Glycative Stress Research
Online edition : ISSN 2188-3610
Print edition : ISSN 2188-3602
Received : April 1, 2020
Accepted : April 20, 2020
Published online : June 30, 2020
doi:10.24659/gsr.7. 2_132

Original article

Actions of various sweeteners on rat sperm.
Yukiko Minamiyama † 1), Keiko Kobayashi 1), Yuta Noguchi 2),
Shigekazu Takemura 3), Hiroshi Ichikawa † 2)
1) Food Hygiene and Environmental Health Division of Applied Life Science,
Graduate School of Life and Environmental Sciences, Kyoto Prefectural University, Kyoto, Japan.
2) Department of Medical System Protective Health and Medicine Laboratory,
Graduate School of Life and Medical Sciences Doshisha University, Kyotanabe, Kyoto, Japan.
3) Department of Hepato-Biliary-Pancreatic Surgery, Graduate School of Medicine, Osaka City University, Osaka, Japan† This author contributed equally to this work.
Glycative Stress Research 2020; 7 (2): 132-141(c) Society for Glycative Stress Research（原著論文：日本語翻訳版）

各種甘味料のラット精子におよぼす影響
南山幸子 † 1)、小林慧子 1)、野口湧太 2)、竹村茂一 3)、市川 寛 † 2)1) 京都府立大学大学院生命環境科学研究科食環境安全性学
2) 同志社大学大学院生命医科学研究科予防健康医学
3) 大阪市立大学大学院医学研究科肝胆膵外科† These authors contributed equally to this work.

抄録［目的］カロリー低下を目的とした食品には砂糖以外の甘味料（化学物質）が多く用いられている。しかしながら、これらの甘味料の中には、活性酸素（ROS）が関与することにより生じる精子数減少や精子運動率低下といった生殖機能毒性を発現することが考えられる。本研究では、日常的に摂取頻度の高い食品添加物甘味料であるスクロース（Suc）、スクラロース（SCL）、アスパルテーム（APM）、またはネオテーム（NTM）の in vitro におけるラット
精子への影響を評価した。さらには APM および NTM をラットに摂取させ、精子への影響を検討した。

［方法］動物は 12 ～ 15 週齢の Wistar 系雄性ラットを用いた。精子は精巣上体尾部より取り出し、実験に供した。

In vitro の実験では精子を含む TYH 培地の原液を作製し、各種、各濃度の添加物を加え、5 分後に精子運動解析

装置（SMAS）で精子運動率を測定した。また、精子を含む TYH 培地精子原液を 5 倍希釈し、L- 012（100 µM）
を ROS 用蛍光プローブとして添加し、ケミルミネッセンス法によって発光強度を測定した。In vivo では最大

無毒性量以下の APM（ 250 mg/kg/day）または NTM（40 あるいは 100 mg/kg/day）を混餌飼料として投与し、連絡先： 教授 南山幸子
京都府立大学大学院生命環境科学研究科食環境安全性学〒606 -8522 京都市左京区下鴨半木町 1- 5
TEL：075- 703- 5409 e-mail：yukiko-m@ kpu.ac.jp
共著者：小林慧子 k-kobayashi@kpu.ac.jp; 野口湧太 uta090226@gmail.com;
竹村茂一 takemura@ med.osaka-cu.ac.jp; 市川 寛 hichikaw@mail.doshisha.ac.jp（ 1 ）Glycative Stress Research 2020; 7 (2): 132-141
本論文を引用する際はこちらを引用してください。
(c) Society for Glycative Stress ResearchGlycative Stress Research

2、4 、8 週間後に血液および精巣上体尾部などを採取した。In vitro と同様に精子運動能および ROS 産生量を測定し、臓器については酸化ストレス関連蛋白質などについて解析した。

