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R本家禽学会誌,39:c"53‑c"58,2002

鶏胚におけるミューラー管の発育を持続させるエストロジェンの作用時期
小柳深＊・桝田信也顎＊＊九州東海大学農学部**九州東海大学総合農学研究所，熊本県阿蘇祁艮￨湯村869‑1404

孵卵5,10および1511日にエストラジオールベンゾ､エイト(EB)をlmg投与した成熟鶏の卵管の発達程度を調査した．雌では，孵卵5および10日日にEBを投与したものには小さな左側卵管と対照鶏よりも発達した右側ﾘ￨崎とが認められた．孵卵151111にEBを投与したものでは右lllll卵管重量は対照鶏と￨131様であったが，左lllll卵管は対照蝿の74%までl'i1大した．雄では，孵卵5F11斗にEBを投与した50%の個体にのみ未発達な左右両側の卵管が出現し，孵卵10および15日目にEBを投与したものには卵管は認められなかった．これらのことから雌鶏においては右側ミューラー管の発達を維持できるエストロ

ジェンの作用時期は孵卵の10日目から15日目の￨11にあると考えられる．一方，雄鶏のミューラー管は雌のイi側ミューラー禰:よりも孵卵のlllい時期に発達を停ll之することおよび発育を仲ll2したミューラー管はその後外囚性エストロジェンによって発達しないものと推察された

一方，孵卵中にEBを投与した雄鶏に孵化後EBを投与することにより，漏斗部，膨大部，峡部，子宮部およびI室部に形態的に区分可能な左右両側卵管の発達がみられた．したがって，孵卵巾のミューラー管の発進が継続す‑れば，雄においても孵化後のエストロジェンの投/j､により，ミューラー管は機能的卵管として分化・発達する口I能性が示￨唆された．
キーワード：エストロジェン，ミューラー管，卵管，ニワトリ

一一目緒

孵卵17.5日llまで急増することが報告されている(WoodsandBrazzill,1981).また,AMHはバイオアッ

雌鶏の右lllllミューラー管は孵卵のおよそ8H目に発育セイによって孵卵8日目以降の雌雄性腺に検ll1され，孵を停止し，雄鶏では左右のミューラー管は孵卵の81̲1

UI110L｣目にその活性は最人となることがflf告されてい13日目に退行することが知られている(Aitken,1971;

る(Carre‑Eusebeem/.,1996).これらの報告は，鶏の卵Woods"".,1975).ミューラー管の分化・発達にはエ管出現の有無には，ミューラー管に対するエストロジェ

ストロジェンとミューラー1γ1;抑制ホルモン(AMH)がンの作用時1りlが大きく関与していることを示唆してい関与←しており，エストロジェンはAMHのｲﾉ￨州を阻害する．

るものと考えられている(Bums,1973;HLltson""j"

本研究は，鶏の卵管への分化・発達を可能にするエス

1981,1982;MacLaughlin"".,1983;Carre‑Eusebe"

トロジェンのミューラー管に対する作用時期について検""1996).桝田・小#￨](2001)およびMasudaalld

討したものである．

Koyanagi(2002)は，孵卵511月にエストロジェンを投与すると，雌雄の成熟鶏に左右両側の卵管が出現するこ材料および方法とを報告した．しかし，孵卵巾のどの時期にエストロ孵卵5,10および15日目の白色レグホーン種の橦卵ジェンか存在すると卵管をll1現させるのか，その詳細にの卵白内に0.1mjのゴマ汕に懸濁した1mgのエストラついては不lljlである．エストロジェン合成に関与するジオールベンゾエイト(EB)を注入し孵卵を継続した．

aromaraseP‑450mRNAは孵卵7日目の鶏胚の左右卵孵化後，成熟した鶏の性はWolffandGinglinger(1935),巣に出現し（水野,2001),エストロジェンは孵卵75日HaffenandWolff(1977)および桝田・小#II(1990)の目の雌雄鶏胚のIⅢ中に認められるようになり，雌鶏では方法にもとづき，第二次ﾔ￨徴と解苫1l後の性腺の形態から2002年6j｣141､受付2002ｲ下7月2211受fll』
連絡者：桝ll1信也､ll別した．対照には無処理の個体を川いた．雌鶏については初産から84日間の産卵を記録した後,11カ月齢で

