超迅速! 大腸菌コンピテントセル

ECOS

TMCompetent E. coli

ECOS TM (イーコス)コンピテントセルについて
Cloning

ECOSTM Competent E. coli は、回復ステップであるSOC培地での培養を必要とせず、短時間で形質転換を行うことができる画期的なコンピテントセルです。
また、形質転換効率も高く、凍結融解や長期保存が可能です。

高速・高効率で形質転換できる

凍結融解ができる※１● ６分間プロトコール

短時間プロトコール

短時間でも高効率を実現！

● １分間プロトコール

長期保存ができる※２

お好みの量に小分けして、残りを−80℃で凍結保存可能。

サブクローニングにお勧め！

形質転換効率低下の目安は１年間で約１/２程度です。
−80℃のフリーザーで保管した場合の実績に基づいています。

※1. 6分間、1分間プロトコールはセレクションにアンピシリンを使う場合にのみ有効です。
※2. 一度の凍結融解（再融解）では形質転換効率はほとんど低下しませんが、凍結融解の繰り返しは大幅な低下につながります。

最短１分間で完了！

ECOSTM シリーズ

製品名

ECOSTM Competent E.coli DH5α
ECOSTM Competent E.coli DH5α -Jumbo PackECOSTM Competent E.coli JM109ECOSTM Competent E.coli XL1-Blue
ECOSTM Competent E.coli BL21(DE3) ※３

1分間／６分間プロトコール

Code No.

容量

希望納入価格(税別）

310-06236

50μl×40 本￥40,000

316-06233

100μl×20 本￥36,000

314-06234

100μl×80 本￥132,000

312-07031

500μl×06 本￥39,000

317-06246

50μl×40 本￥40,000

313-06243

100μl×20 本￥36,000

311-06244

100μl×80 本￥132,000

317-06523

100μl×10 本￥24,000

315-06524

100μl×20 本￥44,000314-06533

100μl×10 本￥27,000

312-06534

100μl×20 本￥50,000※３. カルタヘナ法該当品

形質転換効率（ECOS ™ 1 分間プロトコールで実施した場合）： DH5α、JM109、XL1-Blue ≧ 1×107 cfu/μg pUC19 DNABL21（DE3） ≧ 1×106 cfu/μg pUC19 DNA

高効率(109)なDH5α株！

ECOSTM X

６分間プロトコール

製品名Code No.

容量

希望納入価格(税別）

ECOSTM X Competent E.coli DH5α

310-07733

100μl×10 本￥32,000

形質転換効率（ECOS ™X 6 分間プロトコールで実施した場合）： DH5α ≧ 1×10 cfu/μg pUC19 DNA9

詳細は裏面へ

クローニングにも使用可能なBL21（DE3）改変株！
製品名

ECOSTM SONIC Competent E.coli BL21（DE3）Derived ※３

ECOSTM SONIC

Code No.

容量314-09073

100μl×10 本

形質転換効率（ECOS ™SONIC 6 分間プロトコールで実施した場合）： BL21（DE3）Derived ≧ 1×10 cfu/μg pUC19 DNA
7６分間プロトコール

希望納入価格(税別）￥34,000※３. カルタヘナ法該当品

ECOS TM Competent E. coli の特長について① 高速・高効率で形質転換できます（最短1分間）● 薬剤にアンピシリンを使用する場合、回復ステップであるSOC培地での培養が不要です。
特別な製法で調製したECOSTMコンピテントセルは薬剤にアンピシリンを使用する場合、回復培養の工程を省略して短時間で形質転換を行うことができます。薬剤にカナマイシンやテトラサイクリンを使用する場合は、熱処理後に培地を添加し、回復培養を行ってからプレートに移して下さい。

≪短時間プロトコールの使い分け≫
１分間プロトコール ・・・サブクローニングにお勧め
６分間プロトコール ・・・短時間でも高効率に形質転換できる（1分間プロトコールの2〜3倍）
大腸菌形質転換の操作フロー

