（0029）生物学的評価に関する地盤環境の ISO について
○古川靖英 1・中森泰三 2・ISO/TC190 部会 1
1 土壌環境センター・2 横浜国立大学大学院
1. はじめに
国際標準化機構 ISO (International Organization for Standardization)の概要を図 1 に示す。各 TC は幾つかの小委員会（Sub Committee）を有しており、各 TC にはさらに作業部会（Working Group）が設置されている。TC1 は“ネジ”の規格に関わる技術委員会であり、1947 年に創設された。一方、最新ナンバーの技術委員会である
TC293 は給鉱機（各種の材料を送給する機械）の規格に関わる技術委員会であり、2014 年に設立されている。
ISO 技術委員会への日本からの参加は自動車や鉄鋼などの産業界を中心として多岐にわたっており、様々な分野で活発な提案や JIS 規格との整合性調整がなされている 1）、2）。
第 190 技術委員会（Technical Committee 190, ISO/TC 190）は、地盤環境に関わる国際標準の策定・改定を行っており、日本からは約 40 名のエキスパートが登録されている。この中の第 4 小委員会（Sub Committee 4“Biological methods”, SC4）へは、各国から計約 90 名のメンバー（うち、日本からは 7 名）が登録され、生物学的手法の標準化に取り組んでいる。本報告では、SC 4 において現在進められている標準化作業の概要を紹介すると共に、今後の課題を記した。
技術委員会 Technical Committee
TC1・

Screw thread (ネジ)
省略

・
TC190
・
TC293

Soil quality (地盤環境)
省略
Feed machinery (給鉱機)TC190内の小委員会

Sub Committee

SC1

Terminology

SC2

Sampling

WG1

Biodegradability（休止中）

SC3

Chemical methods

WG2

Effects on soil fauna

SC4Biological methods

WG3

Effects on soil flora

SC5

Physical methods

WG4Effects on soil micro-organisms

SC7

Soil and site assessment

SC4内の作業部会 Working Group

図 1 国際標準化機構 ISO の概要と TC190/SC4 小委員会の構成
2. SC4 における審議状況
本委員会では「土壌環境分野の生物学的手法の標準化」を目的とし、23 ヶ国が積極的に参加して議論を行っている。特に新たな規制の策定に積極的な国はドイツ、フランスであり、SC4 の議長国もフランスである。SC4としては、発足以降、37 の Standard を公表しており、2013 年の総会以降でも 3 つの規格を公表している。表-1に国際標準の段階ごとに、現在の SC4 で主に審議されているドラフトを示す。また、表-1 とは別に、過去に策定された国際標準を見なおす作業である定期見直し（Systematic review 投票）という作業があり、ここでは国際標準は 5 年ごと、技術仕様は 3 年ごとに見直しを図っている。SC4 で現在定期見直しの議論がされている規格を以下に列記する。
・ISO 14239 – Soil quality – Laboratory incubation systems for measuring the mineralization of organic
chemicals in soil under aerobic conditions
・ISO 16072 – Soil quality – Laboratory methods for determination of microbial soil respiration
・ISO 15952 – Soil quality – Effects of pollutants on juvenile land snails (Helicidae) – Determination of theeffects on growth by soil contamination
・ISO 23611-1 – Soil quality – Sampling of soil invertebrates – Part 1: Hand-sorting and formalin extraction ofearthworm
・ISO 23753-1 – Soil quality – Determination of dehydrogenase activity in soil – Part 1: Method using
triphenyltetrazolium chloride
Introduction of ISO/TC190 Soil Quality SC4” Biological method”
Yasuhide Furukawa1,, Taizo Nakamori2, and ISO/TC190 Study Group1(1GEPC, 2Yokohama National University,)
連絡先：〒102-0083 東京都千代田区麹町 4-2 （一社）土壌環境センター
TEL 03-5215-5955 FAX 03-5215-5954 E-mail info@gepc.or.jp

表-1 TC190/SC4内で検討中の規格（案）名と概要
段階と規格番号
ISO規格化済ISO 11267
ISO規格化済ISO 16387
ISO規格化済ISO 29200
FDIS ス テ ー ジ
ISO/FDIS 11268-3

FDIS ス テ ー ジ
ISO/FDIS 17601
DIS ス テ ー ジ
ISO/DIS 18311
DIS ス テ ー ジ
ISO/DIS 18187
DIS ス テ ー ジ
ISO/DIS 18763
NWIP ス テ ー ジ
ISO/NP 20130
NWIPステージ
ISO/NP 20131-1

NWIP ス テ ー ジ
ISO/NP 20131-2

ドラフト名（原文）概要（和訳）

Soil quality–Inhibition of reproduction ofCollembola (Folsomia candida) by soil
pollutants
Soil quality–Effects of pollutants on
Enchytraeidae (Enchytraeus sp.) –Determination of effects on reproduction
Soil quality－Assessment of genotoxic effects
on higher plants - Vicia faba micronucleus test
Soil quality – Effects of pollutants onearthworms (Eisenia fetida) – Part 3: Guidanceon the determination of effects in fieldsituations
Soil quality – Method to quantify theabundance of microbial communities from soil
DNA extracts
Soil quality – Method for testing effects of soil
contaminants on the feeding activity of soil
dwelling organisms – Bait-lamina test
Soil quality – Quality of solid samples – Solidcontact test using the dehydrogenase activity of
Arthrobacter globiformis
Soil quality – Determination of the effects ofpollutants on germination and early growth ofhigher plants
Soil quality – Measurement of enzyme activity
patterns in soil samples using colorimetricsubstrates in micro-well plates
Soil quality – Easy laboratory assessments ofsoil denitrification, a process source of N2Oemissions – Part 1: Soil denitrifying enzymes
activities
Soil quality – Easy laboratory assessments ofsoil denitrification, a process source of N2Oemissions – Part 2: Assessment of the capacityof soils to reduce N2O

