第7回日本水環境学会シンポジウム 2004.9.14

GC/MSによる水産油脂加工食品中のPCBsおよびPBDEsの分析
大阪府立公衆衛生研究所
食品医薬品部食品化学課○阿久津和彦，田中之雄

322´

3´

2O34Clm 54´
66´

5´ClnPCBs
ポリ塩化ビフェニル

Brm6452´
3´

Brn

6´

4´
5´

PBDEs
ポリ臭素化ジフェニルエーテル背景および目的
健康食品・サプリメントの一大ブーム。
水産油脂加工食品（魚油など）の人気も高い。

http://bookweb.kinokuniya.co.jp

http://www.amazon.com

・魚介類体内にはPCBs等の有機ハロゲン化合物が蓄積。
・水産油脂加工食品の汚染実態については知見が少ない。
市販の水産油脂加工食品の汚染状況を把握するため
GC/MSを用いてPCBsおよびPBDEsの分析を行った。

背景および目的
健康食品・サプリメントの一大ブーム。
水産油脂加工食品（魚油など）の人気も高い。

イワシ油

マグロ眼窩油ヤツメウナギ油

タラ肝油

・魚介類体内にはPCBs等の有機ハロゲン化合物が蓄積。
・水産油脂加工食品の汚染実態については知見が少ない。
市販の水産油脂加工食品の汚染状況を把握するため
GC/MSを用いてPCBsおよびPBDEsの分析を行った。

背景および目的
健康食品・サプリメントの一大ブーム。
水産油脂加工食品（魚油など）の人気も高い。

マンボウ肝油

深海鮫肝油

アザラシ油

ウミヘビ油

・魚介類体内にはPCBs等の有機ハロゲン化合物が蓄積。
・水産油脂加工食品の汚染実態については知見が少ない。
市販の水産油脂加工食品の汚染状況を把握するため
GC/MSを用いてPCBsおよびPBDEsの分析を行った。

試 料
国内のインターネット通信販売を利用して2004年2〜6月に購入。
魚油17検体、深海鮫肝油12検体
アザラシ油5検体、ウミヘビ油1検体
計35検体（33銘柄）

試 料
国内のインターネット通信販売を利用して2004年2〜6月に購入。
魚油17検体、深海鮫肝油12検体
アザラシ油5検体、ウミヘビ油1検体
計35検体（33銘柄）

カプセル内容物を分析

対象物質
PCBs
3塩化物 (TrCB): 2,4,4’-/2,4’,5- (#28/#31)
4塩化物 (TeCB): 2,2’,5,5’- (#52)
5塩化物 (PeCB): 2,3’,4,4’,5- (#118)
6塩化物 (HxCB): 2,2’,4,4’,5,5’- (#153)
7塩化物 (HpCB): 2,2’,3,4,4’,5,5’- (#180)

2´

234´

4Clm 56645

3臭素化物 (TrBDE): 2,4,4’- (#28)
4臭素化物 (TeBDE): 2,2’,4,5’- (#49), 2,2’,4,4’- (#47), 2,3’,4,4’- (#66)
5臭素化物 (PeBDE): 2,2’,4,4’,6- (#100), 2,2’,4,4’,5- (#99)
6臭素化物 (HxBDE): 2,2’,4,4’,6,6’- (#155), 2,2’,4,4’,5,6’- (#154),
2,2’,4,4’,5,5’- (#153)
7臭素化物 (HpBDE): 2,2’,3,4,4’,5’,6- (#183)

Cln

2´

O

3Brm

5´

6´

2PBDEs

3´

3´

Brn

6´

4´
5´

前処理フロー
油状内容物 0.75 g
クリーンナップスパイク（13C-PCBs, 13C-PBDEs）
各 0.75 ng 添加（添加量各 1 ng/g に相当）
アセトン/シクロヘキサン（3：7）で 7.5 mL に定容・混和遠心分離（3000 rpm，5 min）して上澄み液約 7 mL を採取

