実 験 動 物 ニュース
The Japanese Association for Laboratory Animal Science目次

日本実験動物学会からのお知らせ
理事候補者選挙について ................................................................................... 65
令和元年度 維持会員懇談会の開催について .................................................... 66
第 13 回実験動物管理者等研修会の開催について ........................................... 67
第 67 回日本実験動物学会総会のご案内（その 1）.......................................... 68
特別寄稿
ゲノム編集生物と遺伝子組換え生物と実験動物 ............................................. 69
実験動物感染症の現状
最近の医学実験用カニクイザルの微生物学的管理を考える .......................... 71
他学会情報.............................................................................................................. 76

Experimental Animals 68(4) 収載論文和文要約集 ................................................ 77
維持会員名簿 ............................................................................................................. i
編集後記 ..................................................................................................................iii

Vol. 68 No. 4 / October 2019

実験動物ニュースVol. 68

No. 4

日本実験動物学会からのお知らせ
理事候補者選挙について
公益社団法人日本実験動物学会選挙管理委員会
委員長：國田 智
委 員：吉木 淳
定款および理事候補者選出細則に則り，令和 2 ～ 3 年度在任理事候補者の選挙を下記の要領で実施します。
1． 日本実験動物学会名誉会員および正会員（平成 31 年 4 月 1 日現在）のうち，理事候補者選出
細則第 4 章第 9 条に従い，名誉会員，浦野 徹会員，國田 智会員，塩谷恭子会員および吉木
淳会員は立候補できません。それ以外の正会員の方々が被選挙人としての有資格者です。日
本実験動物学会会員名簿は 10 月中旬に全会員へ発送します。
2． 選挙は立候補制をとります。下記の ｢ 令和 2 ～ 3 年度理事候補者推薦書 ｣ 用紙に立候補者名と正会員 3 名以上の推薦者名を記入して推薦してください。推薦にあたり，立候補者の承諾を得てください。複数の立候補者を推薦するときは用紙をコピーしてそれぞれ個別に推薦してください。
3． 推薦書は選 挙管理委員会事務局まで郵送してください。推薦受付期間は 11 月 1 日（金）～11 月 30 日（土）（当日消印有効）です。
4． 選挙公報，立候補者名簿，投票用紙等は 12 月 24 日（火）までに会員宛に発送致します。
5． 投票は立候補者の 5 名連記による無記名投票を郵送で行い，上位 15 名を当選者とします（第15 位の得票が同数の場合は抽選）。
6． 投票の受付期間は 12 月 25 日（水）～ 2 月 5 日（水）（当日消印有効）です。
7． 選挙管理委員会事務局は学会事務所（〒 113-0033 東京都文京区本郷 6-26-12 東京 RS ビル）
内におきます。

.......................................................................................................... 切 り と り 線..........................................................................................................
令和 2 ～ 3 年度理事候補者推薦書
令和元年 11 月日

下記会員を理事候補者として推薦致します。
立候補者氏

名：

年

齢：

所

属：

現職名：
推薦者（3 名以上）

氏名

㊞

氏名

㊞

氏名

㊞

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No. 4

令和元年度 維持会員懇談会の開催について
財務特別委員会委員長

高木博隆

日頃，（公社）日本実験動物学会への維持会員の皆様からのご理解とご支援，誠にありがとうございます。例年の通り，動物実験に関する学術振興，技術発展による社会と産業への貢献などの話題を広く情報共有，周知する目的で，講演・展示会および意見交換会を下記要領で開催いたします。維持会員の皆様に限らず，実験動物や動物実験にかかわる多くの皆様をお迎えして，当学会活動に親しんでいただく機会になれば幸いです。
プログラム・参加申し込み等については，本学会のホームページ（https://www.jalas.jp/）に掲載いたしますので，そちらでご確認ください。多くの方のご参加をお待ちしております。
令和元年度（公社）日本実験動物学会

維持会員懇談会

日時：令和元年 11 月 15 日（金）13:00 ～（展示会），13:00 ～（講演会）

場

所：中央大学

駿河台記念館〒 101-8324
内東京都千代田区神田駿河台 3-11-5

容：理事長挨拶「動物愛護管理法改正および外部検証について」
講演会「血液腫瘍治療の最前線」
1）臨床の場から～ CAR-T 療法など最新治療の現状について
2）基礎研究の場から～遺伝子改変動物を用いた病態解析の現状について話題提供「ナショナルバイオリソースプログラム・ラットの紹介とラットの生殖工学技術」
意見交換会
企業説明（プレゼンテーション）
インビボサイエンス株式会社
有限会社葛生運送
意見交換会

参加費：講演会・展示会（無料），意見交換会（5,000 円／人）
主催：（公社）日本実験動物学会

後

援（予定）：
日本製薬工業協会，安全性試験受託研究機関協議会，
動物実験関係者連絡協議会，日本実験動物協同組合，
日本実験動物器材協議会，日本実験動物協会

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No. 4

第 13 回実験動物管理者等研修会の開催について
公益社団法人日本実験動物学会 理事長
実験動物管理者研修制度委員会 委員長

浦野 徹
花木賢一

（公社）日本実験動物学会（以下，本学会）では第 13 回実験動物管理者等研修会を下記の要領
で開催いたします。
我が国の動物実験の基準である「実験動物の飼養及び保管並びに苦痛の軽減に関する基準（環境省告示）」には，実験動物管理者等の教育訓練について記載があります。そこで，本学会では
平成 25 年度より学会員・非学会員を問わず，動物実験を実施する国内の全ての機関の実験動物管理者等を対象として研修会を開催して参りました。そして，これまでに 1,300 名を超える参加を頂いています。内容は実験動物管理者等に求められる基本的な知識と技術，動物福祉や関連法
令など多岐に亘りますが，初学者でも解るように解説いたします。参加を希望される方は参加申込票に必要事項を記入し，本学会事務局宛に FAX（03-3814-3990）でお申し込みください。プロ
グラムや参加方法の詳細は本学会のホームページ（http://jalas.jp/meeting/seminar.html）よりご確認ください。多くの方の参加をお待ちしております。

第 13 回実験動物管理者等研修会
日 時：令和 2 年 2 月 26 日（水）13:00 ～ 18:00，2 月 27 日（木）9:00 ～ 16:20
会 場：東京大学農学部 3 号館 4 階会議室 東京都文京区弥生 1-1-1
http://www.a.u-tokyo.ac.jp/campus/overview.html
参加費：4,000 円（会員），5,000 円（非会員である維持会員団体職員），6,000 円（非会員）
定 員：120 名
その他：受講者には資料を配布，受講修了証を発行
主 催：（公社）日本実験動物学会
後 援：環境省，厚生労働省，農林水産省，文部科学省
プログラム
講義 1 法 律における実験動物の位置づけについて～社会から見た実験動物～
講義 2 動物実験の機関管理，「実験動物管理者」の役割と責任講義 3 実験動物の飼養保管等に関連する法規講義 4 遺伝子組換え動物実験と感染動物実験の規制
講義 5 人獣共通感染症とバイオセーフティ
講義 6 労働安全衛生と危機管理
講義 7 各種実験動物の特性講義 8 実験動物の導入，飼育管理（器材，飼料，飲水，エンリッチメント），記録管理講義 9 実験動物の健康管理（検疫，順化，獣医学的ケア，主な疾病・傷害，感染症予防対策）講義 10 施設・設備の衛生管理（清掃，洗浄，消毒，昆虫・野鼠対策，廃棄物処理）講義 11 動物実験を修飾する要因 ―外部環境と内在性因子―
講義 12 動物における苦痛のカテゴリーと人道的エンドポイント
講義 13 中大動物・霊長類の麻酔，鎮痛，術中術後管理，安楽死
講義 14 げっ歯類の麻酔，鎮痛，鎮静，試料採取，安楽死

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No. 4

第 67 回日本実験動物学会総会のご案内（その 1）
The 67th Annual Meeting of the Japanese Association for Laboratory Animal Science● 実技協協賛企画シンポジウム（「長寿研究を支

テーマ：「健康長寿を支える実験動物」

える実験動物技術」）

大会長：塩谷恭子（国立循環器病研究センター実
験動物管理室）会

期：2020 年 5 月 23 日（土）～ 25 日（月）会

場：大阪府立国際会議場（〒 530-0005●一般講演
・ ポスター発表

大阪

なお，「若手発表賞（仮称）」に応募された方に府大阪市北区中之島 5-3-51）

は口演発表をしていただきます●ランチョンセミナー

プログラム案●ホスピタリティールーム

●特別講演「社会への情報発信●器材展示

UAR に学ぶ（仮題）」●情報交換会Wendy Jarrett（Understanding Animal Research）

大会事務局●学会本部企画シンポジウム

第 67 回日本実験動物学会総会事務局

・ 学術集会委員会（「睡眠，生物リズム研究の〒 564-8565

最前線」）

吹田市岸部新町 6-1

・ 実験動物感染症対策委員会（企画中）

国立循環器病研究センター

・ 動物福祉・倫理委員会（「One Welfare」）

E-mail: jalas67@ncvc.go.jp
https://jalas67.org● LAS セミナー（教育研修委員会，企画中）●第 67 回総会企画シンポジウム（企画中）

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研究所内

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No. 4

特別寄稿

ゲノム編集生物と遺伝子組換え生物と実験動物
三浦竜一
東京大学ライフサイエンス研究倫理支援室

ゲノム編集技術はここ 10 年で爆発的に普及し，実
験動物領域にも甚大な影響を与えることとなった。
それまでは，遺伝子組換え技術を用いてトランスジェ
ニック動物（ゲノムの不特定部位に外来遺伝子を導入）やノックアウト動物（ゲノムの標的部位での相同組換えにより遺伝子を欠損させセレクションマー
カーとなる外来遺伝子を導入）の作成を行ってきた。
特にノックアウト動物の作成は相当な経費と時間，労力をかけて取り組んできたが，それが劇的に解消されたことが大きい。こうした動物を含めた遺伝子
組換え生物は，自然界にはない生物であることから，法律による管理を必要とされた。この法律が「カルタヘナ法」の略称が使われる「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律」である。遺伝子組換え生物は，①細胞外において核酸を加工する技術，あるいは②異なる科に属する生物の細胞を融合する技術の利用により得られた核酸又はその複製物を有する生物と定義されているが，研究開発や産業分野で使用される遺伝子組換
え生物のほぼ全ては①の技術によるものである。一方，ゲノム編集技術では，外来遺伝子の挿入を意図
し痕跡を残す遺伝子操作である場合を除き，ゲノム上の編集内容は自然界でも起こりうる変異と区別することはできない。そのため，一部のゲノム編集生
物は遺伝子組換え生物にはあたらずカルタヘナ法の対象外ではないか，との見解が当初からあった。これに対して，環境省は平成 31 年 2 月 8 日付けの「ゲノム編集技術の利用により得られた生物であってカルタヘナ法に規定された「遺伝子組換え生物等」に該当しない生物の取扱いについて」において，研究開発および産業分野での使用全般について考え方を示した。文部科学省は令和元年 6 月 13 日付けで「研究段階におけるゲノム編集技術の利用により得られた生物の使用等に係る留意事項について」を通知して，研究開発でのゲノム編集生物の使用について具体的な対応を示すこととなった。ここでは，主に研究開発での利用について述べる。

