［II］組織・器官幹細胞：臨床応用への基盤開発（1）●幹細胞と細胞療法

3．造血幹細胞と血管内皮細胞の相互関係
須田

年生＊

神経幹細胞，内胚葉幹細胞，生殖幹細胞，あるいは間葉系幹細胞の解析が進むことにより，造血幹細胞の特徴が明らかとなってきた．その第一には，造血細胞はその寿命が著しく短く細胞交替が速いために，造血幹細胞では自己複製能の限界が観察されることである．すなわち，造血幹細胞移植を繰り返すと造血再構築能に限界がみられる．また，成体の造血幹細胞においては，胎生期幹細胞に比し，テロメア長が短縮していることが明らかにされている．このように真の自己複製に関して疑問が呈されているものの，幹細胞においては不均等分裂があり，未分化にとどまる細胞と分化に向かう細胞が生じることは事実である．第二には，精巣・腸管系など他の組織系列に比し，幹細胞の存在場所が造血組織において特定できないことである．第三には，造血細胞は，組織形成を必要とせず，個々の細胞で機能するといった特徴がある．これらの造血幹細胞はいかにして発生し，未分化のまま存在するのであろうか．このときどのような分子機構が働いているのであろうか．
造血幹細胞は，背側大動脈周辺の組織（P-Sp）および臍腸管膜動脈内に発生する．
造血幹細胞は，血管内皮細胞に接着して集塊をつくり，TIE 2 TEK，c-Kit，Flk-1受容体型チロシンキナーゼを発現している．
P-Sp 外植片をストロマ細胞と共培養することにより，造血幹細胞が血管内皮前駆細胞の増殖と連関して増殖するのが追跡できる．TIE 2 遺伝子欠損マウス胎児の P-Sp を培養すると，二次造血と血管新生がみられないことより，TIE 2 が，それらに不可欠であることが分かる．臍腸管動脈内にある造血幹細胞は，TIE 2 の結合因子であるアンジオポエチン-1 を加えると，インテグリンを介してフィブロネクチンに結合するようになる．アンジオポエチン-1 単独では増殖作用がみられないが，造血幹細胞はアンジオポエチン-1 と SCF（Stem cell factor）の存在下に増殖する．TIE 2 陽性細胞は，ストロマ細胞の下に潜り込み未分化状態を維持する．可溶性 TIE 2 受容体を過剰に加えて TIE 2 のシグナルを抑制すると，造血幹細胞の分化が誘導される．したがって，造血幹細胞におけるアンジオポエチン-1 のオートクラインループは，その自己複製に関与している可能性があると考えられる．一方，われわれは，造血幹細胞がアンジオポエチン-1 を介して血管新生に重要な働きをもつことを見いだしている．造血と血管内皮細胞の相互作用をもとに，幹細胞の組織形成における役割について議論したい．

Interaction between hematopoietic stem cells and vascular endothelial cells
TOSHIO SUDA Department of Cell Differentiation, Institute of Molecular Embryology and Genetics, Kumamoto University
すだ・としお：熊本大学発生医学研究センター造血発生分野教授．
昭和49年横浜市立大学医学部卒
業．昭和57年サウスカロライナ医科大学内科留学．昭和59年自治医科大学講師．平成４年現職．主研
究領域／血液学，細胞生物学．
＊

58 第 117 回日本医学会シンポジウム

Key words

アンジオポエチン
TIE 2 受容体
ヘマンジオブラストファミリーに分類される．i）VEGF（vascularendothelial growth factor）は，今や，VEGF，

