Development of Intranasal mucosal Influenza vaccine

総説

経鼻粘膜投与型インフルエンザワクチンの開発
長谷川秀樹
国立感染症研究所

インフルエンザウイルス研究センター 第六室（〒208−0011東京都武蔵村山市学園4−7−1）［要約］
メキシコを発端とする新型インフルエンザがヒトの間での感染が広がりを見せている。新しい抗原を持つウイルスは多くのヒトが免疫を持たない為容易に感染が広がると考えられる。インフルエンザの感染防御にはウイルスの侵入門戸である上気道の粘膜の免疫が重要な働きをする。粘膜における免疫機構のメカニズムの解明が進みインフルエンザウイルスのような粘膜を介して感染する病原体の感染防御における粘膜免疫の重要性が認識されるようになった。粘膜上での免疫応答を理解しそれを応用する事により次世代の経鼻粘膜投与型インフルエンザワクチンの開発について概説する。
［粘膜ワクチンの開発］

位へのワクチン接種が必要でそれにより最も効現在インフルエンザウイルスに対するワク果的な免疫誘導を行う事ができる。インフルエチンは現在、季節性インフルエンザの流行予

ンザウイルスの最初の感染部位は上気道であり測に基づいて不活化ウイルス(“split-product”鼻腔粘膜にワクチン接種をすることにより粘膜vaccines or“subunit”vaccine)を用いた皮へのインフルエンザ特異的分泌型IgA抗体の誘下接種ワクチンが使われている。これは感染予導の試みが行われてきた。不活化ウイルス抗原防を目的とするものではなく発症予防、重症化よりなるワクチンを経鼻接種することにより粘予防を目的としている。皮下接種ワクチンでは膜免疫を誘導するものであるが抗原のみを接種

主に血中の中和抗体であるIgG抗体が誘導されしても免疫応答はほとんど見られない。抗原とる。このIgG抗体はウイルスの感染自体を予防

共に抗原提示細胞を刺激するアジュバントを投するものではなく更にワクチン株と比較し変異与する事が必要である。田村らはアジュバントしたウイルス株に対する交叉防御能が低いためとしてコレラトキシンのBサブユニット(CTB)

ワクチン株と流行株に違いが有った場合は有効を用いることにより粘膜表面へのHA特異的分性が低い。一方インフルエンザウイルス感染に泌型IgAの誘導に成功しさらにそのIgA抗体がより誘導される免疫は主に気道粘膜への分泌型サブタイプの違うインフルエンザウイルスに対IgA抗体でありこの抗体は粘膜上で働き感染自する交叉防御に非常に有効で有ることを示して体を防御する働きがあり更に変異株に対する交きた1, 2。しかしスイスのワクチンメーカーが叉防御能が高いのが特徴である。ウイルスの自行った大腸菌易熱性毒素（LT）をアジュバント

然感染と同様に粘膜でのIgA抗体を誘導するたとして用いた経鼻インフルエンザワクチンの臨めにはインフルエンザウイルス感染を模倣する床治験においてワクチン接種後に顔面神経麻痺必要がある。そのためには防御を必要とする部（ベル麻痺）の発生が見られワクチンとの関連が− 49 −

Journal of Japanese Society for Clinical Infectious Disease
in Farm Animals Vol.4 No.2 2009

経鼻粘膜投与型インフルエンザワクチンの開発否定できない事から細菌毒素系のアジュバント

Guizhouワクチン接種群においては鼻腔洗浄は未だ臨床応用されていない。粘膜投与型ワク

液中のIgA抗体は違うサブタイプのA/PR8に対チンの開発にはより安全で効果的な粘膜アジュして高い交叉反応性を示した。さらにこれらのバントの開発が不可欠となっている。

