平成 17 年度 応用化学科セミナー学生発表会
平成 17 年 11 月 28 日 17:00-18:30
於：工学部 5 号館リフレッシュコーナー（3、5F）
1. ホスファゼン環を核とする新規星型ポリグルタミン酸誘導体の合成（高分子化学）○新宅 ひかる、伊藤 大道、井原 栄治、井上 賢三
2. アミノ基を有する両親媒性ブロック共重合体を用いた分散重合（高分子化学）○福谷 香織、伊藤 大道、井原 栄治、井上 賢三
3. ベンザインとピリジンの新規交互共重合反応（高分子化学）○黒川 敦史、伊藤 大道、井原 栄治、井上 賢三
4. 遷移金属アート錯体を対アニオンとして用いたイソブチルビニルエーテルのカチオン重合（高分子化学）○吉田 尚記、伊藤 大道、井原 栄治、井上 賢三
5. フェニルジアゾメタンとジアゾカルボニル化合物との共重合（高分子化学）○木多 昌美、伊藤 大道、井原 栄治、井上 賢三
6. 三元系複合金属酸化物によるメタンの酸化カップリング反応（無機物質化学）○小松 裕実子、宮崎 隆文、山口 力
7. ポリアニリン複合膜を用いた直流駆動型湿度センサの開発（工業物理化学）○山中 崇司、松口 正信
8. ペロブスカイト型酸化物基板上に形成したプロトン導電性酸化物膜の電気特性（材料物性化学）○浅本 麻紀子、白井 裕乃、山浦 弘之、八尋 秀典
9. 無機化合物上に担持した銅フタロシアニンの状態と反応性（材料物性化学）○杉谷 興一、木本 邦博、山浦 弘之、八尋 秀典
10. アルミナ担持 Cu 触媒の水性ガスシフト反応（材料物性化学）○山本 哲也、佐伯 和彦、中矢 健太、山浦 弘之、八尋 秀典
11. Nox2 の活性化因子 p47phox の Actin 結合部位の同定とその役割（分子生命化学）○伊藤 克法、奥 知士、田村 実

12. p51nox 短縮型と Rac の融合タンパク質の大量発現とその特性（分子生命化学）○大原 卓也、田村 実
13. 大腸菌を用いた Nox1 活性化因子 p41 と p51 の発現と精製の試み（分子生命化学）○楠野 太郎、水木 一洋、田村 実
14. 新規レクチンを装着したミサイル型人工細胞の担がんマウス体内動態（生体環境機能工学）○竹乗 秀樹、秋山 浩一、菅原 卓也、重川 庸介、川久保明宏、増田 晴造、青儀 健二郎、能勢 眞人、宮崎 龍彦、加藤 敬一
15. 脳腫瘍標的機能を有する人工細胞の調製とその腫瘍のマウス体内動態－ヒト脳腫瘍治療の臨床応用に向けて－（生体環境機能工学）○水岡 大樹、秋山 浩一、菅原 卓也、真鍋 太一、山崎 等、
増田 晴造、青儀 健二郎、能勢 眞人、宮崎 龍彦、加藤 敬一
16. 新規レクチンを装着したミサイル型人工細胞によるマウス大腸癌治療（生体環境機能工学）○福田 祐介、福田 勇騎、菅原 卓也、秋山 浩一、増田 晴
造、川久保 明宏、宮崎 龍彦、加藤 敬一
17. がん臨床応用に向けての新規レクチンを利用したドラッグデリバリーシステム（生体環境機能工学）○重川 庸介、秋山 浩一、菅原 卓也、川久保 明宏、増田晴造、青儀 健二郎、能勢 眞人、加藤 敬一
18. 酸化チタンマイクロ粒子の多孔質化（分離分析化学）○木村 志、山下 浩、前川 尚
19. 浮選法を用いたホウ素含有水からのホウ素の除去（分離分析化学）○赤木 裕幸、山下 浩、前川 尚
20. ホウケイ酸塩ガラスの構造とガラス転移点との関係（分離分析化学）○山下 浩、相本 恭正、前川 尚
21. ゲノムワイドなヒト及びマウスプロテインカイネースの自己リン酸化機能の比較（無細胞遠藤研）京嶋 沙和
22. 高感度無細胞マラリアワクチン候補タンパク質の探索（無細胞遠藤研）松岡 和弘

23. 無細胞タンパク質合成技術を利用した植物タンパク質の機能解析（無細胞戸澤研）宮田 拓治
24. 80S リボソーム翻訳調節因子の機能解析（無細胞戸澤研）宮本 英治
25. Aquifex aeolicus tRNA (m22G26)methyltransferase は、今までにない基質認識メカ
ニズムをもつ（応用生物化学）粟井 貴子
26. 固相プローブ RNA 精製法の改良（応用生物化学）越智 杏奈
27. 無細胞翻訳系によるヘテロサブユニット酵素合成の検討（応用生物化学）松本 啓介
28. 真正細菌と古細菌の RNA 転写後修飾過程の比較に向けての高温培養系の確立（応用生物化学）岩下 知香子
29. RNA 修飾酵素 tRNA グアニン・トランスグリコシラーゼは DNA に作用するか？
（応用生物化学）車田 光謙
30. tRNA (m7G46) methyltransferase の精製法の確立 -結晶化に向けて（応用生物化学）冨川 千恵
31. tRNA (m1G37) methyltransferase の二量体構造安定化機構（応用生物化学）豊岡 峻
32. Thermus thermophilus ポリアミンの高温環境下での RNA 修飾に対する影響（応用生物化学）中本 知里
33. コムギ胚芽無細胞系を用いた三日熱マラリア原虫キチナーゼの合成と精製（無細胞坪井研）久森 大輔
34. 拡張型テトラチアフルバレン型ドナーの合成と性質（構造有機化学）藤岡 純
35. 新規なテトラチアフルバレンダイマーの合成と性質（構造有機化学）山田 智彦

36. テトラチアフルバレン骨格を有する新規ドナー・アクセプター分子系の合成と性質（構造有機化学）松本 智嗣
37. アルキルカルコゲノ基を有するテトラチアペンタレン系導体の構造と物性（構造有機化学）辻 裕也
38. コドン-アンチコドン相互作用における塩基の結合様式（無細胞高井研）山内 裕之
39. tRNA 分子中の修飾ウリジンのプロトン解離（無細胞高井研）武智 正洋
40. 活性汚泥の中空糸精密濾過特性に及ぼす懸濁固形物及び溶存固形物の影響（化学工学）○谷本 寿子、川崎 健二、松田 晃
41. 吸収冷凍機の再生器、吸収器の性能向上に関する研究（化学工学）○兵頭 善章、川崎 健二、松田 晃
42. 超音波照射を利用した凍結濃縮分離に及ぼす凍結速度・凍結管内径の影響（化学工学）○伏田 祥吾、川崎 健二、松田 晃
43. 膜分離を用いた活性汚泥法の効率的な処理方法の検討（化学工学）○丸岡 志登司、川崎 健二、松田 晃
44. インシュリン作用に関与するイノシトールグリカンの全合成（反応有機化学）○岩永 隆之
45. ポリオキサカルボン酸による塩基性アミノ酸の選択的抽出と合成反応（反応有機化学）○丹 康賢
46. アルキンのホスフィン化を経由する新規有機リン化合物の合成と構造解析（反応有機化学）○西村 康伸
47. 生理活性イノシトールリン脂質 PI3P、PI(3,4)P2 等の実用的な効率合成法の開発（反応有機化学）○三宅 慶行
48. myo-イノシトールを用いたカルバ糖の合成（反応有機化学）○姚 永輝

49. ポリオールのスズ誘導体を経由した選択的リン酸化法の開発（反応有機化学）○坂東 里香
50. イソプロピルベンゾフェノン系結晶の光反応に伴う表面形態変化（機能有機化学）井手 佑弥、深野 道太郎、小島 秀子
51. アクリジンと N-フタロイルグリシンから成る２種類の複合結晶の光反応性（機能有機化学）谷口 明広、小野 幸太郎、小島 秀子
52. トリプタミン－安息香酸系複合結晶のキラル結晶化におけるエナンチオ制御（機能有機化学）谷口 智哉、小島 秀子
53. クマリン誘導体のゲル化におけるキラリティー発生（機能有機化学）守時 達也、小林 史明、中田 彩香、小島 秀子
54. N-ベンゾイルグリシン結晶のキラル光学的研究（機能有機化学）大塚 将成、小島 秀子
55. グリシンイミンエステルの溶媒蒸気中での固相不斉アルキル化（機能有機化学）吉岡 慎市、光富 浩太郎、小島 秀子

ホスファゼン環を核とする新規星形ポリグルタミン酸誘導体の合成
高分子化学研究室 ○新宅ひかる

伊藤大道・井原栄治・井上賢三【緒言】我々はホスファゼン環を核とし６本のポリグルタミン酸鎖を持つポリマーを合成し、それらが光学異性体分離能を発揮することや 6 本鎖ポリグルタミン酸の末端に長鎖アルキル基を導入した両親媒性星形ポリマーの二次構造や集合状態について検討を行ってきた。本実験ではホスファゼン環を核としてコア近傍に疎水性基を持つ両親媒性ポリアミノ酸の合成を試み、それらの ヘリックス構造
形成と集合挙動について検討した。
【実験・結果・考察】Figure 1 のポリマー(6p6-s-PLG)の合成は以下のように行った。シクロトリホス
ファゼンに p-安息香酸エチルを全置換し加水分解した後、酸クロライ
HOOC
COOH
COOH
HOOC
ドにしたものと一方のアミノ基を保護したヘキサメチレンジアミン誘
HOOC
COOH
COOH
NH
NH
導 体 と を 反 応 さ せ 、 そ の 後 脱 保 護 に よ っ て 開 始 剤
NH(CH2)6(CH2)6(CH2)6［NP(OC6H4CONH(CH2)6NH2)2］3(6p6)を合成した。まず 6p6 のアミノ基
NH
NH
HN
が全て重合に関与するかどうかを調べる目的で、［BLG-NCA］/［6p6］CO
CO OC=18 とし反応させたところアミノ基がほぼ同時に反応することを
1
O
H-NMR より確認した。仕込み比を［BLG-NCA］/［6p6］=60~230 と変
OP N ON
P
えて得たポリマーの分子量分布は GPC より Mw/Mn=1.03~1.11 となった
P N
O O O
ことから、各鎖長は比較的そろっていると考えられる。また Table に示
すように一本鎖当たり 14 残基以上のポリマー6p6-PBLG(Run 3~7)の
CO OC
OC
ヘリックス含有量は 90%以上を示した。次にポリマー(14)の側鎖のベンNH
HN
NH
ジル基を加水分解したポリマー(6p6-s-PLG)の CD スペクトル測定では、(CH2)6(CH2)6 (CH2)6NH
pH=5.0 付近でランダムコイル構造から ‑ヘリックス構造へ転移するこ
NH
NH
COOH
HOOC
とを示した。
COOH
COOH
HOOC
HOOC
Figure 2 に 7.4 残基の 6p6-PLG(7.4)の疎水性蛍光プローブである
Figure 1. Structure of 6p6-s-PLG
ANS(8‑
アニリノナフタリル‑
1‑
スルホン酸)を用いた蛍光測定の結果を示した。系の pH を pH=5.0 から pH=3.7 にすると -ヘリックス含有量（HC）は 3.0%から 15.2%と増加し、この HC の増加に伴って ANS の蛍光の Fmax は 510nm 付近から 470nm 付近に短波長シフトし、蛍光強度も著しく増加した。これらの結果は ヘリックス構造形成とともに疎水場が構築されていることを示している。この疎水場はポリグルタミン酸鎖に影響され、6p6-PLG(10)では蛍光スペクトルは観測されなかった。これらの結果及びアルキル鎖の長さと位置の異なる開始剤による星形ポリグルタミン酸の二次構造及び集合挙動について報告する。
40

Table. Polymeriztion of BLG-NCA-helixMn cal-4 content (%)
x10

1
2
3
4
5
6
7

1.0
1.4
2.2
1.9
1.8
2.4
3.7

60
90
190
120
120
120
230

65
68
53
73
63
86
67

1.1
1.5
1.9
2.0
2.5
3.0
4.1

50
64
92
89
82
>95
94

Polymer(*)
30

6p6-PBLG(7.4)
6p6-PBLG(10)6p6-PBLG(14)6p6-PBLG(15)6p6-PBLG(17)6p6-PBLG(21)6p6-PBLG(30)Int.

Run [NCA] / [6p6] conv(%) MnNMR
x10-4

pH3.7
pH4.2
pH5.0
pH7.1
pH9.1

20

10

0
360

400 440 480 520
Wavelength (nm)560(*) Number of -benzyl-L-glutamate residues per polymer chain

Figure 2. Fluorescence spectra of 6p6-PLG(7.4)
at various pHs

アミノ基を有する両親媒性ブロック共重合体を用いた分散重合
高分子化学 ○福谷香織・伊藤大道・井原栄治・井上賢三【緒言】本研究では、アミノ基を有する両親媒性ブロック
共重合体 1（PS-b-PAMS）を合成し、これを安定剤としてス

CH2

CH

CH2

x

CH

y

チレン（St）やジビニルベンゼン（DVB）について無攪拌非
水系分散重合法（N AD）を行い、高分子微粒子を得ている。

CH2NH2

これよりブロック共重合体の組成比について着目して、粒1径・粒径分布の制御を試み、次いで微粒子表面の様々な官
能基変換を行った。
疎水部
（PS）

St
or

親水部
（PAMS）
安定剤

AIBN, 17 hethanol, 60 ℃

DVB

NH2
H 2N
NH2 NH2NH
2
H 2N
NH2
H 2N
NH2
H2N
H2 N
NHNH
2 2
H 2N
NH2
NH2
H 2N
H2 N
NH2 NH2
H2N NH2 NH
2【実験】ポリスチレン（PS）とポリビニルベンジルフタルイミド （PVBP） からなるジブロック
共重合体を ATRP により合成し、フタルイミド基を脱保護することで、様々な分子量と組成を有する 1 を得た。次いで、溶媒にエタノール、モノマーに St もしくは DVB、安定剤として 1 を、開始剤に AIBNを用いて、NAD により高分子微粒子を作製した。
【結果と考察】1 の分子量および組成の変化によって、
約 0.2〜2.0μm の粒径を持つ高分子微粒子を得た。ブロ
ック共重合体の DPPS が 17 から 36 へと長くなると、溶媒への溶解性が下がり、微粒子への 1 の吸着能が高まるので、PS 粒径は 0.89μm から 0.34μm へと小さくなった。また、DPPS = 24 では DPPAMS が 62 から 120 へと長くなると、粒径が 1.78μm から 1.03μm へ減少した上、Fig 1. SEM photograph of PS particles withnarrow size distribution.

粒径分布は 1.19 から 1.03 へと狭くなった。これは、PAMS 鎖の慣性半径の増大により微粒子の立体反発能が上昇し,合体が抑制されたためだと考えられる。
また、得られた微粒子表面のアミノ基の塩酸塩、アミド、ポリペプチドへの変換を試みたとこ
ろ、いずれの微粒子も溶媒の分散性に変化が見られたことから、微粒子表面の改質が認められた。

Table. Synthesis of PS particles
run
1
2
3
4

wt %
0.5
0.5
0.5
0.5

a)

stabilizer
monomer[M] / [I]DPPS : DPPAMS St / wt%a)
17 : 11210
100/1
36 : 112
10
100/1
24 : 6210
100/1
24 : 12010
100/1

yield / % Dn / μ ｍb)
75
83
53
66

a) Relative to solution. b) Determined by SEM. c) Particle size distribution determined by SEM.

0.87
0.34
1.78
1.03

c)

PSD

1.01
1.13
1.19
1.03

ベンザインとピリジンの新規交互共重合反応
愛媛大工・VBL ○黒川敦史・幸田武士・村木孝仁・伊藤大道・井原栄治・井上賢三【緒言】
ベンザインは反応性の高い中間体として、有機合成に利用されてきたが、これを重合のモノマ
ーとして用いる試みはこれまで全くされていない。そこで本研究では、ベンザインをモノマーとして用いる重合反応の開発を試みた。その結果、ベンザインとピリジン誘導体が交互共重合体を形成することが判明した 1)。
【実験方法】
反応は窒素雰囲気下で行った。モノマー前駆体(1a~4a)及び CsF、ピリジン誘導体を CH3CN に懸濁させ、攪拌しながら室温で 15-22h、重合を行った。
【結果と考察】ベンザイン(1b~4b)とピリジン誘導体の反応により、濃い紫色のポリマー(1c~4c)が生成した。
得られたポリマーの分子量は GPC により Mn=1310-1880 であった。
元素分析、
MALDI-TOF-MS、IR、1H-NMR 等により、得られたポリマーがベンザインとピリジンの交互共重合体に塩酸が付加したもの(1c~4c)であることが確認できた。さらに、10wt%の NaOH aq で処理を行うとピリジンに由来する六員環が OH-の求核攻撃を受けた構造(1d~3d)になった。さらに 4d の場合には、その後イミンが加水分解されて、アミンとアルデヒドを持った構造のポリマー(4e)が得られた。
Scheme 1. Alternating Copolymerization of Benzyne and Pyridine
R'
R

R

SiMe 3

N

CsF
CH 3 CN

OTf

R

R
HCl

NaOH aq

R'=H,nBu

1a~4a

H2O

1b~4b

(HCl) x
H3C

SiMe 3
1a

OTf

OCH 3
SiMe 3

OTf

N

OH
n

R'

R'

1c~3c(R'=H),4c(R'=nBu)

1d~3d(R'=H),4d(R'=nBu)

R

OTf

2a

SiMe3

SiMe 3
3a

n

N

H 2O

OTf

4a

monomer precursor

H2N
H

OH
n
O

R'

4e(R'=nBu)

Table 1.

