平成24年9月19日

アフラトキシンに関する説明会

アフラトキシンＢ１規制から総アフラトキシンへ規制値変更とその後のアフラトキシン検出状況について（財）マイコトキシン検査協会
岡野 清志

財団法人マイコトキシン検査協会の沿革
１９７１年輸入ピーナッツバターからアフラトキシンが検出された。当初は、輸入落花生は国立予防衛生研究所（現国立感染症研究所）、国立衛生試験所（現国立医薬品食品衛生研究所）で検査された。
１９７２年落花生輸入商社協議会を中心に全国落花生協同組合連合会（現一般社団法人 日本ピーナッツ協会）等の支援により（財）マイコトキシン検査協会が専門機関として設立された。現在、輸入食品の検査（命令検査、輸入自主検査）、依頼検査（自主検査）を受託し、アフラトキシンの検査及び他のマイコトキシンの検査を実施している。

協会の方針
検査の良質、アフラトキシン及びその他のマイコトキシンについて汚染情報の提供や汚染原因の調査研究、相談事業等を行い、輸入者及び加工業者に情報を提供することにより消費者の「食の安全」「安心」に貢献する。

本日のテーマ
１．アフラトキシン検査について
２．総アフラトキシン規制変更後の検査結果について
３．海外の検査結果についてどう見るか
４．当面の対策（提案）５．今後の対策（提案）１．アフラトキシン検査について（１）日本におけるカビ、カビ毒検査（２）総アフラトキシン基準値と５ｋｇ採取について（３）輸入食品のアフラトキシン検査
１）命令検査対象食品
２）サンプリング
３）試料の調整
４）化学分析
５）総アフラトキシンの定量計算（適合、不適合）
６）分析の注意点

(1) 日本におけるカビ、カビ毒検査
１９５２年

黄変米事件

１９７１年

アフラトキシンＢ１規制（分析法の検出限界10ppb）

２００２年

デオキシニバレノール暫定基準（1.1ppm）

２００３年

パツリン規格基準（0.050ppm）

２０１１年

総アフラトキシンＢ１，Ｂ２，Ｇ１，Ｇ２(基準値10μg/kg)

１９６０年 アフラトキシン発見

輸入米のカビ検査

（２）総アフラトキシン基準値と５ｋｇ採取について
食安発０３３１第６号（平成２３年３月３１日）同年１０月実施
基準値
総アフラトキシン（Ｂ１＋Ｂ２＋Ｇ１＋Ｇ２ の合算） １０μｇ／ｋｇを超えてはならない

サンプリング（試験品採取）
粒状食品は１，０００粒以上、１０，０００粒以上で精密度が高まると通知された。

サンプリング量を１粒当たり0.1gを越えるもの5kg、0.1g以下1kgを決定した

輸入落花生のアフラトキシンB1,B2,G1,G2汚染割合

主な国のアフラトキシン基準値
国名

対象食品

日本

基準値(μg/kg)

全ての食品
B1+B2+G1+G2

コーデックス

ＥＵ

加工原料
落花生、アーモンド、ピスタチオ、クルミ等
B1+B2+G1+G2
直接消費用
B1+B2+G1+G2
食品、加工品（ピーナッツ、ナッツ類等）
食品、加工品（ドライフルーツ）
穀物、穀物を利用した加工品
B1
B1+B2+G1+G2
食品原料で選別前か物理的処理前

