2010年（47巻）第1号
第１号（英⽂誌）
総説

トウモロコシ-⼤⾖粕主体の家禽⽤飼料に添加する酵素を選択する際の戦略（要旨）

Aaron J. Cowieson
研究報告
遺伝・育種
タイ在来鶏およびブロイラーの筋⾁柔らかさに関わる形質のプロテオーム解析 (要旨）
Supamit Mekchay, Tawatchai Teltathum, Sutkhet Nakasathienand and Petai Pongpaichan
異なるブロイラー品種における成⻑、屠体と⾁質形質の特性の違いについて (要旨）
Abdullah Y. Abdullah, Nafez A. Al-Beitawi, Murad M.S. Rjoup, Rasha I. Qudsieh and Majdi A. Abu Ishmais
ミトコンドリアDNA解析による中国および⽇本由来の烏⾻鶏における遺伝的類縁関係 (要旨）Bing Zhou , Shi-Yi Chen , Qing Zhu , Yong-Gang Yao and Yi-Ping Liu飼料・栄養
飼料中コエンザイムQ10の卵⻩への移⾏ (要旨）上曽⼭博・本⽥和久・北⼝可奈⼦・⻑⾕川信
酵素添加したオオムギを段階的に含む飼料を摂取したブロイラーの成⻑成績と屠体品質 (要旨）
Mohamad T. Farran, George W. Barbour, Nada N. Usayran, Ali H. Darwish,Hasan H. Machlab, Milan Hruby and Vaheʼ M. Ashkarian
コエンザイムQ10の給与が鶏のコレステロール代謝に及ぼす影響 (要旨）本⽥和久・上曽⼭博・本告友規・實安隆興・⻑⾕川信(研究ノート)
家禽⽤飼料の蛋⽩質源としてのエンドウマメ(Pisum sativum L.)の栄養学的・⽣化学的評価 (要旨）
Ganesharanee Ravindran, Catootjie L. Nalle, Abdul Molan and Velmurugu Ravindran
繁殖・⽣理
⾻髄Side population細胞を利⽤したニワトリ幹細胞の新規濃縮法 (要旨）⾅井⽂武・中村隼明・⼭本耕裕・⾠⾒浩⼀・冨成和枝・⼩野珠⼄・鏡味裕
ニワトリ初期胚⾎液より採取した始原⽣殖細胞のインビトロでの⻑期培養とレシピエント胚⽣殖系列への導⼊ (要旨）内藤充・春海隆・桑名貴

烏⾻鶏雛の始原⽣殖細胞の採取に関する微⼩重⼒の影響 (要旨）
Changsong Qian, Zhenming Zhou, Haitang Han, Chen Zhao, Xiumei Jin, Hongliang Zhao, anfen Zhang, Wei Chen, Ning Yang andZandong Li
ニワトリ胚へのステビア注⼊による影響評価︔

孵化後の発⽣、各臓器、⾎漿甲状腺ホルモン及び代謝産物、への影響 (要旨）

Mohsen Daneshyar, Jan M.C. Geuns, Johan G. Buyse, Hassan Kermanshahi, Hilke Willemsen, Zarbakht Ansari, Eddy Decuypere andNadia Everaert

ニワトリ卵胞発育に伴う⿃βディフェンシン-8，-10および-12の局在変化 (要旨）モハメド

アブデルサラム・磯部直樹・吉村幸則(研究ノート)
左右対称に発達した孵卵17⽇⽬ニワトリ胚卵巣の形態的特徴 (要旨）内藤充・春海免疫・衛⽣隆・桑名貴(研究ノート)
アイメリア・アセルブリナ原⾍感染におけるショウガ、トウガラシ、シイタケ抽出物の経⼝投与による局所免疫促進効果 (要旨）
Sung Hyen Lee, Hyun S. Lillehoj, Seung Ik. Jang, Duk Kyung Kim, Catherine Ionescu and David Bravo

要旨第１号（英⽂誌）
飼料中コエンザイムQ10の卵⻩への移⾏
上曽⼭博・本⽥和久・北⼝可奈⼦・⻑⾕川信神⼾⼤学⼤学院農学研究科
神⼾市 657-8501
疎⽔性の強⼒な抗酸化剤であるコエンザイムQ10（CoQ10）は、⾃然界に普遍的に分布している物質で、⽼化予防⽤のサプリメントとして利⽤されている。ここで、飼料中の脂溶性の栄養成分は卵⻩へ移⾏しうることが知られていることから、産卵鶏へのCoQ10給与は卵⻩中のCoQ10含量を増加させる可能性がある。本研究ではCoQ10の産卵鶏への給与が卵⻩CoQ10含量に及ぼす影響を調べた。20⽻の30週齢のボリスブラウン種の雌鶏を産卵率と卵重に基づき10⽻ずつの2群に分け、CoQ10を0或いは0.8％の含有率で含む試験飼料を28⽇間に渡り給与した。CoQ10の給与は、産卵率、飼料効率、卵重及び卵⻩重量に影響を及ぼさなかった。卵⻩中のCoQ10含量は、試験飼料給与7、14，21及び28⽇後に有意に増加した。肝臓CoQ10含量
及び超低密度リポタンパク質y（VLDLｙ）CoQ10濃度は0.8％群で0％群に対し有意に増加した。CoQ10の給与は、試験飼料給与21及び28⽇後に卵⻩コレステロール含量を有意に減少させた。これらの結果から、CoQ10を摂取した産卵中の雌鶏においては、肝臓CoQ10含量の増加が⾎漿VLDLｙCoQ10濃度を上昇させ、結果として卵⻩中のCoQ10含量が増加することが⽰唆された。
キーワード︓コエンザイムQ10、ユビキノン、卵、コレステロール

