実 験 動 物 ニュース
The Japanese Association for Laboratory Animal Science目次

日本実験動物学会からのお知らせ
公益社団法人日本実験動物学会

平成 27 年度第 3 回理事会議事録 ...............39

公益社団法人日本実験動物学会

平成 27 年度第 4 回理事会議事録 ...............40

公益社団法人日本実験動物学会

平成 28 年度第 63 回通常総会議事録 .........41

公益社団法人日本実験動物学会

平成 28 年度第 2 回理事会議事録 ...............42

平成 29 年度日本実験動物学会賞（功労賞，安東・田嶋賞，奨励賞）
受賞候補者の推薦受付について ......................................................................43
第 66 回日本実験動物学会総会大会長立候補者の受付について.......................43
第 7 回実験動物管理者等研修会の開催について ...............................................44
第 5 回実験動物科学シンポジウムの開催...........................................................45
第 64 回日本実験動物学会総会の開催 ................................................................45
他学会情報................................................................................................................46
実験動物感染症の現状
マウスロタウイルス .............................................................................................47

Experimental Animals 65(3) 収載論文和文要約集 ..................................................51
日本実験動物学会正会員名簿の変更一覧 ................................................................ i
維持会員名簿 ............................................................................................................ iii
お詫びと訂正 ..............................................................................................................v
編集後記 .....................................................................................................................v

Vol. 65 No. 3 / July 2016

実験動物ニュースVol. 6539

No. 3

日本実験動物学会からのお知らせ
公益社団法人日本実験動物学会
平成 27 年度第 3 回理事会議事録
8. 理事会の議事内容及び経過

1. 開催日時（1）定足数の確認

平成 28 年 2 月 15 日（月）10:00 〜 11:15
2. 会場

冒頭で議長が定足数を確認し，本会議の成立を宣言した。

東京大学農学部フードサイエンス棟会議室〒 113-8657（2）議案の審議及び議決結果等

東京都文京区弥生 1-1-1

3. 理事現在数及び定足数並びに出席理事数とその氏名

第 1 号議案 会員の入会について
平成 27 年 12 月 31 日付で申し込みのあった

現在理事数

20 名

出席理事数

17 名

定足数

正会員入会希望者について，定款第 6 条に基11 名

づき審議をした結果，定款第 3 条，定款第 5
条第 1 項に基づき，入会を不承認とすること

出席した理事の氏名
浦野徹（理事長），小幡裕一，久和

山田靖子，國田茂，

第 2 号議案 2015 Experimental Animals 最優秀智（以上，常務理事），

安居院高志，浅野雅秀，喜多正和，黒澤桑原正貴，阪川隆司，塩谷恭子，高倉外尾亮治，三好一郎 ，吉木淳，渡部一人（以上，理事）監事現在数

務台衛，米川博通

三枝順三，中山由紀子（以上，学会事務局）

7. 議

題

新らの Shingle-step

the tyrosinase gene using CRISPR/Cas 9を選承認された。
その他
本法人の顧問弁護士として高橋茂樹弁護士と契約交渉を開始することが，出席理事全員一致で承認された。

〈審議事項〉

11 時 15 分に閉会を宣言し，解散した。

第 1 号議案 会員の入会について
第 2 号議案 2015 Experimental Animals 最優 秀
論文賞
その他

優秀論文賞として，本多考したことが報告され，出席理事全員一致で2名

6. 議長の氏名
徹

編集委員会より 2015 Experimental Animals 最generation of rabbits carrying a target allele of

5. その他の出席者氏名

浦野

論文賞

努，
彰，

4. 監事現在数及び出席監事氏名出席した監事の氏名が出席理事全員一致で議決された。

この議事録が正確であることを証するため，出席した理事長及び監事は記名押印する。
平成 28 年 2 月 15 日

実験動物ニュース40

Vol. 65

No. 3

公益社団法人日本実験動物学会
平成 27 年度第 4 回理事会議事録
1. 開催日時野理事長より新規事業「外部検証の標準化のための人材育成」の概要が説明された。

平成 28 年 3 月 14 日（月）14:00 〜 16:15
2. 会場

資料に基づき審議した結果，出席理事全員一致にて原案通り承認された。

東京大学農学部フードサイエンス棟講義室〒 113-8657

第 2 号議案 平成 28 年度予算について

東京都文京区弥生 1-1-1

3. 理事現在数及び定足数並びに出席理事数とその議長の求めに応じ，國田常務理事より新規事

氏名業のための特定費用準備資金および平成 28

現在理事数

20 名

出席理事数

17 名

定足数

年度収支予算案について説明された。

11 名

資料に基づき審議した結果，出席理事全員一致にて原案通り承認された。

出席した理事の氏名
浦野徹（理事長），小幡裕一，久和

山田靖子，國田茂，

第 3 号議案 規程・細則等の改訂について議長の求めに応じ，山田常務理事より規程・

智（以上，常務理事），

浅野雅秀，伊川正人，喜多正和，黒澤

努，細則等の改訂について報告された。

桑原正貴，阪川隆司，塩谷恭子，高倉彰，

資料に基づき審議した結果，一部修正後出席

外尾亮治，三好一郎 ，吉木淳，渡部一人（以上，理事）

理事全員一致にて承認された。
その他

4. 監事現在数及び出席監事氏名
監事現在数

浦野理事長より，高橋茂樹弁護士に継続的に2名出席した監事の氏名

この法人の顧問弁護士を依頼したい旨の提案
務台衛，米川博通があり，出席理事全員一致にて契約すること

5. その他の出席者氏名が承認された。

荘 一隆（税制研究所，アドバイザー），
三枝順三，中山由紀子（以上，学会事務局）
6. 議長の氏名
浦野

徹

7. 議

題

〈審議事項〉

審議終了後に浦野理事長より，第 3 回理事会で審議された入会申請について，その結果を申請者に通知したことが報告された。
浅野学術集会委員会委員長から第 5 回実験動物

第 1 号議案 平成 28 年度事業計画について

科学シンポジウムが以下の予定で開催されること

第 2 号議案 平成 28 年度予算についてが報告された。

第 3 号議案 規程・細則等の改訂についてその他
8. 理事会の議事内容及び経過（1）定足数の確認

日時：10 月 21 日（金）午後

場

所：信州大学医学部（松本市）

テーマ：医学研究を支える実験動物科学―サル類が果たす役割―

冒頭で議長が定足数を確認し，本会議の成立を宣言した。
（2）議案の審議及び議決結果等
第 1 号議案 平成 28 年度事業計画について議長の求めに応じ，久和常務理事より平成 28
年度の事業計画案が提案された。次いで，浦16 時 15 分に閉会を宣言し，解散した。
この議事録が正確であることを証するため，出席した理事長及び監事は記名押印する。
平成 28 年 3 月 14 日

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No. 3

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公益社団法人日本実験動物学会
平成 28 年度第 63 回通常総会議事録
日時：平成 28 年 5 月 19 日（木）13:30 〜 14:10
場 所：ミューザ川崎シンフォニーホール（音楽ホール）
総社員数：1,117 名［定足数の確認］
山田靖子庶務担当理事によって，出席者数・委任状数・定足数が下記のとおり確認され，定足数を満たし総会が成立している旨の報告が行われた。
出席者：202 名
委任状数：474 名
定足数：373 名［出席理事及び監事］
理事長：浦野 徹
常務理事： 小幡裕一，久和 茂，國田 智，
山田靖子
理 事：安居院高志，浅野雅秀，伊川正人，
黒澤 努，桑原正貴，阪川隆司，
塩谷恭子，高倉 彰，外尾亮治，
松本清司，三好一郎，吉木 淳，
渡部一人
監 事：米川博通［議長の選出］
山田庶務担当理事が議長の選出を出席者に諮ったところ，出席者より加藤秀樹会員の推薦があり，
異議なく推薦通り選出された。
以後，加藤会員を議長として総会が開催された。
［議事録署名人の選出］
加藤議長より 下田耕治会員，高橋利一会員を議事録署名人として推薦したい旨の発議があり，出席者に諮ったところ，異議なく推薦通り選出された。

議題［審議事項］
第 1 号議案 平成 27 年度事業報告
加藤議長から第 1 号議案が上程され，久和 茂
庶務担当理事が平成 27 年度事業報告の要点を第63 回通常総会資料の第 1 頁から第 5 頁にもとづき説明した。
これに対して，加藤議長は第 1 号議案を出席者に諮り，特に質疑応答はなく，全会一致で本議案が承認された。
第 2 号議案 平成 27 年度収支決算ならびに監査報告
加藤議長から第 2 号議案が上程され，國田 智

