受賞者講演要旨《農芸化学女性企業研究者賞》

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カカオポリフェノールに関する包括的研究株式会社 明治
はじめに夏目みどり

単離した (－)-epicatechin ならびにその重合物であるプロシア

カカオ豆は，チョコレートやココアの原料として，アフリニジン類の銅イオンを酸化開始剤に用いた際のヒト LDL の酸カ，中南米，東南アジアの熱帯雨林地域において生産されてい化抵抗性について調べた．その効果は，銅イオンによって惹起る．生のカカオ豆を発酵・乾燥させた後，生産工場にて焙焼・さ れ た 場 合 (＋)-catechin＞procyanidin B2≧(－)-epicatechin≧

磨砕されカカオマスが調製される．このカカオマスに砂糖，ミprocyanidin C1＞cinnamtannin A2，の順位で活性が認められルク等を加え成型したものがチョコレートであり，油分を一部た．成分によって効果に差はあるものの，いずれの成分にも除いたものがココアである．チョコレートは 1797 年より日本

LDL の酸化を抑制する作用があることが確認された．他にも，で食されてきた嗜好食品で，2014 年には国内の菓子販売金額赤血球膜酸化抑制や superoxide radical 消去，ニトロチロシンが和生菓子を抜きトップになり，身近な食品の 1 つになってい生成抑制を明らかとした．これらの結果が，生活習慣病に対する．我々の研究グループでは，当社の主要商品であるチョコる研究へとつながっていった．

レートの原料であるカカオ豆に含まれるポリフェノールに着目

2.

カカオポリフェノールの吸収代謝し研究を進め，カカオポリフェノールの構造をはじめ吸収代

カカオポリフェノールの生理機能を明らかにするためには，謝，それらが有する抗酸化作用，抗炎症作用，抗アレルギー作

これら成分の吸収代謝について明らかにするする必要がある．

用，抗動脈硬化作用や抗がん作用など多彩な生理機能を明らか

そのためカカオポリフェノールの主要成分であるエピカテキンとしてきた．以下，これまで行ってきた研究概要についてお示の吸収代謝についてラットおよびヒトで評価した．ラットおよ

しする．
1.

カカオに含まれるポリフェノール成分とその活性1-1.

成分および抗酸化活性

びヒトにココアあるいはチョコレートを摂取させ，血中のエピカテキンおよびエピカテキン代謝物の分析を行った．その結果，エピカテキンはラットおよびヒトで摂取後速やかに吸収され，1はじめに，カカオに含まれるポリフェノールの構造を明らか

時間から 2 時間で最大血中濃度となり，尿中へと排泄されるこにした．カカオマスを脱脂，70％アセトンで抽出，定法によりとを確認した．血中では，グルクロン酸や硫酸基で抱合体化さ精製し構造決定をした．フラボノイドである (－)-epicatechin，れた代謝物で存在することを見出した．また尿中の代謝物を定(＋)-catechin，(－)-epicatechin の 重 合 物である 2 量 体 の procy-量し，摂取量の 30～50％が吸収されることを明らかにした．さanidin B2，procyanidin B5，3 量体の procyanidin C1，4 量体のらにエピカテキンをラットおよびヒトに摂取させ，尿中から代cinnamtannin A2 が主要成分であることが確認された（図 1）．
次いで，市販のチョコレートやココア中のポリフェノール量謝物を精製単離し NMR 等を用い，構造を確認した．ラットおよびヒト尿中から得られた代謝物の構造式を示す（図 2）．

を定量分析した．チョコレートやココア中には多くのポリフェ興味深いことに，ラットとヒトではグルクロン酸抱合体の結ノールが含まれていることが確認された．また，チョコレート合位置が異なることがわかった．これら代謝物のアゾ化合物おとココアのポリフェノールの成分の組成比は，異なることが分かった．ココアは，一般にその製造工程中でアルカリゼーションを行なう，そのアルカリによりポリフェノールが分解され，チョコレートとは組成比が異なったと推察された．
単離した成分について，その活性を評価した．カカオ豆から

図 1 カカオポリフェノールの構造（a）(－)-epicatechin，（b）procyanidin 類

図 2 Epicatechin の代謝物の構造（a）3′-O-methyl-(－)-epicatechin（rat）（b）(－)-epicatechin-7-O-glucuronide（rat）（c）3′-O-methyl-(－)-epicatechin-7-O-glucuronide（rat）（d）(－)-epicatechin-3′-O-glucuronide（human）（e）4′-O-methyl-(－)-epicatechin-3′-O-glucuronide（human）

54《農芸化学女性企業研究者賞》

よび銅イオンによるヒト LDL の酸化抵抗性を評価したところ，受賞者講演要旨

高カカオポリフェノールココアならびに高カカオチョコ

4.

エピカテキンの B 環のヒドロキシル基が抱合体化あるいはメレートによる臨床試験

チル化されると，本来エピカテキンが持つ抗酸化活性が減弱し動物実験の結果からココアやチョコレートを用いた臨床試験

た．抗酸化活性という視点では，カテコール構造が重要であることがわかった．吸収代謝，および代謝物の活性を測定することで，体内でのエピカテキンの働きを推察する手がかりとなっ4-1.

ココアによる脂質代謝に関する臨床試験

動物実験によってカカオポリフェノールの LDL 酸化抑制作用等が明らかになったことから臨床試験での評価を行なうことた．
3.

