Ⓒ日本臨床微生物学会 2012146［原著］

ヒト皮膚常在細菌の細菌数測定法に関する臨床研究
蓮沼智子・中谷比呂志・高附真樹子・多賀政晴・茂貫洋子・青木綾子・金
北里大学臨床薬理研究所

徹雄・飯島肇

バイオイアトリックセンター（平成 24 年 1 月 13 日受付，平成 24 年 5 月 18 日受理）

米国食品医薬品局（FDA: Food and Drug Administration）によって開発されたスパイラル・プレーティング法は，食品分野で広く用いられている方法であるものの，医薬品分野では十分に活用されていない。また，スパイラル・プレーティング法では試料 1 ml 当たり約 500 CFU以下の細菌数を測定することは困難であり，幅広い細菌数の測定範囲が必要な生体消毒薬の有効性評価等の用途では，一部寒天平板表面塗抹法もしくは寒天平板混釈法との併用が必要である。そこで今回，スパイラルプレーターを用いる寒天平板表面塗抹法に，細菌数が少ない場合でも測定が可能となるようコンラージ棒を用いる寒天平板表面塗抹法を併用する方法（方法1）と，従来法である寒天平板混釈法（方法 2）により，日本人の鼠径部から採取した細菌サンプルを培養し，方法 1 で細菌数を測定することが可能かどうか確認した（目的 1 の試験）。さらに，方法 1 と方法 2 の操作に要する時間を比較することにより，方法 1 の利便性を確認した。その結果，方法 1 は方法 2 と同様に，サンプル中の細菌数を精度良く測定で（目的 2 の試験）きる可能性が示された。また，方法 1 は方法 2 の作業を簡易化，迅速化および省力化することが可能であった。
Key words: 皮膚常在細菌，細菌数測定，スパイラルプレーター

序は試料 1 ml 当たり約 500 CFU 以下の細菌数を測定す

文

食品や医薬品分野で行われる微生物検査のうち，細ることは困難 2） であり，幅広い細菌数の測定範囲が菌数の測定には寒天平板混釈法や寒天平板表面塗抹法

必要な生体消毒薬の有効性評価等の用途では，一部寒が従来から用いられてきた。しかし，これらの方法

天平板表面塗抹法もしくは寒天平板混釈法との併用がは，多数の希釈菌液の調製を要するなど作業が煩雑で必要である。米国では，コンラージ棒を用いる寒天平あるため，作業を簡易化，迅速化および省力化するこ板表面塗抹法およびスパイラルプレーターを用いる寒とを目的として，スパイラルプレーターを用いてシス天平板表面塗抹法を併用して，ヒトの手指から採取しテム化された細菌数測定法（スパイラル・プレーティ

た細菌サンプルを培養し，サンプル中の細菌数を測定ング法）が米国食品医薬品局（FDA: Food and Drugした報告がある 3）。

1）

Administration）によって開発された 。このスパイラル・プレーティング法は，本邦では，食品衛生検査指針に収載されており 2），食品分野で広く用いられている方法であるものの，医薬品分野では十分に活用されていない。また，スパイラル・プレーティング法でそこで今回，スパイラルプレーターを用いる寒天平
板表面塗抹法に，細菌数が少ない場合でも測定が可能となるようコンラージ棒を用いる寒天平板表面塗抹法を併用する方法（方法 1）と，従来法である寒天平板混釈法（方法 2）により，日本人の鼠径部（被験部位）から採取した細菌サンプルを培養し，方法 1 で細著者連絡先：（〒108–8642）東京都港区白金 5–9–1
北里大学臨床薬理研究所 バイオイアトリックセンター
飯島 肇

TEL: 03–5791–6347
FAX: 03–3440–5469
E-mail: iijima-h@insti.kitasato-u.ac.jp

42 日本臨床微生物学雑誌 Vol. 22 No. 2 2012.

