実験動物ニュース

Vol. 71

No. 1

実験動物感染症の現状

SPF フェレットの生産と微生物管理安倍 宏明 1
Bambi Jasmin2
1

マーシャル・バイオリソーシス・ジャパン株式会社
2

要

Marshall BioResources

約

実験動物としてのフェレットは 100 年以上の歴史をもつ。ヒトやトリ・ブタのインフルエンザウ
イルスに感受性があるため，1920 年ころからインフルエンザのウイルス研究に，それ以後は種々のウイルス感染症，最近では SARS や Covid-19 のコロナウイルス研究にも使われている。フェレットの呼吸器や消化器はヒトのそれらと類似性があると言われ，また中動物としてのイヌの代替として，フェレットは嚢胞性線維症・心臓血管系・神経発生・嘔吐・下痢などの研究にも使われる。実験用フェレットは，ジステンパーウイルスなど自然感染する病原体のほか，上記研究に用いられるヒト等の病原体にも感染していないことが求められる。本稿では，実験用フェレットの概要と，
SPF フェレットの生産ならびに微生物管理について述べる。

1. 始めに日本においてフェレットは，実験動物としてなじみが低く，ペットとしては人気があるものの，まだフェレットそのものを見たことがない方も多いかもしれない。フェレットは食肉目イタチ科に属し，ミンク，スカンク，カワウソなどと近縁の動物である。
米国原産の実験用フェレットは学名 Mustela putorius
furo であり，由来はヨーロッパケナガイタチ（Mustelapurtorius） ま た は ス テ ッ プ ケ ナ ガ イ タ チ（Mustelaeversmanni）と言われている［1, 2, 3］。
当社はフェレット（図 1）を米国ニューヨーク州北西部にて 1939 年より繁殖を開始し，SPF フェレッ
トは 2014 年より英国，2015 年より米国にて生産している。
フェレットは，1900 年代には既に実験に使用されていたらしい［4］。フェレットは多くのウイルス感染症研究に用いられ，またヒトの呼吸器や消化器と

図1

マーシャルフェレット

11の類似性があることや，あるいは中動物としてのイヌの代替として，嚢胞性線維症・心臓血管系・神経発生・嘔吐・下痢などの基礎研究のモデル動物として使用されてきた［2, 3, 5, 6］。フェレットは季節性のヒトやトリ，ブタのインフルエンザウイルスに感染して咳症状，微熱などの症状を呈することが知られ，インフルエンザ研究については 1920 年代から論文が発表されている［4］。またジステンパーウイル
ス感受性が高いことからジステンパーの研究［3, 7,8］，SARS や MERS ウイルスを含め種々のウイルス感染症研究［3, 7］に使われてきたほか，2021 年現在，パンデミックとして広がる Covid-19 病原体 SARSCoV-2 に対して感受性が認められ，論文発表も続いている［9, 10］。
2. フェレットの生態・生理［1, 2, 3］
フェレットは社交性が高く，好奇心が旺盛な動物である。このため，様々な知育エンリッチメントを好む。また，ハンティングで利用されてきた習性の通り，穴やトンネルを好み，そしてよく寝る動物であるため，ハンモックなどのエンリッチメントもよく使用される。
妊娠期間は 41 ± 1 日であり，誕生時 8–10g，離乳は 6 週令となる。歯は生後 14 日齢に生え始め，4–5週令までには固形食を食べ始める。耳や目は 30 日令以降に開き始める。雌雄で大きさの異なる性的 2 形成の動物種となる（図 2）。

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N95 マスクを着用する。従業員の施設間移動には制限を設け，SPF フェレットの従事者には毎年，インフルエンザワクチンの接種を行っている。
飼育エリアには HEPA フィルターおよび UV 照射
した空気を 10 回 / 時間強制換気させており，部屋ごとにエアロックを設け，電子または磁気で入退室管理している。施設外からの搬入品は塩素系消毒剤または過酸化水素ガスを用いて消毒する。
動物飼育は 3 層に連なるケージにて群飼育を行っている。ケージ内には床敷を入れた寝床を設けており，穴掘り，潜り込み，寝る行為を促している。また，ハンモックや玩具などの環境エンリッチメントは適宜提供している。
5. 微生物管理
図 2 2 歳令のフェレット .
オス ( 右 ) の方がメス ( 左 ) より大きい．

