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61 2013
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哺乳豚の Actinobacill
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opneumoniae血清型２による全身性感染症村上弘子1)、倉重聖2)（1)福岡県農林水産部畜産課、2)福岡県両筑家畜保健衛生所）

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キーワード：Actinobacill
uspleuropneumoniae、哺乳豚、全身性感染症

し、さらに同乳剤を用いて、豚コレラウイルス（CSFV）、豚繁殖・呼吸障害症候群ウイルス（PRRSV）及び豚サーコウイルス２型（PCV２）の各特異遺伝子に対する PCR

はじめに
Actinobacilluspleuropneumo
niaeは、グラム陰性、非運動性、通性嫌気性を示す Pa
steurellaceae科に属する小を実施した。また血清を用いて、CSFV、PRRSV及びオーエスキー病ウイルス（ADV）に対する抗体検査を実施した。

桿菌であり、豚胸膜肺炎を引き起こす。通常 A.pleuro-

細菌学的検査では、脳、心臓、肺、肝臓、脾臓及び

pneumoniaeによる胸膜肺炎は４～５カ月齢の豚に好腎臓を分離材料として、チョコレート寒天培地、５％発し、壊死性、出血性、気管支肺炎と線維素性肺炎を

馬血液加寒天培地、DHL寒天培地（栄研化学株式会社、6)とする。胸腔以外での病変の報告は少ないが、特徴1,東京）を用いて３７℃で２４時間好気培養及び微好気培養

肥育豚における滲出性髄膜炎と腎炎5)、壊死性骨髄炎（５％CO2ガス）を実施した。小腸及び結腸内容物は、と線維素性化膿性関節炎2)、と畜場における出荷豚のDHL寒天培地を用いて、３７℃で２４時間好気培養を実8)の報告がある。今回、哺乳豚で多発性肉芽腫性肝炎7,施した。

急性経過を示した全身性 A.pleuropneumoniae感染症に

マイコプラズマ検査は肺を材料として、Mucinbac-遭遇し、適正な抗生物質投与により終息したので、概teriological（BD Diagnostics、USA）を５％添加した

要を報告する。

PPLO broth（BD Diagnostics、USA）寒天培地を用いて、３７℃ で７日間微好気培養（５％CO2ガス）を実施

発生概要した。

発生農場は、母豚６０頭を飼養する一貫経営農場であ分離菌株の菌種同定は、市販の同定キット（IDテスり、A.pleuropneumo
niae血清型１、２、５、７、９及ト HN－２０ラピッド「ニッスイ」；日水製薬株式会社、

び１０感染症予防用の不活化ワクチンを２回接種した６東京）を用いた生化学的性状検査と、A.ple
uropneumo-

カ月齢の繁殖候補豚を定期的に県外から導入していた。

niaeに特異的な外膜リポ蛋白質遺伝子（omlA）の PCR

また発生農場内では、導入後に A.pleuropneumoniaeのによる検出9)を実施した。

ワクチン接種は実施していなかった。

A.pleuropneumo
niaeの血清型別は、oml
Aの PCR増幅

今回発症した子豚は、２０１０年９月に導入された母豚産物を制限酵素 HinfⅠで処理した PCRRFLP9)と抗 A.

から、翌２０１１年２月に娩出された。母豚は初産であっpleuropneumo
niaeウサギ免疫血清の血清型１から１２た。同年３月、２２日齢の同腹哺乳豚１１頭のうち２頭が（分与：動物衛生研究所）を用いたスライド凝集試験に呼吸速迫を呈したと連絡を受け、立入検査を実施した。

より実施した。
薬剤感受性試験は、ベンジルペニシリン（PCG）、ア材料及び方法
立入検査時、瀕死状態の豚（No１.）及び死亡豚（No２.）を剖検し、病性鑑定を実施した。

ンピシリン（ABPC）、アモキシシリン（AMPC）、カナマイシン（KM）、ゲンタマイシン（GM）、ストレプ
トマイシン（SM）、フラジオマイシン（FRM）、オキ

ウイルス学的検査は、腎臓、脾臓、扁桃の臓器プー

シ テ ト ラ サ イ ク リ ン（OTC）、ド キ シ サ イ ク リ ン

ル乳剤及び肺乳剤を CPK細胞及び MARC細胞に接種（DOXY）（以上９薬剤：センシディスク、BD Di
agno-

豚病会報

No.
61 201323
ウイルス学的検査では、ウイルス分離は陰性であり、stics、USA）及びエンロフロキサシン（ERFX）（提CSFV、PRRSV及び PCV２に特異的な遺伝子は検出

