ごあいさつ
昨年暮れは日本から３年連続、しかも同時に２人のノーベル賞受賞者が出て長期経済低迷の中で明るい話題として騒がれたのはまだ記憶に新しいところです。ノーベル化学賞を受賞した白川、野依、田中氏の３人はいずれも３０歳前後の研究が受賞対象となっており、その成果は産業に活かされています。また物理学賞を受賞した小柴氏の研究には民間企業の研究成果が重要な役割りをしたとのことですが、これらの受賞者の話の中で印象に残るのは自由な研究ができる環境が重要であること、常識にとらわれない思考を持
ち失敗と思える実験の中でも真実を追究する姿勢が大事であるという言葉です。
もう一つ印象に残るできごととしては J. D. ワトソンと F. H. C. クリック
が DNA の二重らせん構造モデルを提唱してから今年は５０年目となるそうですが、最近の遺伝子技術の発展の中で話題となったことのひとつにはヒトの全遺伝子情報解読が完了したことであり、一方ではクローン技術で生まれた
羊の「ドリー」が通常の羊の寿命の半分である６歳で安楽死させられたことです。こうした生命科学の本質的解明には、基本的な技術のブレークスルーがあったとしても、その完成にはまだまだ究明しなければならないことが多いということを再認識させられたということです。
私どものコスメトロジー財団の研究助成事業においても、より技術の完成を目指す研究と共に、若手研究者の萌芽的な研究や独創的な研究にも目を向けて助成を行ってきましが、今後とも化粧品学の発展を目指して更なる努力を継続していきたいと考えております。
今後とも、皆様方の益々のご協力とご支援をお願い申し上げます。

平成 15 年 8 月
財団法人

コスメトロジー研究振興財団
理事長

目

次

■ ごあいさつ■研究報告
Ⅰ．素材、物性に関する分野
・逆ミセルの微細構造を利用した生理活性物質内包型ナノカプセルの創製………………………………… 2

小 野

九州大学大学院工学研究院
・水分子の移動とその速度制御のための分子膜の開発………………………………………………………… 8
九州大学大学院理学研究院 師 井・1C4 配座のグルコース環状六面体，反転シクロデキストリンの創製研究

・４位置換レゾルシノール誘導体のメラニン生成抑制効果

義清…………………………………12

関西学院大学理工学部

山 田

英俊

……………………………………………………16

九州大学農学研究院森林資源科学部門 清 水・カンキツ精油の有する生体作用の生化学的解析

努

邦義………………………………………………………………23
高知大学農学部 受 田・脂質−高分子界面活性剤混合系による新規分散系“液晶エマルション”の形成…………………………28

京都大学大学院薬学研究科 中 野
・光で透過制御可能な人工ベシクルを形成する新規多鎖型両親媒性化合物の開発

浩之
実…………………………33

大阪大学大学院工学研究科 中 辻洋司

Ⅱ．生体作用、安全性に関する分野
・ヒト皮膚における遊離脂肪酸の動態に及ぼす皮膚常在細菌ならびに化粧品の影響に関する研究
東京薬科大学薬学部 小 谷
・紫外線及び化学合成化合物のヘアレスラット皮膚に対する障害作用及びその防御

谷學……………………………………………………………………50
群馬大学医学部第２内科 倉 林

・発生再生の分子メカニズムを応用した人工皮膚作製

・紫外線防御因子メタロチオネインのヒノキチオールによる合成誘導とその意義

俊博…………………………57

東北大学大学院薬学研究科 永 沼・Wnt シグナルによるメラニン産生の制御機構の解析

正彦…………………………………………………………53
秋田大学医学部生化学第一講座 杉 山章…………………………………………………………62
東北大学大学院医学系研究科 武 田

・皮膚におけるアクアポリン３の発現調節

明………………………46

城西大学薬学部城西大学生命科学研究センター
・老化マウス klotho における皮膚変化の検討

………40

和久

………………………………………………………………………67
自治医科大学薬理学教室 石 橋賢一

目・接触皮膚炎への p38 mitogen-activated protein kinase の関与機構の解明

次…………………………………71

千葉大学大学院医学研究院

粕 谷

善俊

Ⅲ．精神、文化に関する分野
・がん患者への「化粧」支援プログラムの日本への適用可能性に関する研究………………………………78

東京大学大学院医学系研究科 高 橋
・化粧文化史の変遷と流行した化粧の受け入れ方についての研究

都……………………………………………83

武庫川女子大学大学院家政学研究科 玉 置
・日本の化粧意識の近代化をめぐる比較史的考察──清潔習慣の展開をめぐって…………………………95

奈良女子大学生活環境学部 鈴 木・痴呆高齢者の表情分析と主観的 Quality of Life の評価手法に関する研究

育子
則子…………………………………99

三重県立看護大学

鈴 木 みずえ■記念講演
平成 14 年度記念講演 『人のこころと遺伝子のはたらき』 ……………………………………………………107
東京大学大学院総合文化研究科 石 浦■コスメトロジー研究雑感■ 付章一………………………………………………………………………………………………121

録
平成 14 年度事業報告
役員一覧………………………………………………………………………………………………135………………………………………………………………………………………………………………138逆ミセルの微細構造を利用した生理活性物質内包型ナノカプセルの創製
九州大学大学院

小

工学研究院化学工学部門

野努

Reversed micelles and water-in-oil microemulsions can disperse nano-size water droplets in a polar solvents. The nanowater droplets stably solubilize biomolecules such as proteins, peptides and DNA, and the size is controllable by adjustingwater contents. On the other hand, the sol-gel method is a low temperature process widely used to produce opticallytransparent, microporous glasses by the polycondensation of liquid phase alkoxide precursors. Reversed micellar solution
facilitates forming nano-size glasses in the hydrophilic core containing bioactive molecules. The hydrophilic nano sphereis favorable for solubilizing biomolecules and for hydrolysis of the alkoxide precursors. To create a novel nano carrier forbioactive materials, therefore, my strategy is based on the sol-gel encapsulation of the nano-size water droplets solubilizing
biomolecules. Transmission electron microscope (TEM) observation shows that nano particles can be produced by the
AOT and NP-5 reversed micellar droplets. The monodispersed particles with 10 - 20 nm diameter were obtained. However,in fact, almost all the immobilized protein preparations we obtained are a micro-size aggregate of the nano particles. In
addition, the protein encapsulation profiles indicate that proteins solubilized in reversed micelles are completely incorpolated
into them with the growth of silica particles. The efficiency of protein encapsulation into the nano silica particles depends
on the water droplet pH, Wo value (= [water]/[surfactant]), and the composition of alkoxide precursors. It seems thatthese factors affected not only the surface condition of cytochrome c but also the sol-gel processing. The encapsulated
cytochrome c and subutilisin Carlsberg in nano silica particles retain their catalytic activities. Subtilisin Carlsberg entrappedin nano silica particles shows 40-fold greater transesterification activity than any other immobilized subtilisin Carlsberg.
Protein encapsulation in silica gel prevents from denaturing protein by organic solvent. Molecular isolation of proteins in
nano silica particles enhances the effective enzyme quantity and the surface area to contact with bulk substrate solution.
These effects facilitate the high performance of subtilisin Carlsberg entrapped in nano silica particles for transesterification
reaction in organic media. Hereafter we will develop new nanocapsules including biomolecules with high dispersibility
and good reactivity.

１． 緒

ドラッグキャリアとして、またナノカプセル表層へのター

言

ゲティング機能の付与することにより、目的細胞への特異

生命活動を司る酵素や核酸はナノレベルの機能性分子で的な遺伝子導入やサイトカイン放出が期待できる２）。

あり、医療、美容、触媒など今後更に広い範囲で利用されこのようなナノキャリアを創製するために、筆者は有機ている。そのため、これらの極めて特異的な機能を様々な溶媒中で特殊な界面活性剤が自己組織化によって形成する

媒体へ安定かつ高効率に適応させるための手法は、今後重逆ミセルのナノオーダーの微小水滴核に着目し、この微小要な技術になると期待される。近年、「ナノテクノロジー」

水滴核にバイオ分子を可溶化した後に外部からマトリクスと呼ばれる分野が世界的規模で注目されるようになってい形成因子となるシリカ前駆体を投入し、高効率でバイオ分

るが１）、本研究もナノスケールのバイオ分子を効率よく使子を包括したナノカプセル調製法を提案している。既往のいこなすためのデザインという面で、広義のナノテクノロ

研究において、逆ミセル内で金属アルコキシドなどのゾルジーと言えるであろう。

−ゲル反応を行うことによって、金属触媒を担持するシリ従来の生理活性物質包括担体は小さいものでもマイクロカ微粒子３､ ４） や半導体への応用を目指した金属酸化物のスケール（10 - ６m オーダー）の担体であり、回収・再利用性

ナノ微粒子調製５､ ６）あるいは単なるナノシリカ微粒子調製に長けてはいるものの極めて高価なバイオ分子を効率よく

７〜 10）

利用することには十分でなく、生体への適応範囲も限定さ

ル−ゲル反応は穏和な条件で生体物質を包括固定化できるれてしまう。これに対して、ナノカプセルはそのサイズか手法として知られている 11､12）。それ故、生体分子の可溶

ら角質層間隙へも浸透できるほどであり、安定に包括した化能力に優れた逆ミセルの微小液滴 13）をゾル−ゲル反応のツールとして利用されている。また一方、低温ゾでカプセル化することによって、極めて効率的な生体分子
Development of nano particles
encapsulating bioactive molecules by using
microstructure of revesed micelles
Tsutomu Ono
Department of Chemical Engineering,
Faculty of Engineering, Kyushu University

包括法となることが期待される。
本研究では、逆ミセルに可溶化したタンパク質分子がいかにして効率よくナノカプセルに包括されるかを、AOT 逆
ミセルの微小液滴におけるシトクロム c の包括挙動について検討した。また包括されたタンパク質（酵素）の触媒特性に関しては、NP-5 逆ミセルを用いて調製したナノシリ－2－

逆ミセルの微細構造を利用した生理活性物質内包型ナノカプセルの創製

カ包括 subtilisin Carlsberg を用いて Wo 値の影響や他のトクロム c の酵素活性を測定した。

固定化酵素との比較を行った。

２． 実

２−５．包括 subtilisin Carlsberg の酵素活性測定

験エステル交換反応実験は、0.2M 酢酸ビニルと 0.02M ベ

２−１．試薬ンジルアルコールを含むシクロヘキサン溶液中へ調製し包括実験のモデルタンパク質として Horse hea r t cyto-

たナノカプセル包括 subtilisin Carlsberg 標品を分散させ、chrome c（分子量 12,384，Sigma 社製）、ナノ微粒子包括固定化

反応温度 35℃で往復振盪器で振盪させながら行った。所

酵素の実験のモデル酵素として Bacillus licheniformis 由

定反応時間後の試料中の生成物濃度をガスクロマトグラフ

来の subtilisin Carlsberg を精製等をせずそのまま用いィー（Shimadzu GC-14B）によって測定して初期反応速た。シリカゲル前駆体としては、東京化成工業社製のテト

度および反応率を求めた。

ラメトキシシラン（TMOS）、メチルトリメトキシシラン（MTrMOS）、ジメチルジメトキシシラン（DMDMOS）、

２−４．透過型電子顕微鏡（TEM）による観察

アミノプロピルトリメトキシシラン（APTrMOS）を用い

ゾルゲル反応を開始して 24 時間後の溶液サンプルをマた。また、逆ミセル構成因子である界面活性剤には、ジイクログリッド上の垂らし、十分乾燥させた後に、日本電-2- エチルヘキシルスルホコハク酸ナトリウム（AOT）と子製透過型電子顕微鏡（JEM-200CX，加速電圧 200kV）

非イオン性界面活性剤であるポリエチレングリコールモノを用いて観察を行った。

-4- ノニルフェニルエーテル（NP-5）を用いた。酵素活３． 結性測定用の基質には、東京化成工業社製の（2,2'-Azinodi（2-Ethyl Benzthiazoline Sulfonic Acid））Diammonium Salt

果３−１．シトクロムｃのナノカプセル中への包括（ABTS）、酢酸ビニル、ベンジルアルコールを用いた。

シトクロム c を溶解させた逆ミセル内相の pH を 4, 8,
12 としたときのシトクロム c の包括挙動を Figure 1 に示

２−２．タンパク質含有ナノ微粒子の調製した。また、それぞれの pH で調製されたシトクロム c 含タンパク質に Tris-HCl 緩衝液と 250mM AOT/ イソオ

有シリカ微粒子の TEM 写真を Figure 2 に示した。

クタン溶液あるいは NP-5/ シクロヘキサン溶液を添加し、Fig.1 より、pH が高くなるほどシトクロム c の包括が早所定の Wo（=[H2O]/[Surfactant]）値となるタンパク質含くなることが明らかである。また、調製時の pH が高くな

有逆ミセル溶液を調製した。シトクロム c の最終的な溶るにつれて、得られたシリカ微粒子の粒径も大きくなるこ

液濃度は 0.2 ㎎ / ㎖になるように、subtilisin Carlsberg はとが TEM 観察の結果明らかとなった。（Figure 2）。上記

10 ㎎ / ㎖となるように設定した。これらの逆ミセル溶液

pH 領域では、シトクロム c の電荷状態も大きく変化してへ 150mM となるようにシリカ前駆体を溶解させ、恒温往

微細空間を形成する界面活性剤である AOT との相互作用

復振盪器（25℃）で所定の反応時間インキュベーションすにも大きな影響を与えると考えられる。しかしながら、いることによってゾル - ゲル反応を進行させてシリカ微粒子の成長を促した。所定時間後、3,500rpm, 10min の遠心分離によって調製されたシリカ微粒子を沈殿物から回収した。
シトクロム c の包括率は、このときの上澄み液のシトクロム
c 濃度とシリカ前駆体投入前の逆ミセル溶液中のシトクロム c
濃度と比較して算出した。シトクロム c 濃度の測定は、分光光度計（Shimadzu UV-2500PC）により 408 nm の吸光度より求めた。遠心分離によって回収されたナノシリカ微粒
子包括 subtilisin Carlsberg は、24 時間凍結乾燥させ、得られた標品を各種水分活 a W= 0.44 を有する飽和 KCO3 溶
液で 24 時間水和処理して反応実験に用いた。

２−３．包括シトクロム c の酵素活性測定
遠心分離によって回収したナノカプセル包括シトクロム
c は、24 時間凍結乾燥させ、得られた標品を所定濃度のABTS 水溶液へ再分散させて、過酸化水素添加後における ABTS の吸光度の時間変化から、ナノカプセル包括シ

Figure 1. Effect of pH on the cytochrome c encapsulation in
nano-silica particles prepared by AOT reversed micelles.

−3−

Figure 2. TEM images of nano silica particles prepared by
AOT reversed micelles: (A) pH 4, (B) pH 8, (C) pH12.

Figure 3. Effect of Wo value, the molar ratio of water to surfactant in reversed micellar solution, on the cytochromec encapsulation in nano-silica particles prepared by AOT
reversed micelles.

ずれの pH においてもほぼ 100% のシトクロム c がシリカ微粒子内に包括されており、シトクロム c 非存在下でもほ逆ミセル液滴を利用して、subtilisin Carlsberg を包括しぼ同様の粒子成長過程を示すことから、各 pH におけるシたナノシリカ微粒子を調製した。NP-5 逆ミセルによってトクロム c の包括挙動は、主にシリカゲル微粒子の成長速調製されたナノシリカ微粒子は、AOT 逆ミセルで調製さ度によって支配されていると考えられる。

れたナノシリカ微粒子に比べて単分散性が高く、本実験でFigure 3 にはシトクロム c の包括率に及ぼす Wo 値の影

は平均粒径が約 13 nm の単分散シリカ微粒子が調製でき響を示した。溶液中の界面活性剤濃度に対する水分子濃度

る条件で subtilisin Carlsberg を包括した。酢酸ビニルととして定義される Wo 値は、逆ミセル溶液の特徴を示す数

ベンジルアルコールのエステル交換反応において、同量の値としてしばしば用いられる。界面活性剤濃度一定な逆ミ

subtilisin Carsberg を用いて調製したその他の固定化酵素

セル溶液中で水分量が増加すると（すなわち、Wo 値が増に比べて、ナノシリカ包括 subtilisin Carlsberg では約 40

加すると）、逆ミセルは各分子集合体の数を増やすのでは倍ほど初期反応速度が高いことが明らかとなった（Figure

なく、分子集合体が抱える微小水滴核の径を増加させるこ4）。また Fig.4 の挿入図より、通常の酵素反応と同様の反とになる。既往の実験事実より、Wo 値と逆ミセル半径に応挙動を示し、24 時間で約 80％近くの生成物を与えてい14）

は一次の相関があることが知られている 。本実験結果では、ることも明らかである。
粉末酵素よりも凍結乾燥処理で有機溶媒中での酵素活性

Wo 値が小さい場合に、
すなわち逆ミセルのサイズが小さい場を大きく向上することができるという報告 15, 16）もあるが、ナ合に、より迅速にシトクロム c の包括が達成されている。
また、無機シリカ前駆体である TMOS と有機シリカ前駆

ノシリカ包括酵素はそれよりも非常に高い酵素活性を示すこ

体 で あ る MTrMOS や DMDMOS あ る い は 表 面 電 荷 をとができた。また、セライトのような無機担体に吸着させた

カチオン性に変えるアミノ基含有シリカ前駆体である

場合よりも高い酵素活性を示し、さらに酵素なしで調製した

APTrMOS を混合して調製したハイブリッドナノシリカ

ナノシリカ微粒子にその後酵素を吸着させたナノシリカ微粒

カプセルに関する検討も行ったが、シトクロム c 包括挙動

子吸着 subtilisin Carlsberg よりも大幅に高い初期反応速にはほとんど影響を与えなかった。さらに、包括されたシ

度を得たことから、ナノシリカ微粒子内へ包括することによトクロム c は、ナノカプセル内の包括後もペルオキシダーって有機溶媒による失活を抑制されていることが酵素活性

ゼ様の酵素活性を十分に維持していることが、ABTS をの大幅な向上に影響していると考えられる。さらに、N P-5

用いた実験より明らかとなった。

逆ミセル溶液中における均一反 応系よりもナノシリカ包 括
subtilisin Carlsberg の不均一反応系の方が触媒活性の点で３−２．ナノカプセル包括 subtilisin Carlsberg の触媒特性
非イオン性界面活性剤である NP-5 によって形成された勝っているところは、酵素分子への基質のアクセシビリティーが原因になっていると思われる。逆ミセルの液滴中へ可溶−4−逆ミセルの微細構造を利用した生理活性物質内包型ナノカプセルの創製

Figure 5. TEM images of the aggregate of nano silica particles prepared by NP-5 reversed micelles.
Figure 4. Transesterification activity of sublitilin Carlsberg immobilized by various method. Modes of immobilization of sublitisin Carlsberg: a, without immobilization (powder enzyme);b, lyophilized from aqueous buffer; c, solubilized into reversed
micelles; d, attached onto Celite 545; e, attached onto nanosilica particles; f, encapsulated in nano silica particles. Inset,
the time course of the product concentration from transesterification by subtilisin Carlsberg encapsulated in nano silica
particles are shown. Initial concentration of vinyl acetate andbenzyl alcohol are 0.2 M and 0.02 M, respectively.

化した subtilisin Carlsberg は、周囲を水と界面活性剤層で覆われているために求核種であるベンジルアルコールの接近が強く抑制された結果、エステル交換活性はナノシリカ包括subtilisin Carlsberg よりも低くなったと推察される。上記のように有機溶媒による失活抑制は、ナノシリカ包括 subtilisin
Carlsberg が高い酵素活性を示す大きな要因のひとつと考えられるが、ナノシリカ微粒子に酵素を包括することでさらにもうひとつの大きな効果が得られていることも示唆されている。
Fig u re 5 は遠心分離によって回収された凝集物を T EM で観察したものであり、多数のナノシリカ微粒子が連結して多孔Figure 6. Effect of water content, Wo, on the transesterification activity of sublitilin Carlsberg encapsulated in nanosilica particles.

性の凝集物となっていることがわかる。この結果から、ナノシリカ包括酵素は、膨大な表面積を獲得することで埋没によ

解とその加水分解によって生じるシラノール基間の重縮合反る酵素の無効化を防ぎ、酵素へのアクセシビリティーも向上

応によって三次元シリカマトリックスが形成され、そのうち、させたことも今回の活性向上の大きな要因であると考えるこ重縮合反応はアルカリ性において促進されることが知られてとができる。

いる。従って、今回得られた実験結果より、シトクロム c のFigure 6 ではナノシリカ包括 subtilisin Carlsberg のエス

包括挙動はシリカゲルの形成と密接に関係していることが示

テル交換活性に与える微粒子調製時の Wo 値の影響を示し唆された。逆ミセル液滴内の pH が高くなるにつれて、ゾルた結果である。その結果、Wo<5 においては極めて低いエス−ゲル反応の進行が促進され、それによってシリカ粒子の成テル交換活性を示した。これに対して、Wo>5 で調製された長が進むとともに、逆ミセルの液滴交換時におけるシリカ粒

ナノシリカ包括 subtilisin Carlsberg はほぼ一定の触媒活性子の合一も盛んになることが Fig. 2 より明らかである。シリを示している。

カ微粒子どうしの合一によって、溶液中に均一に分散できる

４．考

ナノシリカ微粒子としては存在が難しくなるが、タンパク質を察包括したシリカ微粒子凝集体（Fig. 5）はナノシリカ微粒子の一般に、ゾル−ゲル反応はケイ素アルコキシドの加水分性質を残しているため、固定化された酵素による反応実験の−5−

際にはその固定化状態が大きく反映された結果となった（Fig.

上を達成できれば、均一系でありながら生体分子とは異な4）。ナノシリカ包括酵素は、粉末酵素や凍結乾燥処理酵素

る表面特性を有した生体分子溶液を調製できる。固定化担と同様に有機溶媒中で不均一系を呈している。しかしながら、体に生分解性や徐放性のような機能を付与することによっ粉末酵素や凍結乾燥処理酵素が多数の酵素分子の凝集体でて、サイトカイン徐放特性を有した培地などの開発が可能あり埋没してるがゆえ有効に酵素機能を発揮できない酵素のとなる。

割合は極めて多いと考えられるが、ナノシリカ包括酵素のなお本実験結果から、生体物質の包括挙動はする逆ミセ

場合は各逆ミセル液滴中に酵素分子を分散して固定化されルの性質だけでなく、シリカゲル形成および成長挙動と深ており、得られた凝集体は多孔性の極めて大きな表面積をく関連していることが示唆されており、効率的な生体物質

有した固定化酵素となっている点で、ナノスケールで包括の包括方法に関してはさらなる詳細な検討が必要であろ

して効果が明瞭に現れている。

う。

また、逆ミセルの形状に大きく影響を与える水分量（Wo

生理活性物質内包型ナノカプセルは、そのサイズから皮値）は、包括挙動においては顕著な違いを示したが、包膚中の細胞層に対して効率よく浸透することが可能であ括された subtilisin Carlsberg の酵素活性にはそれほど大り、そこで内包する生理活性物質の効果を発揮させることきな影響を与えることはなかった。ただし、Fig. 3 およびが期待できる１）。それゆえ、本技術を利用して高機能性皮Fig. 5 の結果からみると、Wo=5 付近で包括挙動、酵素活

膚浸透キャリアの開発や生体内の患部へとドラッグターゲ

性ともに良好な結果が得られている。一般に、ゾル−ゲル

ティングを行うナノキャリアの開発へと研究を展開したい

反応が油水界面近傍で開始すると考えられており、タンパと考えている。

ク質周辺においてゾル−ゲル反応が進行することが可能な
逆ミセル径の小さな Wo =5 の系で最も効率的に包括が行（参考文献）

われているためだと推察されるが、現在のところその詳細

１） 川合知二 監修：図解 ナノテクノロジーのすべて，工については不明である。

業調査会

これより低水分量の逆ミセル液滴中でゾル−ゲル反応を

２） Lawrence MJ, Rees GD : Microemulsion-based media

行った場合には、シリカ微粒子の成長は小さく、凝集体をas novel drug derivery systems, Adv. Drug Derivery

形成するには不十分であったと考えられる。Wo<5 の逆ミ

Rev., 45, 89-121, 2000.

セルにおいては、液滴中の水分子はほとんどが界面活性剤

３） Blum J, Avnir D, Schumann H : Sol-gel encapsulatedによる相互作用によって束縛されており、通常の水分子とtransition-metal catalysts, 1999, 32-38, 1999.

異なる性質を有していると言われており、ゾル−ゲル反応４） K i s h i d a M , H a n a o k a T , K i m W Y , N a g a t a H ,の進行にも何らかの影響を及ぼしていると考えられる。

Wakabayashi K : Size control of rhodium particles

５．総of silica supported catalysts using water-in-oil

括microemulsion, Appl. Surf. Sci., 121/122, 347-350,
1997.

本年度の研究成果より、逆ミセルのナノスケールの微細構造を利用することによって、生体分子であるタンパク質

５） Kawai T, Usui Y, Kon-no K : Synthesis and growth

をナノシリカ微粒子内に包括することが可能であることがmechanism of GeO2 particles in AOT reversed micelles,

明らかとなった。さらにナノシリカカプセル内に包括されColloids Surf. A, 149, 39-47, 1999.

たタンパク質は本来の触媒機能を保持しており、ゾル−ゲ

６） Pileni MP, Tanori J, Filankembo A : Biomimetic

ル反応を経て安定にシリカ微粒子内に包括固定化されるこ

strategies for the control of size, shape and self-とが明らかとなった。しかしながら、実際に得られている

organization of nanoparticles, 123/124, 561-573, 1997.

タンパク質固定化シリカゲルは、これらのナノカプセルの

７） Arriagada FJ, Osseo-Asare K : Phase and dispersion

凝集物であり、溶液中に均一に分散できるほどの細かなサ

stability effects in the synthesis of silica nanoparticles

イズではないことも同時に明らかとなった（Fig. 5）。たin a non-ionic reverse microemulsion, Colloids Surf., 69,

だ、多孔性の固定化酵素としては極めて有効であることが105-115, 1992.

subtilisin Carlsberg の触媒特性から示された。今後はナノ

８） Arriagada FJ, Osseo-Asare K : Synthesis of nanosize

カプセル形成後の各粒子間の凝集を巧みに制御することがsilica in Aerosol OT reverse microemulsions, J. Colloid

必要であり、目的に応じてナノカプセルのモルフォロジー

Interf. Sci., 170, 8-17, 1995

を設計することも極めて重要であることが示唆されたこと

９） Osseo-Asare K, Arriagada FJ : Growth kinetics ofとなる。生理活性物質内包型ナノシリカカプセルの表面化

nanosize silica in a nonionic water-in-oil microemulsion:

学修飾によって凝集力の抑制を行い、溶液への分散性の向A reverse micellar pseudophase reaction model, J.

−6−

逆ミセルの微細構造を利用した生理活性物質内包型ナノカプセルの創製

13） Ono T, Kawakami K, Goto M, Furusaki S : Catalytic

Colloind Interf. Sci., 218, 68-76, 1999
10） Arriagada FJ, Osseo-Asare K : Synthesis of nanosize

oxidation of o-phenylenediamine by cytochrome csilica in a nonionic water-in-oil microemulsion: Effects

encapsulated in reversed micelles, J. Mol. Catal. B., 11,of the water/surfactant molar ratio and ammonia

955-959, 2001.

concentration, J. Colloid Interf. Sci., 211, 210-220,

14） Pileni MP, Zemb T, Petit C : Solubilization by
reverse micelles: Solute localization and structure

1999.
11） F u r u k a w a S , O n o T , I j i m a H , K a w a k a m i K :perturbation, Chem. Phys. Lett., 118, 414-420, 1985.

Enhancement of activity of sol-gel immobilized lipase in15） Klibanov AM : Enzymatic catalysis in anhydrous

organic media by pretreatment with substrate analogues,

organic solvents, Trends Biochem. Sci., 14, 141-144,

J. Mol. Catal. B., 15, 65-70, 2001.

1989.

12） Edmiston PL, Wambolt CL, Smith MK, Saavedra16） Ke T, Klibanov AM : On Enzymatic activity in organic

SS : Spectroscopic Characterization of albumin andsolvents as a function of enzyme history, Biotechnol.

myoglobin entrapped in bulk sol-gel glasses, J. Colloid

Bioeng., 57, 746-750, 1998.

Interf. Sci., 395-406, 1994.

−7−水分子の移動とその速度制御のための分子膜の開発
九州大学大学院師

井

理学研究院化学部門

義清Evaporation rate measurement of water molecules across the air/solution interface covered by amphiphilic molecules
is quite valuable for a basic study on molecular transport across an interface. This can be made by using the remodeled
apparatus for a thermal gravitational analysis. The activation energy of water evaporation is quite useful to see theprocess through which evaporation takes place. This can be investigated by determining the temperature dependence of theevaporation rates. The amphiphiles examined were cationic, anionic, and nonionic ones to see if there exists any differencein effect on the rate among the kinds of soluble surfactants. The rate was also examined from the viewpoint of molecularsurface area of the amphiphiles at the air/solution interface derived from the surface excess obtained by surface tension vs.
concentration relationship. The effect of insoluble monolayer on the water evaporation was also examined using long chain
n-alkanols.
The evaporation rate of water molecules across three kinds of interfaces (an air/water interface(1), an air/surfactant
solution interface(2), and air/water interface covered by an insoluble monolayer(3)) was examined using the remodeled
thermogravimetric balance. There was no difference in both the evaporation rate and the activation energy between the first
and the second for three kinds of surfactant solutions not only below but also above the cmc. This means that the molecularsurface area from the Gibbs surface excess has nothing to do with the evaporation rate. In the third case, the insolublemonolayer of n-alkanols decreased the evaporation rate and increased the activation energy, indicating a clear difference
between an insoluble monolayer and a conventional adsorbed film of a soluble surfactant. The concentration profile of watermolecule in an air/liquid interface region was drawn using the equations derived by solving the Fix's second law. The profile
indicates that a definite layer just below the air/liquid interface of surfactant solution is made of water molecules only andthat the layer width is a few times the root mean square displacement(√2Dt ) of surfactant molecules. The width was foundto be longer than a few nm, judging from several relaxation times of kinetics of amphiphile molecules in aqueous systems andfrom a maximum evaporation rate of just purified water.

１．緒

価に手に入るため、改めて水の浄化、換言すれば水分子の言

分離・移動・精製についてミクロな分子レベルで詳細に検「液体の蒸発速度に及ぼす単分子膜の効果」に関する研討されていない。分子膜を介しての水分子の透過はマクロ

究は、古くは 1800 年代に遡る。水の有効利用は強く望ま

サイズのイオン交換膜による水の透過を更に一歩深めた研

れながらも、大量の水が蒸発によって失われている。そこで、究である。水分子の分子膜透過の速度制御が可能となれば1950 年代の初頭、蒸発速度を抑える研究が砂漠保有国で広範囲の分野で応用され且つ実用化の研究に大きく寄与で活発になり、単分子膜を用いて水の損失を 60％も抑えるこきるものと確信し、この研究を提案し、実験を開始した。

とに成功した。しかしながら、水面上の単分子膜は風によっ

幸いにも、コスメトロジー研究振興財団より研究助成金をて容易に流され、失われるので、この研究は以後衰退して頂き、本研究を更に発展させることが出来た。

いった。これまでの研究の対象は専ら水であり、貯水池の

２．実

水の蒸発を抑える研究が主であったが、それ以降果物の保験

湿、最近では稲作への利用（水の蒸発を抑え、水田の温度

水分子の蒸発速度の測定には、熱天秤（理学電気㈱、低下を防ぐ）まで非常に広範囲に渡る研究が進行中である。

Thermo Plus 2）を改良して用いた（Fig. 1）。蒸発表面に水分子は我々の身近に固体・液体・気体の３形態で多量及ぼす周辺効果がなるべく小さくなるように、面積の広に存在し、生命体の維持、環境の維持・浄化等に果たしていサンプルパン（0.739 ㎠）を用いた。試料には 150µℓ のいる役割は計り知れない。その重要性は空気と全く同様で水を用い、試料温度は ±0.1℃に制御した。水面上にできありながら、日本では身近にあまりに多量に存在し而も安る停滞水蒸気層をなるべく取り除くために清浄な乾燥空気

Development of Membrane for MolecularTransport of Water and Its Rate Control
Yoshikiyo Moroi
Department of Chemistry, Graduate
School of Sciences, Kyushu University

を 46.4 ㎖ min − 1 の流速で流した。この装置では、水の重量変化と温度変化を同時に追跡することが可能である（Fig.
2）。75％以上蒸発すると、重量変化は小さくなり直線から少しづつ上方にずれてくるが、これはパンの底に白金面が現れてくるためである。それ故に、重量変化が 50％迄の前半の直線部分を蒸発速度の決定に使用した。
活性剤には水に可溶性の３種類（陽イオン性には N-（1,1-−8−水分子の移動とその速度制御のための分子膜の開発

0Weight/mg

Flow Meter�

Thermobalance
Silica Gel�

80

w

-50

o

Filter�

100

WeightTemperature

Tem per atu re/ C

Sample�60

t40

slope = w/ t

-100

Air

20

Pump�

-150

Sulfuric Acid�

Fig.1 Schematic illustration of modified apparatus forthermogravimetry.

dihyroperfluoro octyl）-N,N,N-trimethylammonium chloride

0

100

200

300

400

Time/min

500

0
600

Fig. 2. Raw data for change of weight and temperature（solidline:experimental change, broken line: straight line fit）

�

（C8-TAC）、 陰 イオン 性 に は sodiu m dodecyl sulfate（DSD）、非イオン性には N-decanoyl-N-methylglucamide

こで、本研究では炭化弗素鎖長の異なる N-（1,1-dihydroper（MEGA-1/0））と水に不溶性の 1-heptadecanol を用いた。

fluoroalkyl）-N,N,N-trimethylammonium Chloride（Cn-

前者は水の蒸発に及ぼす吸着膜の効果を、後者は水に不溶TAC）を新規に合成し、その水溶液中での物性を検討する

性の単分子膜の効果を検討するためである。

ことから開始した。物性としては、ミセル形成と界面吸着を選び、CMC 並びに表面張力の濃度変化から求まる表面

３．結果と考察
３．
１

過剰量について調べた。CMC は電導度の濃度変化より決装置の精度定した。C8-TAC では、CMC の温度変化は 25℃付近に極

水分子の蒸発速度（移動速度）の研究にとって、速度測小をもつが、C10-TAC では温度の上昇とともに単調に増定装置の開発は最も重要な課題である。気体／液体界面を加した。疎水基の炭素数に対する CMC の変化から、メチ介しての物質移動速度の測定は、液体からの分子の蒸発速

レン基当たりのミセル形成に及ぼす疎水性の効果は炭化弗

度を測定することにより可能となる。以前の研究では、液

素では炭化水素の 1.7 倍となった。表面過剰量から分子占面上に乾燥剤を置き、乾燥剤の重量変化を測定する方法を

有面積を算出し、表面圧力と分子占有面積の関係を求めた。

用いたが、本研究では蒸発速度を重量変化として直接求めその結果、炭素数 10 の C10-TAC では、広い分子占有面

た。先ず、空気／水界面を介しての水の蒸発速度を熱天秤積でも高い表面圧力を持ち、狭い分子占有面積まで容易に内に流す乾燥空気の流速を変えて測定した。毎分２㎖の流圧縮されることが分かった。得られた分子占有面積−表速の差でも充分に蒸発速度に差が認められる程に高感度の面圧力の関係から、C8-TAC、C10-TAC 共に表面上の吸装置であった。不溶性単分子膜の水の蒸発速度に及ぼす効

着膜は液体膨張膜であることが判明した。表面張力の温度

果を見るために、1- ヘプタデカノールの不溶性単分子膜変化から求まる吸着のエントロピー変化に関しては、C8-を水面上に展開し、水の蒸発速度も調べた。その結果、蒸TAC では濃度の増加と共に正から負へとなだらかな減少

発速度は顕著に減少し、単分子膜の効果が明らかとなった。

を示すのに反し、C10-TAC では全て負の値で濃度と共にまた、可溶性の両親媒性物質の界面における吸着膜の効果急激に減少した。特に、C10-TAC では、分子占有面積がを調べたが、吸着膜の効果は全く観測されず、純水の蒸発

0.35n㎡まで圧縮できるので、水分子の蒸発を抑える点で速度と何ら変わることは無かった。この結果については、かなりの効果が期待できる。以上の結果は、Langmuir, 16

再度詳細に検討することにした。以上の結果は、Langmuir,（25），9754-9758（2001）に報告済みである。

16（25），9697-9698（2001）に報告済みである。

３．
２

３．３ 純粋液体の蒸発速度の測定と蒸発の活性化エネルギー

炭化弗素系活性剤の吸着膜

本研究では、吸着分子膜に酸素の透過が可能な炭化弗素

これまでの研究で、本研究課題である「水分子の移動と系膜も用いた。その際、分子膜が形成され易くなるためにその速度制御のための分子膜の開発」の基本的な部分を押は、パッキングパラメターが１に近い物質が望ましい。そさえることができた。そこで、熱天秤内に流す乾燥空気の−9−流速を変えて水の蒸発速度を測定し、安定な蒸発速度が得

酸ナトリウム、非イオン性の N-decanoyl-N-methylglucamideられる流速を決定した。その結果、流速が遅い場合、蒸発（MEGA-10）である。これらの活性剤の初濃度が CMC と速度は流速に顕著に影響されるが、ある流速以上になると、CMC/2 の異なる２種類の溶液について、水の蒸発速度と蒸発速度は殆ど影響を受けなくなる。それは、温度に殆ど

その温度変化を測定し、蒸発の活性化エネルギーを求めた。

無関係であった。これは、ある流速以上になると試料皿のその結果、蒸発速度並びに活性化エネルギー共に初濃度と水面上に形成される水蒸気の停滞層が蒸発皿の側を流れるは関係なく、純水の値と何ら変わらなかった。水分子は空空気により充分にかき乱された結果である（Fig. 3）。そ気／溶液界面から蒸発している筈であり、両者の値が純水れ故、実験は流速の影響が少なくなる流速を用いた。次にの値と同一であるということは、活性剤溶液表面が蒸発速

蒸発速度に及ぼす温度変化を調べ、蒸発の活性化エネルギ

度を規定する領域内で純水と同一でないと説明できない。

ーを求めた。その結果、活性化エネルギーは温度と共に減

そこで、蒸発を水分子のフラックスと見做し、拡散に関す少したが、蒸発のエンタルピー変化よりも大きかった。更

るフィックの方程式を用いて解析を行なった。得られた結に、この結果を正しく解釈出来るように、蒸発速度に関す果は、界面から一定の距離の範囲内で水分子の濃度変化がる理論式を新しく展開した。其れは、従来から良く知られ認められた。純水からの蒸発速度を式にいれてこの濃度領た Hertz-Knudsen 式と本質的に似ており、係数だけが異域を見積もると、約 123nm であった（Fig. 4）。

なっていた。

1

し、蒸発の活性化エネルギーに及ぼす疎水基と親水基の効果を調べた。その結果、親水基となるメタノール基の効果
は温度の上昇と共に減少するが、メチレン基の効果は温度の上昇と共に増大し、且つアルキル鎖が伸びると共に温度効果は減少していった。更に、活性化エネルギーの値より、75℃迄の液体状態では、アルキル鎖の形状は炭素数で 10までは線状であるが、11 以上になると環状になっていることが窺えた。しかし、それ以上の温度になると、炭素数11 以上のアルコールでも線状であることが明らかとなった。

Evap orati on r ate/mg minの n-alkanols の蒸発速度の測定並びにその温度効果を検討-1

次に、水の蒸発の理解を更に深める目的で、液体状態

以上の結果は Evaporation Rate Measurement of Water

0.8
0.6
0.4
0.2
0

and Liquid n-Alkanols across Air-liquid Interface Using

298.2 K
308.2 K
318.2 K

0

Thermogravimetry の標題で、Bull. Chem. Soc. Jpn. に掲

水溶液界面への吸 着膜が水の蒸発速度に殆ど影響しないことを述べた。
界面への表面過剰量から算出される分子占有面積の値では、表面の 85％
が両親媒性物質で覆われているにも拘らず、水の蒸発速度に何らの影響も見られないのは如何にも不思議である。そこで、３種類の可溶性両親媒性物質を選び、それらの水溶液の蒸発速度とその温度変化を詳しく調べた。用いた活性剤は、陽イオン性のC8-TAC, 陰イオン性のドデシル硫

Flow r ate/ml min

-1

40

50

5.540�

14�

5.�
538�

12�

5.�
536�

10�

5.�
534�

8�

5.�
532�

6�

5.�
530�

4�

5.�
528�

2�

-7�mo�
-3�c�
10�
l c�m�(+�)�/ �

中で、可溶性両親媒性物質の空気／30-2�mo�
-3�c�
10�
l c�m�
(-�)�/ �

３の蒸発速度の測定装置の開発の

20

Fig. 3. Dependence of evaporation rate by weight of wateron flow rate of dry air.

載予定（５月号）である。

３．４ 空気／水界面上の吸着分子膜を介しての水の蒸発速度

10

5.�
526�

-3�

-2�

-1�

Di�
st�
an�
ce�
/�2� D I�
t�

0�

1

2

3

Di�
st�
an�
ce�
/�2� D II�t�

Fig. 4. Concentration profile of water molecule in the interfacial region;
DI=2.28×10-5 ㎠ sec-1, DII=2.19×10-1 ㎠ sec-1,
C0(I)=5.539×10-2 mol ㎤ , C0(II)=1.240×10-6 mol ㎤− 10 −0��水分子の移動とその速度制御のための分子膜の開発

70以上の結果は、Gibbs の等温吸着式から求まる表面過剰
量が物理化学的にどのような意味を持つのか、表面過剰量から求まる分子占有面積が一体何を意味するのかという新し65

H 2 O, Amphiphile Solution

い課題を投げ掛けている。この課題に対して、色々の角度

60

C17OH

る予定である。投稿原稿の表題は、"Difference in Surface
Properties between Insoluble Monolayer and Adsorbed
Film from Kinetics of Water Evaporation" である。

３．５ 空気／水界面の不溶性単分子膜を介しての水の蒸発速度

E a / kJ mol -1

から現在検討中であり、研究成果を纏めて近い将来投稿すデカノールの不溶性単分子は、水の蒸発速度を顕著に減少

数を変え、水に溶解性の物質から不溶性の物質に渡って幅

40

Temperature / K

は吸着膜と異なり、実際に空気／水界面に存在することよ

後は、炭化水素系の 1- アルカノールのアルキル鎖の炭素4530295 300 305 310 315 320 325 330 335

させ、単分子膜の効果が明らかとなった。不溶性単分子膜の 1.25 倍に増大することが明らかとなった（Fig. 5）
。今

50

35

上記３で述べたように、水面上に展開された 1- ヘプタ

り水の蒸発の活性化エネルギーも純水の活性化エネルギー

55

Fig. 5. Dependence of the activation energy of water evaporation on temperature for purified water, amphiphile solutions at the cmc, and water covered by insoluble monolayerof C17-OH.

広く検討し、吸着膜と不溶性単分子膜の相違を水の蒸発速度の観点から明らかにしていく。

４．総

解性も少ないので、実用の観点からも興味の対象としては
炭化弗素系の両親媒性物質となる。この意味も含めて、合括成の困難な炭化弗素系陽イオン性界面活性剤に挑戦してき長鎖のアルキル基を有する炭化水素系の両親媒性物質た。しかし、現在迄のところ、良い結果が得られていない。

は、水面上に不溶性単分子膜として容易に展開できる。し今後は、時間をかけて、新規に合成した炭化弗素系物質をかし、炭化弗素系の物質は単分子膜としての展開が極めて単分子膜として展開することを検討する。膜厚を変えなが困難であることが、これまでの実験から明らかとなった。

ら水の蒸発速度とその活性化エネルギーを詳細に検討し、炭化弗素系の膜であれば、酸素も容易に透過でき、且つ分合目的的な分子膜の開発に引き続き努力する。

− 11 −

1

C4 配座のグルコース環状六量体，反転シクロデキストリンの創製研究
関西学院大学

理工学部

山

英

田

俊

Ring conformations of glucose derivatives bearing with bulky trialkyl or alkyldiaryl silyl protecting groups at the C-2 andC-3 oxygen functionalities have investigated with the aim of synthetic approach to flipped α-cyclodextrin, a cyclic hexamerof D-glucose in the 1C4 ring conformation. To the same purpose, synthetic route of a glucose derivative flipped by introductionof a bridged protecting group tethering two oxygens at C-3 and C-6 of glucose.
Among 8 glucose derivatives that have bulky silyl protecting groups at the C-2 and C-3 oxygens, the ring conformationof the following 3 compounds flipped to be 1C4 form; 2,3-di-O-tert-butyldiphenylsilyl-α, and β- D -glucopyranose, and 2,3-diO-tert-butyldimethylsilyl-β- D -glucopyranose. These compounds demonstrated the first ring flip due tointroduction of bulky silyl protecting group on C-2 and C-3 oxygens. The ring conformations were determinedbased on the coupling constants of the 1H NMR spectra.
Composition of the flipped derivative of glucose to the flipped cyclodextrin requires a high α-selective
glycosylation reaction. However, a preliminary glycosylation of a flipped sugar with tert-butyldiphenylsilylgroup on the C-2 oxygen showed moderate β-selectivity. This result indicates the inadequacy of the applicationof such silyl-based flipped sugars; we then designed and prepared a glucose derivative flipped by introduction ofa bridged protecting group tethering two oxygens at C-3 and C-6 of glucose.

１．緒

HO

言

OH
4

反転したシクロデキストリンの合成を目的として，嵩高いシリル保護基を２, ３位に導入したグルコース誘導体のHOO

環立体配座を詳細に調べ，環反転が可能であることを明ら反転したグルコース誘導体の合成ルートを確立した．
椅子型立体配座の６員環は，置換基がより多くエカトリ

O
HO

O

O
HO

OH

HO

O

O

O

1

OH

HO

OH

HO
OH

O

O

OH

O
O

O

O

OH

O

HO

OH OH

HO

HO

OH

α-Cyclodextrin (1)てはまり，グルコースは１C ４配座ではほとんど存在せず熱

OH
O

O

H
O HO
O

OH
O OH
O

アル配座を取る方が安定である．これは糖の６員環にもあ

HO

HO
O
HO

OH
O
OH

かにした．保護基を３, ６位に架橋させて導入することで

OH

HO O
HO

OO
OH H

OH

4

O

"Flipped" α-Cyclodextrin (2)Fig.1

力学的により安定な４C １配座で通常存在する．糖の複数の水酸基を嵩高いトリアルキルあるいはアルキルジアリール

ロデキストリンとは対称的に，内部が親水性，外部が親油シリル基で保護すると環立体配座が反転し，アキシアル配性となる化合物を容易に合成することができる．この様な向した置換基が多いいす型で安定に存在する例が知られて化合物を合成できれば親水性の各種化合物を包摂し，全体いる ．しかし単糖の場合，当然のことながら嵩高いシリとして親油性の性質を有する化合物のベースとなると考えル基を除去すると元のエカトリアル置換基がより多い立体

ている．

１）

配座に戻る．私達はこの様な糖の環配座反転を保護基以外

反転した α- シクロデキストリン（2）の合成計画を Fig.

の要因で起こすことはできないかと考え，大員環による束

2 に示した．予め環反転させたグルコース誘導体を合成し，縛が期待できる反転したシクロデキストリン（2）を着想

これを繋いで直鎖六量体とした後環状化させる計画を立てした．反転シクロデキストリンは，環の内部にも外部にもた．シクロデキストリンは，グルコースの１位と４位が酸水酸基を持つ．外部の水酸基は，エステル結合によって脂素を介して結合している．従って，環反転をさせるために肪酸などを結合させることができる．従って，従来のシク

これら以外の水酸基を修飾して利用する事が前提になる．

Synthetic study of flipped cyclodextrin, acyclic hexamer of D-glucose in the 1C4 ring
conformation

これまで知られているシリル保護基による環反転は，いず
れも糖の４位水酸基が関わっている．一方，２, ３位のシリル保護のみで反転させた例は無かった．そこで，グルコ

Hidetoshi Yamadaースの２, ３位に嵩高いシリル保護基を導入した場合のグ

School of Science and Technology,
Kwansei Gakuin University

ルコースの立体配座変化を調べ，３に示すような反転が可能であるか否かを調査した．また，環反転させるもう一つの可能性として，３位と６位の水酸基を架橋する保護基を− 12 −

C4 配座のグルコース環状六量体，反転シクロデキス
トリンの創製研究

1

R3O

R3O

OSiR3

SPh
2
OSiR3

O

OH

OH

O

HO
HO

した．一方，対応する 1-β- フェニルチオグルコシド（9）３）

OSiR3
O

HO

OSiR3

O

6

3

HO OH

R1

D-glucose

O

O

6 O
SPh
O
3
OH OR2

O

4

O

R1

を原料として同様の合成段階を経て２, ３位に嵩高いシリ
OH

O

2

ル保護基を有する β- チオグルコシド 11，12 を合成した．

1

OH

また 11，12 はそれぞれ１位フェニルチオ基を加水分解して，２, ３位のみが修飾されたグルコース 13，14 へと導い

6た．合成した化合物はそれぞれ各種二次元 NMR の手法を

O
OR2

O

4

用いて 1H NMR の全てのシグナルを帰属したのち，ピラ
ノース環上の水素に基づく結合定数を J 分解スペクトル法

6を用いて測定した．測定結果は結果の部にまとめた．

Fig.2

2・2

導入し，４に示したような構造にすることで環反転させる

1-β- フェニルチオグルコシド（9）の 3，6 位水酸基をことを目的にグルコースからの合成を行った．

２．実

３位 - ６位水酸基の架橋による環反転

選択的にメトキシメチル基で保護して 15 とした４）．残っ験

た２, ４位水酸基をベンジル保護し，次いで１位フェニル
チオ基を加水分解して 16 とした．Wittig 反応を用いてピ2・1 2，3 位に嵩高いシリル保護基を導入したグル
コース誘導体の合成

ラノース環を開環しながら末端ビニル基を有する 17 へとの４, ６位水酸基変換した後，５位水酸基を p- メトキシベンジル基で保護をアニシリデン保護して６とした後，残った２, ３位水し２, ４位のメトキシメチル基を脱保護して 18 とした．18

酸基に tert-buthyldimethylsilyl（TBS）基あるいは tert-の２, ４位水酸基に 2-iodo-3,4,5-trimethoxybenzoyl 基を導butyldiphenylsilyl（TBDPS）基を導入して２, ３位に嵩高入して 19 へ導いた後５），Ullmann カップリングを用いていシリル保護基を有する α- チオグルコシド７, ８を合成

ビフェニル部分を構築して 20 とした６）．このとき，二種

1-α- フェニルチオグルコシド（5）

SPh
OH
O
a

SPh

OH

OH OH

OH

O
O

5

SPh
O

b

OH

O

２）

OH OH

6

C6H4-p-OMe
SPh
O

SPh

OH

O

c

OH

OH OH

OH

O

9

SPh
O

d

OH

O

OSiR3
OSiR3
7: SiR3 = TBS
8: SiR3 = TBDPS
OH

OSiR3

e

OSiR3

O

OSiR3

OSiR3

OH OH 11: SiR3 = TBS OH OH
12: SiR3 = TBDPS

10

C6H4-p-OMe

13: SiR3 = TBS
14: SiR3 = TBDPS(a) (MeO)2CHC6H4-p-OMe, TsOH, 50 C, 2 h, 57%; (b)TBSOTf, 2,6-lutidine, DMF, 100C, 12 h, then TsOH,
THF/MeOH,rt,6h,56%for7;TBDPSOTf,
2,6-lutidine, DMF, 100 C, 12 h, then TsOH,
T H F / M e O H ,r t ,6h ,4 1 %f o r8;( c )(MeO) 2 CHC 6 H 4 -p -OMe, TsOH, 50 C, 4 h, 60%; (d)TBSOTf, 2,6-lutidine, DMF, 100 C, 12 h, then TsOH,
THF/MeOH, rt,6h, 73% for 11 ; TBDPSOTf, 2,6-lutidine,
DMF, 100 C, 12 h, then TsOH, THF/MeOH, rt, 6 h,
59% for 12 ; (e) NBS, THF/H2O, rt, 2 min, 75%, for 13 ,Scheme1 Preparation of 2,3-trialkyl or alkyldiarylsilylated derivatives of D-glucose.

OH
O

HO
HO

9

OH

SPh

d

MeO
MeO

BnO
MOMO

OMOM
OH

O
I

O
OPMB
I

OMe

OMe

e, f

b, c

O
O
O O

h

OBn

5

OPMB

OBn OBn
20

19

Scheme 2

BnO
16

OH

g

OBn
18

MeO
OMe
OMe MeO

OMe
MeO

OMOM
O

BnO
MOMO

OH
OPMB

BnO
HO

OBn
17

MeO

BnO
O
O

MeO

HO
MOMO

MeO

OMe

OMOM
O
SPh
3 OH
15

6

a

i, j

OMe
MeO

OMe
OMe

O
O
O O
6
3

O

OH

OBn OBn
21(a) MOMCl, i-Pr 2 NEt, DMF, 0 C →rt, 1 day, 51%; (b)NaH, rt, 1 h, then BnBr, DMF, 0 C→rt, 2.5 h, 75%; (c)NBS, THF/ H 2O, 0 C, 20 min, 92%; (d) Ph 3PCH 2,THF,-50 C →rt,overnight, 82%; (e) NaH, rt, 20 min, thenPMBCl, DMF, rt, 2 h, 93%; (f) conc. HCl,i -PrOH, 60 C,
7 h, 59%, (g) 2-iodo-2,3,5-trimethoxybenzoic acid,EDCI (WSC), DMAP, CH 2 Cl 2 , rt 10 h, 94%; (h) Cu,
DMF, reflux, 17 h, 48%; (i) DDQ, CH 2Cl 2, H 2O, rt, 1 h,85%; cat. OsO4, NaIO4, THF/H2O (1:1), rt, 6h, 70%

Preparation of bridged compound between C-3 and C-6 oxygens.

− 13 −

るとして妥当である（Fig 3）．β- チオグルコシド 11 が示

類の回転異性体に基づくジアステレオマーの生成が考えられるが，得られた化合物は単一であった．ビフェニル部

した値も H2 から H5 にかけて９の値よりも若干小さくな分の立体化学はその誘導体の単結晶 X 線解析で決定した．

っているため，元のいす型から少し変形しているものの基

20 の５位 p- メトキシベンジル基を脱保護し，末端ビニル

本的にもとの４C １配座で存在すると考えられる．TBDPS

部分をオスミウム酸化と過ヨウ素酸ナトリウムにより開裂基で保護した 12 の H1-H2, H2-H3, H3-H4 での値が元のさせピラノース環を再構築し 21 を合成した．

９と比較して小さくなっており，Karplus の式を参考に

３．結すると何れも約 30°の二面角である．また，H1-H3 及び果

H2-H4 間に W 字型遠隔カップリングが観測されたことか

3・1 ２, ３位に嵩高いシリル保護基を導入したグル
コース誘導体の環立体配座

らも H1 から H4 がエカトリアル配向していることを支持

合成した２，３位に嵩高いシリル保護基を導入したグルもそれほど大きな変化は観測されなかった．これらの情報

コース誘導体の環立体配座を推定するため， H NMR の結から，12 は 1, 2, 3, 4 位はアキシアル配向した置換基を有合定数を測定した．ピラノース体である 13，14 は α 体，

し，6 位の置換基はエカトリアル配向したツイストボート

β 体の分離ができないため混合物のまま NMR を測定し型の環配座で存在することが明らかになった．1 位フェニ

各 J 値を測定した．結果は Table 1 にまとめた．比較のルチオ基を除去したピラノース体のうち，13αが示した各

ため，Jackson らによって報告されている TBDMS 基を３結合定数はシリル基を導入していない５の値に近く，環反個導入して反転させた化合物 phenylthio 3,4,6-tri-O-tert-

転は起こっていないことが判る．一方，13β, 14α, 14β のbutyldimethyl silyl-α-D-glucopyranoside（15）（Fig ３） ，各結合定数は何れも小さく，また W 字型遠隔カップリン

及びシリル基を導入していないテトラオール５, ９のデー

グが観測されたことから環反転したことを示している．

している．一方，H4-H5 の結合定数は９の値と比較して

1

１f ）

タを並べて記載した．

3・2 ３位 - ６位水酸基を架橋した化合物 21 の環立体配座

α- チオグルコシド７が示した各結合定数はシリル基を導入していない５の値に近く，環反転は起こっていないことが判る．８の値は H2 から H5 にかけて５の値よりも若化合物 21 はアノマー混合物であり，またピラノース環

干小さくなっている．そのため元のいす型から少し変形し上の水素とメチル基の水素が重なり非常に複雑なパターンていることが考えられるが，基本的にもとの４C １配座であであるため，１H NMR を基にした環配座の解析は困難であった．そのため，21 はさらに二段階を経て天然物から誘導されるコリラジンノナメチルエーテル（22）に変換しTable 1 Coupling constants between two hydrogens on the pyranose rings.
compound
7
8
11
12
13α
13β
14α
14β
15
5
9

3

J (Hz)
H1-H2 H2-H3 H3-H4 H4-H5
5.2
9.0
8.2
9.8
4.7
8.6
7.3
9.4
8.2
6.9
7.7
8.9
2.3
2.5
3.7
8.1
3.3
8.9
8.5
9.9
1.9
2.1
1.6
2.9
1.0
2.9
0.5
0.0
2.9
2.1
1.0
3.2
2.9
5.5
4.5
3.1
5.2
10.0
8.8
10.0
9.6
8.8
8.0
9.2

O HO
HO
TBDPSOTBSOTBDPSOSPh
TBSOSPh
7
8
O
TBSO
OH

13

HO

HO
OTBDPS
O
OH

OH

14

OTBDPSてその構造を確認した（Fig. ４）７）．

４．考

11

誘導体の環配座から，２, ３位に TBDPS 基を導入したピラノース体は α 体，β 体にかかわらず反転した１C ４配座であることが明らかになった．この構造は合成の目的としている反転シクロデキストリンの単糖部分の構造をよく反映していると考えられる．一方，２, ３, ４位に TBDPS 基を有する糖供与体 23 を用いたグリコシル化反応では，βTBDPSO
SPh
O
O
HO
HO
SPh
HO
OTBS
HO
OTBDPS
12

HO

OH
OTBS
O

察

２, ３位に嵩高いシリル保護基を導入した各グルコース

OH

O

OH
HO
TBSO

H1-H3
1.3
0.8
0.8
-

J (Hz)
H2-H4 H3-H5
1.1
0.7
0.7
1.4
1.4
1.0
-

OH

OH
HO
TBSO

4

OH OTBS13OH
OTBDPS
O

OH

Fig. 3− 14 −OTBDPS

14

OH

OH
O

O

HO
HO

HO SPh

5

OH

SPh

9

TBSO
OTBS
O
SPh
TBSO

15

OH

C4 配座のグルコース環状六量体，反転シクロデキス
トリンの創製研究

1

MeO

OMe
MeO

MeO

21

O
O
O

two steps

HO

OMe
OMe

HO

O
O

O

OH

OMe

O
O

OH

OH

Corilagin

Fig. 4

TBDPSOX

HOCH2C6H11OTBDPSOTBDPSOROTBDPSOOCH2C 6H11

OTBDPSOTBDPS

OSiR3
O+

RO

O

HOR

: :

O

OH

OH

RO
RO

OH

O

O

OMe

22

OH
OH

O
O
O

OMe

O
OH

OH
HO

Si

α/β=1/ 4

23

Fig. 5

選択的な反応が観測された．２位の TBDPS 基が α から

（参考文献）のアルコールの接近を妨害した結果であると考えられる

１） a）H. Abe, S. Shuto, S. Tamura, A. Matsuda, Tetrahedron
Lett. 2001, 42, 6159-6161.

（Fig. ５）
．２位に嵩高いシリル保護基を有する反転したグb） K. S. Feldman, M. D. Lawlor, K.Sahasrabudhe, J.

ルコース誘導体を用いてグリコシル化反応を行うと，β 選

Org. Chem. 2001, 65, 8011-8019.

択性が出るという知見は，従来 2 位アシル保護基の隣接基

c） S. Ichikawa, S. Shuto, A. Matsuda, J. Am. Chem.

関与による制御に頼ってきた β 選択的グルコシル化反応

Soc. 1999, 121, 10270-10280.

の別法となるべき芽ではあるが，反転シクロデキストリンd） H. Yamada, M. Nakatani, T. Ikeda, Y. Marumoto,を合成するためにはグリコシル化反応において高い α 選		

択性の発現が必要である．そのため，本法は反転シクロデe） Y. Yahiro, S. Ichikawa, S. Shuto, A. Matsuda, Tetrahedron

キストリンの合成には適さないと判断した．
一方，３位 - ６位水酸基を架橋した化合物 21 から糖供

Lett. 1999, 40, 5527-5531.

与体を誘導した場合，糖の β 面を大きく覆うビフェニルf） C. Walford, R. F. W. Jackson, N. H. Rees, W. Clegg, S.

部分がアルコールの接近を妨害し，α 選択的なグルコシ		

ル化反応が期待できる．今後，21 を基に反転シクロデキ

L. Heath, Chem. Commun. 1997, 1855-1856.

g） T. Hosoya, Y. Ohashi, T. Matsumoto, K. Suzuki,

ストリンの合成を行う．

５．総Tetrahedron Lett. 1999, 40, 5573-5576.

		

Tetrahedron Lett. 1996, 37, 663-666.

h） M. A. Tius, J. Busch-Petersen, Tetrahedron Lett. 1994,

括		

35, 5181-5184

反転したシクロデキストリンの合成を目的に，嵩高いシ

２） M. S. Motawia, C. E. Olsen, K. Enevoldsen, J. Marcussen,

リル保護基を２, ３位に導入したグルコース誘導体の環立体

and B. L. MØller, Carbohydrate Res., 1995, 277, 109-123.

配座を詳細に調べ，環反転が可能であることを明らかにし

３） S. Hanessian and Y. Guindon, Carbohydrate Res., 1980,
86, C3-C6.

