シアリダーゼの皮膚における機能解明と経皮送達技術の開発
静岡県立大学大学院薬学研究院生化学講座

南彰Sialidase is a hydrolase that cleaves a sialic acid residue from sialoglycoconjugate. We have previously developed afluorescent probe (BTP-Neu5Ac) that allows highly sensitive visualization of the enzymatic activity of sialidase on tissue.
Staining of the rat skin using BTP-Neu5Ac revealed intense sialidase activity in the lower layers of the dermis. However,
the role of sialidase in the skin is not well understood. In the present study, we investigated the role of sialidase in the skinand developed the transdermal delivery technology of sialidase. We first examined changes in sialidase activity with aging
and found that sialidase activity increased with growth and decreased with aging. Next, to investigate the role of sialidase,
we delivered the sialidase to the dermis and studied its effect on elastin which gives skin elasticity. The barrier function of
the skin is high and cannot allow substances with a molecular weight of 500 or more to pass through. Therefore, we usedcholine and geranate (CAGE), one of the ionic liquids, to deliver sialidase transdermally. CAGE can provide the sialidase
subcutaneously while maintaining the enzymatic activity. The elastin level in the dermis was increased by applying sialidasefrom Arthrobacter ureafaciens with CAGE on the skin for five days in rats and senescence-accelerated mice prone 1 and 8.
Sialidase activity in the dermis was considered to be mainly due to Neu2 based on the expression level of sialidase isozyme
mRNA. Transdermal administration of Neu2 with CAGE also increased the level of elastin in the dermis. Therefore, Neu2
would be involved in elastic fiber assembly. The reduction of elastin in the skin causes various skin diseases as well as wrinkles and sagging with aging. Thus, transdermal administration of sialidase is expected to be helpful for the improvement of
wrinkles and skin disorders due to the loss of elastic fibers.

1．緒言

シアリダーゼは、糖タンパク質や糖脂質などの糖鎖構造からシアル酸を脱離する加水分解酵素である。研究代表らはこれまでに、組織においてシアリダーゼの酵素活性をイ
メージングすることができる蛍光プローブ
Benzothiazolylphenol-based sialic acid derivative type 3（BTP 3 -Neu 5 Ac）を開発した（図 1）1 - 3）。BTP 3 -Neu 5 Acは抗体を利用してタンパク質を検出する免疫組織染色とは

図1

異 な り、 酵 素 活 性 を 検 出 で き る 利 点 が あ る。BTP 3 -BTP 3 -Neu 5 Acの染色原理

Neu 5 Ac は無蛍光で水に可溶性であるが、シアリダーゼによ る 加 水 分 解 を 受 け る と BTP 3 を 遊 離 す る。BTP 3 はる海馬においては、主要な興奮性神経線維である苔状線維

150 nm 程度の大きなストークスシフトをもつ強い緑色蛍の神経終末が強く染色される。このような脳におけるシア

光物質であり、水に不溶であるため組織に沈着することでリダーゼ活性の分布情報を利用して、シアリダーゼが認知

染 色 さ れ る。 染 色 方 法 は 比 較 的 簡 便 で あ り、BTP 3 -機能に不可欠であることが見いだされている 4 - 6）。また、

Neu 5 Ac（10 - 1 , 000 µM）を含む緩衝液中で 30 分程度イン

BTP 3 -Neu 5 Ac でマウス膵臓を染色したところ、インス

キュベートした後、組織や切片を緩衝液で洗浄することでリンを分泌する膵臓のランゲルハンス島に比較的強いシア完了する。

リダーゼ活性があることが分かった。このイメージング情BTP 3 -Neu 5 Ac でラット脳を染色すると、脳梁や内包報を利用して、シアリダーゼがインスリンの分泌に関与すといった白質領域が強く染色される。また、記憶領域であることや、シアリダーゼ阻害剤 2 , 3 -dehydro- 2 -deoxy-Nacetylneuraminic acid（DANA）がインスリン分泌を促進

Role of s i a l id a s e i n t he s k i n a ndtransdermal delivery technology ofsialidase
Akira Minami
Department of Biochemistry, School of
Pharmaceutical Sciences, University of
Shizuoka

