環境感染誌

Vol. 35 no. 5, 2020

〈短 報〉

Bacillus cereus 芽胞の各種医療用ディスポーザブル手袋への付着に関する定量的評価
石原由華 1）・宇佐美久枝 1）・社本生衣 2）・太田美智男 3）

Quantitative Evaluation of Bacillus Cereus Spore Attachment to the Surface of Disposable Medical
Gloves Made from Various Materials
Yuka ISHIHARA1）, Hisae USAMI1）, Ikue SHAMOTO2）and Michio OHTA3）1）Sugiyama Jogakuen University School of Nursing, 2）Gif University School of Medicine Nursing Course,
3）
Nagoya University School of Medicine（2020 年 2 月 12 日受付・2020 年 6 月 16 日受理）
要旨

Bacillus cereus による敗血症は，清拭タオル等のリネン類の芽胞汚染による患者皮膚・医療者の手指などを介した輸液ラインの汚染が主要な原因であるとされる．医療現場で用いるディスポーザブル手袋に芽胞が付着して汚染源となる可能性があり，そこで手袋の素材別に B. cereus 芽胞の付着しやすさを改良ビーズ抽出法で定量測定した．その結果，ラテックス，塩化ビニル，ニトリル製手袋の中で塩化ビニル製に最も多くの芽胞が付着していた．ニトリル製と塩化ビニル製とでは芽胞の付着量で有意差（P=0.028，＜0.05）があり，ニトリル製はラテックス製との間に有意差は無いが，最も芽胞の付着しない素材であった．
Key words：Bacillus cereus ，芽胞，ディスポーザブル手袋，ニトリル製，改良ビーズ抽出法

有芽胞菌である Bacillus cereus は，塵埃，土壌，腐用ディスポーザブル手袋は JIS 規格により手袋の寸法や敗物，空気中など環境に広く存在し，芽胞の状態になる

水密性，性能値，検査水準などが定められている９）が，と熱，乾燥，消毒薬に対する抵抗性が強く 100 埃の加熱

手袋の素材については規定がなく，ラテックス（ラテッ１）

cereus によクスゴム），ニトリル（ニトリルゴム），塩化ビニル樹脂

る易感染患者への日和見感染により重篤な敗血症を起こやアルコールにも耐性化する ．近年，B.など様々な素材から製造されている．ディスポーザブル

２，３）

し死亡した事例が幾つか報告されている ．その原因は，手袋の素材によるフィット感，価格，ピンホール数等の清拭タオルなどのリネン類の B. cereus 芽胞汚染から患違いやアレルギー惹起性の有無は指摘されるが，これま者皮膚・医療者の手指などを介したライン関連血流感染でディスポーザブル手袋の素材の違いに対するであるとされる２，４）．B. cereus はバイオフィルムをつく

B. cereus 芽胞の付着しやすさについて定量的に調べた

５）

り，カテーテルなどの表面に付着する ．こうした末梢報告はない．

静脈カテーテルや輸液ラインからの感染を防ぐために，本研究では我々が考案した清拭タオルの B.cereus 汚

未滅菌のディスポーザブル手袋を着用する６，７）．しかし，染を高感度に検出する改良ビーズ抽出法を応用して１０），感染防止のためのディスポーザブル手袋そのものに皮膚各種素材を材料とするディスポーザブル手袋についてなどから菌が付着することによって，輸液ラインに汚染B. cereus 芽胞がどのくらい付着するのかを定量的に測する可能性がある．また手袋を外した時に病原体が付着定した．ディスポーザブル手袋はラテックス製グローブ

した手袋を介して手指が汚染されることがある８）．医療（天然ゴム製，帝人フロンティア，大阪），塩化ビニル樹脂製グローブ（アスクル，東京），ニトリル製グローブ

1）椙山女学園大学看護学部，2）
岐阜大学医学部看護学科，3）名古屋大学医学部（Kimberly-Clark，米国）を被験対象とした．全てのグローブはパウダーフリーとした．B. cereus は通常環境― 198 ―環境感染誌