［結果］In vitro において、ROS 産生量は Suc（ 500 µM 以下）、SCL（ 1 µM 以下）または APM（ 10 µM 以下）
添加ではほとんど影響しなかったが、NTM（ 0.1 µM）添加により対照群と比較して増加、NTM（ 1 µM）添加により減少する傾向がみられた。精子運動率は Suc（ 5 mM 以下）、SCL（ 10 µM 以下）、APM（ 100 µ M 以下）添加ではほとんど影響を受けなかった。しかし、NTM（ 0.1 µM 以上）添加により精子運動率は有意に減少した。
また In vivo において、APM 投与は精子数を変化させなかったが、2 週間では対照群と比較して ROS 産生量が有意に上昇した。8 週間では総精子運動数が減少傾向を示した。また NTM は 4 週間投与において ROS 産生が有意に上昇し、8 週間では精子の直線速度、曲線速度、頭部振幅、頭部振動数が低下した。精子数および総精子

運動数に影響しなかった。また、ROS 産生の増加と並行して精巣上体尾部の 4-hydroxy-2 -nonenal（4-HNE）

陽性の脂質過酸化修飾蛋白質が増加した。

［結論］いくつかの甘味料は精子に影響し、APM および NTM 投与では、精子の機能低下に先立ち、ROS 産生が増加した。本機序にはミトコンドリアの電子伝達系異常、抗酸化能低下による酸化ストレスなどの原因が考えられた。

KEY WORDS : 甘味料、酸化ストレス、精子運動能、活性酸素（ROS）産生

はじめに
コンビニ、ファストフード、外食産業の拡大に伴い食品
添加物の影響が懸念されている。この背景には高齢社会や共稼ぎ、単身家庭など日本の社会情勢を反映している。ま

に発表している。この指針では大人は 1 日ティースプーン

約 6 杯の砂糖摂取制限ということになる。この制限はトマ
トケチャップのティースプーン 1 杯に約 4 g 、炭酸飲料には約 4 0 g の砂糖が含まれていることを考えると、ごくわ

た、輸出入や産地からの食品運搬が可能となりフードマイ

ずかの摂取量に制限されることになる。よって、益々人工レージの増加も問題となっている。このため、食中毒防止

甘味料の利用率が高まることが懸念され、その安全性評価

や食品の変敗を防ぐために多くの工夫がなされている。そを慎重に行う必要がある。そこで本研究では、代表的な甘の代表的なものに食品添加物、殺虫剤、防腐剤、防カビ剤、農薬などがある。これらには多くの化学物質が使用されており、内分泌撹乱物質（環境ホルモン）となり得るものは

味 料 で あ る sucrose（Suc）、sucralose（SCL）、aspartame（APM）および neotame（NTM）のラット精子への影響を検討した。なお、精子は細胞膜中に多価不飽和脂肪酸を多生体への影響が問題視されて、生殖器異常や受胎率低下とく含むため、酸化傷害を受けやすく、生体内で最も外的刺

社会性認知を低下させるといった報告がある 2, 3)。代表的な価は優れた高感度の安全性試験にもなる可能性がある。

いった生殖機能毒性 1) や発達期の脳に作用し、学習能力やものに食品容器などのプラスチック可塑剤として用いられ激に敏感な細胞と言われており 8) 、これを用いた安全性評

人工甘味料の SCL 、APM、NTM は甘みが Suc と比較

る bisphenol A（BPA）があり、抗酸化酵素活性の低下によ

し て そ れ ぞ れ 約 600 倍、 約 200 倍、 約 10,000 倍 強 い た

精子運動率の低下や精子数の減少といった生殖機能毒性を

低カロリーであるために近年よく使用されている。しかしる活性酸素種（ROS）産生の増大を引き起こし、ラットの発現することが報告されている 4, 5)。その他、かつて流産防止剤として用いられていた diethylstilbestrol（DES）もヒ

トにおいて精子数の減少や精子運動率の低下させることが6)

