実 験 動 物 ニュース
The Japanese Association for Laboratory Animal Science

目次

他学会情報
日本実験動物技術者協会関東支部
第 32 回懇話会のお知らせ ..................................................................................... 1
ICLAS 情報 ................................................................................................................... 2
EXPERIMENTAL ANIMALS 56(1)収載論文和文要約集 .......................................... 3

Vol. 56 No. 1 / January 2007

実験動物ニュースVol. 561

No. 1

他 学 会 情 報
日本実験動物技術者協会関東支部
第 32 回懇話会のお知らせ

・教育講演「実験用動物としてのゼブラフィッシュ」
岡本テーマ：「実験動物技術者の現在とこれから」
開催日：2007 年 2 月 17 日（土）9:55 − 18:20（受付開始 9:30 −）会場：（独）
国立オリンピック記念青少年総合センター
国際交流棟内，国際会議室（東京都渋谷区代々木）

参加費：技術者協会会員 3,000 円，非会員 5,000 円，学生 2,000 円
内容：仁先生（理化学研究所脳科学総合研究センター）・ランチョンセミナー『バイオリソース（マウス）の生産と供給』「マウスの繁殖・生産体制について」
日本クレア（株）「疾患モデルマウスの特色と供給体制について」
日本チャールス・リバー（株）「マウスの受託生産および受託試験について」
日本エスエルシー（株）

・特別講演Ⅰ

・一般演題（口頭・ポスター）発表「要素解析からシステム理解のための動物実験・懇親会と実験技術者の役割」

18:30−20:30（懇親会費一律3,500円）

懇話会事務局：

城石俊彦先生〒 305-0074（国立遺伝学研究所 系統生物研究センター）（独）理化学研究所 バイオリソースセンター

茨城県つくば市高野台 3-1-1

・特別講演Ⅱ

遺伝工学基盤技術室「独創性と創造性への第一歩：クローンマウス

持田慶司 宛を創るにはナニが必要？」

E-mail: mochida@rtc.riken.jp

若山照彦先生（理化学研究所ンター）

TEL: 029-836-9169
発生・再生科学総合研究セFAX: 029-836-9172

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実験動物ニュース

Vol. 56

ICLAS 情報No. 1

Claudio Bernardi
Gemma Perretta

1．関連学会，講習会等の案内

Chair of the Scientific Committee, Chair of thea. 15th Scientific meeting of The South African

Organizing Committee

Association for Laboratory Animal Science

More information on the web site:

11-13 September 2007

http://www.felasa-iclas2007.com/

The South African Association for Laboratory
Animal Science (SAALAS) in co-operation with the2．ICLAS 会議

University of Cape Town (UCT) will host it’s 15tha. ICLAS 総会開催案内

Scientific meeting in Barnard Fuller Building, UCT

日から 14 日で，第 10 回 FELASA シンポジウムと第Faculty of Health Sciences, Cape Town.

14 回 ICLAS 総会が開催されます。

Co-ordinator: Deborah McTeer
UCTConferenceManagement

北イタリアのコモ湖畔において，2007 年 6 月 11Centre

Deborah@curie.uct.ac.za

b. ICLAS FYI Bulletin
ICLAS FYI Bulletinの受信者を更新中です。受信b. The 10th FELASA Symposium and the XIV

希望者は氏名，メールアドレスを送ってください。

ICLAS General Assembly & Conference

I am in the process of updating the list of recipients

On behalf of the Scientific and Organizingof the ICLAS FYI Bulletin. Please let me know if youCommittees, we are pleased to invite you to attend thewish your name to be removed or if you would like toFELASA and ICLAS Joint Meeting, which will takehave individuals added. Please send me names andplace from June 11th to June 14th 2007 in Northernemail addresses if you wish to add colleagues to theItaly, on the shores of Lake Como. The internationallist.

meeting will include the 10th FELASA Symposium

Steven P. Pakes, DVM, PhD

and the XIV ICLAS General Assembly & Conference,

Professor of Pathology, UTexas Southwestern

and will provide a comprehensive overview of the mostMed. Ctr.

recent developments in the field of laboratory animal

5323 Harry Hines Blvd. Dallas, TX 75390-9072

sciences and technologies. We hope you will join us

E-Mail: steven.pakes@UTSouthwestern.edu

for the full program that will also include enjoyable

Phone: 214-648-1684

social events in the Italian warm and pleasant climate.

