymer membrane saturated with water) at 25 ° C.
b) Initial concentration of proteins in PBS : [BSA]= 0.45 g / dL, [BPF] = 0.03 g / dL.
c) The values in literature (ref. 34).
The values indicated here are mean土S.D. for three experiments. *p<0.01 vs poly((郎MA), **p<0.01 vs PMBIO.

水率が増加することがわかる。 また 、 AAmやVPyあった。 このピ ー ク面積よりポリマ ー 膜中の水のユニットと比較して MPC ユニットの親水性が大融解に起因する熱鼠を求め、 純水の値と比較しきいことが確認できた。

て、 膜に含まれる自由水含率を求めた。 結果を表ー 膜のDSC曲線を示す。

2 に示す。 MPC ボリマ ー の自由水含率は他のポ0℃付近に氷の融解に起因するピ ー クが見られ

リマ ー に比較して大きいことが明らかとなった。

図3に含水したポリマ

20℃から 一 40℃の範囲に

タンパク質の吸着量に関して結果を表 2 に示す。

クが認められる。 一方 、 MPC

MPC ポリマ ー では Poly (HEMA)に比較してタる。 PABやPVB では
゜
ブロ ー ドな発熱ヒ ー

ポリマ

ー

一

では 0 ℃付近の発熱ピ ー

クがシャ

ー

プで

ンパク質 の吸着凪が少ない。 MPC ユニットが多- 18 -

生体膜構造をもつ高分子中の水の構造解析と生体反応の解明に関する研究

図 5 にタンパク質の二次構造の変化についてa

くなると吸着量の低下が見られた。
図 4 に PBS 中での BSA 及びポリマ

着した BSAの CD スペクトルを示す。

ー—ヘリックス含量に着目してポリマ ー 間で比較し表面に吸PBS 中に溶た。

はそれぞれ54% と 19% であった。

存しているBSAでは222nmに大きな負の分子楕円PMB30 に吸着している BSAでもほぼ同じ CD スペクトルが見られた。 MPC ポ

リマ

した BSA 及び BPFのa ヘリックス含量は PBS 中

でのそれぞれの値と有意差がない。 一方、 Poly

において MPC ユニット組成が小さくなる(HEMA) では有意に低値を示した。 このことはと 222 nm の負の楕円率が 0 に近くなり、 さらにPoly

PMB30 に吸着—率が観察される。

ーPBS 中の BSA 及び BPF のa — ヘリックス含量

大きな構造変化が生じていることを示している。

(HEMA) ではこの領向が顕著になった。

1.0

。

(1
ow p ap/zW :>l!ap �01 )A

Free water region

Intermediatewater region

弓 ndm a l801-

3P
E 』;
nn ox3.

-25-50-·BSA in PBS(Native)- 3· 0
2 os

240

220

Wavelength (nm)

260

10

。

。

10

2

H ·Xl
JcO:>X!l.)$ ） JU .))n
日 ilJUO:>X!(ilH,

40

( S

20

BPF

。

50

30

*p > 0.01 vs Native**p < 0.01 vs poly(HEMA)

30

BSA

＊
＊＊

PMB30 ヽ�

図4 CD spectra of BSA adsorbed on polymer surface
and in PBS

DSC curves of hydrated polymer.

60

i
、9、

·-:、-�­250Temperature (0C)
図3

｀ �-�--�

\/Native

PMDIO

PMBIO

Poly(HEMA)PMB30

Native
PMD30

Polymers

PMB10

Poly(HEMA)

PMD10
PMB30

PMD30

Polymers

図5
er -Helix content of BSA and BPF absorbed on polymer surface and in PBS. •represents no significant difference
versus the value for protein in PBS (Native) (p>0.01) and ..represents significant difference versus poly (HEMA) case(p<0.01).

-19 -

4

考

いる様子が見られた。

察以上の結果は MPC ポリマ ー とタンパク質との血液適合性の表面として理想的で、 模範となる相互作用が極めて弱いことを強く表わしている。

ものは血管内皮表面と考えられる。 正常な血管内細胞成分の粘着、 活性化及び凝集はタンパク質

皮上では、 細胞はもとよりタンパク質の吸着、 活

吸着層を介して細胞が材料の情報を得ることが引性化は生起しない。 この構造を人工材料の表面にき金となって生じる。 MPC ポリマ ー 表面ではタ構築できれば、 新しい血液適合性材料として期待

ンパク質吸着を効果的に減少させることができるできる。 研究代表者は、 このような観点から、 リために細胞粘着や活性化を抑制したものと考えら

ン脂質極性基をもつ MPC と疎水性のメタクリル

れる。

酸エステルあるいはスチレンとの共重合体を合成

一般に表面自由エネルギ ー の低いまたは界面自した ！ ）。 この MPC ボリマ ー は溶媒に可溶である

由エネルギ ー 差の小さい材料表面では生体適合ために、 従来の医用デバイス表面に被覆すること性、 抗血栓性あるいはタンパク質吸着抑制効果がが容易にでき 、 また血液と接触した場合において発 現 す る と いわれている。 そ こで親水性甚をも表面での血液細胞の粘着や活性化を効果的に阻AAm、VPy及び2 ー アクリルアミド ー 2 ー メチルプ

止することが見いだされている1. 4)。

ロパンスルホン酸 (AMPS) ユニットとした BMA

材料が血液と接触した際に細胞成分が材料と相互作用する前に脂質やタンパク質のような生体分
子成分が表面に吸着し、 この吸着層を介して血栓形成へと進行する。 したがって、 血液適合性材料

共重合体を合成し、 Poly (HEMA) も含めて血液細胞の粘着及び血漿からのタンパク質吸着を含水率がほぼ等しい MPCポリマ ー と比較検討した 5 )0

その結果、AAmや VPy ユニットを親水性基としを設計する場合において、 なるべく血液に近い状た場合はタンパク質の吸着及び血小板の粘着、 活

態からの生体分子成分と材料との相互作用につい性化も著しく起こることがわかった。 AMPS共重合体はヘパリン様のスルホン酸基があり負電荷表て検討することが重要となる。
これまでに MPC ポリマ

ー

ヘのタンパク質吸着について検討してきている叫 MPC ポリマーが面であることから、 良好な血液適合性の発現が期待されたが、 血液細胞の粘着はある程度抑制する

ヒト血漿と接触した際のタンパク質吸着量及び吸ものの、 タンパク質の吸着が多いことが明らかと

着タンパク質の種類をラジオイムノアッセイ法でなった。 一 方、 MPC ポリマ ー ではタンパク質吸解析した結果、 親水性表面であるガラスや疎水性表面であるポリ (EMA) (PBMA) に比較してMPCポリマーびフィブリノではアルブミン、 y グロブリン及ーー

着及び血液細胞の粘着のいずれも効果的に抑制していた。 このことは材料の血液適合性が表面自由エネルギ ー では議論できない事例である。

ゲンなどの主要タンパク質のみな以上の結果より、 MPC ポリマ ー 表面ではタン

らず微量ではあるが血栓形成に重要な役割を果た

パク質の吸着、 積層化が効果的に抑制されることしている凝固因子 、 補体系 、 細胞接着因子などのが明らかにされた。 これは MPC のホスホリルコ

吸着も抑制することを見い出した。 金コロイド粒
子標識抗体法により特定の吸着タンパク質の吸着

リ ン 基 の親水性に起 因 す る 効果と 考 え ら れ 、

MPC ポリマ ー とタンパク質との相互作用が弱い

分布状態を走査型電子顕微鏡にて調べた。 MPCことを示している。

ポリマ ー 上ではいずれのタンパク質の吸着も少な

水溶性ポリマ ー 濃厚水溶液中の水の状態をポリ

く、 吸着している場合でもまばらであることが認

マ ー 鉗に強く水和した結合水 、 バ ルク中の水と同められた。 これに対してガラスや PBMA では多じ自由水及びそれらの中間水（弱くポリマ ー 銀に一

くのタンパク質が吸着し、 さらに 部が凝集して相互作用している状態）に分けて DSC により解- 20 -

生体膜構造をもつ高分子中の水の構造解析と生体反応の解明に関する研究析してみたところ 、 同じ含水率の溶液でもポリマ性基が集合し、 高度に配向している表面では生体ーの種類によりこれらの分率が大きく異なること

反応を完全に抑えることができる可能性が示唆さが見いだされた。 その結果 、 MPCポリマ

ではれた。 この知見は今後の人工臓器、 医療デバイス

他の親水性ボリマ に比較して自由水含率が極め

あるいはバイオサイエンス（タンパク質工学 、 遺高＼ヽことがわかった。 タンパク質の吸着はタンパ

伝子工学 、 脳の機能解明など）用のデバイスを製

ク質の持つ結合水と材料表面の結合水の交換反応

作する材料を作る分子設計概念として重要となる（共有化反応）を伴う 、 いわゆる疎水性相互作用

であろう。

ー

ー

が重要な役割を果たしていると考えられているが 、 材料側に結合水がないまたは少ない場合には文交換する水分子が存在しないことにより、 タンパ

1) Ishihara K, Ueda T, Nakabayashi N,: Prepa­

ク質分子はあたかも水溶液中に留まっているかの

ration of phospholipid polymers and their prop­

ような挙動をとる。 すなわち 、 表面への吸着が起

erties as hydrogel membrane, Polym.]., 22, 355-

こり難いものと考えられる。 従来、 MPCポリマ

献

360 (1990).

ーのように親水性にもかかわらず結合水を持たな

2) Ishihara K, Ziats NP, Anderson JM, et al., :いポリマ ー は全く知られておらず 、 MPCポリマ

Protein adsorption from human plasma is re­ーの特異性が示された。

duced

5

結

on

ph o s p h o l i p i d p oly m e r.

].Biomed.Mater.Res., 25, 1397-1407 (1991).

論3) Ishihara K, Oshida H, Ueda T, et al., :ー

Hemocompatibility of human whole blood on

は 、 タンパク質との相互作用が極めて弱く、 例え

polymers with a phospholipid polar group andタンパク質と接触している場合でもタンパク質のits mechanism, ].Biomed.Mater.Res., 26, 1543-

構造変化を引き起こさない性質を持つことがわか

1552 (1992).

生体膜表面を模倣して合成したMPCポリマ

ーの生体適合性 （生体4) Ishihara K, Hanyuda H, Nakabayashi N, :Syn­に優しい）の要因であると考えられる。 MPCポ

thesis of phospholipid polymers having a ure­った。 これがMPCポリマ

リマ のタンパク質吸着 、 構造変化抑制効果には

thane bond in the side chain as coating material

水の構造が天然の状態いわゆる自由水が多いため

on segmented polyurethane and their platelet

であると結論できる。

adhesion-resistant properties, Biomaterials, 16,ー

細胞膜（生体膜） 表面で生物は生命維持のため

873-879 (1995).

の反応を行う場合が多い。 この時に非特異的な反5)上田智子 ， 石原 一彦 ， 中林宣男，：リン脂質応が起こると生命維持が危うくなる。 すなわち 、極性基を親水性甚として有する高分子の血液細胞膜を構成するマトリックスであるリン脂質極適合性，高分子論文集 ， 48, 289-294 (1991) .

- 21 -

両親媒性分子が構築する超分子の構造と機能性に関する研究
名古屋大学大学院

理学研究科物質理学専攻

今

東洋子

栄

The surface pressure-area (汀-A) isotherms of dioctadecyldimethylammonium chloride (2C1sDAC) anddioctadecyldimethylammonium cinnamate (2C1sDA ・ Cin) were measured, and their time dependence was
examined. The surfaces of Langmuir-Blodgett films of 2C1sDAC and 2C1,DA·Cin were observed by atomic
force microscopy (AFM). Then the location and effect of cinnamate anions for molecular organization on
Langmuir monolayer of 2C1•DA were discussed. Just after the preparation, cinnamate ions bind on hydrophilic
surface of 2C1•DA monolayer, by forming ion pairs with 2C1sDA cations and by directing aromatic groups
toward the interior of water subphase. When Langmuir film is maintained during long time at a constantsurface pressure, cinnamate ions are intercalated into monolayer, since aromatic groups penetrate intohydrophobic interior of monolayer.

緒

anti-HH異性体の生成は、 ミセル上よりもむし

言ろベシクル上で好んで進行する 4 、 6·8) 。 このこと

両親媒性分子は 、 条件に 依存して色々な種類のは 、 珪皮酸が光二量化反応に適した状態 でベシク分子集合体を形成する。 溶媒中で自己集合した分

ルのラメラニ分子膜内に配列していることを示唆

子集合体は、 化学反応のマトリックスとして有用する。 両親媒性分子による類似の二分子膜配列であることが知られている！）。 珪皮酸のような芳は、 ラングミュア ー ブロジェット (LB) 膜製膜法

香族不飽和カルボン酸は、 両親媒性分子の分散系によっても構築 できる。 ラングミュア法によって内 で光を照射することによって反応して二量体を水面上に配列した単分子膜を固体基板上に累積す生成する叫二量体の4種の 異性体のうちで 、 主

るとき、 繰り返し単位を持つラメラ構造が生成さにanti-head-to-head (HH)とsyn-HHがそれれる。

ぞれミセル 、 逆ミセル溶液中で形成される 3-5)

マトリックスとして用いられる可能性があるけれ

0

光二量化の反応効率と立体化学的選択性は 、 反応マトリックスとしての分子集合体上での珪皮酸

ども、

ベ

シクルニ分子膜に類似のこの構造は反応

LB 膜または他の薄膜上 での光二量化の報

告は究めて少ない。

単量体の吸着と組織性に関係する。 珪皮酸単量体

この研究においては、 二鎖型陽イオン性両親媒

は、 陽イオン性両親媒性分子と静電的に結合する

分子 である塩化 ジオクタデシルジメチルアンモニと同時に集合体内に貰入する。 そのとき 、 分子集

ウム(2C1sDAC)と珪皮酸ジオクタデシ）レジメチ

合体の表面近傍に珪皮酸が存在する状態に3種のルアンモニウム (2C1sDA·Cin) のラングミュア

4

可能性がある \ anti-HHとsyn-HH異性体は、膜について研究した。 表面圧 一 面積(rr-A)等

水 ー集合体界面の同じ側に結合した珪皮酸イオン対

温線の時間依存性を調べた。 さらに 、

2C1sDACと・間での反応によって形成されるはずである1、4)。

2C18DA CinのLB膜を構築し、 原子間力顕微鏡

Structure and F u n c t i onality o fSupramolecules Constructed by
Amphiphiles(AFM)で観察した。 2C18DA単分子膜上での珪皮
酸イオンの状態を議論した。

2

Toyoko lmae
Department of Chemistry, Faculty of
Science, Nagoya University

実 験

2C1sDAC は東京化成工業株式会社から購入した。 2C1sDA·Cinは名古屋大学高木克彦助教授か- 22-

両親媒性分子が構築する超分子の構造と機能性に関する研究

ら寄贈された。 他の試薬は市販品をそのまま使用

特記すべきこと は 、 一定の表面圧に保った時、した。2C18DACと2C,sDA·Cinをクロロホルム

2C,sDA ・ Cin単分子膜の表面積が時間とともに増に溶解して1 -2mg/ cniの溶液を調製した。 水に加することである。 平衡は 30 時間後に達した。

等モルの珪皮酸と水酸化ナトリウムを溶かして珪2C,sDAC単分子膜に対してはrr -A等温線の時

皮酸ナトリウムのlOmM水溶液を調製した。

間依存性は認められなかった。 前者では 単分子膜

表面圧測定と LB 膜生成は LB 膜製膜装置（日を構成する分子が再配列するのに対して、 後者で電子株式会社）を用いて行った。

は 再配列は起こらないことを意味する。 平衡状態

2C,sDACと2C18DA·Ci n のクロロホルム溶液をに達した2C,sDA・ Cin単分子膜を圧縮すると、 r

10 、 25、 または35℃の温度に保った水面上に展開-A等温線は 平衡前の等温線と較べてほぼ2倍にした。30分間放置して溶媒を蒸発させた後 、 表面

膳矧長した。

本レ

ー

ザ

ー

一

定速度で圧縮しながら表面圧を

雲母基板上に移し取った2C,sDACの 単分子層計測した。 表面圧を10または25mN/mに保ってLB 膜をAFMで 観察した写真を図2に示す。

おき、 雲母の新しい僻壊面を垂直浸梢法により上

lOmN/mの表面圧で調製した 単分子膜は4-8

昇の後下降することによってラングミュア膜を雲Aの高低差をもつ粗い表面を示した。 ただし、 こを 10 111111 / minの母基板に移し取った。 単分子陪およびY型3分子の高さは 2C18DACの分子長と較べると非常に低層累積膜を準備した。 LB 膜は 3 時間以上真空中い。 このことは アルキル鎖がすべて伸びているので乾燥した。

ではなくランダムに屈曲していることを示唆して

原子間力顕微鏡観察には AFMN anoScopeIIIいる。25mN/mで調製された膜のAFM写真で（デジタルインスツルメンツ株式会社）を用い、は、 粗い表面と共存して最大8 Aの高さの平坦部

タッピングモー

ドにより空気中室温で行った。
ーが存在した。 平坦部表面の凹凸はたかだか2-3

ンチ

Aであるので 、 平坦部は主として伸びたアルキルップを使用した。LB膜の表面粗さおよび垂直距

鉗を持つ分子によって構成されていると推察でき

離は断面分析によって見積もった。

る。 しかしながら、 表面の より詳細なAFM観察

280 -410Hzの周波数を持つ結晶性シリコ

3結から、 平坦部であっても分子の規則的な二次元配果列には至ってしヽないことが明らかとなった。

2C1sDACと2C1sDA·Cinの展開単分子膜の表
面圧r,:を分子当たりの表面積Aの関数として図l80に示した。2C1sDACの 単分子膜は液体状態のみをとることが膨張したr,: 一A曲線から言及できる。
2C1sDAC分子が占める面積は通常の二鎖型両親媒性分子の占有面積よりも大きかった。
溶媒を蒸発した直後の2C1sDA・Cinの ラングミ

60

＾�

z 40
ヽ
E

•

20

゜゜

ュア膜のr,: 一 A等温線は 2C1sDACの曲線と似ていたが、 崩壊圧は2C1sDA・ Cin単分子膜の方が高かった。 珪皮酸イオンは2C1sDA単分子膜の親水表面に塩素イオンよりも強く吸着す る の で 、
2C1sDA ・ Cin単分子膜は静電反発が抑えられた結果 、 高い表面圧であっても安定であると解釈でき
る。

75

150

225

300

A (A'/mo I ecu I e)

図1 The re -A isotherms of 2C1 8 DAC and 2C 18 DA·
Cin monolayers on water subphase at 25℃ ......'
2C 18 DAC;
, 2C 15 DA ・ Cin (just after preparation);
11111111111111 , 2C 18 DA·Cin (afte「aged for 30 hrs). Allows
indicate the path of equilibrium process.

-23-

図2 AFM photographs of monolayer LB f ilms of
2C18 DAC tansferred on mica at surface pressures of
1 O (upper) and 25 (lower) mN m-1 at 25℃.

図3 AFM photographs of monolayer (upper) and three­layer (lower) LB films of 2C18 DA ・ Cin tansferred on mica
at a surface pressure of 25 mN炉at 25℃

ニ・

図3は平衡に達した後に25mN/mで調製した:2C18DAC

2 C1sD A·Cinの単分子膜と3分子層累積膜のAFM 写真である。 単分子膜は10 - 17 A または〗 10 エl O mN /m

30 A の高低差を持つ粗い表面を示した。 30 A の

高さは伸長した分子長と 一致する。 単分子膜の表面は2C1aDAC の膜表面よりも粗いけれども 、 3層膜の表面（最高58 A の高低差をもつ）はもっMICAと粗かった。

4議r論

rr -A等温線とAFM写真に基づいて 、 雲母上の2C1sDAC 単分子膜の分子配列を推定し、 模式
的に図4に表わした。2C1sDAC分子のアルキル鎖は低い表面圧では基板に平行に存在しており 、 高い表面圧では基板面に垂直に配列して平坦な表面

,-sA

,,
V

2 5mN /m

MICA

図4 Sc h ema tic r e p r e s e n tat ion of mol e c ular
arrangement in monolayer LB f ilms of 2C 18 DAC
tansferred on mica at surface pressures of 1 O and 25
mN m-1 at 25℃.

-24 -

両親媒性分子が構築する超分子の構造と機能性に関する研究を持つ膜を形成する。面内での分子の二次元的な親媒性分子の単分子膜中に挿入されているのでは秩序性は見られなかった。陽イオン性の2C1sDAC

なく 、 単分子膜の親水表面上に静電結合して い分子は、 荷電した親水基間の静電反発力のゆえる。このとき 、 珪皮酸イオンは2C18DAイオンとに 、 水面上にむしろ広い距離を保って配列していイオン対を形成して芳香環を水面内に向けて配列る。結果として、 汀-A等温線は膨張膜の挙動をしている。 この種のイオン対構造はクロロホルム

示し、 単分子膜は低い圧力で崩壊する。膨張膜で中での構造つまり珪皮酸イオンと2C1sDAイオン

一

部屈曲 し て い る で あ ろう 。

との イオン対構造を反映している。この状態でAFMで観察された4-SAの高低差は伸びたア

LB膜を雲母上に転移することはできなかった。

ルキル鎖と屈曲した錯との長さの違いである。そおそらく珪皮酸イオンの疎水的な芳香環が親水的れゆえ、 イオン性の2C1sDAC分子間の強い静電な雲母表面に付着しにくかったと考えられる。ラ

反発力は 、 アラキジン酸膜やオクタデシルジメチ

ングミュア膜が圧縮されるとき、 同じ配列は高い

はアルキル鎖はルアミンオキシドのアニー

リング膜9)よりも粗

表面圧でも保持される。しかしながら 、 もし膜が一い LB膜表面を生じる。

定の表面圧に保たれるとき 、 珪皮酸イオンは長Evansら 10 、 II) は有機溶媒に溶解した2C1sDA分

時間の間に単分子膜内に挿入する（図5右下）。

子を雲母表面に吸着させ、 AFMによって観察しそのとき、 占有面積は約2倍に増加する。珪皮酸た。そのような単分子膜では、 分子は規則的に配イオンの再配列によって2C18DA・ Cin分子の初期列した構造を形成した。このとき得られた分子占配列において生じた分子配列上の不利が緩和さ

有面積(51 A)はこの研究での2C1sDACの面積

れ、 水 面には親水基が配置する。

よりも小さかった。 このことから吸着分子はラン

単分子膜への珪皮酸イオンの挿入は別の実験に

グミュア膜よりも密に配列していることが明らか

よっても証明された。2C1sDAC単分子膜を調製しとなった。吸着過程において 、 両親媒性分子の陽た後に過剰な珪皮酸ナトリウムをトラフ内の水にイオン性親水基は負に荷電した雲母表面と静電的添加し 、 ;r -A等温線の時間依存性を一 定表面積に結合しているので、 両親媒性分子は雲母の陰イで調べた。平衡（約30時間）後の;r -A曲線はオン性電荷の分布と同じ配列をとる。この状況で平衡後の2C1RDA·Cinの曲線と一 致した。この結は、 水面上のラングミュア膜で起こるような親水果は、 珪皮酸イオンが2C1sDAイオンとまず静電

基間の静電反発は起こらない。

的に結合し、 それから単分子膜内部に貫入するモ

Evansら 10) はまた25- 50℃での2C1sDA単分

デルと 一 致する（図5右）。

子膜中の分子配列の温度依存性を研究した。液晶

図6に平衡後の2C18DA·CinのLB膜中での分ーゲル転移温度は25と 50℃の間にある。つま子配列を図示する。珪皮酸イオンが挿入された後り 、 分子は25℃では規則的に配列しているのにの単分子膜では、 疎水領域に十分な空間があるた

対して、 50℃では無秩序である。この事実によっめ、 伸長したアルキル鎖が屈曲した鎖と共存すて、 ラングミュア膜内の2C1sDAC分子の無秩序る。結果として、 膜表面は粗くなる。単分子膜にな配列はアルキル鎖の融解の結果ではなく親水基おいて観察された30A高さは伸びたアルキル鎖間の静電反発によるとした前述の結果を支持すを持つ分子の長さに相当するのに対して、 屈曲しる。

たアルキル鎖を持つ分子の長さは13-2 0Aであ;r-A等温曲線が似ていることから、 調製直後る。 3層LB膜の高低差が 58 Aであることから、の単分子LB膜中の2C1sDA ・ Cin分子は2C1sDAC

平均の単分子層厚は19 Aである。この高さは伸分子とよく似た配列をとると推定できる。分子配びた分子の長さよりも短い。このことは両親媒性

列を図5左に模式的に示した。珪皮酸イオンは両分子が相互貫入した状態で配列していることを示

-25 -

air
air

water

NaC1n aq.

�

6 6 6

t=3 0 h4

↓ compress

WWW

いd C\ ・
A)

0- 6

1t=30hy��-��↓ compress

"'

t=30h

(

二： ZC13DA.,fJ ベ,,0〇—● : Cin

□5OII

図5 Schematic representation of time dependence of molecular arrangement in monolayer of 2C18 DA·Cin on watersubphase at 25℃ .
monolayer

30A

唆している。
水中に分散した2C18DACベシクル上での珪皮MICA

酸の光二量化において生じる可能な4種の二量体のうち、anti- HH 型二量体がより豊富に形成される 4 )。anti- HH 型二量体の形成は二つの珪皮酸分子が平衡に配列したときに可能である 3 、 4 ) 。
そのような配列は、珪皮酸分子がいずれもベシク
ル表面に結合したときまたはベシクル内部に貫入58Aしたときに生じる。後者のモデルはアルキルジメ
チル アミンオキシドベシクルに対して確認されている 7 ) 。現在の仕事では 、 2C1sDAラングミュア
単分子膜内に珪皮酸が挿入することが明白になっMICAた。ベシクル内での2C1sDA分子の配列に似て 、二つの珪皮酸分子が平行配列していることがこの事実によって支持された。

図6 Sc hematic representation of moleculararrangement in monolayer and three-layer LB films of
2C,0DA·Cin after equilibrium tansferred on mica at asurface pressure of 25 mN m- 1 at 25℃.

- 26 -

両親媒性分子が構築する超分子の構造と機能性に関する研究

引用文献

Cyclodimerization of Cinnamic Acids Included

1)

in Surfactant Amine Oxides. Mo!. Cryst. Liq.

Kalyanasundaram, K. Photochemistry inMicroheterogeneous Systems; Academic Press,

Cryst. 1996, 227, 135-138.

Inc., Orland, Florida, 1987.

7)2) Usami, H.; Takagi, K.; Sawaki, Y. Clay­Y.; Furusaka, M. Small-Angle Neutron Scattering

Inclusion Photocyclodimerization: Intercalation

Investigation of Supramolecular Assemblies inand Migration of Stilbazolium Ions. J. Chem. Soc.

Ternary Systems of Alkyldimethylamine Oxide/

Faraday Trans. 1992, 88, 77-81.

Cinnamic Acid/Water. J. Colloid Interface Sci.

3) Takagi, K.; Itoh, M.; Usami, H.; Imae, T.;

1996, 180, 98-105.
8)

Sawaki, Y. Organized Photodimerization of

Okamura, H.; Imae, T.; Takagi, K.; Sawaki,

Imae, T.; Kakitani, M.; Kato, M.; Furusaka,

Unsaturated Carboxylates. Selectivity Control by

M. Effect of Organic Additives or Counterions

Normal and Reversed Micelles. J. Chem. Soc.

on the Supramolecular Assembly Structures

Perkin Trans. 1994, 2, 1003-1009.

Constructed by Amphiphiles. A Small-Angle

4)

Neutron Scattering Investigation. J. Phys. Chem.

Imae, T.; Tsubota, T.; Okamura, H.; Mori, O.;

Takagi, K.; Itoh,M.;

1996, 100, 20051-20055.

S awaki, Y.

Photocyclodimerization o f Cinnamic Acid o n a9)Mori, O; Imae, T. Atomic Force Microscope

Reaction Matrix: Structural Effect of Molecular

Observation of Monolayers of Arachidic Acid,

Assemblies Constructed by Amphiphilic

Octadecyldimethylamine Oxide, and Their

Compounds. J. Phys. Chem. 1995, 99, 6046-6053.

Mixtures. Langmuir, 1995, 11, 4779-4784.

Imae, T.; Mori, O.; Takagi, K.; Itoh, M.;

10) Tsao, Y.; Yang, S. X.; E v a ns, D. F.;

S awaki, Y. Self -Assembly F ormation o f

W e n n e rstrom, H. Interactions b e tween

Amphiph i l i c Molecules M i x e d with

Hydrophobic Surfaces. Dependence on

Photoreactive, Aromatic Unsaturated-Acids:

Temperature and Alkyl Chain Length. Langmuir

Examination by Light Scattering. Colloid Polym.

1991, 7, 3154-3159.

5)

11)

Sci. 1995, 273, 579-583.
6)

Takagi, K.; Nakamura, T.; Katsu, H.; Itoh, M.;

S a wa k i , Y.; Ima e , T . P h o t o c h e m i c a l-27 -Liu, Y.; Wu, T.; Evans, D. F. Langmuir 1994,

10, 2241.

光学活性化合物合成を H 的とする新規不斉触媒及び新規不斉触媒サイクルの開発研究
早稲Ill大学 理工学部

中

田

雅

久

Synthesis of some asymmetric diamines and diphosphines and examination of their utility as ligands aredescribed. The complex prepared in situ by the asymmetric ethylenediamine derivative and Cu (OT02 wasfound to catalyze Diels-Alder reaction of cyclopentadiene with an acrylic acid derivative to afford the adducts
in 99% yield (endo/exo=3.5/1, 82%ee (endo)). The absolute configuration of the major product was detenninedby the comparison of its specific rotation with the reported value. The determined structure of the adductsuggests that the complex formed by the asymmetric ethylenediamine derivative, Cu (OT恥and an acrylicacid derivative exists as a tetrahedral complex. Diels-Alder reaction of cyclopentadiene with an crotonic acidderivative was also catalyzed by the asymmetric catalyst to afford the adducts in 47% yield (endo/exo=8.l/1,
72%ee (endo)). Aldol reaction of asilylenolether with hydrocinnamaldehyde was catalyzed by the asymmetriccatalyst, but the product showed no optical activity. Glyoxylic acid derivative is now tested to react withsilylenolether, because the derivative will act as a bidentate ligand. Asymmetric catalyst based on a diamine
ligand effective on Diels-Alder reaction has not been reported, therefore spectroscopic study on the asymmetriccatalyst is now under investigation

緒の合成が行えれば 、 省資源、 しいては環境問題に言も有効であり、 不斉炭素の増殖という点から生産

光学活性化合物は、 香料、 医薬品、 強誘電性液

的にも意義は大きいと考えられる。

晶等の素材として益々その付加価値が認識されて2きている。 しかし、 現在の光学活性化合物合成上

実

験

の問題点を考えると、 原料入手の問題と複数の不生体高分子（ペプチド）である酵素と比較して斉炭素の構築の問題が挙げられる。 数ある方法論

不斉触媒は低分子であり 、 高選択的反応を実現さの中でも不斉合成法は所望の絶対配置を有する光せるためには効果的に不斉環境を設定しなければ

学活性化合物を任意に合成でき、 上記二点の問題ならない。 すなわち 、 予想される遷移状態間の エに対処できる優れた方法であるが 、 多くの場合、

ネルギ ー 差を大きくするための工夫、 反応場の設

基質と等モル以上の不斉源を必要とし、 その着脱計が必要となる。 この目的には、 基質と反応剤をが不可避で工程数が増加する点、 またそれに伴う引きつけ、 接近させる中心金属イオンの存在が不省資源問題に不満が残る。

可欠である。 金属イオンには大きく分けてアルカ

不斉合成法の長所を失わず 、 また不斉源の着脱

リ金属に代表されるハ ー ドな金属 、 貴金属に代表を要しない触媒量の不斉源を用いた 、 酵素反応をされるソフトな金属がある。 そして、 前者は酸凌ぐ様な不斉触媒反応が開発できれば理想的であ素、 窒素原子等と、 後者はリン 、 硫黄原子等と親る。 そうした不斉触媒反応により光学活性化合物

和性が強い。 従って、 ハー ドな金属イオンと光学活性アルコ ー ル 、エ ー

テル、 アミンなど、 ソフト

Research on Nave! Catalyst a n dCatalysis for the Synthesis o f Chiral
Compounds

スルフィドなどの組み合わせが安定な不斉触媒をMasahisa Nakada

与えるはずである。 窒素 、 リンは4 B族の元素 、Waseda University
Department of Chemistry

酸素、 硫黄はSB族の元素であることに注目するな金属イオンと光学活性ホスフィン、 チオ ー ル 、と 、 ひとたび不斉配位子を設計•合成すれば 、 中- 28 -

光学活性化合物合成を目的とする新規不斉触媒及び新規不斉触媒サイクルの開発研究

心金属に配位する元素を同族元素によって置き換に設計•合成した不斉配位子を配位させ 、 既存のえることが可能である。本研究では、4B族の元

触媒的不斉反応をスクリ ー ニングに利用して不斉素を含む不斉二座配位子の設計と合成に焦点を絞

触媒としての評価を行う。

り検討する。基本的には予想しうる遷移状態の数3を減らす目的でC2対称性を有する不斉配位子を
3 . 1

中心にデザインする。不斉配位子の合成原料は、

結

果

不斉配位子の合成

既知の方法叫こより、2 ーメチルナフタレンl

よって得られる化合物を予定している。中心金属から2を合成し、ブルシンを用いて光学分割を行については、合成した配位子と相性の良いものをった(Fig. 1)。

ロ

入手容易な天然由来の化合物もしくは光学分割に得られた光学活性な2をメチルエステルに変換の測定による錯体形成状態の確認も行うが、実際し、 HPLC (DAICEL CHIRAL PACK OD, n-Hex:

Synthesis of (R,R) -4

-29 -

2

Fig.1

H
p

7

0/
P8

H2

戸PH 2

出P

(R, R)-6％

3(R, R)-4

％
4 B
y
y ,

Et3N, C!fi 6, reflux(R, R)-5

E H
H O
c
T A

n 匂

3 t
H B
B H

HH
0 0

0 0
c
c

2

••
•
,•
s
p

te
s
Hに
sJ
lo
oo lo
P
e7eo
6
t
s8
yM 5%
0 ee
ny2

認

H2H 2

r
BrB

H2NCH2C屯NH2

(+)-3

，，

導£L
rー

lo
゜
8
7
ylo
60
\"
7
y
at
c，

4
%nth5,
12
c
y
7
゜
C
,
2 靡 H
FeQ H y五sHreo
唱 eo clCE

M

e
42MM
min
AC H O•
IDH
Salo c
nc
Br
NB
hex
500
conKM KO
）
）3
ヽ
l4
) ）
）7
）8
））
12
56
9
e

ご :

探索する。この探索については、各種スペクトルフェニレンジアミンに対応するリン配位子の合成

i - PrOH= 9 : 1)により光学純度を決定したと
一

ころ、（＋）体は100%ee、（ ）体は92%ee であを試みた。 しかし 、 炭素ーリン骨格の形成に必要った。 2はジブロミド3へ導き 、 D. ].Cramらのなホスフィン7、 8は取り扱いが難しく、 現在合方法叫こよりジアミン4へと誘導した。 ここで 、成を中断している。

ー(-)- 2由来の(R,R)体は 、 3,5 ジニトロ安息
3.2を100%eeとすることができた。 同様の方法によ

不斉配位子(R,R)-4、 5を用いた触媒的不斉反応の検討 3)

りジアミン5、 6の合成を行ったところ、 5は良3 . 2 . 1

好な収率で得られたものの、 6は得られなかっ合成した配位子と各種のルイス酸を組み合わせ

香酸と塩を形成させ、 再結晶によりその光学純度た。

゜

Oiels-Alder反応

た不斉触媒を用い 、 幾つかのジエンとジエノフィ

4 、 6の窒素原子をリン原子に変えた不斉配位

ルの反応を試みた。 結果をTable 1- 5に示す。 光

即ち、 エ チレンジアミン、

学純度は、 光学活性カラムを用い、 HPLCにより子の合成を検討した。

run solvent
1
2

CH2 CI2
CH2CI23

CH2 C l24

CH2 CI2

5

C 6H6

6

toluene

7

THF

，

8
10

賦O
CH2 CI2
CH2 CI2

run solvent

Table1＋

temp.( 0 C)

Reactions of the acrylic acid Derivative with Cyclopentad1ene

戸

勺Y 。

catalyst(20mol%)
MS4A, solvent

catalystr. t.

Cu(0Tf)2-{R, R}-4

゜
゜゜
゜゜
゜゜

without MS4A

r.t.
- 25

゜

temp.(° C)

誓time(h)endo/exo

ee of endo

yield(%)

120

13.4/1

1.2

100

Cu(0Tf)2 -(R, R}-4

24

2.7/1

79

67

Cu(0Tf)2-{R, R}-4

24

3.0/1

81

99

Cu(OTf)2 -{R, R)-4

69

3.5/1

82

99

Cu(OTf)2-{R, R)-4

24

3.0/1

65

100

Cu(OTt)2-{R, R)-4

23

3.2/1

67

62

Cu(0Tf)2-(R, R)-4

20

3.5/1

72

83

Cu(OTf)2-{R, R}-4

72

5.7/1

59

77

Sn(OTt)2 -(R, R)-424

14.0/1

0.02

99

TiCI(iPr)3 -(R, R)-4

24

2.7/1

79

67

Table2 Investigations on the Amount of the Catalyst

＋

�1(゜
0

catalyst

0ニ�?

ee of endo

yield(%)

73

98

CH2 CI2

r.t.

Cu(OTf)2 -{R, R}-4(5 mol%)24

endo/exo
2.8/1

2

CH2 CI2

r.t.

Cu(OTf)2-{R, R}-4(10 mo!%)

24

2.8/1

77

88

3

CH2 CI2

r.t.

24

2.7/1

79

100

4

CH2 CI2

r.t.

Cu(0Tf) 2-{R, R}-4(20 mol%)

24

2.9/1

85

91

5

CH2 CI2

r.t.

Cu(OTf)2-{R, R}-4(100 mo!%)Cu(0Tf)2

24

1

time(h)- 30

゜run solvent
2

CH2CI2C6H6゜゜

光学活性化合物合成を目的とする新規不斉触媒及び新規不斉触媒サイクルの開発研究

Table3 Reactions using Ligand 5＋

temp.(℃）
r. t.
r. t.

catalyst(20mol%)介。

MS4A, solvent

catalysttime(h)96
312

Cu(0Tf)2-(R, R}-5
Cu(OTf)2-(R, R}-5

�?

endo/exo
13/1
11/1

ee of endo
1.2

yield(%)

-0.2

75

100

Table4 Reactions of the crotonic acid Derivative with Cyclopentad1ene

run
I
2

0

solvent temp.( C)r. t.
CH2Cl2
r. t.
C6H6
toluene

3

゜

゜

停？

+'-/'りcatalyst(20mol%)catalyst

endo/exo

Cu(OTf)2-(R, R}-4
Cu(OTf)2-(R, R}-4

time(h)96
312

Cu(OT恥(R, R}-4

312

2.2/1

MS4A, solvent

8.3/1

ee of endo
70
59
59

1 、 8/1

yield(%)
13
18
25

Tables Reactions of the crotonic acid Derivative with Cyclopentad1ene using Sto1chometric Amount of the Catalyst

run
1
2
3

temp.(0C)
r. t.
CH2Cl2
r. t.
C6H6
r. t.
toluenesolvent

畑＋汀？

lalys1(100mol%)

MS4A, solvent

catalyst
Cu(OTf)2-(R, R}-4

此�。 '1,]time(h)24

endo/exo
8.1/1

ee of endo

24
24

2.6/1

35
27

Cu(OTf)2-(R, R)-4Cu(OTf)2-(R, R)-4

2.4/1

O
Fig.2 Reactions of the Derivative of acrylic acid with Acyclicd1enes
決定した。
アクリル酸誘導体と1,3

44
67

パ
� �/
礼バ
MS4A, solvent
yo
0
0
o

(o;て

72

yield(%)
47

゜3のように決定した。
— ブタジエン、2 ー メチ）レ

-1,3 ー ブタジエンとの反応における触媒効果を観

3 . 2 . 2

察したが、室温では反応は進行しなかった(Fig.

不斉Diels-Alder反応において最も良い結果を

不斉アルド ー ル反応

2)。

与えた反応系でシリルエノ ー ルエ ー テルによる不Table 1 run 4の主生成物は他の反応条件にお斉アルド ー ）レ反応を検討した。 反応は進行した

いても主生成物であった。 その絶対配置は文献記が、 その生成物は光学活性体としては得られなか載°の同化合物の比旋光度の符号と比較し、Fig.

