信州医誌，70⑹：407～418，2022

信州大学において審査された医学博士論文要旨
氏

名

学位授与
番
号

授与年月日

博

士

論

文

名

学位審査委員
主

査

副

査

吉山勇樹

乙第1250号 Ｒ 3. 6.23 Plantar incision with severe muscle injury can 髙 橋
be a cause of long-lasting postsurgical pain in
the skin（重度の筋損傷を伴う足底切開は，皮膚の術後痛が遷延する原因となりうる）

淳

関島良樹
福島菜奈恵
山崎光章

市原靖子

乙第1251号 Ｒ 3. 7.14 Effects of 5-aminolevulinic acid with iron sup­ 駒 津 光 久
plementation on respiratory responses tograded cycling and interval walking training
achievement in older women over 75 yrs（後期高齢女性における５-アミノレブリン酸摂取が自転車による運動負荷漸増時の呼吸応答とイ
ンターバル速歩トレーニング量に与える影響）

鷲塚伸介
小泉知展
鷹股
亮

小林惇一

乙第1252号 Ｒ 3. 9.29 Cholestenone functions as an antibiotic against 梅 村 武 司
Helicobacter pylori by inhibiting biosynthesisof the cell wall component CGL（コレステノン
はピロリ菌の細胞壁成分である CGL の生合成を阻害することにより抗菌活性を示す）

竹下敏一
田中直樹
浅香正博

小林

聡

乙第1253号 Ｒ 3.10.27 Efficacy and safety of eradication therapy for 竹 下 敏 一
elderly patients with helicobacter pylori infec­
tion（高齢者に対するヘリコバクター除菌療法の有効性と安全性について）

副島雄二
田中直樹
横山純二

渡邉隆之

乙第1254号 Ｒ 3.11.12 Tamoxifen resistance alters sensitivity to 5- 山 田 充 彦
fluorouracil in a subset of estrogen receptorpositive breast cancer（タモキシフェン耐性は
一部のエストロゲン受容体陽性乳癌の５-フル
オロウラシル感受性を変化させる）

小泉知展
平塚佐千枝
石川
孝

松尾

純

乙第1255号 Ｒ 4. 2.22 Detecting drug-drug interactions that increase 野見山哲生
the incidence of long QT syndrome using a
spontaneous reporting system（自発報告シス
テムを用いた，QT 延長の発現を助長する薬物
相互作用の検出）

今村
浩
内藤隆文
村井ユリ子

住𠮷愛里

乙第1256号 Ｒ 4. 3. 9 Role of linkage between cerebral activity and 川眞田樹人
baroreflex control of heart rate via central va­
sopressin V1a receptors in food-deprived mice
（マウス絶食時における脳活動と血圧反射連
関：中枢性バゾプレッシン V1a 受容体の役割）

駒津光久
山田充彦
鷹股
亮

No. 6, 2022407

審査学位論文要旨

Plantar incision with severe muscle injury can be a cause of long-lasting postsurgical painin the skin（重度の筋損傷を伴う足底切開は，皮膚の術後痛が遷延する原因となりうる）
吉

山

勇

樹

（論文の内容の要旨）

Ｐ群よりも有意に多かった。機械性刺激に対する逃避【背景】術後の痛みは，皮膚，筋膜，筋肉，末梢神経

閾値はＰ群，Ｍ群ともに低下したが，特に術後５～８などの組織損傷に起因する。足底切開による術後痛動

日目においてはＭ群の方がＰ群よりも有意に逃避閾値

物モデルでの痛みの機序は，組織損傷を誘発する物質が低かった。熱刺激に対する逃避潜時は，Ｐ群とＭ群を投与した動物モデルでの痛みの機序と異なることがの群間差はなかった。足底筋の wet/dry ratio は，術報告されている。しかし，足底切開モデルは痛みの期後４日目で両群において有意に増加し，特にＭ群でよ

間が短いなど，術後痛が遷延するヒトの特徴を完全にり強い浮腫がみられ，その浮腫はＭ群でのみ術後７日は反映していない。近年，皮膚切開よりも筋肉切開が目まで遷延した。HE 染色では，両群で術後４日目に

痛覚過敏の要因であることや，筋肉と神経の局所的な足底筋への炎症細胞浸潤がみられたが，Ｍ群の方がＰ

炎症が，慢性化する術後痛の原因の１つである可能性

群よりも浸潤細胞数は有意に多かった。７日目になるが示された。筋肉の強い損傷とその後の炎症は，皮膚と，Ｍ群の浸潤細胞数は大幅に減少し，両群間に有意の創治癒後も持続する可能性があり，術後痛の慢性化

差はなかった。

をもたらすかもしれない。本研究では，重度の筋損傷

フローサイトメトリーの分析で，足底筋への浸潤細が長期にわたる局所炎症を引き起こし，足底切開治癒

胞のほとんどは好中球やマクロファージなどの骨髄系後の皮膚の痛みを遷延させるかどうかを調査した。

細胞（CD45＋，CD11＋細胞）であることが示された。

【方法】250-300ｇの雄の Sprague Dawley ラットを使術後４日目の骨髄系細胞および非骨髄系細胞の数はＭ用した。セボフルラン麻酔下で足底に皮膚切開を加え，群の方がＰ群よりも多かったが，７日目では骨髄系細

足底筋切開（Plantar incision）群（以下Ｐ群）では，足胞と非骨髄系細胞の数が減少し，両群間に有意差はな

底筋に１cm の切開を加え閉創した。筋損傷（Muscle

かった。脊髄後角浅層および深層における c-Fos 陽

injury）群（以下Ｍ群）では同様に皮膚切開を行い，性ニューロンの数は，術後６時間で両群において増加

液体窒素（－190 ℃）で冷却した直径２mm のスチーした。術後24時間では，c-Fos 陽性ニューロンは浅層

ルバーを足底筋に３分あてて凍結筋損傷を引き起こし，においてほぼ消失したが，深層では両群とも Sham閉創した。Sham 群は麻酔だけを施行した。行動学的群よりも多かった。しかし，術後６時間および24時間

解析として，後肢の自発痛関連行動，機械性痛覚過敏

いずれにおいてもＰ群とＭ群の差はみられなかった。

（フォンフライフィラメント刺激に対する逃避閾値），

脊髄後角における Iba-1の発現は，Ｐ群において術後

熱性痛覚過敏（放射熱刺激による逃避潜時）を評価し４日目に増加し，７日目に Sham 群と同等に減少した。

た。筋切開や筋損傷による浮腫や炎症の評価のため，Ｍ群では，Ｐ群よりも，術後４日目ならびに７日目の術後４および７日目の足底筋を採取し，湿乾重量比

いずれにおいても Iba-1の発現が有意に増加し，術後（wet/dry ratio）やヘマトキシリン・エオジン染色（HE７日目までミクログリアが活性化していた。

染色）による白血球数の計測，フローサイトメトリー【考察】術後４日目に，炎症性の機械性痛覚過敏に強分析による炎症細胞の分離を行った。筋切開や筋損傷く関与する骨髄系細胞がＰ群よりもＭ群で多く浸潤しが脊髄に及ぼす影響を解析するため，脊髄の L4/L5

