学術情報 ～会員企業のプロバイオティクス研究のいま～株式会社 明治 研究本部
所
員
数 約500名
研究開発体制 食機能科学研究所
技術開発研究所

食品開発研究所
品質科学研究所

はじめに菓子開発研究所

株式会社明治（以下、明治）の乳酸菌研究の原点

１. 1073R-1 乳酸菌による免疫機能の調整にあるのは「ヨーグルトの伝統」
を科学することで■1073R-1乳酸菌が産生する多糖体の免疫賦活作用す。ヨーグルトは、コーデックス規格により「ブ

現在、乳酸菌の機能性として免疫賦活作用に関ル ガ リ ア 菌（Lactobacillus delbruecki subsp.

する報告が多く出されています。免疫賦活作用をbulgaricus 、 以 下L.bulugaricus ）お よ び サ ー モ

持つ物質として、ナメコやオクラなどのヌルヌルフィルス菌（Streptococcus thermophilus ）の作用の成分である多糖体が知られますが、乳酸菌も菌により、乳及び乳製品を乳酸発酵して得た凝固乳体外に多糖体を産生しています。この多糖体は製品」と定義されており、ブルガリアに伝わる伝

extracellular polysaccharides（EPS）と呼ばれ、統的なブルガリアヨーグルトが、まさにこの定義やはり免疫賦活作用が報告されていました。に該当する発酵乳です。明治は、4,000株以上のそこで、当社の持つブルガリア菌のライブラ乳酸菌ライブラリーをベースに、ヨーグルト研究

リーからEPSを多く産生する菌種をスクリーニのパイオニアであるメチニコフ やグリゴロフ＊2ングし、L.bulgaricus OLL1073R-1（以下、1073R-1の志を受け継ぐべく、40年以上にわたりヨーグ乳酸菌）に着目しました。1073R-1乳酸菌が産生ルトの保健作用や美味しさを研究し、また、美味す るEPSを 分 離・ 精 製しく食べて健康を維持するという、食品としてのし、試験管内でマウスのヨーグルトの価値を探求しています。

脾臓細胞に72時間作用さ＊1

今回は明治の食品開発研究所を訪れ、同社が進せたところ、リン酸基をめる数多くの研究のうち、乳酸菌による免疫機能持つ酸性EPSにおいて培調整作用と、ピロリ菌抑制作用を中心にお話を伺

養上清中のIFN-γ＊3の濃いました。

度上昇がみられ、IFN-γ＊1：イリヤ・メチニコフ（1845 ～ 1916）…ウクライナ出身の生物学者。ヨーグルトの保健効果を科学的に研究したパイオニアで、ヨーグルト不老長寿説の提唱者でもあった。

産生誘導活性を持つこと＊2：スタメン・グリゴロフ（1878 ～ 1945）…ブルガリア出身の医学者。ブルガリアヨーグルトの研究を続ける中で3種類の乳酸菌を発見。これらの菌がブルガリアヨーグルトの発酵を促し、独特の酸味と風味をもたらす主要菌であると発表した。

が 認 め ら れ ま し た。
〔以上、文献1より〕▲1073R-1乳酸菌＊3：IFN-γ（インターフェロン・ガンマ）…免疫細胞であるヘルパー T細胞が分泌する生理活性物質で、他の免疫細胞を活性化する作用などを持つ。

＊181614121086＊1614NK活性（%）

NK活性（%）

図1 1073R-1EPSおよび1073R-1乳酸菌を使用したヨーグルトのNK活性増強効果

42012108642

蒸留水

0酸性EPS
酸性EPS
5mg/kg30mg/kg＊p<0.05 by Dunnett s test

■マウスへの経口投与によるNK活性増強効果

蒸留水

1073R-1乳酸菌を使用したヨーグルト

対照
未発酵乳
ヨーグルト
＊p<0.05 by Student s t -test■健常高齢者における、1073R-1乳酸菌を使用した（マウス試験）

ヨーグルト摂取による免疫機能調整効果（ヒト試験）酸性EPSをマウスに3週間経口投与し、脾臓細1073R-1乳酸菌を使用したヨーグルトの摂取

胞のNK活性＊4について調べました。また同様に、が、ヒトの免疫機能に与える影響を調べるため

1073R-1乳酸菌を使用したヨーグルトや、EPSをに、健常高齢者を対象とした長期試験を実施し産生しない菌株を使用したヨーグルトを凍結乾燥ました。対象者は、山形県舟形町に住む70 ～ 80

