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ホテルニュー寸ータニ
評論会会場

市戻会館

(北海道経済センター)

NHK

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クラーク会館^ JVV^ー!'■■■■■興■■■■■■■■■■■■●.●.■.●.●.■.■.●.●.■.

北12条

北大正門

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北大本部^.一.一.一.

北海道大学

難 創成川

地下鉄 南 北「蚕爾璽^宜

雪まつり会場
テレヒ塔
ム弄

匙■

大通り公園

毒性病理学会会場(道新ビル)

^ 栓所
^
縞防局

すすきの

^

ヨーク松垣屋

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■■
■■
■■
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学会会場:札幌市中央区大通西3丁目6番地「道新ビル大通館」
T E L 011‑221‑2422

講演会場:8階道新ホール
示説会場:7階A会議室<交通案内>・J R 「札φ霧尺」より徒歩約15分

・地下鉄 r大通駅」より徒歩3分
懇親会会場:キ帥晃市東区北6条東9丁目「サッポロビール園」
T E L OH‑742‑1531<交通案内>学会会場より貸切バスにて送迎
評議員会会場:札幌市中央区北1条西2丁目(時計台東となり)

北海道経済センターフ階「ニュー札幌」
T E L 011‑221‑5359<交通案内>会場より徒歩3分
スライドコンファランス会場:キ帥晃市北区北8条西5丁目(北大正門入って左方ななめ向い)「北海道大学学術交流会館」<交通案内> J R「札φ霧尺」または地下鉄「北12条駅」より、それぞれ徒歩で約5分
会長
事務局

板倉智敏
札幌市北区北那条西9丁目
北海道大学獣医学部比較病理学講座
T E L 011‑716‑2HI(内線5191 5194)
F A X 011‑717ーフ569

程日. ..........
.....
........

9923356688
ーーーーーーーー(2月13日)

第 1日
25

9:30

開会あいさつ(会長)

30

12:00

一般講演(1 15)

00

13:10

昼食,評議員会

10

13:30

総

35

14:55

一般講演(16 23)

00

16:15

シンポジウム(S・1

15

16:30

休憩

心、
ユ式

30

17:45

00

18:20

シンポジウム(S‑4
懇親会場行バス出発

45

21:00

懇親会

1 0

1

0 0

1

10

1

1 0

1

..

00 1

50

S‑6)

(2月14日):0 0

一般講演(24 34)

:1 0

休憩

:1 0

特別講演

:0 0

昼食

:3 0

示説"(P‑1 P:5 0

一般講演(35 48)
会

30 1

ーー2346..

9112346
ーーーーーー

第2日

S・ 3)

閉

※示説は第 2日のⅡ:00 16:00の間展示されてぃますが, 出題者は
13:00 14:30の問会場にて会員からの質疑に応じます。

参加者へのおし、参加者の方へ

1.受付で参加費(6,000円)を納入して参加竜を受取り,氏名を記入のうえ会期中は必ず左胸につけて下さい。

2.受付は学会第 1,2日とも午前8時45分から道新ホールのロビーで行います。

3.質問,討論されたい方はあらかじめマイクの前に立ってお待ち下さい。そして座長の指示に従って所属と氏名を述べ発言下さい。
演者の方へ

1.一般講演の講演時問は8分(7分に予告),討論時問は 2分です。
2.シンポジウムの講演時間は20分,討論は 5分です。
3.プロジェクターは35加判用を 1台用意します。

4.スライドは講演開始20分前までに会場入口のスライド受付に提出して下さし
5.次演者の方は次演者席(会場の左端最前列)に着いて下さい。
座長の方へ

1.次座長の方は次座長席(会場の右端最前動D にお着き下さ
2.持ち時問の範囲で司会下さいますようぉ願いします
懇親会の案内

1.懇親会は学会第1日の18時45分から21時までサッホロビール園(札幌市東区北6条東9丁目)にて開催されます
2.懇親会へ出席の方は学会第1日午後5時までに学会会場受付にてお申し込み下さい。
^

は 4,000円です(バスによる送迎料を含みます)。

3.懇親会場へは学会会場前から18時 18時20分までの間に貸切バスが出ますのでご利用下い。なお,帰路は市の中心街まで貸切バスを用意します。

4.懇親会では,バーベキューを中心に北海道特産品を食べ放題,そして各種飲み物を自由1召し上がっていただきます。
示説をされる方へ

1.示説の受付は学会第2日の9時30分から示説会場の入口で行っていますので,当日Ⅱ時までに受付と展示を済ませて下さい。

2.示説時間は 9時30分 16時00分ですが,13時00分 14時30分の間出題者は必ず会場に居て参加者からの質疑に応じて下さい。

3.パネルの大きさは縦120cm,横180cmです。
4.示説発表物の展示には学会で用意した画鋲などを使用して下さい。
5.演題名,演者氏名,所属の表題を次図の要領に従って作成し持参して下さい(演題番号は主催者で用意します)

名所

15Cm

演題

15Cm

発表者・

属

105Cm
180cm

会場内案内図8
休。鼻 iす↓ 会 場(道新ホール)

0

TEL

演壇

0

座長

,,,,',.ロ,,,;,ーロ,[1^エレペーター

出人U
クローク

1レペーター

総合受付祈

韮

階
憩

出入口
^スライド受

4料

WC

WC

(女)

(男)

州揣

出入口と休憩所は9階にもあります

由動販売機は9階ロビーにあります。

階7

金文化センター文化七ンターノ」く首jt X)、 場(A会議室)

会

エレペーターB

議室

エレペーター

TEL

●冊

入口

、VC (女)兪肺冊>、VC (男)

示説会場は学会第2日のみ開かれますⅢΞ^示説受付
D会議室

特別講演とシンポジウムプログラム

特別講演
第2日

(2月14日) 11:10 12:10

座長

沢成好(横浜市大・医)ラットの肝細胞小増殖巣と肝癌との関連性
原田孝則(残留農薬る刑

シンボジウム司( 2月13日) 15:00 17:45

会

第 1日

岡庭

梓(田辺製薬)板

智敏(北大・唇幻

実験動物の硬組織の構造と病態
S・1.骨組織の形態学的動態

・・・・・・・・ 3

阿部和厚(北大・医・第3解音のS、2.ラットに自然発生する腎性骨異栄養症の病態

4飯田晶敏(大日本製薬・総合研)S、3.ヒトの骨粗髮症の病態とそのモデル作成の試み

5

高橋栄明(新潟大・医・整形外科)

S、4・ラット切歯のエナメル形成に及ぽす薬剤の影響0阿部敏男,宮や宏彰(武田薬品・薬安る刑S・5.薬剤誘発ラット四肢奇形の成立機序

・・ 6

‑8

0大塩至',長嶋和朗',萩野利彦.加藤博之.
(北大・医・' 2病理・゜整形外科)

S、6・ラットにおける骨肉腫移植株樹立とその有用性
佐藤達資(弘前大・医療短大).......................

・・・・ 9

一般講演プログラム
第 1日(2月13日)
9:30 10:00

座長:藤原公策細大・曾幻ラ"ト肝の前癌病巣における Tyzzel'病変

Ⅱ

0 二井愛介1,三木寿雄1,後藤直彰2 (1山之内製薬・安全研,2東大・農)212ラ,,ト肝の前癌病変発生過程におけるキナクリンの影縛0 吉田順一,高村直子,畝山智香子,古田京子,豊田和弘,今井田克己,林 裕造(国3ラ

立衛試・病理)フ

ト 1仟発癌における Adriamycin, Actinomycin D, cis‑ dichlorodiammineplatinum (Ⅱ)の

{1三糾;.

13

田中卓二,森下由紀雄,森良難,ア田イ,杉江茂二き,森秀樹(岐阜大・医・
1病理)
10:00

10:30

座長:津田洋幸(藤田学園保健衛生大・1知実験肝硬変症生成諸段階のラット化学肝発癌に及ぱす影棚M消水昭リ}1,原田昌<1,蟹沢成好2(1神奈川が人セ・臨床研・病理,2横浜市大・医リ丙理)

GST‑P陽性細胞巣を指標とした中期発癌,式験法とその長期観察との相関性
0 小木曽正,長谷川良平, Rica阿O cabral,立松正衛,伊東イ,1i (名市大・隆

15

1病

那病

理)

長期動物試験における心肥大とその介併病変
豊田和弘,高橋道人,佐藤秀隆,岡寓英明,◇井田克己,林裕造(国立衛試・理)
10:30 11:00
7

座長:前川昭彦(国立律弦式)

ラ,,ト腎発癌における糖尿病の影糊

17

小西登1,北堀吉映1,大嶋正人2,日浅義雄2, J.M. ward3 (奈良医大・ 11 病理,
22 病理,3NCI‑FCRF)
8

Diethylene 創yc01の発癌性試験ならぴに EHEN 誘発腎発癌への修飾作用の有無にっいて18

北堀吉映1,森本純司2,小西登1,大嶋正人2,日浅義雄2 (奈良候大・11病理
22 病理)
9

BBN によるマウス腎孟発癌におけるウラシルの増強作用

19

村井隆12,森聖】2,武内康裟1,大原忠、雄1,牧野進1,林 幸之1,福島昭治2 (1シオノギ製薬・油日ラボ,2名市大・医・ 1病)11:00 U :30

座長:小西陽一(奈良医火)ハムスター BBN勝胱発癌におよほす Uraci1の効果20...............

尾崎圭介】2, DanaiTiwawechl,高場克己1,宇和川賢12,白井智之1,福島昭治11名市大・医・ 1病理,2住友化学・安全る刑,ラ"ト勝胱発癌プロモーシ,ン作用に対するウラシル勝胱結石増殖刺激の時期による差異
21

柴田耽朗,山本救,佐野真士,箱井加津男,萩原昭裕,福島昭治(名市大・阪
1病理)
12.

ラ

ソ

トにおける EI020 の勝胱発癌プロモーシ,ン作用発現機序の検討、テ木血彦,中野渡純一,福田種男,五十嵐俊二(エーザイ・安全研)
11:30

12:00

座長:高橋道人(国立衛試)^
13.ハムスター短期縢発無モデルにおける Dielhylnitl・osamine の1萃イニシェーシ,ン活性

23

天沼利宏,水元一博,高工み吉治,下地「l0史,堤雅影、,丸H.1t専Ⅱ」,小西陽(奈良「矣大・がんセ・肝傷病理)
14.

ハムスタ

P448 の局在ならびに BOP誘発嫌掘における発現

0 篠田平[H麦1,古川文夫1,初煉守雄2,佐藤元イ'1,,俗橋通人1(1国立衛二式.柄理,24

国立公衛院・衛生薬学)
15.

ラ・,ト縢管癌皮下継代移柚系の樹立

25

辻内俊文,堤雅彰、,天沼利宏,田村一利,白岩利己,小西1場(奈良1矢大・ が人
セ・腫傷病理)
^昼

13:35

14:05

食

座長:榎本眞(安評センター)]6.化学発癌剤処矧マウスに認められた乳腺肺傷の紕織形態像
宮川義史,柿本也知(日本たばこ・安全研)
17.

ラ

ソ

26

ト子宮内膜腺癌の発ιにに1對する災験病理学的研究一内分泌異常と腺癖の発生 との関係

27

永岡隆時12,小野寺博,占1,前川昭彦1(1国立衛試.病理 2吉富製薬.安全研)
18.ラ・,ト子曾内膜癌の発生に1矧する実験病理学的研究一卵巣腫傷と子宮内膜病変との相関28

小野寺博志,永岡隆岫,渋谷淳,小笠原裕之,前川昭彦(国立.衛試・病理)
14:05

14:35

座長:宮一宏彰(武田粲"゛]9.ラ"トの可移植性悪性線維性組織球腫に由来するクローン細胞の特徴
山手丈至,東郷正治,渋谷一元,伊原二重子,工藤悟,田島正典(日生研)20.培養系における線維芽細胞の細胞間マトリ、"クス及びC0Ⅱag印olytice此ymeS の産生に与える過酸化脂質の影響

・ 30

0柿田徳彦,柳秀隆,笹栗蜻之,福田秀・,森松稔(久大・ 2病理)21.培養ウシ大動脈内皮細胞における DNA複製に対する過酸化脂質の影縛・・ 31

福田秀一1,笹栗靖之1,柳秀隆1,森松稔1,八木國夫2 (1久大・ 2病理, 2応用
生化学研)
14:35 14:55 座長:奈良間巧(摂南大)2232
DHPN投与によるラ・"ト肺クララ細胞の形態学的変化と GST‑YC の誘導
0立野知世,乃田正,伊藤聖一,奥野泰由,松尾昌雫,山田宏彦(住友化学・ 女金2333
1姉Clara細胞の分布と PCB投ぢ・による反応の動物種差
今井田克己,高村直子,畝1.1」智霄了・,吉田順一,古田京子,高橋道人,林裕造 (国性研)

立衛試・病理)第 2日(2月14田
9:10 9:40
24

座長:三森国敏価斐留農薬)

高用量misonid能oleあるいは RK‑28静脈内投与ビーグル犬の神経病理学的研究
34ー.﹂

大瀧サチ1,加藤宗平2,
0吉村慎介1,斉藤義明1,山口柴1,青木道子1,今井松本明徳3 (1食薬安全センター・条野研,2ホーラ化成上業・新薬研,3科薬・薬理
,

センター)
25

チオフェン継続投与によるラット小脳虫部病変について

35

森文秋,吉田泰二,高屋豪瑩何厶前大・医・脳研・神経病理)26

ニ.

トロベンゼンのラット28日問反復投与試験でみられた中枢神経病変について
36

外舘あさひ,渋谷淳,小野寺博志,永岡隆晴,前川昭彦,林裕造(国立衛試・

病理)
9:40 10:10
27

座長:今井清(食薬安全センター)

ラット20分間広範囲脳虚血における海馬の組織学的検索

田中俊光,稲津水穂,後藤鋼星,佐藤良一,堀米範子,杉尾和夫,林37

昌亮 (ヘキストジャパン・医薬総合研)28

マウスを用いた MPTP脳病変作出の試み

38

乾俊秀,山村高章,湯浅啓史,川合是彰,岡庭梓(田辺製薬・安全研)
29

2‑hydroxymethyl‑2‑methyl‑1,3‑propanedi01 投与による中枢神経病変の病理組織像
ビーグル犬における脊髄病変・・・ 39

前田博1,尾嵜清和1,奈良間巧1,鈴木義孝2(1摂南大学,2岐阜大・農)Ⅷ

10:10 10:40
30

座長:森道夫(札幌医大)

Ph印obarbita1投与による肝 Finger print の経時的変化に関する検討
豊岡正好,山本恭之,中舘 世1 三浦稔(三菱化成・安全性る刑
四塩化炭素惹起肝病変の貧血による修飾

40

^,

31

・ 41

0堺俊治1,泉澤伸行1,井上直美】,花田貴宣1,三木寿雄1 野村靖夫2(1山之内製
32

薬・安全研,2麻布大・獣・病理)
四塩化炭素長期吸入暴露によりラ、,ト,マウスに観察された肝病変などの比較
42

片桐卓,長野嘉介,相磯成敏, UⅡ勺勝彦,松本道男,榎本眞(中災防日本バ

イオア,"セイ研究センター)
10:40

11:00

座長:臼居敏仁(萬有製薬)

33

幼雛での牛血清アルプミンによるアフラトキシン羽郎余の試み
平野孝一,足立数吉(家畜律藷式)

4334

遺仏性肝炎(LEC)ラ、,ト1汗の各種肝障奔性薬物に対する感受性の検討

44

上村裕洋,品橋秀俊,坂本裕央,森道夫(札幌1矣大.病理)^昼

座長:立松正衛(名市火・1劉プタ血沽投り'により発生するラ・"ト肝硬変類似病変の検討
14:30

35

食

15:00

45

奥村正直12,広瀬雅雄2,七野補2,星谷達2 津田洋京3(】愛知衛研.生物,2名市大・医・ 1 病理,3藤田学園・医・ 2 病理)36

APA 系ハムスターにおけるストレフトゾトシンの急性毒性・・・・ 46

韓晋洙1,乗松真理】,菅煉由戀1,士J,ヤ邦雄1,光岡知足1 志村克己2 赤井弘幸2
田村一羽」2 e束大・農,2ポゾリサーチセンター)
37

喫煙の経消化管的影糾に関する笑験病理学的研究

47

0 永露博昭1'2,伊藤隆明2,北村均2,脇坂笶国1 蟹沢成好2(1資ι1ι堂研 2横浜市大医・1病理)

38

座長:佐久間貞重(ア、,プジ,ン)
長期自発迎動がラ、,トにおよぼす影郷

39

Physostigmine, DefloS 投ラ・によるラット下乗体中間部の変化

15:00

15:20

48

吉田緑,豊原俊治,田内清戀,施沢隆安,今道友則(動繁研)49

今井俊夫,宵木豊彦,細川暁,日比野イ、1裕,福田種男, 岡田雅昭,中野渡純一,
五十嵐俊二(エーザイ・安全研)15:20 15:50
40

座長:眞板敬三(残留農薬)
・ 50

Harman およぴ Norharman によるラット腎毒、1生

倉田靖1,小川久美子1,田中光】,津田洋幸2,萩原Ⅷ作谷1(1名市大・医・ 1 病理,、蛋田学園・医・ 2 病理)41・ 51
抗生物質の投与による尿中NAG活性の変動と腎の病理学的変化にっいて
0川口隆,細川暁,岡田文彰、,菅沼彰純,ネ品田種男,日比野信裕,富松幹夫,
原孝雄,中野渡純一,五十嵐俊二(エーザイ・安全る刑^、

42

培養近位尿細管上皮細胞におけるカドミウム毒性細胞化学的・細胞病理学的研究
52

濱田哲夫1,藤原イ 1,谷本昭英2,井出良i告2,有占刎1代子2,小出紀・(1産医大,病院病理部・22病理)15:50 16:20 座長:土井邦雄(束大・農)43

イヒ1物質による精巣障害の病理学的検討(第3報)一大量ビタミンB6投り・によるラ ソト
・ 53

柿巣障害一

海適口'氏'1,井出良i告1,小出紀1,森晃爾2,濱田哲夫3 (1産「父大・ 2病理 ・'環
WBN/Kob ラ・,トにおける粘巣の萎縮判ψ丙変にっいて
0佐藤元信,古川文犬,篠田和俊,岡宮央明,ノ》沢孝六:,今井田兇己,商僑近人

45

WBN/Kob ラ"トにおける倒然発症1伴炎モデルの柄理剤1織学的検"、1

馴掴境中毒・'ヲ丙1浣病理)44

立衛試,病理)0古川文夫,今沢孝卜い:,篠田和俊,佐藤兀イ',1,佐藤秀隆,商橋道人,林裕造

55

(国立

衛試・病理)
16:20 16:50 座長:松沼尚史(三共)46.硫酸アトロピン反復投与によるラ、,ト勝胱,ノ、^ダー腺,眼窃外涙腺への影W

一紕織
56

学的検討一

田川義章,朝枝伸幸,岩井久和,早坂郁夫(三和化学研・安全研)
47. CRJ:BDH マウスの切歯に観察された自然発生.性の形成異常及び腫傷類似病変
・ 57

相磯成敏,長野嘉介,片桐卓,山内勝彦,松本道男,榎本真(中災防・日本バ
イオア、,セイ研究センター)

48.老齢ラ、,トの尾椎横突起外側に認められた軟骨組織にっいて

勝田修1,田子穰],土谷稔1,並木正人・,板倉智敏3(1三菱化成・安科研,
2 菱化成.総研,3北大)58

示説プログラム
第 2日(2月14日)
13:00 14:30

ビーグル犬に認められた結a行性動脈周囲炎と思われる 2症例

P

紫jH武仲,鬼勉,児玉院平(パナファP

2

ム・ラボラトリ59ズ)

若齢ビーグル犬においてみられた皮脂腺過形成について
岡田雅昭,早川和宏,脊木豊彦,日比野イ'津谷,福田種男,中野渡純

60
,

五十嵐俊二

(エーザイ・安全研)P

3

ビーグル犬の肝痢朋包1炮体内に'忍められた好酸性滴状封入体についてP

4

両側視相琉制曠冉および多臓器内褐色色索沈新を示したカニクイザルの一例

61

井上尚了,木村均,菅沼和子,和田治・(日本バイオリサーチセンタ

羽上邪升)
62

田中薫1,'"b越徳雄1,永田良一2,池田和彦3,横田真一d (利i日本科学.1病理部
2轟性部,3東京火学・脳研柄理.,雉市淵化学・1餐薬品司f業部)
P

5

F3U ラ、,トに多発した腔円蓋の獲胞性拡張柄変63

人石裕司,松本正博,滕'F"j郎,中劉一雄,三好業二,岩波黄葵,藤井登,占之 紺嘉沢集品・安研柄理.)
P

6

P

7

若齢F344 ラ・,トに,忍められた一仙侘心視神絲無形成症の一例

64

渋谷一元,山手丈至,伊瞭三重子,1藤悟,田島正典細生研)F344 ラ、,トの雌に発生し t: neuroectodel'maltumor とぢぇられる,!1味ある例
65

0廣内康彦1,長嶋和郎2,岩田聖1,小池嘉秀1,小林和雄1,榎本

ι" 1( Zξ評センター,2北火・ 2 病理),P

8骨髄原発と考えられるラ・"ト自然発"ι紕織球性肉腫

66

0 小笠原裕之,小劉寺博志,永岡隆岫,外舘おさひ,渋谷淳,前川昭彦(国立.衛試・
病理)
P

9

NON マウスの絢然発生.腎病変について

培養抹梢血単球によるチェンバースライドを用いた薬物,秀発性脂質光1の形態学的ス

ク能村岡毅博】,松井信志1,原田稔1,牧野迩2 e塩野義研,2j品野鞭.油日ラボ)
P‑10

67

リーニングt去杉本哲則11,鈴木繁生1,竹田泰久2,土屋陽了■,辻紘一郎3 (1中外製薬.安金研
21心用研・3CSK 災動研)
P

1 ].