ゲル浸透クロマトグラフィー
試料液 5 mL（脂肪 0.5 g 相当）を注入
カラム：Shodex EV-G + EV-2000（40℃）
移動相：アセトン/シクロヘキサン（3：7）5 mL/min
対象物質の溶出画分を回収後、溶媒を留去して残留物をヘキサンに溶解

硫酸シリカゲルカラムクロマトグラフィー
44％硫酸シリカゲル（和光純薬，ダイオキシン分析用）3 g
試料液を負荷後，ヘキサン 30 mL で対象物質を溶出

濃縮（1 mL 以下）
シリンジスパイク（13C-BDE-77，10 ng/mL ノナン溶液）50μL 添加

濃縮（約 50μL）

GC/MS 測定
鮫肝油等、妨害成分の多い試料については DMSO/ヘキサン分配処理を追加

測定条件
GC：Agilent 6890A
注入口：250℃，スプリットレス，2μL
Siltek不活性化処理済インレットライナー使用
カラム：Rtx-1ms (15m×0.25mmφ，膜厚0.1μm) インテグラガード付
昇温条件：100℃ (2min) - 10℃/min - 310℃ (3min)

MS：JEOL JMS-GCmateII
イオン源温度：280℃
トランスファーライン温度：310℃
イオン化法：EI (SIM）
イオン化エネルギー：35eV
分解能：1,000
SIMグルーピング
6〜9.8 min：TrCB, TeCB
255.96, 257.96, (268.00, 270.00), 289.92, 291.92, (301.96, 303.96)
9.8〜12.8 min：PeCB, HxCB, TrBDE
325.88, 327.88, (337.92, 339.92), 359.84, 361.84, (371.88, 373.88),
405.80, 407.80, (417.84, 419.84)
12.8〜14.8 min：HpCB, TeBDE
393.80, 395.80, (405.84, 407.84), 483.71, 485.71, (495.75, 497.75)
14.8〜18.2 min：PeBDE, HxBDE
563.62, 565.62, (575.66, 577.66), 641.53, 643.53, (653.57, 655.57)
18.2〜26 min：HpBDE
721.44, 723.44, (733.48, 735.48)

