イオンクロマトグラフ（IA-300）
操作手順書

横浜国立大学機器分析評価センター

作

成日

2021 年 1 月

手順書 No.
作

成

IC-1
承認

20 日

目次
1.

準備............................................................................................................................ 22.

サンプルの用意 ......................................................................................................... 93.

校正または測定 ....................................................................................................... 11

4.

終了操作 .................................................................................................................. 15【著作権・免責】
本マニュアルの著作権は、『横浜国立大学 研究推進機構 機器分析評価センター』に帰属します。
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本マニュアルの印刷およびダウンロードにつきましては、当該設備の利用者および利用予定者に限り認めます。オンライン上での閲覧についての制限はございません。

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著作権および免責につきましては、こちらの URL（https://www.iac.ynu.ac.jp/site_policy）にて詳細が記載されています。

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1. 準備1.1. パソコンを使ってクロマトグラフのデータを取り出す場合は、RS-232C ケーブルが繋がっている必要がある。ケーブルの取り付け、取り外しは、必ず本体電源を OFF の状態で行う必要があるので、外れていたら先に行っておくこと。また、ケーブルが繋がっていた場合でも、ここでパソコンを起動しておく。

RS-232C コネクタ

電源スイッチ

1.2. パネルの POWER キーの LED が点灯していることを確認し、POWER キーを長押しして電源を入れる。点灯していない場合は、背面の電源スイッ
チやコンセントを確認する。

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操作パネルLED

インジェクタ

溶離液タンク(2L)No6 チューブ

試料溶液など1.3. 溶離液を用意する。
＊

溶離液が無くなったら詰め替え用タンクから追加するが、以下の点に注意すること。
1) 配管に空気や汚れが入らないように溶離液にチューブが浸してあるが、長期間（最長 1 カ月）が経った溶離液は劣化しているので捨てること。
また、廃液の分別は溶離液によって異なるので、メーカーの SDS（SafetyData Sheet）を確認して捨てること。
32) 溶離液は、測定モードの違いによって複数の種類がある。誤ったものを使うとカラムが壊れてしまうので、絶対に間違えないこと。また、2 種類の溶離液を誤って混ぜたりしないこと。
3) 容器サイズは本体用（2L または 1L）と詰め替え用（5L）があるが、本体に設置するのは２L または 1L のものを使うこと。
4) 溶離液の使用量は、［流量 mL/min］×［時間 min］で計算できるので、必要量以上になるように用意しておく。
5) 溶離液は使用する前に脱気する必要がある。容器を密閉しないように注意して、容器ごと超音波洗浄器で 10 分くらい超音波をかける。気泡が消えない場合は、更に 10 分ごとに追加で行う。冬場などに温度差が激しいと気泡が出やすいので、エアコンの使用などについても注意するとよい。

1.4. 溶離液を採取する配管が、溶液にしっかり浸かっていることを確認する（浮いていると空気が入ってしまい、装置が停止することがある）。
また、タンクに接続する黒い押しネジが緩んでいると、チューブが抜けてしまうことがあるので、軽く引っ張って抜けないか確認しておく。

1.5. 配管に空気が入っていた場合や、溶離液を交換した場合は、ドレンバルブから空気抜きを行う。
1) 本体左側の側面にある取っ手を持って、前面カバーを手前に開ける。
2) カバー内にあるドレンバルブ（黒）の先端を手で時計方向に回して軽く開ける（緩めるだけでよい）。圧力がかかっていたときは、溶離液が少し飛び出すこともあるので注意すること。

42) エア抜き治具（20mL シリンジ）の先端を、ドレンバルブの穴の部分に差し込む。

3) 外筒をしっかり手で押さえ、やや強めに押し子を引く。このとき、配管の様子を観察しておくとよい。気泡が流れる様子を見ながら、配管を軽く指で弾くなどして、気泡をしっかり抜くこと。
4) エア抜き治具を外し、本体のドレンバルブ（黒）を手で反時計回りに回して閉める。閉め忘れると漏れるので注意！
5) 吸い取った溶離液は捨てる。また、エア抜き治具を純水で洗浄しておく。

