フェキソフェナジンと各種柑橘類の消化管吸収過程における相互作用リスクの評価
慶應義塾大学薬学部
あきよし

秋好

たけし

健志

専任講師

フェキソフェナジンと各種柑橘類の消化管吸収過程における相互作用リスクの評価

慶應義塾大学

薬学部

専任講師

秋好

健志

【要旨】
[Purpose] 小腸に発 現する有機アニオン輸送ポリペプチド（OATP）1A2、OATP2B1 は薬物の消化管吸収との関連が示唆されている。Grapefruit juice 中のフラバノン類がこれらの
OATPs を阻害する事によりフェキソフェナジン等の基質薬物の吸収が阻害されることが報告されているが、その阻害活性本体は完全には明らかとなっていない。また、フラバノン配糖体の阻
害特性やその糖鎖構造が OATPs 阻害に与える影響も明らかでない。本研究では、grapefruit
juice から新規の OATPs 阻害成分として narirutin を同定するとともに、その特性を既知阻害成分 naringin やアグリコン naringenin と比較した。さらに、これらの阻害成分を多く含有する
かんきつであるジャバラ（Citrus jabara）について、その OATPs 阻害活性を解析した。
[Method ] カラムクロマトグラフィーを用いて grapefruit juice を分画し、各画分の OATP2B1阻害活性を評価し、含まれる阻害活性成分を探索した。OATPs の活性は、OATP1A2 またはOATP2B1 発現 HEK293 細胞における 0.3 µM estrone 3-sulfate の取り込みを指標に評価した。続けて、grapefruit juice に含まれる阻害成分による阻害の阻害様式および阻害強度、さらに各成分の IC50 を算出し、ジャバラ果汁の阻害活性を評価した。
[Results] Grapefruit juice か ら 新 規 OATPs 阻 害 成 分として narirutin が 同 定 され、OATP1A2 および OATP2B1 の 輸 送 活 性 に 対 する IC50 は 22.6 µM、18.2 µM であった。Grapefruit juice から見出されたフラバノン誘導体の阻害活性は naringenin, narirutin,
naringin の 順 に 強 か った。 また、Narirutin は OATP1A2、OATP2B1 の high affinity
component を選択的に競合阻害していた。また、5％ ジャバラ果汁は OATP1A2、OATP2B1輸送をそれぞれ 33%、19% にまで阻害した。
[Conclusion] Narirutin は naringin よりも強 力な OATPs 阻害成 分であり、grapefruit
juice 中には naringin に次いで高濃度に含有されていることから、grapefruit juice による
OATPs 阻害には、naringin だけでなく narirutin が大きく関与していると考えられる。さらに、
narirutin を含有するかんきつであるジャバラが OATPs を強力に阻害する事を初めて明らかとした。ジャバラは抗アレルギー作用が期待される健康食品として知られており、フェキソフェナジン
等の OATPs 基質薬物と併用した場合、併用薬物の消化管吸収を阻害する可能性がある。

37

１、調査研究目的
Solute carrier transporter（SLC）に分類される organic anion transporting polypeptides（OATPs）は、薬物の消化管吸収、組織分布、胆汁中排泄、尿中排泄などに関与している 1, 2）。
このうち、消化管においては主に OATP2B1 が薬物の吸収を担っていると考えられてきたが、近年では、OATP1A2 が存在することも報告され 3, 4）、これら OATPs は消化管における新
たな薬物相互作用のターゲットとして注目を集めている 3 - 9）。これまでに OATP1A2 および
OATP2B1 の基質である fexofenadine（FEX）や talinolol, aliskiren などの消化管吸収が、
grapefruit juice（GFJ）や orange juice などの果汁飲料により阻害されることが報告されている
10-17）。また、ヒト OATP2B1 と相同性の高い mOatp2b1 を knockout したマウスでは、FEXの消化管吸収が GFJ を投与した場合と同様に低下することが示されており 18）、GFJ などによる
OATPs の阻害を介した消化管吸収過程における飲食物―薬物相互作用が注目されている。
これまでに、GFJ 中の OATPs の阻害成分について探索が行われてきた 2, 13, 19）。Shirasaka
らは、GFJ についてはフラバノン配糖体の naringin が OATP2B1 の主要阻害成分であると報告している 2）。また Bailey らも、in vitro において naringin が OATP1A2 による FEX
取り込みを阻害し、さらに、健常人被験者において FEX と GFJ と同濃度の naringin を併用した場合にその消化管吸収が阻害されたことから、GFJ による OATP1A2 阻害活性本体
は naringin であると報告した 13）。しかしながら、GFJ が FEXの area under the plasma