することが見出された 7）。DANA は低血糖時にはインス
リン分泌に影響しないことから、低血糖の副作用を回避することができる糖尿病の治療薬として実用化できると期待されている。これまでに大腸癌は強いシアリダーゼ活性を持つことが報告されている。そこで BTP 3 -Neu 5 Ac でヒトの大腸癌を染色したところ、大腸癌を高感度で検出され− 156 −

シアリダーゼの皮膚における機能解明と経皮送達技術の開発た 2）。現在、内視鏡で腸癌と思われる部位に吹きかけることによって、癌細胞を取り残すことなく除くことができる技術の開発を目指している。最近では、BTP 3 -Neu 5 Acがインフルエンザウイルスに感染した細胞の検出や薬剤耐性株の検出に活用することができることが分かった 8）。
様々な組織を BTP 3 -Neu 5 Ac で染色する過程で、皮膚の真皮に強いシアリダーゼ活性があることを見出した。皮膚は、コラーゲンやヒアルロン酸、エラスチンなどの細胞

図2

皮膚の老化に伴うエラスチン量の減少

図3

哺乳動物のシアリダーゼアイソザイム

外マトリックス成分で構成される。細胞外マトリックスの最も巨大な構造はエラスチンで、皮膚、肺、動脈などの組織に豊富に存在している。長期間の日光曝露により損傷を受けた皮膚では、エラスチン含有物質が真皮に蓄積し、最終的に弾力性の欠如に至る（光老化）。逆に、太陽光から保護された皮膚では、エラスチン線維は加齢とともに減少し、シワやたるみ、皮膚障害の原因となる（図 2）。エラスチンのターンオーバーには長い時間がかかるため、失ったエラ
スチンを再生することは難しい。
哺乳類のシアリダーゼには Neu 1、Neu 2、Neu 3、Neu 4の 4 つのアイソザイムが存在する（図 3）。これらの 4 つのアイソザイムは、発現する組織や細胞内局在、基質特異性、至適 pH が異なる。主にリソソームに局在するシアリダー
ゼアイソザイム Neu 1 は、細胞表面においてエラスチン結

図4

経皮酵素送達基剤CAGE

合タンパク質（EBP）と複合体を形成することが報告されている。Neu 1 によるミクロフィブリルからのシアル酸の遊皮下脂肪を含む腹側部組織を採取し、Tissue-Tek OCT コ

離は、エラスチン集合を促進する。このことから、真皮にンパウンド（サクラファインテックジャパン）で包埋した。

検出されるシアリダーゼ活性は、エラスチン産生に関与す

凍結後、100 - 300 µm 厚の切片を作製した。1 mM BTP 3 -ると考えられる。真皮におけるシアリダーゼの機能を解明

Neu 5 Ac（27 ℃）で染色した後、PBS で洗浄し、蛍光顕微する過程で、皮膚におけるシアリダーゼ活性が加齢ととも鏡（ex/em: BP 330 - 385 /BA 510 IF、 ま た は BP 340 - 380 /に著しく低下することが明らかとなった。真皮にシアリダ

BA 500 - 550）で蛍光を観察した。カメラの検出感度は染色ーゼを送達することで、加齢に伴うエラスチンの減少を回していない皮膚切片のバックグラウンド蛍光を検出しない

復させることができると考えられる。

レベルに設定した。写真を撮った後、スライスを 4 % パラ

本研究では初めに、皮膚におけるシアリダーゼ活性の分布と加齢によるシアリダーゼ活性の変化について検討した。

ホルムアルデヒドで固定し、ヘマトキシリン・エオジンで染色した。

また、シアリダーゼの経皮送達がエラスチン産生に及ぼす影響について検討した。経皮投与では角質層が皮膚のバリ
アーとなり、一般的に分子量 500 以上の物質を透過するこ