Fischer344 ラ、,トの肝泡沫削朋包に対するコレステロール負荷およぴ diethylhexyl
Phthalate 絲口投与の影郷69

松本悦嗣,矢本敬,五十嵐功,高岡雅哉,加藤佐和子,松沼尚史(三共・安全WD

P‑12Acid lipase 異常ラ、,ト(wolman 病ラ、,ト)の特性一血中脂質の変動一・・・・ 700岡崎啓幸1,尾根田暁1,畠中真吾1,下園孝治1,栗山勝2,永田良一3, 吉田浩己1(鹿児島大・医・1]病理・23 内科,3新日本科学・毒性音吟
P ‑13.

遺伝性肝炎(LEC)ラ・,トの肝でみられる超微構造的変化

・ 71

0加我雅代1,高橋秀俊12,水無瀬昴2,森道夫2,竹内雅也1,小野江為則1 (1札幌
総合病理,2札φ晃医大・病理)P ‑14

遺伝性肝炎(LEC)ラ、,ト肝における低用量 diethylnitrosamine の initiation 効果の検討

72

0高橋秀俊12,榎本克彦1,森道夫1,小野江為則2 (1札幌医大・病理,2札幌総合病
理)
P ‑15

3'‑Me DAB 投与無アルブミンラ、"トのアルブミン陽性肝細胞に及ほす Puromycin
Aminonucleoside の号三糊・・・・・・・・・ 73

安藤利恵1,田中寿子1,吉田裕明2,鈴木昭男1,長瀬すみ3(慈恵医大・1微細形態研・
P ‑16

22 内科,3佐々木る刑
無アルプミンラットの Alb 陽性j圷細胞に及ぼす 3'‑Me‑DAB の影紳74

玉井幸子1,田中寿 fl,新谷稔2,長瀬すみ3,鈴木昭男1(慈忠医大・1微細形態研・
P‑17

21 内科,3佐々木研)
肝発癌物質の中期発癌性貳験におけるラット1仟GST‑P陽性細胞の三次元的解析・ 75

加藤俊男1,立松正衛1,今井田克己2, 1.1̲1田真弓1,伊東イ'イデ(1名市大・医・ 1病理,2国立律藷式)P‑18

実験肝癌にみられた混合型肝摘の免疫組織化学およぴ電子顕微鏡的研究

76

0小島隆,武知雅人(三菱化成・安全性研)
P ‑19

ウレタンの発がんりスクの評価

フフ

0 有広光司,武島幸男,井内康輝,徳岡昭治(広島大・医・ 2病理)P ‑20

エンドトキシンの一般毒性試験評価に及ぼす影粋(その1)

0高木英利,原田寧,増田達樹,石嶋隆守,山下裕,村田晃了',下地尚史,

78

川久

保安朗,古川泰雄田本レダリー・生る刑P ‑21

DMAB処置ラ"トに観察された心臓肉腫

79

中村厚,高橋智,岩崎省吾,白井智之,伊東信行(名市大・医・1病理)P ‑22

Adriamycin および Mitomycin C の勝胱注入によるラ・,ト1辨胱粘膜上皮の DNA 合成お
よぴ病理組織学的ならぴに走査電顕的変化

・ 80

浅川恵美子,玉野静光,伊藤初美,白井智之,福島昭治(名市大・医・ 1病理)
ハロペりドール投与によるラ・"ト下垂体前葉プロラクチン細1抱の免疫電顕的観察

築館一男,須藤武,甲斐純子,福田種男,見上孝,中野,齢屯一(エーザイ
全研)
P ‑24

3‑Amino‑1,2,4‑triazole 類似イヒ合物のラ、"トにおける抗甲状腺作用一ーー

高岡雅哉,宮腰昶宏,加藤佐利子,五十嵐功,松沼尚史(三共・安全研)

釘安

P ‑23

P ‑25

コルチコステロイド剤のマウス皮下投与による骨格筋および大動脈への影響
83

P ‑26

田中剛太郎,山口修司,水本隆章,大杉芳孝,入村兼司(大鵬薬品.安全研)
エトキシキン投与によるラ,,ト腎石灰化および腎結石の超微形態学的観察ならびに元素分析

84

0今沢孝喜,豊田和弘,佐藤秀隆,下地尚史,今井田克己高橋道人(国立衛試.病
理)
P ‑27

塩化メチル水銀の慢性毒性・発癌性に対する B6C3F1マウスの感受性

85

P ‑28

0三森国敏,平野雅裕,上田英夫,真板敬三,白須泰彦価茎留農薬研)
ラ、,ト中枢神経系神経膿細胞腫にっいての免疫組織学的検討

86

P ‑29

0渋谷淳,小笠原裕之,小野寺博志,前川昭彦,林裕造(国立衛試.病理)87
ラ・,ト新生仔腎の各種レクチンおよびコロイド鉄に対する染色性の検討
0佐藤秀隆,豊田和弘,古川文夫,岡宮英明,今沢孝喜高橋道人,林裕造 (国立
衛試・病理)

P ‑30

チメロサール投与によるマウス footpad の炎症性反応

88

内田哲也,内藤誠之郎,加藤博史,衛藤光明,茅野文利(予研・生物製剤管理)P ‑31

Testicular steroidogenic assessment, Leydig ce11 morph010gy and mercury destribution
after methylmercury treatment in rats

・・・・・・・・・・ 89

Cho、vdhury, AR.(Nau.1nstitute of occupational Health,1ndia)
P ‑32

SP羚gue Dawley ラ"トにおける実験的肝癌誘発に影縛を及ぱす各種要因に関する研究90

李栄純、鄭滋永、李完揆(ソウル大学・獣医科大学)

惣特別講演要旨

ラ
フ

トの肝細胞小増殖巣と肝癌との関連性

原田孝則(残留農藁研)

近年,化学物質による肝発癌機構に関する研究は多分野

Program (NTP)によって行われた F344ラットの 2 力年発癌において精力的に行われ,実験物領域においてもラット
フ性試験の中から6種類の異なった化合物の試験を選ぴ,そを用いたln北iation/promou0力発癌モデルによる肝癌発の肝組織にっいて朋染色標本を作製し,画像解析装置を用生過程の解析に関する業績は多大なものがある。このラ フ

いてAHF の定量解析を行った。なお,化合物は1‑amino‑2,

トの発癌モデルでは,代表的イニシェーターとして既知の"‑dibromoenthraquinone (ADBAQ), C.1. Acid Red 1 仙,発癌物質である 2ーace土y13minofluorene, af1丑toxln BI

meもhyl carbamate,4‑hydroxyacetanilide, epinephrine,benzo(a)pyrene, dleしhy1口北rosam1口eなど力q吏用され,プHC1 およびdlmethoxane で,前 3 者は明らかに肝に対するロモーターとしてはPhenobarb北a1 あるいは肝部分切除法

発癌性陽性であり, ADBAQ および C.1. Acid Red 11"はがよく用いられている。同実験モデルでは,肝癌発生に前Een0τOxicityにっいても陽性であった。後者の 3 化合物は駆して種々の酵素変異を伴った肝細胞小増殖巣 a比ered

全て肝発癌性陰性であった。その結果,発癌陽性化合物を

hepatoceⅡUlar fooi (以下AHF と略す)が出現すること投与したラットでは対照群の自然発生舶F とは形態的に異が解明され,この結果を基に現在AHF を指標にした発癌物質のなる特異なAHF が出現し,モの数および大きさが投与量あ短期検索法が広く用いられており.中でも胎盤型 81Uta仙10ne

るいは投与期問に相関して増加し,しぱしぱ肝腫癌への移S‑transferase 陽性巣を指標にした検索法が最も良い方法

行像が観察された。同変化は Een0切XiclW 陽性の発癌物として推賞されている。この朋F は通常のへマトキシリン.エ質を投与したラットにおいてより明確であった。一方,自オジン細E)染色標本においても観察され,その染色性によ然発生性AHF は同投与群において全般に増加する傾向にあリー般に好塩基性(basopMlic),好酸性(eosinophilic),

り,明細胞性AHF が特に顕著であったが,腫癌への移行像

明細胞性(clear ce11),空胞性(vacuolated),混合型

は各型ともにほとんど認められなかった。これらの結果か(mlxed)の各型に分類される。

ら,肝発癌物質は自然発生性AHF とは異なるある種の特異

AHFは,上記の発癌モデルでは発癌物質の投与量および的AHF を誘発し,それが発展的に腫に移行する可能性が投与期間に相関してモの数およぴ大きさが増加することか示唆された。しかし,我々の今回の研究結果は,限られたら前癌病変として一般に考えられている。しかしながら,数の化合物の試験成績であり,結論を得るには今後さらに一方では朋Fを前癌病変とすることに疑問視する向きもあ

多くの化合物にっいて同様の検索を行う必要があろう。

る0 モの根拠として,ラットでは無処置対照動物においてもかなり高い頻度でAHF は出現し,加齢とともにモの数および大きさが増加(我々の研究結果では,老齢F3岫ラット
フ

共同研究者.

で 1 個体当り3000 "000個のAHF が存在)するのにもかか

Dr. R.R. Maronpot (NTP)

わらず肝細胞癌の自然発生率は極めて低いことが挙げられ

Dr. G.A. Boormal】(NTP)る。この事実を考慮するとAHF が直接腫癌に移行する前癌

Dr

R.W. Morris(Analytical soi.1nc.)病変とは考え難く,むしろ朋F の増加は単なる随伴事敏とDr

K.A. stitzel(P遅C CO.)も考えられる。ま九.1n北lauon/promotlon 発癌モデルにおいても発癌物質の投与を中止すると多くの舶F は消失することが知られており,このことは大部分のAHF はその時点ではまだ自律性増殖能力を持たないことを示唆しているものと解釈される。従って,現時点では朋F の生物学的、義にっいての統一見解はまだ得られておらず,今後の研究,特に情報の不足している長期発癌実験でのAHF の解析が望まれている。

以上の点を考慮して,我々は米国 Natlonal TO×1C010名y(9‑S

ι一S)

昌壷▽04浮く4骨組織の形態学的動態

S・ 1.

阿部和厚

(北大・医・第 3 解割D

硬組織である骨は骨芽細胞と破骨細胞の活動により,常にダイナミックに動いている

^,.

、ー、ー

では

は再び大きくなり,性差を示した.同様の骨吸収面の広さの性差は,大腿骨の骨梁にも存在した

これまで私どもがマウスを用いて観察・研究してさらに,破骨細胞の数も頭頂骨,大腿骨ともに同きた成果を中心ιこ述べる

様の性差を示した.成熟期では,骨吸収は,全身1.骨形成細胞と骨吸収細胞:骨芽細胞 Osteoの骨格系で雌で大きく,雄で小さい性差を示す

blast は間葉細胞に由来し,骨表面に器原線維が性腺除去実験は雌性ホルモンが骨吸収を刺激,雄

密な類骨 Osteoid を形成する性ホルモンが抑制していることを示唆した

^^

に石灰の

hydroxyapatite が沈着して骨ができる.この際骨吸収面の2型.骨吸収面には形態的に2型をに,骨芽細胞は骨に埋没して,骨細胞 Osteocyte区別した.1型は深い陥凹の不規則な集合で,幼となる.骨形成を休止している骨表面は,肩平な

若マウスと成熟マウスに観察された.三型は浅く

休止骨芽細胞 lininE ceH により糧われる.骨やや細長い陥凹の集合により波状の模様を呈し芽細胞の表面はアルカリ性フォスフプターゼ活性成熟マウスでは主としてこの型であうた. 1 型は

を刀てし,

こ

の活性は骨細胞となると消失する,

肥大した破骨細胞によりつくられ,Π型は細く突破骨細胞 Osteoclast は骨表面の多核巨細胞で起を出す破骨細胞によりつくられていた.骨吸収あり,骨を溶解・吸収する.破骨細胞は表面がひ面の形態は破骨細胞の活動性,機能活性を反映しだ状の波状縁と,それを囲む平滑な明調帯とで骨ている.

に接する.胞体はライソゾームに富み,

^^
、^、^

に含

3.骨化.軟骨性骨化を大腿骨で走査電子顕微鏡

まれる酸性フォスフ丁ターゼは波状縁と骨表面とで観察した.骨端軟骨は骨側で球状の石灰穎粒をの間に分泌されて骨を溶解する.溶解・分離した示して石灰化した.軟骨細胞腔が骨髄側へ開放す

石灰と屠原線維は胞体内の空胞へ取り込まれ.消ると,石灰化軟骨が破軟骨細胞 Chondroclast に化される.破骨細胞の酸性フォスフフターゼは酒より浸食され,その表面に微細な米粒状の石灰穎

石酸で処理しても消失しない粒が沈着する骨化を示した.軟骨と骨の石灰化は

破骨細胞は骨髄由来の単球マクロフフージ系

異なる石灰粒子を示す.

の細胞が融合してつくられる.私どもは.マウス

4.骨形成の刺激:エストロゲンは骨形成を促進

大腿骨で酒石酸耐性の酸性フォスフ丁ターゼ活性し,骨芽細胞はこのホルモンのりセプターをもつを染色し,骨表面の破骨細胞の近くの骨儲にこのこ

酵素反応陽性の単核細胞が多いことを発見した.

を知るために,エストラジオールを生後 4 週のマとが知られている.骨形成刺激に対する骨反応の単核細胞は,破骨細胞の前駆細胞とも考えら

ウスに注射し,大腿骨の膝関節側の骨梁部位の反れる.破骨細胞の存在部位にこの単核細胞の分化

応を走査電子顕微鏡で観察した.エストロゲンのあるいは遊走因子が存在することを尓唆する

投与後,骨梁は著明に増生し.1 2週で骨髄腔

こ2.破骨細胞の活動の跡骨吸収嵩:破骨細胞にの大部分を密に充満した.この部につづく皮質骨より溶解・吸収された骨表面の陥凹を,マウス頭の内面も平滑なものが細網状となる骨増生を示し

頂骨の内側面で走査電子顕微鏡で観察した.マウ

た.その後,骨梁表面には骨吸収が優位となうてスは,頭蓋の発育を生後3週で完了し,生後6週

骨梁の密度と量は減少し,16週でほとんど正常で成熟するが,骨吸収面の広さは発育の活発な生と同様となった.皮質骨内面も平滑となった.し後1・2週で大きく.その後,減少し,4週できかし,骨梁のある囲は正常より大きかった

わめて小さくなった.骨芽細胞の活動が活発なとき,破骨細胞も活発に活動している.一方,成熟期では,骨吸収面の広さは雄では小さいが,雌で

ラ

S・ 2.

、:ノ

トιご自熱ミ多毛丕主三すーる^,1生^^今キき宝葦延萱 d>^^飯田晶敏

(大日本製薬働総研)

代謝的な異常により全身性に骨組織が侵される疾患を代謝性骨疾患( metab011C bone dlsease )と総称すろが,そのうち慢性腎不全に発生する代謝性骨疾患を腎性骨異栄症( renal osteodystr叩hy )という。本症は古くは慢性腎不全
患者にしぱしば骨病変の合併をみることで知られてき九が,今日では,長期の慢性腎不全に骨病変はほとんど不変的に存在すろことが明らかとなり,し九がってもっとも一般的な代謝牲骨疾患のーつとされる。その骨病変は.線維牲骨炎を中心とし,骨軟化症.骨硬化症あるいは骨粗懸症を伴うとされろ。本症の成因には多くの因子が関与するが,その中心をなすものは. 1)腎不全→低カルシウム血症→上皮小体ホルモンの分泌亢進(上皮小体機能亢進症)→線維性骨炎,2)腎不全→活性型ビタミンDの不足・代謝異常→骨石灰化陣害であろとされてぃろ。このような骨性骨異栄養症の病態の釈には,近年の骨代謝に関する内分泌学的研究の進歩,すなわ
ち,カルシウム煽節ホルモンであわ,骨堀節ホルモンである
上皮小体ホルモン,カルシトニンおよび活性型ビタミンD(1.25(OH).ビタミン D)の柵造と作用の解明が大きく寄与している。

本症の病理形態学的特徴は,線維性骨炎を主体とする骨病
変,高度の腎陣害.上皮小体の過形成( hyperplasia,機能
亢進像)および全身牲の転移性石灰化であ0九01.骨病変

骨病変は, 1)破骨細胞性の骨吸収,2)骨吸収領城を中心とした線維組織の増生.3)骨芽細胞の増生と類骨形成,より成り,この過程をとって進行してい九。病変は.皮質骨では骨骸腔側に始まり,しだいに骨組織全層へ及ぷもので.
高度の骨病変を示す例ではまれに外骨農性の骨新生もみられナこ。

2.慢性腎陣害(慢性糸球体腎症)

腎臓では,糸球体の硬化性変化,尿細管の拡張と上皮の変性性変化,およぴ間質性炎が高度にみられ,各系統のラツトに共通して自然発生する加齢性の慢性腎疾患の熱末像に相当するものであウ九。

3.上皮小体の変化

上皮小体は肉眼的にも両伺性に腫大し,組織学的には主細胞の翻漫性脛大.過形成( hyperplasla )であったが,なかには結節状の"peTP】aslaを示す場合もみられた0 なお,骨一方,ラットにおいては,とくに加齢とともに数多くの自然発生性疾患、病変がみられるが.そのなかで慢性腎障害はその高い発生率と致死性からもっとも重要性の高い疾患のーつとされ,様々な名称のもとに数多くの報告がある0 しかしながら,その慢性腎疾患を基礎として発症・進展する本症の病変のない例においても上皮小体の変化がみられたが.どのラットにおける報告は.古くはDurand等 a964)あろいはSnenの潜数など機能亢進像を示したが,分泌穎粒にっいては本症a967)が慢性腎障害のラットにおける線維性骨炎と上皮小体の機能亢進徽の合併を報告していろものの,その系統的な報止は少ない。これはラットでは骨組織や上皮小体は,最近まで病理組織検査の対象となる機会が比較的少なかう九こと,
あるいは長期の飼育試験や癌原性試験においても各臓器'組
織ビとの病変の発生率の比較・検討のみに重点がおかれ九こ

例と非本症例の間の差異は明らかでなかっ九0となどがその一因と考えられろ。

九。

程度の"perplaslaで骨病変が出現すろかは明らかでなかった。電子顕微鏡的には,上皮小体の主細胞は細胞質の腫大によろ細胞間隙の狭小化,隣接細胞の形質農の複雑な骸合を示し,付着りボゾームの増加,ゴルジ装置の発達,粗面小胞体

4.転移性石灰化

転移性石灰化は,まっ九く認められない個体から,全身の戯器.組織に及ぷものまで様々にみられ,その程度は骨病変の進行度に対応してい九。モの好発職器・組織は心服,大脈.中,胃,腎識,および全身の中小動脈の血管壁であっ

本報告では老齢ラットに自然発生した腎性骨異栄養症にっいて,その病理形態像を中心に述ぺる0

骨組織はカルシウム(ca)代謝の中心をなし,多くのCa代
謝ホルモンの標的臓器であろ。骨病変の理解にとウて内分泌材料とした物は SpraEue‑Dawley 系ラット 300伊K 25 力
月齢,雌雄各50例;生涯飼育,雄97,雌103 例). wistar系

学.骨代謝学的背景はきわめて重要である。毒性の標的臓器

ラット 100 例(生涯飼育,雌雄各50例),および Flscherからラットの本症は,骨病変・病態の理解に恰好の材料とな

344 系ラット145 例(生涯飼育,雄72,雌73例)の合計545例から本症と診断され九76例である。これら症例から得られた所見は以下の如くであ0た。

として骨組織を捉えるときにも同様であろ。このような観点
ろう。

S・ 3.

