乳の膜小胞/エクソソーム
和(森永乳業株式会社

研究本部

泉

裕

久

健康栄養科学研究所#〒2528583 神奈川県座間市東原 5183)

Milk-derived vesicle/exosome
Hirohisa IZUMI
(Morinaga Milk Industry Co., Ltd. R&D Division Wellness & Nutrition Science Institute, 183, 5-Chome, Higashihara,

Zama-City, Kanagawa 2528583, Japan)

要約
血液†尿ih様々i体液中j存在X‘£ª¹¹ôÜfA‘K#乳中j„存在X‘RgK知‹’eC‘"£ª¹¹ôÜn#non-coding small RNA m一種fA‘ microRNA（miRNA）˜含~#£ª¹¹ôÜjŠbe運搬T’^ miRNA, mRNA K受容細胞f機能X‘RgK報告T’e以降#細胞間m情報伝達˜担E分子gVe再注目T’eC‘"本総説fn#乳中j含}’‘£ª¹¹ôÜ#miRNA ˜中心j#現在報告T’eC‘生理機能†研究上m今後m課題ihj関Ve概説X‘"

1.

^™pN質_PfiN# microRNA （ miRNA ）#n W ƒ jmRNA „存在V#内包T’^ mRNA n in vitro f

大LTK 50 200 nm m脂質二重膜ffL^膜小^™pN質j翻訳T’E‘RgK示T’5)#2010年

胞fA‘£ª¹¹ôÜn# 1980 年代jÎÀ´網状jibe£ª¹¹ôÜ内m miRNA K受容細胞f機

赤血球K分泌X‘粒子gVe発見T’^1) "内部

能X‘RgK 3 cm«çôÓjŠbez{同時jj#ÔÞ«éÏï合成時jn必要_b^ÄåïμÑ

証明T’e68) 以降#細胞間m情報伝達˜担EÝ¿¢æïè·Ó»ôK含}’eC^RgJ‹#発見当·ï´ßôgVe再r注目˜浴r‘ŠEjib^"

初n#細胞K成熟X‘過程f不要jib^分子˜放Rm£ª¹¹ôÜn#z{Xxem細胞K分泌X‘

出X‘「S~袋」mŠEi„mg考G‹’^"gR

gT’#血液#尿#脳脊髄液#唾液#腹水ih様々“ K # 1990 年 代 以 降 # B 細 胞 K 放 出 X ‘ £ ª ¹

i体液中j存在K確認T’eC‘"由来X‘細胞m¹ôÜj MHC ªåμ分子K含}’#T 細胞j抗特徴˜一定程度反映X‘RgJ‹#「K™」ihm

原提示VE‘Rg2) #抗原性ÖÓ½Å˜結合V^

疾患j関V#侵襲性m低Cæ¨¿ÅÌŸ¥Ó³ô診

MHC ªåμ分子˜含‚£ª¹¹ôÜK小腸上皮断m手段gVe„大変注目T’eC‘"

細胞J‹分泌T’#寛容˜誘導VE‘Rg3)ihK

RmŠEj現在fn様々i分野f注目T’#報告

明‹JjiŒ# 2000 年代前半jn生物学的j意味数„指数関数的j増加VeC‘£ª¹¹ôÜfA‘KA‘„mg見iT’‘ŠEjib^4)"\m後#K#乳中j„存在X‘RgK知‹’eC‘"2007 年j Valadi ‹jŠbe#£ª¹¹ôÜ内jn

2.

上述m通Œ 2007 年m Valadi ‹m報告K#£ª¹

E-mail: h-izumi＠morinagamilk.co.jp

Vol. 69. 2019

乳中£ª¹¹ôÜm発見― 34 ―

¹ôÜK再注目T’‘Rgjib^一cm契機fA

抽出・精製V#定量 PCR #ÚŸªé›èŸA‘C‘K#乳jcCen#「£ª¹¹ôÜ」gCE言葉

n³ô¬ï±ôjŠbe miRNA ˜検出VeC‘

K 生 }’ ‘ 前 m 1953 年 j # 牛 乳 中 j 核 酸 ˜ 含 ‚K # 酸 性 条 件 下 # RNase 存 在 下 f „ 安 定 f A「Ûªé¹ôÜ」gVe9) # 1978 年jå¿ÄIŠr

Œ14,17)#牛乳J‹製造T’^乳児用調製粉乳中j„¡³乳腺組織j由来X‘「分泌小胞」gVem報

検出T’‘Rg16,17)#界面活性剤処理jŠŒ乳中j告10)KA‘"^_#「£ª¹¹ôÜ」gVe認識T

内 在 X ‘ RNase j Š b e速 † J j 分 解 T ’ ‘R’^mn 2002 年m Oshima ‹jŠ‘Ú¡μ乳腺上g17) J‹#£ª¹¹ôÜ中j存在X‘„mg考G

皮細胞 COMMA 1D 培養液中j認識T’^報告11)‹’^"

K文献的j初ƒeg考G‹’#同«çôÓn\m後4.

