福岡県保健環境研究所年報第39号, 97－98, 2010

資料福岡県におけるA群ロタウイルスの遺伝子型別結果
石橋哲也・吉冨秀亮・前田詠里子・田上四郎・世良暢之・千々和勝己
平成22年度、23年度に感染症発生動向調査事業で搬入された感染性胃腸炎検体87検体および県内の6地域の医療機関で採取された便検体とA群ロタウイルス抗原検出簡易キット（以下：簡易キット）を合わせた92検体からA群ロタウイルスの遺伝子型別を行った。A群ロタウイルス遺伝子は、感染症発生動向調査で搬入された検体から15件が検出され、県内の6地域の医療機関で採取された検体からは89件検出された。遺伝子型別の結果、G1P[8]型、G2P[4]型、G9P[8]型、G3P[8]型が主な流行遺伝子型であった。
［キーワード：感染性胃腸炎、A群ロタウイルス、遺伝子型別］
１

はじめにEU024633）と比較して系統樹解析を行った。Bootstrap回

感染性胃腸炎の原因ウイルスには、ノロウイルス、ロ数は1000回とした。

タウイルス、アデノウイルス、パレコウイルスなど様々なウイルスが知られている。しかし、県内における感染症発生動向調査事業において感染性胃腸炎と診断された検体の原因ウイルス検出率は 5 割程度であり、そのほとんどが表1

A群ロタウイルス VP7(G)遺伝子型別プライマー
ﾌﾟﾗｲﾏｰ

5'-3' 塩基配列

1st PCR

VP7-F
VP7-R

ATGTATGGTATTGAATATACCAC
ACTTGCCACCATTTTTTCC

2nd PCR

VP7-R
G1G2G3G4G8
G9G12ACTTGCCACCATTTTTTCCCAAGTACTVAAATCAATGATGGCTACAATGATATTACTACATTTTCTACGAACTCAACACGAGAGG
CGTTTCTGGTGAGGAGTTG
GTCACACCATTTGTAAATTCGCTTGATGTGACTACAAATACCCGATGGACGTAACGTTGTA

ノロウイルスであるために、ノロウイルス以外の胃腸炎原因ウイルスについて詳細な遺伝子解析の調査はほとんど行われてこなかった。そこで、県内における A 群ロタウ
イルスの流行形態を明らかにすることを目的に、A 群ロタ
ウイルスの遺伝子型別を行った。
２方法

プライマーセットｻｲｽﾞ(塩基)884619525683453755176386

A群ロタウイルス VP4(P)遺伝子型別プライマー

検査材料は、平成22年度、23年度に感染症発生動向調査事業で感染性胃腸炎と診断され搬入された便検体それぞ

ﾌﾟﾗｲﾏｰ

5'-3' 塩基配列

1st PCR

VP4-F
VP4-R

TGGCTTCGCTCATTTATAGACAATTTCGGACCATTTATAACC

2nd PCR

VP4-F
P[4]
P[6]
P[8]
P[9]

TGGCTTCGCTCATTTATAGACAGCATCCCTACAAGTCTATTACTTGTTGATTAGTTGGATTCAACTATCTACTGGRTYRACGTG
AGGCGTCAATTTAATGAATAATAれ87検体（22年度：33検体、23年度：54検体）、および平
成23年3月-5月に県内6医療機関より搬入された便検体及び簡易キット計92検体を用いた。便検体は、PBSで約10%乳剤とした後、10,000rpm、20分遠心分離した上清を検査ｻｲｽﾞ(塩基)882503268349443

材料とした。簡易キットは、陽性バンドを切り取ったメン
ブランを検査材料とした。検査材料を用いて、抽出キット

３(QIAGEN, QIAamp Viral RNA Mini Kit)によりRNA抽出を行った。得られたRNAをもとに逆転写反応を行いcDNAを作成した。PCR反応に用いるプライマーセットは表1に示す1)。 PCR反応後、電気泳動によりバンドの有無を確認し、目的のバンドが得られたPCR産物についてダイレクトシークエンスを行い、得られた塩基配列を用いてClustalW解析を行い、近隣接合法（NJ法）を用いてレファレンス（例：福岡県保健環境研究所 （〒818-0135 太宰府市大字向佐野 39）

結果及び考察
平成 22 年度、23 年度に感染症発生動向調査事業で搬入された感染性胃腸炎検体 87 検体について検査を行った結果、15 検体から A 群ロタウイルス遺伝子が検出された。
遺伝子型別の結果、G3P[8]が 7 検体、G9P[8]型が 5 検体、G1P[8]型が 1 検体、G2P[4]型が 1 検体、その他が 1 検体であった。また、平成 23 年 3 月～5 月に県内 6 医療機関から A 群ロタウイルス陽性検体を収集し検査を行った結果を表 2 に示した。92 検体中 89 検体から VP7 領域、VP4領域の両方またはいずれかの A 群ロタウイルス遺伝子が－97－

表2
地域

文献

地域別 A 群ロタウイルス遺伝子型別結果

型別1) M. Iturriza-Gomara et al.: Rotavirus genotyping: keeping up
G1P[8] G2P[4] G3P[8] G9P[8] その他

福津市

32古賀市

25福岡市

13333筑紫野市

211113飯塚市

431うきは市
合計

2424with

evolving

population

of

human

rotavirus.

J.Clin.Virol., 31, 259-265, 2004.
17412212) 感染症情報センター：病原微生物検出情報月報, 373, 1-6,

52011.
38

検出された。型別結果は、G1P[8]型および G2P[4]型が最も多くそれぞれ 24 検体、ついで G9P[8]型 21 検体、G3P[8]型 12 検体、G2P[8]2 検体 G3P[4]1 検体であった。
A 群ロタウイルスは、内部に 11 本の分節 2 本鎖 RNA を有していて、その内、ウイルス表面の蛋白質をコードしている VP7 と VP4 の違いによって G 遺伝子型と P 遺伝子型に型別されている。二つの遺伝子型はそれぞれ G1～G27、P[1]～P[35]と多数の型が現在までに知られている。A 群ロタウイルスの主流行株の遺伝子型は、国・地域によって異なり、また、年によって変化することがわかっているが、世界中で検出されている野外株の大部分は、G1P[8]、G2P[4]、G3P[8]、G4P[8]、G9P[8]の主要な 5 種類で占められている 2)。今回検出された主な型も G1P[8]型、G2P[4]型、G3P[8]型、G9P[8]型の 4 種類であり、これらは主要 5種類に含まれていた。
我が国においてロタウイルス感染症の総患者数は年間80 万人で感染者の 15 人に 1 人が入院していると推定されている 2)。しかし、これまでは、補液などによる対症療法のみで特異的な治療法が導入されてこなかった。平成 23
年に我が国でもロタウイルスワクチンが認可された。今後
ワクチンの普及に伴い A 群ロタウイルスの流行型が変化していくことが予想される。今後も、ワクチンによる影響も含めた A 群ロタウイルス流行型の変化を知るために、継続して A 群ロタウイルス流行状況の調査を行っていく予定である。
４

an

まとめ
平成22年度、23年度に、県内で採取された感染性胃腸炎患者の便検体と簡易キット陽性バンドから検出されたA
群ロタウイルス遺伝子について型別を行った結果、G1P[8]、G2P[4]、G3P[8]、G9P[8]の4種類が主要な流行型であることが判明した。

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