1．造血細胞と血管内皮細胞の関係
造血は，卵黄の一次造血（primitive he-

VEGF-B ，VEGF-C ，VEGF-D ，VEGF-E およびPLGF（placenta growth factor）があげられ，gonad

それらの受容体としては， Flt-1（VEGFR 1），mesonephros）領域，胎児肝，骨髄で営まれる

Flk-1（VEGFR 2），Flt-4（VEGFR 3）がある．

二次造血（definitive hematopoiesis）へと移っ

ii）アンジオポエチンファミリーも 3〜4 種類

matopoiesis ） から ， AGM （ aortaていく．系統発生的にみても，サメ，ヤツメ存在するといわれ，受容体としては，TIE 2

ウナギなどは，性腺，腎，心血管などで造血TEK と TIE 1 が存在する．iii）14 種の分子種していると記載されている．したがって，血からなる Eph ファミリーのいくつかの受容管内造血というのは，まさに個体発生が系統体・その結合因子（ephrin）も，血管内皮細胞発生を繰り返していることになる．造血幹細に発現すると同時に造血幹細胞あるいは赤血胞がどのように発生し，移動し，造血を維持球前駆細胞に発現する（図 1）．本稿では，造していくかは興味深い問題である．近年，造血発生学と血管内皮細胞を主とする血管生物血幹細胞研究において，血管内皮細胞分化と学とがどのように出会っているのかを，TIEの関係が注目されている．その要因として以2 とアンジオポエチンの研究を中心に述べ，下の二点が考えられる．

さらに今後，どのような問題が残されている1）Hemangioblast という造血幹細胞と血管のかを検討したい．

内皮細胞の共通祖先細胞の存在が明らかにされたこと．心血管系は胎児で最初につくられる臓器で，ヒト内皮細胞は，1〜6×1013 個存在し，その面積は 1〜7 m2 と見積られている．こ

2．TIE 2 TEK と TIE 1 のクローニングと遺伝子破壊マウスの血管内皮細胞は，最初卵黄内に現れる An-

受 容 体 型 チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ TIE 1，TIE 2gioblast に由来する．最近 Isner のグループには，reverse transcriptase PCR 法 に よ っ て ク

よって，ヒト末梢血において血管内皮細胞のロ ー ニ ン グ さ れ た．1990 年 前 半 PCR 法 に1）前駆細胞が存在することが証明された ．わ

よって，ヘルシンキ大学 Alitalo らは，K 562

れわれも一個の AGM の細胞から，血液細胞という骨髄系白血病細胞株から新規受容体型と同時に血管内皮細胞の分化がみられること

チロシンキナーゼをクローニングし，TIE（ty-2）を証明している ．1,000 日以上の寿命があ

rosine kinase with Ig and EGF homology do-る血管内皮細胞と数日の寿命で入れ替わってmain）と名付けた3）（図 1）．次に，TIE と 50いる造血細胞が共通の細胞に由来するという％の相同性をもつ TEK という受容体が，血管のは，たいへん驚異的なことである．一方，内皮細胞あるいは造血幹細胞からクローニン酸素供給という最も基本的な生命維持機能か

グ さ れ る4）こ と に よ り，TIE は TIE 1，TEK

らみると，血球産生，それを運搬する血管系

は TIE 2 という名で使われることが多くなっの形成というシステムが，発生を一つにするた．というのは合目的的でもある．

TIE 2 と TIE 1 ターゲッティングマウスは，

2）血管内皮細胞の増殖分化に関与する分それぞれ胎生 9.5〜10.5 日と 13.5 日に出血死

子がクローニングされ，それらが造血発生にをする5,6）．血管系はいったん形成されるが，関与することが示 さ れ た こ と．こ れ ら は 3

突然の出血を招来することから，血管内皮細幹細胞と細胞療法 59

図1

血管内皮細胞と造血幹細胞に発現されるチロシンキナーゼ型受容体胞の統合性の低下が示唆された．さらにヒト骨髄系細胞のほかに，B 細胞，T 細胞に分化すにおいても，静脈奇形を示した小児に TEKることが証明された9）．以上のことから，TIEのキナーゼ領域に機能獲得型の異常があるこ