た．嵩高いシリル保護基の導入による環反転例はこれまでにも報告があるが，どの例も３, ４位の水酸基に嵩高いシリ

４） Y. Ikeda, K. Furukawa, H. Yamada, Carbohydrate Res.,
2002, 337, 1499-1501.

ル保護基が導入されており，２, ３位への導入での反転が可能であることを初めて示すことができた．また今回合成し５） R. Beugelmans, J. Chastanet, H. Ginsburg, L. Quintero-

た２, ３位に嵩高いシリル保護基を導入して反転させたグル

Cortes, G. Roussi, J. Org. Chem. 1985, 50, 4933-4938.

コース誘導体は，β 選択的な反応を示した．しかし，シク

６） Dai, D.; Martin, O, R. J. Org. Chem. 1998, 63, 7628-7633.

ロデキストリンの合成には α 選択的なグリコシル化反応が７） a）R. Saijo, G. Nonaka, I. Nishioka, Chem. Pharm. Bull.

必須である．従って新たな β 選択的グルコシル化反応の芽としては期待できるが，シクロデキストリンの合成には利				

用できない．今後，３, ６架橋体を用いた合成を進める．

− 15 −

1989, 37, 2624-2630.

b） T. Tanaka, G. Nonaka, I. Nishioka, Phytochemistry
1985, 24, 2075-2078.

４置換レゾルシノール誘導体のメラニン生成抑制効
九州大学農学研究院

清水邦

森林資源科学部門森林圏環境資源科学講座

義、安

武

政

司、近

藤

隆 一 郎

The color of mammalian skin and hair is determined by a number of factors. The most important factor is the degreeand distribution of melanin pigmentation. Melanin synthesis inhibitory compounds are useful not only for the material
used in cosmetics as skin-whitening agents but also as a remedy for disturbances in pigmentation. Tyrosinase (phenol
oxidase) is known to be a key enzyme for melanin biosynthesis in plants, microorganism and mammalian cells. Therefore,
many tyrosinase inhibitors have been tested in cosmetics and pharmaceuticals as a way of preventing overproductionof melanin in epidermal layers. Also, various types of stimulation, including exposure to ultraviolet (UV) radiation,induce lipid peroxidation in the skin, which might in turn cause damage to epidermal cells, leading to postinflammatory
hyperpigmentation. Considering the importance of counteracting oxidative stress caused by UV to prevent harmful skindamage, it is important to design the multifunctional skin whitening agent with both antioxidant and anti-tyrosinase abilities.
A novel vitamin E derivative, (6"-hydroxy-2",5",7",8"-tetramethylchroman-2"-yl)methyl 3-(2',4'-dihydroxyphenyl)propionate(TM4R) which has chromanoxyl ring and 4-substituted resorcinol moieties, was synthesized and its inhibitory effect ontyrosinase, antioxidant ability and lightning effect of ultraviolet B (UVB)-induced hyperpigmentation were estimated. TM4R
showed potent inhibitory activity on tyrosinase, which is the rate-limiting enzyme in the melanogenesis. The scavenging
activities of TM4R on 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and hydroxyl radicals were found to be nearly the same as
those of α-tocopherol. Furthermore, an efficient lightening effect was observed following topical application of TM4R to
UVB-stimulated hyperpigmented dorsal skin of brownish guinea pigs. These results suggest that TM4R may be a candidate
for an efficient whitening agent, possibly by inhibiting tyrosinase activity and biological reactions caused by reactive oxygen
species.

１．緒に、４位アルキル置換レゾルシノール類が強力なチロシナ

言ーゼ阻害効果を有することが知られている４, ５）ことから、紫外線から誘起される色素沈着メカニズムは、多岐に渡A. incisus より見出された阻害物質の活性発現には、４位っている。少なくとも、紫外線照射における活性酸素種の置換レゾルシノール構造が大きく関与していると予想し

生成 、ケラチノサイトでの各種炎症性シグナル物質の産た。そこで、本研究ではチロシナーゼ阻害活性に関する上生、それに引き続くメラノサイトの活性化、メラニン生合

記知見を基に、チロシナーゼ阻害活性とともに、美白剤と成酵素であるチロシナーゼなど一連の酵素活性の亢進、さして求められている主要な生理活性の一つである抗酸化活

らには，生成したメラニンのケラチノサイトへの受け渡し性を有する多機能性分子の創出及びその美白効果（茶色モなどが、色素沈着メカニズムに関与していると考えられる。

ルモット背部皮膚を用いた UVB- 誘導色素沈着抑制効果）

したがって、色素沈着を抑える物質（美白剤や色素沈着症について検討した。

１）治療薬）の開発には、上記メカニズムの数段階を抑制する

２．実

多機能性美白剤のドラッグデザインが有効であろう。
筆者らは、これまでに未だ不明な点の多く残されている

２・１

験 6）

チロシナーゼ活性測定法

チロシナーゼは、マッシュルーム由来チロシナーゼ [EC

熱帯産樹木心材成分に、美白剤原料を求め、パプアニュー
ギニア産樹木であるクワ科の Artocarpus incisus（パンノキ）の心材抽出物が強力なチロシナーゼ阻害活性を有することを見出した２）。さらに、７種の活性成分を単離、同定したHO。これらの活性成分の構造的共通は、Fig. 1 のボック

２, ３）

ス部分で示した４位置換レゾルシノール構造である。さらThe inhibitory effects of 4-substituted
resorcinol derivatives on melaninbiosynthesis
Kuniyoshi Shimizu, Seiji Yasutake,＊Ryuichiro Kondo＊

Laboratory of Systematic Forest andForest Products Sciences, Faculty ofAgriculture, Kyushu University

OH

O

HO

OH

O

R

R

R=OH: (+)-dihydromorin IC50 =25µ�
M
R= H : (+)-norartocarpanone IC50 =1.76µ�
M

HO

OH

OH

O

R=prenyl: artocarpes in: IC50 =13.5µ�
M
R=CHCHC H (C H 3) 2:isoartocarpes in: IC50 =21.1µ�
M

OH

HO
R

HO
O

HO

HO

OH

O
OH

R =prenyl: 4-prenyloxyresve ratrol IC50 =0.66µ�M
M
R = geranyl: chlrophor in IC50 =0.26µ�OH

artocarbene IC50 =2.45µ�
M

Fig.1 The chemical structures and IC50 of active components from A.incisus.�
The boxed part:4-substituted resorcinol skeleton.(substrate:L-tyrosine)− 16 −

４ 置換レゾルシノール誘導体のメラニン生成抑制効

1.14.18.1]（シグマ）を用い、前報に従い、それぞれ基質が示唆された。しかしながら、同樹木より単離された化合として L- チロシンを用いて、反物である artocarpin（16）は４位置換レゾルシノール構造

応により生じるドーパクロムの極大吸収波長である 475nm

を B 環に有しているにも関らず、チロシナーゼ阻害活性の吸光度を測定し、活性を算出した。ポジティブコントロを示さなかった（Fig. 2）。したがって、４位置換レゾルールとしては、強力なチロシナーゼ阻害物質として知られシノール構造だけでなく、他の構造的特徴も活性発現に重ているコウジ酸８）を用いた。

要な役割を果たしていることが予想された。４位置換レゾ２）もしくは DL-DOPA

７）

ルシノール構造に起因したチロシナーゼ阻害活性をベース

２・２
既報

９）

ヒドロキシラジカル捕捉活性測定とした多機能性分子を設計するためには、４位置換側鎖のに従い、ESR スピントラッピング法により算出

構造に着目した、詳細な構造活性相関の知見が必要である。
まず、Fig.1 に示した化合物群がフラボノイド及びスチルした。

ベンに属することから、当該グループに属する 25 種の化合物

２・３

UV-B 誘導色素沈着抑制活性試験に対して、チロシナーゼ阻害活性を検討した（Table 1, Fig. 3）。
５種のスチルベン（21-25）で検討したところ４位置換

既報 10）に従い、茶色モルモット背部に、UV-B を照射
後の色素沈着を色彩色度計にて評価した。

HO

３．結果及び考察

OH

O

MeO

Fig. １に示すように、A. incisus の心材抽出物から単離OHされたチロシナーゼ阻害活性物質の構造を比較することにより、チロシナーゼ阻害活性発現には、ボックスで囲んだ

Fig. 2 The chemical structure of artocarpin (16) isolated from A. incisus.
The boxed part: 4-substituted resorcinol skeleton

４位置換レゾルシノール構造が活性発現に重要であること
Table 1
No. name(±)-flavanone(-)-pinocembrin(±)-naringenin(+)-aromadendrin(±)-fustin(±)-taxifolin(+)-dihydromyricetin(+)-dihydromorin(+)-norartocarpanone
flavonechrysin
apigeninkaempferol
quercetin
myricetinartocarpin
morin
artocarpesin
isoartocarpesin(-)-angolensin

21
22
23
24
25

pinosylvin
oxyresveratrol
4-prenyloxyresveratrol
chlorophorinartocarbenecaInhibitory activity of flavonoids and stilbenes on tyrosinase (substrate: L-tyrosine)
R3

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20

O

R5

R6

R7

R2'

R3'

H
H
H
OH
OH
OH
OH
OH
H
H
OH
H
OH
OH
OH
Pr
OH
H
H

H
OH
OH
OH
H
OH
OH
OH
OH
H
OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH

H
H
H
H
H
H
H
H
H
H
H
H
H
H
H
CHCHCH(CH3)2
H
Pr
CHCHCH(CH3)2

H
OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH
H
H
OH
OH
OH
OH
OCH3
OH
OH
OH

H
H
H
H
H
H
H
OH
OH
H
H
H
H
H
H
OH
OH
OH
OH

R3
OH
OH
OH
OH

R4
H
H
Pr
Ger

R5
OH
OH
OH
OH

R2'
H
OH
OH
OH

R4'
H
OH
OH
OH

R4'

H
H
H
H
OH
OH
OH
H
H
H
H
H
H
OH
OH
H
H
H
H

H
H
OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH
H
H
OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH
OH

R5'

(C2, C3)

H
H
H
H
H
H
OH
H
H
H
H
H
H
H
OH
H
H
H
H

IC50(µ�M)2S, 2R2S
2S, 2R(2R, 3R)(2R, 3R),(2S, 3S)(2R, 3R),(2S, 3S)(2R, 3R)(2R, 3R)
2S

>200
>200
>200
lag time decreasea
lag time decreasea
lag time decreasea
lag time decreasea
25
1.76
>200
>200
>185
103
lag time decreasea
lag time decreasea
>228
>330
13.5
21.1
>200
>46
0.98
0.66
0.26
2.45

means promotion effect which could act as cofactor like diphenolc

See Fig. 3.

R3'

R2'
R7
R6

O

R5

O
1-9

R4'
R5'

R3

Pr:

R3'

R2'
O

R7
R6

R5

O
10-19

R4'

HO
H

R5'
R3

MeO

Me
20

O

Ger:

Fig.3 The chemical structures of 1-24

− 17 −

R2'

OH
R3
R4

R5

21-24

R4'

レゾルシノール構造を有する４種のスチルベン類（22-25）

また、一方、(-)-angolensin（20）（Fig. 3）も４位置換レに強力なチロシナーゼ阻害活性が観察されたが４位置換レ

ゾルシノール構造を有するにも関らず、阻害活性を示さな

ゾルシノール構造を有さない pinosylvin（21）は、強力なかった。しかし、上述のような立体障害による活性の低減

阻害活性を示さなかった。したがって、スチルベンに関し効果は、考えにくい。したがって、阻害活性低減要因を明ては、４位置換レゾルシノール構造が活性発現に極めて重らかにするために、４位置換レゾルシノール類の特に側鎖要であることが示唆された。

に着目した構造活性相関検討を行った。 Table 2 に示すよ

続いて、20 種のフラボノイド（1-20）について検討しうに、４位置換基の構造によって、大きく活性が変動するた。その結果、B 環に４位置換レゾルシノール構造を有すことが判明した。特に、カルボニル基（26-30）を有する場合、る４種のフラボノイドのみ（8, 9, 18 及び 19）に高いチロ阻害活性が消失した。また、アゾ基（31, 33）を有する場

シナーゼ阻害活性が観察された。しかしながら、16, 17 及合にも阻害活性が著しく減少した。カルボニル基及びアゾ

び 20 は B 環に４位置換レゾルシノール構造を有するにも基は、両置換基ともに、オルソ位の水酸基と水素結合を形関らず、高い阻害活性を示さなかった。これらの結果から成可能である。この分子内水素結合が存在することによっフラボノイド類に関しては、４位置換レゾルシノール構造て、活性発現に必須なレゾルシノール部分がチロシナーゼ

だけでなく、さらに他の構造的特徴が活性発現には、必要に強固に結合できず、阻害活性が著しく減弱したと考えらであることが示唆された。

れる。さらに、側鎖の極性のチロシナーゼ阻害活性に及４位置換レゾルシノール構造を有するフラバノン及びフぼす影響について検討した。Fig. 5 に示すように、側鎖にラボン型フラボノイドの場合には、３位に置換基を有する

水酸基やカルボニル基などの極性基が存在すると活性が弱場合に、チロシナーゼ阻害活性が激減することが判明した

く、逆に疎水性が高いと強力な阻害活性を示すことが判明（９→８、18 及び 19 → 16 及び 17）。つまり、Fig. 4 に示した。これらの結果を Fig. 6 にまとめた。これらの知見をすように B 環に４位置換レゾルシノール構造を有したと基に、筆者らは、４位置換レゾルシノール構造に由来する

しても、３位になんらかの側鎖置換基を有する場合には、強力なチロシナーゼ阻害活性を有し、かつ抗酸化活性を有

その立体障害のために、４位置換レゾルシノール構造部分する化合物の設計を試みた。抗酸活性発現構造として αがチロシナーゼに結合できず阻害活性が低減したことが考えられる。

Table 2 Inhibitory activity of 4-substituted resorcinols on�tyrosinase (substrate: L-tyrosine)

HO

HO

O

HO

HO

OH

R
HO

O

HO

R3

OH

O

OH

OH O

HO

OH

O

O

18: R=Pr, IC50 =13.5µ�
M
19: R=CHCHCH(CH3)2 , IC 50=21.1µ�M

9: IC50=1.76µ�
M

HO

OH

R2

8: IC50 =25µ�
M

Steric hindrance

Substituent (R)
CHO
COCH3
COOH
CONHCH2CH2OH
COC6H5

IC50 ( µM)
>200
>200
>200
>200
>200

31

N

436

32

H

33

N

OH

O

OH O

No.
26
27
28
29
30

N

N

227

N

N

HO
34

R1

16: R 1=Pr, R2=CHCHCH(CH3 )2,
R3 =OCH3 , IC50=25µ�
M
17: R 1=OH, R2 =H, R3=OH,
IC 50>330µ�M

Fig.4 The effect of the introduction of C3 substituent of flavonoids wich have�
4-substituted resorcinol skeleton tyrosinase (substrate: L-tyrosine)

35
36
37
38
39
40
41

OH
Cl
CH3
CH2C6H5
CH2(CH2)4CH3
CH2(CH2)10CH3
CH2CH3
CH2CH2CH3
ROH

OH− 18 −

185

S

58.0
13.0
12.0
2.80
1.98
1.63
1.10
0.91

４ 置換レゾルシノール誘導体のメラニン生成抑制効-tocopherol のラジカル捕捉活性発現部分構造であるクロOH

マノール環に着目し、（6"-hydroxy-2",5",7",8"-tetramethyl

OGlu
HO

chroman- 2"-yl）methyl 3-（2',4'-dihydroxyphenyl）
propionate（TM4R）を分子設計・合成した（Fig. 7）。

IC50=8.85µ�
M

TM4R は、上記のチロシナーゼ阻害に関する構造活性相
関検討により、コウジ酸以上の阻害活性が期待され、また、

OH

その抗酸化効果も α-tocopherol（ビタミン E）11）に匹敵OHHOするものと予想された。そこで、TM4R のチロシナーゼ
阻害活性ならびに抗酸化活性を測定した。また、比較のた

IC50=5.66µ�M

めに 2-carboxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-6-ol（Trolox），

OH

2-hydroxymethyl-2,5,7,8-tetramethyl chroman-6-ol（TM）
及び 3-（2',4'-dihydroxyphenyl）propionic acid（DPPacid）

HOを用いた（Fig. ８）。Table 3 に示すように、４位置換レ
ゾルシノール構造を有する TM4R 及び DPPacid には高い

IC50=0.91µ�M

チロシナーゼ阻害活性が観察されたが、クロマノール環を有する Trolox 及び TM には、阻害活性は観察されなかっOHHOた。さらに、その阻害機構は、競争型であった（Fig.9）。
4 位置換レゾルシノール類によるチロシナーゼの阻害は競hydrophobic
substituent

IC50=0.50µ�
M争型であることが報告されている５, ７）ことからも、TM4Rの強力なチロシナーゼ阻害活性には、4 位置換レゾルシノ

Fig. 5 The chemical structures and IC50 of 4-substituted resorcinols. �(substrate: L-tyrosine) Glu: glucose moiety.

HO

O

H

O

HO

O

N

R

ール構造が強く関与していることが明らかとなった。
また、
DPPacid と比較して高い阻害活性が観察されたことから、

H
N

R

OH

O

The formation of intramolecular� HOhydrogen bond decrease activity.

OH
HO

O

R
R

Introduction of bulky substituent causes weaker activity.

Hydrophobic and less bulky substituents are preferred.�
Replacement of substituent with hygrogen atom�
dramatically decrease activity.
Fig.6 Summarized structure-activity relationship of compounds with 4-substituted resorcinol skeleton

HO
O
Trolox

COOH

HO
O

CH2OH

DPPacid
DMAP, DCC
benzene, 50°�

TM

O

HO
O

O
OH

Antioxidanthydrophobic

Tyrosinase
inhibition
TM4R

Fig. 7 Structure and synthesis of TM4R

− 19 −

OH

HO
COOH
O
TroloxC H2O H
O
TM

HO

6"

4"

5"
10"
9"

7"
8"

O

3"
2"

1

O

O

OH
3
2

TM4R

O

2'

1'
6'
5'

3'
4'

14
12
10
8
6
4
2

OH

-1.5

OH

0

-0.5

0.5

1.5

2.5

1/[ DL-DOPA (mM)]

HO

Fig.9 Lineweaver-Burk plots of mushroom tyrosinase and DL-DOPA��in the absense or presence of TM4R�

Control,OH

DPPacid16

I/V(∆O.D. at 475nm/min.)HO

1.88µM, 3.75µM

Fig.8 The chemical structures of Trolox, TM, TM4R and DPPacid�The boxed part with shadow: 4-substituted resorcinol skeleton�
The boxed part without shadow: chromanoxyl ring moiety

Table 3 Effects of Compounds on Mushroom Tryosinase

CompoundSubstrate
L- Tyrosine

DL -DOPA

IC50 (µM)

IC50 (µM)

Ki (µM) Type of inhibition

TM4R

0.325

23

2.74

Competitive

DPPacid

3.02

62

11.5

Competitive

TM

>423

n.d.

n.d.

n.d.

Trolox

>400

n.d.

n.d.

n.d.

α
�-tocopherol

>232

n.d.

n.d.

n.d.

kojic acid

8.66

a

11.8

arbutin

306

10400 0

n.d.

a

17

a

Mixed

a

n.d.

a

n.d.: Not determined. :Obtained from data of Ref. 7.

クロマン環の疎水性が活性増強にも寄与していることが示

外線による皮膚ダメージならびに脂質過酸化により引き起唆された。また、Table 4 に示すように、クロマノール環

こされる炎症後の色素沈着も知られている。色素沈着の最を有する Trolox、TM 及び TM4R には、強力な抗酸化物

大の要因として紫外線照射後の酸化ストレスの関与が報告

質として知られる α-tocopherol と同等の抗酸化活性が観されている１）。したがって、強力なチロシナーゼ阻害活性察された。このように TM4R は、強力なチロシナーゼ阻ならびに抗酸化活性を有する多機能性分子である TM4R

害活性ならびに抗酸化活性を有する多機能性分子であるこは、紫外線により惹起される色素沈着を効果的に抑制し、とが確認された。チロシナーゼはメラニン生合成の鍵酵素

かつ皮膚の酸化ストレスダメージを防ぐ機能が期待されとして知られており、事実、コウジ酸のようなチロシナーた。そこで、UV-B により誘導される色素沈着に対する

ゼ阻害剤が、美白剤原料として知られている。一方で、紫TM4R の効果を検討した（Fig. 10）。TM4R は、市販の美− 20 −

４ 置換レゾルシノール誘導体のメラニン生成抑制効

Table 4 Antioxidant Activity of the CompoundsaCompoundHydroxyl radical (%)

DPPH [IC50(µM)]

b

1.0 mM

10 mM

TM4R

91

100

3.9

TM

n.d.

n.d.

3.2

Trolox

n.d.

n.d.

3.3

α
�-tocopherol

70

93

3.9

DPPacid

n.d.

n.d.

No activity at 50 µM

n.d.: Not determined.
aHydroxyl radical scavenging activity was expressed as % inhibition concentration of hydroxyl
radicals generated by Fe (II) and H2O2 (Fenton reaction).
b
The IC50 values were caluculated f rom regression lines where the abscissa represented
the concentration of tested compound and the ordinate the average percent reduction of
DPPH radical from three separate tests.

6
5

L* value(light←→dark)

4

*

*

3
2
1

-5

0

5

15
days

25

35

FIG.10 The degree of pigmentation (L* value) before and after daily topical applications(five times per week) of base solution [propylene glycol/ethanol (1/6)](control,○),TM4R (0.25M in base solution, ◆ ), kojic acid (0.25M in base solution, ■ ), or
arbutin [0.25M in base solution,▲). The applications were continued for 35 days.
Data are expressed as mean L values±SEM (n=8). L* valuse at day 0 are
49.9±2.7(control), 48.9±3.4 (TMR), 50.1±2.9 (kojic acid) and 49.9±2.8(arbutin). Student's t-test was used for the statistical analysis of the data. (*P<0.05, vs control)

白剤原料として知られるコウジ酸やアルブチンと比較し連のフラボノイド及びスチルベンを見出した。活性発現にて、顕著な色素沈着抑制効果を示した。この色素沈着抑制

は、分子内の４位置換レゾルシノール構造が関与している

効果メカニズムには、in vitro の結果を考慮すると、少なと考え、４位置換レゾルシノール類の構造活性相関を特に、

くともチロシナーゼ阻害及び酸化ストレス抑制が関与してその側鎖置換基の構造に着目して行い、ある特定の構造的いると考えられる。

特徴（疎水性・分子内水素結合・立体障害）が阻害活性に

４．総

大きく影響を与えていることを見出した。さらにその知見

括を基に、美白剤として求められている主要な生理活性の一A.incisus 樹木心材から強力なチロシナーゼ阻害物質とつである抗酸化能を分子に付与することを試みた。その結して、分子内に 4 位置換レゾルシノール構造を有する一果、抗酸化活性とチロシナーゼ阻害活性を有する多機能− 21 −

性新規ビタミン E 誘導体（TM4R:（6"-hydroxy-2",5",7",8"-4-substituted resorcinol moiety has both antioxidant andtetramethylchroman-2"-yl）methyl3-（2',4'-dihydroxyphenyl）

tyrosinase inhibitory properties. Lipids 36, 1321-1326,

propionate）を合成し、動物実験において、顕著な UV-B

2001.
７） Shimizu K, Kondo R, Sakai K: Inhibition of tyrosinase

誘導色素沈着抑制効果を有することを見出した。

by flavonoids, stilbenes and related 4-substituted（引用文献）

resorcinols: structure-activity investigations. Planta

１） Gilchrest BA, Park HY, Eller MS and Yaar M:

Med. 66, 11-15. 2000.

Mechanisms of ultraviolet light-induced pigmentation,８） Cabanes J, Chazarra S, Garcia-Carmona F: Kojic
acid, a cosmetic skin whitening agent, is a slow-binding

Photochem. Photobiol. 63, 1-10, 1996.

inhibitor of catecholase activity of tyrosinase, J. Pharm.

２） Shimizu K, Kondo R, Sakai K, Lee S.-H. and Sato H:

Pharmacol. 46. 982-985, 1994.

The Inhibitory Components from Artocarpus incisus on
Melanin Biosynthesis, Planta Med., 64, 408-412, 1998.

９） Arroyo CM, Wade JV, Ichimori K and Nakazawa

３） Shimizu K, Kondo R and Sakai K: A Stilbene

H: The scavenging of hydroxyl radical (・OH) by a

Derivative from Artocarpus incisus., Phytochemistry 45,

prostacyclin analogue, taprostene, Chem.-Biol. Interact.,

1297-1298, 1997.

91,29-38, 1994.

４） McEvily AJ, Iyengar R, Gross AT: Inhibition of10） Yokota T, Nishio H, Kubota Y and Mizoguchi M: The

polyphenol oxidase by phenolic compounds. ACS

inhibitory effect of grabridin from licorice extracts on

Symposium Series. 506, 318-325, 1992.

melanogenesis and inflammation, Pigment. Cell. Res., 11,355-361, 1998.

５） Jimenz M, García-Carmona FJ: 4-Substituted
resorcinols (sulfite alternatives) as slow-binding11） Murase H, Yamauchi R, Kato K, Kunieda T, Terao

inhibitors of tyrosinase catecholase activity. J. Agric.

J: Synthesis of a novel vitamin E derivative, 2-(α-D-Food Chem. 45, 2061-2065, 1997.

glucopyranosyl)methyl-2,5,7,8-tetramethylchroman-6-ol,

６） Shimizu K, Kondo R, Sakai K, Takeda N, Nagahata
T and Oniki T: Novel vitamin E derivative with− 22 −by α-glucosidase-catalyzed transglycosylation, Lipids
32, 73-78, 1997.

カンキツ精油の有する生体作用の生化学的解析
高知大学

受

田

農学部

浩

之

Citrus peel essential oils are natural flavoring materials of commercial importance. The peel oil from each citrus
variety not only adds much of the characteristic aroma and flavor to juice products made from that fruit but also hasa physiological activity such as antioxidative action and inhibition of carcinogen formation. In order to elucidate thepotential of citrus peel essential oils as a functional biomaterial, in the present investigation, I examined several in vitro
biochemical activities of essential oils from 13 kinds of citrus fruits. Although yuzu essential oil did not covalently
bind to human serum albumin (HSA), the presence clearly promoted the modification of glucose into HSA. The effectof the essential oil on the Maillard reaction partly resulted from the micro-environmental change around Trp-214
of HSA. The enzyme tyrosinase was significantly inhibited by some essential oils such as Eureka lemon, Lisbon andKiyookadaidai. The comparison of the composition with others suggested the involvement of sabinene, neral, geranial,neryl acetate and geranyl acetate. Interestingly, these essential oils showed the remarkable superoxide anion-scavenging
activity. The intensity of those activities showed no significant relationship with DPPH radical-scavenging activity. As
the tyrosinase involves in melanin production, the result obtained by the present investigation indicates that some citrus
peel essential oils might be applicable to the field of cosmetology.

１緒

そこで本研究では，カンキツ精油が有する新しい機能と言して，皮膚や組織の老化，並びに疾病の予防効果を系統的

カンキツ果皮の最も外側の黄橙色組織には無数の小さいに，かつ成分化学的に追求することを目的として，生体内油胞が存在しており，その中にフレーバー成分，すなわち

タンパク質，酵素並びに活性酸素を中心としたフリーラジ

精油が蓄積されている．この精油はカンキツ特有の爽快なカルに対する精油成分の作用を詳細に解析することを目的

香りの源であるが，最近では精油の有する多様な薬理学的とした．

作用，生理的・心理的効果が注目を集め，｢ アロマテラピ

２ー ｣，｢ アロマコロジー ｣ の中心的な役割を担っている１）．
しかしながら，実用面での華やかさとは対照的に，精油の２. １有する多彩な機能の発現メカニズムについてはほとんど明らかにされていない．

実

験

実験試料

実験材料として，レモン・ライム類，ブンタン類，ダイ
ダイ類，ユズ類，ミカン類などのカンキツを含む 13 品種

一方，最近，生活習慣病や老化の原因として，活性酸素や生体内メイラード反応の関与が指摘されているを用いた．各品種名，学術名，並びに略号は以下の通りで．従ある：①ユーレカレモン，Citrus limon Burm. f., cv Lisbon，って，反応性の高い活性酸素の消去作用を有する物質４），

EUR, ②トサブンタン，C. grandis Osbeck forma Tosa-

またメイラード反応の阻害活性を示す物質群

が，それ

buntan，TOS，③ナオシチ，C. taguma-sudachi Hort. Ex Y.

らの予防に有効であると期待される．これまでにカンキツ

Tanaka, NAO，④ユズ，C. junos Sieb. Ex Tanaka，YUZ，

５）

２, ３）

精油には高い抗酸化能が認められていることから ，活性⑤ケラジ，C. keraji Hort. Ex Tanaka，KER，⑥ダイダイ，

酸素に対して消去活性を示す精油成分が存在している可能C. aurantium Linn. Var. Cyathifera Y. Tanaka，DAI，⑦性は高いと考えられる．また精油成分の中には，タンパクリスボン，C. limon Burm. f., cv Lisbon，LIS，⑧キミカン，

質への高い吸着能を示す成分や，カルボニル基を有する成C. flaviculpus Hort. Ex Tanaka，KIM，⑨イーチャンレモ

７）分も含まれていることから ，皮膚や組織のタンパク質を

ン，C. wilsonii Tanaka，ICH，⑩キヨオカダイダイ，C.

クロスリンクすることで老化へと導いている生体内メイラ

sp.，KIY，⑪カボス，C. sphaerocarpa Hort. Ex Tanaka，ード反応に対して，阻害効果を発揮することも期待される．

KAB，⑫ポンカン，C. reticulata Blanco，PON，⑬モチユ，

６）Biochemical Analysis of Physiological
Activity of Citrus Peel Oil
Hiroyuki Ukeda
Department of Bioresources Science,
Faculty of Agriculture, Kochi University

C. inflata Hort. ex Tanaka，MOC．実験材料は 2001 年 10月から 12 月に高知県果樹試験場，愛媛県果樹試験場，愛媛県果樹試験場岩城分場，静岡県柑橘試験場，静岡県柑橘試験場伊豆分場，鹿児島県果樹試験場，大分県柑橘試験場
津久見分場，広島県工業技術センター果樹研究所，農林水産省果樹試験場興津支場などで収穫したものを，収穫直後に入手した．

− 23 −

２. ２

カンキツ精油の調製に 1.8 mL のリン酸塩緩衝液（0.1 mM, pH6.8）を添加し，25

精油抽出法としては冷圧油（Cold-pressed oil: CPO）

℃で 10 分間インキュベートした．その後，0.1mL の試料溶液，法を用いた．これはフラベド（外果皮）の油胞中に存在す

0.1mL のチロシナーゼ溶液（mushroom 由来，Sigma 製，138る精油を，フラベドを圧搾して抽出する方法である．このunits）を添加して反応を開始させた．チロシナーゼの活性は

方法は溶媒抽出法などの他の精油抽出法と比較して，最もdopachrome の生成を 475nm の吸光度変化速度（dA/min）と天然のフレーバー組成に近い精油が得られる方法である

してモニターした．試料濃度は終濃度として 167μg/mL に

７）．まず果皮を剥皮し，果皮からアルベド（内果皮）を取なるように DMSO で希釈した．試料の代わりに DMSO のみ

り除いてフラベドのみとした．フラベドを折り曲げて圧搾を用いた際の吸光度変化速度をコントロールとした．

し，得られた粗精油を集めて飽和食塩水で塩析後，遠心分離（4000 rpm×15 min, ４℃）して油層と水層に分離した．

２. ６

メイラード反応に対するユズ精油の影響

上部油層を取り出し，無水硫酸ナトリウムを少量加えて冷0.5M リン酸塩緩衝液（pH 7.4）を用いてヒト血清アルブミ

蔵庫内（５℃）で一晩放置した．生じた沈殿及び無水硫酸

ン（HSA：Sigma 製）を 30 mg/mL に調製した．これにユズナトリウムを除去したものを精油試料とした．

精油を 0 または 10μL/mL になるように添加して 37℃で３日間インキュベートした．その後，各溶液にグルコースを 0，

２. ３

DPPH ラジカル消去活性36，300 mg/mL となるように添加してさらに 15 日間，37℃

1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl（DPPH）ラジカル消去活でインキュベートした．0，3，6，9，12，15 日後，それぞれ性の測定は常法８） を一部変更して行った．すなわち精油

試料を分取して，MALDI-TOF-MS（Bruker 製 Protein-TOF

試料 10μL に 100 mM Tris-HCl 緩衝液（pH 7.4）を 900

MALDI-TOF-mass spectrometer）を用いて，各試料の分子量μL，エタノール 40μL，並びに 0.5％（w/w）Tween 20を測定した．なおマトリックスにはシナピン酸を用いた．各

水溶液 50μL を添加して十分混和した．ここにエタノー

試料の分子量はモノマー HSA の分子量分布におけるピーク

ルで調製した 0.5mM DPPH 溶液を 1 mL 添加して，暗所，の質量数として表示した．

室温にて 30 分間反応させ，DPPH ラジカルの吸収に基づ

３

く 517nm の吸光度を測定した．試料の代わりに水を添加した際に観察される吸光度をコントロールとして，試料添

３. １

結

果

生体内メイラード反応に対する影響

加による吸光度の減少を DPPH ラジカル消去能とした．

図１に示すように HSA をグルコースとインキュベート

標準物質としては水溶性ビタミン E 誘導体 Trolox を用いた．

すると，インキュベート時間，及びグルコース添加濃度の増加と共に HSA の分子量が増加した．増加した分子量か

２. ４

-

O2（スーパーオキシドアニオン）消去活性

ら考えて，36 mg/mL と 300 mg/mL のグルコース濃度に著者の開発した WST-1 アッセイ法を用いた ．本法はおいて，それぞれ 15 日間で，４分子と 22 分子のグルコ

キサンチンオキシダーゼ（XOD）の反応で生成させた O2ースが HSA 分子に結合していることが明らかとなった．

—

一方，ユズ精油と HSA をインキュベートしても分子量の９）—を WST-1 と試料中の O2 消去物質との間で競合させる間接法である．本測定原理に基づいてマイクロプレートでの多検体測定を可能とした SOD assay kit-WST（同仁化学研究所製）を本実験では使用した．WST-1 ホルマザンの生成に基づく 440 nm の吸光度変化はマイクロプレートリーダ
ー（Immuno Mini NJ-2300，ナルジェヌンクインターナショナル製）を用いて測定した．試料の代わりに水を添加した
際の吸光度変化を Ac，試料添加での吸光度変化を As，さらに試料に由来する 440nm の吸光度の影響を除くために
XOD 溶液の代わりに緩衝液を添加した際の吸光度 Ab を測定して，阻害率 I（%）を
Ｉ =[Ac-(As-Ab)/Ac]×100で計算した．

２. ５

図１

チロシナーゼ阻害活性

Kubo らの方法に従ってチロシナーゼ阻害活性を測定した 10）．
すなわち 1mL の 2.5 mM L-DOPA（3,4-dihydroxyphenylalanine）

HSA とグルコースのメイラード反応に及ぼすユズ精油の影響

ユズ精油存在下（破線）及び無添加（実線）において，異なる濃度のグルコース（▲，△；300 mg/ml，●，○；30 mg/ml，■，□；0 mg/ml）とインキュベートした HSA の分子 変化− 24 −

カンキツ精油の有する生体作用の生化学的解析

増加傾向は認められず，ユズ精油中の化合物は HSA と共表１

各種カンキツ精油の示す DPPH ラジカル消去能，及びスーパーオキシドアニオン消去活性

有的に結合しないことが明らかとなった．ユズ精油と 15
日間インキュベートした反応液を透析後，Shaklai らの方法に従って励起波長 285nm，蛍光波長 240nm から 480 nmの範囲で蛍光スペクトルを測定した 11）．観測された極大吸収波長はネイティブ HSA と比較して約 10 nm 長波長側にシフトしており，トリプトファン残基（Trp-214）の周辺環境がユズ精油の添加により変化していることが明らかとなった．ユズ精油を添加した HSA にグルコースを添加すると，ユズ精油無添加の試料と比べて HSA 分子量の増加幅が明らかに大きくなることが観察された．しかしながらグルコースの濃度に依存した分子量の増加傾向は認められず，両条件で共に４〜５分子程度の増加であった．３日
間ユズ精油と HSA をインキュベートした反応物から，遊離のユズ精油を透析で取り除いてグルコースを添加した場
合には，分子量の増加傾向は認められなかった．

３. ２

精油の DPPH ラジカル消去能

常法に従い種々の精油について DPPH ラジカルの消去活性を測定したところ，反応液に濁りが生じ，通常の分光学的な測定が困難であることが判明した．そこで標準物質として Trolox を用いて，各精油のラジカル消去活性を目視により Trolox 等価濃度として表示した（表１）．測定に供した 13 種類の DPPH ラジカル消去活性は EUR=YUZ=
ICH>TOS=LIS=KIM>NAO=KER=KIY の順であった．

３. ３

-

精油の O2 消去活性——

WST-1 法を用いて O2 の消去活性を測定した．本法は O2による WST-1 の還元を阻害する活性として評価するもので，
WST-1 ホルマザンの生成を 440nm の吸光度変化としてモニ

図２ターする．今回用いた精油試料の中には，カロテノイドに各種カンキツ精油が示すチロシナーゼ阻害活性起因すると考えられる強い黄橙色を呈するものが含まれていた．そこで，試料の色に基づく着色の影響を差し引くために，精油のチロシナーゼ阻害活性を図２に示す．13 種類の精

各試料のブランク吸光度（Ab）を測定し，アッセイ溶液の油のうち，LIS，KIY，EUR，KER の 4 種類の精油で顕示す吸光度（As）との差を求めた．使用した 13 種類の精油

著な阻害活性が認められた．

が示したコントロールに対する阻害活性を表 1 に示した．な４—

おこの表において，阻害率が高い程，O2 の消去能が強いこ

考察とを示す．消去能は精油の種類に依存して大きな差が認めら

生体内メイラード反応は糖尿病合併症の原因であるばかれた．特に KIY，LIS，KAB，KER で消去能は強く，次にりでなく，アルツハイマー病や動脈硬化症を含めて，様々

KIM，EUR，TOS，NAO，DAI にも活性が認められた．カ

な生活習慣病や老化の原因であることが知られている．精—2ロテノイド含量と関連があると推測される Ab の値と O 消

油成分にはシトラールをはじめ生体内メイラード反応に関去能との間には相関は認められず，精油中のカロテノイド以与するグルコースと同様に，カルボニル基を有する化合物

外の成分が活性に寄与していることが示唆された．

が多数存在していることから，生体内メイラード反応に対して影響を与える可能性が高いと考えられた．さらにタン３. ４

精油のチロシナーゼ阻害活性

パク質のアミノ基に直接作用して，そのタンパク質の機能

Kubo らの方法に従い，DOPA からの dopachrome の生を変化させる可能性もあると予想された．そこで本研究で成をモニターすることでチロシナーゼの阻害を調べた．各はまず，HSA をモデルタンパク質に選び，グルコースと− 25 −

のメイラード反応を分子量変化でモニターすることによsabineneneral（citral B）

geranial（citral A）

り，精油の生体内メイラード反応に対する影響を調べた．

CHO

図１に示したように，ユズ精油は HSA に対するグルコースの修飾を加速させることが明らかとなった．反応の機CHO構については今後の検討課題であるが，蛍光スペクトルによると，ユズ精油の添加が HSA の Trp-214 周辺の構造を変化させていることから，精油の HSA への吸着がその立体構造を変化させ，グルコースに対する反応性に影響を与

neryl acetate

geranyl acetate

えたと推察された．透析によって遊離のユズ精油を除去した際には無添加の HSA と差が認められなかったことから，

O

精油成分の HSA に対する作用は可逆的な吸着によるもの

O

O

O

と推測される．
結果的にユズ精油はメイラード反応の予防効果を示さなかったが，タンパク質の立体構造を変化させ，メイラード

図３

反応の進行に影響を与えることが明らかとなった．今後他の精油と様々なタンパク質との相互作用を詳細に調べるこいる，などいくつかの可能性が考えられる．
—とで，メイラード反応の阻害作用を示す精油を開発することも可能であると考える．

チロシナーゼ阻害に関与する精油成分

一方，DPPH ラジカルの消去活性と O2 消去活性，チロシナーゼ阻害活性との間には明確な関連は認められなかっ

次に，精油成分のタンパク質に対する直接的な影響を調た．これまでに Choi らが同様にカンキツ精油の DPPH ラ

べるために，モデルタンパク質として酵素チロシナーゼをジカル消去能について報告しているが８），成分的には特に用いて，その触媒作用に対する精油の影響を調べた．顕著

geraniol，terpinolene，γ-terpinene の寄与が大きいとしな阻害活性が認められた LIS，EUR，KIY は他の精油にている．これらの関与成分は明らかにチロシナーゼの阻害比べて sabinene，neral，geranial，neryl acetate，geranylとは異なる物質であり，O2— の消去に関与している物質とacetate を多く含有している（図３）．このうち neral とも異なるものと推察される．

geranial はすでにチロシナーゼのアミノ基とシッフ塩基を形成することでチロシナーゼを阻害することが報告されて以上の結果，カンキツ精油はタンパク質，酵素に共有的いるが，今回これらの成分を多く含むカンキツ精油においに，あるいは可逆的に吸着して，それらの分子の生化学的ても，チロシナーゼの阻害活性が認められることが初めてな機能を変化させ得ることが明らかとなった．さらに活性明らかとなった．チロシナーゼはメラニン色素の生成に関酸素やフリーラジカルの反応性を消去する作用も持ち合わ与していることから，その阻害活性を示すカンキツ精油がせており，それらの関与成分がお互いに異なる可能性も示

メラニンの生成を抑制する可能性もあり今後の実用的な利唆された．従って，複雑な多成分共存系であるカンキツ精用が期待される．

油は複数の生化学的な作用を備えている，言い換えれば多メイラード反応と並んで，老化や生活習慣病の大きな要様な機能性スペクトルを示す素材であることが示された．

因として活性酸素をはじめとするフリーラジカルの関与が得られた成果の中で，チロシナーゼの阻害活性は美白効指摘されている．そこで本研究では，カンキツ精油が有すにつながることから，その実用的な利用に向けて今後詳細——

る O 2 と DPPH ラジカルに対する消去能を測定した．
O2 の消な検討を進めていく予定である．

去活性は KER，LIS，KIY に特に強いことが明らかとなった．注目すべきはこれらが同時にチロシナーゼ阻害活性

謝を示している点である．チロシナーゼは DOPA の酸化で—

O2 を生成することが報告されているが，dopachrome の生成—
2に O は関与していないことから，カンキツ精油が有す

12）

辞本研究をするに当たりご支援をいただきました㈶コスメ
トロジー研究振興財団，並びにご指導頂きました高知大学
農学部・沢村正義教授に感謝申し上げます．

—

る O2 の消去活性により，見掛け上チロシナーゼ阻害活性が認められたとは考え難い．従って，現時点ではチロシ（文献）

ナーゼ阻害に関与していると推察される sabinene，neral，

１） 井上重治：香りの抗菌作用—アロマテラピーへの応

geranial，neryl acetate，geranyl acetate などの成分が同——用，化学と生物，39，475-481，2001．

時に O2 の消去能を有する，あるいは他の成分で O2 の消去

２） 受 田 浩 之： 酵 素 ス ー パ ー オ キ シ ド ジ ス ム タ ー ゼ

活性を有する物質が偶然それらのカンキツ精油に含まれて(SOD) の活性測定法，Dojin News，96，1-6，2000．

− 26 −

カンキツ精油の有する生体作用の生化学的解析

Technol. Res., 7, 45-49, 2001.

３） Ukeda, H., Hasegawa, Y., Ishii, T. and Sawamura, M.:
Inactivation of Cu,Zn-superoxide dismutase by intermediates

８） Choi, H.-S., Song, H.S., Ukeda, H. and Sawamura,of Maillard reaction and glycolytic pathway and some sugars,

M.: Radical-scavenging activities of citrus essential oils

Biosci. Biotechnol. Biochem., 61, 2039-2042, 1997.

and their components: detection using 1,1-diphenyl-2-４） 森山洋憲，片山泰幸，中林錦一，受田浩之，沢村正義：

picrylhydrazyl, J. Agric. Food Chem., 48, 4156-4161, 2000.

高知県産茶および青 物の有するスーパーオキシドアニ

９） Ukeda, H., Kawana, D., Maeda, S. and Sawamura,M.: Spectrophotometric assay for superoxide dismutase

オン消去能の測定，食科工，49，679-682, 2002.
５） Ukeda, H., Hasegawa, Y., Harada, Y. and Sawamura,based on the reduction of highly water-soluble

M.: Effect of carnosine and related compounds on thetetrazolium salts by xanthine-xanthine oxidase, Biosci.

inactivation of human Cu,Zn-superoxide dismutase by

Biotechnol. Biochem., 63, 485-488, 1999.

modification of fructose and glycolaldehyde, Biosci.

10） Kubo. I. And Kinst-Hori, I.: Tyrosinase inhibitory
activity of the olive oil flavor compounds, J. Agric. Food

Biotechnol. Biochem., 66, 36-43, 2002.

Chem., 47, 4574-4578, 1999.

６） S o n g , H . - S . , U k e d a , H . a n d S a w a m u r a , M . :Antioxidative activities of Citrus peel essential oils and11） Shaklai, N., Garlick, R.I. and Bunn, H.F.: Nonenzymatictheir components against linoleic acid oxidation, Foodglycosylation of human serum albumin alters its conformationand function, J. Biol. Chem., 25, 3812-3817, 1984.

Sci. Technol. Res., 7, 50-56, 2001.
７） Sawamura, M., Song, H.-S., Sagawa, K. and Ukeda,

12） Koga, S., Nakano, M. and Tero-Kubota, S.: Generation

H.: Characteristic aroma components of Tosa-buntanof superoxide during the enzymatic action of tyrosinase,(Citrus grandis Osbeck forma Tosa) fruit, Food Sci.

Arch. Biochem. Biophys., 292, 570-575, 1992.

− 27 −

脂質−高分子界面活性剤混合系による新規分散系“液晶エマルション”の形成
京都大学大学院

中

薬学研究科

野

実

Aqueous dispersions of lyotropic liquid crystalline phases were prepared by high-pressure emulsification using
lipid mixtures, monoolein (MO) and oleic acid (OA), and emulsifier Pluronic F127 with changing their composition.
The size and internal structure of the prepared particles were characterized by dynamic light scattering and smallangle X-ray scattering, respectively. In MO/F127/buffer system with 8 wt % F127 to MO, particles with a diameterof ca.180 nm and including bicontinuous cubic phases (cubosomes) were formed. The lipid ratios strongly affected themorphology of the internal structure of the particles. By increasing the weight fraction of OA in the lipid mixtures,the internal structure transformed in the order of bicontinuous cubic-inverted hexagonal-inverted cubic.
13
C NMR experiments with paramagnetic shift reagent showed that the signal of carbonyl carbon of oleic-1-13Cacid mixed in the cubosomes readily shifted to a lower magnetic field by addition of europium ion (Eu3+), indicatinghigh accessibility of the ion into the water channel inside the particles.
The cubosomes were stable in buffer, but collapsed in the presence of serum albumin or plasma. Gel filtration
experiments revealed that albumin has the ability to extracts MO from cubosomes and subsequently disintegrate theparticles.

１．緒

同時に液晶構造を壊してしまうためであった。しかし、高言分子の界面活性剤はこれらの構造に対する相溶性が低いた

脂質分子の多くは水中で自己会合し、ラメラ、逆ヘキ

め、このような微粒子の調製に有効であると考えられる。

サゴナル、逆キュービックなどの多様な集合構造（リオ

そこで、本研究では、高分子乳化剤 Pluronic が液晶相とトロピック液晶）を形成する。両連続キュービック、逆ヘの相溶性が低いこと、及び、液晶相の分散微粒化剤としてキサゴナル液晶などの非ラメラ液晶構造は、生体内で過渡有効であることを実証し、得られた微粒子の構造、機能性

的、部分的に形成され、蛋白質の活性を制御すると考えを評価した６、７）。

２．実られており、この構造の特徴と機能についての物理化学
的あるいは生化学的関心が持たれている験

。特に、脂質１- ３）

monoolein（MO）は、両連続キュービック液晶相を形成す

２．１

微粒子の調製る典型的な脂質であり４、５）、非ラメラ構造研究に多く用い

脂質 monoolein（MO）、oleic acid（OA）の混合物に対られている。これらの非ラメラ相は水和により形成される

し８ wt％の Pluronic F127 を混合後、脂質濃度が 10 g/

わけであるが、疎水的な相であり、過剰な水の存在下では

L となるようにリン酸緩衝液（50 mM phosphate, 100 mM

水相とは相分離して存在する。

NaCl, pH7）を加え約 80℃で水和した。Vortex ミキサー

一般の疎水性液体（油）を界面活性剤によって水中に乳やホモジナイザーを用いて試料を粗分散させた後、高圧乳化できるのと同様に、この水に不溶な液晶相も分散安定化化機（Nanomizer, 吉田機械興業）により 35 MPa、60℃、

できれば、粒子内部に液晶構造を有する脂質ナノパーティ

30 min の条件で分散微粒化を行った。得られた微粒子のクル（液晶エマルション）が得られると考えられる。これ

粒径は動的光散乱（DLS）（Photal LPA-3000/3100、大はエマルション（液体分散系）やサスペンション（固体分塚電子）により測定した。

散系）、あるいはリポソームなどとは異なる特性を有した、新規微粒子分散系となることが期待される。しかしなが

２．２

Ｘ線小角散乱（SAXS）

ら、このような分散微粒子の調製は困難であるとされてき分散後に限外濾過により濃縮した試料、および、分散さた。それは、微粒子の分散安定化に寄与する界面活性剤が、せていない水和試料を測定用ガラスキャピラリーに封入しFormation of the Novel Dispersion System“Liquid Crystalline Emulsion” with LipidPolymer Surfactant Mixtures

測定した。測定はＸ線小角散乱装置（理学電機）を用い、出力 200kV-50mA、波長 1.54Å、カメラ長 505 ㎜の条件で行った。回折パターンから非分散試料が形成する液晶相、
および、分散微粒子の内部構造を同定した。

Minoru Nakano
Graduate School of Pharmacetutical
Sciences, Kyoto University

２．３

C NMR

13

カルボニル炭素を 13C 標識した OA（13C-OA）を、MO− 28 −

脂質−高分子界 活性剤混合系による新規分散系“液晶エマルション”の形成に対し５％混合して微粒子を調製し、濃縮後 13C NMR 測

0:10 では、Fd3m の回折パターンが得られ、逆ミセルキュービ

定（Varian Gemini 300）を行った。常磁性シフト試薬

ック相を内部に有する微粒子の形成が確認できた。H I I およ

EuC l3 添加前後における標識炭素のケミカルシフトの変化

び Fd3m 構造の組成範囲では、OA の増加によりピークが広を観察し微粒子内部へのイオン透過性を評価した。

角側に移動した。またこの範囲においては F127 濃度を増加させると粒子径は減少したが、回折パターンは変化せず、内２．
４

ゲル濾過クロマトグラフィ

部構造が F127 濃度によって変化していないことが判明した。

調製微粒子をウシ血清アルブミン（BSA）あるいはラット血漿と 30min インキュベーション後、アガロースゲ
ルカラムにより微粒子画分とタンパク画分とに分離し、それぞれのタンパク量、脂質濃度を酵素法により定量した。

３．結
３．
１

果

非分散試料の液晶相形成

MO/OA/F127/buffer 混合非分散試料（lipids/buffer =10g/L, F127/lipids = 0 および８wt％）は、液晶相の形成を示す明瞭な SA XS パターンを与えた。Fig ure １に MO:OAがそれぞれ 10:0、5:5、0:10 における SA XS プロファイルを示す。10:0 では、F127 が存在しない場合、６次までの回折（（110），（111），（200），（211），（220），（221/300））が観察され、P n3m 型の両連続キュービック相が形成されていることが判明した。８％ F127 の存在下では（110）
（200）
，
（211）
，
，
（310），（222），（321）の回折より Im3m 型の両連続キュービ
ック相であることが判明した。一方、5:5 においては、F127の有無によらず同一の回折パターン（（10），（11），（20））が得られ、逆ヘキサゴナル（H I I）相の形成が確認された。また、0:10 においても、回折パターンは F127 によって変化せず、（111），（220），（311），（222），（400），（331）の回折ピーク
から、Fd3m 型の逆ミセルキュービック相が形成されていることが判明した。

３．
２

液晶相を有する分散微粒子の調製

高圧乳化法により微粒子の調製を行い、その粒径と内部構造をそれぞれ DLS、SA XS により評価した。F127 を全脂質の８w t％とし、脂質混合比（MO:OA）を変えて微粒子

Figure 1 SAXS profiles of nondispersed MO/OA mixtures inphosphate buffered saline with different weight ratios in thepresence and absence of F127.

を調製した。その結果、粒子径は OA の割合の増加により、いったん減少し、その後増加するという傾向を示した（Figure2）。このようにして調製した微粒子の SA XS プロファイルを
Figure 3 に示す。OA の無い場合（MO:OA = 10:0）、両連
続キュービック液晶相を有する微粒子、キュボソームの形成が明らかになった。この際、Pn3m の明瞭な第１，第２ピークと、より小角側に Im3m の第１ピークが出現し、２種類の両連続キュービック構造の共存が示唆された。9:1 から 6:4 においては、不明瞭ながら Im3m の回折ピークが観察された。この範囲においては、OA の増加によりピークが小角側に移動する傾向が見られた。5:5 から 2:8 においては H I I 構造を示
唆する回折パターンが得られ、逆ヘキサゴナル液晶相を有する微粒子、ヘキソソームの形成が明らかになった。1:9 およびFigure 2 Mean diameter of particles prepared in MO/OA/F127/
buffer system with 8% F127 and different MO/OA ratios.

− 29 −

Figure 3 SAXS profiles of MO/OA/F127/ buffer dispersed
system with 8% F127 and different MO/OA ratios.

Figure 4 13C NMR spectra of MO/13C-OA/F127/buffer dispersed system with 8% F127 and 5% 13C-OA before andafter addition of shift reagent (Eu3+).

３．
３

MO がアルブミンによって引き抜かれることが判明した。

キュボソーム内部へのイオン透過性

C-OA を 5% 含むキュボソームを調製し、濃縮後 13C

13

NMR 測定を行った。低磁場領域に２本のピーク（176，

また、血漿とのインキュベーションによって MO は引き抜きに続いて加水分解を受けることも判明した。

179ppm）が観察され、それぞれ MO、OA カルボニル炭素４．考と帰属された（Figure 4 下）。このうち、カチオンと相互作用しうる OA カルボニルの方に注目すると、シフト試

４．１

察

非分散試料の液晶相形成と Pluronic F127 の効果薬である Eu 添加後、ピークは速やかに低磁場シフトし、脂質は水中で疎水性相互作用によって会合し、種々の液元の位置にはシグナルが観察されなかったことから、微粒晶相を形成する。その会合様式は分子の持つ親水、疎水基

子内部の全ての OA が外部から添加された Eu の影響をの大きさのバランスによって決まる。例えば、レシチンは受けたことが判明した（Figure 4 中、上）。OA は微粒子

曲率の無いラメラ相を形成するが、MO はやや負の自発曲内部に分布していることから、イオンは微粒子内部に容易率を有し、両連続キュービック液晶相を形成する。両連続に浸入できることが明らかになった。

キュービック相は水相、脂質相それぞれが連続相である立3+3+方晶であり、脂質二分子膜によって隔てられた水のチュー

３．４

キュボソームと血清アルブミン及び血漿とのブが規則正しく三次元的に繋がった構造をしている。３

相互作用

）
、Q229
種類の両連続キュービック相 Q224（Figure 5（a）

キュボソームを BSA あるいはラット血漿と 30min イン（Figure 5（b））
、Q230 が知られており、それぞれ Pn3m、キュベーション後、ゲル濾過クロマトグラフィにより微粒

Im3m、Ia3d の回折パターンを与える２）。OA は MO と同

子画分とタンパク画分とに分離した。その結果、微粒子

じアシル鎖を有するが親水基が小さいため、膜に負の曲率画分における MO 濃度の低下、およびタンパク画分の MOを誘起する８）。従って、MO に OA を添加すると両連続キ濃度の上昇が観察され、逆に、微粒子画分にはアルブミン

ュービックから、逆ヘキサゴナル、逆ミセルキュービック

は検出されなかった。このことから、キュボソーム中のへと相が転移する（Figure 1）。Figure 5 にはこれらの相脂質−高分子界 活性剤混合系による新規分散系“液晶エマルション”の形成から、H II（ヘキソソーム）、そして Fd3m へと変化した。
これは、OA が膜に負の曲率を与えるためである。しかし、OA が低濃度（脂質の 40％以下）においては、OA の増加
によりピークが小角側に移動する傾向が見られた。これは、低濃度においては OA の解離度が高く、膜に正の曲率を与えるためと考えられる。この範囲における、OA の増加による粒径の減少も、OA の解離によって親水性が高まるためと解釈できる。逆に、OA が高濃度であれば疎水性が増加し、粒径は増加する（Figure 2）。
OA が高濃度（脂質の 50% 以上）においては、F127 濃度によって微粒子の内部構造は変化しなかった。これは上述のように、F127 は H II 相および Fd3m 相に対する相溶性が非常に低いために、微粒子の分散安定性のみに寄与し、Figure 5 Schematic representation of nonlamellar liquid
crystalline phases. (a) Bicontinuous cubic phase of Pn3m,(b) Im3m, (c) inverted hexagonal phase, and (d) inverted
micellar cubic phase of Fd3m.

内部構造に影響を与えないことを表している。

４．３

キュボソーム内部へのイオン透過性

リン脂質リポソームの場合、イオンの膜透過性は非常に低いことが知られており、このことは 31P NMR においての模式図を示した。逆ミセルキュービック相は両連続キュ

シフト試薬の添加によってピークのスプリットが観察されービック相とは異なり、不連続（discrete）型のキュービることから確認できる。これは、リポソーム外葉のリン脂ック相であり、大小２種類の球状逆ミセルが配列し面心立

質のみがカチオンであるシフト試薬と相互作用しケミカル。脂質の種類やシフトの変化が生じるのに対し、内葉のリン脂質はシフト方晶を形成していると考えられている

９-11）

混合組成を変えることで膜の曲率を変化させ、これらの非試薬の影響を受けないためである 13-15）。

ラメラ相を形成させることが出来る。

キュボソームにも同様の手法を適用し、イオンの粒子内F127 の添加により、両連続キュービック相の場合のみ部への透過性を評価した。この際、微粒子の構成脂質であ相変化が生じた。これらのことから、F127 は Pn3m 相にる M O は電荷を持たず、シフト試薬によるケミカルシフトの

対しては混合して Im3m 相へと変化させるが、H II 相およ

変化が起こらないので、５％の 13 C - OA を導入し、OA カル

び Fd3m 相に対してはほとんど相互作用しないことが明ら

ボニルピークの変化を観察した。その結果、ピークは完全かとなった。このことはこれらの液晶相の分散を行う上でにシフトしたことから、シフト試薬が容易に粒子内部に浸透重要な知見を与える。水に溶解しないこれらの液晶相を分したことが判明した。イオンは微粒子表面の F127 の層を散させるためには、用いる分散剤（乳化剤）として、比透過した後、内部キュービック相の水のチャネルを自由に移較的親水性の高い界面活性剤が要求される。しかしそれら動するものと考えられる。このことから、水溶性物質を微は高い正の自発曲率を持っているため、液晶相とよく混ざ粒子に封入するのは困難であることが示唆された。

り合うならば膜の曲率を大きく変化させてしまう。低分子の界面活性剤ではその傾向が強いのに対し、高分子界面

４．４

キュボソームと血清アルブミン及び血漿との活性剤では脂質との相溶性が低いため 12）、分散剤として相互作用有効であると考えられる。実際に、F127 は、HII 相および微粒子の DDS への応用を考える上で、血漿タンパク質とFd3m 相に対する相溶性は非常に低く、また Pn3m 相に対の相互作用を明らかにする必要がある。その中でも血清アル

してはある程度の相溶性はあるものの別の両連続キュービ

ブミンは MO や OA と結合することが知られており 16、17）、こック構造（Im3m）を保っているため、分散に用いることの微粒子の代謝挙動を左右する可能性がある。実際、微が出来ると結論づけられた。

粒子中の MO は血清アルブミンや血漿により速やかに微粒子外へ引き抜かれることがゲル濾過クロマトグラフィに４．
２液晶相を有する分散微粒子の調製より明らかとなった。このことはこの微粒子が血中においF127 を用いて高圧乳化法を行った結果、MO/OA 混合て急速に崩壊することを示しており、微粒子からの薬物の物が形成する液晶相を保持した微粒子（液晶エマルション）

sustained release を想定するとこの特性は不利であると考が得られることが判明した。OA の割合の増加により、微えられる。しかしながら、調製、保存時においては安定で粒子内部の構造が、両連続キュービック（キュボソーム）ありながら、血中投与後速やかに薬物が放出されるという− 31 −

メカニズムは、場合によっては一つの投与形態として有効であると考えられる。

７） N a k a n o M , T e s h i g a w a r a T , S u g i t a A e t a l . :Dispersions of liquid crystalline phases of the

今後、キュボソーム、ヘキソソームの液晶担持微粒子としての特性を最大限に生かすためには、血漿タンパク質にmonoolein/oleic acid/Pluronic F127 system, Langmuir,
18, in press, 2002.

よる構成脂質の引き抜きという微粒子崩壊メカニズムを回８） Borne J, Nylander T, Khan A: Phase Behavior and

避させなければならない。そのためには、微粒子の構成脂Aggregate Formation for the Aqueous Monoolein System

質を変える必要がある。脂肪酸やモノグリセリドはアルブ

Mixed with Sodium Oleate and Oleic Acid, Langmuir,

ミンに対して高い親和性を有するが、二本鎖の脂質は結合

17, 7742-7751, 2001.