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J l 5 4 日 本 家 禽 会 誌

屠殺し，卵巣重量黄色卵胞数，破裂卵胞数および左右卵管爪鼠を測定した．雄鶏については11JJjl齢で屠殺39巻J2)j‑(2002)とほぼ同じ値を示した（表2)．
孵卵5,10および1511目EB処III!鶏のそれぞれ3/5>1>1,1/5>Mおよび7/7>￨>lに産卵が認められたが，初座円し，卵管の有無を￨句￨恨的に調べた．

さらに，孵卵5日目に同様にエストロジェン処理し，齢は対照よりも遅れる傾向を示し，産卵率も低下する傾羽毛色により雌雌を､''別した25[1齢の褐色レグホーン向にあった（表2)．さらに，対照剛には腹腔内排卵は確種の雄鵡を供試し，251−￨齢から29日間0.1m/のプロビ

認されなかったがEB処11M鶏のそれぞれ3/5羽,2/5>Mレンク､リコールに溶解したEBを1日当たり1mg投与および3/7羽に腹腔内排卵が認められた．

した(EB‑EB群).対照には孵卵5日目に0.lmlの．､マ雄鶏については，孵卵5日目EB処理鶏の4/8羽にの油を投1丁.し，孵化後無処理の雄鶏(oil‑intactII､I）およびみ左右のり'1管が認められた（表3).lil,j側卵管は雌の対照

孵卵5H月にEBを投与し，孵化後無処理の雄鶏(EB‑群における左側卵管よりも明らかに細かった．また，片intactI#)を用いた．これらの雄鶏を54F1齢で屠殺し，側卵管のみが発達したものはみられなかった．

体砿，性腺重量および卵管重量を測定した．得られたII111は,Tllkeyの方法(Tukey,1951)で有意差の有艇を検EB‑EB,EB‑intactおよびoil‑intact群の体Inおよび左側ﾈi'i巣重量はほぼ￨,ilじであった（表4).しかし，
EB‑EBおよびEB‑intact群の右l1111精巣重量は,oil‑討した(P<0.05).
鬼士

intact群のそれぞれ43および64%に減少した(P<杲J
10口0.05).また,EB‑EB榊には左右両lllllに良く発達した卵管

III色レグホーン伽のEB処III!した雌鶏の体遁，卵巣重が認められた左右卵管の発達程度は￨司等であり，とも量は対照鶏と同様であった（表l).孵卵5,10およびl5に漏斗部，膨大部峡部，子宮部および膣部に区分でき

RIIEB処理鶏の競色卵胞数は対照鶏とのIHlに差は認めた．一方,EB‑intact群ではわずかに発達した左右の卵られず，孵卵5および15I=IIIEB処蠅鶏の破裂卵胞数管が認められたにすぎず,oil‑intact群には卵管は全くは対照鶏よりも少なくなったが(P<0.05),3つの投与認められなかった．

区間に差は認められなかった．

考 察

孵卵5およびlO￨̲￨目にEBを投与した雌鶏では左ll1ll
卵管電量は対照の約45％に減少し(P<0.05),15BI=￨

孵卵5，10および1511目にEBを投与した成熟雌鶏のEB処理鶏は対照熟の74%となった．右側卵管重量は孵体重および卵巣重量は対照鶏とほぼ￨11等の値を示した

卵の5および10IIHのもので対服の約6倍となったが一方，雄鶏においても成熟時の体重および精巣重量は対(P<0.05),15EIIIEB処理鶏の右側卵管rn量は対照鶏

照鶏とl,:il等であったことから（桝川・小柳,1990),孵卵孵り'1!']にエストラジオールベンゾエイト(EB)を投与した11"jj齢の雌鶏の卵巣重量と卵胞数表］
TablelOvaryweightandNQoffolliclesinthefemalechickenofllmonthsinjectedwitheslradiol
benzoate(EB)duringincubation

EB投与日

供試小l数体重(kg)卵巣重量）

Dayof

破裂卵胞数No．of

No．oI

vellowfollicles I‑upturedIolliclesa'')MeanswiththedifferentsuperscriptswithinthesamecolLImnaresignificantlydifferent(P<0̲O5)ａ2)Mean=tSDと'''同一カラムの異符号間に有意差あり(P<0.05).