2 は，多分化能を有する幹細胞に発現し，その7）とが報告された ．TIE 2 機能獲得型の異常結合因子は，幹細胞に作用すると考えられた．

で，なぜ血管拡張を来すかは明らかでないが，TIE 2 は，血管形成，造血に重要な分子であ血管内皮細胞相互の細胞接着性の亢進が原因ると推定されながら，その機能解析は，結合ではないかと想像される．

因子がクローニングされるまで進まなかった．Yancopoulos らによって，TIE 2 結合因子

3．造血系における TIE 2 の発現とその結合因子アンジオポエチンのクローニング（アンジオポエチン-1，-2）が，secretion-trapexpression cloning という方法により同定され た10，11）．ア ン ジ オ ポ エ チ ン-1 と-2 は，約500 個のアミノ酸からなる 不 溶 性 蛋 白 で，われわれは，それぞれマウスとヒトの TIE

coiled coil ドメイン，fibrinogen 様のドメイン

2 に対するモノクローナル抗体 を 作 成 し，を有する．アンジオポエチン-2 は，アンジオFACS により，その発現を検討した．ヒト・マ

ポエチン-1 と約 50％ の相同性を有し，TIE 2

ウスともに TIE 2 は，造血幹細胞と一部の成シグナルに対して拮抗的に作用する分子とし

熟 B 細胞に発現していた8,9）．さらに，TIE 2て同定された（図 2）．アン ジ オ ポ エ チ ン-1＋の造血幹細胞をストロマ細胞と共培養した遺伝子破壊マウス，あるいはアンジオポエチ

り，放射線照射したマウスに移植したところ，

ン-2 トランスジェニックスマウスでは，血管60 第 117 回日本医学会シンポジウム

内皮細胞の増殖，管構造形成は問題ないが，①安定状態

内皮細胞周辺のマトリックスあるいは細胞とAng-1＞Ang-2の結合が弱く，このために血管の安定性が保たれず，出血死がみられた11,12）．

②萌出

4．アンジオポエチン―TIE 2 の血管新生
Ang-1＜Ang-2と二次造血発生における役割
一般に，血管形成は Risau らによって，あらたに血管が形成される（vasculogenesis）と形③分岐成された血管が伸長したり，分岐したりする（angiogenesis）の 2 段階に分けられる13）．これに対応して，in vitro における血管内皮細Ang-1＞Ang-2胞の培養でも，シート状に増殖する現象と発芽・遊走して，血管網をつくる現象がみられる（図 3）．前者には，VEGF が，後者には，アンジオポエチンが作用すると考えられる．
われわれは，免疫染色法により，AGM 組織④脱落
Ang-1＜Ang-2

および卵黄動脈の造血細胞と血管内皮細胞に，TIE が発現していることを見出した14）．
胎生 8.5〜9.5 日のマウス AGM 移植片をストロマ細胞の上で培養すると，血液細胞と血管内皮細胞の出現を認めた．この血液細胞を放射線照射マウスに移植したところ，造血再建能をもつ幹細胞を含むことがわかった．
また，

①安定状態

AGM から，ストロマ細胞上に PECAM-1 陽性内皮細胞が出現し血管網が形成された（図3）．しかし，TIE 2 ターゲッティングマウスにおいては，血管網の形成がなく血管新生の異常が示唆され，造血細胞の出現もなく二次造Ang-1＞Ang-2⑤再配列

血管内皮細胞ペリサイト

図 2 2 つのアンジオポエチンの相反する作用
アンジオポエチン―2 は，血管内皮細胞の周辺に細胞の少ない小血管に発現していて，周辺細胞（ペリサイト）の多い血管にはほとんど発現していない．このことから，アンジオポエチン―2 は，ペリサイトを血管から drop―off させる作用があると推定され，それは，血管の分岐開始に重要なステップアップであると考えられる．血管の分岐が進むと，アンジオポエチン―1 の作用により，再びペリサイトが血管内皮細胞を裏打ちするように並び， 血管が保持される．