ヒトの骨粗黙症の病態とそのモデル作成の試み
一局

橋

栄

明

(新潟大学医学部整形外科)

ヒトの骨粗松症とは同性、同年代の健常人と比骨が喪失して、結果として骨量が減少する際に、べて骨量が病的に減少している病態を言う。この形成および吸収が両方とも亢進するような高回転

骨量減少を骨減少症(osteopenia)、そしてそこに型骨粗松症、吸収および形成が両方とも低下する

脊椎圧迫骨折など力学的に破綻のき九状態を骨粗低回転型骨粗継症とがある。前者は甲状腺機能亢松症(osteoporosis)と言うが、これはーつの疾患

進症による骨粗松症、および上皮小体機能亢進症

ではなく症候群である。この骨粗松症は骨の代謝に起因する骨粗秘症があり、後者はグルココ

回転(turnover)のうち特にりモデリング(re‑ルチコイド大量投与に起因した骨粗松症(steroid

modeHng再造形)の障害と考えられている。

induced osteoporosis)がこれにあナこる。このよ

臨床上問題となるのは骨粗継症に起因する骨折であり、骨折に基づく癒痛でもある。このようなうな種々な骨粗松症の病態、治療の研究の九めに動物のモデルの作成が試みられていた。

骨粗松症を起こす病因は種々あるが、遺伝性、内ヒトの骨粗松症の動物モデルとして使われてき

分泌性、栄養性、骨髄置換性、局所性、薬剤性なたのはプタ、イヌ、ネコ、ラット、マウスなどがどの他に、最も問題になるのは退行期骨粗松症

あるが、それらがヒトの骨粗松症の病態をそのま(involutional osteoporosis)である。ヒトの生涯ま再現するものではない。動物モデルに期待されで骨量は20 如歳位が最も大きく(最大骨量Peak

る条件は微小外力による易骨折性、りモデリングbone mass)、その後徐々に生理的に減少し、特にの存在、食事中のカルシウム量を含む栄養の低下

女性では閉経期を境にして急速に減少することがによる骨喪失、女性ホルモンの変化に依存する骨ある。そのナこめ骨粗継症は女性ホルモン減少に影喪失、運動負荷に対応する骨構造の変化などであ響された場合と老化に影響され九場合に大別される。さらに、このようなモデルは実験の期間が短る( Ri宮gs&Melton)。前者をType1骨粗称症といことが必要である。それぞれの動物の種によるいう。 51 75歳におこり、女性に多く(閉経後特性と動物のモデルとしての問題点について述べ

骨粗松症)、主に海綿骨に減少がおこり、上皮小る。

体機能は低下するといわれている。後者をTypeⅡ
骨粗松症と言い、70歳以降に起こり女性のみならず男性にも起こる。海綿骨と皮質骨も減少し、上皮小体機能が亢進するといわれている。
リモデリングでの骨の細胞の連鎖は活性化、吸収、逆転、基質形成、石灰化の順序で進行するが、この過程のどこかの障害により、リモデリングの集積である骨量は負のバランスで減少する。
このようないろいろな病因による骨粗松症は、リモデリング率によっても分類される。りモデリ
ングが正常に比べて亢進あるいは低下ということが問題になる。すなわち異常なりモデリング率で

S・ 4.

ラット切歯のエナメル質形成に及ぽす薬剤の影響0阿部敏男,宮嶌宏彰(武田薬品・薬剤安全性研究所)

はじめに

歯牙は生体を成する重要な器官のーつであるが、噛乳類では成長に伴って分化が終了し、肝臓や腎臓のように薬剤のに保九れる。ラットの切歯の成長速度は体重約30ogの榊Star系雄ラットでは、上顎で約2.3 蝕/週、下顎で約4.2 鯛/週
で、下顎切歯の萌出部は15 20日で全て入れかわる。

吸収・分布・代謝・排池などに直接鋭敏に反応しないので毒性学的にはあまり重視されてこなかった。しかし、ラットやマウスのようなげっ歯目の切歯は生体内でもっとも旺盛に成長し続ける器官のーつであり、個体の全身状態をretrospec・tiveに知る上で重要な情報を提供するbi010Eicalindicatorである。

今回は、我々の経験例を中心に、切歯に及ぽす薬剤の病理
形態学的影響ならびに発生病理に関する考察を報告する。
歯牙は複雑な分化をたどり、他器官にない成長をとげるので、はじめに歯牙の基本構造の概要を述べ、炊いで薬剤の影響を受け易いエナメル質について詳述し、最後にラット切歯のエナメル質形成における毒性病理について述べる。

エナメノの形成

エナメル質は以下の各Stage を経て形成される(図1)。
D 細胞増殖期(stage of ce11 ProHferation)および組織分化期(sta8e of histodifferentiation)
根尖部にある歯旺の上皮性細胞が分裂、増殖、分化する時期で、エナメル芽細胞に分化する内エナメル上皮細胞および乳頭層を形成する中間層細胞と外エナメル上皮細胞などがそれぞれ分化出現する。

2)基質形成期(sta8e of matrix formation)
エナメル芽細胞がエナメル基質を形成する時期で、基質はアメロゲニンやエナメリンなどのエナメル蛋白からなり酸不溶性である。この時期にはまだ高度の石灰化はみられない。
歯牙の基本構造3)成熟期(sta8e of maturation)

歯牙は鳥類以外のすべての脊椎動物にみられるが、いずれエナメル基質の形成が終了してから、エナメル芽細胞や工もエナメル質、隷牙質およびセメント質等から構成されていナメル基質の形熊と識能が劇的に変化する時期である。これる。エナメル質(無識成分95%)は最も石灰化度が高い組織

らの変化は、初期(移行期)におけるエナメル芽細胞の形熊で、外脛葉由来のエナメル芽細胞によって形成される。隷牙変化(高円柱状→立方状)にはじまり、乳頭層の形成、エナ質(無機成分65%)およびセメント質(無機成分45%)はい

メル蛋白の脱却とそれに伴う石灰化度の上昇ならびにエナメ

ずれも中脛葉由来の隷牙芽細胞およびセメント芽細胞によっ

ル質における石灰化の完了、鉄色素の沈着(色素沈着期)、て形成され、骨と類似の組成で無機成分を除いては膝原線維

エナメル芽細胞の退縮(退縮期)と続く。成熟期に入ってかを主体とした有識質と水分から横成されている。

ら後、エナメル芽細胞の退縮がはじまるまでの期間、エナメ

ラットやマウスのようなげっ歯目およびウサギのような重ル芽細胞は細胞質の基質側末端に刷子緑をもつ状態と、もた歯目の切歯は根尖部にある歯脛の細胞の分裂増殖によって終ない状態を交互に 3 4 回くり返し変化する。これはエナメ

生成長し続ける。唇側はエナメル芽細胞、舌側はセメント芽

ル質の著しく高度な石灰化の九めの特殊な石灰化微翻節機構

細胞がそれぞれ一尼に配列されて、切歯の長軸に沿0て平行と密接に関連した形態変化と考えられている。色素沈着期にに並び、歯畿腔ではそれを内張りして一層の救牙芽細胞が配はエナメル芽細胞に鉄反応陽性顯粒が出現し、エナメル質表

列されている。エナメル芽細胞は有橡性基質を分泌し、電解尼に移行沈着する。切歯の表面が褐色翻を示すのはこの色素

質軸送によって、石灰化を行いながらエナメル質を形成し、による。次いでエナメル芽細胞は次第に退縮し、歯肉上皮にやがて基質を脱却してエナメル質の成熟を促進する。セメン移行する。このようにして形成された切歯は成長し続けるが、ト芽細胞および象牙芽細胞はそれぞれ有機性基質を分泌し、やがて萌出し、噛み合わせによって切歯婦から磨耗消失する。

電解質輸送を行って石灰化を促進し、セメント質および隷牙質を形成する。これらの芽細胞はいずれも歯質を形成しながエナメル質形成障害の毒性病理

らエスカレーター式に切歯婦に向かって移動する。萌出した

我々は各の薬剤による毒性試験の際に、ラット切歯に白

切歯婦は噛み合わせによって磨耗し、切歯の長さはほぽ一定

色変色巣が発現することに注目し、これらの変化が肉眼的には類似しているにもかかわらず病理組織学的には発現部位お膜を介して周囲の血管および結合組織に接し、能動的輸送をよび病変が多様であることを経験した。そこでエナメル質形

介してエナメル芽細胞と密接に関係して物質交換を行ってい成過程において、最初に病理変化が発現する部位を指標に以ると考えられており、形態的にもエナメル芽細胞の一部は乳下の4 類の病理変化に分類した。

頭層細胞内に骸入している。色素沈着期にこのような乳頭層

1.基質形成期エナメル芽細胞の障害

細胞の変化がみられたことは色素沈着のメカニズムを知る上

5・fluorouraci1誘導体を8週問経口投与すると、エナメルで輿味ある所見と考える。

芽細胞は基質形成期の後半から退縮期にかけて多様な変化を

4.基質形成期 退縮期のエナメル芽細胞の障害示した。ほぽこれらの全域にわたって散在性の配列不整が認

ある種の糖尿病治療剤を26週間経口投与すると、基質形成

められ、色素沈着期の前までは空胞変性、壊死および配列不期から成熟期を経て退縮期にいたる全域にエナメル芽細胞お整に伴う嚢胞形成がみられ、色素沈着期がはじまる前から退よび乳頭層細胞の巣状の空胞化、壊死および色素分泌障害等

縮期にかけて萎縮性変化が認められた。一方、エナメルにが認められた。軟X線撮影では切歯の辺縁は不整で鋸歯状をは顕微X線法で基質形成期の異常を示す石灰化不全線と成熟示してい九。これらの変化は投薬中の強度の削痩と前後して期の異常を示す石灰化不全帯が認められた。このようなエナ発現しており、強度の栄養不良が全域のエナメル芽細胞の発メル芽細胞およびエナメル質の変化は基質形成期に障害を受

育障害をもたらしたものと考えられる。

けたエナメル芽細胞が色素沈着期においても修復せずに継続して存在していることを示している。文献的には蛋白合成阻
害剤のピューロマイシンや微小管阻害剤のコルヒチン等で同まとめラットの切歯は複雑な構造をもつが、エナメル芽細胞は薬様の変化が報告されている。

剤の影響を受け易く、その結果エナメル質の形成に変化が生

2.移行期エナメル芽細胞の障害

じさまざまな病理変化を招来する。また、一本の切歯でエナある種のマクロライド系抗生物質を5週間経口投与するとメル質形成の全過程の観察が可能であり、薬剤に対して高感

エナメル芽細胞は移行期から退縮期にかけて々の病理変化

受性の細胞およびSt3ee を明らかにし、さらに病変の経過をを示した。壊死性変化は移行期にはじまり色素沈着期の前にたどることも可能である。しかし、従来毒性学的に充分な検かけて、空胞変性は移行期の後から色素沈着にかけて、配討がなされていないため、歯牙の毒性に関する発生病理は不

列不整は移行期の後から退縮期にかけて、萎縮性変化と乳頭明な点が多い。今後は多くの毒性病理学者の関心が集まるこ尼の結合組織の増生は色素沈着期から退縮期にかけて、それとによって、この分野の解明が進むことが,待される。

ぞれ認められた。エナメル質には石灰化不全帯が認められナこ。
移行期におけるエナメル芽細胞は基質形成期から成熟期への機能変化に対応して、形態的には細胞内小器官の再構成が行
われ、短小化する。この時期に同細胞の壊死がみられることは、エナメル芽細胞における成熟期への機能および形態転換の障害を示していると考えられる。
3.色素沈着期エナメル芽細胞および乳頭層細胞の障害
ある種の抗生物質を5週問経口投与すると、色素沈着期に乳頭層細胞の変性、壊死および乳頭層の構築の乱れがみられ、それらに近接するエナメル芽細胞の萎縮と鉄色素を保有した
エナメル芽細胞の乳頭層への陥没が認められ九。これらの変化は乳頭層細胞の障害が先行し、洩いでエナメル芽細胞の鉄色素分泌障害が生じたことを示している。乳頭尼細胞は基底

色量辻看期

退田期

S・ 5.

薬剤誘発ラ*ト四肢奇形の成立機序

0大塩至、長嶋和郎dヒ大医2病理)、荻野利彦、加藤博之aヒ大医整形外科)
指の欠損する奇形は欠指症と呼ばれているが、ヒトの欠指症には多くの異左ったタイフが存在し、臨床像の共通性からいくっかの群に分けられている。これら欠指症の代表的衣ものには、上肢の母
指あるいは小指側の縦軸に限局して障害が出現す
る縦列形成障害、中央の指が欠損する裂手症、それに先天性絞拒輪症候群左どがある。催奇形因子が胎児に及んでこれらの奇形を起こしうる1論の範囲は臨界期と呼ばれる。演者らは妊娠ラ*トに種々の薬剤を投与してヒトと同様の先天奇形を誘発し、いくっかの奇形の成因あるいは発現様式を検討してきた。その結果、縦列形成障害や裂手症の臨界期か指放線形成前であることを示したa980荻野)。在た、各奇形の発現頻度と重症度には薬剤の投与時期、種類、量とラ"トの系統差が影響してぃることを示した(1988加藤)。
一方、正常の上肢の発生では、まず肢芽が形成されるが、肢芽は発育し手板を形成する。手板内には指放撤;誘導され、指放線は分化し指が形成される。ラ,ト胎仔の手板内の指放線形成過程をみると、指放線は13日目より形成が始まり、15日目には抵ぼ完成する。正常手板での指放線形成過程における細胞増殖と細胞移動をBrdu(5・brom0由。W‑2'一酬idiM)/抑tj‑B,颪1免疫^霖抗体法を用いて観察した結果は、指放線部の細胞増殖により指放線が形成されるものでは左く、指間部で増殖した細胞が移動凝集し指放線が形成されることを示してぃた(1988大塩)。四肢奇形の発現機序につぃては種々の仮説が提唱されているが奇形発現の際の胎生期手板を詳細に検討したものは少左い0

今回は、入⑮leranをラ*トの妊娠12日目に投与して誘発される欠指症にっいて手板の指放線形成過程における細胞増殖と細胞遊走をBrdτン'anti‑Brdu

免疫酵素抗体法を用いて観察し、正常手板と比較

DNA合成細胞核を標識し、30分後に胎仔を摘出した。

手板掌面に平行左切片を作成し、抗BrdU抗体を用
いて免疫染色を行い各時期における細胞増殖の局在を正常と誘発欠指症で比較した。実験2では、妊娠12日目のMyloran投与郁畍にB,dUを親ラ"トに投与する Myleranの投与後、 12.5日目より

14.0日目までの胎仔を摘出し、実験1と同様の染色方法で指放線形成過程における細胞遊走を正常
手板と欠1旨症手板で比較検討した。
(結果)

実験1.正常および欠指症とも、胎生12.5日目
まで手板間葉組織におけるBrdU陽性細胞は砥ぽー様に分布してぃた。正常では、指放線の形成が認められる胎生13.0日目以降は指間部に多数のBrdu陽性細胞がみられ、指放線部の陽性細胞は少数であった。胎生14.5日目以降は指放線部に接した指間部に限局してB阿U陽性細胞力専在した。欠指症
では、手板内の間葉細包の壊死が上皮に近い部分に多く認、められた。 B阿U陽性細胞は正常に比較し、手板全体で減少しており、特に上皮細胞内のBrdu
陽性細胞の減少が著明であった。一方、指放線形
成にっいては正常に比較し指放線形成の遅れがみられ、軸前部の指放線は形成され左かった。

実験2.正常では、 BrdUにより標識された細胞は胎生12.0日目に手板内に一様に分布していナこが、指放線の形成が明らかに左るにっれて指放線部に集中してぃた。しかし、欠指症では正常に比較し標識された細胞の指放線への集中が減少していた。
(考察)

先天性四肢奇形の発生機序は複雑であり、単一の機序では説明でき左い。しかし、N卿leran誘発第2,討旨欠よ旨症の手板形成過程を正常と比較し九結果、本欠1旨症の発生には従来より提唱されナこ間葉細胞の壊死および増殖の障害による間葉細胞量のすることにより欠指症の発生機序を検討した0不足とともに間葉細胞の指放線への凝集の障害も(方法)まず、 wist3r心Un Ratを用いて撒辰12日目にMyle捻n(B゛.orf釦)を投与し、以下の実験

関与していることが示唆された。

を行っナこ。実験1では、妊煽2日目より15日目ま
でのいずれかの日の親ラ"トにBrdUを投与し、

S・ 6.

ラットにおける骨肉腫移植株樹立とその有用性
佐藤達

資何厶前大・医療短大)

はじめに動物疾患モデルはビト疾患の研究に有用であり,4週問後に軟X線写真撮影を行って腫癌の硬化像を検索した。

組織像がヒト疾患の組織像に類似していることが必要である。実験的骨肉腫の原発組織はヒト骨肉結

果1.原発腫癌腫に類似し,骨・類骨形成能およぴブノレカリフォ

X線写真学的に原発腫癌(POA,POB)はそれ

スフプターゼ(ALP)活性を有しているが,第 1

ぞれ同ーラットの左上腕骨と右大腿骨とに骨形成

代ないし数代の皮下移植により骨形成能を消失しを示す腫癌陰影を認めた。組織学的にPOAとPOBとは同様の結果を示し, HE染色で網状の骨形成てしまうといわれている。

今回,骨・類骨形成能とALP活性とを維持してを示す骨肉腫の像であった。コ"サ反応では黒色

いるラ"ト骨肉腫の皮下移植株を樹立した。これに染色される石灰化骨を認めた。 pierce法では赤らのラ"ト骨肉腫はヒト骨肉腫の化学療法後に認色に染色される類骨形成を認めた。 ALP染色でめられる硬化像の発現機序の解析モデルとして有は腫癌細胞が強陽性を示した。
2.移植株の樹立経過用であることを述べる
材料と方法

移植第 1代のPOA1 およびPOB1 は2週問後

1.原発腫癌と累代移植操作
ラ、"ト骨肉腫の誘発は真鍋の方法に準じ,1例には触知可能な腫瘤を形成し1ケ月後には母指頭大となった。移植率はともに 100%であった。 2の雄ラ、"ト(Fisher F344π)u crj)に体重 l g 当

代目以後の移植率はPOA系が50 100%で平均

り 0.5 1.0 μCi の 32P‑H3P04 を 2は 94.3%であり, POB系が 75 100%で平均は3 週間に 1回の割合で計13回,総量1722μCiを腹腔内に投与した。最終投与約6ケ月後,同ーラ、"トに発生した
先上腕骨原発腫癌(POA)と右大腿骨原発腫癌(POB)とを移植原とした。 POAおよぴPOBの約 13n〕1nをそれぞれ4例の同系雄ラットの背部皮下に97.フ%であった。累代数はともに22代で移植期
問は 3年6 ケ月を経過した。
3.累代移植と骨・類骨形成能およびALP活帷
骨・類骨形成能はPOAI POA22, POB I
POB8およびPOB12 POB22では原発腫癌のP移植しPOA I, POB 1 とした。その後] 3 ケ月

OA,POBと同程度であった。 POB9 POB11では毎に 4例の雄ラットに移植をくり返した。

骨・類骨形成は減弱し, fibroblastiCな部分が多かっ

2.骨・類骨形成能の検索
骨形成能は軟X線写真撮影による観察と組雛学

的にHE染色とコ*サ反応とを用いて検索し六類骨形成能はテクノビ、,ト樹脂包埋切片を作製し,類骨組織の同定に利用されているPierce法を用いて検索した。

た。 ALP活性は全ての累代移植腫癌が原発腫癌と同程度に強陽性を呈した。 ALP活性の電顕的局在は腫癌細胞の細胞膜に認められオ'
4.化学療法後の硬化像

軟X線写真による化学療法後の検索ではシスプ
ラチンの投与前に比較して2週間後に中等度の硬3. ALP活性の検索化像を示した。 3,4週間後には高度の硬化像をALP活性は腫癌組織の凍結切片を作製し,ア呈しヒト骨肉腫の硬化像に類似していた。

ゾ色素法によるALP染色を行った。さらにPOA

化学療法後に出現してくる硬化像には腫癌細胞10 とPOB 9 とのALP活性の局在を電顕的に検4.化学療法後の硬化像の検索の壊死や bone morphogenetic protein(BMP)の関与が考えられる。これらのラ"ト骨肉腫はヒト
骨肉腫の化学療法後に認められる硬化像の発現機

皮下移植腫癌が約4×3×3Cm 大になった時点

序の解析に利用可能である。硬化像の発現機序にでシスプラチン5mg/蚫を静脈内に投与し2,3,

ついて検索中であり,その結果もあわせて発表する索した。

一般講演要旨( 1

48)

ラット肝の前^巣におけるTy2Zer病変

1.