ECOSTM コンピテントセル
薬剤にアンピシリンを使用

１分間プロトコール
Plasmids < 6 kb

省略可
詳しくは当社HPへ

６分間プロトコール
Plasmids > 6 kb

従来コンピテントセル

その他の薬剤を使用

回復培養プロトコール

従来プロトコール

氷上でコンピテントセルを融解

氷上で融解冷却したプラスミド溶液 または ライゲーション溶液を添加

DNA溶液を添加

ボルテックスで 1秒 撹拌
ヒートショック 45秒

氷上で静置 5分

氷上で静置 5分

氷上で静置 20分

LBプレートに塗布

ヒートショック 45秒

ヒートショック 45秒

ヒートショック 45秒

37℃でインキュベート

LBプレートに塗布

氷上で静置 2分

氷上で静置 2分

操作時間

37℃でインキュベート

SOC培地を加え、37℃で約30分間インキュベート

SOC培地を加え、37℃で約60分間インキュベート

操作時間

LBプレートに塗布

LBプレートに塗布

37℃でインキュベート

37℃でインキュベート

約１分間

約６分間

操作時間

操作時間

約40分間

約1時間30分● 他社類似品（短時間プロトコール対応）と比較して、高い形質転換効率を得ることができます。
≪実験例１≫ 形質転換効率の比較（他社比較）

16
形質転換効率（×108 cfu/µg pUC19）

薬剤にアンピシリンを使用する場合、SOC培地による回復培養不要な２製品「ECOSTM Competent E. coli DH5α」および「他社DH5α」を用いて、pUC19 DNA（1 pg）を添加し、各社推奨の短時間プロトコール（ECOSTM：約6分間、他社：約10分間）で形質転換を行った。Bac'n' RollBeads（Code No.314-06251）を用いて、100 µL全量をLBプレートに塗布し、37℃でインキュベート後に形質転換効率を比較した。

181412108642＜結果＞本品の6分間プロトコールは、他社類似製品と比較して、高い形質転換効率を得ることができました。

0他社DH5α② 凍結融解による効率低下を最小限に抑えられます● お好みの量に小分けして、残りを−80℃で再度保管できます。

ECOSTM Competent E. coli DH5αおよび従来型の他社製品を氷上で融解後、−80°Cで再凍結させたものを使用し、各社プロトコールで形質転換を行った。

BC

D

E

F

形質転換効率（×107 cfu/µg pUC19）≪実験例２≫ 再凍結融解による形質転換効率への影響

A

従来型 他社DH5α＜結果＞本品は凍結融解後でも約85%以上の効率を維持＊しました。

A：ECOSTM 1分間プロトコール
B：ECOSTM 1分間プロトコール（凍結融解後）
C：ECOSTM 6分間プロトコール
D：ECOSTM 6分間プロトコール（凍結融解後）E：従来型 他社プロトコール
F：従来型 他社プロトコール（凍結融解後）＊ 一度の凍結融解（再凍結）では形質転換効率はほとんど低下しませんが、凍結融解の繰り返しは大幅な低下につながります。

※1③ SOC培地による回復培養なし でも効率は下がりません

ECOSTM Competent E. coli JM109及び従来型の他社JM109を各社プロトコールで比較した。
プロトコールは、ECOSTM1分間プロトコール、ECOSTM 6分間プロトコール、他社製品プロトコール（SOC培地を添加して培養する従来型のプロトコール、約2時間）で行った。

1 min

6 min2h

1 min

6 min2hAB

CDE

F

形質転換効率（×107 cfu/µg pUC19）≪実験例３≫ 回復培養の有無による形質転換効率の違い＜結果＞本品は1分間プロトコールでも十分な効率が得られます。
さらに6分間プロトコールは、従来型他社プロトコール（2時間）で使用した場合と同等以上の性能を発揮しました。

従来型 他社JM109
A, D：ECOSTM 1分間プロトコール
B, E：ECOSTM 6分間プロトコール
C, F：従来型 他社プロトコール、2時間（回復培養あり）※1. 薬剤にアンピシリンを使用する場合。