会計担当理事が平成 27 年度収支決算の要点を第63 回通常総会資料の第 6 頁から第 14 頁にもとづき説明した。次いで米川博通監事が第 63 回通常総会資料の第 15 頁の監査報告について説明した。
これに対して，加藤議長は第 2 号議案を出席者に諮り，特に質疑応答はなく，全会一致で本議案が承認された。
第 3 号議案 平成 28–29 年度役員の選任
加藤議長から，本総会の終結をもって理事及び監事全員が任期満了になるので，第 3 号議案が上程され，議長が第 63 回通常総会資料第 16 頁にもとづき平成 28–29 年度役員の選任について説明した。
次いで，加藤議長は個々の役員候補者の氏名を読み上げて出席者に候補者ごとの賛否を諮り，特に質疑応答はなく，全会一致で本議案が承認された。
第 4 号議案 平成 28–29 年度役員の選任
加藤議長から第 4 号議案が上程され，浦野理事長が候補者の業績等を第 63 回通常総会資料の第17 頁にもとづき説明した。
次いで，加藤議長は個々の名誉会員候補者の氏名を読み上げて出席者に候補者ごとの賛否を諮り，特に質疑応答はなく，全会一致で本議案が承認された。
第 5 号議案 平成 28–29 年度役員の選任
加藤議長から第 5 号議案が上程され，山田庶務担当理事が謝金支給規程の改正の要点を第 63 回
通常総会資料の第 18 頁から第 19 頁にもとづき説明した。
これに対して，加藤議長は第 5 号議案を出席者に諮り，特に質疑応答はなく，全会一致で本議案が承認された。
［報告事項］
平成 28 年度事業計画・予算
加藤議長から平成 28 年度事業計画・予算について平成 28 年 3 月 14 日に開催された第 4 回理事会において承認されたこと及びその内容が第 63回通常総会資料の第 20 頁から第 23 頁に記載されている旨の報告があった。
加えて，浦野理事長が平成 28 年度開始の新規事業「外部検証の標準化のための人材育成」の概要を説明した。
［閉会］
以上により本日の議事はすべて終了し，加藤議長は閉会を宣言した。

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実験動物ニュース

Vol. 65

No. 3

公益社団法人日本実験動物学会
平成 28 年度第 2 回理事会議事録
1. 開催日時
平成 28 年 5 月 19 日（木）17:00 〜 18:00
2. 会場
ミューザ川崎シンフォニーホール 会議室 3
3. 理事現在数及び定足数並びに出席理事数とその氏名
現在理事数 19 名 定足数 10 名
出席理事数 19 名出席した理事の氏名
浦野 徹（理事長），小倉淳郎，久和 茂，
國田 智，杉山文博，山田靖子（以上，常務理事），安居院高志，伊川正人，大和田一雄，
落合敏秋，庫本高志，桑原正貴，越本知大，
塩谷恭子，林元展人，外尾亮治，真下知士，
吉木 淳，渡部一人（以上，理事）
4. 監事現在数及び出席監事氏名
監事現在数 2 名出席した監事の氏名 米川博通
5. 議長の氏名
浦野 徹
6. 議 題〈審議事項〉
第 1 号議案 平成 28–29 年度理事長の選出
第 2 号議案 平成 28–29 年度常務理事の承認
第 3 号議案 平成 28–29 年度委員会の設置と各委員長の指名と承認〈その他〉
1. 平成 28–29 年度評議員推薦依頼
2. 役員就任に必要な書類の説明
3. 今後の予定
7. 理事会の議事内容及び経過（1）定足数の確認
事務局が理事 19 名および監事 1 名の出席を確認し，本会議の成立を宣言した。
（2）議案の審議状況及び議決結果等
第 1 号議案 平成 28–29 年度理事長の選出
浦野 徹理事より，当会の理事長を浦野 徹とする提案があり，出席理事全員一致にて承認された。
理事会運営細則第 2 条にならい，以下の審議は浦野理事長を議長に実施された。
第 2 号議案 平成 28–29 年度常務理事の承認
浦野理事長から常務理事として久和 茂（理事長代行），小倉淳郎，杉山文博（以上，庶務担当），國田 智，山田靖子（以上，会計担当）が提案され，出席理事全員一致にて原案通り承認された。
第 3 号議案 平成 28–29 年度委員会の設置と各委員長の指名と承認
浦野理事長から編集委員会（桑原理事），学術集会委員会（伊川理事），財務特別委員会（渡部理事），国際交流委員会（吉木理事），広報・情報公開委員会（庫本理事），動物福祉・倫理委員会（大和田理事），定款・細則・規定等検討委員会（安居院理事），実験動物感染症対策委員会（林元理事），教育研修委員会（塩谷理事），実験動物管理者等研修制度委員会（久和理事），将来検討委員会（外尾理事），
動愛法等対策委員会（浦野理事長），人材育成委員会（越本理事）の設置（カッコ内は委員長）が提案され，出席理事全員一致にて原案通り承認された。なお，平成 28 年 9 月を目途に外部検証検討委員会（委員長未定）を立ち上げる予定であることが報告された。
以上をもって議案の審議を終了した。
審議終了後に浦野理事長の求めに応じ，事務局
より，理事会運営細則第 10 条に従い理事に対して平成 28–29 年度評議員推薦依頼と推薦日程の概
要が説明された。次いで，事務局より平成 28–29
年度役員就任にあたり必要な提出書類の説明が行われた。
また，平成 28 年度第 3 回理事会は 11 月 25 日（金）午前に実施し，当日の午後に平成 28 年度維持会
員懇談会が開催されることを確認した。
18 時に議長は閉会を宣し，解散した。
この議事録が正確であることを証するため，出席した理事長及び監事は記名押印する。

実験動物ニュースVol. 65

No. 3

平成 29 年度日本実験動物学会賞（功労賞，
安東・田嶋賞，奨励賞）
受賞候補者の推薦受付について
平成 29 年度日本実験動物学会賞の推薦を下記の要領で受け付けます。学会ホームページに推薦受付 http://www.jalas.jp/prize/suisen.html，推薦募集要領 http://www.jalas.jp/prize/suisenboshu.
html，表彰規程 http://www.jalas.jp/prize/prize-kitei.html，を掲載しておりますので，推薦募集要領および表彰規定に従いご応募下さい。
ご不明な点は事務局（Tel: 03-3814-8276 FAX: 03-3814-3990 e-mail: JDK06323@niﬂy.com）
までお問い合わせ下さい。
【受付期間】 平成 28 年 7 月 1 日（金）〜平成 28 年 9 月 30 日（金）必着【書類の提出先】 応募書類は簡易書留としてお送りください。
〒 113-0033 東京都文京区本郷 6 丁目 26-12 東京 RS ビル 3F
公益社団法人日本実験動物学会理事長 浦野 徹 宛

第 66 回日本実験動物学会総会大会長立候補者の受付について
第 66 回日本実験動物学会総会大会長の立候補を下記の要領で受け付けます。第 66 回総会の開催予定日は平成 31 年 5 月中旬ないし下旬です。
【受付期間】 平成 28 年 7 月 1 日（金）〜 10 月 31 日（月）（必着）【書類の提出先】 申請書類は簡易書留にてお送りください。
〒 113-0033 東京都文京区本郷 6 丁目 26-12 東京 RS ビル 3F
公益社団法人日本実験動物学会理事長 浦野 徹 宛
申請書類の様式及び定期大会開催に関する申し合わせについては学会ホームベージ定期大会
開催関係（http://www.jalas.jp/gakkai/teiki-kaisai.htm）に掲載されております。
不明な点は事務局（Tel: 03-3814-8276 FAX: 03-3814-3990 e-mail: JDK06323@niﬂy.com）まで
お問い合わせ下さい。

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実験動物ニュース44

Vol. 65

No. 3

第 7 回実験動物管理者等研修会の開催について
公益社団法人日本実験動物学会理事長
浦野徹

実験動物管理者等研修制度委員会委員長
久和茂（公社）日本実験動物学会（以下，本学会）が実験動物管理者等研修会を始めてから，はや 3 年が経ちました。おかげさまで，これまでに 700 名を超える多くの方々にご参加をいただきました。どうもありがとうございます。
第 7 回研修会を以下の要領で開催いたします。今回は「機関における動物実験の運営管理」に関する講義を追加しました。動物実験の運営管理に関わる方々にとって，大いに参考になるものと思います。
参加を希望される方は参加申込票に必要事項を記入し，本学会事務局宛に FAX（033814-3990）でお申し込みください。プログラムや参加方法の詳細は本学会のホームペー
ジ（http://jalas.jp/meeting/seminar.html）に掲載していますので，そちらでご確認ください。
第 7 回実験動物管理者等研修会
日時： 2016 年 9 月 16 日（金），17 日（土）いずれも 9:30 〜 16:30

場

所： 九州大学西新プラザ大会議室 AB〒 814-0002

福岡市早良区西新 2-6-23

http://nishijinplaza.kyushu-u.ac.jp/
参加費： 4,000 円（会員），5,000 円（非会員である維持会員団体職員），6,000 円（非会員）
定員： 150 名

その他： 受講者には資料を配布，受講修了証を発行
主催：（公社）日本実験動物学会

後

援： 環境省，厚生労働省，農林水産省，文部科学省

他（予定）実験動物ニュースVol. 65

No. 3

第 5 回実験動物科学シンポジウムの開催
下記の要領で第 5 回実験動物科学シンポジウムを開催します。
【テーマ】 医学研究を支える実験動物科学―サル類が果たす役割―【日 時】 平成 28 年 10 月 21 日（金）午後【場 所】 信州大学医学部附属病院外来棟 4 階大会議室【主 催】 公益社団法人日本実験動物学会，信州実験動物研究会
プログラム等の案内は日本実験動物学会ホームページ（http://www.jalas.jp/）に掲載します。