幹細胞と細胞療法 61

explant
胎生8.5〜9.5日目のマウス胎仔

OP9P-Sp
培養4日目

RPMI 1640 10%FCS
SCF,IL-6,IL-7,Epo
2ME
造血幹細胞の集塊
血管床

Flk-1-Fc

P-Sp

P-Sp

培養4日目

培養14日目

TIE2-Fc

P-Sp
培養14日目

P-Sp

血管網

P-Sp

血管内皮細胞
造血幹細胞P-Sp

図3

胎仔期初期の造血幹細胞の発生・増殖，血管内皮の脈管形成・血管新生を支持する培養
胎生 8.5〜9.5 日目胚の P-Sp 領域を explant（外植体）のまま OP 9 ストローマ細胞上で培養することにより，図のように造血幹細胞，血管内皮細胞の発生が観察される．血管内皮細胞においては培養初期 1 層のシート様構造（vascular bed：血管床，脈管形成）を形成した後，その末梢側に細かな血管網（vascular network：血管新生）を形成する．
造血幹細胞は培養初期に vascular bed 上で増殖がみられ，その後血管網を経由して OP9 細胞上でコロニーを形成する．本培養中に可溶性のレセプターを添加することにより，培養中のリガンドを中和し，レセプターの機能を阻害することが可能である．
FCS：ウシ胎仔血清，SCF：幹細胞因子，Epo：エリスロポエチン，2 ME : 2―メルカプ
トエタノール．

血の欠損があることが示された15）．これに対成が抑割されるのを認めた．

応して，胎生 9.5 日の正常 AGM の共培養系

アンジオポエチン自体は造血幹細胞に対しに，過剰の可溶性 TIE 2 受容体を加えて，TIEて増殖作用をもたないが，インテグリンを介シグナルを阻止すると造血および血管網の形してフィブロネクチンへの接着を促進する．

62 第 117 回日本医学会シンポジウム

VEGFs

Vasculogenesis
Arnt

Endothelial Cell Progenitors
Flk-1,Flt-1,Neuropilin

Angiogenesis
Endothelial Cells
Tie-2,Tie-1

Hemangioblasts
Cloche

GATA-2,AML-1

Angiopoietins

Hematopoietic Cells

Hematopoietic Stem Cells

Primitive Hematopoiesis

Definitive Hematopoiesis

SCF

Scl/tal-1
Tie-2c-Klt

図 4 ヘマンジオプラストの血管内皮細胞と造血細胞への分化
造血幹細胞から産生されるアンジオポエチン―1 は，血管内皮細胞に作用して（パラクライン），血管新生を促進するとともに，幹細胞自身に作用して（オートクライン），幹細胞の未分化性維持に関与する．

図 5 造血幹細胞による血管新生作用
a）造血幹細胞と CD 4―Fc（対照）を含むマトリゲルをマウス腹腔内に包埋して 4 日後，血液を含む血管の増生を認める．
b）血管内皮細胞は，PECAM―1―FITC（緑色），造血幹細胞は PKH 26（赤色）で標識される．
c）
CD 4-Fc の代わりに，TIE―2―Fc を加えてアンジオポエチンのシグナルを抑制すると，マトリゲル内での血管新生が強く抑制される．
d）TIE―2―Fc 存在下では，血管内皮細胞（緑色）の増生を認めない．

幹細胞と細胞療法 63

この系に， 幹細胞増殖因子 SCF を加えると，や肝細胞に系統転換することが明らかにさ

SCF 単独に比し血液前駆細胞が著しく増殖れ，幹細胞の可塑性が議論されているが，幹するのが認められた．また，TIE 2 陽性造血幹細胞の存在する微小環境では，上記のような細胞は，ストロマ細胞の下に潜り込み未分化外的因子により，生体で最も必要とする系統状態を維持する．この系に可溶性 TIE 2 受容の細胞を供給する仕組みが働いているのかも