菌数を測定することが可能かどうか確認した（目的 1の試験）。さらに，方法 1 と方法 2 の操作に要する時間を比較することにより，方法 1 の利便性を確認した（目的 2 の試験）。

147

ヒト皮膚常在細菌の細菌数測定法

験者に対して十分に研究内容を説明し，研究への参加

材料と方法

1. 目的 1 の試験
本研究は，オープン試験（介入を伴う研究）として，当施設において 2011 年 7 月〜8 月に実施した。実施に先立って，北里大学白金治験審査委員会の承認を得るとともに，ヘルシンキ宣言に基づく倫理的原則，臨床研究に関する倫理指針（平成 20 年 7 月 31 日付厚，関係法令および臨床研究実生労働省告示第 415 号）施計画書を遵守して実施した。
1.1 対象同意取得時の年齢が 20 歳以上の健康成人で，被験部位が本研究に適した正常な皮膚の状態にある者を対象とした。ただし，細菌サンプル採取日から 2 週間前までにプールに入泳または公衆浴場に入浴した者，細菌サンプル採取日の前日に入浴（シャワーも含む）した者，細菌サンプル採取日から 1 週間前までに抗菌剤および抗生物質，ステロイド剤，または被験部位の皮膚常在細菌叢に影響を及ぼす薬剤（一般用医薬品を含む）を使用した者，その他研究責任医師または研究分担医師が不適格と判断した者は対象から除外した。
目標被験者数は 5 名とした。
1.2 同意取得
研究責任医師または研究分担医師は，対象となる被について，被験者本人の自由意思による同意を文書にて取得した。

1.3 研究スケジュール
本研究のスケジュールを Table 1 に示した。被験者の同意取得後，研究責任医師または研究分担医師による診察で問題ないと判断した被験者について，被験部位にテンプレートおよびサージカルマーカーを用いて細菌サンプル採取区画をマーキングした。1 被験者当たりの細菌サンプル採取区画は，右鼠径部の No. 1〜5（合計 5 区画）とし，1 区画当たりの大きさは 2.5 cm×2.5 cm とした。細菌サンプルは，これら 5 区画のそれぞれから採取した。被験部位および細菌サンプル採取区画のマーキングの位置を Fig. 1 に示した。
被験部位のマーキングが終了した被験者はいったん帰宅させ，試験日前日の入浴（シャワーを含む）を禁止したうえで来所させた。その後，選択基準を満たし，かつ除外基準に抵触していないことを確認したうえで本研究に登録した。
登録した被験者に対して診察を行い，研究責任医師または研究分担医師が問題ないと判断した被験者から細菌サンプルを採取し，計数培地で培養後，細菌数［皮膚 1 cm2 当たりの菌数（Log10 CFU/cm2）］を算出

Table 1. Outline of the study schedule
Informed consent day
Institution visit

Sampling day●●

Explanation and obtaining the written
informed consent●

Confirmation of subject characteristics●

Confirmation of inclusion andexclusion criteria●●

Subject registration●

Marking the sampling sites●

Sampling●

Washing the test site●

Leaving the institution●

Evaluation of symptoms and signs

●

●

●

●

Evaluation of skin findings（test site）

●

●

●

●

●

●

Identification of adverse events

日本臨床微生物学雑誌 Vol. 22

No. 2 2012. 43

148

蓮沼智子・中谷比呂志・高附真樹子・多賀政晴・茂貫洋子・青木綾子・金徹雄・飯島肇

菌サンプルの原液とした。
〈サンプリング液の組成〉−ポリソルベート 80（松本油脂製薬）：100.0 g−チ オ 硫 酸 ナ ト リ ウ ム 水 和 物（和 光 純 薬 工 業）：

5.00 g−リン酸二水素カリウム（和光純薬工業）：0.4000 g−Triton X-100（和光純薬工業）：1.00 g−無水リン酸一水素ナトリウム（和光純薬工業）：

10.1 g−大豆レシチン（日清オイリオグループ）：20.0 g−Polyoxyethylene（20）cetyl ether（日 本 ケ ミ カ ルズ）：50.0 g−0.1 N 水酸化ナトリウム（和光純薬工業の水酸化ナトリウムから調製）：適量（pH 7.8〜7.9 に調整）
大塚蒸留水（大塚製薬工場）にて全量 1,000 ml に調製1.5 細菌サンプルの処理および培養方法
Fig. 1. Test site and sampling areas
Test site was located in the right groin. Fivesampling areas（Nos. 1 to 5）were marked on
the test site of each subject with a template andsurgical marker. Bacterial samples were collected from each of the sampling areas. This
figure was derived from the figure in theASTM Internationalʼs official compendium（E1173–01）.6）

