Bovine leukemia disease without leukocytosis and enlargement of body surface lymph nodes

症例報告

白血球増多と体表リンパ節の腫大を示さない
成牛型白血病の黒毛和種 2 症例
木野内久美１) 瀧奥健吾１) 大塚浩通１) 今内 覚2 ) 朴 天鎬１) 渡辺大作１) 及川正明１)1) 〒034-8628 青森県十和田市東23番町35-1
2) 〒060-0818 北海道札幌市北区北18条西9丁目

北里大学獣医学部

北海道大学大学院獣医学研究科＊連絡担当者：木野内久美（〒034-8628 青森県十和田市東23番町35-1）
TEL 0176-23-4371

FAX 0176-23-8703

v04036d@st.kitasato-u.ac.jp

[緒論]

［要約］
貧血を主訴とする成牛型白血病を発症した

成牛型白血病は全身性の悪性リンパ肉腫

黒毛和種成牛の2症例が来院した。両症例とを主徴とする疾病で、牛リンパ肉腫bovineも著しい貧血を呈したが、体表リンパ節の腫lympho sarcomaともいわれ、牛白血病ウ脹は不明瞭であり、PCR法によりBLVウイルイルス（bovine leukemia virus : BLV）にスが検出された。血液検査においてヘマトクよる地方病型と原因不明の散発型に分けられリット値の低下がみられたが、白血球の増多る[4]。地方病型は牛に最も多くみられるリは認められなかった。血液生化学検査においンパ系細胞の腫瘍性疾患である。BLVの感染ては両症例ともチミジンキナーゼ活性が高値経路としてはウイルス汚染血液の輸血、注射を示し、症例2では血糖値、AST活性、γGT

器具や直腸検査時の手袋の使いまわしなどの活性ならびにBUNが上昇した。末梢血白血球

人為的な伝播の他、アブによる機械的伝播、ポ ピ ュ レ ー シ ョ ン で は、CD3 、CD4 お よBLV感染母牛からの初乳を介した感染があるびCD8 +T細胞数が低かった。１症例では白単とされる[4]。BLV感染発症牛の臨床症状と核球中のB細胞を示すMHC classⅡ CD14−

しては、全身のリンパ節の腫脹、貧血、心機細胞割合が高く、血液塗抹中においても異型能の低下や出血性の下痢、さらに末梢血異型リンパ球が確認された。このことから、成牛

リ ン パ 球 の 増 加、LDHの 上 昇 な ど の 所 見 が型白血病の発症牛であっても、末梢血白血球観察されることが多い。国内の成牛型白血病数の増多が観察されない症例では、白血球ポの発症頭数は年々増加しているが、最近ではピュレーションの解析やチミジンキナーゼ活典型的な白血病における臨床所見や血液所見性の測定が腫瘍性変化を評価する一助となるが得られず、解剖によって初めて診断される検査であることが示唆された。

例も増えており[8]、BLV感染の生前診断を【キーワード；成牛型白血病、チミジンキナー

する上で多様な所見の理解が必要である。今ゼ活性、白血球ポピュレーション】

回、成牛型白血病で一般的に認められる臨床+++所見が観察されなかったBLV感染和牛2症例に遭遇し、血液検査に加えて末梢血白血球ポピュレーションを観察したのでその概要を報− 21 −

Journal of Japanese Society for Clinical Infectious Disease
in Farm Animals Vol.5 No.1 2010

白血球増多と体表リンパ節の腫大を示さない成牛型白血病

CD3 +、CD4 + お よ びCD8 +T細 胞 数 が 低 く、告する。

また症例2のMHC classⅡ +CD14-B細胞な[症例]らびにCD14 +細胞数が低値であった（Table

症例1は、6歳3ヵ月齢の黒毛和種繁殖雌牛で妊娠8ヵ月であった。食欲不振と重度貧血5）。尚、2頭の供験牛の末梢血のウイルス診断では双方とも陽性であった。

を主訴とした。来院時、可視粘膜は蒼白で心症 例1は 第7病 日 朝 に 呼 吸 速 迫、 膣 か ら の悸亢進が認められた。症例2は、4歳4ヵ月の多 量 の 粘 液 の 排 出 を 示 し、 同 日 午 前 中 に 分

