ごあいさつ
典型的な消費財である香粧品にあっては、 使用者が求めている新しい機能を実現させるための技術的要請が研究開発の原動力となっています。
求められる機能は時代と共に変遷していますが、 高齢化社会の到来と消費者ニ ー ズの多様化を背景とする昨今は、 香粧品にとっての変革期とも言える時期であり、 より高度な内容になっています。 例えば、 従来の安全性、 品質安定性、 使用性を確保した上で、 老化制御、 美白、 育毛などに代表される、 皮膚科学上明確な機能を備えた製品の開発が強く望まれています。 ご承知の通り、 この種の分野の研究はきわめて先端的であり、 学問的な進展は新しい研究手段の導入に待つところが大きいわけですが、 幸い現在では、 生化学的な手法等が成功を納め、 既に多くの点で具体的な成果を挙げていて、 つぎつぎとその研究対象を拡げつつあります。
一方で、 今日は「こころ」の時代であると言われています。 化粧文化を通して、香粧品が果している、 あるいは今後求められる社会的役割が改めて大きな研究課題となっています。
この面に関しても、 既にいくつかの社会科学的な、 あるいは人間工学的なアプロ ー チが試行され、 その結果、 感情心理学、 コミュニケ ー ション理論などの分野で新たな知見が蓄積されつつあります。
これらの自然科学的、 社会科学的側面に於ける研究進展は化粧品学の振興を目的とする当財団にとって、 まことに喜ばしい傾向であります。
今後とも時代の行く末を見つめ、 より有効な研究課題を発掘し、 知見を深めることで、 化粧品学発展のための一翼を担って行ければと念じている次第です。 今までにも増して、 当財団の活動を温かく見守ってくだ
さいますよう、 お願い申し上げます。
平成7年7月財団法人 コスメトロジ ー 研究振興財団
理事長

小林

孝三郎

目

．

次

ごあいさつ
● 研究報告I. 素材， 物性に関する分野.. .. .. . . . .

2

広島大学理学部 鈴木 克周.. . . . . .. . . .. .. .. .. . . . . .. . . .. . .

7•高分泌酵母突然変異体を用いた蛋白質素材生産効率化システムについての研究•紫外線照射による化粧品素材の光分解メカニズムの研究

明星大学理工学部

日高久夫
・・・・・・・・・・•水素添加大豆リン脂質を用いた油性ゲル及び水性ゲルの保湿作用に関する研究
昭和薬科大学藤井

東京大学理学部まき子
・・・・・・・・・・・·•アスパラギン酸プロテア ー ゼ類の蛋白工学的改変によるケラチナ ー ゼ の開発

16

井上

24

英史

ヘの応用 ー ・・・・

29

東北大学理学部 大木 和夫•化粧品基本素材金属酸化物の酸性大気汚染物質との相互作用 • · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · ·39

千葉大学理学部 金子 克美
・・・・· · · · · · • · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · • · ·46•細胞膜の脂質の物性と機能の基礎的な研究—

リン脂質物性のコスメトロジ•新規な構造を有するヒアルロン酸類似多糖の開発

東京工業大学生命理工学部

ー

畑中

研

一

II. 生体作用， 安全性に関する分野•紫外線誘発 DNA損傷の定量とメラニン色素のサンスクリ ー ン効果 ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・· ·54

奈良県立医科大学

小林 信彦
・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・·

62

岡山大学薬学部 山 本
格•化粧品による光老化の抗酸化的制御に関する細胞生物学的及び生化学的研究 ・・・・・・・・・・· ·67

群馬大学医学部 宮地 良樹· · · · · · ·· ·· · · · · · · · · · · · · ·· · · · · · · · · · ···•太陽光紫外線誘発 DNA損偽とヒト細胞における修復

74•安定型アスコルビン酸誘導体の免疫賦活活性とそのメカニズム金沢大学薬学部“”•いわゆる しみ （肝斑など）の発症機構とその憎悪因子に関する研究
秋田大学医学部

二階堂 修・・・· · · · · · · · · · · · · · • · ·富田靖······ ·· · ·

86

山本 綾子
・・・・・・・・・・・・・・・・· ·91

・尋常性座癒の発症機序の解明のための皮府の保湿機能と脂質代謝に関する研究
新潟大学医学部
・不飽和脂肪酸とその過酸化生成物の皮膚角質層への作用に関する研究
大阪薬科大学79森本一洋

皿精神， 文化に関する分野
・『色白』の嗜好構造に関する一考察....................••.......... · · · · · · · · · · · · · · ·· · · 100

早稲田大学人間総合研究センタ ー 齋藤 美穂• 病院看護における化粧に関する研究 ·· ·· ··• · · · · · · · · · · ···· · · · ·· · · ··• · · · · · · · · · · · • · · · · · 114• 高齢者のおしゃれ行動とその評価に関する研究

杏林大学保健学部 大河原千鶴子
・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 129

横浜国立大学経営学部■ 記念講演平成 6 年度記念講演

顔を科学する藤森

立男

・・・・・・・・・・・・・・・・・···· · · · · · · · · · · · · · · ·· · · · · · ·· · · · · · · · · 141
東京大学工学部原

島博■ コスメトロジー研究雑感 ..........••.................................. · · ·· · · · · ··· · · · · · 153■ 付録
平成6年度事業報告 .............•.......•...........•..... ·.. · ·• · · · · · · ·· • · · · · · · · · 163........•......................•................... · · ·• · · · · · ·· · · ·· · · ··· · 170
役員 一 覧

研究助成課題 一 覧· · · · · · · · • · · · · · · · · · · · · · · • · ··· · ·· · · · · · · · · · · · · · · · • · · · · · · · ·• · ·• · · · · · 171

． ．

研究報告
I

素材、 物性に関する分野

II

生体作用、 安全性に関する分野

III

精神、 文化に関する分野

I . 索材，物性に関する分野

高分泌酵母突然変異体を用いた蛋白質素材生産効率化システムについての研究
広品大学理学部鈴木

千葉県工業試験所

克周• 岡

生命工学工業技術研究所

千痔・地神

芳文

Yeast supersecreting mutant strains were examined for their ability to produce lysozyme
protein. The ssll mutant strains secreted 10-fold more lysozyme than the wild type parent strain.
The efficiency was improved 10-folds by introduction of the lysozyme gene by multi-copy
plasmids. About 10-fold improvement was also achieved by supplying casamino acids in culture
media. New ssll host strains, which secreted 3-4 fold more lysozyme than the original ssll mutant
strain, were obtained by crossing the original ssll mutant strain and a wild type strain. The newssll transformant secreted 500-·fold more lysozyme in synthetic media supplemented withcasamino acids than the original ssll muant did in synthetic media. These data indicate that theabove factors help multiplicatively one another and yeast mutants can contribute to build up
highly efficient system to produce protein resources.

1

緒きない例も多い。 真核微生物であるパン酵母は、

言

組み換え遺伝子宿主として大腸菌に近い扱い易さ報告されている。 これらの中にはコスメトロジ 一

ることができる特質を持っている。 またパン酵母

素材として有効と考えられるものもあるが、 適用

は、 真核生物として蛋白質への糖鎖付加などのプ例は少ない。 この原因として蛋白質の固有の特徴

ロセシング機能を持つだけでなく、 突然変異を用である安定性や活性発現条件による制約もあるが、いてこれらの機能を人為的に制御 l) することがで純度の良い酵素蛋白質を多量に得る上での問題点きるという他の真核生物宿主では容易に行えないがあげられる。 天然の含有量が微量な有用蛋白質

操作が可能である。 このパン酵母での蛋白質分泌を微生物で遺伝子発現させて生産しようとする試の高効率システムの構築原理を確立できれば、 様

みは組み換え遺伝子技術が確立された早い段階か々な有用蛋白質素材を生産する場合の指針となりら行われている。 組み換え遺伝子の発現のために

Y●ast Coils Harboring HLY Gene

、一

Chemic>! Mutagenesisが多いが、 ハ クテリアを溶解する活性を持つリゾ

Growth on Ha!o Assay Agar Plateof protein resources by yeast super­secreting mutants
Katsunori Suzuki,
Facutly of Science
Hiroshima University，＾

腸菌を用いて蛋白質を多量に作ることはできるが酵素としての高次構造を構築できず活性を発現で

:ome
Kl

oc
yh
et
M
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ー
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5b

I.:."

発現のための宿主とすることができない例や、 大」ー ー

チ ー ムの場合のように大腸菌を組み換え遺伝子の＼゜

遺伝子発現能力の高い大腸菌を宿主に用いること

Development of efficient system foヤproduction

BA

生体の機能素子として多種多様な酵素蛋白質がを持ち、 バ クテリア固有の障害を被らずに生産す

Isolation of Supersecreting Yeast Mutants

図1 リゾチ ー ム高分泌突然変異体のスクリ ーニング
突然変異処理及びスクリ ーニング法の概要 (A) 、 な
らびに細菌含有寒天培地平板を用いた酵母菌コロニー のリゾチ ー ム分泌能力検定 (B).
コロニ一 周縁の透明環はコロニ ー から分泌されるリ
ゾチ ー ムにより寒天中のバクテリアが溶解されたため形成されるで 矢印 (P) の先のコロニー は野生型親株なのでコロニ ー 周縁に透明環は見えない 、-2-

高分泌酵母突然変異体を用いた蚕白質素材生産効率化システムについての研究

2

うると期待される。 筆者等は先にリゾチー ム遺伝

実験子を染色体DNAに組み込んだパン酵母に突然変異を誘起して、 分泌量が 10 倍以上高まった変異体を2·1

分離した 2) (図1)。 酵母宿主に限らず培養条件

培

養主にイ ストニトロゲンベ ース0. 67% とグルコーの改変や細胞•個体選抜による優良株の育成はこー

れまでに多数行われているが、 どのような機構でンベ ー ス0. 67% とガラクト ー ス 2% (SG培地）を効率が変化したのか明らかにされている例は少な

基本培地として 30 ℃で振とう培養 した。 YPD寒い。 この高分泌変異体中の一つssll変異体では蛋天培地 Cl% イ ー ストエキス、 2% ボリペプトン、

白質のソ

ー

テイング機構が変化しており（回2)、膜透過後輸送の過程が効率化されたものと考えら
れた。

P

S

M

M

,ii.�,•
S

2·2 宿主とプラスミド
高分泌株I69(ssll)野生型株KS45-3DとKS51-3C、P

脱抑制変異体株 KK4、 ならびに、 これらを交配
後に減数分裂させ顕微操作 4) により四分子解離し•ProCPY
疇

て菌株を作成して使用した。 プラスミドとして、

CPY

.,
`

• J’

リゾチ ー ム遺伝子 (HLY) を持つマルチコピ ー

•
•
．
，

図2

型ベクタ ー YEpHLYSIG 5 ' および pESH 6i を用いた。

蛋白質輸送過程に変化のある高分泌変異体
培蓑液上清(M) 、 細胞壁画分(S) 、 及びプロトプ
ラスト画分(P)の蛋白質をアクリルアミドゲル電気泳動した後 、 抗CPY抗体を用いてCPY蛋白質を検出した. CPYは野生型細胞 (SSL1) ではプロトプラスト分に検出されるが 、 変異体(ss/1) では細胞壁画分に前駆体として検出される C

ヒトリゾチー ムはフレミングにより当初鼻水から発見され、 涙液に含有量が高いもののわずかしか得られない3)

2% グルコ ー ス）は主に交配や単細胞分離後の培養に用いた。

ssll

SSLl

ス 2% (SD 培地）、 およびイ ー ストニトロゲ。 この酵素は細菌細胞壁を溶解して細菌を殺菌するという人体防御作用を持つ

一

方

YEpHLYSIGはHLYのプロモ ー タ ー としてGAP lOPを持ち、 pESHでは ENOlpを保持している。
2·3

活性測定

細胞から培養液中へ分泌されるリゾチー ムの活性測定は細菌を基質とする溺度減少法を用いて行った。

Micrococcus 乾燥菌体懸濁液 {50mM リン酸緩衝液 (pH6,4) 中0. lmg/ml} 0. 8mlに試料液
0. 2mlを加えて経時的に吸光度をフォトメ ー タ

で炎症を低下防止するという安定化作用を合わせー

持つ 蛋白質である。 リゾチー ムは蛋白質としては

0. 001 減少するとき、 l ユニット活性とした。 培養

低分子巌のものであり、 立体構造も明らかにされ液の遠心上清を上記緩衝液で希釈して試料液としている。 酵母組み換え体のリゾチ ム分泌の量をた。 四分子解離して得た菌株での高分泌変異は細の段階で検出する手法も開発できたので

菌含有平板で細菌溶解環を大きく形成するものと（図lB)、 制限要因を順次明らかにしてゆくのにして判定した他に、 カルボキシペプチタ ー ゼ Y 活

ー

コロニ ー

好適な素材と考えられる。
本研究は宿主の設計上重要な点であり、 また高分泌変異体ssllにおいてさらに制限要因を明らかを用いて測定した。 450nmの吸光度が 1分間に性が欠損しているかどうかを検出して判定 2 ) した。
その他の変異は酵母遺伝学の一般的判定法 4 ) に従って確認した。

にしてゆく上の基礎知見、 即ち、 交配・遺伝子量効果 ・ 培地の改変などの基本操作で分泌効率を相乗的に操作できるかどうかを知ることを第的としている。

一

2·4

蛋白質の検出

培養液中へ分泌されたリゾチー ムは HPLC及び電の目

気泳動分析した。 電気泳動には培養液遠心上清に、-3-

このことは、ssll変異の効果と遺伝子量効果がSDSとメルカプトエタノ ー ルを含むサンプル緩

相乗的に作用していることを示している。

衝液を加えて、煮沸したものを試料とした。 アクリルアミドゲルで泳動の後、 銀染色で全蛋白質を3·2染色して確認した他、 PVD 膜へ転写した蛋白質
を抗リゾチ

ー

ム抗体を用いるWestern Blot法で検栄養の効果

培養液の成分を変更することによって分泌量が変動した。 合成培地へ添加するアミノ酸をカザミ出した。

ノ酸に置き換えると、10倍高い活性がみられた。
3結

野生型親株とssll変異体で同様に変動しているの

果で、ssll変異の効果とカザミノ酸の効果は相乗的3·1に作用していると考えられた（表 l 、図 4)。

遺伝子量効果先に筆者らが分離したssll変異体は、野生型親株に比べて10倍高い効率を示すものの純粋に遺伝

表 1

生化学的見地から解析するために分離したもので、遺伝子発現も低い形態で設計されていたため、分泌量は低いレペルにとどまっていた。 そこで、リ
ゾチ ー ムのmRNA量を増すために、多コピ ー 数プラ
スミドベクタ ー でリゾチ ー ム遺伝子をssll変異体と親株に導入したところ、 ssll変異体と親株の形
質転換体は、共に10倍多いリゾチー

ムを培養液中へ分泌した。性質の異なる2種のプロモ ー タ ー を用いた場合で同様な結果が得られた（図3)。

YPDによる抑圧作用
リゾチ ー ム活性(unit)

菌株培地

KS45-3D
KS45-3D
I69
!69
I85
I85

YPD
SD+C邸
YPD
SD+CASYPD
SD+CAS

2日後

゜

2
18
2
46

゜
゜
゜

5日後
l

27

56

2日及び5日間培養後の培養上清液中の活性を測定した。
(-; 測定せず）

40

�

20

u
<(

10

·- 15

--

゜

5

pESH

YEpHLYSIG0

HLY in chr

10 5

!

C 25

30 25 20 1

P V
A!
!
E Jl!
(Un) A-i,....,_ 35
E 30

図3 遺伝子岳のリゾチ ー ム分泌に及ぽす効果
染色体 DNA上に 1 コピ ー 挿入したリゾチ ー ム遺伝子
(HLY in chr) 及び多コビ ー 数プラスミドベクタ ーに導入されたリゾチ ー ム遠伝子(YEpHLYS I G, pESH)を持つ細胞を比較した。soc培地(HLY in chr, pESH)
及び SGC培地 (YEpHLYSIG) を用いて培蓑したc 宿主として野生型親株 KS45-3D( ■）及び突然変異体 169(0)を用いたで 培蓑液上清中のリゾチ ー ム活性
を示すで

SDC

SD+CAS

図4 培地のリゾチ ー ム分泌に及ぽす効果
SDC培地及び SD+ CAS培地を用いて染色体DNA 上に 1
コビ ー 挿入したリゾチ ー ム遠伝子を持つ野生型親株
KS45-3D(●）及び突然変異体 169 (口） を培蓑したe
培蓑液上清中のリゾチ ー ム活性を示すe-4-

高分泌酵母突然変異体を用いた蛋白質索材生産効率化システムについての研究

3·4

一方。 パ ン酵母を栄養増殖する目的で使用される培地YPDを用いた場合 は、 一過的に低い活性ss/1変異、 カザミノ酸、 遺伝子量の相乗作用がssll変異体で観察されその後消滅した （表1)。

前項までの 3 つの改善効果は互いに組み合わ

培養液中へ分泌されたリゾチ ー ムが分解を受けてせると相乗的に効果が現れて分泌量を増やせるのいる可能性を示す興味深い基礎的知見である。

か、 それとも、組み合わせによってはそれほど付加的な効果が現れてこなくなるかということは、
リゾチ ー ム生産の課題にとどまら ずに宿主の設計

3·3 交配の効果

上重要な課題である。 そこで前節で得られたssll

パ ン酵母は菌株ごとに性質が少しずつ異なるの

株にプラスミドを導入 し合成培地及びカサミノ酸

で、ssll変異体を他の菌株と交配して子孫を調べれば、分泌量が増大したものが得られる可能性が

表 3 新規宿主、 遺伝子量効果、 カザミノ酸間の相乗効果ある。 そこで生育の良い野生型細胞と交配して2倍体を作成 した。 この2倍体は表現型として高分

Strainリゾチーム活性(unit)

0 0
6 8
8 1

2倍体細胞を減数分裂させl倍体細胞を顕微操作に

pESH
SOC SD+CAS
0 0
0 0
1 4

KS58-2B
KS58-2D

0 0
2 8
9 1
1 2

0 0
0 8
3 2

対して劣性の性質を持っていると解釈される。

YEpHLYSIGSGC SG+CASー泌ではなかった。ssll変異が野生型対立遺伝子により選別して か ら培養すると、 表2に示すよ うにリゾチ ー ムを多く分泌 する子孫(ssll) と、少添加培地で培養して分泌量を測定した。 図3と表 3

ししか分泌しない子孫 CSSLI) が 2対2の割合で得を比べるとプラスミドの導入とカザミノ酸添加培られる。 これらの中には元の変異体よりも 3-4 倍地により新規ssll宿主での分泌量は、 元のssll宿

多い分泌量を示すものがあった。 高 効率な2株の培養液上清をイオン交換HPLCで分析したところ、表2に活性の値でみられたのと同様に天然のリで分離分析すると全構成蛋白質中で最も主要なバていることがわかった。

ンドとしてリゾチ ー ム蛋白質を検出できた（図5)。

交配体から得られた1倍体菌株の分泌量

菌株

活性

菌株

(unit)

B

2

高まっており、 相乗的に 作 用したと判断される。
この培養液上清 中の蛋白質をSDSゲル電気泳動

ゾチ ー ム蛋白質と同じ性 質の蛋白質が著量存在し

表

主を合成培地で培養 した場合 に 比べて500 倍 に

A

活性

l 2

l 2

Ag Stain

Anti HLY(unit)

KS58-1A

1

-l B

43

-lC

99

-l D

l

KS58-3A- 38

64
3

KS58-4A
-4B

-3C
-3D

14

-4C

7

-4D

l

KS58-2A
- 2B

108

-2C
-2D

127

゜

47

゜

l

54

- --------- -------------- - - Wild type & ss/ 7 strainsused for the d1plo1d construction
KS51-3C
l
30
I69

図5

分泌されたリゾチーム蛋白質の分析
KS58-2D(YEpHLYS I G)をカザミノ酸添加培地を用いて培蓑しに培蓑液上清(1 ; 1 Ou I 、 2 ; 20u I)中の全蛋白質をアクリルアミドゲル電気泳動した後、 銀染色(A)及び抗ヒトリゾチーム抗体(B)を用いて全蛋白質ならびにリゾチ ー ムをそれぞれ検出した，

-5-

4

考

を用いて効率化する方法を検討した。遺伝子量効察果によるmRNAの加重、栄養成分の添加による生育

徹生物を 宿主にして蛋白質を作成すると、製品条件の効果を分析した。リゾチ ー ム高分泌ssll変に混入する宿主由来の物質が副作用となることが異体は、野生型親株に比べて10倍高い分泌効率を示す。 mRNAを増すために、多コピ ー 数で複製する問題となると指摘されている。効率の高い生産シ

プラスミドベクタ ー としてリゾチ ー ム遺伝子をステムを作ることは、単に経済的な効果をもたら

ssll変異体に導入することによって10倍効率が上すだけでなく、副作用を低下する点でも役立つと期待されている。本研究ではssll変異、交配、カ昇した。合成培地の成分について検討しカザミノ

ザミノ酸添加、遺伝子量効果の各作用で分泌量を酸の添加によって10倍近く効率上昇した。ssll変増加させられることと、これらの要素の組み合わ異体と生育の良好な菌株との交配により3-4倍効

せが相乗的な改善効果があることを示すことがで率の高い新規ssll宿主を得た。新規ssll宿主は、きた。蛋白質の分泌は遺伝子発現、蛋白質合成、

これまでの 宿主と同様に天然型と同じ性質のリゾ
チ ーム蛋白質を多最に分泌していることを生化学

膜透過、輸送、分解など細胞内の多数の要素が組み合って行われる過程であるので、様々な制限要因を想定できる。筆者等は先にssll変異が転写に的に確認した。新規ssll宿主の利用・プラスミドの導入・ カザミノ酸添加培地での培養は相乗的に作用し得た。新規ssll宿主が天然型と同じ性質のは影響せず蛋白質分配機構に変化をもたらしてい

リゾチ ー ム蛋白質を培養液中に著量分泌している

ることを明らかにした。この変異体において本研ことを生化学的に確認した。以上の知見は本変異究で試みた操作がすべて分泌量を増加させ得たこ体を基にさらに効率の高い変異体の分離や他の変とは制限要因がまだ多いことを示唆している。言い換えれば、 パ ン酵母での分泌効率は遺伝的改変
あるいは遺伝子工学的操作を用いてさらに高められ よう。例えば、 YPD 培地を用いた場合のようにいったん培養液中に検出された酵素活性が消失

異との組み合わせによる柔軟なシステム作りにも役立つと考えられる。

引用文献
1) T.Nagasu, Y.Shimma, Y.Nakanishi, J.Kuromi

してゆく現象が見られた（表1)。この現象に関与

tsu, K. I wama, K.Suzuki, Y. Jigami

する因子の遺伝子を破壊すればさらに効率の高い
安定した 宿主を構築できるものと考えられる。

2) K. Suzuki , K. Ichikawa, Y. Jigami Mot. Gen.

酵母を分泌 宿主に用いると活性を持った蛋白質を分泌生産できるという報告例が多いものの、生産効率は高くないのが一般的である 7) 。一見、回Genet., 219 58-64 (1989)
3) A Fleming Proc. soc. Land., [B] 93 306-317(1922)

り道のようにも見えるか、 パ ン酵母でリゾチ ー ム4) K.Suzuki, N. Yanagishima Cut. Genet., 10 353を分泌するシステムを用いて遺伝子発現から酵素-357 (1986)の集積までの素過程を総合的にかつ遺伝生化学的

5) Y. Jigami, M. Muraki,に解明してゆくことと、関与している遺伝因子を改変してゆくことは、真に望ましい高効率なシステム作りに寄与できると考えている。

総

Yea.st., 8535-547 (1992)

N.Harada, H. Tanaka

Gene.,43 273-279 (1986)
6) K. Ichikawa, K.Komiya, K.Suzuki, T.Nakahara,
Y. Jigami, Agric. Biol. Chem., 53 2687-2694
0989)

括

7) D. T. Moir, L. S. Davidow
491-5075 (1991)

コスメトロジ ー 有用素材と考えられる蛋白質リ
ゾチ ームの生産を突然変異を有する パ ン酵母宿主-6-Meth. E加）,not., 194

紫外線照射による化粧品索材の
光分解メカニズムの研究
明星大学理工学部

日

高

久

夫

Studies on the photocatalytic mechanism for cosmetics containing Ti02 powder is useful forthe protection of human skin. The photodegradations of such cosmetic materials as sur­factants, amino acids, polymers, et. al. in heterogeneous aqueous Ti02 suspensions under UV or
solar exposure were examined in the present work. The anionic surfactant of DBS can be easily
photooxidized in the presence of Ti02 powder under solar exposure to mineralize into CO2 gas.
The photodegradation of amino acids and nitrogen-containing surfactants gives NHげandNOぶions concomitantly. The decomposition of DNA and RNA produces NH計and NQ3·ions(4:1) after 5-h irradiation with a maximal formation of H2P04·ion at 2 h of irradiation. Water­soluble polymers of polyethylene glycols (PEG) and polyvinylalcohol (PVA) were easily
photooxidized to evolve CO2 gas. The CO2 mineralization yield decreased with increasing themolecular weight of PEG and PVA. The photooxidation process involves the photogenerationof ·OH and/or ·OOH radicals at Ti02/H心interfaces. These activated radicals attack theorganic molecules adsorbed on or near to the Ti02 surface to form hydroxylated inter­mediates or peroxides. Subsequently, they were photo- or auto-oxidized to mineralize ultimately
into CO2 via several oxidation steps such as formaldehyde and formic acid

1

緒

言

一見相反することで あ るが、 Ti釘は紫外線(378nm以下の短波長）により皮膚の光劣化や化粧酸化チタン(TiOりは生体に対して毒性がなく、品の光酸化反応も起こっている。 すなはちTi釘はさらに隠蔽性や着色性に優れているなどの特徴をn—型半導体の特性があり、紫外線照射により電荷有しているので、化粧品素材として多量に使用さ分離がおこり、化粧品素材の有機化合物の光酸化れている。 フロンによるオゾン層破壊に伴い、太反応か起こる - 9) 。 このような光触媒作用を抑制

陽光中の紫外線領域(290-320nmのUV-B)の光がするために、触媒活性の低いTi02 (例えばルチル

増加し、地表へ到達し、動植物へ影響を与えてい型を使用）や表面修飾されたTi02 (アルコキシ基る。 免疫低下や角膜炎、白内障なと人体への健康されたもの）が用いられている。 化粧品中には種障害、特に皮阿ガン発生の増加が憂慮されている。

々の有機物質、例えば界面活性剤、高分子、油脂、

このため、化粧品によるスキンケア

ー

1

（皮府の保

炭化水素類、高級脂肪酸、 高級アルコ ー ル、 エ ス護）は大切な課題である。 クリ ー ム、乳液、 ファ

テル、 香料、保湿剤などの成分が含有しているが、ンデ ー ションなどの化粧品中に白色顔料として含Ti02触媒は予想よりはるかに強い光酸化力を示す

まれるTiOz粒子は紫外線吸収や光散乱によつて紫ため、化粧品中の有機化合物を容易に酸化する。

外線の表皮細胞への浸入を遮断(UVカット）する

太陽光線照射下Ti飢の触媒作用で化粧品中の水分役割をしている。

や汗などの水分子から·OHや• OOHラジカルが生成する。 このような活性酸素種は皮府角質を攻撃

Photocatalytic Degradation Mechanism of
Cosmetic Materials under UV
exposure
Hisao Hidaka
Faculty of Science and Technology,
Meisei University

して、過酸化物をつくる。 触媒活性の高いアナター

ゼ型Ti伍粒子により炭化水素はCO2と比0へ、窒十素化合物はNH4 イオンとNOぷイオンヘ、 リン化合
物はH北04-イオンヘ、硫黄化合物はンまで無機化される。

so げ イオ―

本研究では紫外線照射下で化粧品の構成物質で
-7-

用した。
polyethylene glycol (PEG)はミヨシ油脂味のある有機化合物がどの程度 酸化されるか、どのような分解生成中間物が できるかなどの基礎的研究

ものを使用した。
PEG200 (n= 4. 1), PEG300 (n= 6. 4),
PEG400 (n=8:7), PEG600 (n=l3. 2),を行った。 実際の化粧品は多種多様の物質の混合物から構成され、複雑であるので、単品 の界面活性剤や構造の決つた窒素を有するモデル物質 （アミノ酸やDNA, RNA)に関して光酸化反応の分解メ

PEGlOOO (n= 22. 3), PEG2000 (n= 45. 0)
ここで、番号は分子量を意味する。 nは平均オカニズムを検討した。

キシエチレン付加モル数である。

2
2. 1

実

験

polyvinyl alcohol (PVA)はクラレ製で、酢酸ビニル基を完全にケン化した次の分子量のものを使

試薬、 試料用した。

アナタ ー ゼ型Tiむ粒子 ( a -Ti0 2 )はDegussaAG（ドイツ） 製P-25 (表面積55m 2 /g) を、ナノサイ
ズの超微粒子はSachtleben Chemie GmbH(ドイツ）

PVAllO分子量 45000 (n= 1000),
PVAll7分子量 78000 (n=1700),
PVA120分子量 89900 (n=2000),
PVA124分子量 105700 (n=2400)

製UV-100(表面積250m 2 /g)を、ルチル型Tiむ粒子(r-TiOりは和光純薬製（表面積16m 2 /g) を、表面

ス クワレン(squalane, C30 H6 2 )は東京化成の試薬をそのまま使い、乳液はUVwhite (whitening

修飾型T-805は日本エアロジル株製 (octyltrime­
thoxyl silaneで表面改質したもので、37m 2 /gのemulsion)でS社のものを使用した。

表面積）を、ZnOは和光純薬製（純度 9 9. 9%で表面積3. 8m 2 /g, 平均粒径約5µm)をそれぞれ使用した。
sodium dodecylbenzene sulfonate{DBS;C1 2 H 2 sCG
Hぷ04Na}は東京化成味を使用した。

2. 2 光分解および分析方法
Ti0 2 粒子を固定化させたガラス練維は次のようにして作成した。 蒸留水(10ml)にTiむ粒子(lg)

各種アミノ酸a -Alanine { L- a -Ala, CH3CHNH 2 COOH}

を 溶解し、ガラス紘維00X 10cmりに塗布した。

L-Cystine { L-Cys, HSCH 2 CHNH 2 COOH}

その後、200℃、3時間電気炉中で焼結した。
Ti0 2 (65mg) 固定化ガラス練維 を反応装置(17X
10X 1cmりに入れ、DBS(0. lrnM, l50rnL) の水溶液

L-Methionine { L-Met, CHaSCH 2 CHNH 2 COOH}を導入した。 ロ ー ラー ボンプを使い172rnL/分の流は東京化成腑または味の素腑のものを使用した。

量で循環しなから、屋外で日中(11AM-3PM)4-6h

DNA(Herring sperm から得られた試料、分子量約l千万、東京化成）およびRNA (Yeastから得られた

太陽 光照射を行った。 紫外線強度はTOPCON製UVR-1紫外線強度計（測定波長域220-390nrn、極大試料、分子量約2. 5万、東京化成） を用いた。
窒素を有する界面活性剤であるN-dodecanoyl­
N-(2-hydroxyethyl)amide {N-DHA;C11H 2 aCONHCH 2

感度 波長 260run)を用いて測定した。
太陽光の紫外線強度は1994年12月6、7、10日晴
天(11時-16時） 3. 07-2. 47rnW/cm 2 、12月13日基CH 2 0H}は東邦化学工業卸のものをそのまま使用しiこ。 Sodium N-dodecyl-N,N-dimethyl ammonium

り0. 43mW/crn 2 で、および12月15日晴天 (9時-11時）3. 28-1. 96mW/cm 2 ある。

acetate {C1 2 -betaine;C1 2 H 2 sW(CHs) 2 CH 2 COONa}
およびSodium N-dodecylamidopropyl-N, N-dime­
thylammonium acetate{C1 2 -amidobetaine;C11H 2 a
CO-NHCH 2 CH2CH 2 W(CHs) 2 CH 2 COONa} はミヨシ油脂

320nm以下の波長は反応装置のガラスに吸収され、Ti0 2 のバンドギャップである387nm以下の狭い波長領域の光エネルギ ー を使用している。 室内
では、反応装置(75mLバイアル瓶） 中に各測定試

株のものをエタノ ー ル／アセトンで再結晶して使料(0. lrnM, 50rnL)とTiむ粒子(100mg) を入れ、酸/3-Alanine { /3-Ala, NH 2 CH 2 CH 2 COOH}-8-紫外線照射による化粧品素材の光分解メカニズムの研究

素ガス（または空気中）を導入し、撹拌しながら水360runの吸光度から定量した。全有機炭素計(TOC)

銀ランプ(75W、東芝SHL-1002A)で光照射を行った。

は島津製TOC-500を用いて測定した。

T叫粒子をミリポアフィルタ ー または遠心分離で3除去した。 N H 4 十 イオンはHP L C (JASC O製、検出結果および考察CD-5)で、Sh odexY-521陽イオンカラム、溶離液
3. 1（硝酸4m M )用いて測定し、N0 3 ーおよびS0 42 -、太陽光下での光反応とTiむの触媒効果

Ti02を固定 化した ガラス級維を使用した

H2P0 4 ―イオンはShodexl-5 24陰イオンカラム、DBSの溶離液｛フタル 酸2. 5mMとトリス（ヒドロキシメチ

太陽光照射による 分解 をFig. lに示す。日昼4hかル）アミノメタン 2. 3mMの混合溶液｝で測定した。

ら6h太陽光を照射した 時 の紫外線強度 とDBSの濃密閉したバイアル瓶の気相中のC釘はPorapackQ力度（ベンゼン環の開環速度）を示した。一 日の実験

ラム を用い 、ガスクロマトグラフィ ー （大倉理研

が終了後、反応装置を室内に持ち込みアルミフォ

製GC-802、TCD検出） で定量した。過酸化物生

イルで光を遮断した。次の日屋外実験を続けた。
晴天の時は10-ll時 から 紫外線は強く(2-3mW

成量(P OV)はヨウ化カリ法(Wheeler法） により、

/cmり 、午後04-15時）は徐々に弱く(0. 5mW/‘

イ ノオクタン／酢酸(1 : 4)中 で、最大吸収波長cmりとなった。ll時頃から 15-16時 になる につ れ、
紫外線強度はFig. 1(a)に示す ように徐々に低下

3.5

した。DBSの光分解は累積光照射時間と共に 分

f

解が進行する。暴りの時は分解 速度が遅く なる傾向が認められ た 。累積 照 射 時 間 2 0 h後 、D B S

\温 9

_s::l

切

(0. lmM、150mL)で90%が分解した。

9

種々の半導体の触媒効果をFig. 2に示す。ZnOが響�......
..c::
Oil
:.=:

1.0

且
0

0.5

埓

DBS のベンゼン環の開環速度が最も早い。表面修2飾された Ti0(T-805)は化粧品の白色顔料に良く使われているが、光酸化 の能力を持つている。

0.10

ルチル型Ti02(600℃以上で焼結）はDBSをほとん
ど分解しない。一 方、アナタ ーゼ型Ti0(600℃以
2

0.08
号
、
§
・.=i

i

0.06

呂0.04

岳Q 0.020

2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
Irradiationtime (h)Fig. 1(a) The solar I ight intensity of 260nm
on day times of Dec., 6, 7, 10, 13
and 15, 1994.
(b) The photoc I eavage of a benzene r Ing
in DBS (0. lmM) against accumulated
time of so I ar exposure.

-9-

Irradiation time (h)Fig.2

Photocatalytic effects of various semi­
conductors on the ring opening uf ben­zene in DBS surfactant (0. lmM) under UV
i I lumination (75W Hg-lamp).

元） が抑制され、Pt金属の方に移動するため光酸

0.10
8
0
0

化が抑えられる。

[a]

た。P-25 (55mヅg)に 比較して、UV-100 (250m

6
0
0

ll gu
可 ）UOl吾8

アナタ ー ゼ型の粒径に対する触媒効果を比較し/g)表面積は大きくなるが、ナノサイズの粒子は● OL-a-Ala

0.04

2

バンドギャツプが小さくなり、電荷分離された電▲ △ J3-Ala

子とホ ールの再結合が起こり易くなる。酸素分子により伝導帯にある電子が捕獲（光還元）が起こり

0.02

゜

にくくなる。従つてホ ー ルと基質（有機化合物）の光酸化が抑制される。

0.3

oU
OAJi
nf
nW OE E )UOll

3-2
0.2

アミノ酸およびDNA, RNAの光分解
Fig. 3( a )にL-a -Alaと{3-Alaの光分解による十十NH 4 とNOs―イオンを示す。共に、NH 4 イオンがNO
30.1―イオンより圧倒的に生成しやすい。NOぷイオン

は{3-Alaの方が生成しやすい。しかしNH 4十イオン
はL-a-Alaの方が生成しやすい。8h照射後L-a­

05
2

十

Alaと{3-Alaの窒素はほとんどNH 4 とNOs―イオ
Fig.3(b)にC飢の生成を表わす。じ伍の発生は2.0dprx0」:l:iug u:i:i8

OW rf)UO[l(1/[ンに無機化されることが分つた。
L-a-Alaの方が早い。これはNの位置がカルボニル基に近いので、Nの分解が早いためである。

1.5
1.0
0.5

. ,....,,，

ヽ、p-Ala\J ...ヽ、｀―/\ \</,Sh照射後L-a-Alaは約96%、{3-Alaは約8I%C0 2へ無機化された。
i
F g. 3(c)にパ ーオキサイドの生成を示す。L-a-Alaは初期生成から約3hで減少が始まる。{3-Alaの 初期生成時間は、a-Alaと変わらないがその後
8

6

4

2

゜

\、

の生成量があまり伸びず約5hまで持続する。また
L-a-Ala、{3-Ala共に二段階で反応が進行し、初Irradiation time (h)Fig. 3(a) Formation of NH.+ and NO, ― ions forthe photomineral ization of L-a-Ala
and /3-AI a(O lmM, 50ml) in the pre­sence of Ti0 2 (100mg) particles.
(b) CO 2 evolution(c) Tempora I POV changes dur Ing
photodegradation.

下で焼結）は触媒活性が高い。この活性の違いの期ではa位がOOH化され、続いてf3位などがOOH化されていると思われる。
硫黄を含むアミノ酸である L-CysとL-Met の光分解の結果をFig.4に 示す。NH 4十 イオンとNOs―イ
オンは他のアミノ酸と同様な傾向が認められたか、‘‘

so4 2 イオンは末端にあるL-Cysの方が分解が早い――

ことがわかった。一方、L-Metのsoげ イオンが初

理由はまだ明らかでないが、•OHや·OOHラジカル期で少ないのはa炭素からラジカルの攻撃が始まの生成がルチル触媒 表面で抑制されていると推察るためであると思われる。

される。Pt坦持Ti0 2 触媒は光酸化は低下する。こF g. 5 (a)と (b)にDNAとRNA の光分解の結果をi

れは伝導帯 (CV)の電子が0 2 分子への移動（光還が生成し、示す。初期過程でリン酸イオン(H2P0 4 -)-10-

紫外線照射による化粧品素材の光分解メカニズムの研究

0.10
0.08

減少する理由は、光化学反応が進むにつれて、酸[a] L-Cys

十性になりプロトンH が生成し、Tiかの表面電荷プ
ラスにチャ ー ジするためアニオンであるリン酸イ

0.06[a] DNA
0.20

0.04
0.02

N030.10

0.06

sot

0.04

゜

0.15

l

f CO2

0.10

0.02

[b] RNA

'r
,,l

10

5

8

6

4

2

゜

0.05

10

10

゜

0.08

[b] L-Met゜

Irradiation time (h)性酸素の攻撃を受けやすいためである。 その後の，， 一 ｀'RNA _..A
、、 1―
-­
―

5

4

3

溶液に存在するリン酸イオン濃度が低下する。 次2

十(H20+ h → ·OH+W)になり、吸着のためバルク゜ものである。 光酸化が進 むと分解溶 液は酸性

[rradiation time (h)十タイムラグがあり3h の光照射後から NOぷイオン

/J(
ヽ，，

」

リン酸イオンの減少はTi02粒子表面に吸着による

5

らせんの外側に存在するので、 • OHラジカルの活゜

2時間の照射後最大値を与える。 リン酸基が二重にNH4 イオンが生成し、徐々に増加した。 一方、[c] POV0ー

コ j[OWrl)Uggu只己8 ;iprx03d(a) Formation of NH.•, NO, ―and so. 2 ions for the photodecomposition of
L-Cys (0. lmM, 50ml) catalyzed by
Ti0 2 particles (100mg).
(b) Formation of NH.•, NO, ―and so.2 ions for photodecomposition of L­
Met (0.1mM, 5Om L).

Fig.4

n
T oEUI)uo�n]
OA:l"
03

0.10

u03
u;i:i
号 ）uoµll.l)

全 ）uoqti
.I)
g u8

20

Fig, 5+が生成し始めた。 NH4 /N02―イオンの生成比は8時間の光照射後では約4. 6であり、15h後は約3. 7であった。 このことから、OHラジカル が 表面にあるリン酸基を攻撃し、続いてDリボ ー スの塩基部を攻撃するためである。 またリン酸イオンが-11-(a) Formation of NH.+,No 3 -and H 2 Po,­
ions for the photodegradation of
DNA (0.05%) catalyzed by TiO 2 par­ticles (100mg) in aerated aqueous
solutions.
(b) Photomineralization of RNA (0.05%)
under the same ondition as shown in
Fig. 5(a).
(c) Temporal POV changes for the photo­oxidation of DNA and RNA (0.05%).

(57%)> C 1 2-amidobetaine (30%)の順である。

オン吸着しコンプレックスを形成し、ろ過されるため減少する。NH 4十イオンはNos-イオンよりも多両性界面活性剤の第4級の窒素基はベプチド結合
十いが、N Osーイオンは約3hの光照射から生成をの窒素基よりNH 4 十イオンヘ無機化は遅い。NH 4 ィ始める。

オンの生成は初期段階で C- N結合が切断され、続Fig. 5(c)はDNAやRNA (25 mg)の光分解によるパ

いて、この窒素誘導体が光酸化され、さらにNH4ーオキサイドの生成巌を示す。DNA、RNA共に初期

イオンヘ加水分解される。 1個の窒素基を含有し過程で急速にパーオキサイドが生成しその後減少て い る 活 性 剤 と 比較し て 、 2 個以上を持つする。さらにその後徐々にパーオキサイドが増加

Ci 2 ―amidobetaineの光分解は長時間の光照射を必要とする。その理由は活性剤構造中の2つの窒素し、約3-4hで極大値を与えた。

基が酸化力のある• OHラジカルによつて、競争的に攻撃される。NH 4 十イオンはNOs―イオンと同時に3-3 窒素含有界面活性剤の光酸化窒素を有する非イオン界面活性剤 (N-DHA)と両生成し、4-12倍多い。アミド結合や第4級窒素は性界面活性剤(C12- betaineと C12-amidobetaine)NOs―イオンよりNH4 十イオンヘ優先的に光無機化さの光無機化におけるNH 4 十 とNOs―イオンの生成量をれる。

Fig,6(a) に示す。C 12 -amidobetaineはN-DHA

光励起Tiむの伝導帯(cv)中の電子が02 分子によとC12-betaineよりNH 4 イオンの生成量は少ない。

り捕獲され、02ーを与え、H十 プロトンと結合して

C12-betaineは照射時間の増加とともに4hまでは活性酸素種·OOHラジカルを与える。Fig. 6(b)に十増加し、 8hで 一 定になる。N-DHAからのNH 4 十 ィ
十オンの生成は8hまで 1 次反応で増加する。NH 4 イオ
ンヘの無機化率はN-DHA(76%)> C 1 2-betaine

照射時間に対する光酸化 中間体のPOVの値を示す。
C12-amidobetaineとC12-betaineは2h照射で最大のPOV 値を与えた。この結果は2 h照射のC釦発生の増加と一致している。
非イオン系活性剤(N-DHA)の過酸化物の量は比0.08..., 、E0.06
2

較的少ない。この過酸化物誘導体はさらに光酸化�[a] N�'ふ;, No3·

され、アルデヒドやカルボン酸へ酸化が進行する。

i•"a 0.04

;,
＃

＾

芝
旦 0 .15

喜 0.02
1

2

3

4

5

6

7

〗"

8

(a) Formation of NH,+ and No 3-1ons as afunction of irradiation time at aconcentration of 0. lmM in the photomineralization of nonionic N-DHA
and amphoteric C12-betaine and C12amidobetaine.
NH,+ion: ● N-DHA, ■ C 1 2 -beta I ne,▲ C 12_amidobetaine,
N0 3 ―ion: ON- DHA, □ C , 2·-beta I ne,△ C12-amidobetaine

�[b] POV

0.10
0.05

Irradiation time (h)
Fig.6

0.20

1

2

3

4

5

6

7

8

Irradiation time (h)(b) Temporal formation of peroxide (POV) at astarting concentration of lmM.
● N-DHA, ● C12-betaine, ▲ C12-amidobeta1ne-12-紫外線照射による化粧品素材の光分解メカニズムの研究

N-DHAの過酸化誘導体はC 1 2―am idobetaineと

光照射時間に対するのroe変化量をFig. 6 (d)C 12-betaineより分解されやすいことがわかった。

に示す。 roe測定により界面活性剤の光酸化をCむ発生量をFig, 6 < c) に示す。co叶ま照射時間

評価で きる。 roe測定結果 から光分解溶液中のとともに増加し、3�4hで最大の残留有機中間生成物の全炭素量がわかる。両性の定値を与えた。

一

C 1 2 -arnidobetaineとC 1 2 -betaineのroe値はlh80

れた活性剤は光酸化され、 パ ルク溶液中へ 移動す60る。非イオン系N-DHAにはこの様な現象は認められなかった。このことはTi02へ の活性剤の静電気的吸着の違いによるものと思われる。光照射時間40が長くなるにつれて、CO 2 ガスが発生するため、
20

roe 値は減少し、5hで 一定値になった。光照射をしない暗反応での、roe値より予測された Ti02
表面へ の活性剤の吸着はC 1 2-betaine(36. 2%)

8

7

6

5

4

3

2

ー

（
ま） UO!lBZHBl.JlI!
E NOU

照射までは増加する。その後、Ti伍表面に吸着さ>C 12-arnidobetaine(l5. 4%)>N-DHA(8. 3%)の順である。

Irradiation time (h)(c) Relationships between CO, mineralization
chemical yield and illumination time at aconcentration of 0. lmM.
● N-DHA, ● C,,-betaine, ▲ c,,-amidobeta1ne

3-4

その他の化粧品原料（高分子PVA, PEG,
スクアレン）

Fig. 7(a) (b)化粧品の素材によく使用されて8h 後のCO 2へ の無機化率はC 1 2-betaine(68%)

いる水溶性高分子PEGおよびPVAの光酸化について> N-DHA (53%) > C 1 2 -am idobetaine(51. 5%)で調べた。Fig. 7 (a)は、オキシエチレン付加モルある。界面活性剤の炭化水素部分からのC飢生

数の異なるPEGの光酸化のCO2へ の無機化率を 示し

十成は窒素部分からのN03―イオンおよびNH4 イオン

た。0-4hの初期照射ではCむの発生が遅いが、4hの生成より早い。

以後叫の発生が急速に増加した。分子量が増加するにつれ無機化率は低下した。10hの光照射

20

後の結果は、PEG200(46%)> PEG300(25%) >PEG400(23%)>PEG600Cl6%) である。
Fig. 7 (b) はPVA のCO2への無機化率を示した。
PVAの酸化プロセスも同様に•OHラジカル攻撃から

8（日 dd)uoL16

光酸化が始まり、 多くの酸化過程を経てCO2 にな

4る。PVA(l µM、50mL) の無機化率は PVA-110
124(27%)で分子量が大きくなるにつれ無機化

8

7

6

5

4

3

2

0

゜

(37%) > PVA- 117(31%) > PVA- 120(28%)>PVA率は低下した。
過酸 化物(POV)は紫外線照射1-5時間で 化粧

Irradiation time (h)品(100 mg) に対して2µgの過酸化物が生成した。

(d) Total organic carbon (TOC) in the residual
solutions in the photomineralization at aconcentration of 0. lmM.
● N-DHA, ● c,,_betaine, ▲ c,,-amidobeta1ne-13-

化粧品原料としてよく使われているスクワレンのモデル化合物としてのスクアラン炭化水素は203 0分後、POVが最大になった。 引き続き酸化が進行し、別の中間生成物に変わるためはPOV はが起こり、価電子帯(VB)に正孔 が、伝導帯 (CB)減少する。

に電子がそれぞれ生成する。正孔は、Ti飢表面に吸着したH 2 0またはOH-イオンから 電子を捕獲し、• OHラジカルを生成する。同時に溶存酸素は 伝導[a)• PEG200‘こ、'o

帯 より 電子を受け と り. 0 2 ―ラジカル となり、溶液中のプロトンと反応し •OOHラジカルを生

蒋・ジ、 3 0成する。

〗"

Ti0 2+ h v→ ecs-+h v s+

屠 20

[OH-J ad ,+h v s 十 → [•OH] ad,( アル カリ溶液中）
十, W(酸化 溶液中）
［い],d, +h v s → [• OH],d +

゜

乏 10

[0 2 ],d, +ecn―→ [•0 2 -Jad ,[•0 2 -J, d ,+ H 十 → [• OOH], d ,'A.

、 UV white．ゞ:‘ヽ�hite
ning emulsion
▲

、
ヽ

ヽ
ヽ

Irradiation time (h)

-

5

s

PVA120
PVA124゜baE )＞od●,s ualane、\ \ 、 q

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(6エl

0
1

• PVAUO• PVA117
..

Fig.7

,�r\

,,....、

02念） pJa!AUO!lBZffB」aU!ll'J

30

m2
Irradiation time (h)(a) CO, evolution for the photom1neralization of PEG homologues (O.lmM,50ml) in the presence of Ti0 2 par­ticles (100mg) in aerated aqueous
solutions.
(b) CO 2 evolution for the photodegrada­lion of PVA solutions (O.lmM,SOmL)in the presence of Ti0 2 particles(100mg).

ム
半導体光触媒による光酸化メカニズ

Fig. 8Peroxide formation (POV) during thephotodecomposition of squalane in ali0 2 suspension (50ml) containing
squalane (50mg) or a UV white white­ning emulsion cosmetics (50mg) and T805 catalyst (100mg).

4 , 8 - l 2)

Ti妬粒子と 溶液の界面で生成する•OHまたは

光分解速度の観点から見ると、① Tiむの粒子表• O O H ラジカルは、 光酸化過程における主要な面 への界面活性剤の 吸着、②紫外線照射による活性酸化種である。 ・ OOHラジカルは特に酸性 溶液

4

Tiむ中の正孔と 電子への電荷分離、および·OHやにおいて多く生成する。反応性の強いこれらのラ• OOHラジカルの生 成と これら活性酸素種の有ジカルはDMPOスピントラッピング剤によるESR

機分子への攻撃、③ベンゼン環開環、パ ーオキサ

法で確認した。・ OHや•OOHラジカルは、Ti0 2 表面

イド（過酸化物）生成、アルデヒドおよびカルポに吸着した界面活性剤を攻撃し、ヒドロキシル 化

ン酸を経て最終的にCO 2 まで無機 化 する二次的

パー オキサイド の誘導体をそれぞれ生成し、合物 、酸化過程が考えられる。Ti0 2 半導体は3. 2eVのハ

その後、さらに光酸化 および自動酸化によって ア

ンドキャップを有し、すなわち387nm以下のエルデヒド(HCHO)、カルボン酸(HCOOH)を経てCO 2

ネルギーを発生する。ヘテロ 分子はNH 4十 やNOa-, H 2 POいの紫外線を照射することにより電荷分離-14-紫外線照射による化粧品素材の光分解メカニズムの研究などのイオンヘ無機化される。 光酸化反応には、Tiむ触媒、紫外線、酸素（空気）および

4) H. Hidaka, Y. Asai, J. Zhao, K. Nohara,

水分の4つの因子が光分解の必須条件である。 実

99 8244 (1995)
5) H. Hidaka, K. Nohara, K. Ooishi, J. Zhao,

S04 2

ー

N.Serpone and E.Pelizzetti, J Phys. Soc.,

際に化粧品に使用されている粒子は光触媒活性が抑制されているが、 光酸化反応、特に角質表面でN.Serpone and E.Pelizzetti, Chemosphere.,の電子移動についてさらに詳細に検討する必要が29 2619 (1994)
6) H.Hidaka, I.Zhao, S.Horikoshi, N.Serpone
and E. Pelizzetti, J Jpn. Oil Chem. Soc.,

ある。

44 121 (1995)
7) H.Hidaka, K.Nohara, I.Zhao, E.Pelizzetti

謝 辞

and N. Serpone, J Photochem. Photobiol. A:

本財団より研究援助を賜わり、研究成果（引用文献1-9)を国内外の専門雑誌に発表できたこと

Chem., in press. (1995)に厚く御礼申し上げます。

8) H. Hidaka, J. Zhao, E. Pelizzetti and

引用文献
1) H.Hidaka, K.Takashima, K. Nohara, J.Zhao,
E.Pel izzetti and N.Serpone, New]. Chem.,

9) J. Z h a o , H . H i d a k a , A . Ta k amur a ,E.Pelizzetti and N. Serpone, wngmuir., 9

N.Serpone,

J Phys. Chem., 96 2226 (1992)

18 541 Cl 994)
2) K. Waki, L. Wang, K.Nohara and H.Hidaka,
J Mal. Cata!., 95 53 (1994)

1646 (1993)lO)H. Gerischer and A.Heller,

J Phys. Chem.,

95 5261 (1991)
11)H. Gerischer and A.Heller,

J Electrochem.

3) H. Hidaka, J. Zhao, Y. Satoh, K. Nohara,
E.Pelizzetti and N.Serpone, J Mal. Cata!.,12)H. Gerischer, Electrochem. Acta., 38 3 (1993)

Soc., 139 113 (1992)

88 239 (1994)-15-水索添加大豆リン脂質を用いた油性ゲル及び水性ゲルの保湿作用に関する研究 l)
昭和薬科大学

藤

井

ま

き

子

Moisturizing effect of oily gel and aqueous gel formed by hydrogenated phospholipids (HSL)
were examined by application to healthy female volunteers. Water concentration of stratum
corneum was expressed as conductance measuring by high-frequency current. Moisturizing ef­
fect was evaluated with water concentration of stratum corneum, water sorption ability andwater-holding capacity calculated from water sorption-desorption test. Inside of forearm waschosen for application site, because individual variation was small.
Application of oily gel of liquid paraffin (LP) with HSL 15% improve the water concen­
tration about lOOµS over 2h. Water sorption ability and water-holding capacity also increased
significantly. Moreover, addition of soybean phosphatidylcholine (PC) to the gel was effective
on prolongation of moisturizing effect. In contrast, oily gel of octyl isononanoate showed noincrease of water concentration and water sorption ability. Only water-holding capacity
increased. Addition of PC to the gel improve the moisturizing effect, but it was not as high asthat of oily gel of LP. It indicated that character of oil using for gel affected greatly on
moisturizing effect of oily gel.
Aqueous gel was formed by addition of 3% hydrogenated PC to water,water-ethanol (6:4)
or water-ethanol-propylene glycol (PG) (6:2:2) mixture. Water concentration extremely increased
immediately after application, but decreased to control level withn lOmin except water­
ethanol-PG gel. Water sorption ability and water-holding capacity increased when water-ethanol
or water-ethanol-PG gel was applied. These results suggest that moisturizing effect was dependon the state of hydrogenated PC in vehicle.

1

緒

言

全性は高いと考えられ、近年注目を集めている素材の1つであり、 粧原基にも大豆リン脂質が収

皮屑角質層における水分は刺激からの防御機能載されている。 この天然リン脂質に水素添加し、のための重要な因子である。 皮岡の乾燥は皮膚疾

酸化安定性が非常に良好となった水素添加大豆リ

患を招き、また美容上も好ましくない。 近年 老齢

ン脂質の応用を多岐にわたり検討した結果、水素人口が増加し、老年性乾皮症が問題となっており、

添加大豆リン脂質が流動パラフィンなどの液状油

特に湿度が低くなる秋冬は患者が増大する。一方、をゲル化する現象を見出した

2)(油性ゲル）。

若年者においても空調施設の発達により年中乾燥

リン脂質は皮憫に対して保湿効果があることがにさらされる傾向にあり、保湿剤の必要性は年々知られている。 保湿効果には皮膚水分の蒸散抑制

高まってきている。 ・と外界からの水分吸着促進の2種の機序が考えら

リン脂質は生体膜成分であり、親水性、疎水性

れるが、この油性ゲルは基剤の主体が油であるたの両方の性質を示し、界面活性作用を有する。 安め水分蒸散を抑えるとともにリン脂質の吸湿作用により2重の保湿効果があると考えられる。 しかThe study of moisturizing effect of oily gel andaqueous gel formed by hydrogenatedsoybean phospholipids

も処方が単純で、他種の界面活性剤などの添加が不要であるため、角質水分が低く皮府の防御機能が低下しアトピー様の症状を起こしやすくなって

Makiko Fuji,

いる人に対して余分なものを負荷する必要がない。

Showa College of
Pharmaceutical Sciences

そこでこの油性ゲルの保湿効果を検討した。
また、高純度のphosphatidy lchol ine(PC)か水、-16-

水索添加大豆リン脂質を用いた油性ゲル及び水性ゲルの保湿作用に関する研究 ll

エタノ ー ル、 プロピレングリコ ー ル(PG) 等の混

2-3-1

健常人の角質水分の測定

合溶媒をゲル化することも見出しているので 3) 、健常女子ボランティア（年齢18-23オ） の手

この水性ゲルの保湿効果についても併せて検討し甲及び前腕屈側の角質水分を測定した。測定は、た。

室温 22 士 l ℃の部屋で30分以上座位で安静にした後 に行った。

2

実験の部
2-3-2

油及び油性ゲルの角質水分に与える影響

健常女子ポランティア（年齢21-23オ）を対象と

2- 1 . 試料
油として流動パラフィン(LP)、 イソノナン酸オした。室温22土l℃、 相対湿度 40-60%の部屋

クチル(OIN)、ミリスチン酸イソプロピル(IPM)をで30分以上座位で安静にした後、まず前腕屈部の用いた。 リン脂質として、 水素添加大豆リン脂質

3点（手首から3- 4cm 、屈部から3- 4cmの点(HSL; レシノ ー

ルS-10、 日光ケミカルズ）、 大豆リ

及びその中間） の角質水分を測定した。その後、ン脂質より抽出した高純度PC (Epicron200 : PC純

右手は そのまま、 左手 に油または油性ゲルを約

度95%以上）及び、これに水素添加したHPC (レシ5mg/cm 2 塗布した。30分-2時間後油または油性

ノ ー ルS-IOEX、日光ケミカルズ） を用いた。そのゲルをティシュペ ー パ ー で拭き取り、直ちに角質

他溶媒、試薬は特級品を用いた。

水分を測定した。その後さらに田上らの方法 4) に準じて水負荷試験を行った。すなわち、精製水を十分含ませた脱脂綿を10秒間被験部位に置いた後2-2. ゲルの調製

キムワイプで水を拭き取り直ちに角質水分を測定2-2-1した。さらに、30、 60、 90、 120 秒後の値も油性ゲルの調製測定した。

フラスコに適当に乾燥したHSL 1. 5gをとりLPを加え、10gとした。フラスコを密封し、 沸騰水浴

2-3-3

中で加熱し、HSL をLPに溶解させた。 熱時に軟膏

水性ゲルの角質水分に与える影響

その

油性ゲルと同様の方法で測定した。ただし測定後ゲルの性質を一定とするため、40℃ に3日間放置は拭き取らずにそのまま行い、塗布 1 時間後の測チュ ー ブに充填し、20℃水中で30分冷却し、した後室温で保存した

2)

定終了後、水負荷試験を行った。

。 PCを加えるときはHSLと同時に加え、 40℃放置を30℃放置に変えた。

3

結果と考察

2-2-2 水性ゲルの調製
3-1.

フラスコにHPCO. 3gをとり、 エタノ ー ル等の健常人の角質水分

保湿効果の実験に先立ち、 健常人31名の角質水

溶媒を加え、 加温溶解した後、80℃の水を徐々に加えた。 40℃水浴に30分おいた後、室温に放置し分を測定した。測定部位は被験者の抵抗感のないた。

部位として当初、顔面、手甲、前腕部について行ったが、 顔面は化粧や発汗の影響を大きく受ける

2-3.

