実験動物ニュース

Vol. 70

No. 1

実験動物感染症の現状

ラットポリオーマウイルス 2 感染症
田中美有
大阪府立大学生命環境科学研究科獣医学専攻

要約2016 年，米国の X 連鎖重症複合免疫不全症（XSCID）ラットのコロニーにおいて，ラットポリオー
マウイルス 2（Rattus norvegicus polyomavirus 2：RatPyV2）感染症が報告された。RatPyV2 は免疫正常ラットでは不顕性に持続感染するが，免疫不全ラット系統である XSCID ラットでは，様々な程度の呼吸器症状や削痩，繁殖悪化，全身状態の悪化を呈する。RatPyV2 は上皮向性ウイルスであり，
唾液腺やハーダー腺，眼窩外涙腺，呼吸器，生殖器 / 副生殖器の上皮細胞が主な標的臓器である。
病理組織学的には，過形成および異形成を呈する標的上皮細胞における，大型の好塩基性核内封入体の形成が特徴である。唾液腺やハーダー腺，眼窩外涙腺では，線維化や単核球浸潤を伴った腺組
織の萎縮および消失も観察される。特に耳下腺は重度かつ広範囲に傷害される傾向にあり，1 か月
齢の時点でも比較的重度の病変がびまん性に形成される。また，重篤な呼吸器症状を呈する個体では，重度の間質性肺炎が認められる。標的となる上皮組織の中でも，耳下腺は RatPyV2 に対する感受性がより高い可能性があり，RatPyV2 感染症が疑われた際には，耳下腺を含む唾液腺組織を用いた病理学的検査や PCR 検査が必須であると考えられる。本稿では，RatPyV2 感染症の特徴，診断方法，発生状況について，筆者らのこれまでの研究成果と米国の研究グループの報告から，最新の知見をご紹介したい。

1．ポリオーマウイルスとポリオーマウイルス感染症について

マウイルス種を列挙した。ヒトポリオーマウイルス（アルファ，ベータ，デルタポリオーマウイルス属に14 種が知られている）では，悪性腫瘍や HIV 感染によるエイズ発症患者，臓器移植や自己免疫疾患に対ポリオーマウイルス（PyV）は，ポリオーマウイ
す る 免 疫 抑 制 療 法 中 の 患 者 な ど に お い て， 腎 炎
ルス科（Polyomaviridae）に分類される，エンベロー
プを有さない全長約 5,000 bp の環状 2 本鎖 DNA ウイ （HPyV1 あるいは BKPyV）や脳症（HPyV2 あるいはルスである。国際ウイルス分類委員会のサイトでは， JCPyV），肺炎（HPyV4 あるいは WUPyV），メルケ
2020 年 2 月現在，ポリオーマウイルス科として，4
ル細胞癌（HPyV5 あるいは MCPyV）といった，各PyV 種に起因する疾患が報告されており，日和見感
つの属（アルファ，ベータ，ガンマ，デルタポリオー
染症として医学上の問題となっている [3, 5]。
マウイルス属）と 102 の種ならびに 9 の未分類種が[1,2]。ヒト以外に感染する
PyV
実験動物に関しては，マウスでは 3 種の PyV（Mus
記載されている種
musculus polyomavirus 1 ～ 3）が報告されているが，の学名は，宿主の学名に polyomavirus および数字を実験用マウスコロニーでは，PyV 感染の有病率は極加えて構成される（ヒトに感染する場合は，宿主名
めて低いとされている [6]。自然感染では無症状であに human を用いる）。PyV は，1953 年，白血病を自るが，ヌードマウスを用いた MPyV の実験感染では，然発症するマウスの肝臓・脾臓・リンパ組織からの肺や腎臓，脳など様々な臓器における炎症や壊死病
濾過抽出物を新生マウスに接種すると，唾液腺など多臓器に腫瘍が形成される，という実験から発見さ変，乳腺癌などの腫瘍性病変を形成することが知られ た（ マ ウ ス ポ リ オ ー マ ウ イ ル ス，Mus musculus
れている [5–7]。ラットでは，1984 年，消耗性疾患をpolyomavirus 1：MPyV）[3, 4]。PyV は，“ 複数の（poly-） 示したヌードラット（NIH-Foxn1rnu）において，唾液
腫瘍（-oma）” という語源が示すように，宿主の腫腺炎，気管・気管支・細気管支炎，肺炎の原因とし瘍発生に関与する。各 PyV 種は哺乳類・鳥類・魚類て PyV が初めて報告された [8–10]。本例では，抗SV40（Simian virus 40）抗体によってウイルス抗原がなど様々な動物を自然宿主とする。哺乳類では不顕検出され，ポリオーマウイルスであることが示唆さ性感染するが，宿主が免疫不全または抑制状態に陥れたが [8]，当時はウイルスのゲノム配列は決定されると発症する。
ていなかった。2015 年には，野生または野生由来コ
表 1 にラット，マウスおよびヒト（抜粋）のポリオー