した。細菌サンプル採取後，再度診察を行い，問題がないことを確認して試験を終了した。

1.4 細菌サンプル採取方法
FDA の Over-the-Counter 局所ヘルスケア消毒薬製品の暫定的最終モノグラフ（TFM: Topical Antimicrobial Drug Products for Over-the-Counter Human Use;
Tentative Final Monograph for Health-Care Antiseptic
Drug Products, 21 CFR Part 333）4） を参考にしたカップスクラブ法 5） により細菌サンプルを採取した。内径 の 直 径 が 2.1 cm， 高 さ が 4.5 cm の 滅 菌 ス ク ラ ブ
カップをサンプル採取区画の皮膚にしっかりと押しつけて固定し，TFM および米国材料試験協会（ASTMInternational）の公定書 6） に準拠して無菌調製したサンプリング液（組成は以下のとおり）2.5 ml をスクラブカップ内に注入した。その後，滅菌ラバーポリスマンを用いて，スクラブカップ内の皮膚を適度な圧力をかけながら 1 分間擦った。滅菌スポイトでスクラブカップ内のサンプリング液を回収し，再度スクラブカップ内へのサンプリング液の注入から回収までの手順を行い，先に回収したサンプリング液と混合して細44 日本臨床微生物学雑誌 Vol. 22 No. 2 2012.

（1） 希釈菌液の調製
細菌サンプルの原液に，TFM および ASTM Interna-tional の公定書に準拠して無菌調製した希釈液（組成は以下のとおり）を加えて 2 倍希釈菌液を調製し，さらに方法 1 で用いる 100 倍希釈菌液および方法 2 で用いる 20〜200,000 倍までの 10 倍希釈菌液を調製した。
〈希釈液の組成〉−ポリソルベート 80：100.0 g−チオ硫酸ナトリウム水和物：5.00 g−リン酸緩衝液ストック溶液（pH 7.2）［リン酸二水素カリウム：34.0 g, 1 N 水酸化ナトリウム溶液（和光純薬工業の水酸化ナトリウムから調製）：適量，大塚蒸留水にて全量 1,000 ml に調製］：1.25ml−大豆レシチン：20.0 g−Polyoxyethylene（20）cetyl ether：50.0 g
大塚蒸留水にて全量 1,000 ml に調製（2） 計数培地の調製
直径 90 および 150 mm のシャーレに，TFM およびASTM International の公定書に準拠して調製したトリプティックソイ寒天培地（組成は以下のとおり）を加熱溶解して流し込み，冷却固化させたものを方法 1 で用いる計数培地とした。また，加熱溶解したトリプティックソイ寒天培地を固化しないよう保温したものを方法 2 で用いる計数培地とした。
〈トリプティックソイ寒天培地の組成〉−Tryptic soy agar（日本ベクトン・ディッキンソン）：40.0 g−不活化剤［ポリソルベート 80：100.0 g，大豆レ
シチン：11.67 g, チオ硫酸ナトリウム水和物：5.00

149

ヒト皮膚常在細菌の細菌数測定法

g, Tamol NN8906（BASF ジャパン）：10.0 g，大塚

1.8 統計解析用アプリケーションソフトウェア：100 ml
蒸留水：全量 1,000 ml に調製］

統計解析には，以下のアプリケーションソフトウェ−大塚蒸留水：900 ml

アを用いた。

（3） 細菌サンプルの塗抹および培養（方法 1）

リリース 9.2TS レベル
2M3（SAS Institute Japan 株式会社）−Microsoft Office Professional Edition 2007（マイクロソフト株式会社）
2. 目的 2 の試験
本試験は，当施設において 2011 年 7 月〜8 月に実施した。当施設において，臨床検査業務に従事する職員を操作時間の測定対象者（測定対象者）として 6 名指名した。本試験は，目的 1 の試験における細菌サンプルの原液を生理食塩液に置き換えて実施し，方法 1 では生理食塩液の 50 倍希釈液を調製し，方法 2 では生理食塩液の 10〜100,000 倍までの 10 倍希釈溶液を調製した。その他の材料および方法は目的 1 の試験と同様とした。
2.1 方法 1 および方法 2 の操作時間の測定（1） 測定対象者は，方法 1 および方法 2 における試験液の調製開始から塗抹または播種終了までの操作を，無作為に割付けた割付表に従ってそれぞれ 1 回ずつ実施した。なお，方法 1は，コンラージ棒を用いる方法，スパイラルプレーターを用いる方法の順に操作を実施した。
（2） 方法 1 および方法 2 について，試験液の調製開始から塗抹または播種終了までの操作時間を測定した。なお，方法 1 の操作時間は，コンラージ棒を用いる寒天平板表面塗抹法とスパイラルプレーターを用いる寒天平板表面塗抹法の各操作時間を合計した時間とした。
2.2 評価項目および評価方法評価項目は，試験液の調製開始から塗抹または播種終了までの操作時間とした。方法 1 の利便性は，方法1 および方法 2 の操作時間の平均値を分散分析により比較することで評価した。

