lSSN O304−2146

Japanese

Joumalof

TrbpicalMedicine

Hygiene昭和59年9月15日

第12巻第3号

容

内

原

and

著

インドネシア共和国北スマトラ州アサハン地域における腸管寄生蠕虫調査（英文）…………・…・…・……

・…・い・・ 一貢睦澤

教眞， Sudi

Sinulingga

139−148

第25回日本熱帯医学会総会講演抄録

目

次…・…一……

・・149−153

一般講演・・………………・……一・…・・…

・

・

■

・

一

英文抄録・…………・……・・………

会

・・154−179

・・181−226報

昭和59年度第1回幹事会記録一・・……・・…

＿＿ ．．．．．．．．

投稿規定

日熱医会誌
JapanJ．T．M．H．

日本熱帯医学会

・

227−229・Japan. J. Trop. Med. Hyg.. Vol. 12, No. 3, 1984 pp. 139‑148

1 39

PRELIMINARY SURVEY ON INTESTINAL HELMINTHS IN
ASAHAN AREA OF NORTH SUMATRA, INDONESIANORICHIKA H. KUMAZAWAI AND SL 1 SlNULlNGGA2
R***i+*d O*t'b** Io 1983/A*'*pt*d A gust 20 1984

Abstract: Surveys on human intestinal helminths were conducted in Asahan
Regency ofNorth Sumatra, Indonesia, during a period between May 1979 and July 1 980.
The overall positive rates ofeggs in fecal specimens were 77.5 per cent for Ascaris lumbricoides,

88.2 per cent for Trichuris trichiura and 60.5 per cent for hookworms. Necator americanus
and Ancylostoma duodenale were detected in 75.7 and 29. I per cent of247 hookworm positive

fecal specimens, respectively. Positive rates of eggs were correlated negatively in A.
lumbricoides and positively in hookworms with ratios of rice field area to the gross area ineach village. Candidates breeding pigs harbored higher rates of hookworm eggs thanthose without pig, while the former harbored lower rates of eggs of A. Iumbricoides and T.
trichiura than the latter. Positive rate ofA. Iumbricoides eggs was lower in rice farmers thanthat in fishermen while that of hookworm eggs was higher in the former than that in thelatter. Contribution of sources of drinking water to positive rates of 1‑he three
predominant helminth eggs was not clear.

INTRODUCTION
Asahan Regency is a typical rural area of North Sumatra Province, Indonesia,
facing Malacca Strait. As social status of this area is changing with the constructionof an aluminum smelter plant, unfavorable impacts on health have been warned.
Thus, it was requested to obtain basic data on enteric diseases among inhabitants in

Asahan area.
In recent years, some intestinal parasites were detected in northern Sumatra
including a village of Asahan area (Cross et al., 1976; Stafford and Joesoef, 1976).
Some trials on treatments of Ascaris and hookworm infections in this area were also

reported (Kosin, 1 975). However, prevalences of helminths in area around thesmelter plant are not yet elucidated.
Surveys on intestinal helminths were conducted at six villages selected as socialand geographical representatives of the rural area in Asahan Regency surrounding
the smelter site. Names of villages and periods of the surveys are as follows ; Sei

Buahkeras (surveys were conducted between May‑July 1979), Limau Sundai(August‑December 1 979), Perupuk (February‑March 1 980), Guntung (March‑May
This study was supported by the Ministry of Health, Republic of Indonesia, and by the Japan
International Cooperation Agency (OTA‑43).
1 The Institute of Medical Science, The University of Tokyo, 108, Japan (Present address : FacultyofAgriculture, Tottori University, Tottori, 680, Japan)

2 Regional Health Laboratory in Medan, Medan, Indonesia (Director: R. Sudiranto)

1401980), Medang (AprillJune 1980) and Tanjung Muda (July 1980).
This paper describes our findings on risk factors, especially concerning to area ofrice field, breeding pigs and kinds of water source, in relation to human intestinal

helminths in this area, which might be basic informations to control helminthiases
in North Sumatra.

MATERIALS AND METHODS
Study area : The area is located at 3'20! Iatitude north and 99'40 ' Iongitude
east in a low flat land facing Malacca Strait (Figure 1). This area is included in a
climate area of tropical rain forest which has no distinct dry and rainy seasons.

Annual rainfall is I ,400‑1,800 mm. Estimated populations of Sei Buahkeras,
Medang, Limau Sundai, Tanjung Muda, Perupuk and Guntung are about 2,000,
2,900, 3,000, 1,350, 6,000 and 2,500 respectively. Christians are about 95, 70 and 28

per cent of inhabitants in Limau Sundai. Sei Buahkeras and Tanjung Muda respec‑tively. The others are Moslems. Inhabitants are mainly engaged in rice farming,
while majority in Perupuk and parts in Sei Buahkeras and Medang are engaged infishery. There are three kinds of drinking water sources, deep and semi‑deep wells,
shallow wells and rivers. A deep well with about 250 m in depth is seen in Guntung.
Five semi‑deep wells with 70‑90 m in depth are seen in Sei Buahkeras, Medang andPerupuk. Inhabitants having semi‑deep wells sometimes utilize shallow wells or
rivers when water spouting from the semi‑deep wells is not enough. Toilets recom‑.l/ :l t::j:‑=,̲

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INDEX::J:; Swamp areai‑ Rice field

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' 1'Tflrrf. '.l!‑::‑‑‑‑

O 1 2 3 4 5km 'f? Plantation area frubber and Palm] ¥ .,Figure 1..̲. To Kisaran

Location map of the pilot area.

()

Jakarla141

mended by Government (swan neck type) are seen at a few houses in each village.
Most inhabitants utilize no toilet but excrete in bushes or rivers around premises.

They breed many chickens and few ducks, goats, buffaloes or cattle. Someinhabitants breed pigs, who wander around premises, eat and disseminate humanfeces, excrete freely and contact with children in the daytime. They are kept in cages
in the nighttime.

Methods of examination : Fecal specimens were collected from candidates in thesix villages, carried to Regional Health Laboratory in Medan and examined by
Kato's thick smear technic (Komiya et al., 1960) and flotation on saturated saline(Hunter et al., 1967). Species of hookworm larvae were identified using test tube
cultivation method (Sasa, 1969) for a part of hookworm egg‑positive specimens.
Informations on social factors for each individuals were obtained by hearing fromthem. Results were shown in age groups of every two years old for children, while
those obtained from age groups of 1 5 years old or more were shown in two groups,
l 5‑30 and 3 1 years old or more because of no reliable informations on exact age ofadults and of insufEcient number of specimens. Contributions of the epidemiologicalfactors to positive rates of each helminth were evaluated using X2‑test.

RESULTS
Fecal specimens collected from I ,784 candidates in the six villages was examinedand eggs of helminths were detected as listed in Table I . The overall positive rates
ofeggs were 77.5 per cent for Ascaris lumbricoides, 88.2 per cent for Trichuris trichiura and60.5 per cent for hookworms. Specimens collected from 1,741 candidates (97.6 percent of total candidates) harbored at least one kind of helminth egg. Twenty eightin 43 helminth‑free candidates were two years old or below. The overall coverageof candidates was I O. I per cent of total populations in the six villages.
Table I Eggs of intestinal helminths detected in six villages

Village

NumberHelminthof Trichuris
verrmculans
candidates
lumbricoides trichiura nana
' 'Ascaris Hookworms Hymenolepis Enterobius

Sei Buahkeras

235

181 (77.0)*

200 (85.1)

l02 (43.4)

O

Medang30 1

231 (76.7)

278 (92.4)

235 (78.1)

1oLimau Sundai512

383 (74.8)

447 (87.3)

406 (79.3)

loTanjung Mudal 66

105 (63.3)

136 (81.9)

133 (80.1)

oPerupuk296274

249 (84. l)

260 (87.8)

l 17 (39.5)

OO

233 (85.0)

253 (92.3)

87 (31.8)

2l,784 1 382 (77.5) 1,574 (88.2) 1,080 (60.5)

4GuntungTotalo2:t Number in parentheses is a positive rate in per cent.

Table 2 shows results of cultures of some of hookworm positive fecal specimens,

in which dominant hookworm species was Necator americanus, while Anqylostoma
duodenale was less prevalent in this area.

142
Table 2

Results of culture against the feces of hookworm‑ova positive

Village

Ancvlostoma Necator
duodenale americanus

stercol aris

Medang35*

96

Limau Sundai

14

22

4
o

Tanjung Muda

16

50
4

Perupuk

Total

Strongyloides

l 35 ( 126 cases)

36(34 cases)2

68(61 cases)o5(5 cases)(21 cases)

Guntung

6

15

o

21

Total

72

187

6

265 (247 cases)* Number of positive specimens.

Figure 2 shows overall positive rates of three predominant helminth eggs indifferent age groups in the six villages. Most candidates in the age groups of three
years old or more harbored eggs of A. Iumbricoides and T. trichiura, though positive

rates of hookworm eggs were delayed to reach the highest level in the age groupof 1 1‑12 years old. Positive rates of A. Iumbricoides eggs fell in the age groups ofl 5‑30 years or more. Positive rate of hookworm eggs fell in the age group of 1 5‑30
years old and increased again in the age group of 3 1 years old or more.
Positive rates of the three predominant helminth eggs related with ratios of rice
field area to the gross area in each village are shown in Figures 3, 4 and 5. Positive
rates ofA. Iumbricoides eggs were negatively correlated with the ratios (r=‑0.836,
Positiverate('/.)

Positive100

rate[o/.)..' ‑‑‑ ‑‑. . ..‑‑ .‑...

' . +･ ･50

100

Guntung,,
PerupukeSei.

!} ･¥l .l' .
/Buahkeras

Limau SundaieTanjung Muda

¥ //Mel.edang

50

/

: /

t‑' Ascaris lumbricoides

j o‑"c Ti huris trichiurae‑‑e Hookworms

O1 3 5 7 9 11 13 15 31
2 4 6 8 10 12 Ik 30
Age group (year)

Figure 2 Positive rates ofthree predominanthelminth eggs in the six villages.

50 1 OO

Ratio of rice field areo to the grossarea in each village (olo)Figure 3

Correlation between positive rateof Ascaris lumbricoides eggs andVertical bars indicate 95 per centratio of rice field area to the grossreliable range of rates.

area in each village.
r = ‑0.836, t= 5.048.

143

Positive

Positive

rate (olo)rateP/o)100

100

Needang

GeuntungePerupuk SeieBuahkeras

eLimau SundaieTanjung Muda

Limau SundalTanjung Muda
Medangcp e

Sei

50

50

BuahkerasePereupuk

Gun'tung

50 1 OO

Ratio of rice field area to the grossarea in each village(o/o)

50 100

Ratio of rice field area to the grossarea in each village(ola]Figure 4 Correlation between positive rate

Figure 5 Correlation between positive rateof Trichuris trichiura eggs and ratioof hookworm eggs and ratio ofof rice field area to the gross area

rice field area to the gross area inin each village.

each village.

r= ‑0.356, t=2,967.

r=0.925, t=5.361.

Positive

Positive

ra te fo/o )rate(o/.]

100

100

‑+‑

,,

'b

, ‑‑‑

Ilb

,,

,,

,

/

‑
l
l

/

ll

...

l
,
l

,

50

50

l
f
t
,
t
,

,
,

‑･ Community breeding pigs･‑e Community breeding pigsc ‑<) Community having no pig

ol2

3 5 7 9 11 13 15 31
4 6 8 10 12 Ik 30

o･‑c Community having no pig

ol2

Age group(year)

Age group (year)

Figure 6

Positive rates of Ascaris lum‑bricoides eggs in communities

3 5 7 9 11 13 15 31

4 6 8 10 12 14 3'O

Figure 7

Positive rates of Trichuris trichiura

eggs in communities breeding pigs

breeding pigs and that having no

and that having no pig. Vertical

pig. Vertical bars indic te 95

bars indicate 95 per cent reliable

per cellt r liaple range of rate ,range of rates*

144

t=5.048) (Figure 3). Positive rates of T. trichiura eggs were high and not so muchvaried among villages with different rice field areas (r= ‑0.356, t=2.967)(Figure 4) . Positive rates of hookworm eggs were positively correlated with theratios (r=0.925, t=5.361) (Figure 5).
Positive rates of A. Iumbricoides and T. trichiura eggs were not different significantly

among candidates breeding pigs and those having no pig in most age groups (Figures 6
and 7), while those of 1]ookworm eggs were higher significantly in those breeding pigs
than in th0 c having no pig in age groups of 5‑6 years old or more (P<0.05) with the
exception of an age group of 13‑14 years old (Figure 8).
r.* : *=ve'
r‑. t e (e/o )

OO

f !"I

+"f ¥'bl "Il‑ ,b ,,}

50

Nf'' e community breeding pi9s
! o‑=10 community hclving no piglO 1 3 5 7 g 11 13 15 31
2 4 6 8 10 12 14 30
Age group (ye̲ar)

Figure 8 Positive rates of hookworm eggs in communities
breeding pigs and that having no pig. Vcrticalbars indicate 95 per cent reliable range of rates.

Positive rates of the three predominant helminth eggs related with rice field, pig

and drinking water source are summarized in Table 3. The rates of contributionsof rice field and pig to the positive rate of A. Iumbricoides eggs were similar level (X2=

19.62 and 1 7.03, respectively). Positive rate of T. trichiura eggs was lower in those
breeding pigs than those without pig (P<0.01 ). However, contribution of pig to thepositive rates of A. Iumbricoides and T. trichiura eggs was not clear in most age groups
as seen in Figures 6 and 7. Positive rates of A. Iumbricoides and T. trichiura eggs in
those utilizing deep and semi‑deep wells (83.5 and 94.40/0' respectively) was signi‑
ficantly higher than that in those utilizing shallow wells (76.5 and 86.6

, respectively)(‑P<0.05 and P<0.001 , respectively), while that of hookworm eggs in those utilizing
deep and semi‑deep wells (36.50//o) was significantly less than that in those utilizing

shallo v wells (65.20/0) (P<0.001). However, the differences in the positive rates
between those with different water sources were not significant when backgrounds
in rice field and pig w re matched (data not shown). The positive rates of the threc

1 45

Table 3

Positive rates of three predorninant helminth eggs related with three epidemiologicalfactors

Community

Trichuris trichiura

Ascaris lumbricoides

Hookworms

Rice field

719j979

Large
Small

6631805(73.4)*

86 1 j979(87.9)

774/979(79. I )(82.4)

7 1 31805(88.6)

306/805(38.0)

Breeding pigs

Yes5631774 (72.7)

665/774 (85.9)

579j774 (74.8)

No819jl,OIO (81,1)

909/1,010 (90.0)

501/1,010 (49.6)

238j285 (83.5)

2691285 (94.4)

1 041285

1,080/1,412 (76.5)

l,223jl,412 (86.6)

64/87 (73.6)

82j87 (94.3)

Source of drinking water

Deep and semi‑deep wells
Shallow wellRiver

(36.5)

921/1,412 (65.2)

55187(63.2)* Number positive/number examined (positive rate in per cent).
Table 4 Contributions ofrice field and pig to positive rates ofhookworm eggs

Breeding pigs

Total

Area of rice field

Yes

No

Large
Small

491/615 (79.8)*

2831364(77.7)

7741979(79.1)

88jl59 (55.3)

2 1 8/646(33.7)

306j805(38.0)

Total

579j774 (74.8)

501!1,010 (49.6)

l,080jl,784 (60.5)* Number positivejnumber examined (positive rate in per cent).

helminth eggs in those utilizing river waters were not different significantly with theother two groups.

Contributions of rice field and pig to positive rates of hookworm eggs
were analyzed in details (Table 4) . The rates were significantly higher in area withlarge rice fields than in area with small rice fields regardless of breeding pigs (P<0.00 1 ) . In area with large rice fields, the rates were not different significantly between

those breeding pigs (79.80/0) and those having no pig (77.70/0)' However, in areawith small rice fields, the rate was significantly higher in those breeding pigs (55.30/0)

than in those having no pig (33.70/0) (P<0.001).
Positive rates of three predominant helminth eggs related with occupations ofcandidates are shown in Table 5. The positive rates were compared among thosehaving no pig because no candidate other than rice farmers bred pigs. Positive rateof A. Iumbricoides eggs was higher significantly in fishermen (92.60/0) than those in rice

farmers (80.80/0) (P<0.05) and in marchants (63.60/0) (P<0.01). Positive rates ofT. trichiura eggs were not different significantly among those in rice farmers, fishermen

and marchants. Positive rate of hookworm eggs was higher in rice farmers (52.60/0)
than that in fishermen( 23.50/0) (P<0.001) while that in marchants waS nQt different1 46

Table 5Contribution of occupations to positive rates of helminth eggs*

Occupation * *Ascaris lumbricoides

Trichuris trichiura

Rice farmer

727/900

8 1 4/900(90.4)

473/900(52.6)

Fisherman

75/81(92.6)

7 1 18 l(87.7)

1 9/8 l(23.5)Marchant

14j22(63.6)

19/22(86.4)

9j22(40.9)

Teacher

317

Total

(80.8) * * *819/1,010 (81.1)

517
909/1 ,OIO (90.0)

Hookworms

0/7

501/1,010 (49.6)* Positive rates were compared among those having no pig because no candidate

other than rice farmers bred pig.

** The results include those of all fami]y members.

*** Number positvejnumber examined (positive rate in per cent) .

significantly from those in rice farmers and flshermen. Specimens taken fromteachers were not enough to analyze.
Positive rates of the three predominant helminth eggs were not different
significantly among males and females in most age groups.
DISCUSSION

Surveys on human intestinal helminths were conducted in rural areas of North
Sumatra. At least one kind of helminth was detected in fecal sD^ ecimens from 97.6
per cent of candidates, in which A. Iumbricoides, T. trichiura and hookworms werepredominant.
Prevalence of hookworm eggs was positively correlated with ratios of rice fieldarea to the gross area in each village, which seems to be reasonable concerning themode of transmission of predominant hookworm larvae being Necator americanus.
The augmentation of the positive rates of hookworm eggs by breeding pigs wasapparent in areas A'ith small rice fields but not in areas with large rice fields, whichsuggests that factors related with rice farming in large rice fields, but not in small
rice fields, might overcome the contribution offactors related with breeding pigs.
The role of pigs to helminth infections were suggested by Jones (, 1 976) as that

hookworm eggs might dug up with buried human feces and destroyed in pig intestinein Papua New Guinea, based on the fact that eggs of cat hookworm, Ancylostoma
tubaeforme, but not eggs of Ascaris suum, were largely destroyed in pig intestine. In

North Sumatra, candidates breeding pigs harbored higher rates of hookworm eggs
than those without pig, while the former harbored lower rates of eggs of A. Iumbricoides

and T. trichiura than the latter. If pigs eat these worm eggs in North Sumatra,
inhabitants breeding pigs should harbor lower rates of hookworm eggs and should
not harbor lower rates of A. Iumbricoides and T. trichiura eggs, which is inconsistent with

our observations. Thus, further investigations would be necessary to elucidate
sources and routes of these worm infections in this area.
Cross et al. (1976) reported intestinal parasites for those living in North Sumatra,in which p,ositive rates of hookworms were 82 and 77 per cent in two villages where147

ratios ofrice fleld area to the gross area were more than 60 per cent and inhabitants
bred pigs, 44 per cent in a village where the ratio was less than 30 per cent and inha,b‑itants bred pigs, and 10 per cent in a village where inhabitants bred no pig. and they
had no rice field because this area was a small town along the coast. Their observa‑
tions seem to be consistent with our observations because social and geographicalconditions of their areas were similar to those of our pilot areas.
Contributions of rice fleld areas to positive rates of A. Iumbricoides and T. tri‑chiura eggs seem to be less than that of hookworms. High positive rates of A. Ium‑
bricoides and T. trichiura eggs regardless ofrice field area are consistent with observationsof Cross et al. (1976) and Stafford and .Joesoef (1976) in Sumatra Island. Oral
entrance nature of infection of these worm eggs and high positive rates might overcome
the contribution of rice field area.

Differences in positive rates of the three predominant helminth eggs among thoseutilizing different water sources were also observed. However, the contribution ofwater sources seems to be less than those of the other two factors, rice field andpig, because most of the rates were not different signiflcantly among those having thesame epidemiological backgrounds other than different water sources.
Positive rates ofthe three predominant helminth eggs related with occupations ofcandidates (Table 5) seem to be consistent with our considerations on the contributionsof rice field and pig and also with results of Cross et al. (1976). Positive rate ofhookworm eggs was higher in rice farmers than in fishermen. Positive rate of A.
lumbricoides eggs was lower in fishermen than in rice farmers. Positive rates of T.
trichiura were not different significantly among those having three main occupations.

ACKNOWLEDGEMENTS
The authors wish to express our gratitude to all staff members of parasitology
and microbiology sections of Regional Health Laboratory in Medan for their technicalcooperation and to all members who concern to the Asahan health pro.ject. We
wish to express our gratitude to all Japanese experts for their kind cooperation.

REFERENCES
1) Cross, .J. H., Clarke, M. D., Cole, W. C., Lien, J. C., Partono, F., Joesoeff, A. and Kosin, E. H.

( 1 976) : Parasitology survey in Northern Sumatra, Indonesia, J. Trop. Med. Hyg.. 79, 123‑1312) Hunter, G. W., Frye, W. W. and Swartzwelder, J. C. (1967): A manual of tropical medicine,
4th ed., 839‑840, W. B. Saunders Co., Philadelphia
3) Jones, H. I. ( 1976) : The role of pigs in the dissemination of Ascaris and hookworm infections in

Papua New Guinea, Papua New Guinea Med. J., 19, 153‑155
4) Kdmiya. Y., Kobayashi, A., Kumada, M.. Kutsumi, H. and Kqjima. K. (1960) : Study on
thick smear technic with cerophan cover for stool examination for helminth ova, Japan. J.
Parasitol., 9, 61‑68

5) Kosin, E. ( 1975) : Treatment trials of ascariasis and hookworm infection in North Sumatra,
Hlth. Studies Indonesia, 3, 17‑20
6) Sasa, M. ( 1969) : Textbook ofmedical zoology

3rd ed.

278‑281

Igaku ShQin Co.; Tokyo

148
7）

staflbrd，E・E・and

Joesoe￡A．（1976）：Intestinal and blood

Takengon，Aceh Province，sumatra，Indonesiaフsouthcast
518−522parasites of man in

Asian

Bireauand

J．TroP．Med．Pub．Hlth．，7，

インドネシア共和国北スマトラ州アサハン地域における腸管寄生蠕虫調査熊澤教眞1・Sudi

Sinulingga2

インドネシア共和国北スマトラ州アサハン県の6力村で，1979年5月より1980年7月まで，糞便検査による住民の腸管寄生蠕虫調査を行った。検査にはセロファン厚層塗抹法，飽和食塩水浮游法及び試験管内濾紙培養法を用いた。被検者1，784名のうち虫卵陽性率は，回虫卵77．5彩，鞭虫卵88．2％，

鉤虫卵60．5％で，他に倭小条虫卵と嶢虫卵がおのおの4名と2名より検出された。回虫卵の陽性率は〔水田面積／総面積〕比（水田占有率）の高い村が低く，鉤虫卵の陽性率は水田占有率の高い村が高い値を示した。また豚を飼育する地域では，豚を飼育しない地域に比較して回虫卵の陽性率が有意に低く，鉤虫卵の陽性率が有意に高かった。水田占有率の高い村では，豚の飼育の有無により鉤虫卵陽性率に著しい差は見られなかったが，水田占有率の低い村では，住民の鉤虫卵陽性率は豚を飼育する住民の方が，豚を飼育しない住民に比較して有意に高かった。回虫卵，鞭虫卵，鉤虫卵の陽性率は深井戸，浅井戸及び川の水を飲用に供している住民の間で，有意差が見られなかった。

