52 動物抗菌会報 27（2005）

原著

家畜病性鑑定由来株の薬剤耐性動向調査−過去 10 年間の群馬県分離株について−
野末紫央・松浦俊幸
群馬県家畜衛生研究所（〒 371-0103 群馬県勢多郡富士見村小暮 2425-3）

１．緒言

２．材料および方法

国際的な議論の中で食用動物において生じた薬供試菌株は 1995 年から現在までの約 10 年間に剤耐性菌がヒトの医療に影響を与える可能性が指分離された病性鑑定由来株のうち，サルモネラ，摘され，家畜衛生分野においても動物用抗菌剤の大腸菌および Actinobacillus pleuropneumoniae の 3

慎重使用を徹底することが益々重要となってきて菌種を，各症例から各菌種 1 株を抽出し，それぞいる。全国レベルでは 1999 年以降，JVARM（家れ 64 株，53 株および 49 株を用いて薬剤感受性試

畜衛生分野での薬剤耐性モニタリングシステム）

験を実施した（表 1）。サルモネラは牛，豚，鶏由が構築され，健康家畜由来および病性鑑定由来株

来の 3 血清型，大腸菌は豚由来株のうち，株数がについて，一律的な薬剤感受性調査が行われてい多く認められた O 群 3 血清型，A. pleuropneumoniae

るが，本県では，実際の抗菌剤の適正な使用の一は豚由来の 3 血清型を選択した。薬剤感受性試験

助として活用するために必要となる畜産・臨床現には，アンピシリン（ABPC），セファゾリン（CEZ），場における耐性菌動向の推移と現状を把握できる

ストレプトマイシン（SM），カナマイシン（KM），調査成績はない。そこで今回，過去 10 年間に収オキシテトラサイクリン（OTC），ナリジクス酸集した病性鑑定由来株の中から 3 菌種を対象に，（NA）およびエンロフロキサシン（ERFX）の 7

薬剤感受性試験を実施したのでその概要を報告す

薬剤を供試し，NCCLS 法に準拠した寒天平板希る。

釈 法［1］に よ り，サ ル モ ネ ラ お よ び 大 腸 菌 は

表1菌

供試菌株
由来家畜と株数種

血清型

サルモネラ

Typhimurium
Enteritidis
Dublin

大腸菌

O139
O141
O1491833253

A. pleuropneumoniae

12744414952

牛

豚

233156

鶏17計64野末紫央・松浦俊幸／家畜病性鑑定由来株の薬剤耐性動向調査−過去 10 年間の群馬県分離株について−／27（2005） 53

ミューラーヒントン寒天培地を用いて好気，A.て ABPC，SM および OTC に対する MIC 値が 512

pleuropneumoniae はチョコレート寒天培地を用いμg/mL 前後であり，それ以前の年度分離株に比て 5％炭酸ガス下で 35℃，20 時間培養後，最小発べて高い値を示した。

育阻止濃度（MIC）を測定した。成績は，MIC 分（2）S. Enteritidis

布が二峰性を示した薬剤に対して微生物学的ブ他の血清型と比較して供試薬剤の MIC 値は，全レークポイント（耐性限界値）を設定し，その値て低い値であった。しかし，SM と OTC に対してについて動物用医薬品検査所（動薬検）を中心に，は 10.0％の株が耐性を示した。また，鶏由来株で全国レベルで行われている健康家畜由来株およびは SM と OTC に対し，それぞれ MIC 値 256μg/mL，野外流行株での調査成績［2，3，4，5，6，7］と512μg/mL 以上の高度耐性を示した株が 2 株認め比較した。また，各菌種の耐性率は今回設定したられた。

ブレークポイントを用いて求めた。

（3）S. Dublin
KM，NA および ERFX の MIC 値が高く，耐性３．成績

率 は 100％ で あ っ た。NA の MIC 値 は，全 株 が512μg/mL 以上を示し，ERFX についても MIC
値が 0.5 〜 2μg/mL で，他の血清型と比較して高１）サルモネラサルモネラ全体の成績を表 2 に示した。供試 7い傾向であった。

薬剤にブレークポイントを設定したが，CEZ および ERFX の MIC 値は全体的に低く，特に CEZ に２）大腸菌

おいては，1 株が MIC 値 16μg/mL を示し，そのCEZ 以 外 の 6 薬 剤 に 耐 性 株 が 存 在 し，特 に他の 63 株はすべて 4μg/mL 以下であったため，