明らかになっている 。また、日常摂取する食品添加物のめ 9-11)、同じ甘みを出すために必要な量は Suc より少なく、

人工甘味料はその安全性が疑問視されているものも多い。

例えば、APM は経口摂取において腸管腔から吸収され、フェニルアラニンやアスパラギン酸そしてメタノールへと代謝されるが、この代謝物のメタノールが ROS を産生

一部が生殖機能毒性を有するとの報告がなされている7)。

させ、肝臓に障害を引き起こすことやフェニルアラニンの

現在、糖尿病人口の増加やカロリー制限の目的で人工増加により脳のドーパミンやノルエピネフリン濃度に影響

甘味料を利用している人が多くなっている。天然甘味料

し、脳機能を修飾する可能性があるとの報告がある 12-14)。

甘味料の一つであるが、生活習慣病や齲歯の予防を目的にされるジペプチドメチルエステル誘導体で化学構造が類似の sucrose は砂糖の主成分であり、先進国における主要な2002 年から WHO は糖類の摂取量について、一日のエネ

ルギー摂取量の 10 % 未満を推奨してきた。さらに、2020

年より 5 %（約 25 g）未満とする新しい指針を 2014 年 3 月

また、NTM は APM の還元的 N- アルキル化によって合成するが（Fig. 1）、フェニルアラニンとアスパラギン酸に加水分解されないためにフェニールケトン尿症などにも使用できることで使用頻度が増加すると考えられる。

（ 2 ）甘味料のラット精子におよぼす影響

a)b)

CH 2OHHOOHHCH 2OH
O
CI
H
OH H
H

CH 2OH
H
O
H HO

O H
OH H

CH 2OH

OH

OH H

c)

O

OH

H

O

CI H 2C

H

H

HO

OH

H

CH 2CI

d)
HO

O
O

OCH 3

N
H
OH

NH 2

H

O

NH

O

N
H

H O

CH 3

O

H 3C

O

H 3C

CH 3

Fig. 1. Structural formula of sweeteners.
a) Sucrose (Suc). b) Sucralose (SLC). c) Aspartame (APM). d) Neotame (NTM).

1992 年、デンマークの Carlsen 博士らは世界 20 カ国の
男性で 50 年間に精子数および精液量が約半分に減少した大阪）を 5 g/kg 腹腔内注射して麻酔をかけ、腹部大動脈かと報告しており 15)、その原因として食品添加物や環境ホル

後、解析のために血液および精巣上体尾部、睾丸などを採モンなどの影響が示唆されている。すなわち、食品添加物取した。なお、動物実験は、同志社大学の動物実験委員会の安全性評価として精子毒性の有無を調べることが重要での承認を受けて実施した。

ある。

本研究は、Suc、SCL 、APM および NTM は in vitro で、さらに APM および NTM はラットに投与し、精子毒性発

現の有無およびその機序について検討した。

ら採血後に常温の 0.9 % 生理用食塩水で灌流した。犠牲死

血漿のラジカル消去能測定

各種ラジカルは X-band Microwave Unit ESR 装置（RE
Series, 日本電子、東京）を用いて既報に従って測定した 16)。
各種ラジカルの解析には WIN- RAD（Version 1. 30: ラジ
カルリサーチ、東京都日野市）を用いた。

方法

精子機能の測定材料

精巣上体尾部の表面にハサミで 2 mm 程の切り込みを・試 薬

入れ、つまんで精子を押し出した。出てきた精子をピンより供与された。その他の試薬は生化学基準のものを用間以上 37 ℃ 、CO 2 インキュベーター内で温めておいた

APM および NTM はアスタリール株式会社（富山、日本）

いた。
・動 物
本実験において、12 週齢～ 15 週齢 Wistar 系雄性ラット（日本クレア、東京、日本）を用いた。In vivo 実験では対照（Control）群には標準飼料として CE -2（日本クレア）を用いた。APM および NTM は、それぞれ 250 mg/kg/day、

4 0 あるいは 100 mg/kg/day になるように混餌して自由摂取させた。水はいずれの群も自由摂取とし、2 、4 、8 週間（和光純薬、飼育後に 25 % に ethyl carbamate（ウレタン）