concentration time curve（AUC）を約 60% にまで低下させたのに対し、naringin は 75% にまでしか低下させなかったことから、naringin のみではこの阻害の影響を完全に説明することはできない 1 3）。これまで GFJ 中の他の成分の関与について示唆する報告はあるものの、その成分を分画し、網羅的に OATPs 阻害成分を探索する研究は行われてこなかった。 従って、GFJ
中には、これまでに明らかとなっていない新たな阻害成分が含有されている可能性がある。
本邦固有種の柑 橘 類であるジャバラ（Citrus jabara Hort. ex Tanaka）は近年、スギ 花
粉症患者の症状を改善することが報告された 20）。また、ジャバラ果汁に高濃度に含有される
flavanone 配糖体 narirutin が、抗炎症作用を示すことが報告されている 21）。しかしながら、ジャバラと何らかの医薬品との間に薬物相互作用（Food-drug interaction: DDI）が認められるかど
うかは検証がなされていない。
本 研究では、まず、GFJ 中の OATP1A2 および OATP2B1 輸送活性に対する新規阻害成分を見出することを目的とし、その結果、新規阻害成分として narirutin を同定した。また
narirutin の OATP1A2 および OATP2B1 に対する阻害様式について検討した。続けて、その阻害活性を既知阻害成分 naringin や、両者（に共通）のアグリコン naringenin と比較した。
さらに、narirutin を高濃度に含有するジャバラ果汁による OATP1A2、OATP2B1 の estrone3-salfate（E3S）輸送活性に対する影響を評価した。

38

２、調査研究方法
2-1

GFJ 中の narirutin, naringin の抽出と精製、構造決定

GFJ のパルプをろ過により取り除いたのち、4.5 L を Diaion® HP-20 （ 450× 50 mm,
Mitsubishi Chemical, Tokyo, Japan） を用いて chromatography に供し、water 並びに、
methanol, acetone で分画し、6.3 L の water fraction（内 63 mL より凍結乾燥物 4.33 g を得た）並びに methanol fraction（17.5 g）と acetone fraction（ 0.517 g）を得た。また、使用した GFJ の一部を凍結乾燥して − 20 ºC で保管し、再溶解して解析に使用した。
2-2 取り込み阻害実験
取り込み実験は、HEK293-OATP2B1 または OATP1A2 cells を用いて oil layer methods
により評価した。細胞懸濁液を 37ºC で 10 min pre-warming し、HBSS に溶解した最終濃度 0.3 µM E3S（ [3H ] E3S; 0.0475 nCi/tube）を加えて 1 min の取り込みを評価した。阻害活性は、阻害剤を E3S と同時にインキュベーションすることで評価した。阻害剤（narirutin,
naringin 並びに H2O 画分を除く 各 GFJ 画分）は HBSS に希釈して、含量あるいは収量から換算した 1%, 5% GFJ 中濃度、あるいは 10 µg/mL または 100 µg/mL の濃度で使用しmUǸğƁłyTǸğñ (tĄŨwÃ¼³Å½ÃhdtsǓâgmUǸた。GFJ と jabara juice は、前述した 100% 果汁を HBSS を用いて 30% 濃度に希釈した後、
ğñ?2C:CFE:??2C:?8:?Ë{w %ƗíǹaĂ  Ɨíy((wĬǱg1%, 5% juice として使用した。180 µL の細胞懸濁液をとり、液体シンチレーションカウンターrTąǲYZyþǲ^Śƪgm ÌƉıTYZy
N8>"myN8>"xƉısßƕgmU t;232C2;F:46yTðǥgm
で放射活性を評価した。HEK293-OATP1A2
または OATP2B1 による 0.3ůŻ((µM E3S の 1ƕZrƉıwĬǱgmĺT
;F:46tgrßƕgmU