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遺伝子組換え生物に該当しないゲノム編集生物とは通知の中で，「ゲノム編集技術の利用により得られた生物のうち，最終的に得られた生物に細胞外で加工した核酸が含まれない場合は法の対象外」としている。その中で，移入した核酸（ガイド RNA や人工
ヌクレアーゼ mRNA，ベクターの DNA を含む）が宿主のゲノム中に移転又は複製されない場合は「遺伝子組換え生物等」には該当しないとある。また，
人工ヌクレアーゼ遺伝子等を意図してゲノムに組み込んでも，従来品種との戻し交配等によって，組み込まれた遺伝子を除去すれば（null segregant），これも該当しないこととなっている。外来の核酸を含まない人工ヌクレアーゼのみでのゲノムの切断と自然修復で偶然導入された塩基等は細胞外で加工した核酸には当たらないため，その生物も対象外となる。
それでは，細胞外で加工した核酸の移入・残存の有
無をどのように示すのか。標的部位を調べて核酸の移入・残存のないことが確認できれば遺伝子組換え生物に該当しないかというと，それほど単純でもない。非標的部位への移入の有無（オフターゲット効果）も確認しなければならず，これを調べることで「最終的に得られた生物に細胞外で加工した核酸が含まれない」生物となる。文部科学省では，その確認方法として，PCR 法やサザンブロット法をあげているので，使用するゲノム編集技術やゲノム編集生物の使用方法（開放系や閉鎖系等）にもよるが，全ゲノ
ムシークエンス等のより正確な確認方法を必ずしも求めていない。
ゲノム編集生物の取扱い
文部科学省の通知では，「細胞外で加工した核酸を含む生物，もしくは核酸の有無を確認していない生物」は遺伝子組換え生物であり，カルタヘナ法に基づく取扱いをしなければならない。ゲノム編集技術を使用することで，標的部位で外来の核酸の挿入あるいは置換・変異を発生させる場合は明らかに該当する。核酸の欠失（ゲノム配列の欠失）の場合は，

実験動物ニュース

他部位での外来の核酸の移入・残存がないことを確認していれば遺伝子組換え生物に該当しないが，確認していなければたとえ移入・残存がなくとも該当することになる。そのため，問題となるのはカルタ
ヘナ法の対象外である「最終的に得られた生物に細胞外で加工した核酸が含まれない」生物の取扱いである。対象外の生物を開放系で使用する場合と閉鎖系で使用する場合で対応が異なる。開放系の場合は，使用に先立ち所定の書類（ゲノム編集技術の利用により得られた生物の使用等に係る実験計画報告書）を作成して所属機関の安全委員会で検討した後，文部科学省（生命倫理・安全対策室）に提出しなければならない。カルタヘナ法にある第一種使用等に類似した対応である。一方，閉鎖系では，バイオセー
フティの観点から，当該生物に応じた適切な拡散防止措置を執る必要があり，従前のカルタヘナ法に基づく遺伝子組換え生物等の取扱いと同様に取扱いを行うこととなっている。特に，大臣確認を要する生物（ウイルスや細菌等の病原体）を使用する場合は，所属機関の安全委員会において安全な取扱い等について検討した上で，生命倫理・安全対策室に照会を行い，必要に応じて学識経験者の意見を踏まえた拡散防止措置を執ることが必要とされる。それ以外の生物においても，遺伝子組換え生物と同様に所属機関の安全委員会で検討した方がよいだろう。
保管および運搬にあっても同様で，当該生物を漏出，逃亡その他拡散しない構造の容器に入れた上で，所定の場所に保管するもしくは最も外側の容器に取扱いに注意を要する旨表示をして運搬することが必70Vol. 68

No. 4

要である，譲渡先へ所定の情報（（a）当該生物がゲ
ノム編集技術の利用により得られた生物のうち細胞外で加工した核酸を含まないことを確認した生物である旨，（b）閉鎖系において使用等している旨（該当する場合），（c）当該生物の種類の名称（名称が無い場合はその旨），（d）既に主務官庁に届出を提出し（e）譲渡者の氏名および住所（法ている場合はその旨，人にあっては，その名称並びに担当責任者の氏名および連絡先））を提供することや，海外から当該生物を譲受する前に上述の手続きと取扱いが必要となることも忘れてはならない。また，事故や災害等の場
合には，緊急時対応や文部科学省への通報もカルタ
ヘナ法と同様と考えてよい。
実験動物での対応
上述のように，ゲノム編集動物で必要とする手続
きや対応はカルタヘナ法に従った遺伝子組換え動物のやり方をそのまま適用させればよい。ただし，安全委員会への申請様式や情報提供書の様式は，従来の様式を修正するか，ゲノム編集生物用に別に設けるかする必要があるだろう。また，海外から動物を輸入する場合は，ゲノム編集動物であるか否かを必ず確認して，しかるべき対応を行わなければならない。こうしたことから，実験動物の生産・供給ある
いは研究段階での飼養保管において，遺伝子組換え動物や該当しないゲノム編集動物が，一部の家畜や養殖魚のように開放系で飼育されることがない限り，現場の対応がこれまでと大きく変化することはないと考える。

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No. 4

実験動物感染症の現状

最近の医学実験用カニクイザルの微生物学的管理を考える中村紳一朗
滋賀医科大学動物生命科学研究センター

要約

医学実験用カニクイザルの微生物学的管理は，多くの個体が海外から輸入される点，繁殖母群を得る際の発生工学的なクリーニングが困難な点，集団管理ではなく個体ごとに管理される点などから，げっ歯類の管理とは考え方が大きく異なる。実験用イヌやブタで用いられることがあるワクチ
ンによる管理も利用可能なワクチンが限られ困難である。カニクイザルの海外からの導入には我が国における法定輸入検疫を要し，輸出国および各生産施設の衛生管理状況を完全に知ることは難し
く，微生物学的管理における不確定要素が多い。国内施設へ導入してからの管理では，標準的な微生物学的基準が存在せず，各施設で他の国内施設の情報，施設内での試験（実験）内容などを考慮しながら決定している状況である。他種実験動物のような集団管理はできず，個別の定期検診による監視は多くの労力を伴う。また研究トレンドの変化によって配慮すべき微生物も変わる。しかしカニクイザルにはこれらの労苦を上回るインパクトのある研究成果が得られるポテンシャルがある。本稿では最近の，カニクイザルの海外からの導入ならびに国内施設内での管理において，考慮すべきカニクイザル微生物学的管理のポイントと主だった微生物について紹介する。

1．現状に関する総論
感染症を防ぐための基本的な考え方に動物種を超えた共通点は多いが，医学実験用カニクイザルには，げっ歯類などではあまり考慮することの無い特殊事
情が存在する。
まず繁殖施設の問題がある。カニクイザルは繁殖
母群を起こす際に発生工学的手法を用いないため，コンベンショナルな微生物学的レベルで繁殖母群が維持されることになる。生産拠点は国外であり，感染症法に基づく生産国での輸出検疫，そして日本での輸入検疫が必要である。該当する海外繁殖施設は，
農林水産省による許認可を受けてはいるが，我々エンドユーザーには詳細な管理体制がわかりにくい。
海外繁殖施設の状況は，カニクイザル輸入を取扱う業者が現地視察を行っており，詳しい。一方で，入手可能な各種情報を総合しても監視しきれない部分があり，海外繁殖施設で抗生物質や駆虫剤が投与されてから輸出され，“ 擬 ” 陰性となり，我が国へ輸入後に再燃といった実例も存在する。
カニクイザルを国内施設へ導入した後には定期健康診断などにより個体ごとに微生物学的検査を行う必要がある。げっ歯類のようにおとり動物を用いる
検査は経済的な観点から，ワクチンによる感染症コントロールは適用可能なワクチンが少ない（麻疹などヒトとの共通感染症では利用可能なものもあり）
点から，それぞれ問題があり，サル類では集団を対象とした微生物学的管理は困難である。検査対象とする微生物項目の標準的基準は存在せず，各機関で考えなければならない。感染症法による監視微生物（エボラ出血熱ウイルスとマールブルグ熱ウイルス）は，国内での感染源は考えにくいため除外できる（後述）。そこで重要な人獣共通感染症，またはサルコロ
ニーの中で深刻な拡がりを示す感染症などを重点的に考慮して，サルのヘルペス B ウイルス（BV），サ
ルバリセラウイルス（SVV），結核，細菌性赤痢，ア
メーバ赤痢等は必須項目とし，その他の項目（サルレトロウイルス（SRV），サル免疫不全ウイルス（SIV），
サル T リンパ球白血病ウイルス，E 型肝炎，サルモ
ネラなど）については，各機関での試験（実験）期間，
試験（実験）内容に合わせて必要な項目を選択することが多い。試験（実験）内容によりさらに詳細な検査を検討すべき場合は，血液寄生のフィラリアやマラリア，消化管寄生虫（原虫を含む）などを加える。

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No. 4

不十分な微生物の排除によって，輸入後に国内で再細菌，原虫で有効な治療薬が存在し，国内施設間で動物を授受する場合は，各機関の検査項目の差異， 燃する可能性もあり（例えば細菌性赤痢，サルモネ
ラなど），また不適切な運用あるいは動線などから生
試験内容を考慮して導入検疫を行うこともある。
さて，誰がどのように微生物学的検査をするか， じたと思われる事例もある。輸入検疫中に考慮すべき病原体を以下に挙げる。
という点では，カニクイザルを含むサル類の管理は1
実例 1．イヌジステンパーウイルス（CDV）：2008
貧弱だ。信頼できる外部検査機関は 機関，一般社
団法人予防衛生協会（予防衛生協会）だけである。 年に中国から輸入したカニクイザルが法定輸入検疫中に突然死，あるいは眼漏，鼻漏，食欲不振，発咳，
予防衛生協会が提供しているサービスの内訳は基本
鼻炎，下痢，発熱，全身性の発疹などを呈した。こ的に，ウイルス検査として抗原抗体法をベースにしれら症状は麻疹やイヌジステンパーの症状に類似した検査，細菌は培養および抗原同定検査，寄生虫では虫体をより良く描出する染色を施しての顕微鏡検ており，斃死例からは CDV（CYN07-dV 株）が分離査である。一方で各実験動物施設・機関が自前で検された。この CYN07-dV は分子遺伝学的に 2006 年か査する場合もあり，結核に対するツベルクリン検査， ら 2008 年に中国のアカゲザルで発生した CDV 例と消化管内寄生虫・原虫に対する直接鏡検などが挙げ近縁であったため [11]，これらアウトブレークとのられる。これらのうち，ウイルスの抗原抗体反応お関連が Sakai らによって指摘された [10]。
CDV は 麻 疹 ウ イ ル ス と 同 様 に SLAM（Signaling
よびツベルクリンに対する生体反応は結果のブレに
lymphocyte activation molecule, CD150） と Nectin4
悩むことがある。その不安定さを解消するには，核酸をベースとした PCR 等による補完検査が必要と思 （PVRL4; polio virus receptor like molecule 4）を受容体と す る。CYN07-dV 株 は canine SLAM に 加 え て，われるが，現状では必要時に自施設で行うか，そのmacaque SLAM にも親和性を示したが，human SLAM
分野の専門家に依頼することになる。外部検査機関との親和性は低く，ヒトへの感染の可能性は低いとによる二次（オプション）検査が提供されれば，適考えられた [10]。
切な評価への手助けとなるだろう。
霊長類での CDV 感染報告例は多くはないが，ウ
最近，抗体医薬品，免疫を介在した創薬などの開発，
イルス株と宿主の組合せ，その他の要因によっては再生医療の前臨床的評価におけるサル類を用いた評感染成立が起こり得る。なお，世界初のサル類の価の中で，病原性の低い日和見感染症に関わる微生CDV感染報告は，日本のイヌ施設に近接した場所で物のコントロールが必要となってきている。特に消飼育されていたニホンザルの例である [13]。（結局，化管内原虫には検査法の検出限界の問題があり，各カニクイザルでは CDV の感染があり得るのか一文欲機関へ導入された個体には一部，見逃された原虫感しい）。国外のサル生産地での CDV 発生状況，国内染があるかもしれない。治療薬がある場合は薬剤を用いた治療と予防を兼ねた処置も必要となってくる。 においても獣医学的な疫学情報には注意を払いたい。
実例 2．E 型肝炎ウイルス（HEV）：HEV はマカカ
このように医学実験用カニクイザルを取り巻く微
生物学的管理には，様々な制約がある。次項から， 属サル類に対して非病原性だが，感染は成立する非現状で私たちが配慮すべきことは何か，すなわち輸病原性キャリアとなる。ヒトの HEV 感染が国内で公入検疫，国内施設導入検疫と定期健康診断，試験内
衆衛生上の話題になった際，実験動物として使用さ容のトレンドと日和見感染症の微生物，といった各
れているブタ，サル類が媒介する本ウイルス感染の作業項目別の概説と，それぞれで注意すべき微生物可能性が問題となり，2005 年に国立大学法人動物実
験施設協議会（国動協）会員校施設での調査が行わを示していく。
れた。HEV 抗原に対する IgG 抗体陽性率は，動物実
験施設飼育（20 施設）のニホンザル 13％，アカゲザ
2．輸入検疫
ル 10％，カニクイザル 8％だった。一方で，野生由来個体を含む野外飼育ニホンザルの調査では 36.2%
カニクイザルは，我が国の農林水産省に許可されが陽性，またカニクイザルを生産地別に調べた医科
た繁殖施設からのみ日本へ輸出され，日本での輸入
学実験施設でのデータで陽性率は中国 67％，ベトナ
検疫を経て，法令上の対象となるエボラ出血熱ウイム 30％，インドネシアとフィリピン，ならびに国内
ルスとマールブルグ熱ウイルスの陰性個体のみが動産は陰性だった [12]。
物実験施設へ導入される。とはいえ，先方施設での我が国では，衛生的な管理が行われている医学実運用の実態は，日本国内からは想像できないことも験用サル類の飼育管理の中で HEV 感染が起こること多い。現地での抗生物質，駆虫薬による一時的かつ72