Ú ¡ μ 乳 中 j „ 存 在 ˜ 確 認 V e C ‘12) " 表 面 j

乳由来£ª¹¹ôÜj含}’‘ miRNA
jcCe

MFGE8 (Milk Fat Globule EGF factor VIII）（他jåªÄ›Åwæï#PAS6/7 g„呼o’‘）˜発

乳由来 miRNA n£ª¹¹ôÜ内j存在X‘g考

現VeC‘Rg#離乳j伴E乳腺退縮期j乳腺組織

G‹’^K#細胞外 miRNA j関V#例Go血中mIŠr£ª¹¹ôÜf MFGE8 m発現K増加X‘

miRNA jcCen HDL 内j存在X‘„mKA‘

Rg# MFG E8 n#›ÙÄô³μ細胞m「 eat meRg20) # Argonaute2 ih RNA 結合^™pN質gsignal」gVe死細胞表面j露出V^×μÑš½´

複合体˜形成Ve存在X‘„mKA‘Rg21) K報

ç·æïg結合V#ÚªéÑšô´jŠ‘貪食˜誘

告T’eC‘"\Rf筆者‹n#乳清中j含}’e

導X‘RgJ‹#彼‹n#乳腺退縮期j›ÙÄô³

C‘ miRNA K全e£ª¹¹ôÜj含}’‘mJ#

μj至b^乳腺細胞K速†Jj貪食T’‘^ƒm機\m存在形態˜調x‘^ƒ#牛乳乳清J‹超遠心j

構fA‘g考察VeC‘"

ŠŒ調製V^£ª¹¹ôÜg#超遠心後m上清\’ÎÄ母乳中m£ª¹¹ôÜm存在n# 2007 年j]’J‹ RNA ˜抽出・精製V#ÚŸªé›èŸj

Admyre ‹jŠbe示T’^13)"表面j MHC classŠŒ比較˜行ib^22)"\m結果#RNA 濃度gV

I, II, CD63, CD81, CD86, Muc1 ˜発現VeC‘R

en約 3 割K超遠心後m上清j#約 7 割K超遠心

g# MHC class II 発現量jcCe出産後 4 日以内

jŠŒ調製V^£ª¹¹ôÜj認ƒ‹’#ÚŸªé

m初乳m方K出産 1 ò月以降m成熟乳ŠŒ„多C›èŸm結果#両者j存在X‘ miRNA _Pfi

Rg#抗原刺激˜加G^末梢血単核球J‹m IL2,

N#超遠心上清jm~#A‘Cn£ª¹¹ôÜjm

IFN g 産生˜抑制X‘Rg#CD4 陽性 T 細胞中m~検出T’‘ miRNA K相当数存在V^22)"Rm結Foxp3 陽性制御性 T 細胞割合˜用量依存的j増加

果n#乳中jn RNA 結合^™pN質gm複合体i

TZ‘RgK示T’eC‘"

h£ª¹¹ôÜ以外m形態#A‘Cn一般j£ª¹

3.

¹ôÜ調製j使用T’eC‘重加速度fn沈殿Vi

乳中 miRNA m発見

C小Ti膜小胞内j存在X‘ miRNA KA‘可能性

ÎÄ母乳†牛乳中jÈªè¥½ÅK含}’eC‘˜示唆X‘"

Rgn 1960 年代j報告T’eC^K14) #国立K™

乳中£ª¹¹ôÜj含}’‘ miRNA mE`#·ï»ô研究所˜中心gV^筆者‹m«çôÓnlet7a, miR148a ih発現量K多C miRNA n種間2010 年jÎÄ母乳乳清中j miRNA K存在X‘R

f比較的共通VeC‘RgK#ÎÄ#¡³#Ò»#g˜報告V^15) "\m後#筆者‹m報告˜含ƒ¡Íï¼ih複数哺乳類種m乳中£ª¹¹ôÜ由来³16,17)#Ò»18)#å¿Ä19)乳中j„ miRNA K存在

miRNA j関X‘研究˜比較V^報告f示T’eC

X‘RgK報告T’eC‘"R’‹m報告n乳J‹‘23) " } ^ # 乳 由 来 £ ª ¹ ¹ ô Ü j 含 } ’ ‘

直接#A‘Cn乳清調製後j乳清J‹直接 RNA ˜

miRNA m種類j関Ven#複数m報告K免疫系j― 35 ―

乳業

技術

関与X‘ miRNA K多CŠEfA‘Rg˜示VeC

面m DC SIGN j結合X‘Rgf HIV 1 m感染g

‘K2426)#個々m miRNA m役割j関Ven}_明\m後m CD4 陽性 T 細胞wm¡Ÿçμ伝播˜抑制‹JjibeCiCRgK多N#\m役割j関Ve

X‘Rg˜報告VeC‘30)" In vitro f種m異i‘

免疫分野jIP‘研究K進™fC‘点n念頭j置N

乳由来£ª¹¹ôÜ˜比較V^研究„AŒ# Gao

必要KA‘"‹n#àªm乳中jn¡³乳中ŠŒ„多Nm£ª¹

5.

¹ôÜK存在V# TSG101, CD63, HSP70 m^™p

乳由来£ª¹¹ôÜm作用（in vitro ）N質量K牛乳由来£ª¹¹ôÜŠŒ„多CRg#低miRNA n 約 22 残 基 程 度 m 塩 基 J ‹ i ‘ Non-

酸素環境下f培養V^ IEC 6 m生存率˜牛乳由来

coding small RNA m 一 種 f A Œ # 標 的 g X ‘£ª¹¹ôÜŠŒ„増加TZ‘Rg˜示VeC

非翻訳領域j結合V#翻訳抑制#
mRNA m主j 3′‘31) "乳由来£ª¹¹ôÜm作用j関Ve#主j

mRNA 分解˜引L起RXRgf発現˜抑制X‘"

in vitro f検討K行i•’^上記報告˜表 1 j}g

現在ÎÄfn約 2,700 種類#¡³fn約 1,000 種類

ƒ^"（miRbase Rel. 22.1）K見cJbeIŒ#進化上高6.