0二井愛介,,三木寿雄,,1麦藤i自彰2(.山之内製藁・安全研,0^・農)

Ty2Zer病は肝の多発性巣状壊死を特徴とするラット,

数観寮され,その内部における菌増殖も観察された. N

マウス,その他.多くの動物の感染病である.原因菌であ後7あるいは 14日後に薗接種した処群では,多数のる"Baci11U3 Piliformi3"は肝細胞内偏性寄生性を有し,GST・P陽性巣が肝葉全体に散在してみられ(GST・P陰性のその増殖および死巣形成は絶食あるいは低蛋白食投与

変異巣も認められた),これらの変異巣の問の肝細胞はにようて抑制される一方,肝部分切除あるいはCCI'投与

分断された索状構造を示し, ovalce11の増生も著明で後の再生肝において増強されるなど,肝細胞代謝の変化あった.対照群と同様に形成されたTy22er菌による壊死に影響されることが示されている. Diethylnitrosa口lne

巣はGST‑P陽性肝変異巣において数多くみられ, GST‑P陽(DEN)投与によるマウス肝での鉄吸収抵抗性のaltered性肝細胞内に菌殖像が観察された.変異巣以外の部分

Ce11 fociあるいはneoplastic noduleSにおいては菌増でも同様に死巣は観察されたが, PH14日後接種例で殖があまりみられないことを第3回の本学会で報告したはその数は変異巣におけるものよりむしろ少なかった

が,今回はSolt‑Farberによる方法で作出したラット肝PH後21日に菌接種した処群では,肝葉の大部分がの酵素変異巣における菌増殖の有無を免疫組織化学的にGST・P陽性巣で占められ,それら以外の部分は正常肝細検索した

胞索構造に近くな1),これら両者の中に壊死巣が観察さ

〔方法]

れた

実験 1:7週齢F344雄ラットを 2群に分け,1群は

2:実駿 1より処置群の肝細胞の大部分がGST

前癌病変を作製する処置群としてDEN 200血ぎ/k8 b剛.をP陽性となることが示されたPH後2 1日に菌を接種し,腹腔内投与し,その 2 週問1麦よ 1) 0.02× 2‑acetyla血ino‑

血柴中GOT. GPT値を測定して,菌殖環の適否を観察

nuorene(AAF)を含む粉末飼料を 2 週問与え.その後基した. Gσ「, GPT はそれぞれA群:730士299,553士 223,

礎飼料に戻した.2群は対照群として,1群のDENの代

B群:378土 66,249士 42, C 群:1764士 1609.1429 土 12

わりに生理食塩液を投与し,実期問を通じて基礎飼料

14, D群:75士8,47士6 (単位:1. U./D を示し,薗非を与えた.また両群とも実開始3週目には2/3肝部分

接のB, D群の比較では,担前癌病変にあるB群の方切除(PH)を行なっブ::. PH後 2,フ,14,21日に,1 ・ 2が有意に高いことが示された.しかしながら,菌接し群それぞれ3

たA, C群の比較では逆に,担前癌病変にあるA群の方

5 匹の動物にTy22er菌ラット由来RT株

8.8×10, 3.8×10./10OK b市.を尾静脈より接種,12が低いを示した.

日後に殺し,肝を摘出後ホルマリン固定,通常の方法で[青察]

パラフィン切片作製後, A BC法に,より前癌病変のマー

実験 1 より, solt‑Farberの方法によって作出したラカーとしての胎盤型'1Utathione‑S‑tran3fera3e (GST‑P)

ツトのGST‑P陽性の肝細胞変異巣においてTyZ2er菌の強とTy22er菌の二重染色,グロコットーH E, P A S染色

い増殖像が示され,鉄吸収抵抗性を指標としたマウスで等を姥した.

の成鰻と少し異なるものであった.これは,使用動の実験2:実験 1における処群の薗接種(A ),非種差,菌株の違い,前癌病変マーカーの感度の違い等が接( B )と,対照群の菌接(C ),非接種(D )の考えられるが,特に前癌病変作製条件の違いが大きく影計 4 群をおき, A, C群にはPH後21日に RT株1.5×10.

していると考えられる.実験2からは,担前癌病変に/100客 b市.を静注,2日後にB, D群も含めて採血後殺ある動物(B群)では発癌剤を投与していない動物(Dし,肝死病変の指である血紫中Gar, GPT を定し群)と較ぺてGOT, GPTの基準が高いにもかかわらず.

た.( n・フ[A, C], n・5 [B, D])

菌接種後の(A群)は対照群(C )よりも低く,ラ[結果]ツトにおける変異肝細胞でTyzzer菌は殖可能ではある

実験 1

PH後2日に菌接種した処置群では,対照群とほぽ等しいかそれ以上の大きさの肝壊死巣が数多く形成された.これらの問にGSTP陽性の肝細胞変異巣が少が.その増殖環境は正常肝細胞に比して好適では女いことが示された.

^「ソ.

ト月干d>育訂^^^^^^手呈ιこヨら'ιナぞ,=二づークリニノd>景多^0吉田順一.高村直子.畝山智香子.古田京子.豊田和弘・今井田克己.林裕造(国立衛試.病理)【はじめに】

体推移及び摂呈を示した。一方、50oppm投与群ではキナクリンは生体内に取り込まれると肝を始めとする

DEN処置(1 群)、単独(5群)とも4週目以降の有意な諸臓器に長期問蓄積し、電顕的にミエリン様小体の出現

体重加抑制ならびに6週目の有意な摂餌量減少が認めをともなうりソゾームの腫大と増生をもたらす事実から、られ(Pく0.05またはPく0.01)、その程度は 1 群でより強脂症を誘発する薬物であることが確認されている。しかし肝細胞内りソゾームの変化あるいは脂質症誘発と肝いものであった。肝の絶対量は、対照群に対し3群で発癌との関連性は不明である。
今回我々は、脂質症誘発物質であるキナクリンがラッ有意な増加、また1及び5群で有意な滅少を示したが(Pく0.05またはPく0.01)、相対重量では差は認められなかった。

ト肝発癌過程に影響を与えるか否かを諏ぺる目的で、肝肝単位面積あたりのGST‑P陽性細胞巣の数はキナクリン

二段階発癌モデルを利用した発癌物質の中期検索法を用の用量に相関して増加し、 1及び2群では対照群との間い、肝の前癌病変発生に及ぽすキナクリンの影響についに有意差を認めた(Pく0.OD 。さらに単位面積あたりのて検討した。

GSI‑P陽性細胞巣の面積もDEN処置をしたキナクリン投与
群で増加傾向を示し、 1群では対照群との間に有意差が【材料と方法】
6週のF344雄ラット(チャールスリバー社) 100匹を認められた(Pく0.05)。なお、 5群ではGST‑P陽性細胞巣は認められなかった。

1 群20匹として5群に分け、 1 から4群の動物にはdi‑ethylnitrosa加ne (DEN)の20om8/k"を単回腹腔内投与し、5群の動物には生理的食塩水を同様に投与した。DENを投与した2週間後から動物を屠殺する前日までの6週問、1 及び5群の動物には500即m濃度、 2群の動物には100

学的にはホスホリパーゼA2の阻害作用を有し、毒性学的

即m濃度、及び3群の動物には20P叩濃度のキナクリンをには典型的な脂質症誘発作用を示す。しかし、その作用

CRF、1粉末飼料(チャールスリバー社製)に混じて、またと肝前癌病変の促進作用との関係は不明である。キナク

4群の動物には対照群として同粉末飼料のみをそれぞれ自由に摂取させた。なお、飲料水は試験期間中自由に摂の有無にかかわらず体重増加抑制が認められ、投与期問取させた。キナクリン投与開始の1週間後、エーテル麻酔下にて肝の部分切除(partial hepatectomy: PH)を行
つた。体重は隔週に1回、また摂餌量はキナクリン投与【考察】

キナクリンは抗マラリヤ剤、消化管内寄生虫駆除剤として用いられたアクリジン誘導体の化合物であり、生化

リンは毒性が強く、今回用いた50OP叩用量では、 DEN処置が延長するにともないこの傾向が顕著になった。本物質には積性があり、この現象は毒性が加重されたことに加え、摂餌量の減少もその1因と考えられた。今回用い期閻中に2回測定した。

た50OP肌用量は体重が顕著に低下したにもかかわらず、

実験開始8週間後、一夜絶食処置を施し、体重を測定したのち工ーテル麻酔下で動物を放血屠殺した。肝を摘

GST・P陽性細胞巣の面積及び個数が有意に増加し、また出し重呈を測定したのち、10%中性緩衝ホルマリン液で固定した。固定後、常法により肝の薄切切片を作製し、免疫組織化学的にGST・P染色を施した標本を用い、画像解析

GST・P陽性細胞巣の数が有意に増加し、面積も増加傾向を装置(TAS PLUS: LeitZ社製)にてGST・P陽性細胞巣の肝

GST・P陽性細胞巣の面積及ぴ個数が増加したことから、キ

単位面積あたりの個数及び面積を計測した。

ナクリンはラット肝発癌過程を促進する作用を有するこ【結果】とが明らかとなった。

キナクリンの10oppm投与群(2群)及び20叩m投与群(3群)は対照群(4群)と同様あるいはそれを上回る

10OP叩用量では体重が対照群とほぽ同様であったものの、示した。キナクリン単独では6ST・P陽性細胞巣が出現せず、DENの前処置により、用量に相関して肝単位面積あたりの3.

ラット肝発癌における Adriamycin, Actinomycin D, cis‑dicNorodiamm血eplatinum(Ⅱ)の影響
田中卓二,森下由紀雄,森良雄, 岩田仁,杉江茂幸,森秀樹(岐大・医・1病)

Adriamycin (ADC), Actinomycin D (ACT),

第8群は第2群より有意に低い値を示し九。肝腫癌

Cis‑dichlorodiammineplatinum (Ⅱ)(CIS)は各種の発生頻度は第2群で第 1群より有意に高く,第の悪性腫癌の治療に用いられているが,今回,我々3,5群は第 1群よりゃや高値を,第4,6,8群

は N‑2‑fluorenylacetemide (FAA), phenobarbit81は第2群より低値を示し,第2,8群間に有意差を認(PB)を用いたラット肝発癌過程におけるADC, ACT,め九。第7,9 15群に腫癌発生は認めなかった。

CISの発癌修飾作用を検索し九。

結

材料と方法

語

以上の結果より, ADR, ACT, C玲はいずれも肝実験はFig.1に示す如く,6週齢の雄ACI/Nラ"

前癌性病変ないし腫癌発生抑制傾向を示すが,CISは
3

1

1

GT゛中 1⑪1

0

群に 0.05%PB含有飼料を16週投与した。第3‑8H1

その作用がADR, ACTよりも強い事が示され九。

115匹を15群に分け第1‑8群に0.02%FAA含有飼料を}3週投与し,1週間の休薬後第2,4,6,8

Weeks

群には FAA投与終了後 1,3,5日目にADR,(証臥早 2

ACT, CISをそれぞれ 1,0.02,1即/kg体重,腹腔^万ダιyψιψψψ1ι',,ι'ι'タι,ψ4ι'ガノιψ勿'グガ4,ψι影',,Wιι,ι4'伽GTwf玲 3' 5 'フ

内投与しナこ。第9,11,13群は被検物質のみ,第10,12,14群は被検物質+PB,第巧群は対照群としナこ。
実験開始後30週で屠殺剖検し,主として肝の病理組Gr臥^ 4.6 ' 8^彬ι44ψ4'ι夕がι1,,,,4y4,ι,所',グ1ψψψιψ,4ψψ,ψ,4別,肋GTO^ 9,11

13

12

14

織学的検討を行っ九。
結果(Teb]e D

G血^ 10単位面積(所)当りの肝前癌性病変(小増植巣)

G京叉中 15の頻度は第2群で第 1群より有意に高く,第3,5,^,Mdi吐^即di吐^7群は第 1群より低く,第 1,7群問には有意差をBas.1 di.ヒ

Test ohemiC8」S認め九。第4,6群は第2群よりゃや高値であった

Table l. Effects of ADR, ACT a1浪 Cls on FAA‑iTlduced hepat^己工'cirl(刃alesis

腎

Ib七aユ

樋゛

1

FAA

10

5.09 + 0.25b,C I0.82 + 3.32C

2 ι2)

2(2)

0

2

FAV陀

10

6.92 + 0.20 15.12 + 2.14

8 (23)

θι22】

3 ι3)

5.18 + 0.20C

ヨ.47 + 3.34

4 (5〕

4 ι5)

0

フ.14 + 0.19

15.51 + 4.38

4 (9)

'{9】

0

5.20 ゛ 0.10C

4.31 + 3.70

3B)

3(3)

0

フ.01 + 0.26C

17.30 + 9.フユ

フ(」」)

7ιU)

0
0

玖V即WPB
FAV亙:f
FAV^々Bf^i 詫t α■2

u^τ^

5 5

κ丁

0

0

フ.18 + 0.1B

3.38 + 0.46

2ι5)C

2(5)C

4.84 + 0.24

0.76 + 0.57

005.52 + 0.27

0.85 士 0.82

004.64 ゛ 0.21

0.35 + 0.66

0

0

^

00000

10

●^

即WPB

山.of

5.51゛ 0.1BC 4.09 + 0.19

FAV伍S
nNCISルB

5

567B9即U口玲

nN即R

4

即即如即即

^. of 怠セS.^画」^

3

暑 L1尼t

硬ユght

櫛. of 血t5 With li^ b凱口τ$ι1め. Of 廿冨10TS)

IY^U腔11ヒ

AmたB

5

5.52 + 0.12

0.56 + 0.32

0

0

CIS

5

5.30 + 0.14

0.41 + 0.65

0

0

0

14

仭SルB

5

6.06 + 0.37

0.72 + 1.24

0

0

0

15

^セエ追ミセ1■h乞

5

4.60 + 0.33

0

0

0

0

、劃=^IaSヒic ldule;^=墫胞一 ‑11心a*伽.cb血゛.
、仙0゛釦.
S工中df1伽Tluy dlffe冨凹lt 丘守n .^^Iaセe ^住01 ιPく0.05).

4.

実験肝硬変症生成諸段階のラット化学肝発癌に及ぽす響
0清水昭男"、卸、原田昌興"、

沢成好幻D神奈川がんセ、臨床研 2)横浜市大、病理結果ならびに考案

我々は、有機溶媒furfuTa1の長期経口投与によるラット実験肝硬変モデルを用いて、肝硬変症が肝発

furfura1投与30,90,180日後D則を投与した各群癌に及ぽす影響を検索してきた。これまで、 furfu‑の実験群および対照群の体重、肝重量、肝/体重比

ra1 長期経口投与はラット肝に連続的かつ進行性のの平均値と標差を表1に示す。90日投与群の肝

ヒト乙型肝硬変症類似病変を生成させること、肝硬重量と肝/体重比において危険率能で、また180日

変症類似病変生成後には化学肝発癌刺激に対して'投与群では全ての項目において危険率IXで統計学的受性が増加すること、 furfuta1単独投与では肝癌発有意差を認めた。

生を見ないにもかかわらず、'1Utathione‑S‑trans‑

肉眼的には、 30日および90日投与群においては対

ferase胎盤型(GST‑P)陽性細胞巣はfurfuta1の投照とのに明瞭な差はみられなかった。 180日投与

与期に応じて増加すること、などを明らかにした。

群においては、対照群では90日投与と同様に、褐

また昨年度本学会において、 furfura1は 2‑acetyl‑

色、平坦な小病変を散在性に認めるのみであったの

a口inofluorenによる肝発癌刺激に対してのPr0鳶otorに対して、実験群では肝各葉に直径8四度までの作用を有しないことを報告した。これらの結果から、

表面平滑な隆起性病変が在し、その結果肝表面はfurfura1実験肝硬変症生成後の肝発癌刺激に対して

凹凸不整となっており、著明な差を認めた。

の感受性増大は、 furfura1の薬剤としての作用では組織学的にne叩lastic noduleを有する個体数は、なく、肝硬変の生成と関連があると椎定された0 今

30日投与群では実験群・対照群各2/8, V8、 60日投回、肝硬変生成過程の諸段階が化学肝発癌に対して

与群では各1/フ,0/8と差を認めなかったのに対し、如何なるを与えるかを検索する目的で以下の実

180日投与群では各5/6.0/6と実験群ではχ゜検定に験をおこなった。

より危険率IXで有意に高率であった。
材料と方法

今回、 furfura1実験肝硬変の肝発剤に対する,

動物】 44匹の4週齢雄枇Star系ラットを2'間の無処

受性の増大は、投与30日および90日では明瞭ではな

鍾察後実験に供した.動物はいずれも約22'Cに保く、肝変がほぼ完成する180日投与後においてのたれた清浄飼育室内で高圧滅菌処理プラスチック・み見られた.この結果は、肝硬変としての組学的ケージにて、 12時間一12時間の人工照明下に飼育し、変化の成立後に初めて化学肝発剤に対する感受性

10‑15PP 塩素添加水を自由摂取とした。

の増大が見られることを示唆すると考えられ、肝癌薬却n 試薬特級furfuta1ならびにdi■th" nitroso‑

発生母地としての肝硬変症の役割を考える上で興味

a皿i加(DEN)はいずれも和光純薬より購入した。

ある知見と思われた。
表1 体重、肝重、肝/体重比

実験方法】44匹の実験動物を実験群、対照群各22匹
ずっに分割した.実験群には、実験第30日まで飼料
Ikιあたり 20.1のfuTfuta1を添加した飼料を、以後、
飼料lk'あたり 30窮1の furfuTa1を添加した飼料を自30由摂取とし、対照群には無添加飼料を自由摂取とした。実験第30,90,180日の各時点で実験群それぞれ 8,8,6匹の動物のfutfuTa1投与を中止し、その902週後に実験群、対照群各々に D剛200血客ノkι・別を腹腔内投与した.D則投与6ケ月後にモれぞれの動物をエーテル麻酔下に脱血屠穀、肝臓を採取した。型のごとくホルマリン固定、バラフィン切片を作成し、組織学的韻寮に供し夫:.

180

実験群

対照群

体重(宮)

430.0士15.12

431.8士32.20

肝(8)14.3士 0.73

13.7士 1.05

肝ノ体重比

3.3士 0.21

3.2士 0.30

体重(E)437.1 士 25.82

446.9士20.87
14.1士 1.00

肝重量(')

15.5士 1.19

肝ノ体重比

3.5士 0.33

3.1士 0.09

体重(')

448.2 士 26.64

519.0 士 24.01

肝重量(ι)

19.4士 1.75

15.8士 1.39

肝ノ体重比

4.3士 0.48

3.0士 0.21

G S T

P陽性細胞巣を指標とした中期発癌試験法とその長期観察との相関性
0小木曽正、長谷川良平、 RicardocA肌肌、立松正衛、伊東信行(名市大・医.1病理)<はじめに>

Ⅱにおける肝細胞癌の発生率は、表の如くである。

我々は、発癌物質の検索が2年問の長期を要することから短表1

実験一11こおけるGST‑P陽性細胞巣剥定結果期化を目的にラット肝の前癌病変である胎盤型 glutathione s‑
鮮質の中期発癌試験法を開発し種々の化学物質を検索してきた。
今回本法とその長期観察結果が一致するか否かを、肝または肝以外を標的とする発癌物質・発癌促進物質および肝発癌抑制物
質を用いて検討した。
<実験方法>動物は、 7週令のF344系雄性ラット383匹を用い、 105 匹を実験 1の中期発癌試験法に、 278匹を実験Ⅱの長期観察試

2

Ethlorlin■

10

T1110aC●ta鴨ld8

1318.55 士 5.00 介 1"
1.51 士 0.53 介村'?0.引士14.23 介1" 21.82 土 6.64 介**ι円

115.71 士 3.06 01

日^

14

3.'3 土 1.39

0.22 士 0.11^

13

2.17 士 1.13

0.13 士 0.0了

N己・Lーヨ$corb■t6

14

3.35 士? 08

0.22 士 0.18

仔韻

15

1.07 士 0.51 1 斜0.06 土 0.02 ιネネ^

14

2.99 士 1.51

0.20 土 0.12

非投与

11

2.99 士 1.16

0.18 土 0.08

表?.実験一"における肝細胞癌発生牢
聨

実騒一1
ユ

,

苧

匡背

苧

'

1

実撃一Ⅱ
0

ユ

,

〒

匡首

苧

就高'1.1",1",,,.三冨.ι".20●■.ノ韓豊k督旦睦"桟与"肝1/1匪"切陣[コ糎撞仙質冥験肯塗

有効匹数肝細飽癌(%)

Ethi則lin6

14

フ(50)

111i0急伽temld.