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No. 1

2．ラットポリオーマウイルス 2 感染症の特徴
ロ ニ ー の Norway ラ ッ ト か ら 検 出 さ れ た，Rattus
norvegicus polyomavirus 1（RnorPyV1）が報告されたが，こ こ で は， 筆 者 ら が 1 ～ 8.5 か 月 齢 の XSCID本ウイルスに感染したラットは，明らかな異常所見
TALEN ラ ッ ト 系 統（ 計 25 匹 ） を 対 象 に 実 施 し たを示さなかったとされている [11]。さらに，2016 年
RatPyV2 感染症の病変解析の結果 [14] と，米国の研には，Rigatti らが，米国の X 連鎖重症複合免疫不全症（XSCID）ラットコロニーにおいて，ラットポリオー
究グループの報告 [12, 15] にもとづいて，RatPyV2 感
マ ウ イ ル ス 2（Rattus norvegicus polyomavirus 2:染症の特徴について述べる。
RatPyV2, RnovPyV2,）感染症を報告した [12]。ウイ
ルスゲノム塩基配列を用いた系統発生解析により， （1）臨床徴候
RatPyV2 は RnorPyV1（アルファポリオーマウイルス
我々が調べた限り，RatPyV2 は免疫正常ラット系
属）とは異なるウイルスであり，ベータポリオーマ
統では不顕性に持続感染し，臨床的に確認しうる徴
ウイルス属に分類されること，ヒトの WUPyV と近候をとくに認めない。一方で，RatPyV2 に感染した
XSCID-TALEN ラット系統は，衰弱および削痩，呼縁であることが示された [12]。2017 年には，Wistar
Han ラットでの免疫抑制剤を用いた慢性毒性試験に吸器症状，雌の繁殖成績悪化や紅涙 / 色素涙を呈し，
6 か月齢以降で死に至る個体が増える傾向にある（表おいて，病理学的検査から PyV 感染が関連すると考2）[14]。臨床徴候の程度は，ラットの月齢や個体にえられる前立腺炎の症例が報告されが，当時の PCR
検査では PyV 遺伝子の検出には至っていなかった
よ っ て 様 々 で あ り， 特 に 乳 子 や 若 齢 個 体 で は，
[13]。
RatPyV2 に感染していても明らかな臨床徴候を示さ
表1

ラット，マウスおよびヒトのポリオーマウイルス
宿主 / 学名

略称

通称・別称

属

ラット
Rattus norvegicus polyomavirus 1
Rattus norvegicus polyomavirus 2

RnorPyV1 ラットポリオーマウイルス 1
RatPyV2 ラットポリオーマウイルス 2，RnorPyV2，RPyV2

マウス
Mus musculus polyomavirus 1
Mus musculus polyomavirus 2

MPyV
MptV

Mus musculus polyomavirus 3

MPoV3

Alpha polyomavirus
マウスポリオーマウイルス 1，MmusPyV1
Beta polyomavirus
マウスポリオーマウイルス 2，MmusPyV2
Mouse pneumotroic virus（マウス向肺性ウイルス）
Kilham ウイルス，K ウイルス
Beta polyomavirus
マウスポリオーマウイルス 3，MmusPyV3

1BKPyV
JCPyV
WUPyV
MCPyV

HPyV1，BK ポリオーマウイルス
HPyV2，JC ポリオーマウイルス
HPyV4，WU ポリオーマウイルス
HPyV5，Merkel cell ポリオーマウイルス