Fax:

214-648-4096

We look forward to seeing you in Italy in 2007!

URL:

http://www.iclas.org

実験動物ニュースVol. 56

Experimental

No. 1Animals—和 文 要 約—Vol. 56, No. 1 January 2007

原著
高血圧高脂血症自然発症ラットにおける高フィブリノーゲン血症と高血圧および高脂血症合併モデルとしての有用性 ........................................................................... 1–10
五味渕 寛 1)・岡崎雅子 1)・岩井信市 1)・熊井俊夫 2)・小林真一 2)・小口勝司 1)
1)

昭和大学医学部第一薬理学教室，2)聖マリアンナ医科大学薬理学教室

高血圧，高脂血症は動脈硬化から脳血管障害，心筋梗塞を引き起こすが，これは一部高血圧，高脂血症による血液凝固亢進に起因するとされている。また，血漿フィブリノーゲン（Fib）の上昇は血液粘度上昇，血管内皮細胞障害をきたす事により動脈硬化性血管イベント発症に関与すると考えられている。今回，高血圧自然発症ラット（SHR），高脂血症自然発症ラット（HLR）
およびこれらを交配して作成した高血圧高脂血症自然発症ラット（SHHR）を用いて高血圧，高脂血症単独とその合併による場合の凝固系の変化を Fib を中心に測定し，SHHR の合併モデルとしての有用性を検討した。 血漿 Fib 値は，対照ラットである WKY，SDに比し SHR，HLR，SHHR の順に有意に上昇し，この上昇は合併モデルである SHHR で最も著明であった。同時に
Fib 構成鎖であるα鎖，β鎖，γ鎖の肝での mRNA 発現が明らかに増大し，血漿 Fib 上昇が肝での転写過程亢進に基づく事が示され，更にプロトロンビンの mRNA 発現も増大した事よりSHHR における凝固亢進が強く示された。高 Fib 血症の原因には高脂血症がより強く関与している事が示唆されたが，高血圧との関与には遺伝的因子の存在も推定される。以上，高血圧，高脂血症の合併でより強い凝固系の亢進を引き起こす事が示され，高 Fib 血症を伴う SHHR は動脈硬化初期モデルとして有用である事が示唆された。

Severe Insulin Resistance and Moderate Glomerulosclerosis in a Minipig Model
Induced by High-Fat/ High-Sucrose/ High-Cholesterol Diet ..................................... 11–20
Yi LIU1, 3), Zongbao WANG2), Weidong YIN1), Qinkai LI1), Manbo CAI1), Chi ZHANG1),
Junxia XIAO1), Hongjie HOU1), Hongguang LI1), and Xiuhong ZU1)
1)

Institute of Cardiovascular Research, School of Life Sciences and Technology, 2)Department ofLaboratory Animal Science, Nanhua University, Hengyang, Hunan 421001, and 3)Medical Collegeof Shaoguan University, Shaoguan, Guangdong 512026, P. R. China

To develop a minipig model of type 2 diabetes that simulates the common manifestations of themetabolic abnormalities and resembles the kidney pathology of type 2 diabetes in the human population,
male Chinese Bama minipigs were divided into 2 groups (5 in each) and fed with a control diet (CD) or
high-fat/ high-sucrose/ high-cholesterol diet (HFSCD) for 5 months. The biochemical parameters ofblood and urine, and the oral glucose tolerance test were monitored after the feeding program. The
insulin resistance was estimated by the HOMA-IR index and the glucose elimination constant (KG), and3