供：BayerHealthCare、Germany）の１０薬剤についされなかった。抗体検査においても、CSFV、PRRSVて、一濃度ディスク拡散法により実施した。

及び ADVに対する抗体は陰性であった。

また、No１.の血清を用いて、A.pleuropneumo
niae血清型２に対する抗体検査をラテックス凝集試験（日生細菌学的検査では、２頭の脳、心臓、肺、肝臓、脾

研アグテック AP２；日生研株式会社、東京）で実施

臓及び腎臓から、グラム陰性の小桿菌が多数分離されした。判定は、抗体価８倍以上を陽性とした。また同た（表１）。同菌はチョコレート寒天培地にのみに発育時に農場全体の A.pleuropneumoniae血清型２の浸潤状し、同定キット（IDテスト HN－２０ラピッド）を用い況を調べるために、２０１
１年６月に採血した母豚５頭及た生化学性状検査では A.pleuropneumoniae（コード番び２０１
２年１月に採血した母豚５頭と５カ月齢の肥育豚号：
７１０７３５１、相対確率５７％）と Ac
tinobacilluslignieresii

６頭の血清を用いて同様の検査を実施した。これら母（相対確率４３％）に該当した。さらに omlAを標的とし豚の産歴構成は、１産が２頭、３産が１頭、５産が１た PCRでは、９７０bpの DNAが増幅された。これらの頭、６産が３頭、７産が１頭、８産が２頭であり、未結果から、分離菌株を A.pleuropneumoniaeと同定した。

経産豚はいなかった。

PCRRFLPの結果は、約４６０bp、４５０bp及び６０bpにバ

病理組織学的検査は、脳、心臓、肺、肝臓、脾臓、ンドが出現する血清型２、８のパターンを示し、抗 A.

腎臓、扁桃及び下顎リンパ節を１０％中性ホルマリン液

pleuropneumoniaeウサギ免疫血清を用いたスライド凝で固定し、パラフィン包埋後薄切し、ヘマトキシリン・集試験では、血清型２ウサギ免疫血清のみで凝集が確エオジン染色（HE染色）及びグラム染色を実施した。

認されたことから、血清型２と判定した。薬剤感受性

また、免疫組織化学的検査は抗 A.pleuropne
umoniae血試験成績では、KM、GM、SM 及び FRM に耐性を示

清型２ウサギ免疫血清を用いて、ストレプトアビジン・し、PCG、ABPC、AMPC、OTC、DOXY及び ERFX

ビオチン法（ヒストファイン SABPO（R）キット；に対しては感受性を示した。肺からマイコプラズマはニチレイバイオサイエンス、東京）で実施した。

分離されず、小腸及び結腸内容から有意菌は分離されなかった。

検査成績

No１.の A.pleuropneumoniae血清型２に対する凝集抗体価は、陰性（８倍未満）であった。肥育豚の抗体価

外貌所見では、No１.、No２.ともに豚の耳介、鼻鏡部、臀部、腹部にチアノーゼが認められたが、その程度はは１２８倍から５１２倍であった。No１.及び No２.の母豚のNo１.の方が顕著であった。

抗体価は測定できなかったが、同農場における他の母豚の抗体価は、８～１２８倍を示した（表２）。

剖検では、２頭共通の所見として、心臓及び肺の漿膜面に多量の線維素が析出し、一部は胸壁と癒着して病理組織学的検査では、肺の細気管支や肺胞腔内、いた。また肺実質は暗赤色化及び肝変化がみられ、一肺胸膜、小葉間結合組織に、グラム陰性小桿菌塊とそ部は硬化していた。肝臓は腫大及び脆弱化、脾臓ではの周囲に変性した単核細胞の集簇が認められた。同様

辺縁部に数カ所の充うっ血、腎臓では被膜下に点状出の病変は、心外膜、肝臓の小葉辺縁部、脾臓の脾髄内、扁血、下顎リンパ節では充血が認められた。

桃の陰窩腔内及び下顎リンパ節のリンパ洞内にも認め⴫䋱䇭ਥⷐ⤳ེ䈮䈍䈔䉎㩷㪘㪅㩷㫇㫃㪼㫌㫉㫆㫇㫅㪼㫌㫄㫆㫅㫀㪸㪼 㩷䈱ಽ㔌⁁ᴫ䈫఺∉⚵❱ൻቇ⊛ᬌᩏ䈱⚿ᨐ⩶ಽ㔌⣛⤳䋫䋫䋫䋫䋫䋫ᚳ᩶㪥㪫ਅ㗶䊥䊮䊌▵㪥㪫⣖ᔃ⤳⢖⢄⤳⣢⤳㪥㫆㪅㪈఺∉⚵❱ൻቇ⊛ᬌᩏ䋭䋫䋫䋫䋭䋫䋫䋫⩶ಽ㔌䋫䋫䋫䋫䋫䋫㪥㪫㪥㪫㪥㫆㪅㪉఺∉⚵❱ൻቇ⊛ᬌᩏ䋭㪥㪫䋫䋫䋭
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られた。これら病変部のグラム陰性小桿菌塊は、抗 A.