ヒト（全 14 種から抜粋）
Human polyomavirus 1
Human polyomavirus 2
Human polyomavirus 4
Human polyomavirus 5

Alpha polyomavirus
Beta polyomavirus

Beta polyomavirus
Beta polyomavirus
Beta polyomavirus
Alpha polyomavirus

国際ウイルス分類委員会（ICTV）のサイトに記載されているウイルスを列記した．
https://talk.ictvonline.org/ictv-reports/ictv_online_report/dsdna-viruses/w/polyomaviridae/628/genus-alphapolyomavirus
https://talk.ictvonline.org/ictv-reports/ictv_online_report/dsdna-viruses/w/polyomaviridae/629/genus-betapolyomavirus

表2

RatPyV2 に感染した XSCID-TALEN ラットの臨床徴候（文献 14 を改変）
月齢

検査数
呼吸困難
繁殖悪化
衰弱・削痩
紅涙 / 色素涙注）

1 か月齢

2–3 か月齢

4–5 か月齢> 6 か月齢

3 (♂:2, ♀:1)――――

9 (♂:7, ♀:2)
6 (♂:4, ♀:2)
7 (♂:3, ♀:4)――
中等度～重度
3 ～ 4 ヶ月齢を過ぎた ♀ で繁殖悪化する傾向――
中等度～重度――
軽度～重度

注）文献 14 において，剖検および病理組織学的検査を実施した動物数－：異常所見なし18

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図1

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No. 1

唾液腺の肉眼像および耳下腺の低倍率の病理組織像（2.5 か月齢）．RatPyV2 に感染していない免疫正常ラットの唾液腺（A）と比較すると，RatPyV2 に感染した XSCID-TALEN
ラットの唾液腺（B）は萎縮を呈し，その程度は特に耳下腺（青破線で囲んだ組織）で顕著である．組織学的にも，耳下腺の顕著な萎縮，単核球浸潤および線維化が観察される（C：HE 染色，Scale bar: 100 μm）．C の挿入図は，同倍率での正常な耳下腺の組織像を示す．

2C および D），生殖器 / 副生殖器（子宮，前立腺や精ない。米国の研究グループの報告では，RatPyV2 とPneumosystis carinii（P. carinii）の複合感染個体で呼巣上体，精管）において各種病変が認められるが，吸困難を呈するとされている [12]。しかし，筆者らは， 病変の形成時期や程度，範囲は臓器により異なる。
RatPyV2 に感染した XSCID-TALEN ラット系統での，P. carinii 陰性の RatPyV2 感染個体であっても，6 か各臓器における病理組織学的所見を表 3 にまとめた
月齢以上の個体において重篤な呼吸器症状を呈する症例を経験している。繁殖成績の悪化については， [14]。RatPyV2 感染症における最も特徴的な病理組織
XSCID-TALEN ラット系統の雌は 1 産目では良好に学的所見は，ウイルスが感染した上皮細胞における，大型の好塩基性～両染性核内封入体の形成である。
繁殖するが，3 ～ 4 か月齢を過ぎると繁殖しなくな
2 産目以降では産子を得にくいことや， 核内封入体には，その周囲にハローを有するもの
ることが多く，6 か月齢以上の雌ラットは妊娠を維持できないこと （Cowdry A 型：図 2 黒色矢頭）と有さないもの（full 型：が報告されている [12, 14]。
図 2 黄色矢頭）とが観察される。RatPyV2 が感染した上皮細胞が，過形成（増生）および異形成（dysplasia：
細胞および核の大きさや形態，配列の異常を呈する（2）病理学的所見
細胞の増殖性病変）を呈することも特徴的所見の 1
剖検時には，唾液腺（図 1）やハーダー腺，眼窩つである。さらに，唾液腺やハーダー腺，眼窩外涙外涙腺の様々な程度の萎縮が観察される。特に耳下腺では，線維化や単核球（リンパ球・形質細胞主体）
腺とハーダー腺では，1 ～ 3 か月齢の時点で中等度浸潤を伴う腺組織の萎縮や消失，変性および壊死もの萎縮が認められる。また，呼吸器症状を呈する 6認められる。唾液腺では，粘液腺である舌下腺と比か月齢以上の個体では，肺は赤色と桃色のまだらな較して，漿液性の腺細胞を有する耳下腺と顎下腺に色調を呈し，様々な程度の暗赤色の硬化・充実性病
おいて病変はより重度である。耳下腺病変が最も顕巣が観察される。
著であり，1 か月齢の時点で組織の広範囲において病理組織学的には，主に唾液腺（図 1C および図2A），ハーダー腺（図 2B），眼窩外涙腺，呼吸器（図重度の病変が確認できる（図 2A）。顎下腺では耳下19

