SunShell Core shell particle
Sunniest Fully porous particle

Biphenyl

UHPLC & HPLC column

Bentencho station

クロマニックテクノロジーズ

Biphenyl
三官能性シリル化試薬使用
OO SiO

Sunniest Biphenyl
SunShell Biphenylのエンドキャッピング (Sunniest Endcapping)
ダブルエンドキャッピング
Double endcapping

MeMeMe MeMe MeO

OClSi

SiSi

Cl

Hexamethyldichlorotrisiloxaneブリードが少ない
Low bleeding

Trimethylchrolosilane

高温反応
High
temperature
end-capping安定性が高いHigh stabilityOO
SiOH

SiOOO
SiOHSiO

OConversion from silanolgroups to siloxane bondBiphenylの特徴


ビフェニル基の二つのベンゼン環は約45度ねじれており，ビフェニル基は単独のフェニル基とは異なる分離挙動を⽰す。
有機溶媒を含まない水系移動相を用いても，保持の変化がなく，保持時間の再現性の⾼い分離が達成される。
カフェインのような極性化合物の保持が大きくなる。
他社Biphenylはほとんど一官能性シリル化試薬を用いているが，弊社Biphenylは耐酸性の⾼い三官能性シリル化試薬を使用している。

Sunniest Biphenylの物性値
結合相

全多孔性シリカ

Sunniest Biphenyl

粒子径(μm)

細孔径(nm)比表面積(m2/g)

炭素含有量(%)

51234011

固定相

USPL 番号

エンドキャッピング

使用pH範囲Biphenyl

L11

Sunniest end-capping

1.5 - 9

SunShell Biphenylの物性値
結合相

コアシェルシリカ

SunShell Biphenyl

粒子径(μm)

コア径(μm)

細孔径(nm)比表面積(m2/g)

炭素含有量(%)

2.6

1.691505

固定相USP
L 番号

エンドキャッピング

使用最高圧

使用pH範囲Biphenyl

L11Sunniest end-capping

60 MPa1.5 - 9比較で用いた他社コアシェルBiphenylの物性値（他社カタログより転記）
Company A Biphenyl

2.6---

10100

11Biphenyl

L11TMS60 MPa

1.5 - 8.5

Company B Biphenyl

2.7---

9150

7

Biphenyldimethylsilane

L11

Yes

60 MPa1.5 - 8.0

Company C Biphenyl

2.7---

9150

7

Biphenyldimethylsilane

L11Yes60 MPa

1.5 - 9.01コアシェル Biphenylカラムの比較比較に用いたカラム
1. Kinetex Biphenyl, 2.6 μm
2. Halo Biphenyl, 2.7 μm
3. Raptor Biphenyl, 2.7 μm
4. SunShell Biphenyl, 2.6 μm

標準試料の分離
1 36452SunShell C187Column: Company A Biphenyl, 2.6 μm 150 x 4.6 mm

1Company B Biphenyl, 2.7 μm 150 x 4.6 mm

3k5=3.23

5476Company C Biphenyl, 2.7 μm 150 x 4.6 mm
SunShell Biphenyl, 2.6 μm 150 x 4.6 mm

Company A Biphenyl
21.8 MPa

2Mobile phase: CH3OH/H2O=75/25
Flow rate: 1.0 mL/min, Temperature: 40 ºC

31Sample: 1 = Uracil, 2 = Phenol, 3 = Caffeine, 4 = Butylbenzene
54k5=3.08O762OOHH3CCompany B Biphenyl
19.3 MPa

NHNHOOCH3NNCH3NN
CH35 = Amylbenzene, 6 = o-Terphenyl, 7 = Triphenylene
31CH37654Company C Biphenyl
22.8 MPak5=3.212α(Caffeine/Phenol)
3154205k5=5.38

7610

SunShell Biphenyl
19.2 MPa

1520

疎水性

水素結合性
SunShell C18Company A Biphenyl
Company B Biphenyl
Company C Biphenyl
SunShell Biphenyl

立体選択性α(Amylbenzene/Butylbenzene) α(Triphenylene/o-Terphenyl)