N"xƱǀŉƈ
min の取り込みに対する narirutin, naringin（0.3–600 µM）and naringenin（0.3–100 µM）
ƃtTƃÛÃ¤ÁÅ½ÃÃ£ÅsŞĤƁłǓâgmU!  %)&  の阻害活性を評価し、IC50 を算出した。
my%)&  w   N# (x >:?xÿǣwĢh?2C:CFE:??2C:?8:?
  Q N#2?5?2C:?86?:?  Q N#xǸğƁłǓâgT50ƪìgmU
 2-3 パラメータの算出 ¯¾¹Å£xƪìOATP1A2 および OATP2B1 が 2 つの component を介した基質輸送することが知られて%)&  ] {%)&  _ qx4@>A@?6?EÕgmĒǞǡǦhdt_ƞr
いることから、high affinity component 特異的に阻害すると仮定したモデル式（1）, 3）並びに、（Zdt^T9:89277:?:EJ4@>A@?6?EƏƘƛwǸğht×ĝgmº§Àĳ
トを阻害すると仮定したモデル式（2）,（3）に全てのデータを非線形最小二 単一のコンポーネン
Ë{wTûÆxÃµÅ¬Ã¨Ǹğht×ĝgmº§Àĳ wçrx§Å£ǽƸķũĦÑÎſwrYryTĄŨ±¥¦Ãhdts50
乗法にてあてはめ、同時フィッティングすることで IC50 , LAC、mock の輸送活性を算出した。
"T>@4<xǡǦƁłƪìgmUǟżńēǲĒƆ_ Ħfavº§À
赤池情報量基準（AIC）がより小さくなるモデルを採用した。
ŖƕgmU



Uptake'()* (% of control) = mock +Uptake'()* (% of control) = mock +899:(;<=>?@(A)+ LAC
8?([C]⁄EAFG HIJH )899:;<=>

8?([C]⁄EAFG )



 
 

Uptake;<=> (% of control) = mock 
ddsT4@?EC@=y (ûƑŨxÿǣƁłT>@4<y (ûƑŨxÿǣ
ここで、control は E3S
単独時の取り込み活性、mock（%）は E3S 単独時の取り込み活1N#yǸğñƉıTƁłwĢhƝĢåT0509:89N#y9:89277:?:EJ
4@>A@?6?Ex ǸğƉıT
50N#y  ǸğƉıơhU"y=@H
[I ]（µM）は阻害剤濃度を、IC性に対する相対値、
50 high（µM）は high affinity component
277:?:EJ4@>A@?6?ExǡǦĠÉƓơhUǟżńēǲĒƆyŸxĳ ƕZrƪìgmU

SS

AIC = n log(2𝜋𝜋 T ) + 2(𝑘𝑘 + 2)

 
39

ddsT? y 52E2 şT(( y #" D@7EH2C6 _ƪìgm 36DE H6:89E65 DF> @7
DBF2C6DơgT<yº§Àx¯¾¹Å£şơhUŖƕgmUx§Å£ǽƸķũĦÑÎſwrYryTĄŨ±¥¦Ãhdts50%)&  ] {%)&  _ qx4@>A@?6?EÕgmĒǞǡǦhdt_ƞr
899:(;<=>?@(A)"T>@4<xǡǦƁłƪìgmUǟżńēǲĒƆ_Ħfavº§ÀZdt^T9:89277:?:EJ4@>A@?6?EƏƘƛwǸğht×ĝgmº§Àĳ
Uptake'()* (% of control) = mock ++ LAC 8?([C]⁄EAFG HIJH )ŖƕgmUË{wTûÆxÃµÅ¬Ã¨Ǹğht×ĝgmº§Àĳ wçrx§Å£ǽƸķũĦÑÎſwrYryTĄŨ±¥¦Ãhdts50
899:(;<=>?@(A)(% of control) = mock + 899:;<=> Uptake+ LAC

