信州医誌，59⑷：249〜257，2011

F344/DU ラット門脈遮断後の再灌流は
脾臓皮膜下注入 ACL‑15大腸癌細胞の肝転移を促進させる
山本

誠

麻沼和彦

信州大学医学部組織発生学講座

Portal Vein Clamp and Subsequent Blood Reﬂow Enhance Liver Metastasisof Colon ACL‑15 Cells Administered Intrasplenically in F344/DU Rats
Makoto YAMAMOTO and Kazuhiko ASANUMA
Department of Histology and Embryology, Shinshu University School of Medicine
We explored the relationship between transient portal vein clamping (TPVC)‑induced adhesion molecule
expression in the liver and liver metastasis. TPVC was achieved by clamping the portal vein of male F344/
DU rats for 15 min.For the investigation of liver metastasis,the portal vein was clamped in experimental rats
and simple laparotomy was performed in control rats at the ﬁrst operation.All rats were injected 6 and 18 h
post‑ﬁrst surgery with 4.0x10 ACL‑15 colon carcinoma cells intrasplenically. The number of tumor nodules
on the liver surface was determined 14 days later.For the investigation of gene and protein expression in theliver,E‑selectin,vascular cell adhesion molecule‑1 (VCAM ‑1),and intercellular adhesion molecule‑1 (ICAM ‑1)were determined 6 or 18 h after the ﬁrst operation by quantitative RT‑PCR for m‑RNAs and immunohistochemical staining for proteins.Portal vein‑clamped rats had signiﬁcantly more liver metastatic foci than did
unclamped controls.TPVC enhanced mRNA and protein expression of E‑selectin,VCAM ‑1,and ICAM ‑1 on
the liver in experimental rats,except for m‑RNA ICAM ‑1 expression at 18h post surgery.It is supposed thatfactors produced by TPVC can upregulate the mRNA and protein expression of E‑selectin, VCAM ‑1, andICAM ‑1 on the liver, which may facilitate liver metastasis. Shinshu Med J 59 : 249 ―257, 2011
(Received for publication April 11, 2011;accepted in revised form May 24, 2011)
Key words:liver metastasis, portal vein clamp, colon cancer cell, congestion of the intestine
肝転移，門脈遮断，大腸癌細胞，腸管鬱血

緒除する目的で門脈本幹を遮断しない方法がとられるこ

言

とがある

が，門脈遮断と肝転移についての検討は

大腸癌は肝転移の比率が高く，進行大腸癌においてほとんどなされていない。今回われわれは門脈遮断の

初回手術時に肝転移は10‑30％前後に認められ，また，肝転移に及ぼす影響を，癌細胞を経脾臓門脈注入する

肝転移は大腸癌の予後不良の大きな因子である

動物モデル

。

癌の肝転移を促進させる要因として，ストレス ，carcinoembryonic antigen ，肝虚血後の再灌流を用いて検討した。また大腸癌肝転移モデルで転移との関与が推察されている接着因子であなどる E ‑selectin，vascular cell adhesion molecule 1があげられている。特に細静脈の血管内皮細胞の虚血（VCAM ‑1），および intercellular adhesion molecule

