マサバ給餌飼育中のアニサキス幼虫寄生数の変化
メタデータ

言語: ja
出版者:
公開日: 2023-03-22
キーワード (Ja):
キーワード (En):作成者: 古下, 学, 前田, 俊道, 坂本, 龍亮, 福田, 翼, 辰野,竜平, 荒井, 大介, 金庭, 正樹
メールアドレス:
所属:URLhttps://doi.org/10.57348/00000031

Journal of Fisheries Technology，14（2），29 − 33，2022

資

水産技術，14（2），29 − 33，2022

料

マサバ給餌飼育中のアニサキス幼虫寄生数の変化
古下 学＊ 1・前田俊道＊ 1・坂本龍亮＊ 2・福田 翼＊ 1・辰野竜平＊ 1・荒井大介＊ 3・金庭正樹＊ 4
The number and prevalence of Anisakis larvae in chub mackerel Scomber japonicus
on rearing fish with feeding

Manabu FURUSHITA, Toshimichi MAEDA, Ryosuke SAKAMOTO,Tsubasa FUKUDA, Ryohei TATSUNO, Daisuke ARAI and Masaki KANENIWA

The change of the number of Anisakis larvae during rearing with feeding was preliminarily investigated in two groupsof chub mackerel Scomber japonicus. In one group, the mean number of larvae significantly increased from 4.3 to 19.8
during 34 days of rearing, with the reasons unclear. In the other group, the prevalence and mean number significantly
decreased from 100% and 11.1 to 50% and 0.85, respectively, during the 61-day period of 21–82 days after the beginningof rearing. All larvae were obtained only from the body cavity of fish. Among them, Anisakis pegreffii and A. simplex
s. s. occupied 96.1% and 3.9% in total, respectively. In the second group of fish, the ratio of A. pegreffii decreased from
100% to 92.3% during the 61 days of rearing. The decreases in the number of larvae and the ratio of A. pegreffii in thesecond group suggested possible death of A. pegreffii in the body cavity of chub mackerel, although further well-designed
experiments are necessary. Additionally, the presence of Anisakis larvae even after the long rearing indicated that the riskof food poisoning cannot be completely eliminated by rearing.
キーワード：アニサキス，給餌飼育，マサバ
2020 年 10 月 21 日受付

2021 年 11 月 4 日受理

アニサキス属線虫は，ヒト消化管内に経口的に入るこる（Ivanović et al . 2017）。とによりアニサキス症を引き起こし，胃，小腸，大腸の日本におけるアニサキス食中毒発生件数は，2012 年

粘膜に侵入または腸管壁を穿通し激しい心窩部痛，悪心，の食品衛生法の一部改正により食中毒事件票に病因物質嘔吐といった症状を示す（有薗 2011，杉山 2019）。また，としてアニサキスが追加されて認知が進んだ結果，2013

アレルギー抗原タンパク質を分泌することも知られてい年に 88 件であったが 2018 年には 468 件に増加している＊1

国立研究開発法人水産研究・教育機構水産大学校食品科学科〒 759-6595

山口県下関永田本町 2-7-1

Department of Food Science and Technology, National Fisheries University, Japan Fisheries Research and Education Agency, 2-7-1 NagataHonmachi, Shimonoseki, Yamaguchi 759-6595, Japanfurushita@fish-u.ac.jp
＊2

石川県庁

＊3

国立研究開発法人水産研究・教育機構水産技術研究所企画調整部門＊4

国立研究開発法人水産研究・教育機構水産技術研究所環境・応用部門水産物応用開発部– 29 –

mykiss とヒラメ Paralichthys olivaceus に対するアニサキ（厚生労働省 2018）。
アニサキス属線虫は，クジラ，イルカ等の海洋哺乳動物を終宿主とし，第 3 期幼虫が延長中間宿主として魚類

ス幼虫の経口投与感染実験が報告されているが（Quiazonet al . 2011b），マサバの給餌飼育中のアニサキス幼虫のやイカに寄生する。ヒトは，アニサキス属線虫の生活環寄生数に関する知見は極めて乏しい。

では偶然宿主であるとされる（Baird et al . 2014）。このそこで本研究では，2018 年 10 月に石川県能登半島西アニサキス幼虫が寄生した魚介類を非加熱の状態で喫食部にて漁獲されたマサバを対象に，マサバ給餌飼育中のすると，アニサキス症を引き起こす。

