信州医誌，67⑹：443～466，2019

信州大学において審査された医学博士論文要旨
氏
名（所属教室）

学位授与
番
号

授与年月日

博

士

論

文

名

学位審査委員主査

副査

橋 詰 直 人 乙第1217号（内科学⑸）

30. 6.12 Prognostic Value of Ankle-Brachial Index in 岡 田 健 次
Patients Undergoing Percutaneous Coronary
Intervention : In-Hospital and 1-Year Outcomes
From the SHINANO Registry（冠動脈インター
ベンションを受けた患者におけるABIの予後予測
価値：SHINANO レジストリー院内および１年
フォローの結果より）

新 田 憲 市 乙第1218号
（救急集中
治療医学）

30. 7.11 Impact of a negative D-dimer result on the initial 桑原宏一郎 川眞田樹人
assessment of acute aortic dissection（急性大山田充彦
動脈解離の初期評価における D-dimer 陰性の影響）

青 山 達 郎 乙第1219号
（脳神経
外科学）

30. 9.26 Radiographic measurements of C-2 in patients 多 田with atlas assimilation（環椎癒合症例における
軸椎椎弓根と椎弓の放射線学的検討）

剛

加藤博之
佐々木克典

佐々木哲郎 乙第1220号
（脳神経
外科学）

30.11.28 Numerical analysis of bifurcation angles and 多 田
branch patterns in intracranial aneurysm for­mation（脳動脈瘤発生における分岐角と分枝パターンの数値解析）

剛

佐々木克典
関島良樹

小 塚 綾 子 乙第1221号（内科学⑸）

30.12.26

盧郁 乙第1222号（代謝制御学）30.12.26 Peroxisome proliferator-activated receptor α 佐々木克典 菅 野 祐 幸
attenuates high- cholesterol diet-induced toxicity
平塚佐千枝
and pro-thrombotic effects in mice（ペルオキ
シソーム増殖剤活性化受容体 α はマウスにおける高コレステロール食誘導毒性と血栓形成促
進性を減弱させる）

柴田壮一郎 乙第1223号（内科学⑵）

31. 1.23 Liver Stiffness-Spleen Size-to-Platelet Ratio 菅 野 祐 幸
Risk Score Identifies Esophageal Varices inJapanese Patients with Chronic Hepatitis C（日本人のＣ型慢性肝炎患者において LSPS は
食道静脈瘤を判別する）

No. 6, 2019

今村
浩
沢村達也

Quantitative Analysis of Endocardial and Epi­ 桑原宏一郎 今 村浩
cardial Left Ventricular Myocardial Deformation
柴祐司
in Patients with Cardiac Amyloidosis（心アミロイドーシス患者における左室心内膜下および心外膜下心筋変形のスペックルトラッキングエ
コー法による定量解析）

竹下敏一
中沢洋三

443

審査学位論文要旨

倉田
敬 乙第1224号（小児医学）

31. 2.13

Panobinostat inhibits the proliferation of CD34 中 沢 洋 三+CD38-cells under stimulation of hematopoietic
growth factors on AGM-S3 cells in juvenile
myelomonocytic leukemia（Panobinostat は若年性骨髄単球性白血病における CD34陽性 CD38
陰性細胞の AGM-S3上での造血因子依存性増殖を抑制する）

古庄知己
平塚佐千枝

小 林 正 史 乙第1225号
（耳鼻咽喉
科学）

31. 2.27

WFS1 mutation screening in a large series ofJapanese hearing loss patients : Massively par­allel DNA sequencing-based analysis（日本人
難聴患者における WFS1遺伝子変異のスクリー
ニング）

古庄知己

田渕克彦
中沢洋三

山 本 克 己 乙第1226号（麻酔蘇生学）31. 3.13 Knockdown of TRPV2 channels in sensory 中 山
neurons increases limb use and weight bearing
but dose not affect spontaneous flinching be­
havior in a mouse model of bone cancer（一次知覚神経の Transient Receptor Potential
Vanilloid Subfamily２チャネルのノックダウン
は，マウス骨がんモデルにおける自発痛には影
響せず，体動時痛のみを改善する）

木野田文也 乙第1227号（内科学⑴）

31. 3.27 The contribution of genetic variants of the 川眞田樹人 駒 津 光 久
peroxisome proliferator-activated receptor古庄知己
alpha gene to high-altitude hypoxia adaptationin Sherpa highlanders（シェルパ高地民族の高所低酸素適応におけるペルオキシソーム増殖剤
活性化受容体 α 遺伝子変異の関与）

岩谷
舞 乙第1228号
（病態解析
診断学）

31. 3.27 Colitis-associated colorectal adenocarcinomas 本 田 孝 行
are frequently associated with non-intestinal
mucin profiles and loss of SATB2 expression（炎症性腸疾患関連の大腸癌は非腸型粘液形質を有し，SATB 発現を失う）

小泉知展
栗田
浩

清 水 郁 夫 乙第1229号（内科学⑴）

31. 3.27 Use of percutaneous image-guided coaxial 中 沢 洋 三
core-needle biopsy for diagnosis of intraab­dominal lymphoma（腹腔内リンパ腫の診断におけるコアニードルを用いた経皮的針生検の有用性について）

菅野祐幸
小泉知展

市野
隆 乙第1230号（麻酔蘇生学）31. 3.27 Transcranial motor-evoked potentials of la­ 伊 藤 研 一
ryngeal muscles for intraoperative neuromoni­
toring of the vagus nerve during thyroid sur­gery（甲状腺手術中の迷走神経機能モニタリ
ングとしての喉頭筋経頭蓋運動誘発電位）

山田充彦
関島良樹

市 山 崇 史 乙第1231号（内科学⑴）

31. 3.27 Effects of Subtype-selective E Prostanoid Recep­ 花 岡 正 幸
tor Agonists on Bleomycin-induced Pulmonary
Fibrosis in Rats（ブレオマイシン誘発肺線維症ラットモデルに対するサブタイプ選択的Ｅプ
ロスタノイド受容体アゴニストの効果）

山田充彦
小泉知展

444

淳

小泉知展
石塚
修

信州医誌

Vol. 67

審査学位論文要旨

Prognostic Value of Ankle-Brachial Index in Patients Undergoing Percutaneous Coronary
Intervention : In-Hosipital and 1-Year Outcomes From the SHINANO Registry（冠動脈インターベンションを受けた患者における ABI の予後予測価値：SHINANO レジストリー院内および１年フォローの結果より）
橋

詰

直

人

（論文の内容の要旨）

プローチは少なかった。DES 使用率は３群で同等で【背景】末梢動脈疾患（PAD）患者は，症状の有無にあったが，抗血小板薬併用の継続率は ABI 低値群・関わらず長期予後が悪く，また半数以上の PAD 患者

ボーダーライン群で高かった。

は冠動脈疾患を合併しており，冠動脈インターベン

ABI 低値群およびボーダーライン群は有意に PCIション（PCI）を受ける機会も多い。しかしベアメタ

関連合併症が多く発生し（7.7 ％ vs 8.8 ％ vs 4.0 ％，ルステントに比し，治療成績および安全性が向上した

P＝.024，P＝.017），多変量ロジスティック回帰解析

薬剤溶出性ステント（DES） 時代に PCI を受けたにて，ABI 低値およびボーダーライン値は PCI 関連

PAD 患者の予後を検討された報告は少ない。本研究

合併症の独立した危険因子であった。

では PAD の診断において簡便かつ確立した指標であ

１年間のフォロー期間において ABI 低値群は有意る ABI と PCI を受けた患者の院内および１年予後とに NACE 発生率が高かった（低値群 6.3 ％ vs ボーの関連について検討した。

ダーライン群 3.6 ％ vs 正常群 3.0 ％，log-rank P＝【 方 法 】 本 研 究 は Multicenter Analysis for Elderly.020（低値群 vs 正常群））。併存の危険因子で補正しPatients with Coronary Artery Disease Undergoingても，ABI 低値は NACE・脳卒中・大出血の独立しPercutaneous Coronary Intervention（ SHINANO ）た 危 険 因 子 で あ っ た 。ABI ボ ー ダ ー ラ イ ン 群 はregistry のサブ解析である。SHINANO registry 研究

NACE 発生の独立した危険因子ではなかったが，心は PCI を受けた高齢者および若年者の背景を比較し

血管死および大出血は多い傾向にあった。

短期予後・長期予後を検討した研究であり，2012年８【考察】本研究により ABI 低値は PCI 関連合併症お月から2013年７月まで長野県内16施設で PCI を受けよび１年間の心血管イベントのリスクを増加させるこ

た連続1,923名の冠動脈疾患患者を前向きに登録したとが明らかになった。加えて，ABI ボーダーライン

多施設共同観察研究である。このうち ABI を測定し値は PCI 関連合併症高リスクと関連していた。過去

た1,370名を登録し，ABI 低値群（N＝209，ABI ≤の報告と比較すると，PCI 関連梗塞や出血性合併症に0.9 ）・ ボ ー ダ ー ラ イ ン 群（ N＝171 ，0.9＜ABI＜

ついて PCI は以前よりも安全になったことが示され

1.0）・ 正常群（N＝990，1.0 ≤ ABI ≤ 1.4） の３群にたが，デバイスや技術の進歩にも関わらず PAD 患者

分け，患者背景・病変背景および院内・１年予後を解においては PCI 関連合併症や１年予後が依然悪いこ析した。院内評価項目は PCI 関連合併症（手技関連とが示された。本研究では実に ABI 低値群の40 ％以

心筋梗塞・手技関連脳卒中・冠動脈穿孔・出血性合併

上が PCI を受ける以前に PAD と診断されておらず，症・造影剤腎症・コレステロール塞栓症の総計），１

PCI 施行前のルーチンの ABI 測定は PCI 関連合併症

年評価項目は純臨床有害事象（NACEs；退院後１年や１年予後の予測に寄与する可能性が示唆された。

間の心血管死・非致死性心筋梗塞・虚血性または出血

ABI 低値群およびボーダーライン群の患者は有意性脳卒中・大出血の複合）とした。

に SYNTAX スコアが高く，PCI 合併症が多く発生し【結果】ABI 低値群のうち，57.7 ％の患者が PCI をた。特に ABI 低値群の患者において出血性合併症が受ける前に PAD と診断されていた。高齢・低体重に多く発生する傾向にあった。複雑病変のため経橈骨動

なるにつれて ABI が減少する傾向にあった。ABI 低脈アプローチが少なく，穿刺部合併症が増加した可能値群・ボーダーライン群には糖尿病・心房細動・腎機性があった。さらに複雑な病変に対してはより大径の能障害といった併存疾患が多く存在し，多枝病変・左ガイディングカテーテルが必要なことがあり，より多主幹部病変・石灰化病変といった複雑病変が多かった。

くの造影剤を必要とすることで造影剤腎症のリスクを同群で SYNTAX スコアは有意に高く，経橈骨動脈ア増加させた。本研究では0.5 ％の手技関連脳卒中が発No. 6, 2019445

審査学位論文要旨生したが，ABI 低値群・ボーダーライン群は全身の尿病・心房細動・腎機能障害といった併存疾患が多動脈硬化がより進行していることから手技関連脳卒中

く存在した。
３．ABI 低値群・ボーダーライン群は，多枝病変・のリスクが高いものと思われた。
１年間のフォロー期間中に，ABI 低値群・ ボー

左主幹部病変・石灰化病変といった複雑病変が多く，

ダーライン群の患者では出血性心血管死亡および出血SYNTAX スコアは有意に高かった。 同群は ABI性脳卒中が多く発生した。群間で DES 使用率に差は正常群に比し経橈骨動脈アプローチが少なかった。

なかったが，ABI 低値群・ボーダーライン群で抗血４．ABI 低値群およびボーダーライン群は有意に

小板薬２剤併用継続率が高い傾向にあった。複雑病変

PCI 関連合併症が多く発生し，多変量ロジスティッ

ではステント血栓症リスクのために抗血小板薬を減量

ク回帰解析では ABI 低値およびボーダーライン値

しにくい背景が影響したものと思われた。また，このは PCI 関連合併症の独立した危険因子であった。

ような患者は心房細動合併率も高くより抗凝固療法を５．１年間のフォロー期間において ABI 低値群は有併用されていることが多いことが，出血性イベントを意に純臨床有害事象（NACE）発生率が高かった

さらに増加させた可能性がある。PCI 後の自然出血は（低値群 6.3 ％ vs ボーダーライン群 3.6 ％ vs 正

高い致死率と関連しており，患者個人の血栓リスクお常群 3.0 ％，log-rank P＝.020）。併存の危険因子

よび出血リスクに応じて PCI 後の抗血栓療法を考慮で補正しても，ABI 低値は NACE・脳卒中・大出する重要性が示唆された。

血の独立した危険因子であった。ABI ボーダーラ

PCI 術者は ABI の異常値を示す患者により多くのイン群は NACE 発生の独立した危険因子ではな

注意を払うべきであり，PCI 施行前の ABI 測定はかったが，心血管死および大出血は多い傾向にあっ

PCI 関連合併症および１年予後の予測に寄与する可能た。
６．１年間に発生した心血管死亡および脳卒中の内訳性がある。
（論文審査の結果の要旨）

では，ABI 低値群およびボーダーライン群で出血関連イベントが多く発生した。

末梢動脈疾患（PAD）患者は，症状の有無に関わらず長期予後が悪く，また半数以上の PAD 患者は冠これらの結果から，PCI を受けた患者において，動脈疾患を合併しており冠動脈インターベンション