ディスポコンラージ棒（株式会社アテクト）を用いて，計数培地（直径 150 mm のシャーレ）2 枚に細菌サンプルの 2 倍希釈菌液 1 ml ずつを，およそ 15〜30秒間かけて計数培地全面にまんべんなく塗抹した。
］をスパイラルプレーター［EDDY JET（IUL, S.A.）用いて，計数培地（直径 90 mm のシャーレ）2 枚に細菌サンプルの 2 倍希釈菌液を 50 μl ずつ塗抹した。同様に，新たな計数培地（直径 90 mm のシャーレ）2 枚に 100 倍希釈菌液を 50 μl ずつ塗抹した。
細菌サンプルを塗抹した計数培地は，35°C で 2 日間培養した。
（4） 細菌サンプルの播種および培養（方法 2）
細 菌 サ ン プ ル の 2〜200,000 倍 希 釈 菌 液 を 直 径 90mm のシャーレ 2 枚にそれぞれ 1 ml ずつ分注した後，恒温槽で保温したトリプティックソイ寒天培地を 15ml ずつ速やかに分注し混和した。
細菌サンプルを播種した計数培地は，室温で固化させた後，35°C で 2 日間培養した。
1.6 コロニー数の計数および細菌数の算出方法
方法 1 および方法 2 により培養した計数培地を測定検体として用いた。各希釈倍率から 2 検体ずつ発生する測定検体のコロニー数を目視またはコロニーカウン］で計数し，2 検体の平ター［ProtoCOL2（IUL, S.A.）
均コロニー数が 30.0〜300.0 となる希釈倍率の測定検体を優先的に採用して生菌数（CFU/ml）を求めた。さら に 次 式 か ら 細 菌 数［皮 膚 1 cm2 当 た り の 菌 数］を算出した。
（Log10 CFU/cm2）］
細菌数［皮膚 1 cm2 当たりの菌数（Log10 CFU/cm2）
×＝Log10［採用した測定検体中の生菌数（CFU/ml）
5.0 ml（回収した細菌サンプルの液量）÷細菌サンプ］
ル採取面積（3.46 cm2）
1.7 評価項目および評価方法（1） 細菌数測定の可否
評価項目は，方法 1 および方法 2 により得られた細菌サンプル中の細菌数とした。細菌サンプル中の細菌数の散布図を作成するとともに，較正直線 7, 8）を推測し，方法 1 による細菌数の測定が可能かどうかを評価した。
（2） 安全性
評価項目は，自覚症状・他覚所見，皮膚所見とした。発現した有害事象の内容を踏まえて，医学的見地から安全性を評価することとした。

−Windows 版 SAS システム

結果

1. 目的 1 の試験
1.1 解析対象
本研究に登録された被験者は 5 名であった。すべての被験者の細菌サンプル採取区画から合計 25 の細菌サンプルが得られた。被験者背景を Table 2 に示した。
（1） 細菌数測定の可否
細菌サンプル採取区画を解析単位とし，細菌サンプ
ルの採取を行った 5 名の被験者の細菌サンプル採取区
日本臨床微生物学雑誌 Vol. 22

No. 2 2012. 45

蓮沼智子・中谷比呂志・高附真樹子・多賀政晴・茂貫洋子・青木綾子・金150

徹雄・飯島肇

Table 2. Subject demographics
Subject
numberGenderAge(yrs)

Height(cm)Weight(kg)

K-01
K-02
K-03
K-04
K-05

MaleMale
Male
Male
Male2121252236168.8
166.6
168.5
171.8
166.9

54.8
58.4
58.9
55.3
71.7

Table 3. Descriptive statistics of bacterial countDescriptive statistics
Number of bacterial samples
MeanStandard deviation
Maximum
Upper quartile
MedianLower quartile
Minimum

Method 1 Method 2
25
4.411
0.988
6.2
5.2
4.34
3.67
2.79

25
4.398
0.991
6.26
4.65
4.3
3.73
2.55

Unit of the calculated values is “Log CFU” except thenumber of bacterial samples.
画（総数 25）を主解析対象集団とした。
（2） 安全性
被験者を解析単位とし，細菌サンプルの採取を行った 5 名の被験者を安全性の解析対象集団とした。