実験動物ニュース

図2

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No. 1

RatPyV2 に感染した XSCID-TALEN ラットの病理組織像（HE 染色）．唾液腺の腺房および導管上皮細胞（A），ハーダー腺の腺上皮細胞（B），気管支や細気管支粘膜上皮細胞（C），肺胞上皮細胞（D）
において，好塩基性で大型の核内封入体が認められる（挿入拡大図および矢頭）．核内封入体には，ハローを有するもの（黒色矢頭）と有さないもの（黄色矢頭）が観察される．（A）耳下腺，1 か月
齢，（B）ハーダー腺，2.5 か月齢，（C）肺，1 か月齢，（D）肺，7 か月齢．（Scale bar: 100 μm）

RatPyV2 のウイルス抗原は，ポリオーマウイルス
腺よりもやや遅い時期から，多病巣性～局所広範囲マーカーである抗 SV40 large T antigen 抗体（cloneに病変が形成される（表 3）。舌下腺では，3 ～ 4 かPAb416）で検出可能であり [12, 14]，免疫組織化学染
月頃から軽度の病変が比較的限局した範囲に形成さ色では，RatPyV2 が感染した上皮細胞の核においてれる傾向にあり，腺組織の全体の萎縮や消失はみられない。ハーダー腺では，2 ～ 3 か月齢の時点で， 強い陽性所見を確認することができる（図 3）。ウイ
軽度～中等度の腺上皮細胞の過形成や異形成，腺組
ルス抗原の検出が報告されている組織としては，唾
織の萎縮が認められ，6 か月齢以降では組織全体が液腺，ハーダー腺，眼窩外涙腺，気管粘膜上皮，気線維化を伴って重度の萎縮に至る。眼窩外涙腺では， 管支 / 細気管支粘膜上皮および肺胞上皮（肺），喉頭および鼻腔粘膜上皮，子宮内膜，乳腺，前立腺，精腺組織の萎縮や単核球浸潤に加えて，雌雄ともに 2巣上体尾部，精管，腎臓の尿細管上皮があげられ，
か月齢頃から腺上皮細胞の核の顕著な大型化（カリ
筆者らはこれら臓器が RatPyV2 の標的臓器であるとオメガリー）が認められる。肺では，気管支から細考えている。透過型電子顕微鏡観察では，ウイルス
気管支，さらに肺胞上皮へと病変が広がっていき，6感染細胞の核内において，約 40 ～ 50 nm の正二十面
か月齢以上の個体では重度の間質性肺炎の像を呈す
体のウイルス粒子が多数観察される（図 4）。
る。生殖器 / 副生殖器病変は 6 か月齢前後から認められ，それより若い個体では上皮細胞内に核内封入体は検出されない。前立腺と子宮では，上皮の過形 （3）感染様式
ウ イ ル ス 抗 原 が 検 出 さ れ る 臓 器 を 考 慮 す る と，成や異形成が目立ち，前立腺は重度の萎縮に至る。
RatPyV2 は水平感染と垂直感染のいずれによっても精管と精巣上体尾部では，上皮細胞にカリオメガリー
伝播して，感染が広がりうると考えられる。主には，がみられる。なお，RatPyV2 感染個体では，腫瘍性感染個体の唾液や鼻汁，気道分泌物，尿などとの直病変の発生はこれまでに報告されていない。上述したような病変の形成時期や程度，範囲を考慮すると， 接接触や，呼吸器経路を介して感染が成立する [12,15]。また，糞口感染や交配による感染，母乳を介しRatPyV2 の 標 的 上 皮 組 織 の 中 で も， 耳 下 腺 は
RatPyV2 に対する感受性がより高い可能性がある。
た 母 子 感 染 も 起 こ り う る [12, 15]。 そ の た め，