再灌流現象の研究を目的とした肝虚血再灌流の動物実

1（ICAM ‑1）

験モデルについては数多くの検討がなされている。こ白の発現についても検討した。

れらのモデルにおいて，門脈系臓器の鬱血の影響を排
別刷請求先：麻沼和彦

松本市旭３‑１‑１

信州大学医学部組織発生学講座

No. 4, 2011の肝臓における m‑RNA および蛋

材料と方法

〒390‑8621

実験１：門脈遮断と肝転移249

山本・麻沼１ 実験動物と癌細胞た。

動物はチャールズリバー㈱（横浜）より購入した12

実 験 ２：E ‑selectin，VCAM ‑1，ICAM ‑1の 肝

週雄性 F344/DU ラットを用いた。総ての動物実験は，
研究動物実験計画書の承認を信州大学動物実験委員会

臓における m‑RNA および蛋白の発現
１ 実験動物および学長により得た後，信州大学実験動物取り扱い
指針を遵守して行った。

実験１と同様の12週雄性 F344/DU ラットを用い同様に飼育を行った。

ラットの飼育は信州大学医学部附属動物実験施設の２ 実験モデルおよび実験群

アイソラックで行い，滅菌した水と飼料を与えた。

術前処置および麻酔は実験１と同様に行った。

腫瘍細胞は ACL‑15ラット大腸腫瘍株（理化学研究

コントロール群は C6ʼ
群（n＝5）と C18ʼ群（n＝5）

所，埼玉）を用いた。腫瘍細胞の培養は37℃CO イ

からなり，１回目の手術は開腹術のみを行った。実験

ンキュベーターオートクレーブ内で，100mm 組織培

群は P6ʼ
群（n＝5）と P18ʼ群（n＝5）で，１回目の手

養ディシュに10％ heat‑inactivated Fetal Bovine

術の際ブルドッグ鉗子にて15分間の門脈血流遮断をSerum（FBS）‑RPM I 1640（100units/ml penicil-

行った後に閉腹した。２回目の手術は，C6ʼ
群と P6ʼ
群

lin, 100μg/ml streptomycin 添加）を培養液としては１回目の手術の６時間後，C18ʼ
群と P18ʼ
群は１回行った。

目の手術の18時間後に開腹し門脈よりカニュレーショ

２ 実験モデルおよび実験群

ンを行い生理食塩水100cc で灌流後，肝臓を摘出した。

コンフルエントになった細胞を trypsin 処理し，細RNA の抽出用には肝尾状葉を切り出し液体窒素中に胞濃度が4.0x10 cells/ml となるように生理食塩水で投入し，冷凍後‑80℃で保管した。免疫染色用には右調整した。

葉肝門部を約１cm 角で切り出した。

ラットには２度の開腹術を行ったが，２度とも前夜

３ RNA の抽出と E‑selectin，VCAM ‑1，ICAM ‑1

より絶食とし，sodium pentobarbitone（50mg/kg）の半定量 reverse transcription（RT）‑PCRを腹腔内注入した後エーテル麻酔下に腹部正中切開でTotal RNA の精製は Rneasy Mini Kit（QIAGEN,開腹した。

Inc.,Chatsworth,CA,USA）を用いて行った。５μgのコントロール群は C6群（n＝10）と C18群（n＝10）

total RNA の RT‑PCR は SuperScript Ⅱ（Invitro-

よりなり，１回目の手術は開腹術のみを行った。実験

gen,CA,USA）を用いてプロトコール通りに行った。

群は P6群（n＝15）と P18群（n＝15）よりなり，１回目（全量50μl）
RTで得られた ﬁrst‑Strand cDNA 反応液の手術の際にブルドッグ鉗子を用い15分間の一時的門

２μl を 用 い て，E‑selectin，VCAM ‑1，ICAM ‑1，

脈血流遮断を行った後に閉腹した。２回目の手術ではそれに加えてそれぞれと同時に beta‑actin の増幅を，C6群と P6群は，１回目の手術終了より６時間後に，プラト―に至らぬサイクル数を検討後，行った（表１）。

