信州医誌，62⑹：447〜470，2014

信州大学において審査された医学博士論文要旨
氏
名(所属講座)

学位授与
番
号

授与年月日

博

士

論

文

名

学位審査委員主査

副査

大 平 哲 史 乙第1162号 25. 4.10 Predicting the route of delivery in women 小 池 健 一 西 澤
理
（産科婦人
‑
川眞田樹人
with low lying placenta using transvaginal
科学）
ultrasonography: signiﬁcance of placental
migration and marginal sinus（低置胎盤症例
における経腟超音波を用いた分娩方法の予測：
胎盤移動と辺縁静脈洞の意義）
三橋祐布子 乙第1163号 25. 4.24 Prognostic signiﬁcance of Notch signaling 本 田 孝 行 西 澤理（分子腫瘍学）
菅野祐幸
molecules and their involvement in theinvasiveness of endometrial carcinoma cells（子宮内膜癌における Notch シグナル分子発現の意義と内膜癌細胞の浸潤能への関与）
嘉嶋勇一郎 乙第1164号 25. 7.24 Crucial Role of Hyaluronan in Neointimal 菅 野 祐 幸 天 野純（内科学⑸）
瀧伸介
Formation after Vascular Injury（血管障害後
新生内膜肥厚におけるヒアルロン酸の重要性）
内 藤 武 彦 乙第1165号 25. 7.24 Comprehensive genetic screening of KCNQ4 福 嶋 義 光 小 池 健 一
（耳鼻咽喉
村田敏規
in a large autosomal dominant nonsyndromic
科学）
hearing loss cohort : Genotype‑phenotype
correlations and a founder mutation（常染色体優性遺伝形式を呈する難聴患者におけるKCNQ4 遺伝子変異に関するスクリーニング：
遺伝子型―表現型の相関と創始者効果突然変
異）
伊東清志
（脳神経
外科学）

乙第1166号 25.10. 9 Comparative study of ﬁbrin and chemical 加 藤 博 之 池 田 修 一
多田剛
synthetic sealant on dural regeneration andbrain damage（フィブリングルーおよび人工合成被覆剤の，硬膜の再生および神経障害に対する影響の比 検討）横山
仁 乙第1167号 25.10.30 Eﬀects of Herpes Simplex Virus Vector‑ 田 中 榮 司 池 田 修 一（泌尿器科学）菅野祐幸
M ediated Enkephalin Gene Therapy on Bladder Overactivity and Nociception（排尿筋過活動・膀胱痛に対する，単純ヘルペスウイルス
ベクターを用いたエンケファリン遺伝子治療の効果の検討）
望 月 靖 弘 乙第1168号 25.12.25 Expression of Polypeptide N‑acetylgalacto- 中 山（外科学⑵）
saminyl Transferase‑3 and Its Association

淳 奥山隆平
宮川眞一

with Clinicopathological Factors in Thyroid
Carcinomas（甲状腺 癌 に お け る Polypeptide
N ‑acetylgalactosaminyl Transferase‑3の 発
現と臨床病理学的因子の関連の検討）
No. 6, 2014447

審査学位論文要旨

井 上 博 夫 乙第1169号 26. 2.12 Relationship between Toe Temperature and 能 勢（泌尿器科学）
Lower Urinary Tract Symptoms（足指の温度と下部尿路症状との関係）

博 花岡正幸駒津光久

神 戸 宏 樹 乙第1170号 26. 2.12 Chronic ethanol consumption decreases serum 田 中 榮 司 大 森（代謝制御学）多田
sulfatide levels by suppressing hepatic cere-栄剛broside sulfotransferase expression in mice
（マウスにおける慢性的なエタノール投与は肝臓中セレブロシドスルホトランスフェラーゼの発現を低下させることにより血清中サルファタ
イド濃度を減少させる）
寺 﨑 貴 光 乙第1171号 26. 2.27 Clinical Results and Pump Analysis of the 池 田 宇 一 岡 元 和 文（外科学⑵）
川眞田樹人
Gyro Pump for Long‑term Extracorporeal
Life Support（ジャイロポンプを用いた長期体
外循環の臨床成績とポンプの解析）
兵庫谷 章 乙第1172号 26. 2.27 Association of nuclear YB‑1 localization 小 泉 知 展 本 田 孝 行（外科学⑵）
花岡正幸
with lung resistance‑related protein andepidermal growth factor receptor expression
in lung cancer（肺癌における YB‑1の核内局
在と LRP，EGFR の発現との関連）
上垣内崇行 乙第1173号 26. 2.27 Overexpression of O‑GlcNAc by prostate 本 田 孝 行 天 野純（泌尿器科学）菅野祐幸
cancer cells is signiﬁcantly associated withpoor prognosis of patients（前立腺癌細胞における O‑GlcNAc の過剰発現は前立腺患者の予後不良と密接に関連している）
秋 田 眞 吾 乙第1174号 26. 3.13 Role of bone marrow cells in the development 駒 津 光 久 天 野純（外科学⑴）
菅野祐幸
of pancreatic ﬁbrosis in a rat model of pancreatitis induced by a choline‑deﬁcient/ethionine‑supplemented diet（choline‑deﬁcient/ethionine‑supplemented dietによるラット膵炎
モデルを用いた，膵線維化における骨髄細胞の役割に関する研究）中 村 恒 一 乙第1175号 26. 3.26 The eﬀect of vascular pedicle preservation on 大 橋 俊 夫 池 田 修 一（運動機能学）松尾清blood ﬂow and clinical outcome following
ulnar nerve transposition（尺骨神経前方移動術において，伴走血管の温存が血流と術後成績におよぼす影響）
矢 野 卓 也 乙第1176号 26. 3.26 Frequency of mitochondrial mutations in non 福 嶋 義 光 駒 津 光 久（耳鼻咽喉‑syndromic hearing loss as well as possibly
浅村英樹
科学）
responsible variants found by whole mitochondrial genome screening（非症候群性難聴
患者における難聴関連遺伝子変異について：全ミトコンドリア遺伝子スクリーニングを用いた
検討）

448

信州医誌 Vol. 62

審査学位論文要旨

Predicting the route ofdeliveryin women with low‑lying placentausing transvaginal ultrasonography:
signiﬁcance of placental migration and marginal sinus（低置胎盤症例における経腟超音波を用いた分娩方法の予測：胎盤移動と辺縁静脈洞の意義）
大

平

哲

史

（論文の内容の要旨）

migration（胎盤移動速度）をパラメー タ と し て 設【緒言】前置胎盤の分娩方法は帝王切開として確立さ定し，「胎盤移動」の程度とその後の分娩方法についれているが，低置胎盤症例における管理・分娩方法はて検討した。また，しばしば胎盤辺縁に認められるいまだ確立されていない。低置胎盤は「胎盤が正常よ

placental marginal sinus（辺縁静脈洞）にも着目し，り低い部位の子宮壁に付着するが，組織学的内子宮口辺縁静脈洞の有無と分娩方法の相関を検討した。それを覆っていない状態をいう。超音波断層法で診断するにより，低置胎盤症例の分娩管理において有益となる

場合，「同子宮口とそれに最も近い胎盤辺縁との距離

指針を導き出すことを目的とした。

が２cm 以内の状態を目安とする。」とされているが，【方法】2005年４月から2009年11月までの期間におけ

どの妊娠時期に胎盤辺縁が内子宮口から２cm 以内なる当科の総分娩数は2,518例で，低置胎盤を「妊娠30らば低置胎盤なのかについて明確な定義はなく，診断週以降に経腟超音波で内子宮口から胎盤辺縁までの距

基準はあいまいである。日常の診療では多量の性器出離が30mm 以内」と定義した。64例（2.54％）がこ血が出現して緊急帝王切開となる症例がある一方，超れに該当した。低置胎盤64例のうち，前回帝王切開や音波による観察で，妊娠経過とともにあたかも胎盤が移子宮下部巨大筋腫が理由で帝王切開となった症例と出動するかのように内子宮口から離れていき（placental

血以外の理由で緊急帝王切開となった症例の計15例は，経腟分娩となる症例も経験される。1991年
migration）

対象から除外し，49例を研究対象とした。すなわち全のOppenheimerの報告によると，胎盤辺縁から内子宮

対象症例は，経腟分娩を目的として管理した症例であ口までの距離が２cm以内であった８例中７例が前置胎り，緊急帝王切開となった症例は全て多量出血が適応

盤様の出血により帝王切開となった。ただしこの報告でであったことになる。対象49例において妊娠37週の時点

は２cm 以内と最終的に判断した時期が症例により大までの胎盤移動速度を算出し，胎盤移動速度が０‑2.0

きく異なり，妊娠28週の症例から37週のものまでかなり

mm/week であった群を slow migration group ，＞

ばらつきがあった。しかし，このOppenheimerの報告

2.0mm/weekであった群を fast migration groupが元となって2001年にRoyal College of Obstetriciansとしてその後の分娩方法を group ごとに検討した。

and Gynaecologists から「低置胎盤では胎盤辺縁か

また，辺縁静脈洞あり群となし群とで同様に分娩方法

ら内子宮口までの距離が２cm を超える場合に経腟分を検討した。

娩を試みるべき」という提言が出され，以後現在に至【結果】 slow migration group では帝王切開率はるまで多くの産科医が指標としている。他にもこれま

56.3％（9/16）であったのに対して fast migration

でに低置胎盤の分娩方法に関するいくつかの論文が出

group の帝王切開率は０％（0/33）であった。すな

されているが，いずれも出血以外の産科適応で帝王切

わち胎盤移動速度が2.0mm/week 以下である症例が開となったものが多く含まれている。またMatsubara

多量出血で帝王切開となることの感度は100％であり，らの検討では，胎盤辺縁〜内子宮口距離が０‑20mm

特異度は82.5％であった（尤度比5.71）。また，辺縁群と21‑40mm 群では，出血が理由での緊急帝切率に静脈洞あり群の帝王切開率は71.4％（5/7）であっ有意差はなかったとされている。このように，「胎盤たのに対して，辺縁静脈洞なし群の帝王切開率は9.5

辺縁〜内子宮口距離２cm」を指標として低置胎盤の％（4/42）であった。すなわち辺縁静脈洞がある症例

分娩方法を選択することには，検討の余地が残されてで帝王切開と な る こ と の 感 度 は55.6％ で あ り，特いる。

異度は95.0％であった（尤度比11.1）。さらに， slow

【目的】今回我々は，経腟超音波で観察し得たplacental

migration group かつ辺縁静脈洞ありの症例では帝migration（胎盤移動）に着目し，胎盤の移動距離を観王切開率が100％（5/5）であって，それ以外では帝察した期間（週）で除して算出した rate of placental

王切開率は9.1％（4/44）であった（感度55.6％，特No. 6, 2014449

審査学位論文要旨

異度100％）。

法について検討した。また，しばしば胎盤辺縁に認め【結論】低置胎盤症例では，妊娠37週までの胎盤移動られる辺縁静脈洞にも着目し，辺縁静脈洞の有無と分速度が小さく，かつ辺縁静脈洞を認める例では，分娩娩方法の相関を検討した。今回，低置胎盤を「妊娠30前に多量出血が出現して緊急帝王切開となる可能性が週以降に経腟超音波で内子宮口から胎盤辺縁までの距高く，胎盤移動速度と辺縁静脈洞の有無といった二つ

離が30mm 以内」と定義し，出血以外の理由で緊急のパラメータが分娩管理の指標となる可能性が示唆さ帝王切開となった例は対象から除外し，49例を研究対れた。今後は，妊娠37週まで の 胎 盤 移 動 速 度 が2.0象とした。対象49例において妊娠37週の時点までの胎

mm/week 以下であり，かつ辺縁静脈洞を認める低置

盤移動速度を算出し，胎盤移動速度が０‑2.0mm/week

胎盤症例では，帝王切開が選択され得るという管理指で あ っ た 群 を slow migration group ，＞2.0mm/

針が検討されるべきと考えられる。

weekであった群を fast migration group としてそ（論文審査の結果の要旨）の後の分娩方法を group ごとに検討した。また，辺

低置胎盤は「内子宮口と胎盤辺縁との距離が２cm以内の状態を目安とする。
」と定義される胎盤の位置異常である。胎盤が内子宮口を覆う前置胎盤の分娩方縁静脈洞あり群となし群とで同様に分娩方法を検討した。
その結果，以下の成績を得た。

法は帝王切開として確立されているが，低置胎盤症例

１． Slow migration group では帝王切開率は56.3％

における管理・分娩方法はいまだ確立されていない。

（9/16）であったのに対して fast migration group

低置胎盤は「内子宮口と胎盤辺縁との距離が２cm 以の帝王切開率は０％（0/33）であった。

内」とされているが，どの妊娠時期に胎盤辺縁が内子

２．辺縁静脈洞あり群の帝王切開率は71.4％（5/7）

宮口から２cm 以内ならば低置胎盤なのかについて明であったのに対して，辺縁静脈洞なし群の帝王切開

確な定義はなく，診断基準はあいまいである。2001年

率は9.5％（4/42）であった。

に「低置胎盤では胎盤辺縁から内子宮口までの距離が３． Slow migration group かつ辺縁静脈洞ありの２cm を超える場合に経腟分娩を試みるべき」という症例では帝王切開率が100％（5/5）であって，そ提言が出され，以後現在に至るまで多くの産科医が指れ以外では帝王切開率は9.1％（4/44）であった。