ABI 低値は PCI 関連合併症と１年間の心血管イベン（PCI）を受ける機会も多い。

トの高リスクであり，ABI ボーダーライン値も PCI

本研究は，薬剤溶出性ステント時代に PCI を受け関連合併症の高リスクと関連していたことが明らかにた患者において，PAD 診断の確立した指標であるなった。同群において１年間の心血管イベントは出血

ABI と，PCI 関連合併症発生率及び１年予後との関が関連したものが多く，PCI 後の抗血栓療法を個々に連を検討した。

合わせて考慮する重要性が示唆された。また，PCI 施
行前のルーチン ABI 測定は，PCI 関連合併症およびその結果，以下の成績を得た。
１．ABI 低値群のうち，42.3 ％が事前に PAD と診

１年予後の予測に有用である可能性が示唆された。
よって，主査，副査は一致して本論文を学位論文とし断されていなかった。
２．高齢・低体重になるにつれて ABI が減少する傾て価値があるものと認めた。

向にあり，ABI 低値群・ボーダーライン群には糖

Impact of a negative D-dimer result on the initial assessment of acute aortic dissection（急性大動脈解離の初期評価における D-dimer 陰性の影響）
新

田

憲

市

（論文の内容の要旨）いる。これまでの報告では，D-dimer 陰性の急性大【背景と目的】急性大動脈解離は，突如発症し致死的

動脈解離症例では，解離の範囲が短いとされてきた。

状態になる大動脈疾患である。早期診断が予後を改善

しかし，急性大動脈解離と診断された D-dimer 陰性するとされている。D-dimer は，急性大動脈解離のの患者の臨床的特徴や予後に関してはよく知られてい診断に使用され，感度は高いが特異度は低いとされてな い 。 こ の 研 究 は ， 急 性 大 動 脈 解 離 診 断 時 の D-

446

信州医誌

Vol. 67

審査学位論文要旨

dimer 陰性の患者の臨床的特徴を明らかにすることで陽性群と比較した場合，解離腔が短く血小板消費が相ある。

対的に少なかった結果と考えた。これまでの報告では，【方法】本研究は，2009年４月から2015年３月までに解離腔が短いと D-dimer が低値であるとされ，また入院した急性大動脈解離患者を対象にした後ろ向き研

血栓閉塞型急性大動脈解離は D-dimer 値が低く予後究である。来院時心肺停止症例，発症より24時間以上がよいとされている。さらに，D-dimer 陰性は，予経過した症例，D-dimer 値が診断時測定されていな

後がよく緊急手術を要することは少ないと報告されてい症例は除いた。D-dimer 値は診断時の採血を用いきた。 しかし， 本研究において D-dimer 陰性例のた。転院搬送例は，前医診断時の D-dimer 値を用い

33 ％が Stanford A 型でかつ心タンポナーデを合併した。D-dimer 陰性は，それぞれの D-dimer キットの緊急手術となった。緊急手術例はすべて部分閉塞型で検査値の正常値以下とした。 発症時の症状・ 所見，あった。部分閉塞型急性大動脈解離は，re-entry がCT・超音波画像評価，血液生化学検査や手術の有無

ほとんどなく解離腔血流の出口がないために，偽腔内を調査した。また，D-dimer 陰性群と D-dimer 陽性

圧が高く偽腔の拡大が生じ破裂する可能性があると考群とに分け比較検討を行った。

えられる。以上より，D-dimer 陰性の急性大動脈解急性大動脈解離は，造影 CT にて確定診断した。Ex­

離症例は，解離腔が短い場合でも緊急手術を要する致

tension score は，大動脈解離腔を６つにわけ，解離

死的状態になる可能性があるので注意すべきである。

腔の長さを数字化したもの（数値が大きければ解離腔【結論】 血小板数が高いことや解離腔が短いことはが長い）で，１-６の数値で表した。急性大動脈解離

D-dimer 陰性と関連する因子であることがわかった。

は，偽腔の血流の有無により偽腔開存型，部分閉塞型，解離腔がたとえ短い場合でも D-dimer 陰性例のなかあるいは完全閉塞型に分類した。手術適応の判断は，に緊急手術を要する症例がある。D-dimer 陰性のみ

大動脈瘤・大動脈解離診療ガイドライン（2011改訂

だけでは，致死的な急性大動脈解離例を除外すること版）に準じた。

はできない。
（論文審査の結果の要旨）【結果】最終的に急性大動脈解離126例（男性71例，女性55例，年齢69±11歳）が対象となった。126例のう急性大動脈解離は，突如発症し致死的状態になる大ち９例が，D-dimer 陰性であった。D-dimer 陰性群は，動脈疾患で早期診断が予後を改善するとされている。

D-dimer 陽性群と比較して有意に解離の範囲が短く血D-dimer は，急性大動脈解離の診断に使用され，感小板数が高値であった。多変量解析の結果，D-dimer

度は高いが特異度は低いとされている。これまでの報

陰性と関連が認められたのは，血小板数（odds ratio，

告では，D-dimer 陰性の急性大動脈解離症例では，1.31（ 1.09-1.58 ），p＝0.003 ） と extension score

解離の範囲が短いとされてきた。しかし，急性大動脈（odds ratio，0.56（0.33-0.96），p＝0.03）であった。

解離と診断された D-dimer 陰性の患者の臨床的特徴

D-dimer 陰性例において，完全閉塞型は67 ％，部分や予後に関しては明らかではない。本研究は，急性大閉塞型は33 ％で，偽腔開存型は０％であった。特に

動脈解離診断時の D-dimer 陰性の患者の臨床的特徴

D-dimer 陰性例の44 ％が Stanford A 型解離であった。

を明らかにために，当院に入院した急性大動脈解離患さらに，D-dimer 陰性例の33 ％が，心タンポナーデ者を対象に D-dimer 陰性群と D-dimer 陽性群とに分で緊急手術が行われた。

け発症時の症状・所見，CT・超音波画像評価，血液【考察】 急性大動脈解離症例の7.1 ％が D-dimer 陰生化学検査や手術の有無を調査し後方視的に比較検討性であった。頻度に関してはこれまでの報告と同様なした。

結果であった。本研究において D-dimer 陰性と関連する因子は，血小板数と extension score であった。
D-dimer 値と extension score に関しては，これまでその結果，以下の結果を得た。
１．急性大動脈解離症例の7.1 ％（9/126）が Ddimer 陰性であった。

の報告と同様であった。血小板数に関しては，大動脈

２．D-dimer 陰性群は，D-dimer 陽性群と比較し有解離と血小板の減少の関係について報告が散見される。

意に解離の範囲が短く（p＝0.008），血小板数が高血小板減少の原因としては，過凝固状態によって血小値であった（p＝0.0005）。

板が消費され減少すると考えられている。今回，我々

３．多変量解析の結果，D-dimer 陰性と関連が認めは，D-dimer 陰性と血小板高値の関係は，D-dimer

られたのは，血小板数（odds ratio，1.31（1.09-

No. 6, 2019447

審査学位論文要旨

これらの結果より，血小板数が高いことや解離腔が1.58），p＝0.003）と Extension score（odds ratio，

短いことは D-dimer 陰性と関連する因子であること，0.56（0.33-0.96），p＝0.03）であった。
４．D-dimer 陰性例の４症例（44 ％）が Stanford A

解離腔がたとえ短い場合でも D-dimer 陰性例のなか型解離であった。D-dimer 陰性で緊急手術となっに緊急手術を要する症例が存在し，D-dimer 陰性のた例は３症例であった。さらに，緊急手術となったみだけでは，致死的な急性大動脈解離例を除外するこ

例はすべて Stanford A 型解離で部分閉塞型かつ心とはできないことが示せた。よって主査，副査は一致

タンポナーデであった。

して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

Radiographic measurements of C-2 in patients with atlas assimilation（環椎癒合症例における軸椎椎弓根と椎弓の放射線学的検討）
青

山

達

郎

（論文の内容の要旨）

us NET V4.4.7.102，Yokogawa Electric Corp.）を【目的】頭蓋頚椎移行部の不安定性に対する後方固定用いて，1）C2椎弓根最狭部の短径，2）C2椎弓最狭術では，アンカースクリューの選択が重要である。近部の短径，3）C2椎弓の長さを計測した。統計学的検

年では環椎外側塊スクリュー，軸椎椎弓根スクリュー，

討は Student t-test を用い，p＜0.05を有意差とした。

軸椎椎弓スクリューが主流である。一方で，proatlas【結果】CT 再構成画像を用いた計測を行い，1）C2椎の再分節障害によって，環椎と後頭骨が癒合する C1

弓根最狭部の短径は C1A 群で平均は右5.52 mm／左assimilation においては，環椎外側塊が低形成であっ4.90 mm， 対照群で平均は右7.30 mm／左7.05 mm

たり，椎骨動脈走行異常や Klippel-Feil 症候群，頭蓋と有意差が見られた（p＝0.0007／0.014）。一方，2）底陥入症，Chiari Ⅰ型奇形などを伴うことも多く，環C2椎弓最狭部の短径は C1A 群で平均は右5.75 mm／

椎外側塊にスクリュー挿入が困難な症例を経験する。

左4.83 mm，対照群で平均は右6.48 mm／左6.58 mm

そのような症例では軸椎スクリューがアンカースクと左側で有意差が見られた（p＝0.12／0.002）。また，

リューとして重要となる。今回，我々は C1 assimilation

3）C2椎弓の長さは C1A 群で平均は右31.00 mm／左症例における軸椎の形態について放射線学的検討を

29.71 mm ， 対 照 群 で 平 均 は 右 34.02 mm ／ 左 34.11

行った。

mm と有意差が見られた（p＝0.015／0.001）。

【方法】2006年１月～2012年12月に愛知医科大学病院【考察】C1A 群７例のうち，頭蓋底陥入症の５例に対で頚椎手術を受けた患者462名の中で C1 assimilation

し後頭骨軸椎間固定術を行った。軸椎スクリューにつを伴っていた症例（C1A 群）は７例あり，その患者いて，両側とも椎弓根スクリュー挿入できたのは２例，

背景は男女比が１：６，平均年齢は55.4（17～70）歳，

片側は椎弓根スクリュー，もう一方は椎弓スクリュー疾患は頭蓋底陥入症５例，椎間板ヘルニア２例であっとなったのが１例，両側とも椎弓スクリューを選択した。頭蓋底陥入症に対しては経口手術と術中ナビゲー

たのは２例であった。軸椎椎弓スクリューを選択した

ション下に後頭骨軸椎間固定術の併用，椎間板ヘルニ

理由は，椎骨動脈の走行異常と軸椎椎弓根の低形成でアに対しては前方除圧固定術が行われた。合併奇形にあった。全例で術前に CT 再構成画像を用いて適切なついて，頭蓋底陥入症５例中２例において Chiari Ⅰ

アンカースクリューを選択し，術中ナビゲーションシ

型奇形を認め，３本の high riding vertebral artery，

ステムを用いて挿入し，硬膜損傷，神経根損傷や椎骨２本の persistent first intersegmental artery を認め

動脈損傷は認めなかった。 スクリューの最小径はたが，椎間板ヘルニア２例では合併奇形は認めなかっ

3.5 mm であるが，Smith らは，安全に挿入するにはた。対照群として C1 assimilation を伴わない男性２

椎弓根最峡部短径は最低でも5.0 mm が必要であると

例と女性12例を無作為に抽出し比較した。対照群の平報告している。椎骨動脈走行異常や軸椎椎弓根が低形

均年齢は56.7（46～70）歳であり，C1A 群との有意成である場合には，軸椎椎弓スクリューが選択される差はなかった（p＝0.84）。また，対照群では合併奇が，Ma らは，椎弓最峡部短径は最低でも4.0 mm が形や椎骨動脈走行異常は認めなかった。C1A 群と対必要であると報告している。

照群に対し，0.5mm slice の CT 再構成画像（Aquari­【結論】C1 assimilation のある症例では，環椎のみな

448

信州医誌

Vol. 67

審査学位論文要旨

らず軸椎の椎弓根，椎弓ともに小さく，椎弓が短いな

例を無作為に抽出した。対照群に合併奇形はなかった。

どの低形成が多い。我々が経験した症例では環椎外側両群において0.5 mm の thin slice CT 再構成画像を塊スクリューが挿入できない症例でも，アンカースク

用いて，1）C2椎弓根最狭部の短径，2）C2椎弓最狭リューとして軸椎椎弓根スクリューまたは軸椎椎弓ス部の短径，3）C2椎弓の長さの平均値を計測し，ｔ検

クリューの挿入が可能であった。C1 assimilation 症例

定で統計学的検討を行った。

における後方固定術前には CT 再構成画像による詳細な検討と，術中ナビゲーションシステムを用いたよりその結果，以下の結論を得た。
１．C2椎弓根最狭部の短径は C1A 群で右5.52 mm／
左4.90 mm，対照群で右7.30 mm／左7.05 mm（p

安全な操作が必要である。
（論文審査の結果の要旨）＝0.0007／0.014）。C2椎弓最狭部の短径は C1A 群

後頭骨と環椎が癒合する C1 assimilation において，で右5.75 mm／左4.83 mm，対照群で右6.48 mm／

不安定性がある場合には後方固定術が行われる。しか左6.58 mm（p＝0.12／0.002）。C2椎弓の長さはし環椎が低形成かつ椎骨動脈の走行異常を伴い，環椎C1A 群で右31.00 mm／左29.71 mm，対照群で右スクリューの留置が困難な事が多い。そのような症例

