オキシテトラサイクリン（効能追加）
豊田雅典 1）・久保埜和成 2）・渡辺直久 3）・岡村由紀子 4）・沼田厚子 5）・元木弘昭 6）
株式会社インターベット（〒 300-0134 茨城県かすみがうら市深谷 1103）

1）

あすか製薬株式会社（〒 810-0001 福岡県福岡市中央区天神 4-1-1）

2）川崎製薬株式会社（現共立製薬株式会社）（〒 210-0818 神奈川県川崎市川崎区中瀬 3-19-11）

3）

コーキン化学株式会社（〒 579-8014 大阪府東大阪市中石切町 3 丁目 7 番 49 号）

4）

株式会社 トーヨー技術研究所（〒 350-1332 埼玉県狭山市下奥富 883）

5）

バイオ科学株式会社（〒 779-1292 徳島県阿南市那賀川町工地 246-1）

6）たふぐ目魚類についても薬事法に基づく規制対象

１ ．はじめにに含まれることとなったが，当時はふぐの細菌感染症に対する有効な抗生物質又は合成抗菌剤はオキシテトラサイクリン（OTC）は 1950 年に国内で承認されていなかったことから，主要生産発見され，Streptomyces rimosus の培養液から分県からの塩酸オキシテトラサイクリン製剤の本魚離された抗生物質である。米国では 1951 年に人種への効能追加を要望する強い声が上がるに至っ用医薬品および動物用医薬品として発売されていた。

る。

ふぐ目魚類の養殖では寄生虫性疾病による被害

日本では 1961 年に動物用医薬品の飼料添加剤が最も大きいが，ビブリオ病による被害は細菌性として承認され，その後，1981 年に再評価が終疾病の中では最も被害の大きい疾病である。ビブ了した。水産用医薬品としては，1971 年にブリリオ病は，取扱いによるストレスや擦れ，寄生虫などの数種類を対象魚として承認されている。の寄生，栄養障害などが起きたときに発生する傾1984 年の再評価の終了後，8 社共同開発によるギ向があり，Vibrio anguillarum は多くの海産魚にンザケのビブリオ病，9 社によるヒラメの連鎖球とって条件性病原体であるとされている。また，菌症に対する適用拡大が行われ，それぞれ 1988

トラフグの V. anguillarum に対する感受性はそれ年および 1992 年に承認が取得されている。

程高くなく，本菌の感染には何らかの要因が作用

また，2003 年の薬事法改正に伴い使用基準のする必要があることが示唆されていることから，一部が改正され，使用対象動物に関する規定が統計上ビブリオ病とされていない魚病被害の中に「種」から「目」単位に変更されたことにより，も，二次的な疾病又は合併症として本病が影響しその当時，すずき目，にしん目（ただし，あゆをている可能性もあり，その潜在的被害はもっと大除く），うなぎ目およびかれい目がその使用対象きいものであるかもしれない。このようなことか魚種となった。また，同時に動物用医薬品等取締

ら，ふぐ目魚類のビブリオ病対策に使用できる医規則も一部改正になり，それまで代表的な養殖魚

薬品の開発は養殖業者の強い要望となっていたのみが薬事法の規制対象であったものが，食用に［1］。

供するために養殖されているすべての水産動物へ

社団法人 日本動物用医薬品協会の協力の下，と拡大された。

塩酸オキシテトラサイクリン製剤の製造又は販売

そのような状況下で，当時，規制対象外であっ会社が参加し，「トラフグのビブリオ病に対する5758 動物抗菌会報 32（2010）

水産用オキシテトラサイクリン製剤の適応拡大承とブリ又はカンパチ由来の V. anguillarum 13 株認申請に関する共同開発」を実施した。すなわち，について，生化学的検査および参照株のアユ由来

2003 年から 2005 年にかけて，各県の水産試験場，株で作製した V. anguillarum J-O-3 型抗血清によ独立行政法人 水産総合研究センターの協力の下，るスライド凝集反応を行い，それら菌株に対す各種試験を実施した。その結果，塩酸オキシテト

