The Journal of Farm Animal in Infectious Disease
Vol.4 No.1 2015

総CHARACTERISTICS OF MYCOPLASMA MASTITIS

説

マイコプラズマ性乳房炎の特徴
樋口豪紀 1） 岩野英知 2） 権平智 1） 河合一洋 3） 小岩政照 4） 永幡肇 5）1）酪農学園大学・獣医学群・獣医衛生学
2）酪農学園大学・獣医学群・獣医生化学（〒 069-8501

北海道江別市文京台緑町 582 番地）

3）麻布大学・獣医学部・獣医学科・衛生学第一研究室（〒 252-5201

神奈川県相模原市中央区淵野辺 1-17-71）

4）酪農学園大学・獣医学群・生産動物内科学（〒 069-8501

北海道江別市文京台緑町 582 番地）

連絡担当者：樋口豪紀（酪農学園大学）［要約］

近年、世界各国でマイコプラズマ感染症（乳房炎、肺炎、関節炎、子宮炎および中耳炎等）の顕在化が報告されており、その効果的な制圧技術の構築が獣医畜産領域における大きな課題となっている。
マイコプラズマ性乳房炎の浸潤状況を把握するために実施された広域調査（バルクタンクスクリーニン
グ）では日本での浸潤率が 1.29％、米国では 10.48％、デンマークでは 10.2％を示すことが明らかになっている。マイコプラズマの検出には特殊な培養技術が必要とされてきたが、近年、分子生物学的手法を用いた簡便な検査技術も開発され、大型農場での応用も可能となっている。本病制圧に向けた基本的な対応として、検査による積極的な摘発と治療、さらに疫学的に関連性が示唆される子牛の呼吸器感染症の制圧も重要であると考えられる。
キーワード：マイコプラズマ性乳房炎、バルクタンクスクリーニング、病原性、検出技術［はじめに］［マイコプラズマ性乳房炎の歴史］

マイコプラズマ性乳房炎は泌乳停止など重篤

マイコプラズマ感染症は古くから多くの動物な臨床症状をともなう高度感染性の疾病であ種において報告されているが、すべての研究はり、適切な対応が実施されない場合、短期間で牛肺疫に始まる。16 世紀にヨーロッパ大陸での感染拡大により農場に甚大な経済損失をもた猛威を振るった後、アジア、アフリカ、オースらす。特に、マイコプラズマに起因する臨床型トラリアと、大陸をまたいだ大規模な感染拡大

乳房炎に対しては十分な治療技術が確立されてが記録されている［4, 14］。極めて重篤な症状おらず難治性乳房炎として淘汰される症例も多を呈するため［4, 14］、その制圧を目的としたい。本総説ではマイコプラズマ性乳房炎の主な基礎研究には緊急性が求められた。本菌に対す特徴について述べる。

る培養技術や同定技術が次々と確立されていく中で、マイコプラズマには牛肺疫の原因菌種（Mycoplasma mycoides spp mycoides）以外にも多くの菌種が存在し、ウシ以外の動物種も感

受理：2014 年 12 月 30 日

－1－

家畜感染症学会誌
４巻１号 2015

マイコプラズマ性乳房炎の特徴受性を持つことが明らかになった。ウシにおけその他のマイコプラズマ種の浸潤率は 10.2％とるマイコプラズマ性乳房炎の初発事例はイギリ高値を示している［11］。また、ベルギーではスで報告されており［5］、その後、1980 年にM. bovis の浸潤率が 1.5％であった［16］。フラは日本での発生事例が宮崎大学の清水らによっンス南部で実施された同様の調査では M. bovisて報告されている。

は検出されず、浸潤率は 1％以下であるものと推定されている［2］。また、ニュージーランド［原因菌の特性］

ではバルクタンクからの M. bovis の検出は確

マイコプラズマがその基本構造において、他認されていない［13］。の細菌と最も異なる点は細胞壁をもたず、最外［日本における層が細胞膜で構成されている点である［17］。

