実 験 動 物 ニュース
The Japanese Association for Laboratory Animal Science目

第 53 回日本実験動物学会総会

次シンポジウムⅣ

KIT ミュータントマウスから KIT を標的とした癌治療薬まで .... 北村幸彦 ...... 87
形態形成と病態の発症に関わる GDNF/RET シグナル伝達系の個体レベルでの解析 ..................................................... 高橋雅英 ...... 89
ENU 誘発変異アレルシリーズによるマウス遺伝子機能解析 ....... 桝屋啓志 ...... 92
骨形成因子 BMP の骨発生過程における機能解析 ..... 三品裕司・神谷宣広 ...... 97
日本実験動物学会からのお知らせ
AFLAS Council Meeting 報告 ................................................................................ 101
第 2 回 AFLAS 学術大会に参加して ..................................................................... 101
日本実験動物学会と日本疾患モデル学会の統合に関する経過報告 .............. 102
他学会情報
日本動物実験代替法学会第 20 回大会開催案内 ................................................. 105
ICLAS 情報 ............................................................................................................... 105
EXPERIMENTAL ANIMALS 55(5)収載論文和文要約集 ...................................... 109

Vol. 55 No. 5 / October 2006

実験動物ニュースVol. 55

No. 5

87■ 第 53 回日本実験動物学会総会 シンポジウムⅣ

KIT ミュータントマウスから KIT を標的とした癌治療薬まで
塩野義製薬株式会社新薬研究所

はじめに

北村幸彦

の蠕動運動のペースメーカーであるカハール介在マウスの W 遺伝子座のミュータントは，今から細胞も欠損していたのである。マスト細胞の場合

少なくとも30年前には米国のJackson研究所から市から類推すると，KIT の機能獲得性突然変異がカ販されていた。ヘテロのW/+マウスの優勢白斑，ダハール介在細胞から由来する腫瘍の原因になる可v

ブルへテロである W/W マウスのメラノサイト欠能性がある。しかし当時は，カハール介在細胞から損，赤血球低形成，生殖細胞欠損は既に知られてい由来する腫瘍がヒトでも他の動物でも報告されてたが，我々は Jackson 研究所から購入した W/Wv マ

いなかったので，ヒトの消化管筋層に発生した腫

ウスの皮膚組織を観察していて，マスト細胞が欠瘍を抗 KIT 抗体で染色してみたところ，予想より損していることをこのミュータントの 4 番目の異はるかに多く 80％の腫瘍が KIT 陽性であった。し常として偶然見つけた。一方 KIT 受容体チロシン

かも KIT 陽性腫瘍は gastrointestinal stromal tumor

キナーゼはネコの線維肉腫の癌遺伝子産物の正常（GIST）と云う名で病理組織学的に分類される腫瘍

カウンターパートとして見つかった。かなり後にに一致した。それまで組織起源の不明であったなって，マウスの W 遺伝子座が KIT 受容体チロシ

GISTがカハール介在細胞の腫瘍であることが明ら

ンキナーゼをコードしていることが分かったのでかになったのである。また GIST の 90％には KIT のある。我々はマスト細胞を欠損する W/Wv マウスを機能獲得性突然変異が見つかるが，この機能獲得

レシピエントとして種々の移植実験を行い，マス

性突然変異の大部分は傍細胞膜領域に存在するト細胞の分化過程をあきらかにした 1, 2)。

（図 1）。
前述したように，KIT遺伝子の機能喪失性突然変異である W/Wv マウスは生殖細胞を欠損している。

KIT の機能獲得性突然変異と癌
KIT の機能喪失性突然変異の結果マスト細胞が反対にヒトの精巣，卵巣から発生する生殖細胞の欠損するのなら，KITの機能獲得性突然変異はマス

腫瘍では KIT のチロシンキナーゼ領域に機能獲得

ト細胞腫瘍の原因になるのではないかと考えて，性突然変異がみつかる（図 1）。

腫瘍性のマスト細胞株を調べると，KITの機能獲得
性突然変異がヒト，マウス，ラット由来の細胞株で分子標的薬イマチニブ

高率に見つかった 3)。ヒトではマスト細胞腫瘍の頻ヒ ト の 慢 性 骨 髄 性 白 血 病 の 原 因 で あ る BCR-

度は低いが，患者から直接採取したマスト細胞腫

ABL チロシンキナーゼの標的阻害薬として創られ

瘍にも，KITのチロシンキナーゼ領域に機能獲得性たイマチニブが KIT チロシンキナーゼも阻害する

突然変異が見つかる（図 1）。イヌはヒトに比べマことがわかり，転移をおこし他に治療法のない

スト細胞腫瘍の多い動物である。またヒトの場合

GIST の患者に投与されたところ，顕著な延命効果とは異なり，イヌのマスト細胞腫瘍で見つかるのがみとめられた。この 1 例の報告 4)以後多数の患者

はチロシンキナーゼ領域ではなく，傍細胞膜領域

が治験を希望したために，我々が KIT の機能獲得の機能獲得性突然変異である。

性突然変異がGISTの原因であることを報告してか

ちょうどその頃ある班の会議で，W/Wv マウスのv

5 番目の異常が報告された。W/W マウスは消化管

ら数年以内に，イマチニブは転移性 GIST の治療薬として世界の主要国で承認された。

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実験動物ニュース

Vol. 55

No. 5

図1 ヒトのマスト細胞腫瘍，生殖細胞腫瘍，GISTで見られる
KITの機能獲得性突然変異．矢印の太さはおおよその頻度を示す．

イマチニブは GIST 患者の 80％に見られる傍細文

献胞膜領域の変異 KIT を有効に抑制するが，チロシンキナーゼ領域の変異 KIT には無効である。そのため，ヒトの大部分のマスト細胞腫瘍と生殖細胞腫瘍に対してイマチニブは無効である。また，傍細胞膜領域の変異KITを持つGISTの患者にイマチニブ投与を続けると，チロシンキナーゼ領域に2次性の突然変異が出現する。2次性の突然変異は新しく
チロシンキナーゼ領域に生じた機能獲得性突然変
異か，イマチニブが KIT へ結合するのを阻害する
ような突然変異で，いずれの場合もイマチニブの治療効果は失われる。現在イマチニブ耐性となったGISTにも有効な新規治療薬の開発が続けられている。

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No. 5■ 第 53 回日本実験動物学会総会 シンポジウムⅣ

形態形成と病態の発症に関わる
GDNF/RET シグナル伝達系の個体レベルでの解析
名古屋大学大学院医学系研究科附属神経疾患・腫瘍分子医学研究センター
分子病理学分野

はじめに

高橋雅英

は上記の腫瘍に加え，10 〜 20％の頻度で副甲状腺

神経栄養因子 glial cell line-derived neurotrophicの過形成を，後者は高頻度に（60 〜 100％）に粘膜

factor（GDNF）は受容体型チロシンキナーゼRETを神経腫，消化管神経節腫，マルファン様体型を生じ介してその生理機能を発現する。ノックアウトマ

る。MEN 2A 型，MEN 2B 型の家系では RET 遺伝

ウスを用いた研究により GDNF/RET シグナル伝達

子の胚細胞（germline）変異が同定され，その原因

系は腎臓の発生，腸管神経系の形成に必須であり，遺伝子であることが明らかになっている。MEN

そのほか一部の中枢および末梢神経細胞の生存・

2A型変異は主にRETの細胞外ドメインに存在する分化や精子形成にも関与していることが明らかに

コドン 609，611，618，620 あるいは 634 のシステなっている 1)。また RET は，甲状腺髄様癌などを発インのいずれかにミスセンス変異が検出される。

症する多発性内分泌腫瘍症（Multiple Endocrine

MEN2A 型変異 RET 蛋白の性状を解析した結果，Neoplasia（MEN））2 型と腸管神経細胞の分化異常

RET 蛋白が細胞表面にてリガンド非依存性に S-Sを引き起こすヒルシュスプルング病の原因遺伝子

結合を介した二量体を形成し，活性化されているで，その変異により多様なメカニズムでシグナルことを証明した 2)。

伝達異常を引き起こし，疾患発症につながる 1)。し

そこで，MEN2A 型変異 RET の in vivo における

かしながら，生体内において GDNF/RET 系のどの造腫瘍性を明らかにするため，Moloney murine

ようなシグナル伝達がこれらの器官形成あるいはleukemia virus LTR に結合した MEN2A 型変異 RET

病態の発症に関わっているのか必ずしも明らかに

cDNA を導入したトランスジェニックマウスを作

なっていない。われわれは，RETのシグナル伝達系

製した 3)。このトランスジェニックマウスではトラに異常を生じる数種類のトランスジェニックマウ

ンスジーンが脳，肝臓，心臓，精巣，耳下腺で高くス，ノックインマウスを作製し，GDNF/RETシグナ

発現し，甲状腺，肺，腎臓，大腸などで弱く発現しル伝達系の形態形成，病態発症における役割につていた。興味あることにこのような発現様式にかいて個体レベルでの機能解析を行っている。

かわらず，甲状腺髄様癌が必発した（図 1）。その

本稿では MEN2A 型変異を有する RET を発現す

ほかの臓器では，乳癌と唾液腺癌が約 20％づつ発るトランスジェニックマウスとヒルシュスプルン

生した。腫瘍細胞において予想されたとおり，RET

グ病類似の病態を示す 2 種類のノックインマウス

蛋白のリガンド非依存性の 2 量体形成による活性の作製とその表現型について紹介する。

化を検出し，生体内においても RET の 2 量体形成が腫瘍発生の原因であることが証明された。しかMEN2A 型トランスジェニックマウスの作製
MEN 2 型は甲状腺髄様癌と副腎褐色細胞腫を発症し，常染色体優性遺伝を示す腫瘍性疾患である。
MEN 2 型はさらに 2A 型と 2B 型に分類され，前者しながら，肝臓や精巣などでは変異 RET 蛋白を高発現するにもかかわらず腫瘍を生じない理由については現在のところ明らかでない。