セットの先端ですくうようにして取り、あらかじめ 3 時

TYH 培地（三菱化学メディエンス、東京、日本）1. 5 mLの中に入れ、5 分間インキュベート後にゆ っくりとタッピ
ングし、精子を含む TYH 培地の原液を作製した。 In vitro
実験では、精子原液を 37 ℃ の TYH で 5 倍希釈し、その200 µL にそれぞれ 100 倍濃度の食品添加物を 2 µL 添加、
5 分後に専用のチャンバープレート（ SC20-01-04-B: Leja,
Nieuw-Vennep、Netherlands）に 4 µL 入 れ、 精 子 運 動 解析装置 SMAS（ディテクト、東京）を用いて精子運動率（sperm motility: %）、直線速度（straight velocity: µm/sec）、（ 3 ）Glycative Stress Research

曲線速度（curve velocity: µm/sec）、直進性（straightness:

精子ミトコンドリアの膜電位

頭部振動数（head frequency: H z）を測定した。

（Biotum, Fremont, CA, USA）を使用してミトコンドリア

直 線速度／曲線速度）、頭部振幅（head amplitude: µm）、JC-1 Mitochondorial Membrance Potential Detection kitの電位差を測定した。

精子からの活性酸素（ROS）産生

原 液 を 1 × 10 6 個 /mL の 濃 度 の 細 胞 液 に な る よ う にを評価した。

TYH 培地で調製し、neotame 溶液を加え、37 ℃、CO 2 イ
ンキュベーターで 30 分間インキュベ ートした。
その後、400 × g 、5 分間、室温で遠心し、上清を除去した後、J C-1 reagent を Assay Buffer で 1：10 に希釈したものを 500 µL 入れ、3 7 ℃、CO 2 インキュベーターで 15
分間インキュベートした。その後、400 × g 、5 分間、室温で遠心し、上清を除去した後、assay buffer を 2 mL 加えて 400 × g 、5 分間、室温で遠心した。再度繰り返し assay
buffer を 300 µL を加え、96 well black plate（NUNC）の
1 well につき 100 µL ずつ加え、蛍光プレート―リーダー（生細胞 (Red)：Ex. 560 nm、Em 595 nm 、アポトーシス
誘導細胞 (Green)：Ex.485 nm、Em 535 nm）で測定した。

し た 後、70 µm の セ ル ストレイ ナ ー（ REF352350, BD

統計

上記で作製した精子原液を 3 時間以上 37 ℃ 、CO 2 イ

ンキュベーターで温めておいた TYH 培地で 5 倍希釈し、精子 5 倍希釈溶液を作製した。精子 5 倍希釈溶液 5 µL を

DMEM メディウム（D6046 、Sigma、大阪）945 µL に入れ、ケミルミネッセンス法（AccuFLEX Lumi400 、日立
ヘルスケアシステムズ、東京）によって発光強度を測定した。開始 30 秒後に蛍光補足剤である 2 mM L012（和光純薬）溶液 50 µL（最終濃度 100 µM）、開始 100 秒後に各添加物溶液 10 µL 、開始 24 0 秒後に 10,000 U/mL に調製した SOD（日本化薬、東京、日本）溶液 5 µL（最終濃度 100

U/mL）を添加した。ピーク時の発光強度にて ROS 産生量
In vivo 実験における精子数は左精巣上体尾部を細切

Falcon, NJ, USA）で不純物をろ過し 50 mL ファルコンに入れた。これをリン酸緩衝生理食塩水（ PBS (-) ）で 20 倍
希釈し、セルカウンターで精子数を数えた。ここから 1. 5
mL の TYH 培地精子液中に含まれる精子の総数を計算し各データの統計学的処理は、統計解析ソフト IBM SPSS
ver.22（日本 IBM 、東京）を用いた。一元配置分散分析のTurkey 検定を用いて、p < 0.05 を有意水準とした。

て求めた。

結果

ウエスタンブロット法
精巣上体尾部のサイトゾルは臓器の 9 倍量になるように RIPA バッファーを添加し、回転数 20 krpm で 30 秒間、氷上でホモジナイザー（ NS-360D：マイクロテックニチオ