しないので、ジグリセリドやリン脂質などを加えることで

９） L u z z a t i V , V a r g a s R , G u l i k A e t a l . : L i p i d

この崩壊メカニズムを軽減あるいは回避できると考えられpolymorphism: a correction. The structure of the cubicる。液晶構造を維持したまま脂質組成をどこまで変化させphase of extinction symbol Fd-- consists of two types

られるかがこれからの課題である。

of disjointed reverse micelles embedded in a three-５．総括

dimensional hydrocarbon matrix, Biochemistry, 31, 279285, 1992.

高分子界面活性剤を用いることで、液晶エマルションの

10） Luzzati V, Vargas R, Mariani P et al.: Cubic phases

調製、すなわち液晶構造を維持したまま安定に分散微粒子

of lipid-containing systems. Elements of a theory and化することが可能となった。微粒子の薬物キャリアとしてbiological connotations, J. Mol. Biol., 229, 540-551,の性能を考えると、水溶性物質に関してはその保持は困難

1993.

であることが示唆されたが、疎水性あるいは膜結合性のあ11） Cribier S, Gulik A, Fellmann P: Cubic phases of

る物質は、微粒子内部の広大な脂質−水界面を利用してト

lipid-containing systems. A translational diffusion study

ラップすることができると考えられる。血中での微粒子のby fluorescence recovery after photobleaching, J. Mol.

早い崩壊挙動を改善すれば、液晶としての性質を生かしたBiol. 229, 517-525, 1993.

新規 DDS の構築が可能であると考えられる。

12） Kunieda H, Uddin MH, Furukawa, H et al.: Phase
behavior of a mixture of poly（oxyethylene）-Poly

References（dimethylsiloxane）copolymer and nonionic surfactant in

１） Mariani P, Luzzati V, Delacroix H: Cubic phases ofwater, Macromolecules, 34, 9093-9099, 2001.

lipid-containing systems, J. Mol. Biol., 204, 165-189,
1988.

13） Barsukov LI, Victorov AV, Vasilenko IA et al.:Investigation of the inside-outside distribution,２） Lindblom G, Rilfors L: Cubic phases and isotropicintermembrane exchange and transbilayer movement

structures formed by membrane lipids - possibleof phospholipids in sonicated vesicles by shift reagent

biological relevance, Biochim. Biophys. Acta, 988, 221256, 1989.

NMR, Biochim. Biophys. Acta., 598, 153-168, 1980.
14） Ivanov NN, Rykov SV, Isakova OL et al.: Estimation

３） Seddon JM: Structure of the inverted hexagonal（HII）phase, and non-lamellar phase transitions of lipids,
Biochim. Biophys. Acta, 1031, 1-69, 1990.

of liposome integrity by 1H-NMR spectroscopy, Anal.
Biochem., 147, 280-284, 1985.
15） Saito H, Nishiwaki K, Handa T et al.: Comparative

４） Hyde ST, Andersson S, Ericsson B et al.: A cubic

study of fluorescene anisotropy in surface monolayers ofstrucure consisting of a lipid bilayer forming an infinite

emulsions and bilayers of vesicles, Langmuir, 11, 3742-

periodic minimum surface of the gyroid type in theglyceromonooleate-water system, Z. Kristallogr., 168,
213-219, 1984.

3747, 1995.
16） Hamilton JA, Era S, Bhamidipati SP et al.: Locationsof the three primary binding sites for long-chain fatty５） Q i u H , C a f f r e y M : T h e p a h s e d i a g r a m o f t h emonoolein/water system: metastability and equilibrium
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USA, 88, 2051-2054, 1991.
17） T h u m s e r A E A , B u c k l a n d A G , W i l t o n D C ,６） Nakano M, Sugita A, Matsuoka H et al.: Small-angle

Monoacylglycerol binding to human serum albumin:

C NMR investigation on the

Evidence that monooleoylglycerol binds at theinternal structure of "cubosomes", Langmuir, 17, 3917-

dansylsarcosine site, J. Lipid Res., 39, 1033-1038, 1998.

X-ray scattering and3922, 2001.

13光で透過制御可能な人工ベシクルを形成する新規多鎖型
両親媒性化合物の開発
大阪大学大学院

中

工学研究科分子化学専攻

辻

洋

司

In order to develop novel type of artificial vesicles which can regulate the release ability of entrapped
substances by light, four cinnamic acid-derived amphiphiles 1-4 were prepared, and their photoreactivity andaggregation behavior in the solution, the aqueous dispersion, and the DPPC (L-α-dipalmitoylphosphatidylcholine) bilayer matrix were examined. Although 4-hexadecyloxycinnamic acid (3) was converted to the syn head tohead dimer in the DPPC bilayer matrix by irradiation at above 280 nm light with formation of cis isomer, thecorresponding 3-bromo-4-hexadecyloxycinnamic acid (4) dimerized without formation of the cis isomer.
Therelease of entrapped glucose from the vesicle composed of a 1:1 mixture of cinnamic acid-derived amphiphile 1(or 2) and DPPC was suppressed by irradiation at above 280 nm light and the extent of suppression was muchlarger in the case of 2.
The formation of cis isomer accelerated the leakage of the entrapped glucose.
In
addition, the release of entrapped glucose from the vesicle containing 2 was accelerated by irradiation at 254
nm, which can convert the dimer to the monomer.

１．緒

古くから行われており、cis-trans 異性化の他に、[2+2] 付加

言環化（以下、光二量化と呼ぶ）することが知られている。

生体膜の構成成分であるホスファチジルコリン等のリン固体状態での光反応はその結晶構造に依存した光反応生成

脂質は水中で分散させるとベシクルと呼ばれる小胞体を形物を与えるが、溶液中の光反応においては cis-trans 異性化成する。このベシクルは二分子膜によって外水相から隔てが優先的に進行する。また最近では、桂皮酸誘導体をミセられた内水相をもつためその中に水溶性物質を保持させる

ルや L B 膜中に導入することで分子間の配向を変化させ、光ことができ、マイクロカプセルとしての利用が考えられる。

反応生成物を制御する研究が盛んに行われている９-13）。

そのため、ドラッグデリバリーシステムの構築など特に医そこで本研究では、光により自在に内包物の透過制御が療分野で注目されている。一方、化粧品素材としても既にできる新規な人工ベシクルの構築を目的として、光応答部利用されているが、リン脂質のみからなるベシクルでは、位に桂皮酸ユニットをもつ二鎖型リン脂質類縁体（1，2）

水溶性物質の容物としての機能を果たしているにすぎず、

並びに対応する一鎖型類縁体（3，4）を新たに設計合成し、その利用は自ずと限定される。従って、この機能に加えてその光反応性、会合状態、並びに光による内包物の透過制

内包物の透過速度を自在に制御することができればさらに御について検討したので報告する。

利用範囲が拡大され、新しい化粧品素材の開発に大きな可

２．実能性を提供するものと期待される。
最近、著者らは、スチリルピラジン型両親媒性化合物が

2.1

験

合成

光により単量体と二量体間を可逆的に変換できること、さ市販の 3-bromo-4-methoxybenzaldehyde（7）から二鎖らに当該化合物とジパルミトイルホスファチジルコリン型桂皮酸系両親媒性化合物（2）の合成方法を Scheme 1（DPPC）で調製した混合ベシクルでは、光制御により内に示す。化合物１は同様の方法により合成した。

包物の完全な抑制−促進が行えることを見いだした１- ４）。
このような光応答性を示す機能性分子は数多く知られてお2.1.1

り 、それぞれ固有の機能を示すことが期待されるので、ナスフラスコに、7（5.00 g, 23.3 mmol）、マロン酸（4.84

さらなる高性能化を指向して新しい構造を有する両親媒性g, 46.5 mmol）、ピリジン 10 mL、ピペリジン４滴を入れ、化合物を開発することは極めて重要な課題といえる。その100℃で 24 時間加熱した。反応終了後、氷 20 g −濃塩酸

も20 mL 中に投入した。析出した固体をろ別し、水洗後乾５）

一つに桂皮酸誘導体があるが、光反応に関する研究

６- ８）

Development of Novel Amphiphilic
Compounds with Multiple Hydrophilic
Groups Forming Artificial Photoresponsive
VesiclesYohji Nakatsuji
Department of Molecular Chemistry,
Graduate School of Engineering, Osaka
University

化合物 8 の合成燥した。さらにこの固体をクロロホルムで洗浄し、メタノールから再結晶して白色固体を得た。収量 4.5 g（74%）．
1

H - N M R（400M H z , d6- a c e t o n e）: δ 7.91 (d , 1H ,J =2.2H z , a r o m at i c），7.67（d d , 1H , J = 8.4, 2.2 H z ,aromatic），7.58（d, 1H, J= 16.1 Hz, CH=CH), 7.14（d,1H, J = 8.4 Hz, aromatic），6.45（d, 1H, J= 16.1 Hz,
CH=CH), 3.95（s, 3H, ArOCH3）．

− 33 −

構造式

Scheme 1

Anal. Found: H, 3.42; C, 46.43; Br, 30.97. Calcd. for
C10H9BrO3: H, 3.53; C, 46.72; Br, 31.08.

mL を Ar バブリングしながら加えた後、48 時間加熱還流した。放冷後、析出した固体をろ別して白色固体を得た。
収量 3.29g（収率 89%）2.1.2

化合物 9 の合成

mp 140-141 ℃ .

化合物 8（2.34 g, 9.1mmol）を二口ナスフラスコに入

H-NMR（400 MHz, CDCl3）: δ 7.75（d, 1H, J= 2.2Hz,

1

れ、Ar 置換を行った後、ジクロロメタン 18mL を反応容

aromatic），7.56（d, 1H, J= 16.1 Hz, CH=CH)，7.41（dd, 1H，器へ加えた。そこへ三臭化ホウ素（0.1M ジクロロメタン

J= 8.4, 2.2 Hz, aromatic），6.87（d, 1H, J= 8.4 Hz, aromatic），

溶液）（18mL, 18mmol）を加えた。室温で 24 時間反応後、6.31（d, 1H, J= 16.1Hz, CH= CH)，4.19（t, 2H, J=6.6Hz,

反応溶液に水 10mL を加え三臭化ホウ素を失活した後、さ，4.06（t, 2H, J= 6.6 Hz, ArOCH2R)，1.85（m,ArCOOCH2R）らに水 40mL を加えて酢酸エチル（100mL×2）で抽出し2H），1.75-1.21（m, 54H）
，0.89（t, 6H, J= 6.8 Hz）．

た。得られた有機層を飽和食塩水（100mL×3）で洗浄後、NaOH 水溶液（100mL）で有機層を抽出した。この水層をAnal. Found : H, 10.24; C, 70.79; Br, 11.68. Calcd. for
C41H71BrO3 : H, 10.34; C, 71.17; Br, 11.55.

塩酸水溶液で酸性にした後、水層を酢酸エチル（100mL×2）にて抽出した。無水硫酸マグネシウムで脱水した後、2.1.4

化合物 4 の合成

溶媒を完全に留去し淡黄色固体を得た。

ナスフラスコに化合物 10（3.30 g, 4.77 mmol）を入れ、収量 1.97 g（収率 89%)

2.5 N 水酸化ナトリウム水溶液 4 mL、エタノール 8 mL を

H-NMR（400 MHz, d6-acetone）: δ 7.85（d, 1H, J= 2.2 Hz,

加えて、3 時間加熱還流した。放冷後、析出した固体をメ

aromatic），7.59-7.50（m, 2H, CH=CH, aromatic），7.05（d,ンブランフィルターで吸引ろ過し、水（4 mL）とエタノ

1H, J= 8.4 Hz, aromatic），6.39（d, 1H, J= 16.1 Hz, CH=CH）．

ール（4 mL）で洗浄した（白色固体 2.2 g / 収率 94%）。

1

得られた固体 0.40 g に 10 % 塩酸（100 mL）を加えて、2.1.3

化合物 10 の合成

クロロホルム（100 mL× 3）により抽出を行った。この化合物 9（1.30g, 5.35mmol）、臭化セチル（6.53g，21.4mmol）、 炭 酸 カ リ ウ ム（5.90g, 42.8mmol）、 触 媒 量 の有機層を無水硫酸マグネシウムで脱水し、溶媒を留去した（白色固体）。

tetrabutylammonium bromide（TBAB）を二口ナスフラス

収量

コに入れ、Ar 置換を行った。この反応容器にアセトン 20

mp 50-51 ℃− 34 −

0.32 g（収率 84 %）光で透過制御可能な人工ベシクルを形成する新規多鎖型両親媒性化合物の開発

H-NMR（400 MHz, CDCl3/CD3OD = 4/1): δ 7.73（d,の分散液を９つに分取した。それぞれの分散液は Ar バブ

1H, J = 2.2 Hz, aromatic），7.42-7.34（m, 2H, aromatic,

リングを行い空気を除去した後、Xe 灯光（波長 >280 nm）

CH=CH), 6.85（d, 1H, J = 8.4 Hz, aromatic），6.57（d, 1H,

で所定時間照射した。光照射後、1H-NMR により光反応生J = 16.1 Hz, CH=CH），4.03（t, 2H, J = 6.6 Hz, ArOCH2R），

成物の同定を行った。

1，1.51-1.16（m, 26H）
，0.89（t,1.82（m, 2H, ArOCH2CH2R）

2.3

3H, J = 6.8 Hz）．

化合物 1, 2/DPPC 混合ベシクルにおける内包物

流出実験
2.1.5

化合物 2 の合成

化合物 10 µmol（1 : 9.98 mg, 2 : 11.56 mg）、DPPC10

二口反応管に化合物 4（ナトリウム塩）（49 mg, 0.10µmol（7.34 mg）を Pyrex 製の試験管に入れ、クロロホルmmol） を入れて Ar 置換を行い、トリエチルアミン（90

ムを加えて溶解した。ロータリーエバポレータで溶媒を留µL. 0.64 mmol) 、THF 4 mL を加えた。これを -78 ℃

去した後、デシケーター内で一晩減圧乾燥させ、試験管内に冷却してトリメチルアセチルクロライド（40 µL, 0.32

壁に薄膜を形成させた。ここに、グルコース水溶液（20mmol）をゆっくり加えた。その後室温に戻し、さらに

mM Tris-HCl Buffer, 300 mM グルコース , pH7.5）2.0

48 時間撹拌した。溶媒を留去して得られた白色固体に、

mL を加え、80℃ の水浴中で加温し、振とう、膨潤によって、L - α - グリセロホスファチジルコリン（GPC）（13 mg,

試験管内壁から剥離させた後、80 ℃の水浴中で、25 W

0.03 mmol）、ジメチルアミノピリジン（DMAP）（13 mg,プローブ型ソニケーターを用いて、５分間断続的（10 秒

0.10 mmol）を加え、Ar 置換を行い、ジクロロメタン 4

ON、10 秒 OFF の繰り返し ) に超音波照射した。3 時間後、

mL を加えて室温で６日間撹拌した。溶媒を留去して得分散液を 2 分し、一方に Ar 置換を行い、波長 >280 nmられた淡黄色固体を CHCl3 に溶解し、陽イオン交換樹脂の光を 1 時間照射した。 2 つのベシクル分散液は、そのDOWEX-50W を詰めたカラム（展開溶媒 : CHCl3）を通まま一晩静置した。その後、各分散液 1 mL を、バッファ

すことにより Cd を除去し、トリエチルアミンを数滴加えー水溶液（20 mM Tris-HCl Buffer, 300 mM スクロース ,て撹拌した後、溶媒を留去した。次に、シリカゲルクロマ

pH 7.5）を溶離液として、ゲル濾過（Sephadex G-50, 2 g,

トグラフィー（展開溶媒 : CHCl3/MeOH/H2O=7/3/0 →15×100 mm）し、ベシクルフラクション 3.0 mL を集めた。

65/25/4）を行い、白色固体を得た。

このベシクル分散液を 25 ℃の恒温槽中で静置し、所定時

収率 17 mg （収率 50%）

間ごとにサンプリングして相対蛍光強度の測定を行った。

F A B - M A S S（m / z , %） : 1156 （[ M +1] , 7），184+（100）．

1

流出性の測定は酵素法を用いて行った 14）。

H-NMR（400MHz, CDCl3/CD3OD): δ 7.57

３．結果と考察（m, 2H, aromatic），7.40（m, 2H, CH=CH），7.27（m,2H, aromatic），6.72（m, 2H, aromatic），6.15（m, 2H,

3.1

一鎖型桂皮酸系両親媒性化合物 3, 4 の光反応性

CH=CH），5.24（m, 1H），4.38（m, 1H），4.22（m, 1H），

化合物 3, 4 ともにジクロロメタン均一溶液系で光照射（>2804.10（m , 2H），3.98（m, 2H），3.89（m, 4H），3.43（m,nm）すると、ci s 体への異性化が優先するが、水分散系では，
0.71（t,2H），3.05（s, 9H, N+（CH3）3），1.73-1.07（m, 56H）対応する β 二量体 5, 6 をそれぞれ選択的に与える。化合物

6H, J = 7.0 Hz）．

３の構造で、ヘキサデシル基をメチル基に置き換えた誘導体

Anal. Found: H, 8.09; C, 57.39; N, 1.27; Br, 12.84. Calcd. for
C58H94Br2NO10P･ 3H2O : H, 8.33; C, 57.56; N, 1.16; Br, 13.20.

では水分散系で光二量化は進行しないが、長鎖誘導体にすることにより光二量化が起こることは興味深い。3- ブロモ置
換体ではメチル基でも光二量化が優先する。化合物 3, 4 単

2.2

DPPC 二分子膜中における化合物 3, 4 の光反応

独系ではベシクルを形成しないことがわかったので、化合物

Pyrex 製試験管に、両親媒性化合物 10 µmol（3 : 3.89

3, 4 と DPPC の 1:1 混合ベシクルを調製し、カルボキシフル

mg, 4 : 4.67 mg）、DPPC 10 µmol（7.34 mg）を入れ、ク

オレセインを内包物とする取り込み実験を行い、ベシクルをロロホルムを加えて溶解した。ロータリーエバポレータで形成していることを確認した。この混合ベシクルの光反応の溶媒を留去した後、デシケーター内で一晩減圧乾燥させ、結果を Fig. 1 に示す。興味深いことに、化合物 3 では光二試験管内壁に薄膜を形成させた。ここに、超純水 2.0 mL

量体に加えて c i s 体の生成が観測されたのに対して、ブロモを加え、80 ℃の水浴中で加温し、振とう、膨潤によって、置換基をもつ化合物 4 では c i s 体を形成することなく対応す

試験管内壁から剥離させた後、80 ℃の水浴中で、25 W

る光二量体を与えていることがわかった。

プローブ型ソニケーターを用いて、5 分間断続的（10 秒
ON、10 秒 OFF の繰り返し）に超音波照射した。放冷後、

3.2

この分散液に超純水 4.0 mL を加えて、6.0 mL とし、こ− 35 −

二鎖型桂皮酸系両親媒性化合物 1, 2 の光反応性

クロロホルム均一溶液中では、UV スペクトルから化合Fig.1

物 1, 2 ともに二量化反応の進行が示唆されたが、1HNMRからいずれも二量体に加えて cis 体が生成していることを確認した。各生成物を GPC 並びに MALDI-TOF MASSを用いて分析したところ、GPC ではともに原料よりも遅い保持時間にピークが観測され、また MALDI-TOF
MASS でも、ともに分子内二量化反応生成物の分子イオ
ンピークしか観測されなかった。一方、水分散系では、
UV スペクトルから化合物 1, 2 ともに二量化反応が進行していることが示唆されたが、溶液中とは異なり両化合物で顕著な違いが見られた。化合物 2 では光照射直後に UV ス
ペクトルにおいて短波長側へのシフトが起こった。これはc i s 体の生成が考えられる。一方、化合物 2 ではそのような変化はなく、また光照射とともに極大吸収波長（295nm）のピークが単量体の濃度に換算して二次速度式に従って減少し、定量的に光二量化反応が進行していることがわかっFig.2

た。化合物 1 ではこの速度式に当てはめて直線関係が得られないことからも c i s 体の生成が支持される。光を 1 時間

ベシクルの内包物流出性

照射したサンプルを GPC により分析したところ、いずれ化合物 1 あるいは 2/DPPC 混合ベシクルからのグルコも原料よりも保持時間の早いピークが観測され、分子間二ースの流出実験の結果を Fig. 2 に示す。2/DPPC 混合ベ量化反応が起こっていることがわかった。MALDI-TOF

シクルは 1/DPPC 混合ベシクルに比べ流出性が大きいこ

MASS でも分子間二量体の存在を確認した。同様の光照とがわかった。しかし、光を照射することで、2/DPPC

射実験を DPPC との 1:1 混合ベシクルを用いて行った。

混合ベシクルは流出の少ない安定なベシクルを形成するここの場合には水分散系と同様に、化合物 1 では cis 体の生とが示された。この光照射による流出性の変化は、光照射成が認められたが、化合物 2 では cis 体の生成は認められにより DPPC 二分子膜中で桂皮酸ユニットが二量化してなかった。

膜がタイトになることによると考えられるが、その二量化

以上の結果から、二鎖型両親媒性化合物 1, 2 は溶液中反応が分子内よりも分子間で進行することで膜がよりタイにおいては分子内光二量化反応と c i s 体への異性化が進行

トになっていることがわかった。2/DPPC 混合ベシクル

すること、また水分散系においては分子間二量化反応も進

は、光照射による流出性抑制の効果が大きいことから、分行し、特に化合物 2 では ci s 体への異性化が殆ど起こらな

子間での反応が 1/DPPC 混合ベシクルに比べて進行しやいという興味深い知見を得た。

すいことが考えられる。また光反応の結果から明らかになったように 1 での c i s 体への異性化もこの結果に影響して

3.3

二鎖型桂皮酸系両親媒性化合物 1, 2/DPPC 混合

いると思われる。

− 36 −

光で透過制御可能な人工ベシクルを形成する新規多鎖型両親媒性化合物の開発

二鎖型桂皮酸系両親媒性化合物が分子間で光二量化し、膜の高分子化が期待できること、またブロモ基を導入することで光照射による流出性の変化が大きいことから、次に、異なる波長の光照射による 2/DPPC 混合ベシクル膜からの内包物の流出制御実験を行った。その結果を Fig. 3 に示す。2/DPPC 混合ベシクルに波長 >280 nm の光を照射することで流出が抑制されるが、この混合ベシクルに波長
254 nm の光を照射すると流出の促進が認められた。このことから、異なる波長の光照射による内包物の流出制御が可能なことが明らかとなった。

４．総

括

本研究では、桂皮酸ユニットを有する両親媒性化合物の光反応性と二分子膜挙動について検討した。水分散系におFig.3

ける光反応性を調べたところ、一鎖型桂皮酸系両親媒性化合物 3, 4 ではほぼ定量的に二量化反応が進行すること

Chem. Soc., 49, (3), 271-274 (2000).

がわかった。一方、DPPC 二分子膜中では、Br 基を導入

５） D. G. Whitten, Acc. Chem. Res., 26, 502 (1993).

した 4 は cis 異性化を伴わずに二量化反応だけが進行する

６） P. Venugopalan, T. Bharati, and K. Venkatesan, J.

が、3 では cis 異性化を伴うことが明らかになった。cis 体の生成は膜の安定化に不利なことから、Br 基を導入した

Chem. Soc. Perkin Trans. 2, 1991, 981-987.
７） M. D'Auria, and A. Vantaggi, Tetrahedron, 1992, 48,

化合物は、DPPC との混合ベシクルにおける内包物流出

2523-2528.

制御に適した化合物であることが示唆された。次に、二鎖

８） D.Stewart, G. W. Robertson, and I. M. Morrison,

型桂皮酸系両親媒性化合物であるホスファチジルコリン

Rapid Communication Mass Spectrometry, 1992, 6, 46-53.

誘導体 1, 2 の光反応性と二分子膜挙動について検討した。

９） T. Nakamura, K. Takagi, M. Itoh ほか 4 名 , J. Chem.

溶液中では、どちらの化合物も二量化反応と ci s 異性化がともに進行することが確認された。水分散系での光反応でSoc., Perkin Trans. 2, 1997, 2751-2755.
10） M. Yamamoto, N. Furuyama, and K. Itoh, J. Phys.

は Br 基を導入した化合物 2 が ci s 体への異性化を伴わずに二量化反応のみが進行していることがわかった。これら

Chem., 1996, 100, 18483-18490.
11） T. Imae, T. Tsubota, H. Okumura ほか 4 名 , J. Phys.

のホスファチジルコリン誘導体 1, 2 と DPPC との混合ベ
シクルからの内包物の流出性を検討したところ、Br 基のChem., 1995, 99, 6046-6053.
12） H. Koch, A. Laschewsky, H. Ringsdolf ほか 1 名 ,導入により流出性が増加すること、また光照射による流出性抑制の効果が大きいことがわかった。Br 基を導入した

Makromol. Chem., 1986, 187, 1843-1853.
13） M. Sugimoto, K. Shibahara, K. Kuroda ほか 3 名 ,化合物 2 と DPPC との混合ベシクルの内包物流出制御を検討したところ、波長 >280 nm の光照射により流出の抑制、

Langmuir, 1996, 12, 2785-2790.
14） I. Miwa, J. Okuda, K. Maeda ほか 1 名 , Clin. Chim.

波長 254 nm の光照射により流出の促進が観測され、異なる波長の光照射による内包物の流出制御に成功した。
（参考文献）
１） J. Park, W. Zhang, Y. Nakatsuji ほか 2 名 , Chem.
Lett., 1999, 1309.
２） J. Park, W. Zhang, Y. Nakatsuji ほか 2 名 , Chem.
Lett., 2000, 182.
３） J. Park, S. Aoyama, W. Zhang ほか 2 名 , Chem.
Commun., (3), 231-232 (2000).
４） J. Park, S. Aoyama, W. Zhang ほか 2 名 , J. Jpn. Oil− 37 −

Acta, 37, 538 (1972).

ヒト皮膚における遊離脂肪酸の動態に及ぼす皮膚常在細菌ならびに化粧品の影響に関する研究
東京薬科大学

小

薬学部

谷

明

Free fatty acids (FFAs) in skin surface lipids function as a barrier to diseases caused by bacteria and keep
the surface acidity constant. In this study FFAs in human skin surface lipids were determined by HPLC withelectrochemical detection (HPLC-ECD). The electrochemical detection of FFAs was based on electrochemical
reduction of quinone, 2-methyl-1,4,-naphthoquinone (vitamin K3 , VK3) in unbuffered solution. The HPLC-ECD system
was composed of a mobile phase of acetonitrile-ethanol (80:20), an ODS column, a sample injector, 6 mmol/L VK3
solution containing 76 mmol/L LiClO4 which was mixed with eluate, and an electrochemical detector.
The peak heights for lauric, myristic, palmitic, palmitoleic, stearic, oleic, linoleic, linolenic, and arachidonic acids
at a detection potential of -415 mV vs. a saturated calomel electrode (SCE) showed a linear relation to acid amounts
in the range of 50-1600 pmol. FFAs from about 1 mg of skin surface lipids absorbed on oil absorbing paper 5 mm
x 5 mm in size were extracted with 200 µL of ethanol-acetonitrile (20:80) to prepare the test solution, of which 20µL was injected on the ODS column. This method requires small sample amounts and the procedure is quite simple
without derivatization of FFAs, leading to a considerable reduction in analysis time. Since the lipid sample size wasvery small for the analysis by the method, it is ease to investigate the distribution of FFAs on a human face or scalp.
Determination of FFAs in skin surface lipids at 50 points on the head of a male volunteer was carried out and FFA
distribution on his face and scalp was mapped out. It has become apparent that oleic, linoleic, and palmitoleic acids are
distributed at relatively high concentrations on the forehead and nose, and that steric acid mainly distributed on thecheeks.
The sampling using a piece of oil absorbing paper can be applied to a human subject with skin trouble, as wellas men and women of all ages. Furthermore, it is possible to determine the amounts of FFAs on human skin at
pathological sites such as acne. Thus, the present method should be very useful in the cosmetic and clinical fields.

１．緒

必要としたり，アセトンやヘキサンなどの有機溶媒を使用

言するため７） 被験者に対し大きな負担を課するなど多くの

ヒトの皮膚表面は皮表脂質（以下，皮脂と略す）という欠点があった。

薄い脂肪膜で覆われている。皮脂中の遊離脂肪酸は，皮膚

我々は過塩素酸リチウムを含む 2-methyl-1,4-napthoquinone

常在細菌のリパーゼによるトリグリセリドの加水分解によ（ビタミン K3, VK3）の非緩衝溶液であるエタノール溶液って生成される１）。皮脂には，種々の遊離脂肪酸が含まれ，に脂肪酸が存在すると，ボルタモグラム上にキノンの還元

オレイン酸，リノール酸，リノレン酸には抗白癬菌作用が，前置波が現れ，この波高（i H）が酸の濃度に比例すること

ラウリン酸，オレイン酸には表皮ブドウ球菌の発育抑制作を明らかにした（図１）。さらに，この原理を利用した電。また，肌のテカリや化粧崩

気化学検出 - 高速液体クロマトグラフィー（HPLC-ECD）れの原因にはパルミチン酸，オレイン酸が，尋常性ざ瘡（にを作製し，これにより，植物油８），血漿９）中に含まれる遊きび）には起炎性を示す遊離脂肪酸が関与するといわれて離脂肪酸の高感度定量が可能であることを報告した。

用があるといわれている２- ４）いる 。従来，ヒト皮脂中の遊離脂肪酸の分離定量につい

本研究では，この HPLC-ECD を応用して，ヒト皮脂中ては，ガスクロマトグラフフィーや蛍光検出 HPLC が利の遊離脂肪酸の動態を解析できる分離定量法を確立し，頭用されているが，いずれも遊離脂肪酸の誘導体化を行った部 50 箇所の皮脂中の遊離脂肪酸の分布とその組成を明ら上で分析を行っており，そのためある程度多量の試料量をかにした 10）。さらに，本法を利用して，皮脂中の遊離脂確保する必要があった。従って，皮脂の採取方法ではカッ肪酸の量の変動および組成を測定し，皮脂の分泌を抑制す

プ法をはじめとする種々の方法が用いられた６）。これらのる美容液や洗顔料の使用による影響を検討した。

５）

方法は，採取時間が長かったり，特別な大がかりな装置を

２．実験

Effect of Indigenous Bacterium andCosmetics on the Kinetics of Free Fatty
Acids in Skin Surface Lipids

２・１

Akira Kotani

電極にグラッシーカーボン，参照電極に飽和カロメル電

School of Pharmacy, Tokyo University of
Pharmacy and Life Science

極（SCE），対極にステンレススチールを用いた三電極法

HPLC-ECD および測定条件

装置の概略図を図２に示す。電気化学検出器は，作用の電気化学セルおよびポテンシオスタットを用いた。カラムには，市販の ODS カラム LiChrospher 100 RP-18− 40 −

ヒト皮膚における遊離脂肪酸の動態に及ぼす皮膚常在細菌ならびに化粧品の影響に関する研究

図２ HPLC の流路図 : MP, 移動相：アセトニトリル - エタノー
ル混合溶媒（80:20, v/v）; QS, キノン溶液：6 mmol/L VK3+ 76 mmol/L LiClO4 のアセトニトリル - エタノール混合溶媒（80:20,v/v）; DG, デガッサー ; P1 および P2, ポンプ ; S,
試料注入部 (20µL); カラム , LiChrospeher 100 RP-18 (250㎜ x4 ㎜ i.d., 5µm); D, 電気化学検出器（電気化学セルとポテンシオスタット）; R, 記録計 ; W, 廃液 .

図１ ビタミン K3（3.0 mmol/L）のボルタモグラム(a), 0 mmol/L； (b), 3.2 mmol/L パルミチン酸を含む。
測定条件：測定溶液，38 mmol/L LiClO4 のエタノール溶液；
作用電極，グラッシーカーボン；参照電極，飽和カロメル電極（SCE）；対極 , 白金線；走査速度，5 mV/s．

３．結果および考察
３・１

額の皮脂に含まれる遊離脂肪酸

ラウリン酸（C12:0），ミリスチン酸（C14:0），パルミ
チン酸（C16:0），マルガリン酸（C17:0，内標準物質），
ステアリン酸（C18:0），パルミトオレイン酸（C16:1），
オレイン酸（C18:1），リノール酸（C18:2），リノレン酸（250 ㎜ ×4.0 ㎜ i.d., 5 µm），移動相にはアセトニトリル -（C18:3），アラキドン酸（C20:4）の標準混合溶液（５×エタノールの混合溶媒（80:20），キノン溶液には 6mmol/

10-5mol/L）20µL を HPLC-ECD に注入して得たクロマト

L VK3 と 76mmol/L の過塩素酸リチウムを含むアセトニ

グラムを図３A に示す。ラウリン酸とリノレン酸，リノレ

トリル - エタノールの混合溶媒（80:20）とした。流速 1.1

ン酸とアラキドン酸，パルミトオレイン酸とリノール酸のmL/min，検出電位は，-415mV vs. SCE とした。

分離度は，それぞれ 0.15，0.18，0.12 であったため分離は困難だったが，他の脂肪酸については，10 分間以内に２・２

皮脂の採取方法および試料溶液の調製方法

分離ができた。ピーク高さは，それぞれの脂肪酸量につい

健康な男性 7 人（21-25 歳），女性５人（21-23 歳）をて 50-1600pmol の範囲で良い直線性（r > 0.997）を示した。

被験者とした。頭髪および顔面を石鹸を用いて洗った後，上述した９種類の脂肪酸標準混合溶液（1×10-5mol/L）に被検部位への化粧および激しい運動による発汗を避け，約ついて５回の繰り返し測定を行ったところ，相対標準偏差

４時間後に皮脂採取部位に油取り紙（麻 100％，マックス（RSD）は，それぞれの脂肪酸について 1.5％以下であった。

ファクター）を 30 秒間押し付けて，皮脂を吸着させて採また，検出限界は，50pmol（S/N= ３）であった。上述の取した。油取り紙の大きさは５㎜ × ５㎜とした。

方法に従って，額から採取した皮脂の試料溶液を HPLC

皮脂を採取した油取り紙をマイクロチューブに入れ，に注入して得たクロマトグラムを図３B に示す。

50µmol/L のマルガリン酸（C17:0，内標準物質）を含む

表１に示すように，25 歳男性の額の皮脂について繰り

アセトニトリル - エタノールの混合溶媒（80:20）を加え，返し測定と添加回収試験を行ったところ，それぞれの遊離

30 秒間撹拌して遊離脂肪酸を抽出し，試料溶液とした。

脂肪酸について RSD（n=5）は 4.5％以下，回収率は，94

このうち 20µL を HPLC に注入し，クロマトグラムを得た。

％以上と良好な結果が得られた。以上のことから，このHPLC-ECD により，ヒト皮脂中の遊離脂肪酸の定量を精２・３

美容液および洗顔料の使用による皮脂中遊離度良く行うことができることが明らかとなった。

脂肪酸量・組成の比較

続いて，表２には男性５人，女性５人について，額から健康な男性（26 歳）を被験者とし，額を石鹸で洗顔の後，皮脂を採取し，同上の方法で遊離脂肪酸の定量を行った結テカリやにきびの予防が同時にできるジェル状美容液（植果を示す。遊離脂肪酸総量は，上述の 9 種類の脂肪酸の総物物語素肌力，ライオン）を塗布，または余分な皮脂を吸量であり，脂肪酸組成は，その総量に対するそれぞれの脂

着する洗顔料（レシピオ，コーセー）で洗顔した。美容液

肪酸の割合である。表２に示すように，遊離脂肪酸の量おや洗顔料を使用した箇所と使用していない箇所から経時的よび組成には個人差があることが示された。

に皮脂を２･ ２の方法で採取して，HPLC-ECD で皮脂中の遊離脂肪酸量および組成の変化を追跡した。

被験者（23 歳男性）について額および頭皮の遊離脂肪酸組成の３日間の日間変動を追跡したところ，表３に示− 41 −

図 3 (A) 遊離脂肪酸標準混合溶液 (5 x 10 -5 mol/L) と (B) 皮脂中の遊離脂肪酸のクロマトグラム
皮脂は，23 歳男性の額から採取した。HPLC の条件 : 移動相 , アセトニトリル - エタノー
ル混合溶媒 (80:20, v/v)；キノン溶液 , 6 mmol/L VK3 と 76 mmol/L LiClO4 を含むアセトニ
トリル - エタノール混合溶媒 (80:20, v/v); 試料注入量 , 20µL; カラム , LiChrospher 100 RP18, (250 mm x 4 mm i.d., 5µm); カラム温度 , 室温 ; 流速 , 1.1 mL/min; 検出電位 , -415mV vs.
SCE. ピーク : a, C12:0 + C18:3 + C20:4; b, C16:1+C18:2; c, C14:0; d, C18:1; e, C16:0; f,
C17:0 ( 内標準物質 ); g, C18:0.

すように遊離脂肪酸組成の日間変動の
RSD は 11％以下であった。このことから，同じ場所における皮脂の遊離脂肪酸の組成は日によってあまり変化しないことが示された。

３・２

頭部 50 箇所における遊離脂肪酸の組成顔と頭皮 50 箇所の皮脂を上述の方法で採取し，遊離脂肪酸の定量を行った。顔 30 箇所についての結果を図４に，頭皮 20 箇所についての結果を図５に示す。円グラフは，その遊離脂肪酸の組成を示し，その大きさは遊離脂肪酸の総量を相対的に示している。その上の数値はその部位の遊離脂肪酸総量（nmol/ ㎠）を示す。図４が示すよ
うに，脂漏部位である額，鼻，顎は遊
離脂肪酸量が多く，脂漏部位でない頬は，それらの部位に比べ遊離脂肪酸量が少ないことがわかった。また，頭皮では顔面より，遊離脂肪酸の量が多い
ことがわかった。

− 42 −

ヒト皮膚における遊離脂肪酸の動態に及ぼす皮膚常在細菌ならびに化粧品の影響に関する研究

図４ 顔における遊離脂肪酸の分布
皮脂は，23 歳男性から採取した。円グラフの大きさ
は，遊離脂肪酸の総量を相対的に示し，上の数値はその部位の遊離脂肪酸総量（nmol/ ㎠）で表した。

図５ 頭皮における遊離脂肪酸の分布
皮脂は，23 歳男性から採取した。円グラフの大きさは，遊離脂肪酸の総量を相対的に示し，上の数値はその部位の遊離脂肪酸総量（nmol/ ㎠）で表した。

特に，パルミトオレイン酸とリノール酸，オレイン酸は，脂漏部位である額，鼻，顎に多く存在し，頬にはあまり存

そこで，市販の美容液と洗顔料を使用したとき，皮脂中の遊離脂肪酸量と組成に及ぼす影響について検討した。

在しないことがわかった。また，ステアリン酸は皮膚が乾

図７A には，テカリやにきび予防が同時にできるジェル

燥しやすい頬に多く存在することがわかった（図６）。以状美容液（植物物語素肌力）を塗布した場合と，使用して上のように，本法は油取り紙に吸着させた極微量の試料でいない場合の皮脂中遊離脂肪酸の総量の変化を示した。洗

遊離脂肪酸の定量が行えるため，顔面および頭皮 50 箇所

顔した直後は，皮脂中に遊離脂肪酸は検出されなかったが，の遊離脂肪酸を定量し，分布図を作成することができた。

時間が経つにつれて遊離脂肪酸は増加した。美容液を使用した部位の遊離脂肪酸の増加量は，使用していない場合に３・３

美容液および洗顔料の使用による皮脂中遊離比べ抑制されていた。図７B には，それぞれの遊離脂肪酸

脂肪酸量・組成の変化の組成を示した。遊離脂肪酸の組成は，美容液の使用に関

本方法は，試料の採取方法，前処理方法が簡単であるのらずあまり変化しなかった。

で，化粧品や皮膚治療薬を塗布した後の皮脂中遊離脂肪酸の動態を細かく追跡することが可能であると考えられる。

− 43 −

また，余分な皮脂を吸着する洗顔料（レシピオ）を使用

図 7 ジェル状美容液（植物物語素肌力）の使用による皮脂中
遊離脂肪酸（A）総 および（B）組成の変化
皮脂は，26 歳男性の額から採取した。（…），美容液を塗布していない場所；（—），美容液を塗布した場所；◆，遊離脂肪
酸総量；□，C12:0 + C18:3 + C20:4; ■ , C16:1 + C18:2; ▲ ,C14:0; ○ , C18:1; ● , C16:0; ◇ , C18:0.

図６ 顔における（A）パルミトオレイン酸（C16:1）とリノール酸（C18:2）、（B）ステアリン酸（C18:0）、（C）オレイン酸（C18:1）の分布
皮脂は、23 歳男性から採取した。

めた測定時間は，わずか 15 分であり，従来の方法に比べ，被験者の協力も得やすく，より多くのサンプルを扱えることが可能である。また，美容液や洗顔料が皮脂中の遊離脂した場合も同様に比較した（図８）。美容液と同様，皮脂肪酸の生成に対する影響も本法によってモニターすること

中の遊離脂肪酸量の増加は抑制するが，組成にはあまり影ができる。殺菌効果，保湿効果，収れん作用などを有する響を与えなかった。

その他の化粧品や皮膚治療薬を用いた場合でも，皮脂中の４．総遊離脂肪酸量や組成を求めることが可能であり，皮膚常在括細菌が生成する遊離脂肪酸の皮膚に対する影響を明らかに皮膚における遊離脂肪酸の機能を明らかにするために，できると思われる。

皮脂中の遊離脂肪酸を HPLC-ECD で測定した。本法は，本法は，上述した利点があるので，皮膚における遊離脂１㎎程度の試料で測定が可能であり，サンプリングは５肪酸の役割および動態を明らかにするための有力な手段で㎜ × ５㎜の油取り紙に皮脂を吸着させて採取した。皮脂あり，香粧品領域だけではなく，生理学，薬理学，皮膚科学の採取に要する時間は 30 秒であり，このため，幅広い年などといった幅広い分野に応用が可能であると考えられ齢層の被験者やにきびなどといった皮膚の病変部位から皮る。

脂を採取するのも容易であると考えられる。また，検出のための誘導体化も必要ないため，皮脂を採取する時間も含− 44 −

ヒト皮膚における遊離脂肪酸の動態に及ぼす皮膚常在細菌ならびに化粧品の影響に関する研究（参考文献）
１） Strauss JS, Downing DT, Stewart ME: in Physiology,
biochemistry, and molecular biology of skin. Goldsmith
LA, ed., Oxford University Press, New York, 1991,
712-740.
２） 松尾聿朗 , 犬飼則子 , : 皮表脂質の生理的役割 . 油化
学 , 37, 827-831, 1988.
３） E l i a s P M , F e i n g o l d K R , : L i p i d s a n d t h eepidermal water barrier: metabolism, regulation, andpathophysiology. Semin. Dermatol. 11, 176-182, 1992.
４） E l i a s P M , M e n o n G K , : S t r u c t u r a l a n d l i p i dbiochemical correlates of the epidermal permeability
barrier. Adv. Lipid Res. 24, 1-26, 1991.
５） Kellum RE, Strangfeld K, : Studies in pathogenesis:
fatty acids of human surface triglycerides from patientswith and without acne. J. Invest. Dermatol. 58, 315-318,
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６） 安部

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154-158, 1983.
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acids in sebaceous lipids during early adolescence. J.
Invest. Dermatol. 92, 371-378, 1989.
８） Fuse T, Kusu F, Takamura K, : Determination ofhigher fatty acids In oils by high-permormance liquid

図８ 洗顔料（レシピオ）の使用による皮脂中遊離脂肪酸（A）
総 および（B）組成の変化
皮脂は，26 歳男性の額から採取した。（…），洗顔料を使用していない場所；（—），洗顔料を使用した場所；◆，遊離脂肪
酸総量；□，C12:0 + C18:3 + C20:4; ■ , C16:1 + C18:2; ▲ ,C14:0; ○ , C18:1; ● , C16:0; ◇ , C18:0.

９） Kotani A, Fuse T, Kusu F, : Determination of謝10） Kotani A, Kusu F, : HPLC with electrochemical

chromatography with electrochemical detection. J.
Chromatogr. A, 764, 177-182, 1997.
plasma free fatty acids by high-performance liquid
chromatography with electrochemical detection. Anal.
Biochem. 284, 65-69, 2000.

辞本研究を遂行するにあたりご支援いただきましたコスメ
トロジー研究振興財団に深謝いたします。

detection for determining the distribution of free fatty
acids in skin surface lipids from the human face andscalp. Arch. Dermatol. Res. 294, 172-177, 2002.

− 45 −

紫外線及び化学合成化合物のヘアレスラット皮膚に対する障害作用及びその防御城西大学

薬学部城西大学生命科学研究センター谷覺The protection of the skin from ultraviolet rays is the urgent issue, because the harmful sun's rays increase recently.
However, there is no good and simple method for the evaluation of effects of ultraviolet rays on the skin. Then, I improved an
animal model using the hairless rats, that were breeding in Life Science Research Center, Josai University.
After irradiation with ultraviolet rays on the back of hairless rats, the skin was turned to reddish like sunburn withpassage of days. The skin color was recorded with a digital camera, and analyzed as the density by the NIH image software,
after the images were changed to gray. The skin color increased during 3 days, and after 4 days the skin was gradually
recovered from the lesion. Therefore, the degree of skin lesion was evaluated by measuring the skin color at 3rd day after
irradiation with ultraviolet rays.
Using this method I investigated the fundamental study on hairless rat skin lesion induced by ultraviolet lay. In conclusion
the skin lesion of hairless rat were different in each rat and the part of the back. Therefore, it is possible to evaluate theprotective or accelerated effect of the chemical against ultraviolet ray by comparing the right and left skin lesion after one
side treatment by the chemical. However, in cases of general administration of the chemical, we must statistically evaluate theresults with enough amount of rats.

１

緒

るのではないかと考えた。先ず化粧品は皮膚に直接塗布し言て用いることから、皮膚に対する刺激性や毒性などの作用

近年、大気圏におけるオゾン層の破壊による紫外線の増が観察できると考えられる。しかし、この分野では既に多加が心配されるなか、紫外線が皮膚に多大の障害を及ぼす

くの知見が得られているので、紫外線からの防御を中心と可能性が示唆され、サンスクリーン効果を持つ化粧品の開して検討することを試みた。その為にはヘアレスラットの発が望まれている。

皮膚に対して、紫外線がどのような効果をもたらすのかを

現在、化粧品に表示される UVB 領域の紫外線防止効果

基礎的に検討することが必要がある。今回は上記の目的でを示すものとして Sun Protection Factor が用いられ、こ若干の検討を行い結果を得たので報告する。さらに、尋常の測定法は極めて厳密で、かつ煩雑であるが、ヒトにおけ性白斑症の治療薬であるメトキサレンの紫外線増感効果にる効果を見る上では信頼性も高く優れた方法である。しかついても検討したので合わせて報告する。

し、化粧品の開発の観点に立てば、ひとつ一つの化合物の２効果をヒト皮膚で検討するのには、時間的にも経済的にも２．１

効率が悪く、また安全性の面でも問題がある。そこでヒト

実

験

実験材料

雌のヘアレスラットは城西大学生命科学研究センターの皮膚に近く、更に均一な結果が得られる実験動物を用いで飼育されているものを用い、週齡は特に選ばなかった方法の開発が望まれる。
城西大学生命科学研究センターでは、Wistar 系ラット

たが、概ね８週齢以後のものを用いた。メトキサレンの突然変異種であるヘアレスラットを specific pathogen（Methoxalen）は和光純薬（大阪）から購入して用いた。

free 化し繁殖、供給している。このラットは貧毛以外はほとんど正常のラットと変わりなく、生化学的異常も見出さ

２．２

紫外線照射法れていない 。当研究センターでは、従来よりヒト皮膚のヘアレスラットをペントバルビタール麻酔下、頚部から背部モデルとしてヘアレスラットの皮膚を用いて経皮吸収などにかけてバリカン（ナショナル丸刈り用）で毛を刈り、腹位にの実験を発展させてきた。そこで、今回は化粧品開発の分固定し、背部に 1.0×2.0 ㎝に切り抜いたアルミ箔を両面野においても、様々な面でこのヘアレスラットが利用できテープで貼り付け、そこ以外の場所には光が当たらないよ

１）

Skin Lesion by Ultraviolet Ray andChemicals on the Hairless Rats, and its
Protection

うにアルミ箔で覆って健康紫外灯（ナショナル PL20 もしくは同等品 ) ２本で照射した。ラットは紫外線蛍光灯の下に光がなるべく均等に当たるように固定した。２匹を用いSatoru Tani

る場合は対称に並べ、比較検討する場合は、片側を対照とFaculty of Pharmaceutical Science, andLife Science Research Center, Josai
University

した。紫外線蛍光灯と背部皮膚との距離は５及び 10 ㎝とし２本の蛍光灯の距離も５及び 10 ㎝とし、必要に応じ 15㎝も用いた。照射時間はそれぞれ 10 及び 20 分とした。

− 46 −

紫外線及び化学合成化合物のヘアレスラット皮膚に対する障害作用及びその防御

２．
３

皮膚変化の数値化

このラットを毎日、麻酔下でデジタルカメラで記録し、そ紫外線照射後１〜４日のラットをペントバルビタール麻れをグレイスケールで濃淡として測定した（Fig. ２）。４

酔し、腹位に固定し、紫外部照射部、非照射部位、及び約日間の紅斑の変化を示したのが Fig. ３である。Fig. ３に1× 1 ㎝の標準色（財団法人日本色彩研究所発行の新配色

は２本の紫外灯間及び皮膚との距離を 10 ㎝、照射時間 10

カード 199a の PI-8）を約１㎝程度の距離で配置し、デジ分にしたものを示した。全ての場合に３日目に最大値を示

タルカメラで記録した。写真をグレイスケールに変換し、し、以後色調は持続するものの毛が生え、それが無視でNIH image により紅斑を灰色の濃淡の変化として数値化しきなくなったり、皮膚にかさぶた様の剥離が生じ、定量にた。更に、標準色と紫外線照射部位の数値から紫外線照射は耐えられなくなった（Fig. ４）。光源からの距離 10 ㎝、をしていない部位の数値を差し引き、紫外線照射部位を、照射時間 10 あるいは 20 分とし、照射３日後に測定する標準色を 100 にした時の相対値で表した。

ことにしたが、また実験によっては様々な検討も加えた。

２．
４

３．２ ヘアレスラットの紫外線による皮膚障害の個体差

メトキサレンの投与

メトキサレン（５㎎ / ㎖ of propylene glycol）（1, 5, or 25

上記実験の過程でヘアレスラット間で紫外線に対する感㎎ / ㎏）を腹腔内注射し、約１時間後に紫外線を照射した。

受性に個体差が観察されたので、同一個体で時期を変えて

３
３．
１

結

紫外線照射を行い、紅斑の程度を調べ、その結果を Fig.

果５に示した。紫外線照射を始めた週齡は８週齡以降である

紫外線照射による皮膚の経日変化

が、必ずしも同じではなく、また初回と次回の照射との間隔

紫外線を照射した直後の皮膚は、若干赤みを帯びヒトの日も一定ではない。しかし、同一の個体であっても照射回数に焼けと類似する所見であった。この皮膚は１日後では赤みを従い上昇するものと、下降するものがあり、また紅斑の程度帯びているが、まだほとんど変化が見られなかった。しかし、も個体により全く異なっていた。そこで更に、同一個体で同２、３日と経過するに従い皮膚が赤褐色に変化し、４日目に時に照射距離を変え紅斑の程度を観察した。結果を Fig. ６は皮膚の下部に新たな皮膚の再生が見られ、かさぶた様に変に示すが、程度に差はあるものの同一個体では光源からの化した。

距離が近いほど紅斑の程度が強いことが確認された。しかFig. １に紫外線を照射して３日後のラットを示した。こも紅斑の程度は実測した紫外線の強度と近似していた。
紅斑強度（標準色の対する％）の写真のように紫外線照射部位が紅斑として認められる。
30

20

10

0

1

2

3

4

日

紫外線照射後の日数

Fig. 1 紫外線照射３日後のヘアレスラットの皮膚麻酔したラットの背部皮膚の 真。頭方に標準色を配置し、尾方に説明の紙片を置き、デジタルカメラで撮影した。

Fig. 3 紫外線照射による紅斑の経日変化
二本の紫外線灯間及びラットとの距離を 10 ㎝とし、照射時間を 10 分間としたときの紅斑の強度

Fig. 2 皮膚紅斑の測定法
皮膚の 真をデジタルカメラで記録し、標準色を 100 としたときの数値を紅斑強度とした。

Fig. 4 紫外線照射４日後の皮膚皮膚の再生が起こり、かさぶた状に皮膚が剥がれている。

− 47 −

３．
３

背部皮膚の部位による差８に示したように、メトキサレンの投与により、紅斑強度のより均一な結果を得るために、背部部位の違いにより紫増加が観察された。しかし、紅斑の程度はメトキサレンの外線に対する感受性の違いがあるのかどうかを観察した。

投与量に比例せず、むしろ高用量で紅斑強度の減少が見ら

ヘアレスラットの背部皮膚の毛を全て刈り、全面を紫外線れた。

で照射し、紅斑の程度を調べた（Fig. ７）。ラットの背部４の形状から頚部及び尾部は凹凸があり、均一な部位が見つからなかった。比較的均一な背部を観察すると、中心に近

４．１

考

察

紫外線による皮膚障害の指標としての紅斑

紫外線による皮膚障害が紅斑の強度と比例すると仮定しい部分が左右、前後共に均一な紅斑の程度を示していた。

た場合、紅斑をどのように定量化するかという問題がある。

３．４

紫外線照射による皮膚紅斑に対するメトキサ

レンの効果

今回は、紅斑をグレイスケールに変換し、黒化度として
NIH image で定量したが、実際の濃さと若干相違すると考尋常性白班症の治療薬であり、紫外線増感剤であるメトえられる。今回のグラフでも１日目はほとんど紅斑強度がキサレンの効果を検討した。メトキサレンをプロピレング

認められないが、肉眼的にはわずかではあるが、紅斑が認

リコールに溶解し、ラットに 1, 5, 及び 25 ㎎ / ㎏をそれめられる。このことは例えば 500nm 付近の波長で測定す

ぞれ腹腔内に投与し、約１時間後にペントバルビタール麻

れば、もっと良い定量性が得られる可能性が考えられる。

酔下紫外線照射した。紫外線蛍光灯による紅斑強度のバラ

しかし、紫外線照射後は薄いピンク色をしているが、３日ツキを小さくする目的で、実験は同じ紫外灯の左右対称にラットを配置し、一方を対照、他方にメトキサレンを投与
80

1.5
●

60

1.0

40

紅斑強度

紅斑強度（標準色に対する％）

80

60

●

●

20

40

0.0

0

20

0.5

5

10

15

紫外線強度（相対値）

し、対照ラットとの紅斑の強度を比較した。その結果 Fig.

光源からの距離（㎝）

0
10

20

30

Fig. 6 紫外線強度と紅斑強度の関係
同一ラットの同一時期に異なった紫外線光源からの距離からの照射による紅斑強度の変化。同一ラットは同一線で示してある。

紫外線照射実験からの経過（日）Fig. 5 同一ラットの紫外線照射による紅斑強度のばらつき
動物に紫外線を照射し、３日後に紅斑を測定し、同様の操作を
間隔をあけて実施し、その値を示した。同じ動物は同一線で示
してある。

４

３

２

450

１

L

紅斑強度（対照に対する％）

0

450
450
450
450
450
450
450
450
450

R
２

Fig. 7 背部皮膚の紫外線感受性の違い
ラット背部全 に紫外線を照射し、脊椎に頭方から尾方に線を引き、全身を約４等分し、それぞれの部分の紅斑強度を測定した。

− 48 −

1

5

25

㎎/ ㎏

メトキサレン投与量Fig. 8 メトキサレンの用 反応曲線
メトキサレンを腹腔内投与し、紫外線を照射した後、３日後の対照に対する相対的紅斑強度の変化。同一条件でメトキサレンを投与しなかったもの（対照）を、100 としたときの相対値で示してある。

目には赤褐色に変化する。今回は３日目の紅斑になるべくに脊柱の左右に対称に同一の範囲で紫外線を照射すること近い色調を選んだが、ラットの状態によっても少しずつ色により、防御物質などの効果を比較することができると考調が変化するので、どの標準色を用いるかによっても測定えられる。

値が変わる可能性がある。
次に、紫外線照射後の皮膚傷害を、皮膚の紅斑の強度に

４．３

メトキサレンの光増感作用

よって評価できるのかどうかについて検討した。太陽光線

前節で、紫外線の感受性に個体差があることから、紅斑による皮膚の変化として、ヒトでは黒化と皮膚障害が総合を個体間で比較することは困難であるという結論を導いして現れると考えられる。ラットの皮膚に対する紫外線のた。他方、紫外線の皮膚に対する作用を薬剤が増感あるい作用として、皮膚の紅斑を指標とすると、皮膚に紅斑が生は減弱させる作用を検討する場合は、同一個体で検討するじる機序として、紫外線の細胞に対する障害作用によっのは困難である。光過敏症を生じさせる薬物は、一般に全て、細胞から様々な起炎物質が放出され、それにより毛細身投与される。即ち、光増感物質などの作用を検討する場

血管の拡張が起こったと考えられる。著者は紫外線による合は薬物を皮膚適用するのではなく、全身投与して検討す

皮膚障害の強度を紅斑の強度で評価できるという作業仮説

る必要がある。この検討のため、紫外線増感物質であるメを立て、実験を進めた。今回用いた紫外灯の紫外線の強度

トキサレンをモデル薬物として検討した。メトキサレンはは Fig.6 に示すように、ほぼ光源からの距離の二乗に反比

尋常性白斑症の治療薬として用いられる光増感物質である

例する変化を示した。例数が少なく確定的なことは言えなが、Fig. ８に示すように、例数を重ねることで光増感作

いが、ラットの皮膚の紅斑強度は紫外線の強度の曲線と概用を検出することはできるが、用量反応曲線は得られず、ね一致した。このことは、紫外線による皮膚の紅斑は定量

かえって高濃度で紅斑の減少が見られた。これは個体差に的評価は困難であるが、少なくとも傷害がどのように生じよる見かけ上の反応なのか、何か原因があってこのようなるのかの検討には用いることが出来るのではないかと考え反応が起こっているのか、今回は判断がつかなかった。メられる。

トキサレンは、ヒトにおける作用では皮膚に存在するメラニン細胞の活性化を起こすが、アルビノ化したラットでは

４．
２

紫外線照射による紅斑の個体差

メラニン細胞が存在しないため別の機構が働いて皮膚障害

ラットの個体間の差に関しては、同一条件下で紫外線をを増強した可能性がある。即ち、ヒトの皮膚の黒化をもた照射しても紅斑の程度がラットによって異なる等の個体差

らす効果がヘアレスラットの皮膚に対する紅斑強度の増強が見られた。現在は、同腹のラットを用い、同一条件下ので表されることが判明した。このことは光線過敏症を起こ片方を対照とするなどの工夫をおこなっているが、バラツ

す化合物の検出などには多くの動物を用いて統計処理を行

キが大きい。そこで同一のラットを用い、数回の紫外線照うことによりある程度可能になることが考えられた。

射を行い、紅斑強度を比較した。ラットの個体によっては、

５紅斑の程度が強くなるもの、あるいは弱くなるものなどが総括観察され、必ずしも同じ程度の紅斑の強度を示さなかった。

１．ヘアレスラットを用いて、紫外線防御物質などの効果

このことは、個体差のみでなくラットの状態や、年齢などを検討する場合は、同一ラットの背部の中心を用い左右によっても紅斑の程度が変化することを示している。即ち、の片方を対照とし、もう一方に検体を塗布して、紫外線を照射することで検査が可能である。

紫外線による紅斑の変化は個体間では比較できないことを

２．光過敏症などを起こす物質の検討には、薬物投与した示している。
紫外線照射による紅斑は４日程でかさぶた様になり５〜ラットと無処理のラットを左右対称に並べ、紫外線を均６日後には剥離して、障害のない皮膚が再生してくる。こ等に照射し、多数の動物を用い統計処理をすることで検のことから、皮膚の紫外線による障害で、皮膚の細胞がア出可能である。ただし、この場合は個体差にかなりのバ

ポトーシスを起こしたことを示している。今後は個体間でラツキがあるため、対照となるラットには同腹、同齢の差が見られない他の生化学的パラメータ、例えばアポトー

ラットを用いることが望ましい。
３．ヒトのメラニン細胞刺激による黒化をラットの皮膚紅

シスの程度なども検討することが必要であろう。

斑という反応で評価できる可能性がある。

前項の検討から紅斑を個体間で比較するのでは、個体差が大きく困難が予想されたので、同一個体で比較する場合を想定し、どの部分を用いれば比較検討が可能かを調べた。

参考文献

その結果、背部の頚部と尾部の中間点がほぼ均等な紅斑の

１） Tani S, Noguchi M, Hosoda Y, Sugibayashi K, Morimoto

程度を示すことが明らかとなった。即ち、仮に紫外線防御

Y, : Characteristics of Spontaneous Erythema Appeared in物質などの検討を行う場合は背部の中心あたりを選び、更Hairless Rats. Exp. Anim. 47, 253 - 256, 1998.

− 49 −

老化マウス klotho における皮膚変化の検討
群馬大学

医学部第２内科

倉林正彦

The klotho mouse is a novel presenile mouse strain developed by insertional mutagenesis. The homozygous mutant
klotho mice (KL-/-), which have a defect in klotho gene expression, present a short life span and a syndrome resembling humanaging. Skin atrophy and hair loss are observed in KL-/-, in addition to pulmonary emphysema, arteriosclerosis, osteoporosis,
and ectopic calcifications.
The goal of the present study is to understand the pathogenesis of the skin changes observed in KL-/-, and to develop
a new strategy to prevent the skin change during aging. We have generated some experimental tools for the study: (1)Adenovirus has been generated, which expresses the mouse klotho cDNA, has been generated. (2) Two transgenic rat strains
have been established, which overexpress the klotho gene. Regarding the function of the klotho gene, we have shown that
apoptosis of the type II pneumocytes is much more frequently observed in the KL-/- lung when compared with that in the wildtype lung. Further study is now under progress to show the pathogenesis of the skin lesion in the klotho mutant mice, withspecial reference to the apoptosis of the epidermal cells.