香辛料

15
10

24

B18

B1+B2+G1+G2
ナッツ類、トウモロコシ
B1
B1+B2+G1+G2
B1
B1+B2+G1+G2
全ての食品
B1+B2+G1+G2

15

ピーナッツ

アメリカ

1051051020
ＥＵ，アメリカ：2003

採取 モデル

（３）アフラトキシンの検査（落花生、ナッツ類等）
サンプリング（試験品採取）

誤差：約７０～９０％５ｋｇ

大粒：約５，０００粒
アーモンド：約４，０００粒
小粒：約１２，５００粒 ピスタチオ：可食部約７，５００粒
殻付き：可食部約６，０００粒

試料の調製（５ｋｇ全量粉砕）

誤差：約２０～３０％
粉砕機の性能粉砕粒（１０メッシュ1.7mm未満）

混合（混合機均一化）
混合機の性能化学分析

誤差：約１０～２０％
分析技能（施設の実力） 第三者機関の評価 Fapas
確認検査（精密検査）ｎの数、AFの確認

検査結果
検査とは
１．サンプリングはランダム（無作為）に行う
２．試料の調製（粉砕）は出来るだけ粒を細かくする
３．分析値を正確に出す（粉砕した試料から取る分析試料の量）

1)アフラトキシン命令検査対象食品（平成２４年８月１７日）

命令検査対象含有食品（平成２４年３月３０日）

２）アフラトキシン検査のサンプリング

食品１粒重量が ０．１ｇ を超える 場合

食品１粒重量が ０．１ｇ 以下 の場合

3)試料の調製（粉砕）
試料の調製誤差（約３０％)
注意点
・サンプリングした試料の全量を粉砕する
・落花生などのアフラトキシン汚染は粒単位の汚染なので粉砕したものが均一であることが要求される・試料が１０，０００粒に１粒が汚染している場合もあり、粉砕した試料のメッシュの大きさが重要となる・粉砕した試料のメッシュは、汚染粒の混入した粒数にもよるが少なくとも１０メッシュ（1.7ｍｍ）以下にする必要がある

落花生 粉砕

4)化学分析（試験検査）
アフラトキシン分析法（通知法）の推移
1971年3月16日「環食第１２８号」
アフラトキシンＢ１試験法
抽出：メタノール、クロロホルム
精製：シリカゲルカラム（オープンカラム）
検出：薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）
2011年8月16日「食安発０８１６第２号」
総アフラトキシン試験法
抽出：アセトニトリル
精製：多機能カラム、イムノアフィニティカラム
検出：液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）
2011年8月16日「食安発０８１６第７号」
トウモロコシ中の総アフラトキシン試験法
簡易測定法 4ppb未満は陰性、以上は化学分析
試験法の改定：2000年3月（多機能カラム）、2006年7月（トウモロコシ簡易法）、
2008年7月（イムノアフィニティーカラム）

薄層クロマトグラフィー

アフラトキシンB
１，B2

アフラトキシン標準
B1,B2,G1,G2

薄層クロマトグラフィー

アフラトキシB1,B2,G1,G2

定性試験

VICAM IAC フルオロメーター

液体クロトマトブラフィー法（ＨＰＬＣ）

液体クロマトグラフィー（HPLC)

標準アフラトキシン（トリフルオロ酢酸処理）B1,B2,G1,G2

液体クロマトグラフィー（HPLC)

落花生 アフラトキシンB1,B2

液体クロマトグラフィー（HPLC)

落花生 アフラトキシンB1,B2,G1,G2

５）総アフラトキシンの定量計算の方法（適合、不適合）
総アフラトキシンの試験法（食安発０８１６第２号（平成２３年８月１６日）（総アフラトキシンの定量計算）
B1+B2+G1+G2＝合算値μｇ／ｋｇ（定量限界１．０μｇ／ｋｇ）
１０μｇ／ｋｇを超えた場合・・・・違反
１０．５μｇ／ｋｇ・・・１１μｇ／ｋｇ（例）８．７＋１．２＋６．３＋１．０＝１７．２μｇ／ｋｇ
報告値：１７μｇ／ｋｇ
１０μｇ／ｋｇ以下の場合 ・・・・適合
１０．４μｇ／ｋｇ・・・１０μｇ／ｋｇ（食品衛生法第６条第２号の扱い）

６）分析の注意点
化学分析法（全ての食品）
精製するカラムは対象食品及び使用器材（メーカー）のちがい毎に回収率等を確認する（初心者はメーカーの指導が必要）

簡易測定法（トウモロコシ）
エライザ法、ラテラル法などがある。対象食品と測定器材の種類及び手技により正しい結果が得られないことがあるため始める前にメーカーの指導が必要である。
特に測定値のバラツキに注意すること。
測定値が分析法により高く出たり、低く出たりするので食品の種類毎に確認すること。