④ 長期保存ができます● 形質転換効率低下の目安は、−80℃のフリーザーで保管した場合、1年間で約1/2程度 ※2 です。
また、液体窒素による保存は不要です。
※2. －80℃のフリーザーで保管した場合の実績に基づく。

さらに高い形質転換効率が必要な実験には● 高効率 ≧ 1×10 cfu/μg pUC19 DNA
9● 短時間（6分間プロトコール）※3● 高度なクローニングやライブラリー作製に使用可能＜6分間プロトコールでの形質転換効率の比較＞
形質転換効率（×108 cfu/µg pUC19）

ECOSTM X Competent E.coli DH5α

35302520151050

ECOSTM X
DH5α

ECOSTMDH5α

従来型 他社
DH5α※3. 薬剤にアンピシリンを使用する場合。

タンパク質発現の所要時間を短縮！
ECOSTM SONIC Competent E.coli BL21（DE3）Derived
本品は大腸菌BL21(DE3)株からrecAおよびendA遺伝子を欠損させた改変株のコンピテントセルです。
クローニングとタンパク質発現を別々の菌株で行う従来法と比べて、作業時間を大幅に短縮することができます。

● クローニングとタンパク質発現の両方に使用可能● 本品に直接クローニングすることで、タンパク質発現までの所要時間を短縮可能※4● 短時間（6分間プロトコール）で高効率形質転換≧ 1×107 cfu/μg pUC19 DNA※4. 薬剤にアンピシリンを使用する場合。

タンパク質発現の操作手順（従来法との比較）
Day 1（Day 1）

Day 2 （Day 4）

ライゲーション

Day 3（Day 5）
本培養

前培養

形質転換

IPTG発現誘導
プラスミド ※
抽出/解析

従来法

SONIC

従来法

（Day 2）（例：K12株とB株の併用）（Day 3）

プラスミド
抽出/解析

液体培養

形質転換

※ 培養開始4-6時間でプラスミド抽出が可能
目安の時間です。導入するプラスミドの条件によって異なります。

≪実験例≫ プラスミドDNA収量の比較
大腸菌を形質転換した後、コロニーをピックアップし、液体培養（各2 mL)を行った。培養4時間後と6時間後にサンプリングした大腸菌培養液
各1.5 mLからISOSPIN Plasmidを用いてプラスミドpUC19 DNAを抽出し、DNA量の測定とアガロースゲル電気泳動を行った。
プラスミドDNA収量比較

5.04.5MM

培養4時間

4.0
DH5α

収量（µg)

3.5SONICDH5αSONIC

培養6時間
DH5α

SONIC

3.02.5pUC192.0
1.50.8% Agarose S
各レーンに抽出プラスミド5 µL (n=3)

1.00.5DH5α：ECOS TM Competent E. coli DH5α
SONIC：ECOS TM SONIC Competent E. coli BL21(DE3) Derived
M: Gene Ladder Wide 1 (Code No. 313-06961)

0.0

培養4時間

培養6時間

本品は、DH5α株と比べて液体培養開始4時間後と6時間後のプラスミドDNA収量が高かった。

■ 関連製品Code No.

容量

希望納入価格(税別）

ISOSPIN Plasmid

大腸菌からのプラスミドDNA抽出

100 回用

￥18,000

311-07763

Gene RED PCR Mix Plus

2×プレミックスタイプ PCR試薬

96 回分￥8,600314-09311

TEV Protease (Glycerol free)

配列特異的プロテアーゼ

1 mg￥24,000

317-09301

HRV-3C Protease

配列特異的プロテアーゼ

1 mg￥30,000

318-07991

製品名〒930‐0834 富山市問屋町二丁目7番18号
TEL： 076‐451‐6548 FAX： 076‐451‐6547
URL： http://www.nippongene.com

本社 〒540-8605 大 阪 市 中 央 区 道 修 町 三 丁 目 1 番 2 号 TEL ：06-6203-3741 (代表)東京本店 〒103-0023 東京都中央区日本橋本町二丁目4番1号 TEL ：03-3270-8571 (代表)
フリーダイヤル

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フリーファックス

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20230829HT