黒毛和種繁殖雌牛、妊娠8ヵ月で、発熱と食娩したが胎仔は既に死亡していた。第8病日

欲不振を主訴とした。来院時、体温40.0度、から黒色の硬化便の排出がみられるようにな

心拍92回/分であり、可視粘膜蒼白、全身にり、アシドーシスおよび貧血の改善の目的に発 汗 が 認 め ら れ た（Table 1, 2）。 両 症 例 と輸 血 お よ び 輸 液 療 法 を 開 始 し た。 第13病 日も明瞭な体表リンパ節と骨盤腔内のリンパ節

か ら 呼 吸 速 迫 と な り、 第14病 日 に は 体 温 がの腫脹は観察されなかった。

低下し、四肢の硬直ならびに痙攣を呈し死亡

血 液 検 査 はHt、RBC、WBC(自 動 血 球 測し た。 症 例2は 第2病 日 か ら 努 力 性 呼 吸 及 び定器)、単核球、自動分析装置を用いて血漿陽性頚静脈拍動がみられ、排尿時には背湾姿

蛋 白(ビ ュ レ ッ ト 法)、 ア ル ブ ミ ン(BCP法)、勢や怒責を繰り返した。尿検査では潜血、蛋

血糖 (Gluc-DH・UK 法 )、BUN(UV 法 )、白の析出が見られた。また、同日から3日間

Cre(ヤ ッ フ ェ 法)、 総 コ レ ス テ ロ ー ル(酵 素輸血を行った。第5病日に呼吸困難を呈して法)、LDH(SFBC法)な ら び にCPK(GSCC死亡した。

法)の測定を実施した。またチミジンキナー

剖 検 の 結 果、 症 例1で は 腸 骨 下、 腸 間 膜、ゼ(TK)活 性 は ラ ジ オ イ ム ノ ア ッ セ イ 法 に よ縦 隔、 左 右 腎 内 リ ン パ 節 が 腫 瘍 細 胞 に 置 換り測定した。末梢血白血球ポピュレーションされていた。腹水、胸水貯留し、肝臓は腫大の解析はフローサイトメトリー法により、さしていた。第四胃壁は腫瘍細胞の浸潤によりら に 確 定 診 断 と し てnested-PCR法 に よ る

肥厚し、粘膜面には多数の潰瘍が見られた。

末梢血中からのBLV遺伝子の検出を試みた。

十二指腸には腫瘍によるマスが多数みられ、

血 液 生 化 学 所 見 に お い て は、 両 症 例 と も盲腸では漿膜面に潰瘍が散在していた。また

TK活性が高値を示した。症例1では、低Alb心臓は心嚢水が貯留し、心内膜、心筋内に腫血症をともなった低蛋白血症が認められた。

瘍細胞が浸潤していた。また症例2では、腸症例2ではAST、γGT、 T-Bil、BUN、Cre間膜リンパ節の腫大、腹腔内リンパ節の多くの軽度の上昇およびTC値とA/G比の著しいで腫瘍化がみられた。第四胃内には大量の血低下が認められたものの、その他の項目に共餅が貯留しており、粘膜面には点状出血、潰通する異常所見は確認できなかった（Table瘍が多数認められ、噴門部に白色腫瘤が認め3）。

られた。心臓は黄色の心嚢水が貯留し、表面両 症 例 と もRBC、Hbお よ びHt値 の 著 しに 腫 瘍 巣 が み ら れ た。 病 理 組 織 像 で は 全 身

い 低 下 が 認 め ら れ、 血 液 塗 抹 で は 異 型 リ ンの諸臓器の組織に腫瘍細胞の浸潤がみられた

パ球が確認されたが、リンパ球実数の上昇は(Table1〜5、Fig1.2)。

観察されなかった(Table 4)。末梢血白血球
ポ ピ ュ レ ー シ ョ ン に お い て は、 両 症 例 と も

日本家畜臨床感染症研究会誌
５巻１号 2010− 22 −

Bovine leukemia disease without leukocytosis and enlargement of body surface lymph nodes

Table 1

Table 4

供試牛の概要
症例 1

症例 2

禀告

食欲不振、重度貧血

食欲不振、発熱

品種

黒毛和種

性別

血液一般検査の所見
症例 1

症例 2

RBC (104/μl)

231

255

黒毛和種

Hb (g/dl)

4.4

3.9

雌雌

Ht (%)

1412

年齢

6歳3ヵ月

4歳4ヵ月

2

WBC (10 /μl)