ため、以後は手甲と前腕部について検討した。

測定法

角 質 水 分 の 測 定は、 高周波伝 導 度 測 定装置

Fig, 1 に相対湿度と角質水分の関係を示した。

(SKICON-200, IBS製）を用いて行った。各部位で3いずれの部位でも相対湿度の上昇にともなって角回測定し、 その伝導度の平均値を角質水分とした。

質水分の増加がみられた。部位 による差をみると、前腕屈側 より手甲の方か角質水分が高いことが明らかとなった。また、 個人差は手甲の方が大き か

-17-

•一3．

"l

(a)

l

60
(b)

40

も
�

8苫::, 20-111111』35
45
55
65
Relative humidity(%)

Fi�.1

35

75

45
55
65
75
Relative humidity(%)

Effect of Relative Humidity on Water Concentration of theStratum Corneum
right hand回
left hand(a) hand, (b) forearm ●Room temperature was controlled at 2Z'C. 底ch value represents mean土S.E. of3-7
experimentsった。 約半数の被験者がハンドクリ ー ムを使用しリンや液状の油である。 ワセリンは閉塞性が非常ていたが、 これとの関係は明確ではなく、そのほに高いが、 べたつくため使用感が悪く、 コ ンプラ

かの生活条件なども大きく影孵するものと考えら

イアンスが望めない。 ベビ ー オイル等の液状油はれる。 前腕屈側では中央付近がいずれの相対湿度

べ たつき感はワセリンに比 べ 低いが取り扱いにくにおいても角質水分が低い傾向がみられた。 肘のい。 液状油を水素添加リン脂質でゲル化した油性内側に近い部分では、 湿度の影響を受けやすく、

ゲルはワセリン程度の桐度を持つが、塗布時に構特に湿度が70%以上では他の部位に比 べ角質水分造が壊れ、 展延しやすくなるため、 べたつき感はが高い傾向を示した。 これは発汗の影響がでたももとの油と同程度である。 そこで、この油性ゲルのと考えられる。 また、 いずれの部位でも左右での保湿剤としての有用性を検討した。

は差がみられなかった。
以上より実験時の相対湿度はばらつきが比較的

3-2-1

小さい50%以下が望ましいと考えられるが、実験

油の角質水分に与える影響

まず、 ゲルの甚剤として用いる油の保湿効果に

室における環境条件の設定が困難であるため、 相与える影響を検討した。 油としては医薬品添加物

対湿度は60%以下で行うこととした。 被験部位はとして油 相やベビ ー オイルに用いられるLP及び手甲ではハンドクリ ー ムの影響、その他手を使用

IPM、IPMと分子量は同しで、化粧品にエモリエンする作業は多いためその影響かでる可能性がある

卜剤 なととして使われるOINを塗布した後の角ことから、 比較的そのような影密を受けにくい前

質水分を測定した。

腕屈側部の手首及び肘から5 cm以上離れた部位をFig. 2 に油を塗布した後の角質水分を示した。

選び、 さらに個人差、 実験時の条件差を考慮にい

値は塗布した左手の伝導度から コ ントロ ー ルとしれ、 右手を常にコントロ ー ルとし、 左手のみに処た右手の伝導度を差し引いて示した。 コントロ ー

置を行うこととした。

ルに比較してLPでは角質水分は30分で有意に増大
し、 塗布時間2時間でも角質水分が高い状態が続

油及び油性ゲルの角質水分に与える影響いた。 これはLPが皮膜形成能が高い油であるため

油類はその閉塞性のため保湿剤として有用であと考えられる。 IPMやQINではLPに比較し効果は低3-2.

ると考えられるが5)、 実際上使用されるのはワセ

かったが、 IPMでは1、2時間塗布、 QINでは30分、
-18-

1)
水索添加大豆リン脂質を用いた油性ゲル及び水性ゲルの保湿作用に関する研究

S
J
n)

200

200

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150

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01 c;,

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＊

1

Applied period (h)

.1 5

゜゜

2

0.5

I

Applied period (h)1.5Change of Water Concentration of theStratume·corneum after Application of
0 i I y Ge I wi th Liquid Paraffin●
Gel with PC
Gel
A.
-0-- LP

Fig. 2

Fig. 3底ch value represents Mean土S.E. of 6 experiments.
*Significantly different from control site.(p<0.05)*Significantly different from control site.(p<0.05)

Change of Water Concentration of theStratume Corneum after Application of
0i I
1PM
'f'
-l.ャ - OIN-0--- LP

2

0.5

50

底ch value represents Mean土S.E. of 6 experiments.

1時間塗布でコントロールに比べ有意に角質水分200

油性ゲルの角質水分に与える影響

このように油を塗布することにより閉塞性によると考えられる角質水分の上昇がみられたが、 油かとなった。 そこで、 閉塞性の高いLPと、 使用感＊＊

自身の性状によりその効果に差があることが明ら

150 100 50

3-2-2

(
SSg u
s JUpUO:)

が上昇することが明らかとなった。

0 .5

LPを用いた油性ゲルではLPと角質水分には差がなかった。 しかし、 LPを用いた油性ゲルにさらにPCを5%添加したものでは効果の持続がみられ、 2
時間 塗布で有意にLPより高い角質水分を示した

.1 5

Fig.4

Change of Water Concentration of theStratume Corneum after Application of
Oily Gel with Octyl lsononanoate

ー→公—

OIN

A

Gel

●

Gel with PC

Each value represents Mean 土 S.E. of 6 experiments*Significantly different from control site.(p<0.05)(Fig. 3)。
使用感のよいOINの場合、HSL を15%添加しゲルとしたときは、 OIN単独の場合に比べ、I

Applied period (h)2

は油っぽくなくさっぱりしているが角質水分上昇の小さいOINを選び、油性ゲルを調製した。

保湿効果

ルに対し有意差がなかっこのように角質水分の上昇の程度は、 用いる油た。 L P ゲル同様、 未水添のPC5%加えたゲルをによって異なるが、 PCを併用したゲルでは効果の塗布したところOIN単独とほぼ同じ効果が現れ、し持続が示唆された。

が低くなり、

コ

ントロ

ー

かも作用は 2時間後でも持続していた(Fig.4)。
PCは先の1、Pを用いたゲルにおいても効果の持続3-2-3に寄与していたが、OINの場合はこの効果に加え、油及び油性ゲルの皮膚吸水能及び保水能に与える影響ゲル桐度を低下させることにより皮胄との親和性

保湿剤の効果は塗布後の角質水分たけでなく、皮冑の吸水能や保水能に与える影態も重要である。

を改善する効果もあるものと思われる。

-19-

200

試験を行い、その結果の典型例をFig. 5に示した。

1.5

Typical Profiles of Water Sorpt1on­
Desorption Test of Control Site and
Gel Applied Site

200

Each value represents mean土S.E. of 6 experiments.

の変化（塗布した場合の吸水能 ー コントロ ー ルの吸水能）をFig. 6に示した。 い ずれの油でもやーや吸水能は下がる傾向がみられたが、 コ ントロ

ルとの有意差はなかった。 これは拭き取った後油が残存しているためやや水を吸いにくくなっているのではないかと考えれる。 ゲルを塗布した場合、を含む場合は適用時間が長いほど吸水能が上昇する傾向がみられた(Fig. 7)。
OINを用いたゲルではPCを添加した場合のみ
コントロ ー ルより高い吸水能を示したが、わずかであった(Fig. 8)。
保水能は先に示した水負荷試験の時間 一 伝導度
曲線下面積(AUC)として求め

6)

細

0.5

を差し引いた値で示される 。 油塗布による吸水能

LPのゲルで有意に吸水能が上昇しており、特にPC綱

吸水能は水負荷直後の角質水分から負荷前の水分lafter 1 h treatment
with gel with PC

0
100 100 魯

•

300

(
S5 g uepnpuo;::>-D- control

螂

0.5
I
Time(min)

2

Fig.5

2
I
1.5
Applied period (h)Fig.6 Change of Water Sorption Ability of
the Stratume Corneum afterApplication of Oil
1PM--D- LP —て。IN •
0.5

。

-0.5

諏

==

0
0
0
0
6
4
2
(
Sn)
g uepnpuo;:::>

゜

撼 魯

800

0
100

300

した。 各油及びゲル、各塗布時間において水負荷(S3 g uepnpuou

そこで次に角質の吸水能及び保水能について検討

1.5
2
1Applied period (h)Fig.7 Change of Water Sorption Ability of
the Stratume Corneum afterApplication of Oily Gel with Liquid
Paraffin
Gel with PC●
A Gel--D- LP
Each value represents mean 土 S.E. of 6 experiments.
*Significantly different from control site.(p<0.05)

ルが最も効果が大きくかった。
以上の結果より油性ゲルは油単独に比べ皮屑に対する作用時間が長くなる傾向がみられた。 特に、未水添のPCを含む方が効果が良好であると思われる。 また、使用する油の性質によりゲルの保湿効
果にも大きな差があることが明らかとなった。

、処置部からコン

3-3

トロ ー ル部のAUCを差し引いてFig. 9-11 (こ示した。

水性ゲルの角質水分に与える影響
HPCが水やエタノ ー ル、PG等の溶媒系でゲル化

油、ゲルともコントロ ー ルに比べ有意な上昇が認するこ とを見いだした。 この水性ゲルを用いた場められた。 この場合もLPを用い、PCを併用したゲ-20-

水素添加大豆リン脂質を用いた油性ゲル及び水性ゲルの保湿作用に関する研究 1)

(
Uf
W·
Srl)

(
S3g u
s;
m pUO;)

unv

00 0 00000000
1
1 2 3 41.5

0.5

Applied period (h)Fig. 8Change of Water Sorption Abi Iity of
the Stratume Corneum afterApplication of Oily Gel with Octyl
lsononanoate----ts-ー OIN•
Gel●
Gel with PC

Fig.10

u flV

T

●

Gel with PC

Fig, 11

1PM

1.5

Applied period (h)Change of Water-Ho Iding Capacity of
the Stratume Corneum afterApplication of Oily Gel with Octyl
lsononanoate

王OIN
合の保湿効果について油性ゲルと同様に検討した。
水性ゲルの溶媒として、水のみ、水・エタノー

12--fr- OIN

Gel

2

0.5

Applied period (h)Change of Water-Holding Capacity of
the Stratume Corneum afterApplication of Oil

ーロ—LP

A

900
8007006005004003002001000

(
U日 •
·
Sn)

900
8007006005004003002001000

Fig. 9

1.5

1

1.5

Applied period (h)Change of Water-Holding Capacity of
the Stratume Corneum afterApplication of Oily Gel with Liquid
Paraffin

—正LP

:::mv

(
0!
m·
srl)

0.5

1

2

1

2

0.5

900
8007006005004003002001000

300
200

A

Gel

●

Gel with PCル(6:4)混液及び水・エタノール• PG(6:2:2)混液

効果はあるのかも知れないが、有効とは考えられない。 これに対し、水・エタノール• PG混液を用を用いてHPC3%を含むゲルを調製し、塗布後の角いたゲルでは30分程度の効果の持続がみられた。

質水分変化を測定した。 結果をFig. 12に示した。

H PCを添加しない溶媒だけでも効果の持続がみ

いずれの場合も多量に水を含むため、塗布直後られたことから、これはPGの効果も大きいものとは非常に高い水分を示したが、水のみ及び水・エ
クノール混液を用いたゲルでは5-10分後にはコン考えられる 7) 。

トロールとの差がみられなくなった。 水塗布の場

た。 吸水能、保水能共に水を用いたゲルではまった＜効果がないのに対し、水・エタノール及び水・次に吸水能と保水能を水負荷試験により評価し合は5分以内に元に戻ることから考えると多少の
-21-

500

250

Water sorption ability

60Time (min)Fig. 12Water-EtOH-PG gel ー← Water-EtOH-PG

Water-holding capacity

Change of Water Sorption Abi Ii ty andWater-Holding Capacity of theStratume Co-rneum after Applicationof Aqueous Gel

Water ge l
Water-EtOH-PG gel。
・Water-EtOH gel

● 口

.6.

el

●

Fig. 13

Change of Water Concentration of theStratume Corneum after Applicationof Aqueous Gelー--- Water g

50

。

。
40

300

250200150100

5
7

。

(
srl')
aa
uupnpuo
u

(
mws
rl)
Unv5(
s
rl)gu5,npuo:i

1000

Water-EtOH gel
Water-EtOH-PG

Each value represents mean 士 S.E. of 3 experiments
エタノ ー ル• PG混液を用いたゲルでは有意な上昇がみられた。 角質水分では 効果がみられ たHPCを含まない水・エタノ ー ル• PG混液でも吸水能、＊水性ゲルについて

保水能の上昇はみられないことから、吸水能、保角質水分はPGを含む場合のみ塗布後30分程度高水能はHPCに由来すると思われる(Fig. 13) 。

い値を示したが、大きな効果はなかった。 保水能以上のように同じHPCを用いて も溶媒系が水の上昇が水・エタノ ー ル、水・エタノ ー ル• PG系

では効果がなく、水・エタノ ー ルでは吸水能、保でみられ、水のみのゲルでは認められなかった。

ル• PGでは全ての点で保湿

このことからHPCの存在状態が保湿効果 に影響

水能に、水・エタノー

することが示唆された。

効果がみられ、溶媒系が異なると保湿効果に差が出ることか明らかと なった。 これはHPCの存在

引用文献及び注

状態に差があるためではないかと思われる。
公心
租41) 本報告の 一部は第19回日本香粧品科学会学術大会、1994年6月、 東京にて発表

括2) M. Fujii, H. Terai, J. Togasaki, I. Kawarnata,
健常女子ボランティアにより水素添加大豆リン

Y. Takashima, H. Yamaguchi, M. Matsumoto,

脂質を用いた油性及び水性ゲルの保湿効果につい"Oily gel formed by hydrogenated soybeanて検討したところ、次のことが明らかとなった。

phospholipid s and its prop ertie s",＊油性ゲルについて

Yak殴aigaku., 46 45-49 Cl 986)

閉塞性の高いLPを用いた場合の方が、角質水分、; M. Fujii, H. Terai, J. Togasaki, M. Matsumoto,

吸水能、保水能とも効果が大きかった。 未水添の"Eff e c t of stora ge temperature andPCを併用すると効果が持続する傾向がみられた。

phosphatid y lcholine c ontent on the

OIN は使用感はさっばりしているが、 効果は LP

prop e rt i e s of oi l y g e l forme d b y

を用いた場合より低く、 油の性質が保湿効果に大hydrogenated phospholipids",

きな影響を与えることが明らかとなった。

46 266-270(1986)-22-

Ya加a攻aku.,

水索添加大豆リン脂質を）廿いた油性ゲル及び水性ゲルの保湿作用に関する研究』）a s s es sm ent of the stratum corn eum,"3) 藤井、 吉田、 有馬、松本、 “水素添加大豆リン脂質を用いた2成分系（水・エタノ ー ル）

J Invest. Dermatol., 78 425-428 (198 2)””5) 熊坂、 “皮問保湿効果測定法 、 フレグランス
ジャ ー ナル臨時増刊23 2-8 (1994)
6) H, Tagami, "Quantitat1ve mesurements ofにおけるゲルの調製方法 、 日本香粧品科学
会誌14 213-216 (1990 )“；藤井、 吉田、 有馬、松本 水素添加大豆リン脂質•水・エタノ ー ルゲルに対するプロピ

water conc entration of the stratum”

Corn eum i n v i vo by hi g h-frequency

レングリコ ー ル及ひ他の添加物の影響 、日本

current" Acta. Derm. Venereol.,.(Stockh) Suppl.

香粧品科学会誌16 90-93 (199 2)
4) H.Tagami, Y.Kanamaru, K. Inoue, S.Suehisa,

7)

F. In oue, K. lwats uki, K. Yoshikun i,M. Yamada, "Water sorption -d esorption

test of the skin in vivo for functional-23-

185 29-33 (1994)

日本薬学会訳編 “医薬品添加物ハンドブッ”
丸善 PP. 310-311 (1989)ク

アスパラギン酸プロテア ー ゼ類の蛋白工学的改変によるケラチナ ー ゼの開発
束京大学大学院理学系研究科

井

上

史

英

An aspartic proteinases, proctase B from Aspergillus niger var. macrosporus, was preparedby two types of heterologous systems, i.e., an expression- in vitro refolding system using
Escheガchia coli and an expression-secretion system using Bacillus brevis. Both of the systems gave
potentially active proproctase B, which was converted into the mature form under acidic
conditions (pH ;;, 5) by autoprocessing. The completely processed form had almost the same
properties with native proctase B although their N-termini were different from each other. The
B. brevis expression system yielded proproctase B corresponding to 50 mg of active proctase B
per one liter of culture. The replacement of Arg6 or Lys7 in the prosequence with glutamine
increased the yield up to 120 mg. These expression systems, especially the B. brevissystem, enable
us to alter the properties of proctase B by site-directed mutagenesis and to study the relationships
between the structure and substrate specificity of proctase B to increase the activities toward
keratin and collagen.

1

緒

言

蛋白質を消化する機能を持たない、ケラチンを分解するプロテア ー ゼはケラチナ ー ゼと総称されるが、ケラチナ ー ゼに関する研究は少ない。

皮府は身体を被覆することにより、体内の諸器官が外部から種々の刺激や傷害を受けることを防

皮府感染を起こす菌として Candida 属が知られ御する。 表皮の最も外側にあって、この重要な役るが、これらは菌体外にアスパラギン酸プロテア

割を担っている角質層は化粧品学においても非常ーに重要な身体組織である、角質層を構成する成分

ゼはケラチンや コ ラ ー ゲンを分解する活性を持つとして主要なものはケラチンと呼ばれる蛋白質でことが報告されている。 アスパラギン酸プロテアある。 ケラチンは不溶性であり、かつ種々の要因

ーに対して抵抗性が強く、このことにより身体の最おいてもペプシン、レニン、カテプシンD•E等、生外層の構成成分としての重要な役割を果たすと考理機能の異なる他数の分子種が存在している。 こ

ゼを分泌する。 このアスパラギン酸プロテア ーゼは、真核生物に広く存在しており、哺乳類にえられる。 しかし 方では、このような性質のたれらは構造や触媒機構において共通性を持っておめにケラチンは生化学的には非常に扱いにくい蛋

り、同 一の起源から進化したと考えられる。 我々

白質であり、研究は進んでいない。 蛋白質を分解が本研 究 で 用 い る糸状菌 Aspergillus niger var.

一

macrosporus が分泌するアスパラギン酸プロテアする酵素プロテア ー ゼは、これまでに多くの生物

ー

種から非常に多数の分子種が単離され研究されてれているが，

きているが、そのほとんどは、身体の強靭な組織“を構成するケラチンや コ ラ ー ゲンなどの 固いゼ（プロクタ ー ゼB) 1 . 2) は消化薬として用いら
コ ラ ー ゲンを分解する コ ラゲナーゼ活性を持つことが知られている l)”0

プロテア ゼかケラチンや コ ラ ー ゲン等を分解ー

Study on the relationship between structure

するための必要条件は何であるのか、あるプロテand karatinase activity of aspartic

ア ー ゼを改変してこのような蛋白質に対する活性proteinases.

を高めるためにはどうすれば良いのか。 このようHideshi Inoue

な点を明らかにし、ケラチン分解活性を持った新
規な酵素を蛋白工学的に創生することは皮屑科学

The University of Tokyo

や化粧品学の基礎研究・応用に役立つと思われる。

-24-

アスパラギン俄プロテア ー ゼ類の蛋白工学的改変によるケラチナ ー ゼの開発

リン酸カリウム緩衝液(pH7.0)に対し透析した。

また、 ケラチン含有組織を蛋白質資源として有効利用することにも応用されることが期待される。

2·2

そこ で本研究では、 種々のアスパラギン酸プロテ

アッセイ

ゼ活性

蛋白質分解活性は、 pH2 ( リン酸ナトリウム）を付与または増強することを目的とし、 アスパラで酸変性したヘモグロビンを基質として用いて行

ギン酸プロテア ー ゼの大量発現系を構築し、 部位った 5) 。

アー

ゼを改変することにより、 ケラチ ナ

ー

特異的変異を行うことにより発現量の向上を行っ
2·3 Bacillus brevisによる発現系の構築た。

ヒト・ ペプシノ ー ゲンA、 ヒト・ カテプシンE、
2

実

及び A. niger var. macrosporus 由来プロクタ ー ゼ験B のc DN A の プ ロ 体 部 分 を コ ー ド する領域を
2·1

polymerase chain reaction 法により増幅し、 発大腸菌による発現系の構築
ゲンA、ヒト・カテプシンE、及び、

現ベクターpNU211R2 L5 6) に組み込んだ。 これを

A. niger var. macrosporus由来プロクタ ー ゼBのB. brevis HPD3 1株に導入し、 PY-1培地中 で培養しcDNAのプロ体部分をコ ードする領域をpolymeraseた ” 。 以下に、プロクタ ー ゼBについて行った手順

chain reaction法により増幅し、 それぞれT7プロを述べる。 培養上清を集め、 60- 80%硫安で沈殿

ヒト・ペプシノ ーに組みする画分を集め、 プロプロクタ ー ゼBの部分精込み、 大腸菌BL2 l (DE3 )に導入した。 発現に用製試料とした。 また、 培養上清に塩酸を加えていたプラスミドが各プロテア ー ゼ前駆体を正しくp H2 . 2 とし、 3 7℃で10 分処理した後、遠じヽして

モ

コ

ー

ー

タ

ー

を持つ発現ベクター4)

p AR211 3

ド していることを、 DNAシ ー クエンシング

により確認した。 クローン化した形質導入株を

沈殿物を除き、60%飽和硫安で沈殿させた画分をプロクタ ー ゼBの部分精製試料とした。

M9ZB培地で培養し、 イソプロピルチオガラクトピ
ラノシドを加えることにより発現を誘導した。 培

2·4

部位特異的変異

変異をデザインした合成オリゴDNAを用いて、養後、 集菌した菌体をリゾチ ー ム処理、 超音波破ゼ

Kunke lの方法 8) によりプロクターゼBcDNAに変Bにおける実験手順を記す 。 溶菌 後遠心して封異を導入した。 発現に使ったプ ラスミドは変異が入体を沈殿させ、 8 M尿素、lOOrnM 2

正しく導入され ていることをDNAシ ー クエンシ

砕処理により溶菌した。 以下にプロプロクタ
ー

ー

メルカプ

トエ タ ノ ー ルを含むトリ ス ー 塩酸バッファ ー(pH8)で変性 プロプロクタ

ーングにより確認した。

ゼBを抽出した。 透析

3

して変性剤と還元剤を取り除くことによりリフォー果ルディングを行った。 遠心して上清をとり、

DE52 カラムに吸着させた。

3·L 大腸菌による発現
ヒト・ ペプシノ ー ゲンA 、 ヒト・カテプシンE、

0-0. 5M NaCl の直線濃度勾配によりプロプロクタ
ー

結

ゼBを溶出し、 潜在活性をもつフラクションを及びA.n屯er var. macrosporus由来プロクタ ー ゼBの集めた。

cDNAのプロ体部分をコ ー ドする領域をそれぞれT7

次にPhar-macia LKBのSuperose6 HRカラムを用い

プロモ ー タ ー を持つ発現ベクタ ー に組み込み、 大てゲル濾過を行い、 さらに20mMトリエタノ ー ルア

腸菌BL2l(DE3)による発現を行った。 その結果、

ミン緩衝液(pH7. 3)に対し透析した後MonoQカラ

プロクタ ー ゼBにおいて、 完全長のプロ体 蛋白

ムに吸着させ、0 -lM NaCl濃度勾配により溶出質が大量に(1リットル培養液中200mg以上）発現した。 潜在活性を持つフラクションを集め、lOrnMした。 ただし、 発現したプロプロクタ ー ゼBの-52 -大部分は、 不溶性の封入体を形成しており、 活性発現し たプロプロクタ ー ゼBは、 ヘモグロビン

を持たなかった。 そこで、 大腸菌を溶 菌後、 遠心を用いたアッセイにより、 1リットル培養液あ

分 離 に よ り封入体を分離し、 8M 尿素と100m

たり約 50mgのプロクタ ー ゼ B活性に相当すると

M2 ー メルカプトエタ ノ ー ルにより可溶化する画見積もられた。(Fig. 1)

分を集め、 透析して尿素と2 ー メルカプトエタノ ー
3·3 組み換え発現により得たプロクタ ー ゼBとルを取り除くことによりリフォ ー ルディングを行

天然プロクタ ー ゼBとの比較った。 その結果、 酸性条件Fにおいて変性ヘモグ
ロビンを基質に用いたアッセイにより酸性プロテ

大腸菌で発現して精製したプロプロクタ

ーゼB、

ア ー ゼの活性が認められた。 このプロプロクタ ー

B. brevis から得られたプロプロクタ ー ゼ B 、 いずれ

ゼ B は、 DE52 、 Superose HR 、 MonoQによるカラも酸性条件下で、 SDS-PAGE上で天然のプロクタ

ムクロマトクラフィ ー により精製され、 SDS-PAGE

ゼBと等しい移動度を示す活性型成熟体に変換し、上で単 一 のバンドになった。 この完全精製物の収他のプロテア ー ゼ活性を必要とせすに、 自己触媒

量は1リットルの培養液から1 mgであった。 一方、的にプロセッシングすることが明らかになった。

ヒト ・ ベプシノ ー ゲン A は完全長の 蛋白質を発得られる成熟 型プロクタ ー ゼBは天然のも のと現させることが出来なかった。

等しい比活性や性質(pH依存性等、Fig. 2)を持ち、3·2

B. brevis による分泌発現系の構築

ー100

B. brevis は菌体外に大量の蛋白質を分泌 するこ80

要蛋白質のシグナルベプチドと種々アスパラギン

20

現を行った。 その結果、 ベプシノ ー ゲンA の発40酸プロテア ー ゼのプロ体との融合蛋白質の分泌発

60

[l!
A!
P U 0A!I
B10l!

とが知られている。 そこで、 B. brevis の 菌体外主―ー―

現量はた いへん少な く 、 またプロカテプシンE

3の発現は全く検出できなか ったが 、プロプロクpH

タ ー ゼBについては潜在活性の発現が見られた。

--0- Proclasc B●
Recombinant proproctuse B

゜―- ― - ―
0
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O
8
7
7 70

Hd

Fig.2プロクタ ー ゼBと組み換えプロプロクタ ー ゼBの活性のpH依存性
正しい高次構造を持ったプロクタ ー ゼBが得ら

600

゜
。

500

200
100

-·

2

10

セッシング部位は異なっており、 組み換え体のN 端はいずれの発現系を用いた場合も 天然のものより2残基長かった。

Activity (U/1)
OD660

3

Culture day

4

゜。

—

—--0-

すなわちプロ体から成熟体を 精製するときのプロ
0990 0(1/n)Al!
＞l
p<

4

300

れたと考えられた。 しかしながら、 N端の配列、

このことはA. n 屯er var. macrosporusにはプロプ

5ー

ロクタ ー ゼBが自己触媒的に活性化した後に さらにN端の2残基を切断するプロテア ー ゼが存在することを意味する。 ただし、 このことは組み換え発現系を用いてプロクタ ー ゼBの機能改変を行Fig. 1 8. brevis によるブロプロクタ ー ゼB分泌発現の経時変化

うことにおいては全く影響がない。

-26-

アスパラギン俄プロテア ー ゼ類の蛍白工学的改変によ←るケラチナ ー ゼの開発

20

10
ANB
PGA
PCE

40

30

APAPTRKGFTINQIARPANKTRTINLPGMYARSLAKFGGTVPQSVKEAA
' '
= ==
=
=
IMYKVPLIRKKSLRRTLSERGLLKDFLKKHNLNPARKYF
PQWEAPTL..,... ·: ,,,,
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,. '
=
=
=
QGSLHRVPLRRHPSLKKKLRARSQLSEFWKSHNLDMIQFTES====.....,....
Fig.3ブロ配列の比較
ANS: A. niger var. macrosporus proctase B PGA: Human pepsinogen A
PCE: Human procathepsin E 二重下線：塩碁性アミノ酸残茎

3·44プロ配列の改変による発現量の向上

考察

ベプシノ ー ゲンAとプロカテプシンEはプロ配列のN端近傍に塩基性アミノ酸残基が多数存在しプロクタ ー ゼBの発現系を大腸菌及びB. brevisをているのに対し、 プロクタ ー ゼBでは塩基性残用いて構築した。 特に B. brevisによる分泌発現系

基が比較的少ない (Fig, 3) ことから、 N端近傍のの方がいくつかの点で大腸菌による系に比べてす

塩基性残基の存在が分泌発現において不利な要因

ぐれていると考えられる。 すなわち、第 一に、となる可能性が考えられた。 そこで、 プロクタ

B. brevisによる発現系ではリフォ ー ルディングのゼBプロ配列の6位のアルギニン残基と7位の処理をすることなく潜在活性型のプロ体を大量にー

リジン残基をそれそれグルタミンに変換した変異発現できる。 第二に、 B. brevis の系では菌体外に体(R6Q及びK7Q変異体）を部位特異的変異法によプロプロクタ ー ゼBを分泌するのでB. brevis由来のり作製した。 その結果、いずれの変異体において蛋白質の混入が少ない。 第三に、活性型プロクタ

も発現最が上昇し、R6Q変異体ではlリットル培養

ー

ゼBの収星がB. brevisの系の方が多い。 発現量は

ゼBのプロ配列N端近傍の塩基性残基を減らす ことに発現が見られた(Table 1)。 これらのプロ体は野より増加したが、このことは他のアスパラギン酸

生型プロ体と同様に酸性条件下で自己触媒的に速プロテア ー ゼにも応用できるものと考えられる。

液あたり120mgの潜在活性型プロプロクタ

やかに活性型成熟体に変換した。

一ー方、16、22、

すなわち、 プロプロクタ ー ゼBよりもヒト ・ ペ

32位のアルギニン、20、36、46位のリジンは、いプシノ ー ゲンAやヒト ・ カテプシンEの方がプロ配ずれをクルタミンあるいはアスパラギンに変換し

列N端近傍が塩基性残基に富んでおり、このことても発現量の増大が見られなかった。

が B. brevis による分泌発現に不利である可能性が考えられる。 今後検討の余地がある課題である。
第四に、 B. brevis が活性型アスパラギン酸プロテ

Tab I e I 8. brevisによるブロプロクターゼBの発現部位特異的変異による発現岳の増大

ア ー ゼを菌体外に生成することは、種々の変異体の活性の測定を簡便にし、 目的とする基質（ケラチン）を含んだ寒天培地を用いることにより、一

Proproctase B

MediumAmounts of ANB

度に大巌の変異体のスクリ ー ニングを行うことが可能であると考えられる。 また、栄養源をケラチ

Wild type
R6Q
K7Q
R6Q

『

5 PY
5'PY
5'PY
5'PY + 0.3% glycine

ンに制限することによってケラチナ ー ゼ活性発現

50mg
90mg
80mg
120 mg菌の選択も可能かもしれない。 また、プロクタ ー
ゼBのコラ ー ゲ ン 分解活性を増強する研究も同様に行うことが可能である。

-27-

5

総

括

A. niger var. macrosporus由来プロクタ ー ゼBを大腸菌及びB. brevis を用いて発現し、活性型酵素を得た。 特にB.brevis の系ではプロ配列を改変することにより、1リットルの培養により120mgの活性型酵素を分泌発現させることに成功した。 このことは他のアスパラギン酸プロテア ー ゼ類を発現させる上でも重要な指針を提供すると思われる。
また、この活性型酵素の菌体外高発現系を利用することにより、改変酵素の作製と検索を容易に行うことが可能となった。
引用文献
1) Koaze Y., Goi H., Ezawa K., Yamada Y.,2) Horiuchi S., Yamasaki M., and Yamada Y.
Sci.Pap. Coll. Gen. Educ. Univ. T okyo (Biol. Part)19 127-139 (1969)
3) Chomarat N., Robert L., Seris J. L.,andKern P. Enzyme Microb. Technol., 16 756-·rbU(1994)
4) Studier F. W., Rosenberg A. M., Dunn J. J.,
and Dubendorff J. W. Methods in Enzymol.,

185 60-89 (1990)
5) Anson, M. L. ]. Gen. Physiol. 22 77-89 0939)
6) Sagiya Y., Yamagata H., and Udaka S. Appl.
Microbiol. Biotechnol., in press. (1994)
7) Udaka S., and Yamagata H. Methods Enzymol .,217 23-33 0993)
8) Kunkel T. A. Proc.Natl. Acad.Sci. USA 82 488492 0985)

and Hara T. Agガc.Biol. Chem., 28 216-223(1964)-28-

細胞膜の脂質の物性と機能の基礎的な研究
ーリン脂質物性のコスメトロジ ー ヘの応用 ―東北大学大学院理学研究科

大

木

和

夫

Cosmetology includes physiological approach to skincells of human body. And all cells areconstructed with biomembranes which are assemblies of lipids, proteins and various minor
constituents held together by non covalent interactions. Membrane lipids are amphipathic
molecules, and they spontaneously form bilayers in aqueous environments. Hydration of lipids
plays an important role in this process. So the hydration was investigated in various phospho­
lipid species by an optical microscope with image processing devices. Interaction of membraneproteins with lipids is hydrophobic with the lipid hydrocarbon chains in contact with hydro・
phobic regions on the protein surface or penetrating into the protein interior and electrostaticinteraction between charged groups on the protein surface and the lipid head groups. Althougha lot of studies are focused on the structure of biomembranes, the organization of lipid moleculesin biomembranes has not been fully determined. In order to resolve more extensively the inter­action between lipids and proteins, it was investigated by differential scanning calorimetry(DSC) in model membrane systems.
The effect of electrostatic interaction between basic polypeptides (polylysine and poly ・arginine) and acidic phospholipids (phosphatidylserine and phosphatidic acid) was examined by
DSC. Polylysine raised the phase transition temperature of dipalmitoylphosphatidylserine (DPPS)
by 5 degrees. On the other hand, polyarginine lowered the phase transition temperature of DPPS
by 6 degrees. The same effects was observed in dimyristoyl phosphatidic acid (DMPA) anddipalmitoyl phosphatidic acid (DPPA)
Melittin is a major component of bee venom and consists of 26 amino acids starting withpredominantly hydrophobic amino acids in the N-terminal part and finishing with charged andhydrophilic residues in the C-terminal part. DSC studies revealed that melittin was able to induce
membrane fusion between neutral phospholipids and acidic phospholipids.

1

緒

言

集合して膜構造を形成する脂質分子にその基本構
造は依存している。 生体分子の中で、蛋白質、核は生物・医学• 生理学の観点か

酸、糖質はユニットとなる分子が重合した生体高らは多細胞生物の表皮細胞上での作用を扱ってお分子であるのに対して、脂質は低分子（リン脂質り、背景として生命の基本単位である細胞についで分子量が1000程度）であるが、その分子構造にての理解が必要となる。 実際に、構造から機能ま由来する両親媒性から水中で分子集合体を形成しで生物の基本要素のすべては細胞に存在しており、て膜構造となる特徴をもっている。 これは多様な

コスメトロジー

さらに、その環境として水の重要性が指摘できる。

構造と物性を生じさせ、蛋白質との相互作用を通細胞を構築している膜構造は「生体膜」と呼ばれ、して、細胞膜の機能を制御するだけでなく、生物

璽要な生物機能が行われる場である。 生体膜の主の環境適応にも重要な役割を果たしている 1) 。

要な成分は蛋白質と脂質であり、水中で自発的にまた、生物は進化の過程で、生命の誕生した水中から陸上に移行したのであり、そのとき以来、表Basic Study on Physical Property and Function of
Cellular Membrane Lipids- Application of Physical Property of
Phospholipids to Cosmetology
Kazuo Ohki

皮細胞により、体細胞を本来の水環境と同様な環境に維持してきた。 つ まり、脂質は気液界面での物性および水和現象を介して、 コスメトロジ ー に深く関連している。 そこで、細胞膜の脂質についTohoku Universityて、その物性を詳細に研究し、 コスメトロジ ー のGraduate School of Science

発展と新たな展開を可能とする基礎的な知見を得-29-

多様な分子種が存在するが、共通な構造として親ることを目的とした研究を実施した。
いて、脂質2分子膜の 相転移、相分離、流動性など

水性の極性頭部と疎水性の脂肪側鎖をもっている·(Fig. 1)。

の諸物性を測定するとともに、その水和過程につこの性質により、水中では熱力学的な平衡状態

いても検索し、各種のイオン、薬物、ペプチドなとして自発的に分子集合体であるリン脂質2分子どが物性に及ぼす影響を調べ、コスメトロジ ー

膜を形成する。これが生体膜の基本構造となる脂質二重層膜であり、領域を区画するだけでなく、相具体的には、可能な限り多くの脂質分子種につに有用な物性を明らかにすることを試みた。

転移•相分離・流動性•選択透過性など種々の物性を示す。 これにDNAの遺伝情報に従って合成

2リン脂質2分子膜の構造と相転移された蛋白質が結合したものが生体膜であり、細胞を構築するとともに重要な生物機能の場でもあリン脂質は主要な膜脂質であり、生体膜の形成る。

に重要な役割を担っている両親媒性の分子である。

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Fig. 1 Chemical structures of phospholipids
DPPS: dipalmi toylphosphatidylserine. DMPA: dimyristoyl phosphatidic
acid. DPPC: dipalmitoylphosphatidylcholine.
DPPS and DMPA are acidic phospholipids, and DPPC is a neutral phos­
pholipid.
Tm indicates main phase transition temperature of each phospholipid.

-30-

細胞膜の脂質の物性と機能の基伐的な研究—

リン脂質物性のコスメトロジ ー ヘの応用ー

種々の物理的または 化学的な因子は生体膜の構

phase transition)を示す。 リン脂質分子の脂肪造と物性を介して生体膜の機能に反映している。

酸部分は炭化水素鎖であり、 相転移の主転移はこ

脂 質 膜 の 熱物性を 示差走査熱量計(DSC=のall-trans構造にc-c結合間の異性化回転運動がDifferential Scanning Calorimeter )で測定

始まり、 gauche結合が現われる chain-melting

すると、 構成する分子種およびその組成、 また 、である。 さらに、 リン脂質分子の極性頭部に依存

膜内での分布状態に依存した相転移が観察される。

して 、主転移の他にもいくつかの熱誘起型相転移

これは膜に作用する物質の影響を受けるので 、脂を示す。 代表的な合成リン脂質であるジパルミト

質膜の相転移挙動を解明することは 、生体膜の基

イルホスファジルコリン (DPPC) では低温側から 、,結晶相(Le) 、ゲル相(L /3,)、リップル相 (P /3 )、本的な物性の知見を得ることになる。

流動相(La)の相構造を取る(Fig. 2)。

脂質二重層膜は液晶のスメクティック相に類似の構造であり、熱誘起型の相転移(thermotropic

1.5

4.1

8.7

kcal/mo!

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Fig. 2 Thermogram and unit structure of dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC)
membrane
Top: thermogram measured by DSC.
Middle: arrangement of phosphol ipid molecules (side view)
Bottom: Un it structures obtained by X-ray d iffraction (top view)
Le, L/3',P/3', La indicate crystal pr1ase, gel phase, ripple phaseand fluid phase, respectively.

-31-ここで、ゲル相と流動相の間の主転移が脂肪側

UP-1800、 Apple マッキントッシュ Quadra840AV 、鎖の融解に相当しており、この相転移に伴う物性

カラ ー モニタ ー ICMLS-2617FN、 Appleマッキントッの変化がもっとも顕著である。

シュ Quadra610、光磁気ディスク コバルCS-Ml20

リン脂質二重層膜の相転移温度はその分子種でV、カラ ー プリンタ ー YHPデスクライタ ー 550C、レ決定し、極性基部分が共通であれば、その脂肪側ー

ザ ー プリンタ ー 沖 MICROLINE800PSIILT 、 カラ

鎖の種類によっている。 脂肪側鎖に不飽和結合とー

イメ ー ジスキャナエプソン GT-6500、8ミリビ

して、二重結合を導入すると脂質分子の充填構造

デオカメラ ソニ ー CCD-TR3} で解析した。 温度制を崩すために、分子間のファンデルワ ー ルス引力

御は顕微鏡用ウォ ー ムプレ ー トを用い、混度測定を低下させ、相転移温度が低下する。 二重結合ははマルチ温度計アドバンテストTR2114で行った。

折れ曲がるcis型の方が直線のtrans型よりも大き窪みをもつスライドガラスに脂質の粉末を取る
か、脂質の薄膜を形成し、水または緩衝液の数滴

く転移温度を降下させる。

を滴下し、温度変化による脂質の変化の様子を顕

3リン脂質の水和による脂質膜の形成
3. 1目

微鏡で観察し、ビデオに録画して解析した。
3. 3

的

結

果

DPPCの粉末はその主転移温度以上になると水和

リン脂質はその極性頭部が水和することで水中に分散し、その両親媒性により脂質集合体として過程が進行し、ミエリン形成が観察されたの膜構造を形成する。 水和はホスファチジルコリ(Fig. 3)。

ンとホスファチジルエタノー

また、脂質の薄膜を形成して水和させたときは、ルアミンでは差があり、後者は水和し難く、主転移と協同的に進行す

以下のような結果を得た。 DPPCはカルシウムイオることが知られている。 そこで、リン脂質の粉末

ンの存在の影響は受けずに、主転移温度以上でミに水を添加し、種々の条件下での水和にともなうエリン形成が生じ多重層ヴェシクルが生じた。

膜形成（ミエリン形成）と相転移の関係を光学顕

DPPE 、DMPEではミエリン形成の直後に集合して凝微鏡下に観察し、これより分子レベルの条件とマ集塊となった。 DPPA、DPPGなどの酸性リン脂質でクロな分子集合体構造との相関を検索する。

はコントラストが低く積層数の少ない多重層ヴェ
シクルが形成された。

3. 2

材料と方法

4

［材料］ジパルミトイルホスファチジルコリン(DPPC) 、ジミリストイルホスファチジルエタノ

酸性リン脂質と塩基性ペプチドの相互作用

ー

ルアミン (DMPE) 、ジパルミトイルホスファチジ
ルエタノ ー ルアミン (DPPE) 、ジパルミトイルホ

生体膜では、内在性膜蛋白質は疎水性相互作用

スファチジルセリン (DPPS) 、ジパルミトイルホ

で、表在性膜蛋白質は静電相互作用で脂質二重層

ル (DPPG) 、ジパルミト

膜に結合している。 そこで、この相互作用の基本

イルホスファチジン酸 (DPPA) はシグマ社から購的な様式を脂質の相転移を利用して塩基性ペプチ入した。

ドとホスファチジルセリンの系で調べた。 ポリリ

スファチジルグリセロ

ー［方法］ニコンBiophotoノマルスキ

ー

徹分干渉顕

ジンはジパルミトイルホスファチジルセリン

微鏡に浜松ホトニクスCCDカメラセット C3077CCD(DPPS) の相転移温度を上昇させたのに対して、カメラを接続し、画像処理システム｛ビデオテー

ボリアルギニンは低下させた。 これらの相転移挙

プレコ ー ダ ー SONY SLV-SR7、 RGB カラ ー モニタ

動の変化はそれぞれのペプチドに特徴的であり、SONY PVM-1444Q、カラ ビデオプリンタ
ー

ー

ー

SONY

その解析により相互作用の様式を推測した。

-32-

細胞膜の脂質の物性と機能の基伐的な研究 —リン脂質物性のコスメトロジーヘの応用—

Fig. 3 Hydration of dipalmitoylphosphatidyl­
cho Iine (DPPC)The hydration process is accompanied withphase transition.
A: Below the phase transition temperature.
C: Avove the main transition temperature,
hydration was proceeding.

4. 1

目

的

B:Above the main transition temperature,
hydration process just started.
D:Above the main transition temperature,
the hydration was completed. The hydration
process was observed by an optical micro­
scope, and the process was recorded on avideo tape.

蛋白質に含まれ正電荷をもつ塩基性アミノ酸のリ

生体膜には正味に中性なリン脂質に加えて負電ジンとアルギニンのポリマ ー を用いて、 ホスファ

荷が残る酸性リン脂質が存在し、膜蛋白質との静チジルセリンとの静電的な相互作用について、電的な相互作用を介して、 その機能に重要な役割

DPPSの相転移挙動の変化を示差走査熱量計(DSC)を担っていると考えられる。 そこで、 このようなで測定することで検索した。

-33-

4.2

材料と方法

下では52. 6℃と53. 9℃に明瞭に分離した相転移ピ［材料] DPPS (DL-dipalmito ylpho s phatid yl­ークをもつサ ー モグラムを示した。 DPPSリポソ ーL-srine)、ポリリジン(poly-L-lysine ; 平均重合

ムにポリリジンを添加すると、54℃付近に転移ピ

度=120)、ポリアルギニン (poly-L-ar ginine ; 平ー

均重合度=215)はいずれ もSigma社より購入した。

が0. 15、0. 25、0. 5、0. 75と増加すると、 このピ

これらの化学構造をFig. 4に示す。

ー

［リポソ

ー

クが現われ、ポリリジンのDPPSに対する電荷比クが成長し、本来のピ ー クは減少した(Fig. 5)。

一ムの調製］脂質のクロロホルム溶液を一ー

ガラス容器に取り、窒素 気流下、さらに減圧下にI1omJ/K2

溶媒を留去し、内壁に脂質の被膜を作る 。 これに緩衝液 (HEP ES 50mM ; pH7. 4 ) を加えて、浴槽式超音波発振機で80℃、2分間の処理によりリポ
ソ ー ムを調製した。

7 .43< ,cal/.,1，.

0. 2 5ー。

ー

断熱型高感度微小示差走査熱量計DASM-4により、昇温速度0. 5K/minで測定し、 サ ー モグラムを得た。 試料液内の発泡を防ぐためには窒素で2気圧に加圧した。
結

15�

゜

30

戸

20

[DSC測定] 0. 5mlの試料を用い、 プリバロフ

8.!564 kt1l/.. 1

ー
8
ー
｀
c
k

Poly(L-arginine)and poly (L-arginine) Average numbersof polymerization are 120 and 215 forpoly (L-lysine) and poly(L-arginine),
respectively.

二

Lys/DPPSn

FI g. 4 Chemical structure of poly (L-lysine)

4. 3

9.128 kC1l/10l

i

/

ー

ー

n

5

。

�

ー

ー

ー

H
O
＇ c""
,
H ’H \N/ H\c!H\c C H
CIN
C
/
’
\
NIH
H
z
ヽ
z
'
'
oll
C ’ H ,H \H
/ HCHzC\／
HIC C\ / c
z
＼
，
H Z
H

。

/
2
2
O
H , CII
.H
2
3
H ヽ
CH
H
\C
／C
ICIH
z\／ c
／
zH
＼
2’
2
H
H
C
II
/ Ha
CH
\
C\ ／ zH CIC f Haヽ
HIN／
Poly(L-lysine)

0. 7 540 50 60 70
Temperature ［？］Fig. 5 Effect of poly(L-lysine) on thermogramso f dipa l mitoyl pho s phatidyl serine
DPPS I i p o s om e s w e r e p rep a r ed bydispersing 2µ,mol phosphol ipid in HEPES
buffer (50mM HEPES, 5"mM EDTA; pH7. 3)
co ntain ing desi redamou nt of p oly
゜(L-lysine) at 80 C.
The numbers indicate molar ratio of
L-lysine residue to DPPS.
Thermograms were obtained after thei ncu batio n s at a heating rate o f
0.5K/min.
これはDPPSに ボリリジンと結合した領域と結合

果

酸性リン脂質のDPPSのリポソ ー ムはEDTAの存在していない領域があり後者の領域が拡大していく-3 4 -

□ーー

細胞膜の脂質の物性と機能の基礎的な研究ーリン脂質物性のコスメトロジ ー ヘの応用 —ーと理解できる。 電荷比が1になるとそのピ ー クは2

57℃に移行し、電荷比2ではさらに58℃へと上昇した。 一方、ポリアルギニンの添加ではまず電荷/比0. 15でわずかな転移の上昇があり、0. 60まで降下して52℃付近のピ ークとなった。 さらに、ポリからは、 さらに転移温度が降下し4 8℃となった(Fig. 6)。
考察

DPPSは酸性リン脂質であり生理的な条件下で負電荷をもつ。 そのためカチオンの影響を受け易く、緩衝液に含まれる徹量の2価金属イオンのために,を除去すると先鋭な転移ピ ー クとなるだけでなく、

6c:,

幅の広い相転移を示す。EDTAを加えて金属イオン
近接した2本の相転移ピ ー クとなる。これらはpH

0. 5

頭部の異なる解離状態による分裂と推測される。
酸性リン脂質であるホスファチジン酸およびホ

0. 25

スファチジルグリセロ ー ルに及ぽすポリリジンの'·"''""●l'·"'"●1/•liに依存して転移温度を変えたことからDPPSの極性'·'"'"!/•!

今予玉ニエ

4.4

5
5
9 8 87 6クが成長して52℃のピ ー クと置き換わり、0. 90

'
, c:,
＇ c:,
, c:,
' c:,
c:,

ー

1

アルキニンを増し、0. 65を越えると49℃付近のピ"·" ..,11●l

影響と比較して、今回のDPPSに対する効果を考察

0. 15

する。 ポリリジンをジパルミトイルホスファチジン酸(DPPA)にアミノ酸残基と脂質の電荷比lで'·"'●�11●lArg/DPPS添加したときは、その相転移温度を20度上昇させていた。DPPSではその上昇はおよそ5度に過ぎず、'·'""'"·'

これはホスファチジルクリセロ ー ル(DPPG)に添

20 30 40 50 60 70
Temperature [℃］

加した場合の相転移温度の上昇に等しい 。 ポリリ
ジンを添加すると高温側に転移ピ ー クが現われ、添加量に比例して本来のピ ー クが減少し、高温側

Fig. 6 Ef fect of poly(L-arginine) on t hermo­
grams of dipalmi toyl phosphatidylserine(DPPS)DPPS I ipos omes w ere prepared byd i spers in g 2µ.mol phospholipid in
H EPES buf f er (50mM HEPES, 5mM EDTA;
pH7.3) c ontaini n g de sired amounts of゜poly (L-arginine) at 80 C.
The n umbers indicate molar ra tio of L­
arginine residue to DPPS. Thermograms
were o btained a fter the incub ations at
a heating rate of 0.5K/min.

のピ ー クが成長するのはDPPAの場合と 一 致している。 X線回折による研究ではDPPAの多重層膜の膜間にポリリジンがf3構造を取って入り込んだ構造が得られており 2) 、DPPSではaヘリックスを取っているために、脂質とペプチドの相互作用が弱いと推測できる(Fig. 7)。
また、 ポリリジンの脂質膜上の構造はDPPGでは
aヘリックスとf3シ ー トの共存であると報告されており、 aヘリックスは二重層膜内の脂質分子のされる。

配列および分子運動に対する束縛が小さいと想像-35-

ポリアルギニンの酸性リン脂質膜上の構造は不

A
B

C
D
E
F

ァチジン酸を生成することから、細胞内に塩基性

DPPC+DPPSー
二アミノ酸と疎水性領域をもつ蛋白質を介した膜融ーへ合が誘起される可能性を検討したものである。

八

30

40

Temperature ('C)

5. 1

目

的

膜融合は細胞の共通かつ基本的な機構として、

2s0c, 2h

細胞分裂、分泌、エンドサイトシス、 ウィルス感
染なと生体膜の再配列が関与した種々の生物機能に存在している。 また、細胞がレセプタ ー を介し50て外部の刺激を受容すると、脂質代謝が促進され、ジアシルグリセロ ー ルキナ ー ゼおよびホスホリパ
ー

ゼDの活性化によりホスファチジン酸が生成す

Fig. 7 Membrane fus I on detee ted by change In
DSC thermograms
DPPC Ii posames were prepared by (50mM
HEPES, 5mM EDTA; pH7.3) containing(A)OmM, (B)O.02mM, (C)O. 04mM, (D)O. 06mM
and (E)0.06mM melittin.
In the absence of melittin, DPPS lipo­
sames were prepared in the same method.
DPPC and DPPS Iiposames were mixed andincubated for 2h at (a)-(d) 55℃ or (e)2 5℃ • (F) Liposomes of equi molar
mixture of DPPC and DPPS were preparedin 0.06mM melittin at 80℃ .
Thermograms were obtained after thei n c u b ations at a h e a t i n g rate of
0.5K/min.

要な研究課題となっている。 ホスファチジン酸の明であるが、相転移温度を低下させることから、を人工膜系において報告している 4) が、細胞内で膜内脂質分子のパッキングを緩和させるような構の生理的な条件下での活性は確認できていない。

造と相互作用を考える必要がある。

酸性リン脂質を含む脂質膜がCa 2十で融合することる。 一方、細胞外からホスファチジン酸を添加す
ると、絨維芽細胞の増殖を誘導することが示されており 3) 、さらに、好中球、血小板、肝細胞、内皮細胞など多くの細胞でもアゴニスト刺激によりホスホリパーゼDが活性化されることが明らかになっている。 しかし、刺激に応答した細胞で、脂質代謝の促進により生成するホスファチジン酸の役割については、まだ未知であり、 その解明が重役割についてはCa2 十 イオノフォア活性を示すこと

これらの結果は、脂質と蛋白質の相互作用にアは、ホスファチジン酸やホスファチジルセリンな

ミノ酸構成による特異性が存在することを示唆すどについてリポ ‘ノ ー ム系の実験ではよく研究されるとともに、生体膜における蛋白質の機能発現のているが、実際に細胞内でこの機構が作用してい機構に静電的な相互作用を介した脂質の関与があることの証明はまだ充分ではない。 これに対して、ることを示している。

蛋白質による膜融合の機構は解明が進展している。
そこで、ホスファチジン酸の役割として、細胞内

5

蜂毒メリチンによる酸性リン脂質膜とに塩基性アミノ酸残基と疎水性領域をもつ蛋白質

中性リン脂質膜の膜融合

またはペプチドが存在したときに膜融合を誘起するとの仮定のもとに、中性リン脂質のホスファチ

塩基性アミノ酸残基と疎水性領域をもつペプチ

ジルコリン(DPPC)と酸性リン脂質のホスファチジ

ドである蜂毒メリチンは、酸性リン脂質と中性リ

ルセリン(DPPS)およびホスファチジン酸(DMPA)でン脂質の間の膜融合を惹起することを示差走査熱

リポソ ー ムを調製し、蜂毒メリチンを塩基性アミ量計(DSC ) を用いた実験で示した。 これは、ノ酸と疎水性部位をもつペプチドとして用い、断細胞の分泌頼粒の膜にホスファチジルセリンが含熱型高感度示差走査熱量計(DSC)で測定した相まれることや、細胞が剌激を受容したときホスフ転移挙動の変化により膜融合を検索した。
-36-

細胞膜の脂質の物性と機能の基硲的な研究 ーリン脂質物性のコスメトロジ ー ヘの応用 —

5.2

材料と方法

酸残基が酸性リン脂質の負電荷と静電的な相互作

ジパルミトイルホスファチジルセリン (DPPS) 、用し、 両リポソ ー ムの膜融合を誘導するものと予

ジミリストイル ホスファチジン酸 (DMPA) 、 メリ

測して実験を実施した。 この予測を支持する報告

チン（純度85%) はSigma社より、 ジパルミトイル

も あ り 、 酸 性 リ ン 脂 質 のカ ル ジ オリビン を

ホスファチジルコリン ( DPPC) は日油リポソ ー ム

十‘ ームは、 Ca2 で30mol %含むリン脂質のリポノ‘より購入した。 リポノー ムは、 脂質で被膜した試

融合させるにはlOmM以上の濃度が必要であるのに

験管に脂質濃度か2mMになるように緩衝液 (HEPES

対して、 メリチンではµMのオ ー ダ ー でよいこ

50mM, pH7. 4 ; EDTA 5mM) を加え、 浴槽型発振器にとが示されているより 70 ℃で 2 分間、 超音波処理して調製した。

5)。

DPPCは42 ℃、 DPPSは53℃付近で脂肪酸側鎖の融EDTAはメリチンに含まれるホスホリパ ー ゼ活性を解による相転移、 つまり、 主転移を示す。
また、 DPPCと DMPAを混合した状態で水に分散さ抑制するために加えてある。

‘ ー
せ る と 、 そ のリ ポ ノ
ムは D P P C と D P P S の示差走資熱量測定は、 プリバロフ断熱型高感度
微小熱量計 ( D A S M-4) を用い て 、miscibilty に依存した脂質 2 成分系 (binary

昇温速度

0. 5K/min で行った。 試料液の発泡を抑えるた

mixture) の相図（相転移と相分離）を示すこ

めに2気圧に加圧した。

とになる。

DPPCと DPPSの組合せはmiscibilityが高いので、
5. 3一つの相転移を与える。 そこで、 DPPCと DPPSの各

結果と考察

一般にリン脂質は水に分散させると自発的に膜脂質成分でリポソ ー ムを別々に調製して混合した構造を取り、 極性頭部と脂肪酸側鎖の組合せで決系では、 膜融合のないとき各成分の相転移か維持定する分子種に依存した温度で相転移を示す。

され、 膜融合が生じたとき一つの相転移となる。
したかって、示差走査熱量計 (DSC) でこれらのStructure of Melittin I系の相転移挙動を測定すれば膜融合の進行を検索

3.00 nmGly Gly Val Lys Leu Thr Leu Ala Ile Trp
ヽIヽI '\ I \ I'\ I'\ I'\ I'\ I'\·;'\Ile Ala Leu Val Thr Gly Pro Leu Ser Ile'
Hydrophobic Partできる。
それぞれ、 独立に調製した DPPCと DPPSのリポソーI

Lys-Arg-Lys
I
Arg-Gl n-G 1 nNH2
Hydrophilic
Tail

ムを混合して、 55 ℃で2時間インキュベ ー トしたとき、 42 ℃付近と52 ℃付近に相転移のピ ー クが観察される (Fig. 7A; DPPC+DPPS) 。 この相転移のプロファイルは DPPCとりPPSの単純な重ね合わせに近いものであり、 それぞれの転移は分離して観Fig. 8 Chemical structure of bee venom
me I ittin

察されている。 このことは DPPCと DP!'Sの間に膜融合が生じていないことを示している。 また、 全てのリポソ ームが膜融合したときに得られるサ ー モ

一方、蜂毒のメリチンは Fig. 8に示すように、グラムとして、 DPPCと DPPSの混合脂質から 3 モル26残基で構成されるペプチドであり、 アミノ末端％のメリチン存在下で調製したリポソ ー ムの相転から20残基でaヘリックスを形成させると疎水的移挙動を示してある (Fig. 7F; DPPC/DPPS) 。

なアミノ 酸が片側に集中している。 また、 カルボ

メリチンによる DPPC と DPPS の膜融合は、 先にキシル末端には塩基性アミノ酸のリジ ン (Lys)‘ ーDPPC のリポノ
ムにメ リチンを添加し、 これにとアルギニン (Arg) が 2 残基ずつあり、 正電

DPPSリポソ ー ムを混合してインキュベ ー トしたと荷を帯びている。 したがって、 メリチンの疎水性

き効率的に進行した。 このような系での実験結果

領域がDPPCと疎水的な相互作用を、 塩基性アミノが Fig. 7B-Eに示してある。添加したメリチンの濃-37-度に依存して膜融合により生じるDPPC/DPPSの 2

いる限り、細胞を構築する生体膜への作用を考慮

ー

成分混合系の相転移ピ クが45℃付近に現われた。

せざるをえない。 ここでは、生体膜の主要な構成

3 モル％になると、その転移ピ ークは完全な膜融成分である脂質と蛋白質に注目して、 その基本的合が生じたときのサー

モグラムであるFig. 7F

な物性についての研究を行った。 とくに、生物に致しており、DPPCとDPPS

必須な水との関係を重視し、脂質の水和についての膜融合が完了していることを示した。 一方、イの研究も実施した。 生体膜は生物機能が行われる

ンキュベ ー ションの温度をDPPCおよびDPPSがとも場であり、この機能が物性の影響で変化することにゲル相にある25℃に低下させても(Fig. 7E)、

は 一つの機能制御の機構と考えられる。 そこで、モグラムと差のない結果が得られておこの観点からリン脂質の物性の解明がコスメトロ

の相転移ピ

55℃のサ

ー

ー

クとほぼ一

ジ ー ヘの応用の端緒を開くものと期待したい。

り、この膜融合は脂質膜の相構造には依存しない
ことも示された。

文

酸性リン脂質をDMPAに置き換えた系で同様な実験を実施したが、 その結果は、DPPCとDPPSの場合

献

1. 野澤義則、 大木和夫「生体膜のバイオダイとほとんど一致していた。

ナミクス」羊土社、1993

これらの結果は、PSを含む細胞の分泌顆粒の形

2. Takahashi H., Matuoka S., Kato S.,Ohki K.,

質膜との膜融合にカルシウムイオンだけでなく蛋

and Hatta I., Biochem. Biophys. Acta., 1.06.9

白質またはペプチドが関与している可能性だけで229-234 (1991)

なく、刺激を受容した細胞内に生成するホスファ

3. Moolenaar W.H., Kruijer W., Tilly B.C. ,チジン酸がペプチドまたは蛋白質の介在のもとに、

Verlaan I., Bierman A. J. and de Laat S. 聞
Nature., 223 171-173(1986)

細胞内での膜融合現象を惹起している可能性も示

4. Ohki K., Nagaoka S., Sogami M. and Nozawa

唆している。

Y. Biochem. Biophys. Acta., 39 237-249

6

総

括

(1986)
5. Eytan G.D. and Almary T. FEBS Lett., 156 29

コスメトロジー がヒト表皮の細胞を対象として-38--32(1983)

化粧品基本索材金属酸化物の酸性大気汚染物質との相互作用
千業大学理学部

金子克美

The transition metal oxide powders such as ZnO and Ti02 which have been widely used ascosmetic materials, were prepared. Also a new preparation method of uniform Ti-doped
a-Fez03 films was developed in order to get accurate informations on the excited states upon
photoirradiation. Their surface and crystalline states were examined by X-ray diffration, X-ray
photoelectron spectroscopy, UV spectrocopy, electrical conductivity measurement, and Ar or
N2 adsorption at 77K. The adsorption of NO on ZnO and TiOz was measured at 303K and theeffect of photoirradiation on the NO adsorption was examined by a volumetric method and insitu FT-IR spectroscopy. The photoirradiation gave rise to a marked chemisorption, which
produced new IR bands due to the oxidized species of NO adsorped. A perfect deactivation of
the surface of ZnO and TiOz should be preferable to avoid the formation of acidic species ofatmospheric pollutants of NO under the photoirradiation condition. The doping of Ti in
a-Fez03 changed the UV absorption according to the valence controll was clearly shown.