In vitro における食品添加物の精子への影響

Suc、SCL または APM 添加による ROS 産生量は影響しなかった（ Fig. 2）。NTM 添加は 0.01 nM 以下で ROS 産生

ン、千葉、日本）によりホモジネートした。その後、これが増加する傾向がみられたが、それ以上の濃度では逆に低京）で 4 ℃ 、回転数 12,000 rpm で 10 分間遠心した。上清運動率に対してほとんど影響しなかったが、NTM は 0.1

を遠心分離機（CT15RE：日立ヘルスケアシステムズ、東を 1.5 mL 用エッペンドルフ管に回収し、臓器サイトゾル原液とした。その適量の蛋白量を SDS-PAGE した。分子量マーカーとして、プレステインド蛋白質マーカー（和光純薬）を用いた。

Canget Signal Solution 1（東洋紡、大阪）で 1 : 5,000 に希釈した一次抗体 、anti-HNEJ-2 抗体（日本老化制御研究

下する傾向にあった。Suc、SCL または APM 添加で精子µM 以上で有意に減少した（Fig. 3）。精子の直線速度、曲線速度、直進性、頭部振幅、頭部振動数には影響しなかった。

NTM による精子運動率の低下はミトコンドリアの膜電位低下と相関した（Fig. 4）。

APM および NTM 投与による生体 への影響

APM および NTM 投与による摂食量や体重に有意な差所、静岡県袋井市）を加えて、気泡が入らないように密封し、4 ℃ で一晩反応させた。一晩反応後、TBST に浸して室温にて 7 分間振盪器で振盪し、その後溶液を交換した。この操作を 3 回繰り返した。次に、メンブレンをハイブリダイ
ゼーションバッグに入れ、Canget Signal Solution 2 で 1 :20,000 に希釈した二次抗体（ダコ・ジャパン、京都）を加えて、気泡が入らないように密封し室温で 90 分間反応させた。反応後、メンブレンを TBS-T に浸し 7 分間振盪器で振とうした。これを 3 回繰り返した。洗浄後、メンブレン
を発色液に 2 分間浸した。反応後、Image Quant Las 4000
mini（GE Healthcare Lifescience, Buckinghamshire, UK）
でバンドを検出した。

は無かった。また、血漿のフリーラジカル消去活性は、両添加物投与によりいくつかのラジカル種で低下し、特に 2.

週間後では OH・および O 2 − 消去活性が低下した（Fig. 5）。

APM および NTM 投与による精子からのROS 産生と過酸化脂質修飾蛋白質の発現

APM 投与 2 週間では対照群と比較して ROS 産生量を有意に上昇させたが（Fig. 6-a）、8 週間では対照群と比較してROS 産生量に有意な変化はなかった。
NTM（40 mg/kg/day）投 与 2 週 間 で は 対 照 群 と 比 較
して ROS 産生量を変化させなかったが、4 および 8 週間

（ 4 ）

甘味料のラット精子におよぼす影響

a)

b)

c)

d)

Fig. 2. ROS production from sperm by addition of sweeteners.
a) Sucrose (Suc). b) Sucralose (SLC). c) Aspartame (APM). d) Neotame (NTM). Results are expressed as mean values ± SE,
n = 4 ~ 8. ROS, reactive oxygen species; SE, standard error.

a)

b)

c)

d)

Fig. 3. Actions of sweetener on sperm motility.
a) Sucrose (Suc). b) Sucralose (SLC). c) Aspartame (APM). d) Neotame (NTM). Results are expressed as meanvalues ± SE, n = 4 ~ 8, * p < 0.05 vs control without sweeteners by Turkey test.

（ 5 ）Glycative Stress Research

Fig. 4. Decrease actions of NTM on the membrane potential of sperm mitochondria.
NTM was added to the sperm suspension and incubated for 30 min. Results are expressed
as mean values ± SE, n = 6, * p < 0.05 vs control without sweeteners by Turkey test. NTM,
neotame; SE, standard error.

a)

1O

b)

2W
. OH

8W
. OH

150

150

.

1O

50

0

0

RO

ROO

.

.

O2 -

2

50

. CH3

.

100

O2 -

100

2

. CH3

RO

：CT L
：APM

ROO

.

.

