一般用医薬品の適正使用を目的とした生薬成分の定量 NMR による分析に関する研究
東京薬科大学 薬学部
よこすか

横須賀

あきひと

章人

准教授

一般用医薬品の適正使用を目的とした生薬成分の定量 NMR による分析に関する研究

東京薬科大学薬学部

漢方資源応用学教室

准教授

横須賀章人

【要旨】
近年、SI（ 国際単位系、The international System of Units）トレーサビリティを確保した定量法として定量 NMR（qNMR）法が広く用いられ、日本薬局方の生薬成分の定量に導入されている。本研究では、生薬エキスを配合する一般用医薬品の生薬由来の指標成分の純度を
qNMR により値付けし、医薬品中の成分量を正確かつ簡便に分析することを目的とする。今回、一般用医薬品として広く流通しているオンジエキス製剤の定量分析の指標成分を選定し、qNMR
により純度を値付けした指標成分の標準溶液を用いて HPLC による定量分析を行った。

１、調査・研究目的
定量 NMR（qNMR）法は、NMR の化合物中の原子核の数の比がピーク積分比に対応する特性を利用して、化合物の純度や濃度等の定量値を求める方法であり、医薬品の絶対定量法に用いられている [1-4]。生薬や漢方処方エキス製剤など天然物由来医薬品の規格において、生薬成分を指標成分として定量分析をする場合、多くの場合これらの指標成分の化学合成が容易ではなく、天然物より分離精製された市販の化合物を標準品として用い、クロマトグラフ法による定量を行うことになる。その場合、標準品の純度規格は計量学的な値付けが行われておらず、定量分析の信頼性にかけることや、定量時に標準品の吸湿性に起因する水分が不純物として含まれることが問題点として挙げられる [5, 6]。
日本薬局方では、qNMR により純度値を値付けし、SI トレーサビリティを確保した試薬が規格化され、それらを分析用の内部基準物質とした生薬成分の定量法が導入されている。この方法により純度を値付した生薬成分の標準溶液を用いて HPLC 分析をすることで、定量値の信頼性の高い分析が可能となる。
現在、一般用医薬品として、漢方エキス製剤以外に、オンジエキスなどの単味生薬エキス製剤や、その他の生薬エキス配合医薬品が幅広く流通している。単味生薬エキス製剤は、局外生規収載による標準化に向けた確認試験と定量法の検討が進められているが、それらエキスの規定では、市販の生薬成分を標準品とした HPLC 法による定量が行われている [7, 8]。

43

本研究では、生薬エキスを配合する一般用医薬品の生薬由来の指標成分を、qNMR により純度値を値付けした標準溶液を用いる手法により正確かつ簡便に分析することを目的とする。

２、調査・研究方法
2-1

qNMR 法を用いた生薬成分の定量分析に関する調査

第 18 改正日本薬局方日本薬局方の qNMR 法による生薬成分の定量分析の条件を調査した。
あわせて、生薬成分のqNMRによる定量の研究報告について和英文誌、
学会発表、
インター
ネット上の情報を調査した。
2-2

qNMR スペクトルによる定量〔試薬類〕
標準品の候補として qNMR スペクトルの測定に用いた 3,6’-disinapoyl sucrose と tenuifolin
は MedChemExpress（Monmouth Junction, NJ, USA）より、tenuifoliside A は ChemFaces（Hubei, China） より購入したものを用いた。qNMR 用の内部 基 準 物質は、SI トレーサ
ブルな 値 付けをされた核 磁 気 共 鳴スペクトル 測 定 用 1,4-bis(trimethylsilyl)benzene-d 4(1,4-BTMSB-d 4（) 富士フィルム和光純薬、大阪）を用いた。NMR 測定用溶媒は、重水素化
率 99.8% の methanol-d 4（富士フィルム和光純薬）と重水素化率 99.5% の pyridine-d 5（富士フィルム和光純薬）を用いた。
〔機器等〕
天秤はウルトラミクロ天秤（SE2、sartorius、Göttingen、Germany）（最小表示値 0.0001
mg）を用いた。NMR 装置は、オートサンプラー付き JNM-ECZ600R（600MHz）（日本電子、
東京）を用いた。NMR 測定管は、NMR テストチューブ HG タイプ（φ 4.951 〜 4.965mm ×
7 インチ （) 富士フィルム和光純薬）を用いた。
〔試料溶液の調製〕
各試料と qNMR 用の内部基準物質（1,4-BTMSB-d 4）をそれぞれ精密に秤取し、同一の容器に入れ、NMR 測定用溶媒 1.00mL に溶解した。この溶液の 0.600mL を NMR 測定管に封入したものを試料溶液とした。
〔1H-qNMR スペクトルの測定条件〕
試料溶液の 1H-qNMR スペクトルは以下の条件で測定した。