︐ｎ2）、'た均値±標準偏差ａ!）体重100g当たりの重量(9)I)WeightperlOOgofbodyweight(9)ｂａｂ9Controlｂｂ１

対照Ｏ１４７１
１
１０＋ 士士十一０４
６４２
３２４ｂＯ７ｎ０８３
３０＋４士
８０士
９士２３０４７４５４８９５０
５１０００士士十一十一
１２９５９２
１０２３２２715thdaI

リー15U目〕

Ｊ10日目lOthda)

５5H目
5thdayNo.ofbirdsBodyweight(kg)Ovaryweight'

３１２１００００
士士十一十一９１８７１２１１EBinjection

黄色卵胞数Copyright ©2002, Japan Poultry Science Association
小柳・桝田：鶏ミューラー管とエストロジェンJl55

孵卵中にエストラジオールベンゾエイト(EB)を投与した11"jl齢の雌鶏の卵管重量と産卵率

表2

Oviductweightandeggproduclionrateinthefemalechickenofllmonthsinjectedwith

Table2．

estradiolbcnzoate(EB)duringincubation

EB投与日

供試羽数

右側

左側

5５lO[￨目
lOthda1

ａDlrqSlalqｄ９

対照ｂ７l5日日
l5thda】

ａｂ

5LI目
5thdayNo．ofRighl

３１７９Left

ａｂ１ｂＯ
７４５１０２００００＋ ＋ 士士
６４１４５６１１００Ｏ０No.ofbirds卵管重量')Oviductalweight') 産卵したｲ>l数３ｂ４６６６１８７８００００＋ 十一士士
８１６７３１４１２２０３

DayofEBinjection

産卵率2）

初産n齢子、1』Ageatfirst Lggproqucnon
rateeggproduction
163.7±31.830.2±34.2al
l 6 5 6 7 ． 9

154．3=t25.821.6±24.2b
141.3=t10.577.9=t28.9a

Control'）体重100g当たりの重量(9)')WeightperlOOgofbodyweight(9)2)初産から84日間の産卵率（％／日/羽）
2)Rateofeggproductionduringthe84daysaIternrsteggproduction(%/day/bird):I)平均値±標準偏差3)Mean=tSDa･bl司一カラムの異符号間に有意差あり(P<0.05).
a､')Meanswiththedifferentsuperscriptswithinthesamecolumnaresignincantlydifferent(P<O．05)

表3．孵卵中にエストラジオールベンゾエイト'二￨にEBを投与した雌鶏で，本研究の結果と￨ril様な傾向(EB)を投与したllカ月齢の雄鶏におけを認め，産卵率低ﾄﾞのllll因として，左側卵管機能の未発る卵管の出現達ならびに卵￨￨包成長と卵輸送に関与する中枢神経機構のTable3.Appearanceofoviductinthemale形成/f全の可能性を示唆している．さらに，本研究ではchickenofllmonthsinjectedwith

孵卵10日目にEBを投与した雌鶏の卵管の発達程度な

estradiolbenzoate(EB)duringincu.
bation

らびに産卵状況は，孵卵5日目にEBを投与したものとほぼ同様であった．しかし，孵卵15R目にEBを投与しEB投与日

10日目
lOthday

No.ofbirds
withbothoviducts

７

15日目
15thday

No.ofbirds

４０００

5日目
5thday

両側の卵管が認められた>l>l数た雌鶏では左l1lll卵管は対照鶏の74%にまで発達し，すべての雌が産卵したが，多くの雌鶏には腹腔内排卵がみ

８８８

DayOf
EBiniection

羽 数

対照Controlられ産卵率は低卜した．したがって，孵卵'‑￨'に投与したエストロジェンの卵管発達に及ぼす影響は投与￨Iによって異なることが￨ﾘ￨らかになり．少なくとも孵卵l5U目以降の後期胚では外因性エストロジェンによる左側ミューラー管の孵化後の卵管への発育阻害の程度は小さいものと考えられる．
孵卵5日目および10日目にEBを投与した雌鶏には右側卵管が発達し,151=l目処理鶏には右側卵管の発達は認められなかったことから，右側ミューラー管の発達をの時期にかかわらずエストロシェンの投与は，少なくと維持させるエストロジェンの作用時期は孵卵の10日目も成熟後の体重および性腺重量には影響しないものと考から15日目の間にあると考えられる．一方，雄鶏では孵えられる．

