脳内移行性に着目した点鼻薬の潜在的副作用に関する研究
日本大学薬学部 薬理学研究室
こすげ

小菅やすひろ康弘

准教授

脳内移行性に着目した点鼻薬の潜在的副作用に関する研究

主任研究者
分担研究者

日本大学薬学部

日本大学薬学部

薬理学研究室教授

地域医療薬学研究室

助教

小菅康弘

中島理恵

【要旨】
経鼻投与は、血液脳関門を介すことなく脳内に薬物を送達する新たな投与経路である反面、鼻への局所作用を目的とした場合には、眠気や認知機能の低下等の予期せぬ副作用を引き起こすことが予想される。本研究は点鼻用抗ヒスタミン薬をモデル薬物とし、その可能性を検証した。
はじめに、一般用医薬品の抗アレルギー薬の使用状況を当該医薬品の使用経験のある患者へのアンケート調査により明らかにし、薬の使用方法が副作用の発現に与える影響を解析した。1,800人より回答を得た。併用薬として、風邪薬やドラッグストアで購入した睡眠薬の使用が報告された。
副作用の出現の有無と一般用医薬品点鼻薬の使用方法との関連をロジスティック回帰分析にて解析したところ、上限の用量を超えた使用は、眠気 (OR= 1.229, 95% CI: 1.048–1.441) や頭痛 (OR= 1.462, 95% CI:1.239–1.725) と関連しており、一般用医薬品同士の同効薬の併用、不適切使用と副作用の発現との関連が示唆された。また、6 週齢の ICR 系マウスに過量のクロルフェニラミンまたはケトチフェンを経鼻投与したところ、垂直方向の行動量は顕著に抑制され、過量投与による立ち上がり行動の抑制が示された。この行動量の抑制は、クロルフェニラミンを投与された群よりも、ケトチフェンを投与された群が顕著であった、本研究の結果は、経鼻投与剤として一般用医薬品化された抗アレルギー薬の副作用の考え方や指導方法の在り方を再検討するうえで貴重なエビデンスとなる。

１、調査研究目的
鼻腔は、空気の通り道であるとともに、嗅粘膜という特殊な粘膜で匂いを感知する器官でもある。この鼻腔は、アレルギー性鼻炎や風邪などでは局所治療を目的とした医療用医薬品や一般用医薬品の投与部位としても汎用されている。しかし、鼻粘膜はペプチドやタンパク質、あるいは一部の核酸などの高分子物質に対しても比較的高い透過性を示すため、デスモプレシン（中枢性尿崩症治療薬）、オキシトシン（母乳分泌の改善）やカルシトニン（骨粗鬆症治療薬）などのように鼻腔投与が製剤化される例も散見する。また、鼻腔内には脳（中枢神経系）と直接つながっている経路（Nose-to-Brain 経路）があることも知られており、血液脳関門（Blood-BrainBarrier: BBB）を介すことなく脳内に薬物を非侵襲的に送達する経路として注目されている 1)。

19このように経鼻投与は、BBB を通過しない / しにくい薬物の脳移行性を高め得る有用な経路である
反面、鼻への局所作用を目的とした場合には、眠気や運動機能の低下等の予期せぬ副作用を引き起こすことが予想される。本研究では、一般用医薬品としてアレルギー性鼻炎等に使用される点鼻用抗ヒスタミン薬に着目し、実験動物による基礎研究と生活者へのアンケート調査を通して、経鼻投与が中枢神経系副作用の誘因となるか否かを、総合的に評価することを目的として検討を行った。