１．緒

２．実

言

皮膚の老化防止はコスメトロジーの最も重要な課題の一２. １つである。著者らは黒尾・鍋島らと共同で、老化に密接に

KL

-/-

験

創傷治癒過程の観察および野生型マウス（以下 KL+/+）を用いる。それ関わる klotho という新規遺伝子を発見した 1）。klotho 遺伝

ぞれの背部を剃毛後、同部位ににパンチ生検を行い、皮膚子は分子量が約 14kDa で、β-glucosidase と 40％のホモロに全層性の創傷を与える。その治癒過程を観察する。

ジーを示す膜蛋白または分泌蛋白をコードする。klotho 遺伝子ホモ欠損マウス（以下 KL-/- と記載）は、寿命の短縮、

２. ２

K L -/- の皮膚へのアデノウイルスベクターを用い動脈硬化、異所性石灰化、骨粗鬆症、肺気腫、皮膚真皮層

た klotho 遺伝子の局所導入の菲薄化、皮下脂肪層の消失、脱毛などヒト老化に見られまず第一に、klotho 遺伝子を発現するアデノウイルスをる多彩な変化を早期に表現する。著者らはコスメトロジー

作製する。アデノウイルスベクターにマウスの klotho 遺伝研究振興財団の第９回（平成 10 年度）助成により、KL -/-子（膜貫通ドメインを含む全長の cDNA）を組み込む。

は生後４週より肺気腫を発現すること 、７〜９週令の2）

KL -/- 肺では ､ 型コラーゲンと SP-A 遺伝子の発現が増強

２. ３klotho 遺伝子過剰発現ラットにおける皮膚傷害

していること 、飢餓状態の線維芽細胞に klotho 遺伝子をの検討導入することにより、その飢餓による DNA 合成能の低下準備として、klotho 遺伝子過剰発現ラットの系を確立すを抑制しうること 3）を明らかにし、KL -/- における老化徴る。本ラットの系の中で、導入 klotho 遺伝子の発現量が多候の早期発現には、線維芽細胞をはじめとする結合織細胞

いと考えられる系を選択する。さらに導入 klotho 遺伝子にの機能障害が関与すると推測した。

関してホモ接合体である個体を選別し、その個体同士を交2）

本研究の目的は、klotho マウスにおける老化類似の皮膚変化の出現機構を明らかにし、皮膚老化の予防法を開発す配することによって、klotho 遺伝子の発現量の多い個体を安定して利用できるよう系を確立する。

ることである。

２. ４

線維芽細胞の培養実験

細胞は KL -/- および KL +/+ から採取する。それぞれの皮
Investigation on the Skin Change of theaging model mouse "klotho".
Masahiko Kurabayashi
Second Department of Internal Medicine,Gunma University School of Medicine

膚および肺を摘出し細切したのち、細胞培養用プレートに固着させる。これに 10％ FBS 加 DMEM 培地を加えて培養し、線維芽細胞を培養する。この線維芽細胞を利用し、各種の実験に用いる。

２. ５

肺組織におけるアポトーシスの解析

２週齡の KL -/- および KL +/+ から肺を取り出し、10％− 50 −

老化マウス klotho における皮膚変化の検討

４．考

ホルマリンを用いて定圧固定したのちパラフィン包埋する。この肺組織を TACS

TM

察

2 TdT-DAB In Situ Apoptosis

Detection Kit を用いて TUNEL 染色する。さらに細胞レ本研究を進めていく上で重要なツールとなる（1）マウベルの酸化ストレスの指標としてベルリン青染色を行う。

ス klotho 遺伝子（膜貫通ドメインを含む全長の cDNA）をそれぞれ陽性細胞の比率を KL

３．結
３. １
KL

-/-

と KL

+/+

とで比較する。

発現するアデノウイルス、（2）klotho 遺伝子を過剰に発現するラットの系統、を確立することができた。これらのツ果ールは、KL -/- に認められる皮膚真皮層の菲薄化、皮下脂

創傷治癒過程の観察

肪層の消失、脱毛などのヒト老化にみられる変化の病態には皮膚損傷を与えた直後に死亡する個体が多かっklotho 遺伝子がどのように関与しているかを解明するうえた。KL -/- がストレスに非常に弱いことは良く知られておで非常に重要であり、今後これらのツールを用いた研究をり、本法を用いて皮膚に全層性の傷害を与えて創傷治癒過行う予定である。

-/-

一方、当初実験計画の柱として期待した KL -/- および程を観察するのは困難と考えられた。

KL +/+ を用いた創傷治癒過程の観察、あるいは同マウスか

３. ２

K L - /- の皮膚へのアデノウイルスベクターを用いた klotho 遺伝子の局所導入
マウスの klotho 遺伝子（膜貫通ドメインを含む全長のcDNA）を発現するアデノウイルスを作製した。このアデノウイルスを CHO 細胞に感染させ、Western blot 法を用
いて klotho 蛋白が発現していることを確認した。

３. ３

klotho 遺伝子過剰発現ラットにおける皮膚傷

害の検討
klotho 遺伝子過剰発現ラットを 2 系統得ることができた。RT-PCR 法を用いた解析では、導入 klotho 遺伝子はFig.1 klotho 遺伝子過剰発現ラットの作製。２系統で導入
klotho 遺伝子の発現が認められる（矢印、RT-PCR 法）

Strain1 においては肺・腎・心・脳で、Strain2 においては肝・肺・腎・心・脳で、mRNA 発現を認めた（Fig.1）。現在、
導入 klotho 遺伝子に関してホモ接合体である個体を選別し、交配を行っている。

３. ４
KL

-/-

線維芽細胞の培養実験
および KL +/+ の皮膚および肺から線維芽細胞を培養した（primary culture）。しかしながら、培養の条件によって細胞の生育状態にばらつきが生じることが明らかとなった。このため、KL -/- 由来の線維芽細胞と KL+/+ 由来の線維芽細胞の増殖などを単純に比較することは困難であると考えられた。

３. ５

Fig.2 KL +/- の肺では、Ⅱ型肺胞上皮細胞のアポトーシスが認められる（２週齢、TUNEL 染色）。

肺組織におけるアポトーシスの解析

３. ４に示した培養実験系が機能しなかったことから、
KL -/- のヒト老化類似病変形成のメカニズムを解明する別の方法として、組織（in vivo）を用いた病態解析を行うことにした。まず始めに、肺にみられる気腫化病態におけるアポトーシスの関与を検討した。
KL +/+ と比較して KL -/- の肺では TUNEL 染色陽性細胞が高頻度に認められた（Fig.2）。組織学的な特徴から、陽性細胞は II 型肺胞上皮細胞と考えられた。ベルリン青染
色陽性細胞は KL -/- では認められたが、KL +/+ では指摘できなかった（Fig.3）。

Fig.3 KL+/- の肺では、ベルリン青染色陽性細胞が認められる（５週齢）。

− 51 −

らの線維芽細胞の培養（primary culture）実験は、残念

発症メカニズムを解明することが、コスメトロジーに大きながら実験系として機能しなかった。このため著者らは、な貢献をしていくものと信じている。

KL -/- において肺気腫と皮膚の萎縮・脱毛所見が認められることに着目し、それらに共通する病態としてアポトー（参考文献）

シスが関与するという仮説をたてた。これまでの検討か

１） Kuro-o M, Matsumura Y, Aizawa H, et al. : Mutation

ら、KL -/- の肺組織においては II 型肺胞上皮細胞のアポト

of the mouse klotho gene leads to a syndrome resemblingーシスが高頻度に認められることが明らかとなった。今後、

ageing. Nature. 390: 45-51,1997.

の皮膚組織におけるアポトーシスの関与を解析して

２） Suga T, Kurabayashi M, Sando Y, et al. : Disruption

いく予定であり、本実験計画の一つの柱として、klotho 遺of the klotho gene causes pulmonary emphysema in mice.

伝子がアポトーシスの抑制を介して皮膚の老化を抑制してDefect in maintenance of pulmonary integrity duringいる可能性を追究していくことにしている。

postnatal life. Am J Respir Cell Mol Biol. 22: 26-

KL

-/-

これまでの解析によって、klotho マウスは外界からのス

33,2000.

トレスに対する反応が異常であることが明らかとなってい３） 田島俊児、須賀達夫、山洞善恒、ほか：klotho 遺伝る。klotho 遺伝子ヘテロ欠損マウスは、若年では肺気腫を

子は細胞増殖の調節に関与している可能性がある．日呼発症しないが、タバコ主流煙曝露やブレオマイシン肺傷害

吸会誌．37（増刊号）:253, 1999.

に対して気腫化しやすい 。今回のベルリン青染色の結果

４） Maeno Y, Suga T, Sando Y, et al. : The heterozygous

からは klotho マウスの肺は野生型マウスに比べて酸化スト

klotho mice develop pulmonary emphysema after

レス環境下にあることが示唆された。皮膚は外界からのス

exposure to cigarette smoke and intratracheal

トレスに直接さらされ続ける部分であることから、本マウ

instillation of bleomycin. Am J Respir Crit Care Med.

スにみられるヒト老化に類似した皮膚病変（皮膚老化）の159: A447, 1999.

４）− 52 −

発生再生の分子メカニズムを応用した人工皮膚作製
秋田大学

杉

山

俊

医学部生化学第一講座

博、亀

田

隆

Sonic hedgehog (Shh) regulates the principal processes in many developmental stages including the epithelial-mesenchymal
interaction. The extraordinary acceleration of signaling by Shh is responsible for the development of human basal cell
carcinomas and trichoepitheliomas; they might originate from the very immature keratinocytes including the stem cells. We
tried to utilize the mitogenic effect of Shh to accelerate the formation of cultured epithelium, which is already used in the
medical field practically. To this end, we transfected shh cDNA into a Swiss-3T3 cell line, widely used as a feeder for
keratinocytes, and established a Shh expressing cell line. The lethally irradiated Shh expressing feeder cells remarkably
accelerated the growth of keratinocyte colonies obtained from the human neonatal foreskin, and the formation of wellstratified cultured epithelium, which is rich in immature small keratinocytes, expressing cytokeratin 14. This acceleration
was suppressed by the addition of cyclopamine, a specific inhibitor of Shh signaling. These data indicate that the Shh is apromising mitogen to improve the technology for cultured epithelium formation.

１．緒Hedgehog タンパク質がリガンドとして Patched という膜

言レセプターに結合することで Smoothened という別の膜蛋

人体外表面はケラチノサイトが形成する表皮により覆われている。この薄い層は人体を乾燥・紫外線・物理的障害・白への抑制が解除され転写因子 Gli を介した標的遺伝子の発現制御が誘導されると考えられている４）。

免疫学的侵襲から保護する上で重要な役割を担っている。

近年、ヒトの表皮基底細胞がんや毛包腫等の極未熟なケ

このように重要な役割を担う表皮細胞層は非常に高い再生

ラチノサイトが癌化したと考えられる腫瘍では高頻度で能力を持っているが事故などによりその大半が失われるとpatched-1 に変異が生じていることが報告され、また遺伝

生命活動の維持が危機に陥る。

子改変動物を用いた実験から Hedgehog シグナル系を人為

培養表皮は再生医工学技術による最も初期の産物であ的に活性化することにより、これらのがんを誘発できるこる。1970 年代に Green 博士らは Swiss-3T3 細胞をフィーとが報告されている４）。これらの報告は Hedgehog タンパ

ダー細胞として利用することでヒト表皮角質化細胞の増殖

ク質を介したシグナル伝達が表皮幹細胞の増殖制御においをコントロールし、培養人工表皮を作製することに成功して重要な役割を担っていることを示唆する。本研究で我々

た１）。この技術は火傷や母斑の治療に広く応用され成功をはこのような未熟なケラチノサイトにおける Hedgehog シ

収めている 。現在ではベンチャービジネス企業群によりグナル系の生理作用を培養表皮作製系へ応用することを目

同種移植用の培養表皮が凍結品として供給されているが、

指した。

２）

恒久的な生着を可能とする自家移植用培養表皮を迅速に供２．実給する為には培養表皮作製に要する期間をより短縮するこ

2.1とが重要である。

細験

胞

hedgehog 遺伝子産物はショウジョウバエに発生異常をSwiss-3T3 細胞（JCRB no. 9019 from HSRRB, Osaka,

引き起こす変異遺伝子として同定されたが、哺乳類ではJapan）並びに遺伝子導入 Swiss-3T3 細胞は全て 10％のウ

sonic hedgehog・indian hedgehog・desert hedgehog の３シ胎児血清を加えたダルベッコ改変 MEM 培地にて培養を種が相同遺伝子として報告されている 。このうち sonic

行った。継代培養には 0.05％トリプシンと 0.02％ EDTA

hedgehog 遺伝子産物（Shh）は哺乳類の発生において肢を加えた PBS を用いた。Swiss-3T3 細胞はクローン化さ芽の前後軸決定など形態形成のシグナル因子として重要れていない細胞株であるため遺伝的なバックグラウンドをな役割を担っていることが知られている。生化学的には揃えた実験のために我々はケラチノサイトに対して優れた

３）

A new technology for cultured skinformation using developmental molecularmechanism

フィーダー効果を示すクローン（クローン no.5；以下 no.5
cell と標記）を選択した。実験に用いたヒト新生児包皮由来ケラチノサイトは全て米国 Cell Applications, Inc. より

Toshiro Sugiyama, Takashi Kameda

購入した。凍結細胞を融解後、インビトロゲン社のケラチ

Department of Biochemistry Akita
University School of Medicine

ノサイト培養用培地で２日ほど快復培養を行った後に培養＊

表皮作製実験に用いた。

＊− 53 −

2.2

Shh 発現ベクターの作製と遺伝子導入

Swiss-3T3 細胞へ Shh 発現遺伝子を導入することを計画

ニワトリの sonic hedgehog 遺伝子 cDNA（ハーバード大した（図１A）。本法では Shh 発現フィーダー細胞とケラ

学 Tabin 博士より分与）をクロンテック社の真核細胞用

チノサイトを共培養することで充分な Shh タンパク質の発現ベクター pEGFP-N1 に組み込み Shh 発現用ベクター供給が可能になると期待される。またケラチノサイト自体

pSHH を作製した。本ベクターを組み込んだ細胞はジェネの遺伝子改変は行わないため細胞がん化などの危険性も低

ティシンによる選択が可能である。我々は no.5 cell へのいと期待される。

pShh ベクターの導入（インビトロゲン社リポフェクタミ

Swiss-3T3 はクローン化された細胞株ではないため、フンプラスキットを使用）とジェネティシン（400 ㎍ / ㎖）ィーダー細胞のバックグラウンドを揃えるために我々はケによる選択を行い、Shh 蛋白を安定的に発現するフィーダ

ラチノサイトへのフィーディング効果を指標に Swiss-3T3ー細胞株（no.5-Shh）を樹立した。Shh 蛋白の発現はサン由来クローン化細胞株（no.5 cell）を樹立した（詳細は省

タクルツ社の抗 Shh 抗体（H-160）を用いたウエスタンブ略）。Shh 発現誘導のため、我々は CMV プロモータによ

ロット法にて確認した。

りニワトリ shh mRFNA を発現し、G418 による細胞株の選択を可能とする発現プラスミド p-Shh を作製した。リ

2.3

培養表皮作製

ポフェクション法により no.5 cell に p-Shh プラスミドを

フィーダー細胞の増殖停止のためにはガンマー線照射法

導入後、G418 による選択を行った。選択した細胞株におを用いた。培養皿でコンフレントにまで増殖した no.5 ま

ける Shh タンパク質の発現を抗 Shh タンパク質抗体を用たは no.5-Shh 細胞に対して約 70 Gy の照射を行ったのち

いてウエスタンブロット法により検出した（図１B）。Shh

トリプシナイズを行い 60mm 培養皿当たり 4×10 個の割

タンパク質は合成後に自己触媒作用で N 末断片（Shh-N）

合で播種した。12-24 時間後に培養表皮作成用培地（10と C 末断片（Shh-C）に分離する。使用した抗体は生理活

5M アデニン・0.5 ㎍ / ㎖デキサ性を持つ N 末断片に特異的であり、p-Shh 導入細胞におメサゾン・1×10 − 10 M コレラ毒素・10ng/ml EGF・2×10 −けるニワトリの Shh-N（23kD）の発現が確認された。我々

M トリヨードサイロニンを含むダルベッコ改変 MEM 培

はこの細胞株を no.5-Shh と名付けた。No.5-Shh は親株の% ウシ胎児血清・1.8×109−4地）に培地を交換し、快復培養を終えたヒト表皮ケラチノ
サイトは 60 ㎜培養皿あたり 5000-20000 細胞（lot により調節）を播種した。培地交換は週に２回のペースで行った。

2.4

ケラチノサイトコロニーの染色と培養表皮の組

織化学的解析
ケラチノサイトコロニーの染色は培養皿をホルマリン固
定した後、ローダナイル染色液（１％ Rhodamin B, １％
Nile Blue）を用いて行った。培養表皮の組織化学的解析のためには、培養表皮をディスパーゼを用いて培養皿より剥離させた後にホルマリン固定を行いパラフィン切片を作製した。HE 染色並びにバイオメダ社の抗サイトケラチン
14 抗体を用いた免疫染色による解析を行った。

３．結
3.1

果

Shh 発現フィーダー細胞株の樹立と Shh 遺伝子

産物の発現確認
Shh 遺伝子産物のケラチノサイト増殖促進効果は再生医工学分野においても利用可能であると考えられるが、現在までのところ生理活性を持った Shh 精製タンパク質を入手することは一般的に困難である。またヒト表皮ケラチノ
サイトへの直接的な Shh 発現ベクターの導入は細胞のがん化を誘発する可能性が高く安全面での不安が大きい。これらの問題を解決するために我々は上皮系細胞の培養や培養表皮作製にフィーダー細胞として広く用いられている

図１：A 本研究開発の概念図 Swiss-3T3 細胞に Shh 発現遺伝子を導入し改良フィーダーを作製する。
B Shh 発現ベクターの導入による Swiss-3T3 細胞株における Shh タンパク質の発現。

− 54 −

発生再生の分子メカニズムを応用した人工皮膚作製

図２：放射線照射による no.5 ならびに no.5-Shh 細胞のフィーダー化。

no.5 に形態・増殖とも類似している（図２・データ省略）。
放射線照射後は両細胞株とも増殖停止・細胞肥大化が誘発され、良好なフィーダー細胞として利用可能であると考えられた（図２）。

3.2

図３：Shh 発現フィーダーによるケラチノサイトコロニーの増殖促進。

培養表皮の増殖における Shh 発現フィーダー細胞の有用性
我々は Shh 発現フィーダー細胞の有用性を確認するためにヒト包皮由来ケラチノサイトを用いた培養表皮作製実験を行った。放射線照射によりフィーダー化した no.5 細胞ならびに no.5-Shh 細胞とケラチノサイトを共培養し１週ごとに、各培養系でのコロニーの成長を比較した（図３）。ケラチノサイト播種後１週目では顕著な差を認めなかったが、２・３週目では Shh 発現フィーダー細胞との共培養において顕著なケラチノサイトコロニーの増殖促進が観察された。顕微鏡下において成長の良いケラチノサイ
トコロニーを観察したところ Shh 発現フィーダー細胞との共培養で、コントロールではほとんど観察されない極小
サイズのケラチノサイトの活発な増殖像が観察された（図４）。以上の効果が実際に Shh の生理作用によるものかを確認するために Shh のシグナル伝達系を強力且つ高い特異性で抑制するサイクロパミンを用いた実験を行ったとこ

図４：Shh 発現フィーダー細胞との共培養で観察された極小サイズケラチノサイトの活発な増殖像。

ろ Shh 発現フィーダーによるケラチノサイト増殖亢進はサイクロパミンにより顕著に抑制された（図５）。Shh 発現フィーダー細胞を用いて作製した培養表皮を組織化学的に解析したところ基底細胞層に重層した細胞層の形成が認められた（図６）。これらの細胞層は免疫染色により、未熟なケラチノサイトのマーカーであるサイトケラチン 14陽性を示した。

４．考察

線維芽細胞との共培養が上皮系細胞の増殖に有用である
ことは古くから知られているが、その分子メカニズムについては未だ解明されていない点が多い。現在では完全合成培地によりケラチノサイトを培養して培養表皮を作製する

図５：Shh 発現フィーダー細胞によるケラチノサイト増殖促進の Hedgehog シグナル伝達系阻害剤サイクロパミンによる抑制。

− 55 −

の開発ならびに幹細胞研究のためのツールとして有用であると期待される５）。
（引用文献）
１） Reinwald JG, Green H. Serial cultivation of strainsof human epidermal keratinocytes: the formation of
kerainizing colonies from single cells. Cell 6, 331-343,
図６：Shh 発現フィーダー細胞を用いて作製された培養表皮の組織切片像。
（上段：HE 染色 下段：抗サイトケラチン 14抗体による免疫染色）

1975
２） O’connor NE, Mulliken JB, Banks-Schlegel, et al.
Grafting of burns with cultured epithelium preparedfrom autologous epidermal cells. Lancet 1, 75-78, 1981

ことも可能であるが非常に高価な成長因子などを必要とす

３） Murone M, Rosenthal A, deSauvage FJ. Hedgehog

るため Green らによる Swiss-3T3 フィーダー細胞を用いsignal transduction: from flies to vertebrates. Exp. Cell.

る手法は依然として培養表皮作製のための簡便且つ確実なRes. 253, 25-33, 1999

プロトコールである。我々はこの Swiss-3T3 細胞に表皮

４） Bale AE, Yu K. The hedgehog pathway and basal cell

細胞の増殖・分化の調節に重要な役割をなしていると考え

carcinomas. Human Mol Gen. 10, 757-762, 2001.

られる Shh 遺伝子産物を発現させることで培養表皮作製

５） Kameda T, Hatakeyama S, Terada K, Sukiyama T.

法の改良を目指した。Shh 発現フィーダー細胞はヒト包皮

Acceleration of the formation of cultured epithelium

由来ケラチノサイトの増殖を有意に促進した。Hedgehog

using the hedgehog expressing feeder cells. Tissue Eng.

シグナルは体性幹細胞に対する増殖因子である可能性が示

7, 545-555, 2001

唆されており、我々の開発した手法は表皮再生医工学技術− 56 −

紫外線防御因子メタロチオネインのヒノキチオールによる合成誘導とその意義
東北大学大学院

永

薬学研究科

沼

章

Metallothionein has been known as one of photoprotection proteins. Effective inducers of metallothionein are needed for protection of skin from UVB-solar radiation. We have performed a search fornon-metallic substances which activate metallothionein gene expression. Hinokitiol, an extract of steam
distillation of the root or trunk of Japanese cypress, was found to activate the metallothionein promoter.
The results of our study for elucidation of the mechanism of induction of metallothionein synthesis byhinokitiol suggest that hinokitiol activates MTF-1, a transcriptional factor, through mobilization of zinc,an activator of MTF-1, from medium to cells.

１．緒

た、過酸化水素の刺激に応答する antioxidant responsive

言element（ARE）や IL-6 に応答する STAT3-binding site

メタロチオネイン（M T）は 1957 年にウマの腎臓中からの存在も報告されている。しかしながら、これまで知られカドミウム結合蛋白質として発見された分子量約 6000 の蛋ている非金属性の M T 誘導剤の M T 誘導能は亜鉛やカドミ

白質で、構成アミノ酸の約 1/3 をシステインが占めていながウムといった重金属と比べると非常に低い。

ら S - S 結合を一つも持たず、かつ芳香族性アミノ酸を一つ

我々は、MT の示す紫外線防御作用に着目し、皮膚のも持たないという特徴的な構造を有している 。M T および

MT 合成を誘導する金属を検索したが一般的に金属化合物

その類似蛋白質（銅 - ケラチン、フィトケラチンなど）は生

は毒性が比較的高く。毒性の発現しない濃度範囲で効率良物界に広く存在し、ヒトやげっ歯類などのほ乳類をはじめとく MT 合成を誘導する金属は見出せなかった。そこで MTした脊椎動物、酵母、植物などの真核生物のみならず、ラ遺伝子プロモーターを活性化する非金属化合物を約 400

ン藻などの原核生物にもその存在が認められている。

種類の化合物中からスクリーニングしたところ、ヒノキチ

１）

MT の性質として最もよく知られているのは重金属毒性

オール（ヒノキチオール，別名 β-thujaplicin）が MT プロ

軽減作用であり、MT はその SH 基を介して重金属と強固モーターを著しく活性化することを見いだすことに成功しに結合することによって毒性の発現を抑制する。また、フた。ヒノキチオールは、タイワンヒノキや青森ヒバの精油

リーラジカル消去作用や紫外線防御作用なども報告されてに含まれる結晶性酸性物質で、1936 年に野副らによっており、生体内において多機能な防御因子として働いている

天然物として初めて発見された炭素七員環芳香族化合物でと考えられている。

ある３, ４）。ヒノキチオールは殺菌・抗菌力に優れ５, ６）、メ

M T の合成は重金 属に加え、グルココルチコイド、パラ

ラニン生成抑制作用７, ８）などが認められているため、基礎

コート、インターロイキン 6（I L -6）、紫外線照射２）などの化粧品や養毛剤等に広く用いられている。さらに、ある種様々な刺激によって誘導される。重金属やグルココルチコイの癌細胞を分化させたり、アポトーシスを引き起こしたり

ドによる M T の誘導は転写レベルで行われており、M T 遺することや、ヒノキチオールの基本骨格であるトロポロン

伝子のプロモーター領域には重金属およびグルココルチコの誘導体が抗腫瘍活性を持つことなどが数多く報告されてイドによる転写促進に必須の cis - エレメントとしてそれぞいる。しかし、これまでヒノキチオールが蛋白質の誘導合れ metal response element（MRE）および glucocorticoid成に関与したり、特定の転写因子に作用したりするといっ

responsive element（GRE）の存在が確認されている。また報告はほとんどなく、その MT プロモーター活性化機序

Induction of synthesis of metallothionein,a photoprotection protein, by hinokitiolに興味が持たれる。そこでヒノキチオールの MT プロモーター活性化機構の解明を試みた。

Akira Naganuma
Graduate School of Pharmaceutical Sciences,
Tohoku University

２．実
２・１

細

験

胞

マウス線維芽細胞株の Ltk −細胞、およびマウス MT-I
プロモーター（MT-I 遺伝子の転写開始点から 1400bp 上− 57 −

流までの領域）の下流に lacZ 遺伝子を連結したプラスミ

することおよび亜鉛処理による細胞内 MT 量の増加のピ

ド 41）を Ltk −細胞に導入して得られた安定形質転換体

ークが、ヒノキチオールの共存により低濃度側に移動するである L13-17 細胞を実験に用いた）。

ことが明らかになった。従って、これまでの検討により明らかになったヒノキチオールの MT プロモーター活性化

２・２

メタロチオネインの定量作用およびヒノキチオールと亜鉛の併用によるピークの細胞の超音波破砕液を沸騰水浴中で５分間加熱して得た移動を伴う MT プロモーター活性化促進作用は実際の MT

上清を ammonium 7-fluorobenz-2-oxa-1,3-diazole-sulfonate

mRNA レベルの上昇や MT 蛋白質量の増加に反映するも（SBD-F）と反応させて MT の SH 基を SBD 蛍光標識した。

のであることが明らかになった。

この反応液中の MT 濃度を蛍光検出高速液体クロマトグラ
フィ（HPLC）法９）により定量した。

またこのとき、解糖系の酵素である GAPDH の mRNA
レベルがヒノキチオールの濃度依存的に上昇することが観察された。GAPDH は house keeping gene であり、生体

２・３

リポータージーンアッセイ

試料中の特定の蛋白質および mRNA を定量する際の内部種々の長さのマウス MT-I プロモーターの下流に lacZ

標準として広く用いられているが、場合によってはそのレ遺伝子を連結したプラスミドと SV40 プロモーターの支ベルが変動することがいくつか報告されている。特に培養配下でルシフェラーゼを発現するプラスミドを同時に Ltk−細胞に導入した。レポーター活性は、細胞抽出液にX-gal を加えて反応させた後、マイクロプレートリーダー
で 650nm の吸光度を測定して求めた。遺伝子の導入効率
は細胞抽出液中のルシフェラーゼ活性を測定して求めた。

３．結果と考察マウス MT-I プロモーターの支配下で β- ガラクトシダーゼを発現する安定形質転換体である L13-17 細胞を用いてヒノキチオールの MT-I プロモーター活性化作用を検討したところ、80µM までのヒノキチオールによって濃度依
存的に β- ガラクトシダーゼ活性が上昇し、それ以上高い濃度ではプラトーに達した（Fig. １）。一方、最も強力なMT 誘導剤の一つである亜鉛で処理した場合は、200µM
付近でピークに達し最大の β- ガラクトシダーゼ活性を示したが（Fig. １）、ここに比較的低濃度のヒノキチオール（15, 25µM）を共存させることでそのピークが亜鉛の低濃度側に移動する現象が認められた（Fig. ２）。このとき、単独ではほとんど β- ガラクトシダーゼ活性が認められない 15µM のヒノキチオールと 40µM の亜鉛の共存により、200µM の亜鉛処理の場合と同等の強力な β- ガラクトシダーゼ活性が認められることから（Fig. ２）、ヒノキチオー
ルと亜鉛は非常に強力な相乗作用により MT プロモーター
を活性化させると見ることもできる。しかし、ヒノキチオ
ールは亜鉛処理によって得られる最大のプロモーター活性をさらに亢進させることはなかった（Fig. ２）。
次に、L13-17 細胞を用いた検討で見い出されたこれらの現象が実際の MT の合成誘導に反映するか否かを L1317 細胞の親株である Ltk −細胞を用いて検討した。その結果、MT mRNA レベルおよび細胞内 MT 量は共にヒノ
キチオールの濃度依存的に増加することが明らかになった。さらに、亜鉛（10-80µM）とヒノキチオール（15µM）を併用することによって MT mRNA レベルが劇的に上昇

Figure 1
Effects of hinokitiol or ZnCl2 on b-galactosidase
ac tivity and cell survival in L13-17 cells.
L13-17 cells (1x104 cells) were incubated for 24h in medium
containing various concentrations hinokitiol (HT) or ZnCl2.
Then β-galactosidease activity（■）and cell survaival（○）
were determined. Values are the means ± SD from 4 samples. The results were confirmed three separate experiments.

− 58 −

紫外線防御因子メタロチオネインのヒノキチオールによる合成誘導とその意義

Firure 2
Effects of ZnCl2 on β-galactosidase avtivity and cell survival in hinokitiol-treated L13-17 cells.
L13-17 cells (1X104 cells) were incubated for 24 h in medium containing various concentrations of hinokitiol (HT)with ZnCl2. Then β-galactosidase activity（■）and cell survaival（○）were determined. Values are the means ± SD
from 4 samples. The results were confirmed three separate experiments.

− 59 −

細胞を低酸素条件下で培養することや低酸素状態をミミッのエレメントである MRE の一つ、MREd が存在している。

クすると考えられている遷移金属のコバルトや鉄キレー

この MREd はマウス MT プロモーター上に存在する６つ

ターの deferoxamine の存在下で培養することで GAPDHの MRE の中で、亜鉛で処理した場合最も高い転写活性化

mRNA レベルが上昇するという報告が多くある。一方で、能を示すエレメントである。また、この MREd が欠失しヒノキチオールはその分子内に β-diketone 構造を持ってている変異体（-135 − -1）にもわずかにヒノキチオール

おりキレーターとして働くことが知られている。その金応答能があったが、MREd とその下流の MREc を欠失し

属錯塩の形成能は Cu（II）> Ni > Pb > Zn の順であり、また変異体（-117 − -1）ではヒノキチオールに対する応答

たヒノキチオールの母核である tropolone の場合も、一般が全く無かったため ､ MREc も弱いながらヒノキチオールの β-diketone の場合と同様に、Cu（II）> Ni > Co > Zn>

応答エレメントとして働いていることが示唆された。

Pb > Cd > Fe（II）> Mn（II）>Mg > Ca の順である 10）。ヒ

さらに TATA box 領域から MREd までの MT プロモーノキチオールが赤色の鉄錯体である hinokitin から単離

ターを 3' 側から短くすると、最も転写開始点に近い MRE

精製されたことからもわかるように、ヒノキチオールはである MREa を欠失しただけで著しいプロモーター活性

鉄ともキレートを形成する。そのためヒノキチオールがの減少が認められた。しかし、MREd と MREc を欠失さ

deferoxamine と同様の機構により GAPDH mRNA レベル

せた場合と異なり、ヒノキチオールに対する応答の完全なを上昇させることも考えられる。最近、低酸素条件下で細消失は認められなかった。従って、MREa には MREd と胞を培養すると MTF-1/MRE 系を介して MT が誘導されMREc によるヒノキチオール応答を増強するはたらきがあるという報告 11）がなされているため、ヒノキチオールがると考えられる。

MT プロモーター活性化する機構の一つとして、ヒノキチ

また以上のリポータージーンアッセイすべてに渡って、オールが低酸素状態をミミックし、その低酸素ストレスにヒノキチオール処理群と亜鉛処理群のリポーター活性はプより MT プロモーターが活性化されるという可能性も考え

ロモーターの欠失に対しほぼ同様の変動パターンを示しられる。しかし、どうして鉄キレーターが GAPDH を誘た。このことから、ヒノキチオールは最終的には亜鉛と同導させるのか、鉄キレーターが本当に低酸素状態をミミッ

一の作用点、つまり MRE に作用して MT プロモーター活クしているのかといった点に関しては未だ明らかにされて性を上昇させる可能性が強く示唆された。ヒノキチオール

いない。

と亜鉛の併用によっても、亜鉛によって得られる最大のプ

一方、本研究によってヒノキチオールの共存により亜鉛

ロモーター活性を越えるような活性が得られなかったことによる MT プロモーター活性化のピークが移動し、より低も、このようにヒノキチオールと亜鉛の作用点が同一であ濃度の亜鉛で最大のプロモーター活性が得られるようになると考えると説明できるものと思われる。

るという興味深い現象が起きることが明らかになった。そほ乳類の MT の誘導において亜鉛は特別の役割がある

こでこの現象が亜鉛に特異的なものであるかどうかを調べと考えられている。MT プロモーター上に存在する MRE

るために、亜鉛以外の MT 誘導剤（DEX，カドミウム、銅、に結合する転写因子として MTF-1 が知られており、重金

水銀、鉛およびビスマス）について検討したが、亜鉛の場

属による MT の誘導は主に MTF-1/MRE の系を介してい合に見られたようなピークの移動は認められなかった。従ると考えられている。リコンビナント MTF-1 を用いたって、ヒノキチオールによるピークの移動を伴う MT プロ

無細胞系での実験では亜鉛、カドミウム、ニッケル、銀、モーター活性化促進作用は亜鉛との併用の場合に比較的特銅、コバルトといった遷移金属のうち亜鉛だけが MTF-1

異的に認められる現象であることが示唆された。なおこれのコンセンサス MRE への結合を促進することが報告さらの MT 誘導剤のうち、ビスマスはヒノキチオールと併用れている 12）。つまり、亜鉛だけが MTF-1 に直接作用しすると非常に強く MT プロモーターを活性化させ、且つほて MTF-1 の MRE への結合活性を促進し、MT プロモーとんど細胞毒性を示さないことが明らかになった。そのたターを活性化するのであり、亜鉛以外の重金属は亜鉛のめ、ヒノキチオールとビスマスの併用は MT プロモーター

redistribution を介して間接的に MTF-1/MRE に作用するを活性化する理想的な方法であることが示唆された。

か、カドミウムのように MRE 以外の cis- エレメントにも次に、ヒノキチオールによる MT プロモーター活性化機構を明らかにするため、MT プロモーター上のヒノキチオ作用することで MT プロモーターを活性化すると考えられている。

ール応答領域の検索を行った。その結果、MT プロモータ

先の結果からヒノキチオールがこの亜鉛を介して間接的

ーの -150bp から -135bp の領域にヒノキチオールの応答に MT プロモーターを活性化させる可能性が考えられた。

領域の一つが存在すると考えられた。この領域には亜鉛やそこで次に、ヒノキチオールによる MT プロモーター活性カドミウムなどの重金属に加え、過酸化水素や低酸素スト化における亜鉛の影響を検討した。細胞培養に使用した培レスといった重金属以外の刺激による MT の誘導にも必須

地には通常、約４µM の亜鉛が含まれており、この亜鉛は− 60 −

紫外線防御因子メタロチオネインのヒノキチオールによる合成誘導とその意義

全て血清由来だと考えられる。そこで亜鉛を含まない無血５） Miyamoto, D. et al., :Thujapulicin-copper chelates

清培地において、ヒノキチオールの MT プロモーター活性inhibit replication of human influenza viruses, Antiviral化能について検討したところ、ヒノキチオールによる MT

Res., 39, 89-100, 1998.

プロモーターの活性化はほとんど認められなかった。さら６） Akiyama, H., Yamasaki, O., Kanzaki, H., et al. :Effectsに、この無血清培地に亜鉛を添加して通常の半分量に当たof zinc oxide on the attachment of Staphylococcus

る２µM の亜鉛を存在させた場合にはヒノキチオールによaureus strains, J. Dermatol. Sci., 17, 67-74, 1998.

る MT プロモーターの活性化が認められた。従って、ヒノ

７） Baba, T., et al. :Inhibitory effect of beta-thujapulicin

キチオールは細胞外の亜鉛に依存して MT プロモーターを

on ultraviolet B-induced a poptosis in mouse

活性化させるものと考えられる。

keratinocytes. J. Invest. Dermatol., 110, 24-28, 1998.
８） S a k u m a , K . , O g a w a , M . , S u g i b a y a s h i , K . , e t

４．まとめ

al.:Relationship between tyroshinase inhibitory action

本研究の結果、ヒノキチオールによる M T プロモーターのand oxidation-reduction potential of cosmetic whitening

活性化には亜鉛の動員を介した M T F-1 の M R E への結合

ingredients and phenol derivatives, Arch. Pharm. Res.,

活性の促進が関与していることが強く示唆された。これまで

22, 335-339, 1999.

に報告されているヒノキチオールの多彩な生理作用の一部も

９） M i y a i r i , S . , S h i b a t a , S . , a n d N a g a n u m a , A . ,このような亜鉛の動員を介している可能性が考えられる。

:Determination of metallothionein by high-performanceliquid chromatography with fluorescence detection usung（文献）

an isocratic solvent system, Analitical Biochemistry 258,

１） Webb, M., :The Chemistry, Biochemistry and Biology

168-175, 1998.

of Cadmium. Elsvier/North-Holland Biochemical Press,

10） 野副鐵男 , : トロポロン (II), 化学 ,7, 344-351, 1952.

Amsterdam, 196-266, 1979.

11） Murphy, B.J., Andrews, G.K., Bittel, D., et al.

２） Angel, P., Poting, A., Mallick, U., et al. :Induction of:Activation of metallothionein gene experssion by

metallothionein and other mRNA species by carcinogens

hypoxia involves metal response elements and metal

and tumor promoters in primary humen skin fibroblasts.

transcriptional factor-1, Cancer Res. 59, 1315-1322,

Mol. Cell. Biol., 6, 1760-1766, 1986.

1999.

３） Nozoe, T., :Uber die farbstoffe im holzteile des12） Bittel, D., Dalton, T., Samson, S.L.A., et al. :The

"Hinoki"-baumes. I. Hinokitin

DNA binding activity of metal response element-binding

und hinokitiol, Bull. Chem. Soc. Jpn., 11, 295-298, 1936.

transcription factor-1 is activate in vivo and in vitro by４） Kubo, M., Nozoe, T. and Kurita, U., :Dipole moments

zinc, but not by other transition metals, J. Biol. Chem.,of tropolone and related compounds, Nature, 167, 688689, 1951.

− 61 −

273, 7127 -7133, 1998.

Wnt シグナルによるメラニン産生の制御機構の解析
東北大学大学院

医学系研究科医学生物化学講座分子生物学分野

武

田

和

久

Microphthalmia-associated transcription factor (MITF) consists of many isoforms that differ at their N-termini
but share a basic helix-loop-helix and leucine-zipper (bHLH-LZ) structure. Among the isoforms, melanocyte-specific
MITF (MITF-M) is of particular interest, because expression of MITF-M is under the regulation of the melanocytespecific promoter (M promoter) of the MITF gene, and transcription from the M promoter is induced by Wnt signals
through a nuclear mediator, lymphoid-enhancing factor 1 (LEF-1). Wnt, a group of secretory signaling molecule, evokes
a signal to regulate the melanocyte differentiation. The binding of Wnt to its receptor Frizzled leads to inactivationof glycogen synthase kinase-3β (GSK3β), followed by the accumulation of β-catenin and its translocation to nucleus.
LEF-1/TCF transcription factors can bind to the β-catenin, and the formed complexes transactivate the target genes.
Recently, we have shown that functional cooperation of MITF-M with LEF-1 could lead to transcriptional activationof the M promoter and the dopachrome tautomerase (DCT) gene, an early melanoblast marker. The bHLH-LZ regionof MITF-M is responsible for the physical interaction with LEF-1, and β-catenin is required for the collaboration
between LEF-1 and MITF-M. Importantly, MITF-M could function as a non-DNA-binding cofactor for LEF-1.
These results suggest that MITF-M may function as a self-regulator of its own expression to maintain a thresholdlevel of MITF-M at a certain sensitive stage of melanocyte development, which could account for dominant inheritanceof Waardenburg syndrome type 2 (WS2) that is characterized by deafness and hypopigmentation due to lack ofmelanocytes in the inner ear and skin. MITF-M therefore plays dual roles in the Wnt signaling pathway; MITF-M
represents a downstream target and a nuclear mediator of Wnt signals in melanocytes.

１. 緒（M プロモーター）により制御される。

言

MITF 遺伝子の変異による難聴を伴う色素異常症として小眼球症関連転写因子（MITF）は塩基性ヘリックス・ル

ワーデンブルグ症候群２型（Waardenburg syndrome typeープ・ヘリックス - ロイシンジッパー（bH L H - L Z）構造を持

2、WS2）が知られている 10）。WS2 患者は先天性感音難つ転写因子であり、神経堤由来のメラノサイトと脳由来の網聴の他に、皮膚白斑、早発性白髪、虹彩色素異常を呈する。

。Wnt

WS2 の発症は MITF-M の量不足（haploinsufficiency）に膜色素上皮細胞（R PE）の分化制御因子である

１, ２）は胚の形態形成や毛包の再生などに重要な細胞間シグナルよると推定されている 11）。

分子であり、MITF 及びメラノブラストの初期分化マーカーで

M I T F の機能異常は色素異常症（シミあるいは白斑）、毛

３-ある DCT（dopachrome tautomerase）の発現を誘導する

包の機能低下（白髪や脱毛）など、加齢に伴い遭遇する諸問。DCT はメラニン合成系酵素の一つであり、可溶性のメラ

題と関連する。本研究では、M I T F の機能発現の多様な制ニン前駆物質の解毒にも関与すると考えられている 。

御機構を解明し、肝斑などの色素沈着や白斑の有効な予防

５）６）

MITF は少なくとも５種のアイソフォーム（A、B、C、H、法と治療法の開発を目ざす。誰しも美しく老いたいと願うもの

M）から成り、アイソフォームのアミノ末端はそれぞれ特であり、本研究は高齢者の良好な QOL の達成に貢献する。

異的なエキソン１によりコードされ、各エキソン１は固有

２．実のプロモーターの制御下にある（図１）７- ９）。MITF-M の発現がメラノサイト特異的であるのに対し、MITF-A など

2・1

験

RT-PCR 法による新規アイソフォームの探索と発現解析

他のアイソフォームは RPE やメラノサイトを含めた種々の細胞で発現されている。すなわち、MITF-M の N 末を

マウス RPE で発現される新規 Mitf アイソフォームをコードするエキソン１M は最も下流に位置する第一エキ

探索するため、マウス眼球組織由来の mRNA を用いたソンであり、その転写はメラノサイト特異的プロモーター

cDNA の 5' 端増幅法（5'-RACE 法）にて、Mitf cDNA を

Role of Wnt signaling in the regulation ofmelanin biosynthesis
Kazuhisa Takeda
Department of Molecular Biology andApplied Physiology, Tohoku University
School of Medicine

解析した。その結果、
Mitf-D を新たに同定した 12）。ついで、そのヒト cDNA である MITF-D をヒト RPE 細胞株からクローン化した。さらに、マウス及びヒト遺伝子断片を単離し、該当するエキソン（エキソン 1D）の位置を決定した（図１）。種々ヒト細胞やマウス組織における MITF-D
mRNA の発現をノーザンブロット法により解析した。

− 62 −

Wnt シグナルによるメラニン産生の制御機構の解析

2・2 M プロモーター機能解析によるエンハンサーの探索関与するシスエレメントを探索した。Tag 付きの各蛋白を調製

MITF-M を発現するメラノーマ細胞における M プロモ

し、pull-down 法と免疫沈降法により in vivo での結合を解ーター機能解析用の融合遺伝子の一時的発現法により、エンハンサーを探索し、MDE を同定した

析した。

。さらに、MDE

13）

2・4の機能を詳細に解析し、結合タンパクを探索した。

cAMP シグナルと Wnt シグナルのクロストー

クの解析
2・3 MITF の機能制御因子の探索

上 記 実 験 に よ り、DCT 遺 伝 子 の CRE 類 似 配 列 が、DCT プロモーター機能解析用の融合遺伝子との一時的MITF-M と LEF-1 の相互作用による活性化に必須なこと

共発現法により、MITF-M と LEF-1 の相互作用を解析し、が判明した（図２A）５）。そこで、DCT 遺伝子の CRE 類似配

図１ MITF 遺伝子と MITF アイソフォームの模式図
黒い部分はタンパクをコードするエキソン領域を、白い部分は 5' あるいは 3' の非翻訳領域を示す。エキソン２〜
９はすべてのアイソフォームに共通である。４種の MITF アイソフォームの N 末をエキソン１N と示した。エキソン１B の 3' 側の B1b 領域は、MITF-A mRNA などの生成の際に第２エキソンとして利用される。M プロモーター（エキソン１M の転写開始点の上流）はメラノサイト特異的に機能する。bw マウスの外来 DNA 挿入部と rw マウスで見られる DNA 欠失領域に相当する部分も示す。後者の欠失領域には、M プロモーターのエンハンサー（MDE）
が存在する。

図２ MITF と LEF-1 の相互作用による転写調節
A. DCT 遺伝子の転写調節機構。DCT プロモーター領域には、MITF 結合部位、LEF-1 結合部位、及び CRE 類似
配列が存在する。CRE 類似配列に結合するタンパクはまだ不明である。
B. M プロモーターの転写調節機構。MITF 遺伝子の M プロモーター領域を模式的に示す。M プロモーターにはLEF-1 結合部位と CRE は存在するが、MITF の結合部位は存在しない。

− 63 −

列をプローブにしたゲルシフトアッセイにより解析する。場合作用する５）。すなわち、MITF は Wnt シグナル伝達系のによっては、サウスウェスタン法にて結合蛋白を探索する。

構成因子としての役割も担うことが示唆される。この結果、Wnt シグナルは種々細胞において効率的に伝達されると考え

2・5

MITF-M による M プロモーターの自己制御機

構の解析られる。一方、L E F-1 ファミリーに属する TCF-1 は M I T Fと相互作用しない 17）。よって、Wnt シグナル伝達経路におけ培養細胞での一時的発現解析では、MITF-M は LEF-1
による M プロモーターの活性化を促進する

る LEF-1 と TCF １との機能的差異が明らかになった。

。しかし、

14）

同領域には MITF-M の結合部位は存在しない（図２B）。

3・4

Wnt シグナル伝達系と cAMP シグナル伝達系

よって、LEF-1 を介した MITF-M による未知の転写活性のクロスト−ク

化機構の存在が示唆され、その分子基盤を明らかにする。

cAMP と Wnt シグナルによる DCT プロモーターの活性

３．結
3・1

化には、共通の cAMP-response element（CRE）類似配列

果が関与するが、既知の CREB はこの配列には結合しない５）。

新規アイソフォーム MITF-D の同定

Wnt シグナル伝達系と cAMP シグナル伝達系のクロスト

RPE と破骨細胞で発現される MITF-D を新たに同定し−クの可能性が示唆される（図２A）。

た（図１） 。MITF-D の翻訳開始 Met は下流のエキソ
12）

ン１B に位置する。MITF-D mRNA の非翻訳領域はエキ

3・5

MITF による M プロモーターの自己活性化機構

WS2 の発症は MITF-M の量不足（haploinsufficiency）

ソン１D によりコードされる。

によると考えられるが、その発症機構は不明であった。

3・2

M プロモーターの上流エンハンサー MDE の同定

MITF 自身が、LEF-1 を介して M プロモーター（自己遺M プロモーターの機能解析により、エキソン１M の上伝子）の転写を促進する事を明らかにした（図２B）14)。

流約 14kb にエンハンサー MDE を同定した（図１）13）。

この場合、MITF は M プロモーターに結合する必要は無

MDE には２つの SOX10 結合部位が存在し、エンハンサ

い。すなわち、DNA との結合に関わらず MITF は LEF-1

ー機能に必須である。事実、SOX10 は MDE に作用して、のコアクチベータ−として機能し得る。よって、発生過程

M プロモーターを活性化した。さらに、Mitf 変異マウス

で効率良く MITF-M の発現量を維持できると考えられる。

である red-eyed white（rw）のホモ接合体は赤眼、小眼球、広範な白毛を呈する 15）。その本態はエキソン１H、エキソ

3・6

RPE における OTX2 の役割

ン１D、及びエキソン１B を含む DNA 断片の欠失である

RPE は脱落・生成を繰り返す杆体細胞外節片を絶えず（図１）16）。よって、rw マウスは MITF-A など B1b 領域

貪食・処理するのみならず、ロドプシンの構成成分であを持つすべてのアイソフォームを欠損する。さらに、白毛る 11- シス - レチナールを再生し視細胞に供給する。このを呈することから、MITF-M の発現も欠損していること

ように、RPE は視細胞の機能維持に必須である。また、が示唆される。実際、rw マウスでは、MDE が欠失していRPE はメラニン合成という分化形質を持ち、メラニン合ることを明らかにした 13）。

成系の３つの酵素（チロシナーゼ、TRP1、DCT）を発現

これらの結果は Pigment Cell Research 誌に発表され、2002 年の最優秀論文賞を受賞した（文献 13）。

する。RPE に存在するメラニンは視覚機能に重要であるばかりでなく、視神経の適正な伸張にも関与する。転写因子 OTX2 が RPE 特異的に DCT プロモーターを活性化す

3・3

Wnt シグナル伝達系の構成因子としての MITF

ることを発見した 18,19）。

MITF-M が Wnt シグナル伝達系の転写因子 LEF-1 と協４．考

調的に作用してメラノブラストマーカーでもある DCT 遺伝子

察プロモーターを活性化することを発見した 5）。この作用には、最近の美白ブームによりメラニンに対する一般の関心は

L E F-1 と共に β- カテニンも関与する（図２A）。ヒト培養細高く、美白のためのさまざまな化粧品が登場している。さ胞における two-hybrid 法と抗体を用いた pull-down 解析法

らに、高齢化が進む我が国においては、単に健康で長生き

により、MITF の bHLH-LZ 領域が LEF-1 と相互作用する

できればよいというわけではなく、その余生の質が重要視ことを明らかにした。よって、MITF-M は Wnt シグナル伝達されている。今や、美しく老いるという願望は必ずしも女系の構成因子でもある。MITF は DNA との結合の有無に関性だけのものではない。実際、皮膚の老化の指標の一つでわらず LEF-1 のコアクチベータ−として機能する。

ある色素沈着（シミ）を予防できるような化粧品・薬剤のbHLH-LZ 領域はすべての MITF アイソフォームに共通開発が待ち望まれている。

であり、MITF-A などのアイソフォームも LEF-1 と相互− 64 −

オゾン層の破壊により地上に到達する紫外線量が増加

Wnt シグナルによるメラニン産生の制御機構の解析し、世界的にメラノーマが増加している。メラニンの主なYamamoto H, Udono T, Durlu YK, Tamai M, Takahashi

機能は紫外線に対する防護作用であるが、様々な皮膚の炎

K, Shibahara S. Identification of a novel isoform of

症後にもメラニン色素の沈着がおこる。また、加齡に伴うmicrophthalmia-associated transcription factor that is

白髪の形成には、毛包メラノサイトの細胞死による脱落な

enriched in retinal pigment epithelium. Biochem Biophys

どの病態が考えられる。しかし、現時点でもメラノサイト

Res Commun 1998; 247: 710-715.

の機能制御因子が続々と発見されており、メラノサイトの

８） Udono T, Yasumoto K, Takeda K, Amae S, Watanabe

分化・生存には従来考えられてきたよりも複雑な制御機構

K, Saito H, Fuse N, Tachibana M, Takahashi K, Tamaiが存在する。本研究は、メラノサイトの分化と機能維持に

M, Shibahara S. Structural organization of the human

重要な液性因子 Wnt に焦点を当てるものであり、コスメ

microphthalmia-associated transcription factor gene

トロジーにとって重要な知見を提供する。すなわち、我々

containing four alternative promoters: Biochim Biophysが明らかにする Wnt シグナル伝達に関連する新規因子のActa 2000; 1491: 205-219.

機能制御法を開発することにより、将来、皮膚を守る化粧９） Fuse N, Yasumoto K, Takeda K, Amae S, Yoshizawa M,

品・薬剤の開発へと発展する可能性がある。

Udono T, Takahashi K, Tamai M, Tomita Y, Tachibana M,

MITF は色素細胞のみならずマスト細胞、破骨細胞など

Shibahara S. Molecular cloning of cDNA encoding a novelの分化制御因子であり、MITF 変異が及ぼす効果の多面性

microphthalmia-associated transcription factor isoformの分子基盤の解明も今後の重要な研究課題である。一方、with a distinct amino-terminus: J Biochem (Tokyo) 1999;

Wnt シグナルは、メラノサイトを含めた毛包細胞間の相126: 1043-1051.

互作用にも関与する。Wnt が毛包メラノサイトの生存維

10） Tassabehji M, Newton VE, Read AP. Waardenburg

持をどのように制御するのかも興味深い問題である。

syndrome type 2 caused by mutations in the humanmicrophthalmia (MITF) gene: Nature Genet 1994; 8: 251-

（文

献）

255.

１） Hodgkinson CA, Moore KJ, Nakayama A, Steingrímsson

11） Nobukuni Y, Watanabe A, Takeda K, Skarka H,

E, Copeland NG, Jenkins NA, Arnheiter H. Mutations at

Tachibana M. Analyses of loss-of-function mutations of thethe mouse microphthalmia locus are associated with defects

MITF gene suggest that haploinsufficiency is a cause of

in a gene encoding a novel basic-helix-loop-helix-zipper

Waardenburg syndrome type 2A: Am J Hum Genet 1996;

protein: Cell 1993; 74: 395-404.

59: 76-83.

２） Hughes MJ, Lingrel JB, Krakowsky JM, Anderson KP.

12） Takeda K, Yasumoto K, Kawag uchi N, Udono T,

A helix-loop-helix transcription factor-like gene is locatedWatanabe K, Saito H, Takahashi K, Noda M, Shibahara S.

at the mi locus: J Biol Chem 1993; 268: 20687-20690.

Mitf-D, a newly identified isoform, expressed in the retinal

３） Dorsky RI, Raible DW, Moon RT. Direct regulation ofpigment epithelium and monocyte-lineage cells affected bynacre, a zebrafish MITF homolog required for pigment cell

Mitf mutations: Biochim Biophys Acta 2002; 1574: 15-23.

formation, by the Wnt pathway: Genes Dev 2000; 14: 158-

13） Watanabe K, Takeda K, Yasumoto K, Udono T, Saito H,

162.

Ikeda K, Takasaka T, Takahashi K, Kobayashi T, Tachibana

４） Takeda K, Yasumoto K, Takada R, Takada S, Watanabe

M, Shibahara S. Identification of a distal enhancer for theK, Udono T, Saito H, Takahashi K, Shibahara S. Induction

melanocyte-specific promoter of the MITF gene: Pigmentof melanocyte-specific microphthalmia-associated

Cell Res 2002; 15: 201-212.（2002 年の最優秀論文賞を受transcription factor by Wnt-3a: J Biol Chem 2000; 275:

賞）

14013-14016.

14） Saito H , Ya su moto K, Ta keda K, Ta ka ha shi K,

５） Yasumoto K, Takeda K, Saito H, Watanabe K, Takahashi

Fukuzaki A, Orikasa S, Shibahara S. Melanocyte-

K, Shibahara S. Microphthalmia-associated transcription

specific microphthalmia-associated transcription factor

factor interacts with LEF-1, a mediator of Wnt signaling.

isoform activates its own gene promoter through physical

EMBO J 2002; 21: 2703-2714.

interaction with lymphoid-enhancing factor 1: J Biol Chem

６） Steel KP, Davidson DR, Jackson IJ. TRP-2/DT, a new

2002; 277: 28787-28794.

early melanoblast marker, shows that steel growth factor

15） Steingrímsson E, Moore KJ, Lamoreux ML, Ferr_-(c-kit ligand) is a survival factor: Development 1992; 115:

D'Amaré AR, Burley SK, Sanders Zimring DC, Skow

1111-1119.

LC, Hodgkinson CA, Arnheiter H, Copeland NG, Jenkins

７） Amae S, Fuse N, Yasumoto K, Sato S, Yajima I,− 65 −

NA. Molecular basis of mouse microphthalmia (mi)mutations helps explain their developmental and phenotypic18） Simeone A, Acampora D, Mallamaci A, Stornaiuolo A,

consequences: Nature Genet 1994; 8: 256-263.

D'Apice MR, Nigro V, Boncinelli E. A vertebrate gene16） Hallsson JH, Favor J, Hodgkinson C, Glaser T,

related to orthodenticle contains a homeodomain of theLamoreux ML, Magnusdottir R, Gunnarsson GJ, Sweet

bicoid class and demarcates anterior neuroectoderm in the

HO, Copeland NG, Jenkins NA, Steingrímsson E. Genomic,

gastrulating mouse embryo: EMBO J 1993; 12: 2735-2747.

transcriptional and mutational analysis of the mouse19） Takeda K, Yokoyama S, Yasumoto K, Saito H, Udono

microphthalmia locus: Genetics 2000; 155: 291-300.

T, Takahashi K, Shibahara S. OTX2 regulates expression17） Waterman ML, Fischer WH, Jones KA. A thymus-specificof DOPAchrome tautomerase in human retinal pigment

member of the HMG protein family regulates the human T

epithelium: Biochem Biophys Res Commun 2003; 300: 908-

cell receptor Cα enhancer: Genes Dev 1991; 5: 656-669.

914.

− 66 −

皮膚におけるアクアポリン３の発現調節
自治医科大学

石

橋

賢

薬理学教室

一、中

越

雅

道

Water is important for skin to keep its moisture. Water transport is conducted by channel proteins named
aquaporins. Several aquaporins play pivotal roles in water metabolism in our body. AQP3 is expressed in the skinand its importance for the skin moisture is demonstrated by the study of AQP3 knockout mice which have accelerated
drying of the skin. The prevention of dry skin is important not only from the cosmetic point of view but also from theclinical point of view, i.e. it is responsible for an itch especially in aged people. This study was intended to search forthe substances which upregulate the expression of AQP3 in the skin. We used rat skins and human kerationcytes asmodels. In rat skins, vitamin A increased the AQP3 expression in a high dose (10%) but not in lower doses. However,the AQP3 expression was unaffected by vitamin A in a cell line from human keratocarcinoma. On the other hand, theexpression of AQP3 in this cell line responded to hypertonic stimulation with sorbitol suggesting that this cell line isuseful for the screening of the candidate substances which increase AQP3 expression.

１.

緒りグリセリンの輸送を介して皮膚の保湿を保っていると考言えられている３）。従って AQP3 の発現を調節することで水は生命にとって不可欠の物質であり、それを選択的に皮膚の保湿性を変える事が期待される。ヒト鼻腔上皮の通す水チャネルが発見されてこの分野の研究は急速に進展

AQP3 の発現はビタミン A では変化しないようである４）。

した。水チャネルは瞬時に大量の水を運ぶ必要がある細胞

AQP3 はケラチノサイトに発現しているがその発現がビタや浸透圧格差が小さくても水の輸送が必要とされる細胞に

ミン A で変化するかどうかは不明である。一方 AQP1 と存在している。水チャネルの実体はアクアポリン（aqua 水＋

AQP5 は汗腺に分布しているが直接は皮膚の保湿性には関

p o r i n 穴）と呼ばれる膜蛋白であるがヒトにおいて 13 個の与しないと考えられる。

遺伝子がみつかっている。この数は植物のシロイヌナズナのそこで今回の研究では皮膚の保湿性に重要な役割を演じ

38 個にくらべるとはるかに少なく、また線虫の 11 個に比べる AQP3 の発現を調節する物質を検索し、特にその発現ても少ないように思える。一方アクアポリンは水だけを通すを増やすものをみつけることを目標とした。皮膚の保湿をのでないこともあきらかになり名前にとらわれていると他の維持する事で老人に多い乾燥性の掻痒症やアトピー性皮膚重要な機能を見落とす危険がある。水のみならずグリセリン炎の治療や皮膚の創傷の治癒の促進をはかることが可能にや尿素などの小粒子をとおす aquaglyceroporin と呼ばれるなると考えられる。また化粧品の多くが皮膚の保湿性を向サブグループも存在する（AQP3, 7, 9, 10） 。

上させる働きがあることを考えると、化粧品の成分として

１）

皮膚では角質層に適度な水分（20-30％）が含まれており皮膚の柔らかさを生み出している。一方体内にたまったも有望である。さらに加齢による皺を減らす事ができれば美容的にも重要な物質をみつける契機にもなりうる。

熱を体外に放出するために皮膚から水を蒸発させているの２.