20

実験動物ニュース表3

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No. 1

RatPyV2 に感染した XSCID-TALEN ラットの病理組織学的所見（文献 14 を改変）
1 か月齢
3 ( ♂ :2, ♀ :1)

耳下腺

核内封入体形成
上皮の過形成および異形成
腺組織の萎縮および消失，壊死
単核球浸潤

顎下腺

2-3 か月齢
9 ( ♂ :7, ♀ :2)

注）

4-5 か月齢
注）

6 ( ♂ :4, ♀ :2)> 6 か月齢
注）

あり *

あり *

あり *

あり *

びまん性，中等度

びまん性，中等度～重度

びまん性，重度

びまん性，重度

びまん性，中等度

びまん性，中等度～重度

びまん性，重度

びまん性，重度

びまん性，中等度～重度 びまん性，中等度～重度 びまん性，中等度～重度 びまん性，中等度～重度

線維化

軽度

びまん性，中等度

びまん性，中等度～重度

びまん性，重度

核内封入体形成

―

あり *

あり *

あり *

上皮の過形成および異形成―

多病巣性，軽度

多病巣性～局所広範囲， 多病巣性～局所広範囲，

腺組織の萎縮および消失，壊死―

多病巣性，軽度

多病巣性～局所広範囲， 多病巣性～局所広範囲，

単核球浸潤

―

多病巣性，軽度

多病巣性～局所広範囲， 多病巣性～局所広範囲，

線維化

―

―

軽度

軽度

核内封入体形成

―

あり *

あり *

あり *

上皮の過形成および異形成―

限局性，軽度腺組織の萎縮および消失

―

―

単核球浸潤

―

―

中等度
中等度
中等度
舌下腺

7 ( ♂ :3, ♀ :4) 注）

ハーダー腺 核内封入体形成

中等度
中等度
中等度

限局性～多病巣性，軽度 限局性～多病巣性，軽度――限局性～多病巣性，軽度 限局性～多病巣性，軽度

―

あり *

あり *

あり *

上皮の過形成および異形成―

多病巣性，中等度

びまん性，中等度～重度

びまん性，重度

腺組織の萎縮および消失，壊死―

多病巣性，中等度

びまん性，中等度～重度

びまん性，重度

単核球浸潤―

多病巣性，中等度

びまん性，中等度～重度 びまん性，中等度～重度

線維化
眼窩外涙腺 核内封入体形成
単核球浸潤

―

軽度

びまん性，中等度

―*

あり *

あり *

びまん性，重度あり *限局性，軽度～中等度

限局性～多病巣性，多病巣性，中等度

多病巣性，中等度～重度―

限局性～多病巣性，多病巣性，中等度

びまん性，中等度～重度

中等度
腺組織の萎縮および消失

軽度～中等度
核の大型化（karyomegaly）

―

あり *

あり *

あり *

あり *

あり *

あり *

あり *

核内封入体形成：肺胞

―

―

―

あり *

気管支粘膜の過形成

軽度～中等度

中等度

中等度

中等度

間質性肺炎

軽度～中等度

軽度～中等度

中等度

重度

核内封入体形成

―

―

あり *

あり *

上皮の過形成および異形成

―

―

中等度

重度

腺組織の萎縮および変性――

軽度～中等度重度

精管

核内封入体形成

―

―

―

あり *

精巣上体

核内封入体形成

―

―

―

あり *

核の大型化（カリオメガリー）

―

―

―

あり *

核内封入体形成

―

―

―

あり *

上皮の過形成および異形成――

軽度～中等度

中等度～重度

上皮の壊死

―

―

―

中等度

肺

前立腺

子宮

核内封入体形成：気管支 / 細気管支―：病変は検出されず，*：全ての検査動物において，免疫組織化学染色で SV40 陽性所見あり
注）文献 14 において，剖検および病理組織学的検査を実施した動物数とのウイルス量や病変形成部位の違いについて報告している [15]。詳細については，文献 15 を参照していただきたい。