Alternating Copolymerization of Benzyne and Pyridine Derivatives

Monomer Pyridine
Precursor derivatives [Py]
Run
(M)
(Py)
[M] product

yield
(%)

Mn

Mw/Mn

1

1a

pyridine

51c19.1 1730

1.39

2

1a

pyridine11c38.4 1530

1.25

3

1a

pyridine

1／2

1c41.7 1880

1.20

4

1a

pyridine

51d38.6 1200

1.70

5

3a

pyridine53d17.5 1540

1.27

6

4a 3-n-Bu-pyridine 3

4c14.5 1310

1.14

elemental analysis
found
calcd(x HCl, y H2O)

C,67.57;H,5.39;N,7.35
C,68.01;H,5.61;N,6.61(x=1.00, y=0.40)
C,72.60;H,6.05;N,8.67
C,72.65;H,6.00;N,7.06(x=0.80, y=0.00)
C,75.63;H,6.13;N,7.33
C,75.42;H,6.12;N,7.33(x=0.60, y=0.00)
C,76.08;H,6.19;N,8.43
C,76.97;H,6.99;N,7.48(x=0.00, y=0.00)
C,67.47;H,4.50;N,5.29
C,68.20;H,5.19;N,5.30(x=1.00, y=1.30)
C,71.50;H,6.92;N,6.14
C,71.94;H,6.90;N,5.99(x=1.00, y=0.00)

solvent: CH3CN(40ml) , temp: r.t.(except runs 4, 6), 40℃(runs 4, 6) , time: 15-22h1) E. Ihara, A. Kurokawa, T. Koda, T. Muraki, T. Itoh, K. Inoue, Macromolecules, 38, 2167-2172(2005)

遷移金属アート錯体を対アニオンとして用いたｲｿﾌﾞﾁﾙﾋﾞﾆﾙｴｰﾃﾙのカチオン重合（愛媛大工）○吉田 尚記（愛媛大工・VBL）伊藤 大道・井原 栄治・井上 賢三【Introduction】イソブチルビニルエーテル(IBVE)のカチオン重合において、遷移金属アート錯
体を対アニオンとして用いることが重合挙動に与える影響について検討を行った。

1 2
ML mL n+1‑m ＋

Ph3C

x

transition metal ate complex
1

2

L =nBuPhN, iPrPhN, iPr2N;L =H
M = Nb, Mo, W

H
O
iBu

CH2 CH
CH2 CHOO
iBu x‑1iBu

1

2

ML mL n+1‑m【Results and Discussion】五塩化ニオブ(NbCl5)に n‑
ブチルリチウム、リチウムアミド、トリチ
ルクロライドを反応させて生成するアート錯体を用いた IBVE のカチオン重合によりポリマーが得られることを見出した。例えば NbCl5、nBuPhNLi、nBuLi を 1:1:5 の比で反応させて得られたアート錯体を用いて r.t.で 62.5h、金属に対して 100 当量の IBVE を反応させると収率 60%、
Mn=8100、
Mw/Mn=1.13 の分子量の制御されたポリマーが得られた。(run 1) これと同様の条件下で重合温度を 40℃、50℃にした場合も分子量のそろったポリマーが得られた。
（runs 4, 5）
さらに n‑
ブチルリチウムとリチウムアミドの当量を変えた場合や、Nb と同様に toluene に可溶
な Mo、
W の塩化物を用いた場合の重合も行ったが分子量の制御されたポリマーは得られなかった。
従ってこの重合における分子量の制御にはアート錯体の構造が非常に重要であることが明らかとなった。
Table. 1 Polym erization of IBVE by transition m etal ate com plex
run

M

1
2
3

Nb

4
5
8
9

Mo

10
11
12
13

W

Ligand1

2

L (m)L (n+1-m)
n BuPhNLi(1) n BuLi(5)n BuPhNLi(2) n BuLi(4)n BuPhNLi(3) n BuLi(3)nBuPhNLi(1)n BuLi(5)n BuPhNLi(1)n BuPhNLi(2)n BuPhNLi(3)n BuPhNLi(1)n BuPhNLi(2)n B uPhNH(3)n BuLi(5)n BuLi(4)n BuLi(3)n BuLi(6)n BuLi(5)n BuLi(4)[IBVE]/[I] temp.（℃ ） time(h) yield(%)
20.0

GPC
Mn
M w/M n

60.3

8100

1.13

r.t.

62.5

11.4

23900

2.57

34.9

2000

1.05

20.1

40℃

14.5

63.4

8200

1.16

20.2

50℃

14.5

76.8

8600

1.20

63.7
59.7

31300
35200

3.51
3.28

26.8

29800

2.47

53.5

20900

4.63

20.0

28.1

19400

3.36

20.3

17.1

22100

3.54

20.0
20.0

20.1
20.3
20.0
19.8

r.t.

62.5

また 40℃で得られたポリマーの MALDI‑
TOF‑
MASS による測定を行ったところ、モノマーユニット(IBVE)の分子量 100.16 と一致する間隔で二種類のピークが観測された。それらのピークの分析の結果、これら二種類のポリマーの開始末端はともに H であり、停止末端は重合後に加えた MeOH が結合したものと、 ‑水素脱離によって生成した炭素‑
炭素二重結合を有するものであることが判明した。しかしトリチルカチオンにより開始が起こると考えていた開始末端が H となっていた理由は今のところはっきりとは分かっていない。

ジアゾカルボニル化合物とフェニルジアゾメタンの共重合
愛媛大工 ○木多昌美、愛媛大工・VBL 伊藤大道・井原栄治・井上賢三【緒言】我々はポリ(置換メチレン)合成と呼ばれる新しい炭素-炭素結合を主鎖骨格とするポリマーの合成について検討を行っている。これまで、ジアゾ酢酸エステルとジアゾケトンをモノマーとした単独重合・共重合について報告している 1),2)。ここでは、この二つのモノマーとフェニルジアゾメタンの共重合を検討した。
N2

N2
O +

C
H

C

Pd catalyst / Pyridine

H

tolueneOR
1 or 32

R = 1:C 5 H 11

H

H

C

C
R

N N

p

n
m

3: O Et【実験】反応は窒素雰囲気下で行った。まず Pd 触媒をトルエンに懸濁させ、そこにピリジン(Py)を加え 30分間撹拌し、モノマーを加え 17h 加熱しながら撹拌した。後処理後に得られた固体を分取 GPC で精製することにより、共重合体を単離した。

【結果と考察】ジアゾケトン 1 とフェニルジアゾメタン 2 の共重合では 1:2＝300:100 のとき、[1+2]:[PdCl2(MeCN)2]:[Py]＝400:2:50 という反応条件において、収率 30%で Mn=2090 の共重合体(組成比 1:2＝2.8:1.0)が得られた(run 1)。ジアゾ酢酸エステル 3 の場合は 3:2＝300:100 のとき、[3+2]:[Pd2(dba)3]:[Py]＝400:2:100 という反応条件において、収率 16.0%で Mn=1240 の共重合体(組成比 3:2＝1.8:1.0)が得られた(run 6)。1H-NMR
からも、フェニルジアゾメタンとジアゾカルボニル化合物のモノマーユニットのピークがそれぞれ観測されることから、確かに共重合体ができていると考えられる。元素分析等の結果から、窒素の含有が確認され、主鎖中にはモノマーに由来するアゾ基 (-N=N-) が含まれていることが示唆された。アゾ基が主鎖中に含まれているとした場合、分子量の計算値は実測値と一致した。そのアゾ基の存在をラマン分光法により確認した。
さらに、仕込み比を変えて共重合行った。結果を Table 1 に示す。ジアゾケトンの場合、フェニルジアゾメタ
ンの仕込み比が上がるにつれて分子量が低下する傾向はあるが、比較的仕込み比に対応した組成をもつポリマーが得られた。ジアゾ酢酸エステルの場合でも、ある程度仕込み比に対応したポリマーが得られた。
aTable 1. Copolymerization of Diazocarbonyl Compounds with Phenyldiazomethanecomposition inmonomeryield
copolymerc
b
b
run
feed
initiating system(%)
Mn
M w/M n[1]or[3]:[2]
1[1]:[2] = 3:1
PdCl2(MeCN)2
34.2
1500
1.50
2.8:1.02[1]:[2] = 3:1 PdCl2(MeCN)2/Py
26.2
2090
1.33
3.1:1.0
3[1]:[2] = 1:1 PdCl2(MeCN)2/Py
33.5
1720
1.23
1.1:1.0
4[1]:[2] = 1:3 PdCl2(MeCN)2/Py
35.0
1240
1.29
1.0:1.6
5[3]:[2] = 3:1
Pd2(dba)3
37.6
470
1.70
16.7:1.0
6[3]:[2] = 3:1
Pd2(dba)3/Py
16.0
1240
1.19
1.8:1.0
7[3]:[2] = 1:1
Pd2(dba)3/Py
17.2
1230
1.27
1.0:1.4
8[3]:[2] = 1:3
Pd2(dba)3/Py
18.8
940
1.36
1.0:2.5aToluene = 10mL, 60oC, 17h. b M n and M w/M n were obtained by GPC caliblation using a standard PMMA and dibutyl sebacate in THF

solution. c Determined by 1H NMR.

1) E. Ihara, N. Haida, M. Iio, K. Inoue, Macromolecules, 36, 36-41 (2003).
2) E. Ihara, M. Fujioka, T. Itoh, K. Inoue, Macromolecules, 38, 2101-2108 (2005).

三元系金属複合酸化物によるメタンの酸化カップリング反応(無機物質化学分野)○小松裕実子・宮崎隆文・山口力【緒言】メタンの有効利用法としてエタンやエチレン (C2)への直接転換法の開発は重要な課題である。
しかし、工業化の目安となる収率 35%以上を得られる触媒は未だ報告例がない。LiNiO2 は選択的にC2-炭化水素を生成するメタンの酸化カップリング（OCM）反応触媒として報告されたが、低表面積や活性の持続性に問題がある。そこで、本研究では LiNiO2 の Li と Ni の一部を他の金属元素で置換した三元系複合金属酸化物 LixNi2-x-yMyO2(M=Ti, Al, Mn, Fe; 0.7≦x≦0.9, 0.1≦y≦0.5)を調製して、結晶構
造、表面積、CH4 転化率、C2 選択率、OCM 反応の持続性に及ぼす置換効果について検証した。
【実験】試料合成は市販の金属硝酸塩または金属水酸化物を相当する組成比となるように混合した後、Ti 置換体は固相反応法、Al、Mn、Fe 置換体はゾル-ゲル法で調製した。各試料は粉末 X 線回折による同定と BET 法による比表面積測定を行った。各試料の反応活性は固定床流通型反応装置を使用して、触媒量 1g、760℃における生成ガスをガスクロマトグラフ(TCD 検出器)により定量して評価した。
【結果と考察】Fig.1 に LixNi2-x-yAlyO2 (x=0.8, y=0.1, 0.2, 0.3)の XRD パターンを例示する。y=0.1, 0.2 の試料では LiNiO2 と同系の回折ピークのみを観測し、金属の添加量に対して d 値が系統的に変化した。
y=0.3 以上では LiAlO2 などを含んだ混合相になっていた。Fig. 2 は LixNi2-x-yMyO2(M=Ti, Al, Mn, Fe)の
比表面積に対する反応開始 60 分後の CH4 転化率および C2 選択率を示している。混合相では比表面積に対する反応性のバラツキが大きく、単一相では金属置換による依存性が認められた。金属置換による表面積変化は LiNiO2 と比べて最高 3.9 倍まで増大し、CH4 転化率は Al, Mn 置換体において最大 2.6倍となった。また、反応の持続性についても Al 置換体に選択性低下の抑制効果が認められた。その結果、C2 選択率の低下が僅少だった Al 置換体において C2 収率は LiNiO2 の約 1.8 倍となることが分かった。
これらのことから LixNi2-x-yMyO2 の OCM 反応に対する活性は置換金属種に依存性を示しており、表面積の増加だけでなく CH4 転化率と C2 選択率からも Al 置換の有効性が確認された。

40

CH4 conv. / %- LiAlO 2
x=0.8 y=0.3

x=0.8 y=0.23020intensity

10

C 2 select. / %LiNiO 2

20

30

40

50

60

70

2θ/ degree
Fig. 1 LixNi2-x-yAlyO2のXRDパターン

混合相型

60

40

20

0

10

単一相型

0
80

x=0.8 y=0.1

0

1

2

3

40

S.A / m2・g-1

1

2

3

4

S.A /m2・g-1

Fig. 2 反応開始60分後のCH 4転化率 , C2選択率 vs 比表面積
LiNiO 2Ti 置換体Al 置換体M n 置換体

Fe 置換体ポリアニリン複合膜を用いた直流駆動型湿度センサの開発（工業物理化学） ○山中崇司・松口正信［緒言］現在市販されている湿度センサは、感湿材料にイオン伝導性の材料を用いており、直流で測定を行うと電解による分極の影響を受けるため、交流インピーダンスを測定している。そのため、測定回路が複雑になり、測定装置が大きく高価となっている。従って、より安価で利便性の良い湿度センサを実現するためには、直流駆動でも長期間に渡って安定に動作するセンサ素子の開発が必要不可欠である。
そこで本研究では、感湿材料としてより電解の影響を受けにくい電子伝導性高分子であるポリアニリ
ン(PANI)と種々のマトリックスポリマーとの複合膜を作製し、直流駆動型湿度センサ素子への適用の可能性について検討を行った。
［実験］プロトン酸をドープした PANI と種々のマトリックスポリマーとの混合溶液を、櫛型金電極を焼き付けたアルミナ基板上にコートし、乾燥したものを湿度センサ素子とした。
作製した素子を 30℃の恒温恒湿槽中にセットし、湿度を 0-30-60-90-60-30-0％と 15 分間隔で切り替え、直1V,30℃(DiOHP=0.100g)
5.5
流 1V 印加した時の電流値の変化を、デジタルエレクト
ロメーターを用いて測定した。湿度センサ素子は長期間
5c‑PStに渡って実験室で保存しながら、定期的に上記の感湿特性を測定することによって長期安定性を調べた。長期安4.5
定性は、Ｘ日後の 0％RH での抵抗値と 0-90%RH での感度をセンサ作製直後の初期抵抗値及び初期感度に対4するドリフト量として湿度換算値で表して評価した。
［結果と考察］使用したマトリックスポリマーの中では、
3.5
ポリスチレン（PSt）を用いた複合膜が初期感湿特性及PSt
び長期安定性に優れていたが、センサ出力のドリフトを
3
目標値以内に抑えることができなかった。そこで、セン
サ出力のドリフトの主な原因は複合膜の形態変化にあ
2.5
るのではないかという考えから、次にこの複合膜に架橋
0
20
40
60
80
100
構造を導入し、膜の形態変化を抑制させ、センサ出力の%RH
Fig.1 PANI複合膜を用いた湿度センサの初期感湿特性
ドリフトのさらなる抑制を試みた。
まず、PANI 複合膜を用いた湿度センサの初期感湿特性を Fig.１に示す。架橋ポリスチレン（c-PSt）を用いた
1V,30℃(DiOHP=0.100g)
60
複合膜の方が全体に抵抗値は高かった。一方、どちらの複合膜を用いた場合でも相対湿度変化に対する抵抗値の40変化(感度)はイオン伝導性の感湿膜を用いた場合と比べて小さいもののヒステリシスが小さく、初期特性に優れ20ていることがわかった。
Fig.2 は、PANI 複合膜の長期安定性を示している。ま0ず、0%RH での抵抗値の変化を見てみると PSt を用いた複合膜では、センサ作製直後から値が大きくドリフトし-20ているのに対し、c-PSt を用いた複合膜では、作製直後を除き、約 30 日程度まで値が安定していた。この抵抗値の●)PSt,抵抗値(0%RH)○)PSt,感度(0‑90%RH)
ドリフトの主な原因は、長期間に渡る水分子の吸着と脱-40■)c‑PSt,抵抗値(0%RH)□)c‑
PSt,感度(0‑90%RH)
離による膜の 膨潤と収 縮の繰り返 しによっ て起 こる▼)Nafion,感度(0‑90%RH)PANI 粒子の分相化にあることが確かめられた。一方、
-60
0
10
20
30
40
50
感度のドリフトは、Nafion などのプロトン酸を用いた場
days
合に比べて両者共にかなり小さく抑えられた。
Fig.2 PANI複合膜を用いた湿度センサの長期安定性

ペロブスカイト型酸化物基板上に形成したプロトン導電性酸化物膜の電気特性（材料物性化学）○浅本麻紀子・白井裕乃・山浦弘之・八尋秀典

１．緒言
固体電解質形燃料電池（SOFC）は、イオン導電性を持つ酸化物セラミックスを電解質に用いた燃料電池で、電解質は十分な導電性を有するよう薄膜化される。我々は以前、プロトン導電性酸化物(SrCe0.95Yb0.05O3，以後 SCY)を利用した燃料電池のカソード材として La0.7Sr0.3FeO3 が有効であることを報告した[1]。本研究では種々のペロブスカイト型酸化物(La0.7Sr0.3MO3, M=Fe(LSF), Co(LSC),
Mn(LSM))基板上への SCY 膜の形成方法および得られた膜の電気特性について検討した。
２．実験
固相反応によって調製したペロブスカイト型酸化物粉末をディスク状（直径 10mm，厚さ 1mm）に成型したものを 1300-1400℃で熱処理して多孔質な基板と緻密な基板を作製した。基板上への SCY 膜の作製は二種類の方法で行った。1)錯体重合法によって調製した前駆体溶液を基板上にスピンコーティ
ングし、400℃熱処理した。スピンコーティング→400℃熱処理を繰り返し、最終的に 900℃ で熱処理することにより得た（作製法 A）。2)原料粉末をイソパノール中で分散させた溶液を基板上にスピンコー
ティングして、1000℃−1200℃で熱処理することにより得た（作製法 B）。導電率、プロトン輸率はそれぞれ交流二端子法、水素濃淡電池法により評価した。
３．結果と考察作製法 A、B による基板上の膜は、いずれも SCY に帰属

1.0

バルク

可能な XRD 回折線が認められ、本実験条件下で SCY が形
0.8

質基板上では繰り返しのコーティングにより 10〜20μm が膜の形成できた。緻密な基板より亀裂やピンホールが多く輸率成していることが確かめられた。LSF、LSC、LSM の多孔

0.6

10回膜

確かめられた。
Fig.1 に、多孔質 LSF 基板上の SCY 膜（作製法 A）のプ
ロトン輸率を測定した結果を示す。コーティング回数 10 回

0.4

5回膜
0.2

膜の輸率は約 0.6(600℃)であり、コーティング数を増やす

Fig.1

Fig.2 に、緻密な LSF 基板上に 1200℃で熱処理した SCY
膜（作製法 B）の SEM 写真を示す。作製法 B は、コーテ
ィングを繰り返さずに緻密な膜を形成できる。しかし、高温での熱処理が必要となり、基板と膜との界面で反応が進
み導電性を妨げる物質の形成が示唆されたため、さらなる検討が必要である。

[1] H. Yamaura, T. Ikuta, H. Yahiro, G. Okada, Solid

State Ionics, 176, 269 (2005).

