炎症後色素沈着におけるエイコサノイドによるメラノサイト活性化機構の解明
京都大学大学院

医学研究科臨床器官病態学講座皮I肉病態学分野

井

階

一

幸

Skin pigmentation after inflammation is a well recognized phenomenon, but its mechanisms have bee un­
known yet. A number of substances are considered to contribute to post-inflammatory pigmentation, andeicosanoids are one of the most important mediators. Eicosanoids, prostaglandins (PGs) or leukotrienes(LTs) , show a potent pharmacological activity in various tissues, and actively synthesized and degraded in
the skin, and contribute to the pathogenesis of a number of skin diseases such as UV-dermatitis, atopic der­matitis, urticaria and psoriasis. We examined the synthesis of leukotrienes in human melanoma cells inorder to assess the function of leukotrienes in human melanocytes. The enzyme activity of LTA, hydrolase,which catalyzes the conversion of LTA, to LTB,, was detected in the supernatant of cultured human mela­noma cells (MeWo cells) and melanoma cells obtained from patients. Immunoblotting analysis using ananti-human LTA, hydrolase antibody demonstrated LTA, hydrolase as a 70-kDa protein in both MeWo andmelanoma cells. Considerable en勾me activity of LTC, synthase, which catalyzes the conversion of LTA, to
LTC,, was detected in the microsomal fraction of both MeWo and melanoma cells. The HPLC profile of the
LTC, synthase reaction products revealed that LTC, was the main product. LTD, was not detected underthese conditions, indicating that the microsomal fraction of human melanoma cells lacks the membrane­bound g -glutamyl transferase that converts LTC, to LTD,. LTC, synthase activity was inhibited by the addi­
tion of M K -886, and was not altered by treatment with N-ethylmaleimide (NEM) or 1-chloro-2,4-dinitroben­
zene (CDNB) . These results indicate that the enzyme responsible for the conversion of LTA, to LTC, inhuman melanoma cells is LTC, synthase rather than a nonspecific or microsomal glutathione-s-transferase.
These results also suggest that human melanoma cells can generate LTB, and LTC, from LTA,, and that thisprocess is catalyzed by two en勾mes: LTA, hydrolase and LTC, synthase.

緒

し 、 組織障害性に働く諸酵素 、 サイトカイン 、 成言

長因子、接着分子およびエイコサノイドなどが遊

私達の皮膚に紫外線があたると発赤などの急性

離し 、 これらが、表皮基底層のメラノサイトに生の炎症症状(Sunburn) が生じ、 3-4日後から物学的作用を与えることは十分に考えられる。さ黒褐色の色素沈着(Suntan)を認めることはよくらに、肥満細胞がヒスタミンやエイコサノイドを

ー

性皮膚炎を

遊離 し た り 、 ある いは局所に浸潤し たマクロ

はじめさまざまな炎症性皮南疾患はあとに色素沈

ファ ー ジがエイコサノイドを産生する可能性もあ着をきたす。 これらの炎症時の局所皮膚においる。

知られている。ま た、湿疹やアトピて、 プロスタグランジン(PG) やロイコトリエ

さて 、 このエイコサノイドはアラキドン酸由来

ン(LT)などのエイコサノイドが増加することかの脂質メディエ ー タ ー であり、炎症状態にある細ら、これら脂質メディエ ー タ ー が皮南の色素沈着

胞が何らかの刺激や障害を受けて、細胞内のホスに関与していると考えられている (l - 5) 。 さらに 、

ホリパ ー ゼA2がカルシウム依存性に活性化さ皮南の炎症時には好中球、 好酸球が局所に浸潤れ、リン脂質よりアラキドン酸が遊離する。このア ラ キ ド ン 酸 は 速 や か に代謝さ れ て

Study of the Role of Eicosanoids inMelanocyte-stimulation in Post-in­
flammatory Pigmentation

トロンボキサンが 、 Lipoxygenase 経路によりロ

Kouichi Ikai

イコトリエンなどのエイコサノイドが生成する。

Cyclooxygenase経路によりプロスタグランジン 、生成したエイコサノイドは速やかに細胞外へ放出
され、細胞表面に存在する特異的な受容体を介し- 58 -

炎症後色素沈藩におけるエイコサノイドによるメラノサイト活性化機構の解明て、臓器や組織に多彩な生理活性を発揮し、 種々

37℃で培接し、80%コンフルエントになった時点の生理現象や各種疾患の病態に影響を与える。 エで、 ロ イコトリエ ンを添加 し、4 8 時間後、位相差イコサノイドは一般に生体内できわめて不安定で顕微鏡で観察した。

