実 験 動 物 ニュース
The Japanese Association for Laboratory Animal Science目次

日本実験動物学会からのお知らせ
第 5 回実験動物科学シンポジウムについて .......................................................59
平成 28 年度 維持会員懇談会の開催について....................................................60
第 8 回実験動物管理者等研修会の開催について ...............................................61
第 64 回日本実験動物学会総会のご案内（その 1）............................................62
他学会情報................................................................................................................63
実験動物感染症の現状
齧歯類分離 CAR バチルスの新学名，Filobacterium rodentium について ...........65

Experimental Animals 65(4) 収載論文和文要約集 ..................................................69
日本実験動物学会正会員名簿の変更一覧 ................................................................ i
維持会員名簿 ............................................................................................................. ii
お詫びと訂正 .............................................................................................................iv
編集後記 ....................................................................................................................iv

Vol. 65 No. 4 / October 2016

実験動物ニュースVol. 6559

No. 4

日本実験動物学会からのお知らせ
第 5 回実験動物科学シンポジウムについて
学術集会委員会
委員長

伊川正人（公社）日本実験動物学会（以下，本学会）では医学・生命科学研究に重要な実験動物の開発や動物資源リソースの整備や活用に関する最新情報を提供するために，平成 24 年度から実
験動物科学シンポジウムを開催しています。近年，iPS 細胞を用いた再生医療研究や，ゲノム編集技術を使った疾患モデル・治療法開発研究のための実験動物として，サル類の有用性，重要性が高まっています。特に医薬品の安全性（ヒトへの外挿）を考える際に，サル類は重要です。そこで本年度は信州動物実験研究会と共催で「医学研究を支える実験動物科学―サル類―」を下記の要領で開催することとしました。本事業の目的から本学会や信州実験動物研究会会員に限らず，非会員にも門戸を開放しておりますので，多くの方のご参加をお待ちしております。
プ ロ グ ラ ム， 参 加 申 し 込 み 等 に つ い て は 信 州 実 験 動 物 研 究 会 の ホ ー ム ペ ー ジ（http://
shinshuanimal.umin.ne.jp/entry2.html）に掲載しますので，そちらをご確認ください。
第 5 回実験動物科学シンポジウム「医学研究を支える実験動物科学―サル類―」
日時：平成 28 年 10 月 21 日（金）12:40 〜 17:45

場

所：信州大学松本キャンパス

主催：（公社）日本実験動物学会，信州実験動物研究会

旭総合研究棟 9 階

講義室 AB

参加費：無料（当日参加は自由ですが，出来るだけ事前の参加登録をお願いします）
プログラム：
セッション 1

移植免疫寛容カニクイザル① MHC 型特定カニクイザルの紹介（ヒトやマウスを含めた遺伝子解析を中心に）② MHC 型特定カニクイザルの医学研究への応用③ iPS 細胞由来心筋細胞を用いた心筋再生治療：霊長類同種移植モデルを用いた検討
セッション 2

実験用小型霊長類マーモセット④ 実験動物としてのマーモ セットの特性と疾患モデルへの応用⑤ GLP 試験におけるマーモセットの有用性⑥ 遺伝子改変マーモセットを用いた脳科学⑦ 実験動物のエンリッチメントの実例

実験動物ニュース60

Vol. 65

No. 4

平成 28 年度 維持会員懇談会の開催について
財務特別委員会
委員長

渡部一人

日頃，（公社）日本実験動物学会への維持会員の皆様からのご理解とご支援，誠にありがとうございます。例年の通り，動物実験に関する学術振興，技術発展による社会と産業への貢献などの話題を広く情報共有，周知する目的で，講演・展示会および意見交換会を下記要領
で開催いたします。維持会員の皆様に限らず，実験動物や動物実験にかかわる多くの皆様をお迎えして，当学会活動に親しんでいただく機会になれば幸いです。
プログラム・参加申し込み等については，本年 10 月初旬に本学会のホームページ（http://jalas.jp/meeting/ijikai.html）に掲載いたしますので，そちらでご確認ください。多くの方のご参加をお待ちしております。

平成 28 年度（公社）日本実験動物学会

維持会員懇談会

日時： 平成 28 年 11 月 25 日（金）11:00 〜（展示会），13:00 〜（講演会）

場

所： 中央大学 駿河台記念館〒 101-8324

内東京都千代田区神田駿河台 3-11-5

容：「最新の話題講演」・「招待講演」および展示会

参加費： 講演会・展示会（無料），意見交換会（5,000 円／人）主

催：（公社）日本実験動物学会

後

援（予定）：
日本製薬工業協会，安全性試験受託研究機関協議会，
動物実験関係者連絡協議会，日本実験動物協同組合，
日本実験動物器材協議会，日本実験動物協会

実験動物ニュースVol. 65

61

No. 4

第 8 回実験動物管理者等研修会の開催について
実験動物管理者等研修制度委員会
委員長

久和

茂

（公社）日本実験動物学会（以下，本学会）では動物実験を実施する国内の全ての機関に教育訓練を受けた実験動物管理者を配置できるよう，実験動物管理者等の教育訓練を目的とした研修会を平成 25 年度より定期的に開催しています。実験動物管理者に求められる基本的な知識や技術をはじめ，動物福祉や関連法令などについて初学者でも解るように解説いたします。加えて，平成 28 年度から「機関における動物実験の運営管理」に関する講義を追加しましたので，動物実験の運営・管理に関わる方々にとっても大いに参考になると考えます。
本事業の目的から受講対象者は本学会会員に限らず，非会員にも門戸を開放しております。
プログラム，参加申し込み等については 12 月下旬に本学会のホームページ（http://jalas.jp/
meeting/seminar.html）に掲載いたしますので，そちらでご確認ください。多くの方のご参加をお待ちしております。

第 8 回実験動物管理者等研修会
日時：平成 29 年 2 月 27 日（月），28 日（火）場

所：東京大学山上会館大会議室

参加費：4,000 円（会員），5,000 円（非会員である維持会員団体職員），6,000 円（非会員）
定員：100 名

その他：受講者には資料を配布，受講修了証を発行
主催：（公社）日本実験動物学会

後

援：環境省，厚生労働省，農林水産省，文部科学省

他実験動物ニュース62

Vol. 65

No. 4

第 64 回日本実験動物学会総会のご案内（その 1）
The 64th Annual Meeting of the Japanese Association for Laboratory Animal Science

第 64 回大会公式エンブレム
テーマ：「ライフサイエンスが復興を促進する」
大会長：大和田一雄（一般財団法人ふくしま医療機器産業推進機構 安全性評価部長）
会 期：平成 29 年 5 月 25 日（木）〜 27 日（土）会 場：ビ ッ ク パ レ ッ ト ふ く し ま（ 〒 963-0115
福島県郡山市南 2 丁目 52 番地）
プログラム案●基調講演「震災復興に貢献する実験動物〜ヒト疾患の動物モデルと組織培養の互換的統合によるオ
ンリーワンへの道〜」（仮題）
渡辺慎哉 先生（福島県立医科大学
ふくしまトランスレーショナルリサーチセンター
センター長・プロジェクトリーダー）●特別講演
1．
「動物を使用した人体臓器の研究（仮題）」中内啓光 先生（東京大学医科学研究所 教授）
2．
「ブタからヒトへ―心臓病への応用」（仮題）
福田恵一先生（慶應義塾大学 教授）●市民公開講座「研 Q 室のヨーグルト 85 g」（仮題）
関水和久 先生（東京大学名誉教授，
帝京大学医真菌研究センター 教授）●学会本部企画シンポジウム
・ 学術集会委員会企画
光が切り開く新しい実験動物学―ここまできた光遺伝学―（仮題）・ 動物福祉・倫理委員会（企画中）・ 実験動物感染症対策委員会（企画中）・ 国際交流委員会（企画中）●学会本部企画セミナー
・ 教育研修委員会（LAS セミナー 企画中）・ 人材育成委員会（企画中）・ 動愛法等対策委員会（企画中）●第 64 回総会企画シンポジウム
・ 医療機器開発における動物実験評価の課題（仮題）
・ 動物を用いた医学教育 ・ 医療技術トレーニ
ング（仮題）
・ 病態モデルから実臨床へ（仮題）・ 実験用ブタの基本技術（仮題）・ 大動物の麻酔と周術期管理（仮題）・ 基盤的研究を医療現場に活かすための動物実験の役割（仮題）●教育講演
・ 英国における動物実験管理と動物福祉制度
・ 英国における動物福祉のための教育訓練の実際●スポンサードセミナー
募集中。申し込み，お問い合わせは下記事務局まで。
●ランチョンセミナー
募集中。申し込み，お問い合わせは下記事務局まで。
●ホスピタリティールーム
募集中。申し込み，お問い合わせは下記事務局まで。
●器材展示会，展示企業プレゼンテーションス
テージ
募集中。申し込み，お問い合わせは下記事務局まで。
●懇親会
大会 2 日目に予定
大会事務局
第 64 回 日本実験動物学会総会 事務局〒 164-0003 東京都中野区東中野 4-27-37（株）アドスリー内
TEL：03-5925-2840 FAX：03-5925-2913
お問合せ先：jalas64@adthree.net
http://sympo.adthree.net/jalas64/