RatPyV2 感染動物のクリーニングの際には，妊娠 ･哺育期間中の垂直感染に十分に注意する必要があると考えられる。なお，福島県立医科大学の小澤らは胚移植法による XSCID-TALEN ラット系統におけるRatPyV2 のクリーニング化を行い，繁殖成績の改善
お よ び RatPyV2 陰 性 の XSCID-TALEN ラ ッ ト コ ロ
ニーの維持を報告している（第 46 回国動協総会 施
設長・教員・事務職員懇談会，2019 年）。
Besch-Williford らは，ヌードラットを用いた感染実験を実施し，ウイルス曝露経路による標的臓器ご

3．ラットポリオーマウイルス 2 感染症の診断方法
RatPyV2 感染症は，臨床徴候のみでの確定診断は難しい。免疫不全ラット系統では PCR 検査および死後の病理学的検査が，免疫正常ラット系統では血清学的検査と PCR 検査が有用である。

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実験動物ニュース

図3

No. 1

免疫組織化学による RatPyV2 のウイルス抗原の検出（XSCID-TALEN ラット）．（A）耳下腺（1 か
月齢）および（B）ハーダー腺（2.5 か月齢）の組織像を示す．RatPyV2 に感染した腺房上皮細胞の核内封入体は抗 SV40 large T antigen 抗体（clone: PAb416）で強陽性に染まる（Scale bar: 50 μm）．

図4

図5Vol. 70

RatPyV2 に感染した XSCID-TALEN ラットの肺組織の透過型電子顕微鏡像．
気管支粘膜上皮細胞の核内に認められたウイルス粒子の像を示す．約 40~50
nm の正二十面体のウイルス粒子が多数観察される（Scale bar: 100 nm）．

口腔内スワブを用いた FTA-Amp 法による RatPyV2 遺伝子の検出．
（A）検出方法の概略：詳細は文献 14 を参照のこと．（B, C）XSCID-TALEN ラット（B）および免疫正常ラット系統（C）
における RatPyV2 VP1 遺伝子（431 bp）の検出．XSCID-TALEN ラットでは，1 か月齢（1 M）の時点から RatPyV2 VP1 遺伝子が検出された．（C）では，個体 1~4 が RatPyV2 陽性（不顕性感染個体），個体 5 と 6 は RatPyV2 陰性と判定される（コントロール遺伝子：b-actin，199 bp）．