1.2 細菌数の測定結果
細菌数［皮膚 1 cm2 当たりの菌数（Log10 CFU/cm2），図表中では「Log CFU」と表記］の記述統計量を Table 3 に示した。方法 1 および方法 2 の細菌数の平均値±標準偏差は，それぞれ 4.411±0.988, 4.398±0.991 であった。
細菌数の散布図，推測した較正直線および残差プロットを Fig. 2 に示した。また，較正式の推定値をTable 4 に 示 し た。 較 正 式 の 切 片 は−0.029, 傾 き は1.004 と推定し，これらのノンパラメトリック bootstrap による 95％信頼区間に切片 0，傾き 1 を含む結果を得た。残差プロットにおいて，極端な外れ値を認めず，等分散性および独立性の仮定に問題はなかった。
2. 目的 2 の試験
2.1 解析対象
方法 1 および方法 2 について，測定対象者 6 名分の操作時間が得られ解析対象となった。
2.2 操作時間の測定結果
操作時間の記述統計量を Table 5 に示した。操作時間（分） の 平 均 値± 標 準 偏 差 は， 方 法 1 で 14.861±
46 日本臨床微生物学雑誌 Vol. 22 No. 2 2012.

Fig. 2. Scatter diagram of bacterial count, calibrationline, and residual plots
Upper figure,（A）, shows the residual plots
and the lower figure,（B）, shows the scatter diagram and calibration line. The method 1 isthe combination method of the agar plate
method using a bacterial spreader and that using a spiral plater and the method 2 is the pourplate method.

Table 4. Estimates of calibration line
ItemsUnbiased variance ratio
Intercept

Slope

Point estimate

Estimate values
0.993−0.02995% Upper confidence

0.046

95% Lower confidence−0.092

Point estimate

1.004

95% Upper confidence

1.012

95% Lower confidence

0.994

151

ヒト皮膚常在細菌の細菌数測定法

3.068, 方法 2 で 21.051±2.305 となった。
操作時間を応答変数，群（方法 1→2 の順に操作した群，方法 2→1 の順に操作した群）の違い，時期（1番目の操作，2 番目の操作），方法（方法 1，方法 2）を因子として分散分析を行った。Table 6 に示した分散分析の結果，方法の違いは操作時間に有意な影響を。
与えていることが示唆された（p＝0.004）

かなりの時間を要することになる。また，従来法では検査員の個人差による測定値のばらつきがしばしば認められるとの報告 11）もあり，コンタミネーションや誤操作が生じる可能性も懸念される。
本研究で得られた細菌数（Log10 CFU/cm2）は，方法1 で最小 2.790，最大 6.200，平均値は 4.411 であった。
ヒトの皮膚常在細菌の細菌数（Log10 CFU/cm2）は，個体により，また身体各所により異なるが，通常 3〜考4 程度で，多いところで 6 との報告 12）があり，本研究の結果はこの報告と一致する。また，コンラージ棒を用いる寒天平板表面塗抹法にスパイラルプレーターを用いる寒天平板表面塗抹法を併用した方法 1 および従来法である寒天平板混釈法の方法 2 により得られた細菌数から，切片が−0.029, 傾きが 1.004 の較正直線を推測した。較正直線の切片および傾きの 95％信頼区
間には，理想である切片 0, 傾き 1 が含まれていたことから，ヒトの皮膚から採取した細菌サンプル中の細菌数測定に際し，方法 1 は方法 2 と同様に精度良く測定できる可能性が示された。なお，本研究では，細菌数の少ない場合にスパイラル・プレーティング法による測定が困難であることを考慮し，コンラージ棒を用いる寒天平板表面塗抹法を併用することで幅広い細菌数の測定が可能となるよう工夫した。結果的に得られた細菌数は最小 2.790 と比較的多かったが，細菌数が少ない場合については，コンラージ棒を用いる寒天平板表面塗抹法による測定結果を採用することで方法 2 と同様に測定可能と考える。
一方，寒天平板塗抹法にスパイラルプレーターを用いることで，細菌サンプルの希釈操作を大幅に削減することができ，さらに寒天平板への塗抹操作が自動化されていることにより，迅速かつ容易に塗抹操作を行うことが可能であった。このような利点は，正確な細菌数測定だけでなく，シャーレ，試験管，計数培地等の使用量の節約やその準備と実施のための時間の短縮