コエンザイムQ10の給与が鶏のコレステロール代謝に及ぼす影響
本⽥和久・上曽⼭博・本告友規・實安隆興・⻑⾕川信神⼾⼤学⼤学院農学研究科
神⼾市 657-8501
脂溶性の抗酸化物質であるコエンザイムQ10（CoQ10）は⽣物界に広く分布する天然化合物であり、⽼化防⽌のための栄養補助⾷品として使⽤されている。ラットにおいては、げっ⻭類におけるコエンザイムQの同族体であるコエンザイムQ9が肝臓のコレステロール合成を抑制し、⾎漿コレステロール濃度を低下させることが知られている。本研究では、我々は⾷餌CoQ10が鶏のコレステロール代謝に及ぼす影響について調べた。飼料へのCoQ10の添加は肝臓、⾎漿及び超低密度リポタンパク質（VLDL）中のコレステロールレベルを低下させた。コレステロール合成系の律速酵素である肝臓のヒドロキシメチルグルタリルCoA還元酵素（HMGR）の酵素活性は⾷餌CoQ10により有意に低下したが、HMGRのmRNA量には影響が認められなかった。これらの結果は、⾷餌CoQ10は、転写後のレベルにおいてHMGR活性を抑制することにより鶏の肝臓のコレステロール合成を抑制し、その結果、⾎漿VLDLコレステロール濃度を低下させることを⽰唆する。
キーワード︓コエンザイムQ10, ヒドロキシメチルグルタリルコエンザイムA, コレステロール7?-ヒドロキシラーゼ, 肝臓コレステロール、⾎漿コレステロール

⾻髄Side population細胞を利⽤したニワトリ幹細胞の新規濃縮法
⾅井⽂武1、中村隼明1,2、⼭本耕裕3、⾠⾒浩⼀1、冨成和枝1、⼩野珠⼄1、鏡味裕1
1信州⼤学農学部 南箕輪村 399-4598
2(独)畜産草地研究所

つくば市 305-0901

3国⽴遺伝学研究所総合遺伝研究系 三島市 411-8540
近年、ヒトやマウス等の哺乳類において⾻髄細胞から多分化能を保持する幹細胞を採取する新たな実験系が確⽴された。哺乳類の⾻髄細胞をDNA結合⾊素 Hoechst 33342で染⾊後、FACSで分離すると幹細胞においてはHoechst排出能が極めて⾼いため、Side Populationとして特異的に分離される事が明らかとなった。こうして分離された幹細胞はSide Population細胞(SP細胞)と名づけられた。しかし⿃類においては、⾻髄細胞由来の幹細胞を特異的に検出する抗体や、SP細胞分離法もほとんど報告されていない。そこで本研究においては、ニワトリ⾻髄細胞由来のSP細胞分離に関する新規実験系を開発した。こうして分離したSP細胞の形態的特徴や遺伝⼦発現を解析し、ニワトリ⾻髄SP細胞の特徴を明らかにした。ニワトリ⾻髄細胞は、10⽇齢⽩⾊レグホン種の⼤腿⾻および脛⾻から採取した。採取した⾻髄細胞をHoechst 33342の濃度1.25μg/ml、37℃、60分から90分で染⾊した。染⾊した細胞をFACS Vantageで⻑波⻑と短波⻑の2次元解析を⾏い、SP細胞を探索した。その結果ニワトリ⾻髄細胞中には約2.6%のSP細胞が存在する事が判明した。またSP細胞とMain Population (MP)細胞を回収しMay-Gruenwald Giemsa (MG) 染⾊を⾏ない形態的な特徴を解析した所SP細胞はMP細胞に⽐べ細胞が⼩さく⼤きな核を有する事が明らかとなった。更にそれぞれの細胞からRNAを得て、各種プライマー（CD34、ckit、CD4、CD8）を⽤いてRT-PCRを⾏った。その結果SP細胞における遺伝⼦の発現様式がマウス造⾎幹細胞の遺伝⼦発現と⾮常に似通っている事が判明した。これらの結果からニワトリ⾻髄SP細胞中には造⾎幹細胞が濃縮されている可能性が強く⽰唆された。以上の結果から新規に開発したSP法は有⽤なモノクローナル抗体の少ない⿃類において幹細胞を濃縮する⾮常に強⼒な⼿法の1つである事が⽰唆された。
キーワード︓⾻髄細胞、ニワトリ、フローサイトメトリー解析、造⾎幹細胞、サイドポピュレーション

