2011年（48巻）第1号
第１号（英⽂誌）
総説

⿃類の摂⾷調節における視床下部メラノコルチンシステム（要旨）

豊後貴嗣・⽩⽯純⼀・河上眞⼀
研究報告
遺伝・育種(研究ノート)
形質転換ニワトリ作成のための⽀持細胞を使⽤しない ニワトリ胚盤葉細胞の単純培養 (要旨）松原悠⼦・廣⽥あずさ・傍島英雄・鏡味裕・⽥上貴寛・安江博

飼料・栄養
鶏の腸管各部位における飼料穀物のアミノ酸消化率の⽐較 (要旨）上曽⼭博・本⽥和久・⻑⾕川信
マリーゴールド花の粉末またはその抽出物由来のルテインによる⽣および加熱卵における卵⻩⾊の増強 （要旨）
Kanda Lokaewmanee・⼭内⾼円・⼩森勉・⻫藤

恵⼦

産卵鶏へのアスタキサンチン給与は⾼温貯卵した有精卵の孵化率を改善する (要旨）齋藤⽂也・喜多⼀美
⾼地誘導性の低酸素状態下におけるブロイラーの成⻑成績と⼼臓ミトコンドリア機能に及ぼすコエンザイムQ10の影響 (要旨）
Beiying Huang・Yuming Guo・Xiaofei Hu・Yi Song(研究ノート)
2種のブロイラーの成⻑成績と筋⾁強度に関する市販ファイターゼの評価 (要旨）
Ashley L. Shaw ・John P. Blake・Edwin T. Moran, Jr.
⽣理・繁殖
鶏筋芽細胞の分化に伴うタンパク質分解関連遺伝⼦発現の変化(要旨）中島⼀喜・⽯⽥藍⼦・勝俣昌也
凍結融解操作がニワトリ始原⽣殖細胞の⽣存性および機能性に及ぼす影響 (要旨）中村隼明・⾅井⽂武・宮原⼤地・森貴史・今井⼀樹・渡辺晴陽・⼩野珠⼄・武⽥久美⼦・韮澤圭⼆郎・鏡味裕・⽥上貴寛
ニワトリ⽩⾎病阻害因⼦を⽤いて樹⽴した新規ニワトリ胚性幹細胞の特徴 (要旨）中野幹治・有澤謙⼆郎・横⼭聡美・⻄本真樹・⼭下裕輔・坂下真耶・江崎僚・松⽥治男・古澤修⼀・堀内浩幸
免疫・衛⽣
産卵鶏⼦宮部におけるトリβ-ディフェンシン-３および-11蛋⽩密度のリポ多糖刺激に伴う変化 (要旨）
Ahmad M. Abdel Mageed・磯部直樹・吉村幸則
要旨第１号（英⽂誌）
⿃類の摂⾷調節における視床下部メラノコルチンシステム︓総説
豊後貴嗣・⽩⽯純⼀・河上眞⼀
広島⼤学⼤学院⽣物圏科学研究科
東広島市 739-8528
摂⾷⾏動の調節を理解することは、動物⽣産において⾮常に重要な課題である。ニワトリの摂⾷量は、様々な制御機構が関係した複雑なホメオスタシ
ス機構によって調節されている。近年、脳と末梢の神経ペプチドとの緊密な関係が明らかとなってきた。 視床下部漏⽃核は，末梢のエネルギー状態を感知する重要な脳部位であり、そこに存在するメラノコルチンシステムは、これらの情報をもとに神経ペプチド （メラノコルチン、ニューロペプチドYおよびアグーチ関連蛋⽩質）を介して中枢の内分泌機構を調節している。本総説は、ニワトリヒナの摂⾷調節機構についてメラノコルチンシス
テムを中⼼にその役割および末梢と中枢における神経ペプチドの関係について概観する。
キーワード︓メラノコルチンシステム、プロオピオメラノコルチン、ニューロペプチドY、アグーチ関連タンパク質、摂⾷量、ニワトリヒナ
形質転換ニワトリ作成のための⽀持細胞を使⽤しない ニワトリ胚盤葉細胞の単純培養
松原悠⼦１・廣⽥あずさ・傍島英雄・鏡味１農業⽣物資源研究所