700

温度/℃

ことで輸率は増加した。このことから、コーティングを繰り返すことで膜の緻密さが増すことが分かった。

600

Fig.2

800

無機化合物上に担持した銅フタロシアニンの状態と反応性（材料物性化学）○杉谷興一・木本邦博・山浦弘之・八尋秀典
１．緒言
銅フタロシアニン(CuPc、Fig.1)は熱・光・酸・塩基に安定であるため、インク、染料、顔料として用いられている。一方で、CuPc 担持触
媒は酸化反応に活性を示すことが報告されている。本研究では酸化反応
触媒として用いられている CuPc の無機担体上での状態を ESR により検討した。また、無機担体上とゼオライト細孔内での CuPc の構造を比Fig.1

較し、検討した。
２．実験

ベーマイト AlO(OH)を水溶性 CuPc 溶液中で 24ｈ撹拌し、遠心分離後、沈殿物を乾燥し粉砕して、AlO(OH)上に吸着した CuPc の固体試料（CuPc / AlO(OH)）を調製した。CuPc / ゼオライト試料は既報[1]に従って調製した。試料を真空中、473K で 2h 処理し，ESR 測定（77K）を行った。スペクトルのシミュレーションには Bruker 製 SimFonia プログラムを用いた。
３．結果と考察Fig.2 (a)，(b)に市販 CuPc と CuPc / AlO(OH)の ESR スペクトルを示す。市販の CuPc は銅の凝集によりスペクトルの線形がブロードになったが、AlO(OH)に吸着させることにより、孤立した Cu2+に特
徴的な Cu の核スピンと電子スピンの相互作用である超微細構造（hfs）に帰属されるシグナルが確認された。また、Cu の hfs に加えて CuPc に特徴的な N 核による shfs も認められた。Fig.2 (c)に CuPc /AlO(OH)のシミュレーションを示す。シミュレーションより得られた ESR パラメータはｇ⊥=2.025、
g//＝2.152、A⊥=16.0、A//＝224.5 であった。一般に Cu2+の 4 配位錯体はｇ//=2.16 と報告されており、CuPc / AlO(OH)のｇ//=2.152(a)であることから Cu は４配位平面構造が維持されていることがわかった。

7(b)

Fig.3 (a)，(b)に市販 CuPc

6
5

射 UV-vis スペクトルを示す。

4

両試料ともπ電子系の状態(c)

F (R) / a.u.

と CuPc / AlO(OH)の拡散反(a)3と関連深い Q バンドの信号

2が確認された。

1(b)02400 2600 2800 3000 3200 3400 3600 3800

300

400

Fig.2

ESR spectra of (a)“neat” CuPc, (b) CuPc / AlO(OH),and (c) simlation.

500

600

700

800

wavelength / nm

Field / G

Fig.3

UV-vis spectra of (a) “neat”

CuPc and (ｂ) CuPc / AlO(OH)

References[1]H.Yahiro,K.Kimoto,H.Yamaura,K.Komaguchi and A.Lund,Chem. Phys.Lett.,415(2005) 126-130.

アルミナ担持 Cu 触媒の水性ガスシフト活性
やまもと

てつや

さいき

かずひこ

なかや

けんた

やまうら

ひろゆき

やひろ

ひでのり

（材料物性化学）○山本 哲也・佐伯 和彦・中矢 健太・山浦 弘之・八尋 秀典
Al2O3 担持 Cu 触媒（Cu/Al2O3）の一酸化炭素の水性ガスシフト反応（WGSR; CO ＋H2O→H2 ＋CO2）に対する焼成温度（773-1173 K）の影響について検討した．WGSR 活性が最も高い 1073 K 焼成
触媒では CuO と CuAl2O4 が共存すること，CuO は
473 K 水素還元によって高分散 Cu0 として Al2O3 に担持されることがわかった．
水性ガスシフト反応・一酸化炭素・銅・アルミナ・スピネル型酸化物
1．緒 言
WGSR は純粋な水素製造プロセスに欠かせない反応である．これまでに WGSR には Cu 系酸化物あるいは担持 Cu 触媒が活性を示すことが報告されている[1]．本研究では，Cu/Al2O3 触媒の WGSR に対する焼成温度の影響について検討した．
2．実 験
Al2O3(JRC-ALO8)上に Cu(NO3)2･3H2O を含浸させ，所定温度（773-1173 K）で 8 h 焼成することにより前駆体を得た．
反応前に 20％H2/He 中，
523 K，
2 h 還元処理を行った．WGSR は CO(5.4%)+H2O(21.6%)+H2(57%)+CO2(16%)， GHSV = 6000 h-1の条件で行った．試料のキャラクタリゼーションとして BET，XRD，TPR，N2O パルス測定を行った．
3．結果と考察
図１に Cu/Al2O3 触媒の還元前の XRD 結果を示す．
焼成温度 973 K 以下の触媒では CuO およびγAl2O3 に帰属されるピークが確認された．焼成温度1073 K の触媒では，CuO に帰属されるピークは消失し，新たにスピネル型酸化物 CuAl2O4 に帰属されるピークが認められた．さらに焼成温度を上げた触媒では，CuAl2O4 粒子の成長およびアルミナ担体の結晶相の転移（γ- Al2O3→α- Al2O3）が起こることがわかった．523 K で水素還元を行ったところ，焼成温度 973 K 以下では金属 Cu（Cu0）に帰属される
XRD ピークが出現したが，1073 K 以上の触媒ではCu0 の明確な XRD ピークは認められなかった．
種々の焼成温度で調製した触媒の TPR 測定を行った．焼成温度 973 K 以下の触媒には 473-523 K に
CuO の還元(CuO+H2→Cu+H2O)に帰属可能なピー
クのみが確認された[2]．一方，1073 K 以上で焼成された触媒では CuO のピークに加えて，623-673 Kに CuAl2O4 の還元ピークが認められた．水素消費量から求めた担持銅量に対する CuO の割合を表１にまとめた．焼成温度の増加とともに CuO の割合は低下したが，1073 K 焼成でも約 7 割の Cu は CuOとして存在していることがわかった．また，還元した触媒の Cu0 表面積を N2O パルス測定より求めた．
表１に示すように 1073 K 焼成触媒の Cu0 表面積が最も大きく，高分散していた．以上の XRD，TPR，
N2O パルス測定から，1073 K 焼成触媒では CuO とCuAl2O4 スピネル酸化物が共存し，CuO は水素還元
によって高分散 Cu0 となることがわかった．
表１には Cu/Al2O3 触媒の CO 転化率の焼成温度依存性も示している．表より CO 転化率と Cu0 表面
積とには相関があるようである．すなわち, 1073 K
焼成触媒が最も高い活性を示すのはスピネル型酸化物が共存することで Cu0 が高分散化したためであると結論した．
○ CuO● CuAl2O4□ γ-Al2O3
× α-Al2O3

●

×
×

×

●

×
×

× ●

●
●

×

●

●

●

○

□

30

●□

c)

□ ○

□

b)

□

a)

○

○
□

20

d)

○
□

○

×

□

40
50
2θ/degree

60

70

80

図１ Cu/Al2O3 触媒の還元前の XRD パターン．焼成温度 a) 773, b) 973, c) 1073, d) 1173 K．
表１．種々の焼成温度で調製した触媒の触媒活性 a)，
比表面積 b)，Cu0 表面積 c)，CuO の割合 d)．
焼成温度 / K773
CO 転化率/%56

比表面積/ m2･g-1

163

表面積/ m2･g-1

4.6
92

0

Cu

CuO の割合/%

973

1073

1173

73

76

52

137

115

18

8.7

11.9

4.1

92

70

18

a) 498 K での CO 転化率．b)BET 法．c) N2O パルス法．d) TPR 法（室温-573K の水素消費量より計算）．

[1] Y. Tanaka et al., Appl. Catal. A, 238 (2003) 11.
[2] W.-P. Dow et al., J. Catal., 160 (1996) 155.

新規レクチンを装着したミサイル型人工細胞の担がんマウス体内動態（生体環境機能工学）○竹乗秀樹（M2）1）・秋山浩一 2）・菅原卓也 3）・重川庸介 1）
川久保明宏 4）・増田晴造 2）・青儀健二郎 5）・能勢眞人 6）・宮崎龍彦 6）・加藤敬一 1）1）愛媛大工 2）愛媛大総研支援 3）愛媛大農 4）（株）ヤマキ 5）四国がんセンター 6）愛媛大医

２実験方法
2.1 担癌マウスの体内動態 今回使用したベシクル
は、(1)非固定化ベシクルであるノーマルベシクル（NV）、(2)ESA 固定化ベシクル（EV）、および(3)PEG
脂質で修飾したベシクル（ステルスベシクル）に ESAを固定化したもの（EPV）の 3 種類である。これらのベシクルを担癌マウスの尾より静脈投与した。サンプル投与後、任意の時間（1, 3, 6, 15, 24 時間）
放置した後、担癌マウスを心灌流法により脱血処理を行った。その後、マウスの臓器を取り出し、腫瘍と各臓器（心臓、腎臓、肝臓、脾臓、肺、甲状腺）に蓄積した放射能をγカウンターにより測定を行った。また
ベシクル粒径は動的光散乱法により測定した。

3.2 PEG 脂質修飾の効果 今回使用した ESA 固定化
PEG 修飾ベシクルの場合、PEG 脂質修飾効果によりマク
ロファージからの攻撃を回避する、いわゆるステルス
機能をベシクルに付与することができ、肝臓への取り込みを減少させることができた（結果省略）。またこの
ベシクルの体内の長期滞留性も示唆された。
3.3 ESA による腫瘍への標的性 ESA ベシクル（EV）の腫瘍部への標的能は、ノーマルベシクル(NV)に比べて、打ち込み後 6 時間以内で高い値を示した。さらには、ベシクル調製時に添加する ESA 濃度によっても腫瘍への標的効果に違いが生じることが判明した。図Ⅰは ESA ベシクル投与 6 時間後での、腫瘍部における単位重量当たりの放射能分率（腫瘍、各臓器の放射能値の合計を分母におき、分子を腫瘍、各臓器の単位重量当たりの放射能とした％）で示した。なお、血液の影
響を除外するために、上述したように心灌流法により、脱血処理を行った。このベシクルの体内動態はベシク
ルの粒径により腫瘍への標的性が異なることが示唆された。また、ベシクルの優れた代謝性が示唆された。

3% of dose/g

１緒言
海藻由来の新規レクチン ESA は大腸癌細胞表面の異常糖鎖構造に対する特異認識物質であり、さらにその癌細胞のアポトーシスを誘引することを、筆者らはこれまでの研究で明らかにした。1）この ESA を、Span80を主成分とするベシクルに固定化してドラッグキャリ
アーとして利用し、DDS（Drug Delivery System）におけるヒト大腸癌治療の実用化に寄与することを、筆者らはこれまで試みてきた。2） 本研究では、ヒト大腸癌（colo201）の担癌マウスでの、この ESA 固定化ベシ
クルの体内動態を検討した。すなわち、放射性同位体
125
I を BSA に標識した 125I‑
BSA をトレーサーとして用
いて、ESA 固定化ベシクル、非固定化ベシクルなどいくつかのベシクルに内包させた。これらのベシクルを
上記の担癌マウスに静脈注射して、このマウス体内の各臓器への動態を RI（放射性同位元素）で測定して、ESA ベシクルの動態を評価した。

2

1

0
no rmalEV0.6

EV1 .0

図Ⅰ ベシクルによる腫瘍部への蓄積[参考文献]

3 結果と考察3.1 125I‑
BSA のベシクル包括による体内動態への影響
担癌マウスの尾より各ベシクルを静脈投与することにより、どのような体内動態を示すかを検討した。
その結果、すべてのベシクルにおいて肝臓への集積が高くなった（結果省略）。これは、ベシクルそのものの粒径（ベシクル粒径は約 300nm）が大きいため、肝臓に取り込まれやすくなったと考えられる。

1)Sugahara,T., Y.Ohama, A.Fukuda, M.Hayashi, A.Kawakubo and
K.Kato;”The Cytotoxic effect of Eucheuma serra agglutinin(ESA) on
cancer cells and its application to molecular probe for drug delivery
system using lipid vesicles,”Cytotechnology,36,93-99(2002)
2)K.Kato，Y.Omokawa et.al Anti-cancer effect to colon cancer in either
vitro or vivo using lipid vesicle combined with alga lecthin ESA* Keiichi Kato Dept. of Applied Chem. Univ., Bunkyochou 3,Matsuyama,790‑
8577
TEL&FAX089‑
927‑
9928
E‑
mail kato@eng.ehime‑
u.ac.jpProc. of the 10th APCChE 2004 Congress,A162(1P-01-032)(2004)

新規レクチンを装着したミサイル型人工細胞によるマウス大腸癌治療（生体環境機能工学）○福田祐介（M1）1)、福田勇騎２）・菅原卓也２）・秋山浩一 3）
増田晴造 3）・川久保明宏 4）・宮崎龍彦 5）・加藤敬一 1)1）愛媛大工 2）愛媛大農 3）愛媛大総研支援 4）（株）ヤマキ 5）愛媛大医

1．緒言
筆者らはこれまで、海藻由来の新規レクチン
ESA が癌細胞の異常糖鎖構造を認識して特異的に結合し、アポトーシス経路による細胞死を誘導することを明らかにした。一方、非イオン性界面活性剤 Span80 を主成分とするベシクルにこの ESAを固定化したベシクルの調製に成功した。この
ESA ベシクルを Colo201 担癌ヌードマウスに投与した動物実験を行った結果、DDS におけるこのベシクルの腫瘍増殖抑制効果を明らかにした。本研
究ではヒト臨床実験を視野に入れて、この ESA ベ
シクル投与による腫瘍増殖抑制効果と免疫システ
ムとの関わりを調べるため、免疫機能を有するマ
ウスにマウス大腸癌細胞株 Colon26 を移植して担癌マウスを育種し、このマウスに対する上記のESA ベシクルの腫瘍増殖抑制効果を検討することを目的とした。
２．実験方法
2.1 in vitro：マウス大腸癌細胞 Colon26 に対して、①PBS（Control）、②ESA、③Span ベシクルを添加し、トリパンブルーによって死細胞を染色し、細胞の生存率を測定した。
2.2 in vivo（No.1）：Colon26 担癌 BALB/c マウスを育種した後、尾静脈より①PBS（Control）、②ESA、③PV（PEG 修飾ベシクル）、④EPV（ESA を PVに固定化）、⑤EEPV（ESA を EPV 内に内包）を 3
日ごとに計 15 日間投与して腫瘍体積・体重を測定した。
2.2 in vivo（No.2）：No.1 と同様に尾静脈より①PBS（Control）、②TXT（市販の抗癌剤）、③EPV 、
④ETPV（EPV に TXT を内包）を 3 日ごとに計 15日間投与して腫瘍体積・体重を測定した。またマウスの腫瘍を回収し、TUNEL 法により皮下腫瘍中での細胞死の検討を行なった。

者には投与開始 6 日目以降、腫瘍体積に有意差が認められた。
3.3 in vivo（No.2）：EPV、TXT、ETPV の順に
腫瘍増殖抑制効果が増大し、コントロール群に対して ETPV 投与群の腫瘍体積増加は顕著に抑制され、両者には、投与開始 9 日目以降、腫瘍体積に有意差が認められた。（Fig.1）更に、TXT と同様の体重変化でありながら、TXT 単独投与よりも高い腫瘍増殖抑制効果を得ることができた。また TUNEL 法により、ESA によって皮下腫瘍中でもアポトーシスが誘導されることが明らかになった。

３．結果と考察
3.1 in vitro：ESA は 0.1mg／ml の時 48 時間で約 80%、
ベシクルは濁度 2.0 の時 12 時間で約 90%細胞の増殖を阻害していることがわかった。また
Caspase-3 活性の測定等により、両サンプルによってアポトーシスが誘導される事が明らかになった。
3.2 in vivo（No.1）：PV、EPV、EEPV、ESA の順に抗腫瘍効果が増大し、コントロール群に対してESA 投与群の腫瘍体積増加は顕著に抑制され、両【参考文献】

1500
Control
1200
）

TXT

Tumor volume（mm

3

EPV
900

ETPV

600

＊

＊

＊

12

15

300

0
0

3

6

Days

9

＊P＜0.01

Fig.1 マウスの平均腫瘍体積変化
4、今後の展望
今後は臨床研究への移行のための ESA 及びベシクルの毒性試験や、更なる腫瘍増殖抑制効果の向上を行っていく予定です。

1) Keiichi Kato, Yousuke Omokawa, Koichi Akiyama, Takuya Sugahara, Akihiro
Kawakubo and Toshiaki Saeki：Anti-cancer effect to colon cancer in either vitro orvivo using lipid vesicle combined with alga lecithin ESA, Proc. of the 10th Asian
Pacific Confederatio of Chem. Eng. (APCChE), J-STAGE, Vol.2004, pp500（2004）
2) Keiichi Kato, Takuya Sugahara, Koichi Akiyama, Yousuke Omokawa, Norihiko
Tateishi and Motomich Sato ：New Preparation of the Surface-Modified Lipid
Vesicle Targeting to a Cancer Cell and the Vesicle Function, Proc. of the FirstInternational Congress on Biop-Nanointerface (ICBN) ,201 (2003)＊

Keiichi kato Dept of Applied Chem,Ehime Univ,Bunkyo chou

3,Matsuyama,Ehime,790-0826, TEL and FAX:089(927)9928
E-mail kato@eng.ehime-u.ac.jp

がん臨床応用に向けての新規レクチンを利用したドラッグデリバリーシステム
Drug delivery system using new lectin for the clinical application of cancer therapy（生体環境機能工学）○重川庸介(D2)1)・秋山浩一２）・菅原卓也 3）・川久保明宏 4）・
増田晴造 2）・青儀健二郎 5）・能勢眞人 6）・加藤敬一 1), *1) 愛媛大工 2) 愛媛大総研支援 3) 愛媛大農 4) ヤマキ 5) 四国がんセンター 6 ) 愛媛大医

１．緒言

２．実験方法2.1 生体投与用のベシクル調製
ベシクルは、主成分である非イオン性界面活性剤
Span80 230mg とレシチン 24mg とコレステロール 12mgを用いて、二段階乳化法により調製した。また、ベシク
ルには、(a)PBS、(b)ヨードゲン法により放射性同位体 125Iをラベルした bovine serum albumin (BSA)、(c)1 mg/ml ESAのいずれかを包括させた。ESA は、脂質アンカーとして
1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-(succinyl)
3.25 mg を用いて、ベシクル上に固定化した。さらに、ベシクルの血中滞留性を向上させるために、PEG 脂質であるN-(monomethoxy-polyethylene-glycol-carbamyl)-distearoylphosphatidyl-ethanolamine 34 mg を用いて、ベシクルを修飾した。

3.1 ESA 固定化ベシクルのマウスでの標的機能[125I]-BSA 内包 ESA 固定化ベシクルを投与したマウスの各臓器のオートラジオグラフィーより、ESA 固定化ベ
シクルの蓄積量を評価した。[125I]-BSA 内包 ESA 固定化
ベシクル投与後のマウスのオートラジオグラフィーは、腫瘍（Colo201）部分が最も強く感光していた。この結果により、生体内での ESA による大腸癌細胞への標的が示された。
3.2 ESA 固定化ベシクルのマウスでの制癌機能
図 1 に示したように、ベシクル投与 9 日後で、EPV は
T/C％値を 66.9 %まで低減できた。また、EEPV は EPVよりも高い抗腫瘍効果(50.6 %)を示した。しかしながら、顕著な体重減少は認められなかった。
これにより、(a) EPVによる抗腫瘍効果が認められ、(b) さらに ESA をベシク
ルに内包することにより、抗腫瘍効果を向上させることが出来た。これらの結果により、抗癌剤を使用することなく、EPV 単独でがん治療へ利用することが可能である
ことが示された。
125

