［III］組織・器官幹細胞：臨床応用への基盤開発（2）●幹細胞と細胞療法

1．多能性肝幹細胞の分化と自己複製
谷口英樹＊

細胞生物学の進歩に伴い，臓器の「種子」ともいえる幹細胞（stem cell）が各臓器において次々と同定され，その機能解析が着実に進展しつつある．
この幹細胞の分化・増殖機構を人為的に制御し，いわば「種子」から再び健全な臓器を育成することを目指すのが「臓器再生」という新しい治療概念である．21 世紀における臨床医学のひとつの目標は，このような「臓器再生」を肝臓などのような実質臓器 solid organ において実現させることである．
肝細胞や胆管細胞の分化・増殖機構やその様式については，現時点ではほとんど解明が進んでいないが，最近になって FACS（fluorescence activated cell sorting）を用いた精度の高い幹細胞の分離法とクローナルな解析系が肝臓研究に導入され，肝臓における幹細胞システムの理解が大きく進展しつつある．すなわち，胎仔肝臓中の非血球細胞画分（CD 45−Ter 119−細胞）に存在する c-Met＋c-Kit−CD 49 f＋lowCD 29＋CD
45−Ter 119−細胞を回収しその機能をクローナルな培養系と細胞移植系を用いて調べたところ，高い増殖能，肝細胞と胆管細胞への多分化能，長期肝組織再構築能を兼ね備えた肝幹細胞がこの細胞画分中に限定的かつ高頻度に存在することが明らかになったのである．さらに，c-Met＋c-Kit−CD 49 f＋lowCD 29＋CD 45−Ter 119−細胞の一部は，多分化能を維持したまま 6 ヵ月以上にわたり in vitro においてクローナルに分裂・増殖可能であることが示され，幹細胞の性質として重要な自己複製能を有していることが示唆されている．
今後，プロスペクティブな解析系を用いて肝幹細胞の分化・増殖・自己複製機構を解明していくことが，肝臓を標的とした「臓器再生」の実現に向けた基盤科学として重要である．また，内在性自己幹細胞の分化増殖の誘導による再生治療，幹細胞移植と遺伝子治療，幹細胞を材料とした三次元培養による体外肝再構築などの革新的な治療技術の開発が期待される．

Differentiation and self-renewal of pluripotent hepatic stem cells
HIDEKI TANIGUCHI Department of Surgery, Institute of Clinical Medicine, University of Tsukuba
たにぐち・ひでき：筑波大学臨床医学系外科（消化器）講師．平
成７年筑波大学大学院医学研究科博士課程修了．同年日本学術振興会特別研究員．平成９年現職．主研究領域／臓器移植，臓器再生．
＊

80 第 117 回日本医学会シンポジウム

Key words

肝臓幹細胞
分化自己複製再生医学

はじめに置換臓器の効率の良い供給は，移植医療に多分化能？
門脈周囲領域おける最重要課題である．最近，生物学的プ肝幹細胞ロセスの人為的再現とその医療への実践を目指した「再生医学」と呼ばれる研究領域が急速に勃興し，移植医療の未来像にも新たな展2つの細胞系列への分化能開を期待できるようになった．

オーバル細胞

近年の細胞生物学の進歩に伴い，臓器の「種移行肝細胞子」ともいえる幹細胞（stem cell）が各臓器において次々と同定され，その機能解析が着実に進展しつつある．幹細胞とは，ある組織や胆管上皮細胞

成熟肝細胞

臓器を構成する細胞集団の根幹に位置する未分化な細胞であり，多分化能（異なった機能を持つ複数の成熟細胞へ分化する能力）と自己複製能（自己と同様な幹細胞を生む能力）を兼ね備えた細胞として定義される．この幹細図 1 肝臓における幹細胞システムの概略
胆管上皮細胞と肝細胞に，ともに分化可能なオーバル細胞と呼ばれる前駆細胞が知られている．より未分化な多分化能を持つ肝幹細胞がヘリング管近傍の門脈周囲領域に存在すると考えられている．