たが，術後７日目の骨髄系細胞の数はＰ群とＭ群で同を採取して免疫組織化学的分析を行った。脊髄後角に等であったことから，Ｍ群の持続的な痛み行動は，炎おける侵害受容ニューロンの活性化マーカーとして症の持続だけでは説明できないことが明らかとなった。

c-Fos を用い，神経炎症の評価として活性化ミクログ

一方で脊髄での Iba-1の発現は，Ｍ群の方がＰ群よりリアのマーカーである Ionized calcium binding adapterも有意に強く長く増加しており，自発痛関連行動およprotein 1（以下 Iba-1）を用いて染色した。

び機械性痛覚過敏の推移と一致した。このことから，【結果】自発痛関連行動は，Ｐ群，Ｍ群とも Sham 群

筋損傷後の持続的な痛みは，損傷部位の炎症の遷延でより増加し，術後３～７日目においては，Ｍ群の方がはなく，脊髄におけるミクログリアの活性化に起因す

408

信州医誌

Vol. 70

審査学位論文要旨

ることが示唆された。筋損傷による局所の強い炎症が群の方がＰ群よりも有意に強かった。

末梢神経の障害をもたらし，そこから分泌された炎症

３．熱性痛覚過敏は，Ｍ群とＰ群の群間差がなかった性メディエーターが末梢性感作を招き，脊髄神経の興４．足底筋の湿乾重量比は，術後４日目においてＭ群

奮性シナプス伝達が亢進し続けた結果，ミクログリア

でＰ群より大きく，その浮腫はＭ群でのみ術後７日の活性化が長期化したと考えられた。マクロファージ

目まで遷延した。

などの骨髄系細胞や炎症性メディエーターを薬理学的５．HE 染色では，術後４日目において，Ｍ群の方がに阻害することは，術後痛の新たな治療戦略となりうＰ群よりも足底筋へ浸潤する炎症細胞数が有意に多ると考えられるが，これらの細胞は創傷治癒に重要なかったが，７日目になると，Ｍ群の浸潤細胞数は大役割を果たすために注意が必要である。本研究は，さ幅に減少し，両群間に有意差はなかった。

まざまな組織が損傷して術後痛が遷延するという臨床６．フローサイトメトリーの分析では，術後４日目のに即した動物モデル開発の第一段階であったため，末骨髄系細胞および非骨髄系細胞の数はＭ群の方がＰ

梢組織の損傷や脊髄における検討は単純化されていた。

群よりも多かったが，７日目では骨髄系細胞と非骨今後は，より臨床に即した動物モデルの開発を行い，髄系細胞の数が減少し，両群間に有意差はなかった。

術後痛における末梢の局所炎症と中枢の神経炎症の関７．脊髄後角における c-Fos 陽性ニューロンの数は，係をより深く検討する必要がある。
（論文審査の結果の要旨）

術後６時間および24時間いずれにおいても両群間に差はみられなかった。

術後痛において，皮膚切開よりも筋肉切開が痛覚過８．脊髄後角における Iba-1の発現は，Ｍ群ではＰ群

敏の重要な因子であることが示されている。また，筋よりも，術後４日目ならびに７日目のいずれにおい肉と神経の局所的な炎症が，慢性化する術後痛の原因ても Iba-1の発現が有意に増加し，術後７日目までの１つである可能性も示された。筋肉の強い損傷とそ

ミクログリアの活性化がみられた。

の後の炎症は，皮膚の創治癒後も持続する可能性があ以上より，Ｍ群の持続的な痛み行動は，筋損傷後のり，術後痛の慢性化をもたらしているかもしれない。

炎症の持続だけでは説明できないことが明らかとなっそこで吉山は，重度の筋損傷が長期にわたる局所炎症た。一方で脊髄での Iba-1の発現は，Ｍ群の方がＰ群を引き起こすのか，さらに足底切開治癒後の皮膚の痛よりも有意に強く長く増加しており，自発痛関連行動

みを遷延させるかどうか調査した。

および機械性痛覚過敏の推移と一致した。このことか凍結による足底筋損傷モデル（Ｍ群）を，これまで

ら，筋損傷後の持続的な痛みは，損傷部位の炎症の遷の足底筋切開モデル（Ｐ群）と比較検討することを目延ではなく，脊髄におけるミクログリアの活性化に起的とした。行動学的解析（自発痛関連行動の観察，機因することが示唆された。筋損傷による局所の強い炎械性および熱性痛覚過敏の計測），浮腫・炎症の評価

症が末梢神経の障害をもたらし，そこから分泌された（湿乾重量比，HE 染色，フローサイトメトリー），脊髄

炎症性メディエーターが末梢性感作を招き，脊髄神経

免疫組織学的分析（脊髄後角の c-Fos 陽性細胞およびの興奮性シナプス伝達が亢進し続けた結果，ミクログ

活性化ミクログリア）を行った。

リアの活性化が長期化したと考えられた。この知見は，その結果，吉山は以下の成績を得た。
１．自発痛関連行動は，術後３～７日目において，Ｍ群の方がＰ群よりも有意に多かった。

術後痛の新たな治療戦略のターゲットとなりうる。
したがって，主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

２．機械性痛覚過敏は，術後５～８日目において，Ｍ

No. 6, 2022409

審査学位論文要旨

Effects of 5-aminolevulinic acid with iron supplementation on respiratory responses to graded
cycling and interval walking training achievement in older women over 75 yrs（後期高齢
女性における５-アミノレブリン酸摂取が自転車による運動負荷漸増時の呼吸応答とインター
バル速歩トレーニング量に与える影響）
市

原

靖

子

（論文の内容の要旨）

CNT 条件ではこれらの応答の抑制を認めなかった【背景と目的】加齢に伴う身体機能の低下や病気を予（ す べ て P＞0.46 ）。 さ ら に ，ALA＋SFC 条 件 で は防するためには，一定強度以上の運動トレーニングを

CNT 条件と比較して，インターバル速歩時の速歩エネ実施する必要がある。しかし，加齢による体力の低下

ルギー消費量と速歩時間がそれぞれ25 ％（P＝0.032），

によって生じる身体的および心理的な障壁は，高齢者21 ％（P＝0.022）上昇したが日々の運動トレーニングを実施することを妨げてい【結論】以上より，ALA＋SFC サプリメント摂取は75る可能性がある。一方，ヘムの前駆体である５- アミ

