信州医誌，60⑸：241〜248，2012綜説

環境要因，特に汚染物質の曝露による DNA メチル化変化と小児の健康への影響
堺温哉

稲葉雄二

1) 信州大学医学部衛生学公衆衛生学講座
2) 信州大学医学部小児医学講座

Alteration of DNA M ethylation Status by Environmental Factors,
Especially Environmental Contaminants and Eﬀects on Child HelthHaruya SAKAI and Yuji INABA
1) Department of Preventive Medicine and Public Health, Shinshu University School of Medicine
2) Department of Pediatrics, Shinshu University School of Medicine
Key words:DNA methylation, contaminants, in utero exposure
DNA メチル化，環境汚染物質，子宮内曝露

はじめにDNA 脱 メ チ ル 化 に 関 し て は 不 明 な 点 が 多 い が，DNA メチル化酵素をブロックすることで脱メチル化

近年，小児の心身の健康状態の悪化を示すデータがを行う（受動的脱メチル化），またはメチル化シトシ報告されている。文部科学省の学校保健統計調査によン塩基の除去（能動的脱メチル化）などのモデルが提ると，1967年度の幼稚園，小学校，中学校，高校の児唱されている。DNA メチル化は遺伝子の発現調節や童・生徒における喘息罹患率はそれぞれ0.29，0.25，Ｘ染色体の不活化など，遺伝子の発現調節を通して生0.08，0.03％であったが，その後経時的に増加し，命活動に重要な役割を担っている 。また，DNA メ

2011年度には2.79，4.34，2.83，1.94％といずれのチル化に関与する酵素の異常が，ICF 症候群 や Rett年齢層でも増加した。また，厚生労働省の調査による症候群 などの疾患の発症や，2q23.1欠失症候群 なと，1996年の５‑９歳児と10‑14歳児における精神およどの病態にも関与していることが知られている。

び行動の障害による受療率は，人口10万人当たりそれDNA のメチル化パターンは，環境因子によってもぞれ23人と30人だったのが，2008年には66人と72人と変化することが明らかとなっている。例えば，一卵性増加した。このような小児の健康状態の急激な悪化は，双生児における DNA メチル化パターンが異なってい遺伝的な要因だけではなく，環境汚染物質の曝露などたり ，加齢による影響も報告されている 。一般環

環境要因が強く影響していると考えられる。

境における，環境汚染物質によるヒトの DNA メチル

環境汚染物質による健康への影響には様々な要因が化変化の報告は，Bollati ら が benzen 曝露を受けるあるが，近年の分子遺伝学的な手法の発達・普及によ成人を対象として初めて報告した。現在までにヒト成り，エピジェネティクスな影響についての知見が集積

人に関して，環境中の粒子状物質（PM ）や多環芳香されつつある。生体へのエピジェネティクスな影響の族化合物（PAH），残留性有機化合物（POPs）曝露１つとして，DNA メチル化の変化が挙げられる。

による DNA メチル化変化が報告されている

DNA メチル化は，Ｓ‑アデノシルメチオニンをメチ

稿では，DNA メチル化の解析方法について概説し，ル基供給源として，DNA メチル化酵素により CpG

次に環境汚染物質等の胎生期および新生児・乳幼児期配列のシトシンをメチル化する反応である（図１）。

曝露による DNA メチル化変化に関する報告を取りま

別刷請求先：堺松本市旭３‑１‑１

No. 5, 2012

温哉

〒390‑8621

信州大学医学部衛生学公衆衛生学講座。本

とめ，最後に DNA メチル化異常によって引き起こされうる，小児の健康への影響ついて考察する。
241

堺・稲葉

図１

シトシンのメチル化

図２ バイサルファイト法
矢印はメチル化シトシン，矢頭は非メチル化シトシン

DNA メチル化解析方法
DNA のメチル化解析には，特定ゲノム領域のメチクローンのシークエンス結果からメチル化シトシンの出現頻度を解析する。
２ パイロシークエンス法

