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都内水域の環境ホルモンに関する研究（その４）― 東京湾に生息する魚類の精巣卵とボラのビテロゲニン ―
和波

一夫

竹内健

要旨

宮下雄博＊

（＊前・非常勤研究員）

東京都内湾に生息する魚類の生殖異変の実態を把握するため、都内運河などの沿岸域で調査を行った。その結果、主に次のことが明らかになった。
(1)

2004 年度は、合計 8 種類、1,213 尾の魚類を採捕した。生殖腺の観察を行った結果、ボラ、スズキ、マアナゴの精巣組織中に卵母細胞（精巣卵）が認められた。
(2)

雄ボラの血中ビテロゲニン濃度を測定したところ、下水処理場放流水が流入する運河域で採捕した雄ボラから 10,000ng/裨を超える高濃度のビテロゲニンが検出された。
(3)

東京都内湾のエストロゲンの濃度分布を調査した。その結果、運河域のエストロゲンは沖合い域に比べて高濃度であることが分かった。

キーワード：内分泌かく乱化学物質（環境ホルモン）、エストロゲン、魚類、精巣卵、ビテロゲニン、
東京湾

Study on Endocrine Disrupters in metropolitan rivers andTokyo Bay (４)─ Endocrine Disruption in wild fish and concentrationsof plasma vitellogenin in male Grey mullet ─WANAMI Kazuo, TAKEUCHI Takeshi, MIYASHITA Takehiro ＊＊ Associate researcher

SummaryFish were collected in Tokyo Bay (8 species, n = 1213) to investigate the histological conditionof the gonads, and plasma vitellogenin (VTG) concentrations in male Grey Mullet ( Mugil

cephalus ) were measured.

Gonadal abnormalities (testis-ova) in male were seen in threespecies; Mugil cephalus (three out of 23), Lateolabraxa japonicus (five out 31), Conger myri-aster (four out of 328). The VTG concentrations in some male Grey Mullet collected in urban
area were higher than 10,000ng/ml. The concentration of estrogen in Tokyo Bay was investigated. As a result, the estrogen of the waters in urban area near to sewage plant was a highconcentration compared with the offshore part. These results suggest that male Grey Mullet
and other species living in Tokyo Bay were exposed to estrogen and estrogen-like substancesfrom the sewage disposal plants.
Keywords : Estrogen, Estrogen-like substances, Fish, Testis-ova, Vitellogenin (VTG), Tokyo Bay
東京都環境科学研究所年報 2005─ 159 ─
1

はじめにルタ等の魚種を調査対象とした。

魚類への環境ホルモンの影響実態を把握するため、(2)

都内河川・海域の魚類を採捕し、生殖腺の観察を行った。

調査地点と調査時期

2004 年度は、図 1 に示すＡ地点（大田区京浜島）、Ｂ地点（港区港南）、Ｃ地点（江東区夢の島）の運河域

1998 年度〜 2001 年度は、主にコイを採捕し調査の 3 地点で調査を実施した。この 3 地点の他に多摩を行った。多摩川等のコイの精巣に異常が認められ、

川・田園調布堰（大田区田園調布 1 丁目）において海雄コイの血液に高濃度のビテロゲニン（卵黄タンパクから河川に遡上するマルタを採捕した。また、千葉県前駆体）が検出された。調査地点の水質分析結果から、の漁業者から東京湾沖合い域のボラを買い取り、運河雄コイに高濃度のビテロゲニンを産生させる主要因は、域のボラの対照検体とした。その他に、譛東京都内湾下水処理場から放流される天然エストロゲン（女性ホ漁業環境整備協会が羽田沖（空港周辺）で採捕した魚ルモン）であると推測された 1, 2）。

類の一部を譲り受け、検体とした。

2002 年度からは、東京都内湾に生息する魚類を採各地点の特徴はつぎのとおりである。Ａ地点は、大捕し調査を行った。ボラ、スズキ等に精巣卵が認めら

田区京浜島の西側に位置する地点で、近くに都内最大れ、雄ボラに高濃度のビテロゲニンが検出された 3, 4）。

規模の水再生センター（下水処理場。以下、水再生セ

2004 年度は、前年度と同様の魚類調査の他に東京都ンターを処理場と表記する。）である森ケ崎処理場があ内湾の水質調査を行ったので、その結果を報告する。

る。Ｂ地点は、港区港南地区の奥まった運河の地点でまた、2002 年度〜 2004 年度までの調査結果を総括あり、近くに芝浦処理場がある。Ｃ地点は、江東区夢する。の島北側の運河の地点で、近くに砂町処理場があり、水門を通じて荒川とつながっている。多摩川・田園調