った (Fig. 4)。

- 31 -

2

s

了人

℃

゜
ょ人

•
•

伶

〔

゜
゜
m

〗

゜
゜
Y

＋

゜
t

。

〕

巳g.3 Absolute Configuration of the Major product of run 4 (Table1)
OTMS Cu(OTf)zー(R, R)-4(20mol%) p
Ph.......,ヘ H +J:c�ヽ COOMe
C O=<
OMe MS4A, C出C
OTMS
y.68%, 0%ee
l2, -78→0°C, 24h
Fig.4 Aldol Reaction using the Asymmetric Catalyst

4

考

金属塩の中で Cu (OTf)とが最も良い結果を与え察た。これは、窒素原子と銅イオンの親和性が極め

不斉配位子4、5の合成が比較的簡単であるのて高いことを反映していると思われる。Table 2

に対し 、 6の合成は困難であった。これは、アミ

run 5は、 Cu (OTかのみではこの反応の触媒にノ基が4、5では脂肪族 、 6では芳香族であるたなり得ないことを示している。この反応では、反めにその反応性が下がっていること、4 、 5より

応生成物 を光学活性体として得るにはMS4Aのも6の方がリジッドなコンフォメ ー ションを強制

添加が Table 1 run 1 、 2に見られるように必須されているため、立体障害が原因となって二つめであった。これは 、 反応系内に残存する水が Cuのジブロミド体3が反応しにくいことによると思(OTf) 2を分解し、強酸である TfOHを生じさせ、われる。

それが反応の触媒として働くためと解釈できる。

不斉配位子4、5に対応する不斉二座リン配位

溶媒の効果は、Table 1 run3、5、6、8、Table

子の合成は 、 その原料である ホスフィン7 、 8の4、5に見られるように極性溶媒の方が良い結果

取り扱いにくさから困難を極めており、グロ ー プを与える。これは、極性溶媒中では不斉配位子4

ボックス中での取り扱いなどを検討中であるが、とアクリル酸誘導体が二座配位子として働き、Cu

一般にジホスフィンのジリチオ体は反応性が高(OTf) Iとin situ でカチオン性錯体 を生成しやす

く、ジホスフィンの単離精製にさえ成功すれば不いためと推測される。Table3に示したように不斉 二座リン配位子の合成は可能と思われる。

斉配位子5を用いたときは、良い結果は得られな

不斉配位子4とCu (OTf) 2によりin situ で得かった。不斉配位子5とCu (OTf)バこよる錯体

られる錯体は 、 Table 1-5に示すように、シクロは六員環を形成し、そのコンフォメ ー ションが不ペンタジエンとアクリル酸誘導体、クロトン酸誘

斉配位子4を用いたときの様に固定されないため導体の環化付加反応の不斉触媒となった。シクロと考えられる。Table 2に示すようにシクロペン

ペンタジエ ンとアクリル酸誘 導体の反応結果は 、タジエ ンとアクリル酸誘導体の反応では、触媒量

チレンジアミン誘導体とCu (OTf) 2を用いたの変化に対して endo/exo 比 、 ee of endo、yield

エ

ンド体の

（％）に特に変化は見られなかったが、シクロ ペ

ee=82%eeと最も良い結果 を与えた。また、シク

ンタジエ ンとクロトン酸誘導体の反応においてロペンタジ ンとクロトン酸誘導体の反応においは、触媒量の増加に伴い 、 特にyield(%)の上昇

チレンジアミン誘導体とCu (OTf)2をが見られた(Table4 、 5)。これは 、 触媒がうまン

く回転していないとも考えられ、生成物が二座配ド体のee=72%eeと最も良い結果 を与えた。各種

位子として触媒の阻害効果を示していることも考ときが収率99%、endo/exo=3.5/1 、

エ

エ

ても 、

エ

用いたときに収率47%、endo/exo=8. l/1 、エ- 32 -

光学活性化合物合成を目的とする新規不斉触媒及び新規不斉触媒サイクルの開発研究えられる。 クロトン酸誘導体は 、 アクリル酸誘導体に比べてその嵩高さから反応性が低く、

一

般的

二次相互作用による安定化を上回ったためと思われる。

に低収率であった。 これは、 アクリル酸誘導体と

5

1,3 — ブタジエン、 2 ー メチル — 1,3 ー ブタジエンとの反応例に も示した よ う に 不 斉 配 位 子 4 と C u

総括

これまでに光学活性イミンと金属塩による錯体(OTf) 2によりin situで得られる錯体のルイス酸

がDiels-Alder反応の不斉ルイス酸性触媒として性がさほど強くないことを示している。 ただし 、作用することを示す報告はあったが、 光学活性ジ

不斉アルド ー ル反応の検討で示されたようにケテ

アミンと金属塩による錯体を用いた例はなく、 こー ルとアルデヒドの反応を触媒すの錯体によるものが初めてである。 そこで、 不斉

ンシリルアセタる程度の酸性度は有しているようである。
シクロペンタジエンとアクリル酸誘導体の反応における主生成物の絶対配窟から、 不斉配位子 4

配位子 4 と Cu (OTf) 2とアクリル酸誘導体による錯体の構造に関する情報を得るために、 核磁気共鳴スペクトル (NOE 測定）の測定を試みたが、が二座配位子とし て作用し 、 Cu(OTfo と錯体を有 力な証拠は得られなかった。 現在のところは 、形成していると仮定してその反応の遷移状態を想

この錯体は 、 シクロペンタジエンとの反応結果か定すると Fig. 5 の様になる。

ら Fig. 2 に示したような正四面体錯体であろう

二価銅イオンは 、 正方形錯体あるいは正四面体錯体を形成しやすいことが知られている。

一

般的と推測しているが、 今後 、 各種スペクトルの測定などを行い、 この錯体構造を明らかにしたい。

には、 配位子の配位力、 配位子同士の立体反発に

不斉二座リン配位子の合成は 、 その原料であるより形成される錯体の種類が決まる。 不斉配位子

ホスフィンが極めて取り扱いにくく（不安定性 、4と Cu (OTf)2による錯体にさらに二座配位子

自然発火性） グロ

ブボックス、 グロ ー ブバッ

として働きうるアクリル酸誘導体が配位するこのグ中での取り扱いを検討中である。 一般にホスフ

場合は、 不斉配位子4とアクリル酸誘導体との立ィンのリチオ体は反応性が高く、 ホスフィンの単体反発が大きく 、 上に示すような正四面体錯体が離精製にさえ成功すれば不斉二座リン配位子の合優先して生成し、 ジエノフィルの混んでいない面成は可能と思われるので 、 合成しそれを用いた反からシクロペンタジエンが反応したと考えると 、応を検討したい。

得られた主生成物の絶対配箇をうまく説明でき

光学活性アミンと金属塩による錯体がどの程度る。 また、 endo/exo比がさほど高くなかったののルイス酸性を有しているかが 一 つのポイントでは、 上図からもわかるように遷移状態においてシあったが、 前述したように、 シクロペンタジエン

クロペンタジエンと不斉配位子 4 との立体反発がのDiels-Alder反応、 シリルエノ ー ルエ ー テルとシクロペンタジエンとアクリル酸誘導体の軌道のアルデヒドのアルド ー ル反応の触媒になり得ることが判明した。 不斉配位子4と Cu (OTf)2の錯体は、 それほど強いルイス酸性を持たず、 温和な条件が要求される反応に適した触媒である。 ただし、 シクロペンタジエンのDiels-Alder反応においては 、 そこそこの選択性が得られたものの、 シ
リルエノ ー ルエ ー テルと 一般的なアルデヒドのア
ルド ー ル反応では 、 全く選択性が見られなかった。 これは、 シクロペンタジエンのDiels- AlderFig.5 Proposed Transition State of the Diels-Alder Reaction

反応で用しヽたアクリル酸誘導体は、 不斉配位子4-33-

とCu (OTいの錯体に二座配位子として固定さ引用文献れたのに対し 、 シリルエノ ー ルエ ー テルのアルド

1) Kanoh, S.; Hongo, Y.; Motoi,M.; Suda, H. :ル反応で用いたアルデヒドは、 単座配位子であBull.Chem. Soc. Jpn. 61, 1032-1034(1988).

りアルデヒドのカルボニル面に面選択性が生じな

2) Mazaleyrat, J-P.; Cram, D. J.: J. Am.Chem.

ーかったためと思われる。 従って、シリルエノ ー ルSoc. 103, 4585- 4586 (1981).

エ ー テルとアルデヒドのアルド ー ル反応において

3)森田孝博、 荒井孝義、 笹井宏明、 柴崎正勝 、は 、 グリオキシル酸エステルの様な二座配位子に

中田雅久 、 日本薬学会第116年会講演要旨集、なりうるアルデヒドについて今後検討を加えたい

p.87(1996)と考えている。

4) Evans, D. A.; Miller, S. J.; Lectka, T.: J. Am.
Chem. Soc.115, 6460- 6461 (1993).

-34-

II . 生体作川、 安全性に関する分野

ヒト皮膚移植SCIOマウスを用いた新しいコスメトロジ ー 研究
大阪大学

野

村

医学部

大

成

Normal human organs and tissues (skin, thyroid gland, lung, liver, stomach and intestinal mucosa,
endometrium, bone marrow cells, etc.) were well maintained for long periods (> 2 years) over several mouse
generations in the T and B cell function deficient SCID (severe combined immunodeficient) mice improvedby the selective inbreeding of homozygous (scid/scid) male and female mice which showed undetectable
serum lgG and lgM (< 1µg/me), while it was difficult to maintain these human tissues in nude mice and alsoin leaky SCID mice.
Transplanted human organs and tissues were stably maintained morphologically and functionally, providing
an invaluable experimental system for the in vivo study of human organs and tissues. For example, daily
exposure to large dose (>7.5 x 105 Jimりof ultraviolet light B (U四） for long periods (- 2 years) induced
actinic keratosis in nom1al human skin. Consequently, the use of�CID technology maintaining human skinenables us to study on the in vivo influence of cosmetics and allergic agents, protection from environmental
toxic agents, and experimental therapy of human skin diseases.

緒とがわかっているI :i - 5参!'�)。 こ れらSCIDマウスの言

血中IgG、IgM を測定し、 検出限界以下のものを

正常ヒト臓器の発生、 分化、 機能、 およびその20代以上選択的兄妹交配(Selective Inbreeding)

異常に関する研究は人体実験が不可能なため、 極を繰り返すことにより 、 T、B両細胞のleakのな

めて制限されたなかでの臨床研究、 あるいは正常い、 白血病も発生しない改良型SCIDマ ウスC.B17/

個体とかけはなれた生理条件下（培養細胞等）でN- scid/scidの完成を試みている(3-6) 。 これら改良しかなすすべがなかった。1983年、 Bosma博士にSCIDマウスには、 ヒト良性腫瘍 、 ヒト異形成組織

より T 細胞、 B 細胞機能の欠損した重度複合免疫の継代・維持も可能であることを世界で初めて証不全( severe combined immunodeficiency: SCID)

明した (7- 10) 。 しかも、 我々の改良したSCIDマウウスC.B17-scidが発見された(I) 。1988年 McCune

スでは、 ヒト正常組織（皮曲、肺 、 肝臓 、 胃腸 、マ

らにより、 ヒト白血球がこのSCID

マ

ウス体内で

甲状腺、 子宮内膜、骨髄他）が全て生着し、2年短期間内ながら生存し、 機能を発することが報告以上にわたりされ(2) 、 ヒト組織の機能をマウス個体を借りて研可能となった。 即ち、 ヒト皮閲組織で一 部置換し究を行うことができる可能性が示された。 しかたマ ウスを完成させた (12)し、現在米国で使われている C.B17- scid マ ウス
は、 若年で白血病を多発し（約 30%) 、 また、 T 、
B両細胞ともに一 部正常に戻ってしまうため（約30%) 、 マ ウス皮団のallograftすら生着しにくい こ

マウスの世代を越えて継代·維持が0

本研究は、 改良型 C.B17/N-scid/scidマ ウスの量産、T 細胞、 B 細胞、 NK、マ

クロファ ージ機能欠損マウスの系統化と量産システムを完成させ、ヒト皮曲組織移植 マ ウスを用い、 ヒト皮曲の形態
および機能に関する基礎的研究に始まり 、 薬物、A New Appr oach to Cosmetology
with Human Skin Maintained in
SCIO Mic e

環境有害物質等への反応と治療実験への応用、 特Taisei Nomuraの安全性と皮蘭アレルギ ー 等研究への応用を試

Faculty of Medicine, Osaka University

み、 広くコスメトロジー 研究のため に供するのをに医薬品や日常品（化粧品 、 洗剤）のヒト皮蘭ヘ

目的とする。
-36-

ヒト皮膚移植SCIOマウスを用いた新しいコスメトロジ ー 研究

2
2 . 1

をアベルチンで全身麻酔し、 約1cm平方の ヒト正

実 験

常皮曲をマウス背部皮府を同寸大切除した部分にSCIOマウスの改良移植した。 表面を乾燥を防ぐため、抗生物質を含Bosmaより供与され たC.Bl?- scid マウスは、んだクリ ー ムを塗り弾力包帯でカバーした。 2週

幼若 および成熟したT、B両細胞が約半数のマウ間後に包帯およびクリップの除去を行った。SCIDスに出現し(leaky)、 またこれらのマウスでは若マウスが弱った時、 または、死亡した時は、他の年での白血病の 発生が多い。 同種皮閲移植の生着

SCIDマウスにヒト皮閲を再移植し、 ヒト正常皮膚率をみても、 non-leakySCID マウスでは94.1 %の長期維持を試みた。

の生着率を示す のに対し、leakySCIDマウス（血清中 lgG が50µgIme以上の も）ではわずか 28.6

2 . 3

毒性テスト

％であり、同種皮膚移植でさえ 困難である。 ま応用の第一段階として、 ヒト 正常皮曲の長期維

た、 リンパ性白血病は、leakySCIDマウスにおい持と太陽紫外線による日焼けおよびH光角化症のて3から5ヶ月齢で31.7%、 5から9ヶ月齢にな

誘発 を試みた。 B領域紫外線(UVB) を得る のにると半数以上の 58.8%に発生し、長期観察が困難

健康ランプ4本（東芝Fl20S·E、波長280 -360nm、であった。 従って、 ELISA法により全てのSCIDマ

ピ ー ク313 nm)を用いた。 コダック社製のコダセ

ウスを生後4-6週齢の間に血中lgG、lgMを測定

ル ・ セルロ ー スシ ー ト(K6808)を用い、288nm以し、IgG、IgMともに検出限界以下のホモ(C.Bl7下の紫外線を完全に除去し、地上に到達する太陽- scid/scid ) 同士の選択的兄妹交配を繰り返し、紫外線により近似させた。 照射線量率は2.8]/m'/sec

leakと白血病発生の減少を試みた。 また、C.Bl7-である。 月、 水、土曜日に8000]/ m'、火、木、金、

scidマウスの改良に加え、bgl 遺伝子等をC57BL/

日曜日に 2000]/ m'の照射を行った。

6]、C3H/HeJマウスヘ導入し、 T、B両細胞機能

3のみならずNK活性およびマクロファ ー ジ活性も欠如したマウスC57BL/6l/N - scid/scid、C3H/

3 . 1

結果と考察

SCIOマウスの改良

正常ヒト組織の移植による機能と分化の研究を

He]/N - scid/scid、C57BL/6l/N - scid/scid; 如／行う場合、長期間の観察が必要となる。 従って、bglの作製を試みた。

前述のようなleakySCIDマウスの出現と若年での2 . 2

白血病死は研究の 大きな妨げとなる。 我々は、

ヒト正常組織のSCIDマウスヘの移植ー

血中IgG、IgMがlµg/m€以下のSCIDマウスに

1986年よりSCID マウスヘ のb eige,nude, Lps 等

ヒト正常皮園の移植を行った。 ヒト皮膚は乳癌患

免疫不全遺伝子の導入を行うとともに、 全ての者で乳房全摘術を施行したものおよび包茎手術を

C.B17-scidマウスの選択的兄妹交配を繰り返すこ

施行した後の切除皮膚を了解を得 て用いた。 いずとにより、SCIDマウスの改良を行っている。 このれも通常焼却廃棄されるものである。SCIDマウス

地味な努力が大きな成果に結びついた （表1)。

表1
Strains

SCIO mice maintained in the Department of Radiation Biology, Faculty of Medicine,
Osaka University, Japan
Genotype

Generallon

Immunodeficiency

F2s
N如
NsF7+1N心N如T,BcellT,BcellT, B cell, Macrophage
T,Bcell,NKT, Bcell,NK, Macrophagescid/scid
C.Bl 7 IN-scid
scid/scid
C57BL/6J- scid―
Lps- /Lps , scid/scid
C3H/HeJ - scid
C57BL/6J- b就scid scid/scid, 如/bgl―
C3H/HeJ- bgl; scid Lps - /Lps , scid/scid, bgl/bgl
-37-

25-,
20
’―'
�吝 15

告g

u

.s

10

C.B 17 / N-scid,41 15

••
,

■■

lgG

仁

lgM

35

5
F1

F5

F15

F10

F20

F25 F27

No. of Generation
図1

Leaky SCIOマウスの選択的兄妹交配による減少。 ヒストグラム上の数字は測定したSCIOマ
ウスの匹数を示す。 lgG 、 lgM いずれかが 25µg I 叫を超えるものを leaky SCIDとした。

選択的兄妹交配を行ったC. B17- scid/scidマウが検出限界以下のC.B17- scid/scidマウスを選択

ス2,588匹の血清免疫グロブリン値を測定したと的兄妹交配することにより白血病の発生とT、B両

ころ、 大多数のマウスにおける血清lgG、IgM値

細胞機能の出現を抑えることができた。 このようは検出限界以下あるいは25µg/ me以下であった。

に選択的兄妹交配を行い、血清 IgG、IgMが検出

従って、 我々は血清lgG、lgM値が25µg/ meを超限界以下の SCIOマウスにヒト正常皮廂の移植をえるマウスをleakySCID とした。

行っている。

図lは、 それらleakySCIDマウスの出現率を示3 . 2したものである。F1-FバこおいてはIgG がleakすヒト正常組織のSCIDマウスでの維持る頻度が 、 18.2%とBosmaらの報告と同様に高率

表2に、 甲状腺、 副甲状腺、 肺、 肝、 胃、大小であったのに対して 、 f3以降は4.0%と有意に著し

腸粘膜、 子宮内膜、骨髄細胞 、 皮南等ヒト正常組く減少している。 このように選択兄妹交配するこ織のSCIDマウスでの維持状態をまとめた。SCIDとによりleakySCIDマウスの
頻 度 は 有 意 に 減少 し た 。 また、 scid遺伝子をC57BL/6J 、
C57BL/6J-bgl、 C3H/HeJマウ
congenicマウスを作成している。 Ns以後兄妹交配すること
により、leakyの出現は全く見

uap1
:>
u
文 a:>

ス に導入す る こ と に よ り 、られなくなった。

」I

'"ii
i

2
15
0

26

C.B 17 / N-scid

竺”

5

図2は各世代における白血病死の発生率を示している。

0

Eから凡では平均20%発生し

. .

F3

ているが、Fis以降では1- 4

店

F15

F 20

F2 4

No. of Generation％と有意に減少している。
以上のごとく血清IgG、 IgM

F10

図2

SCIOマウスにおけるリンバ性白血病発生率の選択的兄妹交配による減少。

- 38 -

ヒト皮膚移植SCIOマウスを用いた新しいコスメトロジ ー 研究

表2 Survival and maintenance periods of normal and precancerous humantissues in SCIO miceNo.
Skin
Thyroid gland
Lung
Liver
Gastric mucosa
Colorectal mucosa
Endometrium
Bone marrow cell

42
49
13
7
18
10
7
19

Survival
（％）
100
100
100
100
100
100
71.4
84.2

Max. period' No. oftransfer(Month)
28
34
22
14
21
13
22
<6b

7
10
8
4
6
5
6
1

Some continue.
b Identified by human IgG in the serum of SCID mice. Usual C.Bl 7scid mice were used.
a

マウスの世代を越えて長期間維持されている。 特に大きい、 即ち、 日光感受性に個人差が大きいのにヒト皮団は100% 2年以上にわたる長期維持にがよくわかる。 また、 1例だが 、 日光角化症患者成功している。 図3 aは 、 移植後247日目の肉眼の正常皮肉は高感受性を示している。 また 、 UVB像であるが 、 アルビノの SCIDマウス皮曲の中に照射により 、 高率にp53遺伝子の変異が誘発され淡黄色をしているのがヒト皮曲である。 顕微鏡組ている。 しかし、 K-ras遺伝子の変異は今のと織像（図3 b)でも連続性を示しているが 、 表皮ころ誘発されていない。
現在、 2年にわたる連続UVB照射により皮閲癌層の厚さと色素細胞の存在からヒトとマウス皮肉の誘発にも成功しており 、 ヒト皮曲置換 SCIDマの境界（矢印）が区別できる。
日光角化症 、 psoriasis等ヒト皮固疾患のSCIDマ
ウスでの維持にも成功している。 その一部を表3

ウスは 、 日焼け防護クリ ー ムの開発 、 治験には今すぐにでも応用可能である。
本研究で、 改良SCIDマウスの量産システムをにまとめた。

完成させた。 ヒト皮陶組織置換マウスを用いるこ
3. 3

UVB照射によるヒト皮膚疾患と遺伝子変とにより、 ヒト皮膚組織の形態、 機能の基礎研究

異の誘発に加え 、 アレルギ ー 、 がん化 、 毒性、 安全性のテ

真夏の正午頃の砂浜で1 - 2時間寝ころんでいストなど、 これまでヒト臓器ではなし得なかった

た場合とほぼ同じ量を週4日 、 他の3日はその4研究がマウスの個体を借りて可能となった。 ま

5倍量のUVB (8,000 I m')を照射した。 表4に示

た、 他の医学分野においても 、 ヒト臓器組織を用す如く 、 非照射群では全く何の変化もないのに対いて実験的、 臨床的研究を行うことがいかに大切

し、 UVB 長期連続照射により高率にヒト皮肉にか述べる必要もない。 これまで理論的には考えら

日光角化症が発生した（図3 C、 d)。 マウス皮曲れても、 実用化されるとは思いもしなかった独創

は毛で被われているため、 耳の先端と尾を除いて的 、 かつ先駆的な研究 、 および治療実験が可能と何の変化も見られなかった。 図4は、 日光角化症なる。 ヒト臓器組織置換マウスを用いた研究シスの診断時期を照射量に対して表したものである。

テムの完成は、 人間のバイオサイエンスに関する

丸印は包茎患者より切除した正常皮閲 、 三角印は基礎的および臨床的研究に革命的な進歩をもたら

乳房部の正常皮肉、 四角印は顔面日光角化症患者すものと確信する。 特に 、 ヒト皮府の継代維持はの鎖骨部正常皮府を示しているが 、 個人差が非常

100%成功しており (12) 、 コスメトロジ ー の進歩に

-39-

a移植後247日目のヒト包皮。 かすかに黄色を示している部分がヒト皮膚。 見やすくするため周辺のマウスの毛を一部除去してある。
b. 組織像。 ヒト皮膚とマウス皮膚の境界を矢印で示してある。 H.E染色。―; 100µm。
c. UVB 614,000 J/而照射後に見られる日光角化症。茶褐色 、 肥厚 、 表面凹凸を示す。
d. UVB 1,754,000 J/而照射後に見られた日光角化症の組織像。early invasionを示す。 H.E染色。―; 100µm。
図3

SCIOマウスヘのヒト皮膚の移植と太陽紫外線による影響。

表32/2 (100)
4/4 (100)
4/4 (100)
2/2 (100)
1/1 (100)
3/3 (100)
4/4 (100)
4/4 (100)
1/1 (100)
3/3 (100)
4/4 (100)
4/4 (100)
6/6 (100)

Total 42/42 (100)*Experiments continue at present-40 -Max. No. ofGeneration

Period(months)252028256 6 9 201413201821

1 2 3 4 5 6 78 90 1 2 3(breast ca)(breast ca)(phimosis)(breast ca)(breast ca)(breast ca)(breast ca)(solar keratosis)(solar keratosisi)(phimosisi)(breast ca)(phimosis)(phimosis)

Survival (%)

4574133433456

Case

Transplantation of Human Skin

ヒト皮膚移植SCIDマウスを用いた新しいコスメトロジ ー 研究表4

Actimic keratosis induced by ultraviolet light Bin the human skin maintained in SCIO mice
Period(days)

Human skin

l
7 2
7�
▲
▲�- ■●▲ ●A
5

l

9 9

Kera tosis
Incidence (%)-1,890,000

0/8 (0.0)
7/9 (77.8)-1,754,000

0/6 (0.0)
6/8 (75.0)

730,000

0/1 (0.0)
1/1 (100)゜゜゜A Normal skin from breast cancer patients-745
UnirradiatedIrradiated-620
B. Normal skin form phimosis patients-831
Unirradiated-592
Irradiated
C. Normal skin from actinic keratosis patient
Unirradiated366
278
Irradiated1

UVB dose
Olmり

5

▲
I ●●

10

Total UVB dose (x 105 J/m2)

I

15

．

6

20

図4 日光角化症の発生とUVB照射量。正常包皮（●)、正常乳房部皮膚（▲)および顔面日光角化症患者の正常皮膚（■)にUVBを照射し 、 経時的にバイオプシ ー を行い 、 病理組織学的に日光角化症と診断された時の線量を示した。
重要性. Oncologia, 26 321-328 1993.

大きな影響を及ぼすものと思われる。 また、環境
有害物質の人体への影響に関するヒト組織での直5 . 野村大成 、 杉山治夫 、 他： SCIDマウスヘの接的実験研究が可能となるとともに 、 これまで、

ヒト臓器の移植 ． 血液．腫瘍科 、 26 461-467

患者を用いてなされてきた薬剤の安全性テスト

1993.

（臨床治療研究）もヒト臓器組織置換マウスシステ
ムを用いて行うことができるなら 、 最近のソリプ

6 . Inohara H., Nomura T., et al.: Reduction of leaky

lymphocytes clones producing immunogloblins
and thymic lymphocytic leukemia by selective

ジン事件に代表される人身事故も防げる。

i n b reeding o f scid (severe c o m b i n e dimmunodeficient) mice. Acta Otolaryngol., 501

引用文献

107-110 1993.

1 . Bosma, G.C., Custer, RP., Bosma, M.J.: Ase­
vere combined immunodeficiency mutation in

7 . Nomura T., Hamaoka T., et al.: SCID(Severe

Combined Immunodeficient) mice as a new sys­

the mouse. Nature, 301 527-530 1983.

tem to investigate metastasis of human tumor.

2 . McCune, J.M., Namikawa, R, Kaneshima, H.,
Shults, L. D., Lieberman, M., Weissman, I. L.:

The SCID-hu mouse: murine model for the
analysis of human hematolyrnphoid differentia—]. Radiat. Res., 31 287-291 1990.
8 . Nomura T., Takahama Y., et al.: Rapid growthand spontaneous metastasis of human genni­tion and function. Science, 241 1632-1639 1988.

nal tumors ectopically transplanted into scid

3 . 野村大成：重度免疫不全マウスの有用性ーヒ(severe combined immunodeficient) and scid­

卜免疫機能、 ヒト癌転移機構への応用 ． 医学

nustreaker mice. Jpn.]. Cancer Res., 82 701-709のあゆみ、157 635 1991.

1991.

4 . 野村大成：がん研究におけるSCIDマウスの9 . Inohara H., Nomura T., et al.: Growth and me-- 41 -

tastasis of fresh human benign and malignant

maintenance of human solitary and hereditary

tumors in the head and neck regions trans­

colorectal polyps in SCID mice. Cancer Detec­

planted into scid mice. Carcinogenesis, 13 84 5-

血n and Prevention, 21 14 8-157 1997
12 . Nomura T., Nakajima H., et al.: Maintenance of

84 91992
10 . Takatera H., Nomura T., ltatani H.: Differential

normal human tissues and benign tumors in theexpression of a human sperm-specific isozyme

improved SCID mice and in vivo carcinogenesis

in seminoma cells transplanted into scid-nu"'

of human tissues by radiation and chemicals.

mice. Jpn.]. Cancer Res., 84 2応218 1993.

XVI Ind. Cancer Con g. Abs t. Book I, 412 1994.

11 . Kawaguchi T., Nomura T., et al.: Consecutive- 42 -

接触皮膚炎におけるマスト細胞活性化反応の解析
工

昭和大学

薬学部

藤

一

郎

Mast cells contribute to allergic inflammation by releasing chemical mediators in response to activation
with cytokines and/or lgE/antigen. Here we report that when mouse bone marrow-derived mast cells wereactivated with lgE/antigen in the presence of interleukin (IL)-10 and IL-1(3 , but not other cytokine
combinations, there were two phase of prostaglandin (PG) D, generation, in which the first phase occurred
within 1 hr and the second phase from 2 to 10 hr. The delayed phase PGD, generation paralleled the de nova
induction of cyclooxygenase (COX)-2 protein irrespective of the constant expression of COX-1 and wasabrogated by COX-2 specific inhibitor. Detailed examination of individual effect of IL-10, IL-1(3 and lgE/
antigen on COX-2 expression revealed that lgE/antigen or IL-10 each initiated and stabilized COX-2 mRNA
expression, whereas IL-1/3 stabilized COX-2 protein without affecting its mRNA level. Whereas expression ofcytosolic phospholipase A, (cP凶） was unchanged under any culture condition, expression of type II secretory
P凶(sP凶） transcript was induced by 5 hr in cells treated with IL-10 + IL-1(3 independent of lgE/antigen,accompanied by increase in sPL.A, activity. Substantial suppression of delayed phase PGD, generation byanti-sP凶antibody suggests the functional linkage of the two induced prostanoid-biosynthetic enzymes,sP凶and COX-2, to provide PGD2 in the delayed phase.

緒て、 最近、lgE/抗原刺激により活性化した肥満細言胞による多種多様なサイトカインの発現誘導と放肥満細胞は骨髄中の多能性血液幹細胞を起源と出が注目を集めている。

する組織性の細胞であり、 組織微小環境で産生さマウス 骨髄細胞をインタ ー ロイキン 3 (IL- 3)

れる種々のサイトカインに応答して増殖し、 組織

存在下数週間培養すると、 均 ー な肥満細胞集団

固有の形質を持つ肥満細胞サプタイプに分化成熟(B M M C)が 得 ら れ る こ と が知 ら れ て い る 。

する。 肥満細胞表面上に存在する高親和性lgE受

BMMCはその培養が容易で大量調製が可能なこ

容体がlgEを介して特異抗体で架橋されると、 肥と、 機能的IgE受容体を発現していること 、 及び満細胞は急速に活性化し、 顆粒内容物であるヒス

多種多様のサイトカインに応答すること等の理由

タミン、 セロトニン等を放出すると同時に、 膜リから、 肥満細胞研究のモデル系としてよく用いらン脂質から遊離されたアラキドン酸からPGD2やれている。 我々は慢性アレルギ ー の原因を解明す

LTC4 を産生する。 これら肥満細胞由来の化学伝

べく、 肥満細胞の活性化に伴う長期応答について

達物質は即時型アレルギ ー 応答、 アナフィラキシ

着目し、 BMMCを用いて、 特に脂質代謝の視点

ーショックの主要因となるものの、 気管支喘息やから解析を行った。 その結果、 ある特定のサイト

アトピ

ー

ー

の臨床的知見にカイン存在下に BMMCをlgE/ 抗原刺激すると、頻繁に見られる慢性化した病変を説明し得るもの

即時応答で見られる迅速な PGD2の産生に続い性皮膚炎等のアレルギではない。 慢 性のアレルギ

ー

炎症像の要因としStudies on activation of mast cells incontact dermatitisて、 刺激後数時間の間に第二相のPGD2産生が 起
こることを見い出した。

2

Kudo Ichiro
2. 1

Faculty of Pharmaceutical Sciences,
Sh owa uruvers1ty

実験

BMMCの調製

雄のBALB/cJマウスから採取した 骨髄細胞を、50%RPMI 1640 (10%FCS)- 43 -+ 50% WEHI- 3 細胞培養上清液中で3から6週間培養した。 3週間原刺激した場合でも同程度のPGD2産生が見られ後には98%以上がBMMCとなった。

た（約1 ng/106cells)。抗原刺激を行わず、サイトカイン単独では、PGD2産生はほとんど見られ

2.2

BMMCのサイトカインおよび抗原抗体なかった。一 方、刺激5時間後に上清のPGD2を測定したところ、 ほとんどの場合1時間後とはぼによる処理
1度メディウムで洗ったBMMCを1X 10 cells /同じ値を示したのに対し、IL-l+ IL-10共存下に

meの猥度になるようメディウムに縣濁し、 lOmg/

抗原刺激したBMM C の 場合のみ 、 PGD2量は

me抗TNP (Trinitrophenyl) IgE抗体で 30 分間、

5.6ng/106cells に増加していた（表1)。

7

37度で感作させる。メディウムで2回洗った後、そこで IL- l+IL-10共存下にlgE/杭原刺激し様々なサイトカイン(IL-1 (3、IL-3 、 IL-10) がた時のPGD淮生の経時変化を細かく解析したと単独あるいは組み合わさって入っているメディウ

ころ、 刺激後1時間以内にピ ー クに達する第一相

ムに縣濁させ、 抗原で刺激した。

（即時相）と刺激後2時間から上がり始め5時間
から10時間後にピ ー クに達する第二相（遅発相）

2. 3 PGD2量の測定から成ることがわかった（図1)。抗原剌激なし

アマシャム社のPGDグッセイキットを用いて測定した。

にIL-l+IL-10で培養した場合、 即時相でのPGD2
産生は見られず 、 遅発相のPGD2産生がわずかに観察された。

2.4

ノー

ザンブロッティング

RNA は T Rlzol試薬( GIBCO BR L)を用い 、

3 . 2 シクロオキシゲナ ー ゼ(COX)の発現

guanid inium th ioc yanate法により細胞より抽出し

IL- l+IL- lO+lgE/ 抗原刺激によるBMMCの遅RNAはアガロ ー スゲルにより分離後、 ナイロ

発型PGD痒生がどのように調節されているかにした。COX-1、

ついて、 まずアラキドン酸をプロスタノイドに変たoンメンブレンにトランスファ

ー換する酵素である cox に注目して調べた。cox

COX-2、 cPLfu 、 sPLfuあるしヽは(3-Ac t inプロ
ブを ランダムプ ライマ ー 法により32pラベルし、には、 広い組織に恒常的に発現している COX-1

ブロッティングを行った。

と、 炎症刺激や増殖因子刺激により誘導される

2. 5

表1 Effect of various cytokines and lgE/Ag on PGD2
generation by BMMCーイムノブロティング

刺激後の細胞 ライセ

ートをSDS- Polyacryla­

mide gel電気泳動にて分離し、 ニ トロセルロ ー ス
膜にトランスファ ー した。COX-1、 COX-2、cPLAz
または sPLAzに対する抗体でブロッティングし、
ECLシステムにて蛍光発色させた。

3
3. 1

結

果

lgE/抗原剌激による二相性PGD2産生

lgEで感作したBMMCを、様々なサイトカイン(IL-1 、 IL-3、IL-10)存在下に抗原により刺激した。刺激l時間後に上清に放出されたPGD2を定量したところ、どのサイトカイン共存下に抗Cytokines
No cytokine
IL-3
IL-10
IL-1 /3
IL・1 /3 +IL-10
IL-3+1L-10
IL-1 /3 +IL-3

PG西generation (ng/1o6cells)
Without lgE/antigen
With lgE/antigen
<0.1
<0.1
<0.1
<0.1
0.37土0.1s·
0.14土0.08<0.1

1.03 士 0.15 t
1.14土0.11 t
1.27土0.21 t
1.02 士 0.13 t
5.60土1.18 ・ t
1.40土0.48 ・ t
1.05 士 0.18 t

BMMC was cultured for 5 h with the indicated stimuli,
and the PGD 2 released into the supernatants was as­
sessed as described in the experimental section. Means
土S.E.M. for three independent experiments are shown.
•p < 0.05 compared with no cytokine: t P < 0.05 com­pared with each group without lgE/antigen.

-44-

接触皮膚炎におけるマスト細胞活性化反応の解析

IL-l+IL-lO+lgE/ 抗原刺激した BMMC のライ

ゼ ー トを経時的に採取し 、 抗COX-1、 抗 cox-

cox 阻害剤の PGD2 産生に対する効果
即時相及び遅発相における2種の cox アイソ
ザイムの役割を更に明らかにするため、 cox 阻

2 抗体でそれぞれイムノブロットして両酵素の発害剤の PGD産生に対する効果を検討した。 アス

現を調べたところ、 COX-1 蛋白の発現は刺激後ピリンは、 cox を不可逆的に阻害することが知

48時間まで一 定であったのに対し、 COX-2蛋白

られている。 BMMC をアスピリンで 5 時間前処COX-2が存在することが知られている。

は未刺激の BMMC には存在せず、 IL- l+IL­

lO+lgE/ 抗原刺激後2時間後から発現が認めら

3. 3

理した後、 細胞を洗浄し、 アスピリン非存在下にlgE/ 抗原で刺激すると、 いずれのサイトカイン｀

れ、 5時間から 10 時間後に最大に達し、 その後

存在下においても即時相の PG圧産生は完全に消培養した場合、 弱いCOX-2蛋白の発現が認めら性のCOX-1により調節されていることを意味しれた。 他のサイトカイン存在下では、 COX-2蛋ている。 これに対し 、 遅発型 PGD2産生はアスピ減少した（図 2) 。 抗原非存在下にIL-l+IL-10 で白の発現は殆ど認められなかった。 以上の結果から、 遅発相におけるPGD2産生は、 経時変化及びサイトカイン特異性においてCOX-2蛋白の発現失した（表2)。 これは 、 即時型 PGD2産生が常在

リン前処理の影響を全く受けなかった事から 、 新規に誘導された cox によって制御されているものと考えられた。 実際、 遅発型PGD通を生はcox-2 特異的 阻害薬である NS- 398 により完全に抑と相関していた。

制された（表2)。

この結果から、 IL- l+IL- lO+lgE/ 抗原刺激によって惹起される遅発相の PGD2 産生は、 cox-

—゜•

""'
''し

2によって制御されているものと結論された。

-i
2

一
-Ag

2―

x
0
c

1―

x
0
c

2

4
8
8
Culture Periods (h)

+Ag

． ．

！;•

25102510 h

10

図1 Time course of PG店generation in BMMC after
stimulation with IL-10, IL-1 (3 and lgE/antigen

図2 Time course of COX-2 expression in BMMC after
stimulation with IL-10, IL-1 /3 and lgE/antigen

lgE-sensitized BMMC were cultured for the indicatedperiods after stimulation with 100 i.u./ml IL-10 and 5 ng/
ml IL-1/3 in the presence or absence of antigen (Ag). The
PGD2 released into the supernatants were assessed as
described in the Experimental section. Values are ex­pressed as means土S.E.M. for four independent experi­ments.

lgE-sensitized BMMC were cultured for the indicatedperiods after stimulation with 100 i.u./ml IL-10 and 5 ng/
ml IL-1/3 in the presence or absence of antigen (Ag). The
expression of proteins for COX-1 and COX-2 were as­
sessed as described in the Experimental section. A rep­resentative result of three independent experiments.

-45-

表2
Aspirinpretreatment

Inhibition of the delayed phase of PG応generation by NS-398
PG西generation (ng/1o6 cells)
11士0.2
10士03<0.1 t<0.1 t＋＋＋5

Incubation time (h) 1

NS-398 treatment＋

35士0.8*09士0.3
2.7土1.1*<0.1 :j:

BMMC, pretreated for 5 h with or without 1 mg/ml aspirin, were sensitized with lgE
and activation with antigen in the presence of IL-10 and IL-1/3, either with or without
10 ng/ml NS-398. Immediate and delayed PG店generationwas assessed at 1 and 5
h respectively. Values are expressed as the means士S.D. fo「three independent
experiments. •p < 0.05 compared with PG店generation at 1 h afteバhe same
treatment: t P < 0.01 compared with PG応generation at 1 h without aspirin
pretreatment: t P < 0.05 compared with PGD2 generation after pretreatment withaspirin, and in the absence of NS-398.

cox- 2発現誘導におけるサイトカインった。 sPLA:iの発現量は cPLfuに比べて少なく、の役割

イムノブロットや通常のRNAプロットでは 検出

COX- 2発現誘導におけるIL-1、IL-10、lgE/

できなかった為 、 Rr-P CRによりそのmRNAの抗原各々の役割について、RNAブロット及びイ

発現レベルを検討した。 その結果、IL- l+IL-10

ムノブロットにより詳細に検討した。IL-10 は刺激後、 2時間から10時間にかけて、 5時間をCOX-2 mRNAの発現誘導に不可欠の因子であピ ー クにsPlJ知乃発現が上昇することがわかった

3 . 4

り、IL-10非存在下(IL- l+lgE/抗原）では cox（図3)。 COX-2の場合とは異なり、IgE/抗原刺-2 mRNAの発現は弱いものであった。lgE/抗原

激 は s P LA2の発現を更に上昇させなかった。

はIL-lI+ L-10によって誘導されるCOX-2 mRNAsPいの酵素活性は BMMC ライゼ ー トでは殆どの半減期を延ばす効果が額著であった。IL- 1 は検出されなかったが 、 これを酸抽出した後、 抗COX-2 mRNAの発現には全く影響を与えず 、

sP凶抗体カラムによって精製すると 、 sPLfuのCOX-2蛋白の安定性を増すことにより蛋白レベ
ルでCOX-2の発現を増強することが明らかとな

lgE/Ag
IL-10, IL-1�IL-10, IL-1�

った。
0

3 . 5

ホスホリパーゼA2 (PL.k)の解析

sPLA2

P凶はアラキドン酸代謝の初発反応、 すなわ
ち膜リン脂質からのアラキドン酸遊離を司る酵素であり、 肥満細胞には85kDaの細胞質PLA213-Actin(cP凶）と分泌性のII型PLfu ( sPLfu) が存在す
ることがわかっている。 また、IgE/抗原刺激に伴う即時相でのアラキドン酸遊離に cPL知の活性化が起こることが既に示されている。
BMMCにおける cP凶蛋白の発現をイムノブ

ロットにより調べたところ、IL-lI+ L-lO+IgE/抗原刺激後48時間まで有意な変化は認められなか

2

5 10

2 5 10-h

図3 Time course of sPLA2 mRNA expression, assessedby RT-PCR/Southern blotting, in BMMC after activa­tionlgE-sensitized BMMC were cultured for the indicatedperiods after stimulation with 100 i.u./ml IL-10 and 5 ng/
ml IL協in the presence or absence of antigen (Ag). The
expression of sPLA2 mRNA were assessed as describedin the Experimental section.

-46-

接触皮膚炎におけるマスト細胞活性化反応の解析
酵素活性が著しく上昇することを見いだした。 このことから、BMMC中にはsPIAzの活性をマス

Vehicle

クする何等かの因子が存在し、 抗体カラム操作中

Anti-mouse type II sPLA2にこの因子が除かれたものと考えられた。 この方

Control Antibody

法によって検出されたsPIAz活性を各サイトカイ

ン処理間で比較したところ、IL- l+IL-10によりNS-398sP凶蛋白が未刺激の細胞と比べて有意に増加すa

ることが確かめられた。

さらに、 抗sPIA2抗体を培稲系に添加したところ、遅発相のPGD2産生は有意に抑制された（図4)。 また 、 分泌された sPIA2が基質となる細胞膜に結合するのを妨げるヘパリンによっても遅発型 PGD2産生は強く抑制された。 この結果から、

sP凶がBMMCにおける遅発型PGD産生に関与しているものと結論した。

4

考

察

肥満細胞は、 ある特定の刺激に応答して、 二相性のPG圧産生を起こすことが明らかとなった。

数分以内に起こる即時型応答は、 常在型酵素であるcPLfuとCOX-1 により 、 数時間後に起こる遅

1

2

3

4

s

Delayed PGD2 Generation(ng/106 cells}
図4 Inhibition of delayed PG店generation by the Anti­sPLA 2 antibody
Aspirin-pretreated BMMC were activated with lgE/Ag +IL-10 + IL-1/3 for 10 h in the presence or absence of theantibody against mouse type II PLA 2 (10 mg/ml) or the
COX-2 inhibitor NS-398 (10 ng/ml), and PGD2 released
into the supernatant was quantified.