C18群と P18群は１回目の手術の終了より18時間後に，

プ ラ イ マ ー は Bertiの デ ザ イ ン に 従 い ，Sigma‑

１回目と同様な方法で開腹し，総てのラットに1.0ml

Aldrich Com. Japan（東京）により作成されたものの ACL‑15細胞浮遊液を脾臓皮膜下に注入し閉腹した。

を使用した。増幅された PCR 産物10μl を1.5％アガ

ラットは14日後に犠牲死させた後肝臓を摘出し，肝ロースゲルに泳動後，エチジウムブロマイドで染色し，表面に認められる転移結節数および肝重量の計測を行っ

NIH Image を用いて（NIH,Bethesda,MD,USA），

表１ PCR のプライマーおよび PCR 条件
Gene

E‑selectin
VCAM ‑1
ICAM ‑1

250

PrimerForward
ReverseForward
ReverseForward
ReverseSequence

Annealing
conditions‑TGC GAT GCT GCC TAC TTG TG‑3ʼ
5ʼ
65 ℃, 1 min‑AGA GAG TGC CAC TAC CAA GGG A‑3ʼ
5ʼ
‑GGCTCG TAC ACC ATC CGC‑3ʼ
5ʼ
65 ℃, 1 min‑CGG TTT TCG ATT CAC ACT CGT‑3ʼ
5ʼ
‑AAA CGG GAG ATG AA T GGT ACC TAC‑3ʼ
5ʼ
64 ℃, 1 min‑TGC ACG TCC CTG GTG ATA CTC‑3ʼ
5ʼ

Cycles25
25
25

信州医誌 Vol. 59

門脈遮断後の再灌流は肝転移を促進させる
表２

各実験群における転移頻度，肝重量および肝表面に認められた転移結節数。肝重量の測定値は mean ± SEM
C6

C18

P6

P18

0/10（0％）7.7±0.11

0/10（0％）7.6±0.11

8/15（53％）8.9±0.58

9/15（60％）7.8±0.09

0
1‑5
6‑10

10
0
0

10
0
0

7
0
0

6
9
0

11以上

0

0

8

0

転移頻度
肝重量（g）
転移結節数

それぞれのサンプルの beta‑actin との intensityの比定した。

率（relative intensity）計算を行った。

結４ 免疫組織学的検討切り出した組織を10％リン酸緩衝ホルマリン（pH果

実験１：肝表面の肉眼的転移および肝重量7.4）を用いて約48時間固定後パラフィンに包埋した。

肝表面に転移結節が認められたラットの数の割合

このパラフィン包埋ブロックより４μm の薄切切片を（表２）は対照群間（C6群と C18群）および実験群間作成しスライドグラスに貼付した。キシレンにて脱パ（P6群と P18群）で有意差は認められなかった。一方，

ラフィンし，エタノール系列で親水化した後，室温で対照群と実験群においては総ての群間（C6群と P6群，0.3％ H O 添加メタノール溶液と30分間反応させ内C6群と P18群，C18群と P6群，C18群と P18群）で有因性ぺルオキシダーゼ活性を不活化した。免疫染色は，意差を認めた。肝重量は P6群と他群間においてのみ

抗体のブロッキングを行った後，goat polyclonal（P6群 と C6群，P6群 と C18群，P6群 と P18群）有 意

anti‑E‑selectin（diluted at １：100)，goat poly-

差を認めた。P6群の転移結節数10以上の８例うち４clonal anti‑VCAM ‑1（diluted at １：200)，mouse

例においては大きな転移結節が融合しており，転移結polyclonal anti‑ICAM ‑1（diluted at １：100）

節数個数は数えられなかった。またその４例中３例に(Santa Cruz Biotechnology, Inc. Santa Cruz, CA,

おいて腹水を認めた。

USA）を一次抗体として，室温で１時間反応させた後，

実験２：E‑selectin，VCAM ‑1，および ICAM ‑ELITE ABC kit（Vector,Burlingame,CA,USA）を1の遺伝子発現用い，Avidin‑Biotin Peroxidase Complex 法（ABC

群および P18ʼ
群とE‑selectin mRNA の発現は P6ʼ法）にて行った。E‑selectin および VCAM ‑1に対しも，コントロール群の２群（C6ʼ群および C18ʼ
群）よては biotinylated rabbit anti‑goat IgG，ICAM ‑1にり有意に高かった（図１A，B）。VCAM ‑1 mRNA

対しては biotinylated rabbit antimouse IgG と室温の発現は P6ʼ
群および P18ʼ
群とも，コントロール群

で30分反応させ，さらに ABC 溶液 と60分 間 反 応 さの２群より有意に高く，実験群間の比せた後，DAB 溶液と反応させ可視化した。ヘマトキ

群 が P18ʼ
群 よ り 有 意 に 高 か っ た（図 １A，C）。
P6ʼ

シリンにて核染色を行い，E‑selectin，VCAM ‑1，

群がコントロール群の２群
ICAM ‑1 mRNA は，P6ʼ

ICAM ‑1の陽性および陰性の類洞内皮の長さを強拡像より有意に高かった（図１A，D）。そのほかの群間で１検体あたり５視野を無作為に抽出して測定し，陽での比 において有意差は認めなかった。