実験動物ニュース

は考えにくく，国内の野生サル生息地，海外の生産地で感染する可能性が高い。とすると，カニクイザ
ルの場合，もし海外の生産地で感染しても，1）HEVに感染したカニクイザルは無症状キャリアなので発症もウイルス体内再増殖も起こらず [1]，2）1 回の実験的接種では約 30 日でウイルスは排出されるという報告があり [1]，3）国内導入の際に行われる合計 60日の法定検疫にて衛生的に管理されるため国内でのHEV 再暴露の可能性は無い，などのことから，HEV
は検疫期間中に消滅することになる。逆に HEV に対する中和抗体は比較的長期間に渡って上昇を維持することから，生産地での感染の足跡として，導入個
体の中には IgG 抗体陽性（ウイルス陰性）個体が存在することがある。このことは，もしサル類の HEV
抗体価（特に IgG 抗体）が高くても適切な検疫を行えば安全であることを意味している [8]。
実例 3．結核：2014 年に生産国の輸出検疫を終えて日本で輸入検疫が行われたカニクイザル 32 例中 9
例に結核の陽性または擬陽性事例が報告されている。
9 例中の 7 例はツベルクリン反応，菌分離，チール
ネルゼン反応，ラングハンス型巨細胞を伴う壊死性
肉芽腫性炎の病理組織所見が見られたことから典型的な結核症例と判断された [10]。このケースでは明確な臨床症状を認めず，ツベルクリン反応擬陽性になる事例もあり，論文によると，輸出国からの日本への輸出に比較的近い時期に結核菌に暴露した場合，我が国での輸入検疫中に十分な細胞性免疫反応が得らなかったことが理由だろうと推測している。実は本件に関し，Exp. Anim. 誌から気になる報告が出ている [3, 6]。2016 年，2017 年に中国におけるアカゲ
ザルの結核に関する研究報告である。報告としてまとめる時間を考慮すると，2014 年の我が国の報告例と結核感染時期が重複しているように思え，同じマカク属サル類の結核の発生として，何らかの関連性を疑わざるを得ない。日本でも近隣国の感染症の発生情報のアンテナを張っておきたい。
3．国内施設導入検疫と定期健康診断
我が国の多くの機関は，法定輸入検疫の指定係留施設からカニクイザルを導入することとなる。エンドユーザー施設が指定係留施設と連携を取りながら輸入検疫を行った場合は，検疫期間中に並行して自主検査として，エンドユーザー施設で必要とされる
微生物に対する検査が可能である。一方，検査をさらに厳密化したい場合は，施設導入検疫を行う場合がある。例えば，消化管内原虫は法定輸入検疫を含73

Vol. 68

No. 4

むそれまでの検査内で，排泄物中の嚢子等虫体が十分量でない場合は検出できず，国内輸送や環境変化によるストレスで見いだされる可能性がある。また生産国で抗生物質，抗菌剤を投与されて “ 擬 ” 陰性となっている個体が，薬効が切れて陽性へ転換する可能性もある。再検査や，あらためて適切な抗菌剤の投与後，十分な休薬期間にて再燃のないことを確認したあと，ようやく国内施設への導入となることもある。さらに施設導入後の試験内容や試験期間を想定し，日和見感染症の微生物検査を加える場合がある。
試験（実験）目的によって飼育期間が長期化する
場合は，定期的なモニタリングが必要である。その際，げっ歯類の様なカスタマイズされた方法が存在しな
いため，個体別に必要なサンプルを採取し，検査項
目は自らの機関で判断しなければならない。直接鏡
検，ツベルクリン反応，一部の細菌培養検査などは自前で可能であるが，その他の検査項目については
予防衛生協会に頼ることになる。SRV 以外のウイル
ス検査はほとんど抗原抗体反応で，陰陽判別が困難なケースに対し，予防衛生協会では二次検査としての PCR 検査等が用意されておらず，擬陽性が出た場
合などは判断に苦慮することが多い。
私たちの施設はカニクイザルで，発生工学的技術を用いた疾患モデル動物の開発を行っている。そのため，繁殖母群のカニクイザルの飼育期間は数年を超えることが少なくない。そのため 1 年に 1 回程度，
定期健康診断を行い，その微生物学的項目には BV，SVV，結核（ツベルクリン），細菌性赤痢，サルモネ
ラ，消化管内寄生虫・原虫をあげている。
4．試験内容のトレンドと日和見感染症の微生物
最近の抗体医薬品・免疫を介在した創薬などの開発では，厳密な免疫学的評価が必要とされる。また
iPS 細胞への応用を睨んだモデル作製の場では，移植細胞の生着のために免疫抑制剤が使われる。いずれにおいても，病原性の低い日和見感染症の微生物に対するコントロールが必要となる。消化管内原虫は，検査法による検出限界による見逃しの可能性を考慮し，治療薬がある場合は予防を兼ねた投薬も視野に入れる管理が必要となる。一方で，一部のレトロウ
イルスやヘルペスウイルスの抗原抗体反応による検査で検出限界以下だった個体が，免疫抑制剤によってウイルスの増殖を招く場合がある。また基本は無症状キャリアとして一般的に感染している病原体が，免疫抑制剤によって何らかの病態の標榜に関係する

実験動物ニュース

図1

Vol. 68

図2

Epstein-Barr ウイルス関与が示唆される，カニ
クイザルのリンパ腫例．免疫抑制剤を約 5 か
月間投与されたカニクイザルに生じた胸腔縦隔腫瘤の HE 染色像．大小不同の円形から多角形 の 細 胞 が び ま ん 性 に 増 殖（Scale Bar; 50μm）．腫瘍細胞は免疫染色で CD20 陽性の B細胞（挿入図参照）．

こともある。
実例 4．消化管内原虫駆虫の 1 例（大腸バランチ
ジウム）：大腸バランチジウムの病原性は低いとされ，多くの機関では，導入検疫の検査の対象としない，
あるいは陽性個体のみへの駆虫という対応を行っている機関が多いのではないだろうか。
私たちの施設では 2011 年から 2012 年の全頭健康診断で大腸バランチジウムは陰性だったが，2013 年
から 2014 年に行った健康診断で，重度の水様下痢を示した 1 頭に大腸バランチジウムの濃厚感染が見られ，その後の検査で同室または周囲の飼育室で下痢の有無とは関係なく大腸バランチジウム陽性個体が多数確認された。現在はパロモマイシン硫酸（アメパロモ：ファイザー社）を全頭へ投与する予防と治療を兼ねた方法を用い，以後の出現は終息している。
排泄されるシストは一般的な消毒薬に抵抗性である
ため，濃厚感染に気づかないでいると動物実験従事者が拡散し，結果としてかなりのスピードで蔓延するようだ [7]。
実 例 5．Epstein-Barr ウ イ ル ス（EBV）：EBV は，
ヒトではホジキンリンパ腫や上部消化器癌の発生との関与が知られている。また移植後リンパ増殖性疾患という，臓器ならびに細胞移植時に免疫抑制剤投与で生じる免疫抑制状態が引き起こす，制御不能なリンパ球増殖性疾患（特に B 細胞）の原因であるこ

74

No. 4

Epstein-Barr ウイルス関与が示唆される，カニク イ ザ ル の リ ン パ 腫 例．EBV-encoded small
RNA（EBER）に対する in situ hybridization（Scale
Bar; 50 μm）．多くの腫瘍細胞が陽性．

とが知られている [2]。
マカカ属サル類ではほとんどの個体が血清 EBV 抗体陽性であるにも関わらず，病態発生との関連は不明な点が多い。私たちの施設では，免疫抑制剤を必要とする実験操作の中で，ヒトの移植後リンパ増殖性疾患に相当する，全身の腫瘤形成を伴うリンパ腫を 2 例経験した（未発表データ）（図 1）。ともに腫瘍細胞は CD20 陽性の B 細胞由来で（図 1 挿入図），
多くが EBV-encoded small RNA（EBER）に対する insitu hybridization で陽性を示した（図 2）。両例とも血清 EBV 抗 体 陽 性 だ っ た が， こ の 実 験 以 外 で 血 清
EBV 抗体陽性カニクイザル 2 例の脾臓では，EBER
は陰性だった。免疫抑制剤を用いる実験の際には，
体表リンパ節の腫脹，リンパ球の増殖性変化に注意を払っていただきたい。
5．その他
BV のようにサルからヒトへ感染して問題になる
微生物のほかに，実験用サル類の管理の現場ではヒトがサルへうつす微生物が問題になることもある。
上述した結核の他に，麻疹もそうである。サル類の微生物学的管理では，BV を排除するために多くの労力が払われ，現在入手可能なほとんどのカニクイザ
ルは BV 陰性である。一方で，サルの BV に相当す
るヒトを宿主とする単純ヘルペスウイルス（HSV）
については，筆者も含む多くのサル類実験従事者の実験動物ニュースVol. 68

No. 4

参考文献

抗体保有状況は全く調べられていないだろう。我々の施設では育仔放棄された仔カニクイザルに対し人工哺育を行うことがある。その取扱いの中で，仔ザルと従事者との接触は一般的な取扱い以上に密になる。密接なサル類との接触が，HSV のサルへの感染のリスクとなることを知っておきたい。
実例 6．HSV：主にペットとして飼われているサル類やヒトと濃密に接するサル類（特にマーモセット）での HSV 感染報告が多く，動物実験施設における HSV 感染成立の可能性は低いが，いったんヒト由来と推定される HSV 感染が成立するとサル類に致死性の脳脊髄炎を起こす [4, 5]。HSV 感染はマーモセッ
トからオランウータンまで，霊長類の系統発生の中でも多様に発生しているので，どのサル種でも感染の可能性に注意しなければならない。なお，実験動物として汎用されるマカクザルでの論文ベースの報告例は無い。
また，臨床検査機関などでサル血清の HSV 抗体検査を行う際は，他のヘルペスウイルとの交差性を考慮し，慎重にデータを取り扱うべきである。サル類を扱う動物実験施設では，BV を厳重に管理しているが，HSV の抗体検査をしていないヒトの存在は，サルたちにとって大変な脅威である。

1. Clayson, ET, et al. 1995. Viremia: fecal shedding, andIgM and IgG responses in patients with hepatitis E. J.
Infect. Dis. 172: 927–933.
2. Dharnidharka VR et al. 2016. Post-transplant lymphoproliferative disorders. Nat Rev Dis Primers. 28:
15088.
3. Gong W et al. 2017. An alert of Mycobacterium tuberculosis infection of rhesus macaques in a wild zoo
in China. Exp Anim. 66: 357–365.
4. Imura K, et al. 2014. Herpes simplex virus type 1 infection in two pet marmosets in Japan. J Vet Med Sci.
76: 1667–1670.
5. Kik MJ, et al. 2005. Herpes simplex infection in a juvenile orangutan (Pongo pygmaeus pygmaeus). J Zoo
Wildl Med. 36: 131–134.
6. Min F, Pan J, Wu R, et al. 2016. Profiling serum antibodies to Mycobacterium tuberculosis proteins inrhesus monkeys with nontuberculous Mycobacteria.
Exp Anim. 65: 11–16.
7. Nakamura S, et al. 2019. Paromomycin sulfate is aneffective treatment for balantidiasis in captive cynomolgus monkeys. Exp Anim. 68: 285–292.
8. Nakamura S, et al. 2012. Epidemiology of hepatitis E
virus in indoor-captive cynomolgus monkey colony. J
Vet Med Sci. 74: 279–283.
9. 大江紗希ら．2018. 輸入カニクイザルにおける結核症の集団発生事例．日獣会誌．71: 369–375.
10. Sakai K, et al. 2013. Lethal canine distemper virus
outbreak in cynomolgus monkeys in Japan in 2008. J
Virol. 87: 1105–1114.
11. Sun Z, et al. 2010. Natural infection with canine distemper virus in hand-feeding Rhesus monkeys in
China. Vet Microbiol. 141: 374–378.
12. Yamamoto H, et al. 2008. Serological evidence forhepatitis E virus infection in laboratory monkeys andpigs in animal facilities in Japan. Exp Anim. 57: 367–
376.
13. Yoshikawa Y, et al. 1989. Natural infection with canine distemper virus in a Japanese monkey (Macaca
fuscata). Vet Microbiol. 20: 193–205.