歳以上の高齢女性における有酸素運動能を改善するこ

ノレブリン酸（ALA）摂取はミトコンドリア機能をと，これにより速歩トレーニング量を増加させること改善することが報告されている。また当研究室では，が示唆された。

運動トレーニングを継続している前期高齢女性におい（論文審査の結果の要旨）て，ALA とその効果を増強させるクエン酸第一鉄ナ

加齢に伴う身体機能の低下や病気を予防するためにトリウム（SFC）の摂取が，有酸素運動能を改善し，は，一定強度以上の運動トレーニングを実施する必要

運動トレーニング量を増加させることを報告した。しがある。しかし，加齢による体力の低下によって生じ

かし，運動習慣のない後期高齢者における効果は不明

る身体的および心理的な障壁は，高齢者が日々の運動である。そこで，今回，ALA＋SFC の摂取は，運動トレーニングを実施することを妨げている可能性があ

習慣のない後期高齢女性においても有酸素運動能を改る。一方，ヘムの前駆体である5-アミノレブリン酸

善し，自発的な運動トレーニング量を増加させるか否（ALA）摂取はミトコンドリア機能を改善することがかを検証した。

報告されている。また当研究室では，運動トレーニン【方法】本研究は，プラセボ対照の二重盲検クロス

グを継続している前期高齢女性において，ALA とそのオーバーデザインを用いて実施した。運動習慣のない効果を増強させるクエン酸第一鉄ナトリウム（SFC）

平均年齢78歳の女性15人を無作為に２群に分け，それの摂取が，有酸素運動能を改善し，運動トレーニング

ぞ れ ７ 日 間 ，ALA＋SFC（ そ れ ぞ れ 100 お よ び 115

量を増加させることを報告した。しかし，運動習慣のmg/日）またはプラセボサプリメント（CNT）を摂ない後期高齢者における効果は不明である。そこで，取させた。各試験中，被験者は個人の最高酸素摂取量

今回，ALA＋SFC の摂取は，運動習慣のない後期高の70 ％以上に相当する速歩と40 ％の普通歩きを３分

齢女性においても有酸素運動能を改善し，自発的な運

間ずつ交互に繰り返すインターバル速歩トレーニング

動トレーニング量を増加させるか否かを検証した。

を実施した。その後，12日間のウォッシュアウト期間

本研究は，プラセボ対照の二重盲検クロスオーバーを置き，摂取条件を入れ替え，同様の試験を行った。

デザインを用いて実施した。運動習慣のない平均年齢

各試験の前後に自転車エルゴメータを用いて運動負荷

78歳の女性15人を無作為に２群に分け，それぞれ７日

漸増テストを行い，この際の酸素摂取量（VO2 ），二間，ALA＋SFC またはプラセボサプリメント（CNT）

酸化炭素排出量（VCO2 ），血漿乳酸濃度（［Lac ］p ）を摂取させた。各試験中，被験者は個人の最高酸素摂を測定した。さらにサプリメント摂取期間中にイン取量の70 ％以上に相当する速歩と40 ％の普通歩きを

ターバル速歩時の運動強度を携帯型加速度計で測定し３分間ずつ交互に繰り返すインターバル速歩トレーニた。

ングを実施した。その後，12日間のウォッシュアウト【結果】ALA＋SFC 条件では，自転車による運動負荷

期間を置き，摂取条件を入れ替え，同様の試験を行っ漸増時の VO2 と VCO2 の増加が抑制され（共に P＜た。各試験の前後に自転車エルゴメータを用いて運動－－

0.01），［Lac ］。一方，
p が13 ％減少した（P＝0.012）
410

負荷漸増テストを行い，この際の酸素摂取量（VO2），
信州医誌

Vol. 70

審査学位論文要旨

二酸化炭素排出量（VCO2），血漿乳酸濃度（［Lac－］p）

間がそれぞれ25 ％（P＝0.032），21 ％（P＝0.022）を測定した。さらにサプリメント摂取期間中にイン上昇した

ターバル速歩時の運動強度を携帯型加速度計で測定しこれらの結果より，ALA＋SFC サプリメント摂取は75歳以上の高齢女性における有酸素運動能を改善すた。

ること，これにより速歩トレーニング量を増加させる

その結果，次のような結論を得た。
１．ALA＋SFC 条件では，自転車による運動負荷漸ことが示唆された。本研究結果は運動習慣のない後期

増時の VO2 と VCO2 の増加が抑制され（共に P＜

高齢者において，ALA＋SFC 摂取が運動の導入に有

－

0.01）
，［Lac ］。
p が13 ％減少した（P＝0.012）

効であることを示すものであり，主査，副査は一致し

２．ALA＋SFC 条件では CNT 条件と比較して，イて本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

ンターバル速歩時の速歩エネルギー消費量と速歩時

Cholestenone functions as an antibiotic against Helicobacter pylori by inhibiting biosynthesisof the cell wall component CGL（コレステノンはピロリ菌の細胞壁成分である CGL の生合成を阻害することにより抗菌活性を示す）
小

林

惇

一

（論文の内容の要旨）

穴プレートで４日間，35 ℃，15 ％ CO2の条件下で本【背景と目的】Helicobacter pylori（H. pylori）は胃癌培養を行った。菌量は600 nm における吸光度で測定の起因菌で，世界人口の約半数が感染している。胃癌した。また，光学顕微鏡下における菌の形態観察もの予防を目的に除菌治療が行われており，現在はプロ行った。次に CGL を含む脂質分画を評価するため，トンポンプ阻害薬とクラリスロマイシンやアモキシシ

薄層クロマトグラフィー並びに抗 CGL 抗体を用いたリンなどの抗生剤が使用されている。しかしながら，免疫染色を行った。最後にマウスを用いた感染実験と

H. pylori の薬剤耐性，特にクラリスロマイシンの耐して，５週齢の C57BL/6マウス（n＝54）に H. pylori性が問題となり，今後は除菌治療の成功率は低下する

SS1株（３×107個×２回投与）を感染させ，コレステ

ことが予想される。

ノン（0.5 ％ w/w）を含む食餌を与えた群と含まな

H. pylori は細胞壁に cholesteryl-α-D-glucopyrano­

い食餌を与えた群に分けて飼育した。４週間投与後，side（CGL） に代表される α-cholesteryl glucosides

胃粘膜を採取し，CGL 合成酵素をコードする αCgT

（αCGs）を含んでいる。CGL は H. pylori の生存に必須遺伝子の量を定量 PCR にて解析したと共に（n＝48），であり（Kawakubo et al, Science 305, 1003-1006, 2004），