２、調査研究方法
2-1

一般用医薬品点鼻薬の適正使用に関する調査

本研究は、質問票を用いてインターネットを介して無記名で実施した。調査時期は 2021 年 3月 2 ～ 3 日とした。対象者は、インターネットリサーチ会社（株式会社クロス・マーケティング）で保有する一般モニターの中から選定基準（全国 20 歳以上の一般人で過去 1 年間に一般用医薬品の抗アレルギー点鼻薬を使用した経験を持つもの）に適合した者とした。アンケートは対象者全員に一斉配信を行い、期間内に最後まで回答した者を有効回答とした。
調査項目は、回答者の基本属性（性別、年齢、居住地域）に加え、アレルギー性鼻炎の重症度 2)、
過去 1 年間に使用したアレルギー性鼻炎薬の名称、アレルギー性鼻炎薬の使用状況（アドヒアランス）、併用薬の使用、副作用の経験（眠気、頭痛等）とした。このうち、アレルギー性鼻炎の使用状況を測る項目として表 1 の 5 項目を考案した。
解析は、まず回答者の基本背景を単純解析により示した。また年齢、併用薬、重症度を調整したのち、多変量解析（二項ロジスティック回帰解析、ステップワイズ法）にて抗アレルギー点鼻薬の使用状況と副作用との関連を解析した。アレルギー性鼻炎治療薬の使用状況を測る項目の信頼性の検討するため、内的整合性の検討として Cronbach α係数を求めた。解析には、
統計ソフト SPSS ver26 を用い、有意水準は 5% とした。
本研究は、「人を対象とする医学系研究に関する倫理指針」に従い、日本大学薬学部の倫理委員会の承認を受け実施した（承認番号 20-016）。調査は、個人情報の保護や回答拒否による不利益がないことをアンケート画面の冒頭に示し、同意が得られた回答者に対して行われた。
2-2

抗ヒスタミン薬がマウスの自発運動に及ぼす影響の検証

本研究には、6 週齢の雄性 ICR 系マウスを使用した。マウスは日本大学薬学研究所実験動物センターにおいて飼育し、飼料と水は自由摂取とした。また、すべての行動実験は10:00~17:00 の間に行った。鼻炎用点鼻薬として市販されている抗ヒスタミン薬をピペット法 3)にて経鼻投与し、マウス脳内に（海馬および大脳）おける記憶・学習関連タンパク質の変化をWestern blot 法を用いて解析した。
行動量に及ぼす影響の検証には、脳梗塞モデルマウスやパーキンソン病モデルマウスにお20

ける重症度の行動薬理学的な指標として、水平方向および垂直方向の自発運動量の評価が用いられることを参考に、ビーム式運動量センサ（室町株式会社）に専用取付台（室町株式会社）とコントローラを使用することで、ホームケージを利用してマウスの立ち上がり行動と運動量の測定を行った。
なお、ICR マウスの使用に当たっては、動物愛護の観点に基づき、実験中のみならず実験前後の被験動物の苦痛軽減および使用動物数の低減に努めるとともに，日本大学実験動物委員会の審査、承認を受けた後、「日本大学動物実験指針」を遵守して行った（AP19PHA008-1 号）。

