2020 年 2 月 12 日

ISO TC/194 WG8 Arlington 会議報告
（一財）食品薬品安全センター 金澤由基子
報告者：国立医薬品食品衛生研究所 加藤 玲子
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会議名
ISO/TC194/WG8
開催地
米国／アーリントン
開催日
2019 年 10 月 16-17 日
出席者 WG8 出席者は下記の通り（敬称略）
座長 Christian Pellevoisin,（フランス）
日本（金澤、黒澤、谷川、加藤）、アメリカ、オランダ、フランス、ドイツ、イタリ
ア、中国、韓国など

5. 主要課題
1) 刺激性試験 (10993-23)について前回のベルリン会議の討議を受けて作成された ISO/ DIS 10993-23 に対するコメント対応を元に討議が行われた。
＜日本のコメントに対する対応＞
・ ベルリン会議において陽性対照の細胞生存率の判定基準が< 40%とすると結論づけられたが、RRS のプロトコルでは『生存率 < 50%』であり、本結果が既に論文化されていることから、根拠なく< 40%とするのは、科学性に乏しいと意見した。陽性対照である以上、より厳しくするべきとの意見があったが、日本の意見を支持する声もあった。結局、初日の討議では決着がつかず、翌日の討議へ持ち越した。本件に関する日本としての落とし所をメールにて討議した結果、ベルリン会議での結論を受け入れることとなり、会議でもその旨を伝え本件は決着した。
（＊RRS において、陽性対照材料である Y-4 のゴマ油抽出液での EpiDerm モデルを用いた試験の結果、生存率が 50%未満ではあったが 40%を超えている施設があったことから、上記の意見を出していたが、日本の関係者の中で相談し、Y-4については、実運用で対応すればよいと結論づけた。）
・ 文書全体を通して残っている誤植を指摘し、FDIS までにすべて修正されることとなった。
・ 2nd endpoint としてのサイトカイン測定に関して、IL-1a記載と同じ位置へのMIF の記載を提案した。現在投稿中の論文がアクセプトされ、WG8 メンバーがその内容を承認すれば、提案が受け入れられることとなった。
＜その他の主な変更点・論点＞
・「 Determination of skin irritation of medical device extracts using

Reconstructed human Epidermis (RhE)」から「Tests for irritation」に変更された。
・ RhE モデルを利用した in vitro 皮膚刺激性試験の適用範囲や結果の解釈（Step-wise approach の考え方を含）についても議論されたが明確な結論がでず、zoom 会議での討議へ回されている。
2)

感作性試験 (10993-10)について
前回のベルリン会議の討議を受けて作成された ISO/ CD 10993-10 対するコメン
ト対応を元に討議が行われた。
＜日本のコメントに対する対応＞
・文書全体を通して残っている誤植を指摘し、DIS までにすべて修正されることとなった。
＜in vitro 感作性試験法 - Annex C - ＞
・当初予定されていた下記の in vitro 試験法の概要が全て掲載された。記載ミスや最新情報への変更などのコメントがあり概ね受け入れられた。
＜主な論点＞
・FDA から、Annex A (Preparation of materials for sensitization testing)に、
NOTE: For polymeric materials, the extraction method described in Annex B
can be used for submission to some regulatory regions."を追記する提案がなされた。
・さらに有機溶媒抽出について記載がある Annex B (Method for the preparationof extracts from polymeric test materials)に、下記の追記が提案された。
B.X Extraction method considerations

This method has the following limitations, which could result in false
negative findings in the test:
Extraction in methanol or acetone is recommended in this Annex. For
evaluating the sensitization potential of a device, both polar and non-polar
extractables from the device are recommended (See Clause x). The
methanol/acetone recommended as the extraction vehicle here is not as polar
as saline which is commonly used as the polar extraction vehicle for preparing
the test extract for biocompatibility testing of medical devices. Thus, theamount of polar extractables in methanol/acetone could be much lower thanthe polar extractables in saline. The extract residue obtained in this methodresults from evaporation of the solvent or another drying process following
extraction. This process could lead to loss of volatiles and/or semi-volatilecompounds from the extract.
→ 日本としては、このまま受け入れるのは難しいと判断し、この件は WG8だけでなく、WG12、WG6 にも関係するので、改めて議論したい。日本の意見を整理して 2 月までに提案するということで、持ち帰ることとした。
3)

プレゼンテーション
1. RhE モデルを利用した in vitro 皮膚刺激性試験の最新情報について；Dr.
Coleman, USAØ RRS と同じ試験試料を用いて、RRS で検証された 2 モデル（EpiDerm及び SkinEthic) 以外の RhE モデルで同様の検証が行われていることが紹介された。
現在進行中： epiCS （ドイツ）、EpiKutis（中国）
検証済み：LabCyte（日本）Ø RhE モデルでの結果と皮内試験についての比較に関する考察が述べられた。
・RhE モデルは通常の皮膚よりもはるかに透過性が高い。
・皮内注射された薬物（刺激性物質）は、皮下または筋肉内注射よりも速く全身的に影響を与える。
・RRS と同じ試験試料の抽出液を用いた皮内反応試験の刺激性の判定結果は、同等であると結論づけられていた。
→ 比較に使用したサンプル数が少ない、皮内への直接投与は皮膚刺激とメカニズムが異なっている（FDA メンバーも同様の意見）ことから、現時点では日本は、RhE モデルを利用した in vitro 試験はあくまでも皮膚刺激性試験と考えている。
2. in vitro 眼刺激モデルについて；Prof. Kwon, Korea
Ø 再構築ヒト角膜様上皮モデル （RhCE）を利用した眼刺激試験ついて紹介があった。
・RhE モデルの RRS 時に使用した試験試料で試験を行ったところ、偽陰性と判定される物質があった。さらに動物試験では、刺激性物質が含まれるすべての被験物質で非刺激性と判定された。→ 抽出液中の刺激性物質の濃度に問題があると考え、SDS 及び Genapol x-100 において、動物試験で刺激性と判定される濃度を検討し、ポリマーに練り込まれたそれぞれの物質の抽出液中の濃度を測定し比較したところ、抽出液中の濃度は動物実験で刺激性と判定された濃度より遥かに低濃度であることが判明した。
（SDS は約 1/50, Genapol x-100 は約 1/75 程度）そこで歯科用シリコンに SDS の粉末を混ぜ込んだ新たな reference material を作製。動物試験で刺激性判定が出る material が作製でき、RhCE と相関がある結果を示されていた。今後 RRS を行いたいとのこと。

6. 今後の作業とスケジュール・ 10993-10 DIS 及び 10993-23 FDIS を TC194 メンバーに回覧する予定であったが、10993-23 に関しては次回の総会の前に Zoom-meeting が開催される。
＜主な論点＞
1. RhE モデルを利用した in vitro 皮膚刺激性試験の適用範囲について
2. 刺激性及び非刺激性の判定の確認：抽出液の少なくとも 1 つがプラスの効果（生存率≤50％）を示す場合、試験された医療機器またはその構成物は刺激性を有するとみなされる。二つの溶媒で生存率が> 50%であれば、その機器もしくは機器の構成物は非刺激性であると考えられるとされていたが、コンビーナーから再確認の要請
3. Step-wise approach について
4. RRS で検証されていない、他の RhE モデルの取り扱いについて
次回開催の場所と日程
青島/中国、2020 年 5 月