し、200mg/bodyの投与量で4週間経口投与して歳の57名と、佐賀県有田町に住む60歳以上の85NK活性を調べました。その結果、いずれも蒸留名。どちらの地域も、無作為に二つのグループ

水投与群に比べNK活性の上昇が認められ、EPSに分けて調査しました。一つは、1073R-1乳酸投与試験では30mg/kgの投与群において、また菌を使用したヨーグルトを1日90g食べる群、もヨーグルト凍結乾燥物投与試験では1073R-1乳酸

う一つは牛乳を1日100ml飲む群です。摂取期間

菌を使用したヨーグルトにおいてNK細胞の上昇は、舟形町は8週間、有田町は12週間とし、試験が認められました（図1）。
〔以上、文献1による〕開始前と終了後の2回、問診、アンケート調査、＊4：NK活性…ウイルスに感染した細胞を攻撃・破壊するNK細胞（免疫細胞の一種）の働きの強さを示す指標。

採血を行って各指標を測定しました。
その結果、ヨーグルト摂取群、牛乳摂取群ともにNK活性の是正効果がみられました（図2）。
つまり、被験者を試験前のNK活性で低値群、正常値群、高値群に層別化してみると、低値群で

図2 健常高齢者における1073R-1乳酸菌を使用したヨーグルトの摂取前後でのNK活性の是正効果
舟形町 ヨーグルト摂取群

6070
NK活性（%）

NK活性（%）

70
50
403020a10

NK活性（%）

70

牛乳摂取群

6050

高値群

40

正常値群

30

低値群

2010

摂取前

0摂取後

有田町 ヨーグルト摂取群

6050
40b30

a2070
NK活性（%）

0

舟形町

牛乳摂取群
高値群

50

正常値群

40

a30

低値群

201000

摂取後

有田町

摂取後

60

10摂取前

摂取前

摂取前

摂取後

a:p<0.05 vs 摂取前
b:p<0.01 vs 摂取前
by paired t -test

は正常値へと上昇し、高値群では正常値へと変化

イルと同タイプのH1N1亜型ウイルスをマウスにしていたということです。特にヨーグルト摂取群感染させ、1073R-1乳酸菌の効果を検討しました。

では、低値群において正常値へと有意に上昇した実験では、ウイルス接種21日前から4日後まで、ことが認められました。
〔以上、文献1より〕

1073R-1乳酸菌を使用したヨーグルトを与えたマウスと、同乳酸菌が産生するEPSを与えたマウ■健常高齢者における風邪症候群罹患リスクの低スを、蒸留水を与えたマウスと比較して生存率を減効果（ヒト試験）観察しました。

舟形町と有田町の研究では、風邪の罹患リスク

その結果、蒸留水を与えた群ではウイルス接種についても検討を行いました。その結果、牛乳を7日後から死に始め、9日後には全てが死亡しまし飲んだときに風邪をひくリスクを1としたとき、た。一方、ヨーグルトを与えた群ではウイルス摂取

ヨーグルト摂取群は、有田町は0.44で低下する傾21日後の生存率が37.5％で、蒸留水を与えた群に向がみられました。一方、舟形町では0.29でした

比べ、明らかな生存率の上昇と生存日数の延長がが有意な差がみられませんでした。そこで二つを確認されました。また、EPSを与えた群では、ウ統合して解析（メタ解析）をすると0.39と、有意にイルス接種21日後の生存率は11％でした。EPS低下することが明らかになりました（図3）。〔以投与群でも生存日数の延長効果が認められ、抗イ上、文献1より〕

ンフルエンザウイルス活性にはEPSも寄与していることが明らかになりました（図4）。
〔以図3 1073R-1乳酸菌による風邪罹患リスク低減効果
1.2

風邪をひくリスク1.0

上、文献1より〕風邪をひくリスクが有意に低くなる

1.00■ウイルス価低減効果とNK活性増強効

0.8
0.6

0.44（p＝0.084）

0.29（p＝0.103）

0.40.2

舟形町0.0

牛乳摂取果（マウス実験）
0.39
2つの試験結果を （p＝0.019）
統合して解析

上記実験と同様の実験系でウイルス感
染4日後にマウスを解剖し、肺洗浄液中

有田町の感染ウイルス価（ウイルスの細胞感染能力）を調べたところ、ヨーグルトを与1073R-1乳酸菌を使用した1073R-1乳酸菌を使用した
ヨーグルト摂取
ヨーグルト摂取（メタ解析）
検定方法：Fisher s exact test , メタ解析：Mantel-Haenszel method.