あるが、 ごく微量、 通常、 pM-nM のオ ー ダ ー
で、オ ー タコイドとして種々の臓器にきわめて強

2.3

ヒトメラノ ー マ細胞株の培養およびヌ ー

力な薬理作用 を発揮する(6 -り）。遊離された ロ イ

ドマウスヘの移植

コトリエンのうち、LT恥は白血球の局所への浸ヒトメラノ ー マ細胞株としてMeWo cell <19、 20)

潤・脱顆粒を促進させ、 さらに多量の ロ イコトリを用いた。培養は10%fetal calf serum (FCS)をエンが炎症巣に産生・放出される。さらに直接的含むDulbecco's modified Eagl e's mediumに、 LTB1はメラノサイトを活性 化し、 LTCiと(DMEM)(Gibco, Grand Island, NY)培地中、

LTD1はメラノサイトの増殖誘導能を持つ。 ロ イ

37℃で培養した。 5 X 10 6 のMeWo cells をヌ ーコトリエ ンはオ ー タコイドとして作用するので、ドマウスの背に移植 し、 2週後、 腫瘍の重鼠が平メラノサイト自身も ロ イコトリエ ンを産生し、

均1.4 gのところで摘出した。

周囲の表皮細胞、メラノサイト、真皮の、好中球、リンパ球、 マク ロ ファ ー ジ、肥満細胞、線維芽細

2.4

胞などの浸潤細胞にも影響を与えると考えられ

び色素性母斑の採取

る

患者材料よりのヒトメラノ ー マ細胞およ皮廂科手術時に患者の同意のもとにヒトメラ(IO- 16) 0

今回、私達は炎症後の色素沈着の機構を解明す

ノ ー マ細胞および 色素性母斑細胞を入手した。

るために、オ ー タコイドとしての ロ イコトリエ ンのメラノサイトヘの影響ならびにメラノサイト自2.5

体の ロ イコトリ エ ン産生能を検討してみた。

皮閲科手術時に得られたヒトメラノー マ細胞、

2
2 .1

材

実

エイコサノイド合成諸酵粟の活性測定

色素性母斑細胞およびヌ ー ドマウス移植ヒトメラ

験ノ ー マ をホモゲナイズ後 、 細 胞 分 画法に てCytosol 分画 、 Microsome 分画に分離し、 それら料

LTB4、 P GB:心よびLTA4メチル エ ステル はを材料として、以下のエ イコサノイドの合成に関Cayman Chemical (Ann Arbor 、 MI)より、 1-

与する諸酵素の活性ならび に局在を検索した。

chloro-2,4-dinitrobenzene (CD NB)は東京化成より、 N-ethylmaleimide (NEM)とグル タチオ

2.5.1

LTA4水解酵素

ンは和光純薬より購入した。MK-8 86はMerck

LTふ水解酵素活性の測定は、 上記のメラノー

Frosst社(Claire-Dorval, Quebec, Canada)よ

マの分画に、 50mM Tris- HCI (pH7. 8)、 1mg/ me

り提供を受けた。抗LTA4水解酵素抗体 (17) は東ウシ血清アルブミンを含む反応液(50µ€)を

京大学医学部第2生化学教室の清水孝雄教授より

37℃、1分間プレインキュベ ー ションし、LTA工提供を受けた。BALB/c-nu/nu ヌ ー ドマウスは

タノ ー ル溶液 （終濃度70µM)を加えて、 反応

清水実験材料より購入した。

を開始した。37℃、 3 分間の反応の後、 反応停止
液（アセトニトリ ル／メタノ ー ル／酢酸、150/50/

2. 2

ヒト正常メラノサイトの培養

3)100µ€ を加え、12,000回転、5分間で遠心し、ヒト正常メラノサイトはクラボウより購人した

除蛋白をした。 遠心血清120µ€に20µeの0.35"Melanocell"'181を用いた。培養は添付のマニュ% EDTA pH9.8)を加えて混和し、 そのうち50アルに従い、 HMGS 添加Medium154S の培地中、µ€ を HPLCに注入した。HPLCにはODSカラム-59 -( Tosoh OFDS80 TM)を用い 、 溶媒として ア セト