ル化を解析するための方法と，網羅的な DNA メチル

パイロシークエンス法は，DNA ポリメラーゼによ化を解析する方法がある。解析方法の詳細に関する説

る塩基伸長反応によって DNA にヌクレオチドが取り明は他稿 に委ね，ここでは代表的な手法について概込まれる時に放出するピロリン酸を，ATP に変化さ説する。

せて発色反応に用いることで，ヌクレオチドがどれく特定ゲノム領域の DNA メチル化解析
１ バイサルファイトシークエンス法

らい DNA に取り込まれたかを定量する原理に基づき，塩基配列決定を定量的に行う手法である。例えば，対試料を一定時間バイサルファイト処理することで，象配列内にモザイク変異がある場合，それぞれの変異

DNA 中の非メチル化シトシンはウラシルに変換され，アレルの頻度は発光強度から解析することが出来る。

その後の PCR でチミンに変換される。一方メチル化

メチル化解析の場合，バイサルファイト処理と PCRシトシン（mC）は変換されない。このことから，バによりメチル化シトシンと非メチル化シトシンをＣ/イサルファイト処理を行うことでメチル化シトシンとＴの塩基の差異に変換して，このＣ/Ｔの比率を定量

非メチル化シトシンを区別することが出来る（図２）。

的に解析する。得られたＣ/Ｔの比から DNA メチル

バイサルファイトシークエンス法はバイサルファイト化比率を定量的に解析する 。パイロシークエンス法

処理ののちに，特定領域を PCR で増幅し，クローニは，バイサルファイトシークエンス法と比 してクローング後にここのクローンをシークエンスする。複数のニングを行う必要がないことから，短時間で定量的に242

信州医誌 Vol. 60

環境要因による DNA メチル化変化

メチル化頻度を解析することが出来るが，解析できる
DNA 塩基配列長は後者よりも一般に短い。
３ COBRA（Combined Bisulﬁte Restriction Anal-

考えられる。以下に，最近の知見を列挙する。
Wu ら は，着床前のマウス胚（1‑cell stage からblastocyst stage）に10nM ２，３，７，８‑tetra-ysis）法

chlorodibenzo‑p‑dioxin（２，３，７，８‑TCDD）

バイサルファイト処理後に PCR 増幅を行い，メチを培養系で曝露させた後に，仮親に移植することで，ル化 DNA と非メチル化 DNA で配列が異なる箇所を発生初期における２，３，７，８‑TCDD の影響につ認識する制限酵素で処理することで解析を行う 。特いて明らかにした。２，３，７，８‑TCDD 曝露を受別な装置も必要なく，簡便にメチル化状態を解析する

けた群は，成長に関連するインプリンティング遺伝子ことが出来るが，制限酵素サイトの CpG 配列だけがH19 と Igf2 の発現が低下し，胎生14日の体重が有意解析対象となり，定量性は乏しい。に低かった。さらに，H19 /Igf2 のインプリンティン

また，特定ゲノム領域の解析からゲノム全体のメチグコントロール領域における DNA メチル化を調査しル化頻度（ゲノムグローバルなメチル化頻度）を推測たところ，曝露群において高メチル化状態であった。

する方法として，LINE‑1配列もしくは AluI 配列のすなわち，TCDD の胎生期曝露によって，遺伝子特メチル化頻度を解析する方法が現在よく用いられてい異的に DNA の高メチル化状態が起こり，成長に関連る。LINE‑1ならびに Alu1 はどちらもゲノム全体にする遺伝子の発現が抑制されて，胎仔が低体重となる広く分布するリピート配列であり，それぞれゲノム全ことが示された。

体に対する比率は17.3％と10.7％であるため ，こ胎生期の環境汚染物質曝露による DNA メチル化のれらの解析でゲノム全体のメチル化状態を推測できる。

変化は，幼小児期にとどまらず成熟後まで維持され，手法としてはバイサルファイトシークエンスもしくは成人期の健康へも影響する可能性があることが，実験パイロシークエンスが用いられている。また，通常こ動物を用いた研究で報告されている。大迫 は，胎生れらのリピート配列は高度にメチル化されている。

期に TCDD 曝露されたマウスの肝臓における薬物代

遺伝子網羅的なメチル化解析

謝酵素 CYP1A1遺伝子のプロモーター領域が，120日DNA マイクロアレイや次世代シークエンサーを用齢の成熟期まで低メチル化状態が維持されていることいて，全遺伝子について網羅的にメチル化解析を行うを示した。さらにヒストンＨ3とＨ4のアセチル化，手法が開発されている 。試料の前処理として，メチH3K4メチル化も増加し，成熟期まで持続しているこ