34.02 mm／左34.11 mm（p＝0.015／0.001）。いでは軸椎スクリューが重要となるが，軸椎スクリュー

ずれの parameter でも有意差があった。

も留置困難なことがある。これまで C1 assimilation

２．C1 assimilation においては，C1のみならず C2もにおける軸椎の形態を調べた報告はなく，後方視的に低形成であり，椎骨動脈走行異常も多く，固定力にC1 assimilation おける軸椎の放射線学的検討を行った。

優れる軸椎椎弓根スクリューが留置できない例があ2006年から2012年の間に頚椎手術を行った462例のることが分かった。

うち，C1 assimilation を７例で認めた（C1A 群）。男

３．頭蓋底陥入症５例において軸椎スクリューは全例

性：女性＝１：６，手術対象となった疾患は頭蓋底陥で留置可能であったが，より精度が求められる。そ入症５例，椎間板ヘルニア２例であった。頭蓋底陥入の対策として術前の CT 再構成画像を用いた計画と，症５例に対し，経口手術と術中ナビゲーションを用い術中ナビゲーションシステムを用いた安全な操作がた後頭骨軸椎固定術を行った。全例で軸椎スクリュー望ましい。

は留置可能であったが，３例は軸椎椎弓根が低形成あ以上より，C1 assimilation においては軸椎の低形成

るいは椎骨動脈の走行異常があり，固定力はやや劣るを伴う可能性が高く，その他の合併奇形があることもが安全に留置可能な椎弓スクリューを選択した。頭蓋考慮して手術治療にあたるべきである。主査，副査は底陥入症５例において Chiari Ⅰ型奇形を２例，椎骨一致して本論文を学位論文として価値があるものと認

動脈走行異常を５例で認めた。対照群として同データめた。

ベースから，男女比を一致させ，C1A を伴わない14

Numerical analysis of bifurcation angles and branch patterns in intracranial aneurysm
formation（脳動脈瘤発生における分岐角と分枝パターンの数値解析）
佐々木（論文の内容の要旨）

哲 郎
関連性を解析した。

【背景と目的】脳動脈瘤は血管分岐部に発生しやすく，【方法】３次元 CAD ソフトウェアを用い，分枝角をこの分岐部で壁面せん断応力（WSS）の上昇が観察

30度毎に変化させて分岐角（２つの分枝角の和）を60されることから，脳動脈瘤の発生には WSS が大きく

度から180度まで設定し，２分枝の血管径が等しいタ

関わると考えられている。血管分岐における分岐角とイプＡの８モデルと，左分枝径が細いタイプＢの13モ

分枝径が脳動脈瘤発生の関連因子であるとした報告がデルを作成した。流体解析には汎用熱流解析ソフト

あるが，分岐形態と WSS の関連性を詳細に分析したウェアを用い，ヒト血液に近似した密度と粘性係数を文献はない。そこで我々は，多数の血管分岐パターン

与え，壁面を剛体と見做した滑りなし条件とした。入を持つ血管モデルに対して数値流体力学（CFD）を

口境界条件として内頚動脈平均速度の定常流を与え，用いて WSS を計算し，分岐形態と脳動脈瘤発生との左右分枝の出口境界条件は流速比と分枝断面積比が等

No. 6, 2019449

審査学位論文要旨

しくなるよう設定した。各モデルの CFD 解析で得ら（論文審査の結果の要旨）れた WSS から，WSS の最大値（WSSMAX）と，15 Pa

脳動脈瘤発生に血行力学因子，特に壁面せん断応力以上の高い WSS が計測された壁面積（AREA）と，（WSS）が関与していることが以前から示唆されていその面積における WSS の総和（FW）を計算し，これたが，数値流体解析（CFD）の発達により，WSS がらの WSS パラメータと分岐角・分枝角との関連性を上昇している部位で脳動脈瘤が発生することが証明さ

線形回帰分析で検討した。

れている。また，WSS の上昇が血管内皮細胞の炎症【結果】タイプＡモデルにおいて，WSSMAX は分岐角が関連転写因子を活性化し，血管壁に生じる慢性炎症反狭い場合と分枝角が広い場合で有意に上昇し，AREA

応が脳動脈瘤の発生・増大に結びつくことが近年分と FW は分岐角・分枝角が広い場合で有意に上昇した。

かってきた。一方で，脳動脈瘤の発生しやすい血管分タイプＢモデルにおいて，WSSMAX は細い分枝側で高岐部の形態に着目した臨床研究があり，分岐角が広いくなる傾向があり，細い分枝の WSSMAX は分岐角が場合や分枝径が細い場合に脳動脈瘤発生の危険性が高狭くなるにつれて上昇した。AREA と FW は分岐角・いとされている。そこで我々は，分岐角が広い場合や分枝角と正の相関がみられた。以上から，WSSMAX は分枝径が細い場合に WSS が上昇するという仮説のも

分岐角が狭いか分枝径が細いと上昇し，AREA と FWと，分枝角や分枝径を変化させた多数の血管モデルのは分岐角または分枝角が広いと上昇することが分かっ

CFD 解析から，WSS の最大値（WSSMAX）と，15 Pa 以た。

上の高い WSS が計測された壁面積（AREA）と，その【考察】過去の文献で分岐角が広いことが脳動脈瘤発

面積における WSS の総和（FW）を計算し，これらの生の危険因子であるとされているのに対し，本研究でWSS パラメータと分岐角・分枝角との関連性を線形

は分岐角が狭くなるにつれて WSSMAX が上昇する傾回帰分析で検討した。

向がみられた。この反発する結果から，WSSMAX のほ

その結果は以下の通りである。

かに脳動脈瘤発生に関わるパラメータが存在する可能

１． 左右分枝径が等しいタイプＡモデルにおいて，性が考えられる。本研究では分岐角・分枝角が広くな

WSSMAX は分岐角が狭い場合と分枝角が広い場合でると AREA と FW は有意に上昇した。AREA や FW

有意に上昇し，AREA と FW は分岐角・分枝角がが高いことは長期に広い範囲で高い WSS が生じてい広い場合で有意に上昇した。

る状態と捉えると，AREA と FW は分岐角が広いと２．左分枝径が細いタイプＢモデルにおいて，WSSMAX

脳動脈瘤発生の危険性が高まるという事実を支持するは細い分枝側で高くなる傾向があり，細い分枝のパラメータとなるかもしれない。本研究では，分岐形

WSSMAX は分岐角が狭くなるにつれて上昇した。

態と WSS パラメータとの関連性を解析するために単

AREA と FW は分岐角・分枝角と正の相関がみら

純血管モデルで様々な分岐パターンを作成したが，実れた。

際の脳血管は複雑な構造をしており，CFD シミュ

３．以上から，WSSMAX は分岐角が狭いか分枝径が細レーションの技術的な制限も考慮すると，本研究の結いと上昇し，AREA と FW は分岐角や分枝角が広果がヒト血管に必ずしも当てはまるとは限らない。そいと上昇することが分かった。

のため，今後さらに複雑な分岐形態モデルや多数の患

４．WSSMAX は分岐角が狭いほど上昇したが，AREA

者固有モデルを用いた研究により，分岐形態と脳動脈と FW は分岐角が広いほど上昇した。AREA や FW

瘤発生の関連性を深く解析するべきである。

は，分岐角が広いと脳動脈瘤発生の危険性が高まる【結語】WSS の変化は血管分岐形態に強く関連し，という事実を支持する WSS 関連パラメータと考え

WSS は分岐角が狭い場合と分枝径が細い場合で高くられる。

なり，高い WSS が生じる壁面積は分岐角や分枝角が５．WSSMAX が細い分枝側で上昇する傾向がみられた

広いほど大きくなる。高い WSS に加え，高い WSSのに対し，AREA/FW と分枝径との間には一定のが生じる壁面積とその面積にかかる WSS の総和が，傾向を見出すことができなかった。細い分枝よりも太脳動脈瘤発生に関与すると考えられる。分岐形態の観い分枝側の血流量が多いため，太い分枝側の AREA

察は脳動脈瘤発生の予測に結びつく可能性があり，広が細い分枝よりも大きくなる場合があり，そのため

い分枝角と細い分枝は脳動脈瘤発生の危険因子となりに AREA や FW が細い分枝側で上昇する傾向が示さ得る。

れなかったと考えられる。

450

信州医誌

Vol. 67

審査学位論文要旨

以上から，WSS の変化は血管分岐形態に強く関連に結びつく可能性があり，広い分枝角と細い分枝は脳しており，WSS の絶対値だけでなく，高い WSS に動脈瘤発生の危険因子となり得る。したがって，主査，

曝された壁面積の広さも脳動脈瘤発生に関与すると考副査は一致して本論文を学位論文として価値があるもえられた。血管分岐形態の観察は脳動脈瘤発生の予測のと認めた。

Quantitative Analysis of Endocardial and Epicardial Left Ventricular Myocardial Deformationin Patients with Cardiac Amyloidosis（心アミロイドーシス患者における左室心内膜下および心外膜下心筋変形のスペックルトラッキングエコー法による定量解析）
小

塚

綾

子

（論文の内容の要旨）

ドプラ法による左室流入血流波形は偽正常化パターン【背景】アミロイドーシスとはアミロイドと呼ばれるを呈した。円周方向のストレインは４群間で内層，外異常蛋白が全身さまざまな臓器に沈着し，機能障害を層に有意差を認めなかった。壁厚方向のストレインに起こす病気である。このうち，心臓にアミロイドが沈着関しては，左室基部と中部において，Group１に比較し，心病変を有した状態を心アミロイドーシス（CA）

し，Group２，３で内層が低下していた。（P＜0.001）という。

また Group１はコントロール群より内層が低下して心アミロイドーシス患者において，心臓 MRI によいた。

る評価では， 左室心内膜下側から始まる遅延造影

左室基部，中部において，長軸方向のストレインは（LGE）が認められ，アミロイド蛋白沈着領域と一致

内層，外層ともに Group１に対し，Group２，３で低下していると考えられている。心アミロイドーシスでは，を示した。AL，ATTRm アミロイドーシス間では差を左室心内膜下心筋へのアミロイド蛋白の沈着により左認めなかった。99mTc- ピロリン酸心筋シンチグラム

室心筋内層優位の心筋収縮障害をきたすことが予想さは51人中50人の ATTRm 患者に集積を認めたが，ALれる。

患者では全例集積を認めなかった。

今回，我々はこれを証明するために，左室壁を心筋【考察】本研究は心アミロイドーシスの心内膜側の心内層と外層の２層に分け，スッペックルトラッキング

筋収縮障害をスペックルトラッキング法にて心筋スト法にて心筋ストレイン解析を用いて心筋機能を評価しレイン解析を用いて証明した最初の報告である。進行た。

した心アミロイドーシスにおいては左室基部から中部【方法】対象は組織学的に診断がついている全身性アの壁厚方向ストレインは内層でより強く障害され，外ミロイドーシス患者98名（内訳：AL47名，ATTR ｍ

層まで障害が及んでいる。長軸方向のストレインは基51名）と正常コントロール群20名。CA 患者全例で部から中部で内層，外層ともに障害されていた。本検

99m

Tc- ピロリン酸心筋シンチグラムを施行した。

討の結果は，MRI の遅延造影が左室心内膜下から全高血圧症，弁疾患，糖尿病が無く，心エコーで拡張周性に認められるという報告と合致する結果であり，末期左室壁厚が12 mm 以上の症例を心病変ありと判

アミロイドの沈着パターンと関連していると考えられ，断した。アミロイドーシスの心病変を認めない群をスペックルトラッキング法による心筋ストレイン解析

Group１（n＝32），心病変を有するが，心不全が無い，が心アミロイドーシスの早期発見，鑑別に役立つ可能または BNP100 pg/ml 未満の群を Group２（n＝23），性が示された。また本研究は，アミロイドーシスによ

心病変を有し，心不全あり，または BNP100 pg/ml

る心筋障害進展メカニズムの視点からも重要性を有す

以上を Group３（n＝43）に分類した。左室壁を心筋る。すなわち，左室心筋内膜側には内斜走筋が存在し，内層（inner layer）と心筋外層（outer layer）の２層

長軸方向，壁厚方向の機能に寄与する。そのため，心に分け，スペックルトラッキング法にて，心筋ストレ

内膜下側の特徴的なアミロイド沈着パターンは長軸方

イン解析（円周方向，壁厚方向，長軸方向）を用いて向，壁厚方向のストレインを低下させる。しなしなが心筋機能を評価した。

ら，円周方向の心筋繊維は左室心筋の中間と外層に存【結果】Group３では他の２群に比べ，年齢や BNP 値，

在する。その結果，円周方向の収縮能はアミロイドー

左房径，左室壁厚が高い傾向にあった。また，パルス

シスが進行し，心筋外層にアミロイドの沈着が起こる

No. 6, 2019451

審査学位論文要旨まで保たれると考えられる。本研究では Group１でもまた，パルスドプラ法による左室流入血流波形は偽正常群と比較し，内層の壁厚方向ストレインの低下が正常化パターンを呈し，拡張障害の進行が顕著で明らかであった。ATTRm アミロイドーシスでは51
人中50人が Tc 心筋シンチでは集積を認めており，壁厚正常群（Group１）でもすでにアミロイドの沈着があった。
２．円周方向のストレインは４群間で内層，外層に有意差を認めなかった。
３．壁厚方向のストレインは，左室基部と中部においあることを意味する。
本研究の問題点としては，MRI が未施行であるこて，Group１（No LVH 群） に比較し，Group２（LVH 群），Group３で内層が低下していた。（P＜とが挙げられる。
造影 MRI でのアミロイド沈着の定量化とスペック
ルトラッキングとの対比を行うことにより正確な障害パターンの評価が可能となると考えるが，腎障害を有する患者も多く，本研究では MRI の施行は困難であっ0.001）
４．Group１はコントロール群より内層の壁厚方向のストレインが低下していた。
５．左室基部，中部において，長軸方向のストレイン
は内層，外層ともに Group１に対し，Group２，３