３、調査研究成果
3-1

一般用医薬品点鼻薬の適正使用に関する調査

回答者背景
1,800 人より回答を得た。回答者の背景を表 2 に示す。居住地は南関東が最も多く、723 人（40.2%）であった。花粉症の重症度は、重症および最重症の者で 44.9% を占めていた。
過去 1 年間にドラッグストアで購入したアレルギー性鼻炎用の点鼻薬・鼻スプレーで最も使用の多いものはナザールシリーズ（ナザールスプレー、ナザールポンプ、ナザールラベンダー、ナザールスプレーα AR 0.1%、ナザールα AR 0.1% α C）であり、443 人（50.1%）が使用していた。その他、パブロン点鼻 237 人（26.8%）、アルガード鼻炎クールスプレー a125 人（14.1%）、エージーノーズシリーズ（エージーノーズアレルカット M、エージーノーズアレルカット C、エージーノーズアレルカット S）で 119 人（13.4%）と続いた。上記は全てクロルフェニラミンマレイン酸塩を含有していた。
併用薬として最もよく使用されていたものは風邪薬であり、243 人（13.5%）が服用していた。
その他、痛み止め 192 人（10.7%）、睡眠薬（病院で処方してもらったもの）176 人（9.8%）、睡眠薬（ドラッグストアで買ったもの）109 人（6.1%）、咳止め 106 人（5.9%）等もアレルギー性鼻炎の薬と併用されていた。
一般用医薬品点鼻薬の使用と副作用アレルギー性鼻炎治療薬の使用状況を測る項目の内的整合性を検討するために、Cronbachのα係数を算出したところ、α＝ 0.78 となった。回答者の一般用医薬品点鼻薬の使用状況の各項目への回答結果を表 3 に示す。
本研究で汎用されていたクロルフェニラミンマレイン酸塩といったヒスタミン受容体拮抗薬の代表的な副作用である眠気や頭痛の出現について、眠気があると回答したのは 59.1%、頭痛21があると回答したのは 34.2% であった。
副作用の出現の有無と一般用医薬品点鼻薬の使用方法との関連をロジスティック回帰分析
にて解析したところ、眠気は「症状がひどいときは説明書等に書かれた上限の用量を超えて使用することがある」(odds ratio (OR) = 1.229, 95% confidence interval (CI) : 1.048–1.441)
および「使用期限が切れた薬を使うことがある」(OR = 1.262, 95% CI:1.075–1.484) と関連がみられた。また、頭痛は「症状がひどいときは説明書等に書かれた上限の用量を超えて使用することがある」(OR = 1.462, 95% CI : 1.239–1.725) および「症状が治まらないまま長期（１か月以上）同じ薬を使用し続けることがある」(OR = 1.472, 95% CI : 1.0232–1.759) と関連していた。
3-2

抗ヒスタミン薬の経鼻投与がマウスに及ぼす影響

自発運動量の変化に及ぼす影響
点鼻薬として我が国で市販されている鼻炎薬 38 種類の主要成分を検索したところ、抗ヒスタミン薬のクロルフェニラミンを含有する商品が 26 種、ケトチフェンを含む商品が 3 種、市販されていた。ベクロメタゾン、プレドニゾロン、オキシメタゾリン、フルニソリドなどを含有する
点鼻薬も上市されていた。
そこで、含有するクロルフェニラミンおよびケトチフェンの最大量から 1 回噴霧あたりの用量を算出し、4 倍及び 40 倍と推定された用量のクロルフェニラミンおよびケトチフェンを両鼻腔併せて 10μL、経鼻投与した。投与後は鼻腔での滞留性を高めるために、仰臥位でマウスを 5 分間保定した。投前、投与直後、1 時間後、および 2 時間後の行動量を測定した。図 1に示したように、クロルフェニラミン投与は、マウスの水平方向の運動量には変化を及ぼさず、生理食塩液を投与したマウスと同様な変化を示した。一方、立ち上がり回数を示す垂直方向の運動量は、抑制される傾向を示した。これに対して、ケトチフェンの投与は、垂直方向の運動量だけでなく水平方向の運動量も減少させた。これらの運動量の低下は、投与直後が最も顕著であったものの、投与 2 時間後でも持続した。
記憶関連タンパク質の活性化に及ぼす影響
記憶や学習に関連することが 報 告 4) されている Extracellular signal-regulated kinase(ERK) および cAMP response element-binding protein (CREB) の記憶関連タンパク質のマウス海馬および大脳皮質における発現レベルを検討した。ERK、CREB、それらの活性体であるリン酸化 ERK およびリン酸化 CREB の発現レベルは、クロルフェニラミンまたはケトチフェンを単回経鼻投与したマウスと生理食塩液を投与したマウスとの間に顕著な差は認められなかった。