緒1

sos 2 -so 42 -、NOぷあるいはN02 ーとなる。 これらは言

水分子と容易に反応して強酸になる。 このような
a-FeOOH、a-Fe2 恥、ZnOおよびTi02 なとの遷移酸化物上での大気汚染物質からの強酸生成は化粧金属酸化物はファウンデ ー ションあるいはUVケア

品の機能に深く関わってこよう。 本研究では、上として広く化粧品に用いられている。 同時に、こ述のような観点から、化粧品素材酸化物のNOに対

れらの酸化物は著しい表面活性を示し、光触媒作する化学吸着性と光照射効果を検討し、化粧品の用も知られている。

一層の改善に資するものとする。

化粧品として利用されるときには、不活性膜に特にNOx による汚 染の進行により、 都市部のよリコ ー トされているが、分子次元での完全被覆

大気汚染環境は十分快適とは言えなくなりつつあ

は困難である。 従って、これらの酸化物の表面活る。 N Ox汚染の大きな問題は、 自動事道路や駐性が化粧品の品質に深い関連を持つであろう。

車場に限らす、家庭の中でも考慮しなければなら

一方、S02 やNOxによる大気汚染は一向に改善さない点である。 住宅事情が変わって、 閉鎖的住環

れないので、皮府環境の重要因子として考慮すべ境になり、 台所のNOx濃度がし ば し ば基準値をきである。 特に、 自動車排ガスによるNO汚染が深越えている。 強い日光の下では、いつそう著しい

申請者の研 究 に よ れ ば 4 - 9) 、

大気汚染の影響を受けるであろう。 従って、本研

刻で ある

1 -

3)

。

a-FeOOHとa -Fe2 0sはS02 および NOに対して著し究では化粧品と大気汚染物質との相互作用を検討

い化学吸着性を持ち、酸化物表面酸素と反応して、する。 先に述べたように、ZnOあるいはTi0 2 等の酸化物上でのNOの化学吸着状態だけでなく、化粧品素材酸化物の光 学特性が重要であるので、
a-Fe2 0澤については膜状試料合成法を開発してInteraction between cosmetic metal oxides
and acidic pollutants

Tiド ー プによる原子価制御からのUV吸収の変化を

Katsumi Kaneko

調べた。 更に大気中ではミクロ孔とメソ孔が水蒸
気を多巌に吸着して、大気汚染酸性物質と作用しChiba University, Faculty of Sc1encs,
Department of Chemistryて強酸を生ずる可能性もあるので、細孔性にも留
意した。

-39-

2

実

電気伝導性については、赤外除去用にガラスフィ

験

ルタ ー （東芝IRA-255)を用いてXeランプ(450w)
によって、光照射し、その時の電気伝導度を測定

2. 1 試 料した。

ZnO微結晶はZn(C00)2 •2H心を450℃、10h、空気中の条件で分解して冷却後、改めて600℃、4. 5hr、

2. 5

77KでのArもしくは N 2吸着等温線を容量法ある

加熱分解して得た試料を用いた。
Ti0 21散結晶はTi(O-iPr)4 エタノ
HCl・エタノーー

いは重量法により測定をした。試料の吸着前の真ル溶液に水・

空前処理はllO℃、 2hであった I l. 12) 。Tiド ー プ

ル溶液を滴下した水酸化物ゾ ル

a -Fe 2 0s薄膜の表面 電子状態についてはMgKa

を500℃、 lh、焼成して得た。
T iドを用いるX線光電子分光装量 （島津ESCA-80)によってXPSスペクトルを決定した l 3 , l 4)。

ー プa-Fe20s薄膜の試料は、 Fe(NOs)s• 9H20、Ti(O-iPr)4 、 2メトキシエタノ合溶液をスピンコー

表面キャラクタリゼーションールの混ト法で薄膜化し、500℃、lh、3

空気中で加熱して得た。N0(99. 7%)を白色固体の実験結果と考察

NOが得られるまで、liq-Nz及びドライアイス ー エ
3. 1 合成酸化物の結晶状態

タノ ー ル トラップによる蒸留操作を繰り返してか
ら用いた。

3.1.1

ZnOとTiO,

2. 2 試料のキャラクタリゼーション

なピ ー クが見られた。 ミラ ー 指数によると六方晶

ZnOの X 線回折図には全て、ZnOによるシャ ー プ
形に属する通常の ZnO結晶であった。各ピ ー クのCuKa線を用いるX 線回折（理学電機自記 X 線回

半値幅からScherrer式を用いて求めた平均結晶子折装置ガイガ ー フレックス2028)により試料の結径は120nmであった。X線回折によれば合成し晶構造並びに結晶子径を求めた。TG• DTA(理学電機示差熱天秤TG-DTA)にて、5℃/min. の昇温速度

たTi釘はアナタ ー ゼ型構造を有している。一 般にで試料の構造安定性を調べた。試料の比表面積あ

アナタ ー ゼ型がルチル型より光触媒活性が高いので、アナタ ー ゼ型を得ることを目的とした。ゾル

るいは細孔性は、77KにおけるN 2あるいはAr吸

ゲル法 で 調製したが、 500℃焼成によれば残留

着等温線から決定した。

炭素はほとんど見られなかった。半値幅から求めた平均結晶子径は210nmであった。TG• DTAによれ

2. 3 紫外可視光吸収特性

ばZnOおよびTi0 2ともに500℃までは安定である。

微結晶試料の紫外可視光吸収スペクト ルの測定は、 日立ダプルビ ー ム分光光度計200-10を用いた。

3.1.2 Tiドープa-Fe,0 3

試料 5%をKBrに混合して、 200kgw/cm 2可圧成a-Feふ格子にTi 4 十イオンをド ー プすると、欠型して得た100mgディスクを用いた。 薄膜試料

陥化学反応によってFe 2十 が生成するといわれ、は加圧成型することなくそのまま測定した。
2. 4

Fe 3 十とFe 2 十が混合し、その異なる原子価のFeイオ
ン間をd電子がホッピングする混合原子価が実現

光電気伝導度測定する。これは可視吸収特性の制御につながる重要

微結晶試料の電気伝導度測定は、微結晶試料を200-250kg/cm にて加圧し、13¢ ディスクになものである。従来は徴細結 晶 で の T iド ー プ

成型後、ディスク両面にAlを真空蒸着した。両Al

a -Fe 20 3 の研究が主であったが、本研究では光散

電極には、Ni線を取り付け、110℃、2hr、の真空乱効果の少ない薄膜状態のTiド ー プa-Fe 20 3 を調前処理後、de電気伝導度を微小電流計 （アドバン製した。ただし、この系でのNO吸着性の検討は今

テスト社微小電流計R8340)にて測定した 1 0) 。 光

後の課題である。

2-40-

化粧品基本素材金属依化物の酪性大気汚染物質とのtu且作J.11

ー

A V

(012)

(113)

(c)

(116)

（
坦 葺範 出 ｝
磁球
40

50

60

70

述米答
g 珊 製出）

30

20

80

28(度）

図1

Tiド ー プa -Feふ薄膜のX線回折図(a) a -Fe,o,(b) 5%Tiド ー プa -Feふ(Ti/Fe=0.05)(c) 10%Tiドープa -Feふ(Ti/Fe=O.1)

図 1 はTi ド ー プa -Fe 20a 薄膜の X 線回折図である。 薄膜の厚さは Iµmである。 a -Fe 20s とTi5%300

ド ー プ試料は配向性の よ い膜 で あ る た め に 、

104と116反射しか観察されない。 Ti ド ー プでは配

600

500

700

波長(nm}

向性はなくなる。 10% ド ー プまではa -Fe 20a 格子

図2 Tiド ー プa -Fe 、 o,薄膜の光吸収スベクトル(a) a -Fe,O,(b) 5%Tiド ー ブa -Feふ(c) 10%Tiド ー ブa -Fe,O,

以外のピ ー クはみられない。
3. 2

400

比表面積と細孔性ZnOとTi 妬のArあるい は N 2 吸着等温線は(II)ペクトルである。 420nmと500nmにプロ ー ドなビ ー型に近く、 近似的には平坦表面と見なしてよい。

クがみられる。 420nmのピ ークは0

そこで BET解析により吸着等温線を解析 した

2ー十からFe 3 への6電荷移動、 500runのピ ー クはd-d遷移( A 1• → 4T1.)

ところ ZnO とTi釘の比表面積は各々、 9. Om ツgとーによると考えられる。このd-d遷移はTi ド プによ34. lm 2 /gであった。 ただし、 低圧部の立ち上がり

り変わらないが、 電荷移動バンドはTi ドが著しく、 ミクロ孔の存在も考え られるが詳細なー

プにつれて減少する。 Fe格子点をTiが置換してゆくため研究はまだ行われていない。 Ti ド ー プa -Fe 2 0 3 薄

ド ー プ量に比べて鋭敏に紫外光吸収を制御し得る。

膜については絶対表面積が小さいために信頼できる実測値が得られていないが、 ミクロ孔が存在しm ド ー プ酸化鉄薄膜の電子状態ている可能性もある。

3. 4

3. 3 紫外可視吸収特性値とほぼ同じ吸 収特性を与える ことが解った。

上記の光吸収スペクトルからZnOとTiO 外ま文献

Ti ド ー プa -Fe 20s はTi ド ー プにつれて光吸収特性

ZnOでは380nmにピ ー クがみられ、 それより短波が変わるので、 X 線光電子分光決により電子状態

長側で吸収がみられた。 380nm(=3. 27eV) はZnOのを検討した。 図 3 はTi ド ー プa -Fe 20s フィルムの伝導帯と価電子帯のパンドギヤップ間の電子励起

5eVのピ ー クはに関係していると見られる。 Ti0 2 は 400nm より

XPS 原子 価スペクトルであ る。

クはみられなかった。 図 2 はTi ド ー プの光吸収ス変化する。 このピ ー クは配位子場分裂によって局在 3d 電子に帰属され、 Ti ド ー プ最によって短波長側で吸収か始まり、 250nmまでは明瞭なピ ー

-41-

g

5 2—

se.、 2t 2 ., 2e.のピ ー クに分離している。 Tiド ー

eg

2

▼

プ により 2eV の a e, ピ ー ク が 生 ず る 。 これ は
Fe 2+ -Fe 3 十 の混合原子価を持つ Fea04 ではみられない。 従って、Tiド ー プ はFe 2 十 を生成し、混合原ー
担珊艇出）
赳悪沖 翻栄子価a -Fe20sを実現していることがわかる。 この薄膜はTiド ー プにつれて電気伝導度が著しく増大することが見いだされているが、NO吸着ならびに光照射との関係は今後の課題である 4. I 5) 。
I

3. 5

光NO吸着性と光電気伝導度

ZnOとTiO外こつ いては電気伝導度とNO吸着を測定し、それら に対する光吸着効果を調べた I 6. 1 7) 。
図4は30℃でのZnOのNO光吸着性を示す。lOTorrNO゜を暗時 120分放置後に、 光を照射、更に 600分後に光照射を止めた時の吸着量の変化を示している。
10

5

15

結合エネルギー(eV)
図3

暗時には吸着測定感度 (0. 01µmol/g) 内で吸着を認められないが、光照射につれて著しいNO吸着が生ずる。 そして光吸着後に光照射を止めてもNOは脱離せず完全な不可逆吸着である。従ってZnOでTiド ー プa -Fe,飢薄膜のXPS原子価バンドスペクトル(a) a -Fe,o,(b) 5%Tiドープa -Fe,0 3(c) 10%Tiドープa -Fe,O,は顕著な光化学吸着が起こるとも言える。

ロ

ロ

A

△

A

0

0

0

400

100

200

300

時間（分）

light on-0. 10

口

..1

＿
200

口
△
0
口
△ 0
△ 0
口
口
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ロ △0
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口
口
△
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口
△
0
口
△
0
0
△
口

0.6

図5

600

800

ZnOへのNO吸着と光照射昂との関係(30℃)● ：光照射なし

0 : 280W△ : 380W□ : 450W

時間（分）図5はNO吸着か光照射量に依存することを示す。
図4

Xeランプの照射量を増やすにつれて、NO吸着量がlOTorrNO雰囲気下のZnOの吸着に対する光照射効果-42-

化粧品基本素材金屈俄化物の酸性大気汚染物質との相互作JfJ

5著しく増大し、 この減少か光誘起NO化学吸着であlight on

0

がある。

1

た。従って吸着初期にはNOが解離している可能性

゜

NO脱気

NO導入

ご

／

2

もに増大する。 Elovich速度式による解析を行うと初期光誘起NO吸着速度はNO圧の1/2乗に比例し

• ご

3

(
611
0E H )躙 旗 深450Wで行った。この光誘起NO化学吸着はNO圧とと

2. 5

ご

4

ることを端的に示している。 他の光照射は全て

40

120

80

160

200

240

2

5
．
．

(09 ID ) 601

時間（分）
図8

。
。5 0
図6

光照射下1 OTorrNO導入時のNO吸着変化岳

停止と再照射によっていかに変化するかを示す。
400

200

800
600
時間（分）

1000

120C

ここではNO吸着による電気伝導度減少が全く隠されている。
図8に はTi妬の30℃における光照射による
lOTorrNO導入時のNO吸着が示されている。暗時にZnOの光電気伝導度のNO吸脱着時の変化も微量(0. 2µmol/g)のNOが吸着されるが、光照射によって著しい吸着が 生ずる。 この 吸着NOは

図6には光照射120分後にlOTorrNOを導入しZnOの場合と全く同様に不可逆であった。

たときの電気伝導度変化である。光照射によって図9にはTiむの光電流のlOTorrNO導入に伴う変電気伝導度が著しく増大し、NO導入時にはわずか化を示す。ZnOはTi02の約100倍の光電流を示した

ながら減少する。さらにNOを脱気すると、電気伝4導度が減少する。 NOは光照射で生じた(e-,hうペアの電子をトラップして電気伝導度を低下させるが、NOの表面酸化物化による電気伝導度増加も

3

200

400

600

10

時間（分）

時間（分）
図7

5

t

゜

勺な迂o-o-o―0

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゜

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2

(
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見られる。図7にはNO吸着ZnOの光伝導度が光照射

図9

NO吸箔ZnOの光電気伝導度の光照射とその停止の効果-43-

lOTorrNO導入に伴うTi恥の光電流変化

が、Ti0 2 は0.1µAの光電流である。このため、NO4々吉吸着による(e-,hうの電子トラップ効果が著しく、＇

裔

ZnOとTi飢系においてもa-FeOOHで認められたNO導入につれて光電流が激減し、回復しない。

ように、NOの吸着時に酸化物表面の酸素と強く結3. 6

NO光化学吸着状態

合して、N釘あるいはNO此いうNOの酸化物状態に

図10に20TorrNOを導入したときの光照射状態でなっていることが示唆された。特にこのNO表面酸の FT -IRの差スペクトルを示す。 1 3 0 0cm-1と化物生成は光照射によって著しく促進されることクがみられ、時間が経つ には注目すべきである。この酸化物は吸着水と反応

つれて成長する。これらのピ クはNOが化学吸着

して硝酸等へと変化していくことが予想されるたされることを示している。従来の研究によればめに、光活性遷移金属陵化物表面酸素の不活性化、金属酸化物上のNOは1500cm 1 付近でがコスメトロジ ー の分野で重要なことが酸性大気

1530cm� に明瞭なピ
1ーー

6, 8, I 8, I 9)―

はM-0-NOあるいはM-O-N0 2 が考えられ、 1300cm―I

汚染物質との相互作用面からも示された。

付近では、M(8)NOいM-N02、あるいはM-O-N02

本研究は完全には完結しておらず、Tiド ー プと考えられる。従って 、光照射によって、ZnO

a -Fe203系でのNO光吸着あるいは吸 着H 2 0とNOの表面酸素が活性化され、NOを酸化して不可逆に化学吸着種との反応性等の研究が望まれる。

化学吸着していると見られる。同様な光誘起化学
吸着によるNOの酸化物種は Ti02でも認められた。
―

Ti飢系では1170cm 1と900cm

―1

にピ

ー

謝

クが現れた。

―

本研究はコスメトロジ ー 研究振興財団よりの御これらはN02 様の化学吸着種と考えられるが、更に検討を加える必要がある。

I

辞援助で行われたことをここに記し、J早くお札を申し 上げる。

0.1

参考文献l)金子克美、新しいNO吸着剤の開発

現代化学、

18 (1987)
活性炭素練維によるNO還元技術、PPM(日本工c

述栄 替
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5)N. Inoue, A.Matsumoto, I.Suzuki, S.Ozeki,

2000
図10

1500

波数(cm-1)

K. Kaneko, "P hotoadsorption of SO 2 on

1000

Synthetic Goethite a -FeOOH",Langmuir., 4774 0988)

ZnO上の光誘起NO化学吸渚種のFT-IR差スペクトル(a)光照射30分後-NO導入直後(b)同60分後-NO導入直後(c)同90分後—NO導入直後(d)同120分後—NO導入直後

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化粧品基本素材金屈酸化物の酸性大気汚染物質との相互作)fj

93 1988 (1989)
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defects in the chemisorption of NO andS02 on v a r i able-siz e d crystalline

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8) A. Matsumoto, K. Kaneko, "Infrared studyo n S02 c h e m i s o r p t i o n a c t i v i t y of
crystallite-size controlled 1-FeOOH",

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Ti-doped iron oxide film", ]. Chem. Soc.,

Faraday Trans, 印刷中
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the chemisorbed NO species on a -FeOOH",

16) K.Kase, M. Yamaguchi, T.Suzuki, K.Kaneko,"Photo-assisted chemisorptio'n of NO on
Z nO'', ]. Phys. Chem., 印刷中

10) K.Kaneko, S.Kugawa, S. Ishida, Y.Kadowaki,

K.Kaneko, "Photo-induced chemisorption

Colloid Surface., 37 81 0989)
9) A.Matsumoto, K.Kaneko, "Gradual change inLangmuir., 6 1202 (1990)

N. Uekawa, T. Suzuki, "Electronic andmolecular dynamics of chemisorption with17) M. Yamaguchi, K.Kase, M.Kaneeda, N. Uekawa,of NO on Photoconductive transition meta

loxides", Chem. Phys. Lett., 投稿中

time-delayed injection of doner-acceptor
gases",]. Chem. Soc., Faraday Trans, 88 1327

18) J. Laane, J.R. Ohlsen, "Characterization of

11)金子克美、気体の吸着、色材、67 115 (1994)
12) K. Kaneko, "Determination of Pore size19) M.A. Hitchman, G. L.Rowbottom, "Transition(1992)and pore size distribution", ]. Membrane
Sci., 96 59 (1994)-45-

nitorogen oxides by vibrational spectros

copy", Prog. Inog. Chem., 25 465 0980)

metal nitric complexes", Coordination Chem.
Rev., 42 55 0982)

新規な構造を有するヒアルロン酸類似多糖の開発
東京工業大学生命理工学部

畑

中

研

一

Syntheses of analogous polysaccharides to hyaluronic acid were attempted in order to better
understand the relationship between physical and biological properties and the chemical
structure.
The polymerizable l,6-anhydro-2,4-di-0-benzyl-3-0-1- (methoxycarbonyl) ethy隅D-gluco ・pyranose (1) was synthesized by selective benzylation at C-2 and C-4 of l,6-anhydro-/3-D-gluco­
pyranose, followed by 1- (methoxycarbonyl) ethylation with methyl 2-chloropropionate.
Polymerization of 1 with phosphorus pentafluoride as initiator in methylene chloride at low
temperature under high vacuum gave a stereoregular (1→6)- a -D-glucopyranan derivative
Copolymerization of 1 and tri-0-benzylated monomer gave copolysaccharides having various
amounts of carboxylates. The calculated values of monomer reactivity ratios were 0.88 and 0.99
showing the distribution of each monomeric unit in the obtained copolymer was random.
恥drolysis of carboxylate groups was achieved by the reaction with potassium tert-butoxide,g1vmg the stereoregular polysaccharide containing the carboxylic acid. However, debenzylationof the polysaccharideヽ,;as unsuccessful.

1緒

言本研究では、ヒアルロン酸のどの様な化学構造
が保水性や細胞との相互作用に関わっているのか

生理活性を有する機能性多糖の開発は最近の重（ヒアルロン酸様の生理活性を発現するためには要な課題であり、生体の応答性と密着した解析がどのような化学構造が最低限必要なのか）を詳細必要である。 しかしながら現在、機能性多糖の合に調べるため、アミノ基を有する糖とカルボキシ成法も未熟であり、生体との相互作用のメカニズ

ル基を有する糖の共重合体を化学合成する。 化学

ムも未開発である。 本研究では、機能性多糖設計合成であるが故に、多糖ポリマ ー 鎖上における官による生体応答制御のモデル系として、 ヒアルロ

能基の位置や分布を自由に変化させることができ

ン酸類似多糖を化学合成し、皮膚との相互作用にるため、構造と機能の相関が（天然物と比べて）ついて調べる。

より明確にわかると思われる。

ヒアルロン酸は、Nーアセチルグルコサミンとグ

ヒアルロン酸ナトリウムとして販売されている

ルクロン酸との交互共重合体構造を有するヘテロ

粉末の市販品は、その水溶液の粘度や保湿性が分多糖であるが、細胞間隙に水を保持するのに役立

子量によって異なることがわかっている。 また、ち、皮膚の澗滑性や柔軟性を保っていると考えら

ヒアルロン酸ナトリウムの保涅性は、周囲の環境れている。 皮下組織のヒアルロン酸が少なくなっ（相対湿度）の影響を受けにくいのが特徴であるてくると、皮屑にみずみずしさがなくなり、しわことが赤坂日出道氏らにより報告された . 2)がよってくる。

しかしながら、ヒアルロン酸の化学構造や高次構

l0造が保湿性に対してどのように影態するのかを調
Syntheses of New Analogous Polysaccharides

べた報告はない。 また、ヒアルロン酸類似の糖鎖

to Hyaluronic Acid

化合物を化学合成しようとする試みもなされていない。

Kenichi Hatanaka

糖質工学において、天然多糖の化学修飾は古く

Faculty of Bioscience andBiotechnologyから行われてきたが、精密構造を制御するまでにTokyo Institute of Technology

は至っていない。 一方、無水糖誘導体の開環璽合-46-新規な構造を有するヒアルロン醗類似多糖の開発

やオルトエステルグリコシル化法といった優秀なで、位置特異的にカルボキシル基を持つ立体規則

多糖合成法が開発されて以来、官能基を有する多性多糖を合成することであるため、ここではDー グ

糖合成は比較的容易に行われるようになった。 無

ルコ ー スを出発原料として、モノマ ー の合成を行—

水糖誘導体のうちでは、l, 6 無水糖の重合が最もった。 1 , 6- /3 —無水環構造を持たせたのは、重合

よく研究されていて、精密構造を有する機能性多反応における立体規則性の制御が容易であるとと糖合成の土台となっている。

もに、他の結合様式に較べて高い分子量のポリマ

本研究では、開環重合反応に及ぼす影響の小さーが得られることが予想されるからである。 すな

い C-3位に乳酸エステル基を導入し、多糖鎖を構

わちl, 6 — 無水糖の重合は完全にl, 6 — 開裂であり、築することによって、 ヒアルロン酸類似多糖を開反応を低温で行うとオキソニウムイオン機構で進発することを目的としている。

行し、立体 反転を伴ってa — 結合のポリマ ー を与える。 つまり、(l → 6)-a —結合の立体規則性多

2

実

験

糖誘導体が得られるのである 4) 。 また、無水グル
コ ー スの3位に置換基を導入した背景には、重合・

2.

モノマ ー

1

合成

において3位の保護基の影態が最も小さいことが現在までに開環重合法によって合成された多糖

知られているとともに、l. 6 — 無水グルコ ー スの2の種類はかなりの数に上る。 様々な糖残基の種類位と4位を簡単に選択的保護することができるとや結合様式のものはもちろん、水酸基を選択的にいう事実がある l は無水糖の重合における保護基

保護することで種々の置換基を位置特異的に導入にはエ ー テル系保護基であるベンジル基が良好なすることも多く行われてきた3)。 本研究の目的は、ものとして知られているため、ここでも同じ保護にあらかじめカルボキシル基を基を用いた。 ベンジル基は液体アンモニア中ナト

保護した状態で導入し重合および共重合すること

リウムによる還元(Birch還元）で、短時間でモノマ ー ユニット

+ CH 3CHCOO
CH 3
I
Cl

OBn

'

PF5')

NaH
・・ ， >
OMF t1nv -\'0Br
CH3CHCOOCH3t-BuOK...

-�

Fig. 1. Synthesis and polymerization of 1,6-anhydro-2,4-di-O-benzyl-3-01-(methoxycarbonyl) ethyl-/3-D-glucopyranose and hydrolysis of
the obtained po I ymer.

-47-

瓜合管

定量的に脱保護することができる 5 . 6) 。
1,6—無水グルコ ー スの合成は、かつてはデンプ

真空ライン

ンや微結晶セルロ ー スの真空熱分解によって行わ4 にFraser-Reidが、6位トシ
れていた ” が、198年
ル化後アルカリによって閉環させる方法 8) を開発
9)
し、1 989年に大量合成法が確立されたので、ここでもそれに従うこととした。 この方法の利点としては、遊離のDー クルコ ー スを原料として極めて安価な試薬で合成できること、また容易にスケ ー
ルアップできることなどが挙げられる。 カルボキ
シル基（メチルエステルで保護）の導入は、オ ー
ソドックスなエ ー テル合成法により行った。 天然のムラミン酸にヒントを得た1- (メトキシカルボニル）エチル基 1 0 lを導入した(Fig. 1)。 水酸化ナトリウム6. Qgをn— ヘキサンで洗浄して、窒素気
流下、ジメチルホルムアミド（乾燥、蒸留したもの）100mlに加え、しばらく懸濁させた後、2,4 ージ

Fig. 2. Polymerization apparatus.

ベンジル化1,6ー無水グルコ ー ス12. 0gを加え、 2
時間激しく撹拌した。 その後、 2 ークロロプロピオ

まれる水などの不純物を除去するために行った。）

ン酸メチル6. 0mlを滴下し、3時間反応させた。 反

次にEのブレ ー カブルシ ー ルを割って重合管をル添加によって行い、常法に従冷却し、重合溶媒となる塩化メチレンを導入してって後処理した後、シリカゲルカラム（酢酸エチ

Eを切り離した。 溶液を均ーにしてから液体窒素

ル： n- ヘキサン=I: 4)により精製を行った。

で凍らせ、弱火で開始剤前駆体を熱分解させて、応停止はメタノー

生じた五フッ化リンを重合管内に蒸着させた後、
2. 2 重合および脱保護
予め作製しておいた溶媒管を用いて、Fig.

触媒管を切り離して脱気しながら重合管を真空ラ2のインから切り離した。

ような重合装置を作製し、真空ラインに接続した。

所定重合温度に設定したエタノ ー ル恒温槽内でピンホ ー ルチェック、二回の加熱乾燥の後、窒素重合管を10分間激しく振とうし、重合反応を開始

気流下にてAを切断してモノマ ー化合物を導入、した。 一定 時間後、重合反応の停止は、重合管の同じく Bを切断して開始剤前駆体(p ークロロベン

一部を切断してメタノ ー ルを添加することで行っゼンジアゾニウムヘキサフルオロホスファ ー ト）た（この際ポリマ ー が生成していれば、白沈を生を導入し、それぞれ融封した。

じる）。 この溶液をクロロホルムに溶かし、10%一晩高真空下で乾燥してから真空ラインのコッ

炭酸水素ナトリウム水溶液で中和、脱イオン水でクを閉じ、 C のブレ ー カブルシ ー ルを割って重合三回洗浄した後、無水硫酸ナトリウムによる乾燥、管を液体窒素で冷却、塩化メチレンを真空蒸留しろ過を行い、減圧濃縮した。 ポリマ ー をクロロホてモノマ ー を溶解させた。 溶液を均ーにしてから

ルム／メタノ ー ル系で再沈精製し、ベンゼン溶液

1時間室温のまま放置、Cのアンプルを液体窒素でにして凍結乾燥を行った。

冷却して塩化メチレンをもとのアンプルに戻し、多糖ポリマ ー 鎖におけるカルボキシル基の脱保

凍 結させた状態で真空につ なぎ、Dのしぼり部

護は、水を含むTHF中のカリウムて 一 プトキシドにを融封した。 （この操作はモノマ ー 中に微量に含より行った。 また、液体アンモニア中のナトリウ-48-

新規な構造を有するヒアルロン俄類似多拙の開発

ム金属により脱ベンジル化を試みた。

ら二級ハロゲン化試薬に変えたことになるのであるが、結果として反応速度が著しく増大し、室温

3

結果と考察

にて二時間後にはほとんど反応が終了した。 この反応に関して、以前、我々は光学活性な2-クロロ

3.

1

モノマ ー 合成

D クルコ

プロピオン酸を反応させた場合にラセミ化を伴っスを出発物質とする2,4 ジベンジルて反応が進行することを観察し、化合物 5 の生成体の合成は、酸化バリウムを作用させて得る既知反応がSN 1機構で進んでいることを証明した 1 O) 0

ー

の方法

11

ー

ー

に従って行った。 この化合物の3位に種一般の有機化学の教科書で述べられている通り、々の置換基を導入してカチオン開環重合性を検討

ハロゲン化アルキルのSN 1反応における反応性は

した例は多く、様々な応用目的のもとに合成され第三級＞第二級＞第一級の順である。 これはカルている。 本研究ではまず、カルボキシル基を持たボカチオンの陽電荷を非局在化させる程度によっ)せることを目的に、メトキシカルポニルメチル基ている。 これを考慮すると、上記の反応はいずれの導入を、オ ー ソドックスなエ ー テル合成法によもSN 1機構をとる傾向にあり、カルボカチオンのり試みた。 反応溶媒にはジメチルホルムアミドお安定性の差が実際の反応速度および収率に反映しよびジオキサン、反応試薬にはクロロ酢酸メチル

たと考えることかできる。 過去にメチル2— アセト

およびブロモ酢酸メチルを検討するとともに、反アミドー4,6- O —ベンジリデンー 2 — デオキシ ー a-D­

応条件として温度、濃度などを検討した。 しかし

クルコピラノシドの 3 位にクロロ酢酸 1 2およびDL

20回にも及ぶ予備試験を行ったもののなかなか収-2ークロロプロピオン酸 1 3) を反応させた例が報告

率の向上がみられず、むしろ全く反応しなかった

されているか、単純に比較はできないもののこのり精製困難な多くの生成物を与えたりということ

場合も二級試薬のほうがはるかに収率か高くなっの方が多かった。 最終的にジメチルホルムアミドている。 今回ラセミ体の二級試薬を用いた合成で溶媒中でブロモ酢酸メチルを60℃で長時間反応さも収率は高く、1H-NMRスペクトルのアノメリックせるという手段をとり、なんとか収率を30%以上

プロトンから判断すると、生成物はジアステレオにすることができたか、これも再現性は低かった。

マ ー 1 : 1 の混合物であった。

そこで、30%という低収率を改善すべく、次に反応試薬を2 ークロロプロピオン酸メチルに変え、

3. 2

重合、 共重合および脱保護

ジメチルホルムアミド溶媒中室温にて同様の反応

1, 6— アンヒドロ ー2,4ー ジー O ーベンジル —3-0 - 1を行った。 これはすなわちー級ハロゲン化試薬か（メトキシカルボニル）エチル — /3-Dー グルコピラノ

Table 1. Polymerization of 1,6-anhydro-2,4-di-0-benzyl-3-0-1(methoxycarbony I) ethyl- /3 -D-gl ucopyranose (1)"

No.

1
2
3

M岱

Initiator

Temp.

Time

Yield

(mo!%)

（℃）

(h )

（％）

(x1Q4)

5
15
10

-60
-60

゜

12
24
24

46

70

28.7
9.8

53

a. Monomer concentration in d1ch1oromethane: 0.26-0.50 g/mL; imtiator: PF5.
b. Determined by GPC.

-49-

ース

ギュレ ー ションに相当（エクアトリアルCl-Hの変の単独重合性について は既に調べられているので、 まず既報 l 0) の結果を示す。 五フッ化リン

角振動に由来）するピ ー クが認められることから、を開始剤として 重合を行うことにより、高収率得られた多糖誘導体は、a— グリコシド結合か( 61. 9-63. 7%)で高重合度（最高で平均重合度

ら成る立体規則性多糖誘導体、2,4 ー ジー O ーベンジ

4 00程度） の多糖誘導体が得られている。 得ら

ル ー3-0-1-(メトキシカルボニル）エチル ー (1→6)

れた多糖誘導体の立体規則性 は、 1 3C-NMRおよ-a-Dー グルコピラナンであると結論した。
次に、多糖鎖中のカルボキシル基含量が物性に

び比旋光度からa —コンフィギュレ ー ションの及ぼす影響を調べることを目的として、カルボキ

単一構造であると結論されている。 本研究でもこのカルボキシ ル モノマ

シル基含量の異なる種々のポリマ ー を共重合によー の単独重合を行い、Table 1に 示すような結果を得た。 前例よりもって合成した。 カルボキシル基を有するモノマ ー

重合時間を短くすると、数平均分子量28. 7万といとトリベンジル化1, 6ー無水グルコ ー スとの共重合

う高分子量ポリマ ー を得ることができた。 これは、結果をTable 2に示す。 重合時間を短く、 収率

重合時間が長くなると残存触媒によりボリマ ー 主を低く抑さえてあるのは、 モノマ ー の反応性を調鎖が切断されるということを示していると思われべるためである。 仕込みモノマ ー比を変化させるる。 大量にモノマーを仕込んだ重合の収率およびーことによって、カルボキシル基含量が14-100

仕込％の共重合体を得た。Kelen-Tudos法により求み濃度が低かったこと、および開始剤の量が多かめたモノマ ー 反応性比は、0. 88と0. 99であり、共ったことが原因であると考えられる。 ここで、低重合体中の各モノマ ー ユニットは、 ほぼランダム

得られたポリマーの分子量低下は、モノマ

1

温における重合で得られたポリマ ー の 3C-NMRに分布していると言える。

スペク ト ルにおいてアノメリッ ク炭素 (C-1)がさらに、カルボキシル基を有する多糖誘導体の

97. 4ppmのみに単一のピ ー クを与えていること、脱保護を試みた。 カリウムて 一 ブトキシドで処またIRスペクトルにおいて844cm-1にa—コンフィ

理したポリマ ー の 1 H-NMRスペクトル中には、メチ

Table 2. Copolymerization of 1,6-anhydro-2,4-di-O-benzyl-3-0-1(methoxycarbonyl) eth-;.1-{3-D-glucopyranose (1) with 1,6anhydro-2, 3, 4-t ri-0-benzy I- /3 -D-glucopyranose (2)'

No.

1
2
3
4
5
6
7
8
10
11

Mole fri:).ct1on of 1 m feed
（％）

゜

10
20
30

40

50
60
70
80

90

100

Yield
（％）

Mole fraction of 1 in copolymerb
（％）

68.0
3.2
3.8
7.0
18.5
13.9
12.0
6.6
9.0
8.2
11.4

0.0
14.5
23.2
33.3
37.8
48.8
59.0
70.4
75.3
89.7
100.0

a. Total monomers, 1.17 mmol; initiator: PF5, 5 mo!%; solvent:dichloromethane, 1 mL:
temperature, -60 ° C; time: 1-9 min.
b. Determined by lH NMR spectroscopy.
-50-新規な構造を有するヒアルロン俄類似多糖の開発

ル エ ステルに帰属されるメチルプロトンの吸収がのかさ高さ（立体障害）によってf3 ーグリコシド結消失し、 エ ステルの加水分解が完全に起こってい合からなるオリゴ糖誘導体 （平均重合度5-7)をることを示した。 カリウム塩とした多糖は、モノ与えることがわかっている。 このフタルイミド基マーはヒドラジン一水和物を用いて容易にアミノ基にユニット当たり2個のベンジル基を有してい変換することができる 14) 。

るにもかかわらす水溶性で、有機溶媒には不溶で予備的な実験では、アミノ基を有するユニット

あった。
チ還元による脱ベンジル化は、現在までのとカルボキシル基を有するユニットがほぽl : lのところ成功していない。 前記のようにエステル加割合でランダムに存在するコポリマ ー を得ること

水分解生成物が水にしか溶解しないため、適当なができた。 詳しい構造については現在検討中であ反応溶媒がなく、不均一 系となってしまうためで

る。

バ

ー

ある。 また、 エ ステル加水分解前のポリマ

ー

は有
4

機溶媒可溶であるが、還元反応中に エ ステル基が括

総アルコ ルにまで還元されてしまったのである。
ーl, 6 —無水糖誘導体の開環重合および共重合によ

現在、接触水添による脱ベンジル化について検討って、カルボキシル基を種々の割合で持つ多糖を、中である。

かなり自在に設計して合成できるようになった。
3. 3

アミノ基前駆体を有するモノマ ー としかしながら、脱保護がうまくいってないため、の共重合

当初の予定であった保湿性と化学構造の相関を調

前述のように、ヒアルロン酸にはグルコサミン

べるまでには至っていない。 今後、脱ベンジル化残基が含まれている。 ウロン酸ユニットとアミノの方法を確立しなければならない。 あるいは、ベ糖ユニットとの交互共重合体であることから、事ンジル基以外の保護基を検討する必要があるのか

実上50%のアミノ糖含有率ということになる。 今もしれない。 一方で、アミノ糖前駆体モノマ ー とまでに行われたグリコサミノグリカンの構造活性の共重合が成功したことにより、ヒアルロン酸類

相関に関する研究はすべて交互共重合体であるこ似多糖の合成は期待できると考えられる。

とを前提として話を進めているので、アミノ基およびアセトアミド基の活性に対する存在的必然性

参考文献

は、これまでほとんと議論されたことがなかった。

l)

井武夫、日本化粧品技術者会誌、22 35(1988)

そこで各官能甚の存在量比が活性にどれだけ影響
2)

するかを調べる場合、カルボキシル基のユニット

42(1986)3) 瓜生敏之、畑中研一、有機合成化学協会誌、サンプルが必要となる。 そのような多糖サンプル

42 557 (1984)

は、現在のところ開環重合法でしか得ることがで

4) N. K. Kochetkov,

きないと考えてよい。
ーTetrahedron., 43 2389

(1987)

本研究では2位にアミノ基前駆体を導入した重と前述のカルポキシルモノマ

赤坂日出道、山口敏二郎、フレグナンスジャー ナル、14とアミノ基のユニットとの相対含量を変化させた

合性モノマ ー

赤坂日出道、瀬戸進、柳光男、福島正二、光5) T. Uryu,とのPrag. Polym. Sci., 18 717 (1993)

6) E. R. Ruckel and C. Schuerch, Biopolymers.,

共重合によって、合成多糖鎖中にアミノ基を有す

5 515 (1967)

るユニットとカルボキシル基を有するユニットを

7)瓜生敏之、畑中研 一 、阪本吉弘、針間 一 成

同時に持たせることに挑戦した。

萩野新、伊藤克博、船本明士、松崎啓、日本

2位にアミノ基前駆体であるフタルイミド基が化学会誌、10 1638 (1982)

導入されたモノマ ー は、単独重合において置換基-51-8) M. Georges and B. Fraser-Reid, Carbohydr.
Res., 127 162 (1984)
9) M.A.Zotto la, R.Alonso, G.D.Vite, and
B. Fraser-Reid,]. Org. Chem.,

54 6123(1989)
10) K. H atanaka, T . Uryu, S. Miyahara, andH. Kuzuhara, ]. Med. Chem., 30 810 (1987)
11) T. Iversen and D.R. Bundle,

60 299 (1982)
12) T. Miyazaki and Y. Matsushima, Bull. Chem.,
Soc. Jpn.,. , 41 2723 (1968)
13) R. W. Jeanloz, E. Walker, and P. Sinay,
Carbohydr. Res., 6 184 (1968)
14) K. -I. Kanno, Y. Kobayashi, S. -I. Nishimura,
H. Kuzuhara, and K. Hatanaka, ]. Carbohydr.
Chem., in press.

Can. ]. Chem.,

J

-52-

II. 生体作用， 安全性に関する分野

紫外線誘発DNA損傷の定量とメラニン色索のサンスクリ ー ン効果
奈良県立医科大学

小

林

信

彦

Melanin is believed to protect cells against ultraviolet (UV)-induced damage formation. It,
however, has not been experimentally proved, because published results have been inconclusive.
The present study was carried out to determine whether intracellular melanin protected cells
against UV-induced photoproduct type DNA damage formation and killing. Three humanmelanoma cell lines containing different amounts of melanin were used. Absorption spectrum,
subcellular localization of melanin, and melanin concentration were examined in the three celllines. Two types of DNA damage, cyclobutane pyrimidine dimers and (6-4)photoproducts, weredetected by an enzyme-linked immunos0rbent assay (ELISA) with monoclonal antibodies specificfor these photolesions. We found that melanin reduced the induction rates of both types of DNA
damage in pigmented cells irradiated with UVC in a melanin concentration-dependent manner.
Almost no differences in repair capacity for the two types of photolesions were observed among
the three cell lines. We also found that the more highly melanotic cell lines were more resistant
to UVC than the less melanotic cell lines. These results suggest that intracellular melanin plays
an important role in preventing UV-induced cell killing by reducing the formation of two types
of DNA damage. The three cell lines, however, might have different induction rates of
UV-damage and different UV sensitivities, under identical conditions with equal amounts ofmelanin, since they stemmed from melanomas of three different patients. Besides, we have notascertained whether melanin protects cells against sunlight, since we used UVC only. Thus, we
treated highly melanotic HM3KO cells with docosahexaenoic acid (DHA) to reduce the amountof melanin to about half, and prepared two types of cells with the same genetic background, withdifferent melanin levels. We carried out similar experiments using UVC and UVB, and ascetainedthat melanin protected melanoma cells from the two types of DNA damage formation and killingboth after UVC and aft'.!r UVB irradiation. Data obtained from the two studies in series suggestthat the protective effect of intracellular melanin increases in a melanin concentration-dependent
manner and reaches a plateau.
1

緒け、近年、皮府癌の患者数が増加傾向にある。 オ

言

ゾン層の破壊に伴って地表に到達する紫外線量が小麦色に日焼けした肌は健康的かつ魅力的であ増加し、患者数は今後さらに増加すると警告される。 また、太陽の下で遊んだり休息することは実ている。 生活習慣の変化や屋外でのしジャ ー の多に気持ちのいいものである。 しかしなから、太陽様化も皮屑癌の増加の重要な原因のひとつである

光中の紫外線によって、日焼け（紅斑•水疱•色と推測されている。それゆえ、—紫外線をよく知り、

素沈着）、光老化（しわ• しみ• そばかす）、皮岡

太陽光と上手に付き合うことが必要となる。 紫外悪性腫瘍、免疫能の低下、白内障などのさ線により表皮細胞の核にDNA損像が生じ 1) 、発癌

まざまな障害が生ずることも事実である。 とりわの引き金となる 2) 。 また、DNA損傷が紫外線によ良性・る紅斑• sunburn ce11生成• 免疫抑制などのさま
ざまな障害の直接の原因となるという報告もある
Determination of UV-induced DNA damage
and photoprotection by melanin

3- 5)。 紫外線による主なDNA損傷として、 シクロ

ブタン型ダイマ ー ・ (6-4)型ダイマ ー および後者の Dewar型異性体が知られ て いる。 これらの損

Nobuhiko Kobayashi

儀の生成量を定量することは、紫外線による障害
Nara Medical Universityとその防御を考える上で重要である。 しかし、従来これらの損傷を直接定量する方法がなかった。

-54-

紫外線誘発 DNA損偽の定乱とメラニン色素のサンスクリーン効果

共同研究者の森らは、これら3種類のDNA損傷に対ける吸光度から細胞内のメラニン色素量を定量しするモノクロ

た。 また、顕微鏡写真から各細胞の直径を測定し、ーナル抗体を世界に先駆けて樹立す

ることに成功した - 1 1) 。 そこで、本研究では、

細胞内のメラニン色素の濃度を算出した。 その結これらのモノクロ ーナル抗体を用いたELISA法お果、細胞内のメラニン色素量は、ペレットの色調

よび免疫組織化学的染色法によって DNA損傷の定•から予想されるように、HM3KO• G-361. Mewoの順量を試みた。

に多かった(Table 1)。

6

さて、紫外線から身体を守る方法として、 日傘•
帽子・サングラス•長袖のシャツ•長ズボンなど

Table 1 Melanin concentration in threemelanin cell linesの着用やサンスクリ ー ン剤の外用などが考えられ

Cells

HM3KO

G-361

Mewo

Melanin content(pg/cell)
Cell diameter (µm)
Melanin concentration(µg/mm3)

26.0士I.I

5.5士0.5

0.8士0.2

21.2土3.4
5.2土0.2

20.0士3.8
1.3土0.1

13.9土2.7
0.6士0.2·---·---------------------------··--·-----------------·---·-----る。 現在、サンスクリ ー ン剤などの紫外線防御効果の判定には、紅斑抑制効果を指標とした Sun
Protection Factor(SPF) が用いられている。 この評価に、DNA 損像生成に対する抑制効果を用いEach value shows the mean 土 SD

れば、紅斑のみならず、皮岡癌などさまざまな紫
外線障害に対する防御効果を反映することができ

次に、これらのメラノ ー マ細胞をホモジナイズ

ると考えられる。 さらに、我々はメラニン色素を‘ ー
し、遠心分離によってメラノ ノ
ムを含む分画を用いて紫外線防御することを提唱している。 しか抽出し、紫外線領域における吸光曲線を比較した。

し、メラニン色素のDNA 損俄生成抑制効果は実験‘ ー
3種類のメラノ ー マ細胞株に含まれるメラノ ノ

2

的には未た証明されておらず 1 - 1 8) 、さらに逆に

ム分画の吸光曲線は同じパタ ー ンを示し、波長がメラニン色素が光増感作用を持つという報告もあ

短くなるほど吸光度が増加し、200nm付近に吸lり 9) 、メラニン色素の光防御への応用の可否に収極大 を持つというメラニン色素に典型的なもの

ついても決着がついていないのが現状である。 紫であった(Fig. 1 ; デ ー タは真の吸収に加え、散外線とメラニン色素の関係については、総説を参乱による効果も含む）。

照されたい 2 0)

また、これらのメラノ ー マ細胞をプラスチック・。 本研究では、実験材料と実験方法を厳選することによって、メラニン色素の生物

プレ ー ト上で培養し、 その垂直切片をFontana­

学的な差異を際立たせる工夫を行い、メラニン色

Masson染色してメラニン色素の細胞内局在を調べ

素が紫外線誘発DNA損儀の生成を抑制することをた。 すべての細胞株でメラニン色素の局在には差証明した。

がなく、メラノソ ー ムは細胞質全体に分布していた。 以上の結果より、これら3種類のメラノ ー マ

2

験

2.0
マ細胞を用いた

HM3KO

実験材料として、細胞内のメラニン色素と核との位置関係が明確である培養細胞が優れていると考えられた。 そこで、 ベレ ットの 色調 の黒いHM3KO(神戸大•市橋教授より供与された）、茶色い

6
3
G

a
uUl'Q.JO SQV

3種類の培養ヒトメラノ
)
実験 '1

ー

ー
゜ ゜
ー

2. 1

実

200

G-361および白いMewo (ともに JCRB細胞パンクより供与された） の3種類の細胞株を選んだ。 メ

220

240 260 280 300
Wavelength (nm)

320

340

Fig. 1 Absorption spectra of melanosomal
fractions from human melanoma cells.

ラノ ー マ細胞をlN NaO Hにて可溶化し、400nmにお-55-

細胞株を用いて、 細胞内のメラニン色素量 と紫外巌を測定した。 2%牛胎児血清にて抗体の非特異

線 に よって誘発されるDNA損傷量とを比較する

的な吸着を阻害した上で、 シクロブタン型あるいことによって、 メラニン色素の紫外線防御効果をは(6-4)型ダイマ ー に対するモノクロ ー ナル抗体

定量できることが推測された。 さて、 従来の報告を反応させた。 つづいて、 ビオチン標識抗マウス

では、 メラニン色素の紫外線誘発DNA損傷生成

lgG抗体、 さらに、 ペルオキシダーゼ標識ストに対する防御効果はシクロブタン型ダイマ についてのみ論じられて きた l 2- l 9) 。 しかし、 最近でレプトアビジンを反応させた。 oー フェニレンジア

は (6-4)型ダイマ ー も紫外線によって誘発され、る吸光度として測定し、 両ダイマ ー の生成量としシクロプタン型ダイマ ー と同様に細胞死や突然変た。 シクロブタン型ダイマ ー および(6-4)型ダ異の原因となっている ことが知られ ており、

イマ ー ともに、 その生成量は紫外線照射線量に依(6-4) 型ダイマ ー 生成量の定量も必須となってい存して増加していた。 また、 メラニン色素量の多る。 そこで本研究では両DNA損傷の生成量を定量

い細胞株ほど両タイマ ー の生成最が少なかった。

するために、 シクロブタン型ダイマ

あるいは

この結果より、 細胞内のメラニン色素は、 その量ナル抗に依存して紫外線によるDNA損像の生成を抑制ー( 6 - 4)型タイマ ーーに特異的 なモノクロー

ミンを基質として、 その発色度を492nmにおけ体を用いたELISA法を採用した O) 。 この定量法は、していることがわかった(Fig. 2 a, b)。 さらに、

現在のところ最も感度の高い方法のひとつであり、各々の細胞株の両ダイマ ー 修復能を比較したとこ

さらに、 両ダイマ ー 量を同時に定星できる唯一のろ、 ほとんど差が見られなかった(Fig. 3 a, b)。

lー方法である。 本実験では5-20J/が(254nm)という低線量の紫外線照射によっ，て生成する両ダイマ ーg unpoJO

S o�o 6u1u1ewaJ � uau」ad

物学的に充分に低い線量であったため、 メラノー
マ細胞株の紫外線感受性の比較にも用いることができた。 メラノー マ細胞に紫外線を照射した後、細胞からDNAを抽出し、1%硫酸プロタミンで前処理した96穴プレ ー トを用いてDNA上の両ダイマ ー

b. c 6-4)photooroducts
1.2

1.0

1.0

eu~ 6�H

0.8• uu•QJ0SQV

EU~ 6マ 1 eg ueqJ0SQV

1.2

0.6
0.4

5

10

15

UV dose (Jim)

20

0.6
0.4

5

10

15

UV dose I J/m2 I

20

Fig.2 Induction of cyclobutane pyrimidine
dimers(a) and (6-4)photoproducts(b)in DNA from UV-irradiated humanmelanoma eel Is. DNA damage wasmeasured by the ELISA with monoclonal
antibodies against photolesions.

閥•

゜゜

\'

四KO

."]

100

G-361呂QHe匹〖 80？、ミヽ0�

● �3KO
0 G-361
0 Hewo

苔"'

＼＼
;
��し
60

'f

()

6

12

18

.,

:: 20

8!.

24

Repair tlme (h)Fig.3 Repair capacity for cyclobutane
pyrimidine dimers(a) and (6-4)photo­products(b) in melanoma eel Is. HM3KO,
G-361, and Mewo eel Is were UV
irradiated at 20, 15, and 10J/m',
respectively,to induce similar numbersof photo Iesions. The percentage of theinitial number of photolesions wasdetermined at various times after UV
irradiation.

0.8

0.2

0.2

00 80 .
60 40 20

量を定量することができた。 また、 この線量は生

a. Cyclobutane d1mers•。

b. (6-4)Photoprooucts

a. Cyclobutane d1mers

また、 3種類のメラノーマ細胞株の紫外線感受性をコロニ ー 形成法によって比較したところ、 メ
ラニン色素量の多い細胞株ほど紫外線に抵抗性であった。 この結果より、 細胞内のメラニン色素は、-56-

紫外線誘発DNA損傷の定試とメラニン色素のサンスクリーン効果

いることがわかった (Fig. 4)。

果より、細胞内のメラニン色素が紫外線によるDNA損楊の生成 および 細胞死を抑制することが証明された。
2. 2,

ー゜

前実験では、3人の異なる患者さんから樹立さ5

5

ドコサヘキサエン酸(DHA)によってメラニン
色素量を減少させた細胞を用いた実験'?)

,0ー 。

'
O

ー

p>pt ns ,uau」•d

K ● 0如叩L \ \
●e o

]＼＼

l- \

50

99

•K
O

100

゜

死をも抑制していると考えられた。以上の実験結<

その量に依存して紫外線による細胞死を抑制してれたメラノ ーマ細胞株を用いた。このため、細胞内のメラニン色素量が同じであっても細胞株ごと

10 15 20
UV dose (Jim2 lにDNA損傷生成量や紫外線感受性に差があった
可能性を否定できない。また、紫外線として uvc

Fig.4 UV-survival curves of cultured humanmelanoma cel Is. Survival after UV
irradiation was determined by thecolony-formation method.

を照射したが、 uvcは大気中で ほぼ吸収され るため、メラニン色素が実際に地表に到達する太陽光に対しても防御作用を持つかどうかを確かめる

次に、メラニン色素による両ダイマ ー 生成抑制
効果と細胞死抑制効果の関連を検討するために、
UV-protection factor (UPF; 紫外線防御能 を比で表したもの）を算出した (Table 2) 。

必要がある。これらの疑問点を解決するために、遺伝的背景が等しく、メラニン色素量のみ異なる
ようなメラノ ーマ細胞株を作り、メラニン色素自体の uvcおよびUVBに対する防御効果の証明を行った。
我々は、多価不飽和脂肪酸であるドコサヘキサ

Table 2 UV-protection factors(UPF s ) in threemelanoma cell lines

エン酸 ( DH A)にメラニン色素合成阻害作用の あ-------------------------------------------------------------------------------Cells

HM3KO

G-361

Mewo

ることを発見している 2 3) 。そこで、メラニン色

UPFs for cyclobucane dimers*for (6-4)phmoproduccs*
for cell killing!
Relative melanin concentration1

2.4士0.6
2.3土0.5
2.2士0.3
8.7士0.4

1.6士0.5
1.7土0.1
1.7士0.3
2.2土0.2

1.0
1.0
1.0
1.0

素を多量に含むヒトメラノ ーマ細胞株HM3KOにDHA--------------------------------------------------------------------------------

を処理して、細胞内のメラニン色素量をコントロー---------------------------------------------------------------------------------

ルする こ とにした。まず、DHAの細胞毒性をコロニ ー 形成法で調べた。DHA50µM 6日間処理で• Calculated from UV doses showing 0.5 of absorbance at 492 nm in Figs. 2a,b {the mean士 SD). The value of Mewo was expressed as 1.0.
§Calculated from UV doses showing 50 of pcn:cnt survival in Fig. 4 {themean士 SD). The value of Mewo was expressed as 1.0.
f Calculated from melanin concentration in Table I {!he mean士 SD). The
value of Mewo was expressed as 1.0は細胞毒性はほとんど認められなかった(Fig. 5)。

ー•—•ヽ+

100
Le>l>」ns :iuau」ad

各細胞株においてシクロプタン型ダイマ ー および(6-4)型ダイマ ー の生成抑制に対するUPF値がほぼ等しかったことより、メラニン色素は紫外線を遮蔽することにより両ダイマ ーの生成を 同様に抑制していると考えられた。さらに、これら両ダイマ

5010一生成抑制に対するUPF値と細胞死抑制に対す
るUPF値も ほぼ等 しいことがわかった。各々の

゜

25

50

75

DHA (µM)

細胞株の間で両ダイマ ー 修復能に差が見られなかったことも勘案すると、細胞内のメラニン色素は、両ダイマ ー の生成を抑制し、その結果として細胞-57-

Fig.5 Cytotoxicity of DHA. Cytotoxicity wasdetermined by the colony-formation
method.

また、 この 処理条件では、 細胞内のメラニン色
素量は、 溶媒のDMSOのみで 処理したコントロール

線防御効果を判定できると考えられた。 次に、 メ
ラノ ー マ細胞に紫外線(UVCおよびUVB)を照射し、生成するDNA損傷量をELISA法にて測定した。 その細胞株の約半分に減少した(Fig. 6)。

イマ ー の生成量は、 uvc 照射後およびUVB 照射後と

.¢

ー●

g \

- \

もに、 メラニン色素量の多い コントロ ー ル細胞株の方が、­

Cyclo切tone dlmers

DHA

g

ー〇 ●

100

200

JOO

400

UVB dose (J/m2 )I 6-4 ll>hotooroducts
0.5

匹

4
0

／

↓g

10

15
2

260

280

300

320

INC dose (J/m l

340

。

。

●1

1
0

5

Wavelength (nm}

2
0

2
•
0

0.5
DHA

3
0

_o ● _g』~6
マ " .uu•QJOSQV

?
_
c
_
／

4
•
0

1.0

6
•
0

g ~ 6',..,u,q,osqv

au UQQ.JO SQV

DMSD

8
•
0

2.0

240

／
人
｀

INC oose (JJ.,2 J

1.0

220

2
．
0

゜゜

15

Fig.8 Induction of cyclobutane pyrimidine
dimers in DHA- and DMSO-treated cells
irradiated with UVC (left) andUVB (right). Cyclobutane dimers were
measured by the ELISA method.

持っていた(Fig. 7)。

200

4
．
0

る以外には紫外線防御に関してほぼ等しい性質を゜

60

g ~6> lO auUOQJOSQ>I20

細胞内局在がほぼ等しく、 メラニン色素量が異な

10

0●

8
0

4
0

細胞株は、 細胞形態・メラニン色素の吸光曲線・

5

／ も●

0●

1.0

¢●

0 - 6
;5
0

ルのメラニン色素最の多い細胞株を用いて前回と同様の実験を行なった。 2種類の

1. 5

OHAg

ーCT ●

0
1

WU 26'• • auug 」OSQV

゜。

DHAを処 理したメラニン色素量 の少ない細胞
株と

／
／

1
1

6
Days

F i g. 6 Inhi bitory effect of DHA on
melanogenesis. Melanin content ,nDHA- and DMSO-treated eelIs wasdetermined.

コントロ ー

／

1.4

3

；

OHA

゜゜

DHA処理したメラニン色素量の少ない細胞株よりも若干少なかった(Fig. 8, 9)。

^
Y

¢

..
I ..
.
..

'r
『
-—. . .

▽\

60I 1ua1uou u=u•t•H
/

(LLOu

25 20 15 10

！
●
’
.+

結果、 シクロブタン型ダイマ ー および(6-4)型ダ

100

200

300

400

UVB dose (JimりFig.9 Induction of (6-4)photoproducts 1n
DHA- and DMSO-treated cells irradiatedwith UVC (left) and UVB (right).
(6-4)photoproducts were measured by
the ELISA method.

Fig. 7 Absorption spectra of melanosomal
fractions from DHA- and DMSO treatedce11 s.

また、 uvc およびUVBに対する感受性も、 メラニ
この結果より、 この2種類のメラノ ー マ細胞株

ン色素量の多いコントロ ー ル細胞株の方が若干抵を用いることによって、 メラニン色素自体の紫外抗性であった(Fig. 10)。
-58-

紫外線誘発DNA損傷の定鼠とメラニン色索のサンスクリーン効果

ニン色素量と紫外線防御効果(UPF値） との関係を

゜
ー

,
•
•
•
•
^
a
」
u
a
u
s1
n
.
;
．
，
•
•
,
l

11) 。

杉雑寸した (Fig,

v
,

―-’
D
ー 5
e
>
てこn u
a
u
」
a
d

Melan1n concentrat1on (JJg/111113 l

人
・

3.0

゜6．
0

100 200 300 400
UVB dose { Jim2 >゜

50

胞死抑制に対するUPF値がほぼ等しい値をとった。

uvcおよびUVBの両この結果より、 メラニン色素は方に対して防御効果を持つこと、 メラニン色素はー

口cyclobutane dimers
O (6-4)photopr叩ucts△ cell killing

DHA treated
HM3KO

HM3KO

↓

1

B
7
6
5
4
3
2
Relative melanin concentration

910

Fig.11 Photoprotective effect of melaninin melanoma cells with different
pigment levels. The relationshipbetween relative melaninconcentration (or melanin concent­ration) and UV-protection factor
among four types of melanoma cel Is
was shown using the present andprevious results. Only results of
UVC were plotted. Each point shows
the mean (土SD).