ドレンバルブ

本体の前面カバーを開けたところ

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1.6. パソコンを使ってクロマトグラフのデータを取り出す場合は、測定する前に予め設定を行っておく必要がある。以下、3.1.1～の作業は、クロマトグラフデータを受信しない場合は行わなくてよい。
＊

定量結果の数値だけであれば、後で吸い出すことは可能。

1.6.1. GP-LOG システムを起動する。
1.6.2. メニューバーの【設定】－【使用機器】を開き、プルダウンメニューの一番下の「etc.」を選択する。
1.6.3. 収録条件を「受信専用」に選択する。
1.6.4. スタートボタンをクリックする（ボタンがストップに変わる）。
1.6.5. 以下、スタンバイやウォームアップの作業をすると「CD 状態番号（03～05）」の履歴が出るようになる。出ない場合は通信不良の可能性があるので原因を確かめる。

1.7. 本 体 の 表 示 が ［ ス タ ン バ イ ］ モ ー ド に な っ て い る こ と を 確 認 し 、START/STOP キーを 1 秒程度長押ししてから離す。
＊

START/STOP キーは、一度押すとピッと鳴るが、更に 1 秒ほど押し続けるともう一度ピッと鳴り、送液がスタートする。

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1.8. ［ウォームアップ１］の表示になるので、温度のゲージ >>> が右端まで来るまで待つ。

＊

ここで流量、圧力、温度、ベース電圧に異常があれば、START/STOP キーを押して停止するとともに、担当者に相談すること。

＊

カラムオーブンのカバーが外れていると温度が上がらないので、必ず取り付けること。

1.9. 温度が安定すると［ウォームアップ２］の表示になり、リアルタイムで電圧がモニタされる。終了するまで 10～40 分程度待つ。

＊

40 分経ってもベースラインが安定せずに上下している場合や、圧力が一定にならずに不安定な場合は、担当者に相談すること。
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＊

基本的に画面の中央にベースラインがあるが、画面外に曲線が出てしまったときは、ENTER キーを音が鳴るまで 1 秒程度長押しし、オートゼロを行う。

＊

気泡が入ると、ポンプ圧が下がって停止することがある。その場合は、溶離液の脱気や、配管のエア抜き操作をやり直すこと。

1.10. ウォームアップが完了すると、音が鳴って［測定できます］のモードに変わる。
＊

この状態は溶離液が流れ続けている（消費し続けている）ので、なるべく放置しないように注意する。室内で待機しているか、または 10 分おきなど定期的に確認するとよい。なお、クールダウン操作を行って送液を停止すると、ウォームアップからやり直しになるので、予め試料の準備を済ませた上で、予定を立てて準備すること（試料については次章参照）。

1.11. 再校正を行って本体に校正結果を保存する場合は、CAL キーを長押しして、校正モードに変更する。校正しない場合はそのままでよい。
＊

校正を行うと、各イオンのピークが検出される保持時間の情報などが補正される。装置が安定しないまま行うと誤った結果になることがあるので、十分に安定化させてから行うこと（一度、校正溶液で仮測定をするとよいかもしれない）。

＊

校正モードをキャンセルするときは、再度 CAL キーを長押しすれば戻る。ただし、校正データが存在しない場合は、強制的に校正モードになって戻れないようになっている。

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2. サンプルの用意
以下、測定サンプルの調製に関する注意事項をまとめる。このマニュアルに記載できない内容もあるので、不明な点があれば担当者に相談すること。

2.1. 【容器】 容器は、100mL 程度の大きさのポリ製容器が扱いやすい。材質
は、ポリエチレンやテフロン（やや高い）などが使用できる。イオンが溶出しやすいため、金属やガラス容器は推奨されない。
例）プラ容器：LDPE、HDPE、PC

テフロン容器：
ガラス容器：

TFE、FEP、PFA
硬質ガラス、石英ガラス

洗浄は、界面活性剤や酸を使って洗浄することがあるが、イオンが残留しないように注意が必要である。最終的には超純水で洗浄するが、乾燥はさせずに濡れたまま使用した方が清浄であるとされている。