度i生物種zh多CgT’#ÎÄfn全遺伝子m 6

乳由来£ª¹¹ôÜm作用（in vivo ）割程度K影響˜受P‘g考G‹’eC‘"\m^

上述m通Œ乳由来£ª¹¹ôÜn例G異種m乳由ƒ#乳中j含}’‘ miRNA K摂取後j消化管f作

来fAbe„生体j作用V得‘g考G‹’‘K#in

用X‘i‹o#様々i生理機能˜示Xg考G‹’‘

vivo jICe„CNcJm報告KiT’eC‘"

K# in vitro m試験fn#主j種々細胞jŠ‘乳由

Chen ‹nÒ»乳由来£ª¹¹ôÜK#Ò»消化管

来£ª¹¹ôÜm取Œ込~有無#\m機構#取Œ込由来細胞株m IPEC J2 j取Œ込}’#£ª¹¹ô

}’^後m作用K調x‹’eC‘"

Ü由来m miRNA K細胞内f増加X‘Rg#同細胞

Sun ‹n#¡³初乳由来£ª¹¹ôÜjn成熟乳

m増殖˜促進X‘Rg#Ú¡μwm経口投与jŠŒ由来m£ª¹¹ôÜŠŒ„免疫関連 miRNA K多

十二指腸#空腸m絨毛長†陰窩m深T˜有意j増加

N#Ú¡μ由来ÚªéÑšô´細胞株fA‘

TZ‘Rg˜報告VeIŒ32) #同«çôÓn\mRaw264.7 KR’‹牛乳由来£ª¹¹ôÜ˜取Œ込後Ò»乳由来£ª¹¹ôÜK# LPS jŠŒ誘導T‚Rg#¡³初乳}^n成熟乳由来£ª¹¹ôÜ˜’‘ IPEC J2 m›ÙÄô³μ˜抑制X‘Rg#同

取Œ込™_同細胞株˜ LPS f活性化V^gR“#£ª¹¹ôÜm経口投与jŠŒ# LPS 投与jŠŒ

初乳由来£ª¹¹ôÜ˜取Œ込™_群m方K炎症性

誘導T’‘Ú¡μ消化管m炎症K抑制T’#炎症抑±ŸÄ¦ŸïfA‘ IL1b, IL6 産生量K多N#抗制nÒ»乳由来£ª¹¹ôÜj含}’‘ miRNA j

炎症性±ŸÄ¦ŸïfA‘ IL10産生量K少iCRŠ‘Rg„示VeC‘33) " Li ‹n#牛乳由来£ªg˜報告VeC‘27) "}^# Wolf ‹nÎÄ大腸由¹¹ôÜK#ÎÄ大腸由来細胞株 LS174T j取Œ

来細胞株 Caco 2 gå¿Ä小腸由来細胞株 IEC 6込}’#Trefoil Factor 3, Mucin 2 m発現量˜増加

˜用C#Kusuma ‹nÎÄ血管内皮細胞株 HUVEC

TZ‘Rg#高浸透圧Ûçª# LPS 投与#低酸素

˜用C#¡³gn異種j由来X‘R’‹細胞j牛乳

曝露m 3 条件jŠŒ実験的j壊死性腸炎˜誘導V

由来£ª¹¹ôÜK取Œ込}’‘Rg#£ª¹¹ô^Ú¡μ新生仔j対Ve#牛乳由来£ª¹¹ôÜ˜

Üm取Œ込~n£ïÅ±ŸÄô³μjŠbe行i•

同時j投与X‘g#炎症K抑制T’#杯細胞m消失’#\’jn£ª¹¹ôÜ表面m^™pN質抗原K„抑G‹’‘Rg˜示V^34) "腸炎jcCen#

重要fA‘Rg˜示VeC‘28,29)"T‹j NaslundÃ¨μÄåï硫酸ÆÄæ¡ÜjŠŒÚ¡μj大腸炎‹n#ÎÄ母乳由来£ª¹¹ôÜKÎÄ単球J‹分

˜誘導V^ÞÃçf„牛乳由来£ª¹¹ôÜ経口投化TZ^樹状細胞j取Œ込}’‘Rg#樹状細胞表

与jŠbe炎症K抑制T’‘RgK示T’eC

Vol. 69. 2019― 36 ―

表1
乳m由来

乳由来£ª¹¹ôÜm作用j関Ve主j in vitro f検討T’eC‘報告
概

要

参考文献

ÎÄ

ÎÄ母乳£ª¹¹ôÜnÎÄ末梢血単核球J‹m IL2, IFNg 産生˜抑制"
末梢血単核球中 CD4 陽性 T 細胞jIP‘ Foxp3 陽性m制御性 T 細胞割合˜増加TZ‘"

13¡³

蛍光色素fåÕçV^牛乳由来£ª¹¹ôÜn#ÚªéÑšô´様j分化TZ^ÎÄ単球由来細胞株 THP1 jn取Œ込}’‘K#未分化単球jn取Œ込}’iC"取Œ込~n 4°C培養jŠŒ低下"22¡³

牛乳由来£ª¹¹ôÜnÚ¡μ由来ÚªéÑšô´ Raw264.7細胞j取Œ込}’‘"¡³成
熟乳£ª¹¹ôÜg比較V#初乳£ª¹¹ôÜn Raw264.7m炎症性±ŸÄ¦Ÿï（IL1b,IL6）産生˜亢進#抗炎症性±ŸÄ¦Ÿï（IL10）産生˜抑制"

27¡³

牛乳由来£ª¹¹ôÜnÎÄ大腸由来細胞株 Caco2#Ú¡μ小腸由来細胞株 IEC6 j取Œ込}’‘"取Œ込~n 4°
C培養#ÓéÂ›ô¸ K jŠ‘£ª¹¹ôÜ膜表面m抗原切断#£
ïÅ±ŸÄô³μ阻害剤jŠbe抑制"