で、角質層はそれにみあうだけの水を透過させる性質も有している。このダイナミックな水の動きに水チャネルが関

２・１

実

験

材料

与していることが最近 AQP3 のノックアウトマウスが報200g の成体オス SD ラットを用いた。エーテル麻酔下告された２）。このマウスでは腎性尿崩症のほかに皮膚の異に背部の毛を剃ったあとに薬剤を塗布した。24 時間後に常な乾燥が認められた。しかしその機構は直接水の輸送

皮膚を採取した。培養細胞は自治医科大学皮膚科教室でに関与しているという単純なものではなく、ノックアウト

系代化したヒト皮膚癌細胞（keratocarcinoma）を用いた。

マウスの皮膚のグリセリンの含有量が減少していることよHigh glucose の DMEM（ダルベッコ変法イーグルスメジ

The regulation of AQP3 in skin andkeratinocytes.
Kenichi Ishibashi, Masamichi Nakakoshi＊

Jichi Medical School, Department ofPharmacologyウム）にペニシリン（50unit/ ㎖）およびストレプトマイ
シン（50ug/ ㎖）と５％牛胎児血清（FCS）を添加したもので培養した。Subconfluent の状態で試薬を加え、24 時
間後に細胞を採取した。試薬はシグマから購入した。

２・２

RNA, タンパクの抽出

ラットの皮膚はなるべく真皮を含まないようにはぎと＊− 67 −

り、液体窒素に入れ固まった状態でクリオプレスを用いてす

SDS-PAGE をおこなった。セミドライ・トランスファー装置でみやかにパウダーにした。それを R NAea sy（キアゲン）のゲルから PVDF 膜（Immobilon）にタンパクを転写した。膜

lysis buffer に入れ、protenase K 処理をおこなったあとカラは TBST（Tris-buffered saline、0.05％ Tween20）に２％

ムで total RNA を抽出した。培養細胞から RNA を抽出する

スキムミルクを加えたブロッキングバッファーで４度一晩処理には培養液を PBS（リン酸緩衝生理食塩水）であらったあ

した。抗ラットAQP3 抗体を 500 倍に TBST で希釈し室温と lysis buffer を入れて機械的に細胞をこすりとった。それで１時間インキュベートした。TBST で洗浄後、パーオキシダ

を RNAeasy のカラムを通して total RNA の抽出をおこなっ

ーゼ標識抗ウサギ Ig G 抗体と室温で１時間インキュベートした。R NA は 20ug を１％アガロース R NA 用ゲルの各レーンた。TBST で洗浄後、化学発光検出キットで発光させ ECLに電気泳動した。20XSSC でナイロン膜（Hybond plus）に

フィルムに感光させた。

トランスファーした。培養細胞のタンパクの抽出にはホモジ

３.

ナイザーバッファー（0.32M sucrose, 5mM Tris pH7.2, 2mM
EDTA, 0.1mM PMSF, 1ug/ml pepstatin A）内で超音波破

３・１

結

果

ラット皮膚へのビタミン A の AQP3 発現への影響砕したあと、1000g で 10 分遠心した上清を 250,000g で 30

ラット皮膚には 1.8kb のサイズの AQP3 のバンドが検分超遠心した沈澱をホモジナイザーバッファーにけん濁した。

出された（Fig. １）。ラット背部の剃毛した皮膚にビタミ
ン A（all trans retinoic acid）を溶かすのに用いた DMSO

２・３

ノーザンブロット

単独投与しただけで AQP3 の発現が増加することがあき

ナイロン膜を 50％ for m a m ide 入りのハイブリ液で 42 度

らかになった（Fig. １）。さらにビタミン A の影響をみる

16 時間ハイブリさせたあと２XSSC で室温にて 15 分洗ったために 0.1％ , 1％ , 10％のビタミン A を塗布して 24 時間

あと、２XSSC で 42 度 15 分、0.2XSSC で 58 度 15 分洗後の AQP3 の発現をノーザンブロットで調べた。10％でって増感紙といっしょにレントゲンフィルムにはさんだ。プロ

増加がみられたが、0.1％ , 1％の低容量では DMSO のコ

ーブはラットあるいはヒト AQP3 cDNA の全長をランダムプラ

ントロールと較べて変化がみられなかった。これは５匹のイマーで 32P-dCTP でラベルした。ニックカラムで未反応のラットでおこなったが同様の結果であった。

32P-dCTP を除いた。一方 RNA のトランスファーの定量性

つぎに剃毛による傷が AQP3 の発現に影響する可能性があを検定するために、脱プローブ後ヒト GAPDH cDNA をプロるので毛のはえていない後ろ足に塗布した。やはり10％ビタミ

ーブとしてハイブリダイゼーションを行った。GA PDH のデンンA で AQP3 の発現が誘導されることがわかった（Fig. ２）。

シトメーター値で AQP3 の値を補正して比較した。

３・２
２・４

ウェスタンブロット

ヒト皮膚癌培養細胞での AQP3 の発現

皮膚での AQP3 の発現はケラチノサイトに限局していサンプルバッファー（75mMTris, ２％ SDS, 15％ glycerol,

る。従って AQP3 の発現をケラチノサイトで直接検討できれ

3％ 2-mercaptoethanol, pH6.8）にタンパク 10ug を溶かし、ば有用性が高い。そこで当大学皮膚科に保存されているヒト95 度で５分変性させたあと 15％のポリアクリアマイドゲルで皮膚癌培養細胞に AQP3 が発現しているものがないかスクリ

1

2

3

4

5

1

AQP3

2

3

4

5

AQP3

GRAPDHGRAPDH

Fig.1. AQP3 mRNA expression in rat skins
Northern blot analysis of rat skins 24 h after treatment with
1: no treatment, 2: DMSO treated, 3: 0.1% vitamin A, 4: 1%
vitamin A, 5: 10% vitamin A(all trans retinoic acid).

Fig.2. AQP3 mRNA expression in rat hind feet.
Northern blot analysis of rat hind foot skins 24 h after treatment with 1 and 2: DMSO, 3and 4: 10% vitamin A.

− 68 −

皮膚におけるアクアポリン３の発現調節

ーニングしたところ kishi となづけられた細胞に AQP3 が発

AQP3 がソルビトールで増加し尿素ではかわらないという上現していることが明らかになった。まずこの細胞の AQP3 の記の結果が確認された（Fig. ４）。以上の結果からこの細胞発現が浸透圧の変化に応じて変化するかどうか調べた。細

は AQP3 の発現が正常のケラチノサイトと同様の変化をする５）胞に取り込まれない浸透圧物質であるソルビトールによる浸ので AQP3 の発現を調節する物質の検索に使えると考えられ透圧の刺激に反応して AQP3 の発現が増加することがわかる。まずラットで用いたビタミン A の影響を調べてみた。こった（Fig. ３）。一方、細胞にとりこまれて浸透圧格差の生じの細胞では 10-6M のビタミン A でも AQP3 のノーザンブロッ

ない尿素では浸透圧に対する反応がみられなかった（Fig.3）。

トでの変化はみられなかった（Fig. ５）。

これらの結果はウェスタンブロットでは 30k Da のハンドと同じく、dexamethasone(10-6, 10-7, 10-8 M), dibutyl-

40k Da 付近の幅の広いバンドが見られたが後者は糖鎖のつcAMP(10-5, 10-6, 10-7M), dibutyl-cGMP (10-5, 10-6, 10-

いた AQP3 と考えられる。ノーザンブロットと同様の結果が7M ) でも 24 時間後の AQP3 の発現のノーザンブロットでのウェスタンブロットでも見られ、タンパクレベルの発現でも変化はみられなかった。

1

2

3

4

5

6

7

AQP3

GRAPDHFig.3. AQP3 mRNA expression in a human keratocarcinoma with hypertonic medium.
Northern blot analysis of a human keratocarcinoma cell line 24 h after
treatment with 1: 200 mM urea, 2: 100 mM urea, 3: 50 mM urea, 4:
control, 5: 100 mM sorbitol, 6: 200 mM sorbitol, 7: 300 mM sorbitol.

1

kD

1

2

2

3

4

3

50AQP337-

GRAPDH25-

Fig.4. AQP3 protein expression in a human keratocarcinoma
cell line.
Western blot analysis of a human keratocarcinoma cell line
24 h after treatment with 1: control, 2: 200 mM sorbitol, 3:
200 mM urea.

Fig.5. AQP3 mRNA expression in a human keratocarcinoma
cell with vitamin A.
Northern blot analysis of a human keratocarcinoma cell line
24 h after treatment with 1. vehecle(DMSO), 2: 10-8M vitamin A, 3: : 10-7M vitamin A, 4: : 10-6M vitamin A.

− 69 −

４

考膚の AQP3 発現への影響は二次的な可能性があり、ビタ察

ミン A により誘導される未知の物質が AQP3 の誘導をし皮膚の保湿に重要な水チャネルである AQP3 の発現のていると考えられる。今後この機構の解明が必要である。

変化を調節する物質を検索するために２つの実験モデルを

ヒト皮膚癌培養細胞はスクリーニングとして有用なので用いた。１つはラットの皮膚であり、もう１つはヒト皮膚癌

よく用いられる誘導物質であるデキサメサゾン（ステロイ

培養細胞である。ラットの皮膚では DMSO の塗布だけでもドホルモン）、サイクリック AMP、サイクリック GMP に

AQP3 の発現がふえたことから剃毛により皮膚が傷付き炎症

ついて検討してみたが AQP3 は誘導されなかった。これなどの影響や DMSO による浸透圧の変化が原因として考え

は AQP3 がヒト気管培養細胞 (A549 cells) においてデキサられる。よりヒトに近い毛のはえていない足の裏の皮膚を用メサゾンで誘導されるというこれまでの報告６） と違っていても、ビタミン A による AQP3 の発現誘導がみられたのでいるが、細胞の違いや実験条件の違いを考慮にいれる必要

ヒトの皮膚でも同様の結果が期待される。ただ皮膚の R NAがある。今後この細胞を用いて AQP3 を誘導するものがを足の裏の皮膚から十分な量をこわさないでとることは困難

見つかれば、皮膚においても誘導できるかどうか、またそであり、クリオプレスという凍った皮膚をパウダーにする装置

れによって皮膚の保湿性が高まるかどうか、また毒性がなと protenaseK 処理を行う事でやっと可能になった。これはいかどうかを検討していく必要がある。

表皮では細胞間結合が強固なため、細胞内に R Na se の活５．総性を抑える lysis buffer が入りにくく、RNA の崩壊を防ぐの

括がむつかしいためと考えられる。クリオプレスで機械的にバ

皮膚の保湿性に重要な役割を演じる AQP3 の発現をラバラにするだけでなく、proteinase K で化学的にも個々の調節する物質の検索をおこなった。ラット皮膚ではビタミ細胞に分ける事で壊れていない R NA を十分量うることがでン A による AQP3 の発現増加がみられたが、ヒト皮膚癌

きると思われる。真皮部分の細胞成分は少ないので RNA は細胞ではビタミン A の AQP3 への影響は認められなかっ

表皮それもケラチノサイトの R NA を反映していると考えられた。この培養細胞はソルビトールによる浸透圧の上昇に応る。従ってより簡便なスクリーニングのシステムが望まれるの

じて AQP3 の発現が増加し、AQP3 の発現を調節する物

で、ヒト皮膚癌培養細胞で AQP3 の発現を調べたところ１つ

質のスクリーニングに有用であると考えられる。

の cell line で AQP3 が発現しているのを見つけた。この細胞は浸透圧の変化に応じて AQP3 の mRNA だけでなくタン（引用文献）

パクも変化させることがあきらかになり、正常のケラチノサイ

１） 石橋賢一：水チャネルの構造と機能。医学のあゆみ 201,
1077-1082, 2002.

トに近い性質をもっていると考えられる。しかし癌細胞であるので性質が変わっている可能性もあり、結果の解釈に注意

２） Ma T, Hara M, Sougrat R, et al.: Impaired stratumが必要である。とくに薬物に対するレセプターの発現や細胞

corneum hydration in mice lacking epidermal water channel

内シグナリングが変わっていると適切な反応が期待できない。

aquaporin-3. J Biol Chem. 277, 17147-17153, 2002.

それでも AQP3 を増加させる物質のスクリーニングの手始め

３） Hara M, Ma T, Verkman AS.: Selectively reducedとしては簡便であり、タンパクや RNA の抽出が容易でありき

glycerol in skin of aquaporin-3-deficient mice may account

れいな結果がえられるので有用と考えられる。

for impaired skin hydration, elasticity, and barrier
recovery. J Biol Chem. 277, 46616-46621, 2002.

ビタミン A はヒトにおいて皺をへらすことが美容的にも利用されている。従って AQP3 の発現が変化するかど

４） Jun ES, Kim YS, Yoo MA, et al.: Changes in expression

うかは興味あるところである。今回は２４時間という短いof ion channels and aquaporins mRNA during differentiation

時間にもかかわらずビタミン A によって AQP3 の発現がin normal human nasal epithelial cells. Life Sciences 68,
827-840, 2001.

増加することがあきらかになった。10％という高用量で変化がみられたのであるが長期にわたれば低用量でも効果が５） Sugiyama Y, Ota Y, Hara M et al.: Osmotic stress up-

期待できる。しかし一方で長期になるとビタミン A 直接

regulates aquaporin-3 gene expression in cultured humanの作用だけでなく組織の変化に伴う二次的な影響をみる可

keratinocytes. Bichemica et Biophysica Acta 1522, 82-88,
2001.

能性もあるので解釈はむつかしい。一方培養細胞ではビタミン A の効果が認められなかった。これは癌細胞によっ

６） Tanaka M, Inase N, Fushimi K. et al.: Induction ofて形質が変化しているためでないことは primary culture

aquaporin 3 by corticosteroid in human airway epithelialのケラチノサイトでビタミン A の AQP3 への影響を調べ

cell line. Am J Physiol 273, L1090-L1095, 1997.

てみる必要がある。もしケラチノサイトでもビタミン Aの AQP3 への影響が見られないならば、ビタミン A の皮

− 70 −

接触皮膚炎への p38 mitogen-activated protein kinase の関与機構の解明
千葉大学大学院

粕

医学研究院分子生体制御学

谷

善

俊

To elucidate the role of p38 mitogen-activated protein kinase (p38) in the pathogenesis of inflammation, a mouse contact
hypersensitivity (CHS) model induced by 2,4-dinitro-1-fluorobenzene (DNFB) was used. Ear swelling was induced bychallenge with DNFB, accompanied by infiltration of mononuclear cells, neutrophils and eosinophils, and a marked increase
in mRNA levels of cytokines such as interleukin (IL)-2, interferon (IFN)-γ, IL-4, IL-5, IL-1β, IL-18 and tumor necrosis
factor (TNF)-α in the challenged ear skin. Both ear swelling and the number of infiltrated cells in DNFB-challenged
ear skin were significantly inhibited by treatment with SB202190, a p38 inhibitor. Furthermore, the DNFB-induced
expression of all cytokines except IL-4 was significantly inhibited by treatment with SB202190. Ribonuclease protection
assay revealed that the mRNA levels of chemokines such as IP-10 and MCP-1 in ear skin were markedly increased at 24h after challenge with DNFB. The induction of these chemokines was significantly inhibited by treatment with SB202190.
In p38α +/- mice, both ear swelling and infiltration of cells induced by DNFB were reduced compared with those in wildtype mice. However, induction of cytokines by DNFB was also observed in p38α +/- mice, although the induction of IFN-γ,
IL-5 and IL-18 was typically reduced compared with that in wild-type mice. Challenge with DNFB slightly induced IP-10
and MCP-1 mRNA in p38α +/- mice, with weaker signals than those in SB202190-treated wild-type mice. These results
suggest that p38 plays a key role in CHS and is an important target for the treatment of CHS.

１．緒

そこで我々は、2,4-dinitrofluorobenzene（DNFB）による

言

マウス接触皮膚炎（Contact Hypersensitivity：CHS）モデ

Mitogen-activated protein kinase（MAPK）ファミリー

ルを用い、p38 阻害剤の効果を検討するとともに p38α ノッは、細胞外からの刺激を核内の転写機構制御にまで変換・

クアウトマウス（ヘテロ接合体；ホモ接合体は胎生致死３））の伝達するリン酸化酵素群であり、細胞の増殖、分化、形質

DN F B による接触皮膚炎誘導に対する応答を検討し、p38

転換、生存、アポトーシス等の様々な生物現象において中心の接触皮膚炎への関与機構を分子レベルで解明し、p38 阻的役割を演ずる重要な酵素である。哺乳類における MAPKs

害剤の適用法を含めた新たな治療法の開発を目的とした。

は Extracellular signal-regulated kinase(ERK)、c-Jun

２．実

N-terminal kinase（JNK）、p38 MAPK（p38）の３つに分2.1

類することができる。

験

実験動物

p38 は特にサイトカイン、U V 等の細胞外ストレスにより活

C57BL/6J 雄マウスを p38α 遺伝子ヘテロ接合体雌マウスと性化されるとともに、サイトカインの産生にも積極的に関与しかけ合わせ、p38α 遺伝子ヘテロ接合体マウス（p38α +/-）とている 。したがって、炎症を伴う病態伸展に密接に関与す

野生型マウス（Wt: p38α +/+）を得た。F6 世代以降の雌マウると考えられ、p38 をターゲットとしたサイトカイン抑制が炎スを実験に用いた。Genoty ping に用いた３種の PCR プライ

症性疾患治療の良好な st rateg y になることを示唆している。

マーと条件は以下の通り：A, 5’-CCCTATACTCCCTCTCTG

一方、p38 阻害剤の適用は場合によっては一部のサイトカイン

TGTAACTTTTG-3’; B, 5’-CCCAAACCCCAGAAAGAAATGAの産生をむしろ上げるという報告もあり、p38 をターゲットと

TG-3’; and C, 5’-TTCAGTGACAACGTCGAGCACAGCすることに異論を唱える説も登場している 。これらの議論がTG-3’ : 94（30 秒），55（30 秒），72（1 分）で 35 サイク

あるにもかかわらず、現時点では、炎症性病態伸展への p38

ル／ 800-bp および 450-bp の PCR 産物をそれぞれ変異おの関与様式を個体レベルで証明した研究はほとんど存在しな

よび野生型アリールとして認識した。

１）

２）

いとともに、炎症性皮膚疾患に関連した研究報告は存在し

2.2

ない。
E s s e n t i a l R o l e o f p38 M i t o g e n activated Protein Kinase in Contact
Hypersensitivity.
Yoshitoshi Kasuya

接触皮膚炎モデル

0.5％ DNFB（in acetone/olive oil（A/O）soln.）100μl をマ
ウス・8 週令雌の背部に塗布（感作）し、５日後、20μl の同液を耳介部に塗布した（惹起）。耳介腫脹と組織変化を経時的に計測・観察した。対照実験として、同様に感作した

Department of Biochemistry andMolecular Pharmacology, Graduate Schoolof Medicine, Chiba University

マウス耳介部に DNFB を含まない A/O soln. を 20μl 塗布した。p38 阻害剤：SB202190 は、惹起 30 分前に 10 -5 M
を 25μl 塗布した。

− 71 −

2.3

形態学的検討耳介部のパラフィン包埋切片（３μm）を作製しヘマト
キシリンーエオジン（HE）染色後、高倍率下で組織浸潤

Table 1 : Printer sequence, annealing temperature (A. temp),
number of cycles (Cycle#) and size of PCR product used for detection of each cytokine.

炎症細胞を確認した。

2.4

局所サイトカイン mRNA 発現量の検討

耳介部より total RNA を調製し、各２μg の total RNA を
RT-PCR に供し、各種サイトカインの発現量を確認した。
各サイトカインの検出用プライマー、アニーリング温度、
サイクル数は Table １に記載した。

2.5

RNase protection assay による局所ケモカイン

発現量の検討マ ウ ス LT N、R A N T ES、eot a xin、macrophageinflammatory protein（MIP）-1α、1β&2、IFN-γ inducible
protein（IP）-10、monocyte chemoattractant protein（MCP）-1、TCA-3 とハウスキーピングジーンである L32（ribosomal
R NA）および GA PDH に対するマルチプローブテンプレー
ト（mCK-5/BD PharMingen）を用いた RNase protection
assay に、耳介部より調製した total RNA 各 10μg を供した。

2.6

リンパ球の皮下移植実験

感作した Wt および p38α+/- マウスの所属リンパ節よりリンパ球をそれぞれ調製し、2×105 cells in 20μl PBS の懸濁液を未感作の Wt マウス耳介部の表皮下にインジェクショ
ンし、そこに 2020μl の 0.5％ DNFB（in A/O soln.）また
は A/O soln. を塗布して 24 時間後の耳介腫脹を観察した。
対照実験として、細胞を含まない in 20μl PBS を、未感作の Wt マウス耳介部の表皮下にインジェクションし、20μlの 0.5％ DNFB（in A/O soln.）を塗布した。

３．結
3.1

果

DNFB による CHS に対する p38 阻害剤の効果

DNFB は経時的に耳介腫脹を誘導した。p38 阻害剤である SB202190 の投与はこの耳介腫脹を有意に抑制した（Fig. 1）。また、その組織所見から、SB202190 の投与は、
DNFB による炎症細胞の組織内浸潤と表皮細胞間浮腫を抑制した（Fig. 2）。惹起 24 時間後の浸潤細胞の構成は、リンパ球を主体とした単核球細胞が主であるが、好中球および好酸球も確認され、これら細胞の浸潤数も SB202190の投与により抑制された（Fig. 3）。

3.2 局所サイトカイン発現量に対する p38 阻害剤の効果

TNF-α）の DNFB による発現誘導を有意に抑制した（Fig. 4）。

惹起前にはほとんど検出されない耳介部のサイトカイ
ン mRNA レベルが、DNFB による惹起によって時間依存3.3p38α+/- を用いた CHS の検討

的に一律誘導された。また、SB202190 の投与は I L -4 を除

Wt に比して p38α +/- では、DNFB による惹起 24 時間

くサイトカイン（IL-2、IFN-γ、IL-5、IL-1b、IL-18 および後の耳介腫脹、単核球細胞等の組織内浸潤が有意に抑えら− 72 −

接触皮膚炎への p38 mitogen-activated protein kinase の関与機構の解明れていた。また、耳介部のサイトカイン mRNA レ
ベルの DNFB による誘導は、IFN-γ、IL-5 およびIL-18 は p38α +/- では抑えられているものの、他のサイトカインは Wt とほぼ同等であった（Fig. 5）。

3.4

局所ケモカイン発現量の検討

DNFB に よ る 惹 起 24 時 間 後 の 耳 介 部 の ケ モ カ イ ン

MIP-1β、MIP-1α および MIP-2 mRNA がほとんど認めらmRNA 発現誘導と SB202190 投与の効果、および p38α

れず、DNFB による惹起によって誘導される IP-10 およ+/- でのケモカインの挙動を検討した。Wt においてはコ

び MCP-1 mRNA の発現も微弱であった（Fig. 6）。

ントロールレベルでは、MIP-1β および MIP-1α mRNAの微弱な発現と MIP-2 mRNA の強い発現が認められる

3.5

p38α +/- の CHS 抵抗性機構の検討

が、DNFB による惹起によって付加的に IP-10 および

p38α +/- の CHS 抵抗性獲得は感作段階か否かを、移植

MCP-1 mRNA の強い発現誘導が確認された。この典型的実験により検討した。未感作 Wt 耳介部への DNFB 塗布

な IP-10 および MCP-1 の発現誘導が SB202190 投与には CHS を誘導しないが、感作した Wt および p38α +/- か

よって有意に抑えられた。一方 p38α +/- では、Wt およら調製したリンパ球の未感作 Wt 耳介部への移植は、いずび SB202190 投与群のコントロールレベルで認められたれの場合も DNFB 塗布によって CHS を誘導した。また、− 73 −

リンパ球の耳介部への移植後、DNFB-free A/O soln. の塗布では CHS は誘導されなかった（Fig. 7）。

４．考察

本研究から、p38 が CHS の発症に密接に関与することが示唆され、p38 阻害剤が、経皮的投与という簡便な投与法で CHS に治療効果を発揮する可能性が示された。

p38 アイソフォームの関与様式
p38 の関与様式としては、少なくとも局所におけるサイトカ
イン—ケモカインネットワークの産生制御を介して CH S の成立に寄与していると考えられた。p38 には、α、β、γ、δ の４つのアイソフォームの存在が知られている。このうち、様々な種類の細胞に広汎に存在するのは α および β であり、p38阻害剤が効果を発揮する対象も α および β である。したがって、本研究で示された、p38 阻害剤の CH S の病態進展に対する抑制効果および p38α +/- では CHS 発症が抑えられることを考慮すると、p38 の４つのアイソフォームのうち、少なくとも α が中心的な役割を演じていることが考えられた。

− 74 −

接触皮膚炎への p38 mitogen-activated protein kinase の関与機構の解明

p38 の時間的・空間的関与機構にある。p38 阻害剤は、高濃度用いると異なるタイプの

CHS の発症には、感作段階、惹起段階の２つのステッ

MAPK である JNK も阻害する 5）。JNK は p38 と共有する

プを経るが、少なくとも p38 阻害剤を用いた実験では、す

上流のキナーゼ（MAPK Kinase Kinase）を有しており、でに感作したマウスに DNFB による惹起直前に p38 阻害

p38 が活性化する細胞環境下では往々にして JNK も並行剤を投与しているため、惹起段階での p38 の関与が明らして活性化する。本研究の CHS モデルにおいても、p38かである。そこで、p38α +/- において「はたして正常にとほぼ同じ時間経過で JNK は活性化していた。しかしな

感作が成されるか」をリンパ球の移植実験により検討した。

がら、本研究で用いた p38 阻害剤の投与法・投与量では、感作した p38α +/- の所属リンパ節から調製したリンパ球

p38 を特異的に阻害し JNK の活性には何ら影響しないこの未感作（naive）Wt への移植によって、移植耳介部位へとを確認している（未発表データ）。JNK が CHS にどのの DNFB の塗布で耳介部腫脹を誘導できた。この事実は、ように関与しているかは今のところ不明であるが、治療応

p38α +/- においても正常に感作されうることを示してい用を考慮する上で p38 阻害剤の JNK への影響を無視するる。したがって、CHS における p38 の関与の時間的特性

ことはできない。次に、本研究において p38 阻害剤は惹としては、感作段階よりもむしろ惹起段階にあると結論起段階の直前に投与したが、惹起後の p38 阻害剤投与にできる。次に、p38 の空間的関与機構については、DNFB

よる効果の検討が、実用性を考える上で重要となる。また、による惹起 24 時間後の組織に浸潤した CD4 陽性細胞をステロイド剤の繰り返し投与で確認されるような病変増悪

回収・純化し、RT-PCR により Th1 サイトカインである

効果が、はたして p38 阻害剤では成立しないか否かも今

IL-2 と IFN-γ、Th2 サイトカインである IL-4 と IL-5 の後の課題として検討が必要となる。

発現を確認することで検討を加えた。p38 阻害剤を投与した Wt における浸潤 CD4 陽性細胞のサイトカイン産生能

参考文献

は、p38 阻害剤未投与の Wt のそれと同等であった。一方、

１） Rin cón, M ., E n slen , H ., R a ingeaud , J., et a l. :p38α +/- における浸潤 CD4 陽性細胞のサイトカイン産生Interferon-γ expression by Th1 effector T cells mediated

能は IFN-γ および IL-5 で低下が見られた（データは示さby the p38 MAP kinase signaling pathway. EMBO J., 17,2817-2829, 1998.

ず：本研究結果の報告論文 4）参照）。p38α +/- における浸潤 CD4 陽性細胞の IFN-γ および IL-5 の産生低下は、

２） van den Blink, B., Juffermans, N.P., ten Hove, et al. :CHS 病変部におけるサイトカイン低下のプロファイルと

p38 Mitogen-activated protein kinase inhibition increases

相関していたことから、p38α +/- では、細胞内の p38 のcytokine release by macrophages in vitro and during
infection in vivo. J. Immunol., 166, 582-587, 2001.

内活量の低下が一部のサイトカインおよびケモカインの産生抑制に直接的に寄与している可能性が考えられた。一方、

３） Tamura, K., Sudo, T., Senftleben, et al. : Requirement

p38 阻害剤による局所サイトカイン—ケモカインネットワ

for p38α in erythropoietin expression: a role for stressークの産生制御は、浸潤細胞自体の p38 の内活量に影響

kinases in erythropoiesis. Cell, 102, 221-231, 2000.

することなく、少なくとも浸潤炎症細胞数の抑制を介して４） Takanami-Ohnishi, Y., Amano, S., Kimura, S., et al. :寄与することが示唆された。しかし、p38 阻害剤投与によEssential role of p38 mitogen-activated protein kinase in

る CHS 病変部におけるサイトカイン低下はかなり顕著で

contact hypersensitivity. J. Biol. Chem., 277, 37896-37903,
2002.

あったことから、p38 阻害剤は表皮構成細胞でのサイトカ

５） Le-Niculescu, H., Bonfoco, E., Kasuya, Y., et al. :イン産生を付加的に抑えることも考えられた。

Withdrawal of survival factors results in activation of

p38 阻害剤の治療応用の今後の課題

the JNK pathway in neuronal cells leading to Fas ligand

p38 阻害剤の治療応用上の１つの問題点は、その特異性

induction and cell death. Mol. Cell. Biol., 19, 751-763,
1999.

− 75 −

がん患者への「化粧」支援プログラムの日本への適用可能性に関する研究
東京大学大学院

高

医学系研究科健康科学

橋都

Cancer treatments are often accompanied by drastic changes in patients' appearances. Complications such as hair-loss,changes in skin color, loss of body weight have a tremendous impact on body image and self esteem. Despite these impacts
medical professionals focus their interest on treating the disease itself seldom giving comprehensive advice on body image
issues in the clinical setting.
This research focused on the "Look Good ...Feel Better" program that has been catering to cancer patients' needs
regarding body and self esteem issues for more than ten years in the USA. The "Look Good ...Feel Better" program is a free,national public service that helps women undergoing cancer treatment learn to cope with the appearance related side effectsof treatment and regain a sense of self-confidence and control over their lives. The program was founded in 1989 through apartnership between the Cosmetic, Toiletry, Fragrance Association Foundation（CTFA）, American Cancer Society（ACS）
and National Cosmetology Association（NCA）. The three partners support the program through the provision of funding,volunteer training, and supply of free educational materials and cosmetics.
In order to investigate the possibility of implementing this program in Japan, the author participated in a "patient session"and a "volunteer training session" workshops held by the "Look Good ...Feel Better" program in Los Angeles area in
2001. The author also conducted interviews with local American Cancer Society staff who were in charge of the program
to get detailed information on how the project is structured and managed. As for activities in Japan, the author collected
information on the groups/individuals that provide profit/non-profit activities that aim to increase people's quality of life
using cosmetics. The information was obtained through the Internet homepages, an online database "Igaku-chuozasshi",newspapers and magazines.
This report describes the outline of the "Look Good ...Feel Better" program. It includes the breakdown of responsibilityof the three partners who oversee the program, principles and content of the program, training processes for volunteers,
and the author's impression on the "patient session" and "volunteer training session". The report also describes the current
situation of the activities related to cosmetology in clinical settings in Japan. Lastly, the author discussed some points thatare particularly relevant to implementing the program in Japan.

１．緒

これは、美容師やメイクアップアーティストの資格を持つ

言

ボランティアが、がん患者に治療中の化粧のヒントや脱毛
１）

がんは日本人の死因の第一位であり 、我々の日常生活

時の工夫に関するアドバイスを提供するプログラムであに極めて身近な疾病である。がん治療は全身の脱毛、顔色り、がん患者の心身のリハビリテーションの一貫として高の変化、体重減少など、種々の外見変化を引き起こすことい評価を得ている３､ ４）。

があり、それら副作用は患者のボディ・イメージを大きくわが国では LGF B のような化粧ボランティアによる無料サ

変容させ、生活の質（以下 QOL）や自尊心の低下にもつービスはほとんど見られないが、治療を受けながら活発な社

ながる２）。しかし多忙な臨床現場では、患者の外見の変化

会生活を送るがん患者の一層の増加が見込まれる現在、外にまで細やかに対応する余裕がなく、患者は個人的努力で見的変容への支援を検討することは極めて重要である。

工夫や情報収集を余儀なくされているのが現状である。
アメリカでは、全米化粧品工業会（Cosmetic, Toiletry,
Fragrance Association Foundation : 以下 CTFA）、アメリ

本研究の目的は以下の２点である。
１. アメリカにおける LGFB の活動に参加し、運営の実際

カがん協会（American Cancer Society: 以下 ACS）、全米を詳細に検討すること。

コスメトロジー協会（National Cosmetology Association:

２. 日本国内における、「化粧療法」の実施主体や活動内

以下 NCA）の３者が共催で「Look Good...Feel Better」

容を調査し、１．との比較を通じて、LGFB の日本に

（以下 LGFB）という無料支援プログラムを展開している。

おける実現可能性を考察すること。

"Look Good ... Feel Better" program:its
importance and applicability to Japaneseclinical settings

２．研究方法2-1

LGFB の患者セッション及びボランティア養成

セッションへの参与観察

miyako takahashi
Department of Social Gerontology, Schoolof Health Sciences and Nursing,Universityof Tokyo

平成 13 年 10 月 22 日にロサンゼルスの UCLA メディ
カルセンターで行われた患者向けセッションに参加し、スタッフの役割分担や進行の様子の観察、および参加者に提− 78 −

がん患者への「化粧」支援プログラムの日本への適用可能性に関する研究供される資料や化粧品の確認を行った。

がん患者への各種情報提供や支援プログラムを実施する

同 12 月１日カリフォルニア州パサデナのアメリカがん協会

全米最大の非営利団体。プログラム実施の実務（参加者の支部で開かれたボランティア養成セッションに参加した。ま募集、会場となる病院のスタッフとの調整等）を担当する。

た、ボランティア養成セッションを担当したアメリカがん協会
ソーシャルワーカー Kim Young 氏に、セッション教材に記載

3-1-3 プログラム内容

されていないプログラム実務についてヒアリングを行うととも

LGFB プログラムには以下の３原則に基づいて運営さに、関連資料を収集してプログラム運営の詳細を把握した。

れている。
1. プログラムは医学的な情報を提供するものではないこと

2-2

日本国内の「化粧療法」の実施主体や活動内容

2. プログラムは無料で提供されることの実態把握

3. プログラムを通じて特定の製品を推奨しないこと

インターネット、医学中央雑誌データベース、新聞雑誌

患者セッションの会場はほとんどが病院内の一室であなどの活字メディアを通じて、国内で「化粧療法」を提供

り、ACS 担当者と受け入れ病院担当者（多くの場合ソーする団体・個人・医療機関に関する情報を収集した。

シャルワーカー）の事前打ち合わせで決定される。ボラン

３．結
3-1

ティアが参加者に十分個人指導できるよう、参加者数は５

果〜 12 名に限られている。プログラム所用時間は全体で約

LGFB プログラムの概要

２時間である。この時間内に、スキンケア、メイクアップ、

3-1-1 プログラムの目的と歴史

かつら等の利用法、ネイルケアの４トピックが取り上げら

LGFB プログラムは、抗がん剤治療や放射線治療の副れ、参加者の一人をモデルにしたメイクアップの実演が行作用によって外見の変化をきたした患者に美容専門家の資われる。

格を持つボランティアが化粧の仕方や脱毛時の対処方法を

患者セッションでは参加者一人一人に「ツールボックス」

直接アドバイスする、成人女性がん患者対象の無料プログと呼ばれる化粧用品セットが無償提供され、参加者はそれラムである。1989 年に始まったこのプログラムは、全米を用いてボランティアの指導を受ける。一つのツールボッ

で年間約３万人のがん患者に利用され、プログラム開始当

クスには、総額＄200 〜＄300 相当の化粧品が入っており、初からの総利用者数は 20 万人を超える。アメリカ以外でCTFA に属する企業によって無償提供される。化粧品会も展開され、現在までにイギリス、カナダ、オランダ、ア社が寄付をする場合、試供品ではなく市販品を、一つのルゼンチン、オーストラリア、ニュージーランド、ノル

製品につき最低 1000 個以上の提供することが義務づけら

ウェー、シンガポールの 8 カ国で実施されている。なお、れている。ツールボックスは、製品の色調によって Light,

13 〜 17 歳までの患者（男女）を対象にした、「10 代プロ

Medium, Dark, Extra Dark の４種類がある。参加者の人グラム（Look Good ... Feel Better for Teens）というプ種によって ACS コーディネーターが前もって手配するが、ログラムが別に実施されている。また、成人男性患者を対あくまでプログラムからの「贈り物」であって参加者が購象にしたプログラムも開発中である。

入する商品ではないため、参加者の肌色と完全にマッチするとは限らない旨、説明されている。遠隔地に住む患者の3-1-2 プログラムの実施主体

ために、ボランティアが例外的に個人指導をすることもあ

LGFB プログラムは、アメリカの CTFA、ACS、NCA

るが、この場合ツールボックスは提供されず患者個人の化の３者の共催で、全米展開されている。

粧品を用いる。

■ Cosmetic, Toiletry, Fragrance Association (CTFA)
化粧品・トイレ用品・香水関連商品を扱う会社が 400

3-1-4 ボランティアの養成方法と質の維持

以上参加する業界団体。プログラム全体への財政的支援、

LGFB ボランティアとして応募できるのは、コスメト

患者セッションで使用する化粧品の寄付、ボランティアト

ロジスト、エステティシャン、ネイルテクニシャン等、美レーニングや患者用の教材制作、患者のニーズアセスメン

容専門家として既に正規の資格を持つ者だけである。一度トやプログラムの評価を担当する。

ボランティア養成セッションを修了し、LGFB ボランテ

■ National Cosmetology Association (NCA)ィアとして登録した者は、２年に一度更新研修を受けるこ

全米で５万人以上の会員を持つメイクアップアーティスとを強く勧められる。更新研修では基本的技術の復習を行トやヘアスタイリストの団体。以前は NCA の会員である

うとともに、その２年間の LGFB プログラムの変更点な

ことが LGFB プログラムにボランティアとして参加する

どが伝えられる。

ための必須条件だったが、現在は非会員でも参加できる。
■ American Cancer Society（ACS）

ACS 本部は各地区で中心的役割を果たす美容専門家（State Trainer；全米で８名）とその地区の ACS スタッ− 79 −

フを招いて“Train-the-Trainer”という会合を定期的に開・ ツールボックスの製品の色調は種々の人種的背景に対応

き、各地区の養成セッションを指導する美容専門家を確保する目的で４段階用意されているが、参加者の肌色に必する方策をたてている。State Trainer の下には Regional

ずしもマッチするとは限らない。

Trainer と呼ばれるボランティア指導者が配置されてい・ 参加者、ボランティアとも圧倒的に白人が多いので、メる。

イクアップのアドバイスも白人女性を基準につくられて

LGFB プログラムでは、ボランティアへの感謝を表す

いる印象がある。

ため“Look Good ... Feel Better Volunteer Recognition

・ ツールボックス内の化粧品は複数の化粧品会社から寄付

and Award Program”という活動も実施している。ボラン

されているため、ボランティア自身が普段使用しない製

ティアとして参加する美容専門家とともに、受け入れ病院品も含まれており、製品の使用法に関する知識が乏しいなどの担当者（サイトコーディネーター）や ACS のスタ

場合がある。

ッフも表彰し、その後もプログラムに積極的に関わるよう・ 特定の製品を勧めない原則にもかかわらず、ボランティ

動機付けをしている。

アによっては普段使い慣れている製品を患者に勧めることがある。

3-1-5 患者セッション及びボランティア養成セッションの

3-2

印象

日本における高齢者などへの化粧指導の現状

実際に参加した患者セッションとボランティア養成セッ

近年国内でも、高齢者への化粧や、ケガ・病気・先天性

ションの進行内容や参加者の様子は中間報告書５） に詳述

変化による外見の変化を目立たなくする化粧が注目されてしたので、本報告書では両セッションを通じて特に印象にいる６）。活動主体も様々であり、化粧品会社（資生堂・カ

残った点のみ記す。

ネボウ・ポーラ等）、メイクアップアーティスト個人やオ■ボランティアの当事者体験

フィス（小林照子氏、矢野実千代氏、トニータナカ氏・かボランティアとして参加を希望するメイクアップアーティス

づきれいこ氏等）、一般医療機関、老人医療機関・福祉施設、トは、自分自身あるいは家族や親しい友人ががん体験を有地方自治体などが含まれる。サービスは無償であることも、していることが多かった。ボランティア自身、がんに伴う社

営利事業として実施される場合もある。

会生活上の苦労を実感していることが、参加患者への共感

高齢者（痴呆高齢者を含む）を対象としたサービスは主にを高め、セッション運営を円滑にしていると考えられた。

ボランティアによって無償提供されており、「化粧療法」「お■同病者交流の効果

化粧セラピー」「ケアメイク」「コスメティックセラピー」等と参加した患者の病名は、乳がん２名、卵巣がん４名。５呼ばれて化粧行為による心理的効果やリハビリ効果が期待さ

名が脱毛中で、残り１名も脱毛が予想される治療を受けるれている。化粧品会社の専門スタッフやメイクアップアーティ

予定。人種構成はアジア系、ラテン系が一人ずつで、残りストが老人医療・福祉施設に出張して高齢者に化粧指導を

４名は白人。参加者は、会場に入った時点から自らの経験行う活動が多い。岐阜県では県介護普及・実習センターが老談を語り合い、極めて和やかな雰囲気でプログラムが進行

人ホーム職員などを対象に各種療法の専門研修を実施してする。セッション会場は、がん・脱毛・外見的変化というおり、平成 7 年度から化粧療法を取り入れている。その結果、問題を共有する同病者が安全に交流できる場所でもあり、老人医療・福祉施設内の美容室設置、化粧品会社の訪問

参加者の心理的安寧にも効果があると考えられた。

化粧教室などの試みが増加して効果を上げている７）。

■訴追回避の努力

一方ケガ・病気・先天性疾患による外見変化については、

ボランティア養成セッションでは、LGFB プログラム

カバーアップの特殊技術が求められ、有償サービスであるの範囲で実施していいこと / してはいけないことが明確にことが多く、「リハビリメイク」「メディカルメイクアップ」

区別されていた。
（例えば、カツラの装着アドバイスはすのように、より医学との連携を強調した呼び方をされているが、参加者が持参したカツラのトリミングは一切行わなる。特定の大学病院の形成外科や皮膚科と連携して医療現い。ネイルケアについても実演はせず、注意点を口頭で伝場に出張するケースもあれば（例 : 資生堂と昭和大学医学えるに留める。
）本プログラム及びボランティアが参加患部）、メイクアップアーティストが複数の医療専門家の協者から訴追されることがないよう、法的責任範囲を考慮し力を得て専門の相談施設を設置する例も見られる（例 : アてプログラムが立案・実施されていた。

ピアランスリハビリセンター）。

■セッション運営上の問題

近年はサービスの対象を拡げ、院内にエステ施設を開設

セッション中、実際に以下のような問題が観察された。

して一般入院患者にスキンケアも含めた「化粧エステ療法」

・モデルの実演の進行が早い場合、他の参加者が追いつかを提供している拡げる一般病院も見られる（http://www3.

ないことがある。

ocn.ne.jp/~johoku/）。

− 80 −

がん患者への「化粧」支援プログラムの日本への適用可能性に関する研究

このように美容専門家が専門技術を生かして医療・福祉の孤独感が軽減され、自助グループに類似した効果が期待領域で活動する機会は増加しており、今後の需要を見込んできる。

で「美容福祉コース」を設ける福祉・医療技術系の専門学

2. 専門技術を生かした個人ボランティア活動校も増えている。これら教育機関のカリキュラムには、美LGFB は美容専門家が自らの専門技術を生かして取り

容技法と共に社会福祉論・障害者論・リハビリテーション理組めるボランティア活動である。ボランティアは特定の化論・カウンセリング理論などが組み込まれていることが多い。

粧品会社の枠を超えて募集されているので、化粧品会社主

学術研究面からも注目を集めており、平成 11 年には美導の活動が少ない地方在住の専門家も活動に参加できるの容専門家による医療・福祉領域の活動をより学術的に研究は大きなメリットである。

する目的で日本美容福祉学会が設立された。

3. 企業単位・業界としての社会貢献

心理学領域でも化粧行為の心理的効果に関する実証研究が８）

蓄積されており 、日本社会心理学会でも自主企画が組ま
９）

参加企業は、製品を無償提供することでプログラムに貢献している。さらに CTFA がプログラムの共催者としてれている 。これらの研究は「化粧心理学」として心理学本プログラムを強力に推進していることは、化粧品業界全の一分野となりつつある。また、学術領域と実践を結びつ体のイメージアップにもつながっている。

ける活動として、医・美・心研究会によるメイクセラピス

4. 新たな病院サービスの提供による医療施設の差別化

ト養成講座の試みも見られる。

LGFB を病院で行うプログラムの一貫として取り入れるこ

このような趨勢の中で、がん患者を対象とした活動や研とで、その病院が単にがんという疾患の身体的治療だけで究報告はほとんど見られない。継続的な活動としては、わ

なく、全人的な心理社会的支援にも取り組んでいるというずかに、北里大学病院における乳がん患者を対象とした試アピールになっている。特にがん患者の外見的変容に対処

10）

みや、がん治療のため一時的に脱毛した人にかつらを貸与する「夏目雅子ひまわり基金」（http://www.himawari

するプログラムがほとんど見られないわが国では、病院サービスの新たな差別化戦略としての効果も期待される。

.ne.jp/）が挙げられる程度である。その中で、乳癌当事者団体である VOL-NET（http://www.vol-net.jp/）が平成

4-2

LGFB の日本適用可能性について

14 年から始めた「おしゃれわくわくプロジェクト」といLGFB プログラムはアメリカの他にも世界８カ国で展開さう活動は注目に値する。VOL-NET は、脱毛経験者を対象れて高い評価を受けている。前述のように国内におけるがとしたアンケート調査 11）やかつらメーカーへの訪問調査

ん患者を対象「化粧療法」の実践報告は数少ないが、何ら

12）を通じて、当事者のニーズをメーカーに伝えるとともに、かの外見的変容を補うことを目的とした「化粧」に関する研

患者向けパンフレットの作成を行っている。当事者自身に究や実践活動が活発化してきた昨今、わが国においてもがよるこのような活動は、今後一層の広がりを見せる可能性

ん患者を対象とした同様のプログラムは十分に実現可能性があるだろう。

があると言えよう。しかし、L G F B を日本国内で実施する

４．考
4-1

にあたっては、検討するべきいくつかの留意点がある。

察

LGFB の特徴

4-2-1

プログラムの運営主体の課題

LGFB プログラムは美容専門家が無償で専門技術を提LGFB プログラムは CTFA、ACS、NCA のパートナー

供するボランティア活動であるが、活動に関わる４者であシップで実施されている。業界団体である CTFA は、財る患者自身・ボランティア・化粧品会社・病院のそれぞれ政的支援、化粧用品の調達、教材の作成などプログラムのにとっての利点があげられる。１．参加する患者同士の交

ハード面の中核部分を担当している。アメリカにおける流を促進する自助グループ効果

本プログラムの成功はこの CTFA の全面協力に負うとこ

２．美容専門家が専門技術を生かして参加できる個人ボランティア活動の企業、および業界全体としての社会貢献

３．個々

ろが大きく、他の国々でも CTFA に相当する業界団体の４．病院サー

支援が得られている。複数の化粧品会社による連携は本プ

ビスの差別化、の４点である。

ログラム最大の特色であり、フリーや地方在住の美容専門

1. 自助グループ効果

家のボランティア参加を容易にする重要なポイントでもあ

がん治療のために何らかの外見的変容をきたした患者
は、治療のために必要な最低限の外出を除けば自宅にひきる。わが国においても、特定の会社だけでなく広く業界全体の協力を得ることが不可欠であろう。

こもりがちになりやすい。LGFB は外見的変容をきたしCTFA はプログラムのハード面を担うが、美容専門家

た患者に具体的な対応方策を伝授するとともに、似たようであるボランティアは実際に患者に接してメイクアップのな状況にある他の患者と出会う場も提供している。日常生

アドバイスを提供するソフト部分の要である。ボランティ

活の苦労を分かち合い情報交換をすることを通じて参加者

アの多くは自分自身や家族・友人ががん体験を有しており、− 81 −

その個人的経験が活動に参加する最大の動機になっている

３） Anderson MS and Johnson J: Restoring of body imageと考えられた。この点は、患者に対する共感を保つ上で非and self-esteem for women after cancer treatment - a

常に重要である。ただし、がん体験には個人差が大きく、

rehabilitative strategy. Cancer Practice, 2, 345-359.

ボランティア各自の経験に基づいた価値観を患者セッショ

1994.

ンに持ち込まないよう、トレーニング段階で十分留意する

４） La ndis N T: Pha r macy tech nicia n helps ca ncer

ことも必要であろう。

patients look good. American Journal of Health-System

プログラム全体の調整役である ACS の機能を受けもPharmacy, 56, 208, 1999.

つ 団 体 が 国 内 に 存 在 し な い の も 問 題 で あ る。ACS は、

５） 高橋 都：癌患者への「化粧」技術指導プログラムの日LGFB プログラムの全米への広報、会場となる個々の病本への適用可能性に関する研究 . コスメトロジー研究振興院との連絡調整、ボランティア応募者のトレーニングなど

財団 研究業績中間報告集第 11 号 33-43, 2002に関わり、プログラム全体の運営を円滑にしていた。日本

６） 村澤博人：外見に対する意識の変化がもとめるこれからの場合、がん患者会は各地に存在するものの、現時点ではACS に相当するような全国規模の非営利支援組織が存在の社会 . フレグランスジャーナル 49-52, 2003
７） 岐阜県県政トピックス

健康増進課「化粧でいきいき健

しない。この調整役割を誰が担当するのか、新たな NPO

康に！ -- おしゃれ健康法の実践」http://www.pref.gifu.

設立の必要性なども含めて今後詳細な検討が必要である。

jp/kouhou-c/futrai/9708/topics/topics05.htm (2003 年 1
月 20 日アクセス )4-2-2

プログラム内容の課題

８） 大坊郁夫：Well-being としての化粧の心理的効果 . スト

LGFB プログラムの内容は、スキンケアとメイクアップ

レス科学 15, 269-275, 2001

を基礎としており、かつらやネイルケアに費やす時間は相９） 大坊郁夫 , 箱井英寿企画 日本社会心理学会自主企画

対的に短い。しかし抗がん剤治療などで脱毛をきたす場「装い」セラピーの可能性を探る - 化粧と被服の心理的効

合、患者の社会生活に及ぼす影響が大きく、患者にとって果 . 日本社会心理学会第 43 回大会発表論文集 876-877,

はメイクアップよりも脱毛への具体的対策に関する情報提2002

供のニーズが高い可能性もある。LGFB では、かつらに

10） 小越明美、蔵並 勝、越田佳朋他：乳癌在院患者に対ついては法的トラブルを回避するために総論にとどめていする精神的 QOL の改善を目的とした化粧療法

るが、購入方法・使用方法・手入れの仕方など、より具体

日本乳癌学会総会抄録集 , 125, 2002

第 10 回的な情報提供が求められよう。その際、VOL-NET などの

11） VOL -N ET : 化学療法に伴う脱毛経験者の声と問題当事者団体が作成したパンフレットなど、既存資料の発掘

点 - 乳がん患者アンケート結果から . http://www.vol-net.

と活用も課題である。

jp/01opensite/Main2/Sub9-2.htm

５．総12） VOL-NET ：私達が廻ったかつら屋さんの特徴と印象 .

括

http://www.vol-net.jp/01opensite/image/021216katura.pdf

がん患者対象の「化粧療法」プログラムである LGFBに参加し、運営の実際を検討するとともに日本国内におけ（参考文献）

る適用可能性を考察した。本プログラムはわが国において

１） Look Good ... Feel Better -- How to conduct a patientsession. CTFA Foundation, 1997.

も新たな患者サービスとして、また専門技能を生かした美容専門家のボランティアプログラムとして、さらには企業

２） L o ok G o o d ... Fe el B et t er H o m epa ge: ht t p: //lookgoodfeelbetter.org/

や化粧品業界全体の社会貢献活動として、大きな可能性が期待できる。

３） Look Good ... Feel Better -- Guide for American Cancer（引用文献）

４） Look Good ... Feel Better -- Education material for Los

Society Volunteers. American Cancer Society.
１）厚生統計協会 : 国民衛生の動向 , 2000

Angeles Region Certification Class. December 10, 2001.

２） Noyes DD and Mellody P: Beauty and Cancer, Taylor

５） Look Good ... Feel Better News, Volume 101, Number 1,

Publishing, Dallas, 1992.

2001.

− 82 −

化粧文化史の変遷と流行した化粧の受け入れ方についての研究
武庫川女子大学大学院

玉

置

育

家政学研究科

子、横

川

公

子

This research considered formation of modernistic makeup, and makeup in the present age. When I studying modern
makeup, it is made reference the magazine "FUJIN-SEKAI" and the "SHUFU NO TOMO" were used. The beauty
by soul was recited in the Meiji era. A woman began to carry out makeup united with the going-out place to Taisho
Era. And it came to carry out "modern makeup" which emphasizes that eyes go into the Showa time. People called acosmetics house introduced Occidental cosmetology to Japan, and one of them had a face massage. A cosmetics households a school in a beauty parlor, a company, etc. which oneself manages. There was an idea of calling it ready“Aesthetic
thought”in modern makeup. However, the view was finished by establishment of the law of the Showa 30s.
It investigated about fashion of the present makeup. A 30 or older-year women likes red makeup. In order to know
makeup of a young man, personal-effects investigation of makeup was conducted. The young person had all themembers mascara.

