4Proc Jpn Pig Vet Soc No.55 2009

藤崎優次郎賞受賞記念講演

わが国の AR における毒素原性 Pasteurella の重要性とトキソイド開発河合
 透、牛島稔大（財団法人化学及血清療法研究所）

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キーワード：、毒素原性 
、トキソイド＋ に集まりました。そして酢酸で鼻内を前処理が ＋ 単独感染でも強い鼻甲介萎縮することによって １を引き起こすことに成功しました。

はじめにこの度は、栄えある第１６回藤崎優次郎賞を賜わりまして心から感謝申し上げます。
私どもが財団法人化学及血清療法研究所に入所し以上より、私どもは、まずわが国の における＋の役割について野外調査し、続いてより効果の高い ワクチンを目指して開発に着手しました。て間もない頃、１９８７年４月に （ボルデテラ）生ワクチンが製造承認され、同年１２月に発売されました。

２

疫学的調査

しかし、翌年３月頃から本ワクチン接種豚に 症状の発生がみられた１
７道府県５９農場の豚鼻内からがみられるという症例が各地から寄せられたことから、分離した  の 型１００株、型１７株の計１１７株についその原因究明に当たったことが本研究のきっかけでして 産生性を検査したところ、型菌（）た。

が７２．
０％（１００株 中７２株）、 型 菌（）が５．
９％

萎縮性鼻炎（ ）は、伝染性の豚（１７株中１株）で、前者が高率に陽性でした（表１）。の慢性呼吸器病です。特徴的な病変は鼻甲介骨萎縮、（ボルデテラ）生ワクチン接種豚に 症状がみ顔面の変形（鼻曲り、狆面）で、眼下のアイパッチや＋が検出された宮崎県 農場において、られ ４腹分

激しいくしゃみによる鼻出血を伴うこともあります。の子豚について１〜９週齢まで経時的に臨床症状観察

本病の経済的重要性は、中等度から重度の 症状をおよび鼻内菌検査を実施しました。また、１１週齢時に呈した豚の発育が遅延することです。の病因は、大学時代の教科書で「 
によっと教わり、更に「感染試験の結果から て起こる」
および毒素原性  
が病原とみられる。前者は一次病原体として単独で を発病させ，後者は通例、二次病原体としてその を悪化させる」とされておりました。そのため、十分な （）対策を施すことが、毒素＋）対策にもなるという考えが主原性  （流でした。しかし、
１９７
５年にソ連の  は、 の一部の株に皮膚壊死毒素（）を産＋ 株が存在すること、この菌を長期間液体生する 

培養した濾液を用いてウサギと子豚に重篤な鼻甲介萎縮を再現できたこと、あるいは非毒素原性 −）の培養濾液では病変が形成されなかったこと（を報告しました。この発見を らが１９８０年の国際豚病学会で紹介したことで、多くの研究者達の注目⴫䋱䇭㪘㪩⊒↢ㄘ႐䈎䉌ಽ㔌䈚䈢㪧㪅㩷㫄㫌㫃㫋㫆㪺㫀㪻㪸 䈱Ქ⚛଻᦭⁁ᴫ⺞ᩏ䋨㪈㪐㪏㪏ᐕᐲ㪀㆏ᐭㄘ႐ᢙ ᬌ૕ᢙ㪧㫄㪂ᢙ䋯㪧㫄㪂ᢙ䋯⋵ฬ㪧㫄㪛ಽ㔌ᩣᢙ 㪧㫄㪘ಽ㔌ᩣᢙർᶏ㆏㪉㪏㪐㪈㪆㪊㪇㪆㪈㕍᫪㪉㪍㪉㪈㪆㪋㪈㪆㪈⑺↰㪉㪈㪇㪋㪆㪋㵺ጤᚻ㪊㪈㪈㪋㪆㪋㪇㪆㪈⍹Ꮉ㪈㪊㪋㪊㪆㪌㪇㪆㪈ජ⪲㪌㪉㪈㪋㪆㪋㵺ጘ㒂㪉㪐㪉㪆㪉㪇㪆㪈ᄢ㒋㪈㪌㪈㪆㪈㵺౓ᐶ㪉㪈㪈㪉㪆㪉㵺ᗲᇫ㪉㪈㪏㪉㪆㪌㪇㪆㪈⑔ጟ㪊㪊㪊㪉㪆㪉㵺ᄢಽ㪊㪊㪊㪋㪆㪋㪇㪆㪈㐳ፒ㪈㪌㵺㪇㪆㪈૒⾐㪈㪋㪏㪋㪈㪇㪆㪈㪊㵺ᾢᧄ㪏㪐㪈㪈㪉㪆㪈㪌㪇㪆㪍ችፒ㪋㪈㪈㪉㪈㪐㪆㪊㪇㪇㪆㪊㣮ఽፉ㪋㪐㪉㪈㪆㪉㵺ว⸘㪌㪐㪎㪉㪇㪎㪉㪆㪈㪇㪇㩿㪎㪉㪀㪈㪆㪈㪎㩿㪌㪅㪐㪀䋪ㆬᛯၭ࿾䈮䍗䍼䍻䍞䍭䍐䍚䍻㩿㪇㪅㪈㱘㪾㪆㫄㪣㪀㪃䍨䍼䍻䍘䍭䍐䍚䍻㩿㪉㪌㱘㪾㪆㫄㪣㪀ട䍡䍼䍕䍛䍢䍹䍎䍛䍛䍞䍎䍟ኙᄤ䉕↪䈇䈢䇯䋨‐ፉ㪃㩷േ↢දળળႎ㪃㩷㪉㪎㪑㪈㪇㪄㪈㪐㪃㩷㪈㪐㪐㪋䉋䉍৻ㇱᛮ☴䇮ᡷᄌ䈚䈢䋩 