がるものと期待される。
文献1) Ashraf MMD, Murakami M, Kudo I, : Cross­linking of the high-affinity IgE receptor induces
the expression of cyclo-oxygenase 2 and atten­

発応答は誘導型酵索であるsPLfuとCOX-2 によdant prostaglandin generation requiring

り調節されていた。 この様に、炎症刺激によって
時間依存的に産生される同 一 の最終産物(PGD2)interleukin 10and interleukin 1(3 in mouse cul­

実は、アレルギー応答の急性期と慢性期とで異な

2) Ashraf MMD, Murakami M, Shimbara S, et

味深い。 また、肥満細胞の遅発応答はサイトカイ

cyclooxygenase-2-mediated delayed prostaglan­

が、 異なる生合成経路により産生されるという事

る標的分子を考慮する必要性を意味しており、興ンの発現誘導を伴うことが明らかにされつつあ

tured mast cells, Biochem ]., 320, 965-973, 1996.
al., : Type II phospholipase A2 is linked todin D2generation by cultured mouse mast cells

る。 肥満細胞の機能は周囲の微小環境に存在する

following Fcc: RI- and cytokine-dependent acti­

イトカインの産生を制御することが、慢性アレル726-732, 1996.

サイトカインの影響を強く受けることから、各サ

ギ 疾患の病態に影響を与え、治療や予防につなー-47-vation, Biochem. Biophys. Res. Commun., 229,

皮膚表皮繍胞におけるリピドバイオファクタ ー の機能発現機構
新侶大学

医学部生化学第二教室

藤

井

博

Cutaneous fatty acid-binding protein (C-FABP) has been isolated from rat skin and its cDNA has been
identified. As C-FABP contains five cysteines,which is rare in other FABPs so far isolated, we examined
whether or not these cysteine residues are involved in the FABP function. Determination of the locations of
intramolecular disulfide bonds of native C-FABP revealed that two are present between Cys-67 and Cys-87,
and between Cys-120 and Cys-127. Native C-FABP purified from rat skin exhibited the ability to bind to stearicacid whereas both native C-FABP reduced witl1 ditliiothreitol and bacterially expressed C-FABP showed little
binding activity. The reduced C-FABP after renaturation showed the partial recovery of the binding activity.
Ion-Spray mass spectrometry of native,recombinant,or renaturated recombinant C-FABP revealed that two
exact disulfide bonds (between Cys-67 and Cys-87,and between Cys-120 and Cys-127), five free sulfhydryl
groups.or partial exact but not non-native disulfide bonds are present in each molecule.respectively
Hypothetical three dimensional structure of C-FABP showed that atomic distances between the sulfur atomsof Cys-67 and Cys-87 and of Cys-120 and Cys-127 enable to form two intramolecular disulfide bonds. These
results suggest that two exact intramolecular disulfide bonds are required for its high binding activity toward
fatty acids. In situ hybridization and immunohistochemical analyses showed that C-FABP is expressed in theepidermis and sebaceous glands of normal rat skin. Northern blot analysis revealed that C-FABP mRNA ishighly expressed in skin.tongue and eye. Interestingly, the C-FABP message was most abundant in eye, andwas present at lower levels in brain, testis and fat. These results indicate that C-FABP functions in various
tissues containing epithelial cells.

緒

構の解析がコスメトロ ジ ー の新たな展開へ大いに言貢献すると思われる。 我々は、 これまでに、 長鎖

皮南の水分保護バリア ーは、 体内の水分保持機

脂肪酸やその他の脂溶性リガンド（プロスタグラ

構に重要な機能を果たしている。 このバリアーのンジンなど）と結合する蛋白質、 脂肪酸結合蛋白

本体は、 脂質であることから、 皮南における脂質質(FABP)を種々の組織から単離し、 それらの代謝調節機構の研究は、 皮南の恒常性維持機構を構造と機能および遺伝子発現調節機構を解析して考える上で極めて重要である。 一般に、 生体機能きた。 しかしながら、 生体内におけるFABPの生の調節 に与る生理活性脂質（リピドバイオファク

理機能の詳細はよくわかっていない。 これらの蛋タ ー）は、 その機能発現のために、 特異的レセプ
タ ー あるいは結合彊白質を必要とする。 とりわ

白質はレチノ ー ル、 レチノイン酸などと結合するけ、 皮閲における必須脂肪酸など、 リピドバイオ

チノイン酸結合蛋白質(CRABP)とも相同性が高ファクターと呼ばれる生理活性脂質の重要性が示
唆されていることから、 それらのレセプターある

く、 FABPス ー パーファミリ ー を形成している。

いは結合蛋白質の構造・機能・遺伝子発現調節機

ラットの皮園から単離し、 そのcDNAをクロ ー ニ

細胞内レチノール結合蛋白質(CRBP)、 細胞内レ

最近、 我々は皮肉型、(cutaneous)C- FABP をングしたが 、 C- FABP は、 ヒト乾癬症で大量にStudies on a novel protein, cutaneous
fatty acid-binding protein, involved in
tl1e action ofbioactive lipids in出e skin

ス皮閲細胞癌 （扁平上皮癌） で大量発現している

Hiroshi Fujii

蛋白質 (ma! 1) と非常 に高い相同性を示した。

Department of Biochemistry,Nii ga t a Un i v e r s i t y S c h o o l o f
Medicine

皮閲表皮細胞の増殖や分化の調節機構を研究する

発現している蛋白質(PA- FABP)および、 マウ

上で、 乾歯や扁平上皮癌などの疾患はよい実験モ-48-

皮膚表面細胞におけるリピオファクタ ー の機能発現機構

デ ルになると考えられる。 特に、 乾癬 では、表皮細胞の増殖に基づいて、 角質増殖 、 不全角化、 甚rnM)および酸化型(0.2mM)グルタチオンの存在化 で、25℃、 3時間反応させた。:JI底層および有棘層下層の核分裂細胞数の増加など
2 .4

が形態学的特徴としてあ げられるが、 皮曲の光老分子内ジスルフィド結合の位置決定化や 加齢による老化は、 皮肉の角化と密接に関連ネイティブまたは組換えC-FABPを6M塩酸しているた め、 乾癬におけるC- FABPの遺伝子

グアニ ジンの存在下で、 ヨ ー ド アセトアミド(2発現調節機構やC-FABPと脂質代謝との関係のmM)処理後塩酸 グアニジンの濃度を2Mま で研究は、 皮雨の老化や恒常性維持機構の解明につ下げて、 Achromobac et rl yticusのリ ジ ルエンドペ

ながると思われる。 また、 興味深いことにレチノ

プチダ ー ゼを作用させた。 得られたペプチド断片

イン酸はC-FABPと相同性が高く、 同一ファミ

を逆相HPLC で分離し、 各々のペプチド断片の

リ ー に属する CR ABPのリガンド であると同時アミノ酸 配 列 をシ ー ク エ ンサ ー ( A p p l ie dに 、 皮南の老化や角質化を防止する医薬品である

Bi osyste ms 470A) で解析した。 さらに、 ジチオ

が、C-FABPやCRABPの皮曲における生理機

スレイトー ル(DTI)で 還元した断片についても

能、 およびC-FABPの生体内リガンドの同定な同様にシー クエンス解析した。 また、HPLC で精どの研究は、 リピドバイオファクタ ー の皮府にお製したペプチド断片の質量分析も行ない、 アミノ

ける機能発現機構を解析する上で重要な研究課題

酸配列およびジス ルフィド結合の有無を確かめた。

であると思われる。 本研究 では、 細胞増殖が異常2. 5に充進した皮園表皮細胞における皮曲型FABP

正常ラットの皮膚におけるC-FABPの局在の構造と機能の相関八遺伝子発現調節機構、 こ組換えC-FABPに対する特異的ポリクロ ー ナ

れらの疾患への関与機構および 、 皮閲における機ル 抗体を作製し、 こ れ を 用 い て 、 正常 ラッ ト

能解析などを目的とする。

(S pr ague-D awl y, 8週齢）の皮南の切片を免疫染

2
2. 1

実

色した。 また、C-FABPmRNAの局在をin situ験

ハイブリダイゼ ー ション法によって調べた。 41

ラットC-FABPの大腸菌における発現及ゲニン(DIG )UTPをアンチセンスおよびセンス

び精製
先にクロ

C-FABPcDNAをpGE M-3 Zに入れ、 ジゴキシ

ー ニン グした2)全長C-FABPcDNA

プロ ー ブに取り込ませ標識した。 固定組織切片とに入れ大腸菌E.C oli Bl21で発プロ ー ブをハイブリダイズさせた後、 ア ルカリホ現させた。 発現した蛋白質のほとんどは、 可溶性

スファタ ー ゼ標識抗DIG 抗体を作用させ、 発色画分に回収された。 細胞破壊後、 可溶性画分を基質(BCIP、NBT )を加えシグナルを検出した。

をpET3aベクタ

ー

DE-52、S upe rdex 7 5 などのクロマトグラフィ ー
を用いて均 ー になるま で精製した。

2.6

正常ヒトおよびいくつかの皮膚疾患におけ る C- FABP の発現
2. 2

ヒトC-FABP(PA-FABP)5lのN末端領域脂肪酸との結合活性の測定

14c 標識ステアリン酸をリガンドとして 用い、 リ(12-24)の13 アミノ酸から な る ペ プ チ ド

ピデックス法2)でC-FABPとの結合活性を調べた。

RLDDS KGFDEYMK に対するポリクロ ー ナル抗体を作製し、 ヒトの正常およ び 、 有棘細胞癌

2.3

組換えC-FABPのプロテインジスルフィ(Squamous cell c arcinoma : SCC )、 甚底細胞癌

ドイソメラ ー ゼ(PDI)による再生( B a s al c e ll c arc inoma:B CC )、 悪性黒色腫

精製した組換えC-FABPとPDI を還元型(2(Malignant mel anoma:MM)などの皮庖疾患由来- 49 -

の細胞における C-FABPの発現を免疫組織化学

SDSポリアクリルアミドゲル電気泳動上同 一 の的手法で調べた。 6)

大きさ（約14kDa) を示した。 この ことは、 ネイ
ティブC-FABPの質量分析の結果、 ネイティブ

2. 7

C-FABPの組織分布

C-FABPが翻訳後修飾を受けていないことと矛

C-FABPmRNAの発現を調べるため、 種々の盾しなかった。

組織（皮曲、 大脳、 小脳、 眼、 舌 、 心臓、 肺、 脂肪、 肝臓、 牌臓、 筋肉、 腎臓、 副腎、 精巣、 卵巣、

3 . 2組換えC-FABPの脂肪酸結合活性

胃、 十二指腸、 回腸および盲腸）から全RNAをFig. 2に示すように、 精製した組換えC-FABP

Chirgwin

ザンを用いて脂肪酸（ステアリン酸）との結合活性をブロット法によってC-FABPの組織 分布を調べた。

調べたところ、 ほとんど結合活性が見られなかっ7l

らの方法によって抽出し、 ノ

3
3 . 1

ー

た(0)。 3.2でも述べたように、 ネイティプC

結果と考察-FABPは翻訳後修飾を受けていないことから、ラットC-FABPの大腸菌における発現

我々は組換えC-FABPの脂肪酸結合活性が消失

大腸菌で大量発現させた C-FABPは、 可溶性

した理由として、 C-FABP分子内にある5つの画分に回収され、 DE52およびSuperdex75クロ

システイン残基のうち、 いずれかが分子内ジスル

マトグラフィ

な精製標品として得られフィド結合形成に関与し組換えC-FABPでは還た。 Fig. 1に示すように、 組換えC-FABPはラ

元的な環境にさらされたために、 分子内ジスルフット皮曲から精製したネイティブ C-FABPとィド結合が壊れ、 脂肪酸との結合に必要な活性型

ー

で均

ー

コンホ ー メ ー ションが維持できなくなったためで
4

3

9~

はないかと考えた。 この可能性を確かめるため 、

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0.12
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800OEu) 3!VcrV 31S O N n o s-l,.o..

0.02

10

Fig. 1. Analysis of the bacterialy expressed recombinant
rat C-FABP after purification. Samples were analyzed
by a 10% Tricine/SDS/PAGE. The bands were stainedwith Commassie brilliant blue. Lane 1, soluble frac­tion of the transformant containing the pET3a control
vector (20µg of protein); lane 2, soluble fraction of thetransformant containing the C-FABP expression vec­tor (20µg of protein) ; lane 2, purified recombinant C­
FABP (1 µg of protein); lane 4, purified native C-FABP(1µg of protein).

20

STEAR IC ACID (�MJ

Fig. 2. Binding of radiolabeled stearic acid to the recom­
binant and native rat C-FABP. [1且CJ Stearic acid was
incubated with 150 pmol recombinant or native C-FABP
at 37℃ for 1 h. Unbound fatty acid was separated
from bound fatty acid with Lipidex 1000. (●） Native C­
FABP without dithiothreitol;(O) native C-FABP with 2
mM dithiothreitol ; (▲） recombinant C-FABP before
renaturation ; (●） recombinant C-FABP after renatur­
ation.

-50-

皮膚表面細胞におけるリピオファクターの機能発現機構

組換えC-FABPをPDI処理し、 分子内ジス）レフした。 興味深いことに 、 ラット、 マウスおよびヒィド結合を形成させた後に、 脂肪酸との結合活性

トのC-FABPのジスルフィド結合に関与していを測定した。 その結果、 Fig. 2の（■)で示すよ

る システイン残基(Cys67、 Cys87、 Cys120、

うに 、 ネイティブC-FABPの結合活性の約80%

Cys127) の位置は全て保存されており(Fig. 5 )、の活性が得られた。 従って、 ネイティブC-FABP

これらのシステイン残基はC-FABPの機能発現は、 分子内ジスルフィド結合を持ち、 これは脂肪（脂肪酸との結合）に重要であることが示唆された。

酸との結合に必須の役割を担っていることが示唆された。 次に、 我々は、 5つのシステイン残甚の(A)

うちどのシステイン残基が、 分子内ジスルフィド
結合形成に関与しているか解析した。
分子内ジスルフィド結合の位置決定

ヨ

ドアセト アミド処理したC-FABPをリジ

ー

(
Eu マ

3 . 3

[ N

ー
゜
3uz

ルエンドペプチダ ー ゼ処理し、 得られたペプチド

V8ll0SUVクが得られた(Fig. 3 A)。 それぞれのペプチ

ド断片のアミノ酸配列を決定した結果、 システイン残基を含むペプチド断片は 、 ピ ー ク 8
11、 であった。 このうちピ

ー

、

11

)

断片をHPLCで分離精製したところ、 11個のピー

91 JIO

0.2

10 、

ク8は、 2つのシス_,-Jテインを含み 、 DTIで還元すると 2つのペプチ
ド断片に分かれることからCys67と Cys87がジスルフィド結合を作っていると考えられた。 ま。

た 、 ピ ー ク10も2つのシステインを含み、 Cys120とCys127の間でジスルフィド結合を形成していた。 また 、 ピ ー ク11は1つのシステインを含み 、アミノ酸配列からこのシステイン残基はCys43(B)(Cys43)残基は遊離していることがわかった。 また、 組換えC-FABPのシステイン残基は全て遊離しており、 ジスルフィド結合は形成されていなかった。 このことは 、 C- FABPの活性型コンホーメ ー ションの維持にジスルフィド結合が必要であることを示している。 コンピュ ー タ ー 解析によるC-FABPの三次元構造のモデルをFig. 4に示

40

peak 8: TTVFSXTLGE (residues 62-71)

II

peak 11 : PDCUTLDGNNLTV (residues 41-54)

かめられた。 したがって、 ネイティブC- FABP

Cys120-Cys127) に関与し、 1つのシステイン

30

peak IO: MVVEXVMNNAIXTRVYE (residues I I 6-132)

果はそれぞれのピ ー クの質量分析の結果からも確は分子内ジスルフィド結合(Cys67-Cys87 と

20

ELUTION TIME (min)TETVXTFTDGALVQHQ (residues 83-98)

であることがわかった(Fig. 3 B )。 これらの結の5つのシステイン残基のうち2つのシステイン

10Fig. 3. Reverse-phase HPLC separation of peptides pro­
duced on lysyl endopeptidase digestion of C-FABP.
(A) Flow chart of HPLC separation of each peptide.
The separated peptides are numbered in the order of
their elution. Column, Toyo Soda ODS (octadecylsilica)
120T (0.46 X 25 cm) ; buffer, 0.1 % trifluoroacetic
acid; elution gradient, 1-45% acetonitrile (by vol.) in 40
min; flow rate, 1.0 ml/min.
(B) Amino acid sequence of each peptide fragment
after HPLC separation. X, not detected as cysteine
before reduction and subsequent S-carboxymethylationof each peptide. (一） possible disulfide bond.

- 51 -

3 . 4c­正常ラットの皮膚表皮細胞におけるFABPの局在C-FABPの特異的抗体を用いて、ラット皮閉表皮細胞における発現を調べたところ、Fig. 6に示す様に有棘細胞上部から、 顆粒細胞にかけて強く発現していることがわかった。8)即ち、 皮閲
表皮細胞の終末分化過程で強いC-FABPの発現がみられた。 また、 これらの細胞以外に脂質代謝の活発な皮脂腺でもC-FABPの発現していることがわかった。 さらに、in situハイブリダイゼーション法でC-FABP mRNAの局在を調べた

Fig. 4. Three dimentional structure of rat C-FABP de­
duced by the Swiss-Model Protein Modeling Server
System. C -backbone and side chains of the five cys­
teine residues are shown. The system computed thecoordinates for residues 1 O through 134 of the protein.
Large and small spheres indicate S and C atoms ofthe cysteine residues, respectively.

が、 Fig. 7に示すように、 免疫組織染色法と同様に表皮細胞の一 部と皮脂腺に発現していた。 しかしながら、in situハイブリダイゼ ー ション法では、 Fig. 7に示すように、 C-FABPmRNAは、

1

9 T Q *゜

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43

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同

* * * * * * * * E * D * * * * * * * * * * * * * * L * * * *2 > * ＊

Rat
Mouse
Human

* * * * * * * * ** * * * * * * *91
120
D G A L V Q H Q K W E G K E S T I T R K L K D G K M V V E C• • • • • • • • Q • D • • • • • • • • • • • • • • • I •

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Rat
Mouse
Human

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Rat
Mouse
Human

* * * * * * * * * * * * ** * * * * *
* *
*
* *
* * *
* * * *

3 A * ＊

Rat
Mouse
Human

30

M A S L K D L E G K W R L V E S H G F E D Y M K E L G V G L
M
E
R
D E
I
T V Q Q
D
K

ー

Rat
Mouse
Human

Fig. 5. Comparison of the amino acid sequence of rat C-FABP with those of mouse keratinocyte lipid-binding protein andhuman psoriasis-associated FABP. Amino acid「esidues are numberd. Rat, Mouse and Human stand for rat C-FABP,
mouse keratinocyte lipid-binding protein, and human psoriasis-associated FABP, respectively. Identical cysteine resi­
dues found in rat, mouse and man are boxed. The amino acids identical to those in rat C-FABP a「e indicated byasterisks.

- 52 -

皮膚表面細胞におけるリピオファクタ ー の機能発現機構

Fig. 6. lmmunohistochemical analy­
sis of C-FABP in normal rat skin.
Rat dorsal skin was biopsied andstained with anti-C-FABP antiserum(A, C and D) or preimmune serum(B), as described under EXPERI­MENTAL PROCEDURES.
(A) C-FABP was expressed in theepidermis (arrow) and sebaceous
glands (arrow head).
(B) Staining with preimmune se­rum was negative.
(C) In epidermis, C-FABP was ex­pressed in the upper prickle (p) andgranular (g) cell layers. (b), basal
cell layer; (h), horny cell layer.
(D) In sebaceous glands (arrowhead). C-FABP staining was seenin all sebacytes. Bars; A and B, 80µm; C and D, 40µm.
-53-

Fig. 7. Localization of C-FABP
mRNA in normal rat skin. In situ
hybridization was performed us­
ing the digoxigenin-labeledantisense (A, C and D) or sense(B) riboprobe for C-FABP, as de­scribed under EXP ERIMENTAL
PROCEDURES.
(A) C-FABP mRNA was ex­pressed in the epidermis (arrow)and sebaceous glands (arrow
head)(B) No signal was detected withthe sense RNA probe.
(C) In epidermis, C-FABP
mRNA was expressed in the basal(b), prickle (p), and granular (g)cell layers. (h) horny cell layer.
(D) In sebaceous glands (arrowhead), C-FABP mRNA was ex­pressed in the sebocytes. Bars: A
and B, 80µm; C and D, 40µm .
-54-

皮膚表面細胞におけるリピオファクタ ー の機能発現機構

表皮では主として有棘細胞で強く発現し、 顆粒細activated receptor)が同定されてしヽることから、胞でその発現は減少する傾向にあった。 C-FABP

これらのリピドパイオファクタ ー が C-FABP のの蛋白質と mRNA の発現パタ ー ンが何故異なるのか今後検討しなければならない課題である。また、 C-FABP の皮園における機能解明は今後の課題である。

3.5
現ヒト皮膚表皮細胞における C-FABP の発

ヒトの C-FABP(PA-FABP) 特異的抗体を用いたヒト皮膚組織および細胞の免疫組織染色の結果、 C-FABP はラットの場合と同様、 顆粒細胞

で最も強く発現していることがわかった。 表皮細遺伝子発現や表皮細胞の分化、 増殖のシグナル伝

達因子として作用していることも十分考えられる。9)また、 sec は有棘細胞由来の癌細胞であるが、 C-FABP の遺伝子発現は、 正常有棘細胞に比べて、 かなり冗進していた。 一 方、 BCC や

MM などの細胞では、 C- FABP の発現は全く見られなかった。 今後、 C- FABP の表皮細胞における生理機能、 リピドバイオファクタ ー によるC

-FABP 逍伝子発現制御機構、 および上記皮膚疾

患への C-FABP の関与機構などを解明しなければならない。

胞の分化過程で、 遊離脂肪酸の産生は顆粒層で最も多いことから、 C-FABP の発現と脂肪酸の産3 .6

た、 ヒト乾鮮由来の表皮組織でも C-FABP の強で解析したところ、 Fig. 8に示す様に皮膚以外の生が密接に関連していることが推測される。 まC- FABP の組織分布

C-FABPmRNA の発現をノ ー ザンプロット法

い発現が見られた。 乾鮮では遊離脂肪酸やロイコ

組織、 舌や眼で高い発現が見られた。 特に、 眼やトリエン B4 などのリピドバイオファクタ

舌では皮膚に比べて 3-5 倍くらい高い発現が見ーの産生が高くなっていることから、 これらの脂質はCられた。 それぞれの組織の免疫化学的解析の結-FABP の遺伝子発現のシグナル伝達因子の つ果、 舌では上皮細胞、 眼では角膜や網膜などで高一に なっている可能性も考えられる。 最近、 遊離脂い発現が見られた。光情報伝逹に関与する網膜の肪酸やロイコトリエン B4 などで活性化される核

トランスデュ ー シンaサブユニットは脂肪酸で共内レセプタ ー PPAR (Peroxisome proliferator-

有結合修飾されていることから 10) 、 特に網膜では

28S­
.I8S­
C-F/ヽBP→

Fig. 8. Tissue distribution of rat C-FABP mRNA, as assessed by Northern blot analysis. Total RNA (20µg) isolated fromvarious tissues of adult rats was subjected to Northern blot analysis as described under EXPERIMENTAL PROCE­DU RES. The mRNAs in the respective lanes are for: 1, skin; 2, cerebrum; 3, cerebellum; 4, eye; 5, tongue; 6, heart; 7,lung; 8, adipose tissue; 9, liver; 10, spleen; 11, muscle; 12, kidney; 13, adrenal gland; 14, testis; 15, ovary: 16, stomach;
17, duodenum; 18, jejunum; 19, ileum; 20, caecum.
-55-

C-FABPはこれらの脂肪酸の転送に関わってい文

る可能性もあり興昧がもたれる。 また、 発現星

1) Watanabe R, Fujii H, Odani S, et al: Expres­

献は、 皮蘭の 1/5程度であるが、 脂肪組織や精巣、

sion and characterization of rat cutaneous fatty

脳でも発現していた。 とりわけ、 脂肪組織では、acid- binding protein, submitted toJ BiolChem.

これまで脂肪細胞型FABP (aP2)のみが発現し

2) Watanabe R, Fujii H, Odani S, et al: Molecu­ていると考えられていたが、 我々の研究から叫Jar cloning of a cDNA encoding a novel fatty acid­

C-FABPもこの組織で発現していることが示さ

bindin protein from rat skin, Biochem Biophys

れた。 さらに、 培養細胞を使った実験から 、 aP2

ResCommun, 200, 253-259, 1994

は前駆脂肪細胞が脂肪細胞に分化して初めて発現

3) Lambert N and Freedman R B: Kinetics and

するのに対して、 C- FABPは前駆脂肪細胞で既specificity of homogeneous protein disulphide­に 発 現 し て い る こ と が わ か っ た 。 最 近の

isomerase in protein disulphide isomerization

Spiegelmanらの報告 12) によると、 aP2のノック

and in thiol-protein-disulphide oxidoreduction,

アウトマウス(aP2-Iー）では、 C-FABP mRNA

BiochemJ, 213, 225-243, 1983の発現が脂肪細胞で、 約20倍誘導されることが

4) Sakai K, Fujii H, Yamamoto T, et al: Tissue­示された。 C-FABPと aP2に機能的な差異があ

specific suppression of aortic fatty acid-binding

るかどうか、 また、 C- FABP遺伝子発現を誘導

protein in streptozotocin-induced diabetic rats,

しているシグナルは何かなど今後の課題である。

EurJ Biochem, 229, 201-206, 1995

この様にC-FABPの組織 分布の結果から、 c­5) Madsen P, Rasmussen H H, Leffers H, et al:

FABPは発生学的に外胚葉由来の上皮細胞で発現

Moleculer cloning and expression of a novel

している傾向が見られた。 今後、 これらの細胞に

keratinocyte protein (psoriasis-associated fatty

おけるC-FABPの機能の解明が待たれる。 最近

acid-binding protein [PA-FABPJ) similarity toの報告によると、 末梢神経節の損傷ー再生に伴っ

fatty acid-binding proteins,J Invest Dermatol, 99,て、 背根神経節のニュー

299-305, 1992

ロンで発現が上昇している蛋白質の1つがC-FABPであることがわかっ

6) Watanabe R, Fujii H, Yamamoto A, et al: Im­

また、 乾鮮 5) や扁平上皮癌 14) などの増munohistochemical distribution of cutaneous

殖が異常に充進した細胞でC-FABPの発現が誘fatty acid-binding protein in human skin, J

導されることが知られているが、 C-FABPの発

Dermatol Sci, in press

た。

13)

現誘導に関与しているシグナルおよびこのシグナ

7)ChirgwinJ M, Przybyla A E, MacDonald RJ,ルによるC- FABP遺伝子発現制御機構の解析

et al: Isolation of biologically active ribonucleic

は 、 C- FABPの生理 機能を解明する上で重要なacid from sources enriched in ribonuclease, Bio­

研究課題である。

chemistry, 18, 5294-5299, 1979謝8) Watanabe R, Fujii H, Yamamoto A, et al: Ex­

辞pression of cutaneous fatty acid-binding protein
and its mRNA in rat skin, Arch Dermatol Res,ー

コスメトロジ 研究振興財団の研究支援に深謝

288, 481-483, 1996

いたします。 本研究は、 新潟大学医学部生化学第ニ教室教授小野輝夫先生、 同大学理学部教授小谷9)藤井博： Fatty acid-binding protein, FABP, 動脈硬化，24 (7,8), 353-361, 1996

昌司先生および同大学医学部皮閲科学教室との共同研究で行われたものであり、 深謝いたします。

10) Fukada Y, Takao T, Ohgura H, et al:
Farnesylated gamma-subunit of photoreceptor-56-

皮膚表面細胞におけるリピオファクタ ー の機能発現機構

G protein indispensable for GTP-binding, Na­

13) Leon MD, Welcher A A, Nahin RH, et al:

ture, 346, 658-660, 1990

Fatty acid binding protein is induced in neurons11) FujiiH and Ono T: unpublished resultsof the dorsal root ganglia after peripheral nerve12) Hotamisligil GS, Johnson RS, Distel RJ, etinjury, J Neurosci Res, 44, 283-292, 1996

al: Uncoupling of obesity from insulin resistance14) Krieg P, FeilS, Furstenberger G et al: Tumor­

thro ugh a targeted mutation in aP2, thespecific overxpression of a novel keratinocyte

adipocyte fatty acid binding protein, Science,

lipid-binding protein, J Biol Chem, 268, 17362-

274, 1377-1379, 1996

17369, 1993

- 57-

炎症後色素沈着におけるエイコサノイドによるメラノサイト活性化機構の解明
京都大学大学院

医学研究科臨床器官病態学講座皮I肉病態学分野

井

階

一

幸

Skin pigmentation after inflammation is a well recognized phenomenon, but its mechanisms have bee un­
known yet. A number of substances are considered to contribute to post-inflammatory pigmentation, andeicosanoids are one of the most important mediators. Eicosanoids, prostaglandins (PGs) or leukotrienes(LTs) , show a potent pharmacological activity in various tissues, and actively synthesized and degraded in
the skin, and contribute to the pathogenesis of a number of skin diseases such as UV-dermatitis, atopic der­matitis, urticaria and psoriasis. We examined the synthesis of leukotrienes in human melanoma cells inorder to assess the function of leukotrienes in human melanocytes. The enzyme activity of LTA, hydrolase,which catalyzes the conversion of LTA, to LTB,, was detected in the supernatant of cultured human mela­noma cells (MeWo cells) and melanoma cells obtained from patients. Immunoblotting analysis using ananti-human LTA, hydrolase antibody demonstrated LTA, hydrolase as a 70-kDa protein in both MeWo andmelanoma cells. Considerable en勾me activity of LTC, synthase, which catalyzes the conversion of LTA, to
LTC,, was detected in the microsomal fraction of both MeWo and melanoma cells. The HPLC profile of the
LTC, synthase reaction products revealed that LTC, was the main product. LTD, was not detected underthese conditions, indicating that the microsomal fraction of human melanoma cells lacks the membrane­bound g -glutamyl transferase that converts LTC, to LTD,. LTC, synthase activity was inhibited by the addi­
tion of M K -886, and was not altered by treatment with N-ethylmaleimide (NEM) or 1-chloro-2,4-dinitroben­
zene (CDNB) . These results indicate that the enzyme responsible for the conversion of LTA, to LTC, inhuman melanoma cells is LTC, synthase rather than a nonspecific or microsomal glutathione-s-transferase.
These results also suggest that human melanoma cells can generate LTB, and LTC, from LTA,, and that thisprocess is catalyzed by two en勾mes: LTA, hydrolase and LTC, synthase.

緒

し 、 組織障害性に働く諸酵素 、 サイトカイン 、 成言

長因子、接着分子およびエイコサノイドなどが遊

私達の皮膚に紫外線があたると発赤などの急性

離し 、 これらが、表皮基底層のメラノサイトに生の炎症症状(Sunburn) が生じ、 3-4日後から物学的作用を与えることは十分に考えられる。さ黒褐色の色素沈着(Suntan)を認めることはよくらに、肥満細胞がヒスタミンやエイコサノイドを

ー

性皮膚炎を

遊離 し た り 、 ある いは局所に浸潤し たマクロ

はじめさまざまな炎症性皮南疾患はあとに色素沈

ファ ー ジがエイコサノイドを産生する可能性もあ着をきたす。 これらの炎症時の局所皮膚においる。

知られている。ま た、湿疹やアトピて、 プロスタグランジン(PG) やロイコトリエ

さて 、 このエイコサノイドはアラキドン酸由来

ン(LT)などのエイコサノイドが増加することかの脂質メディエ ー タ ー であり、炎症状態にある細ら、これら脂質メディエ ー タ ー が皮南の色素沈着

胞が何らかの刺激や障害を受けて、細胞内のホスに関与していると考えられている (l - 5) 。 さらに 、

ホリパ ー ゼA2がカルシウム依存性に活性化さ皮南の炎症時には好中球、 好酸球が局所に浸潤れ、リン脂質よりアラキドン酸が遊離する。このア ラ キ ド ン 酸 は 速 や か に代謝さ れ て

Study of the Role of Eicosanoids inMelanocyte-stimulation in Post-in­
flammatory Pigmentation

トロンボキサンが 、 Lipoxygenase 経路によりロ

Kouichi Ikai

イコトリエンなどのエイコサノイドが生成する。

Cyclooxygenase経路によりプロスタグランジン 、生成したエイコサノイドは速やかに細胞外へ放出
され、細胞表面に存在する特異的な受容体を介し- 58 -

炎症後色素沈藩におけるエイコサノイドによるメラノサイト活性化機構の解明て、臓器や組織に多彩な生理活性を発揮し、 種々

37℃で培接し、80%コンフルエントになった時点の生理現象や各種疾患の病態に影響を与える。 エで、 ロ イコトリエ ンを添加 し、4 8 時間後、位相差イコサノイドは一般に生体内できわめて不安定で顕微鏡で観察した。

あるが、 ごく微量、 通常、 pM-nM のオ ー ダ ー
で、オ ー タコイドとして種々の臓器にきわめて強

2.3

ヒトメラノ ー マ細胞株の培養およびヌ ー

力な薬理作用 を発揮する(6 -り）。遊離された ロ イ

ドマウスヘの移植

コトリエンのうち、LT恥は白血球の局所への浸ヒトメラノ ー マ細胞株としてMeWo cell <19、 20)

潤・脱顆粒を促進させ、 さらに多量の ロ イコトリを用いた。培養は10%fetal calf serum (FCS)をエンが炎症巣に産生・放出される。さらに直接的含むDulbecco's modified Eagl e's mediumに、 LTB1はメラノサイトを活性 化し、 LTCiと(DMEM)(Gibco, Grand Island, NY)培地中、

LTD1はメラノサイトの増殖誘導能を持つ。 ロ イ

37℃で培養した。 5 X 10 6 のMeWo cells をヌ ーコトリエ ンはオ ー タコイドとして作用するので、ドマウスの背に移植 し、 2週後、 腫瘍の重鼠が平メラノサイト自身も ロ イコトリエ ンを産生し、

均1.4 gのところで摘出した。

周囲の表皮細胞、メラノサイト、真皮の、好中球、リンパ球、 マク ロ ファ ー ジ、肥満細胞、線維芽細

2.4

胞などの浸潤細胞にも影響を与えると考えられ

び色素性母斑の採取

る

患者材料よりのヒトメラノ ー マ細胞およ皮廂科手術時に患者の同意のもとにヒトメラ(IO- 16) 0

今回、私達は炎症後の色素沈着の機構を解明す

ノ ー マ細胞および 色素性母斑細胞を入手した。

るために、オ ー タコイドとしての ロ イコトリエ ンのメラノサイトヘの影響ならびにメラノサイト自2.5

体の ロ イコトリ エ ン産生能を検討してみた。

皮閲科手術時に得られたヒトメラノー マ細胞、

2
2 .1

材

実

エイコサノイド合成諸酵粟の活性測定

色素性母斑細胞およびヌ ー ドマウス移植ヒトメラ

験ノ ー マ をホモゲナイズ後 、 細 胞 分 画法に てCytosol 分画 、 Microsome 分画に分離し、 それら料

LTB4、 P GB:心よびLTA4メチル エ ステル はを材料として、以下のエ イコサノイドの合成に関Cayman Chemical (Ann Arbor 、 MI)より、 1-

与する諸酵素の活性ならび に局在を検索した。

chloro-2,4-dinitrobenzene (CD NB)は東京化成より、 N-ethylmaleimide (NEM)とグル タチオ

2.5.1

LTA4水解酵素

ンは和光純薬より購入した。MK-8 86はMerck

LTふ水解酵素活性の測定は、 上記のメラノー

Frosst社(Claire-Dorval, Quebec, Canada)よ

マの分画に、 50mM Tris- HCI (pH7. 8)、 1mg/ me

り提供を受けた。抗LTA4水解酵素抗体 (17) は東ウシ血清アルブミンを含む反応液(50µ€)を

京大学医学部第2生化学教室の清水孝雄教授より

37℃、1分間プレインキュベ ー ションし、LTA工提供を受けた。BALB/c-nu/nu ヌ ー ドマウスは

タノ ー ル溶液 （終濃度70µM)を加えて、 反応

清水実験材料より購入した。

を開始した。37℃、 3 分間の反応の後、 反応停止
液（アセトニトリ ル／メタノ ー ル／酢酸、150/50/

2. 2

ヒト正常メラノサイトの培養

3)100µ€ を加え、12,000回転、5分間で遠心し、ヒト正常メラノサイトはクラボウより購人した

除蛋白をした。 遠心血清120µ€に20µeの0.35"Melanocell"'181を用いた。培養は添付のマニュ% EDTA pH9.8)を加えて混和し、 そのうち50アルに従い、 HMGS 添加Medium154S の培地中、µ€ を HPLCに注入した。HPLCにはODSカラム-59 -( Tosoh OFDS80 TM)を用い 、 溶媒として ア セト

3

ニトリル／メタノ ー ル／水／酢酸、31 /3 /0.006を3. 1用いた。H P LCの流速は1 me/ 分とし、紫外光270

結果

ロイコトリエンの培養ヒト正常メラノサ

イトヘの影響nmで生成した LTB4 の量を、 PG恥を内部標準として測定した(17.21.22)"Mel anocell"をH MGS添加 Mediuml54 S の培

0

地中、37℃で培養し、80%コン フルエントになっ
2 . 5. 2

LTC 4合成酵素

た時点で、 5 mMのLIB4、 L1C4、PGEz、PGD2

LTい合成酵素活性の測定は LTA 4 水解酵素活一を添加し、48 時間後、位相差顕微鏡で観察した。

で あり、反応系に lOmMのグ）レ

図lに5mMのLT恥添加時の所見を示した。 メ

タチオンを加え、 pH8.0 で反応させ、 生成したラノサイトは大型化し、樹枝状突起の数も増加し

LTC4の量を 紫外光280 nmで測定した(23)ていた。LTC4、PGE2、PGD2添加でも程度の差性測定とほぼ同0はあっても同様の所見が得られた
2. 5. 3ー

5ー

リポキシゲナ

5 リポキシゲナーー

ゼ

ゼ活性測定は25 µM [1-3.2

LTA4水解酵素活性

t4CJアラキドン酸(50,000 cpm、Snmol、 5µ1! 工LTふ水解酵素活性は、皮膚科手術時に採取しタノ ー ル溶液）と酵素を、 2 mMCaCl 2、 2 mMたヒト メラノ ー マ細胞およびヌ ードマウス移植

ATPを含むSOmMリン酸 カリウム緩衝液( pH7.4 )MeWo細胞のCytosol画分(100,000 X g、 1 hr)の反応液（総量 200µR)中で30℃で2分間 反応に局在した（表1)。M e Wo細胞(0.7 2を行った。 0.3 meの反応停止液［ジ土エチルエー テル／メタノ ー ル /0. M
2 クエン酸(30 : 40 : 1) ]を添加後、 反応生成物を 有機層に抽出し 、 200µRの有機層をシリカゲルのT LCプレ ー トに帯状にス ポットした。 石油エー テル／ジエチルエー テ
ル／酢酸 (15 : 85 : 0.1 ) の展開溶媒で 一10℃で50 分間 TLCを行い、 アラキドン酸と生成物を分離した。オー トラジオグラフィ ー で放射能の分布を調べ、アラキドン酸から5-HPETEあるいはそれに由来する生成物への変換量を求めて酵素活性とした(24)。
2. 6

ウエスタンブロッテイング法

上記のメラノ ー マのCytosol画分を0.2meの20％トリクロロ酢酸にて蛋白を沈殿させ、0.1 meの
1 N NaOHに 溶 解した後 、 蛋白10 mgを12%­
SDS ー ボリア ク リルアミドにLaemmliの方法で展開後(25) 、 ニトロセルロー ス紙に転写し 、 抗LTA4
水解酵素抗体にて ウエスタンブロッテイン グ法を行った(26)。蛋白 量はLowry法(27) で定 量した。

図1 Normal human melanocytes were incubated with
SmM LTB, (upper) or control (lower) .

-60 -炎症後色素沈箔におけるエイコサノイドによるメラノサイト活性化機構の解明
0.04nmol/min/mg protein)

表1

Subcellular Localization of LTA, Hydrolase in Human Melanoma Cells

はモルモット肺(O. 81土
や小腸(0.85土0.23nmol/

Specific activity (nmol/min/mg protein)

min/mg protein)に比較できる程の酵素活性を示した。
3.3

LTA4水解酵泰のウエスタンブロッテイング法
ウエスタンブロッテイング法による解析では、 LTA1水解酵素はモルモット肺（図Melanoma cells(from surgical specimen)

MeWo cells

0.21nmol/min/mg protein)

Homogenate

0 20士0.01

0.04土 0.01

0 72士0.04

0.23士001

N.D.
N.D
N.D.

N.D.
N.D.
N.D.

800 x g pellet
10,000 x g pellet
100,000 x g pellet
100,000 x g supernatant

Cultured cells (MeWo) and tumor cells were homogenized, and the subcellular
fractions were examined for L TA, hydrolase activity. Values represent the mean
土SE of 3 experiments. N.D. = not detected.

2 、 lane 1)、 M eWo細胞(lane 2)、手術時に採取したヒトメラノ ー マ細胞 (lane 3)、 色素性母斑細胞(lane 4)において70-kDaの蛋白バンドとして認められた。
3• 4

LTC 4合成酵索活性

LTC4合成酵素活性は、 皮廣科手術時に採取したヒトメラノ ー マ細胞およびヌ ー ドマウス移植ヒ
ト メ ラ ノ ー マ 細 胞 に お い て、 大部分はの

図2 lmmunoblot analysis using an anti-LTA, hydrolase
antibody. The supernatants (100,000 x g, 1 h; 10 オgprotein in each lane) from guinea pig lung (lane 1) ,human melanoma cell line (MeWo cell) (lane 2) ,malignant melanoma cells (lane 3) and nevus
pigmentosus cells (lane 4) were separated on 12%
SDS-polyacrylamide gel and electrophoreticallytransferred to a nitrocellulose membrane. The proteins
were then immunostained using an anti-LTA, hydrolase
antibody.