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実験動物ニュース

Vol. 55

No. 5

図 1 MEN2A型トランスジェニックマウスで発生した甲状腺腫瘍．5ヵ月齢を超えたトランス
ジェニックマウスでは全例に甲状腺腫瘍が発生した．腫瘍は病理組織学的検索によりカルシトニン陽性の甲状腺髄様癌であることが判明した．

ヒルシュスプルング様病態をしめすノックインマ
ウスの作製
1．Y1062F ノックインマウス
RET の細胞内ドメインに存在するチロシン 1062
が GDNF 刺激によりリン酸化を受けると，SHC な
どのアダプター蛋白が結合し，RAS/MAPK や PI3K/AKT などの重要な細胞内シグナル伝達系が活性化されることが知られている 4)。われわれのグルー
プは，このチロシン 1062 をフェニルアラニンに置換したノックインマウスを作製した（Y1062F マウス）5)。作製したホモのノックインマウスは生後 4週間以内に体重減少を伴って死亡した。病理学的検索により十二指腸から直腸にかけての腸管神経系の著しい形成異常と腎臓の低形成が観察され（図 2），チロシン 1062 からのシグナル伝達が腸管
神経系，腎臓の発生に極めて重要な役割を果たしていることが明らかになった。胎生期の Y1062F マ
ウスの解析により，腸管神経前駆細胞の増殖，遊走

図 2 Y1062F ノックインマウスにおける腸管神経系の異常と腎臓の低形成．
（A，B）ホモのY1062Fノックインマウスでは腸管の著明な拡張により腹部が膨満していた．病理組織学的には小腸から大腸にかけての腸管神経細胞の欠損あるいは減少によるものであった．矢頭：盲腸；c：大腸．（C）腎臓はホモのノックインマウス（KI）において正常（Wt）の約 3 分の 1 の大きさで，低形成を示した．生後 13 日の腎臓（k），
尿管（u），膀胱（ub），副腎（ad）．

能がともに障害されていることが示唆された。胎生期の腎臓においては，後腎組織内での尿管芽の2．S697A ノックインマウスの作製

分岐が障害され，腎臓の低形成を引き起こしていわれわれのグループはまた RET チロシキナーゼ

た。ノックインマウスの初代培養神経細胞を用いの機能がプロテインキナーゼA（PKA）によってもた解析から，生体内では PI3-K/AKT シグナル伝達制御されることを明らかにした。RET の細胞内ド系が高度に障害され，RAS/MAPK 系が中等度に障メインに存在するセリン 696 が PKA によるリン酸

害されていることが明らかになった。

化部位であることを証明し，セリン696をアラニンに置換すると，GDNF 刺激によって活性化される

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起こしていた。一方，腎臓の発生への影響は極めて軽微であった。よって，JNKの活性は腸管神経前駆細胞の運動能を制御していることが明らかになった。このマウスの解析結果より，ヒルシュスプルン
グ病のもう1つの原因遺伝子であるエンドセリンB
レセプターと RET のクロストークがこのセリン
697 のリン酸化を介して制御されている可能性が示唆された（図 3）。
文

図 3 プロテインキナーゼ A による RETのセリン 696 のリン酸化．セリン
696（S696）のリン酸化は Rac/JNK
シグナル伝達系の活性化に必須であり，胎児期の腸管神経細胞の遊走に関与している．腸管神経細胞においてエンドセリン3（ET-3）がエンドセリン Bレセプター（EDNRB）を活性化し，プロテイン
キナーゼ A（PKA）の機能を制御することにより，RET の機能を修飾している可能性が示唆される．

Rac1/JNKシグナル伝達系が特異的に障害されることを明らかにした 6, 7)（図 3）。さらに Rac1/JNK シグ
ナル伝達系が神経系細胞の細胞周期，とくに G2 期
から M 期への移行を制御していることを証明した。そこでマウス RET のセリン 697（ヒト RET のセリン696に相当する）をアラニンに置換したノッ
クインマウスを作製し（S697A マウス），その表現系を解析した。その結果，腸管神経系では大腸の肛門側半分の領域に著しい腸管神経系の形成異常を観察した。上行結腸から小腸にかけては異常が認められなかった。ホモの S697A マウスの腸管神経系の形成過程を解析した結果，胎生期における腸管神経前駆細胞の遊走能が低下しており，そのことが大腸遠位部における腸管神経系の欠損を引き

献

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92

実験動物ニュース

Vol. 55

No. 5■ 第 53 回日本実験動物学会総会 シンポジウムⅣ

ENU 誘発変異アレルシリーズによるマウス遺伝子機能解析
理研GSC 動物ゲノム変異開発研究チーム

桝屋啓志

マウスにおける変異リソースには，人工的に作成

テムによって，主に点突然変異によりもたらされ，した変異体と自然突然変異の 2 種類がある。理化学

臨床所見的にも，遺伝学的にも広範囲な多様性を研究所・ゲノム科学総合研究センター・ゲノム機能示すヒト遺伝疾患のモデルとなるような変異マウ

情報解析グループでは，化学変異原エチルニトロソ

スを多数抽出しようとしている。得られた変異体

ウレア（ENU）を用いたマウスの大規模突然変異誘は連鎖解析による遺伝子マッピングを行い，変異発プロジェクトを行っている。ENUによる突然変異

遺伝子の染色体上の位置を調べる。この情報は，既誘発が他の人工的変異作製と異なる点は，1）変異

知の変異体との対応や，原因遺伝子のクローニン率の高さ2）誘発される変異が塩基置換型である。のグに用いられる。我々のプロジェクトで得られた2 点である 1, 2)。ヒト遺伝疾患のほとんどは塩基置換

変異体について，類似した表現型を示すものをコ型の多型（Single nucleotide polymorphism：SNP）にレクションすると，その中に，同じ染色体上に位置

よって引き起こされるといわれており，マウスENUする変異体が複数含まれることがしばしばある。

ミュータジェネシスで塩基置換型の変異が誘発さ

これらは同じ遺伝子の変異に由来すると考えられることは，ヒト疾患モデルマウスを開発する上でれ，1つの遺伝子について複数の変異体を得るため有利となるポイントのひとつである。

に，表現型スクリーニングを用いることが有効で以下に理化学研究所にて行われているマウス

あることを示している 3)。我々は得られた変異マウ

ENUミュータジェネシスの概要を示す（図1）。ENU

スをホームページ（http://www.gsc.riken.jp/Mouse/）は，上述のように，ゲノム上に約 10–3/locus/gamete

にて公開している。これらのマウスは希望があれという高率でランダム位置に塩基置換型（SNP 型）

ば理研 BRC を通して分譲が可能となっている。ま

変異を誘発する。これにより，遺伝子上でも様々な位置に変異が入り，単に機能欠失だけでなく，部分的機能欠失を含めた様々な機能障害をひき起こす
ことになる。1 つの遺伝子について，このような対立遺伝子座（アレル）を複数解析することができれば，遺伝子機能についての複数の側面を知ることができることとなる。このようにして誘発された
変異リソースに対して，表現型本位（Phenotype
driven）なスクリーニングを行うことにより，特定の疾患表現型に関わる遺伝子群，アリル群を網羅的に取得できると考えられる。我々は，表現型スクリーニングのために，網羅的表現型解析プラット
フォームを開発した。このシステムは，可視的表現
型（形態，行動），血液像，生化学，聴覚，発癌等のそれぞれについて，ハイスループットな検査系を開発し，統合したものである（図 2）。このシス

図1

マウスENUミュータジェネシスの概要．

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No. 593

図2 理研GSCにおける網羅的表現型プラットフォーム．

図3

切歯エナメル質に異常を呈する複数の変異体．

た，表現型プラットフォームの内容，コントロール（図 3）。この中で，3 つの突然変異体は第 5 染色体データ等も同サイトで公開している。

上 の エ ナ メ ル 質 構 成 分 子 Enemelin（ Enam），

表現型スクリーニングによって得られたENU誘

Ameloblastin（Ambn）遺伝子近傍にマップされた

発アレルシリーズの一例として，エナメル質形成が，その表現型のタイプは，ヒトAIの低形成型，形不全症（Amelogenesis imperfecta：AI）モデルマウ

成不全型に相当する 2 種類に大別された。Enam，スについて紹介する。ヒト AI はエナメル質形成に

Ambn 量遺伝子の塩基配列解析により，これら 3 つ異常を示すヒト遺伝疾患であり，いくつかの原因の変異体は Enam 遺伝子に DNA 塩基置換があるこ

遺伝子が知られている。ただし，臨床学的な所見おとが確認された（図 4）。ヒト AI のひとつである

よび，遺伝学的な知見の双方が非常にバリエー

AIH2 は ENAM が責任遺伝子であることが判明しションに富んでおり 4)，これらの違った症状の起こている 5–9)。M100521 アレルはイントロン 4 のスプる分子生物学的な基盤については，未だ不明な点

ライシングドナー位置に変異があり，スプライシが多く残されている。

ング異常が引き起こされることが予想されたた

我々はマウス可視的表現型の網羅的スクリーニ

め，RT-PCR および Real time RT-PCR による解析

ングである，Modified-SHIRPA によって，切歯エナを行った。この結果，変異型 mRNA ほぼ全てが分メル質に異常を呈する複数の変異体が抽出した

解されていることが明らかとなった（図 5）。よっ94

実験動物ニュース

図4

図5

Vol. 55

No. 5

M100395，M100514，M100521はEnam遺伝子の変異である．

M100521ホモではmRNAがほぼ完全に分解されている．

実験動物ニュースVol. 55

No. 595

図6 M100521ヘテロ，ホモにおける歯のCT像．ホモではエナメル質が完全に欠失している．

図7

ENUミュータジェネシスによって得られたAIモデルマウスのバリ
エーション．

て M100521 アレルは機能欠失型変異と結論されタンパクの欠損および不足では説明できない。

た。このアレルはヘテロでは低形成型のエナメル

我々はEnam遺伝子機能の異なる側面がM100395お質形成不全症に類似した表現型を示し，ホモではよび M100514 で示されていると考えている。面白形成不全型のひとつに分類されるエナメル質の完いことに，X 染色体上にマップされる M100888 変