た。
（論文審査の結果の要旨）

で低下を示した。

心アミロイドーシス患者において，心臓 MRI による

６．AL，ATTRm アミロイドーシス間では差を認め

評価では，左室心内膜下側から始まる遅延造影（LGE）

なかった。

が認められ，アミロイド蛋白沈着領域と一致している

これらの結果から，心アミロイドーシス患者においと考えられている。心アミロイドーシスでは，左室心て，病態早期からの左室基部，中部内層の壁厚方向と内膜下心筋へのアミロイド蛋白の沈着により左室心筋

全層性の長軸方向の収縮障害の存在が明らかになった。

内層優位の心筋収縮障害をきたす事が予想される。

MRI の心内膜側心筋の遅延造影と類似し，又，解剖本研究は，左室壁を心筋内層と外層の２層に分け，学的な心筋の３層構造の収縮機能とも矛盾しない結果

スッペックルトラッキング法にて心筋ストレイン解析であった。本研究は，心アミロイドーシスの早期診断（円周方向，壁厚方向，長軸方向）を用いて心筋機能法確立に寄与すると共に，その病態メカニズム解明にを評価した。

も貢献することが期待される。よって，主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認

その結果，以下の結果を得た。
１．Group３（CHF 群）は他の２群に比べ，年齢やめた。

BNP 値，左房径，左室壁厚が高い傾向にあった。

Peroxisome proliferator-activated receptor α attenuates high-cholesterol diet-induced
toxicity and pro-thrombotic effects in mice（ペルオキシソーム増殖剤活性化受容体 α はマウスにおける高コレステロール食誘導毒性と血栓形成促進性を減弱させる）
盧郁（論文の内容の要旨）【対象・方法】野生型および PPARα ノックアウトマ【背景】 ペルオキシソーム増殖剤活性化受容体 αウスを用いて， 普通餌もしくは高コレステロール（PPARα）は，脂肪酸およびコレステロール代謝を調［1.5 ％（w/w）］含有餌を８週間与えた後に，血液お節する核内転写調節因子である。高コレステロール食がよび肝臓中のコレステロールおよび中性脂肪含有量・もたらす高コレステロール血症は心臓血管病（CVD）

肝臓病理所見・血液および肝臓中の凝固関連因子含有のリスク因子と考えられている。

量と抗凝固因子であるスルファチド含有量・肝臓におしかし，コレステロール摂取が毒性を発揮する機序

けるスルファチド代謝変化・細胞内脂質輸送体の発現や様々な凝固関連因子の発現変化に影響するか否かは量・酸化ストレスおよびその代謝関連酵素群発現量を不明である。

測定し，両群間で比較検討した。肝臓病理所見はヘマ

そこで，これらの不明点について研究を行い，PPARαの影響を検討した。
452

トキシリン・エオジン染色法にて評価した。mRNA
解析は real-time PCR 法を用いた。蛋白発現量解析
信州医誌

Vol. 67

審査学位論文要旨

は immunoblot 法を用いた。血中の脂質および凝固因

我々は，「高コレステロール食は，脂質代謝の変調・子含有量測定は enzymatic assay kit を用いて測定し酸化ストレスの増加・凝固関連因子の産生変化によりた。スルファチド含有量測定は飛行時間型質量分析機

コレステロール毒性を発揮し，PPARα はこれらのコ（MALDI-TOF MS）を用いて含有量を測定した。７

レステロール毒性を抑制する」という仮説をたてた。

種類のリゾスルファチドの総和をスルファチド含有量

この仮説を検証するために，野生型マウスと PPARαとした。PPARα 活性測定は核内抽出蛋白を用いて，遺伝子欠損マウスに高コレステロール含有餌を８週間PPAR response element（PPRE） 結合能を ELISA

摂取させ，血液および肝臓中のコレステロールおよび法により測定した。統計的解析は，測定結果を平均値

中性脂肪含有量・肝病理所見・血液および肝臓中の凝±SD で示し，統計的有意差は two-way ANOVA を

固関連因子含有量と抗凝固因子であるスルファチド含用いて検定した（解析ソフト：SPSS v22.0J）。P＜

有量・肝臓におけるスルファチド代謝変化・細胞内脂0.05を統計的有意差ありとした。

質輸送体の発現量・酸化ストレスおよびその代謝関連【結果】PPARα 遺伝子欠損マウスにおいて，高コレ酵素群発現量を測定し，両群間で比較検討した。

ステロール摂取は肝臓中の中性脂肪蓄積を引き起こ

その結果，盧郁は以下の結論を得た。

し，肝臓の炎症および酸化ストレス増加を誘発した。

１．PPARα 遺伝子欠損マウスにおいて， コレステ

さらに，血中および肝臓中において，凝固因子である

ロール過剰摂取は肝臓内の中性脂肪蓄積・肝臓の炎

tissue factor・plasminogen activator inhibitor-1・症および酸化ストレスを増加させた。

carboxypeptidase B2の含有量の増加， また， 抗凝２．PPARα 遺伝子欠損マウスの血中および肝臓内に固・抗血小板作用を示すスルファチドの含有量の低下

おいて，コレステロール過剰摂取は凝固因子であるが認められた。野生型マウスでは，これらの変化は著

tissue factor・plasminogen activator inhibitor-1・

しく抑制されていた。

carboxypeptidase B2各々の含有量の増加，また，【結論】本研究結果は，コレステロール過剰摂取は脂抗凝固・抗血小板作用を示すスルファチド含有量の肪肝炎・酸化ストレスの増強・血栓形成促進性の増加

低下をもたらした。

などの毒性作用を発揮し，それらに関連する凝固亢進

３．野生型マウスでは，これらの変化は有意に抑制さをもたらす可能性を示唆した。 また， 本研究は，れていた。

PPARα 活性化の示す脂質代謝の恒常性維持・ 抗炎

これらの結果により，コレステロールの過剰摂取は，症・抗酸化ストレスといった既知の作用に加えて，凝脂肪肝炎・酸化ストレスの増強・血栓形成促進性の増固因子やスルファチドの発現調節を介してコレステ

加などの毒性作用を発揮する可能性があることが判明

ロール毒性を減弱させることを初めて示唆した。

した。また，PPARα は，脂質代謝の恒常性維持・抗PPARα 活性化は，様々な凝固因子や抗凝固因子の発

炎症・抗酸化ストレスといった既知の作用に加えて，現調節を介して高コレステロール血症が誘発する凝固因子やスルファチドの発現調節を介してコレステ

CVD の発症予防に有効かもしれない。

ロール毒性を減弱させる作用を発揮する可能性が初め（論文審査の結果の要旨）て示唆された。これらの結論は，心血管病に対する新PPARα は，脂肪酸代謝臓器に広く分布する核内受規予防法や様々な薬剤の心血管病抑制機序を考える上容体であり，エネルギーの恒常性維持作用・抗酸化ス
トレス作用・抗炎症作用などの生理機能を発揮する。
また，近年，PPARα はコレステロール代謝の恒常性で有用と思われた。
従って，主査・副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

維持や一部の凝固因子の発現にも関与することが報告されている。
高コレステロール血症は心血管病のリスク因子であるが，心血管病の発症機序としてコレステロールがプラーク形成を促進すること以外に，一部の凝固因子を増加させ凝固活性を高めることも報告されている。しかし，コレステロール毒性の分子的機序や様々な凝固因子に与える影響については不明のままである。
No. 6, 2019453

審査学位論文要旨

Liver Stiffness-Spleen Size-to-Platelet Ratio Risk Score Identifies Esophageal Varices inJapanese Patients with Chronic Hepatitis C（日本人のＣ型慢性肝炎患者において LSPS は食道静脈瘤を判別する）
柴 田

壮一郎

（論文の内容の要旨）

静脈瘤のある患者はない患者と比較して有意に高齢で【背景と目的】門脈圧亢進症は慢性肝疾患の合併症のあり，血小板数が低く，アルブミン値が低く，AST１つである。食道静脈瘤は門脈圧亢進症によって生じ値が高く，PT％が低く，LS が高値であり，CAP がる側副血行路の異常であり，肝疾患の重症度と関連す低 値 で あ り ， 脾 臓 長 径 が 長 か っ た 。 ま た ，APRI ，る。肝硬変と診断された患者には食道静脈瘤の有無を

FIB-4，血小板数 / 脾臓長径，LSPS などの非侵襲的確認するため上部消化管内視鏡検査を推奨するが，上な線維化マーカーはいずれも食道静脈瘤と有意に関連

部消化管内視鏡検査は苦痛を伴う検査であるためこれしていた。多変量解析では LSPS と CAP 値が独立しを希望しない患者もおり，また，希ではあるが偶発症て食道静脈瘤の存在と関連していた。続いて食道静脈の危険性がある。そのため，非侵襲的に食道静脈瘤の瘤の出血のリスクの程度と非侵襲的な線維化マーカー有無を予測する方法の開発が望まれている。これまでの関連を検討した。食道静脈瘤の程度は LS，脾臓長に，食道静脈瘤の原因となる肝硬変の存在予測を非侵径，APRI，FIB-4，LSPS と正の相関をもち，血小板襲的に行うことができる FibroScan が開発されてい数，CAP 値，血小板数 / 脾臓長径と逆相関を示してる。FibroScan は肝の線維化と相関する肝硬度を非侵いた。また，食道静脈瘤の有無の予測能評価のため非襲的に測定可能である。肝硬度自体も食道静脈瘤の予侵襲的な線維化マーカーの ROC 曲線を作成し AUC

測に有用と考えられるが，血小板数，脾臓長径，肝硬を求めたところ，LSPS の AUC は0.928と最も高く，度の３つの検査項目を組み合わせて作られた計算式でLSPS のカットオフ値を0.7と設定した場合， 感度

ある LSPS がさらに有用である可能性がある。今回

86.3 ％，特異度89.6 ％，陽性的中率70.4 ％，陰性的LSPS を用いて，日本人のＣ型慢性肝炎患者において中率95.8 ％であり，LSPS が0.7未満の患者において食道静脈瘤の有無を予測できるか否かを検討した。

食道静脈瘤がないことに対する正確度は88.9 ％と高【対象と方法】信州大学医学部附属病院にて，2012年値であった。

４月から2014年12月の間にＣ型慢性肝炎にて加療を受【結論】LSPS は日本人のＣ型慢性肝炎患者において，けた99人を対象とした。対象は日本人とし，除外基準

非侵襲的に食道静脈瘤の有無及び出血リスクの予測がは食道静脈瘤出血の既往や腹水の既往がある患者とし可能であることが示唆された。

た。Ｃ型慢性肝炎の診断は以下のように行った。①（論文審査の結果の要旨）

HCV 抗体が陽性かつ HCV-RNA が陽性であること，

門脈圧亢進症は慢性肝疾患の合併症の一つであり，② HBs 抗原，HIV 抗体が陰性であること，③ 他の肝食道静脈瘤は門脈圧亢進症によって生じる側副血行路疾患が存在しないこととした。

の異常である。時に静脈瘤が破裂し死亡することもあ以上の患者は血液検査， 腹部超音波検査，Fibro

るため，肝硬変患者では食道静脈瘤の有無を確認してScan を同日に施行した。上部消化管内視鏡検査はそおく必要がある。食道静脈瘤の有無を確認するためにの前後１年以内に施行した。FibroScan の実施についは上部消化管内視鏡検査の施行が必要であるが，苦痛ては，全ての患者はＭプローブを用いて評価した。肝を伴う検査であるため検査を希望しない患者も多い。

硬度は10回の測定値の中央値とし，成功率が60 ％以

そこで，非侵襲的な検査を組み合わせて食道静脈瘤の上かつ，四分位範囲の中央値が30 ％未満の場合のみ，発生を予測し，これを根拠として，食道静脈瘤の発生

信頼できる結果とした。CAP 値は肝硬度を測定する

リスクが高い患者に対して上部消化管内視鏡検査の施際に同時に測定され，肝硬度の測定が有効であった場

行を勧める方法を考案した。

合にのみ有効とした。

今回，非侵襲的な検査で求められる肝硬度，血小板【結果と考察】対象患者99人を食道静脈瘤の有無で分数，脾臓長径を組み合わせた計算式である LSPS が日け，各種データを比較検討した。単変量解析では食道