Microsome分画(100,000 X g pellet、 1 hr)に局在したが、 一部は10,000 X g pelletの分画にも局在した（表2)。MeWo細胞のMicrosome分画とLTA4とによる反応産物を逆相HPLCで解析すると 、Microsome分画の量の増加とともにLTC4も表2 Subcellular Localization of LTC, Synthase in Human Melanoma Cells
MeWo cells

Melanoma cells(from surgical specimen)

Specific activity (nmol/min/mg protein)
Homogenate

800 x g pellet
10,000 x g pellet
100,000 x g pellet
100,000 x g supernatant

N.D.
N.D.

0.65士0.03
1 88士0.32

N.D.

0 42士003
0.26士0.08
0.19 土0.02
1.62土 0.06

N.D.

Cultured cells (MeWo) and tumor cells were homogenized, and the subcellular fractions
were examined for LTC, synthase activity. Specific activity values represent the mean土SE of 3 experiments. N.D. = not detected.
- 61 -

増加した（図3)。 LTD1 は認められなかった。一れた。 このことは、 LT いを LTD4 に変換する酵

よる反応産物には LTいと LTD1 の両方が認めらーゼがモルモット 肺には存在しても、 ヒトメラ

方 、 モルモット肺のMicrosome分画と LTふとに素である膜結合型y ー グルタミルトタンスフェラ

10µI

0µI
E UQ8N • �
ueq,
osqv

Guinea pig lung20

10Time [min)

40µI

20µI
E uOBZ oou•q,
osqv

E uOBZ eoueqJ
osqv

20

゜

゜

10

Time (min)

;1c、

PGB,

10

20

Time (min)10Time (min)
図3 Reverse phase HPLC profiles of products formed from the incubation of the microsomal fraction(100,000 x g pellet) of cultured melanoma cells (MeWo cells) incubated with LTA,. LTC, isproduced in a dose-dependent manner. LTD, was not detected. In contrast, both LTC, and LTD,are produced by the microsomal fraction of guinea pig lung, indicating that the microsomal fractionof MeWo cells lacks the membrane-bound g-glutamyl transferase that converts LTC, to LTD,表3. Effects of Various Compounds on LTC, Synthase Activity in MeWo cells
Compound
None
CDNB (10 mM)
NEM (10 mM)
MK-886 (0.01 mM)
MK-886 (0.1 mM)
MK-886 (1 mM)
MK-886 (10 mM)

LTC, synthase activity (nmol/min/mg protein)
1.62士0.06
1.59土0.06
1.61土0.03
1.15土0.00
0.66土0.01
0.20士0.01
N.D

Effects on LTC, synthase activity in the microsomal fraction (100,000 x gpellet 1 h ) of MeWo cells by various compounds. LTC, synthase activity,
which was assayed as described in Materials and Methods, was inhibited byincreasing concentrations of MK-886. In contrast, 10 mM of CDNB and NEM
had no effect on the production of LTC,. Values are expressed as the mean
土SE of three experiments. N.D. = not detected.
- 62 -

炎症後色素沈藩におけるエイコサノイドによるメラノサイト活性化機構の解明

0採取したヒトメラノ ー マ細胞およびヌ ー ドマウス

このMeWo細胞のMicrosome分画に局在する

移 植 ヒ ト メラ ノ ー マ細胞において、 大部分はLTC4合成酵素の性質を調べる と、 酵素活性はMicrosome分画(100,000 X g pellet 、 1 hr) に局

MK-886で濃度依存性に阻害されたが、lOmMN

在した（表2)。MeWo細胞のMicrosome分画と-ethyl maleimide やlOmM CDNB、 過剰のグルタ

LTA1とによる反応産物を逆相HPLCで解析する

チオンの添加には影響を受けなかった（表3)。

と、Microsome分画の量の増加とともにLTC4のノ ー マ細胞には欠如していることを意味する(23)4考

産生量は増加したが（図3) 、LT D 1の産生は認め察られなかった。 一方、 モルモット 肺のMicrosome

LTB 4 は浪度依存性に培稲新生児ヒトメラノサ(1

分画とLTA4とによる反応産物にはLTCは�LID1

4 は培養新の両方が認められた。 このことは、LTC1をLID1

生児ヒトメラノサイトの細胞分裂を促進する と報に変換する酵素である膜結合型y ーグルタミルト

告されている (11. 13. 151。従って、これらのロイコ

タンスフェラー ゼがモルモット肺には存在しても、トリエンは種々の皮蘭疾患における炎症後色素沈

ヒトメラノ ー マ細胞には欠如していることを意味

着の重要なメデイエ ー ターでる かもしれない (10、する(2:1)。 このMeWo細胞のMicrosome分画に局

14. 16)。さらにメラノサイト自体によって産生され在する LTC4合成酵素の性質を調べると、酵素活

たロイコトリ エンは表皮のケラチノサイト、他の性はM K-8 8 6 で濃度依存性に阻害されたが、メラノサイト、真皮の好中球、 リンパ球、 マクロlOmMN-ethyl maleimideやlOmM CDNB、 過剰

ファ ー ジ 、 肥満細胞 、 線維芽細胞、 内皮細胞にものグルタチオンの添加には影響を受けなかった

作用する と考えられる。 このことからも、 メラノ（表3)。 MK-886 はロイコトリエン合成 の阻害

サイト自体のロイコトリエン産生を詳しく研究す剤(29)であり、 かつLTC1合成酵素活性をも阻害ることは重要であろう。Abdel-Malekら(28)の若する(30)。 N -e ht yl maleimide はMicrosome分画

干の報告があるものの、ヒトメラノサイトのロイに局在するグルタチオン— s— トランスフェラ ー ゼ

コトリエン合成 についての 研究は乏しい。 それを活性化する(31)、 そしてCDNB はMicrosome分

で、今回、 私達はロイコトリエンの メラノサイト

画に局在するグルタチオン— s— ト ランスフェラ ーへの影響ならびにメラノサイト自体のロイコトリ

ゼの拮抗阻害剤である(32)。 この結果から、 ヒト

エン産生能を検討してみた。ヒト正常メラノサイ

メラノ ー マ細胞において、 LTA1からLTC1へのトを大量に調整する の は困難なので、私達は代わ変換に関与する主たる酵素はMic rosome分画にイトを活性化し 2. 141、 LTC 4 と LT D

りにヒトメラノー

マ細胞株としてMeWo cell を用局在する グルタチオン— sー トランスフェラ ー ゼやしヽた。

非特異的なグルタチオン— s— トランスフェラ ー ゼ

LTふ水解酵素活性は、 皮膚科手術時に採取しではなく、 LTC1合成酵素である と考えられる 。

たヒトメラノ ー マ細胞およびヌ ー ドマウス移植ヒ

これについては、LTC1合成酵素に対する特異抗

トメラノ

ー

マ細胞のCytosol分画に局在した（表体を用いた研究を継続中である(30 )。

1)。 これは抗LTA4水解酵素抗体を用いた免疫

さて、 LTA1水解酵素とLTい合成酵素の基質

組織化学(data not shown) 、ウエスタンブロッテ

であるLTA1はどのように合成 される かという問

ィング法においても確認できた（図2)。これらの題が残っている。 私達の予備的な実験結果では、

結果は、従来のLTA 4 水解酵素はモルモットのほ

アラキドン酸からLTA4への変換に関与する酵素一である5 ー リポキシナ ー ゼ活性はヒト末梢白血球

ぼ全ての細胞、組織に認められるという報告と致する(17. 21 )では認められたものの、 MeWo細胞では認めら

0

一

方 、 LTC4合成酵素活性は、 皮閲科手術時にれなかった。 これは抗5 ー リポキシナ ー ゼ抗体を

- 63-

用いた免疫組織化学、 Western Blotting 法 、 さら

levels of arachidonic acid-derived inflammatoryに、 5

mediators and histamine in atopic dermatitis andー

リボキシゲナーゼ遺伝子をコードするpsoriasis. J Invest Dermatol 86: 105-108, 1986

cDNAの塩基配列に基づいて合成した適切なプラを用いた Rr-PCR 法によっても確認でき

4. R u z i c k a T : T h e p h y s i o l o g y a n d

た。 最近、 ケラチノサイトに 5 ー リポキシナ ー ゼ

pathophysiology of eicosanoids in the skin.

活性が存在するかどうかについては種々の論議がEicosanoids 1: 59-72, 1988

ある。もし、 メラノサイトやケラチノサイトに 5

5 . Ikai K, Imamura S: Role of eicosanoids in the

ゼ活性が存在しないということでpathogenesis of atopic dermatitis. Pros Leuko

イマ

ー

ー

リポキシナ

ー

あれば 、 好中球などのような 5 リポキシナ ー ゼ

Ess Fatty Acids 48: 409-416, 1993

活性が存在する細胞からLTA4 がメラノサイトや

6 . Samuelsson B:Leukotrienes: Mediators of

ケラチノサイトに何らかの機構で移動し、 LTA4

immediate hypersensitivity reactions and

水解酵素や LTC4 合成酵素により LTB4 や LTC4

inflammation. Science 220:568-575, 1983が生成すると仮定されている (33 、 34. 35) 。 このとこ

7 . Lewis RA, Austen KF, Soberman RJ:

ろの機構は興味深いが、不明な点も多い。今回のLeukotrienes and other products of the 5-ー

研究結果はほんの第一歩であり、私達はメラノサ

lipoxygenase pathway. New Eng J Med 323: 645-ー

イトとエイコサノイド、アラキドン酸カスケ ドに関係する酵素、エ イコサノイド受容体の機能 、

655,1990
8 . Janssen TU, Tomic I, Specht E, Beilecke U,

細胞分布を明らかにし、これに基づいて各種炎症

Habenicht AJ: The arachidonic acid cascade,性皮膚疾患の炎症後色素沈着の機構を解明し 、 治

eicosanoids, and signal transduction. Ann NY

療に結び付けていきたいと考えている。

Acad Sci 733: 325-334, 1994

5

追9 . Henderson WR: The role of leukotrienes in記

inflammation. Ann Intern Med 121: 684-697, 1994

抗LTA4 水解酵素抗体を提供していただいた東

10.

Tomita Y, Maeda K, Tagami H: Leukotrienes

京大学医学部第 2 生化学教室の清水孝雄教授に感and thromboxane B2 stimulate normal human

謝の意を表する。また、上記の結果は下記の論文

melanocytes in vitro: possible inducers ofで発表した。

postinflammatory pigmentation. Tohoku J Exp

Okano-Mitani H, Ikai K, Imamura S: Human

Med 156: 303-304, 1988

melanoma cells generate leukotriene B4 and C4

11. Morelli JG, Yohn JJ, Lyons MB, Murphy RC,

from leukotriene A4. Arch Dermatol Res 290:in

Norris DA:Leukotriene C4 and D4 as potent

press,1997.

m i t ogens for cultured human neonatal
melanocytes. J Invest Dermatol 93: 719-722, 1989
12. Morelli JG, Hake SS, Murphy RC, Norris DA:

引用文献
1 . Ikai K, Danno K, Horio T, Narumiya S: EffectLeukotriene B4-induced human melanocyte

of ultraviolet irradiation on mast cell deficient W/

pigmentation and leukotriene C4-induced humanv

W mice. J Invest Dermatol 85: 82-84, 1985

melanocyte growth are inhibited by different

2 . Ikai K, Danno K, Horio T, Narumiya S: Ear

isoquinolinesulfonamides. J Invest Dermatol 98:

swelling in response to UVB irradiation. Arch55-58, 1992

Dermatol Res 278: 455-448, 1986

13. Morelli JG, Kincannon J, Yohn JJ, Zekman T,

3 . Ruzicka T, Simmet T, Peskar BA, Ring J: Skin
- 64 -

Weston WL, Norris DA: Leukotriene C4 and炎症後色素沈箭におけるエイコサノイドによるメラノサイト活性化機構の解明

TGF-alfa are stimulators of human melanocyte
migration in vitro. J Invest Dermatol 98: 290-295,

Biophys Res Commun 135: 139-145, 1986
22. Ikai K, Okano H, Horiguchi Y, Sakamoto Y:

1992

Leukotriene A4 hydrolase in human skin. J Invest
Dermatol 102: 253-257, 1994

14. Tomita Y, Maeda K, Tagami H:Melanocyte­
stimulating properties of arachidonic acid23.

Izumi T, Honda Z, Ohishi N, Kitamura S,

metabolites: Possible role in postinflammatory

Tsuchida S, Sato K, Shimizu T, Seyama Y:

pigmentation. Pigment Cell Res 5: 357-361,1992

Solubilization and partial purification of

15. Medrano EE, Farooqui JZ, Boissy RE, Boissy

leukotriene C4 synthase from guinea-pig lung: a

YL, Akadiri B, Nordlund JJ :Chronic growth

microsomal enzyme with high specificity towards

stimulation of human adult melanocytes by

5,6-epoxide leukotriene A4. Biochim Biophys

inflammatory mediators in vitro: Implication for

Acta 959: 305-315, 1988

nevus formation and initial steps in melanocyte

24. Furukawa M, Yoshimoto T, Ochi K, Yamamoto

oncogenesis. Proc Natl Acad Sci USA 90: 1790-

S: Studies on arachidonate 5-lipoxygenase of rat

1794,1993

basophilic leukemia cells. Biochim Biophys Acta
795: 458-465, 1984

16. M o r e l l i J G , N orris D A:I n f l u e n c e ofinflammatory mediators and cytokines on human

25. Laemmli UK: Cleavage of structural proteinsmelanocyte function. J Invest Dermatol 100: 191s-

during the assembly of the head of bacteriophage

195s,1993

T4. Nature 256: 495-497, 1975

17. Ohishi N, Minami M, Kobayashi J, Seyama

26. Towbin H, Staehlin T, Gordon J: Electrophoretic

Y, Hata J, Yotsumoto H, Takaku F, Shimizu T:transfer of proteins from polyacrylamide gels to

I m m u n o l o g i c a l q u a nt i t i c a t i o n a n dnitrocellulose sheets: procedure and someimmunohistochemical localization of leukotriene

applications. Proc Natl Acad Sci USA 77: 980-

A4 hydrolase in guinea pig tissues. J Biol Chem

984, 1980

265: 7520-7525, 1990
18.

27. Lowry Oh, Rosebrough NJ, Farr AL, Randall

RJ: Protein measurement with the Folin phenol

メラノセル(Melanocell)取扱説明書（クラreagent. J Biol Chem 193: 265-275, 1951

ボウ）
19. Carey TE, Takahashi T, Resnick IA, Oettgen

28. Abdel-Malek Z, Swope V, Doupnik C, Leikauf

HF, Old LJ: Cell surface antigens of human

G, Nordlund J]: Responsiveness of malignant andmalignant melanoma: Mixed hemadsorption

normal melanocytes to autocrine eicosanoids. J

assays for humoral immunity to cultured

Invest Dermatol 92: 393, 1989

autologous melanoma cells. Proc Natl Acad Sci

29. Gillard J, Ford-Hutchinson AW, Chan C,
Charleson S, Foster A, Fortin R, Leger S,

USA 73: 3278-3282, 1976
20. Fogh J, Wright WC, Loveless JD: Absence ofMcfarlane CS, Morton H, Piechuta H, Riendeau

HeLa cell contamination in 169 cell lines derived

D, Rouzer CA, Rokach J, Young R, MacIntyre E,

from human tumors. J Natl Cancer Inst 58: 209-

Eirmann G, Hopple S, Hupe L, Meurer R, Opas

214, 1977

E, Pacholok S: L-663,536 (MK-886)(3-[1- (4-21. Izumi T, Shimizu T, Seyama Y, Ohishi N,

chlorobenzyl) -3-t-butyl-thio-5-isopropylindol-2-

Takaku F: Tissue distribution of leukotriene A4yl]-2,2-dimethylpropanoic acid) , a novel, orallyhydrolase activity in guinea pig. Biochem

active leukotriene biosynthesis inhibitor. Can J-65 -Physiol Phannacol 67:456-464, 1989

Biochem Pharmacol 44: 2047-2053, 1992

30. Welsh DJ, Creely DP, Hauser SD, Mathis KL,

33. Medina JF, Odlander B, Funk CD, Fu JY,

Krivi GG, Isakson PC: Molelular cloning andClaesson HE, Ramark 0: B-lymphocytic cell line

expression of human leukotriene-C4 synthase.

Raji expresses the leukotriene A4 hydrolase gene

Proc Natl Acad Sci USA 91: 9745-9749, 1994

but not the 5-lipoxygenase gene. Biochem

31. Metters KM, Sawyer N, Nicholson DW:

Biophys Res Commun 161: 740-745, 1989

Microsomal glutathione s-transferase is the

34. Jakobsson PJ, Odlander B, Claesson HE:

predominant leukotriene C4 binding site in

Effects of monocyte-lymphocyte interaction on

cellular membranes. J Biol Chem 269: 12816-

the synthesis of leukotriene B4. Eur J Biochem

12823, 1994

196:395-400, 1991

32. Agarwal R, Raza H, Allyn DL, Bickers DR,

35. Breton J, Woolf D, Young P, Chabot-Fletcher:

Mukhtar H: Glutathione s-transferase-dependent

Human keratinocytes Jack the components toconjugation of leukotrine A4-methyl ester toproduce leukotriene B4. J Invest Dermatol 106:

leukotriene C4-methyl ester in mammalian skin.

162-167, 1996-66-

細胞内小器官ペルオキシソ ー ム：エ ー テルリン脂質の生合成と酸素ラジカルスカベンジャ ー 機能及び欠損症
九州大学 理学部

藤

木

幸

夫

We have isolated peroxisome biogenesis mutants from Chinese hamster ovary (CHO) cells by the 9- (1'­pyrene) nonanol/ultraviolet (P90H/UV) method, using the wild-type CHO-Kl cells that had been stablytransfected with cDNA encoding peroxisome assembly factor-I (PAF-1). Nine P90H/UV-resistant cell clones,
ZP104, ZP105, ZP106, ZP107, ZP108, ZP109, ZPllO, ZPlll, and ZP114, were isolated and examined for
intracellular location of catalase, a peroxisomal matrix enzyme, by immunofluorescence microscopy using
anti-catalase antibody. 111ese mutant cell clones showed cytosolic localization of catalase, apparently indicating
the defect of peroxisome biogenesis. Mutants lacking morphologically recognizable peroxisomes also showed
typical peroxisome assembly-defective phenotype such as severe loss of catalase latency and resistance to 12(1'-pyrene) dodecanoic acid (P12) /UV treatment. By transfection of cDNAs for PAF-1 and PAF-2 and cellfusion analysis between the CHO cell mutants including previously isolated Z24, Z65, and ZP92, six mutants,
ZP105, ZP104 and ZP109, ZPllO and ZPlll, and ZP114 were found to belong to four novel complementationgroups, respectively. Complementation analysis with fibroblasts from patients with peroxisome biogenesis
disorders such as Zellweger syndrome revealed that ZP105 and ZP104/ZP109 were found to be in the same
complementatin as human groups II and III, respectively. Furthurmore, ZPllO/ZPlll and ZPl14 were notclassified to any of.ten human complementation groups, indicating that these two groups of mutants are in
the 11th and 12th complementation groups in mammals. Thus, the newly isolated CHO cell mutants defectivein peroxisome biogenesis would be very useful for not only isolating peroxisome biogenesis factors but alsodelineating pathogenic genes responsible for peroxisome biogenesis disorders.

緒

ソ ー ム 病には、 副腎白質ジストロフィ ー (ALD)

言などの単 一 酵素欠損症 、 rhizomelic chondrodys­

ペルオキシソ ー ム (peroxisome) は 、 真核細胞
一plasia punctata などの複数酵素異常症およびペルに広く分布する 重の単位膜で囲まれた球状ない

オキシソ ー ム欠損症がある。 そのうち最も重篤なし楕円形の直径 0.3 から 1µmの細胞内小器官（オものはZellweger症候群や新生児型 ALD などいわ

ルガネラ）である。 その生理的機能は過酸化水素

ゆるペルオキシソ ー ム欠損症であり 、 平均寿命もの生成を伴う酸化反応（呼吸反応） の他 、 脂肪酸

1 年未満と非常に短く、の¢酸化 、 特に最近注目されている極長鎖脂肪酸

現在までに 10 の相補性群が報告されている 2) 、 3) 。

（炭素鎖C22 以上）の短鉗化 、 プラスマロ ー ゲンな

ペルオキシソ ー ムの形成機構については、 細胞質

どエ ー テルリン脂質の合成、 胆汁酸の生合成などの遊離型ポリソ ー ム で合成された構成タンパク質

多岐にわたる 1 ) 。

方 、 ペルオキシソ ー ム 機能のが翻訳後すでに細胞内に存在しているペルオキシ

障害は遺伝性の致死的疾患をもたらすことが判明

ソ ー ム に移送された後、 成長、 分裂により増殖しし、 このオルガネラは生体機能に不可欠と考えらていくというモデルが現在受け入れられている 4)一れるに至っている。 先天性代謝異常症ペルオキシ
Peroxisome : biogenesis of phospho­
lipids, oxygen radical scavenger, andperoxisome biogenesis disorders

また我々は、の共通

常染色体劣性遺伝病として

0

一群のペルオキシソ ー ム タンパク質c 末端 3 アミノ酸配列 SerI Ala-Lys/Arg/

His-Ser-COOH (SKL モチ ー フ） がペルオキシ

ソ ー ム局在化シグナルであることも in vitro タン

Yukio Fujiki,

パク質輸送系、 遺伝子工学的手法を用いて見出し

Kyushu University Faculty of Scienceた 3) 、 5) 。 その他 、 ペルオキシソ ー ムの生合成機構
やヒト欠損症病因解明を目的として、 我々はヒト-67-

ペルオキシソ ー ム欠損症患児由来細胞と同じ表

胞ZP92に対しては、 最近、 相補活性を有するPAF

現型を示す3つの相補性群に属するペルオキシ- 2 cDNAのクロ ー ニングに成功して＼ヽる1111

0

ソ ー ム欠損性CHO(Chinese Ha mster Ovary )細本研究では 、 以下の項目を研究目的とした。

胞株 、 Z24、 Z65 およびZP92を現在までに分離している い 、 7) (図1)。 その1つ ， Z65細胞に対しペ1 . 1）レオキシソー

ペルオキシソ ー ムの形成機構と病 因遺伝子の解明におけるCHO変異細胞の有効性が実ムの形成を回復させるcDNAを遺証されたことから、 さらにより多くの新しい

伝学的相補活性を指標にしてクロ ー ニングし、 そ相補性群に属するペルオキシソ ー ム欠損性の遺伝子産物を Peroxisome Assembly Factor-1

CHO変異細胞の分離を試みる。

(PAF-1、 ペルオキシソー

ム形成因 子一1)と名

1. 2

新しく分離されたCHO変異細胞に対し 、付けた 。 ま た 、 この CHO変巽細胞と同じ相補CHO細胞間 およびヒトペルオキシソ ー ム欠損群（日本F群、 アメリカX群、 ヨ ー ロッパ5群）

症患者由来線維芽細胞との間で細胞融合法なの Zellweger 症候群の患児由来線維芽細胞に 対どにより相補性群を明らかにする。

8)

し、 PAF-1 cDNAはペルオキシソ

ー

ムの形成を

1 . 3 CHO変異細胞の異常を正常化する相補相補 した。 つぎに、 この患者細胞由来のPAF-1

遺伝子を単離するとともに、 正常細胞との比

遺伝子を解析したところ、 119Arg (CGA) がstop

較によりペルオキシソ ー ムの機能とくにプラ

c odon (TGA)に点突然変異した いわゆるho­

スマロ ー ゲンの生合成とその機能に ついて追mozygous nonsense mutationのためペルオキシソ

究 する。

ーム形成能を有しないことが判明した 9 )。 すなわ

2ち、 世界で初めてこの病態の原因遺伝子が解明さ実験れたことになる叫さらに両親は共に同じ部位に

上記目的解明へ向けて、 以下の手法を用いた。

変異をも つheterozygous mutationであることも

2 . 1

新たなペルオキシソ ー ム欠損性CHO細明らかにし、 Zellweger症候群が劣性遺伝病であ胞株の分離： l::'. トの先天性ペルオキシソ ー ム

ることも分子レベルで証明した叫また 、 変異細欠損症には現在少なくとも約10種類の相補性

図1 CHO細胞野生株とペルオキシソ ー ム欠損性変異細胞の表現型
ペルオキシソ ー ムマトリック酵素 、 カタラ ー ゼは変異細胞ではサイトゾ ー ルに局在し 、 ペ ルオキシ ‘ノ ー ムが認められない。a, CHO-K1野生株； b, PAF-1安定表現型野生株； C, 変異細胞ZP104; d,ZP105; e,ZP109; f,ZP110;
g,ZP111; h,ZP114-68-

細胞内小器官ペルオキシ ‘ノ ー ム：エ ー テルリン脂質の生合成と酸素ラジカルスカベンジャ ー 機能及び欠損症群が知られているので、 すでに分離しているびZP92と同様の表現型を示し、3つの相補性群CHO変異細胞に加えて、 多く

ム欠損性変巽細胞と推定された。

の ペ ルオキシソー

ペ ルオキシソ ー

ム欠損性変異細胞株を得る

ため、 先に有用性を示した 9- (1 1 - pyrene)

3 . 2

相補性群分類,,、 12)

nonanol (P90H) /UV法などいわゆる変異株

つぎに、 これらの新たに分離したCHO変展細選択法を用いて変異細胞株の分離を試みた。

胞および先に分離したZ24、 Z 65、 ZP92を含めた

但し、

PAF- lcDNAのクロ ー ニングに用いた細胞間相補性群解析を相補遺伝子導入法および 細CHO変異細胞Z65と同じ相補性群に属する変胞融合法により検討した。 ZP92相補遺伝子であ異細胞の高頻度な分離を避けるため、 CHO細るPAF-2 cDNAのトランスフェクションでは胞（野生株）に予め ペ ルオキシソ

ム形成因子

ZP106に対してのみ ペ ルオキシソ ー ムの形成が観-1 (PAF- 1) cDNAを導入しておき変異原

察されたことから、 ZP106はZP92と同じ相補性処理に供した。

群に属することが明らかになった。 またPAF-1
ーー

ム欠損性CHO変異細胞

cDNAのトランスフェクッションではいずれの細の相補群解析：新たに分離された ペ ルオキシ胞もその巽常が相補されなかったことから、 Z 65

ソ ー ム欠損性CHO変異細胞株について、CHOと同一相補性群の変異細胞は期待通り分離されな変異細胞間にみなら ず、

ペ ルオキシソ ー ム欠

かったことになる。 一方、 細胞融合法による検討

損症患者由来線維芽細胞との間ですべての組

では、 ZP107 およびZP108はZ24との融合ではペみ合わせについて相補性群分類を行った。 そルオキシソ ー ム形成は認められず、 Z24と同じ相の方法としては 、 ポリエチレングリコ ー ルを補性群であることが明らかとなった。 ZP104 と用いた細胞融合法および現在すでにクロ ー ニ

ZP109 およびZPllOとZPlllはそれぞれ融合によ

ングされているPAF-1、 PAF-2の cDNA導り相補できず同 一 相補性群であると判定した。

入トランスフェクション法を併用した。

ZP105およびZP11 4はいずれの細胞との融合によ2 . 2

ペルオキシソ3
3 . 1っても ペ ルオキシソ ー ムが形成されたことから、結果と考察

ペルオキシソー

それらいずれの細胞とも嬰なる相補性群に属する

ム欠損性CHO変異細胞

ことが判明した（表1)。

株の分離と生化学解析 11 、 12)

さらに患者由来細胞との融合試験から、 ZP105

P90H/UVr耐性細胞の中からペルオキシソ ー ム

はヒト相補性群II群 （アメリカ）と、 ZP104 およのマトリクスタンパク質であるカタラ ー ゼに対す

びZP109 は川群とそれぞれ同じ相補性群に属する抗体を用いた蛍光抗体染色でペ ルオキシソ ー ム

ることも明らかになった。 ついで、 ZPllOとZPlllの有無を顕微鏡下で確認したところ、 明らかに ペおよび ZP1 14については、 先に報告されている

ムを欠損しカタラ ー ゼがサイトゾ ー

CHO およびヒトのいずれの相補性群にも属さなルに局在した9つの変異細胞、 ZP104、 ZP105、い、 哺乳動物細胞における第1 1 番目、 第12番目

ZP106、 ZP107、 ZP108、 ZP109 、 ZPUO、 ZPlllおの相補性群変異細胞であることも判明した。

ルオキシソ ー

よびZP1 1 4を得ることができた。 さらにこれらの変異細胞について、 細胞生化学的諸性質を検討し以上の結果から、 分離法の改良により新たな ペペ ルオキシソ ー ム¢—酸化系酵素のプルオキシソ ー ム欠損性CHO変異細胞が効率よく

ロセッシング異常や12- (1'-pyrene) dodecanoic

得られることが実証されたことになり、 この系をacid (P12) /lN処理に対する高い感受性など生用いた さら に多くの ペ ルオキシソ ー ム欠損性

化学的にも先に分離した変異細胞Z24、 Z 6 5 およ

CHO変嬰細胞の分離が期待される。 ヒト相補性

たところ、

-69 -

ペルオキシソーム欠損症相補性群とCHO変異細胞および相補遺伝子

表1

日本

A

ヒ ト
アメリカ オランダ
VIII

相補性群臨床型

CHO変異細胞

相補遺伝子

ZP92

PAF-2

ZS, NALD, IRD

C

VII
IV

D

IX

E

I

2

ZS, NALD, IRD

Z24

F

X

5
4

ZS

265

PAF-1

(ZPl 05)

PTS1R

B

ZS, NALD
3

ZS
ZS

II

ZS, NALD

Ill

ZS

VI

IRD

(ZPl 04,ZP109)

ZS

G(ZPl 1O,ZPl 11)(ZPl 14)
ZS: Zellweger症候群 NALD: 新生児型副腎白質ジストロフィ ー IRD: 乳児型Refsum病群に属する2 種の変異細胞 ZP105 およびZP104/

群と同じ相補性群に属すること、 ZPllOとZPlll

ZP109 を用いた病因解析や ZPllO /ZPlll 細胞並およびZP114はヒトを含む哺乳動物細胞におけびにZP114は2つの新しい哺乳動物細胞 相補性

る新たな2つ（第11、 12番目）の相補性群 変異群に属するペルオキシソーム欠損性CHO変異細胞であることが証明されたことからこれらを相補する新たなペルオキシソーム形成因子の単離につながると考えられる。 さらにこれら動物細胞はプ細胞であることが明かとなった。 今後これらの変異細胞は相補遺伝子の単離など、
ム形成 機構やプラズマロ

ベンジャ ー 機能の解明への有用性が期待される。

ラスマロ ー ゲンの合成とその機能などまだ不明な謝

ペルオキシソ ー ムの生化学的研究にも有用であ

総辞本研究を行うにあたり、 御援助を項いた財団法

り、 今後これらの点についても追究したい。

4ペルオキシソ ーー ゲン等のラジカルスカ

人コスメトロジ ー研究振興財団に謝意を表します。

括

本研究では新たな相補性群に属するペルオキシ

引用文献

ー

ム欠損性CHO変異細胞の分離を、 9 - (1'­1)藤木幸夫：ペルオキシソ ー ムの形成機構とpyrene) nonanol (P90H) /UV法を用いて試み

ペルオキシソ ー ム病 ． 生化学67:204- 223

た。 その結果、 多くのP90H/UVi耐性細胞からカ(1995).

ソ

タラ ー ゼ抗体染色検定法により9つ(ZP104 -2)藤木幸夫：ペルオキシソ ー ム病の遺伝子診

ZP114)の典型的なペルオキシソ ー ム欠損性変異

断「遺伝子診断ー その現状と展望J. 医学のあ細胞を同定、 分離した。 これらの変異細胞についゆみ174: 477 - 483 (1995).

て、 既存の3種を含めCHO変異細胞間およびペ

3) Fujiki, Y.: Peroxisomal topogenic signals andム欠損症患者由来線維芽細胞との細the etiology of peroxisome - deficient disease.

胞融合法等による相補性群解析の結果、 ZP105、

In Membrane Protein Transport (Rothman, S.,

ZP104とZP109はそれぞれヒト相補性群II群 、 UIed.) JAI Press, Greenwich, 1996, vol. 3, 213 -

ルオキシソ

ー

-70-

細胞内小器官ペルオキシソ ー ム：エ ー テルリン脂質の生合成と酸素ラジカルスカベンジャ ー 機能及び欠損症

T., Shirayoshi, Y., Mori, T., and Fujiki, Y.: A hu­

229.
4) Lazarow, P. B. and Fujiki, Y.: Biogenesis ofman gene responsible for Zellweger syndrome

peroxisomes. Annu. Rev. Cell Biol. 1, 489-530

that affects peroxisome assembly. Science, 255,

(1985).

1132 - 1134 (1992).

5) Miura, S., Kasuya - Arai, I., Mori, H.,

10) Tsukamoto, T. Miura, S., Nakai, T., Yokota,

Miyazawa, S., Osumi, T., Hashimoto, T., andS., Shimozawa, N., Suzuki, Y., Orii, T., Fujiki,

Fujiki, Y.: C - Terminal consensus Ser - Lys

Y., Sakai, F., Bogaki, A., Yasumo,H.,and Osumi,- Leu - related tripeptide of peroxisomal pro­T.: Peroxisome assembly factor - 2, a putative

teins functions in vitro as a minimal peroxisome

ATPase cloned by functional complementation- targeting signal. J. Biol. Chem. 267, 14405 -on a peroxisome - deficient mammalian cell

14411 (1992).

mutant. Nature Genet. 11,395 - 401 (1995).

6) Tsukamoto, T., Yokota, S. and Fujiki, Y.: Iso­

11) Okumoto, K., Bogaki, A., Tateishi, K.,

lation and characterization of Chinese hamster

Tsukamoto, T., Osumi, T., Shimozawa N.,

overy cell mutants defective in assembly of per­Suzuki, Y., Orii, T. and Fujiki, Y.: Isolation andoxisomes. J. Cell. Biol. 110, 651 - 660 (1990).

characterization of peroxisome - deficient Chi­

7) Shimozawa, N., Tsukamoto, T., Suzuki, Y.,nese hamster ovary cell mutants representing

Orii, T.,and Fujiki, Y. : Animal cell mutants rep­

human complementation group Ill . Exp. Cellsome - defective Zellweger syndrome. J. Clin.

12) Tateishi, K., Okumoto, K., Shimozawa, N.,

resent two complementation groups of peroxi­

Res. 233, in press (1997).

Invest. 90: 1864 - 1870 (1992).
8) Tsukamoto, T., Miura, S. and Fujiki,Y.: Res­

Tsukamoto, T., Osumi, T., Suzuki, Y., Kondo, N.,

Okano, I. and Fujiki, Y.: Newly identified Chi­

toration by a 35K membrane protein of peroxi­

nese hamster ovary cell mutants defective in per­some assembly in a peroxisome - deficient

oxisome biogenesis represent two novel comple­

mammalian cell mutant. Nature 350,77 - 81

mentation groups in mammals. Eur. J. Cell Biol.,(1991).
)
9 Simozawa, N., Tsukamoto, T., Suzuki, Y., Orii,- 71 -

in press (1997).

多成分油性皮膚透過促進システムの有効性及び作用機構に関する研究
城西大学

薬学部

杉 林 堅 次Utility and action mechanism of a multi-component Jipophilic skin-penetration enhancer, L-lactic acid-ethanol­
isopropyl myristate CTPM) system (LEI system) were investigated. Silicone fluid, 1PM, ethanol-IPM (ED system,
and L-lactic acid-IPM (LD system were used for comparison with the LEI system. Rank order of the permeationof a model compound, ketotifen (KT) through excised hairless rat skin was silicone fluid< 1PM< LI system«EI system< LEI system. Addition of ethanol in the lipophilic vehicles markedly increased the permeationof L-lactic acid as well as KF. Enormous effect by 1PM on the ethanol permeation was found from an skinpermeation experiment where the systems were applied on the dermis surface (not the stratum corneum
surface). These results suggest that the penetration-enhancing effect of the LEI system is complicatedly
related to the effects by each component in the system. The KT permeation through two artificial membranes,silicone membrane and porous polypropylene membrane was then measured for further understanding themechanism of the LEI system. Although both membrane permeations were increased by ethanol, the ethanol
effect on the polypropylene membrane permeation was much greater than the silicone one. Addition of L­
lactic acid promoted the KT permeation through the polypropylene membrane. These results using artificial
membranes suggest that the LEI system acts on the lipophilic domain in the skin banier and that the solvent
drag of KT by ethanol is one of the enhancement mechanism by the LEI system. The skin permeation
experiments were finally done using nine drugs. This data pointed out that ethanol increased the skinpermeation of ethanol-soluble drugs and that the addition of L-lactic acid was useful to increase basic drugs
containing amino groups but acidic drugs containing carboxyl groups.

緒各ドメインに移行し透過促進効果を発揮するもの

言と考えられる。 促進剤のこの様な選択的な皮膚パ

薬物の皮膚透過性を促進する添加剤（促進剤）の作用発現部位は、 ごく一部の促進剤を除き、 皮

リアー 移行性は種々の薬物に対する促進効果の違

蘭の薬物透過パリアーにある。 したがって、 十分したがって、 促進剤が皮膚バリア ー 中のどこにな安全性と効果を兼ね備えた促進剤を開発するた作用するかを評価することが重要となる。 このよめには、 皮曲バリアーの性質とその中での促進剤

うな知見が得られたことに並行して、 異なった吸の作用機構について十分理解しておく必要があ

収促進作用を示す添加剤を併用することによってる。 皮膚最外層に位置する角質層がこの最大のバ効果や安全性がより高い促進システムを模索する

リアーと考えられているが、 ここには極性の異なようになった。 著者らが報告したメントール／エる2つの領域、 すなわち多孔性で親水性に富んだ

タノ ー ル ／水システムはその代表例である 3 バ。

ドメイン と親油性に富んだドメインが存在する1) 0

この促進系は水ベースの基剤中で大きな効果を発薬物はその親油性に応じて各々のド メ インを浸揮する。 我々はさらに脂溶性基剤でも高い効果を示す促進剤を探索し、 有機酸、 低級アルコール、透•透過するが、 促進剤もその親油性に依存してSkin penetration enhancement andmechanism by mul ti-component
lipophilic systems

いと密接に関係する凡および脂肪酸エステルからなる親油性多成分シス
テムがケトチフェン(KT)のヘアレスラット皮咽透過性を著しく促進することを報告した叫まKenji Sugibayashi

た、 最も強力な促進作用が乳酸(1 %)、Faculty of Pharmaceutical Sciences,
Josai Universityール(10%)、 及びミリスチン酸イソプロピル

エ

タノ

(IPM)
(89%)の組合せ(LEI系）で得られるこ- 72 -

多成分油性皮膚透過促進システムの有効性及び作用機構に関する研究とも明らかにした。しかし、LEI系を構成する各腹部皮蘭をペントバルビタ ー ル麻酔下摘出後、直成分が皮曲バリア ー のどの部位に影響するのかはちに用いた。シリコ ー ン膜は微温湯中で洗い、 室

明らかとなっていない。

温にて一晩乾燥させた。多孔性ポリプロピレン膜

そこでこの問題を 解明することを目的に、ヘ アはそのまま用いた。

レスラット皮園に加えて親油性の ドメインおよび
2. 3

多孔性で親水性のドメインの典型的なモデルとし透過実験法

ン膜および多孔性ポリプロピレン膜 6-8)透過実験にはすべて横型の2チャンパ ー 拡散セを選択してKT透過性を測定した。また、乳酸、エル （有効拡散面積； 0.95 cni、容積； 2.5me) を用

てシリコ

ー

一

部または全てを含有する油

い 、 このセルに摘出皮周、シリコ ー ン膜あるいは性碁剤からこれらの 膜を介するKT透過性を測定

多孔性ポリプロピレン膜をはさんだ。薬物を懸濁した。さらに物理学的性質を指標に種々薬物の皮させたシリコ ー ン液、IPM、乳酸 (1 %)- IPM

朋促進効果の差異を評価し、このシステムの有効(99%)系(LI系）、 エ タノ ー ル(10%)-IPM (90性と特徴を明らかにすることとした。

％） 系(EI 系）または LEI系の各基剤を片方のセタノー

ル 、 1PM の

2
2. 1

試

実

ル（ ドナ ー 側）に適用し、もう 一 方のレシ ー バ側験

セルには同量の蒸留水を満たした。なお透過実験
は37℃ の温度条件下で行った。試料溶液(0.2-薬

フマル酸ケトチフェンはサンド薬品（株）から供与

1.0me) を定期的にレシ ー バ ー 側から採取し 、 容されたものを用いた。インドメタシン(IDM)お量を保つため同量の蒸留水を加えた。また 、 実験

よび硝酸 イソソルビ ド (ISDN) は東光薬品工業

中の薬物と基剤成分の熱力学的活動度の減少を防（恥 （東京） から、イププロ フェン(Ip)、ジクロ

ぐため、 ドナ ー 側の甚剤を定期的に交換した。

フェナクナ トリウム (DCナトリウム） はそれぞ
2. 4

れ日清製粉（恥 および浜理薬品工業（松から供与され分析法た。また、アミノピリン(AMP)は和光純薬工業

すべての薬物はHPLC法で定量した。また、 エ（樹（大阪） から、アンチピリン(ANP)、 メチル

タノ ー ル、乳酸 、 およびIPMの定量にはガスクロ

パラベン(MP) およびエチルパラベン(EP) は

マ ト グラフィ ー を用いた。

東京化成工業（株）（東京）から賭入した。医療用シ3

リコ ー ン膜(Silastic凰厚さ 0.005inch)及び対照
基剤として用いた医療用シリコ ー ン液 (Medical

3. 1

結果および考察

ケトチフェンおよび基剤成分の皮膚透過

fluid360、粘度 19mPa·s)はダウコ ー ニングアジに及ぼすLEI系の促進効果

ア（神奈川）から供与された。多孔性ボリプロピ

LEI系の皮曲透過促進メカニズムを明らかにすガ ー ド@2400、空隙率38%、ポア径

るため、LEI系に加え、IPMのみ、LI系 およびEI

0.2 X 0.02µm 、 厚さ 25µm)は ヘ キス トセラニ ー ズ

系を用いた。なお、対照基剤として、この系が油（恥（米国）から入手した。他の基剤成分である エ性基剤であることを考慮して、皮蘭に対して不活ー ル、乳酸(L-乳酸 ）、IPM およびその他溶性なシリコ ー ン液を用いた。Table 1にこれら各レン膜（セル

タノ

媒や試薬は特級品を購入後そのまま用いた。

甚剤からのKTの ヘ ア レスラット皮蘭を介する定常状態透過速度とラグタイムを基剤中溶解度と共2. 2に示す。基剤をシリコ ー ン液から IPM にするこ皮膚及び人工膜試料の作成

雄性ヘアレスラット (WBN/I1A-Ht系 、 体重ー

180 g、城西大学生命科学研究センタ 、埼玉）のとで、KTの溶解度 および透過速度が増加し促進効果が認められた。またラグタイムも短縮され、-73-

で 1PMの透過は認められなかった。 しかし、 1PM

1PM が皮曲に作用していることが推察された。

の高い脂溶性と促進効果を考慮すれば、 1PMは角1PM への乳酸の添加 (LI 系）はさらに KT の透過を促進した。 一方、 IPM または LI 系にエタノー質層中に移行すると考えられ る。 Table 2 には LI、
EI および LEI 系からのエタノー ルおよび乳酸のルを添加する (EI、 LEI 系）と非常に高い促進効果が得られ、 LEI系での促進メカニズムにエタノールが大きな役割を果たしていることが示唆され透過速度を示す。 LI 系からの乳酸の透過速度はエタノールの添加 (LEI 系） により6.5倍と大き＜促進された。 したがって、 乳酸の透過性にもエタノールが関与していることが明らかとな った。

た。

次に基剤成分であるエタノール、 IPMおよび乳

一方、 EI 系からのエタノールの透過は 乳酸を添酸の各基剤系からの透過性を調べた。 すべての系

加 (LEI 系）することにより若干増加した程度であった。

Table 1 KT solubility in various vehicle system, andflux and lag time of KT through hairless rat skinvehiclesilicone fluid
1PM
LI system
El system
LEI systemIsolubility (mg/ml)

flux (µg/crn'/h)

8.41x10"3
0.105
0.106
0855
2.22

03 土 0.1
2.5士0.2
18.5 土 1.4
2044.4士121.8
2785.2 土 254.2

lag time (h)75 土 2.0
5.0 土 0.3
2.9士01
2.2:t:0.3
0.6 :!: 01

LI system
El system
LEI system

50

ず!
ミ

4

ethanol (mg/cm'/h)
40.0 土 4.81
49.0 土 3.35

層側あるいは真皮側に各碁剤系を適用し、 KT および基剤成分の透過性の変化を検討した。 Fig.l

ン液を各側に適用したときの KT

0.76 土 0.07

皮岡透 過 性 は等しかった(0、4.88士0.16●、 Fig.la) 。 このことはシリコ

6000

b)

0
000
4

30

al団§翌 20

2000

10

゜゜

10

Time (h)

20

30

゜
゜

�

らかにするために、 皮曲の角質ぞれの基剤系を適 用したときのKT の透過挙動を示す。 シリコー

L-lactic acid (mg/cm'/h)a)

進効果へのかかわりをさらに明に角質層あるいは真皮側にそれTable 2 Ethanol and L-lactic acid fluxes throughhairless rat skin from various vehicle systemvehicle

基剤中の個々の構成成分の促4Time (h)8Fig. 1 ヘアレスラット皮膚角質層側から真皮側および真皮側から角質層側へのKTのin vitro透過性
オープンシンボル：角質層側から真皮側透過 、 クロ ー ズドシンポル：真皮側から角質層側透過、
a)シリコ ー ン液(0 、 ●)、 1PM (△ , A)、 b) El系（口 、 ●）それぞれは平均値士S.E. (n=3 - 9)を示す。

-74-

12

多成分油性皮膚透過促進システムの有効性及び作用機構に関する研究

ーン液が皮膚に対して何ら作用を及ぼさないことを示している。 角質層側に 1PMを適用した場合となっていると推察され、 また、 その結果がKTの透過性の差に反映されたと考えられる。

LEI 系の作用機序は複雑であり、KTの透過促のKTの透過速度（△)は真皮側に1PMを適用したとき（▲)に比べ2倍高かった。また真皮側適進効果には甚剤成分相互の皮閲透過あるいは皮閲

用時には実験開始より12時間まではシリコ ー ン

移行の増加が関係していると考えられる。これま液と同じ透過速度を示し 、 それ以降にKTの透過での結果から最も促進効果発現に寄与が大きいの促進が認められた。これは親水性の高い真皮中では エ タノ ー ルであると予測される。 エ タノ ー ルにの1PMの拡散が極めて遅いことに起因しているは 溶媒牽引（共輸送あるいはsolvent drag) と呼と考えられる。 一方1PMに エ タノ

ー

ルが添加さ

ばれる効果があることが知られている 9 )。 この効れると（すなわち EI 系とすると）、 同様に角質層果の出 現は基剤中の薬物の溶解性（度）に密接に側適用時のKTの透過（口）は真皮側適用時（■）

関係している。 すでにTable 1に示したように促より50倍も高かった(Fig. 1 b)。 また1PMで認進効果の増大に伴って慈剤中の薬物 溶解度も大きめられたような促進効果の遅れはなかった。 Fig.