2.2 担癌ヌードマウスによる in vivo 実験
ヒ ト 大 腸 癌 細 胞 （ Colo201 ） を ヌ ー ド マ ウ ス(Balb/cAJcl-nu) に移植した担癌マウスを育種した。この担癌マウスに、上記トレーサーである[125I]-BSA を内包した ESA 固定化ベシクルを投与して、ベシクルの癌標的効果を検討した。体内動態測定は、灌流固定法で処理したマウス臓器の感光写真撮影（オートラジオグラフィー）を行った。
2.3 ESA 固定化 PEG 修飾ベシクルを用いた動物実験
ESA 固定化ベシクルによるがん治療を検討するために、
ESA 固定化 PEG 修飾ベシクル,EPV (ESA 含有量：200μg)と、さらにESA含有率を高めたESA固定化ESA内包PEG
ベシクル, EEPV (ESA 含有量：250 μg/ml) を Colo201 担癌
マウスへ静脈内注射により投与した(0.01ml/g of bodyweight)。それぞれのベシクルによる抗腫瘍効果は、癌腫
瘍体積より算出した T/C%値を用いて評価した。対照群として、リン酸緩衝生理食塩水(PBS)を担癌マウスへ投与し
た。

PBS
緩衝液
EPV
ESA固定化
PEG修飾ベシクル
EEPV
ESA固定化
ESA内包PEG修飾
ベシクル

100
T/C [%]

これまでの研究で、抗癌作用を有する海藻トゲキリン
サイ由来のレクチン、Euchuema serra agglutinin（ESA）を固定化したベシクルの調製に成功した。またベシクルをPEG（ポリエチレングリコール）脂質でコーティングした、いわゆるステルスベシクル上に ESA を固定化した
ESA 固定化ベシクルを調製した。そのベシクルを、ヒト
大腸癌細胞 colo201 を移植したヌードマウスに注射して、癌腫瘍への蓄積と増殖抑制に関する動物実験を行った。
その結果、ESA による標的効果と、そのベシクルの抗腫瘍増殖効果がみとめられ、今後のヒト大腸癌治療に対する利用の道が拓けた。

３．結果と考察

75
50
25
0
PBS

EPV

EEPV

図1 EEVとEEPVの抗腫瘍効果の比較
参考文献
1) 加藤 敬一：リポソーム応用の新展開 —人工細胞の開発に向けて—（第３編８章；非イオン性界面活性剤 Span80 ベシクルの構造と利用）,
NTS 出版、(2005)
2) K.. Kato, Y. Omokawa, K. Akiyama, T. Sugahara, A. Kawakubo and T. Saeki：
Anti-cancer effect to colon cancer in either vitro or vivo using lipid vesicle
combined with alga lecithin ESA, Proc. of the 10th Asian Pacific Confederatio ofChem. Eng. (APCChE), J-STAGE, Vol.2004, pp500（2004）
3) K. Kato: Preparation and characterization of vesicle for DDS mainly composedof nonionic surfactant span80, Proc. of the 2nd Symposium of Engineering Scienceof Liposome, 3 (2004)*

Keiichi Kato Dept of Applied Chem, Ehime Univ, Bunkyo chou 3,
Matsuyama, Ehime, 790-8577 TEL and FAX: 089(927)9928 E-mail:kato@eng.ehime-u.ac.jp

酸化チタンマイクロ粒子の多孔質化（分離分析化学） ○木村 志・山下 浩・前川 尚
Ⅰ．緒言
液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は試料適応性の広さ、分離手法の豊富さ、再現性の高さ、システム対する信頼性などのさまざまな特徴をもつ非常に有用な汎用分析法である。
ＨＰＬＣのカラム充填剤として一般的に使用されているのは球状多孔質シリカ粒子である。
しかし、シリカは酸性酸化物であるために、充填剤そのものが溶出してしまうという欠点を持っている。そこで、本研究ではＳｉＯ２粒子に代わるＨＰＬＣ充填剤として耐薬品性に優れた
ＴｉＯ２粒子の合成を試る。
ＴｉＯ２はその結晶性により、熱処理を施すと著しく比表面積が減少するという問題を含んでいる。カラム充填剤のような吸着分離剤として、比表面積が低いことは致命的な問題である。
そこで、本研究ではＴｉＯ２粒子の多孔質化による比表面積の拡大を目的とした。
Ⅱ．実験
チタンの金属アルコキシドを溶媒と混合し、SiO2 粒子を分散させた水を加えて撹拌する事でゾル溶液を調整した。そのとき

Homogenizer
Tefron beakerの実験装置の概略図を図１に示す。W/O エ
マルジョンを反応場として撹拌する事でThermometer

球状湿潤ゲルを得、これを洗浄・乾燥後、熱処理を施した。さらに、NaOH 水溶液にてアルカリ処理を施し、SiO2 粒子を溶出さMagnetic stirrer

せ、SEM・細孔分布などにより粒子を評価した。

Water bath

図１ 実験装置概略図

Ⅲ．結果と考察ＴｉＯ２ 粒子内部にＳｉＯ２ 微粒子を分散させた粒子の完成後、ＳｉＯ２成分を溶出させる事により、図２に示すような球状多孔質粒子を得た。TiO2 粒子にＳｉＯ２粒子を内包する事で純粋なＴｉＯ２粒子より高表面積のＴｉＯ２粒子を合成できる事が確認できた。

図２ ＴｉＯ２粒子 ＳＥＭ写真

浮選法を用いたホウ素含有水からのホウ素の除去（分離分析化学）○赤木裕幸・山下 浩・前川 尚
１．緒言
ホウ素は単体で用いられるよりも化合物として用いられることが多く、ホウ素を混ぜたガラスは耐火ガラスとして、ホウ酸（Ｈ３ＢＯ４）を水に溶かしたホウ酸水は弱酸性で消毒薬としてうがい薬・目薬として利用されている。
一方、ホウ素は毒性を持つ金属で、多量摂取による動物の成長阻害や神経障害を引き起こすなど人体にとっては有害な金属である。そのため、平成 11 年 2 月に新たに環境基準が設定され、排水基準 10ppmを上回るものは除去しなければいけなくなった。そこで、本研究では、浮選法を用いホウ素の除去を試みた。
２．実験方法
一定濃度のホウ素溶液に各金属溶液を加え、よく撹拌した。さらに、界面活性剤を加えた後撹拌した。
その溶液を１５ ml 取り、浮選管に移し、窒素ガスを通じて泡が出なくなるまで浮選させた。
３．結果と考察
１元素添加系では鉄を添加したものの浮選率が高かった。２元素添加系では、１元素添加系に比べ浮選率はどの組み合わせでも高かった。同じ組み合わせでも、各々の濃度によって浮選率が違った。一例
として、図１に鉄及びマンガン添加系での、ホウ素浮選率に及ぼす pH の影響を示す。鉄を 200ppm、マンガンを 100ppm 添加し、pH を８から 10 に調整して浮選した際、浮選率は 65%であった。添加濃度範囲を 100ppm〜300ppm で変化させたが、添加濃度が高け

70■＋Fe200＋Mn100■＋Fe100＋Mn100■＋Fe300＋Mn100■＋Fe100＋Mn300■＋Fe100＋Mn200

れば浮選率が高いわけではな

60

生成する水酸化物綿状沈殿の状態に影響を及ぼしているためであると考えられる。

浮選率(％)

く、これは pH と添加金属量が5040■＋Fe200＋Mn200
30
20
6

7

8
pH

9

図１ ホウ素浮選率に及ぼす pH の影響

10ホウケイ酸塩ガラスの構造とガラス転移点との関係（分離分析化学）○山下 浩・相本恭正・前川 尚
１． はじめに
フラットディスプレイは、近年我々の身近のいたるところで見られるようになった。その中でも液晶ディスプレイは、パソコン、液晶テレビ、携帯電話など最も広く実用化されている。この
液晶ディスプレイ用ガラス基板には、無アルカリで、耐熱性、低熱収縮、耐薬品性、高透過率などさまざまな物性を要求されている。これらの物性を発現させるためには基板となるガラスの構造を把握する必要がある。これまで我々は、固体ＮＭＲを用い、液晶ディスプレイ用ガラスのNMR スペクトルから、ガラスの組成とその時とりうる構造ユニットとの関係を明らかにし、ガラスの構造を酸・塩基反応の観点から考察してきた。また、塩基性酸化物種の違いによる酸性酸
化物との反応性について、定数化を試みた。これらのことから、ガラスのバッチ組成から、その時取りうるガラス構造ユニットを予測できることが明らかとなった。今回は、液晶ディスプレイ
ガラスの組成を考慮し、0.139MO (M’2O)・0.188B2O3・0.673SiO2（M= Mg、Ca、Sr、Ba、M’=Na、K）ガラスを作成し、11B の NMR スペクトルから得られるガラス構造ユニットとガラス物性の代表としてのガラス転移点（Tg）との関係を見たので報告する。
２． 実験
ガラス作成時の出発原料としては H3BO3、SiO2 を用い、アルカリ金属酸化物、アルカリ土類金属酸化物についてはそれらの炭酸塩を用いた。これらを目的の組成となるように秤量し、この混合物にアセトンを加えて磁性の乳鉢で良く混合し、電気炉中 1200〜1600℃で溶融した後、ステンレス板上に流しだし、ガラス化させた。得られたガラスを粉砕して JEOL 製 JNM CMX300 により、11B の NMR スペクトルを測定した。また、島津製 DTG-50 によりガラス転移点を測定した。

600
３．結果と考察rK 2O・(0.139-r)CaO ・0.188B 2O3・0.673SiO 2

rK2O ・ (0.139-r)CaO ・ 0.188B2O3 ・0.673SiO2 ガラスのｒとガラス転移点 Tg

590て、B(Q4)及び Si(Q4)ユニットの割合が大きくなり、ガラスネットワークがより密になり結果として Tg も大きくなった。
図 １ に

Tg / ℃との関係は、K2O がリッチになるにつれ

580

rK2O ・ (0.139-r)CaO ・

0.188B2O3 ・ 0.673SiO2 ガ ラ ス の

570

XSi(Q4)+B(Q4)と Tg との関係を示す。まだ一例だけではあるが、これらの間には良い相関性が見られた。今後は、種々の組成のガラスの Tg をとり、組成から Tg を見積もることを可能にしたい。

560

70

80

90

XSi(Q4)+B(Q4) / %Fig. 1 Relation between Tg and XSi(Q4)+B(Q4).

ゲノムワ イド なヒト 及びマ ウス プロテ インカ イ ネースの 自己 リン酸 化機能 の比 較

愛媛大学工学部応用化学科（無細胞センター遠藤研）

京嶋 沙和【 緒 言 】 分化・増殖・プログラム死などの多種多様な細胞機構の多くは、細胞内情報伝達機構により制御されている。細胞内情報伝達の主要制御機構は、タンパク質の活性を制御する分子スイッチとして機能するリン酸化修飾反応と考えられ，それらはプロテ
インカイネース(ＰＫ)により触媒される。ＰＫにはセリン／トレオニン残基をリン酸化
するＳ／Ｔ型とチロシン残基をリン酸化するＹ型カイネースの２種類がある。タンパク
質のリン酸化は、細胞の癌化に関与していることが報告されており，まだほとんど解明
されていないプロテインカイネースのリン酸化ネットワークは、生命現象の根冠をなすのみでなく，創薬ターゲットを知るうえにおいても重要である。ヒトゲノムには 518
種類のＰＫ遺伝子がコードされており、マウスゲノムにはそのうち 510 種類のヒトオーソログＰＫを含む 540 種類のＰＫがコードされていると考えられている。マウスはモデル哺乳動物として利用されており，ヒトオーソログマウスＰＫも細胞内でよく似た機能を有していると期待されている。しかし、マウスにはマウスの，ヒトにはヒト特有の細胞内タンパク質リン酸化ネットワークが存在することは，容易に想像できることから，それらの違いを担うＰＫが存在する可能性が考えられる。そこで、本研究では理化学研究所のマウス完全長ｃＤＮＡリソース(FANTOM)に含まれるマウスＰＫ232 種類とヒトＰＫ216 種類の自己リン酸化機能を調べることにより，オーソログＰＫにおいてリン酸化アミノ酸触媒活性が異なるＰＫの探索を行った。
【方 法 】 FANTOM よりマウスＰＫ232 種類と我々の研究室でクローニングしたヒト
ＰＫ216 種類を、コムギ無細胞タンパク質合成系を用いて合成し、それらの自己リン酸化活性を抗リン酸化Ｓ／Ｔ抗体、抗リン酸化Ｙ抗体を使ったエネルギー転位アッセイ
系を用いて解析した。
【結 果】顕 著に 自己リン酸化活性のみられたものはマウスＰＫで３３種類、ヒトＰＫでは５０種類だった。そのうち抗リン酸化Ｓ／Ｔ抗体で活性がみられたものはマウスＰＫ
で２６種類、ヒトＰＫで３６種類、抗リン酸化Ｙ抗体で活性がみられたものはマウスＰ
Ｋで９種類、ヒトＰＫでは１３種類だった。マウスＰＫとヒトＰＫの結果を比較すると、ヒトＰＫとマウスＰＫともに活性がみられたものは抗リン酸化Ｓ／Ｔ抗体で２種類、抗リン酸化Ｙ抗体で１種類であった。また、ヒトＰＫとマウスＰＫともに両方の抗体で活性が得られたものも１種類あった。活性のみられたオーソログＰＫは３１種類であった
ことから、２１種類のオーソログＰＫはヒトとマウスで異なった働きをもっている可能性が示唆される。今後はこれらのＰＫのターゲット分子の解析等を進める予定である。

高感度無細胞マラリアワクチン候補タ ン パク質の探索
愛媛大学工学部応用化学科（無細胞センター遠藤研）松岡和弘【 目的】 近年薬剤耐性マラリア原虫の出現により患者数が急増しているマラリ

アは、現在もなお、世界三大疾病の一つとして猛威を振るっている。しかし、長年の研究から２０種類程度のマラリアタンパク質がワクチン候補として解析されてきているが、現時点において、決定的なマラリアワクチンの開発には至っていない。このような背景から 2002 年に熱帯熱マラリア原虫のゲノムシー
クエンスが行われ、約 5400 種の遺伝子が見いだされ、ゲノムワイドにマライ
アワクチン候補をスクリーニングできる環境が整った。しかし、マラリア原虫
遺伝子のＡＴ含量は７０％以上と非常に高いため、従来の方法では、スクリー
ニングに必要なマラリア原虫タンパク質を得ることは不可能であった。我々は、これまでにコムギ無細胞タンパク質合成系を用いて、マラリア原虫タンパク質（マラリアタンパク質）の網羅的な発現に成功しており、現在、世界で最も多種類のマラリアタンパク質を保持しているセンターであるといえる。そこで本研究は、マラリアワクチン候補をゲノムワイドに探索することを目指して、コ
ムギ無細胞系で合成したマラリアタンパク質とマラリア患者血清中に含まれる抗体との反応を、高感度かつハイスループットに検出可能な新規マラリアワク
チン候補スクリーニング法の開発を行った。
【実験方法】マラリアゲノム情報を元に、マラリア原虫のヒト血中ステージ（トロフォゾイト、スポロゾイト、メロゾイト）の遺伝子クローニングを行った。
得られたクローンを split ‒PCR 法により転写・翻訳に必要な鋳型を構築し、コムギ無細胞系を用いたマラリアタンパク質の合成、さらにビオチン化を行った。
スクリーニングは、患者もしくは健常者から得られた血清と、ビオチン化された合成マラリアタンパク質を混合後、アルファースクリーン法により行われた。
【結果と考察】得られた 169 種類のマラリアタンパク質をスクリーニングを行った。その結果、健常者血清と比較し、患者血清でより顕著な抗原抗体反応を示すものを、28 クローン得ることができた。今後、得られたクローンの大量タンパク質合成を行い、それを抗原として、抗体を作製し、候補タンパク質がマラリア原虫の表面に局在しているか、またその抗体が生育阻害を引き起すかどうか調べことにより、ワクチン候補としての生理学的な解析を試みる予定である。

Aquifex aeolicus Trm1 [tRNA(m22G26)methyltransferase]は今までにない基質認識メカニズムを持つ
応用生物化学粟井 貴子【緒言】
DNA 情報をもとにしたタンパク質の合成は生命の根幹をなす現象である。タンパク質の翻訳過程における tRNA の役割は、コドン・アンチコドン対合により DNA 上に暗号化された情報をアミノ酸に対応させるという非常に重要なものである。 tRNA の特徴として、さまざまな修飾塩基が見られるが、それらは tRNA がその機能を発揮するために必須のものである。修飾塩基の多くは、tRNA の転写後、修飾酵素によって合成される。
超高熱菌 Aquifex aeolicus は生物進化において最も初期に分岐したと考えられる真正細菌である。つまり、本菌の RNA 修飾酵素の分析により、初期のタンパク質合成系に関する重要な情報が得られるだろう。当研究室の武田らによって、本菌が真正細菌に属するにも関わらず、真核生物と古細菌だけにしか発見されていない
tRNA(m22G26)methyltransferase (trm1) 遺伝子を保持していることが確認されている。
この酵素は、 S‑
adenosyl‑L‑methionine をメチル基供与体として tRNA の G26 を2
m 2G26 へとメチル化する酵素である。本研究では、Aquifex aeolicus Trm1 がどのような基質認識メカニズムを持つのかを調べることを目的とした。
【実験方法及び結果・考察】
まず、 Aquifex aeolicus の Trm1 を大腸菌内で発現させるためアミノ酸配列を変化させることなく trm1 遺伝子の 1/3 を合成 DNA で置換した。 Aquifex aeolicusのコドン使用頻度はきわめて A‑
T rich であるため、もとの遺伝子配列のままでは大腸菌内でのその発現がきわめて困難だからである。この遺伝子を用いた大量発現系によって、培地 1L あたり 1 g 以上の Trm1 が得られた。発現したタンパク質は、 heat
treatment (70 ℃, 30 min.) 、DE52 column chromatography そして CM‑
Toyopearl 650M
column chromatography によって調製した。
これを用いて、さまざまな tRNA transcript のメチル基受容活性を調べたところ、
Aquifex aeolicus の Trm1 は 真核生物、古細菌どちらの Trm1 とも完全に異なる基質
認識メカニズムを持つことがわかった。真核生物の Trm1 は D‑ステム の G10‑C11 塩基対が必須であり、また、 Class ㈵ tRNA しかメチル化しない。 Aquifex aeolicus のTrm1 は G10‑
C25 、 A11‑
U24 である tRNA Metf をメチル化した。そして Class㈼tRNA である tRNALeu(CAG) もメチル化した。古細菌の Trm1 は 4 塩基からなる可変ループを持つ tRNA が基質となるが、そうでない tRNA も基質となった。
二次元薄層クロマトグラフィーを行ったところ、 m2G 、 m22G 以外の修飾塩基が見られる場合があった。この修飾塩基を同定するために分析を行ったところ、調整された
Trm1 には RNA 分子が混ざっているためにうまく同定できなかったので、現在、 Trm1
から、RNA 分子を取り除く操作を模索している。