2. 2. シアリダーゼ活性の測定
ラット皮膚のホモジネートを 96 ウェルプレートに移し、とができない。効果的かつ非侵襲的な経皮吸収のためには、

10 µM 4 MU-Neu 5 Ac を含む PBS 中で 27 ℃、60 分間イン

最適な経皮輸送基剤の選択が必要となる。イオン液体は、キ ュ ベ ー ト し た。 炭 酸 ナ ト リ ウ ム 緩 衝 液（500 mM、陽イオンと陰イオンからなる低融点溶融塩として知られてpH 10 . 7）を加えた後、マイクロプレートリーダー（ex/em,

いる。イオン液体のうち Choline and geranate（CAGE）は355 nm/ 460 nm）を用いて遊離した 4 MU の蛍光強度を測

低分子化合物からペプチドやタンパク質などの高分子化合定した。

物まで様々な種類の薬剤を効率的に経皮投与できる（図 4）。

2. 3. CAGE中のシアリダーゼの安定性評価

ここでは、経皮送達基剤として CAGE を利用した。

2. 方

Arthrobacter ureafaciens 由来シアリダーゼ（AUSA）を法

10 mU/mL で CAGE または PBS に溶解し、27 ℃で 28 日間

2. 1. シアリダーゼ活性のイメージング静置した。その後、4 MU-Neu 5 Ac でシアリダーゼの酵素

Wistar 系雄性ラット（12 週齢、日本 SLC）
から皮膚、筋肉、活性を測定した。

− 157 −

コスメトロジー研究報告 Vol. 30, 2022

Neu 4 : 5’ -TCTGGAGTGCCAACTGGC- 3’ と 5’ -AAGGAA

2. 4. シアリダーゼの経皮投与

GTGCCTTCATCAGCAC- 3’

ラットやSAMP1、SAMP8 の腹側部の皮膚を剃毛した後、CAGE に溶解したシアリダーゼ AUSA（1U/mL）を 1 日 2 回、5 日間にわたって塗布した。真皮組織を採取し、ホモジナイ
ズした。ホモジネート中のシアリダーゼ活性は、4MU-

エラスチン : 5’ -GCTTAGAGTCTCAACAGGTGC- 3’ と 5’
-CGGAACCTTGGCCTTGACTC- 3’
GAPDH: 5’ -TGAACGATTTGGCCGTATCGG- 3’と 5’-TC
AATGAAGGTCGTTGATGG- 3’

Neu5Ac（40µM）を用いて測定した。真皮から抽出したエラ
スチン含有量は、定量色素 5, 10, 15, 20 -tetraphenyl-21 ,23 -porphine tetra-sulfonate（Fastin Elastin Assay Kit）を利用して測定した。

2. 8. Neu2の経皮投与
先に樹立したラット Neu 2 を安定に発現する C 6 ラット
グリオーマ細胞から分泌された Neu 2 を、限外ろ過フィル
ター（Amicon Ultra）を用いて回収した。4 MU-Neu 5 Ac

2. 5. 免疫組織化学染色

でNeu2 のシアリダーゼ活性を測定した。Neu2（21.3nmol/

真皮の伸展切片を 4 ％パラホルムアルデヒドで固定した

min/mL）と CAGE を 3：7 の割合で混合した。剃毛後、後、2 ％ヤギ血清でブロッキングした。エラスチンの染色

Neu 2 と CAGE の混合物 60 µL をラット（12 週齢）の側腹部

では、切片をウサギ抗エラスチンポリクローナルIgG（Bioss

皮 膚 に 塗 布 し た。 ま た は、Neu 2 を 18 µL 塗 布 し た 後、Antibodies）および FITC 標識ヤギ抗ウサギ IgG（Jackson

CAGE を 42 µL 塗布した。塗布は 1 日 2 回、5 日間行った。

ImmunoResearch Laboratories）に よ り 染 色 し た。Neu 2

真皮に含まれるエラスチンは、２. 4 . と同様の方法で定量の染色では、切片をウサギ抗 Neu 2 ポリクローナル IgGした。

（Rockland, Gilbertsville, PA）および HiLyte Fluor 555 標
識ヤギ抗ラビット IgG（Anaspec, Fremont, CA）で染色し2. 9. 統計解析た。また、DAPI（1 g/mL）で対比染色を行い、蛍光顕微鏡

