2010年（47巻）第2号
第2号（英⽂誌）
総説

ブロイラー飼料としての酵素と有機酸の利⽤ （要旨）
Muhammad S. Anjum and Abdul S. Chaudhry
ニワトリに対する微⽣物給餌とその腸内細菌叢並びに免疫系にあたえる影響 （要旨）
Kyungwoo Lee, Hyun S. Lillehoj and Gregory R. Siragusa
研究報告
育種・遺伝
C2C12筋芽細胞における変異型WWP1遺伝⼦の導⼊によるmyosin heavy chain遺伝⼦の発現変化 （要旨）松本 ⼤和・陰場 由美・笹崎 晋史・藤原 哲・市原 伸恒・菊池 建機・万年 英之
マイクロサテライトマーカーによるホロホロチョウの遺伝的多様性の解析 （要旨）
Boniface B. KAYANG・Issaka Youssao・井上英治・Augustine Naazie ・阿部秀明・伊藤愼⼀・井上-村⼭美穂
ブロイラー２系統における筋⾁形質への２つの異なる飼育条件の影響－光学顕微鏡的研究 （要旨）
Polak Magdalena, Przybylska-Gornowicz Barbara and Faruga Andrzej
アリル特異的リアルタイムPCRにおける融解曲線解析を⽤いたニワトリMx遺伝⼦第2032座のSNP分析 （要旨）
Xiangqun Ye, Zongcheng Tan, Yueling Zhang and Kangsheng Li(研究ノート)ガチョウ初代肝細胞でインシュリンとブドウ糖によって誘導されたリポ蛋⽩質リパーゼ(LPL)遺伝⼦発現の調節とその組織分布 （要旨）
Chunchun Han, Jiwen Wang, Liang Li, Zhixiong Pan, Shouhai Wei and Feng Xu(研究ノート)ニワトリ⽔晶体特異的遺伝⼦に対する挿⼊型ターゲティングベクターの構築 （要旨）福島祐⼆・佐藤正治・松⽥治男・古澤修⼀・堀内浩幸
飼料・栄養Enterococcus faeciumとイヌリンを含むシンバイオティクスがブロイラーの成⻑成績とコクシジウム症抵抗性に及ぼす影響 （要旨）
Hossein A. Ghasemi, Mahmood Shivazad, Kasra Esmaeilnia, Hamid Kohram and Mohammad A. Karimi
ブロイラーにおける脂肪酸とカルシウムの消化性および脚異常に対する飼料トリグリセリド中sn-2飽和脂肪酸の影響 （要旨）
Chuan-Shun Lin and Shu-Hsing Chiang
ベルガモット(Citrus bergamia)油の添加が産卵鶏の産卵性、卵質および卵⻩の脂肪酸組成に及ぼす影響 （要旨）
S. Canan Bolukbasi , M. Kuddusi Erhan and Hilal Urusan
繁殖・⽣理
ニワトリの最⼤卵胞の顆粒層細胞におけるカルシトニンの直接作⽤について （要旨）
中川-⽔⾕内⾹⾥, ⾼橋哲也, 笠井俊輔, 中⼭広之, 川島光夫

ニワトリの脂肪代謝を制御する局所性アグーチシグナルタンパク／メラノコルチンシグナル系 （要旨）
藪内雅⽂・板東可奈・平松美紗都・⾼橋純夫・⽵内栄

ウズラ卵殻形成過程における⼦宮上⽪の形態学的および組織化学的変化 （要旨）岩澤淳 ・ムハンマド A ラーマン・ツシャール K ロイ・森⼭昭彦 ・ 吉崎範夫
免疫・衛⽣(研究ノート)「サルモネラエンテリティデス（ファージ型４型）およびその３種の変異株による産卵鶏への感染実験」 （要旨）
Seongbeom Cho, Nicole S. Crisp, Jessica R. Maley, Kristin M. Evon, Muhammad Younus, Mokhtar M. Arshad, Sangwei Lu and A.Mahdi
Saeed
要旨