1東京大学医科学研究所細菌感染研究部（現所属：鳥取大学農学部獣医学科）

2メダン衛生試験所

日本熱帯医学会雑誌 第12巻 第3号 1984

第25回

日本熱帯医学会総会講演抄録（2）

日場長
期会会
目

149−179頁

昭和58年10月17日（月）一19日（水）Lux

Auditorium（豊中市）

阪大微生物病研究会理事長

N．Somboon，K．Watana，A．Sompop

次（タイ国公衆衛生省・ウイルス研）

B．Damrong

シンポジウム（前号掲載済）
1国内外におけるマラリアの現状と対策
司会

奥野

3

沢井

芳男

（プラポクラオ病院）

良信，深井孝之助（阪大・微研）1977−1982年のタイ国におけるポリオの血

清疫学調査

大鶴 正満 （琉球大・医・寄生虫）

II毒蛇咬傷における蛇毒の毒性因子の役割
司会

深井孝之助

（日本蛇族学術研）

山田

光昭，加藤伸之輔，渡理

英二，

鈴木

博，草間みちる，山地

幸雄

三木

康

（日本医大・微生物）グループ報告（前号掲載済）

Jirapom（山梨県衛研）Supawadee，Somboon（チェンマイ大）タイ国北部における日本脳炎のウイルス学的疫

4

学的調査

司会

大谷

Suprasert

タイにおけるデング出血熱患者血清の免疫

酵素測定法

明

分藤 桂子，五十嵐，（予研・ウイルスリケッチア）

章（長崎大・熱帯医研・ウイルス）

一
1

般

請

演

5マラウイ共和国における供血者血液のHBs抗原一抗体に関する調査

高岡千代子，菊池 典子

ホルマリン固定赤血球のアルボゥィルス（元青年海外協力隊員）

HAおよびHI試験への応用
A．Sompop，N．Somboon，1．Wallapa，

鹿住砧子（上尾中央総合病院）

P．Krawan，C．Kanai

赤尾 信吉（防衛医大・寄生虫）（タイ国公衆衛生省医科学局・ウイルス

6

いて

研）

B．Damrong

海老沢 功（プラポクラオ病院）

伊藤 宝務

2

発展途上国における肝炎罹患の危険性につ（東邦大・医・公衆衛生）

大谷 杉士，大利 昌久，表（武田薬品・中研）

光代，

タイ国チャンタブリ県における日本脳炎ウ佐藤 幸子 （日本青年海外協力隊診察室）

イルスの疫学的調査一飼育豚血清中のJE−

小原

7

HI抗体の検出伊藤 宝務（武田薬品・中研）

宮崎 武夫，長谷川恩（チャンタブリ計画本部）

博（金沢医大・医動物）

コレラ菌型別用ファージの近縁性検討とヶニア国分離エルトールコレラ菌の型別

内藤 達郎，重野 秀明，森賢治

（長崎大・熱帯医研・病原細菌）

150

8

インドネシアにおける土壌中嫌気性菌の研（鹿児島大・医・第二病理）

究

奥脇

上山

義行，矢内 寿恵，豊経子

田辺藤田紘一郎，月舘 説子，黒川 憲次

9（順天堂大・医・衛生）朝倉健夫（日本熱帯医学協会）（東邦大・医・公衆衛生）

17 4例のマラリア患者に対するST合剤の臨
床効果

ヶニア共和国，クワレ地区におけるビルハ

山口

恵三，賀来

満夫，松瀬真寿美，

草野

展周，重野

芳輝，斉藤

嶋田

雅暁 （長崎大・熱帯医研・寄生虫）

原

耕平

平田

瑞城

John

Ouma

（久留米大・医・寄生虫）18

精製虫卵抗原を用いた日本住血吸虫症の今井

田辺（長崎大・医・第二内科）

名古屋市における広東住血線虫の分布状況
真喜屋 清（名大・医・医動物）

鬼武（名大・医短・生物）

一夫

19 近畿地方におけるブラックバス（オオクチ
真，石井

淳一

明，堀井洋一郎，バス）の寄生蠕虫類の調査（宮崎医大・寄生虫）

正垣

11ELISA法によるマラリア抗体の検出渋谷

20

敏朗，亀井喜世子
清勝

幸男（京大・医・病理）

マウス内被嚢旋毛虫幼虫（USA

哲雄，神原

の効果

（東大・医科研・内科）

牧純，中島美佐保，柳沢十四男

廣二，中林

敏夫

（北里大・医・寄生虫）21（阪大・微研・原虫）

物学的ならびに疫学的研究
錬蔵（聖マリアンナ医大・病害動物）

Bithionolによるσiαr4如10〃め1∫oの呼吸阻害と致死活性について

13東アジア地域におけるマラリア媒介者の生神田

strain）に対するフルベンダゾールとメベンダゾール（帝京大・医・寄生虫）

マラリア原虫の検出法に関する検討

柳厚，

一市内のネズミ集団における感染率

ELISA

14

（東大・医科研・寄生虫）

ルッ住血吸虫症の流行像について大橋

12（東大・医科研・感染症）

海老沢 功（D．V．B．D．，Ministry ofHealth，Kenya）

10

清勝

田中寛

（長崎大・医・医動物）雅俊（上山内科）

16三日熱マラリアの再発した2症例（女子栄養大・微生物）

杉山

達典

22

小林

正規，竹内

勤，河村

康司，

浅見

敬三

（慶大・医・寄生虫）

藤原

達司（慶大・電顕研）

グアテマラ・ブユ撲滅対策地区住民のオン

インドネシア共和国北スマトラ州の1海岸

コセルカーミクロフィラリア陽性率の4年

村落における・4nqρh8185躍n吻Jcμs幼虫の間における変動

生態学的研究伊藤洋一（北里大・医・寄生虫）多田功（熊本大・医・寄生虫病）

林

滋生（予研・寄生虫）

今井長兵衛（大阪市環科研）

高木 正洋（三重大・医・医動物）

William Panjaitan（北スマトラ州衛生局）
Sumitro（保健省リージョナルオフィス）

15急激な経過をたどった熱帯熱マラリアの1

23

ベネズエラ国アマゾナス州におけるオンコ

セルカ症伝搬に関する研究高岡 宏行（大分医大・医動物）

例

多田

功

尾辻 義人，原田 隆二，堂園 貞已，

鈴木

博

橋本 修治

（鹿児島大・医・第二内科）（熊本大・医・寄生虫病）

徳永 正義，佐藤栄一（長崎大・熱帯医研・ウイルス）野田 伸一（鹿児島大・医・医動物）

151

Luis．Yarzゑbal，Maria．G

小野Bas飴ez

忠相，中林敏夫（阪大・微研・原虫）（ベネズエラ国立皮膚科研）

24

ナイジェリアにおけるロア糸状虫症の疫学

世界各地の発展途上国の飲料水についての的研究2．Epeにおけるmicronlaria調査

化学的および細菌学的検査成績と媒介アブの調査

藤田紘一郎，月舘

堀

栄太郎

Eugene25

29

上田（埼玉医大・寄生虫）

O．Ogunba

正勝，森

説子，黒川

憲次，

章夫，小田

力

（長崎大・医・医動物）（イバダン大・医）タイ国チャンタブリ県における蚊の発生源

奥脇義行（女子栄養大・微生物）

調査

杉山

雅俊

（順天堂大・医・衛生）池田

照明，及川陽三郎

武衛

和雄（金沢医大・医動物）（JICA，タイ国公衆衛生省医科学局；
アース製薬）
Mongkol

Chenchittikul，Boonluan

26

小笠原やす子，朝倉健夫（日本熱帯医学協会）

恩30

インドネシア各地の飲料水の細菌学的研究

奥脇（JICA，タイ国医科学局）

義行，矢内

末永

渕

敏

藤田紘一郎，月舘建吾，徐薇（中国科学院・上海昆虫研）

世界各地の発展途上国に在留する邦人の腸

上田

正勝，森

憲次，

章夫，小田

力

（女子栄養大・微生物）杉山雅俊（順天堂大・医・衛生）池田

照明，及川陽三郎

七戸

和博

雅俊

（順天堂大・医・衛生）朝倉健夫（日本熱帯医学協会）

32

沖縄県における1982年のハブ咬症

新城

安哲，西村

昌彦，山川

雅延

（沖縄県公害衛研・ハブ支所）

33

ハブトキソイドの野外接種（第10報）

福島 英雄，水上 惟文，鳥入 佳輝，（金沢医大・医動物）古賀 繁喜，東勝観，川畑 英機，「（日本医大・薬理）

山下

恭史，坂本

正策，香月

宗春

（鹿児島大・医・熱疫研）

小笠原やす子，朝倉 健夫
28

芳男（日本蛇族学術研）（長崎大・医・医動物）

奥脇 義行

憲次

杉山

について
川村 善治，沢井

年的観察
説子，黒川

説子，黒川

311982年における奄美大島のハブ咬症の現況

管寄生虫感染率と飲料水汚染についての経藤田紘一郎，月舘経子（長崎大・医・医動物）（長崎大・熱帯医研・資料室）

維徳，擢

寿恵，豊

（女子栄養大・微生物）

上海市内におけるアカイエカ産卵活動の1982年の季節的推移

27（日本医大・薬理）Phanthumachinda（タイ国公衆衛生省医科学局・衛生昆虫部）
長谷川

七戸 和博

（日本熱帯医学協会）

村田

良介，松橋

直，近藤

海外旅行者下痢症からの腸管原虫の検査成貞弘

省二（予研・細菌第二部）

績について

大井

木村

明生，峯川 好一，北浦 敏行（大阪府公衛研）

中野宏秋，細溝 浩二，市来 重光，

橋本智，阿部 久夫，浅野 信夫（大阪空港検疫所）

34

清，近藤

了，

久（千葉県血清研）

スリランカ，アヌラダプラ地区における毒蛇咬傷の死因について

沢井

芳男，鳥羽

通久
（日本蛇族学術研）

糸川 英樹（東京医歯大・医・医動物）152

Anslem

de

Silva

山本

典巳，木村

富紀，大山

（ペラデニア大・医）（関西医大・微生物）35沖縄ハブ毒中のプロティナーゼ：精製と酵

Mi M．Khin

素的性質
佐藤（Virol．Res．Div．，D．M．R．，Burma）

保，貞弘 省二

44 Tr』γpono30〃辺 orμz∫ と Sprague−Dawley（予研・細菌第二部）

36

ラット腹腔マクロファージとの相互作用の熱帯地在留邦人の健康管理

超微形態学的研究

渋谷 敏朗，亀井喜世子

三浦左千夫，竹内勤，浅見（帝京大・医・寄生虫）

ンケート調査藤原45

綱清（烏取大・医・小児科）

原宏（鳥取大・医・第二外科〉

大礒

敏雄（日本国際医療団）

達司（慶大・電顕）マウス腹腔マクロファージ培養におけるデングウイルスの増殖に及ぼす回虫抗原の影

響
AgusS．wiharta，堀田

38 中近東・北アフリカ滞在日本人の健康調査

小原

博，谷

敬三

（慶大・医・寄生虫）

37 アフリカ在留邦人の健康・衛生に関するア
笠置

昭夫

博

（神戸大・医・微生物）

荘吉

堀田

進

（金沢医大・医動物）（神戸大・医・国際交流センター）

39巡回医療からみた東南アジア・インド亜大

松村武男（神戸大・医・医動物）

陸における在外邦人の疾病

Sujudi （インドネシア大・医・微生物）

山村

好弘

辻

高嶋

哲也

（国立療養所刀根山病院・内科）

46

守康

実験的トキソプラズマ感染マウスの胸腺萎（大阪府立羽曳野病院・内科）

縮について

40 タンザニア国Moshi市Kilimanjaro

田辺 將信

ChristianMedicalCentreにおける医療状況（広島大・医・寄生虫）（慶大・医・寄生虫）

NormanChen，Walter

Brian

Grimwood

Stahl，

奥村悦之（高知学園短大・保健）奥村泰之（順天堂大・医・消化器外科）

Jams

Lyimo

（Radiology，K．C．M．C．）

47 トキソプラズマ抗原接種によるマウス・バ

41過去5年間におけるベトナム難民の罹患状況

ベシア感染に対する感染死防御効果とその天野（New York

博之

西山

利正，森田

博，瀬川

荒木

恒治

（奈良医大・寄生虫）

小川

武彦，

了，桜井

鈴木 直義

48

断について

変化

小林

光男，大渡

伸，藤原真理子（長崎大・熱帯医研・疫学一環境生理）
43蚊培養細胞（7bxorhツnch∫

8sα〃めo加θn5∫sl71株）におけるDengue

virusの増殖並

治久，齋藤

昭夫，渡辺

直煕，鈴木

康弘，

牧岡 朝夫，片倉賢，平井 徳幸，

浜田（慈恵医大・寄生虫）篤郎

49 酵素抗体法によるトキソプラズマ特異IgM
抗体検出に関する研究
中島ひとみ，土橋 賢治，鈴木伊藤松本

英紀，Thet−win，

篤志，（帯広大・獣医・生理）

びに形態学的な観察
富由，谷村

of

トキソプラズマ性リンパ節炎の血清学的診

温度順化の形成過程における局所脳血流の小坂

Department

機構について（天理相談所病院・海外医療科）

42

State

Health）

慶蔵

寛，（長崎大・熱帯医研・内科）

153
50

1gM酵素抗体法（ELISA）によるトキソプ

51

トキソプラズマ抗体保有状況と感染経路にラズマ（Tp）急性感染妊婦の検索関する1疫学調査

土橋

賢治，鈴木

小西

松本

慶蔵

寛，中島ひとみ，（長崎大・熱帯医研・内科）

英二，高橋

純子，松村

武男

（神戸大・医・医動物）

154

一 般 講

1

ホルマリン固定赤血球のアルボウイルス

HAおよびHI試験への応用
A．Sompop，N．Somboon，1．Wallapa，

P．Krawan，C．Kanai（タイ国公衆衛生省医科学局・ウイルス研）

B．Damrong
伊藤

宝務

演

2

タイ国チャンタブリ県における日本脳炎ウ
イルスの疫学的調査一飼育豚血清中のJE−

HI抗体の検出伊藤宝務宮崎武夫，長谷川（プラポクラオ病院）（武田薬品・中研）

N．Somboon，K

andCasals（1958）が標準化した赤血球凝Watana，A．Sompop（タイ国公衆衛生省・ウイルス研）て重要な疾患の1つにあげられている。本ウイル
Clarke恩（チャンタブリ計画本部）

アルボウイルス感染症は東南アジア地域においスに対する血清学的診断ならびに疫学的調査には（武田薬品・中研）

B．Damrong奥野（プラポクラオ病院）

良信，深井孝之助（阪大・微研）集阻止（HI）試験が広く使用されてきた。HI試験
は操作が比較的簡便で正確，感度も高く，しかも日本脳炎の流行が近年益々重要な問題になりつ

短時間内に判定できるなどの利点を供えている。

つあるタイ国において，JEVの感染環の中での豚

しかし，従来のHI試験ではガチョウまたは初生の役割についての情報を得ることを目的として，

ビナの新鮮な生赤血球を使用するので，試験の都

東タイ，チャンタブリ県において1982年7月から

度採血，洗浄して反応用赤血球を調整する必要が

1983年6月にわたり，毎月一定期日に30頭の屠場あった。また，アルボウイルスの赤血球凝集（HA）反応の特徴として，希釈液のpHに依存す

豚から採血し，その血清中のHI抗体を測定，Hl
抗体陽性率を指標として豚におけるウイルス伝播る傾向が著明で，予備試験による条件の設定が要の分析を試みた。

求された。そこで，アルボウイルスのHI試験を

HI抗体陽性率は現地における雨期 （5月中旬

さらに簡便化，省力化する目的で，試験に繁用さから9月まで）前の数カ月は30％あるいはそれ以れているガチョウ赤血球をホルマリンで固定して，下に低下したが，その他の月ではほぼ100％で，ベ長期保存可能に安定化することを試みた。ホルマ

クターであるコガタアカイエカ数の消長に密接にリン固定ガチョウ赤血球（FGRBC）のJE，Den−

関連した季節性を示す。雨期前の陽性率の低下は

gue1，2，3および4型ならびにChikungunyaHA

蚊の多発時期（一雨期）を経過しない豚個体の増抗原に対する感受性は新鮮ガチョウ赤血球のもの

加の反映であり，低い陽性率からほぼ100鰯の陽とほぼ同等であった。上記HA抗原を使用して，性率への転化は雨期の始まりと共に急速に起こる。

ヒトおよびブタ血清中のHI抗体価を測定したと陽性率の消長には，通年ゆるやかな変動を示す

ころ，これもFGRBCと新鮮ガチョウ赤血球と市街地近郊型と，雨期（ベクターの消長）に伴っで，ほぼ同等の抗体検出感度を示した。

て著しい変動を示す農業地区型との2っの型があ以上の結果から，FGRBCが新鮮ガチョウ赤血球に代ってアルボウイルスHI試験に使用できるるようで，一般的にはこの2っの型の複合として観察される。

可能性を認めた。今後，FGRBCは東南アジア地

以上から，タイ国においても豚の日本脳炎ウイ域におけるアルボウイルス疫学調査，血清診断な

ルス感染は，ベクターの生能と結びついた周期性

らびにワクチン接種後の効果判定などに役立つも（季節性）をもっことが示唆され，日本脳炎のコのと考えられる。

ントロールに役立っ基本的情報の一つを明らかに

155
た。

することが出来た。

3

1977−1982年のタイ国におけるポリオの
光昭，加藤伸之輔，渡理鈴木

タイにおけるデング出血熱患者血清の免疫

酵素測定法

血清疫学調査山田

4

博，草間みちる，山地

英二，

分藤

幸雄

（日本医大・微生物）（山梨県衛研）桂子，五十嵐章（長崎大・熱帯医研・ウイルス）東南アジアにおいては，毎年多数のデング出血

三木康Jirapom

Supawadee，て死に致ることから，小児のウイルス感染症としSomboonSuprasert （チェンマイ大）て最も重要視されている。最近新しい血清反応と熱（DHF）患者が発生し時にはショック症状を経

我々は，1977年一1982年に，タイ国チェンマイ，して免疫酵素測定法（ELISA）がウイルス血清診およびバンコックを中心とする地域において採取断に導入されているが，今回，この方法をDHFした1，318検体のヒト血清試料について，ポリオの患者血清に応用した。

ウイルス抗体価の測定を，ウイルス中和テストに

ンマイ地区において採集された血清，1978年福永より行った。

中和テストは，微量中和反応術式により行った。

100TCID50Mahorey

DHF患者血清は，1982年五十嵐らによりチェ

strain（Type1），MEF lstrain（Type2），Sankett

stmin（Type3）を希釈した血清に加え37。C3時間，炭酸ガス培養器内におき，さらに4。C1夜後，サル腎またはHeLa

らによりチャンタブリ地区で採集された血清を用いた。対照としてチェンマイ地区の脳炎患者，日本の日本脳炎（JE）患者，およびチェンマイと北海道の正常人血清を用いた。

ELISAはデングウイルス1型Hawai株，2型細胞に接種し細胞変性効果を観察して判定し抗体

NewGuinea

価≧：4を中和抗体陽性とした。

株をC6／36細胞に感染させた培養液からポリエ

抗体陽性率，平均抗体価は，Z2testおよびt−testにより解析を加え，以下の結果を得た。

B株，3型H−87株，4型H−241

チレングリコールと超遠心により濃縮したもの，

及び阪大微研観音寺研製JEホルマリン不活化精1） 母児免疫の失われる時期の1歳児では抗体製濃縮ワクチン原液を抗原とした微量間接法を使

価保有率は，0〜40彩に低下するが，6歳以上で用した。HIはClarke−Casalsの微量変法を用いた。

は，70〜90％以上の抗体保有者がおのおのの集団

DHFと診断された患者血清165についてHl抗においてみられた。

体価の対数（X）とIgG−ELISA抗体価の対数（Y）

2） 各タイプの抗体保有率を9歳以下，10歳以は相関係数0．82〜0．88で相関した。DHF患者血上に分けて検討したところ，それぞれのタイプ

清66対のうちデング及びJEのどれか1つの抗原の抗体保有状況は地域により異なるが，山間部ででHIが4倍以上の上昇を示したものは47検体あはType1，Type2，チェンマイ周辺ではType1，

り，そのうち34検体はIgG−ELISAでも4倍以上

TyPe3，バンコック周辺ではType1・Type3のの上昇を示し残りの13検体もすべてlgG−ELISA

抗体保有率がやや低いと示唆された。

抗体価16，000以上を示した。一方IgG−ELISAで

3） 抗体保有率が50％以下であったのは，山間は39検体が4倍以上の上昇を示し，こ．のうち5検部の一部の集団の9歳以下において，Type1お

体はHIで陰性または判定不能であった。脳炎及びよびType2でみられた。

DHF患者血清のIgM−ELISAをD1とJE抗原

4）ワクチン接種歴の明らかなものでは，居住地域による抗体保有率の差を認めなかった。

5）

ワクチン接種による抗体価の上昇は，

Type2，Type3ではType1に比べ顕著であっで測定したところ，lgM−ELISA抗体価は初感染時で高く同種の抗原により強く反応した。これらの結果からELISAはDHFの血清診断，特にJEとの鑑別に使用できると思われる。

156

海外に長期間滞在する日本人の代表として日本

5

マラウイ共和国における供血者血液の 青年海外協力隊（JOCV）の肝炎罹患状況を調べて

HBs抗原一抗体に関する調査
高岡千代子，菊池次の結論を得た。

典子（元青年海外協力隊員）

鹿住祐子（上尾中央総合病院）信吉（防衛医大・寄生虫）

赤尾

マラウイ共和国の国立病院Queen

1）1978−1982年の5年間の平均罹患率は，年間3，25％で男女の罹患率に差はなかった。

2）隊員の2年間の滞在中における肝炎罹患率
は東南アジア（フィリピン，ネパール，バングラ

Elizabethデシュ），地中海沿岸諸国（シリア，チュニジア，HospitalとKamuzu Central Hospitalの検査室モロッコ），アフリカ（ガーナ，ザンビア）等でにおける輸血の検査の状況をまとめ，特に供血者多かった。全隊員の5％以上が肝炎にかかった国のHBs抗原一抗体を調査した。

は28力国中11力国にのぼる。

供血者の条件は年齢18歳以上，血色素量129／

3）現地到着後6〜9カ月と13〜15カ月に患者d1以上。原則として患者の家族・親戚・友人か集積の傾向があるが，全期間にわたり発生していら1回500m1の血液が採血される。

る。

HBs抗原陽性は供血者433名中23名

HBs抗体陽性は供血者297名中73名（5．3彩），（24．6％）で4）HAが主であるがHNANBもこれに次いで多い。HBの血清反応は派遣前後で陽転したもあった。このことにより健康なマラウィ人20人のと陰転した者がありその差は1．1％と少なかっに1人がHBs抗原をもち，4人に1人がHBs抗た。

原の感染をうけたことになる。

5）」OCVは同年代のビルマ人より30倍以上の

現在マラウイ共和国においてHBs抗原一抗体 肝炎罹患率を示す。
検出の検査は行われておらず，現在もこのように

HBs抗原陽性の血液が患者に輸血されていることになる。

コレラ菌型別用ファージの近縁性検討とケ
ニア国分離エルトールコレラ菌の型別血液型に関しては，Queen

Elizabeth

Hospital

において約1万人を対象とした調査では，0型
53％，A型24％，B型20％，AB型3％で，Kamuzu
Central7

Hospitalにおける692名の血液型の結果の，0型54％，A型23％，B型19％，AB型4％内藤 達郎，重野秀明，森賢治（長崎大・熱帯医研・病原細菌）

1981年カルカッタの National lnstitute
Cholera and EntericofDiseasesで分与を受けた

Mukerjeeのクラシックコレラ菌型別用ファージとほぼ一致する。

マラウイ共和国だけでなく発展途上国において，4種（1−IV）とエルトールコレラ菌型別用ファージ

患者はもちろんのこと医療従事者，長期滞在者に5種（1−5〉について，各群の増殖用菌株（154ともHBs抗原感染の危険性は高く，大きな問題と757）から各ファージヘの抵抗性変異株を分離，それらのファージ感受性を精査した。またエルトー

なってくるのではないかと思われる。

ル用ファージではヶニア国分離株の型別を試みた。

抵抗性変異株の分離は軟寒天重層法で行い，分6

発展途上国における肝炎罹患の危険性につ離困難な場合は親株を変異誘起剤N一メチルーN仁

いてニトローN一ニトロソグアニジンで処理した。クラ海老沢功（東邦大・医・公衆衛生）

大谷 杉士，大利

佐藤
小原

昌久，表

光代，

シック系の場合H218も用いた。
757／1の9株はすべて5にも抵抗性，2には感受性低下，10株の757／2は1と5への抵抗性と2への幸子（日本青年海外協力隊診療室）

感受性低下，757／3の9株は4への感受性低下，10

博株の757／4は1，2，5への抵抗性と3への抵抗性ま（金沢医大・医動物）

157

たは感受性低下，757／5の9株は1への抵抗性と2でも特にヒトとの疾病に因果関係をもっClo5屠一への感受性低下を示し，1と5は近縁とみられた。

めμ溺属に注目し，検出を試みている。

154からは154／18株と154／Il4株のみが分離

第1回目の報告を，第23回の本学会においてでき，前者のうち，4株はIl，Ill，IVにも抵抗性，行ったが，その成績は必ずしも満足すべきもので残る4株は1のみに抵抗性であった。154／IIははなかった。そこで，引き続き，1982年6月から

III，IVへも抵抗性であった，H218の場合分離で7月にかけての調査時に，再びインドネシア各地

きた8株と10株のH218／1ではII，III，IVに対しより合計21検体の土壌を採取し，帰国後，分離培て前者は感受性，後者は抵抗性，10株ずっの養し，さらに菌種の鑑別を行った。

H218／II，／III，／IVは全株が全ファージ抵抗性をその結果，合計20菌種というように，前回の検示した。この結果HV特にIHVは極めて近縁 討に比較して，多岐にわたり菌種の検出がなされた。その中で，最も多く検出されたのはα03師一と考える。

性状試験を行った757由来の47株とH218株由4∫μ〃1pε所 n8θn3で14検体から分離された。つい来の38株では，前群の一部でVP反応，ポリミキで多かったのは，それぞれ8検体から分離された

シンB感受性が，後群の一部で血清型，VP反応，

Clos

ポリミキシンB感受性が親株と異なっていた。

r∫cμ〃1であった。一方，最も注目されるClos

ケニア国分離エルトールコレラ菌434株の型別

r4∫μ〃100ぬvθr∫3とClos〃∫4如配αμronだわμ ：γ一r∫一

ゴ加彫獅on1は4検体から分離された。

では，2回目の成績と1回目のそれが一致したも今後，より多くの土壌を集めて検討を加えるこの67．7彩，3回目の成績が前2回のいずれかと一とにより，インドネシアにおけるClo3か∫4加n属

致したもの27．0％，残る23株も4回目を実施したの分布図を作製できればと考える。

後の一致した2成績でと，全株型別可能であった。
その結果4型44．0彩，3型27．2％，1型11．3彩，5型11．1％，6型4株，2型1株となり，残る23株は型別表の型に一致しなかった。この成績から，再現性は実用に耐えるものであり，ファージ型は疫学的に利用できる標識であろうとみられた。

9 ケニア共和国、クワレ地区におけるビルハ
ルツ住血吸虫症の流行像について
嶋田雅暁（長崎大・熱帯医研・寄生虫）

平田 瑞城 （久留米大・医・寄生虫）John Ouma

8

インドネシアにおける土壌中嫌気性菌の研（D．V．B．D．，MinistryofHealth，Kenya）

究
奥脇義行，矢内寿恵，豊経子（女子栄養大・微生物）藤田紘一郎，月舘 説子，黒川 憲次（長崎大・医・医動物）杉山雅俊（順天堂大・医・衛生）朝倉健夫（日本熱帯医学協会）

我々は現在進行中の伝染病研究対策プロジェク
トにおいて，ビルハルツ住血吸虫症の流行像を解析しその対策に資するために，住民の寄生虫学的検査，伝搬貝の調査，住民の水との接触状況の調査等を，パイロット地区を設けて長期に行っている。今回はその一部の成績について報告する。

インドネシアにおいては，依然として，新生児

1982年5−6月の住民検診では，得られた851の破傷風患者は5〜6万人はいるものと推定されて検体中581に虫卵を認め，男女それぞれの陽性率

いるし，また，小児における破傷風罹患率は3％は62．4％と69．4彩で，平均排泄虫卵数は時間あた

以上で，その致命率は45％にものぼるであろうとりそれぞれ52．4，47．4個であった。性差はこれらいう報告が得られている。

を年齢別にみる時に明らかで，陽性率，排泄虫卵

このような観点から，我々は，インドネシア各

数共に男性では15−19歳を過ぎて急激に低下する

地で土壌を採取し，その土壌中より嫌気性菌の中のに対し，女性では徐々にしか下がらない傾向が158

ス血清との間に明確な1本の沈降バンドを形成し認められた。

1982年6−9月に行われた住民と水との接触調査た。またFCAを用いてウサギに免疫して得た抗。

では1人あたりの水との接触時間は男性で16．9分，

J−1血清はCOP陽性であった。J−1はCOP反

女性では21．4分であった。これを男女それぞれ年応に関与する主要抗原の1つであると考えられる。

齢別にみると異なる年齢分布を示し，男性では0−4歳と30−39歳のふたつの年齢層にピークがみ

J−1を抗原としたELISAでは，Sj患者について
はSEAを抗原とした時とほぼ同じ感度が得られた。Sm，Sr患者ではJ−1抗原の使用により交差られた。

反応性の減少が見られたが，完全に除去すること

5−19歳での接触時間が長いのに対し，女性では以上の結果から，ビルハルッ住血吸虫流行地のはできなかった。一方SEAを抗原とした時，肺吸年齢別陽性率，排泄虫卵数の解釈にあたり水との虫及び肝蛭症に見られた交差反応は，J−1を使用

接触状況の把握が不可欠であることが示唆される。

することにより完全に除かれたが，旋毛虫症では本報告にみる男女差は水との接触の違いから説明

逆に交差反応性が増加した。以上の結果よりJ−1

できるかもしれない。また，女性の20−39歳の年は他の吸虫症との交差反応を除くことができる点

齢層で水との接触時間が年齢と共に増加してゆくですぐれた抗原であるが，線虫症との交差反応性にもかかわらず，陽性率，虫卵排泄数が低下しての点はさらに検討の必要があると考えられる。

ゆくのは，ヒトにおけるビルハルッ住血吸虫の再感染に対する抵抗性を示唆する現象かもしれない。

今後さらにくわしく解析するために，これら調査

11ELISA法によるマラリア抗体の検出渋谷 敏朗，亀井喜世子の継続とセルカリオメトリーなどが必要と考えている。

（帝京大・医・寄生虫）田辺清勝（東大・医科研・内科）

今回我々は邦人の輸入マラリア症例の血清を入10

精製虫卵抗原を用いた日本住血吸虫症の

ELISA
大橋

今井

手し，IgGおよびIgM抗体の検出を試みた。症例は東アフリカに1ヵ月間滞在し帰国後悪感・発

真，石井

淳一

明，堀井洋一一郎，（宮崎医大・寄生虫）

熱をもって発病し（潜伏期間37〜67日）発病7日

目に熱帯熱マラリアと診断された。患者は帰国後

住血吸虫症の免疫診断法としてELISAが有望 1回だけ抗マラリア剤（内容不明）を服用したのみである。診断当日よりクロロキン塩基総量

視されている。虫卵可溶性抗原（SEA）は感度の点ですぐれているが，肝蛭症，旋毛虫症，肺吸虫

1，500m9による治療を型のごとく行い，3日目に症などと交差反応性がある。この交差反応性のなは末梢血中のマラリア原虫は消失し，体温も平熱

い抗原がより精度の高いELISAの確立に必要と考えられる。今回は日本住血吸虫虫卵抗原よりとなった。

DE52陰イオン交換クロマト及びSephacryl法でlgG，lgM抗体の測定を行った。標識酵素は

S200

この患者の治療開始前の血清を用いてELISAのゲル濾過により得られた精製抗原J−1（分子量アルカリフォスファターゼ，また酵素基質として26万，pI4．9）をELISA用の抗原として用いた。

リン酸パラニトロフェニル（pNPP）を用いた。

ELISA用平底マイクロタイターフ。レート（Dyna−

結果：lgGELISAのODは0．082で2例の正A129M）にSEA（2．5μ9／m1）及びJ−1（1μ9／

常対照（0．044および0．060）と有意の差がなかっm1）をコートした。ラベル抗体はペルオキシダー

た。IgGELISAのODは0503で正常対照（0，058

ゼ標識抗ヒトlgGを用いた。基質はo−phe−nylene diamineを用い，H2SO4で反応を停止後および0．089）に比し充分高値を示した。比較の

tech

OD492nmを測定した。
結果：ゲル内沈降反応においてJ−1は感染マウためにタイで採取した熱帯熱マラリア患者2例の血清と熱帯熱マラリアの実験感染を数回くりかえしたヨザル血清につき同様のテストを行ったとこ159

ろ，これら3検体においてはIgG抗体価が有意に高く，IgM抗体はヨザルのみに検出された。

赤血球成分はCM−Celluloseの場合はほぼ100％

また本患者血清につき螢光抗体法により抗マラリを通したことによる赤血球成分の損失は僅少でア抗体を調べたところ，lgGおよびIgMの両テあった。同時に赤血球感染率の変化もみられなを，Celluloseの場合は90％を回収でき，column

かった。また薄層塗抹標本作製の要領で溶血後のストで血清希釈256倍まで螢光を認めた。

以上，マラリア初感染の本患者では本法でlgG

沈渣をスライドグラスに塗抹した場合，厚層塗抹

抗体は検出されずIgM抗体のみ高値を示した。

標本と同程度の原虫の濃縮率を得た。原虫は元の慢性のマラリア感染と考えられるヒト血清では，形態を維持したまま黄緑色（DNA）と赤色（RNA）

これと逆にIgG抗体のみ高値を示し，IgM抗体とに明瞭に核酸染色され，しかも暗視野中に原虫は検出されなかった。実験感染をくりかえしていのみが螢光を発するので400倍の低倍率でも容易るヨザルの血清ではIgG，IgM抗体が同時に検出に原虫を見い出すことができた。

された。本患者の螢光抗体法によるテストでは

以上のようにAO染色による原虫の検出法は先IgG，IgM両者の抗体価が高く，ELISA法と異なに述べた3っの条件を満たしており，ヒトマラリる結果を得たが，その原因については今後の検討

ア検査への応用も可能であると考える。ただし熱が必要である。

帯地方の流行地フィールドでは設備上本法を利用できないし，また原虫種の鑑別もむずかしいなどの難点がある。

12 マラリア原虫の検出法に関する検討

柳

哲雄，神原

廣二，中林

敏夫

（阪大・微研・原虫）

マラリア原虫の形態学的な検出法に血液塗抹標
本検査法（薄層および厚層）があるが，マラリア原虫を検出する機会の少ない国内の検査技術者に

13東アジア地域におけるマラリア媒介者の生物学的ならぴに疫学的研究
神田錬蔵（聖マリアンナ医大・病害動物）

とっては通常行われている一般的なその検出法でマラリア駆除の達成が，今までのところ系統発は心許なく，原虫を誰もが容易に検出できる方法

生にはじまる生物学的性状の解明に不充分なとこが改良あるいは開発されれば，増加傾向にある輸ろが多いために，他の要因とも併せて困難に直入マラリアに対しもっと速やかな診断や対処が可

面している現状をふまえ，媒介者の生物学的基礎能となる。

研究の取り残されてきた数々の解明に努力してき①原虫数を濃縮できる。②原虫の形態を変形さた。今回は東アジア地域分布のマラリア媒介者にせない。⑧原虫を顕微鏡下に確実に見い出すことついて調査し得られた情報を報告する。h醐o伽硲

ができる。以上の3点を満たす方法としてマウス

群シナハマダラカはオオツルハマダラカと共に北マラリア・Plos規04加脚わεr8hθ∫を材料に用いてア

東アジア地域での媒介者であり，現在，中国，ベ

クリジンオレンジ染色を利用した原虫の検出法のトナムに至る地域で三日熱媒介の猛威をふるって検討を行った。

いるが，両者との交配実験で交雑F、のX染色体
col−が対合するかどうかの相違でわけられる。日本でserum加PBs）を通しは対合しない動物吸血性のものが多く分布し，三PBSで希釈した感染血液をCM−Cellulose

umn（溶出液は16％calf

ammoni−

日熱マラリア原虫に感染しないという実験結果とchlorideで溶血してその沈渣のAO染色を合わせて，置換えによる駆除への方向の導入の可て白血球成分を分離し，Tris−bufferedum

能性が考えられる。1θμco5ρhツr硲群は熱帯熱マラ

行った。

ならびに

リアの強力な媒介者であるが，台湾系と東南アジ

powderを加圧して充損したCellulose

ア8つの諸系との調査で遺伝的分化の程度の差こ

colu；unも同様に白血球成分を完全に分離し得た。

そあれ同一種わα14加cβns∫5に含まれることがわ

その結果，CM−Cellulose
Cellulosecolumn160

かった。瞬n舳μsはタイ国で広大な地域にわたる媒介者で，カンチャナブリ省サトウキビ栽培流行

幼虫は高塩分濃度の池の多いSub・areaで多く，地での雨期終りから乾期の始まる3ヵ月間の調査

他の2っのSub−areaでは少なかったが，水位が急増した3−4月に密度が高く，以後は低密度で推によると，採集蚊8，257頭中74％がハマダラカで移するという傾向がいずれのSub−areaにおいてうち60％が本種で他の16種はごくわずかであった。

も認められた。

蚊の自然感染率は5／646，1／156と2っの部落でみ全データを各要因についてクラス分けし，各クられた。経産率は3部落で0．539，0．462，0．707

ラスに属するデータ数を分母にして，幼虫が採集であった。時間による吸血頻度は開けた野外が最された場合の比率（出現頻度）と密度の平均値を高で植物密生地，屋外ベランダが次ぎ，屋内は最求めたところ，塩分濃度が高くて陽当たりの良いも少ない。吸血活動は動物吸血性で明方盛んなも池で水位が急増した場合に幼虫が多く，その逆ののが多く，夜半型，両者混合の3型がみられた。

条件や水が濁って悪臭を放つ池には少ないことが脚ocμ1の硲は形態上3型に分けられるものの間に判明した。魚類の生息する池の密度は低かったが，8酵素系で11遺伝子座に関し2相違を見，遣伝分

出現頻度には差が認められなかった。これらの結化がみられたが熱帯熱感染症には変化なく高率で果から，幼虫の生息に好適な要因の組合せと不適あった。

な要因の組合せをつくって出現率と密度を求める

nocμ1躍螂，履n伽μsの殺虫剤抵抗性で進展はないようであった。

と，予測通りの結果が得られた。

成虫調査定点から150m以内のSub−areaにっ14

インドネシア共和国北スマトラ州の1海岸

いて池の面積と密度の積として求めた幼虫発生指村落における∠数の消長はMano卿ε1θs躍π4切c照幼虫

今井長兵衛
WilliamDensityのそれとほぼ対応し，4月と9−10月にピークをもった。第1のの生態学的研究
高木 正洋

Hour

（大阪市環科研）（三重大・医・医動物）

ピークは高密度により，第2のピークは広い発生
源がその原因である。

Panjaitan（北スマトラ州衛生局）

Sumitro15急激な経過をたどった熱帯熱マラリアの1
例（保健省リージョナルォフィス）インドネシアと日本の技術協力の一環として，

尾辻

義人，原田

（鹿児島大・医・第二内科）

北スマトラ州アサハン県の1海岸村落でマラリア
媒介蚊・4nρρhθZ8s

s吻吻fc硲幼虫の生態を1982年

徳永

正義，佐藤

栄一

（鹿児島大・医・第二病理）

3月から1年間観察した。ヒトおとりによる成虫調査定点から半径600m以内の大部分の池41カ

隆二，堂園 貞巳，

橋本 修治

上山

達典

（上山内科）

所を対象に月2回，すくいとりによる幼虫密度，

私達は最近ナイジェリア・エヌグ地区で医療活水位，面積，透視度，塩分濃度，長繊維状浮遊藻動に従事し，熱帯熱マラリアに感染，死亡した症

類群落，魚類の生息状況などを調べた。

例を剖検する機会を得たのでその概要を報告する。

発生源の面積は5−6月と10−12月にピークをもっ2峰型の消長を示し，乾季の末の3月には23カ所の池が，小乾季の8月には9カ所の池が干上っ患者は36歳の男性で，職業は医師。