豚病会報

No.55

2009

5は各腹の産子を４頭ずつ剖検して鼻甲介検査を行ない＋ の定着を助ける 以外の粘膜に障害を与えて ました。その結果、いずれの腹の産子も が 
 因子がわが国の野外に存在することが示に先行して感染しており、の初期症状であるく唆されました。

しゃみの発現が、母豚 ９
７の産子を除く３腹の産子

発生農場豚の毒素中和抗体保有状況を調査しまで 感染とほぼ同時期に観察されました（表２）。

した。 由来皮膚壊死毒（）中和試験にはまた、鼻甲介萎縮の程度も の感染程度に比例す牛胎子肺細胞を、
中和試験にはモルモット＋と のどちらが早期にる傾向がみられました。

（皮膚壊死反応）を用いました。その結果、中鼻内から検出されるかを調査したところ、本農場を含和抗体は母豚の２０．
９％（４０頭／１９１頭）が陽性を示しま＋ 先行が７農場、先め九州地区４県１０農場中、した（表３）。一方、肥育豚の陽性率は４カ月齢まで低行が２農場、両者同時が１農場で認められました。本下傾向を示したことから移行抗体と推察されました。

＋ は健康な鼻粘膜に定着できないことから、鼻来 
中和抗体は０．
２％（４３９頭中母豚１頭のみ）が⴫䋲䇭ችፒ⋵䌋ㄘ႐䈮䈍䈔䉎ሶ⽋䈱䌁䌒ㅊ〔⺞ᩏᲣ⽋㗄䇭⋡ᬌ૕ᢙㅳ䇭㦂㪸㪀㪹㪀ᐔဋ㥦↲੺⪜❗䉴䉮䉝㪉㪅㪍㫧㪇㪅㪎వⴕᗵᨴ㪌㪍㪎㪏㪐㩿㪙㪹㪆㪧㫄㪛㪀㪉㪊㪋㥦ౝ⩶ಽ㔌 㪧㫄㪛㪉䌾㪋㪄㪂㪂㪂㪂㪂 㪂㪂 㪂㪂㪂㪂㪂㪂㪂㪄㪧㫄㪛㪙㪹㪄㪄㪄㪄㪄㪂㪂㪂㪂 㪂㪂㪂⥃ᐥ∝⁁䈒䈚䉆䉂 㪈㪉䌾㪈㪊㪄㪄㪂㪂㪂㪂㪂㪂㪂㪂䍏䍐䍨䍽䍍䍟㪄㪄㪄㪂㪂㪄㪄㪄㪈㪇㪇 㥦ౝ⩶ಽ㔌 㪧㫄㪛㪉䌾㪋㪄㪄㪂㪂㪂㪂㪂 㪂㪂㪂㪂㪂㪂㪂㪄㪉㪅㪋㫧㪈㪅㪉㪧㫄㪛㪙㪹㪄㪄㪄㪄㪄㪄㪄㪄⥃ᐥ∝⁁䈒䈚䉆䉂㪏䌾㪐㪄㪄㪂㪄㪂㪂㪄㪄㪂㪂㪂䍏䍐䍨䍽䍍䍟㪄㪄㪄㪂㪂㪂㪂㪂㪄㪐㪎 㥦ౝ⩶ಽ㔌 䌐䌭䌄㪊䌾㪋㪄㪄㪄㪂㪄㪄㪄㪄㪉㪅㪇㫧㪇㪅㪍㪧㫄㪛䌂䌢㪄㪄㪄㪄㪄㪂㪂㪂㪂 㪂㪂㪂⥃ᐥ∝⁁䈒䈚䉆䉂㪈㪇㪄㪄㪄㪄㪄㪂㪂㪄㪄䍏䍐䍨䍽䍍䍟㪄㪄㪄㪄㪄㪄㪄㪄㪊㪏 㥦ౝ⩶ಽ㔌 㪧㫄㪛㪊䌾㪋㪄㪄㪂㪂㪄㪂㪂㪄㪄㪂㪂㪂㪈㪅㪐㫧㪇㪅㪐㪧㫄㪛㪙㪹㪄㪄㪄㪄㪄㪄㪄㪂㪂㪂㪄㪄㪄㪂㪄㪂㪂㪄⥃ᐥ∝⁁㪻㪀 䈒䈚䉆䉂 㪈㪇䌾㪈㪈䍏䍐䍨䍽䍍䍟㪄㪄㪄㪄㪄㪄㪄㪄㪸㪀㩷㔌੃䉕ታᣉ㪃㩷㪹㪀㩷Უ⽋䋱⣻ಽ䈱ሶ⽋⟲䈮䈧䈐䋴㗡䈝䈧䋱䋱ㅳ㦂ᤨ䈮೬ᬌ䈚䇮㪤㪸㪼㪻㪸䉌㩿㪈㪐㪍㪐㪀䈱ၮḰ䈮ᓥ䈦䈩Ꮐฝ䈱㥦↲੺䈮䈧䈇䈩䈠䉏䈡䉏್ቯ䈚䈢䋨䋰䋽ᱜᏱ䇮䋱䋽シᐲ䇮䋲䋽ਛ╬ᐲ䇮䋳䋽㊀ᐲ䇮䋴䋽ቢో⪜❗䋩㪃㩷㪺㪀㩷ᬌᩏ⽋䈱㓁ᕈ₸䈱್ቯၮḰ䋺㪖 