44

デジタル分解能：0.25 Hz、観測スペクトル幅：20 ppm、スピニング：オフ、13C デカッ
13
プリング：あり、パルス角：90º、積算回数：8回、ダミースキャン：2 回、測定温度：
デジタル分解能：0.25 Hz、観測スペクトル幅：20ppm、スピニング：オフ、C デカップリン

25グ：あり、パルス角：90º、積算回数：8ºC回、ダミースキャン：2 回、測定温度：25 ºC
内部標準法（accuratequantitative
NMR
withwith
internalreference
substance:
AQARI）によ
内部標準法（accuratequantitative
NMR
internalreference
substance:
AQARI）
り、各試料につき3 回測定を行った。NMRのデータ処理は、日本電子の解析ソフトでにより、各試料につき3 回測定を行った。NMRのデータ処理は、日本電子の解析ソフトでああるDelta NMR Processing
v6.0
る Delta
Processingand
andControl
ControlSoftware
Softwarev6.0ののqNMR
qNMR解析により行った。化学
解析により行った。化学シ
シフト値は、内部基準物質として用いた
1,4-BTMSB-d
ppm とし、δppm
値
4 のシグナルを
フト値は、内部基準物質として用いた 1,4-BTMSBd 4 のシグナルを
0 ppm0とし、δ値をを単位で表した。
ppm 単位で表した。
各試の純度（%）は、以下の式から算出した。
各試の純度（%）は、以下の式から算出した。