標としている。これまでに低置胎盤の分娩方法に関す

以上より，低置胎盤症例では，妊娠37週までの胎盤るいくつかの論文が出されているが，「胎盤辺縁〜内

移動速度が小さく，かつ辺縁静脈洞を認める例では，子宮口距離２cm」を指標として低置胎盤の分娩方法

分娩前に多量出血が出現して緊急帝王切開となる可能を選択することには，検討の余地が残されている。今性が高く，胎盤移動速度と辺縁静脈洞の有無といった回我々は，経腟超音波で観察し得た placental migra-

二つのパラメータが分娩管理の指標となる可能性が示（胎盤移動）に着目した。Placental migration とは，
tion

唆された。今後は，妊娠37週までの胎盤移動速度が妊娠週数の進行に従い子宮下部の筋層が進展するため，2.0mm/week 以下であり，かつ辺縁静脈洞を認める

胎盤が内子宮口からあたかも移動して離れていくよう

低置胎盤症例では，帝王切開が選択され得るという管にみられる現象である。今回の検討では，placental

理指針の検討が必要であると考えられた。本論文は低migration を定量的に評価するために，胎盤の移動

置胎盤に対する新たな管理法を提案する研究として，距離を観察した期間（週）で除して算出した rate of

主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値がplacental migration（胎盤移動速度）をパラメータあるものと認めた。

として設定し，「胎盤移動」の程度とその後の分娩方

Prognostic signiﬁ
cance of Notch signaling molecules and their involvement in the invasiveness ofendometrial carcinoma cells（子宮内膜癌における Notch シグナル分子発現の意義と内膜癌細胞の浸潤能への関与）
三

橋

祐布子

（論文の内容の要旨）腫瘍であるが，近年，欧米諸国や本邦においての発生【背景】子宮内膜癌は婦人科癌で最も頻度が高い悪性

頻度は著増している。また，子宮内膜癌は比 的予後450

信州医誌 Vol. 62

審査学位論文要旨良好とされているが，進行例や再発例の増加により抗管侵襲および筋層浸潤と有意に関連し，多変量解析で癌剤を含む既存治療への抵抗性を示す症例の増加が問も臨床病期と正の相関を認めた。また，Noth1高発現

題となっている。このような背景から子宮内膜癌にお症例では低発現症例に比べ有意に予後不良であった。

ける予後不良因子の同定および新たな治療戦略が求め

更に，Notch1，Jagged1ともに高発現症例では最もられている。

予後不良であった。

Notch シグナル伝達経路は胚発達に必須で，組織② 子宮内膜癌細胞株において DAPT（1μM ）添加にの自己複製制御に重要な役割を果たすことが知られてよる有意な増殖能変化を認めなかった。KLE 細胞へいる。Notch シグナルは，細胞―細胞間接着によるのDAPT（1μM ）添加により，接着能に変化はなかっ

細胞表面の Notch リガンドが Notch 受容体に結合すたが，matrigel invasion assayにおいて有意な浸潤ることにより賦活化され，γ‑secretase の Notch 受能抑制が認められた。また，scratch assayにて遊走

容体切断により遊離する細胞内ドメイン（NICD）が能は有意に低下した。

核に移行し，標的遺伝子の発現調節が行われる。

【結論】正常内膜と比し子宮内膜癌において Notch

近年，悪性腫瘍において Notch シグナル分子の発シグナル関連タンパクの発現は亢進しており，特に現異常や活性化遺伝子変異が報告されており，悪性腫

Notch1‑Jagged1が患者予後不良に関与していた。ま瘍の増殖，浸潤，血管新生等に関与することが示唆さた，その機序に関しては子宮内膜癌の浸潤能亢進を介れている。更に，Notch シグナル経路阻害剤の臨床しており，Notch シグナル阻害剤が今後子宮内膜癌

応用が検討され始めているが，婦人科癌における知見の新たな治療薬となる可能性が示唆された。

は乏しい。

（論文審査の結果の要旨）【目的】正常子宮内膜，子宮内膜癌における Notch シ

子宮内膜癌における予後不良因子の検索や新たな治

グナル経路の役割に着目し，その Notch シグナル関

療戦略が求められている背景から，三橋は子宮内膜癌

連分子（Notch リガンド，Notch 受容体）発現の有における Notch シグナル分子の発現に着目した。そ無，発現の臨床病理学的検討を行う。また，子宮内膜の発現意義および子宮内膜癌細胞での Notch シグナ

癌細胞での Notch シグナル経路の機能を解析するた

ル経路の機能を検討するため，め，Notch シグナル阻害剤の効果について検討する⑴ 患者の同意を得て採取した正常子宮内膜37例（増ことを目的とする。

殖期19例，分泌期18例）および子宮内膜癌（類内膜腺【方法】癌）76例に対し，Notch 受容体（Notch1，Notch3），① 患者の同意を得て採取した正常子宮内膜37例（増Notch リガンド（Jagged1，DELTA‑4）発現を免疫

殖期19例，分泌期18例）および子宮内膜癌（類内膜腺染色にて検討し，また⑵ 子宮内膜癌細胞株を用 い癌）76例に対し，Notch 受容体（Notch1，Notch3），

Notch シグナル経路阻害剤（γ‑secretase inhibitor：

Notch リガンド（Jagged1，DELTA‑4）発現を免疫

DAPT）の増殖能への影響を WST‑1 assayにて，ま染色にて検討した。

た接着能，浸潤能および遊走能への影響をそれぞれ② 子宮内膜癌細胞株を用い Notch シグナル経路阻害

adhesion assay，matrigel invasion assayおよび剤（γ‑secretase inhibitor：DAPT）の増殖能への影

scratch assayにて検討した。

響を WST‑1 assayにて検討した。また接着能，浸潤

その結果以下の成績を得た。

能および遊走能への影響をそれぞれ adhesion assay，

１．正常内膜腺上皮において Notch 受容体（Notch1，

matrigel invasion assayおよび scratch assayにて検Notch3）およびNotchリガンド（Jagged1，DELTA‑討した。

4）発現は月経周期に伴う変化は認めなかった。

【結果】

２．Notch 受容体，Notch リガンドともに正常子宮① 正常内膜腺上皮において Notch 受容体（Notch1，

内膜腺上皮細胞と比し内膜癌細胞で有意に発現が亢Notch3）およびNotchリガンド（ Jagged1，DELTA‑進していた。

4）発現は月経周期に伴う変化を認めなかった。Notch

３．単変量解析において Notch1発現は臨床病期，脈受容体，Notch リガンドともに正常子宮内膜腺上皮

管侵襲および筋層浸潤等と有意に関連し，多変量解細胞に比し内膜癌細胞で有意に発現が亢進していた。

析でも臨床病期と正の相関を認めた。また，Noth1

単変量解析において Notch1発現は臨床病期，リンパ高発現症例では低発現症例に比べ有意に予後不良でNo. 6, 2014451

審査学位論文要旨あった。更に Notch1，Jagged1の両者を高発現した症例では，最も予後が不良であった。

以上より，子宮内膜癌において Notch シグナル関
連タンパクの発現は亢進しており，子宮内膜癌の浸潤

４．子宮内膜癌細胞株において DAPT（1μM ）添加能亢進を介し予後不良に関与する可能性が示唆された。

による有意な増殖能の変化は認められなかった。

Notch シグナル阻害剤は子宮内膜癌細胞の浸潤能・５．KLE 細胞への DAPT（1μM ）添加により接着能

遊走能を阻害し，今後子宮内膜癌の新たな治療薬となの変化はなかったが，matrigel invasion assayにおる可能性も示唆された。したがって主査，副査は一致いて有意な浸潤能抑制が認められた。また，scratch

して本論文を学位論文としての価値があるものと認めassayにて遊走能は有意に低下した。

た。

Crucial Role of Hyaluronan in Neointimal Formation after Vascular Injury（血管傷害後新生内膜肥厚におけるヒアルロン酸の重要性）
嘉

嶋

勇一郎

（論文の内容の要旨）

また，HA 刺激により VSMCs の RhoA 活性化が見【目的】ヒアルロン酸（HA：hyaluronan）は，グリコサ

られ，RhoA 活性化の特異的阻害剤であるＹ27632使

ミノグリカンの一種であり，我々の身体を構成する細用により，HA 刺激による遊走能増加が抑制された。

胞外マトリックスの主成分として，細胞の基本的な働

これらの結果より，HAは CD44‑RhoAシグナル活性きである増殖や移動などを調節し，様々な疾患におい化により，VSM Cs の遊走能を高めることが示された。

て重要な役割を果たすことが知られている。循環器領引き続き，HAが VSMCsの増殖能に与える作用につ域においては，動脈硬化血管の新生内膜肥厚部位や血いて検討した。HA刺激により，VSM Csの ERK‑1/2

管治療後のステント再狭窄部位に HA が過剰に蓄積の活性化が見られ，また，ERK‑1/2活性化の特異的することが知られる。しかしながら，HA が動脈硬化阻害剤であるＵ0126使用すると，HA刺激によるVSMCs

や冠動脈形成術後ステント再狭窄の進展に関与する機の増殖能が抑制された。さらに，HA刺激によるVSMCs

序は，現在のところほとんど解明されていない。そこの ERK‑1/2活性化は，CD44‑siRNA 使用にて抑制さで，マウス血管傷害モデルにおける新生内膜肥厚部位れた。以上より，HAはCD44‑ERK‑1/2シグナル活性の主要細胞成分である血管平滑筋細胞（VSMCs：化により，VSM Cs の増殖能を高めることを確認した。

vascular smooth muscle cells）と，VSM Cs より産

また，野生型マウス由来の VSMCsに対し HAにより生された HA が血管傷害後の新生内膜肥厚形成に関刺激を行うと，炎症性サイトカイン（IL‑6，MCP‑1）

与する機序について研究を行った。

および酸化ストレス産生能が有意に増加した。HA は【方法と結果】まず，ヒト動脈硬化血管およびマウス

HA合成酵素（HA synthase：HAS）により合成され，血管傷害モデルのいずれにおいても，新生内膜肥厚部

３種類の isoform が知られている（HAS1，2，3）。

位に HA が産生されていることを確認した。さらに，

血管傷害部位から採取した VSMCs では，HAS2の発

HA の特異的合成阻害剤である4‑methylumbellifer-

現が他のisoformより有意に増加していたため，最後

one（4‑M U）を経口投与し，血管傷害モデルを作製に，HAS2cre‑lox conditional transgenic strategyにすると，新生内膜肥厚が著明に抑制された（内膜/中より，VSM Cs特異的にHA過剰産生モデル（cHAS/

膜比：2.10±0.08（非内服群）vs.0.63±0.03（内 服CreSM 22α）を作製し，血管傷害後の新生内膜肥厚群），p＜0.001）。次に，野生型マウス（ C57BL/6）のの作用について検討したところ，著明な新生内膜肥厚

大動脈より血管平滑筋細胞を採取し，HA が VSMCs形成が見られた（内膜/中膜比：1.45±0.03（cHAS/の遊走能に与える作用を，Trans‑wellchambersystem（cHAS2）and 0.50±0.04
CreSM 22α）vs.0.54±0.07

およびスクラッチ・アッセイにて検討すると，HA（CreSM 22α）
，p＜0.001）。また，cHAS/CreSM 22α

刺激により VSMCs の遊走能に著明な増加が見られの大動脈より採取した VSM Cs は，コントロールのた。CD44に対するsiRNA（CD44‑siRNA）を使用し，マウス（cHAS2，CreSM 22α）に比して，IL‑6，MCP‑1，

VSM Cs の CD44発現を knock down させると，HA

酸化ストレス産生能が有意に高いことが確認された。

刺激による VSM Cs 遊走能増加は有意に抑制された。

【考察】本研究は，血管傷害モデルにおける新生内膜452

信州医誌 Vol. 62

審査学位論文要旨

肥厚形成に HA が深く関与することを示した。そのれ，HA 特異的合 成 阻 害 剤（4‑methylumbellifer-

機序として，HA は CD44を介し VSMCs に作用し，one）の経口摂取により新生内膜肥厚形成が著明にRhoA 活性化により遊走能を高め，ERK‑1/2活性化

抑制された。

により増殖能を高め，炎症性サイトカインや酸化スト

２．マウス大動脈より採取した VSMC を用いた実験

レスの産生能を増加させることが考えられた。今回のに て，HA は VSMC の CD44‑ERK1/2 pathway

基礎的検討の結果をふまえ，さらなる HA の動脈硬活性化させることにより増殖能を，CD44‑RhoA

化進展に関わる機序や，4‑M U による動脈硬化進展

pathway活性化させることにより遊走能を高めた。

の抑制の詳細な機序の検討を進めることで，HA 糖鎖

また，HA は CD44を介して VSMC の炎症性サイ合成を作用点とする新たな抗動脈硬化治療薬，ステント再狭窄予防法を開発できる可能性が考えられる。

トカインおよび酸化ストレス産生能を高めた。
３．血管傷害部位の VSMC では，HAS1，2，3の iso-

（論文審査の結果の要旨）

form のなかで HAS2がもっとも活性化されていた。

ヒアルロン酸（hyaluronan：HA）は，ヒアルロン

４．Cre‑lox conditional transgenic strategyにより酸合成酵素（hyaluronan synthase：HAS）により合作成した VSMC 特異的 HAS2過剰産生モデルマウ