2.2. 【試薬】 使用する試薬は、純正品や適切なものを用いること。グレードは HPLC 用（LC-MS 用でも可）またはイオンクロマトグラフ用の純度のものが望ましい。水は純水以上の純度とし、超純水（電気抵抗率では 18MΩ・cm 以上）の使用が望ましい。

2.3. 【前処理①】

試料溶液は、必ず水溶液にしなければならない。沈殿があるような試料や、有機溶剤を直接導入することはできない。水溶液にできないものは、酸分解などの前処理をする必要がある。

2.4. 【前処理②】

粒子状の物質が混入しているとカラムが詰まってしまうた

め、溶液は事前に 0.45µｍ以下のフィルターでろ過して試料とすること。
微生物も除去する場合（保存する場合）は、0.2µm 以下のフィルターが良い。
92.5. 【濃度】

使用できる濃度は、モード、イオン、サンプルループの容量によって異なる。適切な範囲となるように希釈するなどして調製すること。

モードイオン

20µL ループ

200µL ループ

PCI-322Li

0.05～10 mg/L

0.005～1 mg/L

（1,2 価陽イオン）

Na，NH4，Mg

0.25～50 mg/L

0.025～5 mg/L

K，Ca

0.5～100 mg/L

0.05～10 mg/L

PCI-211

F,Cl,NO2,Br,NO30.5～50 mg/L

0.05～5 mg/L

（ノンサプレッサ

SO41～100 mg/L

0.1～10 mg/L陰イオン）

PO42.5～100 mg/L

0.25～10 mg/L

PCI-205

F,Cl,NO2,Br,NO3

0.05～50 mg/L

（サプレッサSO40.1～100 mg/L陰イオン）

PO40.25～100 mg/L＊

NH4 や NO3 などは、濃度換算に注意すること。たとえば、NO3 であれば、硝酸イオン（NO3－）濃度か、または硝酸態窒素（NO3－ -N）の濃度かで表記が変わってくる。換算表は以下の通りである。
1 NH4+ = 1.288 NH4+-N

1 NH4+-N = 0.776 NH4+

1 NO2－ = 3.284 NO2－-N

1 NO2－-N = 0.304 NO2－

1 NO3－ = 4.427 NO3－-N

1 NO3－-N = 0.226 NO3－

1 PO43－ = 3.066 PO43－-P

1 PO43－-P = 0.326 PO43－

2.6. 【保存期限】

試料や溶離液は希釈した水溶液であり、養分となるものも入っていることがあるので、非常に劣化が早い。できるだけ調製してから日を置かずに測定することが望ましい。溶離液は、開封後からバクテリア等が繁殖し始めるため、小まめに交換すること。

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3. 校正または測定
以下、校正または測定の操作について説明するが、どちらも溶液の注入作業は同じ手順であり、あわせて説明する。校正の ON/OFF の切替えは、前項を参照すること。

3.1. パソコンを使ってクロマトグラフのデータを取り出す場合は、GP-LOG シ
ステム画面のスタートボタンが押された状態にする（ストップに変わる）。

3.2. 測定したい溶液（校正液、ブランク溶媒、試料溶液など）のボトルを用意しておく。100mL 程度の大きさのポリ製容器が扱いやすい。
＊

校正液は、サンプルループ（カバーを開けたところにあるインジャクタ背面に繋がっているチューブのこと）の容量［20µL または 200µL］によって種類が異なる。容量の合ったものを使うこと。

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3.3. インジェクタのレバーが START（右下向き）になっていることを確認する（ここではまだ動かさない）。
インジェクタPEEK 製チューブ

No6 チューブ

シリンジガイド

3.4. ディスポーザブルシリンジ（1mL）の先端に専用の白いインジェクターガイドを刺し込む。
＊

予め、インジェクタの方に白いインジェクターガイドを刺し込んでおいてもよい。

3.5. ディスポーザブルシリンジのプランジャを押し込んだ状態（空気を抜いた状態）にして、インジェクタ中央部（インジェクタポート）に刺し込む。
インジェクターガイドをポートに付けていない場合は、インジェクタの中から出ている細い PEEK 製チューブ（シリンジ針）を、ディスポーザブルシリンジの先端に入れて、奥のシリンジガイドまで押し込むようにする。
＊