容家と称される人々の活躍とその根底に流れる思想を追っはじめにている。その際の主な資料としては、美容家の著書や当時多くの女性はいつの時代も化粧をしつづけている。さらに大げさな表現をすれば、人類が化粧をしなかった時代は発行されていた雑誌「婦人世界」や「主婦之友」などでの美容家の発言を参考としている。

無かったと言っても過言ではない。化粧は変わることなく

第三章は、現代において化粧をしている女性たちをとり続けられた行為であり、時代によって化粧で様々な顔が作

まく化粧に関する環境について調査を行った。これまでのられてきた。例えば、白い肌が良いとされた時代があれば、化粧文化及び化粧史に関する研究は、どのような化粧が提日焼けした肌が良いという時代もある。唇の輪郭を小さく唱されてきたのかを述べることに重点が置かれてきた傾向

おちょぼ口に描き真っ赤な口紅を塗る時代もあれば、ピンが強く、実際の化粧の調査はあまりなされていない。本章

クの口紅を唇いっぱいに描いた時代もある。多くの女性はではアンケート調査を行い化粧の傾向を年代別に見ること

時代と共に大きく変化する価値基準によって技巧を凝らしとする。さらに、18 歳 19 歳の学生を対象に化粧ポーチのながら化粧をし、どんな化粧したら良いのかを模索し続け所持品調査を行った。18・19 歳の学生を調査対象としたている。本研究では、時代と共に変化する化粧への基準をのは、学校、バイト先、家とあらゆる環境において化粧を追うと共に、学問としての化粧文化の可能性を追求したい

許されるようになった年齢であり、化粧に興味を持ちやすと考えている。

い年代だと考えたからである。また、化粧ポーチの調査を本研究において、まず近代における化粧がどのような変行った理由は、顔を作るための道具箱でもあり、即座に顔容をたどってきたのかを追う。また、現在の化粧についてを修正できるようと救急箱のような存在であると考えたかも考察を行うこととする。

らである。

本論では、次の通りに章を設定した。第一章、これまで

第１章：これまでの化粧文化研究の変遷の化粧文化研究の変遷。第二章、近代的化粧の形成。第三化粧が研究テーマにされることは、決して多くなかった。

章：現代における化粧環境について。
これらの研究を遂行する上で次のような方法を用いた。
第一章では、これまでの化粧文化研究の変遷を追っている。

まず、化粧文化に関するこれまでの研究を振り返ってみることとする。
日本における化粧文化研究の端緒を、久下司、江馬務に

第二章では、化粧に携わる美の実践者として美容家たちの提唱内容に耳を傾けることとする。近代に台頭してきた美A study of the change in Make-up practices
through History and the Acceptance ofMake-up fashion, among young women

もちろん久下司、江馬務より以前にも、化粧関連の書籍として『容顔美艶考』、『都風俗化粧伝』など化粧を扱った書は多く発行されているが、これらは女性が化粧をする際

Yasuko Tamaki, Kimiko Yokogawaに参考にする美容書であるため、資料としては貴重である

Human Environmental Science, Mukogawa
Women's University

が、化粧を歴史的、文化的に総括した研究的視座をとるも＊＊見ることができる。

のとはいえない。従って、久下司、江馬務の化粧研究によって、以下、日本における化粧文化史の系譜を辿ることに− 83 −

する。

学”と命名し、更に自然科学、人間科学、社会科学と三点

久下司の化粧文化研究を『化粧』（法政大学出版、1970年）で、江馬務による化粧文化研究は『江馬務著作集第四巻からのアプローチが可能であると述べており、化粧文化研
究の可能性を示唆している。

装身と化粧』（中央公論社、1976 年）などで確認でき現在において化粧文化研究を遂行する上で、村澤博人とる。久下と江馬の研究は、化粧の歴史をたどることに重点

石田かおりの存在も無視できない。村澤博人はポーラ文化が置かれている。両者における化粧の歴史は、日本での化研究所で「化粧文化」の編集を行うなど長年にわたり“化粧の発生を原始時代に見出し、記紀の時代、奈良・平安時

粧文化”という言葉の生みの親でもある。現在は顔・化粧代を経て江戸時代までを扱っている。両者の研究は化粧を文化研究所にて研究を継続している。これまでの研究を著

広義の意味で捉えおり、白粉や紅などの化粧品や化粧方法

書『美人進化論』（東京書籍、1987 年）、『顔の文化誌』（東

だけではなく、髭、額の形状など顔面における装飾や加工

ii）（ポプラ社、
1998 年）
京書籍、
1992 年）『これがわたしの顔 』も扱っている。江馬は、これらの変遷を「固有風俗時代」「、韓などで確認できる。村澤は顔と化粧を関連づけて考察を行

風輸入時代」、「唐風模倣時代」、「国風発達時代」、「国風っている。化粧を通史的に追っていることはもちろんだが、発達全盛期」のような時代区分を設定して位置づけ、大陸か

興味深い報告の一つに、顔を横から捉える“横顔文化”とらの影響を受けた化粧が日本において独自の変容を追ってい顔を正面から捉える“正面文化”比較文化研究がある。こる。

れらに基づき、日本は顔を真正面から捉えようとする“正記紀の時代から明治前期にかけての化粧史を、より詳細に記載した資料として、『化粧史文献資料年表』（ポーラ文化面文化”であるとし、韓国などは顔を横からとらえる“横顔文化”であるという分析を行っている。

研究所、1978 年）がある。この資料集には、あらゆる文献

石田かおりは、著書『おしゃれの哲学』（理想社、1995

における化粧関連の記述が通史的に掲載され、貴重な化粧年）、『「裸のサル」は化粧好き』（求龍堂、1999 年）『化粧文化関連資料の一つと考えられる。

せずには生きられない人間の歴史』（2000 年、講談社）なしかし、これまでの化粧史は、化粧と人との関わりの中でどで化粧文化研究を確認できる。これまでの化粧を古今東全く語られていないため、化粧の目的等は全く不明である。

西取り上げ、日本、西洋を問わず化粧をし続けてきた歴史i）

樋口清之は『日本風俗史事典 』で、「化粧」の目的をと清潔感との関係を述べている。

①宗教的目的（呪術、禁忌など）、②本能的目的（快感、産業史や社史による化粧史は、資料がまとまっている資

美的本能など）、③実用的目的（防衛、保温など）、④表示

生堂に頼らざるを得なかった。しかし、戦後の化粧品業界的目的（経歴、地位）と四分類して述べている。しかし、の変遷を追う際には、水尾順一による『化粧品ブランド史』

現代社会において化粧の行為の目的は、個々の生活によっ（中央公論社、1998 年）がおおいに参考になる。

て細分化され、様々な要因が絡み合っているために、容易に目的を定めることはできない。
明治時代以降の化粧史は、『モダン化粧史

また、これまでの化粧文化の研究は歴史を追う傾向が強かったが、米澤泉による化粧文化研究は言語文化学的要素

粧いの 80 年』

を取り入れた方法を用いており、電車での化粧行為を読者（ポーラ文化研究所、1986 年）や 1996 年に資生堂より創参加型の「読み」行為と位置づけている点が大変興味深い。

刊された研究紀要『おいでるみん』では、の陶智子によるこれまでの化粧研究からは、古代記紀の時代から現在に「近代化粧の基礎的研究」でも確認できる。

至るまでの化粧史の総論を確認できた。しかし、化粧史研

2002 年に発行された『研究紀要 おいでるみん 化粧文化

究は多くの研究者によってなされているが断片的でしかな

特集号 日本の化粧文化—明治維新から平成まで—』では、い。一次資料として当時の雑誌を通史的に読み解いていく

スキンケア、礼儀、ジェンダー、フレグランス等、これま方法はほとんどなされていない。今後の課題としてはより

での化粧史を多角的に分析する研究報告がなされている。

詳細な化粧史の構築の必要を感じる。

高橋雅夫の検討は、「化粧文化」12 号、13 号、14 号に第 2 章：近代的化粧の形成

おける「広告における明治期の化粧品」や著書『化粧ものがたり』（雄山閣、1997 年）でも確認できる。さらに高橋は、

第１項：近世から近代への移行
江戸時代までは、既婚した女性は眉を剃り、歯を黒く染

著書において化粧の基本となる色を白・赤・黒とわけて個々

める＝鉄漿など日本独特の化粧をしていた。その風習がに考察を行い、1990 年代までの化粧史を追っている。
また、化粧に関する民俗学的考察として、石上七鞘『化1868（明治元）年の太政官布告によって禁止された。明治

粧の民俗』（おうふう、1999 年）で取りあげられる化粧に政府が鉄漿や眉剃りは諸外国には無い野蛮な風習とみなまつわる伝承に関する論考を知ることが出きる。

し、これらの風習を公卿たちに止めさせたのである。引き

南博は『化粧とゆらぐ性』（ネスコ、1991 年）で学問と続き、1870（明治３）年の太政官布告でも華族の鉄漿が止しての化粧の可能性を摸索し、化粧に関する研究を“化粧め ､1873（明治６）年も昭憲皇太后もお歯黒を止めたので− 84 −

化粧文化史の変遷と流行した化粧の受け入れ方についての研究あった。公卿や皇室から端を発した眉剃り・鉄漿の排除は、ブルーにフェイスマッサージを学んだ人物として荘司直子

次第に一般の人々の間でも広がり始めた。しかし、太政官の存在も確認できる。荘司直子は、夫の七之助が理髪店を布告はこれらの風習を排除したが「しなくてよい」という経営しており、夫の仕事を助けたいという思いから英語を程度であるため、眉剃り・鉄漿などの日本独特の風習は即修得し医師キャンブルーのもとでフェイスマッサージを学i i i）座に無くなったとは言いきれない 。これらの太政官布告はんだ。その後荘司直子は独学で生理学・解剖学の研究し、これまでの化粧の風習を禁止し、海外の化粧法を取り入れる

明治 39 年 10 月から夫が経営する理髪店で婦人部を設け、きっかけの一つでもあったため近代的化粧の発端と考える。

フェイスマッサージを行っている。しかし、美容家荘司直

太政官布告以降の新しい化粧法＝近代的化粧は、当時の子は雑誌記事や書籍は確認できない。

新聞・雑誌で提唱されることはほとんど無かった。当時の美容家の祖として遠藤波津子の存在も無視できない。遠「読売新聞」では新商品の紹介が化粧関連の主な記事であ藤波津子は明治 34 年に帝国ホテルで着つけ業務を開始し、る。例えば、明治 13 年 5 月に田所町の井善の「井桁香水」

その後明治 38 年に東京の京橋で「理容館」を開業し「美の発売、同年 10 月に浅草の「天香水」の発売、11 月には顔術」を本格的に開始した。遠藤波津子は「大日本美髪会」

馬喰町の岳陽堂で「小町水」などである。

の講習会で芝山兼太郎からフェイスマッサージを習得し、ア

次に、雑誌「風俗画報 iv）」の化粧関連記事を参考とす

メリカ式のフェイスマッサージを行っている v i i）。アメリカ式美る。「風俗画報」における化粧関連記事は全 22 件確認でき

顔術はエレクトリックボールという電気の球で顔を撫で、そた。化粧関連記事で鉄漿が詳細に述べられている。先にもれから蒸したタオルで顔を蒸らした後にマッサージクリーム

述べたように、太政官布告によって鉄漿は一応禁止とされを顔に塗り込み、パンピングバルブというゴムで作った機械ているが、明治 20 年頃、女の歯の白いのは恐ろしいとしを用いてクリームを吸い上げる方法をとっている。

v）て再び鉄漿をつける女性が増え 、明治 32 年の記事でも

当時の美顔術は人気を博しており、荘司七之助の経営す

鉄漿を止める風習はまだまだ浸透していないと述べられてる理髪店の顧客の割合は男４割、女６割で、主な顧客は学いる。さらに明治 34 年の記事では、始めて鉄漿をつける者、令嬢、令嬢夫人などであった。遠藤波津子の「理容館」

時に鉄漿親（かね親）をたてる風習や初めてつける鉄漿はも人気を博し、大阪 ､ 神戸、広島に支部が存在した。遠藤

近所の人が持っている鉄漿壷に入っている鉄漿水を少しずの主な顧客は山手のお屋敷の婦人令嬢たちであった。主な

つ分けてもらうなど、鉄漿に儀礼的風習が残っていたこと

男性客は学校帰りの学習院の男子生徒たちであった。日本も確認できる。太政官布告が発布されるなか、鉄漿で歯をで導入され始めた美顔術は男女問わず、裕福と言われた

黒く染める風習が残っているこの様子を明治 34 年の「風人々に受け入れられた。

俗画報」では当時の女性を「半和半洋」（半分和風、半分洋風）が混乱した様子だと述べている。

当時の美容はマッサージだけではなく、医学的・化学的見地から美容を唱える整容医学（Kosmetik）と称される思想も存在した。
“整容医学”とは、肌や髪の毛の荒れを

第２項：美容家の誕生

薬で治療することである。しかし、整容医学は医学とも異本章では美容に関する情報を発信している人達—美容家なる。医学は悪い部分を取り除き、整容医学は痕を残さずの提唱内容について追うこととする。明治 30 年代頃に日取り除くことを目的としている。例えば、医学的では、ホ本における美容家が登場し始めた。明治時代、美容家の祖

クロや雀斑は痛みが生じないので取り除かないが、整容医として、芝山兼太郎の名は無視できない。芝山兼太郎は、学では肌を美しく見せるためにホクロや雀斑を痕が残らな

西洋理髪師の祖の一人である松本定吉のもとで理髪を修得

いように薬などを用いて取り除くのである。治療に使用すし、横浜の山下町に明治 28 年「日之出軒」という店を構る薬は整容医学を提唱する医師らの著書や婦人雑誌での化

える理髪師であった。明治 38 年 11 月に芝山兼太郎はアメ粧記事で述べられている。

リカ人の医師、キャンブルーと出会い、血行療法を主としたマッサージ法を学んだ。そのマッサージは「フェイシャ

当時、整容医学を提唱する医師として北原十三男や高橋
毅一郎などが存在する。

ル・マッサージ」として「日之出軒」の営業品目に加えら

北原十三男は欧米諸国を調査旅行し、医師と白粉屋、髪れると、「生理的マッサージで、顔がとてもきれいになる」

結い屋の合いの子のような職業の必要を感じ、顔の表面だ

vi）。しかし、これまで

けを綺麗にするのではなく、肌を荒らしている原因をしらマッサージは目の不自由な人の仕事であったため、職業妨なければならぬと、整容医学を率先して取り入れた。北原

害であるとの非難を受けたが、芝山兼太郎は美容を目的に十三男は雑誌「婦人世界」の誌面に度々登場し、特に読者した顔のマッサージであり、これまで行われていたマッサ

から寄せられる美容関連の質問コーナーである美容問答を担ージとの違いを明確に示した。

当し、読者に対して随時薬の作り方を指示していたと評判になり「美顔術」とよばれた

明治 40 年 11 月 13 日の読売新聞の記事より医師キャン

viii）

。ま

た著書『実際美容』でも、皮膚の荒れる原因を突き止める− 85 −

ために基礎知識として皮膚の構造を説明し、化粧品に入っる。美容科では早見君子と共著を執筆している医師高橋穀ている薬品の成分の説明もしている。

一郎が美容相談を担当している。美髪科では、アメリカ在高橋毅一郎は美容家早見君子と『新化粧法・整容医学』を執筆し、整容医学の章を担当している。まず、高橋は整

住の美容家ヘレン・グロスマンを資生堂の講師として呼び寄せた。

容医学における大きな枠組について次のように述べていクラブコスメティックで有名な中山太陽堂が大正 12 年

る。美容科学という言葉があり、その中に化粧の医学と整に創業 20 周年を記念して大阪堂島ビルの５階に中山研究

容医学がある。
「化粧の医学」とは人体の美を維持し増進所が設置し、同年 15 年にも東京麹町東洋ビルに同様の研すること、「整容医学」とは人体美の妨げとなるものを除究所が設置された。中山文化研究所では、４つの研究所が去することと述べている。

設けられている。女性文化研究所、西洋美粧研究所、口腔他に、整容医学を捉えた著書に『科学的化粧法』大正 2

衛生研究所、児童教養研究所の四つである。その中で美容

年、『美容医学（Kosmetik）』が大正 15 年に出版されている。

に関する研究機関は、西洋美粧研究所が担当しており、所『科学的化粧法』は、医師と薬剤士によって執筆されており、長は医師三内健治が勤めている。

これまでの整容医学と同様に皮膚・毛髪・における薬の作

当時は、企業が人々に美容を教授するための機関を設けり方を示唆している。そして、最後には結論として、心身ているが、いずれも医師が担当しており、整容医学の思想

共に健康な体であることが美しさの条件である。

に基づく美容が強かったということ、いずれも子供に関す

当時の美容家は美容院を開業していることが多い。山本
久栄は明治 44 年に美顔術の店「美粧倶楽部」を大阪の本る研究所が併設されているため主婦をターゲットとした研究所であったことも考えられる。

町に開業、大正 14 年には女子整容大学園（今でいう美容

大正時代の終わりから昭和の初期にかけて、これまでの専門学校）を設立している。他にも ､ 大正元年に来日した肌の美しさを重んじる化粧法から、顔のパーツを技巧的にフランス人マリールヰズ

ix）

が大正２年に美容講習所を設立、ハリー牛山 x）・メイ牛山 xi）夫妻が大正 14 年にハリウ

化粧する方法が提唱され始めた。その際には、化粧美・自然美という言葉で表現されていた。

ッド美容専門学校、ハリウッド美容院を設立している。

資生堂では、美容部長の小幡恵津子が自然美や化粧美とこれら設立された美容院や美容学校は、新しい美容を普いう言葉を用いながら個々人の肌の色や顔のパーツに合わxiii）』で述べている。本来の自分及させる拠点として、美容家による講習会が度々行われた。

せた化粧法を著書『整容例えば、東京の神田の東京女子美髪学校では、大正９年８の持っている自然な顔を生かした化粧が自然美である。ま

月１日より 15 日まで結髪法・婚礼用美顔術化粧法、消毒法

た、化粧美では、目の化粧には瞼を眉墨でなぞったり、睫

の夏期講習を開催しており、山本久栄が主催する東京の赤にオイルを塗ったり後に、目を“パッチリ”させるという坂の美粧倶楽部でも、同年８月 15 日から三日間の午前中に表現をし始めた。また、小幡の提唱する美顔術は、自宅で自分でできる結髪法や外出時の化粧法などの講習会を行っできるコールドクリームを使用した手軽なフェイスマッサている。さらに大正９年１0 月１日から３日まで東京の赤坂見ージと、美容室で機械などを用いて行うフェイスマッサー

附にある東京美粧倶楽部に、全国女教員大会へ出席のため

ジを紹介している。美容室でのフェイスマッサージは、機上京していた女教員を招いている。女性教員に対して山本

械のランプの光を顔を当てマッサージを行い、拡大鏡で皮

久栄は、「教育に従事する人間は質素を重んじるあまり身の膚の検査を行うなど、医学的な見地から美容を述べる“整回りの修飾を疎んじる傾向がありましたが、品位ある容儀を容医学”の思想も根強く残っている。小幡は美顔術の意義保つためには、整身法を用いるほうが良い xii）」と述べている。

は、著書において「美顔術によって皮膚の組織を改造し、引き続き、山本久栄は、講習会だけでは、参加できる人数

蘇らせる」と述べている。この頃から基礎化粧品やマッサに限りがあると、山本久栄は弟子６人を引き連れて、大正９ージ用として使用されていたバニシングクリームは戦後も年 12 月美粧行脚に出かけた。美容講習会は、神戸、姫路、人気の化粧品として使い続けられるが、化粧は戦争によっ岡山などにある各女学校で開催された。山本久栄が美粧行て封印されることとなる。

脚を行った理由を、美粧倶楽部を開業して 10 年経ち、これまでの経験や研究を公開しようと思ったこと、20 万円の資第３項：封印される化粧戦争ムードが高まると共に、化粧は余剰品、贅沢行為だ

産ができたことと述べている。
大正 10 年代頃から企業が盛んに美容研究所を設置し、として封印される xiv）。まず、昭和 14 年に文部省はいっそ

これらの研究所でも美容に関する新しい情報が発信されたうの自奮を促すために女生徒に口紅、白粉、頬紅、パーマのであった。

ネントを禁止。昭和 15 年 7 月 7 日奢侈贅沢品製造発売禁

確認出来る範囲では、資生堂が、大正 11 年に化粧品部の２階を改装し、美髪科、美容科、子供服科を設置してい止規制、昭和 15 年には化粧品の一時製造停止が増える。
化粧品は生産できても品薄の状態であった。

− 86 −

化粧文化史の変遷と流行した化粧の受け入れ方についての研究

しかし、戦争中全く化粧ができなかったと言うわけでも—』、拙稿「変わらない化粧、変わり行く化粧」を参考とした。

なかったようだ。例えば、宇野千代や吉行あぐりのエッセ

第二次世界大戦の終わりは、新しい化粧の始まりでもあイなどでは、戦争中で化粧ができないときはマッチを刷っり、化粧の自由が獲得された瞬間でもあった。しかし、本た後の竺で眉を書いた。と、女性たちは様々なアイデアを格的に化粧が普及し始めたのは 1950 年頃になってからでしながら化粧をしていたようだ。

ある。当時の化粧法はバニシングクリームやコールドクリ

戦争が終わり、封印された化粧が解放された時に美容家

ームを化粧下に使用する“光る化粧”であった。ファンデは細分化され、近代的化粧は大きな転換点と終焉を迎える

ーションはピンク化粧と称されたように赤みがかった色をこととなる。

使用し、ポイントメイクにも口紅が中心で赤色やピンクが

本項では美容家を顔を中心とした美容の提唱者もしくは好まれており、眉を含む目元は脇役でしかなかった。当時実践者として扱ってきたが、実践者としての美容家は、化の化粧で好まれたキーワードは「明るい」
、
「清潔」
、
「健康」

粧のみならず、頭髪や整容医学に関する知識を持ち合わせなどが化粧によって演出され、“健康美”を感じさせるよていたのである。また、当時は法令による規制もなく、美うな顔を目指していたのであった。

容と理容の差異も見受けられなかった。

その後口元に気を配る化粧から徐々に化粧の中心は目元

しかし、昭和 32 年に制定された理容師法、美容師法にへと変化していった。その目元の化粧法は目尻に三角州をよって美容家が頭髪を扱う仕事して都道府県の知事による作るなどアイラインを技巧的に使用して目元を演出していxv）。また、この法令にる。目元の化粧は 1960 年代以降更に強調された。それはより、理容とは「頭髪の刈込、顔そり等の方法により、容1967 年に来日したツイギーによる影響も一因と考えられ姿を整えること」（理容師法１条の２）。美容とは「パーマる。ツイギーの化粧は目元を強調しており、目元を強調際

ネントウエーブ、結髪、化粧等の方法により、容姿を美しにはつけ睫毛を二段重ねて使用し、濃いアイラインを描き、くすること」（美容師法２条）と規定され差異が明確化さ

さらに下瞼には書き睫毛を施すといった具合である。彼女れたのであった。近代美容家は、顔・髪・整容医学の知識の影響を受け目元を強調した化粧を試みた女性達に「たんを兼ね備えていた実践者であったが、制度上で髪と顔とがねんに目の化粧をするときはおしろいや口紅はあくまでも免許を取得しなけならなくなった

分けられるようになった

xvi）

。

控えめに

xvii）

」と警鐘を鳴らす記事もあった。その後、化さらに昭和 35 年の薬事法制定に伴い整容医学が終焉を粧法は短期間に目まぐるしく変化するファッション的要素迎える。薬事法において、化粧品とは、人の身体を清潔にを強めていく事となった。化粧品業界によって様々な商品し、美化し、魅力を増し、容貌を変え、又は皮膚若しくはPR が盛んになり、新しい化粧法も季節毎に唱えられ始め

毛髪をすこやかに保つために、身体に塗擦、散布その他こたのであった。1962 年「青い化粧」が提唱されたが、それらに類似する方法で使用されることが目的とされているの直後には「ワイントーン」、1964 年には「青白さは過去物で、人体に対する作用が緩和なものを示している。つまのもの」と１年間に化粧法が目まぐるしく変化していた。

り、近代に貫かれた整容医学の化粧品によって“治る”と1960 年代は化粧人口が増大したといわれる時期でもあいう言葉の使用が禁止された。近代的化粧は、昭和 30 年

るが質的変化のみならず、女性達の化粧がより自分を美し代の法令によって美容に携わる仕事が頭を扱うのかハサミ

く見せる為の化粧に変わったといわれている。

を使用するのか、剃刀を使用するかなどによって差異化がさらに自分を良く見せようとする化粧法は 1970 年代頃図られ、整容医学は薬事法によって終焉を余儀なくされたには眉を含めた目元に化粧をするようになった。特に眉ののであった。

化粧は 1970 年代に入ってからは雑誌でも注目され始めた。
「明るくて健康な眉」、「温和でやさしい眉」、「女の子らし第３章：現代における化粧環境について

い眉」、「情熱の眉」など女性の顔は眉と言葉によって、な

第１項：第二次世界大戦以降から現在までのこれまで

りたい女性を演出するのであった。

の化粧史

その後、言葉による演出をし始めた化粧は、化粧に自ら

第一章では、これまでの化粧文化の変遷を追ってきた。

の意思を託すようになり、その矛先は眉へと向けられ、人第二章では近代における化粧の形成と変容について追って

類史上最も太い眉を作り出したのである。1985 年の男女きた。

雇用機会均等法の制定が後押ししてか、
彼女たちの眉は「男本章においては現在における化粧観について追究したに媚びない自立心の現れ」というメッセージがこめられてい。まず、第二次世界大戦から現在までの化粧の流れをおいたのである。一方、男性の方は化粧を他人事では済まささえておくこととする。その際には高橋雅夫『化粧ものがれなくなった。「男らしさ」を眉墨やファンデーションなたり』、村澤博人『顔の文化誌』、『研究紀要 おいでるみん

どの化粧で演出しようとした。しかし、当時の男性の化粧

化粧文化特集号 日本の化粧文化—明治維新から平成までを全てが容認し賛成したわけでもなかった。昔気質の年配− 87 −

者たちは否定的な意見を新聞に投稿していたのだ。「本当に関する情報として、有効な資料として扱いたい。

に美しくなりたければ、自分の内面をファンデーションや

アンケート内容は、①化粧の情報源について、②化粧開

シャドーなどで色づけできないことに早く気づくべきだ」

始年齢、③化粧で気を配っている顔の箇所、④目元でもっと。

とも気を配っている箇所、⑤ファンデーション・口紅のメ

女性達の化粧は引き続き眉へと関心は向けられた。1990
年代は「トレンディードラマ」が流行し始め、女性達は“流ーカー名と色、⑥化粧に求めるイメージ、以上について調査を行った。

行の女優の顔”にあこがれたのであった。その際に即座に形状を変化させられる眉が重要な位置を占めていた。

まず、①情報源について。化粧に関する情報を採取する
際、どのような雑誌を読み、参考としているかを知るため

戦後の化粧のポイントメイクは口元が中心的な化粧から調査を行った（表１）。

目に移り、それから眉へと移行したと考えられる。それら

10 歳代では 36 種類の雑誌の名前があげられた。その中の背景には人気のモデルや企業のキャンペーンなど生活ので最も良く読まれている雑誌は「Non-no」が 42 件、「Zipper」

様々な場面でも情報によって我々の顔はつくられている。

が 40 件であった。20 歳代でも 30 種類の雑誌の名があげ次項では、これら戦後の化粧が顔にどのように刻み込まれられた。特に「JJ」の 19 件、「Non-no」の 18 件と購読率ているかを検証したい。

が高い。ちなみに 10 歳代で「JJ」は 20 件と第四位に入っており、10 歳代と 20 歳代との情報に多少のずれはあるが第２項：各年代に見られる化粧観

共通した情報を入手している傾向がある。30 歳代では 16

前項では第二次世界大戦から現在までの化粧の流れを大種類の雑誌の名が上げられた。
「MORE」が 6 件、「WITH」

きくとらえた。しかし、その流れの中で現在の化粧についが 5 件である。やはり、30 歳になると、「DOMANI」やてはまだまだ研究がなされていない。そこで本項ではアン「VERY」などの 30 歳前後の主婦をターゲットとした雑誌

ケート調査を行い化粧の傾向を年代別に見ることとする。

の名が上げられ 20 歳とは確実に差が見られ始めている。

アンケート実施時期は、平成 14 年 7 月から８月。対象と40 歳代では 15 種類の雑誌が上げられた。そのうち「主婦した年齢は 10 歳代から 60 歳代までで、計 237 人に調査をの友」が３件、「家庭画報」が３件と読者層を主婦に限定行った。年代別にみると、10 歳代が 110 人、20 歳代が 57 人、した雑誌が登場し始める。大正時代に発行された“主婦之30 歳代が 10 人、40 歳代が８人、50 歳代が 11 人、60 歳代

友”は読者層も主婦に限定しているが、現在は主婦といっ

以上は５人であった。年齢にかなりの偏りが見られるためても 40 歳代以降の主婦が主に愛読しているということがこれらのデーターは一般化しにくいが、現代における化粧このデーターから読み取れる。50 歳代も 40 歳代同様「主表１ よく読まれている雑誌
10代
雑誌名
Non-nozipperViVi
JJ
springbea'supanan
CanCam
vita
MORE
mini
s cawaii
popteen
SEDA
With
美的
olive
cawaii
cutie
up
happy
FRaU
LUCI
Oggi
FIGAROJapon
SPUR
ef
Hanako
ルイール
ray
egg
カジカジ
mina
セ ブ ンティーン
Fine

数
42
40
22
12
8
7
5
4
3
3
3
3
3
3
2
2
2
2
2
2
2
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1

20代
雑誌名

JJ
Non-no
MORE
ViVi
WITH
anan
Zipper
LUCI
spring
VOCE
美的
SPUR
Oggi
BAILA
VERY
Vingtaine
FRaU
VERY
カジカジ
SWEET
ルイール
SEDA
VITA
Ray
JILLE
FIGAROJapon
ef
Hanako
olive

数
19
18
15
15
11
7
7
6
6
4
3
3
2
2
2
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1

30代
雑誌名
数
MORE
6
With
5
JJ
4
CanCam
2
ViVi
2
LUCI
1
DOMANI
1
VERY
1
家庭画報
1
SAVVY
1
LEE
1
通信販売のカタログ 1
美的
1
SPUR
1
ef
1
Non-no1− 88 −

40代
雑誌名
主婦の友
家庭画報
MORE
With
VERY
Oggi
婦人画報
オレンジページ
通信販売のカタログ
25ans
SPUR
BAILA
VERY
Non-no

数
3
3
2
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1

50代
雑誌名
数
With
1
主婦の友
1
家庭画報
1
Oggi
1
anan
1
Zipper1
クロワッサン 1
UP
1

６０代
雑誌名
数
婦人画報
2
スタイルブック 1

化粧文化史の変遷と流行した化粧の受け入れ方についての研究

婦の友」と「家庭画報」を愛読している。50 歳代で「With」、でもある。なりたい顔を参考するには好みの雑誌で十分と「anan」、「Zipper」などの雑誌は娘からのお下がりであろいったところである。

う。60 歳以上では、「スタイルブック」、「家庭画法」とな

雑誌以外の情報源について。いずれの年代も百貨店、ドっている。これらのデーターにより、10 歳代、20 歳代とラッグストア、ソニープラザなどの化粧品を扱う店舗にてそれほど愛読雑誌に差は見られないが、30 歳代を転換点

情報を入手している（表２）。その他、雑誌広告や友人知とし、若者が愛読する雑誌から主婦の雑誌へと移行してい人との会話等にそれほど差は見られないが、インターネッ

く。50 歳代では娘の雑誌に目を通すことも度々ある。50

トのサイトによる情報収集が意外と少ない。インターネッ

歳代の女性達がこれらの雑誌を参考に化粧を模倣するので

トには化粧品についての日本最大級の“化粧品口コミ情報”

はなく、あくまでも参考として若者文化を参照しているのサイト「＠コスメ」が存在するし、MSN や YAHOO などだろう。

のトップページなどにも化粧関連サイトが存在しているが愛読雑誌のデーターで興味の引かれたのは、いずれもコ

今回の調査協力者による利用者が多くはないようだ。10

スメマガジンといわれる化粧に関する専門雑誌の購読率が代後半の女性たちによる店舗における情報収集についての低いことだ。10 歳代では「Bea's-up」は 8 件、「美的」は

詳細は化粧品ポーチの所持品調査にて詳細に述べることと２件、「Voce」に至っては読まれていない。20 歳代でようする。

やく「Voce」が４件、「美的」が３件であるが、「Bea's-up」②化粧開始年齢について。化粧開始年齢についての質問は読まれていない。30 歳代でも「美的」の１件といったに対して有効回答数は以下の通りであった。10 歳代 100 人、具合である。

20 歳代 67 人、30 歳代 11 人、40 歳代 25 人、50 歳代 12 人、コスメマガジンの購読率の低さを次のように推測した。

60 歳代以上５人であった（表３）。

コスメマガジンを読まなくてもファッション雑誌において化粧を開始した時期は 10 歳代では 14 歳に 28 人。15 歳

は化粧に関する情報は掲載されている。10 歳代で多く読で 31 人と、中学生三年か高校一年生のうちに半数以上はまれている雑誌「Non-no」、「Zipper」、「Vivi」などは雑誌

化粧を開始している。20 歳代でも 15 歳が 16 人、16 歳がの傾向がはっきりと打ち出されている。あえてコスメマガ

18 人、
ついで 18 歳が 13 人である。しかし、
30 歳代になると、ジンの化粧に関する情報を参考しなくとも、化粧法や新し化粧開始年齢は 18 歳が３人、19 歳が３人である。40 歳代

い化粧品の発売情報は掲載されていており、化粧もファッ

では 20 歳が７人という結果が出ている。50 歳代、60 歳代

ションも購読している雑誌のモデルを参考にすればよいのも化粧開始時期は 18 歳くらいだそうだ。

だ。また、コスメマガジンは化粧法の指南することが多い

かつて花王が 1992 年に首都圏の女子高生に初めて化粧xix）。初めて化粧をしたが、新商品の掲載の記事がとにかく多い。コスメマガジンをした時期について調査しているは消費者に対して「あなたは何を選ぶのか」と言わんばか

時期が高校２年生９％、高校１年生 21％、中学校３年生

りに選択を迫っており、どのような化粧品を用いてどんなが 11％という報告があるが、子供の化粧開始時期につい化粧をするのかまさに「化粧センス

xviii）」を問うているのて親は高校を卒業してからだを望んでいると述べられてい表２ 雑誌以外の情報源について
10歳代
情報源
百貨店・ドラッグストアなど
雑誌広告
友人知人との会話
テレ ビ
新聞広告
インターネット
その他

20歳代
30歳代
40歳代
50歳代
数
情報源
数
情報源
数
情報源
数
情報源
73 百貨店・ドラッグストアなど 53 百貨店・ドラッグストアなど 8 百貨店・ドラッグストアなど 10 百貨店・ドラッグス
51 雑誌広告
33 友人知人との会話
6 友人知人との会 話
10 友人知人との会
話
51 友人知人との会話
26 雑誌広告
4 雑誌広告7 雑誌広告5 テレビ
4 新聞広告4 新聞広告2 新聞広告0 新聞広告1 インターネット
2 テレビ
2 テレビ
0 その他（自然食品のお店） 1 テレビ
1 その他（娘）1 その他（娘）0 インターネット
0 その他（訪問販売の人） 1 インターネット
0 インターネット

表３

60歳代
数
情報源
6 百貨店・ドラッグストアなど
2 友人知人との会話
2 雑誌広告2 新聞広告2 テレビ
1 その他（娘）0 インターネット

化粧開始年齢について

10代
20代
30代
40代
化粧開始年齢 数 化粧開始年齢 数 化粧開始年齢 数 化粧開始年齢
12歳
12歳
2
12歳
0
0
14歳
13歳
13歳
7
13歳
1
1
15歳
14歳
14歳
28
14歳
2
0
16歳
15歳
15歳
31
15歳
16
1
17歳
16歳
16歳
19
16歳
18
1
18歳
17歳
17歳
4
17歳
7
0
19歳
18歳
18歳
9
18歳
13
3
20歳
19歳
19歳
4
3
22歳
20歳
20歳
4
1
26歳
1
24歳
1
21歳
1
23歳

− 89 −

50代
60代
数 化粧開始年齢 数 化粧開始年齢 数
6
5
0
18歳
18歳
0
19歳
3
1
20歳
1
0
21歳
5
25歳
1
6
7
5
1

数
1
1
1
1
0
0
0

た。先述の結果から分るとおり、化粧開始時期の低年齢化

顔の中ではもう一箇所、ファンデーションに気を使っては 1990 年代に入ってから加速し、さらに低年齢化しているいる傾向が強いことがわかる。肌が顔の多くを占めているとも言える。

ため気を使う個所であり、赤ら顔、ニキビの痕、シミ、毛アンケート調査に協力してくれた 10 歳代の彼女たちは化粧をするようになった背景を次のように述べていた。中穴などを隠すことでツルンとした、年齢不詳の肌を獲得できる手っ取り早い方法である。

学生時代の頃に眉を異常なまでに細くするのが流行し、中次にファンデーションに使用している化粧品のブランド

高校生時代は授業中に眉を抜くのが習慣化していたそうなどを追った。興味を引かれる結果として、10 歳代 20 歳だ。どんどん抜き続ける眉は次第に細くなり、一時的に生代は国内ブランドの化粧品であるコーセー、資生堂、花王

えてこなくなった眉をどうすることもできず、睫毛に着眼を使用が多くみられる一方、百貨店に店舗を構える海外ブしマスカラをし始めたという。マスカラで固めてビューラ

ランド系の化粧品も一通りということである所持し、多種ーで上向きになる睫毛は目が大きく見えるため、プリクラ

多様のブランドを使用している点である。しかし、30 歳などで可愛く映るという理由からマスカラが定着し始めた

代以降になると、メナード、オッペンなど百貨店に店舗をそうだ。また、中学生や高校生で行う化粧とはマスカラと持たない訪問販売系の化粧品の使用頻度が高いことがわかファンデーションを示しているという。ファンデーションる。新興勢力として最近日本で発売され始めた海外ブランを用いる理由は、赤い頬は子供のようだと恥ずかしさの対

ドの化粧品を使用は年齢を重ねる毎に購入頻度が少なくな象となり、赤みを消す為にファンデーションを塗るようにり、同じ化粧品のブランドを使い続けていると推測できる。

なったと言う。10 歳代における化粧行為とはファンデー

次に、化粧に求めるイメージとして、次の言葉から選ん

ションとマスカラの使用開始を指していたのであった。

でもらった（表６）。透明感、女らしさ、若々しさ、肌の③化粧で気を使う顔の箇所について本調査では気になる

滑らかさ、さっぱり感、みずみずしさ、しっとり感、うる部分を三箇所述べてもらった（表４）。いずれの年代も化

おい感、りりしさ。その中で、10 歳代、20 歳代では“透粧をする際に気を配る顔の箇所として目元とファンデーシ

明感”という言葉が最も多く、次に女らしさが多かった。

ョンが上げられている。さらに目元の化粧については 10

しかし、30 歳代になると若々しさを求めるようになり、

歳代、20 歳代では圧倒的にマスカラを重視する傾向が見

ついで透明感を求めている。40、50 歳代では、しっとりられる。30 歳代では目元に気を配る箇所として、アイラ

感を求め、ついで若々しさとなっている。

イン、マスカラが上げられている。40 歳代以上に至ってこれらの結果から推測すると、10、20 歳代の間は化粧はアイシャドーに気を配る傾向が強そうだ。いずれの年代で透明感のある肌を作りながら女らしさを求めているが、も目に気を配っている（表５）。「目は口ほどにものを言

30 歳代以降は、化粧で若く見えるように化粧に励むのでう」という通り、目は表情を伝わりやすい箇所であるためある。いずれの年代も透明感を求めた化粧を望んでいる。

特に気を使う場所であるとも考えられる。また。マスカラ

透明感という言葉は、肌が化粧をしていないような透明なで睫毛にマスカラを塗ることで睫毛の長さやボリュームが肌つまり自然な化粧という意味である。これまでの自然的増し、アイシャドーで目の上に色を乗せることで、即座にな化粧法は、昭和初期には化粧をしても真っ白ではない化

目が大きくなったような印象に変わるからであろう。

粧法を“自然美”と表現し、1980 年代にも化粧をしても表４ 化粧で気を使う顔の箇所
10歳代
顔の箇所

20歳代
顔の箇所

数
102 目元目元
83 ファンデーション
ファンデーション
79 眉
眉
21 頬
頬
13 口
口
9 鼻
鼻
2 輪郭
輪郭
2 骨格
骨格
その他（つけまつげ） 1 その他（にきび）

30歳代
数
顔の箇所
63 目元
54 ファンデーション
52 眉
4 頬
13 口
10 鼻
5 輪郭
5 骨格
1 その他

40歳代
数
顔の箇所
11 目元
10 ファンデーション
11 眉
1 頬
3 口
10 鼻
2 輪郭
2 骨格
0 その他

50歳代
数
顔の箇所
20 目元
15 ファンデーション
18 眉
1 頬
11 口
2 鼻
2 輪郭
1 骨格
0 その他

60歳代
数
顔の箇所
10 目元
6 ファンデーション
10 眉
1 頬
4 口
6 鼻
0 輪郭
1 骨格
0 その他（皺）

50歳代
数
目元の化粧
5 マスカラ5 アイライン13 アイシャドウ
1 アイブロウ（眉）4 ハイライト
0 つけ睫

60歳代
数
目元の化粧
3 マスカラ2 アイライン
6 アイシャドウ
1 アイブロウ（眉）2 ハイライト
0 つけ睫

数
2
1
3
2
2
0
1
0
1

表５ 目の周り特に気を配る化粧
10歳代
目元の化粧
マスカラ
アイライン
アイシャドウアイブロウ（眉）ハイライト
その他（つけ睫）

20歳代
数
目元の化粧
70 マスカラ49 アイライン
28 アイシャドウ
12 アイブロウ（眉）8 ハイライト1 その他（くま）

30歳代
数
目元の化粧
47 マスカラ30 アイライン
23 アイシャドウ
8 アイブロウ（眉）4 ハイライト1 その他（つけ睫）

40歳代
数
目元の化粧
5 マスカラ
6 アイライン
4 アイシャドウ
3 アイブロウ（眉）1 ハイライト0 つけ睫

− 90 −

数
1
1
1
0

化粧文化史の変遷と流行した化粧の受け入れ方についての研究化粧をしていないような化粧法を“ナチュラルメイク”と際にマスカラが瞼に付いた時に拭い取るために使用する。

表現したものだった。現在もファンデーションは自然的な綿棒に関する面白い発言の一つとして、マスカラはスパや化粧法を好む傾向があり、これまでの言い方とは異なる“透入浴娯楽施設などに出かけた際の洗面台から拝借してくる明感”という言葉で表現し、誰もが求める共通したキーワことが多いそうだ。

ードとして認識されている。

顔の中で特に動きのある箇所として目と同様に口も忘れてはならない。しかし、口元に彼女たちはそれほど気を配って

第３項：化粧ポーチが語る化粧観

いない。口はほとんど化粧をせず薬用リップを塗るか、グロ

本項では化粧ポーチの中に入っている化粧品の所持品調

スで唇に塗れた感じを出す程度である。中にはアレルギー体査を行った。聞き取り調査実施日は、平成 15 年 1 月 13 日

質で口紅やグロスを塗布すると唇がただれてしまうこともあ20 日。対象者：18 歳、19 歳の専門学校生 15 人に行った。

り、全く何もつけない人もいた。唇に何も塗らなくても気にな

先ず、毎日使用している化粧ポーチを取り出してもらい、らず、彼女達は口元の化粧をあまり重要視していない。

その中に入っているもの全てを書き出してもらった（表７、
図１・２）

他に所持品率が高かった化粧品にパウダリーファンデーシ
ョンがあった。化粧ポーチの中でのファンデーションは、日常

まず、全員が持ち合わせていた化粧品は、マスカラであった。18 歳 19 歳の彼女たちはマスカラが何よりも重要な生活の中で化粧が崩れて光り始めた鼻の頭の脂分を抑える程度に使用している。

化粧品であったのである。“パッチリとした目”にはマス

先述のアンケート調査結果で、化粧に関する情報は百貨店、

カラを何度も塗り込むそうだ。平均２本のマスカラを所持

ドラッグストア、ソニープラザなどのファンシーショップ系を参し、最も多くマスカラを所持していた人は６本だった。こ考としていたが、さらに詳細を聞いてみた。

れら６本のマスカラは用途別に使用している。その用途と百貨店は海外ブランド（シャネル、ランコムなど）の化粧品

は、マスカラの下地、ボリュームを出すために塗るマスカ購入であり、美容部員（ビューティーアドバイザー）の化粧法

ラ、カールする為に塗るマスカラ、長く見せるために塗るを模倣したり、メーカー所属のメークアップアーティストの来マスカラそして下睫毛に塗るマスカラで、二度付け用のマ

店の際に直接化粧をしてもらうことで“流行”の化粧法を習スカラなどもある。カネボウでの意識調査においても、睫得するのだという。百貨店の化粧品コーナーは新商品の情報

毛は「長くて上向き」がいいという報告がなされており、の入手場所でもあり、化粧法を伝授してもらう場所でもある。

より具体的なイメージとしては“バービー人形”のようなこれに比べてドラックストアは資生堂、コーセーなどの国

xx）。これらのマスカ

内ブランドの化粧品を購入場所である。言い方を換えると、ラブームによりファイバーウィッグと称されるマスカラが国内ブランドの化粧品はドラッグストアで購入するものであ開発され、そのマスカラの塗布により、つけ睫毛をつけてり、同じ商品が百貨店に並んでいても購入しないそうだ。ドいるような睫毛が得られるのである。これらの化粧の流行

ラッグストアはあくまでも安価な商品を入手する場所なのだ。

をイミュマーケティング部主査の西山泰乃は「今は目を自ドラッグストアにも美容部員は常駐しているが彼女たちに化然な形で印象づけて、自分を主張したい」と分析している。

粧法を学んだりすることは無い。あくまでも化粧品のより安目を印象付けるために雑誌では、目の周りに気を配る化粧い化粧品を求めていく場所にしか過ぎない。この際のドラッ法を“目力”と称して、目元を強調した化粧品が流行する

グストアはマツキヨ、コクミン、ダイコクなどの大手のディスカ

中マスカラが最も重要な化粧品であったことは言うまでもウント薬局を指し示しており、街の小さな薬局兼メーカーのない。

代理店などを指し示しているのではない。

パッチリとした目を理想としている

さらにマスカラとセットとして持ち合わせている化粧道
具にビューラーと綿棒がある。

最近のドラッグストアは大規模店舗方の改正と薬の価格改定と安価な化粧品が購入できるという理由により、ビューラーはよりカールしたマスカラを獲得するために店舗数や売上なども好調に伸ばし 2002 年５月で全国に必要な道具として欠かせない。綿棒はマスカラを睫に塗る

一万二千店となっている。ドラッグストアにおける化粧品

表６ 化粧に求めるイメージ
10歳代
20歳代
イメージ
数
イメージ
52 透明感
透明感
25 女らしさ
女らしさ
14 若々しさ
若々しさ
12 肌の滑らかさ
肌の滑らかさ8 さっぱり感
さっぱり感
7 みずみずしさ
みずみずしさ4 しっとり感
しっとり感
4 うるおい感
うるおい感
4 りりしさりりしさ
その他（かわいらしさ） 1 その他（清楚）

30歳代
数
イメージ
28 透明感23 女らしさ
16 若々しさ
13 肌の滑らかさ
7 さっぱり感
4 みずみずしさ
3 しっとり感
3 うるおい感2 りりしさ1 かわいらしさ− 91 −

40歳代
数
イメージ
0 透明感
4 女らしさ5 若々しさ
0 肌の滑らかさ
1 さっぱり感
2 みずみずしさ
8 しっとり感
1 うるおい感0 りりしさ0 かわいらしさ

50歳代
数
イメージ
4 透明感
11 女らしさ
7 若々しさ4 肌の滑らかさ
1 さっぱり感
5 みずみずしさ
8 しっとり感
2 うるおい感0 りりしさ0 かわいらしさ

数
2
5
5
1
0
0
3
1
0
0

表７

化粧ポーチに入っている化粧品を全て書き出した

45
40
35
30
25
20
15
10
5
0

ア
イ
ラ
イ
マ ン
ス
カ
ラ
口
紅
ア グロ
イ
シ ス
ャ
フ アイ ドー
ァ
ン ブロ
デ
ー ウ
シ
ョ
ン
チ
ハ ー
イ ク
コ ライ
ン
シ ト
ー
ラ
ー

系列1

図１ 化粧ポーチの中に入っている化粧品の売上も全体の約 23％を占めるそうだ xxi）。

の風習を払拭するのに躍起となった時代でもあった。それ

そして、ソニープラザなどのファンシーショップは情報

は、明治元年（1868 年）１月 30 日に朝廷・公卿にお歯黒・収集の場所として訪れ、気にいった商品があれば購入する

点眉は古制に基づくものではないとして、必ずしも厳守し程度である。チープコスメと称される安価な化粧品など掘ないように通告したことに近代的化粧の発端をみることがり出し物を探すにはうってつけの場所なのである。

できる。しかし、明治 30 年代頃に美容家が誕生し、欧米

化粧品は多くの場所で売られ、多くの商品が陳列していの美容法を日本の美容法に取り入れようとしたこれらの働る。そんな多くの情報を耳にし、多くの商品も目にした「何きが日本における西洋化の流れをより強くうえつけたといを買おうか？」と迷ってしまう。そんな時、彼女たちは、えよう。新しい美容法は、婦人雑誌の美容関連記事などで欲しい化粧品について友人などに相談するという。そして、掲載されたり、経営する学校や美容院などの美容事業が講「友達の友達が良いって言っていたよ」という発言によっ

習会等から発信されていた。大正時代中期から企業に所属て商品の購入を決めるそうだ。雑誌などで掲載されているした美容家が台頭し始め、企業は研究所を設立するなど化

美容ジャーナリストの発言よりも、見知らぬ「友達の友達」

粧品を売るだけではなく美容の提唱にも乗り出したのであの存在が影響力は大きいようだ。「友達の友達」は誰を特った。明治 30 年代以降美容家は常に存在し、新しい美容定しているかは定かではないが、しかし見知らぬ第三者の法を提唱し続けたのであった。つまり、これらの新しい美存在が化粧品購入に第一歩を踏み出させるのである。

容法は常に美容家から発信されたのであった。
さらに、近代的化粧の根本にあり続けた思想があった。

さいごに

近代的化粧の思想の根底には、人体美の妨げとなるものを除去しようとする「整容医学」が昭和 35 年まで常に貫か本研究では、明治時代、大正時代、昭和時代そして平成れて続けた。医学や薬の知識等を化粧に生かそうとする思時代までと大まかな流れであるが化粧史を追うことができ

想は北原十三男が欧米を視察した頃に日本に持ち込まれたた。ここで本研究を振り返りながらまとめていきたい。

と考えられる。欧米の化粧法が日本に導入されたと同時

明治以降の化粧にまつわる風俗は、これまでに日本古来期に欧米での化粧に関する思想も導入されたのである。化

− 92 −

化粧文化史の変遷と流行した化粧の受け入れ方についての研究

粧を科学的に捉えようとした点が近代的化粧の特徴でもあタルビューティーコースの生徒の皆さんにご協力いただいる。近代的化粧は昭和 30 年代に制定された美容師法、理た。記して感謝の意を表したい。

容師法、薬事法などで制度上終焉を迎えたが、美容家の遠藤波津子は現在４代目が襲名し、メイ牛山も存命である。

i）日本風俗史学会編、平成６年、弘文堂

美容術の祖芝山兼太郎の娘芝山みよかは現在日本エステテii）1998 年、ポプラ社

ィック協会会長を勤めるなど、西洋から取り入れられた近iii） 高橋雅夫『化粧ものがたり』で「お歯黒おばあさん訪

代的美容法は終焉を迎えるのではなく、美容家によって当問記」で昭和 51 年、秋田市在住の山崎スガさんを訪ね、時の技術は受け継がれているのである。

鉄漿の習慣について取材を行っている。

第三章では、化粧に関する情報源、使用している化粧品iv）「 風 俗 画 報 」 と は、1889 年 の 明 治 22 年 に 創 刊 さ れなど化粧環境に関する調査を行った。今回の調査はアンケ

1916 年の大正５年まで 27 年間にわたって発行されていートを実施した年齢に偏りが見られるため、一般か出来な

た日本初のグラフ雑誌である。出版総数は、全 518 冊にいが、現在の化粧に関する現状であることには変わり無い

もおよび、内容は、江戸・明治・大正の世相風俗・歴史・ため、これらのデーターを使用した。

文学・事物・地理・戦争・災害という全ての分野に及ん

まず、10 歳代、20 歳代では好みの雑誌などはあるがとにかく多種多様の雑誌を読み、多くの化粧品ブランドを使でいる。
v）下川耿史、家庭総合研究会編『明治・大正家庭史年表

用していた。しかし、30 歳代ごろから参考にする雑誌や1868 → 1925』2000 年、河出書房

購入する化粧品などが 10 代の女性たちと異なってきた。

vi） 芝山兼太郎『芝山美容術』1986 年、女性モード社

それは、化粧品の購入場所が店舗に出向いて行く方法からvii） そのアメリカ式美顔術の詳細が明治 40 年の「婦人世販売員が自宅に商品を持ち込む形式へと移行しているとい界」２号の付録「化粧かがみ」で紹介されている。アメうことである。

リカ式の「美顔術」とは、洗顔だけではとれない顔のゴ

また 18、19 歳の学生を対象に化粧ポーチの所持品検査

ミを取り除くことを目的としている。アメリカでは「ハを行い、化粧にまつわるインタビューをおこなった。彼女

イジエコック・フェーシャル・カルチャー」と称するたちの化粧はとにかく睫毛を中心とした化粧を行っていviii）例えば、「婦人世界」の美容問答では「夏冬の別なた。使用する化粧品の購入場所などもメーカーや値段によく、手が荒れて指に割れめも生じ仕立物をするときに困って使い分け、用途に合わせた店の利用などが確認できた。

る、よき方法なきや」という相談に対して、「カセイカ

そして、認識できない“第三者の声”によって購入を決定

リ 5､0。グリセリン 30,0。酒精 40,0。水 120,0．
」を混ぜするなどという点に興味が引かれた。

合わせて薬つまり化粧水を作るように述べている。

彼女たちは化粧によって劇的に変身を遂げることを望んix） マリールイズは、当時アメリカ式の美容が主流であでいるのではなく、とにかく上に向いた、長くて、カールった日本にフランス式の美容法を伝えた人物の一人であした睫毛の獲得を日々試みている。マスカラを塗布した睫る。

毛に美しさが宿るのではなく、マスカラで固まった睫毛をx） ハリー牛山は早川雪洲の付き人兼ボディーガードをかがみで見ることが自己確認の一種の行為でもあるのだ。

していた際に、「ここで学んだメイクアップ技術と化粧本研究の全体を通して今後の化粧文化研究には次のような品の知識を持ち帰って、日本で大成しなさい」と助言を問題が課題として考えられる。これまでの化粧文化論では、うけ、帰国後美容院及び美容学校を始めた

主に化粧の歴史が研究されてきたため、化粧の総論のようxi） メイ牛山はアメリカでエディセンズやレオアメンドな大枠で捉えることができたといえる。今後の課題として

ラなどの美容家にヘアスタイルやメイクの技術を学んでは、当時の雑誌の化粧関連記事を細かく読み解き、化粧のは海外の新しい技術を日本に紹介した。

傾向を把握すると共に、化粧に含まれる行為の意味や行為

xii） 読売新聞、大正９年 10 月 22 日の解釈など、化粧の担い手との関係に関する研究の必要性

xiii）1940 年、大地社が要請されると思う。

xiv）ここで、化粧に対して“封印”という言葉を用いる

謝のは、自らの意思で化粧をしないのではなく、命令とし辞て化粧を止めざる得ない業況であったため封印と言う言研究を遂行する上で、「ケンショク 食の資料館」所蔵の葉を用いている。

大部にわたる「主婦之友」誌を使用させていただいた。資xv） 平成５年には厚生省の免許へと変わっている料を使用するにあたり、「ケンショク

食の資料館」の吉xvi）現在において人に化粧をする仕事（例えば、メイク

積さんに多大な便宜をはかっていただいた。また、アンケ

アップアーティストなど）では、特に国家試験や免許はート調査に関しては、大阪ビジネスカレッジ専門学校トー交付されていない− 93 −

xvii）「朝日新聞」1967 年９月 15 日

６） 芝山兼太郎『芝山美容術』女性モード社 1986 年

xviii）米澤泉「教授される化粧」『日本顔学会誌』1 巻 2 号にて、

７） 下川耿史編『明治大正家庭史年表』、河出出版研究所、

米澤は化粧にも着こなしがあると指摘している。

2000 年

xix）「朝日新聞」1992 年２月７日

８） 新美容出版『全国著名美容家名鑑』新美容出版株式会xx）「朝日新聞」2002 年６月 16 日

社 1965 年xxi）「朝日新聞」2002 年５月５日

９） 津田紀代ら編『モダン化粧史 粧いの 80 年史』ポーラ文化研究所 1986 年（参考文献）

10） 早見君子・高橋源一郎『新化粧法・整容医学』文化生

１） 青木保ら編『近代日本文化論』岩波書店 1999 年

活研究会 1928 年

２） 小山田兼・三本松清吉『科学的化粧法』東亜堂 1913年３） 川村邦光『オトメの祈り』紀伊国屋書店 1993 年

11） 廣澤榮『黒髪と化粧の昭和史』1993 年岩波書店
12） 前田愛『近代読者の成立』岩波書店 2001 年13） 三須豊『化粧美學』都新聞社 1925 年

４） 川村邦光『オトメの身体』紀伊国屋書店 1994 年

14） 村澤博人『顔の文化誌』東京書籍 1992 年

５） 北原十三男『実際美容術』婦女界社 1932 年

15） 水谷八重子『舞台の合間に』演劇研究社 1933 年− 94 −

日本の化粧意識の近代化をめぐる比較史的考察──清潔習慣の展開をめぐって
奈良女子大学

生活環境学部鈴則木子

The aim of this paper is considering the relation of makeup and development of the concept of cleanliness in the late Edo
period, and comparing it with European cosmetics consciousness.
In the Edo period, the textbook for girls used at the educational institutes encouraged washed the body, and keeping it
clean, the textbook for boys does not contain such a statement. This is because cleanliness was deeply connected with one ofthe virtues of the woman "fuyo（婦容）."The makeup document in the late Edo period "Miyako Fuzoku Kewai-den（都風俗化粧伝）" teaches the repairing method
for aiming at the skin not to carry out oil or grease to keep clean, and white with powder, and the medicine for removing
body odor, and the "Kinsei Fuzoku-shi（近世風俗志）" of the period points out current fashion of the hairstyle using only
light makeup without perfumed hair oil. It was the beauty which will not be able to be realized without the thorough bodymanagement which pursues the beauty of the natural body. These new makeup customs pass to aesthetic senses, such as "ada（婀娜）" and "iki（意気）". Although the opportunity of light makeup of Edo has been conventionally explained in connection＿
with customs control of Tempo reform, probably, the side of the thorough cleanliness accompanying it should also be indicatedto be the spread of the bathing customs in the second half of Edo.
On the other hand, fashion of light makeup will be seen also in Europe after the 19th century. By having given
encouragement medically, it is deeply concerned with the odorless body in which the bourgeoisie aim transparent body thatneither closes pore with dirt nor with cosmetics. The leaders of Japanese clean culture and light makeup fashion werecommon people represented by prostitutes, and that was a remarkable difference between Japan and Europe.

１．緒ず江戸時代の和製の女訓書のさきがけであり、後の女訓書

言に多大な影響を与えた、貝原益軒著『女子を教ゆる法』（1710

私はこれまでの研究で、江戸時代後期における庶民の化年）３）を見てみよう。本書は女性が努力すべき四つの徳目の粧意識が、従来の嗜みとしての化粧の域を越えて、自分のひとつに、「婦容」をあげる。
「婦容とはかたちをよきをいう。

身体をどれだけ価値あるものに演出するか、という積極的

あながちに飾りを専らにせざれども、女は容なよよかにて、

１）

意識に変化することを明らかにしてきた 。その背景には雄々しからず。装いのあではか（上品）に、身持ちきれいに

社会全体が、身体は自分の努力次第でより価値のあるもの

いさぎよく、衣服もあかつきけがれなき」をよしとしている。

へ変えられる、という近代的な身体観にからめ取られてい美しくあることは女性のつとめであり、美しさには「身持ち」、

くという変化があったことも指摘した。現在は江戸後期のすなわち身体を「きれい」に「いさぎよく（潔く）」することも化粧意識の変化を、欧米・韓国・中国の化粧意識との比較含まれた。

の中で考察することによって、化粧意識の近代化の日本的『女子を教ゆる法』の基『女大学宝箱』（1936 年）４）は、特徴を明らかにすることをめざしている。

本的教育方針を継承しながら、様々な実用知識も網羅した

この研究助成報告においては、日本社会における「清潔」

大部の女訓書である。その後の女訓書は、本書の内容の一概念の展開に焦点をあて、それが美容意識にどのような影部分を展開して一書を成す形を取ることが多い。本書は装響を与えたのか、またヨーロッパの「清潔」と「化粧」のいについて、華美な衣装を禁ずるとともに、「身と衣服と２）関係の仕方との比較を行う 。

の穢れずして潔げなるはよし」と述べる。身体に付着する
垢も、衣服に移った垢も、汚らわしく、その人自身を醜悪

２．身体をめぐる女子教育にするものとみなされた。

江戸時代、体を洗って清潔にすることを、より直接的に説だが、ひとつ考えねばならないのは、体を清潔に保つこ

くのは、庶民の女子教育の場で使われた女訓書である。まとを勧める言説が、女訓書に限定されていて、男子の用いModernization of the makeup consciousnessof Japan − Deployment of a clean custom.
Noriko Suzuki
Nara Women's University

る寺子屋用教科書には、殆ど登場しないという点である。
清潔は、とりわけ女子に厳しく強要される徳目だったらしい。江戸の銭湯における糠袋の使用率が、男性よりも圧倒的に女性の方が高いことも、その反映だろう５）。
「銭湯へ行かぬで下女は毒づかれ」６）という川柳がある。
下女のような下層の女性であっても、湯で垢を落とすことは不可欠の社会常識であって、他者から非難されるものだ− 95 −

った。だがここで非難されるのが、下男ではなく下女であたびたび洗い、悪しき臭いを去るべきことなり」とある。

ることに、注意しなければならない。なぜ女子は、男子よ

艶やかでべとつかず、汗くささのない髪がめざされた。

りも清潔を心がけねばならなかったのだろう。それは身ぎ

それ以外の全身のみだしなみとて、おろそかにはできな

れいにすることが、「婦容」という容姿に関する女性独自い。
「女の身の嗜みのよしあしにて、その人の意気よく見の徳目に含まれることと関係している。

ゆるものなれば、心を用い、身だしなみを専一とすべし。
身だしなみのあしきは、大いにけおとされて、あなどられ、

３．美しく臭わない身体

笑わるるもの」だからである。具体的には、爪垢・耳垢を女性の美しさと身体を洗うこととは、どのように関連づ

除き、鼻毛、耳の毛といったむだ毛を処理し、口の中の清けられていたのか。この問題を考えるために、美容関係の潔のために毎朝歯ブラシで歯垢を取り、舌糟を除いた。口

史料をひもといてみよう。江戸時代、化粧法に関連する記臭、体の汗の臭い、髪の臭いも常に注意することが求めら事を比較的詳しく載せた女性向けの本は、10 種類ほど確れた。身体から汗が出るのを止めるためには、薬草を煎じ７）認されている 。中でも『都風俗化粧伝』

８）

は、その量

て飲んだり、米の粉を全身にはたく。口臭をおさえるのにと詳しさで群を抜く。本書は 1813 年に出版されて以来、は、薬草を粉にして食後に飲んだ。腋臭は、薬草を脇の下

1922 年に至るまで、幾度となく版を重ねた、化粧本の大に塗る。清潔のための身体管理は、単に肌の表面上だけでベストセラーだった。

はなく、体臭の管理にまで及び、入浴だけではことたりな

その出版年が示すように、ここに説かれる化粧法等は、

くなっていた。

江戸後期の流行と嗜好を示すものである。出版されたのは清潔で臭わない身体を実現するための熱意は、式亭三馬
９）に登場する人々の、念入りな入浴風景

京都で、著者も京都の公家という形を取る。これは京都が著『浮世風呂』

江戸時代中後期以降、経済の中心から退いた後も、実態はと重なってくる。糠や洗い粉で身体を洗うだけでは飽きた

ともかく、形の上では一貫して文化、とりわけファッショらず、舌を洗ったり、さらには「腋臭ぷんぷん」（『浮世風呂』）

ンの中心地であり続けたことを示している。京・大坂を示とそしられぬために、身体から発散されるあらゆる臭いをす「上方風」という言葉は、ある種の憧憬を持って江戸の排除しようとした。
ことさらに女性に要求された、身体を磨くという徳目、女たちの心を捉え続けたのである。
さて、本書はその冒頭で「みがきよそおわざればひかり

これを実践する、いかにも受け身に見える女性たち。しかなし」と断言する。女子の容貌の美しさは、玉と同じで磨しながら彼女たちは、その磨き抜いた身体にふさわしい、

くか否かにかかっており、どのような醜女でも磨けば美し新しいファッションの流れを作り上げた。

くなることができるという。そして以下、具体的に肌の手４．薄化粧の流行

入れ法、化粧、着物、髪の手入れ、髪型などについて詳し
く説明している。本書から、当時どのような女性が美しい『近世風俗志』10）は、江戸時代後期の江戸・上方それぞとみなされたのか、また女性がどのような美を求めて努力

れの化粧風俗について、詳しく紹介している。1809 年生をしていたのかを抽出してみよう。

まれの著者・喜田川守貞は、「美人」とは時代によって変本書のかなりの部分を占める記述は、肌を美しくする、化するものであると断った上で、「今世絶世の美貌」の絵

もしくは美しく見せる方法である。特に白くて、かつ油がを載せている。この図に添えられた、「江戸洗ひ髪の兵庫

浮いていない肌が理想とされた。本書の記述は、読者が毎結び」という髪型の名前に注目したい。まず「江戸」とい朝糠を用いて湯で洗顔していることを前提にしているが、う言葉から、彼女の美しさが上方ではなく、江戸のものでその糠に種々の漢方薬などを混ぜて洗うよう勧める。しかあったことがわかる。また「洗い髪」が意味するのは濡れも、それは単に顔面に限定されない。白い肌は全身に及ぶた髪ではなく、洗髪後、鬢付け油で固めたり、香油を振りことが求められ、行水や銭湯での入浴の際には、こういっ

かける前の状態をいう。本来は、洗髪後にきちんと髪を結たものを全身にすり込むよう指示される。そして曰く、「或うまでの、一時的な髪型に過ぎなかったのが、ひとつのヘる人の処女、うまれつき色黒きを嘆き、或る家に秘め置きアスタイルとして流行していったのである。守貞によれば、たるこの法をつたえ用いしかば、忽ち色を白くして、双な

当時こういった風貌の女性を、「婀娜（あだ）な女」、「意

き美人となりたる奇法也」。肌は努力次第で白くなり、白

気なあねさん」といった。しかも、この女性の年齢を守貞は、い肌は美女の誉れを保証した。

当時花盛りの年齢とみなされた二八（16 才）の娘ではなく、髪の美しさも、洗う頻度にかかっている。「髪を洗うこ

二十歳過ぎの「中年増」、つまり成熟した女性に設定してとは、髪のつやを出だし、髪の脂（あか）ねばりを去らんいる。江戸時代後期の江戸に出現したこの新しい美意識、がためなれば、たびたび洗うてよし。夏の日は汗と油の腐「婀娜」
・「意気」とは、どのようなものだったのだろうか。

りたるにて、はなはだあしき臭いすれば、嗜みて、ことに『浮世風呂』の描写する、入浴中の二人の下女の会話は、− 96 −

日本の化粧意識の近代化をめぐる比較史的考察──清潔習慣の展開をめぐって「婀娜」という江戸の美意識をよく示す。「なぜあんなに上的な髪の美意識の否定の上に成り立つものである。

方風を嬉しがるだらうか、気がしれねへよ。」「さうさ。あ

このような美意識の変化の中で、理想とされる肌の質感のまあ、化粧の仕様を御らんか。目のふちへ紅を付け置いも変わる。17 世紀に流行した「花之露」という化粧品は、て、その上へ白粉をするから、目のふちが薄赤くなって、

顔につやを出す油だった。だが 19 世紀の女性の肌に塗ら少しほろ酔いという顔色に見えるが、否なことたねへ。
」「それたのは、顔の脂浮き、てかりをおさえるための、「江戸しておめへ、そればかりぢやねへはな。顔の白粉と生際のの水」に代表される、さっぱりとした化粧水である。しか白粉とは、別々にあっての、眉掃きも三本入るとさ。
」「をも普通の女性はこれさえあまり用いず、古風を守る御殿女や大騒らしい。私らは眉掃きさへ遣ねへものをや。
」「それ

中が愛用した 14）。

だからあのざまをお見。本面屋ともいひさうに、顔がてら

首筋、襟足の美の表現のしかたにも、変化が見られる。

てらして誠に本塗りだはな。あんまりべたべた化粧したの江戸時代、島田髷の普及と人工的な鬢の張りによって、バも、助兵衛らしくしつつこくて見つともないよ。諸事婀娜

ランスの都合上後ろのたぼが小さくなり、襟足が強調されとかいって薄化粧がさっぱりしていいはな。」

ると、襟足にも白粉を塗ることが普及した 15）。額、襟足町で見かける上方風の化粧の女に対する、同性としてのや首筋は、顔よりも一段濃く白粉を塗るのが普通だった。

辛辣な批判であり、手間暇かけた厚化粧を「助兵衛」と受

しかし守貞は云う。「近年は頸額とも白粉と肌と際立ず、け取る感性は、男への露骨な媚びをいさぎよしとしない姿

幽に塗る者もあり。娼妓は幽にする者多きか。然ども坊間

勢のあらわれである。

には、きつときはたてたると際立ずかすかに粧たると半々

自然な髪、薄化粧を尊ぶ「婀娜」・「意気」の美意識は、なるべし。十女に四人素顔、三人は幽粧、三人は際立てぬ

当時の女性の化粧や髪型の流行を、大きく変えていった。

る。御殿女中は此形にて際立て粧ふ者多し」。襟足の化粧江戸時代後期、化粧の流行は江戸を中心に、明らかに薄化は十人中四人はしておらず、三人は薄く塗るに留めている。

粧の時代へと移っている。『近世風俗志』は、「今世江戸のいまだに襟足を真っ白にしているのは、ここでもやはり流粧ひ、平日は素顔多し。式日及他行にも淡粧多く、口紅も行と無縁の御殿女中だけだった。
香りに対する感覚の変化も見逃せない。先に触れた髪だ