HE 染色にて胃粘膜の形態を観察した（n＝６）
。

α-glucosyltransferase（αCgT）の作用により，コレ【結果】蛍光コレステロールを添加した培養アッセイ

ステロールの３位の水酸基にグルコースが α1,3結合すで，H. pylori（ATCC 43504）は外因性コレステロー

ることで生合成される。我々はコレステロールの３位

ルを取り込んでいることが確認された。続いてコレスにある水酸基は CGL の生合成に重要であると考え，

テロール，コレスタノール，β-シトステロール，コレ「コレステロールの３位の水酸基がケト基に置き換

ステノンを添加した培養アッセイではコレステノンでわったコレステロール類似物質であるコレステノンはのみ明らかに H. pylori（ATCC 43504）の増殖が抑

αCgT の基質となれず，その結果 CGL の生合成が阻制された。この結果は，臨床的に分離したクラリスロ

害されることで H. pylori に対して抗菌作用を示す」

マイシン耐性株である “2460” でも同様であった。まという仮説を立て，下記の解析を行った。

た，H. pylori の形態も螺旋状から球状に変化してい【方法】H. pylori として標準株である ATCC 43504，

た。150 μM コレステロール濃度下でコレステノンがクラリスロマイシン耐性臨床分離株“2460”，マウス

H. pylori の増殖を抑制できるか検討を行った。そのに感染可能な SS1株を用いた。菌の培養は10 ％不活

結果，コレステノンは濃度依存的に H. pylori の増殖化ウマ血清を添加した Brucella broth にて35 ℃，15 ％を抑制することが確認された。不活化ウマ血清，コレ

CO2 の条件下で24時間前培養を行った後，Mueller

ステロール， コレステノンを添加して培養した H.

Hinton broth に各種添加物を混じた培地を用いて96

pylori（ATCC 43504）から脂質成分を抽出し，薄層

No. 6, 2022411

審査学位論文要旨

クロマトグラフィーで分析した。ウマ血清の添加では各種コレステロールによる H. pylori の増殖能，形態

CGL とその誘導体である CAG と CPG が，コレステの変化を検討した。続いて，CGL を含む脂質分画をロールと培養した菌体では CGL と CAG が確認され評価するため， 薄層クロマトグラフィー並びに抗た。一方，コレステノンと培養した菌体では CGL とCGL 抗体を用いた免疫染色を行った。最後にマウス

CAG の減少が示され，さらに CGL の減少は抗 CGLを用いた感染実験として，５週齢の C57BL/6マウス

抗体を用いた免疫染色でも明らかであった。マウスをに H. pylori を感染させ，コレステノンを含む食餌を用いた感染実験で，コレステノン投与群はコレステノ

与えた群と含まない食餌を与えた群に分けて飼育した。

ン非投与群と比較して有意に感染菌数が減少しており，４週間投与後に胃粘膜を採取し，CGL 合成酵素を

コレステノンの経口投与による H. pylori の除菌効果コードする αCgT 遺伝子の量を定量 PCR にて解析しが確認された。また，HE 染色では形態学的にいずれたと共に，HE 染色にて胃粘膜の形態を観察した。
その結果，小林は次の結論を得た。

の群にも異常所見は認められなかった。
【結論】コレステノンはクラリスロマイシン耐性株も含めて H. pylori に対して抗菌活性を示すことが認め

１．H. pylori は外因性のコレステロールを利用していることが確認された。

られた。コレステノンは安全な物質と考えられ，CGL

２．コレステロールの３位がケトン基に置き換わったの生合成を阻害するという従来の抗菌剤とは異なる作

コレステノンは，H. pylori の増殖を抑制し，形態

用機序で抗菌作用を示すことから，ピロリ菌に対するも球状に変化させた。また，コレステロールの存在

新たな抗菌薬となる可能性がある。

下でも，コレステノンは用量依存的に増殖を抑制し（論文審査の結果の要旨）た。

Helicobacter pylori（H. pylori）は胃癌などの原因とされ，除菌療法が施行されている。一方で除菌療法は不完全であり，H. pylori の耐性化により更なる除菌率の低下が危惧される。H. pylori は細胞壁に cho­
lesteryl-α-D-glucopyranoside（CGL）を含んでおり，３．２．の結果はクラリスロマイシン耐性株でも同様であった。
４．コレステノンで培養した H. pylori において，CGLの合成が低下していた。
５．コレステノンを経口投与されたマウスでは，H.

CGL は H. pylori の生存に必須である。CGL はコレ

pylori が除菌された。

ステロールの３位の水酸基にグルコースが α1,3結合す

これらの結果により，コレステノンはクラリスロマ

ることで生合成されるが，「コレステロールの３位のイシン耐性株も含めて H. pylori に対して抗菌活性を水酸基がケトン基に置き換わったコレステロール類似示すことが認められた。コレステノンは安全な物質と物質であるコレステノンは αCgT の基質となれず，考えられており，CGL の生合成を阻害するという従その結果 CGL の生合成が阻害されることで H. pylori

来の抗菌剤とは異なる作用機序で抗菌作用を示すことに対して抗菌作用を示す」という仮説を立て，実験をから，H. pylori に対する新たな抗菌薬となる可能性

行った。

がある。

各種コレステロール類による H. pylori の培養アッセイを行い，H. pylori のコレステロール取り込みや主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

Efficacy and safety of eradication therapy for elderly patients with helicobacter pylori infection（高齢者に対するヘリコバクター除菌療法の有効性と安全性について）
小林（論文の内容の要旨）

聡されていないため，今回，高齢者に対する H. pylori【背景と目的】Helicobacter pylori（H. pylori）は慢性除菌療法の有効性と安全性を検討した。

胃炎，胃十二指腸潰瘍，胃癌，MALT リンパ腫と関【方法】2013年１月から2017年12月に北信総合病院で連する最も一般的な細菌であり，治療として除菌療法がH. pylori 除菌療法を施行した1,276名を対象として後広く行われている。成人では除菌療法の有害事象は軽方視的観察研究を実施した。データが不足している５度で頻度は少ないと報告されているが高齢者では検討名を除外した1,271名について65歳未満を若年群，65

412

信州医誌

Vol. 70

審査学位論文要旨

歳から74歳を高齢群，75歳以上を超高齢群と３群に分は少ないと報告されているが高齢者では検討されていけて検討を行った。血清抗体価，尿素呼気試験，便中ないため，今回，高齢者に対する H. pylori 除菌療法

抗原検査，病理組織学検査のいずれかで陽性と判定さの有効性と安全性を検討した。2013年１月から2017年

れたものを H. pylori 感染と診断した。全症例で除菌

12月に北信総合病院で H. pylori 除菌療法を施行した

療法前に上部消化管内視鏡検査を行った。治療レジメ

1,271名を後ろ向きに解析した。65歳未満を若年群，ンは３剤併用療法で，１次除菌を施行し４から８週間

65歳から74歳を高齢群，75歳以上を超高齢群と３群に後に尿素呼気試験を行い，陽性と判定された場合は２分けて検討を行った。血清抗体価，尿素呼気試験，便次除菌を施行した。尿素呼気試験で治療効果を判定し中抗原検査，病理組織学検査のいずれかで陽性と判定た。有害事象の有無，内容についてカルテベースで確されたものを H. pylori 感染と診断した。全症例で除認した。