２．総アフラトキシン規制変更後の検査結果について（生落花生、落花生加工品、ナッツ類、いちじく）（１）届け出件数による検査結果（２）検体数による検査結果（３）濃度別検出数（濃度分布をみる）（４）アフラトキシンＢ１，Ｂ２及びＢ１，Ｂ２，Ｇ１，Ｇ２汚染の検体数と割合の比較（５）アフラトキシンＢ１規制時と総アフラトキシン規制変更後の検出数と検出率の比較

大粒生落花生の不適合検体について生落花生濃度別検出数
検体数μg/kg

バターピナッツ、ローストピーナッツのＡＦ濃度別検出数
検体数

中国産μg/kg

アーモンド、クルミの濃度別検出数
検体数μg/kg

いちじくのＡＦ濃度別検出数
検体数μg/kg

（４）アフラトキシンＢ１，Ｂ２及びＢ１，Ｂ２，Ｇ１，Ｇ２汚染の検体数と割合アフラトキシンＢ１，Ｂ２及びＢ１，Ｂ２，Ｇ１，Ｇ２汚染の検体数と割合

アフラトキシンＢ１，Ｂ２及びＢ１，Ｂ２，Ｇ１，Ｇ２汚染の検体数と割合

（５）ＡＦＢ１規制時と総ＡＦ規制変更後の検出数と検出率の比較

ＡＦＢ１規制時と総ＡＦ規制変更後の検出数と検出率の比較

ＡＦＢ１規制時と総ＡＦ規制変更後の検出数と検出率の比較

３．検査結果のまとめ○総アフラトキシン１０μｇ／ｋｇ規制及び５ｋｇ採取により検出率不適合率が高くなった食品があった。
○アフラトキシンＢ １，Ｂ ２，Ｇ １，Ｇ ２汚染が検査結果に影響している。

（１）生落花生検出率と違反率が増加した。
＜中国産大粒落花生＞
生産地は汚染しやすい地域で、検出した濃度が多様なことから今後さらなる注意深い管理が必要である 。
＜中国産小粒落花生＞
２３年度産は検出率も低く、違反もなかった。
産地の遼寧省は北のため汚染が低いと考えられるが、年度により変わるため注意する必要がある。
＜米国産小粒落花生＞
検出率が高いが低濃度の検出が多く品質が検査等でコントロールされていると考えられる。

（２）落花生加工品
中国産バターピーナッツ、ローストピーナッツは変更後も低濃度のものが多く検出率、違反率はほぼ変わらない。
バターピーナッツは加工する行程で選別も加わるためとも考えられる。
ローストピーナッツは殻付きが多く外見上変色も少なく割れも少ないので良品が多いと考えられる。

（３）アーモンド、クルミ、ピスタチオ
米国産アーモンド、クルミ、ピスタチオの検出率は低く低濃度ものが多い。検査等で品質のコントロールされていると思われる。

（４）いちじく
総アフラトキシン１０μｇ／ｋｇなったこと、５ｋｇ採取により検出率、違反率も増加し影響がある。
輸入国はトルコ、米国、イランが主であるが米国、イランが検出率、違反率が高い傾向があった。 トルコ産は２国と比べ検出率も低く違反率も少ない。
輸出国の選別方法、輸出検査等にちがいがあると思われる。

３．海外の検査結果をどう見るか
サンプリング

試料の調製

化学分析

分析値

検査（サンプリング＋試料の調製＋化学分析＝分析値）○分析値だけが情報としてひとり歩きしているのではないか○試料の分析値はサンプリング、試料の調製、化学分析の結果の答えである。
○検査法は国により異なる

生落花生＜米国のアフラトキシン検査＞ Total ２０μｇ／ｋｇ
ＴＥＳＴＴＥＳＴＴＥＳＴ（Ⅰ）２２ｋｇ（Ⅱ）２２ｋｇ（Ⅲ）２２ｋｇ（Ⅰ）＋（Ⅱ）（Ⅰ）＋（Ⅱ）＋（Ⅲ）