2

調査方法

(1)

布堰地点は、都水道局の取水堰であり、この堰の中央調査対象魚種部と左岸には魚道が設けられている。取水堰の下流は都市沿岸域に生息するボラ、コノシロ、スズキ、マ感潮域である。
Ａ地点、Ｂ地点、Ｃ地点の 3 地点については、2004
年 7 月期、9 月期、12 月期、2005 年 3 月期に調査を実施した。多摩川・田園調布堰については、マルタが遡上する 3 月に調査を実施した。
(3)

採捕方法

Ａ地点、Ｂ地点、Ｃ地点では、投網を用い、多摩川・田園調布堰では投網・玉網を用いて魚類採捕を行った。
(4)

計測・血液処理方法

採捕した魚類の全長・体長・体重を測定した。ボラについては尾部から採血後、採血液を既報 3）の方法で遠心分離処理し、ビテロゲニン分析に供するまで冷凍保存した。
(5)

ボラのビテロゲニン分析

ボラの血液中ビテロゲニンの測定を既報 3）の方法で行った。片山化学工業㈱製のボラ用 SRID 測定プレー
トを用いて高濃度の検体をスクリーニングしたのち、同法で不検出のものを対象に検出感度の高い ELISA 法を用いて測定した。
(6)
図1

魚類調査地点生殖腺組織異常の判定摘出した生殖腺を既報 1, 3）の方法で処理した後、生殖東京都環境科学研究所年報 2005─ 160 ─
腺の生殖細胞の発達状況、構造、組織の変性及び精巣8 種 1,213 尾を観察した。魚類の性別判定は、生殖腺卵の有無等を顕微鏡で観察して、その状態を記録した。の外観及び組織学的観察にもとづいて行ったが、生殖(7)腺が未成熟で雌雄の判定が困難なものや生殖腺が著し

水質分析の方法

内分泌かく乱化学物質については既報 5）の図 1 に記

く未発達であるため、生殖腺を摘出できない検体もあ載する分析方法で試料の濃縮を行ったうえで、17 β-った。表 1 の魚類 8 種のうちマアナゴについては、他エストラジオール、エストロンを日本エンバイロケミの魚種の採捕方法と異なり、水産試験場（現・島しょカルズ㈱製の ELISA キットで分析した。一部の検体農林水産総合センター）の調査に用いられた検体の中については外部委託により LC-MS/MS 法で 17 β-エから雄を多く選んで供与されたものであるので、当然、ストラジオール、エストロン等の分析を行った。その雄の数が雌に比べて多い。

他の項目は工場排水試験方法 JIS-K0102 にしたがって2002 年度から 2004 年度までに採捕した主な魚種分析した。の総数と精巣卵の出現数を総括したものを表 2 に示す。

(8)

クサフグと意図的に雄を多く選択をしたマアナゴの 2

東京都内湾の水質調査

水質調査地点を図 2 に示す。水質測定計画に基づく種を除く魚種は雌が多かった。100 尾以上採捕された測定調査地点 6）のうち環境基準点の 8 地点と、東京港魚種の性比（雄：雌）は、ボラは 1 ： 8.2、コノシロ

内および河口部に位置する一般地点の中から選択したは 1 ： 3.1、スズキは 1 ： 5.4、マハゼは 1 ： 3.1、シ地点について 7 月、1 月に水質調査を行った。

ロギスは 1 ： 2.3、マルタは 1 ： 1.2 であった。表中の雌雄不明は、雄と断定できなかったものの、雄である可能性が高いがものが大半を占める。これらの雌雄不明をすべて雄に含めて集計すると、ボラは 1 ： 3.2、コノシロは 1 ： 2.6、スズキは 1 ： 1.8、マハゼは 1 ：3.1、シロギスは 1 ： 2.3、マルタは 1 ： 1.1 であった。このように性比に偏りがみられたが、ボラは特に性比の著しく、雌の割合が高かった。
ボラの調査地点別の内訳を表 3 に示す。雌雄不明をすべて雄に含めて集計した性比は、運河域のＡ地点、Ｂ地点、Ｃ地点の 3 地点合計では雄 1 ：雌 8 であった。
この 3 地点の中で特にＢ地点は雌が多く、雄 1 ：雌 11であった。一方、沖合い域で採捕されたボラの性比は、雄 1 ：雌 2 であった。このように、本調査では、ボラの性比はすべての地点で雌に偏っていた。これに対して、産卵期に漁獲されるボラの親魚では、性比は雄が圧倒的に多いことが報告されている 7）。このことから、東京湾とりわけ都内運河域には、雌ボラを誘引する要因があることが示唆される。ただし、国内外の内湾に生息するボラの標準性比は不明であり、今後、ボラの図 2 東京都内湾におけるエストロゲン調査地点（7月、1 月）（○で大きく囲った地点がエストロゲン調査地点。数字は水質測定計画の ST 番号）