ル化 DNA 結合タンパク質を用いてゲノム DNA がメとを明らかにした。これらのことから環境汚染物質のチル化されている領域を濃縮する Methylated CpG

胎児期曝露が，器官発達過程において DNA メチル化

Island Recovery Assay（M IRA） や，抗メチル化シ変化を含むエピゲノムの変化をもたらし，これが原因トシン抗体を用いてメチル化領域を濃縮する Meth-となって病態発症に影響をもたらすことを示唆された。

ylated DNA Immunoprecipitation（MeDIP） が 報

なお，TCDD およびポリ塩化ビフェニル（PCBs）の告されている。これらの前処理法によって濃縮した胎児期曝露による，成熟後の化学発がん感受性，およDNA を，マイクロアレイもしくは，次世代シークエ

び薬物代謝酵素発現の変化についてはこれまでにも報ンサーを用いてメチル化解析する。次世代シークエン

告されているがサーはアレイ解析に比べ１解析当たりのコストが高い

ル化変化が関与していることが示唆される。また，が，DNA 断片に個体を識別するバーコードタグを付

Armenti ら は胎生期・新生仔期における methoxy-加することで複数検体を同時に解析することが可能とchlor（MXC）の曝露は，成熟後の子宮に，ERβのなり ，この技術を用いることで検体当たりの解析コ発現変化をともなう機能障害を生じることを報告してストを抑えることが出来る。

いる。この ERβの発現変化は，ERβのプロモーター胎児・新生児期における環境汚染物質の曝露による DNA メチル化の影響，大迫の報告 から DNA メチ領域が胎生期 MXC 曝露によって高メチル化状態に変化したことが原因である 。
ヒトに関しても，胎児期もしくは新生児期の化学物種々の環境汚染物質が DNA メチル化に変化をもた質曝露による DNA メチル化変化が報告されている。

らしていることが報告されている。また一般に，哺乳例えば Guerrero‑Preston ら は母親の喫煙ならびに類の健康への影響は，胎児期や幼少期でより大きいと

perﬂuorinated alkyl 化合物（PFCs）蓄積が，胎児のNo. 5, 2012

243

堺・稲葉

ゲノム DNA をグローバルな低メチル化状態に変化さと考えられる健康への影響について，近年いくつか報せることを報告している。また，Breton ら は親の告されている。

喫煙状況とゲノム DNA のメチル化頻度との関連につ多くのプラスチック製品に使われ代表的な内分泌攪

いて調査し，親の喫煙が子どものゲノムDNAのグロー乱物質である Bisphenol A（BPA）による胎生期曝バルな低メチル化状態への変化をきたすことを報告し露は，DNA メチル化状態を変化させ，脳形成・発達ている。別の項で詳細に述べるが，Perera ら は母に影響をもたらす可能性があることが報告されている。

親の PAHs 曝露による児の DNA メチル化異常につDolinoyら は雌の variable yellow agouti マウスに，いて報告している。

妊娠前から授乳期間を通して BPA を投与すると，出生仔の毛色が変化することを示した。これは毛色決定親の DNA メチル化異常と次世代への影響に関与する Agouti 遺伝子プロモーター領域のメチル

哺乳類におけるゲノム DNA のメチル化は，生殖細化状態を，BPA 曝露により低メチル化状態に変化さ胞で全て脱メチル化されることから，インプリンティせたためであり，BPA が DNA メチル化に変化を与ング領域を除き，一般には次世代には遺伝しないと考えることを明らかにした。また Yaoi ら は胎生 期えられている。しかし，汚染物質曝露による DNA メBPA 曝露したマウスの前脳における DNA メチル化チル化変化が，複数世代にまで影響を与えることを示変化を網羅的に調査し，48領域において DNA のメチす研究が報告されている。例えば Anwayら は子宮ル化頻度に変化（高メチル化・低メチル化）があるこ

内で殺菌剤 Vinclozolin に曝露されたＦ1ラット，なとを認め，低メチル化が明らかとなった２つの遺伝子らびに曝露されていないＦ2からＦ4ラットを対照群とについては，遺伝子発現が亢進していたことを明らか比 すると，Ｆ1からＦ4雄ラット全てにおいて精原細にしている。また，胎仔マウス前脳におけるメチル化胞のアポトーシスが有意に増加し，精子数と精子の運状態の変化は，発生段階特異的に発現変動を示す遺伝動能が有意に低いことを明らかとした。また少なくと子のプロモーター領域にもあり，機能遺伝子の転写をもゲノム上の25箇所でメチル化変化を確認し，この異常に制御している可能性を指摘している