7840

その他

妊娠8ヵ月

妊娠8ヵ月

Band（%）

32Seg（%）

48.5

16.0

Lymp（%）

28.0

72.0

Mono（%）

7.08.0Eosin（%）

1.00.0Baso（%）

0.00.0

異型（%）

12.5

2.0  

Table 2

来院時の臨床所見
症例 1

症例 2

体表リンパ節の腫脹−−

骨盤腔内リンパ節の腫脹++

心機能異常++

眼球突出

−

−

食欲不振++

下痢

−−

貧血++

++

リンパ球増多+−異型リンパの出現++

BLV遺伝子の検出++

末梢白血球ポピュレーション
症例 13365.8760.7

単核球

4434.23239.3

CD3+

385.3

647.9

CD4+

188.5

465.5

CD8++；明瞭、+；所見あり

症例 2

顆粒球59.9

142.2

MHC classⅡ+CD14−2634.4

240.2

CD14+

1108.6119.5+；所見なし

Table 3

Table 5

血液生化学検査所見
症例 1

症例 2

TP (g/dl)

4.5

7.3

ALB (g/dl)

2.3

2.7

A/G

1.05

0.59

Glu (mg/dl)

62

114

TC (mg/dl)

72

27

AST (IU/L)

85

190

γGT (IU/L)

17213

Tbil (mg/dl)

0.3

1.2

Dbil (mg/dl)

0.04

0.32

LDH (IU/L)

1387

2043

TK（IU/ｌ）

53

160

CPK (IU/L)

146

117

BUN (mg/dl)

18.1

48.6

Cre (mg/dl)

2.02

3.24

iP (mg/dl)

6.6

6.1

Ca (mg/dl)

8.2

8.9

Mg (mg/dl)

1.79

1.14

Fig.1
Neoplastic lymph node near thediaphragm of case 2− 23 −Journal of Japanese Society for Clinical Infectious Disease
in Farm Animals Vol.5 No.1 2010

白血球増多と体表リンパ節の腫大を示さない成牛型白血病している。症例1はリンパ球増多が認められなかったものの成牛型白血病の所見に類似した様相であり、血液中への強い腫瘍細胞の浸潤を認めない型の成牛型白血病であったと考えられる。一方、症例2では血液塗抹中に異型リンパ球が観察されたが、白血球実数が増多せず、さらに単核中のMHC classⅡ+CD14− 細胞割合は上昇していなかった。吉野ら[16]は、白血病を造血細胞による腫瘍性疾患であると提唱し、
Fig.2
表5

Lung histological section of case 2的に侵襲するため、リンパ節の腫瘤は勿論、末梢血にリンパ球系細胞が腫瘍性に出現しない事

末梢白血球ポピュレーション
症例 1

その腫瘍化の場が骨髄を中心として臓器を系統症例 2例もある事を述べている。特に骨髄性白血病で顆粒球3365.8760.7は末梢血において腫瘍細胞を認めない事例があ単核球

4434.23239.3

CD3+385.3647.9

り[16]、BLVの検出がされた症例2において、

CD4+

188.5465.559.9142.2

能性があり、症例2は症例1とは異なる白血病

MHC classⅡ CD142634.4240.2

CD14+1108.6119.5であった可能性は否定できない。

CD8++−

BLV感染とは別に骨髄性白血病を発症した可妊娠末期における健康な成牛のCD3+T細胞※単位は（cell ／μｌ）

数 な ら び にMHC classII+CD14−B細 胞 数 が10×102/μl以 上 存 在 す る こ と か ら[10]、 両[考察]

症例とも低T細胞血症であることが示唆され、今回観察した2頭の症例において、成牛型白BLV感染牛では末梢血T細胞が減少するとした

血病にしばしば観察される末梢リンパ球の増多Gateiら[1]の報告と類似した。T細胞数の減少や体表リンパ節の腫脹などの所見を得なかっは免疫機能の低下を疑う所見であり、本症例のた。また、BLVが感染し増加するB細胞につ免疫機能に異常が有ったものと示唆された。ヒ

いても、両症例とも明瞭な増加を認めなかっ

トのB細胞が腫瘍性増殖する慢性リンパ性白血た。しかし症例１では単核球中のB細胞を示す病においても、T細胞が減少し免疫抑制が観察

MHC classⅡ CD14 細胞割合が高く、血液されることから[5]、今回の両症例とも末期の塗抹中においても異型リンパ球が確認された。

白血病であり、T細胞機能の低下が有った事がLewinら[6]は、BLV感染牛における末梢血B疑われる。

+−

細胞数の増多が末梢血白血球数に影響すること

成牛型白血病は白血球の悪性腫瘍であるためでリンパ球増多に至っている症例では、リンパLDH活性が上昇しやすく[3, 15]、身体検査や球中のB細胞の割合が70％以上観察されること