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Vol. 56

No. 1

beta-cell function by the HOMA-beta index and the acute insulin response (AIR). Glomerulosclerosisindex (GSI) was semi-quantitated by the degree of glomerular lesions in kidney sections stained withMasson trichrome. Extracellular matrix deposition in the kidney was examined by the protein expression of type IV collagen, connective tissue growth factor (CTGF) and matrix metalloproteinases 2(MMP-2) using immunohistochemistry. Feeding HFSCD to minipigs markedly caused hyperglycaemia,hyperinsulinaemia and dyslipidaemia. HOMA-IR was significantly increased while HOMA-beta, AIRand KG were obviously decreased in the HFSCD group compared with control group. Microalbuminuria,glucosuria and moderate glomerulosclerosis were exhibited in HFSCD-fed minipigs. The expression oftype IV collagen and CTGF was elevated whereas that of MMP-2 was reduced in the kidneys ofHFSCD group compared with the CD group. We concluded that feeding HFSCD to Chinese Bamaminipigs for 5 months can induce humanoid type 2 diabetes and early-stage diabetic nephropathy, andaccelerate extracellular matrix deposition and glomerulosclerosis.

Age-Dependent Changes in Iron Deposition in the Gerbil Hippocampus ............... 21–28
Ki-Yeon YOO1), In Koo HWANG1), Il-Jun KANG2), Tae-Cheon KANG1), Hak-Ju LEE3),
Ha-Young KANG3), Hyeon Yong LEE4), Yang-Seok OH5), and Moo Ho WON1)
1)

Department of Anatomy, College of Medicine, 2)Department of Food Science and Nutrition, Hallym
University, 3)Division of Wood Chemistry & Microbiology, Korea Forest Research Institute, 4)Schoolof Biotechnology and Bioengineering, Kangwon National University, and 5)Department of Medical
Genetics and Experimental Animal Center, College of Medicine, Hallym University, South Korea

In this study, we focused on age-dependent changes in intracellular iron deposition in the gerbil
hippocampus. At 1 month of age (PM 1), iron reactivity was weak in the gerbil hippocampus. At thistime, cells in the polymorphic layer of the dentate gyrus showed weak iron reactivity. At PM 3, ironreactivity in cells had not changed significantly. Thereafter, iron reactivity in the CA1–3 regions and in
the dentate gyrus increased with time until PM 18. At PM 24, iron reactivity in all the subfields wassimilar to that at PM 18. In animals aged PM 18–24, iron positive cells had various shapes, and hadprocesses which contained iron. These results suggest that the increase of iron deposition may be
associated with normal aging and that the iron deposition in the aged hippocampus is different according
to hippocampal subfields.

2% acetamide または glycerol をもちいた日本白色種ウサギ凍結保存精子の受精能 ........................................................................................................................ 29–34
奥田泰士 1)・清田弥寿成 1)・久松 伸 2)・其木茂則 2)・紫野正雄 1)・政岡俊夫 1)・
猪股智夫 1)・上條信一 3)・柏崎直巳 1)
1)

麻布大学獣医学部，2)麻布大学環境保健学部，3)三菱化学生命科学研究所

ウサギは，非常に重要な実験動物である。本研究は，日本白色種ウサギ射出精液凍結保存法の改善を目的として，卵黄希釈液における凍害保護物質 2％ acetamide と glycerol を比較した。
凍結融解精子は，人工授精による受精能，前進運動精子率および精子原形質膜の正常性について調べた。凍結融解精子の前進運動精子率および精子原形質膜の正常率は，acetamide が（27.1± 8.3％および24.5 ± 6.5％）glycerol（16.3 ± 10.9％および14.3 ± 7.6％）より有意に（P<0.05）高かった。人工授精においては，分娩率に有意な差は認められなかったが，平均産仔数では，acetamide（6.0 ± 1.1）が glycerol（3.0 ± 0.4）にくらべて有意に（P<0.05）多かった。この結果より，日本白色種ウサギ精子凍結保存において 2％ acetamide は，2％ glycerol よりも高い凍害保護効果を有していることが明らかになった。