えた群、EPSを与えた群ともに、蒸留水を与えた群に比べ感染性ウイルス価の有意な減少がみられました（ 図5）。 さ ら に、 脾 臓 細 胞

2. 1073R-1 乳酸菌ヨーグルトおよびEPS の抗インフルエンザウイルス活性（様々な免疫細胞が集まった細胞集団）のNK活性■インフルエンザ感染マウスにおける生存率上EPS投与群で有意な上昇がみられ、ヨーグルトを測定したところ、蒸留水を与えた群に比べ、昇、生存日数延長効果（マウス実験）を与えた群では上昇傾向がみられました（図6）。

北里大学との共同研究で新型インフルエンザウ〔以上、文献1より〕

図4 インフルエンザウイルス感染マウスの生存日数1073R-1乳酸菌を使用したヨーグルト
蒸留水
1073R-1乳酸菌を使用した
ヨーグルト（0.4ml/body/day）

生存率
（%）

8060
40

＊p=0.0018（n=9）
Kaplan-Meier法
Logrank test

2000510
感染後の日数

15100

蒸留水
1073R-1EPS（20μg/body/day）

80
生存率
（%）

100

1073R-1乳酸菌EPS

60＊p=0.0648（n=9）
Kaplan-Meier法
Logrank test

40200200510
感染後の日数

152050＊4012＊＊（＊）

103020100

図6 マウスの脾臓NK活性NK活性（%）

肺洗液感染性ウイルス価（×105PFU/ml）

図5 肺洗液中の感染性ウイルス価

8642蒸留水

1073R-1乳酸菌を使用したヨーグルト
0.4ml/day

1073R-1EPS
0.4μg/day

0

蒸留水

1073R-1乳酸菌を使用したヨーグルト
0.4ml/day

1073R-1EPS
0.4μg/day

Mean±SD（n=9）＊p<0.05,（＊）
p<0.1 by t -test

Mean±SE（n=9）＊p<0.05 by Tukey-Kramer

このような結果から、1073R-1乳酸菌を使用しpylori ）は、慢性胃炎や胃潰瘍、十二指腸潰瘍、胃たヨーグルトは抗インフルエンザウイルス活性をがんの主要な発症要因とされる細菌で、1982年示し、この効果にはEPSが寄与していることがに オ ー ス ト ラ リ ア の 病 理 学 者 で あ る ロ ビ ン・示唆されました。

ウォレン博士と消化器病医のバリー・マーシャ
ル博士によって発見されました。ピロリ菌は実■インフルエンザワクチンの効果を増強験用マウスに感染しなかったため、マーシャル

さらに最近の研究では、インフルエンザワクチ

博士は自らピロリ菌を飲んで、ピロリ菌が胃炎ンを接種する前後に1073R-1乳酸菌を使用したの原因であることを確かめたことは有名な話でヨーグルトを摂ると、ワクチンの効果が増強されす。日本では約40％の人がこの菌に感染していることがわかっています。

る と 推 定 さ れ て お り、 ま た、 胃 潰 瘍 の70 ～研究は、18歳～ 25歳の健康な男性40人を2群に80％、 十 二 指 腸 潰 瘍 の90 ～ 100％、 胃 が ん の分けて実施しました。ワクチン接種3週間前から99％以上にピロリ菌が関与していると考えられ約13週間にわたり、一方に1073R-1乳酸菌を使用ています。

したヨーグルトを、もう一方の対照群には同菌を使用しない酸性乳飲料を、毎日1本飲んでもらい■ピロリ菌と乳酸菌に関する研究のきっかけました。そして、引用前、ワクチン接種1週間現在、ピロリ菌が原因と考えられる胃の疾患