マサバのアニサキス幼虫寄生数の変化について調査をアニサキス幼虫には形態学的な識別が困難な姉妹種が行った。

含まれているため分子生物学的手法による同定が進んでおり，internal transcriptional spacer 2（ITS2）領域（ITS1-材料と方法5.8S-ITS2）やミトコンドリア cox 領域がその標的とされマサバ試料ている（D’Amelio et al . 2000, Zhu et al . 2000，Valentini
et al . 2006）。日本近海の魚介類に寄生するアニサキス種

月 20 日に石川県富来漁港から約 64km 西北西に位置す

マサバは，2018 年 10 月 6 日，および 10についても分子生物学的手法による同定が進んでおりる瀬漁場においてまき網漁法により漁獲され，石川県漁（ 中 島・ 山 本 2009，Suzuki et al . 2010，Quiazon et al .

業協同組合西海支所がある羽咋郡志賀町の富来漁港内に2011a，Gomes et al . 2020），その多くが Anisakis simplex s.

漁船で輸送後，海面生け簀に漁獲日を分けて収容し給餌

s. または A. pegreffii と同定されている。A. pegreffii は A.

飼育を行った。生け簀の大きさは 10m × 10m，水深 5m

simplex s. s. と比較して，魚類の内臓から筋肉へ移行するであり，生け簀 1 基あたりマサバ約 4,000 尾を収容した。

割 合 は 100 分 の 1 程 度 で 寒 天 培 地 へ の 侵 入 力 も 弱 く

給餌飼育期間中の死亡個体は，約 200 尾（約 5%）であっ（Suzuki et al . 2010）ヒトへの感染リスクが高くないと考た。凍結イワシまたは凍結サバを 2 日毎に給餌したが，えられている。

水温の低い 1 月は 5 日毎に給餌した。アニサキス幼虫は鮮度保持技術や低温流通技術の発達により，非冷凍の生食用水産物の供給が伸びて来たところであるが，近年凍結により殺虫可能であり，凍結魚を給餌することでマサバへのアニサキス幼虫の取り込みを防いだ。

生食用水産物の喫食によるアニサキス幼虫による食中毒

平均表面海水温度は，石川県が富来西海に設置していの報告例が急増したため感染源となる恐れのある生食用る海洋観測ブイから得られたデータを用いた。10 月で非冷凍鮮魚の販売量が減少するなど関連産業等への影響

22.3°C，11 月で 19.2°C，12 月で 15.9°C，1 月で 10.7°C であっが懸念されている。

た。
10 月 6 日に漁獲したマサバは，漁獲直後（10 月 6 日）養殖魚においても，2004 年に輸入された養殖カンパ
チ Seriola dumerili およびイサキ Parapristipoma trilineatumと給餌飼育 31 日後（11 月 10 日）に試料採集し，10 月の中間種苗に高率に A. pegreffii が寄生し問題となった。

20 日に漁獲したマサバは，給餌飼育 21 日後（11 月 10 日），これは，アニサキスが寄生した生餌の給餌が原因であり51 日後（12 月 10 日），82 日後（1 月 11 日）に試料採集し，（Yoshinaga et al . 2006，小川 2010，鈴木・村田 2011），厚アニサキス幼虫の寄生状況を調べた。

生労働省も養殖カンパチの取り扱いに関する通達を行う

1 回に採取したマサバ試料数は，20 ～ 30 尾とした。マなど（厚生労働省医薬品局 2005），養殖魚の生産流通段

サバ試料は，尾叉長と体重を測定後，内臓，腹側筋肉，階におけるアニサキスの対策を行っている。

背側筋肉に分けて検査に供した。

日本近海に分布するマサバ Scomber japonicus は，主に九州から三陸沖分布する太平洋系群（黒田ら 2017）と，アニサキスの検出および計数

アニサキス幼虫の検出

東シナ海と日本海の間を回遊する対馬暖流系群の 2 系群

は，酵素溶解法により行った。溶解液は，Jackson et al .に分けられる（由上ら 2019）。太平洋系群のマサバから（1981） の 方 法 を 改 変 し た 溶 解 液（0.85% NaCl，1%は 主 に A. simplex s. s. が 対 馬 暖 流 系 群 か ら は 主 に A.