第 64 回日本実験動物学会総会の開催
テーマ：「ライフサイエンスが復興を促進する」

大会長：

大和田一雄（一般財団法人ふくしま医療機器産推進機構）期日：

平成 29 年 5 月 25 日（木）〜 27 日（土）内容：特別講演，シンポジウム，一般講演，LAS セミナー，市民公開講座，
器材展示，懇親会等

場

所：

ビックパレットふくしま（福島県産業交流館）〒 963-0115 福島県郡山市南二丁目 52 番地
電話：024-947-8010，FAX：024-947-8020
URL：http://www.big-palette.jp/

お問合せ先：第 64 回日本実験動物学会総会 事務局〒 164-0003 東京都中野区東中野 4-27-37（株）アドスリー内
TEL: 03-5925-2840 ／ FAX: 03-5925-2913

45実験動物ニュース

46

他

学

Vol. 65

会

No. 3

情

報

公益社団法人日本実験動物協会の動き
Ⅰ．第 32 回定時総会
本協会は平成 28 年 6 月 14 日に第 32 回定時総会を，東宝土地高橋ビルにおいて開催し，
平成 27 年度決算を承認した。貸借対照表はホームページに掲載する。
また，任期満了に伴い次期役員（平成 28 〜 29 年度）を選任した。次いで開催された理事会にて役職を次のとおり決定した。
◇役員
会長：福田勝洋（代表理事）

副会長 ：髙木博義（代表理事），吉川泰弘（業務執行理事），務臺衛（業務執行理事）

専務理事：田口福志（業務執行理事）
常務理事：武石悟郎（業務執行理事兼事務局長）
理事：日栁政彦（業務執行理事），橋本正晴（業務執行理事），外尾亮治（業務執行理事），三宅誠司（業務執行理事・新任），新井秀夫，浦野 徹，江利川智己，
齋藤敏樹，坂本雄二，椎橋明広，清水英男，関口冨士男

監事：柴田美佐男，夏目研二（新任）更に，永年にわたり監事として協会に貢献された夏目克彦氏に協会会長功労賞及び記念品を贈呈するとともに，委員として当協会事業に貢献された山田章雄氏，大島誠之助氏，
大和田一雄氏，並びに職員として当協会の運営に尽くされた工藤慈晃氏に会長感謝状と記念品を贈呈した。

実験動物ニュースVol. 6547

No. 3

実験動物感染症の現状

マウスロタウイルス渡邊利彦
中外製薬株式会社

1．病原体（ウイルス）病態も共通点が多い [27]。

マウスロタウイルス（MRV）は伝染性マウス幼仔下痢症（Epizootic diarrhea of infant mice: EDIM）の原
因ウイルスであり，レオウイルス科ロタウイルス属に属するエンベロープを持たない 2 本鎖 RNA ウイル
スである。
ロタウイルス属は外殻と内殻の 2 層のカプシドに覆われたコアシェルの中にウイルスゲノムが収められた 3 層構造をしている。ウイルスゲノムは 11 分節に分かれ，ウイルス粒子を形成する 6 種の構造タン
パク（VP1~6）と感染した細胞内で作られるがウイルス粒子には取り込まれない 6 種の非構造タンパク（NSP1~6）をコードしている。
ロタウイルス属は内殻を構成する VP6 の抗原性によって A 〜 H 群に分類され，MRV はヒトを含む種々の脊椎動物を宿主とする A 群に属している [26]。
MRV は 56℃ 30 分の加熱では完全に失活しないが，70℃ 15 分で失活する [24]。低 pH 溶液，非イオン性洗浄剤，タンパク分解酵素，エーテル，クロロホルム，
デオキシコール酸に抵抗性があり，フェノール，塩素あるいはエタノールを含む消毒剤によって失活する [9, 13]。
MRV には EB，EW，EC，EL，EHP，YR-1 など数種の株が報告されており [7, 20]，株によって病原性に違いが認められている [12]。

3．感染様式下痢を発症したマウスの糞便中には大量（糞便 1 g
中に 1011 個以上）のウイルス粒子が含まれ，糞便を介して経口感染する [9]。感染個体との直接接触による感染の他，ウイルスに汚染された浮遊塵埃や床敷きも感染源となる。MRV の感染力は非常に強く，施設内で急速に広がる。一方，胎盤を介した垂直感染は認められていない [1, 2]。
4．発生状況
ロタウイルスは，世界中で普遍的に見られる，下痢症の原因ウイルスの一つである。ヒトの場合，特に，小児に対して重篤な下痢を引き起こし，罹患患者の10％は入院となる [25]。
MRV の 発 生 状 況 は，Charles River Laboratories
International, Inc. が，北アメリカと東ヨーロッパの 2
つの研究施設で受託した各地域の研究機関からの血清サンプル（N = 466,572）を解析した報告がある [15]。
その結果，北アメリカ；0.56%，東ヨーロッパ；0.35%であった。日本国内の発生状況は極めて低いと考えられている [27]。
5．臨床症状2．宿主
MRV はマウスにのみ感染し，実験用マウスの感染はよく知られているが，野生マウスでの感染も報告されており，オーストラリアで捕獲されたイエハツ
カネズミ（Mus domesticus）では 74% が MRV 抗体陽性であったことが報告されている [19]。
ラットからもロタウイルス様のウイルスが分離された報告があるがよくわかっていない。各動物種には固有のロタウイルスが存在すると考えられており，

MRV に対する感受性は生後 2 週までのマウスが最も高く，水溶性黄色下痢，活動性低下（元気消失），
腹部膨大，被毛の汚れ等の症状を呈する [1, 5]。一方，
成熟したマウスでは明らかな臨床症状は見られない。
MRV の罹患率は高いが，発症しても乳仔は母乳を飲み続けることができ，死亡することはほとんどない。
死亡する例は，乾燥した糞便による肛門閉塞と関連していると考えられている。下痢は発症後 2 週以内に回復する [9]。

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実験動物ニュース

6．病変
下痢を発症したマウスの胃内には母乳が貯留し，腸内には大量の黄色粘液状消化物とガスが充満し膨張する。病変は主に空腸と回腸の絨毛尖端部の成熟上皮細胞に認められ，陰窩の変化は少ない。絨毛の粘膜上皮細は空砲化し，リンパ管の拡張，血管の鬱血により絨毛先端部が球状に膨らむ [1, 2, 18]。感染上皮細胞内には粗面小胞体に由来する小胞が認められ，多数のウイルス粒子，電子密度の高い顆粒状物
質および脂質が含まれる。ウイルスは小腸と大腸何れの上皮細胞内にも認められるが，小腸では絨毛の基部から尖端に向かってウイルスに対する感受性が高くなる。感染細胞の崩壊，剥離によってウイルスが腸管内に放出される [2]。
MRV の感染は年齢に関係なく起こるが，感染後の経過は年齢によって異なる。生後 1 週未満のマウスにウイルスを経口接種すると 3 時間後に胃，小腸，
大腸，22 時間後に血中，肝，脾，肺，30 時間後には腎，膀胱，尿，脳からウイルスが検出される。糞便からは接種 3 週後までウイルスが検出されるがその後消失する。下痢は接種 40 時間後から始まり，11
日後には回復する。ウイルスの複製は胃を除く十二
指腸から肛門の上皮細胞内で起こる。ウイルス血症
は 6 日後でも確認される [2]。また，成熟マウスは下痢を発症しないが少なくとも感染 17 日後までウイル
スを糞便中に排出し [9]，血清中からもウイルス抗原が検出されている [3]。
ヌードマウスはウイルスに対する感受性が通常マウスと差がなく，Eiden らの報告 [8] ではヌードマウ
ス，正常マウスとも下痢は感染後 3 日目から認められ 13 日目までに消失した。一方，SCID マウスは感受性が高く Riepenhoff-Talty らの報告 [21] では，下痢の持続期間が 15.5 日と正常マウスの約 2 倍長く，軟便は 16 日目以降も継続した。また，糞便中のウイル
ス は 正 常 マ ウ ス が 24 日 後 に 消 失 し た の に 対 し，SCID マウスでは 36 日後以降も検出された。さらに，
SCID マウスでは哺乳行動の減少も認められ臨床症状はより重度であった。また，T cell と B cell を欠損している Rag-1 欠損マウスと Rag-2 欠損マウスでも持続感染が成立する [21]。
7．ロタウイルスの感染と下痢発症機構
ロタウイルスは外殻のスパイクタンパク VP4 が細胞表面レセプターに吸着し，その後 VP4 と VP7 を脱殻して細胞内に侵入する [26]。細胞表面のレセプター
は O- 結合型シアル酸を含む糖タンパク質と言われてVol. 65