28¡³

牛乳由来£ª¹¹ôÜnÎÄ血管内皮細胞株 HUVEC j取Œ込}’‘"取Œ込~n 4 °C培養#ÓéÂ›ô¸ K jŠ‘£ª¹¹ôÜ膜表面m抗原切断#£ïÅ±ŸÄô³μ阻害剤j
Šbe抑制"蛍光åÕçV^牛乳由来£ª¹¹ôÜ˜Ú¡μj経口投与V^gR“#肝臓#脾臓#肺j経口色素K検出T’^"29ÎÄÎÄ母乳由来£ª¹¹ôÜnÎÄ単球J‹分化TZ^樹状細胞j取Œ込}’‘"ÎÄ母乳由来£ª¹¹ôÜn#樹状細胞表面m DCSIGN j結合V#HIV1 感染g\m後m CD4 陽性
T 細胞wm感染伝播˜抑制"

30¡³科màªm乳j由来X‘£ª¹¹ôÜn#低酸素環境jŠŒÚ¡μ小腸由来細胞株
IEC6 f誘導T’‘ PHD1 (prolyl hydroxylase1）m減少#HIFa (hypoxiainducible facàª#¡³
tora), VEGF (vascular endothelial growth factor）m増加˜#牛乳由来£ª¹¹ôÜŠŒ„抑制V#生存率˜増加TZ‘"

31‘35) K#興味深CRgj# 35,000 g g 100,000 g f

与X‘g#抗酸化能#抗炎症能#免疫反応K亢進T

調製V^£ª¹¹ôÜfn#前者m方K大腸炎j伴’‘RgjŠŒ#K™細胞m›ÙÄô³μK誘導T

E大腸短腸化†»ŸÄ´ßïª³ãï機能低下m抑’‘Rg˜示VeC‘37)"

制能n高Cj„関•‹Y#大腸jIP‘炎症性±Ÿ

RmŠEj#生体j対V乳由来£ª¹¹ôÜn基Ä¦Ÿï†¬Þ¦Ÿï量n後者m£ª¹¹ôÜ˜投本的jn抗炎症的j働NŠEfA‘K#炎症˜促進

与V^方K少iCih#£ª¹¹ôÜ±Ÿ¶jŠb

X‘gCE報告„A‘" Nordgren ‹n#牛乳由来

e抗炎症能†作用点・機序K異i‘RgK示唆T’£ª¹¹ôÜ˜含‚}^n含}iC餌˜Ú¡μj摂eC‘"腸炎以外m炎症fn#Arntz ‹jŠŒ#牛取TZ#有機¼μÄ˜鼻腔内j単回投与X‘急性炎

乳由来£ª¹¹ôÜ経口投与jŠ‘関節炎抑制作用症ÞÃç#連日投与X‘慢性炎症ÞÃçm両者jI

K IL1Ra Ê¿ª›¡ÄÚ¡μA‘Cn¯åô®ï

Ce#牛乳由来£ª¹¹ôÜ餌投与群m方K#肺w

誘導性関節炎ÞÃçÚ¡μm 2 cmÞÃç˜用C

m好中球浸潤K増加V#肺胞洗浄液中炎症性±ŸÄ

e 報 告 T ’ e C ‘36) " 彼 ‹ n # Ú ¡ μ Ú ª é Ñ¦Ÿï#¬Þ¦Ÿï濃度K高Jb^Rg#腹腔Úª

šô´細胞株 Raw264.7#脾細胞#消化管細胞K牛éÑšô´m炎症性±ŸÄ¦Ÿï産生K増加V#抗乳由来£ª¹¹ôÜ˜取Œ込‚Rg„示VeC‘"

炎症性±ŸÄ¦Ÿï産生K減少V^炎症誘導性m「乳」gVe我々日本人jn珍VCK#中東f良N

M1 形質ÚªéÑšô´j³ÑÄVeC^Rg˜示

飲用T’‘åª¼乳由来m£ª¹¹ôÜj関X‘報V^38) "乳由来£ª¹¹ôÜm作用j関Ve#主告„A‘" Badawy ‹n#ÎÄ乳K™細胞 MCF7

j in vivo f検討K行i•’^研究jcCe#上述

˜移入V^å¿Äjåª¼乳由来£ª¹¹ôÜ˜投V^報告˜含ƒ#紹介VL’iJb^報告„表 2― 37 ―

乳

業

技

術

表2

乳由来£ª¹¹ôÜm作用j関Ve主j in vivo f検討T’eC‘報告

乳m由来

概

要

Ò»

Ò»乳由来£ª¹¹ôÜnÒ»消化管由来細胞株 IPECJ2 j取Œ込}’‘"£ª¹¹ôÜ
由来 miRNA K細胞内f増加"同£ª¹¹ôÜ˜Ú¡μj経口投与V^gR“#十二指腸g
空腸m絨毛長gªæÓÄm深TK有意j増加"32Ò»Ò»乳由来£ª¹¹ôÜn LPS jŠŒ誘導T’‘上記 IPECJ2 m›ÙÄô³μ˜抑制"同£ª¹¹ôÜ˜Ú¡μj経口投与V^gR“#LPS 投与jŠŒ誘導T’‘消化管炎症K抑制T’#炎症抑制作用jn£ª¹¹ôÜ由来 miRNA K関与"

33¡³

牛乳由来£ª¹¹ôÜn#ÎÄ大腸由来細胞株 LS174T j取Œ込}’# TFF3 ( trefoil factor 3 ), Mucin 2 m発現量˜増加TZ^"実験的j壊死性腸炎˜誘導V^新生仔Ú¡μj同£ª¹¹ôÜ˜同時投与V^gR“#炎症・杯細胞消失K抑制T’^"

