学術情報 ～会員企業のプロバイオティクス研究のいま～

雪印メグミルク株式会社 ミルクサイエンス研究所
設立 1933年5月

はじめにacidophilus ）と呼ばれていた菌種は、さらに6菌種

雪印メグミルク株式会社（以下、雪印メグミル

セリ菌（Lactobacillus gasseri ）として分類されるク）の研究開発拠点は、ミルクサイエンス研究所

ようになった菌種はアシドフィルス菌より腸管へ（埼玉県川越市）、札幌研究所（北海道札幌市）、の親和性が高いことから、同社はこの菌の研究をチーズ研究所（山梨県北杜市）の3カ所があります。

開始します。味覚的な特性や、胃酸や胆汁酸へのこのうち、乳酸菌や乳成分の機能性の研究を主に耐性を指標に菌株を探索した結果、ガセリ菌SP行っているのが、ミルクサイエンス研究所です。

株（Lactobacillus gasseri SBT2055）を見いだし、同社の乳酸菌研究は、1930年代にスタートしに細分化されることになりました。そのなかでガ2002年に製品化しました。

ました。乳酸菌飲料の開発に向け、国内の乳からその後の研究により、ガセリ菌SP株は様々な乳酸菌を分離したことが、研究の第一歩でした。

効果を持つことが確認されています。その主な研このとき開発された乳酸菌飲料は、『カツゲン』と究成果について、ミルクサイエンス研究所の研究いう名称で現在も北海道で販売されています。

者の皆さんからお話を伺いました。

1980年代から、国内で乳酸菌の整腸作用に関する研究が盛んになり、雪印メグミルクも腸内細菌の研究を本格的に開始しました。特に、腸内環1. 腸管に長期間定着境で優勢に生育している菌種を中心に研究・製品

ガセリ菌SP株の持つ特性として、“生きて腸ま開発を進め、1985年にはアシドフィルス菌とビで届く”ことが挙げられます。研究を進めるなかフィズス菌による発酵乳を製品化しました。

で、ガセリ菌SP株は単に生きて腸に届くだけで1990年代に入ると世界規模で乳酸菌研究が進なく、“摂取した後、腸の中で生きたまま長くと展 し、 従 来 ア シ ド フ ィ ル ス 菌（Lactobacillusどまる”ことが確認されました。その研究とは、次のようなものです。
8人の社内ボランティアに、1千億個のガセリ菌SP株を1日1回、7日間摂取してもらい、定期的に便を採取して検査しました。その結果、摂取後90日が経過しても4名の便からガセリ菌SP株が検出されました（図1）。
また、ガセリ菌SP株を摂取している間、便内▲ガセリ菌SP株のスタフィロコッカス属＊1の菌数と腐敗物質（パラ10■ヒトにおける内臓脂肪低減効果

投与ストップ

ラットの試験で好成績が得られたことを受け、次に行ったのがヒトで8（対数）
糞便内菌数の試験です。肥満気味の健常成人男
6女87名を2グループに分け、ガセリ菌SP株を含む発酵乳と、含まない

4

発 酵 乳 を、 そ れ ぞ れ1日200ｇ ず つ12週間摂取してもらったところ、ガ2セリ菌SP株摂取群では、内臓脂肪、皮下脂肪が有意に減少しました（図00投与開始

10202）。
〔以上、文献2より〕

30

図1

それまで、乳に含まれるペプチド90

試験期間（日）や酵素、脂肪酸などに抗肥満効果が腸からのガセリ菌SP株の検出状況あるという報告はありました。しかし、プロバイオティクス自体が内臓脂肪を減少クレゾール）の濃度が減少し、便性（色、におい）させるという報告は、世界でも初めてでした。にも改善が認められました。
〔以上、文献1より〕＊1：ブドウ球菌属とも呼ばれます。毒素型食中毒の原因菌の一つである黄色ブドウ球菌もその1種類です。

■慢性炎症と脂肪細胞肥大化の抑制
なぜ、ガセリ菌SP株の摂取により内臓脂肪が減少したのでしょうか。そのメカニズムには、脂肪組織の炎症が関係することが推測されまし2. 内臓脂肪の低減効果た。