裕・⽥上 貴寛・安江 博

茨城県つくば市、305-8602
キメラ形成能を有するニワトリ胚盤葉細胞に遺伝⼦を導⼊し、⽣殖系列キメラニワトリを介して次世代に形質転換ニワトリを得るのは、ひとつの有効な形質転換法である。しかし、in vitro で胚盤葉細胞を培養するには、⼀般的には⽀持細胞を必要とする。今回、ニワトリ胚盤葉細胞の培養と移植の簡素化を⾏うために、⽀持細胞を使⽤せずに⽣殖系列キメラ形成能を有する胚盤葉細胞の培養⽅法を試みた。⿊⾊⽻装を有する横斑プリマスロック(i/i)由来の胚盤葉細胞を培養し、ニワトリ胚性幹細胞が有する多能性細胞のマーカーであるALP活性、PAS陽性性、抗SSEA-1抗体、抗EMA-1抗体に対する反応性を調べた。その結果、培養した多くの細胞がこれらの性質を有していた。放卵直後、2⽇培養あるいは5⽇培養した胚盤葉細胞を、⽩⾊⽻装を有する⽩⾊レグホン(I/I)のレシピエント胚に移植して キメラを作出した。キメラニワトリが、横斑プリマスロック由来の細胞を⽣殖細胞にもてば、後代には、⿊⾊⽻装の⼦孫を得ることができる。今回、⽀持細胞を使⽤せずに5⽇間培養した細胞は⽣殖系列キメラ形成能を有することが証明され、形質転換ニワトリを簡易に作出する⼀つの⽅法が提案できた。
キーワード: 胚盤葉細胞, ニワトリ, キメラ, ⽣殖細胞伝達性, 簡素化細胞培養法
鶏の腸管各部位における飼料穀物のアミノ酸消化率の⽐較
上曽⼭博・本⽥和久・⻑⾕川信神⼾⼤学⼤学院農学研究科
神⼾市 657-8501
腸管にフィステルを装着した鶏を⽤いて、飼料穀物であるトウモロコシ、ソルガム、⼩⻨、⽪⻨及び裸⻨の給与がアミノ酸の消化率に及ぼす影響を調べた。鶏の 空腸遠位部、回腸中央部、回腸遠位部或いは直腸遠位部にフィステルを装着した。上述の飼料穀物を唯⼀のタンパク質源として、それぞれの試験飼料に添加した。腸管内消化物をそれぞれの部位で採取し、消化物中のアミノ酸含量を測定した。鶏の腸の部位間におけるアミノ酸消化率に有意な違いは認められなかった。 しかしながら、⽪⻨飼料区においては、13種のアミノ酸（Asp、Thr、Ser、Gly、Ala、Val、Met、Ile、Leu、Tyr、Phe、 His及びArg）の消化率がトウモロコシ飼料給与区のそれに⽐べ有意に低かった。ソルガム、⼩⻨或いは裸⻨飼料給与区においては、それぞれ5種 （Gly、Met、Lys、His及びArg）、9種（Asp、Thr、Gly、Ala、Met、Ile、Leu、Tyr及びArg）或いは10種 （Asp、Thr、Ser、Gly、Ala、Val、Met、Ile、Leu及びTyr）のアミノ酸の消化率が、トウモロコシ飼料給与区のそれに⽐べ有意に低かった。これらの結果は、本研究で⽤いた飼料穀物の中でトウモロコシが最も⾼いアミノ酸消化率を⽰すこと及びサンプリング部位は飼料穀物のアミノ酸消化率に有意な影響を及ぼさないことを⽰す。
キーワード︓アミノ酸消化率、⼤⻨、トウモロコシ、ソルガム、⼩⻨
マリーゴールド花の粉末またはその抽出物由来のルテインによる⽣および加熱卵における卵⻩⾊の増強Kanda Lokaewmanee１・⼭内⾼円１・⼩森勉2・⻫藤