0.39
2.69
2.52
3.07
1.82

1.60
1.39
1.371.38
1.441.46
1.451.46
1.45
1.28

Retention time/min
他社コアシェルタイプBiphenylとC18を比較しました。A, BおよびC社のBiphenylはよく似た分離パターンを示しました。SunShell Biphenyl は5番のアミルベンゼンの保持が大きく，ブチルベンゼンとアミルベンゼンの炭素一個の差の分離係数（表中の疎水性）も大きく，他社よりも疎水性が高いことが確認されました。炭素含有量は，SunShell Biphenylが5%で，他社Biphenylは全て7%以上であり，炭素含有量の最も低いSunShellが疎水性が高いことは，高密度にエンドキャッピングされていることを示しています。なお，BiphenylはC18とは大きく分離パターが異なっております。

ピリジンのピーク比較

オキシンのピーク比較
23Company A
Biphenyl23Company A
Biphenyl11Company A
Biphenyl2132Company B
BiphenylCompany C
BiphenylCompany CBiphenyl

1321SunShell
Biphenyl21421212Company B
Biphenyl322211313Company B
Biphenyl

210

ギ酸のピーク比較

68SunShell
Biphenyl

10Retention time/min

0246810Retention time/min

012Company C
Biphenyl

3SunShell
Biphenyl3456Retention time/min

Column dimension: 150 x 4.6 mm
Mobile phase: CH3OH/H2O=30/70
Flow rate: 1.0 mL/min
Temperature: 40 ºC
Detection: UV@250nm
Sample: 1 = Uracil
2 = Pyridine
3 = Phenol

Column dimension: 150 x 4.6 mm
Mobile phase: CH3CN/20mM H3PO4=10/90
Flow rate: 1.0 mL/min
Temperature: 40 ºC
Detection: UV@250nm
Sample: 1 = 8-Quinolinol (Oxine)
2 = Caffeine

Column dimension: 150 x 4.6 mm
Mobile phase: CH3CN/0.1% H3PO4=2/98
Flow rate: 1.0 mL/min
Temperature: 40 ºC
Detection: UV@210nm
Sample: 1 = Formic acid
2 = Acetic acid
3 = Propionic Acid

ピリジンは残存シラノール基によりテーリングが起こりやすい化合物です。移動相中の有機溶媒には，アセトニトリルよりもメタノールを用いたほうがテーリングが起こりやすく，ブランド間の差が明確になります。

8-キノリノール（オキシン）は金属配位性化合物で充塡剤内に金属不純物が存在するとテーリングピークとなります。

酸性化合物はほとんどのカラムで問題なく溶出しますが，ギ酸はテーリングしやすい酸性化合物の代表です。A社Biphenylはギ酸がテーリングしています。

2Superficially porous particle

アミトリプチリンのピーク比較
Company A Biphenyl

Company B Biphenyl

Company C Biphenyl

SunShell Biphenyl

Retention me/min

Retention time/min

Column dimension: 150 x 4.6 mm
Mobile phase: CH3CN/20 mM Phosphate buffer pH 7.0=60/40
Flow rate: 1.0 mL/min
Temperature: 40 ºC
Detection: UV@250 nm
Sample: 1 = Uracil, 2 = Propranolol, 3 = Nortriptyline, 4 = Amitriptyline

Column dimension: 150 x 4.6 mm
Mobile phase: CH3CN/10 mM Ammonium acetate pH 6.8=40/60
Flow rate: 1.0 mL/min
Temperature: 40 ºC
Detection: UV@250 nm
Sample: 1 = Uracil, 2 = Propranolol, 3 = Nortriptyline, 4 = Amitriptyline

CH 3CH 3ONHCH 3NHNCH 3OH

CH 3

塩基性化合物（アミトリプチリン）のテーリングはメタノール/緩衝液移動相よりもアセトニトリル/緩衝液移動相で起こりやすいため，アセトニトリルと20 mMリン酸緩衝液およびアセトニトリルと10 mM酢酸アンモニウム水溶液の二種類の移動相に用いて，他社コアシェル
Biphenylとの比較を行いました。他社Biphenylでは塩基性化合物のテーリング度合いが高く，残存シラノール基への吸着が影響していると思われる保持時間の増大も確認されました。