以降、ディスポーザブルシリンジをインジェクタに刺し込むときは、同様の手順で行う。
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3.6. シリンジから手を離さないようにして、インジェクタのレバーを素早くSAMPLE IN（右上向き）に変える。レバーの切替えが遅すぎると、圧力が上昇してエラーになるので注意。

3.7. No6 チューブ（採液用チューブ）の先端がボトルに浸かっていた場合は、取り出して宙に浮かせた状態にする。その後、ディスポーザブルシリンジのプランジャをゆっくり引いて、空気を吸引する。

3.8. No6 チューブに付いた水滴があれば落としておく。測定したい溶液のボトルを用意し、No6 チューブの先端を浸ける。その後、ディスポーザブルシリンジのプランジャをゆっくり引いて、溶液を吸引する。このとき、内部に空気が残らないように十分に引いておく。
＊

シリンジから手を離したり、チューブの先端が溶液から浮いたりすると、空気が入って結果がおかしくなるので注意すること。

3.9. シリンジから手を離したり、プランジャを押したりしないようにして、インジェクタのレバーを素早く START（右下向き）に変える。これで、自動的に測定がスタートする。

3.10. ディスポーザブルシリンジのプランジャを START 状態で押し込むと、本体の前面カバーの裏にある廃液タンクに排出される。その後はシリンジを引き抜いてよい。純水でインジェクタポートを洗浄する場合は、シリンジに吸引してから、ポートに刺し込んで吐出させる。
＊

試料は容器から直接吸い上げているため、ディスポーザブルシリンジは、ある程度、再利用ができる（1 日分など）。

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3.11. 次の測定をしないときは、純水を入れたボトルに No6 チューブを浸しておく。
＊

最後の測定が終わった後は、ブランク測定として純水の測定を確認に行っておくと良い。

＊ 純水は、ICP 室（208 号室）の製造装置が使用できる。詳しくは担当者に相談すること。

3.12. 測定が終わるまで、約 15 分（モードによっては 10～18 分）待つ。以下、次の試料があれば、本章の最初から繰り返し行う。
＊ GP-LOG システムでクロマトグラフを取り込んでいた場合は、1 回の測定が終わったら、ストップボタンをクリックし、保存ボタンで CSV データを保存する。
＊

CAL キーを押して校正モードにしていた場合は、ここで本体に保存するかしないか決められる。保存する場合は ENTER キーを押すが、10 件までしか保存できないので、管理者に確認して必要なものだけ保存すること。データの詳しい管理や操作については、据付マニュアルの 9 章「メモリデータ」を参照すること。

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4. 終了操作

4.1. すべての測定が終わったら、START/STOP キーを長押しする。クールダウンが開始され、20 分ほどで自動的に終了する。
＊

クールダウン後にスイッチを切る必要はない。

＊

POWER スイッチは押さないこと！

急に止めるとカラムの劣化や装置不具合の原因となる。

4.2. 使用簿に記録を残す。

4.3. 予約時間が大幅に（1 時間以上程度）余ったら、大学連携研究設備ネット
ワークにログインし、予約時間終了の変更を行う（現在時刻の直後あたりに終了時間を設定する）。また、小時間余ったときは、利用報告の機能により申告する。

4.4. テーブル等を汚していたら、掃除等をして後片付けする。使用済みキムワ
イプ、手袋等のゴミは、（溶剤等で濡れていなければ）廊下にゴミ箱があるので、そちらに捨てる。

4.5. 使用日以降に次回の予定がない場合（次の利用者が誰もいない場合）は、管理者にその旨を連絡し、指示を仰ぐこと。
＊

長期間放置すると、装置や部品が劣化してしまう。配管を溶離液に漬けたまま、1 カ月以上放置しないように注意すること。特に夏季は注意する。

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