胞の分化・増殖機構を人為的に制御し，いわば「種子」から再び健全な臓器を育成することを目指すのが，「臓器再生」という新しい治1）

療概念である ．

る「骨髄の再生」が細胞療法として確立してい る．さ ら に，G-CSF（granulocyte-colony

血液，皮膚，神経などの組織レベルの再生

stimulating factor），EPO（erythropoietin）な（tissue engineering）については，既に幹細胞どの各種サイトカインの投与による造血前駆をもちいた細胞療法へのアプローチが現実の細胞の分化や増殖の制御による再生誘導法がものとなりつつある．このような「再生」と医療として実践されており，目覚ましい恩恵いう治療概念を臓器レベルで実現することをもたらしている．

（organ engineering）が，今後の臨床医学の大21 世紀における臨床医学のひとつの目標きな目標のひとつである．その為には，「臓器は，このような「臓器再生」という治療概念再生」の鍵を握る各器官幹細胞の同定と機能を，肝臓や心臓などのような実質臓器におい解析が必須である．本稿では，我々が標的臓て実現させることである．そのために解決す器としている肝臓を例にとり，現時点におけべき最も重要な課題は，各臓器における多能る多能性肝幹細胞の分化と自己複製に関する性幹細胞の同定・分離とその制御機構の解明

サイエンスの集積と今後の治療応用への展望である．

について述べる．

2．肝臓における多能性幹細胞の分離・1．再生治療と幹細胞システム

同定

現時点で最も解明の進んでいる幹細胞シス

我々は，個体中に極少数しか存在しない造テムは造血系であり，造血幹細胞の移植によ血幹細胞を純化する手段として，FACS（fluo幹細胞と細胞療法 81

CD45−TER119−gated

細胞数

CD49f＋CD29＋CD45−TER119−gated

CD49f

細胞数

A

CD45/TER119

CD29

c-Kit

B
no-gateCD45＋TER119−
CD45−TER119＋
CD45−TER119−
CD45＋TER119＋
CD49f＋CD29＋CD45−TER119−
CD49f＋CD29−CD45−TER119−
CD49f−CD29＋CD45−TER119−
CD49f−CD29−CD45−TER119−−

c-Kit CD49f＋CD29＋CD45−TER119−＊

c-Kit＋CD49f＋CD29＋CD45−TER119−
05101520
H-CFU-C 数

2530

図 2 FACS による肝幹細胞の分離
A : FACS によるマウス胎仔肝臓細胞（胎生 13.5 日）の画分化．
B：各々の細胞画分における H-CFU-C（hepatic colony forming unit in culture）数の比較．低密度培養条件下における，5 日目に観察される H-CFU-C コロニー（100 個以上の細胞で構成されるクローナルなコロニー）の各細胞画分中（1×104 個）の存在頻度．サンプル数 n=32. MannWhiteney's U test ; *, P<0.001

rescence activated cell sorting）と蛍光標識モ1）．

ノクローナル抗体を用いた精度の高い細胞分

ま ず，肝 幹 細 胞 の 解 析 系 と し て in vitro

離 法 を 確 立 し，そ の 機 能 解 析 を 行 っ て きにおけるコロニーアッセイ法を確立し，ク2,3）．そこで，同様の実験手法を用いて，単離ローン性コロニーを形成する胎仔肝細胞（he-した肝細胞集団の中から，少数しか存在せず，たpatic colony forming unit in culture ; H-CFU-かつ形態によって区別することが難しい肝幹C）を効率よく誘導可能な培養条件を見いだ細胞（hepatic stem cell）を純化・回収し，そした4）．このコロニー形成能を指標として，れらの機能解析を行うことを試みている（図FACS で分離したマウス胎仔肝臓中のさまざ

82 第 117 回日本医学会シンポジウム

A

Bス
酸ン
質ン
18819ンク トラ
リン
ンン
シ6パン ゼン
チチチプン
TTン
ミ ース
ン トタ
ラララ
リ
リ＋R−R
ター
ミケケケ
T
糖 ルタ チダ キュtTブ フェ 1-抗ト ルコトトトe
RR汁ル αイイイγ-グ ペプ ビン
胆HPHPαc-mグアサ
サ
サ
質