3

結果と考察

(1)

調査魚種

表１

魚種別の採捕尾数と精巣卵の出現数を表 1 に示す。
2004 年度はボラ、コノシロ、スズキ、マアナゴ等の
東京都環境科学研究所年報 2005

漁種別採捕数と精巣卵の出現数

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表2

主な魚種別採捕数と精巣卵の出現数について精巣卵の出現率は、雌雄不明の個体を雄に含めて集計すると 5 〜 6 ％であり比率の違いはなかった。
ただし、ボラについては、運河域・羽田沖と沖合い域
では環境が大きく異なるので、2 つの水域分けて精巣卵の出現率をみることにする。2004 年度調査で精巣卵が認められた雄ボラ 3 尾は、すべて運河域で採捕された個体であった。2002 年度から 2004 年度までの生殖腺観察したボラ（雌雄不明の個体を雄に含めて集表3ボラの地点別採捕数と精巣卵計）では、運河域・羽田沖では 7 ％ （188 尾中 13 尾。
精巣卵が疑われる卵母細胞様の細胞がみられるもの 2尾を加えると、188 尾中 15 尾で 8 ％となる）に対して、沖合い域では 1 ％（69 尾中 1 尾）であった。この精巣卵出現率について統計的検定を行ったところ、運河部・羽田沖と沖合い域では有意の差が認められた。

性比の著しい偏りについては、生活史や生態的な知見

運河域のボラは、沖合い域のボラに比べて、精巣卵のを踏まえて検討する必要がある。

出現率が高いと推測された。

(2)

(3)

生殖腺異常

ボラの血液中ビテロゲニン濃度

魚類の生殖腺異常については、組織学的観察にもと

通常、ビテロゲニンの産生は雌に限られるが、雄にづく知見が少ないことから、現時点では、精巣の細胞エストロゲンを投与するとビテロゲニンが産生される。

や組織に顕著な変性が認められる場合を異常ありと判

また、環境中に存在するエストロゲン様物質によって定した。

も産生される。雄魚にビテロゲニンが検出された場合、雄の生殖腺を観察した結果、すべての魚種で生殖腺に外観上の異常は認められなかった。しかし、精巣のエストロゲンやエストロゲン様物質に曝露された可能性が高いとされている 9-11）。

組織学的観察からは、ボラ（23 尾中 3 尾）、スズキ

本調査で採取したボラのうち、雄および雄である可（31 尾中 5 尾）、マアナゴ（119 尾中 4 尾）の精巣組能性があるものについて血液中ビテロゲニン分析を行織中に卵母細胞（精巣卵）が認められた。ボラ、スズった。その結果を図 3、表 4 に示す。高濃度用の測定

キ、マアナゴの精巣卵を写真 1 〜 6 に示す。

法である SRID 法でビテロゲニンが検出したものは、表 2 に示した 2002 年度から 2004 年度までに観察

いずれも運河域の地点であり、12 月のＢ地点で採捕さしたボラ、コノシロ、スズキ、マアナゴについて精巣れた雄ボラは、500 μｇ/裨以上の非常に高い値が検出

卵の出現率をみると、ボラは 14 ％ （100 尾中 14 尾）された。SRID 法で不検出であったボラについては、高であった。コノシロは 7 ％（72 尾中 5 尾）であった。

い感度の ELISA 法で再測定した。その結果、沖合いスズキは 16 ％（43 尾中 7 尾）、マアナゴは 5 ％（328域の雄ボラに低濃度ではあるがビテロゲニンが検出さ尾中 15 尾）であった。

れた。SRID 法と ELISA 法のビテロゲニン濃度単位を一般に魚類では、卵巣は精巣よりも初期に分化するng/裨で表すと、Ａ地点のボラのビテロゲニンは NDことが知られている 8）。従って、生殖腺が未成熟で雌〜 73,000ng/裨、Ｂ地点は 22 〜 500,000ng/裨以上、雄の判別ができなかった個体については雄の可能性がＣ地点は ND 〜 190,000ng/裨であった。一方、沖合ある。そこで、これら雌雄不明の個体を雄に含めて集い域は計すると、雄ボラの尾数は 257 尾となり、精巣卵の出沖合い域のボラに比べてビテロゲニンの検出率が高く、現率は 5 ％（257 尾中 14 尾）、コノシロは 6 ％（84その濃度も著しく高いことが分かった。