統計解析は、Bonferroni の多重比較検定を伴う一元配置

BZ-X 710 で観察した。蛍光のバックグラウンドレベルは、

分散分析、および t 検定を利用した。2 群間の分散が異な二次抗体のみで染色した切片を利用して決定した。すべてる場合は、Welch の補正を加えた t 検定を利用した。

のイメージングは少なくとも 2 回実施し、再現性を確認し

3. 結

た。

果

3. 1. 皮膚組織におけるシアリダーゼ活性の加齢に伴う変化

2. 6. エラスチンの自家蛍光の観察
真皮切片を 4 ％パラフォルムアルデヒドで固定した後、皮膚におけるシアリダーゼ活性の分布を調べるために、

蛍 光 顕 微 鏡（BZ-X 810、ex/em: BP 450 - 490 /BA 500 -12 週齢のラット腹側部を 100 µM BTP 3 -Neu 5 Ac で染色550）で自家蛍光を観察した。

した。ヘマトキシリン・エオジン染色で確認された真皮下層や筋肉に強いシアリダーゼ活性は検出された（図 5 A）。

2. 7. リアルタイムRT-PCR

また、皮膚におけるシアリダーゼ活性の加齢による変化を

TRIzol 試薬（Life Technologies）を用いて、ラットの腹調べたところ、胎生 19 日から 12 週齢にかけて上昇した。

側部の皮膚や脂肪などの組織から mRNA を抽出した後、21 ヶ月齢以上のラット皮膚におけるシアリダーゼ活性は、

サーマルサイクラーシステム（Thermal Cycler Dice Real-

12 週齢のラット皮膚における活性と比較して著しく減弱

Time System Lite, タ カ ラ バ イ オ ）と One-Step SYBRした（図 5 B）。

PrimeScript PLUS RT-PCR キ ッ ト（Perfect Real Time,ア ル デ ヒ ド - 3 - リ ン 酸 デ ヒ ド ロ ゲ ナ ー ゼ（GAPDH）の3. 2. シアリダーゼの経皮送達による皮膚エラスチン
量の増加

mRNA を内部標準として利用した。以下に使用したプラ

次に、シアリダーゼの経皮投与がエラスチン量に及ぼす

タカラバイオ）を利用して mRNA を定量した。グリセル

イマーの配列を示す。

影響について検討した。初めに、経皮輸送基剤 CAGE に

Neu 1 : 5’ -CCCATCCCGAGTACCGAGT- 3’と 5’-CCCGGC

よって酵素活性が変化しないことを確認した（図 6 A）
。次に、経皮輸送基剤 CAGE を使用してシアリダーゼ（AUSA）

CACAACTGGAC- 3’
Neu 2 : 5’ -GAGCCACCAACCATGTCAAG - 3’ と 5’ -AAG
Neu 3 : 5’ -CGGAGCTGTGAGCTGAG- 3’と5’-CCTGCTGG
AACAGTGCTG- 3’

を 1 日 2 回、5 日間皮膚に塗布すると、ラット皮膚におけるシアリダーゼ活性が増加した（図 6 B）
。また、ラット皮

GGACATGATTCATGGAG- 3’

膚に含まれるトロポエラスチンを含むエラスチンの総量を測定したところ、エラスチン量が増加した（図 6 C）。

− 158 −

シアリダーゼの皮膚における機能解明と経皮送達技術の開発

図5 ラット皮膚におけるシアリダーゼ活性の分布と加齢に伴う変化（A）BTP 3 -Neu 5 Acによるラット皮膚のイメージング、（B）老化に伴う皮膚シアリダーゼ活性の減弱

図6 シアリダーゼの経皮送達によるエラスチンの増加（A）CAGEがシアリダーゼ活性に及ぼす影響、（B, C）シアリダーゼの経皮送達後における真皮のシアリダーゼ活性（B）およびエラスチン量（C）の増加BTP 3 -Neu 5 Ac によるシアリダーゼ活性のイメージン

スと免疫不全が特徴である。SAMP 1 系統は、12 - 18 ヶ月

グにおいても同様に、AUSA を経皮投与すると真皮に強齢でエラスチンと表皮の厚みが増加し、明らかなエラスト

いシアリダーゼ活性が観察された（図 7 A）
。また、伸展切ーシスに発展し、その特徴はヒトの光老化と類似している。

片の免疫組織染色およびエラスチン自家蛍光の観察においSAMP 8 系統は、アルツハイマー病様の神経変性と認知障て、AUSA 投与後の真皮にエラスチンの高い発現が認め