6．最後にここまで公になっているデータと私たちの施設での経験を元に，カニクイザルの微生物学的管理の現状を記してきた。単純にげっ歯類の現状と比べることはできないが，拠り所とする標準的な基準がない
ことが，現場での管理を困難にしている。げっ歯類
では標準的な項目と免疫不全の項目が準備されているように，最近の試験（実験）内容を考えるとサル類でもグレード別の項目が必要かも知れない。また
サル類を飼育するためには，ある程度の経済的バッ
クグランドが必要だが，情報を表に出しやすいアカ
デミアの動物施設に大規模なサル類飼育施設が少ないことが，サル類の微生物学的管理に関わる情報の少なさに響いているのかも知れない。民間機関を含めた情報共有があれば，国全体のサル類を用いた研究の質向上に繋がるものとなるであろう。開発途上の試験中には制限も多いと思われるが，ご協力願いたい。

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No. 4

他学会情報
公益社団法人日本実験動物協会の動き
Ⅰ．ブタ実技研修会の開催について
この実技研修会は，今回も実技試験を受験される方を優先したうえで，一般の受講希望者にも参加していただけるよう広く募集し，下記の内容で開催いたします。
記
開 催 予 定 日：令和元年 11 月 9 日（土）〜 10 日（日）場

所：日本獣医生命科学大学

受 講 者 数：12 名
研 修 内 容：ハンドリング，保定，性別判定，体重測定，体温測定，心拍測定，投与（経口，皮下，静脈内，筋肉内等），採血（耳介静脈，前大静脈叢），
麻酔，切皮・縫合等
実習テキスト：公益社団法人日本実験動物協会教育・認定委員会発行，A4 版，18 頁
詳細については，日動協ホームページ（http://www.nichidokyo.or.jp/）をご確認願います。

Ⅱ．ウサギ実技研修会及びサル類実技研修会について
1. ウサギ実技研修会（1 級・2 級実技試験受験者対象）
開催予定日 : 令和元年 11 月 9 日（土）〜 10 日（日）場

所 : 日本獣医生命科学大学

対象者には個別に連絡

2. サル類実技研修会（1 級・2 級実技試験受験者対象）
開催予定日 : 令和元年 11 月 9 日（土）場

所 : 日本獣医生命科学大学

対象者には個別に連絡

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No. 4

Experimental Animals—和 文 要 約—Vol. 68, No. 4 October 2019

総説
熊本大学生命資源研究・支援センターにおけるマウス生殖工学技術の研究開発 ......391–395
中潟直己・竹尾 透
熊本大学生命資源研究・支援センター（card）資源開発分野

熊本大学生命資源研究 ・ 支援センター（CARD）は，遺伝子改変マウスを用いた生命科学 ・1998 年に設立された。我々は，医学研究に関する国際研究拠点の形成を目的として，
研究コミュ
ニティにおける遺伝子改変マウスの利活用を促進するために，研究支援事業として遺伝子改変
マウスの凍結精子および胚を保管するマウスバンク（CARD 公開マウスバンク，CARD 有償マ
ウスバンク）を運営している。さらに，マウスバンクの機能強化を目的として，様々なマウス生
殖工学技術を開発し，現在では CARD の技術が世界中の研究機関で利用されている。本論文では，CARD マウスバンクに関する活動および我々が開発したマウス生殖工学技術について紹介する。

齧歯類モデルの遺伝的修飾因子：その白内障発症における役割 ...........................397–406
和田健太 1,2)・安田俊平 2)・吉川欣亮 2)
1)

東京農業大学生物産業学部，2) 東京都医学総合研究所哺乳類遺伝プロジェクト

視覚障害は，ヒトにおいて著しい Quality of Life（QOL）の低下を引き起こす。白内障は，視覚障害の中で最もありふれた眼疾患である。白内障発症のリスクファクターは，加齢，感染，外傷，放射線および紫外線などの環境的要因に加えて，遺伝的要因も強く発症に関与することが知られている。さらに，白内障患者は重症度や発症時期において病態の不均一性を示し，それらの一部は遺伝的背景の違いによって引き起こされることが示唆されている。しかしながら，ヒト白内障の重篤度や発症時期に関与する修飾遺伝子は同定された例がない。それとは対照的に，これまでマウスおよびラットモデルにおいて白内障に関与する複数の修飾遺伝子が同定，あるいはマッピングされてきた。本総説では，モデルマウスおよびラットから見いだされた白内障の遺伝的修飾因子について述べた。

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実験動物ニュースVol. 68

No. 4

The promise of zebrafish as a model of metabolic syndrome................................. 407–416
Khaled Benchoula1), Alfi Khatib2,3), Ashika Jaffar4), Qamar Udin Ahmed2),
Wan Mohd Azizi Wan Sulaiman1), Ridhwan Abd Wahab5) and Hesham R. El-Seedi6,7)
1)

Department of Basic Medical Sciences, Kulliyyah of Pharmacy, International Islamic University
Malaysia, Sultan Ahmad Shah Street, Kuantan 25200, Pahang, Malaysia, 2)Pharmacognosy
Research Group, Department of Pharmaceutical Chemistry, Kulliyyah of Pharmacy, International
Islamic University Malaysia, Sultan Ahmad Shah Street, Kuantan 25200, Pahang, Malaysia,
3)
Central Research and Animal Facility (CREAM), Kulliyyah of Science, International Islamic
University Malaysia, Sultan Ahamad Shah Street, Kuantan 25200, Pahang, Malaysia, 4)School of
Biosciences & Technology, VIT University, Vellore 632014, India, 5)Kulliyah of Allied Health Science,
International Islamic University Malaysia, Sultan Ahmad Shah Street, Kuantan 25200, Pahang,
Malaysia, 6)Pharmacognosy Group, Department of Medicinal Chemistry, Biomedical Centre,
Uppsala University, Box 574, SE-751 23 Uppsala, Sweden, 7)Alrayan Medical colleges, Medina
42541, Kingdom of Saudi Arabia

Metabolic syndrome is a cluster including hyperglycaemia, obesity, hypertension, andhypertriglyceridaemia as a result of biochemical and physiological alterations and can increase therisk of cardiovascular disease and diabetes. Fundamental research on this disease requires validated
animal models. One potential animal model that is rapidly gaining in popularity is zebrafish (Daniorerio). The use of zebrafish as an animal model conveys several advantages, including high human
genetic homology, transparent embryos and larvae that allow easier visualization. This review
discusses how zebrafish models contribute to the development of metabolic syndrome studies.
Different diseases in the cluster of metabolic syndrome, such as hyperglycaemia, obesity, diabetes,
and hypertriglyceridaemia, have been successfully studied using zebrafish; and the model ispromising for hypertension and cardiovascular metabolic-related diseases due to its genetic similarity
to mammals. Genetic mutation, chemical induction, and dietary alteration are among the tools used to
improve zebrafish models. This field is expanding, and thus, more effective and efficient techniques
are currently developed to fulfil the increasing demand for thorough investigations.

原著
naSh 病態モデルマウスの血中アミノ酸組成変動及びバイオマーカーの探索 .......417–428
飯田綾香 1,2)・倉貫早智 1)・山元涼子 3)・内田雅也 4)・太田雅規 2)・市村真祐子 5)・
常山幸一 5)・正木孝幸 6)・清家正隆 7)・中村 強 2)
神奈川県立保健福祉大学保健福祉学部栄養学科，2) 福岡女子大学大学院人間環境科学研究科
博士後期課程人間環境科学専攻栄養健康科学領域，3) 弘前大学農学生命科学部食料資源学科，
4)
有明工業高等専門学校創造工学科，5) 徳島大学大学院医歯薬学研究部疾患病理学分野，
6)
大分大学医学部内分泌代謝膠原病腎臓内科，7) 大分大学医学部消化器内科

1)

NASH から肝硬変への血中アミノ酸組成の変動は明確にはなっていない。本研究では NASH
病態モデルとされる STAM マウスを用い，肝疾患の進展ならびに血清中遊離アミノ酸組成比を評価し，さらにバイオマーカーを探索することを目的とした。すなわち，生後 2 日目の雄性
C57BL/6J マウスにストレプトゾトシンを接種して膵機能を低下させ，4 週齢より高脂肪食を投与して STAM マウスを作製した。STAM マウスは 6，8，10，12 及び 16 週齢にて経時的に脱血
屠殺し，血清生化学検査，血清中遊離アミノ酸分析及び肝臓組織学的検査（HE 染色，Azan 染色）を行い，病態の進展を経時的に評価した。なお，正常値は 8 週齢の正常雄性 C57BL/6J マウスの値とした。その結果，各週齢の STAM マウスにおける血清 AST，ALT，TCHO，GLU は正78

実験動物ニュースVol. 68No. 4

常値に比べ，高値を示した。フィッシャー比は 8 週齢から12 週齢まで上昇する傾向にあり，次いで 16 週齢では低下することが認められた。さらに，肝臓組織学検査の結果，6 週齢で肝脂肪化，8 週齢で NASH 発症が認められ，10 週齢以降で線維化が進展し，16 週齢では発癌例も認められた。さらに，血清アミロイド A 蛋白が NASH の炎症マーカーとして有用であることが明らかとなった。以上の結果から，STAM マウスはアミノ酸代謝異常を示し，短期間で病態が進展するモデルであり，アミノ酸代謝や予防／治療を目指した薬理効果の検討ならびにスクリー
ニング系として有用であることが期待された。

cT 撮影装置を用いた雄ウサギ（日本白色種）の体表面積及び体積の計測：
ニュージーランドホワイト種（雄）との比較 .........................................................429–434
伊藤 格 1)・川部美史 2)・長瀬孝彦 1)・遠藤克己 1)・三好雅史 3)・宮原和郎 3)
1)
3)

株式会社日本バイオリサーチセンター，2) 岐阜大学応用生物科学部附属動物病院，
帯広畜産大学動物医療センター

動物の体表面積は，一般的に体重の 2/3 乗に k 値を掛けて算出される（Meeh の式）。数学的に，
動物の密度及び体形が一定であれば，体表面積は体重の 2/3 乗に比例する。我々は，CT 撮影装
10–54 週齢）の体表面積及び体積を計測した。計測後，置を用いて 50 例の雄ウサギ（日本白色種，
k 値，密度及び球形度を算出し，成長に伴うこれらの値の変化を解析した。k 値は体重と負の相関を示し，その主因は，密度の変化であることが示された。回帰分析の結果から，10–54 週齢の日本白色種雄の k 値の算出式を k 値 = 14.602 − 0.959 × 体重（kg）と提唱する。体重 1.98 〜 3.81
kg において k 値の計算値は 10.9 〜 12.7となった。以前我々が発表したニュージーランドホワイ
ト種雄の k 値と比較した結果，日本白色種雄の k 値の方が大きく，ウサギは品種毎に k 値が異なることが示された。