Vol. 35 no. 5, 2020ːαϫω਼ϧτρέηԚԿϑωϩωφϨϩυΡηϛʖδϔϩघୀ͹ોࡒ
図1

ディスポーザブル手袋の素材別の B. cereus NC1241 株芽胞の付着量（1 cm 平方あたり）．
は t 検定で＜0.05 を示す．

＊

中では芽胞の状態で存在するため，B. cereus NC1241 株

ニーを B. cereus と推定し，コロニー数を測定した．な（食品由来株，嘔吐毒素非産生）から芽胞粉末を次のよお必要に応じグラム染色によって確認した．さらに，羊うに作製した．B. cereus NC1241 株を NGKG 卵黄加寒血液寒天培地（栄研化学）に接種して β 溶血の有無を天培地（栄研化学）に接種し 30℃ で 2 日培養後室温に確認して B. cereus と同定した．対照として，芽胞粉末

7 日間放置し，芽胞染色によってほぼ 100％（1 視野）がを付着させずに上記の改良ビーズ抽出法を実施し培養し芽胞になっていることを確認後，滅菌水に懸濁して OD550た．以上の実験は 3 回あるいはさらに数回繰り返した．

=0.55（マクファーランド濁度標準液 No.3）に調整した．

培養後の結果は，対照実験では 3 種類の素材のディス懸濁液をエッペンドルフチューブに 1000 μL 分注後，ポーザブル手袋の切片において，B. cereus のコロニー

5℃，12000 rpm で 2 分間遠心して上清を捨てた．沈殿はまったく検出されなかった．芽胞付着実験ではラテッに 99％ エタノールを 1000 μL 添加後，ボルテックス・クス製手袋の 1 cm 平方あたりのコロニー数（平均値）ミキサーで最大強度で 20 秒間振とうして，上記と同様は 106990 で，塩化ビニル製手袋は 130090，ニトリル製の条件で遠心後上清を捨てた．沈殿をデシケーターで 2手袋は 19380 であった．塩化ビニル製手袋とニトリル製

日間乾燥後，ボルテックス・ミキサーで最大強度/20 秒

手袋との間では，p=0.028（t 検定，＜0.05）で有意差が間の振とうを 20 回実施して粉末状にして芽胞粉末としあった（図 1）．

た．ディスポーザブル手袋への芽胞付着実験は以下の手

本研究では，市販のディスポーザブル手袋の素材の違順で行った．芽胞粉末に市販の各ディスポーザブル手袋いにより，B. cereus 芽胞の付着のしやすさに差がある（非滅菌製品）から無菌的に切り取った切片（1 cm×1

ことを初めて見出した．安価でよく使われる塩化ビニルcm）を入れ，ボルテックス・ミキサーで最大強度/20製手袋がもっとも芽胞を付着しやすく，したがって輸液

秒間振とう後，5 分間放置した．すなわち乾燥状態でのラインなどの汚染を引き起こす可能性が他の手袋よりも芽胞の付着を行った．放置後各切片をそれぞれ 20 mL高い可能性がある．B. cereus 芽胞はどこにでも見られ，の滅菌生理食塩水と直径 5 mm の滅菌ガラスビーズ（ア人の皮膚にもしばしば付着している．また芽胞に高度にズワン，大阪）30 個が入った滅菌遠心管（50 mL）に汚染されたおしぼりタオルで拭いた皮膚には無数の芽胞入れた．これをボルテックス・ミキサーで最大強度/20が付着している．その芽胞がディスポーザブル手袋表面秒間の振とうを 10 回実施して付着芽胞を洗い出し，洗に付着し，輸液ラインの操作に伴って輸液から血流感染

浄液 20 μL を採取して 2 mL の滅菌水が入ったプラスを引き起こす危険がある．今回の実験によって，ニトリチック菅に添加した．ボルテックス・ミキサーで最大強ル製手袋はラテックス製手袋との結果に有意差が無いが，度/10 秒間振とう後，100 μL を採取し 10 倍希釈系列液