を行い，その健康効果について評価を進めた．

動物モデルを用いた抗がん作用，動脈硬化，糖代謝への効果
3-1.にした．健常な日本人の男女 160 名を 4 群に分け，カカオポリフェノールを含まないプラセボココアと濃度の異なる 3 種類の抗がん作用ココアを，それぞれ 4 週間摂取させた．その結果ポリフェノー

カカオポリフェノールの抗がん作用については，ヘテロサイ

ルを含むココアを摂取させた被験者では，LDL-コレステロー

クリックアミンに対する抗変異原作用，DNA 酸化障害抑制作用

ル濃度の低下，HDL-コレステロールの上昇，LDL-コレステといった作用，さらにはマウス皮膚 2 段階発癌試験による抗プロールの酸化抵抗性の上昇が認められた．また摂取前の LDL-ロモーション作用がある．またヘテロサイクリックアミンのコレステロールが 125 mg/dL 以上の被験者ではそれらの結果

一 種 で あ る 2-amino-1-methyl-6-phenylimidazo[4,5-b] pyridineが顕著になることが分かった．これらの結果よりカカオポリ（PhIP）による乳腺発がんモデルにおいて，カカオポリフェノー

フェノールは動脈硬化発症を予防する可能性を示した．

ルの投与が乳腺腫瘍生成に抑制的な作用を示すこと，F344 系雄性ラットを用い，多剤のイニシエーターによる多臓器発がん試
験において生存期間を有意に延長させることを報告した．
3-2.

抗動脈硬化作用4-2. チョコレートによる生活習慣病に関する大規模臨床試験
高カカオチョコレートを 4 週間摂取させたときの生活習慣病への影響について，健康な日本人男女 347 名を対象に評価を行った．その結果，血圧低下作用，HDL コレステロールの上脳心血管系疾患は日本人の死因上位の疾患である．その原因

昇，酸化マーカーである 8-OHdG の低下，炎症マーカーであるである動脈硬化の予防作用について評価を行った．コレステ

hs-CRP の低下が認められた．これら結果から高カカオチョコ

ロールを負荷したウサギにカカオポリフェノール含有餌を摂取

レートを摂取することで，動脈硬化進展を抑制する方向で働くさせると，血中 LDL の酸化抵抗性の増加が認められた．さら可能性を見出した．に Apo-E 欠損マウスを用いた実験では，カカオポリフェノー

おわりにル摂取が病理学的評価により動脈硬化病変を抑制することや大カカオポリフェノールは，in vitro ならびに動物実験により動脈弓においてコレステロールの結晶の増加が抑制されたこと

抗酸化活性，糖代謝，脂質代謝改善作用，動脈硬化抑制作用なを明らかにした．同時に，病変部位での接着因子の発現抑制どを有することが認められた．さらに臨床試験ではカカオポリや，dityrosine などの修飾タンパク質の発現抑制を確認した．

フェノールを多く含むココアやチョコレートを摂取すること

その他，肝細胞 HepG2 を用いた評価では，カカオポリフェで，脂質代謝改善や血圧の低下作用などが認められた．海外のノールの各成分が ApoA1 タンパク質の増加促進作用や LDL

疫学研究においてカカオ製品を摂取することで心疾患の発症率Receptor の発現低下作用を示すことを見出し，カカオポリが低いことが報告されている．これらの結果を併せて考えるとフェノールがコレステロール代謝に与える影響の作用メカニズ

カカオ製品の摂取により動脈硬化発症を遅延させる働きがあるムを明らかにした．カカオポリフェノールが動脈硬化を抑制すことが推察される．心疾患の死亡者数が増えている日本で，おる働きがあることが推察され，臨床試験へとつながった．

いしく健康に良いカカオ製品を提供することで，心疾患発症を3-3.

糖代謝への作用予防する一助になればと考えている．

糖尿病の罹患率が世界中で増加していること，加えて糖代謝異常は動脈硬化発症の一要因であることから，糖尿病予防を目謝的として糖代謝への作用についてカカオポリフェノールの評価（現辞を行った．Streptozotocin で膵臓機能を低下させ糖尿病を発症大学）寺尾純二教授，岡山大学大学院吉田隆志名誉教授，波多させたラットでは，コントロール群に比較し，カカオポリフェ野力教授，お茶の水女子大学（現ノール群で血糖値，尿糖値が有意に低いことが確認され，さら神戸大学大学院芦田均教授に感謝いたします．また，本研究に白内障について評価した結果，その白濁が抑制されているこは，明治製菓株式会社並びに株式会社 明治にて，中村哲夫，とが確認された．またカカオポリフェノールには，筋肉細胞で滝沢登志雄，越阪部奈緒美（現の Glut4 の誘導やインクレチンの誘導効果が認められることが吾，染谷恵，三本木千秋，草野亜紀子，佐々木和恵，武藤裕分かった．カカオポリフェノールの摂取により，糖代謝異常や子，福田久美子，伊藤裕之，山地健人，大柴幸男など多くの先糖代謝異常によって生じる QOL 低下が抑制される可能性が示

輩方，同僚とで行った研究です．関係者の皆様に，この場を借唆された．

りまして御礼申し上げます．

本研究のご指導をいただきました名古屋大学大学院愛知学院大学）大澤俊彦教授，徳島大学大学院（現甲南東洋大学）近藤和雄教授，芝浦工業大学教授），馬場星