14

13 (93)介■"兜

13

1?(9?) 9ネ村日^

15

5 (33)^

1'

6 (43)

N■・L一■$corb.t. 12

6 (5の

臼韻

18

4 (22)^

17

3 (18)

Eth1伽11nεThlo.C6t.mid.
内日^
胴^Na‑L一●5Corb■t●
臼韻

朽M行玲W玲巧Π

叫月

被験物質

12345678

リ

●﹄

匡『

卑

週

奥

三一

匡肖

■適

2345678

00.43 士 0.24 介'ネ■ Pく0.価.幹 Pく0.01.■*ネ Pく0.001

験に使用し九実験方法は、図の如くである。
虹

GST‑P陽性細胞巣数 C01
面積(鵬1)/ cml

有効匹数

123'567含

tra貼femse 陽性細胞巣の発生を指標とし九発癌・発癌修飾物

被験物質

^

被験物質は、実験一 1・Ⅱとも肝発癌物質として、 1. Ethト3

15 a0の9■"
13 (8D 介■
16 (94) 9■ネ*
1 (6)
11 (6D
6 (開)
'ロフ)
1 (6)

非投与

20

フ(35)

Onine (0.25%) 2. Thioaceta加de (0.06%) 3. ph印obarbjtal, Pく0.05,(PB)(0.05%)(以上飼料中混入)、肝以外の発癌物質として4
N Ethyl N (4 hydroxybut")nitrosami舵(E朋め(0.025%)
5. N Methyl N' nitro N nitrosoEuan id ine (棚NG)(0.005%)**ネ Pく0.001<まとめ>

実験一1でのGST P陽性細胞巣の測定結果と実験Ⅱで(以上飲料水中混入)、発癌促進物質(勝胱)として6. sodiumの長期観察における肝細胞癌の発生率の結果は、

L ascorbate (Na L ascorbate)(5.0%)、肝発癌抑制物質とし

1.肝発癌物質(Ethionine, Thioacetamide, PB)は、 G S T ‑ Pて 7. Butylated hydroxyanisole (B獣)(2.0%) 8. D, P'‑Dia‑

陽性細胞巣あるいは肝細胞癌の発生を著明に促進させた

皿inodiphenylmeth肌e (DDPM)(0.1%)(以上飼料中混入)である。

2.肝以外を標的とする発癌物質(EH別,棚NC)および促進物質

実験一1の動物は、実験開始8週経過後屠殺剖検し、肝はG(Na L ascorbate)は、いずれの試験にも影響を示さなかった。

ST‑P免疫組織化学染色を行い、 GST‑P陽性細胞巣の単3.肝発癌抑制作用のある朋Aは、中期試験ではGST‑P陽位面積(cmり当たわの数と面積を測定し比較検討した。
実験Ⅱの動物は、実験開始 104週経過後屠殺剖検し、各臓器の腫癌発生について比較検討した。

性細胞巣の発生に著明な抑制を示し、長期観察では肌A,即剛に肝細胞癌の発生に抑制傾向を認めた。
以上より、ラット肝の前癌病変であるGST P陽性細胞巣<実験結果>

を指標とする中期発癌性試験の結果は、モの長期試験の結果と実験 1におけるGST P陽性細胞巣の測定結果と実験極めて高い一致率を示すことが明らかとなった。

^其月重カヰ勿言式庸灸ιこヨ、'(ナる,,0、月巴二大ことそ'd》^イ并^^
0 田和弘.高橋道人.佐藤秀隆.岡宮英明・今井田克己.林裕造(国立"試.病理)
長期物試験における心肥大の意義にっいての報告はほとんどなく、各種の合併疾患に基因する心肥大を認識が各 1 例に、また、雌では、牌における髄外造血の亢進が2例、心筋炎、甲状腺のC細胞腺腫、陰核腺の腺がしておくことは重要なことと思われる。今回我々は、 2

各 1例に認められた。

年間の癌原性威験の無処対照群として用いられたラットを対象とし、心肥大がどの様な自然発生病変との関連において引き起こされるのかにつき検討を行うと共に、無と心重量との相関性の有無についても検索を行った0

またこの他、上己の主な病変の症例をめ、病変の有【考察】

その発症機序について考察を行った0【実験材料および方法】

動物:2年問の癌原性試験の無処置対照群として使用されたラット、雄200匹(50匹X4試験分)、雌
1 50匹(50匹X3試験分)を検索の対象とした0 こ
れらの動物は、いずれも日本チャールスリバー社(神奈jlD より 4週齢にて購入した F344/Ducrj 系ラット( SP F)であり、各試験共、 11 5 11 7週齢にて全生存物を屠殺、剖検した。また、中途死亡例にっいては、
1年以上生存したものを対象動物とした。
飼育条件:動物の飼育はバリャーシステムの飼育室にて、室温24土 1 勺、湿度55土5%、換気回数 1 8回

心肥大は、心臓に対する圧負荷あるいは容量負荷等によって生ずるものと考えられる。今回認められた副腎の褐色細胞腫および尿路閉塞にっいては、ヒトの二次性高血圧の原因としてよく知られており、また、下垂体腺、
廊島細胞腫、甲状腺のC細胞腺腫および腺癌等について
は内分泌性の高血圧、大脳の混合型謬腫にっいては神経性の高血圧が生ずる可能性が考えられ、圧負荷によって心肥大が引き起こされた可能性が示唆される。その他、白血病、乳腺の巨大腫癌にっいては、循環血液量の増大による容量負荷によって、心筋炎は心筋自体の障害によつて、また腹膜中皮腫については血性腹水の貯留による循環障害によって心肥大が生ずる可能性が考えられる0ノ時(オールフレッシュ)、 1 2時間蛍光灯照明、 1 2

60

Mean
N = 197

方法:動物を雌雄に分け、それぞれの心重量について
ヒストグラムを作成し、心重量が平均より明らかに重い﹂ΦOEコZ

50

Mean = 133 g
S. D.= 027 g

40
30
20

と思われる動物にっいて病理組織学的検索を行い、心重10量の増加と種々の合併病変との関係にっいて検索を行っ

0■■■■1冒'

した。

巳邸﹂一0

時問消灯の条件下で行った。動物は透明なポリカーボネ
ト製ケージに4 5匹ずっ収容し、床は週2回交換

■■一■■

■一

0.9 1.1 1.3 1.5 17 1.9 2.1 23

た。

Head weight ( g )

【結果】

Fig.1
60
50

乳腺の線維腺(巨大腫癌)が雄2例、雌1例、下垂体腺腫が雄1例、雌3例にみられたほか、雄では腹膜中皮腫、廊島細胞腫、副の褐色細胞腫が各2例、甲状腺癌、包皮腺の腺腫、大脳の混合型謬腫、刊腎の神経節細胞腫、移行上皮癌による尿路閉塞、横紋筋肉腫(肺転移有り)﹂ΦOEコZ

量 1.8 呂以上の動物1 7匹、雌では心重量 1.28以
上の動物7匹にっいて病理組織学的に検索を行った0
その結果、主な所見として、白血病が雄6例、雌1 例、の一愽﹂一0雌雄ラットの心重量のヒストグラムをF i g. 1,2に示した。これらのヒストグラムをもとに、雄では心重Histogram of Heart weight in Male Rats
Mean
N = 147

Mean = 094 g

S. D.= 0.16g

40
30
20
10
0
05 07 0.9 1.1

13 1.5 1.フHead weight ( g )Fig.2. Histogram of Heart weight in Female Raラット腎発癌における糖尿病の影響
小西登1,北堀吉映1,大嶋正人2,日浅義雄2,」.門.Yard3 (奈医・第 11,2病2, NCI・FCRF3)【はじめに】

生について検討するため各群,各屠殺時点における5Strept020tocin (STZ)は,実験的糖尿病を誘発するばかりでなく,ラット腎に対し発癌性を有している.
今回,我々はSTZ を腎発癌のイニシェーションとして用い,同時にひきおこされた糖尿病状態下におけるBarbital sodi瞰(BBS)のブロモーション効果を検索し,腎発癌過程における糖尿病の修飾作用を検討した.

匹ずっのラツト腎を用い,50μ"毎の連続切片(stepSectjon)を作製した.

【結果】

腎病変を dysp lastic foci, adenoma と Carc inomaに分類した.各時点における 1,2,3群問の腎腫癌発生頻度に有意差はみとめられなかったが, step se、【実験方法】

Ction による検索では 1個体あたりの腫癖発生頻度は動物は6週令のF344系雄ラット150 匹を用い,以下

2,1,3群の順に増加しており,この傾向は実験期
問の長期化に伴い明隙となっていった.72週における Carcln0鵬の発生頻度は 1 群2/20 aox),2群12/2
4 (50%),3群眺,4群0奮で, adenomaの発生頻度は 1
群0%,2 群9/24 (38%),3 群4/28 (14×),4 群OXであの4群に分けた.1群及び2群はりン酸緩衝液(P"フ.
4)に溶解したSTZ 50m8/k8 を 1 回腹腔内注射し,3群および4群は同量のりン酸緩衝液のみ注射した.2週
問の休薬期問後に2群及び3群は 400O P叩のBBSを粉末基食に混入し72週問まで投与した.
02

つた.また3群の飴S投与群には腎孟移行上皮の過形成および乳頭腫の発成率が有意に増加していた.一方,

←︼

←■■

33

52

72

マ

▽

ワ

マ

マ

加令に伴う腎症は4群とともに3群の BBS投与群において著明に認められた.これらの変化は STZ投与群でマある 1 群,2群で抑制された. BrdUの labeling in de
X は皮質並びに骸質の尿細管にっいて検討した結果,
3群において是も高く,2群,4群,1群の1順であっ

マ

マ

マ

マ

マ

た.これは腎症の程度と良く相関し,腎腫癌性病変との直接的因果鬨係は認められなかった.しかしながら,
dysplastic fociや adenoma, carcinomaの部位においマては周囲正常尿細管に比ぺ有意に高いlabelin8 index
を示した.

↓:

屋潤・
マ

i.P. injection of sTZ (50 mg/k8)
BBS (4000 叩め in diet

【結語】

Basa l d iet

BrdUはラツト腎症の程度をよく反映し,必ずしも腎腫癌の発生頻度と相関関係は認められなかった.また腎症は STZ誘発による尿病によって抑制されたと考えられた.更に腎症の程度は腎腫癌の発生頻度と相関しないことから,腎症による尿細管の過形成性変化は腎癌発生の直按要因とはならないと考えられた.まSacrifice

実験計画

実験開始後,33,52週時に各5匹ずっ屠殺解剖し,72週時で残りの全てのラットを屠殺した.肝,腎の臓器重量を測定するとともに腎腫癌およびその前腫癌性病変にっいて病理組織学的に検索した,屠殺1時問
前に 10o m8/k8の 5・bromo‑2'・deoxyurid ine (Brdu)を腹腔内投与し, ABC法による免疫組織染色で BrdU 識細胞を腎の部位別に計測した.更に,腎腫癌の組織発

た, STZ並び部S誘発腎腫癌は近位尿細管の特にP1ある

いはP2Se8mentから発生すると推察される組織学的変化が得られた.

Diethylene81yc01の発癌性試験ならびにEHEN誘発腎発癌への修飾作用の有無にっいて
0北堀吉映.,森本純司2,小西壹,,大嶋正人2,

日浅義雄2(奈良医大.第 1病1,2病2)【はじめに】 Diethylene glyc01 (DEC)のヒトへの毒【結果】<癌原性試験>

性にっいては, calveryとκIum即(1939)らが72X DEGを含む10x sulfaηilamideの服用で105 名の死亡を報告している.その蝦告によると腎および肝への毒性が明か

008 当りに換算すると検体濃度に比例し摂取量の増加

で,肉眼的に腎は1 暗く腫大し,光顕的には尿細管上皮細胞の著しい空胞形成と上皮の脱落,肝では中心静脈周囲の空胞形成が観察されている.現在なお, DEC
は抽出剤,各種染料,塗料の溶剤,羊毛および綿など

検体摂取量:雄および雌共に, DECの摂取量は体重1
が全期問を通じみられ,実験開始初期では3群共に摂取量は高く, 14週問目頃からは最終までほぽ一定の値を示した.

生存動物数:最終時まで生存した動物は,雄で2.5%
群26匹(52%),1.2噐群36匹(72%)および眺群36匹(72×),の光沢仕上げ剤等広く使用されている.

雌では2.5X群30匹(60%),1.25%群32匹(64%)および0%群

今回, F344ラットを用いてDEC の癌原性試験および腎発癌への修飾作用にっいての有無を検討したので粗31匹(62×)であった.

告する.

索をおこなった.各臓器とも毒性変化は認められず,

病理組織学的検索:有効動物は引週以降とし組織検
腫癌発生好発部位は下垂体,甲状腺,副腎,乳腺,皮【実材料および方法】

膚などが雌雄共通で対照群と実験群との問に有意な差<癌原性試験>は認められなかった.

動物:5 週齢のF344ラツト雌雄各150匹を日本チャールスリバー社(神奈jlD から購入し,1群50匹の雌<腎発癌におよぽすDECの修飾作用>
腎変化の組織学的分類:腎腫癌関連変化は3つに分雄各3群を設け,6週齢で実験を開始した.
試料: DEGは2.脇, 1.25Xおよび眺の割合で水道水に混じ,飲料水として自由に摂取させた.純度は97%以類した. simple hyperplasia :1 個の尿緬管からなる

上,閲東化学から購入.

Tumor:さらに大きさは増し皮膜で明瞭に周囲組織と堺

実験期問:検体の投与期間は108週問とし実験を終了した.全ての生存動物は採血後,屠殺解剖した.全臓器および全ての肉眼的病変部を摘出し,ホルマリンで固定後,通常の方法で光顕標本を作製し病理学的検され,圧迫性に増殖.

過形成. Adenomatous hyperplasia :尿細管からなる過形成が管腔内へ増殖し,しかし,ほぽ糸球体の大きさ.

発生率および発生数:癌の発生率;EHEN単独群でフ/16 (43%), EHEN + DEC 群で13/19 (68×)およびEHEN+ NTA 群では 14/17 (82%). Adenomatous hyperplas ia

索を行った.

の発生率; EHEN単独群で 13/16 (81×), EHEN + DEC群

<腎発癌におよぽすDEGの修飾作用>

で 15/19 (78×)およびEHEN + NTA群では 17/17 (100×).

動物:6週齢のWist鮎雄ラツト60匹をSLC (静岡)から購入し,1群20匹で3群を設け実験を開始した.

S imple hyperplas iaの発生率; EHEN単独, EHEN + DEG

Initiator:0.1X N・ethyl・N・hydroxyethy1ηitrosa"1ine(EHEN)混入食を 2週問全ての動物に投与した.

群およびEHEN+ NTA 群ともに100%の発生率であった.
発生数;腫癌の発生数はEHEN単独群で7個,1例当り0.43個. EHEN + DEG群で 14個,1例当り 0.73個およびChemicals :① 2.5X D iethylene 81yc01 混入水を

EHEN + NTA群では29個,1例当り 1.70個の発生数であっ30週問投与した.② 1% Trisod ium n itrilotriacetat

た. Aden0朔atous hyperplasiaの発生数はEHEN 単独群

e 朔onohydrate(NTA)混入食を30週問投与した.(すでに腎癌Pr0柳oterとして綴告.」.N.C.1 72.483,̲1984)

で22個, EHEN + DEC群で32個およびEHEN + NTA群では72個であった.

実験方法:動物は3群に分け,1群: EHEN + DEG,
2群: EHEN + NTA,3群: EHEN 単独.実験期間は32【考察】① DECのF344ラットへの癌原性試験の結果,週問とした.全ての生存動物は屠殺解剖後,腎および肝を摘出後病理学的検索を行った.尚,全ての腎は縦

発癌性は認められなかった.② EHENで initiateされた腎発癌過程へのDEC のPromotion効果は,軽度ながらそ

断で1個あたり4切片として標本を作製した.

の傾向が認められた.

BBNによるマウス腎孟発癌におけるウラシルの増強作用
0村井隆1・2、森聖1・2、武内康義1、大原忠雄1、 牧進 1、

林幸之1、福島昭治2(1 シオノギ製薬・油日ラポ、 2名市大.医.一病)
ウラシルはラットへの単独経口投与により、75および71俳8/k8ノ日、ウラシルの摂取量はそ

高濃度(3×)では高率に勝胱癌を発生させ、低れぞれ 3.フ、 0.0、 4.1 および 0.08/k8ノ日であ濃度(0.3×)では勝胱癌を発生させないことがつた。

報告されている。また、 3Xウラシルを N・
butyl・N・(4・hydroxybutyl)nltrosamine(BBN)と同時に投与すると、ラットの勝胱癌

腎孟: NON系マウスの 1 および 2 群において、癌は 1 群で 20%(4/2の、 2 群で 11×(2/19)に発生した。乳頭状ないし結節状過形成(PN過形の発生と進展はともに促進されることが明ら成)はそれぞれ6能(13/2のおよび21×(4/19)にかにされている。しかし、マウスの腎孟および勝胱に対してそのような作用が発現するか発生した。 1群に発生した腎孟癌の4例のうち2例に、肺や肝への転移が認められた。腎孟癌

どうかは不明である。

の A B C 分類(赤座ら、 cancer、 1987)に従う

ところで、我々は、第5回日本毒性病理学と、 1 群の4例中 1例は A (片側性の腎孟癌の会で BBNを投与した NON系マウスにおける腎孟および勝胱発癌について蝦告した。そこで、み)、 2例は B (片側性の腎孟癌および勝胱癌)、
1例は C(両側性の腎孟癌)に分類された。 2 群

この実験系を用いて、ウラシルがBBNによるマの2例はそれぞれ A と B に分類された。

ウスの腎孟および勝胱発癌に対して増強作用を発揮するかど入かを検討した。
材料および方法

ICR系マウスの 3 と 4 群において、癌は発生
せず、 PN過形成が 60%(9/15)および 6Xa/18)に認められた。

動物は、 NON(Nonobese Non・diabetic)系雄勝胱: NON系マウスにおいて癌は 1 群で 11%性マウスの40匹(シオノギ製薬.油日ラポ)(2/19)、 2 群で 47X(9/19)発生し、上皮異形成および Crj:CD・ K にR)系雄性マウスの 40匹(日がそれぞれ2腿(5/19)および79%(15/19)、

本チャールス・りバー)をΠ週齢で用いた。

過形成が100%(19/19)および95×(18/19)に発生化合物としてウラシル(和光純薬)および
BBN (東京化成)を用いた。

PNした。 2 群に発生した勝胱癌の9例中 1例に肺への転移が認められた。

1 群: NON系マウスの 20匹に 3%ウラシル混合

ICR系マウスの 3 と 4 群において、癌は 4 群

CA・1固形飼料と0.04 0.05XBBN含有飲にのみに11×(2/18)発生した。上皮異形成はそ

料水を8週問同時投与した群、れぞれ47%(フ/15)と 17%(3/18)、 PN過形成はそ

2 群: NON系マウス 20匹に 0.05XBBN含有飲料
水のみを8週問投与した群、3 群:

ICR系マウスの 20匹に 3%ウラシル混合

れぞれ87%(13/15)と67%(12/18)に観察された。
尚、腎孟、勝胱の結石形成は両系とも全く認められなかった.

CA・1固形飼料と0.04 0.05%BBN含有飲料水を8週問同時投与した群、4 群:にR系マウスの 20匹に 0.05%BBN含有飲料水のみを 8週問投与した群、を設定して、実験開始1‑8週目まで化合物を投与し、その後20週目まで無処置で飼育した。

実験開始20週目に殺後、勝胱および腎臓を病理組学的に検索した。
結
1

結

^

1. NON系マウス腎孟発癌に対して、ウラシ
ルは部Nとの増強作用を発揮した。一方、
勝胱発癌に対して、ウラシルは両系とも8BNとの増強作用を示さず、むしろ抑制作用を示した。

2. NON系マウスにおいて、ウラシルと BBNを投与した群に発生した腎孟癌の4例中2例に、

果

4 群の BBNの摂取量はそれぞれ 82、 81、肺や肝への転移が認められた。

ハムスターBBN 勝胱発癌におよぼすUracHの効果

10.