恵⼦2

１⾹川⼤学農学部応⽤⽣物科学科，⾹川県⽊⽥郡三⽊町, 761-0795
2コーキン化学株式会社，東⼤阪市中⽯切町，579-8014
マリーゴールド花(MFM)由来のケン化させないルテインならびにマリーゴールド花から抽出された(MFE)由来のケン化させたルテインが卵⻩⾊に及ぼす影響について検討するために, 90⽻の産卵鶏 (Boris Brown) を9区に分けた。基礎飼料 (18.0% CP, 2800 kcal/kg ME, 0% ルテイン, 対照区) にMFMまたはMFEのルテイン含量が両者とも10, 20, 30 および40 mg/kgになるように添加し，⾃由摂⾷下で３週間飼育した。摂⾷量と産卵については毎週記録し，卵質と卵⻩⾊については毎週各区から5個の卵を⽤いて検索した。卵⻩⾊はロシュカラーファンによる⽬視測定を⾏うとともに，分光⾊差計を⽤いて卵⻩⾊，イエローインデックス，明度(L*)，⾚み(a*)，⻩⾊み(b*)，⻩⾊みに対する⾚みの割合(a/b)，彩度および分光反射率を客観的に測定した。摂⾷量，体重，産卵率，産卵量，卵殻強度，卵殻の厚さ，卵殻 率，卵⽩率，ハウユニットについてはルテイン添加による影響は⾒られなかった。40 mg/kg MFMルテイン区ならびに20, 30と40 mg/kg MFEルテイン区は対照区よりも濃い卵⻩⾊を⽰した(P<0.001)。⼆元配置分散分析では，⽬視ならびに客観的卵⻩⾊，a*およびa/bがルテ イン添加処理(P<0.05)およびルテイン添加濃度(P<0.001)によって改善された。以上の結果は，約30〜40 mg/kgのルテインの添加は，卵⻩⾊を濃くさせ，MFE由来のケン化させたルテインはMFM由来のケン化させないルテインよりも効果的であることを⽰唆する。
キーワード: 卵⻩⾊，加熱卵，ルテイン，マリーゴールド, 分光⾊差計
産卵鶏へのアスタキサンチン給与は⾼温貯卵した有精卵の孵化率を改善する
齋藤⽂也・喜多⼀美
岩⼿⼤学⼤学院連合農学研究科、盛岡市上⽥3-18-8
本研究は、産卵鶏へのアスタキサンチン(AX)給与と貯卵条件（温度及び期間）の交互作⽤が有精卵の孵化率に及ぼす影響について調査することを⽬的とした。単冠⽩⾊レグホン産卵鶏を4群に分け雄鶏と共に飼育した。基礎飼料にファフィア酵⺟を添加することにより4レベルのAXを含む実験飼料を調製した。AXレベルは0、5、10及び20ppmとした。各群から得られた有精卵は、湿度70％、温度10℃または21℃で0、4、7、14及び21⽇間貯卵した。孵化した雛の数を数え、孵化しなかった卵は胚の死亡⽇齢を調べた。10℃で貯卵した場合、貯卵期間に関わらず⾼い孵化率が維持され、産卵鶏へのAX給与は孵化率に影響を及ぼさなかった。⼀⽅、21℃で貯卵された有精卵の孵化率は、10℃で貯卵された場合より有意に低く、産卵鶏へのAX給与により孵化率は上昇した。産卵鶏⽤飼料のAX含量が0 ppmから20 ppmまで増加すると、21℃貯卵により低下した孵化率は段階的に改善された。孵卵開始から7⽇間における胚の死亡率において飼料中AXレベルと貯卵温度との間に交互作⽤が認めら、21℃貯卵における胚の死亡率の抑制に効果を⽰した。これらの結果より、産卵鶏へのAX給与は⾼温貯卵によって低下した孵化率を改善させることが明らかとなり、このAXによる孵化率上昇効果は胚発⽣の初期段階において有効であることが⽰唆された。
キーワード:アスタキサンチン、産卵鶏、貯卵温度、ファフィア・ロドチーマ、孵化率
鶏筋芽細胞の分化に伴うタンパク質分解関連遺伝⼦発現の変化
中島⼀喜・⽯⽥藍⼦・勝俣昌也