22

４、考察
本研究のアンケート調査の結果、添付文書の用量上限を超えての使用、使用期限切れの薬の使用、漫然使用といった不適切使用を経験している回答者が 30% を超えていた。特に上限を超えての使用や漫然使用は副作用の発現と関連が示唆されたため、これらの点に関しては薬剤師や登録販売者のより徹底した指導が求められる。また、本研究ではアレルギー性鼻炎症状に対する治療薬を使用している際に風邪薬や睡眠薬を併用している回答者がみられたが、特にドラッグストアで購入する睡眠薬にはアレルギー性鼻炎治療薬同様、ヒスタミン受容体拮抗薬が含まれているため、併用による過量投与にも注意する必要があることが示唆された。本研究の利点として、調査期間が花粉飛散のピークと重なったため、医薬品をリアルタイムで使用している回答者が多いと予想され、思い出しバイアスを最小化できたと考えられる。
本研究では、一般用医薬品の抗アレルギー薬の使用状況を当該医薬品の使用経験のある患者へのアンケート調査により明らかにし、薬の使用方法が副作用の発現に与える影響を解析した。
一般用医薬品の購入者は匿名で継続的に来局しないケースが多く、適正使用や副作用のモニタリングは、処方箋薬と比べて不十分である。また、点鼻や吸入などのデバイスを使った医薬品は使用方法の十分な説明が必須であり、内服薬と比較するとアドヒアランスが低いことが明らかになっている 5)。このように一般用医薬品の使用状況に関しては懸念があるにもかかわらず、その実態はあまり知られていないため、本研究で得られた情報は、経鼻投与製剤特有の副作用の考え方や指導方法の在り方を検討するうえで貴重なエビデンスとなる。
本研究では、さらに、一般用医薬品として市販されている点鼻用抗アレルギー薬に含有する抗ヒスタミン薬（クロルフェニラミンおよびケトチフェン）の経鼻投与が、マウスの行動に及ぼす影響を検証した。これらの薬物を過量単回投与したマウスでは、投与直後から、立ち上がり行動が抑制される傾向が認められ、抗ヒスタミン薬の経鼻投与による軽度のふらつきが原因であることが示唆された。このように、鼻への局所作用を目的とした場合においても、過量投与された場
合では運動機能や一部の行動量を低下されるといった予期せぬ副作用を引き起こす可能性が示された。本検証で使用した濃度設定には検証の余地が残るものの、第一世代の抗ヒスタミン薬であるクロルフェニラミンよりも、中枢移行性を改善した第二世代の抗ヒスタミン薬であるケトチフェンの方が、強い抑制効果を示したことは興味深い。これは経鼻投与は、BBB を通過しない/ しにくい薬物の脳移行性を高める経路であることに起因すると思われるが、ケトチフェンのみが持つ物理化学的性質に由来する可能性もあり、他の第二世代の抗ヒスタミン薬や第三世代の抗ヒスタミン薬を用いた詳細な検証が必要である。
点鼻用の一般用医薬品や医療用医薬品では、抗ヒスタミン薬のみの単剤で製剤されることは稀であり、アドレナリンα1 受容体刺激薬のナファゾリンや、ケミカルメディエーター抑制薬であるクロモグリク酸ナトリウムなどが併用されることが多い。特に、鼻での滞留性を高めるために使用されるナファゾリンの影響については今後、詳細に検討する予定である。同様に、ベクロメタゾンなどのステロイド系抗炎症薬の経鼻投与が及ぼす影響についても今後の検討が必要である。

23

５、まとめ本研究では、一般用医薬品としてアレルギー性鼻炎等に使用される点鼻用抗ヒスタミン薬に着目し、実験動物による基礎研究と生活者へのアンケート調査を通して、経鼻投与が中枢神経系副作用の誘因となるかを総合的に評価し、過量投与された場合では運動機能や一部の行動量を低下されるといった予期せぬ副作用を引き起こす可能性が示唆された。今後は、一般用医薬品同士の同効薬の併用や不適切使用による副作用の発現といった患者の不利益を避けるため、その詳細なメカニズムの解明と経鼻投与製剤特有の副作用を理解した薬剤師や登録販売者による徹底した指導と管理が求められる。

