環境感染誌

Vol. 38 no. 2, 2023

〈短 報〉

敗血症患者血液由来および健常者皮膚分離 Bacillus cereus 株芽胞のポビドンヨード感受性石原由華 1）・柴山恵吾 2）・社本生衣 3）

宇佐美久枝 1）・太田美智男 4）

In Vitro Susceptibility of Bacillus cereus Spores of Blood Isolates and Healthy Skin Isolates to10% Povidone-iodine
Yuka ISHIHARA1）, Keigo SHIBAYAMA2）, Ikue SHAMOTO3）,
Hisae USAMI1）and Michio OHTA4）
1）
Sugiyama Jogakuen University School of Nursing, 2）Department of Microbiology and Immunology, Nagoya University Graduate Schoolof Medicine, 3）Gifu University School of Medicine Nursing Course, 4）Nagoya University Graduate School of Medicine（2022 年 9 月 12 日受付・2022 年 12 月 8 日受理）
要旨

Bacillus cereus 芽胞のポビドンヨードに対する感受性を血液由来 15 株と健常者皮膚分離 15 株の芽胞を用いて作用時間と温度を変えて検討した．いずれの処理条件でも高度耐性株はなく，多くの菌株で 10% ポビドンヨード処理 5 分で約 99％ の芽胞が殺菌されたが，残りの約 1％ の芽胞は 30分処理後も生残した．皮膚由来株 5 株，血液由来株 3 株は 5 分処理後に生菌数が約 0.1% になった．
作用温度の違いによるポビドンヨードの効果には大きな差が無く，また血液由来株と皮膚由来株の間に差がほとんど見られなかった．以上により B.

cereus 芽胞による皮膚汚染が軽度なら 10% ポビドンヨードによる消毒が可能と考えられた．
Key words：Bacillus cereus ，芽胞，ポビドンヨード，感受性，消毒Bacillus cereus は有芽胞菌であり，塵埃，土壌，腐有効であったとの報告６）もある．WHO の手指衛生ガイ

敗物，空気中など環境に広く存在し，芽胞の状態になる

ドライン（2009 年）によればポビドンヨードは芽胞にと熱，乾燥，皮膚消毒薬に対する抵抗性が強く 100℃ の対してある程度殺菌効果を示すが，消毒薬として通常使

１）

加熱や 70% アルコールにも耐性である ．近年，B. cereus

用される濃度では芽胞を殺菌しない，と述べられている７）．

による易感染患者への日和見感染により重篤な敗血症を

しかし WHO のガイドラインは主に Clostridioides 属の２，３）起こし死亡した事例が幾つか報告され ，その原因が，芽胞を対象としていて，実際 Clostridioides

清拭タオル等のリネン類や末梢静脈留置カテーテルなど

芽胞に対する 10% ポビドンヨードの効果についての報

ルート類および患者皮膚の B. cereus 芽胞汚染であると告は多く見られるが，B. cereus 芽胞に対する殺菌効果

２，４）

difficile のされる ．皮膚消毒に使用するポビドンヨードは，Bacil-の具体的データ報告はこれまでほとんど見られない．そlus 属などの芽胞には無効であるが Clostridioides 属なこで本研究では，B.

５）

cereus の敗血症患者血液由来 15

ど一部の芽胞に有効であるとされる ．その一方で，10%株と健常者皮膚から分離した 15 株を用いて B.