成されるグリコサミノグリカンの一種であるが，ヒトス（cHAS2/CreSM 22α mice）において，血管傷

動脈硬化性病変における内膜肥厚部位に過剰発現が見

害後の新生内膜肥厚は著明に増強された。

られ，動脈硬化進展の機序に深く関与することが示唆

５．cHAS2/CreSM 22α mice 大動脈より採取したされている。そこで嘉嶋は HAS2 conditional trans-

VSM C は，増殖能，遊走能，炎症性サイトカイン

genic mice を作成し，新生内膜肥厚部位の主要細胞および酸化ストレス産生能が高かった。

成分である血管平滑筋細胞（vascular smooth mus-以上により，VSMC 由来の HA は，血管傷害後のcle cells：VSMC）由来のヒアルロン酸が血管傷害後

新生内膜肥厚形成に関与し，動脈硬化治療の標的となの新生内膜肥厚に関わる機序を検討した。

りえる可能性が示された。本研究は臨床に直結した新

その結果以下の成績を得た。

規性の高い基礎研究であり，主査，副査は一致して本

１．ヒト新生内膜肥厚部位と同様に，マウス血管傷害論文を学位論文として価値があるものと認めた。

後の新生内膜肥厚部位にも HA の過剰発現が見らComprehensive genetic screening ofKCNQ4 in alargeautosomal dominant nonsyndromichearing loss
cohort:Genotype‑phenotype correlations and a founder mutation（常染色体優性遺伝形式を呈する
難聴患者における KCNQ4 遺伝子変異に関するスクリーニング：遺伝子型―表現型の相関と創始者効果突然変異）内

藤（論文の内容の要旨）

武

彦

行った。

【研究目的】常染色体優性遺伝形式を呈する非症候【対象と方法】日本人難聴遺伝子データベース（全国

群性難聴（ADNSHL）は多くの原因遺伝子があるこ

33施設より集まった難聴遺伝子1396家系）のうち，と，また同じ遺伝子であっても家系毎に変異が異なり，

ADNSHL287家 系 を 対 象 に KCNQ4 遺 伝 子 を サ ン

同一変異の報告が殆どないため，遺伝子変異スクリー

ガーシーケンス法にてスクリーニングした。臨床情報とニングは難しいのが現状である。KCNQ4 遺伝子はして聴力レベル，問診票により発症年齢や難聴の進行

ADNSHL の原因遺伝子の中では比 的変異の報告が性などを確認した。検出された代表的な３変異（c.

多く，変異の分布や遺伝子型と表現型の相関を解析

211delC，p.V230E，p.W 276S）について聴力レベルできる可能性がある。今回，我々は日本人における（dB）とその進行速度（dB/年）を測定し，遺伝子型

KCNQ4 遺伝子変異の大規模スクリーニングを行い，と表現型の相関につき検討した。また高頻度に認めら

KCNQ4 遺伝子変異の分布，および遺伝子型と表現型

れた c.211delC 変異に関しては，変異周囲の48SNPsの相関について検討を行った。また高頻度に検出されを用いたハプロタイプ解析を行い，変異の起源についる遺伝子変異を認めたため，その起源につき検討をて検討を行った。

No. 6, 2014453

審査学位論文要旨【研究結果】スクリーニングの結果，19家系から７変多くの原因遺伝子がありまた同一変異をもつ罹患者数異を認めた。いずれもコントロール群には変異は認めが少ないという特徴を有する。そのため遺伝子変異ス

られなかった。またそのうち５変異は新規変異であっクリーニングには広範な領域の塩基配列を決定するた

た。KCNQ4 遺伝子変異の頻度は6.62％（19/287）

めの相当な労力が必要で大規模集団での遺伝子変異ス

で あ り，特 に c.211delC 変 異 は4.53％（13/287）とクリーニングが進んでおらず，また変異ごとの臨床的高頻度であった。KCNQ4 遺伝子変異による難聴の臨特徴が明確になっていない。KCNQ4 遺伝子は ADN-

床的特徴としては，発症年齢が３‑40歳と幅広くまた

SHL の原因遺伝子として比進行性の難聴が多いことが明らかとなった。c.211

遺伝子型別の表現型の特徴を捉えられる可能性がある。

的変異の頻度が高く，

delC，p.V230E，p.W 276S の聴力像はそれぞれ高音

本論文において内藤武彦は，日本人難聴患者におけ

急墜型，中音域障害型（皿型），高音漸傾型の特徴的

る KCNQ4 遺伝子変異の頻度や分布およびこれらのなタイプを示し，難聴レベルの進行速度（dB/年）を変異を有する症例に関する臨床像について大規模調査

比

を行った。

すると c.211delC では他の変異と比し低音域（125，250Hz）の聴力が有意に保持されることが示さ

まず，常染色体優性遺伝形式を呈する難聴家系の発れた。また c.211delC 周囲のハプロタイプ解析では，

端者287人を対象に KCNQ4 遺伝子の全エクソン領域

変異アレルには533kbp と広範囲に共通するハプロタ

における遺伝子変異検索を行った。その結果，287人

イプ（SNP 配列）が存在することを明らかにした。

中19人（＝6.62％）と高率に KCNQ4 遺伝子変異を【考察】日本人の ADNSHL 家系の6.62％に KCNQ4確認した。検出した変異は p.V230E などの新規変異

遺伝子変異が同定された。ADNSHL の中で頻度が高５種，p.W 276S など既知変異２種の合計７種で，c.

いとされる TECTA 遺伝子変異の頻度2.9％（4/139）

211delC 変異は13人と極めて高頻度に認めた。続いてと比べても高く，KCNQ4 遺伝子は ADNSHL の原

家系内で変異を特定できる罹患者が３名以上で３世代

因遺伝子のなかで最も高頻度なものの１つであり，にわたる家系のある c.211delC 変異，p.V230E 変異，

ADNSHL 患者の遺伝学的検索を行う場合に最初に考

p.W 276S 変異について，その臨床的特徴を検討した。

慮すべき遺伝子と言える。我々は既に世界で４家系にその結果いずれの変異でも徐々に難聴が進行するが c.

見出された hot spot 変異（p.W 276S）を報告してい211delC 変異は発症年齢が10歳代以降と比るが，13家系に認められた c.211delC はハプロタイあることが確認された。また各変異ごとに難聴の周波プ解析結果から hot spot 変異ではなく founder 変異

数特性を検討したところ，c.211delC では高音域障害と推定された。頻度が高く，また特徴的な聴力像を呈型の難聴（高音急墜型），p.V230E 変異では中音域障するため c.211delC を中心に ADNSHL の遺伝子解害型の難聴（皿型），p.V276S 変異では中音高音域障析が一挙に進む可能性がある。また p.V230E の臨床

害型の難聴（高音漸傾型）といずれも特徴的な聴力像的特徴である皿型の聴力像はこれまで TECTA 遺伝を示した。難聴の年齢変化を詳細に検討したところ，

子変異に特徴的とされたが，KCNQ4 遺伝子変異でもc.211delC 変異では低音域が保存され，p.V230E 変同様の聴力像を呈することが今回初めて示された。今異では他の変異に比べ高音域障害が有意に軽度である

後，未解明の中音域障害型の ADNSHL の解析が進ことが確認された。また高頻度に認められた c.211

む可能性がある。治療については，c.211delC では低

delC 変異については変異周辺のハプロタイプ解析を

音域が経時的に保存されるため残存聴力活用型人工内行った。その結果，c.211delC 変異は特定の創始者か耳（EAS）が良い適応となることが明らかとなった。

ら日本国内に広く広まった変異であることが推定され【結論】ADNSHL では KCNQ4 遺伝子変異の頻度が

た。

的高齢で

高くまた遺伝子型と表現型の相関が認められるため，

本論文により，日本人における優性遺伝形式を呈す

ADNSHL に対しては，まず KCNQ4 遺伝子変異のる非症候群性難聴（ADNSHL）の原因遺伝子として検索を考慮することが重要である。

KCNQ4 遺伝子は，その変異頻度が高く，また変異の（論文審査の結果の要旨）

種類により特徴的な臨床像を示すことが明らかとなっ

常染色体優性遺伝形式を呈する非症候 群 性 難 聴

た。またこのことよりADNSHL集団に対してはまず（ADNSHL）は遺伝性難聴の約20％を占めると報告

は KCNQ4 遺伝子変異の検索を考慮することが重要されている（N.Hilgert el al.2009 ）。ADNSHL にはであると考えられた。一定の知見が得られたことは今454

信州医誌 Vol. 62

審査学位論文要旨

後の研究の上で非常に重要な発見であると考えられる。

として価値があるものと認めた。

以上より，主査，副査は一致して本論文を学位論文

Comparativestudyofﬁbrin and chemicalsyntheticsealant on duralregeneration and brain damage（フィブリングルーおよび人工合成被覆剤の，硬膜の再生および神経障害に対する影響の比 検
討）
伊

東

清

志

（論文の内容の要旨）（論文審査の結果の要旨）【背景と目的】脳脊髄領域の外科手術の際に，硬膜切脳脊髄手術の術後結果を左右する因子の１つに，術開部分からの髄液漏を予防するために，様々な医療用

後髄液漏の予防が挙げられる。以前よりヒト血清を用接着剤が使用される。従来は，ヒト血清より作成した

いて作成されるフィブリングルーによる，硬膜の被覆

フィブリングルーを使用する機会が多かったが，近年による髄液漏予防法が施行されてきた。フィブリング

人工合成材料であるポリエチレングリコールのポリマー

ルーは，生体反応であるフィブリノーゲンからフィブが使用される機会が多くなってきた。しかしポリエチ

リンを析出させ，そのフィブリンによる硬膜被覆作用

レングリコールのポリマーを使用した後に，髄液漏やを応用したものである。したがって，元来生体がもつ感染が生じた症例の報告が散見されるようになった。

創治癒の過程を利用しているため，未知ウィルスの混

この術後合併症との関連は，まだはっきり分かってい入の危険性はあるものの，組織への侵襲度は低い。そない。今回，in vivo において，フィブリングルーとれに対して，近年，ポリエチレングリコールエステル

ポリエチレングリコールのポリマーを，家兎に使用し化合物である Duraseal sealant system（Conﬂuent

病理組織学的に硬膜の形成，感染および脳組織の傷害

Surgical，Waltham，USA）が本邦に導入され被覆の有無を検証した。

剤として使用されるようになってきた。ポリエチレン【方法】22羽の Japanese white rabbit の頭頂部に，

グリコールエステル溶液とトリリシンアミノ酸を混合

円形の骨欠損および硬膜欠損部を作成した。その骨欠し作成される吸収性ハイドロゲルである。２剤を混合

損および硬膜欠損部を，一方はフィブリングルーで，した際に架橋構造が作成されゲル状となり，４‑８週

もう一方はポリエチレングリコールのポリマーで覆い，すると加水分解され腎臓より体外へ排泄される特徴を

一週間毎，四週間まで犠牲死させた。そして，硬膜の持つ。この期間に安定化した新しい硬膜が形成される。

再生，脳組織への影響を，病理組織学的に評価した。

合成された原料より作成されるためウィルス感染の可【結果】

能性はなく，アナフィラキシー反応は低減すると思わ① 硬膜の形成に関しては，フィブリングルーがポリれる。しかし，組織学的に，神経組織への影響を検討

エチレングリコールのポリマーに勝っていた（p＝した報告は現在までない。フィブリングルーおよび

0.014）。

Duraseal② 有意差は認められなかったが，フィブリングルー

神経組織への影響を，組織学的に比 検討した。

と比して，ポリエチレングリコールのポリマーで，脳膿瘍を生じやすい傾向にあった。

sealant system における，硬膜の形成，その結果，伊東は次の結論を得た。
１．硬膜形成に関して，フィブリングルーは，Dur-③ 脳表面の傷害は，脳膿瘍の形成を伴った家兎で強aseal

く認められた（p＝0.007）。

成されることが組織学的に示された。

【結論】硬膜の形成に関しては，フィブリングルーで

sealant system に比 して早期に硬膜が形

２．肉芽，膿瘍形成に関して，フィブリングルーは，より早期に生じると考えられた。一方，感染である脳Duraseal

膿瘍は，ポリエチレングリコールのポリマーで生じやが分かった。

すいことが示唆された。病理組織学的な検討により，sealant system と比 して少ないこと

３．神経組織の傷害は，肉芽形成，膿瘍形成と相関が人工合成材料であるポリエチレングリコールのポリあることが分かった。

マーは，通常の創傷治癒過程が抑制されている可能性

以上の結果より，未知ウィルスの混入やアナフィラが示唆された。
No. 6, 2014

キシー反応などの可能性は，残るものの創治癒の観点455

審査学位論文要旨

よりフィブリングルーは，Duraseal sealant systemと比してより生理的に創治癒が得られると考えられた。

本研究は，組織学的に両者の創治癒過程における相違を明確にしたことにより，主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

Eﬀects of herpes simplex virus vector‑mediated enkephalin gene therapy on bladder overactivity andnociception（排尿筋過活動・膀胱痛に対する，単純ヘルペスウイルスベクターを用いたエンケ
ファリン遺伝子治療の効果の検討）
横山（論文の内容の要旨）

仁
HSV は，５μL ずつ計４カ所膀胱壁に注入した。２【背景と目的】泌尿器科領域において慢性疼痛を呈す

週間後に以下の実験を行った。

る代表的な疾患に間質性膀胱炎がある。膀胱充満に伴１．L6 dorsal root ganglion（DRG），L4 DRG におう恥骨上の痛みが特徴である。正確な病因は不明で疼

