22-05

取扱説明書(BTQ-101)

Code No. BTQ-101
Code No. BTQ-101X5
Code No. BTQ-101X10
保存温度 －２０℃
増幅効率、伸長性に優れた高性能 Taq ポリメラーゼ

Ｂｌｅｎｄ Ｔａｑ®
3’→5’エキソヌクレアーゼ活性（Proof reading 活性）を有さない Taq DNA polymerase などの polⅠ型ポリメラーゼにProof reading 活性を有するα型ポリメラーゼを微量混合（Blend）することによって、Long PCR などの性能が飛躍的に向上することが分かっています。１） Blend Taq® は、最高レベルの PCR パフォーマンスを実現するため、Taq DNA
polymerase にα型ポリメラーゼが至適濃度で Blend されています。
・ 優れた DNA 増幅効率： 微量の鋳型からでも効率よく PCR を行うことができます。
・ 優れた伸長性： Taq DNA polymerase に比べ PCR における伸長性が向上しています。
・ 簡単な条件設定： Taq DNA Polymerase と同じサイクル条件で PCR を行うことができます。

１．内容物
Blend Taq® は容量別に次の 3 種類をご用意しております｡
BTQ-101(250U×1 本)
Blend Taq® (2.5U/μL)

100μL×1 本

10× Buffer

1000μL×1 本

2mM dNTPs

1000μL×1 本

BTQ-101X5

BTQ-101X10(BTQ-101)×5(BTQ-101)×10（注）PCR 反応時の Mg2+最終濃度は 2mM となります。
２．安全上の注意
本製品は､研究用試薬です｡診断・臨床用試薬として使用しないでください｡本製品の使用にあたっては､実験室での一般の注意事項を厳守し､安全に留意してください｡
３．性能･品質
Blend Taq® は､各ロットにおいて､human genome β-globin 17.5kb の増幅を確認して出荷しております｡＜製品の内容・技術に関するお問合せ＞
東洋紡（株）バイオプロダクト営業部 テクニカルラインTEL 06-6348-3888 FAX 06-6348-3833
開設時間 9:00~12:00, 13:00~17:00 (土日祝日、休日を除く)
E-mail: tech_osaka@toyobo.jp
Ａ３６６５Ｋ[URL] https://lifescience.toyobo.co.jp/-1-

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４．PCR プロトコール（１）PCR 反応液の調製・凍結している試薬は完全に融解してからご使用ください｡
・反応液を調製する前に各試薬を十分混合してからご使用ください｡
Components

VolumeFinal Concentration

10× PCR Buffer for Blend Taq
Blend Taq® (2.5U/μL)
テンプレート

5 μL
0.5 μL
1-50 ng

1×1.25 U/reaction
Plasmid10-1000 ng
1 μL
5 μL
to 50 μL

各プライマー (10μM)
2mM dNTPsAutoclaved, distilled water

Genome0.2μM each
0.2mM

全ての液を添加した後､反応液を十分混合してからサーマルサイクラーにセットしてください｡（２）PCR サイクル条件
ターゲットの長さによるサイクル条件例
SegmentTarget< 1kb

1kb ～ 6kb

1 Predenaturation

94℃
2min.

2 Denaturation

94℃
30sec.

3 Annealing
4 Extension

Primer Tm-5℃ (55～60℃)
30sec.
72℃
1min.

72℃
1min./kb PCR target>6kb

Number ofCycles
168℃
1min./kb PCR target

30５．使用上の注意（１）変性時間（Denaturation time）は至適化する必要があります。典型的な変性時間は 94℃で 25～30sec.，98℃
で 5～10sec.です。
（２）6kb 以上のターゲットの PCR にはプライマーの Tm 値が 70℃を越えるように設計することをお勧めいたします。
（３）10kb 以上のターゲットには、dNTPs の最終濃度を 0.3～0.4mM にすることをお勧めいたします。
（４）Blend Taq®の PCR 産物は直接 TA cloning vector にクローニングできます。十分量の形質転換体とポジティブクローンを得るためには、ライゲーション時間を長くすることが効果的です。1kb 以上の PCR 産物は２時間から一晩の反応を推奨いたします。

弊社では、最近接塩基対法（Nearest Neighbor method）に基づく Tm 計算プログラムを公開しています｡弊社のウェブページ (https://lifescience.toyobo.co.jp/user_data/pcr_tm.php) からダウンロードしてご利用になれます。

＜製品の内容・技術に関するお問合せ＞
東洋紡（株）バイオプロダクト営業部 テクニカルライン
TEL 06-6348-3888 FAX 06-6348-3833
開設時間 9:00~12:00, 13:00~17:00 (土日祝日、休日を除く)
E-mail: tech_osaka@toyobo.jp[URL] https://lifescience.toyobo.co.jp/-2-

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６．実施例【human β-globin 遺伝子領域(3.6kb)増幅比較】
human β-globin 遺伝子 3.6Kb をターゲットにして Blend Taq®とＡ社混合型酵素で増幅比較を行いました。Blend Taq®はゲノム 5ng においても良好な増幅が認められ、Ａ社混合型酵素に比べて優れた増幅効率を示しました。
Lane 1： 0 ng human genome DNA
Lane 2： 5 ng human genome DNA
Lane 3： 10 ng human genome DNA
Lane 4： 20 ng human genome DNA
Lane 5： 40 ng human genome DNA※弊社ウエブサイトの製品ページに本製品の実施例を掲載しております。ご確認ください。
https://lifescience.toyobo.co.jp/detail/detail.php?product_detail_id=163

７．関連商品
内容Code.No.

250 U×1 本(250 U×1 本)×5

BTQ-201
BTQ-201X51 mL

BTQ-1B

100 回用FSK-101F<高効率 TA クローニングキット>
TArget CloneTM

10 回用

TAK-101<ホットスタート用抗 Taq 抗体>
anti-Taq high100 μL×1 本(100 μL×1 本)×5

TCP-101
TCP-101X5

200 回用NPK-601

1 mL

NTP-201

品名<ホットスタート PCR が可能>
Blend Taq® -PlusBlend Taq® / Blend Taq® -Plus- 用 Buffer<ReverTra Ace®を用いた cDNA 合成キット>
ReverTra Ace -α-®

<PCR 産物の精製>
MagExtractorＴＭ -PCR & Gel Clean updNTPs Mixture(2mM)

８．参考文献（１） Barnes,W.M., Proc.Natl.Acad.Sci.USA,91:2216-2220(1994)＜製品の内容・技術に関するお問合せ＞
東洋紡（株）バイオプロダクト営業部 テクニカルライン
TEL 06-6348-3888 FAX 06-6348-3833
開設時間 9:00~12:00, 13:00~17:00 (土日祝日、休日を除く)
E-mail: tech_osaka@toyobo.jp[URL] https://lifescience.toyobo.co.jp/-3-

取扱説明書(BTQ-101)【製造・販売元】－価格・在庫に関するお問い合わせ－

東洋紡株式会社 バイオプロダクト営業部 (大阪)〒530-0001 大阪府大阪市北区梅田一丁目 13 番 1 号
大阪梅田ツインタワーズ・サウス
TEL 06-6348-3786 FAX 06-6348-3833
E-mail : order_lifescience@toyobo.jp
東洋紡株式会社 バイオプロダクト営業部 (東京)〒104-8345 東京都中央区京橋一丁目 17 番 10 号 住友商事京橋ビル
TEL 03-6887-8819 FAX 03-6887-8951
E-mail : order_lifescience@toyobo.jp-4-