ポビドンヨードは 0.5% グルコン酸クロルヘキシジンア

芽胞の 10％ ポビドンヨードに対する感受性を比較検討

cereus

ルコールよりも高い殺菌効果を示し B. cereus に対してした．

B. cereus 血液由来株（6693，6362，T，5999，5354，
1）椙山女学園大学看護学部，2）
名古屋大学大学院医学系研究科微生物・免疫学講座，3）岐阜大学医学部看護学科，4）名古屋大学大学院
医学系研究科5904，6000，6564，5102，6441，5538，7111，7333，7245，6912）と皮膚分離株（5，13-2，27-1，30-1，3-1，31-1，291，1-①，20，17-1，57，59-1，80，100-1，23）を そ れ― 57 ―

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図 1 B. cereus 皮膚分離株・血液由来株芽胞の 10% ポピドンヨードに対する効果．A 〜 C：皮膚分離株，A：37℃，B：20℃，C：4℃，
D 〜 F：血液由来株，D：37℃，E：20℃，F：4℃．

ぞれ 15 株使用した．各菌株を NGKG 卵黄加寒天培地（栄薬品工業株式会社. 大阪）5 mL に添加して，5 分，10研化学）に接種し 30℃ で 2 日培養後室温に 7 日間放置分，30 分後に各 100 μL 採取して 10 倍希釈系列で希釈し芽胞形成を行った．培地から集菌した菌を滅菌水に懸し，NGKG 卵黄加寒天培地に接種し 30℃ で 2 日培養後濁して OD550=0.55（マクファーランド濁度標準液 No.3）コロニー数を測定した．10% ポビドンヨード液の処理に調整し 80℃ で 30 分間加熱後 5℃ で一晩放置し，芽胞温度は 4℃，20℃，37℃ とした．以上の実験を 3 回ある染色によって 100%（1 視野）が芽胞になっていること

いはさらに数回繰り返した．

を確認した．懸濁液から 100 μL を採取して，予め各処10％ ポビドンヨード処理後の生菌数を図 1 に示す．B.

理温度で 10 分間保温した 10% ポビドンヨード液（兼一cereus 芽胞に対する殺菌効果はどの菌株も最初の 5 分― 58 ―

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で生菌が約 1/100 に減少した．すなわち高度耐性株はなドンヨード液の殺菌効果を示すものではないが，作用時く芽胞の 99% が殺菌された．しかしその後作用時間が間を 5 分に近づければ，本研究で示したように 99％ の延びても特に 20℃ と 4℃ の作用温度では生菌数にほとB. cereus 芽胞の殺菌が期待できる．WHO の手指衛生んど減少が見られなかった．すなわちどの菌株においてガイドラインによれば芽胞の最も効果的な除去方法としも 10％ ポビドンヨードに非常に耐性の芽胞が約 1％ 程て流水石けんによる洗浄が推奨されている７）．しかし鼠度存在した．ポビドンヨードに対する感受性は菌株に径部など皮膚の部位によっては流水石けん処置を適切によって違いがあり，5 分間のポビドンヨード処理によっ行うことができない．もしその部位の芽胞汚染が軽度でて生菌数が 0.1% になった菌株が皮膚由来株で 5 株，血あることが予想されれば，本研究で示されたように 10％液由来株で 3 株見られた．また皮膚由来株 3 株は，37℃ポビドンヨード塗布によって大部分の B. cereus 芽胞の30 分間作用後芽胞が全て死滅したので，作用温度が高殺菌が可能であり，芽胞に有効な他の皮膚消毒薬が無いければ殺菌効果がより高い傾向があることが示唆された．

現状では使用を可とすることができる．

これらの結果から，10％ ポビドンヨードは室温での 5分間の作用で B.

利益相反自己申告：申告すべきものなし．

cereus 芽胞を 99％ 殺菌するが約 1％は生残するので，臨床的には，芽胞の濃厚汚染の可能性がある場合には消毒薬としての使用は推奨されないと考文えられる．なお，測定に使用する菌株によっては芽胞に対して 10％ ポビドンヨードが十分な殺菌効果を持つ，という誤った結果になる可能性が示唆された．10％ ポビドンヨードは芽胞に対して 4℃ でも 20℃ とそれほど変わらない殺菌効果を示した．37℃ では作用時間 30 分後は皮膚由来株 2 株，血液由来株 1 株で強い殺菌効果を示したが，通常使用される条件に近い 5 分後の殺菌効果においては作用温度の違いによる影響は明らかではなかった．血液由来株と皮膚由来株の比較では，特に 20℃ におけるポビドンヨード感受性でそれぞれの由来株に差が見られなかった．また他の作用温度でも大部分の菌株は分離源にかかわらず同様の感受性を示した．B.