神経細胞特異的 Mafb 遺伝子欠損は，Gh/iGf-i axis の異常を伴う
成長障害を引き起こす............................................................................................435–442
Sayda maimaiti1,5)・越田隆介 2)・小島正美 1)・Kaushalya Kulathnga1,3)・
大石久史 4)・高橋 智 1)
筑波大学医学医療系解剖学発生学研究室，2) 筑波大学医学医療系解剖学・神経科学研究室，筑波大学ヒューマンバイオロジー学位プログラム，4) 名古屋市立大学医学研究科病態モデル
医学分野，5) 沖縄科学技術大学院大学
1)

3)

Growth hormone (GH)/Insulin-like growth factor I (IGF-I) axis は，哺乳動物が生後に成長する上で，極めて重要な役割を担っている。MafB は塩基性ロイシンジッパー（bZip）型転写因子である。菱脳分節の誘導など，胎仔脳において MafB は重要な役割を果たしている。一方，成体の神経細胞における MafB の機能については不明なままであった。今回著者らは，神経細胞特異的 Mafb 遺伝子欠損（cKO）マウスの表現型解析を行った。結果，Mafb cKO マウスでは，約 50%の新生仔が生後 48 時間以内に死亡した。加えて，生存した Mafb cKO マウスは成長障害を示した。Mafb cKO マウスには，血糖値の低下や糖新生酵素の発現上昇など，エネルギー摂取の低下を示す所見は見られなかった。一方，血中 IGF-I 濃度が低下しており，これが成長障害の主要因と考えられた。加えて，Mafb cKO マウスに growth hormone-releasing hormone を投与しても，一貫したGH 分泌の亢進が見られず，神経内分泌系の異常が示唆された。これらの結果より，
著者らは，神経細胞における MafB が，GH/IGF-I axis を介した出生後の成長において，重要な役割を果たしていることを明らかにした。

79

実験動物ニュースVol. 68

No. 4

ウサギにおける三種混合麻酔薬の麻酔効果とアチパメゾールによる拮抗作用 ......443–452
桐原由美子 1)・武智眞由美 1)・黒﨑 薫 1)・松尾裕之 1)・梶谷尚世 1)・齊藤洋司 2)
1)
2)

島根大学研究・学術情報機構総合科学研究支援センター実験動物部門，
島根大学医学部麻酔科学講座

メデトミジン，ミダゾラム，ブトルファノールを混合した三種混合麻酔薬（MMB）は，近年
マウス，ラットを中心に実験動物の麻酔薬として使用されている。しかし，ウサギでの報告例は少なく適切な投与量も明らかではない。本研究では MMB の麻酔効果について，従来からウ
サギの麻酔薬として汎用されているケタミンとキシラジンとの混合麻酔薬 (KX) と比較検討を行った。また，ウサギでの MMB 麻酔後のアチパメゾール（ATI）投与による拮抗作用を，投与経路の違いにより検討した。MMB は KX と比較し，正向反射消失時間，外科麻酔開始時間は有意に遅かったが，外科麻酔時間および麻酔からの回復時間に有意差は認められなかった。
MMB 投与 30 分後の ATI 投与による麻酔からの回復時間は，静脈内投与が筋肉内投与より有意に早かった。MMB は KX と同等の麻酔効果を示し，アチパメゾールで麻酔から容易に回復出来ることから，ウサギにおいても有用な麻酔薬である。

Osthole improves therapy for osteoporosis through increasing autophagy ofmesenchymal stem cells.......................................................................................... 453–463
Xuedan Zheng1–3), Yang Yu1–3), Binyi Shao1–3), Ning Gan1–3), Liang Chen1–3)
and Deqin Yang1–3)
1)

Department of Endodontics, Stomatological Hospital of Chongqing Medical University, No. 426
Songshi Bei Road, Yubei, 401147 Chongqing, China, 2)Chongqing Key Laboratory of Oral Diseases
and Biomedical Sciences, No. 426 Songshi Bei Road, Yubei, 401147 Chongqing, China,
3)
Chongqing Municipal Key Laboratory of Oral Biomedical Engineering of Higher Education,
No. 426 Songshi Bei Road, Yubei, 401147 Chongqing, China

Osteoporosis is a common skeletal disorder resulting in elevated fracture risk. Improvementof osteogenic differentiation is thought to be the top priority in osteoporosis treatment projects.
Significant characteristics of bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSCs), especially attractive
ability to differentiate into osteoblasts, have made them alternatives for osteoporosis treatment.
However, therapeutic effect with BMMSCs remains to be improved. Here, osthole, a bioactive
simple coumarin derivative extracted from many medicinal plants, was introduced to pre-stimulate
BMMSCs and then applied in osteoporosis therapy. The results showed that osthole-treated-BMMSCs(OBMMSCs) brought a better outcome than BMMSCs alone in estrogen deficiency-induced
osteoporosis model. And elevated autophagy level was suggested to be the underlying mechanism of
the ability of osthole to promote osteoblast differentiation, which is indicated by the upregulation ofprotein and mRNA expression level of autophagy-associated genes, Beclin1 and LC3. We concluded
from these experiments that OBMMSCs are more effective than BMMSCs in osteoporosis treatment
maybe through upregulation level of autophagy level induced by osthole.

80実験動物ニュースVol. 68

No. 4

Slc:hartley 系モルモットは高率に重複後大静脈を具有する ..................................465–470
中村鉄平 1,2)・法村美幸 3)・鷲見嘉奈子 3)・市居 修 2)・Yaser hosny ali elewa2,4)・
昆 泰寛 2)・辰巳 治 1)・服部秀樹 3)・吉安友二 3)・長崎健一 5)
一般財団法人日本食品分析センター千歳研究所生物科学課，2) 北海道大学大学院獣医学院基礎獣医科学講座解剖学教室，3) 一般財団法人日本食品分析センター千歳研究所安全性試験課，
4)
department of histology and cytology, faculty of Veterinary medicine, Zagazig university，
5)
一般財団法人日本食品分析センター多摩研究所安全性試験課

1)

後大静脈の形成は複雑であり，発生，退縮及び吻合が関連する。正常な哺乳動物においては，後大静脈は腹大動脈の右側を走行するが，伴侶動物及びヒトにおいて重複後大静脈と呼ばれる発生異常が起こる。本研究では，Slc:Hartley 系モルモットが無症状の重複後大静脈を高率に具有することを発見した。その発生率は雄で 30%，雌で 24% であり，性差は認められなかった。Saad ら（2012）の基準に従った場合，モルモットの重複後大静脈は 2 種の変異に明確に分類された。主要な変異は腸骨間静脈を伴わない complete duplication であり，低頻度な変異はincomplete duplication であった。Complete duplication においては，左後大静脈は左総腸骨静脈から連続し，左腎静脈に合流した。左腎静脈は右側に向かって走行し右後大静脈に合流した。
Incomplete duplication においては，左後大静脈は腎静脈より尾側，正常例よりも頭側で右後大静脈に合流したが，腎臓周囲の血管走行は正常であった。重複後大静脈は体重及び腎臓重量に影響を与えなかった。以上，Slc:Hartley 系モルモットは腸骨間静脈を伴わない重複後大静脈を具有するが無症状であり，伴侶動物及びヒトの重複後大静脈の新規かつ有用な動物モデルであると結論した。

超免疫不全動物である noG と nSG マウスにおける生物学的性状の比較.............471–482
永谷真理子 1)・小寺 努 2)・鈴木大介 2)・伊倉佐織 2)・福永八千代 2)・金光弘幸 2)・
中村大地 2)・望月雅裕 2)・花見正幸 3)・田村一利 1)・笠原健一郎 2)
1)
3)

株式会社ボゾリサーチセンター御殿場研究所，2) 株式会社ボゾリサーチセンターつくば研究所，
一般財団法人ふくしま医療機器産業推進機構ふくしま医療機器開発支援センター

超 免 疫 不 全 マ ウ ス で あ る NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Sug/ShiJic（NOG）と NOD.Cg-Prkdcscid
Il2rgtm1Wjl/SzJ（NSG）マウスについて，11 週齢までの背景データおよび HeLa 細胞の皮下移植における腫瘍形成に対する感受性を比較した。体重は，NSG マウスに比べ NOG マウスの方が低値を示した。これらの動物での特徴として良く知られている末梢血中のリンパ球数の著減と組織学的なリンパ系組織の低形成に関しては，両系統間に差はなかった。胸腺における異所性外分泌腺や嚢胞が，系統差を示すことなくしばしばみられた。さらに，延髄および脊髄では軽微な海綿状変化が両系統で同様にみられた。この変化の雌での発生率は，NOG マウスで NSG
マウスに比べやや高かった。副腎では，遺伝子非操作マウスで加齢に伴い出現する被膜下細胞の過形成が，NOG マウスに比べ NSG マウスで早期かつ高い頻度で発生した。一方，異種細胞の移植による腫瘍形成に対する感受性を比較するために，HeLa 細胞の 1×103 から1×106 個を雌マウスの背部皮下に移植し，その 16 週間後に観察した結果，腫瘍の発育と腫瘍体積について
は両系統間に明らかな差はみられなかった。以上のことから，NOG と NSG マウスの間には明らかな生物学的性状の違いはないことが明らかとなった。

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実験動物ニュースVol. 68

No. 4

老齢マウスに存在する Th17 様自己細胞反応性 T 細胞の特徴.................................483–490
植松崇之・藤田智子・小林憲忠
北里大学メディカルセンター研究部門バイオメディカルラボラトリー

インターロイキン 17 産生ヘルパー T 細胞（Th17）は，T 細胞の新しい CD4 陽性サブセットとして注目を集めており，標的細胞からの炎症性サイトカインの放出を促すことによって，様々な自己免疫疾患の原因となることが報告されている。しかし，Th17 を介した自己免疫疾患発症に関するほとんどの研究は，若齢動物に由来する実験的自己免疫疾患モデルに焦点を当てて解析されており，老化などの生理的要因を加味した研究は非常に少ない。本研究では，老齢マウス由来の同種同系混合リンパ球培養（sMLC）で樹立された自己細胞反応性 T 細胞を分析し，Th17との類似性を検討した。その結果，老齢マウスの末梢リンパ節中には，sMLC によって増幅される IL-17 産生自己細胞反応性 CD4 陽性 T 細胞が存在することが確認された。また，これらの細胞は，細胞表面にいくつかの幹細胞マーカーおよび免疫抑制受容体 PD-1を発現していたため，典型的な Th17とは異なる Th17 様細胞である可能性が示唆された。さらに，RT-PCR による解析の結果，Th17 様細胞は Il17a，Il17f，Il23r，Rorc および Tdt mRNA を発現していたが，Rag1 または Rag2 mRNA は発現していなかった。このことから，Th17 様細胞は老齢マウスにおける自己免疫応答に関与する可能性が示唆された。

母体レチノイン酸関連オーファン受容体γ t の上昇は，ポリイノシン－ポリシチジル酸の流産誘導効果を高める......................................491–497
當銘幸貴 1,2)・佐々木哲也 1,2)・高橋

智 3)・武井陽介 1,2)

筑波大学医学医療系解剖学神経科学研究室，2) 筑波大学院人間総合科学研究科
感性認知脳科学専攻，3) 筑波大学医学医療系解剖学発生学研究室

1)