3

ニトリル／メタノ ー ル／水／酢酸、31 /3 /0.006を3. 1用いた。H P LCの流速は1 me/ 分とし、紫外光270

結果

ロイコトリエンの培養ヒト正常メラノサ

イトヘの影響nmで生成した LTB4 の量を、 PG恥を内部標準として測定した(17.21.22)"Mel anocell"をH MGS添加 Mediuml54 S の培

0

地中、37℃で培養し、80%コン フルエントになっ
2 . 5. 2

LTC 4合成酵素

た時点で、 5 mMのLIB4、 L1C4、PGEz、PGD2

LTい合成酵素活性の測定は LTA 4 水解酵素活一を添加し、48 時間後、位相差顕微鏡で観察した。

で あり、反応系に lOmMのグ）レ

図lに5mMのLT恥添加時の所見を示した。 メ

タチオンを加え、 pH8.0 で反応させ、 生成したラノサイトは大型化し、樹枝状突起の数も増加し

LTC4の量を 紫外光280 nmで測定した(23)ていた。LTC4、PGE2、PGD2添加でも程度の差性測定とほぼ同0はあっても同様の所見が得られた
2. 5. 3ー

5ー

リポキシゲナ

5 リポキシゲナーー

ゼ

ゼ活性測定は25 µM [1-3.2

LTA4水解酵素活性

t4CJアラキドン酸(50,000 cpm、Snmol、 5µ1! 工LTふ水解酵素活性は、皮膚科手術時に採取しタノ ー ル溶液）と酵素を、 2 mMCaCl 2、 2 mMたヒト メラノ ー マ細胞およびヌ ードマウス移植

ATPを含むSOmMリン酸 カリウム緩衝液( pH7.4 )MeWo細胞のCytosol画分(100,000 X g、 1 hr)の反応液（総量 200µR)中で30℃で2分間 反応に局在した（表1)。M e Wo細胞(0.7 2を行った。 0.3 meの反応停止液［ジ土エチルエー テル／メタノ ー ル /0. M
2 クエン酸(30 : 40 : 1) ]を添加後、 反応生成物を 有機層に抽出し 、 200µRの有機層をシリカゲルのT LCプレ ー トに帯状にス ポットした。 石油エー テル／ジエチルエー テ
ル／酢酸 (15 : 85 : 0.1 ) の展開溶媒で 一10℃で50 分間 TLCを行い、 アラキドン酸と生成物を分離した。オー トラジオグラフィ ー で放射能の分布を調べ、アラキドン酸から5-HPETEあるいはそれに由来する生成物への変換量を求めて酵素活性とした(24)。
2. 6

ウエスタンブロッテイング法

上記のメラノ ー マのCytosol画分を0.2meの20％トリクロロ酢酸にて蛋白を沈殿させ、0.1 meの
1 N NaOHに 溶 解した後 、 蛋白10 mgを12%­
SDS ー ボリア ク リルアミドにLaemmliの方法で展開後(25) 、 ニトロセルロー ス紙に転写し 、 抗LTA4
水解酵素抗体にて ウエスタンブロッテイン グ法を行った(26)。蛋白 量はLowry法(27) で定 量した。

図1 Normal human melanocytes were incubated with
SmM LTB, (upper) or control (lower) .

-60 -炎症後色素沈箔におけるエイコサノイドによるメラノサイト活性化機構の解明
0.04nmol/min/mg protein)

表1

Subcellular Localization of LTA, Hydrolase in Human Melanoma Cells

はモルモット肺(O. 81土
や小腸(0.85土0.23nmol/

Specific activity (nmol/min/mg protein)

min/mg protein)に比較できる程の酵素活性を示した。
3.3

LTA4水解酵泰のウエスタンブロッテイング法
ウエスタンブロッテイング法による解析では、 LTA1水解酵素はモルモット肺（図Melanoma cells(from surgical specimen)

MeWo cells

0.21nmol/min/mg protein)

Homogenate

0 20士0.01

0.04土 0.01

0 72士0.04

0.23士001

N.D.
N.D
N.D.

N.D.
N.D.
N.D.

800 x g pellet
10,000 x g pellet
100,000 x g pellet
100,000 x g supernatant

Cultured cells (MeWo) and tumor cells were homogenized, and the subcellular
fractions were examined for L TA, hydrolase activity. Values represent the mean
土SE of 3 experiments. N.D. = not detected.