心拍数 200–300 回 / 分，呼吸数 30–40 回 / 分であり，平均寿命は 5–8 歳，体温は 37.7–39℃となる。寿命は5–7 歳である。
性成熟は 5–7 カ月令であり，雌は成熟後，交配しなければ，高エストロゲン症となり，重度の骨髄抑制を起こすため，実験動物においても避妊手術を行うことがある。
3. フェレットの実験手技情報，ゲノム情報と遺伝子改変
実験用フェレットを用いる実験手技についてはすぐれた総説が存在している［2, 3, 5］。実験用フェレッ
トの全ゲノム配列は 2014 年に決定された［11, 12］。
それに先立つ 2008 年にはアデノ随伴ウイルスを利用した嚢胞性線維症関連 CFTR 遺伝子ノックアウトフェレットの報告［13］もあり，実験用フェレットを対象とした基本的な実験手技や遺伝子情報は揃っている。
4. 施設管理
当社の米国施設は AAALC 認証を受け，英国施設は国内法に準拠し，ISO 9001:2008 を取得している。
飼育室は 18–21℃にて管理を行い，明暗を 10 時間，14 時間にて行い，繁殖エリアでは 16 時間，10 時間に設定している。
従業員はバリアルームにはウェットシャワーを通じて入り，室内では個人防護具（PPE）および個別
空気清浄呼吸器（Stryker Flyte），PAPR ヘルメット，フェレットに感染するウイルス［3, 7, 8］には，パルボウイルス科のアリューシャン病ウイルス（ADV）［14］，パラミクソウイルス科のイヌジステンパーウイルス（CDV）（イヌモルビリウイルス），コロナウイルス科のフェレットコロナウイルス（腸管型），ラブドウイルス科の狂犬病ウイルス，レオウイルス科のロタウイルス A，そしてオルソミクソウイルス科のヒト・トリ・ブタインフルエンザウイルスなどがある。
当社の SPF フェレットでは，ウイルスとしてインフルエンザウイルス，寄生虫・原虫としてジアルジア，コクシジウム，耳ダニを SPF 項目としており，臨床症状を観察して健康の維持管理を行っている。
インフルエンザウイルス検査においては，現在 4株（B/Phuket/3073/2013，B/Washington/02/2019，A/Tasmania/503/2020V1，A/Vitorial/1/2020 V7）の季節性インフルエンザ株を定期検査し，陰性を維持している。SPF 対象外の病原体では，ADV，フェレットコロナウイルス（腸管型），ロタウイルス A を検査しているが，フェレットコロナウイルス（腸管型）は現在，全例で陽性が確認できているため定期検査から除外している（注：フェレットコロナウイルス（腸管型）はアルファコロナウイルス属のウイルスで，SARS や Covid-19 の原因となるコロナウイルス（ベータコロナウイルス属）とは異なる）。なお，CDV と狂犬病ウイルスに対してはワクチンを接種している。
細菌では気管支敗血症菌（Bordetella bronchiseptica）
およびキャンピロパクター属，ヘリコバクター属，ローソニア（Lawsonia intracellularis），パスツレラ・マルトシーダ（Pasteurella multocida），サルモネラ属
菌，黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus），エルシニア属菌の検査を実施しており，黄色ブドウ球菌は陽性例が認められる。
寄生虫はコクシジウムおよび犬糸状虫，耳ダニを，原虫では小形クリプトスポリジウムを検査している。

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以上の検査は当社米国および英国施設，ブルーク
ロス動物病院，ミシガン州立大学，コーネル大学，米国チャールス・リバー社にて実施し，4 回 / 年の最新レポートを公開している［15］。
表 1 に当社で行っている各検査項目の概要，図 3に 2021 年第 3 四半期の検査レポートの概略を示す。

表1Vol. 71

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6. 出荷・配送
当社では，希望があれば研究用途に応じて去勢，避妊手術（卵巣および子宮摘出），臭腺摘出を当社内で実施している。SPF グレードを求める場合にはフィルター付輸送箱（図 4）を用いるものの，夏場は温度ストレスにより動物へのダメージが懸念されることからフィルターのない輸送箱（図 5）を用いる。配送は国際運送協会（IATA：International Air Transportationマーシャル・バイオリソーシスで行っているフェレットの微生物モニタリング概要

AgentsTest Methods

SpecimenLaboratories

Viral infections
Aleutians mink disease virus (ADV) PCR

BloodBlue Cross Animal Hospital

Canine distemper virus (CDV)<vaccinated>**Ferret coronavirus (enteric)

PCR

Rabies virus<vaccinated>**Rotavirus A

PCR

Fecal

Michigan state University

B/Phuket/3073/2013

HAI

Blood

Marshall UK Laboratories

B/Washington/02/2019

HAI

Blood

Marshall UK Laboratories

A/Tasmania/503/2020 V1

HAI

Blood

Marshall UK Laboratories

A/Victoria/1/2020 V7

HAI

Blood

Marshall UK Laboratories

Bordetella bronchiseptica

CulturePharingeal/nasal swab Cornell University

Campylobacter species

CultureRectal swab

Cornell University

Helicobacter species

PCRFecalCharles River Research Animal
Diagnostic Services

Lawsonia intracellularis

PCRBloodCharles River Research Animal
Diagnostic Services

Pasteurella multocida

CulturePharingeal swab

Cornell University

Salmonella species

CultureRectal swab

Cornell University

Staphylococcus aureus

CultureRectal swab

Cornell University

Yersinia enterocolitica

CultureRectal swab

Cornell University

Coccidia

Sodium nitrate

Fecal

In house

Dirofilaria immitis

Snap 4Dx

Blood

In house

Otodectes cynotis

Microscopy

Not applicable***Human inﬂuenza*

Bacterial infections

Parasitological infections

In house

Protozoan parasites
Cryptosporidium parvum

PCRFecalCornell University

Giaridia

Zinc sulfateFecal

In house* インフルエンザ株については、過去に A/Switzerland/9715293/2013(H3N2) などについて検査し、陰性であった . 詳細は、当社の Health Monitoring Report に記載している . Inﬂuenza-Free Ferret Health Monitoring(marshallbio.com).
** ワクチンプログラムや使用ワクチンの概要は，当社の Health Monitoring Report に記載している .
*** フェレットコロナウイルス（腸管型）は，現在のところ全例で陽性のため、検査を停止している .

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図3

図4

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微生物検査成績書抜粋（2021 年第 3 四半期版）

フィルター付輸送箱図5

フィルターなし輸送箱

7. まとめAssociation）に準拠し，また陸送は空調車を使用してストレスの軽減を図り，納品まで可能な限り速やかに行っている。

ここまで実験用フェレットの簡単な紹介と，微生物管理について述べた。以上の情報が感染症領域をはじめフェレットを用いる生物・医学研究領域における研究の進展に役に立つようであれば幸いである。

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