る OTC の最小発育阻止濃度（MIC）を「動物由ラサイクリン製剤のトラフグに対する安全性，ビ来細菌に対する抗菌性物質の最小発育阻止濃度

ブリオ病による死亡率低下に対する有効性が確認（MIC）測定法（動物用抗菌剤研究会 2003 年改定

され，またその組織内での残留性が明らかとなっ標準法）」に準じて測定した。

たことから，ふぐ目魚類への効能拡大の申請をす

ブリおよびカンパチ由来の V. anguillarum とトるに至った。その後，2006 年に承認が取得され，ラフグ由来の V. anguillarum との生化学的性状お2 年後の 2008 年に再審査期間が終了した。

よび血清学的性状の比較では両者の間の生物学的同等性が示され，OTC のふぐ目魚類のビブリオ

２ ．試験成績病に対する有効性が示唆された。また，トラフ
グ由来株は，ブリおよびカンパチ由来株と同様に（1）トラフグに対する安全性

OTC に対して高い感受性を示し（表 1），ふぐ目臨床適用量（OTC として 50mg（力価）/kg）

魚類のビブリオ病に対する OTC の有効性が裏付の 2 倍量，5 倍量および 10 倍量を 1 日 1 回，7 日けられた。

間連続投与し，その後，8 日間の観察期間を設けイ．吸収などの試験て，平均体重 13.6g のトラフグに対する安全性をトラフグにおける吸収などを調べるため，OTC1 群当たり 30 尾で確認した。飼育期間中の水温として 50mg（力価）/kg 魚体重を配合飼料およは 24.0 〜 25.0℃で，飼育中は EP 飼料を給餌した。

び水とともに練り合わせ，平均体重 350g のトラ

その結果，10 倍量で投与した場合であっても，フグ 30 尾に 1 回強制経口投与した。投与後 0，1，成長抑制の可能性が示唆された以外は，一般状態，3，6，24，48 および 72 時間にそれぞれ 3 個体を摂餌量，死亡数に違いは認められなかった。

取り上げ，血漿，筋肉，肝臓および腎臓を採取し，HPLC 法｛中央法規「食品安全性セミナー 4 動物

（2）トラフグのビブリオ病に対する有効性用医薬品・飼料添加物」，抗生物質：オキシテト

ア．薬剤感受性

ラサイクリン（OTC），クロルテトラサイクリン1999 年〜 2004 年に長崎県，香川県，愛媛県で（CTC）およびテトラサイクリン（TC）試験法｝

養殖トラフグから分離された V. anguillarum 5 株により各臓器における OTC の組織内濃度を測定

表1

V. anguillarum に対するオキシテトラサイクリンの最小発育阻止濃度（MIC：mg/L）

由来魚種

分離場所

分離年度

菌株数

MIC（mg/L）

トラフグ

香川

1999 年

11長崎

2003 年

21愛媛，香川2004 年

21ブリ

愛媛2003 年

41

カンパチ

鹿児島

1993 年

31香川1999 年

11香川

2002 年

21愛媛

2003 年

31

長崎

1974 年11アユ ** J-O-3 型血清作製用日本原株豊田雅典・久保埜和成・渡辺直久・岡村由紀子・沼田厚子・元木弘昭／オキシテトラサイクリン（効能追加）／32（2010） 59

臓からの菌分離を行い，コロニーを形成した分離菌について抗 V. anguillarum J-O-3 型血清によるスライド凝集反応で陽性を示し，他に原因が認められない場合に V. anguillarum 感染によるビブリオ病と診断した。
安全性の評価：死亡魚の外観は体表の擦れを中心に，ビブリオ病の主症状である尾鰭の欠損が観察された。剖検では，ほとんどの個体にえらの貧血症状が観察される一方，死亡原因がビブリオ病であることを裏付ける肝臓の発赤が散見された。
図1

吸収等試験における OTC のトラフグ組織内濃度

これらの症状は，投薬群のみならず無投与対照群の死亡魚にも共通して認められていることから
OTC による特異的な反応でないと考えられた。

した。試験期間中の水温は 22.0 〜 23.0℃であった。

また，両群の摂餌状態，遊泳状態および体色変化

試験の結果，トラフグに投与された OTC は，にも差が認められなかったことから，OTC のト筋肉，肝臓および腎臓に残留すること，筋肉ではラフグに対する安全性が確認された。