0尾崎圭介.・.,Danai Tiwawech',高場克己',宇和川賢"之,白井智之',福島昭治'(,名市大・医・ 1 病理,2住友化学・安全研)(結果)(はじめに)
ラットおよびマウスにおいてN‑butyl‑N‑(4‑hydroxy‑

出現した跨胱粘膜病変を表 1 に示す。 0.05%"肌およびbutyDnitrosamine(朋N)を経口投与すると勝胱粘膜に高3%uraci1同時投与の第 1群において単純性過形成が全例

率、かつ選択的に勝胱癌が発生する。しかし、ハムスタに、乳頭状ないし結節状(PN)過形成が17匹中16伊K94%)

ーは BBNに低感受性で跨胱癌の発生は極めて低頻度であに認められた。ま九、悪性腫癌が 8 例(47%)にみられ、る。まナこ、 uracHをラット、マウスに3%の濃度で飼料にその内訳は移行上皮癌(TCC)が 4 伊1(24%)、上皮内癌(C混じて投与すると UracHそのものから成る可逆性の勝IS)が 3 伊K18%)、血管肉腫が 1 例(6%)であうた。 0.05

胱結石が高率に形成され、それに伴い勝胱上皮は著明な%BBN投与の第 2 群では、単純性過形成およびPN過形成が増殖を示し、いわゆる乳頭腫症の状態を呈する。さらに全例に出現したが、移行上皮癌が10例中 1 伊1(10%)に認

我々はラットに BBNと UracHを同時投与すると朋Nにめられ九のみであった。また、 3%uracHのみの第 3 群による勝胱癌の発生と発育がともに促進されることを見い

おいては腸胱粘膜はすべて正常であり、腫癌性の病変は出している。そこで、今回、朋Nに対して極めて低感受認められなかった。乳頭腫は各群を通じて 1例もみられ性であるハムスターにUracHを同時投与することによるなかっ九。さらに、結石形成はいずれの群にも全く認め

Uraci1の朋N勝胱発癌に対する影響を検討し九ので報告られなかっ六。

今回発生したハムスター廟胱粘膜病変の組織学的特徴

する。
(実験方法)

として前癌病変であるPN過形成は結節状が主体であり、動物は 6 週令の雄性Syri肌 golden hamster 如匹を用癌では冊N誘発ラット勝胱癌に比較的よくみられる内腔い、第 1 群には BBNを飲料水中に 0.05%の濃度で混じ、に乳頭状に増殖する、いわゆる乳頭状・非浸潤型とは異さらにUracHを3%で混餌投与した。第 2 群は0.05%BBNのなり、発生し九 5例すべてが、粘膜下組織以上への浸潤みを、第 3 群は3%uraci1のみを与える群とし、 52週間そを示す非乳頭状・浸潤型の癌であっ九ことがあげられる。

れぞれの投与を行うた後、動物を屠殺解剖し九。勝胱を(まとめ)

頸部にて結紫し、 10%中性緩衝ホルマリン約0.5m1 を注

以上、ハムスターにB卵とUraci1を同時投与すること

入、固定後8分割し、病理標本を作製、勝胱粘膜の病変により BBN勝胱癌の発生が促進された。しかも、ラットと異なり勝胱結石の発生はみられず、勝胱発癌の促進にを組織学的に検索し九。

関して他の要因の関与が窺われる。

T北le lHist010gical Firdings of 卜la鵬ter Bla劇er 印it抽 liL肋(%)
胎li

E仟ective
M). ofGrα畢Treat1肥nt

CIS

SarCα間Total

3 (18)0ao)

1 ( 6)

8(47)

00

(24)

1

0

(10の

0

(叫)

T此
4

0

(10の

O

o

(100)

W

w

玲

n

7

3

W

2

0.備%^

nt tW1めr^ngio‑hYperplasia hYperplasia papi11α胎

n10.05%^+訊 Uracil

ani1胎IS

剛

Si叩le

1(1の
0

訊 Uracil

FN 開Pi11arY or nα士"11ar; TⅨ, transitia'1al ce11 Carcir剛胎; CIS Carclr剛柏 ln sltu

‑20‑

ラツト勝胱発癌プロモーション作用に対するウラシル勝胱結石1曽殖束1激の時期による差異
0 柴田雅朗,山本敦,佐野真士,箱井力呼男,利東昭裕,福島昭治(名市大・医・ 1殉里)

<はじめに>

ラット2段階勝胱発癌のプロモーション過程において、および癌の有意な発生を観察した。ウラシルの8 Ⅱ避曼与

ウラシル投与による勝騰吉石の物理的増殖束1激はプロモーシ

では Nal{CO.および E11BN の群で乳頭腫,癌ともに有意なヨン作用を増幅することが知られている。そこで、発癌過程における何れの時期に増殖束11激を与えると最も効果的なプロ

発生j勸0が示された。ウラシルの12 15週投与では NaHCO.
群の手極頁腫のみに有意な発生j勧口を認めた。

モーション作用の1曽婚効果が発現するかを検討した。

DNA 合成(Table 2)<実験方法>

朋N 無処置のいずれの時期においてもNal{CO.およびEH別6週令のF344ラット135 匹を用い、 1 9群にはイニシ投与群で勝胱粘膜士皮のBrdU標識率は軽度上昇を示し、そのエーターとして0.05%B則を飲料水にて4週ル搬与した後、4 7週(1 3群),8 H週(4 6群),12 15週程度をみると4 7週および8 Ⅱ週投与群でより高値を(フ 9群)の各時期に 3%ウラシル含有飼料を投与した。
また、ウラシノL般与を除く時期に 3% Na11CO.Ⅱ,4,7 群},
0.002%冊N 12,5,8群)および基礎食(3,6,9 群)を投与し走査電顕、的変化

示す傾向にあった。

郎N 無処置群の各時期において、 Na11CO.およびE卵N群の勝胱表層細胞表面には増殖性病変を観察したが、各時期にた。なお、10 18群は朋N無処置群で伺様の投与を行なった。全経過20週で動吻を屠殺音11検し、勝胱を中心に痛里組織学的に検索した。さらに、10 18群にっいてはbromode0渉・おける変化の程度には明らかな差異は認められなかった。

Ⅷidine {Brdu}を用いて勝胱粘膜上皮の DNA合成を測定し、した場合にプロモーション作用力壮曽幅され、日母N群では8

一部の動物については走査電顕的に勝胱の表層細胞表面のⅡ週のウヲシル投与が効果的であうた。このように non・

形態学的変化を観察した。

genotoxiC であるブロモーターと genotoxiCな発癌物質ではウラシル投与時期によりやや異なった反応、を示したが、両者<結果>勝胱腫傷の発生頻度仟曲lel)B剖処置群における各時期のラット1匹当りの勝胱腫癌発生個数物

NaHCO.
日冊N

Pく0.05;

**

癌

孚懐酬重

癌

ウラシル 12‑15避丑与
孛師腫
癌

3.6*

1.1**

2.8**

1.0**

2.フ*

0.3

0.1

0.2

1.3*

1.1*

0.6

0.2

0.2

0

0.3

0.1

0.1

0

検索匹数

孚■頁腫

川川扣

+++
Table 2

各時期のウラシル4‑7週投与ウラシル8‑11週投与

合

処
化

*.

時期は8 Ⅱ週であった。

置B剖

Nal{m0群ではウラシルを4 7週あるいは8 Ⅱ週に投与の化合物において共通に増幅作用を発現するウラシル投与

ウラシルの4 7週投与では、 NaHCO.群のみに乳頭腫
Table l<まとめ>

Pく0.01

朋N熱旦置群における各時期の勝胱粘膜上皮のDNA 合成

処 置
BBN
化 合 物

5
5

田冊N

BrdU標識率(%)
ウラシル 4‑7 週投与ウラシル 8‑11ヨ司投与

ウラシル 12‑15逓登与

5

一一一

Na11C03

各時期の検索匹数

0.16 土0.11

0.12 士0.05

0.10 士0.07

0.14 士0.21

0.18 士0.04

0.08 士0.仍

0.06 士0.四

0.08 士0.04

0.06 士0.13

ラットにおける引020の勝胱発癌プロモーシ"ン作用発現機序の検討

12.

男,五十嵐俊二(エーザイ(株).安全研)

0 青木豊彦,中野渡純一,福田

基礎食のみを与えた。 EI020休薬群には、 5週から 16週問

我々は、昨年の本学会においてi■id能叩γridine系の新同様に 2%のEI020を投与した後、基礎食に戻した。

規化合物 EI020投与によりラット勝胱でみられた増殖性

引叱0継続投与群については、投与後0,2,8日,2,4,8,病変および勝胱発癌プロモーシ"ン作用は、大量投与で生じた高度の結晶尿およぴ結石形成による物理的剌激に

16,23および記週で、休薬群については休薬後2,6日,2,

起因するもので化合物自体に勝胱発癌性あるいは発癌プ

4,フ,16週で各群の5 10例を屠殺剖検し、勝胱について肉ロモーシ窒ン作用はないことを報告した。

眼およぴ病理組織学的に検査した。また、勝胱粘膜上皮

本実験では、 inviv0勝胱中期検索法を用いて、先の結の細胞増殖動態を餌べるため、 Br0■odeoxyurldine (Brd

果を追試すると共に、勝胱の病理学的変化およぴ勝胱粘U)を屠殺 1時間前に腹腔内投与し、 BrdUの免疫染色を実膜上皮の細胞増殖動の変化を経時的に検討した。

施し九後、勝胱上皮細胞1000個あたりのBrdU陽性細胞数をカウントしラベりング.インデックス(LD とし九。
<結果>

<材料と方法>実験には、雄7週のF344ラットを計195匹用いた。

①肉眼所見:勝胱結石は、 EI020投与後8日にはじめて

0.05% N‑butγ1‑N‑(4‑hydroxybuty Dn itroS8● ine ( BBN)

出現し、8週目以降、勝胱粘膜肥厚と共に有意に増加し含有飲料水を4週間投与した後、 EI020継続投与群には、23週以降全例にみられた。勝胱粘膜の肥厚は休薬後4週ま5週目から 2%の濃度のEI020を混餌投与し、対照群にはでみられるものの肉眼的な勝胱結石は休薬後4週までに完全に消失した。
心14「〒而可函石^②組織所見:病理組織学的に腫癌性病変の出現頻度は、
0

2%EI020投与後、乳頭腫が23週時点で、癌が32週時点で9有意に増加しており、一方、勝胱単位基底膜長あ允りの病変数は、投与後18週時点で既に勝胱の前癌病変である

0.

4

PN(結節状/乳頭状)過形成の有意な増加を認めた。休

.,

10

0
Σm

3

40

30

20

薬群では腫癌性病変の頻度も単位基底膜あたりの病変数も継続投与群に比較して低下し、対照群と差がみられな‑O「下耶liE吊三「EO0ミ

かった(左図参照)。

......■■■....●●■■●..■.^

2③細胞増殖動態:勝胱粘膜上皮細胞のBrdUのUは、

mc0一のΦ一で.0

EI020投与群で投与後8週以降から増加がみられた。一方、休薬群ではBrdUのL1は休薬後急激に減少し、休薬後6日で0は既に対照群のレベルまで低下し差を認めなかった。
<考察およぴ結論>

0.

「、6磊示る吊ミ「

今回の結果から、先に行ったin Yiv0勝胱中期検索試験..

dを追試し、ラットにおいてEI020による勝胱発癌プロモー゛.

シ,ン作用を確認し九。今回、経時的検討を行うことに.,.....0...............

より、この勝胱発癌プロモーシ"ン作用はEI020の投与期間と勝胱結石形成に密接な相関が認められ、 EI020のラッ
10

0

20

30

40

EX凶"m■n仏IP●Πod (we●捻)..^^ Contr01 .酬"0....,2%EI020
Fig^ 2%EI020旧ec)

S9quential changes of preneoplastic/ Neoplaslic

Lesions in the urinary Bladd引 Treated with EI020

トでみられた勝胱発癌プロモーシ"ン作用の発現機序は化合物自体によるものではなく、勝胱結石形成による持続的な物理的剌激に起因するものであることが明らかと
なった。

13.

ハムスター短期騨発癌モデルにおけるDiethylnitrosa口ineの牌イニシェーシ,ン活性

0天沼利宏、水元一博、高島吉治、下地尚史堤雅弘、丸山博司、小西陽一(奈良医大.がんセンター.腫癌病理)

我々は、既知の騨発癌物質であるBOPを用いてハム【総括】

スター短期肺発癌モデルを開発してきた(JNCI.198
8;80:1564‑1567)。同モデルは、 10週間という短期

DENは肝.上部気道をはじめとして各種器におい間で高率に騨管癌を発生させる事ができる重要なモて発癌性を有するが、騨発癌性についての報告は種々の投与ルート並ぴに動物種を用いた多くの発癌性デルである。

試験においても見られていない。今回の知見は、in

今回、このモデルがBOP以外の発癌性物質の検索に

ViY0においてDENは騨に対してイニシエーシ,ン作騨に対しては標的性を示さないとされるDENを伺モデ用を持つ事を示唆するものである。

ルに適用したので報告する。

この縢病変を指標とした実験系は、単に騨発癌物
質のみならず、広く発癌物質の短期検索法としての有用性が考えられ、今後更に検討していきたい。

【材料と方法】
動物は6週齢の雌性 Syrian‑80lden 系ハムスター
合計102匹を用いた。実験デザインは図 1に示す。 1●乞倉

おいて有用であるか否かにっいて検討する目的で、

0゛●U,●

群は10o m8/kEのD則腹腔内注射ΦEN19.)によりイニ
シエーシ"ンした後、 50 ■8/k8のDEN腹腔内注射(OE才N59)を8回繰り返した。 2群は 1群と伺様の処憧に

コ

曇.""●

1

加えて、 4日間コリン欠乏食を投与しつつ、'

ethionine 500 ■8/k8 の4日問連日腹腔内注射と、
6

配thioni舵 800 叱ノk8 の 1回腹腔内注射を行う一連の処匠( aU8口entation pressure(AU'))を 3 回実施し,

舌●^ 3き1,,●,■●0 ●4 ●●

TO更冒,."肌.州.1,.".' 1●."

九。 3、 4、 5群は各々、生理食塩水、 70 8/k8の

早:0亜M ,"朗削、,1,↓、:●0, M ^●,..,:刷.■h,.",..与伽師0ん0 1..

BOP皮下注射(BOP7.)、あるいはDEN1舶にてイニシェ^: C島.制"●.".,."1 ',.,,.0是""輔".1巨↓●●0,"所",■●.ι●し冊,、,●","●■此""0,.P

Figure l. Expe"mental protoc01

ーシ"ンした後、 AU'と20 ■εノk'のBOP皮下注射(BOP2.)を8回実施した。
各群とも試験開始10週間後に屠殺し、肺を病理組織学的に検索した。

Tabl0 1

Exporimental delails and body, pancrをas and liv.r woight ol hamsters

Group

Tr●●lm●"t【結果】

肺における"yperP18S ia、 Atyp iC81 hyperplasia、および Carcin0 8、あるいはこれらをあわせた総病変の頻度とハムスター個体あたりの総病変数を表2●与増加がみられた。

3

肺体重比は腫癌形成がみられた6群において有意な之はAUEを実施した2から6群において増が抑制され、

1

各群の体重および嵐器体重比を表1に示す。体重In"1.1EⅡ●eⅡ冒●DEN{100,50翼3】

20

20

距朧器詔刈
!ιIL闇;1,1啓20・3)
9:ι鶴:巴ι:OP(20・3】器,N:、.瀦.1

之,
20
2,
20

P■"e,●血,,'■士7■ 16ユ士1,

0.'6士0.07'.0,士0.23島1之0,フ.1士●.●,27全14■1 0.4,士0.,0

4.4●士0.'6bl20

97.0士7.4 134土16el o.4,土0.07

き.フ,士0.26

之0●■■'フ.1 ,26士13C) 0.尋3士0.0,

4.03土0.35dl

之0,'.●士'.4,才0士13■'●1 0.'5士0.12b," 3.06士0.才'

U¥●r

Table 2.1ncldenC●日nd number30I P8ncr.atlc le310"SGroup

EⅡ●C"リ●
numb●' 01
h■,"季1●門

Incld●"C●ι郭)M●■""UI"b●,魯

T01■IP■nC門■"C H¥P●rP1■零1■■ AIYPιC.1 C.,elnom..

゜',::,::豐宵

1●豊10n尋.j hYP討P1■尋1晶与,23●6

ずかにみられ九のみで、対照群である1群に比較して有意な変化は認められなかった。

10門ooo b.樹.}FI".1"劇0"1"0■"", dl".門"1 h0惰 0,OUP ●.,.0.0,

群に対して各病変の頻度ならぴに総病変個数が有意加した。一方、 DENでイニシエーシ"ンした後、 AUEと DEN5.を 3回実施した 2群では、 Hyperplasiaがわ

Inl".1.) 0.1.■r.官MW"、,"腸.",士 S.0、1 馴■"Ⅱ1心●n"y 'Ⅱ"門"1 h0吊,rouP 3. P'0 伽1■曇抽"1"■●"N,'Ⅱι●f●"1 h0柵 or.U0 1. P.0."1に示す。陽性対照となる5群においては対照群の3に増加した。 D別でイニシエーシ"ンした後、 AU8とBOP2Bを3回実施いこ4群においては総病変の頻度ならびに個数が対照群である3群に比較して有意に増Bod¥智.'0川.){oj

Numb●10l h■r"与胎門

才0

0{0}

010.0)

0(0)0ιの0.00土0.00

204(20.0)4(20.0)

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0.20生0.●0.】

205(25.0)ユ(,0.0)3(,5.0)1(3.010.35土0.73

才013{屡5.のdl■(●0.0)与{25.0】3t,5.0),.00士0■5.)

1■

1●{100.01.1

10ι100.0).},'ι■●.ユ).1

17(■●.5).1

T.,■士3.76""} 0■t●●門■"OW"●Υ冊●"急士 3.0.
■1310"1"■●"", dⅢ酎●州"0吊 ofoup ,. P竜003●) 310"Ⅱ'e■"tlY d1Ⅱ●門"1 "0市音rouP 3.,40.伽●1 き10"Ⅱle●州,Y dl"●門"1 1.●吊 orou0 3, P'00,"豊10""ιC■""Y d舶,●f●"1 "0帥,'OUP コ.,'0.MI

ノ＼'、ニス 5オ

14.

P 4.4‑8 d>^司生7き=牙コて》'しこ

B () P言秀^月華^しこニヨSιナそ,^王見0篠田和俊1.古川文夫1.福原守雄2.佐藤元信1.高橋道人1(1国立衛試・病理,2国立公衛院.衛生薬学)【はじめに】

我々はすでにハムスター肝ミクロゾームより精製した
3‑methylcholanthrene ( 3 ‑M C)で誘導される3種のP 450分子種の中にアフラトキシンBI(A F B)を代謝活性化する分子種を見いだし、この分子種(P448
1)がハムスターに特徴的であり、ラットや他の動物の主要な分子種に比ぺてAFBに対する活性が極めて高2)腫癌におけるP448‑̲1̲の発現
BOPを処した動物においては、胆騨共通管および膝管のP448‑1陽性細胞の染色性が無処置の場合に比して増加した。また、騨腺癌、異型増巣はP448

1陽性を示した。一方、腺房細胞や島細胞、さらに随伴病変である胞状増殖巣では陽性細胞を認めなかった。

いことを報告した。

【考察】

今回、免疫組織化学的にP448‑1の組織分布や誘導の様式を検討し、併せてN‑nitrosobis(2‑O×opropyl)ー
amine(BOP)により誘発される騨癌での発現についてと反応し、他のP450分子とは交叉しないことを実験で用いたポリクローナル抗体はP448‑1のみ
Western blot法によって確認している。さらに今回の免検索を行った。

疫組織化学の結果は Western blot法や Sandwich ELISA【材料と方法】

法による種々の臓器でのP448‑1の定性/定量結果

実験1:7週令の雄性シリアンゴールデンハムスターと一致した。

(日本SLC)を用いた。 3‑MCはオリープ油に溶解(1.25% W/V)し、 25 m'/kE b.W.の用呈で 1日 1 回、 4日問連続して腹腔内投与を行った。また、対照物には無処置動物を用いた。品終投与から3日後に工ーテル麻酔下にて瀉血屠殺して主要臓器を摘出し、各臓器におけるP448‑1の組織内分布を免疫組織化学的に検索した0

実壁2.:5週令の雌性シリアンゴールデンハムスター(日太SLC)を用いた。 BOPは生理食塩水に溶解(0.1% W/V)し、 10 mE/kE b.W.の用量で週 1 回、 5週問

本検索において騨管やBOPにより誘発された騨腺癌
はP448‑1陽性を示したのに対し、腺房細胞や嚢胞状増殖巣は陰性であり、 BOP誘発のハムスター廊腺癌が脚管由来であることを示唆していた。

以上の結果から、 P448‑1ポリクローナル抗体を用いた免疫組化学は、ハムスターの発癌過程を検索する上で有用な手段になり得ると思われる。

表 1 1mmunohistochemical Findings of cytochrome
P448‑1in Hamsters

Histochemical findings

皮下投与を行った。呈終投与から30週後に工ーテル麻酔下にて瀉血屠殺して樺臓を摘出し、騨癌組織におけるP448‑1の発現を免疫組織化学的に検索した0
尚、免疫組織化学には3‑MCを投与したハムスターの肝ミクロゾームからP448‑1を精製し、これをウサギ(雌)に免疫して得たボリクローナル抗体を用いた0Organs組織は 10%中性緩衝ホルマリンにて固定後、常法に従い

StomachNormalLung : bronchi01θS
alveoliHeart

Salivary 91andLiver
Intestin8:$rna11

パラフ'ン切片を作製し、 ABC法により免疫組織化学

Iarge
Pancrea$

的に染色を行った。

aclnarislet【結果】1) P 448‑1 の

+

duct

布と・エ

P448‑1陽性細胞は無処置ハムスターでは気管および気管支の上皮細胞(クララ細胞)、小腸と大腸の粘膜上皮細胞、胆廊共通管およぴ廊管に認められた0 また、
3‑MC投与によってP448‑1を誘導したハムスタ
ーにおいては陽性細胞は上記の組織の他に肝細胞や精巣上体でも認められた(表 1)。

SpleBnKidney : tubU1θ
glomerulus
Urinary bladd8r
Prostate
TestisEpididyrnis

negative,+:

Positive

3・Mc treated+15.