ー
メラニン色素による両ダイマ 生成抑制および細紫外線を遮蔽することによって両ダイマ

0
1

uvcおよびUVB照射後ともに、

』�{

o

O

UV-protection factor(UPF; 紫外線防御能の比）を算出したところ、

A

5
．
1

Fig.10 UV-survival curves of DHA- and DMSO­
treated cells. Survival after
UVC"(left) and UVB (right)
irradiation was determined by thecolony-formation method.

0
．
2

10
15
uvc dose I Jim2 l

2.5

/\fl
'
d
J
lQ
a
nu
」uo
e
u
ら3

゜

o
5

Y

g
\

＼

.
＾

ー
O
5
0.6

実験から得られたデ ー タも加えて、 細胞内のメラの生成を同様に抑制すること、 そして、 その結果として紫外線による細胞死をも抑制することが示唆され

tこ(Table 3)。
そして以下のことが明らかとなった。
1)

Table 3 UV-protection factors between DNA­and DMSO-treated cel Is

UVC-induced cyclobutane dimers0(6-4)photoproductsb
cell killingc
UVB-induced cyclobutane dimersd(6-4)photoproducts'
cell. killingc.
ReJat1ve meI anm concentration

DMSO---------

1.18土0.11
1.14士0.10
1.19土0.08
1.12士0.07
1.24士0.15
1.21土0.02
2.33土0.37

D------------------------------

クロブタン型ダイマ ー 生成抑制・(6-4)型ダイマ

oooooouAH:lll lllll

HM3KO cells treated by

細胞内のメラニン色素量が増加するほど、 シ一生成抑制および細胞死抑制に対する UPF値が増加すること。
2)

3 種類のUPFについて、 各細胞株のUPF値を結ぶと、 ほぼスム ー ズな3本の曲線が描けること。

3)abde Calculaied from UV doses showing 0.7°,0.4丸o.sd, or 0.2< ofabsorbance al 492 nm (the mean士SD). The values of DHA-trealed cells wereexpressed as 1.0.
c Calculated from UV doses showing 10 of percent survival (the mean士SD).
The values of DHA-1rea1ed cells were expressed as 1.0.

3種類のUPFの曲線がほぼ重なること。
これらの結果より、 メラニン色素が紫外線を遮蔽することによって両DNA損像の生成を抑制し、その結果として紫外線による細胞死をも抑制することが推測された。 さらに、 メラニン色素の紫外

しかし、 2つの細胞株間の相対的なメラニン色

線防御作用が強力であるため、 メラニン色素量が素量の差が2.33倍あったにも関わらず、 その紫外

比較的少ない状態でもある程度の防御効果が認め

線防御効果(UPF値）は非常に小さな値(1.12-1. 24)

られるが、 その効果はメラニン色素最が中等度にととまった。 この理由を検討するために、先の(2µg/mmりの状態で飽和してしまう事が推測され-59-た。 2つの実験で細胞内のメラニン色素量の比盛んである。 一方、太陽光中の紫外線によって、とUPF値が並行していなかったこと、および2番

しわ• しみ• そばかす・皮府癌なとさまざまな障目の実験でメラニン色素の紫外線防御効果が非常害が生ずることも事実である。 しかし、紫外線にに小さかったことは、このメラニン色素の紫外線よる障害を最小限に予防しながら、太陽光と上手

防御効果の飽和のためであったと考えられた。 こに付き合ってゆくことは可能であろう。
一般に、一生に被ばくする総紫外線巌のうち、の結果より、培養細胞を用いてメラニン色素の紫外線防御効果を証明する場合には、細胞内のメラ半分以上を青年期までに被ばくすると言われていニン色素量の差と同時に、メラニン色素の絶対的る。 このことから、紫外線対策をなるべく早い年

な最も非常に重要であることがわかった。

齢（幼少時）から、特に戸外での運動の際に行うことが大切である。 紫外線から皮rf1を守る方法とし

2. 3

免疫組織化学的染色法を用いた紫外線誘発て、帽子• 長袖のシャツ• 長ズボンなどの着用やDNA損傷の定量

サンスクリ ー ン剤の外用などが考えられる。 日本

現在、培養細胞レベルで認められたメラニン色

人の皮府には、メラニン色素が比較的多量に含ま素の紫外線防御作用が、皮問でも実際に見られるれている。 そこで、我々はメラニン色素も利用しことの証明を試みている。 多層構造をとる表皮でて紫外線防御することを提唱している。 具体的には、メラニン色素と核との位置関係が培養細胞には、 1)急に強い紫外線にあたらないこと。 あた

比べてより複雑である。 そこで、シクロプタン型

る場合にはサンスクリ ー ン剤などを使用して強力および(6-4)型ダイマ ー に対するモノクロ ー ナルにブロックすること。

抗体を用いた蛍光抗体間接法を用いて、紫外線照る場合、日光にあたった後に皮府が色素沈着しや射した表皮細胞内の両ダイマ

ー

生成量を定最する

2)慢性的に紫外線にあた

すい人は、紫外線量の少ない季節あるいは時間か系を作製している。 この方法を用いると、メラニ

ら少しずつ日光にあたる時間を延ばしていったり、ン色素の分布などの組織学的な検討とDNA損傷

あるいはサンスクリ ー ン剤 を併用して徐々に日焼の定量を同時に行うことが可能となる。 また、表け（色素沈着）し、内因性サンスクリ ー ン剤である

皮各層ごと、あるいは細胞1個ごとについての両

メラニン色素の量を徐々に増加させて紫外線防御

ダイマ

ー

を行なう。

生成量を定量することができるようにな

3) 日光にあたってもほとんど色素沈る。 皮府癌の発生には、幹細胞の性質を持つ基底

着しない人は、常にサンスクリ ー ン剤などを用い細胞におけるDNA損傷が引き金となると考えらて紫外線防御を行う。 この方法ならば、サンスクれている。 この方法を用いれば、基底細胞に生じ

リ ー ン剤の副作用・経済的負担• わずらわしさな

た両ダイマ

ー

の生成量も定量できる。 そ れゆえ、

メラニン色素やサンスクリー

どの問題を最小限にとどめ、子供にも応用できるン剤などの皮府癌予と思われる。 さらに、我々はサンスクリ ー ン剤な

防効果についての予測も可能となる。 現在のとことの紫外線防御効果の判定を、表皮細胞に生ずるろ、蛍光抗体間接法の基礎実験はほぼ終了し、まDNA損俄に対する防御効果(SPF)で表すことを提唱もなく本学に導入されるレ ー ザ ー 顕微鏡を用いてしている。 現在は、紅斑反応の抑制効果を指標と定最化する予定である。

して評価されているが、紅斑反応は生物学的な反応であるため、被検者間の個人差が大きく、最適

3

総

括

とは言えない。 一方、DNA損傷は光化学的反応の結果として、紫外線照射線量に依存して生成するため、検査のばらつきが少ない。 また、紅斑の太陽光にあたることは、人類にとっての基本的ー・

みならず、皮阿癌やその他さまざまな紫外線障害

ゴルフ ・ テニス ・ 釣りなどの屋外でのレジャ ー もに対する防御効果を反映することができる。 我々

な欲求のひとつである。 また、海水浴• スキ-60-

紫外線誘発 DNA担出の定屈とメラニン色索のサンスクリーン効果のモノクロ ー ナル抗体を用いた免疫組織化学的染色法が確立されれば、紅斑をおこさない程度の低線温の紫外線によって誘発されるDNA損俄の定量が、組織レベルで可能となるであろう。 さらに、
人工的に再構成した皮屑を用いて統一した規格を作製すれば、被検者も不要になる。 このことから、被検者によるばらつきも無くなり、 さらに精度・再現性に優れた方法となることが期待される。 本研究は、 現実的な紫外線予防方法の確立およびその効果の評価に大きく貢献するものと確信している。

文 献1) Muramatsu T., Kobayashi N., Tada H.,
Yamaji M., Shirai T., Mori T., Ohnishi T.
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A., Kibitel J.T. , Mitchell D.,RosensteinR., Spinowitz A., Citron M. Cancer Res., 52: 4227-4231 (1992)
3) Ley R.D.Proc. Natl. Acad. Sci.USA82 : 2409
-2411 (1985)
4) Ley R.D., Applegate L.A. J Invest.Dermatol.,
85 : 365-367 (1985)
5) Kripke M.L., Cox P.A., Alas L.G., Yarosh
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6) Mori T., M atsunaga T., Hirose T.,
Nikaido 0. MutationRes., 194 :263-2700988)

11) Matsunaga T., Hatakeyama Y., Ohta M.,
Mori T., Nikaido 0. Photochem.Photo松ol.,
57 : 934-940 (1993)
12) Londori D.A., Carter D.M., Condit E.S.
J Invest.Dermatol., 67 : 261-264 (1976)
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36 : 1930-1934 (1976)
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35 : 681-684 (1982)
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18) Yohn J. J., L yons M. B., Norris D. A.
J Invest.Dermatol., 99 : 454-459 (1992)
19) Huse 1ton C.A., Hi11 H.Z. Environmental
Mot.Mutag., 16 37-43(1990)
20)小林信彦、村松 勉、 山科幸夫、 白井利彦、
大西武雄、森 俊雄 放射線生物研究 28(4): 20-37 (1993)21) Kobayashi N., Muramatsu T., Yamashina Y.,
Shirai T., Ohnishi T., Mori T. J Invest.
Dermatol., 101 : 685-689 (1993)22) Kobayashi N., Muramatsu T., Yamashina Y.,
Shirai T., Hashizume R., Ohnishi T., Mori
T. "Photoprotection by melanin against

7) Matsunaga T., M o r i T., Nikaido 0.
MutationRes.,235 : 187-194 0990)
8) Mizuno T., Matsunaga T., Ihara M.,
Nikaido 0. MutationRes., 254 :175-1840991)
9) Mori T., Matsunaga T., Chang C. - C.,
Trosko J.E., Nikaido 0. Mutation Res., 236: 99-105 (1990)
10) Mori T., Nakane M., Hattori T., Matsunaga
T., Ihara M.,Nikaido 0. Photochem.Photo杭ol.,photoproduct type DNA damage formationand cell killing." In:Zeise L., Chedekel
M.R., Fitzpatrick T.B. (eds.) M elanin; Itsrole in human photoprotectio., Valderunar Pub­lishing Company, 炒141-150 (1995)
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shima S., Kobayashi N., Mori T. J Dermatol.
Sci., 4 : 115 (1992)(abstr.)

54 : 225-232 (1991)-61-

安定型アスコルビン酸誘導体の免疫賦活活性とそのメカニズム
岡山大学薬学部

格本

山

A stable form of ascorbate, AA-2P significantly enhanced anti-SRBC antibody productions
by cultured splenocytes at a concentration of 0.5rnM, as had been previously described with
AA-2G, whereas AA-2S was without effect. In this culture system, it was confirmed that AA-2G
and AA-2P were cleaved by lymphocyte's a-glucosidase and phosphatase, respectively, to releaseintact ascorbic acid. We also demonstrated that AA-2P synergistically enhanced the antibody
responeses with nerve growth factor (NGF) by T-cell depleted splenocytes, as had been previously
reported with AA-2G, whereas AA-2S did not. SRBC-induced expression of NGF receptor on B
cell surface was stimulated by AA-2P as well as AA-2G. These results indicate that AA-2G or
AA-2P, as an ascorbate source, may be a useful tool for finding new biological actions and for
elucidation of their mechanisms.

緒

養細胞に対し ても 作 用 を 発揮 す る 。 例 え ば、

言

AA-2G はヒト線維芽細胞におけるコラ ー ゲン合
ビタミンC はビタミンの中でもそ の働きや機成を促進する 6) 。 この場合、 培地中に含まれる血能について最もよく知られており、 それ故に研究

清また は細胞膜面上の a — グルコシダーセによし尽くされたかに見えるビタミンである。 しかし、り AA-2G から遊離したアスコルビン酸が本作用

近年細胞レベル、分子レベル並びに遺伝子レベルを発揮するしていることも明らかにされている。

の研究が進むにつれ、 今なお新しい機能の発掘と我々は AA-2Gをアスコルビン酸供給源として用

生体内での意義について知見が蓄積されつつある。

い、 牌細胞培養系において、 アスコルビン酸の抗

最近、 我々は新規安定型アスコルビン酸誘導体、体産生増強作用を初めて実証した 7 〉 。

ビタミンC

2- 0 - a -D-g 1 ucopyranosy 1-L-ascorbi c acidの免疫増強作用については、 古くより多くの研究(AA-2G)を見い出し、その酵素的大巌合成にも成功

者により報告されているが、 in vitroにおける細した 1-3) 。

胞レベルで作用が認められないことから、 例えば

AA-2G は熱や酸化に対し極めて安定であるが、抗体産生増強作用のメカニズムに関してはこれま経口投与された場合には、 i肖化管組織の a グルコ

で全く不明であった。 この原因がアスコルビン酸—

スとアスコルビン酸が生の不安定さにあることを証明した。 その後、 我々

じ、 それが吸収され抗壊血病作用（モルモット）

はアスコルビン酸の抗体産生促進作用が神経成長などのビタミンC活性を発揮する · 5> o AA-2Gは培因子 (NGF) により相乗効果を受けること を見

Immnostimulatory activity of stable ascorbates

ところ、 B リンパ球上のNGF受容体発現がアスコル

シダ

ーゼによリグルコ ー

4

いだした（投稿中）。 そのメカニズムを解析した｀

and it's mechanism

ヒ ン酸により増強されるという輿味ある知見を見いだしている（投稿中）。

Itaru Yamamoto

本研究では、 主に安定型アスコルビン酸誘導体
Okayama University

であるAA-2PとAA-2S について、 AA-2Gと同様の作用があるか否かにつき検討した。

-62-

― -―
—-

安定型アスコルピン酸誘導体の免疫試活活性とそのメカニズム

(A)

l l -

使用した。

-

ニ

動物：雌性BALB/cマウスは7週齢で（株）日本ク
レアより購入し、一定の環境下で馴化後10週齢で

NGF

FCS 含有 RPMI1640培地を24穴カルチャ ー プレ ー．

4Xl炉をSRBC抗原及びNGFなどの薬物と共に、10%

．

ASA 2

抗SRBC抗体産生応答：マウ スT細胞除去牌細胞

++＿
＋++

〗 〗

実験方法と材料

ト(NUNC)を用いて5日間培養した。 培養終了後細0胞を回収・洗浄後、補体並びにSRBC存在下、 プラー246
Anti-SRBCx10-2/Culture

ク形成細胞をcunninghamの方法 8) に準じて計数

8

(B)

した。
NGF受容体発現細胞の測定：培養細胞lXl炉をMEM

Medium

培地50µ1に懸獨し、ビオチン化NGF溶液6µ1を加SRBCぇ、氷冷下30分放置し、洗浄後0. 5% BSA 含有PBS+/IA-2Gに懸櫛しフロ ー サイトメトリ ー にて解析した。

+AA-2P+AA-2S

結 果+AsA
AA-2G は全牌細胞系においては、0. 25mM以上の+2-ME濃度で抗体産生を著明に増強することをすでに報
告している

7)

0

。 この増強作用はAA-2Gによる単なる非特異的な牌細胞の生存維持作用ではなく、特異的抗体産生細胞数の増加によること、すなわ
ち、分化促進作用に基づくことを明らかにしている。 一方、T細胞除去牌細胞系では0. 25mMのAA-2G
は単独ではほとんど増強作用を示さず、 また、
N G F も同様に単独では抗体産生に対し無作用である。 しかし両者を併用すると相乗効果が出現し、抗体産生は著明に促進される。
ここではAA-2Gと同様、 既知の安定型アスコ
ルビン酸誘導体であるAA-2P並びにAA-ZSにも抗SRBC抗体産生におけるNGF との相乗作用が認め

2

4

6

8

NGFR positive cells(%)

10

Fig.1(A) Combind effect of NGF and several
A s A der iv a t ives o n anti-SRBC PFC
response in Teel I depleted spleno­cytes.
(B) Flow cytometric analysis of Teel I
depleted splenocytes stimulated withSRBC in the presence of severa I As A
der i vatives, Sp I eno cy t es were cu I tured
with NGF (30ng/m I) and AA-2G (0. 5mM),
AA-2P(0. 5mM), AA-2S(0. 5mM). ASA(0. 5mM) or 2-ME (0. 5µM) for 5days(A) or 4days(B). NGF was added to thecultured medium at day 4. Significant
differences from each control was
expressed as •: P<O. 05, •• :<O. 01.

られるか否かを検討した。 その結果、図lAに示す
ように0.5mMのAA-2Pは単独では何等作用は認めら

リンパ球膜面上の NGF受容体の発現促進であるこ

れないにもかかわらず、30ng/ml のNGFを同時にとが明らかにされている。 そ こで、AA-2Pの 場

培地に添加すると、AA-2GとNGFの場合に認められ合にも同様の現象が観察されるか否かにつき検討たとほぼ同程度の相乗効果が認められた。

した。 その結果、図lBに示したように、抗原SRBC

ところで、先に我々が報告したように、AA-2Gの剌激下、0. 5mMの AA-2PによりNGF受容体の発現とNGFの相乗効果の 原因の 一 つはAA-2GによるB増加が認められた。
-63-

それに対し、AA-2S (0.5mM)及びAsA (0.5mM)

コルビン酸含量の間に相関性があるか否かを知る

では抗体産生における NGFとの相乗効果は認めらために、 培養Bリンパ球内のアスコルビン酸含れず、また AA-2SやAsAではNGF受容体発現促進効

巌を経時的に測定 した。 その結果、 NGFとの相果も認められなかった。 また、抗体産生促進効果

乗効果の認められたAA-2GまたはAA-2Pを添加したは認められるが NGFとの相乗効果の認められていときに、培養期間中、細胞内アスコルビン酸含最ない2 メルカプトエタノが培養開始時のレベルに維持されていることが判ーー

ル(2ME)でも、NGF受

容体発現促進作用は観察されなかった。 デタに明した。 それに対して、相乗効果の認められなかは示していないが、デヒドロアスコルビン酸やイったAA-2S及びAsAではコントロ ー ルと同様に培養‘ノアスコルビン酸に関しては、全牌細胞系で抗体

後期にはアスコルビン酸含量がほとんど消失して産生促進作用やNGFとの相乗作用、さらにはNGF受いた（図3)。

ー

容体発現作用もすべて認められていない 。
図2にはNGF受容体を発現している細胞数を示し

80

0
2

1

2

3

4

5

゜
゜

SRBC

0
4

Medium9

いることが判明した。

（

細胞では顕著に NGF受容体発現細胞数が増加して

s11
a�o こ Bu)にくらべ、AA-2Gまたは AA-2Pの存在下培養したB

06SEuaiuo�vsv H'f
n11
a�1?
J
\
u1

た。 図から明らかなように、抗原SRBCのみの場合

Days after addition

8

6

2

4

+2-ME

゜

+AsA

10

12

Number of NGFR expressing cellsXJ0-4/Culture

Fig. 2 F I OW Cy t o m e t r i C a n a I y S i S o f T
celldepleted splenocytes stimulatedwith SRBC in the presence of several
As A der ivatives. splenoc ytes were
cultured with or without SRBC in thepresence of AA-2G(O. 5mM), AA-2P(O. SmM),
AA-2S (0. 5 m M), ASA (0. 5mM) or 2- ME( 0.5µ,M) for 4days. Cultured cells(lXlO') w e r e i n c u b a t e d w i t hbiotinylated-NGF and then stored with
PE-conjugated streptavidin.

Fig.3 Time course of Intrace llular As A
contents in T cel I-depleted spleno­cytes. Sple·nocytes were cultured withSRBC in the presence of AA-2G(O.SmM:O·t
AA-2P (0.SmM: ●） ， AA-2S(O. SmM: ロ） ， ASA(0, 125mM: ●） for Sdays, Then the cel Is
were washed and lysed with TC A at theindicated days. Those supernatants
were analyzed by HPLC equipped with
ECD.
このことか ら、AA-2GやAA-2PのNGFとの抗 体産生の相乗効果やNGF受容体発現促進には一定の細胞内アスコルビン酸含嚢の維持が重要である
こと、すなわち、アスコルビン酸がその作用の本体であることが示唆された。

察

考次に、安定型AA-2GとAA-2Pのみでこのような作

これまでのビタミンCに関する研究には三つの用が認められ、AsAを遊離しないAA-2Sや不安定な

方向性がある。 第 ー はビタミンCの新しい生理活

AsAでは 認められなかったことと、 細胞内アス性並びにその作用メカニズムに関する研究である。

-64-

安定型アスコルピン俄誘導体の免疫試活活性とそのメカニズム

第二は新規アスコルビン酸誘導体の合成並びに天AA-2G の免疫賦活作用発現が酵素により切断さ然からの抽出•構造決定に関する研究であり、第れ徐々に生じたアスコルビン酸そのものに基づく

三はビタミン C 及びその誘導体の医療的応用であことを示唆するものである。そこで、アスコルビる。中でも新規アスコルビン酸誘導体の発見や開ン酸を12時間毎に5日間の培養期間中総計10回に発は、それをきっかけにビタミン C の研究を広範

渡り分割添加したところ、アスコルビン酸に抗体

囲に活性化する傾向がある。

産生促進作用のあることが認められた。

先に我々は 哺 乳 動 物 a—

グルコシダ ー

ゼや

その後の研究により、抗体産生におけるAA-2G

Bacill硲 stearothermophylus 由来CGTaseを用いてアとNGFとの相乗作用とAA-2GによるB 細胞上の NGF受

スコルビン酸と二糖または多糖から新規安定型ア

容体発現促進作用を見いだしたが、この作用もそ

スコルビン酸誘導体、 AA--2G が合成出来ことをの本体はアスコルビン酸であることを証明した。

発見した l - 3, 9) 。 AA-2G は酸化的条件下で安定

そこで本研究では、 AA-2G と同様、安定型アであり、生体に投与された場合または細胞培養系

スコルビン酸として知られるAA-2PやAA-2Sにおいに添加された時 には、a — グルコシダ ー ゼによても AA-2G で認められている抗体産生促進作用

りアスコルビン酸を遊離しビタミン C 活性を発揮など 一 連の作用が認められるか否かを検討した。

ビタミンCには IFN 誘導能や抗ウイルス作用、さな差異が観察された。すなわちAA-2Pのみに AA-2G

その結果、 AsA、 AA-2SとAA-2P との間で明確する叫

らには免疫増強作用があると言われている。しかと同様の免疫活性作用が観察された。これは、しながら、実験的にそれを証明することは極めて

AA-2G と Al!,.-2P の場合には、a — グルコシダ ー ゼ

困難である。その理由として、アスコルビン酸はやホスファタ ー ゼにより水解を受け、遊離したア

他のビタミンと異なり化学的に極めて不安定であスコルビン酸が培養期間を通じてリンパ球に対しること、また実験動物であるマウスやラットでは作用を発揮出来た結果であり、一方、 AsAは不アスコルビン酸を生合成していること、ヒトの場安定であり、 AA-2S はアスコルビン酸を遊離で合にも常時食事からアスコルビン酸を得ているこきなかったため、それぞれ作用を示すに至らなかとから、ビタミン C 投与により誘導されるったものと考えられる。

一定の効果を観察出来ないためと考えられている。そこ

AA-2GやAA-2Pのような安定型アスコルビン酸誘で、例えば細胞培養系でアスコルビン酸の免疫賦導体を用いることにより、細胞培養系でアスコル活作用などが観察されるならば、そのメカニズム

ビン酸の作用解明が可能となった意義は大きいもの解析や基礎的・応用的研究が可能となる。しかのと思われる。すなわち、培養ヒト線維芽細胞にしながら、これまでそのような報告はない。我々おけるコラ ー ゲン生合成のように、アスコルビン

もマウス牌細胞を用いたin vitro一次抗体産生系

酸によっても促進効果が観察できる作用はむしろにおいて、アスコルビン酸の作用を検討したが、稀であり、それ故にアスコルビン酸の生理作用•

既知の免疫賦括物質に見られるような抗体産生増薬理作用のメカニズム解明が遅れていたからであ

強作用は観察出来なかった

”

る。

。

ところで、著者らはAA-2G の生理活性、 薬理

一般に哺乳動物はアスコルビン酸を生合成し、活性に関する研究過程で、 AA-2G がアスコルビ

その1日合成最は体重60kg当たり少なくとも4g、ン酸と異なり、培養マウス牌細胞を用いた抗体産多いものでは12gを越えることが知られている。

生系において、顕著な抗SRBC PFC 応答促進作用を

一方、生合成能を欠くヒトの場合、ビタミン C

グルコシダ ー ゼの1日の所要量は 50mgと定められており、この量阻害剤（キャスタロスペルミン）の存在下では消で壊血病は予防できる。それではこの開きは一体示すこと 、そして本作用はa
失する こ と を 観 察した

7)

ー

何を意味するのか。ビタミン C のコラーゲン合成。 これらの知見は、-65-

促進作用を介しての抗壊血病作用以外に、ビタミ
ン C は生体の恒常性と言う基本的機構に対し、様々な形で 関与していで可能性があるのではないか。
筆者らが見い出した抗体産生増強におけるビタミ
ンCと神経蛋白質(NGF)の相互作用に関する•

transglu cosylation with rat intestialand rice seed a-glucosidases: It'si m p r o ved stability and structurede termination", Chem. Pharm., Bull., 383020-3023 (1990)

5) Wakamiya H., Suzuki E., Yamamoto I.,
A k i ba M., Otsuka M., A r akawa N,

知見は、 ビタミン C の生体防御作用を考える上で重要な意義を持つものと考える。 それと共に、こ"Vitamin C activity of 2-0-a-D-glucopy­
ranosyl-L-ascorbic acid in guinea pigs"]. Nutr. Sci. vitoin., 38 , 235-245 (1992)

れらの知見はビタミン C と神経系との直接の関わり合いを示しており、従来から示唆されているビ
タミン C の精神・神経機能への役割を研究する手がかりを与えたものと思われる l 0)6) Yamamoto I., Muto N., Murakami K.,
Akiyama J. "Collagen synthesis in humanskin fibroblasts is stimulated by a

参考文献

1) Yamamoto I., Muto N., Nagata E., .
Nakamura T.,and Suzuki Y., "Formation of

stable form of ascorbate, 2-0-a-D­
glucopyranosyl-L-aseorbic acid",]. Nutr.,_
122 871-877 (1992)

a stable L-ascorbic acid a-glucosidases

7) Yamamoto I., T anaka M., Muto N.,"Enhancement of in vitro antibody produc­

catalyzed transglucosylation", Biochim.
Biophys.Acta., 1035 44-50 (1990)
2) Muto N., Nakamura T., Yamamoto I.,"Enzymatic formation of a nonreducing

tion of murine splenocytes by ascorbic
ac id 2 - 0 -a- g l ucoside",

Int. ].

L-ascorbic a c i d a-gluco s idases

Immunopharmacol., 15 319-325 (1993)

catalyzing site-specific transglucosy­8) Cunningham A. J., Szenberg A. "Further

latio n from rat small i ntestin e",

improvements in the plaque technique fordetecting single antibody forming cells",]. Biochem., 107 222-227 (1990)
3) Aga H., Yoneyama M., Sakai S., Yamamoto I.
"Synthesis of 2-0-a-D-glucopyranosyl
L-ascorbic acid by cyclomaltodextrin
g 1 u c a n o t r a n s f e r a s e f r o m Bacillus
steo,rothermophilus," Agric. Bio(Chem., 55 1751

Immunology., 14 599-600 (1968)
9) T a n aka M., Muto N., Yamamoto I.

"Characterization of Bacill硲 stearothermoph枷s,c ycl odextr in glucanotransferase inascorbic acid 2-0-a-glucoside for­mation",Bioehim. Biophys. Acta,1078 127-132-1756 (1991)(1991)
10)ボ ー リングL. 「ビタミンCとカゼ、 インフル

4) Yamamoto I., Muto N., Murakami K.,
Suga S., Yamaochi H. "L-ascorbic acida-glucoside formed by regioselective

エンザ（村田晃訳）」共立出版(1977)-66-

化粧品による光老化の抗酸化的制御に関する
細胞生物学的及び生化学的研究
群馬大学医学部

宮

地

良

樹

Photoaging i's a term that denotes the gross and microscopic cutaneous changes induced bychronic sun exposure, which is quite different from intrinsic chronological aging both
qualitatively and quantatively. Among the various insults brought by ultraviolet (UV) irradiation,
reactive oxygen species (ROS) and lipid peroxides are one of the most reasonable candidates for
explaining actinic injuries in photoaging.
In the present study, using an experimental animal model of photoaging, we investigated thetime dependent antioxidant enzyme changes as well as dermal glycosaminoglycan levels by_
disaccharide analysis. We have found that SOD activity was increased by repeated UVB
irradiation, but catalase was not, indicating that the skin SOD and catalase activities are notcoordinately regulated by a long-term UV irradiation and that the SOD activity, which has beenreported to decrease after acute actinic·injury, is induced by chronic photo-oxidative stress.
We have also demonstrated that the total amount of main disaccharide units increased by
UV irradiation confirming the previous histochemical findings.
Another important progress made during the present investigation was the development of
the three-dimensional culture system supplemented with L-ascorbic acid 2-phosphate using
dermal fibroblasts from photoaged murine skin. This method should provide a promisingtechnique to evaluate the capacity for regulating the photoaging process by cosmetics in the near
future.

緒

医療費か使われてる疾患である 1 - 3) 。 しかし、光言

老化は予防あるいは制御可能な老化現象であり、高齢化社会を迎えて、加齢による皮府老徴に対一般の人々の啓蒙が重要であるが、現在のところする関心も高まり、また皮膚悪性腫瘍患者、とり被服やサンスクリ ー ンなどによる物理化学的な光わけ日光角化症、基底細胞上皮腫、有棘細胞癌な防御のみ可能である。 この光老化の本質的な制御との患者数が明らかに増加している。 これらの疾手段が開発されれば医療経済の面からみても福音患に共通していることは、長期にわたる紫外線曝と考えられる。
そこで、今回の研究では、 ヘアレスマウスを用露による蓄積性の光線皮膚傷害が、 高齢期に露

光部皮rii 病変としてあらわれる点である。 すなわ

いた光老化モデル を作成し、得た試料を皮府抗ち、紫外線生物学の研究対象として克服されるべ

酸化能、皮阿ムコ多糖の側面から検討するとともき課題と考えられる。 日光露出部にみられる皮府に、次のステップとして光老化モデルマウス由来

老徴は光老化として通常の非露光部皮府の老化と線維芽細胞の三次元培養系を確立・検証することは、質的にも量的にも明確に区別される加齢現象

で、将来、培養下での紫外線照射および各種酸素で、整容的な観点からも、光発癌とともに莫大なストレスによる抗酸化能、過酸化脂質レベルの変Cell biological and biochemical studies on

折、 コ ラ ー ゲン架橋結合の解明をめざすことにし動 4) 真皮ムコ多糖の組成および量的変化の二糖分

anti-oxidative regulation of photo­

た。 さらにこれらの変化が化粧品として投与可能

aging by cosmetics

な抗酸化剤の外用というドラッグデリバリ ー によYoshiki Miyach1

りとのように修飾され、 それが究極的に光老化制

Gunma University

御に貢献しうるか否かを明らかにしたいと考えている応 7)
0

-67-

2

実

3)ムコ多糖二糖分析

験

9)

まず、租ムコ多糖を精製のうえ、 コ ンドロイチ

I)光老化モデルマウスの作成

ナ ーゼ ー

8)

ABC消化したのち、PMPラベルし、HPLCにて、 ヒアルロン酸、 コ ンドロイチン硫酸、デルマ

譴齢の雌性ヘアレスマウス (HOS: Hr-1)を購入し、週3回、マウス背面剃毛皮附に、 1 回あたり
UVB(290-320nrn)を40rnJ/crn八UVA(320-400nrn)

タン硫酸を構成する△Di-HA (HA)、△ Di-6S (CS)△ Di-4S (CS)、 △ Di-4S (DS)を測定した。

を30 J/crn吋つそれぞれ照射した。 1 群を12匹と14)皮府抗酸化能測定 0)

し、最高36週間照射した。

SOD活性は、チトクロ ー ム法にて、 カタラ ー
ゼ活性は、紫外部吸収法によりそれぞれ測定した。

2)皮府試料の準備
UVA、UVB照射群、非照射コントロー ル群の三群115)線維芽細胞の三次元培養

それぞれ より12、24、36週後に4匹ずつのマウ
スから皮阿片を採取し、実験まで 80℃にて保存した。 凍結試料は、 フリ ー ザ ー ミルにて粉砕し所定の実験に供した。

)

マウス線維芽細胞に先立ち、 ヒト線維芽細胞を—10%FCS添加DMEM に0. lmMのリン酸化アスコルビン酸 (Ase• 2-p) を加えて、 co 臼ンキュベ ー ターで培養した。 細胞を収穫したのちムコ多糖分析

圃
●
□

に供した。
ADl-4S(CS)
ADl-4S(DS)ADI-HA

6 weeks

12 weeks
1

UVA

10

。

。
Control

15

5

名苓シ A』
p 3El
ー
OEu

10

5

l
q竺giA』
p :1
El
OEu

15

UVB

Control

24 weeks
P<0.01

〇
ー
UVB

10

。

。
UVA

15

5

5

Control

UVB

36 weeks
g
ヱ8p
A A』
p iEl
ー
OEu

1

品l
a
A A』
p :I
El
OEu

15

UVA

Control

UVA

Fig. 1 The total amount of skin main disaccharide units in UVA-,UVB-irradiated and unirradiated control mice at 6th.12th,
24th and 36th week.

-68-

UVB

化粧品による光老化の抗陪化的制御に関する細胞生物学的及び生化学的研究△ Di-4S(DS)8Control··•··UVA

6

-uve

••

•
•ふ→

嶋

i

i­

．
．
．
．
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I．
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と．．
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嶋

＝6-aMピp6w11owu
-

．
一
▲
．
．
．
．
．
．
．

6

――

8

12

゜゜

36
weeks

24

�
6

6

゜。

2

2

OEu
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iMAl
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—

一

△ DI-HA

12

2鼻

36
weeks

△ Di-4S(CS)
8
6
鼻

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p6w11
aMAl
461
1

2 ,

． ... I-· ．一—
．

6

゜゜

, 2

2

36
weeks

Fig. 2 The sequential changes of skin main disaccharide units,
hyaluronic acid-derived△ Di-HA (HA) ,dermatan sulfate
derived △ Di-4S (DS) and chondroitin-sulfate derived△ Di-4S (CS), in UVA-,UVB-irradiated and unirradiatedcontrol mice.
鼻

士口
係

3

UVA、 UVB照射群 とも 有意な増加を示した(P<果

0. 0 l)。 二糖レベルの分析では、 すべて増加傾向を示すものの、UVA照射36週の △ Di-HA (HA)をI) 光老化モデルマウスの皮店ムコ多糖分析

コ ントロールヘアレスマウスでは、 △ Di-HA

除いて統計的な有意差はみられなかった(Fig. 2)。

(HA)と △ Di-4S (DS)がほぼ全ムコ多糖の95%

二釉組成をみると、照射36週でUVB、UVA、 コント

を占め、その全体量はFig. lに示すように、照射ロ ー ル群の順に、△ Di-HA (HA)の減少、△ Di-4S

12週からUVA照射群で増加しはじめ、24週では、(DS)の増加傾向が認められた(Fig. 3) 。

-69-

ISi
•

D

△ D1-4S(CS)△ 01-45(05)△ oi-HA

12 weeks

Control

Control

UVA

UVA

UVB

UVB
0

20

一

6 weeks

40

60

80

100

20

24 weeks
Control

UVA

UVA

UVB

UVB
20

40

60

60

80

36 weeks

Control

0

40

80

100

％

゜

20

40

60

80

100

％

100

％

Fig. 3 The compositional change of skin main disaccharide units
in UVA-, UVB-irradiatcd and unirradiated co11trol mice at
6th, 12th, 24th and 36th week.
..... ·UVA-• UVB155゜>弓 BO OS UPI
S

ml
�,

0
ー

(
ui
a1
0Jd 6E二·-contr

12

24

36

Weeks

Fig. 4 The effect of UVA or UVB irradiation on SOD activity ,nhairless mice skin. Results are expressed as mean士SEM(n = 4) . *p<O. OS;analyzed by two factor ANOVA followed
by Fisher's protected LSD test.

2)皮屈抗酸化能の変化

迦後に上昇したSOD活性は、 24週までにほほコ

UVB照射群では 一 様に有意な(P<0.05) SOD

ントロ ー ルレペルに復した(Fig. 4)。 カタラ ー

活性の上昇がみられたが、 UVA照射群では、12ゼ活性は、 全経過を統計処理するとコントロ ー ル-70-

化粧品による光老化の抗俄化的制御に関する細胞生物学的及び生化学的研究

群およひUVB照射群に比して、 有意な低下かみ

細胞外マトリックスも産生し、あたかも真皮の様られた(Fig. 5)。

相を呈す る よ う に なった 。 単層培 養に比し 、

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20

•

DNA量にして約5倍となり、ムコ多糖の二糖分折でもFig, 7に示すように、 Asc•2-p添加群の方がより正常ヒト真皮のムコ多糖に類似するようにな

control

った。
● △Di-6sロ△Di-4s(CS)● △Di-4s(DS)四 △Di-Os□ △Di-HA

％
100

80

゜

60

12

24
Weeks

36

40

20

3)線維芽細胞の三次元培養

Fig. 7 The composit1onal change of maind1saccharide units in the medium andthe eel I layer supplemented with orwithout L-ascorbic acid 2-phosphate.
The eel I layer supplemented with Ase
2-p beeame eloser to that of thedermis mainly due to the inerease of△ Di-4S (DS)゜

Fig. 5 The effect of UVA or UVB irradiation
on Catalase activity in hairless miceskin. Results are·expressed as
mean士SEM (n = 4) . *p<O. 05, "n<O. 01;
analyzed by two factor ANOVA
followed by Fisher's protected
LSD test.

Dermis(n =7)

Asp·2- pを添加することにより、20日間の培養で、 Fig. 6に示すように、線維芽細胞は重層し、Cell layer
Cell layer
with Ase 2-p without Ase 2-p(n =3)(n :4)

4

考案

今回の研究から判明したことを列挙すると以下のようになる。
1) 光老化モテルマウスの皮腐変化は、ヒト光老化を反映したものであり、光老化研究に供することが可能であること。

2)

Fig. 6 Microscopic finding of the eel I layer
supplemented with L-ascorbic acid2-phosphate. Multi layered fibroblasts
supplemented with L-ascorbic acid2-phosphate are surrounded by a dense
extracellular matrix.

長期紫外線反復照射による皮屑抗酸化能の変化は、SODとカタラ ー ゼとでは挙動が異なること、
急性紫外線照射では減少するSOD活性も、 慢性反復照射ではむしろ誘導されること、UVAとUVB と

-71-

5

では、異なる変化を示すこと。
3)

総

括

真皮ムコ多糖の二糖分折では、従来の組織化

学的変化をほぼ反映した変化を量的に把握できた

光老化モデルマウス皮膚を用いて、長期反復紫こと、これらの変化は UVA、UVBにより差異があり、外線による皮膚抗酸化能、ム コ多糖組成、 コラ ー

しかも照射回数に依存して変化していくこと l 2)0ゲン架橋形成などに対する影響を検討した。 同時

Ase ・ 2-pを添加したヒト線維芽細胞培養系でに、線維芽細胞三次元培養系を確立することによ4)ー

は線維芽細胞は重層し、コラゲンやムコ多糖をり、将来の抗酸化剤投与による光老化制御実験系

産生すること、ムコ多糖の組成は、真皮に類似しとしての応用、化粧品による光老化の抗酸化的制ていること、などの諸点である。 さらに、現在判御を展望した。

明しつつある事実として、ヒト日光露出部皮膚の文

ム コ多糖分折においても、光老化モデルマウスとl献、さらに、ヒト

1. Yoshiki Miyachi, "Photoaging from an

線維芽細胞の三次元培養系において コラー ゲン産

oxidative standpoint", J Dermatol. Sci., 9 79

同様の所見が得られつつあり

3)

ー

生を電顕的に確認し、 また コラ-86 (1995)

ゲン架橋結合に”

2. 宮地良樹、 “老化の趾床 一 皮膚 、活性酸素•フついても生化学的に解析する技術を確立した（いリ ー ラジカル、5 181-186 (1994)

ずれも発表準備中）。

3. 宮地良樹、 “紫外線防御、NMシンポジウム

これらのデー タに基づき、今後の検討課題とし””

1) 光老化モデルマウス由来線維芽細胞の三次元

4. 宮地良樹、 “皮膚老化と過酸化脂質 、Geガatric

培養の確立。

Medicine.,32 1069-1072 (1994)

同培養系を用いて、in vitroにおける紫外線

2)

5. 宮地良樹、 “活性酸素病態学(3) ー 皮盾科領域

照射を含む新たな酸素ストレスに対し、線維芽細における抗酸化剤の臨床応用

胞の抗酸化能、過酸化脂質量がどのように変動す

56 503-513 (1994)”

西日本皮膚科

6. 宮地良樹、“皮膚抗酸化療法とフリ ー ラジカル＂

るかの検証。
同じく、 コラ ー ゲン架橋結合やムコ多糖組成

3)

光と皮膚 日経メディカル311 155-158 0994)ては以下のような実験が求められよう。

Mebio.,11 (4) 72-77 0994) -がどのような挙動を示し、それが光老徴をどあよ7. 宮地良樹、 “抗酸化剤による皮膚疾患の治療

うに説明しうるかの検討。

”

日皮会誌、104 1608-1609 (1994)”

最終的に、cosm eticsとして外用可能な抗8. 宮地良樹、“紫外線儀害モデル 、細胞工学別冊

酸化物質（現在実用化しているB —カロテンやビタ

活性酸素実験プロト コー ル、 谷口直之監修

ミンEなどとの比較も含めて）をin vitr吋支与し、秀澗社283-287 (1994)

4)

上記の変化をいかに制御しうるかの検索などであ9. Tadayoshi Higuchi, Kazunori Ohnishi,る。

H i r o aki H a ya shi, O s a m u Ishikawa,

これらの検討により、長期紫外線照射による変Yoshiki Miyachi "Cha n g es in skin

一 部でも抗酸化物質投与により制御可能であdisaccharide compon ents correlate with

化のることが判明すれば化粧品に配合することにより、

t h e sev erity of sclerotic skin in

光防御よりもさらに積極的な抗光老化戦略手段と

systemic sclerosis" , Acta. Dem叫ol. Venereal.,

しての有用性が明らかになり、臨床応用が可能と

74 179-182 (1994)

なるものと期待される。

10 K a t s u yuki Okada, Yu m i ko Non aka,
Kazunori Ohnishi, Osamu Ishikawa, Yoshiki-72-

化粧品による光老化の抗帷化的制御に関する細胞生物学的及び生化学的研究

Miyachi, UTime-dependent effect of chronic

Miya chi, "Disac charide ana 1 ysis of the

UV irradiation on superoxide dismutase

skin glycosaminoglycans in chronicallyand cata lase activity in hairless miceultraviolet-irradiated hairless mouse,"]. Dermatolぷ，in press
13 Yumiko Takahashi, Kat suyuki Okada,skin" , J Den湿ol.ぷ，8 183-186 0994)
11 Osamu Ishikawa, Yoko Kojima, Yoshiki
Miyachi, UDisaccharide analysis of dermal

Kazunori Ohnishi, Osamu Ishikawa,

fibroblast derived glycosaminoglycans

Yasushi Igarashi, Yoshiki Miuachi,in the three dimensional culture",]Dem皿ol. Sci., 8 203-207 (1994)"Disaccharide analysis of human skinglycosaminoglycans in sun-ex posed andsun-protected skin of the aged people"

12 Yumiko T akahashi, Kat suyuki Okada,
Kazunori Ohnishi,Osamu Ishikawa, Yoshiki]. Derrnatol. Sci., in press-73-

太賜光紫外線誘発DNA損傷とヒト細胞における修復金沢大学薬学部階堂

修

We analyzed the induction and repair of various kinds of DNA damage in human cells
exposed to a solar UV-simulator, by means of an enzyme-linked immunosorbent assay or an
immunoslot blot conjugated with enhanced chemiluminescence (ISB-ECL) system. When we
irradiated normal human cells with up to 1!)1/ m・ of UVC (germicidal lamps, predominantly
254nm), we could detect the induction of both cyclobutane thymine dimers (TT-dimers) and(6-4) photoproducts (64Ps) in their cellular DNA in dose-dependent manners. Normal humancells completely excised 64ps by 8hr after the exposure, whereas the cells excised only 50% of
initial amount of TT-dimers by 24hr. On the other hand, the xeroderma pigmentosum cells
beloging to complementation group A (XPA) could not excise both TT-dimers and 64ps.
We succeeded to detect the induction of the Dewar isomers of (6-4) photoproducts in humancells exposed to a solar UV-simulator (Oriel) by using a monoclonal antibody DEM -1 specificfor Dewer photoproducts (Dewer-P) in DNA. Normal human cells excised Dewer-P from their
DNA faster than TT-dimers, but slower than (6-4) photoproducts. However XPA cells defective
in DNA repair could not excise any kinds of DNA damage at all.

1

序 論

長の紫外線のDNAへの効果とともに、混在する他の波長の紫外線による複合効果をも併せ考慮する必太陽光紫外線は295nm�400皿の波長の長波長紫要があることになる。 これまでヒト細胞への紫外外線を含むが、そこに含まれるUVB (295�320nm)

線の効果を調べるのに、専ら254nmの単一波長に近とUVA(320�400nm)は、様々な人体影響、例えばい紫外線を特異的に放射する殺菌燈が用いられて免疫能の低下や皮贋がんの発生をもたらすことか

きたが、得られた効果は太陽光紫外線の効果を近知られている。 太陽光紫外線は前述の様に極めて似するものですら無いことが明らかである。 従っ

広範囲なスペクトルを有する長波長紫外線であるて、太陽光紫外線の生物・人体影響を解析する場

ため、そこに含まれるUVBがDNAに様々な損像を誘

合には、太陽光紫外線に特徴的な損像を指標とし起すること、およびUVAが誘起された損傷の一つて研究をおこなうべきと思われる。

である(6-4)photoprciductを光異性化する l. 2) と紫外線の照射によって種々の損儀か DNAに誘発いう特徴かある。 即ち、太陽光紫外線の生物学的されるが、前述の様に損傷の種類とその生成量は影継を調べる場合には、そこにふくまれる各種波

波長依存的である。図 — lに代表的な損傷の構造式を示した。254nmの紫外線照射 (UVC)によって、DNA中の隣合ったthymineが cyclobutane thymine

DNA damege and its repair in human cells
exposed to solar light

dimer (TT-dimer)と (6-4)photoproduct (64P)に変換されるが、Dewar photoproduct (Dewar-P)

Osamu Nikaidoは生成されない。 一方、320nm付近の紫外線が照Division of Radiation Biology,
Faculty of Pharmaceutical Sciences

射されると、64PがDewar-Pに光異性化されるので、Kanazawa University

太陽光紫外線などの長波長紫外線によって生成さ-74-

太腸光紫外線誘発DNA損傷とヒト細胞における修復

cH
゜
人ー／
z
zー〈

中の紫外線をシミュレ ートする照射装置 (Oriel社

3

゜

81192型）、並びに太陽光紫外線そのものを紫外線源として実験に用いた。 シミュレ ート照射装置の

ー

o

�'
�

゜

示した。

゜

。I

CH3

TT Dewar photoproduct—Solar simulator (Oriel)

紅証

図 ー l. 紫外線で誘発される thymine を含む各種の捐傷

Action spectra of a solar simulator (Oriel)

5
5

aoue1
pe,
,
1a>1
1
e1
a1:1

T(6-4)T photoproduct

照射する紫外・可視域のスペクトル分布を図 ー 2にThymine

5 店

戸；I

Cyclobutane thymine dimer

5
2

。

⑬

れるのは主として TT-dimerとDewar-P となる。

350

450

550

650

750

Wavelenghth (nm)

これま で我々は、
紫外線によって誘発されるDNA損傷を特異的に分別検出するモノクロ ー ナル抗体

図 — 2. 太陽光紫外線シュミレ ー ト照射装醤から照射される

紫外・可視域のスペクトル分布の樹立を行って、ヒト細胞の損傷修復動態や修復の機構について解析してきた。 本研究では、太陽光紫外線で特異的に誘発されるDewar-P のヒト細胞での生成と修復の動態を解析することを目的とした。

紫外線の線量率は、 uvc の場合東京工学のト
プコンUV-radiometer で、 太陽光紫外線シミュ

2

レ ー ト照射装置に よる照射の際には、 Mecam社

実験(Scotland) の ultraviolet digital radiometer(360nm) で測定した。 紫外線照射直後、 あるい

2. 1

細

胞

は 一 定時間37℃でインキュベ ート 後、細胞を取りヒト細胞として GUN-2M(ヒト皮膚由来正常2倍体出し DNA を抽出した。

細胞）、WI38VA13 (ヒト胎児肺由来SV40形質転換細胞）とHeLa S3 (ヒト子宮頚がん由来細胞）を用

2. 3

各種細胞の太陽光紫外線感受性の検討いた。 またA相補性群に属する色素性乾皮症患者

100�200 個の各種の細胞を直径10cmのシャ ー レ

由来細胞 (XP lEH, XP20SSV) を用いた。 全ての細に播種した後、 6時間インキュペ ートした。 つい

胞はダルベッコ変法 MEM培地に10% の濃度に仔牛で氷冷PBS(-) で細胞を洗浄し、氷冷浴下太陽光紫胎児血清を加えた培養液によって、37℃の co 臼

外線シミュレ ート照射装置で照射を行った。 照射

ンキュベータ内で培養された。

後加温した培養液を再び加え、37℃で2週間イン
キュベ ートした。 シャ ー レ上に形成されたコロニ

2. 2

紫外線照射

ー

数から生存率曲線を求めた。

各種の細胞10 叶固を直径 lOcrnのプラスチックシ
ャ ー レに培養して 2 日後、細胞をlOrnlの氷冷PBS(-)
で2 回洗浄し、細胞の乾燥を防ぐため厚さ lrnrnの石
英ガラスをシャ ー

2.4

損傷の検出

紫外線を照射後、一定時間インキュベ ートされレ上面にかぶせ、氷冷下で種々た細胞から DNA を抽出し、DNA 中に残存する各種損の紫外線を照射した、 主として 254nrn の紫外線傷をモノクロ ー ナル抗体を用いて免疫化学的に定(UVC) を照射する殺菌燈（東芝 GL-15) 、 太陽光量検出した。

-75-

2.4. 1

正常ヒト由来GUM-2M、 ヒト由来の無限増殖する

DNA抽出。細胞を PBS(-)で洗浄

Wl38V A 13細胞、 子宮頚がん由来HeLaS3細胞では、後、 E D T A と SD Sを含む細胞溶解液で処理し、共に太陽光紫外線に対する感受性に大きな違いは水野等の方法によった

3〉

トした。

無い結果が得られたが、色素性乾皮症A相補性群

つ いでphenol/ ch 1 oroforrn: i soarny !alcoholに属するXPl EH細胞は、 太陽光紫外線に対し高い

proteinase Kで一晩37℃でインキニペー( P/CIA)でDNAを抽出した。抽出されたDNA 標品を

感愛性を示した。この結果は uvcを照射した際のトした後、再XP 1 EH細胞の高感受性と矛盾しない（未発表）。

RNa s e で 37℃、1時間インキュベーびP/CIA処理によりDNAを抽出し、ethanol沈殿後、PBS(-)に溶解した。

uvcを照射されたヒト細胞におけるDNA損傷

3. 2

の修復

2. 4. 2

図 —4にuvcを照射された正常ヒト、XPA群細胞にモノクロ ー ナル抗体

本実験にはTT-dimerを認識するTDM-1 3> 。TDM-2
4)

4)

おけるTT-dimerと64Pの修復動態を調べた結果をとDe war-Pを示した。XPA (XP20SSV) 細胞は両損楊の除去修復を用いた（各種抗体の認識能力を示さない。正常ヒト細胞は64Pを6-12時間するエピト ー プについては図 ー1を参照のこと）。

以内に完全に除去するが、TT-dimerは24時間を経抗体、64Pを認識する64M-2抗体

認識するDEM-1抗体

2)

過しても約40-50%か除去されるに過ぎないこと
2. 4. 3

紫外線損傷検出法が明らかである。なおつけ加えるならば、10J/m 2のuvc照射ではDewar-Pは全く生成されない。

各種のモノクロ ー ナル抗体を用いた酵素標識免疫抗体法(Enzyme-L inked Immunosorbent Assaychemiluminescence(ISB-EC L)を適用した方法で損傷を検出した。

果

。

結

3

3. 1

20008060 8 20 0
1 1

一ー
一

sans6u1
pu1
q
,qy
8d
u O U80J
e111
1: ELI SA) 5 〉 とimmunos lo t blotにen hanced

12

18

24

0

6

12

18

24

Repair lime (hr)

太隔光紫外線を照射されたヒト細胞の感受性の検討

図 —4. UVCIOJ/m'を照射された各種のヒト細胞における損
侶の修復動態（左図はTDM-1抗体で検出された
TT-dimer, 右図は64Pを示す）

太陽光紫外線シミュレ ー ト照射装置を用いて細3. 3胞の感受性を検討した結果を図 —3に示した。

るDNA損傷の誘発

1000

太陽光紫外線シミュレ ー ト照射装置で各種のヒ

GUN-2M
Wl38VA13
HelaS3
XP-1EH

1

哀）
一
m
>
l
こn
s

゜

0
ー
.01

太隔光紫外線を照射されたヒト細胞におけ

卜細胞を照射し、その直後にDNAを抽出して各種の損俄を測定した結果を図 ー 5に示した。 左右両図の縦軸は異なっていることに注意されたい。なお、損儀の生成量をUVC(殺菌燈紫外線）等量で示した。
TDM-2抗体で測定されたTT-dimer に比較し、64M-2

O

10

20

30

Solar Dose (kJ/m 2)40

図 — 3. シュミレ ー タ ー 照射装貸で照射された各種ヒト細胞の生存率曲線抗体で検出された64Pは生成量が低いことが明らかである。 その理由はシミュレ ー ト照射装置によって生成された64Pが光異性化されてDewar-Pに変化したことによる。 事実、生成量は低いながら-76-

人船光紫外線誘発DNA損侶とヒト細胞における條役

4

〇△●
-―

も右に掲けた図からも明らかなようにDewar-Pの考察生成が認められる。
これまでの細胞を用いた多くの研究か UVC( 殺35 2 9 6 3
1 1
(E l
r)
••
op::,
,
>n
＂

点
こ

8
1

菌燈）を紫外線線源として用いたものであり、太陽光紫外線、もしくはシミュレ ー ト照射装置によ心 60 80 100

る長波長紫外線照射の効果を調べた実験は数える程しか無いのが現実である。 我々がこれまで報告し、また本報告で明らかになったように、太陽光
紫外線は、広範囲にわたる各種の波長の紫外線を含み、その複合効果が現われることから、太陽光図—5. 太隔光紫外線シミュレート照射装醤で照射されたヒ卜細胞における種々の損傷の誘発（左図はTT-dimerと64Pを、 右図はDewar-Pの誘発動態を示す）

3.4

紫外線の生物・人体影響を uvcを用いた実験から推定することは出来ないという結論が導かれる。
本報告では、Dewar-Pの正常ヒト細胞における修復動態を解析した。 一方、 修復能の欠損を示す

太陽光紫外線シミュレ ー ト照射装置で照射

XPA群細胞は何れの損傷をも除去できない結果がされたヒト細胞におけるDNA損傷の修復得られた（未発表）。

照射後、横軸に示した時間インキュベートした

Dewar-Pは太陽光紫外線の照射によった生成さ細胞よりDNAを抽出し、 残存する損傷量を測定れる64Pか、同時に太陽光紫外線に含まれる320nm

したところ、 uvcで得られた結果と同様に64Pの除の波長によって効率よく光異性化されることに去はTT-dimer のそれより早いことが分かった

よって生じる。 今後は太陽光紫外線に照射された（図 ー6)。 一方、Dewar-Pの除去動態を見ると、正常ヒト細胞では24時間の間に約70%を除去する能

ヒト皮附組織で、TT-dimerやDewar-Pがどの様に生成・除去されるかを明らかにする予定である 6)

力があることが分かった。
以上の結果から、正常ヒト細胞におけるDewar­

5

Pの除去は TT-dimerより早く、64Pより遅いという結果が得られた。

総

0

括

近年のオゾン層の減少に伴い、これまで我々が経験したことの無い短波長紫外線が地表上に到達

GUN-2M Cell

細胞遺伝子に誘発される様々な DNA損傷であることは疑いを容れない。 短 波 長 紫 外 線の増加は
TT-dimerと64Pを生成し、64PはさらにDewar-Pに効率よく変換されることから、その修復動態を

一

〇
0
5
ー
6u1
u1
ewa 』a6mEep O文°

し、皮府がんの多発する可能性が示唆されている。
皮府がんの原因の 一つは、太陽光紫外線によって

゜゜

解析することが重要である。 本研究の結果から
Dewar- Pの除去はTT-dimerと同様に遅滞すること(6-4)photoproduct12
6Time after irradiation (hr)が明らかになったが、その変異原性についての詳細な研究が今後必要となると考える。 また、 コス

24

メトロジ ー の観点から見ると、 UVBのみならず UVA
をも効率的に防護する製剤を開発することが急務となるであろう。

図—6. 正常ヒト細胞における各種損イgの修復
-77-

6

謝

study with 64M-l antibody specific for(6-4) phot oproducts",Mutation Res. DNA

辞R�拉ir., 254 175-184 (1991)
4) Mori T.. M.Nakane, T. Hattori, T. Matsunaga.

我々は長年にわたって太陽光紫外線生物学研究の樹立を訴えてきたが、 今回コスメト

ロジ ー

財団

M . Ihara and 0 . Nikaido, "simultaneousから研究助成を受けたことにより、 その碁礎を築

establishment of monoclonal antibodies

く研究を完成させることが出来た。 深く感謝すると共に貴財団の今後の発展を祈るものである。

specific for either cyclobutane pyrimidine
dimer or (6-4) photoproduct from the same

引用文献

m o u s e immunized with u ltra violet
irradiated-DNA", Photochem. Photo杭ol., 54

1) Taylor J. -S. and M.P. Cohrs, "DNA, light and
Dewar pyrimidone: the structure andbiological significance of Tp T 3", ]. Am.
Chem. Soc., 109 2834-2835 (1987)
2) Matsunaga T., Y. Hatakeyama. M. Ohta. T.Mori.

225-232 (1991)
5) Matsunaga, T., T. Mori and 0.Nikaido. "Basesequence specificity of a monoclonaa n t i b o d y binding t o ( 6-4) p h o t o­and 0.Nikaid o , " E stablishment andproducts", Mutation Res., 2 3 5 187-194 Cl 990)

characterization of a monoclonal antibody

6) Chadwick C.A., C. S.Potten, O .Nikaido,
T.Matsunaga, A. R. Young, "The detection ofrecognizing the Dewar isomers of (6-4)
p h o t oproducts", Photochem. Photobiol., 57

cy c l o b u t a n e thy mine dimer s , 6-4
photolesions and the Dewar photoisomer in

934-940 (1993)
3) Miz uno T., T . Matsunaga, M. Ihara and0.Nikaido, "Establis血ent of a monoclonalsections of UV-irradiated human skinu sing sp ecific antibodies.and th edem onstration of dep th p enetration

antibody recognizing cyclobutane-type
thymine di田 ers in DNA: a comparative

effects", Photochem. Photobiol., in press.

-78-

”

”

いわゆる しみ （肝斑など）の発症機構とその増悪因子に関する研究
秋田大学医学部

富田

秋田大学医学部

秋田大学医学部靖• 前田

憲舟• 松永純

Normal human epidermal melanocytes became swollen and more dendritic with an increasein the amount of tyrosinase activity and immunoreactive tyrosinase-related protein 1 (TRP-1)
when they were cultured for 2days with each one of [Nle 4, D-Phe 7] a melanocyte-stimulating
hormone(a MSH), follicle-stimulating hormone (FSH) and luteinizing hormone (LH). Estradiol,
estriol, progesterone and ACTH affected the melanocyte morphology and the amount of TRP1, but did not increase the tyrosinase activity. These data suggest that all of those hormones,
especially a MSH, FSH and LH, may be respe!hsible for the induction of facial hyperpigmentationsuch as chloasma.

