課題番号 :25 指 201
研究課題名 :生活習慣などにおける脂質バイオマーカー探索 主任研究者名 :清水孝雄
分担研究者名 :キーワード :エイコサノイド、脂肪酸、リン脂質、生活習慣病、潰瘍性大腸炎
研究成果 : 脂質バイオマーカー探索のための検出システムを開発した。そのシステムを利用して脂質代謝酵素欠 損マウス各種組織のリン脂質、脂肪酸、エイコサノイドを網羅的に解析した。
LPCAT2 欠損マウス:血小板活性化因子(platelet-activating factor, PAF)生合成酵素 12 組織を測定した。定常状態でのエイコサノイドに大きな差はなかったが、PAF は減少していた。脂肪酸やリン脂質組成に変動はなった。in vitro の LPCAT2 活性から、アラキドン酸含有ホスファチジル コリン量が変動すると予測していたが、ほとんど変化しなかった。LPCAT2 は急性炎症時に PAF 産生に 寄与しているのだろう。
LPCAT3 欠損マウス:多種多様なリン脂質生合成酵素 出生後 1 日でほとんど全て死亡してしまう
ため、出生後 P1 マウスの 9 組織を解析した。多くの組織に おいて、主にアラキドン酸を含む高度不飽和脂肪酸が減少していた。また、アラキドン酸を含むリン 脂質(ホスファチジルコリンなど)も減少していた。これらは、LPCAT3 が広範囲に発現し、高度不飽 和脂肪酸をリン脂質に組み込む活性を持つ事と一致している。なぜ、LPCAT3 を欠損すると新生児致死 になるのかを解明する必要がある。
LPAAT3:ドコサヘキサエン酸(DHA)含有リン脂質生合成酵素
LPAAT3 はリン脂質に DHA を組み込む酵素として最初に同定された。いくつかの組織を調べた
結果、予測通り精巣の DHA や DHA 含有リン脂質が減少していた。LPAAT3 欠損マウス研究から
DHA と生殖機能 の関係を調べられる。 また、DHA 代謝物の機能についても解析を進めたい。

Subject No.

:25 指 201
:Screening of lipid biomarkers associated with lifestyle diseases :Takao Shimizu:Eicosanoid, fatty acid, phospholipid, lifestyle disease, ulcerative colitis :LPCAT2-KO mice: platelet-activating factor (PAF) biosynthesis
Under resting condition, eicosanoids, fatty acids, and phospholipids of LPCAT2-KO weresimilar to those of wild-type (WT, control) mice. Only PAF was decreased in LPCAT2-KO
mice. These results indicate that LPCAT2 may contribute to biosynthesis of PAF, but notaffect phospholipid composition under this condition.
LPCAT3-KO mice: biosynthesis of broad types of phospholipids
LPCAT3-KO mice died within 4 days after birth. We checked lipid profiles of P1 ofLPCAT3-KO mice. Polyunsaturated fatty acids, especially arachidonic acid (AA) and AA
containing phospholipids were decreased in LPCAT3-KO tissues. Biochemical property ofLPCAT3 could explain the lipid profiling. It is important to study the correlation of lipid
compositions and newborn lethality of LPCAT3-KO mice.
LPAAT3: biosynthesis of docosahexsaenoic acid (DHA) containing phospholipids LPAAT3 ismainly expressed in the testis and its mRNA is upregulated age-dependently. LPAAT3plays important roles in DHA accumulation in various tissues. DHA, DHA containing
phospholipids, or DHA metabolites may play important roles in various tissues.