DNA メチル化の変化と生殖細胞の機能異常との関連を示唆している。

。

汚染物質の曝露による DNA メチル化変化と喘息発症との関連についても報告されている。Perera ら

また，Ng ら は父親ラットの慢性的な高脂肪食摂は 母 親 の PAHs曝 露 と，子 ど も の メ チ ル 化 変 化 に取による次世代への影響について明らかにしている。

ついて調査し，PAHs 曝露レベルが高い母親から生すなわち，高脂肪食摂取の父ラットを親に持つ雌ラッまれた子供ほど，脂肪酸代謝に関与する acyl‑CoAトは，対照群と比 して，インスリン分泌低下およびsynthetase longchain family member 3（ACSL3 ）グルコース耐性障害が早期発症して時間とともに増悪のプロモーター領域が高メチル化していることを明らし，膵島において642個の遺伝子の発現が変化していかとした。PAHs曝露による ACSL3 プロモーター領ることを明らかにした。これら遺伝子のうち発現量に域のメチル化は，同じ論文内でＨ1299細胞を用いた最も大きな差が認められた Jak‑Stat シグナル伝達系

ベンツ［ａ］ピレン（PAHs の代表的な化学物質）に関連する II13ra2（1.76倍の増加）では，プロモー曝露実験でも確認している。これまで ACSL3の機能ター領域にある CpG のメチル化率が対照群と比しと喘息発症との関連についてほとんど明らかにされてて有意に低く，発現量の変化が DNA メチル化変化のいないが，新生児において ACSL3 プロモーター領域影響であることを明らかとした。母の高脂肪食摂取にが高メチル化されている子どもは，そうでない子ども

よって次世代に脂肪過多や代謝障害など有害な影響をと比 して，５歳児までに喘息が発症する頻度が高い与えることは報告があるが ，仔マウスの栄養状態にことを報告している。

直接影響を与えない父からの影響を報告したのはこの報告が初めてである。
ゲノムメチル化変化と小児への影響

Nadeau ら は大気汚染と小児喘息の発症に関して，制御性Ｔ細胞（T‑reg）分化へのマスター遺伝子である Foxp3 のメチル化変化の関与について報告している。彼らは高大気汚染地域に居住する小児喘息患者と胎生期および新生児・幼児期における環境汚染物質非喘息患者，ならびに低大気汚染地域に居住する小児の曝露によって DNA メチル化が変化し，これが原因喘息患者と非喘息患者の４グループについて，T‑reg

244

信州医誌 Vol. 60

環境要因による DNA メチル化変化機能を調査するとともに，T‑reg からゲノム DNA を抽出し，Foxp3 のプロモーター領域のメチル化頻度を解析した。その結果，大気汚染物質の曝露によりFoxp3 プロモーター領域が高メチル化状態になり，Foxp3 発現が抑制され，T ‑reg の機能不全が生じることを明らかにし，喘息の発症には汚染物質の曝露による DNA メチル化変化が関与することを示唆した。
また，Nadeau ら は PAHs 曝露が高い検体 ほ ど，Foxp3 のメチル化が亢進していることを報告している。
おわりに
本稿では，環境因子，特に環境汚染物質の曝露によるゲノム DNA メチル化の変化と，それにともなう小児の健康への影響についてこれまでの報告をまとめ，概説した。これら研究の多くは，最近数年間に発表されたもので，pyrosequencer などメチル化解析技術の進歩と普及によるところが大きい。
環境汚染物質の曝露による DNA のメチル化変化は，
図３

遺伝子の発現抑制もしくは発現亢進，染色体構造の安胎生期・小児期における環境汚染物質の曝露による DNA メチル化変化と生体への影響（推測）定性に影響を与えることが推測される（図３）。臓器や脳神経の発達段階である胎生期および幼少時期において，遺伝子発現のプログラムが崩されると，これらの冒頭に述べた通り，現在小児の心身の健康に関して正常な発達が阻害されさまざまな悪影響が生じるもの看過できない状態が進行している。特に発達障害に関と考えられる。成人病胎児期発症説（Fetal Origins