菌療法前に上部消化管内視鏡検査を行った。治療レジ【結果】対象患者1,271名の年齢中央値は61歳，男性がメンは３剤併用療法で，１次除菌を施行し４から８週730名であった。除菌療法を施行した背景疾患として間後に尿素呼気試験を行い，陽性と判定された場合は慢性胃炎77.0 ％，胃十二指腸潰瘍16.4 ％，胃癌治療

２次除菌を施行した。尿素呼気試験で治療効果を判定

後5.4 ％であった。１次除菌施行1133名中，除菌成功した。有害事象の有無，内容をカルテベースで確認し率は92.1 ％，有害事象発現率は9.1 ％，２次除菌施行

た。

146名中，除菌成功率は84.2 ％，有害事象発現率は8.9％であった。有害事象の内訳としては下痢が51.7 ％，皮疹12.9 ％，便秘7.8 ％を認めた。14名は皮疹のため，高齢群（347名），
治療を中断した。若年群（791名）
超高齢群（133名）の３群における除菌療法について検討すると超高齢群は他の２群と比較して慢性胃炎に対する施行率が有意に低く，胃十二指腸潰瘍と胃癌治療後に対する施行率が高かった。除菌成功率，有害事象発現率に違いは認めなかった。

その結果，小林は次の結論を得た。
１．除菌理由は慢性胃炎77.0 ％，胃十二指腸潰瘍16.4％，胃癌治療後5.4 ％であった。
２．１次除菌を施行した1,133名中，除菌成功率は92.1％，有害事象発現率は9.1 ％であった。
３．２次除菌を施行した146名中，除菌成功率は84.2％，有害事象発現率は8.9 ％であった。
４．有害事象は下痢51.7 ％，皮疹12.9 ％，便秘7.8 ％であった。14名は皮疹のため治療を中断した。

【考察】超高齢者は若年者と比較して除菌成功率，有５．超高齢群は他の２群と比較して慢性胃炎に対する

害事象発現率に有意差が無いことから高齢者に対する施行率が有意に低く，胃十二指腸潰瘍と胃癌治療後

H. pylori 除菌療法は有効で安全であることが示唆さに対する施行率が高かった。

れた。一方，超高齢者では慢性胃炎に対する除菌療法

６．３群間で治療レジメンや有害事象発現率，除菌成の施行率が少ないことから有害事象の危険性を懸念し功率には有意差を認めなかった。

て除菌療法を導入されていない可能性が明らかとなっ以上より，H. pylori 感染症に対する３剤併用療法

た。また，H. pylori の感染経路はまだ完全には分かっ

は高齢者にも有効で安全であることが判明した。超高ていないが家族内感染の報告もある。拡大家族では超齢者に対しては，臨床医が有害事象の危険性が高いと高齢者にも除菌療法を行うことで，小児への感染を防判断して処方を躊躇している可能性が考えられるが，止できる可能性がある。

本研究の結果は75歳以上でも治療を差し控える必要は【結論】H. pylori 感染症に対する３剤併用療法は高齢ないことを示唆している。H. pylori の感染経路はま者にも有効で安全である。

だ完全には分かっていないが，家族内感染の報告もあ（論文審査の結果の要旨）
Helicobacter pylori（H. pylori）は慢性胃炎，胃十二指腸潰瘍，胃癌，MALT リンパ腫と関連する最も一般的な細菌であり，治療として除菌療法が広く行わる。拡大家族では超高齢者にも除菌療法を行うことで，小児への感染を防止できる可能性がある。
よって，主査，副査は一致して，本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

れている。成人では除菌療法の有害事象は軽度で頻度

No. 6, 2022413

審査学位論文要旨

Tamoxifen resistance alters sensitivity to 5-fluorouracil in a subset of estrogen receptorpositive breast cancer（タモキシフェン耐性は一部のエストロゲン受容体陽性乳癌の５-フル
オロウラシル感受性を変化させる）
渡

邉

隆

之

（論文の内容の要旨）

5-FU の活性代謝物であるフルオロデオキシウリジン【背景と目的】エストロゲン受容体（ER）陽性再発乳（FdUrd）が増加し，DPD により産生される２-フル癌の治療では，内分泌療法または化学療法による逐次

オロ-β-アラニン（FBAL）が減少しており，TS の代治療が行われる。しかし，ER 陽性乳癌に対する長期

謝経路が活性化されていることが確認できた。

間の内分泌療法が，その後に用いられる化学療法剤に続いて，DPYD mRNA 発現低下の機序を解析する

対する感受性にどの様に影響するかを調べた研究は少ため，DPYD 遺伝子のプロモーター活性を luciferase

ない。先行して行った内分泌療法が化学療法剤に対す

reporter assay を 用 い て 解 析 し た と こ ろ ，DPYD

る感受性を変化させるかを解析し，内分泌療法抵抗性

mRNA のプロモーター活性は，MCF7に比べ MCF7/

乳癌の個別化治療に有用なバイオマーカーを探索する

T で有意に上昇していた。そこで，DPYD mRNA のために，３種類の ER 陽性乳癌細胞株（T47D，MCF7，

プロモーター活性の調節にメチル化が関与している可BT474）でタモキシフェン（TAM）耐性株（T47D/T，

能性を考え，脱メチル化剤５-アザシチジンで MCF7

MCF7/T，BT474/T）を樹立し，化学療法剤に対すと MCF7/T を処理した後，DPYD mRNA 発現を解る感受性を in vitro および in vivo で解析した。

析したところ，MCF7では1.2倍，MCF7/T では8.6【方法と結果】ER 陽性乳癌細胞株（T47D，MCF7，BT474）

倍の DPYD mRNA 発現の増加が認められた。さらに，から TAM 耐性株（T47D/T，MCF7/T，BT474/T）

５-アザシチジン処理により MCF7/T の5-FU 感受性を樹立し，これらの細胞の５-フルオロウラシル（5-の低下が認められたことから，MCF7/T では DPYDFU），パクリタキセル，ドキソルビシンに対する感受mRNA のプロモーター領域のメチル化が亢進してお性を WST アッセイを用いて解析した。また，薬剤にり，これが5-FU 感受性増加に部分的に関与している

よ り 誘 導 さ れ る ア ポ ト ー シ ス の 定 量 的 解 析 を Cellと考えられた。また，3’-UTR luciferase assay を用い