耐久性比較
弱アルカリ性条件での段数比較

酸性条件でのブリード比較
8010060━ SunShell Biphenyl50━ Company A Biphenyl40━ Company B Biphenyl

相対理論段数/%

Absorbance/mAU

70━ Company C Biphenyl

3020

Chromatogram of a base line atthe third gradient cycle

108060● SunShell Biphenyl■ Company A Biphenyl
Company B Biphenyl▲ Company C Biphenyl

40
2000-1056789101112050Retention time/min%B0105101090

150200250300

通液時間/h

ブリード試験条件
Column dimension: 50 x 2.1 mm
Mobile phase: A) 1% H3PO4 (pH 1.2)
B) Acetonitrile
Gradient programTime (min)100

耐久性試験条件
Column dimension: 50 x 2.1 mm
Mobile phase: 20 mM Sodium phosphate pH 8.0
Flow rate: 0.2 mL/min
Temperature: 40 ºC
179018103510

理論段数測定条件
Mobile phase: CH3CN/H2O=50/50
Flow rate: 0.2 mL/min
Temperature: 40 ºC
Detection: UV@250 nm
Sample: Butylbenzene

Flow rate: 0.3 mL/min
Temperature: 40 ºC
Detection: UV@250 nm

酸性条件の耐久性は1%リン酸水溶液とアセトニトリルのグラジエント溶離でのベースラインの変化を比較しました。Biphenyl基は酸性条件下ではシリカ表面から脱離し、有機溶媒の増加に伴い、カラム外に溶出します。ベースラインの変動は脱離したBiphenyl基を検出しており、SunShellは最も脱離が少なく、高い耐酸性を示しました。また、弱アルカリ性条件では充填剤のシリカが溶け出し、カラムイン側がへこむため、カラムの理論段数を比較しました。Biphenyl カラムは有機溶媒を含まない移動相でも保持時間の再現性が高く（6ページ参照）、高極性化合物の分離に有効なため、有機溶媒を含まないpH 8の条件で耐久性比較を行いました。SunShell は他社カラムと比較して、2倍以上の耐久性を示しました。
3メチル馬尿酸の異性体の分離比較
Methanol/buffer=25/75

Acetonitrile/buffer=13.5/86.5

p- m-

C18

α=1.039o-p- m-C30

α=1.022o-p- m-Phenyl-hexyl

α=1.033o-α=1.034o-p- m-

Phenyl-hexyl

α=1.029

o-

p- m-

C30

p- m-

C18

α=1.029

opm-

Biphenyl

α=1.047

o-p-Biphenylmo-Retention time/min

Retention time/min

2-Propanol/buffer=7/93
C18C30o-p- m-po-Phenyl-hexyl

Tetrahydrofuran/buffer-10/90
p- m-

C18

α=1.057

α=1.077

op-C30m-

α=1.070po-m-

α=1.080o-m-p-

Phenyl-hexyl

α=1.038m-

α=1.068o-Biphenylmo-

α=1.009

pp-

Biphenyl

α=1.066m-

α=1.050o-Retention time/min

Retention time/min

Column: SunShell C18 2.6 μm 150 x 4.6 mm
SunShell C30 2.6 μm 150 x 2.1 mm
SunShell Phenyl 2.6 μm 150 x 4.6 mm
SunShell Biphenyl 2.6 μm 150 x 4.6 mm
Mobile phase: Organic solvent/25 mM Phosphate buffer pH 3.0
Flow rate: 1.0 mL/min, 0.2 mL/min for only C30

Temperature: 40 oC
Detection: UV@230 nm
Sample: o-, m-, p-Methylhippuric acidorthometaOparaOOOHOHOHNHNHNHOOO
H 3C