2 、 lane 1)、 M eWo細胞(lane 2)、手術時に採取したヒトメラノ ー マ細胞 (lane 3)、 色素性母斑細胞(lane 4)において70-kDaの蛋白バンドとして認められた。
3• 4

LTC 4合成酵索活性

LTC4合成酵素活性は、 皮廣科手術時に採取したヒトメラノ ー マ細胞およびヌ ー ドマウス移植ヒ
ト メ ラ ノ ー マ 細 胞 に お い て、 大部分はの

図2 lmmunoblot analysis using an anti-LTA, hydrolase
antibody. The supernatants (100,000 x g, 1 h; 10 オgprotein in each lane) from guinea pig lung (lane 1) ,human melanoma cell line (MeWo cell) (lane 2) ,malignant melanoma cells (lane 3) and nevus
pigmentosus cells (lane 4) were separated on 12%
SDS-polyacrylamide gel and electrophoreticallytransferred to a nitrocellulose membrane. The proteins
were then immunostained using an anti-LTA, hydrolase
antibody.

Microsome分画(100,000 X g pellet、 1 hr)に局在したが、 一部は10,000 X g pelletの分画にも局在した（表2)。MeWo細胞のMicrosome分画とLTA4とによる反応産物を逆相HPLCで解析すると 、Microsome分画の量の増加とともにLTC4も表2 Subcellular Localization of LTC, Synthase in Human Melanoma Cells
MeWo cells

Melanoma cells(from surgical specimen)

Specific activity (nmol/min/mg protein)
Homogenate

800 x g pellet
10,000 x g pellet
100,000 x g pellet
100,000 x g supernatant

N.D.
N.D.

0.65士0.03
1 88士0.32

N.D.

0 42士003
0.26士0.08
0.19 土0.02
1.62土 0.06

N.D.

Cultured cells (MeWo) and tumor cells were homogenized, and the subcellular fractions
were examined for LTC, synthase activity. Specific activity values represent the mean土SE of 3 experiments. N.D. = not detected.
- 61 -

増加した（図3)。 LTD1 は認められなかった。一れた。 このことは、 LT いを LTD4 に変換する酵

よる反応産物には LTいと LTD1 の両方が認めらーゼがモルモット 肺には存在しても、 ヒトメラ

方 、 モルモット肺のMicrosome分画と LTふとに素である膜結合型y ー グルタミルトタンスフェラ

10µI

0µI
E UQ8N • �
ueq,
osqv

Guinea pig lung20

10Time [min)

40µI

20µI
E uOBZ oou•q,
osqv

E uOBZ eoueqJ
osqv

20

゜

゜

10

Time (min)

;1c、

PGB,

10

20

Time (min)10Time (min)
図3 Reverse phase HPLC profiles of products formed from the incubation of the microsomal fraction(100,000 x g pellet) of cultured melanoma cells (MeWo cells) incubated with LTA,. LTC, isproduced in a dose-dependent manner. LTD, was not detected. In contrast, both LTC, and LTD,are produced by the microsomal fraction of guinea pig lung, indicating that the microsomal fractionof MeWo cells lacks the membrane-bound g-glutamyl transferase that converts LTC, to LTD,表3. Effects of Various Compounds on LTC, Synthase Activity in MeWo cells
Compound
None
CDNB (10 mM)
NEM (10 mM)
MK-886 (0.01 mM)
MK-886 (0.1 mM)
MK-886 (1 mM)
MK-886 (10 mM)

LTC, synthase activity (nmol/min/mg protein)
1.62士0.06
1.59土0.06
1.61土0.03
1.15土0.00
0.66土0.01
0.20士0.01
N.D

Effects on LTC, synthase activity in the microsomal fraction (100,000 x gpellet 1 h ) of MeWo cells by various compounds. LTC, synthase activity,
which was assayed as described in Materials and Methods, was inhibited byincreasing concentrations of MK-886. In contrast, 10 mM of CDNB and NEM
had no effect on the production of LTC,. Values are expressed as the mean
土SE of three experiments. N.D. = not detected.
- 62 -

炎症後色素沈藩におけるエイコサノイドによるメラノサイト活性化機構の解明

0採取したヒトメラノ ー マ細胞およびヌ ー ドマウス

このMeWo細胞のMicrosome分画に局在する

移 植 ヒ ト メラ ノ ー マ細胞において、 大部分はLTC4合成酵素の性質を調べる と、 酵素活性はMicrosome分画(100,000 X g pellet 、 1 hr) に局

