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HIRANUMA APPLICATION DATA 水分データAQVシリーズ データNo 2222/1/12

医薬品 – 逆滴定
日本薬局方 適合性試験

水分１．測定の概要

MOIVO／AQV シリーズでは、カールフィッシャー容量滴定法を採用しています。容量滴定法では、試料中の水とカールフィッシャー試薬を反応させ、消費された滴定値をもとに水分量を求めます。
H2O＋

I2＋

SO2＋３RN＋

CH3OH→

２RN・HI＋RN・HSO4CH3

容量滴定法には、直接滴定と逆滴定の２種類の滴定方法があります。一般的な試料には直接滴定で滴定を行いますが、試料によっては日本薬局方で逆滴定が採用されているものもあります。
本アプリケーションデータでは、アプリケーションデータ No. 11 で紹介しましたデキストロメトル
ファン臭化水素酸塩水和物について、日本薬局方の各条に規定される逆滴定法により、薬局方第 18改正における適合性試験を実施しました。力価標定の手順やデキストロメトルファン臭化水素酸塩水和物の繰り返し測定結果などについては、アプリケーションデータ No. 11 をご参照ください。
参考文献： 日本薬局方 第 18 改正

２．装置構成および試薬
１）装置構成自動水分測定装置

MOIVO-A19

オプション：

ビュレット

B-3000滴定セル ：滴定セル(ドレインコックなし)

採取器

ガラス製注射器

本体：：

粉末ロート(足外径 12 mm 以下)
２）試薬
滴定液

：

アクアライト KF3
アクアライト 水・メタノール標準液 力価 2滴定溶媒 ：

一般水分測定溶媒 S３）試料
測定試料 ：

デキストロメトルファン臭化水素酸塩水和物 (試薬グレード)

標準試料 ：

アクアライト水標準品 10(試験成績書記載の力価：10.06 mg/g)

2/6３．測定手順
１）試料測定の空試験① 滴定セルの共栓を外し、滴定溶媒 40 mL を加えます。
② 滴定セル内のブランクを消去し、セル内を無水状態で安定させます。
③ 滴定セルふたの共栓を取り外して粉末ロートを差し込み、試料を添加することなく、２）において試料の添加に要するのと同じ時間保持した後、共栓を取り付けます。
④ 測定を開始します。空試験は正滴定で実施します。測定条件を表 4・1 に示します。
⑤ 得られた滴定値を試料測定の空試験値として、試料の測定条件のブランク値に入力します。
２）適合性試験の測定手順① 滴定セルの共栓を外し、滴定溶媒 40 mL を加えます。
② 滴定セル内のブランクを消去し、セル内を無水状態で安定させます。
③ バイアル瓶などの試料を入れて保管している容器を天秤に載せて風袋を消去します。
④ 滴定セルふたの共栓を取り外して粉末ロートを差し込み、薬さじを用いて試料を加えます。
投入後は共栓を取り付けます。
図 3・1 に粉末ロートと薬さじによる試料の投入図を示します。
⑤ 測定を開始します。まずカールフィッシャー試薬 10 mL が分注され、水メタノール標準液により滴定します。測定条件を表 4・2 に示します。カールフィッシャー試薬および水・メタノール標準液の力価は、あらかじめ標定した値を入力します。
⑥ 再度試料容器を正確に秤量し、秤量値を試料量として本体に入力します。
＊ 薬さじやロートに試料が付着してしまう場合は、これらも風袋に含めます。
⑦ 続いて、試料測定後の装置、設定条件と試薬をそのまま用いて、水標準品の測定を行います。
注射器を水標準品で共洗いしたのちに採取し、天秤に載せて風袋を消去します。
⑧ 滴定セルフタの共栓より注射器を用いて水標準品を加えます。注入量は水分検出量が測定試料の測定での検出量の 50 ~ 100 %となるように調整します。
⑨ 水標準品の測定を 5 回繰り返します。

図 3・1

粉末ロートと薬さじによる試料の投入図

3/6３）適合性試験の解析① 解析に必要な測定結果を抽出します。

M: 測定試料中の実測水分量 (mgH2O)⇒ 試料の測定結果 (mgH2O)

M1-X: 添加された水分量 (mgH2O), X は水標準品測定の何番目であるかを示す⇒水標準品の添加量(g) × 水標準品の力価 (mgH2O/g)

M2-X: 測定された水分量 (mgH2O) , X は水標準品測定の何番目であるかを示す⇒水標準品の測定結果 (mgH2O)② 表計算ソフトを用いて、次のようにプロットします。
x軸
y軸
M1-1
M + M 2-1
M1-1 + M 1-2
M + M 2-1 + M 2-2
M 1-1 + M 1-2 + M 1-3
M + M 2-1 + M 2-2 + M 2-3
M 1-1 + M 1-2 + M 1-3 + M 1-4
M + M 2-1 + M 2-2 + M 2-3 + M 2-4
M 1-1 + M 1-2 + M 1-3 + M 1-4 + M 1-5
M + M 2-1 + M 2-2 + M 2-3 + M 2-4 + M 2-5③ プロットに対して回帰直線を作成し、以下の値を求めます。

b : 直線の勾配
a : y 軸との交点
d : 回帰直線を外挿して得られる x 軸との交点④ 次式より、百分率誤差 e1 (%)と e2 (%)を求めます。
e1 = {(a－M)／M} × 100
e2 = {(|d|－M)／M} × 100⑤ 次式より、水標準品 5 回の測定それぞれについて水分回収率 r(%)を求め、平均水分回収率 R(%)
を算出します。

r (%) = (M2-X／M1-X) × 100

４．測定条件例および測定結果
表 4・1
項目
計算式
13:ブランク測定値の自動入力
待ち時間
30 秒
最大滴加量
20 mL
最小滴加量
0.01 mL
Ｓ．タイマ
0分

