日本大学歯学部紀要 31, 17―24，2003

エナメル芽細胞における CBFA―1/Ranx 2 の局在
桑田 文幸1，5

山本 達也2

蓼沼 真樹子4

坂口豊3

稲毛 稔彦2，6

Localization of CBFA―1/Ranx 2 in ameloblasts during amelogenesis in rat incisor
Fumiyuki Kuwata1，5, Tatsuya Yamamoto2, Yutaka Sakaguchi3,
Makiko Tatenuma4 and Toshihiko Inage2，6Abstract
Mutations in Runx 2/CBFA―1（Core binding protein A―1）cause cleidocranial dysplasia（CCD）,
an autosomal dominant disorder in humans and mice characterized by defective bone formation.
CCD also results in dental defects. Runx 2 is a critical transcriptional regulator of osteoblast differentiation, and also has an important role for this molecule in the tooth formation. However, little is known about function in the ameloblasts of the maturation stage. Therefore, Runx 2 localizations of ameloblasts were investigate in ameloblasts during amelogenesis in rat incisor, by meansof immunohistochemistry. In the transitional stage, the ameloblasts and the outer enamel epithlium showed an intense immunoreactivity. The periodicaly stained bands were appeared in thematuration stage. The periodic bands were corresponded with the transitional region of
ameloblastic modulation. During the modulation, immunoreactivity was detected in the ruffled―
ended ameloblasts and the cells of pappilary layer. Runx 2 plays an important role in the differentiation of the amelobasts and enamel formation.
Key words : Runx 2, CBFA―1, amelogenesis, ameloblast, rat incisor緒

ることが同定された1）。また，その後の研究に

言

鎖 骨 頭 蓋 異 骨 症（Cleidocranial

よって CBFA―1 は骨芽細胞や軟骨芽細胞の分Dysplasia,

CCD）
は上顎や鎖骨の形成不全，過剰歯胚およ化を調節する重要な転写因子であることも明らかにされた2,3）。

び歯の萌出異常も生じる疾患である。近年，

CBFA―1 の mRNA 発現は BMP によって誘導

CCD 患者の転写因子 Core Binding Factor A―1

さ れ る と い う 報 告2，4〜9）が な さ れ，CBFA―1 はを code す る 染 色 体 の 塩 基（CBFA―1，Ranx 2）

BMP の下流にある骨芽細胞の分化における主配列に異常があり，CBFA―1 のヘテロ変異マウ

要な転写因子であることが明らかとなった。

スではヒトの CCD と一致した表現型を示した

BMP は骨組織のマトリックスに含まれるタンことから，CBFA―1 は CCD の原因遺伝子であ

パクで，異所性の骨形成能を有する10，11）。また，

1

Departments of 1Chemistry, 2Anatomy, 3Oral and Maxillofacial
Surgery and 4Pediatric Dentistry, Nihon University School of
Dentistry
Divisions of 5Oral and Graniomaxillofacial Research and 6Func-

日本大学歯学部化学教室
日本大学歯学部解剖学教室第 2 講座
3日本大学歯学部口腔外科学教室第 2 講座
4日本大学歯学部小児歯科学教室
5
日本大学歯学部総合歯学研究所顎口腔機能研究部門
26

日本大学歯学部総合歯学研究所機能形態部門〒101―8310 東京都千代田区神田駿河台 1―8―13（受理：2003 年 9 月 25 日）

tional Morphology, Dental Research Center, Nihon University
School of Dentistry
1―8―13 Kanda―Surugadai, Chiyoda―ku, Tokyo 101―8310, Japan― 17 ―

日本大学歯学部紀要 31, 17―24，2003

BMP は胎児の軟骨および骨組織の骨格形成おpolyclonal goat anti―human CBFA―1（Santa

よび成体における骨折治癒過程など，とくに硬Cruz組織形成における骨芽細胞の初期分化に重要な使用した他の抗体とそれぞれ交差反応を示さな働きを担っていることも報告されている