固相プローブ RNA 精製法の改良
応用生物化学 越智 杏奈＜緒言＞
DNA 上にコードされた遺伝情報は、RNA を介してタンパク質へと変換される。故に、遺伝子を基本として生命現象を理解する上で、RNA の解析は重要である。しかしながら、生体内には様々な RNA 分子種が存在し、それらの一つ一つを単離精製することは極めて難しい。その単離方法の一つとして、固相プローブ精製法が開発されている。
固相プローブ精製法とは、相補な配列をもつ一本鎖の核酸同士が、水素結合により二本鎖核酸（hybrid）を形成する性質を用いて、目的とする核酸を単離する方法である。
今回、この固相プローブ精製法をより簡単に行えるよう改良することを目指した。まず、モデルシステムとして、酵母 tRNA 混合物からの tRNAPhe の単離を試みた。目的とする tRNAPhe とその相補な配列である YF3’biotin primer を用いて選択的に hybrid を形成させる。YF3’biotin primer には 3’末端に biotin が付いており、これは streptavidinと特異的に結合するため、streptavidin を固定化したカラムにより単離出来る。また、後処理によって hybrid を解離させることで tRNAPhe のみを得ることが出来る。
＜実験結果と考察＞
最初に、酵母 tRNAPhe 転写産物と YF3’biotin で hybridization を行い、その条件および最良のモル比を確認した。次に、大腸菌 tRNA 混合物と酵母 tRNAPhe 転写産物の混合物を用いて行い、YF3’biotin が酵母 tRNAPhe 転写産物とのみ選択的に hybrid 形成することを確認した。最後に、スケールを大きくして、ドライイーストより得た天然の tRNA
混合物中 tRNAPhe の単離を試みたが、後処理として尿素処理を行っても hybrid を解離出来ず、tRNAPhe を得ることはできなかった。
現在、より短い YF3’biotin primer を用いて hybridization を行い、どのようにして
tRNAPhe をはずすか検討中である。
また、好熱菌 tRNA など、立体構造が安定で hybrid 形成しにくいことより固相プローブ精製を用いるのが難しいとされるものへの適用を考えている。

無細胞翻訳系によるヘテロサブユニット酵素合成の検討
応用生物化学分野

松本 啓介

緒言：tRNA の修飾は、tRNA 分子の立体構造の安定化、受容ステムへの適切なアミノ酸の結合、コドン・アンチコドン相互作用の強化などに関与している。
tRNA 中で 79 種類以上の修飾が確認されており、酵母においては 25 種類の修飾が発見されている。これらの修飾を行う酵素の多くは、ホモサブユニットから成っている。しかし、酵母由来の tRNA (m7G46) methyltransferase は例外的にヘテロサブユニットタンパク質である。よって、我々はこのヘテロサブユニットの tRNA メチル化酵素に注目することにした。本酵素は Trm8, Trm82 という二つのタンパク質のヘテロ二量体から形成されている。この二種類のタンパク質をコムギ無細胞翻訳系によって共発現させ、ヘテロサブユニット酵素を合成し、活性の有無を検討した。
実験方法：まず、trm82 は His-Tag を付加させ、trm8 はそのまま、それぞれ無細胞系用汎用ベクターpEU3 に組み込み、ベクターを構築した。次に、透析合成法
を用いて Trm8 と Trm82 を共発現させ、アフィニティカラムクロマトグラフィーにより精製した。透析後、本酵素を用いて、メチル基転移活性の有無を確認した。
結果・考察：バッチ合成を用いて 14C-Leu で標識合成された Trm8 と Trm82 は、
電気泳動上、目的通りの大きさであった。また、Trm8 と Trm82 を共発現させた試料を、アフィニティカラムクロマトグラフィー精製し、電気泳動した結果、Trm8 と Trm82 両方のバンドが確認でき、ヘテロ二量体を形成していることが強く示唆された。さらに、メチル基転移活性があることも確認した。今後は、活性の経時変化を追跡し、さらに、TLC を用いて本当に tRNA が m7G に修飾されているかを確認していきたい。最終的には、真核生物にしか発見されていない、
Trm8 と Trm82 が生物進化の過程でどのように変化してきたのかを、アミノ酸配列や機能解析を行うことによって明らかにしていきたい。

真正細菌と古細菌の RNA 転写後修飾過程の比較に向けての高温培養系の確立
応用生物化学

岩下 知香子・ 緒言
原核生物は、真正細菌と古細菌に分けられる。真正細菌の tRNA 前駆体にはイントロンが含まれていないが、古細菌のものには含まれている。イントロンは真核生物 tRNA 前駆体にも含まれており、タンパク質をコードしておらず、遺伝情報を持たないのに存在する不可解なものとされてきた。しかし、現在、イントロンは、修飾ガイド機能をもち RNA 修飾に関与する場合があることが判ってきた。RNA 修飾では修飾酵素が RNA の特定部位に結合することが必要である。本
研究では、イントロンの有無により修飾過程にどのような影響があり、また、どういう順序で RNA
修飾がおこるのかを調べたいと考えている。そのためには、生きた細胞を使って、成熟 RNA に至るまでの様々な段階にある tRNA を取り出すことが必要となる。そこでまず、真正細菌と古細菌の生きた細胞を得るため、本研究室における培養系を確立することに取り組んでいる。真正細菌、古細菌として、それぞれ高度好熱性真正細菌 Thermus thermophilus（至適温度 70℃）
、超
好熱性古細菌 Aeropyrum pernix （至適温度 90℃）を使っている。
・ 方法[Aeropyrum pernix]：90℃という高温培養であるため、東京薬科大の超好熱菌培養システムを借用した。マリンアート スーパーフォーミュラ SF1、Bact peptone、yeast extract を使用して20L+10L の栄養培地を調製し、ジャーファーメンターを用いて 90℃で培養した。
[Thermus thermophilus]：インキュベータでの高温培養を実現するため、メディウムビン、エアーポンプ等を用いて培養装置を組み立て、空気による冷却に対して培地の温度を一定に保てるよ
うに温度の調整をし、60〜80℃での培養を試みている。
・ 結果、考察Aeropyrum pernix の培養では、培地 30L、96 時間の培養で約 3g の菌体量を得た。これは、文献
値の 10 分の 1 の量である。温度に関しては、至適温度の 90℃を保っており、酸素もよく供給されているので、問題点として栄養培地が考えられた。この栄養培地の組成に関して最適なものを調製していこうと思う。
また、Thermus thermophilus の培養では、温度一定のもとでの培養ができるようにしたいが、その温度調整に苦戦している。インキュベータを用いての培養装置において、エアーポンプを通じて送られる空気によって培地の温度が下がってしまうため、途中で設定温度を上げる必要がある。
この温度調整で Thermus thermophilus の一定温度での培養ができ次第、その装置でさらに高温の90℃で Aeropyrum pernix を培養することにも着手する。

RNA 修飾酵素 tRNA トランス・グリコシラーゼは DNA に作用するか？
車田光謙
緒言：RNA 中には基本となる四種のヌクレオシド（A、U、G、C）の他に、修飾ヌクレオシドが存在する。とりわけ tRNA 上には数多くの修飾ヌクレオシドが存在し、tRNA の立体構造の安定化や翻訳時におけるコドン認識等に作用している。修飾ヌクレオシドは、tRNA 上の塩基配列や立体構造を認識して作用する生合成酵素によって導入される。7-デア
ザグアノシン骨格を持つ修飾ヌクレオシドとして、tRNA のアンチコドン一文字目に存在するキューオシンが知られている。キューオシンは、tRNA 上で塩基の交換反応によって導入される。この交換反応を触媒する酵素が tRNA トランス・グリコシラーゼ(TGT)である。
近年、Garcia らにより明らかにされた TGT の触媒メカニズムによると、TGT はリボー
スの 2’位を認識していない。すなわち、DNA にも作用する潜在活性を有しているのではな
いだろうか？もし、TGT が DNA 塩基の交換反応を触媒しうる場合、TGT が tRNA 遺伝子
自身に作用し、その分子進化に影響を与えてきた可能性が考えられる。本研究では、TGTが DNA の塩基交換反応を触媒しうるかどうかを調べることを第一の目的とした。
実験方法：(1) Aquifex aeolicus TGT-pET30a 大腸菌発現系は、当研究室の當間によって作成されていたが、PCR クローニング時に２カ所変異が入っていた。そこでまず、ゲノムプロジェ
クトの報告した配列に基づき、部位特異的に変異を導入し、発現系を再構築した。
(2) 上記発現系は、大腸菌にとってきわめて負荷の大きな発現系であり、イソプロピル 1チオ-β-D-ガラクシド(IPTG)による誘導で溶菌が起こった。そこで、添加する IPTG 量の最適化をはかった。
(3) 上記発現系の細胞抽出液を加熱処理し、内在性の大腸菌 TGT を失活させ、上清溶液中のグアニン塩基交換活性を、14C-グアニンの tRNAAsp 転写産物への取り込みにより測定した。
(4) (3)の結果、耐熱性 TGT 活性の発現を確認できたので、大量培養系から DE52 及びCM-Toyopearl カラムクロマトグラフィにより、TGT の精製を行った。
結果と考察：変異２カ所について、順次、部位特異的に変異導入し、目的とする Aquifex

aeolicus TGT-pET30a 大腸菌発現系を構築した。本発現系に対して、IPTG を最終濃度 50
μM になるように加えると、溶菌することなく細胞を遠心操作で回収することができることが判った。リコンビナント TGT はグアニン塩基交換活性を有しており、電気泳動上でシングルバンドになるまで精製することができた。
今後はこの酵素が DNA に作用するかどうかを調べていきたい。

tRNA(m7G46) methyltransferase の精製法の確立−結晶化に向けて−
応用生物化学 冨川 千恵
生命が地球上に誕生して、約４０憶年経過すると言われるが、この間に、生命体は、
どのような栄枯盛衰をし続けてきたのであろうか。もし、生命の起源がある一つの種に集約していると仮定するのなら、どのようなきっかけで種の分岐が起こったのか。
生命の進化を語る上で、生命活動の中心であるタンパク質にスポットがあたることは少なくない。我々は、生命進化のおこる前の化学進化の過程で獲得されたと考えら
れる、ＲＮＡ修飾酵素に着目している。好熱性細菌の多くは、地球が高温であった頃の残存種であるかもしれない。なかでも、90℃を超える高温下で生息する、超高度好熱菌 Aquifex aeolicus は、最も初期に分岐した真正細菌で、生命維持に必要な最小クラスの遺伝子セットしか持っていない。本種のＲＮＡ修飾酵素の構造解析・生化
学的解析を行なうことで、分子進化の基本原理の解明、あるいは、広義に渡り、生命そのものの意義について言及できるのではないかと考えている。
7-メチルグアノシン（m7G）は、tRNA、rRNA、さらに mRNA や snRNA の Cap 構
造などにみられる、最も普遍的な修飾ヌクレオシドである。このうち、真正細菌、真核生物、古細菌に共通に存在する tRNA の m7G46 は、分子種・部位特異性の高い酵
素、tRNA (m7G46) methyltransferase によって修飾される。また、m7G46 はtRNA 中で、三塩基対合（レビット塩基対）を形成し、L 字型立体構造の維持に重要である。従来、tRNA (m7G46) methyltransferase の基質認識メカニズムは不明であったが、2004 年、当研究室の岡本らにより、T アームとアンチコドンステムの重要性が報告された。
しかしながら、活性中心および原子レベルでの触媒反応メカニズムは、未解明のままである。生物機能を理解するためには、それに関わる物質を直接見ることが非常に重要である。よって、我々は、tRNA (m7G46) methyltransferase の X 線結晶構造解析に着手した。これまでの精製方法では、結晶化に至るほどのタンパク質量を得ることができず、純度も低いといった問題があった。そこで、様々な精製方法・条件を検討し、プロトコールの最適化を行った。

tRNA(m1G37) metyltransferase の二量体安定化機構
応用生物化学分野

豊岡 峻

＜緒言＞
超好熱性細菌 Aquifex aeolicus は、95℃という高温環境で生育する真正細菌である。近年のゲノムプロジェクトの進展により、A. aeolicus の全遺伝子配列が解読され、非寄生生物としては最小の遺伝子セットをもつため、生命に必須な遺伝子を絞り込む上で有力な情報源となることが期待されている。また、真正細菌の中で最も初期に分岐したと考えられ、進化の観点から非常に興味深い。
本菌は、tRNA (m1G37) metyltransferase 遺伝子（trmD）を保持しており、本研究室の武田らによって、TrmD の大量発現系および精製法が確立されている。2003 年、海外のグループにより X 線結晶構造解析がなされ、TrmD は二量体を形成していることが報告された。我々は、この報告から、当該酵素のアミノ酸配列の 20 番目のシステイン（Cys）
残基同士がジスルフィド結合を形成しうることに気づいた。この Cys 残基は、他の生物
種由来 TrmD には保存されておらず、A. aeolicus TrmD に特異的である。我々は、このジスルフィド結合が、高温環境下で TrmD が機能するために必要なのではないかと推定した。本研究は、Cys 残基を中心に、その周辺のアミノ酸残基を標的としてキメラ酵素を作成し、高温下での野生型酵素の二量体構造安定化機構の追究を目的とする。

＜実験方法および結果、考察＞
まず、野生型酵素がジスルフィド結合を形成しているかどうかを調べた。ジスルフィ
ド結合を切断する作用を持つジチオスレイトールを加えることで、野生型酵素が二量体から単量体に移り変わっていく様子を電気泳動で示すことができた。
次に、野生型酵素をベースに以下の 3 つのキメラ酵素の作成に着手した。
① C20S : アミノ酸配列の 20 番目の Cys を−OH 基を持つ Ser に変えた。
② E.coli 型 : アミノ酸配列の 16〜23 番目を E.coli の TrmD の配列に変えた。
③ T.toga 型 : アミノ酸配列の 16〜23 番目を T.toga の TrmD の配列に変えた。
野生型酵素の精製法を用いて、この 3 つのキメラ酵素を精製することができた。
現在、野生型酵素とキメラ酵素の耐熱性に差が生じる条件や、高温下における酵素の
構造変化の詳細について検討している。

Thermus thermophilus 由来ポリアミンが高温環境下で RNA に及ぼす影響
応用生物化学中本 知里

目的
高温環境下で生育している生物の RNA はメチル化などの修飾を受けることによって、耐熱化されている。そして高温下で、より効率良く RNA 修飾が行われるためには、転写直後の未修飾 RNAの構造が安定化される必要がある。その安定化因子の一つとしてポリアミンが挙げられる。高度好熱菌 Thermus thermophilus は、Caldopentamine や Caldohexamine の様に直鎖状のものや、アミノ基が４つ結合し分岐した状態の Tetrakis(3-aminopropyl)ammonium(Taa)など 16 種類の特異的なポリアミンを生産している。これまでに、Caldopentamine や Caldohexamine,Taa については調べてあるので、残りのポリアミンについて、これらが RNA 修飾に高温環境下でどの様な影響を与えているのかを調べたい。
実験方法
まず初めに、化学合成した２種類の好熱菌特有ポリアミン（Homospermidine,Thermine）と市販されている３種類のポリアミン(Putrescine,Spermidine,Spermine)について、tRNA の G18 を修飾する酵素である Thermus thermophilus tRNA(Gm18) methyltransferase（TrmH）のメチル基転移活性に対する影響を調べた。放射性標識された S-Adenosyl-L-Methionine(AdoMet)を用いて、tRNA へのメチル基転移活性を測定し、各ポリアミンの至適温度や至適濃度を調べた。
結果・考察
酵素活性を測定した結果、Putrescine などの短く直鎖状のポリアミンは比較的低温側で有効であり、Homospermidine,Thermine などの長鎖状のポリアミンは低温側でも有効であるが、高温側では他のポリアミンに比べより有効であることが判った。よって分子量が大きいもの（長鎖や分岐しているもの）ほど、より高温側で有効なのではないかと考えられる。この様に１種のポリアミンだけを用いても高温環境下で tRNA 修飾に大きく関与していると言えるであろう。おそらく生体内でポリアミンは混合物として作用すると考えられる。今後は Thermus thermophilus を模擬したポリアミン
混合液を用いて高温環境下でのメチル基転移活性に対する影響を調べていきたいと思う。そして
更に、今は試験管内転写した酵母由来の tRNAPhe を使用しているので、Thermus thermophilus 由来の tRNA を調製し、ポリアミンと修飾塩基の相互作用についても調べていきたいと思う。

コムギ胚芽無細胞系を用いた三日熱マラリア原虫キチナーゼの合成と精製（応用生物化学）久森大輔【緒言】マラリアは年間約 5 億人が感染し死亡者は 300 万人にも及ぶと推定されている重要な
寄生虫感染症である。マラリア原虫はハマダラカによってヒトからヒトへ媒介される。マラリ
ア原虫のヒトから蚊への感染は、ヒト血流中の原虫が蚊に吸血された後、蚊中腸内でキチンに富む膜を通過することで成立する。この過程には原虫のキチン分解酵素キチナーゼが関与し、この活性を阻害することで原虫の蚊への感染を阻止できることが知られている。したがって、
マラリア原虫のキチナーゼは原虫の生活環を媒介蚊内で断つ伝搬阻止ワクチンや伝搬阻止薬の有望な標的分子と考えられている。しかし、詳細な解析に必要な量のキチナーゼタンパク質を原虫から抽出することは困難である。特に温帯地域にまで広く分布している三日熱マラリア原
虫のキチナーゼは、遺伝子の存在は知られていたが、組換えタンパク質の発現には既存の系で成功していない。そこで我々は、コムギ胚芽無細胞系を用いて三日熱マラリア原虫キチナーゼの合成及び精製を試みた。
【実験方法】C 末端にヒスチジンタグを付加した三日熱マラ
リア原虫キチナーゼ遺伝子を
コムギ胚芽無細胞系発現ベク
ターに組み込み、コムギ胚芽無細胞系を用いて組換えタンパ
ク質の合成を行った。そして、
Ni‑
NTA カラムを用いてアフィ
ニティ精製を行った。また、キチナーゼ活性は蛍光基質を用いて測定した。
【結果】組換えタンパク質合成反応産物を SDS‑
PAGE により解析したところ、予想されたサイズの
分子量 60kDa 付近に可溶性の組換えタンパク質の発現を確認できた。次にアフィニティ精製を行ったところ、200 mM イミダゾール溶出画分に組換えタンパク質が溶出され、この画分に量依存的にキチナーゼ活性が認められた。一方、同様に合成した陰性コントロールの原虫表面タンパク質
Pvs25 にはキチナーゼ活性は認められなかった。さらに、アフィニティカラムからの溶出条件を検討することにより、80kDa 付近に混在するコムギ胚芽由来の内在タンパク質を除去することができた。

拡張型テトラチアフルバレン型ドナーの合成と性質（構造有機化学） ○藤岡 純，久保高志【序】 二分子の TTF が融合した TTP は、低温まで金属的な塩を与える事が明らかとなっている。このような TTP を

R1

S

R1

S

X

X=S, R =R = SMe
一次元に拡張した高次 TTP 分子系は分子性金属の伝導成分、 1a:
1b: X=S, R1=SMe, R2=CO Me
1

回、その前駆体となる化合物の合成法を改善し、それを用いて新規な拡張型 TTP ドナー（1~6）の合成を行なったので

H3C(H2C)5S

S

S

S

報告する。

H3C(H2C)5S

S

S

S

S

S

S
S

S

ヒド 7 (X=S, O, N-CH3)を 8, 9, 10 に対してそれぞれ THF 中、BuLi 存在下-70℃で反応させる

S

R1

R1

X
S

S

S

S

S

S

H3C(H2C)5S

TTP【結果と考察】拡張型ドナー1~6 は、ジアルデ

OHC
X

S

R2

OHC

S

R2

7

R2

S

4b’: X=S, R=CO2Me
5a’: X=O, R=SMe
5b’: X=O, R=CO2Me
6b’: X=N-CH3, R=CO2MeSS

1c: X=S, R1=R2=CO2Me
2a: X=O, R1=R2= SMe
2c: X=O, R1=R2=CO2Me
3b: X=N-CH3, R1=SMe, R2=CO2Me

更には分子ナノワイヤーとして有望であると期待される。今

S

R2

2

2

S

S

MeS

S

MeS

S

8

ことで得られた。
分子軌道計算(PM 3)により拡張型ドナー1の最適化構造を求めたと

H
P(OEt)2
O

S

R

S

R

S(CH2)5CH3

MeO2C

S H

MeO2C

S PBu3PF6-

9

H3C(H2C)5S

S

S

S

H3C(H2C)5S

S

S

S

10

H
P(OEt)2
O

ころ、ジチオール環が拡張TTFユニットに対して直交していることがわかった。HOMOは主に拡張
TTFユニットの部分に分布し、一方、 HOMO-1は主にジチオール環の部分に分布している。1aについての電気化学的性質をサイクリックボルタンメトリー法を用いて調べたところ、３つの一電子移動過程が観測された。1aの分子軌道計算でジチオール環が立っていたことを考慮すると、最初の２電子酸化は主にチオフェン拡張TTFユニットで起こり、続いてジチオール環で酸化されると考えられる。また、2~6の分子軌道計算と電気化学的性質についても調べたので併せて報告する。

QuickTimeý Ç²TIFFÅià•èkÇ»ÇµÅj êLí£ÉvÉçÉOÉâÉÄ
Ç™Ç±ÇÃÉsÉNÉ`ÉÉÇ¾å©ÇÈÇžÇ½Ç…ÇÕïKóvÇ-Ç•ÅB

Fig. 1 PM3-optimised conformations calculated for 1.