純度（%） = �

𝐼𝐼𝐼𝐼 s 𝐻𝐻𝐻𝐻 st 𝑊𝑊𝑊𝑊 st 𝑀𝑀𝑀𝑀 s
� × 𝑃𝑃𝑃𝑃 st×××
𝐼𝐼𝐼𝐼 st 𝐻𝐻𝐻𝐻 s 𝑊𝑊𝑊𝑊 s 𝑀𝑀𝑀𝑀 st

I s: I標準品（生薬由来成分）の積分値、I）の積分値、Hs : 標準品（生薬由来成分）の積分値、st:I st基準物質（1,4-BTMSB-d: 基準物質（1,4-BTMSB-4dH s:s4）の積分値、標準品（生薬由来成分）のプロトン数、H
st:st基準物質（1,4-BTMSB-d: 標準品（生薬由来成分）のプロトン数、 H: 基準物質（1,4-BTMSB-4）のプロトン数、
d 4）のプロトン数、
Ws:
st:: 基準物質
基準物質（1,4-BTMSB-d
標4）の質量、M
W s標準品（生薬由来成分）の質量、W: 標準品（生薬由来成分）の質量、W st（1,4-BTMSB-d 4）の質量、
M s : s:標準
準品（生薬由来成分）の分子量、M
基準物質（1,4-BTMSB-d
st: 基準4）の分子量、P品（生薬由来成分）の分子量、M st :st:
基準物質
（1,4-BTMSB-d 4）の分子量、P st : 基準物質物質（1,4-BTMSB-d4）の純度（%）（1,4-BTMSB-d 4）の純度（%）
なお、内部基準物質として用いた
1,4-BTMSB-d
226.50、プロトン数は
18
4 の分子量は
なお、内部基準物質として用いた 1,4-BTMSBd 4 の分子量は226.50、プロ
トン数は 18（CH3
（CH
x 6）
、純度は
100.0
%である。
3、純度は
x 6）
100.0 %である。
2-52-3 HPLCにによる分析
よる分析
HPLC
〔試薬類〕
〔試薬類〕
オンジエキス製剤は、現在国内で製造承認されている
4 社のエキス製剤を用いた（メオンジエキス製剤は、現在国内で製造承認されている 4 社のエキス製剤を用いた（メーカー、ーカー、製品名は非公開とする）。
製品名は非公開とする）。
標準品として用いた
3,6’-disinapoylsucrose
sucroseは、MedChemExpress
は、MedChemExpressよより購入し、qNMR標準品として用いた 3,6’-disinapoyl
り購入し、qNMR ににより純度を値付けしたものを用いた。
より純度を値付けしたものを用いた。
HPLC
分析に用いたアセトニトリル、リン酸は、いずれも高速液体クロマトグラフ用
HPLC
分析に用いたアセトニトリル、リン酸は、いずれも高速液体クロマトグラフ用（富（富士フィルム和光純薬）を用いた。水は超純水［18.2
蒸留水をSynergy
SynergyUV
UV（Merck士フィルム和光純薬）を用いた。水は超純水
［18.2
M MΩ、
Ω、蒸留水を（MerckMillipore,
Darmstadt,
Germany）で精製］を用いた。
Millipore,
Darmstadt,
Germany）で精製］を用いた。
〔試料溶液の調製〕〔試料溶液の調製〕
オンジエキス製剤（1回服用分）回服用分）にメタノール
10.0
mL を正確に加えて超音波抽出（20
オンジエキス製剤（1にメタ
ノール 10.0mLを正確に加えて超音波抽出（20 分間）し、分間）し、遠心分離（3000rpm、10 分間）したものをオンジエキス製剤の試料溶液とし遠心分離（3000rpm、10 分間）したものをオンジエキス製剤の試料溶液とした。
た。
〔HPLC の分析条件〕〔HPLCの分析条件〕
オンジエキス製剤の試料溶液中の
3,6’-disinapoyl sucrose の定量分析は HPLC により、以45

下の条件で行った。
ポンプ：島津 LC-20AD、検出器：日立 Chromaster 5410 UV、波長：UV 330 nm、インテグレーター： Chromato-Pro（ランタイムインスツルメンツ、東京）、カラム：InertSustain C18（内径 4.6 mm、長さ 150 mm、粒子径 5μm、ジーエルサイエンス、東京）、移動相（溶離液）：
アセトニトリル –0.1% リン酸 = 200 : 800、流速：1.0 mL/min、試料注入量：20μL〔3,6’-Disinapoyl sucrose 標準溶液の調製〕
3,6’-Disinapoyl sucrose をウルトラミクロ天秤で正確に秤量後、メタノールに溶解し、qNMRによって得られた試薬の純度を考慮に入れ、0.00439μg/mL、0.0439 μg/mL、0.439μg/
mL の濃度の3,6’-disinapoyl sucrose 標準溶液を調製した。標準溶液 20μLをHPLC に注入し、得られたクロマトグラムのピーク面積を Chromato-Pro により求め、検量線を作成した。回帰
線は、原点を通る回帰直線とみなした。
（相関係数 R=1.00）。
〔試料溶液の定量分析〕
試 料溶液 20μL を HPLC に注入し、絶対検 量線法により試 料溶液中の 3,6’-disinapoyl
sucrose 量を算出した。各オンジエキス製剤の添付文書に記載されているエキス量から、試料溶液中の 3,6’-disinapoyl sucrose の含有率（%）を算出した。