12〜16）。

17）

Biotechnology）
を用いた。この抗体は，

い こ と お よ び マ ウ ス CBFA―1 お よ び マ ウ ス

稲毛ら は臼歯を用いた CBFA―1 の免疫組織化

BMP―4 と交差反応を示すことを免疫 ブ ロ ッ

学的研究を行い，CBFA―1 が歯の形成過程におティング法で確認した。

いて上皮間葉の signal 伝達物質として重要な

2）免疫染色切片をキシレンで脱パラフィンし，0.3% H2O2役割を果たしていることを報告した。
および Vaahtokariら19）
Thesleff と Nieminen18），を含むメタノール溶液で 30 分間処理して内因

は，歯の形成過程においても様々な成長因子や性ペルオキシダーゼを不活化した。次いで，切転写因子が関与しており，BMP は上皮―間葉相

片は下降エタノールを用いて親水処理を行った

互作用における signal 伝達物質で，エナメル芽

のち，pH 7.4 の 10 mM PBS で 10 分間，2 回洗細胞や象牙芽細胞などの分化およびアポトーシ

浄した。さらに，非特異的反応を防止するため

スを調節していることを報告した。
成熟期では遠に 10％ ウサギ正常血清（ニチレイ）
で 20 分間処

心 端 に ruffle

理してブロッキングを行った。一次抗体を切片

border を 持 つ ruffled―ended

ameloblast（RA）と遠心端に ruffle

border を持た上で反応させたのち，Biotin 標識ウサギ抗ヤギ

（SA）
が交互に出
ない smooth―ended ameloblast

IgG 抗体（ニチレイ）
を反応させ た。そ の 後，現 する amelo-blastic modulation が み ら れ る。

Streptavidin―HRP（Perkin Elmer Life Sciences）

エナメル芽細胞が示す形態変化は何らかの因子を反応させて 37℃ で 1 時間，インキュベート

によって制御されていると考えられるが，どのし，さらに Biotin Tyramide（Perkin Elmer Life

ような因子であるか知られていない。そこで，

Sciences）
を 37℃ で 20 分間インキュベートし著者らは，ラット切歯の成熟期エナメル芽細胞

た。これによりラジカル化された Tyramide がに お け る CBFA―1 の 局 在 を 免 疫 組 織 化 学 に

HRP のごく近傍の組織やブロッキングタンパ

よって検索した。

クに結合して免疫反応を増感する。その後再び室温で Streptavidin―HRP で反応し，0.03% H2O2

材料および方法および 3 ’ 3 ― diaminobenzidine

1．組織学的方法

hydrochloride（DAB）を含む溶液で発色反応を行った。さら実験動物は体重約 40 g の Wistar 系ラットを使 用 し た。体 重 10 g 当 た り 0.5 mg の 割 合 でに，切片を 1% methyl green で核染色を行い，光顕下で免疫反応の局在を観察した。

Nembutal（Dainabot）
を投与して麻酔を行った

対照実験は一次抗体のかわりに PBS，ある

のち，左心室より約 3 分間灌流固定を行い，同いはウサギ正常血清を用いて同様に反応を行っ固定液でさらに 4℃，4 時間浸漬固定を行った。

た。

次いで，0.1 M

EDTA（pH 7.4）
で 3 週間脱灰を成行い，エタノールで脱水し，パラフィン包埋を績

成長端では，免疫反応が cervical loop の内エ行った。その後，切歯が矢状断される方向に切片を作製し，スライドガラスに貼付した。

ナメル上皮にみられる（第 1 図）
。免疫反応は細2．免疫組織化学的方法

胞質あるは核内にみられた。前エナメル芽細胞

1）抗体

では免疫反応は弱いが，エナメル質が形成され― 18 ―

エナメル芽細胞における CBFA―1/Ranx 2 の局在た分泌期エナメル芽細胞では免疫反応性は増加

る2，4〜9）。BMP における signal の伝達は BMP リ

した（第 2 図）

ガンドが BMP

receptor（BMPR）と結合するこ分泌終期ではエナメル芽細胞の遠心端のとにより開始される19）。BMP が receptor に結Tomes 突起が消失し，遠心端は平坦になる。