Uptake'()* '()* (% of control) = mock + 8?([C]8?([C]⁄⁄EA
EAFG) HIJH )"T>@4<xǡǦƁłƪìgmUǟżńēǲĒƆ_Ħfavº§ÀFGŖƕgmU
Uptake;<=> (% of control) = mock 899:;<=> Uptake'()* (% of control) = mock + 899:(;<=>?@(A) ⁄
8?([C]
EA)
Uptake'()* (%of control) = mock + 8?([C]⁄EAFG+ LAC
 

ddsT4@?EC@=y(ûƑŨxÿǣƁłT>@4<y(ûƑŨxÿǣ
)
FG HIJH
の
50%
阻
害
濃
度
を、IC
50（µM） は 50% 阻 害 濃 度 を 示 す。LAC（%） は low affinity
1N#yǸğñƉıTƁłwĢhƝĢåT0509:89N#y9:89277:?:EJ
Uptake;<=> (%of control) = mock 
component の輸送寄与率を示す。
899:;<=>
N#yǸğƉıơhU"y=@H
4@>A@?6?Ex ǸğƉıT
50
ddsT4@?EC@=y(ûƑŨxÿǣƁłT>@4<y(ûƑŨxÿǣ
Uptake'()* (%of control) = mock + 8?([C]⁄EA )
 
277:?:EJ4@>A@?6?ExǡǦĠÉƓơhU
赤池情報量基準は次の式（4）を用いて算出した。 50FG9:89N#y9:89277:?:EJ
1N#yǸğñƉıTƁłwĢhƝĢåT0ǟżńēǲĒƆyŸxĳƕZrƪìgmU(% of control)
Uptake= mock  ǸğƉıơhU"y=@H N#y
4@>A@?6?Ex ǸğƉıT
;<=>

50

SS
277:?:EJ4@>A@?6?ExǡǦĠÉƓơhU
ddsT4@?EC@=y (ûƑŨxÿǣƁłT>@4<y(ûƑŨxÿǣ
AIC = n log(2𝜋𝜋 ) + 2(𝑘𝑘 + 2)
 
T ƕZrƪìgmUǟżńēǲĒƆyŸxĳ
1N#yǸğñƉıTƁłwĢhƝĢåT0509:89N#y9:89277:?:EJN#y ǸğƉıơhU"y=@H
4@>A@?6?ExǸğƉıT
ddsT? y52E2
şT((
y50#"
D@7EH2C6
_ƪìgm 36DE H6:89E65 DF> @7
SS

AIC
=
n
log(2𝜋𝜋
)
+
2(𝑘𝑘
+
2)
  sum of
ここで、n
は
data
数を、SS
は
MLAB
softwareが算出した best weighted
277:?:EJ4@>A@?6?ExǡǦĠÉƓơhU
DBF2C6DơgT<yº§Àx¯¾¹Å£şơhU
TǟżńēǲĒƆyŸxĳƕZrƪìgmU!iはモデルのパラメータ数を示す。
şT((|xŚƪyĳ D@7EH2C6 wơh96?8&CFD@77mTy^squares を示し、kddsT?
52E2
y #"
_ƪìgm
36DExţſƕZmU
H6:89E65 DF> @7
EAFG
 また、IC50𝐾𝐾W = から
SS
K
式（10）に示す Cheng-Prusoff の方法を用いた。
[X] 
DBF2C6DơgT<yº§Àx¯¾¹Å£şơhU
i への換算は
AIC =8?nYlog(2𝜋𝜋
)
+
2(𝑘𝑘
+
2)
 