pepsin (Biocon L. T. D.), 0.1M HCl，pH2.0）を用いた。腹pegreffii が分離されることが知られている（Quiazon et側と背側のマサバ筋肉は，200 ～ 300ml の溶解液に各々al . 2011a）。この分布の違いは，魚の産地によってアニ浸漬し，内臓は 100ml の溶解液に浸漬した。筋肉およびサキス症の発生リスクに差があることを示し，西日本で内臓は，37°C で 6 ～ 8 時間振とう溶解した。溶解中にサバを生食する食習慣と対応しているという指摘がある

溶解液が pH4.0 を上回った場合，HCl 水溶液を適量加え（横山 2013）。本試験を行った石川県においてマサバはpH2. 0 に再調整した。筋肉および内臓の溶解液は，目開主要な水産物であり，2010 ～ 2019 年までの石川県の平き 0.46mm の篩で溶解液を除去後，アニサキス幼虫を計

均漁獲量は，3,382 トンであった（石川県水産総合セン数した。寄生数平均は，寄生虫個体数を調査魚体数で除ター 2020）。また，本県では生産調整や品質を一定にすした数値とした。

るため漁獲したマサバを給餌飼育後に生食用として出荷統計解析は，エクセル統計（株式会社 社会情報サーすることがある。これまで，飼育ニジマス Oncorhynchusビス）を用いて，クラスカル = ウォリス検定を行い，多– 30 –

マサバ給餌飼育中のアニサキス幼虫寄生数の変化

マサバに寄生するアニサキス幼虫数

重比較は Steel-Dwass 検定を行った。

マサバに寄生するアニサキス幼虫数の結果を表 1 に示す。すべてのアニサ
アニサキス幼虫の同定

アニサキス幼虫の同定は，魚体キス幼虫はマサバ内臓から分離され，筋肉からは分離さ当たりのアニサキス幼虫 5 個体を上限に無作為に選択し，れなかった。試料個体別のアニサキス幼虫数は，0 ～ITS2 領域の PCR ダイレクトシーケンスにより行った。

116 個体であった。

DNA 抽出はアニサキス虫体に Buffer ATL（Qiagen）と10 月 6 日漁獲マサバ群のアニサキス幼虫平均寄生数

プロテネース K を加えてペッセル（アズワン）で潰し，（総虫体数 / 調査魚数）は，4.3 ± 6.8 個体であった。また，55°C で一晩加温溶解し，QIAamp DNA Mini Kit（Qiagen）

マサバの体重と魚体当たりのアニサキス幼虫数に相関は見られなかった（図 1）。このマサバ群の給餌飼育 31日後，を用いて行った。
この様に抽出した DNA を鋳型とし，既報に従ってITS2 (ITS1-5.8S-ITS2) 領 域 の PCR 増 幅 を 行 っ た（D’アニサキス幼虫平均寄生数は 19.8 ± 31.3 個体と有意に増加した。

Amelio et al . 2000）。PCR 増幅には，Taq DNA polymerase

10 月 20 日漁獲マサバ群における平均寄生数は，給餌(Takara) を用いた。プライマーは，NC5 (5’-TAGGTGAA

飼育 21 日後に 11.1 ± 14.1 個体，51 日後に 2.65 ± 2.9 個体，

C C T G C G G A A G G AT C AT T - 3 ’ ) と N C 2

82 日後に 0.85 ± 1.3 個体と減少した。すべての給餌飼育(5’-TTAGTTTCTTTTCCTCCGCT-3’) を 使 用 し た（D’後試料間で有意差が見られた。

Amelio et al . 2000, Zhu et al . 2000）。

マサバのアニサキス幼虫保有率は，10 月 6 日漁獲マサ

PCR 増 幅 産 物 の 精 製 は，NucleoSpin Gel and PCR

バ群の漁獲直後で 86.7%，給餌飼育 31 日後で 100% とな

Clean-up kit (Takara) を使用した。PCR 増幅産物の塩基配り，寄生数平均と同様に増加した。また，10 月 20 日漁列決定は，Dye Terminator法を用いた。使用プライマーは，獲マサバ群では，給餌飼育 21 日後に 100% であったが，各 遺 伝 子 の 増 幅 に 用 い た プ ラ イ マ ー セ ッ ト に 加 え，

51 日後に 85.0%，82 日後に 50.0% と減少した。

N C F 1 ( 5 ’ - T TA AT G A G C C A C G C T - 3 ’ ) と N C R 1(5’-GATCCACGAACCGAGT-3’) を用いた。塩基配列をアニサキス幼虫の同定決定後，制限酵素 Hinf I と Hha I の認識配列を検索し予虫 153 個体は，すべて A. pegreffii あるいは A. simplex s.