血液検査などと併用し成牛型白血病の診断に用もあるとしている。またOhshimaら[9]は、成いられることがあるが、今回の2頭の症例では牛型牛白血病と診断した94症例中3症例では末LDH活性の明瞭な上昇は見られなかった。一梢血リンパ球増多、末梢血中への異型リンパ球

方、チミジンキナーゼはDNA合成に関与するの浸潤をほとんど認めない症例であったと報告

酵素であり、悪性リンパ腫の腫瘍量や細胞増殖

日本家畜臨床感染症研究会誌
５巻１号 2010− 24 −

Bovine leukemia disease without leukocytosis and enlargement of body surface lymph nodes

率を反映する[11]。TK活性は、ヒトでは白血[引用文献]

病やリンパ腫などの腫瘍性疾患の病態の評価の[1] Gatei, M. H., Brandon, R. B., Naif, H.

ために有用とされている[2]。獣医領域ではイM., McLennan, M. W., Daniel, R. C.

ヌにおける造血器腫瘍の診断, 治療効果の判定

and Lavin, M. F. 1989. Changes inに有用であることが報告され[7]、最近では牛B cell and T cell subsets in bovineの白血病の診断においても応用できることが報

leukaemia virus-infected cattle. Vet

告されている[12, 13]。この報告ではウシにおImmunol Immunopathol. 23:139-147.

けるTK活性の基準値は5.4U/L未満とされてい[2] Gronowitz, J. S., Hagberg, H.,

るが、本症はこの基準値を大きく上回っており、

Kallander, C. F. and Simonsson,

白血病の病状を反映した変化であったことが示

B. 1983. The use of serum

唆された。

deoxythymidine kinase as a

来院時の臨床所見において、両症例からは成prognostic marker, and in the牛型白血病に典型的な臨床所見である体表リン

monitoringof patients with non -パ節あるいは骨盤腔周辺リンパ節の腫脹は認め

Hodgkin’s lymphoma. Br. J. Cancer

られなかった。リンパ節の腫瘍性変化は全身の47:487-495.

リンパ節が腫瘍化して腫大する症例だけでな[3] Ishihara, K., Ohtani, T., Kitagawa,く、一部のリンパ節に腫瘍性変化が集中して触H. and Onuma M 1980. Clinical

診などにより異常が判断できるようになるまで

studies on bovine leukemia in

進行する症例も多く、本症例のように腫瘍性変Japanese black cattle

化が内部臓器の所属リンパ節に限局的に存在す

lactate dehydrogenase activity andることもある[14]。成牛型白血病では腫瘍性変its isoenzyme pattern in groups of化が集中した臓器における機能不全によって病

leukemic cattle and those negative or態は様々であることが示唆され、本症のようにpositive for antibody against bovine

骨髄への腫瘍細胞の浸潤により造血障害に起因leukemia virus. Jpn. J. Vet. Sci.

したことが疑われる重度の貧血が観察されるこ

42:289-295.

Ⅲ . Serumともある[16]。このことから成牛型白血病の所[4] 川 村 清 市、 内 籐 善 久、 前 出 吉 光 監 修．

見として、体表リンパ節の腫脹、白血球数の上2007．獣医内科学大動物編, 文永堂出版,

昇や異型リンパ球数の観察、あるいは末梢血液208－209.

B細胞の増多は特徴的で必須の所見とは言い難[5] Kvasnicka, J., Kruzík, P., Cmunt,

い。今回の結果から、成牛型白血病の病状の評

E. and Neurwirtová, R.. 1994.

価として末梢血白血球ポピュレーションの解析

Lymphocyte subpopulationsに加え、TK活性測定が有効であると考えられ、

determined by flow cytometry in

触知できない内臓臓器の所属リンパ節の種大のchronic type B lymphatic leukemia

診断方法が今後の課題であると示唆される。

Cas. Lek. Cesk. 133:506-510.
[6] Lewin, H. A., Wu, M. C., Nolan, T. J.
and Stewart, J. A. 1988. Peripheral
B lymphocyte percentage as anindicator of subclinical progression− 25 −

Journal of Japanese Society for Clinical Infectious Disease
in Farm Animals Vol.5 No.1 2010press)of bovine leukemia virus infection. J.