主訴は発熱で，家族歴ならびに既往歴に特記すべきことなし。

た。藻類群落は主として低塩分濃度の池において

現病歴：昭和58年6月20日より6月28日までナ

季節の推移とともに0〜51％の池で観察された。

イジニリア・エヌグ地区で医療活動に従事。58年

魚類は3−4月には半数未満の池に，5月以降は大6月29日帰国，7月10日悪感戦懐を伴って発熱

半の池に出現した。

（体温39。C），7月11，12，13日も同様，午前中は

161

下熱，夕刻発熱を繰返した。軽度の頭痛，筋肉痛，

回目の入院となった。三日熱マラリアの診断でク

軟便，下痢便あり。7月14日黄疸，肝障害を認め

ロロキン3日間総量1．59塩基とフ。リマキン1回たのでマラリアまたはA型肝炎を疑って入院をす

15mg，14日間の型通りの治療をしたが2カ月後すめた。7月14日15時，歩行入院。

に再発した。2回目の入院時治療は先ずクロロキ

入院時所見：体温37。C，熱感，頭重感，全身ンL59塩基を投与してその1週間後に再度クロ

倦怠感を訴える。皮膚黄染を認めるも意識は正常。

呼吸不全，乏尿となったので，挿管して呼吸管理

ロキン300mg塩基を2日間投与し，その翌日からプリマキン45mg塩基を週1回，8週投与したが投与後9ヵ月目にまた再発した。3回目の入院を行うとともに強心処理を行った。熱帯熱マラリ

時にはプリマキン8週間投与と共にクロロキン

アの脳症を疑い末梢血を検索，熱帯熱マラリア原

300mg塩基を毎週服用させた。

19時突然全身痙攣頻発，意識混濁，39。C発熱，虫を証明した（parasitedensity351，900／mm3）。直症例2：40歳の男性。予防薬にファンシダール

ちにキニマックス4m1（塩酸キニーネ400mg含を服用してタイ農村部にて調査活動を行った。帰有）を開始したが（点滴終了直後のparasiteden−

国後2週間目に発熱し，手持ちのファンシダール

sity28，880／mm3），7月15日2時40分熱帯熱マラを服用してまもなく入院してきた。クロロキン総リアによる多臓器不全（脳，心，肝，腎，脾な量1．59塩基とプリマキン15mg塩基，14日間投与を受けたが，2カ月後に再発した。2回目の入ど）で死亡した。

剖検所見および病理診断：病理組織学的には全院前にも手持ちのファンシダールを服用して入院

身の小血管及び毛細血管の著明な拡張を来たし，しており，入院後クロロキンは初回と同量，プリ

赤血球内のマラリア原虫や遊離したマラリア色素

マキンは1回30mgで7日間に変更して投与しが充満していた。病理診断としては熱帯熱マラリた。1年を経た現在でも再発はみていない。2症

アで，①クッパー細胞の反応を伴う肝腫大，②組例ともプリマキン投与後の血中濃度は測定してい織球反応及び赤脾髄の拡張を伴う脾腫，③著明なない。

血管拡張を伴う脳浮腫，④肺及び腎のうっ血水腫，⑤出血傾向などが目立った所見であった。

17

4例のマラリア患者に対するST合剤の臨
床効果

16三日熱マラリアの再発した2症例

山口 恵三，賀来 満夫，松瀬真寿美，

田辺清勝（東大・医科研・感染症）

草野 展周，重野 芳輝，斉藤田中

寛（東大・医科研・寄生虫）

原

海老沢

功

（東邦大・医・公衆衛生）

厚，耕平 （長崎大・医・第二内科）

目的：マラリアの流行地では依然として，その過去3年間に当研究所病院に入院して治療した発生率は高く，これらの国を旅行し，帰国後国内

マラリア患者数は29名であり，三日熱マラリアはにおいて発病する患者が近年増加の傾向にある。

19名であった。その中の2名が帰国後治療して再本疾患の治療剤としては，通常はクロロキン製発した。2例とも感染地はタイーカンボジアの国剤が用いられる場合が多いが，わが国においては境周辺であった。プリマキン低感受性三日熱マラ

本剤が限られた施設にしか用意されておらず，入リアの疑いがあり報告した。

手迄に時間を要する場合が少なくない。そこで，

症例1：37歳の男性。予防薬にキニーネを服用

私達は日常の診療の場で入手が極めて容易で，且しながら福祉活動に従事していたが，帰国3ヵ月

つすでに抗マラリア薬としての評価を受けている前（カンボジアに移動して3週目）にマラリアに

ST合剤による治療を4名の患者を対象に試み，罹患し，2度現地の病院で入院加療を受けた。そ

良好な成績が得られたので報告する。

の後は帰国前まで定期検査でマラリア原虫を指摘

成績：現在迄に私達が経験したマラリア患者はされていないが帰国後まもなく発熱し，当院に17例で，その内訳は熱帯熱マラリア4例，三日熱

162

マラリア1例，熱帯熱マラリアと三日熱マラリア， ブ集団の感染率は港区・南区・名東区でそれぞれ
四日熱マラリアと卵型マラリアの混合例がそれぞ

25．8％

れ1例ずつであった。全例国外で罹患したと考えと港湾部に近いほど高く，同線虫の移入ルート・られ，7例中6例はアフリカで感染したものと思定着状況を考察する上で興味深い。また，市内10

われた。

数地域で行った住家性ネズミの蠕虫調査の結果か治療剤としてはクロロキン，プリマキンが3例に対して投与され，残りの4例を対象にST合剤が投与され，そのうち1例のみはクロロキンが追（8／31），

25．0彩（4／16），

16．7彩（6／36）

ら見ると，市の東よりに分布する傾向が認められた。

広住虫以外の蠕虫類の寄生もクマよりドブ集団

加された。STが投与された4例は熱帯熱マラリ
アが3例，三日熱マラリアが1例で，末血中の原27％（23／84）であり，また2種以上の混合寄生

虫数は1．7×104〜6．7×105／μ1であった。STの率もクマよりドブで著しく高く，ドブでは蠕虫陽

総投与量は12〜36錠で投与日数は2〜6日間であった。4例中3例はSTの単独投与であったが，性個体の89彩に2種以上の蠕虫寄生を認めたが，全例とも速やかな末梢血中原虫の消失と症状の軽広住虫のネズミ1匹当たりの寄生頻度は，他ので著しく高く，それぞれ93％（91／98）および

クマでは22彩と低率であった。

快がみられた。残りの1例ではST投与後直ちに 蠕虫と同様負の二項分布に適合する集中型の傾向
解熱傾向がみられたが，症状の軽快が少し遅れたを示した（た＝0．0456，0．30＜P＜0．50）。しかし，分ため，熱帯熱マラリアであることを考慮して，2布の集中度を示すんの値が他の5種の蠕虫

日目にはクロロキンに変更したが，その翌日には（0．2457〜0．0702） よりさらに小さいことから，原虫は消失していたことから，本症例においても本虫のネズミヘの感染がより集中的に起こってい有効であったものと考えられた。

るものと推定された。

副作用としては1例に軽度の胃腸障害を認めただけであった。

19近畿地方におけるブラックバス（オオクチバス）の寄生蠕虫類の調査

18

名古屋市における広東住血線虫の分布状況
一市内のネズミ集団における感染率
真喜屋 清（名大・医・医動物）

鬼武（名大・医短・生物）

一夫

正垣 幸男

（京大・医・病理）

ブラックバスは大正11年（1925）に北米オレゴ
ン州より芦の湖に移殖され，ブルーギルは昭和35

年（1960）に北米・シカゴより伊豆半島に移入さ名古屋市内のドブネズミ（以下ドブ）から昨年れて以来，一時は絶滅に瀕したが，後によく繁殖

広東住血線虫（以下広住虫）が見つかったが，こ力を恢復して生態的地位を獲得した。現在では本の場所は港湾部から約14kmも離れた内陸部で州，九州，四国全域の湖，沼，池，淵などに繁殖あった。そこで，本虫の定着状況を知るために，を来たし，その水域に生息していた在来の淡水魚

その後港湾地区も含めてその分布を調べた。

の大部分が食害されて，養魚家に大きな被害を与

その結果，港湾地区の港区船見町で捕獲されたえている。今回はブラックバスについて報告した8匹および港湾部から数kmはなれた南区松城町

い。ブラックバスはルアー，餌釣り共に可能な極で捕獲された4匹のドブから，それぞれ163匹おめて魅力のあるゲーム・フィッシュであり，また，

よび104匹の広住虫成虫（合計雄142，雌125）が採

その肉は白味で，淡白であり，さしみ，塩焼き，集され，最初の発見場所名東区猪子石でこれまで

バター焼き，フライなどの何れにしても美味であに得られた120匹（雄62，雌54，不明4）を加えるる。従って，本種がヒトに感染する寄生虫を持たと，380匹以上の同成虫が採集されたことになる。 ず，また魚毒のないことが判明すれば，将来必ず広住虫が寄生していたのはドブだけであり，ク
食料魚として重要視されるであろう。
マネズミ（以下クマ）には認められなかった。ド咋秋（1982）11月より本調査に着手し，本魚の163

胸部（幅3cm），腹部（幅3cm），尾部（幅3cm）

与した（10，50，100mg／kg／day×3daysまたはにおける鱗（各部300枚）及び筋肉を剖検して，300mg／kg／day×1day）。対照群には1彩Tween

寄生蠕虫幼虫の有無を検査した。更に内部諸器官

80のみを与えた。投薬終了後3週間または6週間（鯛，腹腔，消化管，腸間膜，肝，膵など）を剖

を経て横隔膜の圧平標本を調べた。横隔膜に於け検して，寄生蠕虫幼虫及び成虫の有無を検査した。

る幼虫数の減少から他の筋肉に於けるそれが推定

滋賀県・琵琶湖産のブラックバス11匹（大きさできることが予備的検討で確認されているので今16．5×5．5〜28．5×8．5cm），宇治市・喜撰山ダム産

回は横隔膜のみについて正常な幼虫の残存数を算の5匹（19．0×6．8〜28，0×7．5cm），兵庫県・円山定した。横隔膜の生鮮重量100mg当たりの正常

川産の5匹（15．2×3．7〜29．0×8．5cm）を剖検した。

幼虫数を投薬群と対照群の間で較べて減少率（％）

調査したブラックバス20匹（琵琶湖産11匹，喜撰を求めこれを更にプロビット変換してED50の大山ダム産5匹，円山川産4匹）には何らの寄生蠕小を推定した。感染5週後の投薬ではいずれの投虫幼虫成虫を認めず，円山川産の1匹（雌，体長

薬群に於ても極めて高い虫体減少率（82〜100％）29．Ocm，体高8．5cm）の腹腔小腸上部外壁に鉤頭が認められた（P＜0。01）。300mg／kgを感染35日

虫Acanthocephalaの被嚢幼虫2個体を検出した。

後に投与した場合はMBがFBよりも有意に効

本幼虫（雌）はバーリーゼ氏液封入，カバーグラ

果的であったが（P＜0．1）他の投与ではFBとMBスによる加圧標本にて吻の大きさ0．43×0、33mm，の間に差がみられなかった（0．1＜P）。FB，MBと虫体の大きさ2．80×0．84mm，鉤縦列10個であり，もに分服（100mg／kg／day×3days）が頓服（300

虫体前部の体壁に小棘の縦列が見られた。

mg／kg／day×1day）よりも高い効果をもたらし

本鉤頭虫幼虫を犬，ラット，ミニ豚或は鶏などた（P＝0．05）。感染後10週間を経て投薬した実に感染実験を実施して得た成虫について精査した

験結果は以下の通りであった。いずれの薬物も上で種が決定されるが，虫体前部の体壁に棘を持

50mg／kg／day×3daysまたは100mg／kg／day×3

つ特徴によりPolymorphidae科に属するものとdaysの投与で高い虫体減少率（79〜100％）をも思われる。本幼虫が人体内で成虫になるか否かはたらした（P＜0．01）。FBの10mg／kg／day×3

不明である。本種及びブルーギルの剖検，円山川

daysでは殆ど効果がみられなかったが（0，5＜P），

畔のブラックバスより採集した鉤頭虫の発育史をMBのそれでは中程度（60鰯）の効果が認められ検討中である。

た（0．01＜P＜0．05）。FBとMBの総投与量のED50はそれぞれ115及び21mg／kgでMBがFB
20

マウス内被嚢旋毛虫幼虫（USA strain）により効果的であった（P＜α05）。

対するフルベンダゾールとメペンダゾール

21Bithionolによる0εαr4珈

の効果

牧純，中島美佐保，柳沢十四男（北里大・医・，寄生虫）

ベンズイミダゾール系の薬物の旋毛虫に対する治療効果が近年一層注目されている。今回演者

α㎜6Jjαの呼吸阻害と致死活性について
小林

正規，竹内

勤，河村

康司，

浅見

敬三

（慶大・医・寄生虫）

藤原

達司（慶大・電顕研）とメベンダゾール

我々は先に肺吸虫症の治療薬であるビチオノー（MB）のマウス内被嚢旋毛虫幼虫に対する治療効

ルが赤痢アメーバ栄養型の内因性呼吸を阻害し，果を比較検討したので発表する。感染マウスの筋また致死活性もあることを報告した。

らはフルベンダゾール（FB）

肉をペプシン消化して得た幼虫を♀ICR（6週齢）

今回は赤痢アメーバと同じ嫌気性原虫であるラのマウスに体重109当たり50匹経口投与した。

ンブル鞭毛虫についてビチオノール及び近縁化合感染後35日，35−37日または70−72日に，1％Tween

物の効果を検討したので報告する。

80に懸濁させたFBまたはMBの原末を経口投

ランブル鞭毛虫は米国NIH由来の無菌培養株

164

Portlandstrainで，これをTYI−S−33改良培地

行地の内6地区（Santa

Cruz，10s

Rfos，Patro−にて培養した。呼吸活性の測定にはClark型のcinio，Berlin，Guachipilin及びHamburgo）の酸素電極を用い，intactな虫体について基質を加住民を検査対象とした。調査は毎年1回7−8月にえることなしに呼吸を測定し薬剤の阻害効果を検実施した。Holth型パンチを用いて2ヵ所より皮討した。薬剤によるランブル鞭毛虫の増殖阻止活膚片を採取し，生食水に浸し，遊出するmfを検性については各種濃度の薬剤を添加した培地内で鏡した。

の増殖曲線を対照と比較することで検討した。ま結果：（1）mf陽性率の年次変動は，各地区ともた薬剤により作用を受けたランブル鞭毛虫の形態漸減の傾向が認められ，特にBerlin，losRfosで的変化を電子顕微鏡により観察した。その結果ビ減少の傾向が著しかった。しかし，ブユ撲滅対策

チオノールのランブル鞭毛虫の内因性呼吸50％阻の施行されていないHamburgoでも減少傾向の害濃度は0．50mMであり，近縁化合物であるジ認められたことから，この減少が撲滅対策の影響

クロロフェン及びヘキサクロロフェンではそれぞと考えることが出来なかった。（2）各調査時に腫瘤れ0．75mM及び0．50mMであった。致死活性に保有者の腫瘤摘出術を施行してきた。そこで前年

ついては，ピチオノール100μ9／m1の濃度では72

度腫瘤摘出術を受けた者のmf陰転率を調べたが，時間以内にランブル鞭毛虫は全て死滅した。ジク

わずか5％にすぎなかった。このことは腫瘤摘出

ロロフェン，及びヘキサクロロフェンについても術施行後1年間は皮膚内のmfが陰転することがほぼ同様な結果を得た。ビチオノールを作用させなく，また，減少傾向が腫瘤摘出の結果でないこたランブル鞭毛虫の形態学的変化としては通常のとを示している。（3）4年間で4回ないし5回の検細胞死の一連の変化と同じ様であり特異的な変化査を受けた総数700名の住民の内，いずれの検査は見い出せなかった。今回inでも陽性であった例が115名，全て陰性であったv∫∫roの結果より得たランブル鞭毛虫に対するビチオノールの有効濃例が393名，合計508名（72．5勉）が常に同一の検度は赤痢アメーバに対するものとほぼ同程度であ査結果を示した。このことはmf検査法の安定性

り，また∫nを示している。（4）1980年を境に前2年がmf陰性，v漉oにおける肺吸虫に対する有効濃度より低いことから実際のランブル鞭毛虫症にも後2年が陽性の例を新感染例，前2年が陽性，後応用が可能なものと考えられた。よってさらに加2年が陰性の例を自然治癒例とみなして，その率v漉oの実験系の確立を検討中である。

を求めた。全体としてみると，6地区の対象者
52名の内16名（2．9％）の自然治癒例と13名（2．4％）

22グアテマラ・ブユ撲滅対策地区住民のオンの新感染例が認められた。この両者の価の差を求

コセルカーミクロフィラリア陽性率の4年めることによってその地区の感染状況を推察し得るものと考えられた。

間における変動伊藤 洋一
多田林（北里大・医・寄生虫）

功 （熊本大・医・寄生虫病）
滋生（予研・寄生虫）

1976年よりグアテマラにおいて実施されてきたオンコセルカ症撲滅対策事業において，その効果を調べるために対策の実施された地区住民を対象

23

ペネズエラ国アマゾナス州におけるオンコ

セルカ症伝搬に関する研究高岡宏行（大分医大・医動物）多田功（熊本大・医・寄生虫病）

鈴木博（長崎大・熱帯医研・ウイルス）として毎年1回，定期的にオンコセルカ症の疫学調査が行われてきた。そこで，資料の整っている
1978年一1982年の4年間におけるミクロフィラリ
ア（mf）検出状況につき検討した。

方法：San Vicente Pacayaのオンコセルカ流

野田伸一（鹿児島大・医・医動物）

Luis

Yarz査bal，Maria

G．Bas葡ez（ベネズエラ国立皮膚科研）

文部省科研海外学術調査「南米型および中米型

165

オンコセルカ症とその伝搬機構の比較研究」の一の1都市，Epeの周辺で，被験者は3っの中学・環として1982年10−11月，南米ベネズエラ国アマ

高校の学童（11歳一23歳）と給水施設住民（20歳一

ゾナス州のオリノコ河上流域に広がるオンコセル

70歳）であった。Mfの検査は午前11時から午後

カ症流行地数地区において本症の総合調査を行っ2時までの間に行い，母指頭採血，血液厚層塗抹た。本大会では，本症の伝搬に関して行った昆虫標本を作り，ギムザ染色して検出した。また，陽学的調査の結果を報告した。人吸血ブユはS加砕性者の問診による症状も調査した。Mfの保有状

1加nρ∫n況は3っの学校で学童440名，陽性率平均6．6％o∫，＆ρ卿吻on∫∫〃α耀溺，＆アαrzφα11，S．

εκ碧照脚および＆o〃10zoncμ〃1グループの4種1（5．8〜10．4％），職員（20歳一48歳）107名，陽性種グループであった。これまで自然感染の結果か率平均7．5％（4．5鰯〜1L4％）であった。給水施ら媒介種として報告されているS．戸n嬬と8．

設住民は38名で陽性率28．9％の高率であった。問o胴zoncμ〃！グループはおのおの標高250−1，000m

診による症状調査ではMf陽性者（46名）は非陽

および標高約200mにおいて最優先種であった。

性者（39名）に比較し，Calabar swelings（63％），

人体吸血部位は前者ブユ種が下半身，また後者ブprickysensation（71．7％）が高率であった。

ユ種が上半身と異なっていた。S．p n∫o∫を0．

媒介アブ種の調査：西南部熱帯雨林域のLagos，

VOIV㍑1硲ミクロフィラリア保有者から吸血させたOgun，Oyo，Ondo，Bendelの5州で調査し，成虫，感染実験により次の結果を得た。本種のmfとり

幼虫と踊，卵塊を採集した。アブ類成虫は計179

こみ数は人体部位で異なり脚で0−77（平均9），個体採集，うち，Chrン3ρρ5属は47・8％でC

背中で58−495（平均245）であった。24時間後のs∫1α6εα77．6免∫，C㌃4

死亡率は脚を吸血したブユ群2彩であったが，背C4i5枷o吻8nni3であった。幼虫と蜻は計474個

nπゴ∫o∫018．9％，C㌃

中から吸血した群では47％と高かった。飼育温度

体採集し，うち，Chr

16−24。Cの条件下で幼虫発育は正常に，しかも同s

調して進行した。第皿期幼虫は吸血後8日以降死

Clon8∫corn∫s57．6％，C読s∫

10n8∫corπ∫5，

op3属は6L8％でC、

1αcεθ8．6％，（二〇8n躍r∫on∫513．3彩，同定保留9、4％，nc

ゆθnn∫510．9％で亡したブユから見出された。8日以上生存したブあった。卵塊は計224個体採集，Chrysρρ5属が大ユのうち第皿期幼虫保有率は脚および背中を吸血部分で（二ciloc8αgroup（C3∫1αc召α，C、4∫〃1∫4∫θ

した群でおのおの55．3％と62．5彩と高かった。今C

回の生態調査によりアマゾナス州の主要伝搬ブユ

72．5彩，（ニゴ

種は地域により異なることが示唆された。また，集した成虫27個体（C

感染実験によりS．ρ∫n

飢θ2個体）を解剖し，C、s∫1σoθoとC4加∫読躍αo∫はmf多数とりこみに

cεn∫μr∫on∫5を含む）20，7％，C
5

lon8

α，

corn

5

ncゆεnn∫s6．8彩であった。また採s∫10cθα25個体，C4加∫ゴ

一

よる死亡がみられるもののαVOIV麗1硲幼虫を効のそれぞれ1個体からロア糸状虫第2期幼虫をい率よく伝搬しうることが明らかになった。

ずれも腹部から検出した。

24

ナイジェリアにおけるロア糸状症の疫学的研究 2．Eoeにおけるmicromaria調査と媒介アブの調査堀栄太郎

25

タイ国チャンタブリ県における蚊の発生源調査

武衛（埼玉医大・寄生虫）

和雄（JICA，タイ国公衆衛生省医科

EugeneαOgunba（イバダン大・医）学局；アース製薬）

1982年10月，11月の2カ月間，ナイジェリア
西南部のロア糸状虫症流行地において，住民のMongkol

microfilaria保有状況の調査と媒介アブ類の調査（タイ国公衆衛生省医科学局・衛生昆

を行った。

虫部）

住民のMf調査：調査を行った地区はラゴス州

Chenchittikul，Boonluan Phanthumachinda

長谷川

恩（JICA，タイ国医科学局）

166

1981−83年，チャンタブリ県において蚊の生態学的研究を行った。本報では，当地方の蚊相と種族維持の立場からみた発生水域の重要性を明らかにする目的で，主として人為的に開けた環境の水域を対象として行った蚊の発生源調査の結果を報告する。

26上海市内におけるアカイエカ産卵活動の1982年の季節的推移
末永（長崎大・熱帯医研・資料室）

刻

維徳，樫

建吾，徐

薇

（中国科学院・上海昆虫研）

調査した水域は，人工容器，地表の水溜り，湿原，水田，井戸，ピット，ロックプール，竹株，

敏

アカイエカは上海においては下水溝や汚れた池，ゴム林の受皿，葉腋など145カ所で，計9属67種があるいは，各種の人工的容器から多発している。

採集された。

我々は1981年8月から1982年12月まで，上海市内

オ8漉3属は8種類を得たが，人家周辺の人工容の1公園で，この蚊の産卵活動の季節的推移につ器にはネッタイシマカ，ヒトスジシマカが普遍的いて調べたので，今回は1982年の調査結果についに発生し，特に水がめ，放置されたゴムタイヤなて報告する。

どはデング出血熱の予防対策上重要な発生源とみ調査を行った上海市は北緯32度付近にあり，鹿られた。ネッタイシマカの発生場所は人家に近接

児島市とほぼ同じ緯度に位置している。この都市したところに限られたが，ヒトスジシマカとの混は中央部の市区と周辺の県部にわかれているが，棲場所が約30％もみられた。ゴム林ではヒトスジ

今回の調査は市区の南寄りにある復興公園内で行シマカの高密度の発生がみられた。また，海水をわれた。この公園の一角で，人家に隣接した木蔭

含むロックプールでは多数のトウゴウヤブカの発に，容量約101の水がめを置き，水をはり，適生が認められた。

宜少量の麩を投入して水を汚染させ，オピトラッ

Cμ」εx属は29種が得られた。ネッタイイエカとプとした。この水がめを毎朝点検し，水表面に産コガタアカイエカが優占種で，後者は地表の水溜

み落されているすべての蚊卵塊を採集して実験室

り，湿原，水田，浅井戸など広範囲にわたり，しへ持ち帰り，卵塊別に汲み置きの水を入れた容量

ばしばシロハシイエカと混棲していた。C、3漉ns

90m1のプラスチック容器に移して27。Cの恒温は海岸ぞいの塩分を含む水溜り，ロックプールに室内で2〜3日間放置し，その艀化状況を調べた。
アカイエカの産卵活動は1982年には最高及び最多数棲息していた。
。4noρh8183属は14種を得たが，ρ84∫

ロ8π

α

硲，

低平均気温がそれぞれ24。Cおよび15。Cを示し

5肋εη5∫3，わoめ〃03〃∫3，、ρh〃φP∫η8πs∫5がdominant

た5月上旬に開始された。その後次第に活発となな種類であった。、4．加10δocεns∫sは清例な水溜り，り，7月上旬の梅雨期前に最も多くの卵塊が採集

井戸，漢流のロックプールなどから採集されたが，された。梅雨期の後半から盛夏にかけてその活動個体数は少なかった。しかし，この地方に多い果はやや低下するが，8月下旬には再び活発となり，

樹園の敷地内には本種の好発生環境が散見された

9月上旬に第2の山を示した。9月中旬に入り，ことは，マラリア対策上考慮されるべきである。

最低平均気温が20。C以下になると産卵活動は急

竹株からは3種の丁吻研o翅θ3属が得られ，に衰えるが，11月中旬まで産卵がみられた。しかorono∫飽sが優占種であった。U雌no 磁n∫o属はし，11月下旬になり，最高平均気温が20。C以下8種を得たが，ε伽orぬ∫以外は未同定である。

になってからは全く産卵がみられなかった。この消長の傾向は8月下旬から9月上旬にかけての山
が前年よりかなり低かった点を除いて，概ね前年の調査結果と一致していた，

167

27

世界各地の発展途上国に在留する邦人の腸管寄生虫感染率と飲料水汚染についての経年的観察藤田紘一郎，月舘

上田

正勝，森

説子，黒川

章夫，小田

憲次，

力

在留邦人の寄生虫感染率と飲料水の大腸菌群検出の割合が，今回も有意な（P＜2．5％）正の相関を示した（r＝0．925）。しかし，寄生虫感染率と飲料水の過マンガン酸カリウム消費量陽性率の間には全く相関が見出せなかった。

（長崎大・医・医動物）

奥脇 義行（女子栄養大・微生物）

杉山 雅俊（順天堂大・医・衛生）池田

照明，及川陽三郎

28

海外旅行者下痢症からの腸管原虫の検査成
績について

木村

明生，峯川 好一，北浦 敏行（大阪府公衛研）（金沢医大・医動物）

七戸 和博（日本医大・薬理）小笠原やす子，朝倉

健夫

中野

橋本

宏秋，細溝 浩二，市来 重光，智，阿部（日本熱帯医学協会）

第23回熱帯医学会総会において，我々は世界各

久夫，浅野

信夫

（大阪空港検疫所）

小野

忠相，中林

敏夫

（阪大・微研・原虫）地に在留する邦人の腸管寄生虫感染率について報告し，それが，邦人の在留地域に供給されている

海外旅行者下痢症の実態把握を目的に，これま飲料水から大腸菌群が検出される度合と有意なで，主として細菌学的検査を行い，海外旅行者下（P＜1．5彩）正の相関（r＝0．957）を示すことを証明

痢患者の約半数は細菌性下痢症であることを明らした。今回は世界各地に在留する邦人の寄生虫感

かにしてきた。残る半数は下痢原因を知るため，

染率と飲料水汚染度について経年的変化を調べ，下痢の原因となる腸管原虫の検索を始めたので，

さらに，最近のデータにより再度両者の相関を求

今年1月から6月までの成績について報告する。

めたので報告する。

大阪空港から入国した海外旅行者下痢患者のう

インドネシアにおいては，邦人の寄生虫感染率

ち，旅行期間が5日以上で，自然排便を採取できは1978年から1980年にかけて，8．0彩からL8勉にた318名を検査対象として，直接塗抹法，培養法まで低下したが，それ以降は増加に転じ，1983年（田辺・千葉培地），MGL法の3者を併用して腸には再び8．0％にまで達した。また，彼らが使用

管原虫の検索を行った。

している飲料水からは70％から50％の高い割合でその結果，ランブル鞭毛虫を2月，3月，4月，

大腸菌群が検出されていた。フィリピン，タイも6月の各月にそれぞれ1名，合計4名（L3％）・

同じような傾向で，邦人が感染している寄生虫のから検出した。ランブル鞭毛虫陽性者は，いずれ種類では，回虫，鞭虫，ランブル鞭毛虫が多く，も5週間以上にわたる長期間旅行者で，うち3名

次いで異形吸虫，テニア属条虫，鉤虫などであっはインド・ネパールでの感染であった。2名は赤た。一方，マレーシア，シンガポール，ホンコン

痢菌との混合感染であったため隔離病院に収容さなどに在留する邦人の寄生虫感染率は低く，飲料れたが，他の2名は軽度の下痢を3〜7日間隔で水もほとんど汚染を受けていなかった。パキスタ

くり返し，うち1名は帰国後1カ月以上続き，アンをはじめとする南西アジア，中近東，東アフリ

テブリンの投与によって駆虫できた。6月にインカおよび中南米の在留邦人の寄生虫感染も比較的

ド・ネパールを7週間にわたって旅行した者1名

低く，経年的変化もあまり認められなかった。しから大腸アメーバを検出した。

かし，飲料水の汚染度は，調査する年によって多少異なる結果が得られた。

以上，今回の6ヵ月間の成績では，ランブル鞭毛虫と大腸アメーバの2種類，合計5名（1．6勉）

次いで，1983年度における各地の在留邦人の寄しか検出できなかった。しかしランブル鞭毛虫陽生虫感染率と飲料水の汚染度との相関を求めた。

性者は，下痢症状を一定間隔でくり返し，長期間168

にわたることから，検出率が低率であっても，今飲料水の水質は極めて不良であり，一部の地域を

後十分な注意が必要である下痢症の1っと考える。 除き，ほとんどの飲料水が大腸菌により汚染されていることがわかった。特に，東南アジアでは，

29 世界各地の発展途上国の飲料水についてのインドネシア，タイ，フィリピン，南西アジアではパキスタン，中近東ではイラク，アフリカでは

化学的およぴ細菌学的検査成績
藤田紘一郎，月舘

説子，黒川

憲次，

ヶニア，モンザビーク，ナイジェリア，中米では上田 正勝，森章夫，小田力

メキシコ，南米ではエクアドル，ペルーの飲料水（長崎大・医・医動物）

が糞便系汚染にさらされていた。殺菌剤としての

奥脇義行（女子栄養大・微生物）

残留塩素が末端から見出された地域としては，シ杉山雅俊（順天堂大・医・衛生）

ンガポールとマレーシアで，その他，パナマとエ

池田 照明，及川陽三郎（金沢医大・医動物）七戸

和博

ジプトの一部の地域にみられ，他の国では全く検出することはできなかった。

（日本医大・薬理）小笠原やす子，朝倉健夫

30

インドネシア各地の飲料水の細菌学的研究（日本熱帯医学協会）

奥脇

義行，矢内

藤田紘一郎，月舘

人の数は著しく増加している。それと同時に，各

説子，黒川

憲次

（長崎大・医・医動物）

地でA型肝炎，腸チフスやアメーバ赤痢など重篤な経口感染症に罹患する邦人の数も増加している。

我々は，その主な原因が飲料水の汚染にあると考に糞便系汚染との関連について調査した。

経子（女子栄養大・微生物）

世界各地の，いわゆる発展途上国に在留する邦

え，世界各地の発展途上国の飲料水について，特

寿恵，豊

杉山

雅俊

（順天堂大・医・衛生）朝倉健夫（日本熱帯医学協会）

今回は，1982年の6月から7月にかけて，インドネシア各地で採取した飲料水75検体について

我々は，1982年より1983年にわたり，東南アジ

行った一般細菌数と大腸菌群数の算定，腸内細菌

ア，南西アジア，中近東，アフリカおよび中南米

およびその類似菌の検出，およびその検出菌の化の国々を訪問し，主として在留邦人が利用してい学療法剤に対する感受性試験の結果にっいてを報る飲料水を採取し，細菌学的および化学的水質検告する。

