The Journal of Farm Animal in Infectious Disease
Vol.5 No.4 2016

総TREATMENT OF ENDOMETRITIS

説

子宮内膜炎の治療― キトサンの効果について ―小比類巻正幸（有）小比類巻家畜診療サービス〒 039-2683 青森県上北郡東北町字大平 63-3
TEL 0175-64-2710 FAX 0175-64-9748
E-mail kopi@kopi-kopi.com［要約］

繁殖間隔を適正に維持するためには分娩後における子宮機能の速やかな回復が必要である。子宮内膜炎への罹患は受胎性を著しく低下させることから正確な診断と適切な治療を早期に実施することが肝要となるが子宮機能の評価方法や治療方法には不明な点が多いのが現状である。そこで我々は免疫賦活効果や創傷治癒効果が認められるキトサンの子宮内注入による治療効果の検討を行った。繁殖共用時期に明瞭な発情兆候が観察されなかったホルスタイン種経産牛に対し、子宮内環境の正常化を目的に、液状キトサン製剤 200mg/50ml を子宮内に注入した。注入 7 日後から CIDR ショートプログラムで定時人工授精を行ったキトサン CIDR 群（n=106）の受胎率は 59.4％であり、無注入の対照群（n=101）の44.6％と比べて有意に高かった（p<0.05）。液状キトサン製剤注入後 3 日の子宮還流液中の CD18 陽性
白血球比率は、生理食塩液を注入したそれと比較して有意に高く、子宮内膜の病理組織所見では注入後3 ～ 7 日に子宮内膜に好中球の浸潤が観察された。以上のことから液状キトサン製剤の子宮内注入は、子宮内膜における白血球の血管外遊走を促し、子宮内環境の正常化が図られることで、繁殖成績の向上をもたらすことが示唆された。
キーワード：子宮内膜炎、液状キトサン製剤、乳牛、治療ては子宮機能の状態を正確に診断し、的確な治【はじめに】療を施すことで子宮内環境を正常に回復させる

酪農経営において適正な分娩間隔を維持する必要がある。子宮内膜炎は繁殖期の子宮疾患のことは生産性やコスト削減などの観点から重要中では発生頻度が高いものの子宮機能の客観的であり、そのためには分娩後の速やかな卵巣及な評価方法や診断および治療に関しては不明なび子宮機能の回復が必要となる。繁殖成績に影点が多く［12］、卵巣機能の制御に主眼を置い響を及ぼす要員の一つに子宮内環境が挙げらた定時授精プログラムなどのような治療プロトれ、分娩時に難産、双子分娩、胎盤停滞をともコルが確立されていないのが現状である。本稿なった場合、正常に分娩したものと比較して細では臨床現場における子宮内膜炎に対する治療

菌感染を伴う子宮内膜炎に罹患する可能性が高の実際と免疫賦活作用が確認されている液状キくなるとともに、繁殖成績が低下することが知トサン製剤の治療応用について述べてみたい。

られている［2, 5, 11］。このような症例に対し【周産期における栄養と繁殖】
高泌乳に改良された近年の乳牛は、エネル

受理：2016年10月11日－ 161 －

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子宮内膜炎の治療

ギー要求量が高く分娩から泌乳最盛期にかけて移行していくと推察される。PGF2α製剤は黄体要求エネルギーに対して摂取エネルギーが不足を退行させ子宮を収縮させることでそれらを排する負のエネルギーバランスに陥ることが知ら出させる目的で投与される。しかし、すでに初れている［16］。また、分娩前後における体重回排卵があり、黄体が存在する状態でなければ変動率の減少が著しい牛群においては周産期疾効果は限定的となる可能性も高い。また、ワン病の発症率が高く繁殖成績が低下すること［7］ショットで済む治療であるため第一選択としてや周産期における栄養バランスの失調は免疫機投与されることも多いが治療効果においては不能能の低下を誘発し周産期疾病の発生に影響を明な点も多い［15］。

およぼすとされ［18］、周産期疾病を発症した牛では受胎率が低下する［13］。これらのこと（２）子宮洗浄から乳牛では分娩後の繁殖共用時期における栄現在では、繁殖障害の治療領域では多くのホ養と繁殖成績には密接な関連があり、さらにはルモン製剤が市販され使用することが可能と分娩前から周産期にかけての栄養状態と繁殖成なっているが、そのようなホルモン製剤が無績も同様であると考えられる。分娩後の速やかかった時代から子宮洗浄は繁殖障害に対して有な子宮機能の回復には、泌乳ステージの特性を効な治療方法として実施されてきた。当時は洗理解した適切な栄養管理が不可欠である。