：NTM

Fig. 5. Radar chart of plasma free radical scavenging activity after administration of APM and NTM.
a) At 2 weeks. b) At 8 weeks. Results are expressed as values when ROS elimination rate in control plasma defined as
100%. APM, aspartame; NTM, neotame; ROS, reactive oxygen species.

（ 6 ）甘味料のラット精子におよぼす影響

a)

b)

c)

Fig. 6. ROS production from sperm and 4-HNE-modified protein in the cauda epididymis induced
by administration of APM and NTM.
a) ROS production. b) 4-HNE-modified protein (53 kDa). c) Membrane image by Coomassie brilliant blue

staining. Results are expressed as mean values ± SE, n = 3 ~ 5, * p < 0.05 vs control by Turkey test. APM,
aspartame; NTM, neotame; ROS, reactive oxygen species; 4-HNE, 4-hydroxy-2-nonenal; SE, standard error.

（ 7 ）Glycative Stress Research

で は 対 照 群 と 比 較 し て ROS 産 生 が 上 昇 した（Fig. 6-a）。

精子機能への影響意に増加した。また、NTM（40 mg/kg/day）投与 4 およ

APM も NTM 投 与 で は 精 子 数 お よ び 総 精 子 運 動 数 を変化させなかった（Fig. 7）。APM 投与では直進性（s/c）、
頭部振幅（µm）、曲線速度（µm/sec）直線速度（µm/sec）
を変化させなかった）。 Fig. 8 に対照群を 100 % とした時のAPM または NTM 投与群の直進性、頭部振幅、頭部振動数を示した。NTM 投与 8 週間では直進性が増加傾向を示

増加し、4 週間では有意であった。

の可能性を意味した。

睾丸・精巣上体尾部において、53kDa、28kDa の場所に

4 -hydroxy-2-nonenal（HNE）修飾蛋白質のバンドが検出された。どの臓器のバンドも同じ濃淡の傾向がみられたので、Fig. 6-b では精巣上体尾部における 53kDa のバンドを示した。APM 投与 2 週間で HNE 修飾蛋白質の発現は有び 8 週間では対照群と比較して HNE 修飾蛋白質の発現がし、頭部振幅、頭部振動数が有意に減少し、受精能の低下

Fig. 7. Actions of APM and NTM
administration on total motile
sperm count.

The sperm motility was measured 2,
4 or 8 weeks after administration of
APM (250 mg/kg/day) or NTM (40 or
100 mg/kg/day). Results are expressed
as mean values ± SE, n = 3 ~ 5. APM,
aspartame; NTM, neotame; SE,standard error.

a)

b)

c)

Fig. 8. Effects of APM or NTM administration on
sperm motility.
a) Straightness. b) Head amplitude. c) Head frequency.
Results are expressed as mean values ± SE, n = 3 ~ 5,
* p < 0.05, ** p < 0.01 vs control by Turkey test. APM,
aspartame; NTM, neotame; SE, standard error.

（ 8 ）甘味料のラット精子におよぼす影響

耐糖能異常を惹起することが報告された 20)。近年、人工考察
本研究は、甘味料が精子へおよぼす影響について Wistar

系ラットを用いて in vitro および in vivo で検討した。

In vitro において Suc、人工甘味料の SCL または APM

添加によって精子運動機能に影響はなく、精子毒性はみら

甘味料入りのソフトドリンクを飲むことと、脳卒中および認知症リスク上昇には関係があることが、4,000 人以上を対象とした分析結果から判明した。観察研究では、少なく

とも 1 日に 1 回人工甘味料入り飲料を飲む人は、飲まない人に比べて、10 年間で虚血性脳卒中のリスクがほぼ 3 倍、れなかった。しかし、NTM 添加により濃度によって精子

アルツハイマー病のリスクは 2.9 倍であることが報告された。さらに、NTM（ 0.1 µM 以上）添加では、精子ミトコン

結果がすべて対応している可能性は不明であるためさらな運動率の有意な減少および ROS 産生量の上昇が観察されドリアの膜電位は有意に低下した。一方、in vivo において、APM 投 与 に よ り 精 子 数 に は 変 化 は み ら れ な か っ た が、8 週間で総精子運動数が減少傾向を示した。また、NTM
投与では精子数および総精子運動数に変化はなかったが、受精機能に重要な直進性の増加、直線速度、曲線速度、