く増加している。また、

2にこのときのエ タノ ー ルの透過性を示す。 エ タ加とともにKTの透過も増加している。したがっノー

ルの皮曲透過性も角質層側への基剤の適用で

エ タノ ー ルの透過性の増て エ タノ ー ルの皮膚透過がKTの透過促進メカニエ タノ

高くなった。Fig. 1 bとFig. 2の結果を併せて考ズムに関連していると推定できる。また、

えれば 、 1PMの真皮中拡散は エ タノ ー ルにより改ールと乳酸により作り出される酸性の環境もKT善されていることが予測された。 一方、エ タノ ー

ルは比較的速やかに真皮を透過するので、 エ タノ

溶解度の増加、ひいては薬物の透過促進に寄与していると考えられる。

ールの角質層 透過も1PMにより促進されていることが推測できる。 ここで認められた エ タノ ー ル

3.2

人工膜に対する促進効果の両方向での皮陶透過性の差は、真皮の存在によ

前述したように 、 角質層は単純な 脂質膜ではなって角質層中の1PM濃度が低くなることが原因

く、親水性および親油性の部分を合わせ持った不均 ーな膜であると考えられる。 LEI 系の吸収促進機構を解明するためには、 これらのどちらの経路

250

る。 そこで皮肉の脂質部分のモデル膜としてシリコ ー ン膜を 、 また水溶性の部分のモデル膜として多孔性ポリプロピレン膜を用いてLEI系の主な作用部位について検討した。Fig. 3にシリコ ー ン膜(a)およびボリプロピレン膜( b)を通るKTの各基剤系からの透過 推移を示す。 シリコ ー ン膜の紅の透過は IPM に エ タノ ー ルを添加 (EI 系）す

8

4

゜
゜

200 150 100 50(E 0/E )pai
6
eaEJ
ad1
oue4i
W
a

に どの程度作用するのかを知ることが重要であることにより増加したが、 この基剤系に乳酸を添
12

加 (LEI 系）すると透過の抑制が観察された。 こTime(h)Fig. 2 ヘアレスラット皮膚角質層側から真皮側および真皮側から角質層側へのエタノ ー ルのin vitro透過性
オ ー プンシンボル：角質層側から真皮側透過 、 クロ
ーズドシンボル：真皮側から角質層側透過、 それぞれは平均値士S.E. (n=3 - 6)を示す。

の現象は1PMに乳酸を添加 (LI系） することによっても認められた。またポリプロピレン膜透過においても1PMへのエ タノ ー ル添加の効果は大きく、さらに乳酸の添加により透過の促進が認め

-75-

600

,.―•a
(\J

r•I

600

且ミoi， 400 �

I b)

400

゜

c.. 200�

一

え

゜
゜

4

Time (h)

200

0.5

12

8

1.5

Time (h)a)シリコ ー ン膜 、 b)多孔性ボリプロピレン膜● : 1PM 、 △: LI系 、 口： El系 、 ●： LEI系
それぞれは平均値士S.E. (n=3)を示す。
Fig. 3人工膜を介したKT透過性

b)

100

」

8

4

゜

6 I
d

)

0.5

1.5

0.5

1.5

)

4

4

」

OBl ,1laE adppeO!
5E )pare
(E 0/
z

6 I c

12

゜
゜

0
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2
1
E ad1
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W
ea
E )paJ
D
(E 3l
a

200

a)

2

2

゜
゜

8

4

゜
゜

12

Time (h)Time (h)a)シリコ ー ン膜 ー エタノ ー ル 、 b)多孔性ボリプロピレン膜 ー エタノ ー ル 、 c)シリコ ー ン膜一乳酸 、 d)
多孔性ポリプロピレン膜一乳酸△ : LI系 、 口： El系 、 ● ： LEI系
それぞれは平均値土S.E. (n=3)を示す。
Fig. 4人工膜を介したエタノ ー ルおよび乳酸透過性-76-多成分油性皮膚透過促進システムの有効性及び作用機構に関する研究られた。 しかしながらLI系においてはシリコ ーン膜の場合と同様に 1PMよりも KTの透過が抑制された。Fig. 4は エ タノ ー ル(a、b)および乳酸(c、 d)の各人工膜透過を示す。 エタノ ー ルの透

その物理化学的性質からLEI系の促進効果メカニ

ズムに ついて検討した。 Table 3 に実験に用いた薬物の pKa 、 溶解度パラメ ー タ (S.P.)、 分子量(M.W.) および各基剤中の溶解度を示す。Fadors

過性は用いた2つの人工膜で EI系、 LEI系のどちの官能甚寄与法 II) により求めた溶解度パラメ ー

LEI系からの乳酸のシリコ ー ン膜透過性の差は認

分子量は皮南中の拡散係数に大きく影響を及ぼす

らの碁剤系を適用して も等しかった。 また、 LI、

められなかったが、 乳酸のポリプロピレン膜透過性は エ タノ ー ルが添加されることによって上昇すが、 本実験で用いた薬物の分子星は最小 (MP) と最大（フマル酸ケトチフェン） で1.7倍の差であり、 拡散への影響は無視できると考えられた。 一ることが認められた。
これらの結果から、

タは 10.22 から 13.31(cae / c而）1/2の範囲であった。

エ タノ

ー

ルはシリコ

ー

ン膜

方、 基剤中の溶解度は薬物により大きく異なり、およびポリプロピレン膜両者での KT透過促進効

すべての碁剤中で小さな溶解度パラメ ー タをもっ果に関係しているが、 乳酸に関しては脂溶性膜では作用せず水溶性透過経路で エ タノ

ー

ルと協力的

に効果を示すことが示唆された。 また皮曲においた薬物が高い溶解度を示した。 例外として ISDNと2つのパラベン類 (MP およびEP) が溶解度パ
ラメ ー タから予測されるより高いシリコ ー ン液おて もLEI系が最も優れた促進効果を示しているこ

よび IPM 中溶解度を示した。 IPM 中の溶解度は作用してKTの透過を促進していると考えられした。 また IPM への エ タノ ー ルの添加 (EI系）はとから、 LEI系は皮陶の水溶性の透過経路に主にすべての薬物でシリコ ー ン液中よりも高い値を示

ISDN 以外の薬物の溶解度を著しく増加させた。

る。
3 . 3

一方 LEI 系中の溶解度は AMP とフマル酸ケトチ

種々薬物に対するLEI系の促進効果 IO)

次にいくつかの薬物に対する促進効果を調べ 、フェンのみが EI 系よりも高く、 これには 2 つの薬物のもつアミノ基と乳酸のもつカルボキシル碁

Table 3 Physicochemical properties of drugs

Ibuprofen(1, IP)
Aminopyrine(2,AMP)
Antipyrine(3,ANP)
Ketotifen fumarate(4,KT:Ketotifen)
Ethyl paraben(5, EP)
Diclofenac sodium(6, DC: Die lofenac)
lndomethacin(7, IDM)
lsosorbide dinitrate(8, ISDN}
Methylparaben(9, MP)

pKa

S.P.

(acid/ base)(cal/cmヤ

5.20
acid
5.00
base
1.50
base
6.05
base
84
acid
4.00
acid
4.50
acid

10 22

84
acid

M.W.

solubility (mg/ml)
silicone fluid

1PM

El system LEI system

206.272.56

172.59301.95274.41

10.86

231.29

2.36

24.03

52.96

136.83

11.27

188.23

0.31

7.35

43.72

44.23

11.89

42550

0.01

010

086

2.23

12.82

166.17

0.05

28.70

134 58137.3812.93

318.13

0.02

0.06

1.03

0.618

13.03

357 81

002

2.47

1524

17 36

13 09

236.14

1.31

23.67

26.22

24.17

13 31
152.14ketoti fen

O.Q4

38.64

10322

100.86

S.P.: solubility perameter, M.W.·molecular weig ht-77-

の相互作用もしくは乳酸添加によるアニオン型分1より大きく（つまり促進効果が認められ）、 カ

率の増加が関係している可能性が考えられた。

ルボキシル基をもった酸性薬物のIP、 DC および

Fig. 5に各々の薬物の溶解度パラメ ー タと碁剤

IDMで1より小さな値を示した。 乳酸はカルボ間の透過速度の比の関係を示す。 1PMからの各薬

キシル甚を有していることから、 酸性、 塩甚性薬

ー物の間の促進効果の違いには薬物と乳酸の相互作

物の透過速度はシリコン液からより高かった(ISDNで2.1倍、 ANPで16.7倍） (Fig. 5 a)。 ま用が関係していることが推察された。

タの増大とともに本検討から 1PM が不活性基剤であるシリコ ー

減少する傾向を示した。 次にエタノ ー ルの効果をン液と比べ様々な物理化学的な性質を有する薬物

明らかにするため、 1PM からとEI 系からの透過の皮向透過性を上昇させること、 またエタノ ー ル

速度の比を溶解度パラメ ー タに対してプロットしの 1PM への添加による透過促進効果はエタノ ーた(Fig. 5 b)。 1PMにエタノ ー ルを添加するとエルに溶けやすい薬物に対してより効果的に現れる

たこの促進比は溶解度パラメ

ーー

タを示す薬物ことが明らかとなった。 さらにLEI系の乳酸はその透過速度が増加し、 透過速度の比と溶解度パラの酸性が塩基性薬物との相互作用により、 薬物のタの関係はベル型となった。 本結果からもエ

皮曲中の拡散性を増大し、 薬物の皮膚透過を促進

タノ
メ

ー

ー

タノ ー

ルと同程度の溶解度パラメ

ルのsolvent drag効果の存在が推定されしていることが示唆された。

た。

4

Fig. 5 cはEI系とLEI系の透過速度の比の関係

総括を示している。 この比は乳酸の添加により3級ア

本研究で用いたような多成分系の促進剤の作用

ミンを構造中にもつ塩基性薬物のAMPとKTで機序は非常に複雑である。 基剤の各構成成分を組

6△

゜

3

10

c)

． ．

1 0'

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切

10'

4

1

6

5 8
10°

且

ethanol

↓

'
10

11

12

13

14

10

11

12

13

14

10

3 1 /2
Solubility parameter (cal/cm)a) 1PMのみ／シリコ ー ン液 、 b) El 系 /IPMのみ 、 c) LEI 系 /El 系

Fig. 5

各薬物の溶解度パラメ ー タと皮膚透過速度比の関係
-78-

ロ

口9

7

10-

6

11

12

13

14

多成分油性皮膚透過促進システムの有効性及び作用機構に関する研究

み合わせて検討を行うことにより 、 各々の成分のenhancers based on a two-layer skin model.

果たしている役割が明らかとなり 、 碁剤成分相互Pharm. Res., 11, 96-103, 1994.

の促進効果により薬物の皮向透過促進が達成され

5) Nakamura H, Pongpaibul Y, Hayashi T, et al.,ていることがわかった。 また促進効果には薬物の: Effect of lipophilic multicomponent system on

物理化学的性質も関係し、 いくつかの条件が合致したときに大きな効果が現れることが明らかとな

the skin permeation of ketotifen fumarate. Int.
]. Pharm., 141, 71-80, 1996.

った。 このような促進メカニズムを検討すること

6) Lee SJ, Kurihara-Bergstrom T, Kim SW,: Ion

で、 応用可能な薬物を選択することができるととも に 、 さらに新しい促進系の発見の糸口ともなる-paired drug d iffusion through polymer
membranes. Int.]. Pharm., 47, 59-73, 1987.

と考えられる。 経皮吸収型製剤の開発にはまだま

7) Hatanaka T, lnuma M, Sugibayashi K, et al., :だ多くの障害が存在している。 本研究がその一

Prediction of skin permeability of drugs. I:

助

Comparison with artificial membrane. Chem.

となれば幸いである。

Pharm. Bull., 38, 3452-3459 (1990).
8) Hatanaka T, Inuma M, Sugibayashi K, et al., :参考文献
1) Ghanem AH, Mahmoud H, Higuchi WI, et al.,Prediction of skin permeability of drugs. II .

: The effects of ethanol on the transport of (3 —Development of composite membrane as a skinestradiol and other permeants in hairless mousealternative. Int.]. Phann., 79, 21-28, 1992.

skin. Il . A new quantitative approach.].

9) Karino A, Hayashi M, Horie T, et al., : Solvent

Controlled Release, 6, 75- 83, 1987.

drag effect in drug intestinal absorption. I.

2) Barry B W, : Lipid -protein -partitioning

Studies on drug and D20 absorption clearances.

theory of skin penetration enhancement.].
Controlled Release, 15, 237-248, 1991.

]. Pharmacobio-Dyn., 5, 410-417, 1982.
10)

Nakamura H, Kobayashi Y, Sugibayashi K,3) Morimoto Y, Sugibayashi K, Kobayashi D, etet al., : Effect of L-lactic acid- ethanol­al., : A new enhancer-coen hancer system toisopropyl myristate mixed system on the skin

inc rease skin peremeation of morph ine

permeation of several drugs, Drug Deliveryhydrochloride in vitro, Int.]. Pharrn., 91, 9-14,

System, 12,101-106, 1997.

1993.

11) Fedors RF,: A method for estimating both the4) Kobayashi D, Matsuzawa T, Sugibayashi K,

solubility parameters and molar volumes of

et al., : Analysis of the combined effect of 1-

liquids. Polymer Eng. Sci., l, 147-154, 1974.

menthol and ethanol as skin permeation-79-

ill. 精神、 文化に関する分野

化粧と痴呆老 A に関する碁礎研究
産業l医科大学

松

岡

成

明

In this study, we measured laughter expressions as a fundamental study of makeup in dementia patients.
The laughter expressions of the patients were measured by the presence communication systems, and wereanalyzed using FACS and distance between the characteristic points. From the results of this investigation,
fo11owing points were suggested.
\(1) Amount of eye movements of dementia patients were less than that of not dementia patients
Facialmovements of dementia patients were not symmetric
(2)

緒

2

言

表情の測定にあたって

化粧の効果は 、 とりわけ意思表示や対人魅力な表情に関する研究は 、 これまで心理学や精神分

どの、 心理的効能に関して 、 広く体験されるとこ

析学の分野で広く行われてきた。 その中で、 数あろである。 しかし 、 痴呆患者をはじめとする 、 脳

る表情のうち幸福の感情の表出である笑い表情に疾患のある高齢者への影響については 、 あまりが、最も判断が容易であるとされている。 本研究報告されていない。 老人病院などの高齢者施設にでは、 患者の表情として笑いに着目し、 笑いの表て 、 われわれが観察した中には 、 異性とのコミュ情の指標として次の2種類に分類した。 1つは 、ニケ

ーションが多い場では、 女性痴呆患者の表情

眼元の笑いである。 もうlつは 、 口元の笑いであが、 明る＜、 活性化し 、 化粧をし始めたという例る。 眼元の笑いは 、 主として眼輪筋によって形成もいくつかある。

され、 前頭連合野（新皮質）が関係しているとい

表情は 、 脳の活動が反映されたものであり 、 感う。 一方、 口元の笑いは主として口輪筋によって情の種類によって支配する部位が異なると考えら形成され、 辺縁系が関係しているという。 したがれている。 また、 非言語コミュニケ

ー

ションにお

って、 眼元の笑いは人間でなければできない笑い

いても、 表情は最も重要なチャンネルであり、 個といえるのに対して、 口元の笑いは原始的である

人の内的惑情を推測する手がかりとなる。 そこでと考えられる。

本研究では 、 化粧と痴呆老人に関する基礎的な研以上の見解を前提として、 患者の笑い表情の測究として、 痴呆患者の表情の測定・解析を行い 、定を行い 、 その所見から痴呆患者に与える化粧の非痴呆患者との比較・検討を行った。

影響を検討することが本研究の目的である。 将来的には、 痴呆患者に与える化粧の効能の評価や、
非侵製的な痴呆の診断などのパラメディカルな応A Fundamental Study of Makeup in
Patients with Dementia

用が期待できる。

3

Shigeaki Matsuoka
Uni vers i t y of Occupational andEnvironmental Health (Kitakyushu)

表情の測定システム

まず 、 TVモニタによる刺激の呈示によって誘発された表情の変化を、 ビデオカメラで収録するシステムを検討した。 これは近年インタ ー ネット- 82 -

化粧と痴呆老人に関する基礎研究などでも使用されている、 TV会議システムであ科の4例の患者(68- 87歳）を対象として、 呈る（図1)。 しかしながら、 この方式では、 TVモ

示内容の検討を目的とした、 試験的な表情の測定

ニタの上にカメラが設置されていることから、 患を行った（図3)。 呈示内容は、 ビデオソフト と者の表情を、 正面からとらえることができな い。

して販売されている、 次の3種類を選択し、 30分

そのため、 臨場惑通信システムを応用した。 この程度に編集して使用した。

システムは、 患者とTVモニタの間に、

ハー

フミ

1)ホ ー ムビデオで撮影した、 子供の失敗など

ラ ー が設置されている 。 ハー フミラ ー の透過によ

2) ドタバタしたコメディって、 患者はモニタ上の映像を観察することがで

3)アニメ ー ション

きる。 同時に、 ビデオカメラは、 ハー フミラ ー の

なお、 表情の測定にあたっては、 患者の家族に反射によって、 患者の表情を正面からとらえるこ

研究目的および方法を説明し、 同意書に記名・捺とができる（図2)。 さらに、 このシステムを使印を得た。

用した表情の測定では、 特に幸福の感梢の判別が
4 . 1

容易となるという報告がある。

4

測定結果

4例の患者の中で、 3例が笑い表情を形成し予備実験た。 た だ し、 呈示内容そのものというよりは、 検
者との会話によって、 笑い表情が誘発されたよう者の方々に笑っていただくための呈示内容の検討に思われた。 図4に、 患者の表情の変化および測が必要となる。 まず、 北九州中央病院・脳神経外定中の検者との会話のプロトコルの1例を示す。

口患者の笑い表情を測定するためには 、 まず、 患

4 . 2

本実験への課題

今回の試験的な測定から 、 以下の諸点が、 本実
験への課題として示唆された。
(1)患者の緊張を軽減するため、 個別で行うのではなく、 複数の患者を同時に対象とするな
どの、 測定条件の検討。
(2)患者のプロトコルを考慮に入れた呈示刺激の検討。
(3)患者の表情の変化を定量的に把握するため

図1

図2

TV会請システム

ハ ー フミラ ー を用いた臨場感通信システム

図3
-83-

表情の測定風景

N.F. 87歳 女性
左視床出血(H.6.5.29発症）

定し、 その一 角に、 測定シス

プロトコル
Doctor(以下D): どうでした？ちょっと疲れたかな？
Subject C以下S): 疲れました
o: ちょっと笑えた？どうだった？
s: 笑えるところが少なかった
o: 何が面白かった？
s: 子供のものが面白かった
o: 漫画とか大阪弁のはどうだった？
s: まあ ， よくやっていると思いました
o: けど ， あんまり面白くなかった？
s: あんまり笑えんかった
o: 罷後の漫画は？
s: ようこざいました
o: おかしかった？かわいかった？どうかねs: 楽しかった

常時、 多くの患者の方々がリテム を設置した。 ここでは、ハビリテ ー ションに取り組んでいるため、 リラックスした雰囲気の中で、 被験者の方々に実験への参加を求めることができた。
呈示内容には 、 ホ ー ムビデ
オで撮影した子供や動物のハプニングや失敗などを、20分程度に編集したものを使用した。 これは、 予備実験の被験者に 、 比較的好評であったた

図4

患者の表情の変化およびプロトコルの1例

めである。 実験中は、 若い女
性の検者に、 被験者の傍らで付き添い、 ビデオを観察して一 緒に笑うことを求の、 解析手法の開発。
5

実めた（図5)。

験

また、 予備実験では、 検者との会話によって笑予備実験の結果から示唆された課題について、い表情が多く誘発されたため、 測定システムに、それぞれ検討を行い、 本実験を行った。 なお本実

お互いの顔を見て、 自由にコミュニケ ー ションが験は、 主として下関市の昭和病院にて行 った。

できる機能を付加した。 このような対話型の測定システムは、 ビデオを観察しても笑い表情を形成

5 . 1

測定条件についてしない被験者に対して、 とりわけ有効であった

閉ざされた空間のなかで、 個別にビデオを呈示（図6)。
ビデオと対話という2種類の条件で、 のべ21する方法をやめ、 広い空間で、 2人の被験者を同剛こ測定する方法を採用した。 実験室には、 解放

例の被験者(58- 89歳 、 うち痴呆患者7例）の惑を高めるため、 リハビリテ ー ションル ー ムを選

表梢を測定した。 なお、 痴呆患者と非痴呆患者

図5

図6

本実験での測定風景- 84-

対話型測定システム

化粧と OO 呆老人に関する基礎研究

5 .2.2は、CTや長谷川式ス コ ア、および神経学的所 見などの、臨床デー

特徴点による客観評価

表情の解析のために 、表情の数値化を行う際のタから判別した。

パラメ ー タとして、眉•眼•口の上下 左右端に 特
5.2

徴点を設定することが 一般的である。笑い 表情で表情の解析手法測定した 被験者の表情の解析には、以下の3種

は、眼裂の上下の収縮、左右の口角の伸長とい類の手法を採用し、定量化を行った。

う、一貫した 距離 変化が 見られる。そこで、左右

1) FACS による主観評価の眼裂の動き（上下方向） と 口角の動き（左右方2) 特徴点による客観評価向）を、特徴点間の距離として 求めた。笑いの表

3) オプティカルフロ

ーを求める画像処理

情 に対応する 特徴点を、図8に示す。
具体的には、笑い始めから笑い形成までの被験

5 .2 . 1

FAGSによる主観評価

FACS ( Facial Action Coding System)は 、表情

者の表情を、等間隔で 6 フレ ー ム抽出し 、 コ ンピ
ュ ー タ 上での座標系から距離デ ー タ（単位：ピクを要素に 分解し、惑情を記述するための手法であセル）として計測 した。さらに 、 測定時の画角のり、表情の評価に広く用いられている。万国共通

差や個人差を等質化するために、各被験者の笑いの 6 つの惑情（驚き·恐怖•怒り・嫌悪•悲しみ始めの特徴点間 距離をベ ー スラインとした 変化率・幸福）は、数種の顔の基本動作の組み合わせとしに 変換した。

て 記述できるという考えが 、 前提である。その基本動作を形成する最小単位が、44箇所のAction

5.2. 3

Unit (AU)であり、AU を用いて 表情の定量化を処理行うことができる。

オプティカルフロ ー を求める画像

動画像中の運動物体の見かけの速度場（オプテ

ここでは 、笑いの表情に対応するAUを評価対ィカルフロ ー ）を求める 手法は、コ ンピュ ー タビ

象とした。笑いの表情に対応する 6 種類のAUのジョンの分野で注目されいる。近年では、表情認

動作を、図7に示す。

識への応 用も検討されている。本研究では 、 被験解析法としては 、被験者の笑い始めから笑い形

者の表情の変化を視覚的に把握するために 、 オプ

成時までの各AUの変化を、 検者を含む 6 名の評

ティカルフロ ー を求める画像処理を採用した。特価者が、そ れぞれ 3段階の評点を行った。変化のに、FACSによる主観評価を行う際の補助資料となかったAUを 0 点、大きな 変化が認められたAUして有効であった。また 、 表情の変化を表現すを2点とした。各評価者による得点の平均を、そる、一種のトポグラフィとしても利用した。

れぞれのAU の評定点の代表値とした。

眼輸筋
l . 目尻にカラスの足跡(AU6+9+12)
2. 下瞼の下に臨(AU5+7)＼
大頬骨筋／、AU6+9+12
3. 頬を持ち上げる(AUG)ヽAUS+フう@〈t:)AUS+�

、AUS+?

＼(\'"·'言亨弘")

竺

図7

守亨

口溝を深める(AUll)
5. 唇の両靖を引き上げる(AUl2)
6. 唇を開く(AU25 or 26)

笑い表情に対応する6種類のAU

図8

-85 -

笑い表情形成時の特徴点の変化

5.3

FACS の結果からは、 全ての被験者において 、

結果

結果は 、 上記の3種類の解析を各被験者につい笑い表情の形成が認められた。 個別の結果からて行い、 個別のカルテとして蓄積した。 笑い表情

は、 前頭薬 、 側頭萌の障害やパーキンソン病の被カルテの1例を図9に示す。

験者について 、 症例から予想される表情の異常が被験者 No._ 測定条件：ビデオ
82オ女
HB.4.4入院
14年前交通事故，後頭部受傷
HB年3月末転倒し，再度頭部・腰部両下肢打撲
脳神経学的には年齢相当の物忘れ程度
CT; 正常(BOオ代）
主症状は根性坐骨神経痛 ， 腰·頚部の疼痛
日常生活は自立l

特徴点およびFAGSによる分析結果

5.00

0
s
1

国

0
o
0
0
s
1

.J

-s_oo

Right-Eye

Left-EyeMouth

回図1.1 特徴点による評定結果

図9-a

笑い表情の個別カルテの1例- 86 -

化粧と痴呆老人に関する基礎研究見られた。 特に、 パ ー キンソン病の被験者では、がら、 口角に関しては、 差は認められなかった。

特有の症状である筋強剛により各AUの評定点が各特徴点間距離の時系列的な変化の結果を、 図低かった。 痴呆患者と非痴呆患者の間では、 眼輪

10-11に示す。 非痴呆患者では、 笑い始めに両筋の変化が、 非痴呆患者において顕著であった。

眼での左右差が見られたが、 笑い表情形成までの特徴点の結果からも、 全ての被験者において、後半では、 左右差は認められなかった。 全体的に笑い表情の形成が認められた。 痴呆患者と非痴呆は、 概ね線形の距離変化といえる。 一方、 痴呆患患者の間では 、 左右眼の特徴点間の距離変化が、者の結果では、 両眼での左右差が顕著であり、 時

非痴呆患者において顕著に大きかった。 しかしな系列的な変化も非線形であった。

50 00 50
0
1
,
‘

s一
eo
us
o
v
,i
o
,
●
●
w一

う〈j)

AU6+9

2.00

0.00

AU5+7

'

AU6••• 12圧
図 1.2 FAGSによる眼輸筋の評価結果

1

゜

00 50

50
O

．
．

8
I
0.00

2.00

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uくと， H-

8
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●
§一

2.00

0.00

AUG

AUll

'AU25o,26'

AU12

区

亨

図 1.3 FACSによる大頬骨筋の評価結果

図 1.4 FAGSによる口轍筋の評価結果

結果から●この被験者では 、 比較的笑いの形成が顕著であった。
■ FACS の結果からは、 右側の表情筋の動きがやや弱かった。
●特徴点の結果からは 、 口が左右に開かれなかった。
■ FACS と特徴点の結果では、 口の動きに関して評価がやや異なった。また、ピデオの方が対話形
式の場合よりも 、 口の笑い表情の形成が顕蓄であった。
● CTでは、異常が見られなかった。
●以上のことから、この被験者では笑い表情の異常が見られなかった。

図 9-b

笑い表情の個別カルテの 1 例

- 87-

：

m
：

凰
1.20

1.20

1.10

60
Q

70 60
O
Q

70
0090 即QOO
10090 80
0
0
1

＇

1.10

F·1

F-3

F-2

F-4

F-5

F-6

F-1

F-2

区
図10

図11

非痴呆患者の時系列変化

F-3

F-4

ビ

F-5

F-6

痴呆患者の時系列変化

また、 表情の測定時に、 ビデオと対話という2られる。 これは、 今後、 追加実験を行う際にも有種類の条件を設定したが、FACS、 特徴点とも、 条

効な手法であると考えられる。 次に、 痴呆患者と件間の差異は認められなかった。

非痴呆患者間での 、 大まかな笑い表情形成の傾向

6

考が把握できたことが挙げられる。 痴呆患者の笑い察

表情形成における、 眼輪筋の動きの表出の弱さ

本実験の結果から、 次の3点が考察として挙げや、 時系列で認められた表情形成の左右差は、 家られた。

庭での簡易な痴呆の診断法への応用の、 基礎とな

1)非痴呆患者の方が、 笑い表情形成の際の、 眼

るデ ー タといえる。
本研究で得られた結果を、 今後、 痴呆老人に与の動きが大きい。
2)痴呆患者の方が、 笑い表情形成の際の、 左右える化粧の効能調査へ 、 実際に応用していくため差が大きい。

には、 次の3点が、 課題として残されている。

3)測定時の条件（ビデオ ・ 対話）による差は認

1) 患者の臨床デ ー タとの詳細な照合められない。

2)被験者数の増加

痴呆患者の笑い表情において、 眼の動きが少な

3)笑い表情の質的な評価の検討いという傾向は 、 FACSと特徴点の分析においてCTや長谷川式スコアなどによる、 症例や患者共通の結果であった。 次に、 痴呆患者において、の臨床デ ー タとの詳細な照合を行うことにより、

笑い表情形成の際の左右差が大きいことは、 特徴

脳の障害部位と、 笑い表情との関連を探ること

点間距離の時系列の解析から認められた。 これらは、 重要である。 今回は、21例に留まったが、 被は、 痴呆が笑い表情に与える影響として、 とらえ

験者数を増加し、 デ ー タを蓄積していくことによることができるといえる。 また、 ビデオと対話とり、 結果の信頼性を高めていく必要がある。 さらいう2種類の条件で、 差が認められなかったといに 、 どのような笑いかという、 質的な評価を行う

うことは 、 被験者の笑いを誘発するための刺激ことによって、 痴呆患者への化粧の効能評価へのは、 個別に設定可能であることを示唆している。

応用が期待できる。

謝
7

総

括

辞

本研究は 、 主として早稲田大学人間科学部の野本研究における主な成果としては、 まず 、 笑い

呂影勇教授および研究室の方々の努力に負うとこ

表情形成に関する解析手法を検討したことが挙げろが大であり、 またオプティカルフロ ー を求める

- 88 -

化粧と痴呆老人に関する基礎研究

画像処理プログラムの作成については、 神奈川工

chirurgia, 7 (3) , 195-2 01, 197 7

科大学情報工学科助手の井上哲理先生にご努力を

5) Ma tsuoka S, : Various Benefits of Laughter,

賜り併せて 、 ここに感謝の意を表します。

Special Lecture in 7th Int. Congress of Brain
Electromagnetic Topography, Brazil, 1996
6)野呂影勇：痴呆患者の笑い表情についての参考文献
1) P. エクマ ン ， W.V. フリ ー セン：表情分析入7)志水彰 ， 角辻豊 ， 中村真：人はなぜ笑うのか，門（工藤力訳編） ， 誠信書房，1987
2)

一松信 ，松岡洋ー

監修 ， 日本学際会議編：感性と情報処理共立出版，1993
一

らみた笑いの 考察，大分脳腫瘍話会誌，7, 3—
14, 1986の例を用いた老人の笑い表情解析 ， 人間工学 ， 30（特別号） ， 364-365, 1994
9)津田兼六 ， 鈴木直人：画像解析による表情の

4)松岡成明他：笑い発作を主訴とした髄膜腫ー

講談社ブル ー バックス ， 1994
8)鳥居塚崇 ，野呂影勇他：臨場惑通信システム

3)松岡成明， 角谷千登士 ， 奥田慎也：神経学か

一

研究 ， ヒュ ー マンサイエンス ， 8(1), 2-5 , 1995

文献的考察 ， Neurologi a medico-- 89 -

分析の試み(V), 日本心理学会第54回大会講演集 ， 811, 1990

対人魅力の形成にかかわる顔の構造的特徴と化粧行動の影響の研究
北星学園大学大坊

郁夫

The purpose of this study is to clarify the effect of the make-up behaviour and the facialmetric features on
the perception of interpersonal attractiveness. Face is prominent agent among many features of physicalappearance. Face has more important role than other physical features on the attraction formation. In thiscase, facial attractiveness is evaluated by the made up subjects themselves (intrapersonal attractiveness) andby other persons (interpersonal attractiveness). Face is perceived as clue of personalitry perception, too. But,
we have to consider carefully that there are true correlations between facialmetric features and theirpersonalities themselves.
In study I, we clarified that subjects'self-consciousness and their evaluation of own's attractiveness depended
on the three conditions of make-up (natural, heavy, and no make-up). In study II, there were considered that
Ss'attractive ratings to their made up face conditons and their cosmetic sensitivisties (attitudes for usuage of
cosmetics and interests in cosmetics). In study皿 ， there were analyzed the correlationships between somefacialmetric measures and their personal attributes (personality traits and social skill). Then, personality
traits were not so correlated with their facialmetric features as people said. But, Ss were aware of their own
some facial features such as oval face, small mouth, big eyes and long nose.

問

題

顔の部位的特徴が当該人物の認知に大きな影響

演出する化粧や動的な表情は重要な要因になっている（大坊、 1996) 7)。
ここでは、個人属性と密接に関連させながら、を及ぼすことはこれまでよく知られてきている。

人間にとって重要な個性発信源である「顔」によ

また、「魅力的な」顔の特徴も時代や文化に応じる魅力形成の構造を力動的に把握することを目指て変化するものでもある（村澤、 1992 ; 大坊、す。

甚準は多くの要因によって影響され 、 対人的な特の変化、 化粧することについての感受性、魅力認徴が反映されることを示しており、顔が社会的な知にかかわる化粧の影響メカニズムを検討する。

脈絡で機能していることを物語っている。

2)顔の形態的特徴と当該人物のパ ー ソナリティ

1995) IS) 、 6) 。このことは 、 顔の特徴に対する認知

また、 顔はその個人の一 つの重要な識別子であり、対人的な文脈の中で様々な行動の原因として、結果としての制約をもたらす。 日常の生活の中で暗黙のうちに広く受け入れられている現象のそこで、 1)化粧されることによる自己表出性

特徴、 自己の顔の特徴についての認知イメ ー ジとの関係を把握する。

2

一つとして、 他人のパーソナリティやその他の個

人的属性を容貌特徴を手がかりとして推定してい2 . 1

る。 この場合に、顔の構造的特徴とともにそれを
A Study of the Effect of Facial
Structural Features and Cosmetic
Mak e-Up Be hav io u r o n theInterpersonal AttractivenessIkuo Daibo
Hokusei Gakuen University

研究I

化粧行為が自己表出性に及ぽ

す影響
目

的

化粧の持つ多くの機能の中で、 化粧されることによって外見への自信を持ち、 他者との関係においてどの程度、 積極的な自己表現ができるかを 、測る一つの方法として、 化粧後、 自己の見解を聞き手に述べるという機会を設定し、その発話行動を検討する。 同時に、 化粧法の違いによって、 自己への魅力認知がどの程度異なるのかについても-90-対人魅力の形成にかかわる顔の構造的特徴と化粧行動の影響の研究検討する。

開示傾向の程度）として分析指標とした。

2 . 2

パーソナリティ指標：被験者のパー ソナリティ
特徴としては、自己意識尺度(SCS、押見ら、1985) 16'、

方2 .2 . 1

法

特性不安(STAIによる 、 遠山ら、 1976) l?) 、 自尊

化粧方法(HE) 、
ヘビ ー ・メイク
条件の化粧（アイシャド

ナチュラル ・ー

心(SE、 井上、 19 92) ll) を取りあげた。

メイク
(NA )

印象評定と状態不安尺度については各 条件後に

、 口紅など）を施した。

化粧法の設定に際しては、 チーク やアイシャド

その回答を求め た。

一、 マスカラなどについてはいくつかの違いを与えながら、 口紅の色をキ ーとして化粧を施した(NA条件では、 アイシャドーー：赤、 アイライナ

2 . 3＋青＋紫、 黒、 グレ 。 なお、 チー果2 .3 . 1：

焦げ茶、 眉毛：茶、 HE条件では、順に、 ピンクー

結

状態不安の比較

状態不安の 得点 を比較すると、 HE、 NO(化粧クはともに自なし） >NA の有意な大小関係にあり、 メイクを然な肌色系 、 マスカラは透明）。 具体的には、 ロ

していない素顔の場合 も、 あまり普段することの紅の 選択としては、 肌に映える色、 肌になじむ色ない入念に濃いメイクの場合にも不安は高く、 なを各4種類用意し、 予備調査で最も濃い（かつへ

じみの ある ナチュラル ・ メイク時に不安は最も低ビ ー ）、 薄い （かつナチュラル）と評定された色くなっている(p< .001、 Fig. 1)。

を用いた。 HE条件では、 濃赤 （ロ ー ズ）、 NA 条
件では淡赤
。 被験者には両方の化粧を施すが、 そ2 . 3 . 2

発話行動の順序については全体で相殺されている。

記録した発話行動のうち、 開始から3分間の 意
見開示を測定の対象として、 ビデオ記録から文字

なお、 化粧は被験者とは面識の ない上級学年の化した逐語記録に基づいて、 その発話文字数、 意

女子学生によって施された。

見尺度（「＊＊＊＊と思う」、 「＊＊＊＊と考える」
2 . 2 .2

対象者などの表現の出現頻度）、 感情表現尺度 （自分の文科系大学で心理学専門科目を履修中の女子学

感情 に言及している；怖い、 好き、 楽しいなどの出現頻度） の判定を行い、 指標値とした。

生 3名 、 4年生22 名。 年齢は20-25歳。

発話文字数を比較すると、 NA > HE>NO で
2 .2 . 3

測定尺度

あった(p

< .003 、 Fig. 2)。

自己意識·概念 を把握する ために、 各化粧実施

また 、 意見得点 についてはHEで高く、感情表

後に、 自身についての魅力印象評定( 7段階 、 11

現尺度については、NA条件で高い。 HE条件では、項目、 大坊、 1988 ) 2) 、および状態不安(STAI、 遠

他に比べて意見得点( 3 .32) >感情 得点( 2.3 6) の山ら、 1976)17)を測定 した。

また 、 呈示した 26項目の話題リストの中で被験者が自分で最も話しやすいとして選択した話題

ss50について、 聞き手（実験者） に向かって約5分間
意見を述べる。 その様子をVTRで撮影、 録音し<5た。
なお、話題リストは、 自己開示の調査で用いた,o

No Make

もの であり、 その結果で得られた平均開示度を、選択された話題の 開示度（話題選択による 一 種のHeavy Make

化粧条件

Fig. 1-91-

Natural Make
化粧後の状態

不安得点の比較

0,.
800

。
。
＇

文字 数

-a叶

6SO

600

c

因子得点

o.,

?SO

No Make

巨因子1 リラックス□ 因子2 悩み謳i 因子3 緊張--0- .