浄嘴管を用いて洗浄が行われていたが穿孔の危険もあることから現在ではバルーンカテーテル【子宮内における炎症と免疫】を留置し行われることが多い。生理食塩水を子分娩後早期の子宮内ではさまざまな細菌が存宮内に満たし軽くマッサージすることにより細在し、発情期では自然交配による細菌汚染の危菌感染による菌体や免疫反応による産出物質が険が高まる。このような状況下において子宮内物理的に排除されることや粘膜上皮細胞が再生

では細菌をはじめとする異物の侵入および増殖されることによる子宮内環境の正常化を期待すを阻止するために細胞性免疫（Th1）優位の免る治療法と考えられる。子宮内膜炎をはじめと疫バランスとなっている。一方、受精卵が子宮する子宮疾患に対する治療としては有効性が高内に下降する黄体期においては P4 の刺激下にい［17］ものの詳細な効果に関しては不明な点

おいて液性免疫（Th2）や Treg が優位な免疫も多い。生田ら［4］は異常産であった乳牛にバランスとなり非自己である受精卵を免疫的に対して強酸性水を用いて子宮洗浄を実施したと寛容し NK 細胞の活性を阻害する［10］。子宮ころ、正常分娩牛と同等の繁殖成績が得られ、内膜炎に罹患し慢性的な炎症状態が持続してい難産や胎盤停滞を経験した牛に対しては分娩後る場合、授精後に子宮内に下降してきた受精卵早期に子宮洗浄をすべきと報告している。まは異物として認識される可能性が高くなる。また、子宮洗浄はその作業の煩雑さや処置に多くた、黄体の存在下で子宮内に細菌や炎症産物がの時間を要することなどから敬遠される傾向が存在する場合は逆にそれらが排出されないままあり、今後は簡便で時間短縮が可能な子宮洗浄持続する場合が考えられる。このようにして子方法の開発が望まれる。

宮内膜炎の治癒が遅延し受胎がおぼつかない状
況を想像するに子宮内膜炎は早期に診断し適切（３）子宮内薬液注入な治療を速やかに実施することが必要であるこ

細菌感染を起した子宮内の清浄化や、薬剤のとが理解できる。

刺激による子宮粘膜上皮の再生および修復作用を目的に、子宮内への抗生剤やヨード剤の投与【子宮内膜炎治療の実際】が行われている。しかし金子ら［6］は、人工（１）PGF2α製剤

授精後に 2％ポビドンヨード溶液や抗生物質を正常な乳牛では、分娩後おおむね５週間で子子宮内に注入しても、その後の受胎率に差異は宮機能は回復するとされているが、回復が遅れみられなかったと報告している。また、ポピドる個体においては悪露や炎症産物が排出されずンヨード溶剤の濃度は２％では刺激性が強いたに子宮内にとどまることにより子宮内膜炎へとめ、低濃度の方が有効であるとの報告もある［1］。

－ 162 －

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TREATMENT OF ENDOMETRITIS

胎盤停滞の経歴のない個体で分娩後 60 日以内【子宮内膜炎に対する液状キトサン製剤のに発情が認められず未受精であった、あるいは治療応用】

受精後 40 〜 60 日間発情が認められなかったも子宮内膜炎の診断および治療に関しては不明のの不受胎であったホルスタイン経産牛に対しな点が多く、数回の授精を試みるも受胎に至ら試験を行った。直腸検査により子宮壁の著しいないため診断的子宮洗浄や薬液注入を試みる例

肥厚や子宮内貯留物が認められた個体は除外しも少なくない［12］。

た。同一農場で同時期に投与群と対照群がほしかし子宮機能の正常化には子宮内への刺激ぼ均等になるように区分した。投与群には酢や抗生剤投与による細菌の排除だけにとどまら酸を溶質とした液状キトサン製剤（明治キトず免疫機能の回復を伴ったアプローチが必要とサイド C、Meiji Seika ファルマ（株）、東京）の観点から我々は子宮内膜炎に罹患した個体やを 200mg/50ml、人工授精用シース管を用い子子宮内膜炎が疑われる個体に対する液状キトサ宮内に注入した（キトサン CIDR 群、n=106）。

ン製剤の子宮内投与を行ってきた［8］。その研対照群には液状キトサン製剤の投与を行わな究の一部を以下に記述する。

か っ た（CIDR 群、n=101）。 両 群 の 年 齢 及 び
分娩後日数の平均±標準偏差（SD）はそれぞ（１）キトサンについてれ、4.3 ± 0.2 及 び 116.7 ± 16.5 と 4.0 ± 0.2 及