性割合を算出した。
統計学的検討
実験１における転移を認めたラットの数の各群間での比は Fisherʼs exact test で，実験１での各群間の肝重量の比，および実験２での relative intensity

および免疫染色陽性比率の比 は Mann‑Whitney U‑

においても

実験２：E‑selectin，VCAM ‑1，および ICAM ‑1の蛋白発現E‑selectin，VCAM ‑1，および ICAM ‑1の蛋白質の肝類洞内皮における発現は P6ʼ
群および P18ʼ
群とも，
コントロール群の２群（C6ʼ群および C18ʼ
群）より有意に高かった（図２）。

test で行い，危険率５％以下をもって有意差ありと判No. 4, 2011251

山本・麻沼A

BCD

図１ 肝臓における E‑Selectin，VCAM ‑1，および ICAM ‑1の mRNA の発現
遺伝子発現の典型的泳動像（A）。C6ʼ
群，C18ʼ
群，P6ʼ
群，P18ʼ
群における，E‑selectin（B）
，
‑
1
（
）
，
‑
1
（
）と
‑
との
の比（
）
。測定
VCAM
C ICAMD
beta actin
intensity
relative intensity
値は mean ± SEM （n＝5）で， は危険率５％以下をもって有意差ある群間を示す。

252

信州医誌 Vol. 59

門脈遮断後の再灌流は肝転移を促進させる

A

B

C

D

E

F

図２ 肝臓における E‑Selectin，VCAM ‑1，および ICAM ‑1の蛋白の発現
6
群，
1
8
群，P6ʼ
群，P18ʼ
群における E‑Selectin，VCAM ‑1，および ICAM ‑1の E‑selectin（A），
Cʼ C ʼ
群，C18ʼ
群，P6ʼ
群，
VCAM ‑1（B），ICAM ‑1（C）免 疫 染 色 の 典 型 的 染 色 像。bars＝100μm。C6ʼ
群における，E‑selectin（D），VCAM ‑1（E），ICAM ‑1（F）の陽性肝臓類洞内皮の割合。測定値
P18ʼ
は mean ± SEM （n＝5）で， は危険率５％以下をもって有意差ある群間を示す。

No. 4, 2011253

山本・麻沼考起こされる発現は４時間でピークに至りより長い時間

察発現する 。Ｅ‑セレクチンの発現増強は肝転移の重肝転移モデルにおける癌細胞投与方法には，盲腸に要な因子と報告されており ，Ｅ‑セレクチンの発現癌細胞を移植する方法（同所移植），門脈に直接癌細抑制は肝転移を抑制するとの報告，VCAM ‑1の胞を注入する方法（門脈内投与），脾臓を介して門脈類洞細胞での発現は，脾臓注入肝転移モデルで肝転に注入する方法（脾臓被膜下投与）が主に行われてい移を促進する主なる要因であるとの報告 ，およびる。盲腸に移植する手法は主にヌードマウスを用いてICAM ‑1の発現亢進も肝転移を増幅させるとの報告が行われているが，癌細胞の進展にとどまらず，癌細胞ある。

と臓器特異的な微小環境条件における宿主側要因の影

一方ヒトの大腸癌の臨床における肝転移群と非肝転響，さらにパラクライン作用による相互反応が発癌す

移群における各種接着分子の血清値の比 検討でも，る臓器環境の中で解析できる点で優れている。しかし肝転移群ではＥ‑セレクチン，VCAM ‑1，ICAM ‑1，

それらの要因のため，転移を標的としたその作用機序

糖鎖抗原のシアリル Le やシアリル Le などの接着分の解明には複雑すぎるという欠点があり，肝，肺，骨子が有意に高値である と報告されており，大腸癌肝などの多臓器転移の研究には静脈内への癌細胞注入に転移における癌細胞と血管内の接着に，Ｅ‑セレクチ