ける hPPEmRNA の発現を RT ‑PCR にて確認し痛対策が治療の中心である。慢性疼痛に対してオピオた。

イドが使用されることがあるが，中枢性に作用するこ２．Resiniferatoxin（RTx）を膀胱内注入し，痛みとでしばしば副作用が問題となる。副作用を避けなが行動（なめ，すくみ）の回数を比 検討した。

らかつ目的臓器に限定したオピオイドの投与方法が確

３．RTx を膀胱内注入後に L6の c‑Fos 陽性細胞数

立された場合，間質性膀胱炎を代表とする慢性疼痛疾
患の治療の礎となりうる。そのような観点から単純ヘルペスウイルスベクター（HSV）を用いた遺伝子治療は理想的と言える。HSV のターゲットは一次求心性神経であり，取り込まれた神経細胞体において遺伝を免疫組織染色にて比 検討した。
４．RTx を膀胱内注入後に尿中サイトカインの量を
ELISA にて比 検討した。
５．ウレタン麻酔下，膀胱内圧測定を施行し排尿筋過活動について検討を行った。

子産物の発現を行う。HSVのgenomeは大きくかつそ【結果】の半分は増殖に不要なため，多くのターゲット遺伝子

１．hPPEmRNA は，vHPPE 投与群 L6にのみ発現を組み込むことが可能である。Immediate‑early（IE）が認められた。L4には発現は認められなかった。

gene を削除することで複製能力を失くした HSV に，vHG 投与群では L6，L4ともに発現は認められなδオピオイド受容体アゴニストであるエンケファリン

かった。

の前駆体プレプロエンケファリン（hPPE）遺伝子を組み込み作成されたベクターを使い，炎症性，神経性，内臓痛に対する疼痛モデルにおいてその有効性が報告されている。われわれも排尿筋過活動や膀胱痛に対す
る HSV の効果について報告した。さらに複数の IE
geneを削除し，より細胞毒性を弱めた新しいベクター

２．vHPPE 投与群において，すくみ行動が有意に減少した。
３．vHPPE 投与群において，c‑Fos 陽性細胞数が有意に少なかった。
４．vHPPE 投与群において尿中 IL‑1β，IL‑6レベルが有意に少なかった。

が作成され，臨床試験にて重大な副作用がなく鎮痛効

５．生食から RTx に還流を切り換えると，膀胱収縮果を示したことが報告された。しかし，この新しい

間隔 intercontraction interval（ICI）は vHPPE投HSV が膀胱痛や排尿筋過活動に対して同様に有効か

与群，vHG 投与群共に減少する。しかし，vHPPE

どうかの検討はなされていない。今回，ラット膀胱痛投与群において ICI の減少率は有意に少なかった。

モデル，排尿筋過活動モデルにおける有効性について

vHPPE の 効 果 は naloxone hydrochloride に て 拮検討した。

抗されたが，naloxone methiodide では変化なかっ【方法】IE gene である ICP4，ICP27を削除することた。

で複製能力を失活させた HSV を用いた（PPEgene【考察】上記の結果からHSVの感染，効果が，膀胱かを組み込んだ vHPPE と，コントロールベクターとらの求心性神経（骨盤神経）に限局されていることがして，代わりに GFPgene を組み込んだ vHG）
。すべ

分かった。この効果は血液脳関門を通過するnaloxoneての実験は雌 SD 系ラット（250‑300g）を用いた。

hydrochloride においてのみ拮抗されたことから，

456

信州医誌 Vol. 62

審査学位論文要旨

HSV の効果が末梢では無く中枢神経系（脊髄）で発性が報告されている。われわれも排尿筋過活動や膀胱揮されていることが示唆された。また，尿中 IL‑1β，痛に対する HSV ベクターの効果について報告した。

IL‑6が治療に対する効果判定のターゲットとして使用

今回，より細胞毒性を弱めた新しい HSV ベクター可能であることも示された。

（vHPPE）が作成され，臨床試験にて重大な副作用【結論】HSV によるエンケファリン遺伝子治療は，がなく鎮痛効果を示したことが報告された。そこで，目的臓器の求心性神経に限局しながらオピオイドの効

排尿筋過活動や膀胱痛に対する vHPPE の効果につ果を発揮するため，理想的な慢性疼痛治療となる可能

いて検討した。

性がある。

hPPE mRNA は，vHPPE 投与群の脊髄 L6にのみ（論文審査の結果の要旨）発現が認められた。L4には発現は認められなかった。

膀胱充満時に生じる恥骨上の痛みを特徴とする慢性コントロールベクター投与群ではL6，L4ともにhPPE

疼痛疾患として間質性膀胱炎という疾患がある。正確mRNA の発現は認められなかった。vHPPE 投与群

な病因は不明である。主な治療は疼痛に対するコントにおいて膀胱刺激後の，痛み行動，L6 c‑Fos 陽性細ロールであり，オピオイドが用いられることがあるが，胞数，尿中サイトカイン量（IL‑1β，IL‑6），膀胱収

しばしば副作用が問題となる。上位中枢にあるオピオ

縮期間の短縮程度，は有意に減少した。

イドレセプターに作用することなく，かつ目的臓器に上記の結果から vHPPE が排尿筋過活動，膀胱痛

限局したオピオイドの投与方法が確立された場合，間に対して有効であり，かつその効果が膀胱からの求心質性膀胱炎を始めとした慢性疼痛疾患に対して理想の性神経（骨盤神経）に限局されていることが分かった。

治療法となりうる。単純ヘルペスウイルス（HSV）

また，血液脳関門を通過する naloxone hydrochlor-

をベクターとして使う遺伝子治療は上記の条件を満た

ide においてのみ拮抗されたことから，vHPPE が末す可能性がある。HSV のターゲットは一次求心性神梢ではなく中枢神経系にて効果を発揮することが示唆経であり，取り込まれた神経細胞体において遺伝子産された。

物の発現を行う。HSV の genome は大きくかつその

HSV ベクターによるエンケファリン遺伝子治療は，半分は増殖に不要なため，多くのターゲット遺伝子を

目的臓器の求心性神経に限局しながらオピオイドの効

組み込むことが可能である。オピオイドであるエンケ果を発揮するため，理想的な慢性疼痛治療となる可能

ファリンの前駆体プレプロエンケファリン（hPPE）性がある。

遺伝子を組み込み作成されたベクターを使い，炎症性，神経性，内臓痛に対する疼痛モデルにおいてその有効主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

Expression ofPolypeptideN‑acetylgalactosaminyl Transferase‑3 and Its association with Clinicopathological Factors in Thyroid Carcinomas（甲状腺癌における Polypeptide N‑acetylgalactosaminyl
Transferase‑3 の発現と臨床病理学的因子の関連の検討）
望

月

靖

弘

（論文の内容の要旨）に最初に作用する糖転移酵素である。特に GalNAc‑【目的】甲状腺癌は組織型により臨床像が大きく異なT3の発現は組織特異性が高く，正常組織では膵臓，り，また，緩徐に進行する分化癌（乳頭癌および濾胞卵巣等に著明に発現し，胃癌，大腸癌，肺癌などの腺癌）から極めて悪性度の高い未分化癌が生じてくるが，癌においては，その発現が分化度や浸潤・転移等とのこの未分化転化の機序も解明されていない。細胞の癌相関が報告されてきた。そこで，本研究では，甲状腺化に伴う膜蛋白の構造や分布の変化が，癌の浸潤・転癌における GalNAc‑T3発現と臨床病理学的因子との移に関与していることが報告されている。この膜蛋白相関について検討した。

の多くが糖蛋白であり，癌の種類により糖鎖構造に特【対象と方法】1997年から2005年に当科で切除した甲異性があることが明らかとなっている。Ｎ‑アセチル状腺癌169例（乳頭癌135例，濾胞癌12例，髄様癌７例，ガラクトサミン転移酵素（GalNAc‑T）は細胞質の未分化癌15例）の手術検体を用いた。パラフィン包

ゴルジ装置に存在しムチン型糖蛋白の glycosylation

埋切片を，抗ヒトGalNAc‑T3ポリクローナル抗体とNo. 6, 2014457

審査学位論文要旨

抗ヒト thyroglobulin モノクローナル抗体を用いて免現と Tg の間に正の相関が認められた。Tg は甲状腺

疫組織染色を行い，光学顕微鏡にて細胞質内に Gal-

分化癌の腫瘍マーカーとしての役割を持つが，甲状腺NAc‑T3，thyroglobulin の発現を認めた場合をそれ癌由来の Tg は糖鎖の heterogenietyを有することがぞれ陽性とし，各症例の臨床病理学的因子と免疫組織示された。また，未分化癌での Tg の陽性率は10％染色との結果を解析した。

未満であり，甲状腺癌が低分化になり浸潤能が高まる【結果】正常甲状腺の GalNAc‑T3陽性率は85.8％でにつれて Tg の産生能が失われていくものと考えられあった。年齢，性別による統計学的な有意差は認めなた。甲状腺組織における GalNAc‑T3と Tg の直接のかった。甲状腺癌における GalNAc‑T3陽性率は，乳関連は明らかではないが，今回のわれわれの結果から頭癌73.7％，濾胞癌45.5％，未分化癌13.3％，髄様GalNAc‑T3の発現の低下には，分化型甲状腺癌の未癌０％であり，分化癌（乳頭癌，濾胞癌）において有分化転化に伴う，糖鎖の翻訳後修飾の変化が関与して意に高発現していた（p＜0.001）。乳頭癌における臨いる可能性が考えられた。

床病理学的因子との検討では，高分化型に分類される【結論】本研究より，GalNAc‑T3の発現は，甲状腺乳頭状構造，濾胞状構造では GalNAc‑T3陽性率は癌の分化度の有用な指標となりうることが示唆された。

70.7％であり，低分化型に分類される索状・充実性（論文審査の結果の要旨）

構造は14.6％であり，高分化の構造において有意に甲状腺癌は組織型により臨床像が大きく異なり，緩。そのほ
GalNAc‑T3発現の増加を認めた（p＜0.01）

徐に進行する分化癌（乳頭癌および濾胞癌）から極めかの臨床病理学的因子に関しては，GalNAc‑T3の発て悪性度の高い未分化癌が生じてくるが，その機序は現と組織学的腺外浸潤との間に有意な相関を認めた解明されていない。Ｎ‑アセチルガラクトサミン転移（p＜0.05）。濾胞癌においては濾胞状構造の陽性率が酵素（GalNAc‑T）は細胞質のゴルジ装置に存在し40.0％，索状・充実性構造が20.0％であり，高分化

ムチン型糖蛋白の glycosylation に最初に作用する糖の構造において発現が増加する傾向が認められたが，転移酵素である。特に GalNAc‑T3の発現は組織特異

統計学的な有意差は認められなかった。未分化癌にお性が高く，胃癌，大腸癌，肺癌などの腺癌においてそいては15例中13例が GalNAc‑T3の発現を認めなかっの発現と分化度や浸潤・転移等との相関が報告されてた。未分化癌の検体で，同一検体内に乳頭癌部を含むきた。

検体が７例あり，６例は乳頭癌部では GalNAc‑T3おそこで，本研究では，1997年から2005年に信州大学

よび thyroglobulin（Tg）がともに陽性であったが，医学部附属病院で切除した甲状腺癌169例（乳頭癌135

未分化癌部では両者の発現ともに陰性であった。

例，濾胞癌12例，髄様癌７例，未分化癌15例）の手術【考察】甲状腺癌における GalNAc‑T3の発現は，乳検体を用い，免疫組織化学的検討し，甲状腺癌におけ頭癌においては高分化型の構造でより高率に発現してる GalNAc‑T3の発現と臨床病理学的因子との相関をおり，未分化癌においてはほとんど発現が認められな検討した結果以下の成績を得た。

かった。甲状腺癌においては，浸潤傾向が強いほど

１．正常甲状腺のGalNAc‑T3陽性率は85.8％であっ

GalNAc‑T3の発現が増加していた。胃癌および食道た。

癌での検討では GalNAc‑T3の発現は腫瘍の浸潤と相２．甲状腺癌における GalNAc‑T3陽性率は，乳頭癌関することが，一方，膵臓癌，胆嚢癌では進行癌ほど

73.7％，濾胞癌45.5％，未分化癌13.3％，髄様癌

GalNAc‑T3の発現が低下していることが報告されて０％であり，分化癌（乳頭癌，濾胞癌）において有いる。さらに胆嚢癌と肝外胆管癌では，GalNAc‑T3

意に高発現していた（p＜0.001）。

現は非浸潤癌や微小浸潤癌で高く，進行癌の浸潤部に

３．乳頭癌における臨床病理学的因子との検討では，

おいて発現が低下していることが報告されている。今高分化型に分類される乳頭状構造・濾胞状構造では回の結果と合わせて考察すると，GalNAc‑T3の発現

GalNAc‑T3陽性率は70.7％であり，低分化型に分は内・外分泌腺組織と他の臓器では異なると考えられ類される索状・充実性構造は14.6％であり，高分た。髄様癌では GalNAc‑T3の発現が認められず，髄化の構造において有意に GalNAc‑T3の発現の増加