ク

パ

肝細胞特異的マーカー

図3

肝管細胞特異的マーカー

FACS を用いて回収された c-Kit−CD 49 f＋CD 29＋CD 45−TER 119−細胞により形成される多分化能を有したクローン性コロニー
A：低密度培養条件下において，FACS により回収された c-Kit−CD 49 f＋CD 29＋CD 45−
TER 119−細胞から形成される，培養 5 日後（a，b），培養 21 日後（c，d），および培養
71 日後（e〜g）のコロニーをアルブミンとサイトケラチン 19 に関して免疫染色（二重染色）したものを示す．図中緑色に染まった細胞はアルブミン陽性細胞を，赤色に染まった細胞はサイトケラチン 19 陽性細胞を，黄色に染まった細胞はアルブミンおよびサイトケラチン 19 共陽性細胞をそれぞれ示している（b，矢頭）．b，d はそれぞれ a，c の赤線で囲まれた箇所を拡大した像を示している．培養 71 日後のアルブミン陽性細胞の多くが成熟肝細胞の特徴である 2 つの細胞核を有することがわかる（f，矢頭）．同
じく培養 71 日後では，サイトケラチン 19 陽性細胞にて形成された管類似構造が多数観察された（g）．スケールバー；100 µm.
B：培養 21 日後のコロニーにおける肝細胞および胆管細胞マーカーの PT-PCR による発現解析．

まな細胞画分の増殖能について解析を行った．

その他

FACS による画分化の指標として，門脈周囲に限定して存在する細胞外マトリックス，幹細胞と細胞療法 83すなわちラミニンに特異的なレセプターであ高い増殖能と多分化能，さらに長期組織再構る α 6 β 1 インテグリンに注目した．これは，築能を持った多能性肝幹細胞が存在すること肝幹細胞の予想存在部位が肝小葉門脈域ヘリを強く示唆する5,6）．

ング管周辺であるとの仮説に基づいている．
そこで，胎仔肝臓中の非血球細胞画分（CD45−Ter 119−細胞）における α 6 インテグリン

3．肝幹細胞の純化と自己複製（CD 49 f）と β 1 インテグリン（CD 29），さらc-Kit−CD 49 f＋CD 29＋CD 45−Ter 119−細 胞に c-Kit（stem cell factor receptor）の発現を指は，胎仔肝臓中の約 4〜5％ を占める細胞群

標として細胞を画分しコロニー形成能を検討であるが，最近，さらに細胞表面マーカーを−した．その結果，c-Kit CD 49 f+CD 29+CD 45−追加して細胞の画分化を段階的に進め，胎仔Ter 119−細胞画分中に，増殖能の高い細胞が肝臓中の約 0.3〜0.4％ を占めるにす ぎ な い

限定的かつ高頻度に存在することが明らかと極めてマイナーなポピュレーションであるなった（図 2 A〜B）．
この細胞の多分化能について，一個の c＋＋c-Met＋c-Kit−CD 49 f＋lowCD 29＋CD 45−Ter
119−細胞に限定して同様の細胞が高頻度にKit−CD 49 f CD 29 CD 45−Ter 119−細胞から存在することを明らかにしている．そして，派生したコロニーの一つ一つを回収し，RT-これらの細胞の一部は多分化能を有したままPCR 法および免疫染色法を用いて肝細胞・6 ヵ月以上にわたり in vitro で増殖可能なこ胆管細胞マーカーの発現を検討した．その結とが，クローンソーティングを繰り返すこと果，一個のコロニー中に肝細胞マーカーと胆により明確に証明されており，幹細胞の性質管細胞マーカーを発現した細胞がそれぞれ存として重要な自己複製能を有していると考え在することが確認された（図 3 A〜F）
．したられる（未発表データ）．すなわち，我々は肝がって，c-Kit−CD49f＋CD29＋CD45−Ter119−

幹細胞の同定・分離にとどまらずその純化を細胞は，肝細胞と胆管細胞の二種類の異なっ可能としつつあるが，今後，この細胞のプロた細胞に分化可能な多分化能を持っているこ

スペクティブな解析系を用いて肝幹細胞の分とが明らかとなった．

化・増殖・自己複製機構を解明するととも

また，胎仔肝細胞を前処置を施したレシピに，肝臓における幹細胞システムの制御を如エント脾臓内へ移植し，長期間にわたる組織何に人為的に行えば良いのかを検討していく再構築能を検討可能な実験系を確立した．そことが重要である．の結果，移植されたドナー細胞はレシピエント脾臓内で増殖し，肝小葉的構築を少なくとも 120 日以上にわたって維持することが判