残留した薬剤の排泄が他の臓器よりも遅いこと，有効性の評価：いずれの施設においても，無投肝臓および腎臓では投与後数時間で最高濃度に達与対照群と投薬群の死亡率には統計学的な有意差し，その後低下すること，ならびに筋肉よりも肝が認められたことから，ビブリオ病によるトラフ臓および腎臓の方が高い濃度で残留し，最も高くグの死亡率の低下に対する OTC 製剤の有効性が残留するのは肝臓であることが示唆された。

確認された（表 2）。

ウ．臨床試験
トラフグ養殖現場における OTC 製剤の安全性（3）トラフグに対する残留性およびビブリオ病による死亡率低下に対する有効

トラフグに対する OTC 製剤の残留性を明らか性を評価した。主要生産地の養殖場 2 ヵ所の海面にし，休薬期間を設定するため，国内 2 ヵ所にお生簀において，ビブリオ病自然発生群に OTC 製いて，トラフグ臨床適用量の 2 倍である 100mg（力剤の 50mg（力価）/kg 魚体重を，飼料添加によ価）/kg 体重の製剤を 1 日 1 回，7 日間経口投与

り 1 日 1 回，7 日間連続投与した。そして，投与した後，9，18，27，36 および 45 日目に筋肉お期間中の 7 日間および投薬終了後の 8 日間の計

よび肝臓の OTC 濃度を HPLC 分析法により測定

15 日間にわたり，一般状態，死亡数より安全性を，した。

また，無投与対照群と投薬群の死亡率を統計学的試験の結果，飼料の種類や水温の違いによってOTC の組織内濃度が異なり，施設 3 は 36 日までに比較することにより有効性を評価した。
ビブリオ病の確認は，試験を実施する前の死亡残留が認められたが，施設 4 では 18 日までしか魚の一部について，寒天培地を用いて腎臓又は肝認められなかった。より長い残留が認められた施

表2
施設
施設 1
施設 2

試験群
無投薬対照
投薬
無投薬対照
投薬

トラフグのビブリオ病に対する OTC の臨床試験

平均体重（g）
85

供試尾数（尾）水温

累積死亡数

死亡率（％）

1,100

22.1 〜
23.2℃

34

3.1

90.8*

22.2 〜
23.4℃

189

18.9

131

13.1*

1,100
1,000
1,000

* 無投薬対照群との間に p<0.01 で有意差あり（カイ二乗検定）

60 動物抗菌会報 32（2010）表3
施設

平均体重（g）

飼料

施設 3

施設 4

残留試験におけるオキシテトラサイクリンの組織内濃度（μg（力価）/g，5 尾／時点）

EP93

モイスト

238

供試尾数
（尾）

水温

50

21.4 〜22.5℃

50

22.2 〜
24.6℃

投薬後日数

臓器・組織9182736

45

筋肉

0.29
〜 0.620.05〜 0.17<0.01〜 0.04<0.01〜 0.05<0.01

肝臓0.49〜 0.930.12〜 0.280.01〜 0.05<0.01〜 0.06

<0.01

筋肉0.04〜 0.07

0.01
〜 0.05<0.01<0.01<0.01

肝臓0.05〜 0.08

<0.01〜 0.03

<0.01

<0.01

<0.01

設 3 での投与後 9，18，36 日の肝臓での各個体濃ました，福井県，愛媛県，長崎県および熊本県の度より，統計学的解析の結果，OTC の残留基準

各水産試験場，独立行政法人水産総合研究セン値（0.2ppm）を考慮した日数は 35 日と算出されター，社団法人日本動物用医薬品協会の関係各位

たが，他の魚類での休薬期間（30 日又は 40 日）の皆様に感謝の意を表します。

を考慮し，ふぐ目魚類の休薬期間を 40 日間と設定した。

３ ．謝

辞４ ．参考OTC の各社製剤名と承認事項および使用上の注意は表 4 の通りである。

本試験を実施するにあたり多大なご協力を頂き
表4製剤名と承認事項および使用上の注意

剤名

水産用 OTC20％ 水 産 用 OTC 散 水 産 用 OTC 散 水 産 用 OTC 散 水 産 用 OTC 散 水産用 OTC20％「あすか」
10%「KSK」「コーキン」
20％「SP」「TG」10％「バイオ」NC
水 産 用 OTC 散 水 産 用 OTC 散
水 産 用 OTC 散
20%「KSK」「コーキン」200「TG」20％
水 産 用 OTC 散 水 産 用 OTC 散
水 産 用 OTC 散
50%「KSK」
100W「TG」40％
水 産 用 OTC 散
200W
水産用テラマイシン散
水産用テラマイシン散− 200