卵5日目EB処III!鶏にのみ左右の卵管がみられたことか

孵卵5日目にEBを投与した雌鶏では左側卵管が対照

ら，エストロジェン投与による卵管出現の有無には雌雄鶏に比較して未発達であり，右側卵管は増大しているので違いがあることが￨Ijlらかとなったバイオアッセイにが認められ，初産￨]齢の遅延および産卵率の低下傾li1がよるAMH活性は孵卵8R目以降の雌雌性ll肌にみられ，みられた.MasudaandKoyonagi(2002)は，孵卵511精巣の方が卵巣よりも高いこと(Hutsongj".,1981)なCopyright ©2002, Japan Poultry Science Association'1本家禽会誌

J156

39巻J2号(2002)

表4．エストラジオールベンゾエイト(EB) 投与による25日齢の雄鶏における卵管発達の誘起
Table4.Inductionofoviductaldevelopmentin themalechickenatthe25daysbytheinjectionolestradiolbel]zoate(EB)

EB投与EBinjection

則仇左Ｌ
ｊ４１Ⅱ︽Ｐ︶Ⅲ
１９３９２

十＋４＋２５５３
３６０００士士士
９４２７００１１１

incubation nalcnlnR

Ｊ４ｌＪヘリらBodyweighlT 』 で ■

００１

No．ofbirds

１︒
５８０．
２
４１
９５＋｜＋｜＋
３４２
４０７１
０
６６８８alter

４５５During

孵化後2）

体重

則ｈ ｔ ０００
右薊Ｉ ３＋ ５十 ３十６９４孵卵巾!）卵巣重量))Testisweight3)卵管重量Oviductalweight:')

ⅢｎＩｌｅ左Ｌ

羽数右側
Righ{

356.3±205.9;1355.2士215．1:！

3．8±2.51)

2.4=tl.lb

N O N O（ゴマilll)(Sesameoil)'）孵卵5日目の卵白内に1回投与(1mg)')EBwasinjectedintoeggalbumenat5thdayofincubation(1mg)2)2511齢から28Elllll投与(1mg/II)
2)EBwasinjectcdduring28daysaftertheageo｢25days(1mg/day).
3)体重lOg当たりの重量(mg)3)WeightperlOgofbodyweight(mg)!)平均値士標準偏差')Mean=tSD

NO:卵管なし
NOrepresentsnooviduct.

a.b同一カラムの異符号間に有意差あり(P<0.05).

制・')MeanswiththedifferentsuperscI‑iptswithinthcsamecoILlnmaresignincantlydifferent(P<0.05)

らびに孵卵8日目から17日目の精巣のAMHmRNA

雄鶏にはわずかに発達した卵管がみられ，｜司じ処理をしレベルは卵巣よりも高いことが報告されている(Carre‑

た後2511齢よりEBを投与した雄鶏には良く発達したEusebe""/"1996).一方，エストロジェンはAMHと左右の卵管がみられた．発達した左右卵管重量のlliは成AMIIレセプターとの結合をIIII害する''I能性が考えられ熟雌鶏の/!《側卵管よりも大きく（桝ⅡI・小＃1,2001),こており(I‑Iutsonaa/.｡1981),血中エストロジェン濃度

れらの卵管は肉眼的に州斗部膨大部，峡部，子宮部おは雌胚において孵卵7．5日目から17.51=11」まで急増するよび膣部に区分が可能であった．現在のところ，出現しが，雄胚では雌胚よりも常に低いことが報告されているた雄鶏の卵管が生理的機能をもつか否かについては不Iﾘ｜(WoodsandBrazzill,1981)したがって，孵卵51II1であるが,RahilandNarbaitz(1972)は，孵卵初ⅢlににEBを投与した雌雄の鶏に左右両側の卵管が出現した