実験動物ニュース他

学

Vol. 65

会

63

No. 4

情

報

公益社団法人日本実験動物協会の動き
Ⅰ．ブタの実技研修会開催について
この実技研修会は，主に実験動物技術者認定試験の実技試験を目指す方々からの要望を受けて開催しており，今回も実技試験を受験される方を優先したうえで，一般の受講希望者にも参加していただけるよう広く募集し，下記の内容で開催いたします。
記
開催予定日： 平成 28 年 10 月 29 日（土）〜 30 日（日）場所：

日本獣医生命科学大学

受講者数：

12 名程度（1 級，2 級技術者レベルを班分けして実施する予定です。）

研修内容：

ハンドリング，保定，性別判定，体重測定，体温測定，心拍測定，投与（経口，皮下，静脈内，筋肉内等），採血（耳介静脈，前大静脈叢），
麻酔，切皮・縫合等

実習テキスト：公益社団法人日本実験動物協会教育・認定委員会発行，A4 版，18 頁
Ⅱ．ウサギ及びサル類の実技研修会について
1. ウサギ実技研修会（1 級・2 級実技試験受験者対象）
開催予定日 : 平成 28 年 10 月 29 日（土）〜 30 日（日）場所 :日本獣医生命科学大学

2. サル類の実技研修会（1 級・2 級実技試験受験者対象）
開催予定日 : 平成 28 年 10 月 29 日（土）場所 :日本獣医生命科学大学

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Vol. 65

No. 4

NPO 法人動物実験関係者連絡協議会（動連協）
第 5 回シンポジウムのご案内
テーマ：動物愛護管理法の過去・現在・未来
日

時：平成 28 年 12 月 10 日（土） 13:00 〜 17:00

会

場：東京大学農学部 1 号館 8 番教室
文京区弥生 1-1-1（http://www.a.u-tokyo.ac.jp/campus/overview.html）

参加費：会員 1,000 円，非会員 3,000 円【プログラム】
司会：浦野徹（動連協 理事，生理学研究所特任教授）

三好一郎（東北大学教授）
13:00 〜 13:20

開会の挨拶
板東武彦（動連協 理事長，生理学研究所特任教授）

13:20 〜 13:25

はじめに
浦野

徹（動連協理事）

13:25 〜 14:10 「動物愛護管理法の歴史的経緯」
則久雅司（環境省自然環境局総務課動物愛護管理室室長）
14:10 〜 14:55 「医薬品食品領域での動物愛護管理法の現在 と未来」
小島肇（国立医薬品食品衛生研究所安全性予測評価部第二室室長）

休憩（20 分）
15:15 〜 16:00 「動物実験領域での動物愛護管理法の現在と未来」
八神健一（動連協 理事，筑波大学特命教授）
16:00 〜 16:50

総合討論

16:50 〜 17:00

閉会の挨拶
泰羅雅登（動連協 副理事長， 東京医科歯科大学教授）

主催： NPO 法人動物実験関係者連絡協議会

後

援：（公社）日本実験動物学会，（公社）日本実験動物協会，日本実験動物協同組合，
日本神経科学学会，（一社）日本生理学会，日本実験動物技術者協会，
日本製薬工業協会

申込方法： NPO 法人動物実験関係者連絡協議のホームページでご確認ください
http://www.renkyo.or.jp/
問合せ先： NPO 法人動物実験関係者連絡協議会 事務局〒 164-0003

東京都中野区東中野 4-27-37 （株）アドスリー内TEL 03-5925-2840

FAX 03-5925-2913

E-Mail npo@renkyo.or.jp

実験動物ニュースVol. 65

65

No. 4

実験動物感染症の現状

齧歯類分離 CAR バチルスの新学名，
Filobacterium rodentium について
池郁生

国立研究開発法人理化学研究所バイオリソースセンター実験動物開発室

要

約“CAR（カー）バチルス は，寒天培地を用いた培養ができず，学名は未定であった。2016 年，“CAR
バチルス のラット分離株である SMR-CT はバクテロイデス門スフィンゴバクテリウム目の新科
フィロバクテリウム科（Filobacteriaceae）に，新属・新種として「フィロバクテリウム・ローデンティ
ウム（Filobacterium rodentium）」と命名された。基準株は SMR-CT である。

“CAR（カー）バチルス” はラットやマウスに見られる慢性呼吸器疾患（chronic respiratory disease）の一因として発見されたグラム陰性のフィラメント状桿菌である [5]。この菌はそれら動物の気道の線毛上皮細胞（ciliated epithelial cell）に主に感染し，菌の形状が線毛と類似しているため Ganaway らにより CAR
バチルス（Cilia-Associated Respiratory bacillus）と命名された [5]。 CAR バチルス” はいわゆる培養困難菌であり，1980 年の発見 [20] 以来，本菌には学名がつけられていなかった。理化学研究所（理研）バイ
オリソースセンター（BRC）実験動物開発室の池，同微生物材料開発室（JCM）の坂本，放射線医学総合研究所生物研究推進課の小久保らの共同研究グ
ループは， CAR バチルス” が分類学の「科」レベルで新しい生物群であることを明らかにし， CAR
バチルス” のラット分離株である SMR-C T をフィロ
バクテリウム科（Filobacteriaceae）フィロバクテリ
ウム属のフィロバクテリウム・ローデンティウム（Filobacterium rodentium）と命名した [6]。本稿ではこれについて概説する。
CAR バチルス” は寒天培地で培養できない [5, 7,9]。この菌の分離には孵化鶏卵漿尿膜腔への注入培
養 [5] や，3T3 細胞等に感染させて共培養する方法 [2,15, 17] が取られ，ラット・マウスからは CAR-NIH [5]，SMR [10]，CBR [7]，CAT-StL および X シリーズ [15]，
CBM [16] の諸株，そしてウサギ分離株として B シ
リーズ [3]，ブタ分離株として PigCAR-1 など [13] が報告されている。これら分離株は以下の CAR バチルス” としての特徴を示す。すなわち，感染動物の呼吸器線毛上皮の線毛部で増殖し，感染実験で慢性呼吸器疾患を起こし，菌自体はグラム染色陰性かつ銀染色陽性のフィラメント状桿菌を呈し，電子顕微鏡で 3 層の外膜が確認され，滑走運動を行う。
細菌に学名を命名するためには，国際原核生物分類
命名 委 員会（International Committee on Systematics ofProkaryotes, ICSP）
による国際細菌命名規約（International
Code of Nomenclature of Bacteria）に沿い，ICSP の公式機関誌である Int. J. Syst. Evol. Microbiol. にその性状を記載して提案しなければならない。他誌での学名提案も可能だが，その場合は提案した学名とその性状を記載した論文を Int. J. Syst. Evol. Microbiol. に送り，ICSP の審査を受ける必要がある。細菌の学名
命名については，森と中川による解説が参考になる[12]。
国際細菌命名規約によると，学名命名には表 1 の要件が必要である。簡単に述べると，学名は菌株に対して命名されるものであるため，培養可能な基準
株（Type strain）を決め，それを誰もが自由に使えるようにカルチャーコレクションに無条件で寄託し（要件 1），その基準株について必要な記述を行い（要件
2–5），ラテン語文法に適った学名を考案し（要件 6），
Int. J. Syst. Evol. Microbiol. に提案する。提案が認められれば，同誌に採択され，LPSN（List of Prokaryotic
names with Standing in Nomenclature, www.bacterio.net/
index.html）や，NCBI の Taxonomy Browser（www.ncbi.
nlm.nih.gov/Taxonomy/taxonomyhome.html/）に記載さ