よる転移モデルが用いられることが多い。門脈に癌細ン，ICAM ‑1，VCAM ‑1が重要だと考えられている。

胞を注入する手法において肝転移数にはばらつきが大われわれの検討でも肝転移が高度に認められた門脈

きく，本研究のコントロール群として用いることがで

遮断６時間後に癌細胞注入を行った群および門脈遮きなかったこと（結果は未発表），および脾臓被膜下断18時間後に癌細胞注入を行った群に，コントロー投与による門脈内への癌細胞の注入は大腸癌肝転移モ

ル群に比べ，多くの肝転移と，Ｅ‑セレクチンおよびデルでは広く行われていることから，本研究ではVCAM ‑1の m‑RNA の発現増強が認められた。また

脾臓被膜下投与による門脈内注入肝転移モデルを用い

ICAM ‑1の m‑RNA に関しては門脈遮断６時間後にた。

癌細胞注入を行った群に発現の増強が認められた。こ癌の血行性転移は癌細胞の原発巣からの離脱と血管れらのことより，門脈遮断によりＥ‑セレクチン，

内への遊離，血管内での移動，末梢血管内皮への接着，

VCAM ‑1，および ICAM ‑1の発現あるいは増強が認

基底膜および結合組織内への浸潤，という段階を経てめられ，また肝転移が促進されことが明らかになった。

成立すると考えられている。

免疫染色にても，肝類洞内皮におけるＥ‑セレクチ細胞が癌化すると，その表面に正常細胞には見られ

ン，VCAM ‑1，および ICAM ‑1蛋白の門脈遮断群にない抗原が出現する 。Ｅ‑セレクチンは，シアリル

おけるコントロール群に対する有意な発現が認められ

Le 抗原やシアリル Le 抗原を発現した癌細胞が血管た。無酸素再酸素化による血管内皮における接着分子

内皮細胞へ接着する最初の段階での重要な役割を果たの発現は，無刺激の状態では発現していないＥ‑セレク

している 。Ｅ‑セレクチン m‑RNA は，IL‑1，IL‑6，チン蛋白は２時間位から発現し４から５時間後にピー

TNF‑αなどのサイトカインの刺激で血管内皮表面にクとなり，VCAM ‑1蛋白も同様な発現パターンをと発現し，およそ２から４時間で最大になり24時間で元り４時間位から発現し約８時間ピークとなる。無刺激に戻る 。Ｅ‑セレクチンによる細胞接着作用により状態でもかなり多量な発現をしている ICAM ‑1蛋白

静止後，癌細胞のインテグリン受容体 で あ る very

は２時間位から発現が増強し，それが長時間持続す，lymphocyte function‑aslate antigen‑4（VLA‑4）

る と報告されている。またＥ‑セレクチンは癌細胞

sociated antigen‑1（LFA‑1）が活性化され，インターを脾臓に注入した場合，１時間後に m‑RNA はピー

フェロン γ（IFN ‑γ），インターロイキンー１（IL‑

クとなり，６時間後から48時間後に蛋白の発現が認め1），腫瘍壊死因子（TNF）等の炎症性サイトカインられる 。ICAM ‑1蛋白の発現は肝虚血再灌流２時間の刺激により血管内皮細胞表面のインテグリンファミ後および24時間後で増強が認められる 。これらのこリーである VCAM ‑1や ICAM ‑1が発現あるいは増強とから，Ｅ‑セレクチン，VCAM ‑1，および ICAM ‑1

すると，より強固な細胞間接着が生じる 。VCAM ‑蛋白の発現は m‑RNA の発現から４時間以内には増1や ICAM ‑1は２時間でピークに至り少なくとも72時

強されると考えられ，本実験の蛋白発現の結果と一致間程度続くが，ICAM ‑1の phorbol ester により引き

する。

254

信州医誌 Vol. 59

門脈遮断後の再灌流は肝転移を促進させる

癌細胞を脾臓注入すると２時間以内で E‑selectinて生じた諸因子が，非虚血再灌流肝臓類洞内皮の接着が発現し肝転移が促進されるとの報告があるが ，コ因子の発現を増強させた可能性があることを強く示唆