4．幹細胞制御による治療への展望明した．同様の実験系を用いて c-Kit−CD 49

1）幹細胞移植 遺伝子治療＋

CD 45−Ter 119−細 胞 の 機 能 解 析 を一部の代謝性肝疾患では，患者の肝細胞へ行ったところ，他の細胞画分を移植した場合正常遺伝子を導入・発現させることにより代には生着は全く確認されなかったのに対し，謝異常の是正が可能であり，既に萌芽的な試この細胞画分を移植した場合にのみドナー由みが行われつつある7）．肝幹細胞の同定と分来細胞による肝組織の再構築が確認された．

離，それらを標的とした遺伝子導入のためのこれらの結果は，マウス胎仔肝臓内の c-培養条件や細胞移植法を確立することが，肝Kit−CD 49 f＋CD 29＋CD 45−Ter 119−細胞中に疾患に対する遺伝子治療の基盤技術の開発に＋f CD 2984 第 117 回日本医学会シンポジウム

は必要である．また，最近，膵内分泌細胞における幹細胞の in vitro 増幅技術につい て
報告 さ れ た が8），肝 臓 に お け る 同 様 な ア プ
ローチの展開が望まれる．
2）内在性幹細胞 前駆細胞の分化増殖の誘導

おわりに今後の再生医学の展開を考える上で意識しなくてはならないのは，例えば造血幹細胞研究の進展を基盤として造血幹細胞移植の臨床応用が進んだのではないという点である．実

肝不全における血液浄化法・補助的部分肝際は，造血幹細胞移植の臨床的展開が造血幹移植・ハイブリッド型人工肝臓などの一時的細胞研究の大きな推進力となってきたのが事

肝機能補助療法の進歩を背景として，自己肝実である．これは，臓器移植の歴史的展開に再生誘導法の開発が重要な臨床的課題となりもあてはまるものである．すなわち，基礎免つつある．造血系における各種サイトカイン疫学が解明された後に，その応用として臓器の臨床応用の成功は，造血幹細胞の分化・増移植が行われるようになったわけではない．

殖機構の理解を背景としていることは明らか

無知ではあるが鋭い嗅覚を持った外科医達がであり，肝臓における同様の基礎科学の発展

半ば強引に未踏分野へ踏み出していったことが，肝再生誘導法の臨床応用に必須の知見をが牽引力となり，免疫学の進歩を大きく引きもたらすことが期待される．特に，既知の機出したといってよい．臨床医にとって重要な能分子の肝幹細胞に与える影響のスクリーニのは，どちらの方角を目指して足を踏み出す

ングと，新規分化誘導因子のクローニングがのかというただこの一点である．
「臓器置換」望まれる．

から「臓器再生」を目指す潮流が，より強く

3）胚 性 幹 細 胞（embryonic stem cell ; ES大きな流れとなることを期待したい．

細胞）の分化誘導
最近，ヒト ES 細胞の樹立法が確立されたことから9），ES 細胞から移植用の細胞や組織，将来的には臓器そのものを，細胞工学的あるいは発生工学的アプローチにより工業的に生産することが，現実的な目標として掲げられるようになった．
実際，血液10）・神経11）・心筋細胞12）などでは，ES 細胞の分化誘導系が確立されつつあり，さらに，神経系では ES細胞を用いた治療手法が既に報告されている13）．内胚葉分化誘導の試みは，外胚葉や中胚葉と比較して遅れてはいるものの，今後，ES 細胞の肝幹細胞へのコミットメントの効率を上げる手法を開発することが重要である．また，三次元培養法や血管系再構築法との連携により，ES 細胞から肝臓という臓器そのものを再構築することを目指すことが，移植医療における置換臓器の工業的供給という視点より求められている．