合すると，receptor がリン酸化され，活性化しこの後，エナメル芽細胞は背丈が低くなり，移た!型 receptor は Smad―1，―5，―8 をリン酸化

行エナメル芽細胞になる。移行期エナメル芽細し，Smad―4 と複合体を形成する。Smad の複胞およびその上部の乳頭層細胞にみられた（第合体は細胞質から核へ移行し，核の中で他の転

3 図）。

写因子や転写共役因子とともに標的遺伝子の発移行期以後，エナメル芽細胞はさらに背丈を現を誘導すると考えられている20，21）。

減じ成熟期エナメル芽細胞になる。成熟期でBMPR―IA お よ び IB は 機 能 が 異 な っ て お

は，遠心端に ruffle border を持つ ruffled―ended

り，in vitro の実験7）では，骨芽細胞あるいは脂ameloblast（RA）と遠心端に ruffle border を持た肪細胞に分化することが可能な 2 T 3 細胞に，

（SA）
が交互に出
ない smooth―ended ameloblast

BMP―2 を加えて培養を行った場合では，2 T 3

modulation”がみられる。

細胞は CBFA―1，アルカリホスファターゼ（Al-現する“ameloblastic

RA では terminal bar は基底端，SA では遠心端

kaline Phosphatase, ALPase）
および osteocalcinに位置している。成熟期では切端側に向かうにを合成することから BMPR―IB が骨芽細胞の分したがい，細胞内に ferritin 顆粒が増加し，pig-化に重要な signal を伝達していることを証明

mentation

した。

stage になる。移行期になると免疫近 年 の 報 告 で は，Zaidi ら22）は 活 性 化 し た

反応は，移行期エナメル芽細胞および乳頭層細Smad は CBFA―1 が存在する場合にのみ細胞の胞に反応が強かった。
成熟期の弱拡大像では，エナメル芽細胞層に

核内に留まることが可能であることを示した。

強い免疫反応を示す periodic band が観察されさらに，CBFA―1 の mRNA 発現は BMP―2，―4，

た（第 4 図）。banding は接合上皮に至る pigmen-―7 によって誘導されるという報告2，4〜9）がなされ

tationstage にもみられた。強拡大で観察するたことから，CBFA―1 は BMP と BMPR によっと，免疫反応は RA およびその上部の外エナメて mRNA の転写レベルが促進され，Smad をル上皮に強かった。SA の band では免疫反応介して核内で target 遺伝子の転写レベルを調は SA にはみられず，その上部の乳頭層細胞お節しているものと考えられた。
骨芽細胞の分化の stage は，骨芽細胞の産生

よび外エナメル上皮に観察された。

考する基質タンパクによって推定されている23）。

察

骨芽細胞の前駆細胞は type I collagen, ALPase

CBFA―1 は collagen などの細胞外マトリック

および osteonectin を発現する。これより分化

スの 5’領域に結合領域を持つことから，骨芽細の 進 ん だ stage の 前 骨 芽 細 胞 で は osteopon-胞の分化を調節する重要な転写因子であること

tin，さらに BSP を産生する。成熟した骨芽細が報告されている2，3）。しかし，硬組織形成にお胞では，osteocalcin を産生し，骨芽細胞は分

け る CBFA―1 の 役 割 は 充 分 に 知 ら れ て い な化が進行するにしたがい，異なった種類の細胞い。

外マトリックスを合成することが報告されてい8）

CBFA―1 の作用は TGF―β および BMP におる。従来の研究で，BMP は骨芽細胞の初期分

け る signaling と 密 接 な 関 係 を 持 っ て い化に深く関係 し て い る こ と が 報 告 さ れ て い― 19 ―

日本大学歯学部紀要 31, 17―24，2003

第 1 図 成長端

第 2 図 前エナメル芽細胞と分泌期エナメル芽細胞

第 3 図 分泌期エナメル芽細胞

第 4 図 成熟期初期のエナメル芽細胞

第 5 図 成熟期中期のエナメル芽細胞

第 6 図 成熟期後期のエナメル芽細胞― 20 ―

エナメル芽細胞における CBFA―1/Ranx 2 の局在る24〜26）。

で上皮・間葉の signaling

骨芽細胞の分化における CBFA―1 の機能は充分に解明されていない。CBFA―1 ホモ変異体
マウスではnetwork に関係しており，エナメル芽細胞の分化や形態形成に深く関係していると考えられた。