No. 3

いる [22]。
ロタウイルス感染による下痢の発症メカニズムとして，①小腸絨毛上皮細胞の破壊による吸収不良，②感染細胞内で産生され細胞外へ放出された NSP4による細胞膜の透過性亢進（細胞外に放出された
NSP4 は細胞膜上のホスホリパーゼ C‐イノシトール
三リン酸経路を活性化し，小胞体からの Ca2+ の放出を促す。その結果，細胞膜の Cl- 透過性が増大し，Cl– と水分の分泌が亢進する），③腸管神経系の活性化による水分と電解質の分泌亢進，④絨毛の虚血により上皮細胞の機能障害等が報告されている [16]。
MRV に感染した乳仔マウスでは腸管運動が亢進するとの報告があり [11]，腸管神経系が関与している [16]。
8．実験への影響
ロタウイルスは宿主の生理機能に種々の変化を及
ぼし，MRV に感染した哺育マウスでは病原性大腸菌による死亡が増加するとの報告がある [14]。また，
腸の酵素活性 [6] や吸収能 [10] が影響受けるとの報告もあるため，幼若マウスを用いた研究に影響する。
一方，ロタウイルスに感染したマウスはヒトのロタウイルス性下痢症モデルとして利用され，病原性発現機序の解明やワクチン開発に貢献している。
9．検査方法臨床診断と抗体検査により確定診断を行う。ウイルス抗原は，糞中や，感染 3 から 7 日目に血中に現れ る。 ス ク リ ー ニ ン グ 検 査 と し て は，multiplexed
fluorometric immunoassay (MFIA)， 確 定 診 断 に は，Indirect fluorescent antibody (IFA) が有効とされている[4, 15]。また，サル腎初代培養細胞や MA104 細胞を用いてトリプシン加培養液による回転培養により，腸内容物からウイルス分離が可能である [22]。
10．感染対策
感染を予防するために，野生マウスを動物施設から排除することや，定期的な抗体検査が有効とされている。また，胚移植か子宮摘出術が，新生児の感染防御に有効との報告がある。この他，動物に接触する器具等のオートクレーブ滅菌や，洗剤・酸化剤による徹底した消毒も感染予防として重要である[5]。

実験動物ニュースVol. 65

11．最後に
10.
海外では MRV 感染の発生報告があるが，日本国内の実態はよくわかっていない。感染しても致死に至ることは無いが，その後の生育などに影響を与えることから，特に自家繁殖のコロニーを持つ施設にとっては重要な感染症の一つである。免疫不全動物はもとより，遺伝子改変動物の繁殖生産については
予期せぬ影響が懸念される。日本国内の感染状況について調査を進める必要があると思われる。
文

11.

12.

献

1. Baker, D.G. 1998. Natural Pathogens of Laboratory
Mice, Rats, and Rabbits and Their Effects on Research Digestive System, Viruses, (iii) Mouse rotavirus.
Clin. Microbiol. Rev.11: 237.
2. Barthold, S.W. 1997. Murine Rotavirus Infection, Intestine, Mouse. Jones, T.C. et al. (eds.) Digestive
System (sec. ed.) Springer-Verlag Berlin Heidelberg.
p. 384.
3. Blutt, S.E., Fenaux, M., Warfield, K.L., Greenberg,
H.B., and Conner, M.E. 2006. Active Viremia in Rotavirus-Infected mice. J. Virol. 80: 6702–6705.
4. CDC. [Internet].Rotavirus, In: Epidemiology and Prevention of Vaccine-Preventable Diseases, The Pink
book, Course Textbook 13th ed. [Cited 11 Jan. 2016].
Available at http://www.cdc.gov/vaccines/pubs/pinkbook/downloads/rota.pdf
5. Charles river. [Internet]. Technical sheet: Mouse Rotavirus. [Cited 11 Jan. 2016]. Available at http://
www.criver.com/files/pdfs/infectious-agents/rm_ld_
r_mouse_rotavirus
6. Collins, J., Starkey, W.G., Wallis, T.S., Clarke, G.J.,
Worton, K.J., Spencer, A.J., Haddon, S.J., Osborne,
M.P., Candy, D.C., and Stephen, J. 1988. Intestinal
enzyme profiles in normal and rotavirus-infected
mice. J. Pediatr. Gastroenterol. Nutr. 7: 264–272.
7. Dunn, S.J., Burns, J.W., Cross, T.L., Vo, P.T., Ward,
R.L., Bremont, M., and Greenberg H.B. 1994. Comparison of VP4 and VP7 of five murine rotavirus
strains. Virology 203: 250–259.
8. Eiden, J., Lederman, H.M., Vonderfecht, S., andYolken, R. 1986. T-cell-deficient mice display normal
recovery from experimental rotavirus infection. J. Virol. 57: 706–708.
9. Held, N., Hedrich, H.J., and Bleich, A. 2011. Successful sanitation of an EDIM-infected mouse colony

13.

14.

15.

16.
17.

18.

19.

20.

21.

22.

No. 3

49

by breeding cessation. Lab. Anim. 45: 276–279.
Ijaz, M.K., Sabara, M.I., Frenchick, P.J., and Babiuk,
L.A. 1987. Assessment of intestinal damage in rotavirus infected neonatal mice by a D-xylose absorption
test. J. Virol. Methods. 18: 153–157.
Istrate, C., Hagbom, M., Vikström, E., Magnusson,
K.E., and Svensson, L. 2014. Rotavirus infection increases intestinal motility but not permeability at theonset of diarrhea. J. Virol. 88: 3161–319.
McNeal, M.M., Belli, J., Basu, M., Choi, A.H., andWard, R.L. 2004. Discovery of a new strain of murine
rotavirus that is consistently shed in large quantities
after oral inoculation of adult mice. Virology 320:
1–11.
Much, D.H. and Zajac, I. 1972. Purification and characterization of epizootic diarrhea of infant micevirus. Infect. Immun. 6: 1019–1024.
Newsome, P.M. and Coney, K.A. 1985. Synergistic
rotavirus and Escherichia coli diarrheal infection of
mice. Infect. Immun. 47: 573–574.
Pritchett-Corning, K.R., Cosentino, J., and Clifford,
C.B. 2009. Contemporary prevalence of infectious
agents in laboratory mice and rats. Lab. Anim. 43:
165–173.
Ramig, R.F. 2004. Pathogenesis of Intestinal and Systemic Rotavirus Infection. J. Virol. 78: 10213–10220.
Riepenhoff-Talty, M., Dharakul, T., Kowalski, E. Michalak, S., and Ogra, L.P. 1987. Persistent rotavirus
infection in mice with severe combined immunodeficiency. J Virol. 161: 3345–3348.
Rodriguez-Toro, G. 1980. Natural epizootic diarrhea
of infant mice (EDIM): a light and electron microscope study. Exp. Mol. Pathol. 32: 241–252.
Smith, A.L., Singleton, G.R., Hansen, G.M., andShellam, G. 1993. A serologic survey for viruses andMycoplasma pulmonis among wild house mice (Musdomesticus) in southeastern Australia. J. Wildl. Dis.
29: 219–229.
Ushijima, H., Morikawa, S., Mukoyama, A., and Nishio, O. 1955. Characterization of VP4 and VP7 of amurine rotavirus (YR-1) isolated in Japan. Jpn. J.
Med. Sci. Biol. 48: 237–247.
VanCott, J.L., McNeal, M.M., Flint, J., Bailey, S.A.,
Choi, A.H., and Ward, R.L. 2001. Role for T cell-independent B cell activity in the resolution of primaryrotavirus infection in mice. Eur. J. Immunol. 31:
3380–3387.
Willoughby, R.E. 1993. Rotaviruses preferentially

50

実験動物ニュース

bind O-linked sialylglycoconjugates and sialomucins.
Glycobiology 3: 437–445.
23. 有川次郎．2000．ウイルス性疾患．pp. 156．実
験動物感染病の対応マニュアル（前島一淑監修），
アドスリー , 東京．
24. 岩井 浤．1985．マウスロタウイルス性腸炎．
pp. 196–198．実験動物感染病学（藤原公策編），
ソフトサイエンス社，東京．

Vol. 65No. 3

25. 河島尚志，渡邉知愛子，五百井寛明．2006．ロ
タウイルスの最近の話題．モダンメディア 52:
371–376.
26. 河本聡志，谷口孝喜．2014．1. ロタウイルス．
ウイルス 64: 179–190.
27. 公益法人日本実験動物協会編．2015．マウスロ
タウイルス．pp. 44–45．実験動物の感染症と微生物学的モニタリング．アドスリー，東京．

実験動物ニュースVol. 65

No. 3

Experimental Animals—和 文 要 約—Vol. 65, No. 3 July 2016

原著
コモン・マーモセット新生子卵巣のガラス化保存 ................................................189–196
本橋秀之 1, 2)・石橋英俊 1, 3)（独）国立精神・神経医療研究センター 神経研究所，2) 現所属：岡山大学生殖補助医療技術教育
研究センター，3) 現所属：東京医科大学動物実験センター

1)

卵巣内には数多くの未成熟卵子が含まれているが，非ヒト霊長類新生子卵巣の凍結保存については，まだ十分に調査されていない。本研究では，非ヒト霊長類であるコモン・マーモセッ
ト新生子卵巣におけるガラス化保存 ・ 加温後の凍結損傷について調査を行った。卵巣全体の凍結保存のためのデバイスとしてクライオトップを用い，ガラス化保存を行った。ガラス化保存 ・ 加温後の卵巣の外観は，新鮮卵巣と同等であり，組織学的評価において，組織切片の単位
面積あたりの正常形態卵子の数に有意差は認められなかった。しかしながら，卵巣を解離した細胞群の解析において，ガラス化保存 ・ 加温後の細胞生存性は，減少する傾向が認められた。
コメットアッセイの結果においては，DNA 損傷に有意な差は認められなかった。以上の結果，本研究におけるガラス化法を用いたマーモセット新生子卵巣の凍結保存は，卵巣全体の保存法として有用である可能性を示した。

ROS 産生オキシダーゼ Nox1 は大腸炎からの上皮再生に必要である ....................197–205
加藤真良 1)・丸茂雅哉 1)・中山 淳 2)・松本みさき 3)・矢部千尋 3)・鎌田 徹 1)
1)
3)