害および概日リズム障害を特徴とする。SAMP 8 マウスはられた
（図 7 B および C）。

野生型マウスの老化と比較的類似した老化症状を示す。
本研究では、SAMP 1 および SAMP 8 を用いて、エラス

3. 3. シアリダーゼの経皮送達による老化促進マウスの皮膚エラスチン量の増加

チン量に及ぼす AUSA の影響を検討した。AUSA を含む

老化促進モデルマウス（SAM）は、寿命が短く、老化症

および SAMP 8 でエラスチン量が有意に増加した（図 8 A状の早期出現と急速な進行を特徴とするマウスであり、CAGE を 1 日 2 回、5 日間経皮投与したところ、SAMP 1
および B）。

AKR/J 系統の近親交配により、これまでに 9 系統の老化促進マウス（SAMP）と 3 系統の老化抵抗性マウス（SAMR）が確立されている。SAMP 1 系統は、老化アミロイドーシ

3. 4. 皮膚におけるシアリダーゼアイソザイムの発現
真皮における強いシアリダーゼ活性が哺乳動物シアリダ− 159 −

コスメトロジー研究報告 Vol. 30, 2022

図7 シアリダーゼの経皮送達によるエラスチンの増加（A-C）シアリダーゼの経皮送達後における真皮のシアリダーゼ活性（A）、およびエラスチン量（B: 免疫組織染色;
C: 自家蛍光観察）の増加

図8 シアリダーゼの経皮送達による老化促進モデルマウスの真皮におけるエラスチンの増加（A）SAMP 1 （B）SAMP 8− 160 −

シアリダーゼの皮膚における機能解明と経皮送達技術の開発

ーゼの 4 つのアイソザイムの内、どのアイソザイムに起因法でも皮膚のエラスチンレベルが上昇することが見出ださするのかを明らかにする目的で、ラットの皮下組織におけれた（図 10 B）。また、皮膚のエラスチン mRNA レベルは、るシアリダーゼアイソザイムの発現を比較した。Neu 2

Neu 2 を適用しても有意な影響を受けなかった（図 10 C）。

mRNA の発現量は、脂肪組織よりも真皮や筋肉などの組4．考織で顕著に高かった（図 9 A-D）
。一方、Neu 1、Neu 3、Neu 4 の発現量は、真皮と筋肉を含む組織よりも脂肪組織で高かった。

察

本研究では、皮膚におけるシアリダーゼの酵素活性の分布や発現するアイソザイム、加齢に伴う発現量の変化など、
シアリダーゼに関する基礎的知見を得た。ラット側腹部の3. 5. Neu2の経皮投与による皮膚エラスチンの増加

組織を pH 7 . 3 の BTP 3 -Neu 5 Ac で染色すると、脂肪組織

腹側部における免疫組織染色において、Neu 2 は皮下脂と比較して真皮と筋肉に強いシアリダーゼ活性が検出され肪に比べ真皮と筋肉に多く発現していた（図 10 A）。Neu 2た。BTP 3 -Neu 5 Ac は pH 7 . 3 ではシアリダーゼアイソザ

がエラスチン産生に及ぼす影響は不明であることから、イムの Neu 2 と Neu 4 によって優先的に加水分解され、C 6 ラットグリオーマ細胞で作製したラット Neu 2 を用い

Neu 1 と Neu 3 によって弱く加水分解される 6）。従って、て、Neu 2 が皮膚のエラスチン量に及ぼす影響を検討した。

pH 7 . 3 の真皮と筋肉における強いシアリダーゼ活性は、

Neu 2 の経皮投与においては、Neu 2 を含む CAGE をラッNeu 2 によるものと推定された。また、pH 4 . 6 におけるシト皮膚に塗布する方法、または、Neu 2 を先に皮膚に塗布