査を行った。なお，一部の調査は1977年より1980
年にかけて行われた。あらかじめガス滅菌してあ

現地で，ウリカルトセットを用いて行った一
般細菌および大腸菌群数の結果では，一般細菌数

る検水用器を，検水で何度も洗い，飲料水を採取

は43検体（59％）で陽性（103／m1以上）を示し，し，これを検体とした。ただちに，この検水をマッ

このうち，カリマンタン，スラウェジ，スマトラ

コンキー培地およびCLED培地が塗布されていでの18検体は全てで陽性であり，最も検体の多るウリカルトセット（第一化学）に十分浸し，それかったジャワ島での57検体については水道水で28を37。C，24時間保存し，翌日発生した集落の数

検体中11検体を算定し，1m1中の生菌数とした。化学的検査と（48％）で陽性を示した。一方，大腸菌群数の成しては，過マンガン酸カリウム消費量，アンモニ

績では，37検体（49％）で陽性（103／m1以上）

ア性窒素，亜硝酸性窒素，硝酸性窒素，塩素イオがみられ，そのうちカリマンタン，スラウェジ，

ン濃度，総硬度，pH，残留塩素および鉄，銅，鉛スマトラでの18検体は全て陽性であり，またジャを水質基準に関する省令で定められている方法に

ワ島での57検体は，水道水28検体中6検体（21％），

よって，それぞれ測定した。その他，色度，濁度，

井戸水29検体中13検体（45％）で陽性を示した。

臭い，味，沈殿の有無についても調べた。

その結果，世界の発展途上国に供給されている（39％），井戸水で29検体中14検体

検水より分離された腸内細菌およびその類似菌は，En 8roわαC陀ro100CロθとCi ro6θC陀r／yθ麗n4∫∫力弍169

最も多く，それぞれ16検体から分離された。

ついだ。また，男性の受傷は120（74．5％）で女

次いで多かった菌種は，6検体より分離された子の41（25．5％）に比べると2倍以上にのぼって

κZθわS陀〃0ρn8μ〃10n如8とPSθμ吻〃20nα3αεr㎎

いる。

nOSα

であった。し尿汚染との関連からその指標として

次に受傷場所では，田畑で農作業中に受傷した

最も重要視されるEsohεr ch∫αco1∫は5検体からものが92（57．1彩）で最も多く，屋敷内が29分離された。この中には，ジャカルタ市内の水道（18．0彩）でこれに次いでいたが，両者が全咬症

水の2検体から分離されたものが含まれている。

数の75彩を占めていた。これを地区別にみると，また，今回の調査で特に注目されるのは，Sθ1一

田畑の受傷率は徳之島が本島より明らかに高い傾刑onθ〃oC1群がジャカルタ市内の1件の井戸水

向を示している。受傷部位では上肢が86（52．8％），より，さらにSα1襯on8110E、群がジャカルタ市内，

下肢72（44．2％）で受傷の大部分を占めていた。

カリマンタン，スラウェシ，スマトラのそれぞれ最も多いのは手指の56（34．4彩）で，手の21

1件ずつの井戸水からというように全島から分離（12．9％）を加えると50％に近く，下肢では下腿されたことである。

が36（22彩）で最も多い。

分離した菌株の57菌株にっいて，Kanamicin，

受傷時刻では，午前6時一午後6時までの明るChloramphenicol，

い時刻に121（75。6％），午後6時一午前6時まで

Carbenicillin，Cephaloridine，Cephalothin，Col−の暗い時刻に39（24．4％）が受傷しているが，田istinおよびNalidixic acidに対する感受性試験

畑では93．5％が昼間に受傷しているのが特徴的でをディスク法で行った結果，特に顕著な傾向や耐ある。これに反して，屋敷内及び道路では夜間の性菌の出現はみられなかったが，501〃！onε〃o sp．

受傷が目立っている。

Gentamicin，Tetracyclin，についてのみ，CephaloridineとCephalothinでハブ咬症の予後は受傷数161（死亡1）の内，ジャカルタ市内で検出されたものは感受性陰性，軽症が134（83．2％），重症27（16．8彩）でその内一方他の3島でのものは感受性陽性というように高度の腫脹，嘔吐，嘔気，血圧低下，下痢などの差がみられたことは興味深い。

全身症状を呈した9例，受傷局所の壊死のみを起こした15例と全身症状を合併した3例計18例
31 1982年における奄美大島のハブ咬症の現況

1名は死亡した。致命率は0．6％であった。壊死

について
川村

（1L2％）中，後遺症は4例（2．5％）にみられた。

善治，沢井 芳男
（日本蛇族学術研）

我々は1957年以来，奄美大島のハブ咬症患者の疫学及び治療，予防，予後に関する調査を行って来たが，今回は前年に引続いて1982年の調査について報告する。患者数161名（死亡1）で前年より8名増加した。その内，徳之島が105名（8増）を伴った18例中9例は手指，4例は下腿等で後遺症の4例は手指運動障害であった。

32

沖縄県における1982年のハブ咬症
新城

安哲，西村

昌彦，山川

雅延

（沖縄県公害衛研・ハブ支所）

近年，沖縄県においてはハブによる咬症が減少で全咬症の65％を占め，奄美本島が56名で35％でし始めているが，今回はサキシマハブ咬症とともあった。

に1982年の調査について報告する。

月別発生数では，6月が34で最も多く，5月がハブによる咬症者は，戦後初めて200名以下を

22，8月が20，4月が17，9月が16，3月が14，記録し，179名，1，000人当たりの受傷率は0、17と7月が12であった。即ち3月から10月までの8カ
月間に146（9％）が受傷していた。年齢別，性なった。最近10年間（1972−81年）の平均受傷者別受傷数では最も多いのは50代の45（28％）で，ている。サキシマハブの咬症者は80名（八重山78

40代の31（19．3％）60代の23（14．3彩）がこれに名，沖縄島の2名を含む），八重山の受傷率はは270．1名，受傷率は0．28であり咬症者が急減し

170

1．86であった。最近10年間の平均は51。1名，受傷

ハブトキソイド（沈降ハブトキソイドLot12，13，

率はLO9である。なお，ハブ・サキシマハブとも

14，15，18，20，36，37，C−1，C−2，アルコール沈殿に死亡者はいなかった。

ハブトキソイドLot1）を，基礎免疫としては，月別発生数では，ハブで10月が33名（18．8％）

トキソイドα5m1（〜α1m1）あて4週間隔で2〜で最も多く，3月26名，11月21名，6月19名で3回接種し，その後追加免疫としては，数カ月〜

あった。サキシマハブでは，3月11名（13．8彩），1年〜2年数ヵ月の間隔で，6回接種した。

4月10名，6・11月9名であった。
ハブの受傷場所で最も多かったのは，田畑68名

位1m1以上の者が，抗出血1価においては，基（38．6％）で，次いで不明36名，屋敷内21名，道礎免疫終了4週後61．8％，追加免疫4週後88・9％

その結果，有効と考えられる血中抗毒素価1単路18名，山野14名，屋内13名となっており，サキに認められた。このうち181mU／m1より高力価

シマハブでは田畑38名（47．5％），屋敷内17名，のトキソイド（Lot12，13，15，36）接種群において

道路9名，屋内・山野・水辺各5名であった。

は，基礎免疫終了4週後76．2％，追加免疫4週後

受傷部位は，ハブで上肢95名（53．4％），下肢96．0％に認められた。抗出血2価は，総てのトキ76名（42．7％）となり，受傷の大部分を占めてい

ソイドにおいて，基礎免疫終了4週後，追加免疫た。最も多いのは手指58名（32．6％）で，次いで4週後も共に，殆ど全例において1単位／m1以上

手の21名を加えると半分近くを占めている。下肢を示した。

では足が32名で最も多い。サキシマハブの場合はハブトキソイド接種時の副反応としては，接種

上肢65名（81．3％），下肢13名（16．3％）で，ハ部位の疹痛，腫脹などが主であるが，その他，硬ブに比べ上肢の受傷の比率が高かった。

結，掻痒，発赤などを訴える者もある。稀には蓉

ハブ咬症の大幅な減少は，多くの市町村におい麻疹を訴える者（0、043％）もあったが，重篤なてハブ対策の事業が始まっていることや住居環境

アレルギー反応，発熱などを呈する者は認められの整備，特に木造家屋が鉄筋コンクリートの家屋，なかった。

古い石垣がブロック塀になっていること，それに

昭和56年7月までのトキソイド接種後のハブ咬

農地改良事業の進展，各種団体に対する衛生教育症者176例（181回）中，咬傷時，全身症状3例の普及などが，発生の減少につながっていると考（1．7％），壊死20例

えられる。

（6．1％），死亡者1例（0．55％）である。ただし，（1LO％），後遺症11例

この死亡例は不完全接種者であった。

33 ハブトキソイドの野外接種（第10報）
福島 英雄，水上

惟文，鳥入

佳輝，

古賀 繁喜，東

勝観，川畑

英機，

山下

正策，香月

恭史，坂本

宗春

これらの成績から，ハブトキソイド接種は有効
な血中抗毒素を産生させ，かつ，副反応も軽微で，また，ハブ咬症の重症化を減少させ，臨床的にも有効と考えられる。

（鹿児島大・医・熱疫研）

村田 良介，松橋
貞弘

大井

省二

直，近藤

了，

（予研・細菌第二部）

清，近藤

久

34

スリランカ，アヌラダプラ地区における毒蛇咬症の死因について

沢井 芳男，鳥羽 通久（日本蛇族学術研）（千葉県血清研）

昭和45年から奄美において，ハブトキソイドの接種によるハブ咬症の重症化予防に関する研究を行い，その成績は，第16回総会以来逐次発表してきているが，今回は，総括して述べる。

昭和45年から57年3月までに，成人9，618名に，

糸川英樹

Anslemde（東京医歯大・医・医動物）
Silva（ペラデニヤ大・医）スリランカでは毒蛇咬症による死亡は年間800171された。今回は文部省科学研究費海外学術調査の濾過して得た粗HR2画分を出発材料とした。これをBioRex−70でクロマトグラフし，HR2aと2bに先行して溶出される主要なプロティナーゼ

補助をうけて行われたアヌラダプラ地区における画分を集めSephadex

毒蛇咬症の死因に関する調査について報告した。

BioRex−70で再クロマトグラフした。精製標品

調査方法は同地区の政府統計局から1980年及びはSDS一ポリアクリルアミドゲル電気泳動で均一

81年の毒蛇咬症による死亡患者のリストを入手し，で，比活性は粗HR2画分から10倍上昇していた．

それによって直接各部落を訪問し，患者の家族等

本酵素は分子量約25，000の単一ポリペプチドで，に会い，患者の受傷から死亡に至るまでの経過をカードに記録した。また一方では患者が入院した

至適pHを9付近に持ち，EDTAやシスティン
で阻害されたがNEMやDFPでは阻害されなとみられる病院を訪問して調査を行った。

かった。またZn2＋とMn2＋で若干失活したが，名前後が記録されているが，特にアヌラダプラ地
区では人口10万に対して18人という死亡数が記録調査された死亡例110の中で，毒蛇が鑑別された99例のうち44例はインドアマガサヘビ，28例はG−75でゲル濾過した後，

Ca2＋，Co2＋，Mg2＋は阻害も活性化も起こさなかった。

ラッセルクサリヘビ，26例はインドコブラによる

数種のタンパク質基質に対する作用を奄美ハブもので，他にヒプナレマムシによるものが1例で毒の主要なプロティナーゼの結果と比較し，Hide

あった。

powder

死亡は年間を通してみられたが季節により発生

azureとAzoalbuminを特に好んで分解する事を明らかにした。

のかたよりがみられた。年齢別にみると，最高はインシュリンA鎖やB鎖，各種の合成ペプチド

10代の28例（25．5％）で71例（85彩）が0−29歳を加水分解した時に生ずる新しいN末端をダンシに集まっていた。また男子は女子の2倍以上多く

ル法で同定し，分離したペプチドのアミノ酸分析

死亡した。受傷時間ではアマガサヘビでは夜間，の結果とあわせ，基質特異性を調べた。その結果，クサリヘビは昼間，コブラでは昼夜を問わず咬症

インが発生していた。受傷部位でもヘビによって特徴

rAla、4−Leu、5一が切断され，SubstancePとPhys−がみられた。

alaeminでは一Gly−Leu一が切断される事が分った。

シュリンA鎖では一Ser、2−Leu、3一，B鎖では臨床的には79％の患者は受傷後，部落内の民間

一方，レニンに対する合成基質中の一Leu−Leu一は療法師の手で治療をうけ，血清注射なしで死亡し切断されなかった。dipepti（1eやtripeptideは切ていた。残りの21彩は病院にたどりつき，中には断されなかった。

血清の注射をうけた者もいたが，手おくれのため死亡した。血清はインドから輸入された4種混合の多価血清が用いられているが，その普及度は低いo36

熱帯地在留邦人の健康管理渋谷敏朗，亀井喜世子（帝京大・医・寄生虫）

海外在留邦人を対象として巡回健康診断を行う

35沖縄ハブ毒中のプロティナーゼ：精製と酵
素的性質

佐藤

場合，限定された期間内における問診，診療，臨
床検査，生活指導などを効率よく行うためには，

保，貞弘

省二

予め仕事量を考慮しつつ手順，検査項目の選定な（予研・細菌第二部）

どを行うことが必要である。そこで今回は臨床検

沖縄ハブ毒から出血因子を分離する過程で一種査面について，特に熱帯地の現状から見て重要とのプロティナーゼを分離・精製し，その酵素的性考えられる2・3の項目を取り上げて検討した。

1．血液検査：熱帯地において重要な急性ない質を明らかにした。

2っの出血因子（HR1とHR2）を相互分離するために，粗ハブ毒をSephadex

G−100でゲルし慢性感染性のスクリーニングに役立つ検査の中で最も基本的なものとして白血球数，白血球百分

172

率を取り上げ同時に赤血球数，ヘモグロビン，ヘ

現地の衛生状態に対しては生水の飲用，野菜なマトクリットにつき検討を加えた。上記5項目のど食物の生食はほとんどなく，充分警戒心があっうち，赤血球，Hb，Htは簡易検査キットとしてた。また，現地到着後に発病した下痢，不明熱，

発売されているが，白血球数算定用キットは発売

マラリアなど風土病的疾患は到着後6ヵ月以内にされていないので希釈法を考案した。原理は通常発症するものが過半数を占めており，現地到着後のメランジュールを用いた方法と同様であるが6カ月は現地の生活に馴化する準備期間といえる。

EDTA加凝固阻止血液をマイクロピペッターで0．02m1採取し，これをあらかじめ96穴のマイク

ロプレートに用意した9倍量のチュルク氏液と混和して血算盤を用いて算定した。この方法による

38

中近東・北アフリカ滞在日本人の健康調査

小原

博，谷

荘吉

（金沢医大・医動物）

結果はメランジュール法およびコールターカウン
ターによる測定値とほとんど同様の値を示した。

マイクロプレート法ではピペッターに採取する血液量が極微量なのでチップの外側に付着した血液のふきとりが不充分である場合大きな誤差がでる。

マイクロタイタープレートによる希釈法では百分率算定の薄層標本を同時に作成しながら35検体処

理するのに1時間15分を要した。
2．糞便検査：虫卵検査は直接塗抹法，飽和食塩水浮遊法を行い，潜血反応は便潜血スライドを用いて行った。当然のことながら浮遊法は直接塗抹法より発見率が高く，また浮遊法では35名分の検体処理に3時間，潜血反応は同数の検査に2時

中近東・北アフリカ諸国に滞在する日本人の健康状態，滞在中に罹患した疾患等につき調査を行い検討した。調査の対象となった者は，総数254
名で，平均滞在日数は248日である。

滞在中に罹患した主要疾患としては，下痢性疾患が93例で最も多く，胃炎，胃・十二指腸潰瘍36

例，腰痛症18例が上位を占め，以下急性肝炎7例，

交通事故6例，高血圧6例という順位であった。
高血圧，糖尿病，胃・十二指腸潰瘍，心疾患等については，出国前よりすでに異常所見またはその疾患を示唆する症状を呈したことがある例が多く，既往歴または検査の異常が有る者と無い者との間には，発症率に関して有意差が認められた。

間を要した。

帰国時に実施した諸検査の結果では，異常所見として，好酸球増多症5．3勉，HBs抗原陽性3．1％，

37

アフリカ在留邦人の健康・衛生に関するア
ンケート調査

寄生虫陽性3．8彩，血沈充進3．1％などが多く認められた。調査対象者中52名については，現地滞在

笠置綱清（鳥取大・医・小児科）

原宏（鳥取大・医・第二外科）

大礒

敏雄（日本国際医療団）

中あるいは帰国時における抗A型肝炎ウイルス抗体を測定し，9名が陽性であるという成績が得られた （17．3％）。12名にっいては出国時と比較し昭和57年度アフリカ在留邦人の巡回健康相談をて抗A型肝炎ウイルス抗体を検索することができ，

機会に，健康と現地での衛生状態についてのアン

2名は現地滞在中に陰性から陽性へ転化したもの

ケート調査を行い，次のような結果を得た。赴任であることが判明した。

前の健康診断の受診率は82彩で，必ずしも高いと

リビアでは，日本人102名につき糞便検査を実はいえず，赴任後も定期的に受診していない人も多かった。巡回医師団による健康相談は高く評価施したが，鞭虫2例，回虫1例が認められたのみであった。同時に現地人126名にっいて実施した

されていたが，風土病的疾患はもっと現地の医療

糞便検査では，大腸アメーバ20名，鞭虫12名，回機関を利用すべきであった。特に，マラリアは恐虫12名，ランブル鞭毛虫4名が陽性であるというるべき風土病であるが，副作用を恐れて予防薬の成績が得られた（感染率35．7％）。

定期的内服をしていない人が多く，さらに啓蒙が必要であった。

本調査を実施した地域は，比較的衛生状態が良い地域であり，特に問題となるような風土病も存173

在しない地域であったため，感染症の此率は低ビェンチャンで受診者の18％が，またデング熱はかったが，既往の疾患が悪化もしくは再発する例，

ビエンチャンで受診者の12％が，コロンボで23彩

身体的および精神的疲労を訴える者の多いのが目が罹患しており，2回罹患した者も6人いた。地立った。また，A型肝炎ウイルスおよび各種寄生

理と気候が関係あるように思われる。特に成人女虫に感染する機会は決して少なくなく，注意を怠子に多いのは服装，生活と関連するものと考えらることは極めて危険であると考えられた。

れる。2）消化器感染症としては，A型肝炎，チフス，パラチフス，細菌性赤痢，アメーバ赤痢，ラ39巡回医療からみた東南アジア・インド亜大
陸における在外邦人の疾病
山村好弘（国立療養所刀根山病院・内科）

高嶋哲也（大阪府立羽曳野病院・内科）

ンブリア症の既往者が受診者の6％に，激症または長期下痢の経験者は14％であった。他に過去に狂犬に咬まれた者が2名があった。

4．結論：在外邦人の疾患としては日本人でもみられる疾患と，熱帯性感染症の2つが存在する。
そして後者の場合，蚊の媒介する感染症と消化器感染症が多く，予防が重要であると考える。

我々は，外務省から派遣されて東南アジア・イ
ンド亜大陸を巡回し，在外邦人の健康相談を行ったので，その結果を報告する。

40 タンザニア国
Christian

1．巡回地・相談数：期間は58年1月25日より

MedicalKilimanlaro

Centreにおける医療状況

2月21日迄28日間，1カ所3〜4日滞在した。相奥村 悦之

談数はハノイ17，ピエンチャン17，ラングーン89，

ダッカ133，カルカッタ44，マドラス38，コロン（高知学園短大・保健）

奥村

泰之

Jams

Lyimo（Radiology，K．C．M．C．）（順天堂大・医・消化器外科）

ボ98，計436，他に予防注射51，総計487（男243，

女193）であった。年齢的には30歳台の家族同伴が最も多く，40歳台の男は単身赴任が多い。これ

Moshi市

Kilimanjaro

ChristianMedica，Centreは子供の教育事情を反映しているものと考えられ（KCMC）では通常の診療の他，rural診療所医師る。

の卒後研修，医療技術者養成，特定地域の栄養改

2．現有疾患：1）日本にも存在する一般疾患と，2）熱帯特有の感染症に分けられる。

善，防疫活動等を行っている。規模は420床，常勤医師11名，看護師45名，他の医療従事者4名で，1）に関しては心疾患，肝障害，糖尿病，消化医療活動範囲は120km2，医療対象人口は8万人

器潰瘍等日本から持ち越した慢性成人病と感冒等

前後，診療科目は内科，外科整形外科，小児科，の急性疾患がある。小児では扁桃腺疾患と皮膚疾

産科，眼科，放射線科，歯科で，1日の外来診療患が多かった。後者は現地の高温多湿の気候が影

件数は400名前後，年間入院総数は12，512名，う響しているように思われる。尚受診者の50彩が何ち退院者総数11，735名，死亡者は755名で死亡率

らかの疾患を有していたが，これは訴えのあるもは6、03％である（1981年度の統計）。

のが，特に集合してきたためではないかと考える。

伝染性疾患の罹患状況はマラリアが第1位を占2）に関しては，A型肝炎，細菌性赤痢，アメーバ

め，次いで下痢性疾患，麻疹，回虫症，肺結核，

赤痢，マラリア，フィラリアが数例認められた。

アメーバ赤痢，腸チフス，鉤虫症，ジストマ，ポ3．既往症としての熱帯感染症：熱帯感染症は
急性一過性であるため，検診時数例しか遭遇しな

リオ，癩と続く。

予防接種はBcG，DPT，Polio，麻疹ワクチンなかったが既往症を尋ねるとかなりの人が罹患してど施行されているが対象人員の0．2％前後にすぎいた。1）蚊の媒介する感染症としては，マラリない。

アは大都市には少ないが，田園に接する小都市の入院患者の上位10疾患は循環器疾患が第1位で，

174

糖尿病，高血圧，マラリア，肺結核，アメーバ赤かった。一梅毒が11例認められるが淋疾は皆無で痢，消化性潰瘍，ジストマ，気管支喘息，貧血とあった。また尿路結石症の多いことが1っの特徴

続き，寄生虫疾患及び結核が上位を占めるのが特であった。入院患者では，マラリア4例（全て三徴的である。小児科領域で特徴的なことは麻疹の日熱マラリア），アメーバ赤痢および肝膿瘍2例，罹患率が最も高く，死亡率も第1位で，クワシオ

結核症3例，尿路結石症4例などであった。結核

コール，腸管寄生虫，マラリアと続く。産科では症のうち1例は大量喀血により死亡していた。医

流産が多い。

療費として年平均3，558，357円が出費されていた。

これらの事実に基づき，KCMCでは疾病予防受療率が人口10万対1，105で，1980年日本人15−19の為の地域医療活動を行っており，動物性蛋白生

歳のそれ（2，740）の0．40倍であり，一人当たり

産産業育成による栄養改善，母子保健サービス，医療費は50．8千円で，1980年日本人15−44歳のそ医療教育等がsketch−outlineとされ，それぞれのれ（55．8千円）と同程度であるので，疾患当たり

projectの医療費がむしろ高値であると言えよう。

staffにより少額予算ながら活動が続けら

れている。

42

41過去5年間におけるべトナム難民の罹病状

温度順化の形成過程における局所脳血流の
変化

小坂

況

天野

伸，藤原真理子

博之（天理相談所病院・海外医療科）

生理）

西山 利正，森田荒木光男，大渡（長崎大・熱帯医研・疫学一環境

恒治

博，瀬川

武彦，

（奈良県医大・寄生虫）

暑熱・寒冷順化ウサギにみられる脳血流の変化
から温度適応や体温調節機序を検索している。（1）

我々は来日するベトナム難民の健康状態に関し

温度25。C，湿度60％の環境条件で飼育したウサて大きな関心を寄せ，これまでもその検診結果をギ（非順化群）の視束前野（PO／AH），中脳網様体

当学会に発表して来た。1982年2月に，長崎県大（RF），脊髄の各局所血流量は村市に大村難民一時レセプションセンターが開設する入国時の健康診断が確実に実施されるように

minと有意差は無いが，LPS発熱物質投与による高体温時のPO／AH，RFの各血流は共に20％の有意な増加を示したが，この有意変化は暑熱なった。したがって，今後は，各施設における難（30。C，60％）・寒冷（10。C，60％）条件にて1カ月

民の罹病状況にも変化をもたらすことが期待され間飼育した温度順化ウサギのLPS一発熱期には殆され，今まで各施設毎に放任されていた難民に対36〜37m／100g・る。そこで今回，それ以前のベトナム難民の疾病ど消失した。（2）暑熱順化群のPO／AH，RFの血を総括する目的で受診状況を調査してみた。対象

流量は25。C・60％条件ではそれぞれ38．8，39．9

は1977年5月から1982年4月までの5年間に滋m1／100g・minで非順化群（既述）の値との間に賀県日野町の施設に入所したベトナム難民322名

有意差は無かった。寒冷順化群では31．7，28．9m1／（大人192，小児130；男210，女112）である。

1009・minで暑熱順化群との間に有意差があった。

平均年齢18．0歳（男18．9歳，女16．5歳），平均施（3）以上3群のウサギに皮膚加温（気温40。C）・冷設内生活者数68．13名であった。外来受診延総数

却（15。C）を行ってPO／AHの血流量を測定する

1，465件で，入院患者25件，21名であった。またと非順化群は加温で18．8％，冷却で一8。0％；暑この間に9名の出生があった。科別では，内科，

熱順化群では加温で1．6％，冷却で一5．4彩；寒冷小児科の受診者が多く42．7彩を占め，加えて，歯順化群ではそれぞれ5．5％，一2．8％の血流変化を科（26．7％）および泌尿器科（11、0％）受診者も認め，これらの変化は非順化群の加温時の18・8％

かなりの数にのぼる。呼吸器系，消化器系の疾患（P＜0．005）を除いてすべて有意の変化ではなかっが圧倒的に多く，循環器系疾患，貧血は見られなた。（4）この事はLSP発熱や皮膚加温による高体175

温時には非順化ウサギのPO／AH，RFの局所血流

methyl−celluloseを含む培養液で7日間，37。C

量は共に20彩の増加を認めるが暑熱や寒冷に順化したウサギでは，この量的変化が消失または減少で培養した場合，Tr1751株では直径1．2〜1．5mmとほぼ均一なplaqu6を形成したが，BR OO6株でする事を示し，所謂，Habituationの現象を示唆

は直径1．4〜1．8mm；19％，0．8〜1．2mm；50％，0．4

している。以上の結果の生理学的解釈や血流量変〜0．6mm；31％の割合，BR116株では直径1．4〜化の機序については温度順化形成過程における経1．8mm；10％，0．8〜1，2mm；29％，α4〜α6mm；

時的観察，特に各種体温調節反応指標や脳内組織

61彩の割合で形成され，大小不均一であった。まの器質的変化などの同時記録・照合が必要と考えた，各virUS株の温度感受性を検討するため温度られる。

（39〜35。C）変化によるplaque形成の差を検討した。Tr1751株ではほとんど影響は認められな
43

蚊培養細胞（恥xo 妙

c彪

卵σ撹60

171株）におけるDengue

肥π5

εvirusの増殖並びに形態学的な観察伊藤 富由，谷村 英紀，Thet−win，

山本

典巳，木村

富紀，大山

昭夫

（関西医大・微生物）

Mi

M．Khin（Virol．Res．Div．，D．M、R，
Burma）

かったが，BR

OO6株，BR116株では低温でplaque数は増加し，35。Cの場合37。Cに比較し，10〜100倍高く認めた。D−2感染TRA171細胞の電顕観察では他の蚊培養細胞と同様な所見を観察した。しかし，非感染細胞の細胞質に10nm，および15〜20nmの粒子の配列した構造，核内には100nmの電子密度の高い粒子も観察した。

以上の如くTRA171細胞はArbovirusの分離，同定には優れた培養細胞と考えられるが，非感染細胞の電顕観察でvirUS様粒子を認めた事は今後，非吸血性のToxorhツnch漉s属蚊を用いたAr−
virus増殖の宿主として疑問を投ずるものと考え
bovirusの分離，同定法は，従来の方法に比較し， る。
分離率の優れている事が報告されている。我々も蚊培養株化細胞を用いて，JEVおよびDengue

44Trアpσ 050漁αc摺4とSOrague・Dawley
ラット腹腔マクロファージとの相互作用のvirUSの増殖に関する研究を行い，報告してきた。
今回Toxorhアnch

εsα〃めo∫n召n3（TRA171細胞）を用い，Denguesの株化細胞virus

超微形態学的研究

type2

三浦左千夫，竹内（D−2）の増殖の様相を検討した。virus株として，

勤，浅見

敬三

（慶大・医・寄生虫）教室保存マウス脳継代馴化株（Tr1751株），およ藤原び，ビルマのDMRにてDHF患者（BR OO6株），
並びにDSS患者（BR116株）より分離，D−2と達司（慶大・電顕）TrJ脚no50〃1αc耀z∫（Tulahuen stmin）（以下T同定された継代歴の極めて少ないvirUS株を用い

c耀z∫）はSprague・Dawley（以下SD）系ラットにて比較，検討した。

感染しないが，同系のヌードラットは強い感受性

TRA171細胞におけるvirusの増殖は，何れのvirus株とも感染48時間後より細胞凝集を伴う
CPEを認め，螢光抗体法による観察でも核膜周を示す。従ってSD系正常ラットとヌードラッ

辺部，および細胞質内に特異螢光陽性部位を認めが可能になるものと思われた。従来の検討においた。Vero細胞を用いたplaque法による定量は，てはSD正常ラットではT

感染5日後にBRトを対比して検討する事により正常ラットの示すTc酬z∫に対する強い抵抗性のメカニズムの解明

c剛z∫腹腔内接種にOO6株では106御7PFU／m1，BR 対して液性抗体の出現，白血球遊走阻止等が観察

116株では105岬6PFU／m1に達し，10日目までこされた。そこで免疫担当細胞等のヌードラットヘの値を維持した。一方，Tr1751株では6日後にの移入実験も行ったがいずれもT

108PFU／m1に達した。Plaque形成は1・2％は発現しなかった9今回はTc耀z∫感染当初干生

c剛z∫感染防御

176

体防御反応の上で重要な役割を演じうる腹腔マクするとDV産生が増大した。

ロファ」ジに注目し，T C耀z∫とラット腹腔マク
ロファムジとの相互作用にっ1・て超微形態学的にて増大し，carrageenanの添加により抑制された。

検討した。その結果SD正常ラットとヌード

しかしマウス脾細胞とのco−cultureにより特にラットの腹腔マクロファージの間ではParasito−

増強されなかった。Limulus

phorous

細菌LPSの関与の可能性は除外された。

vacuole内の虫体処理能力に差がある事が示唆された。また正常ラットマクロファージの（2）

この効果は抗原の添加量と添加時間に応じtestの成績により，（3）抗原処理によりDV感染Mφの数が増加

虫体処理能力はcarrageenan投与により抑制され，したが，一方，Mφ自身の1atex粒子またはブド

ヌードラットマクロファージ内に観察される虫体

ウ球菌食作用の増強も認められた。

増殖像と同様の所見が得られた。

（4）Sephadex濾過による分画も同様の効果を示したが，見掛け上1，IIIの効果がIl，IVにくらべて強い傾向が示された。

45

マウス腹腔マクロファージ培養におけるデングウイルスの増殖に及ぽす回虫抗原の影
46

響
Agus

S．Wiharta，堀田博（神戸大・医・微生物）堀田

実験的トキソプラズマ感染マウスの胸腺萎
縮について
田辺 將信
Norman進（神戸大・医・国際交流センター）

松村 武男（神戸大・医・医動物）（慶大・医・寄生虫）

Chen，Walter

Stahl，

Brian Grimwood
（New

York

State

Department

of Health）

Sujudi（インドネシア大・医・微生物）

辻守康（広島大・医・寄生虫）
我々はマウス腹腔マクロファージ（Mφ）とデン

慢性Tbxρρ10s灘80n4∫（Tp）感染マウスの胸腺萎縮について報告する。実験にはNya：

グウィルス（DV）との関連を追求し，Mφの培養を

NYLARマウスを使用し，Tpは強毒（RH）および弱毒（CS）株を用いた。弱毒CS株を感染させ細菌菌体成分（LPS，細胞壁成分等）で処理すると，たマウスの胸腺の変化を経日的に観察した。胸腺