66

実験動物ニュース

Vol. 65

No. 4

表 1．細菌とアーキアの学名命名に必要な項目
1．最低 2 カ国のカルチャーコレクションに寄託
培養可能であること，無条件寄託であること
2．菌のコロニー性状，細胞形態の記述
3．生理・生化学的性状試験結果の記述
至適生育温度・pH，耐塩性，生化学試験性状など
4．化学分類学的性状試験結果の記述
菌体脂肪酸組成分析（分類群の特徴を表す）
細胞壁アミノ酸組成分析（グラム陽性菌で重要）
キノン類分析（呼吸における電子伝達系補酵素）
G+C 含量測定
5．16S rDNA 塩基配列に基づく分子系統関係の記述
6．ラテン語文法に適った学名れる。
CAR バチルス” の学名命名の場合も，培養可能な基準株を決めてそれをカルチャーコレクションに寄託する必要があった。共同研究グループは Schoeb
らの方法を参考に， CAR バチルス” のラット分離株である SMR [10] が Vero E6 細胞と共培養するとよく増殖することを見いだした。3T3 細胞など他の細胞との共培養でも SMR は増殖したが，SMR の培養
初期では増殖可能な状態に至るまで 2–3 週間必要とし，寿命の長い Vero E6 細胞のほうが SMR の増殖支持効果が高いと判断した。SMR は菌端を Vero E6 細胞上に付着させ，もう一端を培地中に伸ばした。位
相差顕微鏡を用いて培養中の菌を観察すると，Vero
E6 細胞に付着した SMR 菌体は培地中でイソギンチャ
クの触手のようにゆらゆらと揺れた。
SMR はいったん増殖を始めると，一部は Vero E6細胞に付着しないで浮遊状態で増殖した。そこでVero E6 調整培地（Vero E6 細胞を 37℃，5%CO2 イ
ンキュベータで 10% ウシ胎児血清添加 IMDM 培地
を用いて 3 日間，集密培養し，その培養上清を 0.22
μm フィルターろ過したもの）を使用すると，SMR
を 37℃，5%CO2 インキュベータで単独培養可能なことが分かった。こうして単独培養できるようになった SMR を改めて SMR-C 株と名付け，学名命名のための基準株とした。SMR-CT を理研 BRC の微生物材
料 開 発 室 と ド イ ツ の DSMZ（German Collection of
Microorganisms and Cell Cultures）に条件無しで寄託した（JCM 19453T = DSM 100392T）。
SMR-CT の培養条件は，Vero E6 調整培地を用い，SMR-CT を様々な温度，pH，NaCl 濃度で培養し，増殖するか否かで評価した。SMR-CT の生化学性状はRapid ID 32A（bioMérieux）を用い，キットの説明書にしたがって判定した。菌体脂肪酸組成は，湿菌体をアルカリけん化処理後にメチル化し脂肪酸メチル
エステルとして抽出して，菌体脂肪酸組成分析シス
テム（MIDI Inc.）を用いて決定した [8, 11]。SMR-CTのゲノム DNA はフェノール / クロロホルム法で抽出し，次世代シーケンサーでドラフトゲノムを定め，欠失部分は別途シークエンスを行って完全な環状ゲ
ノム塩基配列を決定した（東京大学大学院新領域創成科学研究科附属オーミクス情報センター 服部正平
元教授らとの共同研究）。MiGAP（www.migap.org）[18]を用いてゲノム DNA 塩基配列から 16S rRNA 遺伝子
領域を推定し，また G+C 含量を計算した。SMR-CTの 16S rRNA 遺伝子はゲノム中に 1 セットのみ存在した。16S rRNA 遺伝子（LC055729, GenBank/EMBL/
DDBJ） を 対 象 に BLASTN 解 析（blast.ncbi.nlm.nih.
gov/blast.cgi）[1] を行って近縁の基準株を選び，各遺伝子配列を MUSCLE 法で整列させ，近隣結合法 [14,19] ならびに最尤法 [4] で系統樹を描いた（ブートス
トラップ値 1,000）。
SMR-CT は微好気性で，胞子を形成せず，グラム
染色陰性かつ好銀性のフィラメント状桿菌であった。
増殖中の菌は位相差検鏡で容易に確認できた。分裂
時間は 20–24 時間。4–37℃で増え，最適温度は 37℃だった。pH は 6 から 8 が最適であった。ラット・マ
ウ ス の 生 理 的 な 塩 濃 度 以 上 で は 成 長 し な か っ た。
Vero E6 調整培地を用い，超低付着性培養器で培養す
ると，菌は単独で浮遊状態で増え，大きさは 0.8–0.9×
8.3–10.0 μm であった。SMR-CT は鞭毛や線毛といった運動器官を持たないが，滑走運動を行った。SMRCT を BALB/c マウスに投与すると慢性呼吸器疾患を発症した。SMR-CT を透過型電子顕微鏡で観察すると，他の CAR バチルス 同様に 3 層の外膜を確認

実験動物ニュースVol. 65

67

No. 4

表 2．Filobacterium rodentium の学名

表 3．Filobacterium rodentium SMR-CT の主要性状

学名
門
綱
目
科
属
種
基準株

分離源
グラム染色
銀染色
細胞長
形状
胞子形成
鞭毛・線毛
滑走運動
DNA G+C 含量
ウレアーゼ活性α- ガラクトシダーゼ活性
β- ガラクトシダーゼ活性
α- グルコシダーゼ活性
α- フコシダーゼ活性
主要脂肪酸

Filobacterium rodentium
Bacteroidetes
Sphingobacteriia
Sphingobacteriales
Filobacteriaceae fam. nov.
Filobacterium gen. nov.
rodentium sp. nov.
SMR-CT = JCM 19453T = DSM 100392T

ラット呼吸器疾患肺陰性
陽性
8–10 μm
フィラメント状桿菌なし
なし
あり
47.7 mol%
あり
なし
なし
なし
なし
iso-C15:0, anteiso-C15:0,
C16:0, C14:0

することができた。
SMR-CT のゲノム塩基配列から推定した 1,491 塩基の 16S rRNA 遺伝子配列を用いて BLASTN 解析を行うと，ラットやマウスから分離報告のある CAR バ
チルス の株と 99–100% 一致した。 CAR バチルス
ブタ分離株との相同性は 87-88% であった。 CAR バ
チルス 以外の基準株との比較では，一番近縁だったのが Chitinophaga pinensis DSM 2588T，Terrimonas
ferruginea DSM 30193 T，Chitinophaga ginsengisoli
ですべて陰性を示したものはなかった。
Gsoil 052 T，Chitinophaga filiformis NBRC 15056 T，
16S rRNA 遺伝子配列を対象とした系統樹解析でChitinophaga cymbidii R156-2T お よ び Chitinophaga
は，SMR-CT は CAR バチルス” の他の齧歯類由来
skermanii CC-SG1BT であり，すべてキティノファー
株とクレイドを形成したが，近隣結合法と最尤法のガ科（Chitinophagaceae）に属し，SMR-CT との相同
双方ともに SMR-CT はキティノファーガ科のいずれ
性はいずれも 86% であった。
の属ともクラスターを形成せず，SMR-CT が細菌のT
SMR-C の 脂 肪 酸 組 成 は，iso-C15:0（41.0%）， 新たな系列を代表することが示唆された。
anteiso-C15:0（25.8%），C16:0（17.0%），C14:0（10.3%），
以上から，共同研究グループは，SMR-CT などラッ
iso-C16:0（4.4%），そして anteiso-C17:0（1.7%）であった。 トやマウスから分離された CAR バチルス” は「科」
不飽和脂肪酸やヒドロキシ脂肪酸は認められなかっレベルで新しい生物群であると考えた。そしてこのた。SMR-CT の最優勢脂肪酸は iso-C15:0 であり，キティ
SMR-CT を，バクテロイデス門スフィンゴバクテリウ
ノファーガ科に属する他の基準株と同様であったが， ム 目 の 新 し い 科 で あ る フ ィ ロ バ ク テ リ ウ ム 科
anteiso-C15:0，C16:0 および C14:0 の構成比はいずれの基 （Filobacteriaceae），その中の新しい属であるフィロバ
準株とも異なっていた。
クテリウム属の新種「フィロバクテリウム・ローデ
ゲノム塩基配列から計算した G+C 含量は，47.7
ンティウム（Filobacterium rodentium）」と命名した [6]。
mol% であった。文献から調べたキティノファーガ科
Filobacterium は，新ラテン語でフィラメント状細菌に属する他の基準株の G+C 含量は 40.7–51.9% だっの意味，rodentium は，マウスやラットが属する齧歯た。
類由来であることを意味する。基準株は SMR-CT でT
SMR-C の生化学性状で特徴的であったことは， ある（表 2）。表 3 に Filobacterium rodentium SMR-CT
ウレアーゼ陽性，ならびに α ガラクトシダーゼ，βの主要性状を記載した。
ガラクトシダーゼ，α グルコシダーゼ，α フコシダー
CAR バチルス” は 1980 年の最初の報告 [27] からゼがそれぞれ陰性だったことである。文献から調べ35 年を経て，SMR-CT を基準株として学名を得るこたキティノファーガ科に属する他の基準株ではととなった。しかし，SMR-CT の病原性発揮機構にT
Chitinophaga ginsengisoli Gsoil 052 と Chitinophaga
ついては未解明のままである。上記のように SMRpinensis DSM 2588T のほかはウレアーゼ陰性（一部のCT のゲノム塩基配列は既に決定しているが，類縁菌株では未検査）であり，α ガラクトシダーゼ，β ガラを含め未知の遺伝子が多く，SMR-CT の病原性関連
クトシダーゼ，α グルコシダーゼ，α フコシダーゼに遺伝子候補は不明である。今後，病原性発揮機構のついては，キティノファーガ科に属する他の基準株研究が必要である。

実験動物ニュース68
謝Vol. 65

辞10.