標準溶液
PCBs

TrCB-28m/z 255.96
13C-TrCB-28m/z 268.00

TeCB-52m/z 291.92
13C-TeCB-52m/z 303.96

PeCB-118m/z 325.88
13C-PeCB-118m/z 337.92

HxCB-153m/z 359.84
13C-HxCB-153m/z 371.88

HpCB-180m/z 393.80
13C-HpCB-180m/z 405.84
89101112Time/min

PCBs標準溶液のクロマトグラム
Native：各 1 ng/mL，13Cラベル体：各 10 ng/mL

1314

標準溶液
PBDEs

TrBDE-28m/z 405.80
13C-TrBDE-28

TeBDE-47
TeBDE-66
TeBDE-49m/z 417.84m/z 485.71
13C-TeBDE-47

13C-TeBDE-77

PeBDE-100m/z 497.75

PeBDE-99m/z 563.62
13C-PeBDE-99m/z 575.66

HxBDE-154

HxBDE-155

HxBDE-153

13C-HxBDE-154

13C-HxBDE-153m/z 643.53m/z 655.57

HpBDE-183m/z 721.44
13C-HpBDE-183m/z 733.48
111213141516Time/min

PBDEs標準溶液のクロマトグラム
Native：各 1 ng/mL，13Cラベル体：各 10 ng/mL

17181920

魚油PCBs

TrCB-28/31m/z 255.96
13C-TrCB-28m/z 268.00

TeCB-52m/z 291.92
13C-TeCB-52m/z 303.96

PeCB-118m/z 325.88
13C-PeCB-118m/z 337.92

HxCB-153m/z 359.84
13C-HxCB-153m/z 371.88

HpCB-180m/z 393.80
13C-HpCB-180m/z 405.84
8910111213Time/min

イワシ精製魚油のクロマトグラム（3〜7塩化PCBs）

14

魚油PBDEs

TrBDE-28m/z 405.80
13C-TrBDE-28m/z 417.84

TeBDE-47
TeBDE-66
TeBDE-49m/z 485.71
13C-TeBDE-77

13C-TeBDE-47m/z 497.75

PeBDE-100

PeBDE-99m/z 563.62
13C-PeBDE-99m/z 575.66

HxBDE-154
HxBDE-153HxBDE-155m/z 643.53
13C-HxBDE-154

13C-HxBDE-153m/z 655.57

HpBDE-183 (ND)m/z 721.44
13C-HpBDE-183m/z 733.48
11121314

15Time/min

16171819

イワシ精製魚油のクロマトグラム（3〜7臭素化PBDEs）

20

60

深海鮫肝油
魚油
アザラシ油
ウミヘビ油

50

40

同一銘柄の
アイ鮫肝油

30

同一銘柄の
タラ肝油

2010

イワシ油
マンボウ油

00

ヤツメウナギ油

100200Σ6PCBs (ng/g)

300

各試料群におけるPCBs濃度とPBDEs濃度の比較

400

総PCBsの定量
各異性体の感度は同一と仮定
面積を合計して計算

TrCBs溶出範囲*m/z 255.96

TeCBs溶出範囲*m/z 291.92

PeCBs溶出範囲*m/z 325.88

HxCBs溶出範囲*m/z 359.84

HpCBs溶出範囲*m/z 393.80
681012Time/min

クロマトグラム例（3〜7塩化PCBs、イワシ精製魚油）

1416

結 果
総PCBs（3〜7塩化物）摂取量
製品の推奨一日摂取量からの概算値

マンボウ肝油 3粒 (内容物 0.75 g) → 0.07μg
深海鮫肝油NZ 6粒 (内容物 1.8 g) → 0.2μg
イワシ油 15粒 (内容物 3 g)
→ 0.5μg
ヤツメウナギ油 9粒 (内容物 1.8 g) → 0.8μg
タラ肝油 2 g→ 1μg
深海鮫肝油JPN 7粒 (内容物 1.75 g)→ 2μg
大阪における1980〜1990年代の食事由来のPCBs一日摂取量(0.2〜4μg/人/日)* と同程度。

多いものでも暫定ADI (300μg/人/日、体重60kg)*の約1%であり、直ちに問題となる量では無い。
*参考：衛生試験法・注解（2000）

まとめ
EPA・DHA等を濃縮精製した魚油加工食品やアザラシ油加工食品では全体的にPCBs濃度・PBDEs濃度が低い傾向がみられた。
タラ肝油やアイ鮫肝油から比較的高濃度のPCBsおよびPBDEsが検出され、有機ハロゲン化合物による海洋汚染が深海域の生態系にまで及んでいることが示唆された。
製品の一日推奨摂取量に基づき概算したPCBs（3〜7塩化物）の一日摂取量は最大（鮫肝油カプセル7粒摂取）で約2μg/人/日（暫定一日許容摂取量の約1％）であり、食品衛生上、直ちに問題となるレベルではなかった。

α-HCH

魚油
塩素系農薬

β-HCH
γ-HCH

m/z 255.96

HCB
m/z 268.00

オキシクロルデン
m/z 291.92

γ-クロルデンα-クロルデン

m/z 303.96

trans-ノナクロール

cis-ノナクロール

m/z 325.88p,p'-DDEm/z 337.92

p,p'-DDDo,p'-DDTp,p'-DDTm/z 359.84
5678910111213Time/min

イワシ精製魚油のクロマトグラム（塩素系農薬）

1415

謝 辞
本研究の一部は文部科学省/日本学術振興会
平成15・16年度 科学研究費補助金 若手研究(B)(課題番号15790291) の助成を受けて実施しました。
記して謝意を表します。

予備スライド（参考）水産油脂加工食品に含まれる代表的な有効成分
および標榜されている効能効果
OOH

エイコサペンタエン酸 (EPA)

スクアレン（スクワレン）

アレルギー体質の改善、心臓疾患の予防

免疫力強化、抗酸化作用

OOH

ドコサヘキサエン酸 (DHA)
知能の向上、視力改善

DPA

K A RE N S. MOO R E, et al.,Squalamine: An aminosterol antibiotic fro m the shark.
Proc. Nati. Acad. Sci. USA, 90, 1354-1358 (1993).