培養細胞からのDV産生が増大することを知った

湿重量は感染1週から5週にかけて減少し，5週（Microbiol．Immunol．，26，665，1982；ICMR

から7週にかけて一時的な回復がみられ，その後

Annals2，65，1982；Infbct、Immun．，41，462，

再び減少した。この変化にほぼ一致して胸腺の蛋

1983）。それに引き続いて寄生虫（オsoor∫s側μ1nお

白およびDNA含量の低下が認められた。病理組

よびPoros6ロr∫3θ卯o耀脚）抗原の効果を検討した。 織学的には，皮質小リンパ球の消失および皮質・Mφ培養術式は上記論文に既報の通りで，抗原は泓s膨規では虫体体腔液，丑8卯orμnでは細髄質の境界不鮮明化が観察された。胸腺の∫nv∫voDNA合成能は感染の1週から4週において切虫体の0．1％NaCl液抽出物を粗抗原とし，有意に低下していた。また感染の7日から14日にSephadex

おけるマウスの胸腺細胞はG−100濾過により4種の分画（1，II，

n

v∫

ro

DNAおよびIIl，IV）を得た。抗原の蛋白，糖の定量，limulus

蛋白合成能の有意な低下を示した。また，感染マ

amebocyte

testなどは定法の通り行い，ウスの胸腺内チミジンキナーゼ活性の顕著な低下

またMφの1atexあるいはブドウ球菌食作用をも観察された。一方，Tp感染マウスの血漿中コ

既報の通り実施した。

ルチコステロン含量は対照に比較して低下する傾lysate

得られた成績の要点は次の通りである。

向を示した。そこで，次に非感染系モデルを用い（1）Mφ培養にDV（2型，Trinidad株）はほて，このTp症における胸腺萎縮の病原機構の解

とんど増殖しないが，これを上記回虫抗原で処理析を企だてた。Tpが感染しているマウスの血清・

177

腹水，あるいは培養BHK細胞にTpを感染させ球の軽度な増加とマクロファージの〇三産生の増て得たメディウム上清を濾過滅菌し，正常マウス

加が認められたが，脾臓細胞培養上清と血清のに投与した。この結果，投与後5日から7日目にMIF活性は変化しなかった。Tp−LKsとの併用投は胸腺湿重量の低下，蛋白・DNA含量の低下，与によって感作されたマウスは・MIF活性の上チミジンキナーゼの活性減少，胸腺細胞の∫n

昇と，マクロファージ貧食能の尤進が認められた。

roDNAおよび蛋白合成能の低下等が観察され以上のことから，TLA−FIA乳剤の投与，あるた。しかしながら，腹水・血清あるいはメディウ

いは，リンホカインとの併用投与により，マウス

ム上清いずれにおいても，正常胸腺細胞への直接はバベシア感染に対する感染死防御能が充進し，的な影響は見出せなかった。以上の成績は，Tp

その機構の一部に，マクロファージの活性化が関感染マウスの胸腺萎縮がTp由来の何らかの物質

与するものと推察された。

v1に起因していることを推測させる。この点について今後さらに検討を加える予定である。

47

トキソプラズマ抗原接種によるマウス・バ

48

トキソプラズマ性リンパ節炎の血清学的診断について
小林 昭夫，渡辺 直煕，鈴木 康弘，

ベシア感染に対する感染死防御効果とその

牧岡

朝夫，片倉

機構について小川
了，桜井 治久，齋藤 篤志，

浜田

篤郎

鈴木

直義

（帯広大・獣医・生理）

バベシア感染に対する宿主の発症軽減，あるい

賢，平井

徳幸，

（慈恵医大・寄生虫）

後天性トキソプラズマ（Tp）症の代表的病型であるTp性リンパ節炎に対する，血清反応による診断基準を求めることを目的とし，リンパ節の病理は予防効果賦与物質の検索を目的として以下の実

組織学的所見から本症と診断された10例，対照と験を行った。

して悪性リンパ腫13例，上記以外の一般外来患者368

まず，トキソプラズマ可溶性抗原（TLA）と共例につき，各種血清反応を施行，結果を検討した。

に，マウス・バベシア・リンホカイン（B−LKs）お色素試験（DT）：Tp性リンパ節炎全例が抗体価

よび，マウス・トキソプラズマ・リンホカイン

1，024倍以上，80％が4，096倍以上を示したのに対（Tp−LKs）を用いて，マウス・バベシア原虫（Bo一し，悪性リンパ腫では全例が64倍以下，一般外来

加5如ro4hα∫n∫）感染に対する，免疫アジュバント

患者では殆どが256倍以下であり，最高1，024倍を効果の有無について基礎的検討を行った。

示した者は僅かに1．9％に過ぎなかった。間接ラ

TLAとFIAの乳剤（TLA乳剤）を投与する テックス凝集反応（ILA）：Tp性リンパ節炎全例
群，TLA乳剤とB−LKsあるいはTp−LKsを併用

が512倍以上を示し，57彩が4，096倍以上であった

投与する群とし，14日おきに2回腹腔内投与した。 のに対し，悪性リンパ腫では全例256倍以下，一般外来患者では4，096倍以上はなく，512倍以上は初回処理から28日目に，R ro4hθ∫n∫感染赤血球102個を腹腔内接種した。

12．8％に過ぎなかった。間接赤血球凝集反応

無処置群では，感染後12日目までに全例死亡し（IHA）：Tp性リンパ節炎全例が1，024倍以上を示た。TLA乳剤投与群では14例中5例，B−LKs併用群で15例中8例，Tp−LKs併用群で15例中11例

し，89％が4，096倍以上であったのに対し，一般外来患者においても1，024倍以上28％，4，096倍以が20日目以降も生残し，これらの処置が，マウ上13％と高い抗体価を示す例がみられた。間接螢

ス・バベシア感染に対し宿主抵抗性を賦与するこ

光抗体法（IFA）一IgM：Tp性リンパ節炎全例が16とが示唆された。

倍以上を示し，63％が32倍以上であったのに対し，以上のことから，我々は，このような感染死防悪性リンパ腫は全例8倍以下，一般外来患者は16御の機構について1，2の検討を行った。

TLA乳剤によって感作されたマウスは，白血倍以下20．8％，32倍以上4．3％に過ぎなかった。

以上から次の結論が得られた9リンパ節腫張患

178

者でDT，IHA1，024倍以上，ILA512倍以上，特異性が秀れている事が明確にされた。現在我々

IFA−IgM16倍以上の場合，Tp性リンパ節炎の可能性がある。さらにDT，ILA4，096倍以上，IFA−

新生児の臨床経過を追っている。

は・IgM−ELISAを用い，Tp抗体陽性妊婦やそのlgM32倍以上の場合，本症の可能性は極めて高いo501gM酵素抗体法（ELISA）によるトキソプ
ラズマ（Tp）急性感染妊婦の検索

49 酵素抗体法によるトキソプラズマ特異IgM
抗体検出に関する研究
中島ひとみ，土橋

松本

賢治，鈴木

土橋 賢治，鈴木松本寛，慶蔵（長崎大・熱帯医研・内科）

妊婦が妊娠中にトキソプラズマ（Tp）初盛染を寛，中島ひとみ，

慶蔵（長崎大・熱帯医研・内科）

妊婦が妊娠初期にTp症に感染した場合，先天性Tp障害児出産の可能性が指摘されている。現

うけると，流・死産，奇形児出産の可能性がある

在我々はTp一急性感染の血清診断に，ELISA法によるTp−IgM抗体の検体を行っているが，今と言われ，妊婦のTp感染症診断においては，感回Tp−IgM抗体保有妊婦における妊娠経過及び，染時期を知る事が重要である。現今，急性感染か新生児への本症の影響を調べた。また本IgM
否かを判定する際には，Tp特異lgM抗体価の測 ELISA法によって検出されたTp−IgM抗体の意定が不可欠である。そこで我々は，Tp特異IgM 義に関しても詳細に検討を行った。
抗体検出法としての，間接赤血球凝集反応（IHA

昭和51年12月より昭和58年9月までに検査した法）・ラテックス凝集反応（LA法）・酵素抗体法

血清3，728検体の中で，急性Tp感染症が疑われ（ELISA）を比較検討した。

た283検体をプロテインA処理した後，Tp−IgM
ELISA法にてTp−IgM抗体価を測定した。10倍

検査対象は，長崎大学熱研内科のTp陽性患者
血清195検体と長崎市医師会より検査依頼をうけ以上の高値を示したものは35症例・66検体であった妊婦血清3，176検体，合計3，371検体である。また。妊婦は31症例であり，この内経過を知り得た

ず，全検体をIHA法にて測定し，主に高い抗体 23症例では，人工中絶，自然流産が各1症例ずつ価を示した189検体に対してプロティンA処理を見られたが，残りの21症例では母児共に異常は見行い以下の実験に用いた。

られなかった。高いTp−lgM抗体価を示した8
成績としては，IHA法では12検体，LA法では 症例で，さらに精査を行った。その結果，新生児16検体でIgM抗体の存在が疑われたが，さらに には先天性のTp感染は1例も発見されなかった。
ショ糖密度勾配遠心法による確認試験を行った結

その他，この検査の中で母親の血清中に，感染よ

果，IHA法では全く検出できず，LA法では2検り数年を経た今日においてもTp−IgM抗体が存体で検出した。ここで，感度・特異性が高いと言在していることが判明した。詳細に検討した結果，われるELISAを試みた。本法には，lgG抗体

急性感染によって上昇したTp−lgM抗体は，そ価測定用キットをIgM抗体価測定用に転用する方法を用いた。高いELISA値を示した検体につの後次第に減少するが完全には消失せず，ほぼプいてショ糖密度勾配遠心法を行った結果，lgM分とが推測された。また慢性Tp症の急性増悪にお画にのみ抗体が存在する事が証明された。さらに，特異性確認のためにTp虫体による吸収試験も実いては，IHA及びTp−lgG ELISA値は著明に上昇するが，Tp−IgMELISA値は上昇せず，従っ施したが，明らかにTp由来のIgM抗体であるて，Tp−lgM抗体の上昇の有無によって初感染か，事が示された。

慢性Tp症の急性増悪かの鑑別が可能であると考以上より，ELISAは，Tp特異IgM抗体検体法としてIHA法やLA法に比しはるかに感度・ラトーの状態にて患者血中に長期間検出されるこえられた。今後の課題として，本IgM

ELISA法を用いる場合，急性感染と見なしうる，また先天179

2峰性を呈し，陽性率の違いにかかわらず陽性群

性

Tp障害児出産の可能性を示す，Tp−IgMの抗体量はELISA値の05−0、7をピークとし男
女間・年齢間で有意差は認められなかった。また

ELISA値を明確にする必要がある。

市街部と農村部とでは抗体保有率，保有量ともに

51 トキソプラズマ抗体保有状況と感染経路に関する1疫学調査

小西

英二，高橋

有意差はなかった。アンケート調査の結果，ネコ飼育経験の有無は陽性率と有意に関係しなかった

純子，松村

武男

（神戸大・医・医動物）

トキソプラズマ（Tp）は先天性奇形や免疫力低が，一方，50歳代の女性と60歳以上の男女において生肉摂食経験者の陽性率は非経験者に比べて有意に高かった。

下時の日和見感染を引き起こす原虫であり，ヒト

一度感染を受けると宿主はTpを容易に排除でヘの主要な感染源はネコ糞便中に排出される卵嚢

きないために年齢とともに陽性率は上昇するが，子や食肉中の嚢子と考えられている。今回，兵庫

抗体保有量に差のないことから宿主の免疫におい

県三木市住民を対象とした抗体保有調査を実施して一種の平衡状態が存在するものと思われる。陽

Tpの感染経路について考察した。

性率の男女差については生肉摂食経験率

調査に供した血清は1982年7月から9月にかけ（男，

41．6％，女，17．2％）の差が一因であろう。一般て健康診断で集められた総数891検体で，Tp抗体にネコから排出される卵嚢子は感染力が強いが，を酵素抗体法（ELISA）により定量した。

現在の三木市の環境下ではヒトの感染機会はネコ

陽性率は年齢とともに上昇し，50歳代以上の男の飼育とは関係しないことが明らかにされた。

女には有意差が認められた （男：42。5％，女：（兵庫県三木保健所の御協力に感謝します）。

22．8％，P＜0．001）。抗体量の頻度分布は典型的な

Japan. J. Trop. Med. Hyg., Vol. 12, No. 3, 1984 pp. 181‑226

181

PROCEEDINGS OF XXV ANNUAL MEETING OF
JAPANESE SOCIETY OF TROPICAL MEDICINE
1 7‑19 O.t.b.* 1 983 L** A*dit.*i* T.y""ak*

CONTENTS
Symposium : Recent malaria status and control at home and abroad, Japan
Chaired by M. Otsuru

Symposium : Activities of toxic component of venom in snakebite
Chaired by Y. Sawai

Group reports : Virological and epidemiological studies on encephalitis innorthern part of Thailand Chaired by A. Ohya
(Appeared in the last issue)

General presentationl Application of formalinized goose red blood cells to arbovirus hemagglutination(HA) and hemagglutination‑inhibition (HI) tests A. Sompop et al.
2 Sero‑epidemiological investigation on Japanese encephalitis virus transmission

among pigs in Eastern Thailand (Chanthaburi Province) H. Ito et al.
3 Seroepidemiological survey of polio in Thailand, 1977‑1982 M. Yamada et al.

4 Enzyme‑linked immunosorbent assay on sera from dengue hemorrhagic fever

patients in Thailand K. Bundo and A. Igarashi

5 Studies on the positive rate of HBs‑antigen of donors in the Republic of Malawi
C. Takaoka et al.

6 The risk of hepatitis infection in developing countries ‑Foreign sojourners versus
local residents‑

I. Ebisawa et al.

7 Specificity of the typing phages for Vibrio cholerae based on the receptors of pro‑pagating strains and application of phage typing to V. cholerae biovar eltor isolated
T. Naito et al.

in Kenya
8 Study on anaerobic bacteria in the soils in Indonesia

Y. Okuwaki et al.

M. Shimada et al.
9 Schistosomiasis haematobium in Kwale district, Kenya
10 Efficacy of a purified egg antigen ibr ELISA in the diagnosis of schistosomiasis' ' M. Owhashi et al.

Japonrcal I Malarial antibody detection by enzyme linked immunosorbent assay

T. Shibuya et al.

12 A method for detecting malaria parasites T. Yanagi et al.
13 Phylogeny, population genetics and bionomics which concern to epidemiology ofvectors of malaria and their related entities of anopheles in East Asia T. Kanda
14 An ecological survey on larvae of Anopheles sundaicus in a coastal village of North

Sumatra, Indonesia C. Imai et al.

15 A case of rapidly‑developed falciparum malairia Y. Otsuji et al.

16 Two cases of recurrent vivax mala;ria ‑ K. Tanabe et a.1.
1 7 Clinical evaluation of Smx!Tmp on treatment of patients with malaria
K. Yamaguchi et al.

182
18 Distribution of Angiostrongylus cantonensis in Nagoya City ‑Infection rate of house

rat populations K. Makiya and K. Onitake

1 9 A helminthologic,al survey on black‑bass, Micropterus salmoidcs in the Kinki district

20 Effects of flubendazole and mebendazole on encysted larvae of Trichinella spiralis(USA Strain) in mice J. Maki et al.

2 1 Giardia lamblia : Inhibition of respiratory activities and growth in vitro by bithionol

S. Kobayashi et al.

22 Some relative chages of onchocerca microfilaria positive rates during four years
Y. Ito et al.
survey in six endemic areas of onchocerciasis in SVP, Guatemala

23 Studies on the transmission of onchocerciasis in the territory of Amazonas,
H. Takaoka et al.
Venezuela
24 Epidemiological studies on loiasis in Nigeria 2. Surveys of microfilaria andsurveys of vectors, C'hrysops
E. Hori and E. O. Ogunba
25 Survey of mosquitocs in Chanthaburi Province, Thailand, with special reference
to the epidemiology of mosquito‑borne diseases

K. Buei et al.

26 Seasonal change in the oviposition activity of Culex pipiens pallens in Shanghai in
l 982

O. Suenaga et al.
27 Time course observation of the parasitological infection ofJapanese inhabitants intropical countries and the pollution of the drinking water

28
29

K. Fujita et al.

Detection of intestinal protozoa from oversea travelers

A. Kimura et al.
Chemical and bacteriological analysis of the drinking water of the tropical countries
K. Fujita et al.

30

Bacteriological study of the drinking water in Indonesia Y. Okuwaki et al.

31

Snakebites on the Amami Islands in 1982 Y. Kawamura and Y. Sawai

32

Snakebites in the Okinawa Prefecture in 1982 Y. Araki et al.

33

Studies on prophylaxis against Habu snake ( Trimeresurusflavoviridis) bite with Habu‑

venom toxoids in the A･mami Islands, Kagoshima Prefccture, Japan ( lO)
H. Fukushima et al.
34 The cause of deaths due to snakebite in Anuradhapura district of Sri Lanka
Y. Sawai et al.

35 Proteinase in the venom of Okinawa Habu ( Trimeresurus flavoviridis) : purification

36
37

and properties T. Omori‑Satoh and S. Sadahiro

Health control strategy for residents in the tropics T. Shibuya and K. Kamei
Enquete study for health of the Japanese, resident abroad in Africa
T. Kasagi et al.

38 Medical cxamination of the Japanese stationed in Middle East and North Africancountries H. Ohara and S. Tani

39 Diseases ofJapanese people in Southeast Asia and India ‑Report of the travelling
medical consultation service dispatched by the ministry offoreign affains‑

Y. Yamamura and T. Takashima
40 Medical situation of Kilimanjaro Christian Medical Centre in Moshi, Tanzania
E. Okumura et al.
41 The problems on the health states of Vietnamese refugees during the past five42
43

years H. Amano et al.

Local cerebral blood flow in the process of thermal acclimation M. Kosaka et al.
The studies of dengue virus type 2 in Toxorhynchites cell line (TRA‑171) replica‑tion and morphological observation T. Ito et al.
44 Ultra$tractural studies on the interactiQn of p ritoneal macrophages Qf rnu!rnu

l 83

and rnuj+ of Sprague‑Dawley rats with Trypanosoma cruzi S. Miura et al.
45 Effects of ascaris‑parascaris antigens upon multiplication of dengue virus in mouse

46
47
48
49

A. S. Wiharta et al.
peritoneal macrophage cultures
M. Tanabe et al.
Thymus atrophy in experimental murine toxoplasmosis
Body defence mechanism in mice sensitized with toxoplasma lysate antigen against
R. Ogawa et al.
babesia infection
A. Kobayashi et al.
Serologic diagnosis of lymphadenopathic toxoplasmosis

Study on detection of toxoplasma specific lgM antibody by ELISA
H. Nakashima et al.
50 The investigation of pregnant women infected with acute toxoplasmosis
K. Tsuchihashi et al.

51 Some epidemiological aspects of toxoplasma mfectrons among mhabitants m Japan
E. Konishi et al.

184

Generalpresentationl AP肌ICATION OF FORMAHNIZED GOOSE RED BLOOD
CE皿S TO ARBOV皿US HEMAGGLUTINATION（HA）AND
HEMAGGLUTINATION・INHIBITlON（HI）TESTS
A．SoMpop1，N．SoMBooN1，1、WALLApA1，P．KRAwAN1，C．KANAI1，
B．DAMRoNG2AND HoMu ITo3
Virus ResearchandInstitute，Bangkok1，Prapokklao

CentralResearch

Divison，Takeda

Hospita1，Chanthaburi，Thailand2
ChemicalIndustries，Ltd．3

Arthropod bom（arbo）virus in艶ction is a serious problem in Southeast Asian
countries．In serodiagnosis and seroepidemiological studies on arbovirus infbction，
the HI−test，developed by Clarke and Casals（1958），has been widely used as astandard

A

test．Erythrocytes

collected

difnculty

associatedinstability

of

the

red

blood

bleedingofthefbw1，subsequent

HA

m司or

againstIn

toJE，Dengne
ofoff卜esh

type
human

Namcly，FGRBC
ologicalerythrocytes，however，isis，theuseoferythrocytes

treatmentoferythrocytes，andf｝eshinvolves

thef｝equent

standardizationofthe arbovirus HLtcst which is widely used in Southeast

attempt

wasfbrmalinization，so that they cantitersused．

prepared

cells，that

simplify

countries，anComparison

chicks or geesc have been routinely

fヒeshly

assay（HI−test）．

order

Asian

fヒom

with

and

storedfbrmalinized

l，2，3and4andand

pig sera

was｛bundHI−testbecarriedtotoarbovirus

out
fbr

to

a

stabilize

long

time

erythrocytes

and

this

trial

goose erythrocytes（FGRBC）in

of

goose

by

was

successfULHI

assaysfbr

chlkungnya virus antigens showed that antibody

were

the

be usefUlsame，or within one

fbr

the

routinedilution of each other．

serodiagnosis

orepidemi−in｛bction．

2SERO−EPIDEMIOLOGICAL INVESTIGATION ON JAPANESEENCEPHAHTIS VIRUS TRANSMISSION AMONG PIGS IN
EASTERN THAILAND（CHANTHABURI PROVINCE）
HoMu ITo1，TAKEo MIYAzAKI，MEGuMI HAsEGAwA2，N．SoMBooN3，
K WATANA3，A．SoMpops3，B．DAMRoNG4，YosHINoBu OKuNo5
AND
CentralResearch

Division，Takeda

KONOSUKE
Chemical

FUKAI5

Industries，Ltd．1，Chanthaburi

Pr句ectHeadquarter ofJapan Intemational Cooperation Agency，Bangkok2，Virus ResearchInstitute，Ministry of Public Health，Thailand3，Prapokklao HospitalラChanthaburi4

Sera

and

ResearchobtainedfヒomInstitutefbr

Microbial

monthly bleedings

Diseases，Osaka

University5

ofpigs in Chanthaburi municipal slaughter

185house were determined for HI titer against JE Nakayama antigen during the period
from July 1982 through to June 1983.
Seasonal periodicity in the fluctuation of HI antibody positive rate was observed.
The positive rate was nearly 1000/0 in rainy season (June to September, 1982) and in

the following several months (October to December, 1982). HI negative rate
gradually increased from January 1983 and became highest in May 1983 (670/0)'This high negative rate abruptly dropped to Oo/o (=1000/0 Positive) in June 1983.
The marked sero‑conversion seems to be closely related to the starting of rainyseason which resulted increased vector population.
The results of observations suggest that there is a seasonal peak in transmissionof JE virus in pigs in Chanthaburi similar to the observations in temperate zones
such as .Japan.

3 SEROEPIDEMIOLOGICAL SURVEY OF POLIO IN
THAILAND, 1977‑1982

MITSUAKI YAMADA1, SHlNNOSUKE KAT02, EIJI WATARll, HIROSHI SUZUKll
MICHIRU KUSAMA1, YUKIO YAMAZ11, YASUSHI MIK13
SOMBOON SUPRASERT4 AND JIRAPORN SUPAWADEE5
Department of Microbiologyl and Department of Public Health2, Nippon Medical School,
Yamanashi Public Health Institute3, and Department of Community Medicine4and Department of Microbiology5, Chiang Mai University

Sera from 1,318 persons aged O‑72 years old were collected at Chiang Mai
Province and Bangkok in Thailand by the Society for Medical Research in Southeast

Asia, Nippon Medical School in 1977‑1982. These sera were examined by the
micro cell culture method for determination of the Polio neutralizing (NT) antibody
titer using Vero and HeLa cells.
Polio antibodies were found in 0‑40 per cent of children at the age of one year
when they had lost maternal antibody but 70‑lOO per cent of the antibody positive
rate was observed in each age group over six years.
Distribution of the antibody by age were somewhat different in different geo‑
metrical areas. Children younger than nine years of the Karen tribe and of employeesof the Raming Tea plantation living in high land showed lower antibody positive
rates against type I and type 2 than the adult of the each group. Antibody positive
rate of children in Chiang Mai against type I and type 3 were lower than those of
adults in the same area. In Bangkok a low antibody positive rate against type 1
and type 3 were observed in children younger than nine years.
Difference of the antibody positive rates was not observed between group ofchildren living in rural areas and those in urban areas, if they had been immunizedwith the oral polio vaccin (OPV).
After immunization of the trivalent OPV, increase of the NT antibody against
the type 2 and type 3 were more different than the type I .

186

4 ENZYME‑LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY ON SERAFROM DENGUE HEMORRHAGIC FEVER PATIENTSIN THAILAND

KEIKO BUNDO AND AKIRA IGARASHI
Department of Virology, Institute for Tropical Medicine, Nagasaki University

Dengue hemorrhagic fever (DHF) is a viral infection with greatest publichealth concern in Southeast Asian countries attacking many children with severe
manifestations of shock syndrome. Recent advance in the diagnostic virology has
introduced enzyme‑linked immunosorbent assay (F.LISA) to the serodiagnosis andseroepidemiological study on various viral diseases. We attempted to apply the
ELISA to sera from DHF patients in Thailand.

Sera were obtained from Chiang Mai and Chanthaburi in Thailand. As
controls, encephalitis sera from Chiang Mai and those from Japanese encephalitis(JE) patients in Japan, as well as from healthy adults in Chiang Mai and Hokkaido
were examined. ELISA antigens of dengue viruses were concentrated from culture
fluids of Aedes albopictus, clone C6/36, cells infected with one of the four types of dengue

viruses; type 1, Hawaiian, type 2, New Guinea B, type 3, H‑87, and type 4, H‑241
strains, by using polyethylene glycol precipitation and ultracentrifugation. Antigen
of JE virus was formalin‑inactivated purified JE vaccine concentrate (Research
Foundation for Microbial Diaseses of Osaka University), and indirect micromethod
was used in the ELISA. Hemagglutination‑inhibition (HI) titers ofsera were assayedby Clarke and Casals' method with modification to microtiter system.
Correlations were obtained between the logarithm of the HI (X) and that of thelgG‑ELISA (Y) for sera from DHF patients, with correlation coeficients between
0.82 to 0.88 according to the assay antigens. Forty seven out of 66 pairs of DHF
patients' sera showed 4‑fold or more titer rise by any of the four types of dengue or JE
antigens, and 34 of the latter also showed 4‑fold or more titer rise by the lgG‑ELISA,

and the remaining 13 specimens possessed the lgG‑ELISA titer over 16,000. On
the other hand, IgG‑ELISA could detect 4‑fold or more titer rise in 39 pairs of the'‑pecimens, five of which did not show positive results by the HI test. IgM‑ELISA

was performed on sera from DHF, as well as from encephalitis patients, and theresults showed that the patients with primary type of HI antibody response possessedhigher lgM‑ELISA titers than those with secondary responses, and also that thehigher lgM‑ELISA titers were obtained by the homologous than the heterologous
assay antigens.

These results and the frequency distribution of ELISA titers indicated that the

ELISA can be applied to the serodiagnosis or seroepidemiological survey on DHF
and also to the differential diagnosis on JE from dengue infections.

187

5

STUDIES ON THE POSITIVE RATE OF HBs−ANTIGEN
DONORS IN THE REPU肌IC OF MALAWICHIYoKo

TAKAoKA1，NoRIKo KIKucHI1，YuKo
AND SHINKIcHI AKAo3
Japan

Overseas Cooperation

CentralDepartment ofParasitology，National De佃ense

transfhsion，it

However，there

is

is

easy

no laboratory

toinfbctsystemKAzuMI2

volunteer1，

Department of Clinical Laboratory，Ageo

In blood

OF

in

case

to check

Hospital2andMedicaloftheCollegc3

donor

having

HBs−antigen、

the HBs．antigen ofdonors inthc

R．epublic ofMalawi．
This report describ6s the positive rate of HBs−antigen and a、ntibody of thedonors in Kamuzu Central HospitaL In case of taking a blood transfUsion，HBs−
antigen becomes an issue．It is important fbr the patients，Malawian medical staff
and other people．According to the Jocv，about loo Jocv members stay in thc
Republic ofMalawi up to date．
The

positive

rate of HBs−antigen

cent

the donors． This

is24．6per

HBV

on

is5．3perreportcent，and the positive rate of antibody

suggests

that

there

is

a

great

possibilityofspreading．

6

THE

RISK

OF

HEPATITIS

cOuNTRIEs
IsAo

LOCAL

EBIsAwA1，SuGlsHI
SAcHIKo

Department

CooperationofPublicIN

DIEVELOPING

soJOURNERs7ERSσSRESIDENTS一OTANI2，MAsAHIsA
ITo2AND HIRosHI

Health，Toho

Volunteers2and

INFECTION−FoREIGN

university

schoolDepartment ofMedical

OwRI2，MITsuYo
OHARA3OMoTE2，ofMedicine1，Japan

Overseas

Zoology，Kanazawa

MedicalSchoo13The yearly incidence of hepatitis among the Japan Overseas Cooperation
Volunteers（」OCV）was3．25（range2．O to4．9〉per100persons per year during
1978−1982、 The incidence was high in Southeast Asian（Philippines，Nepal and
Bangladesh），peri−Meditcrranean（Syria，Tunisia and Morocco）and A位ican（Ghana
and Zambia）countries．The incidence ofhepatitis in twoyears ofassignmentreached
five to32pcr cent ofvolunteers during1978−1980in those countries．They contracted
hepatitis throughout two years of sqjoum，although a small accumulation of thepatients was seen between seven and nine months after arrival in the assigned

country．Hepatitis
andhepatitis
The

A（HA）predominated，but

B（HB）werealso

hepatitis non−A non−B（HNANB）

diagnosed．

yearly incidence of hepatitis in

the

Jocv

was

compared

with

that

of

thc

188

Burmesepeople30timeshigher risk ofhepatitis

ofthe

same

age group．It
in免ction

was

fbund

7 SPECIFICITY

OF THE TYPING

that

than the Burmese

C丑OLER∠E BASED

ON

THE

theJOCV

ran

more

than

youths．

PHAGES

FOR

RECEPTORS

OF

VBRm

PROPAGATING STRAINS AND APPLICATION
OF PHAGE TYPING TO V．CHOLER、4E
BIOVAR EL7りR ISOLATED IN KENYA
TATsuRo
Department

Using

the

NAITo，HIDEAKI SHIGENo

AND KENJI MoRI

ofBacteriology，Institute｛br Tropical Medicine，Nagasaki University

bacteriophages

fbrtyping臥ohoJ8rα6and

their

and

Phages1−5andStrain757fbr6麗or

andclassical，thesensitivities

PhagesofI−IV

phage−resistanttestedtoclarify speciHcities ofthe phages．From Strain757，

strainsofphage−resistantmethodorN−methy1−N1−nitro−N−nitrosoguanidine

aresensitivities

idcntical

andtreatedby

NTG，only

resistanttoPhagesmutants

ofmutants

fbr

to eachPhages2，3and4aretheothers

were

cach

phage

independent

were

isolatedisolatedbyfヒom

directparentstrain。Sum−

be

that

Phages l and5

said

each

other．From

The

half

isolated．

resistant tomutants

treatedphage，it can

l54／1an⊂1154／11werc

I，and

H−218fbrphagessevcraltheStrains1540r

the

were

marizing

strains，

topropagating strains

fヒom

propagatingallphages．

Strain154

of154／1were

only

All of154／11showedsensitivity

to Phage I．In the case of Strain H−218，resistant mutants to phages
were also isolated by NTG treatment．Nearly halfofH−218／1remained sensitivities
to Phages ILIV，and the remainings and all other mutants were resistant to Phages
I−IV．These

results

indicate

that

there

is

a

close

relation

among

Phages

II−IV．

Atotalof434strainsof臥ohoJθ7α6biovar6」∫orisolatedinKenyaweretypedby
Phages1−5．Phagc

typesof294strains（67．7％）were decided by theafter

typingand83．6percenttypin言，thethe

secondadditional

test．Afしer

the

fbrth

two of thesame pattems

in

fbur

reproducibility

phage

types

of

thc

phage

were

as

fbllowsl

oftheremainings

fbr8」彦07was

same

classified

remaining23strains

rcsults．From thesetypingwereresults

after

an

were

classifiedbyresults，it can besaid that

the

good

enoughType4：191（44．0％），Type3：ltoapply．

The

resultedl8（27．2％），Type

l：49（1L3％），Type5：48（1L1％），untypable：23（5．3％），Type6：4（0．9％），Type2：1（02％）．

Untypablc strains showed

fbllowingpa，ttemsl一十十一十：2，一一十一十：1，

一一＋一＋：10，＋＋＋一一：2，＋＋一一一：3，一＋一＋一：1，＋一一一一一：1，
一一一一一：3．Fromitcanprophagebethegeographicaldistribution

said that the phage typing

will

give

ofphage

types

more

inlbrmation

typc fbr epidemiological observation ofcholera．

fbr

tested strains，
thanserotypc

or

1 89

8 STUDY ON ANAEROBIC BACTERIA IN THE SOILSIN INDONESIAYOSHIYUKI OKUWAKll, HISAE YANA11, KYOKO YUTAKAl
KOICHIRO FU.JITA2, SETSUKO TSUKIDATE2KENJI KUROKAWA2, MASATOSHI SUClYAMA3
AND TAKEO ASAKURA4
Department of Microbiology, Kagawa Nutrition Collegel, Department of Medical Zoology,
Nagasaki University School of Medicine2. Department of Hygiene, Juntendo University
School of Medicine3 and Japan Association for Tropical Medicine4

Tetanus is expected to affect 50,000‑60,000 newborns in Indonesia. Current
morbidity of tetanus in children is greater than three per cent and the mortality of
those affected reaches 45 per cent.
We sampled soils in various places of Indonesia in an attempt to isolate anaerobes.
Special emphasis was given to genus Clostridium.