桃花色にす。」というような、薄化粧の流れを記す。
その動きの背景は従来、天保改革の贅沢の禁止のためとけではなく、衣服に香りをつけることも、江戸ではされな説明され、上方に比して江戸のほうが薄化粧になるのも、くなる。かつて高価な伽羅を頂点とする濃厚な香りは、非将軍のお膝元のほうが取り締まりが厳しかったからだと

日常の世界への誘いであり、遊女たちの美しさを一層引き

されてきた

11）

。しかしながら江戸と上方と比較したとき、両者の差異は、単に化粧の濃さの問題にとどまらない。

立てる、舞台装置としての機能を果たした。それは江戸初期の浮世草子における美女の類型的描写に、彼女たちの放たとえば洗髪頻度がまったくちがう。19 世紀前半、江つ伽羅の香りが切り離せなかったことからも明らかである戸の女性は毎月一二回髪を洗い、特に夏期は頻繁に洗う。

16）

しかも「匂油」や髪に香を焚きしめることもしなくなって志向は、人為的で濃厚な香りをも拒否していく。露骨にあいった。ところが上方の女性は滅多に髪を洗わず、櫛で垢

ざとい香りは、「粋」の対極たる「野暮」に通じていった。

。しかし入浴によってあらゆる体臭を排除してきた清潔を梳いて「匂油」で臭気を防いだ。銭湯の数が、江戸と５．
「いき」の美意識

上方では圧倒的に江戸のほうが多いことも、入浴習慣の普ここで想起すべきは、「婀娜」や「意気」といった文化・及度、すなわち身体を洗って磨き上げる習慣の差を物語る
12）

文政期の美意識を論じた九鬼周造の名著『「いき」の構造』

は、単に倹約の結果というよりも、身体を磨くことの延長17）

線上にあるのであって、天保改革という政治的契機によっき」の内包的構造は、異性にたいする「媚態」、「意気地」、てのみ説明しきれるものではない。

「諦め」の三者に求められる。「意気地」とは、媚態を持ち。江戸の女性の、香りも含めて薄化粧をよしとする感性である。九鬼は「いき」を以下のように説明する。
「い

山東京伝『賢愚湊銭湯新話』（1802 年）13）は、「そもそつつ、なお異性に対して一種の反抗を示す強みを持った意

も湯上がりの時美しき女はまことの美人なり。はたけ・そ識である。「諦め」は、執着を離脱した無関心であり、こばかす・いぼ・ほくろ・頬の赤きも□あ□たも、紅白粉でれを獲得するには数多の恋を経る必要がある。従って若い

くろめれば、相応に見ゆるものなり。」と、湯上がりの美女よりも、年増女に「いき」を見出すことが多い。最終的

女の磨き上げた肌を賛美し、紅白粉でとりつくろった美にに九鬼は、「いき」を「垢抜して（諦）、張のある（意気地）、

対して否定的である。

色っぽさ（媚態）」と定義する。

湯上がりの肌や髪の自然な美しさ（実はそれが女性たち

そして「いき」の「身体的発表」として、言葉遣い、身の涙ぐましい努力の結果であったとしても）への賛美は、振り、体型、表情、装いなどをあげる。このうち、本論考

それまでの人形のような白塗りの化粧や、油で固めた人工と関係の深い、装いについて紹介しよう。

− 97 −

「いき」な姿としては湯上がり姿もある。裸体を回想かにしている。垢や化粧品で毛穴を塞がないことが医学的として近世の過去に持ち、あっさりした浴衣を無造に奨励され、透き通った無臭の体を志向するブルジョアと、作に着ているところに、媚態とその形相因とが表現

不潔な大衆との社会的差異は際だっていく。このような状を完うしている。
「いつも立寄る湯帰りの、姿も粋な」況は、同時期の日本の清潔文化が医学のあり方とは無関係とは『春色辰巳園』の米八だけに限ったことではなに、「粋」の美意識として遊郭を中心とする庶民文化の中い。
「垢抜」した湯上がり姿は浮世絵にも多い画面でで花開いたことと、大きな隔たりがある。

ある。

またヨーロッパでは近代衛生学が、入浴を中心とする衛上記の九鬼の指摘は、九鬼の意図するところではないに生習慣の普及のために、健康的な美しさを人々に宣伝した

しても、「いき」と身体を洗うこととの関係性を浮かび上

結果、薄化粧が流行した。それは、若さの美や肉体美の賞がらせている。「いき」に必要な、「あっさり」と「無造作」

賛へと結びつく。これに対し、日本の「いき」の美意識は、であること、「垢抜」けることは、銭湯で身体を洗うとい

健康そのものとは全く無縁であり、むしろ精神的洗練を高う行為を媒介に可能となる。

く評価する点で、非常に対照的である。

続けて九鬼は「薄化粧」、油を用いない「水髪」や略式

明治維新を迎えて、日本は西洋の身体観・美意識・清潔の髪型、首筋を強調する抜き衣紋、ふくらはぎをかいま見

観・衛生思想の攻勢を受けることになる。そのことによっせる左褄、冬でも足袋をはかずに素足で通すことなどにつて、日本の化粧意識がどのように変化するのかを検討する

いて言及する。いずれも日常的な肌の手入れを前提とすることを、今後の研究課題としてあげておく。

美である。守貞のいう「婀娜」
・「意気」といった美意識が、上方ではなく江戸の地で花開いたのは、背景に入浴による

１）「鏡中美女−− 従江戸時代的化粧書看美容意識的変

身だしなみを、より強く求めた江戸文化がある。

遷」『新史学』第 11 巻第２期、2000 年６月。

入浴によって清潔な身体を保つことは、女訓書によって

２） 江戸時代の清潔観と入浴の普及の関係については、

特に女子に対して徹底された徳目だった。しかしながら、

拙稿「江戸の銭湯に見る養生と清潔」（吉田忠他編『東それによって自己の身体と向き合い、磨き抜いた身体でもと西の医療文化』思文閣出版、2001 年所収）参照。

って女性たちが表現したのは、男に媚びない意志ある美し

３） 石川松太郎編『女大学集』、東洋文庫 302、平凡社。

さ、豊富な人生経験を感じさせる美という、本来の封建的

４） 前掲『女大学集』所収。

価値観から逸脱した女性美だった。そしてまた、こういっ

５） 室松岩雄編『類従近世風俗志』下巻、名著刊行会。

た美しさを『浮世風呂』に登場する下女のような、当時広６） 安永４（1775）年版『川柳評万句合勝句刷』収録。

範に存在した、都会に働く女性たちが身近に感じている点

７） 江戸時代初期のものでは『女鏡秘伝書』（1650 年）がに、彼女たちが身体表面だけでなく、内面的にも変化を遂ある。この他著名なものとしては『女重宝記』（1692 年）、げつつあったことを見て取ることができるだろう。

『当世化粧容顔美艶考』（1819 年）など。
８） 佐山半七丸著・速水春暁斎画図。東洋文庫 414。

６．ヨーロッパの清潔と化粧９）『新古典文学大系』86、岩波書店。

さて、このように清潔感の展開は化粧のあり方とも深く関わっているのだが、それについて論じた先行研究を、中10） 前掲『近世風俗志』。
11）この説は 1908 年の前掲『近世風俗志』に書かれ、以後日本

国・韓国で探すのは難しい。たとえば韓国の化粧史は、韓の化粧史は、江戸時代の化粧を論ずるときに、本書のこの記述を国文化が歴史的に白い肌を重視してきたことを指摘する。

よく引用するが、その真偽は検討されたことがない。

だがその背景は、韓国を含むシャーマニズム文化圏が白い

12） 前掲『近世風俗志』。

皮膚を尊敬する傾向をもつことや、美しい肉体に美しい精

13） 京都大学頴原文庫蔵本。

神が宿るという「霊肉一致思想」に求められるにすぎない。

14） 前掲『近世風俗志』。

これに対してヨーロッパの社会史研究は、アラン・コル
19）

バン『においの歴史』

や、ジョルジュ・ヴィガレロ『清20）

潔になる「私」−身体管理の文化誌−』 、ジュリア・ク
21）

セルゴン『自由・平等・清潔』のような、清潔・衛生といった感覚の展開が、社会の近代化の中で果たした役割
を、化粧をはじめとする身体作法の側面から論じている。

15）
ポーラ文化研究初編『日本の化粧』、ポーラ文化研究所、1989 年。
16） 佐伯順子『遊女の文化史』、中公新書 853、1987 年。
17） 初版は1930 年刊（岩波書店）。本稿では岩波文庫版（1979 年）を参照した。
18） 全完吉「韓国の化粧文化史」『化粧文化』36 号、1997 年５月、ポーラ文化研究所。

これらの研究は、ヨーロッパでは 19 世紀以降、体を洗う

19） 山田登世子・鹿島茂訳、藤原書店、1990 年。

ことをはじめとする清潔の習慣が、身体衛生の普及を一つ

20） 見市雅俊監訳、同文館、1994 年。

の背景に、ブルジョアジーを中心に広がっていく様を明ら

21） 河出書房新社、1992 年。

− 98 −

痴呆高齢者の表情分析と主観的 Quality of Life の評価手法に関する研究
三重県立看護大学＊、びわこ成蹊スポーツ大学＊＊、遠江病院＊＊＊鈴木

みずえ＊、金

森

夫＊＊、大

雅

一＊＊＊

城

This study clarified a relationship between Japanese version Dementia Quality of Life Instrument (DQoL) and facial
expression analysis using Philadelphia Affect Rating Scale (PARS). There was significant positive correlation between
anxiety/fear (PARS) and negative feelings (DQoL), depression (PARS) and sense of aesthetic (DQoL). Interest (PARS) andsense of aesthetic (DQoL) showed a significant negative correlation. It was suggested that DQOL was related to PARS,
moreover, DQOL was able to evaluate the QOL in elderly patients with dementia.

1.

緒

護負担が減少していることを報告した４）。痴呆性高齢者に言とっての表情の活性化は、精神的安定および社会生活のQuality of Life は、生命の質あるいは生活の質などとし適応を促し、問題行動の減少に繋がることが考えられる。

て訳されるが、医療においては患者個人の主観的満足感あLawton ６）はアルツハイマー患者の情動評価として表情分

るいは幸福度と考えられている。痴呆性高齢者に関して

析に関する研究を行っており、評価基準が明らかであり、は、記名力および認知機能の障害が中核をなす疾患であ訓練された看護師、介護福祉士であれば使用可能であるこることから、本人による QOL 評価は不可能とされてきたとから本研究にて用いた。痴呆性高齢者の主観的 QOL 指

１）。しかし、従来の観察による QOL 評価が果たして適切標については、1999 年に Brod ら 7） が質的研究手法を踏であるかは、十分明らかではない。痴呆高齢者の QOL は、

まえ定量化に関する研究を行った。本研究では、著者ら痴呆の進行、自立度によっては損なわれる部分もあるが、のこれまでの研究を踏まえ、痴呆高齢者の表情分析と主QOL を保つことも可能であり、本人のおかれた環境およ

観的な QOL の評価手法を組み合わせることで痴呆性老人

び家族などの周囲の人々との相互関係の結果として表情、の表情の活性化が QOL の維持につながることを明らかに行動を中心として評価されてきた 2）。著者らは痴呆性高齢したい。本研究では、日本語版 Dementia Quality of Life

3）として表情分析について取り組み表情分

Instrument（DQoL）を用いて、わが国の痴呆高齢者の主析に関する先行研究を 1 対 1 の構造面接法であるコミュニ

観的 QOL の測定を行い、主観的 QOL 評価と Laton の表

者の QOL 評価

4）5）を行った。しかしなが情分析評価である Philadelphia Geriatric Center Affect

らこの面接手法は、言語的コミュニケーションを理解でき

Rating Scale（フィラデルフィア老年医学センター情動ス

ない痴呆性高齢者には不安や心理的負担を生じさせ日常とケール）との関係を明らかにすることが目的である。

ケーション行動による表情評価

比べて笑顔の表出が少ない対象者も認められた。これらの2.

結果から施設およびデイケア、デイサービスの通所サービスの痴呆性高齢者のケア評価として日常生活における笑顔

2.1

実

験

痴呆性高齢者の表情分析

表情分析研究の第１人者である Ekman ８）は、幸福、悲などを簡便に評価する表情分析評価法が必要である。
痴呆性高齢者の QOL 評価については、中程度の痴呆でしみ、怒り、嫌悪、驚き、恐れの 6 種であると考え、感情

あれば主観による評価も可能であることが、近年、米国でを表す表情の特徴が、世界の文化を超えて共通しているとも報告されている。痴呆性老人は他者とのコミュニケーシ

報告している。Lawton らは Ekman の研究にもとづき生活

ョンに対して積極的に関わろうとする動機が低くなり、認の中で Philadelphia Geriatric Center Affect Rating Scale

知機能の更なる低下を引き起こす。我々はデイケアにおい

（表１）
。訓練
（Affect Rating Scale ：ARS）を開発した６）て心理社会的療法の一つである動物介在療法を行い、痴された看護助手によって行われ、尺度としての妥当性が示

呆性高齢者の表情が豊かになり、精神的にも安定し、介されている。わが国での高齢者の表情分析については、増Evaluation Technique of Facial Expression
Analysis in Elderly Patients with Dementia
and Subjective Quality of Life1

きによく表出され、怒り、恐れ、軽蔑、嫌悪などにおいて個人差が著名であることを報告している。

2

Mizue Suzuki , Masao Kanamori , Hajime＊
Ooshiro3＊

谷らが高齢者の表情の他者からの認知を研究し、喜びと驚M ie Prefe ct ua l C ollege of Nu r sing1,
Biwako Seikei Sport College2, Totomi
hospital3

表情の中で最も QOL を表現しているのは笑顔である。
笑顔は、単に自己の情動を表現するだけではなく、笑うことで他者との快の感情を他者に伝達して社会的関係を深める作用もある。軽度の痴呆性高齢者であれば自発的な− 99 −

表１ Philadelphia Geriatric Center Affect Rating
Lanton MP, observed Affect and Quality of Life in dementia, Scale Assessing
Quality of Life
Alzheimer’s Disease, 95-110, Springer Publishing Company, 2000た。しかし、新しい痴呆高齢者の評価手法として本人に直接インタビューする試みも増えてきている。著者らは、早期痴呆患者に対する病気の受容に関する研究を行い、早期患者の場合には、病気の受容が痴呆症状の軽減ないし進行に影響を及ぼしていることを報告した。
図１に示したように表情の絵を用いて、重度痴呆患者に対する情動を測定する
Dementia Mood PictureTest（痴呆情10）緒を測定するための検査） を用いた報
告などの報告もみられる。しかし、重度痴呆性患者の場合には言語的なコミュニケーションが困難な場合が多く、主観的判断は非常に困難な点が多い。米国の Gold mad 老化研究所の Dr.Brod
は中程度の痴呆の高齢者を対象に主観的な QOL を測定する 29 項目からなる
笑顔がみられるが、重度の痴呆性高齢者の笑顔は受身であDementia Quality of Life Insturument（DQOL）６）を開発しり、相手から話し掛けられた際に微笑む。また、矢冨らはた。従来の観察者による QOL 評価尺度は、認知機能、身痴呆性老人の笑いの表出について研究しており、認知機能

体機能、ADL、行動範囲、レクリエーション活動、社会的交流、の低下に伴い情動的笑い、内発的社会的笑いの低下を報告

対話能力である。痴呆性高齢者の主観的 QOL は表２に示し９）している 。痴呆高齢者の取り繕う行動や不安行動は、コ

たが、（1）自己尊重、（2）肯定的感情、（3）否定的感情、（4）

ミュニケーションの失敗とそれに伴う他者の評価を意識し所属感、（5）審美的感覚の５つの下位尺度に分かれている。

た行動と言われている。痴呆性高齢者の笑顔の表出は、介本研究では Dr.Brod から DQOL 翻訳の作成の許可を受けて護者との意識の共有化だけではなく、介護負担の緩和作用

おり、日本語版を開発し、その信頼性、妥当性についても検にもなりうると思われる。Affect Rating Scale は、楽しみ

証し、痴呆性高齢者の心理社会療法およびケア評価に有効（Pleasure）、怒り（Anger）、不安・恐れ（Anxiety/Fear）、に活用可能なものとしたい。本尺度は、介護保険制度にお抑うつ・悲哀（Depression/Sadness）、関心（Interest）、
満足（Contentment）の６つの感情を表情から分析する。

2.2

良い気分の絵痴呆性高齢者の QOL の概念化

生活の質は、近年において医療の目的として挙げられた
比較的新しい概念であり、医療評価として患者側からの評価することの重要性が認識されるようになった。QOL は人間の身体・心理・社会経済的な各領域を含む包括的な概念であり、1980 年代に実証研究が行われ、保健・医療領域

悪い気分の絵においては健康関連 QOL に限定して報告されている。痴
呆性老人の QOL については、近年、抗痴呆薬開発にあたり、その有効性を評価するための評価手法としても開発された。
（1）行動能力（Behavioral competence）、（2）外的環境の質（Eternal environment quality）、（3）心理的 Wellbeing、（4）知覚された生活の質（Perceived quality of life）の４領域にまとめている。痴呆は記名力、認知機能低下が中核となる疾患であり、心理的 well-being、知覚された生活の質の測定が、痴呆性高齢者の場合には最も大きな課題となるため従来は本人が QOL について表現できないとされてき

図１ Dementia Mood PictureTest
Tappen RM, Barry CB, Assessment of affect in advanced Alzheimer’s disease : the dementia mood picture test, Journal ofGerontologyal Nursing, 21(3), 44-46, 1995

− 100 −

痴呆高齢者の表情分析と主観的 Quality of Life の評価手法に関する研究

表２

痴呆性高齢者の QOL 測定尺度の５つの領域

表３

表４

対象者の特性

Affect Rating Scale の結果

ける課題である高齢者の自己決定の尊重、残存能力の活用といった側面から痴呆性高齢者の新しい主観的 QOL を明らかにすることは、ノーマライゼーションの理念からも痴呆性高齢者の保護といった側面からも、超高齢社会に向かうわが国において、今後、重要な課題である。

2.3

研究方法

平成 14 年 10 月から平成 14 年１月 31 日までにデイケアおよびデイサービスにおいて痴呆症と診断された在宅高齢者のうち、調査の参加の承諾の得られた 56 名に対して面接調査

0.730 〜 0.857（p<0.05）であり、クロンバッハによる信頼係を実施した。DQOL 日本語版の翻訳に関しては、翻訳許可

数は 0.66 〜 0.864 であった。表４に Affect Rating Scale おを受けて看護研究者、老年精神医学専門医、臨床心理学研

よび DQOL の平均値を示した。Affect Rating Scale では満究者、バイリンガルなどにて検討した。質問項目はわが国の足が最も高く、男性 4.94（±0.25）、女性 5.00、次に関心

痴呆性高齢者に理解しやすい言葉を用い、概念枠組みに適

4.88（±0.34）、4.98（±0.16）であった。最も低かったのはした内容を基本とした。10 名の痴呆性高齢者にプレテスト

怒り、男性 1.06（±0.25）、女性 1.00 であった。DQOL で実施した。回答が得にくい項目を検討後、バックトランスレ

は、審美的感覚が最も高く男性 3.15（±0.93）、女性 3.70（±

ーションとして、別のバイリンガル１名に日本語から英語に翻0.61）であった。最も低かったのは否定的感情で男性 2.23（±

訳後、DQoL 開発者の Brod 博士に最終確認を依頼し、修0.65）、女性 1.89（±0.67）であった。表５は Affect Rating

正項目をさらに検討し、最終の日本語版 DQoL を作成した。

Sca le、DQOL と N M スケール、NA DL の相関を示した。

11）

認知機能検査である Mini‐Mental State（MMSE） 、行動

Affect Rating Scale（ARS）では、
抑うつ（ARS）と関心（NM）、評価尺度である N-ADL（N 式老年者用日常生活動作能力評

抑うつ（ARS）と見当識
（NM）
、
抑うつ
（ARS）と歩行（N-ADL）

12）

価尺度） を実施した。日本語版 DQOL は自己尊重、肯定

が負の有意な相関を示した。関心（A RS）と見当識（N M）、的感情（ユーモア）、否定的感情、所属感、審美的感覚の５歩行（N-ADL）が正の相関を示した。DQOL では、否定的感

つの領域からなる 29 項目に対して視覚スケールを用いて回答

情と見当識（N M）、審美的感覚と見当識（N M）が負の相関してもらった。DQoL の質問の前は 3 項目のプレテストを行い、を示した。表６に Affect Rating Scale と DQOL の相関を示

視覚による 5 段階のスケールを理解して回答が適切かを確かしたが、不安（ARS）と否定的感情（DQOL）、抑うつ（ARS）

めた。Affect Rating Scale に関しては、看護師が DQOL をと審美的感覚 ( DQOL) が正の有意な相関を示した。関心回答した同日の患者の様子を 20 分間観察して評価した。

（ARS）と審美的感覚 (DQOL) は負の有意な相関を示した。

3.

結

果

4.

考

察

対象者の属性については、表３に示した。痴呆高齢者 56

本研究では、従来、注目されることが少なかった痴呆性

名（アルツハイマー型 11 名、血管性 46 名、混合型２名、男高齢者の表情分析と主観的 QOL の側面に着目した。日本

性 17 名、
女性 42 名）、平均年齢は 82.66（±8.18）歳であった。

語版 DQoL に関しては、内的一貫性も英語版とほぼ同様

MMSE は 20.37（±4.48）であり、NM スケールは 33.77（±の傾向が認められ、信頼性も確認された。本研究により、

8.72）、N -A DL は 39.88（±39.88） であった。DQOL のM MSE が 13 点以上の中度から軽度痴呆症高齢者において2 週間後の再テストでは、５項目の下位尺度の相関係数は視覚による５段階のスケールが理解できる場合には、主観的− 101 −

表５

Affect Rating Scale、DQOL と NM スケール、NADL の相関

表６

Affect Rating Scale と DQOL の相関

QOL の測定が可能であることが示唆された。本尺度は、痴

低下し、ストレスに対処できなくなった結果として引き起呆性高齢者に対するアクティビティなどケア介入の評価などにこされると仮定している。DQOL は高齢者の生活の主観おいても有効であると思われる。Affect Rating Scale に関し的な側面を評価しており、Affect Rating Scale を用いてそては、デイケア、デイサービスのプログラム中の様子を観察しの妥当性を検証した。介護保険制度における痴呆の進行をたため、「満足」が最も高く、「怒り」が最も低かったと思わ予防するためのケアの開発および痴呆患者の尊厳を守るたれる。Affect Rating Scale の抑うつと NM スケールの関心、めのケアの評価の一つとして活用が可能であることが示唆

見当識、NADL の歩行と負の有意な相関を示した。これは、された。

痴呆性高齢 者の見当識が高いほど抑うつ傾向にあったり、

5.

意欲を低下させることから周囲への関心を低下させることが総括

明らかになった。しかし、歩行機能は維持されている対象者

平 成 14 年 10 月 か ら 平 成 14 年 １ 月 31 日 に デ イ ケ ア

ほど、抑うつ傾向にある。DQOL の否定的感情と見当識はおよびデイサービスにおいて調査の参加の承諾の得られ有意な関連があり、否定的感情が少ないほど見当識が良好

た痴呆性高齢者 56 名に対して面接調査を実施した。日であることが示唆された。これらの結果からは、自己の否定

本語版 Dementia Quality of Life Instrument（DQoL）と感情が低い高齢者ほど痴呆症状の進行が遅い可能性があり、Philadelphia Affect Rating Scale（PARS）を用いて表情

今後、本尺度を用いて追跡調査が必要である。

分析の関係を明らかにした。不安（PARS）と否定的感情

DQOL の審美的感覚と NM スケールの見当識は負の有(DQoL)、抑うつ（PARS）と審美的感覚（DQoL）が正の意な関連があり、見当識が良好な人は審美的感覚が低いこ

有意な相関を示した。関心（PARS）と審美的感覚（DQoL）とが示唆された。わが国では、高齢者の日常生活においては負の有意な相関を示した。DQOL は高齢者の生活の主動物、鳥、空などをみることで美しさを意識したり、認識観的な側面を評価しており、Affect Rating Scale を用いてすることが少ないなどの欧米と習慣の違いなどの影響も考

その妥当性を検証した。DQOL、PARS ともに臨床においえられる。しかし、認知機能の低下した高齢者では、デイて活用可能であることが示唆された。

ケアなどにおける動物介在療法などにおける変化もみられ
３）、残存機能や残された感性を刺激することで認知機能の低下を予防したり、問題行動の軽減につなげる可能性も高い。Hall1 ３）は、痴呆高齢者の問題行動はストレス閾値が謝

辞本研究を遂行するにあたりご支援頂きましたコスメトロ

ジー研究財団に感謝申し上げます。

− 102 −

痴呆高齢者の表情分析と主観的 Quality of Life の評価手法に関する研究（引用文献）

instrument(DQoL), Gerontologist, 39(1), 25-35, 1999.

１） 本間昭：痴呆性高齢者の QOL 精神科の観点から、11８） P・エクマン：表情分析入門—表情に隠された意味を（5）、483-488,2000

さぐる、信誠書房、1987

２） 山本則子、阿部俊子、稲毛田美香：痴呆性高齢者の９） 矢冨直美：痴呆性老人のコミュニケーション行動、

QOL：看護介入を評価する尺度開発、日本老年精神医
学雑誌、11（5）、489-495,2000

看護研究、29（3）、243-252、1996
10） Tappen RM,

Barry CB： Assessment of affect in３） 金森雅夫、鈴木みずえ、山本清美、神田政宏、他：:

advanced Alzheimer's disease: the dementia mood picture

痴呆性老人デイケアにおける動物介在療法の試みとそ

test, Journal of Gerontologal Nursing, 21(3), 44-46,1995の評価方法に関する研究 . 日本老年医学会雑誌、38(5)：11） Folstein MF, Folstein SE McHugh PR: Mini-mental

659-664（2001）.

State; Practical method for grading the cognitive state４） 矢冨直美、宇良千秋 , 吉田圭子 , 他：痴呆性老人におfor the clinician. J Psychiatr Res, 12, 189-198(1975).

ける笑いの表出、老年精神医学雑誌、7（7）783-791、

12） 小林敏子、播口之朗、西村健、武田雅俊： 行動観察

５） 中谷陽明、野村豊子、和気純子、矢冨直美：

痴呆による痴呆患者の精神状態尺度（NM スケール）および性老人に対する回想法の効果に関する研究．平成 6 年度

日常生活動作能力評価尺度（N-ADL の作成）: 臨床精ジェロントロジー研究報告 2 : 114-119(1996).

神医学、17（11）:1653-1668(1988)

６） Lowton MP： Quality of Life in Alzheimer's Disease.

13） Hall GR, Buckwalter CB： Progressively lowered

Alzheimer's Dis Assoc Disord,8(S.3)138-150,1994

stress threshold: A conceptual model for care adults

７） B r o d M B , S t e w a r t A L , S a n d s L , W a l t o n P：
Conceptualization and measurement of qualityof life instrument: the dementia quality of life

− 103 −

with Alzheimer's disease, Achieves of PsychiatricNursing, 1(6): 399-4061957.

●
平成1 4年度記念講演
●

石

浦

章

一

コスメトロジー研究振興財団
第 13 回表彰・贈呈式記念講演

人のこころと遺伝子のはたらき
東京大学大学院総合文化研究科

石

浦

章

一
場所 ㈱コーセー本社２階会議室
日時 平成 14 年 11 月 20 日㈬Ⅰ

序

見ていると遺伝するのではないかと思うのですが、それはど

私は現在、東京大学の文系と理系の中間として新しくでうして証明したらいいのでしょう。人のクリエイティビティ、創きた生物学と心理学が一緒になった学科におります。そこ

造性とか、計算の才能、金儲けの才能はどこまで遺伝するかで私たちの精神の働きというものを何とか遺伝子の働きとということが問題になるわけです（表 -１）。

結びつけることができないかという研究をやっております

そこで、２，３ご紹介したいと思うのですが、例えば、こので、少しそれについてご紹介させていただきます。ご高れは有名な神経学者のシャルコーが講義をしているところです

名な先生方がたくさんおられるので、大変失礼な話をする（図 -１）。フランスのサルペトリエール病院の壁画にあるのでかもしれませんが、その時はハハハと笑っていただければすが、シャルコーが女の人をかかえて、講演をしています。こ非常にありがたいと思います。

の講演は筋肉麻痺の若い女性、つまりヒステリーを起こして今日は遺伝子の働きから話をさせていただきます。その筋肉が固くなって倒れている女性について、心理的抑圧が身あとアルツハイマーの話、最後に人間のこころの働きにつ体症状に転化した時にこういう症状が出ると講義をしている

いて話をさせていただきます。

ところです。このシャルコーという人と、ご存じのフロイトという人が、この筋肉麻痺、ヒステリーの治療はどうすればいい

Ⅱ

遺伝子の働きⅡ -1

かを研究し、催眠術によってこのような症状が劇的に治ると遺伝するものとしないものいうことが判ったわけです。そこで、この当時フロイトは脳の遺伝するものとしないものというのが世の中にはいっぱいございますが、どれが遺伝するかというのはいろいろ問題が出るところです。まず、遺伝しそうなものというのはご存じのように顔の造り、髪とか私の顔を見ていただければ判りますが、私の父親がどのような顔をしているか、大体推測がつくわけです。その他によくいわれていますのは、眉毛が濃いとか、ほほ骨が張っているなどは遺伝するのではないかといわれています。しかし、どのような遺伝子が表-１遺伝するもの、しないもの
遺伝しそうなもの

遺伝する？

・顔のつくり（髪、まぶた、まゆ毛、頬骨、
えくぼ、そばかす、体毛）・身体全体の骨格・血液型

・長寿・身体醜形障害・ヒステリー・創造性
・計算の才能・金儲けの才能それに拘ってくるかというのはよく判っておらず、最近ようやく、例えば耳垢が湿っているとか、耳垢が乾いている

シャルコーの講義（筋肉麻痺の若い女性）という特性の遺伝子が判ったという段階です。
その他に体全体の骨格というのはだいたい似ています。電車の中で親子を見ますと、あれは親だ、子だというのは必ず判ります。その他に血液型もそうですが、それ以外に今日問題にしたいのは、長寿とか身体醜形障害、自分が醜いと思って何度も整形を繰り返す、そういうことは遺伝するのだろうか、
ヒステリーは遺伝するのだろうかということです。周囲の人をMind and genes
Shoichi Ishiura
Department of Life Sciences, Graduate
School of Arts and Sciences, The
University of Tokyo.

心理的抑圧が身体症状に転化↓
催眠によって劇的に治る！
「心の病気と分子生物学」（日経サイエンス）より引用

図-１− 107 −

研究をするのではなくて催眠という心理分析によって、精神ですが、今どれくらい判っているかをちょっとだけご紹介しま症状が治るのではないかと考え、新しい学問を打ち立てましす。人間の遺伝子というのは、33,000 個位あることがゲノムた。これが 100 年以上前の話です。

プロジェクトで明らかになっています。理論的にはそれが全部

ところが最近は心理分析だけでは人のこころは治らない、

判れば、私たちのこころや、病気の素因とかがわかるはずで

例えば鬱病の症状は薬の方がよく治って、精神分析では治らす。ところが人間はハエとか、土の中にいる線虫とか、植物ないということで、人間のこころも精神医学という面で見なけであるナズナなどの他の生物に比べて、そんなにたくさん遺ればいけないというようになってきています。先ほどご紹介し伝子を持っているわけではないのです。酵母菌とか大腸菌なた身体醜形障害、例えば自分の顔が醜いと思うような心を持

どのように、もっと下等な生物は遺伝子はもちろん少ないことっているのはどういう人だろうか、その人の脳を見たらどうだ

は判っています。といってピロリ菌の 1,500 個の遺伝子が全ろうか、ということが研究で非常に大事だということが言われ部判ればヘリコバクターピロリが判って胃潰瘍は無くなるかとるようになってきました。今日はそれらのいろいろな例をご紹いうと、そこは判らないわけで、遺伝子が判ったとしても人間介したいと思います。

そのものが判るとは限らないのです。それを今皆さんが一生懸命に調べているところです。

Ⅱ-２

脳の研究と遺伝子

遺伝子は今どうなっているかと申しますと、一般的に一つ一番最初になにが遺伝し、なにが遺伝しないかというお話の遺伝子というのは、遺伝子の部分とそれ以外の意味の無をしましたが、例えば計算能力は遺伝するでしょうか。これ

い部分がだいたい３：７位になっていると考えられています。

についてもいろいろなテストや、いろいろな家系調査がありま

人間の遺伝子の約３割の部分が非常に大事な部分であって、す。例えば今、世界にはこういう方がいます。２桁の数字でその大事な部分の中でも最終的には私たちの体のタンパク質

あれば２乗から５乗はもう暗記している人がいる。ということを造る部分、これをエキソンといいますが、このエキソンの部

は５桁と５桁の掛け算はたちどころにできる、という方が世分はだいたい２％位です｡ 後で切り取られてしまう残りの部分

界中にいて、数時間前に覚えた数字は絶対に覚えている。１をイントロンなどと言うのですが、このイントロンの部分はエ割る 113 の答えを永久に暗算で続けることができる。1950 年

キソンの部分の約 20 倍位の大きさで、一つの遺伝子は平均

12 月８日、私の誕生日なのですが、これは何曜日かをたちど

８個から９個のエキソンでできているといわれていますから、ころに言うことができるというような人が世の中にいるそうで全体の一つの遺伝子の大きさは平均約３万塩基でできているす。こういう能力は遺伝するのでしょうか。もう一つは学習だと考えられます。

けで、勉強だけでこういうことができるのか、ということを調そうしますと遺伝子診断をすると、全部最初から最後までべる研究が行われています。この人は普通の人よりも神経細調べなくてはいけないので、一回の PCR（ポリメラーゼ連鎖胞の数が違うのだろうか、それとも神経の伝達スピードが速反応）で約 500 塩基が判りますから、３万の塩基を全部調いのでしょうか。光が光ったときにボタンを押すというテスト

べるには 30,000/500 でだいたい 60 回 PCR をしないと、全をやりますと、頭のいい人は早くボタンを押すといわれていま部の遺伝子の中のどこに変異があるか判らないわけです。皆すが、それは神経の伝達スピードが速いせいだという理論もさんと隣の人が少し性格が違うなどというのも簡単に遺伝子ある。もう一つはこの人は使っている脳の場所が違うのではで調べようと思えば調べられるのですが、非常に大変なことなかろうか。この３つの仮説が立てられて、この他に遺伝すであるということが現在判っています。

るかという仮説があるわけですが、遺伝は現在のところ否定されているのです。こういう頭のいい人は、どこで決まっていⅡ-４

るか、皆さんはご存じですか。これは脳の研究から明らかにそこで遺伝子診断というのはどのようにやるかというと、私遺伝子診断なりました。正解はこの人は使う脳の個所が違うということがに髪の毛を３本いただければ、特定の遺伝子が診断できます。

判ってきたのです。即ち、計算の練習をすればするほど、今

将来 60 歳になったらボケやすくなるとか、そういう遺伝子もまで使っていなかった脳の個所が使えるようになる。こういう今判っていますから、何だって判るわけです。私がやっていことをきちっとやりますと、この計算能力は遺伝ではなくて、るある病気の人は嘘をつきやすくなるという特徴があるので

実は後天的に獲得する、学習で獲得できる能力であるというすが、もしその原因遺伝子が判ると、皆さんの髪の毛を診断ことが判るわけです。そういうことをきちっと示していくことして、この人は嘘をつきやすい、私を騙しているのではないか、

で、何が遺伝か何が遺伝ではないかということが明らかにななどということが判るかもしれないのです。今はどこの大学でってきました。

も血液だったら一滴でいいですし、うがい水の中にはホッペ
タの中の細胞が含まれていますから、そこから DNA を抽出

Ⅱ-３

遺伝子の構造して、遺伝子診断ができるようになっています。

ここで、簡単な遺伝子の話を先生方にするのは大変恐縮

例えば、これは有名な教科書から採ってきた DNA プロフ− 108 −

人のこころと遺伝子のはたらきァイリングの図ですが、親子鑑定の図がこの A というところDNA
プロファイリングに描いてあります。M というのがお母さんで、隣の C というのが子供で、F1 と F2 のどっちがお父さんか判らない、という場合を示しています。そうしますと C という真中の子供

（A）

（B）

M C F1 F2

精子
試料

Ａ. 親子鑑定はお父さんとお母さんから遺伝子が半分ずつきてこの真中の C という人になるわけですから、父親がどっちか、皆さん

被害者

Ｂ. 犯罪捜査

容
疑
者
1 2 3

は判りますか。ぱっと見て F1 の遺伝子がそのまま子供にきていることがお判りになるかと思います。F2 の遺伝子はいずれの線も子供に伝わっていませんから、F2 は違うということが見てすぐ判ります。F1 がお父さんです。本当に横田めぐ
みさんの子供かどうかもすぐに判るわけです。ところが法律
家は 99.999％の確率で正しいが ､ 違うかもしれないなどと言っているのですが、そういう問題ではなくすぐ判ります（図 ２,A）。
また、犯罪の被害者の中に精子の試料が残されていた。
女性の遺伝子が被害者の遺伝子であり、そこに残されていた（ from Human Mol.Genet.）

精子の試料の遺伝子がこれだとしますと、怪しい容疑者が３

図-２人います。誰が犯人ですか、などと言われると１番が犯人であることがすぐに判ります（図 - ２,B）。

だということで、母親にあとは判断してもらおう、ということ

このように遺伝子診断というのは殆ど確実に答えがでますになったのです。ところがどんでん返しが起こりました。何がから、皆さんもあまり悪いことはできないということがお判り起こったかと言うと、現実はどの国で診断しても、日本でもアになるかと思います。車の中に髪の毛が１本落ちていたら、メリカでもソ連でもフランスでも 200 組の父子のうち父子が違私のところに持ってきていただければ、どの女性かということ

うということが、必ず起こったわけです。つまりどの国でも遺がすぐ判るはずです。遺伝子はすぐ診断できるし、病気の遺伝子診断をすると本当の父親ではないということが何％かは伝子が判ると，皆さんが将来どうなるかというのはすぐ判る

確実にあるということが判って、実子かどうかは無意味であわけです。

る、だから病気のことだけ伝えればいいというのが最後の結論になったのです。

Ⅱ-５

遺伝子情報の取扱い

皆さんはこの結論と最初の私の話を聞いてどう思いますか。

遺伝子診断の逸話を一つご紹介したいと思います。これはやはり実際と違うということがお判りになるかと思います。即女性の話ですが、ある時ジョンという男の人とサラという女のち、遺伝子診断というのはこういう問題を含んでいるから、人が結婚して、子供を産みました。この２人はユダヤ人だっ

簡単に遺伝子を調べなさいと言われても、簡単に調べてそのたので、その子供がユダヤ人に非常に多いテイサックス病の結果を人に言うことはなかなか難しい、ということがお判りい遺伝子を持っているかどうかを診断しました。テイサックス病

ただけるのではないかと思います。そこで、今日お話したいのにかかると２歳から４歳で亡くなってしまいますから、産まれはもっとナイーブな､いろいろ難しい問題を話したいわけです。

た子供がこの病気かどうかはこの夫婦にとって非常に大事な

例えば、もし P TSD と呼ばれているトラウマになりやすい人

ことで、ユダヤ人の方はだいたい診断をしているのです。その素因の遺伝子が見つかったとしたら、その遺伝子のことをの結果、その子供はジョンの子供ではないことが判りました。

本人に言ったほうがいいのか。または、自分が醜いと思って

こういう時皆さんはどうしますか。この結果を二人に伝えます

いる女性がいたとすると、その人の遺伝子診断をすると、あか、伝えませんか。問題ですよね、遺伝カウンセラーはどうる素因の遺伝子を持っていたということが判る。その時、そ伝えるかが問題になります。

の人に対してどう言えばいいのだろうという問題がいろいろ出

これはある学会で話題になった話です。病気のことを聞かてくるわけで、遺伝子診断というのは問題を非常にたくさん含れたのだから、実子かどうかを言う必要は無いという考え方

んでいるということをお判りいただけるとありがたいと思いまと、いや将来のことを聞かれたのだから、本当のことを言わす。

なかったと訴えられたら困るから、やはり両方に正しいことを言うべきだという考え方の２つがある。学会で最初にどう決まⅡ-６ったかと言うと、この結果をサラだけに伝えると決まったので血液型のＯ型の方はこの中にたくさんいらっしゃると思いす。つまり、本当の子供かどうかを知っているのは母親だけ

ますが、Ｏ型は赤血球の中にガラクトースとフコースという糖− 109 −

遺伝子変異

がついている。Ａ型の人は GalNAC という糖が一つ余計にで、遺伝子変異の話をしますが、これは決して劣っている

ついていますから、Ａ型の人の方がＯ型の人よりも複雑な人というものではないということをお判りいただきたいと思い間である、まあ進化した人間であるというように考えることます。

ができます。Ｂ型はどうかというとＢ型は余分にガラクトース

ところで環境が遺伝子を変えることは絶対にありません。

という糖がついていて、Ｂ型とＡ型はついているものが違う

うちの大学の一年生に聞くと、遺伝子を変えることができる関係です。何が違うかというと、アという反応の酵素を持っなどと思っている人がいるのです。ところが遺伝子というのている人はＡ型になり、イという反応を司る酵素を持っていは体中の細胞に同じものがありますから、遺伝子は一生のる人はＢ型になるわけです。そこでＡ型の酵素とＢ型の酵素

間絶対に変わることはありません。どんなに努力しても変えの遺伝子を調べてみると、遺伝子は全く同一であるというることはできません。しかし、環境つまりライフスタイルにことが判ってきました。何が違うかというと、遺伝子の４箇

よって遺伝子のオン・オフは変えることができるので、これ所が違っていて、４箇所タンパク質のアミノ酸が違うと基質が学習とか環境の大事さである、ということがお判りになる

特異性が違ってきて、このグリコシルトランスフェラーゼといとありがたいのですが、これすら判っていない大学生がいう酵素は糖をくっつける酵素なのですが、違う糖をくっつけるというのは非常に嘆かわしいことです。ここで、２番目のるということが判りました。つまり、Ａ型の人とＢ型の人は話題に入ります。遺伝子でどういうことが判ってくるかという同じ遺伝子の遺伝子変異によって酵素の働きが少し違うとお話をさせていただきます。

いうことが判ってきました。ではＯ型の人はどうかというと、Ｏ型の人は実はタンパク質が半分しかできていないというこⅢ

アルツハイマー病とが判ってきました。Ｏ型の人は途中でストップコドンという

Ⅲ-１

アルツハイマー病とはものが入って未成熟なタンパク質ができて、完全なタンパク

アルツハイマー病は全ての病気の中で全員がリスクを持っ質ができない。つまり、アとイという反応を行うことができている病気です。ガンは３人に１人が亡くなりますが、アルツないわけです。Ｏ型は遺伝子変異なんですね。つまりＯ型

ハイマー病は長生きすれば必ず誰でもなる可能性があるわけの人は遺伝病ということです。でもそんなことは私たちの生で、これは大事な問題かと思います。アルツハイマー病は今活には全然無関係であり、そういうことでＯ型の人を差別な

日本では 65 歳以上の高齢者の約８％位を占めると考えられどできないわけです。私は自分がＡ型ですから自分は進化ています。ちょっと、あの人の名前を忘れたなどというのはアした人類だと思っていますが、といってＯ型の人を差別してルツハイマー病ではなくて、アルツハイマー病の人というのはいるわけではないのです（図 - ３）。

自分の家の場所を忘れるとか、朝何を食べたかを忘れるとか、

ところが、病気の場合は遺伝子が判るとやはり差別されとんでもない忘れ方をするのです。アルツハイマー病の原因はるという問題が起こります。例えば、化粧品を塗るときに色３つありまして、頭を怪我したり、サッカーをし過ぎたりする

盲の人が塗ると変な色に塗るかもしれないわけです。といっとアルツハイマー病になる。また、脳卒中の後遺症でもアルて、子供のときに色盲を測ると、その子供は差別される可ツハイマー病になりますが、一番問題なのは何か原因が判ら能性があるわけです。だから、そういう問題がいろいろでてないのにボケてくるという、これが現在のアルツハイマー病のくるということが、この遺伝子の取扱いで難しい問題である

定義です。

ということをお判りいただけるとありがたいと思います。そこ

実際脳がどうなるか写真を持ってきました。正常の脳はびっしり詰まっていますが、アルツハイマー病では脳がスカスカになっていることがお判いただけると思います（図 - ４）。

血液型と遺伝子

今、皆さんの脳を見るとアルツハイマー病かどうかが判る時
GalNAC赤血球

Gal-Fuc（ア）

A型

アルツハイマー病

正常

Gal-Fuc
Gal
Gal-Fuc

（イ）

O型
1
（ア）
,（イ）
1

B型

353
×
115

×

××

O型は遺伝子変異！
図-３アルツハイマー病による脳の萎縮
脳の海馬や皮質といった領域では、神経細胞が減少し、普通回旋状となっている
脳の表面がしなびている。

図-４− 110 −

この症状は、左のアルツハイマー病患者の方が、右の同年齢の正常人に比べて顕著だ。
「日経サイエンス」より引用

人のこころと遺伝子のはたらき代が来ています。でもその話はちょっと自分のことにも拘わ最初から 3,000 日ですからかなり測定している例ですが、る問題ですからあまり言いたくないので、まず良い話からし脳がだんだん萎縮していきます。そうしますと最初の矢印のましょう。

所で症状が出現して、ちょっとこの人は変なことを言っているとか、そういうことが判ってきて、だんだん萎縮してきて

Ⅲ-２

長寿の条件

最期にこの辺りでアルツハイマー病だと診断が確定するわけ

どんな人が 100 歳になるか知っていますか。今、日本でです（図 - ６）。

どういう生活をした人が 100 歳まで生きるかというと、生活

自分の脳がだんだん減っていくと、これはまずいと普通習慣がバラバラなのです。走っている人もいるし、朝から晩は思うわけです。だから今、皆さんは自分で脳を見れば、まで酒を飲んでる人もいる。泉重千代さんを覚えています

これは危ないかどうか判る時代がきているのです。このグラか。あの人はお酒を飲むことが生甲斐だったわけです。タフの脳の減り方は非常に顕著な人の例で、一般の方はあまバコを手放さない人もいるのです。こういう人がいるから本り萎縮しない。でもご老人になるとだんだんと萎縮してくる

当に困るのですが、タバコは本当は悪いのですが、タバコことは確かで、私くらいの年代でももうずいぶん萎縮していを手放さなくて 100 歳まで生きられる非常に頑丈な方もいると言われている。だから、こういうことが、もう今判ってらっしゃる。でも、私が伺ったところによると、平均的に適いますから、わざわざ遺伝子を調べなくてもアルツハイマー度な運動を毎日されているとか、歩いているとかそういうこになるかならないかというのは判るということです。

とをしている人です。あとは、非常に楽天的な生活をしていて、非常にフレキシビリティがある。何か違うぞと言われると、

Ⅲ-４

アルツハイマーと遺伝子診断

ああそうですねというような方が良い、あまり頑固な生活はところが、遺伝子の研究で大事なことはなにかというと、まずいですよということです。あと今一番問題になっている

非常に若い段階で判るということです。例えば、私がアルツのは、動脈硬化との問題で、食生活であまり肉を食べない

ハイマーの遺伝子を持っているとすると、20 歳位からタバような生活をしていた方がよかろうということです。だいた

コは止める、酒は止める、運動をするというような生活をすい平均的にはこういう人が 100 歳に達すると言われていまる。そうすればアルツハイマーを防ぐことが可能になるわけ

す。

で、やはり、遺伝子でアルツハイマーを調べるということは非常に大事なことだと思うのですが、今、日本でこういうこ

Ⅲ-３

脳とボケ

とができるかどうかというのは問題になっているところです。

ここで脳を見てみます。これはアルツハイマーの人の脳でこれも日経サイエンスの本から採ってきた図ですが、これす。この人は毎回健康診断で脳を見ていったわけです。そは人間の卵の話です。人の受精卵の８細胞の卵で１個だけうしますと、１年半、３年と経っていくとだんだん萎縮してピペットで吸って、この１個の細胞で遺伝子診断をすることいるのがお判りいただけるかと思いますが、脳の中でも海が可能です。だから卵の段階でこの卵は将来アルツハイマ

馬という部分が非常にきれいに萎縮しているのがお判りになーになるかどうかが判るわけです。残り７／８をお母さんのるかと思います（図 - ５）。つまり、皆さんの脳を見るだけで、お腹の中に返すと子供が誕生するわけで、人間の子供がこ

萎縮が起こると将来ボケるぞということが判ってきます。

うして生まれることは現在もう証明されています（図 - ７）。

これをグラフにしますと、この人はアルツハイマーになってということは遺伝病はこういうことができるわけですが、お医者さんに行くたびに脳を測ってもらっていたわけです。

誰か悪い科学者がいてアルツハイマーの遺伝子をこうやって脳が縮んでいく
アルツハイマー病での脳の萎縮

86
84

↑
萎 82
縮 80
の
度 78
合 76
い 74
︵
％ 72
︶ 70

↓症状の出現

系列1

診断確定↑

0

500

1000

1500

2000

2500

3000

日数→
１年半後

３年後

（from The LANCET Neurology 1, 13, 2002）

図-５

図-６

− 111 −

刺激

てんかん、不整脈
筋ジストロフィーK +、Na +、Ca 2+

OFF

ヒトの受精卵８細胞期↓
１つの細胞で
遺伝子診断
↓

GEF

GAP

↓
残りを子宮に
返す
↓
望む子ども
の誕生

細胞内の化学
反応を促進するON細胞の形を変えるI Q 遺伝子で子どもを選択することも可能である
図-８

いろな反応が進むということが判っています。この反応タン
図-７「日経サイエンス」より引用

パク質は細胞の中でオンとオフを繰り返しているスイッチみたいなタンパク質で、細胞の中の化学反応をオンにしたりオフにしたりする。オンにすると何が起こるかというと、細胞調べてお母さんのお腹の中に戻せば、今は絶対アルツハイの形が変わっていく。神経だったら神経細胞が伸びていく

マーにならない子供を作ることが可能になっています。もっのに効いている一番最初のスイッチのタンパク質だということ怖いのは、現在遺伝性の精神遅滞の遺伝子が判り始めとが判る。スイッチがおかしくなるとどうなるかというと、神ています。細胞にはいろいろな化学反応があって、先ほど経が伸びていかない、回路が作れないということで精神遅全部で 33,000 遺伝子があると申しましたが、人間の遺伝滞が起こるということが判ってきました（図 - ８）。

子産物はこの中で何かの働きをしているわけです。いろい

この遺伝子を遺伝子診断すると、ひょっとして頭のいいろな働きがあります。例えば細胞の中の化学反応を促進す

人が造れるかもしれないわけです。ＩＱが低い遺伝子は異る働きとか、外からホルモンの刺激があった時にそれをいろ常がいい方に移ると、ここにいらっしゃる皆さんのように頭いろ伝えていく反応があったり、細胞の形を変えるような反の良い方ができるわけです。そうすると先ほどの卵で遺伝応があったりしますが、現在判っているいろいろな病気から子診断をしてそんな卵をお母さんのお腹の中に戻せば、ＩＱ

こういうことが明らかになってきました。

の高い子供だって造れる。つまり、今はゲノム研究からＩＱ
遺伝子で子供を選択することも理論的には可能であること

Ⅲ-５

遺伝子の作用が判ってきている。このような時代がきているということで、

例えば、癲癇と不整脈は両方とも細胞膜のイオンを外か

これは非常に厳しい状況です。どうやって、それをちゃんとら中に、また、中から外に出すイオンチャネルに異常がある守っていくか。勝手にこういうことやっていいかという問題と、脳では癲癇、心臓だと不整脈という病気が起こるといが出てきます。

うことが判ってきました。つまり、不整脈と癲癇は同じ種類

そこで、アルツハイマー病にならないためにはどうしたらの病気であり、発現する臓器が違うだけということが判ってよいかと言うと、例えば、ポリフェノール、β ｰカロテンとかきたのです。また、筋肉の形を造るタンパク質があって、いビタミンＢなどを食べていると思いますが、これは活性酸素

ろいろなタンパク質が複合 体を造っていますが、このうちを減らすという役割があって、こうすれば多分長生きできる

どれか１個でも無くなると筋ジストロフィーという病気が出てだろう。その一つの証拠は、活性酸素を減らしたハエを造くるということも判ってきました。筋ジストロフィーは全部でる。つまりスーパーオキシドディスムターゼという酵素を入れ10 種類近くの病気があるのですが、それは全部細胞膜上たハエを造ると、ハエの寿命が３割延びた。これはハエだ

で同じ一つの塊を作っているということが判ってきました。

けでなくてネズミでも寿命が延びる。たった１個の遺伝子をそれでは皆さんの知能を規定する遺伝子はどの反応を規入れただけで寿命が延びるということは、活性酸素が非常定しているかというと、33,000 の遺伝子があるうち、いまに悪者なのだ、だから活性酸素を減らせば良い。活性酸素

遺伝性の精神遅滞、知的障害が起こる遺伝子が全部で 20を減らすのはビタミンＥとかポリフェノールだといってワイン個位判っています。その 20 個の半分は全部一定のタンパクばっかり飲んでいる人もいらっしゃいますが、これではアル質がおかしいということが判ってきた。これはどういうタン

中で死んでしまうわけです。だから、本当にこれが正しいか

パク質かというと、細胞の外からの刺激を細胞の中に伝えどうか判りませんが、寿命というのは、たった１個の遺伝子

る一番最初の働きをしていて、このタンパク質があるといろで動き得るということが、今判ってきました。これは非常に− 112 −

人のこころと遺伝子のはたらき

興味あることで、長寿の遺伝子に結びつく研究になるので活性酵素を減らしたハエ（体が錆びるのを防ぐ）はないかというのが現在の研究の進展具合になります（図 ９）。
Ⅲ-６

120
N
SOD1

100
生
存 80
率
︵ 60
％ 40
︶
20

アルツハイマー病の発症機序一つくらい自分の研究の話をしないといけないと思ってア
ルツハイマーの話を持ってきました。アルツハイマー病の脳の中には老人斑というものが溜まっていて、これは Aβとい0

うタンパク質が溜まっています（図 -10）。アルツハイマー病

10 20 30 40 50 60 70 80 90
生存日数（日）ポリフェノール、βカロテン、ビタミンE・Cの人はなぜこのようなものが溜まるかというと、きれいな化
学反応で溜まってくることが判ってきました。それは A PP0

図-９という遺伝子からできる。脳の中に溜まっているＡ βというタンパク質は大きな A PP というタンパク質の一部分なので老人斑（主成分はAβ）す。これがなぜ溜まるかというと、β セクレターゼという酵
素で左側が切れ、γ セクレターゼという酵素で右側が切れてＡ β ができる（図 -11）。
これを防ぐためにはこの反応を止めてやればいいわけです。皆さんのようにしゃきっとした人の頭の中では何が起こっているかというと、Ａ β が溜まらないで、この真中が切れているのです。普通の人ではこの真中が切れているために老人斑ができない。これは正常では α セクレターゼが働いている。だから α を上げてやって、β を下げてやればい
いわけで、私のやっている研究は、この α セクレターゼと呼ばれているいろいろな種類の酵素（ADAM ９，10，17）、「日経サイエンス」より引用

図 -10

β セクレターゼと呼ばれている BACE １という酵素 ､γ セク
レターゼと呼ばれているこの４種類のタンパク質（プレセニAPP代謝経路

リン、ニカストリン、PE N - ２、A PH - １）の複合体、こういうものを採って来て、それぞれ反応を左側に進めて右側に進めないようにすればいいわけです。
理論的には誰でもできる反応ですが、こんな薬を探すのは非常に難しくて、今、世界中で競争しています。私が今やっているのは α セクレターゼと β セクレターゼで、これらBACE1は細胞の中でくっついている。β セクレターゼとγ セクレタ

sAPPβ

sAPPα

ーゼは細胞の中でニカストリンを介してくっついているということを示して、片方を上げて片方を下げるしくみを探しています。特に左側の反応を促進すれば良いということが判り、プレセニリン・ニカストリン

β セクレターゼを阻害すると、もう一つの α が上がるという

PEN-2・APH-1 複合体

ことを見つけました。今こういう薬を使って、アルツハイマー

Aβ

図 -11

病が治るのではないかという研究をやっているわけです。皆さんも興味があれば一緒に研究させていただけれればあります。ところがベンゾピレンという物質はガンを誘発する物質

がたいと思います。

で、タバコのなかにはこの両方が入っています。タバコを朝起
き抜けに一服吸うと気持ちがよくなるというのは、これは煙はⅣ行動の生物学的要因（人間のこころの働き）

Ⅳ-１

７秒で脳に到達して、ニコチンがアセチルコリンというものの習慣行動と分子機構

代わりにくっつくということが明らかになっています。この話最後に行動の話をいたします。この中にたくさんいらっしゃはこれからお話する行動の話と非常に密接に拘ってきますのるタバコをお飲みになる方の話から入っていきます。タバコがで、ちょっと例として挙げました。皆さんが物事をじっと集中

絶対やめられないのはニコチンという物質が依存に拘っていして勉強している、例えば私のスライドを今ご覧になっている− 113 −とき、アセチルコリンというものが脳から出ていて集中してい細胞膜上での化学反応

るわけです。ところがタバコを吸うと同じようにシャキッとす
るのは、ニコチンが同じ働きをするということが判っています。
では何故止められないかというと、ドーパミンという別の物質が出て、それが快感を感じタバコを吸うと気持ちが良

ON

ニコチン
（ムスカリン）

いな、ということでタバコを止められなくなるわけです。皆さんタバコを吸うとニコチンという物質が受容体にくっついて集中し気持ちが良くなってくるわけですが、これは実はア
セチルコリンという皆さんの脳の中にある物質の代わりにニコチンが働いているわけです（図 -12）。

アセチルコリン
ON

レセプター
（受容体）

そうするとタバコを飲みすぎるとどうなると思いますか。
タバコ飲みの方はこの本当に大事なアセチルコリンが来るのではなくてニコチンだけが脳の中に入ってくるわけです。朝OFFから晩までタバコを吸っているとだんだんアセチルコリンがクラーレ（アトロピン）

図 -12

出なくなると言われています。だからタバコ飲みはタバコを吸わない時はものを考えることができないというのはこれかくということが判ってきました。これは心理的なものだと皆ら判ってくるわけです。それはもう証明されている。このよ

思い込んでいたのに、セロトニンという先ほどの伝達物質にうなことが脳の中で他のことでも起こっているということが拘ってくる脳の問題ではないかということが判ってきて、こ判ってきました。

れは調べる価値があるというわけです。こういうことがもし簡単にご紹介しますと、神経末端、神経終末にはある物

ちゃんと判れば、Body Dysmorphic disorder になり易い

質が溜まっていて、これが出てくる。アセチルコリンの場合人とか、なり難い人もチェックできるということで研究が進もこういう物質が出てくると、それが次の神経にくっついてみ、こんなことが判ってきたわけです。

神経が伝達していくわけです。つまり、このアセチルコリン

選択的セロトニン再吸収阻害薬とはどういうことかというとか、そういう伝達物質は次の細胞の受容体というものにと、神経の末端からセロトニンという物質が出てくるのです

結合いたします。出た神経 伝達物質は出っ放しになると困が、このセロトニンは私たちが安心したりする時、たくさんりますから、トランスポーターという分子で戻っていくこと出ていると考えられます。イライラするとセロトニンが少なくが判っています。これが私たちの脳の中で行われているわなると考えられるのです。このセロトニンがトランポーターでけです。

戻っていくはずなのですが、この戻っていくところをこの薬がブロックするわけです。そうすると何が起こるかと言うと、Ⅳ-２

精神障害と分子機構

出たセロトニンが非常に過剰になる。セロトニンが多くなっ

先ほどちょっとだけご紹介しました、Body Dysmor phicて安心し、この病気が治るのではないかと考えられるように

disorder, BDD と呼ばれている身体醜形障害という病気、なりました。ということは、これになり易い人となり難い人

精神障害があります。これは体の一部、例えば髪の毛とか、がいるとすれば、人によってこのセロトニントランスポーター

皮膚とか、鼻が醜いと思い込む症状で、こういう人はいつの分子に異常があるかも知れないわけです。だからこういうでも鏡を見ます。そして若い女の方に非常に多いということ

遺伝子を調べると、こういう病気になり易いか、なり難いかが判っています。女性は気をつけてくださいね。毎日鏡を見というのが判るという考え方が現在出てまいりました。

ているとこの病気じゃないかと疑われます。もっと問題は、醜いと思うとそれをカモフラージュしようとして何時でも帽子Ⅳ-３を被ったりします。何度も何度も美容整形に行きますが、マ

今、セロトニンのお話をしましたが、また、元に戻ります。

イケルジャクソンみたいに、なかなかそれが治らないという

今度はドーパミンという物質について考えます。ドーパミンとことになる。そういう人はいっぱいいるのですが、これが何いう物質ができないネズミを造ってみました。ドーパミンが故問題かというと、これがひどくなると鬱病とか社会恐 怖でないとネズミはどうなるかというと、なにもしない。じっと症などと一緒になり、ひどい場合は自殺する人もいるというしていて、水も飲まない、ご飯も食べない、友達とも遊ばことです。したがって、なるべく早くこれはどういう症状かない。そのまま 20 日位で死んでしまうというネズミが造らということを知りたいわけです。そうすれば治療法ができる。

れる。つまり、生きる意欲が無いネズミが造られたわけです。

これは実はセロトニン再吸収阻害薬 S S R I という薬が効このネズミにドーパミンを造る薬を投与します。L-Dopa とう− 114 −

生活意欲と分子機構（受容体異常と行動特性）

人のこころと遺伝子のはたらきいう物質を投与しますと L-Dopa が脳の中に入ってドーパミの物質の行き来が非常によく効いていて、その物質の行きンを造っていく。そうすると２時間位でドーパミンがたくさん