Filobacterium rodentium SMR-CT 学名命名に関わったすべての方々，すべての機関に感謝申し上げます。
11.
文

献

1. Altschul, S. F., Madden, T. L., Schäffer, A. A., Zhang,J., Zhang, Z., Miller, W. and Lipman, D. J. 1997.
Gapped BLAST and PSI-BLAST: a new generationof protein database search programs. Nucleic Acids
Res. 25: 3389–33402.
2. Cundiff, D. D., Besch-Williford, C., Hook, R. R. Jr,
Franklin, C. L. and Riley, L. K. 1994. Detection of cilia-associated respiratory bacillus by PCR. J. Clin.
Microbiol. 32: 1930–1934.
3. Cundiff, D. D., Besch-Williford, C. L., Hook, R. R.
Jr, Franklin, C. L. and Riley, L. K. 1995. Characterization of cilia-associated respiratory bacillus in
rabbits and analysis of the 16S rRNA gene sequence.
Lab. Anim. Sci. 45: 22–26.
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No. 4

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実験動物ニュースVol. 65

No. 4

Experimental Animals—和 文 要 約—Vol. 65, No. 4 October 2016

原著
Effects of nimesulide on the small intestine mucositis induced by methotrexate
in rats....................................................................................................................... 329–336
Aynur Arslan1), Adalet Ozcicek2), Bahadir Suleyman3), Taha Abdulkadir Coban4),
Ferda Keskin Cimen5), Hatice Sevim Nalkiran6), Mehmet Kuzucu7),
Durdu Altuner3), Nihal Cetin3), and Halis Suleyman3)
1)

Department of Internal Medicine, Istinye State Hospital, 34465, Istanbul, Turkey,
Department of Internal Medicine, Faculty of Medicine, Erzincan University, 24030, Erzincan, Turkey,
3)
Department of Pharmacology, Faculty of Medicine, Erzincan University, 24030, Erzincan, Turkey,
4)
Department of Biochemistry, Faculty of Medicine, Erzincan University, 24030, Erzincan, Turkey,
5)
Department of Pathology, Mengucek Gazi Training and Research Hospital, 24030, Erzincan, Turkey,
6)
Department of Medical Biology, Faculty of Medicine, Recep Tayyip Erdogan University, 53020,
Rize, Turkey, 7)Department of Biology, Science and Art Faculty, Erzincan University, 24030,
Erzincan, Turkey
2)

Intestinal mucositis is one of the major problems in the patients receiving cancer treatment.
Nimesulide is a drug with antioxidant, antiinflammatory and antiulcer features. We aimed toinvestigate the effect of nimesulide on the small intestine mucositis induced by methotrexate(MTX) in rats. Experimental animals were divided into the control group, MTX group (MTXG) andnimesulide+MTX administered group (NMTXG) with eight rats per group. The control and MTXG
groups were given distilled water by gavage and the NMTXG was given nimesulide 100 mg/kg
orally. After one hour, the NMTXG and MTXG rat groups were administered oral MTX 5 mg/kg.
This procedure was repeated once a day for 15 days and the rats were sacrificed. The duodenum andjejunum of each rat was removed for the assessment of biochemical markers and histopathologicalevaluation. Malondialdehyde (MDA) and myeloperoxidase (MPO) levels were significantly
higher in the duodenal and jejunal tissues of the animals which received MTX, compared to thecontrol and NMTXG (P<0.001). Also, the levels of total glutathione (tGSH), glutathione reductase(GSHRd), glutathione peroxidase (GSHPx), catalase (CAT) and superoxide dismutase (SOD) weresignificantly lower in the MTXG (P<0.001) compared to other groups. MTX led to villus and crypt
epithelial damage and inflammation containing marked PMNL and eosinophils in the intestinal
tissues histopathologically. Whereas, there was only mild irregularities in the villus structures of the
NMTXG. Nimesulide protected the small intestines against damage by MTX. Intestinal mucositis
caused by MTX may be preventable by co-administered nimesulide.

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実験動物ニュース70

Vol. 65

No. 4

癌性神経因性疼痛に対する抗 nGF 治療の効果 ......................................................337–343
宮城正行 1)・石川哲大 2)・鴨田博人 2)・鈴木 都 2)・井上 玄 1)・佐久間詳浩 2)・及川泰宏 2)・
内田健太郎 1)・鈴木崇根 2)・高橋和久 2)・高相晶士 1)・大鳥精司 2)1)

北里大学医学部整形外科学，2) 千葉大学大学院医学研究院整形外科学

悪性腫瘍の脊椎転移は脊髄を圧迫し麻痺を起こす一方，神経根を圧迫し激しい疼痛を訴える。この疼痛はオピオイドを含む種々の薬物治療に難治性である。昨今，抗 NGF（神経成長因子）製剤の鎮痛効果が注目される。本研究の目的はマウス坐骨神経悪性腫瘍浸潤モデルにて抗NGF 中和抗体の効果を検討することである。悪性腫瘍浸潤モデル作製のため，8 週齢雄性マウ
スの右坐骨神経に NCTC2472（マウス線維肉腫細胞）を注射した。腫瘍注射 2 週後に抗 NGF 中
和抗体を腹腔内投与した治療群と生食を投与した無治療群にわけた。さらに右坐骨神経に生食を注射した sham 群も用意した。3 週後（治療 1 週後）に CatWalk を用いた歩行解析を行った
後，右 L4–L6 の後根神経節（DRG）を CGRP（炎症性疼痛ペプチド）と ATF-3（神経傷害のマーカー）で，腰膨大部の脊髄を iba-1（マイクログリア ： 神経傷害のマーカー）で免疫組織化学染色を行った。CatWalk で解析された歩行時の後肢の平均接地圧の患健比，DRG の CGRP 陽性
細胞数，ATF-3 陽性細胞数，脊髄後角のマイクログリアの数を算出し検討した。処置後 3 週での平均接地圧の患健比は sham 群に比し，無治療群は有意に減少していたが，治療群は有意に回復を示した（P<0.05）。DRG の CGRP 陽性細胞数，ATF-3 陽性細胞数，脊髄後角のマイクロ
グリアの数はいずれも sham 群に比し，無治療群は有意に上昇したが，治療群は有意に上昇を抑制した（P<0.05）。本モデルで有意に歩行時の平均接地圧が減少し，DRG や脊髄後角での感作が確認された。しかし，抗 NGF 抗体を投与することで歩行変化や支配感覚神経の感作を抑制することができた。このことより悪性腫瘍浸潤に伴う神経因性疼痛に対して抗 NGF 治療は有効である可能性がある。

ブスルファンによる出血時間延長を伴う急性血小板減少のブタモデル ................345–351
阿部朋行 1, 2)・河野正太 1, 2)・大貫貴広 1)・菱川修司 3)・國田 智 4)・花園 豊 1, 2)
1)
自治医科大学分子病態治療研究センター再生医学研究部，2) 自治医科大学先端医療技術開発セン
ター幹細胞・創薬基盤研究部門，3) 自治医科大学先端医療技術開発センター医療技術トレーニング
部門，4) 自治医科大学先端医療技術開発センター動物資源開発部門

ブスルファン（BU）は，造血幹細胞移植の前処置に使用される薬剤であり，骨髄抑制の結果として血小板が減少する。本研究では，BU による急性血小板減少のブタモデルを作出した。
マイクロミニブタ（6~12 ヵ月齢，体重 8.5~14.4 kg，富士マイクラ）に BU 4，6，8 mg/kg を静脈内投与し（各々 n=1，8，1），16 日間にわたって末梢血の血小板数を測定した。その結果，血小板数は BU 投与量に依存して減少したが，6 mg/kg の BU 投与が血小板減少モデルとして至適と判断された。この至適投与量の BU を投与した場合，血小板数は 7 日目から低下し，12 日
目に 30,000/µl 未満に減少した（最低値 14,000/µl，投与 15 日目）。出血時間は血小板数の減少に伴って延長した（r = –0.63，P<0.01）。白血球数は BU 投与後 3日目から減少傾向だったが，最低
値 5,000/µl にとどまり，感染徴候は見られなかった。ヘモグロビン値および血液凝固検査値に著明な変化はなかった。いずれの個体も食欲減退，体重減少，活動性の低下は見られなかった。
BU 投与 16日目では，骨髄有核細胞数および各血球系統コロニー数が有意に低下し，骨髄細胞密度の低下が認められ，予想どおり血小板減少は骨髄抑制に起因するものであった。本ブタモ
デルは臨床応用をめざした止血製剤の試験等に有用と思われる。