後、5週間後、8週間後、10週間後で抗体価の変に対して、抗生物質によるピロリ菌除菌療法が化を測定しました。

健康保険の適用となりますが、かつては保険がその結果、インフルエンザA型H3N2型に対す適用されませんでした。また、抗生物質によるる抗体価が、ワクチン摂取後に対照群に比べて除菌では一定の割合で耐性菌が出現する恐れがヨーグルト接種群で有意に高値となりました。まあり、腸内の善玉菌も一緒に減らしてしまうとたA型H1N1、A型H3N2では、ワクチン摂取後のいう問題もあります。そこで、東海大学医学部

抗体陽転率が対照群に比べてヨーグルト摂取群での古賀泰裕教授と髙木敦司教授（当時は助教授）有意に高値となりました。B型については、ワクは、抗生物質以外でピロリ菌を抑制する方法をチン摂取後の抗体保有率がヨーグルト接種群で有検討。実験用マウスにピロリ菌が感染しないこ効性の基準である70％を上回りました。
〔以上、とから、マウスを開腹して胃を調べると、マウ

文献2より〕

スの胃内には乳酸桿菌が多数定住していることを見つけました。ヒトに比べ酸度の低いマウス

３. 2716 乳酸菌によるピロリ菌の抑制の胃内では、乳酸桿菌に妨げられてピロリ菌が■ピロリ菌とは〔以上、文献3より〕

ピロリ菌（ヘリコバクター・ピロリ：Helicobacter

感染できないと予測し、無菌マウスで感染を試みたところ、容易にピロリ菌が感染しました。
この試験から、乳酸桿菌の継続投与によりヒト

グルトを食べた後ではその値が有意に下がっていました（図7）。また、2716乳酸菌を含むヨーグルトを食べた後では被験者の血清ペプシノーゲンⅠ/Ⅱ比が有意に上昇し、炎症の改善が認められました（図8）。
〔以上、文献4より〕
この研究データが論文として発表された2001
年、FAO ／ WHO合同専門家会議で、慢性胃炎、胃十二指腸潰瘍、胃がんといったピロリ菌感染症にプロバイオティクスが有効であることが報告さ▲2716乳酸菌（左）と、ダメージを受けたピロリ菌（右）（提供：東海大学古賀泰裕）れました。その後、日本でも胃潰瘍、十二指腸潰瘍、早期胃がん治療後の除菌治療が健康保険の適でもピロリ菌の感染抑制が可能であることが示唆用となり、2013年2月には慢性胃炎にも内視鏡検され、古賀先生は当社に共同研究を提案しまし

査を条件に除菌治療が適用となりました。

た。乳酸桿菌の性質として、強酸性であるヒトの胃内に耐えうること、胃の中にある程度滞留でき■2716乳酸菌と除菌療法の併用る（胃粘膜付着能が高い）ことなどがあったため、近年、従来の抗生物質が効かない耐性菌の出現

当社の持つ2500株以上の乳酸菌ライブラリーからによるピロリ菌除菌率の低下が問題になっていまスクリーニングし、この条件に叶う乳酸菌を探す。1回 目 の 除 菌 成 功 率 が10年 前 の90％ 台 か ら索。その結果、Lactobacillus Gasseri OLL271670％台まで低下しているとの報告もあります。

（以下、2716乳酸菌）が選び出されました。

そこで、2716乳酸菌を除菌療法に併用することで効果的に除菌できるのではないかと考え、その■2716乳酸菌によるピロリ菌減少効果検討を行いました。

ピロリ菌感染者30人に対して、2716乳酸菌を229人のピロリ菌感染者を対象に、一方は通常含まないヨーグルト（1個90g）を1日2回、8週間食通り除菌治療（3剤除菌療法）を行い、もう一方は3

べ て も ら い、 そ の 後2716乳 酸 菌 を10億 個 含 む剤除菌療法と2716乳酸菌ヨーグルト（1個90g×1ヨーグルト（1個90g）を1日2回、8週間食べてもら日2回）を、治療開始3週間前と治療期間中1週間、いました。ピロリ菌の存在を調べるための尿素呼計4週間食べてもらいました。その後2つのグルー