MK-886で濃度依存性に阻害されたが、lOmMN

在した（表2)。MeWo細胞のMicrosome分画と-ethyl maleimide やlOmM CDNB、 過剰のグルタ

LTA1とによる反応産物を逆相HPLCで解析する

チオンの添加には影響を受けなかった（表3)。

と、Microsome分画の量の増加とともにLTC4のノ ー マ細胞には欠如していることを意味する(23)4考

産生量は増加したが（図3) 、LT D 1の産生は認め察られなかった。 一方、 モルモット 肺のMicrosome

LTB 4 は浪度依存性に培稲新生児ヒトメラノサ(1

分画とLTA4とによる反応産物にはLTCは�LID1

4 は培養新の両方が認められた。 このことは、LTC1をLID1

生児ヒトメラノサイトの細胞分裂を促進する と報に変換する酵素である膜結合型y ーグルタミルト

告されている (11. 13. 151。従って、これらのロイコ

タンスフェラー ゼがモルモット肺には存在しても、トリエンは種々の皮蘭疾患における炎症後色素沈

ヒトメラノ ー マ細胞には欠如していることを意味

着の重要なメデイエ ー ターでる かもしれない (10、する(2:1)。 このMeWo細胞のMicrosome分画に局

14. 16)。さらにメラノサイト自体によって産生され在する LTC4合成酵素の性質を調べると、酵素活

たロイコトリ エンは表皮のケラチノサイト、他の性はM K-8 8 6 で濃度依存性に阻害されたが、メラノサイト、真皮の好中球、 リンパ球、 マクロlOmMN-ethyl maleimideやlOmM CDNB、 過剰

ファ ー ジ 、 肥満細胞 、 線維芽細胞、 内皮細胞にものグルタチオンの添加には影響を受けなかった

作用する と考えられる。 このことからも、 メラノ（表3)。 MK-886 はロイコトリエン合成 の阻害

サイト自体のロイコトリエン産生を詳しく研究す剤(29)であり、 かつLTC1合成酵素活性をも阻害ることは重要であろう。Abdel-Malekら(28)の若する(30)。 N -e ht yl maleimide はMicrosome分画

干の報告があるものの、ヒトメラノサイトのロイに局在するグルタチオン— s— トランスフェラ ー ゼ

コトリエン合成 についての 研究は乏しい。 それを活性化する(31)、 そしてCDNB はMicrosome分

で、今回、 私達はロイコトリエンの メラノサイト

画に局在するグルタチオン— s— ト ランスフェラ ーへの影響ならびにメラノサイト自体のロイコトリ

ゼの拮抗阻害剤である(32)。 この結果から、 ヒト

エン産生能を検討してみた。ヒト正常メラノサイ

メラノ ー マ細胞において、 LTA1からLTC1へのトを大量に調整する の は困難なので、私達は代わ変換に関与する主たる酵素はMic rosome分画にイトを活性化し 2. 141、 LTC 4 と LT D

りにヒトメラノー

マ細胞株としてMeWo cell を用局在する グルタチオン— sー トランスフェラ ー ゼやしヽた。

非特異的なグルタチオン— s— トランスフェラ ー ゼ

LTふ水解酵素活性は、 皮膚科手術時に採取しではなく、 LTC1合成酵素である と考えられる 。

たヒトメラノ ー マ細胞およびヌ ー ドマウス移植ヒ

これについては、LTC1合成酵素に対する特異抗

トメラノ

ー

マ細胞のCytosol分画に局在した（表体を用いた研究を継続中である(30 )。

1)。 これは抗LTA4水解酵素抗体を用いた免疫

さて、 LTA1水解酵素とLTい合成酵素の基質

組織化学(data not shown) 、ウエスタンブロッテ

であるLTA1はどのように合成 される かという問

ィング法においても確認できた（図2)。これらの題が残っている。 私達の予備的な実験結果では、

結果は、従来のLTA 4 水解酵素はモルモットのほ

アラキドン酸からLTA4への変換に関与する酵素一である5 ー リポキシナ ー ゼ活性はヒト末梢白血球

ぼ全ての細胞、組織に認められるという報告と致する(17. 21 )では認められたものの、 MeWo細胞では認めら

0

一

方 、 LTC4合成酵素活性は、 皮閲科手術時にれなかった。 これは抗5 ー リポキシナ ー ゼ抗体を

- 63-

用いた免疫組織化学、 Western Blotting 法 、 さら

levels of arachidonic acid-derived inflammatoryに、 5

mediators and histamine in atopic dermatitis andー

リボキシゲナーゼ遺伝子をコードするpsoriasis. J Invest Dermatol 86: 105-108, 1986

cDNAの塩基配列に基づいて合成した適切なプラを用いた Rr-PCR 法によっても確認でき

4. R u z i c k a T : T h e p h y s i o l o g y a n d

た。 最近、 ケラチノサイトに 5 ー リポキシナ ー ゼ

pathophysiology of eicosanoids in the skin.