製造販売元

あ す か 製 薬 株 式 川崎製薬株式会 コーキン化学株 セラケム株式会 株式会社 トー バイオ科学株式会社社式会社社
ヨー技術研究所 会社

販売

あ す か 製 薬 株 式 川崎製薬株式会 コーキン化学株 株 式 会 社 イ ン 株式会社 トー バイオ科学株式会社
社
式会社
ターベット
ヨー技術研究所 会社

成分・分量

本剤 1g 中，塩酸オキシテトラサイクリン 100 〜 500mg（力価）を含有する。

用法・用量

魚体重 1kg 当たり 1 日量オキシテトラサイクリンとして下記の量を飼料に添加し投与する。
すずき目魚類：50mg（力価）にしん目魚類（淡水中で養殖されているもの。ただし，あゆを除く。） ：50mg（力価）にしん目魚類（海水中で養殖されているもの）：50mg（力価）
うなぎ目魚類：50mg（力価）
かれい目魚類：50mg（力価）
ふぐ目魚類：50mg（力価）

豊田雅典・久保埜和成・渡辺直久・岡村由紀子・沼田厚子・元木弘昭／オキシテトラサイクリン（効能追加）／32（2010） 61
効能・効果

オキシテトラサイクリン感受性菌に起因する下記疾病魚類の死亡率の低下
すずき目魚類：ビブリオ病にしん目魚類（淡水中で養殖されているもの。ただし，あゆを除く） ：せっそう病，ビブリオ病，連鎖球菌症にしん目魚類（海水中で養殖されているもの）：ビブリオ病うなぎ目魚類：パラコロ病かれい目魚類：連鎖球菌症
ふぐ目魚類：ビブリオ病使用上の注意 *1 （特に今回の追加適応症に関係して重要な項目のみ記載する。
）【一般的注意】
1．本剤は下表に掲げる対象魚種の対象疾病を治療するために使用し，下表に掲げる対象魚種以外の魚又は動物には使用しないこと。
対象魚種

対象疾病

すずき目魚類

ビブリオ病にしん目魚類（淡水中で養殖されているもの。 ビブリオ病，せっそう病，連鎖球菌症
ただし，あゆを除く。
にしん目魚類（海水中で養殖されているもの） ビブリオ病
うなぎ目魚類

パラコロ病

かれい目魚類

連鎖球菌症

ふぐ目魚類

ビブリオ病

2．本剤は，適切な量で使用しないと期待される治療効果が得られず，これを超えて使用した場合には，思わぬ副作用が発生するおそれがあることから，本使用説明書の【用法及び用量】に従って正しく使用すること。
3．本剤は，病気の治療に必要な最小限の期間の使用に止めることとし，病気が治まった後は使用しないこと。また，治療の効果の有無にかかわらず，8 日間以上の連続投与は避け，繰り返し使用しないこと。
4．本剤は「使用基準」の定めるところにより使用すること。
5．本剤は指導機関（家畜保健衛生所，魚病診断総合センター，水産試験場等）に相談の上使用すること。
その他

注意：本剤は薬事法第 83 条の 4 の規定に基づき使用者が遵守すべき基準が定められた動物用医薬品であるため，次の使用禁止期間を遵守すること。
本剤投与後，下記の期間は食用に供する目的で水揚げを行わないこと。
すずき目魚類：30 日間にしん目魚類（淡水中で養殖されているもの。但し，あゆを除く。
） ：30 日間にしん目魚類（海水中で養殖されているもの）：30 日間うなぎ目魚類：30 日間かれい目魚類：40 日間ふぐ目魚類：40 日間うなぎ目魚類（うなぎにあっては，体重 100g 以下のもの及び食用に供するために水揚げする前 30
日間は飼育水の交換率が 1 日平均 40％以上の条件におかれる体重 100g を超えるもの）