実験結果から B. cereus 芽胞がより付着しない素材であをつくり，希釈液 100 μL を採取し NGKG 卵黄加寒天培ることが示された．今後は臨床の場で用いられている地に接種して 30℃ で一晩培養した．培養後，培地上にディスポーザブル手袋の芽胞汚染状況を広く調べ，今回発育してきたコロニーを観察し，卵黄反応陽性のコロの実験結果と併せて芽胞付着性の低い材質の手袋の医療― 199 ―環境感染誌

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6）WHO Guidelines on Hand Hygiene in Health Care, WHO
2009: https://www.who.int/gpsc/5may/tools/978924159790
6/en/. accessed April 20, 2020.
7）Guidelines for the Prevention of Intravascular CatheterRelated Infections, CDC 2011: https://www.cdc.gov/infecti
oncontrol/guidelines/bsi/index.html. accessed April 20,2020.
8）Larson EL: APIC guideline for hand washing and hand antisepsis in health care setting. Am J Infect Control 1995;
23(24): 251-69.
9）医療用手袋の JIS 規格と AQL について：http://www.nihon-glove.com/medicalTreatment.html：2019 年 12 月 30 日現在.
10）石原由華，宇佐美久枝，畠山和人，太田美智男：清拭タオ
ルの Bacillus cereus 汚染を高感度に検出する改良ビーズ抽
出法．日本環境感染学会誌 2017; 32(2): 85-8.

現場での使用を提言したい．
利益相反自己申告：申告すべきものなし．

文献1）Drobniewski FA: Bacillus cereus and related species. ClinMicrobiol Rev 1993; 6(4): 324-38.
2）Sasahara T, Hayashi S, Morisawa Y, Sakihama T,
Yoshimura A, Hirai Y: Bacillus cereus bactermia outbreak
due to contamainated hospital linens. Eur Clin Microbiol
Infect Dis 2011; 30(2): 219-26.
3）国立がん研究センター中央病院におけるセレウス菌感染症
ご報告（第 1 報）：http://www.ncc.go.jp/jp/ncch/information/20130822/index.html：2020 年 2 月 7 日現在.
4）井沢義雄，伊藤 誠：Bacillus cereus による偽アウトブレ
イクと清拭タオルの管理について．日本臨床微生物学雑誌
2005; 15(2): 82-9.
5）E. J. Bottone EJ: Bacillus cereus , a volatile human pathogen. Clin Microbiol Rev 2010; 23(2): 382-98.

〔連絡先：〒464-8662 名古屋市千種区星が丘元町 17 番地 3 号
椙山女学園大学看護学部 石原由華
E-mail: y-ishihara@sugiyama-u.ac.jp〕

Quantitative Evaluation of Bacillus Cereus Spore Attachment to the Surface of Disposable MedicalGloves Made from Various Materials
Yuka ISHIHARA1）, Hisae USAMI1）, Ikue SHAMOTO2）and Michio OHTA3）1）Sugiyama Jogakuen University School of Nursing, 2）Gif University School of Medicine Nursing Course,
3）
Nagoya University School of Medicine

Abstract
It is generally recognized that most Bacillus cereus blood stream infections are caused by thecontamination of infusion solution due to contaminated hands of healthcare personnel and skin ofpatients. The contamination of hands and skin with B. cereus spores frequently occur from contaminated hospital linens such as reused towels. Disposable medical gloves can also be a sourceof B. cereus spore contamination. The present study was therefore undertaken to quantitatively
measure the attachment behavior of B. cereus spores to the surface of disposable gloves madefrom various materials, such as latex, nitrile rubber, and vinyl chloride plastic. Our modified bead
extraction method was used for the assay. The number of spores attaching to gloves was highest for vinyl chloride gloves, followed by latex gloves and nitrile rubber gloves, and the difference in the numbers of attached spores between vinyl chloride gloves and nitrile rubber gloves
was significant (P = 0.028, ＜0.05). We therefore recommend nitrile rubber gloves for medical use
rather than other gloves.
Key words: Bacillus cereus , spore, disposable gloves, nitrile rubber gloves, modified bead extraction method― 200 ―