尾中 5 尾）、スズキは 5 ％ （130 尾中 7 尾）、マアナ
ゴは 5 ％（328 尾中 15 尾）であった。

ND 〜 86ng/裨であった。運河域のボラは、後述の(4)水質分析結果の項で示すように運河域の地点は、下水処理場の放流水の影響を受けエストロゲン

以上のとおり、ボラ、コノシロ、スズキ、マアナゴ濃度が高い。運河域の雄ボラに高濃度のビテロゲニン

東京都環境科学研究所年報 2005─ 162 ─

写真 1

ボラの精巣卵写真 2

ボラの精巣卵

採捕時期 2004 年 7 月
識別番号（7 ア 2）
体長 400 ㎜、体重 1,310 ｇ

採捕時期 2005 年 2 月
識別番号（2 イ 37）
体長 382 ㎜、体重 1,030 ｇ

写真 3

写真 4

スズキの精巣卵

採捕時期 2004 年 11 月識別番号（11 ウ 10）
体長 395 ㎜、体重 940 ｇ

写真 5

スズキの精巣卵

採捕時期 2004 年 11 月
識別番号（11 ウ 25）
体長 350 ㎜、体重 630 ｇ

マアナゴの精巣卵

写真 6

採捕時期 2004 年 12 月
識別番号（12 マ 5）
全長 414 ㎜、体重 140 ｇ

マアナゴの精巣卵

採捕時期 2005 年 1 月
識別番号（1 マ 5）
全長 434 ㎜、体重 169 ｇ

東京都環境科学研究所年報 2005─ 163 ─
ELISA 法によるエストロゲン作用強度は、Ａ地点は11 〜 26ng/褄、Ｂ地点は 15 〜 27ng/褄、Ｃ地点は16 〜 19ng/褄であった。LC-MS/MS 法による同作用強度は、Ａ地点は 4 〜 13ng/褄、Ｂ地点は 7 〜 25ng/
褄、Ｃ地点は 9 〜 20ng/褄であった。下水処理場の放流水については、ELISA 法によるエストロゲン作用強度は、森ケ崎処理場は 17 〜 25ng/褄、芝浦処理場は18 〜 28ng/褄、砂町処理場は 21 〜 25ng/褄であっ
図3

雄ボラの血液中ビテロゲニン

表4ボラのビテロゲニン測定結果た。LC-MS/MS 法による同作用強度は、森ケ崎処理場
は 6 〜 23ng/褄、芝浦処理場は 6 〜 24ng/褄、砂町処理場は 16 〜 55ng/褄であった。
以上のように運河域の調査地点と下水処理場は同程度のエストロゲン作用強度であった。閉鎖性の強い運河にあるＡ、Ｂ、Ｃ地点は、いずれも近傍に下水処理場があるため、下水処理場からのエストロゲン影響が大きいと考えられる。既報 1）で述べたように、河川水のエストロゲン作用強度（ELISA 法）が 10ng/褄を超えると雄コイは高い濃度のビテロゲニンを産生する。
ボラがコイと同様なエストロゲンの影響を受けるとす
れば、運河域や下水処理場放流水は、十分に高濃度のビテロゲニンを産生させるレベルにあるといえる。
一方、東京都内湾のエストロゲン作用強度は、Ａ、Ｂ、Ｃの各地点に比べると低い値であった。ELISA 法によるエストロゲン作用強度は、0.1 〜 6.6ng/褄、LCMS/MS 法による同作用強度は、0 〜 0.5ng/褄であった。内湾調査地点のうちエストロゲン作用強度が高い地点は、ST.23 であったが、これは森ケ崎処理場の放流水が内湾に流れ出る地点に位置することから、下水処理場の影響と考えられる。
環境省の内分泌かく乱化学物質リストにあげられている 4-t-オクチルフェノールと 4-ノニルフェノールの測定結果を表 6 に示す。4-t-オクチルフェノールの測が検出されたのは、下水処理場の放流水中のエストロ定最大値は 150ng/褄、4-ノニルフェノールの測定最ゲンに暴露されたからだと考えられる。

大値は 880ng/褄であった。これらは、いずれも砂町(4)処理場の放流水であった。環境省によるメダカの雄に

調査地点の水質分析結果調査地点とその近傍の下水処理場の放流口で水質調ビテロゲニン産生が有意に見られた水中濃度は 11,600査を魚類調査にあわせて行った。その他に東京都内湾のエストロゲン濃度分布を把握するため、内湾環境基