同定をおこなったアニサキス幼測切断パターンにより種同定を行った。

結果

漁獲後および給餌飼育中のマサバ試料

石川県沖で2018 年 10 月 6 日に漁獲したマサバ群は，漁獲直後および給餌飼育 31 日後に試料採集を行ったが，それ以降は尾数を確保できなかった。そこで，10 月 20 日に漁獲したマサバ群を用いて 2 回目の飼育を行い，21 日，51 日，82 日後の試料採集を行った（表 1）。
10 月 6 日漁獲直後のマサバ群の体重は，327.7 ± 44.2gであった。給餌飼育 1 ヶ月後のマサバの平均体重は，461.3 ± 75.9g と増加した。一方，10 月 20 日漁獲マサバ
群の平均体重は，飼育 21 日後で 439.5 ± 71.2g，51 日後で 437.2 ± 71.6g，82 日後で 482.4 ± 61.5g であった。

図 1．漁獲直後（2018 年 10 月 6 日）のマサバ体重と1 尾当たりのアニサキス幼虫数

表 1．漁獲直後および給餌飼育マサバとそのアニサキス寄生状況* アニサキス虫体はすべて内臓に寄生しており，筋肉からは検出されなかった*2 平均寄生数 = 寄生虫体数の合計 / 調査魚体数 数値は，平均値±標準偏差で表した
数値の上付きアルファベットは，Steel-Dwass 検定による有意差を示す（p<0.05）– 31 –

s. と同定され，全体のうち A. pegreffii は 96.1% と優占し，飼育した生け簀は漁港沿岸に設置し，オキアミの大量発A. simplex s. s. は 3.9% であった（表 2）。A. simplex s. s. の生は認めていないことから新たなアニサキスの取り込みみが寄生していたのは 1 尾（10 月 20 日漁獲マサバ群のは考えにくい。また，漁獲後のマサバ体重と魚体あたり給餌飼育 51 日後）のみであった。このように，給餌飼のアニサキス幼虫数の相関は見られず（図 1），この群育期間に拘わらず A. pegreffii が優占していたが，そので寄生数が有意に増加した理由は不明である。

割合は 10 月 20 日漁獲マサバ群で給餌飼育 21 日後から一方，10 月 20 日に漁獲されたマサバ群では給餌飼育

82 日後で 100％から 92.3% に減少し，一方 A. simplex s.

21 日後から 82 日後の間に，平均寄生数が 11.1 ± 14.1 個s の割合は，0% から 7.7% と増加した。

体 か ら 0.85 ± 1.3 個 体 と 有 意 に 減 少 し た。 ま た，A.
表 2．アニサキス幼虫の同定結果

考察pegreffii の割合が，飼育開始 21 日後の 100％から 81 日後には 92.3% に減少した。A. pegreffii は，比較的温暖な地マサバから得られた虫体のほとんどが A. pegreffii で中海や東シナ海と日本海間の対馬暖流に分布することがあった。日本におけるマサバに寄生するアニサキス幼虫知られている（Levsen et al . 2018，Gomes et al . 2020）。の分布は，太平洋沿岸域で A. simplex s. s. が 80% 以上とまた，水温の高い夏季に A. pegreffii が寄生するマアジが優占する一方，長崎県から新潟県の日本海で A. pegreffii

増 加 す る こ と が 知 ら れ て い る（Abattouy et al . 2014，が 80% 以上と優占することが報告されている（Suzuki etEissa et al . 2018）。一方，A. pegreffii 幼虫を経口投与したal . 2010）。この両種は日本におけるヒトアニサキス症のニジマスを 12°C で飼育すると，魚体内から A. pegreffii

症例において最も高い頻度で分離される種であり，その幼虫の死亡個体が分離されるなど，水温が A. pegreffii の割合は 98.9% が A. simplex s. s.，1.2% が A. pegreffii であると報告されている（Umehara et al . 2007）。過去に石川県挙動に影響を与える可能性が指摘されている（Quiazonet al . 2011b）。本研究においても，飼育海域の水温は冬で水揚げされたマサバから分離したアニサキス幼虫は，季に 12°C 以下と低くなった。給餌飼育中のマサバ死亡