Our first report was presented before the 23rd meeting. The results of ourreport were unsatisfactory. Therefore, we obtained a total of 2 1 samples of soil
from various places of Indonesia. The time interval of this survey included Juneto July, 1 982. On returning to .Iapan, the differential culture for type species weremade from the 2 1 soil samples.

As a result, 20 type species were detected, which predominates the previous
detection as to variety of type species. The most frequently detected was Clostridium
perfringens, isolated from 1 4 samples. This was followed by Clostridium cadaveris andClostridium au,rantibutyricum which were isolated from eight samples. Clostridium
tetani, which has attracted the greatest attention, was isolated from four samples.

We plan to make a distribution map of the genus C.lostridium in Indonesia bycollecting and studying more Indonesian soil.

9 SCHISTOSOMIASIS HAEMATOBIUM IN KWALE
DISTRICT, KENYAMASAAKI SHIMADA1, MIZUKI HIRATA2 AND JOHN OUMA3
Department of Parasitology, Institute for Tropical Medicine, Nagasaki Universityl

Department of Parasitology, Kurume University School of Medicine2
Division of Vector Borne Diseases, Ministry of Health, Kenya3ndSince 1 981 , we have been studying several aspects of the infection of S. haematobium

in Kwale district, Kenya, under the Communicable Diseases Research and Control

Prqject, supported by KEMRI (Kenya‑ Medical Research Institute) and JICA
(Japan International Cooperation Agency). This first report on schistosomiasis

190

describes the egg output pattern and the water contact pattern of' inhabitants in the
study area.

Of the 1,338 people registered by census, 851 suitable urine specimen werecollected successfully to be examined for the ova of S. haematobium. 581 or 68 percent were determined to be positive in the study carried out in May and .June, 1982.

The overall prevalence was higher in females than in males. However, there wasno statistically significant difference between them. The age‑prevalence distributionof males showed a typical pattern of S. haematobium infection usually reported in otherstudies. The infection rate increased with age in the first decade of life, and had aclear peak of 100 per cent at 10‑15 years of age. After the peak, the prevalence
dropped down rapidly and remained at about 60 per cent consistently in the older
groups. However, this usual pattern of age‑prevalence was not observed in females.
Although the prevalence also increased rapidly, and had a peak of 98 per cent at
the same age group, it declined gradually in contrast to that of males.
The overall geometric mean egg count of total population was 50.2 eggs per hour,that of males was 52.4 eggs per hour and that of females was 47.4 eggs per hour.
No statistical difference was observed. The age‑intensity distributions showed almost
the same patterns as that of age‑prevalence distributions in both males and females.

The water contact study was carried out̲ by the direct observation method.
A total of 323 people were observed at the observation sites in the first four months

from June to September, 1982. Ofthese, 164 were males and 159 were females. On
the geometric mean of duration of contact according to age and sex,, there was aremarkable difference between males and females. Among males, the childrenof age 5‑19 years showed a high level of water contact with a peak of 20.74 min
at I 0‑14 years of age. The geometric mean of contact decreased gradually with' age after the peak to the lowest level of 4.73 min at age 40‑49, then increased again.

On the other hand, the geometric mean for females showed two peaks ; at 0‑4 yearsof age, and at 30‑39 years of age.

An unusual pattern of age‑prevalence distribution of S. haematobium infection
was observed in females in contrast to males in this study, which might be explainedby the difference of the water contact pattern between males and females. Thissuggests the importance of study on the water c,ontact pattern in the epidemiologicalstudy of schistosomiasis. Furthermore, in spite of the increase of the degree ofwater contact in female at age 30‑39, the prevalence and intensity of the same age‑group still continued to decrease. This fact may suggest the existence of resistanceto reinfection of S. haematobium.

191

10 EFFICACY OF A PURIFIED EGG ANTIGEN FOR ELISA IN
THE DIAGNOSIS OF SCHISTOSOMIASIS JAPONICA
MAKOTO OWHAsrll, AKIRA ISHII, YOICHIRO HORII AND JUN‑ICHI IMAI
Department of Parasitology, Miyazaki Medical College

ELISA is a useful technique for immunodiagnosis of schistosomiasis. Thoughsoluble egg antigen is an excellent antigen for its sensitivity, it has some' degree ofcross‑reactivity with facioliasis, trichinosis or paragonimiasis. Purified antigen isneeded to get further specificity in ELISA. In this study, we obtained a purifled

antigen (J‑1, MW 260,000, pl4.9) from S, japonicum SEA by DE52 anion‑exchange
chromatography and gel filtration on Sephacryl S200, and examined its efficacy
for ELISA in schistosomiasis japonica. J‑1 showed a single clear precipitin band
against S. japonicum‑infected mouse serum in Ouchterlony immunodiffusion. In
addition to this, anti‑J‑1 serum caused significant COP reaction. From these result,J‑1 is likely to be one of the main antigens which cause the COP reaction. J‑l( I pg/ml) showed snnilar sensrtrvrty wrth crude SEA (2 5 pg/ml) m EI ISA Decreaseof cross‑reactivity with S, mansoni or S. haematobium was observed by the use of J‑1.
Cross‑reactivity with P. westermani or F. hepatica was completely abolished. On thecontrary, cross‑reactivity with T, spiralis was augmented by the use of J‑1. These
results suggested that J‑1 is a promising antigen' for serodiagnostic purpose.

11 MALARIAL ANTIBODY DETECTION BY ENZYMELINKED IMMUNOSORBENT ASSAYTOSHIRO SHIBUYAl, KISEKO KAMEll AND KlYOKATSU TANABE2
Department of Parasitology, Teikyo University School of Medicinel and
The Institute of Medical Science, The University of Toky02

Serum was obtained from a imported case of falciparum malaria and was
examined for serum lgG and lgM Ievel using enzyme linked immunosorbent assay.
A patient presented himself to our clinic with a complaint of fever with chillwhich had continued to occur every evening for seven days. He returned home from
East Africa after sojourn of one month. Blood examination revealed Plasmodium̲falciparum and venous blood was taken for further serological study. The incubation
period was estimated to be between 37 and 67 days. This was thought to be primary
infection of malaria considering his past history. Soon after blood taking, chloroquine

treatment was started and after three days no plasmodium was found in the bloodand fever subsided also.

Optical density of this serum read at lgG ELISA was 0.082 and showed nodifferenQe frQm thQse Qf tWQ nQrm.̲̲al cQntrols (0.044 and 0.060). IgM ELISA with192

the patient's serum revealed very high optical density of 0.503 as compared withthose of normal controls (0.058 and 0.089).

For comparison, IgG and lgM ELISA was performed similarly on two falciparum
malarial cases in an endemic area in Thailand, and also on the serum from an owl
monkey which had received several experimental infections of Plasmodium falciparum.
lgG antibody titers were higher in these three cases, but high lgM titer was observed

only in the sample from owl monkey.
It is interesting that immunofluorescence technique revealed high titer of bothlgG and lgM in this patient. The difference between the results obtained by ELISA
and by IF needs further analysis.

12 A METHOD FOR DETECTING MALARIA PASASITESTETSUO YANAGI, HIROJI KANBARA AND TOSHIO NAKABAYASHI
Department of Protozoology, Research Institute for Microbial Diseases, Osaka University

In standard medical practice, a method routinely employed to detect malaria
parasites is the microscopic examination of thick and thin blood films. However,in a non‑malarious country such as Japan, even such a routine procedure provesdifficult for the unexperienced technician. It is, therefore, necessary to devise amethod which is both reliable and simple, allowing even an unexperienced technician
to reach a definite diagnosis and thus, permitting the immediate administration of asuitable treatment.
Such a new method must satisfy the following criteria; ( I ) the parasites must

be concentrated ; (2) the morphology of the parasite must not be altered in any
way; and (3) the parasites must be demonstrated in a microscopic field.
We have examined a method for detecting malaria parasites using blood obtained
from Plasmodium berghei ‑ infected mice.

0.1 ml of infected blood was diluted with PBS containing 10 U/ml of heparinat a ratio of I :5 and then passed through a CM‑cellulose column (2.0x3.0 cm).
PBS supplemented with 10 per ce,nt calf serum was used as eluent. Flow was re‑gulated at a constant rate of 6 ml/min. The leukocyte‑free erythrocyte suspension
eluted out was centrifuged and the pellet was then lys ed with Tris‑buffered ammonium

chloride (Boyle, 1968). This solution was again centifuged to wash out the ammo‑nium chloride. The pellet obtained from the second centrifugation was stained withAcridine Orange.
Microscopic examination of the solution eluted from the CM‑cellulose column,
as well as the one eluted from a tig. htly‑packed cellulose column, revealed a complete

absence of leukocytes. Approximately I OO per cent of the erythrocytes could becollected‑ through the CM‑cellulose column. On t.he other hand, only 90 per
cent of the erythtrocytes could be collected through the c.ellulose column. ' Bloodparasita mia before and aftdr passage through the column remained basically thesame. Although a thin blood smear was made from the stained pellet, the patasi es

193

seen were concentrated at a degree almost similar to that of a thick blood smear.
No alteration in the morphology of the parasites was observed. The nucleic acids

were stained very brightly with the DNA (nucleus) appearing yellowish and theRNA (cytoplasm) appearing reddish. In dark field only the parasites could be seen
very well so that microscopic examination can be easily done at a magnificationof 400 x .

It is clear, therefore, that the method presented above meets all the criteriapreviously mentioned, and thus could be of practical value in detecting cases ofhuman malaria. However, such a method cannot be used in the field studies ofmalarious areas because of lack of instruments. Moreover, this method does notallow for distinction among various species.

13 PHYLOGENY, POPULATION GENETICS AND BIONOMICS
WHICH CONCERN TO EPIDEMIOLOGY OF VECTORS OF
MALARIA AND THEIR RELATED ENTITIES OF
ANOPHELES IN EAST ASIA
Tozo KANDA
Department of Medical Zoology, St. Marianna University

Due to overlap in their morphological vatiation there exist many biologicalcritical problems unresolved among the malaria vectors and their related species ofEast Asia for their future control. Among strains from geog̲ raphically separate
area within same species of malaria vectors and their related entities, it seems that

there exist some grades of genetic divergence in their cytogenetic observations,hybridization tests and allozyme variations in their electrophoretic analysis. There‑
fore, the relationships between these genetic characters and ecological ones related
to epidemiology have been revealed, then these informations will be reported herewith.

The Hyrcanus group : Some vector entities of the group are distributed innorthern East Asia. Hybridization and experimental and field transmission ofvivax malaria indicated that apparently there does exist a close genetic relationshipbetween Korean and Chinese populations of sinensis and the strains of lesteri fromboth Japan and China. When cross‑mating was performed between the both species,
their F1 hybrids showed synaptic X‑chromosome but asynaptic autozomes in theirsalivary gland polytene chromosomes. This type of sinensis is a vector of vivax
malaria in these countries. Crosses between another type of sinensis and lesteri
yielded asynaptic progeny for all their chromosomes, this type did not infect with
Plasmodium vivax in our experiments, distributes in most part of .Japan, and canbe found in China, too. These facts suggest that replacemental possibility ofthese two types of sinensis can be tried for future control. The Leucosphyrus group :Cytogenetic observations, hybridization experiments and isozyme‑system analysis
by adopting electrophoretic method revealed that there exist the evolutionary facts

Qf the process Qf divetgence ar long geographically separated species. W th a194

direction of genetic affinities, TSG‑KTD‑IMR‑CTB‑KCH. These nine strains areincluded in a taxon balabacensis. The Minimus group : Ecological and bionomical
investigations were performed in the Province Kanchanaburi, Thailand, from Septem‑
ber 1982. Twenty five strains at the six localities were set. A total of 8,257 werecollected, 74 per cent of them were Anopheles belonging to 1 7 species. The pre‑dominant species was An. minimus with 60 per cent of the total catch. An. minimus
density was strongly decreasing with the oncoming lower temperature season. A

decrease of 925 was recorded between September and November. Regarding to
the natural infection, the rate was 5/646 at Tha‑lamyai, 11158 at Pong Chang, andtheir sporozoite rates were 4j646 and I ! 1 58 respectively in these villages. Physiologicalage composition was not changed by the time during the night. The attractivenessof various habitates was investigated at Tha‑lamyai (TLY) and Wat Seri Somchai(WSS) where are sugarcane areas An. minimus attacked most frequently in open field,
followed by dense vegetation, verandah, high vegetation fringe and indoor. The
attractiveness of out door stations did not change during the night. Biting cycle werevariable. Evidence was found that this variability was due to two different types ofbiting cycles. In a first type peak biting activity occured in the early morning, inthe second type around mid‑night. Often a mixture of the two types was observed.
The two biting cycle types were neither related to time, stations nor localities. The
occurence was at random. It is suggested that the biting cycle types are due to two

behavioural subpopulation of minimus. The biting cycles of highly anthropophilic

minimus population is comparable to one with a mixture of anthropophilic andzoophilic individuals. An influence of spray of insecticides also considered thatthe mosquito bite mostly outdoor and even when they go indoor for bite, they goout, to rest outside. However, this species and maculatus were tested for their re‑sistance against DDT, malasion, smithion and abate, etc. and the results showed

little resistance against these insecticides. The Maculatus complex : Threemorphological types of the mosquito vector Anopheles maculatus are known to occur

sympathetically at Kanchanaburi, Thailand. Although we previously reported
that these types were interfertile upon hybridization, analysis for 1 1 electrophoreticloci of Fl raised from wild‑caught females that one type, known as variety willmori,is fixed or near]y fixed for electromorph differences at two loci. The significance of
this discovery is examined in the light of hybridization experiments and with respect

to what is known about mosquito systematics and evolution. This report is sum‑merized from our laboratory work and collaboration with SEAMEO‑TROPMED
and WHO collaborating centre in China and Vietnam.

195

14 AN ECOLOGICAL SURVEY ON LARVAE OF ANOPHELESS UNDAICUS IN A COASTAL VILLAGE OF NORTH
SUMATRA, INDONESIACHOBEI IMAll, MASASHIRO TAKAG12, WILLIAM PANJAITAN3
AND SUMITR04
Osaka City Institute of Public Health and Environmental Sciencesl, Department of Medical
Zoology, School of Medicine, Mie University2, Provincial Health Service, North
Sumatra3 and Health Department Regional OfBce, North Sumatra4

An ecological survey on the larvae of Anopheles sundaicus, the vector of coastal

malaria, was carried out under the cooperation between Indonesia and Japan in avillage of Asahan Regency from March 1 982 to February 1 983. The larval density,
size of larval habitat, salinity, the presence of floating algae and fishes etc. wererecorded biweekly on 41 ponds within 600 m from a fixed point for adult survey.
The size (m2) of larval habitat fluctuated with two seasonal peaks in MaylJune

and in October‑December. Twenty three ponds and nine ponds dried up in March,
the end of dry season and in August, the small dry season, respectively. In March‑
April, just after the depth of water increased rapidly, the seasonal peak of larval
density was observed. In late May, when the increase of water depth was terminated,the density decreased, even though the water depth itself was still high. Afterwards
the density remained at low level towards February.
The effect of each environmental factor on the larval density was examined,

based on total q̲ 43 data. The density was high when the water depth in ponds
increased rapidly, or in ponds with sunny surface or high salinity. On the other
hand, Iow density was observed in ponds with shady surface, Iow salinity or door.
The density was lower in fish‑present ponds than fish‑absent ones, but the frequencyof larva‑present cases was not affected by the presence of fishes. Based on the above
results, combinations of these factors for the breeding of the larvae were worked out,

and the density and frequency were calculated from data set under each condition.
The results almost coincided with the estimation based on tendency on each single
fac.tor.

The index of larval abundance was estimated as

di･Si, where di was thedensity in pond i and S: was the size (mi) of pond i. The index in ponds near the
fixed point for adult survey fluctuated with two seasonal peaks in April and in

September‑October, somewhat corresponding to the seasonal prevalence of man
hour density of adults. The first peak of the index was due to the high density andthe second peak was caused by large size of habitat.

196

15 A CASE OF RAPIDLY‑DEVELOPED FALCIPARUM

MALARIAYOSHIHITO OTSUJ11, RYUJI HARADA1, SADAMI DOZONO1SYUJI HASHIMOTol, MASAYOSHI TOKUNAGA2, EIICHI SAT02

AND SATONORI UEYAMA3
The 2nd Department of Internal Medicinel, and The 2nd Departmcnt of
Pathology2, Faculty of Medicine, Kagoshima University, andUeyama Internal Medicine Clinic3

We have recently had an opportunity of necropsing a male who was infected with
Plasmodiumfalciparum parasites while he had been engaging in medical activities in
Enugu district, Nigeria and died later. The result of the course and necropsy isreported briefly herein.

The patient is a 36‑year‑old male, physician by profession. His chief complaint
was fever and there was nothing particular with his family and past history.

Present history: For a period ofJune 20‑28, 1983 the patient had engaged in
medical activities in Enugu district, Nigeria. He returned home on June 29. On
July 10 fever of 39'C developed, accompanied with shaking chill which persisted
through July 1 1 , 1 2 and 1 3. The fcver lowered to normal in the morning and thenrose higher again toward the evening. Slight headache, myaglia and loose feces
and/or diarrhea occurred as well.
On July 1 4 jaundice and liver dysfunction were recognized. As a result malaria

or hepatitis A was suspected and he was advised to be hospitalized. The patient
checked into a hospital at 3 :OO p.m.

Findings on hospitalization : Body temperature was 37'C. He complained offeverish sensation, heavy‑headedness and general malaise. The skin was yellowish
and consciousness clear. A sudden spell of generalized convulsion attack occurred
around 5 :OO p.m. accompanied with turbid consciousness, high fever of 39'C,
respiratory insufficiency and oliguria, which condition eventually required respiration

management by means of endotracheal tube insertion. Cerebral malaria due to
Plasmodium falciparum was suspected and the peripheral blood examination revealed
Plasmodiumfalciparum parasites (parasite der,sity 351,900/mm3). Intravenous admin‑
istration of4 ml of quinimax (contains 400 mg of quinine) was instituted immediately
The parasite density in the peripheral blood after first administration of the drug was

found to be 28,880/mm3. However, at 2 :40 a.m., July 15, the patient died ofmultiple organ failure with the brain, heart, Iiver and kidneys involvement.

Necropsy findings and pathologica] diagnosis : Whole small blood vessels andcapillaries were dilated remarkably and filled with malarial parasites in the red blood
cells as well as with isolated malarial pigments. Pathologically the case was diagnosed
as falciparum malaria.

Noticeable pathological findings were : 1) Hepatomegaly with Kupffer cells'
reaction. 2) Splenomegaly with histocytic reaction and expansion of red splenic

197

medulla. 3) Cerebral edema with marked blood vessel dilatation. 4) Congestionand edema of the lung and kidneys. 5) Hemorrhagic tendency, etc.

16 TWO CASES OF RECURRENT VIVAX MALARIAKIYOKATSU TANABE1, HIROSHI TANAKA2 AND ISAO EBISAWA2
The Institute of Medical Science, The University of Tokyol and Departrnent of
Public Health, Toho University School of Medic.ine2

In these three years (Sep. 1980‑Aug. 1983), 29 patients suffering from imported
malaria have been treated in our hospital. Nineteen cases were diagnosed as vivax
malaria by identifying the species. Two cases were recurrenced after the chemo‑
therapy including primaquine.
Case I : I. K., a 37‑year‑old male. Oral administration of quinine was used
for malaria prophylaxis. Three weeks after arrival in Cambodia, he became febrileand was hospitalized in the region. After the therapy by antimalaria drugs, noparasites had been detected in blood smears until his departure from the endemic
area. Soon after his arrival in Japan, he developed a fever of 40'C with rigors. As
Plasmodium vivax ring forms were seen on blood slides, he was admitted to our hospital.
A standard course of chemotherapy for viva.x malaria was given ; 600 mg chloroquinebase orally on admission (day l), followed by 300 mg six hours later and on day 2‑3

he received 300 mg chloroquine base daily. Two months after the therapy, fever
returned with rigors and malaria parasites appeared in his blood. During his second
admission a modified protocol for the antimalaria was followed, that is, total amountsof I .5 g chloroquine base was given on day 1‑3, then on day 6‑7 300 mg was admin‑
istrated daily for two days and on the 8th day 45 mg primaquine base for one dose
was prescribed. The same dose was repeatedly administrated for eight weeks, once a
week. In spite of the preceeding therapy, next recurrence could not be avoided.
Nine months after the second admission, parasites of vivax malaria reappeared.
Case 2 : A. T., 40‑year‑old male. Fansidar (25 mg pyrimethamine plus 500 mg
sulfadoxine) were used for prophylaxis of malaria. Two weeks after his return tohome, he became febrile. Self‑prescribed two tablets of Fansidar were ingested one
day before his first admission to this hospital. A standard course of chemotherapy
for vivax malaria was given. Two months after his discharge, he was hospitalizedagain because of the recurrence of malaria. The second protocol for the therapy was
the same as the first one except the twice doses of primaquine for a half period. No
recurrence has been observed since the second chemotherapy.

Both cases are imported malaria by which non‑immune Japanese were infected

near the boundary between Cambodia and Thailand. Decreased sensitivity toprimaquine may be suggested, but the serum concentration of the drugs has not beenmeasured yet.

198

17 CLINICAL EVALUATION OF SMX/TMP ON
TREATMENT OF PATIENTS WITH MALARIAKEIZO YAMAGUCHI, MITSUO KAKU, MASUMI MATSUSE,NoBUCHIKA KUSANO, YOSHITERU SHIGENO, ATSUSHI SAITOAND KOHEI HARAThe 2nd Department of Internal Medicine, Nagasaki University School of Medicine

The case of malaria carried back from endemic areas is increasing in Japan with
the increase of travelers abroad and the progress of transportations. On the other
hand, it is rather difficult to obtain immediately the common anti‑malarial drugs
such as chloroquine or primaquine for the urgency since these drugs are kept at only
limited institutes or hospitals in our country.

Therefore, we tried to administer the Smx/Tmp to the patients with malaria
for the treatment instead of those antimalarial drugs and evaluated its clinical efficacy
by reasons that this drug is so popular among the general hospitals and its effectivenessis already established in the endemic countries.

The SmxlTmp were administered orally to four cases of malaria patients (threecases of falcrparum and one case of vrvax malaria) with the parasitemia of I . 7 x I 04
to 6.7 x 105/pl and total doses were 12 to 36 tablets for one to six days.

Disapperrances of parasite from the peripheral blood and symtoms were observed
within four days after the start of administrations in three out of four cases. The
drug was changed to chloroquine after one day administration in the remaining one
case with most severe parasitemia due to P. falciparum, because thc patient was notreleased from severe headache although fever and parasitemia were rapidly improved.
But, it seemed that Smx/Tmp was probably effective in this case, because parasites
disappeared from the blood on the next day after change of drug.
Remarkable adverse reations were not observed in the cases except one case withgastric disturbance such as anorexia and vomiting.

As the results, it was concluded that the Smx/Tmp was very useful for thetreatment of malaria, particular]y when chloroquine or primaquine was not available
at the hospitals.

199

18 DISTRIBUTION OF ANGIOS TRONGYLUS CAN TONENSISIN NAGOYA CITY ‑INFECTION RATE OF HOUSERAT POPULATIONSKIYOSHI MAKIYAI AND KAZUO ONITAKE2
Department of Medical Zoology, Nagoya University School of Medicinel andCollege of Medical Technology, Nagoya University2

The rat lungworms, Angiostrongylus cantonensis, were detected last year from ahouse rat, Rattus norvegicus, in an inland area, Meitoh‑ku (Area T) of Nagoya City,
some 1 4 km apart from the seaport.

Subsequent surveys were made to know possible establishment of t,he rat
lungworm populations around the seaport area. As a result, 163 and 104 worms
were collected from eight and four house rats (R. norvegicus) in a port‑side area, Minato‑ku (Area P) and in a residential quarter, Minami‑ku (Area M) several km north of
the seaport, respectively. The number of the worms were more than 380 in total
including 120 specimens so far collected in the inland residential area (Area T) where
this worm was first detected.
All of these worms were collected not from R. rattus but from R. norvegicus. The

infection rate of the worm in R. norvegicus populations was in decreasing order of
25.8 per cent in Area P, 25.0 per cent in Area M, 16.7 per cent in Area T along a
direction from the seaport (Area P) towards the in]and area (Area T). This result
seems interesting from the viewpoint of immigration route and establishment of theworm populations in the areas. And it can be concluded from the infection rate
in various areas that this worm is distributed in eastern side of the city.
The infection rate of other helminths was far higher (93 /o) in R. norvegicus thanin R. rattus (2701 ), and the co‑infection rate by more than two helminth species was
also higher (890/0) in the former rat species than in the latter (220/0)'

Frequency distribution of the rat lungworm per host showed a good fit to thenegative binomial as well as five other helminth species. However, the parameter ofoverdispersion (k=0.0456) was smaller than the range for other helminths (k=0.2457‑0.0702) , indicating that infection of this worm might occur more aggregatively
than that of other helminth species.

19 A HELMINTHOLOGICAL SURVEY ON BLACK‑BASS,MICROPTER US SALMOIDES IN THE KINKI
DISTRICT AREAYUKIO SHOGAKI
Department of Pathology, School of Medicine, Kyoto University

The freshwater fishes, black‑bass, Micro pterus salmoid es and blue‑gill, Leptomis

200

macrochirus were imported to Japan from North America ; the black‑bass to Lake
Ashino‑ko, near Mt. Fuji in 1925, and the blue‑gill to Lake lppei‑ko, on the lzu
Penninsula. Both species have subsequently increased ponds, Iakes and bays of
streams, and are now found all round Honshu, Kyushu and Shikoku area, where they
have eaten many of the indigenous species of Japanese freshwater fishes. Both species
are very important as game fishes and very useful as cooking fishes.
I am current]y engaged in a helminthological survey on black‑bass, Micropterus

salmoides. Black‑bass collected since November 1 982 were dissected and examined
for the larvae and adults ofhelminthes in the scales, muscles, gills, abdominal cavities,

digestive organs, mesenteries, Iiver and pancreas. Eleven fishes from Lake Biwa
(16.5 x 5.5‑28.5 x8.5 cm), five fishes from Kisenyama Dam, Uji City (19.0 x6.8‑
28.0 x 7.5 cm) and five fishes from Hyotan‑ike Pond, bank of Maruyama River, Hyogo
Prefecture (15 2 x 3 7‑29 O x 8 5 cm) were dissected. No parasitic helminthes were

found in these black‑bass. However, I found two encysted female larvae of
Acanthocephala in the mesenteries of one black‑bass (female, 29.0 x 8.5cm) at
Hyotan‑ike Pond, bank of Maruyama River. One of these females was fixed by
hot 70 per cent alcohol and mounted with Berlese's mounting media under a coverglass. This cylindrical female larva was 2.80 x 0.84 mm in body size and0.43 x 0.33 mm in proboscis size. The proboscis bears 10 hooks in a longitudinalrow. The anterior parts of the trunk bear small spines. I had previously been
engaged in the survey of the life cycle of this larval Acanthocephala, and also studied
Hoffma,n's literature ( 1967), "Parasites of North American freshwater fishes"

20 EFFECT OF FLUBENDAZOLE AND MEBENDAZOLE ON
ENCYSTED LARVAE OF TRICHINELLA SPIRALIS(USA STRAIN) IN MICE

JUN MAKI, MISAO NAKAJIMA AND TOSHIO YANAGISAWA
Department of Parasitology, Kitasato University School of Medicine

The aim of the present study was to evaluate effects of the two benzimidazole

compounds, mebendazole and flubendazole (fluorine analogue of mebendazole) on
encysted Trichinella spiralis larvae of early and late stages in mice.

After saline suspension containing 50 T. spiralis larvae of USA strain/0.1 ml
was prepared, six‑week‑old females of ICR strain mice were each inoculated with

50 Iarvae/10 g of body weight via a stomach tube. The infected mice wererandomly divided into experimental and control groups of 6‑7 mice each.
Pure powdered flubendazole and mebendazole (Janssen Pharmaceutica, Belgium)
were suspended in one per cent (V/V) Tween 80 so as to give the following specified
dosage in 0.1 ml of the suspension per I O g body weight. These suspensions wereorally administered to mice of the experimental groups at lO, 50 or I OO mg/kg/day
for three days (35‑37 days or 70‑72 days post‑infection) or a single dose of 300 mg/kg
35 days post‑infection. The control mice were given one per cent Tween 80 alone

201

Mice were autopsied 56‑57 days or 1 1 1‑ll2 days post‑infection. Because worm
reduction in the diaphragm was well correlated with that in the other muscles (Makiand Yanagisawa, 1983, Parasit., in press), only diaphragm was examined. The
number of normal larvaelIOO mg wet weight of the diaphragm was counted by themethod of Maki and Yanagisawa (loc. cit.). Data were analyzed statistically using
the Student's t‑test. Differences between means were considered significant at
P‑values less than 0.1 unless otherwise noted.
Both the drugs given 35‑37 days or 35 days post‑infection significantly reduced

82‑100 per cent of the larvae (P<0.01). No significant difference was observed
between the number of larvae recognized from the mice treated with flubendazole
and mebendazole at 10, 50 or 100 mg/kg/day for three days. At the single dose of
300 mg/kg administered 35 days post‑infection, mebendazole was significantly more
effective than flubendazole (P<0. 1). Divided administration of the drugs (100 mgj
kg/day for 3 days) was significantly more effective than the single administration(300 mg/kg) in both flubendazole and mebendazole at the P‑value of 0.05. The
two drugs given 70‑72 days post‑infection at 50 and I OO mg/kg/day elirninated 79‑
lOO per cent of the larvae (P<0.01). Flubendazole at the dose of 10 mg/kg/day
for three days was ineffective against the old encysted larvae while mebendazole at thesame dosage regimen showed 60 per cent in worm reduction (P<0.05). From thecomparison of the values of ED50 m the treatment of late‑stage larvae, mebendazole(ED50=21 mgjkg) was more effective than flubendazole (ED50=115 mg/kg) (P<0.05). In conclusion, mebendazole is as effective as or more effective .than
flubendazole in the treatment of encysted T. spiralis larvae in mice. This is con‑sistent with the data of Takada and Tatefuji (1982, Program and Summary of Sino‑
Japanese Seminar on Parasitic Zoonoses, 136‑140), who reported that mebendazole
was more effective than flubendazole from the viewpoint of degeneration, calcificationand edematous changes of larvae in mice treated with the two drugs.