本人の食道静脈瘤の発生予測に有用であるかを検討し

454

信州医誌

Vol. 67

審査学位論文要旨と他の項目と比較しても最も良好であり，陽性的中た。

率70.4 ％，陰性的中率95.8 ％であり，LSPS が0.7

その結果，以下の結論を得た。
１．単変量解析では APRI，FIB-4，血小板数 / 脾臓未満の患者において食道静脈瘤がないことに対する

長径，LSPS などの非侵襲的な線維化マーカーはい

正確度は88.9 ％と高値であった。

ずれも食道静脈瘤の有無と有意に関連していた。

これらの結果から，日本人のＣ型慢性肝炎患者にお２．食道静脈瘤の程度は LS，脾臓長径，APRI，FIB-

いて，現在臨床で使用されている線維化計算式の中で，4，LSPS と正の相関をもち，血小板数，CAP 値，

LSPS は最も正確に食道静脈瘤の発生を予測する検査

血小板数 / 脾臓長径と逆相関を示していた。

となり得ることが示唆された。

３．多変量解析では LSPS と CAP 値が食道静脈瘤の存したがって主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

在と関連する独立した因子であった。
４．LSPS のカットオフ値を0.7とすると AUC は0.928

Panobinostat inhibits the proliferation of CD34＋CD38-cells under stimulation of hematopoietic growth factors on AGM-S3 cells in juvenile myelomonocytic leukemia（Panobinostat
は若年性骨髄単球性白血病における CD34陽性 CD38陰性細胞の AGM-S3上での造血因子依存性増殖を抑制する）
倉田敬（論文の内容の要旨）

AGM-S3細胞の増殖能力には影響を及ぼさなかった。

【はじめに】血液悪性疾患に対するヒストン脱アセチ

また panobinostat は正常の CD34陽性細胞に対してもル化酵素阻害剤（HDACi）の効果が多数報告されて増殖抑制を示した。5-azacytidine は JMML CD34陽いる。我々は若年性骨髄単球性白血病（JMML）患者

性細胞に対する増殖抑制は示さなかった。

の CD34陽性細胞に対するヒストン脱アセチル化酵素【 考 察 】Panobinostat は JMML CD34 陽 性 細 胞 の 増阻害剤 panobinostat と脱メチル化剤5-azacytidine の殖，特に CD34陽性 CD38陰性細胞の増殖を直接的に影響について検討したため報告する。

抑制したと考えられた。Niemyer らは JMML に対す【方法】 我々は既報にて stem cell factor（SCF）とる5-azacytidine の臨床的な治療効果を報告している

thrombopoietin（TPO）を添加した胎生中期マウス

が（Blood，2015），今回の実験では5-azacytidine はの大動脈―中腎―生殖原器（AGM）領域から樹立さ

JMML CD34陽性細胞に対する増殖抑制効果は示さなれた細胞株 AGM-S3細胞上で JMML の CD34陽性細かったことから，5-azacytidine の JMML に対する効

胞が増殖し，免疫不全マウスに移植可能であることを果は間接的な生体内の免疫反応が関与している可能性示した（Sakashita ら . Leukemia. 2015）。今回我々が 考 え ら れ た 。In vitro で panobinostat は 正 常 のは８名の JMML 患者（NRAS 変異２名，CBL 変異２

CD34陽性細胞に対しても増殖抑制効果を示したこと

名，PTPN11変異２名，7 monosomy２名）の CD34

から，いくつかの臨床研究で示されている panobino­

陽性細胞に panobinostat（10，20，40 nM）あるいは5-stat による汎血球減少と矛盾するものではなかった。

azacytidine（２，３，８μM）を添加し，１週間培養後【結論】Panobinostat は遺伝学的な異常の差異によらに AGM-S3細胞と SCF（10 ng/ml）＋TPO（10 ng/ml）

ず，JMML CD34陽性細胞の増殖抑制効果を示したたにより誘導される JMML CD34＋細胞増殖に対する影

め，正常の CD34陽性細胞にも抑制効果を示したこと

響を検討した。

も踏まえて，JMML 幹細胞に対する移植前治療薬の【結果】Day7の解析で，panobinostat は用量依存性に１つとなりうる可能性が示唆された。

AGM-S3 細 胞 上 で の JMML CD34 陽 性 細 胞 の 増 殖（論文審査の結果の要旨）を抑制し，遺伝子変異，染色体異常の差異の影響を受

若年性骨髄単球性白血病（JMML）患者の CD34陽

けなかった。CD34陽性 CD38陰性細胞は CD34陽性性細胞に対するヒストン脱アセチル化酵素阻害剤 pa­

CD38陽性細胞よりも panobinostat に感受性を示しnobinostat と脱メチル化剤5-azacytidine の影響につた。Panobinostat は JMML CD34陽性細胞に対するいて検討した。

No. 6, 2019455

審査学位論文要旨

５．Day2（培養開始後48時間）の解析で，HL-60細胞

その結果以下の成績を得た。
１．AGM 細胞＋SCF/TPO 依存性の JMML CD34＋細では panobinostat，5-azacytidine 添加により apop­

胞は，panobinostat 添加により，10 nM で42 ％に，

tosis が誘導されていたが，JMML CD34＋細胞で20 nM で14 ％に，40 nM で１％に減少した。PTPN-

は apoptosis を誘導された細胞は12 ％に留まった。

11変異，NRAS 変異，CBL 変異，7monosomy のいpanobinostat 添加により HL-60細胞ではＳ期の細ずれの検体でも CD34＋細胞の増殖は抑制された。

胞は無添加群に対して24.3 ％の減少が見られたが，また panobinostat は AGM 細胞の CD34＋細胞増殖

JMML CD34＋細胞では3.5 ％の減少に留まった。

支持能には影響を及ぼさなかった。JMML CD34＋

６．薬剤添加後 Day7の JMML CD34＋細胞では CD14，
CD15の発現は見られなかった。

細胞に対する IC50は9.2 nM±3.0 nM だった。
２．Panobinostat 添加群では，JMML CD34＋CD38-

７．臍帯血 CD34＋細胞，骨髄 CD34＋細胞の増殖も細胞の減少が CD34＋CD38＋細胞の減少よりも顕panobinostat 添加により抑制された。

著であった。

以上より，panobinostat は遺伝学的な異常の差異に

３．5-azacytidine 添加では JMML CD34＋細胞数の明よらず，JMML CD34陽性細胞の増殖抑制効果を有することを示した。正常の CD34陽性細胞にも抑制効果

らかな減少は認められなかった。
４．培養４週間後の8 trisomy，7 monosomy の比率はを示したことも踏まえて，JMML 幹細胞に対する移無添加群，panobinostat 添加群，5-azacytidine 添

植前治療薬の１つとなりうる可能性が示唆された。し加群の間で差はなく，in vitro の長期培養では染色たがって，主査，副査は一致して本論文を学位論文と体異常は消失しなかった。

して価値があるものと認めた。

WFS1 mutation screening in a large series of Japanese hearing loss patients : Massively
parallel DNA sequencing-based analysis（日本人難聴患者における WFS1遺伝子変異のスクリーニング）
小林

正

史（論文の内容の要旨）を行った。これにより，13の WFS1遺伝子変異を19

難聴はおよそ出生1,000人に一人の割合で認められ家系30例に認めた。13変異中８変異は過去に報告される頻度の高い障害であり，その約３分の２では原因がており，５変異は新規変異であり，また19家系中15家

遺伝子の関与する遺伝子難聴である。遺伝性難聴の原

系は優性遺伝形式，４家系は孤発家系であった。この因遺伝子は約100種類報告されており，その約30種類

結果日本人常染色体優性遺伝性難聴患者における頻度が優性遺伝形式をとる。優性遺伝形式を呈する難聴はは2.5 ％（15/602）であることを明らかにした。

罹患頻度が低く，また家族歴のない場合でも発症する

またその WFS1遺伝子変異をみとめた19家系30例可能性があり，従来の手法では解析困難であった。近の臨床的特徴の検討を行った。難聴の進行，耳鳴，若年次世代シーケンサーの登場により，多数の難聴原因

年発症を呈する症例を多く認め，難聴の程度は様々で遺伝子を高速かつ網羅的に解析することができるようあったが，中等度が多かった。聴力の左右差は認めなになった。これにより今まで見出すことが困難であっかった。また多くの家系では過去の報告と同様に低音た原因遺伝子変異を検出することが可能になった。

障害型感音難聴であったが，いくつかの家系では高温

WFS1遺伝子は，Wolfram 症候群や非症候群性難聴

漸傾型の難聴を示す家系も認めた。低音障害型感音難（DFNA6/14/38）の原因遺伝子である。４番染色体聴を呈する日本人難聴患者の中では約36 ％の頻度

短腕に存在し，８個のエクソンから構成されており，だった。過去の報告では稀ではあるが，めまい症状もWolframin タンパクをコードしている。非症候群性難複 数 の 家 系 で 認 め た 。 さ ら に p.A716T ，p.K836T ，聴（DFNA6/14/38）は，常染色体優性遺伝子形式を

p.E864K の３変異においてはハプロタイプ解析を行い，呈する。これまでに40種類以上の変異が報告されていどの変異もホットスポット変異であることが示唆される。本研究では日本人難聴患者2549例を対象に，次世た。 本研究では WFS1変異を有する患者において，

代シーケンサーを用いた，網羅的な遺伝子変異の解析

今までにない表現型も示唆した。

456

信州医誌

Vol. 67

審査学位論文要旨（論文審査の結果の要旨）した。またほとんどの変異のドメインは C-terminalに認めた。

WFS1遺伝子は，常染色体優性遺伝形式をとる非症
候群性の原因遺伝子（DFNA4/16/38）であるが，常３．多くは若年発症で，特に就学前検診で見つかることが多かった。

染色体劣性遺伝形式をとる Wolfram 症候群，常染色体優性遺伝形式をとる Wolfram-like 症候群の原因遺４．ほとんどの症例で難聴の進行を認めた。耳鳴は約

伝子でもある。WFS1遺伝子がコードする Wolframin

半数の症例に認め，めまいは複数家系に認めた。

タンパクは小胞体に発現しているが，まだその機能に５．中等度の低音障害型感音難聴を多く認めたが，皿ついて明らかにされていない。過去の報告では，常染型難聴・高音漸傾型感音難聴など非典型的な難聴も

色体優性遺伝形式をとる非症候群性難聴は，低音障害認めた。

型感音難聴を呈する事が多く，Wolfram-like 症候群，

６．Wolfram-like 症候群を呈すると報告されている

Wolfram 症候群は高度～重度難聴を呈することが多WFS1遺伝子変異では，７例中２例に視神経萎縮をいとされている。

認めた。難聴の程度は常染色体優性遺伝形式をとる
非症候群性難聴と比較して重かった。

今回日本人難聴患者2549例を対象に，次世代シーケ
ンサーを用いた網羅的な遺伝子変異の解析を行い，日７．複数家系で認めた変異（p.A716T，p.K836T，p.E

本人難聴における WFS1遺伝子変異の頻度やその臨

864K）においてハプロタイプ解析を行い，どの変床像について詳細に検討した。

異も Mutation hot spot であることを明らかにした。

その結果は以下の通りであった。

以上より，常染色体優性遺伝形式をとる日本人難聴

１．13の WFS1遺伝子変異を19家系30例に認めた。

患者における WFS1変異症例の頻度は比較的高く，

13変異中８変異は既知変異であり，５変異は新規変臨床上重要な遺伝子と思われた。また，今回明らかに異であった。また19家系中15家系は優性遺伝形式でなった詳細な臨床像は WFS1遺伝子変異症例の診断，あり，４家系は孤発家系であった。この結果日本人

介入を選択する上で重要な情報として活用可能である。

難聴患者における頻度は2.5 ％（15/602）だった。

以上，主査，副査は一致して本論文を学位論文とし２．全ての変異はミスセンス変異であり，exon8に存在て価値があるものと認めた。

Knockdown of TRPV2 channels in sensory neurons increases limb use and weight bearing
but dose not affect spontaneous flinching behavior in a mouse model of bone cancer（一次知覚神経の Transient Receptor Potential Vanilloid Subfamily２チャネルのノックダウンは，マウス骨がんモデルにおける自発痛には影響せず，体動時痛のみを改善する）
山

本

克

己

（論文の内容の要旨）【方法】雄性 C3H/HeJ マウス（20-25ｇ）を使用した。

【背景と目的】骨がん痛には安静時の自発痛と，体動⑴ 骨髄へ投射する腰部後根神経節ニューロン（DRG）

時に生じる痛み（体動時痛）があり，その機序は十分を明らかにするために，逆行性神経トレーサーであには解明されていない。がん性痛の中でも原発性や転る Fluoro-Gold（FG）を左大腿骨骨髄内へ注入した。

移性の骨がん痛は，オピオイド抵抗性で難治性である。

48時間後に DRG を摘出し，TRPV1と TRPV2の抗新たな骨がん痛の治療法を開発するためには，骨がん体を用いて免疫染色し， 骨髄に投射する TRPV1と痛の機序解明が求められる。我々はこれまで Tran­

TRPV2陽性 DRG の数と直径を計測した。⑵ 大腿骨

sient receptor potential vanilloid 1（TRPV1）が骨がへ肉腫細胞を移植後，痛み行動を確認し，small in­

んの自発痛に関与するが，体動痛には関与しないこと

terference RNA（siRNA）を３日間マウス腰髄髄腔内を報告した（Fuseya et al., Anesthesiology 2016）。一に投与し，DRG の TRPV2遺伝子をノックダウンした。