第2号（英⽂誌）
C2C12筋芽細胞における変異型WWP1遺伝⼦の導⼊によるmyosin heavy chain遺伝⼦の発現変化
松本 ⼤和1・陰場 由美1・笹崎 晋史1・藤原 哲2・市原 伸恒3,4・菊池 建機3・万年 英之1
1神⼾⼤学⼤学院農学研究科、兵庫県神⼾市灘区六甲台町 657-8501
２（財）⽇本⽣物科学研究所附属実験動物研究所、⼭梨県北巨摩郡⼩淵沢町上笹尾 408-0041
３国⽴精神・神経センター神経研究所モデル動物開発部、東京都⼩平市⼩川東町 341-2711
4⿇布⼤学獣医学部、神奈川県相模原市淵野辺 754-7111
不要なタンパク質を除去するユビキチンリガーゼの⼀種WW domain containing E3 ubiquitin protein ligase 1 (WWP1)は、以前の研究によりニワトリ筋ジストロフィーの原因遺伝⼦と同定された。WWP1と発ガンとの関係は詳細に研究されているが、筋ジストロフィー発症における機能は不明である。ニワトリ筋ジストロフィーではmyosin heavy chain (MyHC)の幼鶏型から成鶏型へのアイソフォームの遷移が妨げられる。そこで本研究では、C2C12筋芽細胞に野⽣型及び変異型WWP1遺伝⼦を導⼊し、その影響をMyHC遺伝⼦等の筋分化マーカーを対象とした発現解析により分析した。WWP1遺伝⼦の過剰発現に伴いMyHC Ia遺伝⼦の発現は増加し、MyHC IIb遺伝⼦の発現は減少した。⼀⽅、変異型WWP1遺伝⼦を導⼊した細胞
では、MyHC遺伝⼦の発現様式が変化し、WWP1遺伝⼦の変異が筋分化の異常を導くことが⽰唆された。これらの結果は、WWP1遺伝⼦が筋芽細胞の速筋型への分化を促進することを⽰しており、WWP1遺伝⼦の変異はニワトリ筋ジストロフィーの特徴である筋分化の異常を導くことを⽰唆していた。
キーワード︓ニワトリ，遺伝⼦発現，筋ジストロフィー，myosin heavy chain，WWP1
マイクロサテライトマーカーによるホロホロチョウの遺伝的多様性の解析
Boniface B。 KAYANG1、 2・Issaka Youssao3・井上英治4・Augustine Naazie 5・阿部秀明1、 6・伊藤愼⼀7・井上-村⼭美穂1
1京都⼤学野⽣動物研究センター、京都市 606-8203
2ガーナ⼤学農業消費科学部、アクラ、ガーナ
3アボメィ－カラヴィ⼤学動物⽣産学部、アボメィ－カラヴィ、ベニン
4京都⼤学⼤学院理学研究科、京都市 606-8502
5ガーナ⼤学農業研究センター、アクラ、ガーナ
6神⼾花⿃園、岐⾩市 650-0047
7岐⾩⼤学応⽤⽣物科学部、岐⾩市 501-1193
在来家畜集団の遺伝的多様性の情報は、将来⼈類が直⾯するであろう地球規模の難題や不確定要素、たとえば気候変動、疾病、⼈⼝増加、消費者の要望変化、などに対応するための、有⽤遺伝⼦の保全に不可⽋である。本研究では、ガーナ3集団、ベニン1集団、⽇本2集団の、計232⽻のカンムリホロホロチョウ（Numida meleagris）、およびアウトグループとしてフサホロホロチョウ（Acryllium vulturinum）3⽻を⽤いて、常染⾊体マイクロサテライト6座位の型判定を⾏った。観察されたアリル数の合計は66で、1座位あたりのアリル数は平均11。0であった。ガーナおよびベニン由来の⻄アフリカの在来集団（Na = 9。8; Ho = 0。457; FST = 0。162）は、⽇本の集団（Na = 4。2; Ho = 0。236; FST = 0。389）と⽐較して、遺伝学的多様性が⾼かったが、分化の程度は⼩さかった。ホロホロチョウは、ニワトリの代替として、農業および産業的に重要な家禽であり、本研究で得られた情報は、本種の持続的な選抜改良計画に役⽴つと考えられる。
キーワード︓遺伝的多様性、ガーナ、カンムリホロホロチョウ、マイクロサテライト
ニワトリ⽔晶体特異的遺伝⼦に対する挿⼊型ターゲティングベクターの構築
福島祐⼆1・佐藤正治2・松⽥治男1・古澤修⼀1・堀内浩幸1,2
1広島⼤学⼤学院⽣物圏科学研究科 東広島市 739-8528
2広島県産業科学技術研究所 東広島市 739-0046
遺伝⼦ターゲティングニワトリは、基礎研究や産業⾯で⾮常に有⽤であると期待されるが、これまで実現していない。そこで本研究は、相同組換えニワトリ作出の評価が簡便なδ1クリスタリン遺伝⼦（d1cry）に対する挿⼊型ターゲティングベクターを構築した。ゲノムPCRによって増幅した相同DNA配列（プロモーター配列不含）は、全7,402 kbであり、アンバー変異やフレームシフト変異は含まれていなかった。リンカー配列を付加した
DsRed（linkerDsRed）は、PCRによって pCMV-DsRed-Expressから増幅し、⼈⼯的なエラーを含まない正確な塩基配列のクローンを取得した。
loxPサイトで挟まれ、CAGプロモーターによって制御されるenhanced green fruorescent protein（EGFP）遺伝⼦、internal ribosome entrysite（IRES）およびピューロマイシン耐性遺伝⼦（Pac）（PCAGEIP）は、遺伝⼦⼯学的⼿法によって構築した。これらの材料とpCC1BACをもとに、全⻑20.7 kbの挿⼊型ベクターを完成させた。このベクターは、相同組換えによりδ1クリスタリン遺伝⼦座にd1cry-DsRed融合遺伝⼦を形成することが予想される。そのため、多能性幹細胞などで相同組換えを起こさせた後、胚へ移植することで、ニワトリの形質転換を胚発⽣早期の⽔晶体特異的な⾚⾊蛍光として迅速かつ容易に観察し、評価することができる。
キーワード︓ニワトリ、δ1クリスタリン、遺伝⼦ターゲティング、挿⼊型ベクター
ニワトリの最⼤卵胞の顆粒層細胞におけるカルシトニンの直接作⽤について
中川-⽔⾕内⾹⾥1, ⾼橋