ヘルパー T 細胞 17（Th17）は母体免疫活性化（maternal immune activation; MIA）に関与し様々な問題に重要な役割を果たすことが示唆されている。MIA 媒介性流産におけるTh17 細胞の役割について検討するため，筆者らは Th17 細胞のマスターレギュレーター
であるレチノイン酸関連オーファンレセプター γ-t（retinoic acid receptor-related orphan
receptor gamma-t; RORγt）を過剰発現する遺伝子改変マウス（RORγt Tg マウス）の解析を行った。RORγt Tg マウスは血清中のインターロイキン 17A（IL-17A）の恒常的上昇と，胎盤組織における細胞接着因子 E カドヘリンの発現減少を示した。ウイルス RNA を模倣した合成二本鎖 RNA ポリイノシンポリシチジル酸（polyinosinic-polycytidylic acid; poly(I:C)）
投与後の流産数は野生型マウスに比べ RORγt Tg マウスにおいて高かった。これらの結果
は，過剰な Th17 活性が免疫応答性を変化させ，妊娠中の流産率を増加させることを示唆
している。

82

実験動物ニュースVol. 68

No. 4

胚葉を可視化するバイシストロニック・レポーター・ノックインマウスの作製 ............499–509
鈴木颯 1,2)・Tra Thi huong dinh1)・大徳陽子 1)・谷本陽子 1)・加藤花名子 1)・
浅見拓哉 3)・依馬正次 3)・村田知弥 1)・水野聖哉 1)・杉山文博 1)
筑波大学医学医療系トランスボーダー医学研究センター，生命科学動物資源センター，
筑波大学大学院人間総合科学研究科生命システム医学専攻，
3)
滋賀医科大学動物生命科学センター幹細胞・ヒト疾患モデル研究分野

1)

2)

原腸胚は胚発生の中で最も動的な時期であり，三胚葉への細胞分化が生じる。しかし，原腸胚で発現する遺伝子の機能は完全には理解されていない。その原因として，原腸胚における三胚葉形成の評価は技術的に容易ではないことが挙げられる。この問題を解決するため，我々は各胚葉を可視化する三種類の新規バイシストロニック・レポーター・ノックインマウスの作製を試みた。まず，CRISPR/Cas9 を用いて，P2A ペプチド配列と融合された蛍光タンパク質遺伝
子 EGFP，tdTomato，TagBFP をマウス受精卵の Sox17 遺伝子（内胚葉マーカー），Otx2 遺伝子
（外胚葉マーカー），T 遺伝子（中胚葉マーカー）の終止コドン直前にそれぞれ挿入させた。結果，Sox17-P2A-EGFP 系統，Otx2-P2A-tdTomato 系統，T-P2A-TagBFP 系統のファウンダーマウ
スが得られた。次に，全系統においてホモ接合型ノックインマウスを作製し，形態学的な異常は見られず妊娠や出産が可能であることを確認した。胎齢 6.5日〜 E8.5日のノックインマウス
原腸胚を用いてレポータータンパク質を蛍光実体顕微鏡で観察したところ，それらシグナルは胚葉特異的な発現様式で検出された。さらに，胎齢 7.5日胚においてレポーターと標的マーカー
タンパク質の胚内局在を蛍光免疫染色にて解析したところ，発現部位は重複していることが確認された。以上の結果から，本研究で作製された Sox17-P2A-EGFP 系統，Otx2-P2A-tdTomato 系
統，T-P2A-TagBFP 系統は各胚葉を可視化するマウスとして原腸胚の遺伝子機能解析に有用であることが示された。

老化促進モデルマウス（SamP8）における自律神経系機能の早期老化に関する報告............................................................................................ 511–517
近本明俊・関澤信一・栃内亮太・桑原正貴
東京大学大学院農学生命科学研究科獣医衛生学研究室

老化促進モデルマウス（SAM）は，早期に老化兆候を示す近交系マウスとして確立されてきた。中でも，SAM prone-8（SAMP8）系統は，早期に学習障害および免疫機能不全などの異常を示すことが知られている。しかしながら，SAMP8 における自律神経系機能に及ぼす加齢の影響に関しては明らかにされていない。本研究は，自律神経系の老化関連研究におけるSAMP8の有用性を明らかにすることを目的とした。実験には，20 週齢および 40 週齢の SAMP8，同週
齢の通常老化を示す対照系統（SAMR1）の雄を用いた。テレメトリー法を用いて無麻酔・無拘束下で記録した心電図から心拍変動の周波数解析を行い，自律神経系機能の評価を行った。自律神経系によって調節されている生体機能の指標として，心拍数，体温及び活動量についても同時に記録した。20 週齢において，SAMP8 と SAMR1 の両群に自律神経系機能および生体機能指標に違いは認められなかった。SAMR1は，同系統の 20 週齢と比較して，40 週齢において加齢に伴う有意な変化は認められなかった一方で，SAMP8 は 40 週齢において副交感神経系機能の低下，活動量の減少および体温の上昇が認められた。以上よりSAMP8 は，通常老化を示す対照系統と比較して，早期に自律神経系における加齢性変化を示し，本分野における老化関
連研究に有用であることが示唆された。

83

実験動物ニュースVol. 68

No. 4

Hairless-knockout piglets generated using the clustered regularly interspaced shortpalindromic repeat/CRISPR-associated-9 exhibit abnormalities
in the skin and thymus............................................................................................. 519–529
Qing-Shan Gao1), Mei-Fu Xuan1,2), Zhao-Bo Luo1,2), Hyo-Jin Paek2),
Jin-Dan Kang1,2) and Xi-Jun Yin1,2)
1)

Department of Animal Science, Agricultural College, Yanbian University, No. 977 Gongyuan Street,
Yanji City, Jilin 133002, P.R. China, 2)Jilin Provincial Key Laboratory of Transgenic Animal and EmbryoEngineering, Yanbian University, No. 977 Gongyuan Street, Yanji City, Jilin 133002, P.R. China

The nuclear receptor corepressor Hairless (HR) interacts with nuclear receptors and controls
expression of specific target genes involved in hair morphogenesis and hair follicle cycling. Patientswith HR gene mutations exhibit atrichia, and in rare cases, immunodeficiency. Pigs with HR genemutations may provide a useful model for developing therapeutic strategies because pigs are highly
similar to humans in terms of anatomy, genetics, and physiology. The present study aimed to knockout
the HR gene in pigs using the clustered regularly interspaced short palindromic repeat (CRISPR)/CRISPR-associated-9 (Cas9) system and to investigate the molecular and structural alterations in theskin and thymus. We introduced a biallelic mutation into the HR gene in porcine fetal fibroblasts andgenerated nine piglets via somatic cell nuclear transfer. These piglets exhibited a lack of hair on theeyelids, abnormalities in the thymus and peripheral blood, and altered expression of several signaling
factors regulated by HR. Our results indicate that introduction of the biallelic mutation successfully
knocked out the HR gene, resulting in several molecular and structural changes in the skin andthymus. These pigs will provide a useful model for studying human hair disorders associated with HR
gene mutations and the underlying molecular mechanisms.

16S rrna クローンライブラリー法に基づいた実験動物および野生のスンクスの消化管内微生物叢の比較 ...........................................................531–539
篠原明男 1)・野原 諒 1,3)・近藤優太 1)・城ヶ原貴通 1,4)・名倉（加藤）悟郎 1)・
伊澤雅子 2)・越本知大 1)
1)
3)

宮崎大学フロンティア科学実験総合センター，2) 琉球大学理学部，
現所属：WdB 株式会社エウレカ社，4) 現所属：沖縄大学法経学部

スンクスは食虫性の実験動物として生命科学研究において重要な役割を担ってきた。スンクスの特徴として，その消化管構造がシンプルなことが挙げられる。消化管全長が体サイズに比べて短く，盲腸や前胃といった発酵槽を持たず，大腸が極めて短い。これらの特徴はスンク
スがヒトやマウスとは異なる栄養生理学的特性を有していることを示唆しているが，消化管内微生物叢については知見が少ない。また，実験動物化はスンクスの消化管内微生物叢の多様性に影響を与えた可能性も考えられる。そこで本研究では，実験動物のスンクスと野外捕獲した
野生スンクスの小腸および大腸内の消化管内微生物叢を 16S rRNA クローンライブラリー法を用いて比較した。合計 759 クローン（実験動物−大腸＝176，実験動物−小腸＝174，野生−大腸＝195，野生−小腸＝214）の塩基配列を得て多様性を比較した結果，スンクスの消化管内微生物叢はフィルミクテス門の乳酸菌が主構成群で，バクテロイデス門の細菌は検出されなかった。また，実験動物のスンクスにおいては小腸と大腸の部位間で微生物叢構成に違いが検出されたが，野生スンクスでは検出されなかった。さらに，消化管内微生物叢の多様性指数は実験動物よりも野生動物の方が高い値を示した。これらはスンクスが消化管内において乳酸発酵を利用していること，実験動物化が消化管内微生物叢を変化させたことを示唆している。

84

実験動物ニュースVol. 68

No. 4

Oral supplementation of L-glutathione prevents ultraviolet B-induced melanogenesis
and oxidative stress in BALB/c mice....................................................................... 541–548
Tava Shelan Nagapan, Wenna Nallance Lim, Dayang Fredalina Basri and
Ahmad Rohi Ghazali
Programme of Biomedical Science, Centre of Health & Applied Sciences, Faculty of Health Sciences,
Universiti Kebangsaan Malaysia, Jalan Raja Muda Abdul Aziz, 50300 Kuala Lumpur, Malaysia

Dietary antioxidant supplements such as L-glutathione have gained considerable attention
in dermatology and cosmeceutical fields. L-glutathione possesses antiaging, antimelanogenic,
antioxidant, and anticancer properties. This study aimed to investigate the inhibitory effects of
L-glutathione on melanogenesis activity and oxidative stress in ultraviolet B (UVB)-irradiated
BALB/c mice. Eighteen female BALB/c mice were randomly divided into 3 groups: a control group(n=6), a group without UVB irradiation and L-glutathione administration; a UVB irradiated group(n=6), a group irradiated with a UVB dose of 250 mJ/cm2 for 3 min; and a treatment group (n=6), agroup irradiated with UVB and treated with 100 mg/kg of L-glutathione by oral gavage. Treatment
was given for 14 days, and UVB irradiation was given on days 9, 11, and 13. Oral L-glutathione
significantly (P<0.05) reduced lipid peroxidation and elevated superoxide dismutase activity the andglutathione level. L-glutathione also inhibited melanin content and tyrosinase activity significantly(P<0.05) as compared with the UVB-irradiated group. Histopathological examination also showedthat L-glutathione reduced the deposition of melanin pigment in the basal layer of the epidermis
as compared with that in UVB-irradiated mice. All in all, the present study demonstrated that
L-glutathione has the potential to be developed as a photoprotection agent against UVB-induced
oxidative stress and melanogenesis.

Astragaloside IV reduces cardiomyocyte apoptosis in a murine model ofcoxsackievirus B3-induced viral myocarditis............................................................ 549–558
Tianlong Liu1), Fan Yang2), Jing Liu1), Mingjie Zhang1), Jianjun Sun1), Yunfeng Xiao3),
Zhibin Xiao3), Haiyan Niu2), Ruilian Ma1), Yi Wang1), Xiaolei Liu3) and Yu Dong4)
1)

Department of Pharmacy, Affiliated Hospital of Inner Mongolia Medical University, No. 1 Tongdao
North Street, Huimin District, 010059 Hohhot, P.R. China, 2)Department of Service Center, Healthcommittee of Inner Mongolia Autonomous Region, No. 63 Xinhua Street, Xincheng District, 010055
Hohhot, P.R. China, 3)Department of Pharmacology, Inner Mongolia Medical University, Jinshan
Development Zone, 010059 Hohhot, P.R. China, 4)Department of Natural Medicinal Chemistry,
College of Pharmacy, Inner Mongolia Medical University, Jinshan Development Zone, Hohhot
010110, P.R. China

Apoptosis plays a crucial role in regulating cardiomyopathy and injuries of coxsackievirus B3(CVB3)-induced viral myocarditis (VM). It has been reported that Astragaloside IV (AST-IV) from
Astragalus membranaceus could inhibit apoptosis under a variety of pathological conditions in vivo orin vitro. However, the functional roles of AST-IV in CVB3-induced VM still remain unknown. Here,
we found that AST-IV significantly enhanced survival for CVB3-induced mice. AST-IV protected themice against CVB3-induced virus myocarditis characterized by the increased body weight, decreased
serum level of creatine kinase-MB (CK-MB) and lactate dehydrogenase (LDH), supressed expressionof Ifn-γ, Il-6 in heart, enhanced systolic and diastolic function of left ventricle. At the pathologicallevel, AST-IV ameliorated the mice against CVB3-induced myocardial damage and myocardial
fibrosis. In vitro, the results from flow cytometry showed that AST-IV significantly suppressed
CVB3-induced cardiomyocytes apoptosis, which also were verified in vivo. Moreover, an increased85

実験動物ニュースVol. 68

No. 4

expression of pro-apoptotic genes including FAS, FASL, cleaved caspase-8 and cleaved caspase-3 wasfound in CVB3-induced cardiomyocytes, while those was inhibited in cardiomyocytes treated with
AST-IV. Taken together, the data suggest that AST-IV protected against CVB3-induced myocardialdamage and fibrosis, which may partly attribute to supress activation of FAS/FASL signaling pathway.