アラキドン酸代謝物の一斉測定例
2013年version1

網羅的SRMによるリン脂質測定例

2

研究発表及び特許取得報告について

課題番号：２５指２０１
研究課題名： 生活習慣病創薬創出に資する新規バイオマーカーの探索研究班
主任研究者名：清水孝雄

論文発表
論文タイトル

著者

掲載誌

掲載号

年

Taketomi Y,
Ueno N,
Kojima T, Sato
H, Murase R,
Yamamoto K,
Tanaka S,
Sakanaka M,
Nakamura M,
Nishito Y,
Kawana M,
Kambe N,
Ikeda K,
Taguchi R,
Nakamizo S,
Mast cell maturation is driven via a group
Kabashima K,
III phospholipase A2-prostaglandin D2Nat Immunol
Gelb MH, Arita
DP1 receptor paracrine axis.
M, Yokomizo T,
Nakamura M,
Watanabe K,Hirai H,
Nakamura M,
Okayama Y, RaC, Aritake K,
Urade Y,
Morimoto K,
Sugimoto Y,
Shimizu T,
Narumiya S,
Hara S,
Murakami M.

142013

Yoshikawa, K.,
Kita, Y.,
Furukawa, A.,
Excitotoxicity-induced immediate surge in
Kawamura, N.,
hippocampal prostanoid production has
Hasegawalatent effects that promote chronic
Fatty Acids.
Ishii, S., Chiba,
progressive neuronal death.
Y., Takei, S.,
Prostaglandins Leukot. Essent.
Maruyama, K.,
Shimizu, T.,
Shimada, A.

882013436

2013

Alkylglycerol monooxygenase as apotential modulator for PAF synthesis inmacrophages.

Tokuoka M, S.,
Kita, Y.,
Biochem Biophys
Shindou, H.,
Res Commun.
Shimizu, T.

研究発表及び特許取得報告について

Hashimotodani, Y., OhnoAcute inhibition of diacylglycerol lipase
Shosaku, T.,
blocks endocannabinoid-mediatedTanimura, A.,retrograde synaptic suppression: evidence Kita, Y., Sano, J. Physiol.
for on-demand biosynthesis of 2Y., Shimizu, T.,arachidonoylglycerol.
Marzo,Vincenzo
Di, and Kano,M.

591

2013

Identification of Sec14-like 3 as a novel
lipid-packing sensor in the lung.

Hishikawa, D.,
Shindou, H.,
Harayama, T.,
FASEB J.
Ogasawara, R.,
Suwabe, A. andShimizu, T.

27

2013

TDAG8 activation inhibits osteoclastic
bone resorption.

Hikiji, H.,
Endo, D.,
Horie, K.,
Harayama, T.,
Akahoshi, N.,
Igarashi, H.,
Kihara, Y.,
Yanagida, K.,
Takeda, J.,
Koji, T.,
Shimizu, T.,
and Ishii, S.

FASEB J.

28

2013

Antiobese function of platelet-activating
factor: increased adiposity in plateletactivating factor receptor-deficient micewith age.

Sugatani, J.,
Sadamitsu, S.,
Yamaguchi, M.,
Yamazaki, Y.,
Higa, R.,
Hattori, Y.,
FASEB J.
Uchida, T.,
Ikari, A.,
Sugiyama, W.,
Watanabe, T.,
Ishii, S., Miwa,M., Shimizu, T.

28

2013

443

2013

55

2014

A Novel Lysophosphatidic Acid
Acyltransferase Enzyme (LPAAT4) with a Eto, M.,
Biochem Biophys
Shindou, H.,
Possible Role for Incorporating
Res Commun.
and Shimizu, T.
Docosahexaenoic Acid into Brain
Glycerophospholipids.
Hishikawa, D.,
Diversity and function of membrane
Hashidate, T.,
glycerophospholipids generated by theShimizu, T.,
J. Lipid Res.
remodeling pathway in mammalian cells. and Shindou,H.

研究発表及び特許取得報告についてInterplay between CXCR2 and BLT1
facilitates neutrophil infiltration andresultant keratinocyte activation in amurine model of imiquimod-inducedpsoriasis

Sumida, H.,
Yanagida, K.,
Kita, Y., Abe,J.,
Matsushima,J. Immunol.
K., Nakamura,M., Ishii, S.,
Sato, S., andShimizu, T.

192

2014

12-Hydroxyhpetadecatrienoic acidpromotes epidermal wound healing byaccelerating keratinocyte migration via
BLT2 receptor.

