光スイッチを搭載したCreリコンビナーゼ

PA- Cre with Magnet System®
生命科学分野において、遺伝子の機能解析や病態モデルの作製手段として、時間・空間分解能が高く、薬剤投与では難しい精密なコントロールを実現可能な光操作技術が求められています。本 製品は、Creリコンビナーゼに、光スイッチタンパク質 Magnet

Systemを組み合わせた、光誘導型の Creリコンビナーゼ（ Photoactivatable Cre; PA-Cre ）です。この製品を用いることで、遺伝子の働きを、光刺激で時間・空間特異的にコントロールすることが可能になります。株式会社ミーバイオは、試薬の提供を通して、生命科学分野における研究者の皆様の「これまでできなかった」を克服し、サイエンスの発展に貢献してまいります。

本 製 品 に つ いてInactive PA-Cre

NLS

COOH

nMag
CreN59(19-59)

Active PA-Cre

Blue light (BL)

NH2

Dimerization

NLS
pMag

loxP

Recombination

CreC60(60-343)
NH2

COOH

loxP

ComplementationPA- Cre with Magnet System® は、Creリコンビナーゼを二分割して DNA 組 換え活 性を失わせた断片（ split- Cre；CreN59とCreC60 ）に光スイッチタンパク質 Magnet System（ nMagとpMag ）を連結しています。PA-Cre は、暗所ではloxP（塩基配列）に対するDNA 組換え活性を示しません（ Inactive PA-Cre ）。青色光（ 470±20nm ）を照射すると、PA-Creに導入したMagnet System（ nMagとpMag ）の結合により、Creリコンビナーゼの分割体（ CreN59とCreC60 ）の相補化（ complementation ）が起こり、PA-Cre は速やかに活性を回復します（ Active PA-Cre ）。この作用機構により、2 つの loxPで挟まれた DNA 配列の組換え反応を、青色光を照射したタイミングで、青色光を照射した細胞でのみ起こし、遺伝子の働きを、時間・空間特異的にコントロールすることが可能になります。
参考文献：”A photoactivatable Cre-loxP recombination system for optogenetic genome engineering ”

Nature Chemical Biology, 12, 1059-1064 (2016). DOI: https://doi.org/10.1038/nchembio.2205※本製品は東京大学の佐藤守俊教授によって開発され、株式会社ミーバイオが独占的にライセンスを受けて関東化学株式会社が販売しているものです。
※本製品の仕様や注意点に関しては、3枚目をご確認ください。

お問い合わせ先株式会社ミーバイオ

株式会社ミーバイオ Email : info@mii-bio.com※「Magnet System」は株式会社ミーバイオの登録商標です。

本 製 品 のご活 用 例
任 意の 遺伝 子 の 発 現を時 空 間 的にO N /O F F 制 御Magnet System®
光刺激で活性化したPA-Cre によってDNA 組換え反応が起きることにより①任意の時間 ②任意の部分 での遺伝子のノックアウト・発現を制御可能に 。

Split-Cre

遺伝子ノックアウト
loxP

ターゲット遺伝子

遺伝子発現

loxP

毒性遺伝子やレポーター遺伝子他

loxP

P

GeneloxP

STOP

GenePromotorloxP

遺伝子ノックアウト

遺伝子発現loxPPGene

光 スイッチ・コン ディショナルノックアウトマウス
PA-Creをノックインしたマウスを作製することで、超時空間特異的にマウスの任意の遺伝子の破壊を制御することができます。
以下の実験では、青色光照射部位でのみCre-loxP反応が起こり、部分特異的にレポーター遺伝子が光るのが確認できました。
※PA-Creノックインマウスの作製に関してはミーバイオにご相談ください。

肝臓筋肉（ 左 足 のみ ）参考文献：” Photoactivatable Cre knock-in mice for spatiotemporal control of genetic engineering in vivo ”

Laboratory Investigation. 2020 DOI: https://doi.org/10.1038/s41374-020-00482-5

お問い合わせ先株式会社ミーバイオ

株式会社ミーバイオ Email : info@mii-bio.com※「Magnet System」は株式会社ミーバイオの登録商標です。

製品情報●本製品は「 PA-Cre with Magnet System® 」のクローニングに適したプラスミドベクター（ pUC57 ）です。細胞などに発現させる場合は、発現ベクターへの導入が必要となります。
●本製品は株式会社ミーバイオによる事前の承認なしに、第三者への譲渡、再販、再販のための修正、商用製品の製造または第三者へのサービスに提供することはできません。詳しくは、お問い合わせください。
●本製品は「試験研究用」
ヒトや動物を対象にした医療や臨床診断の目的では使用しないでください。
: 1_pUC57-PA-Cre.ape(環状 です。
/ 4124 bp)
シークエンス酵素:
独特な 6+ カッター（合計 678 の内の 40）:
15
フィーチャー合計

独特なカッター 太字

pPA-Cre with Magnet System®

製 品 名濃度

1.0 μg/μl

容量10 μl

溶媒

10 mM Tris-HCl, pH8.0, 1 mM EDTA-20 ℃

保管温度

Esp3I (3)PfoI (46)(4059) AatII(4057) ZraI

PfoI(3941) SspI

OliI (70)Start codon
XmiI (353)
Bst1107I (354)(3617) ScaI

Ppu21I (474)
AarI (522)
BbvCI - Bpu10I (524)(3507) PvuI

NLS

(3309) VspI

(3198) Eco31I(3137) Eam1105I

pPA-Cre with Magnet System®
4124 bp

SspDI (706)
NarI (707)
EheI (708)
PluTI (710)
NgoMIV (736)
PdiI (738)AjiI (744)
NLS
Bsp1407I (971)
XapI (1173)
Bsp68I - RruI (1199)

BpiI (1342)
BglII (1381)PsyI (1510)
Mva1269I (1661)
PasI (1722)(2128) LguI

SapI

Cfr9I - Eco88I (1853)
SmaI (1855)
Bsp120I* (1856)
ApaI* - Eco24I (1860)

Stop codon

お問い合わせ先株式会社ミーバイオ

株式会社ミーバイオ Email : info@mii-bio.com※「Magnet System」は株式会社ミーバイオの登録商標です。