哲也2, 笠井俊輔2, 中⼭ 広之1 , 川島光夫1,2

1 501-1193岐⾩県岐⾩市柳⼾1-1 岐⾩⼤学⼤学院連合農学研究科,
2 501-1193岐⾩県岐⾩市柳⼾1-1

岐⾩⼤学⼤学院 応⽤⽣物科学研究科 ⿃類内分泌学研究室

産卵鶏の最⼤卵胞の顆粒層細胞にカルシトニンの受容体が存在するかどうかを明らかにするために、最⼤卵胞を採取して顆粒層細胞の細胞膜画分を調製し、125Iで標識したニワトリのカルシトニンに対する結合実験を⾏なった。その結果、ニワトリの最⼤卵胞の顆粒層細胞にはカルシトニンに対して結合特異性と結合飽和性を有し、⾼い結合親和性と⼩さい結合容量を持った、１種類のカルシトニン受容体と⾒なしうる物質が存在することが明らかとなった。さらにカルシトニンが卵胞顆粒層細胞において、⻩体形成ホルモン（LH）によるプロジェステロン（P4）産⽣に及ぼす影響を明らかにするために、in vitro で最⼤卵胞(F1)の顆粒層細胞の培養実験を⾏なった。カルシトニンを単独で培養液に加えると、P4の産⽣は⾒られなかったが、LH と⼀緒にカルシトニンを加えるとP4産⽣における LH の感受性が低下し、P4産⽣量は減少した。本研究において、カルシトニンはニワトリのF1の顆粒層細胞に直接作⽤することにより、LH による P4産⽣を抑制することが⽰唆された。
ニワトリの脂肪代謝を制御する局所性アグーチシグナルタンパク／メラノコルチンシグナル系
藪内雅⽂・板東可奈・平松美紗都・⾼橋純夫・⽵内栄