マイコプラズマ性乳房炎の浸潤状況］

ゲノムサイズも他の細菌の 3 分の 1 程度と小さい［17］。本菌は通性細胞内寄生菌であるため筆者らは 2010 年に日本における広域調査を無細胞培地での培養も可能であるが、栄養要求実施し、浸潤状況の概要を明らかにした（Table性は極めて高く、ウマ血清や新鮮酵母抽出液等

1）［7］。 本 調 査 で は 飼 育 頭 数 45 頭 ～ 1125 頭の特殊な成分を含有するヘイフェリック培地がの 1241 酪農場を対象にバルクタンクスクリー用いられる［17］。人工培地上での発育が可能ニングを実施したところ、調査農場の 1.29％な最小の微生物である。本菌は生体への適応性に相当する 16 農場においてバルクタンクよりを高めるために、本来の細胞機能を長い時間マイコプラズマ種が確認された。主要な菌種の中で退化させる、いわゆる退行性進化を効は M. bovis（0.56％）, M. californicum（0.24％）,率的に成し遂げてきたことは特筆すべき点でM. canadense（0.24％）, M. arginini（0.16％）, M.

ある。マイコプラズマ乳房炎を引き起こす主bovigenitalium（0.08％）, M. alkalescens（0.08％）

要な菌種として M. bovis, M. californicum, M.

and M. bovirhinis（0.08％）であった。陽性農

bovigenitalium, M. canadense, M. arginini, M.

場における個体の平均罹患率は 6.0％（0.4 ～alkalescense, M. disper, M. bovirhinis 等が報告

34.78 ％） で あ っ た。 こ の う ち、 感 染 に よ っされている［10］。て体細胞数に有意な上昇を認めた菌種は M.
bovis、M. californicum、M. canadense、M.

［諸外国におけるbovigenitalium であった［8］。

マイコプラズマ性乳房炎の浸潤状況］［感染経路］

マイコプラズマ性乳房炎の浸潤状況の把握にはバルクタンクスクリーニングが用いられていマイコプラズマ性乳房炎における排菌量は M.

る。本スクリーニングでは概ね 200 ～ 300 頭に59bovis において概ね 10 ～ 10 CFU/ml とされ1 頭の感染を検出するとされているが、これはるており、主として搾乳器具を介して牛群内に病勢ステージによる排菌数に大きく依存するた伝搬する［9］。環境に排菌された後も一定期間、め、感染初期等、菌数が低い場合には検出感度生存することが確認されている。これは、自身も低くなる。2001 年から 2011 年にかけて米国が産生するバイオフィルムによるものであり、カリフォルニア州の 21 地域で実施されたバル敷料での長期生存等も報告されている［12］。

クタンクスクリーニングでは、M. bovis の浸潤

また、バイオフィルムの産生量が菌株によって率が平均 10.48％（0.0 ～ 100％）であり、その大きく異なることも、病原性や環境への定着性

他のマイコプラズマ種の浸潤率は 1.74％（0.0を考える上で重要であると考えられる［12］。

～ 40.0％）であった。これらの結果から、調査

水平伝搬の起点となる初発牛の感染メカニズ

対象とした 21 地域の内、8 地域（42.9％）がムについては十分に解明されていないが、他の

浸 潤 率 20 ％ 以 上 を、 さ ら に 6 地 域（28.6 ％）臓器（組織）から全身循環を介して乳腺に到達が 浸 潤 率 40 ％ を 示 す こ と が 明 ら か に な っ た

する可能性が指摘されている［3］。マイコプラ［1］。一方、デンマークで行われた調査では、ズマは好中球やマクロファージ等の貪食細胞はM. bovis の浸潤率が 1.8％であったのに対し、もちろん、非貪食細胞（リンパ系細胞および赤－2－

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Vol.4 No.1 2015

CHARACTERISTICS OF MYCOPLASMA MASTITIS

Table 1  Prevalence of Mycoplasma species in bulk tank milk of 16 commercial dairy farms in Japan
Herd size

Bulk tank milk

Farm No. （cows/herd） Culture PCR Mycoplasma species
123456789101112
13141550
59
60
64
69
98
102
105
112
120
162
166
180
258
358++++++++++++++++++++++++++++++++