アリダーゼ活性の分布は、pH 7 . 3 における分布と大きなし、 そ の 後 CAGE を 塗 布 す る 方 法 の 2 通 り で 試 し た。

違 い は な か っ た。pH 4 . 6 で は、BTP 3 -Neu 5 Ac は Neu 1

Neu 2 の塗布を 1 日 2 回、5 日間行った結果、どちらの方と Neu 3 によって効率よく加水分解されるが、Neu 2 と

図9

皮膚におけるシアリダーゼアイソザイムの発現比較

図10 Neu 2の経皮投与による皮膚エラスチンの増加（A）皮膚におけるNeu 2の発現分布（B, C）Neu 2の経皮投与がエラスチン（B）やエラスチンｍRNA（C）の発現に及ぼす影響− 161 −

コスメトロジー研究報告 Vol. 30, 2022

Neu 4 によっても分解される 6）。pH 4 . 6 でも皮膚における

5．総シアリダーゼ活性のイメージングには主に Neu 2 が寄与していると思われる。

括

皮膚の真皮には Neu 2 に起因する強いシアリダーゼ活性

皮膚の老化は、真皮のコラーゲン、エラスチン、グリコがあり、加齢とともに活性が低下することが示された。まサミノグリカンなどの質的・量的な変化に起因している。

た、経皮輸送基剤 CAGE は、シアリダーゼの酵素活性を

皮膚エラスチンの減少によって、皮膚の弾力性が失われる。

維持したまま経皮投与できる有用性が確認された。CAGE

本研究では、4 MU-Neu 5 Ac を用いて pH 7 . 3 で測定したはシアリダーゼだけでなく、様々な酵素の経皮投与に有用

シアリダーゼ活性が老化によって低下することを明らかにであると考えられる。さらに、CAGE を用いたシアリダー

した。シアリダーゼはエラスチン集合を促進することから、

ゼの経皮投与により、皮膚エラスチンが増加することを明

加齢に伴うエラスチンの減少は、シアリダーゼ活性の低下

らかにした。シアリダーゼの経皮投与は、エラスチンの減と関係している可能性がある。

少によるシワや皮膚障害の改善に有用であると期待される。

CAGE を用いてシアリダーゼを経皮投与したところ、真皮におけるシアリダーゼ活性は経皮投与後に増加した。

（本研究により得られた成果）

CAGE が酵素活性を維持したまま酵素を経皮投与できるこ・Akira Minami, Yuka Fujita, Jun Goto, Ayano Iuchi,とを示唆している。今回、シアリダーゼの経皮投与によっ

Kosei Fujita, Yasuyo Mikami, Mako Shiratori, Amiて、皮膚のエラスチン量を増加させることが見いだされた。

Ishii, Samir Mitragotri, Yasunori Iwao, Hiroaki

Neu 1 はエラスチンの集合を促進するだけでなく、エラス

Kanazawa, Yuuki Kurebayashi, Tadanobu Takahashi,

チン由来ペプチドの分解調節に関与することが報告されてTadamune Otsubo, Kiyoshi Ikeda, Takashi Suzuki:

いる。シアリダーゼの経皮投与によりエラスチン量が増加

Enhancement of elastin expression by transdermal

したことから、外因性のシアリダーゼはエラスチンの分解

administration of sialidase isozyme Neu2. Sci. Rep., 11,

促進ではなく、エラスチン集合の促進に主に寄与すると考3302（2021）．

えられる。
バクテリア由来のシアリダーゼのみならず、Neu 2 を経

（引用文献）

皮投与することによっても皮膚のエラスチン量が増加した。

1） Minami A, Kurebayashi Y, Takahashi T, Otsubo T,

エラスチン産生には Neu 1 だけでなく Neu 2 も関与していIkeda K, Suzuki T: The Function of Sialidase Revealed

ると考えられる。皮膚中のエラスチン mRNA 量は Neu 2

by Sialidase Activity Imaging Probe. Int. J. Mol. Sci.,

塗布による有意な影響は見られなかった。従って、シアリ．
22,（2021）

ダーゼによるエラスチンの増加は、ミクロフィブリルから

2） Minami A, Otsubo T, Ieno D, Ikeda K, Kanazawa H,のシアル酸脱離によるエラスチンの集合の促進によると考Shimizu K, Ohata K, Yokochi T, Horii Y, Fukumoto H,