ラット縢管癌皮下継代移植系の樹立

゜辻内俊文、堤雅弘、天沼利宏、田村一利、白岩和己、小西陽一(奈良医大.がんセ.腫癌病理)
肺外分泌腺由来の悪性腫癌は、ヒトの場合には大部分質の変化はみられなかっ九。
が縢管癌であり、腺房細胞癌は稀である。一方、実験動

一方、ハムスター縢管癌移植系はN‑b is (2‑物では、ハムスターの場合はヒトと同様であるが、ラッOxypropyD nitrosamine (BOP)

トの場合には大部分が腺房細胞癌であり、肺管癌は稀でを腹腔内投与して発生させ九縢管癌を同系ハムスター皮ある。このように、肺癌の組織型には種により好発する

下に継代移植し九もので現在55代である。この腫癌のものが大きく異なることが知られている。しかしながら増殖に関して性差はみられなかっ九。

何故に動物種により発生する肺癌組織型が異なるかにっ

今回の結果より、ラット肺管癌移植系は肺癌研究の有いては未だ十分には理解されておらず、この点を解明す用な実験モデルとなりうると考えられる。
ることは、ヒト胖癌の発生要因.発生母地などを研究す
るうぇで重要である。今回我々は、ラットに発生し九縢管癌の同系ラ"ト皮下継代移植に成功し、その生物学的特性及び増殖特性についてハムスター胖管癌継代移植系

Tabl0 1

Immunohlstochomlcal characlerlzatlon olthe Notmal pancreaS 8nd
Pancreatic Duct C8rcinom8 in Rat
キ、GTP

PT'

一一

duct■I C●11宝皐CI"■I C011与+一と比較検討し九ので報告する。

移植に用い九ラット縢癌は、 n ewb o r n w i ‑GST.P"ormo poncr●■卓0■C●卑10"●"γ
一士
OtC●●■0"●",、士

゛{■PIC.1】+

゛ t■P1心0"◆化,U血 bord."士」31●I C.1」魯ducl C●,CI"om■

Star雌ラットに体重kgあ九りlgのN‑bis

C■n0■r C●1"

0心C●,10".ⅡY(2‑hydroxypropyl) nitrosa‑m i n e (BHP)を腹腔内に 1回投与し、 1年後に発生し九ものである。摘出した腫癌は酢酸エタノール固定

T8bl0 Ⅱした後、常法に従いパラフィン包埋して連続切片を作製

Pancreatic Duct carcinoma ln Hamster

Immunoh13toch●mlcal ch自racter↓Zauon ofth. Normal pancrea$ and

し病理組織学的検索を行った。その結果、 HE染色にて

PT貞

゛一一

土一一

●CI"●f C●11与られ九。 Table1に示すように、フ‑GTP染色陰

GST.P

一゛一

腫癌細胞が乳頭状・腺管状に増生しており縢管癌と考え,GTP"orm● P●"C門●■
duC1■I C●1胎
1魯胎t c011与
duct C■rcln0■"具0OC■創on.Ⅱ,

性、 GST‑P染色陽性であり、免疫組織化学的にも縢C■nco' C■11畢

』゛

゛

゛

管由来と考えて矛盾しないものであっ九。ま九、 Tab
IeⅡに示すように、ハムスター縢管癌と比較しても大差は見られなかっ九。

継代移植は、腫癌を無菌的に摘出し九後、 Eag le
MEM培養液中で約lmm角に細片し、移植針にて同系

Table 1Ⅱ

Obserν且tion perlod, T『ansplantabiⅢy, Doub11"g Timo ot pancroatic Duct
Carcinoma in Each GenEra"on
季P●C胎季1 含1

1.ι".」.

2nd」"■」0
1.m.1.

い移植率100%、腫癌容積倍加時間は6.26日であつ九。 2代目は雌雄のラットを用い九。移植率は両者とm■1●
1●1"■1.
m●1●
1●m皐」●

5thm■1●1.m.」.

52thm■1.
1●m■1●

も100%であっ九が、腫癌径の増大は雄で雌より著し
H■m訓●rかった。 3代目以降は雄ラットから雄ラットへ雌ラットから雌ラットへ移植し継代を続け九。ラット縢管癌は継代するにっれ間質が増加する傾向を示したが、腺管形成能は保持されてい九。ま九組織化学的にも継代による性

7フ

31d
'1h

書.●急■8eⅢに示すごとくである。継代初代は雌ラットのみを用

゜"鮎鴨:噐.1."00
ヨフフ

ラット背部皮下2か所に移植し九。移植結果はTab l "..

0●n●ro"on"""叩1劉'""",

゜゜"tl:1,}'叫

3J●

(75)

'.き士,.6

1■/之0
1■/20

開

3.0士0.5
3.5士0'

20/20
20/20

郡:}
鬪
ネフ1才0
1●120
鬪

6■士1.3
14.5士6.5

1●1才0
1■120

●.,士1.3
5■全1.010110,00

5.2士1.2'.7士,.0,. 1,。。1

き■士之.0■.5士1.急化学発癌剤処圃マウスに認められ九乳腺腫癌の組織形態像

16.

0宮川義史,

柿本恒知

安全研)(日本たばこはじめに

マウスの乳腺腫癌発生には、遺伝因子、ホルモン因子及び乳る腫癌発生の促進はみられなかっ九。MNNG投与群ではいずれの癌ウィルス(MTV)の存在が複雑に関与しているが、ウィルス系統とも腫癌発生率は低く、0 フ%の発生率であった。これら

誘発癌を含むいわゆる自然発生乳癌と化学発癌物質で誘発し九の乳腺腫癌はすべて70週以降に認められた。発生した腫癌の組乳癌では発癌過程に相違があると考えられ、組織像にも差異が織形態像は系統にかなり特微的であり、 CDF1マウスでは、立方。忍められる。化学発癌剤処置を行っ九マウスの乳腺に、自然発上皮でうちばりされ周囲を筋上皮細胞が取り巻く小型の嚢胞状生あるいは実験発癌においても極めて稀とされているC型腺癌

腺管の集合よりなるC型腺癌、及び腺上皮成分と筋上皮細胞と及び澀合腺癌(Mixed adenocarcin卯a)をはじめ様々なタイプの思われる紡錘形細胞両者が増殖する混合腺癌が大多数を占め九。

唖癌発生を認、めたので、組織形態像を中心に報告する0混合腺癌における腺上皮成分は立方上皮あるいは円柱上皮の乳頭状増殖ないしは腺管様増殖が主体で、稀に皮脂腺様柵造、骨様組織、粘液腫様組織が腫癌内に混在して認められた。一方、

突験材料と方法
7週齢のBALB/c crslc. C57BL/6 Crslc, DBA/2 Crslc, BDFIDBA/2マウスでは、乳頭状増殖を特徴とし、嚢胞構造、従様構(C57BL/6 Crs lC 早 X DBA/2 Crs lC き)' CDFI(BALB/c ctslC 早 X造、腺房構造など多彩な形態像を示すB型腺癌が主体であ0た

DBA/2 CrslCき)系の雌マウス各120匹を用いた0 化学発癌剤処が、自然発生例に比較すると筋上皮細胞が目立う九。即F1マウ

置として、フ,12‑d imethy lben2 [a] anthracene ΦMBA) 50 μ Eあスでは小さな腺房様構造を特徴とするA型腺癌、 B型腺癌、 C

るいは N‑methyl‑N'‑nitro‑N‑nitrosoguanidine (MNNの 500型腺癌及び混合腺癌が同程度に認められた。

μEを背部皮膚に 1回塗布した後、動物を二分し、一方(各群考察別)匹)には12‑0‑tetradecanoylpholb01‑13‑acetate (TPA) 0.5

μEを週3回、残りの半数には溶媒のみを2年問にわたり塗布L

乳癌低発系と考えられている5 系統のマウスにDMBA処置を行た。実験開始108週後に全生存動物を屠殺・剖検し、死亡例もい、 3 系統のマウスに比較的高率の乳腺腫癌発生を認め九。発含め全例にっいて乳腺を中心に病理組織学的検柔を実施し九0

生した腫癌の組織型に系統差がみられ、CDF1マウスではC型腺癌及び混合腺癌が主体をなした。両腫癌は極めて発生が稀とされている腫癌で病理発生も明らかにされていない。我々の観察

結果

DMBA投与群では比較的高率の腫癌発生を認め、 CDF1マウス

する限り、両腫癌間には形態学的に移行が認められ、腺上皮成27%、 DBA/2マウス 26%、即F1マウス 15%、 BALB/Cマウス 2%、

分はおおむね細乳管上皮由来と思われ九。 B型腺癌と混合腺癌

C57跳ノ6マウス0%の発生率であっ大(T3ble D。 TPA処置によとの関連は明かではなかっ九。

T急ble lno. of冒ith

a●口窒ryAdeno‑

Adeno‑

Adeno‑

Mixed

Adeno‑■Ice

角念血■急rytU画orsC急rcln0■aC急rc ln0■含C急rcln0西3

adeno‑

きC急nth0負且

type At了Pe B

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CarC1110ma

tU■or (X)

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0
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﹂0000

CDFI

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BDFI

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1 (2)
4 (フ)
1 (2)
3 (5)

10414

Or

MNNC

C57BL/6
BALB/C
DBA/2

95
58
5
58
50
6

削NC/TPA

ーー0ー6

CDFI

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BDFI

0 (の
1 (2)
15 ( 26)
9(15)16(27)

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0τ

DMBA

C57BL/6
BALB/C
DBA/2

兄郭能印印

DMBA/TPA

00000

StraiR00210

no. ot

0031ー

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014'フ

Total

E!tecuYe

00118

Hist010Eica】 types ot 0急0■ar丁 tⅡ■ors

NO. ofMouse

00

Treat■ent

Incidence .nd hist010宮ical types ot ■急里■急ty tU負ors in ■ice t re急ted 闇ith cheniC窒I C急rcin0宮ens

ラ・,ト子宮内膜腺癌の発生に関する実験病理学的研究

17.

一内分泌異常と腺癌の発生との関係一0永岡隆晴1・2,小野寺博志1,前川昭彦1 (1国立衛試・病理,2吉富製薬・安全研)
我々は第 4 回日本毒性病理学会で, DonryUラットに子

3)子宮内膜の経時的変化

宮内膜腺癌が高率に自然発生し,モの発生には内分泌環

DonryUラ・"トにおける子宮内膜の組織学的変化は,持境の変化が大きく影響している可能性を報告した。今

続的発情の発現し九時期にほぽ一致して被蓋上皮および回,我々はDonryUラットにおける子宮内膜癌の発生機序

内膜腺の一部に出現した。被蓋上皮の組織学的変化は,を更に検討する目的で,腺癌嫌発系のF3"ラ・"トを対照高円柱状化,細胞異型および上皮内での腺管形成等としとして,連続的に性周期の観察を行うとともに,経時的てみられ,これらの形態変化は8および10ケ月齢で程度がに動物を屠殺し,血中ホルモンの測定および生殖器の組増し, 12ケ月齢では上皮が乳頭状を呈するとともに上皮

織学的検索を行い興味ある結果を得たので報告する。

内ないしは上皮直下での小腺管形成が目立っようになり,

方法

上皮下の一部では小腺管の充実状の増殖も認められ九。

DonryU ラット 53例およびF3"ラット'7伊1について生後15ケ月齢以降腺癌の発生がみられ, 15 および 18ケ月齢の計月より 15ケ月まで性周期を連続的に調べ九。ま九,別各1例で被蓋上皮由来の小腺管より発生したと思われるのDonryUラット59例およびF34'ラット55例について,生腺癌が認められた。内膜腺の変化としては,一部の腺で後6週および6.8,10.12,15'18ケ月の各時点で5‑H例ずつ

肩平上皮化生様変化がみられ,部分的に腺腔を形成するを選択し,5日問腔垢を採取の後,エーテル麻酔下で腹所見もみられ大が明らかな増殖性変化は認められなかっ部大脈より採血し九。続いて生殖器を採取し, 10%ホ

た。 F344ラットでは,肘月齢で持続的発情を示し九 1例

ルマリンで固定し九後,定法に従うてHE染色標本を作製

のみに内膜上皮の軽度の増殖性変化がみられた。

し光学顕微鏡で観察した。性ホルモンとしては, 17β一estradi01(E2)とProEesterone(P)を選び, RIA怯で血衆中の値を測定した。
結果
1)性周期および性ホルモンの検索

考察
子宮内膜腺癌と内分泌異常との関係は古くから指摘され,モの発生にはホルモン特にエストロゲンが重要な役割を果九しているといわれている。 DonryUラソトでは生後5ケ月齢より持続的発情に示される内分泌異常が発現し,DonryUラ,トでは持続的発情が生後"月齢で約 10%に

この時期にほぽ一致して内膜被蓋上皮の高円柱化ないし発現し六後.加齢に伴い漸増し,"月齢以降には80‑90

腺管形成と内膜腺の肩平上皮化生様変化がみられ九。こ%の範囲に達した。これに対して門'4ラ,トでは生後9れらの変化は,持続的発情の頻度や卵巣の萎縮の程度とケ月齢より少数例で散発的に持続的発情が観察され九が,相関していること,ま九子宮内膜の円柱上皮の肩平上皮

加齢とともに増加する傾向はみられなかう九。性ホルモ

化生にはエストロゲンの関与が指摘されていること,さンの検素において, DonryUラットでは加齢に伴う E2およらに DonryU ラットにおいては E2/P値がF344 ラヅトのそれ

びPの値の低下がみられ, E2に比しPの低下の割合がよりに比べて, 12ケ月で約7倍高か 0 たことなどから,プツ

大きかっ九。その九め, E2/P値が10ケ月齢より漸次増加

ト子宮内膜癌の発生にはホルモン環境の変化,特に相対する傾向を示し, 12ケ月齢での DonryU ラットの E2/P値は的なエストロゲン(E2/P)の高値がきわめて重要であると

F344 ラ,トに比べ約?倍高かった。

考えられる。第4回の本学会で報告した如くDonryUラッ2)生殖器の重量および組織学的変化

トの自然発生子宮内膜腺癌は形態学的および生物学的特DonryUラ・,トでは,加齢に伴った卵巣重の減少がみ徴がヒトのそれらに類似し,今回の結果が示すようにそられ, 12ケ月齢以降には6週齢の重に比し実重で約の発生機序もヒトの内膜癌の場合と類似していることか

1/2,相対重で約V4の値を示した。重冠減少が認めらら, DonryUラットはヒトの子宮内腹癌の動物モデルとし

れ九卵巣では黄体の欠除や卵胞のCystをともなう萎縮性て有用である事が示された。

変化がみられ,腔では上皮の角化が認められた。これら
卵果や腔上皮の変化の出現は,持続的発情の出現と一致していた。これに対し, F344 ラットにおいては,卵巣の実重量は各測定時点でほぼ同等であった。

18.

^^王里^白勺石升^
トヨニ^プヨ月莫^d>^^しこ^すー^とd)キ目^^四日^月重^と子二^Pa ^^0 小野寺博志.永岡隆晴.渋谷淳・小笠原裕之.前川昭彦 (国立衛試.病理)ー^、ニノボリープを認めたのみで、 BOP 投与群では内膜癌も含め腫癌の発生は認められなかった。子宮内膜は対照群で正常の所見を示していたが、BOP 投与群では内膜被上皮の高円柱状化、細胞異型が見られ、更に、上皮内あるいは上皮下での腺管形成が見られた。また内膜腺の平上皮様化生が多発し、少数例においては内膜過形成と考えヒト子宮体部癌発生の high risk 因子として不妊、肥満、糖尿病、高血圧、卵機能障害(多嚢胞性卵、機能性卵巣腫癌)や長期間ピル服用等があげられており、腫癌発生と内分泌異常との関連が古くより指摘されている。実験的にマウスではホルモン、特にエストロゲン投与により子宮内膜腺癌が誘発されることが報告されているが、ラットではホルモンや化学物質などの投与でこの腫癌を高率に誘発することは困難であるとされている0られる組織像を示していた。

歴上皮は BOP 投与群で殆どが角化していた。これに対し対照群では少数例で角化を示したが、多くの例では円柱上皮様細胞の出現を認めた。ホルモン測定の結果、E2および P は個体間でバラツキがあるものの、対照群と
較ぺ、卵巣腫癌のない BOP 投与群ラットでモ2 と P 値、
特に E2 値が著しく低下していた。これに対し、卵巣腫癌を有するラットでは対照群より低いものの、卵癌のない BOP 投与例に較ぺ、E2 およびP がを示し、特に巳で顕著であり、 E2/P 比は対照群より高かった0

残々は第4回日本毒性病理学会で DonryU ラット1こは子
宮内膜腺癌が高率に自然発生するが、 F344 ラットではその発生はきわめて稀であることを報告した0 更に、第48回日本癌学会総会においてBOPをラットに経胎盤投与すると、そのF1に卵巣腫癌(穎粒膜細胞腫/黄体腫)が高率に発生することを報告した。今回、我々はこれら卵巣腫癌と子宮内膜病変との関係にっいて病理組学的検索を行い、興味ある知見を得たので報告する0【考察】【実験材料・方法】

例に認められたのみであった。

今回の実験において BOP 投与群には、子宮内膜腺癌の発生は 1例も見られなかったが、内膜被糧上皮や子宮腺に形態学的変化がみられ、一部には前癌状態と考えられ
る内膜過形成の像も認められた。子宮内膜にみられたこ
れらの病変は子宮内膜腺癌好発系である DonryU ラットの子宮内膜の経時的検索でみられた変化と伺様の病変であった(本学会で永岡等が発表)。また BOP 投与群と対照群との腔上皮および卵所見の違いは、子宮内膜腺癌を有する DonryU ラットと有さないラットとの違い、
あるいは DonryU ラットと F344 ラットとの系統による違いと同じであった。これらのことは、対照群と較ぺ
BOP 投与群において内分泌境の変動、特にエストロゲ
ンの高値状態を示唆していると考えられる。ホルモン測定の結果からも卵巣癌を有するラットにおいては相対的なエストロゲン(E2/P)の高値が認められた。 BOP 投
与群に子宮内膜腺癌の発生が見られなかった理由として、観察期間が短いことや、 F344ラットが子宮内膜腺癌嫌発系であることなどが考えられる。更に長期間観察するか、あるいは好発系ラットを用いることにより子宮内膜腺癌の発生が期待できると思われ、本実験系はヒトにおける卵巣癌と子宮癌発生の関係を検討するための良い実験

実験全期間を通して子宮の癌は対照群の 2 例に内膜モデルと考える。

動物:F344/Duorj 8 10週齢
検体: N‑Nitrosobis (2‑O×opr即yl)amine (80P)
方法:動物を一晩交配させ、腔スメアーで精子を確認した日を妊娠1日目とし、妊娠14、 18及び20日目に生理食塩水に溶解した BOP を 10m8/kE B.W.で、合計 3回皮下投与した。対照群には伺様の方法で生理食塩水のみを投与した。出生した F1 は4週目で離乳させ、その後は無処置で飼育察した。実験群、対照群の少数例について
血疑中の性ホルモン(17β一estradi01 [E2]および Pro‑
Eesterone [P])を RIA 法により測定した0 生後 87 93
週目に全生存動物を屠殺.剖検し、常法にしたがい病理
組織学的に検索した。
【結果】

卵巣腫癌の発生率は対照群の 0%に対し、BOP 投与
群では腿%と高率であった。肉眼的に卵巣腫癌は黄色

赤褐色鯛を呈し、多くは片側性であったが両側性にみられる例もあった.卵巣腫癌の組織型はすぺて顯粒膜細胞腫/黄体腫であった。また卵巣の非腫性病変として卵胞の嚢胞形成や消失、黄体形成不全等の萎縮性変化が多く認められた。それに対し対照群では嚢胞形成が 1

‑28‑

19.