６、調査研究発表
現在計画中

７、引用文献1. Mignani S, Shi X, Karpus A, Majoral JP. Non-invasive intranasal administration route
directly to the brain using dendrimer nanoplatforms: An opportunity to develop new
CNS drugs. Eur J Med Chem . 2021 209 : 112905.
2. 鼻アレルギー診療ガイドライン作成委員会 . 鼻アレルギー診療ガイドライン―通年性鼻炎と花粉症―2005 年版（改訂第 5 版）,p25 , ライフ・サイエンス ; 2005.
3. Matsuyama T, Morita T, Horikiri Y, Yamahara H, Yoshino H.Influence of fillers inpowder formulations containing N-acetyl-L-cysteine on nasal peptide absorption.

J Control Release . 2007 120(1-2) : 88-94.
4. Maher P, Akaishi T, Abe K. Flavonoid fisetin promotes ERK-dependent long-term
potentiation and enhances memory. Proc Natl Acad Sci U S A . 2006 103(44) : 16568-73.
5. World Health Organization. 2003. ADHERENCE TO LONG-TERM THERAPIES:EVIDENCE FOR ACTION.
https://www.who.int/chp/knowledge/publications/adherence_report/en/24

ᴾ
表 1 アレルギー性鼻炎治療薬のアドヒアランス指標（Cronbach α=0.78）

表 2 回答者背景（N=1,800）

25

ᴾᴾ

表 3 回答者の一般用医薬品点鼻薬の使用
表 3 回答者の一般用医薬品点鼻薬の使用

表 4 副作用の出現の有無と一般用医薬品点鼻薬の使用方法との関連のロジスティック
表 4 副作用の出現の有無と一般用医薬品点鼻薬の使用方法との関連のロジスティック※※
回帰分析（ステップワイズ法）
回帰分析（ステップワイズ法）※※
年齢、併用薬（病院で処方されたアレルギー性鼻炎の飲み薬、ドラッグストアで買年齢、併用薬（病院で処方されたアレルギー性鼻炎の飲み薬、ドラッグストアで買ったアレルギー性鼻炎の飲み薬、ドラッグストアで買った睡眠薬）
ったアレルギー性鼻炎の飲み薬、ドラッグストアで買った睡眠薬）、重症度で調整 、重症度で調整

図１ 抗ヒスタミン薬の経鼻投与がマウスの自発運動量に及ぼす影響
図１ 抗ヒスタミン薬の経鼻投与がマウスの自発運動量に及ぼす影響

SalX4
SalX40
X4X40

クロルフェニラミン 水平方向
クロルフェニラミン 水平方向500

43 0 032 0 021 0 0

クロルフェニラミン 垂直方向

54 0

回数（回）
回数（回）

回数（回）
回数（回）

54 0 0100

43 032 021 010

P re

0h r

0P re

0h r

時間

1h r

2h r

1h r

2h r

P re

0h r

P re

0h r

0

時間

時間

1h r

2h r

1h r

2h r

時間

SalX4
Sal
X40
X4X40

ケトチフェン 水平方向
ケトチフェン 水平方向500

43 0 032 0 0
21 0 0

Sal
X4
Sal
X40
X4
X40

ケトチフェン 垂直方向
ケトチフェン 垂直方向

50
54 0

回数（回）
回数（回）

54 0 0

回数（回）
回数（回）

Sal
X4
Sal
X40
X4X40

クロルフェニラミン 垂直方向
50

100

43 0
32 0
21 0
10

P re

0h r

P re

0h r

0

時間

1h r

2h r

1h r

2h r

P re

0h r

P re

0h r

0

時間

時間時間

26

1h r

2h r

1h r

2h r