体を過剰に加えると分化が誘導される．したしれない．

がって，造血幹細胞におけるアンジオポエチ

今後，AGM 領域さらには骨髄において血液ン-1 は，造血幹細胞の自己複製に関与してい細胞と血管内皮細胞の共通祖先細胞の同定がる可能性が示唆される（図 4）．

進み，より詳細な解析が可能になるであろう．
Hemangioblast の分化において，現在，明らかにされているリガンド，受容体と転写因子を

5．造血幹細胞による血管新生の誘導

図 4 にまとめた．

転写因子 AML 1 の遺伝子破壊（AML-1  ）− −マウスでは胎生 12.5 日に造血不全を呈し出血死する．CD 31 染色により，前脳，心外膜の血管が棒状に伸展して血管網形成が低下していることを認めた．そこで，AML-1−−マウスの血管新生能を検討するため，9.5 日マウス
胚 の 傍 背 側 大 動 脈 領 域 の 中 胚 葉 組 織（PSp）を取り出し，OP 9 の上で共培養した．その結果，AML 1 の遺伝子破壊マウスでは，正常マウスに比し，血管内皮細胞の増殖はみられるものの，血管網の形成が著明に低下していることが分かった．また，予想通り，二次造血細胞の増殖はまったくみられなかった．
外から造血幹細胞を加えたところ，幹細胞の存在部位に血管新生の回復がみられた．幹細胞からアンジオポエチン-1（Ang-1）が産生されていることを見出したので，AML-1−−マウ
ス P-Sp 培養系に Ang-1 を加えたところ，血管新生がみられるようになった15）．これらのことから，AML-1−−マウスでは二次造血不全のため，血管新生異常が存在し，その原因としては造血幹細胞から産生される Ang-1 の欠損が考えられた．Ang-1 は血管周囲細胞から産生されるが，血管新生過程においては，造血幹細胞由来の Ang-1 が，血管内皮細胞の移動・再配列に重要な働きをしていることを示された（図 5）．最近，造血幹細胞が筋細胞
64 第 117 回日本医学会シンポジウム〔文献〕
1）Asahara T, Murohara T, Sullivan A, et al. : Isolation of
putative progenitor endothelial cells for angiogenesis.
Science 1997 ; 275 : 964―967.
2）Hamaguchi I, Takakura N, Suda T, et al. : In vitro hematopoietic and endothelial cell development from
cells expressing TEK receptors in murine aorta-gonad-mesonephros region . Blood 1999 ; 93 : 1549 ―1556.
3）Partanen J, Armstrong E, Makela TP, et al. : A novel
endothelial cell surface receptor tyrosine kinase withextracellular epidermal growth factor homology domais. Mol Cell Biol 1992 ; 12 : 1698―1707.
4）Iwama A, Hamaguchi I, Hashiyama M, et al. : Molecular cloning and characterization of mouse TIE andTEK receptor tyrosine kinase genes and their expression in hematopoietic stem cells . Biochem Biophys
Res Commun 1993 ; 195 : 301―309.
5）Dumont DJ, Gradwohl G, Fong GH, et al. : Dominantnegative and targeted null mutations in the endothelial receptor tyrosine kinase, tek, reveal a critical rolein vasculogenesis of the embryo. Genes Dev 1994 ; 8 :1897―1909.
6）Sato TN, Tozawa Y, Deutsch U, et al. : Distinct roles of
the receptor tyrosine kinase Tie―1 and Tie―2 in bloodvessel formation. Nature 1995 ; 376 : 70―74.
7）Vikkula M, Boon LM, Carraway KL, et al. : Vasculardysmorphogenesis caused by an activating mutationin the receptor tyrosine kinase TIE 2. Cell 1996 ; 87 :1181―1190.
8）Sato A, Iwama A, Takakura N, et al. : Characterizationof TEK receptor tyrosine kinase and its ligand angiopoietins, in human hematopoietic progenitor cells.
Int immunol 1998 ; 10 : 1217―1227.