全な欠損を示した（図 6）。このことより，エナメ

異体と，これら 2 つのアレルの症状は類似していル質形成に Enam 遺伝子が不可欠であることが示た。M100888 は，Amelx 遺伝子近傍にマップされ，された。また，エナメル質の主要構成タンパクであ

塩基配列解析の結果，この遺伝子に変異を持つこる Amelogenin をコードする Amelx ノックアウトマとが明らかとなった。共にエナメル質構成タンパ

ウス 10)との比較により，Enamelin はエナメル質形クである Enamelin とAmelogenin には何らかの相互成開始，Amelogenin はエナメル質成長において機作用があるかもしれない。

能していることが示唆される。

以上のように，ヒトにおける変化に富んだ臨床

アミノ酸塩基置換をもたらす M100395 および所見を，マウスモデルにおいて再現することがで

M100514 のヘテロ接合体はヒトでの形成不全型にき（図 7），これらのマウスの解析によって，遺伝相当する症状を示すことが確認された。この症状

子機能について新たな知見を得ることが出来た。

はM100521ヘテロ，ホモとも異なるため，Enamelin

今後さらに AI の分子生物学的および，遺伝学的基96

実験動物ニュース

盤を明らかにする上で，これらのマウスがモデルとして極めて有効であることが示唆される 11)。
文献

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実験動物ニュースVol. 55

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No. 5■ 第 53 回日本実験動物学会総会 シンポジウムⅣ

骨形成因子 BMP の骨発生過程における機能解析
米国立環境衛生科学研究所生殖発生毒性学部門

はじめに

三品裕司
神谷宣広

クアウトマウスを作成し，中胚葉を誘導すること

骨形成因子（BMP）はTGF-β スーパーファミリー

なく初期胚で致死となることを報告した 2)。そこに属する分泌タンパク質である。これらは皮下にで，BMPRIA を介する BMP シグナルの発生後期，

移植した場合，異所性に骨を作る活性を持った物

生誕後の機能を調べるために，Cre/loxP系を利用し質として発見された。その活性がタンパク質分解たコンディショナルノックアウトマウスを作成し酵 素 に 感 受 性 で あ っ た こ と か ら Bone

た（図1）
。11個あるエクソンのうちの第二エクソン

Morphogenetic Protein と命名された。精製されたタを loxP サイトで囲み，第二エクソンがなくなるこ

ンパク質のペプチド配列をもとに遺伝子がクローとで BMPRIA の活性が消失することを確認した 3)。

ン化され，TGF-β の仲間であることがわかり，今でこうして作成したマウスを様々な発現特異性をは20種類以上のBMPとその関連遺伝子が知られる

持った Cre トランスジェニックマウスと交配するようになった。これまで 10 年以上にわたり，BMP

ことによって，ボディパターン，心臓形成，肢芽形

やその受容体のノックアウトマウスが作成され，成，顔面形成，神経発生，毛根形成などさまざまな

その解析結果からBMPは異所的骨化作用ばかりで組織に対する多様なBMPシグナルの機能を示してなく，初期胚での軸形成から様々な臓器形成まで，

きた 4)。

広範な生物活性を持つことが明らかになってきた。しかしながら，最も強力な骨誘導活性を持つ
BMP2 や BMP4，その受容体のノックアウトマウスが初期胚で致死となってしまうため，これら遺伝
子産物の骨の発生や維持に対する機能については解析が遅れていた。
BMP 受容体とその機能解析
BMP の受容体は I 型と II 型が知られており，どちらも細胞膜貫通ドメインを一つ持ったセリンス
レオニンキナーゼである。シグナル伝達には両者が複合体を作ることが必須である。I 型受容体には
BMPRIA，BMPRIB，ACVRI の 3 種類が知られている。受容体からのシグナルは大きく Smad のリン酸化を介する経路と，p38MAPキナーゼを介する経路とに二分する。それぞれの経路に関与する遺伝子のノックアウトマウスもいくつか作成され，現在解析が精力的に行われている 1)。
我々は以前 IA 型 BMP 受容体（Bmpr1a）のノッ

図 1 コンデイショナル変異マウスの作成．11 個ある BMPIA 型受容体遺伝子（Bmpr1a）のエクソンのうち，第二エクソンをジーンター
ゲティング法によりloxPサイトで囲んだ．第二エクソンをCre組み替え酵素によって除く
ことで遺伝子の機能欠損が起こることを確認し，以後の実験に用いた．文献 3 より一部
改変．

98

実験動物ニュース

Vol. 55

No. 5

図 2 骨特異的な Bmpr1a ノックアウトマウスの表現型．オス
テオカルシン-Cre（Og2-Cre）マウスと掛け合わせること
で Bmpr1a を骨芽細胞特異的にノックアウトした．胎児致死は回避され，体長の少し短いマウスが誕生した（矢印）．文献 5 より一部改変．

また，骨の維持に対する BMP シグナルの役割を調べるため，オステオカルシンプロモーターにより骨芽細胞特異的に Cre を発現するトランスジェ
ニックマウスを用いて解析を行った 5)。Cre/loxp 系の利用により，初期胚での致死は回避され，骨特異的にBMPRIAを消失したマウスが誕生した（図2）。
生後3ヵ月齢までは，これら骨特異的ノックアウト
マウスはコントロールに比べてやや短い体長を示し，大腿骨の骨量は約半分程度に減少していた。これらのことは，BMP シグナルが骨芽細胞の造骨作用に重要な働きを果たしていることを示している。興味深いことに，生後 3ヵ月の変異マウスではコントロールに比べて低い骨量を示したのに対し，生後 10ヵ月の変異マウスはより高い骨量を示した（図 3）。骨特異的ノックアウトマウスにおいて，骨の合成速度は低いままであったので，破骨細図 3 月 齢 特 異 的 な 骨 の 表 現 型 ． 3ヵ 月 齢 で は
Bmpr1a の 骨 特 異 的 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス（KO）はコントロール（WT）に比べ低い骨量を示した．10ヵ月齢ではノックアウトマ
ウスの骨の合成速度は低いままであったが，コントロールに比べ高い骨量を示した．BV，
bone volume，TV，total volume. 文献 5 より
一部改変．

胞の機能低下がその理由として考えられた。実際にノックアウトマウスから調整した頭蓋骨の器官
培養系において，BMP 添加により破骨細胞特異的

BMP の骨に対する多様な役割

なマーカー遺伝子発現の増加がみられなかったこ

これらの結果を踏まえて，月齢依存的な BMP シとから，10ヵ月齢の骨特異的ノックアウトマウス

グナルの機能をより直接的に調べるため，我々はタにおいては，BMP は骨芽細胞による破骨細胞へのモキシフェン（TM）投与によって DNA 組み換え活機能補助に重要であることが示された。これらの性が誘導できるCreERを使い，組織特異性に加えて結果はBMPシグナルへの骨芽細胞の反応が月齢依

ステージ特異性を合わせた2次元的なノックアウト

存的に変化することを示唆している（図 4）。

を行うことにした。骨芽細胞特異的にノックアウト

実験動物ニュース

図 4 月齢特異的な骨芽細胞の反応．骨芽細胞は自身で骨を作るとともに，破骨細胞による
骨の吸収機能に必要であることが知られている．月齢の低いときには骨芽細胞はBMP 刺激によってより骨を作る方向へ反応し，月齢が高いときには逆に破骨細胞をよりサポートする方向へ反応すると考えると，骨特異的な BMP 受容体ノックアウト
マウスの加齢による表現型の変化を説明できる．OB，osteoblast，OC，osteoclast．

Vol. 55

No. 599

図 5 骨特異的，月齢特異的なノックアウトシステ
ム．Cre 組換酵素とエストロジェン受容体の融合タンパク（CreER）はタモキシフェンと結合するまでは細胞質にとどまり，核でのDNA組換えには関与できない．これを骨特異的なプロモータ（ここでは I 型コラーゲンを使用）で発現させることによって，骨特異的，かつ月齢特異的な BMP 受容体のノックアウトを行うことができる．Cre の活性を lacZ レ
ポーターマウスを使って調べると，骨特異的，かつタモキシフェン（TM）依存的に活性がみられた（黒い染色）．

を行うため，CreER を I 型コラーゲンプロモーター
で発現させた（図 5）。胎児期 13 日目から 17 日目まで TM を妊娠マウスに投与し，18 日目で胎児を調べし，また長管骨の間でも場所によって異なることたところ，長管骨においてはミネラル化の大幅な低が示唆された。以上述べたように，BMP の作用は下が認められた。皮質骨は薄く，骨稜は未発達な形

単一の組織をとってみた場合でも，時期や部位に態を示した。一方，頭蓋骨は変異マウスの方でよりよって異なっており，その多面作用には改めて驚高いミネラル化が見られた。これらの結果は骨芽細かされる。

胞における BMP シグナルの働きが内軟骨性骨化と膜性骨化とで異なる可能性を示している。

謝辞

生誕直後から 3 週間 TM を投与した場合には，変第 53 回大会において発表の機会を与えてくだ

異マウスの骨稜はより成熟した形態を見せたが，さった国枝哲夫先生に感謝いたします。また，今回

骨密度はコントロールに比べ低い値を示した。生の発表の一部はハーバード大学マサチューセッツ

後 2ヵ月から 5ヵ月までの間 TM を投与した場合に総合病院の小林竜也博士，ハンククローネンバー

は，変異マウスの骨密度はコントロールに比べ高グ博士，メルク／ワイエスの原田俊一博士，ミズー

い値を示した。これらの結果はオステオカルシン

リ大学カンザス校のジャンフェン博士，ノースカ

Creマウスで得られた結果と一致している。興味深

ロライナ大学チャペルヒル校の山内三男博士とのいことに長管骨の間でも骨密度が高くなる程度は共同研究です。なお，原田俊一博士は本年 7 月，執骨の場所によって大幅に変化した。これらのこと