実験動物ニュースVol. 56

No. 1

Effects of Xylene and Formaldehyde Inhalations on Oxidative Stress in Adultand Developing Rats Livers ...................................................................................... 35–42
Cavit KUM1), Funda KIRAL2), Selim SEKKIN1), Kamil SEYREK2), andMurat BOYACIOGLU1)
1)

Department of Pharmacology and Toxicology, and 2)Department of Biochemistry, Faculty ofVeterinary Medicine, Adnan Menderes University, P.K. 17, 09016, Isikli, Aydin, Turkey

In this study, it was aimed to demonstrate the possible oxidative stress caused by exposure of xylene
and formaldehyde (HCHO) on liver tissue, and on body and liver weights in adult as well as developingrats. The rats (96 female Sprague-Dawley) were randomly divided into four groups: embryonic day 1(Group 1), 1-day-old infantile rats (Group 2), 4- week-old rats (Group 3) and adult rats (Group 4). Theanimals were exposed to gases of technical xylene (300 ppm), HCHO (6 ppm) or technical xylene +HCHO (150 ppm + 3 ppm), 8 hours per day for 6 weeks. Superoxide dismutase (SOD) and catalase(CAT) activities, and glutathione (GSH) and malondialdehyde (MDA) levels were evaluated. In addition, body and liver weights were determinated. Compared to the control animals, body and liver
weights were decreased in the embryonic day 1 group (P<0.001, P<0.01, respectively) and the 1-day-oldinfantile group (P<0.001). Liver weight was increased in the 4-week-old group (P<0.01). SOD activities
were decreased in the 4-week-old rats exposed to HCHO (P<0.01). CAT activities increased in theembryonic day 1 group (P<0.05). GSH levels were decreased in the 1-day-old infantile group (P<0.01),
and MDA levels was increased in the embryonic day 1 group (P<0.05) as compared with the respective
control groups. As to GSH and MDA levels in adult and 4-week-old animals, no statistically significant
differences were observed (P>0.05). The present study indicates that exposures to xylene, HCHO and a
mixture of them are toxic to liver tissue, and developing female rats are especially more adverselyaffected. Furthermore, the results of this study show that adult female rats could better tolerate theadverse effects of these toxic gases.

ビーグル犬における潜血の仮の指標としての糞便および尿中の炭酸脱水酵素
アイソエンザイム -I（CA-I）濃度 .............................................................................. 43–49井口光二 1)・川戸克仁 1)・清田哲郎 1)・栗林尚志 1)・島田時博 1)・松本真理子 1)・山本豊厳 2)・
山田 学 3)・山本静雄 1)
1)

麻布大学環境保健学部免疫学研究室，2)産業動物臨床研究所，3)県立広島大学生命環境学部

ヘモグロビンに代わる潜血の仮の指標として糞便および尿中の炭酸脱水酵素アイソエンザ
イム-I（CA-I）濃度を酵素免疫測定法（ELISA）により評価した。健康な各種年齢の実験用ビーグル犬 113 頭（雄 50 頭，雌 63 頭）における糞便中の CA-I 濃度は， 4.3 から 16.7 ng/g 糞便 （平均; 7.0 ± 2.9 ng/g 糞便）であった。3 頭の健康なビーグル犬から採取した血液 1 ml 中に含まれる CA-I は，それぞれ 1,047，1,062 および 1,150 µg であった。自己血（10 ml）を胃内へ注入したイヌの糞便 CA-I 濃度は大変低かった。しかし，自己血（5 ml）を上行結腸部へ注入したイヌの糞便 CA-I 濃度は大変高かった。糞便中の CA-I の検出は大腸からの出血があるイヌを見分けるのに有用であろう。健康な 55 頭のビーグル犬から採取した尿を化学的潜血検査で調べた結果，44 頭が陰性であったが，これら尿中の CA-I 濃度は ELISA で 1.8 から 12.6 ng/ml （平均；6.9 ± 5.4 ng/ml）であった。また，尿の化学的潜血検査の結果が陽性であった 11 頭のイヌの CA-I 濃度は，ELISA で 41.2 から 525.0 ng/ml と高値を示した。CA-I は赤血球の特異的な指標ではないが，Hbに対する抗体を用いた特異的な免疫学的潜血検査キットが開発されるまで，CA-I はイヌの糞便および尿の潜血の検出に用いられるであろう。