Natural Make Heavy Make

No MakeNatural Make Heavy Make

化粧条件
Fig. 2

Fig. 3

発話文字数の比較

化粧条件

化粧後の状態不安の因子得点の比較

Q. 8

関係が顕著である。

2 . 3 . 3o ••。

度に化粧条件間に有意な差は見られていない。

因子得 点

なお、 選択された話題については、 その開示程-o. 疇

魅力印象評定-o .•魅力印象評定値を2条件間で比較すると、 HE

化粧条件

は感じ悪く、 親しみ難い、 下品、 冷めたいなどとFig. 4

好悪惑情 については否定的に評価されるが 、 派
手、 外向的と社会的に積極的と評定されている。

Heavy Make

Natural Make

化粧後の魅力評定因子得点の比較

定がが明瞭であった(Fig. 4)。

これに対して、 NAは、 好意的、 内向的な評定が2 . 3 . 5指標間の相関関係

なされている。

化粧条件ごとにパーソナリティ特徴と自己表現
2 . 3 . 4

状態不安と魅力印象認知の構造指標との関係を見ると、 他に比べて、NO条件で状態不安項目への回答を基にして最低固有値

公的自己意識と発話文字数、 感情得点、 意見表出

1.0の抽出基準で主因子分析を行ったところ3因得点が高い有意な正の相関を呈していた(Table

子抽出された。 Varimax回転を施したところ、「リ1)。 HE 条件では化粧後の発話行動とはなんらー

不安定」(19.5%)、の有意な関連も示されていない。 これらのことか「緊張」(17.3%)と名づけ得る3因子（合計62.7

ら 、 化粧操作は元来のパーソナリティに伴う行動％）が得られた。 各化粧条件間でその平均因子得特徴を概ね抑制する傾向にあるのではないかと考点を比較すると、 NO 条件では「悩み ー 不安定」、えられる。

ラックス」(25.6%)、「悩みNA条件で「リラックス」、 HE条件では「緊張」が最大であった(Fig. 3)。 カジュアルな親しみの2 . 3 . 6

ある化粧条件ではくつろげるものの、 化粧なし条

印象評定値、 状態不安、 発話行動指標値を説明

件もまた、 不安定で、 元来の神経質な、 悩みが顕変数として3化粧条件について判別分析を行った

わになり易いことが知られる。

ところ、 内向 一 好き ー 安定次元で3条件間の判別

対人魅力評定項目についての因子分析では、「好悪」(45.5%) と「外向ー化粧条件についての判別分析性が高い結果が得られた。

内向」(23.3%)の2
2 . 3 . 7

因子 （合計68.7%)が抽出され、「好悪」 因子では、 NA>HEで、 NAが好ましく、「外向 ー 内向」

因子では、 HE>NAの関係でHEが外向的との評

パ ー ソナリティ特徴との関係

高自尊心 (SE) 者は、 HEは女性的ではあるが、自分には似合わないとの評価が有意に高い。 対人-92 -対人魅力の形成にかかわる顔の構造的特徴と化粧行動の影墜の研究化りI. 条HNo

SETSE 1�1 X�、し、

l'RI
私的自己意l乱

PUil
公(Iり自己意淵

soc
対人不安

TRAITA
特性不安尺度ィヒ引条件

自己意識尺度等パーソナリティ尺度と発話行動との相関関係

Make

訊迎IJ/1示
0 11199
0 61980 18055
0.42140 10645
0 6373-0 36140
0 0984-0 [2327
0 5847NaturalSET
SI・：自祁心

PR!
私的自己意庶PUB
公的自己意汎soc
対人不安

TRAITA
特竹不安尺度
化り1条件

Table 1訂；迎開示
0 13544o.5479発訊文字
0 18067
o.4210-0. 06326
0 7797-0. 13680
o. 5438-0 02593
0 9088-0 32062
0.1457
0 02156
0 9241-0 2 3171
0. 2995·O 02079
0 9268発訊文字
0 17604
0 4 333

感WJ―く度
0 07039
0 7556

意見Ji.'. 復o.06770
0 7647

発訊合�I
0 10694
0 6357o. 28133
0 20470.01602
0 9436o.42704
o. 0475

ro.3o. 0™61 674-0. 15190
0 4998·O 06076
0 7382-0 20737
0 3544Make

0.02188
0 9230-0 25966
o. 2432

lleavyo. 4865

発烈合引
0 04239
0 8514-0 12878
0 5679-0 08551
o.70520. I 0559
0.6400o I s6sn-0 04799
o.83200 21604o.33420 00952
0 9665

沿：見尺J虹感ti'/尺IJ[-0 12005
0 5946-0.12148
o.5902

Mil k e10 40873
O 488811 f
1
0. 0589o.02100 02358
0. 9 I 70

0 19967
o.3 730

0 18032
0 4 220-0. I 7499
0 4 3601�§3
o.0698門-0.24595
o. 2699

状態不安-0 2035�
0 3636

意． 見尺l夏-0.00994
0 9650発訊合�I·O 07155
0 7517l'Ull
公/1りEl己意牒

0 17075
0 4474

0. 27350
0 21810 17731o. 4299

0 06207o.78380 16976
0 450 I

0 28279
0 20220 13318
0 5:i17

TII A 1· 「A't.\ l'I 1、友Ii..'. J.U.

-0 28196
0 2036- o 11nan

0 5948-0. I 5�81o.�915-0 1%00 380り-0 17690
0 4310-0.23666
0.2890感ti'i尺度-0 09578
0 6716

soc
対人不安

状1m不安
-0.15925
o. 4790-0.13256
0 5565

発訊又字
o. 06049
0 7892o.08629
0 7026

0 20004
0 3721-0 06342
o. 7792

訊題rm示-0 03166
0 88880 24274
o.2764-0 04468
0 8435o. 20920
0 35010.24184
0 2782SETSI�11: /,�., じヽI'll!
j:J、(Iり1ぎI己意屈l

状應不安-0 267,15
o. 22an

0 02672
o. 9060-0 05872
0 7952-93-

0 28001o. 2069

0. 07200
0 7502

0. 25682
0 2486

0 02286
0 91960 30022
0. 171 G

o.20969
o.34 90-0. I 0894
0 6294-0 21592
0 33450 I I 194
o. 6199不安要因は化粧条件による効果が大きく、 低者は生と2年生を対象とするために実験時期を5-6

NA 条件で自己肖定惑が強まることが示された。

月とした(2期）。

化粧条件の効果は パー ソナリティによって必ずしも一定ではなく 、 むしろ 、 化粧が対人指向性の違

3. 3

方

3 . 3 . 1

いを反映するものであることが示唆される。

法
調査表の構成被験者の基本的 パ ーソナリティ特徴、
2. 4

考

コ ミュニ

ケ ー ションにかかわる社会的スキル尺度等として察

化粧法としてはナチュラル ・ メイクが最も好ま

以下のものを用いた。

ない。 そして 、 ナチュラル ・ メイク時に、 最も自1 . 惑情表出 的コミュニケ ー シ ョ ンテスト
(ACT、 大坊、 1991a) 3 >己表出がなされる傾向が強い。 化粧することが 、

2. 自己意識尺度 (SCS) 日 本語版 （押見ら

先ず、 社会的な覚醒を高め 、 ひいては元来の個人, 1986)lo) 公的自己意識と、 私的自己意識、 さら差を凌駕するほどの影響が表れるものと言えよに、 対人不安の3下位尺度からなる。

しく、「落ち着ける」もので 、 覚醒度も大きくはう。 また、ヘ ビー ・

メイク は 好まれないものの、

3. 和田 ノンバ ー バルスキル尺度(WSS(N))

社会的積極さは大きく、対外的な主張が可能にな

和田(1992)IS)によるノンバーバルスキル尺度を用いた。 ノンパ ー バル表出、 ノンバ ーバル惑受

りやすいものと捉えられていると。
化粧法の多様化、 指標の設定についてはさらに検討が必要ではある。 しかし 、 化粧による自己意性、 そして、 非言語による表出の抑制の「ノンバーバル統制」の下位尺度からなる。
4. 自尊心尺度(SE)

識の変化、 自己認知の側面が化粧条件によって異井上(1992)ll) が改定なることを踏まえるならば 、 さらに有効な知見をした日本語版(SE- I)を用いた。 因子分析結果得ることが可能と考えられる。

から、 因子性のはっきりしている 12項目を使用

3

研究 II

3. 1

目

した。

化粧顔の魅力と化粧指向性

5. 化粧品の使用実態先の研究で作成した 、「化粧品を1週間に何日ほど使用するか」という的化粧行動にはいくつもの目的が考えられるが、質問項目と、 3条件（学校に行く時、 デ ー トする粧うことによって社会的に積極的な行動がとり得時、 休日家にいる時）ではどの程度各化粧品を使るようになることからすると 、 他者との円滑な関用するのか、 経験ない場合には想定で答える質問係を展開していくための社会的スキルの一

つと言

項目も用意した。

パ ーソナリティや日常の化粧行動への指向

化粧への関心を把握する質問項目として、 大坊

性との関連で化粧のもたらす魅力について検討す(1992) S) の化粧品ブランド選好に関する質問項る。

目を用いた。 そして同時に、 ある特定の化粧品のえる。

所持実態から化粧への関心を探るため、 口紅の所
3 . 2

実験の方法

持本数を問う質問項目を加えた。

化粧の経験が多い被験者と少ない被験者を得る

6. 顔の印象評定尺度ことを目的として、 実験時期を設定した。 化粧の顔の印象を問う尺度（村澤： 1988、大坊： 1988)への回答を求めた 1 4) 、経験が多い被験者として主に3、 4年生を対象と叫素顔時(NO、 11項目） 、 ナチュラル ・ メイク

し、 大学が長期の休みに入る前 、 12月から翌2月時(NA、 12項目）、

までに実験時期を設定した(1期）。 化粧の経験項目）に実施した。 ナチュラル ・ メイク 、が少ない被験者群として 、 入学してまもない1年

メイク時には 、 化粧がどの程度似合っているかと- 94-

ヘ ビー ・

メイク時(HE、 12
ヘ ビ ー・

対人魅力の形成にかかわる顔の構造的特徴と化粧行動の影響の研究

時間を含め1人の被験者に対して約1時間 20分

いう質問項目が加わっている。
7. 容貌特徴についての調査表

さらに、 大坊要した。

(1988 ) Z) が作成した、 自分の容貌特徴、 タイプの質問項目と自己意識の特徴を測るための調査表

3 . 3 . 3

イ七湘む去を実施した。

1. 化粧方法パタ ー ン
大坊(1991) 4)の結果を基に20代の女性が好む化粧法について化粧品メ ー

しながら、 顔の部位等の特徴についての好悪度をカ ー（ コーセー、 札幌市）の美容部員からの意見(1 : とても好きー7 : とても嫌い） 7段階によを参考にしながら進めた。 メイクは、 オフィスやる評定を求めた。 用いた項目は、 眉、 目、 鼻、 口 、学校などの場所で好まれるナチュラルな惑じのす輪郭 、 肌質、 全体（顔） の7種類である。

るメイク（ナチュラル ・ メイク）と、 街に出掛け

8. 顔の受容度

9. 魅力評定

化粧を施す前、 洗顔してもらったときなどに行なう華やかな惑じのするメイクー（ヘビー ・ メイク） の2パタ ー ンに分けることがた後 、 化粧水、 乳液、 下地クリ

ムの基礎化粧のみを施した状態で撮影された正面顔写真を基にしできる。

て、 心理学専攻の女子学生5名(4年次）が「美美容部員は 、 化粧の差異は目元に色を多くいれしさ」の程度を5段階で評定した。 その結果からて目をはっきり見せるようにするか、 あまり色を評定の個人差による影響を小さくするために各人いれずに素顔に近いままにするか、 また 、 口紅のの評定値を標準化し、 その平均値を求め、 平均評

色を華やかな色にするか、 肌の色に近い地味な色

定魅力度として分析に用いた。

にするかで識別が可能だと述べていた。 したがって、 ナチュラル ・ メイクと ヘ ビー ・ メイクの違い

3 . 3 . 2

化粧手続き

は目元と口元の印象を変えることで行なうことに

まず洗顔後、 素顔時（甚礎化粧品のみ）に顔のした。

印象を問う質問紙を実施する。 顔写真と表情のビ

2. 使用色の決定

デオ撮影を行なった後、 1回目のメイクを施行す

1. の内容から 、 まず初めに、 口紅と目元にいる。 メイクは、一人目の被験者がナチュラル・ メ

れる化粧品～アイシャドウ～の色を決定した。 ロ
コーセ ー のVISSE (ヴィセ） を使用した。

イクを最初に行なったなら、 次の被験者は初めは紅は、

ヘ ビー・ メイクから行なう、

これは、 レッド 、としヽうようにメイクローズ、 ピンク、 ベージュ、 オの）I厠茅を変えて行なった。 施行後に、 表情のビデ

レンジ系の5系統に分けられている。 この5系統

オ撮影を行なった。 洗顔後2回目のメイクを施行

を、 モデルに施行してナチュラルな惑じに発色すする。 2回目のメイクは、 必ず1回目のメイクとる色と華やかな感じに発色する色の2タイプ 、 10は違う種類を施し、 2回ともに、 ナチュラル・メ

色選び出した。 施行後 、 写真撮影し、 色の差異を

ヘ ビー・ メイクとは連続しない。

1

確認した。 人気の色も考慮に入れ、 色の差異が顕

イク、 または、著だった3系統（レッド、 ピンク、期では施行後に、 表情のビデオ撮影を行なった。
化粧を施さない時と2種類の化粧を施した後でベージュ）各

ナチュラル （色番号、 順に R D470 、 P K 8 1 0、
ビー (RD471、 R0630、 OR251)の計の、 顔の印象の変化を測定するために質問紙を実PK85 0) 、施する。 また、 実験後に被験者の顔の魅力評定を6色を採用した。

ヘ

アイシャドウも、行なうため、 顔写真（基礎化粧時のみ）を撮影す

コーセ ー のVISEEを使用しる。 実験時間は 、 約1時間10分程度、 化粧施行

た。 こちらも、 美容部員に相談し 、 まぶたの形状

ヘビ～ 一 重、 二重まぶた～によって印象が変わらない

メイクで17-20分、 そして、 実験後の洗顔ために、 一 重 、 二重用メイク法と、 ナチュラル ・

時間は、
ー ・

ナチュラル ・ メイクで12 - 14分 、- 95-

メイクとヘビ ー ・メイクのアイシャドウの入れ方

項目で 、 「化粧の経験がある」と答えた人は、 10 5

コー セ

名( 9 1.3%)「化粧の経験がない」と答えた人は、を教わった。 また、 アイシャドウの色は、ーのアイシャドウ(VISEE)の売れ筋の色～ベー

10 名( 8.7%) であった。
口紅の所持本数の平均は、 5.26本(SD : 4. 87 、

ジュ系に仕上がる3色 OR250、 RD4 70、 BR330;
ベー ス、 セカンド、 アクセントの順）とピンク系

0から 30本） であった。

に仕上がる3 色 (PK810 、 PK811、 RD410) -を使用すること にした（上記 、メイク。 ナチか」という質問項目では、 11種類の化粧品の使用

ベー

ジュ系OR250、を問うものである。 その選択数を得点として換算ヘビュラルメイクでは 、 各l色で 、「1週間に何日くらい、 その化粧品を使用するーピンク系PK830)。 一重、 二重、 ナチュラル 、

ヘ

し、 その総計を「使用頻度得点」として分析に用の4条件の化粧をモデルに施し、 それぞれ被いた （全体では2 7.37士14.03)。 また 、 11 種類の験者の素顔の写真と比較しアイシャドウの浪さ

化粧品それぞれについて平均は、 スキンロ ー ショ

（色の入れ具合） を確認 、 調整した。

ンが 6.26日/7日で最多であった。 次いで、 ロビー紅、 ミルクロ ー ション、 ファンデー ション と続き
3 . 3 .4

（以上3日以上）、 メイク ・ アップのチー ク、 アイ

被験者

ライナ ー 、 マスカラの使用頻度は1日以下で少な

被験者はすべて女子学生で、 以下の2時期に学しヽ (Fig. 5)。

生に分けて行った。
実験1. 2年生4名、 3年生41名、 4年生13

化粧が好きな程度を問う質問項目を、 5段階で

名 、 合計58名 （平均 21. 00歳、 SD:1.0 8、 19-26

評定した結果 、 「化粧が嫌い」と答えた人は8名

歳）。

(7.0%)、「あまり好き ではない」と答えた人は9

実験2 . 1年生42名 、 心理学研究法受講者名( 7.8%) 、 「どちらとも言えない」と答えた人は2年生21名で、 合計 63名（平均18.63歳 、 SD:0.75、31名(27.0%)、 「少し好き」と答えた人は42名

18-20歳）。

(36.5%)、「好き」 という人は 、 25 名(21.7%)で両時期の実験合計で 121名が対象であったが、あった。
好きなメイク ・ プランドを問う質問項目で、回答調査表の不足な者があり、 その項目により異な る が 、 有効被験者数
7

は、 11 5 名である。
なお、 被験者を募る

6

際、 皮膚炎などで肌が弱54

齢 により化粧効果に違い

平均 日数い者を除いた。 また、 年

6.26が生じる危険性を避ける

3

ため 、 年齢も一定範囲に

2

限定した。

チーク

-96 -

アイライナーt

化粧品使用の割合（週平均の使用日数）

マスカラ

Fig. 5

マニュキ ュア

化粧の経験を問う質問

アイシャドウ(1) 化粧品の使用状況

香水等

本的特徴

アイブロウ

回答者の甚

ファンデーション

果

口紅

3 .4. 1

スキンローション

結

゜

3 . 4

対人魅力の形成にかかわる顔の構造的特徴と化粧行動の影響の研究「ある」 と答えた人は、 27.0%、「ない」 と答えた

ーク 、 マニキュアであり、 顔に華やかさを演出す

人は、 73.0%であった。

る化粧品の負荷量が高い。これは、「メイクアッ(2) 自分の顔の好悪

プ演出」 の因子と名づけられよう。第2因子は、自分の顔についての受容の程度を顔部位等への口紅、 ファンデーション、 ミルクロ ー ション、 ス

好悪評定で求めた。 その結果、 目 (4.09) >ロ

キンロ ー：ノョノ(3.95)、 全体 (3.84) >眉(3.49) >輪郭(3.18)、

れは、 化粧する前に肌を整える基礎化粧品と、 華鼻(3.12) >肌質 (2.85) の順であった。相対的やかさを演出する意味よりも肌の色、 眉毛の長一

アイフロウの負荷量が高く、 -に目の好意得点の高さはこれまでの報告とも 致

さ 、 口の形などの欠点をカバーするような意味合している（大坊 、 1988 、 1991b)。肌質については、

いが強い化粧品が並んでいる。これを、「碁礎化一その滑らかさや肌理の細かさへの憧憬が強く 般粧」 因子と名づけられる。第3因子は「香水等」

化していることが示されている。

のみで、 これは「アロマ空間の演出」 因子と言え
る。

3.4.2

化粧品と顔の印象の構造

なお、 ここで得られた因子得点を算出し、 これと回答者のパ ー ソナリティ、 ACTとの相関係数(1) 化粧品使用度の因子構造
化粧品使用の際の 11 品目間の関連 、 分類を目を求めたところ、 ACTと第3因子との間にのみ指して、 共通性の推定値LOで抽出した後、 因子

有意な正の相関係数が得られた(.225、 p< .016)。

分析 （主因子分析、 Varimax回転）を行なった。

惑惜表出の豊かな者ほど、 アロマ演出の傾向香水

その結果 、 3因子（合計説明率、 44.62%)抽出さの使用の多さ ー が強いと考えられる。

れた (Table 2)。

(2) 化粧条件ごとの顔の印象得点の比較

説明率は順に、 20.08%、 18.21%、 6.32%であFig. 6は3化粧条件での各自己印象評定値の平った。第1因子の中で負荷量の高い化粧品は、 ア

均値を 示したものである。「好きな 一 嫌い な」、

イシャドウ、 アイライナ ー 、 マスカラ 、 そしてチ

「親しみやすい 一 にくい」、「セクシ ー な 一 清楚な」Table 2 使用化粧品傾向についての因子分析結果のま
とめ 一 主因子法により 、 Varimax回転後の因子負荷量
FA叩Rl

FA⑳R2

FA叩R3

Corm,u叫ity

7イシャト ク・

0. 918況

0.11430

0.13277

0. 874481

7イうイt-

0.720200.07245 -0.02817

0. 524732,Abう

0.57179

0. 05102

0.45698

0.538379（上記いずれも素顔 ー ナチュラル）、「女性的 ― 男
性的」 （ナチュラル ー ヘビ ー メイク）のみで有意差が見られないだけで 、 いずれの条件間にも高度な有意差が示された。
化粧することは女性的なことであるが 、ヘビー

メイクには、 否定的で親近さを抱いていないこと

チーク

0.36882

0.!!!55-0.021520.1砧939が分かる。特に、 派手で、 外向的、 嫌い、 似合わ？ニギュ7

0.265RO0.14568

0.11487

0.105064

ないとされている。他2条件に比してヘ ピ ー メイ

口紅

0. 27206

0.74901

0.05915

0.638537

クの得点の極端さがうかがわれる。また、 この年

1,1t ークョY 0. 30825

0.744900.01709

0. 650180

代を考慮しなければならないが 、 「かわいさ」、

ミ珈ーショl -0.03800

0. 60716

0.21056

0. 414420

7イ r�

0.05669

0.49460

0.12486

0. 263437「あたたかさ」 はナチュラルメイク＞素顔＞ヘビ入\i'0-;1ョ,0.37160

0.417310.25283

0.376157

香水等

0. 03215

0. 21375

・ー

メイクであり、 ナチュラルメイクヘの許容度が高い。
化粧すること自体の社会的積極さにはきわめて

0.373812

敏感であるが、メイクアップに慣れていないこと

r a•
r a•%

2.208908 2.003588

0.695641

4.908137

20.080982 18.214437 6.324009 44.619427

による「怖れ」 がこの評定には反映していると思
われる。
-97-

6 5 5 5 4 5 3 5 2 5 1
5
4
3
2
1

I

5.9

□ heavy皿no makeup ● natural

I

2.1

似合 う

女性 的

セク シ ー な

可愛 ぃ

外向 的 な

派手 な

美し い

暖か い

上品 な

親し み易 ぃ

好き な

感じ のよ いFig. 6

化粧条件ごとの平均評定値の比較

魅力の低さを示す） 。

(3)顔の 印象の因子構造
次に(2)で示した、顔の 印象を問う3条件下

第2因子は全てヘ ビ ー・ メイク時に実施した項の 35 項目 (NOの 11項目、NAの12 項目、HEの目で、1 . 「 感じのよい（悪い ） 」 2 . 「好きな （嫌12項目） について、 素顔、 ナチュル ・ メイク 、 ヘいな）」、3 . 「親しみやすい（親しみにくい）」6.

ビ ー・ メイク 条件の関連性を検討するために、 前「美しい（醜い ）」、12. 「化粧が似合っている（似項と同様に、 共通性の推定値1.0、最低固有値1.0

合っていな い）」4. 「上品な 一 下品な」9. 「可愛の基準で8因子を抽出し、 その後Varimax回転をいー にくらしい」の7項目であった。 これは、「 ヘ行なった。

ピ ー ・ メイク魅力」因子と言える。

その結果、 8因子（合計説明率、 60.61%)が抽

第3因子は全て素顔時に実施した項目で、6.

出された。 説明率は、 第1因子か ら順に、16.66「美しい （醜い）」 1 . 「感じのよい（悪い ）」、2 .

%、16.23%、 9.59%、6.11%、3.87%、3.03%、2.88．「好きな（嫌いな）」、 4. 「上品な（下品な）」、 9.

%、2.25%であった。

「可愛い（にくらしい）」、 3. 「親しみやすい（親第1因子の中で、因子負荷量が高かった項目

しみにくい）」 の6項目であった。 これは、 素顔

は、 全てナチュラル ・ メイク時に実施した項目、時に対人的 な場面で感じる印象を示すもの で、

12.「化粧が似合ってい る（似合っていな い）」、 1 .

「 素顔魅力」 因子と名づけた。

「感じの よい（悪い）」、2. 「好きな（嫌いな）」、 4.

第4因子は、 8. 「内向的 （ 外向的 ）」、 7. 「派「上品な （下品な）」、3 . 「親しみやすい（親しみ

手な（地味な）」、10. 「 セクシ ー な（清楚な）」、11.

にくい ）」、6. 「美しい（醜い）」、 9. 「可愛い（に「女性的（男性的）」、 そして弱いが、 8. 「内向的な） 清楚な」、7. 「（派（外向的）」（ここでは唯一の ナチュラル ・ メイク）手な ） 地味な」、 5, 「（つめたい） あ たたかい」、の5 項目で、概ね ヘ ビ ー・ メイク時の 項目であっそして11. 「 女性的（男性的 ） 」 の11項目で高い負た。 これは、 ヘ ビ ー ・メイク時に対人的 な場面で荷量 を示していた。 これは 、 「ナチュラル ・ メイ

感じる印象を示すと思われるため、「 ヘ ビ ー メイ

ク魅力」因子と名づけられる（なお、括弧内の語

ク／女性性強調」 因子と名づけた。

くらしい）」、10. 「（セクシーは高い得点方向に な るので、 数値的 には高いなど- 98-

第5因子は、 素顔時の7 . 「 派手な （地味な）」、対人魅力の形成にかかわる顔の構造的特徴と化粧行動の影響の研究

8. 「（内向的な） 外向的な」 、 1 0 . 「セクシ ー な（清がわれる(- .24 9、 p<.01)。

5% 水準での相関関係にある項目は、 4 か所に楚な）」の 3項目であった。これは、 普段本人が素顔でいる時 、 感じている惑情を示す項目で「素見られた。第1因子と1週間の化粧品使用頻度得

顔／社会性」因子と言える。

点と(-.1 92)、 デ ー トに行く時の化粧品使用得

第6因子以降は 、 説明率が低く、 十分な解釈は点との間に負の(- .188 ) 、 素顔魅力（第3)因あたたか

子と化粧品使用頻度得点(- .188 ) とデ ー トに行い」の項目が 6 、 7因子に分散し、 第 8因子にはく時の化粧品使用得点との間に負の相関関係が見素顔時の 「女性的 （男性的）」のみが高い負荷量られた(- .213)。

難し誤差的なものである。「つめたいー

また、 第 3因子と口紅の所持本数との間に負のを示していた。

相関関係がある傾向が見られた(-.170、 p<
3 . 4 . 3

化粧顔の印象と印象因子得点との相関分析.07)。素顔の魅力度 を高く捉える者ほど口紅所持数が多い。

(1)顔の印象に関する因子得点とパー

つまり 、 素顔の魅力を高く捉える者ほど、 学校

ソナリテ

ィとの関係

やデ ー トに出かける際に多くの化粧品 を使用し、ACT、 WSS(N) 、 SE と素顔魅力（第3)因子

粧うことに敏感 、 積極的であること を示してい

得点との間に負の相関関係が見られる （順に、r=- .18 9 、 一.221 、一.21 1 、 p

< .05)。艮Pち、 社

会的スキルや自尊心が高いほど素顔の魅力を高くる。
なお、顔の魅力評定値については、 有意な相関関係は見られなかった。

捉えていることが示されている。
また 、 第1因子とACT の間に正の(.172、 p<.06 ; 非言語的コミュニケー

3 . 4 . 4

いての被験者属性要因の効果

ション表現力の高い者は、 ナチュラル メイクの魅力を重視していな・い）、 第 3因子と soc との間に正の(.1 59、 p<.09; 対人不安の高い者は素顔の魅力を高く認知していない） 、 第 5因子とPUBとの間に負の（一

顔の印象因子f尋点、 化粧行動につ(1)顔印象因子得点に関するパーソナリティな
どの影響

ACT、 PUB、 PRI 、 soc 、 WSS(N) 、 SE を属性要因とした 1要因の分散分析を行った。

.176 、 p< .06; 他者 を意識する傾向は化粧が外向

パ ー ソナリティなどの属性要因について、 その的効果 を持つこととして認知している）、 SEとの得点人数分布に基づき、 高群•中群•低群の 3 段

間に正の相関関係の傾向(.172、 p< .08 ; 自尊心階に分けた。 それぞれの群間の比較を行なった。
その結果 、 「素顔魅力」（第3)因子得点についの高い者ほど素顔の持つ社会的積極性 を低く 評価てACT 水準間に有意差が見られた(F=4 .54 、 Pしている） が見られた。
されなかった。

< .013)。下位検定によると、 中群 低群の間(p< .013)で有意な差が見られた。また第3因子に(2)顔の印象に関する因子得点と化粧品使用頻

ついて PUB得点水準間に有意差の傾向が見られ

なお 、 平均評定魅力度とは有意な相関係数は示一< .093)。

度等との関係た(F = 2.43、 p

3 種類の状況別化粧 度 、 口紅の所持本数 、 化粧(2) 化粧品使用傾向とパ ー ソナリティとの関連が好きな程度 を問う項目と相関分析を行なった。

パーソナリティ要因について、 各得点分布から

第 3因子と化粧品使用状況（学校） 得点との間に

高低の 2群とし 、 他のパーソナリティ特徴との関

負の高い相関関係が見られ 、 素顔の魅力を高く捉連を捉えることとした。

えている者ほど化粧品 を多数使用する傾向がうか-99-

自尊心得点水準について有意な主効果がある傾向が見られ(F=3.25、 p < 0.07)、 自尊心が高い

学年要因に有意な主効果がある傾向が見られ、ほど化粧品使用得点が高くなる傾向が見られた。

高学年で使用得点が高い傾向が見られた (F =また、ACT水準と私的自己意識尺度 (PRI)水準

2.29、 p < .087)。

間 (F=2.79、 p < 0.090) に有意な交互作用があ6)化粧品使用 因子得点との関連る傾向が見られた。

第l因子（ メイクアップ演出）得点と平均評定

次に 、 化粧品使用頻度 、3 種類の状況別化粧魅力度との間に有意な正の相関係数が得られた

度 、 化粧が好き な程度を被験者の顔の 魅力水準と(.208、 <p.04)。 顔の華やか さを演出するツ ー ル

学年水準で比較するために2要因の分散分析をしを多く用 いる傾向のある者は、 他 者 から 魅力 的た。

（美しい） と評定される関係のあることが分 か る(3)顔の平均評定魅力度と顔印象因子得点 、 お（ この評定は碁礎化粧の 段階の顔 についてなされ

よび化粧行動との関連たものであるが 、 容貌部位特徴から演出の可能性

心理学専攻で化粧 、 顔の研究に詳しい女子 学生

が評定に反映されたものであろうか） 。 また、 第群による平均評定魅力度を基にして、 その顔の 魅

3因子 （アロマ空間の演出） 得点とACT得点と力評定値の得点分布 に基づき高、 中 、 低魅力群の 正の有意な相関係数が得られた(.225、 <p
02)。

（高群： H群、 中群：M群、 低群 ： L群）の 3段

香水は、 化粧ツ ー ルの なかでは他とは異なる因子

階 に分けた。 また、 被験者の 学年分布状況を考感を構成したものであり、 コ ミュニケ ー ションの多して、 低学年 、 高学年（高学年群： H群、 3年以様な表現力が豊か な者であるほど、 空間的なメイ

上、 低学年群： L群、 1、 2 年）の2群に分けた。

クヘの指向性が強いことが うかがわれる。

魅力要因 、 学年要因で化粧品使用頻度得点 、

3(5)顔部位特徴への好悪度と化粧品使用 傾向 、種類の状況別化粧度得点 、 化粧が好き な程度を比

顔印象 因子得点との関係

較するための分散分析を行なった。

自分の顔の部位特徴についての好悪・受容の 程

1)顔の印象因子得点度は、 化粧時 に 用 いる
化粧品使用と関係すること

いずれの 因子得点 についても 、 魅力度 による高が考えられる。 顔部位等の好悪度と化粧品使用度

中低3水準 による分散分析では、 有意差は認めらとの相関係数を求めたと こ ろ、「口」への好意度

れなか った。

が高いほど、 アイライナ ー、 チ ー クを使う程度が2 )化粧品使用頻度得点

高く、 プロー についても これに準じて多い傾向が学年水準 に有意な主効果がある傾向が見られ、ある（順 に 、.236p <.02、.231p < .02、.169p <高学年の得点が高い傾向が見られた(F=3.21、 p.09)。 また、 学校へ行く際の使用化粧品が多いこ< .08)。

と も示 された(.195、 p < .05)。「輪郭」への好意

3)化粧の好き な程度

度は、 チ ー ク使用と有意な正の相関が (.222、 p

魅力要因と 学年要因間に有意な交互作用が見ら<.03)、 アイライナ ー使用との相関が有意な傾向<.09)。 また、「目」への好意れた(F=3.13、 p < .049)。 低学年群では、 魅力を示した(.172、 p

中群く低群、 高群の順で化粧が好きであるが、 高

度は、 マスカラ使用の多さと 正の相関係数を示し

学年群では、 これと 異なり、 低魅力群く高群く中てしヽる (.165、 p < .10)。

群の順で化粧が好きと なっている。

次に 、 顔の印象因子得点との相関関係を見 る4 )大学での化粧品使用 状況得点と 、 第4因子（ヘビ ー メイク 女性性強調）との間

学年要因の 主効果が有意であり、 高学年で使用に鼻、 全体への好意度と有意な負の相関関係が見

状況得点が高か った (F = 7.43、 p < .008)。
5)デ ー トに行く時の化粧品使用 状況得点

られているにとどまっている（鼻： ー .200、 p </04、 全体： 一 .242、 p <.01)。
-100 -

対人魅力の形成にかかわる顔の構造的特徴と化粧行動の影響の研究

3 . 5

考

察

る上級学 年の方が化粧品使用傾向の高いことにそ

化粧は化粧をする人に様々な効用をもたらす。

のことが知られる。

化粧する行為自体に快い緊張感をもたらしたり、

4

積極的なストレス解消の効用もある。 それだけではなく、 外見上の欠点をカバ ー し、 目立たなくさせるという改善の効果を望むことができ、 そのこ

研究m
との関係

4 . 1

とが自信や快適感をもたらし 、 積極的な自己表現

目

顔の構造的特徴と個人特徴的対人認知を行う際に利用している手がかりのl
つに、 相手の容貌がある。 われわれは、 相手の容が可能になるという対人的効用もある。
このような効用からすると、 化粧は対人関係を貌からその人のパ ー ソナリティ特徴を種々推論し円滑に行なうためのスキル足り得ると考えられ対人行動の手がかりとしている。 例えば 、 「丸顔る。 人間にとって、 顔は表情や音声を生み出すコだから優しそう」 「頬がこけているから神経質そ

ミュニケう」など、 中には失礼な表現もあるが、 容貌的特ー

ションの場であり重要なメディアである。 化粧はそのコミュニケーションの場である顔に施されるものである。 化粧は他の社会的スキ）レ

徴と性格特性の間にはある種の関連性が存在していると考えることが多い。

と同様な効用を有すものであり、 不足する自己主張性などを補うことが十分に可能であろう。

このような、 容貌から相手の性格特性を推定するという考え方は古くから存在する。 顔や身体的

スキル得点と普段のメイクアップとの関係を見特徴といった相貌特徴と性格との関連性を組織的ると 、 概ね正の関連性があると言える。 ただし、に記述しようとする相貌学(physiognomy)なる

素顔への魅力は 、 社会的スキルと関連し、 自信 の研究分野も成立している。 しかしこの相貌学 は理ある者ほど自分の素顔への感受性も強いことが分論的根拠にとぼしいうえ、 相貌特徴と性格特性とかる。 また、 同時に、 化粧品の保有数も多く、 柔の相関は非常に弱いものであったため、 その後、軟な指向性を持って切り替え可能なことを示唆さ

この種の研究はあまりなされなくなった。 しかしれる。

ながら、 人びとが今なお、 他者の相貌特徴と性格

対象者の年代や学 生集団であることを十分に勘特性との間になんらかの関連性を暗黙のうちにせ案しなければならないが、 スキル得点の高低にかよ仮定しているとするならば、 われわれがそれをかわらず、 多くの者は「化粧」 への関心を有して研究する必要度は高い。

ーション表現に比べて指向

大坊(1986) l) は、 林ら(1983) S) の容貌認性は高い。 しかし、 ヘ ビ ー メイクについては、 日

知次元を用いて、 パ ー ソナリティ認知および対人常との距離が惑じられたようであり、 積極性は高

魅 力認知との関係を検討している。 その結果、まるが、 美的、 好意的判断は抑制されている。 こ「色白で目元はっきり」「細っそりした、 目鼻立ちの点については飛田(1996)IO) の報告もあるが、の整った」の肖定タイプが特にポジティブに認知

パー ソナリティ等の個人要因の他に、 化粧自体へされた。 これに対して、「口が小さい、 下がり目」の慣れ、 色彩 パタ ー ンについての選好による個人の否定タイプが最も社会的に活動的であると認知差は検討課題にならざるを得ない。 今回は被験者された。 また、 個人の パー ソナリティ特徴がこれに応じてピンク系、 レッド系と合わせたメイクをらの認知に作用することも示されている。 例え施したが、 その パタ ー ンについてはさらに細分化

ば、 外向的な人は 「細っそり」「色白」 タイプ をして検討が必要と思われる。 具体的な化粧遂行に

可愛く、 そして問題解決能力に長けていると認知向かうには、 適切な日々の観察や情報の選択がうしているのに対して、 内向的な人は「細っそりしまくなされけなばならない。 各種情報の蓄積のあていない」 「ふっくら」 「口が小さい」 タイプを、

おり、 他のコミュニケ-101 -

問題解決能力に長けていると認知している。
村澤(1988) t4)は、 女性の顔写真(10歳代後

4. 3

結

4.3. 1

果パ ー ソナリティ、 スキル尺度との関係

半-40歳代前半） の印象評定を 、 女性被験者に得られた指標値についてパ ー ソナリティ、 ACT求めた。 その評定結果と容貌特徴との関係を因子等の尺度得点との相関係数 (Pearson)を求めた

分析によって検討している。 その結果、 目の丸さ

(Table 3)。

（大きさ）は「親しみやすさ」と、 目の上がり、 顎投影 全赤唇高、 唇面積とACTの間にそれぞれに対する口の大きさは「大人っぼさ」 と、 目の二負の相関がみられ、 唇の大きさはコミュニケ ー シ

重は 「セクシ ー さ」「派手さ」とそれぞれ正の相ョンの表現力とは逆の関係にある。 唇全体の幅に関関係がみられた。

対する人中幅 （上唇上部中央の隆起幅） の比は、

これらの諸研究からすると、 顔の特徴からその人らしさを広範に判断し、 いくつかのステレオタ

正の相関を示していた（富士山様のここの隆起の大きいことは、 表現力と関係している）。

イプがあると思われる。

私的自己意識は、 瞳の大きさ（顔の面積に対す

そこで、 顔の実際のサイズ特徴がストレ ー トにる瞳の面積の比など）と有意な正の相関を呈してその人の性格等と関係しているのであろうか。 そいた。 公的自己意識は、 目の大きさ（目の面積、の研究は必ずしも十分になされていない。 また、眼の上下高など）と正の相関を示している。 対人

同時に化粧を施す際に、 目や口などの特徴を強調

不安と瞳子内縁間幅 、 願結節点高の間にそれぞれ／抑制する工夫がされていることは、 これらの正の相関がみられた。

「見られ方」を懸念したものであり、 この点からしても、 顔の構造的特徴とパー

ソナリティなどの個人特性との検討が必要であろう。

自己受容度と両目の間隔、 つまり瞳子外縁間幅、 瞳子内縁間幅の間にそれぞれ負の相関がみられた。 自尊心は唇の厚さと負の相関を示している。 また、 顔について意識している程度は、 目の

4. 2

方

法

大きさ、 鼻の長さ、 大きさほど顔を意識する程度

被験者は北星学園大学の1 - 4年の女子学生が高いことが示されており、 個人的特徴として優43名（平均年齢19.5歳、 SD0.88)であり、 正面

先的に認知されやすい部位特徴が関連しているこ

顔•横顔の2枚の写真を撮影し、 合わせて自己受とが分かる。 ただし、 用いた測定指標数からする容尺度（伊藤、 1991) 121 、 感情表と多くの指標については関係が少ないと言わざる出コミュニケ ーション尺度(ACT; 大坊、 1991a) 31 、 自尊心尺度を得ない。

(SE; 井上、 1992) II) 、 押見ら(1986) 161 の自己
自己のパ ー ソナリティ認知との関係

意識尺度(SCS)、 また、 顔について、 いくつかの

4.3.2

状況での意識度を問う質問紙（大坊、 1988) 2)を

鼻下上唇高と「健康な 一 不健康な」、 鼻根顔高、実施した。 撮影した写真をphotoCDを介してパ下顎高比と「無口な ー おしゃべりな」の間にそれソコンに取り込み、 先行研究を基にしながら選んぞれ正の相関がみられた。 また、 鼻根点 ー 鼻下点だ顔形態指標57種類について画面上で測定した

高と 「ふまじめな 一 まじめな」の間に正の相関（なお、 人類学で用いられているMartin式の人体が、 鼻根点鼻下点高比との間に負の相関がみられ計測法によ っている。 人類学講座編袋委員会、
1991; 大坊・村澤• 趙、 1992) 131 、 8) 。これらの形た。 以上はいずれも5%の水準で有意な相関であった。

態測定値とパーソナリティ特性との関連を検討した。

鼻下上唇高が長いほど 「不健康な」、 鼻根顔高が長いほど、 また下顎高比が大きいほど「おしゃべりな」、 鼻根点 ー 鼻下点高が長いほど 「まじめ-102 -

対人魅力の形成にかかわる顔の構造的特徴と化粧行動の影響の研究

Table 3

顔の部位サイズと個人特性との相関関係

ACT

対人不安

t\7°1
格rfii段

0.:!593!
0.0180

T、1
人中幅/II裂幅0.2256b0. I•157

私的自己 公的自己意識
意識
0. O:l6S I -0 02642
0 81620 8664

自己受容 自尊心度
0 2,16•18 -0.2 1727
0. 1616
0. 1111

顔意識度（逆転）-0. IIHH:l
0. :1:176

0.:l199fi
0.03650.11865
0 4 186-

0.15560
0 3191

0. I595Y
0 30670.028250�01:10.02589
0.86Yl

-0 09787
0 5:!�I,\73
投彩全赤悩高�() 30587
0.0461

0.2-1662
0 I 10\Jo.oio110 8�5�

-0.00115
0.96370.2�3420. 11 :i7

0. 18289
0 2404-0.03982
0.7999A2·1
邸結節点尚-0.28686
0 06220.361:l?.
0.0173·O.1·1850
0.34l!J-0.08939
0 56860.010900 !J,H7← 0.20446

0. 188fi-0 01038
0. g.17:1

1\39
瞳 f -内絃ILIJ幅-0.�:l888
ll 1229

0 32fi00
0.0335

0 286 I I
0 062Y

0 06:J t 7
0 6874

0 :I,1a70
0.0232·O.10530
0.5016-0. 19007
0.22�2

T5
瞳子麻径／眼裂幅

o. o:l64·1
0 8166

0. I8788
0. 2276

0.461850.00180.02\185
0 84930.082070 6009-0.09056
0 5636

0 30561
0.0463Tl 7瞳リ）面積／頗の面積

0 05861
0 70890.20fi28
0. 1866

0.38%40.00980 18500
0.23500 035610 8�070.27064
0 07920 06418
o. 68n'1'8

0.01655
0.9161

0.0·1159
0. 79II

0 31676
0.03850 J 6667
0.28540 (H6U:!
0.7695

0 3070I
0.0452-0.04586
0 770:l

瞳十面径?./頬骨弓幅0 01725
0 9126

0.;!3278
0. I:l3I

0.308-10
0.0442

0. 18355o.�387

O.J:38-19
0 :l758-0.228:JJ
0 1409o.o�no0.78571\76llu)f/JiM-0 00178
0.99100. 18HYI
o.22ao-0 034:J9
0.8267

0 36265
0.01690.157.05
0. :l:10-1

0 16192
0. 2996-0. l:l6!JO
0 :38 J:l0 10�91
0 fi03Y.