抗体価が８倍の母豚（８産）が存在するなど、抗体価

pleuropneumo
niae血清型２ウサギ免疫血清に陽性反応は一定していないので、母豚の中には分娩時ほとんどを示した（表１）。これらの病変は多臓器に膿瘍が認抗体を保有していない母豚がいる可能性がある。今回、められた５０日齢の子豚の所見3)とほぼ一致した。また発症子豚の母豚の抗体検査は実施できなかったが、発上記病変の他、肺では細気管支や肺胞腔内に出血を症時に No
１.は A.ple
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niae血清型２に対する抗伴った線維素の析出や漿液の貯留、肺胞中隔毛細血管体を保有しておらず、そのため A.pleuropneumo
niae血内に硝子血栓の形成、肺胸膜や小葉間結合組織に単核清型２に感染し、瀕死状態になったものと考えられた。

や好中球の浸潤を伴った水腫と線維素析出も認められまた、No２.も同様な理由で急死したものと思われた。

た。心臓では、外膜に出血を伴った線維素の析出、外今後の対策として、母豚の抗体価を一定にするため分膜下で血管壁のフィブリノイド変性が認められた。脾

娩前の A.pleuropneumoniae血清型２をふくむワクチン

臓では被膜上に線維素の析出が認められた。腎臓ではの追加接種の実施、さらに子豚に初乳を確実に摂取さ糸球体毛細血管の充うっ血や硝子血栓の形成が散見させるために、分娩後２４時間以内に大きな子豚約半数をれた。

コンテナなどに取り、残りの小さな子豚に自由に初乳を飲ませ、次に大きな子豚に初乳を飲ませる分割授その後の経過

乳 4)の実施が必要と思われる。

病性鑑定をした４日後に同腹豚の１頭が同様の症状を呈し死亡した。診療獣医師と協議した結果、薬剤感謝辞

受性試験で感受性を示した６薬剤のうちから ABPC

本報告をまとめるにあたり、抗 A.pleuropneumoniaeを選択し、全ての哺乳豚に投与した。その後、続発はウサギ免疫血清を分与していただいた動物衛生研究所認められていない。の小林秀樹先生、検査等に助言、協力いただいた福岡
県中央家畜保健衛生所病性鑑定課の皆様に心から深謝考察いたします。

A.pleuropneumoniaeは全ての日齢の豚に発生するが、胸膜肺炎が主病変である。今回の症例は、発症日齢及引用文献

び剖検所見から、Haemophilusparasuisや Ac
tinobacil-１）ChoWS,etal.(2004)Expressionofni
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delussuisなど他の感染症を疑ったが、主要臓器から A.

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uropneumoniae血清型２のみが分離されたことから、

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uropneumoniae血清型２による全身性感染症と診

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断した。一般に哺乳豚は病気の進行が早く、そのまま２）JensenTK,etal.(1999)Ac
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無処置であれば被害が拡大した可能性はあるが、感受

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性のある ABPCを全ての哺乳豚に投与した結果終息

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し、被害を最小限に抑えられた。

258261.

同農場の母豚は、導入時に２回ワクチン接種後、追３）久保正法ら（２００９）多臓器に膿瘍の見られたアク加接種をしておらず、肥育豚では１回も接種していな

チノバチルス症の１例．豚病会報，54:1.

い。それにもかかわらず、母豚や肥育豚が抗体を保有していた事から、肥育豚舎及び母豚舎における A.pleuropneumoni
ae血清型２の浸潤が示唆された。しかし、４）呉克昌（２００２）離乳舎での成績を最適化する飼養管理．豚病会報，40:
1821.
５）MadseLW,etal.(2001)Actinobacilluspleuropneu-豚病会報

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６）NaritaM,etal.(1997)I
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2533.
７）Ohba T,etal.(2008)Mult
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８）大場剛実ら（２００９）と畜場搬入豚の Ac
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２型による多発性肉芽腫肝炎．
豚病会報，54:
27.
９）OsakiM,etal.(1997)Genetic diversit
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