しては，医療のみならず教育・社会的にも重要な問題

of Adult Disease）は胎児期の環境がその後の疾患発となり，様々な対応が迫られている 。このような中，症に大きく影響を与えることを示し ，一部にはDNA2011年から環境省による「子どもの環境と健康に関すメチル化異常の関与も示唆されている。本稿で紹る全国調査（エコチル調査）」が開始された。この調介したように，主に動物実験で汚染物質の子宮内曝露査は全国10万組の親子を対象にした大規模コホート調により，胎児（仔）において DNA メチル化異常が生査で，化学物質の曝露や生活環境が，胎児から小児のじ，出生後もその影響が持続していることが明らかと健康に与える影響について明らかにすることを目的となってきた。しかし，ヒトにおける環境汚染物質の曝した調査である。信州大学医学部では小児環境保健疫

露と DNA メチル化の変化，さらに健康への影響につ学研究センターを設置し，上伊那地域を対象に調査をいての研究はまだ少ない。胎生期から小児期を通じて開始している 。本調査によって，胎生期・新生児期成人に至るまでの長期的な観察が必要であるうえに，の化学物質の曝露による，長期的な健康影響が解明さ微量かつ膨大な種類の環境汚染物質についての解析がれることが期待される。

必要とされるため，その研究は容易ではない。
文

献1) Strachan T, Read AR :Human Molecular Genetics. 3rd ed, 2005 (松村正實, 木南

凌 (監訳) ヒトの分子遺伝学.

第３版, メディカル・サイエンス・インターナショナル, 東京, 2005)
2) Hansen RS, Wijmenga C, Luo P, Stanek AM , Canﬁeld TK, Weemaes CM , Gartler SM : The DNM T3B DNA
methyltransferase gene is mutated in the ICF immunodeﬁciency syndrome.Proc Natl Acad Sci U S A 96:14412‑14417, 1999
No. 5, 2012245堺・稲葉3) Amir RE, Van den Veyver IB,Wan M,Tran CQ,Francke U,Zoghbi HY :Rett syndrome is caused by mutationsin X‑linked M ECP2, encoding methyl‑CpG‑binding protein 2. Nat Genet 23:185‑188, 1999
4) M otobayashi M, Nishimura‑Tadaki A, Inaba Y, Kosho T, Miyatake S, Niimi T, Nishimura T, Wakui K,Fukushima Y,Matsumoto N,Koike K :Neurodevelopmental features in 2q23.1 microdeletion syndrome:report ofa new patient with intractable seizures and review of literature. Am J M ed Genet A 158A :861‑868, 2012
5) Fraga MF, Ballestar E, Paz MF, Ropero S, Setien F, Ballestar M L, Heine‑Suner D, Cigudosa JC, Urioste M ,Benitez J,Boix‑Chornet M,Sanchez‑Aguilera A,Ling C,Carlsson E,Poulsen P,Vaag A,Stephan Z,Spector TD,Wu YZ,Plass C,Esteller M :Epigenetic diﬀerences arise during the lifetime ofmonozygotic twins.Proc Natl Acad
Sci U S A 102:10604‑10609, 2005
6) Bollati V, Schwartz J, Wright R, Litonjua A, Tarantini L,Suh H,Sparrow D,Vokonas P,Baccarelli A :Declinein genomic DNA methylation through aging in a cohort of elderly subjects.Mech Ageing Dev 130:234‑239,20097) Bollati V, Baccarelli A,Hou L,Bonzini M ,Fustinoni S,Cavallo D,Byun HM ,Jiang J,Marinelli B,Pesatori AC,
Bertazzi PA, Yang AS :Changes in DNA methylation patterns in subjects exposed to low‑dose benzene. Cancer
Res 67:876‑880, 2007
8) Pavanello S,Bollati V,Pesatori AC,Kapka L,Bolognesi C,Bertazzi PA,Baccarelli A :Global and gene‑speciﬁc
promoter methylation changes are related to anti‑B［a］PDE‑DNA adduct levels and inﬂuence micronuclei levels