21 GIARDIA LAMBLIA , INHIBITION OF RESPIRATORYACTIVITIES AND GROWTH IN VITRO BY BITHIONOLSEIKI KOBAYASHll, TSUTOMU TAKEUCH11, KOJI KAWAMURAl
KEIZO ASAMll AND TATSUSHI FUJIWARA2
Department of Parasitology, School of Medicinei andElectron Microscope Laboratory2, Keio University

Endogenous respiration of intact trophozoites of Giardia lamblia (Portland strain)
were inhibited by 2, 2 '‑thiobis (4, 6‑dichlorophenol), i.e., bithionol, which is aneffective chemotherapeutic agent for some trematode and cestode infections in man.

Among other halogenated phenol derivatives examined, 2, 2 '‑methylenebis (4‑chlorophenol), i.e., dichlorophene, and 2, 2 '‑methylenebis (3, 4, 6‑trichlorophenol),i.e., hexachlorophene were also found to be highly inhibitory to the respiration of

G. Iamblia. Concentrations of bithionol, dichlorophene and hexachlorophene needed2 02

for 50 per cent inhibition of this respiration were 0.50 mM, 0.75 mM and 0.50 mM
respectively.

Bithionol, dichlorophene and hexachlorophene also inhibited in vitro growth oftrophozoites (Portland strain) of G. Iamblia. It took less than 72 hours to kill virtu‑

ally all trophozoites in the cultures with I OO pg/ml of these compounds. Theseobservations suggest that halogenated bisphenols such as bithionol inhibit some
respiratory ac,tivities of G. Iamblia, and that these compounds may be useful for thetreatment of human giardiasis.

22 SOME RELATIVE CHANGES OF ONCHOCERCA MICRO‑FILARIA POSITIVE RATES DURING FOUR YEARS SURVEY
IN SIX ENDEMIC AREAS OF ONCHOCERCIASIS IN
SVP, GUATEMALAYOH ICHI ITol ISAO TADA2 AND SHIGEO HAYASH13
Department of Parasitology, School of Medicine, Kitasato Universityl, Department of

Parasitic Diseases, Kumamoto University School of Medicine2 and Department of
Parasitology, National Institute of Health, Toky03

An epidemiological survey of onchocerciasis was undertaken to study the effect ofinsecticidal treatment to the habitats of Simulium larvae in San Vicente Pacaya,
Guatemala. The survey was conducted on the inhabitants of six endemic areas ofonchocerciasis by parasitological and immunological examinations, once in a year
from 1978 to 1982. Within these examinations, we discussed the results of micro‑
filarial rate by skin biopsy in the representation. Results were summarized asfollows ;l ) Microfilarial positive rates decreased gradually with years between 1 978 and 1 982,
although they were not statistically significant.

2) Only five (4.30/0) of I 1 7 inhabitants received onchocercal nodulectomy one
year prior became microfilaria‑negative by skin biopsy. This result has shownthat the nodulectomy does not result in microfilarial negative at least within one
year.

3) Out of 700 inhabitants who received four or five times of skin biopsy between 1978
and 1982, 1 15 showed positive and 393 showed negative at all times of examinations.

These results suggested that skin biopsy was most reliable for the diagnosis ofonchocerciasis.
4) New infection (2.40/0) and cure (2.90/0) rates were calculated from the proportionof people who converted from negative to positive and reversed from positive tonegative between 1978 and 1982.

2 03

23 STUDIES ON THE TRANSMISSION OF ONCHOCERCIASISIN THE TERRITORY OF AMAZONAS, VENEZUELAHIROYUKI TAKAOKAl, ISAO TADA2, HIROSHI SuzuK13, SHIN‑ICHI NoDA4

Lrus YARZABAL5 AND MARiA G. BAA EZ5
Division of Medical Zoology, Medical College of Oital, Department of Parasitic Diseases,
Kumamoto University School of Medicine2, Department of Virology, Institute forTropical Medicine, Nagasaki University3. Department of Medical Zoology,
Faculty of Medicine, Kagoshima University4 and Instituto
I 'acional de Dermatologia, Venezuela5

In relation to the transmission of onchocerciasis in the southern Vcnezuelan
focus, blackflies in the Territory ofAmazonas, Venezuela were investigated in Octoberand November 1982. Adult females of four blackfly species and one species group(Simulium pintoi, S. pseudoantillarum, S. yarzabali, S. exiguum and S. amazonicum group)

were captured using a human attractant at seven localities with different altitudes(180‑1,000 m). Among these, S. pintoi was the predominant man‑biting species in
the region of' the Parima mountain and its foothills (250‑1.000 m in alt.), whereas
this species was replaced with S. amazonicum group in the lowlands (ca 200 m in alt.)
along the main channel of the Orinoco river. With regard to the biting preference,
S. pintoi had a predilection for the lower parts of the human body, making a marked
contrast to the biting preference of S. amazonicum group which exclusively bites thehuman body parts above the waist. On the other hand, it was clarified in our
experimental infection study that under a temperature varying between 16'C and
24'C, microfilariae of Onchocerca volvulus developed to the infective larvae in S. pintoi on

day nine after ingestion of microfilariae. Furthermore, S. pintoi has been proved tobe highly susceptible to infection with O. volvulus, as larval development therein was

synchronous, no abnormal and deformed larvae were observed, and nearly all thelarvae recovered on day 10 or larter were in the third stage. It is thus suggested that
this species is an ef icient experimental vector of O. volvulus, despite high mortality
following the excess intake of microfilariae.

24 EPIDEMIOLOGICAL STUDIES ON LOIASIS IN NIGERIA
2. SURVEYS OF MICROFILARIA AND SURVEYS OFVECTORS, CHRYSOPSEITARO HOR11 AND EUGENF‑ O. OGUNBA2
Department of Parasitology, Saitama Medical Schooll andUniversity of lbadan, Nigeria2

From an epidemiological point of view, the surveys on loiasis and its vectors
were carried out in the south‑western region of Nigeria during the two months from

204

October to November 1982.
Prevalence of Loa loa was surveyed in Epe, Lagos State, by detecting the micro‑
filaria in the thick films of the peripheral blood taken from the fingertip during thehours from I I a,m., to 2 p.m. . In the three secondary and high schools in thetown, a total of 440 students (aged 1 1 to 23) were examined and the positive rate formicrofilaria was 6.6 per cent (5.8‑l0.40/0) ' Among the stuffs (aged 20 to 48) of theseschools, 107 were examined and 7.5 per cent (4.5‑11.40/0) of them were positive.
In a Water Works of the town, 38 town inhabitants (aged 20 to 70) were examined
and the positive rate, 28.9 per cent, were considerablly higher than those in the schools.

With regard to the clinical symptoms, a total of 85 persons (46 with microfilaria
and 39 without it) were examined. In the group with microfilaria, carabar swelings(630/0) and prickly sensation (71.70/0) were more common than those in the group
without microfilaria.

The surveys on the vector tabanids were carried out at many points within fivestates, Lagos, Ogun, Oyo, Ondo and Bendel, and the adults, Iarvae, pupae and egg‑
masses were collected. A total of 1 79 adults were obtained and 47.8 per cent ofthem were Chr̲vsops species : Among the Chrysops, 77.6 per cent were C. silacea, 1 8.9
per cent were C. dimidiata and the rests were C. Iongicornis and C. distinctipennis. A
total of 474 Iarvae (including some pupae) were obtained and 61 .8 per cent of themwere Chrysops species : Among the Chrysops, 8.6 per cent were C. silacea, 1 3.3 percent were C. centurionis, 57.6 per cent were C. Iongicornis and 10.9 per cent were C.
distinctipennis. With regard to the 9.4 per cent of the Chrysops larvae, the identification

was reserved, though it was clear that they belong to the silacea‑group. A totalof 224 egg‑masses were obtained and the most of them were those of Chrysops : Among
the Chrysops, 72.5 per cent were C. Iongicornis, 6.8 per cent were C. distinctipennis andthe rests (20.70/0) were the silacea‑group (C. silacea, C. dimidiata and C. centurionis) .

During the survey, a total of 27 adult flies (25 of C. silacea and two of C. dimidiata)were dissected to examine for the larvae of Loa loa, and the second stage‑larvae were
found in the abdomen of two individuals (one of C. silacea and one of C. dimidiata).

25 SURVEY OF MOSQUITOES IN CHANTHABURI PROVINCE,THAILAND, WITH SPECIAL REFERENCE TO THE EPI‑
DEMIOLOGY OF MOSQUITO‑BORNE DISEASESKAZUO BUEll,2, MONGKOL CHENCHITTIKUL3, BOONLUAN PHANTHUMACHINDA3

AND MEGUMI HASEGAWAl.JICA Expert, Department of Medical Sciences, Bangkokl, Earth Chemical Company2 andDivision of Medical Entomology, Department of Medical Sciences, Bangkok3

During the period May 1981 to March 1983, a survey was made on mosquito
breeding in Chanthaburi Province to determine the mosquito fauna in the area andthe importance of each breeding habitats viewed as a place for species preservation.

A total of 67 species of mosquitoes were collected. Aedes aeg̲ypti and Aedes

205

albopictus, the principal vectors of dengue haemorrhagic fever, were dominant species
breeding in the domestic containers in close associate to house of human beings in all
localities in Chanthaburi. There are extensive rubber plantations, and A, albopictus
larvae in large numbers were found in coconut shells which lie scattered there.
A principal Japanese encephalitis vector, Culex tritaeniorhynchus, were collectedfrom a wide variety of ground water habitats including puddles, swamps, marshes,
rice fields and shallow wells. It was suggested that rice field is the most important
breeding sauce of C. tritaeniorhynchus in this survey.

A malaria vector, Anopheles balabacencis, was not common though its larvae
were col]ected from puddles, wells and rock pools.

26 SEASONAL CHANGE IN THE OVIPOSITION ACTIVITYOF C ULEX PIPIENS PALLENS IN SHANGHAI IN 1982
OSAMU SUENAGAl, WEIDE I.ro2, JIANWU MIA02 AND WEI XU2Reference Center, Institute for Tropical Medicine, Nagasaki Universityi andShanghai Institute of Entomology, Academia Sinica2

The breeding places of Culex pipiens pallens in Shanghai are polluted water inditches, pdnds, and various kinds of containers etc. The seasonal change in theoviposition activity of this mosquito was observed a Fuxing Gongyuan (RenaissancePark), Shanghai from August 1981 through December 1982. An earthen jar ofabout I O Iitters in size containing wheat bran solution was set up as an ovi‑trap forhouse mosquitoes in a corner of the park. A11 egg rafts of mosquitoes, which were
deposited on the water surface in the jar, were picked up every morning and examinedfor hatching in the laboratory.

The flrst egg rafts in 1 982 were collected in the begining of May when thetemperatures were 23.9"C (Mean Max.) and 15.7'C (Mean Min.). The oviposition
activity of Cx. p, pallens in Shanghai seems to be rather low during the summer whenthe maximum temperatures are over 30'C. Two clear peaks of the activity wereobserved ; higher peak was in early July and lower one was from late August throughearly September. The last egg rafts were collected in mid November. No egg
rafts were found from late November through late December, when the maximum
temperature was below I O'C. The pattern of seasonal change in the oviposition
activity of Cx. p. pallens in Shanghai in 1982 is similar to the result in 1981 at thesame place, except that the second peak in the fall of 1982 was rather lower thanthat of 1981 .

206

27 TIME COURSE OBSERVATION OF THE PARASI‑TOLOGICAL INFECTION OF JAPANESE INHABITANTS
IN TROPICAL COUNTRIES AND THE POLLUTION

OF THE DRINKING WATER

KOICHIRO FUJITA1, SETSUKO TSUKIDATE1. KENJI KUROKAWA1

MASAKATSU UEDA1, AKIO MORll, TSUTOMU ODA1YOSHIYUKI OKUWAK12, MASATOSHI SUGIYAMA3TERUAKI IKEDA4, YOZABURO OIKAWA4.
KAZUHIRO SHICHlNOHE5, YASUKO OGASAWARA6
AND TAKEO ASAKURA6
Department of Medical Zoology, Nagasaki University School of Medicinel, Department ofMicrobiology, Kagawa Nutrition College2, Department of Hygienc, Juntendo University
School of Medicine3, Department of Medical Zoology, Kanazawa Medical University4,

Department of Pharmacology, Nippon Medical University5 andJapan Association for Tropical Medicine6

As reported previously, the drinking water in tropical countries contained various

kinds of microorganisms and was polluted by faeces and sewage. In order to know
the relationship between the prevalence of the parasitological diseases and the degreeof faecal pollution of the drinking water, we carried out the time course observationof the parasitological infection of Japanese inhabitants and the pollution of thedrinking water.
First, we checked parasite eggs and protozoas in the stool samples ofJapanese.
Eggs of Ascaris lumbricoides, Trichuris trichuira and cysts of Giardia lamblia were foundamong Japanese. Infection rate of intestinal parasites was proved to be highest

among Japanese in Indonesia, Thailand and the Philippines, and the rate wasfollowed by those of people in Southwest Asia, in East Africa and in Central andSouth America. But the infection rate did not change so much in th'e past 10 vears.
Drinking water samples from these countries were also tested with potassium

permanganate consumed test and number of coliform bacilli. Relatively highproportion of samples was proved to be polluted by faecal matters.
The relationship between the infection rate of intestinal parasites and the degreeof pollution of the drinking water was studied. Significant relationship was observed
between the infection rate and the rate of the water samples containing coliform
bacilli (r=0.957). However, no relationship between the infection rate of Enterobius
vermicularis among the Japanese children in tropical countries and the deg. ree of thepollution of drinking water was found.

207

,

28 DETECTION OF INTESTINAL PROTOZOAFROM OVERSEA TRAVELERSAKIO KIMURAl, YOSHIICHI MINEKA1, TOSHIYUKI KITAURA l,
HIROAKI NAKAN02, KOUJI HOSOMIZ02, SHIGEMITSU ICHIKI 2,
SATORU HASHIMOTOZ, HISAO ABE2, NoBUO AsAN02

TADASUKE ON03 AND TOSHIO NAKABAYASH13
Osaka Prefecture Institute of Public Healthl, Osaka Airport Quarantine8 andDepartment of Protozoology, Reseach Institute for Microbial Diseases, Osaka University8

To investigate the actual circumstances of travelers' diarrhea, we had madebacteriological examinations before and demonstrated that half of the cases werecaused by bacteria. However, since the nature and cause of the other half remained
unknown, we began parasitological examination from January to .Iune 1 983. Free
discharged stools of 3 1 8 travelers who stayed abroad for more than five days were

examined using direct microscopic examination of stool smears, Tanabe‑Chiba
culturing technique and formalin‑ether concentration technique. Giardia lambria wasfound in four patients ( I .30/0) and Fntamoeba coli was found in one. The four patients

who were infected with G. Iamblia traveled abroad for more than five weeks. Threeof them were infected in India and Nepal. Mixed infection of Shigella was ditected
in two of the Giardia cases so that the patients were sent to hospitals. The othertwo patients suffered from slight diarrhea durin their tour. In one of them, diarrhea

contiriued for more than a month aftet he returned to Japan. The patient was
treated and cured with Atebrin. Entamoeba coli was found in one tourist who
visited lhdia and Nepal for seven weeks.
Although the positive rate in the examination during this six months was low(1.6010)' we intend to continue the detection to elucidate the nature of travelers'

diarrhea caused by protozoa.

208

CHEMICAL AND BACTERIOLOGICAL ANALYSIS OF 'THE DRINKING WATER OF THE TROPICAL COUNTRIES
29

KOICHIRO FUJITA1, SETSUKO TSUKIDATE1, KENJI KUROKAWA1

MASAKATSU UEDAl, AKIO MORll, TSUTOMU ODAl
YOSHIYUKI OKUWAK12, MASATOSHI SUGIYAMA3TERUAKI IKEDA4, YOZABURO OIKAWA4
KAZUHIRO SHICHlNOHE5, YASUKO OGASAWARA6
AND TAKEO ASAKURA6
Department of Medical Zoology, Nagasaki University School of Medicinel, Department ofMicrobiology, Kagawa Nutrition College2, Department of Hygiene, Juntendo University
School of Medicine3, Department of Medical Zoology, Kanazawa Medical
Universityi, Department of Pharmacology, Nippon Medical University5
and Japan Association for Tropical Medicine6

The number ofJapanese stayed in tropical countries is increasing, as the Japanesetechnical cooperation with the countries is improved. The diseases from which
Japanese suffers in these countries are infectious hepatitis, especially type A, amoebic
as well as bacillary dysentery, typhoid fever, various kinds of intestinal helminthiasis

and so on. T, hese diseases are though to be orally infected, and among sources ofinfection, the drinking water is considered to be most important as the main route of
infection.

From 1 977, we started to examirie the drinking water at various places in tropicalcountries. Results were shown that almost all water samples contained a large
amount of coli form bacilli and were polluted by faeces and sewage. The degree ofthe pollution of water samples was proved to be highest in samples from Indonesia,
Thailand and the Philippines of Southeast Asia, Pakistan of Southwest Asia, Iraq

of Middle East. Kenya, Mozambique and Neigeria of Africa, Mexico of Central
America, and Ecuador and Peru of South America. The residual chlorine as abactericide was observed in the drinking water from Singapore and Malaysia, andsome samples from Egypt and Panama, but, in the water samples from the otherparts of tropical countries, no residual chlorine was found at all.

209

30 BACTERIOLOGICAL STUDY OF THE DRINKINGWATER IN INDONESIAYOSHIYUKI OKUWAK11, HISAE YANAll, KYOKO YUTAKAl
KOICHIRO FUJITA2, SETSUKO TSUKIDATE2, KENJI KUROKAWA2MASATOSHI SUGIYAMA3 AND TAKEO ASAKURA4
Department of Microbiology, Kagawa Nutrition Collegel, Department of Medical Zoology,
Nagasaki University School of Medicine2, Department of Hygiene, Juntendo University
School of Medicine3 and Japan Association for Tropical Medicine4

This time, we will present the results of a bacteriological study of 75 samples ofdrinking water collected in many regions of Indonesia for approximately one month(JLlne to July 1982).

We carried out a quantitative test of total colony counts and coliform groupcounts, using URICULT set. The results of total colony counts were positive (morethan I 03/ml) in 43 samples. Eighteen samples out of these 43 samples which werepositive were taken in Kalimantan, Sulawesi and Sumatra. Fifty‑seven samples
taken in Java, with Jakarta being the central location, showed the greatest number of
positive samples; 1 1 out of28 samples (390/0) from tap water and 14 out of29 samples(480/0) from well water. On the other hand, the results of coliform group counts
were positive (more than 103/ml) in 37 samples (490/0)' Eighteen out of 37 samples
in Kalimantan, Sulawesi and Sumatra were positive. Fifty‑seven samples in Java,
with Jakarta being the central location showed positive results in six out of 28
samples (210/0) taken from tap water and in 13 out of 29 samples (450/0) takenfrom well water.
Enteric bacteria and related bacteria that are found in sample water were pri‑marily Enterobacter cloacae and C̲.,itrobacter freundii. Both species were identified in 1 6

samples. The next most frequently identifled bacteria were Klebsiella pneumoniae andPseudomonas aeruginosa found in six samples. Escherichia coli, which attracts the greatest

attention in relation to fecal matter contamination, was found in five samples.
This includes those discovered in two samples of tap water taken in Jakarta City.
The most noticeable point in this investigation is that Sa/monella C1 group was detectedfrom one well in Jakarta City; Salmonella E1 group from another well in Jakarta

City, and each type was found in wells in Kalimantan, Sulawesi and Sumatra
showing the existence of the bacteria throughout the islands.

The drug sensitivity test for Kanamicin, Gentamicin, Tetracycline, Chloram‑
phenicol, Carbenicillin, Cephaloridine, Cephalothin, Colistin and Nalidixic acid
were performed by the sensitivity disk inethod, on 57 strains of the bacterial species
identifled with the following results: So far as Salmonella sp. only is concerned,
Salmonella sp. detected in Jakarta City was resistant to Cephaloridine and Cephalothin
in the sensit.ivity testing, whereas Salmonella sp. detected in the other three islands
were susceptible,

210

31 SNAKEBITES IN THE AMAMI ISLANDS IN l 982
YOSHIHARU KAWAMURA AND YOSHIO SAWAI
Japan Snake Institute

In 1982, 161 bites were reported on the Amami Islands in which 105 (650/0)

wcre from the Tokunoshima and 56 (350/0) were from the Amami Main Islands.
During warmer months from March through October, 1 46 (91 o/o) of the total bites

were recorded in which the maximum number (34) of bites occurred in June. Al‑
though the age of bite is widely distributed from teen to seventies, 75 per cent of thebites occurred in ages from thirties to sixties in which the maximum number of bites
occurred in fifties. Bites in male occurred two times as frequent as those in female.
The most frequent bites (57.1 o,/o) occurred in agricultural field, whereas 18 per centof the tota,1 bites occurred in residential area and 9.5 per cent of bites were on road.
Those fact indicated that the human life and snakes are in close proximity.
Most bites occurred in extremities in which 56. I per cent were in upper extrem‑
ities and 42.6 per cent were in lower extremities. Most frequent bite occurred infinger (42.60/0)' whereas 22 per cent of bites was in lower leg. In daylight hours
from 6 a.m. to 6 p.m., 102 or 75.5 per cent of the bites occurred mostly in agricultural
field and 39 or 24.4 per cent of bites did at night time mainly in residences and onroad.
The prognosis of habubites indicated that most patients recovered completely
after the administration of antivenom except one death (0.6 /o) and four cases ofmotor disturbances (2.50/0) of finger after the wound had healed.

32 SNAKEBITES IN O KINAWA PREFECTURE IN 1 982
YASUTETSU ARAKI, MASAHIKO NISHIMURA AND MASANOBU YAMAKAWA
Division of Venomous Snakes, Okinawa Prefectural Institute of Public HealthIn 1 982, 1 79 bites of habu ( Trimeresurus flavoviridis) and 80 bites of sakishima‑habu ( T. elegans) were reported in Okinawa Prefecture.

During 10 years, from 1972 to 1981, the average annual number of habubiteswas 270.1 and the average morbidity rate per I ,OOO population was 0.28, with theboth cases showing a continued decrease.
In the case of sakishima‑habu they were 51. I and I .09 respectively.

Seasonal change of snakebites : Habubites occurred mainly during warmer
months through March to November in which the highest number, 33 (18.80/0) bites,
was recorded in October. But in the case of sakishima‑habu, considerable numberof bite cases were reported during colder months? while the number decreased in,July and August.

211

Locations where snakebites occurred: Sixty‑eight (38.60/0) of the habubites
occurred in agricultural fields, 36 (20.50/0) unknown sites, 21 (ll.90/0) in humanresidence, 18 (10.20/0) on roads and 14 (8.00/0) were in mountains. Thirty‑eight(47.5 o/o) ofsakishima‑habubites occurred in agricultural fields, 1 7 (21 .30/0) in humanresidence, 9 (1 1 .30/0) on roads, and each 5 (6.30/0) in houses, mountains and at thewaterside.

Body site of snakebites : Most of habubites occurred on the extremities; 95(53.40/0) and 76 (42.70/0) were the number of bites on the upper and lower extrem‑
ities, respectively. Sakishima‑habubites occurred mostly on the upper extremities(65, 81 .3010)' Bites on the lower extremities were 13 (16.30/0)'

33 STUDIES ON PROPHYLAXIS AGAINST HABU SNAKE( TRIMERES UR US FLA VO VIRIDIS ) BITE WITH HABU‑VENOM TOXOIDS IN THE AMAMI ISLANDS,KAGOSHIMA PREFECTURE, JAPAN ( 10)HIDEO FUKUSHIMA, KOREBUMI MINAKAMI, YOSHITERU TORIIRE,
SHIGEKI KoGA, KATSUMI HIGASHI, HIDEKI KAWABATA,SHOSAKU YAMASHITA, YASUFUMI KATSUKI, MUNEHARU SAKAMOTO1

RYOSUKE MURATA, CHOKU MATSUBASHI, TOORU KONDO,SEIJI SADAHIR02, KlYOSHI OH‑I

AND HISASHI KoND03
Research Institute of Tropical Medicine, Faculty of Medicine, Kagoshima Universityl,
The 2nd Department of Bacteriology, National Institute of Health, Toky02

and Ciba Serum Institute3

Between October 1970 and March 1982, 9,618 adults living in the Amami
Islands in Kagoshima Prefecture were vaccinated with 0.5 ml each of Habu‑venom
toxoid (mixed toxoid lots 12, 13, 14, 15, 18, 20, 36, 37, C‑1, C‑2, APF toxoid lot 1).

Basic immunizations were given 2‑3 times at four week intervals. Booster
immunizations were given thereafter up to six times at intervals from several months

to one and two years.
An effective anti‑HRI of higher than I u/ml in persons at the time of the basic
immunization and four weeks after it was found to be 61.8 per cent, and at the timeof the booster immunization and four weeks after it was found to be 88.9 per cent.

Among these, when toxoids of 18 ImUjml or higher were injected, the anti‑HRI of
higher than I u/ml at the time of basic immunization was found to be 76.2 per cent,and at the time of the booster immunization was found to be 96.0 per cent. And at
the time ofboth the basic and booster immunizations, the anti‑HR2 in most cases washigher than I u!ml.
At the time of the Habu‑venom toxoid vaccination, only mild side reactions wereobserved without any severe allergic reactions.
Among 1 76 (181 times) snake bite cases, there were three cases pf generalized

212
symptorns (1 .70/0)' 20 ca es of necrosis (1 1 .Oo/o)' I I cases of sequelae (6. I o/o)' and one

death (0.550/0) of a patient with an incomplete series of vaccinations.

From these results, it was found that the Habu‑venom vaccinations produced
effective serum antitoxins with only mild side reactions, and reduced the severity of
the illness of snake bite victims, and was clinically effective.

34 THE CAUSE OF DEATHS DUE TO SNAKEBITE IN
ANURADHAPURA DISTRICT OF SRI LANKAYOSHIO SAWA11 MICHIHISA TORIBAI HIDEKI ITOKAWA2
AND ANSLEM DE SILVA3
Japan Snake Institutel, Department of Entomology, Faculty of Medicine,Tokyo Medical‑Dental College2 and Faculty of Medicine,
Peradeniya University8

It is recorded that 800 deaths due to venomous snake occurred annualy in Sri

Lanka in which the mortality per 100,000 population was 18 in Anuradhapura.
This report concerns the study on cause of death due to snakebite in Anuradhapura.
According to the fatal statistics due to venomous snakes from the government
agent of Anuradhapura, we have visited villages and hospitals where the fatal bites
occurred during three years from 1981 to 1983. The snakes responsible for bites wereidentified in 99 cas es out of the total of I I O cases in which 44 cases of bite were due to

Bungarus caeruleus, 28 cases and 26 cases were Vipera russelli and Naja naja, respectively.

One death due to Hypnale ypnale ¥ ras also noted. Certain seasonal patterns in bites

were found, although the bites occurred in each month of the year. The highest
number of28 cases or 25.5 per cent were recorded in teen agers and 71 cases or 85 percent of bites were concentrated between the ages from O to 29 years. Bites of male
were two times as frequent as those in females. The time of the day of bites showed acharacteristic feature by the species of snake; most of the krait bites occurred at night
while the victims were sleeping in their house, whereas Russell's viper bites occurredin daylight hours mainly in agricultural field and cobra bites occurred in both day
and night time in residence or in field.
The body site of bites indicated characteristic choice of each species of snakes.
Clinically, 79 per cent of the victims died at home after the treatment by traditional
physician without antivenoms and 21 per cent of the victims visited hospital too late

for medical treatment. The polyvalent antivenoms were imported from India, but
the degree of their application is not yet satisfactory.

213

35 PROTEINASE IN THE VENOM OF OKINAWA HABU
( TRIMERES UR US FLA VO VIRIDIS)= PURIFICATION
AND PROPERTIESTAMOTSU OMORI‑SATOH AND SEIJI SADAHIROThe 2nd Department of Bacteriology, National Institute of Health, Tokyo

A proteinase has been isolated from the venom of Okinawa Habu ( Trimeresurusflavoviridis) and its enzymatic properties have been investigated.

Crude HR2 fraction obtained by gel filtration of crude venom of Okinawa Habu

on Sephadex G‑lOO was subjected to column chromatography on Bio Rex‑70, andthe main proteinase fraction was purified further on Sephadex G‑75 and Bio Rex‑70.
The purifled proteinase was homogeneous in SDS‑polyacrylamide gel, and wasshown to be a single polypeptide having molecular weight approx. 25,000. Its

optimum pH was about 9. The enzyme hydrolysed Hide powder azure and azo‑
albumin more preferentially than H2‑proteinase, the main proteinase from Amami
Habu .
Substrate specificity of the proteinase was investigated by the use of several
piptide substrates such as oxidized insulin A and B‑chains, substance P, physalaemin
and synthetic peptides, and the proteinase was shown to be a typical endopeptidase
having a relative narrow specificity.

36 HEALTH CONTROL STRATEGY FOR RESIDENTS
IN THE TROPICSTOSHIRO SHIBUYA AND KISEKO KAMEI
Department of Parasitology, Teikyo University School of Medicine

Visiting tropical countries for health control of residents necessitates medical

personnels to elaborate selection of items for examination considering amount ofworks to be done within limited time. Some items of examinations are especially
important in the tropics because of its special circumstances. Based on this fact,
blood examinations, especially that of white blood cells, are picked up and simple
technique for their counting was devised and evaluated.
The principle is based upon dilution method as in normally used counting

technique. Peripheral blood is taken with EDTA as anticoagulant, 0.02 ml ofblood is taken by micropipette and mixed with O. 1 8 ml of Turk's solution prepared ina well of microplate. After mixing thoroughly by micropipette, the mixture wasput in the Neubauer's hemacytometer for counting the number of white blood cells.
The results obtained by this method showed no difference from those obtained bytraditional method and coulter counter.

214

In the field study WBC countin.g by this techni,que was performed in parallel
wrth preparatron of blood films for differentral countmg of leucocytes. Time spent
for all these procedures for 35 samples was I l/4 hour.
At the same time, stool examinations were evaluated for their efficacy and timerequirement. In examinations for parasite egg detection, positive rate was evidently
higher in concentration method using saturated saline than direct smear. Time forprocessing 35 samples for concentration technique was three hours, and the test for
detecting occult blood using commercially available kits of "Fecal Occult Blood
Slide" required two hours for the same number of samples.
Other items of examination though to be important for the health control in thetropics were discussed.

37

ENQUETE STUDY FOR HEALTH OF THE JAPANESE,RESIDENT ABROAD IN AFRICATSUNAKlYO KASAG11, HIROSHI HARA2 AND TOSHIO OH‑IS03

Department of Pediatricsl and The 2nd Department of Surgery2, Tottori University
School of Medicine, and International Medical Foundation ofJapan8

In 1982 we have conducted a traveling health consultation for Japanese residents
in Africa. On that occasion, questionnairing on their health and sanitary conditionsin the locales was held, and the following results were obtained.
The ratio of receiving health examination before coming to Africa was 82 per cent,not definitely so high. Many residents did not take periodic examinations evenafter coming there.