CH3CH3メチル馬尿酸のオルト，メタおよびパラ異性体の分離を比較しました。固定相はC18, C30, Phenyl-hexylおよびBiphenylを用い，移動相中の有機溶媒にメタノール，アセトニトリル，2-プロパノールおよびテトラヒドロフランの４種類を用いました。有機溶媒によりメタ-とパラ-メチル馬尿酸の分離は大きく変わり，アセトニトリル，メタノール，2-プロパノール，テトラヒドロフランの順に分離は最善されました。アルコールを移動相の有機溶媒として用いた場合に，Biphenylは特に大きな保持を示し，さらにメタとパラの溶出順序が他の固定相とは逆転しました。これは標準試料の分離で求められた水素結合性が高いことが起因していると考えられます。アセトニトリルを使用した場合には，溶質と固定相のπ-π相互作用がアセトニトリルのCNの三重結合により弱められるため，Biphenylの特徴を十分発揮できないと考えられます。テトラヒドロフランを用いた場合には，固定相内部にテトラヒドロフランが入り込み固定相はテトラヒドロフランと混合した状態となるため，アルコールを用いた場合とは異なった分離挙動になったと考えられます。

4

Superficially porous particle

クレアチニン，マンデル酸，馬尿酸およびメチル馬尿酸の分離比較
MS検出器用移動相
Column: SunShell C18 2.6 μm 100 x 2.1 mm
SunShell C8 2.6 μm 100 x 2.1 mm
SunShell Phenyl 2.6 μm 100 x 2.1 mm
SunShell Biphenyl 2.6 μm 100 x 2.1 mm
Mobile phase: 2-Propanol/20 mM Ammonium acetate pH 6.8=3/97
Flow rate: 0.4 mL/min
Temperature: 40 oC
Detection: UV@230 nm

Sample: 1 = Creatinine,

2 = Mandelic aci 3 = Hippuric acid
O

OH

NH

HNOH

O

OH
NH

N
H3C

O

O

4 = o-Methylhippuric acid, 5 = p-Metylhippuric acid,
OO

OH

OH

NH

NH

O

O
CH3

H 3C

6 = m-Methylhippuric acid
O
OH
NH
O

CH3

イオンペアー試薬添加移動相
Column: SunShell C18 2.6 μm 150 x 4.6 mm
SunShell Phenyl 2.6 μm 150 x 4.6 mm
SunShell Biphenyl 2.6 μm 150 x 4.6 mm
Mobile phase: 2-Propanol:10 mM KH2PO4, 2 mMSodium 1-Octanesulfonate (pH 2.5; H3PO4)=10:90
Flow rate: 1.0 mL/min
Temperature: 40 oC
Detection: UV@210 nm
Sample: 1 = Creatinine,
2 = Mandelic aci
3 = Hippuric acid
4 = o-Methylhippuric acid,
5 = p-Metylhippuric acid,
6 = m-Methylhippuric acid

前頁のメチル馬尿酸の異性体の分離には，移動相にリン酸塩緩衝液を用いましたが，クレアチニンを含めたこの分離比較ではLC/MSに応用できる酢酸アンモニウム緩衝液移動相とイオンペアー試薬を添加した移動相を用いました。有機溶媒には2-プロパノールを用いました。両移動相条件でも，Biphenylは最も保持が大きく最も良好な分離を示しました。Biphenyl の特徴的な分離として，異性体のメタ-メチル馬尿酸とパラ-メチル馬尿酸の溶出順序がC18, C8およびPhenyl-hexylと逆になることが挙げられます。

5核酸塩基の分離比較A) Methanol/10 mM ammonium acetate
pH6.8=20/80B) 10 mM ammonium acetate pH6.8

3k6=0.68

223k5=0.586

1時間送液停止後の保持係数の変化: 15% まで減少

3C18R5,6=1.05422

3022343k5=0.37

6RP-AQUA

R5,6=2.5

8k6=4.47
54

1. NaNO264112

1時間送液停止後の保持係数の維持率: 99%

650411165065k6=4.53

4122. Cytosine
NH 2N01223022

3,4k5=0.76

6
5R5,6=3.64368NH

3. Uracil

1時間送液停止後の保持係数の維持率: 96%

BiphenylOONH

k5=5.00

NH65411O

4. Guanine
O012302Retention time/min

46Retention time/min

HNHN8H 2NN

N

5. Thymine
Column: SunShell C18 2.6 μm, 150 x 4.6 mm (pore size: 9 nm)

OH 3C

NH

SunShell RP-AQUA 2.6 μm, 150 x 4.6 mm (pore size: 16 nm)
SunShell Biphenyl 2.6 μm, 150 x 4.6 mm (pore size: 9 nm)
Mobile phase: A) Methanol/10 mM ammonium acetate pH 6.8=20/80
B) 10 mM ammonium acetate pH 6.8
Flow rate: 1.0 mL/min
Temperature: 40 oCNHO