気試験を行ったところ、2716乳酸菌を含むヨープを比較したところ、ヨーグルト3剤除菌群と比

図7 ピロリ菌数の推移（尿素呼気試験による）

図8 胃の炎症度合いの推移（血清ペプシノーゲンⅠ/Ⅱ比による）

303.5

NS

25

p<0.05

20

通常
ヨーグルト
摂取期間

15002716乳酸菌
ヨーグルト
摂取期間
8 9投与期間（週）

17PⅠ／PⅡ比【胃の炎症・萎縮度合いの指標】

尿素呼気測定値Δ13C（‰）
【ピロリ菌数、ピロリ菌活性の指標】

統計的有意差無し

p<0.01

数値が低いほど炎症度が高い
3

通常
ヨーグルト
摂取期間

2.5002716乳酸菌
ヨーグルト
摂取期間
8 9投与期間（週）

17較して、2716乳酸菌併用群の除菌成功率が10％

バリア機能とは、食物とともに腸に入り込む細以上も上回りました（図9）。
〔以上、文献5より〕

菌やウイルス、腸内の悪玉菌が代謝の過程で産このような研究から、日常の食生活でヨーグル生する有害物質などを防ぐ腸のガード機能のこトを食べ続けるこが、ピロリ菌の抑制につながるとです。腸管バリア機能の向上により、様々なことが示されたといえます。

疾患を予防し、全身のアンチエイジングにもつながると期待されています。

図9 ピロリ菌一次除菌における2716乳酸菌事前投与の効果（％）
100

一次除菌成功率80なのだそうです。一つは、原料である「乳」の持つ力。乳のすばらしさは栄養だけでなく、乳児

ITT解析
p=0.018

ヨーグルトが持つ力は、3つの力の合わせ技82.6のように未発達の消化管でも消化吸収できることにもあるといいます。二つ目は「発酵」の力。

69.360

発酵によってつくられる乳酸はカルシウムの吸40収を助け、また前述の通り多糖体には免疫賦活20作用が認められています。そして三つ目が「乳酸0通常療法（n=114）2716乳酸菌ヨーグルト＋通常療法（n=115）

おわりに菌」自体が持つ力。プロバイオティクスとしての整腸作用はもちろん、ピロリ菌抑制作用もその一つといえます。
ヨーグルトの魅力はこのような保健作用だけではありません。
「“良薬は口に苦し”といいますが、“良食は口に美味し”でなければいけないと思いま

明 治 は、 パ ス ツ ー ル 研 究 所 と の 共 同 研 究 をす」と、今回お話を伺った研究者は話します。「美2011年にスタートしました。共同研究により、味しいから食べていたら、何となく健康状態がよ

腸内フローラの改善機能に加え、腸管内の免疫細くなった。これこそが、食品の理想だと考えてい胞に働きかけ、腸の細胞の老化を防いだり、腸のます」。まさに、「ヨーグルト」と「食」への明治の炎症を抑えて腸管バリア機能を向上させる働きがこだわりが凝縮された一言といえそうです。

乳酸菌にあることがわかってきたそうです。腸管《今回の記事は、以下の文献を参考にまとめました》
1）池上秀二, 牧野聖也 : 1073R-1乳酸菌がつくるEPS（多糖体）の免疫賦活作用. 食品工業2010年1月30日
号: 36-43, 20102）日本臨床免疫学会会誌36（5）, 403a, 20133）古賀泰裕, 有江泰彦 : プロバイオティクスの基礎研究からヨーグルトのヒット商品. 産学官連携ジャーナル Vol.6 No.10: 20-22, 20104）Sakamoto I, Igarashi M, Kimura K, Takagi A, Miwa T, Koga Y : Suppressive effect of Lactobacillus
gasseri OLL 2716（LG21）on Helicobacter pylori infection in humans. Journal of Antimicrobial
Chemotherapy 47: 709-710, 20015）Deguchi R, Nakaminami N, Rimbara E, Noguchi N, Sasatsu M, Suzuki T, Matsushima M, Koike J,Igarashi M, Ozawa H, Fukuda R, Takagi A : Effect of pretreatment with Lactobacillus gasseri
OLL2716 on first-line Helicobacter pylori eradication therapy. Journal of Gastroenterology andHepatology 27: 882-92, 20126）上村直美, 高橋信一, 髙木敦司 : ピロリ除菌 保険適用が拓く未来. MMJ Vol9 No.2: 60-65 , 2013
7）上野川修一監修 : 楽しくわかる 漫画 びっくり免疫学. 共同通信社医療情報センター , 20118）髙木敦司, 古賀泰裕監修 : ピロリ菌を追い詰めた男 漫画 プロフェッサー マーシャル奮闘記. 共同通信社医療情報センター , 2011
《取材・編集：（株）BBプロモーション 髙林 昭浩》