䋽䋰䋦䇮㪂䋽䌾䋲䋵䋦䇮㪂㪂䋽䌾䋵䋰䋦䇮㪂㪂㪂䋽䌾䋷䋵䋦䇮㪂㪂㪂㪂䋽䌾䋱䋰䋰䋦㪃㩷㪻㪀㩷Უ⽋䋱⣻ಽ䈱ሶ⽋⟲䈮䋱䋰ಽ㑆䈝䈧ⷰኤ䈚䈢䇯䋨ᴡว䇮㪪㪺㫀㪅㩷㪩㪼㫇㪅㩷㪚㪿㪼㫄㫆㪄㪪㪼㫉㫆㪄㪫㪿㪼㫉㪸㫇㪅㩷㪩㪼㫊㪅㩷㪠㫅㫊㫋㪅㪃㩷㪍㪑㪉㪈㪄㪊㪎㪃㩷㪈㪐㪐㪎䉋䉍৻ㇱᛮ☴䇮ᡷᄌ䈚䈢㪀㪥㫆㪅㪐㪐

表３ Pm＋汚染農場における Pm-DNT 中和抗体保有状況（１９８８〜１９９２年、１４道府県３６農場）

6Proc Jpn Pig Vet Soc No.55 2009
つを６回鼻内投与しても正常のままでしたが、１０７個ず⴫䋴䇭㊁ᄖ⽋䈮䈍䈔䉎Bb-DNTਛ๺᛫૕଻᦭⁁ᴫ䋨1988-1995䋩
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00/15 (0)12/15 (80)

4/15(27)

10/42 (0)30/42 (71)

4/30(13)

20/31 (0)20/31 (65)9/28(32)

鼻甲介萎縮を引き起こすことは難しいのですが、前述

30/64 (0)36/64 (56)

16/47(34)＋がのとおり、野外では 
 因子によって 

4

0/50 (0)29/50 (58)19/44(43)50/56 (0)43/56 (77)34/53(64)60/28 (0)23/28 (82)

14/24(58)

先行感染がなくとも が起こり得ると考えられまし70/2 (0)2/2 (100)2/2(100)＋も の一次病原体た。そして のみならず、

? 1)
Უ⽋Bbಽ㔌ᢙ䋯ᬌᩏᢙ
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つを３回以上鼻内投与することにより、中等度以上の᦬㦂

0/46 (0)27/46 (59)

3/17(18)

1/105 (1.0)

97/105 (92)0/31(0)ว⸘
1/439 (0.2)
319/439 (73)105/291 (36)1䋩᦬㦂ਇ᣿
(Kawai T. et al., Proceedings of 14th IPCV Congress, Bologna, Italy, 1996) ＋ は のような鼻甲介病変が再現されました。