〔文献〕
1）Stcum DL, ed. : Science,1997 ; 276 : 59―87.
2）Taniguchi H, Toyoshima T, Fukao K, et al. : Presenceof hematopoietic stem cells in the adult liver. Nat Med
1996 ; 2 : 198―203.
3）Osawa M, Hanada K, Hamada H, et al. : Long-term
lymphohematopoietic reconstitution by a single CD
34-low negative hematopoietic stem cell . Science
1996 ; 273 : 242―245.
4）Taniguchi H, et al. : Cell Transplant（in press）
5）Taniguchi H, Kondo R, Suzuki A, et al. : Evidence forthe presence of hepatic stem cells in the murine fetalliver. Transplant Proc 1999 ; 31 : 454.
6）Suzuki A, Taniguchi H, et al . : Hepatology（in press）
7）Grossman M, Raper SE, Kozarsky K, et al. : Successful
ex vivo gene therapy directed to liver in a patient withfamilial hypercholesterolaemia. Nat Genet 1994 ; 6 :335―341.
8）Ramiya VK, Maraist M, Arfors KE, et al. : Reversal of
insulin-dependent diabetes using islets generated invitro from pancreatic stem cells. Nat Med 2000 ; 6 :278―282.
9）Thomson, JA, Itskovitz-Eldor J, Shapiro SS, et al. :幹細胞と細胞療法 85

Embryonic stem cell lines derived from human blastocysts. Science 1998 ; 282 : 1145―1147.
10）Nakano T, Kodama H, Honjo T : In vitro developmentof primitive and definitive erythrocytes from different
precursors. Science 1996 ; 272 : 722―724.
11）Brustle O, Jones KN, Learish RD, et al. : Embryonicstem cell-derived glial precursors : a source of myelinating transplants. Science 1999 ; 285 : 754―756.
12）Klug MG, Soonpaa MH, Koh GY, et al. : Genetically selected cardiomyocytes from differentiating embronic
stem cells form stable intracardiac grafts. J Clin Invest 1996 ; 98 : 216―224.
13）McDonald JW, Liu XZ, Qu Y, et al. : Transplanted embryonic stem cells survive, differentiate and promote
recovery in injured rat spinal rat spinal cord. Nat Med
1999 ; 5 : 1410―1412.

されましたが，量的な問題が非常に大きいと思います．つまり肝臓の再生に contribute する stem cell は，造血幹細胞なのか，hepaticstem cell なのか，これには量的な関係があると思います．おそらく造血幹細胞からの hepatocyte の分化は，一種のバックアップのシステムとして機能しているのかもしれません．私どもも少し解析はしましたが，今のところ，造血幹細胞からの hepatocyte の分化は
少 な く と も major な passway で は な い と 考えています．やはり，hepatic stem cell からの分化が肝臓の恒常性制御の主役であろうと思います．
森亘（日本医学会会長） まず 肝臓という臓器は非常に再生能力が強いとおっしゃって質疑

応

答から，stem cell の話に入られたと思い ま すが，肝臓を部分切除しますと，残っている肝座長（秦） どうもありがとうございまし

臓の肝細胞索の中に組み込まれているごく当た．それではディスカッションをお願いしまたり前の肝細胞の方々に核分裂像がみられます．

すね．あれは stem cell との関連ではどのよう溝口秀昭（女子医大） たいへん面白いお仕事ですが，骨髄細胞を移植すると，肝臓に ovalに説明すればよろしいのでしょうか．
谷口

肝切除後の肝再生と，例えば劇症肝cell とか，アルブミンを作っている細胞が出炎のような，mature な hepatocyte が同時にたということが，確か最近の『Nature』の brief

そして大部分なくなってしまうような状態のcommunication に 出 て い ま し た が，実 際 に後に起こっている肝再生を，区別して考える

partial hepatectomy などをした時には，肝臓必要があると思います．
肝切除後の肝再生は，の stem cell が増殖して大きくなるのか，血中トータルとして hepatocyte の mass は減りまにはそういう造血幹細胞がありますから，外すが，mature な hepatocyte も残っていますからそれ由来のものが行くのか，そのようなし，progenitor も残っていますし，もちろん研究はありますでしょうか．

stem cell も残っています．そういった状況か

谷口

そこは現在注目を集めている研究課ら始まる肝切除後の肝再生は，terminal dif-題だと思います．ただ高久先生が少しお話し

frentiation の流れでいうと，かなり末梢の部分で補われてしまうような肝再生だと思いまはた・じゅんいち：慶應義塾大学
医学部病理学教授．昭和41年慶應
義塾大学医学部卒業．昭和50年東海大学医学部助教授．昭和59年国立小児病院小児医療研究センター
病理病態部長．平成２年現職．主研究領域／小児病理学，発生病理学．

