BNA™ Real-time PCR Mutation Detection Kit

Extended RAS

RAS (3 遺伝子 , 計 13 コドン ) 全変異型 同時検出
exon2

KRAS exon3exon4

G12 G13

A59 Q61

K117 A146

exon2 G12 G13

NRAS exon3

A59 Q61

exon4 K117 A146

BRAF exon15

V600

BRAF

Exon 15codon 600

迅速高感度簡単操作

人工核酸 BNA® を利用した PCR クランピング技術により、迅速・高感度な解析を簡単な操作だけで行えます。
- 1 時間 40 分 (Real-time PCR 工程のみ、抽出工程除く )- 検出感度 1 〜 5%
- DNA 抽出液とキット試薬との調液、Real-time PCR だけの簡単操作‐FFPE サンプル用 UNG（Uracil N-Glycosylase）試薬もご用意

汎用 Real-time PCR 機器対応
Bio-Rad CFX96, Applied Biosystems StepOnePlus で適合確認※BNA®とは？

一本鎖の「良質な」核酸分子の創製を目的に構造と機能との関係から理論的に設計・開発した新しいタイプの人工核酸の総称で、化学構造的特徴の｢Bridged Nucleic Acid（架橋構造型の核酸分子）｣に由来しています。人工核酸BNA®は、DNAあるいはRNAオリゴヌクレオチド中にBNA®モノマーユニットを数ユニット組み入れた修飾オリゴヌクレオチド(BNA®オリゴ)として利用します。BNA®オリゴは、以下の特徴を有し、様々なゲノムテクノロジーの基盤材料として利用することが出来ます。
・一本鎖および二重鎖の天然核酸と非常に強く結合して、それぞれ安定な二重鎖、三重鎖構造を形成可能
・この二重鎖や三重鎖形成では、相手核酸の塩基配列を認識する大変優れた能力
・ヌクレアーゼへの高い抵抗力

HO

Base4ʼHOO

NRO2ʼ

BNAの基本構造

BNA™ Real-time PCR Mutation Detection Kit

Extended RAS
測定原理
野生型Primer

BNA ClampFProbe

BNA Clampを用いた野生型遺伝子の増幅

野生型アレル特異的なQのみを抑制したPCR（PCRクランピング）

BNA Clamp が PCR 増幅
Primer
BNA Clamp

F

変異型

Probe

Primerにより、変異型遺伝子のみを特異的に増幅を抑えます。

させることが出来ます。

PCR 増幅が起こり、野生型／変異型共通プローブが分解され蛍光を発します。

Q

Primer蛍光物質とクエンチャーで修飾したプ
ローブがPCR増幅反応時に分解されるように設計されており、変異型遺伝子の増幅に合わせ蛍光が検出されます。

使用手順
反応液調製（反応液量25µL)

増幅・蛍光検出 (Real-time PCR 1時間40分~)

DNA抽出サンプル（20-100ng) ~5µL
10x Oligo mix (キット構成品)

2.5µL

2x Master mix (キット構成品)

12.5µL※UNG（別売品）
20.25µL

50℃

3分95℃

2分

95℃ 30秒
60℃ 30秒

データ解析

40サイクル①FAM
蛍光測定設定 ②HEX（またはVIC)③ROX（Reference不要の機種であれば測定不要）＊ 13コドン全てを検出させる場合はOligo mixを切り替え、9反応分の調製を行って下さい。

２：ホルマリン固定パラフィン包埋（FFPE）組織ブロックの薄切標本を使用する場合は、反応時にBNA™ Real-time PCR UNG(Uracil-N-glycosylase)を添加してください。

※

３：変異型を特定する場合は、別売りのSequencing Primer Set Extended RASを使用してシーケンス解析を行ってください。

※

製品情報
型番

品名

希望販売価格

容量

保管温度

A410

BNA™ Real-time PCR Mutation Detection Kit Extended RAS￥200,000（税込￥220,000） 40 反応ｘ9 種

-20℃

A420

Sequencing Primer Set Extended RAS￥20,000 （税込￥22,000） 10μM50μLｘ9 種-20℃A426

BNA™ Real-time PCR UNG(Uracil N-Glycosylase)￥24,000 （税込￥26,400） 100μL(~400 反応）-20℃※本製品は受注生産品となっており、受注処理後製造を開始しております。
ご発注後のキャンセルは基本的にお受けしておりません。予めご了承くださいますようお願いいたします。

検出対象コドンexon2

G12 G13

exon4

K117 A146

KRAS exon3

A59 Q61

exon2

G12 G13

exon4

K117 A146

NRAS exon3

A59 Q61

製品構成（Ａ410）

BRAF exon15

・KRAS 10x Oligo mix 4種（Gly12/Gly13、Ala59/Gln61、Lys117、Ala146）・・・各40反応
V600

・NRAS 10x Oligo mix 4種（Gly12/Gly13、Ala59/Gln61、Lys117、Ala146）・・・各40反応
・BRAF 10x Oligo mix1種（Val600)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・各40反応
・2x Master Mix ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 360反応【パテントマーキング】

本製品は日本特許第4731324号および第6242336号ならびにそれらの対応外国特許の１つまたはそれ以上によって保護されています。

【免責条項／ラベルライセンス】

本製品は研究用途にのみご使用いただけます。研究以外の用途での使用（商業目的または診断あるいは治療目的での使用を含む）および弊社の許諾なく本製品を転売することを禁じます。弊社は研究以外の用途で本製品を使用された場合に生じるいかなる法的責任も負いません。

第三者が保有する特許その他の知的財産権が本製品を特定の用途に使用することを制限するか否かの判断はお客様の責任において行うものとし、弊社は当該第三者の知的財産権の侵害によって生じる損害賠償責任その他一切の法的責任を負いません。

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価格はいずれも税込です。記載事項は予告なく変更される場合があります。 本製品は、研究用試薬としてのみご利用いただけます。
製品詳細および最新情報は http://www.rikengenesis.jp でご確認ください。 「BNA」は株式会社理研ジェネシスの日本及びその他の国における商標又は登録商標です。
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Doc.C07-001-21J-05