察

日本薬局方の微生物限度試験法9）では，生菌数試

験の方法の一つとして，本研究で実施した寒天平板法（寒天平板混釈法，寒天平板表面塗抹法）が規定されているが，本試験方法との同等性が示されている場合は，自動化法を含む別の微生物学的方法を用いてもよいとされており，日本薬局方解説書 10）では，自動化法の例としてスパイラル・プレーティング法が紹介されている。
コンラージ棒を用いる寒天平板表面塗抹法や寒天平板混釈法では，ヒトの皮膚常在細菌数を測定するためにかなりの希釈操作が必要である。そのため，これらの方法のみで細菌数を測定しようとすると，測定検体数が多い場合に作業量が膨大となり煩雑であるばかり
でなく，計数培地に菌液を塗抹または播種するまでにTable 5. Descriptive statistics of measurement time
Descriptive statistics

Method 1

Method 2

Number of subjects
MeanStandard deviation
Maximum
Minimum

614.861
3.068
19.6
11.324621.0512.305
24.80317.985

Unit of the calculated values is “minutes” except thenumber of subjects.

Table 6. Analysis of variance table

First
SecondFactors

Sum ofsquares

Degree offreedoms

Mean sum ofsquares

F Values

P Values

Group

21.69

1

21.69

2.28

0.206

First error

38.11

49.53

2.79

0.172

Point0.17

10.17

0.05

0.832

Method114.931114.93

33.68

0.004

Second error

13.65

43.41

Total

188.5611日本臨床微生物学雑誌 Vol. 22

No. 2 2012. 47

152

蓮沼智子・中谷比呂志・高附真樹子・多賀政晴・茂貫洋子・青木綾子・金にもつながる。さらにバイオセーフティの観点からは，感染性微生物の培養時における感染リスクの低減につながる可能性もある。なお，スパイラルプレー
ターの経済効果は，わが国でスパイラル・プレーティ
ング法を利用している 5 カ所の企業を対象にした調査において，年間検査費用を 108〜593 万円削減することが可能であったとの報告 13）がある。
皮膚常在細菌の細菌数測定は，新規生体消毒薬の有効性評価の指標としての利用が可能である。現在，米国では FDA の TFM, ヨーロッパでは欧州標準化委員会（CEN: European Committee for Standardization）の欧州連合欧州規格（EU-EN: European Union-EuropeanNorm）において，新規生体消毒薬の有効性評価に関する公的かつ標準的な評価方法が策定されており，新規生体消毒薬の製造販売に伴う規制当局の許認可条件となっている。特に TFM では，手術前における殺菌消毒薬の有効性について，当該消毒薬を健康成人の皮膚に適用した際の皮膚常在細菌の細菌数減少量により判定することとしている。一方，わが国では，新規生体消毒薬の有効性評価に関する公的かつ標準的な評価方法は策定されていないものの，日本環境感染学会から発出された「手指衛生における生体消毒薬の有効性14）」のように，生体消毒薬の評価方法評価指針（案）の標準化に向けた動きがある。指針（案）では，これら標準的試験法に基づく評価資料が，臨床現場での生体消毒薬使用に際しても，信頼性の高い情報として活用され，医療関連感染症の予防ならびに制圧に大いに役立っているとの見解が示されており，わが国においても将来的に生体消毒薬の評価方法が標準化される可能性がある。われわれは，すでに TFM に基づいた術野殺菌消毒薬の有効性評価法を日本人で評価しており，日本人でも皮膚常在細菌の細菌数減少量による評価は可能と考えている 15）。このような背景を踏まえると，より簡易化，迅速化および省力化された皮膚常在細菌の細菌数測定法の検討は今後も必要であり，検討した測定法によるデータの蓄積は，新規生体消毒薬の開発において有益なエビデンスの構築につながると考える。
利益相反
本研究は，株式会社大塚製薬工場からの委託および資金提供を受けて実施した。
引用文献
1） J. E. Gilchrist, J. E. Campbell, C. B. Donnelly, et al.
Spiral plate method for bacterial determination.

48 日本臨床微生物学雑誌 Vol. 22 No. 2 2012.

徹雄・飯島肇

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ヒト皮膚常在細菌の細菌数測定法

A Clinical Research on the Bacterial Count Measurement for theResident Bacterial Flora of Human Skin
Tomoko Hasunuma, Hiroshi Nakatani, Makiko Takatsuki, Masaharu Taga,
Yoko Monuki, Ayako Aoki, Tetsuo Kin, Hajime Iijima
Bio-Iatoric Center, Research Center for Clinical Pharmacology, Kitasato UniversityWe confirmed that the resident bacterial count of the human normal skin sample can be measured by a combination
method of the agar plate method using a bacterial spreader and that using a spiral plater.

日本臨床微生物学雑誌 Vol. 22

No. 2 2012. 49