Death Detection ELISA plus を用いて行った。これた解析で，MCF7/T では親株に比し DPYD 3’-UTR

らの解析で， 親株に比べ MCF7/T では5-FU 感受luciferase 活性が有意に低下しており，miRNA によ

性 の 15 倍 の 増 加 を 認 め た 。 そ こ で ，5-FU の 代 謝

る転写後調節も MCF7/T の DPYD mRNA 発現の低経路に関与する酵素に着目し，それぞれの細胞株の下に関与している可能性が示唆された。

チミジンシンターゼ（thymidine synthase，TS），チ

さらに，MCF7と MCF7/T を17β-エストラジオー

ミジンホスホリラーゼ（thymidine phosphorylase，

ルを投与したヌードマウスの皮下に移植し xenograftTP），およびジヒドロピリミジンデヒドロゲナーゼ（dihy­

model を作成し，5-FU のプロドラッグであるカペシ

dropyrimidine dehydrogenase，DPD/DPYD gene）

タビンの経口投与を行ったところ，MCF7/T ではの mRNA 発現を RT-PCR 法で解析したところ，各MCF7親株に比べ有意な腫瘍縮小が認められ，5-FU細胞株の TAM 耐性株では親株に比し TS mRNA 発

感受性上昇が in vivo でも認められた。また，マウス

現の有意な上昇を認め，また MCF7では TAM 耐性

皮下で形成された腫瘍の免疫組織染色で，MCF7腫瘍

株で DPYD mRNA 発現の有意な低下を認めた。

に比べ MCF7/T 腫瘍での DPD 発現の低下が確認でMCF7の5-FU 感受性に TS および DPD が関与してきた。

いることを確認するために，MCF7の TS と DPYD

【考察】今回の結果から，一部の ER 陽性乳癌細胞株を siRNA でノックダウンすると，DPYD のノックダ

では，内分泌療法により化学療法剤感受性が変化する

ウンにより MCF7の5-FU 感受性は増加した。また，可能性と，TAM 耐性になった乳癌に対して5-FU がマトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間型有効である可能性が示された。

質量分析法（MALDI-TOF MS）を用いて TS の代（論文審査の結果の要旨）

謝産物を定量したところ，MCF7/T では親株に比しエストロゲン受容体（ER）陽性再発乳癌の治療で

414

信州医誌

Vol. 70

審査学位論文要旨

は，内分泌療法または化学療法による逐次治療が行わ

reporter assay を用いて解析したところ，MCF7/T

れる。しかし，ER 陽性乳癌に対する長期間の内分泌で DPYD mRNA プロモーター活性が MCF7に比べ療法が，その後に用いられる化学療法剤に対する感受有意に上昇していることを認めた。DPYD mRNA性にどの様に影響するかを調べた研究は少ない。先行のプロモーター活性の調節にメチル化が関与していして行なった内分泌療法が化学療法剤に対する感受性

る可能性を考え，脱メチル化剤5-アザシチジンでを変化させるかを解析し，内分泌療法抵抗性乳癌の個MCF7と MCF7/T を処理した後，DPYD mRNA

別化治療に有用なバイオマーカーを探索するために，発現を解析したところ，MCF7では1.2倍，MCF7/

３種類の ER 陽性乳癌細胞株（T47D，MCF7，BT474）

T では8.6倍の DPYD mRNA 発現の増加を認めた。

でタモキシフェン（TAM）耐性株（T47D/T，MCF7/T，さらに，５-アザシチジン処理により MCF7/T のBT474/T）を樹立し，化学療法剤に対する感受性を5-FU 感受性の低下を認めたことから，MCF7/T で

in vitro および in vivo で解析した。

は DPYD mRNA のプロモーター領域のメチル化の
亢進が DPYD mRNA 発現低下と5-FU 感受性増加にその結果，渡邉は次の結論を得た。
１．WST 法での解析で，親株に比べ MCF7/T では部分的に関与していると考えられた。続いて miRNA
が関与している可能性を考え，3’-UTR luciferase assay

5-FU 感受性の15倍の増加を認めた。
２．Cell Death Detection ELISA plus を用いてアポを用いた解析を行い，MCF7/T では親株に比し DPYD

トーシスの定量的解析を行い，親株に比べ MCF7/

3’-UTR luciferase 活性が有意に低下しており，こT でアポトーシスの増加を認めた。

の結果から miRNA による転写後調節も MCF7/T の

３．5-FU の代謝酵素の mRNA 発現を RT-PCR 法で解析し，各細胞株の TAM 耐性株では親株に比しDPYD mRNA 発現の低下に関与している可能性が示唆された。

thymidylate synthase（TS）mRNA 発現の有意な７．MCF7と MCF7/T を17β-エストラジオールを上昇を認め，また MCF7では TAM 耐性株で dihy­投与したヌードマウスの皮下に移植し xenograft

dropyrimidine dehydrogenase（ DPD ）mRNA 発

model を作成し，5-FU のプロドラッグであるカペ

現の有意な低下を認めた。

シタビンの経口投与を行ったところ，MCF7/T で

４．MCF7の TS と DPYD の mRNA 発現を siRNAは MCF7親株に比べ有意な腫瘍縮小が認められ，でノックダウンすると，DPYD のノックダウンにより5-FU に対する感受性上昇が in vivo でも認められ

MCF7の5-FU 感受性は増加した。

た。また，マウス皮下で形成された腫瘍の免疫組織

５．マトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間

染色で，MCF7腫瘍に比べ MCF7/T 腫瘍での DPD

型質量分析法（MALDI-TOF MS）を用いて5-FU発現が低下していることが確認できた。

の代謝産物を定量し，MCF7/T では親株に比しこれらの結果から，一部の ER 陽性乳癌細胞では，5-FU の活性代謝物であるフルオロデオキシウリジ

内分泌療法により化学療法剤感受性が変化する可能性

ン（FdUrd）の増加と，DPD により産生される2-フと，TAM 耐性になった乳癌に対して5-FU が有効でルオロ-β-アラニン（FBAL）の減少を認め，5-FU のある可能性が示された。よって，主査，副査は一致し代謝経路が活性化されていることを確認した。

て本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

６．DPYD 遺伝子のプロモーター活性を luciferase

Detecting drug-drug interactions that increase the incidence of long QT syndrome using a
spontaneous reporting system（自発報告システムを用いた，QT 延長の発現を助長する薬物
相互作用の検出）松尾純（論文の内容の要旨）

序は， 心室再分極に関わる human ether-a-go-go-【背景・目的】薬剤性 QT 延長（diLQTS）は稀であ

related gene（hERG）チャネルを阻害することによるが，Torsade de pointes（TdP）と呼ばれる心室性ると考えられている。薬物相互作用が diLQTS のリ

不整脈を引き起こす重大な副作用である。その発生機スク因子であることが報告されており，薬物動態学的No. 6, 2022415

審査学位論文要旨

相互作用（PK）と薬力学的相互作用（PD）の両者がロルプロマジンの組合せは英国において併用禁忌に設関与すると考えられている。

定されていた。Lexicomp®の分類においてはベプリ

副作用自発報告システムは，市販後に発生した薬剤

ジルとクラリスロマイシンの組合せが併用禁忌に相当の副作用報告が集積されるデータベースで，製造販売する“X（avoid combination）”に分類されていた。
“D