来に関係するような遺伝子がおかしいといろいろな病気ができるのですが、そのドーパミンがある時だけ動き始めて、出てくる。また、そういう行動の素因になり得るということ

ご飯を食べたりする。友達と遊んだりする。ところが、ドーが判ってきたわけです。即ち、私が言いたいのは、例えばパミンが無くなると一切何もしなくなる。

ドーパミンの受け取るレセプター、受容体に遺伝子変異があ

つまり人間の意欲というのは、ドーパミンという物質が決れば、意欲や薬物常習の素因である可能性がある。意欲がめているのではないかということが判ってきた。こういう研非常にある人と無い人というのは遺伝子が違う可能性があ究がだんだん進みますと、例えば、皆さんもご存じの覚醒るというわけです。

剤はどこに効いているか、覚醒剤を脳に打つと覚醒剤は今
度はドーパミントランスポーターにくっつくことが判り、トラン

Ⅳ-４

スポーターをブロックしますからドーパミンが出っ放しになっこんな話があります。ここにいらっしゃる皆さんはどちらて元に戻っていかなくなるわけです。そうすると、ドーパミ

かに入ると思いますので見てください。それはドーパミンのンが過剰になるという状況が、幻覚症状、被害妄想という受容体というのが脳の中にあって、グジャグジャしている分症状ではないか、こういうことがだんだん明らかになってま子なのですが、ここにいらっしゃる皆さんは人によって、そいりました。

の途中の繰り返しが２つの人と４つの人と７つの人がいると

注 意欠陥多動 性障 害という病気がありますが、これは探究心と遺伝子いうわけです（図 -13）。

A D H D という病気です。この A D H D にはリタリンという治

これは皆さんから毛髪をもらえばこのように遺伝子診断

療薬が非常に良く効きます。このリタリンは実はドーパミンがすぐできます。２の人と４の人と７の人は線が違うところ

トランスポーターに結合することが判ってきました。というに出てきますから、皆さんから遺伝子を採って調べると、例

ことはどういうことかと言うと、この注意欠陥多動性障害とえば、一番右の人を見てください。Ｋという人を見てください。

いうお子さんはもともとトランスポーターの分子の機能がおこの人は４というところと２というところに線がでていますか

かしいのではないか。そうすると動き回って落ち着きの無いら、この人は２の遺伝子と４の遺伝子を持っているというこ子供になる。落ち着きの無い大人も結構いますが、そういとが判ります。これは皆さん遺伝子を必ずお父さんとお母さう人かもしれません。落ち着きの無い子供さんというのは生んから一個ずつ貰っていますから２個あるわけです。どうい

まれつき何か遺伝子に異常がある可能性がある、こういう考う遺伝子を持っているかが判るわけです（図 -14）。

えが出てきたわけです。あとで申しますが、ドーパミントラ

そうすると、先ほど話した繰り返しが多ければ多いほど、ンスポーターの遺伝子にやはりある特定の型を持っている人

人間の行動でよく遺伝すると言われている新奇探求行動にが、この A D H D が多いということが判ってきて、それらが効いているということが判ってきました。皆さんはどちらか

私たちの行動の素因になっている可能性があるということが見てみてください。新しい強烈な経験を望む性格がノベルテ

最近の研究で明らかになりました。

ィシーキングが高いと言います。これは強烈なセンセーショ

クロロクロマジンという薬は分裂病の治療薬なのですが、ンが得られるのだったら少し位のリスクは厭わなくて、一般

この分裂病の治療薬もドーパミンの受容体に結合すること

的に衝動的で、気まぐれであり、短気で、浪費家であって、が明らかになってきました。即ち、私たちの行動に脳の中ドライブが好きで、バンジージャンプが大好きだ、ジェットコ

ポジティブ
コントロール

ドーパミン受容体 D4

サンプル

細胞外ループ

H 2N

1419

膜貫通領域

細胞内ループ

α
α

β

η

α

ζ

β

θ
ε

517
396

COOH

ζ
β

D4.2
D4.4
ε

ζ

214

D4.7
リピート数

繰り返し配列

図 -13

図 -14

− 115 −

ースターが好きで、研究をやる時も必ず新しいＤＮＡチップにして測定していますが、こういうことでひょっとして人間のなどを取り入れて研究をやっている、知らないエキゾチック

性格と遺伝との関係があるのではないか。私は細胞にこのな場所へ旅行するのが好きで、新しいレコードが出ると直ぐ繰り返しをもつタンパク質を造らせて、タンパク質の機能が買うようなタイプの人。こういうタイプと、安寧を求めて非常どう違うかということを調べて、確かに機能の違いがあるこに堅実な性格で、研究でも一切危険を冒すのは嫌いで、ことが、今判っています。このように遺伝子というのは、これの道一筋という方がいて、一般的に非常に気長で、質素でで性格が 100％決まるわけではなくて素因になるわけです。

あり、古い友人と付き合って、環境の変化を好まず、電車

これに関連して不登校のお子さんを調べた例があります。

に乗るときも同じドアから乗るといったタイプの人間です。

今のドーパミン受容体の遺伝子も調べたり、不登校ですかイスラエルとアメリカからこの特性が遺伝する、その遺伝

ら朝起きられないということで、この会場にも専門の先生

子が先ほどの遺伝子であるという発表があった。これは面がいらっしゃいますが、生体リズムの遺伝子等をいろいろ

白い、もし行動にこういう遺伝的な要因が効いているので調べてみて、不登校とそうでないのと差があるかどうか調べあれば非常に面白いわけです。例えば、私の大 学の学生

る。こういう研究は結構日本でたくさん行われているわけで100 何人かを調べますと、例えば新奇探究というのは非常すが、この不登校とか自閉症とか多動障害などの問題のあに探究心があり、その辺に虫がいると必ず触ってみるというるお子さんの遺伝子を調べて、差があるかどうかを今見てタイプの人と、踏みつけてしまうタイプの人がいるわけです。

いるところですが、今のところあまり差が無い。こういうのは、

この探究心がある人、もう一つは切れやすい人というのが点

例えば性格に関係する遺伝子 20 個位をいっぺんに調べな

数で出てきます。

いとどうも判らないのではないかというのが現状です。

右から２列目が平均点で、例えば損害回避というのは神経質の指標です。将来の不安があるとか、そういう神経質

Ⅳ-５

オカルトと科学の境目の指標も点数で出てきます。右側に書いてある８、８という

このようにして遺伝子を調べると、私たちの素因とか、そのはこれは実は私の点数で、私は全く将来の不安を感じな

ういうのが判る。面白い発表が『NATURE』という雑誌にい楽天的な人間であるということが直ぐ判ります。一番下のされました。皆さんご存じかもしれませんが、これは脳で固執と書いてあるのはねちっこさを示す指標で、うちの研す。癲癇の人の脳で、この脳の矢印のところに針を突っ込

究室の女性で、私が怒ると一時間でもじっと自分の意見をんで、刺激をした。その時、角回という部分を電気刺激す

通すまでそこに座っている学生がいますが、その女性はこると、この人は非常に面白いことを言うようになったのですの試験をすると８点位を採ります。それで、多分確かだろう（図 -15）。それは『私の心が私を抜け出て、天井から私をと思っているのですが……（表 - ２）。

覗き込んでいる』というようなことを言いはじめたわけです。

このテストで新奇探求性が先ほどのドーパミン受容体の遺これはどういうことかと言うと、ご存じの臨死体験と呼ばれ伝子に関係あるというのが結果です。例数は少ないのですていて、死にそうな人でよく行われることで、自分が死の淵が、例えば男性の新奇探求性の値、先ほど言った衝動性とに入った人は、お医者さんが自分の息を吹き返そうしているか、新奇探求とか、全部で４つ項目があって、それを足しのを遠くから見ている、などいうことを昔からよく言ってい算した値がここに出ています。例えば先ほどドーパミン受容たわけです。

体の遺伝子が２と４の人、繰り返しが４と４の人が日本人に

科学者は ｢ そんな馬鹿ことを ｣ と皆思っていたわけです。

非常に多いのですが、それでも少し差が出た。このように

ところが、この脳のここを刺激するだけで同じようなことが遺伝子によって素因の差が出てくるわけです（表 - ３）。
この場合はドーパミントランスポーターの遺伝子型を一定

表 -3

表-２

新奇探求性と衝動性との関係

大学生115人の性格

DRD4 の新奇探求性*
遺伝子型(n)

私
新奇性探求

損害回避

固 執

探究心

6.53 + 2.40

8

衝動性4.24 + 2.20

8

将来の不安

5.61 + 2.540

不確実性への恐れ 5.96 + 2.00

7

3.80 + 2.00

4

全サンプル
男

性

女

性

2/4 (15)
4/4 (77)
2/4 ( 8)4/4 (35)
2/4 ( 7)
4/4 (42)19.07 (4.53)
20.90 (6.11)
17.88 (3.14)
21.11 (6.01)
20.43 (5.68)
20.71 (6.26)

DAT1の遺伝子型を10/10に固定した時− 116 −

衝動性*3.40 (1.99)
4.36 (2.25)
2.63 (1.77)
4.74 (2.37)
4.29 (1.98)
4.05 (2.12)

人のこころと遺伝子のはたらき←後あるということが明らかになってきたわけです。そうだとした

前→

こ
こ
を
電
気
刺
激
す
る
と
�
（

2002 Sep.19）

ら、脳の研究というのは、もう少し深いところまでいくかもしれない。だから私の言いたいことは、例えば、マインドコ

臨
死
体
験
︵
霊
魂
遊
離
︶
が
再
現

ントロールなども、ひょっとして判るかもしれない。今、オウム真理教とか宗教に一途になる人がいっぱい世の中にいらっしゃいますが、そういうことも、ひょっとして脳の研究で判るかもしれないというのが私の印象です。攻撃性、暴力などは、ある遺伝子を潰すだけでネズミは暴力的になるわ
けですが、そういう全体像が今判ってきているところです。

Ⅴ

図 -15

結

語

心の研究というのは、私たちが思っている以上に面白い
ところに入ってきて、遺伝子を調べることで、病気ではなく起こる。もし、これが本当だったら、再現性があって誰でもてそういう素因がある、そういう病気になり易い人とか、そこういうことが起こるのだったら、臨死という今まで科学のういうことがこれから判るのではないかと思い、私もこうい範疇に無かったようなことが、これは単に脳の問題であり、う研究をやっていこうと思っております。皆様の中で興味の脳のこの辺に異常がある人がそういうことを起こす可能性がある方がいらっしゃいましたら、是非一緒にやっていきたいと思います。ご清聴ありがとうございました。

− 117 −

コスメトロジー研究雑感

平成 12 年度

研究助成

コスメトロジーとナノ微粒子
小野努

コスメトロジーというのは単なる化粧品の域に留まらが穏和であるため生体分子の包括に適しており、また微粒ず、医学的な分野まで広がりをもつ奥の深い学問だと本子表面の化学的加工が容易であることやシリカが生体不活研究助成を受けて改めて感じました。実際に、私の回りに性という性質から生体内研究を行ううえでは適した材料のも乾燥肌やアトピー性皮膚炎に悩む女性がいることを考えひとつでありましょう。この包括担体を生分解性高分子なると、コスメトロジーがクオリティーオブライフ（QOL）

どの材料へと応用できれば、より体に優しい機能性化粧品の向上に果たす役割は非常に大きいと実感しているところとなると期待されます。

です。また、私が行ってきたナノ微粒子中への生体分子のまた最近では、肌の保湿成分でもあるセラミドなどのス包括に関する研究がこのような学問にどのように貢献でき

フィンゴ脂質に関する研究も始めており、細胞機能に深くるか考える良い機会も得たと思います。

関与していると言われるスフィンゴ脂質代謝を制御できる

約 50 ナノメートル以下のサイズの薬物伝達媒体があれドラッグとその伝達手法に関する研究にも興味を持っていば、角質細胞間隙から効果的に皮膚へ浸透することが可能ます。ナノ微粒子中へ酵素や遺伝子を包括し、その包括担と言われており、バリア層として存在する角質層を透過し体をドラッグキャリアとして皮膚からの有効な治療法が提て皮膚中の生きた細胞層に効率よく働きかけることができ

案できればと期待しています。

ます。それゆえ、生体成分などを包括したナノ微粒子を用

近い将来、コスメトロジー精神をもった新製品が社会へいることによって高い皮膚浸透性をもつ化粧品あるいはド浸透することを願っていますし、私の研究も微力ながら本ラッグデリバリーシステムが構築できると期待されます。

学問の発展に貢献できれば幸いです。
（九州大学大学院工学研究院）

現在行っているナノシリカ微粒子の場合、微粒子作製条件

平成 12 年度

研究助成

化粧品雑感
師井

義清

化粧の意味付けは、歴史的にも、性別によっても、個人

結果は次の三つに要約できる。身だしなみ、外出着、元気によっても夫々異なっている。斯くして、斯も多様な化粧づけである。始めの二つは見た目と関係する。見た目が大の定義は極めて困難である。しかし、今日の意味付けは、切だとすれば、中身はさておいて外見を競うことに意味が個人的な価値観に頼らざるを得ないように思える。「健康出てくる。人間には視覚、嗅覚、触覚、聴覚、味覚の五感な笑顔は化粧に勝り、実に美しい」と思うのも個人的な価がある。他人に良い印象を与える、即ち見た目を良くする

値観に過ぎない。化粧の意味付けは、化粧品を製造・販売にはできるだけ多くの五感に訴えるほど効果的である。香している企業では誰もが受け入れてくれる一般的な内容に

水も化粧品に入るとすれば、化粧は最初の二つの感覚で好なっている筈である。それを否定する積もりはさらさらな印象を与えるのに有効である。握手をし、会話を交わし、

いが、通り一遍の意味付けが出来ないのが化粧ではあるま

食事のもてなしまで進めば、他人も他人では無くなってくいか。例えば、動物に関しては、鳥類では雄が外見上姿・る。そこまで進むための入口にあるのが化粧であると見る

軆共に優れて見えるが、昆虫類では雌が優れて見えるのがことも出来る。平成 14 年の秋、パリでフランスの女性研

一般的である。これには、生物学上それなりの理由がある究者と会話する機会があった。その際、仄かに匂う香水の筈である。個人によっても、外見の判断基準はまちまちで効能を実感できた。化粧品も、最初の二感だけに留まらず、ある。

出来るだけ五感に訴える方向で研究開発は出来ないもの

本来無粋な我が身にとって、化粧は想像の域を出ない。

か？脳を刺激して面白い話題が提供できるよう記憶を甦らされば、「化粧は女性にとって何であるか」を問うてみた。

せ、相手を空腹にして食事に誘えるような物質を化粧水中− 121 −

に入れておくとか、出来ないものか。否、これは刑法に触なければならない」のが、化粧品であろう。勿論、使用者れるかもしれない。
「他人の視覚と臭覚だけに訴えて、自の健康を害することが有ってはならない。何だか、つまら分と他人をどれだけ化かすことが出来るか否かで、勝負しない結論になってしまった。
（九州大学大学院理学研究院）

平成 12 年度

研究助成

コスメトロジー雑感
山田英俊

背が低い，胴の割に足が短い，顔が長いので５頭身であどうにもならない事はさて置いて，どうにかなる事に関る……悩み多きティーンだった頃の私のコンプレックスでしては見栄えのために努力の仕様がある．その努力発現のある．親からもらった健康な体である．見栄えがしないこ

一形態がコスメトロジーではないかと受け取っている．コとを不満に思うと罰が当たること，骨格の問題だからどう

ンプレックスを克服し精神的安定性を保ったり，生きる力

しようも無いことを承知の上でのコンプレックスである．

を与えることさえあるという．気から来る病を未然に防ぐ今となってはもう全く気にならない．いつから，なぜ気に人類に備わった上等な智恵だと思う．価値観の多様化で，ならなくなったのかさえ覚えていない．オジサン化現象のその努力のベクトルが気になることもあるが，個人的には一形態である精神的鈍感化が起こっているのだろうか．

努力は素直に評価しよう，どうしようも無いことは大目に不便が無いわけではない．結婚式では身長のバランスを取るために無理矢理履かされた踵ばかり高い靴のために足見ようと思っている．これは，そうして欲しいという希望の裏返しであるのかも知れない．

がつってしまったり，珍しく座ったグリーン席のフットレ

根本から変えてしまおうとする gene cosmetology など

ストに足が届かず残念な想いをしたことがある．しかしそという言葉が巷にあふれ出す時代の到来を恐れながらも，の程度である．一方，飛行機のエコノミー席が苦にならな

一介の科学に携わる者として，「どうにかなること」を増

い，私が車を運転すると後席の人がリラックスできるメリ

やす一旦を担えれば幸である． （関西学院大学理工学部）

ットもある．

平成 13 年度

研究助成

コスメトロジーにおける化学物質と生体との相互作用清水邦義

私は、ひょんなとこから、化粧品原料の探索研究に足をる。一般的に、化粧品を含む薬理活性物質を議論する際に、突っ込んだ。いくつか有望そうな素材を見出すことはでき

選択的な一つの都合の良い活性のみに目を向けがちである

たが、実用化への道は、極めて険しい。皮膚の構造の複雑が、それは、危険なことである。安全性試験をクリアし、さと、その調和の美しさに圧倒されながらも、本来持つそ認可されていたとしても、化学物質は、本質的に多機能性の皮膚の持つ機能の長所を失うことなく、目的の作用だけであることを認識して、その潜在的リスクから目をそらさを有する物質を見出すのは、なんと難しいことだろうか？

ないようにせねばならない。

近年、化学物質のリスク評価が盛んに叫ばれている。化粧先日、美白剤原料として使われていたコウジ酸の発がん性品を含む機能性を有する化学物質というのは、別の言葉でが報道されていた。当化合物の美白化粧品として用いた場表現すると、体に何らかの影響を与えるものである。それ合のリスクがどの程度あるかは、筆者は不明であるが、皮を、いかに制御して、人体に良い機能だけを抽出するか。

膚外用剤として用いた場合のリスク評価が極めて難しいこ

本来、皮膚は、角質、表皮及び真皮と呼ばれる組織で、完とを物語っているのだろう。科学が進歩したとはいえ、化

全なハーモニーを奏でており、多機能性である。一方、天学物質と生体分子との、分子レベルの相互作用については、

然抽出物を含む一連の化学物質は、本質的に多機能性であ不明な点が極めて多い。いわんや、複雑な組織で構成され− 122 −

コスメトロジー研究雑感ている皮膚全体への作用については、予測困難である。今安全で、皮膚と調和し、ハーモニーを形成するような化粧後、皮膚組織の分子レベルでの挙動及び化学物質の相互作

品、科学の粋を結集してなしとげたいものである。

用を明らかにするサイエンスの必要性を強く感じる。真に（九州大学大学院農学研究院）

平成 13 年度

研究助成

コスメトロジーと食品化学の融合
受田浩之

日常我々が口にしている食品には生命活動を営むための今回，貴財団にご採択頂いたテーマはこのような考えに栄養成分が含まれている．さらに最近では，食品が単にエ基づき，本来経口で摂取されていた食素材をガス状にしてネルギーとして役に立つだけでなく，病気の予防にも有効

呼吸器，あるいは経皮で吸収させ，病気を予防しようといであることが明らかにされ，｢ 特定保健用食品 ｣ の誕生へ

うコンセプトである．経口で摂取させる場合と比べて鼻や結びついたことはご承知の通りである．

皮膚からであれば特に食事時間を設ける必要も無く，有効

通常，経口摂取された栄養成分は腸管から吸収されるこな成分を常時環境中に維持しておける．問題は揮発性成分とで体の隅々まで運ばれていく．吸収された成分は，体内の中に，病気予防に役立つ成分が存在しているかどうかでに存在している様々な物質と混ぜ合わされ，それらが特にある．今回，我々は爽やかな香りとして知られるカンキツ

生合成されたものであるか，食品に由来するものか，薬との精油成分に活性酸素を消去する作用やチロシナーゼ活性して摂取されたものかは区別できなくなる．もちろん肺やを阻害する働きがあることを明らかにした．この結果は将

皮膚から吸収された物質も存在しているので複雑である．

来，香りによる美白効果や，皮膚の老化予防が可能になる

食品化学に携わっている研究者は，主に経口摂取を唯一のことを示唆しており，化粧品に含まれる香りが感覚的な役

吸収経路として研究を行っている．しかしながら吸収され割に加え，もっと高次な病気予防機能まで担えることを予た後の食品成分の運命を考えると，有用な食品成分の摂取感させる．

経路を経口のみに限定して考えるのはもったいないように

食品化学とコスメトロジーの融合で新しい機能を持った

思えてきた．たとえば食品として有効な成分を呼吸器や皮化粧品を誕生させることを期待しつつ今後もこの研究を発膚から吸収させて，健康の維持・増進に役立たせることは展させていきたい．

（高知大学大学農学部）

できないだろうか．

平成 13 年度

研究助成

コスメトロジー雑感
中野

辞書を開くとコスメトロジー ＝ 美容とある。化粧気のない妻と、当分化粧をしない娘（１歳）を持つ私には、こ実う。これは、
コスメトロジーについても言えるのでは（少々強引な話の展開か）。

のテの話は苦手であるが、研究助成いただいたことに感謝しつつ、少々述べさせていただく。

今の化粧品には、保湿性とか、肌本来の力を呼び起こす、などの色々な機能性が重視されるようになった。また、化

私もついこの間まで若者であったはずなのだが、今の学

粧は、そのひとの心を映したり、隠したり、変えたりする生たちを見ているとギャップを感じてしまうようになっパワーを持つことも理解されている。つまり、化粧の役割た。茶髪がフツーであり、みんな携帯を手放せなくなった。

ははただ単に表面上の美を追究するだけのものではなくな

私が大学院に進学した頃は、ポケベルを持っている人もまり、体と心の内面から美しさを引き出す手段になったのでばらであったのに。この 10 年で世の中は大きく変わり、ある。また一方で、ガングロのように誰が見ても美しいと

それとともに人々の考え方も変わってきているように思は思えないものでも、「＝ 女子高生」といった、一つのス− 123 −

テータスを形成する手段として用いられたりもする。また、質を追究する研究であると言うのは言い過ぎであろうか。

この例は化粧がその時代、世相を色濃く反映するものであ

さて、10 数年後はどんな時代で、ガングロを越えるどんることを表している。

な化粧が流行っているのかと考えると、娘を持つ親としてこれらを踏まえれば、コスメトロジー研究とは、常に時少し心配になるが…。

（京都大学大学院薬学系研究科）

代の最先端で社会のニーズに応え、人間の生命と精神の本

平成 13 年度

研究助成

コスメトロジーとインターネット検索
中辻洋司

コスメトロジーという名前はかなり専門的で一般には余メトロジー研究振興財団のホームページ」とある。その他

り普及していないようだ。というのは、この小文を書くにのものも大半は当財団に関係しており、研究者が業績欄に当たって研究室の学生（大学院工学研究科院生）５、６人

当財団の援助を受けたことを記した HP も多数見受けられに聞いてみたところ、残念ながら誰一人としてコスメトロる。なるほど、コスメトロジーといえばコスメトロジー研

ジーを耳にしたことがないという返事であった。もちろん、

究振興財団が代表しているのだなと妙に納得してしまう。

コスメチックであれば化粧品ということは彼らはすぐわか

確かにわずかではあるが、おなじみの化粧品会社の HP もったのだが、それからコスメトロジーは連想できなかった

あってコスメトロジーの解説をしているが、これらは例外ようだ。恥ずかしながら小生もコスメトロジー研究振興財的な存在で、どうやら我が国ではコスメトロジーはこの財団の存在によってその言葉とその意味するところを知った団のためにあるような言葉らしい。何でも外来語がそのまのが最初である。

ま入って定着する我が国のことでもあり、また、化粧品とところで最近、わからないことや困ったことがあるというすべての人が使うものを対象としている学問なので、インターネットでとりあえず検索してみる習慣がついて

大手化粧品の CM にでも使ってもらえば、コスメトロジー

いる。そこで、ヤフーのホームページを立ち上げ、検索のという名前もすぐに定着するかも知れない。それがどうしところで「コスメトロジー」と入力してみた。すると 130たといわれれば言葉もないが、小生が貴財団から援助を受件のページの一致があり、結構あるものだなと最初は思っけたことにより、少なくとも小生の周りの学生だけはコスた。しかしながら、内容を一つずつ見てみると、実はそう

メトロジーとは何かを知ったことだけは確かである。

ではないことがわかってきた。まず、その先頭には「コス（大阪大学大学院工学研究科）

平成 12 年度

研究助成

コスメトロジーと分析化学
小谷

この度、貴研究振興財団の研究助成をいただき、心から御礼申し上げます。

明

人のお肌に適した化粧品を提案するコーナーがあることを思い出しました。分析化学者の性といいましょうか、何を私の所属する研究室は総合テーマとして「高性能分析法

測定し、どのような結果をだして判断するかということに、の開発とその生体機能解明への応用」を掲げる、いわゆるとても興味を持ちました。しかし、売り場のお客様、店員

分析化学の研究室です。誰でも簡単に、短時間に、少ないはほとんど女性のため、こういうチェックを男性がしても試料で測定できる方法を開発するのが主な研究です。

らうのはいささか抵抗がありました。そこで、私の妻と義今回、貴財団から本研究が選ばれたことをきっかけに、妹に頼んで、付き添いというかたちで、化粧品売り場に行

皮膚の状態の評価法について考えるうちに、デパートの化ってみました。二人がチェックを受けているのを隣で観察粧品売り場で、センサーのようなものを使って、お客様個していましたが、その時は、マイクロスコープで皮膚表面− 124 −

コスメトロジー研究雑感を拡大し、肌のきめ細かさや皮膚の厚さを観察したり、皮ることがわかりました。同じ血のつながった姉妹でも、肌膚の油分と水分をセンサーで測定して、それらの結果から質がこうも違うのは驚きでした。

皮膚の状態を 4 つのパターンに分類し、判定するものでし最近、オーダーメードの化粧品に注目が寄せられているこた。きめ細かい肌の状態、皮膚の油分と水分の理想的な割とから、個人の肌質を評価することは重要であり、評価項

合など、とても勉強になりました。妻達より、私のほうが目が増えても、それらを簡単に測定できる方法が必要にな

いろいろ聞いていたので、店員さんもさぞ不思議に思った

ると考えられます。本研究で構築した H PL C は遊離脂肪かもしれません。二人とも皮膚の油分、水分ともにいい状

酸組成の個人差などを簡単に評価できる方法として活用で態であり、特に、妻は皮膚の水分が平均より 10 倍も多い

きると思います。今後開発する新たな分析方法も皮膚の評という結果が得られました。妻の皮膚の厚さは普通でした

価に応用できればと考えています。
（東京薬科大学薬学部）

が、義妹の方は皮膚が薄いのでとてもデリケートな肌であ平成 12 年度

研究助成

ヒトの皮膚の奥深さと厚さ
谷

コスメトロジーの研究助成金をいただき感謝し、お礼を申し上げます。

覺程度に生えているので、むき出しの肌という訳ではないのかも知れない。しかし、象の皮膚が日焼けして黒くなった

同時に、この研究を通してヒトの皮膚に関して色々なこなどとはあまり聞いたことがない。

とを考えるきっかけになった。先ず、人の皮膚の多様性とこのような皮膚の多様性は類人猿から始まったのかも知

特異性である。肌の色に関して、ヒトほど多様性に富む動れない。このように考えると、ヒトの肌は、元来服を着る物が、他にいるのだろうか？我々が研究する実験動物ではように何かでカバーするのが当然だとも考えられる。地球

モルモットのように有色有毛の動物もいるが、ほとんどは環境に対応するために、日差しの強いアラブの女性がベーアルビノ化したラットで、元々は黒毛である。このような

ルで覆うのも、熱帯アジアやアフリカで色の付いた泥や植有毛の動物には皮膚にメラニン細胞があるのかどうか、筆物の粉末を塗るのも根本は同じであろう。地球温暖化によ者には分からない。ヒトの場合、肌の色は白（？）、ブラる急激な地球環境の変化に対応し、従来何万年もかけて適

ウン、赤色、黄色、黒等があり、色調に差はあるが、メラ応してきた肌を守るために、何かで肌を覆うのが人類がこ

ニン細胞があるといわれている。一方、写真で見るとゴリの地球で生き延びていくための手段であろう。その覆うもラは黒い肌で、ニホンザルは黄色く、チンパンジーはそののとは正に機能性化粧品であろう。折角、化粧品を使うの中間のように見える。中国にいる、孫悟空のモデルのキンであれば、より美しく、より肌に為になれば、それに越しシコウ（金絲猴）は、さしずめ白人といったところか。次たことはない。
「化粧品は人類を救う」かも知れない。

に、毛の生えていないむき出しの皮膚を持った哺乳動物はひるがえって、他人のそしりを面の皮の厚さでカバーすどの位いるのだろうか？ブタ、ゾウ、サイ、カバ、クジラるようになった小生は、進化の最先端をいっているのかも……。思い出すのもなかなか難しい。ヒトでも毛が申し訳知れない。

（城西大学薬学部）

平成 12 年度

研究助成

コスメトロジーと klotho 遺伝子
倉林正彦

皮膚の老化防止はコスメトロジーの最も重要な課題の一トの老化に類似した徴候がマウスに現れる」のであるが、つである。私たちが発見した klotho マウスは、非常にユ

マウスは１〜２年という寿命を全うして死亡する間際にな

ニークな老化モデル動物として位置づけられている。「ヒってもそのような老化徴候は示さないので「マウスの老化」− 125 −

とは異なり、話はややこしい。つまり、「ヒトの老化をマの老化徴候の現れやすさにも個人差があるだろう。加齢、ウスでみる」ということになる。遺伝子工学を用いた最新

日焼けなどさまざまなストレスよる皮膚のダメージをどのの研究ツールではあるが、この辺りを間違えてはならない

くらい消去できるか、どのくらい健康な皮膚に修復できるということである。

のか、といった能力が klotho 遺伝子の働きの個人差に依さて、この klotho 遺伝子は最初マウスで発見された存している可能性もある。

が、私たちヒトにも存在することが明らかになっている。

皮膚の老化の出現を少しでも遅らせ、可能であれば若々klotho 遺伝子の働きを完全に欠損する（ホモ欠損）マウス

しい皮膚を取り戻すこと、これによって美しく豊かな人間には、寿命の短縮（約８週間）、動脈硬化、異所性石灰化、生活を実現することがコスメトロジーの目標である。老骨粗鬆症、肺気腫、などがみられる。そして皮膚真皮層の化モデルマウス「klotho」を研究することは、「不老不死」

菲薄化、皮下脂肪層の消失、脱毛などのヒトの皮膚老化にを実現することを目標とするものではない。
「klotho 遺伝

類似した所見がみられるのが興味深い。私たちの身体では、子を皮膚に導入する」などといえばおよそ情緒を欠くかも

顔や背格好に個人差があるのと同様に、さまざまな遺伝子しれないが、将来「klotho 蛋白」や「klotho 遺伝子の働きの働き（発現）の個人差も存在する。klotho 遺伝子の働きを助ける成分」を配合した化粧品が実現し、世の女性が幸の個人差（遺伝子多型など）が存在するとすれば、これら福になるとしたら素晴らしい。

（群馬大学医学部）

平成 13 年度

研究助成

さと美しき人の郷とコスメトロジー
杉山俊博

秋田県の観光パンフレットを開きますと、“「美」の冠の特に秋田のお酒は大変美味しいことで有名です。日本酒

ついた秋田がいくつあるか、ご存知ですか。代表的なものはもともと、老化の三大原因と呼ばれる紫外線、活性酸素、は秋田美人、秋田美酒、日本三大美林秋田杉、美味しい秋

乾燥を防ぐ効果があるといわれています。これに加えて美田米……。秋田美人について例えると、それは容姿の美貌

白や育毛の効果までも持ち合わせています。最近話題のコ

よりも、きめ細かな色白肌への称賛。酒、杉、米もきめ細

ウジ酸 kojic acid（5-hydroxy-2-hydroxymethyl-4-pyrone）

かい滑らかさが決め手といわれます。”と書かれています。

は、日常的に麹（酒粕など）を扱う人の手が白くなること

そこで「秋田の美」についてふれたいと思います。

から発見されました。抗菌作用や酸化作用、シミやソバカ

秋田県は小野小町の時代から美人の里とされています。

スの原因となるメラニン色素形成の抑制作用があることや、

秋田美人には、色白できめ細かい健康な肌、豊かな髪とい保湿効果もあることから、今日ではバイオ技術によって作りった伝統的なイメージがあります。肌色の白さについては、出されたコウジ酸はいろいろな美白化粧品に応用されてい冬場の日照時間の少ないこと、ヨーロッパやアジアとの混ます。また、コウジ酸を含む養毛剤、育毛剤には、老化し血などが理由としてあげられています。秋田美人研究で知て発毛力が衰えた頭皮や毛根に働きかけ、育毛を助ける効られている湯沢市の医師、杉本元祐さんの調査（高校生

果が確認されています。このような秋田美酒の美容効果が、

4000 人）によると、秋田県人の肌の白色比率は平均 29.6％、色白で髪のゆたかな秋田美人を育てているのでしょう。

全国平均の 22.0％を大きく上回っていたそうです。

私たちの研究室は、秋田産の麹菌・納豆菌や白神山地の食べ物との関連では、秋田では麹を使用した自家製の味

放線菌から産生される生理活性物質に注目して、これをコ

噌や漬け物などを多く摂ります。麹には脂質と蛋白質から

スメトロジー分野へ展開しようと考えています。

なる複合蛋白質が多く含まれていて、肌を滑らかにする効（注）

果があるといわれています。

最近、コウジ酸に発癌性の疑いが指摘され、その使用が見合わされています。

− 126 −

（秋田大学医学部）

コスメトロジー研究雑感

平成 13 年度

研究助成

細胞内制御因子とコスメトロジー
永沼章

皮膚がん発症率が増加しているが、その原因のひとつが紫外線から効率良く皮膚を守ることが可能になると思われ

紫外線である。我が国では紫外線から皮膚を守るためのサる。このような効果を皮膚細胞に与える化合物や方法を見

ンケア商品が数多く販売されており、これらの使用が皮膚出したり確立したりすることは容易ではないが、理論的にがんの発症率をいくらかでも低下させているものと予想さその有効性は大いに期待できる。我々もこのような考えかれる。皮膚を紫外線から守る方法は沢山あると思われる

ら、抗酸化作用を有する誘導性蛋白質であるメタロチオネ

が、皮膚細胞が本来有する防御機構を亢進させるのも有功

インを対象としてその合成誘導剤の検索を行ってきた。残な方法ではないだろうか。ビタミンＥなどの抗酸化因子が念ながら、未だ実用可能な化合物の発見には至っていない

紫外線の細胞障害性を軽減することが知られているが、細が、ヒノキチオールをはじめその候補となり得る化合物を胞内には酸化ストレスに対する防御因子としてグルタチオ

いくつか見出している。このような新しい理論に基づいた

ン、チオレドキシンなどの還元作用を有する物質やカタラ

新しいコスメトロジーの展開が、これまでにない画期的なーゼ、スーパーオキシドディスムターゼ、グルタチオンペ効果を生みだして皮膚がんの予防などに貢献するのではな

ルオキシダーゼ、メタロチオネインなどフリーラジカルをいだろうか。コスメトロジーがこれまで以上に発展して、付加除去する蛋白質群が存在するので、これら防御因子の細胞

価値のある新しい化粧品が開発されることを願っている。

内濃度を上昇させたり、活性を高めたりすることによって（東北大学大学院薬学研究科）

平成 13 年度

研究助成

コスメトロジー観と本研究の位置付け
武田和久

コスメトロジーとは人が美しく心地よく生活するあり方る。したがって正常な肌の生理機能やその破綻の原因を理だと思う。しかしこんな表現は曖昧なもので、個人のコス

解することはコスメトロジーにとって重要である。様々な

メトロジー観は一見多様である。肌を美しくしたい、脱毛

化粧法にとってもその知識は不可欠である。

を防ぎたい、老いてもなお美しくあり続けたいなど、強い

最近は芸能界ばかりでなくスポーツ界でも金髪にする人て言えば身体的に理想の状態を願う人たち。黒髪を金髪にたちを頻繁に目にするようになった。当初はそれに批判的したり、ピアスなどの身体の修飾に一所懸命な人たち。一な意見を耳にしたが、今はあまり聞かない。批判の的とな方、精神的に『内なる美しさ』を追求する人たち。さらにった本人たちが本来のスポーツにおいて私達を感動させてこの頃は、コスメトロジー観に男性、女性の違いが薄れてくれるからに他ならない。彼等は日々身体的能力の機能保来た。いやむしろ、女性に近くなったと言うべきか。

持に努力していることだろう。心地よく生きる術として、

こんな多様な要求の中に普遍的な研究課題を見い出すとすれば、何か。精神的にもむろん同様なのだが、身体的に化粧が仕事やその他様々な面でいい影響が期待できるならば好ましいことである。

如何に健康であり続けるかは重要な問題の一つである。医本研究における Wnt という分泌性蛋白はメラニン合成

学的に私達の肌（皮膚組織）は、ウイルス、細菌、紫外線の調節（色素形成）や毛髪の成長に関与する重要な因子となどの様々なストレスから私達を守っている。あまりにも考えられ、肌の生理機能の基本的理解に必須である。さら当然すぎて意識されることはほとんど無いが、色素沈着やに将来 Wnt に関連して物質的発見、発明がコスメトロジ

肌荒れなどコスメトロジーに関わる身体的な問題は、私達ー分野にもたらされる可能性を願いたい。

の肌の正常な生理機能による応答およびその破綻に起因す− 127 −

（東北大学大学院医学系研究科）

平成 13 年度

研究助成

水チャネルと人のコミュニケーション
石橋

賢一

皮膚における水チャネルの研究は始まったばかりであールされていると考えられる。自然に二重まぶたになるる。これまで細胞外物質による研究が主体であったが、のもこの微妙なバランスの上に成り立っているように思え

AQP3 ノックアウトマウスの知見から細胞膜の輸送体とくる。アイシャドウの例をみてもまぶたは表情のなかでも重に水チャネルの役割も重要であることが明らかになり、皮要なポイントであり、もっと研究されてもよいと思う。も膚の保湿性の研究の方向に変化がおきると考えられる。プ

う一つは声帯の AQP3 である。いろいろな声をだすときローブとして調べやすいので、それぞれの局所の皮膚でのには非常な高速で振動しているが、水を失わないように水AQP3 の発現状況をしらべるとおもしろい結果がえられそのバランスが厳密にコントロールされていると思われる。

うな気がする。例えば有毛のところと無毛のところの差、その動物の出す声に応じた AQP3 の発現があるような気

手のひらと手の甲の差、腹部と背部の差など。

がする。アルコールを飲んだり、お風呂で歌うといい声でさらに AQP3 に関しては次の二ケ所での発現が興味深歌えるのも声帯の水の含有量と関係しているような気がす

いと思われる。またこれは人のコミュニケーションともかる。従ってここにも AQP3 の関与が考えられる。生まれかわるので重要である。１つはまぶたである。ここは浮腫つき声の良い人はひょっとして声帯の AQP3 の発現が多になると目があけられなくなるのでこまるであろうし、十いのではないだろうか。

（自治医科大学薬理学教室）

分な弾力性も要求されるので水の出入りが厳しくコントロ

平成 13 年度

研究助成

コスメトロジー研究に選ばれて思うこと粕谷

コスメトロジー研究振興財団からの研究助成は、現実的

善俊

考える機会が持てたことも貴重な経験となった。

には研究テーマの推進に、また、精神的には助成対象課題「安全性」は化粧品を含めた生体への適用物質に課せらに選ばれたという自負が研究遂行上の motivation に多大なれたハードルである。特に化粧品に関しては、消費者の商プラス効果をもたらしてくれた。

品別危害情報件数で常にトップにランクされ、その利用者

これまで皮膚に関連するテーマを対象にしたことはなく、数および使用頻度の点から高いハードルを突きつけられて興味対象の細胞内分子がたまたま接触皮膚炎と関連するこいると感じる。美の追究と安全性の両立が化粧品の理想的とを見いだして、「生体作用、安全性に関する分野」で選んな方向性と思われ、また、本研究助成はその観点に根ざしで頂いた。しかも、化粧品に関する知識は当然の事ながらて成立していると理解している。研究者にとっては、研究持ち合わせておらず、はたして本助成にマッチしているので成果の社会還元への直結は１つの理想である。その意味で、あろうかという疑問を持ちつつも、一応の研究成果を上げ

本研究が化粧品の安全性推進の一助になることを期待しつ報告書を提出できたことは、個人的には感慨深い。また、

つ貴研究振興財団の益々のご発展を祈っております。

逆に助成対象に選んで頂き、特に本コラムを書くに当たって、友人から化粧品を選ぶ基準を聞くことで、化粧品に関して− 128 −

（千葉大学大学院医学研究院）

コスメトロジー研究雑感

平成 12 年度

研究助成

きれいになって、気分よく！
高橋

都

私の研究テーマは、がん治療を受ける人の暮らし全般にどないし、周囲も特別扱いしがちである。しかし、たった関わっている。究極のゴールは、人が命にかかわる病いを

３時間のプログラムのあいだに、化粧を通じて女性たちは得ても自分らしく暮らし続けられるよう、医療現場や社会

自分自身と向き合い、意識的に自分の優先順位を上げ、見の環境を少しでも整えることだと思っている。今回取り上せたい自分になるためのコントロール感を取り戻していく

げた Look Good ... Feel Better プログラムを初めて知ったのだ。必ずしもメイクの出来の良し悪しは重要ではない。

のは、もう８年前のことだ。がん・化粧・ボランティアと化粧という身近な行為を通じて楽しもうとする姿勢がプロ

いう取り合わせには一見何の脈略もなさそうだし、私は普グラムに満ちあふれ、それが参加者を内側から変えていく

段滅多に化粧もしない。それでも興味をひかれたのは、パように感じた。まさに、Look Good ... Feel Better（きれンフレットやビデオに登場する女性患者たちの表情が、化いになって、気分よくなる）効果なのである。そして、ボ粧前後で一変していたからだった。何が彼女たちをこれほ

ランティアとしてプログラムを支える美容専門家たちの深ど変えるのだろう？

い共感と配慮、そして外見的問題への認識の高さも印象的

今回アメリカで実際に患者セッションとボランティア養だった。

成セッションに参加し、その魅力の一端を理解することが漠然と興味をもっていたプログラムを体験し、その効用できた。患者セッションは何となく静かに始まるのだが、を実感する機会を与えてくださったコスメトロジー研究振進行するにつれ参加者の笑顔が増え、声が大きくなり、会興財団に、心から御礼を申し上げたい。今後は、賛同者を場が賑やかな井戸端会議のようになっていく。普通、がん増やして Look Good ... Feel Better の国内展開を目指した

患者は治療をこなすのに必死で生活を楽しむ余裕はほとん

いと考えている。

（東京大学大学院医学系研究科）

平成 12 年度

研究助成

微笑む化粧
玉置

育子

これまで私は何度か失笑されたことがある。そんな失笑だろう。たとえば、日本文化と聞くと茶道や華道のようなされたときには必ず「何の研究をしているのですか？」と高尚なイメージを彷彿とさせる一方、文化包丁や文化住宅

質問をされ、「化粧文化の研究をしています」と答えた時という簡易的なイメージがあるからだ。化粧は果たして高

である。

尚なのか？

そんな質問は愚問だろう。化粧はこうすべき

どうやら失笑した人たちの言い分は皆一緒のようだ。
「化という雛形がない状態でカメレオンのようにころころと色粧の研究なんか…」というのである。多くの人々は研究はを変えながら我々の生活に浸透しているような気がする。

難しくて、わからなくて…というのが“研究”に対する思い込みの相場らしい。
化粧には、チャラチャラしたイメージが付きまとうから、そんなものを研究にするの？

化粧に愛着をある程度感じることが個人的にある。だから、化粧は笑われる対象ではなく、微笑みかけられるようという戸惑いを感じるようだ。また、“化粧文化”と聞くと、さらに戸惑いは募る。

な存在であってほしいと願っている。そして、そんな化粧を研究対象としての“化粧文化論”を支える一人であり続けたいと思う。

文化という言葉に含まれる多様な意味がそうさせているの− 129 −

（武庫川女子大学大学院家政学研究科）

平成 13 年度

研究助成

コスメトロジー雑感
鈴木則子

私は日本の医療社会史の研究の一環として、化粧史研究

これに対してヨーロッパは、早い段階からキリスト教がにここ何年か取り組み、勤務先の大学でも、日本やヨーロ「化粧は、神が下さった容姿に手を加えて別物に仕立て上

ッパの化粧史を講義の中にとりいれている。だが、「女性

げる、悪魔の仕業」と位置づけてきた。どうもヨーロッパはなぜ化粧するのか？」という問いかけを、私は人から受人は、化粧で相当変身可能と信じてきたらしい。

けたことがない。それはどうも多くの人が、美しくなりた

日本のメディアが、努力次第で誰でも綺麗になれる、とがるのは女性の本能だから、こんなことは聞くまでもない喧伝し始めるのは殆ど幕末、19 世紀以降であり、それはと思っているかららしい。すると化粧しない女性というの化粧品業界の発展や、都市の女性の購買力の向上などと密は、女性としての本能の欠落した人間であったりするのだ

接に関わっている。

ろうか。ちなみにかくいう私も、仕事の時以外は滅多に化粧をしない。

誰もが綺麗になれるという夢は、時には女性にとって、誰もが綺麗であらねば、という強迫観念ともなる。最近の

実は化粧をしたり、ダイエットをしたら、誰でも綺麗に小中学生のプチ整形流行の新聞記事を見て、幼くしてすでなれるという考え方が日本の文献に登場するのは、江戸後に、容姿が美しくありさえすれば幸せになれると信じ込ん期以降である。江戸時代前期の貝原益軒という医者・思想でいることにも驚く。美貌など一過性のもの、諸行無常だ

家は、その著書の中で、「容姿は努力しても変えられないと言ってみても、昨今のアンチ・エイジングの技術の展開

から、無駄なことに時間を費やさずに、中身を磨きなさい」と言説の攻勢の中で、そんな言葉はかき消されてしまいそと女性たちに説いているくらいである。美しくない女性が、うだ。今世紀、科学の発展は、高齢化社会を迎えてもとり

いくら化粧しても痩せても、厚化粧で痩せた醜婦にしかな

あえず見かけは若く麗しい男女であふれた世界を実現するれないとしたら、だれがこのようなことに血道をあげるだのだろうか。

（奈良女子大学生活環境学部）

ろうか。

平成 13 年度

研究助成

痴呆高齢者の笑顔とコスメトロジー鈴木

みずえ

わが国では高齢化が著しく、2000 年から介護保険が施

痴呆性高齢者の表情、特に笑顔は快の情動反応の一つで行されるようになり、高齢者の介護の問題が注目されていあり、ケア評価あるいは残されたコミュニケーション機能ます。レーガン元大統領が自らアルツハイマー病であることとして重要な役割を果たします。現在、我々の研究グルーを公 表しました。このニュースが非常に衝撃的であったのプは、今回の痴呆性高齢者の主観的 QOL を初めとして、は、アルツハイマー病を初めとした痴呆症が、私たちが一

動物介在療法、音楽療法などの研究を行っていますが、こ生を掛けて培った知識、記憶を破壊するだけではなく、人

れらは痴呆性高齢者の笑顔を表出してもらうための研究ととしての人格や尊厳までも脅かす病気として考えられてきも言えます。私が音楽療法で関わった F さんは、認知機たからです。介護保険以前、痴呆性高齢者が興奮したり、能の低下が著しく、介護への抵抗があり、興奮行動が激し便をこねるなどの問題行動がみられると、なすすべがないい方でした。しかし、音楽療法では「船頭小唄」を聴いた

ために対処的につなぎ服を着せたり、鍵のついた個室に入時には、懐かしいと涙ぐみました。それ以降、笑顔をみせれていました。しかし、痴呆性高齢者は単に記憶や認知にたり、懐かしい歌では目を潤ませて泣いているような、笑障害を起こす病気であり、問題行動は、自分がなぜここにっているような表情を何度か見せました。笑顔がみられる

いるのさえもわかないなどのストレスによって生じることがと同時に問題行動と呼ばれる介護の負担となる行動も少な

わかってきました。そしてケアの方向性も変わってきました。

くなりました。

− 130 −

コスメトロジー研究雑感

コスメトロジーは、より美しくなるための皮膚や化粧品がいつまでも笑顔などの豊かな感情の表情においても表出に関する研究が主流かと思われますが、今回、痴呆性高齢

して暮らしていけるための研究をめざしていきたいと思い

者の主観的評価と表情分析をテーマとした地道な研究にもます。貴財団のますますのご発展をお祈り致します。

助成を賜ったことを深く感謝申し上げます。さらに高齢者（三重県立看護大学）

平成 13 年度

招聘研究者：タイ

外国人招聘助成

アジアとの架け橋

チェンマイ大学医薬部助教授

阿部

受入責任者：東京理科大学理工学部教授

Yanee Pongpaibul
正彦

数年前、やはり貴財団の助成のお陰で、タイ国チェンマを目的としたリポソームの調製とその物性評価を行うこと

イ大学薬学部のラダ・ワウングパヤプクル助教授を招聘すにあります。特に小生が感じたことは、滞在中、小生と同ることができ、かなりの成果を上げることができました。

年輩にもかかわらず、実に意欲的に、精力的に動き回られ

特に、同助教授は本来の明るい性格の性もあり、日本におていたことです。例えば、リポソームの調製法を種々学ばける異文化生活も十分に堪能され、かつ、学問的刺激もかれた直後、ご自分で調製されたリポソームの形態を観察すなり受けておられた様子です。そのことが分かりましたのるために、休みもとらずに当研究室の博士課程の学生に指は、ラダ先生の同僚でもあり、同時に彼女の博士課程の指導を受けながら、原子力顕微鏡、透過型電子顕微鏡などの導教官でもあるヤニー・プングパイブル博士（今回の招聘

測定法を短時間で習得され、熱心に観察されておられまし者）から伺ったからです。

た。一方、学生に与えた影響も大きく、特に同助教授は学

チェンマイ大学の薬学部では、無数に生育する熱帯植物

位を長期間のアメリカ留学で取得されたためにコミュニケ

から抽出した天然物を化粧品に応用するための開発研究がーションの手段は自ずから英語となりましたので、当研究盛んであり、学科としても化粧品学講座として設置する予室の学生の英語のレベルアップに大きく貢献していただき定のようです。また、同学部の正面玄関近くには一般人をました。

対象とした薬局が設置されており、驚いたことに薬学部の嬉しいことに、ごく最近、当大学ではチェンマイ大学と先生方が直に薬品や化粧品の販売に携わっています。したの学術交流の締結を目指して準備を始めることになりましがって、化粧品と密接に関係しているコスメトロジー財団

た。もし、この締結がうまく進めば、近い将来、交換教授の助成により、特に化粧品製造技術に優れている日本社会

制度や交換留学生制度も完備され、アジアがもっと近くなに身を置くことに強い関心をもっています。この様な事情るような気がしてきます。

により、ヤニー先生の来日の機会が設定された次第です。
日本におけるヤニー博士の研究目的は、スキンケア製品

そんなチャンスを、財団が与えて下さったものと深く感謝している次第であります。

平成 14 年度

外国人招聘助成

海外交流とコスメトロジー研究振興財団の国際交流助成
招聘研究者：台湾

台湾大学皮膚科教授

余幸司

受入責任者：聖マリアンナ医科大学皮膚科助教授

相馬良直

研究者の国際交流は、年々盛んになっている国際学会でしかしながら、最近の日本経済の低迷、医療費の逼迫な交流するのも１つの良い機会ではあるが、同じテーマの海どの関係で研究費は減少し、ましてや国際交流に使用でき外の研究者を講演に招待し、あるいは招待されることによ

る費用は年々乏しくなってきている。

り、より深い交流となり、若い研究者に留学のチャンスが出来ることもある。

色素産生細胞（メラノサイト）およびメラニン産生の研究はコスメトロジーと密接な関係のある分野である。この− 131 −

分野の研究者は、日本色素細胞学会（Japanese Sciety ofの研究テーマの１つはメラノサイトであるため、メラノサ

Pigment Cell Research, JSPCR）という学会を設立し、共イトの異常に関する講演を企画した。今回も活発な討論がに知識の交換、共同研究企画の場となっている。化粧品・あった。尋常性白斑の世界的権威である台湾大学皮膚科の医薬部外品を産出する企業の研究者も、両学会の会員であ

余幸司教授をお招きすることが出来た。素晴らしい講演でり活躍している。

活発な討論があった。

この関係もあり、これまで JSPCR の年次大会（東京）

このためもあり、余教授が本年１月まで勤務していた高と IFPCS の３年に１回開かれる国際会議（名古屋）の計雄大学から留学生が、本年７月から約１ヶ月間共同研究の２回の学会に、コスメトロジー研究振興財団から国際交流ために聖マリアンナ医科大学の皮膚科に来ることになっ助成をいただいた。この助成のお陰で世界的に有名な米国た。

の Weston 博士とイギリスの Bennett 博士を招待し、交流を深めることができた。

以上のように交流が出来たのもコスメトロジー研究振興財団と関連が深く、国際交流助成を頂戴したお陰である。

平成 15 年２月、聖マリアンナ医科大学皮膚科が、第 66

心より御礼申し上げたい。

回日本皮膚科学会東京支部学術大会を開催した。当研究室− 132 −

●
事業報告書（平成14年度）
役

員●

− 134 −事業報告書事 業 報 告 書
（自平成 14 年４月１日

至平成 15 年３月 31 日）《研究助成等の選考関連》
2002

5

7

公募開始

				

全国 259 ヶ所の大学・病院・研究機関等、関係学術雑誌８誌
当財団 HP 他２HP に掲載

7

5

公募締切り

9

3

選考委員会（分科会１）素材、物性に関する分野の選考

9

11

選考委員会（分科会３）精神、文化に関する分野の選考

9

13

選考委員会（分科会２）生体作用、安全性に関する分野の選考

926

本選考委員会			11

20

応募数 87 件

各分科会の結 を総合的に判断して研究助成 19 課題、国際交流援助１課題を選考

表彰贈呈式

				

記念講演：｢ 人のこころと遺伝子のはたらき ｣東京大学大学院総合文化研究科教授

石浦

章一氏

11

20 〜

助成課題の公表

関係学術雑誌７誌、当財団 HP に掲載

2

中旬

持ち回り企画委員会

平成 15 年度の研究助成課題選考に関して

常理事会

平成 13 年度事業報告ならびに収支決算報告、第７期評議員の					

選任、理事長及び専務理事の互選、選考委員の選任、株主と				しての議決権行使について、報告事項

2003《理事会関連》
2002

6

11

20

20

常理事会

				

平成 14 年度（第 13 回）研究助成者等の承認
平成 15 年度事業計画及び予算案の承認、選考委員の補選《評議員会関連》
2002

6

20

常評議員会

平成 13 年度事業報告及び収支決算報告、第７期理事及び監事の選任、報告事項

11

20

常評議員会

				

平成 14 年度（第 13 回）研究助成者等の承認
平成 15 年度事業計画及び予算案の承認

《その他》
2002

6

財団活動の情報更新

9

コスメトロジー研究報告 「コスメトロジー研究報告」９号の概要を当財団 HP に記載

11

20

12		

基本財産

当財団 HP へ平成 13 年度計画・事業報告を記載
保有株式が無償分割により 874,023 株から 961,425 株へ

コスメトロジー研究報告 「コスメトロジー研究報告」10 号の概要を当財団 HP に記載− 135 −

第 13 回 研究助成を受けられたかたがた
管理番号

研

究

課

題

分

（ J：一般研究助成

H：国際交流援助）

野

研

代

表

究

者

J-02-01

エストロゲンの皮膚老化防御における分子機構の解明

機能再生学
分子移植学
産科婦人科学

金沢大学大学院医学系研究科教授

J-02-02

正常皮膚角化における蛋白質脱イミノ化の役割解明－瑞々しい肌をいつまでも保つために－

皮膚科学
皮膚老年学
蛋白質化学

東京都老人総合研究所研究員

J-02-03

環境に適した新規な糖型界面活性剤の開発と応用

界面・コロイド

J-02-04

生体内環境を再現するポリホスフェートヒドロゲルの調製と機能機能性高分子材料学
バイオマテリアル学

J-02-05

コラゲナーゼ抑制作用をもつ天然物の探索

J-02-06

フレグランスの減量および生活習慣改善効果－特に内臓脂肪、酸化ストレスに対する影響－

内科学

J-02-07

生体適合性超薄膜の吸水および保湿特性の評価

機能性薄膜
高分子化学

J-02-08

毛包、汗腺、皮脂腺など皮膚附属器官の形成に関わる細胞内シグナル伝達経路の解明

分子生物学

J-02-09

皮膚における生体リズムの分子機構

時間医学
分子生物学
細胞生物学

神戸大学大学院医学系研究科教授

J-02-10

トリクロロ酢酸とフェノールの生体におよぼす安全性に関する研究

皮膚老化
皮膚科学
創傷治癒

和歌山県立医科大学教授

J-02-11

紫外線遮断剤用単分散球状酸化セリウムナノ粒子の低環境負荷な製造法の開発

無機材料化学
物理化学

J-02-12

新規な化粧品素材としての、コウジ酸、β-ツーヤプ
リシン、p-アミノ安息香酸、及び、アルブチンのさらなる高機能化を目的とした酵素的分子設計

酵素化学
生物工学

岡山県立大学保健福祉学部専任講師

J-02-13

集合して生体に作用する有機分子の設計と合成およ
び機能評価

有機合成
有機物理化学

東京大学大学院薬学系研究科教授

J-02-14

日本人と韓国人の化粧観の国際比較研究

化粧文化学

J-02-15

ヒアルロン酸水溶液のナノコットン効果の研究

物理化学− 136 −

天然物化学

井
石

上
神

正
昭

樹
人

東京理科大学理学部助手

吉

村

倫

一

東京医科歯科大学生体材料工学
研究所助教授岩崎

泰彦

千葉大学大学院薬学研究院教授

石

橋

正

己

福島大学保健管理センター助教授

渡

辺

英

綱

東北大学大学院薬学研究科教授

安

斉

順

一

東京大学医科学研究所教授

井
岡
古

上

純一郎

村
川

均
福

実

直

文

千葉大学工学部助手

上
中

川
島

大和田

伸
智

佳
彦

日本大学芸術学部非常勤講師

村

澤

博

人

理化学研究所先任研究員

丑

田

公

規

事業報告書

管理番号

研

究

課

題

分

野

J-02-16

リボザイムを用いた皮膚細胞新規老化遺伝子の単離と解析

J-02-17

モーションキャプチャーシステムを用いた、スマイ
ルトレーニング前後の笑顔の動的変化に関する研究

J-02-18

コラーゲン経口摂取が結合組織（骨、皮膚）におよ
ぼす作用

薬理学
生化学
整形外科学
皮膚科学

J-02-19

表皮細胞に対する機械的刺激の作用についての検討

皮膚科学

分子生物学

代

表

研

究

者

筑波大学応用生物化学系教授

柳

澤

純

顎口腔機能再建学 大阪大学大学院歯学研究科助教授
歯科材料学
荘 村 泰 治東京医科歯科大学大学院医歯学
総合研究科教授春日井昇平

東京大学医学部附属病院講師

小宮根

真

弓

高雄医学院大学皮膚科教授
H-02-01

尋常性白斑におけるメラノサイト消失と再生の機序

皮膚科学

余

幸

司

良

直

受入責任者
聖マリアンナ医科大学皮膚科助教授

相馬（敬称略・受付順）※第１回〜12回の研究助成課題はホームページ（http://www.cosmetology.or.jp/）でご覧ください。

− 137 −

役

員
平成15年 3月31日現在

理事長

小林 次郎

専務理事
（常勤） 有本亨

コーセー代表取締役会長（元厚生省薬務局安全課長）

理 事

磯邊 律男

㈱博報堂相談役（元国税庁長官）

理 事

宇佐美昭次

早稲田大学理工学部教授

理 事

内山

㈶日本薬剤師研修センター理事長

理 事

小林 保清

理 事

橋

充
久

㈱コーセー代表取締役社長
帝京大学名誉教授

理 事

新村 嘉也

高砂香料工業代表取締役社長

理 事

西川 武二

慶應義塾大学医学部教授

理 事

花輪 隆昭

昭和館 館長（元厚生省援護局長）

理 事

廣部 雅昭

静岡県立大学学長

理 事

牧野 利孝

日本化粧品工業連合会専務理事（元厚生省生活衛生局食品化学課長）

監 事

小田倉正典

公認会計士

監 事

黒田 節哉

弁護士

評議員

上野 芳夫

東京理科大学薬学部教授

評議員

緒方 宏泰

明治薬科大学教授

評議員

北原 文雄

東京理科大学名誉教授

評議員

近藤

保

東京理科大学名誉教授

評議員

齊藤

勲

㈳東京医薬品工業協会理事長（元厚生省大臣官房審議官）

評議員

長野 哲雄

東京大学薬学部教授

評議員

西岡

東京医科歯科大学医学部教授

評議員

野田 裕充

㈱コーセー常務取締役

評議員

野呂 影勇

早稲田大学大学院人間科学研究科教授

評議員

福内 靖男

足利赤十字病院院長

評議員

溝口 昌子

聖マリアンナ医科大学教授

評議員

宮

千歳科学技術大学教授

評議員

山崎 幹夫

清

榮三

千葉大学名誉教授（専務理事以外は全員非常勤）− 138 −

＊本財団についてのお問い合わせは下記にお願いいたします。

財団法人 コスメトロジー研究振興財団〒104－ 0061 東京都中央区銀座三丁目 5 番12号
電話 03（3564）6731

コスメトロジー研究報告

Vol.11／2 003

非売品

2003年９月１日発行

編集責任者
発
行

制

作

印

刷

©2003

有本 亨
財団法人

コスメトロジー研究振興財団〒104－ 0061 東京都中央区銀座三丁目５番12号
電話 03（3564）6731

エイエム企画〒170－ 0013 東京都豊島区東池袋三丁目15番２号
電話 03（3590）5375

太陽印刷工業
不許複製

禁無断転載

●
平成14年度記念講演 石 浦 章 一
●

Ⅰ.
Ⅱ.
Ⅲ.

●
素材、物性に関する分野
生体作用、安全性に関する分野
精神、文化に関する分野●