1

緒

言

わらず、 ヒト色素細胞を用いてこれらのホルモン
種々の女性ホルモンの効果を、 細胞形態の変化、メラニン生成に関与する酵素の増加を指標にして多くの日本人女性は、中年になると顔面の色素沈着、 いわゆる

“

しみ

”

調ぺた。

に悩まされる。 この顔面の色素沈着の大部分は、肝斑と呼ばれる、眼周囲や2頬部の褐色の色素増加で、 早い女性で30歳前後よ実験り出現する。 この肝班の発症機序は不明であるが、妊娠時には増悪すること

1)

2·1

、 女性により月経時に材料、 閉経後の女性に肝斑が見られ実験に使用した主な試薬は以下のとおりである。

ないこと、 避妊用のピルにより肝斑が誘発される

phorbol-12-rnyristate-13-acetate (PMA),insulin,も濃くなることこと

3)2)

h ydrocortisone, N 6 , 0 2 -dib utryl cyclic、 そして男性には極めてまれであることな

どから、黄体形成ホルモン、 卵胞剌激ホルモン、

adenosine3', 5'-rnonophosphate

卵胞ホルモン、黄体ホルモンなどの女性ホルモン[Nle 4 , D-P h e 7 ] a rne lanocyte-stirnulatingが肝斑の発症および増悪に関与していることが推hormone

察される。

stimulating hormone( 以下単 にaMSHと略す），(dbcAMP),follicle­F( SH)以上はSigma製。

さてこれらの女性ホルモンが直接に色素細胞に

fime lanocyte-stimulating hormone{J( MSH)

働いて、 メラニン色素の増加をもたらすのか否か(Bachem Co.), luteinizing hormone

L( H)(UCB

bioproducts), MCDB153 (極東製薬）， epidermalは、 肝斑の発症機序を知る上で重要であるにも関

growth factor
Effect of pituitary and ovarian hormons on
normal human melanocytes in vitro.

( Clonetics Co.), humanb asic fib rob last growth factor(bFGF)(Amersham社）。

Yasushi Tomita
School of Medicme(EGF) (湧永製薬）， bovine

pituitary extract

2·2 色素細胞の培養

Akita University

色素細胞の培養は、 以前に我々が開発した吸引水疱を用いた方法によって行った 4) 。 簡単にその

-79-

士口
徐

3

方法を述べる。健常人男性（年齢20-24オ）の前果の直接作用を調べた報告はいまだにない。 そこで3·1

本研究において、培養ヒト正常色素細胞に対する腕をヒビテンで消毒後、抗真菌剤ビフォナゾ
含有クリ

ー

ー

下垂体ホルモンのTRP-1への影響

まず下垂体前葉から分泌される性ホルモンであルる黄体形成ホルモン(LH)、卵胞刺激ホルモン(FSH)

ムを滅菌ヘラで塗布する。20mlのディ

スボサプル注射筒の外筒を4ヶ所または8ヶ所皮膚について、同じ下垂体から分泌されるACTHと、 f3に密着し、陰圧(300-350mmHg)で、1時間-2時

色素細胞刺激ホルモン(/3 MSH)とともに比較検討

間吸引すると表皮と真皮が遊離し、吸引水疱が形した。またすでに色素細胞にたいする刺激効果が成される。表皮全層よりなる水疱蓋を無菌 的に切報告されているa色素細胞刺激ホルモン (aMSH)

除し、それを0. 25% I、リプシンEDTA/PBS液で37℃、

8, 9)30分処理して、表皮細胞をバラバラに分離する。

/3MSH、aMSH、ACTH、FSH、LH について、 それぞ

これら表皮細胞の大部分は角化細胞で、色素細胞

れ終濃度がlng/rnl、lOng/rnl、100ng/rnl、lµg

は数％しか含まれていないが、 後述の培地にて培/rnlになるように培地へ加えて培養した後、色素養を続けると、角化細胞は増殖せず分化をとげ死細胞中のTRP-1の相対量を測定し、 それぞれの平

滅し、いずれ色素細胞のみとなる。

均値土SDを図1に示した。
"P<0.05...・・P<0.01
P<0.001.... P<0.0001

色素細胞の形態とチロシナ ー ゼ活性およびチロシナ ー ゼ関連蛋白量の測定

30

□口巴曰●

2·3

を、陽性コントロ ー ルとして加えて検討した。

単離した色素細胞を20ng/mlPMA、 ウシ脳下垂体

゜0.001

0.01
0.1
1.0

抽出液含、EGF、インシュリンとハイドロコルチゾ
L.du 卜ンを含む10%FCS/MCDB153培地で4日間培養後、10%FCS/MCDB153のみの培地に交換し、さらに3'日間培養した。この初代培養ヒト色素細胞に種々のホルモンを添加し、二日間培養した後にメタノー

I r·-T'lll I ·f'II I f-·.1ぎI。 nNone
MSH pMSH ACTH FSH

ル／アセトンで固定した。 これを抗チロシナ ー
5>ゼ関連蛋白1抗体 (TMH-1)

トーとFITC抗ラットlgG抗体で染色し、個々の細胞の一個あたりの相対蛍(tyrosinas e-related protein 1、TRP-1) 量の相対変化を調べた。また蛍光顕徹鏡で写真を撮り、色素細胞の形態変化（樹状突起の数、細胞周
囲長、細胞面積）を イメ ー ジスキャナ ー を用い、すでに報告した方法 6) で測定した。またチロシナ
ゼ活性を前田らの方法 ” で定量した。

2·4

LH

図1. 下垂体ホルモンによる色素細胞内チロシナ ー ゼ関連
蛋白1への影響0.001µ,g/mlから1.0µ,g/mlまでの濃度の種々のホルモンを培地に添加して 、 色素細胞を2日間培養した後 、 細胞を固定し 、 チロシナ ー ゼ関連蛋白 1 (TRP1)の相対岳（細胞1個当たりの平均値＋／ 一 標準偏差）を測定したr
MSHはfimelanocyte-stimulating hormone色素細胞刺激ホルモンを 、 p MSHは[NI e', D-Phe'] a me I anocyte­
stimulating hormoneを 、 ACTHは副腎皮質刺激ホルモ
ンを 、 FSHはfol I icle-stimulating hormone卵胞剌激ホルモンを 、 LHはluteinizing hormone黄体形成ホルモンを示すく光 強 度 を 測 定 して 、 チロシナ ー ゼ 関 連蛋白1

ー

―

統計的処理

個々の色素細胞30個について蛍光強度、 樹枝状

TRP-1は、メラニン生成の場であるメラノソ ー

突起の数、周囲長、面積の それぞれの平均値と標ムに局在し、 チロシナ ー ゼとともにメラニン生成

準偏差を算出した。 有意差検定にはStudent'sに関与している 1 0) 。したがって、TRP-1の増加は、

t-testを用いた。

メラニン生成機能の充進を意味している。

-80-

いわゆる

“

しみ. (/Jf斑なと）の発症機構とその憎 :m 囚fーに関する研究

aMSH 、 ACTH 、 FSH、 LH において、 lng/ml か

全てについて著しい増加を示した。

た。 特に、 lOOng/ml と lµg/ml のFSH では著しい増加を認めた。 一方、 /3MSHは lµg/ml を除き、
図 l 中の無添加のNoneとほほ同し値を示し、 TRP-1

下垂体ホルモンの細胞形態への影響
生体表皮基底層に散在する色素細胞は、紫外線などの刺激により、 メラニン生成か充進し、か

aEl
a1
」"d
a
』d J

3·2

800

ao
11

巌の増加を認めなかった。

つまた周囲の角化細胞ヘメラニン頻粒を盛んに転。 従って細胞形態の変化も色素細胞の活動性の指標にな

600
500
400
300
200

゜

は樹枝状突起を増加させ、かつそれらを延長させ
II)

700

゜

0.001
0.01
0.1
1.0
10

100

送することは周知の事である。 その際、色素細胞
たり、細胞自体が大きくなったりする"P <0.05""P <0.01
000P< 0.001....P < 0.0001

(µm)

ロ
ロ
ロ
回
·
m

ら 1µg/mlで濃度依存的に TRP-1 の増加が認めらにおいて樹枝状突起数、細胞周囲長、細胞面積の

図3

None

下垂体ホルモンによる色素細胞の周囲長への影響
実験条件は図1と同様 C グラフは細胞1個あたりの平均周囲長＋／一標準偏差を示す ぐ
図中のMSHは(3melanocyte-st1mulating hormone色素細胞剌激ホルモンを 、 p MSHは[Nie', D-Phe'J o:mela­nocyte-stimulat ing hormoneを 、 ACTHは副腎皮質剌
激ホルモンを 、 FSHはfol I icle-stimulating hormone
卵胞剌激ホルモンを 、 LHはluteinizing hormone黄体形成ホルモンを示す ぐると考え測定した。 細胞形態の測定として、細胞1個あたりの樹枝状突起の数、細胞周囲長（複数の樹枝状突起の長さの和を反映するものとして）、
細胞面積のそれそれについて定量した。

LHのみか、細胞周囲長に有意の増加を示さなかったことを除けば、全てのホルモンが多少の違いがあっても、いすれも細胞形態を変化させた （図2-4) 。 特に /3MSH と aMSH は、 0. 01-1. Oµg/ml

゜

・P <0.05""P<0.01···p <0.001....P<0.0001

(µm')

0.001
0.01
0.1
1.0
10

3000

□口回 曰匿曰

i

3

゜

0.001
0.01
0.1
1.0
10

2000

1000

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7

「
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ー

a:) i
ad sa1ppuaa

図2"P < 0.05""P <0.01···P < 0.00
1....P < 0.0001

None

pMSH

下垂体ホルモンによる色素細胞の樹枝状突起数への図4. 下垂体ホルモンによる色素細胞の胞体の大きさ（面積）への影響

実験条件は図1と同様 ，、 グラフは細胞1個あたりの平均突起数十／ 一標準偏差を示す 』 図中のMSHはf3 me I a­
nocyte-stimulat,ng hormone色素細胞剌激ホルモンを 、 pMSHは[Nie', D-Phe'] amelanocyte-stimulating
hormoneを 、 A_CTHは副腎皮質剌激ホルモンを 、 FSHは
fol I I c I e-st ,mu I ating hormone卵胞剌激ホルモンを 、LHはluteinizing hormone黄体形成ホルモンを示す C

実験条件は国と同様 C グラフは細胞1個あたりの平均面積＋／ 一標準偏差を示す c 図中のMSHは/3 me I anocyte-stimulating l1ormone色素細胞刺激ホルモンを 、 pMSHは[Nie', D-Phe'] o:melanocyte-st imulat ing
hormone. を 、 ACTHは副腎皮質刺激ホルモンを 、 FSHは
fol I icle-stimulat1ng hormone卵胞刺激ホルモンを 、LHはluteinizing hormone黄体形成ホルモンを示す C

里�·迎
月／芦

-81-

ル、 エス トリオーエスル、 プロジェス テロ

6

トラジオ

ー

7

卵巣から分泌される女性ホルモンとして、

ルとエ

ス

トリオ

ー

ル で は、(p<O. 001) に認め

30

0口□口●

"P < 0.05..P<O 01・・・P< 0.001....P< 0.0001

゜

1.0
10

None

0.001
0.01
0.1
1.0

0.1

゜

られた（図5)。

0.01

2

ンに、 TRP-1 量の増加が有意

0.001

3

0. 001-1. 0µMにおいて、 また lµM プロジェステロ

゜

4

トラ ジ オ

ー

5

エ

ス

ppuaa
a�Jad sa1

ン 、 17(0H) ー プロジェステロン について検討した。

口口 回 日 閾 四・P<0.05..P<〇.01···P<0.001····P< 0.0001

3·3 性ホルモンのTRP- 1への影響

Estradiol

Estriol

Proge 17{0H)Pro
sterone gesterone

L'du L図6. 女性ホルモンによる色素細胞の樹枝状突起数への影智
実験条件は図 5 と同様 C グラフは細胞 1個あたりの平均突起数十／一標準偏差を示すぐ

20

10

it:

EstrlolProgesterone·P<0.05..P < 0.01... P <0.001
・P< 0.0001

17(0H)Pro
gesterone=a::iJad J
aaE忘 d

図5. 女性ホルモンによる色素細胞中チロシナ ー ゼ関連蛋
白1への影愕
0. 001µ.M から1. 0µM までの濃度の図中に示すホルモ

600
500

一

ンを培地に添加して 、 色素細胞を2日間培養した後 、細胞を固定し 、 チロシナ ー ゼ関連蛋白 1(TRP-1) の相対岳（細胞1個当たりの平均値＋／一標準偏差）を測定
した r

700

゜

(µm)
800

ー
0 1
0 0 1 00 0． 0． 0． 1． 1

Estradiol00ロロ■已

゜
None

400
300
200

゜

100

3·4

性ホルモンの細胞形態への影響

エストラジオ ー ル、 エ ス トリオ ー ル、 プロジェNone

ステロン 、 17(0H) -プロシェス テロンの細胞形態に対する影孵を下垂体ホルモンの場合と同様に調図7. 女性ホルモンによる色素細胞の周囲長への影啓
実験条件は図 5 と同様 ， グラフは細胞 1個あたりの平均周囲長十／一標準偏差を示すぐべた（図6-8)。

17(0H) — プロジェス テロンの樹枝状突起数と細胞周囲長に対して有意の影態を示さなかった事を除けは、 いずれの性ホルモンも細胞形態へ強い影密を与えていた。 エ ストリオ ー ルにおいては、

lnMから 10µMま定濃度依存性に効果が強まったが、

エストラジオ ー ルでは0.01と0.1µMで強い効果を3·5減少を示している（図6-8)。

胞中のチロシナ ー ゼ活性に対する影勝を検討した。

示し、 それより高濃度の lと10µM では逆に効果がホルモンのチロシナ ー ゼ活性に対する影響

本研究で用いたホルモン全てについて、 色素細

-82-

いわゆる

3000

゜

0.001

考

察

(µm')

しみ. (/Jf斑など）の発症機構とその研也池Ifに関する研究

400 日 口 閾 四·P<0.05.. P<0.01...P< 0.001.... P< 0.0001

“

0.01
0.1

日本人をはじめ黄色人種の中年女性に多い肝班

1.0の発症機序は、現在不明である。 妊娠時の婦人の

0
0
0
2

皮府の色素が増加すること l) 、月経周期の終り頃に眼周囲の色素が増加すること 2) が知られている。
また皮I胄科の日常診療で気付くことであるが、閉

0
0
0
1

叉3 』ad ea』<
一

10

経後の女性には肝斑が減少していくことからも女性ホルモンと肝斑との関係をうかがわせる。 月経時あるいは妊娠時にはMSHのほかにLH(黄体形成ホNoneルモン）、FSH(卵胞剌激ホルモン）、エストロシェン（卵胞ホルモン）、フロジェステロン （黄体ホル

図8. 女性ホルモンによる色素細胞の胞体の大きさ（面積）への影界
実験条件は図5と同様 で グラフは細胞1個あたりの平均面積＋／ 一 標準偏差を示す Cモン） なとの女性ホルモンの血中濃度か増加することから、これらのホルモンが色素沈着に関与していると考えられる。 またアメリカでは避妊用のピルを内服している女性の約29%に肝斑が発症す

図9に示すように、高濃度の/3MSH、aMSH、FSH、れるエストロジェンやブロジェステロンか肝斑のLH、において、チロシナ ー ゼ活性の増加が認められた。 エストラジオー

ジェステロン、17(0H)

ル、エストリオーーると報告されていること a) などから、ピルに含ま発症に関わっ．ていると推測される。

ル、プロ

Snellら l 2) の動物実験の結果でも、卵巣を摘除

プロジェステロンにおい

したモルモットにエストロジェンを投与すると、ては、有意の増加か認められなかった。

皮団のメラニンを増加させることか観察されてい0 1
O O． O ．
1ーる。 その場合、少量のプロジェステロンはややメ
ラニンを増加させるものの、大量のプロジェステ
ロンは逆にメラニンを減少させるとい う。Sne11
らの動物実験以来、女性ホルモンの色素生成に対2する影態をみた研究の報告は見当らない。
ところで 、魚類、両生類に おいては、MSHが0

エト — — -11L

1(
＝Jao,nw ) Al!>弓 If aseu1so,A1

D□ l
JD

3

"P<0.05

色素細胞に直接作用して、皮府色の調節に関与している事は、あまりにも有名である。 このMSHが、ヒトの肝斑の発症に関与するのではないのかと考え 、肝斑患者の血中MSH量の測定が行われたようであるが、positive dataが得られていない。

図9. 種々ホルモンによる色素細胞内チロシナーゼ活性岳への影恕
0.001µ.g/ml から 1. 0µ. g/m I までの浪度の MSH(色素細胞刺激ホルモン）、 pMSHA([Nle', D-Phe'] a mela­nocyte-stimulating hormone) 、 ACTH(副腎皮質刺激ホルモン） 、 FSH(卵胞刺激ホルモン） 、 LH(黄体形成ホルモン）を、また0. 001M から 1.OMまでの濃度の図中の女性ホルモンを培地に添加して 、 色素細胞を2日間培蓑した後、細胞を固定し 、 チロシナーゼ活性を測定したr グラフは細胞1個当たりの活性平均値＋／一標準偏差を示す で

例えば、 ビルにより発症し た 肝斑患者の血中MSHは決して高くはなかった 3) 。 そんな訳で現在ではMSHが肝斑 の発症に関係しているとは考えられていない。 しかし培養ヒト色素細胞では、MSHによって細胞内のcAMPが増加することが知られており、またチロシナ ー ゼ活性の増加も報告されている l 3) 。そこで本研究では、このMSHを女

-83-

＇

性ホルモンの効果を比較する上ての、 positive

は肝斑が見られなくなる。 閉経後のホルモン動態

controlとして加えた。

を見ると'.:L ストロ ー ジェンが著しく減少するの

本研究において、検討した3つのバラメ ー タ ー 、に対して、そのnegative feedbackとしてFSH、LH

すなわちは細胞形態の変化とTRP-1そしてチロシが著しく増加する 4 J。 もしFSHとLHか肝斑野出現

ナ ー ゼは、いすれも表皮での色素増加に関係するに関与している とすると、 閉経後のFSHとLHのパラメである。 つまり紫外線照射により皮増加と肝斑の消失は矛盾してくる。 ホルモンの動府のメラニンが増加するが、このとき表皮基底層態からみると、むしろエストロジェンやプロジェに散在する色素細胞が大きくなり、そして樹枝状ステロンが肝斑の形成に関与しているように見え突起が著しく延長し、 周囲の角化細胞にメラニンる。 しかし今回のin-vitroの実験結果では、 エス

I l) 0

トロジェンやプロジェステロンは、色素細胞の形

ー

タ

ー

顕粒を盛んに配送することが観察されている
またチロンナーl

態変化に対して直接刺激効果をそれなりに示して

ゼはメラニン生成の律速酵素、つ番重要な酵素であることははいるが、 TRP-1やチロシナ ー ゼに対しては有あまりにも有名である。 TRP-1は褐色のメラニ

意な作用を示さす、強力な肝斑を引き起こす犯人

ン生成に関与する蛋白として知られていたが、メとするには、もの足らない。 たが エ ストロジェン

ラニン生成経路の下流で働< dihydroxyindoleあるいはプロジェステロンかある細胞に作用して、carboxylic acid oxidase (DHICA oxidase)であ

その細胞か色素生成促進因子を産生して、その結まりメラニン生成で一

る こ とか最近判明した

lO)。 従ってチロシナ ー

果肝斑が生ずる可能性かある。 今後この点に関しての検討を進める必要がある。

ゼとTRP-1の増加は、 色素細胞内でのメ ラニン
生成の冗進を意味しており、また色素細胞の樹枝状突起の延長は、増加したメラニン頼粒の配達の文

献増加を意味していると考えて良い。

l)Snell RS., Bischitz PG., "The rnelanocytes

結果に示したように、LHの細胞周囲長とプロジ

and melanin in human abdominal wall skinェステロンの細胞面積に対して有意の効果を示さ

a survey mad e at different ages in

なかった事を除き、今回調べた全てのホルモンがb oth s e x e s and during preg n a ncy",
J Anal., 97 361 (1963)

色素細胞に剌激を与え細胞形態の変化を誘導した。
2)

TRP-1も/3-MSHとプロジェステロンを除き、他のSnell RS

Turner R"Sk·in p1gmentat1 on

ホルモンで大なり小なりの反応を示した。 特に

in relation to the menstrual cycle",

FSH、
LH、 エ ストラジオ] Invest Dermatol., 47 147 (1966)

ールにおいては、著しい増加を示した。 しかしチロシナー

3)

ゼ活性はaおよび

Resnick CS.,

"Melasma induced by oral

/3-MSH、FSH、LHで有意の増加を示したのみてあっcontraceptive drugs", ].A.M.A .. 199 601

た。 細胞形態の変化とTRP-1そしてチロシナ ー ゼ(1967)の増加の3つのパラメ ー ター4) Tomita Y., Yamamoto H.. Sato C., et al. ,は、 今回調べたホルモンの刺激にいつも平行して反応する訳ではない"Eff i c i e n t c u l t u r i ng o f hu m a nので、これらはそれぞれ異なった、 レセプタ

melanocyt es from suction bli$ters",ーとTohol?11 ].EゅMed., 147 219 (1985)

シグナル伝達系を持っているようてある。 それでもa-MSH、FSHそしてLHの3者は、細胞形態変化、ー

5)Tomita Y., Shibahara S., Takeda A., etタ

al. "The monoclonal antibodies TMH-1 andを増加させた事から、生体内の色素細胞に対し

TMH-2 specifically bind to a protein

チロシナ

ー

ゼ活性、TRP-1最の3つのバラメ

ー

encoded at the murine b·-locus, not toても直接に作用する可能性を強く示している。

the authe ntic tyrosinase encoded at

ところで、 前にも述べたように閉経後の女性に

-84-

いわゆる

“

しみ

”

f-に関する研究（肝斑など）の発症機構とその憎悪囚：：

c-locus", J Invest Dem皿ol., 96 500(1991)
6) Tomita Y., Iwamoto M., Masuda_ T., et al10) Kobayashi T., Urabe K., Winder ., A et

"Stimulatory effect of prostaglandin

interactions with other melanogenic

E2 on configuration of normal human

enzymes", Pig Cell Res., 7 227 (1994)

melanocytes in vitro", ]. Invest. Dermatol.,11) Quevedo WC. Jr, Szabo G., Virks J., etal. "Me lanocyte populations in UV­
irradiated human skin", ]. Invest. Dern叫ol.,

89 299 (1987)
7) Maeda K., Tomita Y., Fukuda M., et al.
"Effects of staurosporine, PMA and
A23187 on human melanocyte cultures withdibutyryl cyclic AMP", Br,J,Der印atol.,al. "DHICA oxidase activity of TRPl and

45 295 (1965)
12) S n e l l RS. "Ho r m ona l cont rol of
pigmentation in man and other mammals" ,In : Advan ces in biology of skin, vol.

126 118 (1992)
8) Lerner AB., M cGuire JS., "Effect ofVlll, The pigmentary system.Pergamon Press,
Oxford, p447, (1996)

a MSH and /3 MSH on the skin color ofman", Nature., 189 176 (1961)

13) Pawelek JM., "Factors regulating growth9) Le e TH., Le e MS., "Stu dies on MSH
induced melanogenesis:effect of longterm

and pigmentation of melanoma cells",

administration of MSH on the melanincont e nt and ty rosinase activity",14)倉智敬―, “女性内分泌機能の異常と皮膚病”
変 現代皮府科学大系2B. 中山書店p96 ,]. Invest. Dermatol., 60 201 (1976)

Endocrinology., 88 155 (1971)(1981)-85-

尋常性座楢の発症機序の解明のための皮膚の保湿機能と脂質代謝に関する研究
新潟大学医学部

山

本

綾

子

In acne vulgaris, abnormal follicular keratinization is important for comedo formation, yet
no precise mechanisms of comedogenesis is known. The present study examined the inter­
relationship between sebum secretion rate (SSR), and lipid content and water-barrier function(WBF) of stratum corneum (SC) in 36 acne patients and 29 control subjects. All major SC lipid
classes were separated and quantitated by thin-layer chromatogrphy/photodensitometry. WBF
was evaluated by measuring transepidermal water loss (TEWL), and hygroscopic property andwater-holding capacity of SC. SSR for 3h was significantly larger in patients with moderate acne
than in control subjects, but no significant difference was noticed between patients with mild acneand control subjects. Significant differences between acne patients both moderate and mild andcontrol subjects were noted in the amount of sphingolipids (ceramides and free sphingosine), but
not for any other lipid classes. Furthermore in acne patients, lower amount of sphingolipids wereobserved corresponding to diminished WBF. These results suggest that impaired WBF caused
by decreased ceramides may be responsible for comedo formation, since barrier dysfunction isaccompanied by hyperkeratosis of follicular epithelium.

1

緒

言

Downingら 2) は、 座癒患者の皮脂分泌の冗進によって角層のセラミドlに結合している脂肪酸に

尋常性座癒（座癒）は、 思春期に一般的な皮府疾

皮脂由来の脂肪酸が多く含まれ、 リノ ー ル酸含有患である。 しかしその発症機序についてはいまだ量が相対的に減少していることを指摘した。 すな

不明の点が多く、 治療についてもその効果は充分

わち、 毛包上皮における必須脂肪酸欠乏状態が、とは言えない。

バリア ー 機能を低下させ、propinibacterium acnes座癒の最も初期の病理組織学的変化は、 脂腺性(P acnes)の増殖をもたらし、 炎症を惹起すると推毛包の毛包凝斗下部の過角化によって引き起こさ察した。 また、Melnikら 3) は角層の剥離の調節れる面胞形成である。 これまで、 面飽形成に及ぽ·因子として、 コレステロ ー ルサルフェイトの役割

す脂質の役割に関して種々の研究がなされている。

に注目した。 彼らによれば、 皮脂分泌の充進によな か でもKligman 1 >の遊離脂肪酸説が古くからる遊離脂肪酸の増加の結果、 コレステロ ー ルがエ

知られている。 これを要約すると皮脂分泌の冗進ステル化される割合が増えるために、 遊離コレス

によって増加した遊離脂肪酸が刺激性を有するた

テロ ー ルが減少し、 コレステロ ー ル／コレステロ

めに、 毛包上皮の過角化を来すというものである。

ーさらに80年代後半にあいついで2つの仮説が提言化が誘導される。 この2つの説は、増加した皮脂がされた。

角質細胞間脂質を希釈すると推測している点で共ルサルフェイト比を低下させ、 毛包上皮の過角通している。 しかしこれらの説では座癒が皮脂分
泌量の最も高い20 歳代 -30 歳代ではなく、 思春期

Water-barrir function and lipid composition ofstratum corneum in acne vulgarisに多く発症し、 20 歳代ではむしろ軽快する理由がAyako Yamamoto

示されていないために疑問が残っている。
一方、 最近Prokschら 4) は、マウスを用いた実験

Department of Dermatology, Niigata
University School of Medicine

で、 表皮の DNA と脂質の合成が角層の水分バリ
ア ー 機能の変化によって制御されることを示した。

-86-

尋常性座癒の発症機序の解明のための皮膚の保湿機能と脂質代謝に関する研究

この説に従えば、 ヒトにおいても水分バリア ー のの皮脂分泌量を測定した 9)障害は上皮の増殖を充進させる可能性がある。 な(3)かでも脂腺性毛包の漏斗下部は、一旦過角化を来

角質細胞間脂質の分画と定量

脂質組成 の分析は、 高性能薄層クロマトグ
ラフィ ー (HPTLC)を用いた 8) 。 HPTLCプレ ー ト上

すと容易に閉塞する機序が予想される。
そこで本研究では、座癒患者において水分バリに 採 取 し た 脂 質 を塗布し 、 展 開 、発 色 後 に

ア ー 機能を初めて検討し、面胞形成機序について

photodensitometerを用いて各脂質分画を定量考察したので報告する。

した 8)

2

実

験

(4)

0

1

スフィンゴ脂質の抽出と分画 0)

カップ法で採取した脂質を、 シリカゲルカラム
1.

実験の対象

を用いて、極性および非極性脂質に分画した。 極

未治療の座癒患者を、PlewigとKligmanの座癒重
症度分類

5)

性脂質画分より、TLCにて展開の後ninhydrin反応

によって面胞型と丘疹膿疱型のgrade!

にて 発色させて定量した。

からgradeIVに分類し、面胞型のgrade!(軽症群：
顔面半側の面飽数が9個以下で丘疹や膿疱を伴わ

3

結

果

ない）の患者25例（平均年齢21. 1士3. 4歳）、およびgrade II (中等症群：顔面半側の面飽数が10個以

1)角層の水分バリア ー 機能の評価

上20個末満で、小数の丘疹や膿疱を伴う）の患者

水分バリア ー 機能の成績を座癒群と対照群で比11例(20. 5歳土3. 2歳）を対象に実験を行った。 対較すると、座癒群ではTEWLが高く、角層水分量が照として16歳から24歳の顔面に皮膚炎や座癒のな

低い 値を示した（表 1) 。 すなわち座癒患者では、

い健常人29名(21. 8土2. 9歳）を被験者とした。

健常人に比較して保水機能の低下が明らかであった。 また、座癒の重症度の比較では、中等症群が

2.

実験の方法

(1)

保水機能

軽症群よりも保水機能の低下が見られた。（表 1)
尋常性疸潅患者と健常対照者の角隈水分バリア ー 機
I 0)
能の比較（平均値土標準偏差）

角層の水分バリア ー 機能は、transepidermal
water loss (TEWL)および角層の水分含有量（角尋常性疫潅患者層水分量）により評価した。

中等症群(n=ll)T EWUi、 evaporimeter (EPl, Servo, Med.,
Stockholm, Sweden)を用い

6)

TEWL (g/m'h)、角層水分量は

軽症群(n=25)

16.8土3 .8" 14.4土2 .5"

10.3士2 .4"

conductance( µ O) 52 I土6. 7" 92 8土s.o·· 188.9土12.1··高周波伝導測定装置(SKICON-100、IBS社、浜松）

疇を用いて八いずれも頬部を被験部位として測定を行った。 測定は、室温20℃、湿度50%の条件に健常対象者(n=29)

2)•3群間でP<O. 01

皮脂分泌量設定した皮団機能検査室で行い、前夜洗顔後12時

吸着法で得られた前額の皮脂分泌量は、中等症間以上経過した被験者に、安静を保たせて測定し群で対照群よりあきらかに高値を示したが、軽症た。

群では有意の差がなかった。 （表 2) 。

(2)

角質細胞間脂質と皮脂分泌量の測定

3)

保水機能を測定した後、頬部から、カップ法に

角質細胞間脂質の組成
頬部からカップ法により採取された角質細胞間より角質細胞間脂質を採取した 8) 。 さらに前額を脂質における各脂質画分の重最を比較すると、セ軽くエ ー テルで拭き取った後、吸着法にて3時間

ラミドは、座癒群が対照群に比較して明らかに低-87-

い値を示したが、他の脂質成分には、統計的に有Knutson 11 'しま、正常毛包と面飽の漏斗部を観察

意の差はなかった（表 2) 。単位面積当たりの総している。それによれば、初期面胞では、毛包堀

脂質量の比較では、 中等症群で多い傾向にあった斗の過角化が層板顆粒の減少に伴って認められる。

が、 3群間で統計的に有意の差はなかった（表 2) 。

角質細胞間のスフィンゴ脂質は、層板顆粒より由来し、水分バリアー 機能を担っている。 最近セ

表2尋常性痙癒患者と健常対照者の皮脂分泌岳(µ,g/cm'/3h) と角質細胞間脂質曇(µ, g/cm')の比較（平均値土標準偏差） 1 O)
尋常性座潅患者
健常対象者
軽症群

中等症群
(n= l!)

皮脂分泌量
スクアレン
ワックスエステル
トリグリセライド
遊雌脂肪酸
コレステロ ー ル
コレステロ ールエステル
コレステロ ールサルフェイト
セラミド
リン脂質
総脂質量

(n=25)

472 5 土 101.7'

27.42 土 4.46
51.03 土 7.10
40 88 土 6 00

27.81 士 I .32
5.79 土 0.71
7.65 士 0.30
0.54 士 0 . 18
3 40 士 0.45'
0. 77 土 0.15
165.29 士 20.1

377.8 士 153 5

35.33 土 3.50
31.24 士 3.57

35.81 土 3.18

6.53 士 0.80
6 . 85 土 0.94
0 74 土 0.20
4 . 07 土 0.87'
0.15 土 0.21
138.48 土 10.22

成人に比してセラミドが少ないことも予想される。

(n=29)

351.0 士 91.0
16.37 士 3.80

36.60 土 5.50

ラミドの合成は、年齢によって変化する可能性が示唆されており、座癒患者において、 思春期では水分バリアー 機能の低下と過角化を伴う病態は、
魚鱗癬 1 2) 、乾癬 1 3) 、アトピ ー 性皮屑炎 1 4) 等で16.66 土 2.58
39.21 士3.39

報告されている。本研究は、直接毛包上皮について検討していないが、表皮角層において、アトピ

31.54 土3.16
5. 72 土 0.65

一性皮阿炎患者より強い水分バリア ー 機能の低下

5. 77 士0.87
0.87 土 0.18
6.49 土 0.98
0.79 士0.09
142.86 土 15.75とセラミドの減少が認められる（山本ら、未発表成績） 。そこで、Prokschら 4) の前述の説に従えば、毛包上皮の水分バリアー 機能の低下が、上皮”健常対照者に比較して P<O. 01の増殖性変化を生じ、面胞を形成する機序が考えられる。はじめに紹介したDownin�ら 2) とMelnick

表 3に、極性脂質画分に占めるスフィンゴ脂質

ら 3) の仮説は、今回検証を試みたが、合致する成の割合を示す。スフィンゴシンとセラミドのいず

績は得られなかった l 0) 。座癒は本邦では、思春期

れも、対照群に比べ座癒群は減少が見られ、中等に好発するが、欧米の白人に比較して軽度で、20症群が最も低値を示した。

歳前後に軽快してくる場合が多いことと考えあわ

表 3 尋常性痙蒼患者と健常対照者の角暦の極性脂質におけるスフィンゴ脂質の割合（％）（平均値士標準偏差） I 0)
尋常性座癒患者
健常対象者
中等症群(n=ll)

軽症群(n=25}(n=29)

スフィンゴシン018 土 0.05"

0.30 士 0.07 00

0.74 土 0.09 ..

セラミド

29.08 士 207" 35.46 土 3.94" 44.96 土 5.83 °0

せると、表皮の脂質代謝に人種差が存在するのかも知れない。
座癒においては、面飽形成に加えて、炎症が惹起される。今回の被験者の中等症群では、軽度の炎症所見すなわち丘疹や膿疱が混在し、軽症群より低い 水分バリア ー 機能（表1)と 高い皮脂分泌量（表2)が認められている。これまでP a;nesが面..3群間でP<O. 01

4

考

胞形成に働いていると推測する幸艮告が多い。しかし、Lavker ら l 5) は、P acnesが存在しない状態で

按面胞の角化異常が起こることを示した。一方最近
今回の実験では、座癒患者の頬部において水分の報告では、P acnesが表皮の炎症のmodulatorとバリア ー 機能の低下（表 1) とスフィンゴ脂質のして、あるいはサイトカイン遊離に促進的に作用減少（表 2、3) を認めた。 軽症群と対照群においする成績が示されている l 6) 。おそらく、パリアて皮脂分泌量の差はなかったが、水分バリア ー 機

ー

能は軽症群で低下していた（表lと2を比較）。し

豊富な皮脂を栄養として炎症惹起に関与する可能

たがって座癒患者では、同年代の健常人比較して性は大きいと考えられる。また今回の座癒群では、機能の損なわれた毛包において、 P acnesが

特に皮脂分泌巌が高くなくても、毛包堀斗部の閉

スフィンゴシンの低下が見られた（表3)。 角層の塞すなわち面胞形成が起こり得ると考えられる。

スフインゴシンは、セラミドの水解によって生じ-88-

尋常性座癒の発症機序の解明のための皮膚の保湿機能と脂質代謝に関する研究

ると考えられる。 最近スフィンゴシンは種々の生

pushpull meter and an improved high­物活性を有することが明らかになりつつあり、 なかでもP acnesなどの細菌の増殖を抑制する成績が示されている 1 7 l 。 そこで座癒患者は水分バリ

performance thin-layer chromatographic

ア ー 機能だけでなく、 感染防御能の低下も併せ持
つことも推測される。 しかしスフィンゴシンとP acnesの関係についてはさらに詳細な検討が必-236 (1992)
9) Yamamoto A, Serizawa S, Ito M et al.

separation system of all major stratum
corneum lipids", J Invest. Dermatol., 99 232"Effect of aging on sebaceous gland
activity and on the fatty acid composi­tion of wax esters", J Invest. Dermatol., 89

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不飽和脂肪酸とその過酸化生成物の皮膚角質層への作用に開する研究大阪薬科大学森

本

一洋

Effects of unsaturated straight-chain fatty acid and its oxidized products on skin stratum
corneum were examined using rat skin permeation of drugs in in vitro and FT-IR method. We
investigated that the effects of pretreatments of high purity oleic acid and its oxidation productson the permeations of indomethacin, as relatively lipophilic compound and 6-carboxyfluorescein(6-CF),as hydrophilic compound through rat skins. The skin permeations of indomethacin and
6-CF were very low (duffusivity;2.3 x 10-6 and 0.19 x 10 -6cm'/h, respectively). Permeations ofindomethacin and 6-CF were significantly increased by prepreatment with oleic acid or its firstand second oxidation products.
The frequency of the asymmetric CH bond stretching a bsorbance (2919cm-I ) on FT-IR spectraof stratum corneum was shifted to higher wavenumber (7.5cm-I) by the treatment of high purity
oleic acid. Therefore, the perturbation increase of lipid domain in stratum corneum by oleic. acid
The degree of shift was decreased by first and second oxidized products of oleic acid. On the other
hand, the frequency of the a-helix NH deformation of amidell (1548cm-1) on FT-IR spectra ofstratum corneum was shifted to higher wavenumber·(2cm-1) by the treatment of high purity oleic
acid. The shift significantly increased by first oxidized product with highest peroxide value(85.7meq/kg). Therefore, keratin cell in stratum corneum should be affected by first oxidized
product with high peroxide value.

緒の吸収促進剤が見出されているが、 それらの吸収

言促進剤の実用化には皮屑刺激性、安全性などが問
経皮吸収型製剤は薬物の全身治療を目的とした題となる 2 〉 。 オレイン酸などの不飽和脂肪酸類は新しい投与剤形として期待されている。 しかし、高い薬物の皮盾透過促進効果を示すことが知られ

皮盾の最表面に存在する角質層はケラチン、紬維ているが、 これらは生体由来物質であることより状たん白、 さらにはセラミトや中性脂質より成り実用化が期待されている(Fig. 1)、 体内からの水の蒸発や外部からの物質以上）のオレイン酸が開発されているが、 一般的｀

3)。 最近、 高純度(99%の侵入に対し強いハ リア ー として機能している。

に市販オレイン酸は酸化物を含み、 また酸化されしたがって、 この角質層は皮府表面からの薬物のやすい欠点を有している。 したがって、 これらの。 現在、 薬物の皮府吸収促

酸化生成物の皮附への影響を調べることは重要で進に関する様々な研究が進められており、 数種類ある。 本研究では、 高純度オレイン酸、 酸化生成

吸収バリア

ー

となる

1)

段階の異なる酸化物を含むオレイン酸による薬物の皮膚透過促進効果および皮膚角質層（ケラチノ
Effects of Unsaturated Fatty Acid and its Oxidized
Products to Skin Stratum Corneum

サイトおよび脂質層）への影響について検討した。

Kazuhiro Morimoto

ステロイド系消炎剤であるインドメタシンおよびOsaka Universityof Pharmaceutical Sciences

皮膚透過の検討には脂溶性モデル薬物として非水溶性モデル薬物として6ー カルボキシフルオレセ
イン(6-CF)を用いた。 皮膚角質層への影響はフーリエ変換赤外分光法(FT-IR)により解析した。

-91-

KERATIN IS ED
CELL

CeramideRoute of Drug Permeation through Human Stratum Corneum

Fig. 12

方

1>cycloheptan-2-one)は Nelson 社のものを使用した。

法

モデル薬物としては、 インドメタシンと 6-CF
2-1

は Sigma 社のものを使用 した。 吸収促進剤溶液

材料および試料の調整

はプロピレングリコ ー ル (PG) またはプロビレン

吸収促進剤としては、 高純度オレイン酸 (E0-99
酸化生成物を含むオレイン酸 (Table 1)

グ リコ ー ル (PG)/ エタノ ー ル (EtOH) (l/2) 混は日本油脂（株）のものを、 Azone (1-dodecylaza

液に溶解させ調製した。 製剤は水に溶解させた; 99. 9%) 、

Table 1

Peroxide values and carbonyl values of oleic acids of various grades

High Purified Olelc Acid
E0-99 (99.9%) a)
E0-90 (90%) a)
Low Grade Olelc Acid
LL(60%) a)peroxide value(meg/kgl

゜

carbonyl value (meq/kg)
total
saturated 11nsaturated
0.3

゜

0.3

0.1

0.8

0.1

0.9

1.7

6.9

0.9

..7.8

-92-

53
4534
．．
．．．．
38
5928
24
2336

Oxidized Olelc Acid
First Oxidized b)
SO-L
48.7
5.4
20.0
SO-H
5.4
27.4
12. 1
30.5
47.5
PO-L
1.8
85.7
3.7
PO-H
64.7
Second Oxidized c)
0.6
SO-LR
O
23.5
0.4
SO-HR
46.9
1.5
al.P urity of olelc acid(mol%)
b ) O;! bubbling(1 oo ° C) treated high purity olelc acld(E0-99)c ) Heat(200 ° c treated first oxidized olelc acid)イ淋包和脂肋峻とその過酸化生成物の皮Jill'角質脳への作用に関する研究

3

Carbopol 1342 (1%w/w) にPG (12%w/w)および

結果および考察EtOH(24%w/w)を加えて製したゲル基剤 中に薬物
( 0 .5mg/g)を溶解させ、 アンモニア水を加え3-1 皮膚透過性pH7.
0とすることにより調製した。

高純度オレイン酸(E0-99)と強制酸化物を含む
オレイン酸のインドメタシンと6-CFの皮膚透過に

2 -2

In Vitro皮膚透過実験

及ぼす影響について検討した。

除毛したWist ar系雄性ラット（体重200-250g)

Fig. 2 には高純度オレイン酸 (E0-99)と強制1次の腹部摘出皮府表面を 吸収促進剤溶液で 前処理酸化したオレイン酸(SO-L, SO-H, PO-L, PO-H)に(1時間）し、 その前処理液を 皮盾表面から取り除よる インドメタシンと6-CFの皮膚透過促進効果をいた後、薬物の皮盾 透過実験に 用いた。透過実験示した。インドメタシンの皮膚透過におけるこれ

4)

。イン

らの促進効果は、 E0-99< SO-H<PO-L く SO-L く

ドメタシンはHPLC 法、 6 CFは蛍光光度法 により定PO-Hの順に高いことが認められたが、 E0-99と量した。

強制1次酸化したオレイン酸の透過促進効果の間にはFranz型拡散セル(37℃)を用いたには有意差は認められなかった。6-CFの皮屑透過2-3におけるこれらの促進効果は、PO-L く E0-99<PO­

FT-IRによる皮膚角質層の解析

白色ウサギ（体重約2kg) の耳から剥離した

H<SO - H<SO-Lの順に高いことが認められた。

皮膚角質層を用いた。吸収促進剤溶液で表面を処

E0-99と強制1次酸化したオレイン酸の透過促進

理(2時間）した 皮膚角質層を FT- IR (P arkin

効果の間には有意差は認められなかったが、酸化

Elmer,1720X)を用い測定しFT-IRスペクトルを得過程の中間体であるSO-Lの6-CFへの吸収促進効果

た。
光源にはHe: Neレー ザ ー (0.633µm)を使用の高いことが示された。

し、出力は400m Wとし、 分解能2cm―I、 積算回数

100回、 室温で測定した。
5306-carb oxyfl u orescel nlndomethacln

4
8

Fig.2

゜

2

゜゜

2

10

3

OE 』ad880 P % ) UO IICD―

O ! maE [ad(ilBO P % ) LI

20

10
6
4
2
0
10
8
6
4
Time (h)Time (h)Effects of pretreatments of oleic acids·(0.2%) containing first oxidation
products on the permeations of indomethacin and 6-carboxyfluorescein throughrat skins.
0 Control, High Purity Oleic Acid (● E0-99)
First Oxidized Oleic Acid (D SO-L, ● SO-H, △ PO-L, ▲ PO-H)
Each point represents the mean 土S .E. of 4 experiments.
-93-

5

30

6-ca rboxyfl u oresce In

lndomethacln

4
3

2

』

10

8

゜

2

゜゜

Fig. 3

asop%)uoneaE ad
(

ad
eaEJ
―
aSOP%)UOI
(

20

10
6
4
2
0
·10
8
6
4
Time (h)Time (h)Effects of pretreatments of oleic acids (0.2%) containing first oxidation
products on the permeations of indomethacin and 6-carboxyfluorescein throughrat skins.
0 Control, High Purity Oleic Acid (● E0-99)
First Oxidized Oleic Acid (口SO-L, ● SO-H, △ PO-L, ▲ PO-H)
Each point represents the mean 士S.E. of 4 experiments.

Fig.3には高純度オレイン酸(E0-99)と強制2次を用い 、 細 胞 間 隙 脂 質 C H 2逆 対 称 伸 縮 振 動

酸化したオレイン酸(SO-LRはSO-Lを2次酸化した(2919cm I付近）由来の波数のシフトにより評価しもの、SO-HRはSO-Hを2次酸化したもの） によるイた 5) 。赤外吸収の波数は脂質流動性の上昇に伴い

ントメタシン と6-CFの皮膚透過促進効果を示した。

高波数側にシフトすることが報告されている。まインドメタシンの皮府透過におけるこれらの促進

た、皮府角質層のたん白変成はa-helixのペプチ

効果ば、 SO-HR< E0-99< SO-H< SO-LくSO-LR のl
ト 結合のN-H deformation (1548cm 付近）由来の順に高いことが認められたが、E0-99と強制2次酸

波数のシフトから評価した。 ウサギの耳の皮膚角化したオレイン酸の透過促進効果の間には有意差

質層のFT-IRスペクトルをFig. 4に示した。

―

―

‘

―I

は認められなかった。6-CFの皮膚透過におけるこ細胞間隙隙脂質C比逆対称伸縮振動(2919 cm

れらの促進効果は、 SO-HR< E0-99< SO-H< SO­

付 近 ） 由 来 の 赤 外 吸 収 は 、 高 純 度 オ レ イ ン酸

LR< SO-Lの順に高いことが認められた。 E0-99(E0-99)の処理によりコントロ ー ル(PG処理）にと強制2 次 酸化したオレイン酸 の透過促進効果

比べ高波数側に約7. 5cm 1、ンフトした。たん白―の 間には有意差は認められなかったが、 強制2の a-h e lixのペプチド結合のN-H deformation

次酸化物の6-CFへの透過促進効果は減少した。

(1548cm I 付近）由来の赤外吸収も高純度オレイン―酸(E0-99)の処理によりコントロ ー ル(PG処理）
3-2

FT-IRによる皮懇角質層の解析に比べ高波数側に約2 cm―l

シフトした。 オレイ

皮岡角質層の細胞間隙脂質流動性 と細胞実質のン酸並びにAzoneで処理した皮門角質層の脂質CH2

たん白の立体構造に及ぼす高純度オレイン 酸

逆対称伸縮振動 、並びにたん白のa-helixのペプ(E0-99)、強制酸化したオレイン酸 、Azoneの影孵

チド結合のN-H deformation(l548cm l付近）由を検討した。皮膚角質層の細胞間隙脂質流動性は、

来の赤外吸収の波数をTable 2に示した。

―

角質層のFT-IR スペクトル からGolde n らの方法

-94-

c-c二重結合を有するオレイン酸の2次酸化物でィ�fi糾和脂肋俄とその過醸化生成物の皮I青角質Jfliへの作用に関する研究、N-H deformation

CH2 asymmetric stretching

A11sua UJ

一

hl!
SU.I
IUI

Al!S U a lu

a)
b)

....

....

，．．．

，．ヽ.

""

1600
1800
1400
1200
Frequency(cm- 1)

1000

800

Frequency(cm·1)

2800

3200

Fig.4

2400

2000

，．．．

a)
b)

Frequency(cm·1 )

600

400

FT-IR spectra of stratum corneum of rabbit ear skins over the―Irange 400-3200cma) treatment with 0.2%b)high purity oleic acid (E0-99)

treatment with solvent(PG)

ある不飽和カルボニルに着目しその角質層細胞間

来の赤外吸収はコントロ ー ル(PG処理）に比べ高波

隙脂質流動性に与える影響を評価した。 Fig. 5 に

数側にシフト（約 7. 5cm示すように高純度オレイン酸の処理により細胞間オレイン酸の不飽和カルポニル価の増大に伴い低隙隙脂質 CH2 逆対称伸縮振動 (2919cm

Table 2―lof N-H deformation of amideIIfrom proteins and CH,

from lipids of stratum corneum of rabbit ear skins
N-H deformatlon(Protelns)
Frequency(Sh 1ft I n\'.I)
1546.00%0.12(0.00%0.12) b)Control (PG)
High Purity Olelc Acid
E0-99(0.2%)
1548.10ェ0.10(2.10±0.10)8)First Oxidized Olelc Acid
1547.40±0.27(1.40±0.27)8)so・L(0.2%)
SO-H (0.2%)
1547.95五0.03(1.95,,0.03)8)

PO-L(0.2%)
1547.55±0.71(1.55±0.71)8)PO·H(0.2%)
1550. 04ェ0.89(4.04±0,59)B)b)Second Oxidized Olelc Acid
1548.35x0.22(2.35,,0,22)8)
SO-LR(0.2%)
AZONE (0.2%)) した。

この効果は、下し、 その値が12meq/kg と 2 次酸化の進んだ SO-H付近）由Effects of treatments with oleic acids and Azone on FT-IR

SO-HR(0.2%)―l1547.85±0.12(1.85土0.12)8)1553.83,,0.23(7.83±0.23)a)b ))

asymmetric stretching

CH2asymmet.r lc (Llplds)
Freq uency(Shlftlnq)
2918.00x0.40(0.00ェ0.40)b )292 5.SOct0.33(7.50ェ0.3 3)3)
2923.33±1.20(5.33±1.20)8)2921.GB_ct0.61(3.68辺.61)a) b)
29.25.45,e0.92(7.45±0.92)3)2924.54ct1 .30(6.54ェ1.30)3)2926.95±0.15(8.95x0.15)a) b)

2924.45,eQ,66(6.45±0.66)3)2923.83,e0,69(5.83±0.69)3)Shlftlng=frequency shifting from control(treatment with PG)a)Slg nlflcant In comparison with c o ntrol (p<0.05)b )Slgnlflcant In c omparison with high purity olelc acid ( E0-99 ;0.2%) (p<0.05)
Each point represents the mean ±S .E.of 4experiments .

-95-

―1

frequency(cm

――
10

8

6

4
2

E ov )(L,

uenbe 』L::,4S ..{
6u1 !

0

•2

゜

5

15

10

Unsaturated Carbonyl Value(meq/kg)

Relationship between unsaturated carbonyl value of ole1c
acids and CH, asymmetric stretching frequency(IR) ofstratum corneum of rabbit ear skins
0 Control(PG), High Purity Oleic Acid(● E0-99)
First Oxidized Oleic Acid('[コ SO-L, • SO-H, △ PO-L, ▲ PO-H)
Each point represents the mean 士S. E. of 4 experiments.

Fig.5

では高純度オレイン酸に比べ有意に低波数側にシ吸収の波数のシフトとオレイン酸の過酸化物価の―フ（約4cm l )した。

関係を示した。 たん白のa-helixのペプチド結合―のN-H deformation (1548cm I付近）由来の赤外吸

一方、Fig. 6にたん白のa-helixのペプチド結―合のN-H deformation (1548cm l付近）由来の赤外収も高純度オレイン酸(E0-99)の処理によりコ

一

5

▲
—

3
2

゜

Fig.6

T

•

4

(L •
E OV )

uenbeJ::1,
S .<:6C IU!II

ー

゜

20

40

60

80

100

Peroxide Value (meq/kg)

Relationship between peroxide value of oleic acids and shiftingof N-H deformation frequency(IR) of stratum corneum of
rabbit ear skins
0 Control(PG), High Purity Oleic Acid(● E0-99)
First Oxidized Oleic Acid(口SO-L, ■ SO-H, △ PO-L, ▲ PO-H)
Each point represents the mean 士S.E. of 4 experiments.

-96-ィ＜胞和脂肪酸とその過酸化生成物の皮Ii! 角質層への作用に関する研究―l

ントロ ー ル(PG処理）に比べ高波数側に約2cm

レイン酸(1次、2次）によるインドメタシン並びシフトした。 高純度オレイン酸と過酸化物価が約にCFに対する経皮吸収促進効果には有意な差は認50meq/kgまでのものとたん白のa-hel ixのペ

められなかった。 これは強制酸化物は酸化過程でプチド結合のN-H deforma tion(1548cm-1付近）

オレイン酸とその酸化物を共存するために、薬物由来の赤外吸収のシフトの間には有意な差は認めの経皮吸収促進効果には直接的に影態しなかった

られなかった が、 過酸化物価が80meq/kgと酸と考えられる。

化が進んだオレイン酸(PO-H)では有意に高波数側ヘシフト（約4cm-1)した。

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III. 精神， 文化に関する分野

『色白』の嗜好構造に関する 一 考察
早稲田大学

齋

藤

美

穂

The main purpose of this study is to determine the psychological structure of aesthetic
preference for white by surveying the preference for a fair complexion. A series of studies oncolor preference conducted by the author have shown a strong preference for white among
Japanese and other Asian subjects (Japanese Psychological Research , Vol.36, No.4, 1994). Thissuggests that "whiteness" and positive feelings like "pleasantness" may be interrelated forJapanese and Asian people, as shown, for an instance, by the ancient Japanese saying "A faircomplexion can hide seven blemishes." Not only to determine whether or not a fair com­
plexion is preferred psychologically but also to study the cultural aspects of the preference forcomplexions, 176 Japanese and 132 Indonesian male and female university students were
presented four stimuli, i. e., four pieces of paper, each colored with one of four stages of flesh
color from fair to dark. Covering each color sample was a transparent plastic sheet with a draw­
ing of the contour of a female face. The subjects were then asked to answer a questionnaire
designed to discriminate personal images. The results, examined by both Factor Analysis andQuantification Method III by Hayashi, showed that the images associated with a fair com ・plexion were positive in Japan, but were rather negative in Indonesia. This suggested that thecultural criteria in feelings of pleasantness and beauty may have been a factor in the study results.