方，TRPV2は，炎症性痛に関与するとされるが，骨コントロール群に対しては scrambled control siRNA

がん痛については骨組織への存在も含めて，その関与を投与した。自発痛の評価のために患肢を振り回すは不明であった。そこで本研究の目的は，骨がん痛に（flinch）回数を測定した。体動時痛を評価するためおける TRPV2の役割を明らかにすることである。

に患肢の使い方（limb use）と体重のかけ方（weightNo. 6, 2019457

審査学位論文要旨

bearing）を評価した。ウエスタンブロット法により，

TRPV2チャネルが存在するのか検討した。次いで，骨がん進展時の TRPV2に対する siRNA の効果を確

骨がん痛，特に体動時痛の発生に TRPV2チャネルが認した。

関与しているか否かを，ノックダウン法を用いて検討【結果】⑴ 左大腿骨骨髄へ投射する TRPV2と TRPV1

した。

陽性 DRG ニューロンの割合はそれぞれ22 ％と21 ％雄性 C3H/HeJ マウス（20-25ｇ）の左大腿骨骨髄であった。TRPV1陽性細胞は主として小型ニューロに逆行性神経トレーサーFlouro-Gold を注入し，対応

ン（＜30 μm）であり，TRPV2陽性細胞は中型ニューする L2，L3の後根神経節（DRG）を摘出し，骨髄にロン（30-40 μm）で多かった。⑵ コントロール群で分布する感覚神経に TRPV2チャネルが存在しているは，肉腫細胞移植13日後には flinch 回数が増加し，limbのかを調べた。また，骨がん痛モデルマウスを作製後，use と weight bearing のスコアが悪化した。siRNA のTRPV2に対する siRNA を腰部脊髄くも膜下腔へ投与

投与により limb use と weight bearing のスコアが改して骨がん痛関連行動への効果，および後根神経節細善したが，flinch 回数は減少しなかった。⑶ 骨がんの胞の TRPV2発現の効果を調べた。また正常動物にお痛みが生じた13日後の DRG における TRPV2の遺伝

ける TRPV2のノックダウンの効果を，機械・熱刺激

子の発現量に変化はなかったが，siRNA の三日間投に対する閾値，逃避潜時を指標として調べた。

与によりその発現量は有意に低下した。TRPV2に対その結果，山本克己は次の結論を得た。

する siRNA の投与自体は，正常マウスの熱・機械刺１．正常動物の大腿骨骨髄に分布する L2，L3 DRG

激に対する痛みの潜時・閾値に影響を与えなかった。

の約22 ％は TRPV2陽性で，これらは主として me­【考察】本研究から，骨髄内に投射する TRPV2陽性

dium 細胞であった。

DRG が TRPV1陽性 DRG とほぼ同数存在し，TRPV1とは異なり，TRPV2陽性細胞の多くは中型ニューロ

２．骨がん進展時にも TRPV2チャネル発現量は増加しなかった。

ンであることが示された。TRPV2は正常マウスの通３．マウス DRG の TRPV2チャネルをノックダウン

常の熱・機械的な痛みや，骨がん進展時の自発痛にはすると，骨がん痛モデル動物における体動時痛が軽関与しなかった。しかし，骨がんの増殖時には，骨髄減したが，自発痛は軽減しなかった。

内に投射する TRPV2陽性 DRG が感作され，体動時

４．正常動物の機械刺激と熱刺激に対する閾値と逃避痛が生じる可能性が示唆された。すなわち，骨がんに潜時は，TRPV2チャネルのノックダウンで影響をおいては，自発痛と体動時痛に関与する分子とそのメ受けなかった。

カニズムが異なり， 前者には TRPV1が， 後者にはこれらの結果より，骨がん痛モデルマウスにおいて

TRPV2が関与している可能性が示唆された。

後根神経節細胞の TRPV2発現を選択的にノックダウ【結論】骨がん進展時の体動時痛には TRPV2チャネ

ンすることによって，体動時痛を減弱させることが明ルが関与する。

らかとなった。本研究から，マウス骨がんモデルにお（論文審査の結果の要旨）
骨がんによる痛み（骨がん痛）は難治性の疼痛で，オピオイドは効果が弱く，新たな鎮痛薬・方法の開発が求められている。われわれは先行研究で，骨がん痛

いて，骨がん進展時の体動時痛には TRPV2チャネルが関与することが示唆された。
主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

における自発痛の発生には Transient Receptor Po­
tential Vanilloid Subfamily 1（TRPV1）が関与する
が，体動時痛には関与していないことを示した。一方，
Transient Receptor Potential Vanilloid Subfamily 2（TRPV2）は，痛みを伝える Aδ 線維に発現し，様々な臓器で機械応答の分子とされるため，体動時痛に関与している可能性がある。しかし，そもそも骨髄に分布する神経に TRPV2チャネルが存在するか否か，骨がん痛，特に体動時痛へ関与しているのか不明であった。そこで本研究では，まず骨髄に分布する神経に
458

信州医誌

Vol. 67

審査学位論文要旨

The contribution of genetic variants of the peroxisome proliferator-activated receptoralpha gene to high-altitude hypoxia adaptation in Sherpa highlanders（シェルパ高地民族の
高所低酸素適応におけるペルオキシソーム増殖剤活性化受容体 α 遺伝子変異の関与）
木野田

文 也

（論文の内容の要旨）

rs1800234（exon）のブロックは４種類のハプロタイ【目的】シェルパ民族はネパールの高地に在住し，そプを形成し，そのうち３つのマイナーアレルの組み合の高い高所低酸素耐性によってエベレスト登山で重要

わせ（C-C-C） と， メジャーアレルの組み合わせな役割を果たしている。彼らは遺伝的背景によって高（T-T-T）の２つのハプロタイプにおいて両群間で有地適応を得ていることが知られている。ペルオキシ

意差を認めた。

ソーム増殖剤活性化受容体 α 遺伝子（PPARA）は，【考察】本研究で解析を行った rs1800234は PPARα 受

複数の代謝経路に関する核ホルモン受容体スーパー

容体のコドン227においてバリンをアラニンに置換しファミリーとその発現制御を行う転写因子をコードすており，これは DNA 結合ドメインのヒンジ部分に位る。これまでの研究から，チベット高原に住むチベッ

置し，PPARα 受容体の代謝レベルの変動に関与する

ト民族の高地適応において PPARA の関与が示されてと考えられている。これまでの研究から，チベットのいる。本研究ではシェルパ民族の高地適応への PPARA

高地民族においては，PPARA の遺伝子変異により遊の関与を調べるため，その単塩基多型（SNPs）を解離脂肪酸のレベルの最適化が行われ高地適応に寄与す

析し検討を加えた。

ると報告されている。本研究では，シェルパ群と非【方法】研究対象は，高地適応群としてシェルパ族111

シェルパ群で PPARA 単塩基多型の比較検討を行い，名，対照群として非シェルパ族105名である。シェルエクソン領域にある rs1800234を含む５つの SNPs でパ族はネパールのナムチェバザール（標高3,440ｍ）

有意差を認めた。また rs1800234を含む２つのハプロに在住するシェルパ民族であり，非シェルパ族はネタイプで有意差を認めており，シェルパ高地民族におパールのカトマンズ（標高1,300ｍ） に居住するネ

いて，PPARA の単塩基多型が遊離脂肪酸の代謝を介パール人である。それぞれよりインフォームドコンセ

して高地環境への適応に寄与することが示唆された。

ントを得て静脈採血を行い，フェノール法で DNA を（論文審査の結果の要旨）抽出した。対象の SNPs は以下の基準で選択した。⑴

ゲノムワイド解析からチベット民族で，ペルオキシ

PPARA 内に位置する。⑵ SNP 間は10 kbp 以上離れソーム増殖剤活性化受容体 α 遺伝子（PPARA）の変ている。⑶ Fixation index（Fst）が南アジアと東アジ

異が，低酸素下での代謝の効率化を行うことで，高所アで0.05未満である。⑷ Expression of quantitative

適応に関与していることが示されている。同じチベッtrait loci（eQTL） である。 ⑸ 入手可能な TaqMan

ト高原を起源とする，シェルパ民族でも同様の関与がassay である。以上の条件から７つの SNPs（rs135547，

考えられる。シェルパ群と非シェルパ群の静脈血から

rs5769178，rs881740，rs4253712，rs5766741，rs5767700，

フェノール法で DNA を抽出し，選択した７つの単塩

rs1800234（in exon））を選択し，TaqMan SNP Ge­

基 多 型（ SNPs ；（ rs135547 ，rs5769178 ，rs881740 ，

notyping Assay を用いて分析し，遺伝的距離，遺伝rs4253712 ，rs5766741 ，rs5767700 ，rs1800234 ） で ，

子型分布，対立遺伝子頻度，連鎖不均衡，ハプロタイ

リアルタイム PCR 法（Applied Biosystems, Inc.）にプの組み合わせを解析した。

よる TaqMan SNP Genotyping Assay を行った。分

【 結 果 】 ７ つ の の う ち ５ つ（ rs135547 ，rs4253712 ，析結果から，遺伝的距離，遺伝子型分布，対立遺伝子

rs5766741，rs5767700， および rs1800234） の SNPs

頻度，連鎖不均衡，ハプロタイプの組み合わせの解析

で遺伝子型分布，遺伝子頻度が両群間で大きく異なっを行った。

ていた。連鎖不均衡解析では２つのハプロタイプブ
ロックがみられた。それぞれのハプロタイプブロック

その結果，木野田は次以下の結論果を得た。
１．シェルパ民族と非シェルパ民族で検討した７つのの SNPs は遺伝子座が近く，関連して遺伝していると

SNPs のうち５つ（rs135547，rs4253712，rs5766741，

考 え ら れ た 。rs5766741（ eQTL 転 座 ），rs5767700 ，

rs5767700，および rs1800234）で，遺伝子型分布，No. 6, 2019459

審査学位論文要旨

対立遺伝子頻度，遺伝子型分布に有意差を認めた。
そのうち，rs135547以外の４つでシェルパ民族のマに置換する非同義置換であった。
５．Block1のハプロタイプの組み合わせでは有意差を認めなかったが，Block2ではマイナーアレルの組み

イナーアレルの頻度が高かった。
２．両群間の７つの SNPs の Fixation index（FST）

合わせである C-C-C と，メジャーアレルの組み合は0.0103～0.0883で，遺伝的分化は小さいことが示わせである T-T-T で有意差を認めた。

された。

以上より， シェルパ民族において PPARA 内の３．連鎖不均衡の解析では，両群ともに２つの Block

SNPs で eQTL や非同義置換を含む対立遺伝子頻度，（Block1 : rs5769178，rs881740 ; Block2 : rs5766741，

ハプロタイプに有意差を認めたことで，PPARA の単

rs5767700，rs1800234）を形成していた。

一塩基多型は高所適応に関与していることが示された。

４．Block2のすべての SNPs で対立遺伝子頻度の有意差を認め，rs5766741は Expression of quantitative

よって，主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

trait loci（eQTL），rs1800234はバリンをアラニン

Colitis-associated colorectal adenocarcinomas are frequently associated with non-intestinal
mucin profiles and loss of SATB2 expression（炎症性腸疾患関連の大腸癌は非腸型粘液形質を有し，SATB 発現を失う）
岩谷

舞（論文の内容の要旨）

理組織学的特徴に加え，CAC と sporadic CRC にお【緒言】炎症性腸疾患（Inflammatory Bowel Disease :ける SATB2，CDX2（十二指腸から直腸までの粘膜上IBD）は潰瘍性大腸炎とクローン病に大別され，長期皮の核に発現するホメオボックス遺伝子），MUC5ACにわたり再燃を繰り返す大腸粘膜の活動性炎症を原因（胃型形質ムチン），MUC6（胃型形質ムチン），および，とする大腸癌（腸炎関連大腸癌 Colitis associated col­ミスマッチ修復蛋白（MLH1，MSH2，MSH6，PMS2）

orectal carcinoma : CAC）の発生リスクが高まることについて免疫組織学的に検討した。

が知られている。診断から10年の罹病期間で２％，30【結果】CAC 症例において，切除時平均年齢は50歳で，年で18 ％の患者が CAC を発症するという報告もある。

sporadic CRC 69歳よりも優位に若かったが，発生部

CAC の発生メカニズムは，散発性大腸癌（i.e., 非腸炎位，pT および pN に有意差はなかった。CAC の組織

関連癌，非症候性発癌，sporadic colorectal carcinoma :型は，sporadic CRC（94 ％が conventional type）に比

sporadic CRC）の発生メカニズムとは異なり，持続し，conventional type（59 ％）が少なく，mucinous

性の炎症および繰り返される粘膜障害と密接に関連しtype（20 ％） が多かった。 また，low grade tubul­ていると考えられている。

oglan­dular（10 ％）は CAC のみに認められた。クロー

Special AT-rich sequence-binding protein 2（SAT
B2）は核マトリックスの一部を形成する転写因子でン病 CAC の組織系は，潰瘍性大腸炎に比して mucinous
type の頻度が優位に高かった。

あり，骨芽分化に関与する遺伝子として認識されたが，免疫染色では，CAC26例（43 ％）に SATB2の発大腸粘膜上皮にも発現していることが明らかとなった。

現を認め，コントロール群29例（91 ％）に比べ有意

SATB2は大腸上皮細胞の細胞系列マーカーとしてに低かった（p＜0.0001）。Sporadic CRC に組織像が類

sporadic CRC において高頻度に発現しており，大腸似した conventional type CAC における SATB2発現癌における SATB2発現の欠失は予後不良因子と報告