T
  wơh 96?8&CFD@77 xţſƕZmUmT  ^Z!i |xŚƪyĳ
dds0(1yEAFG(Ɖı  N#ƕZmUddsT?
şT(( y #" D@7EH2C6 _ƪìgm 36DE H6:89E65𝐾𝐾y DF> @7
W = 52E2
[X] 
8?
YZ
DBF2C6DơgT<yº§Àx¯¾¹Å£şơhU ǸğŴĳxŲǑ
dds0
1y
(Ɖı
N#ƕZmU!i |xŚƪyĳ
  wơh
96?8&CFD@77 xţſƕZmUmT
 ^
%)&
 (]
{ %)&  wĢh?2C:CFE:?
xǸğŴĳŲǑhmT( ûƑEA[]
FG N#
ここで
S
は
E3S
濃度
0.3
µM
を用いた。
kl

Q
Q
N#my
N#T
N#?2C:CFE:?ĚđÈsx
𝐾𝐾W = [X]  ǸğŴĳxŲǑ
8?
YZǡǦƁłǓâgmUļmh}rx
52E2ǽƸķũĦÑÎſwrŸxƨăǸğ%)&   ] { %)&   wĢh ?2C:CFE:? xǸğŴĳŲǑhmT ( ûƑ
dds0(1y (Ɖı  N#ƕZmUº§ÀĳtYZyǽƨăǸğº§ÀĳtwĄŨwkl
 Q
N#  Q
N#my N#T N#?2C:CFE:?ĚđÈsx
2-4 阻害様式の検討±¥¦ÃgmUƪìfm36DEH6:89E65DF>@7DBF2C6D((_ĦfaǡǦƁłǓâgmUļmh}rx52E2 ǽƸķũĦÑÎſwrŸxƨăǸğ ǸğŴĳxŲǑOATP1A2
および
OATP2B1に対する
narirutinの阻害様式を検討するため、E3S
単独
vº§À_
Ơ^gZtïĝgmUº§ÀĳtYZyǽƨăǸğº§ÀĳtwĄŨw%)&   ] { %)&   wĢh ?2C:CFE:? xǸğŴĳŲǑhmT ( ûƑ（それぞれ 0.3–1000 µM,
0.03–1000µM）または 50 µM、30 µM narirutin 存在下での輸送]Z^_ HIJH
bcd±¥¦ÃgmUƪìfm36DEH6:89E65DF>@7DBF2C6D((_Q = N# +Q ]Z^_N#my
N#T N#?2C:CFE:?ĚđÈsx
+ 𝐾𝐾e Ħfa
kl𝐶𝐶𝐶𝐶'()*[`]?aZ HIJH[`]?a
活性を評価した。得られたすべてのdataを非線形最小二乗法にて次の競合阻害モデル式
（6）,
Z bcd
vº§À_
Ơ^gZtïĝgmUǡǦƁłǓâgmUļmh}rx 52E2 ǽƸķũĦÑÎſwrŸxƨăǸğ
（7）と（9）あるいは非競合阻害モデル式
ッティングした。算出さº§ÀĳtYZyǽƨăǸğº§ÀĳtwĄŨw]Z^_ HIJH]Z^_ bcd（6）,（8）と（9）に同時にフィ
𝐶𝐶𝐶𝐶'()* = [`]?a+ [`]?a+ 𝐾𝐾e ±¥¦ÃgmUƪìfm36DEH6:89E65DF>@7DBF2C6D((_
Ħfa
HIJH
Z bcd がよ
れた best weighted sumZofsquares（SS）
り小さくなるモデルがより確からしいと判定した。
vº§À_ Ơ^gZtïĝgmU





]

]

Z^_ HIJH
Z^_ bcd
𝐶𝐶𝐶𝐶'()* = [`]?a+ [`]?a+ 𝐾𝐾e Z HIJH

𝐶𝐶𝐶𝐶
𝐶𝐶𝐶𝐶'()*'()*==[`]?a
[`]?a



Z bcd

]]
Z^_
Z^_
HIJH
HIJH

]]

Z^_
Z^_
bcd
bcd
++[`]?a++𝐾𝐾𝐾𝐾ee[`]?a(8?fgh(8?fgh(ij[C]:kTa(ij[C]:kTa))))
ZZHIJHHIJH
I HIJHI HIJH