34¡³

牛乳由来£ª¹¹ôÜ˜Ã¨μÄåï硫酸ÆÄæ¡ÜjŠŒ腸炎˜誘導V^Ú¡μj投与V^gR“#炎症K抑制T’^"35,000 g g100,000 g f調製V^£ª¹¹ôÜm効果j差A
Œ"

35

¡³

牛乳由来£ª¹¹ôÜnÚ¡μÚªéÑšô´細胞株 Raw264.7#Ú¡μ脾細胞#Ú¡μ消化管細胞j取Œ込}’‘"同£ª¹¹ôÜ˜ IL1Ra Ê¿ª›¡ÄÚ¡μ#¯åô®ï誘導性関節炎Ú¡μj経口摂取TZ^gR“# MCP 1, IL 6 ihm血中炎症Úô¦ôK低下
V#関節炎症状K抑制"

36

åª¼

åª¼乳由来£ª¹¹ôÜKÎÄ乳K™細胞 MCF7 m細胞死˜誘導X‘Rg˜ in vitro f確
認"同£ª¹¹ôÜ˜ MCF7 ˜移入V^å¿Äj経口投与V^gR“#K™細胞m›ÙÄô³μ˜誘導"37¡³

単回#}^n連日有機¼μÄ経鼻投与jŠ‘急性炎症#慢性炎症Ú¡μÞÃçjICe#牛乳由来£ª¹¹ôÜ含有餌給餌jŠŒ肺wm好中球浸潤†肺胞洗浄液中炎症性±ŸÄ¦Ÿï
K増加"牛乳由来£ª¹¹ôÜ含有餌給餌Ú¡μŠŒ得‹’^腹腔ÚªéÑšô´n炎症誘導性m M1 ÚªéÑšô´j形質K³ÑÄ"

38¡³

牛乳由来£ª¹¹ôÜ含有餌A‘Cn非含有餌˜Ú¡μj給餌V^gR“#非含有餌給餌群
m方K腓腹筋m断面積中筋繊維#含有 RNA 量K増加"

59¡³

牛乳由来£ª¹¹ôÜ含有餌A‘Cn非含有餌˜Ú¡μj給餌V^gR“#含有餌給餌jŠ
be盲腸内容物中m腸内細菌叢K変化（門èÕçfn Tenericutes K増加#科èÕçfn
Verrucomicrobiaceae K減少V#Lachnospiraceae K増加）"

60¡³

牛乳由来£ª¹¹ôÜ˜Ú¡μj経口投与V^gR“#脛骨m海綿骨面積jn変化K認ƒ‹’iJb^„mm#骨細胞数n増加V#骨髄中脂肪細胞割合K低下"

61¡³

牛乳由来£ª¹¹ôÜ除去餌給餌jŠŒ#Ú¡μ肝臓mÓæï代謝産物K増加"
大豆乳Õôμm調製乳˜飲用VeC‘ÎÄ乳児尿中Óæï代謝産物nÎÄ母乳#}^n牛乳
Õôμm調製乳˜飲用VeC‘乳児ŠŒ„増加V^"乳製品m摂取˜ViC成人m血中#尿中Óæï代謝物n摂取X‘成人g比較Ve増加"

62j}gƒ^"

7.

参考文献

K中国人m血中J‹検出T’^RgJ‹始}b^研
究fA‘K#米˜摂取TZ^Ú¡μ血中f„

乳由来 miRNA・£ª¹¹ôÜm血中移

MIR168a K増加V#同 miRNA m»ô®¿Äg予行†遠隔臓器到達jcCe

測T’^ LDLRAP1 (low-density lipoprotein recep-

乳由来£ª¹¹ôÜK細胞j取Œ込}’‘RgJ

tor adaptor protein 1）m肝臓fm発現K抑制T’‹#経口摂取後m血中移行†遠隔臓器到達j関X‘

eC‘RgK示T’^"^_V#本報告j関Ven

検討„iT’eC‘K#食物j由来X‘ miRNA m

別m«çôÓJ‹再現性jcCe疑問K呈T’eI

血中移行j関Ven# 2012 年m Zhang ‹jŠ‘報Œ40)#miRNA m検出方法†実験環境m違Cih„

告j端˜発X‘39) "米j豊富j存在X‘ MIR168a

含ƒ\m解釈jn注意˜要X‘"乳由来 miRNA j

Vol. 69. 2019

― 38 ―

表3
乳m由来

乳由来£ª¹¹ôÜm血中移行†遠隔臓器到達j関X‘報告
概

要

参考文献

Ò»

Ò»新生仔˜Ò»初乳m~A‘Cn成熟乳m~f飼育V#血中 miRNA ˜比較"
初乳m~f飼育V^新生仔Ò»血中 miRNA mE`CNcJn#成熟乳m~f飼育V^群g
比較V#初乳中j多C miRNA n多N#成熟乳中j多C miRNA n少iJb^"

25¡³

ÎÄ成人j牛乳˜飲用TZ^gR“#牛乳中j豊富j存在X‘ miR29b, miR200c m血中濃度K飲用量依存的j増加"miR 29b m»ô®¿ÄfA‘ RUNX2 m末梢血単核球中発現K増加"植物fA‘Òé¿¯æô摂取fn同様m事象n起R‹Y"
牛乳由来 miRNA ˜除N餌fÚ¡μ˜ 4 週間飼育V^gR“#血中 miR29b K有意j減少"