86 第 117 回日本医学会シンポジウム

す．つまり progenitor からちょっと分裂してしまった，あるいはかなり mature な hepatocyte が分裂・増殖することで liver mass として十分に補われてしまうということです．
肝 臓 に お い て stem cell system が 働 く のは，おそらく劇症肝炎のように，そういったmature な hepatocyte が一気になくなった，あるいは progenitor もなくな っ て し ま っ たはありません．
須田

最後に伊東細胞の重要性をいう人がという時に，hepatic stem cell の分化や増殖にいるのですが，この系からは出てくるのです

初めてスイッチが入るのではないかと思いまか．

す．ですから，劇症肝炎後の肝再生は非常に谷口

stem cell や progenitor の 増 殖 や 分時間がかかって，1 ヵ月かかることもありま化におそらく伊東細胞は大事だと思います

す．一方肝切除後の肝再生は 1 週間で終わるが，私どもは，例えば co-culture 等はまったくというような違いがあると思っています．

検討しておりませんので，ちょっとわかりま

須田年生（熊本大） in vitro，in vivo の肝せん．
私たちが同定した stem cell から stroma

臓細胞の分化についておうかがいしたいので細胞である伊東細胞が分化してくるのかも今

すが，H-CFU-C はどのような条件で培養されは分かりません．ているのですか．
谷口

北 村 幸 彦（大 阪 大） 先 生 は c-Kit negative

これは，まずは細胞を非常に粗く播の fraction を採って，culture しておられます

きますと，それでコロニーが立ち上がってきね．その時に oval cell は c-Kit positive と書います．てありますが，先生が culture をしておられ須田

コロニーといってもこれは dish でしょうか．
谷口

dish です．接着した細胞です．それる 間 に c-Kit negative の 細 胞 か ら も，c-Kitpositive の細胞も出てくるのですか．
谷口

c-Kit 陽 性 細 胞 が，PCR level で，c-にはある matrix をコーティングしまして，実Kit 陰性細胞由来のコロニー中に確認できるは少しデータも出しましたが，laminin もしくということはあります．ただ，c-Kit positiveは type-4 collagen でうまく行きます．の fraction を最初に sorting してきますと，そ須田

HGF などは入れていないのですか．

谷口

HGF は入っています．
HGF は必須のこからはコロニーはできません．
北村

oval cell などは，むしろ先生の stem

factor です．さらに，培養系にプラス α があっcell の子孫に当たるものと考えておられるわて初めて clone sorting の system に持ち込めけですね．

るようになりました．
須田

谷口今のところそう考えていますが，た細胞移植の実験で非常にきれいに肝だ oval cell 自 体 が ど う い う 細 胞 か と い う

小葉の構造が見えますが，あれは胆管や血管definition が非常に曖昧で，私どもの stem cellはどのようになっているのですか．とどのような関係にあるのかはちょっとわか

谷口

血管系に関してはちょっとわかりまらない状態です．

せん．今日お示しした実験系では，胆管細胞梅澤明弘（慶應大） 脾臓のスライドが非常があの中にいるかどうかは実はわからないのに印象的でした．脾臓に肝小葉が再構築されです．つまり胆管細胞へ suitable な移植の条ていて，中心に中心静脈のような構造と，肝件と hepatocyte に suitable な移植の条件，こ細胞索が見えました．もし肝臓ができている

れは microenvironment の調整という意味でとすると胆汁ができますね．胆汁ができれば少し違いがありますので，今のところ，同じそれは毛細胆管ができていて，それはどこへ細胞移植の system で二つの cell lineage への流れて行っているように，形態学的に見えま分化の確認はできていません．それぞれ違うしたか．また，肝臓には肝細胞以外にたくさ移植実験で確認しています．あそこには胆管んの構造がありますが，あのようなきれいな幹細胞と細胞療法 87