𝐶𝐶𝐶𝐶
𝐶𝐶𝐶𝐶'()*'()*==([S]?a([S]?a

]]
Z^_
Z^_
HIJH
HIJH

Z^_
Z^_
bcd
bcd
++[S]?a++𝐾𝐾𝐾𝐾ee
[S]?a)(8?fgh)(8?fgh(ij[C]:kTa(ij[C]:kTa))))
ZZHIJHHIJH
I HIJHI HIJH

𝐶𝐶𝐶𝐶
𝐶𝐶𝐶𝐶;<=>;<=>==𝐾𝐾𝐾𝐾
ee

]]

ZZbcd
bcd

ZZbcd
bcd








"y!
y!  %)&%)&  @C%)&@C%)&  46==Dmy>@4<xÿǣ¿¾Ã
46==Dmy>@4<xÿǣ¿¾Ã
dds
dds"
ここで CL は HEK293-OATP1A2
orOATP2B1 cells または mock の取り込みクリアラ++maxmaxyũĘǡǦǨıA>@=>8AC@E6:?>:?TyũĘǡǦǨıA>@=>8AC@E6:?>:?T!!my
N">8AC@E6:?>:?ơhU
N">8AC@E6:?>:?ơhU
my
·¿
·¿
¹Ã¦Ãĝş¹Ã¦Ãĝş
N#
N#
ơhUŘħǢxơhUŘħǢx
9:89
9:89
t
t=@H
=@Hyklykl
9:89
9:89
ンス（µL/mg
protein/min）を示す。
V max は最大輸送速度（pmol/mg
protein/min）、K m
277:?:EJ
277:?:EJ4@>A@?6?ET"@H
4@>A@?6?ET"@H277:?:EJ
277:?:EJ4@>A@?6?E
4@>A@?6?Ex¯¾¹Å£sYdtơhU0(1x¯¾¹Å£sYdtơhU0(1はミカエリスメンテン定数（µM）を示す。接尾辞の high と low はそれぞれ high affinity
1y?2C:CFE:?Ɖı%)&   N#%)&N#%)&   N#N#yy (xƉıN#T0(xƉıN#T01y?2C:CFE:?Ɖı%)&[S] は E3S の濃度
component、Lowaffinity component のパラメータであることを示す。
（µM）
ơhU
ơhU
!!i ihighy9:89277:?:EJ4@>A@?6?EwĢhǸğĝşN#ơhUy9:89277:?:EJ4@>A@?6?EwĢhǸğĝşN#ơhU!!dyǽ
highdyǽƏƘƛvÿǣN">8AC@E6:?>:?ǈhUƏƘƛvÿǣN">8AC@E6:?>:?ǈhU
を、[I ] は narirutin 濃度（OATP1A2 : 50 µM, OATP2B1 : 30 µM）を示す。K i high は high (E2E:DE:42=2?2=JD:D
(E2E:DE:42=2?2=JD:D
affinity
component に対する阻害定数（µM）を示す。K d は非特異的な取り込み（µL/mg
protein/min）(( ûƑƻwĢhTůŻûƑƻwĢhTůŻ
ĂƗíË{wŊíƻxÿǣƁłxźǠy
ĂƗíË{wŊíƻxÿǣƁłxźǠy!CFD<2=!CFD<2=を表す。
,2==:DŲĝwƶaF??
,2==:DŲĝwƶaF??xţſƕZmUxţſƕZmUAA xŨTxŨTƵǐƛwŪŅsYtgmUƵǐƛwŪŅsYtgmUȋTǘűƟƧŊů
ȋTǘűƟƧŊů ÌxŢǍǸğŊíxŗưÌxŢǍǸğŊíxŗư  þǲąǲtgrŚƪgmþǲąǲtgrŚƪgm xx x&x& 4@=F>?49C@>2E@8C2A9JƗíyT4@=F>?49C@>2E@8C2A9JƗíyT40þǲąǲtgrŚƪgT
þǲąǲtgrŚƪgT]] {{ƩâƉıw]b%)&DǸğƁłǓâgmU
ƩâƉıw]b%)&DǸğƁłǓâgmU