も Sporadic CRC に比し有意に低かった。また，CAC

さ れ て い る 。 一 方 ，CAC に お け る SATB2 発 現 パの MUC5AC 発現は sporadic CRC に比し有意に高く

ターンについては未だ検討がなされていない。

認められた（25 ％ and 52 ％；p＝0.013）。CAC８例【対象と方法】Mount Sinai Hospital（University of（13 ％）で CDX2陰性であったが，sporadic CRC で

Toronto）で切除された CAC60例（潰瘍性大腸炎症は全例陽性を示した（p＝0.047）。

例40例，クローン病20例）を検討し，sporadic CRC

CAC の SATB2陰性例と SATB2陽性例において，32例をコントロール群として用いた。CAC の臨床病

組織型および MUC5AC，MUC6，ミスマッチ修復蛋

460

信州医誌

Vol. 67

審査学位論文要旨

白発現に有意差はなかった。 また，SATB2陰性例

CAC の臨床病理組織学的特徴に加え，CAC と spora­

50 ％にリンパ節転移が認められ，SATB2陽性15 ％に

dic CRC における SATB2，CDX2（十二指腸から直腸比し有意に転移頻度が高かった（p＝0.007）。

までの粘膜上皮の核に発現するホメオボックス遺伝

CAC において， 粘液癌の83 ％が SATB2陰性で，子），MUC5AC（胃型形質ムチン），MUC6（胃型形質SATB2の発現消失傾向が認められた。

ムチン），および，ミスマッチ修復蛋白（MLH1，MSH2，【考察】 本研究により CAC の臨床病理学的特徴がMSH6，PMS2）について免疫組織学的に検討した。

明らかになり，CAC と sporadic CRC では免疫組織

その結果，岩谷舞は以下の結論を得た。

化学的な違いが認められた。 特に，CAC における

１．CAC の組織型は，sporadic CRC（94 ％が con­

SATB2発現頻度は sporadic CRC に比し有意に低かっ

ventional type）に比し，conventional type（59 ％）た。sporadic CRC では SATB2の発現消失はミスマッ

が少なく，mucinous type（20 ％）が多かった。まチ修復蛋白の発現消失と関連性があるとされているが，た，low grade tubuloglandular（10 ％）は CAC のCAC では両者の発現に関連は見出せなかった。これ

みに認められた。

らの結果は，CAC と sporadic CRC の発癌メカニズ

２．CAC26例（43 ％）に SATB2の発現を認め，コムの違いを反映していると推測された。診断病理学的

ントロール群29例（91 ％） に比べ有意に低かっには，原発不明転移巣を有する IBD 患者において，た（p＜0.0001）。Sporadic CRC に組織像が類似し

SATB2陰性を根拠に大腸癌転移を除外することは難た conventional type CAC における SATB2発現もしい。SATB2陰性 CAC は有意にリンパ節転移が多Sporadic CRC に比し有意に低かった。また，CAC

く，SATB2陰性 sporadic CRC と同様に予後不良であの MUC5AC 発現は sporadic CRC に比し有意に高ることが示唆された。また，sporadic CRC に頻度のく認められた（25 ％ and 52 ％；p＝0.013）。

高い組織型を示した conventional type CAC において

３．CAC の SATB2陰性例と SATB2陽性例において，も SATB2の発現が優位に低く，conventional type

組織型および MUC5AC，MUC6，ミスマッチ修復

CAC が必ずしも sporadic CRC と同様の生物学的特蛋白発現に有意差はなかった。

徴を有さないことを示唆した。 近年 SATB2陰性の４．CAC のうち，SATB2陰性例50 ％にリンパ節転

sporadic CRC ではミスマッチ修復蛋白の免疫組織学

移が認められ，SATB2陽性15 ％に比し有意に転移的発現が消失する傾向にあると報告されたが（Ma et

頻度が高かった（p＝0.007）。

al, 2018），CAC において SATB2発現の欠失とミス本研究により CAC の臨床病理学的特徴が明らかにマッチ修復蛋白の欠失に相関は認められなかった。

なり，CAC と sporadic CRC では免疫組織化学的な（論文審査の結果の要旨）違いが認められた。特に，CAC における SATB2発

炎症性腸疾患（Inflammatory Bowel Disease : IBD）

現頻度は sporadic CRC に比し有意に低かった。CACにより腸炎関連大腸癌（Colitis associated colorectal car­において SATB2の発現消失とミスマッチ修復蛋白のcinoma : CAC）の発生リスクが高まることが知られ発現消失とに関連は見出されなかった。SATB2陰性ており，その発生メカニズムは散発性大腸癌（sporadic

CAC は 有 意 に リ ン パ 節 転 移 が 多 く ，SATB2 陰 性

colorectal carcinoma : sporadic CRC）とは異なり，IBD

sporadic CRC と同様に予後不良であることが示唆さに伴う持続性の炎症もしくは繰り返される粘膜障害とれた。これらの結果から，CAC と sporadic CRC の密接に関連していると考えられている。

発癌メカニズムの違いを反映していると推測され，Special AT-rich sequence-binding protein 2（SAT
B2）は大腸上皮細胞の細胞系列マーカーとして用い
られ，sporadic CRC において高頻度に発現している。
また，大腸癌における SATB2発現の欠失は予後不良

CAC において SATB2免疫染色の有用性が初めて証明された。
よって主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

因子として報告されている。 一方，CAC における
SATB2発現に関しては未だ検討がなされていない。
本 研 究 で は Mount Sinai Hospital（ University ofToronto）で切除された CAC 症例60例を対象とした。
32例の sporadic CRC をコントロール群として用いて，
No. 6, 2019461

審査学位論文要旨

Use of percutaneous image-guided coaxial core-needle biopsy for diagnosis of intraabdominal
lymphoma（腹腔内リンパ腫の診断におけるコアニードルを用いた経皮的針生検の有用性につ
いて）
清

水

郁

夫

（論文の内容の要旨）断を得られたのは， 針生検群86 ％， 外科的生検群【背景と目的】悪性リンパ腫の診断および治療におい100 ％（p＝0.846）で有意差を認めなかった，Flowて，病理学的診断は必須である。腹腔内を原発とする

cytometry 解析等が実施できたのは針生検群81.4 ％，リンパ腫に病理学的診断を下すのは，外科的手術を要

外科的生検群100 ％（p＝0.237），染色体分析が実施することから，侵襲性が問題となりしばしば困難であできたのは針生検群58.8 ％，外科的生検群80 ％（p＝る。しかし，コアニードルを用いた画像ガイド下経皮0.406）でいずれも有意差を認めなかった。一方，受的針生検であれば，腹腔内病変であっても十分量の当診から生検に要した日数の中央値は，針生検群１日

該病変を採取することが可能であるため，病理組織診（0-7），外科的生検群16日（0-48）日と針生検群で有断だけでなく免疫組織学的評価をも行えることから，意に短縮され（p＜0.001），生検から治療開始に要し診断上有用な手技である可能性がある。そこで本研究た日数の中央値も，針生検群14日（1-35），外科的生では，コアニードルを用いた経皮的針生検は，腹腔内検群35日（3-58）日（p＜0.001）と針生検群で有意にのリンパ節病変を診断する上で，外科的生検と比較し短縮された。針生検で用いた画像モダリティの比較でて病理学的診断率は劣っていないか，免疫化学的・染は，CT と超音波で有意差を認めなかった。

色体評価の面では劣っていないか，迅速な診療に寄与【考察】本研究では後方視的に経皮的コアニードル針しているかを検証した。

生検と外科的生検を比較し，診断精度に有意差を認め【対象と方法】対象は1999年４月から2011年３月にかなかった。さらに，治療開始までの期間を有意に短縮

けて，肝臓，脾臓，腎臓，鼠径部を除く腹腔内リンパした。他の低侵襲手技には，より細い針を用いる経皮節病変を呈して長野赤十字病院を受診し，最終的に悪的穿刺吸引細胞診や，内視鏡を用いた内視鏡的超音波性リンパ腫と診断された症例である。病変の解剖学的ガイド下穿刺吸引細胞診があるが，どちらも組織を採位置関係等から CT もしくは超音波ガイド下でコア取できないため，WHO 分類が推奨する病理組織学的ニードルによる針生検を実施可能であった場合は針生診断は行えない。

検を実施し，実施困難であった場合は外科的生検を実【結論】本研究は，腹腔内リンパ節病変に対する経皮施した。針生検は15ゲージまたは18ゲージの Quick-

的コアニードル針生検が有用である可能性を示した。

Core Biopsy Needle を用い，当該手技に関する専門（論文審査の結果の要旨）

医資格を有した医師が施行した。治療目的で外科手術

リンパ腫の診断には病理学的検討が必要である。腹を施行し，偶発的にリンパ腫と診断された症例は対象腔内を原発とするリンパ腫の検体を採取するためには，から除外した。両生検で得た検体によって，病理組織

標準的には外科的手術が選択されるが，侵襲性が問題

学的診断，Flow cytometry 解析，g-band 法での染となるため，さまざまな代替的手技が開発・検討され色体分析が実施しえた割合を比較した。さらに，受診てきた。その中の一つとしてコアニードルを用いた画から生検に要した日数，生検から治療開始に要した日

像ガイド下経皮的針生検は，すでに臓器生検手技とし数を比較した。

て一定の評価が確立しており，十分量の病変を採取で【結果】針生検が実施可能であったのは全59症例で，きるだけでなく，免疫組織学的評価をも行えることか

合計66回の針生検が実施された（男性32例，女性27例。

ら，リンパ節組織の採取においても有用な手技である

平均年齢63.5歳）。検体不良ないし再発のため，４例可能性がある。

は２回，１例は３回の生検を施行された。外科的生検

そこで本研究では，コアニードルを用いた経皮的針を施行されたのは20症例（20回）であった。75歳以上

生検は，腹腔内のリンパ節病変を診断する上で，外科の症例はすべて針生検群に割り当てられていた。両群的生検と比較して病理学的診断率は劣っていないか，

ともに重篤な合併症は認めなかった。病理組織学的診

免疫化学的・染色体評価の面では劣っていないか，迅

462

信州医誌

Vol. 67

審査学位論文要旨

群81.4 ％，外科的生検群100 ％，染色体分析が実施

速な診療に寄与しているかを検証した。
清水郁夫は，1999年～2011年にかけて，肝臓，脾臓，腎臓，鼠径部を除く腹腔内リンパ節病変を呈して長野できたのは針生検群58.8 ％，外科的生検群80 ％で，いずれも有意差を認めなかった。

県内の某中核総合病院を受診し，同院にて画像ガイド

３．受診から生検に要した日数の中央値は，針生検群

下コアニードル針生検または外科的生検が実施された

１日（0-7），外科的生検群16日（0-48）日と針生検症例を後方視的に検討した。治療目的で外科手術を施群で有意に短縮された。

行し，偶発的にリンパ腫と診断された症例は対象から

４．生検から治療開始に要した日数の中央値も，針生除外した。両生検で得た検体によって，病理組織学的検群14日（1-35），外科的生検群35日（3-58）日と診断，flow cytometry 解析，g-band 法での染色体分針生検群で有意に短縮された。

析が実施しえた割合を比較した。さらに，受診から生これらの結果より，針生検は外科的生検と比べて診検に要した日数，生検から治療開始に要した日数を比

断精度の面で劣ることなく，かつ受診から生検までの較した。

日数，および治療開始までの日数を有意に短縮する可

針生検群59例，外科的生検群20例の解析を行い，清能性が示された。本研究成果は腹腔内リンパ節病変の水は次の結果を得た。

病理学的探索を行う際に，生検手技を選択する根拠の１．病理組織学的診断を得られたのは，針生検群86

一つとなりうるものと考えられた。
したがって，主査，副査は一致して本論文を学位論％，外科的生検群100 ％で有意差を認めなかった。
２．Flow cytometry 解析等が実施できたのは針生検文として価値があるものと認めた。

Transcranial motor-evoked potentials of laryngeal muscles for intraoperative neuromonitoringof the vagus nerve during thyroid surgery（甲状腺手術中の迷走神経機能モニタリングとしての喉頭筋経頭蓋運動誘発電位）
市野

隆（論文の内容の要旨）

コークスクリュー電極を留置した。刺激強度は100-【背景と目的】経頭蓋刺激による運動誘発電位（MEP）

400Ｖ，連発刺激数は１-５回であった。迷走神経 MEP

は，外科的侵襲により運動機能障害が生じる危険のあは，EMG チューブの電極（ワイヤ型とフラットワイド

る脳・脊髄外科手術で確立された術中神経モニタリン型）から記録した。迷走神経 MEP の振幅は経頭蓋電グの方法である。甲状腺手術では反回神経同定・保護

気刺激後10ミリ秒付近から開始する波形でピーク間距のため，声帯と接する記録電極を備えた気管チューブ離とした。迷走神経 MEP の振幅を刺激強度，トレイ（EMG チューブ）を使用し，反回神経の機能評価を

ン数を変化させて測定した。また手術中の迷走神経

神経の直接刺激によって行っている。近年，頭蓋底手MEP 振幅の変化を測定した。

術時に迷走神経などの脳神経の神経機能評価目的で，【結果】54名の患者で行った。術前から片側の反回神

EMG チューブを用いた経頭蓋刺激による MEP 測定

経麻痺のある患者は５名であった。迷走神経 MEP 測が行われ，手術中の神経機能モニタリングとして臨床定の成功率はフラットワイド型電極で91 ％でありワ的に活用されている。しかし，EMG チューブを記録