Liu, M., Saeki,K., Matsunobu,T., Okuno, T.,
Koga, T.,
Sugimoto, Y.,
Yokoyama, C., J. Exp. Med.
Nakamizo, S.,
Kabashima, K.,
Narumiya, S.,
Shimizu, T.,and
Yokomizo, T.

in press

2014

Rapid Production of Platelet-activating
Factor Is Induced by Protein Kinase Cαmediated Phosphorylation of
Lysophosphatidylcholine Acyltransferase
2.

Morimoto, R.,
Shindou, H.,
Tarui, M., andShimizu, T.

in press

2014

Lysophospholipid acyltransferases
mediate phosphatidylcholine
diversification to achieve the physicalproperties required in vivo.

Harayama, T.,
Eto, M.,
Shindou, H.,
Kita, Y.,
Otsubo, E.,
Cell metab.
Hishikawa, D.,
Ishii, S.,
Sakimura, K.,
Mishina, M.,
and Shimizu, T.

in press

2014

Selective inhibitors of a PAF biosynthetic
enzyme lysophosphatidylcholine
acyltransferase 2.

Tarui, M.,
Shindou, H.,
Kumagai, K.,
Morimoto, R.,
Harayama, T.,
Hashidate, T., J. Lipid Res.
Kojima, H.,
Okabe, T.,
Nagano, T.,
Nagase, T., andShimizu, T.

in press

2014

垂井愛、進藤英雄、森本亮、衛藤
血小板活性化因子(PAF)生合成酵素(LPCATs)
分子呼吸器病、先樹、原山武士、長阻害剤の検討
端医学社
瀬隆英、清水孝雄

172013

グリセロリン脂質リモデリング2482014

進藤英雄

J. Biol. Chem.

医学のあゆみ研究発表及び特許取得報告について

学会発表
タイトル

発表者

学会名

衛藤樹、進藤英「脂肪細胞分化におけるリン脂質リモデリング酵 雄、原山武士、柳日本脂質生化学会素（リゾリン脂質アシル基転移酵素）の解析」
田圭介、清水孝雄
Masaki
Yamada,High-speed monitoring method for
Yoshihiro Kita, 61st ASMS
eicosanoids and related compounds using Suzumi
Conference onliquid chromatography / mass
Tokuoka,Massspectrometry
Takahiro
Spectrometry
Kohira, Takao
Shimizu

場所

年月

ホテル松島大観2013年6月
荘、日本、松島米国 ミネアポリスコンベン
2013年6月
ションセンター

Yoshihiro Kita,Suzumi
M.Tokuoka,
Masaki
Yamada,and
Takao Shimizu

61st ASMS
Conference onMass
Spectrometry

Glycerophospholipid metabolism andbiological functions

清水孝雄

2013 FASEB
SummerResearch
Conference
ヒルトンニセコビ
Lysophospholipid レッジ 北海道ニ 2013年8月
セコ村 日本
and OtherRelated
Mediators – From
Bench to Clinic

Monoacylglycerol lipase mediates
lipopolysaccharide-induced fever in mice

Yoshihiro Kita,
Asami
Tanimura,
Maya
Yamazaki,Kenji
Sakimura,
Masanobu
Kano, Takao
Shimizu

FASEB ScienceResearch
Conferences
ヒルトンニセコ(Lysophospholipid ビレッジ（北海 2013年8月
and other Related 道ニセコ町
Mediators - From
Bench to Clinic)

リゾリン脂質アシル転移酵素による生体膜リン脂質多様性形成

進藤英雄、清水孝雄

第86回日本生化学 パシフィコ横浜、
2013年9月会シンポジウム
神奈川県A very fast triple quadrupole mass
spectrometer as a tool for SRM-based
phospholipidomics

Yoshimitsu
Bioactive lipid inNakanishi,
Cancer,Analysis of human leukotriene B4 type I
KeisukeInflammation,
receptor phosphorylationsites by Phos-tag Yanagida,
and Related
SDS-PAGE
Takao Shimizu, Diseases, 13thMotonaoInternational
Nakamura
Conference