ガセリ菌SP株の機能性として、当社では2000

肥満時の脂肪組織は炎症状態にあると考えら年頃から血清コレステロールや脂質代謝への影響れています。これまでに、脂肪を多く含む食餌に着目していました。その一環として2008年、（高脂肪食）の摂取と、体内の炎症状態を示す物

ガセリ菌SP株摂取によるラットの内臓脂肪蓄積質（炎症マーカー）の一種である、血中可溶性接状況の変化を、九州大学と共同で調べました。ガ着分子（sICAM-1）の上昇との間に関連があるこセリ菌SP株摂取群と非摂取群を比較したところ、とが報告されています。そこで、ガセリ菌SP株摂取群では内臓脂肪の脂肪細胞が縮小しているこの 摂 取 が、 高 脂 肪 食 に よ り 引 き 起 こ さ れ るとが認められました。

sICAM-1の濃度上昇と内臓脂肪にどのような影

内臓脂肪

皮下脂肪

102102101.2

（％）
変化率

9896

＃＃
＊＊

ガセリ菌入りガセリ菌なし940

p＜0.01,対0週,Bonferroni法＊＊

図295.4
週

12100（％）
変化率100
10099.4100

＃
＊＊

9896

ガセリ菌入り96.7

ガセリ菌なし94#p＜0.05,##p＜0.01,対 対照食,一元配置分散分析

ガセリ菌SP株摂取による内臓脂肪および皮下脂肪の変化

0週1235＊＊

25＊［μm2］）（log10脂肪細胞面積（ng/ml）
sICAM-1濃度＊：p＜0.05

4週間後

3020151053.2

32.82.60

発酵乳原料
（非発酵）
摂取群

図33.4

開始時

通常の乳酸菌による発酵乳摂取群

ガセリ菌SP株添加
発酵乳摂取群

ガセリ菌SP株 に よ る 血 中 炎 症 マ ー カ ー（sICAM-1）
濃度上昇抑制効果

響を及ぼすかを検討しました。

発酵乳原料
（非発酵）
摂取群

通常の乳酸菌による ガセリ菌SP株添加
発酵乳摂取群
発酵乳摂取群図4 ガセリ菌SP株による脂肪細胞面積低減効果

この試験から、ガセリ菌SP株摂取により、炎

まず、ラットに与える餌として、①発酵乳原料症マーカーであるsICAM-1濃度上昇および脂肪（非発酵）、②発酵乳原料を通常使用される乳酸菌細胞の肥大化が抑制されることがわかりました。

（サーモフィラス菌、ブルガリクス菌）で発酵させ〔以上、文献3より〕た発酵乳、③②にガセリ菌SP株を加えて発酵させた発酵乳の3種類を用意し、それぞれ高脂肪食に混合し、ラットに与えました。

3. 感染予防効果

4週間後に血中の炎症マーカー濃度を測定した■インフルエンザウイルスに対する感染予防効果

結果、①および②の群では炎症マーカー濃度が2000年頃から、乳酸菌の免疫賦活作用が報告有意に上昇しましたが、③の群では上昇せず、されるようになり、ガセリ菌SP株においても免他の2群に比べて有意に低い結果となりました

疫機能を活性化して感染防御に働くというエビ（図3）。また、同様に脂肪細胞面積も③の群ではデンスが得られるようになりました。そこで北他の2群に比べて有意に小さいことが確認されま

海道大学と共同で実施したのが、ガセリ菌SP株した（図4）。

によるインフルエンザウイルスの感染予防効果に関する試験です。

100試 験 は、 ガ セ リ 菌
SP株を経口投与した

（％）
生存率

80

マ ウ ス と、 ガ セ リ 菌SP株を投与しなかっ60

109cfu40

1日あたりに食べさせた
ガセリ菌の個数108cfu20control
246810121416た。 ガ セ リ 菌SP株 投
与 群 に は 事 前 に3週間、 ガ セ リ 菌SP株 をガセリ菌非投与群