務中に急逝されました。新しい環境で意欲的なから，骨芽細胞の BMP シグナルへの反応性は，骨テーマを展開しようとしていた矢先でした。硬組の場所，形態によって異なることが示唆された。

織研究界へ数多くの業績を残され，だれからも親しまれた博士のその早すぎる旅立ちはまことに残おわりに念でなりません。謹んでご冥福を祈ります。

これらの結果はBMPRIAを介するBMPシグナル
は骨の形成そのものには必須ではないものの，骨文

献の質を保つために重要な働きをしていることを示している。また，BMP の作用は骨化の様式が異なる長管骨と頭蓋骨とで異なり，加齢によって変化

1. Kishigami, S. and Mishina Y. 2005. BMP signaling
and early embryonic patterning. Cytokine Growth

100

実験動物ニュース

Factor Rev. 16: 265–278.
2. Mishina, Y., Suzuki, A., Ueno, N., and Behringer,
R.R. 1995. Bmpr encodes a type I bonemorphogenetic protein receptor that is essential for
gastrulation during mouse embryogenesis. Genes
Dev. 9: 3027–3037.
3. Mishina, Y., Mark C., Hanks, M.C., Misura, S.,
Tallquist, M.D., and Behringer, R.R. 2002.
Generation of Bmpr/Alk3 conditional knockout mice.
Genesis. 32: 66–72.

Vol. 55

No. 5

4. Mishina, Y. 2003. Function of Bone Morphogenetic
Protein signaling during mouse development.
Frontier in Biosciences 8: d855–869.
5. Mishina, Y., Starbuck, M.W., Gentile, M.A., Fukuda,T., Seedor, G.J., Hanks, M.C., Amling, M., Harada,
S., Pinero, G.J., and Behringer, R.R. 2004. BMP
type IA receptor signaling regulates postnatal
osteoblast function and bone remodeling. J. Biol.
Chem. 279: 27560–27566.

実験動物ニュースVol. 55

101

No. 5

日本実験動物学会からのお知らせ

AFLAS Council Meeting 報告

3 名に変更する案

日時：2006 年 8 月 31 日（木），13:30 〜 15:00

5．新メンバー候補場

所：韓国済州島が承認された。これに伴い

AFLAS 規程の改正がなされる。
マレーシアとシンガポールが新メンバーとして

Jeju International Conference Center

加わる意思が示された。帰国後国内で承認を得た
後で正式に参加手続きを取ることとなった。

Council memberの中で，韓国（4名），中国（3名），
台湾（1 名），日本（5 名）が出席し，タイとフィリ

6．AFLAS Journal
出版の可否について，今後更に検討をすること

ピンが欠席した（定足数を満たした）。オブザーとした。

バーとしてマレーシアとシンガポールが出席。日

7．AFLAS ホームページ

本からの出席者は，菅野茂前 AFLAS 会長，笠井憲雪 AFLAS 副会長，伊藤豊志雄 AFLAS 委員，芹川忠夫理事長，黒澤今後中国実験動物学会が管理することが決められた。
（文責：伊藤豊志雄）

努国際交流委員長であった。

Lee 会長の挨拶，出席者の自己紹介の後に Kwon
事務局長の司会で議事が進行した。

議第 2 回 AFLAS 学術大会に参加して事

1．決算と予算

第 2 回アジア実験動物学会連盟（AFLAS）学術2005 〜 2006 年の決算と 2006 〜 2007 年の予算が承認された。

大会は去る 8 月 30 日から 9 月 1 日までの 3 日間，韓国の代表的な観光地であるジェジュ（斉州）島の国

年会費は変更なしで，JALAS の分担金は 2,000

際コンベンションセンターにて開催されました。

ドル。

今大会は AFLAS 会長韓国ソウル大学イ・ヨンスン

2．次回 AFLAS 会議（李栄純）教授を大会長として韓国実験動物学会

2008年第3回大会は中国実験動物学会（CALAS）

会長オウ・ヤンセオク教授（ハリム大学）を実行委の Qin 大会長で，北京での開催が決定した。時期は員長として，韓国実験動物学会を挙げて運営され，

11 月上旬を予定。

すばらしい大会となりました。

3．次々回 AFLAS 会議

大会にはアジア各国はもとより世界各地から約2010年は台湾実験動物学会（CTSLAS）が担当す

500名の参加者があり，日本からも本学会会員を中ることの内諾を得た。

心に約 50 名が参加しました。大会はキム・サンゴ

4．2006 年〜 2008 年の Executive Board

ン博士の開会講演に始まり，ヒト疾患モデル動物

President: Dr. Qin Chuanなどの 9 シンポジウムには 10ヵ国から 41 名の方がImmediate past-President: Dr. Yong-Soon Lee

講演を行い，うち日本からは 10 名の方が講演を行

Vice-President: Dr. Yang-Seok Ohいました。また，ポスターは 5 カ国から 148 題の発Dr. San-Chi Liang

表があり，うち日本からは 20 題の発表がなされま

Dr. Noriyuki Kasai

した。

Secretary General: Dr. Zhang Lian-Feng

今大会の特徴は，ICLAS（国際実験動物学会）とAuditor: Dr. Parntep Ratanakorn

AAALAC International の支援によりこれらの国際

なお，今回，ICLAS 定款の組織が主体となり 2 つのシンポジウムが開かれた

副会長を 2 名から

102

実験動物ニュース

Vol. 55

No. 5め，アジアのみならずアメリカやイタリアなど世ね，1986年に文部省所管の公益法人「社団法人 日界 12ヵ国から参加者が集い，国際レベルでの議論

本実験動物学会」として認可を受けた。この間に，がなされたことです。

1966 年に「日本実験動物技術者懇談会（現，日本

また，この大会で高橋英機会員（理研）が優秀若手研究者として，久和茂会員（東京大）と岡野伸

実験動物技術者協会）」，1985 年に農水省所管の公益法人「社団法人

日本実験動物協会」が設立さ

哉会員（東北大）が優秀ポスター発表者として，され，実験動物技術者の組織化や教育認定事業が発らに菅野展的に展開されていった。

茂会員（東大名誉教授）と笠井憲雪会員（東北大）がAFLAS設立と第1回大会開催の功労者としてそれぞれ顕彰されました。

一方，学術研究分野においては，実験動物が広く医学研究分野，特に人の疾患研究に多用される

期間中に開かれたAFLAS会員学会代表者によるにつれ，学会内に「疾患モデル動物専門部会（ワー

AFLAS Council 会議で，次回の第 3 回大会は秦川キンググループ）」を設置し，疾患モデル動物の利

AFLAS新会長の下で2008年秋に北京にて中国実験用と維持に関する全国調査や疾患モデル動物

動物学会による運営で行われること，さらに第4回

ニュースの学会誌上での連載など活発な活動が進

大会は 2010 年に台湾で開催されることが決められめられた。このワーキンググループの廃止を契機ました。

に，1984年に発展的に「疾患モデル動物研究会」が（文責：笠井憲雪）

設立され，「日本疾患モデル動物学会」，「日本疾患モデル学会」と名称変更を重ね，現在に至っている。このように，両学会は，学術研究という学会活日本実験動物学会と日本疾患モデル
学会の統合に関する経過報告

動の中心部分において，その目的を同じくするものであり，両学会に所属する会員も多い。
2．統合の必要性

現在，日本実験動物学会と日本疾患モデル

近年，学術研究が網羅的になり，複合的・総合的学会の間では，実験動物，疾患モデルに関するなアプローチによる巨大な科学研究プロジェクト

学術活動の一層の発展を目的として，両学会が導入されるにいたって，細分化，専門化した学会・を統合することを前提とした検討が進められ研究会の統合を図る必要性が，多くの学術分野で認ている。この経過については，適宜，理事会，識されるようになった。実験動物学会においても，総会等で報告がされているところではあるが，疾患モデルは学術研究の主要命題のひとつであり，今回，学会員にこの件に関してより正確に理

現在も，その演題は多数を占める。疾患モデル学会

解していただくために，これまでの両学会のとの統合により，疾患モデル動物を用いた研究成果

間での検討の経過について改めて報告する。

が実験動物学会にフィードバックされ，この分野の本報告は，平成 16・17 年度実験動物学会将来

研究のいっそうの発展が期待できる。

計画委員会（吉川泰弘委員長）の報告をもと

一方，学会の運営には，会員管理や会計処理なに，平成 18 年 4 月に発足した両学会の合同のらびに学会誌編集等，多大な労力を要し，大学や研委員会（学会統合組織委員会：八神健一委員

究機関の法人化が進む中で独自の事務所や事務局長）における検討状況を加筆したものである。

スタッフを持たない学会の運営は困難な状況にある。さらに，学会の資産管理や個人情報管理，情報

1．両学会の歴史
日本実験動物学会は，1951年に安東洪次，田嶋嘉雄らにより「実験動物研究会」として設立され，翌公開など，学会活動に対する社会的要請も格段に強まる中で，疾患モデル学会の組織的基盤の強化は避けられない現状がある。

1952年には「実験動物彙報（現，学会誌「Experimental

また，学会の発展のためには，ある程度の規模がAnimals」の発行が開始された。その後，「日本実験必要であり，会員の増加は規模の拡大に向けての第動物研究会」，「日本実験動物学会」と名称変更を重1 歩となる。特に，若い研究者の確保は，どの学会