Emodin reactivated autophagy and alleviated inflammatory lung injury in micewith lethal endotoxemia........................................................................................... 559–568
Yan Dong1), Li Zhang2), Yu Jiang3), Jie Dai4), Ling Tang1) and Gang Liu5)
1)

Department of Neurology, University-Town Hospital of Chongqing Medical University, 55
Middle Road, University City, Shapingba District, Chongqing 401331, China, 2)Department of
Pathophysiology, Chongqing Medical University, 1 Yixueyuan Road, Chongqing 400016, China,
3)
Department of Respiratory, University-Town Hospital of Chongqing Medical University, 55 Middle
Road, University City, Shapingba District, Chongqing 401331, China, 4)Hospital of Chongqing
University of Arts and Sciences, 319 Honghe Avenue, Yongchuan District, Chongqing 402160,
China, 5)Department of Emergency, University-Town Hospital of Chongqing Medical University,
55 Middle Road, University City, Shapingba District, Chongqing 401331, China

An uncontrolled inflammation induced critical health problems with serious morbidity and death,
which namely acute lung injury (ALI). Recently researchs have found the anti-inflammatory effectsof emodin. Here, we investigated the potential effects of emodin on a mouse model with a lethal doseof the potential mechanisms and lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammatory lung injury in mice.
The pulmonary histological abnormalities, the Evans blue’s leakage, the myeloperoxidase (MPO)
activity, the grades of TNF-α, IL-6, nitric oxide (NO), lactic acid (LA) in lung tissues were determined
18 h post exposure of LPS. Based on the expression of LC3-II with BECN1 was determined using
Western blotting. Besides, the LPS-exposed mice for survival rate was monitored. The results
indicated that intervention with emodin was important for mitigating LPS-induced pulmonary
histological change and LPS-induced leakage of Evans blue, which were associated with suppressed
elevation of MPO activity and inhibited up-regulation of TNF-α, IL-6, NO with LA in lung tissues.
Moreover, intervention with emodin enhanced the survival rate of LPS-exposed mice. Finally, therapy
with emodin increased the LC3 and BECN1 in lungs of LPS-exposed mice. Treatment with 3-MA (theautophagy inhibitor) reversed the beneficial effects of emodin. In conclusion, emodin might provide
pharmacological benefits in LPS-induced inflammatory lung injury, and the mechanisms might berelated to the restoration of autophagy.

minimum environmental enrichment はマウスの移植腫瘍細胞に対する
抗腫瘍免疫を活性化するのに有効である ...............................................................569–576
高井大策 1)・安部暁子 2)・三浦平太 2)・田中 聡 1)・小村潤一郎 1)
1)

公益財団法人環境科学技術研究所生物影響研究部，2) 株式会社ジェー・エー・シー

環境エンリッチメントに関する研究は，神経系やストレス，運動の分野で進んでいる。最近，エンリッチされた環境での動物の飼育が発がんや寿命に影響を与えることが示されている。しかしながら，環境エンリッチメントの抗腫瘍効果に関する研究は，実験手法が複雑であるため再現が難かしい。そこで，環境エンリッチメントを用いた抗腫瘍研究には，より単純な実験系が必要となる。本研究では，通常はマウスシェルターとして使用されるマウスイグルーを 1 つだけ設置した Minimum Environmental Enrichment を提案する。この実験系は再現が容易である

86

実験動物ニュースVol. 68

No. 4

だけでなく，移植腫瘍の増殖を有意に抑制することができる。ナチュラルキラー細胞の活性化
は，Minimum Environmental Enrichment 後の腫瘍に対する免疫に関与することが示された。マウスにおける移植腫瘍細胞に対する Minimum Environmental Enrichment は抗腫瘍免疫を活性化するのに有効なので，我々はこれが環境エンリッチメントを用いた抗腫瘍研究を促進するのに有用であろうと考えている。

87

実験動物ニュースVol. 68 No. 4

維持会員（五十音順）（92 社）（令和元年 8 月 31 日現在）
会（株）IHI

員名〒

135-8710（株）アイセイ594-1151（株）アイテクノ391-0004
旭化成ファーマ（株）
410-2321
味の素（株）
210-8681
あすか製薬（株）
213-8522
アステラス製薬（株）
305-8585（株）アドスリー
164-0003（株）アニマルケア
160-0022（株）アニメック
183-0031
EP トレーディング（株）
162-0825（株）イナリサーチ399-4501
エーザイ（株）
300-2635（株）LSI メディエンス
314-0255（株）大塚製薬工場
772-8601
小野薬品工業（株）
913-0032
小原医科産業（株）
165-0022
オリエンタル酵母工業（株）
174-8505
花王（株）
321-3497
科研製薬（株）426-8646
鹿島建設（株）107-8348
北山ラベス（株）
396-0025
キッセイ薬品工業（株）
399-8304
九動（株）
841-0075
共立製薬（株）
300-1252
協和発酵キリン（株）富士リサーチパーク 411-0943（有）葛生運送
287-0224
クミアイ化学工業（株）
439-0031（株）クレハ169-8503（株）ケー・エー・シー
604-8423
KM バイオロジクス（株）
869-1298
興和（株）
189-0022
三協ラボサービス（株）
132-0023
参天製薬（株）
630-0101（株）三和化学研究所
511-0406（株）ジェー・エー・シー
153-0043
シオノギテクノアドバンスリサーチ（株） 520-3423（公財）実験動物中央研究所
210-0821
清水建設（株）
104-0031

住所

東京都江東区豊洲 3-1-1
大阪府和泉市唐国町 1-6-1
長野県茅野市城山 10-10静岡県伊豆の国市三福 632-1
神奈川県川崎市川崎区鈴木町 1-1
神奈川県川崎市高津区下作延 5-36-1
茨城県つくば市御幸が丘 21
東京都中野区東中野 4-27-37
東京都新宿区新宿 5-18-14 新宿北西ビル 7F
東京都府中市西府町 3-17-4
東京都新宿区神楽坂 4-8
長野県伊那市西箕輪 2148-188
茨城県つくば市東光台 5-1-3
茨城県神栖市砂山 14-1
徳島県鳴門市撫養町立岩字芥原 115
福井県坂井市三国町山岸 50-10
東京都中野区江古田 4-28-16
東京都板橋区小豆沢 3-6-10
栃木県芳賀郡市貝町赤羽 2606
静岡県藤枝市源助 301
東京都港区赤坂 6-5-11
長野県伊那市荒井 3052-1
長野県安曇野市穂高柏原 4365-1
佐賀県鳥栖市立石町惣楽 883-1
茨城県つくば市高見原 2-9-22
静岡県駿東郡長泉町下土狩 1188
千葉県成田市新田 280-1
静岡県菊川市加茂 3360
東京都新宿区百人町 3-26-2
京都府京都市中京区西ﾉ京西月光町 40
熊本県菊池市旭志川辺 1314-1
東京都東村山市野口町 2-17-43
東京都江戸川区西一之江 2-13-16
奈良県生駒市高山町 8916-16
三重県いなべ市北勢町塩崎 363
東京都目黒区東山 1-2-7 第 44 興和ビル 3 階
滋賀県甲賀市甲賀町五反田 1405
神奈川県川崎市川崎区殿町 3-25-12
東京都中央区京橋 2-16-1 8 階i

実験動物ニュース会員

名

昭和セラミックス（株）〒

486-0934（有）新東洋製作所
334-0073（株）新日本科学安全性研究所
891-1394554-8558
住友化学（株）（株）精研
542-0081
清和産業（株）132-0033
ゼリア新薬工業（株）
360-0111
全国農業協同組合連合会飼料畜産中央研究所 300-4204
第一三共（株）134-8630
大正製薬（株）331-9530
ダイダン（株）102-8175
武田薬品工業（株）
251-0012
田辺三菱製薬（株）
227-0033
247-8530（株）中外医科学研究所
中外製薬（株）412-8513
千代田テクノエース（株）
221-0022（株）ツムラ
300-1192
帝人ファーマ（株）
191-8512（一財）動物繁殖研究所
300-0134
東洋熱工業（株）
104-0031
960-0280
トーアエイヨー（株）
トキワ科学器械（株）
110-0005（株）夏目製作所
113-8551（株）日本医科学動物資材研究所
179-0074（合）日本医学広告社
102-0071
日本エスエルシー（株）
431-1103
日本化薬（株）115-8588
日本クレア（株）
153-8533
日本実験動物器材協議会
153-8533
101-0051（公社）日本実験動物協会
101-0032
日本実験動物協同組合
日本新薬（株）601-8550（一財）日本生物科学研究所
198-0024
日本たばこ産業（株）
569-1125
日本たばこ産業（株）たばこ中央研究所
227-8512
日本チャールスリバー（株）
222-0033
日本農産工業（株）
300-2615
日本農薬（株）総合研究所
586-0094
180-0002（株）ハクバテック・ライフサイエンス・
ソリューションズ
370-0074
バニーグループ 日本事務所
ハムリー（株）306-0101Vol. 68 No. 4

住所

愛知県春日井市長塚町 1-1-9
埼玉県川口市赤井 2-13-22鹿児島県鹿児島市宮之浦町 2438 番地
大阪府大阪市此花区春日出中 3-1-98
大阪府大阪市中央区南船場 2-1-3
東京都江戸川区東小松川 4-57-7
埼玉県熊谷市押切字沼上 2512-1
茨城県つくば市作谷 1708-2
東京都江戸川区北葛西 1-16-13
埼玉県さいたま市北区吉野町 1-403
東京都千代田区富士見 2-15-10神奈川県藤沢市村岡東二丁目 26 番地 1
神奈川県横浜市青葉区鴨志田町 1000 番地
神奈川県鎌倉市梶原 200
静岡県御殿場市駒門 1-135
神奈川県横浜市神奈川区守屋町 3-13
茨城県稲敷郡阿見町吉原 3586
東京都日野市旭が丘 4-3-2
茨城県茨城県かすみがうら市深谷 1103
東京都中央区京橋 2-5-12 東熱ビル
福島県福島市飯坂町湯野字田中 1
東京都台東区上野 5-11-1
東京都文京区湯島 2-18-6
東京都練馬区春日町 4-32-25
東京都千代田区富士見 2-12-8
静岡県浜松市湖東町 3371-8
東京都北区志茂 3-31-12
東京都目黒区東山 1-2-7
東京都目黒区東山 1-2-7 日本クレア（株）内
東京都千代田区神田神保町 3-2-5 九段ロイヤルビル 502 号室
東京都千代田区岩本町 2-8-10 神田永谷マンション 602
京都府京都市南区吉祥院西ﾉ庄門口町 14
東京都青梅市新町 9-2221-1
大阪府高槻市紫町 1-1
神奈川県横浜市青葉区梅が丘 6-2
神奈川県横浜市港北区新横浜 3-17-6
茨城県つくば市田倉 5246
大阪府河内長野市小山田町 345 番地
武蔵野市吉祥寺東町 2-38-2
群馬県高崎市下小鳥町 290-1
茨城県古河市尾崎 2638-2

ii

実験動物ニュース会員

名Vol. 68 No. 4〒

住大阪府吹田市山田丘 3-1 大阪大学内

Meiji Seika ファルマ（株）横浜研究所
持田製薬（株）（株）ヤクルト本社
八洲環境エンジニアリング（株）
ライオン（株）レッテンマイヤージャパン（株）

565-0871
314-0103
412-0039
108-0074
250-0862
222-8567
412-8524
186-8650
116-0014
256-0811
101-0052（株）レナテック259-1114