6. Adenine
N H2NHNNNDetection: UV@250 nmSample: 1 = Sodium nitrite, 2 = Cytosine, 3 = Uracil, 4 = Guanine, 5 = Thymine, 6 = Adenine

核酸塩基類の分離をC18, RP-AQUAおよびBiphenylカラムで行いました。移動相としてメタノール/10 mM酢酸アンモニウムpH 6.8=20/80と10 mM酢酸アンモニウム水溶液の二種類を用いました。上記核酸塩基はメタノールが20%含まれる移動相でも分離できますが，保持時間は短くなります。この20%メタノールを含む移動相の比較では，5番ピークのチミンの保持係数(k5)はBiphenyl が 最も大きく，チミンとアデニンの5，6番ピークの分離度(R5,6)もBiphenylが最も大きくなりました。有機溶媒を含まない水系移動相を用いた場合には，Biphenylの最後に溶出するチミンの保持係数は5.00で，C18およびRP-AQUAの最後に溶出するアデニンはそれぞれ4.53と4.47となり，最後に溶出した成分についてはBiphenylが 最も大きな保持係数となりました。
BiphenylはRP-AQUAやC18tと試料の溶出順序が異なるなど，選択性が大きく異なっております。また，水系移動相を用いた場合の保持時時間の安定性は，RP-AQUAと同様にBiphenylでも高いことが確認されております。C18は送液を1時間停止した後，再度測定した保持係数は15%まで減少しており，再現性の低いことが確認されました。

★Biphenyl固定相は水素結合性が⾼く，極性化合物の保持に有効です。しかも100%水系移動相でも保持時間の再現性が⾼い分離が可能です。
6メチル⾺尿酸の異性体の分離（他社との⽐較）＊測定条件は4ページに記載のものと同じです

SunShell Biphenylの価格表 （コアシェルカラム）
内径 (mm)

1.0

2.1

3.0

USP category

4.6

長さ (mm)型 番

価 格型 番

価 格型 番

価 格型 番

価 格305075100150----------------------------------------------------

C86931
C86941
C86951
C86961
C86971¥67,000¥69,000¥75,000¥84,000¥89,000

C86331
C86341
C86351
C86361
C86371¥67,000¥69,000¥75,000¥84,000¥89,000

C86431
C86441
C86451
C86461
C86471¥67,000¥69,000¥75,000¥84,000¥89,000

SunShell Biphenyl,
2.6 μm

L11※内径0.5 mmから0.075 mmのミクロ・ナノカラムはお問い合わせ願います。
※上価格には消費税は含まれておりません。上記価格表は2020年11月現在の国内販売価格です。
※外観および仕様は改良のため，予告なく変更する場合もございますのでご了承願います。

Sunniest Biphenylの価格表 （全多孔性カラム）
内径 (mm)Sunniest Biphenyl,
5 μm

2.0

3.0

4.610USP
category20

長さ (mm)型 番

価 格型 番

価 格型 番

価 格型 番

価 格型 番価 格

50100
150250E83241
E83261
E83271
E83281¥60,000¥65,000¥67,000¥70,000

E83341
E83361
E83371
E83381¥60,000¥65,000¥67,000¥70,000

E83441
E83461
E83471
E83481¥60,000¥65,000¥67,000¥70,000---------------E83781---------------¥240,000---------------E83881---------------¥480,000

L11※上価格には消費税は含まれておりません。上記価格表は2020年11月現在の国内販売価格です。
※外観および仕様は改良のため，予告なく変更する場合もございますのでご了承願います。

開発・製造・発売元

2011

株式会社 クロマニックテクノロジーズ
代表取締役社長 長江 徳和
552-0001 大阪府大阪市港区波除6-3-1
TEL: 06-6581-0885 FAX: 06-6581-0890
E-mail: info@chromanik.co.jp
URL: http://chromanik.co.jp
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