甲殻類や菌類の骨格成分であるキチンのアセび 133 ± 6.0 で あ っ た。 子 宮 内 注 入 か ら 7 日

トアミノ基がアミノ基になったものである。キ

後を Day0 として CIDR-synch 変法を実施し、トサンは組織活性を高め、生体の防御機能を局Day10 に人工授精を行った。CIDR 群の受胎率所的に誘発する特性があり［9］、創傷部位におは 44.5%（101 頭中 45 頭）であったのに対し、ける肉芽形成を促し、治癒促進作用が明らかに

キ ト サ ン CIDR 群 は、59.4%（106 頭 中 63 頭 ）なっている［3］。と有意に高い受胎率を示した（p<0.05）（図 1）。

（２）発 情・排卵同期化プログラムの前処置と（３）PG 投与による発情誘起前の液状キトサ

して液状キトサン製剤を子宮内注入する

ン製剤の子宮内注入が受胎率に及ぼす影ことが受胎率に及ぼす影響

響

青森県内に飼養されている分娩時に難産及び青森県内 14 農場に飼養されている分娩時にp<0.05

63頭/106頭中(59.4%)

7060

45頭/101頭中(44.5%)％50403020100■キトサンＣＩＤＲ群図１□ＣＩＤＲ群キトサンCIDR群とCIDR群の受胎率の比較

図１ キトサンCIDR群とCIDR群の受胎率の比較－ 163 －

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子宮内膜炎の治療

難産及び胎盤停滞の経歴がない個体のうち、分PG 投与から受胎までの日数は、PG 群と比較娩後 60 日以内に発情が認められなかったホル

してキトサン PG 群で有意な短縮が見られた

スタイン種経産牛を試験に用いた。直腸検査に（p<0.01）（図 2）。同じく PG 投与から受胎までより子宮壁の著しい肥厚や子宮内貯留物が認めに要した平均受精回数は、PG 群と比較してキられた個体は除外した。同一農場で同時期に投トサン PG 群で有意な減少が見られた（p<0.01）

与群と対照群がほぼ均等になるように区分し（図 2）。

た。投与群には液状キトサン製剤 200mg/50ml
を人工授精用シース管を用いて子宮内に注入し（４）液状キトサン製剤の子宮内注入後におけた（キトサン PG 群 n=27）。対照群には子宮内る子宮内白血球サブポピュレーションの注入を行わなかった（PG 群、n=29）。両群の推移

年齢及び分娩後日数の平均± SD はそれぞれ 4.7

キトサン投与後の子宮内の免疫細胞の推移を± 0.4 及 び 160.4 ± 16.9 と 5.0 ± 0.4 及 び 143.5

観察する目的で実験を行った。発情を同期化し± 12.1 であった。子宮内注入から 7 〜 14 日後たホルスタイン経産牛 8 頭を用いた。発情後７の直腸検査で黄体の認められた個体に対して日に液状キトサン製剤を注入したキトサン群

PG を筋肉内投与し、3 〜 4 日後の外部兆候と（n=4）と生理食塩液 50 ｍｌを子宮内注入した直腸検査で発情を確認して、人工授精を実施し対照群（n=4）において、それぞれ投与前、投た。キトサン PG 群 5 頭と PG 群 6 頭は PG 投

与後 3 日、7 日に生理食塩液を用いて子宮を還与後に明瞭な発情が確認されず、人工授精が実流した。定法に従い［14］フローサイトメトリー施できなかったため試験から除外した。PG 投（FCM）法によって表面抗原と好中球貪食能を与後で不受胎であった個体は、自然発情の回帰解析した。子宮還流液中の総白血球数を示す

時に人工授精をその都度実施したが、キトサン

CD18 陽性白血球比率は、注入後 3 日においてPG 群で 1 頭、PG 群で 2 頭が不受胎のため淘対照群と比較してキトサン群で有意に高い値を汰され、それ以外は全頭が受胎した。PG 投与示した（p<0.01）（図 3）。単球を示す CD14 陽後の受胎率は、PG 群で 37.9%（29 頭中 11 頭）性細胞比率は、キトサン群、対照群ともに 注であったが、キトサン PG 群では 74.1%（27 頭

入後 3 日、7 日と増加する傾向が見られたが、中 20 頭）と有意に高かった（p<0.01）（図 2）。

両群の間に差は認められなかった。

PG投与から受胎までの平均日数

初回授精受胎率（日）

（％）

100

PG投与から受胎までの平均授精回数

p<0.0180（回）
p<0.01p<0.01

2.5

2.080

74.1

49.1

60

2.060
404037.9

16.3

1.4

1.5

2020

100

:キトサンPG群（ｎ＝27）

図2:PG群（ｎ＝29）

キトサンPG群とPG群の繁殖成績

図2 キトサンPG群とPG群の繁殖成績－ 164 －平均±標準誤差

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TREATMENT OF ENDOMETRITIS（５）子宮内膜炎牛に対する液状キトサン製剤