実験動物ニュース

にとっても今後の学会の維持・発展のために必須のVol. 55

103

No. 5

・ 2005年11月

疾患モデル学会幹事会，評議員会，要素である。このような状況から，両学会の統合は総会において，統合に関する検討経緯が説明

双方の不都合を補完しあうものであり，この統合をされ，実験動物学会との統合を基本方針とす契機として，今後，新たな実験動物学会が実験動物ること，両学会の統合に向けて両学会より選

関連の諸団体を必要に応じて統合して行くための出された委員による合同委員会を設置するこ

リーダーシップを発揮することが期待できる。

と，委員の選定は会長に一任することが承認された。

3．統合に向けた両学会の取り組み

・ 2005 年12 月

実験動物学会理事会において，統疾患モデル学会将来検討委員会，合に関する検討経緯が説明され，両学会の統幹事会において，実験動物学会との統合に向合に向けて両学会より選出された委員によるけた検討を開始した。

合同委員会で具体的協議を開始することが承・ 2002 年 11 月

・ 2003年11月

疾患モデル学会評議員会および総会において，将来検討委員会，幹事会での統認された。
・ 2006 年 4 月

両学会より選出された委員による合に関する検討状況について報告され，意見「学会統合組織委員会（委員長：八神健一，委交換がなされた。

員：岡部

勝，菅野

純，国枝哲夫，桑原正山村研一疾患モデル学会会長よ貴，佐伯武頼，関口冨士男，芹川忠夫（6 月より，菅野茂実験動物学会理事長および吉川泰り米川博通に交代））」が設置され，統合条件

弘将来計画委員会委員長に対し，両学会の統の整理や統合合意書（案）の検討を開始した。

・ 2003 年 11 月

・ 2006 年 5 月

合に関する検討が依頼された。

実験動物学会理事会および総会に疾患モデル学会総会において，実

おいて，統合問題に関する経緯が報告され，

験動物学会との統合を一つの選択肢として具2006 年度の事業計画として，両学会の統合を

体的検討を進めること，会員の意向を確認す

進めることが承認された。

・ 2004 年11 月

るためアンケートの実施が承認された。
・ 2005 年 3 月

実験動物学会将来計画委員会（委徹，① 実験動物学会と疾患モデル学会は，疾患モデル

茂，国枝哲夫，芹川忠夫，

動物を含む実験動物学関連領域のいっそうの強，八神健一，山村研一）において，両発展と関連する学術研究の推進のため，両学会

員長：吉川泰弘，委員：井上 達，浦野
加藤秀樹，久和降矢

4．統合の基本方針

学会の統合に関して審議し，統合に向けた具の統合を進める。

体的な協議を進めることとした。また，同委② 疾患モデル学会正会員は，2007年度をもって実員会の中に，学会統合ワーキンググループ（委験動物学会正会員に移行するものとし，また，

員長：八神健一，委員：岡部 勝，久和 茂，

疾患モデル学会の基本財産も 2007 年度をもっ国枝哲夫，樋野興夫）を設置し，統合に向けて実験動物学会に移管するものとする。そのたた具体的な問題点やタイムテーブル案の検討
・ 2005 年 3 〜 4 月疾患モデル学会が統合に関する会員アンケートを実施し，回収率約 60％で，賛成（積極的賛成および消極的賛成）の回答が約 70％であった。
・ 2005 年 11 月

めに必要な手続きを行う。
③ 実験動物学会は，定款の改正をしない範囲で，を開始した。

実験動物学会将来計画委員会は，

上記の手続きを円滑に進めるために必要な細則・規程・申し合わせ等の改正を行う。
④ 実験動物学会は，疾患モデルに関する学術研究が学会活動の中核のひとつであることを認識
し，学術集会や学会誌のあり方について，それ学会統合ワーキンググループによる検討結果

ぞれ当該委員会において継続的に検討する。

をもとに，「日本疾患モデル学会・日本実験動⑤ 統合に向けた諸手続きの検討および統合合意書

物学会の統合に関する検討報告」をまとめ，案作成を，学会統合組織委員会において進める。

菅野理事長および山村会長に報告した。

104

実験動物ニュース

Vol. 55

No. 5

5．実行計画（タイムテーブル）案（現時点での概要を示すものであり，詳細は学会統合組織委員会で引き続き検討）
予定年月日
2006 年 10 月

実施事項
統合の条件について「学会統合組織委員会」で検討し，統合合意書案を作成

2006 年 11 月
2006 年 11 月

実験動物学会理事会において統合合意書案の審議
疾患モデル学会幹事会，評議員会，総会において「統合合意書案」を提示し，審議のうえ学会統合の承認を得る

2007 年 5 月

実験動物学会理事会において統合合意書案および関連する細則等の審議，承認，さらに総会において統合合意書案の承認

2007 年 8 月 31 日

疾患モデル学会幹事会，評議員会において，統合合意書の審議，承認，さらに総会において報告

2007 年 9 月 1 日

疾患モデル学会会員の実験動物学会会員への移行手続きの実施

2007 年 12 月頃

実験動物学会次期役員（2008 ／ 2009 年度）の選挙

2008 年 3 月 31 日

疾患モデル学会は基本財産を実験動物学会に移管し，残務整理を終えた後に，事務局を閉鎖する。

6．今後の検討課題③ 会員の権利：疾患モデル動物学会会員のうち約① 疾患モデル関連の企画：現在の疾患モデル学会

半数を占める実験動物学会非会員の意見が統の活動を，シンポジウム等の形式で統合後も一合後の学会運営に反映できるよう考慮し，統合

定期間行うなど，実験動物学会非会員の疾患モ後直ちに実験動物学会会員としての権利を行

デル学会会員が，実験動物学会に入りやすい環

使できるような対応を検討する。具体的には，境を作ることが必要である。疾患モデル関連の統合後の役員選挙に合わせて，選挙権および被秋季シンポジウムあるいはワークショップな選挙権を行使できるよう，会員の移行手続きをどの新企画も検討する。

検討する。

② 会員の移行：疾患モデル動物学会会員のうち約④ 細則・諸規程・申し合わせ等の改正：上記の手半数を占める実験動物学会非会員が，円滑に実続きを円滑に進めるため，必要な改正を行う。

験動物学会に移行できるよう，具体的な手続き⑤ 学会誌の名称など，統合後も引き続き検討する。

を検討する。

（学会統合組織委員会）

実験動物ニュースVol. 55

105

No. 5

他 学 会 情 報
日本動物実験代替法学会
第 20 回大会開催案内

懇親会：12 月 8 日（金） 18:00-20:00
ホワイエ（ポスター会場）にて参加申し込み日時：2006 年 12 月 8 日（金）・9 日（土）会

場：〒 153-8505

東京都目黒区駒場 4-6-1

東京大学駒場IIキャンパス内・総合研究実験棟（An棟）2階コンベンションホール（口・参加登録費：
会員事前5,000 円

会員当日

7,000 円

（事前登録は 9 月 30 日まで）

演）
・隣接するポスター会場（ホワイエ）お非会員事前 7,000 円

よび必要に応じて棟内の各種会議室。

非会員当日 9,000 円

小田急線東北沢駅・井の頭線駒場東大前

学生（事前・当日にかかわらず）駅から徒歩7分程度で到着できます。いわ2,000 円

ゆる「東京大学教養学部」（駒場Ｉキャン

・懇親会費：

パス）とは異なりますので，ご注意くださ

会員・非会員 5,000 円（当日は 7,000 円）

い。キャンパスおよびキャンパス内ビル

学生

配置については，以下のウェブページを・参加費振込先：

3,000 円（当日も同額）

ご覧下さい。

三菱東京 UFJ 銀行

http://www.iis.u-tokyo.ac.jp/map/index.html

代々木上原支店（店番 137）

大会 HP：代替法の HP 内にアップデートされた情

普通預金 0879936

報を適宜追加告知します。

20th JSAAE 代表

http://wwwsoc.nii.ac.jp/jsaae/（ニジュッカイ

大会長：東京大学大学院医学系研究科・疾患生命工学センター，同大学生産技術研究所（兼務）酒井康行酒井康行
ジェイエスエーエーイー

サカイヤスユキ）＊振込みに当たっては，振込み人名義に，必ずフルネームと所属を明記してください。

大会事務局：＊恐縮ですが，振込費用は各自ご負担ください。

東京大学生産技術研究所
物質・環境系部門

酒井康行研究室内

TEL 03-5452-6352

FAX 03-5452-6353

E-MAIL jsaae20@iis.u-tokyo.ac.jp＊宿泊のお世話は致しませんので，恐縮ですが各自でご手配ください。

106

実験動物ニュースICLAS 情報Vol. 55

No. 5

Filip Mulkens
Vice-president BCLAS

1．関連学会，講習会等の案内

www.bclas.org

a. The 10th FELASA Symposium and the XIVICLAS General Assembly & Conference
On behalf of the Scientific and Organizing

d. CAAT 25th Anniversary Symposium and Gala
DinnerCommittees, we are pleased to invite you to attend theNovember 2, 2006

FELASA and ICLAS Joint Meeting, which will takeJohns Hopkins Bloomberg School of Public Healthplace from June 11th to June 14th 2007 in Northern

Baltimore, MD

Italy, on the shores of Lake Como. The international

For more information, visit www.altweb.jhsp.edu

meeting will include the 10th FELASA Symposium<http://http://altweb.jhsph.edu/>, or contact Marilyn

and the XIV ICLAS General Assembly & Conference,Principe at mprincip@jhsph.edu.

and will provide a comprehensive overview of the mostrecent developments in the field of laboratory animal

2．ニュースsciences and technologies. We hope you will join us

The European Commission seeks input from experts

for the full program that will also include enjoyable

in animal use for experimentation and other scientificsocial events in the Italian warm and pleasant climate.

purposes. The Commission is revising animal welfare

We look forward to seeing you in Italy in 2007!

legislation 86/609/EEC and has posted two

Claudio Bernardi

questionnaires on its website, one for the general public

Gemma Perretta

and one for experts in animal welfare, animal testing,

Chair of the Scientific Committee, Chair of theanimal science, natural sciences (especially biology,

Organizing Committee

medicine, pharmacology and toxicology), legal andMore information on the web site:

economic affairs related to these areas.

http://www.felasa-iclas2007.com/

Commission is interested in collecting facts, figures,Theand expert feedback as it works to prepare the revisionb. AALAS National Meetingof the legislation. To participate in the survey, go to:

October 15–19, 2006

ec.europa.eu/environment/chemicals/lab_animals/

Salt Lake City, UT

ia_info_en.htm.