１２μｇ／ｋｇ以下合格
１３～２２μｇ／ｋｇ（Ⅲ）へ
２３μｇ／ｋｇ不合格

１５μｇ／ｋｇ以下合格

８μｇ／ｋｇ以下合格
９～４４μｇ／ｋｇ（Ⅱ）へ
４５μｇ／ｋｇ以上不合格＜ＥＵのアフラトキシン検査＞ Ｂ１ ８μｇ／ｋｇ ，Ｔｏｔａｌ
重量サンプリング

調製

１８，０００ｋｇ

１００個所 ２０ｋｇ

１０ｋｇＸ２

１６μｇ／ｋｇ以上不合格

１５μｇ／ｋｇ

分析２検体＜日本のアフラトキシン検査＞ Total １０μｇ／ｋｇ
１８，０００ｋｇ
１８，０００ｋｇ

５０個所 ５ｋｇ

５ｋｇ

１検体

４．当面の対策（提案）
検査は、陽性を偽陰性、陰性を偽陽性にするリスクをもつものである。
そのリスクを最小限にし、検出を抑えなくてはならない。
＜輸出国の検査に関する調査＞（１）検査方法を確認する
１）貨物の重量２）サンプリングの数、重量３）調製法と重量
４）分析法
５）分析値
６）その他（例：EU輸出用検査等）（２）日本向け検査になっているか確認する（日本と同等だと検出する可能性がある）（３）現地で検査を見る

＜輸出国の調査した結果からの対策＞◯検査法が確認でき、正しく実施されているサンプリングのリスクは小さいがリスクを減し少しでも再検出を減らすためには追加検査をする。
◯検査法が不明確で正しく実施されいるとは思えないサンプリングのリスクが大きいく再検出する可能性が高い。
再検出しないためには追加検査が重要になる。

（１）生落花生
検査はEUと同等、基準値は５μg／ｋｇ以下

（２）アーモンド、クルミ
米国産は、現在の結果から違反が極端に増えることはないと思われる。
アーモンドはグレードが明らかでアフラトキシン汚染は正常粒＜機械によるダメージ＜カビ粒＜その他＜虫食い（ＵＳＤＡ）
選別効果はある。輸入する際はグレードを注意すること。

（３）いちじく輸出国の検査方法を確認すること。
検査を強化する。（ＥＵと同等）
ＢＧＹＦ(brighit greenish yellow fluoresence)ブラックライト365nmによる選別に効果がある。
再検出しないために追加検査を考えることである。

５．今後の対策（提案）＜新規生産地の開拓＞生産品からのアフラトキシン汚染を調査する。
生産品からのアフラトキシン産生カビを調査する。
土壌のアフラトキシン産生菌の調査をする。

＜再処理（選別）法を確立する＞
落花生等の選別法を確立する。
今は不合格検体の再選別は許可されていない。
現在の再処理技術は、選別が許された４０年前とはちがい進んでおり、また当時の不合格検体は汚染粒率が高かったが、現在は不合格でも中には汚染粒率が低いものもあり選別が期待される。

（再処理法）
近赤外選別機、色彩選別機、レーザー選別機、Ｘ線選別機等あり実用には検討が必要である。

＜落花生の再処理の提案＞
落花生ついては、近赤外選別機が研究として検討されており、実サンプルについてテストし検討する必要がある。その結果、効果があれば実用化する。
米国では陽性になった検体の再処理が許されており、再検査することができる。

輸入者の皆様が依頼していただいた検査結果をまとめたものです。
この貴重なデータを有効に活用し輸入の際に役立てていただきと思います。なお、国民の「食の安全」「安心」を確保したく（財）マイコトキ
シン検査協会は協力をおしみませんのでよろしくお願い致します。

ご静聴ありがとうございました財団法人 マイコトキシン検査協会で実施している検査