QuickTimeý Ç²TIFFÅià•èkÇ»ÇµÅj êLí£ÉvÉçÉOÉâÉÄ
Ç™Ç±ÇÃÉsÉNÉ`ÉÉÇ¾å©ÇÈÇžÇ½Ç…ÇÕïKóvÇ-Ç•ÅB

Fig. 2 Electronic density contours calculated for the
HOMO of 1.

新規なテトラチアフルバレンダイマーの合成と性質(構造有機化学) ○山田智彦・棚橋徹彦【序】 BDT-TTP のダイマーは、結晶構造を形成Sする際に平面構造のみならず様々な形をとるため、

S

S

S

S

S

S

S

BDT-TTP

分子内相互作用による新しい電子構造を持つ物質の発見が期待される。当研究室では、これまでにTTF と BDT-TTP をアルキルジチオ鎖で架橋した

S

S

S

S

S

S

S

R

S

S

SMe MeS

S

S

S

R

n

1(n=1), 2(n=2), 3(n=3)

非対称ダイマーの酸化還元挙動ならびに電子状態について検討を行ってきた。しかしながら TTP 骨

R

S

S

S

S

S

S

S

S

R

R

S

S

S

SMe MeS

S

S

S

R

格を含むダイマーは、溶解度が低く、ラジカルカ

4チ オン 塩の 作製 が困難 であ った 。そ こで今 回、 溶解 度の 向上 のため にa, R=Meb, RR=(CH2)4

BDT-TTP よりπ骨格を縮小した DT-TTF 骨格を含む対称ならびに、非対称ダイマー(1-4)の合成を行い、それらの性質について検討したので報告する。
【結果と考察】

1-3 は下の Scheme のように 5 と 6-8 をトルエン中で P(OMe)3 を用いてクロスカップリング反応させることにより 20-44%の収率で得られた。
一方、4 はチオレートの保護基の付いた DT-TTF(9)を THF、
水酸化セシウム一水和物により脱保護した後、ジヨードメタンと反応させることにより 89-91%の収率で得られた。

Scheme

R

S

S

S

S

S

S

S

S

SMe MeS

S

S

n

O + S
R

S

S

5

P(OMe)3
toluene1-36(n=1), 7(n=2), 8(n=3)

R

S

S

S

S

R

S

S

S

SMe

CO2Et

1)CsOH・H2O/MeOH/THF
2)CH2I249次に合成した 1 並びに 4 の電気化学的性質をベンゾ二トリル中、サイ

Table. Redox Potentials of 1 , 4 in benzonitrile (V vs. Fc/Fc+)

Donor

E1

E2

討した結果を Table に示した。いず

1a

れも４対の酸化還元波を示し、各段階のピーク電流値ならびに対応する

4a
10

-0.01
0.00
-0.01

0.06
0.07
0.36

モノマー(10, 11)の酸化還元電位と

11

0.03

0.30

0.98

MeS

S

S

H

MeS

S

S

MeS

S

S

H

MeS

S

S

クリックボルタンメトリーにより検

E3

E4

E5

0.44
0.45

E6

1.03
1.02

の比較から 1 の第三段階目は二電子移動過程、残りは一電子移動過程に対応するものと考えられる。一方、4 については最初の二段階が一電子

10移動過程で、残りは二電子移動過程に対応すると考えられる。

11

S

Me

S

Me

テトラチアフルバレン骨格を有する新規ドナー・アクセプター分子系の合成と性質（構造有機化学） ○松本智嗣
テトラチアフルバレン(TTF)誘導体は多くの導電性錯体を与えることが知られている。
我々はアクセプ
ターを加える代わりに TTF にアクセプター部位を導入した TTF 誘導体を単一成分有機導体の候補として考え、研究を行っている。導電性には TTF 部位間の軌道の重なりが重要である。当研究室ではすでに
1,3-ジチオール-2-イリデンが縮合した TTF (DT-TTF)誘導体を合成し、それらを用いた導電性錯体が多次元結晶構造を有していることを見出している。本発表ではアクセプター部位としてジシアノメチレン基を導入した DT-TTF 誘導体 1, 2 を合成し、性質を検討した。またこのような分子をユニットとしてアルキル鎖で結合したオリゴマーは、ユニットの配列により導電性を示す分子ナノワイヤーとしても興味深いことから、そのプロトタイプとして DT-TTF 二量体 3 の合成および性質の検討を行った。
R

S

S

R

S

S

n

S

CN R

S

S

S

CN

NC

S

S

S

S

CN R

S

S

S
2a,b

CN

NC

S

S

S

1a,b

a: R = SEt
b: R = SnC6H13S C6H13
S

S

S

S

S

CN

C6H13S S
3 (cis/trans)

S

S

CN

n

1-3 は下記の Scheme に従って合成した。1b, 2b, 3 の電子スペクトルにおいて最長波長吸収ピークはそれぞれ 560, 691, 556 nm (in CH2Cl2)に観測された。1b と 3 は吸収波長がほぼ同じことから TTF ユニット
間の相互作用は見られなかった。さらに 1b, 2b および 3 の酸化還元電位を CV 法を用いて測定したとこ
ろ、1b, 3 は DT-TTF の酸化に相当する三対の酸化還元波を、2b は TTF の酸化に相当するニ対の酸化還
元波とジシアノメチレン基の還元に相当する一対の酸化還元波を示した。酸化還元電位は以下の通りである。1b: 0.16, 0.47, 1.05 V (vs. Fc/Fc+, in CH2Cl2), 2b: -1.06, 0.26, 0.51 V, 3: 0.18, 0.52, 1.09 V。2b がジシア
ノメチレン基の還元に相当する酸化還元波を示したのは、キノイド構造を持っていることにより第一還元状態が安定化しているためと考えられる。また 3 は 1b と比べての第一酸化還元波がブロード化しており、酸化状態において 2 つの DT-TTF ユニット間にある程度相互作用があることが示唆される。1a についてＸ線結晶構造解析を行ったところ、TTF 部位をアクセプター部が囲んだ構造を持っており、伝導パスが形成されていないことが分かった。
Scheme
R

S

S

S

R

S

S

S

CN
O

CN (3.5 eq.), AcOH, AcONH44a,btoluene, reflux

1a,ba: R = SEt
b: R = SnC6H13

a: 51%
b: 88%

CN
R

S

S

S

R

S

S S
5a,b

O

CN (5 eq.) , AcOH, Et3N

R

S

S

S

CN

toluene, reflux

R

S

S

S

CN
a: 53%
b: 70%

6a,b
n

O

S

S

S

S C6H13

S

S

S

S

CN

7 (cis/trans mixture)1) CsOH・H2O, MeOH,
O
DMF, r.t.

S

S

S

S

S

S

2) CH2I2 (12eq.),
DMF, r.t.

DDQ (3 eq.)

CN (10 eq.), AcOH, AcONH4
toluene, reflux

3 (cis/trans mixture, 36%)

a: 42%
b: 84%

SnC6H13
S

S

S

S

S

C6H13SSSSn

8 (cis/trans mixture, 62%)
CN

2a,b

1,1,2-trichloroethane,
refluxO

コドン−アンチコドン相互作用における塩基の結合様式
無細胞生命科学部門 山内 裕之【緒言】生体内で様々な働きをするタンパク質は、DNA から転写された mRNA をリボソーム内で翻訳することで合成される。mRNA がリボソーム内で翻訳される時、mRNA のコドンとよばれる三塩基が、対応する tRNA の三塩基(アンチコドン)に読み取られ、アミノ酸がつながっていく。コドン−アンチコドン間の認識では通常、Watson-Crick 型の塩基対ができるが、コドン三字目とアンチコドン一字目との塩基対としては Watson-Crick 型塩基対以外にゆらぎ型塩基対も可能である。本研究では、この部位でのアンチコドン一字目のウリジン誘導体とコドン三字目のグアノシンが塩基対合する場合、ウリジン誘導体の種類によって、水素結合様式の異なる 2 種の塩基対が可能と考えた。この仮説を検証するため、
グアノシンの２位のアミノ基および６位のＯ原子が、塩基対に必要か調べる。
【実験及び結果】図１のグアノシン誘導体を mRNA の一箇所にのみ含み、その他の部分には含まない mRNA を調製し、翻訳することでコドン−アンチコドンの認識を調べることを計画した。翻訳に必要な開始コドンを含む前半の RNA と特定部位のみにグアノシン誘導体を含みその他の部位にはグアノシンが含まれない後半の RNA との二つをそれぞれ転写により合成した。得られた２つの RNA を連結して mRNA を作り、大腸菌の無細胞タンパク質合成系で翻訳を試みた。
まず始めにイノシンを用いて実験を行った結果、イノシンを mRNA に特異的に導入することはできたが、翻訳はされなかった。原因を検討した結果、mRNA の配列及び連結に用いた酵素に問題があることがわかった。mRNA の配列については、翻訳されることが確認されている他の配列を組み込むことで解決した。現在は連結の方法と条件を検討している。
また、キサントシンや 6-チオグアノシンといった他のグアノシン誘導体についても同様の実験を進めている。

O

O

N
N

HN
N
HN
H

riboseイノシン（Ｉ）

S
N

N

N

ribose

N

HN

N

HN

グアノシン（Ｇ）

O

N

N
N

HN
riboseO
キサントシン（Ｘ）

N

riboseHN
H 6-チオグアノシン（ｓ６Ｇ）

図１：グアノシンとグアノシン誘導体

tRNA 分子中の修飾ウリジンのプロトン解離（無細胞生命科学分野）

武智 正洋〔緒言〕tRNA は mRNA 中の遺伝情報を解読する機能を持つ．その際，tRNA のアンチコ
ドン 1 字目は，mRNA のコドン 3 字目と塩基対合する．これは，一般にアンチコドンが（注）
U*（34）の時，A（Ⅲ）の他に G（Ⅲ）とも塩基対合すると考えられるが，これは tRNAの U*（34）が修飾されていることに依存する．5-メチルウリジン誘導体（xm5U*）のうち，5-アミノメチルウリジン誘導体（xnm5U*）は原核生物の tRNA に見られ，G（Ⅲ）と塩基対合するが，5-カルボニルメチルウリジン誘導体（xcm5U*）は真核生物に見られ，G（Ⅲ）と塩基対合しない．xm5U*は多くの場合，その 2 位の酸素原子が硫黄に置換されている（xnm5s2U*）が，コドン選択性は 2-チオ化の有無にはあまり関係ない．ここで，このコドン選択性の違いは， xnm5U*が生理的条件下で部分的に図 1 のようにプロトン解離しており，xcm5U*ではプロトン解離が起きない と考えると説明出来る．しかし，そのことを示す直接的な証拠はない．そこで，tRNA 中の xnm5s2U*，xcm5s2 U*の pK a を測ることが重要だと考えた．
xnm5s2U をもつ大腸菌 tRNA はヨウO

素と反応することが知られている．この

5

X

N

NH 2 +HO

O

2

N

反応の速度は，硫黄原子上の電荷に依存S−することが期待できる．色々な pH でヨウ素と混ぜ，各 pH における反応進行度を測定することによって，pK a を求めることが可能であると考えられる．その反OH OH

応進行度の分析法として，現段階では次

図１．プロトン解離した原核生物型修飾ウリジン（xnm5s2U）の 2 つの方法を計画している．第一に，反応産物はアミノ酸受容活性を失うと期待されるので，アミノアシル

tRNA 合成酵素によりどれだけアミノアシル化されるかを測定する方法が考えられる．第二に，反応産物は電気泳動における移動度が未反応物と異なると考えられるので，ノーザ
ンブロット法により定量する方法が考えられる．現在までに，大腸菌から約 60mg の tRNA
混合物を調製出来たので，これを用いてヨウ素との反応を試みている．また，コムギ，酵母，ヒトの tRNA で同様に pK a を測定することも検討している．

注）*で，誘導体も含むことを示す．また，ヌクレオシド記号の直後の括弧の中に，ヌクレ
オシドの位置（アンチコドン 1 字目では 34 ，コドン 3 字目では Ⅲ ）を示す．

活性汚泥の中空糸精密濾過特性に及ぼす懸濁固形物及び溶存固形物の影響(化学工学) ○谷本寿子・川崎健二・松田晃
1．緒言
膜分離を用いた排水処理システムは水中に含まれる微粒子・細菌等の非溶解性物質及び高分子
量の溶解性物質を高度に分離でき、消費エネルギ
ーが小さい等の利点があるので、今後の利用と拡大が期待されている。その一つとして浸漬型膜分
離活性汚泥法がある。この方法は、高い汚泥濃度での処理が可能で、装置をコンパクトにできる。
また、汚泥の沈降性に左右されずに非常に良好な処理水が得られる等の利点がある。しかしながら濾過の経過に伴い、膜の細孔が目詰まりを起こしたり、膜の表面上に汚泥が付着して、膜の透過性能が低下するという問題点がある。
本研究では膜分離の基礎的な知見を得ることを目的とし、実際に水処理に用いられる中空糸精密濾過膜を用いて活性汚泥及び遠心分離液、ガラ
ス繊維濾液での定圧濾過実験を行い、結果から懸濁固形物及び溶存固形物が中空糸精密濾過特性に及ぼす影響について検討した。
2．実験
2・1 実験試料 活性汚泥(松山市下水道中央浄化センターの返送汚泥を冷蔵庫内に一晩静置し上澄みを除いて調整したもの)、遠心分離液(活性汚泥を遠心加速度 1600g で遠心分離して得た上澄み液)、及びガラス繊維濾液(遠心分離液をガラス
繊維濾紙(公称孔径 0.6 ㎛)を用いて濾過した濾液)の三つの試料を用いた。
Table1 に三つの試料の懸濁固形物濃度及び溶
存固形物濃度を示す。懸濁固形物(SS)はガラス繊
維濾紙上に残る固形物と定義し、溶存固形物(DS)はガラス繊維濾紙を通る固形物と定義している。

2・2 実験方法 ポリエチレン製、公称孔径 0.1㎛、長さ 20cm の中空糸精密濾過膜 5 本をＵ字型に束ねて作製した膜モジュールを使用した。この膜モジュールを Fig.1 に示すように装置に取り付
け、30℃一定のもと濾過圧力 34.7ｋPa で吸引濾過し、100 分間定圧濾過実験を行い、濾液量の経時変化(透過流束 Jv)を測定した。
3．結果と考察Fig.2 にそれぞれの試料の累積透過量の経時変化を示す。SS 濃度が増えるにつれて透過量が少なくなっていることから SS が中空糸精密濾過に及ぼす影響が大きいことが分かった。結果から定圧濾過実験で膜面上に形成したケークによる濾過抵抗 Rc を求めた。
膜を透過する時、透過流束 Jv[m/s]は濾過圧力⊿P [Pa]に比例することから、濾過抵抗 R[1/m]との間に RP / J v の関係が成り立つ。ここ
でμは試料の粘度[Pa･s]である。活性汚泥にはSS と DS が含まれるが、さらに SS は遠心分離で取り除くことができる固形物 (SSa)、遠心分離後残存する固形物(SSb)の二種類に分けられる。膜面上に堆積したケークを構成する固形物を上記の固形物で示すと、活性汚泥は SSa+SSb+DS、遠心分離液は SSb+DS、ガラス繊維濾液は DS となる。以上から求めた活性汚泥中の各種の固形物が濾過抵抗に占める割合を Fig.3 に示す。活性汚泥
中の各固形物が濾過抵抗に及ぼす割合は DS：(SSa+SSb)は約 1：2 となった。すなわち濾過抵抗に DS も大きく影響することが分かる

Table1 試料の性状
懸濁固形物濃度

溶存固形物濃度[mg/L][mg/L]