包装10kg（1kg × 10）

貯法

室温保存

*1 使用上の注意については各社異なる部分があるため，代表として本申請の幹事役であった株式会社インターベット（製造販売元：セラケム株式会社）の内容を記載した。

ではこれまで細菌感染症に対する有効な薬剤の承要約認が国内でなかったが，2006 年に新たにビブリオ病に対する効能が追加された。

オキシテトラサイクリンは，現在，動物用医薬申請の際に実施された試験結果のうち，まず，品として多くの動物種で承認・販売されているテ

トラフグに対する安全性では，臨床適用量（50mgトラサイクリン系の抗生物質である。ふぐ目魚類（力価）/kg）の 2 倍，5 倍および 10 倍のオキシ

62 動物抗菌会報 32（2010）

テトラサイクリン量を 1 日 1 回，7 日間連続投与

日でも肝臓において 0.06μg（力価）/g の残留がし，その後，8 日間の観察を行った。その結果，認められ，統計学的解析の結果も考慮し休薬期間成長抑制の可能性が示唆された以外は，一般状態，を 40 日に設定した。

摂餌量，死亡数に違いは認められなかった。次に，以上，ビブリオ病に罹患したトラフグに，魚体トラフグを含むビブリオ病罹患の各魚種から分離

重 1kg あたり 1 日量オキシテトラサイクリンとされた Vibrio anguillarum 18 株に対する薬剤感受して 50mg（力価）を投与するときの安全性およ性を調べた結果，いずれの菌株も最小発育阻止濃び有効性が確認された。

度（MIC）は 1μg/mL であった。吸収等試験では，臨床適用量を 1 回，トラフグに経口投与したと引用文献

き，肝臓中で最も高い濃度が確認され，6 時間後で 1.29μg（力価）/g が検出された。野外 2 ヵ所

1 ）室賀清邦，Varin Tanasomwang，桃山和夫：トラの臨床試験では，いずれの施設での投薬群も，無フグ稚魚に発生した Vibrio anguillarum 感染症，投薬対照群と比較してビブリオ病による死亡率を魚病研究，22，29-30（1987）有意に低下させた。魚体内の残留は，投与後 36

Oxytetracycline
Masanori TOYOTA1), Kazushige KUBONO2), Naohisa WATANABE3),
Yukiko OKAMURA4), Atsuko NUMATA5) and Hiroaki MOTOKI6)
1)

Intervet K.K. 1103 Fukaya, kasumigaura-shi, Ibaraki 300-0134, Japan

2)

ASKA Pharmaceutical Co., Ltd., 4-1-1, Tenjin, Chuo-ku, Fukuoka-shi, Fukuoka, 810-0001, Japan

3)

Kawasaki Seiyaku K.K., 3-19-11, Nakaze, Kawasaki-ku, Kawasaki kanagawa 210-0818, Japan4)

Kohkin Chemical Co., Ltd., 7-49, 3chome, Nakaishikiricho, higashiosaka-shi, Osaka 579-8014, Japan5)

TOYO R&D Co., Ltd., 883 Shimookudomi, Sayama-shi, Saitama 350-1332, Japan6)

BIO SCIENCE Co., Ltd., 246-1, Takumuji, Nakagawa-cho, Anan-shi, Tokushima 779-1292, Japan

Oxytetracycline (OTC) is an antibiotic of the tetracyclines, that is currently approved and marketed as a veterinary
pharmaceutical for use in many species. For the Fugu (tetradontiformes) puffer fish order, no drugs efficacious
against bacterial infections were approved before a new claim for OTC against vibriosis in Fugu was approved in 2006.
Among the studies in the submission dossier, 2 times, 5 times and 10 times the recommended dose of OTC wereadministered orally once a day for 7 consecutive days in a safety study on Tora Fugu, and ﬁsh was observed for 8 days.
Except for the possibility of delayed growth, no differences in general condition, feed consumption and death between
the different groups were observed. The MICs of OTC were 1mg/mL for 18 strains of Vibrio anguillarum isolated
from several ﬁsh species including Tora Fugu. Absorption studies on OTC in Tora Fugu showed that the highest tissue
concentration - 1.29 mcg (titer)/kg, was detected in the liver 6 hours after the clinical dose had been administered. In
the residue study, 0.06μg (titer)/g was detected in the liver 36 days after administration. The withdrawal period wastherefore established as 40 days in consideration of the results of statistical analysis.
In conclusion, safety and efficacy were confirmed for the administration of OTC, 50 mg (titer)/kg/day against
vibriosis in Tora Fugu.