信州大学医学部分子細胞生化学教室，2) 信州大学大学院医学系研究科分子病理学教室，
京都府立医科大学大学院病態分子薬理学教室

内在性代謝酵素から産生される活性酸素（reactive oxygen species: ROS）が様々な細胞内機構にシグナル分子として関与することが知られてきた。NADPH oxidase（Nox）ファミリーは，この細胞内 ROS の主要な発生源である。特に，スーパーオキサイド（O2–）を産生する Nox1は，大腸上皮組織によく発現しており，大腸の正常な生理過程や疾患に関与すると考えられてきた。
しかし，大腸炎からの回復過程で，Nox1 が如何なる役割を果たすのかはまだよくわかっていなかった。本研究で，我々は，マウスでの大腸炎モデルを用いて，この問題を追究した結果，次のことを明らかにした。Nox１遺伝子欠損（Nox1KO）マウスでは，dextran sulfate sodium（DSS）
によってひきおこされた大腸炎からの回復が，粘膜上皮の修復異常により，野生型マウスに比べて遅延した。このとき，Nox1KO の大腸 crypt では腸上皮細胞の増殖，生存活性，遊走性，および goblet cell への分化が抑制されることが判明した。さらに，野生型マウスでは，大腸炎からの回復過程で，腸上皮細胞における Nox1 の発現と Nox1 由来の ROS 産生が上昇するが，それらをNox1 欠損が抑制した。以上の結果から，Nox1 は障害を受けた大腸上皮細胞の修復を通して，大腸炎からの回復過程で重要な媒介的役割を果たすことが示唆された。

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実験動物ニュース52

Vol. 65

No. 3

Cav2.1 変異 tottering-6j マウスの小脳におけるタンパク発現解析 ..........................207–214
金 泰延・新美君枝・高橋英機
理化学研究所脳科学総合研究センター動物資源開発支援ユニット

神経型電位依存性 Ca2+ チャネル（Cav）は，神経伝達物質の放出，神経細胞の興奮，遺伝子の発現，神経細胞の生存性などの機能を制御し，α1，α2/δ，β，γ のサブユニットからなる。Tottering-6j マウスは，Cav2.1 のチャネル孔を有する α1 サブユニットの遺伝子 cacna1a の一塩基変異により，α1 サブユニットのドメイン I 内の S4 から S6 の領域が一部欠損し，運動機能障害と発作を示す常染色体劣性の変異マウスである。本研究では小脳での calbindin D-28K（Calb1），calretinin（Calb2），tyrosine hydroxylase（TH），zebrin II，ryanodine receptors 1（Ryr1），
ryanodine receptor 2（Ryr2），ryanodine receptor 3（Ryr3）の発現検討をしたところ，tottering-6j
マウスは野生型マウスに比べ TH，zebrin II，Ryr3 の発現が高く，Calb2 の発現が低かった。これらの結果により，tottering-6j マウスはタンパクの発現機能を理解するのに有用なモデルであることが示唆された。

シルデナフィルがモノクロタリン誘発性肺高血圧症ラットの右心機能へ及ぼす影響..............................................................................................................215–222
吉行里依子 1)・田中 綾 1)・福島隆治 1)・町田 登 2)
1)

東京農工大学農学部獣医外科学研究室，2) 東京農工大学農学部臨床腫瘍学研究室

シルデナフィルはホスホジエステラーゼ 5 阻害薬であることから肺血管拡張作用を示し，肺高血圧症（PH）の治療薬として利用されている。これまでの報告ではシルデナフィルによるPH 患者の臨床症状および運動機能の改善が認められているが心臓超音波検査による右心機能への影響は十分に検討されていない。このことから本研究では植物性アルカロイドであるモノ
クロタリン（MCT）を用いてラットに PH を誘発し，シルデナフィルが右心機能へ及ぼす影響について検討した。Sprague-Dawley 系ラット，12 週齢，雄，54 匹を用いた。1 群は生理食塩水を投与するコントロール群としての saline 群（n=18)とし，もう1 群は MCT を単回皮下投与した
Placebo 群としての MCT 群（n=18）とした。さらにもう1 群は MCT 投与後にシルデナフィルを経口投与する MCT/sildenafil 群（n=18）とした。各群 6 匹ずつ，計 6 週間，2 週間毎に心臓超音波
検査後に心臓カテーテル検査による右室収縮期圧（RVSP）を測定した。その結果，シルデナフィ
ルによりRVSP は有意に低下し，心室中隔の扁平化の指標である Eccentricity index は数値が低下した。拡張機能の指標である右室 E/A は MCT/sildenafil 群と saline 群との間に数値の差が認められなかった。本研究ではシルデナフィルによって右心機能計測指標が改善したことから，
シルデナフィルの投与は RVSP の上昇抑制効果とともに右心機能の改善効果をもたらすことが明らかになった。また，シルデナフィルの投与による PH の改善を示唆する心機能指標が明確になったと考えられた。

実験動物ニュースVol. 65

No. 3

ラットのイソフルラン吸入麻酔におけるミダゾラム，ブトルファノールの併用効果 .................................................................................................................223–230
塚本篤士 1)・内田佳歩 1)・前里静香 1)・佐藤礼一郎 2)・金井泳一 3)・猪股智夫 1)1)
3)

麻布大学獣医学部実験動物学研究室，2) 麻布大学獣医学部獣医内科学第三研究室，
麻布大学獣医学部獣医放射線学研究室

イソフルランはラットにおける代表的な吸入麻酔薬であるが，呼吸抑制が強いとされている。人医療，獣医療では，吸入麻酔における麻酔効果の補完を目的に，麻酔前投与薬が用いられている。本研究ではラットのイソフルラン吸入麻酔におけるミダゾラム，ブトルファノール（MB）の併用効果を検討した。雄 Sprague Dawley ラットをイソフルラン単独麻酔群，ミダゾラ
ム - ブトルファノール併用麻酔群（MBI 群）の 2 群に分けた。まず，両群における最小肺胞内濃度（MAC）を算出した。麻酔導入時における副作用の発生頻度ならびに導入時間，覚醒時間を評価した。各群で得られた MAC からイソフルランの維持麻酔濃度を決定し，バイタルサインを麻酔後 1 時間，5 分おきに計測した。各群の各種バイタルサイン変動係数を算出することで，その不安定度を評価した。MBI 群ではイソフルラン単独麻酔と比較して MAC が 32％低下した（イソフルラン単独麻酔：1.30±0.09%，MBI: 0.87±0.08%）。また，MB の前投与により速やかかつ十分な鎮静効果が得られ，さらに導入時における副作用の発生頻度の減少を認めた。MBI
群では呼吸数が安定推移し，変動係数がイソフルラン単独麻酔群と比較して減少した。SPO2はイソフルラン単独麻酔群において麻酔後一貫した低下を認めたのに対し，MBI 群ではいず
れの時間においても有意な低下を認めなかった。以上のことから，MB の前投与は，イソフル
ランによる呼吸抑制の緩和と，速やかな導入を可能にし，ラットにおける麻酔法の新たな選択肢になると考えられた。

広範囲の組織における時期特異的遺伝子改変のためのタモキシフェン誘導型
Cre ドライバーマウス系統の樹立 ..........................................................................231–244
市瀬広武 1)・堀 暁子 1)・塩澤誠司 1)・近藤小貴 2)・鐘ヶ江裕美 2)・斉藤 泉 2)・
市瀬多恵子 1)・吉田進昭 1)1)2)

東京大学 医科学研究所 システム疾患モデル研究センター 発生工学研究分野，
東京大学 医科学研究所 遺伝子解析施設

マウスにおけるリガンド誘導型 Cre を利用した時期特異的遺伝子改変は，遺伝子改変に起因する胎生致死を回避し，成獣での表現型解析を可能とするうえで重要な技術である。本研究では，広範囲の組織での時期特異的遺伝子改変のための，タモキシフェン誘導型 Creドライバー
マウス系統を作出した。CM32 と名付けた新系統は，FLP 組換え前には GFPneo 融合タンパク質を広範囲の組織で発現し，組換え後にはタモキシフェン誘導型 Cre タンパク質を発現する。
生殖系列における FLP 組換えで GFPneo カセットを除去した CM32Δ マウスとCre レポーターマ
ウスを用いて，タモキシフェンの投与前および投与後における Cre 組換え効率を検討し，タモ
キシフェンに依存した Cre 組換えが成獣の各種組織において起こることを確認した。さらに，
CM32Δ マウスを用いて，成獣での癌遺伝子の発現誘導が可能であることを示した。Cre 組換えに依存して SV40 ラージ T 抗原を発現するトランスジーンを有する CM32Δ;T26 マウスは，正常に生育して生殖能力にも問題がなく，生後 3 か月までは異常を呈さなかった。タモキシフェンに依存しないバックグラウンドレベルの Cre 組換えによって，生後 6 か月までに松果体芽腫や胸腺肥大を呈するものの，タモキシフェン投与によって皮膚表皮の過形成を呈した。以上の結果より，CM32Δ マウスは floxed アレルを有する成獣マウスの表現型解析に有用であると考え
られる。