３、調査・研究成果
3-1

qNMR 法を用いた生薬由来成分の定量分析に関する調査と分析対象の選定

オンジはヒメハギ科イトヒメハギ Polygala tenuifolia Willdenow の根または根皮を基原とする生薬で、去痰薬として家庭薬の原料として用いられる [9]。最近では中年期以降の物忘れの改善を目標として、多くのエキス製剤が販売されている。本研究では、一般用医薬品として広く流通しているオンジエキス製剤を定量分析の対象とした。
第 18 改 正日本 薬 局 方 で は、(E ) -cinnamic acid、geniposide、magnolol、magnflorine、
paeonol、rhein、rosmarinic acid、saikosaponin b2、loganin、[6 ] -gingerol、[6 ] -shogaol、( E ) -ferulic acid、10-hydroxy-2- ( E ) -decenoic acid、evodiamine、sinomenine、mangiferin、
saikosaponin b、saikosaponin a、diphenyl sulfone (perillaldehyde の定量用 ) の 19 成分について、qNMR による定量法が規定されていることから、これらの生薬成分の定量分析の条件を確認した。あわせて、生薬成分の qNMR による定量研究に関して和文誌やインターネッ
ト上の情報を確認し、広く文献調査を行なった。
第 18 改正日本薬局方のオンジの確認試験において、tenuifolin が TLC の標準物質として46

規定されているが、定量の規定はないことから、定量に用いる指標成分を選定する必要がある。他国の薬局方あるいは医薬品基準を調査すると、香港中薬材標準に、オンジ中の 3,6’
-disinapoyl sucrose を定量する規定が存在した [10]。また、オンジの TLC 分析における特徴的な指標成分として、3,6’-disinapoyl sucroseとtenufoliside A および B が報告されている [11]。
以上のことから、tenuifolin、3,6’-disinapoyl sucrose、tenufoliside A を、本研究での qNMRの分析対象とする生薬成分に選定した。これら生薬成分の qNMR による定量の測定条件を検討するため、文献検索ソフト SciFinder Web 版で文献調査を行い NMR データに関する情報を収集した [12, 13]。
3-2

1H-qNMR スペクトルの測定

オンジの 含 有成 分である tenuifolin、3,6’-disinapoyl sucrose、tenufoliside A について、
1

H-qNMR スペクトルによる定量の測定溶媒と定量に用いるピークの選定を行った。
過去のこれら化合物のスペクトルデータに関する文献調査の結果から、tenuifolin の測定溶

媒を pyridine-d5 とし、3,6’-disinapoyl sucrose と tenufoliside A の測定溶媒を methanol-d4として 1H-qNMR スペクトルの測定が可能であることを確認した。また、いずれの化合物も1

H-qNMR の内部基準物質として 1,4-BTMSB-d4 を用いるのが適切であると考えられた（図 1）。

定量に用いるシグナルは、他のピークとの分離がよく、積分値の算出が可能なものを選定した。
すなわち、tenuifolin ではδ 5.80 (1H, br s, H-12) を、3,6’-disinapoyl sucrose ではδ 7.43 (1H, d,

J = 16.0 Hz, H-7’’) を、tenufoliside A ではδ 7.66 (2H, d, J = 8.8 Hz, H-2’’’, 6’’’) のシグナルを定量に用いた（図 2 〜 4）。
それぞれの化合物の 1H-qNMR スペクトルを測定し純度を算出した結果、tenuifolin が 97.4
± 0.311 %、3,6’-disinapoyl sucrose が 86.4 ± 0.341 %、tenufoliside A が 66.9 ± 0.769 %であった。これら化合物のうち、比較的純度が高く HPLC での分析において紫外線検出器
による分析が可能な 3,6’-disinapoyl sucrose を指標成分として選定した。
3-3