9）Yano M, Iwama A, Nishio H, et al. : Expression andfunction of murine receptor tyrosine kinases, TIE andTEK in hemtopoietic stem cells . Blood 1997 ; 89 :4317―4326.
10）Davis S, Aldrich TH, Jones RF, et al . : Isolation ofangiopoietin-1, a ligand for the TIE 2 receptor , bysecretion-trap expression cloning . Cell 1996 ; 87 :1161―1169.
11）Maisonpierre PC, Suri C, Jones PF, et al. : Angiopoietin-2, a natural antagonist for Tie 2 that disrupts invivo angiogenesis. Science 1997 ; 277 : 55―60.
12）Suri C, Jones PF, Patan S, et al. : Requisite role ofangiopoietin-1, a ligand for the TIE 2 receptor, during
embryonic angiogenesis. Cell 1996 ; 87 : 1171―1180.
13）Risau W : Mechanisms of angiogesesis. Nature 1997 ;
386 : 671―674.
14）Takakura N, Huang X-L, Suda T, et al. : Critical role ofthe TIE 2 endothelial receptor in the development ofdefinitive hematopoiesis. Immunity 1998 ; 9 : 677―686.
15）Takakura N, Watanabe T, Suda T, et al. : A role of hematopoietic stem cells in promoting angiogenesis. Cell
2000 ; 102 : 199―209.の stem cell には TIE 2 は 出 て い な い と い うことですか．
須田

いいえ出ています．いわゆる幹細胞

traction の 1 3 から 1 2 は TIE 2 陽性です．
中内

しかし造血，長期骨髄再建能は TIE

2 陰性のものもあるというように publish されたと思いますが．
須田

それは TIE 2 陽性も陰性細胞も，幹細胞 fraction の両方にあるので，先生方が肝臓でやられたほどきれいには差がつきませんでした．しかしながら，CFU-S 等のデータか
らは，TIE 2 positive の方が，幹細胞機能がより高いということは一致していると思います．
中内

私 ど も も 本 当 に pure な stem cellで，angiopoietin-1 がかなり高濃度に出ていることは確認していますが，それ自体が本当にself-renew に効いているかどうかという，直接的なエビデンスはあるのですか．
須田

それは今お示しした，TIE 2 FC のキメラ蛋白で抑制がかかるデータだけです．や

質疑応

答

はり一番 む ず か し い の は，先 生 に は CD 34
negative の stem cell にも angiopoietin-1 が 出（平井） ありがとうございました．そ座長

れではご質問をお願いします．ているというデータを見せていただきましたが，ここに示しましたように，幹細胞自体が（癌 研 究 会） angiopoietin-2 は，
宮園浩平

angiopoietin を出していることです．ですか

ずっと angiopoietin-1 の antagonist とば か りら，外から加えてどうなったという現象がな思っていたのですが，angiopoietin-2 にも作用かなか見えにくいのです．しかも，constitu-があるとしますと，receptor は一緒と考えてtive active TIE 2 の遺伝子導入では，細胞が基よろしいのでしょうか．

質に強力に接着するので，そうなると増殖ど

須田

今のところは一緒とされていますころの話ではないのです．ですから細胞接着が，angiopoietin-1 は TIE 2 receptor をリン酸というのは，適量というものがあるのではな化させる，angiopoietin-2 はリン酸化誘導がないかと思っています．

いとか，angiopoietin-1 のリン酸化誘導を止め

中内もう一つうかがいたいのですが，るとかいわれていますが，この現象がなかな

erythroid progenitor と Eph―4 が 出 て い る とか説明できませんので，第 3 の receptor が存いうことですが，そこから入るシグナルは何在する可能性はあると思います．