様癌が濾胞上皮細胞ではなくＣ細胞由来であることにを認めた（p＜0.01）。そのほか，組織学的腺外浸よると考えられる。

潤との間に有意な相関を認めた（p＜0.05）

今回の未分化癌における検討で，GalNAc‑T3の発458

４．濾胞癌においては濾胞状構造の陽性率が40.0％，
信州医誌 Vol. 62

審査学位論文要旨

索状・充実性構造の陽性率が20.0％であり，高分がともに陽性であったが，未分化癌部では両者の発化の構造において発現が増加する傾向が認められた

現ともに陰性であった。

が，統計学的な有意差は認めなかった。

これらの結果より，甲状腺癌において，GalNAc‑

５．未分化癌においては15例中13例が GalNAc‑T3の発現を認めなかった。未分化癌の検体で，同一検体

T3の発現が，分化度の有用な指標となりうることが示唆された。

内に乳頭癌部を含む検体が７例あり，このうち６例は乳頭癌部では GalNAc‑T3および thyroglobulin

よって，主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

Relationship between toe temperature and lower urinary tract symptoms（足指の温度と下部尿路症状との関係）井上博

夫（論文の内容の要旨）

スコアを記録し，手指，および，足指の温度をサーモ【背景と目的】環境温度の低温への変化は，循環器系，グラフィーにて測定した。生活習慣改善指導，および，神経系などに作用し，さまざまな生理学的反応をもた

末梢循環改善体操指導を行った。末梢循環改善体操をらす。泌尿器科領域においては，手足が冷えることで２週間実施した後，再度，血圧測定，IPSS，OABSS，

尿意切迫感や頻尿などの下部尿路症状が生じることが，QOL スコアを記録し，手指，および，足指の温度を経験的に知られている。しかし，冷えによる下部尿路測定した。

症状の発症機序は，不明な点が多い。これまで，冷え【結果】冷えを自覚する CS 群の BMI 値（22.6±2.6），

性の自覚と下部尿路症状の関連に対する疫学的調査は，収縮期血圧（123.4±14.6mmHg），拡張期血圧（73.4

ほとんどされていない。本研究は，冷え性と下部尿路±7.3mmHg）は，冷えを自覚しない CNS群の BM I

症状の関連性を明らかにするとともに，生活習慣改善値（23.6±2.6），収縮期血圧（120.0±13.7mmHg），

指導，および，末梢循環改善体操によって，冷え性の拡張期血圧（74.5±15.4mmHg）と有意な差を認め改善，あるいは，下部尿路症状の改善が認められるかなかった。末梢循環改善体操の実施前において，CS検討した。

群の手指の温度は，CNS群と比【方法】2011年10月松本市の健康管理セミナーに参加

しかし，体操実施前の CS 群の足指の温度（左28.7±

した50名（男性７名女性43名，平均年齢66.3歳）を対

3.7℃，右28.8±3.9℃）は，CNS 群における足指の象とした。問診によって，冷え性を自覚する群と冷え性

温度（左30.7±4.2℃，右30.8±4.3℃）と比 して，を自覚しない群に分けた。冷え性を自覚しない群（cold

有意に低かった。また，体操実施前の IPSS，OAB

non‑sensitive：CNS）は，男性３ 名，女 性20名，平

スコアにおいて，CS 群と CNS 群との比

均年齢66.9歳であった。冷え性を自覚する群（cold

意な差が認められなかった。

して，差がなかった。

では，有sensitive：CS）は，男性４名，女性23名，平均年齢

２週間の末梢循環改善体操実施後，CNS 群におい65.8歳であった。評価項目には，BMI値，安静時座位て，手指の温度変化は認められなかったが，CS 群の血圧，国際前立腺症状スコア（IPSS），過活動膀胱症

左手指において，有意な上昇が認められた。体操実施

状質問票（OABSS）を用いた。さらに，被験者の手後の足指の温度変化において，両群ともに，有意に上指，および，足指の温度をサーモグラフィーにて測定昇した。また，CS 群の足指の温度上昇は，CNS 群した。生活習慣改善指導として，水やコーヒーなどのと比水分制限，飲酒の制限・膀胱訓練・辛い食事の制限・

スコアにおいて，CS 群の改善傾向が認められた。２

便秘を避ける・長時間の座位を避けるなどの講演を週間体操実施後，両群の IPSS のトータルスコア，行った。末梢循環改善体操は，１）つま先立ち10から

QOL スコア，蓄尿症状スコアにおいて，有意な改善

20回，２）手首回転10から20回，３）スクワット10回を認めた。

を１セットとして，就寝前に15から20分間行い，２週【考察】本研究は，10月に行われ，寒さに敏感な冷え

間繰り返すとした。

性を伴う過活動膀胱の患者に対する，生活習慣指導と最初に，血圧測定，問診にて，BM I値，IPSS，OAB
No. 6, 2014

して，有意に上昇した。体操実施後，OABSS

体操実施の効果を評価するには，最適な時期であった
459

審査学位論文要旨と考える。CS群とCNS群を比すると，年齢・BMI・

名女性43名）で，問診により冷え性を自覚している被血圧に差がなく，下部尿路症状についても統計学的な

験者と冷え性を自覚していない被験者の２群に分け差を認めなかった。しかし，冷え性を自覚する人でのた。評価項目には，BMI値，安静時座位血圧，国際

足指の温度は，自覚しない人と比 すると，有意に低前立腺症状スコア（IPSS），過活動膀胱症状質問票

かった。

（OABSS），QOL スコアを用いた。さらに，被験 者

本研究において，末梢循環の改善と基礎代謝の改善の手指，および，足指の温度をサーモグラフィーにてを目的とした体操を実施することによって両群ともに，測定した。問診により生活習慣改善指導，末梢循環改

足指の温度の上昇を認めた。特に，CS 群においては，

善体操指導前の評価を行い，両手中指と両足中指の温CNS 群と比度を測定した。生活習慣改善指導を行うとともに，就して，上昇する傾向が認められた。こ

れらの結果から，冷え性を自覚する人における末梢循

寝前に末梢循環改善体操を２週間続けるよう指導した。

環と基礎代謝は，冷え性を自覚しない人よりも低下し２週間後，両手中指と両足中指の温度を再度測定し，ているものと考えられる。しかし，体操実施により末IPSS，OABSS，QOL スコアを用いて再評価した。

梢循環と基礎代謝が改善し，足指の温度が大きく上昇したと考えられる。年齢や身体状況により体操の実施や継続が制限される場合があるかもしれないが，末梢循環と基礎代謝を改善する体操は，冷え性を自覚する
人の手足の温度を改善するのに有用であることが示された。

その結果以下の成績を得た。
１．BMI と血圧は，冷え性自覚群と自覚なし群との両群で有意な差はなかった。
２．末梢循環改善体操体前，両群における足指の温度は，手指の温度より有意に低かった。
３．体操実施後，手指の温度は変化しなかったが，両日本泌尿器科学会からの過活動膀胱，男性の下部尿群における足指の温度は高くなった。

路症状と前立腺肥大症の診療ガイドラインでは，過活

４．体操実施後，冷え性を自覚する群の足指の温度上動膀胱の症状改善には，過剰な水分摂取の制限，膀胱

昇は，冷え性を自覚しない群よりも高くなる傾向が訓練や適切な排尿などの指導による生活習慣の改善があった。

勧められている。本研究は，これらのガイドラインに

５．生活週間改善指導と末梢循環改善体操実施２週間

沿った指導を行うとともに，末梢循環改善効果を目的

後，冷え性を自覚する群の OABSS は，冷え性をとした体操を２週間実施した。その結果，下部尿路症

自覚しない群と比 して改善傾向が認められた。

状，特に，蓄尿症状の改善効果を認めた。生活習慣指６．生活週間改善指導と末梢循環改善体操実施２週間

導や体操などは，下部尿路症状の改善や予防において，後，冷え性を自覚する群の IPSS トータルスコア，有用であることが示された。本研究では，冷え性を自IPSS 蓄尿症状スコア，QOL スコアは，冷え性を覚する人の足指の温度の低下，あるいは，末梢循環改自覚しない群と比 して有意な改善が認められた。

善体操による下部尿路症状改善における機序について

冷え性を自覚する群では，足指の温度低下が認めらの解明には至っておらず，今後さらなる研究が必要でれた。末梢循環の改善と基礎代謝の改善を目的としたあると考える。

体操を行うことにより，足指の温度の上昇を認めた。

（論文審査の結果の要旨）
東洋医学における 冷え

特に，冷え性を自覚する群の足指の温度は，冷え性をは，重要な症状とされて自覚しない群よりも有意に上昇した。２週間の生活習いる。手足が冷えることで尿意切迫感や頻尿などの下慣改善と末梢循環改善体操により，蓄尿症状の改善が部尿路症状を生じる，あるいは悪化することが経験的認められた。また，冷え性を自覚する群では，その改に知られている。しかし，西洋医学では， 冷え と善効果が大きい傾向にあった。末梢循環改善体操は，いう概念は，重要視されておらず，冷えと下部尿路症

冷え性を自覚し，下部尿路症状を有する患者において，状に関する疫学調査は少ない。本研究は，冷え性の有症状の改善，あるいは，予防に有用であると考えられ

無における，冷えストレスと下部尿路症状の関係を明た。

らかにし，生活習慣改善指導，および，２週間の末梢循環改善体操の実施により，下部尿路症状の変化を評

以上より主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

価した。
対象は健康管理セミナーに参加した50名（男性７460

信州医誌 Vol. 62

審査学位論文要旨

Chronic ethanol consumption decreases serum sulfatide levels by suppressing hepatic cerebrosidesulfotransferase expression in mice（マウスにおける慢性的なエタノール投与は肝臓中セレブロ
シドスルホトランスフェラーゼの発現を低下させることにより血清中サルファタイド濃度を減
少させる）
神

戸

宏

樹

（論文の内容の要旨）

レスの関与が示唆された。さらに，典型的凝固促進因【背景と目的】過去の疫学調査から慢性的なアルコー子の一つである血清中 tissue factor レベルは中及び

ル大量摂取と血栓症との関連が示唆されているが，両高用量エタノール投与群で有意に増大し，血清サルファ者の関連を説明するメカニズムは未だ不明である。サタイドレベルの減少に逆相関していた。

ルファタイドはセラミド，ガラクトース及び硫酸基か【結論】慢性的なアルコール大量摂取では血清中サルら構成される内因性スフィンゴ糖脂質であり，血清中

ファタイドが減少した。これは肝臓での酸化ストレス

サルファタイドは抗血栓作用を有することが知られて増加，CST の発現低下に関連していると考えられた。

いるが，アルコール摂取が血清中サルファタイドに与これらの結果は，慢性的なアルコール多飲者におけるえる影響は今まで調べられていない。本研究では，慢

心血管系及び脳血管イベントの発症率の増加を説明す

性的なアルコール大量摂取と血栓症との関連についてる新たな知見を提示している。

調べるため，マウスを用いて抗血栓作用を有すること（論文審査の結果の要旨）が知られている血清及び肝臓中サルファタイドに影響

過去の疫学調査から，慢性的なアルコール大量摂取を与えるかどうか，またその分子機構の解明を試みた。

と血栓症，例えば心筋梗塞や脳血管障害との相関が示【方法】野生型メスマウス（26週齢，Sv/129系統）を唆されているが，両者の関連を説明するメカニズムはコントロール群，低用量（0.5g/kg/day），中用量（1.5

未だ不明である。サルファタイドは内因性スフィンゴ，及び高用量エタノール投与群（3.0g/kg/
g/kg/day）

糖脂質であり，抗血栓作用を有することが知られてい，エタノールを21日間腹day）に分類し（各群６匹）

るが，アルコール摂取が血清中サルファタイドに与え腔内投与した。最終投与２時間後に血清及び肝臓を採る影響は今まで調べられていない。本研究では，アル取した。血清及び肝臓を用いて，中性脂肪，サルファ

コール摂取が血清及び肝臓中サルファタイドに影響を

タイド濃度を測定した。血清を用いてリポプロテイン

与えるかどうか，そしてその分子機構の解明を試みた。

分布，ALT，AST，エタノール濃度及びtissue factor

野生型メスマウスに低，中及び高用量（それぞれを測定した。肝臓を用いてコレステロール定量，過酸

0.5，1.5及び3.0g/kg/day）のエタノー ル を21日 間化脂質マーカーの解析，病理組織学的解析，real‑time

腹腔内投与した後に血清・肝臓を採取し，サルファタ

PCR法による mRNAの分析，イムノブロット法によ

イド濃度，エタノール濃度，tissue factor 及び生化学

るタンパク発現量解析を実施した。

パラメータの分析，過酸化脂質マーカーの解析，病理【結果】エタノール投与により血清 ALT，AST 値の組織学的解析，real‑time PCR 法による mRNA の分上昇，血清及び肝臓中のコレステロール及びトリグリ

析，タンパク発現量解析を実施した。

セライド量の有意な変化は認められず，肝臓の病理学

その結果，「神戸宏樹」は次の結論を得た。

的検索でも肝細胞変性や炎症，脂肪化などの病的変化

１．エタノール投与により血清 ALT，AST 値の上は観察されなかった。一方，血清及び肝臓中サルファ

昇，血清及び肝臓中のコレステロール及びトリグリ

タイドは中及び高用量エタノール投与群で有意に減少

セライド量の有意な変化は認められず，肝臓の病理した。サルファタイド合成酵素の一つである肝臓セレ学的検索でも肝細胞変性や炎症，脂肪化などの病的ブロシドスルホトランスフェラーゼ（CST）の発現変化は観察されなかった。