85.0% が A. pegreffii ，15.0% が A. simplex s. s. であると報

個体数は 5% 以下であり，寄生強度の高いマサバ個体が告されている（Suzuki et al . 2010）。本研究においても同死亡したために見かけの寄生強度が下がったとは考えに様の傾向を示し，10 月 6 日の漁獲直後のマサバ群に寄生くい。これらを考え合わせると，10 月 20 日漁獲マサバするアニサキス幼虫は A. pegreffii が 96.5%，A. simplex s.

群では飼育期間中に比較的高温性の A. pegreffii が飼育期

s. は 3.5% と，A. pegreffii が占める割合がこれまでの報告間中に死亡した可能性が考えられる。

より高かった。海水面温度の影響による海流の変動がマ給餌飼育により，マサバに寄生する A. pegreffii 幼虫数

サバの回遊に影響し，A. simplex s. s が優占すると考えの減少がみられ，アニサキス幼虫が寄生する魚体数もられていた青森で A. pegreffii が優占するなどこれまでの50% へ減少した。一方，食中毒を起こした検体で優占す傾向と反対のアニサキス種が優占する場合があることがるとされる A. simplex s. s. の寄生数は給餌期間もほぼ一知られている（Gomes et al . 2020）。それぞれの種が占め定であった。漁獲後の給餌飼育は，マサバの安定供給おる割合は強く固定されているわけではなく，一定の変化よび品質の均一化に重要な役割を担っているが，非凍結があると考えられる。

製品の生食によるアニサキス食中毒のリスクを完全に除

10 月 6 日に漁獲した群では，約 1 ヶ月の飼育期間中に去するものではないことに注意が必要と考えられた。

虫体数が有意に増加した。本研究では，マサバ試料の採集は無作為に行っており，餌は凍結魚を使用した。給餌– 32 –

マサバ給餌飼育中のアニサキス幼虫寄生数の変化

謝辞Levsen A, Cipriani P, Mattiucci S, Gay M, Hastie LC, MacKenzie K,Pierce GJ, Svanevik CS, Højgaard DP, G Nascetti, González AF,

本研究を実施するにあたり，多大なご協力を賜った石Pascual S (2018) Anisakis species composition and infection

川県漁業協同組合西海支所職員の皆様に厚く御礼申し上

characteristics in Atlantic mackerel, Scomber scombrus, from major

げる。本研究は，国立研究開発法人水産研究・教育機構

European fishing grounds - reflecting changing fish host distribution

交付金プロジェクトとして実施した。

and migration pattern. Fish Res., 202, 112-121.
中島文献

祥・山本淳（2009）日本近海 ( 東シナ海 ) と南シナ海における Anisakis I 型幼虫の分子生物学的特徴による識別．水産増殖，56，525-530．

Abattouy N, López AV, Maldonado JL, Benajiba MH, Martı´n-Sa´nchez

小川和夫（2010）魚介類の寄生虫病に関する研究．日本水産学会誌，J (2014) Epidemiology and molecular identification of Anisakispegreffii (Nematoda : Anisakidae) in the horse mackerel Trachurus

76，586-598．
Quiazon KM, Yoshinaga T, Ogawa K (2011a) Distribution of Anisakistrachurusfrom northern Morocco. J. Helminthol., 88, 257-263.

species larvae from fishes of the Japanese waters. Parasitol. Int., 60,有薗直樹（2011）アニサキスとアニサキス症 ─その現状と課題─．

223-226.
Quiazon KM, Yoshinaga T, Ogawa K (2011b) Experimental challenge of

京都府保環研年報，56，1-5．

Anisakis simplex sensu stricto and Anisakis pegreffii (Nematoda:

Baird FJ, Gasser RB, Jabbar A, Lopata AL (2014) Foodborne anisakiasis
and allergy. Mol. Cell Probes, 28, 167-174.