M. bovigenitalium
M. arginini
M. californicum
M. californicum
M. bovis
M. alkalescens
M. canadense
M. bovirhinis
M. canadense
M. bovis
M. bovis
M. bovis
M. bovisM. californicum
M. bovis
M. arginini

16420++++M. bovis
M. canadense

Cows
Number of （％）
Mycoplasma species
infected cows
1
2.00 M. bovigenitalium
11.69 M. arginini
58.33 M. californicum
5
7.81 M. californicum
24
34.78 M. bovis
1
1.02 M. alkalescens
32.94 M. canadense2
1.90 M. bovirhinis
2
1.79 M. canadense
43.33 M. bovis
4
2.47 M. bovis
3
1.81 M. bovis
11
6.11 M. bovis
18
6.98 M. californicum
15
4.19 M. bovis
5
1.40 M. arginini
30.84 M. bovis + M. arginini
104
24.76 M. bovis
15
3.57 M. canadense
102.38 M. bovis+ M. canadense血球）へ定着・侵入することが報告されている

コレプラズマも発育するため、これらを排除す［18］。これらのことから、白血球等の生体細胞るためのジギトニンディスク検査を併せて行に侵入したマイコプラズマが、全身循環を介しう。て乳腺に到達している可能性についても注目さ

分子生物学的手法では主として PCR が用いれており、今後の研究展開が待たれるところでられる。本法は培養法で数週間を要する平板培ある。

地での分離に変わるものであり、3 時間程度で迅速に実施することが可能である［6］。また［マイコプラズマに特徴的な病原性］

PCR 法は培養法よりも多検体処理に適しておマイコプラズマが様々な臓器に高い定着性をり、大型農場への対応も可能になった［6］。

有し、さらに難治性の病態を引き起こす機序に［おわりに］

ついて研究が進められている。病原因子として最も注目されているのは（Variable Surface

マイコプラズマ性乳房炎は 2010 年前後から

Lipoprotein：VSP）である［15］。VSP は構造日本国内で急増した感染症の一つである。「臓を恒常的に変化させ液性免疫を巧みに回避して器特異性が低く様々な臓器に定着する」、「白血いる［15］。さらに、感染によって白血球にア球等に感染し全身循環によって体内を移動すポトーシスを誘導する等、高い免疫抑制作用をる」、「抗原性を連続的に変化させることで生体発現する［18］。の免疫システムを逃れる」等の特性を持つため、その迅速な排除が極めて困難であることは想像［マイコプラズマの検出技術］に難くない。

マイコプラズマの検出は培養法および分子生

マイコプラズマ性乳房炎については検査によ物学的手法によって行われる。培養法では液体る積極的な摘発と治療、さらに感染の起点とな培地により増菌培養した後、平板培地に塗布しる可能性の高い子牛の呼吸器感染症制圧に向一定期間、37℃の微好気で保持する。3 ～ 4 週