表6準地点等の水質調査を行った。表 5 に各調査地点のエストロゲン等の濃度を示す。表中のエストロゲン 2 成分作用強度は、既報 5）の比活性値を用いて 17 β-エストラジオールとエストロンの値から求めたものである。
東京都環境科学研究所年報 2005

ノニルフェノール等の測定結果

─ 164 ─
表517 β-エストラジオール等分析結果

東京都環境科学研究所年報 2005─ 165 ─ng/褄、最大無作用濃度は 6,080ng/褄である 12）。こ（2002）．

れらのことから、4-ノニルフェノールのビテロゲニン2）宮下雄博ら：多摩川等の環境ホルモン問題に関する産生への影響は小さいものと推測される。

研究（その 9）、東京都環境科学研究所年報、56-65

エストロゲンは水中から底泥に移行すること 13）こ（2002）．とが知られているため、一部ではあるが運河域の底質

3）和波一夫ら：都内水域の環境ホルモン問題に関する調査を行った。表 5 に示すとおり、ELISA 法によるエ研究（その 1）、東京都環境科学研究所年報、55-62

ストロゲン作用強度は、2.1 〜 3.4ng/ｇ、LC-MS/MS（2003）．

法によるエストロゲ作用強度は、1.6 〜 4.1ng/ｇであ4）和波一夫ら：都内水域の環境ホルモン問題に関するった。これらの底質中のエストロゲンが魚類に影響を研究（その 3）、東京都環境科学研究所年報、101-

及ぼす影響については今後検討していきたい。

109（2004）．
5）嶋津暉之ら：多摩川等の環境ホルモン問題に関する

4

おわりに研究（その 3）、東京都環境科学研究所年報、165-

2002 年度から 2004 年度まで都内運河域等の水域

175（2000）．

で魚類を採捕して、生殖腺の観察を行った。採捕した魚類のうち、ボラ、スズキ、マアナゴ等の雄に精巣卵が認められた。ボラの精巣卵については、運河域で採捕された個体に多く認められた。雄ボラの血液中のビ

6）東京都環境局、平成 15 年度公共用水域及び地下水の水質測定結果（2004）．
7）堀田秀之：長崎県樺島のいわゆるカスミボラについて、魚類学雑誌、162-169（1955）．

テロゲニンを測定したところ、運河域の雄ボラは、沖

8）小林牧人；足立伸次：生殖、魚類生理学の基礎、会合い域の雄ボラに比べて著しく高い濃度であった。

田勝美編、恒星社厚生閣、155-184（2002）．

2004 年度に行った水質調査では、LC-MS/MS 法によ9）原 彰彦：魚の血液で環境ホルモン汚染をみる、科るエストロゲン作用強度は、下水処理場 6 〜 55ng/
褄、運河域 4 〜 25ng/褄、沖合い域 ND 〜 0.5ng/褄
であった。2003 年度調査でも運河域のエストロゲン学、68(7)、591-596（1998）．
10）原彰彦：内分泌攪乱物質の生態影響、廃棄物学

会誌、10(4)、278-287（1999）．

作用強度は、下水処理場と同レベルであった。林ら 14）11）有薗幸司：河川海域などにおける内分泌攪乱化学

は、16ng/褄の 17 β-エストラジオールにメダカを暴物質の検出、資源環境対策 34、844-848（1998）．

露し、精巣卵が発現することを明らかにした。雄コイ

12）環境省環境保健部：ノニルフェノールが魚類に与は、河川水のエストロゲン作用強度が 10ng/褄以上でえる内分泌攪乱作用の試験結果に関する報告（2001）．

あると高濃度のビテロゲニンを産生する傾向がみられ

13）山下信義ら：柱状底質中の内分泌活性物質、化学た 1）。これらのことから、都内運河域の雄ボラに認め

総説、50、206-212（2003）．

られた精巣卵や高濃度のビテロゲニン産生は、運河域

14）林彬勒ら：メダカ（Oryziaslatipes）精巣卵の定に流入する下水処理場放流水のエストロゲンとの関連

量的検出のための新手法（小片化法）、水環境学会

性が高いと推測される。

誌、725-730（2003）．

謝辞譛東京都内湾漁業環境整備協会からは羽田沖の魚類検体を提供していただいた。マアナゴの生殖腺摘出については、東京都水産試験場の協力を得た。
ここに、関係各位に深く感謝の意を表します。

引用文献
1）和波一夫ら：多摩川等の環境ホルモン問題に関する研究（その 8）、東京都環境科学研究所年報、45-55
東京都環境科学研究所年報 2005