ABPC，SM，KM および OTC に対し，それぞれその 1 株を耐性株とした。全国調査の成績では，

60.4，41.5，41.5，90.6％ と 高 い 耐 性 率 を 示 し た

CEZ および ERFX についてはブレークポイントが（表 4）。O 群血清型の違いによる MIC 値および設定されていないが，その他の薬剤については，耐性率の差は認められず，年度別に比較すると本県分離株のブレークポイントとほぼ同じ値で1995 〜 1999 年分離株の KM，NA に対する耐性率あった。血清型ごとの成績は以下のとおりであっは，それぞれ 34.9％，11.6％であったが，2000 〜た（表 3）。

2004 年分離株はいずれの薬剤に対しても 77.8％の（1）S. Typhimurium

高い耐性率を示した。

供試 29 株は，ABPC，KM および OTC に対してそれぞれ 72.4％，48.2％，72.4％と高い耐性率を

３）A. pleuropneumoniae

示した。NA の MIC 値は 4 〜 16μg/mL と低い値で供試株の血清型は 2 型が最も多く，9 割を占めあった。豚由来株は 29 株中 6 株と少なかったが，た。MIC 値は全体的に低い値を示したが，ABPC，そのうち 2000 〜 2004 年に分離された 3 株はすべ

SM，KM，OTC，NA についてブレークポイント

表2薬剤MIC 分布（μg/mL）

ABPCCEZSMKMOTCNAERFX

1->5122-162->5122->5121->5124->512<0.125-2

MIC50（μg/mL）
2232224<0.125

サルモネラ（3 血清型）の薬剤感受性成績
MIC90（μg/mL）>512425664
512
512
0.5

ブレークポイント（μg/mL）
全国調査
32−32321664−

群馬

耐性株数

耐性率（％）

3281281616640.12524172927
1515

37.5
1.6
10.9
45.3
42.1
23.4
23.4

54 動物抗菌会報 27（2005）
表3サルモネラの血清型別薬剤感受性成績

血清型

薬剤

ブレークポイント（μg/mL）
MIC 分布MIC50
MIC90（μg/mL） （μg/mL） （μg/mL）
全国調査
群馬

耐性株数耐性率（％）

S. Typhimurium

ABPCCEZ
SMKM
OTCNA
ERFX

1->5122-164->5122->5122->5124-16<0.125>5124642128
4<0.125>5124256>512128
4<0.125328128161664
0.125

328128161664
0.125

211
514
21
0
0

72.4
3.4
17.2
48.2
72.4
00

S. Enteritidis

ABPCCEZ
SM
KM
OTCNA
ERFX

1-2
22-256
21->5124-8<0.1251232228<0.1251264
228<0.125328128
1616640.125

3281281616640.12500202000−
10.0010.00−

S. Dublin

ABPCCEZ
SMKM
OTC
NA
ERFX

1->5122-416-3264->5121->512512->5120.5-22216641
5120.53281281616640.1253281281616640.125

300154151520.0−
0100
26.7
100100

表4>51243264>512>5122

大腸菌の薬剤感受性成績

薬剤

MIC 分布（μg/mL）

MIC50（μg/mL）

MIC90（μg/mL）

ABPC
CEZ
SMKM
OTC
NA
ERFX

1->5122-322->5121->5122->5122->512<0.125-2>5124642256
4<0.125>5128>512>512512
5120.5

ブレークポイント（μg/mL）
全国調査
1632323216324群馬

耐性株数

耐性率（％）

32−2563216640.125

320222248121360.4041.541.590.622.624.5を設定した（表 5）。低い割合ではあったが，耐性を示す株も 1 株ずつあり，全体的に耐性化傾向が株が存在し，NA に対する感受性では，MIC 値 32認められた。7 型の分離株は 1 株ではあったが，μg/mL 以上を示す株が 2 株存在し，それら以外SM，OTC に対して 512μg/mL，32μg/mL 以上は 2μg/ml 以下であった。全国調査の成績ではと高い値を示した。一方，2 型の 44 株に耐性株のSM，KM および OTC にブレークポイントが設定出現は認められなかった。