畜産草地研究所、茨城県つくば市池の台２、305-0901
鶏筋芽細胞の分化における⾻格筋のタンパク質分解関連遺伝⼦発現の推移を調べた。鶏筋芽細胞の分化（MyoDならびにMyogenin mRNA発現）が促進され、増殖（PAX-7 Myogenin mRNA発現）が抑制されると同時に、タンパク質分解関連遺伝⼦（ユビキチン、プロテアソームC2サブウニット、m-calpain⼤サブユニット、カテプシンB、カスパーゼ3 mRNA）発現も減少した。以上の結果は、鶏筋芽細胞の分化促進には、タンパク質分解関連遺伝⼦発現の減少がが重要である可能性が⽰唆された。
凍結融解操作がニワトリ始原⽣殖細胞の⽣存性および機能性に及ぼす影響
中村隼明1,2,3・⾅井⽂武1・宮原⼤地1・森貴史1・今井⼀樹1・渡辺晴陽1・ ⼩野珠⼄1・武⽥久美⼦2・ 韮澤圭⼆郎2・鏡味裕1・⽥上貴寛2
1 信州⼤学農学部 上伊那郡南箕輪村 399-4598 2 畜産草地研究所 つくば市 305-0901

3 ⽇本学術振興会 特別研究員DC2

始原⽣殖細胞(PGCs)によりニワトリ遺伝資源を安定的かつ恒久的に保存するには、凍結融解操作がニワトリPGCsの⽣存性および機能性へ及ぼす影響を明らかにする必要がある。PGCsは⽩⾊レグホーン種(WL)、横班プリマスロック種(BPR)、ファイオミ種(FA)胚の⾎液中よりそれぞれ収集した。なお、移植による機能解析を⾏うため、⼀部のPGCsを蛍光標識した。100個のPGCsを1単位としたグループを形成し、それぞれ試験に⽤いた。凍結区
ではPGCsを緩慢冷却法により凍結後、液体窒素中にて1ヶ⽉間保存した。融解は定法に従いおこなった。⼀⽅、⾮凍結区ではただちにPGCsを⽣死判定あるいは移植に⽤いた。凍結融解後におけるPGCsの回収率は54.3%であり、品種間に差はみられなかった。PGCsの⽣死判定はトリパンブルー染⾊により⾏った。凍結区におけるPGCsの⽣存率(85.7 %)は⾮凍結区(99.2 %)と⽐較して有意に低く(P < 0.05)、品種間に差はみられなかった。凍結区では融解後に回収されたPGCsから、⾮凍結区では100個のPGCsからおのおの30個を選び、WL胚の⾎流中へ移植した。凍結融解後のPGCsを移植した場合、5⽇胚⽣殖巣において観察された標識PGCsの数は、⾮凍結区のPGCsを移植した場合の52.8%であった (P < 0.05)。また、⾮凍結区では、品種間において観察された標識PGCsの数に有意な差がみられ、WLが最も多く、次いでFA、BPRの順であった(P < 0.05)。以上の結果より、凍結融解操作に伴うダメージにより、ニワトリPGCsの機能性が低下することが⽰唆された。また、凍結融解後における回収率と⽣存率を考慮に⼊れた場合、凍結保存したPGCsの約46.5%が融解後に利⽤可能と推察された。
キーワード︓ ニワトリ、始原⽣殖細胞、凍結融解操作、⽣存性、機能性
ニワトリ⽩⾎病阻害因⼦を⽤いて樹⽴した新規ニワトリ胚性幹細胞の特徴