実験動物ニュースVol. 65

No. 4

隔離飼育した亜鉛欠乏食マウスの攻撃行動に対する抑肝散加陳皮半夏の改善効果と海馬過剰興奮に対する二つの成分の改善効果......................................353–361
玉野春南・塩谷悠介・井出和希・武田厚司
静岡県立大学薬学部統合生理学分野

認知症患者の周辺症状である精神症状や行動障害（攻撃性，興奮性，幻覚，徘徊など）を改善することが期待される漢方薬，抑肝散加陳皮半夏の効果について，亜鉛欠乏食動物を用いて検討した。マウスを隔離飼育すると攻撃性（噛みつき ・ レスリング）が増加するが，亜鉛欠乏
食を与えるとこの攻撃性は顕著に促進され，この攻撃行動には興奮性グルタミン酸作動性神経の過剰な活動が関与する。本研究では隔離飼育した亜鉛欠乏食マウスを認知症周辺症状のモデルとして用い，このマウスに抑肝散加陳皮半夏水（1.5 mg/ml）を飲料水として与えた。マウスの飲水量から 1日あたりの抑肝散加陳皮半夏の摂取量は約 300 mg/kg 体重であった。抑肝散加陳皮半夏を飲料水として与えると，体重増加と飲水量においてコントロール群との間に違いは見られなかった。一方，攻撃行動を示したマウスの割合は抑肝散加陳皮半夏摂取により低下しなかったが，攻撃行動を示したトータル時間は有意に減少した。抑肝散加陳皮半夏の成分
でカンゾウとチョウトウコウにそれぞれ含まれる18β-glycyrrhetinic acid（GA）と Geissoschizine
methylether（GM）は，亜鉛欠乏食で亢進した海馬グルタミン酸作動性神経からの過剰なグル
タミン酸放出を細胞内カルシウムシグナリングの抑制を介して改善することが明らかとなった。この改善は，抑肝散加陳皮半夏による攻撃行動減少の一因であることが考えられる。

Optimization of phenylhydrazine induced hyperbilirubinemia in experimental rabbit........................................................................................................................... 363–372
Haq Nawaz1), Muhammad Aslam Shad2), and Mohammad Saeed Iqbal3)
1)

Institute of Chemical Sciences, Bahauddin Zakariya University, Multan, Punjub, Pakistan,
Department of Biochemistry, Bahauddin Zakariya University, Multan, Punjub, Pakistan,3)
Department of Chemistry, Forman Christian College, Lahore 54600, Punjub, Pakistan
2)

Induction of hyperbilirubinemia in experimental rabbits by phenylhydrazine was optimized interms of dose, dose interval and number of doses using response surface methodology. Central
Composite Design was employed using five levels for each of the three input variables. Degree ofhyperbilirubinemia was measured in terms of bilirubin level in serum of animals. A dose dependentsignificant elevation (P<0.05) of total serum bilirubin level was observed which was optimized byusing eight factorial, six axial and six central points as suggested by experimental design. Optimum
levels of phenylhydrazine dose, total number of doses and a dose interval to achieve maximum
elevation (4.06 mg/dl−1) of total serum bilirubin were found to be 11.56 mg/kg−1 body weight, 8 and24.65 h, respectively. The induction procedure was validated by performing five replicate experiments
on a group of five animals which showed 3.56 ± 0.47 mg/kg−1 body weight elevation in total serum
bilirubin level.

71

実験動物ニュース72

Vol. 65

No. 4

An HBV-tolerant immunocompetent model that effectively simulates chronic
hepatitis B virus infection in mice............................................................................ 373–382
Lunzhi Yuan1, 2), Tengyun Wang1, 2), Yali Zhang1, 2), Xuan Liu1, 2), Tianying Zhang 1, 2),
Xiaoling Li1, 2), Pingguo Liu3), Kun Wu1, 2), James Wai Kuo Shih1, 2), Quan Yuan1, 2),
Tong Cheng1, 2), and Ningshao Xia1, 2)
1)State Key Laboratory of Molecular Vaccinology and Molecular Diagnostics, School of Life Sciences,
Xiamen University, Xiamen, 361102, P.R. China, 2)National Institute of Diagnostics and Vaccine
Development in infectious diseases, School of Public Health, Xiamen University, Xiamen 361102,
P.R. China, 3)Department of Hepatobiliary Surgery, Zhongshan Hospital of Xiamen University, Xiamen
361102, P.R. China

Hepatitis B virus (HBV) is the leading cause of liver disease and hepatic carcinoma (HCC).
Approximately 350 million people worldwide are infected with HBV and at risk of chronicity. An
efficient HBV-tolerant murine model that mimics HBV infection in humans is desirable for HBVrelated research. In this study, we investigated and established a murine model by hydrodynamic
injection (HDI) of pAAV/HBV into the tail vein of AAVS1 site element-transgenic mice. In 80%of the injected mice, the serum level of HBsAg reached 103-4 IU/ml and persisted for more thanhalf a year. Next, the model was used to evaluate RNA interference (RNAi)-based antiviral therapy.
Data obtained using the model demonstrated that this model will facilitate the elucidation of themechanisms underlying chronic HBV infection and will also be useful for evaluating new antiviraldrugs.

Physiological and pharmacokinetic effects of multilevel caging on Sprague Dawley
rats under ketamine-xylazine anesthesia................................................................. 383–392
Aurore Dodelet-Devillers1), Chiara Zullian1), Francis Beaudry2),
Jim Gourdon3), Julie Chevrette3), Pierre Hélie2), and Pascal Vachon1)
1)

Department of Veterinary Biomedicine, Faculty of Veterinary Medicine, University of Montreal,Saint-Hyacinthe, Quebec, Canada, 2)Department of Pathology and Microbiology, Faculty of
Veterinary Medicine, University of Montreal, Saint-Hyacinthe, Quebec, Canada, 3)Comparative
Medicine and Animal Resources Centre, McGill University, Montréal, Quebec, Canada

While the cage refinement is a necessary step towards improving the welfare of research rats,
increasing the complexity and surface area of the living space of an animal may have physiologicalimpacts that need to be taken into consideration. In this study, ketamine (80 mg/kg) and xylazine(10 mg/kg) caused a short duration anesthesia that was significantly decreased in Sprague-Dawley
rats housed in multilevel cages (MLC), compared to rats housed in standard cages (SDC). The
withdrawal reflex, the palpebral reflexes and the time-to-sternal all occurred earlier in MLC housed
rats, suggesting an effect of housing on the physiology of the rats. In addition, during anesthesia,
cardiac frequencies were increased in animals housed in the smaller SDC. Respiratory frequencies,
the blood oxygen saturation and rectal temperatures during anesthesia did not vary between conditions
during the anesthesia. While xylazine pharmacokinetics were unchanged with caging conditions, theclearance and half-lives of ketamine and its metabolite, norketamine, were altered in the rats housed in
MLC. Finally, while no difference was ultimately seen in rat body weights, isolated liver and adrenal
gland weights were significantly lighter in rats housed in the MLC. Increasing cage sizes, while
having a positive impact on wellbeing in rats, can alter anesthetic drug metabolism and thus modify
anesthesia parameters and associated physiological processes.

実験動物ニュースVol. 65

No. 4

イソフルラン吸入麻酔が sHr/izm，wky/izm，crl:cD (sD) ラットの呼吸循環機能に及ぼす抑制作用及び抑制作用に対する感受性の系統差 ................393–402
加藤弘毅 1)・若井 淳 2)・小澤和典 3)・関口美穂 3, 4)・片平清昭 3)2)
防衛医科大学校医学教育部動物実験施設，
岩手医科大学医歯薬総合研究所実験動物医学研究部門，
福島県立医科大学ふくしま国際医療科学センター医療 – 産業トランスレーショナルリサーチセンター，4)
福島県立医科大学医学部附属実験動物研究施設

1)3)

イソフルランは齧歯類の麻酔に幅広く用いられるが，イソフルランの吸入濃度増加がラットの呼吸循環機能に及ぼす影響及びその系統間比較に関しては十分に明らかになっていない。
そこで，本研究では，麻酔気化器のダイヤル設定値を増加させた際の SHR/Izm，WKY/Izm，Crl:CD (SD) の呼吸循環器系パラメータを取得し，解析した。1.5% イソフルランによる麻酔導入後，双極誘導心電図，tail-cuff 法による血圧そして呼吸数を取得した後，設定値を段階的に，
2，3，4 および 5% へ上げ，各吸入濃度における呼吸循環器系パラメータを取得した。4% 以上の吸入濃度で，RR および PR 間隔の有意な延長が 3 系統で認められ，QTC 間隔の有意な短縮が
SHR/Izm でのみ観察された（P<0.05）。心拍変動の周波数領域解析で，LF/HF の有意な増加が
SHR/Izm で，HF の有意な減少が WKY/Izm で認められた（P<0.05）。また，血圧および心拍数は
SHR/Izm で顕著に減少し，一方，減少の程度は 3 系統の中で WKY/Izm が最も小さかった。呼吸数は，吸入濃度増加に伴い 3 系統で同様に減少した。以上の結果は，イソフルラン吸入麻酔による心循環器系への抑制作用に対してラット系統間で感受性に差があり，用いた 3 系統の中では，SHR/Izm は感受性が高いことを示唆している。