が mRNA 及びタンパクレベルで減少しており，これが血清サルファタイドの減少に関連していると考えら

２．血清及び肝臓中サルファタイドは中及び高用量エ
タノール投与群で有意に減少した。

れた。さらに CST の低下は肝臓での過酸化脂質量と３．肝臓において，サルファタイド合成酵素の一つであ

逆相関しており，CST の発現低下における酸化スト

るセレブロシドスルホトランスフェラーゼ（CST）

No. 6, 2014461

審査学位論文要旨の発現が mRNA 及びタンパクレベルで減少してお逆相関していた。

り，これが血清サルファタイドの減少に関連してい以上より，慢性的なアルコール大量摂取は酸化ストると考えられた。

レスの増大と肝臓中 CST 発現を減少させることによ

４．CST の低下は肝臓での過酸化脂質量と逆相関し，り血清中サルファタイドレベルを減少させることが示

酸化ストレス消去酵素であるカタラーゼ及び super-唆された。これらの結果は，慢性的なアルコール多飲

oxide dismutase の発現と相関しており，CST の者における心血管系及び脳血管イベントの増加のメカ発現低下における酸化ストレスの関与が示唆された。

ニズムを理解する新たな知見であると考えられた。し５．凝固促進因子の一つである血清中 tissue factor
レベルは中及び高用量エタノール投与群で有意に増たがって主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

大し，血清サルファタイドレベルの減少と比 してClinical Results and Pump Analysis of the Gyro Pump for Long‑term Extracorporeal Life Support（ジャイロポンプを用いた長期体外循環の臨床成績とポンプの解析）
寺

﨑

貴

光

（論文の内容の要旨）【結果】７症例すべて心肺補助導入時は人工呼吸管理【目的】Gyro pump は通常の開心術で，主に６時間以を要する状態であった。２例は心停止を契機に，残り下の使用を目的として市販されている遠心ポンプであの５例はショック状態での導入であったが，全症例でるが，抗血栓性にすぐれ長期間使用に適した構造上の心肺補助開始後に速やかにショックを脱した。２症例特徴を有しており，当科では Gyro Pump を用いた回は心肺補助を離脱し退院，右心補助を行った１例は拍路で長期心肺補助を行っている。

動型心室補助装置に切り替えて生存したが，残りの４

今回，Gyro pump により４日以上の長期心肺補助

症例は心肺補助から離脱できず死亡し，死亡率は57.1を行った症例について，その臨床成績と使用したポン％であった。回路交換期間は平均10.5±7.2日，平均プの解析を行い，Gyro pump の長期使用の可能性に補助期間は22.6±16.4日であった。回路交換は症例１ついて検討を行った。

で４回，症例２，４，６，７で１回の計８回で，交換【対象と方法】Gyro pump はインペラーをポリカーボ

理由は酸素化能低下５回路，その他は人工肺の血栓，

ネイトの外殻で覆い，ポンプ内に Double pivot bear-

追加手術，感染であった。ACT は平均188秒で，回

ing system を有することで完全なシールレス構造を

転数は2262±604回/分，流量は2.4±0.6Ｌ/分であっとっている。インペラーには上下に vane を作成するた。AST，LDH は重症な患者背景を反映して導入時ことで血流の停滞を防ぎ，結果として抗血栓性に優れは高値であったが心肺補助開始後はいずれも速やかにた形態を有している遠心ポンプである。

低下し，開始４日後には概ね AST＜100IU，LDH＜

2008年４月から2012年３月の間，Gyro pumpを長期

1000IU 以下に維持可能であった。AST，LHD の値補助として使用した７症例15回路を対象とし，レトロと補助期間には相関関係は認められなかった（AST

スペクティブに早期成績と回路状況，補助期間の血液R ＝0.043，LHD R ＝0.12）。使用後の観察で２つの検査結果を検討した。長期心肺補助導入となった原因

ポンプの軸周辺に血栓形 成 を 認 め た。う ち 一 方 はは，開心術後の低心拍出量症候群４例，急性心筋梗塞，もう一方は低回転（1143±
ACT 低値（141±23秒）

２例，心筋炎１例であった。６症例は左心補助として，173回/分）であった。電子顕微鏡での６ポンプの解析

１症例は LVAD 装着時の右心補助として用いた。までは，軸受け部の摩耗は上部で0.02±0.03mm，下た，すべての回路は使用後に観察・検査を行い，内６

部では0.00±0.00mm であった。軸受け部の摩耗と回路は走査電子顕微鏡で軸と軸受け部分の観察を行っ補助期間の相関は認めなかった（R ＝0.005）。

た。なお，補助期間中の ACT は180秒以上を目標と【考察】心肺補助はショックに陥ったのち速やかに導し，人工肺出口の動脈血酸素分圧は200mmHg を維入したにもかかわらず mortalityは57.1％と高かっ持するよう調節した。回路交換の理由は人工肺の酸素た。文献上も mortalityは54‑66％と高く，長期心肺化不良，ポンプの異音，回路内の血栓形成とした。

補助が必要となる症例の救命は依然困難な状況にある。

462

信州医誌 Vol. 62

審査学位論文要旨

しかしながら Gyro pump の平均補助期間は10日を超の組み合わせで長期の心肺補助を行い，⑴ 長期心肺え，他の遠心ポンプを使用した場合の平均期間（2.2‑

補助を行った症例の臨床成績と運用状況⑵ 使用した3.8日）の報告を上回る結果であった。この検討から

血液ポンプの解析を行った。

Gyro pump による長期心肺補助の有用性が示唆されたと考える。

その結果以下の結果を得た。
１．７症例，計15回路を使用し，死亡症例は７症例中

AST，LDH 値は補助開始後４日には低下し，補助４例（57.1％）であった。

期間中やや高値にとどまったが補助期間と値の相関は２．平均使用期間は10.5日，補助期間は平均22.6日，認めなかった。15回路中２回路で LDH のみ再上昇を

回路交換理由は酸素化能低下５回路，その他は人工認めたが，AST 値は全症例で再上昇を認めず，LDH
再上昇の原因は個々の症例の重症度によるものと判断した。このことから Gyro pump の血球障害性の低さが伺えた。

肺の血栓，追加手術，感染であった。
３．ACT は平均188秒で，回転数は2262±604回/分，流量は2.4±0.6Ｌ/分であった。
４．AST，LDH は重症な患者背景を反映して導入時

使用後ポンプの解析で血栓を２つのポンプで認めたは高値であったが心肺補助開始後はいずれも速やかが，軸上部に認めたポンプでは出血コントロールのたに低下し，開始４日後には概ねAST＜100IU，LDH

めヘパリン投与が不十分で ACT 値が低かったことが，＜1000IU以下に維持可能であった。AST，LHD

また下部の軸周辺に血栓を認めたポンプでは低回転での値と補助期間には相関関係は認められなかったあったことが原因と考えられた。走査電子顕微鏡を用（AST R ＝0.043，LHD R ＝0.12）。

いた検討で上部軸受けに0.02±0.03mm の摩耗を認

５．使用後15回路の肉眼的観察で２つのポンプの軸めた。摩耗の程度は大動物を用いた14‑33日間の長期

周辺に血栓形成を認めた。うち一方は ACT 低 値補助の報告と同程度で，このポンプの長期臨床使用の（141±23秒），もう一方は低回転（1143±173回/分）

可能性が示唆された。

であった。

【結語】低心拍出症候群に至った症例の救命は依然困

６．走査電子顕微鏡での６ポンプの解析では，軸受け難ではあるが，Gyro pump による心肺補助は，適切部の摩耗は上部で0.02±0.03mm，下部では0.00±

な抗凝固療法下で長期補助可能な device であると考

0.00mm であった。軸受け部の摩耗と補助期間のえる。

相関は認めなかった（R ＝0.005）。
（論文審査の結果の要旨）

以上より，低心拍出症候群に至った症例の救命は依Gyro pump（Medtronic）はダブルピボットベアリ

然として困難な状況にあるといえるが，Gyro pump

ングを有することでシールレス構造をとっており，まによる心肺補助は，適切な抗凝固療法使用下では長期た上下に vane を有することで抗血栓性にすぐれ長期補助可能な device であると考えられる。したがって使用に適した構造上の特 徴 を 有 し て い る。寺 﨑 は主査，副査は一致して本論文を学位論文として価値がGyro Pump とメラ NHP エクセランプライム人工肺あるものと認めた。

Association of nuclear YB‑1 localization with lung resistance‑related protein and epidermal growth
factor receptor expression in lung cancer（肺癌における YB‑1の核内局在と LRP，EGFR の発現
との関連）
兵庫谷

章

（論文の内容の要旨）

剤耐性機構に寄与すると考えられている。LRP は乳【背景】YB‑1は，癌細胞における細胞増殖，DNA 複癌，卵巣癌で予後不良因子であることが報告されてい製，薬剤耐性などに重要な役割を果たす転写因子で，る。EGFR は細胞膜に存在する糖蛋白で，epidermal

抗がん剤，紫外線などのストレスに反応して活性化

growth facter などの特異的なリガンドと結合するこされることが知られている。LRPは doxorubicin耐とにより活性化され，腫瘍細胞の増殖を亢進し，アポ性の肺癌の cell line で発現の亢進が発見された蛋白トーシス，血管新生，浸潤を抑制すると言われている。

で，細胞内の標的より薬剤を運び出すことにより，薬また，EGFR の過剰発現は，非小細胞肺癌の予後不No. 6, 2014463

審査学位論文要旨

良因子であることが報告されている。最近大腸癌で，かな発現減少しか認めなかった。これは，肺癌においYB‑1が LRP の発現を上昇させることが報告された。

て，LRP 発現の制御に YB‑1以外の因子も関与して

また，乳癌において，YB‑1の欠損が EGFR の発現をいることを示唆していると考えられる。kashihara ら

抑制することが報告された。本研究の目的は，原発性の研究では，NSCLC cell line PC‑9において YB‑1の肺癌において，YB‑1がLRPおよびEGFRの発現と相発現低下が EGFR の発現を減少させることを証明し関するか，さらにYB‑1の核内局在，LRP，EGFRの発たが，A549を含む他４種のセルラインでは発現の減現が肺癌の予後と関連するかどうかを解明することで少を認めなかった。さらに，肺癌の臨床検体においてある。

YB‑1の核内発現と EGFR の発現に相関を認めなかっ【対象と方法】信州大学病院にて2000年から2001年にた。本研究との間の矛盾は，臨床検体の患者特性の違手術を行った非小細胞肺癌症例105例を対象とした。

いに起因する可能性があると考えられる。

YB‑1の核内発現および LRP，EGFR の発現は免疫【結論】我々の研究は，非小細胞肺癌において，YB‑

組織化学にて解析した。YB‑1メッセンジャー RNA

1の核内局在は，LRP と EGFR の発現と関連するこのノックダウンには２種類の SiRNA を用い，肺癌細と，さらに YB‑1の核内局在と LRP，EGFR の発現

胞株 A549と Calu‑3についてウエスタンブロッティン

が，非小細胞肺癌の予後因子として意義があることをグにてそれぞれの発現を検討した。

示した。

【結果】YB‑1の核内発現は LRP，EGFR の発現陽性（論文審査の結果の要旨）と良く相関した（P＜.001）。YB‑1の核内発現とLRP，

YB‑1は，癌細胞における細胞増殖，DNA 複製，

EGFR の発現陽性は，非小細胞肺癌患者において独

薬剤耐性などに重要な役割を果たす転写因子で，抗が立した予後不良因子であった（P＜.001）。さらに，ん剤，紫外線などのストレスに反応して活性化される

YB‑1の核内発現と LRP の発現が共に陽性の腫瘍をことが知られている。最近大腸癌で YB‑1が LRP のもつ患者は，それらが共に陰性の患者に比べ，著しく発現を上昇させることが報告され，また乳癌において予後不良であった（P＜.001）。加えて，YB‑1の核内

YB‑1の欠損が EGFR の発現を抑制することが報告さ

発現と EGFR の発現が共に陽性の腫瘍をもつ患者も，れた。

それらが共に陰性の患者に比べ，著しく予後不良でそこで，本研究では，信州大学病院にて2000年からあった（P＜.001）。非小細胞肺癌の細胞株 A549と2001年に手術を行った非小細胞肺癌105例の手術検体

Calu‑3を用いたin vitroでの解析では，siRNAによるを用いた免疫組織化学的解析と，非小細胞肺癌の細胞

YB‑1の発現低下は，EGFR の発現を大幅に減少させ

株 A549と Calu‑3を用いた in vitro での解析で検討し，た。一方で，siRNAによるYB‑1の発現低下は，A549

YB‑1がLRPおよびEGFRの発現と相関するか，さらにおいて LRP の発現を著明に減少させたが，Calu‑3に YB‑1の核内局在，LRP，EGFR の発現が肺癌のにおいては，僅かな減少を引き起こしたのみであった。

予後と関連するかどうかを検討した結果以下の成績を【考察】我々は，非小細胞肺癌の臨床検体に お い て得た。

YB‑1の核内発現が LRP と EGFR の発現に相関する

１．YB‑1の核内発現は LRP，EGFR の発現陽性とこと，さらに YB‑1の核内発現とともに LRP あるい

良く相関した（P＜.001）。

は EGFR の発現が増加している非小細胞肺癌は予後

２．YB‑1の核内発現と LRP，EGFR の発現陽性は，が悪いことを証明した。また，in vitroの解析において，非小細胞肺癌患者において独立した予後不良因子でYB‑1の SiRNAによる発現低下は EGFRと LRPの発あった（P＜.001）。