53

実験動物ニュース54

Vol. 65

No. 3

Hirschsprung disease is associated with an L286P mutation in the fifthtransmembrane domain of the endothelin-B receptor in the
N-ethyl-N-nitrosourea-induced mutant line............................................................... 245–251
Bing Chen1–3), Hui-Ling Ouyang2), Wen-Hua Wang2), Yi-Heng Yin2),
Lin-Na Yan2), Bin Yang2), and Zheng-Feng Xue1–3)
1)Comparative Medicine Center, Yangzhou University, Yangzhou, P.R. China, 2)College of Veterinary
Medicine, Yangzhou University, Yangzhou, P.R. China, 3)Jiangsu Co-innovation Center for Prevention
and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou University, Yangzhou,
P.R. China

Hirschsprung disease (HSCR), or colonic aganglionosis, is a congenital disorder characterized
by the absence of intramural ganglia along variable lengths of the colon, resulting in intestinal
obstruction. It is the most common cause of congenital intestinal obstruction, with an incidence of
1 in 5,000 live births. N-ethyl-N-nitrosourea (ENU)-induced mutagenesis is a powerful tool for the
study of gene function and the generation of human disease models. In the current study, a novel
mutant mouse with aganglionic megacolon and coat color spotting was generated by ENU-induced
mutagenesis. Histological and acetylcholinesterase (AChE) whole-mount staining analysis showeda lack of ganglion cells in the colon in mutant mice. The mutation was mapped to chromosome 14
between markers rs30928624 and D14Mit205 (Chr 14 positions 103723921 bp and 105054651
bp). The Ednrb (Chr 14 position 103814625–103844173 bp) was identified as a potential candidate
gene in this location. Mutation analysis revealed a T>C missense mutation at nucleotide 857 of thecDNA encoding endothelin receptor B (EDNRB) in which a proline was substituted for the highly
conserved Lys-286 residue (L286P) in the fifth transmembrane (TM V) domain of this G proteincoupled receptor. The mutant mouse was named Ednrbm1yzcm (Ednrb; mutation 1, Yangzhou University
Comparative Medicine Center). The results of the present study implicate the structural importance of
the TM V domain in Ednrb function, and the Ednrbm1yzcm mouse represents a valuable model for the
study of HSCR in humans.

ブタ精巣におけるマウス CaBS1 タンパクのホモログの同定，局在および機能解析 .................................................................................................................253–265
Hossam H. SHaWKi1, 2)・木越琢海 1)・加藤侑希 3)・松田 学 1)・Chioma M. ugBOMa2)・
高橋 智 2)・大石久史 2)・川島明弘 1)
1)
3)

筑波大学人間総合科学研究科生殖生化学，2) 筑波大学人間総合科学研究科解剖学，
茨城県立医療大学保健医療学部人間科学センター

我々は，以前マウスにおいて，精子細胞に発現し，成熟精子の鞭毛に分布するカルシウム
結合タンパク質 CABS1 を同定した。一方で，男性生殖系における生理学的役割は明らかとなってない。本研究では，ブタにおける CABS1（pCABS1）の局在および役割を明らかにすることを目的とした。まず pCABS1 の mRNA 全長配列を決定した。また，CABS1 抗体を用いたWestern blot 解析を行ったところ，精巣では 75 kDa と 70 kDa の 2 つのバンド，精巣上体精子では 70 kDa のバンドを認めた。さらに，精細管内では長頭形精子細胞に，精巣上体精子では，鞭毛と先体に発現を認めた。また，アミノ酸配列から，pCABS1 は，膜タンパクであることが予想され，成熟精子を抗 CABS1 抗体で処理すると，有意に先体反応の減弱を認めた。本研究結果
は，pCABS1 が，先体反応中のカルシウム・シグナリングに関与することを示唆する。

実験動物ニュースVol. 65

No. 3

人工飼育したマウスは高い不安行動を示す ...........................................................267–274
安田秀美・原馬明子・加藤真紀・大友ゆき・畑中えりさ・守口 徹
麻布大学生命 ･ 環境科学部

新生児や乳幼児期の栄養学的，薬理学的な研究には，実験動物の新生仔哺育手技を確立することが重要である。母乳の影響を受けない人工哺乳法による飼育技術は，新生仔栄養の検討に非常に有効である。我々は出生後 48 時間以内に母獣から分離し，人工乳で新生仔を人工哺育法により育て，9 週齢時に高架式十字迷路試験（EPM）を用いて情動行動を評価した。人工飼
育マウスは，母獣飼育マウスよりも EPM オープンアームへの進入及び覗き込み回数の有意な低下が認められた。また，行動試験終了後の人工飼育マウスの脳内モノアミン濃度は，海馬セ
ロトニン，
5-HIAA，
ノルエピネフリンが，母獣飼育マウスに比べて有意に高かった。したがって，誕生早期に母子分離され，人工飼育により哺育成長したマウスの不安レベルは，通常の母獣飼育よりも著しく高いことが示された。これらの結果は，授乳期間中の栄養以外の母親とのスキンシップが新生児の情緒的発達のために非常に重要であることを示唆している。今後の課題
としては，人工飼育による情動行動への影響を軽減できるような環境，条件を検討する必要がある。

Cas9 変異体および crRNa/tracrRNa を用いた CRiSPR/Cas9 システムによる遺伝子改変マウスの高効率な生産..........................................................................275–283
寺尾美穂 1)・玉野萌恵 1)・原 聡史 1)・加藤朋子 1)・木下政人 2)・高田修治 1)
1)
2)

国立成育医療研究センター研究所システム発生・再生医学研究部，
京都大学農学研究科応用生物科学専攻海洋生物機能学分野

CRISPR/Cas9 システムに代表されるゲノム編集技術は，これまでの遺伝子改変システムに比べて高効率に遺伝子改変を行うことができる。CRISPR/Cas9 システムは短い一本鎖ガイド
RNA（sgRNA）と DNA 切断酵素 Cas9 の組み合わせで DNA 二本鎖切断を誘導する。しかしガ
イド RNA が標的配列以外に結合し DNA 切断（オフターゲット効果）を引き起こすリスクを持っていると同時に，sgRNA の作製には一週間程度の時間を要することが問題としてあげられる。
本研究では，
化学的に合成された CRISPR RNA（crRNA）
および trans-activated crRNA（tracrRNA）
を sgRNA の代わりに用い，2 種類のガイド RNA を必要とする Cas9 変異体（Cas9D10A あるいは FokI-dCas9）とともにマウス受精卵へマイクロインジェクションし，この組み合わせによっても野生型 Cas9 と同様に，高効率に遺伝子改変マウスを作出することが可能であることを実験的に示した。これらの結果から，crRNA および tracrRNA と Cas9 変異体の組み合わせでマイクロインジェクションを行う本研究の方法は，ハイスループットかつオフターゲットのリスクを最大限抑えた遺伝子改変動物の作出法であると考えられた。

55

実験動物ニュース56

Vol. 65No. 3

ツパイ周期性寒冷ストレスモデルの樹立と NRSF を標的とした
C737 化合物の評価 .................................................................................................285–292
池 海英 1, 2)・永野希織 1, 2)・Sayeh ezzikouri3)・山口千穂 1, 2)・Kayesh MeH2)・
Khadija R2)・Bouchra K2)・中野洋文 4)・小路弘行 4)・小原道法 5)・小原（築山）恭子 1, 2)
鹿児島大学共同獣医学部附属越境性動物疾病制御研究センター，2) 鹿児島大学共同獣医学部動物衛生学分野，3) モロッコパスツール研究所，4)PRiSM BioLab 社，5) 東京都医学総合研究所

1)

ツパイは，ヒトに近い遺伝情報を持ち，チンパンジーしか自然感染系のない B 型肝炎ウイル
スや C 型肝炎ウイルスに感染感受性を持つ。また，ツパイの神経伝達物質の受容体は霊長類のものに高い相同性を持つ。冷温と室温を 30 分ごとに移動させる負荷（Intermittent Cold Stress;
ICS）はほ乳類に鬱に似た行動を引き起こし，遺伝子のプロモーターにヒトの神経疾患で見られる様な修飾が生じる。Neuron-restrictive silencing factor（NRSF）は神経特異的な機能で作用する遺伝子を制御する。我々は，NRSF のヘリックス構造を模倣した化合物 C737 を合成し，ICS への作用を評価した。ICS により，体温や体重の減少が見られるが，C737 を投与すると特に雌で体温や体重の減少が抑制された。この効果は，陽性コントロールである抗鬱薬アゴメ
ラチンよりも強い効果であった。以上の結果から，非霊長類のモデルであるツパイを用いて，
NRSF を標的とする新規化合物 C737 が，雌に多い ICS に誘導される鬱病等の神経疾患に有効である可能性が示唆された。

アスパルトアシラーゼ遺伝子は本態性振戦の発症に関与する ..............................293–301
西谷あい 1)・田中美有 1)・清水佐紀 2)・國澤直史 2)・横江繭子 1)・吉田裕作 3)・鈴木登志郎 3)・
佐久間哲史 4)・山本 卓 4)・桑村 充 5)・竹中重雄 6)・大野行弘 2)・庫本高志 1)
京都大学大学院医学研究科附属動物実験施設，2) 大阪薬科大学薬品作用解析学，3) 日本エスエルシー
株式会社バイオテクニカルセンター，4) 広島大学大学院理学研究科，5) 大阪府立大学獣医病理学，
6)
大阪府立大学細胞分子生物学

1)