in polycyclic aromatic hydrocarbon‑exposed individuals. Int J Cancer 125:1692‑1697, 20099) Rusiecki JA,Baccarelli A,Bollati V,Tarantini L,M oore LE,Bonefeld‑Jorgensen EC :Global DNA hypomethylation is associated with high serum‑persistent organic pollutants in Greenlandic Inuit.Environ Health Perspect 116:1547‑1552, 2008
10) Kim KY,Kim DS,Lee SK,Lee IK,Kang JH,Chang YS,Jacobs DR,Steﬀes M ,Lee DH :Association of low‑dose
exposure to persistent organic pollutants with global DNA hypomethylation in healthy Koreans.Environ Health
Perspect 118:370‑374, 201011) Baccarelli A, Wright RO, Bollati V, Tarantini L, Litonjua AA, Suh HH, Zanobetti A, Sparrow D, Vokonas PS,Schwartz J :Rapid DNA methylation changes after exposure to traﬃc particles.Am J Respir Crit Care Med 179 :572‑578, 200912) Laird PW :Principles and challenges of genomewide DNA methylation analysis.Nat Rev Genet 11:191‑203,201013) Yamamoto E,Toyota M,Suzuki H,Kondo Y,Sanomura T,Murayama Y,Ohe‑Toyota M ,M aruyama R,Nojima
M ,Ashida M,Fujii K,Sasaki Y,Hayashi N,Mori M ,Imai K,Tokino T,Shinomura Y :LINE‑1 hypomethylation
is associated with increased CpG island methylation in Helicobacter pylori‑related enlarged‑fold gastritis.Cancer
Epidemiol Biomarkers Prev 17:2555‑2564, 2008
14) Bird AP, Southern EM :Use of restriction enzymes to study eukaryotic DNA methylation :I. The methylation
pattern in ribosomal DNA from Xenopus laevis. J Mol Biol 118:27‑47, 197815) Rauch T, Li H, Wu X, Pfeifer GP :MIRA‑assisted microarray analysis, a new technology for the determinationof DNA methylation patterns, identiﬁes frequent methylation of homeodomain‑containing genes in lung cancercells. Cancer Res 66:7939 ‑7947, 200616) Weber M, Davies JJ, Wittig D,Oakeley EJ,Haase M,Lam WL,Schubeler D :Chromosome‑wide and promoter‑speciﬁc analyses identify sites of diﬀerential DNA methylation in normal and transformed human cells.Nat Genet
37:853‑862, 200517) Sakai H, Suzuki S, M izuguchi T, Imoto K, Yamashita Y, Doi H, Kikuchi M, Tsurusaki Y, Saitsu H, Miyake N,M asuda M,Matsumoto N :Rapid detection of gene mutations responsible for non‑syndromic aortic aneurysm anddissection using two diﬀerent methods: resequencing microarray technology and next‑generation sequencing.
Hum Genet 131:591‑599, 201218) Wu Q, Ohsako S, Ishimura R, Suzuki JS, Tohyama C :Exposure of mouse preimplantation embryos to 2,3,7,8‑246