後の安全性を評価するための情報源である。２剤以上（modify regimen）”に２通り，“C（monitor therapy）”の薬剤が副作用の被疑薬として報告されることもあるに３通り，“B（no action needed）”に４通りが該当ため，薬物相互作用により発生した副作用についても評した。

価することが可能である。本邦においては，医薬品医【考察】最も多くシグナル検出されたのは抗精神病薬

療機器総合機構が the Japanese Adverse Drug Eventと抗うつ薬の併用であった。両者はいずれも hERG

Report（JADER）を公開している。JADER を用い阻害作用を有する一方，一部の抗うつ薬は抗精神病薬

た我々の先行研究において，フルオロキノロン系抗菌の代謝を阻害することが報告されている。５組のうち，薬による diLQTS のリスクを上昇させる薬物相互作

オランザピンとフルボキサミンの組合せは PKPD 両用に着目し，ガレノキサシンとジソピラミドの併用が，方の機序で diLQTS に関与していると考えられた。

それぞれを単独で使用する場合と比べて diLQTS のアルツハイマー型認知症治療薬のドネペジルは hERG

発生リスクを上昇させる可能性を見出した。本邦の添を阻害することが示されており，４通りでシグナルが付文書において，一部のフルオロキノロン系抗菌薬は検出された。重大な副作用として diLQTS や TdP がジソピラミドと併用禁忌に設定されているが，ガレノ分かっているものの，他剤との併用による diLQTS

キサシンについての記載はなく，添付文書で注意喚起への注意喚起は記載がなく，相互作用による diLQTS

されていない薬剤の組合せについても注意が必要であにも注意が必要と考えられた。マクロライド系抗菌薬

ることが示唆された。そしてこれは，フルオロキノロのクラリスロマイシンは hERG 阻害作用に加えてン系抗菌薬以外の薬剤についても同様である可能性が

CYP3A4と p-糖タンパク質（p-gp）阻害作用も有し考えられる。

ており， シグナル検出された３組はいずれも PK，

本研究は，自発報告システムを用いて，diLQTS のPD が関与した相互作用と考えられた。このうちベプ

リスクを上昇させる可能性のある薬物相互作用を見出リジルとの併用は，Lexicomp®において“X（avoid

すことを目的とした。

combination）”に分類されていたが，本邦の添付文書【方法】2004年４月～2020年４月の間に JADER ににおける注意喚起は併用注意に留まっていた。本組合報告された有害事象を解析対象とした。対象とする

せによる diLQTS は17例とシグナルが検出された31

有害事象は，MedDRA 標準検索式「トルサード

ド

通りの中で最も多く報告されていたことも配慮し，よポアント/QT 延長（狭域）」に属する基本語６語としり注意が必要な組合せである可能性が示された。ジゴ

た。安全性評価はシグナル指標である報告オッズ比キシンやメチルジゴキシンは p-gp を介した尿細管分（ROR）を用いた。２剤を同時に被疑薬として報告し泌により排泄されるため，p-gp 阻害作用を有する薬ている場合とそうでない場合，それぞれの ROR を算剤との併用には注意が必要であるが，本研究で検出さ出し，併用時の ROR の95 ％信頼区間（CI）の下限値

れた相互作用のうちアミオダロン，クラリスロマイシ

が，併用しない場合の ROR の95 ％CI の上限値を上ンがそれに該当していた。ジゴキシンの添付文書には回った場合，シグナルありと判断した。シグナルが検アミオダロン，クラリスロマイシンは併用注意に記載

出された組合せについて相互作用の発生機序を評価しされていたが，メチルジゴキシンの添付文書には記載た。また，各組合せが添付文書および Lexicomp®にがなかった。メチルジゴキシンもジゴキシンと同様のおいてどのように注意喚起されているか確認した。

薬理学的作用を有することから，同等の注意が必要と【結果】31組がシグナルありと判断された。抗精神病考えられた。

薬と抗うつ薬の組合せが５組と最も多かった。PD に【結論】JADER を用いて，diLQTS のリスクを上昇さ

よ る 相 互 作 用 が ８ 組 ，PKPD に よ る も の が 14 組 でせる可能性のある薬剤の組合せ31組を抽出することがあった。各国の添付文書において，併用禁忌または注できた。今後の評価によっては，今後より注意深い使意として注意喚起されていたのは日本，米国，英国で用が求められる可能性がある。

それぞれ16，17，21組であった。ハロペリドールとク
416

信州医誌

Vol. 70

審査学位論文要旨（論文審査の結果の要旨）

p-糖タンパク質（p-gp）阻害作用を介した相互作

薬剤性 QT 延長（diLQTS）は稀であるが，Torsade用が危惧されるが，本研究では４組に含まれていた。

de pointes（TdP）と呼ばれる心室性不整脈を引き起一方，これらの阻害作用がないか弱いとされている

こす重大な副作用である。human Ether-a-go-go Relat­

アジスロマイシンも２組に含まれていた。アジスロマ

ed Gene（hERG）チャネルを阻害する薬剤が，diLQTS

イシンと QT 延長作用を有する薬剤の併用は，米国，に関与すると考えられている。薬物相互作用が diLQTS

英国の添付文書では注意喚起されていたが，本邦ののリスク因子であることは報告されているが，具体的添付文書には記載がなかった。

にどの薬剤の併用がリスクを増大させるかは不明であ５．クラリスロマイシンとベプリジルの併用による17る。そこで松尾は，副作用自発報告システムである

件と，上記３同様最も症例数が多かった。本組合せ

the Japanese Adverse Drug Event Report（JADER）

は，相互作用評価ツールである Lexicomp®においを用いて，diLQTS のリスクを上昇させる可能性のあて，併用禁忌に相当する risk rating X に分類される薬物相互作用を見出すことを目的に検討を行った。

ていた。
６．ジゴキシンおよびメチルジゴキシンが３通りの組

その結果以下の成績を得た。

合せに含まれていた。ジゴキシンの添付文書にて

１．31組の併用において diLQTS のシグナルが検出

hERG チャネル阻害作用，p-gp 阻害作用を有するされた。
２．抗精神病薬と抗うつ薬の併用が５組検出された。

アミオダロン，クラリスロマイシンは併用注意に設

このうちオランザピンとフルボキサミンの併用は，定されていたが，メチルジゴキシンの添付文書には両者の添付文書にて併用注意に設定されていたが，記載がなかった。

残り４組はどちらか一方の薬剤の添付文書でしか注以上より，自発報告システムを用いて QT 延長のリスクを増大させる可能性のある薬物相互作用を31組意喚起されていなかった。
３．ハロペリドールとクロルプロマジンの併用による抽出することができた。これらの相互作用について，

diLQTS は17件と，症例数が最も多かった。この組

今後の検討によってはより注意深い使用が求められる合せは英国の添付文書にて併用禁忌に設定されてい可能性があると示された。したがって，主査，副査はたが，本邦では併用注意に留まっていた。