3，
27，
28〜30），膜性骨化や軟骨内骨化がみ

また，稲毛ら17）は臼歯を用いた CBFA―1 の免らないこと，および osteocalcin や osteopontin

疫組織化学的研究を行い，免疫反応は蕾状期のなどの骨マトリックスタンパク遺伝子の歯 堤 の 上 皮 細 胞，帽 状 期 歯 胚 で は primarymRNA を発現する成熟した骨芽細胞がみられ

enamel knot の上皮細胞と鐘状期歯胚では sec-

なかったことから，CBFA―1 は骨芽細胞の分ondary enamel knot の上皮細胞歯乳頭，分泌期

化，とくに成熟する時期で重要な役割を果たす

エナメル芽細胞および歯小嚢の細胞にみられ転写因子であることを示唆されている。また，

た。また，Hertwig 上皮鞘付近のエナメル芽細CBFA―1 ホモ変異体マウスでは頭蓋冠の膜内骨胞，セメント芽細胞，および歯小嚢の細胞に反発生する部位の間葉細胞で ALPase を発現して応がみられ，CBFA―1 は歯の形成過程だけではいたことから，分化のきわめて初期段階の骨芽なく，歯根および歯周組織の形成にも関与して細胞がみられることが報告された。しかし，いることが示唆された。このことから BMP お

4）

Tsuji ら は osteocalcin や osteopontin ノ ッ ク ア

よ び BMPR を 介 し て CBFA―1 に 伝 達 さ れ る

ウトマウスでは CBFA―1 の mRNA は発現してsignal は顎顔面の骨組織形成とその形態形成おいるが，成熟した時期の骨芽細胞が観察されたよび歯や歯周組織の形成に重要な役割を果たしことを報告した。この所見は CBFA―1 が骨芽ているものと考えた。

細胞の初期分化にも関係していることを強く示唆している。

これらの研究においてもエナメル芽細胞の分化，特に成熟期における研究は行われていな

ThesleffとNieminen17）, および Vaahtokariら18）

い。CBFA―1 の免疫反応はエナメル芽細胞の分は歯の形態形成において様々な成長因子や転写化の全 stage で観察された。この所見は CBFA因子が関与しており，enamel knot が BMP な―1 がエナメル質形成特にエナメル芽細胞の分どの成長因子の合成分泌を行い，歯の形態形成化に重要な役割を果たしていることを示していにおける signal 中心であると報告している。

る。移行期においては約 25％ のエナメル芽細歯 の 形 成 過 程 に お け る CBFA―1 の 研 究 は胞が死滅し，残りのエナメル芽細胞は成熟期にD’Souza ら5）の ISH を用いた研究によって詳細移行するために，再分化を行う。このように移に研究されている。CBFA―1 ホモ変異体マウス

行期において，エナメル芽細胞には劇的な変化

ではエナメル芽細胞および象牙芽細胞への分化が生じる。CBFA―1 はこの時期に生じるエナメ

はみられず，エナメル質や象牙質にも変形や減ル芽細胞は変化を調節しているものと考えられ形成がみられた。マウス臼歯における CBFA―1

た。

mRNA の発現は蕾状期と鐘状期初期の歯乳頭

成熟期においては ameloblastic

modulation

細胞に発現し，生後では分泌期エナメル芽細胞がみられる。このエナメル芽細胞の形態学的なに強く発現することを示した。また，器官培養

変化は様々な因子によって調節されていると考mRNA

えられるが，具体的な因子に関しては未だ同定の発現レベルはエナメル器の上皮細胞によってさ れ て い な い。CBFA―1 の 免 疫 反 応 は調節されていることが示された。したがって，