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実験動物ニュース

Vol. 56

No. 1

スンクスにおいて連鎖マッピングされた新規マイクロサテライトマーカー
遺伝子座 ..................................................................................................................... 51–56サミュエル アジェイ・石川 明
名古屋大学大学院生命農学研究科動物遺伝制御学研究室

ヨーロッパジネズミ（Crocidura russula）で開発された 10 個のマイクロサテライトマーカー
遺伝子座がスンクス（Suncus murinus）において増幅されるか否か，連鎖研究に利用できるか否かを調べた。その結果，4個のプライマーペアがPCRにより増幅し，2つの突然変異系統BANkc, oeb と WZ 間で多型を示した。これらの PCR 増幅産物をクローニングしてシークエンス解析したところ，マイクロサテライト配列の存在が確認された。上述の 2 系統間 F2 交雑群において確認できた対立遺伝子の数は 2–5 個であった。これら 4 個のマイクロサテライトマーカー
遺伝子座，以前に開発された 18 個のマーカー遺伝子座および 3 個の突然変異遺伝子座を用いて連鎖解析を行ったところ，5 個の連鎖群を構築することができた。これらの連鎖群には 3 個のマイクロサテライトマーカー遺伝子座が含まれていた。本研究で開発されたマイクロサテ
ライトマーカーはスンクスにおいて最初のものであった。

短報
イソプロテレノール処置ラットにおける心筋傷害の臨床病理パラメータ相関について ........................................................................................... 57–62
倉田昌明・飯高 健・笹山由紀子・福島民雄・ 村雅憲・白井紀充
ファイザー株式会社，中央研究所，安全性研究統括部

心筋傷害の臨床病理パラメータとして知られる項目について，イソプロテレノール（0.04，0.4，4 mg/kg，単回皮下投与）処置ラットを用いて，項目間あるいは方法間の相関を検討した。
その結果，LDH アイソザイム，トロポニン T および特定の方法で測定したトロポニン I の間に高い相関がみられた。本成績は，毒性試験において，異なる項目や方法を用いる場合の心筋傷害の評価に参考になるものと考える。

Btkxid マウスの新たな分子遺伝学的診断 .................................................................... 63–66
木弓枝 1)・増井則夫 1)・安田真美 2)・小野史郎 2)1)

日本エスエルシー（株），2)大阪大学大学院医学系研究科腫瘍発生

X 染色体に連鎖した劣性の B 細胞免疫不全（Xid）を呈する CBA/N マウスの原因遺伝子 Btkxidを簡便に且つ正確に識別するために，変異遺伝子領域に人為的制限酵素部位を導入したミスマッチプライマーを用いた分子遺伝学的診断法を確立した。この方法は，Btkxid 遺伝子を導入した多様な免疫欠損モデルの作製やXidへテロ接合体におけるX染色体不活性化を含めた多くの研究に有用な手段を提供すると考えられる。

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No. 1

健康な実験用ビーグル犬の耳道微生物叢 .................................................................. 67–69
青木（小守） 忍 1)・島田健一郎 2)・谷 健二 1)・片山泰章 1)・斎藤 徹 3)・片岡 康 4)1)

岩手大学 外科，2)日本獣医生命科学大学 外科，3)日本獣医生命科学大学 比較行動医学，
日本獣医生命科学大学 微生物4)

犬の正常耳道の微生物叢に関する報告はあるが，多数の犬種が対象とされ耳の被検部位が明らかにされていないため比較検討することが難しい。今回，外耳炎症状のないビーグル犬の耳介，対輪および垂直耳道から採材し微生物叢を検索した。3 箇所の細菌の検出率は耳介中央から垂直耳道へと低下する傾向を，イーストの検出率は増加する傾向を示し，耳では部位により微生物増殖に関係する生理学的因子に相違のある可能性が示唆された。

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