現を減少させた。これらの結果は，YB‑1の核内移行

３．YB‑1の核内発現と LRP の発現が共に陽性の腫が LRPと EGFRの発現上昇を誘導し，腫瘍をより活

瘍をもつ患者は，それらが共に陰性の患者に比べ著発な性質に導くことを示唆していると考えられた。こしく予後不良であった（P＜.001）。また，YB‑1のの報告では，NSCLCのcell line A549において，YB‑

核内発現と EGFR の発現が共に陽性の腫瘍をもつ

1の siRNA による発現低下が LRP の発現を減少させ患者も，それらが共に陰性の患者に比べ著しく予後た。これは肺癌細胞において，YB‑1が LRP 発現の不良であった（P＜.001）。

制御機能を持つことを示唆すると考えられる。しかし

４．非小細胞肺癌の細胞株 A549と Calu‑3を用いた

今回，他の NSCLC の cell line である Calu‑3では僅in vitro での解析では，siRNA による YB‑1の発現464

信州医誌 Vol. 62

審査学位論文要旨

低下は，EGFR の発現を大幅に減少させた。一方

核内局在は LRP と EGFR の発現と関連すること，で，siRNA による YB‑1の発現低下は，A549におさらに YB‑1の核内局在と LRP，EGFR の発現が非いて LRP の発現を著明に減少させたが，Calu‑3に小細胞肺癌の予後因子として意義があることを示した。

おいては，僅かな減少を引き起こしたのみであった。

よって，主査，副査は一致して本論文を学位論文とこれらの結果より，非小細胞肺癌において YB‑1のして価値があるものと認めた。

Overexpression of O‑GlcNAc by prostate cancer cells is signiﬁcantly associated with poor prognosisof patients（前立腺癌細胞における O‑GlcNAcの過剰発現は前立腺患者の予後不良と密接に関連している）
上垣内

崇

行（論文の内容の要旨）

LNCaP および control LNCaP を作成し，これら２【背景と目的】この数年，発生，再生，増殖，分化，

種類 LNCaP の OGT mRNA の定量，O‑GlcNAc のシグナル伝達などの細胞生物学の現象のみならず，神発現，細胞形態の変化，E‑cadherin の発現，増殖能経筋肉疾患，感染症，生活習慣病などでも，糖鎖が直および浸潤能を比 した。

接または間接的にその発症に関わることが明らかに【結果】前立腺針生検標本56例すべてにおいて癌細胞なっており，癌領域においても糖鎖と癌の転移，浸潤，は免疫染色にて O‑GlcNAc 陽性を示し，同一標本内増殖などとの関係が報告されている。O‑結合型 N ‑における正常腺管の染色性と比 して弱く発現するもアセチルグルコサミン（O‑GlcNAc）は転写，翻訳，のを弱発現患者群，強く発現するものを強発現患者群

核輸送，タンパク質の安定性，細胞質間の相互作用なと定義したところ，弱発現患者群34例（60.4％），強発

どの細胞活動に必須の糖鎖で，核および細胞質内に存

現患者群22例（39.3％）に分けられた。O ‑GlcNAc

在する種々のタンパク質のセリンあるいはスレオニンの染色と Gleason score の関係を検討すると強発現残基に，N ‑アセチルグルコサミン（GlcNAc）が１

患 者 群 の ほ う が 有 意 に Gleson scoreが 高 く 高 悪 性

分子結合した O‑GlcNAc 化蛋白質として存在する。

度であった（P＜0.01）。また５年生存率を比O‑GlcNAc 化は翻訳後修飾によるタンパク質の機能

ところ強発現患者群が有意に予後不良であった（P＜制御機構の一つであり，その修飾はリン酸化と同じ部

0.01）。コックス比例ハザードモデルを用いた単変量

位またはその近傍で相補的または拮抗的に修飾され，酵

解析では，PSA 値，病期および O ‑GlcNAc の染色素であるO‑GlcNAc転移酵素（O‑GlcNAc transferase，性が有意に予後に影響する因子であった（P＜0.05）。

OGT），O‑GlcNAc除去酵素（O‑GlcNAcase，OGA）

さ ら に，多 変 量 解 析 で は PSA 値，病 期，Gleason

により触媒される。近年，肺癌，乳癌，大腸癌などにscore，O‑GlcNAcの染色性のなかで唯一O‑GlcNAc

おいて O‑GlcNAc は腫瘍の進展に促進的に働くことの染色性のみが独立した予後予測因子であった（Ｐ＝が報告されているが，in vitro またはマウスを使用し0.0475）。in vitro の実験においては real time RT‑た報告が主であり，臨床的検討の報告は少ない。今回，

PCR に よ る 解 析 で OGT

我々は前立腺癌における O‑GlcNAc の発現とその臨OGT mRNA は control LNCaP に比床的意義を明らかにするため，前立腺癌生検標本並び減少することが確認された。また，Western blot解に前立腺癌培養細胞株である LNCaP を用いて解析

析により35および39kDa 付近の O ‑GlcNAc 化蛋白した。

質が OGT knockdown LNCaP で減少することも確【方法】1996年から2002年に長野市民病院泌尿器科に認できた。さらに，OGT knockdown LNCaP の細胞

おいて前立腺針生検により病理学的に前立腺癌と診断

形態および E‑cadherin の発現は control と比され，年齢や病期からホルモン治療を受けた56例の病変化は認められなかった。M TS assayによる増殖能，

理標本につき O‑GlcNAc の発現を免疫組織化学的にInvasion assayによる浸潤能は OGT

分析し，臨床病理学的パラメータおよび５年生存率とLNCaP で有意に低下した。

の関係を検討した。また，in vitro の実験として前立【結論】病理組織学的に O ‑GlcNAc の強発現は統計

腺癌培養細胞株 LNCaP を用いて OGT

学的に独立した予後不良因子であった。また in vitro

No. 6, 2014

knockdown

した

knockdown LNCaP のし て12％ にしてknockdown465審査学位論文要旨の実験においても O‑GlcNAc は前立腺癌の増殖およ常腺管での発現量と比

び浸潤に促進的に働くことが示された。以上より，前者群と低発現患者群の二群に分類すると，単変量解

立腺癌組織の O‑GlcNAc 免疫染色は予後予測に有用析において O‑GlcNAc 強発現患者群は弱発現患者と考えられた。

群に比 して有意に予後が不良である。

（論文審査の結果の要旨）

し，O‑GlcNAc 強発現患

３．PSA値，Gleason score，病期およびO‑GlcNAc

O‑結合型N ‑アセチルグルコサミン（ O‑GlcNAc）の発現量の４つの因子の中で，O‑GlcNAc の発現

は転写，翻訳，核輸送，タンパク質の安定性，細胞質

量のみが多変量解析における唯一独立した予後予測間の相互作用などの細胞活動に必須の糖鎖である。癌因子である。

領域においては肺癌，乳癌，大腸癌で腫瘍の進展に促

４．LNCaP 細胞の O‑GlcNAc 転移酵素を抑制する

進的に作用することが知られているが，前立腺癌でどことにより35および39kDa付近の O‑GlcNAc化蛋のように作用するかほとんど明らかにされていない。

白質が減少する。

本研究では前立腺癌の病理標本において O‑GlcNAc

５．LNCaP 細胞を用いた解析により，O ‑GlcNAcの免疫組織化学的解析を行うことにより O‑GlcNAc

は腫瘍細胞の増殖能や浸潤能を促進するが，E‑の発現と臨床病理学的パラメータおよび生存率との相

cadherin の発現と細胞形態には影響しない。

関を検討，さらに前立腺癌培養細胞株である LNCaP

以上の結果より，前立腺癌において O‑GlcNAc はを用いて O‑GlcNAc が前立腺癌細胞の増殖や浸潤に臨床的および実験的ともに腫瘍の進展に対して促進的

対してどのように作用するかを検討した。

に作用し，予後を規定する重要な因子であることが示

その結果，上垣内は次の結論を得た。

された。前立腺癌患者において O‑GlcNAc の発現を

１．前立腺針生検組織において O‑GlcNAc はすべての前立腺癌細胞に発現する。

免疫組織化学的に分析することが予後を予測する上で重要であると考えられた。よって主査，副査は一致し

２．前立腺癌細胞における O‑GlcNAc の発現量を正て本論文を学位論文として価値があるものと認めた。

Role of bone marrow cells in the development of pancreatic ﬁbrosis in a rat model of pancreatitis
induced by a choline‑deﬁcient/ethionine‑supplemented diet（choline‑deﬁ
cient/ethionine‑supplemented diet によるラット膵炎モデルを用いた，膵線維化における骨髄細胞の役割に関する研究）
秋

田

眞

吾

（論文の内容の要旨）は明らかではない。今回，コリン欠乏エチオニン添加【背景と目的】膵星細胞（pancreatic stellate cell，（choline deﬁcient ethionine supplemented；CDE）

以 下 PSC）は，生 理 的 状 況 下 で は periacinar/per-

飼料ラット膵炎モデルを用いて，骨髄細胞由来 PSC

iductular space に存在し，細胞質にビタミンＡを含の経時的な変化について検討し，骨髄細胞由来 PSC

む脂質小滴 が 認 め ら れ，Desmin や glial ﬁbrillary

が PDGF や TGFβ1を産生するか否かも検討した。

acid protein（GFAP）な ど の 中 間 フ ィ ラ メ ン ト タ【方法】Lewisラット・♂に，致死量の放射線（10Gy）

ンパクを有し て い る。膵 臓 の 障 害 に よ り PSCは 活を全身照射後，Green ﬂuorescent protein（GFP）トラ性化され，細胞質のビタミンＡの消失とともに筋線

ンスジェニックラット・♀の大腿骨から採取した骨髄維 芽 様 細 胞 に 形 質 転 換 し て alpha smooth muscle

細胞（５×10 個）を尾静注し骨髄置換を行った。骨

actin（αSM A）やcytoskeletal proteinを発現し，細髄置換６週間後に採血し，ﬂow cytometlyにより骨胞外基質蛋白だけでなく，PSC 自体を 活 性 化 す る

髄置換率を確認後，CDE 飼料を１，３，８週間投与

platelet‑derived growth factor（PDGF）や，trans-

しモデルを作製した。

forming growth factor β1（TGFβ1）などを産生し，① 膵障害の程度を hematoxylin and eosin 染色にて，

autocrine roop を形成する。近年，マウスの慢性膵炎

膵の線維化の評価を Masson Trichrome 染色にて経モデルにおいて PSC の一部は骨髄細胞（BMC）由来

時的に検討した。

であることが確認されたが（Marrache，2008Gut），② Desmin，αSMA の免疫染色により，PSC の出現

BM C が膵線維化において果たす役割の詳細についてと活性化細胞の程度，範囲を検討した。

466

信州医誌 Vol. 62

審査学位論文要旨③ GFP の免疫染色により膵組織内における骨髄由来

近年，マウスの慢性膵炎モデルにおいて PSC の一細胞の有無を検討した。GFP＋Desmin の二重免疫染部は骨髄細胞（BM C）由来であることが確認された色により骨髄由来 PSC の有無を，GFP＋αSMA のが（Marrache，2008Gut），BMC が膵線維化におい二重免疫染により骨髄由来活性型 PSC の有無を検討て果たす役割の詳細については明らかではない。

した。また，GFP＋Desmin（またはαSM A）二重免疫

本研究では CDE（Choline‑deﬁcient ethonine‑sup-

染色により骨髄由来 PSCと骨髄由来活性型 PSCの割

plement）によるラット膵炎モデルにおいて，BMC 由

合を，無作為に選んだ400倍，５視野内の細胞数で評来の活性化 PSC 数の経時的変化と，同細胞が PDGF

価した。

や TGFβ1産生能を有するか否かについて検討した。

④ GFP＋αSMA＋PDGF（またはTGFβ1）の三重免方法：雌の GFP（green ﬂuororecenct protein）trans-

疫染色を行い，骨髄由来活性型 PSC による PDGF まgenic rat の BMC を，10Gyの全身照射を行った雄

たは TGFβ1産生の有無を検討した。

に移植。６週間後より CDE の摂取を開始。１，３，【結果】CDE 飼料投与１週間から膵腺房細胞の萎縮，８週後に犠牲死させ，① 膵組織を GFP と desmin or線維化が出現し，３週間では tubular complexes がαSMA を用いて二重染色を行い，BM C 由来の活性出現，膵腺房細胞萎縮，葉間と細胞間の線維化が進

化 PSC数をカウント，② 三重染色（ GFP＋ αSMA＋行した。８週後には steatosisが生じ，線維化による

PDGF or GFP＋αSMA＋TGFβ1）にて，BMC 由来

bridging ﬁbrosis や nodular appearance が認められの 活 性 化 PSC の PDGF or TGFβ1産 生 能 を 検 討た。骨髄由来 PSC は CDE 飼料投与善意も存在し，（CDE開始後１週目のラットを使用）。BMC移植施行，投与後１週間で，骨髄細胞由来活性型 PSC は活性型