ニワトリ初期胚⾎液より採取した始原⽣殖細胞のインビトロでの⻑期培養とレシピエント胚⽣殖系列への導⼊
内藤充１・春海隆１・桑名貴２

１農業⽣物資源研究所、茨城県つくば市305-8602

２国⽴環境研究所、茨城県つくば市 305-8506
ニワトリ始原⽣殖細胞のインビトロでの培養法の開発は、ニワトリ個体への遺伝⼦導⼊や希少種の⼈⼯増殖等において極めて有⽤な技術になると期待される。本研究では、初期胚⾎液より採取した始原⽣殖細胞の培養を試みた。孵卵2.5⽇⽬の初期胚（⽩⾊レグホーン、横斑プリマスロック）より⾎液を採取し、始原⽣殖細胞を⾎球細胞より分離濃縮した後、GFP遺伝⼦の導⼊処理を⾏った。処理した始原⽣殖細胞は、7⽇胚⽣殖巣由来細胞をフィーダー細胞として培養を⾏った。この際、始原⽣殖細胞とフィーダー細胞の品種は異なるようにした。培養下における始原⽣殖細胞の存在は、導⼊したGFP遺伝⼦の発現および⽤いた両品種のミトコンドリアDNAのDループ領域におけるSNPを利⽤して確認した。また、培養した始原⽣殖細胞は、レシピエント胚⾎流中へ移植し、⽣殖系列への導⼊を試みた。培養した始原⽣殖細胞は、⼀部でGFP遺伝⼦の発現が観察された。これらGFP発現細胞はフィーダー細胞に緩やかに接着し、⼀部でゆっくりと増殖してコロニーを形成した。23〜61⽇間培養した始原⽣殖細胞をレシピエント胚⾎流中へ移植した結果、28⽻の成熟したニワトリ個体が得られた。これらについて交配実験を⾏ったところ、1⽻の⽣殖系列キメラニワトリの存在が確認された。この個体からは0.4% (1/270)の頻度でドナー細胞由来の後代が得られた。以上の結果より、培養始原⽣殖細胞は⼀部の細胞で未分化状態が維持されたものの、その他の細胞は培養期間中に分化して、⽣殖隆起への移住能を失ってしまったことが推察された。今後は、始原⽣殖細部の未分化状態を維持できるように培養法を改良する必要があると考えられる。
キーワード︓ニワトリ、培養、胚、⽣殖系列キメラ、始原⽣殖細胞

ニワトリ卵胞発育に伴う⿃βディフェンシン-8，-10および-12の局在変化
モハメドアブデルサラム・磯部 直樹・吉村幸則

広島⼤学⼤学院⽣物圏科学研究科，東広島市鏡⼭739-8528
⿃βディフェンシン（avBD）は抗菌ペプチドとして⾃然免疫に重要な役割をはたす．この実験はニワトリ卵胞にavBD蛋⽩が存在することを検証し，このavBD蛋⽩局在の卵胞発育に伴う変化を明らかにすることを⽬的とした．産卵鶏から⻩⾊卵胞（最⼤卵胞，第2位および第3位卵胞︔F1-F3），⻩⾊⼩卵胞（SYF），⽪質卵胞を含む卵巣⽪質組織を採取した．AvBD-8，-10，-12蛋⽩の存在と分布を免疫組織化学とウエスタンブロット法で解析した．AvBD-8，-10，-12は各発育段階の卵胞の顆粒層と卵胞膜組織に検出され，3種のavBDは類似した局在を⽰した．顆粒層細胞において，AvBD8，-10，-12の免疫反応産物は⽪質卵胞で検出され，SYFで減少した．同免疫反応産物は⻩⾊卵胞（F1-F3）で多く認められた．卵胞膜間質細胞において，⽪質卵胞ではAvBD-12の免疫反応産物が少量認められたが，AvBD-8と-10の免疫反応産物は認められなかった．同細胞においては，3種のavBD免疫反応産物がともにSYFで検出され，⻩⾊卵胞（F1-F3）でさらに増加した．ウエスタンブロット解析により，⻩⾊卵胞の顆粒層と卵胞膜でAvBD-8，-10，-12の特異バンドが検出された．以上の結果から，AvBD-8，-10，-12蛋⽩が卵胞の顆粒層と卵胞膜に発現し，その量は卵胞の発育に伴って増加することが明らかとなった．このAvBDは卵胞の宿主⾃然免疫システムに重要な役割をはたすものと思われた．

左右対称に発達した孵卵17⽇⽬ニワトリ胚卵巣の形態的特徴
内藤充１・春海隆１・桑名貴２

１農業⽣物資源研究所、茨城県つくば市305-8602

２国⽴環境研究所、茨城県つくば市 305-8506
本研究では、孵卵17⽇⽬ニワトリ胚に⾒られた左右対称に発達した卵巣の形態的特徴について調べた。観察された卵巣は左右ほぼ同じ⼤きさであったが、組織構造は正常な左側卵巣と⽐べ⽪質の発達が悪く、また髄質には多数の⼤きな窩(lacunae)が存在していた。これらの特徴は、おそらく右側卵巣が退化せずに発達したことによるものと考えられた。
キーワード︓ニワトリ胚、卵巣、形態