[14] 田川道人, 下田

Dairy Sci. 71:2526-2534.

崇, 富樫義彦, 渡辺由紀,[7] Nakamura, N., Momoi, Y., Watari,

古林与志安, 古岡秀文, 石井三都夫, 猪熊壽

T., Yoshino, T., Tujimoto, H. and2008. 非典型的牛白血病のホルスタイン

Hasegawa, A. 1997. Plasma

種乳牛3症例 日獣会誌 61:936-939.

Thymidine Kinase Activity in Dogs

[15] Yasutomi Y, Takahashi K, Kurosawa

with Lymphoma and Leukemia. J.Vet.

T, Sonoda M and Onuma M. 1987.

Med.Sci. 59:957-960

Early diagnosis of enzootic bovine[8] 岡田幸助 2008. 牛白血病の病理発生からleukosis. Jpn .J.Vet. Sci, 49:957-963.

見た拡大防止対策 家畜診療55: 101-106[16] 吉野知男、谷山弘行、岡田洋之 1997. 牛[9] Ohshima, K., Ozai, Y., Okada, K. andNumakunai, S. 1980. PathologenicalStudies on Aleukemic Case of Bovine
Leukosis. Jpn. J. vet. Sci. 42:297-309.
[10] Ohtsuka, H., Uematsu, M.,Saruyama, Y., Ono, M., Kohiruimaki,
M., Ando, T. and Kawamura, S. 2009.
Age-related alterations in peripheralleukocyte population of healthy
Holstein dairy cows during the precalving period. J. Vet. Med. Sci.
71:1121-1124.
[11] Rehn, S., Gronowitz,  J. S., Kallander,C. F., Sundstrom, C. and Glimelius,B. 1995. Deoxythymidine kinase in
the tumorcells and serum of patientswith non Hodgkin’slymphoma. Br. J.
Cancer 71:1099-1105.
[12] Sakamoto, L., Obayashi, T.,
Matsumoto, K., Kobayashi, Y. andInokuma, H. 2009. Serum thymidine
kinase activity as a useful marker forbovine leukosis. J. Vet. Diag. Invest.
21: 871-874.
[13] 坂本礼央、大林 哲、古林与志安、松本高太郎、石井三都夫、猪熊 壽. 2010. 血清チ
ミジンキナーゼ活性の測定により摘発した牛白血病発症牛の１症例. 日獣会誌. (in日本家畜臨床感染症研究会誌
５巻１号 2010− 26 −

白血病の疾病学的輪郭と疾病学的問題点
家畜診療 40: 3-11.

Two Cases of Bovine Leukemia Disease without Leukocytosis andEnlargement of Body Surface Lymph Nodes in Japanese Black CattleKumi Kinouchi1), Kengo Takioku1), Hiromichi Ohtsuka1), Satoru Kon-nai2),
Tenko Baku1), Daisaku Watanabe1), Masa-aki Oikawa1)
School of Veterinary Medicine, Kitasato University(35-1 Higashi 23 bancho Towada Aomori 034-8628)
Graduate School of Veterinary Medicine, Hokkiado University(kita 18 jo nishi 9 chome Sapporo, Hokkaido 060-0818)
ABSTRACTTwo cases in bovine leukemia disease of Japanese Black cattle that observed
marked anemia were encountered. Although bovine leukemia virus was detectedby PCR in both cases, we could not observed enlargement of body surface lymph
nodes.  Hematocrit values decreased, but leukocytosis was not found in both cattle.  
In biochemical findings, higher thymidine kinase activity showed in both, and thelevels of glucose,   AST, γ -GT,   and BUN increased in case 2.    Peripheral CD3+、
CD4+ and CD8+ T cells were lower, but marked changes in numbers of B cells andmonocyte were not found.  There were cases with development of bovine leukemia
disease that were no-increased peripheral B cell number, and it seemed to useful ofthymidine kinase activity to evaluate degree of illness of this disease.
【Key Words：Bovine Leukemia Disease, Leukocyte Population, Thymidine Kinase
Activity】− 27 −

Journal of Japanese Society for Clinical Infectious Disease
in Farm Animals Vol.5 No.1 2010

出生時に発症を認めた子牛型白血病の一例

日本家畜臨床感染症研究会誌
５巻１号 2010− 28 −