2-5

Statistical analysis

E3S 単 独群に対する、果汁 , 各画分並びに成分 群の取り込み活性の比較は KruskalWallis 検定に続く Dunn の方法を用いた。p < 0.05 の時、統計的に有意であるとした。

３、調査研究成果
3-1

GFJ 中の新規阻害成分の探索

収 量を含 量として換算した 1%, 5% の GFJ の HP-20 column chromatography 画分
は、収量を含量として換算し、1% および 5% 等価濃度における OATPs 阻害活性を評価した。メタノール画分は、1% および 5% の等価濃度で OATP2B1 の取り込み活性をそれぞれ 58%, 25% にまで低下させた。このメタノール画分より単離した二つの化合物は narirutinと naringin であった。HPLC-UV 法により定量した GFJ 中の narirutin と naringin の含量はそれぞれ、264 µM, 1260 µM だった。また興味深いことに、ジャバラ果汁は narirutin
を 439 µM 含有していた。 GFJ は 1%, 5% の濃度で OATP1A2 による E3S 取り込みをそれぞれ 72%, 29%, OATP2B1 による E3S 取り込みをそれぞれ 60%, 39% にまで低下させた（Fig.1A, B）。Narirutin と naringin は 5% GFJ に対応する濃度で OATP1A2 の取り込みをほとんど阻害しなかったが（Fig.1A）、OATP2B1 の取り込み活性をそれぞれ 57%, 72% にまで低下させた（Fig.1A）。また、OATP2B1 に対しては 1% 等価濃度においても narirutin（3.0 µM）の方が naringin（13 µM）よりやや強い阻害活性を示した（Fig.1B）。加えて、
narirutin と naringin の混合物の OATP2B1 阻害活性は narirutin と同等だった（Fig.1B）。
3-2

Flavanone 配糖体の阻害活性比較

OATP1A2 と OATP2B1 による 0.3µM の E3S 輸送に対する narirutin と naringin の阻害活性は 300µM から頭打ちが見られた（Fig.2AB）。このため、フラバノン類が、親和性が異なる二つの輸送 components の片方のみを選択的に阻害すると仮定したモデル（Eq（1））と、単一の component を介した輸送を阻害するモデル（Eq（2））をあてはめ、両者の結果を比較したところ、OATP1A2, OATP2B1 いずれにおいても narirutin と naringin については前者のモデルの方が AIC 値が小さかった。このとき、OATP1A2 による E3S 輸送に対する non-inhibitable component の輸送寄与率は narirutin で約 11%、naringin で 7.5% と算出された。また、OATP2B1 では narirutin, naringin いずれも約 17% と算出された。一方、アグリコン naringenin による阻害では OATP1A2, OATP2B1 いずれも単一の componentを介した輸送を阻害するモデルが選択された（Fig.2B）。OATP1A2 を介した E3S 輸送に対する阻害活性は、naringenin（IC50 = 9.08µM）, narirutin（IC50 = 22.6 µM）, naringin（33.9µM）の順に強かった。同様に、OATP2B1 による E3S 輸送に対する阻害活性は、
naringenin（IC50 = 10.3 µM）, narirutin（IC50 = 18.2 µM）, naringin（37.0µM）の順に強く、

41

いずれの阻害活性も OATP1A2 と OATP2B1 で近似していた。
3-3 Narirutin の阻害様式
50 ま た は 30µM narirutin 共 存 下、OATP1A2 ま た は OATP2B1 に よる estorone
3-sulfate 輸送はそれぞれ最大 30 または 43% にまで阻害され、Eadie-Hofstee plot は
OATP1A2、OATP2B1 ともに 2 相性の挙動を示した。競合阻害モデルと非競合阻害モデル
により評価した際の残差平方和は、OATP1A2、OATP2B1 いずれの場合にも、競合阻害モ
デルにおいて小さかった（Table 1）。このとき、Ki は OATP1A2 で 81.6 µM、OATP2B1 で16.3 µM と算出された。
3-4 ジャバラ果汁の OATPs 阻害活性
ナリルチンを高濃度に含有するジャバラ果汁は、1%, 5% 濃度で OATP1A2 の取り込み活性をそれぞれ 70%, 33% にまで低下させ、GFJ とほぼ同等の OATP1A2 阻害活性を示した（Fig.3）。また、OATP2B1 の取り込み活性についてもそれぞれ 54 ± 5.9%, 19 ± 5.5% にまで低下さ、GFJ とほぼ同等またはやや強い阻害活性を示した（Fig.3）。