マウスはA/PR8株のウイルスのチャレンジに対し完全防御を示した4。

［自然免疫 (Innate immunity)とこのようにTLR3のリガンドであるdsRNAをワクチンと共に経鼻アジュバント作用］

接種することによりワクチンのみでは誘導でき

我々はより安全でヒトで応用可能な新しいなかった獲得免疫である粘膜免疫応答を誘導でアジュバントの開発を試みている。粘膜上にきTLR3の刺激がウイルス感染時のNALTでの獲得免疫を得るためには抗原と共に自然免疫免疫応答スイッチであることが証明された4。

(Innate immunity)の刺激が必要である。ウイ

ヒトで使える経鼻ワクチン開発の為にはヒト

ルス感染を模倣することにより感染時と同様での使用に安全なアジュバントが必要になる。に有効な獲得免疫が誘導される事が期待でき

我々は内因性のインターフェロン誘導薬としてる。インフルエンザウイルスはマイナス一本

米国で第Ⅲ相臨床治験が終了している二本鎖鎖RNAをその遺伝情報として持つRNAウイル

RNA製 剤Ampligen (polyI:polyC12U)に 注 目スであり、感染の際にその一本鎖RNAがTLR-した。Ampligenをアジュバントに用い不活化

7(Toll like receptor 7)により認識され最初のH5N1インフルエンザワクチンと共に経鼻投与

ウイルス感染の信号として細胞に伝えられるする事によりpoly(I:C)を用いた時と同等の粘事がわかってきた3。

その後増殖の過程で二膜免疫応答が誘導されワクチン株（ベトナム株）本鎖RNA（dsRNA）が存在しTLR-3(Toll likeとcladeの異なるインドネシア株の高病原性鳥receptor3)により認識される。このようにイインフルエンザ（H5N1）に対し感染防御が可能

ンフルエンザウイルスは感染直後から生体にであった5。さらに、05/06年のシーズナルイ

よって様々な感染の信号を認識される。そこ

ンフルエンザワクチンをマウスにAmpligenとで我々はアジュバントとしてウイルスが増殖共に経鼻接種したところ、亜型の異なる高病原するときに産生するdsRNAに注目した。合成性鳥インフルエンザ（H5N1）での攻撃感染に対dsRNAで あ るpoly(I:C)をA/PR8イ ン フ ル エ

し有意に生存率を向上させた6。皮下接種ではンザＨＡワクチンと共に3週間の間隔で2回経このような効果は認められなかった。現在臨床鼻接種した。最終免疫から2週間後の鼻腔洗浄応用に向けた研究を進めている。

液中にはＨＡ特異的分泌型IgA抗体が誘導され、血清中には特異的IgG抗体が誘導された。

インフルエンザウイルスの自然感染時に起こさらにワクチンとpoly(I:C)で経鼻免疫されたる事象を解析する事によりその生体応答を利用

マウスは40LD50のウイルスチャレンジ感染し安全で効果的な防御が可能になる。自然免疫に対して抵抗性をしめし100％生存し、感染のから獲得免疫まで様々な多重の防御機構が働き兆候も全く見られなかった。誘導されたIgA抗一つが破綻してもすぐにバックアップがとられ体の交叉防御能を見るためサブタイプの異なて個体をウイルス感染の驚異から守っており、

るA/Yamagata, A/ Guizhou, さ ら にB型 でそれらのネットワークにより個体が守られていあ るB/Ibarakiの ワ ク チ ン を 用 いpoly(I:C)とる。経鼻粘膜投与型インフルエンザワクチンは経鼻接種を行った。するとA/Yamagata, A/

生体のメカニズムを利用した新しい感染防御手

日本家畜臨床感染症研究会誌
４巻２号 2009− 50 −

Development of Intranasal mucosal Influenza vaccine

4. Ichinohe, T. et. al. 2005. Synthetic

段となる事が期待される。

d o u b l e - s t ra n d e d R N A p o l y ( I : C)
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Hideki Hasegawa
Center for Influenza virus Researches, National Institute of Infectious Diosease（4-7-1, Gakuen, Musashimurayama, Tokyo 208-0011, Japan）− 51 −

Journal of Japanese Society for Clinical Infectious Disease
in Farm Animals Vol.4 No.2 2009