オンジエキス製剤中の 3,6’-disinapoyl sucrose の HPLC による定量分析

3,6’-Disinapoyl sucrose をウルトラミクロ天秤で正確に秤量後、メタノールに溶解し、qNMRによって得られた試薬の純度を考慮に入れ、3,6’-disinapoyl sucrose 標準溶液を調製した。標準溶液を HPLC により定量分析し、得られたクロマトグラムのピーク面積を算出し、検量線を作成した（図 5）。
4 種のオンジエキス製剤（製剤 A 〜 D）試料溶液を調製し、3,6’-disinapoyl sucrose 量を定量した結果、全ての製剤に 3,6’-disinapoyl sucrose が検出された（図 6）。各製剤のエキス量に対する 3,6’-disinapoyl sucrose の含有率は、製剤 A が 0.369 ± 0.0237 %、製剤 B が 0.358± 0.0432 %、製剤 C が 1.10 ± 0.110 %、製剤 D が 0.367 ± 0.0483 % と算出された。

47

４、考察
本研究では、一般用医薬品として広く流通しているオンジエキス製剤の指標成分を選定し、
qNMR により純度を値付けした生薬成分の標準溶液を用いて HPLC による定量分析を行った。
第 18 改正日本薬局方では、オンジ中の成分の定量に関する規定がないことから、定量分析の標準品となる成分の検討を行った。分析対象とした tenuifolin、3,6’-disinapoyl sucrose、
tenufoliside A の純度を qNMR により算出した結果、全ての化合物の定量値が、メーカーが表示する純度よりも低い値で確認された。それら各化合物の1H-NMR スペクトルを確認したところ、生薬由来の試薬で懸念される純度や、試薬の吸湿性に起因する水分の影響が考えられた。今回の研究のように、定量分析をする都度、標準品を正確に秤量し、qNMR により標準品の純度を算出してから HPLC 分析を行うことで、信頼性の高い正確な定量分析が可能になると考えられる。
また、医薬品としての定量規定を定める上では、純度が正確に値付けされた標準試薬や、それらを用いた定量用標準液が試薬メーカーから供給されることも望まれる。
qNMR で純度が保証された標準物質を用いた定量分析は、日本薬局方の医薬品の定量規定のほか、食品衛生分野における機能性表示食品の機能性成分や食品添加物の定量に応用されている [14-16]。また、ドーピング検査の禁止薬物の認証標準物質の定量分析にも応用されて
おり、qNMR により純度が保証された分析用の標準液（禁止物質であるクロミフェンの代謝物
4-hydroxyclomifene とホルメスタンの代謝物 3β,4α-dihydroxy-5α-androstan-17-one）が、産業技術総合研究所軽量標準総合センターにより開発され、世界アンチドーピング機構の認定検体分析機関への頒布が開始されている [17, 18]。
今後も qNMR による定量分析について、様々な分野での研究の発展に期待し、研究の動向に注目していきたい。

５、まとめ
本研究は、生薬エキスを配合する一般用医薬品の生薬由来の指標成分の純度を qNMR により値付けし、医薬品中の成分量を正確かつ簡便に分析することを目的に、一般用医薬品として広く流通しているオンジエキス製剤の指標成分を選定し定量分析を行った。今回の研究から、生薬エキス製剤中の生薬成分の定量を行う場合、qNMR で純度が保証された標準物質を用いることで、HPLC による信頼性を確保した定量を行うことが可能であると考えられた。
現在、本研究の手法を用いて、構成生薬としてオンジを含む加味帰脾湯や人参養栄湯などの一般用漢方エキス製剤の定量分析の検討を進めている。また、本研究期間内には実施できなかったが、生薬エキス製剤中の成分を抽出して NMR の測定溶媒に溶解し、内部基準物質とともに
qNMR を測定することにより、エキス中の指標成分の定量をすることが理論的には可能であるので、検討を進めていきたい [19]。

48本研究で得られた成果を足がかりとして、漢方エキス製剤や生薬エキスを配合する一般用医薬品の生薬成分の定量分析に関する研究を今後も進めていく予定である

６、調査・研究発表（口頭叉は誌上発表）
該当なし（口頭叉は誌上発表を検討中である。）

７、謝辞
本研究の遂行のため、公益財団法人

一般用医薬品セルフメディケーション振興財団により研究助成を賜りましたことを深く感謝申し上げます。

８、引用文献1） 厚生労働省ホームページ．第 18 改正日本薬局方（令和 3 年 6 月 7 日厚生労働省告第 220 号）．
https://www.mhlw.go.jp/stf/seisakunitsuite/bunya/0000066530.html
2） 末松孝子．有機化合物の純度をはかる．核磁気共鳴法（NMR）を用いた SI（国際単位系）
化学と生物，52, 473–477 (2014).