41¡³

牛乳由来£ª¹¹ôÜ˜Åå¿«ÃæÌæô担体gVe利用X‘Rg˜目指V^研究"蛍光色素f標識V^牛乳由来£ª¹¹ôÜ˜Ú¡μj経口投与V^gR“#投与24時間後˜Ðô
ªj血中蛍光色素量K増加V#投与後144時間}f蛍光色素K検出T’^"投与 4 日後j肝臓#脾臓ihm臓器中色素量K増加V^"牛乳由来£ª¹¹ôÜ˜å¿Äj単回経口投与V^ 6 時間後#連日経口投与V^15日後mCY’jICe„ AST, ALT ihm肝酵素ihj
変化n無Jb^K#血中中性脂肪K低下"

42

蛍光色素fåÕçV^牛乳由来£ª¹¹ôÜ˜Ú¡μj経口投与V^gR“#投与量jŠ‘„mm#肝臓#腎臓#心臓#肺#脳f蛍光色素量K増加"CD63j GFP ˜発現TZ^Ú¡μ¡³#Ò»# 乳˜摂取TZ^乳仔Ú¡μjICe脾臓#心臓#肺f蛍光量K増加"Ú¡μPrimiRNA mÓé·³ï«j必須m Drosha j関V#»Þ¨³Ñ¢ï誘導性m Drosha Ê¿ª›¡ÄÚ¡μj牛乳由来£ª¹¹ôÜ含有餌#}^n非含有餌˜給餌TZ^K#両群間m
寿命j差n無V"43

Ú¡μ乳腺上皮細胞特異的j miR30b ˜過剰発現TZ^Äåïμ´¢Ç¿ªÚ¡μm乳g野生型
Ú¡μm乳˜摂取TZ^仔Ú¡μm臓器中 miR30b ˜比較"\m結果#乳中g胃˜除N肝臓#小腸#腎臓#肺#血液中m miR30b 量j差˜認ƒY"

44

Ú¡μ

miR375, miR200c Ê¿ª›¡ÄÚ¡μ（KO Ú¡μ）g野生型Ú¡μ˜用C#野生型Ú¡μm仔j#A‘Cn KO Ú¡μm仔j野生型#A‘Cn KO Ú¡μm乳˜摂取TZ^"\m
結果#野生型# KO Ú¡μh`‹m乳˜摂取V^場合f„#空腸#回腸#大腸#肝臓#脾臓#血漿m miR375, miR200c 量j差n無Jb^"

45

関Ven#Gu ‹m報告K血中移行˜示唆V^最初‘Rgn上述m通Œ_K#彼‹n 34～102 g mÒé

m報告gi‘25) "彼‹n#Ò»新生仔jÒ»m初¿¯æô摂取fn同様m事象K起R‹iJb^R

乳m~#A‘Cn成熟乳m~˜摂取TZe飼育V#

g#}^#牛乳由来 miRNA ˜除去V^餌A‘Cn

初乳m~f飼育V^新生仔Ò»血中 miRNA mCN

含有X‘餌˜Ú¡μj 4 週間摂取TZ^gR“#cJjcCe#成熟乳m~f飼育V^群g比較V#

除去餌摂餌Ú¡μ血中fn#含有餌摂餌Ú¡μ血中

初乳中j多C miRNA K多N#成熟乳j多C miR-

g比較V# miR 29b K約 6 割減少V^Rg„示V

NA n少iJb^Rg˜示V^"Ò»初乳j由来X

eC‘"‘何‹Jm因子K仔Ò»消化管j作用V#結果gV

RmŠEj経口摂取後j血中j移行X‘RgK示

e特定m血中 miRNA K増加V^可能性„A‘K#

唆T’‘乳由来 miRNA fA‘K#血液˜介V^遠乳由来 miRNA K血中j移行X‘可能性˜示V^点

隔臓器wm到達j関Ve„検討KiT’eC‘"乳f興味深C"\m後 Baier ‹jŠŒ#牛乳 250 mL

n細胞培養液ihg比較X‘g多数m£ª¹¹ôÜ

～1 L ˜摂取V^ÎÄ成人m血中j#牛乳中j多C

˜含‚^ƒ#牛乳由来£ª¹¹ôÜ˜Åå¿«ÃæmiR 29b, miR 200c K摂取V^牛乳m用量依存的Ìæôm担体gVe利用X‘Rg˜検討V^研究K

j 増 加 X ‘ R g # miR 29b m » ô ® ¿ Ä f A ‘A‘"同研究fn#蛍光åÕçV^牛乳由来£ª¹

RUNX2 m末梢血単核球jIP‘発現K増加X‘R¹ôÜ˜ÈôÅÚ¡μj経口投与V#血中色素K投

gK示T’^41)"米ih植物j„ miRNA K存在X

与後 144 時間}f検出T’‘Rg#肝臓#脾臓#― 39 ―

乳業

技術

肺#腎臓#脳ih複数m臓器f検出T’‘Rg#安n受容細胞f翻訳T’#機能VE‘Rg#内包T’

全性確認m^ƒå¿Äj牛乳由来£ª¹¹ôÜ˜投‘^™pN質分子„機能X‘Rg˜考慮X‘g#乳与V^gR“#単回投与 6 時間後#連日投与 15 日

由来£ª¹¹ôÜj含}’‘ mRNA †^™pN質

後mCY’jICe„血中中性脂肪K減少X‘Rg„重要fA‘"K示T’eC‘42) "}^# Manca ‹n#蛍光åÕmRNA j関Ve#筆者‹m行ib^å¿Ä乳清çV^牛乳由来£ª¹¹ôÜ˜Ú¡μj投与V^g

J‹直接抽出・精製V^ RNA m mRNA ÚŸªéR“#投与量jŠ‘„mm#肝臓#腎臓#心臓#脳› è Ÿ 解 析 f n # 10,948 種 類 m mRNA ˜ 検 出

ih複数m臓器j到達V得‘Rg˜示VeC‘43)"