エストロジェンを投与後孵化した雄雛にエストロジェンのは，外因性エストロジェンがその後に分泌されるとアンドロジェンを投与することによって出現した卵管AMHを阻害した結果であると考えられる．また，雄鶏を組織学的に観察し，これらの卵管は卵白合成能をもつにおいて孵卵10[￨￨三￨以降のエストロジェン投与によっことを#M'；している．したがって,llliのIIj期にミューて卵管のll1現がみられなかった原因には，内因性エストラー管が退行しなければ，鶏の雌雄の￨,i,jllllミューラー管ロジェン濃度が低いことおよびAMHの生理活性が雌は機能的卵管として分化・発達する可能性が示唆されよりも高いことが挙げられ，エストロジェンの投与前にる‐ミューラー管が退行していた可能￨生が考えられる．さら謝 辞に，孵卵151]目にEBを投与した雌鶏には右側卵管，雌鶏には左右両側卵管がそれぞれ発達しなかったことか

本研究を遂行するにあたり，終始征￨1指導を賜った元九ら，一度AMHの作用を受けたミューラー管は，その後州東海大学教授西山久吉博士に深謝します．なお，水研

エスi､ロジェンが存在しても発達しないものと推察され究の一部は東海大学総合研究機構のi￨￨j肋を受けて行ったる．

ことを付記する．

本研究においては，孵卵5日目にEB処理後無処理のCopyright ©2002, Japan Poultry Science Association
小柳・桝￨Ⅱ：鶏ミューラー管とエストロジェン

J157

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Jl58￨I本家禽会誌39巻J2号(2002)

EffectiveStageofEstorogenThatMaintainsDevelopmentof
theMiillerianDuctintheChickenEmbrvos'FukaShiKoyanagi')andShinyaMasuda2)')FacultyofAgriculture,KyLIshuTokaiUniversity2)AgriculturalResearchlnstitute,KyushuTokaiUniversity,Choyo‑mura,Asogun,
Kumamoto869‑1404,JapanOnnfth,tenthand6[teenthdayofincllbation,onemgofcstradiolbenzoate(EB)wasinjectedintofertilizedeggstoinvestigateitseffectsonthedifferentiationand
developmentoftheoviductinmaturedchickens.Thelargerrightandthesmallerleft

oviductscomparingwithcontrolwerefoundinthefemalechickensilljectedwithEB
onnfthandtenthdayofincubation.Weightoftherightoviductofthechicken
injectedwithEBonfifteenlhdayofincubationwassimilarasthecontrolchicken,left

oviductIoundas74percentofthecontrolchicken.TheunderdevelopedovidLIctsof
rightandleftbothsidesappearedinfiftypercentofthenfthdayEB‑treatedmales,
althoughnooviductappearedinthetenthandnfteenthdayEB‑treatedmales.FromtheseresLllts,itisconceivablethatthecriticalstageofestrogeneffectthatisabletomaintainthedevelopmentoftherightMUllerianductisbetweententhandnfteenth
dayoftheincubationperiodinthefemalechickens.Furthermore,itisguessedthatthe
developmentofMUlleriandLIctsofthemalechickenwassuspendedintheearlystage
oftheincubationperiodevenmorethedevelopmentofrightMUllel‑ianductofthe
femalechicken,andthattheMiillerianductdegradedoncedosenotdevelopby
subsequentexogenousestorogen.
Ontheotherside,thewell‑developedrightandlefloviductswerefoLIndinthe

EB‑treatedmalesduringincubationbyinjectionwithEBa[terhatchingonceagain.
Theinfundibulum,magnum,Isthmus,uterusandvaginaweredistinguishablein
appearanceintheoviducts.TheresultssuggestthattheMUllerianductsdifferentiate

anddevelopintothefunctionaloviductsbytheinjectionwithestrogeneveninthe
malechickensifthedevelopmentofthcMUllerianductscontinuesduringincubation.

(Jtzp"zcsGPo""ryScie"cG,o39:Eﾉ153‑J1,58,2002)
Keywords:estrogen,MUllerianduct,ovldLIct,chicken