トレーサブルな定量分析技術．

3） Miura T, Sugimoto N, Bhavaraju S, Yamazaki T, Nishizaki Y, Liu Y, Bzhelyansky A,
AmezcuaC, Ray J, Zailer E, Diehl B, Gallo V, Todisco S, Ofuji K, Fujita K, Higano T, Geletneky
C, Hausler T, Singh N, Yamamoto K, Kato T, Sawa R, Watanabe R, Iwamoto Y, Goda
Y. Collaborative study to validate purity determination by 1H quantitative NMR
spectroscopy by
Using internal calibration methodology. Chem. Pharm. Bull., 68, 868–878 (2020).
4） 三浦亨，杉本直樹，渡邊龍一，末松孝子，高柳庸一郎，伊藤喜之，斎藤直樹，澤一，加藤毅，藤峰慶徳，小池竜

亮，大福裕子，山田裕子，内海博明，鈴木敏之．

1H 核定量核磁気共鳴分光法の標準化のためのラウンドロビン試験による評価．薬学雑誌 ,137, 1543–1553 (2017 ).
5） 合田幸広．定量 NMR とレギュラトリーサイエンス分野への応用．化学と教育，61, 300–
305 (2013).
6） 内山奈穂子，細江潤子，三浦亨，杉本直樹，石附京子，山田裕子，岩本芳明，末松孝

子，小松功典，丸山剛史，五十嵐靖，日向野太郎，嶋田典基，合田幸広．日本薬局方・49

定量用試薬の規格化を目的とした定量 NMR を用いた吸湿性化合物の絶対純度の測定（Part 1）．薬学雑誌，140, 1063–1069 (2020).
7） 内山奈穂子，増本直子，丸山卓郎，合田幸広，袴塚高志，山本豊，玉木智生，中田孝之，

山田修嗣，伊藤雅文，若林健一，武田修己，小栗志織，佐々木隆宏，岡

秀樹，白鳥

誠，

秋田幸子，植村清美，塩本秀己，浅野年紀，日向野太郎，須藤慶一，近藤誠三，西川
加奈子，木内文之，東田千尋，竹林憲司，中村高敏，西尾雅世，中川和也，横倉胤夫，
神本敏弘，田辺章二，土屋久美，高尾正樹，高橋喜久美，松本和弘，嶋田康男，佐々木博，
川原信夫．局外生規 2018 に新規収載された単味生薬エキスの確認試験及び定量法の設定について，生薬学雑誌 , 74, 20–34 (2020).
8） 厚生労 働 省ホームページ． 日本 薬局方外 生薬規 格 2018 について．
https://www.mhlw.go.jp/web/t_doc?dataId=00tc3795&dataType=1&pageNo=1
9）木内文之，小松かつ子，三巻祥浩 編．パートナー生薬学 改訂第 4 版，南江堂，2022.
10）香港中薬材標準．Radix Polygalae．
https://www.cmro.gov.hk/files/hkcmms/vol3/pdf_e/Radix_Polygalae_v3_e.pdf11）Uchikura T, Sugiwaki H, Yoshimura M, Mitsuhashi H, Fuchino H, Kawahara N,
Hakamatsuka

T, Amakura Y. Characterization of UV-sensitive marker constituentsof Polygala root for TLC: Applications in quality control of single crude drug extract
preparations. Chem. Pharm. Bull., 66, 1174–1180 (2018).
12）Iketa Y, Sugama K, Okada M, Mitsuhashi H. Four new phenolic glycosides from
Polygala tenuifolia. Chem. Pharm. Bull., 39, 2600–2605 (1991).
13）Han BH and Han NH．Studies on triterpenoid corticomimetics ( V ) - Oxidationof presenegenin with chromium trioxide-acetic acid to yield 11-keto and 12-ketoderivatives. Arch. Pharm. Res., 8, 229–235 (1985).
14）大槻崇． qHNMR の食品添加物分析への応用．化学と生物，52, 622 - 626 (2014).