00たマウスで行いまし18

感染からの日数

図5 A型インフルエンザウイルス感染マウスの生存率に対するガセリ菌SP株の効果

摂 取 さ せ、 両 群 に
H1N1型インフルエン
ザウイルスを経鼻感染させて生存率を調べました。その結果、ガセリ菌SP株投与群では、

＊＊＊：p＜0.0001

0.8

4×106

p＝0.052
3×106

2×106

1×106（ng）
タンパク質1mg中のIL−6の量（個／ml）
A型インフルエンザウイルス5×1060

ガセリ菌非投与群

0.60.4＊＊＊0.20

ガセリ菌投与群

ガセリ菌
非投与群

ガセリ菌投与群

図6 A型インフルエンザウイルス感染マウスの肺におけるガセリ菌SP株のウイルス増殖抑制効果

図7 A型インフルエンザウイルス感染マウスの肺におけるガセリ菌SP株の炎症抑制効果

非投与群に比べてウイルス感染後の生存率が有意

4. 寿命延長効果に高く、ガセリ菌SP株の量に依存して生存率が向上しました（図5）。

これまで当社が行ったいくつかのマウス試験

また、感染後5日目に肺のウイルス量を調べるから、ガセリ菌SP株にはマウスの寿命を延長さと、ガセリ菌SP株投与群の方がウイルス量が少せる効果が示唆されていました。そのメカニズないことがわかりました（図6）。さらに、インフムを解明するために、北海道大学と共同で、人ルエンザ感染マウスの肺における炎症の様子を調間と多くの生物的特性（生殖系、神経系、筋肉べたところ、ガセリ菌SP株投与群は炎症も抑制系）を共有する線虫を使った試験を行いました。

されていたのです（図7）。

ガセリ菌SP株を与えた群と、ガセリ菌SP株を以上の試験から、ガセリ菌SP株はインフルエ含まない一般的な餌（大腸菌）を与えた群（対照ンザウイルスの増殖を抑制し、また炎症を抑える群）による比較試験を複数回実施したところ、そことで、マウスの生存率を向上させていると考えのうちの代表的な試験では、ガセリ菌SP株投与られます。〔以上、文献4より〕

群の平均生存日数が20.63日、対照群の平均生存日 数 は16.99日 と い う 結 果 を 示 し ま し た（ 図9）。

■歯周病に対する予防効果
歯周病は、歯ぐきや歯槽骨への細菌の感染にまた、ガセリ菌SP株投与群では平均29％の寿命延長＊3を確認しました。

よって炎症が引き起こされる病気です。当社は日250

本大学と共同で、歯周病菌に対するガセリ菌SP株の予防効果を検討しました。
かったマウスに歯周病菌を感染させ、歯肉などの状況を観察しました。すると、ガセリ菌SP株投与群では、非投与群に比べて歯槽骨吸収＊2や歯肉200（μm）
歯槽骨吸収量ガセリ菌SP株を投与したマウスと、投与しな＊＊：p＜0.01

＊＊

150

100

組織における炎症が抑制されていました（図8）。
この試験により、ガセリ菌SP株投与による歯50周病に対する抗炎症効果の可能性が示唆されまし0た。〔以上、文献5より〕＊2：歯槽骨吸収とは、歯周病などの細菌感染で誘発される炎症により、歯を支える歯槽骨が溶けてしまうこと。

図8

ガセリ菌
非投与群

ガセリ菌
投与群

ガセリ菌SP株による歯槽骨吸収抑制効果

血中濃度を調べたとこ100

16.99日20.63日8070（％）
生存率

ろ、ガセリ菌SP株＋ビ平均生存日数906050は、プラセボ群に比べて有意に減少していました（図11）。
こ の 試 験 結 果 か ら、

40

ガセリ菌SP株とビフィ

3020

ガセリ菌投与群10対照群

ズス菌SP株を含む発酵
p＜0.00100510152025

乳は、これらを含まない発酵乳に比べ、免疫系の活性化とストレス30の軽減効果があること

日 数

図9

フィズス菌SP株摂取群

ガセリ菌SP株投与による線虫の寿命延長効果が示唆されました。〔以上、文献7より〕

さらにガセリ菌SP株投与群では、酸素感受性の発現量の増加に関連する遺伝子（skn-1 、pha-4 ）が見られました。これらの遺伝子は、寿命や様々50な疾患に影響を与える活性酸素の消化能力に関連＊するとされており、その発現量増加が寿命延長に6より〕＊3：線虫の寿命延長に関する実験は複数回実施しており、平均生存日数が29％延長したというのは、複数回実施した実験結果の平均です。