19)#¡³生乳由来£ª¹¹ôÜm mRNA ÚŸV#

一方f乳由来£ª¹¹ôÜ#miRNA m血中移行ªé›èŸ解析fn19,320 種類m mRNA ˜検出V

†遠隔臓器到達j関Ve否定的i報告„存在X‘"^17) "発現量K多C„mn各種¦¸Ÿï#各種乳

Laubier ‹n miR 30b ˜過剰発現TZ^Äåïμ清^™pN質ih#乳^™pN質˜¯ôÅX‘´¢Ç¿ªÚ¡μm乳˜乳仔Ú¡μj摂取TZemRNA †æØ¹ôÜ構成^™pN質˜¯ôÅX‘„#胃˜除N各臓器g血中f miR 30b mèÕçnmRNA K多Jb^" Chen ‹nÒ»乳由来£ª¹

変化KiJb^g報告VeIŒ44) # Title ‹n#合¹ôÜJ‹16,304m mRNA ˜検出VeIŒ#†n

成 miRNA g比較V#乳由来 miRNA K消化酵素jŒ乳関連^™pN質#æØ¹ôÜ構成^™pN質˜

対Ve分解抵抗性fA‘Rg˜#乳仔Ú¡μ消化管¯ôÅX‘ mRNA K多Jb^Rg˜報告VeC

内容物分析J‹示VeC‘„mm#miR375, miR‘48）"現在mgR“乳中 mRNA m機能n明‹Jj

200c Ê¿ª›¡ÄÚ¡μm乳仔j野生型Ú¡μm

ibeCiCK#筆者‹m報告J‹#乳清†乳由来

乳˜摂取TZ^場合g#KO Ú¡μm乳˜摂取TZ£ª¹¹ôÜ中j存在X‘ mRNA n#乳中^™p^場合m#乳仔Ú¡μ血中IŠr各臓器中 miR 

N質m量g必YV„一致ViC"RmRgn#乳由375, miR200c èÕçn変•‹iJb^Rg˜報告

来£ª¹¹ôÜ中m mRNA K#^™pN質翻訳後

V e C ‘45) " ^ _ V # 前 者 m 報 告 j 対 V e n #m^_m残渣fniCRg˜示唆VeC‘"miR 30b K\„\„£ª¹¹ôÜ内j含}’eC

乳由来£ª¹¹ôÜjcCeÓéÂ¥ôÜ解析˜

iJb^可能性K考G‹’eIŒ46) #後者m報告

行ib^報告„CNcJ存在X‘"Reinhardt ‹nj 対 V e n # 野 生 型 Ú ¡ μ 乳 j miR 375, miR 

牛乳由来£ª¹¹ôÜj 2,107種類m^™pN質˜

200c K本来高発現VeCiCRg#両 miRNA K

確認V#£ª¹¹ôÜÚô¦ô^™pN質_Pfi£ïÅ±ŸÄô³μ・£¨¹±ŸÄô³μj関与X

N#乳脂肪球被膜（Milk fat globule membrane;‘RgJ‹#消化管jIP‘£ª¹¹ôÜ取Œ込~

MFGM ）関連^™pN質K多N含}’eC‘Rg

j問題K生W^可能性K指摘T’eC‘47) "乳由˜報告VeC‘49)"}^# Samuel ‹n¡³初乳#

来£ª¹¹ôÜm血中移行†遠隔臓器到達j関V#

成熟乳由来£ª¹¹ôÜjcCeÓéÂ¥ôÜ解析

上記報告˜表 3 j}gƒ^"˜行iC#初乳由来£ª¹¹ôÜj 8,124 種類#成8.

乳由来£ª¹¹ôÜj含}’‘ mRNA#^™pN質#lncRNA jcCe

熟乳由来£ª¹¹ôÜj 4,443種類m^™pN質˜
同定V#成熟乳g比較V#初乳由来£ª¹¹ôÜj
n自然免疫反応†炎症反応j関連X‘^™pN質K
多CRg˜示VeC‘50) "「 6.

上述V^ŠEj様々i生理作用K報告T’eC‘

乳由来£ª¹¹ô

乳由来£ª¹¹ôÜfA‘K#各生理機能j関V

Üm作用（ in vivo ）」m項f 35,000 g f調製V^£e#£ª¹¹ôÜ中m責任分子n必YV„明‹Jjª¹¹ôÜ（35 K）g100,000 g f調製V^£ª¹

ibeCiC"£ª¹¹ôÜjn miRNA _Pfi

¹ôÜ（100 K）間j生理活性j差KA‘Rg35)˜

N# mRNA †^™pN質„含}’eIŒ# mRNA

紹介V^K# Benmoussa ‹n#両£ª¹¹ôÜj

Vol. 69. 2019― 40 ―

共通X‘^™pN質K 1,838 種AŒ# 35 K, 100 K

j持cRgjiŒ#R’‹分子K「£ª¹¹ôÜ」

各々jm~存在X‘^™pN質˜\’]’20, 41種

Úô¦ôgVe頻用T’‘K#例Go超遠心jŠb

同定V# 35 K jm~認ƒ‹’‘^™pN質n主j

e回収V^膜小胞j対Ve¡¢μ»ïÒé¿Ä˜行

翻訳#細胞増殖#細胞寿命j関与X‘分子K#100

iC#R’‹分子m発現K認ƒ‹’^gVe„#£

K jm~認ƒ‹’‘^™pN質n代謝†免疫j関ª¹¹ôÜ以外m膜小胞˜含}iCgn限‹iC"

与X‘分子K多Cg推測T’‘gVeC‘51)"