1

緒

言

の間で比較し、 日本での白嗜好の高さは他のグループには観察されない傾向であることを報告した。

白に対する嗜好順位が我が国 における色見本をさらに1988年にはソウルと東京との色彩嗜好傾向

使用した選択評価による色彩嗜好調査結果の中での比較（齋藤1992) 12) 、 また1992年には天津、比較的上位に出現し はじめる のはTs ukada &台北、 東京での比較研究を行った（齋藤1994)13) 0

Funatsu & Sato(1964) 14>の研究以降であり、 そその結果から白嗜好は他の周辺アジア地域でも観2>の後の中小企業振典事業団と千々岩(1972)の研察され、むしろその傾向は日本を上回っているこ

究結果や日本色彩研究所による嗜好調査結果の継とが分かった。 白に対する嗜好理由を調査の自由

年変化(1992)7 > および齋藤ら(1991)10. 11)によ回答から探ると、 東京やソウルでは清潔感や純粋る東京・大阪が主な理由となっているが天津や台北では純潔が

福岡•富山の4都市で実施した調・査結果からも日本での白嗜好は高く安定している最も多く、時には白に対する神聖視も見られた。
ところで日本文化の中で白いものが良いとされことが確認されている。
また齋藤(1981) 9> は日本人の色彩嗜好傾向

る具体的なある種の概念に「色白は七難隠す」とを 9つの文化的グル ー プ（アメリカ・ドイツ ・いう古くからの言い伝えがあるか、特に女性におギニ

いて色白の肌の方が好ましいという概念は光との

デンマ
ア

・

ー

ク ・オ

ー

ストラリア・パプアニュ

ー南アフリカ共和国・日系米国人•在日外国人）

関係から生まれている。 昔の家屋の構造も原因して低照度下で営まれた生活場面では高明度の色白

A study on the structure of preference fora fair complexionの顔色は顔の明るさとして映え、 この明るさが好
まれ美し いとされ化粧文化の中ではおしろいの使

Miho Saito

用へと関連してくる。 特に最近の化粧文化の中でSchool of Human Sciences,
Waseda University

は紫外線の有害性やホワイトニンクに対する意識の高まりが注目されている。
本研究はこの色白に対する嗜好構造を探ること-100-

「色白」の嗜好構造に関する 一 考察

刺激3 : ナチュラル肌／普通肌の色黒寄りを目的とするが、具体的には、肌の色における白(5. OYR 6.5/5.0),

さは果して本当に好ましいとされているのか、また色白肌はどのような心理的イメー

刺激4: ナチュラル肌／色黒肌(5.OYR 6. 0/5.0)

ジを持って構成されているのかという点を、他の肌色との相対
2·3

的なかかわりの中で検討することにある。 またそ手続きの評価に対する文化的な差異という点に関しても

上記 4 種の刺激に従って 4 種の肌色色票をB5版

輿味がある。 本研究では日本の嗜好構造をインドの大きさで作成し、それらの 上に女性の顔の輪郭

ネシアと比較したがその主たる理由は、同じア ジが描かれた透明シ ー トを重ね、これをもって4枚アに位置するインドネシアにも色白の肌を好まし1組とした。 なお肌の色が白いか黒いかというイ

いとする概念があることと、日本に比べ多民族文

メー化である為、色白への嗜好構造が日本とは若干異

被験者にはこの 1 組中の 4 つの刺激を同時に 1 よジは多分に相対的な関係も考えられるので、り左から順に並べてもらい、容貌を手がかりとしなるものと仮定したからである。

たパ ー ソナリティ ー イメ ー

研究は調査 1 と調査 2 により構成されている。

ジの因子分析結果 5) を基に選び出した52個の評価語（次項に対して、最）調査 1 は調査 2 のプリテストとして日本の女子大学生に実施したものであるが、調査2は文化的側も適切だと思う順番に刺激の順位づけをしてもら面を検討するため日本およびインドネシアの 男子った。

大学生と女子大学生に実施した。 調査 1 は刺激の

使用照明は蛍光灯。なお質問紙はインドネシア語 ・英語 ・日本語のものを用意した。

ー

選択パタ ンより因子分析を用い嗜好構造を探ってみたが、調査2では被験者が各評価語に対して選択した刺激の第ー選択に着目し、数量化田類に

2·4

評価語

より分析したものである。

01)美しい、02)明るい感じ、03)女性的な感じ、04)りこうそうな感じ、05)親しみやすい感

2
2·1

方

じ、06)ふけた感じ、07)のんびりした感じ、08)法

貧相な感じ、09)派手な感じ、10)柔らかい感じ、
11)はきはきとした感じ、12)近づきやすい感じ、

被験者

調査1; 日本の女子大学生 (18オから20オ ）59名。

13)古くさい感じ、14)いやらしい感じ、15)陽調盗2; 日本 （東京の大学生176名（男）性90名・

気な感じ、16)丸みのある感じ、17)きりっとし女性86名）、およびインドネシア（ジャカ

た感じ、18)好き、19)落ち着いた感じ、20)弱ルタ）の大学生132名（男性68名・女性64々しい感じ、21)知性的な感じ、22)モダンな感名）。被験者総数308名（男性158名・女性

じ、23)育ちがよい感じ、24)うわべだけの感じ、

150名）。 年齢はいずれも18オから25オ。

25)可愛らしい感じ、26)静かな感じ、27)軽い感じ、28)意志が強そうな感じ、29)貴族的な感し、30)保守的な感じ、31)善人のような感じ、

2·2 調査剌激
既存の研究より日本人の肌色を調査し分類した

32)デリケ ー トな感じ、33)特色のある感じ、34)

肌色調査結果 6) を参考にしながら、ナチュラル肌

清潔な感じ、35)ていねいな感じ、36)
うちとけたの肌色色票である以下の4種の刺激を抽出した。

感し、37)幼い感じ、38)上品な感じ、39)愉快な（）内は JIS記号。

感じ、40)ねちねちした感じ、41)消極的な感じ、

刺激l : ナチュラル肌／色白肌(5.0YR 7.5/4.0),42)やさしい感じ、43)おとなしい感じ、44)甘い刺激2: ナチュラル肌／普通肌の色白寄り感じ、45)うすっぺらな感じ、46)あたたかい感(5. OYR 7. 0/5.0),じ、47)あじわいがある感じ、48)しゃれた感じ、-101-

Table 1
質

問因子マトリックス
項

目

育ちが良い
デリケートな
上品な
ていねいな
特色のある
丸みのある
ねちねちした美しい
優しい
柔らかい
のんびりした
うちとけた
善人のような
甘い
好き
可愛らしい
清潔な
幼い
陽気な
弱々しい
はきはきした愉快な親しみやすいふけた
きりっとした
派手な
貧相な
あたたかい
古くさい
女性的な
魅力的
しゃれた
貴族的な
モダンな
知性的な
明るい
いやらしい
消極的な
女らしくない
いばった
おとなしい
静かな
落ち着いた
おだやかな
うわべだけの軽い
保守的な
りこうそうな
意志が強そうな
近づきやすいあじわいがある
うすっぺらな

第 1因子

第 2因子

第 3因子

第 4因子

第 5因子

第 6因子

-.0040-.3733
.0305
.0314
.1091
-.3679.1774-.0485.0197.0262.175 2-.2596-.1606.3937-.1737
.0937
.2202
.3280
.0522
-.1550-.0311-.1323.1154-.0413-.0659、.2682-. 3568-.3313-.0647
.1075
.1034
.0480
-. 0507 .
1-------·---.-4-1-6-8--•-.0080-.1014.3181-.1756-.2644.0112.5133-.3114-.3249-.0647-. 1387
.1059
.2969
.0162
-.2318
.3944
.1102
.0117
.7050
.6553
.6377
.5641
.5127
.4568
.3789
.3707
. 1532.1373-. 0221.0300-.0567_ .
- 1278- -: -.-46- 9-- : - 1-.- 3- 4-5-5- : --.44- -0-0- -: .1069-.0762
.2120
.0409
.0223
.2177
.1932
-.3661.07 49.0502.1875-.2338.0143-.0912.2039.0 6 68-.2296
.0542
.3535
.1285
.1457
-.0355
.0422
.0110
.2657
.2663
.1915

.0043
-.0406.2709
00238-.1682.1103.3366-.1334. 0216. 1495-.0699-.3149-.2380-.2061-.1596-.0232.0137-.1058-.7834.6732-.5547-.4909-. 4909.4643-.4569-.4336.3594-.3530.3012.253 4-.1501-.1083.0209-.1964.1785-.0825.3283.1357-.0515
.0490
.2468
.0196
.1273
.1838
-.1085-.0918.0404- -.-04- -6- 7- -.0247:_-. 4301 :-.1900.1413.3045-.1211-.0119-.1259.2256.0-6- 2-6 ---.-399- 3--:＇, -—.2870
.2522
.1602
-.0398.15 59.0544.-.
. .0.1.5.0••.362 :- - 8,＇ . 0124
.0417-.0580
.0781
.0353
.3244
.3332
-.0088-.1496.2643.0095. 0280-.0082-.1752-.0918.1990-.0618. 2548.0851-.0414
.0093
.2277
.2748
-.2053.0489-.1285.2435. 324 9. 2440.0557-.0999-.1285-.0635.1331-.2653-.0659
.1589
.1916
.1373
-.1646
.1398
.2745
.1373
-.0987.1451-.1577-.1120.0382-.0476.0428-.3101.2486-.1619.1846-.0665.0082-.0049-.0031.0091.057 5. 0939-.0280-.0455.0083.0 680.0561-. 1010-.1301-.2633-.0393. 09 6 8-.0206.139 8.1104-.0263.2 588.0131-.0518
.0749
.1247
.1184
.2886
-.1010.055 2. 075 6.357 5-.0925.3350-. 2370.0719. 2608.0428. 06 9 6.007 7
.0869
.1632
.1699
-.1295-102--.1811-.0896-. 2385.1281.- - . 0113 .:--.- 3- 6- 3- 5- - :-.1056-.0367.0605-.1079.2299.0705.0 7 09-.2393.0582.0698-.0593.0217.0936-.3013

「色白Jの嗜好構造に関する 一 考察

49)女らしくない感じ、50)おだやかな感し、51)

りっとした」等が主なものであることが分かった

Table 1 は、選択反応パタ ー ンと評価語との関係

いばった感じ、52)魅力的に対して行った因子分析による因子マトリックスである。6因子が抽出されたが、 第l因子には「育

分析

2·5

調査l; 上記4つの刺激の選択反応パタ ー ンに対しちが良い」、「デリケ ー トな」、「上品な」、 「てて因子分析を行った。

いねいな」等、 品格と関連したものに対する因子

調査2; 上記の手続きにより得られた結果に対し、負荷量が高くなっている。 第2因子は「優しい」、

色白肌(5. OYR 7.5/4. 0)の剌激を最初に選んで「のんびりした」、「うちとけた」、「やわらかい」、

いる評価語に対し1を与え、 それ以外の刺激を選「善人のような」等、好ましいパ ー ソナリティ ー とんでいる評価語に対しては 0 を与えたパタ ー ンを関連した因子であることが分かる。 第3因子にはス1、 同様に普通肌の色白寄り(5. OYR 7. 0/「陽気な」、「弱々しい」、「はきはきした」、「愉ス2、快な」等、 強さとの関わりの他に、 「ふけた」等

5. 0)の刺激を選
普通肌の色黒寄り(5. OYR 6.5/

年齢との関わりが見られる。 第 4 因子には「魅力んだパタ ー ンをケ ー ス3、 色黒肌(5. OYR 6. 0/

的な」が最も高く、 その次に「しゃれた」、 「モの刺激を選んだパタ ー ンをケ ー ス4とし、 各
5. 0)

ダンな」等、 魅力と現代性（モダンさ）を含んで

ケ ー スについて数量化皿類により分析した。

いる。 第 5 因子には「いばった」が最も高いが、

ケー

5. 0)の剌激を最初に選んだパタ

2·6

ー

ンをケ

ー

その次からは「おとなしい」、「静かな」、「落ち着いた」等が続き、 静の因子と考えられる。 第 6

実施期間

因子には「軽い」、 「保守的な」の他に、 「りこ調査l ; 1992年10月

うそうな」、 「意志が強そうな」等があり、怜悧

調査2 ; 1993年4月�1994年1月
3. 結性との関連が見られた。
なお選択反応パタ ー ン頻度との関わりを見ると、

果

第 l 因子（品格の因子）と第 5 因子（静の因子）
3·1には色白肌 一 普通肌の色白寄り 一 普通肌の色黒寄調査1の結果り 一 色黒肌の順に選ぶ反応パタ ー ンが多く、 第 2、4刺激の順位づけに対する被験者の選択反応バ

第 4 因子には普通肌の色白寄り 一 色白肌ー普通肌

タ ー ンとしては全部で24パタ ー ンあるが、 選択反応パタ ー ンの各評価語に対する度数を調べた結果、色白肌 一 普通肌の色白寄り 一 普通肌の色黒寄り 一多かった。 また第 6 因子（怜悧性の因子）は普通

多かったものは、 「女性的な」、 「弱々しい」、「貴族的な」、「おとなしい」、「デリケ ー トな」、
「消極的」、「育ちがよい」、「静かな」、「ていねいな」、 「上品な」、 「清潔な」、 「保守的な」、「優しい」、「可愛らしい」、「丸みある」、「おだやかな」、「美しい」、「甘い」などであり、 逆の反応パタ ー ンである色黒肌 ー 普通肌の色黒寄り 一
普通肌の色白寄り

因子（強さの因子）には色黒肌 一 普通肌の色黒寄
り ー 普通肌の色白寄り 一 色白肌の反応パタ ー ンが色黒肌の順番で選択された評価語として反応数の一の色黒寄り 一 色黒肌の反応パタ ー ンが多く、 第3

色白肌の順番で選択された評価語として反応数の多かったものは、 「女らしく肌を最初に選択していく反応パタ ー ンが多く見られた。
3·2 調査2の結果
調査 2 の結果の処理は 4 種のケ ー ス全てについて数量化頂類によって分析を行ったが、 ここでは
特に色白肌(5.0YR 7.5/4. 0)の剌激に関する分
析結果を中心に述べる。

ない」、 「派手な」、 「いばった」、 「陽気な」、「はきはきした」、「いやらしい」、「軽い」、「き-103-Table 2

ケ ー ス 1 (色白肌を最初に選択したケ

I. >'.

日＇蔦麗：順位

p戸
:/ $位
,,,.

---―"_ー-·_ -,ー--_6
―

)'

、

7,

•• •••々：選択率(%.):::.::

インド ネシア.•
評価·'語 ....';\;-· If
心

;

92.0

貴族的な＋＋

86.4

弱々しい
清潔な ＋＋

デリケートな＋＋立;立ス）に対する評価語の上位

弱々しい

ご屯立<
.
.
.
？姿..．..芯4位. .. '·..,
．
．．

”

評価語

”・

>本

ー

.

位
.. . • ,.

位. . . ．．
.
•・·••....・·•ヽ・●.ヤ・•・、． ..•.8.●．・ ．
・• ．． 位
•
. ..・
．
.
.
. . �． . . 位.. . •.•. •...
.. ....，.•..9.
•.
{) 位
・ ・
．.・・・.・1..

選択率（；%）
85.6
85.6

85.8

いばった＋＋

78.0

静 かな＋＋

83.5

貴族的 な＿＿

71.2

おとなしい＋＋

83.0

上品な＋＋

81.3

幼い ＋＋
しゃれた＋＋

育ちが良い＋＋

79.5

明るい＋＋

65 2

消極的 な＋＋

77 3

派手な＋＋

59 8

女性的な＋＋

75.8

保守的 な＋＋

71.0

きりっとした＋＋特色のある＋＋

59.1
59.1

70.5
70.5

清潔な—

69.9

.... 1. 2..,位, ••.

ていねいな＋＋

68.2

保守的な——
デリケートな——

56 8
56.8

柔らかい＋＋

64.8

静かな——

55.3

美しい＋＋

60.8

育ちが良い——

54.5

可愛らしい ＋＋

55 1

軽い＋＋

53.0

LA 位
1.5位

践表

ダ

l.1位

.
... .
3. 位
； 1● ー―ー；．．

一注）全ての Table および Fiq. において、殆どの評価臣における「・・・感じ」という表現は省い た。
＋＋およびーー はバー セントの 差の検定においで％水準での有意差、 十および一（お％水準での有意差をそれぞれ示す。なおプラス記号はその評価籍における選択串をカテゴリー間で比較した時に相対的に有意に高いもの 、 マイナス記号は有意に低いものを示している。

Table 3

ケ
—

'i)

•
..••. 順位•,，：

ス 1 (色白肌を最初に選択したケ

性別での比較

ース）に対する評価語の上位

一

覧表

—

インドネシア男性 インドネシア女性
日本女性:: : ·,,・
這択率
選択
選択率
率 ·
価
'"
·, , · l平.
• • .・・・ ( 9')率 ,.... 評価語 ．．
.• ・評.... .... ..話..・.・ :'•�. fili.l目 ., /."•'•(96) ...
屯（％）

日本男性/,'.

. .

評価騒：

1位

弱々しい

92.2

弱々しい

91.9

清潔な ＋

868

弱々しい

859

2位

貴族的な＋

88 9

おとなしい ＋＋

907

弱々しい

85 3

清潔な

84 4

デリケ ー トな＋＋

84 4

デリケ ー トな＋＋87 2

いばった＋＋

77 9

しゃれた ＋＋

81 3

静かなサ

86 0

貴族的な

73 5

いばった＋＋

78.1

83 7

幼い＋

721

保守的な

71 9

明るい ＋＋

67 6

きりっとした＋＋
派手ない

66 2
66 2

貴族的な·
幼い

688
688

特色のある＋＋

67.2

しゃれた

603

デリケー トな

641

52 9

明るい ＋

625

静かな—

594

育ちが良い·

56 3

•••

.

、：

ー

. .
3位

·'..,

4位
・

静かな ＋
上品な ＋＋

811
811

6位

育ちが良い＋

77 8位：

消極的ない•

76 7

8位.

おとなしい ＋

75 6

9位

漬潔な

74 4

':l 0位

女性的な＋＋

73 3

l l位

保守的な

71 、 1

1 2位

ていねいな ＋
知性的な＋＋

1 4位,1 ,5位

5 位· ·.

1 3位

貴族的な
上品なサ
育ちが良い＋＋

814
814

消極的な＋＋
女性的な＋＋77 9
77 9

柔らかい＋＋
可愛らしい ＋＋

721
721

66.7
66 7

保守的な

709

清潔な＿＿

65 1

美しい

60 0

甘い＋＋

柔らかい

578

美しい ＋

育ちが良い—
静かな-軽い＋特色のある＋＋

51 5
51 5
51 5

628

デリケ ー トな――

500

軽 い＋＋
うわぺだけの＋＋

54 7
54 7

61 6

やさしい

48 5

派手ない

53.1

-104-

「色白」の嗜好構造に関する 一 考察

3·2·1 色白肌(5.0YR 7.5/4.0)の刺激に関す

色白肌(5. OYR 7.5/4. 0)の刺激が最初に選択る分析結果された評価語として総合的に最も多かったものはTable 2およびTable 3は、 ケ ー ス1、 即ち4つ の「弱々しい」の275反応であった。 Table 2から両刺激中、最も色白肌の剌激である1番の刺激を最初

地域とも色白肌は「弱々しい」イメ ー ジと最も結に選んだ評価語を、 その多い順に上位15位まで示

びついている点は共通しており、 その他、 共通しした 覧表である。Table 2は日本とインドネシて持たれているイメ ー ジの上位には、「貴族的な」アとの総合的な比較であり、Table 3は両地域の、「デリケ ー トな」、「静かな」、「育ちが良い」、

一

＋＋

―ー

とあ

「保守的な」、「清潔な」があがっている。 しかしるのはパ ー セントにおける有意差検定において1

日本では色白肌に対して、 「おとなしい」、 「上性別における比較である。 表中に および％水準で有意差の見られたものであり、 ＋および―品」、 「消極的」、 「女性的」、 「ていねいな」、とあるのは、5%水準で有意差のある場合を示す。

「柔らかい」、「美しい」、 「可愛らしい」といっいずれの場合もプラスの記号はその評価語に対たイメ ー ジがインドネシアよりも高く、 インドネ

してカテゴリ ー 間（例えばTable 2では日本とインシアでは、 むしろ「いば った」、 「派手な」イメ

ドネシアの間、Table 3では日本男性・日本女性・ー

インドネシア男性・インドネシア女性の間）で総た「幼い」、 「軽い」、 「明るい」、 「きりっと合的な選択率による期待値と比較したとき有意にした」というイメ ー ジが日本より高く選択されて高かったもの、 マイナスはカテゴリ ー 間で相対的いるのが分かる。 その他、 15位以下の評価語で、に有意に低かったものである。

日本の方が 1% 水準で有意に高く選択している評

Fig. 1-0.0200
0.0200ジや「特色のある」「しゃれた」イメ ー ジ、 ま

数量化Ill類による色白肌に対する評価語のカテゴリ ー プロット(1軸X2軸）-0.0160-0.0120＊派手＊＂色のある-0.0080-0.00400.00000.0040＊（女らしくない ． いばった）

o.0080＊うわぺだけ＊うすっぺらな

0.01200.01600.02000.0200＊いやらしい0.01600.0160

ねちねちした＊＂るい＊

0.0120＊しゃれた

0.0120＊幼い＊軽い

0.00800.0080＊甘い＊きりっとした

0.0040＊保守的＊モダン-0.0000

＊迅々しい

＊消拒的

0. 0040*ll!i2＊丸みのある＊デリケ ー ト

＊費杭的

古くさい＊
ふけた＊

*Oか

＊隣気

ヽ

-0.0040-0.00 0

＊おとなしい＊百ちがよい-o, 0000

貧柑＊＊あじわいがある＊美しい＊可愛らしい＊やさしい＊笈社的-0.0080 ＊泊快

＊柔らかい

＊魁力的

-0. 0120-0.0120

ていねい＊＊りこうそう＊好き-0.0160-0.0080＊上品＊女性的＊沼ち芍いた-0, 0160* (Illしみやすい． はきはさとした）＊（近づきやすい． うちとけた）＊のんびりした＊おだやか-0.0200·�志かなそう-0.0200＊あたたかい-0.0160-0.0120-o.0200*i!I人のような-0.00BO-0.00400.0000-105-

0.00400.00600.01200.01600.0200「おだやかな」、

りっとした」と「やさしい」であり、 女性では、「古くさい」、「のんびりした」、「落ち着いた」、「うわべだけの」と「保守的な」であるが、「しゃ「りこうそうな」、「善人のような」、「ふけた」、れた」というイメ ー ジも女性の方に高く選択され「貧相な」であり、 逆にインドネシアの方に有意ている。

価語としては、 「知性的な」、

このように順位一覧表を見ても両地域におけるに高く選択された評価語としては、 「うわべだけの」、「あじわいがある」、「愉快な」、「陽気な」色白肌への評価がかなり異なっているようである。

であった。

そこでこれらの結果を数量化頂類により分析した。
Fig. 1は、 ケ ー ス 1 における評価語のカテゴリ ー

両地域のこれらの評価語のうち日本の男性に特スコアを 1 軸と 2 軸によりプロットしたものであに高く見られる評価語は、 「ていねいな」と「知る。 各軸の味を分析すると 1 軸は、陰気で消極的性的な」であり、女性では、 「可愛らしい」と「甘い」であることがTable 3より分かる。「おとなしな感じか、 陽気で活発な感じかを分けている軸でい」と「柔らかい」というイメ ー ジも女性が影響あり、 積極性· 消極性の軸と言えよう。 それに対を与えている評価語と考えられる。 インドネシア

し2軸はうわべだけの表層的な感じか、 あたたかの男性の方に高く見られる評価語としては、 「きい善人そうな感じかを分けている軸のようである。

Fig. 2数量化Ill類による色白肌に対する国および性別のカテゴリ ー プロット(1軸X2軸）

1�"'

2�·,

-0. 00360

0, 00490I-0, 00270

I'-o.00180-0. 00090

0, 00000l0.00090I

0.00180I

0. 00270I

0. 00360-1

0, 00490•インドネシア女性
0.004200.00420

0. 00350

0. 00350• インドネシア

0.00280

0. 00280•インドネシア男性

0.002100.00210● FEMALE

0.00140o.00140

0. 00070

0. 00070

0. 00000

I
I

'

，

l

，

'

亭HALE

I

I

＇

'

I

-0. 00070

O. 00000→

0.00070

日本女性零
拿 日本

-0. 00140-0. 00140•日本男性-0.00210I-o. 00360

I-o.00210＇·-o. 00180

I-o. 00090

o. 00000-106-I

o. 00090

I

o. 00180，
o.00210＇-0.00210

o.00360

「色白」の嗜好構造に関する 一 考察

これにFig. 2の日本とインドネシアの性別およびトネシア男性； 32, 4%, インドネシア女性； 23. 4%)

国別のプロットを考え合わせると、 インドネシア

イメ ー ジの方向にベクトルが向いている。 日本男では日本に比べ色白肌に対して「特色のある」ィ

性は、 「善人のような」（日本男性； 44. 4%

メ ー ジ（インドネシア； 59.1% 十． 日本； 10. 2%

一や「しゃれた」イメ ー ジ イ（ ンドネシア； 70. 5%+++

日本； 37.5%--)、「明るい」イメ

ー

． 日

）

本女性； 29. 1%, インドネシア男性； 22. 1%, イ,

ンドネシア女性； 14.1%

一） 、 「りこうそうな」（インドネ（ 日 本男性； 4 5. 6% +十．日本女性； 29, 1%, イン， 日本； 36. 4%--)は持っているよ

ドネシア男性； 27.9%, インドネシア女性； 14. 1

うであるが、同時に、「いばった」（インドネシア；%--)、 「好き」 日（ 本男性； 44. 4% 十． 日本女性

ンア； 65. 2%
78. 0%
ー

+十

+十

一

ジ

+十

+

）「女らしくない」
イメ; 31. 4%, インドネシア男性； 29. 4%, インドネ

ジも持っており、日本人が持っているような「女

シア女性； 25. 0%)、「意志の強そうな」（ 日 本． 日本； 26.1%

性的」（日本； 75. 6%―+十， インドネシア； 25. 8% -)で「おだやかな」（日本； 50. 0%+十， インドネシア；+++

男性； 22. 2% 十． 日本女性； 4.7%――

，インドネシア

男性； 14. 7%, インドネシア女性； 7. 8%)等の方向,にベクトルが向いているか、 日本女性の特徴は、ジはあまり持たれ「貧相な」の方向にベクトルが向いていることでていないことが分かる。 特に「うわべだけ」の表ある。 これは色白肌に対して日本人全体としては層的なイメジの方向にベクトルが向いているの

ポジティプなイメ ー ジを抱いているものの、 日本

は 、 イ ン ド ネシア女性 の 方 で あ る こ と が こ の女性の中では貧相なというイメ ー ジを持っている図からもわかる （日本男性； 21.1%--. 日本女性

被験者が男性より若千多かったことに起因する; 37. 2%, インドネシア男性； 3 2. 4%, イントネ

（日本男性； 30. 0%□ 日本女性； 34.9% 十， イン

29. 5%--)「 のんびりした」
インドネシア； 20. 5%ーシア女性； 54. 7%

+十

一

）イメ

（ 日 本； 49. 4 %ー） 。 インドネシア男性の方は、女性に比べると「きりっとした」、

「陽気な」

+

ドネシア男性； 5. 9%――， インドネシア女性； 4. 7

―

% -)。

（日本男性； 7. 8%-. 日本女性； 4. 7%--. イン
Table 4ケ ー ス2 (普通肌の色白寄りを最初に選択したケ ー ス）に対する評価語の上位一覧表

56 8

近づきやすい52 3

親しみやすい

46 6

魅力的

43.2

好き

42 0

あたたかい

40 9

うちとけた

40 3

おだやかな＋＋
陽気な＋＋

りこうそうな

39.2

魅力的

36.9

知性的な＋＋

49 2

35 2
35 2

りこうそうな

48.5

モダンな＋＋

47 0

落ち着いた——

34.1

美しい＋

45.5

知性的な――

32.4

上品な＋＋

45 5

モダンなー→
美しい —
可愛らしい

31 3
31.3
31.3

ていねいな＋＋

44 7

善人のような43 9

善人のような
おだやかな—
明るい

l5位

l

-107-

53.0
53.0
53.0

好き
柔らかい
あじわいがある
落ち着いた＋＋

I

I

52.3
50.8
50.8
50 0

3·2·2

選択していた評価語が含まれていることが典味深

普通肌の色白寄り(5.0YR 7.0/5.0)のし、 ゜

刺激に関する結果

日本の男性が特に多く選択していた評価語は、

Table 4およびTable 5は、同様にケ ー ス2 (普「可愛らしい」であり、 「やさしい」、 「美しい」通肌の色白寄りの剌激である2番の刺激を最初に、「柔らかい」という評価語も女性より上位に位選んだもの）の評価語を、その多い順に上位15位
まで示した

一

置している評価語である。日本女性の場合は 「明覧表である。普通肌の色白寄り(5. 0

るい」、 「落ち着いた」、 「知性的な」、 「あじYR7. 0/5. 0)の刺激が最初に選択された評価語として総合的に最も多かったものは「近づきやすい」

わいがある」、 「モダンな」が男性の上位評価語の149反応であった。Table 4から両地域に共通しには見られない特徴的なものとなっている。インて多く選ばれた評価語を探ると、 「好き」、 「おドネシアの男性の場合は、 「モダンな」、 「うちうそうな」、 「モダンな」、 「美しい」、 「善人ドネシア女性の場合は、 「美しい」、 「善人のよ. 「知性的な」、 「りこだやかな」、 「魅力的」.、とけた」、 「愉快な」、 「あたたかい」が、イン
うな」、 「知性的な」、 「親しみやすい」、 「ののような」があがる。日本の上位評価語の中でイんびりした」が特徴的なものであった。インドネ

ンドネシアの上位評価語に登場しないものをあげ

シアの場合、 「女性的な」イメ ー ジを普通肌の色るならば、 「うすっぺらな」、 「近づきやすい」、

白寄りの刺激に抱いているが（インドネシア； 56. 8「親しみやすい」、 「あたたかい」、 「うちとけ％，日本； 17. 6%)、その傾向は特にインドネシア

た」、 「明るい」、 「可愛らしい」であり、インドネシアの場合は、 「女性的な」、 「柔らかい」、

女性の方に多く見られるようである（男性； 44.1%,「あじわいがある」、 「陽気な」、 「上品な」、

女性； 70. 3%) 。

「ていねいな」等、日本人が色白肌に対して主にTable 5ケ ー ス2(普通肌の色白寄りを最初に選択したケ ー ス）に対する評価語の上位一覧表—性別での比較-., .\苓:'忍� ：日本男性t ヽ：翠． ＜へ<,; 日本女性
インドネシア男性 インドネシア女性..
.
� 、..．. .． ． ． .....． 翡·,’..
:-=::,·:.
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・.
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.
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．
.
．
え
.
率
•
評
.
"
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．
．
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.
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•
．
.
・
•、
..
.
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選
．·",••、,·cc.. . ,<·
. 価
. .評
価 .
．．． モ
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'.'
...
択 ·. ""
・ :. 遺●:. .>:1.,i
順位．、 ·・・ 評• 価証 •・ ．. 選・(961
・ . "・• '_. (· 択
jli
� ．�. :各； . . . .
54.4
70.3
女性的な＋＋
jY\1位 うすっぺらな＋ ＋ 56.7 近づきやすい＋ 581 落ち着いた＋.・
467 うすっぺらな＋＋
柔らかい＋＋
近づきやすい
54 7
594
2位
52,9
好き
3位

．4． • .位 .,r..·,, 5..．.位••• .•
6位
7位
8位
9位•••••••
1 9位

rl位
1 2位
13位
1 4位
l, ·
S... 位. ••.

親しみやすい

51 2

好き
魅力的

465
46.5

善人のような

442

明るい＋

43 0

りこうそうな
落ち着いた
うちとけた

41 9
41 9
41.9

333

知性的な
おだやかな

40.7
407

柔らかい

322

あたたかい

395

おだやかな—
善人のような—30.0
30,0

あじわいがある
モダンな

349
34.9

親しみやすいあたたかい
可愛らしい ＋＋

422
422
422

魅力的

40.0

うちとけた
やさしい

389
389

好き。

378

りこうそうな

36.7

甘い＋＋

35 6

美しい

-108-

あじわいがある＋

52 9

魅力的
モダンな＋

505
50.5

柔らかい
陽気な＋

47.1
471

おだやかな
上品な＋＋

45 6
456

りこうそうな
うちとけた
女性的な
愉快な＋＋

44 1
441
441
44 1

あたたかい
ていねいな＋

42.6
426

おだやかな＋＋

56.3

陽気な＋＋

54 7

好き
りこうそうな
あじわいがあるt

531
53.1
53.1

魅力的
落ち着いた
芙しい ＋

500
500
500

善人のような
知性的な
紐しみやすい

484
484
484

ていねいなサ

469

のんびりした＋＋
上品な＋＋

453
45 3

「色白」の嗜好構造に関する-·-考察

ケ ー ス3 (普通肌の色黒寄りを最初に選択したケ ー ス）に対する評価語の上位一覧表

Table 6

31.8

23.9
23.9

うちとけた
ふけた ＋＋

22.7

30.3

親しみやすいのんびりした

28.8
28.8

愉快な
善人のような

21.2
21.2

意志が強そうな

19.7

貧相な＋＋
あたたかい

22 2
222

ねちねちした＋＋

21 6

．�ぶ；

陽気な

21.0

あたたかい
可愛らしい＋＋

18.9
18.9

J 0位

愉快な

19 3

うちとけた

18.2

モダンな＋＋
近づきやすい—

18.8
18.8

落ち着いた
りこうそうな

17 4
17.4

好き

15 9

陽気な
うすっべらな

15.2
15 2

1)1位
1 2位
、

近づきやすい ＋

J 3位

古くさい

18.2

14位

落ち着いた

17.6

はきはきとした——

17 0

l5位

ケース3 (普通肌の色黒寄りを最初に選択したケ ー ス）に対する評価語の上位 一 覧表

Table 7

—性別での比較 —:?

日本男性，�

.•.
順位率
評価..騒...''.;,...、'�． ‘選'·(択%\'1位心貧相な ＋＋

278

2位

ねちねちした＋＋

267

3位

ふけた ＋

25.6

4位

のんびりした5位

意志が強そうな

6位
7位

8位••• •.• •9 ·. • •.••·..
' 位
1 0位

． ． ． .．
.
．

.
.彎

1 1位
1 2位

.'

親しみやすいうちとけたサ

32 6
32.6

23.3

意志が強そうな
あたたかい

26,7
267

222

あじわいがあるサ

256

落ち着いた
あじわいがある

200
200

陽気な

244

憧快な

233

あたたかい
陽気な

17 8
178

ふけた
モダン な＋＋
きりっとした＋＋

221
221
22.1

親しみやすい—近づきやすい
丸みのある

16 7
167
16.7

1 3位

1 4位·
1 5位

日本女性

..
•
遺択率
価I吾.','・.・'..... · :·
'
I'll)
, 評

うちとけた
愉快な
古くさい
モダンな

156
156
156
15 6

近づきやすい古くさい
りこうそうな
はきはきとした

明るい ＋＋

20.9
20.9
198
198

186

..

や忍

-109-

インドネシア男性 インドネシア女性
．
'.

. !..
.

•:
話 •.••
ぢ評価

：

．.
. .

：
.
• ー
. .. ,. •·. ..
•,. . ..,.:v •
.
..

湛択率
・(96)

はきはきとした＋338

近づきやすいのんびりした＋30.9
309

親しみやすい294

善人のような
うすっぺらな＋
女性的な＋＋

191
191
191

意志が強そうな
古くさい

17 6
176

あたたかい
好き

16 2
162

陽気な
りこうそうな
うわぺだけの

147
14 7
14 7

憤快な
落ち着いた
可愛らしい
甘い
おとなしい
保守的な

132
13 2
132
132
132
132

I
・評価 吾

． ．． .
.
.

選択率
（％）

近づきやすいはきはきとした
憎快な

297
297
29.7

親しみやすい28.1

のんびりした26.6

可愛らしい ＋＋
うちとけた

25a
25O

菩人のような

23 4

意志が強そうな
あたたかい
落ち着いた

21 9
21 9
21 9

りこうそうな

203

陽気な
好き
美しい ＋
おとなしい＋

15 6
15 6
156
156

3·2·3 普通肌の色黒寄り(5. OYR 6. 5/5.0)のては両地域に共通して性差を感じさせる。

刺激に関する結果
3·2·4 色黒肌(5.0YR 6.0/5.0)の刺激に関Table 6およびTable 7は，同様にケ ー ス3 (普通
肌の色黒寄りの刺激である3番の刺激を最初に選する結果んだもの）の評価語の上位一覧表である。 普通肌

Table 8およびTable 9は、 同様にケ ー ス4(最もの色黒寄り(5.0YR 6.5/5. 0)の刺激が最初に選

色黒肌の剌激である4番の刺激を最初に選んだも択された評価語として総合的に最も多かったものの）の評価語の上位一覧表である。 色黒肌(5.0YR

は「親しみやすい」の81反応であり、 これは4つ6.0/5.0)の剌激が最初に選択された評価語としの刺激の中で最も第ー選択になりにくかった剌激て総合的に最も多かったものは「女らしくない」と言える。 両地域に共通して多く選ばれた評価語の237反応であった。両地域に共通して多く選ばれとしては、「親しみやすい」、「意志が強そうな」、

た評価語としては、「女らしくない」、「派手な」、「うちとけた」、 「愉快な」、 「近づきやすい」、「いやらしい」、 「うわべだけの」、 「はきはき「あたたかい」、 「落ち着いた」、 「陽気」、「はとした」、 「意志が強そうな」、 「貧相な」、「ふきはきとした」であるが、 このうち、 「はきはきけた」、 「うすっぺらな」、 「ねちねちした」でとした」という評価語はインドネシアでは第1位ある。 日本で多く選ばれた評価語として特徴的なとなっているのに対し、 日本では15位である。 まものは、 「特色のある」、 「いばった」であり、た日本で多く選ばれた評価語はインドネシアで上これらはインドネシアで色白肌の剌激への評価で位に選ばれた評価語と異なっているのがこれらのあったのが興味深い。 その他、 「軽い」、 「陽気表から分かる。すなわち日本の上位評価語は、「ふな」、 「愉快な」も日本での上位評価語である。

けた」、 「あじわいがある」、 「貧相な」、 「ねインドネシアの上位評価語は、「古くさい」、「消ちねちした」、 「モダンな」、 「古くさい」のよ極的な」、「甘い」、「静かな」、「丸みのある」

うにネガティブなイメ

で、 これらは逆に日本の色白肌の刺激へのイメ ーー

ジのものが多いが、 インドネシア 場合は 「のんびりした」、 「善人のような」、 「可愛らしい」、

シと多く一致する。

「りこうそうな」、「好日本男性の場合、「あじわいがある」、「うすっき」というようにポジティプなイメ ー ジも含まれぺらな」が日本女性には観察されない上位評価語ている。

であるのに対して、 日本女性の場合は、 「きりっーとした」、 「ねちねちした」が上位評価語としてジであ特徴のあるものである。このうち「きりっとした」

ることがTable 7より分かる。 日本男性の場合はは普通肌の色黒寄りの剌激における日本女性でも日本で多く選択された「貧相な」というイメ
ジは特に日本男性が多く抱いているイメー

その他に、 「ねちねちした」、 「のんびりした」、

上位に見られた特徴的な評価語であり、 日本の女「落ち着いた」、 「丸みのある」が多いが、 女性性の場合、 肌の色が濃くなると「きりっとした」の場合は、 「きりっとした」、 「りこうそうな」、印象を持ち始めることが分かる。 インドネシア男「はきはきとした」、「明るい」が多く、 ポジティ性の場合は「保守的な」というイメ ー ジが特徴的

プな評価語が男性よりは若干多く見られる。 インであり、 インドネシア女性の場合は、「派手な」、

ドネシア女性の場合も、 「うちとけた」、 「美し「うちとけた」、 「デリケ ー トな」が上位評価語

い」というボジティブなイメ ー ジが多く持たれてとして特徴的であった。

いるが、インドネシア男性の場合になると「うすっぺらな」、 「女性的な」、 「古くさい」、 「うわ

4

考

察

ベだけの」、 「甘い」、 「保守的な」というようにネガティブなものが多くなり、 この刺激に関し-llO-

調査1の因子分析による結果でも調査2の数量

「色白」の嗜好構造に関するケ ー ス4 (色黒肌を最初に選択したケ ー ス）に対する評価語の上位 一 覧表

Table 8871
特色のある ＋＋

ro 位

1 J位:

l2位
1 3位

1>．4．．．位

1 5位

Table 969 9

女らしくない79 5

派手 な＋＋

64.2

いやらしい＋＋

76.5

いやらしい——

61 4

ふけた ＋＋

74 2

いばった＋＋

58 5

古くさい ＋＋

52.3

うわぺだけの＋＋

54 5

意志が強そうな

51 5

軽い＋＋

51 1

消極的な＋＋

48.5

陽気な＋＋

48.9

ねちねちした44.7

はきはきとした

46.0

はきはきとした43.2

愉快な ＋＋
意志が強そうな

44.9
44 9

うすっべらな

40 2

うわぺだけの――

37.9

貧相な ——

38 6

甘い＋＋

37.1

ふけた ——

36 9

静かな＋＋

35.6

うすっぺらな35.2

丸みのある＋＋

34.1

ねちねちした

341

派手な――

31 8

ケ ー ス4(色黒肌を最初に選択したケ ー ス）に対する評価語の上位一 覧表

’

順位

—

性別での比較 —

'.

日本男性ャ
.

, ...'. :'.·'.'.. 評 価�
, , ..

1位.
語
胃.• .彎. . . .. .
..
.
.
.
.

.
.

.
.
.
.

女らしくない

2位
�� ���
,3 位

特色のある＋＋• l率，選...• 傑択

インドネシア男性 インドネシア女性

日本女性
.
.
. . .
彎.
..ゾ
... ... · . ..
..
. .
.
. .
.

.
評
.,

価

.

語

.

75 6

女らしくない711

特色のある＋＋． '●·.
•. ; :；'�. •. �.• 評厨価話..;:..• 選択 率
選択率..
.率
評.. 価琵 ，.;．� 選択(91:l{%} I I
(%1
．

744
68 6

貧相な ＋＋
女らしくない838
838

貧相な ＋＋

90 6

女らしくない75 0

派手な ＋＋

65 6

派手な＋＋

62.8

いやらしい ＋＋

824

ふけた ＋＋

734

いやらしい

644

い ばった＋＋

605

ふけた ＋＋

75 0

いやらしい

703

うわべだけの＋＋

611

いやらしい —

581

古くさい＋＋

588

いばった＋＋
軽い ＋＋

567
567

意志が強そうな

500

はきはきとした

488

ねちねちした＋
消極的な＋＋

51 5
51 5

陽気ない

511

うわぺだけの477

うすっべらな＋

1 0位

愉快な ＋＋

467

陽気な＋＋

465

はきはきとした

433

軽い＋＋

453

1 2位

意志が強そうな

400

あじわいがある＋＋378

慌快な-貧相な ＋＋

43 0
43 0

ふけた ——

36.7

きりっとした＋＋

41 9

4位
5位

6位

7位
8位

：

9位

l i位

1 3位
l 4位

. . ..:,•••••...'.•· ：1. •·.• .:·5••·· ·•.·位: .：.:：·.:• .·; . ..· . .
:
.
.

彎

・

貧相な—
うすっぺらな

344
344

ふけた・一
ねちねちした

37 2
37 2

.

-111-

意志が強そうな

563

はきはきとした

500

5D D

古くさい
消極的な＋＋

45 3453

意志が強そうな

47.1

甘い ＋＋

42 2

うわぺだけの

41

派手な

40 6

丸みのある＋＋
静かな ＋＋
保守的な＋＋

38 2
38 2
38 2

はきはきとした368
32.4

うすっぺらな
丸みのある
デリケートな＋＋

29.7
297
297

甘 い＋

4

ねちねちした

375

うちとけた

459

静かなサ

328

うわべだけの——

31,3

一

考察

結び付きがインドネシアでは強かったわけだ。 こ

化皿類による分析でも日本における各刺激に対す致していており、 またそのように、年配者には褐色の肌、若者にはたとえのイメ ー ジにはそれぞれ特徴があったが、調査2男性であっても色白の肌のように、老若の対比をの日本とインドネシアの比較から、肌の白さに対肌の色で表現するようなことは、特に西洋絵画のする評価は両地域でかなり異なっていることが分

中では一 種の約束事のように使用されていた。

るイメー

ジはほとんど一かった。 色白の肌は日本では 「弱々しい」イメ ー

また日本では、色白肌の刺激に対し、インドネ

ジか強いものの、その弱々しさは、おとなしくデ

シアでは普通肌の色白寄りの刺激に対してそれぞ

リケ ー トで保守的な印象や、やわらかく女性的でれ「女性らしい感じ」を抱き、逆に色黒肌の刺激

可愛らしいイメ ー ジとの結び付きであることが分に両地域とも「女らしくない感じ」を抱いていたが、かり、日本における女らしさのステレオタイプに

絵画の世界ではエジプトやロ ー マの壁画でも男女致するイメ ー ジを持たれていると判断できよう。

の肌の色分けを慣習的に行っており、男は褐色、それに対してインドネシアでは、同様に「弱々し女は白、と明確な性別の区分を示す記号としていく」「清潔な」印象は強いものの、 「いばった」

たようである。1400年頃に書かれたと思われるイ

イメー

タリア初期ルネッサンスの画家であるCenniniのメ

ジなと、どちらかというとネガティブな傾向書(" I1 1 ibro dell'arte") 1 lにも既にその約束事を持つ。 ポジティプな場合でも「特色のある」「しは書かれている。 このように色白肌は女性らしさ

ゃれた」イメ ー ジなど、ある種の特殊性が感じらと結び付き、褐色の肌は女性らしくない、即ち男れる。 ただし選択率としては多くないが、日本も性的なイメ ー ジと結びつく背景は絵画にも見出せインドネシアも男性は色白肌に対して「弱々しい」

るようだ。

一

ー

ジや 「派手な」イメ

ー

イメ

ー

ジ、 また 「幼い」ィ

有意な性差も多く観察された。 特に普通肌の色

ジだけではなく「意志の強そうな」（日本男+十――， インドネシア男

黒寄りの刺激では日本もイントネシアもネガティ

性；14. 7%, インドネシア女性； 7. 8%)、「はきはきプな評価をしているのが男性であり（日本男性：性； 22. 2%，日本女性； 4. 7%+

貧相な、ねちねちした等。 インドネシア男性：うした」 （日本男性；17.8% , 日本女性； 5. 8%, イ｀

ント ネンア男性；13. 2%, インドネシア女性； 7.8%)
イメーはむしろポジティプな受け止め方をしていた（日ジも持っていることは興味深い。

しかし結果でも述べた様にこの相反する関係は
色黒肌の刺激を第1選択としたケー

ス4において逆転する。 すなわち日本人が色黒肌の刺激に抱いたイメー

すっぺらな、古くさい、うわべだけの等）、女性

ジはインドネシア人が色白肌の剌激に抱本女性：きりっとした、りこうそうな、はきはきとした、明るい等。 インドネシア女性：うちとけた、美しい等）。

美しさの判断において色白肌を 「美しい」と評価しているのは日本の方であり、致し、逆に日本人か色白肌の刺インドネシアの場合はむしろ普通肌の色白寄りを激に抱いたイメ ー ジはインドネシア人が色黒肌の「美しい」と選択していた（ 「美しい」という評

いたイメ

ー

ジと

一

刺激に抱いたイメ

ー

ジと多く

一

価語に対する選択率：色白肌の場合：日本； 60.8%,

致する点である。

その理由に関しては何らかの文化的背景とその影

普通肌の色白寄りの場合：
インドネシア； 39. 4%、

態を感じさせるが、本研究結果からは明かではな

日本； 31. 3%, インドネシア； 53. 0%)。 また嗜好

くこの点に関してはより深い研究が必要と考えら性という点から「好き」という評価語に着目するれる。

ならば、 「好き」と思われていたのは、日本もイ

インドネシアの場合、肌の色の濃さは加齢を意

ンドネシアも最も色白の印象を持つ剌激よりも普「ふけた」と通肌の色白寄りの刺激であったことが明かとなっいう評価語とのかかわりで分かった。 即ち「幼い」

た。 具体的な形態を伴った場合、色の嗜好性は変と色白肌の刺激、 「ふけた」と色黒肌の刺激との化することが既存の研究結果からも明かであるが、味するようであることが、 「幼い」

-112-

「色白」の嗜好構造に関する•一考察

引用文献

本研究結果からも同様の結論が導かれたと言えよ1)Cennini C. circa 1400 "Il libro dell'arte".

う。
自己のアイデンティティーが形成されるに従い、

2) 中小企業事業団報告書 “消費者の色彩嗜好に”

自分の肌の色に肯定的な評価を与えるという主旨関する研究の事を述べる研究は幾つかあるが C( lark 19633)、
Ogletree 1960

3)Clark K., "Prejudice and your child".
Beacon Press, Boston, (1963)

8))、本研究のこのような結果は、それぞれの地域におけるナチュラルな普通肌の色

中小企業事業団 0972)"Discrepancy from adaptation

4) Haber R. N.

level as a source of affect". Journal

を自己のある種の基準として、それよりも若干、色白寄りのものへと好みや美しさの評価が偏向しExpeガmental

たものとも考えられる。 また肌色における記憶色5)岩下豊彦、の調査結果からも、自分が理想とする肌の色や、( 983)
書店 1ofPsychology., 56 370-375 0958)·so法によるイメ ー ジの測定” 川島”

6) 小林嗣幸、“おしゃれの色彩 日本色研事業株

記憶している自分の肌の色が、実際の肌の色の測( 967)
式会社 1定値よりやや明度が高く色白寄りであるという事
実にも関連していると言えよう。 即ち基準からの7). 日本色彩研究所色彩情報研究会
ー

若干の不適合が見られる訳だが、これらのことは者の色彩嗜好調査報告書デ タ集

好ましさや快さの感情が、心理的水準との適度の( 992)
色彩研究所 1”

第12回消費（財）日本

不適合と関わりを持つ H( aber 1958)4 ) というこ

8) Ogletree E. "Skin color preference of theとをも示唆するものと考えられる。 そうであるとNegro child". Journal of Social Psychology.,
79 143-44

するならば、その心理的水準が形成される過程で、文化という環境要因が影響を与えることになるの

9) 齋藤美穂、“色彩嗜好におけるCross-Cultural
Research"

かも知れない。

211-216

しかし，「おだやか」で「魅力的」で「知性的」パーという( 969)1

ソナリティーと関連しているのは、日早稲田大学文学研究科紀要， 27

1( 981)

10)齋藤美穂、冨田正利、向後千春、 “日本の四都本もインドネシアも普通肌の色白寄りであり「陽市における色彩嗜好( 1 ) —因子分析的研究—気」で「親しみやすく」「あたたかい」 パー ソナ

日本色彩学会誌 15 No.1.1-12”( 991)
1

リティ ー として捉えられているのは、両国とも普11)齋藤美穂、冨田正利、山下和幸、“日本の四都通肌の色黒寄りであるということを考えあわせる

市における色彩嗜好(2) ー クラスター分析によと、パー ソナリティ ー の側面からは中庸であるこるライフスタイル特性の類型化—とが最も好ましいようである。

会誌、15 No.2,99-108

”

日本色彩学

(1991)

近年、ホワイトニングヘの意識が高まる中、色12)齋藤美穂、“アジアにおける色彩嗜好の国際比

白の嗜好構造に着目して調査および検討を行って較研究( 1 ) ― 日韓比較• 白嗜好に着目して—”きたが、肌の色における白さが重んじられるのは、その貴族的なイメ

ー

ジとデリケ

ー

トで弱々しいも日本色彩学会誌、16 No. I,1-10( 992)
113)Saito M. "A cross-cultural study on colorp r e f e rence i n three

ろさという特殊性が関連しているようである。 こ:Comparison betweenのことはまた日本をはじめとする周辺アジア地域

As i a n c i t i e sTokyo,

Taipei andで観察される白嗜好が、その特殊性や稀少性から

iT anjin". fa拉nese Psychological Research.,

変容していったことを示唆するのかも知れない。

36 No.4,
14)T s ukada

219-232 (1994)
I., Funatsu K., & S a to M.

"A

study on color preference ". Acta Chro加ztica.,
I 131-146 0964)-113-

病院看護における化粧に関する研究
千葉大学看護学部

杏林大学保健学部

大河原

千鶴子・金井和子

The purpose of this study is to make clear the effectiveness to self-consciousness of hospitalnurses concerning the use of cosmetics on themselves. The study consists of 5 parts as follows;
In part 1, 269 hospital nurses were asked about their habit to make-up and self-consciousness to
it by questionaire. In part 2, 234 hospital nurses who are employed in three hospitals in different
area were asked same questions as part 1. In part 3, 67 nursing school teachers and bedside nurse
leaders were asked same questions as part 1 and effectiveness to patients about make-up of nurse
moreover. In part 4, 60 patients belong in a hospital were asked their impressions about make-up
of nurses by interview and questionaire. In part 5, 99 nursing school teachers and bedside nurse
leaders were asked how the make-up on them affect to their feelings by qestionaire. The results
are as follows:
1. There are 85% nurses who use cosmetics on their working hours, but it makes a somedifferences about both area of hospital and their age. Some nurses of a hospital in thirties
and forties have no time of their make-up for they are compatible with an employment anda home life.
2. Many nurses answer in the affirmative about their make-up in working hours. They say thatto make-up themselves increase tensible force and make positive attitude them in working
hours.
3. Many patients also answer in the affirmative about make-up of nurse. As desirable image
for make-up of nurse many patients point out such as "clean and fresh" "healthy and cheerful""mild and grace" as the feelings of nurse.

1

緒

言

共に上昇傾向を示していた。

「香り」への配慮、化粧する理由の「身だしなみ」の内容に年代差が我々は魅力ある職業イメ ー ジヘの脱皮・転換にみられ、年齢的要因が高いことがわかった。 また必要な要因の つとして「看護婦の化粧」をとり化粧により気持ちが多少なりと「変化する」のはあげ、化粧の効果に対する看護婦の意識を把握し、約60%を占めていた。

一

現代看護婦の好ましい化粧のあり方について提言

調査II 4 >として、看護婦の化粧は年齢的要因がすることを目的として、 5回にわたる質問紙調査

主であるのか更に意識を探る意味で、地域の異なおよび看護の管理職を対象に聞き取り調査を行っ

る2病院の看護婦234名を対象として、調査Iの内てきた。

容に化粧品の種類を加え調査を行った。 年齢要因

その結果、 浦和市内の2総合病院に勤務する看に多少の地域差は認められたが、概して同じよう

護婦296名を対象とした調査Iでは、勤務時に「化な傾向であった。 しかし中堅の30および40代に職粧をする」ものは85.1%で日常より高く、年齢と業と家庭の両立、育児のために忙しく「化粧した
くても出来ない」ものがおり、したがって化粧したときの気持ちの変化が大きいことが一施設の特A Study on the Actual Situation of Make-up,

徴として見い出された。

Cosmetics and Personal Apperance of
Hospital Nurse
Chizuko Ohkawara

調査Iおよび調査IIを基礎調査として、調査田の概要を加え中間報告を行った。 本稿では調査 mの分析 ・ 検討結果と調査WおよびVに加え、看護

School of Health Sciences,の管理職に対する聞きとり調査の結果を検討し、Kyorin University

最終報告としたい。

-114-

病院看護における化粧に関する研究

査

2

目

2-1

調

III

ちの変化、化粧以外などこれまでの調査項目に、看護婦の化粧に対する意見と好ましいイメ ー ジ、
患者に与える影響についての意識、教育指導の必的要性を加えた。

調査I1で3地域・施設における看護婦の化粧に開して比較検討を行ったところ、谷津の30および40

対象の構成は図2-1に示すように、30および40代代に結婚、育児のためにゆとりがなく、化粧をしが86. 6%を占め、平均年齢は37. 0士6. 3歳である。

たくても出来ないという特徴があったことを前述

勤務場所は病院55. 2%、看護学校44. 8%で、埼玉した。 看護婦の中でこの年代は、勤務を継続して県内の在職者が70%である。

いれば看護のキャリアを積みいわば中堅リ

ー

ダ

ー

2-3

および管理職である。

結果

そこで調査田としては、30および40代が多い現

年齢別および所属別にみた化粧する割合につい任教育講習会受講中の看護教員および臨床指導者て（図2 -2)日常と勤務時を比較すると、日常を対象に、化粧や身だしなみに加えて、看護婦の化粧の患者への影響、化粧や身だしなみに関する

年
1

8
0
＝
2ー n

教育についての考え方などの把握を目的とした。
2-2 対象及び方法

平成5年度埼玉県主催の看護教員研修会受講者

旧令

竺

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310

40

n =33

n =26

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症
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字

％

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100

100

80

80

l衰
n=37

+交
n=30

51名、文部省主催看護教員講習会の受講者16名の計67名を対象に、平成5年8月に質問紙調査を実施した。 調資内容は勤務時の化粧の有無、化粧する

60

理由 と配慮、使用化粧品の種類、化粧による気持

l

40-I

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20

図2. 2化粧する割合

は40代が他の年代より低く、勤務時は年代を増す

99
9毎に上昇している。 所属別では看護学校勤務の方

9
9
9
9

が高い。
化粧の理由（図2-3)はこれまでと同様「身だし

9
9

10

9
9

゜

なみ」が一番多く、特に40代は80%以上を占めていた。 次は「他人への印象」でやはり年代が増すに従い高い傾向を示した。 化粧品の種類（図2-4)をみると、 ファウンデ ー ション、 口紅、ほほ紅といった一般的な化粧品は、年代に比例して高くな

図2. 1対象の構成っているが、眉ずみは逆に若い年代に多く、アイ-115-

身だしなみ

％
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n =33 n =26

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清潔感

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40 ·オ

゜

図2. 3化粧の理由

シャド ー 、 アイライナ ー も年代に比例しておらず、①患者に不快感や剌激を与えない ②香水などの

これらは個性によるちがいと思われる。 化粧に当

強いにおいをさける

たっての配慮（図2-5)は、「薄化粧」 と「 香り淡色の悪さは患者に心配をかける泊」であり40代にやや高い傾向を示し、 これまでからイメの調査を裏付けるも のであった。

ー③夜勤あけの疲れた顔や顔④初対面は外観

ジされるなどがあげられていた。

看護婦は化粧をした方が「よい」の回答と「気また患者への影響を「意識する」の回答は、 年にな る」 化 粧は共に年 代に比例して高くなり代に比例して高率となり、 40代は100%を占め、（図2-6)気になる内容の記述は「 意識しない」の回答がみられるのは34歳以下でつい香りの化粧品あった。

粧への配慮と逆の内容であった。 化粧による気持

患者への影響を意識した自由記述内容として

①厚化粧

②き

③派手な化粧など であり、 化

ちの変化は「非常に」と「少し変わる」をあわせ-116-

病院看没における化粧に関する研究

％

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80

ファンデーション
20

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30

20

図 2.4 化粧品の種類

患者への影響を
100

％

80

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40

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゜

20

I

薄化粧
30

I

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I

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20

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I

30

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I冒鼠
図2. 5配

-117-

I

I

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I

20

意識する
30

l

40 オ

I

化粧以外の身だしなみは清潔感が重視され、 ユー
ニフォ ー ムや靴のデサイ ン 、 ピアス、 ハン カチ

ると、20および30代で約60%、40代では約80%の高率であった。（図2-7)変化の内容は「気持ちをひきたて明るくなる」「気持ちがシャキツとひフ（ポケットチ ー フ）などおしやれ感覚をとり入きしまる」など緊張感と気持ちの高揚を示すもの

れる意識が、若い年代に多い傾向であった。

であった。

（図2-8)

図2. 7きもちの変化
ユニホ ー ム清潔

80

デザイン

ベ

ー

靴デザイン

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20

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ユニホ ー ム

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40

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60

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整

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ピアス

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80

60

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60

゜
図2. 8化粧以外の身だしなみ-118-

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80

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爪の手入れ

その他

翁翁

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図 2. 6 看護婦の化粧

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30

少し変わる

非常に変わる

看護婦の化 粧気になる

看護婦は化粧
した方がよい

病院看役における化粧に関する研究

看護婦の化粧 に関する好ましいイメ ー ジとしてなみに関する教育・指導については「必要である」

6つの選択肢のうち、 どの年代も1位に「清潔でさと75%が回答し、年代別では20代と40代が30代に比べやや高い傾向であった。 どこで希望するかは「おだやかで優しい」であり、「エレガントで上品」

基礎教育においてが20代に高く、30および40代は「知的でク ー ル」は低率を示し、「はつきり個性的」

就職時のオリエンテ ー ションで希望する ものがやは皆無であった。

や高い傾向であった。（図2-10)（図2-9)看護婦の化粧や身だし% 008060 40200
ー

乎

n=8

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才
40i

30ー

図2.9看護婦の化粧はどうあればよいか

才

40i

-119-

就職時に
30i

図2. 10化粧についての教育・指導

20 i

才

40i

30ー

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ー

40

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基礎教育で

20 i

ー
心
ー

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20 i

必要あり

才

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知的でク ー ル

20 i

40ー

才

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20

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オ

20 |

おだやかでやさしい

健康で明るい才% 00 8060 4020 0

乎

゜

゜

‘
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'
`
3‘

% 00
9 8060 4020 0

20 t

清潔でさわやかー

わやか」を選び、2位に 「健康で明るい」、3位は

2-4

考

とが明らかとなった。 では看護を受ける側の患者

察

調査I• Ilの対象は20代が過半数を占め、30おは、看護婦の化粧についてどうみているのであろ

よひ40代は35-37%であったが、調査皿ではこのうか。 その意識を探ることを目的として入院患者

年代が87%を占めていた。 職位別てもこれまでのを対象に調査を行った。

調査対象はスタッフが70-80%であったか、今回
3-2 対象および方法

は約10%であり前述の中堅リ ー ダ ー が大部分であ調査Iで対象とした浦和市内の1総合病院に、った。
結果にみられるように勤務時に「化粧をする」

平成 5 年 3 月 9 日の時点に入院中で調杏に応じてものは高率で、谷津は特殊であることがわかり、くれた患者60名を対象とした。 調査内容は、看護

これまで以上に化粧に関し肯定的であると考えら

婦は化粧をしていた方がよいか、「感しよい」化れる。 化粧をする理由としては「身だしなみ」が粧の程度、看護婦の化粧について気になったこと、

高率で、他人を意識した回答はこれまでの調査よ

不愉快と感じたこと、看護婦の化粧の好ましいイ

り上まわっていた。 化粧にあたっての配慮は、こメ ー ジ、看護婦の化粧の有無で受ける感じなどでれまでと同じく「薄化粧」と「香り淡泊」であり、ある。 方法は質問紙による聞きとり調査とした。

この2点は看護婦にふさわしい化粧としての必須条件であると思われる。 化粧による気持ちの変化も高率であったが、その記述内容は前述のごとく

49.4 土 17.8才

積極的な行動、仕事への動機づけ、気持ちの高揚を示すものが大部分であり、内にもてる魅力をひき出す原動力ともなっていることがうかがえ、これまでの調査を裏付けるものであった。
化粧以外の身だしなみとしては清潔感が重視され、化粧についての意見、好ましいイメ ー ジとも’
36.7%•，
I

人

＇

41.7%

21.6%

1�

一致している。 ここでは化粧や身だしなみについて、患者に与える影態を意識したことが「ある」と90%が回答し、「ない」のは10%以下で年代的

10lには34歳以下であったことに注目しておきたい。

5·

つまり看護のキャリアを積むに従い患者との教育的・治療的関係において、看護婦か患者をどうみるかと同時に患者が看護婦をどうみるかという冶
療的環境としての自己の存在に気づいていくことが重要と考えるからである。
3調

図3. 1対象の構成

査
対象の構成を年齢別にみると図3 -1のように20

3-1

目

的

および30代が36. 7%、40から64歳までが41. 7%、

調査頂までにより看護婦の化粧に対する配慮は、65歳以上が21.6%を占め、男性31名、女性29名で「薄化粧」と「香り淡泊」であり、患者に不快な

年齢平均は49.4士17. 8歳である。 入院病棟は男性刺激を与えぬよう患者への影懇を意識している看の場合内科21名、泌尿器科10名、女性は産科18名、護婦が多く、年代に比例して高率となっているこ

内科・外科11名である。

-120-

病院呑没における化粧に関する研究

3-3 結

なっていた。

果

看護婦の化粧が気になったことが「ある」のは、

看護婦は化粧をしていた方か「よい」の回答は、男性80. 6%、 女性96. 6%で女性の方が多く、 「い男性12. 9%、 女性20. 7%で女性がやや多い傾向でいえ」は男性l名のみであり化粧に対し看護婦以上あった。 その理由は、 男性では「厚化粧」 「起床に肯定的であった。（図 3-2) 「感じがよい」化粧時に濃い口紅をみるとギヨツとする」であった。

の程度は薄化粧が一番多く71. 7%であり、 男性

女性の場合全員産科入院患者であり、 派手な化粧67. 7%、 女性7ふ8%でやはり女性の方が多い傾向と 濃い口紅に加え「香水のきついにおい」があげを示し、 厚化粧は皆無であった。（図 3-3) その他

られ、 逆に化粧をしていない人も気になるとしてについての内容をみると、 男性は「その人の自由」

いた。 看護婦の化粧で不愉快な思いをしたことが「普通でよい」 「化粧をしていた方が明るくなっ「ある」のは、 やはり産科入院中の女性患者であてよいが強烈なにおいは困る」などであり、 女性

り、 その理由としては、特に妊娠悪阻の時に香水の場合は「その人の肌にあわせ似合っ た 化 粧 」

および化粧品のにおい、 口紅の光りをあげていた。

「顔がよくみえる 化粧」「自分にあった節度あ

男性患者の場合は不愉快な思いをしたことは「なる化粧」などかみられ、 化粧に対しより具体的にい」と回答し、 化粧をしていない方が不愉快だと

その他

40

40

⑳
〇

言

図3. 3「感じよい」化粧の程度

図3. 2看護婦は化粧をしていた方がよいか
-121-

｀

60

｛
冒冒 胃昌冒冒

60

言ロ

80

碑

厚化粧

100

80

20

個性的

%

素肌を整 える

100

薄化粧

定

定

どちら でもな い否肯%

気になったこと�

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上
ロ日

図
図3. S看護婦の化粧の好ましいイメ ー ジ

三％

図3.4看護婦の化粧についての選択肢により選んでもらったところ、1位「清潔でさわやか」、2位「健康で明るい」、 3位「おだやかで優しい」であり、選び方の順位は看護婦と一致していた。性別では、男性は上位3位までの順位がはつきりしており、女性は「健康で明るい」
31.2%を1位に、「清潔でさわやか」と「おだやかであった。 （図3-5)その傾向を年代別順位づけでみたのか図3-6である。「健康で明るい」を1位に占め、40から64歳までは45%、65歳以上では33.3％になっていた。 2位への順位づけは、40から64
歳までが45%で 一 番多く、20および30代が一 番少

I

誓

品
60

0 % 80 6

したのは、多い順に20および30代が50%と半数を

I
I
39 64

l
l
l
l
2:l
n

40 2

で優しい」は31.0%の同率2位で、1位とは僅少差

健康で明るい20 40 65オ

述べているものもあった。（図3-4)看護婦の化粧はどうあればよいかについて、調査皿と同様6つ

二 二

彦、、

ぉだやかでやさしいLI

なく20%、65歳以上は中間であった。 3位への順戸�

位づけは一 番少ないのが40から64歳までであった。
すなわち20および30代において1位への順位づけが多く、40から64歳までは1位、2位が同率、65歳以上ではいずれも同率であった。
「清潔でさわやか」の1位順位づけは、65歳以上が際立って高率(77. 8%)で、20および30代が40%、-122-