（％）
NK細胞活性関与する可能性が示唆されました。
〔以上、文献454035平均値±
平標準誤差＊：p＜0.05

ガセリ菌・ビフィズス菌入り

5. NK 細胞活性増強効果／ストレス軽減効果
当社の発酵乳には、ガセリ菌SP株とビフィズス菌SP株の両方を含むものがあります。この発ガセリ菌・ビフィズスなし
30図10012

摂取期間（週）ガセリ菌SP株＋ビフィズス菌SP株入り
発酵乳によるNK細胞活性増強効果

酵乳による保健効果を探るために、免疫およびストレスとの関連を検討しました。

2.5ンターの協力を得て、32歳から76歳までの健常者224名を対象に実施。ガセリ菌SP株とビフィズス菌SP株を含む発酵乳摂取群と、含まない発酵乳摂取群（プラセボ群）に分け、それぞれ1日100ｇずつ、12週間摂取してもらいました。
12週間の摂取試験の結果、免疫活性化の指標（pg/ml）
血中ACTH変化量

試験は、北海道情報大学・健康情報科学研究セ

0.0

ガセリ菌・ビフィズス菌入りであるNK細胞活性については、ガセリ菌SP株＋ビフィズス菌SP株摂取群は、プラセボ群に比べて有意に上昇しました（図10）。また、ストレスホルモンである副腎皮質刺激ホルモン（ACTH）のガセリ菌・ビフィズスなし
-2.5

図11＊＊

平均値±
平標準誤差
＊＊：＜0.01

ガセリ菌SP株＋ビフィズス菌SP株入り発酵乳によるストレス軽減効果（血中ACTH低減効果）

今後の展望イオティクス・イムノロジー研究部門を開設し、これからもガセリ菌SP株を中心に、「内臓脂肪ティクスがもたらす疾病予防機能の評価や作用蓄積予防効果」と「免疫増強効果」両面に関する研機序の解明に関する研究も、意欲的に進めてい究を進めていきたいと、今回お話をうかがった研ます。

特 任 教 授 の 宮 崎 忠 昭 先 生 と 共 に、 プ ロ バ イ オ

究者の皆さんは話します。特にそのメカニズムを雪印メグミルクは、コーポレートスローガン

解明し、なおかつ、ヒトを使った試験で効果を明として「未来はミルクの中にある」を掲げていまらかにすることが、今後の研究テーマとして重要す。乳酸菌研究をさらに深めることで、私たちだと強調します。の健康にさらに貢献してくれるに違いありませまた、ミルクサイエンス研究所は、北海道大学ん。

遺伝子病制御研究所内に、寄附講座としてプロバ《今回の記事は、以下の文献を参考にまとめました》
1）Shigeru Fujiwara, et al. Establishment of Orally-administered Lactobacillus gasseri SBT2055SR in
the Gastrointestinal Tract of Human and its influence on Intestinal Microflora and Metabolism. J.
Appl. Microbiol., 90, 343-52 (2001)
2）Y. Kadooka, et al. Regulation of abdominal adiposity by probiotics (Lactobacillus gasseri SBT2055)
in adults with obese tendencies in a randomized controlled trial. Eur. J. Clin. Nutr., 64, 636-643(2010)
3）Y. Kadooka, et al. The probiotic Lactobacillus gasseri SBT2055SR inhibits enlargement of visceraladipocytes and upregulation of serum soluble adhesion molecule (sICAM-1) in rats. Int. Dairy J., 21, 9,623-627 (2011)4）Y. Nakayama et al. Oral administration of Lactobacillus gasseri SBT2055 is effective for preventing
influenza in mice. Sci. Rep., 4, doi : 10, 1038/ srep 04638（2014）
5）小林良喜ほか. Anti-inflammatory effect of Probiotic bacterium, Lactobacillus gasseri SBT2055 toperiodontal disease. 日本食品免疫学会（2012年10月）
6）中川久子ほか. 乳酸菌Lactobacillus gasseri SBT2055による線虫の寿命延長とその作用機構. 日本基礎老化学会 (2013年6月)
7）J. Nishihira, et al. Elevation of natural killer cell activity and alleviation of mental stress by theconsumption of yogurt containing Lactobacillus gasseri SBT2055 and Bifidobacterium longum
SBT2928 in a double-blind, placebo-controlled clinical trial. J. Functional Foods (in press)《取材・編集：（株）BBプロモーション 髙林 昭浩》