cereus菌血症が皮膚に汚染した菌（芽胞）から起こる可能性があるならば，血液由来株と皮膚由来株のそれぞれの芽胞の間にポビドンヨード感受性に顕著な差が見られなかったことは妥当と考えられる．
本研究は，B. cereus の芽胞懸濁液を用いて 10% ポビドンヨード液の殺菌効果を調べた in vitro の実験であり，

献1）Drobniewski FA: Bacillus cereus and related species. Clin
Microbiol Rev 1993; 6: 324-38.
2）Sasahara T, Hayashi S, Morisawa Y, Sakihama T,
Yoshimura A, Hirai Y: Bacillus cereus bactermia outbreak
due to contamainated hospital linens. Eur Clin Microbiol
Infect Dis 2011; 30: 219-26.
3）国立がん研究センター中央病院におけるセレウス菌感染症ご報告（第 1 報）：http://www.ncc.go.jp/jp/ncch/information/20130822/index.html：2022 年 9 月 11 日現在.
4）井沢義雄，伊藤 誠：Bacillus cereus による偽アウトブレ
イクと清拭タオルの管理について．臨床微生物 2005; 15(2):82-9.
5）小林寬伊，大久保憲，尾家重治：新版増補版 消毒と滅菌のガイドライン，へるす出版，東京，2015. p. 123-4.
6）橋本浩司，三谷孝子，千葉眞彰，関口定美：採血部位消毒におけるポビドンヨードの有効性について．日輸血会誌
1999; 45(1): 20-5.
7）WHO Guidelines on Hand Hygiene in Health Care: World
Health Organization 2009: https://www.who.int/publicatio
ns/i/item/9789241597906. accessed September 11, 2022.

〔連絡先：〒464-8662 名古屋市千種区星が丘元町 17 番 3 号
椙山女学園大学看護学部 石原由華
E-mail: y-ishihara@sugiyama-u.ac.jp〕

その結果が直ちに患者皮膚に汚染する芽胞に対するポビ― 59 ―

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In Vitro Susceptibility of Bacillus cereus Spores of Blood Isolates and Healthy Skin Isolates to
10% Povidone-iodine
Yuka ISHIHARA1）, Keigo SHIBAYAMA2）, Ikue SHAMOTO3）,
Hisae USAMI1）and Michio OHTA4）
1）
Sugiyama Jogakuen University School of Nursing, 2）Department of Microbiology and Immunology, Nagoya University Graduate Schoolof Medicine, 3）Gifu University School of Medicine Nursing Course, 4）Nagoya University Graduate School of Medicine
Abstract
The susceptibility of Bacillus cereus spores to 10% povidone-iodine was measured at 0˚C, 20˚C,and 37˚C, respectively. The spores of 15 B. cereus blood isolates and 15 isolates from healthy
adult skin, respectively, were used for the measurement. The spore solution was prepared 9days after the culture of B. cereus on NGKG plates, and spore formation was confirmed microscopically. No B. cereus strain in the spore form was highly resistant to any conditions of 10%
povidone-iodine treatment. Approximately 99% of the spores of most strains were killed after a5-min treatment with 10% povidone-iodine irrespective of treatment temperature, whereas 1%of spores survived a 30-min treatment. The spores of 5 blood isolates and 3 healthy skin isolates
were more sensitive to 10% povidone-iodine, and only 0.1% of the spores survived the 5-mintreatment. No apparent differences in susceptibility to povidone-iodine between the blood andskin isolates were observed. From these results, 5-min treatment using 10% povidone-iodine forskin disinfection is applicable when contamination of B. cereus spores on the skin is expected tobe mild or low.
Key words: Bacillus cereus , spore, povidone-iodine, susceptibility, disinfection― 60 ―