ameloblastic

CBFA―1 は歯の形成の開始期や初期の細胞分化

RA に一致して観察された。このことは CBFA―を用いた実験では，歯乳頭の CBFA―1― 21 ―

modulation で繰り返し出現する日本大学歯学部紀要 31, 17―24，2003

1 が RA の形態や形態維持に重要な役割を果た

ト研究），日本学術振興会科学研究費補助金およびしていることを示している。一方，SA には免

日本大学歯学部・学術フロンティア推進事業「顎疫反応はみられなかった。現在までの研究では口腔領域の構造・機能を基盤とした先端的歯科医

SA に特異的に現れる因子は同定されていな学研究」の一環として行った。

い。ameloblastic modulation を調節する因子に関して今後研究されることが要求される。

結

文

献

１）Mundlos S, Otto F, Mundlos C, Mulliken JB,
Aylsworth AS, Albright S, Lindhout D, Cole

論

WG,

Henn

W,

Knoll

JH ,

Owen

MJ ,

転写因子 Core Binding Factor A―1（CBFA―1,

Mertelsmann R, Zabel BU, Olsen BR.（1997）

Ranx 2）は鎖骨頭蓋異骨症の原因遺伝子である

Mutations involving the transcription factor

ことが報告され，骨形成のみならず歯の形成に

CBFA 1 cause cleidocranial dysplasia. Cell 89

おいても重要な機能を持つことが示唆されてい（5）, 773―779

る。しかし，エナメル質形成とくに成熟期形成２）Ducy P, Zhang R, Geoffroy V, Ridall AL,
Karsenty G.（1997）Osf 2/Cbfa 1 : a transcrip-

における機能は明らかにされていない。そこ

tional activator of osteoblast differentiation.

で，ラット切歯における CBFA―1 の局在を免
疫組織化学的方法を用いて検索を行い，以下のCell 89（5）, 747―754３）Komori T, Yagi H, Nomura S, Yamaguchi A,

結論を得た。

Sasaki K, Deguchi K, Shimizu Y, Bronson RT,

成長端では，免疫反応が cervical loop の内エ

Gao YH, Inada M, Sato M, Okamoto R, Kita-

ナメル上皮にみられた。エナメル質形成が開始

mura Y, Yoshiki S, Kishimoto T.（1997）Tar-

されると分泌期エナメル芽細胞に免疫反応性がgeted disruption of Cbfa 1 results in a complete増加した。免疫反応は細胞質あるいは核内に局

lack of bone formation owing to maturationalarrest of osteoblasts. Cell 89（5）, 755―764

在していた。移行期になると免疫反応は移行期
エナメル芽細胞およびその上部の乳頭層細胞に

４）Tsuji K, Ito Y, Noda M.（1998）Expression of
the PEBP 2 alphaA/AML 3/CBFA 1 gene isみられた。成熟期の弱拡大像では，エナメル芽

regulated by BMP 4/7 heterodimer and its

細胞層に強い免疫反応を示す periodic band がoverexpression suppresses type I collagen and

観察された。banding は接合上皮に至る pigmen-

osteocalcin gene expression in osteoblastic andtationnonosteoblastic mesenchymal cells. Bone 22

stage にもみられた。強拡大で観察すると，免疫反応は ruffle―ended ameloblast および（2）, 87―92

その上部の外エナメル上皮に強かった。smooth５）D’Souza RN, Aberg T, Gaikwad J, Cavender A,―ended ameloblast の band では免疫反応は SA

Owen M, Karsenty G, Thesleff I.（1999）Cbfa 1にはみられず，その上部の乳頭層細胞および外is required for epithelial―mesenchymal interac-

エナメル上皮に観察された。CBFA―1 はエナメ

tions regulating tooth development in mice.