た 21)。しかし、これらには相関関係があるものの、原因とる追跡が必要であるとしている。さらに、砂糖以外の甘味料摂取についてのメタ解析による健康への影響が報告されたがまだ明確な結果は得られていない 22)。

しかしながら、本研究において最大無毒性量以下の投与により、生体の抗酸化能低下や精子からの ROS 産生亢進

頭部振幅、頭部振動数が低下した。また、精子からの ROS

および精子運動機能への影響が生じることが判明したこと増加させることが示された。これらの所見は、bisphenol
A などの内分泌かく乱物質の投与試験の結果 17) と同様で

さらに、生涯にわたって暴露される遺伝要因以外の化学

産生は、このような精子の機能低下に先立ち、ROS 産生をある。

から、これまでの毒性試験を再評価することも重要である。
物質すべてをエクスポソームという概念が提唱されている
23, 24)。エクスポソームは放射線や食品添加物など外因性の精子の中片部には多くのミトコンドリアがあり、運動す

ものと酸化ストレスや炎症など内因性の要因もすべてエクに電子伝達系から ROS が産生されている。そのため ROSが散見されるようになった 26-28)。反対に、トランスクリプ

るためのエネルギー源として ATP を産生していると同時が過剰産生された場合、ミトコンドリアから漏れ出すと同時に精子の機能障害や運動率低下を引き起こす原因となる。本研究では、APM および NTM 投与により ROS 産生と同時に ω6 系高度不飽和脂肪酸の酸化二次生成物である

HNE 修飾蛋白質が増加することが判明した。以上のこと

スポソームであり、炎症性腸疾患 25) や様々な疾患との関連
トーム分析により、食事介入でエクスポソーム関連疾患を予防できることも報告されている29)。このような概念に基づいて、疾患予防および健康維持のためのさらなる研究が必要不可欠である。

より、酸化ストレスの増大により精子の膜が酸化されたことが精子機能低下の一因であると考えられた。

In vitro で精子毒性がみられなかった SCL は分子には塩結論素がついており、オルガノクロライドの一種ということで安全性を疑問視されている。遺伝子発現において無毒性であることや生殖に影響がないという報告もあるが 18, 19)、代謝物の影響を考慮する必要があるので in vivo での酸化ス
トレスの観点からの検討が必要であるかもしれない。

いくつかの甘味料は酸化ストレスによる精子毒性を有することが判明した。

利益相反申告現在、我が国では食品添加物の AD I（一日摂許容量）は安全係数を 100 として NOAEL（動物試験においての最大無毒性量）× 1 /100 で設定されており、APM および NTMの NOAEL はラットにおいてそれぞれ 4,000 mg/kg/day、

96.5 mg/kg/day である。これに対して本研究の介入実験では APM および NTM をそれぞれ NOAEL より低濃度の量であるラット体重（kg）当たり 250 mg/kg/day、40 mg/

kg/day で検討したにもかかわらず精子毒性を有する可能性が示唆された。平成 23 年の厚生労働省の調査によると、
APM の一日摂取量は ヒトの体重（kg）当たり 0.019 mg/
kg/day と報告されているため、APM 単独での毒性は無視できるかもしれないが、長期的な複合摂取の影響を考慮する必要がある。よって、食品添加物の安全性を慎重に評価することが重要であると考えられる。

をもたらして、
人工甘味料が腸内細菌叢の変化（dysbiosis）
（ 9 ）

該当なし。

Glycative Stress Research

参考文献
1) Issam C, Samir H, Zohra H, et al. Toxic responses todeltamethrin (DM) low doses on gonads, sex hormones
and lipoperoxidation in male rats following subcutaneous
treatments. J Toxicol Sci. 2009; 34: 663-670.
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isobutyl-paraben exposure alters anxiety and passive
avoidance test performance in adult male rats. Neurosci
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