0.089.J-l
0.568・1

0.04405
0.77HJ

0.34686
0.0227

0 25753
0 (Iり5fi-0. 18015
0.2-177-0 12172
0 ,1�68A72
眼上下向0.02:l73
0.879()

0 I 593:i
0.307·1

0 0I79•10.9091

0. 3257-1
0.0330O 22827
0.14 10·O.12498
0. ,1245← 0.01207

心7
瞳子外絃間幅-0. Ui8:J
0.07780.26/J:JO
0 0819

�0.15511
0. :!206

0 12278
0 43280 370fiY
0. 0144-0. 17629
0 2581-0. 1558-1
0.3183A78
ド赤唇,:'Ii. o nJ18
0.076:1

0 169:lfi
0 i7760.07561
0 fi2!Jり0.050140.7.195

0 0645Y
0 68070.32909
0.03120. I 0675
0 4957Tlti
柑面槙/iJ釦/) 1!11禎- 0. 1.9:J JI
0 05ti4

0. 17361
0. 1655

O.O:l471
0 8�fi I-0 0�175
O 88!!9o.1819H
0�-1�8.. o.32605
0.0329-o. 152aJ
0. :l�H8

T!3
外眼角幅／頬骨弓幅-0.01851
0.906�

0.067I5
0 6688-0.26374
0 0875

0. 1796 I
0 2491

0.063240.6871-0 16456
0.2917-0.40931
0.0064Tl
眼裂幅2/頬骨弓幅0.05331
0.7:142·0 00793
0 9598→0 25560

0. 18903
o nm

0 053·16
0. 7:!35← 0.15922

0 0981-0.37036
0.0145ABO
昇尖i柘

0.0520V
0 71010.04 IYl
0 7896-0.16:l3l
0 295-1

0. I 2099
0.13960 O:l6J I
0 81800.03747
0 8I 15→ 0. 3207 I

All I
外I艮l,(葬ド．＇はri:i;

0.0、1816
o. 7a91

0.O:Jfi6、1
0.8!060.10560
U ;iOO:l0.114·17
0 4ti,t8o o�:l25
IJ.78:lO

0.036160.8179·0.3J:l6l
0.0406A70
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鼻根卸高／相貌学頷i訴

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糾 l}j 懃識度いI ( I柘） ·--'l (低）I、段は 、 s i g : ノ
ベル中2は2倍を、r<す- 103 -→

0.30780 78880.0360な」、 鼻根点鼻下点高比が大きいほど「ふまじめ

うかと考えられる。
「鼻が高い」については、 鼻尖高で「はい」＞

な」と認知している。
ーソナリティ認「いいえ」、 鼻尖高比については「いいえ」＞「は知における 要因となっていることが言える。 鼻い」、 鼻根点 ー 鼻下点高 （の間隔） が 「はい」＞の下口の上までの長（高）さは不健康さ、 鼻の長「いいえ」の関係が有意であった（順にp<.001、

さはまじめさの要因となる。

p< .001、 p< .01)。

特に鼻から下の長さが自己のパ
一

鼻尖高は鼻のつけ根から尖端までの長さを表す
4 . 3 . 3

測定値であり、 鼻根点 ー鼻下点高は鼻の尖端から顔の特徴の自意識

自分の顔の特徴について該当するか否かの回答

鼻の下までの長さを表す測定値である。 自分の鼻（例、「面長な」：はい 、 いいえ） を求めた結果かが高いと認知している人の方が、 鼻が低いと認知ら被験者を2群化し、 諸形態サイズ値についてのしている人よりも 、 これらの値は大きかった。 つ分散分析を行った。

まり、 鼻の長さが長い人は、 自分の鼻が高いと認「面長な」については、 鼻幅（いいえ＞はい）、知していると言える。

鼻尖高 （はい＞いいえ）、 顔高幅比（顔の長さに対する横幅の比）（はい＞いいえ） が有意であった （各p< .05)。「面長な」対する認知は正確で

4.4

考

察

このように、 形態測定値と各パーソナリティ特あると言える。

性との相関分析を行ったところ 、 高魅力の要因と「口の小さな」につい ては 、 投影全赤唇高（唇なる部位と各パ ー ソナリティ特性との相関関係はの縦の長さ）と唇面積でいずれも「いいえ」＞「はきわめて少ないものであった。 巷間で一般的に交い」の関係が有意であった (pわされる暗黙の見解とは異なり、 用いた指標数か< .01)。 大きな口をしている人は、 自分が大きな口をしていること

らすると、 容貌特徴が当人のパ ー ソナリティなどを認知していると言える。

の特徴を表しているという可能性は低いと思われ「頬のこけた」については、 眼上下高、 目のる。 ただ、 ここで用いた個人的特性指標は限られ面積で 「いいえ」 ＞「はい」が有意であった (pたものであり、 社会的な評価や自己像との関係を< .001)。

目指した特徴との間についてまで拡大しての断定はできない。 しかし 、 ここでの結果からすると 、間幅で「いいえ」＞「はい」の関係が見られた(p容貌特徴とパーソナリティ等の特性との間には積< .01、 p < .05)。

極的な関係は見られないと言う方が賢明と言えよ

これらの測定値は大きいほど目と目の間がはな゜
つ「目の大きな」については、 内眼角比、 内眼角

れていることを示す。 自分の目が小さいと認知しこれに対して 、 顔の特徴をどの程度意識できてている人の方が、 目が大きいと認知している人よ

いるかについては、 ある程度の関連は認められ

りも、 これらの値は大きかった。 つまり、 目と目た。 その主な結果からすると、 輪郭、 口 、 目の大の間がはなれている人は、 自分が小さな目をしてきさについては、 容易に日々認識しやすい、 注意

いると認知していると言える。 ところが、 実際にの向かっている箇所であるがためか、 自己認知は目の大きさを示す測定値、 目の面積、 眼裂幅、 眼

ほぼ正確と言える。

上下高にお いては、 有意な結果が得られなかっパーソナリティ認知との関連では 、 鼻から下のた。 このことから、 目の大きさに対する認知は、長さが自己のパ ー ソナリティ認知における一要因

実際の目の面積や長さによるのではなく 、 目と目となっていることが言える。 鼻の下口の上までのの間の長さによってなされているのではないだろ

長（高）さは不健康さ、 鼻の長さはまじめさの要-104-

対人魅力の形成にかかわる顔の構造的特徴と化粧行動の影響の研究因となるが、 その因果関係についてはここでは追究できない。 多数者の特徴を収集した研究の展開-123.
9) 林文俊•大橋正夫・ 廣岡秀 一 1983 暗黙裡
の性格観に関する研究(I) 一 個別尺度法に よが必要であろう。

るパーソナリティ認知次元の抽出

また、 自分の鼻が高いと認知している人の方学研究， 23,9-25.

が、 鼻が低いと認知している人よりも、 鼻部の長さの値は大きかった。 つまり、 鼻の長さが 、 鼻の高さの認知の有力な手がかりになっていると言え

10) 飛田操 1996 化粧の個人的効果と対人的効果に関する実証的研究 ．
究報告， 4, 145-157.

る。
顔の構造的特徴は、 そのサイズ自体とともに、

実験心理11) 井上祥治

1992

コスメトロジ ー 研

セルフ ・ エスティ ー ムの他の部位との相対的な比較で主観的に自己認知さ測定法とその応用 ． 遠藤辰雄•井上祥治 ・ 蘭千

れていることも十分に考慮した検討が必要と言え

壽編

よう。

章 ナカニシヤ出版 .Pp.26-36.

セルフ ・ エスティ ー ムの心理学 ．

第212) 伊藤美奈子 1991 自己受容尺度作成と青年期自己受容の発達的変化 ． 発達心理学研究，

引用文献

1) 大坊郁夫 1986 対人魅力印象に及ぼす身体的特徴の影響 ． 日本社会心理学会第27 回 日・本グル ー プ・ ダイナミックス学会第 34 回大会
発表論文集， 67-68.

2,70-77.

13) 人類学講座編纂委員会編 1991 人体計測法： I生体計測法

人類学講座別

巻l

雄

山閣出版

2) 大坊郁夫 1988 顔の意識～顔、 横顔そし

14) 村澤博人 1988 顔の印象度の甚礎的研究 ．

3) 大坊郁夫 1991a 非言語的表出性の測定：

15) 村澤博人 1992 顔の文化誌 ． 東京書籍
16) 押見輝男•渡辺浪二•石川直弘 1986 自己て自己意識 ． 化粧文化 ， 18, 76-88.

ACT 尺度の構成 ． 北星学園大学文学部北星論集， 28,1-12.

4) 大坊郁夫 1991b 容貌の構造的特徴と対人
魅力 ． 化粧文化、 24,55-68

5) 大坊郁夫 1992 外見印象管理におけるブランド選択と流行意識 ． 北星学園大学文学部

北星論集， 29,91-113.
6 ) 大坊郁夫 1995 気持ちいい顔 ー 好まれる

化粧文化、 18, 89-100.

意識尺度の検討 ． 立教大学心理学研究年報， 28,

1-10.
)
17 遠山尚孝•千葉良雄·末広晃二 1976 不安
感情ー特性尺度(STAI)に関する研究 ． 日本心理学会第 40 回大会発表論文集， 891-892.
18) 和田実 1992 ノンバ ー バルスキルおよび
ソ ー シャルスキル尺度の改訂．東京学芸大学紀要第一部門（教育科学）第 43 集， 123-136.

顔、 好まれない顔 ． （アクロス編集室編 気持
ちいい身体 一 進化する「カラダと快惑」

一、

Pp.24-41.,パル コ出版）

7) 大坊郁夫 1996
修監修

【付記】

化粧心理学の動向（高 木大坊郁夫• 神山進絹

社会心理学、 北大路書房、 2 章

この研究の実施に際し、 扇野歌織、 小山

内ゆり、 沼田綾、 佐々木綾子さんの協力を得ま
コス被服と化粧のしたので、 記して謝意を表します。 また、

Pp.28-46.)

メトロジ ー 研究振興財団事務局の宮川安正氏、

8) 大坊郁夫・ 村澤博人・趙鎖珍 1992

魅力 的な顔と美 的惑情 一 日本と韓国における女性の顔の美意識の比較ー ． 惑情心理学研究， 1,101- 105 -

および、

コー セー 化粧品の研究員の方々のご配感に厚く惑謝いたします。

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平成8年度記念講演

田゜

心翌等贄'!!If�ふ 、，戸滋史注

出,-!'!

冷�コスメトロジ ー 研究振興財団
第7回表彰・贈呈式記念講演

コスメティックとコスミック
大阪大学文学部

鷲

田

教授

清

一
場所 日本薬学会長井記念ホ ー ル
日時

平成8年11月20日休

サハラのウォ ー タベ族に は、 女性が男性のひとはその社会的生活のなかで、 他人の眼に身「美」的優劣を決めるダンス ・ コンテストがある。

体としてのじぶんの存在を映す。 そこで視線を交男は髪の生え際を剃り落とし、 眼と歯の白さを際わしながら、 それぞれが〈わたし〉というイメ ー

立たせるメイクをし、 顔を絵の具で塗り分け、 腐ジを調整しあうのである。 ファッションとは、 人除けのネックレスで飾る。 そして、 女に向かってびとがそれぞれのセルフ ・ イメ ー ジを構成し、 補眼を大きく見開き、 目くばせする。 背を高く見せ

強し、 相互に調整するために、 共通の可視性のスるために爪先で立ち、 前方に揺れる•…..。

タイルヘとじぶんの身体的存在を加工•変形する

このシ ンを見ていて考えさせられるのは、 化

この共同のいとなみのことである。 装いという現粧について論じるとき、 メイクしながらメイクし象はこのようにまずは共同性というレヴェルで出ていることを見せないようにする、 つまりもとも現するのであって、 まことに「ロビンソンにとっとこういう顔であったかのように偽装することをてはモ ー ドは存在しない」のである。 ファッシ

本質とするような「ナチュラル ・ メイク」が、 化

ョンとは、 このように、 人びとがたがいに自己を粧の常態であると考えると、 大きな誤りにおちい

映しあうという、 そういう〈鏡〉のゲ ー ムのもっるということだ。

とも重要な媒体なのである。 いいかえると、 ファー

化粧をしていることを隠さないメイクは、 偽装のメイクの長い伝統を破って、 わたしたちの周辺

ッションはこのようにひとを秩序の内部へと組み入れるメディアである。

にもしだいに広がりつつある。 茶髪、 細い眉、 そが、 その同じファッションが、 ひとをその秩序してブル ー やブラックのマニキュア／ペディキュの外部へと連れだす。 既存の秩序の枠組みのなか

アの流行、 いわゆる悪趣味メイクがその一例であでそれぞれのセルフ ・ イメ ー ジを相互に演出したる。 これらはじぶんの外見がフェイクであることり操作したりするためのメディアとしてのファッを隠さない。 むしろそういう変換のプロセスをこションを 〈水平のファッション〉 とよぶならば、そ見せあっている。

ひとをその外部へと連れだし、 いわば世界の尺度

一

そこで つの区別を導入したい。 それはコスメ

や社会のならわしを全面的にひっくりかえすかた

ティックにおける水平性と垂直性の区別である。

ちで外見の変化をおこなう作業を、 わたしたちは

Cosmetique and Cosmique

宇宙的な意味をもった存在の変化という意味で、〈垂直のファッション〉とよぶことができる。
身だしなみや身づくろいの技法であるコスメテ

Kiyokazu Wasida
Osaka Universityィック(cosmetique) は、 本来、 コスミック（宇宙的=cosmique)な意味で浸されていたのであった。 身体の塗飾や変エとしての装いには、 かつて-109 -

宗教儀礼や科学的探究に擬することのできるよう一般にメイク ・ アップというのは、ひとが顔のなパワ ー があったのである。ここで宗教や科学と表面を変えることによって、別のものになろうと言っているのは、見えないものを掴む技法としてする行為である。それは、顔を現にあるものとはのそれである。宗教は超自然的なもの、世界を超別の顔にするという意味では 一種の〈変身〉であえたものへの祈りであり 、 また科学はかつてはこ

ろうし、また現にある顔を隠す、偽るという意味の世界を動かしているある見えないものを掴もう

では 一 種の〈変装〉とみなすことができる。そしとする技法であったが、化粧や服飾もまた同じよてその極限状態が、それぞれ仮面と覆面である。

うに、わたしたちの目に見えているもの以上のも顔に仮面をかぶる、覆面をするといった習慣のを掴もうとする技法であり、そのために、惑覚

は、現代では 、 祭儀のときですらめずらしくなっの器官（＝媒体）であり、惑覚が出現する場そのているが、逆にそのより穏やかな形態としての化ものである身体の諸様相をさまざまに変換する装粧は普遍化して、ほとんどのひとがほとんどの時置としてあった。つまり、「別の世界」へと移行

間、じぶんの顔になんらかの加工を施すようになするために、あるいは 「別の世界」を呼び込むたっている。そしてそれとともに、化粧の水準が、めに、じぶんの身体を可変的な状態に置く 、 そう「化ける」ことから、信ら」こと、つまり「おこいう装置としてあったのである。

しらえ」 へとスライドしてきたと言える。

しかし、見える世界のなかには存在せず、むし

化粧がもはや変身のメディアでも、変装のメソ

ろわたしにとって世界の可視性の裂け目そのもの

ッドでもなくなったとしヽうことは、いいかえるであるようなわたしの顔、あるいは宇宙を感受すと、化粧しているという事実をできるだけ目立たるその感覚の場であり、感覚の出来事そのものでせないような仕方で顔をこしらえるようになったある身体が、世界の 「内部」 に引きずり込まれ、ということだ。人びとはじぶんの「素顔」を、ま

顔はこの世界の「外部」に向けられることはなくるで生まれつきにそんなに美しかったかのようなってゆく。「仮面の衰退とともに、近代の類廃に、懸命に演出しようとするのである。ひとはそが始まった」とは、ロジェ ・ カイヨワの指摘であこで、別のものになるというよりむしろ、じぶんる。マスク（顔＝制服）が市民の制服としてのおの別のイメ ー ジをたぐり寄せようとするのであさまりのよい顔に縮小していったのである。

る。だからスタ ー やアイドルの化粧はすぐに模倣

これとともに、化粧や装いが、変身とエクスタされるが、鳥や猛獣や霊などといった昔からあるーの媒体としての機能を見失ってしまった。身

モデルは参照されない。そして模倣されるセル

体の表面、とくにその開口部（目や口や耳）や指フ ・ イメ ー ジのモデルがメディアを通してみんな先といったわたしたちの感覚器官は、墨で、紅に供給されるので 、 結果としてみんなが同じ化粧で、鉱石や金属で、そしてエナメルで飾られてい品、同じ化粧法で自己のイメ ー ジを構成することても、それはもはや、宇宙をより深く、より瑞々になる。このように、人びとを本質的に個性 化

しく迎え入れるためのものではなくなる。それら

し、多様化するはずのコスメティックという装置

シはむしろ他者、つまり同じ社会の別の構成員に向は、逆説的にも人びとの存在を同質化し、平準化けられた誘惑の手段、もしくは対人関係の微調整してしまうのである。
しかしそれは、ひとの存在が長らく、そしてよのための手段としてしかなくなる。あるいはせ い
ぜい、

一

定のル

ー

ルのなかでかすかな逸脱を演出と収縮させられてきたからかもしれない。あるいするものでしかなくなっている。
こうした歴史的なコンテクストのなかで 、 もう一度現代の化粧についてみてみよう。

り巧妙に身体のうちへと囲われ、さらには顔面へ
は「エセ ー jのモンテ ー ニュをまねて、こんなふうに言うこともできる。かつてわたしたちは身体- 110 -

記念講演 「コスメティックとコスミック」

じゅうが顔であった。 身体じゅうに絵を描き、 疵

時間ももだえも哀しみも傷もない顔。 それは顔でをつけ、 装っていた。 それがいまでは、 顔が顔面はない。 それは匿名のボディにすぎない。

に収縮しているからこそ、 変身といっても、 化粧

目尻の跛がチャ ー ミングだな、 とふと思う女のでじぶんのイメ ー ジをちょっとシミュレ ー トする

ひとがいる。 掌の憑やかな駿がかわいいなと思う

ことくらいしかできなくなっているのだ、 と。

女のひともいる。 その言葉をためらいなしにその顔を思い浮かべずにだれかを思い浮かべることはできないが、 その存在を顔に還元することもでひとに届けることのできるようなコスメティック
を夢見たいとつくづく思う。

きない。 ひとは顔よりも、 もっと見えにくい存在

ミシェル ・ セ ー ルも言っているように、 人類がを、 あるいは〈わたし〉の意識などそれのたんな

太古から入れ墨や塗飾などのコスメティックを施る表層効果にすぎないような 「影」 をも っていしてきたのは、 人びとの感覚の表面である皮南がる。 そうした個人の存在の重層性は、 表面として折り畳まれ、 製となって、 みずからと接触していの顔のメイクを超えて、 もっと多様なコスメティ

る部分、 あるいはそれが他と交惑しようとしていックのチャンネルを要求しているのではないだろる場所、 つまりは「魂」が宿っている場所である。

うか。 じぶんを他人と同調（あるいは対抗）させそして垂直の コ スメティックは、 皮南のあちこちるためにではなく、 じぶんの重層的な存在を発見に散在するその 「魂」の声にもっと耳を傾けるこするための垂直のコスメティック、 じぶんの皮固とを要求している。 そのときその声は、 おそらの内部に入っていくようなコスメティックを。

く、 美しく飾られた耳にこそもっとも清澄に響くじぶんの重層的な存在を発見するためには、 お
そらくはまず、コ スメティックに時間性を回復させねばならないだろう。 いまのメイクは老いを回ことだろう。 コスメティックとは、 世界へのわた
したちの感受性を飾るものとして 、 宇宙（ コ スモス）の解釈法にほかならないのだから。

避しようとしている。 そして顔面に透明の被いをコスメティックはわたしたちの存在を飾るのでかけ、 いわば防水加工をほどこす。 しかし美しいはなくて、 かたどるのだ。 そしてそのことをつう顔というのは、 ほんとうに時間を消去した顔のこじて世界に深く浸透していくのだ。 わたしはいとなのだろうか。 そのような「つやつやの」顔は、

ま、 そういう視点から 、 失われたコスメティック

時間という契機があらかじめ抹消されている顔、としての化粧を論じてみたいと思っている。

つまりだれの顔でもないただの皮廣ではないか。

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測させるに充分な根拠を与えるものとして評価さより一層鮮明になるため、 新たな化粧品開発へのれよう。 今後さらにこれらの基礎研究を継続して夢が広がる可能性があり、実施する予定であるが、 近い将来必ずや遠赤外線

及ぼす影響ははかりしれないものがあると思われの決定的な効果が明らかになると思われる。 そのる。

コ スメトロジ 一 領域に（静岡県立大学）

ような場合、 遠赤外線の機能、 生体での役割等が（平成7年度）水を自然に保つポリマ ー とコスメトロジ 一
石原

一

彦

生命は水を媒 体として、 特異的、 選択的な反応

極めて効果的な知見となった。 これにより皮肉老を確実に行うということで進化してきた。 今、 人化や機能低下のメカニズムを知ると同時に、 これ

工材料と生命•生体との関わりでバイオテクノロ

らの好ましくない生体反応を防止する化粧料の開ジーやライフサイエ ンスが進みつつあるが、 必ず発にも拍車がかかると考える。

水を意識して考えることが大切である。

本研究の遂行中に単に保水性という観点ではな

今回、 助成の対象となった研究は、 新しいポリ

く、 健全な生体膜と同様に周囲の水の構造を自然ーを生体にいかになじま せるかの研究の過程の状態に維持できる合成ポリマ ー 構造が規定でき

で 、 水の構造と生体反応の関連を検討したものでた。 近年、 乾燥や大気汚染による皮膚機能の低下ある。 生体（細胞）膜表面を単純なモデルとはいが、 肌荒れを引き起こすことがわかってき ていえ、 生体膜を構成しているリン脂質極性基を有する。 ここで人工材料で第二の皮膚と言えるようなるポリマ ー (MPCポリマ ー の誕生）で再現し、 こ

生体適合性の高い被覆層を作ることができればこれを取り巻く水の状態についての知見を得たこと

れらの原因を除けるであろう。 このMPCポリマ

は、 皮淘に対して直接接触する化粧料の効果を理ー解する上でも有効である。 さらに、 生体反応を司“肌に優しく、 肌を健康に保ち続ける または 水るタンパク質の構造変化や機能発現と水の構造とを感じ続けることができる 新しい概念の化粧品

マの相関関係を知ることができ、

コ ラ ー ゲンの変性を化粧料の添加材として利用することにより、”“”の開発も可能である。

（東京医科歯科大学）

過程における皮膚表面近傍の水の状態を推測する（平成7年度）コスメトロジ ー のなかの物理化学
今栄 東洋子コスメトロジ ー の対象物は、 両親媒性分子／水

エマルションの熱力学的安定性の議論が主流であ／油または助剤からなる多成分系である場合が多ったが、 電子額微鏡による観察や散乱による計測

い。 初期の研究は多成分系の相図の作成とミクロ法が導入されるに至ってその研究は飛躍的に進歩- 116 -

コスメトロジ ー 研究雑感した。 すなわち 、 ミクロエマルションが球形であ注目されている。

るのはある（水リッチ 、 油リッチ）相のみであり、物理化学における分子論的研究手段として近年

他の多くの相内では複雑な組織体が形成されてい注目されているのは、 走査プロ ー ブ顕微鏡と表面分光学である。 電子顕微鏡よりも分解能が高く、ることが明らかにされた。
多成分系内での組織体構造の解明と並行して、大気中での観測が可能である原子間力顕微鏡の普関連する自己組織体分散系を熱力学以外の観点か及によって組織体の構造がナノスケ ー ルで観察可ら、 すなわち 、 動力学的、 流体力学的、 分子論的能になった。 ここから得られる情報に従って、 分な立場から解明することが可能になった。 このこ子のレベルでの議論が急激に進歩した。 一方、 分“＂とは 物理化学に基づいたコスメトロジ ー の研

光学を表面解析に利用した研究が注目されてい究に対して大きく貢献している。 特に、 私の研究る。 装置上の改良によって単分子膜程度の微量分

一

つである両親媒性分子／水／助剤の3成子数であっても計測可能になったためである。 こ分系は 、 水性商品に対する機能性分子の取り込み

れら方法をコスメトロジ ー に適応することによっのみならず、 ドラッグデリバリ ー システムにおけて、 その物理化学的研究はさらに発展するであろる薬物の可溶化に関する基礎研究の対象系として

う。

対象の

（名古屋大学）（平成7年度）香りと人間
中田
化粧というと口紅やアイシャドウなど視覚に訴“”える 化けること を思い浮かべるが、 人に与え雅久か、 人と人との距離が接近している都会で香りを身に縛う人が多いのは気のせいだろうか。

る印象とかその場の雰囲気を醸し出す要素として香りの正体は分子量千以内の小分子がほとんど

香料も目に見えない化粧として挙げられるだろで、 構造式で書き表すことができる。 これが鼻にう。

人ると人はその分子を香りとして認識するのだ

動物では 、 香りは別の意味があるらしい。 例えが、 面白いことにその分子Aを鏡に映した化合物

ばイヌやネコが自分の匂いを縄張りに放ったり、（鏡像体） が分子 A と重ねられないものは似て非餌のありかを嗅ぎつけるなど、 香りはむしろ生存なるものとして、 香りと認識されな かったりす

し続けるための情報源のようだ。

る。 これは多くの医薬品の作用機構においても同

人間は視聴覚を主な情報伝達の手段として高度様で、 このような場合、 所望の化合物をいかに選

情報化社会を築き上げてきたためか、 嗅覚の必要

択的に効率良く合成するかが有機合成化学者の永性は低くなったといえる。 ただし、 香りそのもの

遠のテ ー マの一 つである。 その研究のここ十年のは、 いかなるメディアを使っても伝えるのは非常

進歩は目覚ましいものがあるが、 依然として更なに困難であるから、 香りはある光景、 経験や感情る進展が望まれている。

とともに人の記憶にリアルに残るものとして無視

香りは有機化学者の手にかかると亀の甲の話にできない。 ある香りを嗅ぐと昔の記憶が蘇ったなってしまうのだが、 人間に対してはある情惑をり、 何かを連想する人も多いだろう。 香りと人に呼び起こすほどの作用を持つ。 光学活性化合物の与える印象とが 同時に認識され記憶されるから合成法の進歩を天然資源保全に対応する光学活性- 117 -

な人工香料の合成等に活かし、 豊かな生活に貢献

したいものである。

（早稲田大学）（平成7年度）コスメトロジ ー は不滅の学問？
野村 大成
ー

研究振興財団の助成金申請書をたら、 何と「不景気になっても、 化粧品の使用は手にした時、 私の専門分野（放射線の人体影響）増えることはあっても減りはしない。 減るのは旦コ スメトロジとは性格を全く異にするが面白い学問があるもの

那の小遣いだけですよ。 きちんと化粧品を買ってだなと思った。 というのは、 私はこの十年間 、 膨

項いています。」との返事だった。 かねてより、 家大な予算をつぎ込んで免疫機能のないマウスの改

内から 「主婦は化粧品にお金を使うなんてしな

良を行い、 ヒト臓器・組織をマウスの体を借りてい。」 と絶えず聞かされていたが、 知らぬは亭主

長期間維持することを試みてきたからである。 特ばかりなのか。 女性の美への願望のすごさに驚いにヒト 皮膚および皮膚疾患はSCIDマウスに2年た。 女性が（男子が？）いる限り、以上にわたって維持され、 今般とやかく問題になーっている臨床治療実験にかわるものとして 、 化粧った。 かつて、 私の教室で仕事をしているお嬢さーんが「化粧品って何て高いんでしょう」と言った品の適性や皮膚アレルギ、 治療実験に広く応用

コ スメト ロジとは永遠の学問なのかなとふと考え込んでしま

時 、 先輩（主婦）が「わずか5千円で男性をだまされる可能性を明らかにしてきた。
我々の研究をよく理解して項き、 本財団より研せると思えば安いものよ」と笑って言った。 やは究助成金を戴くことになった。 贈呈式の席上、り男性の責任か。 という私も沖縄がまだ米国軍政

（株）

コー

セ

ー

コ

下にあった頃、 船医として訪れたことがある。 その研究のため 、 研究所をつくり 、 この時、 米国系のデパ ー トで新妻のため、 最も高価のような研究助成までもされていることを知り、で、 最も美しい コ ンパクトを買い 、 意気揚々と持はからずも「不景気になったり、 また戦争でもあって帰り馬鹿にされた。 その時初めて 、ったら、 一番先にけずられるのが化粧品と思うが日本の化粧品会社と知った。 二十数年ぶりに思し、 パ ブルがはじけて大変でしょう」とお尋ねし

い出した。

スメトロジ

ー

の研究所の方々と雑談した折、コー セ ー（大阪大学）（平成7年度）「化粧をする」ことについて工藤
あと2、 3年で50歳になる基礎の薬学研究者である私にとって、 日常生活で必要な 「化粧品」
ー

一郎

いう行為はいかにも縁遠い。 そんな私が今回、スメトロジ ーコ

財団の助成金を頂いた。 これまでにといえば、 洗髪後のヘア トニックと朝出がけに本助成金を受けられた多くの研究者の方たちと同使う整髪料ぐらいで 、 いわゆる「化粧をする」と様、 従来私が手がけてきた研究の一環として コ ス- 118 -

コスメトロジ ー 研究雑感

メトロジ ー を捉えて研究をさせていただいた。 即

でグレ ー ドアップしたような錯覚に陥り、 それ時型アレルギ ー の担い手である肥満細胞の研究、を、 難問の解決に利用したりする。「化粧をする」

およびそこに関わる脂質性生理活性物質の研究をということはちょうどこれに相当するのかもしれした。 本助成金を項くことを契機に、 教室では皮ない。 中身はもちろん普段着の自分なのだが、 う

南由来の細胞も扱うようになり、 研究のいっそうまくすると外見が中身を元気づけてくれる。

の展開を期した。 大変ありがたいことである。

私は私立薬系大学に勤務している。 約7割が女専門の報告と将来展望は報告書の項で充分述べ子学生。 教室配属の年齢ともなると多くの学生がたので 、 ここでは、「化粧品」あるいは「化粧を「化粧をする」ようになる。 学生たちはちょうどする」ということについて、 ズブの素人の立場でこの時期に、 卒業後の就職を決め、 国家試験の合考えてみる。

格を目指し本気で努力を始める。 内面的な充実がアメリカで開かれる研究会でよく経験すること

うまく外面とマッチした場合に、 彼女たちは文字だが 、 多くの参加者が、 国際的に著名な研究者でどおり輝き始める。

すら 、 非常にラフな服装で登場する。 我々日本人「化粧品」は効果的であり、 かつ安全でなくてはといえば、 大学での講義は必ずネクタイをしはならない。 化学物質に関する基礎的な科学知識て 、 上着を着てする 、 目上の人に会うときは正装の集積が 、 高度に複雑な練細な形で応用される。

しなければいけない 、 等々なかなか難しい。 かく

なかなか興味深く、 やりがいのある応用分野であ言う私も、 新しくつくった背広を着ると 、 中身まることを改めて認識した。

（昭和大学）（平成7年度）コスメトロジ ー における本研究の意義
藤井 博
高齢化が進む現代社会において、 化粧品は 、 単

能と密接に関係している。 例えば 、 必須脂肪酸でに皮膚の美しさを保つだけではなく皮膚の保護やあるリノ ー ル酸は皮膚の水分保護バリア ー の必須

老化防止の為にもその重要性が増している。 本研

構成脂質であり、究では、 皮膚の保護や老化防止を考える上で重要

ノサイトの分化誘導因子として、 またレチノイン

な基礎的研究を行った。 皮膚は、 体温や水分の損

酸は、 ケラチノサイトの分化制御因子として知ら失を防ぐ防護組織として大変重要な機能を持ってれている。 これらのリピドバイオファクタ ー は、いる。 皮膚の水分保護バリア ー は、 脂質から構成

脂溶性の為、 その機能発現には、 特異的レセプタ

コ レステロ ー ル硫酸は、ケラチされていることから、 皮膚における脂質代謝調節

ーや結合蛋白質を必要とすると考えられている。

機構の研究は、 皮膚の恒常性維持機構を考える上我々は、 これまでに、 これらのリピドパイオファで大変重要である。 また、 これらの脂質は、 単に

クタ ー のうち、 長鎖脂肪酸やプロスタグランジン

皮膚の水分保護バリアーを構成するだけでなく、などと結合する蛋白質群、 脂肪酸結合蛋白質

細胞増殖 、 分化、 細胞死といった細胞機能の発現(FABP)の構造と機能の相関、 遺伝子発現調節機に重要なシグナル伝達因子として働いていること

構を解析してきたが、 今回、 新たに皮膚型FABP

もわかっている。 とりわけ、 リピドパイオファク

を単離同定し、 その構造と機能、 皮膚における発

タ

ー

と呼ばれる

一

群の生理活性脂質は、 皮曲の機現に関する基礎デ ー タを得ることができた。 皮膚- 119 -

型FABPの発現は、 分化過程特異的で水分保護バ

蛋白質 CRABP と結合することがわかっている。

リア を構成する脂質の構築機構と密接に関係し皮固におけるレチノイン酸のシグナリング機構及ていることが示唆された。 また 、 乾鮮や扁平上皮

びCRABP の機能などについては、 不明の点が多ー

コ スメトロジ ー 研究の癌などの皮膚疾病でこのFABPの発現が充進してく残されている。 従って 、いることからも、 今後、 これらの疾患への関与機

新たな展開においても、 今後これらのリピドバイ

構に興味がもたれる。 更に、 レチノイン酸は、 ケ

オファクタ ー の機能発現機構に関する基礎研究がラチノサイトの分化を抑制することが知られてい重要であると思われる。

るが、 FABPと相同性が高く 、 同

一（新渇大学）

ーファミリ の（平成7年度）コスメトロジ ー 雑感
井階幸一

「色の白いは七難隠す」といわれるから、 どう

白人と黒人は数百万年も前から住むところが違っやら日本人は肌の色の白い方を美人としてきたよていたので 、 まあそれ位長い期間なら自然淘汰がうだ。 同じことは古来、 中国でもいわれていたか

生じてもよいかもしれないが、 印欧語を話す人々

ら金斐美人に弱いとかいう明治以来の白人 コ ンプ

（ア ー リア人といわれたが）があるものはインドレックスではないのであろう。 私の専門とする皮へ、 あるものはヨ ー ロッパヘ向かってユカサス

膚科でもシミの類を治してほしいという患者は多地方（？）から民族移動したのは、 たかだか5千年い。 皮園の色の人種差はメラニン色素の分布の違位前のことと思われている。 たったそれ位の期間

いにより決定される。 そして、 メラニンが太陽光にインドの人とスカンジナビアの人の肌の色があ線からの紫外線を遮閉して、 私たちの皮膚を守っれほどまでに違ったのはなぜか？オ ー ストラリアている。·従って、 北欧に住む民族は色が白く、 熱の白人はあと5千年たてばインド人のような肌の帯地方に住む人は色が黒いことは自明のことであ色になるのだろうか？誰か説明できればぜひ教えって私たちは何も疑問をさしはさまなかった。 してほしい。 ともかく「 コ スメトロジ ー 」の大きなかし、 すこし考えてみると、 いくら色が白くて紫

目標の一つは「色を白く」することである。 単に

外線に弱くても、 その人の生殖能力に影響はしな

シミを隠したり 、 メラニン合成を抑える位では患いと思われる。 つまり、 熱帯地方に色の白い人が者さんを満足させることはできない。 何かもっと住んでいても、 それによる障害、 すなわち皮膚癌

大きな、 未知のメカニズムがあってヒトの皮膚ヘで死ぬかもしれないのは子供を作って からであの色が決定されているのかもしれない。 まだまだる。 従って、 なぜ、 北欧の人は色が白く、 熱帯の分からないことは多い。

人は色が黒いのか、 考えてみれば不思議である。

- 120-（京都大学）

コスメトロジ ー 研究雑感

（平成7年度）コスメトロジ ー とオルガネラ
藤木 幸夫
コ スメトロジ ー(cosmetology)という語に触れた折、 果たしてこれはcosmethicを研究開発すこの意味において、

コ スメトロジ ー は脂質の合成·代謝系のみならず生体膜、 細胞内膜系の形成る学問だろうと想定し辞書(Webster)をめくっとしても重要なリン脂質類の合成と輸送を含んだてみると 、 "the cosmetic treatment of the skin,

細胞内及び細胞間ダイナミズムを対象とした学問

hair, and nails"と説明されており、 邦訳では美容と解される。 これらの問いに対して現在いかほど

学 、 化粧学とある。 いずれにしても私達生命科学の解答が得られているのだろうか。 探求の旅のほ基礎研究者にとっては、 皮曲化学(dermatology)

んの出発点にいるというのが実惑である。 21世

とも大きくオー

バーラップした形でとらえることになる。 従って研究内容となればUV照射、 酸素

紀のコスメトロジ ー は これらの解決へ向けて大きく発展すること が期待される。

ラジカル、 DNA障害、 細胞膜、 脂質代謝など多また、 これは極私的な感想だが、 近頃街で見かくの分野の研究対象となることから、 私などオルける若い人にルックス ・ 教簑 ・ 言葉遣い ・ 品等ト

ガネラを研究している者にとっても興味ある縄張ーー

タルに揃った人が見かけられなくなったと常々ム思っていた。 現在のコスメトロジ ー の"skin, hair,

は 、 プラスマロ ー ゲンと呼ばれるエ ー テルリン脂

and nail"という説明の中に、 近い将来に"heart"質の合成や極長鎖脂肪酸（炭素鎖C 22以上）のという語が入った総合ヒュ ー マンサイエンスの一代謝には必須の小器官として近年注目されてい分野となる日がくることを切望し 、 「雑感」としる。 ペルオキシソ ー ム欠損症は先天性代謝異常でたい。

領域である。 オルガネラの1つペルオキシソ（九州大学）あり乳幼児期早期に死亡する重篤な疾患である。

（平成7年度）コスメトロジ ー 雑感
杉林 堅次
私の学生時代の研究テ ー マは薬物の経皮吸収にされたし、 また、 微量で薬効を示す薬物が数多く関するものであった。 モデル薬物としてサルファ

世の中に出てきたからである。 さらに、 研究を始剤を使ったが、 皮廣を介して薬物を吸収させ薬効めた頃にニトログリセリンの経皮吸収型製剤が開を期待するなど、 当時は夢物語であった。 現在の発され、 商業的にも大成功したため、 薬物が皮膚大学に奉職するようになって別の研究を始めるこを介して吸収され全身循環系に移行していくことととなったが 、 米国留学を機会にまた経皮吸収のは薬学の世界では常識となった。 この間の研究で研究を始めることとなった。 しかし今度は夢物語

皮園に適用する製剤の科学的レベルは大きく前進

ではなくなった。 薬物の経皮吸収を促進する添加した。 では化粧品ではどうであろうか。また、 化剤が十分満足できるものではなかったものの開発

粧品中の成分や添加剤は皮膚を経て全身循環系ま- 121 -

で移行しないのであろうか。 物質の微量分析法のこととなれば副作用に関しても注意を払う必要が進歩により、 今まで吸収されないと考えられてい生じてくるが、 効果を科学的に論証する絶好のチたものが、 定量感度が上がっていけば、 極微量で