をしているとお考えですか．

（筑波大） fetal liver では TIE 2 が中内啓光

須田

まだそれが増殖のシグナルに伝わる出ることはわれわれも確認していますが，先かどうかはわかりません．Eph の下流の分子生方の報告 に よ る と，adult の bone marrowはまだよくわかっていません．ただそれも接幹細胞と細胞療法 65

着かもしれないのです．actin 等の cytoskele-た．そうしますと，もし本当に一部の stem

ton の遺伝子につながってくるという話もあcell だけが使われているのであれば，3 ヵ月りますので，この EphB4，エフリンの刺激単たっても4ヵ月たっても，5％の細胞しかBrdU

独 で は 赤 血 球 は ふ え ま せ ん．必 ず erythro-を取り込まないはずですが，大体 4 ヵ月やりpoietin がなければ駄目なのです．

ますと 8〜9 割の細胞が取り込みますので，中内

何か additive な effect があるのでは一部の細胞だけに使われているのではなくないでしょうか．たとえば survival とか……．て，全体が非常にゆっくりと，おそらく 3〜4須田

それに効いているのではないかという仮説です．
（大阪大） ナイーブな質問で申し岡野栄之

週間に 1 回の頻度で分裂して，造血に関与しているのだと思います．
岡野造 血 能 再 建 の activity は ど ち ら に

わ け あ り ま せ ん が，stem cell か ら transient

あって，どちらにないのでしょうか．transient

amplifying cell に行き commited cell に行った

amplifying cell はあるのですか．
もし自己複製というシェーマを示されたと思いますが，要をしないのであればどの程度……．

す る に lineage commitment の 前 に transient

中内

今の実験では，その造血幹細胞が分amplifying cell と い う state を と る と い う こ裂したかどうかが見られるだけで，本当にそとは，要するにいわゆる quiescent の状態かの時に asymmetric な分裂をして，片方が造血ら transient amplifying cell に行くシグナルはに関与したかどうかまではわかりません．で何でしょうか．それは多分化能を保ったまますから，先生のご質問に厳密な意味でお答え自己複製しないということなのでしょうか．

することはできないと思います．

須田

それも大きな問題で，大半の幹細胞

須田

ずっと以前に，ヒト骨髄移植で見たは dormant な状態にあって，ある時に activeことがあるのですが，幹細胞を移植しますと，になるわけです．造血幹細胞では，例えば CDまず最初に動員されるのは myeloid progeni-

34 negative な 細 胞 は dormant で，あ る 時 にtor などで分化が進むと思います．
まだ感染防

positive になって動員されるのではないか，御体制がまったく敷かれていない状況で

ま た CD 34 positive に な っ て も CD 34 nega-

self-renew しているというようなことはない

tive になったりと，dormant と active を繰りと思います．
やはり動員がかかるのですから，返すというモデルもあるのですが，いつ，いいったんは分化に向かうと思います．その間かなる時に，眠っている幹細胞が使われ始め未分化細胞をだんだん蓄積するのではないか

るかということはわかっていません．と思っています．

岡野

それではマーカーの違いとしては，CD 34 くらいしかないのですか．
須田岡野

神 経 系 で す と transient amplifying

cell は neurosphere は作りませんし，あれはそうですね．CD 34 negative が本当stem cell ではないということは，かなりいわに全部眠っていて，CD 34 positive が全部起きれていまして，reversibility があるかどうかはているということはいえるかどうか，中内先だれにもわからない状況です．

生にコメントをお願いしたいと思います．
中内座長

そろそろ時間になりました．続きは

私どもは 3〜4 ヵ月にわたってマウ総合討論のときにお願いしたいと思います．

ス に BrdU を 投 与 し，経 時 的 に stem cell を須田先生，どうもありがとうございました．

採ってきて BrdU の取り込みを調べてみまし

66 第 117 回日本医学会シンポジウム