For more information, visit<http://nationalmeeting. aalas.org/>.

3．出版
a. Enrichment for Nonhuman Primatesc. The BCLASThe NIH’s Office of Laboratory Animal Welfare

The BCLAS (Belgian Council for Laboratory(OLAW) has announced a new resource on enrichment

Animal Science) will organize its annual Symposiumfor nonhuman primates, developed in concert with theon 16 November 2006 in Louvain-la-Neuve. The title

Association of Primate Veterinarians, the Americanis: “How to apply the 3 R’s in our daily work?” andSociety of Primatologists, and USDA Animal Care.

the working languages are Dutch and French.

This resource is divided into six booklets that serve as

More information (program, how to reach,an introduction to the basic behavior and environmental

registration form, contact,…) can be found on theenrichment of species commonly used in education,

website: www.alphavisa.com/bclas2006

research, and entertainment. The booklets are intended

実験動物ニュースVol. 55

107

No. 5

to be primers because they provide a basic introduction

issues, laboratory animal science workshops andto the subject of environmental enrichment for primates

conferences, and news from various laboratory animal

housed in a diversity of conditions. The booklets may

science organizations.

be downloaded as PDF files from <grants.nih.gov/

TO SUBSCRIBE to “What’s New at ILAR”

grants/olaw/request_publications.htm>,

E-mail ILAR at ILAR@nas.edu and type

where

instructions are also available for requesting hard copy

SUBSCRIBE in subject line.

(delivery may take 5-6 weeks).
The booklets are _Baboons_, NIH Pub No. 05-5745;_Capuchins,_ NIH Pub No. 05-5746; _Chimpanzees_,

e. ILAR JOURNAL
Current Issue

NIH Pub No. 05-5748; _Macaques_, NIH Pub No. 05-

Volume 47(3): Type 2 Diabetes and Obesity5744; _Marmosets and Tamarins_, NIH Pub No.

<http://www.nationalacademies.org/ilarjhome>

05-5747; and _Squirrel Monkeys_, NIH Pub No. 05-

Publication of a previous ILAR Journal issue574.

devoted primarily to animal models of type 1(insulin-dependent) diabetes occasioned a demandb. OLAWNew OLAW brochure, What Investigators Need tofor a similar review focused on models of type 2(T2D)-non-insulin-dependent or adult-onset

Know About the Use of Animals <http://grants.nih.gov/

diabetes.

grants/olaw/InvestigatorsNeed2Know.pdf>, provides a

Articles in this issue:

succinct resource for investigators to quickly grasp the
expectations and requirements when using animals in* Type 2 Diabetes-An Introduction to theDevelopment and Use of Animal Models

research supported by the PHS. Contact OLAW at* Animal Models of Type 2 Diabetes: Clinicalolaw@od.nih.gov for hard copies, include number ofPresentation and Pathophysiological Relevancecopies needed and a complete mailing address.

to the Human Condition* Molecular Approaches to Study Control ofc. LABORATORY ANIMALS<http://www.lal.org.uk/>
The International Journal of Laboratory Animal
Science and Welfare
Current Issue-Volume 40(2) April 2006
Working Group Report
Assessing the welfare of genetically altered

Glucose Homeostasis* Nutritionally Induced Diabetes in Desert
Rodents as Models of Type 2 Diabetes: Acomys
cahirinus (Spiny Mice) and Psammomys obesus(Desert Gerbil)* Islet Amyloid Polypeptide (IAPP) Transgenic
Rodents as Models for Type 2 Diabetes

animals. 111. DJ Wells, LC Playle, WEJ Enser, P* Feline Models of Type 2 Diabetes

Flecknell, MA Gardiner, J Holland, BR Howard,* Swine Models of Type 2 Diabetes Mellitus:

R Hubrecht, KR Humphreys, IJ Jackson, N Lane,

Insulin Resistance, Glucose Tolerance, and

M Maconochie, G Mason, DB Morton, R

Cardiovascular Complications

Raymond, V Robinson, JA Smith, N Watt.

* Old World Nonhuman Primate Models of Type
2 Diabetes Mellitus

d. “WHAT'S NEW AT ILAR” E-NEWSLETTER

Articles and whole issues of ILAR Journal andA quarterly e-newsletter to inform readers of new

ILAR e-Journal can be ordered and downloaded

ILAR reports, current and upcoming ILAR Journal

onlineatwww.ilarjournal.com<http://

108

実験動物ニュース

Vol. 55

No. 5

www.nationalacademies.org/ilarjo>. Overnight

the ILAR e-Journal will address the need for moredelivery of print copies is available within the U.S.

published information on these topics. All submitted

Next Issue-September 2006

manuscripts will be peer reviewed. All published articles

Vol 47 (4): Preparation of Animals for Use in the
Laboratory

will be fully indexed online and will have the same
visibility as ILAR Journal articles that appear originally

Recent Issues

in print. Interested authors should follow the ILAR

Vol 47 (2): P h e n o t y p i n gofGeneticallyEngineered Mice

Journal “Instructions to Authors,” <http://dels.nas.edu/
ilar_n/ilarjournal/instructions_to_authors.shtml> e-mailVol 47 (1): Animal Models of Diseases Related

their respective manuscripts to ILAR@nas.edu, andto the Fetus and Newborn

include “Prospective MS” on the Subject line of theVol 46 (4): Serendipity, Science, and Animals
Vol 46 (3): Immunization

Procedures

email.

andAdjuvant Products

4．ICLAS 会議
a. ICLAS 理事会開催

f. ILAR e-JOURNAL ONLINE

韓国・済州島において，2006 年 8 月 30 日から 9<http://dels.nas.edu/ilar_n/ilarjournal/journal.shtml>

月1日のAFLAS会議に先立つ8月28，29日にICLASILAR launched its online publication, ILAR e-

理事会が開催された。また，8 月 30 日の午前中にJournal, with the article “Verification of IACUCICLASメンバーとAFLASメンバーとの会談も行わ

Approval and the Just-in-time Process,” by Michael

れた。

D. Mann and Ernest D. Prentice. ILAR e-Journal will
expand upon ILAR Journal’s mission of providing

b. ICLAS FYI Bulletin

pertinent information for investigators in biomedical

ICLAS FYI Bulletinの受信者を更新中です。受信and related research, institutional officials for research,

希望者は氏名，メールアドレスを送ってください。

veterinarians, and members of animal care and use

I am in the process of updating the list of recipients

committees by publishing additional ONLINE ONLYof the ICLAS FYI Bulletin. Please let me know if you

articles on laboratory animal research topics inwish your name to be removed or if you would like toconjunction with the quarterly printed issues of ILAR

have individuals added. Please send me names andJournal.

email addresses if you wish to add colleagues to thelist.

Seeking Manuscripts for ILAR e-Journal
To all readers and authors: If you have a manuscript

Steven P. Pakes, DVM, PhD
Professor of Pathology, UTexas Southwesternthat relates to science-based, high-quality, humane careMed. Ctr.

of animals, novel animal or other biological models for5323 Harry Hines Blvd. Dallas, TX 75390-9072

the study of disease, or any other topic pertinent to the

E-Mail: steven.pakes@UTSouthwestern.edu

mission of ILAR, you may submit it for publication in

Phone: 214-648-1684

the new ILAR e-Journal. While the theme-based

Fax:

214-648-4096

quarterly print issues of ILAR Journal will not change,

URL:

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実験動物ニュースVol. 55

No. 5

Experimental Animals—和 文 要 約—Vol. 55, No. 5 October 2006

原著
F344

の二大亜系統，F344/Du と F344/N の下顎骨の特性比較 ........................ 415–418

田中 愼 1)・桑原佐知 1, 2)・西島和俊 1)・大野民生 3)・長屋政博 4)・中村康典 5)・
角 保徳 5)・宮石 理 6)・青山博昭 7)・後藤信男 8)1)
国立長寿医療センター・加齢動物育成室，2)兵庫医科大学解剖学教室，3)名古屋大学大学院医学研究科，4)国立長寿医療センター・リハビリテーション科，5)国立長寿医療センター・先端医療部・口腔外科，6)中部労災病院，7)残留農薬研究所，8)日本実験動物協会

近交系ラット， F344 の二大亜系統である，F344/DuCrlCrljとF344/NSlcの下顎骨性状をDXA法で 60 日齢前後で比較した。これら 2 系統は生存性や下顎骨の形状が大きく異なり，遺伝的な違いが示唆されるのに，以前のマイクロサテライトによる解析では差を検出できなかった。
今回測定した，体重・下顎骨重量・下顎骨の骨塩量（BMC）
・骨面積（AREA）
・骨密度（BMD）
そして骨塩率（BMR）のいずれでも亜系統差が見られ，F344/Du が大きかった。いずれも歯を含んだ測定値をもとにしたが，実験への使用に当たっては亜系統差に注意すべき事がこれらの結果からも喚起された。また，新たに提案された骨塩率：BMR は，骨特性の種間比較に有用であろうと考えられた。

ヒトウイルソン病モデル，Long-Evans Cinnamon（LEC）ラット脳細胞における銅の蓄積と DNA 損傷の生成 .............................................................................419–426
林 正信 1)・布施清夏 1)・遠藤大二 1)・堀口 昇 1)・中山憲司 2)・昆 泰寛 3)・奥井登代 2)
1)