されており，本県分離株の値とほぼ同じであった。血清型別の成績を表 6 に示した。1 型では

４．考察

SM，KM および OTC の MIC 値は，それぞれ 16 〜256μg/mL，4 〜 512μg/mL，16 〜 32μg/mL で動薬検を中心に全国で行われている薬剤耐性菌あり，NA の MIC 値が 32μg/mL または 128μg/mLのモニタリング調査で，健康家畜由来のサルモネ

野末紫央・松浦俊幸／家畜病性鑑定由来株の薬剤耐性動向調査−過去 10 年間の群馬県分離株について−／27（2005） 55

表5
薬剤MIC 分布（μg/mL）

ABPCCEZ
SMKM
OTCNA
ERFX

<0.125-8
0.5-2
16->512
4->5122-64
1-128<0.125

A. pleuropneumoniae の薬剤感受性成績

MIC50（μg/mL）

MIC90（μg/mL）<0.125116822<0.1250.25
16416162<0.125

表6ブレークポイント（μg/mL）
全国調査

群馬

耐性株数−−32324−−

1.0−
6464
88<0.1253043520

耐性率（％）
6.1
08.2
6.1
10.2
4.1
0

A. pleuropneumoniae の血清型別薬剤感受性成績

血清型 1 型

血清型 2 型

血清型 7 型薬剤

MIC 分布
（μg/mL）

耐性率（％）

MIC 分布
（μg/mL）

耐性率（％）

MIC 分布
（μg/mL）

耐性率（％）ABPCCEZSMKM
OTCNA
ERFX<0.1250.5-1
16-256
4-512
16-32
2-128
<0.1250050.075.0
100
50.0
0

<0.125-1
1-2
16-32
8-16
21-4<0.125000000082>5128322<0.1251000100010000

ラはジヒドロストレプトマイシン（DSM）と OTC

薬剤耐性菌の出現頻度と薬剤使用量との間にはに，また，大腸菌は OTC，DSM および ABPC に一定の条件下で関連性があることが指摘されてい対して耐性率が高いという成績が示されている

る［13，14］。農林水産省が行った調査［15］によ［8，9］。本県分離株では耐性率に差があるもの

れば，テトラサイクリン系，サルファ剤，マクロの，全ての菌種において SM，KM および OTC にライド系，ペニシリン系，アミノグリコシド系は対する耐性株が存在した。また，本県分離株で今販売量が上位になっており，本県における耐性菌回設定されたブレークポイントは，全国調査によ出現傾向もそれを反映しているものと推察される健康家畜由来株および病性鑑定由来株の成績とた。また，分離年度を前後 5 年毎に区分して耐性大きな差は認められず，薬剤感受性動向には同様率を比較したところ，大腸菌においては KM およの傾向が窺われた。供試 3 菌種では，キノロン系

び NA，サルモネラにおいては，特に豚由来の S.の NA および ERFX に対してはサルモネラと大腸

Typhimurium における ABPC，SM および OTC な菌に耐性株が存在し，A. pleuropneumoniae におい

ど一部の薬剤に対する耐性率に年次変化認められては MIC 値の高い株が散見されたため，臨床上たが，それら以外の薬剤では大きな違いはみられ重要なキノロン系薬剤の使用に対しては，注意喚なかった。セフェム系やキノロン系薬剤のように起する必要があると思われた。サルモネラや A.

牛と豚において経口薬として使用される頻度の少pleuropneumoniae については，血清型の違いによない薬剤は，全体の薬剤使用量に占める割合も低り，薬剤に対する感受性が異なることが既に報告

く，耐性率に大きな年次変動を与えなかったものされており［10，11，12］，今回の成績にも同様のと考えられる。現在，県内における動物用抗菌剤傾向が見られた。血清型ごとに特徴をもつ菌種にの使用実績や流通量を知る十分なシステムがな

ついては，血清型の優位性を意識した抗菌剤選択

く，薬剤の使用状況と耐性菌の出現動向との関係が適正使用につながると考えられる。

を農場段階も含めて継続的にモニターしていくこ

56 動物抗菌会報 27（2005）とは難しい。今後，家畜に対する抗菌剤の効果的した。本県分離株の耐性限界値は，全国の健康家な使用だけでなく，人が畜産物の摂取から受ける畜由来および野外流行株における調査で設定され影響についても意識した適正な薬剤の使用が求めた値とほぼ同様であった。