土 壌 汚 染 物 質 に よ る ト ビ ム シ （ Folsomiacandida）の繁殖阻害
汚染物質がヒメミミズ類に与える影響
繁殖影響評価高等植物に対する遺伝毒性の評価 Vicia
faba小核試験
汚染物質がミミズ（Eisenia fetida）に与える影響 野外における影響評価

土壌から直接抽出されたDNAのリアルタイ
ムPCRによる微生物群集の定量
土壌汚染物質が土壌生物の摂食活動に与える影響の評価 ベイト・ラミナ試験
Anthrobacter globiformisを用いたデヒドロゲ
ナーゼ活性を用いた個体接触試験
汚染物質が高等植物の発芽と初期生長に与える影響の評価
マイクロプレートでの比色基質法を用いた土壌試料の酵素活性パターンの計測
簡易の実験室での土壌の脱窒能評価手法
土壌脱窒酵素活性

簡易の実験室での土壌の脱窒能評価手法
亜酸化窒素削減の土壌キャパシティ

3. SC4 WG4について
土壌の質は、その土壌に生息している生物の特徴、あるいは、土壌に実験的に投入された生物の反応から評価される側面を持っている。本小委員会では従来から、生物相調査のためのサンプリング方法や生物の生存、生長、繁殖といった数量（個体数・バイオマス）に関わる項目への影響評価試験方法の規格化が審議されてきが、近年では以下の点が新たに議論されるようになってきている。
・機能の種類や機能する程度を指標とした評価手法の提案
例として、SC4 WG4の「ISO/DIS 18311」が挙げられる。本規格は土壌小型節足動物（主に植物遺体や微生物を摂食する）の摂食活動の程度を評価する手法に関するものである。有機物の消費速度や微生物により消費される速さに関係している。
・既存の規格における適用対象地域の拡大
既存の規格は主に温帯地域において開発された手法に基づいており、亜寒帯や熱帯地域における評価は考慮されていない。適用対象とする地域が異なれば、扱う生物種やその生物の飼育条件も異なり、それらの違いを考慮する必要がある。国際規格としては全世界を対象にしたものが望ましく、亜寒帯および熱帯地域における評価にも利用可能な手法の文献調査（あるいは開発）を行うことで合意した。
・試験生物種の遺伝的特徴の記述
試験方法が国際化され、各国の研究室で同じ生物種が使われるようになると、その生物種の同定の確かさや遺伝的変異が問題視されるようになってきた。そこで、各国の研究室で利用されているミミズの遺伝子型に基づく種同定がおこなわれた。この結果、いくつかの研究室では誤同定されていたこと、同じ種でも大きく3つの系統に分けられることがわかっている。この国際比較試験の結果をふまえて、既存の規格に試験生物種の遺伝的特徴の記述が加えられる予定である。
4. ベルリン総会での主な議論
2014年10月20日～24日にドイツ ベルリンにて、TC190の全体総会が行われた。SC4に関係する議論の主体はISO/DIS17601記載のリアルタイムPCRや今後規格化の可能性のある統一指標についてであった。定量的PCRに関わるリングテストについて、今回、日本は参加しなかったが、リアルタイムPCRを用いた計測が可能な研究機関は国内に多数存在することから、今後は積極的に参加していくことが望ましいであろう。
また、ベルリン総会中には、2013年度から引き続き議論されている統一指標（例：脱窒や硝化、窒素除去、生産性（植物）、酵素活性、CO2活性など）について、SC4 WG4では今後も継続して、注意深く、議論を進めていくことに合意している。ここでは、個別の指標の議論ではなく、より高所から全体を評価できる指標を選ぶべきであること、また、非常に挑戦的であり、例であっても個別の指標名称を出すべきではなく、まちがった指標の名称を出すと、Biologicalの分野自体が信用できないものと扱われかねないので注意が必要であるといった議論がなされている。この一方で、統一指標を作成する目的は、生態系評価や生物多様性評価にむけた取り組みであり、ドイツ政府も興味を持っているといったコメントが出されている。
5. おわりに
国内のJIS規格は、1995年に発効された「貿易の技術的障害に関する協定（WTO/TBT協定）」に基づき、基本的にISO国際規格に整合させる、あるいはその努力をする必要があるが、徹底されるまでには至っていない。
そこで、国内で使用されているJIS規格や日本として必要な規格を、逆にISO規格に採用させる、あるいは部分的に整合させる努力が重要となってくる。現在、土壌環境センター ISO/TC 190 部会では、国内の審議団体である地盤工学会と共同で、ISO/TC 190 で行われている土壌汚染に関わる規格の情報を収集すると共に、一部の方法の国際標準化（ISO 化）を目指しており、今後、国内の関係各所のエキスパート登録や研究機関の連携をはじめとした諸々の活動を推進していく予定である。
参考文献
1) 平田桂・王寧・松村光夫・石川洋二・浅田素之・ISO/TC190 部会（2014）：ISO/TC190 における土壌中化学物質の分析法の制定現状について，第 20 回地下水・土壌汚染とその防止対策に関する研究集会講演集，pp.425～427.
2) 肴倉宏史・古川靖英・保高徹生・中島誠・川端淳一・ISO/TC190 部会（2014）：サイト評価に関する地盤環
境の ISO について，第 20 回地下水・土壌汚染とその防止対策に関する研究集会講演集，pp.156～158.