図3..6看護婦の化粧の好ましいイメ ー ジ
世代別順位づけ病院看i投における化粧に関する研究

40から64歳までは36. 4%であった。2位順位づけは、

20および30代

20および30代、40から64歳まで、65歳以上の順と

健康的な

不健康的な

なっていた。

明るい

暗し、「おだやかで優しい」は、3位への順位づけがど

活気がある

活気がない

の年代も多く、 20および30代では57. 9%、40から

きれい

きたない

64歳までは66. 7%、65歳以上ては75%で年代が増

清潔な

不潔な

すにつれ高率となっていた。

安らぎがある

安らぎがない

あたたかい

つめたい

化粧を「している」看護婦と「していない」看
護婦から受ける感じについて、これまでの調査結果を基に看護婦の化粧と関係がある形容詞対を740から64歳まで

対選ぴ、5段階評定をしてもらった結果が図3-7で

明るい

暗い

ある。

健康的な

不健康的な

きれい

きたない

活気がある

活気がない

，

明るい

●

化粧あり

0

化粧なし

E
？

暗い

腱康的な

不腱康的な

活気がある

活気がない

清潔な
安らぎがある
暖かい
きれい「↑―—安らぎがない

li
．

つめたい

清潔な

不潔な

安らぎがある

安らぎがない

65歳以上

不潔な

一

あたたかい

冷たい

――きたない図3. 7看護婦の化粧の有無で受ける感じ

明るい

暗い

健康的な

不健康的な

清潔な

不潔な

あたたかい

つめたい

きれい

きたない

安らぎがある

安らぎがない

活気がある

活気がない

3-4考察
化粧の有無で受ける感じの差が大きい順に列挙す

対象が入院中の患者であり、看護婦から直接的ると次のようであった。

なケアを受けていることもあって、看護婦に好意

全体では的な回答が寄せられたと考える。しかし不快や気

明るい

暗い

になる内容について率直に答えていることから、

健康的な

不健康的な

結果をそのまま受けとめてよいと思われる。化粧

きれい

きたない

に関しては、していた方が「よい」と看護婦以上

活気がある

活気がない

清潔な

に肯定的であり、「感じがよい」程度は博化粧と不潔な香り淡泊であって、看護婦を対象としたこれまで

あたたかい

つめたい

の調査と全く一致していた。したがってこの2点

安らぎがある

安らぎがないは看護婦に望まれる化粧の程度といえる。強い香りは患者にとって剌激的かつ不愉快であり、特にそれを年代別にみると次のようであった。

妊娠悪阻など匂いに敏感で気分が左右される患者-12 3-

極めて高率であり特徴的である。 つまり「おたやへの配慮は、これまでと同様重要であることか証かで優しい」は順位づけでは 3 位であるが、年代明された。
看護婦の化粧に対する好ましいイメーを増すに従い高率を示す傾向と言える。

ジとして選択された「清潔でさわやか」 「健康で明るい」

4「おたやかで優しい」の上位3つは、看護婦のイメー

ジとして患者が希求している現れであり、看護4-1

婦のイメ ー ジは患者に反映するといえよう。つま持ちの変化か行動に及ぼす影響について示唆されジ、親しみやすく安らきが感じられるおだやかで優しいイメ

的た対象を選択し調査を進めた結果、化粧による気

清潔でさわやかなイメ ー ジ、明る＜元気づけられる健康で明るいイメ

査V

これまでに看護婦の年齢的な要因も考慮に入れ

り健康回復を願う患者は、気分的にさっぱりしたー目調た。 そこで調査の最終として気持ちの変化に焦点

ー ジを求めていをしぼり、行動の動機づけとなる要因を詳細に調ると考えられる。

べることを目的として検討を行った。

これを年代別の順位づけでみると、若い年代の患者は「健康で明るい」を1位に、「清潔でさわやか」を 2 位に「おだやかで優しい」を 3 位にし4-2である。40-60歳までの中年層の患者は「健康で教員講習会平成 6 年度受講生99名を対象に、平成

調査皿と同様埼玉県、および文部省主催の看護ており、何れも半数を占めていて順位づけが明確

6年11月に質問紙調査を実施した。 調査内容は勤明るい」が 1 位および 2 位同率であり、「清潔で務時の化粧の有無、化粧する理由ならびに配慮、さわやか」は2位、「おたやかで優しい」は順位

化粧による気持ちの変化に、気持ちの変化を表現

づけでは3位であるが66. 7 %と他に比べ高率であした23項目に対する4段階評定を加えた。対象のり 、 ここに特徴があるといえる。65歳以上では構成の年代別では、20代は10. 3%、30代は69. 0%、「清潔でさわやか」の1位順位づけが他に比べ高率

40代は20. 7%で平均年齢は35. 0土5. 0歳であり、で、「健康で明るい」は 2 位と 3 位が同率で、3位

調査皿の対象に比べ30代が多い。

の「おだやかで優しい」は75%を占め、他に比ヘ

表1,n目
I i'.Iタ）に自はがもてる

1l4
0. 66 0. 44 0. 51:

対象および方法

気持ちの変化 23 項目の相関

560. 60 0. 11

7
0. 58

8

9

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10
0.41

11

12

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0. 44

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13

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1 亘立亘ニニニニ二二三亘廷豆：二丘ニ-—-� ニニ
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ニ三三三 ーニ三―_no,糧二］―丑置i尺誓□

森提示したものはすべてP<O. 05以上の有意差を有する-124-

1丙肱石設における化祉に関する研究

表2 : 気持ちの変化23項目の因子分析
兵
ヽヨ

-ヌ
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．

匡］子1

目

区］子2

巨子3

因子4

-0. 746

生き生きしてくる

因子5-0.714

外向的になる気
持 積目的になる
ヤっ
すっきりした気持ちになるのゅ やさしい気分になるとり 身だしなみにまで注意がはらえる-0.684-0. 630-0. 611-o. 513

背筋がしっかり伸びる気持ちになる-0. 478

人に明るい印象を与える-0. 441

女らしいしぐさを心がけるようになる-0. 438-0. 823

対 自分に自信がもてる
人 気持ちが前向きになる-0. 686-0.655�邑五, きれいになったような気がするの
高 対人意識が高まる°' 気持ちが明るくなるり
気になる部分を隠せる-0. 561-0. 546-0. 542-0.537

人と会うのが楽しくなる-0.826

仕 仕事に行くという緊張感が出る
謳
ヘ 仕事をするぞという気持ちになるの私生活と仕事のきりかえができる-0. 748-0. 617:a-==丸
気分転換ができる持
ち 気持ちにハリがでるの気持ちがひきしまる/\-0. 718-0. 560-0. 450リ-0 622

顔 顔色が悪いのをおぎなう
色ことができる
の
-、

ぎ

t0-、

し＼

累積寄与辛

19. 39-125-

34. 22 I 46. 12

54. 41

58. 97

4-3ったという。さらに戦後アメリカの影態を受けフ果結(1)勤務時に「化粧すろ」ものは78. 8%で、理由ァンデ ー ションが入ってきて、個人の肌の状態には身だしなみ53. 9%、他との組み合わせ28.1%で応じた化粧品、無香化粧品、肌色価値観多角化、両者で82%を占めていた。

バイオロ紅およびシャンプ ー やリンスなどの開発(2)配慮は、薄化粧44. 3%、香り淡泊13. 6%、両

めざましい時代を迎えることになる。1980年代に者の組み合わせ11. 3%で調査IlIに比べ低率であり、入ると女性の社会進出が定着し、行動する女性時

なしか25.0%を占めていた。

代となり、自然なメ ー キャップ、自分らしさの表(3)化粧による気持ちの変化は「非常に変わる」

現へと変遷し、化粧品は幅広い領域に関連した総16 .. 9%、「少し変わる」73.0%で計89.9%は調査IlI合人間科学の観点から研究開発が行われるようによりわずかに高率であった。

なってきた。

(4)これまでの調査の自由記述から選んだ気持ち

この化粧品の進歩発展は、看護婦の化粧にも大の変化の表現23項目については、表1のようにかきく影響を及ぽしていると考えられる。かって化なりの項目間に相関がみられた。

粧は派手でけばけばしく刺激的であるため、病人(5)気持ちの変化の表現23項目に対する回答から、を看とる看護婦の身だしなみとしては、ふさわし

因子分析により 5 因子を抽出した（表 2) 。

くないとされていた。しかし今回の一連の調査で識の高まり、因子 3 は仕事への意欲、因子 4 は気し肯定しており、むしろ化粧をしていない方が不因子 1 は活気・気持ちのゆとり、因子 2 は対人意

は、看護婦も患者はそれ以上に看護婦の化粧に対持ちのハリ、因子 5 は 顔色のおぎないにそれぞれ愉快だとしていること、看護婦の患者への配慮が分類された。

患者の意識と一致していること、最終調査結果で示された気持ちの変化の内容は、顔色のおぎない 、

4-4

気持ちのハリ、対人意識の高まり、活気などでこ察考明治41年わが国最初の看護婦による著書といわれらが仕事への意欲に連なって、生き生きと働くに、“看護婦心得として患者の精

原動力になっていることが明らかになった。つま神の慰めや衛生を保つ心配りとして何時も麗しきり看護婦の化粧は単に外観だけでなく、看護の姿れる実地看護法I)”とある。また「身だしなみ」

勢の反映であり、気持ちの変化に関与し、内にあ束ね髪、身体の清潔、爪切り、手の荒れる魅力を引き出し、明るく生き生きと意欲的に働を防ぎ、衣服は清潔にして飾らず と記述されてく行動への動機づけとなっていることが分かったいる。

ことは大きな意義があると考える。

顔で接するようにとして“”

戦後の新制度と言われた看護教育では、看護倫

5

理叫こ看護婦の容姿としてi青楚な美しさが求めら

結論にかえてれ、 “看護婦の清らかな心の表現は患者の慰めで看護婦の教育・指導的立場にある看護部長や婦あり、人の目に清らかな感しを与える化粧• 身だ
しなみが望ましく煽情的であってはならない”と長は、看護婦の化粧に関しどのような意見を持っているかを把握する目的で、平成6年10月末にこある。
方、 日本の化粧品の歴史 3) によると、明治のれまでの調査結果の概要を話した上で聞き取り調

初めは洗顔入浴には石鹸は高級品であり、化粧水査を行った。その内容を整理したのが表3である。

時代であり、白粉による鉛中毒が問題となってい対象は看護部長であった70代および60代各l名、た。大正時代に入って色白は七難隠すの諺から、現職にある50代2名、40代3名の看護部長および自分の肌色を生かす意識を与える色白粉の開発に

婦長計7名であり、内容は看護婦の好ましい化粧、

一より、化粧の方法が個人表現へとすすむことにな

化粧に関する教育・指導等である。

-126-

紺院看没における化粧に関する研究

表3 : 管理職を対象とした看護婦の化粧に関する意見
質

問

項

回

自

I -1. 看護婦の化粧や身だしなみについて看護教育
で教えられたか

答

結

果

・

内

容

·7名全員が敦えられたと回答した。
1)学科目としては看護倫理 、 蕊業的潤整 、 看護菅理など
2)教えられた内容としては化症についてというより「実吉時の身だしなみ」として教えられた（日赤）
3)白衣9こふさわしい化症をし 、 髪を笠える
4)白衣 、 ナ ー ス靴の清潔 、 ナ ー ス靴としてサンダル型はいけない
5)毎日朝礼時にユニフォ ー ム 、 髪をチェックされた（日赤）
6)ネックレス 、 指⇔はいけな•い

2. 白衣にふさわしい化粧と髪の望え方について教えられたことは• 薄化粧がよい1)剌敏的でないどぎつい化症はよくない
2)口紅はうすく 、 アイシャド ー はしない方がよい
3)マスカラ｀アイラインはいけない
4)顔色が悪いときは頬紅でカパ ー する
5)特に深夜勤時起きっばなしの顔 、 髪ポサポサはいけない•長の笠え方1)髪が捻足にかからぬようにショ ー トカットにするかあげてとめる
2)前髪をたらさぬように下を向いた時にダラッとならぬように
3)髪が捻元につかぬようネットをかぷる（日赤）「特になかった」は1名～ただし日常勤店中宝
3. 就志時にオリエンテ ー シ ・「はい」が6名 、Iョンされたかが過ぎている時は注意された。例えば患者から麻酔が寛めてみたら口紅コッテリ 、 アイシャド ー が温い看護婦は嫌と言われ 、 注意

4. 化証したいと思ってもできないことがあったかI .

n-1. 現臼顆帰の化症に関すI .

る意誨をどうみているか

特にない 、 写化証 、 口紅位でそれ以上したいと思ったことはない
・マニキュアが好きだったがいけないと宗止されできなかったので爪を磨いた（日赤）

2. 化症をする事についての意厄が変わったと思うか1
3. 勤務場所 、 也代による遠いがあるか

4. 化症をするのは自分のためか 、 他者を意誨してのことか

rn- 教育・

指導上の留意最近のクリニックや近代的な病院では事顆帰のオシャレに積抵的
例えば
1)ポケットチ ー フ ー 白にうつる柔らかい色は患者さんに安らぎ を与える
ー手がきれいに見える2)ナ ー スリング
3)小さなピアス

・変わってきた。昔は化症をしない誓顆帰が多かったが女性の社会進出 、 化証品の進歩 、 一般社会の化症に影誓されていると忠う・見かけだけでなく誓衷の姿勢の反映である。化症により自分に自信をも って笑顔で接することができる

I .

若い人は化粧をしなくても肌がきれい ー ロ紅はつけた方がよい• 中年すぎてもきれいにしたいと思う人が多くなった 一 いくつになってもその人にあった写化粧• 勤務場所の外来 、 病棟別は特に意五しないがクリ ー ンル ー ムは化証しない 、 手術室はしている• 卒業生をみていると1年自は化粧しない人が多いが外出する潰会が多くなると化症する人が多くなる• 病院の外では 一般社会の女性と違いがなくなったI .

自分と他者（特に患者さん）の両方である・雑と接するかによって違う• 化粧の程度と化粧以外の身だしなみ
1)化粧はその人にあった薄化粧 、 口紅を奨励
2)香りは患者さんに克国を与えぬよう、ほんのりと
3)結婚指綸はよいが石の入った物はだめ
4)白衣とのつりあい 、 清潔感 、 清楚な感じがよい
5)化症は身だしなみであり 、 全くしないのはよくない
6)アイシャド ー は注意してどぎつくつけるのはどうかと思う
紫系はよくない 、 特に夜勤の時は患者にとってアイシャド ー は
束lj滋的7)看護の諏場と外出先によって使い分ける-127-

表3にはこれまでの調査結果が集約されており、

引用文献

さらに化粧に関する教育・指導上の配慮として、

l. 大関

現代看護婦の化粧に関する意識、 特に若い世代は(1908)”

和、 ＂実地看護法（復刻版） 、 医学書院”

勤務する場所に応じて身たしなみの内容におしや

2. 橋本寛敏、 “看護倫理れ感覚をとり入れ、 自己表現がなされるように変3. 光井武夫、 “新化粧品学 、南山堂(1993)

わって来ていることを受けとめた上で、 個々人に

4. 大河原千鶴子、 コスメトロジ ー 財団、 研究、医学書院(1964)＂

あった薄化粧を奨励したいと考えていることに注
目したい。

-128-

業績中間報告集3 51 (1993)高齢者のおしゃれ行動とその評価に関する研究
横浜国立大学経営学部

藤森

堅マリアンナ医学研究所

立男•藤森

和美

The purpose of this study was to examine the images held by elderly people about what "anelegant elderly lady" is like, and to clarify the qualities of such a lady. The subjects of this study
were seven hundred and thirty five elderly people who were taking educational courses for theaged held at local community centers.They were asked to imagine two kinds of elderly ladies;
One who was elegant, and another who was not elegant. Then they filled out questionnairesconsisting of items dealing with their images and cognitions of their qualities. The main results
were as follows:
1) The image ratings of an elegant elderly lady were analyzed by factor analysis. Two factors
were extracted : leadership and maturity. The elderly people had images that an elegant
elderly lady was superior to an inelegant elderly lady in such inner qualities as leadership andmaturity.
2) The cognitive ratings of properties which she had were analyzed by factor analysis. Threefactors were extracted : sophisticated appearance, economic capacity and make-up skills. The
elderly people had cognitions that an elegant elderly lady was superior to an inelegant elderly
lady in outer qualities as sophisticated-appearance, economic capacity and make-up skills.
3) Elegant elderly ladies were grouped into three clusters by cluster analysis : gold cluster,sophisticated cluster and executive cluster.

1

緒

言

的地位の高さに関する判断と服装 ・ 容姿などの特徴、言葉使いや立ち振舞いなど、さらに保有財産

従来、社会心理学の分野では、特定の非言語的や経済行動などの特性がどのように関連している

コミュニケーション (Non-Verbal Communication;

かを検討している 6) 。 その結果、他者の社会的地

NVC) のキュ ー (Cue)が対人認知と密接に関連して位が高いかどうかを判断する手がかりとして、大いるとの研究がなされている -4 l 。 その代表的な学生および社会人(25歳から49歳）ともに 「話し研究は、Dionらによるものである 5) 。 彼らは大学

方 ・言葉使い」「身だしなみ」「仕事の内容」「職業・生を対象にして、 「外見的に魅力的な人物が社会勤め先」「身分・肩書」などの特性を重視している的に望ましい性格特性を持っており、将来においことを明らかにしている。

1て社会的地位の高い職業につくだろうと認知されしかしなから、 これまでの研究は対象か大学生る」ことを報告している。 わが国では、山本らのや成人中期までに限定されていることが多く、成社会的地位のイメ ー ジに関する研究があり、社会

人後期に属する高齢者が同年代の他者をどのように認知しているかについてはほとんど検討されてしヽなし、 7. 8) 。
そこで本研究では、従来の研究では触れられる

A Study on Elderly People's Cognitions of"an Elegant Elderly Lady"
Tatsuo Fujimori

ことの少ないこの問題を検討した。 すなわち、高齢者が認知する「おしゃれの上手な人と上手でない人」のイメ ー ジとはどのようなものであり、高Faculty of business administrat10n

齢者のおしゃれのイメ ー ジの構造はどのような要

Yokohama National University

素から構成されているかを検討した。 また、高齢-129-

者が認知する「おしゃれの上手な人と上手でない構成されていた。

人」の服装・容姿、言葉使いや立ち振舞いなどの

2. 4

調査内容

質問項目の主要な内容は、以下の通りであった。

外見的特性にどのような違いがあるかを調べ、同時に高おしゃれ者の外見的特性に関する構造を検(1)高おしゃれ者と低おしゃれ者討した。さらに、高齢者が認知するおしゃれの上①印象・イメ ー ジ

手な人はどのようなグル ー プに分かれるかをクラ②容姿•服装などのおしゃれ特性

スター③所属・趣味・購買行動などの行動特性分析を用いて検討した。

④身長・体型などの身体的特徴

2

方⑤職業・年齢などのデモグラフィック特性

法(2) 回答者の特性

2. 1①おしゃれの評価基準

対象者②おしゃれに対する態度

本研究の対象者は、東京都世田谷区内および杉並区内のコミュニティセンタ ー などを利用する高③自尊感情

齢者、北海道函館市・江差町・恵山町・木古内町④職業・年齢などのデモグラフィック特性のシニアカレッジや高齢者大学などの参加者であ3り、最終的な分析対象者は合計735名（男性249名、結果と考察

女性486名）であった。年齢は60歳代から80歳代ま3. 1でに分布し、 平均年齢は男性が7 0. 5 歳、 女性が評定対象者として選択された人物の妥当性

高おしゃれ者と低おしゃれ者の差異を具体的に

68.9歳であった。

検討する前に、各回答者が想起しているそれぞれ
2. 2

実施時期

の人物のおしゃれの程度が実施条件どおりである

平成5年6月から9月までの期間に調査票を配布

か否かを検討する必要性がある。そこで、実施条

し、施設内に設置した回収箱、または郵送によっ件のチェックを行った。おしゃれの程度の認知にて回収した。

関する測定は、おしゃれが「 じょうず」「ふつう」「じょうずでない」の3件法を使用し、高おしゃれ

2. 3

調査票の内容者または低おしゃれ者として想起された人物のお調査票は初めに 、 「あなたの知っている女 性

しゃれの程度について対応のあるt検定を行った。

の中で、おしゃれの上手な人 (A さん）とおしゃ

その結果、男女ともに高おしゃれ者と低おしゃれれの上手でない人(Bさん）の条件にあてはまる者としてあげている人物の平均値に有意差が認め女性を1人ずつ思い浮かべて下さい」と教示し、られ、高おしゃれ者の方が高い評価であった （男それぞれの人物を想起させ、その印象や外見的属

性 ： t=37.021, df=248, p< . 001; 女性： t=52.501,

性などについて記入することを求めた。

df=485, p< .001)。したがって、本研究におけるAさんの条件は、①60歳 以上の女性が会ったことのある人②あなた③おしゃれが上手な人とおしゃれの高低に関する条件操作は、有効である
ことを示している。

いう3条件であった。次に、Bさんの条件は、①
Aさんとほぼ同じ年翡の女性
ことのある人②あなたが会った

3. 2

高おしゃれ者・低おしゃれ者の基本属性

回答者は実際にどのような人物を高おしゃれ者③おしゃれが上手でない人というや低おしゃれ者として選択しているのだろうか。

3条件となっていた。
質問項目は、I. Aさんについて、II. Bさんについて、ill. あなた自身についての3部門から

ここでは、高おしゃれ者と低おしゃれ者の基本的な属性を明らかにする。

-130-

高齢者のおしゃれ行動とその評価に関する研究たれていることを示している。

(1) 評定対象者と回答者との間柄
まず評定対象者と回答者の間柄、好意度、年齢、

3. 3 高おしゃれ者と低おしゃれ者との差異

職業の側面を検討することにより、回答者と評定対象者との関係、および評定対象者のことを回答

高おしゃれ者と低おしゃれ者として認知される者がとのように認知しているかについて検討した。

人物がどのような点で異なるかを調べるために、①評定対象者と回答者との関係「身体的特徴」「おしゃれのイメ ー ジ」「生活・行動

高おしゃれ者として選ばれているのは、 男性では多い順に 「趣味やクラブ活動の仲間(38.2%)」の外見的属性」などの諸特性について検討した。
(1)身体的特徴「家族・親戚(18.5%)」「近所の人(17.3%)」「職高おしゃれ者と低おしゃれ者の身体的特徴がど場や仕事上の友人 ・ 知人(10.8%)」であった。 女のように異なっているかについて調べた。 身体的性では、「趣味やクラブ活動の仲間(45.3%)」「近特徴の指標には、体型と身長をとりあげ、それぞ所の人09.5%)」「学生時代の友人・知人(11.7%)」

れについて3件法を使用し、対応のあるt検定をであった。

行った。 その結果、高おしゃれ者は低おしゃれ者

低おしゃれ者では、男性は 「近所の人(29.3%)」に比べて、体型が細く（男性： t =3.970, df=248,p「趣味やクラブ活動の仲間(27.7%)」「家族・親戚< .001 ; 女性： t=3.272, df=485,p< .01) 、身長(18.5%)」「職場や仕事上の友人・知人(12.0%)」は高いことが明らかとなった（男性： t =6. 226,が多く、女性では「近所の人(35. 0%)」「趣味やクdf=248, p< .001 ; 女性： t =5.767, df=485, p<

ラブ活動の仲間(34.8%)」「学生時代の友人・知人. 001)。 こうしたことから、高おしゃれ者は低お(10.1%)」が多く選ばれていた。

しゃれ者に比べて、体型が細く、背が高いと認知評定対象者と回答者との関係は、全体的傾向としで性差は認められない。

されており、総じてスタイルが良いとみなされて男女とも高おしゃれ者

いることを示している。

の上位に 「趣味やクラプ活動の仲間」「近所の人」(2) 社会的地位の程度を選択していた。 また、低おしゃれ者では上位に

高おしゃれ者と低おしゃれ者の社会的地位がど

男女とも 「近所の人」「趣味やクラブ活動の仲間」のように異なっているかについて調べた。 社会的をあげており、高おしゃれ者の選択と類似してい地位に関する測定は、 「高い方」 「ふつう」 「低た。 このことは、 男性の回答者が退職によって現い方」の3件法を使用し、高おしゃれ者と低おし在の対人関係の範囲が女性の回答者のそれに近づゃれ者について対応のあるt検定を実施した。 そき、 男女とも同様の結果が得られたものと推察さの結果をみると、 男女ともに高おしゃれ者は低おれる。

しゃれ者に比べて、社会的地位が高いと判断され評定者対象者に対する好意度ていた（男性： t=6.518, df=248, p< .001 ; 女性：

高おしゃれ者、低おしゃれ者のそれぞれの評定

t =3. 272, df=485, p< .001)。
(3) おしゃれのイメ ー ジ

対象者に対する回答者の好意度を 「非常に好き」

高齢者のおしゃれのイメ ー ジに関する測定には、「ふつう」「非常に嫌い」の3件法で評定することを求め、性別ごとに高おしゃれ者と低おしゃれ者

予備調査の自由記述によって得られた12項目を使との間で好意度に差があるかを調べるために対応用した。 各項目は「あてはまる」「ややあてはまる」のあるt検定を実施した。 その結果、 男女ともに「あてはまらない」の3件法であった。 そして、そ高おしゃれ者は低おしゃれ者に比べて好意度が有の回答結果に基づいて高齢者のおしゃれに関する意に高かった（男性： t=11.939, df=248,p< .001;

イメ ー ジがどのような要素から構成されているの

女性： t=l5.674,·df=485,p< .001) 。 このことかかを調べるために、 因子分析を実施した。 因子数ら、高おしゃれ者は低おしゃれ者よりも好意を持の決定には、 固有値(1. 0以上）と解釈可能性を基-131-

準とした。 また、 当該因子には . 40以上の負荷量

みや温かさに関する因子と考えられ、 『成熟性』

をもち、 他の因子には . 40未渦の負荷最をもつ項の因子と解釈された。 これらの結果から、 高地位

目だけが残るように、 主因子解による因子の抽出者のおしゃれのイメ ー ジは『積極性』や『成熟性』と直交 Varimax 回転を繰り返した。 その最終的から構成されていることが確認された。

な結果は、 表 1 に示されており、 高齢者のおしゃ

次に、 『積極性』にかかわる項目と『成熟性』

れのイメ ー ジとして2因子が特定された。

因子の特徴を具体的にみていくと、 第 1 因子には、「1. リーにかかわる項目について、 それぞれ合成得点を作成し、 高おしゃれ者と低おしゃれ者に対するイメダシップのある」「2. 外向的な」「3. 決断が速い」「 4. 意見をはっきり言う」「5.人目を引ージに違いがあるかどうかを対応のあるt検定にく」などの負荷量が高く寄与していた。 このこと

よって検討した。 その結果、 男女ともに高おしゃ

から、 第 1 因子は社交的で、 しっかりとした主張

れ者は低おしゃれ者に比べて、を持っていることに関する因子と考えられ、 『積性』などの各側面で優れているというイメ ー ジを極性』の因子と解釈された。 第2因子には、 「6. 思

強く持たれていることが明らかとなった（積極性

いやりのある」「7.上品な」「8. 親しみやすい」「9.

：男性t=10. 242, df=248, p< . 001、 女性t=16.

センスのよい」などの負荷量が高く寄与していた。
このことから、 第2因子は上品で、人間的な親し『積極性』『成熟266, df=479, p< . 001 ; 成熟性：男性t =19. 360,

df=248, p< . 001、 女性t=25. 220, df=482,
p< . 001)。

表1

項

おしゃれな女性のイメ ー ジに関する因子分析の結果

目

因子l

因子2

共通性

1.

リ ー ダ ー シ ップのある

0.6643-0.1230

0.45642.

外向的な

0. 6385

0. 0557

0.41083.

決断の速い

0.6115-0. 1269

0. 3900

4.

意見をはっきり言う

0.5213-0.0766

0.2776

5.

人目を引く

0.4118-0. 0388

0.1711

6.

思いやりのある

0.0171-0. 6398

0.4097

7. 上品な

0.0079-0.589 5

0. 34768.

親しみやすい0. 0496-0.5136

0.26639.

センスのよい

0.3237-0. 5010

0. 3558

因子負荷量の2乗和

1.77181.3135因子の寄与率(%)

19. 6866

14.5940

累積寄与率(%)

19. 6866

34.2806-132-

I埒齢者のおしゃれ行動とその評価に関する研究した。 各項目は「あてはまる」「ややあてはまる」

3. 4生活・行動の外見的属性
高おしゃれ者と低おしゃれ者に関する生活 ・ 行「あてはまらない」の3件法であった。 その回答結動の外見的属性を測定するために、 予備調査の自果に基づいて、 高齢者の外見的属性がどのような由記述から生活・行動特性に関する30項目を作成

要素から構成されているかを明らかにするために、

表2

おしゃれな女性の外見的特性に関する因子分析の結果

項

目

因子1

因子2

因子 3

共通性

1 . j青潔である-0.7018-0.01210.05000. 4951

2. 話をしていて楽しい-0.5850

0. 0375

0.09490.3526

3. 話し方が上品である-0.58150.2437-0.1048

0. 4085

4 .- 顔立ちが美しい-0.4891

0. 1060

0.08450.2575

5. 食事のマナ ー がよい-0. 4840

0.28530. 0258

0.3163

6.

服装の趣味がよい-0. 4681

0. 20960.18410.29697. 健康への関心が高い-0.4446

0. 04620.09400.20878.

スタイルがよ い-0.4168

0.18710.01150.20899.

高級な時計 ・ メガネなどをつけて い る-0.1727

0.63200. 2306

0.482410.

高価な美術品をもっている-0.1571

0.62210.05010.414211.

高級住宅地に住んでいる-0.1724

0.5584-0.0068

0.341612.

高級な香水・ コロンなどを使っている-0.1009

0. 4955

0.36270.387313.

服装にお金をかけている-0. 1683

0.4911

0. 3806

0.4143

14. 自由に使えるお金が多い-0. 0854

0. 4692

0.17640.2586

15. 明るい色の服装が多い-0.0531

0. 0601

0. 6200

0. 3908

16. 地味な服装が多い-0.09830.0209-0.5130

0.273317. 化粧品にお金をかけている-0.03200.37720.5091

0.402518.

D紅の色がよい-0.30930.23970.48070.3842

19.

おしゃれの流行に敏感である-0.2856

0.35500.45300.4128-0. 1522

0.21490.40600.2341

因子負荷量の2乗和

2.5806

2. 4156

1.9443因子の寄与率（％）

12. 9030

12.0781

9. 7216

累積寄与率（％）

12. 9030

24.981134.7027

20. ほほ紅をさしている-133-

因子分析を実施した。 因子数の決定は固有値(1. 0

df=470, p< . 001 : . 装飾性：男性t =16. 663,

以上）と解釈可能性を基準とし、当該因子に . 40以

df=248, p(. 001、 女性t=29. 350, df=471,

上の負荷量をもち、他の因子には . 40未満の負荷

p< . 001)。

量をもつ項目だけが残るように、主因子解による因子の抽出と直交Varimax回転を繰り返した。 表 2

3. 5

高地位者のクラスタ ー 特性

は、その最終的な結果を示したものであり、外見、本研究の結果から、高おしゃれ者は『洗練性』

的属性の心埋的構造として 以下の3つの因子が特『経済力』『装飾性』などの多くの側面で優れて定された。

いると認知されており、この傾向は男女とも共通

各因子の特徴を具体的にみていくと、第l因子にしていた。

「1. 清潔である」「2. 話をしていて楽しい」「3.
は、しかし、ひとりの高おしゃれ者が全ての属性に話し方が上品である」「4. 顔立ちが美しい」「5. 食関して 一 様に優れているのではなく、高おしゃれ

事のマナ ー がよい」「6. 服装の趣味がよい」「7. 健

者はいくつ かのタイプに分かれていることも予想

康への関心が高い」「8. スタイルがよい」などの負された 3) 。 そこで、高齢者の認知する高おしゃれ

荷量が高く寄与しているので、 第l因子は『洗練者はどのようなグル ー プ（クラスタ ー ）に分類さ「9. 高級な性』の因子と解釈された。第2因子には、れるのか、またそれらクラスク 一 にはどのような時計・メガネなどをつけている」「10. 高価な美術特徴がみられるのかを検討するために、高おしゃ品をもっている」「11. 高級住宅地に住んでいる」

れ者の属性についてクラスタ ー 分析を実施した。

「12. 高級な香水・コロンなどを使っている」「13.

その手順は、以下の通りである。

服装にお金をかけている」「14. 自由に使えるお金

まず、高おしゃれ者のおしゃれを特徴づけていが多い」などの負荷量が高く寄与していた。このこると考えられる変数を年齢・I椴業 ・体型・社会的とから、第2因子は『経済力』の因子と解釈された。

地位 ・ 外見的特性などにしぼった。 ここでは、 社

第3因子には、「15. 明るい色の服装が多い」「18.

会的地位の変数は回答者が対象者を認知している

口紅の色がよい」「19. おしゃれの流行に敏感であ程度を表す指標と考え、職業の変数は実際の社会る」「20. ほほ紅をさしている」などの負荷量が高的地位を表す指標と位置づけている。 ところで、く寄与しているので、第3因子は『装飾性』の因

これらの変数には質的変数（例えば、職業）と量子と解釈された。これらの結果から、高齢者が認知的変数（例えば、年齢 ・ 外見的特性なと） が混在するおしゃれの外見的特性は『洗練性』『経済力』

しているため、クラスタ ー 分析に変数を投入する『装飾性』などの因子で構成されていることが確

前に、各変数の標準化が必要となった。 このため、認された。

変数の標準化を目的として、数量化理論皿類によ

次に、各因子を構成する項目の得点を合算してる分析を行った。 その結果、解釈が可能な軸は第合成得点を作成し、高おしゃれ者と低おしゃれ者

1軸と第2軸であり、それぞれ「洗練性に関するの外見的特性の得点に差があるかとうかを対応の軸」「ソ ー シャル・リソ ー スに関する軸」 と解釈さあるt検定によって検討した。 その結果、男女とれた。

もに高おしゃれ者は低おしゃれ者に比べて、『洗次に、数量化理論田類の第1軸と第2軸のサン

練性』『経済力』『装飾性』などの多くの側面でプルスコアを投入し、 高おしゃれ者を分類するた優れているとみなされており、高おしゃれ者の外めのクラスタ ー 分析を実施した。 クラスタ ー 分析

見的特性の評価は 一 様に高いものであった（洗練の手法としては、WARD法を使用した。 その結果、

性：男性t =22. 481, df=248, p< . 001、女性t=

各クラスタ ー の特徴が最も明瞭であったのは3ク

12. 824, df=248, p< . 001、 女性t=23. 665,

用することとした。

30. 361. df=468, p< . 001 ; 経済力：男性t=

ラスタ ー に分類した場合であったので、これを採-134-r岱齢者のおしゃれ行動とその評価に関する研究

表3

属性別にみた各クラスタ ー の比率（対数 — 線型モデル分析）
第1 クうスター

第2りうスタ ー

第3 りうスク ー人数

6 0 - 6 4歳

40.9

17. 1

42. 0

264

6 5 - 6 9歳

44.0

14. 2

41. 8

218

7 0 - 7 4歳

35. Z* (-)

16. 7

48. 1

162

7 5歳以上50.6* (+)

7. 9+ (-)

41. 5

89

経営者 ・ 管理眠

41. 5

2. 4* (-)

56. 1* (+)

41

専門職

51.6

15. 6

32. 8* (-)

64

自営業 ・ 商店

28.6

14. 3

57. 1

35

事務系

4 3.5

19. 6

3 6. 9

46

現場系

38.7

16. 1

45. 2

31

専業主婦

41.2

16.1

42. 8

49 1

低

4 3. 5

8. 7

4 7.8

23

中

40.4

17. 3+ (+)

42. 3

520

高

45. 3

9. 5

45.2

19 0

やせ型

46.9

1 3. 1

40. 0

145

社会的地位

体 型

身長

38.8* (-)

16. 2

44. 9

476

太り型

47 8

12. 6

39. 6

111

低

45. 0

10. 0

45. 0

80

標

準

中

41.2

16.8* (+)

42. 0

500

高

41.8

11. 8

46. 4

15 3

低

40. 3

15. 4

44. 3

325

高

42. 8

14 9

42 3

402

低

38 6+ (-)

18. 1* (+)

4 3. 33 32

高44.1+ (+)

12.B* (-)

44. 1

392

低

40. 9

1 3. 4

45. 7

374

高

4 2.5

16 7

40 8

35 3

洗練性

経済力

装飾性

+p(.10, *p<.05,**p<.01-135-表3は、これらクラスタ ー がどのような特徴を持ィスティケイト ・クラスタ ー 』と『エグゼクティっているかについて検討するために、クラスタ ー

ブ ・ クラスタ ー 』の選択に関しては男女に違いが

x属性の2要因対数 一 線型モデル分析を実施した

認められた。 すなわち、男性は女性に比べて『ソ

結果である

9)

。 各クラスターの特徴を整理すると、フィスティケイト ・ クラスタ ー 』に属する人々が以下のようになる。 第1クラスタ ー は、75歳以上

有意に多いのに対して、女性では『エグゼクティの高齢者が多く、経済力では高い人が多い。 このブ・クラスタ ー 』に属する人々が有意に多かったことから、このクラスタ ー は充実した裕福な人々のである。 これらのことは、男性と女性では高齢か多いと考えられるので、『ゴールド ・ クラスタ

者のおしゃれを判断するための手がかりが異なるーー

は、75歳以上の部分があることを示唆している。 すなわち、男性

高齢者が少なく、60歳前半の相対的に若い層が多の場合には60歳前半の若い層の中からおしゃれない傾向にある。 また、身長は平均的な高さの人が女性を選択する傾向にあり、年齢的な若さがおし

多く、社会的地位は中程度の人が多い。 こうしたゃれ判断の重要なポイントになっている。 これに』と命名した。 第2クラスタ

は年齢的に若く、 ほど対して、女性の場合にはそうした若さは必ずしもほどの女性らしさを有する人々から構成されると重要ではなく、キャリア・ ウ ー マンとしての実績考えられるので、『ソフィスティケイト・クラスが重要であり、豊かな社会的資源を有する側面かタ ー 』と命名した。 第3クラスタ ー は、経営者やおしゃれ判断の基準となっていることを示してい

管理職を経験した人が多く、年齢では60歳前半のるのである。

ことから、このクラスター

以上、高齢者のおしゃれについて議論してきた若い層は少ないのが特徴となっている。 これにより、このクラスタ
ア・ウ

ーーが、おしゃれな女性として認知されている人物はは優れた業績を持つキャリマンから構成されると考えられるので、『ゴ ー ルド・クラスタ ー 』『ソフィスティケイト・
クラスタ ー 』『エグゼクティブ・クラスタ ー 』な

『エグゼクティブ・クラスタ ー 』と命名した。
また、高齢者の性別によって、高おしゃれ者のどのグル ー プに分類することができ、さまざまなクラスタ ー の特徴が異なるかどうかを調べるため様相を呈していることが明らかとなった。 これらに、クラスターX性別の2要因対数の結果から、おしゃれが単に化粧という表層的な

一

線型モデル

分析を実施した。

現象だけにとどまらず、積極性や成熟性などの心表4は、その結果である。 この表から明らかなよ理的なイメ ー ジや洗練性や経済力といった外見的

うに、『ゴ ー ルド・クラスタ ー 』の選択に関して属性など、さまざまな意味あいを持って他者に認は男女に差異はみられなかった。 しかし、『ソフ知されているという興味深い知見が得られた。

表4

性別にみた各クラスタ ー の比率（対数 — 線型モデル分析）
第1りうスタ ー

第2りうスタ ー

第3りうスタ ー

人数

男

性

40. 0

20. 5**(+)

38. 5* (-)

249

女

性

4 2. 2

12. 2H(-)

45. 6* (+)

484*P<. 05,**P<. 01-136-

高齢者のおしゃれ行動とその評価に関する研究

Personality and Social Psychology, 24 285-290

引用文献

0972)

1) A rgyle, G. W. Psychology of Sosial Class.

6)山本真理子編、 ソ ー シャルステイタスの社会

Routiledge. (1994)
2)大坊郁夫、顔心理学

ーコミュニケ ー ション手段とし一日米にみる地位イメ ー ジ ー サイエ

ンス社、(1994)て —、資生堂ビュ ー ティ ー サイエンス研究所編7)藤森和美•藤森立男、 高齢者の社会的地位の化粧心理学、 フレグランスジャ ー ナル社、108

認知に関する研究、人文論究、 54 167-180-117 (1993)

0992)

3) Feldm a n S. D . "Th e Pres e ntation o f
Shor tness in everyday 1 i fe". Paper

8)藤森和美•藤森立男、 高齢者のおしゃれの認

presented at the meeting of the American

知に関する研究、日本心理学会第58回大会発表
論文集、690 0994)

Sociologi cal Association.
ーその判9)弓野憲 一、 対数 一線型モデルによる質的デ ー

断基準と上昇方略 、 東京都立大学人文学報、

タの解析とそのための BASIC プログラム、静岡

233 197-215 (1991)

大学教育学部研究報告（自然科学篇） 32 189-4)山本真理子、社会的地位のイメ

ー

ジ

—

5) Dion K., Bers heid E. & Walster E.
is beautiful is g oo d."215 0981)"Whatjournal of

-137-

記念講演
• ▼

原島

．

平成6年度記念講演博コスメトロジ ー 研究振興財団
第5回表彰・贈呈式記念講演

顔を科学する原博

島東京大学工学部電子工学科

教授

場所

日本薬学会長井記念ホ ー ル

日時

平成6年11月21日(fj)

当かどうかはわかりませんが「男の顔は履歴書だ」

はじめにと言われることもあります。

ご紹介頂きました東京大学の原島でございます。
本日は「顔を科学する」ということで 1 時間弱の時間を頂戴致します。 コスメトロジ ー 関係の集
まりということですので、 ここにいらっしゃる方々は何らかの意味で「顔」に関係していると思いますか、私も最近コンビュ

ー

タ

ー

や、 情報学の立場から、 「顔」にいろいろと関心を持つようになりました。 ただ「顔を科学する」というと非常に広い意味になるのですが、 その中で特に、 「顔の心理学関係の方は、 顔から心の動きを探ります。
「感情」 「精神状態」だけでなく、 「精神的な疾患」も対象となるかも知れません。 「仏像」、私は仏像を見ることが好きですが、 仏像の顔はまさに当時の文化の反映です。 総じて、 人間は顔を通して、 さまざまなコミュニケ ー ションをしています。
顔と私のかかわり情報学を目指して」ということでお話ししてみた

さて、私自身の専門は「コミュニケ ー ションエ

いと思います。

学」、 もう少し厳密に言えば「電気通信工学」です。 今とは少し変わった方式の画像通信、 例えば

顔と情報「テレビ電話」を考えてみたいという立場から、ご承知のように、私たちはいろいろな情報を顔

顔に関心を持つようになりました。
テレビ電話では、声だけでなく顔も見えるようから受け取っています。
まず、 ある人の顔を見ることによって、 その人の大体の「証明」が得られます。 例えば「何才ぐにします。 ところが、 実際の通話場面を想定しま
すと、 単に「本当の顔」を送るだけで良いのだろらいか？」「男か女か？」あるいは「この子はあうかとの疑問が生じます。 たとえば朝早く電話がの人の子供だ」などをある程度判断できます。 本

かかってきたとき、 また顔を見せたくないと思う
こともあります。 このような時に、 「申し訳ありませんが朝早いので、 あらかじめ化粧した顔で話Face and It's Science

させて頂きます」と断った上で、 自分が気にいっている顔写真をまず相手に送り、 この写真を動か

Hiroshi Harash1ma
Faculty of Engmeenng
The University of Tokyo

しながら相手とコミュニケ ー ションできれば便利でしょう。
このような方式を「顔画像の分析合成符号化」
とか「知的画像符号化」と名づけて研究を始めま-141-まずは研究ツ ー ルの整備からした。 約10年前のことです。
1枚の顔写真を動かすためには、「右向いた」「左向いた」という顔の動きに関する情報だけで共同研究は、研究ツ ー ルの整備、すなわちコン

なく、 「あっ！笑った」という顔の表情に関するピュ ー タ ー を使った「顔の容貌と表情分析合成シ情報を抽出して送らなければなりません。 そこでステム」の構築から始めました。
そこではまず、コンピュ ー タ ー のなかに 「顔の必要となる顔の表情の情報とは何でしょうか？
そもそも顔とは何でしょうか？

こうして顔の研張り子」を作ります。 顔の張り子の骨組みは、こ究に関わるようになりました。

の写真のようなものを用意します（写真1)。 こ

正直言って、こういう研究はなかなか実用にはれは3次元的に作られています。

結びつきません。 工学部の研究としてはかなり異当然ながらあらかじめ用意してある骨組みは個色かも知れません。 しかし、大学の研究には、こ々の人のそれとは異なります。 顔写真とはずれてのような遊びがあってもよいのではないか、 たといます。 そこでまずその人の特徴点、例えば口元、

え世の中に注目されなくとも、夢のある研究をや

鼻、目尻等が 一致するように骨組みを変形させて、りたい。 それが当時の私の気持ちでした。

少なくとも正面から見る限りその人特有の骨組み

ところがこの研究は、最初予想もしなかった形で注目されるようになりました。 コンピュ ー タ ーになるようにします（写真2)。 そして、その上に皮膚として、顔写真を張りつけます。

を使って、表情などの顔の情報を引き出し、それによって顔写真を動かす技術は、心理学 や人類学

写真2

骨組みの変形などで顔を研究するときの、基本的な研究道具になるかも知れないというわけです。「顔」が縁で、いろいろな分野の研究者との交流が生まれ、 共同研究が始まりました。 それが本日お話しする内容
でございます。

写真1

顔の骨組み（ワイヤ ー フレ ー ム）

1枚の顔写真ですから中 心部 分はぴったり 一致しますが、耳の付近は怪しくなります。 その部
分は最初は適当にぼかしておいて、テレビ電話の場合であれば、横を向いたときに側面の情報を取り込んでそれを送り、張りつけていくことにしま
す。

-142-

顔を科学する

とりあえず は1枚の写真だけを張り つけてみ

み合成では技術的な発展性がありません。 本格的ましょう。 このときこの顔は横から見るとどうなにやるには、骨組みをきちんと動かしながら表情るでしょうか。 骨組みが3次元的にできている付けをする必要があります。

ので、正面の顔写真だけから作っても、それなり

例えば「笑い顔」、日を三日月にすればそうなに立体的な横顔ができます（写真 3)。 最初はもるだろうと思ってやってみましたが、失敗でした。
異様な顔になってしまいした。 自然な表情を作る

写真3には何かル ー ルがあるはずです。

正面顔写真からの横顔の合成

例えば、皆様の中にご専門の方がいらっしゃると思いますが、表情は、顔の筋肉（表情筋）の動きによって変わります。 したがって、筋肉が走っている方向に沿って、顔を動かせば自然な表情になるでしょう。 逆に、筋肉の動きがない方向に動かせば不自然に見えるわけです。
実際にコンピュ ー タグラフィックス等で表情を合成する時は、こういうやり方を使います。 ただし、私たちはこの方法は採用しませんでした。 私たちの目標である通信（テレビ電話）では、送信側で顔の動きから表情がどうなっているかを分析します。 ところが顔の筋肉の動きそのものは外か
らは見えません。 見えないものの動きを外から分っと不自然になるのではないかと心配していたのですが、目も顔の正面方向を向いており、まあま
あ自然な顔になりました。

析することは非常に難しい問題です。
できれば、目尻とか口とかのように外から見える部位の動きを基にして、表情を分析したいとこ

こうなると欲が出て来ます。 例えば、単に合成ろです。 この立場から文献をいろいろ調べているするだけではなく、実際の顔の動きを自動的に解

うちに、 アメリカのある心理学者のグル ー プがお析して、 これと同じように張り子の顔を動かすこ

もしろい研究をしていることを見つけました。

とができないか？
したら良いか？

これに表情をつけるにはどう

このグル ー プは、人間の表情の記述法として、「フェイシャル ・ アクション・コ ー ディング・シ

などです。

ステム」なるものを提唱していました。 彼らは表顔の表情学へ

情を客観的に記述することを目的として、表情を要素に分解することを検討しました。 そして、人の表情の取扱いには非常に難しいところがあ

44通りの基本的な動きを考えれば、ほとんどすべ

ります。 最初は単純なシステムを組んでみました。
人の表情はほとんど目と口の周りに集中していまての表情を記述できるとの結論を出しました。 それぞれの基本的な動きは「アクション・ユニット」

す。 私どもでは「テレビ電話」への応用を考えてと名づけられて、例えばAUl 、AU2と番号が付されおりましたので、表情が集中している目や日の周ています。 簡単に紹介しますと、 AUl は眉の内辺部分たけは元の画像をそのまま送り、残りを合側を上に上げる、 AU2 は眉の外側を上に上げる、成にする方式をまず試しました。 いわゆる「はめAU3は欠番になっています。 AU4は眉全体を下に下込み合成」です。

げる動きであり、強くすると眉間に鋏が寄ります。

しかしこれではおもしろくありません。 はめ込-143-

AU12は口元を引き上げる動きです。 いわゆる「紀子さんスマイル」になります。 これにAU26、 口を単に表情を合成するだけではなくて、同時に分開ける動作を加えますと口が三日月型になります。

析もしてみようと考えました。 表情のある顔画像

ところがこれではまだ笑っているようには見えまが与えられたら、その表情にアクション ・ ユニッ

せん。 笑わせるにはもうひとつAU6、頬を緊張

トの何番がどのくらい含まれているかを自動的にさせて上に上げる動きが必要です。 これにより、分析しようというわけです。 分析したアクション ・

結果的に目が細くなり、目が笑います。 つまり、

ユ ニ ットのパラメ ー タ ー を 使って、もう1度表

AU1 2、26、6を組み合わせることにより笑い顔情を合成します。 無表情の顔をパラメ ー タ ー で動ができるのです。 他にもいろいろな表情がAUの組かしてみるわけです。 その結果、元の表情と再合合せで記述できます。

成された表情が印象的に一致していれば分析が成ー

私たちは、この考え方を使って、 コ ンピュ ー タ

功したと考えます。 テレビ電話に当てはめて考えの上で実際に表情を合成することを試みてみま

ると、元の表情のある顔が送信側、そこからアク「生の顔」を用いますと時々不気味な表情

ション ・ユニットのパラメ ー タ ー だけを相手に送を呈しますので、最初は「マネキン」でやりましり、受信側であらかじめ用意してある顔写真を動た。 マネキンに先程の紀子さんスマイルAU12、そかす。 そういうシステムになります。

れにAU26をつけ加え、 更にAU6を少しつけ加えるとたしかに笑い顔になりました（写真 4)。

研究ビデオの紹介した。

それではビデオをお願い致します。 学会発表用

写真4 マネキンの笑い顔に作ったピデオですので見にくい部分があるかとも思いますがご容赦いただきたく思います。
まず、いままで申し上げたことを簡単に復習します。 このような張り子の骨組みをあらかじめ作っておきます。 3次元的に作られていますので、横から見ると鼻がとび出ています。
具体的にこの女の人の顔に適用してみましょう。
まず、少なくとも正面から見る限り、その人と一致する様に骨組みを変形します。 これに顔写真を張りつけると、このような横顔が合成できます。
l枚の顔写真 だけから作った横顔ですが、それなりに自然な感じになっています。 修正は施していません。
次に、顔の動きを自動的に追うことをやってみました。 実はこれが非常に難しい技術で、当時は一 方、AU12にAU l 、 眉の内側を上げる動きを余りうまく行かず、この女性の顔に点を打ってそ加えると、マネキンでありながら生き生きした表れを追う工夫などをしています。 顔の動きをきち情が合成できます。

んと追える様になれば、例えば、 目の部分、 口の次に「生の顔」でやってみました。 良く見て頂部分が画面のどこに相当しているかがわかります

けるとわかると思いますが1枚l枚表情が違います。

から、これらの部分は原画をしっかり送って、ほこれ はすべて1枚の顔写真を動かして作った合かの部分は適当に合成すれば、はめ込み合成で表成像です。 これは後ほどビデオでお見せします。

情付けができます。
-144-

顔を科学する

次に、 「フェ ー シャル・ アクション ・ コ ー ディ

驚き。 驚いているように見えたらお慰みです。 こング・システム」に基づいて表情を合成した例をれが恐怖。 ホラ ー 映画を見ている時の目になって示します。 これがアクション・ユニットの12番、いるかどうか？

つまりAU12、 例の紀子さんスマイルです。 これにい」とかの感情を表現しようとしています。 これ

AU26をつけ加え、最後にちょっとAU6をつけるは怒り。 歯を剥き出して怒っています。 これはと 目も笑って笑い顔に なります。 3次元的に作「笑い」のつもりなのですか、余り笑っていませっていますから、ちゃんと横顔も笑っています。

んね。 どう見ても作り笑いに見えます。 これは悲横顔で見るとわかりますが、笑いというものはロ

しみ。 これらは心理学で基本感情といわれるものも重要ですが、 それ以上に目の下の部分が重要でです。

これが嫌悪。

「いや 一 」 「臭 ―す。 目玉だけを動かすこともできます。 これは相このように基本的な表情が合成できましたので手の視線を受けながらコミュニケ ー ションをする

ちょっとしたシ ー ケンスを作ってみました。 このという意味で非常に重要な動作です。

シ ー ケンスでは最後にウインクします（写真6)。

次に、生の実在の顔でやってみました。 これがアクション ・ユニットの1番、AUlです。 これが写真 6

AU2。 すべて1枚の顔写真を動かしています。 本人

ウィンクの合成（サルとマネキン）

はこんなに顔の筋肉が発達しておりません。 これはAU4。 これがAU9。 これがAU12。 自然に顔の徽も出るようになっています。 これがAU26。
これはAUlと2の組み合わせです。 眉の内側と外側を同時に動か すと全体が 動きま す 。 これはAU4と9の組み合わせ。 だんだん複雑な表情になってきます。 もちろん目玉だけ動かすこともできます。 このような基本的な動きを組み合わせて、人間の感情を表現してみました（写真 5) 。 これはl枚の顔写真を与えられれば、 異なる顔がすべて同じ動きをする例をいくつかお見せします。 こ

写真 5

表情の合成

れがマネキン。 結構自然な動きなのでびっくりしました。 動くはずがないものが動くので自然な動きに見えるのでしょう。 動くはずのものが動いても、 全然おもしろくないというのが次の実在の顔の例です。 やはり生の人間を動かすことは難しく、
どこか不自然になります。
国際会議にはこのモナリサ像を持っていきました。 これでこの研究が国際的に有名になってしまいました。 これも動かないはずのものが動くので自然に見えるのです。 その次の国際会議にはこの猿の顔を持っていきました。 この顔でも大丈夫なのだから、貴方の顔でも大丈夫ですよと強調した
かったのです。 マネキン、生の顔、 モナリザ、猿、それぞれ顔写真は違いますが、 表情のコマンドは
同じです。
-145-

モナリザの表情付けは、外国の人に持て囃され側です。 顔そのもの、例えば明るさは異なっていまして、早速イタリアの友人から百面相を作ってますが、表情については結構似ています。 通信がくれと依頼されました。 これがそうです。 この時それなりにしっかり成立しているわけです。 中に気がついたのですが、AUの1番と2番、眉の内と外は難しい表情があります。 笑いは非常に難しい。

ですが、これを動かしても顔に変化がありません

笑いが非常に高級な表情であることがこれでわかでした。 良く良く見たらモナリサには眉毛がない

ります。 もちろん、技術的には唇の形を放物線でことに気づきました。

近似して処理するなどをしますので、それらの近1枚の顔写真から横顔が作れるのだから、 ダ・似の限界があるわけですが....。
たまたま受信側に他の人の顔が登録してあれば、ヴィンチも知らなかったモナリザの横顔ができるの で は な い か とい う こ と で試し て み ま し た 。

その顔でテレビ電話をするという、誘拐犯人が喜顔 を 上から見ると結構厳し い 顔 を し て い ま すびそうなこともできます。
次に、ちょっと毛色の違った話題になりますが、

写真7 モナリザの横顔

かなり前に、 NHKの依頼で次のような映像を作ってみました。

「トライ・ アンド・トライ」という番組です。 徳田アナウンサ ー の顔がはっと気づ
くと眼鏡をかけていない山川アナウンサ ー の顔になって、それがまた女性の遠藤アナウンサ ー の顔になっています。 彼女の顔がまた徳田アナウンサーに戻りました。 逆まわしをしてみます。 徳田ア

ナウンサ ー が少し若くなったかなあと思うと遠藤
アナウンサ ー になって、その顔が年とると山川ア
ナウンサ ー になって、最後に元の徳田アナウンサーになります。 ついでに徳田アナウンサ ー を猿にしてしまいました。

「これを逆にすると人間の進化の過程が解るではないか？」 「進化の途中の方（写真7)。 下から見上げると結構笑っていて、が美男じゃないか？」など感想がずいぶん寄せら

正面に戻るとなぞの微笑となります。 このようにれました。
長くなりますのでビデオはこの辺にします。

向きによって表情が変わります。 考えてみれば日本の能面もそうなっているんですね。 見る向きに顔の印象学へ

よって面の表情が変わるように作られています。
それと同じことがモナリザでも起きてしまいまし

最後にお見せした顔が少しづつ変わる映像につた。
ここまで合成ができましたので、分析すなわちアクションユニットのパラメー

タを自動的に求めいて説明します。 ここで用いた方法は最近よく使われる技術になりました。

「モ ー フィング」と呼ることもやってみました。 そして、そのパラメ ー

ばれています。 御存知かもしれませんが、テレビタで無表情の顔を動かして表情を再合成してみまのコマ ー シャル・ フィルムの中で子供の顔がだんした。

だんとラモスの顔になる映像があります。 その技

左側が実際の画像です。 当時、私の部屋にいた
留学生か自分で表情を作った顔です。 右側が合成術です。 原理的には古くから知られている技術で、それほど難しいことはありません。

の顔です。 通信で言えば、左が送信側、右が受信-146-

要するに2つの 顔の間で、 一方の顔にたとえ

顔を科学する

ば0.8の重みを付け、他方に0. 2の重みをつけるとが、この実験ではワイヤ ー フレ ー ムの骨組み、いその比率で合成された顔になります。 この比率をわば骨格を少しづつ動かし、それと同じ様に肌も、少しづつ変化させると顔を少しづつ変えられます。

別の方式で制御している髪の毛も同じように直線

単なる写真の濃淡値ではなく骨組みの方もしっか

的に動かしたわけです。 ところで本当にこのようり中間の比率にすることにより、 ぽけない顔が合に変化するのだろうか、骨格の変化と肌の変化と成できます。

は様子が異なるのではないか、必ずしも直線的にこの手法を使うといろいろな実験ができます。

は変化しないのではないか、との疑問です。

例えば、外人の顔と日本人の顔の中間を採ると、そこでこういう顔を作ってみました（写真8)。

もしかしたら、 ハー フができるかもしれないということでやってみましたら、何となくハ ー フっぽ

写真8

年齢の印象

い顔ができました。 人間の顔の印象とは一体何なのでしょうか。 日本人らしさ、西洋人らしさはいったいどこから来るのでしょうか。 すこしづつ動
かすと、あるところで日本人の顔が急に外人的になったりします。 目だけ動かす口だけ動かすこともできます。 日本人と外国人の違いに顔のどの部分が関係しているかを調べられるというわけです。
この手法を使うと、もしかしたら「顔の印象学」
なるものを作ることができるかも知れません。 先
程のはいわば「顔の表情学」ですがこちらは「印象学」です。 男性的な印象、女性的な印象、人種の違いによる印象、あるいはこの顔は何才ぐらいなのかという印象はどこから来るのかというわけです。 断っておきますが「顔の印象学」は別に「人相学」ではありません。 本人の属性を言い

左下が息子で、右上が親つまり私です。 眼鏡をか当てることはまったく考えていません。 その顔をけていない時の顔です。 残りの右下と左上は実在

見た時に私たちがどういう印象を持つかだけが関しない顔です。 右下は顔の形や、 目鼻の配置など心の対象です。 本人が実際にとうであるかは問題

はまったく私、張り子で言えば骨組みは私のを使ではありません。

って、皮府だけを子供の皮膚にしたものです。 左

年齢の印象に関して、 ちょっと実験をしてみま

上は逆に骨組みは子供で皮膚が私です。

した。 顔の研究というのは非常に難しくて、勝手この右下と左上の顔は、いずれも子どもとそのなことをやるとその人の人格を偽つけることにな

親の顔の要素が半分ずつ入っています。 ところが、ります。 身近な顔でやってみました。 この顔は、

この両者の年齢印象はまったく違います。 右下は

実は私の息子です。 その父親の顔がここにありま

中学生ぐらいの印象です。 それに対して左上は何す。 これが中間の顔です。 時間の関係で、本日はとも異様な感じです。 私自身より年上の感じすらお見せできませんがピデオにも収録してあります。