活性汚泥

8950

遠心分離液

43

ガラス繊維濾液

0390
Fig.1 実験装置図

活性汚泥

80
累積透過量[ml]遠心分離液
ガラ ス繊維濾液

60
40
20
0
0

20

40
60
時間[min]80

100

Fig.2 累積透過量の経時変化

Fig.3 各種固形物の濾過抵抗に占める割合

吸収冷凍機の再生器、吸収器の性能向上に関する研究（化学工学） ○兵頭善章・川崎健二・松田 晃
1.緒言 現在一般に普及している圧縮冷凍機は、フロンガスを圧縮機で圧縮して液化し、この液体フロン
を低圧で蒸発させるときの蒸発潜熱を冷熱として利用する方法である。このときの駆動源は電気であることから、夏の昼間の電力消費量の増大や使用したフロンによるオゾン層の破壊などの問題がある。一方、吸収冷凍機は水やアンモニアなどの自然冷媒を使用するので環境への影響が少ない。加えて動力源として
都市ガス・石油・蒸気の熱を利用するので圧縮冷凍機と比べ電力の消費を大きく抑えることができる。
吸収冷凍機は主に蒸発器、吸収器、再生器、凝縮器の４つから構成されていて、二重効用の場合、再生器は高温再生器と低温再生器の 2 つからなる。水平管式装置は吸収器として広く用いられており、低温再生器としても使用されることがある。また垂直平板式装置は熱･物質移動特性が優れており、単位体積あたりの表面積を大きくできる利点も有している。私共の研究室ではこの２つの装置を用いて水/ LiBr 系の吸収・再生実験を行ってきた。本研究では再生器の加熱水温度、吸収器の冷却水温度の再生・吸収性能に及ぼす影響について調べ、また実機の吸収器の性能向上のために LiBr 水溶液に加えられている界面活性剤濃度の影響についても検討する。
2.実験 実験装置を Fig.1 に示す。サンドブラストして表面の濡れ性を高めた銅板からなる垂直平板式装置を再生器に、平滑な 10 本の銅管からなる水平管式装置を吸収器に用いている。減圧した装置内で LiBr
水溶液を循環させ、再生器で濃縮した LiBr 水溶液を吸収器に送り、再生器で発生した水蒸気を吸収させる循環式で実験する。定常状態に達した後に再生器、吸収器の入口・出口での LiBr 水溶液の濃度、温度、
流量と、加熱･冷却水の入口・出口での温度、流量及び系内圧力を測定する。実験は再生器／吸収器に流す加熱水/冷却水の温度を 47/21℃、53/27℃、59/33℃に設定し、界面活性剤（1‐Octanol）濃度を 0、500、1000、5000ppm で行う。
3.結果および考察 Fig.2 に垂直平板式装置（再生器）および水平管式装置（吸収器）における LiBr 水溶液の流下液膜熱伝達係数 hL［W/㎡・K］とレイノルズ数 Re[−]の関係を示す。垂直平板（再生）の場
合、表面張力により液膜は均一になるので壁面が一様に濡れ、そのため hL は流量に関係なくほぼ一定の値をとる。界面活性剤濃度が高いほど hL は大きくなっている。観察によって添加濃度が高いほど液がさ
ざ波のように細かく波打つことから、液膜がよく攪拌されていると推測される。水平管（吸収）の場合、低流量では分散器での液の分配が十分でなく、流量が大きくなると水平管全体に均一に分散されるようになり吸収面積が増えるため hL は増加すると思われる。界面活性剤の添加濃度が高いほど液表面での表面張力差が小さくなり、液膜が切れにくくなって水平管が濡れやすくなる。また吸収では液膜表面での表面張力の違いにより、液膜内で混合が生じ、熱・物質が移動しやすくなると考えられる。
このことから水平管と垂直平板を比べると界面活性剤の影響は水平管のほうが大きいことがわかる。な
お両装置とも循環水温度の影響はあまりなかった。
オイルマノ メ ータ ー

界面活性剤濃度 [ppm]

0

50 0

10 00

5 00 0垂直平板 （ 再生器 59 ℃）

○

△

?

◇

水平管 （吸収器 3 3℃）

●

▲

■

◆

水蒸気

Fig.1
密度 流
･ 量計

分散器

循環 水 恒温 槽

循 環水 恒温 槽

集液器
溶液ポンプ
真 空ポ ンプ

集液器
温度測定部
溶液ポンプ
水平管式装置

熱伝達係数 ｈL [W/㎡・K]

分散器

2000

Fig.2
1500

1000

500

0
垂直平板式装置

銅管[ 外径19. 05mm 長さ 300mm 厚み1mm] 銅板[幅300mm 高さ 459mm 厚さ 5mm]

0

10
20
30
レイノルズ数 Re [−]40

超音波照射を利用した凍結濃縮分離に及ぼす凍結速度及び凍結管内径の影響（化学工学）○伏田祥吾・川崎健二・松田 晃
１．緒言
溶質や懸濁固形物を含んだ水を端から凍結すると凍結部に純粋な氷が成長し、溶質などは未凍結部に押し出され、濃縮、分離することができる。この原理を利用したのが本研究で行っている凍結濃縮分離法であり（Fig.１参照）、以下のようなメリットがある。
・溶質成分が変質しにくいである。
未照射では凍結管内径によらずほぼ１を示しほとんど濃縮分離されないが、超音波を照射すると凍結
管内径が小さい方が分配係数が全体的に低い値をとることが分かる。これは凍結管内径を小さくすること
で超音波照射により凍結管の内径方向全体を均一に攪拌することができるからである。

→低温で操作され、しかも気液界面を少なくできるため、微生物汚染、溶質の劣化、揮発芳香成分の散逸を極めて低いレベルに抑えられる。
・加熱濃縮分離法に比べてエネルギー的に有利

Fig.1 凍結濃縮分離の様子

Fig.2 実験装置図87mm/h 照射（内径55mm）

14

87mm/h 未照射（内径55mm）
82mm/h 照射（内径30mm）

12

82mm/h 未照射（内径30mm）

凍結距離[cm]→蒸発熱：2257kJ･kg-1 凝固熱：334kJ･kg-1
溶液を凍結する際、凍結速度が速いとそのままでは十分濃縮分離できない。凍結界面付近を激しく乱してやると凍結界面は滑らかなまま成長し、溶質が液全体に拡散され、凍結界面付近の濃度を比較的低く保つことが出来る。したがって、凍結界面に溶質を取り込み難くさせることができ、溶質を濃縮分離出来る
ことが知られている。
凍結界面を乱す方法として超音波照射法を用いると、超音波を照射するときに振動子を液に浸すだけで簡単に凍結界面付近の液を激しく攪拌でき、凍結濃縮分離法の適用範囲を大きく広げることが出来ると考えられる。本研究では照射距離一定型装置を用い凍結速度・凍結管内径を変化させた場合の濃縮分離
特性の変化について調べ、その結果を報告する。
２．実験方法
実験装置図を Fig.２に示す。試料は約 0℃のフェニ
ルアラニン溶液（0.03mol/L）を使用した。内径の違う
二種類のステンレス製凍結管(内径 30,55mm)に試料をそれぞれ 150,500mL 入れ、超音波(20kHz)を照射
し な が ら 冷 媒 中 (-16.5 ℃ ) に 降 下 し 、 凍 結 速 度
80mm/h で凍結した。所定時間後に冷媒から取り出した試料は凍結部と未凍結部に分離し、それぞれの濃度と体積を測定した。凍結部は 6〜8 分割して測定し、高さ方向の濃度分布を調べた。
３．結果・考察
凍結管内径差による濃縮分離効率の違いを調べた結果を Fig.３に示す。分配係数は凍結部の濃度とそれに対応する未凍結部の濃度の比であり、小さいほど良く濃縮分離されていることを示す。また、凍結
距離は凍結部の底面を 0 として上方向にとった距離10

凍結速度 80mm/h

8
6
4
2
0
0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

分配係数[-]

Fig.3 分配係数に及ぼす凍結管内径の影響

1.2

膜分離を用いた活性汚泥法の効率的な処理方法の検討〈化学工学〉○丸岡志登司・川崎健二・松田 晃と比べ MLSS 濃度が高く、60 日目に 15000mg/L を超えると、膜に汚泥が付着しやすくなり吸引圧の上昇が速くなった。80 日目に MLSS が 18000mg/L になると吸引
圧は 30kPa を超えてしまい安定操作ができなくなった。
以上より、BOD 容積負荷 0.5kg/m3･d の条件では、開始 MLSS 濃度 3000mg/L で長期の処理が可能であることがわかった。また、MLSS 濃度は低すぎても高すぎても安定な長期運転ができないことがわかった。
pH 計

P

DO 計

原水槽

原水ポンプ

ORP 計

PFC
ｺﾝﾄﾛｰﾗ

水位ｾﾝｻｰ

恒温水（30℃）

ｲﾝﾊﾞ
ｰﾀ

中空糸膜

ド ラフトチ ューブFS
流量ｾﾝｻｰ

ﾌﾛｰﾒｰﾀｰ

処理水
圧力ｾﾝｻｰ
PG
ﾃﾞｨﾌｭｰｻﾞｰ

B

Air

ブロワー

膜分離槽
膜分離反応槽

P

処理水槽

吸引ポンプ
ドレン

放流

恒温水（30℃）

Fig.1 浸漬型膜分離活性汚泥法の装置図

Key
開始 MLSS 濃度[mg/L]
BOD 容積負荷[kg‑BOD/ｍ3･d]

RUN1
○
1350
0.5

RUN2
●
3000
0.5

RUN3
△
9300
0.5

20000
18000
16000
14000
12000
10000
8000
6000
4000
2000
0
0

50

100
経過日数 [d]150200Fig,2 MLSSの経日変化
6050
吸引圧[kPa]

MLSS[mg/L]

1．緒言
現在、我が国では一般的な排水処理方式として活性汚泥法が用いられている。活性汚泥法は、懸濁固形物の物理化学的な除去をし、微生物（活性汚泥）による排水中有機物の分解を行い、その後、活性汚泥と処理水の分離を沈殿槽で重力沈降により行い、上澄み液を処理水として放流する処理法である。
これに対し、浸漬型膜分離活性汚泥法は、活性汚泥と処理水の分離を膜によって行うものである。分離膜
を生物反応槽である曝気槽に直接浸漬して処理水を吸引濾過するため沈殿槽が不要となり、生物反応槽の微生物濃度を高く保てることから、装置のコンパクト化が可能となる。また、処理水質が汚泥の沈降性に左右されず固形物が完全に除去されることから、安定して清澄な処理水を得ることができる。
本法においては、槽内の微生物濃度(MLSS)が余り高くなると膜に汚泥が付着することにより吸引圧が上昇し、安定な操作が難しくなるので汚泥の引抜きが必要となる。ここで、引抜き後の MLSS 濃度が低いほど、引抜きの間隔を長くでき、汚泥引抜きの手間とコストの削減ができる｡よって本研究では、汚泥引抜き後の生物
反応槽内汚泥濃度の違いによる処理特性について検討
をした。
2．実験
浸漬型膜分離活性汚泥法の装置図を Fig.1 に示す。
処理実験では有効容量 20L の PVC 樹脂製円筒槽に中空糸膜を浸漬した。膜モジュールは、長さ約 70cm の中空
糸を半分に曲げて U 字型にし、両端を同一集水部へと繋いだ構造となっている。グルコースとペプトンを基質とした合成排水を定量供給し、処理水は膜透過流束20L/m2･h 、6 分吸引 4 分停止の間欠運転で吸引濾過して得た。槽内の活性汚泥は槽底部にあるディフュ−ザーからの曝気によりドラフトチューブ内を上昇し槽内を循環する。なお、この曝気は、活性汚泥微生物への酸素供給だけでなく、中空糸膜への汚泥付着防止のた
めの物理洗浄を兼ねている。本実験では、BOD 容積負荷0.5kg‑
BOD/m3･dの条件で開始MLSS濃度を1350mg/L，3000mg/L,9300mg/L として実験を行った。
3．結果と考察MLSS と吸引圧の経日変化をそれぞれ Fig.2 と Fig.3に示す。RUN1(○)では、処理開始直後、MLSS 濃度が低すぎたため、単位微生物量あたりに供給された基質量(F/M 比)が 0.37kg‑
BOD/kg‑
MLSS･d と高くなった。この
ため有機物を十分に分解できず、残存有機物が膜の目詰まりの原因となり、安定な吸引が困難となった。
MLSS 3000mg/L で処理を開始した RUN2(●)では吸引
圧は 20kPa を超えることなく長期の安定処理が可能であった。
MLSS 9300mg/Lで処理を開始したRUN3(△)では、
RUN2

40
30
20
10
0
0

50

100
経過日数 [d]150

Fig.3 吸引圧の経日変化

200インシュリン作用に関与するイノシトールグリカンの全合成(反応有機化学）岩永隆之

糖質は近年その生理学的意義および疾病との関わリから注目されている。こうした背景から有機化学の分野でも糖質合成に関する研究が活発に展開されている。その中でイノシトールグリカン類がインシュリ
ン作用に関わっていることが示唆されている。その本体の構造を明らかにし、インシュリン作用の詳細の解明や糖尿病の治療薬の開発することが重要な研究課題となる。そこで、本研究ではイノシトールグリカ
ンの候補のひとつと考えられる 1 及び周辺誘導体の合成を目的とした。

O
HO
HO

OH
O

O
OH

NH3+
O

-

OPO3H
OH

OH
1

インシュリン作用に関与しているポリオキサカルボン酸による塩基性アミノ酸の選択的抽出と合成反応(反応有機化学）丹康賢

アミノ酸は通常有機溶媒に不溶であるがポリオキサカルボン酸（TEG 酸）を混ぜると塩基性アミノ酸のみがクロロホルムに可溶化し、しかも Lys の場合には 1:1 以上に過剰の Lys が抽出され集合体を形成することを当研究室で既に見出している。この集合体を有機合成に活用する目的で今回はアシル化反応を試みた。
その結果について報告する。
O
NH2

CH3O

O

O

O

OH

H2N

CO2H

CHCl3

塩基性アミノ酸・Lys
（固体）

過剰量
Lys

Lys - TEG酸
1 : 1 集合体

TEG酸

可溶化

Lys - TEG酸
n : 1 集合体

乳化
図1. TEG酸によるLysの抽出

クロロホルムに可溶化された Lys-TEG 酸 (>1:1) の組成比の集合体にベンゾイルイミダゾール (Bz-Im) を作用させると高収率で選択的に末端 N-ベンゾイル化体 (ωBz Lys) のみが得られることがわかった (表１）。
この反応は TEG 酸が存在しないと進行しないが用いる TEG 酸の量を 1 モル％まで下げても触媒的にアシル化が進行した。通常のアシル化法では Lys の選択的アシル化は困難でω N アシル体を得るためには銅錯体を用いる煩雑な合成操作を必要としている。このような事実に対して本反応は選択的に進行するので合成法として利用できることが期待できる。そこで Z-Im を用いて同様に反応を行ったところ収率よく選択的に目的物を得た。今後様々なアシル化剤で Lys 以外の各種塩基性アミノ基酸への選択的アシル化反応を検討し、実用化を目指していく予定である。
TEG酸

Lys - TEG酸 (>1 : 1)集合体(n - 1)当量O

in CHCl3 乳化状態
NH2
H2N

(CH2)4
Lys

R

N

N

CO2H
(n - 1)当量

n 当量
Lys - TEG酸 1 : 1集合体

Bz -Im, (R = Ph)
Z - Im, (R = PhCH2O)

NH2

RCONH
(CH2)4CO2H

図2. Lys - TEG酸集合体の触媒サイクル
収率(%)
アシル化剤

TEG酸モル%ω体

α体

Bz - Im

10

100

-

5

76

-

1

79

-

0 ( in CHCl3)--0 ( in H2O)

63

3

10

71

-

Z - Im

表1. Lysのアシル化反応

アルキンのホスフィン化を経由する新規有機リン化合物の合成と構造解析(反応有機化学)○西村康伸・河村有香・林 実・渡邉裕
当研究室では、リン̶ケイ素結合（P-Si）を有するシリルホスフィンを用いる合成反応について研究を行っており、これまでにシリルホスフィンとアルキン類の反応により、シリルホスフィン化生成物が収率よく得られることを見出している。この反応の際に、アルキンとしてアセチレンジカルボン酸ジメチル２を用いると、低温では付加体が得られる
が、室温では複数の着色生成物が生成する。その反応生成物はホスフィンに対してアルキン２が多重付加した環状イリド構造を有する化合物が含まれていることが既に分かっている。
今回、ホスフィン源としてリン̶リン結合を有するテトラフェニルジホスフィン５を用いてアルキン２との反応を行なったところ、シリルホスフィン１と２の反応とは異なる
着色化合物が複数得られた。反応混合物から黄６、青７といった色を有する化合物を分離した。これらはシリルホスフィン１とアルキン２の反応同様リンを含む共役系化合物であると考えられる。それらの構造は、物性と共に興味が持たれるため構造解析を行なった。
1

H、13C、31P-NMRおよび質量スペクトルより黄６は１：１付加体であることが分かった。また、６はジホスフィンがシン付加した化合物であることもわかった。
青７の構造を決めようとしたが、青７はあまり安定な化合物ではなく、きれいなスペ
クトルデータがとれず構造決定が困難であるので、青７を別ルートで合成することで構造を検討しようと考えた。１：1付加体を経由していると考えて、まず黄６とアルキン２との反応を試みた。すると、６にアルキンがもう１分子反応した化合物８が得られた。８は、５と２の反応では得られない化合物である。
現在、青７の構造の検討、４、８の誘導化による構造の検討、ジホスフィンのアルキ
ンへのシン付加の検討を行なっている。

生理活性イノシトールリン脂質 PI(3)P,PI(3,4)P2 等の実用的な効率合成法の開発（反応有機化学）三宅 慶行
イノシトールリン脂質類（ PtdIns) は、細胞内の情報伝達系の担い手として様々な場面で重要な役割を演じていることが明らかにされてきた。その機能の詳細を明らかにしたり、医薬への展開が近年の重要な研究課題となっている。しかし、これらは細胞内に極微量しか存在しておらず、化学合成による供給が望まれている。

イノシトールリン脂質

PI(3,5)P2
小胞輸送

O
O P OOOH-HO PO
3-HO PO
3

OH
OH

OH

-HO PO3HOOO P OO
OH

OH

PI(3,4)P2
Akt 活性化
O2CR
O2CR

OH O OP O
O
O2CR
HO
OH
HO
O2CR
PI

細胞骨格の調節小胞輸送
核への情報伝達PI(3,4,5)P3

PI(3)P
小胞輸送

HO

O2CR
O2CR

PI(4)P

O2CR
O2CR
DAG
プロテインキナーゼ 活性化

PI(4,5)P2

HO

細胞骨格の調節

Phosphatidylinositol

HO-HO PO3

PI(5)POH

OPO3H-OH
OPO3H- IP3

カルシウム動員

実用的な供給を考えた場合、より簡便な合成法が望まれ、保護基の利用を最小限にし、選択的反応を駆使することが重要と考えた。この考えに基づき、ひとつの保護基のみをもつイノシトール誘導体を選び、PI(3)P および PI(3,4)P2 の効率的かつ実用的な合成法の確立を目指すことにした。
下式従って、スズ誘導体を形成させた後にリン酸スクシンイミドエステルを作用させたところ、選択的に 1 位モノリン酸エステルを得ることに成功した。これまでリン酸化剤としてピロリン酸エステルを用いていたが、この場合には半分のリン酸残基が無駄になっていた。
yield, %P
nBu Sn=O
2

O
HO

O

2.2 eq.
toluenereflux, 1 h

DL
HO

OH

nBu

O
RO
PO
RO

O

nBu

O

Sn

O

OH
1

O

P

DL

CH2Cl2,r.t, overnight

O n
O Sn Bu
nBu
2

O
O
DL

HO

R= nBu

Bn

O
O
RO
P
O
P OR
RO
OR

90

86

O
O
RO
P ON
RO
O

81

OH
OH

nBu=C H 4 9

Bn=PhCH280

次に脱保護を行うことにより、PI を得ることに成功した。現在、PI を選択的リン酸化することで PI(3)Pと PI(3,4)P2 を簡便に合成しようと検討中である。
選択的リン酸化nBu Sn=O
2