け、さらなる取り組みが必要になるであろう。

間保持し、特徴的な目玉焼き状コロニーの形成を確認する。マイコプラズマの分離培地にはア－3－家畜感染症学会誌
４巻１号 2015

マイコプラズマ性乳房炎の特徴

comparative medicine. Academic Press; p121159.
10. Jasper, D. E. 1980. Prevalence of mycoplasmal
mastitis in the western states. Calif Vet 43:24–
26.
11. Kathoon, J. 2013. Surveillance of Mycoplasma
bovis and Mycoplasma spp by real time PCR
in bulk tank milk sample from all Danish dairy
herds in 2011. Proceeding of World Buiatrics
Congress pp39.
12. McAuliffe, L., Ellis, R. J., Miles, K., Ayling, R.
D. and Nicholas, R. A. 2006. Biofilm formation
by mycoplasma species and its role inenvironmental persistence and survival.
Microbiology 152: 913-922.
13. McDonald, W. L., Rawdon, T. G., Fitzmaurice,J., Bolotovski, I., Voges, H., Humphrey, S.,
Fernando, K., Canagasebey, Y., Thornton, R.
N. and McIntyre, L. 2009. Survey of bulk tankmilk in New Zealand for Mycoplasma bovis ,using species-specific nested PCR and culture.
N Z Vet J. 57: 44-49.
14. Nocard, E. and Roux, E. R. 1898. Le microbe
de la perpneumonie. Ann. Inst. Pasteur 12:
240-262.
15. Nussbaum, S., Lysnyansky, I., Sachse, K.,
Levisohn, S. and Yogev, D. 2002. Extended
repertoire of genes encoding variable surface
lipoproteins in Mycoplasma bovis strains. InfectImmun. 70: 2220-2225.
16. Passchyn, P, Piepers, S., De Meulemeester, L.,
Boyen, F., Haesebrouck, F. and Vliegher, S.
2012. Between-herd prevalence of Mycoplasma
bovis in bulk milk in Flanders, Belgium. ResVet Sci. 92: 219-220.
17. Razin, S. and Hayflick, L. 2010. Highlights
of Mycoplasma research: an historicalperspective. Biologicals 38: 183–190.
18. van der Merwe, J., Prysliak, T. and PerezCasal, J. 2010. Invasion of bovine peripheral
blood mononuclear cells and erythrocytes byMycoplasma bovis. Infect Immun. 78: 4570-4578.

［引用文献］
1.

2.

3.

4.

5.

6.

7.

8.

9.

Aly, S. S., Williams, D. R., Lehenbauer, T.
W., Chanpagne, J. D. and Glenn, K. S. 2014.
Prevalence of Mycoplasma spp. in California
bulk tank milk samples. Proceeding of National
Mastitis Council 2014.
Arcangioli, M. A., Chazel, M., Sellal, E., Botrel,M. A., Bezille, P., Poumarat, F., Calavas, D. andLe Grand, D. 2011. Prevalence of Mycoplasma
bovis udder infection in dairy cattle:
preliminary field investigation in southeast
France. N Z Vet J 2011 59: 75-78.
Biddle, M. K., Fox, L. K. and Evans, M. A.
Pulsed-field gel electrophoresis patterns ofMycoplasma isolates from various body sites
in dairy cattle with Mycoplasma mastitis. 2005.
J Am Vet Med Assoc 227: 445–459.
Cottew, G. S. 1979. Pathogenicity of thesubspecies mycoides of Mycoplasma mycoides
for cattle, sheep and goats. Zentralbl Bakteriol
Orig A 245: 164-170.
Hale, H. H., Helmboldt, C. F. and Plastridge,W. N. 1962. Bovine mastitis caused by a
Mycoplasma species. Cornell Vet 52: 582–591.
Higuchi, H., Gondaira, S., Iwano, H., Hirose,K., Nakajima, K., Kawai, K., Hagiwara, K.,
Tamura, Y., Nagahata, H. 2013. Mycoplasma
species isolated from intramammary infectionof Japanese dairy cows. Vet. Rec. 172: 557.
Higuchi, H., Iwano, H., Kawai, K., Gondaira, T.,
Nagahata, H. 2011. Prevalence of Mycoplasma
species in bulk tank milk in Japan. Vet. Rec.
169: 442.
Higuchi, H.1, Gondaira, S., Iwano, H., Hirose, K.,
Nakajima, K., Kawai, K., Hagiwara, K., Tamura,Y. and Nagahata, H. 2013. Mycoplasma species
isolated from intramammary infection ofJapanese dairy cows. Vet Rec 172: 557.
Jasper D. E. Bovine mycoplasma mastitis.
1981. Advance in veterinary science andCharacteristics of Mycoplasma Mastitis
Hidetoshi Higuchi1）, Hidetomo Iwano2）, Satoshi Gondaira1）,
Kazuhiro Kawai3）, Masateru Koiwa4）, Hajime Nagahata1）
1）Animal Health Laboratory, School of Veterinary Medicine, Rakuno Gakuen University2）Veterinary Biochemistry, School of Veterinary Medicine, Rakuno Gakuen University3）Department of Animal Health 1, School of Veterinary Medicine, Azabu University4）Department of Large Animal Sciences, School of Veterinary Medicine, Rakuno Gakuen University－4－