岡⼭⼤学⼤学院⾃然科学研究科，岡⼭市北区津島中3－1－1
アグーチシグナルタンパク（ASIP）／メラノコルチンシグナル系は，ヒトでは脂肪代謝を制御するが，マウスではその作⽤がない。ニワトリの脂肪組織に局所性ASIP／メラノコルチンシグナル系が存在する可能性をRT-PCR解析により調べた。その結果，⽪下および内臓の両脂肪組織において，メラノコルチン1受容体（MC1R）とMC5R，ASIP，およびメラノコルチン産⽣に関与するPOMCと2種類のプロホルモン転換酵素（PC1とPC2）がそろって発現していることが明らかとなった。このことから，脂肪組織に局所性ASIP／メラノコルチンシグナル系が存在する可能性が⽰唆された。この系の⽣物学的機能を調べるため，ニワトリに48時間の絶⾷を負荷した。絶⾷により，体重と脂肪組織の細胞サイズの減少が観察されるとともに，⾎漿中遊離脂肪酸は有意に増加し，グルコース，トリアシルグリセロール，インスリンレベルは減少することが明らかとなった。これは糖新⽣に繋がる脂肪分解が脂肪組織で起こったことを⽰す。このような条件下で，脂肪組織のASIP発現は低下し，POMC発現は上昇していた。ASIPは脂肪産⽣・蓄積ホルモンであり，メラノコルチンは脂肪分解・動員ホルモンとしてそれぞれ知られている。本研究成果は，ニワトリの脂肪組織に局所性ASIP／メラノコルチンシグナル系が存在し，脂肪代謝を制御している可能性を強く⽰唆する。本論⽂はまた，脊椎動物の脂肪組織において，ASIP発現がエネルギー⽋乏状態下で低下することを⽰した初めての報告でもある。
キーワード︓脂肪，ASIP，ニワトリ，メラノコルチン，POMC
ウズラ卵殻形成過程における⼦宮上⽪の形態学的および組織化学的変化
岩澤淳 1・ムハンマド A ラーマン1・ツシャール K ロイ1・ 森⼭昭彦 2・ 吉崎範夫 1
1 動物⽣産利⽤学講座、連合⼤学院農学研究科、岐⾩⼤学、岐⾩市501-1193
2 ⾃然科学研究教育センター、名古屋市⽴⼤学、名古屋市467-8501
この研究は⽇本ウズラCoturnix japonicaの⼦宮で、卵殻マトリックスが⽣産される場所とその期間を決定することを⽬指した。EDTA処理による脱灰で得られた卵殻マトリックスを電気泳動し、得られた116 kDaバンドに対する抗⾎清を作成した。116 kDaタンパクのN-末アミノ酸配列はニワトリovocleidin-116と⾼い相同性があった。免疫組織化学法と免疫電顕法による観察で、116 kDaタンパクは⼦宮粘膜上⽪の分泌細胞で⽣産され、放卵後7時間⽬から20時間⽬の間に分泌され、卵殻マトリックスの構造に組み込まれることが分かった。⾛査電顕法により、粘膜上⽪に10 μm径の円柱が21時間⽬まで出現し、その後消失することが観察された。これらの円柱の出現は、卵殻の鋭端部に⾯する上⽪では、⾚道部や鈍端部に⾯する上⽪に⽐べて、あまり顕著ではなかった。他⽅、卵殻表⾯にある気孔の⽳の数も、鋭端部では⾚道部や鈍端部に⽐べて、有意に少なかった。我々の結果は、気孔の⽳は、⼦宮上⽪に現れる円柱が卵殻完成後に退縮して形成されることを⽰している。