られていく中で，動物用抗菌剤の使用実態が各県レベルで把握できるようなシステムを構築するこ

引用文献とも課題の一つと考える。
１）動物用抗菌剤研究会 MIC 測定標準化委員会：動謝

辞

物用抗菌剤研究会報，25，49-60（2003）
２）動物医薬品検査所：動薬検ニュース，257，3-7

本稿を終えるにあたり，ご助言，ご校閲いただ
いた農林水産省動物医薬品検査所高橋敏雄室長に深謝します。

（2003）
３）農林水産省生産局衛生課：家畜衛生週報，2633，
4-6（2000）４）農林水産省生産局衛生課：家畜衛生週報，2683，

要

約

1-5（2001）５）農林水産省生産局衛生課：家畜衛生週報，2735，

群馬県での薬剤耐性菌の現状を把握するため，
病性鑑定由来株のうち，サルモネラ 64 株，大腸菌
53 株，Actinobacillus pleuropneumoniae 49 株について寒天平板希釈法で最小発育阻止濃度（MIC値）を測定した。MIC 値が二峰性の分布を示した
薬剤については耐性限界値を設定し，耐性率を求めた。供試薬剤は，ABPC，CEZ，SM，KM，OTC，NA，ERFX の 7 剤とした。サルモネラは供試 7 薬剤すべてに耐性株が存在した。血清型別には S.
Typhimurium で ABPC，KM，OTC に耐性率が高かった。S. Enteritidis は全ての薬剤に対して MIC
値は低かったが，SM，OTC に耐性株が存在した。S. Dublin は KM，NA および ERFX に 100％耐2-5（2002）
６）農林水産省生産局衛生課：家畜衛生週報，2819，2-6（2004）
７）動物医薬品検査所：動薬検ニュース，258，3-5（2004）
８）高橋敏雄ら：動物医薬品検査所年報，41，63-67（2004）
９）M. Kijima-Tanaka, K. Ishihara, et al.: J Antimicrob
Chemother, 51, 447-451 (2003)
１０）Suzuki S, et al.: Jpn J Vet Sci, 51 (2), 450-452(1989)
１１）Yoshimura H, et al.: Vet Res Commun, 26, 11-19(2002)性であった。大腸菌は，CEZ 以外の 6 剤に耐性株

１２）Yoshimura H, et al.: Vet Rec, 147, 48-50 (2000)

が存在し，特に ABPC，SM，KM，OTC の耐性率１３）Emborg H D: DANMAP, 2002 (2002)が高かった。A. pleuropneumoniae の MIC 値は全１４）田村豊：畜産の研究，56，1，4-8（2002）

体的に低く，血清型 1 および 7 型に耐性株が存在

１５）田村豊：日獣会誌，56，685-691（2003）

野末紫央・松浦俊幸／家畜病性鑑定由来株の薬剤耐性動向調査−過去 10 年間の群馬県分離株について−／27（2005） 57

Investigation on Antimicrobial Resistance of Bacteria Isolated from
Diseased Animals in Gunma Prefecture for the Past 10 years
Shion NOZUE and Toshiyuki MATSUURA
Gunma Livestock Health Laboratory, 2425-3, Kogure, Fujimi, Gunma 371-0103, Japan
A total of 166 strains of Salmonella (64), Escherichia coli (53) and Actinobacillus pleuropneumoniae (49) obtained
from diagnostic submission of clinical cases of food-producing animals in Gunma prefecture during 1995-2004 were
tested for antimicrobial susceptibility. The minimum inhibitory concentrations (MICs) of 7 antimicrobials weredetermined using an dilution method based on the guidelines of the NCCLS. Resistant strains of Salmonella wereidentified in all antimicrobials, and were characterized by serotype. Resistant isolates of E. coli were found in 6
antimicrobials and the resistant rates to ABPC, SM, KM and OTC were especially high. In total, MIC levels of A.
pleuropneumoniae were low and serotype 2 were sensitive to all antimicrobials, but serotypes 1 and 7 were resistant tosome antimicrobials. The breakpoints of antimicrobials in isolates were almost the same as those of JVARM report,
nationwide investigation.