米国 ミネアポリ
スコンベンション 2013年6月
センター

Sheraton
Puerto Rico,
San Juan,Puerto Rico

2013年11月

研究発表及び特許取得報告について

Lipid mediators: enzymes and receptors

3th InternationalConference on
Bioactive Lipids
Shimizu Takao in Cancer,Inflammation,and RelatedDiseases

Sheraton
Puerto Rico,
San Juan,Puerto Rico

2013年11月

Megumi Tarui,
Hideo Shindou,
Ryo Morimoto, 13th
Miki Eto,
International
Takeshi,
Conference on
Discovery of a selective inhibitor for theHarayama,
Bioactive Lipids
PAF biosynthetic enzyme
Kazuoin Cancer,
lysophosphatidylcholine acyltransferase 2Kumagai,
Inflammation,
Tetsuo Nagano, and Related
TakahideDiseases
Nagase, Takao
Shimizu

Sheraton
Puerto Rico
2013年11月
Hotel , PuertoRico, San Juan

13thInternational
Ryo Morimoto,Conference on
Acceleration of platelet-activating factor
Hideo Shindou,
Bioactive Lipids
biosynthesis by phosphorylated
Megumi Tarui,in Cancer,
lysophosphatidylcholine acyltransferase 2 and Takao
Inflammation,
Shimizuand RelatedDiseases

Sheraton
Puerto Rico
2013年11月
Hotel , Puerto
Rico, San Juan

日本肺サーファクタ
東京医科大学、ント・界面医学会
2013年11月
第49回学術研究会 東京都新宿区
特別講演

肺サーファクタントのリン脂質と呼吸機能

進藤英雄

イミキモド誘発マウス乾癬様皮疹における好中球浸潤の機序と役割の解明

住田隼一、柳田圭介、北芳博、阿部淳、松島綱治、 第41回日本臨床免 海峡メッセ下関、
2013年11月
中村元直、石井 疫学会総会
下関市、日本聡、佐藤伸一、清水孝雄

Sec14L3 a novel protein recognizing
liposome curvature and packing defect清水孝雄

LIPID MAPS
Annual Meeting
Scripps
2014:Lipidmics
Seaside Forum
Impact on Cell
2014年5月
UCSD、La
Biology,
Jolla CA, USA
Inflammation andMetabolic Disease

研究発表及び特許取得報告について

Yoshihiro Kita,
Kenji Yoshida,
Suzumi M.
Tokuoka,
Monoacylglycerol lipase mediates fever via Fumie
hypothalamic prostaglandin E2 production Hamano, Kenji
Sakimura,
Masanobu
Kano,Takao
Shimizu

LIPID MAPS
Annual Meeting
Scripps
2014:Lipidmics
Seaside Forum
Impact on Cell
2014年5月
UCSD、La
Biology,
Jolla CA, USA
Inflammation andMetabolic Disease

Development of glycerophospholipid
profiling methods using ternary gradientliquid chromatography/high-speed triple
quadrupole mass spectrometry

LIPID MAPS
SuzumiAnnual Meeting
Tokuoka,Scripps
2014:Lipidmics
Yoshihiro Kita,
Seaside Forum
Impact on Cell
2014年5月
MasakiUCSD、La
Biology,
Yamada, Takao
Jolla CA, USA
Inflammation andShimizu
Metabolic Disease

Deficiency of monoacylglycerol lipase
attenuates diet-induced obesity in an
endocannabinoid system-independentmanner

Kenji Yoshida,
Yoshihiro Kita,
SuzumiTokuoka, Kenji
Sakimura,
Masanobu
Kano, Takao
Shimizu

LIPID MAPS
Annual Meeting
Scripps
2014:Lipidmics
Seaside Forum
Impact on Cell
2014年5月
UCSD、La
Biology,
Jolla CA, USA
Inflammation andMetabolic Disease

その他発表(雑誌、テレビ、ラジオ等)
タイトル

特許取得状況について※出願申請中のものは(発明名称発表者

発表先場所年月日)記載のこと。
登録番号

該当無し

※該当がない項目の欄には「該当なし」と記載のこと。
※主任研究者が班全員分の内容を記載のこ

特許権者(申請者）
登録日(申請日)（共願は全記載）

出願国