定着因子を保有していないため、単回投与で健康豚に定着しやすい環境が形成されており、必ずしも のであるとみなされました。

４

ワクチン

＋、はいずれも野生動物に広く分布している

陽性でした（表４）。以上より、毒素中和抗体検査はことから、農場から撲滅することは非常に困難です。

＋及び の感染時期を推察する血清学的検査法と
および 
は鼻甲介萎縮のみならず、主して妥当でないと考えられました。

要な 症状である増体抑制、鼻粘膜上皮細胞の破壊、肺炎などの影響をもたらします。このように は、

３

病因

ヒトのジフテリアや破傷風と同様に毒素性疾患である＋
冒頭で、鼻内を酢酸で前処理することにより、といえるため、・
両中和抗体を誘導単独感染でも強い鼻甲介萎縮を引き起こすことを紹介するトキソイドが最も効果的であると考えられます。

＋ の実験感染はわが国でも報告されてしました。

および はいずれも菌体外に分泌おりますが、単独感染による の再現に成功しておされずに細胞質内に蓄積される外毒素ですが、菌体かりませんでした。そこで、我々は国内で分離されたら抽出した粗毒素は抗毒素産生能がよくありません。

＋


７０株（長崎県

しかし、クロマトグラフィーなどによって精製度を上岩松茂博士より分与）を用い、豚の鼻内に複数回投与することによる鼻甲介への影響昇させることにより、抗体産生能が改善され（表５、６）、を検討しました。その結果、１日齢豚に 
７０株１０４個ずホルマリンによる無毒化もより容易になります。

表５ Pm-DNT の精製による免疫原性の改善



豚病会報

No.55

2009

7価を頂いた時に、大変感激したことが思い出されます。そして、ボルデテラ・パスツレラ混合トキソイドが１９９９年１月に市販され、母豚・子豚両方免疫に代わり母子免疫が主流になると、もはや は容易にコントロールできる疾病となり、野外で鼻曲りの豚を見かけることはほとんどなくなりました。このように、＋ が のワクチン効果の面からも 一次要因であることはもはや疑いの余地がなく、現在ではパスツレラトキソイ

ドが含まれる多数の ワクチンが使用されるようになりました。

は既報に従って精製できましたが、はしかし、の被害が減っても、現行の ワクチ


の優れた方法があるものの、工ら（１９９０）
ンはいずれも発症予防効果であるため、今後は更に効業スケールでの生産には応用困難でした。そこで、私果の高い、感染防御のできるワクチン開発が望まれまどもは 
が硫酸化多糖類に親和性を示すことす。また、豚用ワクチンは鶏用や牛用ワクチンに較べを見出し、その原理を応用した群アフィニティークロて混合化が遅れております。ワクチン注射の豚へのスマトグラフィー法を開発しました。本法は１ステップトレス軽減や省力化のためにも混合化が要望されてお
の方法に匹敵する比活性にまで 
ら（１９９０）り、本混合トキソイドは比較的混合しやすい利点があで 
を精製することができ、また回収率も良好ります。これからも、より安全で有効な日本のニーズでした。に合致したワクチンの開発を通じて、養豚業界の発展精製した ・
両トキソイドにアルミに少しでも貢献できればと思います。

ニウムゲルアジュバントを添加したボルデテラ・パス
ツレラ混合トキソイドは、菌体を含まないため安全が引用文献

高く、両 中和抗体を誘導できる世界で唯一のワ１）尾形クチンです。また、子豚能動免疫では移行抗体の影響を受けにくく、防御レベルの中和抗体が長期間維持されます。更に、
２．
７か月以上の間隔で追加免疫すると高いブースター効果が得られます。そのため、移行抗体学（１９７９）豚伝染性萎縮性鼻炎．
３６８−

３７１，獣医伝染病学，近代出版，東京．
２）中瀬安清（１９８７）萎縮性鼻炎．
４０７−４
１６，豚病学（３版），近代出版，東京．
３）

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が３〜４か月齢まで持続するので、母子免疫のみでも
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高い効果が期待できます。しかし、発育の遅い黒豚は   


出荷までの期間が長いので、パスツレラトキソイドによる子豚免疫の併用を推奨しています。

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    

５

最後に  


わが国では 死菌ワクチンが１９７
０年代半ばから使５）
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用されてきましたが、依然として の発生が多く、       

母豚・子豚両方免疫や抗菌剤の飼料添加、鼻内噴霧の    

併用など 対策に苦慮してきました。しかし、国内 
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で最初の トキソイドであるパスツレラトキソイド
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が１９９６年４月に市販されると、子豚に使用した臨床獣６）


医師から「トキソイド注射豚は発育が良好で色つやが   
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よく、肉眼的に非注射豚と区別できる程」との高い評