信州医誌 Vol. 60

環境要因による DNA メチル化変化
tetrachlorodibenzo‑p‑dioxin (TCDD)alters the methylation status of imprinted genes H19 and Igf2.Biol Reprod
70:1790‑1797, 2004
19) 大迫誠一郎 :ダイオキシンの胎生期曝露による生後の化学発癌感受性亢進とエピゲノム変化. 2009年日本環境変異原学会大会プログラム講演要旨集 87, 200920) Holcomb M, Safe S :Inhibition of 7, 12‑dimethylbenzanthracene‑induced rat mammary tumor growth by 2, 3, 7,8‑tetrachlorodibenzo‑p‑dioxin. Cancer Lett 82:43‑47, 199421) Wakui S, Yokoo K, Takahashi H, M uto T,Suzuki Y,Kanai Y,Hano H,Furusato M ,Endou H :CYP1 and AhR
expression in 7,12‑dimethylbenz［a］anthracene‑induced mammary carcinoma of rats prenatally exposed to 3,3ʼ,4, 4ʼ
, 5‑pentachlorobiphenyl. Toxicology 211:231‑241, 200522) Wakui S,Yokoo K,Takahashi H,Muto T,Suzuki Y,Kanai Y,Hano H,Furusato M,Endou H :Prenatal 3,3ʼ
,4,4ʼ
,5‑pentachlorobiphenyl exposure modulates induction of rat hepatic CYP 1A1,1B1,and AhR by 7,12‑dimethylbenz［a］anthracene. Toxicol Appl Pharmacol 210:200‑211, 200623) Armenti AE, Zama AM, Passantino L, Uzumcu M : Developmental methoxychlor exposure aﬀects multiple
reproductive parameters and ovarian folliculogenesis and gene expression in adult rats.Toxicol Appl Pharmacol233:286‑296, 200824) Zama AM, Uzumcu M :Fetal and neonatal exposure to the endocrine disruptor methoxychlor causes epigenetic
alterations in adult ovarian genes. Endocrinology 150:4681‑4691, 200925) Guerrero‑Preston R,Goldman LR,Brebi‑Mieville P,Ili‑Gangas C,Lebron C,Witter FR,Apelberg BJ,Hernandez‑Roystacher M , Jaﬀe A, Halden RU, Sidransky D : Global DNA hypomethylation is associated with in utero
exposure to cotinine and perﬂuorinated alkyl compounds. Epigenetics 5:539 ‑546, 201026) Breton CV,Byun HM,Wenten M,Pan F,Yang A,Gilliland FD :Prenatal tobacco smoke exposure aﬀects globaland gene‑speciﬁc DNA methylation. Am J Respir Crit Care Med 180:462‑467, 200927) Perera F, Tang WY, Herbstman J, Tang D, Levin L, Miller R,Ho SM :Relation of DNA methylation of 5ʼ
‑CpG
island of ACSL3 to transplacental exposure to airborne polycyclic aromatic hydrocarbons and childhood asthma.
PLoS One 4:200928) Anway M D,Cupp AS,Uzumcu M ,Skinner M K :Epigenetic transgenerational actions of endocrine disruptors andmale fertility. Science 308:1466‑1469, 200529) Ng SF,Lin RC,Laybutt DR,Barres R,Owens JA,Morris M J :Chronic high‑fat diet in fathers programs beta‑celldysfunction in female rat oﬀspring. Nature 467:963‑966, 201030) Dunn GA, Bale TL :Maternal high‑fat diet promotes body length increases and insulin insensitivity in second‑generation mice. Endocrinology 150:4999 ‑5009, 200931) Dolinoy DC, Huang D, Jirtle RL : Maternal nutrient supplementation counteracts bisphenol A‑induced DNA
hypomethylation in early development. Proc Natl Acad Sci U S A 104:13056‑13061, 200732) Yaoi T,Itoh K,Nakamura K,Ogi H,Fujiwara Y,Fushiki S :Genome‑wide analysis of epigenomic alterations infetal mouse forebrain after exposure to low doses of bisphenol A. Biochem Biophys Res Commun 376:563‑567,200833) 伊藤恭子 :脳形成・発達と環境化学物質. 日児誌 116:10‑19, 201234) Nadeau K, McDonald‑Hyman C, Noth EM, Pratt B, Hammond SK, Balmes J, Tager I :Ambient air pollution
impairs regulatory T‑cell function in asthma. J Allergy Clin Immunol 126:845‑852, e810, 201035) Barker DJ :The origins of the developmental origins theory. J Intern Med 261:412‑417, 200736) Pham TD, MacLennan NK, Chiu CT, Laksana GS, Hsu JL, Lane RH : Uteroplacental insuﬃciency increases
apoptosis and alters p53 gene methylation in the full‑term IUGR rat kidney. Am J Physiol Regul Integr Comp
Physiol 285:R962‑970, 2003
37) Sinclair KD, Allegrucci C, Singh R, Gardner DS, Sebastian S, Bispham J, Thurston A, Huntley JF, Rees WD,No. 5, 2012

247

堺・稲葉
M aloney CA,Lea RG,Craigon J,McEvoyTG,Young LE :DNA methylation,insulin resistance,and blood pressurein oﬀspring determined by maternal periconceptional B vitamin and methionine status. Proc Natl Acad Sci U S
A 104:19351‑19356, 200738) 稲葉雄二, 新美妙美, 石田修一 :軽度発達障害児の支援を目的とした学校への outreach clinic の実践. 脳と発達42:267‑272, 201039) 堺 温哉, 津田洋子, 塚原照臣, 日高義彦, 稲葉雄二, 金井誠, 福嶋義光, 野見山哲生 :上伊那地域における「子どもの健康と環境に関する全国調査」. 信州公衛誌 6:101‑106, 2012

（Ｈ 24. 5. 7 受稿）

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信州医誌 Vol. 60