活性が存在するかどうかについては種々の論議がEicosanoids 1: 59-72, 1988

ある。もし、 メラノサイトやケラチノサイトに 5

5 . Ikai K, Imamura S: Role of eicosanoids in the

ゼ活性が存在しないということでpathogenesis of atopic dermatitis. Pros Leuko

イマ

ー

ー

リポキシナ

ー

あれば 、 好中球などのような 5 リポキシナ ー ゼ

Ess Fatty Acids 48: 409-416, 1993

活性が存在する細胞からLTA4 がメラノサイトや

6 . Samuelsson B:Leukotrienes: Mediators of

ケラチノサイトに何らかの機構で移動し、 LTA4

immediate hypersensitivity reactions and

水解酵素や LTC4 合成酵素により LTB4 や LTC4

inflammation. Science 220:568-575, 1983が生成すると仮定されている (33 、 34. 35) 。 このとこ

7 . Lewis RA, Austen KF, Soberman RJ:

ろの機構は興味深いが、不明な点も多い。今回のLeukotrienes and other products of the 5-ー

研究結果はほんの第一歩であり、私達はメラノサ

lipoxygenase pathway. New Eng J Med 323: 645-ー

イトとエイコサノイド、アラキドン酸カスケ ドに関係する酵素、エ イコサノイド受容体の機能 、

655,1990
8 . Janssen TU, Tomic I, Specht E, Beilecke U,

細胞分布を明らかにし、これに基づいて各種炎症

Habenicht AJ: The arachidonic acid cascade,性皮膚疾患の炎症後色素沈着の機構を解明し 、 治

eicosanoids, and signal transduction. Ann NY

療に結び付けていきたいと考えている。

Acad Sci 733: 325-334, 1994

5

追9 . Henderson WR: The role of leukotrienes in記

inflammation. Ann Intern Med 121: 684-697, 1994

抗LTA4 水解酵素抗体を提供していただいた東

10.

Tomita Y, Maeda K, Tagami H: Leukotrienes

京大学医学部第 2 生化学教室の清水孝雄教授に感and thromboxane B2 stimulate normal human

謝の意を表する。また、上記の結果は下記の論文

melanocytes in vitro: possible inducers ofで発表した。

postinflammatory pigmentation. Tohoku J Exp

Okano-Mitani H, Ikai K, Imamura S: Human

Med 156: 303-304, 1988

melanoma cells generate leukotriene B4 and C4

11. Morelli JG, Yohn JJ, Lyons MB, Murphy RC,

from leukotriene A4. Arch Dermatol Res 290:in

Norris DA:Leukotriene C4 and D4 as potent

press,1997.

m i t ogens for cultured human neonatal
melanocytes. J Invest Dermatol 93: 719-722, 1989
12. Morelli JG, Hake SS, Murphy RC, Norris DA:

引用文献
1 . Ikai K, Danno K, Horio T, Narumiya S: EffectLeukotriene B4-induced human melanocyte

of ultraviolet irradiation on mast cell deficient W/

pigmentation and leukotriene C4-induced humanv

W mice. J Invest Dermatol 85: 82-84, 1985

melanocyte growth are inhibited by different

2 . Ikai K, Danno K, Horio T, Narumiya S: Ear

isoquinolinesulfonamides. J Invest Dermatol 98:

swelling in response to UVB irradiation. Arch55-58, 1992

Dermatol Res 278: 455-448, 1986

13. Morelli JG, Kincannon J, Yohn JJ, Zekman T,

3 . Ruzicka T, Simmet T, Peskar BA, Ring J: Skin
- 64 -

Weston WL, Norris DA: Leukotriene C4 and炎症後色素沈箭におけるエイコサノイドによるメラノサイト活性化機構の解明

TGF-alfa are stimulators of human melanocyte
migration in vitro. J Invest Dermatol 98: 290-295,

Biophys Res Commun 135: 139-145, 1986
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