15）Ohtsuki T, Sato K, Furusho N, Kubota H, Sugimoto N, Akiyama H. Absolute
quantification of dehydroacetic acid in processed foods using quantitative ¹H NMR.
Food Chem., 141, 1322–1327 (2013).
16）佐藤（増本）直子，西﨑雄三，斎藤直樹，山﨑太一，沼田雅彦，井原俊英，杉本直樹，
佐藤恭子．qNMR および HPLC による機能性表示食品中の機能性関与成分ルテインの定量．日本食品科学会誌，24, 75–81 (2017 ).
17）井原俊英．ドーピング検査を科学的に支える定量核磁気共鳴分光法．現代化学，17-20 (2021).
18）産業技術総合研究所ホームページ．ドーピング検査用の認証標準物質を供給開始．
https://www.aist.go.jp/aist_j/press_release/pr2020/pr20200323/pr20200323.html
19）Tanaka R, Inagaki R, Sugimoto N, Akiyama H, Nagatsu A.

Application of aquantitative 1H-NMR (1H-qNMR) method for the determination of geniposidic acidand acteoside in Plantaginis semen. J. Nat. Med., 71, 315–320 (2017 ).

50

図および表
図および表
図
および表

図 1、3,6’-Disinapoyl sucrose、tenuifoliside A、tenuifolin、1,4-BTMSB-d4 の構造式
図1、3,6’-Disinapoyl
1、3,6’-Disinapoyl sucrose、tenuifoliside
図sucrose、tenuifoliside AA、tenuifolin、1,4-BTMSB、tenuifolin、1,4-BTMSB-d4 dの構造式
4 の構造式

図および表図 1、3,6’-Disinapoyl sucrose、tenuifoliside A、tenuifolin、1,4-BTMSB-d4 の構造式

11
図2、Tenuifolin の
図 2、Tenuifolinの H-qNMR
H-qNMRスペクトル（pyridine-dスペクトル（pyridine-d55））
図 2、Tenuifolin の 1H-qNMR スペクトル（pyridine-d5）1スペクトル（pyridine-d
図2、Tenuifolin の 1H-qNMR5）
図 3、3,6’-Disinapoyl
sucrose のH-qNMR スペクトル（methanold 4）1
図 3、3,6’-Disinapoyl sucrose の1 H-qNMR スペクトル（methanol-d4）
図 3、3,6’-Disinapoyl sucrose の H-qNMR スペクトル（methanol-d4）

図 3、3,6’-Disinapoyl sucrose の 1H-qNMR スペクトル（methanol-d4）
51

図 4、
4、Tenuifoliside
Tenuifoliside A
Aのの 11H-qNMR
スペクトル（methanol-d44））1
図
図 4、Tenuifoliside
A の1H-qNMR
H-qNMRスペクトル（methanol-d
スペクトル（methano-d ）図 4、Tenuifoliside A の H-qNMR スペクトル（methanol-d44）

図 5、3,6’-Disinapoyl
5、3,6’-Disinapoyl sucrose
sucrose の検量線の検量線
図
図
図 5、3,6’-Disinapoyl
5、3,6’-Disinapoylsucrose
sucrose の検量線の検量線

濃度（µg/mL）濃度（µg/mL）濃度（µg/mL）

図 6、エキス製剤の分析結果例（HPLC
6、エキス製剤の分析結果例（HPLC クロマトグラム）
クロマトグラム）
図
図
図 6、エキス製剤の分析結果例（HPLC
6、エキス製剤の分析結果例（HPLCクロマトグラム）
クロマトグラム）

3,6’-Disinapoyl sucrose
sucrose3,6’-Disinapoyl
3,6’-Disinapoyl sucrose

52