酪農学園大学獣医学部放射線獣医学，2)北海道立衛生研究所，3)北海道大学獣医学研究科解剖学

ヒトウイルソン病では遺伝性の銅の代謝異常により肝臓，腎臓，脳に銅が蓄積し，それぞれの組織に障害が引き起こされる。ウイルソン病のモデル動物である Long-Evans Cinnamon（LEC）ラットの脳における銅濃度は 20 週齢から増加し，24 週齢で対照の WKAH ラット脳の銅濃度と比較して 3.5 〜 6 倍高い値を示した。LEC ラット肝臓の銅濃度は 4 から 12 週齢まで週齢に依存して増加し，ついで 16 から 20 週齢で減少した。これらの結果から，肝臓に蓄積していた銅が肝障害に伴って肝臓から遊離し，脳に蓄積すると考えられたが，脳の銅濃度は肝臓の濃度の 1/20 以下であった。また，脳における DNA の一本鎖切断（SSBs）の生成をコメット法で解析した。LECラットの大脳と小脳でDNA損傷を有しない細胞核の割合は24週齢で減少し，DNA損傷度の大きい細胞核が24週齢で出現した。DNA損傷頻度をコメットスコアで評価した
ところ，LEC ラットの大脳と小脳細胞のコメットスコアは 24 週齢で 20 週齢以下の値と比較して有意に増加し，WKAHラットのそれよりも有意に高い値を示した。これらの結果はLECラットにおいて，肝臓で DNA の SSBs が生成されるよりも低い銅濃度で脳細胞において SSBs が生成されることを示した。

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No. 5

Microbiological Monitoring of Guinea Pigs Reared Conventionallyat Two Breeding Facilities in Korea ................................................................ 427–432
Jong-Hwan PARK1)*, Seung-Hyeok SEOK1), Min-Won BAEK1), Hui-Young LEE1), DongJae KIM1), Jung-Sik CHO2), Chuel-Kyu KIM2), Dae-Youn HWANG2), and Jae-Hak PARK1)
1)

Department of Laboratory Animal Medicine, College of Veterinary Medicine and School of
Agricultural Biotechnology, Seoul National University, and 2)Laboratory Animal Resources Team,National Institute of Toxicological Research, Korea FDA Republic of Korea*Present Address: Department of Pathology and Comprehensive Cancer Center, University ofMichigan Medical School, Ann Arbor, MI 48109, USA

In this study, microbiological monitoring of guinea pigs reared conventionally in two facilities was
performed twice in 2004, with a three-month-interval between surveys. This study was based on therecommendations of the FELASA Working Group, with some modifications. In serological tests in thefirst survey, some animals from facility A showed positive results for Encephalitozoon cuniculi, Sendai
virus, pneumonia virus of mice (PVM), and Reovirus-3 (Reo-3); facility B showed a positive result onlyfor E. cuniculi. The results of the second survey were similar to the first, except for the presence of
Sendai virus; all animals from the two facilities were Sendai virus-negative in the second experiment.
No pathogenic bacteria were cultured in the organs of any of the animals in the first survey. However,in the second survey, Bordetella bronchiseptica was cultured from the lung tissue of two 10-week-old
animals from facility A. Chlamydial infection was examined by the Macchiavello method, but noanimal showed positive results. Tests using fecal flotation or the KOH wet mount method showed no
infection of endoparasites, protozoa, ectoparasites, or dermatophytes in any animal in both surveys.
However, in the histopathological examination, an infection of protozoa-like organisms was observed in
the cecum of some animals from facility A. The present study revealed that microbiological contamination was present in guinea pigs reared conventionally in two facilities in Korea, suggesting that there is aneed to improve environmental conditions in order to eradicate microbial contamination.

F344 の亜系統，F344/Du と F344/N の下顎骨の形態計測学的比較 ..................... 433–438
田中 愼 1)・桑原佐知 1, 5)・西島和俊 1)・中村康典 2)・角 保徳 2)・大野民生 3)・後藤信男 4)1)

国立長寿医療センター・加齢動物育成室，2)国立長寿医療センター・先端医療部・口腔外科，
名古屋大学大学院医学研究科，4)日本実験動物協会，5)兵庫医科大学解剖学教室

3)

近交系ラット，F344 の 2 つの主な亜系統，F344/Du と F344/N のうち，わが国で入手できる
F344/DuCrlCrlj と F344/NSlc について 2ヵ月齢で下顎骨を形態計測学的に，主成分分析で比較した。これら 2 つの亜系統は，その加齢特性（生存性や加齢に伴う疾病）で大きく異なるにも関わらず，マイクロサテライトマーカーで比較した際には違いがなかった。下顎骨上の 13 の位
置で，高さと長さを測定したところ，体重やいくつかの測定値は，F344/Du が有意に大きいものがあったが，F344/N が大きい項目や差のない項目もあった。主成分分析の結果抽出された 3つの主成分で両亜系統を比較・検討したところ，下顎骨の総体的な大きさ，とくに長さについて亜系統差が検出され，F344/Du が大きかった。また，形状での個体差は F344/N で大きいようであった。これらの差は，亜系統ながら，遺伝的な違いを示唆し，他にも特性の差がうかがわれることから，使用にあたっては注意が必要と考えられた。

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No. 5

Diffuse Alveolar Lesion in BALB/c Mice Induced with Human Reovirus
BYD1 Strain and its Potential Relation with SARS ........................................ 439–447
Cheng HE1), Qi YANG1), Ming LEI1), Wanyong PANG1), Jianmin YANG1), Hong ZHU2),
and Qing DUAN2)
1)

Laboratory Animal Institute, College of Veterinary Medicine, China Agricultural University, Beijing
100094, and 2)Microbiology and Epidemiology Institute, Academy of Military Medical Science,
Beijing 100071, People’s Republic of China

The objective of this study was to investigate the pathogenicity and associated lesions of a new
reovirus (ReoV) isolated from patients with Severe Acute Respiratory Syndrome (SARS) in China.
Twenty-five four-week-old BALB/c female mice inoculated intranasally with either ReoV (strain BYD1)
alone, or ReoV combined with SARS-CoV (strain BJF) displayed ejecting fur and loss of body weightcompared with control animals. ReoV and SARS-CoV were isolated from most postmortem tissues.
The histopathological features of ReoV infected animals consisted of diffuse alveolar damage, with
scattered hemorrhage, hyaline membrane formation and interstitial pneumonia. A typical type II
pneumocyte hyperplasia and fibrogranulomatous tissue formation in the alveolar septae were observed
both in the animals inoculated simultaneously with these two viruses and in the animals inoculated
firstly with SARS-CoV, followed by ReoV. The animals inoculated firstly with ReoV, followed with
SARS-CoV displayed scattered hemorrhage in the alveolar septa. Furthermore, other lesions in above
two combination groups included depletion of lymphocytes in the germinal center of lymph nodes in thelung hilus and the spleen, hemorrhagic necrosis in white pulp of spleen, hydroid degeneration, and fatty
degeneration in the liver and kidney. Mice induced with SARS-CoV alone did not display clinical signs,
characteristically hyaline membrane formation, hemorrhage and early pulmonary fibrosis in lung tissue.
This study demonstrated that the newly isolated ReoV might be a virulent pathogen for BALB/c mice.
Mice infected firstly with SARS-CoV, followed with ReoV developed a typical diffuse alveolar lesion.

Inhibition of DMBA Induced Rat Mammary Duct Damage by Novel Synthetic
Organoselenium Compounds .......................................................................... 449–455
Ilknur OZDEMIR1), Zeliha SELAMOGLU TALAS2), Mehmet GUL3), Burhan ATES1),
Yetkin GOK1), Mukaddes ESREFOGLU3), and Ismet YILMAZ1)
1)

Department of Chemistry, 2)Biology, Faculty of Science and Art, Inonu University, 44280,
Malatya, and 3)Department of Embryology and Histology, Medical Faculty, Inonu University, Turgut
Ozal Medical Center, Malatya, Turkey, TR

The balance between prooxidants and antioxidants is crucial to the survival and functioning of aerobic
organisms. Partially reduced derivatives of oxygen, which are produced in aerobic organisms as part ofnormal physiological and metabolic processes, are toxic species, oxidizing numerous biomolecules,
which initiate tissue injury and cell death. DMBA (7,12-dimethylbenz[a]anthracene) is a polycyclicaromatic hydrocarbon (PAH) known to cause tumors in rats. DMBA is known to generate DNA-reactive
species, which may enhance oxidative stress in cells, during its metabolism. Besides the formation of
DNA adducts, oxidative products derived from mutagen metabolism, such as DMBA, might impair vital
cellular functions by damaging proteins and lipid membranes. Synthetic organoselenium compounds
inhibit the initiation phase of carcinogenesis by inhibiting DMBA-DNA adduct formation in the target
organ in vivo. Because of the health problems induced by many environmental pollutants, many efforts
have been undertaken to evaluate the relative antioxidant potential of selenium and syntheticorganoselenium compounds. We undertook the present study to evaluate the chemopreventive potentialof the novel synthetic organoselenium compounds (1-isopropyl-3-methylbenzimidazole-2-selenone (SeI)

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Vol. 55

No. 5

and 1, 3-di-p-methoxybenzylpyrimidine-2-selenone (SeII)) in the well-established DMBA-treated rat
model by monitoring the extent of lipid peroxidation and mammary duct damage. In this study, adultfemale Wistar rats were treated with DMBA and the novel organoselenium compounds (SeI and SeII) in
determined doses. In DMBA-treated rats, the effects of the organoselenium compounds onmalondialdehyde (MDA) levels and histological changes in the rat mammary lactiferous duct werestudied. The ability of the organoselenium compounds to prevent oxidative damage induced by DMBA
in rat mammary ducts was demonstrated. Protection against lipid peroxidation measured as MDA in the
SeI and SeII treated groups was provided by the novel synthesized organoselenium compounds. SeI and
SeII both provided chemoprevention against DMBA-induced oxidative stress in the rat mammary duct.