中野幹治1・有澤謙⼆郎2・横⼭聡美1・⻄本真樹2・⼭下裕輔1・ 坂下真耶1・江崎僚2・松⽥治男1・古澤修⼀1・堀内浩幸1,2
1広島⼤学⼤学院⽣物圏科学研究科 東広島市 739-8528
2広島県産業科学技術研究所 東広島市 739-0046
遺伝⼦組換えニワトリは、基礎研究から応⽤研究分野まで幅広い利⽤が期待され、その作出⽅法のルートの⼀つとして、胚性幹（ES）細胞がある。本研究では、ニワトリ由来の⽩⾎病阻害因⼦を⽤いることによって、新規のニワトリES細胞（cESC）を樹⽴し、その特徴解析を⾏った。新規
cESCは、100⽇以上の⻑期継代培養が可能であり、多能性マーカーであるニワトリNanog（chNanog）および⽣殖細胞特異的因⼦であるchickenvasa homolog（Cvh）の発現を維持していた。また、enhanced green ﬂuorescent protein（EGFP）遺伝⼦導⼊後、1細胞からの細胞クローニングが可能であり、その後もchNanogやCvhの発現が維持されていた。これらの結果は、cESC中のCvh陽性細胞が⻑期間にわたって増殖を繰り返すことができることを⽰している。この細胞をレシピエント胚へ移植した結果、胚⾎液中を循環する始原⽣殖細胞（PGC）や⽣殖隆起に移動するPGCでEGFPの発現を観察した。またこの移植実験では、胚全体でのEGFPの発現、また⽻⽑⾊キメラニワトリを誕⽣させることも可能なことから、多能性も維持されていることが明らかとなった。これらの結果から、我々が樹⽴した新規cESCは、遺伝 ⼦組換えニワトリの作成へ向けた有効な⼿段となり得るものと考えられる。
キーワード︓ニワトリ胚性幹細胞、始原⽣殖細胞、chNanog、Cvh、ニワトリ⽩⾎病阻害因⼦
産卵鶏⼦宮部におけるトリβ-ディフェンシン-３および-11蛋⽩密度のリポ多糖刺激に伴う変化
Ahmad M. Abdel Mageed・磯部直樹・吉村幸則
広島⼤学⼤学院⽣物圏科学研究科，東広島市 739-8528
本実験は産卵鶏⼦宮部に発現するトリβ-ディフェンシン(avβD)-３および-11蛋⽩の密度がリポ多糖(LPS)による刺激で変化するかどうかを明らかにすることを⽬的とした．産卵鶏の卵管をLPS投与前および投与3,6,12時間後に採取し，⼦宮部のパラフィン切⽚を作製した．これにavβD -3または-11に対する免疫染⾊を施して，免疫反応産物の密度を画像解析した．avβD -3免疫反応産物は粘膜上⽪細胞の核上部細胞質に認められ，avβD -11の産物は同上⽪細胞の頂部に検出された．avβD -3の免疫反応産物密度はLPS投与後3時間に⼀時的な低下を⽰し，その後に元のレベルに回復した．avβD -11の免疫反応産物密度はLPS投与3時間と12時間に有意に増加した．これらの結果から，avβD -3と-11は⼦宮部の粘膜上⽪に局在し，LPS刺激により刺激されるとavβD -3は同細胞から分泌され，またavβD -11は同細胞内で産⽣されて蓄積するものと推定された．これらのavβDは⼦宮部の局所的な宿主防衛のために働くものと思われた．