本態性振戦とは，病態の不明な振戦のことをいう。振戦の中で最も頻度の高い疾患である。
TRM/Kyo ラットは振戦を示す自然発症ミュータントラット系統で，本態性振戦のモデルとして確立された。最近，我々は，TRM ラットにおける振戦の発症には 2 つの座位における変異が必要であることを示した。
ひとつはHCN1チャネルのA354Vミスセンス変異（Hcn1A354V）
であり，もうひとつは，tm 欠失変異である。しかし，tm 欠失変異には，少なくとも13 個の遺伝子が含まれており，
そのうちどの遺伝子が本態性振戦の発症に係るかは未解明であった。本研究では，
Aspa/Hcn1 ダブルミュータントラッ
13 個の遺伝子のうち Aspartoacylase（Aspa）遺伝子に着目し，トを作製し，振戦の発症を確認することで，TRM ラットの振戦発症に係る原因遺伝子を同定することを目的とした。TALEN 法により Aspa ノックアウトラットを作製した。2 ラインが得られ，いずれのラインもナンセンス変異を持ち，ASPA タンパク質の発現は確認されなかった。
次いで，Hcn1A354V をもつ WTC ラットとの交配から Aspa/Hcn1 ダブルミュータントラットを得た。このダブルミュータントラットは，離乳時ごろから TRM ラットと同様の振戦を示した。また，振戦は本態性振戦の治療薬により抑制された。以上の結果から，Aspa 遺伝子は，TRM ラッ
トの本態性振戦の原因遺伝子と判断した。Aspa/Hcn1 ダブルミュータントラットの振戦は，ヒト本態性振戦と類似している。今後，
このラットを用いて，本態性振戦の発症機序解明や，予防，治療法の開発が期待される。

実験動物ニュースVol. 65No. 3

二酸化塩素ガスによる消毒効果の検討 ..................................................................303–310
白崎康文 1)・松浦 歩 2)・植艸雅士 2)・伊藤由広 2)・林 俊昭 2)
1)

第一三共 RD ノバーレ（株）生物評価研究部，2) ハムリー（株）

二酸化塩素ガスの発生方法および殺菌効果について検討を行った。容積 87 m3 の室内を湿度
約 80％に加湿し，亜塩素酸ナトリウム（Purogene）にリン酸を 10:1 の割合で加え二酸化塩素ガ
スを発生させた。その際，同室内の壁，床，天井面に黄色ブドウ球菌および大腸菌を接種，定着させた濾紙あるいは二酸化塩素空間殺菌用バイオロジカルインジケーター（BI，指標菌 ：Bacillus atrophaeus）を設置した。二酸化塩素ガスは，亜塩素酸ナトリウムの容量（0.25 〜 20.0
ml/m3）に応じて上昇し，ガス発生後 2 〜 3 時間に最大 0.8 〜 41 ppm に達した。その後緩やかに低下し，24 時間後には最大濃度値の 3％以下になった。室内の高低差によるガス濃度に差はなく，ガスは室内に均一に拡散した。亜塩素酸ナトリウム1.0 ml/m3 でガス（最大ガス濃度 ： 3ppm）を発生させたところ，黄色ブドウ球菌および大腸菌のコロニーは全く検出されなかった。
BI を用いた検討において，4.0 ml/m3 の容量（最大ガス濃度：10.6 ppm）で指標菌の殺滅効果が確認された。ガスを 20 回以上暴露した後でも，コンピューターなどの精密機器は正常に作動した。今回用いたガス化法は，高価なガス発生装置を必要とせず，ガスの発生 ・ 統御が容易で殺菌効果も認められ，ホルマリンガスに代わる有効かつ簡便な消毒方法であると考えられる。

カニクイザルにおける MRi を用いた移植細胞の動態追跡について ....................... 311–318
藤城（伊藤）康世 1, 2)・鯉江 洋 2)・柴田宏昭 1)・岡林佐知 3)・片貝祐子 3)・大野智恵子 3)・
金山喜一 2)・保富康宏 1, 4)・揚山直英 1)
国立研究開発法人医薬基盤・健康・栄養研究所霊長類医科学研究センター，2) 日本大学生物資源
科学部獣医学科獣医生理学研究室，3) 予防衛生協会，4) 三重大学大学院医学系研究科病態解明医学講座免疫制御分野

1)

現在，冠動脈症候群やバージャー病等の様々な疾患に対して，幹細胞移植による再生医療の臨床適応が注目されている。例えば，心筋梗塞部位に幹細胞を移植することにより，虚血性心不全の革新的な治療効果が期待できるとされている。小型の実験動物を用いた基礎研究では，移植によって局所の血流や心機能の改善が報告されている。一方，MRI は，非侵襲的に超常磁性酸化鉄微粒子（以下 SPIO）で標識された移植細胞の識別と追跡が可能である。また，患者に対する再生医療の臨床適応が行われているものの，いまだ移植細胞の運命は解明されておらず，回復後におけるいくつかの有害事象も確認されている。そこで本研究ではヒトに近縁な
カニクイザルに静脈および筋肉注射によって移植された SPIO 標識末梢血単核球を 3 テスラのMRI を用いて動態追跡を実施し，評価を行った。その結果，標識細胞は肝臓および腓腹筋において，T1 および T2 強調画像にて確認され，組織学的にはベルリンブルー染色にて集簇像が確認された。また，本研究の細胞動態追跡施行過程において移植個体に対する臨床上の異常所見は認められなかった。これらの結果により，SPIO 標識細胞を移植されたカニクイザルにおける MRI を用いた評価手法は，移植細胞の体内動態追跡のための，安全かつ有効なシステムである事が証明された。本システムは再生医療における治療メカニズムを明らかにするための一助となる事が期待される。

57

実験動物ニュース58

Vol. 65

No. 3

CRiSPR/Cas9 によるバイシストリック ins1-cre ノックインマウスの開発 ...........319–327
長谷川賀一 1)・星野貴一 1, 2)・abdelaziz e. ibrahim1, 3)・加藤花名子 1)・大徳陽子 1)・
谷本陽子 1)・池田祥久 1, 4)・大石久史 1)・高橋 智 1, 5)・吉木 淳 6)・八神健一 1)・
伊関大敬 1, 5)・水野聖哉 1)・杉山文博 1)
筑波大学生命科学動物資源センター，2) 星野試験動物飼育所，3) スエズ運河大学獣医学部，
日本チャールス・リバー株式会社，5) 筑波大学国際統合睡眠医科学研究機構，
6)
理化学研究所バイオリソースセンター

1)

4)

本研究において我々は膵島 β 細胞特異的な遺伝子組換えのための新規 cre ドライバーマウ
ス開発を目的とした。CRISPR/Cas9 システムを用い Ins1 遺伝子のストップ配列直前部位を 2A
配列融合 cre 遺伝子挿入の標的とした。C57BL/6J-Ins1em1(cre)Utr マウスは gRNA と Cas9 をコードする pX330 及び DNA ドナープラスミドの受精卵前核導入により作製された。
（R26GRR ×em1(cre)Utr
C57BL/6J-Ins1）F1 マウスは胎仔及び成体で cre-loxP 遺伝子組換えが組織学的に解析され，全ての膵島においてインスリン陽性細胞の殆どは赤色蛍光を示し，β 細胞特異的な遺伝
子組換えが示唆された。さらにホモ及びヘテロ C57BL/6J-Ins1em1(cre)Utr の耐糖能は野生型マウスと有意差が観察されなかった。これらの結果より，C57BL/6J-Ins1em1(cre)Utr はグルコース代謝研
究に有用であり，CRISPR/Cas9 システムを用いたバイシストロニック cre ノックインマウスの作製戦略は creドライバーマウス作製において有用な方法であると思われる。

実験動物ニュースVol. 65 No. 3

維持会員（五十音順）（88 社）（平成 28 年 4 月 30 日現在）
会

員

名

〒

住

（株）IHI

東京都江東区豊洲 3-1-1（株）アイセイ

大阪府和泉市唐国町 1-6-1

135-8710
594-1151
旭化成ファーマ（株）
410-2321
味の素（株）
210-8681
あすか製薬（株）
213-8522
アステラスリサーチテクノロジー（株） 305-8585（株）アニマルケア
160-0022（株）アニメック
183-0031
EPS 益新（株）LSG 事業部
162-0821（株）イナリサーチ399-4501
エーザイ（株）
300-2635（株）LSI メディエンス
314-0255（株）大塚製薬工場
772-8601
小野薬品工業（株）
913-0032
小原医科産業（株）
165-0022
オリエンタル酵母工業（株）
174-8505
花王（株）
321-3497（一財）化学及血清療法研究所
869-1298
科研製薬（株）426-8646
鹿島建設（株）107-0052
北里第一三共ワクチン（株）
364-0026
北山ラベス（株）
396-0025
キッセイ薬品工業（株）
399-8304
九動（株）
841-0075
共立製薬（株）
300-1252
協和発酵キリン（株）富士リサーチパーク 411-0943
クミアイ化学工業（株）
439-0031
Crimson Interactive Pvt. Ltd.
（株）クレハ169-8503（株）ケー・エー・シー
604-8423
興和（株）
189-0022
三協ラボサービス（株）
132-0023
参天製薬（株）
630-0101（株）三和化学研究所
511-0406（株）ジェー・エー・シー
153-0043
シオノギテクノアドバンスリサーチ（株） 520-3423（公財）実験動物中央研究所
210-0821
清水建設（株）
104-0031