(1)

O
O

OH
DL

HO

OH
OH

O
O

Si

O

O
(2) RO P ON
OBn
1.2 eq. O
CH2Cl2,r.t, overnight

DL

(1)

HO

O
O P OR
OBn
OH

OH
62 %

Ethylene glycol TsOH
1.1 eq.
0.2 eq.
CH2Cl2,r.t, 3 h

脱保護

84 %

-HO PO
3

OH
HO
DL
HO

選択的リン酸化1.2 eq.
toluene reflux, 1 h
DL
O
O
OH
(2) RO P ON
OH
OBn
1.2 eq. O
CH2Cl2,r.t, overnight
OH

O
O

O

nBu Sn=O2OHSi

2.2 eq.
toluene reflux, 1 h

OH
Si

O
O

Si

DL
O

O
O P OR
OBn
OH

OH
66 %

脱保護

OH

85 %

OH

O

PI

OH
TBAF
2.5 eq. 2.8 eq.
THF,r.t, 3 hO
O P OR
OBn

HO

OH

O OR
P
O-

O

OH
OH
PI(3)P -HO3PO

OH-HO PO
3

O OR
P
O OOH

OH
PI(3,4)P2

myo-イノシトールを用いたカルバ糖の合成（反応有機化学）姚永輝

グルコースの環内酸素原子を炭素原子で置き換えて得られる炭素環（シクロヘキサン環）のグルコース類
似体はカルバ糖質（carba-sugars）と呼ばれている。カルバ糖質には、糖質に似て非なる性質に基づく特異な生理活性を持つものが多く、糖鎖化学、工学、生物学の研究分野で重要な研究対象の一つとなっている。近年の糖鎖の生理的重要性からも、カルバ糖への興味が今後益々広がるものと考えられる。そこで、天然から豊富に得られる myo-イノシトール２を基盤としたカルバ糖の簡便な合成経路の開拓を目指すこ
ととした。
OH

OH

C

O

HO

HO

OH

OH

HO

HO

OH

OH
sugar

carba-sugar

まず２から 1,2:4,5-ジケタール 3 を合成し、続いて 3,6 位をトリフリル化することによって 4 を得た。4に各種炭素系求核剤を作用させ炭素-炭素結合の形成の難易度を検討した（表）。

O

O

OH
HO

OH

HO

OH

HO

O

O

TfO

O

OH

O

OTf
O

O

OH
2

3 (27%)

4 (95%)NuO
HOH2 C

HO

OH

Nu

OTf

O

OH

O

OTf
O

1
5

run
1
2
3
4
5

condition

solutionyield(%)-20 ˚C, 3hthen r.t.,overnight

THF:HMPA=6:1

77

CH2 NO2-20 ˚C, 3hthen r.t.,overnight

THF:HMPA=6:1 no reaction

C4 H9-20 ˚C, 3hthen r.t.,overnight

THF:HMPA=6:1 no reaction

CH2 CN-20 ˚C, 3hthen r.t.,overnight

THF:HMPA=6:1

29-20 ˚C, 3hthen r.t.,overnight

THF:HMPA=6:1

検討中

CH2 SOCH3NuC

CC4 H9

今後、より良い炭素系求核剤を検討するとともに、カルバ糖の合成を行っていく予定である。

ポリオールのスズ誘導体を経由した選択的リン酸化法の開発（反応有機化学） 坂東里香

核酸やリン脂質に代表されるように、リン酸エステルは生体内において重要な生理的役割を演じている。
また、各種リン酸塩類の原料、触媒、医薬品として広く利用されている。これらリン酸エステルの合成が望み通りにできることは有用である。そこで、本研究ではスズ誘導体を経由した選択的リン酸化法の開発を目指した。
選択的リン酸化反応
O
R1

R1
OH

n(H2C)P

OROR

r.t., 5 h

nBu

O

P

O

OR

Sn

OH
R2

RO

nBu

O

nBu SnO
2n(H2C)

δO

CH2Cl2

R2

1

R1

R1

O
OP(OR)2n(H2C)O
OP(OR)2

O
OP(OR)2n(H2C)

+
OH

R2

R2

2

3

上記のスキームはジオールの選択的リン酸化法を示したものである。ジオールと Bu2SnO をトルエン(またはベンゼン) 中で２時間加熱還流し、環状スズ誘導体１を形成させた後に、溶媒を塩化メチレンに換え、ピロリン酸エステル (R=Bn,nBu) と室温で反応させた。その結果、1,3-プロパンジオール、1,4-ブ
タンジオールからモノリン酸エステルが高収率かつ選択的に得られた (table 1, table 2)。しかし、
1,5-ペンタンジオールの場合には全く反応が進行しなかった。この原因は、下図のような８員環状中間体４が大きなひずみにより形成されにくいためと考えられる。そこで、1,3-プロパンジオールと 1,5-ペン
タンジオールの混合物で同様の反応を行ったところ、1,3-プロパンジオールからモノリン酸エステル５のみが得られた。
ntable 1 Bn pyro を 用 い た リ ン 酸 化

table 2 n Bu pyro を 用 い た リ ン 酸 化
yield, %yield, %run

substrate

3

ジリン酸

run

99

-(a)

1

OH

1
2

モノリン酸

OH
HO
HO

4 HO

OH

93

6

2

OH

92

7

3

OH

no reaction(b)(a ) ジリン酸は生成しなかった。

モノリン酸

ジリン酸

88

-(a)

OH

93

4

OH

89

10

OH

no reaction(b)substrate
OH
OH
HO
HO

4 HO

O
SnnBu2O4( b ) 室温で一晩反応。

O
nBu SnO
2

HO

OH + HOOH

benzenereflux, 2 h(nBuO)2P

2O

CH2Cl2r.t., overnightO
HO

OP(OnBu)2

5, 99 %

今後は、本方法を利用してトリオールなどのポリオールの選択的リン酸化やトシル化、アシル化の検討を行う予定である。

イソプロピルベンゾフェノン系結晶の光反応に伴う表面形態変化(機能有機化学)○井手佑弥・小島秀子[緒言] ジイソプロピルベンゾフェノンのカルボン酸誘導体は、(S)-または(R)-フェニルエ
チルアミンとのキラルな塩結晶中でエナンチオ特異的光環化を起こす。その反応は最初の結晶構造をほとんど保ちながら進行する単結晶-単結晶反応である。今回、結晶の反応に伴う分子レベルの構造変化と、結晶表面のナノレベルでの形態変化との関係を調べた。

O
C

hν
COOH

・ HN

H

2

crystal

OH

COOH

・ H2N

H
H3 C

H3C
(S )-phenylethylamine(R )-(-)-cyclobutenol

98% ee[結果と考察] 反応の進行とともに結晶表面の形態がどのように変化するかを原子間力顕微鏡を用いて観察した。その結果、(001）面と（010）面については、照射前はほとんど平らで滑らかであったが、光照射に伴って数十 nm 程度のふくらみやしわが現われることが分かった（図１）。また（100）面は自然面に出なかったため、カミソリで切断して面を出したところ、nm レベルの粗い表面が観察された（図１）。この面では光照射に伴い、表面がしだいに滑らかに変化する様子が観察された。この観察で、単結晶-単結晶反応を起こす二分子結晶であるにも関わらず、結晶の表面では nm レベルの形態変化が起こっていることが分かった。
(001)

(010)

(100)

照
射
前

P2 1 2121, a=6.1890, b=14.411, c=28.732 Å

hν

20
分

60 分

60
分
P2 1 2121, a=6.3312, b=13.776, c=28.712 Å

図１

2,5-ジイソプロピル 4’カルボキシベンゾフェノンと(S)-フェニルエチルアミンの塩結晶の単結晶−単結晶エナンチオ特異的光環化に伴う表面形態変化の AFM 像

アクリジンと N-フタロイルグリシンから成る２種類の複合結晶の光反応性（機能有機化学）○谷口 明広・小野 幸太郎・小島 秀子【緒言】

結晶中では分子が３次元的に規則正しく配列しているので、分子の動きは溶液

中よりもはるかに拘束されている。このため結晶状態の反応性は、分子の性質ばかりではなく結晶構造によっても左右される。今回、アクリジンと N-フタロイルグリシンの溶液
から、同時に黄色と橙色の２種類の複合結晶が生成することを見い出した。本研究では、両結晶の光反応性の違いと結晶構造との関連性について検討を行なった。
【結果と考察】 アクリジンと N-フタロイルグリシンの混合溶液から、再結晶法により、同時に黄色結晶（mp 151℃）と橙色結晶（mp 165℃）の２種類の複合結晶が得られた。
アクリジンと N-フタロイルグリシンの組成は、黄色結晶は１：１、橙色結晶は１：２であり、組成が異なる。両方の単結晶を作製し X 線結晶構造解析を行なった。その結果、黄色結晶は空間群 P21/n のアキラル結晶であったが、橙色結晶はキラル空間群 P1 に属するキラル結晶であることがわかり、アキラル成分からなる新たなキラル複合結晶を見い出すことができた。図１a に示すように、黄色結晶中では、アクリジンと N-フタロイルグリ
シンは水素結合を介して分子対を形成しており、２つの分子対が対称中心をもって headto-tail に配列している。一方、橙色結晶では、２分子の N-フタロイルグリシがカルボン酸の部分で水素結合でつながり、さらに一方の N-フタロイルグリシンはアクリジンと塩結合し、１：２の分子対を形成している（図１b）。この分子対が結晶格子中で head-tohead に対称中心を欠いて配列することによりキラルな構造となっている。光反応性については、黄色結晶は光照射により脱炭酸を速やかに起こすが、橙色結晶はほとんど反応を示さないという大きな違いが見られた。
(a)(b)

図１ (a) 黄色結晶と(b) 橙色結晶の分子配列

トリプタミン−安息香酸系複合結晶のキラル結晶化におけるエナンチオ制御（機能有機化学）○谷口 智哉・小島 秀子【緒言】 アキラルな分子であってもキラルな結晶を形成するキラル結晶化現象は今まであまり知られていなかったが、このような結晶を反応させると絶対不斉合成が可能となるので大変有用である。このため私達は、アキラルな異種分子を組み合わせてキラルな複合結晶を創製する研究を進めており、すでに数多くのキラル複合結晶を見い出している。またこのようなアキラル分子のキラル結晶化は、必ず右と左の両方の鏡像結晶を与えるので、一方の結晶を作り分けるエナン
チオ制御の方法として、結晶構造のよく似た結晶を互いに種結晶として用いる「擬似種結晶法」を開発している。そこで今回、二成分ともアキラルなトリプタミンと安息香酸置換体とのキラル複合結晶の創製とそれらのエナンチオ制御を検討した。
１ ）とアキラルな種々の安息香酸置換体（a–g）を１：１のモ【結果と考察】 トリプタミン（１ル比でメタノールに溶解し、室温で蒸発させることにより複合結晶を作製した。単結晶 X 線構造解析を行った結果、図 1a に示す一連のキラル結晶が見い出された。それら結晶の空間群は P21 ま
たは P212121 に属しており、いずれの結晶中でも四級アンモニウム塩と水素結合の連なった、同じ様式の一方向ヘリックス構造が形成されている（図１b）。溶液からの自然晶出では P 体（右巻
ヘリックス）、M 体（左巻ヘリックス）両方の鏡像結晶が生成した（図１c）。ところが、空間群が異なる結晶（P21 と P212121 ）どうしであっても、P 結晶を互いに種結晶として加えて結晶化させた場合、必ず P 結晶が生成し、逆に M 結晶を種結晶とした場合は M 結晶が生成することがわかり、エナンチオ制御に成功した。このような結果は、結晶形成過程において、溶液中の分子は擬似種結晶の分子全体を認識するのではなく、極性の強いカルボキシル基とアミノ基を優先的に認識して集合し結晶に組み込まれるために、擬似種結晶と同じ様式、同じ方向のヘリックス構造が形成されることを示唆している。
H
N
CH2CH2NH2 • HO2C

1

(a)

a–g
空間群

安息香酸

X

a:

F

CO2H

P21

b:

Cl

CO2H

P212121

c:

Br

CO2H

P212121

d:

I

CO2H

P212121

e:

NO2

CO2H

P212121

f:

Cl

CO2H

P212121

CO2H

P212121M-helix

(b)

(c)
+

∆CD

P

Cl

g:

Cl

Cl

M
200

400
300
Wavelength, nm

図１ (a)トリプタミンと安息香酸のキラルな複合結晶と( b )M結晶1•b内で形成された
左巻きヘリックス構造、および( c )P、M結晶の固体CDスペクトルクマリン誘導体のゲル化におけるキラリティー発生（機能有機化学）○守時 達也・小林 史明・中田 彩香・小島 秀子【緒言】

アキラルな有機化合物であってもキラルな結晶を形成するキラル結晶化現象は知られている。今回、ゲル化においても同様な現象が起きることをアキラルな成分である
クマリン誘導体（1）について見い出したので報告する。
O
O

O

O

C

N
H

(CH2)nCH3

ゲル化
アキラル分子キラルゲル

1 (n=3~17)【結果と考察】クマリン骨格にエーテル結合とアルキルアミドを導入した一連の化合物 1は、ヘキサン、シクロヘキサンなどの無極性溶媒、および、グリセロールなどの高極性溶媒中でゲルを形成した。ゲルの微細構造を走査型電子顕微鏡（SEM）を用いて観察した
ところ、多くは繊維状であったが、中に。とくに、シクロヘキサンを用いて作製したゲルは、アルキル基の長さにかかわらず、n = 3〜17 すべてについてらせん状のキラルなゲルが生成した。この場合、らせんの方向は、右巻き、左巻きのものが共存していることがわかった（図１a）。これはアキラル成分からのキラル結晶化が右と左の両方の鏡像結晶与えるのと同じ現象と言える。これに対して、(R)-フェニルエチルアミンとのアミド結合を導入した(R)体のキラルなクマリン誘導体 1-R が、シクロヘキサン中で形成するゲルは左巻きのみのらせんであることがわかった（図１b）。一方、逆の(S)体のクマリン誘導体 1-S
からは右巻きのみのらせん状ゲルが形成されることがわかった（図１c）。
はらせん状の形態のゲルも観察され、アキラルな成分からキラルなゲルが生成することを
見い出した
O
O

O

O

C

O H C
3

N
H

(CH2)17CH3

O

O

O

C

N
H

1-Rのゲル（b）キラル成分1
左巻きらせんのみ

1-17 のゲル（a）アキラル成分1
右巻きと左巻きらせん混合

O

H
O

O

O

C

H

N
H

1-Sのゲル（c）キラル成分1
右巻きらせんのみ

左巻き

右巻き

図１ シクロヘキサン中で生成したクマリン誘導体のらせん状ゲルのSEM像

CH3

N-ベンゾイルグリシン結晶のキラル光学的特性（機能有機化学） ○大塚将成・小島秀子[緒言] 最も簡単でしかもアキラルなアミノ酸であるグリシンは多形結晶を形成し、そのう
ちの一つはキラルな結晶であることが知られている。グリシン結晶のキラル光学的特性を測定できれば意義深いが、キラルなグリシン結晶は空気中では不安定であるため測定は難しい。このため、アキラルなグリシン誘導体で安定なキラル結晶を形成する N-ベンゾイル
グリシンについて検討を行なった。測定は HAUP（High Accuracy Universal Polarimeter）法を用いた。
[結果と考察] この結晶は空間群 P212121 に属しており、結晶中で分子がらせん状に配列している。メタノール溶液を室温でゆっくり蒸発させることにより数ミリメータの大きさの単結晶を作製した。アルミナのラッピングフィルムにより研磨し、仕上げにはより柔らかい酸化鉄のものを用い、両面を光学面とした。次に、He-Ne レーザーの 632.8 nm の波長、30〜40℃の範囲で消光位の温度依存性を測定した。P 結晶、M 結晶それぞれの（100）
、
（010）
、
（001）の３つの面について測定を行なった。偏光板の寄生楕円率は、光学不活性な LiNbO3結晶を測定して求め、系統誤差の補正を行い、比旋光能（厚さ 1 mm 当たりの旋光度）および複屈折を決定した。その結果、らせん構造を形成している（100）面と（010）面について大きな旋光性が得られた。

O
N
H

(100)

CO2H

(010)

(001)

+c

+c

+a
0

+a

0
0

+b

+b

グリシンイミンエステルの溶媒蒸気中での固相不斉アルキル化（機能有機化学） ○吉岡 慎市・光富 浩太郎・小島 秀子
[緒言]

光学活性

アミノ酸は生体成分であり医薬品の原料としても用いられる重要な物質である。天然型、非天然型アミノ酸のエナンチオ選択的合成法として、グリシンイミンエステルの相間移動触媒を用いる不斉アルキル化は活発に研究されてきた。私達は以前に、塩基処理した粘土やアルミナの固相担体表面でキラル相間移動触媒の存在下、N‑ジフェニルメチレングリシン t‑ブチルエステル（1）のアルキルハライド（2）による不斉アルキル化が迅速かつ高収率、高エナンチオ選
択的に進行し、さらにカラム法を用いることで生成物（３）が反応混合物から容易に分離できることを報告した 1,2)。そこで今回、飽和蒸気中での反応を試みたところ、不斉アルキル化が迅速に進行することがわかった。
[結果と考察]

表１に、1、2a、KOH、触媒として 2,7‑ビス[O(9)‑アリルハイドロシンコニジウム‑
N‑メチル]ナフタレンジブロミドの固体混合物を、飽和溶媒蒸気中で静置して反応させた結果を示す。
CH2Cl2、CHCl３蒸気を用いた場合、わずか２分で反応が簡潔し、良い収率、エナンチオ選択性でアルキル化体 3a を得た（エントリー2、3）。この場合、溶媒蒸気を用いないまったくの固相状態では反応の進行は非常に遅かった（エントリー1）
。

Ph 2C

N

Br

CO 2 Bu t +chiral catalyst

Ph 2 CN* CO 2Bu

2a

*

CO 2H

H+ , hydrolysis

solvent v apor / KOH
1

H 2N

t

-amino acid3a

表 1 グリシンイミンエステルの飽和蒸気中での固相不斉アルキル化
エントリー

a

飽和蒸気

反応時間

収率

光学純度

(分)

(％)

(ee％)

４２（日）a

６３

１９(S)

１

なし

２

CH２Cl２

２

７０

６５(S)

３

CHCl３

２

５９

６９(S)

４

エーテル

１０

７４

３９(S)

５

ヘキサン

４０

８０

３８(S)

６

トルエン

６０

７０

３８(S)

反応未完結

文献
(1) Yu, H.; Koshima, H. Tetrahedron Lett. 2003, 44, 141.
(2) Yu, H.; Takigawa, S.; Koshima, H. Tetrahedron 2004, 60, 8405.