ントロール群では肝転移が認められなかった本研究のしている。腸管鬱血で引き起こされた微小循環障害に結果より，６および18時間の門脈遮断による門脈系臓よって生じた諸因子が大循環に入り多臓器にその影響器の鬱血が，虚血および再還流の暴露を受けていないを与える可能性は，大腸癌手術での，腫瘍摘出に先立

肝臓類洞内皮に，Ｅ‑セレクチン，VCAM ‑1，およびつ支配動静脈の結紮による腸管鬱血によって産生されICAM ‑1蛋白の発現の増強をもたらす主要因であるこた因子が辺縁静脈を通して門脈血流に流入し肝類洞内とが明らかとなった。

皮を刺激する可能性を与えている。

肝虚血再灌流障害とは，血流が途絶し虚血が遷延す本研究で使用した ACL‑15大腸癌細胞は脾臓内注入

ると活性酸素など諸種の因子による微小循環系の障害により高率に肝転移を認める1,2‑dimethylhydrazineが引き起こされ，血流再開後に進行性の臓器障害誘発ラット大腸癌細胞で，組織学的には印環細胞を有を来すことを言う。障害を引き起こす因子として，スーする低分化腺癌である。しかしながら ACL15細胞をパーオキサイド，ハイドロキシルラジカルなどの活性脾臓注入した園田ら の報告では，２週間後の肝転移

酸素や，一酸化窒素などのフリーラジカル産生によるはコントロール群で12例中３例であり，われわれの研障害，各種サイトカインや各種ケミカルメディエータ

究ではコントロール群20例すべてにおいて肝転移を認

産生による障害，活性化好中球と血管内皮細胞の相互めなかった。肝転移を認める頻度の要因は移植細胞数

作用に基づく障害などが考えられ研究されている。肝と癌細胞投与からの観察期間であるが，本研究での脾

虚血再灌流障害下におけるそれらの因子が肝転移に及臓注入細胞数は4.0x10 であり，また注入細胞の生存

ぼす影響の研究には，肝動脈および門脈の遮断が必要

率は90パーセント以上であり，常に脾臓に癌結節を認であるが，腸管鬱血による影響を排除するために門脈めていることより，癌細胞数が少なかったとは考えに血流を保つ肝部分虚血再灌流モデルが用いられることくい。

が多い。しかしながらそれらの検討において，肝部分

本研究より，肝転移を増強させる宿主側の要因の一

虚血実験群の非虚血肝領域にも，肝虚血を行わないコつは門脈系臓器，特に腸管の鬱血によって引き起こさ

ントロール群に比し肝転移の頻度が高いことれたＥ‑セレクチン，VCAM ‑1，および ICAM ‑1蛋白が解明すべき問題点となっている。

の肝類洞内皮における発現だと考えられた。だが，本腸管の急性の血行障害では流入動脈の遮断より静脈実験において門脈遮断６時間の実験ラットでは，肝転の遮断による組織障害の方が高度であり，灌流静脈の移結節が10以上か，結節を認めないか，の２群に分か

遮断は組織の微小循環系の障害を来すことが知られてれたことは，これらの接着分子の発現の違いからだけいる。小腸の鬱血に関する検討では，Xanthine‑Ox-

では説明がつかない。血管内皮と癌細胞との接着にはdase 系を介した活性酸素による障害は腸管壊死を起癌細胞側の要素も重要である。血管内に侵入した癌細こした30分の鬱血より，10分間の鬱血の方が強く認め

胞は，癌細胞が互いに集塊を作る，あるいは血小板やられる 。また，長時間の腸管鬱血では内因性エンドリンパ球と混ざり合って集塊を作り，遠隔臓器の毛細トキシンにより刺激を受けた単球―マクロファージ，

血管床での着床や生存，増殖が促進されると考えられ血管内皮細胞，好中球などから産生されるサイトカイている。ほぼ同じ世代の癌細胞を同じ手法で用いていン，エイコサノイド，血小板活性化因子（PAF），活