イヤ型よりも有意に高かった。迷走神経 MEP は３連電極とする経頭蓋刺激による MEP は体系的な研究が発刺激以上かつ約300Ｖの刺激強度で信頼性の高い波なされていない。本研究の目的は，EMG チューブを形が得られ，刺激強度および連発刺激数の増加と共に用いた迷走神経の MEP の基礎的特徴を解明すること，増大した。甲状腺手術中の迷走神経 MEP 振幅は甲状および，甲状腺手術中の迷走神経・反回神経支配領域

腺摘出後に67 ％まで低下し，手術終了時には回復傾の喉頭筋の MEP を測定することにより，手術操作に向を示した。術前から反回神経麻痺のある患者においよる反回神経機能と MEP の関連を明らかにすることて，麻痺側と健常側の迷走神経 MEP を測定でき，迷である。

走神経 MEP は麻痺側においても刺激強度およびトレ【方法】全身麻酔下で甲状腺手術を予定した患者で MEP

インパルス連発刺激数の増加と共に増大したが，健常測定を行った。刺激電極は C3および C4または Cz に側に比べ有意に低値であった。本研究では，手術中にNo. 6, 2019463

審査学位論文要旨

意図して反回神経を切断したのは１名であった。迷走の EMG チューブでの迷走神経 MEP 測定の成功率

神経 MEP は反回神経切断後に切断側だけが著しく低２．刺激部位（C3/Cz あるいは C3/C4）の違いによる迷走神経 MEP の振幅測定下した。
【結語】経頭蓋刺激による迷走神経 MEP は，刺激強

３．刺激強度やトレイン数の変化と迷走神経 MEP の
振幅測定

度と連発刺激に依存して変化した。３パルス以上かつ約300Ｖの刺激強度で，迷走神経 MEP を高い成功率

４．甲状腺手術時の迷走神経 MEP の振幅の経時的変化で記録できた。また，迷走神経 MEP は手術の状態によって変化した。術中操作による反回神経の牽引・圧５．反回神経麻痺患者の迷走神経 MEP の特性
その結果，市野は次の結論を得た。

迫などが迷走神経 MEP 低下の要因であったのかもしれない。１例のみであったが反回神経切断後に同側の１．フラットワイド電極タイプの EMG チューブの方が測定成功率は高かった。

迷走神経 MEP が著明に低下した。これらの結果は，迷走神経 MEP は迷走神経・反回神経の機能を反映す

２．C3/C4で刺激を行った方が C3/Cz よりも高い振幅の波形が得られた。

る可能性を示唆する。経頭蓋刺激により誘発される迷走神経 MEP は，迷走神経や反回神経を同定せずとも

３．刺激強度またはトレイン数の増加と共に，迷走神記録できる利点がある。本研究から，甲状腺手術時に

経 MEP の振幅が増大した。３パルス以上かつ約おける迷走神経 MEP の測定は，反回神経の機能状態

300Ｖ以上の刺激強度で，迷走神経 MEP は安定しのモニタリング方法となる可能性が示唆された。

て測定できた。

（論文審査の結果の要旨）

４．迷走神経 MEP の振幅は甲状腺手術中に低下し，手術終了にかけて回復する傾向を認めた。

甲状腺手術では合併症の反回神経麻痺を予防するた
めに，表面電極付気管チューブ（EMG チューブ）を

５．反回神経麻痺側では健常側より低振幅の迷走神経
MEP が測定された。

用い，反回神経を直接電気刺激し声帯の反応を観察す
る術中神経モニタリングを行なっている。経頭蓋刺激６．甲状腺手術中に反回神経を切断した症例では，迷による運動誘発電位（MEP）は，運動機能障害が生

走神経 MEP の振幅が著明に低下した。

じる危険のある脳・脊髄外科手術，大血管手術で確立

これらの結果より， 経頭蓋刺激による迷走神経された術中神経モニタリングの方法である。頭蓋底手MEP は，刺激強度とトレイン数に依存して増加し，術時に迷走神経の神経機能評価目的で，EMG チュー

３パルス以上かつ約300Ｖの刺激強度で， 迷走神経

ブを用いた経頭蓋刺激による MEP 測定が行われ，手MEP は高い確率で測定できること，迷走神経 MEP

術中の迷走神経機能モニタリングとして臨床的に活用は甲状腺手術進行によって変化すること。迷走神経されている。しかし，EMG チューブを記録電極とす

MEP は迷走神経・反回神経の機能を反映する可能性

る経頭蓋刺激による MEP は体系的な研究がなされてがあり，甲状腺手術時における反回神経の機能評価のいない。本研究では，EMG チューブを用いた迷走神

モニタリング方法として有用である可能性が示唆され経の MEP の基礎的特徴と，甲状腺手術中の迷走神

た。
主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値

経・反回神経支配領域の喉頭筋の MEP を測定するこがあるものと認めた。

とにより，以下の検討を行った。
１．ワイヤー電極タイプとフラットワイド電極タイプ

Effects of Subtype-selective E Prostanoid Receptor Agonists on Bleomycin-induced Pulmonary
Fibrosis in Rats（ブレオマイシン誘発肺線維症ラットモデルに対するサブタイプ選択的Ｅプ
ロスタノイド受容体アゴニストの効果）
市

山

崇

史

（論文の内容の要旨）

ドンやニンテダニブという新規抗線維化薬が臨床で使【はじめに】特発性肺線維症（IPF）は治療選択肢が用されているが，IPF 患者の予後を改善するためには限られた予後不良の肺疾患である。近年，ピルフェニ

新しい抗線維化薬の開発が期待される。IPF 患者の肺

464

信州医誌

Vol. 67

審査学位論文要旨

ではプロスタグランジン（PG）E2 が減少しているこ

アゴニスト，ピルフェニドンとニンテダニブ投与群でとが報告されている。また，ブレオマイシン（BLM）

溶媒投与群と比べて有意に低下した。プロコラーゲン

誘発肺線維症マウスモデルに対する PGE2投与による1a1の mRNA 発現は EP2アゴニストとピルフェニド

コラーゲン産生量の抑制と，死亡率の低下が報告され

ン投与群で溶媒投与群と比べて有意に低下し，プロコている。PGE2 の受容体として EP1～EP4の４つが同

ラーゲン1a2の mRNA 発現は EP2アゴニスト，ピル

定されているが，どの受容体が抗線維化作用に寄与しフェニドンとニンテダニブ投与群で溶媒投与群に比べているかは明らかではない。PGE2 投与により cAMP

有意に低下した。BLM 誘発肺線維症ラットモデルのレベルが上昇する。EP2と EP4はＧ蛋白と結合し細胞肺組織と IPF 患者の剖検肺組織ではいずれも EP2が内の cAMP レベルを上昇させることが知られている。

強く発現しており，EP4は発現していたが程度は弱

我々は新規抗線維化薬の候補として EP2アゴニスト

かった。一方，sham コントロール群ラットの肺組織

および EP4アゴニストを開発し，BLM 誘発肺線維症と肺癌手術検体から得られた正常肺組織では，EP2とラットに対する薬理学的効果を調べた。また，ヒト

EP4は発現していなかった。

IPF 患者の肺組織と BLM 誘発肺線維症ラットの肺組【考察】EP2アゴニストが肺重量の増加を有意に抑制

織で EP2と EP4の発現を免疫染色で調べた。

し，肺線維症関連マーカーである TGF-β1およびプロ【方法】 肺線維症ラットモデルは10週齢の Wistar-

コラーゲン遺伝子の mRNA 発現を有意に抑制し，線Hann ラットに対し day０に BLM 2.2 mg/kg を気管

維化スコアおよびヒドロキシプロリン含有量を低下さ内投与して作製し，以下の6群に分けて21日間介入をせる傾向を示した。これらの結果より EP2アゴニス行った。① sham コントロール群；day０に生理食塩トの投与により線維化が抑制されている可能性が示唆

水を気管内投与したのみ，② BLM＋溶媒群；肺線維された。また，これらの結果はニンテダニブ投与群と症ラットモデルに介入薬の溶媒１mL/kg のみを１日

類似していた。一方，EP4アゴニストは線維化を抑制

３回皮下注射する，③ BLM＋EP2アゴニスト群；肺しなかった。EP2アゴニストと EP4アゴニストで薬効

線維症ラットモデルに EP2アゴニスト0.3 mg/kg をに差があった理由として以下の３つが考えられる。①

１日３回皮下注射する， ④ BLM＋EP4アゴニスト

EP2の刺激による cAMP の発現量と EP4の刺激によ

群；肺線維症ラットモデルに EP4アゴニスト0.3 mg/

る cAMP の発現量には７倍の差があること，② EP4

kg を１日３回皮下注射する，⑤ BLM＋ピルフェニドには cAMP 非依存性のシグナル伝達経路があること，ン群； 肺線維症ラットモデルにピルフェニドン30③ 本研究において肺線維症組織の免疫染色で EP2のmg/kg を１日３回皮下注射する，⑥ BLM＋ニンテダ

強い発現と比べて EP4の発現の程度が弱いこと。

ニ ブ 群； 肺 線 維 症 ラ ッ ト モ デ ル に ニ ン テ ダ ニ ブ【結論】EP2アゴニストが肺線維症に対する有望な治

50 mg/kg を１日１回経口投与する。Day22に深麻酔療薬になる可能性が示唆された。別の動物モデルや臨下で大動脈離断により安楽死させ，肺を摘出し右肺重床検体でのさらなる検討が望まれる。

量を測定した。左肺はマッソン・トリクローム染色に（論文審査の結果の要旨）より病理組織学的に評価し，コラーゲンの主要成分で特発性肺線維症（IPF）患者の肺ではプロスタグラ

あるヒドロキシプロリンの含有量を ELISA 法で，肺ンジン（PG）E2 が減少し，ブレオマイシン（BLM）

線維症関連マーカーである TGF-β1とプロコラーゲン

誘発肺線維症マウスモデルで PGE2投与によるコラーの mRNA 発現を定量 RT-PCR で評価した。病理解

ゲン産生量や死亡率の抑制が報告されている。PGE2

剖で得られた IPF 患者の肺組織，また本研究の BLMの受容体は EP1～EP4と４つあり，EP2と EP4がＧ蛋＋溶媒群のラット肺組織で，EP2と EP4の免疫染色を白と共役し細胞内 cAMP レベルを上昇させるため，施行し発現の有無を確認した。

抗線維化に働くとされる。本研究では，新規開発した【結果】病理組織学的評価では溶媒投与群に比べ EP2EP2アゴニストと EP4アゴニストの抗線維化作用をアゴニストとニンテダニブ投与群で線維化の軽減が示

BLM 誘発肺線維症ラットで検討した。またヒト IPF

唆されたが，スコア評価，ヒドロキシプロリン含有量

患者の肺組織と BLM 誘発肺線維症ラットの肺組織にで有意な差はなかった。肺重量は，溶媒投与群に比べおいて，EP2と EP4の発現の有無を免疫染色で調べた。

EP2アゴニストとニンテダニブ投与群で有意に軽減し10週齢 Wistar-Hann ラットを用い day０に BLM

た。TGF-β1の mRNA 発現は EP2アゴニスト，EP4

2.2 mg/kg を気管内投与し肺線維症モデルを作製し

No. 6, 2019465

審査学位論文要旨た。① sham コントロール群；day０に生理食塩水を

１．EP2アゴニスト投与群では溶媒投与群と比べ，肺気管内投与する群，② BLM＋溶媒群；肺線維症モデ

重 量 の 増 加 お よ び TGF-β1 と プ ロ コ ラ ー ゲ ン のルに介入薬の溶媒のみを投与する群，③ BLM＋EP2

mRNA 発現が有意に抑制された。組織スコアとヒアゴニスト群；肺線維症モデルに EP2アゴニスト0.3

ドロキシプロリン含有量は低い傾向だったが，有意mg/kg を投与する群，④ BLM＋EP4アゴニスト群；

差はなかった。

肺線維症モデルに EP4アゴニスト0.3 mg/kg を投与する群，⑤ BLM＋ピルフェニドン群；肺線維症モデ
ルにピルフェニドン30 mg/kg を投与する群，（②～⑤
は１日３回皮下注射），⑥ BLM＋ニンテダニブ群；

２．ニンテダニブ投与群でも EP2アゴニストと類似した結果が得られた。
３．EP4アゴニスト投与群は線維化抑制効果を認めなかった。

肺線維症モデルにニンテダニブ50 mg/kg を１日１回

４．ヒト IPF 患者の肺組織および BLM 誘発肺線維症

経口投与する群，の６群に分類し，21日間介入薬を投ラットモデルの肺組織では，EP2と EP4の発現が認与した。Day22に安楽死させ肺を摘出し，右肺重量をめられたが，正常肺組織ではそれらの発現は認めな測定した。左肺を病理組織学的にスコア評価し，ヒドかった。

ロキシプロリン含有量，TGF-β1とプロコラーゲンのこれらの結果により，EP2アゴニストは特発性肺線mRNA 発現量を測定した。ヒト IPF 患者の肺組織と維症の新規治療薬になる可能性が示唆された。よって，

BLM＋溶媒群のラット肺組織で，EP2と EP4の免疫主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値が染色を施行した。

あるものと認めた。

その結果，市山は以下の結論を得た。

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