Health consultation by our team was highly evaluated, but concerning endemic
diseases, medical institutions in the locales should have been utilized more. Especiallymalaria is a horrible endemic, but those who took no oral prophylactics periodicallywere many, suggesting the necessity of further enlightenment.
As to their precautions against sanitary conditions, they did not drink unboiled
water or eat raw foods such as vegetables, keeping a full lookout.

Such endemic diseases as diarrhea, unknown fever and malaria taking place
after arriving there were found to show the first onset within six months after arrival in

the majority of cases involved. The duration of six months from arrival may besaid to be a preparatory period to get accustomed to the life in the locales.

215

38 MEDICAL EXAMINATION OF THE JAPANESESTATIONED IN MIDDLE EAST AND
NORTH AFRICAN COUNTRIESHIROSHI OHARA AND SHOKICHI TANI
Department of Medical Zoology, Kanazawa Medical University

Major diseases and laboratory flndings of Japanese staying in Middle East andNorth African countries were studied. The sub.ject of this study consisted of 254
persons and average period of stay was 248 days.
Diarrheal diseases (93 cases), gastritis/peptic ulcer (36 cases) and lumbago (18cases) ranked high among the diseases that occurred during their stay in those countries
followed by acute hepatitis (7 cases), trafflc accidents (6 cases), and hypertention (6cases). Some diseases (hypertention, diabetes mellitus, peptic ulcer, heart diseases,etc.) seemed to have relation to the diseases contracted in the past or to be aggravationof chronic diseases.

Among abnormal laboratory findings eosinophilia (5.3010)' HBS antigen (+)(3. I o/o) and intestinal parasites (3.80/0) were detected frequently upon their return to.Iapan. Nine out of 52 persons were proved to have anti‑hepatitis A virus antibody

upon return to Japan and two of them were regarded to be converted cases fromnegative to positive during their stay.

Results of stool examinations performed in Libya showed that Entam.oeba coli
( 1 5.90/ ), Trichuris trichiura (9.5?lo)' Ascaris lumbricoides (8.70/0) and Giardia lambria(3.20/0) had high infection rate among local people, although only two cases of infec‑
tion with Trichuris trichiura and one case of Ascaris lumbricoides were detected amongl 02 Japanese.

The sanitary conditions of the districts where the present investigation was
carried out were, generally speaking, good and few serious endemic diseases were
present. Although frequency of infectious diseases among Japanese were rather low
in these countries as compared with other tropical or subtropical countries, cases ofaggravation or recurrence of chronic diseases which were present before their oversea

assignment were rather conspicuous.

216

39 DISEASES OF JAPANESE PEOPLE IN SOUTHEASTASIA AND INDIA ‑REPORT OF THE TRAVELLINGMEDICAL CONSULTATION SERVICE DISPATCHED
BY THE MINISTRY OF FOREIGN AFFAIRS‑YOSHIHIRO YAMAMURAI AND TETSUYA TAKASHIMA2
Department of Internal Medicine, Toneyama National Hospitall and Department
of Internal Medicine, Habikino Osaka Prefectural Hospital2

We were dispatched from the Ministry of Foreig̲ n Affairs as travelling medical
doctors and did health consultations to Japanese people living in Southeast Asia
and India. The results are shown in this paper.
l . Number of consultations and visiting places

We have travel]ed for 28 days from Jan. 25 to Feb. 21, 1983 and stayed for 3‑4days in each place. The number of health consultations was 1 7 in Hanoi, 1 7 inVientiane, 89 in Rangoon, 133 in Dacca, 44 in Calcutta, 38 in Madras and 98 in

Colombo; the total was 436. In the meantime, vaccinations were done for 51
persons, and finally 487 persons, 243 males and 193 females, received the medical
service. The largest population in ages was seen in their thirties, most of them wereaccompanied by their family, while most males in their forties was staying alone.
These phenomena may reflect the educational problem for their children.
2 . Diseases seen in the health consultations

Most of the diseases seen in the health consultations were the illnesses which also
commonly existed in Japan : diabetes mellitus, cardiovascular diseases, chronic liver
damage, peptic ulcer or cold etc. In children, hypertrophy of the tolrsilles and skindiseases were frequently seen. The latter may be caused by the high temperature andhumidity. Fifty per cent of the persons had more or less some disease and we supposethat those persons who had some physical complaint particularly came for the con‑sultation. We observed several cases of tropical diseases : acute hepatitis, bacillary
and amebic dysentery, malaria and filaria.
3 . Anamnesis oj' tropical infectious diseases

Since tropical infections progress acutely and transitorily, we encountered only
several cases in the examinations, but when we asked the anamnesis of the infections,

we found that many people had suffered in the past. I ) Regarding mosquito‑borne
infectious diseases, past infections of malaria were rare in the big cities, but 1 8 per centof the examined persons had the anamnesis of the infections in a small city, Vientiane.
The anamnesis of dengue fever infection was observed in 1 2 per cent of the examined

in Vientiane and 23 per cent in Colombo; six of them were infected twice. These
infections may be related to the geographical feature and weather. In adult, thefemales were infected more than the males and it would be due to their dressing styleand living condition. 2) About orally infectious diseases, six per cent of the examined
had the anamnesis of the infections : acute hepatitis, typhoid and paratyphoid fever,bacillary and amebic dysentery and giardiasis, and 1 4 per cent of the examined had

217

severe or long‑lasting diarrhea. 3) Two persons were bitten by a rabid dog in thepast.

4. Summary
The diseases among Japanese people living in Southeast Asia and India can bedivided into two types : one is the diseases commonly seen in .Iapan and the other istropical infection. In the latter cases, mosquito‑borne and orally infectious diseases
are popular and the knowlege for their prevention is most important.

40

MEDICAL SITUATION OF KILIMANJARO CHRISTIANMEDICAL CENTRE IN MOSHI, TANZANIAETSUSHI OKUMURA1, YASUSHI OKUMURA2 AND JAMS LYIM03
Department of Health Science, Kohchi Gakuen Collegel, Department of
C.astrointestinal Surgery, Juntendo Medical College2 and Department ofRadiology, Kilimanjaro Christian Medical Centre3

The Kilimanjaro Christian Medical Centre is doing ordinary medical therapy,
medical training of doctor in rural clinic, education of paramedical staff, inprove‑
ment of nutrition in the undernutrition area and activation of communicable diseases
control.

There are 420 beds and I I doctors, 45 nurses and four paramedical staff are
working in this hospital. The scope of therapeutic activity is approximately 1 20 km2

and the subject population is about 80,000. They have eight departments i.e.
internal medicine, surgery, orthopaedics, ophthalmology, gynecology, pediatrics,
radiology and dentistry. The number of outpatients is about 400 per day. The total
number of hospitalization is 12,512, and death toll was 755 persons in 1981, andthe mortality rate was 6.03 per cent.
According to statistical analysis of communicable diseases in this medical centre,
morbidity of malaria was significuantly higher. Then, enteritis and other diarrheal
diseases, measles, ascaris, tuberculosis of respiratory system, amaebiasis, typhoid fever,anchylostomiasis, schistosomiasis, poliomyelitis and leprosy were reported.

Although they are doing vaccination (BCG, DPT, Polio, measles etc.), only
0.2 per cent of population are vaccinated in this area.
In the hospitalized patients, heart failure has highest morbidity, followed bydiabetes mellitus, hypertension, malaria, pulmonary tuberculosis, amaebiasis, peptic

ulcer, schistosomiasis, bronchial asthma, anemia. Parasitogenic disease and tuber‑culosis are outstanding.

In pediatric area, measles has highest morbidity, and kwashiorkor, intestinal
helminthiasis, malaria are very common.

218

41 THE PROBLEMS ON THE HEALTH STATES OF
VIETNAMESE REFUGEES DURING THE PAST FIVE YEARSHIROYUKI AMANol, TOSHIMASA NISHIYAMA2, HIROSHI MORITA2
TAKEHIKO SEGAWA2 AND TSUNEJI ARAK12
Department of Overseas Medical Services, Tenri Hospitall andDepartment of Parasitology, Nara Medical Universityl

The health care of Vietnamese refugees who lived in H. Camp, Shiga Prefecturefrom May 1977 to April 1982 were studied. The total 322 (adult 192, children under
14 year‑old 130, male 210, female I 12) of refugees were investigated, resulting asfollows :1) The total number of outpatients was 1,465 and inpatients 21. Moreover,the live births were nine in this. period.

2) Forty‑two point seven per cent of all outpatients have visited the depart‑ments of internal medicine and of pediatrics, and 26.7 per cent of dentistry, 1 1.0 per
cent of urology.
3) Respiratory diseases and gastrointestinal diseases were most common diseases

among the refugees, while cardiovascular diseases and anemia were not found.
Although I I cases of syphilis were registered, no case of gonorrhea was detected. It
was the one of the most characteristic findings in the Vietnamese refugees' diseases
that many cases of urolithiasis were found.
4) Among the inpatients, four malarial cases (all P. vivax cases), one amaebic

dysentery, one amaebic liver abscess, three tuberculosis (one was died) and four
urolithiasis were included.

5) The case rates (per 100,000 population) of outpatients was 1,105, which was
lower than that of 15‑19 year‑old Japanese (2,740). But the cost of medical care(per one population) was 50.8 thousand yen, which was as much as that of 15‑44
year‑old Japanese (55.8 thousand yen).

42 LOCAL CEREBRAL BLOOD FLOW IN THE PROCESSOF THERMAL ACCLIMATIONMITSUO KOSAKA, NOBU OHWATARI AND MARIKO FUJIWARA
Department of Epidemiology and Environmental Physiology, Institute forTropical Medicine, Nagasaki University

The role of hypothalamic and extrahypothalamic deep body thermosensitivity
in central mechanisms of thermal acclimation was investigated in heat‑ and cold‑
acclimated rabbits. These animals were subjected to surgical procedures for measur‑ing local metabo]ism, blood flow and temperature of the hypothalamus (PO/AH)2 19

and mid‑brain reticular formation. Blood flow was calculated from the initial slopeof the hydrogen clearance curves. Local metabolisrn of the hypothalamus was
detected by an electrical method. Blood flow of hypothalamus increased by 25 percent during external heating as compared with cooling̲ of control rabbits. After an
intravenous injection of LPS‑pyrogen, the local metabolism and blood flow of hypo‑thalamus of normal (control) rabbits either increased or decreased, with similar
biphasic shifts in hypothalamic temperature. However, the increased and decreased

hypothalamic blood flow observed in thermally non‑acclimated rabbits (control
animals) vanished in heat‑ and cold‑acclimated rabbits during both pyrogen‑induced
fever and external heating and cooling. This suggests that blood flow changes incentral thermosensitive tissues may play an important role in both thermoregulatory
mechanisms and in the process of thermal acclimation.

References: 1) Inomoto, T. et al. : Tropical Medicine, 21 (3), 153, 1979,
2) Kosaka, M. and Ohwatari, N.: Neuro‑science letters, suppl. 6, 25, 1981, 3)
Kosaka, M. and Ohwatari, N. : Neuro‑science letters, suppl. 9, 6, 1982, 4) Kosaka,
M. et al. : J. Physiol. Soc. Japan, 44, 540, 1982, 5) Ohwatari, N. et al. : Tropical
Medicine, 25 (2), 107, 1983.

43 THE STUDIES OF DENGUE VIRUS TYPE 2 IN
TOXORHYNCHITES CELL LINE (TRA‑171)

REPLICATION AND MORPHOLOGICAL OBSERVATIONTOMIYOSHI ITOI EIKI TANIMURA1, THET‑WIlql,2, NORIMI YAMAMOTO1ToMINORI KIMURAl, AKIO OI lYAMAI AND MI MI KHIN2
Department of Microbiology, Kansai Medical University, Osakal and Virology
Research Division, Department of Medical Research, Rangoon, Burma2

Arbovirus isolation and identification by the inoculation into Toxorhynchites, anon‑hematophagous mosquito, has been reported superior to the other methods suchas suckling mouse brain or other hematophagous mosquitoes inoculation. Many
mosquito cell lines have been established and used for the in vitro arbovirus researches.

We have also reported some arbovirus replications in the cultured Culex mosquito cells.

In the present report we studied the replication of dengue virus type 2 (D‑2)
using a newly established Toxorhynchites amboinensis cell line TRA‑ 1 7 1 . Prototype

strain Tr 1 751 and wild type strains BR 006 and BR I 16 were used. The former
strain was highly passaged and adapted to suckling mouse brain. The latter two strains

were isolated from DHF and DSS patients respectively, and identified as D‑2 at the
Department of Medical Research, Burma. These wild type strains were passaged inminimum and still unadapted and difficult to replicate in suckling mouse brain (ICR
strain) .

In the D‑2 infected TRA‑171 cells, cytopathic effects (CPE) acompanied withcell aggregation were observed at 48 hours after infection. These CPE were ob‑served in each virus infected cells. Specific fluorescence was shown at the perinuclear

220

membrane at the same time. Thereafter these positive area had spread into cyto‑
plasm.
Viral growth in TRA‑ 1 7 1 cells was studied by plaque assay using Vero cells as
the host cell. Viral titers were raised gradually from two days after infection andreached to 106‑7 PFU/ml for BR 006, 105‑6 PFU/ml for BR 1 16 at five days after
infection. These titers were kept until 10 days after infection. The titer of Tr 1 751
was reached to the plateau at six days after infection and the titer was 108 PFU/ml.

White Tr 1 751 showed uniform plaques of 1.2‑1 .5 mm in diameter, BR 006 andBR 1 1 6 showed heterogeneous plaques. The plaque diameter of BR 006 were I .4‑
1.8 mm, 0.8‑1.2 mm and 0.4‑0.6 mm and their ratios were 19, 50 and 31 per centrespec,tively. Those of BR I 16 were lO, 29 and 61 per cent respectively. Those

plaques were formed at 37'C. Plaque numbers increased in BR 006 and BR I 16
for 10‑100 folds with the increased ratio ofsmaller p]aques by changing the incubation

temperature to 35'C. These phenomena were reversed at 39'C. The ratio of smallerplaque decreased causing the decrease of total plaque numbers. P]aque numbers
and size of Tr 1 751 were unchanged throughout the experiments.
Viral particles with 40‑50 nm in diameter were found in the D‑2 infected TRA‑l 7 1 cells under the electron microscopy. They were distributed in the cytoplasmic
vacuoles and in the tubular structures which were typically found in the arbovirus
infec.ted cells. These particles were found only in the D‑2 infected cells. We also
found some virus like particles unexpectedly both in the D‑2 infected and not infected

cells. Their sizes were about 10 nm, 15‑20 nm and they were distributed in thecytoplasm and the cytoplasmic vacuoles. Larger size of particles of about 100 nm
were found in the nucleus. Therefore, TRA‑171 cell is useful for the isolation andidentification but seems to be unfavorable for the morphological or biochemical
studies of arbovirus replication.

The results were summerized as follows. These two wild type strains were
heterogeneous in plaque size, were sensitive to temperature and grow in cultured
cells but difiicult in suckling mouse brain. The prototype strain was homogeneousin plaque size, was not affected by the temperature and grow in cultured cells andsuckling mouse brain.

44 ULTRASTRACTURAL STUDIES ON THE INTERACTION
OF PERITONEAL MACROPHAGES OF rnu/rnu AND
rnu/+ OF SPRAGUE‑DAWLEY RATS

WITH TRYPANOSOMA CRUZISACHIO MlURA1, TSUTOMU TAKEUCH11, KEIZO ASAMll
AND TATSUSHI FUJIWARA2
Department of Parasitology, School of Medicinel andElectron Microscope Laboratory2, Keio University

We have already found that Sprague‑Dawley (SD) nude rats (rnu/rnu) are22 lhighly susceptible to Trypanosoma cruzi (Tulahuen strain), although the littermates(rnu/+) had no sensitivity to this parasite. Accordingly, it has been expected thatcomparison of nude rats with the littermates may enable us to elucidate the mechanismof natural resistance of SD rats to T. cruzi. Previous investigations also demonstrated
appearance of humoral antibodies, and inhibition of migration of leucocytes in thelittermates. On the basis of these observations, immunological‑competent cells weretransferred from normal rats to nude rats. Howev r, these cells did not elicit resist‑ance to infection with T. cruzi in nude rats. Accordingly, in this study, ultrastractural

aspects of the interaction of the parasite with macrophages of nude rats and thelittermates were investigated, since macrophages appears to have a major role in the.

initial stage of host defense mechanisms against T. cruzi infection. Our studies
suggested that there was a significant difference of the fate of the parasite in theparasitophorous vacuoles between nude rats and the littermates. The parasites inthe vacuoles of the littermates were more readily killed than in those of nude rats.
Moreover, addition of carrageenan diminished the rate of intracellular killing of theparasite inside the vacuoles of the littermates, which resembled T. cruzi inside thevacuoles of nude rats.

45 EFFECTS OF ASCARIS‑PARASCARIS ANTIGENS UPON
MULTIPLICATION OF DENGUE VIRUS IN MOUSEPERITONEAL MACROPHAGE CULTURES

AGUS S. WIHARTAl'2, 4, HAKU HOTTAl, SUSUMU HOTTA2TAKEO MATUMURA3, SUJUD14 AND MORIYASU TSUJ15
Department of Microbiologyl, ICMR2 and Department of Medical Zoology3, Kobe
University School of Medicine, Department of Microbiology, Faculty of Medicine,
University of Indonesia4 and Department of Parasitology,
Hiroshima University School of Medicine5

In our previous studies, we have reported that cultures of mouse peritoneal macro‑phages (Mo), when treated with certain substances of bacterial origin, such as LPS,

peptidoglycans and other cell wall components, produced larger amounts of dengue
virus (DV) compared with untreated control cultures of the same cells (H. Hotta,
et al., Microbiol. Immunol., 26, 665, 1982; Agus S. W., et al. ICMR Annals, 2, 65,
1982 ; H. Hotta, et al. Infect. Immun., 41, ,462, 1983). In the present experiments,
we examined similar effects, if any, of antigens from parasites (Ascaris suum andParascaris equorum) upon the Mo cultures.
Mo's, collected from the peritoneal cavity of BALB/C mice ip:iected intraperito‑
neally with methylcellulose, were cultivated in vitro and inoculated with DV.
Parasitic antigens were prepared as follows : (i) A. suum : The body fluid,
harvested by puncturing the posterior end of each worm, was filtered through a filter
paper and dialyzed against distilled water. (ii) P. equorum : The body of worm was
Qut intQ small pieces which w re th n subjected tQ freezin ‑and‑thawing. in 0.1 per222cent NaC1 solution; the extract was centrifuged and the supernatant was dialyzed
against distilled water. (iii) Those crude materials were passed through a Sephadex
G‑100 column and four fractions were separated.
The results obtained are surnmarized as follows :(1) While the Mo cultures not treated with the parasitic antigens were poorly
permissive to the DV infection, the same cultures treated with the antigens produced
significantly large amounts of DV.

(2) In experiments in which infectious center assay and anti‑DV immuno‑
fluorescent stain were performed, it was shown that number of DV‑infected cells in
the antigen‑treated cultures were more than those in untreated control cultures.
(3) The virus production‑enhancing effect depended upon the doses of antigens
added and also upon the duration of treatment.

(4) The enhancement was suppressed by cotreatment with carrageenan, aspecific Mo inhibitor; however, no additive effect was observed in cocultures of Mo
and splenocytes from the same line of mice.

(5) The treated Mo's ingested larger number of latex particles and staphy‑
lococci as compared with untreated cells.

(6) The four Sephadex fractions showed similar effects as those by the crude
extract; a tendency was noted that the fractions I and 111 were stronger in activity
than were the fractions 11 and IV.
Virologic‑immunological significance of the data are discussed.

46 THYMUS ATROPHY IN EXPERIMENTAL
MURINE TOXOPLASMOSISMASANOBU TANABEl, NORMAN CHEN2, WALTER STAHL2
AND BRIAN GRIMWOOD2
Department of Parasitology, School of Medicine, Keio Universityl and

New York State Department of Health2

Thymi of Nya : NYLAR female adult mice infected with a non‑lethal Toxoplasma
gondii (Cornell strain) showed a marked involution throughout the course of observa‑
tion period. In comparison with uninfected control, thymic DNA and protein con‑tents reduced significantly in the infected animals. In in vivo thymidine incorporation
into trichloroacetic acid (TCA)‑soluble fraction of thymus, there was no appreciable
difference between infected and uninfected animals, whereas thymidine uptake into

DNA significantly reduced in the thymi of Toxoplasma‑infected mice. Thymocytes
from Toxoplasma‑infected mice nine days after infection, incubated in vitro, also showed alower incorporation of radioactive thymidine and leucine into TCA‑insoluble fraction
than did cells from control animals. In this experiment, there was no difference incell viability and uptake of precursors into acid‑soluble fraction between these twokinds of cells. Moreover, the activity of thymic thymidine kinase, a rate‑limiting
enzyme for DI lTA synthesis via salvage pathway, decreased significantly in Toxoplasma‑

223

infected mice. However, plasma corticosterone level of infected animals showedno changc or slightly lower value than that of controls.

Thymus involution was reproducible by intraperitoneal injection of parasite‑
free serum or peritoneal fluid prepared from infected mice with a lethal Toxoplasma(RH strain), but not with a non‑lethal one (CS strain). The activity of thymidine
kinase and protein content signiflcantly reduced in the thyrr]i of treated animals on
the 7th day post‑injection.

Intraperitoneal injection of the parasite‑free culture medium of BHK (babyhamst.er kidney) cell infected with a lethal strain of Toxoplasma (RH) into the normal

adult mice also resulted in a significant reduction of thymic weight, its DNA andprotein contents, its thymidine kinase activity and in vitro DNA and protein synthetic
activity of the thymocytes.

These observations probably suggest that the toxic substance(s), which may bederived from Toxoplasma trophozoite, play an important role on the pathogenic
mechanism of thymic atrophy in the toxoplasmosis.

47 BODY DEFENCE MECHANISM IN MICE SENSITIZEDWITH TOXOPLASMA LYSATE ANTIGEN
AGAINST BABESIA INFECTION

RYO OGAWA, HARUHISA SAKURAI, ATSUSHI SAITOAND NAOYOSHI SUZUKI
Department of Veterinary Physiology, Obihiro University

Toxoplasma lysate antigen (TLA), mouse Babesia lymphokines (B‑LKS) andmouse Toxoplasma lymphokines (Tp‑LKS) , were used to examine the effect ofimmune
adjuvant in reducing clinical symptoms of Babesia rodhaini infection in mice.
Normal mice were treated twice a,t an interval of two weeks an emulsion of TLA

in Freund's incomplete adjuvants (TLA emulsion) , or a combination of TLA emulsion

and B‑LKs or Tp‑LKS' Two weeks after the second treatment, these mice were
infected with B. rodhaini (102 parasitized erythrocytes/mouse, i.p.). 35.7 per cent(5jl4, number of survivalsjnumber examined) of mice treated with TLA emulsion,
53.3 per cent (8/15) of mice treated with a combination of TLA emulsion and B‑LKS,
and 73.3 per cent (1 1 jl5) of mice treated with a combination of TLA and Tp‑LKS,
survived for more than 20 days postinfection. None of the mice in the non‑treatedcontrol group survived for more than 1 2 days postinfection.

The defence mechanisms possibly involved in the group treated with TLA
emulsion and a combination of TLA emulsion and Tp‑LKS, were examined withrespect to macrophage activation. Mice treated with TLA emulsion showed a slightincrease of leukocyte count, and O release of macrophages. The activity of macro‑phage migration inhibitory factor (MIF) of spleen cell culture supernatant and serum
was not increased in this group. The mice treated with a combination of TLA and
Tp‑LKs showed increased MIF activity and greater macrophage phagocytosis.

224

These results suggest that treatment with TLA emulsion and a combination of

TLA emulsion and B‑LKs or Tp‑LKs induces a degree of immunity in the hostagainst babesia infection, and that macrophage activation is part of this d f
e encemechanism.

48 SEROLOGIC DIAGNOSIS OF LYMPHADENOPATHICTOXOPLASMOSISAKIO KOBAYASHI, NAOHIRO WATANABE, YASUHIRO SUZUKI,, ASAO MAKIOKA, KEN KATAKURA, NoRIYUKI HIRAIAND ATSUO HAMADA
Department of Parasitology, Jikei University School of Medicine

Various serologic tests were performed on the patients and evaluated to determine
the serologic criteria for the diagnosis of lymphadenopathic toxoplasmosis (lymph.
toxo.) . The serum specimens were those from I O adult cases as lymph. toxo. in which

lymphnode biopsies were performed and the histology was consistent with toxo‑
plasmosis, 13 cases of malignant lymphoma and 368 general outpatrents. In all but
two patients of lymph, toxo., the biopsied tissue and serum specimens were obtained
within three months from the onset.
The Sabin‑Feldman's dye test (DT) titers of I : 1,024 or higher were reached in
all patients of lymph. toxo. and 80 per cent of them showed the titers of I : 4,096 or
higher. All patients of malignant lymphoma showed the titers less than I : 64. In
the great majority of general outpatients the titers were I : 256 or lower, the highest
titer of I : 1,024 being shown in only I .9 per cent.

In the indirect latexagglutination (ILA) test, all cases of lymph. toxo. hadtiters of I : 512 or higher and 57 per cent of them had I : 4,096 or higher. In bothgroups of malignant lymphoma and general outpatients, no one had a titer of I : 4,096
or higher.

The immunofluorescent antibody test for lgM (IFA‑IgM) titers were positivein all patients of lymph. toxo., and I : 32 or higher in 63 per cent. The patients ofmalignant lymphoma were all negative. Although 20.8 per cent of the general
outpatients showed the positive titers, those who had I : 32 or higher were seen in
only 4.3 per cent.

In the indirect hemagglutination (IHA) test, considerably large proportion of
the general outpatients revealed high titers such as I : 1,024 or higher.

From these results, serologic test titers for the diagnosis of possible lymphade‑

nopathic toxoplasmosis would be DT; 1: 1,024, IHA l: 1,024, ILA; 1: 512
IFA‑IgM l: 16, and the titers for the definite lymphadenopathic toxoplasmosis
should be DT

I : 4,096, ILA

I : 4,096, IFA‑IgM

I : 32.

225

49 STUDY ON DETECTION OF TOXOPLASMA SPECIFIC
lgM ANTIBODY BY ELISAHITOMI NAKASHIMA KENJI TSUCHIHASHI HIROSHI SUZUKIAND KEIZO MATSUMOTO
Department of Internal Medicine, Institute for Tropical Medicine, Nagasaki University

The method of the lgM enzyme‑linked immunosorbent assay (IgM‑ELISA) for
the detection of Toxoplasma specific lgM antibody was evaluated in comparison withthat of the lgM indirect hemagglutinin test (IgM‑IHA) and that of the lgM micro‑

latex agglutination test (IgM‑LA). Toxo ELISA Test Kit (M. A. Bioproducts),
which originary contains the alkaline phosphatase conjugated anti‑human lgG,
was modified, by utilizing the alkaline phosphatase conjugated anti‑human lgM( Sigma) .

One hundred and eighty‑nine human sera, which had 1 78 IHA‑positive sera,
were preabsorbed with Stapylococcus aureus protein A. And then, they were measured

using lgM‑ELISA, IgM‑IHA, and lgM‑LA. The suc.rose gradient centrifugation
and absorption test with Toxoplasma gondii were performed to evaluate. the spec,ificityof the lgM antibodies detected. Although both lgM‑IHA and lgM‑LA revealed
false‑positive sera, the lgM‑ELISA demonstrated no false‑positive results.
It was concluded that the specificity and the sensitivity of the lgM‑ELISA werehigher than those of lgM‑IHA and lgM‑LA and that the lgM‑ELISA method forthe serodiagnosis of acute toxoplasmosis is very useful.

50

THE INVESTIGATION OF PREGNANT WOMENINFECTED WITH ACUTE TOXOPLASMOSISKENJI TSUCHIHASHI HIROSHI SUZUKI HITOMI NAKASHIMAAND KEIZO MATSUMOTO
Department of Internal Medicine, Institute for Tropical Medicine, Nagasaki University

When pregnant women are infected with acute toxoplasmosis, it is said that
abnormal delivery is seemed sometimes. But actual condition is not sure in our coun‑try still now. Therefore, we have measured toxoplasma lgM antibody (Tp‑IgM)
using the newly developted Enzyme Immunosorbent Assay (ELISA) for the purposeof serological diagnosis of acute toxoplasmosis, and investigated pregnant womenand newly‑born infants. 3,728 sera obtained in Nagasaki City from December 1976
to September 1 983 were examined. 283 high titer sera were treated by Staphylococcus

protein A, and then Tp‑IgM was measured by lgM TOXO‑ELISA system. Tp‑IgM
was detected from 66 specimens of 35 patients. 31 cases were pregnant women, andonly 23 cases were confirmed their progress. One artifical and one spontaneous

2 26

abortion was found, but the rest of 21 pregnant women and children were all healthy.
We could not find out the child infected with toxoplasmosis qongenitaly. But thefollowing were discovered newly.

(1) Tp‑IgM, detected by Toxo ELISA system, was remained for a long term. It
seerns that, even if, Tp‑IgM is detectcd by ELISA, it is not always acute toxoplas‑
mosis.

(2) Elevation of Tp‑IgM titer did not appeared in the exacerbation of chronic
toxoplasmosis, so that we can.judge which is toxoplasmosis or exacerbation of chronic

toxop]asmosis by investigating the movement of Tp‑IgM.

51 SOME EPIDEMIOLOGICAL ASPECTS OF TOXOPLASMAINFECTIONS AMONG INHABITANTS IN JAPANEIJI KoNISHI, JUNKO TAKAHASHI AND TAKEO MATSUMURA
Department of Medical Zoology, Kobe University School of Medicine

The total examined for antibodies to Toxoplasma was about 891 human serum
samples collected at medical examinations in Miki City, Hyogo Prefecture, Japan,
from July through September in 1982. The prevalence of antibodies determined byenzyme‑linked immunosorbent assay (ELISA) method indicated its increase withage and its significant difference between males and females of age over 50 years(males, 42.50/0 ; females, 22.80/0 ; P<0.001). Irrespective of age and sex, however,mean antibody levels of positive cases were almost equal : the frequency distribution
was bimodal and the peak of the positive group ranged from 0.5 to 0.7 in ELISA
value for all age and sex groups. This suggests that an equilibrium relationshipexists between host immunity and the parasite which is hardly eliminated from thehost infected once. The sera collected in urban area had antibodies at a similar
degree and frequency to those in rural area, indicating minor epidemiological impor‑tance of exposure to contamination from oocyst‑infected soil.
To further cla,rify the factors relating to the acquisition of Toxoplasma infections,
all the 891 pcople were requested to answer a series of questions involved in experi‑
ences in breeding. cat(s) and in ingesting raw meat. While the prevalence of anti‑
bodies among the people who have bred cat(s) did not differ significantly from that of

the inexperienced people in every age and sex group, consumption of raw meatsignific.antly increased seropositivity in males more than 60 years old and females

more than 50. Consequently, it is concluded that breeding cats itself, thoughinfective oocysts in cat feces are still important, is not a major epidemiological factor

under climatic, geographical and ecological circumstances in Miki City, but raw
meat comsumption is closely related to the chance of acquiring the infection. Sex
difference in antibody prevalence can be partly explained by a significant differencem the raw meat mgested population between males (41 60A ) and females (17.20/0)'

JAPANESE JOURNALOF
TROPICAL MEDICINE AND HYGIENE
September, 1984

Vol. 12 No. 3

C O NT E NT S
Original article

Kumazawa, H. N. and Sinulingga, S.
Preliminarj Servey Qn Intestinal Helminths in Asahan Area of North Sumatra,. 139‑148

Proceedings of XXV Annual Meeting of Japanese Society of Tropical Medicine
Contents . . . . .

.181‑183

General presentation . . . . . . .

. 184‑226

Published byJAPANESE SOCIETY OF TROPICAL MEDIClNE
c/o Institute for Tropical Medicine, Nagasaki University

l 2

Sakainoto‑machi, Nagasaki, 852, Japan