空試験の条件例項目
KF Buret No.
KF吐出速度KF吸引速度BG自動補正検出メソッド
断続制御点
終点
ﾌﾞﾗﾝｸ自動入力

124 mL/分
24 mL/分
OFF電流法150 μA
200 μAON4/6
表 4・2

試料の水分測定の条件例

項目
計算式
11:逆滴定１(ＫＦ試薬定量分注)
待ち時間
30 秒
最大滴加量
20 mL
最小滴加量
0.01 mL
Ｓ．タイマ
1分
KF試薬力価2.9263 mg/mL
KF Buret No.
1
KF 分注量10 mL
KF反応ﾀｲﾏ1分
水･ﾒﾀ力価2.0279 mg/mL
水･ﾒﾀ Buret No.
2
水･ﾒﾀ 分注量
0 mL
水･ﾒﾀ反応ﾀｲﾏ
0分

項目
KF吐出速度KF吸引速度水･ﾒﾀ吐出速度
水･ﾒﾀ吸引速度
BG自動補正
試料量入力
ブランク値
水分量単位
検出メソッド
断続制御点
終点
ｵｰﾄｲﾝﾀｰﾊﾞﾙ

図 4・1 試料の測定結果

図 4・2 水標準品の測定結果例

24 mL/分
24 mL/分
24 mL/分
24 mL/分
OFF
毎回入力0.01 mL
AUTO
電流法
150 μA
200 μA
0g

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表 4・3
試料

適合性試験の手順による測定結果

測定数 測定時間

空試験

12112345

試料
水標準品

0:00:40
0:00:36
0:07:33
0:10:54
0:14:20
0:17:54
0:20:48
0:21:16

表 4・4
試料

測定回数

試料
水標準品

112345試料
添加量(g)0.20560.77080.92480.87720.96000.9512

試料量 滴定値
(g)
(mL)
0.01
0.01
0.20569.43
0.7708 10.56
0.92489.82
0.8772 10.03
0.96009.61
0.95129.65

測定値 水分量
統計結果
(mg)
(%)
0.01 mL
平均10.111
4.9178＊ M = 10.111 mg
7.819
1.0144 平均
1.0135 %9.320
1.0078 標準偏差 0.0033 %
8.894
1.0139 変動係数
0.32 %
9.746
1.01529.665
1.0161

適合性試験の回帰曲線作成に用いる値

添加された
測定された
水分量 M 1-X 水分量 M 2-X(mgH2 O)
(mgH2 O)
10.111
7.754
7.819
9.303
9.320
8.825
8.894
9.658
9.746
9.569
9.665

図 4・3

x軸
添加量累計
(mgH2 O)
7.754
17.05825.88235.54045.109回帰直線の結果

y軸
測定値累計＋M(mgH2 O)
17.93027.25036.14445.89055.555

水分回収率r (%)

100.8
100.2
100.8
100.9
101.0

6/6表 4・5項目

適合性試験の結果

結果

規格判定

試料水分量 M (mgH2O)

10.1115～30mgH2O

適合

平均水分量回収率 R (%)

100.7

97.5～102.5%適合y軸交点 a (mgH2O)

10.088-直線の勾配 b1.008

0.975～1.025

x軸交点 d (mgH2O)-10.013-

百分率誤差 |e1| (%)

0.22.5%以下

適合

百分率誤差 |e2| (%)

1.02.5%以下

適合

適合-５．摘要
適合性試験においては、下記の点に注意して測定を行ってください。
① 適合性試験では、試料の測定後に滴定溶媒を交換することなく、続けて水標準品を 5 回測定する必要があります。一方で、逆滴定では KF 滴定液を分注した後に水・メタノール標準液にて滴定するため、正滴定に比べて測定 1 回あたりのセル内の液量増加分が多くなります。標準セルの液量上限は 150 mL となります。本アプリケーションデータでは、適合性試験中に液量上限を超えないよう、最初にセルに加える滴定溶媒を 40 mL に減らすことで対応しました。
標準セルでは、最初に加える滴定溶媒の最小量は 30 mL となります。適合性試験により液量上限を超えてしまう場合、オプションの容量 200 mL(P/N: D327512-1 など)のセルを使用してください。
② 水標準品は液体であるため注射器に採取し、通常は試料注入用ゴム栓からセル内に注入します。ゴム栓を通して注入することで、添加時に外気がセル内に混入することなく、液体試料を添加することができます。
本アプリケーションデータでは、試料のデキストロメトルファン臭化水素酸塩水和物が固体であり、セルフタの共栓を開けて添加する方法を採用したため、適合性試験における水標準品の添加方法もそれに合わせて行いました。

キーワード：逆滴定、日本薬局方、デキストロメトルファン臭化水素酸塩水和物、適合性試験