従be#本稿fn#広N認知T’eC‘「£ª¹

乳由来£ª¹¹ôÜjn#200残基以上f^™p「£ª¹¹ô
¹ôÜ」gCE名称˜使用VeL^K#

N質˜¯ôÅViC long non-coding RNA (lncR-Ü」研究jICen#£ª¹¹ôÜ以外m膜小胞˜NA）„存在X‘"Karlsson ‹n#ÎÄ母乳由来£

含‚例KA‘Rg†#£ª¹¹ôÜ˜調xeC‘jª¹¹ôÜjcCe qPCR jŠŒ 87 種m lncRNA„関•‹Y#別名称f記載T’eC‘可能性KA‘˜調x#55種類m lncRNA ˜検出V^52)"Zeng ‹点j注意C^_L^C"現在fn上記理由J‹#混

n³ô¬ï±ôjŠŒ牛乳由来£ª¹¹ôÜ中j

乱 ˜ 避 P ‘ ^ ƒ j 「 細 胞 外 小 胞 （ Extracellular

3,481 種 類 m lncRNA ˜ 検 出 V # 高 発 現 V e C ‘vesicle; EV）」g呼uRg˜「国際細胞外膜小胞学

lncRNA n免疫機能#骨芽細胞形成#神経系発達i会（International Society for Extracellular Vesicles;

hj関与X‘Rg#泌乳時期jŠbe発現量K異i

ISEV）」K提唱VeC‘"名称†調xeC‘膜小胞‘Rg˜示V#口腔J‹消化管下部}fm消化条件

m実態j関X‘混乱n#「£ª¹¹ôÜ」研究全般

˜模V^ in vitro digestion ÞÃç˜用C#牛乳由j共通X‘課題fA‘"来£ª¹¹ôÜ#IŠr内包T’‘ lncRNA K安}^#「£ª¹¹ôÜ」研究全般j言G‘Rgf

定fA‘Rg˜示V^53)"上述m通Œ#lncRNA nnA‘K#特j乳由来£ª¹¹ôÜ研究f課題ji\m定義K「200残基以上m^™pN質情報˜持^‘Rgj#£ª¹¹ôÜm精製方法K挙Q‹’‘"iC（non-coding）RNA」gT’eC‘K#近年#「乳」m場合#£ª¹¹ôÜ調製前j乳清˜調製X

一 部 m lncRNA n ^ ™ p N 質 j 翻 訳 T ’ e C ‘‘必要KA‘K#乳清調製m^ƒm¦¸Ÿï除去j（多Nn 100 ›ÛÊ酸以下mÙæÖÓ½Å）RgK„ EDTA jŠ‘除去#遠心jŠ‘除去#酸沈殿j

明‹JjibeLeC‘54)"lncRNA J‹翻訳T’Š‘除去ihKAŒ#統一T’eCiC"従be現‘新規ÙæÖÓ½Ån#生命jgbe重要i役割˜

在„乳清調製方法K\m後m£ª¹¹ôÜ調製j与担beC‘g考G‹’eIŒ#乳由来£ª¹¹ôÜ

G‘影響jcCe研究KiT’eC‘55,56)"遠心jj含}’‘ lncRNA † lncRNA J‹翻訳T’^ÙŠ‘除去j関Ven#12,000 g f„ CD63陽性m膜æÖÓ½ÅK生体j機能X‘i‹o大変興味深C"

小胞K一定量除去T’eC‘RgK示T’eI

9.

Œ57,58) #報告jŠben\m後 35,000 g, 70,000 g

乳由来£ª¹¹ôÜ研究m今後m課題

m遠心˜行iERgf¦¸Ÿï˜除去VeC‘研究

細胞K分泌X‘膜小胞jn#大LT†#起源gX„A‘"Rm^ƒ#現在乳由来£ª¹¹ôÜm生理‘細胞jŠbe#ÚŸªéÕ³ªç#£ªÄ¹ôÜ

機能j関Ve報告T’eC‘研究m中jn#結果的ih£ª¹¹ôÜ以外m„m„存在X‘"所謂「£j£ª¹¹ôÜm中f„特j小TC集団m~˜対象ª¹¹ôÜ」n#細胞内f£ïÅ¹ôÜ内j腔内小

j調xeC‘RgjibeC‘„m„AŒ#上述m

胞（ intraluminal vesicle; ILV ）K形成T’#多胞35 K £ª¹¹ôÜg 100 K £ª¹¹ôÜf\m効性£ïÅ¹ôÜ（ multivesicular endosome; MVE ）果K異ib^gX‘報告35) „踏}G‘g#乳清調

jib^後#MVE m膜m一部K陥入V#出芽X‘

製方法j„注意˜払E必要KA‘"乳清調製後m£

RgjŠbe産生T’‘"\m^ƒ# ILV 内j多ª¹¹ôÜ調製j関Ve„#密度勾配#超遠心#沈N含}’‘ÂÄåμÍÇïm CD9 † CD63 ˜膜上殿試薬#抗体#¦åÜih様々i選択肢KA‘Rg― 41 ―

乳業

技術

J‹#「乳由来£ª¹¹ôÜ総体」m生理機能m一(2007).

般化jcCen#乳清調製・£ª¹¹ôÜ精製m方6)法統一化K重要g考G‹’‘"

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抗原#表面糖鎖#内包X‘^™pN質#RNA 分子

Bian, Z., Sun, F., Lu, J., Yin, Y., Cai, X., Sun,

個々m機能†#標的細胞m違CihK明‹Jji‘

Q., Wang, K., Ba, Y., Wang, Q., Wang, D.,

Rgf乳由来£ª¹¹ôÜK生体j与G‘機能m詳

Yang, J., Liu, P., Xu, T., Yan, Q., Zhang, J.,

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