立体的生活環境構造による成長期マウスへの運動導入効果 .................................. 403–411
中村 悠 1)・上野安貴 1)・布村由香 2, 4)・中垣和英 2, 5)・武田庄平 3)・鈴木 馨 1)
東京農工大学フィールドサイエンスセンター，2) 日本獣医生命科学大学，3) 東京農工大学農学部比較心理学，4) 現在：株式会社ケーナインラボ，5) 現在：新潟大学医歯学総合病院生命科学医療センター

1)

ICR マウスを成長期の 3 週齡から10 週齡まで飼育し，生活環境にハシゴなど障害物を設置する環境エンリッチメントによる運動導入効果を標準的環境との比較で調べた。障害物を設置することにより，雌雄ともに運動量が有意に増加した（P<0.01）。運動群のマウスは，標準環境に比べてオスでは 6 〜 9 週齡，メスでは 8 週齡時の体重が大きかった（P<0.05）。また，運動群のメスのマウスは性成熟が有意に早くなった（P<0.001）。運動群の雌雄マウスにおいて，情動を測定するオープンフィールドテストの不安様行動とストレスホルモンである血漿コルチコス
テロン濃度に減少傾向が有り，これらはオスで有意だった（P<0.05）。さらに，血中のナチュラ
ルキラー細胞は運動群のマウスで多い傾向があったが，有意な差は検出されなかった。結論として，立体的な生活環境の提供によってストレスのない日常的な運動が成長期のマウスに導入された。さらに，これらの実験結果から，運動が体の成長，性成熟，不安様行動に有益な効果を果たすことが示唆された。また，動物を集団飼育する場合に環境エンリッチメントがメスよりもオスに対してより効果的である可能性が示唆された。

73

実験動物ニュース74

Vol. 65

No. 4

Radiotherapy combined with an engineered Salmonella typhimurium inhibits tumor growth
in a mouse model of colon cancer.......................................................................... 413–418
Xiande Liu1), Shengnan Jiang2), Linghua Piao3), and Feng Yuan4)
1)

Department of Veterinary Medicine, Hainan University, 58 Renmin Road, Haikou, Hainan, 570228,
P.R. China, 2)Department of Nuclear Medicine, Affiliated HaiKou Hospital, Xiangya School of
Medicine, Central South University, 43 Renmin Road, Haikou, Hainan, 570208 China, 3)Departmentof Physiology, Hainan Medical University, 3 Xueyuan Road, Haikou, Hainan, 571199, P.R. China,
4)
Department of Radiation Oncology, Affiliated HaiKou Hospital, Xiangya School of Medicine,
Central South University, 43 Renmin Road, Haikou, Hainan, 570208, P.R. China

The engineered Salmonella typhimurium ΔppGpp (S.t ΔppGpp) has been studied in terms of its
ability to carry imaging probes (bacterial luciferase, Lux) for tumor imaging or carry therapeutic
molecules (Cytolysin A) to kill cancer cells. To establish a novel cancer therapy, bacterial therapy was
combined with radiotherapy using the attenuated strain S.t ΔppGpp/pBAD-ClyA. Radiotherapy (21Gy)
contributed to S. typhimurium colonization in a colon tumor (CT26) model of BALB/c mice. The
combination of bacterial therapy and radiotherapy treatments reduced tumor growth compared with
only bacterial therapy.

wHHlmi ウサギにおける冠動脈病変の進行による冠スパズムおよび狭心症様虚血性心疾患の発生 .................................................................................419–426
小池智也 1)・田村姿央理 2)・于 イン 1)・國吉信恵 1)・塩見雅志 1, 2)
1)

神戸大学医学研究科附属動物実験施設，2) 神戸大学医学研究科疾患モデル動物病態生理学分野

WHHLMI ウサギでは重度の冠動脈病変が発生し，慢性虚血による心筋梗塞が発症する。しかし，急性の虚血性心疾患の発症については適切なモデル動物が開発されていない。本研究では，WHHLMI ウサギに冠スパズムを誘発し，冠動脈病変の程度と冠スパズムの発生との関係
および狭心症等の急性の心筋虚血病変の発生について解析した。麻酔下でノルエピネフリン
を耳介周縁静脈から持続点滴投与中にエルゴノビンを投与し，冠スパズムを誘発した。冠動脈造影と病理組織学的解析において，冠スパズム発生部位に冠動脈病変が観察され，冠スパズムは進行した冠動脈病変で発生頻度か有意に高く，心エコーによる解析において冠スパズムの発生で左室壁の運動度が低下し，血清心筋虚血マーカーが上昇し，心筋虚血を示す心電図変化が認められた。これらの変化はいずれも統計的に有意であった。以上の結果から，冠スパズムの発生に冠動脈病変の重症化が関与し，WHHLMI ウサギは狭心症様急性虚血性心疾患のモデル動物として有用であると考えられる。

自己免疫疾患および 2 型糖尿病モデルマウスでの実験的 AA アミロイドーシスの伝達 .....................................................................................................................427–436
前田麻友子 1)・村上智亮 2)・naeem muhammad3)・猪島康雄 1, 3)・石黒直隆 1, 3)
岐阜大学応用生物科学部共同獣医学科食品環境衛生学研究室，2) 東京農工大学農学部共同獣医学
科獣医毒性学研究室，3) 岐阜大学大学院連合獣医学研究科

1)

AA アミロイドーシスは，アミロイド A（AA）蛋白質の蓄積に特徴づけられる蛋白質の折りたたみ異常疾患である。AAアミロイドーシスは，食肉動物にみられ，異なった動物に伝達する。
AA 蛋白質の前駆蛋白質は，急性期蛋白質の血清アミロイドＡ蛋白質であり，リュウマチ疾患の慢性病に観察される。自己免疫病や 2 型糖尿病など慢性疾患は，AA アミロイドーシスを惹実験動物ニュースVol. 65

No. 4

起するファクターと考えられる。本研究は，自己免疫病や 2 型糖尿病と AA アミロイドーシスの関係を明らかにする目的で，マウス，ウシおよびニワトリ由来の AA 蛋白質をこれら疾患モデ
ルマウスに実験的に投与した。コントロールとして野生マウスを用いた。自己免疫疾患モデル
マウスでの SAA，IL-6 および IL-10 の濃度はコントロールマウスより高かった。しかし，自己免疫疾患および 2 型糖尿病モデルマウスでの脾臓の AA 蛋白質の蓄積は，コントロールマウスに比べて低く，両モデルマウスの脾臓での AA 蛋白質の蓄積は，コンゴレッド染色や免疫組織
化学検査ではコントロールマウスに比べて少なかった。これらの結果は，生体の免疫応答において，SAA 濃度や炎症あるいは非炎症状態以外の要因が AA 蛋白質の蓄積に関与していることを示している。

Noni (Morinda citrifolia Linn.) fruit juice attenuates the rewarding effect of ethanol
in conditioned place preference in mice.................................................................. 437–445
Vijayapandi Pandy and Yasmin Khan
Department of Pharmacology, Faculty of Medicine, University of Malaya, 50603 Kuala Lumpur,
Malaysia

Morinda citrifolia L. commonly known as noni or Indian mulberry belongs to the family Rubiaceae.
Noni fruit juice has recently become a very popular remedy for the treatment of several diseases,
including psychiatric disorders. This study aimed to investigate the anticraving effect of Tahitian
Noni® Juice (TNJ) against ethanol seeking behavior in ICR male mice using the conditioned place
preference (CPP) test. The CPP procedure consisted of four phases: preconditioning, conditioning,
extinction, and reinstatement. During conditioning, intraperitoneal (i.p.) injections of ethanol (2 g/kg
body weight (bw)) and normal saline (10 ml/kg bw) were given on alternate days for 12 days. Then,the animals were subjected to extinction trials for the next 12 days to weaken CPP. Finally, CPP wasreinstated in the extinguished animals by a single low-dose priming injection of ethanol (0.4 g/kg bw,
i.p.). The effect of TNJ (as a source of drinking water) on different phases of ethanol CPP in mice wasstudied. TNJ-treated mice showed a significant reduction in ethanol seeking behavior in the CPP test.
The reference drug, acamprosate (ACAM) also showed a similar effect in the CPP test. The outcomeof this study suggests that TNJ is effective in attenuating ethanol craving in mice and could be utilized
for the treatment of alcohol dependence. Further clinical studies in this direction are warranted tosupport the present preclinical findings.