を day-1 とし、キトサン投与群には day0 液状の子宮内注入後の PMN％の推移

キトサン製剤を子宮内注入し、無処置群は何青森県の酪農家 3 戸で繋養されていた、分も投与しなかった。両群とも day10 に再びサ娩後 60-100 日のホルスタイン種経産牛のうちイトブラシ検査を実施し day-1 の結果と比較しサイトブラシを用いた細胞診断により PMN がた。day-1 の PMN% の 平 均 ± 標 準 誤 差（SE）

4% 以上を示し子宮内膜炎と診断した 12 頭をはキトサン投与群 6.0 ± 0.9%、無処置群 5.1 ±供した。キトサン投与群（n=6）にはおよび無0.3% と両群間に有意差はなかったが、day10処置群（n=6）に分けて、サイトブラシ検査日の PMN% はキトサン投与群 2.6 ± 1.1%、無処100

CD14+細胞比率(%)

CD18+白血球比率(%)

p<0.01806040200806040200037（日）白血球貪食能(%)

100
CD3T+細胞比率(%)

1008060402000370370376050403020100（日）■:キトサン群（n=4）、 □:対照群（n=4）
図3（日）

（日）

平均±標準誤差

液状キトサン注入前、注入後の子宮内還流液中の白血球比率

ＰＭＮ（％）
図3 液状キトサン注入前、注入後の子宮内還流液中の白血球比率( p ＜ 0.05 )10864
20day-1

day10■キトサン投与群（ｎ＝６）

図４□無処置群（ｎ＝６）

液状キトサン注入後のPMN%の推移

図４ 液状キトサン注入後のPMN%の推移－ 165 －家畜感染症学会誌
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子宮内膜炎の治療

置群 6.7 ± 2.4% となり、キトサン投与群では4.

有意に減少した（p<0.05）（図 4）。
【おわりに】

5.

子宮内膜炎は子宮疾患の中では最もポピュラーな疾患でありその罹患により繁殖間隔が延長するなどの経済的損失は甚大である。子宮内6.

膜炎は軽度のものから重度のものまで多様であり、病態を正確に診断し適切な治療を選択する

7.

ことが肝要である。これまでは子宮機能の客観的評価が難しい背景があり、その診断や治療に関しては不明な点が多く数回の授精を試み受胎しないものに関して子宮疾患を疑うことが少な8.

くなかった［12］。しかし、フレッシュチェッ
ク時や生理的空胎期間を経過した時点で正確に子宮機能を評価することが出来れば無駄に授精する回数を減少させたり分娩間隔を短縮するこ

9.とが可能である。子宮内膜炎に対する液状キトサン製剤の子宮内注入は局所における白血球の遊走を促し PMN％を減少させることが明らかとなった。しかし、重度の子宮内膜炎に対して10.

は、PMN％が減少後に再度上昇する例も散見されることから子宮洗浄との組み合わせての治療やさらに効果の高い治療法の検討が必要と考

11.

える。
近年では子宮内膜の細胞診用のサイトブラシ

12.

が市販されたことや携帯用超音波診断装置のフィールにおいての普及が進んでいることから

13.

子宮内膜炎の診断精度の向上が見込まれるとともに子宮内局所における免疫機能の研究が進んでおり、臨床現場における受胎性の向上につながる知見に期待したい。

14.

【引用文献】
1.

2.

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5 巻 4 号 2016

子宮内膜炎の治療

Treatment of endometritis－ Effect of chitosan solution －Masayuki Kohiruimaki
Kohiruimaki Animal Medical Service［Abstract］
We performed a study about the effect of intrauterine infusion of chitosan solution on conception
rate. Postpartum Holstein cows which showed no clear estrus after parturition were investigated.
The cows were intrauterine infused the chitosan solution at a dose of 200mg/50ml. Seven days
after infusion of the chitosan solution, the cows were used CIDR short program and timed artificial
insemination (TAI)(chitosan CIDR group : n=106). The conception rate of the cows without theinfusion of chitosan solution (CIDR short program and TAI only) were 44.5% (control group : n=101).
In contrast, the conception rate of the chitosan CIDR group was 59.4% and it was significantly higher
than that of control group (p<0.05). Three days after infusion of chitosan solution, the percentage ofCD18-positive white blood cells from the uterine fluid in the chitosan CIDR group was significantly
higher than those in the control group. Furthermore, histological study of endometrium between
3days and 7days after infusion of chitosan solution showed neutrophil infiltration. These results
suggested that intrauterine infusion of chitosan solution stimulated leucocyte migration in theendometrium, and it followed that the conception rates were improved.
Key words: Chitosan solution, Dairy cows, Improve reproductive performance, Intrauterine infusion－ 168 －