構造をとった時に他の細胞はどのような構造

teraction がありそうな臓器に植えた場合はをとったのかを，教えていただきたいと思いどうなりますか．
谷口ます．
谷口

それを今確認しているところです．

実はそのような詳細な解析はまった

また，この細胞が，他の organ の reconstitu-くできておりませんので，わからないとしかtion に 絡 ん で い な い か と い う こ と は，今言いようがありません．胆汁の分泌自体，脾チェックしているところです．

臓 中 の 細 胞 に あ る の か，要 す る に function

岡野

須田先生のご質問にあった，hepato-として持っているのかということも，いろいcellular carcinoma では，例えば cell line とかろな酵素を発現していることは確認していまで marker study をなさったことがあります

すが，ちょっとそこまでは確認できていませか．

ん．
峯石真（国立がんセンター） 例えば先生

谷口

私どもはそれはやっておりません．

北村

先ほど森先生が質問されたことに関が見ておられる肝細胞の stem cell のような連しますが，この細胞は stem cell だと思うのものは，末梢血中には detect できるのでしょですが，それが hepatocyte の形質を発現しなうか．それとも肝臓を切ってみなければわかいということは証明してあるのでしょうか．

らないのでしょうか．

hepatocyte の一部がそう い う stem cell の 特

谷口

その点もまったく検討しておりません．造血系と違いまして，やはり実質細胞は三次元的に構築をとって integrate している徴を持っているのではないかということは否定できますか．
谷口

否定はできません．
私どもの実験は，ものだと思っていますので，あまり circulat-肝臓細胞をバラバラにして，この phenotype

ing stem cell のような考えは今のところありを持った細胞を採ったらこうでしたというだません．

けで，これがどの細胞かということは，まだ峯石

ちょっと馬鹿げた考えかもしれませんが，例えば，先ほどの劇症肝炎の回復期に今後の課題だと思います．
北村

その 1 個採ったものが，hepatocyte

stem cell が出てくる，というようなことはあの phenotype を持っているかどうかと い うり得ないでしょうか．肝臓の stem cell が末梢ことは調べられないのですか．の血中に出てくるとか，そういうことはあまり考えられないのでしょうか．
谷口

谷口

それは，私どもは fetus を使っていまして，まだ liver の hepatocyte の定義づけ劇症肝炎のような，かなり組織の構といいますか，これが hepatocyte であるとい築が崩れた時には，こぼれて出て行くような

うのは，もう少し胎生後期の話になってきま可能性はあると思いますが，ちょっとわかりせんと，なかなかむずかしいのです．
α-fetoprotein 等 は 産 生 し て い る でません．あるいは逆に，そのような組織構築

北村が崩れたような状況下で circulating stem cell，しょうか．

例えば造血幹細胞などが組織に integrate し谷口

α-fetoprotein は産生しています．

座長

細胞の増殖は，例えば in vitro でどて，そこからの分化や増殖が起こるというような可能性はあると考えています．のくらいですか．

岡野栄之（大阪大） 脾臓は niche になって谷口非常によく増殖します．

いるかということで，脾臓以外の臓器，例え座長

そうしますと，今臨床応用を考えてば 肺 と か 他 に も epithelium-mesenchymal in88 第 117 回日本医学会シンポジウム

いらっしゃるということですが，そのくらい増殖能があっても，劇症肝炎や肝硬変の治療だ一時的なサポートをしている間に，例えばに使うにはむずかしいのでしょうか．

subacute な fulminant hepatitis のよ う な，う谷口

例えば劇症肝炎の治療を考えた場合まく再生をしない，再生不全が起こるようなに，一時的な肝機能の補助という意味で，こ劇症肝炎の治療に，こういう stem cell を移植の細胞を移植して肝機能を補助しようというすることによって，患者さんを rescue すると

考えは基本的にないと思います．なぜなら，いう考えはあると思います．

stem cell から機能を持 っ た hepatocyte が 分

座長

どうもありがとうございました．

化してくるまでに時間がかかるからです．た幹細胞と細胞療法 89