成長ホルモン分泌パターンに依存する性的二形性ラット肝シトクロム P450
遺伝子発現の検出のための新しい in vivo 解析モデル ............................................447–454
丸山基世 1)・藤澤正彦 2)・横須賀誠 3)・斎藤 徹 3)・羽山伸一 4)・秋元敏雄 1)・袴田陽二 2)1)
3)

日本医科大学実験動物管理室，2) 日本獣医生命科学大学獣医学部獣医保健看護学科，
同 比較動物医学教室，4) 同 野生動物学教室

肝臓の薬物代謝酵素シトクロム P450（CYP）の一部は性的二形性を示し，薬物の効果や副作用の性差の原因として臨床上重要な問題となっている。ラットにおいて CYP の性的二形性は下垂体成長ホルモン（GH）の分泌パターンの性差に強く依存するとされているが，詳細なメカニズムは明らかでない。我々は，以前にマウスアルブミンエンハンサー／プロモーターの制御下で，肝細胞特異的に蛍光タンパク質 DsRed2 遺伝子を発現するトランスジェニック（AlbDsRed2 Tg）ラットを作製し，肝 DsRed2 発現が成熟雄ラットに限定される性的二形を示すことを報告した。本研究では，GH 分泌パターンに依存する内因性 CYP 発現と性的二形性 DsRed2

75

実験動物ニュース76

Vol. 65No. 4発現の関連性を検討するために，本ラットの GH 分泌パターンを雌雄で逆転させ，肝 CYP お
よび DsRed2 発現を比較した。生後 1 日目に雌雄 Alb-DsRed2 Tg ラットの性腺を摘出し，雌には同時にテストステロンプロピオネートを投与した。従来の報告と一致して，実験的に GH 分
泌パターンを雌雄で逆転させると CYP の性的二形性発現が逆転し，それと同期して本ラットの DsRed2 発現の性的二形性が逆転した。肝 DsRed2 発現は性的二形 CYP 発現と強く相関し，
本ラットは GH 分泌パターンに依存する性的二形 CYP 発現の変化を簡便に評価できる有用なツールであることが明らかとなった。

ヒト il-6 をコンディショナルに発現するトランスジェニックマウスの作製 .........455–463
森 大気 1)・村澤裕介 2)・猪飼里奈 3)・早川朋子 1)・中村博幸 4)・小木曽 昇 5)・
新飯田俊平 1)・渡辺 研 3)1)
国立長寿医療研究センター（ncGG）メディカルゲノムセンター，2)ncGG 健康長寿支援ロボットセンター，3)ncGG 運動器疾患研究部，4) 金沢大学大学院顎顔面口腔外科学分野，5)ncGG 実験動物管理室

IL-6 は様々な生理機能や疾病に関与する重要なサイトカインである。これまでに，機能獲得型のトランスジェニックマウスを用いた実験系が確立され，IL-6 の機能解析に大きく貢献してきた。しかし，多様な IL-6 の機能の解明に用いるトランスジェニックマウスを発現部位や時期に合わせてそれぞれ作製するには非常に労力と時間を要する。本研究では，Cre-loxP システムを用いたコンディショナルにヒトIL-6を発現するトランスジェニックマウス（LGL-IL6）を樹立した。このマウスでは，Cre 活性依存的に緑色蛍光タンパク質の発現ユニットが除去され，ヒト
IL-6 が発現する。この LGL-IL6 マウスと，発現様式が記述された Creドライバーマウスを使うことにより，時空間特異的にヒトIL-6 の過剰発現による病態の解明に役に立つと考えられる。

コモンマーモセットの脳における CYP2D mRNA の in situ
ハイブリダイゼーション研究 .................................................................................465–471
嶋本良則 1)・新美君枝 2)・北村 浩 3)・椿下早絵 4)・高橋英機 2)
酪農学園大学獣医学群獣医保健看護学類動物疾病治療研究室，2) 国立研究開発法人理化学研究所
脳科学総合研究センター動物資源開発支援ユニット，3) 酪農学園大学獣医学群獣医保健看護学類獣医学類獣医生理学研究室，4) 酪農学園大学獣医学群獣医保健看護学類動物理学療法研究室
1)

コモンマーモセットは，神経科学および行動研究などの生物医学の研究分野でますます使用されるようになってきた霊長類動物である。シトクロム P450（CYP）2Dは，ヒトの脳内において精神神経学的な活動に関与することが推測されるようになった。本研究で，我々はマーモ
セットの脳内での CYP2D の役割を明らかにするために，in situ ハイブリダイゼーション（ISH）
法を用いて脳内での CYP2D の発現パターンを調べた。加えて，コモンマーモセットの CYP2D
でよく研究されているアイソフォームである CYP2D19 遺伝子の染色体上の位置を決定するた
めに，蛍光 in situ ハイブリダイゼーション（FISH）解析を実施した。コモンマーモセットの脳におけるCYP2D mRNA は，大脳皮質，海馬，黒質，小脳の神経細胞に局在しており，これはヒト脳での知見と一致していた。FISH 解析では，CYP2D19 遺伝子は 1 番染色体の長腕に位置していた。この部分はヒトの CYP2D6 が存在する 22 番染色体に相同な領域であった。これらの結果から，マーモセット脳内の CYP2D は，脳活動においてヒトCYP2D6と同様な役割を果たしうること，そして CYP2D19 遺伝子はシンテニックな様式で保存されていることが示唆される。以上の知見は，コモンマーモセットは脳内での CYP2D の機能不全に関連した精神疾患を研究するための有益なモデルであることを示唆している。

実験動物ニュースVol. 65

No. 4

ラットの頭部骨膜欠損モデルに対しフィブリン糊およびポリグリコール酸シートとゼラチンスポンジにより被覆した創部治癒効果の比較 .........................................473–483
越沼伸也 1)・村上翔子 1)・野井将大 1)・村上拓也 1)・向所賢一 2)・杉原洋行 2)・山本 学 1)
1)

滋賀医科大学医学部歯科口腔外科学講座，2) 滋賀医科大学医学部病理学講座分子診断病理学部門

口腔外科領域の手術では，骨膜の除去が必要となる症例が存在する。そのような症例において，骨面を露出させたままにすると感染する可能性が存在し，また創部は二次治癒の間，瘢痕形成をする。本研究の目的は，手術によって骨膜が欠損した症例に対し，創傷治癒における理想的な被覆材料を検討することにある。今回われわれは，10 週齢の Wistar rat を用いて頭部の皮膚と骨膜が 1 cm2 欠損したモデルを，イソフルレンによる全身麻酔下に作製した。rat は，欠損部に対する治療法から 3 グループに分けた。
（1）フィブリン糊付きポリグリコール酸シートにより創部を被覆した群（PGA-FG），（2）スポンゼル ®（ゼラチンスポンジ被覆材）により創部を被覆した群（GS），（3）開放創群（Control），とした。そして創部の治癒を，2 週間，4 週間，6週間で組織学的に評価した。その結果，GS と PGA-FG 治療では湿潤環境が維持され，骨の表面が乾燥と感染から保護されたことから，Control と比較してより治癒が認められた。術後 6 週間では，GS はすべての rat で完全な上皮化が認められたが，PGA-FG と Control ではすべてのrat ではなかった。創部被覆材では，維持がよく湿潤環境が保たれると創傷治癒が促進される。
GS の術後 6 週間を組織学的に観察した結果，骨表面の骨芽細胞の増殖が付属器の再生とともに完全な上皮化が認められた。それと比較して，PGA-FG では，素材の吸収速度が遅く，創部に残存していたことから治癒の遅延を引き起こし，また異物反応のある瘢痕組織形成によって骨芽細胞の増殖を阻害していた。

77

実験動物ニュースVol. 65 No. 4

維持会員（五十音順）（91 社）（平成 28 年 8 月 31 日現在）
会

員

名

〒

住

（株）IHI

東京都江東区豊洲 3-1-1（株）アイセイ

大阪府和泉市唐国町 1-6-1

135-8710
594-1151
旭化成ファーマ（株）
410-2321
味の素（株）
210-8681
あすか製薬（株）
213-8522
アステラスリサーチテクノロジー（株） 305-8585（株）アドスリー
164-0003（株）アニマルケア
160-0022（株）アニメック
183-0031（株）アネシス101-0052
EPS 益新（株）LSG 事業部
162-0821（株）イナリサーチ399-4501
エーザイ（株）
300-2635（株）LSI メディエンス
314-0255（株）大塚製薬工場
772-8601
小野薬品工業（株）
913-0032
小原医科産業（株）
165-0022
オリエンタル酵母工業（株）
174-8505
花王（株）
321-3497（一財）化学及血清療法研究所
869-1298
科研製薬（株）426-8646
鹿島建設（株）107-0052
北里第一三共ワクチン（株）
364-0026
北山ラベス（株）
396-0025
キッセイ薬品工業（株）
399-8304
九動（株）
841-0075
共立製薬（株）
300-1252
協和発酵キリン（株）富士リサーチパーク 411-0943
クミアイ化学工業（株）
439-0031
Crimson Interactive Pvt. Ltd.
（株）クレハ169-8503（株）ケー・エー・シー
604-8423
興和（株）
189-0022
三協ラボサービス（株）
132-0023
参天製薬（株）
630-0101（株）三和化学研究所
511-0406（株）ジェー・エー・シー
153-0043
シオノギテクノアドバンスリサーチ（株） 520-3423