一致して本論文を学位論文として価値があるものと認

４．クラリスロマイシンは hERG 阻害作用や CYP3A，めた。

Role of linkage between cerebral activity and baroreflex control of heart rate via central
vasopressin V1a receptors in food-deprived mice（マウス絶食時における脳活動と血圧反射
連関：中枢性バゾプレッシン V1a 受容体の役割）
住𠮷（論文の内容の要旨）

愛里

受容体が関与しているのかについて検討した。

【背景と目的】我々は，マウスにおいて大脳皮質活動【方法】本研究では，動機づけ行動の一つである餌のの上昇が血圧反射を抑制すると，それをトリガーとし探索行動を引き起こす介入として絶食負荷を用いた。

て動脈圧が上昇し，自発運動を開始することを報告しすなわち，自由摂食，絶食，回復の条件それぞれを連た。さらに，この大脳皮質活動上昇後の一連の反応に続する３日間，暗 / 明サイクル（19時 /７時）の下で中枢のバゾプレッシン V1a 受容体が関与することを負荷した。餌は２日目の暗期開始１時間前の18時に取報告した。しかし，これらは数十秒単位の短期間の自り除き，３日目18時に再給餌した。このプロトコルを発運動時におけるもので，体内の恒常性維持のための

自由行動下の正常マウス（WT，n＝10），V1a 受容体

より持続的な行動である動機づけ行動時の脳活動と血遺伝子欠損マウス（KO，n＝９），正常マウスの孤束

圧反射の関係については不明であった。そこで，本研

核に V1a 受容体阻害剤を局所投与したマウス（BLK，究では，動機づけ行動時に脳活動上昇と血圧反射抑制n＝10）に対して行い，その間の脳活動（脳波電極），の連関は亢進するのか，もし亢進するならば，その反動脈血圧（動脈カテーテル），心拍数（動脈圧波形よ応に循環中枢（延髄孤束核）のバゾプレッシン V1aり）を連続測定し，さらにマウスの行動（CCD カメ

No. 6, 2022417

審査学位論文要旨ラ）を記録した。脳活動は，脳波の θ 波と δ 波のパ

体遺伝子欠損マウス（KO，n＝９），正常マウスの孤束ワー比（θ/δ）から4秒ごとに算出した。圧反射性血圧

核に V1a 受容体阻害剤を局所投与したマウス（BLK，調節は，血圧の自発性変化に対する心拍数変化の相互n＝10）を用いて検証を行った。本研究では，動機づ相関関数（R（t））から４秒ごとに評価した。さらに，け行動を高める方法として，最も一般的でかつ簡単な脳活動と血圧反射の連関を，θ/δ と R（t）の間の相互絶食負荷を用いた。すなわち，自由摂食，絶食，回復

相関関数から評価した。

のそれぞれの条件を負荷した連続３日間，明暗サイク【結果】WT マウスにおいて，脳活動と血圧反射の連ル（19時 /７時）下で測定を行った。その間の脳活動

関は，絶食日の暗期に亢進し（P＝0.006），回復日に自（脳波電極），動脈血圧（動脈カテーテル），心拍数（動由摂食日のレベルに戻った（P＝0.68）。同様に，WT

脈圧波形より）を連続測定し，さらにマウスの行動

マウスにおいて，餌の探索行動は，絶食日の暗期に（CCD カメラ）を記録した。脳活動は，脳波の θ 波と自由摂食日と比較して２倍高いレベルに増加し（P＝δ 波のパワー比（θ/δ）から４秒ごとに算出した。圧反0.0008），回復日に自由摂食日のレベルに戻った（P＝射性血圧調節は，血圧の自発性変化に対する心拍数変0.54）。しかし，絶食日におけるこれらの亢進は KO化の相互相関関数（R（t））から４秒ごとに評価した。

または BLK マウスのいずれにおいても認められな

さらに，脳活動と血圧反射の連関を，θ/δ と R（t）のかった（P＞0.11）。

間の相互相関関数から評価した。

【結論】絶食時の動機づけ行動である餌の探索行動のそして，次のような結果を得た。

増加に伴って脳活動上昇と血圧反射抑制の連関が亢進

１．WT マウスにおいて，脳活動と血圧反射の連関

することが示唆された。さらに，孤束核のバゾプレッ

は，自由摂食日と比べて絶食日暗期に亢進し（P＝シン V1a 受容体は，この中枢性血圧反射抑制を促進

0.006），回復日に自由摂食日のレベルに戻った（Pすることで，動機づけ行動の開始に重要な役割を果た＝0.68）。一方，V1a KO マウスにおいては，このしていることが示唆された。

反応が阻害されていた（P＝0.58）。

（論文審査の結果の要旨）

２．WT マウスにおいて，餌の探索行動は，絶食日

これまで大脳皮質活動の増加が血圧反射を抑制するの暗期に自由摂食日と比較して２倍高いレベルに増と，それをトリガーとして昇圧反応が起こり，マウス

加し（P＝0.0008），回復日に自由摂食日のレベル

は自発運動を開始することが報告されていた。さらにに戻った（P＝0.54）。一方，V1a KO マウスにおいこの大脳皮質活動上昇後の一連の反応に中枢のバゾプてはこの反応が阻害されていた（P＝0.29）。

レッシン V1a 受容体が関与していることが報告され

３．正常マウスの延髄孤束核に V1a 受容体阻害剤をていた。しかしながら，これらの報告は数十秒単位の局所投与した際 V1aBLK マウスでは，V1a KO マ

短期間の自発運動におけるもので，体内の恒常性維持

ウスの反応が再現できた（P＞0.11）。

のためのより持続的な行動である動機づけ行動時の脳これらの結果より，絶食時の動機づけ行動である餌

活動と血圧反射の関係については明らかになっていなの探索行動の増加に伴って脳活動上昇と血圧反射抑制

かった。

の連関が亢進することが示唆された。さらに延髄孤束

そこで，住𠮷は動機づけ行動時に脳活動上昇と血圧

核の V1a 受容体は，この中枢性血圧反射抑制を促進

反射抑制の連関は亢進するのか，もし亢進するならば，することで，動機づけ行動の開始に重要な役割を果た

その反応に循環中枢（延髄孤束核）のバゾプレッシン

していることが示唆された。

V1a 受容体が関与しているのか，について検討した。
自由行動下の正常マウス（WT，n＝10），V1a 受容

418

従って，主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

信州医誌

Vol. 70