Anisakidae) in rainbow trout and olive flounder. Parasitol. Int., 60,

D’Amelio S, Mathiopoulos KD, Santos CP, Pugachev ON, Webb SC,Picanço M, Paggi L (2000) Genetic markers in ribosomal DNA for126-131.
杉山

the identification of members of the genus Anisakis (Nematoda:Ascaridoidea) defined by polymerase chain reaction-based restriction

広（2019）人と動物の共通感染症の最新情報(15)アニサキス症．
日本獣医師会雑誌，72，581-586．

鈴木 淳・村田理恵（2011）わが国におけるアニサキス症とアニサキ

fragment length polymorphism. Int. J. Parasitol., 30, 223-226.

ス属幼線虫 . 東京都健康安全研究センター研究年報，62，13-24．

Eissa AE, Showehdi ML, Ismail MM, El-Naas AS, Mhara AAA,Suzuki J, Murata R, Hosaka M, Araki J (2010) Risk factors for humanAbolghait SK (2018) Identification and prevalence of Anisakis

Anisakis infection and association between the geographic origins

pegreffii and A. pegreffii × A. simplex (s.s.) hybrid genotype larvaeof Scomber japonicus and anisakid nematodes. Int. J. Foodin Atlantic horse mackerel (Trachurus trachurus ) from some North

Microbiol., 31, 88-93.
Umehara A, Kawakami Y, Araki J, Uchida A (2007) Molecular

African Mediterranean coasts, Egypt. J. Aquat. Res., 44, 21-27.
Gomes TL, Quiazon KMA, Kotake M, Itoh N, Yoshinaga T (2020)

identification of the etiological agent of the human anisakiasis inJapan. Parasitol. Int., 56, 211-215.

Anisakis spp. in fishery products from Japanese waters: Updated
insights on host prevalence and human infection risk factors.

Valentini A, Mattiucci S, Bondanelli P, Webb SC, Mignucci-Giannone
AA, Colom-Llavina MM, Nascetti G (2006) Genetic relationships

Parasitol. Int., 78, 102137. doi:10.1016/j.parint.2020.102137.

among Anisakis species (Nematoda: Anisakidae) inferred from石川県水産総合センター（2020）漁獲統計資料．http://www.pref.
ishikawa.jp/suisan/center/sigenbu.files/opendata/top.html, 2020 年

mitochondrial cox2 sequences, and comparison with allozyme data. J.

9 月 27 日 .

Parasitol., 92, 156-166.

Ivanović J, Baltić MŽ, Bošković M, Kilibarda N, Dokmanović M,横山

Marković R, Janjić J, Baltić B (2017) Anisakis allergy in human.

博（2013）魚介類の生食による寄生虫症．日本食品微生物学会雑誌，30，100‒103．
Yoshinaga T, Kinami R, Hall KA, Ogawa K. (2006) A preliminary study

Trends Food Sci. Technol., 59, 25-29.
Jackson GJ, Bier JW, Payne WL, McClure FD. (1981) Recovery ofon the infection of anisakid larvae in juvenile greater amberjackparasitic nematodes from fish by digestion or elution. Appl. Environ.

Seriola dumerili imported from China to Japan as mariculture

Microbiol., 41, 912-914.

seedlings. Fish Pathol., 41, 123‒126.

厚 生 労 働 省（2018） 食 中 毒 統 計．http://www.mhlw.go.jp/stf/

由上龍嗣・西嶋翔太・井須小羊子・渡邊千夏子・上村泰洋・古市

seisakunitsuite/bunya/kenkou_iryou/shokuhin/syokuchu/04.html,

生（2019）平成 30（2018）年度マサバ太平洋系群の資源評価．

2020 年 9 月 27 日 .

平成 30 年度我が国周辺水域の漁業資源評価，水産庁増殖推進

厚生労働省医薬品局（2005）中国産中間種苗由来養殖カンパチ等のZhu X, Gasser RB, Jacobs DE, Hung GC, Chilton NE (2000)

取扱いについて．食安鑑発第 0615001 号 .
黒田啓行・衣田真理・安田十也・鈴木部・国立研究開発法人水産研究・教育機構，163-208．

圭・竹垣草世香・裔光素行（2017）平成 28 (2016) 年度マサバ対馬暖流系群の資源評価．平成 28 年度我が国周辺水域の漁業資源評価（魚種別系群別資源評価・TAC 種）第 1 分冊．水産庁増殖推進部，国立研究開発法
人水産研究・教育機構，201-235．

– 33 –

Relationships among some ascaridoid nematodes based on ribosomal
DNA sequence data. Parasaitol. Res., 86, 738-744.