します。

子の顔をすこしづつ変えるとだんだん成長して親の顔になります。 モ ー フィング技術です。
ところが、ここで疑問が沸いてきました。10オの子供から当時 45オの親に徐々に変えたわけです

そこでもう少し細かく実験してみました。 骨格と肌の様子を独立に変化させて組み合わせた5X5、
つまり25通りの顔を作って、その年齢判定をさせたのです。 川村短大の山田寛先生との共同研究の-147-

形で、川村短大の学生と東大生のグル ー プに独立の顔のモ ー フィングでは、 その中間に2つの平に年齢を推定してもらいその平均を取りました。

均の顔ができます。 別の2つの顔の平均顔も作り、その結果を大まかに言いますと、 ある年齢以上

次に平均顔どうしで平均をとると、結果としてになると、肌の状態だけが年齢を判定する要素と4つの顔の平均顔ができます。 その平均の顔は、なることが示されました。 それに対して、10オか

もとの4つの顔に対して1/4ずつの重みをつけ

年齢まて加えた形にな っています。 一般にN個の顔がでは顔の形が年齢評価に関係している、という結

あれば、このすべてに1/Nの重みをつけて加えれ論が得られました。 まだ検証にまでは至っており

ば、 N個の顔の平均が得られます。

ら10数オまでは、つまりティ ンー・エ ー ジ

ませんが、 ひとつの仮説として、20オぐらいまで

東大生22人の平均の顔を示します（写真9)。 いは骨格が年齢印象に影響し、それ以上では、 肌がずれも修士 2 年生で 、研究室の修士が自分の同級生を集めたものです。 それぞれの顔には個性が効いてくるといえます。
こうして私たちの研究は、もともとの目的であった画像通信の領域を越えて、 「顔の情報学」とありますが、 平均を取るとその集団に共通の要素が浮かび上がってきます。

しての展開をみせてきました。 この立場から数年別の職業でやってみました。 たとえばこの写真

前にたまたまテレビ取材を受けて作られたビデオ

はどう い う 職 業 の 平 均 の 顔 でしょ う か？

を見て頂きたいと思います。 音声が入っております。 フジテレビの深夜番組です。

写真10 職業別平均顔（ビデオ放映5分''・.内容割愛）
ビデオどうもありがとうございました。

平均顔のいろいろ
このビデオにも出てきましたが、最近「平均顔」というものに興味を持って、いろいろやっています。 平均顔に ついてちょっと説明します。 2つ
写真9 東大生の平均顔（写真10)答えは銀行員です。 いかにもそういう顔、 居そうな顔になっています。 プロレスラ ー 約
10名の平均の顔も作って見ました。 比べてみれば一目瞭然です。 これは政治家の顔。 自民党の派閥の親分クラス約10人です。 何となくそういうイメージがあります。 この席にはそれなりの年配の方がいらっしゃいますのでおなじみでしょうが、 日
活アクションスタ ー の平均の顔もあります。 若き-148-

顔を科学する

日の裕次郎とか、渡哲也とか、小林旭です。 何とクリ ー ムコ ー ンにアイスクリ ー ムをたっぷりのせなく納得できる顔です。

た形をしています。 顎か小さくなるのは、固いも男性ばかりではおもしろくないので女性で試みのを食べなくなるという食生活の変化によります。

たのがこれです（写真11)。 明治時代の芸妓

現在でも中学生や高校生の顔は、かなりこれに近

写真11くなっています。

時代別日本女性の顔

顔の印象学は、顔の魅力学とも関係します。 こ
こにいらっしゃる大坊先生のご専門です。
例えば、ある有名な写真家が「昔は美人が多かったが最近少なくなった」と言っています。 それではと言うことで女優さんの顔で検討しました。
これは戦後すぐの女優さんの平均顔です。 懐かしい方がいらっしゃることと思いますが、久我美子、
岸恵子、そして山本富士子です。 一 方の写真は、現代の女優の平均顔です。 ダブル浅野、つまり浅野ゆう子と浅野温子、それに鈴木保奈美です。
この両者 を比較すると、確かに昔の顔の方がはっきりしています。 少なくとも静止画、止まっているかぎり昔の顔のほうが美人です。 これに対して、表情が豊かなのは現代の女優で、むしろ動くと魅力的になります。 カメラマンは静止画で見ま
すから、その立場からは、昔のほうが美人となるさんの平均の顔は、どことなく浮世絵のイメ ー ジ

かも知れません。 しかし、顔がアップとなって表に似ています。 凌雲閣百美人と言う絵はがきの写情が強調されるテレビの立場からは、逆になるのではないかという気もします。

真を使いました。 大正の平均の顔は、「丸の内のビ ルl美人特集」なるもの をある雑誌が組んでこのような分析をある新聞社が嗅ぎつけて、いましたので、そこに掲載された顔を使いました。

「明治から平成まで美人の変遷を分析、東大工学

丸ビルとか新丸ビルに勤める、当時で言えば、い

部原島教授」と見出しをつけ、記事にしてしまい

わば職業婦人です。 何となく大正的な雰囲気がでました。 「東大教授がどうしてこんなことをするています。 平成は、92年ミス日本候補者10人の平のか」と物議を醸し出しそうですが、幸いきちん

均顔で、 顔が小さくなっているのが特徴です。 王とした科学欄でした。 言っておきますが科学欄で冠を被っていますので髪の形は多少変になってい

す。

ます。

むすび

そうこうしていると、ある雑誌社から「未来の日本人の顔」を人類学の方と共同でシミュレ ー シ
ョンするように依頼されました。 人類学の馬場悠

顔学へ向けて

さて、そろそろ結びに入らせて頂きます。 顔の男先生、大変偉い方ですが、この方が未来の日本研究をやっていまして、私にとって 一 番嬉しかっ

人の骨がどう変化するかを検討されました。 このたことは、今までの工学畑だけではつき合えない、
いろいろな方とつき合えるようになったことです。

言わば骨格に皮府をつけてみたわけです。 結果と今日もまさに、そのような良いチャンスであるわ

して得られた未来の日本人の顔は、顎が極端に小けです。

さくなっています。 ちょうど先がとがったアイス-149-

人類学の先生、心理学の先生もあります。 化粧

そして、 今年(1994年）の夏にこのシンポジウ

や伝統芸能が専門の先生もあります。 そうして気ムを基にして、 「顔学宣言」という特集を「科学づいたのですが、 こういう先生方同士は必ずしも朝日」に組んで頂きました。 内容的には顔の哲学、知り合いではありません。 そこで互いに 堂に会進化学、 美学、 認知学、情報学、心理学、 魅力学する場があれば面白いのではないかということで、などです。 まさに「顔学」は、 典型的な学際分野

92年 春から毎年1回、 有志主催という形で「シであります。

一ー顔 」を開いています。

そしていま、 「顔学」の更なる発展を願って、第1回目の表題は「ヒュ ー マンコミュニケ ー

ポ ー ラ文化研究所の村澤博人さんや国立科学博物

ションの原点を探る」です。 文化人類学の立場、

館の馬場悠男さんたちと共に、 顔の研究者のネッ

顔と犯罪などの立場での発表も あります。 第2トワ ー ク作りを進めています。 そして、準備が間

回が「その魅力を探る」 、 第3回が「その演出に合うかどうかはわかりませんが、 来年春頃に仮の しくみ」です。 この第3回では、 顔の美学と

称「日本顔学会」ができればと思っております。

ンポジウム

いうテ

ー

ー

マで芸大の美術解剖の先生にも話して頂

いています。

時間が来てしまいました。 私の「顔学」への夢につきあっていただき、 ありがとうございました。

-150-

コスメトロジー研究雑感=:,:::::,::, , :, :::::::::::,:::,:,,,,:::::,::::::,::::::::, ,:::,::::::;;:::::::,,::::::J::JJ:J:::J:::,:,::::::::::::

研寃雑揺

らの御助成により研究を始めることができ、深く感謝する次第である。

コスメトロジ ー と本研究藤井

（昭和薬科大学）

コスメトロジ ー 雑感

まき千

井上 英史

化粧をするとは、メ ー クアップをするというのか子供の頃のイメ ー ジであった。 最近はシミやシ（平成4年度）〉ワを改善する基礎化粧品により皮）杓そのものを美私が現在所属している研究室には、酵素学講座

しくしようという研究が盛んである。 いずれもよという名前かついており、その名のとおり酵素がり美しくなりたいという文化的社会的な意味合い

主な研究対象となっている。 酵素学というと古めか大きいと思う。 化粧にはこの他にもうlつ大かしい印象を持つ人もいるようだが、遺伝子工学

きな役割がある。 これも最終的には美しさ につな等の発展により、酵素（あるいは機能性蛍白質）

かるのかも知れないが、皮rl't(の健康を保つというの周辺には新たな研究分野か誕生している。 クロことである。 紫外線吸収剤や保湿剤はこの目的のーために開発されたものである。 そしてこれは化粧高純度の蛋白質を大最に得ることが可能になった品と医薬品の接点である。

ことから、近年、蛋白質の高次構造か次々に解明

ン化した遺伝子やcDNAを大腸菌等に発現させて皮府はなにもしない状態でも健康であればそれされている。 その結果、蛋白質の機能がしばしばに越したことはないが、実際には様々なストレス

原子レベルで議論され、高次構造に基づいた議論にさらされている。 健康な状態を保っために使用か不可欠になりつつあるとも言える。 また、様々されるものは化粧品、何らかの1蒻害を起こしてしな変異蛋白質を作製することが容易であり、天然

まったときに用いるのか医薬品である。

には全く見出されていない一次構造を待った蛋白

今回保湿剤に関する研究を行ったか、乾燥によ

質や非天然型アミノ酸を含む蛋白質も人工的に作り多少傷害を起こしても医薬品のお世話になる前ることが可能である。 このような高次構造に基づに何とか健康な状態に戻れるものはないか、あるいた蛋白質機能の解明と人工的に蛋白質を作る技

いは 一度具合か悪くなった後ほとんと快復したと術を柱として、蛋白質工学という領域が発展してきに使えるものはないか、つまり化粧品と医薬品きている。 蛋白質工学は自在に蛋白質をデザインの問に位置するものをと考えた。 結果は使用感がし創生することを大きな目標としているが、このよいと保湿性は低く、保湿性を高くするには多少ことが実現すれは非常に広範囲の基礎研究や産業・

使用感は犠牲にしなくてはならないということで医療に大きなインパクトを与えることはまちがいあった。 化粧品と医薬品の境界領域ということでない。 化粧品の世界においても、蛋白質工学は新どちらに比重をおくかはケ ー スバイケ ー スであろしい材料や方法を提供することが期待される。 例

つ。

えば、人工的に蛋白質をデサイン・創生すること

本研究により コ スメトロジ ー 研究の難しさを感により、保湿性が高く、紫外線を遮断する機能をじさせられたが、 コ スメトロジ ー 研究振興財団か持ち、かつ徹生物が繁殖しにくいような新しい素-153-

材を開発することも可能であろう。 しかし蛋白質がてきました。 水と油、つまり、親水性と疎水性

工学はまた若い学問であり、高次構造の構築原理の問題、および、生体分子の水和の問題は、生物や機能発現のメカニズムの解明、機能性蛋白質をの機能を考えるときに必須であり、それが生体膜大量生産する技術の開発（現在は量的発現を実現の機能では本質的な問題を与えています。

できない蛋白質も多い）等、解決すべき課題が多トロジ ー はこの点に生理学的に関わっていますの

コ スメ

い。 私は、地道な基礎研究の中から、いつか有用

で、生体膜の研究とともに進展するものとの思いな物質を生み出したいと思っている。 その物質がを強くしました。 研究には、視点を変えたり、多仮に化粧品に応用できないとしても、蛋白質工学

角的に考察することで、問題が解けたり、新しいにおける つの成功は化粧品学の将来にとってもアイデアを得ることがよくありますが、 コ スメト

価値のあることと信じている。

ロシ ー の視点を導入したことは、私の研究でまさ一（東京大学）にそのような例になりそうてす。 研究は基本的な部分の知見を得たたけですが、今回の研究助成に

コスメトロジ ー と生体膜
大木

心より感謝しております。

和夫

異邦人から見た（平成5年度）〉私の専門は一

応、生物物理学です。

一（東北大学）

コスメトロジ 一応と云う

金子のは、生物物理学は定義しにくい学問領域であり、克美

生化学と重複している部分が多いのですが、侵れた教科書が数多く出版されている生化学と比較す

この度の「化粧品基本素材金属酸化物の酸性大ると、これはと言う教科書を挙げることが難しい

気汚染物質との相互作用」の研究を考えるまでは、からです。 ところで、生命の基本的な単位は細胞

私の意識のなかに コ スメトロジ ー は存在しなかってあり、その構造は生体膜により構成されていまた。 もちろん、生活のなかには コ スメトロジ ー はす。 生物機能の場として、生物科学の進展ととも厳然として存在し、多くの恩恵をうけていた。 にに生体膜の重要性はさらに増しているのか現状でもかかわらす、意識のなかには コ スメトロシ ー とす。 また、生体膜の動的な構造の解明には生物物の強い関係を想像することは出来なかった。 とう

理学的な手法が貢献したこともあり、生体膜の研みても私はコスメトロジ ー にとって異邦人である。

究は生物物理学の主要な研究テ ー マの一つとなっ意識の上だけでなく、専門研究歴からも。 たた、ています。 私自身は、膜脂質の構造・物性および良く考えて見ると、私の研究しているテ ー マは コ

蛋白質との相互作用に興味をもって研究を進めて

スメトロジ ー たけでなく実に多くの分野に関係しきました。 とくに、膜脂質の研究を広範囲に行っている。

ていたことが、 コ スメトロジ ー との大きな接点に化物、酸化チタン、酸化亜鉛なとは文字どおり化なりました。 つまり、私の研究の視点を変えて、

粧品基本素材であり、自分の意図とは離れて金属

コスメトロジ ー

酸化物関連の研究は コ スメトロジ 一 の一環に組みから眺めることで、基本的で璽要コ スメトロジ ー にかぎって見ても、鉄酸な問題をその観点から整理することができました。

入れることが出来る。 私の別の研究テ ー マである、

さらに、幸いしたことは、この助成金で研究を進

微細孔性固体全般の研究、表面フラクタルの研究、めているときに、私の所属している日本膜学会年

ナノスペ ー スの分子科学研究もまた、私の研究理会の特別講演で本財団理事の小林随次郎氏のお話

解が進むと、 コ スメトロジ ー に関係してくるのでを伺う機会を得ました。 これにより、 コ スメトロ

はあるまいか。 皮府にも微細孔があるであろう。

ジー の理解を深め、以後の研究に反映させること

皮附微細孔中の分子が、人間の感覚にも関連しよ-154-う。 私が一方的にコスメトロジ ー にとって「異邦分解酵素）を支配するだけであり、糖鎖の精密構人」と考えていても、どうもそうではないらしい。

造を自由自在に操るまでには至らないのである。

いかなる科学も実は深いところでは技術あるいこれに対して、化学合成に基盤をおいた糖鎖工学

は他の科学分野に繋がっている。 特に近代の技術

では、上記のような糖鎖機能の本質を探ることも分野は極めて総合的であり、多くの「異邦人」のできるし、超高機能を発現する糖鎖を設計、構築

目か役にたつと信じたい。

していくことも可能となる。 生体適合性もよく、（千葉大学）

化粧品の原料として期待の大きい糖質化合物を分子のレベルまで掘り下けて研究していくことは、本研究のコスメトロジ ー に
及ぼす影響
畑中

今後のコスメトロジ ー を支えていくのにおおいに役立つものと信じている。

（東京工業大学）

研一

紫外線と皮膚とコスメトロジ 一

ヒアルロン酸は哺乳動物の結合組織に分布し、皮府の潤滑性と柔軟性を保っている。 皮Ji!i'にみず
みずしさがなくなり、しわかよってくるのは、ヒ小林

アルロン酸の量が滅ってくるためである。 したが信彦（平成4年度）羽って、しわを防ぐためには、不足分のヒアルロン

太陽光中の紫外線によって、しわ• しみ• そば

酸を外部から供給してやる必要が生じる。 ヒアル

かすといった美容の敵が生じる。 さらには恐ろし

ロン酸は鶏のトサカに多く含まれることかわかっ

い皮府がんも生ずる。 とはいえ、スキ ー やゴルフているので、初めの頃は盛んに抽出が行われた。

や海水俗にも行きたい。 そして、太陽の光を浴びしかしながら、この方法では製品が高価になってたいという欲求は抑え切れるものではない。 このしまう。 最近になってバイオテクノロジ ー を用いジレンマを解決するのか、コスメトロシ ー であろた微生物生産が開発され、より安価なヒアルロン

う。

酸か得られるようになってきた。
本研究では、 クルコ ー スやマンノ ー

紫外線による害を防ぐためには、ます、自分のスなとの単皮府についてよく知ることが大切である。 皮I胄の糖を出発原料とするため、さらに安価なヒアルロ

タイプによって、紫外線を浴びたときのリスクがン酸類似体を大量に合成するのに適していると言違ってくる。 色白で、日光にあたった後に赤くなえる。 しかも、 色々な化学構造の多糖を設計し、る人ほど、紫外線による害を受けやすい。 皮府の合成することができるため、品質向上も容易に行

メラニン色素か少ないためである。 こういう人は、われるものと考えられる。 さらに、本研究では、外出する際には、必ず、日傘• 帽子・長抽シャツ・

ヒアルロン酸様の物性および生理活性を示すため

サンスクリ ー ン剤などで紫外線を強力にカットすにはどのような化学構造が本質的なのか、すなわること。 そして、 白い肌を守ってください。 皮阿ち、機能表現のための必要条件の決定、さらには、の色がやや黒くて、太陽光にあたった後に黒くなより高い機能を引き出すための細工について分子

りやすい人は、紫外線による害を比較的に受けにレペルで探索していくために、使用目的に合致しくい。 天然のサンスクリ ー ン剤であるメラニン色

た非常に綴密な分子設計を行うことを可能とする素を持っているためである。 それでも、急に強いであろう。 タンパク質工学では遺伝子を制御する

紫外線にはあたらないこと。 あたる場合にはサン

ことにによって種々の性質のタンパク質を得るこスクリ ー ン剤などを使用して紫外線をカットするとができる。 しかしながら、糖鎖構築を行う際にこと。 慢性的に紫外線にあたる場合には、紫外線

は、遺伝子の制御は酵素（糖転移酵素および加水量の少ない季節あるいは時間から少しずつ日光に-155-

あたる時間をのばしていったり、あるいはサンスつある。 コスメトロジ ー 研究者は、薬事法の「化クリ ー ン剤を併用して徐々にメラニン色素の量を粧品」の範囲を越えて医薬品研究に参人すること増加させると良い。ただし、日焼けサロンで紫外を踏躇せす、もっと積極的に、このボ ー ダ ー レス

線を浴びて日焼けをするなどもってのほかである。

時代のコスメトロジ ー 研究に参画すべきであろう。

後でしみやしわかできる恐れがあります。また、その成果の蓄積がコスメトロジ ー をサイエンスと白い肌を守りたい人は、色白の人と同様にして紫して成熟させることになるものと信じたい。

外線をカットして下さい。

（群馬大学）

白い肌も小麦色の肌もどちらも魅力的である。
自分の皮府のタイプをよく考えて、紫外線による一基礎研究者の立場から害を少しでも予防しなから、紫外線対策は、小さい頃から始めるとそれだけ効果も大きくなる。身二階堂 修の周りのお子さんたちにもできるたけ早く始めてあげてくたさい。

（奈良県立医科大学）（平成5年度）〉紫外線のヒト細胞に与える影態について、殺菌
燈紫外線(UVC)を用いた研究は数限りなく報ボ ー ダ ー レス時代の
コスメトロジ ー 研究店［」也

告されてはいるが、太陽光紫外線の人体影態に関する基礎的研究は余りにも少ない。容易に入手で

l赳村i

きて安価であること、単 一 i皮長の紫外線であるた（平成5年度）羽め研究が進めやすいことなとが uvc 生物学か今

本来、化粧品は薬事法により、医薬品とは異な日まで繁栄した理由と考えられる。しかし、 オゾ

り、健康な人を対象として、美しく装うことが目

ンホ ー ルの拡大 に伴うUVB領域の紫外線線量の的とされ、 身体の構造や機能に影態を及ほさな増加、及びそれに基づく皮府がんの増加が懸念さい生理作用の緩和なものと定義されている。しかれる現在、地表上に到達する太陽光紫外線には全し、最近のサンスクリーン製剤や保湿剤の進歩をみるまでもなく、抗光老化の戦略の一

く含まれない uvc を利用した研究は、 我々の科つとして明学的知識の増加に貢献こそすれ、太陽光紫外線のらかに薬理作用を有するものが志向され、機能性

人体影懇研究や、そのリスク推定には何の寄与も化粧品とも呼ぶべきジャンルが拓かれつつある。

しないことになる。確かに、広範囲の波長の紫外

私の研究対象である光老化の抗酸化的制御におい線を含む太陽光紫外線の人体影密研究を行うことては、外用というドラックデリバリによる抗酸は困難である。そこに含まれる各種波長の紫外線化剤の開発が急務であるが、この領域などはまさの効果に加えて、他の波長の紫外線による複合効にコスメトロジーーの最大の研究タ ー ゲットとなっ果が加わるからである。
各種の紫外線によってヒト細胞に誘発されるており、医薬品との境界分野である。医薬品研究でも、主として虚血ー

再灌流傷害の制御を求めて抗酸化剤開発か盛んであるが、この動向は直ちにDNA損傷の修復機構を解明するため、 我々は過去8年間にわたって紫外線損傷を特異的に認識研究にも反映され、むしろ外用剤するモノクロ ー ナル抗体の樹立研究に携わってきの技術では一歩進んだ感のある化粧品として先にた。その結果、これまでにンクロブタン型チミン

結実する可能性さえある。熱傷初期治療に対する二最体、 (6• 4)光産物、デワ ー 型光産物を認識

抗酸化外用剤などは、コスメトロジ ー 研究から生する複数の抗体を樹立し、その性格付けを完成さまれるかもしれない。このように、コスメトロジ

せることが出来た。これら抗体を利用して、各種

コスメトロジーー研究は、医薬品とのボ

ー

ダ

ー

レス時代を迎えつの単 一 波 長紫外線のDNA損傷誘発動態を調べた-156-

私が皮蒋科の分野に入った 20年前頃は、皮屑科

ところ、 当然のことなから照射紫外線の波長が異なれば、生成されるDNA損傷の種類と 量か大き医が化粧品を扱った研究を行うのは、邪道というく異なることが明らかになったのである。 一方、意識がありました。 名古屋大の早川律子先生か、

ヒ ト細胞に誘発された各種のDNA損像は、そのその辺の偏見に昔苦しめられた事を書いた文章を種類によって、細胞から除去修復される速度が異どこかで、読んだ記憶があります。

なる結果かえられた。 これについては、個々の損時代は明らかに変わったと思います。昨年私の似の生成量と、それら損傷のヒト細胞での修復さ教室に入った 2 名の新卒の女医さんは、 化粧やれ易さに関して、分子レベルでの検討か今後必要

化粧品に興味があるので、ぜひそちらの方面の事と思われる。

をやりたいと、申し出ました。昨年美容皮膚科学
会も でき 、 私とそ の 2 名の女医さんは早速入会

太陽光紫外線による皮府かんの原因は、それによっ てDNA中に誘発される損傷であることは明しました。 現在の私には、女性患者を前にして、白である。事実、太陽光紫外線に高感受性の遺伝

化粧品については 一般的な話しかできません。出

疾患• 色素性乾皮症では損傷の除去能が全く欠損来ない理由のひとつには、化粧品について細い知しており、患者の日光購露部位に皮屑がんが多発

識がない事、女性がどのような種類の化粧品を、する。ヒト皮屑における紫外線損傷の蓄積は、皮とのように使い分けているかも女性なみには知ら膚の色調の決定に関与するメラニン含最と存在形ないからです。 もし知っていても、女性患者を相態、スキンタイフ、 ならびにその個人の細胞の手に化粧や化粧品について、あれこれと細かく質DNA除去修復能力に依存すると考えられる。こ問したり、指導する事にはまだ照れくささを感しれらの諸点に関する実証的な基礎研究が今後必要て、抵抗かあります。

ストラリア、 イギリス、及び日時代は今後も急速に変わると思います。 今でも本の研究者とともに共同研究を企画しているとこと考えられ、オ

男性のタレントやロック歌手が、女性のように厚ろである。 この国際共同研究が成果を挙げること

化粧したり、町を歩いている若者の中には、頭髪により、太陽光紫外線の人体影響を制御する道かを黄色に染めたり、ピアスを付けている人もいまー

拓け、健康な生活を楽しむのに必要なコスメトロ

す。10年後には、 男性も女性と同じように化粧を

ジ ー に関する種々の情報が得られるものと期待ししても、なんら違和感のない状況となるでしよう。

ている。

その時には、私も抵抗感もなく、女性も蔑くほと（金沢大学）

詳しい化粧の知識を振りまいて、化粧や化粧品についての患者指導をしている事でしよう。

私のコスメトロジ 一（秋田大学）

上目
t
’

田
富

私のコスメトロジ ー 感
顔に色素沈着、つまリメラニン増加を引き起こ

山本

す皮周疾患はかなり多く、 それらはいずれも患者さんに、美容的、心理的に大きな悩みをもたらし綾子（平成5年度）g

ます。 私は、このメラニン色素に関する研究を、

このたび研究助成に応募するまで、正直のとこ

20 年問続けてきています。 そんな訳で、皮府科医

ろコストロジ ー 研究振興財団について何も知識があるいは皮府に関する研究者の中でも、私は、コスメトロジ ー に比較的近い分野の研究者と思います。

ありませんでした。 ところが思いかけなく助成をいたたき、はしめてコストロジ ー （化粧品学）の意義について考えております。近年皮府科学と化-157-

粧品学は非常に接近している部分が多いと思われしい点が多い。また、欧米ではヒト 皮府（死体かます。たとえばいまやスキンケア化粧品は、しみ、ら採取したもの）を用い研究することは容易であ

しわ、肌あれを防ぐのみならず治療する（？）使るか、動物実験は動物愛護の観点からかなりの制命を持ちつつあるようです。私は表皮の脂質代謝限を受けている。一方、わが国ではヒトの皮旧をと皮府の病態の関係についてこれまで勉強してき研究に用いることは特別な場合を除くと不可能でましたが、最近では、表皮の水分バリア ー 機能にあるが、動物実験は一 定のル ー ルを守れば行える。

ついて典味を持っております。肌あれは、まさにその場合、どの動物の皮附を用いるかが重要とな

この水分パリアる。最近では、動物実験の代替に培養細胞を用いー

機能の損なわれた表皮であり、この発症機序の解明と治療はいまや私の重要な研ることも多くなってきているが、ヒトの皮附角質

究課題のひとつであります。すなわち私にとって層の培疫細胞に関しては開発が遅れているようで

皮府科学と化粧品学は一 致する目的を持っているある。

といえます。 私達皮府科学 の業 界（？）では、最後に、コスメトロジ ー は科学のみならず、美「お肌の話」を「皮府 の 研究」より格下にみな学や心理学なと様々な学問を背景に成り立っていす立場もありますが、私個人としては、きれいなる学問であり、社会構造、高齢化が進む21世紀にお肌（ ＝ 正常な皮盾）をめさして実験を重ねてゆはますます魅力のある学問となるであろう。
（大阪薬科大学）（新焉大学）

きたいと思う次第です。

看護とコスメトロジ 一

私の研究とコスメトロジ 一
森本

洋

大河原

千鶴子

（平成5年度）〉私の研究分野は薬剤学（製剤学）であり、現在

21世紀に向けて変革の時代といわれるが、女性

主に生体表面（皮荊および枯膜組織）に薬物を投の代表的な職業として長い歴史をもつ看護職も急与するための剤形設計を行っている。皮府は最表速に変化しつつある。 その第1は、 専門職にふ

面に角質層を有し、外界から身を守るために異物

さわしい教育としてようやく大学化が進んでいるの侵入に対しハリア ー になっていると同時に体内ことである。教育による質的な向上は今年の大学からの水分の蒸発を防ぐ働きをしている。したか

受験にも影響し、折からの不景気と就戦難というって、皮I阿表面に投与した薬物の全身的な薬理効現実を見越して職業や資格に直結した学部を好む

果を発揮させるためには何らかの方法を講じ、皮傾向にあるという。

府に障害を与えずに薬物を皮府透過さ•せなければ

特に薬学· 看護系などに代表される実学志向がならない。私はこの様な皮附を扱う研究をしてい女子の進出とともに目立つと新聞に出ていた。 私ることから、数年前よりコスメトロジ ーたちがコスメトロジ ー 研究に着手した3年余りの研究にも関わるようになった。
化粧品の場合、医薬品とは異なり皮府表面に塗られた化粧品の成分が体内に入らず皮府表面に留まり皮府におだやかに働く必要がある。医薬品の前は「白衣の天使」とあこがれの的だった職業も、
きつい、 汚い、危険の3K職種というイメ ー ジが強く、看護婦不足が社会的な問題になっている時であった。

評価は薬物の血中濃度や薬効により行われるが、看護をめさした人たちが、看護に魅力を感じ溌

化粧品の評価はその作用がおだやかであり、また剌と働くためには看護の質的向上、社会的な位置

それ以外の様々な観点からの評価も必要となり難づけ、待遇の改善など基本的な問題はもとより様-158-

生をいかに豊かに過こすかということは、 大きな々な要因がある。
ジヘの脱皮・転換に社会問題となっている。 この高齢化の進行は多様影響を与える要因のひとつとして、 病院におけるな生き方や価値観を生じさせ、 さらに「老い」 と「看護婦の化粧」を取り上げてみたいと考えた。

の共存も同時に問い直させている。

そこで魅力ある職業イメー

しかしこのようなテ ー マの研究はみられなかっ

われわれは東京都や北海道の高齢者大学や高齢

たし、 一般社会の女性に比べ看護婦と化粧はあま者のサ ー クルを訪問し、 そこに参加している高齢

り結びつかず、かなり突飛な発想と見られていた。

者のおしやれに関する意識を調森した。 当初、 各だか日本看護研究学会に報告を重ねているうち機関に対して「高齢者のおしやれの研究をしたい」

次第に関いが寄せられて次の報告を促されるようになってきた。 昔から看護婦の容姿に求められてきたのは患者の心の慰め、 清らかな心の表現であり煽状的であってはならないとされ、 素肌を整える程度であった。 つまり当時化粧は派手でけはけ
ばしく、 刺激的なイメ ー ジとしてとらえられていたのであろう。 今回の一 連の調査結果では看護婦が化粧をする事に対し、 看護婦自身及び患者はそれ以上に肯定的であった。 患者が描く化粧による看護婦の好ましいイメ ー シは「清潔でさわやか」「健康で明るい」 「穏やかで優しい」であり、 看護婦の描くイメ ー ジとも一致していた。 また化粧が外観たけでなく看護婦の気持ちの変化に多大な影態を及ばし、 魅力的で明る＜生き生きと意欲的に働く行動への動機づけとなっていることが分かった。これらの点は注目してよい成果といえよう。
看護婦の化粧は患者に不快感や剌激を与えない
よう「薄化粧」「香り淡白」であること、 そして若い人達に見られた化粧による自己表現に対し、無香料化粧品、 自分の肌にあった多種類のファン
テ ー ション、 口紅の選択なと自然なメ ー キャップが可能となった化粧品の進歩• 発展が大きく関与している。 さらに私たちの調資研究もまた総合人
間科学をめざすコスメトロジ ー に影態を与えるも（杏林大学）のと思われる。

と申し出たところ、 担当職員に実際のおしやれの専門家であると間違えられて「高齢者が大変輿味を持っているテ ー マなので、 おしやれの指導をして欲しい」と反対に依頼されてしまい、 戸惑ったことが数多くあった。 もちろん、 自分自身はおし
やれとは縁遠い存在なので、 丁寧に辞退させていたたいた。 このことから、 調査に入る以前に、 い
かにおしやれに対する高齢者の関心が高いかを知らされる思いがした。
実際に調査に人ってみると、 生涯学習の場面に積極的に参加している高齢者たちは、 男女とも教養や知識の習得だけでなく、 対人関係の交流をはかり、 新たな生活の目標を意識的に選択し、 社会とのつながりを模索しているようであった。 また、
男女ともに服装や髪型を整え、 女性はおしろいに
口紅と化粧をしてやってきていた。 このことは、「 おしゃれ」という外見的な特性が与える印象形成の意味を、 高齢者自身が熟知していることを窺わせている。 老化については、 どうしてもネガ
ティプなイメ ー ジが先行するものであるが、 高齢者か能動的に加齢を謳歌している姿がそこに存在していたのである。
今後は、 青年期ゃ成人期の人々が高齢者のおしゃれをどのように認知しているかを明らかにする
ことにより、 高齢者とどのような点で類似し、 とのような点で異なっているのかを検討していくことが新たな課題であると考えている。
（横浜国立大学）

高齢者のおしゃれ藤森 立男（平成4年度）〉
劇的な平均寿命の上昇にともなって、 老後の人
-159-

録

． ．

付

事業報告書（平成6年度）
役

員

研究助成課題一覧

事業報告書（自平成6年4 月 1日 至

平成7年3 月 31日）

I . 5 年度事業（平成6年度）
昨年に引き続き以下の ような事業を計画し， 実行しました。
自然科学や社会科学の各分野にわたり， ひろくかかわりをもつ化粧品を総合的に体系化することを目的として①化粧品学の調査・研究に関して顕著な成績をあげた研究者や機関に対して功(1 件あたり 100万円）

労金をもってこれを表彰する。

②皮膚の生理機能や老化機構の解明， 美容に役立つ素材の研究等化粧品学に関連した生命科学， その他の分野の調査・研究に対する助成を行う。
(1件あたり200万円及び100万円）③化粧品学の調査・研究にたずさわる研究者の海外派遣や招聘に対して資金援助を行う。

(1件あたり50万円）

II. 募集及び選考の経過
本年度の各事業につきましては平成6年5 月 9日より募集を開始し同6年7 月
20日をもって締切りました。 研究助成事業は本年度も 一 般公募を原則とし全国160ヶ所の大学· 病院・研究機関等にダイレクトメ ー ルで推薦書を送付するほか8誌の関係学術雑誌にも広告し， その結果多数の応募をいただきました。 応募
者の研究分野が多岐にわたった為， 選考委員会の中に 3 分科会を設けそれぞれにおいて予備選考を行い平成6年9 月20日（火）ルビ ー ホ ー ルにおいて本選考委員会を開催し受賞候補者を決定し11月2 1日に理事長・理事・評議員の諒承を得て受賞者を最終決定しました。

III . 第5回功労賞・研究助成等の結果
以下のとおり合計19件が決定され， 功労金1 00万円，研究助成金2,800万円，功労表彰（小林孝三郎賞）
研

究

助

成

国際交流援助-163-

件 一件 件
1 171

国際交流援助金50万円が交付されましfこ oN. 会議等
理事会
第1回通常理事会
開催日時

平成 6 年 6 月 14 日（火）午後 5 時

開催場 所

東京都千代田区丸の内 1-1-1 パレスホテル会議室

理事総数

12名

本人出席

10名

監

2名

出席

2名

事

委任状出席

2名（賛成）

審議事項
第一号議案

事業報告ならびに収支決算報告について
平成6年度の事業内容が事務局より詳細に説明された。 続
いて収支計算， 財産内容などが詳しく説明された。 次に小田倉監事より上記内容が適正適法である旨の監査結果が表明された。 質疑応答， 審議の後， 本議案は書面表決者を含め全員 一 致で賛同を得， 可決承認された。

報告事項
平成6年度の助成表彰の公募方法について研究助成事業の方式について， 昨年との相違点を主とした詳細な説明がなされた。 理事会及び評議員会は全員でその趣旨を認めた。
そ の他
研究業績中間報告集第3号が披露され，近く研究報告集第2号（収載
論文20編）が発刊される予定であることが報告された。
評議員会
第1回通常評議員会
開催日時・場所・議案ともに理事会に同じ。
評議員総数

14名

本人出席

10名

欠席

3名

委任状出席

各議案とも全員一 致で承認された。

-164-

1 名（賛成）

第2回通常理事会
開催日時分
平成 6 年 11 月 21 日（月）午後 2 時 30

開催場所

東京都渋谷区渋谷 2-1 2-15

理事総数

12名

本人出席

11 名

日本薬学会館会議室

欠席

l名

審議事項
第一号議案第5回表彰・贈呈者の決定について
表彰・贈呈の候補者について， 選考枠， 選考経過などに及ぶ詳細な説明の後，分野別の応募状況の確認などを含めた活発な意見が交換された。なお今回は功労表彰対象者として， 本年8月急逝された細田文一 郎氏が提案された。 しかるのち本議案は書面表決者を含め全貝 一致で原案通り可決
された。
第二号議案

平成7年度事業計画案及び予算案について配布された資料に基づき， 事業計画， 予算案について新規事業， 金利動向などにもふれた詳細な説明があり， 前年の事業規模を維持， 継承した提案がなされた。 原案は書面表
決者を含め， 全員 一 致で賛同を得た。

第三号議案寄附行為の一 部改正について配布された別紙に基づき変更理由が説明され、財団が保有する株式会社コ ー セ ー の株の運用について、一定の制約を設けるために複数の条項の改正提案がなされた。国税局の指摘事項である旨の説明があった後、原案は書面表決者を含め全員 一 致の賛同を得た。
報告事項
研究報告について第一 巻に続き，第二巻を平成6年に発行配布した点と，今後も年報を継続発行する旨の報告がなされ了解された。

-165-

第2回通常評議員会
開催日時・場所・議案ともに理事会に同じ。
評議員総数

14名

本人出席

8名

各議案とも全員

-166-

一

委任状出席
致で承認された。

6名（賛成）

選考委員会
分科会I
開催日時

平成6年9月7日（水）午後5時30分

開催場所

東京都港区虎の門 1-8-7 富田屋会議室

審議事項

素材、物性に関する分野の選考

分科会II
開催日時

平成6年9月16日（金）午後5時

開催場所

東京都千代田区丸の内 1-9-1 ルビ ー ホ ー ル会議室

審議事項

生体作用、 安全性に関する分野の選考

分科会皿
開催日時

平成6年9月7日（水）午後6時

開催場所

東京都新宿区西新宿2-2-1 京王プラザホテル会議室

審議事項

精神、 文化に関する分野の選考

本選考委員会
開催日時

平成6年9月20日（火）午後5時

開催場所

東京都千代田区丸の内 1-9-1 ルビ ー ホ ー ル会議室

審議事項

各分科会の結果を総合的に判断して助成候補者が決定さ
れた。

表彰贈呈式
開催日時

平成 6 年11月21 日（月）午後 4 時

開催場所

東京都渋谷区渋谷2-12-15 日本薬学会長井記念ホ ー ル

以

-167-

上

管理番号

K-94-01

第5回研究助成を受けられたかたがた(K-功労表彰

JA ー一般研究助成A JB ー一般研究助成B

研 究 題

分

目

香粧品の有効性PR、香粧品科学教育を通しての産業育成野

ハーダー腺の分泌するアルキルジアシルグリセ
ロ ー ルの物性解明とその素材としての応用開発

生化学
脂質生化学

JA-94-02

代表研 究者

香粧品科学 コスメチックコンサルタント
美容評論

JA-94-01

細田文 一 郎東京大学医学部教授

脊

山

洋

右

植物紐織培養法を用いたクチナシ植物からの
東京理科大学総合研究所助教授
橙黄色色 素Crocin及び青色色索イリドイド配 植物細胞工学
糖体の生成に関する研究
生田安喜良

表皮ケラチノサイトにおけるヒト細胞老化因子のJA-94-03 研究

大阪大学医学部助教授
皮膚科学

橋JA-94-04

H ー 国際交流援助）

植物培養細胞・組織による 化粧品索材としての活性成分の生産と育種に関する研究

化粧と痴呆老人に関する基礎的研究

生薬学
植物細胞・
組織培養

本

公

九州大学薬学部教授

正

山

征

洋

脳神経外科学 産業医科大学名誉教授
心理学
人間工学
松 岡 成 明JA-94-05

皮膚生理機能賦活物質の合理的吸収促進法
JA-94-06 の開発

京都大学薬学部教授
薬剤学

橋 田

充

JA-94-07

遺伝子工学的手法を用いた必須脂肪酸y-リノ 植物生理学
九州大学理学部助教授
レン酸の高等植物における多量生産
植物細胞工学栄養化学
厚射 場

JA-94-08

リポソー ム封入薬剤の皮膚吸収過程の解析と 生体物理化学 九州大学薬学部教授
皮情内ラジカル消去への応用
生体医用化学内 海 英 雄

-168-

管理番号

研

究 題

目

表皮細胞の細胞接着と角化制御に関するシグJA-94-09 ナル伝達，
JA-94-10

JA-94-11

野·.

代表 研 究者

皮膚科学

岐阜大学医学部教授

分

細胞生物学

JB-94-02

静岡県立大学薬学部助教授

微生物に由来する多糖分解酵素のコスメトロジ一
への応用

遺伝子工学

東京工業大学生命理工学部助教授

皮膚発現型レチノイン酸受容体のドミナントネ
ガティブ・トランスジェニックマウスを用いた皮膚の成熟過程の検討
化粧が高温環境下の発汗反応及び選択的脳冷却機構に及ばす影響

皮膚科学
遺伝子工学
環境生理学

サンスクリー ン剤の光ハプテンとしての性格
JB-94-03

JB-94-05

JB-94-06

雄

康

物理化学
（薬学・医学・
理学系）

温熱生理学

JB-94-04

島

遠赤外線の水の構造と物性に及ばす影響及び遠赤水の保湿効果に関する研究

生化学

JB-94-01

北弾性繊維蛋白質エラスチンの自己組織化集合体の構造、物性、機能に関する研究

中

山

誠

村

聡

京都大学医学部助手

田中

本,-L-.

俊

金沢大学医学部助手

田

辺

＇

実

浜松医科大学講師
皮膚科学

対人魅力の形成にかかわる顔の構造的特徴と化粧行動の影響の研究

片

戸

倉

新

樹

社会心理学
対人コミュニケー
ション ・ 対人魅力

北星学園大学文学部教授

物理化学
生物物理学
生体物性学

九州大学理学部助手

大

坊

郁

夫

梢

甲斐原

バイオシグナル分子を固定化した細胞成長促 生体材料化学 京都大学工学部助手
進タンパク質ハイブリッド材料の合成
品
高分子化学
浩
伊 藤 ---'--毛周期の皮府遅延型過敏症成立に与える影響

H-94-01

皮府科学
毛髪学

Freie Universitat Berlin医学部
Udo Hofmann
受入責任者 浜松医科大学
‘

毛
ヽI立

JI I

雅

i｛生
ロ

（敬称略受付順）

-169-

員

平成 7 年 4 月 1 日現在

役

理
理

理

理

閥コ ー セ ー 取締役名誉会長

大

正

律

男

（株）博報堂代表取締役会長

次

早稲田大学理工学部教授

利東京大学名誉教授證次郎（掬コ ー セ ー 代表取締役社長

正 文
孝
冨士

安田信託銀行（掬代表取締役会長

芳昭郎

慶応義塾大学医学部教授

武昭

慶応義塾大学医学部教授

隆

昭 香

理

林 藤 邊 美 澤 林 原 山 村 川 輪 澤佐
小 佐 磯 宇 大 小 菅 高 中 西 花 宮

長事 事 事 事 事 事 事 事 事 事 事
理
事
務
理 専 理
理 理

理

三郎

理

砂香料工業（樹代表取締役社長

社会福祉法人福利厚生センタ ー 理事長
東京化粧品工業会顧問

典哉

公認会計士

雄

弁護士

夫

隆

三夫 彦 徹桂影 雅 榮 幹 晴々 橋村 呂 部 崎 崎 本 辺

泰雄 保 之 久 子 勇 昭

芳孝 宏 文野 隈 方 原 藤

近佐 高 中 野 廣 宮 山 山 渡田

上大 緒 北員 員 員 員 員 員 員 員 員 員 員 員 員 員

議 議 議 議 議 議 議 議 議 議 議 議 議 議

評 評 評 評 評 評 評 評 評 評 評 評 評 評

黒

正節

事 事

監 監

小田倉

東京理科大学薬学部教授
高
学校法人名城大学理事
明i台薬科大学教授
東京理科大学工学部教授
東京理科大学薬学部教授
内科医師
帝京大学医学部教授
早稲田大学人間科学部教授
早稲田大学人間科学部教授
東京大学薬学部教授
東京工業大学理学部教授
千葉大学薬学部教授
神奈

大学理学部教授

日本薬剤師会-170- 川務理専

研究助成課題一覧

素材、 物性に関する分野
研

管理番号J 90-03

課

題

リン脂質膜の表面修飾と分子集合体としてのI 機能発現に関する研究

代表研 究者

分 野I
I

I 界面物理化学

筑波大学化学系助教授

古 澤 邦 夫

ヒアルロン酸で表面を修飾したリポ ノ ー ムか1東京理科大学薬学部助手
薬品物理化学らの内容物の温度による放出制御
牧 野 公 子‘J 90-06

皮膚DDSとしての高分子脂質リポソ ー ムの基礎研究

J 90-07

皮膚への作用性を有する各種糖脂質の合成

J 90- 15

1
J 91-02

究

1

I

高分子合成

早稲田大学理工学部教授
西

出

宏

之

I
I千葉大学薬学部助教授
I有機合成化学中

新製剤（去及び新素材を用いた化粧品の品質確 l

生体適合性逆型ベシクルの生成、安定化と応用に関する研究

衛生化学
溶液論
界面化学

川

昌

子

国立衛生試験所環境衛生化学部長

I!

横浜国立大学工学部助教授

国 枝 博 信J 91-05

新しいDDS剤型としての高分子ミセルの設計と機能開発J 91-06

化粧品素材としての利用が可能な乳酸菌の新規育種技術の開発
応用生物化学

早稲田大学理工学部専任講師

J 91-08·

化粧品素材としての竹節人参並びに甘草の組織培養による物質生産並びに大量増殖に関する研究

広島大学医学部助教授]91-10

界面活性剤を含む溶液混合系の相挙動と濡れの挙動に関する研究

界面化学

J91-ll超微粒子分散系の構造と物性及び自己制御
コロイド系の開発

高分子物性

高分子合成
DDS

生

片

薬

薬用生物学

物理化学

I

東譴科大学生命科学研究所助教授

コロイド物性

岡

一

則

桐村光太郎

神

田

博 史

九州大学理学部助教授

荒

殿

誠

京都大学工学部助手

松 本 孝 芳J 91-20

各種界面活性物質によるマクロ及びマイクロ東京理科大学理工学部講師
エマルションの調製並びに物性に関する
応用界面化学
物理化学的研究阿 部 正 彦J 92-01

ヒトリゾチ ー ムタンパク質を高分泌する酵母
突然変異体を用いた素材生産の効率化研究

-171-

1I

分子生物学
遺伝学

広島大学理学部助手

鈴

木

克 周

管理番号

研

ワ九
b

課

題

J 92-03

化粧品の紫外線照射による光酸化メカニズムの研究]92-04

水素添加大豆リン脂質を用いた油性ゲル及び水性ゲルの保湿作用に関する研究

J 92-05

アスバラギン酸プロテア ー ゼ類の蛋白工学的
機能改変によるケラチナ ー ゼの開発

JA-93-05

細胞膜の脂質の物性と機能の基礎的な研究
ー
リン脂質物性のコスメトロジ ー ヘの応用 一

化粧品基本素材金属酸化物の酸性大気汚染物
JA-93-06 質との相互作用

JA-93-07

色素化合物の光照射下での反応の解析

新規な構造を有するヒアルロン酸類似多糖
JA-93-08 の開発
ペプチドシナ ー ジストによるビタミンEの抗JB-93-01 酸化能の向上 ー ヒト血清アルブミン由米のペプチドシナ ー ジストの開発 一＇

分 野

代表研 究者

物理化学

明星大学理工学部教授

界面科学
薬

-子

蛋白工学
生化学

日

高 久 夫

昭和薬科大学講師

藤井まき子
東京大学理学部助手

井 上 英 史

生体物性学
東北大学理学部教授
細胞生物
大 木 和 夫
物理学
物理化学

千葉大学理学部教授

固体界面化学金 子

克 美

生物物理化学
光化学治療
光増感化学

東京工業大学生命理工学部教授

糖鎖工学

東京工業大学生命理工学部助教授

大 倉
中

高分子化学

畑

脂質生化学

水産大学校講師

食品化学

一

研

郎

一

幡 手 英 雄層状鉱物を用いたホスト ー ゲスト反応による 無機材料化学 早稲田大学理工学部助教授
JB-93-02 有機色素のカプセル化
菅 原 義 之粘土科学
ハーダ ー 腺の分泌するアルキルジアシルグ
JA-94-01 リセロ ー ルの物性解明とその素材としての応用開発
植物組織培養法を用いたクチナシ植物から
JA-94-02 の橙黄色色索Crocin及び青色色素イリドイ
ド配糖体の生成に関する研究

生化学
脂質生化学
植物細胞工学

東京大学医学部教授

脊 山 洋右東京理科大学総合研究所助教授

生田

安喜良

植物培養細胞・組織による化粧品索材とし
JA-94-04 ての活性成分の生産と育種に関する研究

生薬学・植物細胞・

遺伝子工学的手法を用いた必須脂肪酸y ー リ
JA-94-07 ノレン酸の高等植物における多量生産

植物生理学

九州大学理学部助教授

植物細胞工学

射 場

-172-

組織培養

九州大学薬学部教授

正 山 征洋
厚

管理番号

研

ワ
九

課

I

題

遠赤外線の水の構造と物性に及ばす影響及JA-94-10 び遠赤水の保湿効果に関する研究

分 野

代表研究者

物理化学

静岡県立大学薬学部助教授（薬学・医学系）

弾性線維蛋白質工ラスチンの自己組織化集

JB-94-05 合体の構造、物性、 機能に関する研究

物理化学
生体物性学

片

山

誠 二

九州大学理学部助手

甲 斐原梢

バイオシグナル分子を固定化した細胞成長 生体材料化学 京都大学工学部助手

JB-94-06 促進タンパク質ハイブリッド材料の合成

-173-

高分子化学

伊 藤 嘉浩

研究助成課題一覧

2

生体作用、 安全性に関する分野
管理番号

J 90-01

J 90-02
J 90-05
J 90-08
J 90-09

J 90-10J 90-11

研

ワ九
七

課

題

分野
．．

染毛剤成分の代謝に関する研究

薬物代謝

ドレイズ試験代替法の開発 ー ヒト細胞、 昆虫細胞を用いた高感度迅速試験法の開発研究一
胆汁酸生合成のメカニズムに関する研究 ・

組織培養学

生物有機化学-皮膚の老化に伴うエラスチン遺伝子発現の動
ヒ
ヽ
,目.ヒ
- �

皮膚科学

Werner症候群患者皮膚由来培養線維芽細胞のサイトカイン細胞成長因子に対する応答性

皮膚科学

光化学反応によるフリ ー ラジカルの産生と表皮培養細胞に対する影響
色素性皮膚病変に対するレ ー ザ ー 療法の研究

医科学
生化学
皮膚科学

J 90-12

表皮糖脂質の生化学的、 形態学的並びに臨床的研究（エビデルモシド）

J 90-13

生体の酸化的障害に対する防御機構の生化学的研究ー ビタミンEの活性発現機構の解析 一

生化学J 90-14

皮胸生理機能賦活物質の経皮吸収に対する評
価解析理論の確立

薬剤学J 91-01

培養表皮細胞及び線維芽細胞におけるグリコサミノグリカン及びコラ ー ゲンの代謝生化学

J 91-03

活性酸素、 フリ ー ラジカルによる生体膜障害の防止に関する研究

有機生化学

J 91-04

パッチテスト結果のコンピュ ー タ ー 処理シス
テムの開発

-174-

代表 研 究者
食品薬品安全センタ ー 秦野研究所

中尾美津男
理化学研究所副主任研究員

大 野 忠 夫
東京工業大学理学部助教授

藤

本 善 徳
-"

�

島

新

吾

横浜市立大学医学部助手

佐々木哲雄
東京大学医科学研究所教授

金ケ崎士朗
帝京大学医学部助教授

渡

辺

晋

一

山口労災病院皮膚科部長

生化学

浜中すみ子

接触皮膚炎

.

慶應義塾大学医学部講師

皮膚科学

皮膚科学

'

東京大学薬学部助手

新 井 洋 由京都大学薬学部教授

瀬仁崎

東京薬科大学教授

陽
東京大学先端科学技術研究センタ ー 教授

二 木 鋭 雄名古屋大学医学部附屈病院分院皮膚科長

早

川

律 子

研

管理番号

究

課

皮膚過敏症に対するマスト細胞の役割
ーマスト細胞欠損動物を用いた検定法の開発 一

J91-07

代表 研 究者 ．

分· 野

題

実験病理学

大阪大学医学部教授

北村 幸彦

＼

J91-09マウス悪性黒色腫を用いたチロシナ ー ゼ抑制因子の精製と応用

J91-12

接触光過敏症のマウスモデルを用いた化粧品
による光アレルギーのスクリー ニング及びサンスクリ ー ンの効果の評価
メラニン生合成の調節＇

J91-14皮膚科学

北里大学医学部講師

亀山孝 一 郎メラニン色素
光生物学
皮筒免疫
分子生物学

！

浜松医科大学教授
·,

滝 川

雅 浩

東北大学医学部教授

柴 原 茂 樹J91-16

ビタミンCと上皮成長因子によるヒト皮膚線 分子細胞生物学 東京医科歯科大学助手
維芽細胞の増殖とコラ ー ゲン代謝調節機構の
・ •
隆 一 郎
畑
分子細胞生物学的研究
医化学

J91-17

人工皮膚を用いた皮膚の形成機構及び皮膚の反応性試験に関する研究

細胞生物学

J91-18

サンスクリー ンの紫外線性表皮障害に対する防御作用の免疫生物学的研究

皮膚科学

J91-lりダイレクトスキンセンサー を用いて測定した
皮溝と加齢の関係

J91-22

フリ ーラジカルとポルフィリン代謝に関連する皮膚の老化機構解明に関する研究

J92-02

J92-06

J92-07

J92-08·I

光熱変換分光法による薬物の組織及び細胞ヘの非侵襲吸収計測法の開発

広島大学理学部教授‘
吉 里 勝 利京都大学医学部講師

古

川

福

実

老年病学

慶應義塾大学医学部助手

動脈硬化

本 間 聡 起

環境科学
毒性学
分析科学

国立公衆衛生院労働衛生学部室長

市· 川

勇

東京大学工学部教授

田嗣 郎

神経ペプチドによる皮膚炎症反応の成立機序
内科学
千葉大学医学部助手とその特異的制御．．
アレルギ ー 学
岩 本 逸
皮膚の機能と脂質代謝に関する基礎的研究..

転移因子を用いたアントシアニン色素生合成
遺伝子とその発現調節因子遺伝子の解析

-175-

生化学
分子遺伝学
分子生物学

夫

新為大学医学部教授―

小 野 輝 夫
東京理科大学基礎工学部教授

飯

田

滋

管理番号

J92-09J92-10

研

ワ九
b

課

分 野

題

モノクロ ー ナル抗体を用いた紫外線誘発ON
A損傷の定量とメラニン色素のサンスクリ ーン効果の実験的証明
皮膚の老化における染色体構造の変化と遺伝
子修復機構に関する研究

皮膚科学

細胞生理学

代表研 究者
奈良県立医科大学大学院生

小 林 信彦
理化学研究所主任研究員

花 岡 文雄J92-llアスコルビン酸2 ー グリコシドの生物学的有用性研究ー経皮吸収によるビタミンC
活性発現の評価 一

JA-93-01

還元型ネオプテリンCNPH-4)の紫外線照射皮膚障害に対する効果

放射化学
薬理学
生化学

東京理科大学生命科学研究所講師

化粧品による光老化の抗酸化的制御に関する
JA-93-02 細胞生物学的及び生化学的研究

皮膚科学

群馬大学医学部教授

免疫薬理学

紫外線生物学

岡山大学薬学部教授

山 本

格

小 島 周 二宮 地 良樹太陽光紫外線でヒトDNA中に誘発される損 放射線生物学 金沢大学薬学部教授
JA-93-03 傷とその修復に関する研究
二階堂
修
細胞生物学
”

いわゆる しみ.. (肝斑など）の発症機構とJA-93-09 その増悪因子に関する研究

皮膚科学

尋常性座癒の発症機序の解明のための皮屑のJB-93-04 保屋機能と脂質代謝に関する研究

皮膚科学

哺乳類皮膚細胞のアポト ー シスと細胞接着を
JB-93-05 つかさどるセラミドの研究

糖生物学
発生生物学
生化学

不飽和脂肪酸とその過酸化生成物の皮膚角質層への作用に関する研究

製剤学

表皮ケラチノサイトにおけるヒト細胞老化
JA-94-03 因子の研究

皮盾科学

皮府生理機能賦活物質の合理的吸収促進法
JA-94-06 の開発

薬剤学

JB-93-06

JA-94-08

東北大学医学部講師

�
晶

田

上

↓
＼主
円

新潟大学医学部助教授

山 本 綾 子
九州大学理学部助教授

野 村

一

也

大阪薬科大学薬学部助教授

森 本

一

i羊

大阪大学医学部助教授

橋本 公 二京都大学薬学部教授

橋 田充

リポゾ ー ム封入薬剤の皮膚吸収過程の解析 生体物理化学 九州大学薬学部教授と皮府内ラジカル消去への応用
生体医用化学
内 海英雄
-176-

研

管理番号

JA-94-09

JA-94-11
JB-94-01

九ワ

課

分 野

題

表皮細胞の細胞接着と角化制御に関するシグナル伝達

皮府科学
細胞生物学

代表研究者
・.
岐阜大学医学部教授

北島康雄

微生物に由来する多糖分解酵素のコスメト
ロジ一への応用

迫伝子工学
生化学

中村

皮附発現型レチノイン酸受容体のドミナン
トネガティプ・ トランスジェニックマウスを用いた皮府の成熟過程の検討

皮府科学

京都大学医学部助手

迫伝子工学

化粧が高温環境下の発汗反応及び選択的脳環境生理学

JB-94-02 冷却機構に及ばす影響

温熱生理学

サンスクリ ー ン剤の光ハプテンとしてのJB-94-03 性格

-177-

皮府科学

東京工業大学生命理工学部助教授

田

聡

中 俊 宏

金沢大学医学部助手

田辺実

浜松医科大学講師

戸倉新樹

研究助成課題一覧

3

精神、 文化に関する分野..
管理番号

J 90-04

J 91-13
J 91-15]91-21
Js-92-01
Js-92-02
JA-93-04

研

ワ九
ヒ

課

題

分 野

化粧が意識性に及ぼす効果の研究

心理学

香料に関する定量的解析

感覚生理学

ー
アルツハイマ型老年痴呆症者と、 いわゆ”
る ほけ" 症状を呈する人々への化粧による情動活性化の研究「色白」の嗜好構造に関する 一考察

I

臨床心理学
心理学
色彩心理学
造形心理学

病院看護における化粧に関する研究

高齢者のおしゃれ行動とその評価に関する研

ク九
I::

基礎看護学

人間行動科学
計最心理学
認知心理学
行動計量学

色彩の心理学的意味空間の研究

化粧の個人的効果と対人的効果に関する実証

JB-93-03 的研究
JA-94-05

感情心理学

化粧と痴呆老人に関する基礎的研究

社会心理学

対人魅力の形成にかかわる顔の構造的特徴-178-

早稲田大学人間科学部教授

春

豊

木

北海道大学薬学部教授

栗 原 堅 三同志社大学文学部教授

浜治世子

早稲田大学人間総合研究センター

齋 藤 美穂
埼玉県立衛生短期大学教授

大河原千鶴子北海道教育大学教育学部助教授

藤 森 立 男
金沢大学文学部助教授

岡 本 安 晴福島大学教育学部助教授

田操

脳神経外科学 産業医科大学名誉教授
心理学

JB-94-04 と化粧行動の影響の研究

代表研 究者

松 岡 成 明社会心理学

北星学園大学文学部教授

対人魅力

大坊郁 夫

＊本財団についてのお問い合わせは下記にお願いいたします。
財団法人
〒104
電話

コスメトロジ ー 研究振興財団
東京都中央区銀座三丁目5番12号
東京03(3564)6731

コスメトロジ ー 研究報告 Vol.3/'95
1995年9月15日発行

非売品

編者

佐藤大正，

宮川安正

発行

財団法人

コスメトロジ ー 研究振興財団〒104東京都中央区銀座三丁目5番12号
電話
製作

東京 03 (3564) 6731

デ ー タ八十二〒104東京都中央区新富一丁目17番8号
電話 東京03 (3551) 3726 (代表）

印刷

宮崎印刷
©1995

不許複製

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