22

実験動物ニュースVol. 70

No. 1

る（図 5C）。データは示さないが，FTA カードに塗布した免疫不全ラットの血液検体でも，RatPyV2 の
VP1 遺伝子が検出可能であることも確認している。
（2）病理学的検査
筆者らが RatPyV2 に感染した免疫不全ラット系統（XSCID-TALEN ラット）で認めた病理学的所見は 2(2) で述べた。病理学的検査においては，ウイルスの標的臓器をよく理解した上で，マクロ・ミクロレベ
ルで検出される病変の形成部位（臓器）や程度が，発症個体の月齢や感染後の期間によって異なる可能性がある点を考慮しておくことが重要である（表 3）。
また，臨床徴候が明らかでない若齢個体では，唾液腺，
ハーダー腺および眼窩外涙腺病変の程度に明瞭な左右差を認める症例も経験しているため，筆者らは必図 6 Polyomavirus の基本的なゲノム構造（文献 16
ず両側の組織を採材し，どちらとも病理組織学的なの 図 1 を 改 変 ）．TCR: Transcritional control
評価を実施するようにしている。
region，TAg: Laege T antigen，tAg: small T
病理組織学的には，標的臓器の上皮細胞におけるantigen．
特徴的な核内封入体形成や，唾液腺やハーダー腺，
眼窩外涙腺の萎縮病変を検出することができれば，病理組織学的診断および他のウイルス感染症との鑑（1）PCR 検査
別は比較的容易であると考えられる。ただし，性成
RatPyV2 ゲノムは，他のポリオーマウイルスと同熟後の雄ラットの眼窩外涙腺では，腺房細胞の核の様に，VP1 などの構造遺伝子と T antigen 遺伝子を保有する，全長約 5,000 bp の環状構造を持つ（図 6）[16]。 大 型 化（ カ リ オ メ ガ リ ー） や 核 内 偽 封 入 体
RatPyV2 の 検 出 法 と し て，Rigatti ら は RatPyV2 の （pseudoinclusions）の形成が一般的にみられ，加齢とともに発生率や病理組織学的重症度が高くなること
VP1 遺伝子や Large T antigen 領域に対するプライマーが知られているため [19–21]，それらをウイルス性封を用いた PCR 法を報告した [12]。RatPyV2 の標的臓入体と見間違えないよう注意が必要である。ヘマト器（特に唾液腺やハーダー腺）の新鮮組織，凍結組
キシリン・エオジン（HE）染色標本の評価のみでは織やパラフィン包埋組織，または糞便から抽出した
封入体形成の判別が難しい場合には，抗 SV40 large TDNA
ゲノムが検体として利用できる。環境試料や排気ダストも検体となりうる [17]。筆者が調べた限り， antigen 抗体を用いた免疫組織化学染色が有用である。
なお，ウイルス性封入体を形成しうる他の感染症と国内では，実験動物中央研究所 ICLAS モニタリング
は，封入体の形成部位（細胞の種類および細胞内でセンターや日本チャールス・リバー社にて，RatPyV2の局在）や形，色調から病理組織学的に鑑別するこPCRの検査が実施可能となっている。
とができる。また，唾液腺涙腺炎ウイルス（ラット
糞便検体を用いた RatPyV2 の PCR 検査には，非侵コロナウイルス）感染症でも唾液腺が標的となるが，襲的かつ簡便というメリットがある一方で，免疫正臨床徴候の違い（唾液腺涙腺炎ウイルス感染症では，常個体での RatPyV2 陽性検出率が，唾液腺組織を用
顎下腺の腫脹や涙腺腫脹による眼球突出が認められPCR[12]，安定した増幅がいた検査と比較して低くる）や，コロナウイルス感染症では封入体形成が認得られないなどのデメリットがある。そこで筆者らは，迅速で正確，簡便，低侵襲な PCR 検査法として， められない点などから鑑別することが可能である。
唾液検体（口腔内スワブ）と FTA-Amp 法に着目した[14]。FTA-Amp 法は，PCR 阻害物質を中和する PCR （3）血清学的検査
筆者らが知る限り，米国 IDEXX 社と米国チャー
緩衝液 Ampdirect Plus（島津製作所）と FTA カード
ルス・リバー社にて，RatPyV2 の血清学的検査が実技術を組み合わせた PCR 法であり，ゲノム DNA 抽
施されている。筆者らは，RatPyV2 の血清学的検査
出を必要としない [18]。口腔内スワブを用いた PCRを
米 国 IDEXX 社 に 依 頼 し て い る [22]（ 国 内 のRatPyV2
VP1
検査（FTA-Amp 法）による遺伝子の検
IDEXX 社は本検査には対応していない）。凍結した
出手順の概要は，図 5A に示すとおりで，具体的な血清（数十 μl）または乾燥塗抹血液を検体として提手法については文献 12 をご参照いただきたい。本手出する。後者では，Opti-Spot card（米国 IDEXX 社か
法は免疫不全ラット系統での RatPyV2 感染症の診断
cm2 程度の円形の検体エら無償提供される）上の，15B）だけでなく，免疫正常法として有用である（図リア内を埋めつくすように血液を塗布して乾燥させラット系統においても，RatPyV2 を不顕性に持続感るだけで検体準備が完了する。検体採取方法が簡便染している個体を安定して検出することが可能であ23