え ら れ る。Neu 1 は リ ソ ゾ ー ム 酵 素 で あ り、 至 適 pH は

Taguchi R, Takahashi T, Oku N, Suzuki T:

4 . 4 - 4 . 6 である。Neu 2 は糖タンパク質、オリゴ糖、ガンVisualization of sialidase activity in Mammalian tissues

グリオシドを加水分解し、至適 pH は 6 . 0 - 6 . 5 である。

and cancer detection with a novel fluorescent sialidase

Neu 2 は細胞外の中性 pH で作用するので、Neu 2 を経皮投

substrate. PLoS One, 9, e81941（2014）．

与すると細胞外空間のミクロフィブリルからシアル酸が効

3） Minami A, Shimizu H, Meguro Y, Shibata N,

率的に遊離すると思われる。Neu 2 を経皮投与した皮膚にKanazawa H, Ikeda K, Suzuki T: Imaging of sialidase

おいて、光老化皮膚に見られるような重度の皮膚エラスト

activity in rat brain sections by a highly sensitive

ーシスは観察されなかった。しかし、シアリダーゼが皮膚fluorescent histochemical method. Neuroimage, 58, 34-

エラストーシスを誘導しないことを厳密に確認するために40（2011）．

は、より詳細に検討する必要がある。

4） Minami A, Ishii A, Shimba S, Kano T, Fujioka E, Sai

エラスチンは、皮膚の老化に伴って減少する。加齢のほS, Oshio N, Ishibashi S, Takahashi T, Kurebayashi Y,か、 皮 膚 弛 緩 症 や 弾 性 線 維 性 仮 性 黄 色 腫、Williams-

Kanazawa H, Yuki N, Otsubo T, Ikeda K, Suzuki T:

Beuren 症候群、肥満による皮膚障害などによって、皮膚

Down-regulation of glutamate release from

環境が悪化するとエラスチンが減少することが明らかにさ

hippocampal neurons by sialidase. J. Biochem., 1 6 3,れている。皮下脂肪組織の増加は、真皮エラスチンの分解

273-280（2018）．

を促進させる。エラスチンのターンオーバーには長い時間

5） Minami A, Meguro Y, Ishibashi S, Ishii A, Shiratoriを要するが、シアリダーゼの経皮投与によりエラスチンを

M, Sai S, Horii Y, Shimizu H, Fukumoto H, Shinba S,

回復させることで皮膚環境が改善されると考えられる。

Taguchi R, Takahashi T, Otsubo T, Ikeda K, Suzuki T:− 162 −

シアリダーゼの皮膚における機能解明と経皮送達技術の開発

Rapid regulation of sialidase activity in response to

Mikami Y, Sekita R, Kurebayashi Y, Takahashi T,

neural activity and sialic acid removal during memory

Miyagi T, Ishikawa T, Suzuki T: The sialidase inhibitor

processing in rat hippocampus. J. Biol. Chem., 2 9 2,

2,3-dehydro-2-deoxy-N-acetylneuraminic acid is a5645-5654（2017）．

glucose-dependent potentiator of insulin secretion. Sci.

6） Minami A, Saito M, Mamada S, Ieno D, Hikita T,

Rep., 10, 5198（2020）．

Takahashi T, Otsubo T, Ikeda K, Suzuki T: Role of8） Kurebayashi Y, Takahashi T, Miura T, Otsubo T,

sialidase in long-term potentiation at mossy fiber-CA3

Minami A, Fujita Y, Sakakibara K, Tanabe M, Iuchi A,

Synapses and hippocampus-dependent spatial memory.

Ota R, Ikeda K, Suzuki T: Fluorogenic probes for

PLoS One, 11, e0165257（2016）．

accurate in situ imaging of viral and mammalian7） Minami A, Fujita Y, Shimba S, Shiratori M, Kaneko

sialidases. ACS Chem. Biol., 14, 1195-1204（2019）．

YK, Sawatani T, Otsubo T, Ikeda K, Kanazawa H,− 163 −