所

静岡県伊豆の国市三福 632-1
神奈川県川崎市川崎区鈴木町 1-1
神奈川県川崎市高津区下作延 5-36-1
茨城県つくば市御幸が丘 21
東京都新宿区新宿 5-18-14 新宿北西ビル 7F
東京都府中市西府町 3-17-4
東京都新宿区津久戸町 1-8 神楽坂 AK ビル 8F
長野県伊那市西箕輪 2148-188
茨城県つくば市東光台 5-1-3
茨城県神栖市砂山 14-1
徳島県鳴門市撫養町立岩字芥原 115
福井県坂井市三国町山岸 50-10
東京都中野区江古田 4-28-16
東京都板橋区小豆沢 3-6-10
栃木県芳賀郡市貝町赤羽 2606
熊本県菊池市旭志川辺 1314-1
静岡県藤枝市源助 301
東京都港区赤坂 6-5-11
埼玉県北本市荒井 6-111
長野県伊那市荒井 3052-1
長野県安曇野市穂高柏原 4365-1
佐賀県鳥栖市立石町惣楽 883-1
茨城県つくば市高見原 2-9-22
静岡県駿東郡長泉町下土狩 1188
静岡県菊川市加茂 3360
1001, 10th Floor, Techniplex-II, Veer Savarkar Flyover,
S. V. Road, Goregaon (W), Mumbai 400062, India
東京都新宿区百人町 3-26-2
京都府京都市中京区西ﾉ京西月光町 40
東京都東村山市野口町 2-17-43
東京都江戸川区西一之江 2-13-16
奈良県生駒市高山町 8916-16
三重県いなべ市北勢町塩崎 363
東京都目黒区東山 1-2-7 第 44 興和ビル 3 階
滋賀県甲賀市甲賀町五反田 1405
神奈川県川崎市川崎区殿町 3-25-12
東京都中央区京橋 2-16-1 8 階

lxi
iii

実験動物ニュース会員

名

昭和セラミックス（株）〒

486-0934（有）新東洋製作所
334-0073（株）新日本科学安全性研究所
891-1394554-8558
住友化学（株）（株）精研
542-0081
清和産業（株）132-0033
ゼリア新薬工業（株）
360-0111
全国農業協同組合連合会飼料畜産中央研究所 300-4204
第一三共（株）134-8630
大正製薬（株）331-9530
ダイダン（株）102-8175
武田薬品工業（株）
251-0012
田辺三菱製薬（株）
227-0033
412-8513（株）中外医科学研究所
中外製薬（株）412-8513
千代田テクノエース（株）
221-0022（株）ツムラ
300-1192
帝人ファーマ（株）
191-8512（一財）動物繁殖研究所
300-0134
東洋熱工業（株）
104-8324
960-0280
トーアエイヨー（株）
トキワ科学器械（株）
110-0005（株）夏目製作所
113-8551（株）日本医科学動物資材研究所
179-0074（合）日本医学広告社
102-0071
日本エスエルシー（株）
431-1103
日本化薬（株）115-8588
日本クレア（株）
153-8533
日本実験動物器材協議会
153-8533
101-0051（公社）日本実験動物協会
101-0032
日本実験動物協同組合
日本新薬（株）601-8550（一財）日本生物科学研究所
198-0024
日本たばこ産業（株）
569-1125
日本チャールスリバー（株）
222-0033
日本農産工業（株）
300-2615
日本農薬（株）総合研究所
586-0094
370-0074
バニーグループ 日本事務所
ハムリー（株）306-0101（一財）阪大微生物病研究会
565-0871
314-0103
フィード・ワン（株）（株）ボゾリサーチセンター
412-0039

Vol. 65 No. 3

住所

愛知県春日井市長塚町 1-1-9
埼玉県川口市赤井 2-13-22鹿児島県鹿児島市宮之浦町 2438 番地
大阪府大阪市此花区春日出中 3-1-98
大阪府大阪市中央区南船場 2-1-3
東京都江戸川区東小松川 4-57-7
埼玉県熊谷市押切字沼上 2512-1
茨城県つくば市作谷 1708-2
東京都江戸川区北葛西 1-16-13
埼玉県さいたま市北区吉野町 1-403
東京都千代田区富士見 2-15-10神奈川県藤沢市村岡東二丁目 26 番地 1
神奈川県横浜市青葉区鴨志田町 1000 番地
静岡県御殿場市駒門 1-135
静岡県御殿場市駒門 1-135
神奈川県横浜市神奈川区守屋町 3-13
茨城県稲敷郡阿見町吉原 3586
東京都日野市旭が丘 4-3-2
茨城県茨城県かすみがうら市深谷 1103
東京都中央区銀座 1-16-7 友泉ビル
福島県福島市飯坂町湯野字田中 1
東京都台東区上野 5-11-1
東京都文京区湯島 2-18-6
東京都練馬区春日町 4-32-25
東京都千代田区富士見 2-12-8
静岡県浜松市湖東町 3371-8
東京都北区志茂 3-31-12
東京都目黒区東山 1-2-7
東京都目黒区東山 1-2-7 日本クレア（株）内
東京都千代田区神田神保町 3-2-5 九段ロイヤルビル 502 号室
東京都千代田区岩本町 2-8-10 神田永谷マンション 602
京都府京都市南区吉祥院西ﾉ庄門口町 14
東京都青梅市新町 9-2221-1
大阪府高槻市紫町 1-1
神奈川県横浜市港北区新横浜 3-17-6
茨城県つくば市田倉 5246
大阪府河内長野市小山田町 345 番地
群馬県高崎市下小鳥町 290-1
茨城県古河市尾崎 2638-2
大阪府吹田市山田丘 3-1 大阪大学内茨城県神栖市東深芝 4-2
静岡県御殿場市竃 1284

lxii
iv

実験動物ニュース会員

名

三浦工業（株）（株）明治

Meiji Seika ファルマ（株）横浜研究所
持田製薬（株）（株）ヤクルト本社
八洲電機（株）ライオン（株）レッテンマイヤージャパン（株）

Vol. 65 No. 3

〒

住

所

108-0074
250-0862
222-8567
160-0004
186-8650
105-8686
256-0811
101-0052

東京都港区高輪 2-15-35 三浦高輪ビル 2F
神奈川県小田原市成田 540
神奈川県横浜市港北区師岡町 760
東京都新宿区四谷 1-22KDX 四谷ビル
東京都国立市泉 5-11
東京都港区芝 2-7-17

住友芝公園ビル 8F

神奈川県小田原市田島 100
東京都千代田区神田小川町 3-26-8
野村不動産小川町ビル 3F〈お詫びと訂正〉
実験動物ニュース 65 巻 2 号に掲載された「2015 年 Experimental Animals 最優秀論文賞」のご報告の中に誤りがございました。謹んでお詫び申し上げるとともに，下記の通り訂正させていただきます。

2015 年 Experimental Animals 最優秀論文賞
Single-step generation of rabbits carrying a targeted allele of the tyrosinase gene using
CRISPR/Cas9（CRISPR/Cas9 を用いた簡便なウサギチロシナーゼ遺伝子の破壊）
Experimental Animals Vol. 64, No. 1, 31–37, 2015
誤：著者名： 本多井口新・廣瀨美智子・ヤスミン ルブナ・湯澤和明・本勝希実子・伊豆美奈・
純・伊川正人・小倉淳郎

正：
著者名： 本多新・廣瀨美智子・山海

伊豆美奈・井口直・ヤスミン ルブナ・湯澤和明・本勝希実子・純・伊川正人・小倉淳郎● 編集後記 ● —————————————————————————————————————————

今年の学会総会も伊藤 守会長および関係者のご尽力により盛況裡に終了しました。
会場がミューザ川崎シンフォニーホールということで，昼休みにメイン会場で催された音楽鑑賞はこれまでにない企画として記憶に残るイベントでした。2 期目になる浦野徹理事長と新役員のもと平成 28 年度における本学会の運営も本格的にスタートしま
した。編集委員会は大きな変更はないものの，これまで副委員長を務めて頂いた伊川正人先生が学術集会委員会の委員長を務めることになり，真下知士先生が副委員長として新たに加わりました。更なる学会誌の充実に向けてご活躍頂けるものと期待しているところです。一方，4 月 14 日から連続的に発生している熊本地震では，大きな被害を受けた熊本や大分を中心としてまだまだ復興には程遠い状況にあります。東日本大震災の教訓が生かされたかどうか等，私達の関係する実験動物分野における施設等を含めた検証も重要であると思われます。何れにしましても，一日も早い復興を祈るのみです。
̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶ 【EIC】

lxiii
v

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株式会社 フナバシファーム株式会社 ケー ･ エー ･ シー北山ラベス株式会社
日本エスエルシー株式会社
室町機械株式会社
日本エスエルシー株式会社
わかもと製薬株式会社
エデストロムジャパン株式会社
有限会社 仁木商事
清和産業株式会社
株式会社 夏目製作所
株式会社 ソフトロン株式会社 アニメック
ダイダン株式会社
株式会社 アイセイ
株式会社 ビオスタ
株式会社 アニマルケア
九動株式会社
ハムリー株式会社
日本医学広告社

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動物と飼料
実験動物総合受託事業
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飼料
新型麻酔器
実験動物
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噴水式自動飼育架台
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非観血血圧測定装置
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