心臓疾患・リウマチ

スクアラミン（スクワラミン）
抗ガン作用（血管新生阻害）

OH
HOHO

ビタミンA1OH

視力改善

ビタミンD3

アルキルグリセロール類（グリセリルエーテル類）

骨の強化

免疫力強化、抗ガン作用HO（参考）JHFA（ジャファ）マークについて
JHFA: Japan Health Food Authorization
JHFAマーク

http://www.jhnfa.org/

汚染物についての自主規制基準
エイコサペンタエン酸（EPA）含有精製魚油加工食品規格基準
昭和61年8月10日 公示

PCB 1.0 ppm 以下
BHC 2 ppm 以下（暫定値）
DDT 2 ppm 以下（暫定値）
JHFAマーク認定品は市場流通品のごく一部にすぎない。

350

アイ鮫

HpCB-180
HxCB-153

60

HxBDE-153
HxBDE-154

PeCB-118300

TeCB-52

HxBDE-155

50

PeBDE-99

TrCB-28/31

PeBDE-100
TeBDE-66

250

タラ

TeBDE-4740
内容物中濃度 (ng/g)

内容物中濃度 (ng/g)

アイ鮫

HpBDE-183

200150TeBDE-49
TrBDE-28

タラ

30

20100

1050

0

タラ肝油
ボトル入

タラ肝油
ボトル入

アイ鮫肝油
カプセル

アイ鮫肝油
カプセル

アイ鮫肝油
カプセル

No.16
A社ロットA

No.17
A社ロットB

No.18
B社ロットA

No.19
B社ロットB

No.20
C社

タラ肝油およびアイ鮫肝油中のPCBs濃度

製造ロットの異なる同一銘柄品および類似品の分析結果

0

タラ肝油
ボトル入
No.16
A社ロットA

タラ肝油
ボトル入
No.17
A社ロットB

アイ鮫肝油
カプセル
No.18
B社ロットA

アイ鮫肝油
カプセル
No.19
B社ロットB

タラ肝油およびアイ鮫肝油中のPBDEs濃度

アイ鮫肝油
カプセル
No.20
C社

100%

75%

HpCB-180
HxCB-153
50%PeCB-118
TeCB-52
TrCB-28/31

25%0%

ヤツメ

イワシ

マンボウ

タラサメ

各試料におけるPCBs組成の比較

ウミヘビ

100%

HxBDE-153
75%

HxBDE-154
HxBDE-155
PeBDE-9950%

PeBDE-100
TeBDE-66
TeBDE-47

25%

TeBDE-49
TrBDE-280%

ヤツメ

イワシ

マンボウ

タラサメ

各試料におけるPBDEs組成の比較

ウミヘビ

結 果
Σ6PCBs
100 ng/g〜
深海鮫肝油 (2銘柄)、タラ肝油 (1銘柄)
10〜<100 ng/g
魚油（ヤツメウナギ、イワシ、マンボウ、各1銘柄)、
深海鮫肝油 (9銘柄)、エラブウナギ油(1銘柄)
1〜<10 ng/g
魚油 (マグロ眼窩油等、6銘柄)、アザラシ油 (3銘柄)<1 ng/g
魚油 (マグロ眼窩油等、6銘柄)、アザラシ油 (2銘柄)結 果
Σ10PBDEs
100 ng/g〜
該当製品なし10〜<100 ng/g
深海鮫肝油 (3銘柄)、タラ肝油 (1銘柄)
1〜<10 ng/g
魚油（イワシ、マンボウ、ヤツメウナギ等、5銘柄)、
深海鮫肝油 (8銘柄)、エラブウナギ油 (1銘柄)、
アザラシ油 (1銘柄)<1 ng/g
魚油 (10銘柄)、アザラシ油 (4銘柄)