４、考察
本研究では、GFJ の成分を分画し、各画分の阻害活性を評価するとともに、GFJ の OATPs
阻害成分を網羅的に探索した。その結果、既知阻害成分 naringin よりも強力な OATPs 阻害成分として narirutin を見出すことに成功した。本研究で用いた GFJ 中には、narirutin はnaringin の約 1/5 量含有されていた。Narirutin はこれまでに GFJ 中に含有することは報告されていたが 16, 22）、その OATPs 阻害活性は検討されておらず、本研究によって初めてその阻害活性が明らかになった。
本研究では、naringin と narirutin が OATP1A2, OATP2B1 を介した E3S 輸送の二つの components のうち high affinity component を特異的に阻害するのに対して、アグリコン
naringenin は両 component を阻害する可能性が示唆された。そのため、糖鎖は low affinity
component に対する親和性を低下させるかもしれない。
本研究で我々は、ジャバラ果汁が、OATP1A2, OATP2B1 を強力に阻害する事を明らかにした。このジャバラ果汁の阻害活性は、narirutin 濃度から推定される阻害活性（5% jabara juice
推定残存活性 : OATP1A2: 57.5%; 2B1: 59.2%）と比べて強力であった。
ジャバラは、本邦において花粉症に対して有効性をうたう健康食品として数多く販売され、その中には 1 錠あたり 50 mg という多量の narirutin を含有する製品も市販されている。こうした商品では、FDA ガイドラインに即して消化管内濃度を算出した場合、narirutin 濃度は約340 µM となるが、これは OATP1A2, OATP2B1 の K i 値の 16–25 倍に相当する。したがって、

42消化管の OATPs を十分に阻害すると考えられる。例えば、OATPs の基質薬物である FEXと併用することでその消化管吸収が阻害される可能性がある。今後、in vivo においてもこの新
しい食品薬物相互作用が認められるかを検証することが必要である。

５、まとめ
私たちは GFJ から OATP1A2, OATP2B1 阻害成分として、従来の naringin、naringeninに加え、新たな flavanone 配糖体 narirutin を見出した。Narirutin と naringin はいずれもnaringenin をアグリコンとする化合物であるが、これら 3 者で OATPs の阻害活性が異なっていたことから、糖鎖の有無やその構造の違いは OATPs 阻害活性に影響を与えることが確認された。また、narirutin の OATPs 阻害様式は競合的であることが示唆された。この narirutinを高濃度に含有するジャバラ果汁は強力に OATPs を阻害した。これらの結果は、ジャバラと
OATPs 基質薬物を併用した場合、併用薬物の消化管吸収が阻害される可能性があることを示唆している。

６、調査研究発表（口頭叉は誌上発表）
Morita T1, Akiyoshi T1 , Sato R 1, Uekusa Y1, Katayama K 2 , Yajima K 1, Imaoka A 1,
Sugimoto Y1, Kiuchi F1, Ohtani H1. The citrus fruit-derived flavanone glycoside narirutin
is a novel potent inhibitor of organic anion-transporting polypeptides J Agric Food Chem.
68 (48): 14182-14191, 2020

1. Graduate School of Pharmaceutical Sciences, Keio University
2. School of Pharmacy, Nihon University

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８、謝辞
本研究は貴財団の「一般用医薬品セルフメディケーション振興財団・研究助成金」のご支援により実施いたしました。ここに心より御礼申し上げます。

９、図表
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 Table 1 Narirutin の競合阻害モデルと非競合阻害モデルにおける OATP1A2 と OATP2B1)23=6 $2C:CFE:?xƨăǸğº§ÀtǽƨăǸğº§Àw]b%)&  t
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ティングして算出した value (estimation error) を示す。

4445