CDE 摂取未施行ラットをコントロール（CR）とした。

PSCの約23％となったが，その後は８‑９％であった。
また，骨髄細胞由来活性型 PSCは，PDGFと TGFβ1

その結果，秋田眞吾は今回の実験で次の結果を得た。
１．BMC由来の活性化 PSC数は，CRと比し CDEを産生していることが認められた。

摂取後１週で有意に上昇し（全PSCの23.3±0.9％），【結語】骨髄細胞由来 PSC は，膵臓内に常に存在しピークとなりその後は CR と同程度まで低下した。

ていた。CDE 飼料投与後１週間という早い時期に，

２．BMC由来の活性化PSCの中に，PDGF or TGFβ1

骨髄細胞由来 PSC が急増し活性型 PSC の約1/4を占にて染色される細胞を認めた。

め，PDGF や TGFβ1を産生する事が証明された。膵

以上の結果から，CDE によるラット膵炎モデルに

炎早期の炎症と線維化に骨髄細胞由来 PSC が関与し

お い て，BMC 由 来 の PSC は CDE 投 与 開 始 後 １ 週ている可能性が示唆された。

間という比（論文審査の結果の要旨）
膵星細胞（pancreatic stellate cell，以下 PSC）は，的早い段階から活性化され，PDGFや

TGFβ1の産生を介して膵の線維化に関与している
可 能 性 が あ る と い う 結 果 を 得 た。本 論 文 は，CDE

生理的状況下では periacinar/periductular space に（Choline‑deﬁcient ethonine‑supplement）によるラッ

存在し，休止状態では細胞質にビタミンＡを含む脂質

ト膵炎モデルにおいて，BM C 由来の活性化 PSC 数

小滴が認められ，desmin や glial ﬁbrillary acid pro-の経時的変化と，同細胞が PDGF や TGFβ1産生能

tein（GFAP）のような中間フィラメントタンパクをを有することをはじめて，明らかにしたものであり主有している。一旦，膵の障害がおこると PSC は活性査，副査は一致して本論文を学位論文として価値があ化され，細胞質のビタミンＡの消失とともに筋線維芽るものと認めた。

様細胞に形質転換して alpha smooth muscle actin（αSM A）や cytoskeletal proteinを発現する。活性化されたPSCは線維化を促進する extracellular matrix
proteinだけでなく，PSCを活性化 す る こ と が 知 られている platelet‑derived growth factor（PDGF）などのサイトカインや，transforming growth factor
β1（TGFβ1）などの成長因子も産生することが知られている。このように PSC は膵線維化において重要な役割を担っている。
No. 6, 2014467

審査学位論文要旨

The eﬀect of vascular pedicle preservation on blood ﬂow and clinical outcome following ulnar nerve
transposition（尺骨神経前方移動術において，伴走血管の温存が血流と術後成績におよぼす影
響）
中

村

恒

一

（論文の内容の要旨）

4）握力（GP），5）母指と示指の側方つまみ力（SP），【背景と目的】尺骨神経皮下前方移動術は肘部管症候

5）小指の２点識別距離（2PD）による感覚機能分類，群（Cubital tunnel syndrome：CubTS）の標準的手

6）小指の圧感覚である Semmes‑Weinstein（SW ）術治療法とされている。しかし，この手術では尺骨神

monoﬁlament test 値。

経を移動する際に周囲の 離が必要で，そのため神経【結果】１）尺骨神経血流量の比の血流低下が危惧される。この欠点を補うために，伴non‑VP 群は16例であった。２群間において，年齢，

走血管を温存した尺骨神経前方移動術が考案され広く

性別，罹患側，肘の可動角度，M cGowan 分類に有意用いられている。伴走血管の温存と非温存では尺骨神差は認めなかった。尺骨神経移動前でのそれぞれの測経の血流にどの程度違いがあるのか，伴走血管の温定部位での血流は肘伸展位および肘90°
屈曲位ともに存が術後尺骨神経機能回復に影響を与えるのかを明

２群間で有意差を認めなかった。尺骨神経移動後の各らかにする目的で，prospective randomized clinical

点での血流は VP群が non‑VP群よりも肘伸展位，90°

studyを行った。

屈曲位ともに有意に高値であった。２）肘部管症候群【方法】肘関節症を有する CubTS 患者を対象とした。

の臨床成績の比

ランダムに血管柄温存尺骨神経皮下前方移動術群

分類，DASH，MCV，2PD，SW では VP 群と non‑

（Vascular Pedicle：VP 群）と伴走血管を凝固切離

VP 群の間に有意差を認めなかった。術後３，６カ月

して尺骨神経皮下前方移動術を行う血管柄非温存群の評価でも，すべての項目において２群間で有意差（non‑VP 群）に分けた。【手術方法】肘内側の皮膚切はなかった。術後12カ月の評価では，DASH scoreで開で進入し，肘部管近位にて尺骨神経を同定し，Os-

VP群が有意に低値（良好）であったが，DASH scoreborne 靱帯と尺側手根屈筋の深部筋膜で構成される肘を除いたすべての項目で２群間に有意差を認めなかっ

部管支帯を切離した。近位より superior ulnar collat-

た。

，inferior ulnar collateral
eral artery（SUCA）【考察】今回の結果では伴走血管を温存した場合の方：VP 群は20例，：術前の評価において，McGowan

artery（IUCA），posterior ulnar recurrent arteryが神経移動直後の神経血流は有意に高値に保たれるこ（PURA）を同定した。VP 群ではこれら３本の伴走とがわかった。術後１年での DASH score が伴走血動脈を温存し，non‑VP 群では３本すべてを結紮切離管を温存した群で有意に良好であったが，尺骨神経機し，神経を前方に移動した。【レーザードプラーによ

能以外の上肢全体の機能や肘変形性関節症の程度がる血流評価】レーザードプラー血流計（FLO‑N1，

DASH score の差に影響したのではないかと思われ

Omegawave，Tokyo，Japan）を用いて尺骨神経上た。術後１年までの M CV，握力，側方ピンチ力，感の血流を評価した。内上顆部のレベルをＭ点，それよ覚機能などの神経機能の回復には，伴走血管の温存はり近位２cm をＰ点，遠位２cm をＤ点とし，３点で影響を与えず，伴走血管を結紮切離しても，温存した血流を測定した。測定時期は，① 神経移動前の肘最場合と同様の神経機能回復を示した。

大伸展位，② 神経移動前の肘90度屈曲位，③ 神経移（論文審査の結果の要旨）

動後の肘最大伸展位，④ 神経移動後の肘90度屈曲位

尺骨神経皮下前方移動術は肘部管症候群（Cubitalとした。空気止血帯を解除した10分後に20秒間の血流

tunnel syndrome：CubTS）の標準的手術治療法とさを測定し，その平均を血流値とした。
【術前，術後臨れているが，この手術は尺骨神経を移動する際に周囲

床評価】術前と術後３，６，12カ月で以下の項目を評の 離が必要で，そのため神経の血流低下が危惧され

価 し た。1）尺 骨 神 経 麻 痺 重 症 度 評 価 の M cGowan

る。この欠点を補うために，伴走血管を温存した尺骨

分類，2）患者立脚型上肢機能評価法である DASH

神経前方移動術が考案され用いられている。伴走血管，
score，3）尺骨神経の運動神経伝導速度（MCV 値）の温存と非温存では尺骨神経の血流にどの程度違いが468

信州医誌 Vol. 62

審査学位論文要旨

あるのか，伴走血管の温存が術後尺骨神経機能回復に

小指の圧 感 覚 を 示 す Semmes‑Weinstein（SW ）影響を与えるのかを明らかにする目的で，prospec-

monoﬁlament test 評価では VP 群と non‑VP 群のtive randomized clinical studyを行った。ランダム間に有意差を認めなかった。

に血管柄温存尺骨神経皮下前方移動術群（Vascular

３．術後12カ月の評価では，DASH scoreで VP群がPedicle：VP 群）と伴走血管を凝固切離して尺骨神有意に低値（良好）であったが，DASH score を

経皮下前方移動術を行う血管柄非温存群（non‑VP

除いたすべての項目で２群間に有意差を認めなかっ群）に分けて，術中のレーザードプラー血流計によるた。

尺骨神経の血流量を比 した。また，術後３，６，お以上より，伴走血管を温存した場合の方が神経移動

よび12カ月での臨床成績を比 した。

直後の神経血流は有意に高値に保たれることがわかっその結果以下の結果を得た。

た。しかし術後１年までの McGowan 分類，運動神

１．尺骨神経移動後の神経の血流は VP 群が non‑VP

経伝導速度，握力，側方ピンチ力，感覚機能などの神群よりも肘伸展位，90°
屈曲位ともに有意に高値で経機能の回復には，伴走血管の温存は影響を与えず，あった。

伴走血管を結紮切離しても，温存した場合と同様の神

２．術前および術後３，６カ月の評価において，麻痺

経機能回復を示すことがわかった。

重症度を示す McGowan 分類，患者立脚型上肢機

肘部管症候群に対する手術方法に関する新しい知見

能評価法である DASH score，尺骨神経の運動神を提唱した本論文は極めて重要な研究であり，した

経伝導速度，握力，母指と示指間の側方つまみ力，がって主査，副査は一致して本論文を学位論文として小指の２点識別距離（2PD）による感覚機能分類，価値があるものと認めた。

Frequency of mitochondrial mutations in non‑syndromic hearing loss as well as possibly responsible
variants found by whole mitochondrial genome screening（非症候群性難聴患者における難聴関連
遺伝子変異について：全ミトコンドリア遺伝子スクリーニングを用いた検討）矢野（論文の内容の要旨）

卓也の面から検討を行った。

先天性難聴は出生児1,000人に１人に見られる頻度

コホート１とコホート２の直接シーケンス法によるの高い先天性疾患である。先天性難聴には100種類以

解析では19種類の既知変異が同定された。この中で病上の遺伝子が関与しているとされ，すでに様々な遺伝的変異として確立している４変異はコホート１におい子について，変異の頻度，種類，表現型についての報て14.6％（37/254），コホート２において0.7％（1/

告がなされている。今回，我々は難聴の原因の一つで140）に認められた。このうち1555Ａ＞Ｇ変異，3243

あるミトコンドリア遺伝子についてスクリーニングを

Ａ＞Ｇ変異が多いことが確認され，母系遺伝家系にお行い，日本人の非症候群性難聴患者における１）既知

ける難聴の重要な原因であることが明らかとなった。

の難聴関連遺伝子変異の頻度，および２）新規の難聴

次に，10種類の新規病的変異候補のうち3595Ａ＞Ｇ，関連遺伝子変異について検討を行った。

6204Ａ＞Ｇの２種類においては１）常染色体優性遺伝

日本人難聴遺伝子データベース（全国33施設より集もしくは母系遺伝家系である，２）哺乳類におけるア

められた難聴遺伝子家系発端者）のうち，母系遺伝難

ミノ酸保存性が50％を超えて高い，３）ミトコンド

聴家系群254名（コホート１）と様々な遺伝形式をと

リア難聴に特徴的な高音障害型難聴像を示したことかる難聴家系群140名（コホート２）について全ミトコ

ら新規病的変異の可能性が高いことが推測された。

ンドリア遺伝子の直接シーケンス法による解析を行い，今回の研究により日本人におけるミトコンドリア難難聴の原因となる既知変異についての頻度について検聴変異の頻度がより明確となり，ミトコンドリア遺伝討を行った。次に，検出された塩基置換のうち公表さ子変異を持つ患者への詳細な情報提供が可能となった

れているミトコンドリアデータベースにて多型塩基置と考えられる。また新規変異候補として２つの変異が換を除外し，新規の難聴関連遺伝子変異と思われるも同定され難聴原因究明の足がかりとなると考えられた。

のについて塩基置換の哺乳類における保存性，聴力像
No. 6, 2014469

審査学位論文要旨（論文審査の結果の要旨）
先天性難聴は出生児1,000人に１人に見られる頻度の高い先天性疾患である。遺伝性難聴には100種類以認された。また，このうち1555Ａ＞Ｇ変異，3243Ａ＞
Ｇ変異が多いことを確認し，母系遺伝家系における難聴の重要な原因であることが明らかとなった。

上の遺伝子が関与しているとされ，すでに様々な遺伝

次に，検出された塩基置換のうち新規難聴関連遺伝

子について，変異の頻度，種類，表現型についての報

子変異について検討したところ，10種類の新規病的変告がなされている。

異候補を認めた。そのうち3595Ａ＞Ｇ，6204Ａ＞Ｇの本論文において矢野卓也は日本人難聴患者における２種類においては１）常染色体優性遺伝もしくは母系

１）既知の難聴関連遺伝子変異の頻度，および２）新遺伝家系である，２）哺乳類におけるアミノ酸保存性

規の難聴関連遺伝子変異について検討を行った。

が50％を超えて高い，３）ミトコンドリア難聴に特まず，母系遺伝形式を呈する難聴家系の発端者254
名（コホート１）と様々な遺伝形式をとる難聴家系群

徴的な高音障害型難聴像を示したことから新規病的変異の可能性が高いと考えられる。

140名（コホート２）を対象に全ミトコンドリア遺伝

本論文により，日本人難聴患者の母系遺伝形式にお子解析を行い，難聴の原因となる既知変異についてのけるミトコンドリア遺伝子変異の既知変異の頻度が高頻度について検討した。その結果，コホート１とコホーいことが明らかになった。また新規変異候補として２ト２の直接シーケンス法による解析では19種類の難つの変異が同定され，一定の知見が得られたことは今聴に関係する既知変異を認め，この中で病的変異とし後の研究の上で非常に重要な発見であると考えられる。

て確立している４変異はコホート１において14.6％

以上より，主査，副査は一致して本論文を学位論文（37/254），コホート２において0.7％（1/140）に確470として価値があるものと認めた。

信州医誌 Vol. 62