るにもかかわらず癌細胞移植転移実験においては，実性酸素，エラスターゼ，NO などが微小循環障害や細験群とコントロール群の有意差はありながら必ず転移

胞障害を引き起こすことが知られている。腸管は門脈

数にばらつきがみられるの遮断によって循環障害を引き起こしやすい臓器であ

欠点は総ての実験を同一日に行えないことであり，本り，本研究において，門脈遮断が，門脈系臓器，特に研究において，癌細胞の，生育速度の違い，培養ディ

腸管の組織障害を引き起こし，それによって発現されシュからの 離に要する時間の違い，浮遊液とした場

た諸種の因子が，虚血および鬱血に暴露されていない

合に連銭傾向の強さの違いが認められた。本研究では，

肝臓類洞内皮における接着因子の発現をもたらしたと同一細胞浮遊液をコントロール群と実験群に投与して考えられる。この結果は，肝虚血再灌流モデルで虚血おり，この癌細胞の要因は本研究の目的である，門脈再還流に暴露された部分の肝臓類洞内皮の障害によっ遮断が肝臓転移に及ぼす影響についての検討に影響をNo. 4, 2011

。肝転移実験モデルの255

山本・麻沼与えることではなく，また本研究の結果である癌転移

肝転移モデルにおいても転移増殖の機序は複雑と考えに肝臓の接着分子発現が関与するという結論に抵触すられ，今後の検討課題である。

る事項でもないが，転移モデルにおける詳細な分析に結は移植癌細胞の移植時の解析も行わなければならない
ことを示唆しており，肝臓転移率を議論する際に考慮されなければならない事項であると考えられる。

語

門脈遮断による腸管鬱血動物モデルの検討により，門脈遮断による門脈系臓器の鬱血が，虚血および鬱血門脈遮断６時間と18時間の実験群の転移を認める群に暴露されない肝臓類洞内皮での，Ｅセレクチン，での癌結節の数の相違は，癌細胞の増殖速度は門脈遮vascular cell adhesion molecule‑1，intercellular

断18時間の実験群に比し極めて速いことだと考えられ

adhesion molecule‑1 の mRNA や蛋白の発現を促進る。これは癌細胞の因子だけからでは説明ができない。

させ，その発現増強は肝転移の主要な要因であること

また，本研究においてＥ‑セレクチン，VCAM ‑1，

が明らかとなった。また転移した癌組織の成長が肝臓

ICAM ‑1の m‑RNA および蛋白の門脈遮断実験群のおよび全身の腫瘍免疫の低下をもたらし，腫瘍の増大発現では ICAM ‑1の m‑RNA のみに有意差が認めらをきたすことが推測された。

れただけであることから，これらの接着因子の発現の謝違いからでも説明がつかない。手術のみでも肝転移は
促進される

辞

こと，肝臓の Kuppfer 細胞を軸とし本研究に御指導を頂きました，安達 亙厚生連富士見た腫瘍に対する防御活性は手術侵襲により低下するこ高原病院長，藤森 実東京医科大学茨城医療センターと より，手術侵襲に伴う肝臓および全身の腫瘍免疫乳腺科教授，天野 純信州大学医学部第２外科教授，の低下が動物肝転移モデルに関与している可能性が推佐々木克典信州大学医学部組織発生学教授に深く感謝

測されている。転移腫瘍細胞の接着および増殖には致します。

様々な因子が関与していることを示しており，経門脈
文献1) 森谷宣晧, 小山靖夫, 北條慶一 :大腸癌肝転移の検討―転移巣の切除とその遠隔成績を中心に―. 日本大腸肛門病会
誌 36:１‑６, 1983
2) 椎木滋雄, 淵本定儀, 岩垣博巳, 安井義政, 佐々木章公, 大倉充博, 浦久保直澄, 浜田史洋, 三村 久, 折田薫三 :大腸癌同時性肝転移症例の臨床病理学的検討. 日本大腸肛門病会誌 44:1107‑1112, 1991
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信州医誌 Vol. 59

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（Ｈ 23. 4.11 受稿；Ｈ 23. 5.24 受理）

No. 4, 2011257