ャンスともなる。 当然、 医薬品や化粧品成分の皮あるが吸収されていると考えねばならなくなる。

南への浸透や吸収を促進することに加えて、 皮閲

化粧品は毎日使用するものであるから、 成分や添

浸透•透過を制御するための研究も今後ますます加剤がどの程度皮膚組織に浸透し、 また吸収して必要になるものと考えている。 今後とも薬学サイ

いくのか、 今後科学的にかつ広範に検証してみる

ドから化粧品を見ていこうと思っている。

必要があるようだ。 添加物が皮曲深くに浸透する（城西大学）（平成6年度）人との出会い松岡成明「1. 見逃さない目、 2. 見つめる目、 3. 見

学生時代、 脳外科入局以来先輩達から、 患者の顔をよく見て判断するよう教えられてきた。

抜く目」 の3つである。

ヒトの顔にその人の生活が出る、 健康状態を映

20数年前1人の笑い症状を呈する脳腫瘍の患

す、 そして人生を映す鏡でもあるといわれてい者と出会った。巨大な腫瘍摘出後、 その病的笑い・る。 美人 ハンサムを超えたいい顔をつくることは全く見られなくなった。 それ以来、 笑いにまつは大切である。 いい顔は環境とその人の努力次第わる問題が小生のライフワ ー クとなり、 その後、である。

80歳になるも、 綺麗な顔•綺麗な笑いを見る度に誰でも目を見てニッコリ、 目を見て握手、 スマ

人との出会いの大切さを痛惑している。 造形美術

イル ・ コミュニケ ー ションができるようになる。

論の中で口の表情が造形上一 番重要であると強調会うだけでホッとする顔、 聞くだけでホッとするされているが、 他面目の表情に対する役割を軽視

声、 そんなホットラインが果たして何人あるだろするわけにはいかない。 笑い顔• 泣き顔にも目うか？

元 ・ ロ元の役割はそれぞれ大きい。 目元には新皮

現在400床の老人病院で痴呆患者がベッドから何回となくナー

スコー

ルのボタンを押す。

笑の精神が反映し、 口元には辺縁皮笑の心が漂う、 という考えはどうであろうか。「モナ ・ リザ

訴えを聞いた事例によって、「あ"' またか」との微笑」の謎も目元 ・ ロ元の笑いの競合というこ

思うような事はないか、 慣れというものは恐ろしとで解けそうな気がすると時実氏は述べておられいもので、 そのように感じる時、 人の感性は鈍くる。

なり、 ナ ー スとして、 医師としての大切な姿勢を

最近神経学の大家である豊倉先生がある雑誌に失っている事が多いものである。「なぜ」「どうし「モナ ・ リザの胸鎖乳突筋」 というタイトルで書て」とその意味を追いつめていけばそれがショッかれている論文に、 モナ ・ リザは顔をや>左方にクの前駆症状であることに気づいて、 必要な対応

向けるとともに、 眼球は強く左方共同視、 そして処置がとれる事をたびたび 経験している。

胸鎖乳突筋は逆に右側のみ収縮していることであ

われわれは何時いかなる時も3つの目を持たなければならない。

る。 このパラドキシカルな現象の説明に有益な神
経学的考察をされ、16世紀のはじめ、 奇しくもレ-122 -

コスメトロジ ー 研究雑感

オナルド ・ ダ ・ ビンチの描tヽたモナ・リザの胸鎖リザはなぜ魅力的に見えるのか"と種々述べられ乳突筋は、 彼女の 「神秘的な微笑」とともに500ている。 幸い畏友野呂氏と汽車の中で会ったのがー年近く経た今日もなお神秘のヴェ ルに包まれた縁で 、 笑い療法時の笑顔をパ ー チャル ・ リアリテ

ままといわねばならないと結ばれている。

ィ通信方法を用いて痴呆患者の笑い顔を真正面か

わたしは笑いの講義の終わりにいつもこのモらとらえて分析することができたのは、 今回の研・ リザのスライドを見せて、か究費のお蔭と深甚の謝意を表すると共に、 老人痴

の微笑と思うかと問うたものであ

呆の応接の甚本の一つである言葉遣いをていねいる。 どうしても左口角が右に比してつり上がってに、 大きな声ではっきりと、 近くから|ま>笑み、いると感じるのは思いすごしであろうか。

目を合わせ、 時には手や肩に触れながら話して、

ナ

アンハッピ

ー

これはハッピー

奇しくも研究費授与式で原島氏の顔の コ ンピュ
ータ科学について特別講演で拝聴し、 そして氏等“”

楽しく痴呆患者との笑い療法に励みたいと思っている。

（産業医科大学）“の近著 人の顔を変えたのは何か の中の モナ ・

（平成6年度）「活きのいい」コスメトロジ ー 研究と自己表現
大坊 郁夫「粧（装）う」というと、 なにかしら、「振りを行動すること、 社会的な関係を担うことに他ならする」、 本当の自分を 「偽る」 かのようなニュア

ないと言える。 つまり、 どのような場面、 相手にンスがつきまといやすいものである。 ところが、対しても自分が期待する目的というものはある。

「自分」というもの自体がそう確たるものではな

言いたいことだけ示しても伝えたことにはならな

く、 他者や世間の中でいつの間にか形造られるもい。 目的に合わせて コ ミュニケ ー ションの仕方をのであると言っていいものである。 身近な友人、工夫し、 自分の伝えたいことと相手の意図との折家庭の特徴によって好むと好まざるとにかかわりり合いをうまく見つけていくものである。 その際なく、 考え方や行動の仕方まで強く影響されていに、 服装も同様であるが、「自分」の識別子の代る。 しかし、 大方は、 なんとなくは分かっていて表である「顔」に施すメイクアップは相手の視線も敢えてこのことを認めたくないもののようであにアッピ ールする大きな枠を与える。 その技法だる。 自分は独自•独特、 そう易々と誰かの影響をけが切り離されて問題になるのではなく、 顔全

受けてはいないと思いたいのも人情である。 で体、 そして表情を始めとする コ ミュニケ ー ション

も、 このような姿勢は世情に流され、 気づかない

スタイル等々と常に同時に関連している。

うちに周りの意見を自分のものと簡単に誤解してしたがって、 コ ミュニケ ー ションのための手がしまうことにつながりかねない。 時々立ち止まっ

かり要因の優先性、 その相互の関係についてさらて、「はて、 自分はこれまでどう表現してきたのに仕事を展開しなければならない。 日常の行動をか、 考えていたのか」をチェックすることが大切

リアルに扱おうとするほど、 コ トはやっかいになである。

っていく。 でも、 素材の「活き」をうまく生かし「粧う」ことは、 相手や状況に合わせて柔軟にた仕事をしたいものである。

-123 -（北星学園大学）

（平成7年度）

nn

化粧 からギリシャ美Aの秘密を探る？
服部 等作
美人の化けの皮の秘密をはぐことは勇気のいる

とりわけシルカップ遺跡から多数出土した化粧ことである。 とりわけ古代のヘレニ ズム世界には

皿は、 そのテ ー マの多くが西方のギリシャ神話、

アフロディテ（ロ ー マではビ ー ナス）、
ルテミスなど女神が壁画 、 陶器のモチ

ー

ニケ、

ア

フに多く

とりわけディオニソスの祭を代表にエロス、フ 、 怪獣テーマなど男性好みのテーニンマが好んで採登場する。 これらの女神たちは、 紀元前4世紀マ用されている。 いっぽう化粧する女性の姿が残さ

ケドニ アのアレクサンダ大王のインド遠征一 現在れているのは、 女性が鏡や化粧道具を使う姿がベによって東の古代ガンダ ー ラ

グラム遺跡の象牙装飾板に 、 また女性が化粧皿をー用いる場面が仏教寺院のレリ ー フで残されている

ド の要衝の地であり大王の遠征以降も東西の文程度で、 本当の古代美人の化粧の秘密はわからな

化、 民族が興亡を繰りかえした。

いことが多い。

パキスタン西北部、地方に伝わった。 この地は、 いわゆるシルクロ

この地を支配した ギリシャ 、 イラン 、 インド、東西文化が興亡するこの地で、 おそらく古代のスキタイといった多くの民族 、 王朝は、 交易と経女性たちは、 特別な階級意識や環境での化粧文化

済活動で化粧文化を示す遺品も多数残して いる。

であるに違いない。

例えば、 スキタイ朝からクシャン朝にかかるバク

この化粧皿と文化について、 幸いコスメトロジ
研究財団による今回の助成により、 皿を一枚ず

トリアのティリアテベ遺跡においてはギリシャのー化粧道具だけでなく遥か東の漢時代の鏡が、 さら

つ明らかにする機会は、 近寄ることすらできないにパルティア支配下、 ガンダ ー ラのタキシラ ・ シ

古代美人たちの化粧の秘密に一歩近づくことに な

ルカップ遺跡では、 遥か西のエジプト、 ギリシ

りそうである。

ャ、 ロー

マ世界に及ぶ化粧道具が見出される。

-124-（神戸芸術工科大学）

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事業報告書（平成8年度）
役 員
研究助成課題 一 覧事業報告書（自平成 8 年 4月1日

I .

至平成 9 年 3月31日）

7 年度事業（平成 8 年度）

昨年に引き続き以下のような事業を計画し、 実行しました。
自然科学や社会科学の各分野にわたり、 ひろくかかわりをもつ化粧品を総合的に体系化することを目的として①化粧品学の調査・研究に関して顕著な成績をあげた研究者や機関に対して功労金をもってこれを表彰する。(1件あたり100万円）②皮肉の生理機能や老化機構の解明、 美容に役立つ素材の研究等化粧品学に関連した生命科学、 その他の分野の調査 ・ 研究に対する助成を行う。
(1件あたり200万円及び100万円）③化粧品学の調査·研究にたずさわる研究者の海外派遣や招聘に対して資金援助を行う。(1件あたり50万円まで）

II . 募集及び選考の経過
本年度の各事業につきましては平成 8 年 5 月 7 日より募集を開始し同 8 年 7 月 10日をもって締切りました。

研究助成事業は本年度も 一 般公募を原則とし全国195ヶ所の大学·病院 ・ 研究機関等にダイレクトメ ー ルで推薦書を送付するほか、 関係学術雑誌 8 誌にも広告し、 その結果多数の応募をいただきました。 応募者の研究分野が多岐にわたった為、 選考委員会の中に 3 分科会を設け、 それぞれにおいて予備選考を行 い平成 8 年 9 月 24 日（灼ルビ ー
ホ ー ルにおいて本選考委員会を開催して受賞候補者を決定し、 11月20日の理事会及び評議員会の議決を経て、 受賞者を最終決定しました。
皿．

第 7 回功労賞・研究助成等の結果

以下のとおり合計19件が決定され研究助成金2,600万円、 国際交流援助金135万円が交付されました。
功労表彰（小林孝三郎賞）

0件

研究助成

16件
3件

国際交流援助

-127-

N.

会議等

理事会
第1回通常理事会
開催日時 平成 8 年 6 月 18 日（灼
開催場所

午後 5 時東京都千代田区大手町 1- 5 -1 大手町ファ ー ストスクエア23階宴「銀河」

理事総数

13名

本人出席

12名

監事

2名

出席

2名

委任状出席

l名（賛成）

審議事項
第 一号議案

事業報告ならびに収支決算報告について

平成7年度の事業内容が事務局より詳細に説明された。 続いて収支計算、財産内容などが詳しく説明された。 次に小田倉監事より上記内容が適正適法である旨の監査結果が表明された。 質疑応答、 審議の後 、 本議案は書面
表決者を含め、 全員 一 致で賛同を得、 可決承認された。
報告事項
平成 8 年度の研究助成課題の公募について

研究助成事業の方式について、 昨年との相違点を主とした詳細な説明がなされ、 理事会全員でその趣旨を認めた。
その他
本年 8 月中にコスメトロジ ー 研究報告第 4 号（収載論文 20 編）が発刊される予定であることが報告された。
評議員会
第1回通常評議員会
開催日時・場所は理事会に同じ。
評議員総数

14名 本人出席

上記理事会の決議を全員

一

10 名 委任状出席

致で確認した。

-128-

4 名（賛成）

第2回通常理事会
開催日時

平成8年11月20日（水）午後2時30分

開催場所

東京都渋谷区渋谷2 -12-15

理事総数 13名
監事

2名

日本薬学会館会議室

本人出席 11名
出府

委任状出席

2名（賛成）

2名

審議事項
第 一号議案 第7回表彰・贈呈者の決定について
表彰・贈呈の候補者について、 選考枠、 選考経過などに及ぶ詳細な説明の後、 分野別の応募状況の確認などを含めた活発な意見が交換された。 なお今回は功労表彰対象者として該当者なしが提案された。 しかるのち本議案は書面表決者を含め全員 一 致で原案通り可決された。
第二号議案

平成9年度事業計画案及び予算案について配付された資料に基づき、 事業計画、 予算案について財源、 財団運営指導に甚づく仕訳の変更などにもふれた説明があり、 前年の事業規模を維持、継承した提案がなされた。 原案は書面表決者を含め、 全員 一 致の賛同を得
た。
第三号議案

選考委員を選任する件について配付された資料に基づき、 厚生省の人事異動に連動する選考委員の交替が提案された。 慎重審議の結果、 原案は書面表決者を含め、 全員 一 致の賛
同を得た。
報告事項
研究報告について
平成 8 年 9 月に第 4 巻が発行、 配付された点と、 今後も年報を継続発行する旨の報告があり、 了解された。
その他

株式増資割当への対応、 今後の予定などが報告され、 理事会はこれを確認した。

-129 -

第2回通常評議員会
開催日時・場所は理事会に同じ。
評議員総数

14 名

本人出席

上記理事会の決議を全員

一

9名

委任状出席

致で確認した。

3 名（賛成）

選考委員会
分科会I
開催日時 平成 8 年 9 月 3 日（灼 午後 6 時
開催場所 東京都港区虎の門 1 - 8 - 7
審議事項

富田屋会議室

素材、 物性に関する分野の選考

分科会II
開催日時 平成 8 年 9 月 5 日（木）午後 6 時
開催場所 東京都千代田区大手町 1 - 5 - 1

審議事項

トップオブザスクエア会議室

生体作用、 安全性に関する分野の選考

分科会皿
開催日時 平成8年9月19日（木）午後7時30分
開催場所

東京都新宿区西新宿 2 - 2 - 1

審議事項

精神、 文化に関する分野の選考

京王プラザホテル会議室

本選考委員会
開催日時 平成8年9月24日（灼 午後5時30分
開催場所 東京都千代田区丸の内 1 - 9 - 1
審議事項

ルビ ー ホ ー ル会議室

各分科会の結果を総合的に判断して助成候補者が決定された。

表彰贈呈式
開催日時 平成8年11月20日（水）午後4時
開催場所

東京都渋谷区渋谷2 -12-15 日本薬学会長井記念ホ ー ル
以
-130-

上

第7回研究助成を受けられたかたがた(JA- 一般研究助成 A 、 JB- 一般研究助成 B 、 H 国際交流援助）
管理番号

研

究

課

題

分

野

代

研

究

者

近畿大学薬学部教授

JA-96-01

化粧用生理活性物質の皮膚透過と皮内貯留性及びヒ卜皮膚と動物並びに培養皮膚との比較

生物薬剤学

JA-96-02

単分散無機顔料粒子のモルフォルジ ー 制御とそのキャラクタリゼイション

コロイド化学
界面化学

神

皮膚科学

表

小木曽

太郎

大阪教育大学教育学部助教授

鳥

和

彦

JA-96-03

酸化ストレスにより生体膜に生成する酸化型リン脂生化学

北里大学薬学部教授

質の代謝機構の解明

薬学中JA-96-04

化粧品の香り表現に関する研究

JA-96-05

合成糖脂質の超分子集合体に関する研究

JA-96-06

HGFによる皮膚の再生促進と老化防止の碁礎的研究

生化学
細胞生物学

大阪大学医学部助教授

JA-96-07

高分子経皮吸収促進剤の開発と応用研究

高分子化学
製剤学

相模中央化学研究所主任研究員

新発見の糊代を持ったタンパク質の基礎と応用（タンパク質接着能を有する化粧品素材の開発）

JA-96-09

in vitroヒト樹状細胞培養系を用いた化学物質の感作性試験の可能性についての基礎的検討

JA-96-10

ケラチノサイトの発現するエラスチンと皮膚老化の関連について- 131 -

靖

心理学
官能評価

東京学芸大学教育学部助教授

高分子化学

早稲田大学理工学部助教授

高分子物性JA-96-08

JI I

生物化学

神
武
松
長

宮
岡
本

英
真
邦

瀬

夫

東京工業大学生命理工学部教授

広

瀬

茂

東北大学医学部講師

皮膚免疫

相

生化学
分子生物学

司

裕

皮膚科学

皮膚科学

夫

場

節

久
也

防衛医科大学校助教授

多

島

新

ロ

管理番号
JB-96-01

研

究

課

分

題

野

表

研

究

光老化におけるフリ ー ラジカルの関与 ー 長期紫外線

細胞生物学

金沢大学医学部助手

反復照射による皮膚抗酸化能の変化

光生物学

安

生物材料化学
応用生物化学新涅大学工学部教授

生薬学

北海道大学薬学部教授

JB-96-02

食用乳酸菌による化粧品素材としての機能性多糖の生産とその改質

JB-96-03

メラニン生合成阻害作用を示す海洋天然物の探索

JB-96-04

高齢女性における情動活性化の試み：リハビリテ ーション ・ プログラムヘの適用可能性の検討

JB-96-05

免疫不全マウス再構成皮膚における培務毛乳頭細胞による毛包形成の誘導と関連因子の検討

皮膚科学

細胞増殖因子および接着分子による皮岡硬化制御に

皮膚科学関する分子生物学的研究

膠原病学

JB-96-06

代

天然物化学
情動心理学
発達心理学

谷
小

井

口
林

者

子

裕
正

之

淳

同志社大学文学部学生（博士課程）

伊

波

恵

和

聖マリアンナ医科大学助教授

窪

田

夫

泰

獨協医科大学助教授

山

陰
’‘’

生

明

欧州宇宙開発機構
Human Factors Engineers
H-96-01

宇宙に滞在する人間のための室内デザインと宇宙に於ける人間行動とくに顔の表情について

Ergonomics

Nicholas Colford

受入責任者
早稲田大学人間科学部

野

H-96-02

接着分子におけるムチン型糖鎖の構造機能解析

細胞生物学
微生物学

呂

影

勇

近畿大学農学総合研究所助教授

吉

田

信

冗

オレゴン大学神経科学研究所
Professor of Biology
H-96-03

SCF/c-KIT情報伝達と神経冠細胞の分化• 発達の関
連について

生物学

James A Weston

受入責任者
聖マリアンナ医科大学

口

昌

（敬称略

- 132-子受付順）

平成 9年3 月 31 日現在

役員（株）コ ー セ ー代表取締役会長

理事長

小林橙次郎

専務理事

宮澤

香

理

事

有本

亨

理

事

磯邊

律男

理

事

宇佐美昭次

早稲田大学理工学部

理

事

内山

闘日本薬剤師研修センタ ー充

日本化粧品工業連合会（株）博報堂ーセ専務理事

代表取締役会長

ー教授
理事長

代表取締役社長

理

事

小林

保清

（株）コ

理

事

菅原

正文

高砂香料工業（株） 代表取締役社長

理

事

高橋

久

帝京大学医学部

教授

理

事

高山冨士雄

安田信託銀行（株

相談役

理

事

西川

武二

慶應義塾大学医学部

理

事

花輪

隆昭

社会福祉法人福利厚生センタ ー

理

事

廣部

雅昭

東京大学

監

事

小田倉正典

公認会計士

監

事

黒田

節哉

弁護士

評議員

秋吉

信夫

（株）コ ー セ ー

評議員

市原

久照

元食薬センタ ー

評議員

上野

芳夫

東京理科大学薬学部

評議員

緒方

宏泰

明治薬科大学

教授

評議員

北原

文雄

東京理科大学

名誉教授

評議員

近藤

保

東京理科大学

名誉教授

評議員

長野

哲雄

東京大学薬学部

教授

評議員

西岡

清

東京医科歯科大学医学部

評議員

野呂

影勇

早稲田大学人間科学部

評議員

福内

靖男

慶應義塾大学医学部

評議員

溝口

昌子

聖マリアンナ医科大学

評議員

宮崎

榮三

東京工業大学

名誉教授

評議員

山崎

幹夫

千葉大学薬学部

教授

評議員

渡辺

徹

日本薬剤師会

専務理事

教授

名誉教授

常務取締役
副所長

-133 -

教授

教授
教授

教授
教授

理事長

研究助成課題 一 覧

素材、 物性に関する分野
研

管理番号J 90-03

J 90-06

究

課

分

題

リン脂質膜の表面修飾と分子集合体としての機能発現に関する研究
ヒアルロン酸で表面を修飾したリポ‘ノ ー ムからの内容物の温度による放出制御

野

界面物理化学

薬品物理化学J 90-07

皮膚DDSとしての高分子脂質リポソ ー ムの基礎研究

高分子合成

J 90-15

皮膚への作用性を有する各種糖脂質の合成

有機合成化学J 90-16

J 91-02

J 91-05

J 91-06

J 91-08

J 91-10

J 91-11

J 91-20

新製剤法及び新素材を用いた化粧品の品質確保に関する研究
生体適合性逆型ベシクルの生成 、 安定化と応用に関

衛生化学

する研究

溶液論
界面化学

新しいDDS剤型としての高分子ミセルの設計と機能

高分子合成

開発

化粧品素材としての利用が可能な乳酸菌の新規育種技術の開発
化粧品素材としての竹節人参並ぴに甘草の組織培接

DDS
応用生物化学

生薬

代

表

研

究

筑波大学化学系助教授

古

澤

邦

牧

野

公

西

出

宏

中

JI I

昌

子

国立衛生試験所
環境衛生化学部長

武

田

明 •治

横浜国立大学工学部助教授

国

枝

博 ·信

東京理科大学
生命科学研究所助教授

片

岡

則

早稲田大学理工学部専任講師

桐村 光太郎
広島大学医学部助教授

神

田

博

界面化学
物理化学

九州大学理学部助教授

超微粒子分散系の構造と物性及び自己制御コロイド

高分子物性
コロイド物性京都大学工学部助手- 134-

之千薬大学薬学部助教授

界面活性剤を含む溶液混合系の相挙動と濡れの挙動に関する研究応用界面化学子

早稲田大学理工学部教授

薬用生物学

各種界面活性物質によるマクロ及びマイクロエマル
ションの調製並びに物性に関する物理化学的研究

夫

東京理科大学薬学部助手

による物質生産並びに大量増殖に関する研究

系の開発

者

荒
松

殿

史
誠

本 孝

芳

東京理科大学理工学部講師

阿

部

正

彦

管理番号
J 92-01

J 92-03

J 92-04

研

究

課

題

分

ヒトリゾチ ー ムタンパク質を高分泌する酵母突然変異体を用いた素材生産の効率化研究

化粧品の紫外線照射による光酸化メカニズムの研究

水素添加大豆リン脂質を用いた油性ゲル及び水性ゲ
ルの保湿作用に関する研究

代

表

研

究

分子生物学

広島大学理学部助手

遺伝学

鈴

物理化学
界面化学

薬剤学

木

者

克

周

明星大学理工学部教授

日

高

久

夫

昭和薬科大学薬学部講師

まき子

藤井

蛋白工学
生化学

東京大学理学部助手

細胞膜の脂質の物性と機能の基礎的な研究
ー
リン脂質物性のコスメトロジ ー ヘの応用―

生体物性学
細胞生物物理学

東北大学理学部教授

化粧品基本素材金属酸化物の酸性大気汚染物質との物理化学
固体界面化学

千葉大学理学部教授

生物物理化学

東京工業大学生命理工学部教授

J 92-05

アスパラギン酸プロテア ー ゼ類の蛋白工学的機能改変によるケラチナ ー ゼの開発

JA-93-05

JA-93-06

野

相互作用

井
大

上

木

金 子

英
和
克

史
夫
美＇

JA-93-07

色素化合物の光照射下での反応の解析

JA-93-08

新規な構造を有するヒアルロン酸類似多糖の開発

糖鎖工学
高分子化学

東京工業大学生命理工学部助教授

JB-93-01

ペプチドシナ ー ジストによるピタミンEの抗酸化能の向上ーヒト血清アルプミン由来のペプチドシナ ー
ジストの開発 ー

脂質生化学
食品化学

水産大学校講師

JB-93-02

層状鉱物を用いたホスト ーゲスト反応による有機色
素のカプセル化

無機材料化学

早稲田大学理工学部助教授

ハ ー ダ ー 腺の分泌するアルキルジアシルグリセロ ー

生化学
脂質生化学

JA-94-01

光化学治療
光増惑化学

ルの物性解明とその素材としての応用開発

粘土科学

植物組織培蓑法を用いたクチナシ植物からの橙黄色
JA-94-02

色素 Crocin及び青色色素イリドイド配糖体の生成に関する研究-135 -

植物細胞工学

大
畑
幡
＃
巳

倉
中
手
原

郎

研
英
義

雄

之

東京大学医学部教授

脊

山

洋 ｀ 右

東京理科大学総合研究所助教授

生田

安喜良

管理番号

JA-94-04

研

究

課

分

題

野

生薬学

植物培養細胞・組織による化粧品素材としての活性植物細胞•組織培簑成分の生産と育種に関する研究

代

表

研

究

九州大学薬学部教授

正

山

征 洋

九州大学理学部助教授

JA-94-07

退伝子工学的手法を用いた必須脂肪酸Y ー リノレン

植物生理学

酸の高等植物における多量生産

植物細胞工学

JA-94-10遠赤外線の水の構造と物性に及ぼす影響及び遠赤水―の保湿効果に関する研究（薬学・医学系）

片

JB-94-05

弾性線維蛋白質工ラスチンの自己組織化集合体の構

物理化学

九州大学理学部助手

造 、 物性 、 機能に関する研究

生体物性学

甲

バイオシグナル分子を固定化した細胞成長促進タン

生体材料化学

京都大学工学部助手

パク質ハイプリッド材料の合成

高分子化学

伊

JA-95-01

材料表面 一 生体分子間相互作用の直接解析に基づく生体適合性の発現機構の解明

高分子化学

JA-95-06

生体膜構造をもつ高分子中の水の構造解析と生体反応の解明に関する研究

高分子化学
生体材料学

JA-95-07

オリゴ糖による皮膚の耐乾燥保護の分子メカニズムに関する基礎的研究

生体分子工学

JA-95-10

両親媒性分子が構築する超分子の構造と機能性に関する研究

JB-95-02

光学活性化合物合成を目的とする新規不斉触媒及び新規不斉触媒サイクルの開発研究

JA-96-02

単分散無機顔料粒子のモルフォルジ ー 制御とそのキャラクタリゼイション

JA-96-05

合成糖脂質の超分子集合体に関する研究

JB-94-06

物理化学

超分子物性化学
高分子物性

有機合成化学

コロイド化学
界面化学
高分子化学
高分子物性

- 136-者

射場

厚

静岡県立大学薬学部助教授

山
斐
藤

"

誠
原
嘉

梢
浩

九州大学工学部助教授

高

淳

原

東京医科園科大学
医用器材研究所助教授

石

原

彦

東京工業大学生命理工学部教授

井

上

義

夫

名古屋大学理学部助教授

今栄 東洋子早稲田大学理工学部助教授

中

田

雅

久

大阪教育大学教育学部助教授

神

鳥

和

彦

早稲田大学理工学部助教授

武

岡

真

司

---

管理番号

研

JA-96-07

高分子経皮吸収促進剤の開発と応用研究

JA-96-08

--

究

課

題

分

新発見の糊代を持ったタンパク質の食用乳酸菌による化粧品素材としての機能性多糖の生産とその改質

JB-96-03

メラニン生合成阻害作用を示す海洋天然物の探索

-137-

高分子化学

L

と応用 基礎d'
タンパク質接着能→』を"一在 tiit 粧 �--（-

JB-96-02

野代

生物材料化学

応用生物化学
生薬学
天然物化学

研

究

者

相模中央化学研究所主任研究員

製剤学

生物—化学
,

表

裕

瀬

長

東京工業大学生命理工学部教授

広

茂· 久

_____
瀬

.....
新潟大学工学部教授

谷口正

北海道大学薬学部教授

小

林 淳

之

ー，--一

研究助成課題一 覧

2

生体作用、 安全性に関する分野
管理番号
J 90-01

J 90-02

研

究

課

分

題

薬物代謝

染毛剤成分の代謝に関する研究

ドレイズ試験代替法の開発 ー ヒト細胞 、 昆虫細胞を用いた高惑度迅速試験法の開発研究

野

一

組織培養学

J 90-05

胆汁酸生合成のメカニズムに関する研究

J 90-08

皮団の老化に伴うエラスチン遺伝子発現の動態

皮膚科学] 90-09

Werner症候群患者皮膚由来培養線維芽細胞のサイト
カイン細胞成長因子に対する応答性

皮膚科学

生物有機化学

光化学反応によるフリ ー ラジカルの産生と表皮培養細胞に対する影響

医科学
生化学

J 90-11

色素性皮廣病変に対するレ ー ザ ー 療法の研究

皮岡科学

J 90-12

表皮糖脂質の生化学的 、 形態学的並びに臨床的研究（エピデ）レモシド）

皮膚科学
生化学

J 90-13

生体の酸化的障害に対する防御機構の生化学的研究
ー ビタミンEの活性発現機構の解析 一

生化学J 90-14

皮咽生理機能賦活物質の経皮吸収に対する評価解析
理論の確立

薬剤学

J 91-01

培接表皮細胞及び線維芽細胞におけるグリコサミノ
グリカン及びコラ ー ゲンの代謝生化学

J 90-10

J 91-03

活性酸素 、 フリ ー ラジカルによる生体膜障害の防止に関する研究- 138 -

代 表 研

究

者

食品薬品安全センタ ー 秦野研究所

中尾 美津男理化学研究所副主任研究員

大

忠一 夫

野

東京工業大学理学部助教授

藤

善

本

徳

慶應義塾大学医学部講師

多

新

島

吾

横浜市立大学医学部助手

佐々木 哲雄東京大学医科学研究所教授

金ヶ崎

士朗

帝京大学医学部助教授

辺

―

晋

山口労災病院皮膚科部長

浜中 すみ子東京大学薬学部助手

新

井

洋

由

京都大学薬学部教授

瀬 崎

仁

東京薬科大学教授

森

陽

京 大学

有機生化学

東先 端 科学技術研究センタ ー 教授

木

鋭 雄

研

管理番号
J 91-04

J 91-07

J 91-09

J 91-12

究

課

題

分

パッチテスト結果のコンピュ ー タ ー 処理システムの開発
皮膚過敏症に対するマスト細胞の役割 ー マスト細胞
欠損動物を用いた検定法の開発 一
マウス悪性黒色腫を用いたチロシナ ー ゼ抑制因子の精製と応用
接触光過敏症のマウスモデルを用いた化粧品による光アレルギ ー のスクリ ー ニング及びサンスクリ ー ンの効果の評価J 91-14

メラニン生合成の調節

J 91-16胞の増殖とコラ ー ゲン代謝調節機構の分子細胞生物

J 91-17

J 91-18

J 91-19

J 91-22

J 92-02

J 92-06

野

皮咽科学
接触皮膚炎

実験病理学

皮膚科学

光生物学
皮膚免疫

分子生物学

ビタミン C と上皮成長因子によるヒト皮膚線維芽細学的研究
人工皮膚を用いた皮膚の形成機構及び皮膚の反応性試験に関する研究
サンスクリ ー ンの紫外線性表皮障害に対する防御作用の免疫生物学的研究

分子細胞生物学
医化学

細胞生物学

皮膚科学

ダイレクトスキンセンサ ー を用いて測定した皮溝と

老年病学

加齢の関係

動脈硬化

フリ ー ラジカルとポルフィリン代謝に関連する皮膚

環境科学
毒性学

の老化機構解明に関する研究
光熱変換分光法による薬物の組織及び細胞への非侵襲吸収計測法の開発
神経ペプチドによる皮膚炎症反応の成立機序とその特異的制御-139 -

分析化学

内科学
アレルギ ー 学

代

表

研

究

者

名古屋大学
医学部附属病院分院皮岡科長

早

JI I

律

子

大阪大学医学部教授

北

幸

村

彦

北里大学医学部講師

亀山

孝 一 郎

浜松医科大学教授

滝

JI I

雅

:｛ti::
口

東北大学医学部教授
此木

原

茂

樹

東京医科歯科大学助手

隆 一 郎

畑

広島大学理学部教授

吉

里

勝

利

京都大学医学部講師

古

JI I

福

実

慶應義塾大学医学部助手

本

間

聡

起

国立公衆衛生院
労働衛生学部室長

市

JI I

勇

東京大学工学部教授

澤

田， 嗣

郎

千葉大学医学部助手

岩

本

逸

夫

管理番号

研

J 92-07

皮膚の機能と脂質代謝に関する基礎的研究

J 92-08

転移因子を用いたアントシアニン色素生合成遺伝子

分子追伝学とその発現調節因子追伝子の解析

分子生物学

J 92-09

モノクロ ー ナル抗体を用いた紫外線誘発DN凡負傷の定鼠とメラニン色素のサンスクリ ー ン 効果の実験的皮膚科学

J 92-10

J 92-11

JA-93-01

JA-93-02

究

課

題

分

野

生化学

証明
皮膚の老化における染色体構造の変化と遺伝子修復機構に関する研究アスコルビン酸 2 ー グルコシドの生物学的有用性研
究 ー 経皮吸収によるピタミンC活性発現の評価 一
還元型ネオプテリン (NPH- 4) の紫外線照射皮膚障害に対する効果

細胞生理学

免疫薬理学
放射化学
薬理学

代

表

研

究

新渇大学医学部教授

小野

東京理科大学基礎工学部教授

飯

• 滋

田

奈良県立医科大学大学院生

小

林

信

花

岡

文

山

本

東京理科大学
生命科学研究所講師

島周

群馬大学医学部教授

太陽光紫外線でヒトDNA 中に誘発される損傷とその放射線生物学
細胞生物学

金沢大学薬学部教授“＂

尋常性痙癒の発症機序の解明のための皮膚の保湿機

皮膚科学

JB-93-04

能と脂質代謝に関する研究

JB-93-05

哺乳類皮膚細胞のアポト ー シスと細胞接着をつかさどるセラミドの研究

糖生物学
発生生物学
生化学

JB-93-06

不飽和脂肪酸とその過酸化生成物の皮膚角質層への作用に関する研究

製剤学-140 -

皮膚科学

雄
格

皮膚科学
紫外線生物学（肝斑など）の発症機構とその増いわゆる しみ
悪因子に関する研究彦

岡山大学薬学部教授

化粧品による光老化の抗酸化的制御に関する細胞生
物学的及び生化学的研究

JA-93-09·｀

理化学研究所主任研究員

小修復に関する研究

夫

輝

生化学

JA-93-03

者

宮

地

良

樹

二階堂

修

東北大学医学部講師
、_,_,
田
晶

靖

新瀦大学医学部助教授

山

本

綾

子

九州大学理学部助教授

野

村

也

大阪薬科大学薬学部助教授

森

本

洋

研

管理番号

究

課

分

題

表皮ケラチノサイトにおけるヒト細胞老化因子の研

野

代

表

研

究

大阪大学医学部助教授

JA-94-03

究

JA-94-06

皮膚生理機能賦活物質の合理的吸収促進法の開発

薬剤学

JA-94-08

リポソ ー ム封入薬剤の皮膚吸収過程の解析と皮膚内ラジカル消去への応用

生体物理化学
生体医用化学

九州大学薬学部教授

表皮細胞の細胞接着と角化制御に関するシグナル伝

岐阜大学医学部教授

達

皮岡科学
細胞生物学

徴生物に由来する多糖分解酵素のコスメトロジ ー へ

遺伝子工学

JA-94-09

JA-94-11の応用

JB-94-01

皮膚発現型レチノイン酸受容体のドミナントネガテ
イプ・ トランスジェニックマウスを用いた皮咽の成

皮蘭科学

生化学

熟過程の検討化粧が高温環境下の発汗反応及び選択的脳冷却機構

公

京都大学薬学部教授

橋
内
北

田
海
島

充
英
康

JB-94-03

サンスクリ ー ン剤の光ハプテンとしての性格

皮膚科学

脂質皮膚モデルを利用した化粧品及び水の浸透と安生物物理化学全性に関する基礎的研究

高分子物性JA-95-03

小分子化学物質によるアトピ ー 性皮膚炎の発症と予防についての基礎研究

免疫薬理学

JA-95-04

ヒト皮膚移植SCIDマウスを用いた新しいコスメトロ
ジ ー 研究実験病理学

JA-95-08

接触皮団炎におけるマスト細胞活性化反応の解析

生化学

雄
雄

東京工業大学
生命理工学部助教授

中聡

村

金沢大学医学部助手に及ぼす影評- 141 -

本京都大学医学部助手

環境生理学
温熱生理学

JA-95-02

橋

皮曲科学
遺伝子工学

JB-94-02

者

田
田

中

俊

宏
実

辺

浜松医科大学医学部講師

戸

倉

新

樹

東京工業大学工学部助教授

谷

岡

明

彦

博

式；

岐阜薬科大学教授

永井

大阪大学医学部教授

野

村

大

成

昭和大学薬学部教授

工

藤

郎

管理番号

JA-95-09

JB-95-01

JB-95-03

研

究

分

課 題

放射線照射あるいは制癌剤投与による脱毛の抑制

皮膚表皮細胞におけるリピドバイオファクタ ー の機

野

生化学

代

表

研

究

星薬科大学講師

放射線生物学

太 田

生化学

新潟大学医学部助教授

藤

節

井

分子生物学

炎症後色素沈着におけるエイコサノイドによるメラ

皮膚科学
生化学

京都大学医学部助教授

細胞生化学

九州大学理学部教授

細胞内小器官ペルオキシソ ー ム：エ ー テルリン 脂質

井

階

幸 •一

JB-95-04の生合成と酸素ラジカルスカベンジャ ー 機能及ぴ欠

JB-95-06

機構に関する研究

JA-96-01

化粧用生理活性物質の皮膚透過と皮内貯留性及びヒ卜皮膚と動物並びに培養皮膚との比較

生物薬剤学
皮膚科学

近畿大学薬学部教授

酸化ストレスにより生体膜に生成する酸化型リン脂生化学

北里大学薬学部教授

質の代謝機構の解明

薬学

JA-96-03

JA-96-06

損症
多成分油性皮膚浸透促進システムの有効性及び作用

HGFによる皮膚の再生促進と老化防止の基礎的研究

分子生物学

製剤学

生化学

藤 木 幸
杉

林

堅、 次

小木曽 太郎中

JI I

靖

大阪大学医学部助教授

細胞生物学

松

本

邦

in vitroヒト樹状細胞培養系を用いた化学物質の感作

皮膚科学

東北大学医学部講師

性試験の可能性についての基礎的検討

皮膚免疫

相

JA-96-10

ケラチノサイトの発現するエラスチンと皮膚老化の関連について

皮膚科学
生化学
分子生物学

防衛医科大学校助教授

光老化におけるフリ ー ラジカルの関与 ー 長期紫外線

細胞生物学

金沢大学医学部助手

反復照射による皮膚抗酸化能の変化

光生物学

JB-96-05

免疫不全マウス再構成皮膚における培養毛乳頭細胞による毛包形成の誘導と関連因子の検討-142 -

皮膚科学夫

城西大学薬学部助教授

JA-96-09

JB-96-01

子
博

能発現機構

ノサイト活性化機構の解明

者

多

場

島

安 井

節
新

裕

夫
也

ロ

子

聖マリアンナ医科大学助教授

窪

田

泰

夫

管理番号

JB-96-06

研

究

課

分

題

野

代

表 研

究

細胞増殖因子および接着分子による皮膚硬化制御に

皮膚科学

獨協医科大学助教授

関する分子生物学的研究

膠原病学

山

-143 -

蔭

明者

生

研究助成課題 一 覧

3

精神、 文化に関する分野
研

管理番号

究

分

課 題

野

J 90-04

化粧が意識性に及ぼす効果の研究

J 91-13

香料に関する定量的解析

惑覚生理学

J 91-15

アルツハイマ ー 型老年痴呆症 、 ぼけ症状を呈する人々への化粧による情動活性化の研究

惑情心理学

J 91-21「色白」の嗜好構造に関する 一 考察

心理学

臨床心理学
心理学
色彩心理学
造形心理学

代

表

研

究

者

早稲田大学人間科学部教授

豊春 木
北海道大学薬学部教授

栗 原

臣

土

同志社大学文学部教授

治世子

浜

早稲田大学
人間総合研究センタ ー
乖
｝示l

藤

美• 穂

埼玉県立衛生短期大学教授

Js-92-01

病院看護における化粧に関する研究

基礎看護学

Js-92-02

高齢者のおしゃれ行動とその評価に関する研究

人間行動科学

JA-93-04

色彩の心理学的意味空間の研究

計量心理学
認知心理学
行動計量学

JB-93-03

化粧の個人的効果と対人的効果に関する実証的研究

社会心理学

JA-94-05

化粧と痴呆老人に関する基礎的研究

脳神経外科学
心理学

産業医科大学名誉教授

JB-94-04

対人魅力の形成にかかわる顔の構造的特徴と化粧行動の影響の研究

社会心理学
対人魅力

北星学園大学文学部教授

化粧皿を通じた古代ヘレニズム世界における化粧文

装飾文化
デザイン

神戸芸術工科大学助教授

JA-95-05

JB-95-05

化の研究
化粧品の表示に関する研究ー ことに誓告表現につい
て一

-144-

社会心理学

大河原

千鶴子

一

北海道教育大学教育学部助教授

藤

森

jL

ヵ
甲

金沢大学文学部助教授

岡

本

安

晴

福島大学教育学部助教授

飛
松
大
服

田
岡

操
成

明

坊 郁 夫
部

等

作

筑波大学社会工学系講師

吉

JI I

肇

子

管理番号

研

究

課

題

分

野

心理学

JA-96-04

化粧品の香り表現に関する研究

JB-96-04

高齢女性における情動活性化の試み：リハビリテ ーション ・ プログラムヘの適用可能性の検討

官能評価-145 -

情動心理学
発達心理学

代

表

研

究

者

東京学芸大学教育学部助教授

神

宮

英

夫

同志社大学
文学部学生（博士課程）

伊

波

和

恵

-----------------------------------------------------＊本財団についてのお問い合わせは下記にお願いいたします。

財団法人 コスメトロジ ー 研究振興財団〒104
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Vol. 5 /'97

非売品

1997年9月1日発行

者行

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印 刷
©1997

宮澤

香、

徳田

純一

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