ル質形成を通してエナメル芽細胞の分化に重要な役割を果たしているものと考えられた。

謝Development 126（13）, 2911―2920
６）Shen ZJ, Nakamoto T, Tsuji K, Nifuji A, Miyazono K, Komori T, Hirai H, Noda M.（2002）
Negative regulation of bone morphogenetic

辞protein/Smad signaling by Cas―interacting zinc
本研究は日本大学学術研究助成金（総合研究），
日本大学歯学部総合歯学研究所研究費（プロジェク― 22 ―

finger protein in osteoblasts. J Biol Chem. 277（33）, 29840―29846

エナメル芽細胞における CBFA―1/Ranx 2 の局在

７）Chen D, Ji X, Harris MA, Feng JQ, Karsenty

developing limb. Development 122（11）, 3557―

G, Celeste AJ, Rosen V, Mundy GR.（1998）

3566

Harris SE.Differential roles for bone morpho-

１６）Zou H, Wieser R, Massague J, Niswander L.

genetic protein（BMP）receptor type IB and（1997）Distinct roles of type I bone morphoge-

IA in differentiation and specification of mesen-

netic protein receptors in the formation andchymal precursor cells to osteoblast and adipo-

differentiation of cartilage. Genes Dev. 11（17）,cyte lineages. J Cell Biol 142（1）, 295―305

2191―2203

８）Ji C, Casinghino S, Chang DJ, Chen Y, Javed

１７）稲毛稔彦，蓼沼真樹子，山本達也，坂口豊，

A, Ito Y, Hiebert SW, Lian JB, Stein GS,

中田智子，佐藤吉則，寺門正昭，関和忠信，

McCarthy TL, Centrella M.（1998）CBFa（AML

横瀬勝美，桑田文幸，堀稔，田中博，後藤實，/PEBP 2）
―related elements in the TGF―beta

赤坂守人，小方頼昌，福島一雅，大井田新一

type I receptor promoter and expression with郎
（2003） マ ウ ス 顎 顔 面 の 発 育 に お け る

osteoblast differentiation. J Cell Biochem. 69

CBFA―1 および BMP―4 の局在について．日大（3）, 353―363.

歯学，77, 141―149

９）Bae SC, Lee KS, Zhang YW, Ito Y.（2001）Inti-

１８）Thesleff I, Nieminen P.（1996）Tooth morpho-mate relationship between TGF―beta/BMP sig-

genesis and cell differentiation. Curr Opin Cell

naling and runt domain transcription factor,

Biol. 8, 844―850

PEBP 2/CBF.J Bone Joint Surg Am.83―A Suppl

１９）Vaahtokari A, Aberg T, Jernvall J, Kernen S,
Thesleff I.（1996）The enamel knot as a signal-

1（Pt 1）, 48―55.

ing center in the developing mouse tooth.

１０）Urist MR.（1965）Bone : Formation by autoin-

Mech Dev. 54, 39―43

duction. Science 150, 893―899
１１）Urist MR. & Strates BS.（1971）Bone morpho-２０）Heldin CH, Miyazono K, ten Dijke P（1997）

genic protein. J. Dent. Res. 50, 1392―1406

TGF―beta signalling from cell membrane to１２）Suzuki A, Thies RS, Yamaji N, Song JJ,

nucleus through SMAD proteins. Nature 390

Wozney JM, Murakami K, Ueno N（1994）A
truncated bone morphogenetic protein receptor（6659）, 465―471２１）鴨川大助（2002）
マウス臼歯歯胚における Smadaffects dorsal―ventral patterning in the early
Xenopus embryo. Proc Natl Acad Sci U S A. 91の局在について日大歯学 76, 257―265２２）Zaidi SK, Sullivan AJ, van Wijnen AJ, Stein JL,（22）, 10255―10259

Stein GS, Lian JB.（2002）Integration of Runx

１３）Zou H, Nisander L.（1996）Requirement for

and Smad regulatory signals at transcription-

BMP signaling in interdigital apoptosis andally activesubnuclear sites.Proc Natl Acad Sci
U S A. 99（12）, 8048―8053

scale formation. Science 272（5262）, 738―741.
１４）Ganan Y, Macias D, Duterque―Coquillaud M,

２３）Aubin JE, Liu F, Malaval L, Gupta AK.（1995）

Ros MA, Hurle JM.（1996）Role of TGF beta s

Osteoblast and chondroblast differentiation.
Bone 17（2 Suppl）, 77―83

and BMPs as signals controlling the position of
the digits and the areas of interdigital cell２４）Masuhara K, Nakase T, Suzuki S, Takaoka K,

death in the developing chick limb autopod.