神奈川県伊勢原市高森 4-19-15（一財）阪大微生物病研究会
フィード・ワン（株）（株）ボゾリサーチセンター
三浦工業（株）（株）明治所

茨城県神栖市東深芝 4-2
静岡県御殿場市竃 1284
東京都港区高輪 2-15-35 三浦高輪ビル 2F
神奈川県小田原市成田 540
神奈川県横浜市港北区師岡町 760
静岡県御殿場市神場字上ノ原 722
東京都国立市泉 5-11
東京都荒川区東日暮里 3-11-17
神奈川県小田原市田島 100
東京都千代田区神田小川町 3-26-8
野村不動産小川町ビル 3F（公社）日本実験動物学会

会員の入会・退会・変更の申込みについて

会員の入会・退会・変更の申込みは下記の方法で受け付けております。
https://www.jalas.jp/（公社）日本実験動物学会ホームページより受け付け［ご不明な点はこちらまで］株式会社 アイペック〒 170-0002 東京都豊島区巣鴨 1-24-12 アーバンポイント巣鴨 4F
TEL 03-6822-9767
FAX 03-5978-4068
Email jalas@ipec-pub.co.jp● 編集後記 ● ̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶

9 月の台風の影響で，千葉県を中心として，甚大な被害を受けられた方々に，心よりお見舞い申し上げます。家屋（施設）の損害，長期の停電，断水は，ヒトのみならず家畜や実験動物にも大きな被害を与えます。台風の進路である日本に居住する我々にとっては，想定内の出来事であるかもしれません。今一度，施設等につきまして，リスクマネジメントの再確認をすべきではないでしょうか。
本号では，令和元年度の維持会員懇談会（令和元年 11 月 15 日）ならびに第 13 回実験動物管理者
等研修会（令和 2 年 2 月 26 〜 27 日）の案内が掲載されています。是非，多くの方々のご参加をお願い申し上げます。また，特別寄稿（文科省通知「研究段階におけるゲノム編集技術の利用により得られた生物の使用等に係る留意事項について」に関する解説）として，「ゲノム編集生物と遺伝子組換
え生物と実験動物」というタイトルで東京大学ライフサイエンス研究倫理支援室の三浦先生にわか
りやすく解説をお願いいたしました。主に研究開発でのゲノム編集生物の利用について大変参考となりますので，ご一読ください。次号では，本総会のシンポジウムテーマなどから，総説の掲載を予定しております。楽しみにお待ちください。また，総説の掲載をお考えの方は，是非，ご一報いただければ検討いたします。その他，皆さまからのご意見 ･ ご要望をお待ちしております。
̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶̶【広報・情報公開検討委員会】

iii

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URL：http://www.kacnet.co.jp/

の実 験 動 物
マウス
●アウトブレッド
Slc：ddY☆ ⅣCS
Slc：㻵CR●インブレッド

DBA/1JJmsSlc(コラーゲン薬物誘導関節炎）
BALB/cCrSlc
C57BL/6NCrSlc・C57BL/6JJmsSlc
C3H/HeSlc
C3H/HeNSlc
C3H/HeJYokSlc
DBA/2CrSlc
NZW/NSlc
A/JJmsSlc
AKR/NSlc
NC/NgaSlc（薬物・アレルギー誘導アトピー性皮膚炎）
CBA/NSlc
129×1/SvJJmsSlc●B10コンジェニック

C57BL/10SnSlc
B10.A/SgSnSlc・B10.BR/SgSnSlc
B10.D2/nSgSnSlc・B10.S/SgSlc●ハイブリッド

B6D2F1/Slc（Slc:BDF1）
CB6F１/Slc（Slc:CBF1）
CD２F１/Slc（Slc:CDF1）
B6C3F1/Slc（Slc:B6C3F1）※上記以外の系統については御相談ください。

●ヌードマウス（ミュータント系）
BALB/cSlc- nu（Foxn1 nu ）KSN/Slc（Foxn1 nu ）●疾患モデルBXSB/MpJJmsSlc-Yaa（自己免疫疾患）
C3H/HeJJmsSlc-lpr（自己免疫疾患・Fas lpr ）C57BL/6JSlc-gld（自己免疫疾患・Fasl gld ）C57BL/6JJmsSlc-lpr（自己免疫疾患・Fas lpr ）MRL/MpJJmsSlc-lpr（自己免疫疾患・Fas lpr ）NZB/NSlc（自己免疫疾患）
NZBWF1/Slc（自己免疫疾患）
WBB6F1/Kit-KitW/KitW-v/Slc（肥満細胞欠損貧血・KitW/KitW-v）
WBB6F1/Kit-KitlSl/KitlSl-d/Slc（肥満細胞欠損貧血・KitlSl/KitlSl-d）
NC/Nga（皮膚炎）☆ Hos：HR-1（ヘアレスマウス）☆ Hos : HRM-2（メラニン保有へアレスマウス）★ SAMR1/TaSlc（非胸腺リンパ腫・SAM系対照動物）★ SAMP1/SkuSlc（老化アミロイド症）★ SAMP6/TaSlc（老年性骨粗鬆症）★ SAMP8/TaSlc（学習･記憶障害）★ SAMP10/TaSlc（脳萎縮を伴う学習･記憶障害）
AK㻵TA/Slc（糖尿病）☆ TSOD（2型糖尿病）
C57BL/6JHamSlc-ob/ob（肥満・2型糖尿病・Lepob）
C57LKS/J㻵ar−+Leprdb/+Leprdb（肥満・2型糖尿病・Lepr db）☆ NSY/Hos（2型糖尿病）
y
C57BL/6JHamSlc-A /＋（肥満）
HIGA/NscSlc（ⅠgA腎症）
C.KOR/StmSlc-Apoeshl（アポE欠損高脂血症・Apoeshl）
adjm
C.KOR/StmSlc-Traf3ip2 （アトピー性皮膚炎マウス・Traf3ip2adjm）

ラット●アウトブレッド

Slc：SD
Slc：Wistar
Slc：Wistar/ST
Hos：Donryu☆ 㻵ar：Wistar（Wistar-Imamichi）☆ 㻵ar：Long-Evans☆ 㻵ar：Copenhagen（前立腺腫瘍継代）●インブレッド

F344/NSlc
WKAH/HkmSlc
BN/SsNSlc
DA/Slc（薬物誘導性関節炎）
LEW/SsNSlc（薬物誘導性関節炎）●疾患モデル★ SHR/Izm（高血圧）★ SHRSP/Izm（脳卒中）★ WKY/Izm（SHR/Izmのコントロール）★ SHRSP5/Dmcr（NASHモデル【HFC飼料給餌】）★ SHR/NDmcr-cp/cp（肥満･糖尿･高血圧・Leprcp）★ SHRSP/Ezo（AD/HD）★ SHRSP/㻵Dmcr-fa/fa（肥満･高血圧･脳血管障害・Leprfa）
D㻵S/EisSｌｃ（食塩感受性高血圧症）（食塩抵抗性）D㻵R/EiｓSlc
Slc：Zucker-fa/fa（肥満・Leprfa）☆ Hos : ZFDM-Leprfa（糖尿・肥満）HWY/Slc（ヘアレスラット）☆ Hos : OLETF（2型糖尿病）☆ Hos : LETO
（OLETFのコントロール）

モルモット

ハムスター

●マイクロミニピッグ●アウトブレッド●フェレットSlc：Syrian●疾患モデル

J2N-k（心筋症モデル）
J2N-n（J2N-kのコントロール）

スナネズミ●インブレッド

MON/Jms/GbsSlc

無菌動物（ラット）●ラット●インブレッド

F344/NSlc（GF）

エンヴィーゴ（旧ハーランOEM生物動物）※維持●アウトブレッドラット

RccHan® : W㻵ST
※Hsd:Sprague Dawley® : SD®

●インブレッドマウス
CBA/CaOlaHsd●免疫不全モデルマウス
C.B-17/㻵crHsd-Prkdc scid

遺伝子改変動物●マウス

C57BL/6-Tg（CAG-EGFP）（グリーンマウス）
C57BL/6JJmsSlc-Tg（gpt delta）●ヌードマウス

C57BL/6-BALB/c-nu/nu -EGFP（EGFP全身発現ヌードマウス）

●ラット

SD-Tg
（CAG-EGFP）（グリーンラット）
F344/NSlc-Tg（gpt delta）
Slc:WistarHanover/Rcc-Tg(gpt delta)

その他（conventional動物）●アウトブレッド●ビーグル犬ウサギ●カニクイザル●アウトブレッド●ミニブタ

Slc：Hartley

Slc：JW/CSK
Slc：NZW☆ 国内繁殖生産（（一財）
動物繁殖研究所）（輸入）☆ カニクイザル☆ 国内繁殖生産（（一財）
日生研・NPO法人医用ミニブタ研究所）☆国内繁殖生産（富士マイクラ（株））
自家繁殖生産（中伊豆支所）★印は受託生産動物、☆印は仕入販売動物です。

受注生産動物
マウス●疾患モデルC3H/HeJJmsSlc-gld（自己免疫疾患動物・Faslgld）
C57BL/6 JHamSlc-bg/bg（NK細胞活性低下）
CTS/Shi（免疫不全・白内障）（NZW×BXSB）
F1/Slc（紫斑症）

ラット●インブレッド
ACI/NSlc●疾患モデル

DahlS.Z-Leprfa/Slc
GK/Slc（2型糖尿病）EHBR/EisSlc（高ビリルビン尿症）
PVG/SeaSlc
KDP（1型糖尿病・Cblb）
WBN/KobSlc（高血糖好発）WBN/KobSlc-fa/fa（高血糖好発Leprfa）
NAR/Slc（無アルブミン症）
NER（自発性強直-間代性けいれん発作発症）
DA/Slc-bg/bg（NK細胞機能低下）
SDR（矮小体駆症ラット）
OM/NSlc（栄養関係・腎障害）
FH/HamSlc（脳内セロトニン系の機能不全）（大腸癌易誘発）F344/NSlc-Apcm1kyo
Gunn/Slc-j/j（高ビリルビン血症）
Slc : WsRC-Ws/Ws（肥満細胞欠損貧血-c-kit異常-kitW/s）

モルモット●アウトブレッド

Hos : Weiser-Meples（メラニン保有）●インブレッド
Strain2/Slc
Strain13/Slc

ウサギ●アウトブレッド

Slc : JWF-NIBS（ヘアレス）

2019.3

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気管内にウイルスや薬液を噴霧するときに、使用するスプレーです。

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ృ৿ઙૄভ঺ 嵆崎崡ে༢ੵ৾ঢ়৴૥ఇ঳༮
CARD FERTIUPၥ嵆崎崡ಖ৕๋੥৳ோั (0.13 / 0.5 / 1.0 mL)

CARD HyperOvaၥ嵆崎崡ૌ๪ൾຼාକද (0.6 / 1.0 mL)

CARD 0.25M Sucrose (2.0 / 5.0 mL)

CARD FERTIUPၥ嵆崎崡ಖ৕৐သുသ৉ (0.5 / 1.0 mL)

CARD mHTF (2.0 / 5.0 mL)

CARD 1M DMSO (1.0 mL)

CARD MEDIUM®嵆崎崡৬ਗਭಖ৷သ৉ (Kit / Set )CARD KSOM (2.0 / 5.0 mL)

CARD DAP213 (0.5 / 1.0 mL)‫ٿ‬841-0075 ଯவ਩೭ၓ৘য়લ঴ႏ௫883-1
TEL : 0942-82-6519
URL : http://www.kyudo.co.jp/
Email : web_req@kyudo.co.jp
FAX : 0942-85-3175