ラットにおける卵巣摘出術前後のリセドロネーﾄ投与が海綿骨量減少におよぼす影響 ...........................................................................457–466
岩本 潤 1)・ 竹田 毅 1)・佐藤能啓 2)・Chwan-Li SHEN3)・James K. YEH4)
1)慶應義塾大学病院スポーツクリニック，2)見立病院神経内科，3)Department of Pathology, Texas
Tech University Health Sciences Center, TX, USA，4)Metabolism Laboratory, Department ofMedicine, Winthrop-University Hospital, NY, USA

目的：本研究の目的は，骨形態計測の手法を用いて，ラットにおける卵巣摘出術（OVX）前のリセドロネーﾄ（Ris）投与と OVX 後の Ris 投与（投与回数減少）が海綿骨量減少におよぼす影響について比較検討することおよび OVX 前の Ris 投与のもと，OVX 後の Ris 継続投与（投与回数減少）の海綿骨量減少に対する有用性について明らかにすることである。材料および方
法：1）6 週間の実験：材料は 4ヵ月齢の Sprague-Dawley 系ラット 50 匹である。これらを無作為に以下の 5 群に分けた（1 群 10 匹ずつ）
。すなわち，4 週間の Ris（2.5 µg /kg）または溶媒（Veh）
投与後，OVX を施行し，以後 2 週間の Ris または Veh 投与群（Ris-OVX-Ris，Veh-OVX-Ris，RisOVX-Veh，Veh-OVX-Veh の 4 群）および 4 週間の Veh 投与後，偽手術（Sham）を施行し，以後 2 週間の Veh 投与群（Veh-Sham-Veh 群：対照群）である。Ris または Veh は皮下注射で投与したが，その頻度は手術前の 4 週間は週 5 回，手術後の 2 週間は週 2 回とした。2）10 週間の実
験：手術後の Ris または Veh の投与期間を 6 週間とした以外，6 週間の実験と同じプロトコー
ルで実験を行った。3）6 週間および 10 週間の実験プロトコール終了後に，脛骨近位部２次海綿骨の骨形態計測を行った。結果：1）6 週間の実験：OVX 前および OVX 後の Ris 投与は海綿骨量の減少を同程度に予防した。2）10 週間の実験：OVX 前および OVX 後の Ris 投与は海綿骨量の減少を緩和するのみであったが，OVX 前の Ris 投与の海綿骨量減少の緩和効果は OVX 後の Ris 投与のそれよりもより小さかった。3）6 週および 10 週の実験とも，OVX 前 Ris 投与とOVX 後 Ris 投与は海綿骨量に対して相加的作用を有していた。結論：OVX 前の Ris 投与（週 5回）および OVX 後の Ris 投与（週 2 回）は OVX 後早期の海綿骨量減少の予防に有用であることおよび OVX 後の Ris 投与（週 2 回）は OVX 後長期の海綿骨量減少の緩和に有用であることが示唆された。また OVX 前の Ris 投与と OVX 後の Ris 投与は海綿骨量に対して相加的作用を有していたことから，OVX 前に十分な Ris 投与（週 5 回）が行われていれば，OVX 後には Ris
は少ない投与回数（週 2 回）で効果的に海綿骨量減少を緩和できることが示唆された。

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No. 5

短報
低温曝露時ならびに高脂肪食投与時におけるスンクス

Ucp1 mRNA 発現量の変動 ...............................................................................467–471
鈴木大輔 1, 2)・村田善晴 2)・織田銑一 1)
1)

名古屋大学大学院生命農学研究科動物管理学研究室，2)名古屋大学環境医学研究所発生遺伝分野

スンクスにおける低温不耐性の原因を検討するため，低温曝露時ならびに高脂肪食摂取時における，褐色脂肪組織の脱共役蛋白質 1（Ucp1），およびその調節因子として機能する 2 型脱ヨード酵素（D2）の mRNA 発現量を測定した。その結果，単一条件のみでは両遺伝子の発現量は変化しなかったが，両条件を並行すると両遺伝子の発現量は増加した。低温不耐性の原因
として，摂取している餌の内容に起因していることが示唆された。

齧歯目における腎臓の短および長ループネフロンの比率の種差 .......................... 473–476
市居 修・矢吹 映・小嶋敏慶・松元光春・鈴木秀作
鹿児島大学農学部基礎獣医学講座解剖学分野

本研究では，マウス，ラット，ハムスター，スナネズミおよびモルモットの腎臓における長および短ループネフロンを Air Cast 法を用いて可視化し，その比率を測定した。マウスとラッ
トでは短ループネフロンの，ハムスターとスナネズミでは長ループネフロンの占める割合が有意に高く，モルモットでは短ループネフロンと長ループネフロンの比率はほぼ同等であった。

雌カニクイザルの血中コルチゾン濃度，NK 細胞活性および T リンパ球細胞のマイトジェン反応に対するメタンフェタミン投与の影響 ................................ 477–481
斎藤正好 1, 5)・山口孝雄 2)・川田哲也 1)・伊東久夫 1)・金井孝夫 3)・寺田 賢 4)・
横須賀誠 5)・斎藤 徹 5)1)

千葉大学大学院医学研究院放射線医学，2)（株）
サイエンス・サービス実験動物事業部，
東京女子医科大学実験動物施設，4)東邦大学医学部法医学，
5)
日本獣医生命科学大学獣医学部比較動物行動医学
3)

雌カニクイザルに metamphetamine（MAP）の単回投与（3.0 mg/kg, iv）を行い，血清コルチ
ゾン濃度とリンパ球系細胞の反応について検討した。コルチゾン濃度は，投与 6 時間後で投与前の 2.66 倍で有意な上昇がみられ，24 時間後も継続した。ＮＫ活性は投与 6 時間で増加がみられたが，24 時間後では顕著な低下を示した。マイトジェン反応は，PHA 添加リンパ球で上昇し，24 時間後まで上昇傾向が続いた。MAP 投与後のＮＫ細胞活性の一過性増加とその後の顕著な低下，さらにTリンパ球のマイトジェンに対する変動は血清コルチゾン濃度の上昇と深く関連すると推測された。

A New Approach for the Analysis of Testicular Cells Usinga Laser Scanning Cytometer .......................................................................... 483–486
Jungkee Kwon
Biosafety Research Institute, College of Veterinary Medicine, Chonbuk National University, Korea

The laser scanning cytometer (LSC) is a new laboratory tool that offers increased sensitivity and

113

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実験動物ニュース

Vol. 55

No. 5

specificity compared to traditional technology. By combining the properties of the advantages of flow
cytometry and immunohistochemistry, LSC-based analysis allows the automated evaluation of testicular
cells in general and meiosis in particular. Testicular cell smears with previous staining by propidium
iodide were analyzed by LSC. The results were compared with those for flow cytometry. LSC is a new,applicable methodology for analyzing spermatogenesis schedule.

gyrB 遺伝子配列を用いた実験動物由来 Pasteurella pneumotropica 分離株の系統樹解析 ........................................................................................................487–490
林元展人・植野昌未・高倉 彰・伊藤豊志雄
財団法人実験動物中央研究所 ICLAS モニタリングセンター

gyrB 遺伝子の配列を用いて実験動物由来の P. pneumotropica 49 株の系統樹解析を行った。
系統樹では 49 株は明瞭な 3 群（A：生物型 Jawetz マウス由来株，B：生物型 Jawetz ラット由来株，C：生物型 Heyl 株）に分けられた。その結果，本菌の gyrB 遺伝子は 2 生物型間で，さらに生物型 Jawetz では株の由来動物種間で異なる事が示唆された。

エンドセリンＢ受容体遺伝子における欠失が WS4 マウスのワールデンブルグ症候群様表現型の原因である .............................................. 491–495
大谷 真 1, 3)・新海雄介 1, 4)・片山健太郎 1)・堀部晃央 1)・辻 岳人 1)・
松島芳文 2)・橘 正芳 2)*・国枝哲夫 1)
1)

岡山大学大学院自然科学研究科，2)埼玉県立がんセンター研究所，3)現所属：国立精神・神経セン
ター 神経研究所，4)現所属：近畿大学先端技術総合研究所，* 故人

WS4 マウスは，色素異常，難聴，巨大結腸症を呈するヒトのワールデンブルグ症候群 4 型のモデル動物であり，その原因遺伝子はエンドセリンＢ受容体遺伝子（Ednrb）と同座であることが明らかにされている。本研究では WS4 マウスの Ednrb 遺伝子の塩基配列を解析し，この遺伝子中に 598-bp の欠失を見いだした。この欠失領域は第 2 エクソンの全領域と，第 3 エクソンの5 側の領域を含んでおり，欠失を誘発したと考えられる逆向きの反復配列に挟まれていた。
以上から，Ednrb遺伝子内に生じたこの欠失がWS4マウスの表現型の原因となる突然変異であると結論づけられた。

MES 系ラットにおける好酸球増多症の第３の原因遺伝子は第１番染色体上に存在する ...............................................................................497–500
森 政之 1)・樋口京一 1)・松本清司 2)
1)

信州大学大学院 医学研究科 加齢適応医科学系専攻 加齢生物学分野，2)信州大学ヒト環境科学研
究支援センター 生命科学分野 動物実験部門

MES 系ラットは好酸球増多症および多くの器官での好酸球による炎症性傷害を自然発症す
る。MES 系ラットの好酸球増多症の一義的な原因遺伝子は第 19 番染色体上に，また血中好酸
球数に対する弱い効果をもつ QTL が第 2 番染色体上に存在する。今回我々は好酸球増多症の
第 3 の原因遺伝子が第 1 番染色体上に存在することを報告する。これらの結果は MES 系ラットの好酸球増多症が複雑な遺伝的支配下にあることを示唆する。