GeneAce Probe qPCR Mix III.

DescriptionV.

Typical PCR Protocol

GeneAce Probe qPCR Mix II is a convenient 2X premix for

Choose an appropriate total reaction volume, depending

real-time qPCR using sequence-specific fluorogenic

on the instrument used. (e.g., 50 µl or 25 µl)probes.
This product enables reliable results across a wideComponent

VolumeVolumedynamic range and allows for reducing non-specific

2 x GeneAce Probe qPCR Mix II

25.0 μl12.5 μl

amplification by using optimized buffer components and25 μM each Primers

1.0 μl0.5 μl

Hot-Start Gene Taq NT, a chemically modified Taq DNA

10 μM TaqMan® Probe *3)

1.0 μl

0.5 μlPolymerase. This product contains dUTP and therefore

Template

5.0 μl

2.5 μlcarryover contamination is prevented by adding UNG

d.d.H2O

50.0 μl25.0 μlup to(This product does not contain UNG).
This product contains a unique passive reference dye that

Recommended cycler conditions *4), *5)is compatible across a variety of instrument platforms.

95°C

10 min.

Enzyme activation *6)

95°C

30 sec.

II. Storage–20°C, protected from light.

60°C1 min.

This product should be protected from light. After thawing,

Optimum PCR condition depends on primer sequence

the master mix may be stored at 4°C for up to one monthand template DNA and so on.

45 cyclesor returned to -20°C for long term storage.

III.

2 x GeneAce Probe
qPCR Mix II *1)*1)*3) TaqMan® is registered trademarks of Roche Molecular Systems,

Components
50 rxns

200 rxns

1.25 ml x 1

1.25 ml x 4Inc.
*4) Depending on the primer sequence, the annealing time can beIt contains Hot-Start Gene Taq NT, dNTP Mixture with dUTP,
Mg2+, Passive reference dye, stabilizer.

decreased to 15 sec, and the extension time can be decreased to30 sec (optional).
*5) For carry over prevention, add UNG in reaction mix and incubate
prior to qPCR reactions (optional).

IV.

Notes

・ The PCR must start with an initial 10 minutes*6) Ensure that the cycling program includes the DNA polymerase
activation step. Initial 10 minutes incubation at 95ºC is required.

incubation at 95°C to activate the chemicallymodified hot-start Taq DNA polymerase.
・ We recommend two-step cycling protocols. (See V.
Typical PCR protocol)
・ This product cannot be used for runs in “Fast”*2)
mode on ABI real time instruments.
*2) 95°C 20 sec→(95°C 3 sec , 60°C 30 sec) x cycle numbers

・ Always ensure that the product has been fully thawed
and mixed before use. Gently mix the mixtures without
creating bubbles.

NIPPON GENE CO., LTD.
www.nippongene.com

For Research Use Only

GeneAce Probe qPCR Mix III.

V. 使用例

製品説明

GeneAce Probe qPCR Mix II は、2 x プレミックスタイプのリご使用の装置に対応した反応液量でご使用下さい。

アルタイム PCR 試薬で、蛍光標識プローブ検出系に最適化されています。化学的な修飾を施されたホットスタート PCR 用＜反応液（例）＞[ 50 μl 系 ][ 25 μl 系 ]酵素を採用しており、非特異的増幅を抑制し、広範囲の鋳型

2 x GeneAce Probe qPCR Mix II

25.0 μl12.5 μl濃度に対し精度の高い分析ができます。また、別途

25 μM each Primers

1.0 μl

0.5 μl

10 μM TaqMan® Probe *3)

1.0 μl

0.5 μlバー防止処理を行えます（本品に UNG は含まれていませTemplate

5.0 μl

2.5 μlん。）

d.d.H2O

50.0 μl25.0 μl

Uracil-N-Glycosylase (UNG) を添加することでキャリーオーup to

本品は、パッシブリファレンス色素が予め添加されているため、各種プレートタイプのリアルタイム PCR 装置に対応していま＜推奨 PCR サイクル条件＞＊4), *5)

す。

95℃

10 min.

95℃

30 sec.

60℃

1 min.

II. 保存－20℃ (遮光)4℃保存(遮光)も可能ですが、その場合は１ヶ月以内にご使用下さい。

試 薬

50 反応用200 反応用

2 x GeneAce Probe
qPCR Mix II *1)

1.25 ml x 1 本

1.25 ml x 4 本＊1) Hot-Start Gene Taq NT, dNTP Mixture (dUTP を含む), Mg2+,
Passive reference dye, stabilizer を含んでいます。

IV. 注意*6)

45 cycles

プライマーの設計や鋳型 DNA 等により反応の至適条件が変わることがあります。
＊3)

III. 製品内容酵素活性化ステップ

＊4)

＊5)
＊6)

TaqMan®は、Roche Molecular systems 社の商標です。
プライマー対とプローブの設計によっては、熱変性時間は 15 秒まで、伸長時間は 30 秒まで短くすることもできます。
反応液に別途 UNG を添加した場合、酵素活性化ステップの前に UNG 処理を行えます。
酵素の活性化ステップは、95℃10 分間必ず行って下さい。

・ 化学修飾を施したホットスタート PCR 用酵素を用いている
ため、酵素活性化ステップ（95℃ 10min.）を必ず実施してください。
・ 推奨 PCR サイクル条件にてご使用下さい。（V.使用例 参照）
・ ABI リアルタイム PCR 装置のランモード「Fast」＊2)には対応しておりません。
＊2) 95℃ 20 sec →(95℃ 3 sec , 60℃ 30 sec)×ｻｲｸﾙ数

・ 使用時は、泡立てないように穏やかに転倒混和し、試薬を十分均一にしてからご使用ください。

本製品は、試薬（試験研究用）として販売しているものです。
医薬品の用途には使用しないでください。

株式会社ニッポンジーン

TEL 076-451-6548

FAX 076-451-6547

www.nippongene.com
HO1902