Matsui M, Anderson HC（1995）Use of mono-

Development 122（8）, 2349―2357.

clonal antibody to detect bone morphogenetic
protein―4（BMP―4）. Bone 16（1）, 91―96

１５）Kawakami Y, Ishikawa T, Shimabara M, Tanda
N, Enomoto―Iwamoto M, Iwamoto M, Kuwana

２５）Ohta S, Hiraki Y, Shigeno C, Suzuki F, Kasai R,

T, Ueki A, Noji S, Nohno T（1996）BMP sig-

Ikeda T, Kohno H, Lee K, Kikuchi H, Konishi

naling during bone pattern determination in

J, et al.（1992）Bone morphogenetic proteins― 23 ―

日本大学歯学部紀要 31, 17―24，2003（BMP―2 and BMP―3）induce the late phase
expression of the proto―oncogene c―fos in

付図の説明
図は全てラット切歯における CBFA―1 抗体を用

murine osteoblastic MC 3 T 3―E 1 cells. FEBS

いた免疫を行った光顕像×20

Lett. 314（3）, 356―360

第 1 図 成長端

２６）Yamaguchi A, Katagiri T, Ikeda T, Wozney JM,

内エナメル上皮（IEE）に反応がみられる。

Rosen V, Wang EA, Kahn AJ, Suda T, Yoshiki S

第 2 図 前エナメル芽細胞と分泌期エナメル芽細（1991）Recombinant human bone morphoge-

胞

netic protein―2 stimulates osteoblastic matura-

エナメル質形成が開始されると分泌期エナメル

tion and inhibits myogenic differentiation in vi-

芽細胞
（ScA）
に免疫反応がみられる。

tro. J Cell Biol. 113（3）, 681―687

DP：歯髄，PA：前エナメル芽細胞，PDL：歯根膜

２７）Komori T（1998）Cbfa 1, a transcription factor
for osteoblast differentiation and bone forma-

第 3 図 分泌期エナメル芽細胞
分泌期エナメル芽細胞（ScA）の免疫反応は強い。
DP：歯髄，Od：象牙芽細胞

tion. J Bone Miner Metab. 16, 1―4
２８）Kobayashi H, Gao Y, Ueta C, Yamaguchi A,
Komori T （2000） Multilineage differentiation

第 4 図 成熟期初期のエナメル芽細胞
遠心端に ruffle

border を持つ ruffled ― endedof Cbfa 1―deficient calvarial cells in vitro.Bio-

ameloblast（RA）には免疫反応がみられるが，smoothchem Biophys Res Commun. 273（2）630―636―ended ameloblast（SA）にはみられない。

２９）Harada H, Tagashira S, Fujiwara M, Ogawa S,

ES：エナメルスペース，PDL：歯根膜

Katsumata T, Yamaguchi A, Komori T, Nakat-

第 5 図 成熟期中期のエナメル芽細胞

suka M （1999） Cbfa 1 isoforms exert func-

免疫反応は RA にがみられるが，SA にはみられtional difference in osteoblast differentiation. J

ない。

Biol Chem. 274（11）, 6972―6978

ES：エナメルスペース

３０）Jimenez MJ, Balbin M, Lopez JM, Alvarez J,
Komori T, Lopez―Otin C（1999）Collagenase 3
is a target of Cbfa 1, a transcription factor of

第 6 図 成熟期後期のエナメル芽細胞
免疫反応は RA みられる。
ES：エナメルスペース

the runt gene family involved in bone formation. Mol Cell Biol. 19（6）, 4431―4442― 24 ―