所

静岡県伊豆の国市三福 632-1
神奈川県川崎市川崎区鈴木町 1-1
神奈川県川崎市高津区下作延 5-36-1
茨城県つくば市御幸が丘 21
東京都中野区東中野 4-27-37
東京都新宿区新宿 5-18-14 新宿北西ビル 7F
東京都府中市西府町 3-17-4
東京都千代田区神田小川町 3-3
東京都新宿区津久戸町 1-8 神楽坂 AK ビル 8F
長野県伊那市西箕輪 2148-188
茨城県つくば市東光台 5-1-3
茨城県神栖市砂山 14-1
徳島県鳴門市撫養町立岩字芥原 115
福井県坂井市三国町山岸 50-10
東京都中野区江古田 4-28-16
東京都板橋区小豆沢 3-6-10
栃木県芳賀郡市貝町赤羽 2606
熊本県菊池市旭志川辺 1314-1
静岡県藤枝市源助 301
東京都港区赤坂 6-5-11
埼玉県北本市荒井 6-111
長野県伊那市荒井 3052-1
長野県安曇野市穂高柏原 4365-1
佐賀県鳥栖市立石町惣楽 883-1
茨城県つくば市高見原 2-9-22
静岡県駿東郡長泉町下土狩 1188
静岡県菊川市加茂 3360
1001, 10th Floor, Techniplex-II, Veer Savarkar Flyover,
S. V. Road, Goregaon (W), Mumbai 400062, India
東京都新宿区百人町 3-26-2
京都府京都市中京区西ﾉ京西月光町 40
東京都東村山市野口町 2-17-43
東京都江戸川区西一之江 2-13-16
奈良県生駒市高山町 8916-16
三重県いなべ市北勢町塩崎 363
東京都目黒区東山 1-2-7 第 44 興和ビル 3 階
滋賀県甲賀市甲賀町五反田 1405

lxxix
ii

実験動物ニュース会

員名（公財）実験動物中央研究所〒

210-0821
清水建設（株）
104-0031
486-0934
昭和セラミックス（株）（有）新東洋製作所
334-0073（株）新日本科学安全性研究所
891-1394554-8558
住友化学（株）（株）精研
542-0081
清和産業（株）132-0033
ゼリア新薬工業（株）
360-0111
全国農業協同組合連合会飼料畜産中央研究所 300-4204
第一三共（株）134-8630
大正製薬（株）331-9530
ダイダン（株）102-8175
武田薬品工業（株）
251-0012
田辺三菱製薬（株）
227-0033
247-8530（株）中外医科学研究所
中外製薬（株）412-8513
千代田テクノエース（株）
221-0022（株）ツムラ
300-1192
帝人ファーマ（株）
191-8512（一財）動物繁殖研究所
300-0134
東洋熱工業（株）
104-8324
960-0280
トーアエイヨー（株）
トキワ科学器械（株）
110-0005（株）夏目製作所
113-8551（株）日本医科学動物資材研究所
179-0074（合）日本医学広告社
102-0071
日本エスエルシー（株）
431-1103
日本化薬（株）115-8588
日本クレア（株）
153-8533
日本実験動物器材協議会
153-8533
101-0051（公社）日本実験動物協会
101-0032
日本実験動物協同組合
日本新薬（株）601-8550（一財）日本生物科学研究所
198-0024
日本たばこ産業（株）
569-1125
日本チャールスリバー（株）
222-0033
日本農産工業（株）
300-2615
日本農薬（株）総合研究所
586-0094
180-0002（株）ハクバテック・ライフサイエンス・
ソリューションズ
370-0074
バニーグループ 日本事務所

Vol. 65 No. 4

住所

神奈川県川崎市川崎区殿町 3-25-12
東京都中央区京橋 2-16-1 8 階
愛知県春日井市長塚町 1-1-9
埼玉県川口市赤井 2-13-22鹿児島県鹿児島市宮之浦町 2438 番地
大阪府大阪市此花区春日出中 3-1-98
大阪府大阪市中央区南船場 2-1-3
東京都江戸川区東小松川 4-57-7
埼玉県熊谷市押切字沼上 2512-1
茨城県つくば市作谷 1708-2
東京都江戸川区北葛西 1-16-13
埼玉県さいたま市北区吉野町 1-403
東京都千代田区富士見 2-15-10神奈川県藤沢市村岡東二丁目 26 番地 1
神奈川県横浜市青葉区鴨志田町 1000 番地
神奈川県鎌倉市梶原 200
静岡県御殿場市駒門 1-135
神奈川県横浜市神奈川区守屋町 3-13
茨城県稲敷郡阿見町吉原 3586
東京都日野市旭が丘 4-3-2
茨城県茨城県かすみがうら市深谷 1103
東京都中央区銀座 1-16-7 友泉ビル
福島県福島市飯坂町湯野字田中 1
東京都台東区上野 5-11-1
東京都文京区湯島 2-18-6
東京都練馬区春日町 4-32-25
東京都千代田区富士見 2-12-8
静岡県浜松市湖東町 3371-8
東京都北区志茂 3-31-12
東京都目黒区東山 1-2-7
東京都目黒区東山 1-2-7 日本クレア（株）内
東京都千代田区神田神保町 3-2-5 九段ロイヤルビル 502 号室
東京都千代田区岩本町 2-8-10 神田永谷マンション 602
京都府京都市南区吉祥院西ﾉ庄門口町 14
東京都青梅市新町 9-2221-1
大阪府高槻市紫町 1-1
神奈川県横浜市港北区新横浜 3-17-6
茨城県つくば市田倉 5246
大阪府河内長野市小山田町 345 番地
武蔵野市吉祥寺東町 2-38-2
群馬県高崎市下小鳥町 290-1

lxxx
iii

実験動物ニュース会員

名

ハムリー（株）（一財）阪大微生物病研究会
フィード・ワン（株）（株）ボゾリサーチセンター
三浦工業（株）（株）明治

Meiji Seika ファルマ（株）横浜研究所
持田製薬（株）（株）ヤクルト本社
八洲電機（株）ライオン（株）レッテンマイヤージャパン（株）

Vol. 65 No. 4〒

306-0101
565-0871
314-0103
412-0039
108-0074
250-0862
222-8567
160-0004
186-8650
105-8686
256-0811
101-0052

住所

茨城県古河市尾崎 2638-2
大阪府吹田市山田丘 3-1 大阪大学内茨城県神栖市東深芝 4-2
静岡県御殿場市竃 1284
東京都港区高輪 2-15-35 三浦高輪ビル 2F
神奈川県小田原市成田 540
神奈川県横浜市港北区師岡町 760
東京都新宿区四谷 1-22KDX 四谷ビル
東京都国立市泉 5-11
東京都港区芝 2-7-17

住友芝公園ビル 8F

神奈川県小田原市田島 100
東京都千代田区神田小川町 3-26-8
野村不動産小川町ビル 3F● 編集後記 ● —————————————————————————————————————————

リオデジャネイロオリンピックにおいて日本選手団は，これまでに最高のメダル獲得数であった前回ロンドン大会での 38 個を上回り 41 個のメダル獲得となり，寝不足と戦いながらも日々感動の連続だった。引き続きパラリンピックで盛り上がっているところであるが，その間には立て続けに台風が襲来し甚大な被害を及ぼしている。
一方，実験動物分野に関連するところでは，第 1 回ゲノム編集学会が広島で開催とのニュースも新聞紙上を含め流れていた。急速な発展を見せているゲノム編集技術は，モザ
イク性やオフターゲット作用といった問題も指摘されているが，いかにこれらの諸問題を克服しながらどのような方向に進んでいくのであろうか。研究の発展に大きな期待が寄せられているからこそ，倫理的な配慮の重要性が改めて問われるところかもしれない。
̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶ 【EIC】

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iv

広告掲載一覧
日本クレア株式会社
オリエンタル酵母工業株式会社
株式会社 フナバシファーム株式会社 ケー ･ エー ･ シー北山ラベス株式会社
日本エスエルシー株式会社
室町機械株式会社
日本エスエルシー株式会社
わかもと製薬株式会社
エデストロムジャパン株式会社
有限会社 仁木商事
清和産業株式会社
株式会社 夏目製作所
株式会社 ソフトロン株式会社 アニメック
ダイダン株式会社
株式会社 アイセイ
株式会社 ビオスタ
株式会社 アニマルケア
九動株式会社
ハムリー株式会社
日本医学広告社

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