実験動物ニュース

で，必要な血液量も少なく，日本からでも室温で検体輸送が可能である。
以上，RatPyV2 の検査方法の概略を述べた。なお，
対応可能な検査や検体の種類は検査会社によって異なるため，検査会社に RatPyV2 の検査を依頼する際
は，各検査会社にお問い合わせいただきたい。
4．ラットポリオーマウイルス 2 感染症の発生状況
一部の免疫不全ラット系統（XSCID ラットおよび関連系統）では，米国と日本の複数の研究機関 / 施設において，RatPyV2 感染症が確認されている。免疫正常ラット系統については，Besch-Williford（米国IDEXX 社）らが北米での汚染状況調査を実施し，免疫正常ラット系統の 32%（480/1,500 検体）が血清学的検査に陽性，0.7%（7/1,000 検体）が糞便検体を用いた PCR 検査に陽性であったと報告した（2017 年）[15]。日本で研究に利用される免疫正常ラット系統コ
ロニーにおいても，RatPyV2 不顕性感染個体が一定の割合で存在することが報告されている。筆者らは，計 121 匹（37 系統）の免疫正常ラット系統を対象に，
RatPyV2 の血清学的検査 と口腔内スワブを用いた
PCR 検 査（FTA-Amp 法 ） を 行 っ た。 そ の 結 果，
37.7%（46/121 個体）が血清学的検査に陽性，41.1%（37/90 個体）が PCR 検査に陽性となった。RatPyV2
陽性となった系統には，一部の F344，Wistar や SD系統のほか，いくつかの疾患モデル系統が含まれてい た。 ま た， 山 本 ら [23] が 実 験 動 物 中 央 研 究 所
ICLAS モニタリングセンターにて実施した大規模な調査（271 施設由来の 746 個体を対象）では，国内の免疫正常ラット系統の 4.6%（個体数）が PCR 検
査陽性となり，11.8% の機関 / 施設において RatPyV2
陽性ラットが検出されたと報告されている。国内で報告された RatPyV2 陽性の免疫正常ラットでは，明らかな臨床兆候はみられず，病理組織学的検査でも明 ら か な 異 常 所 見 は 検 出 さ れ て い な い。 し か し，
RatPyV2 に不顕性感染した免疫正常ラットは免疫不
全 / 抑制動物への汚染源となるだけでなく，免疫不全ラット系統を用いた研究や免疫抑制処置を要する研究および毒性試験などへの影響 [13] も懸念される。

Vol. 70

No. 1

法は，RatPyV2 感染症の簡便かつ迅速な診断法として有用である。
現在，がん研究や再生医療研究，移植研究，創薬研究など医学・生命科学分野の研究を推進する上で，各種の免疫不全ラット系統は必要不可欠なツールとなっている。一方で，日本の免疫正常ラット系統コ
ロニー中には，RatPyV2 不顕性感染個体が一定の割合で存在することが報告されており，免疫不全ラット系統を用いた研究への影響が懸念される。RatPyV2
感染症の病変について理解することや，RatPyV2 を不顕性に持続感染している個体を確実に検出して汚染状況を把握することは，RatPyV2 感染症に対する対策を講じていく上で重要であると考える。本稿がRatPyV2 感染症についての理解を深める一助となれ
ば幸いである。
なお，ナショナルバイオリソースプロジェクト「ラット」（NBRP-Rat）では，現在，XSCID-TALEN ラット系統の生体維持および提供は行っておらず，分担機関である東京大学より，F344-Il2rgem1Iexas を含む 3
種類の免疫不全ラット系統が提供されています（https://www.ims.u-tokyo.ac.jp/animal-genetics/scid/
index.html）。これらの免疫不全系統は，RatPyV2 陰性が証明されていることを申し添えておきます。
謝辞
本 稿 で 紹 介 し た 内 容 の 一 部 は，JSPS 科 研 費
18K14610（若手研究）の助成を受けた研究により得られたものです。RatPyV2 感染症の病変解析にあたり，ご協力ならびにご助言をいただきました，京都大学大学院医学研究科附属動物実験施設 庫本高志先生（現所属：東京農業大学），中西聡先生，山崎賢一
氏，根小田祐基氏，萩原和美氏，大阪府立大学 桑村充先生に心より感謝いたします。なお，筆者らが病
変 解 析 に 用 い た XSCID-TALEN ラ ッ ト（NBRP Rat
No. 0694: F344-Il2rgem7Kyo）は，NBRP-Rat より提供を受けました。最後に，本稿の執筆にあたり，校閲をいただいた大阪府立大学 桑村充先生と国立研究開発
法人理化学研究所 池郁生先生にお礼を申し上げます。
参考文献

5．おわりに
以上，RatPyV2 感染症の概略について，主に筆者らが XSCID-TALEN ラットを用いた病変解析によって得られた知見にもとづいてご紹介した。標的となる上皮組織の中でも，耳下腺は RatPyV2 に対する感受性がより高い可能性があり，RatPyV2 感染症が疑われた際には，耳下腺を含む唾液腺組織を用いた病理学的検査や PCR 検査が必須であると考えられる。
筆者らが確立した，口腔内スワブを用いた FTA-Amp

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polyomaviridae

実験動物ニュースVol. 70

No. 1

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