ラットの可移植性悪性線維性組織球腫に由来するクローン細胞の特徴
0山手丈至,東郷正治.渋谷一元, 伊原三重子,工藤悟,田島正典(日生研)

悪性線維性組織球腫(HFH)は,主に線維芽細胞様細胞及び組間で著しい違いはなかウた。

織球様細胞から成る腫癌で,起源細胞は未だ明確に同定されて2.クローン細胞誘発腫癌の類察いない。我々は15力月齡の給44ラットに自然発生した"FH から各クローン細胞株にっいてin vltr0継代1,7及び21代の107

同可移植性腫癌(竹FH・"T)を得九。起源癌はStoriform 型の個の細胞を同種ラットの背部皮下組織に接し,形成されたH則と診断され九が,尾根部皮内及び尾静脈内接により肺に癌を組織学的に察した。 HT・7及びHT・10 はStorifor謂型(S),形成された"FH・"T及びヌードマウスに異種移植された"FH、HTは多形細胞型(P)及び粘液型(H)が混在する組織像を示し,中等多彩な組織像を示したU印.J.vet.sci.:587,1989)。また,"F度の藤原線維を含んでいた。"T・9は豊富な鰹原線維を含んだS

H・HTに由来するinvitr0継代細胞("T・P)には,組織球の性格をの均一の組織像を呈した。HT・8は,束状に配列する紡錘形細胞

有する細胞が含まれることが証明され元Upn.J.vet.sci.:861.

(紡錘形細胞型(SP))から成り,時にS 及びH が混在した。 S,

1989).今回,竹FH・HT構成細胞の性質をより明らかにするため

P 及び"を構成する細胞はACP, NSE及び崩B に中等度の陽性反に,限界希釈法によるクローニングを行い, HT、Pから4つのク応を示し,組織球の性格を示し九が. SPを構成する細胞はこれ

ローン細胞株("T・フ,"T・8,"T、9,"T、1のを得た。これらクロらに対して陰性であった。SP構成細胞は未分化な細胞と考えらーン細胞の形態学的及び機能的性格について報告する。

れ九。ま九, invitr0継代7代の細胞から誘発した腫癌の組織につい片を同種ラットに移植し5代まで連続的に継代した

1.invitr0 における細胞性の観察
増殖培地"剛で継代された4クローン細胞株の特徴を形態学て,継代に伴う組織像の変化を奴察した。 HT、7及びHT、10 は継的,免疫組織化学的及び機能的に検査した。得られた成綬を表代3 4代以降SPが出現し始めた。一方,竹T、9は継代5代までに示すが,継代に伴う細胞性質の変化は寮されなかった。

S を維持した。 HT・8は継代にっれSPがより優位となり,紡錘形

1‑1.形態観察から卵円形の細胞が血管周囲で増殖し, or三anoid構造を取る部"T・フ:円形から多角形の細胞形態を示し允。電顕的に,多く位が彼察され,組織学的にはHFH とは異なる未分化肉腫と診断の細胞質突起と卵円形の核を有し,細胞質には粗面小胞体及びされた。また, HT・8及び竹T・10 には骨様組織が時に察された。

多くのりソソームを容れていた。"T・8:紡錘形から長楕円形の以上の成綬より, HFH・"Tには未分化細胞(HT、8),組織球(竹T、細胞形態を示し九.電顕的には,比較的滑らかな細胞表面を有フ,"T・10)そして線維芽細胞と組織球の双方("T.9)の性格を持し.細胞質には無数の遊航りボゾーム,グリコーゲン穎粒及びつ細胞が混在することが示された.また, inviv0 での継代に少数のりソソームカ察されたが.細胞小器官の発達は極め伴い, HT・7及びHT・10 は未分化な細胞へと脱分化する可能性がて悪かった。町、9:大型円形から多角形の細胞であった。電顕示唆された。今回の成綬より, H岡、"Tは多彩な細胞から成るこ

的には,無数の細胞質突起と刻み目の多い分葉核を有し,細胞とが示された.

質に拡張した粗面小胞体,多数のりソソームとミトコンドリア

in vitr0継代クローン細胞の般察
検査そして細線維束を有し,線維芽細胞の特徴があった。"T、10:細

ラ・P

8即5
3即7

9 D 1
1 N 1

6即3

3 D6
N

巧舶5

50
6
N

‑29‑

一一一

いて翻べた。表に示すように各クローン株の陽性率は低く,株カカカ

欧及びEAC ロゼット形成能, EAとラテックス粒子貪食能につ2+ 11 7ND ND 即ND 21 35即玲

1‑4 3+ 2+
12 3+ 3+
16‑18 3+ 2+

カカみ力力刷1‑3.機能検査成綬

3D
4
N

HT、10

た。一方,乢P に対しては,竹T・10 が陰性で,他の3 クローン細胞が陽性反応を示した。

2+ 2+
3+ ND
2+ ND

7肋2

1‑4 3+
12 3+
16‑18 3+

2肋2

HT・9

1+
ND
ND

N

1‑4 2+
12 2+
16・18 2+

8D7

"T・8

3+ 2+ 2+2+ 2+肋2+ 2+ ND

お柚0

1‑4 3+
12 3+
16‑18 3+

1‑2.免疫組織化学染色成綬

4クローン細胞株はACP, NSE及び"AB に対し陽性反応を示し

EA EAC EA、P

"丁・フ

多くの細胞質突起と不規則形な核を有する細胞で.細胞質には良く発達した粗面小胞体と多くのりソソームを容れていた.

橡能検査(幻継代数

7肋6

長い数本の突起を持った星状の細胞から成った.電顕的には,組織化学染色ACP NSE 肌P "船した株

ACP:酸ホスフナターゼ. NSE:非特異的エステラーゼ, ALP:了ル
カリホスファターゼ, HAB:抗ラット単球/マクロファージモノ
クローナル抗体, EA及びEAC:ロゼット形成能, EA、P:EA に対する貪食能,ラ・P:ラテックス粒子貧食能.1+:軽度.2+:中等度,3ト:重度,ー:陰性. HD:査せ,'.

20.

培養系における線維芽細胞の細胞間マトリックス及びC011agenolytic enzymeS の産生に与える過酸化脂質の影響
0柿田徳彦,柳秀隆,笹栗靖之,福田秀一,森松稔(久大二病理)
最近,血清過酸化脂質が血管壁細胞を障害し,色々の血管障害を起こす可能性について検討がなされている。我々は,培養血管細胞系を用いて,過酸化脂質による細胞障害の検討を行ない,報告してき九。その結果,過酸化脂質がきわめて強い細胞毒性を示すことが示唆された。今回
我々は, Fibroblastにおける細胞間マトリック
スの産生及びC011agenolytic enzymeS の産生に対する,過酸化脂質の影響について検討し九。
実験方法:培養細胞は,解剖時に採取し九人の皮膚組織より分離し九Fibroblastを用い九。
各種濃度の過酸化脂質存在下において,三時間培養した後,1m1の血清無添加培養液を用いて三日間培養し,その培養液と細胞を検体として用いた。 C0Ⅱagenの type l.Ⅲ.1V・V及びfibronectin にっいては,市販されている

Polyclonal antibody を用いて, western
blotting法及び間接蛍光抗体法により検討した。

C0Ⅱagenolytic enzymeにっいては, C0ⅡagenaseにっいてFITCラペルの活性測定キットを用いて,その活性について検討し, gelatinase及び
MN佃 3活性については,ゼラチンを含むSDS

gel、ページを用いて検討しナこ。過酸化脂質は,
Iynoleic acid hydroperoxide を用いナこ。

結果: Fibtonectin及び各種C0Ⅱagenの産生は,全体的に低下する傾向を示しナこ。 C011agenolytic
enzymeにっいては, gelatinase 活性は低下する傾向を示したが, C011agenase とNNP 3 の産生は,ある濃度において刺激される所見が得られ九。高濃度の過酸化脂質存在下においては,細胞は死壊し九。

以上より,創傷治癒のメカニズムに対して,過酸化脂質の存在は,細胞間マトリックスの産
生とC0Ⅱagenolytic enzymeの産生による,組織
再構築のバランスを,著しく障害することが示
唆され九。

21.

培養ウシ大動脈内皮細胞におけるDNA複製に対する過酸化脂質の影響0福田秀一,笹栗靖之,柳秀隆,森松稔(久大二病理),八木國夫(応用生化学研究所)
血管壁細胞とくに血管内皮細胞の傷害は動脈上に培養後,種々の濃度の過酸化脂質を加えイ硬化の発生,進展に直接関係していると考えられている。過酸化脂質による傷害の機序は一般

ンキュベート後,感染細胞を冷アセトンで固定し, adenovirus DNA polymerase抗血清とともに細胞膜への傷害と考えられているが,細胞増にインキュベート後PBSで洗浄し, nuorescein、殖が特徴である動脈硬化ではDNAレベルでの傷

Isothiocyanate (FITC)でラベルし九ヤギ抗ウ害の可能性も充分考えられる。そこでDNAレベ

サギ1gG immunoglobulinを用いて蛍光顕微鏡を

ルでの過酸化脂質の内皮細胞傷害を検討する為に,培養系におけるadenoviruSのDNA複製系を利用して行っ九。

用いて観察し九。
(結果〕〔材料と方法〕

1)過酸化脂質のadenovirus DNA合成に与える影響として,感染直後に過酸化脂質を投与し1.ウシ大動脈内皮細胞

九場合,ウィルスDNAの合成は著明に減少し九。

内皮細胞として屠殺材料より分鼈したウシ大動脈内皮細胞を実験に用い九。
2. 1inoleic acid hydroperoxide (L.且 0.)
過酸化脂質として血oleic acid hydroperoxide(L.H.0.)を使用しナこ。使用に際してはエタノ
ルに 2 μM/m1の濃度に溶解して用いた。コントロールとしてエタノールに溶角早しナこⅡnoleic

acid を用いナこ。

ま九感染後16時間後に過酸化脂質を投与し九場
ム、

ロ,

小型のincomplete DNA fragmentが多量に検出され九

2)過酸化1旨質のadenovirus DNA polymerase
遺伝子転写に与える影響として,過酸化脂質の存在下でその転写が抑制され九。
3)過酸化脂質のadcnovirus DNA polymerase
蛋白合成に与える影瓣としてDNA polymerase

3.ウィルスDNA合成

蛋白の合成が開始される感染後4時問以内に過内皮細胞をDulbecco's modified eagle
medium(DMEM)含10%ウシ胎児血清を用いて酸化脂質を投与し九場合, DNA polymerase蛋

培養後, adenovirus type・ 2 感染させナこ。ウィ

白の発現は殆ど見られなかっ九。また感染直後に過酸化脂質を投与し九場合, DNA polymerase

ルス DNAの抽出は Hirt's extraction method

蛋白の発現は濃度に依存して減少し九。

によった。ウィルスDNAの合成量はSouthernhybridizationにより比較し九。 hybridization
は fUⅡ lengthのウィルスDNAをNicktranslation system (NEN, Boston)により 32P
でラベルしてプローべとして用いた。
4.ウィルスDNA転写

内皮細胞を培養後adenoviruSを感染させ九。
1時間半の培養後, 1inoleic acid hydroperoxideを加えCytoplasmic RNAを抽出し九。
hybridization は adenovirus DNA polymerase
遺伝子の大半を含むfragmentを分籬し, Nickttanslation system (NEN, Boston)1てて陀P でラベルしたものをプローべとして用い九。
5. adenovirus DNA polymerase の検出
内皮細胞をadenoviruS存在下でカバーグラス

22.

DHPN投与によるラット肺クララ細胞の形態学的変化とGST‑YCの誘導
0立野知世,乃田正,伊藤聖一,奥野泰由,松尾昌垂,山田宏彦(住友化学・安全性研究所)

D H P N (Di(2・hydroxypropyDnitrosamine)はラツ
トやマウスの肺に腺、腺癌および肩平上皮癌を誘発させること、また、これらの腫癌の発生母細胞は、電子顕浸漬固定後パラフィン切片とし、光学顕微鏡察用にへマトキシリン・エオジン染色を行つた。

一方、ホルマリン浸漬標本から凍結切片を作製し、免微鏡や免疫組織化学的手法によりクララ細胞または肺胞疫組織化学的にGST‑Ya、 GST‑YC、 GST‑
Ⅱ型細胞であることが報告されている。
我々はDHPN投与ラットにおける肺腫癌誘発の初期

P染色を行った。免疫染色は、それぞれの抗体を用いてABC法により行った。

病変をつかむべく、肺腫癌を誘発する度のDHPNを
短期間ラットに投与し、肺における形態変化の察を光結果: DHPN投与のラットの肺を光学顕微鏡により学顕微競、透過型および走査型電子顕微鏡を用いて行っ観察したところ、終末気管支上皮細胞の肥大が高頻度に認められた。走査型および透過型電子顕微鏡を用いて詳^0

一方、これまでラットの肝臓、廊臓、小腸、大腸、子細に観察したところ、終末気管支のクララ細胞の腫大宮、勝胱の前癌病変のマーカーとしてG S T (G]uta・(図 1)、核の大型化、ミトコンドリアの肥大および分

むhion s・tr3nsferase)が有用であることがよく知られ泌顕粒の減少が観察された。

ており、今回、 G S Tの分子種のうち、 G S T‑ Y a、

また、これらの腫大したクララ細胞では、 G S T‑Y

GST‑YCおよびGST‑Pについて、 DHPN投与

C の発現が認められたが、 GST‑Y a、 G ST‑ Pにした肺における発現様式を免疫組搬化学的手法により検ついては陰性の結果が得られた。

討したので併せて報告する。
方法:6週令のF344雄ラットを用い、 0.2%DH P Nの考察:肺腫癌を誘発させるDHPNをラットに短期間飲水投与を5週間行った。投与終了後、エーテル麻酔下投与したところ、発生母細胞のーつであるクララ細胞ので開腹し、 2.読グルタルアルデヒドで還流固定および注

腫大が高頻度に認められ、腫大したクララ細胞にGST

入固定を行い、透過型および走査型電子顕微鏡用試料を‑ Y C の発現が認められた。 Benzo(α)pyrene 投与 7日作製した。また、残りの肺を10%中性緩衝ホルマリンで目のラットの肺においても、クララ細胞の大とG ST‑Y Cの発現が伏見らによって U988年、第47回日本癌学会総会)報告されており、 GST‑Y C が肺における化学発癌初期病変のマーカーとして有用であることが示唆された。また、これらの肺における変化が、 DHPN
腫癌誘発の初期病変であると思われた。

図1. DHPN投与ラットの肺クララ細胞の腫大(スケールは2 μを示す。)

23.

月市C lara糸田月包d>づヲニ内子と: PCBキ登^しこ.゛=^^ル芯d>
重カヰ勿^^

0今井田克己.高村直子.畝山智香子・吉田順一・古田京子.高橋道人.林裕造(国立衛試.病理)【はじめに】

ウスおよびハムスターのC1鮎a 胞とも反応した。しかし、気管及び気管支上皮を構成する細胞には線毛細胞、杯"型肺胞上皮細胞を含むほかの細胞とは反応せず、 cla細胞、基底細胞のほかに、無線毛細胞(non‑ciliatedra細胞に対する特異性が高いことが確認された。動物種

CelDいわゆるC1鮎a細胞があり、この細胞内にはチトク

における幾について検討してみると、同一の希釈倍率でロームP450関連代謝酵素を含有することが知られており、分布あるいは代謝活性の差が種々の薬物に対する肺毒性

免疫組織化学的に染色した合、ラットで最も強く反応し、ついでハムスター、マウスの順であった。陽性細胞の分布を見ると、対照群の気管上部では陽性上皮細胞は認められず、気管支並びに細気管支に多くのC1鮎a 胞が認められた。細気管支の上皮細胞の中でClara細胞の占めや化学発癌物質に対する感受性の動物種差として現われる割合はマウスが最も多く、ついでハムスターであり、ていると考えられている。

ラットでは最も少なかった。

Ⅱ型肺胞上皮細胞とともに肪における薬物の解毒、代謝活性化に重要な役割を果たしていると考えられている。
Clara細胞の分布は動物種により異なること、更に、その従来、 clara細胞の同定には形態学的特徴とくに電顕を用いた超微形態学的手法が主として用いられている。

^

回、我々はClara細胞に対する抗体を用い、ラット、マウス、ハムスターの気管及び気管支上皮のC1鮎a細胞を免疫PCB投与群ではいずれの動物種においても同抗体の陽性細胞の増加傾向がめられたが、マウスでは対照動物でも多くの細胞が既に陽性に染色されており、その増加傾向は明瞭でなかった。

組織化学的に染色し、その分布の動物種建を検討した。
まナこ、 polychlorinated biphenyl (PCB)は種々の臓器の細胞にチトクロームP450関連酵素を誘導することが報告されているが、 PCB投与によるClara細胞の反応動態における動物種差についても検索を行った。

【考察】今回用いた抗体はラットの引鮎a細胞に存在する特有の蛋白質に対する抗体であったが、マウスおよびハムスターのClara細胞とも交差反応し、陽性に染色され、また、線毛気管上皮細胞やClara 胞以外の気管や気管支上皮を【実験材料及び実験方法】
実験にはF344ラット,1CRマウスおよびシリアンゴール
デンハムスターの5週齢または6週齢の雄を用いた。
いずれの動物種にもPCBを体重kEあたり500昭のPCB(Ar成する細胞、また、 1型およびⅡ型肺胞上皮細胞とは反応せず、 clara細胞に対して特異性の高いものであることが確認された。 PCB により各庶器のチトクロームP450

関連酵素の誘導が起こるが、今回の実験でも PCB投与に

Oclor1254)を5m1のコーン油に溶解し、腹腔内投与した。

より肺の抗Clara細胞陽性数の増加がみられた。このこと

まナこ、対照群にはコーン油のみを投与した。各群とも投は、 PCBによるP450関連酵素の誘導とClara細胞の陽性細与1週後に屠殺剖検し、気管を甲状腺より上部にて切除

胞の増加と関することが示唆された。

し、気管を含めて肺を摘出後、気管より10%中性緩衝ホ

Ⅱ型肺胞上皮細胞も同様にSurfactant apoprotein(SP

ルマリンを注入、固定した。気管、気管支ならびに左右A)に対する抗体を用いることによって、免疫組織化学的の肺を、 H・E標本による病理組織学的検索をするととに同定可能であり、今後、抗Clara細胞抗体と共に抗SAP抗体を用いた免疫組織化学的検索により、 clara細胞やもにラットのClara‑specific‑proteinを抗原とする抗CI
ara細胞抗体を用いて、希釈倍率1000倍で、 A BC法によⅡ型肺胞上皮細胞の分布と種々の化学物質に対する同細る免疫組織化学的検索により、 clara細胞の検討を行った。

胞の反応動態の追求が可能である。さらに、肺の各種病

なお、今回用いたClara細胞の抗体はUniversity of pi‑

変におけるこれら細胞の変動、特に、肺腫癌発生の初期

ttsbur'hの Dr. si肥hから供給されたものである。

過程や腫癌細胞の発生母地を追求するのに有効な手段となるものと思われる。

【結果】
抗Clara細胞抗体はラットに対するものであったが、マ高用量 misonidazole あるいは RK‑28 静脈内投与ビーグル犬の神経病理学的研究

24.

0吉村愼介、斉藤義明、山口肇、青木道子、 今井清、大瀧サチ(食薬安全センター・秦野研)
加藤宗平(ポーラ化成工業縢・新薬研究所) 、松本明徳(嶋科薬・薬理センター)
高用量の 2,5・heX即edione (2,5‑HD)をラツトに経口

100 !11宮ノkg 投与群の 1例にも見られた。 64 1嘔/kg 以上投与すると、小脳核や前庭神経核に細胞外水腫が起き、の投与群では小脳核および前庭神経核の多数の細い有髄

神経線維軸索や神経終末が変性するなど、今までに知ら神経に軸索変性が見られ、軸索が消失して髄鞘が球状にれてぃる dista] axon01)athy とは異なる変化が認めら変化した像も多く認められた。電顕的には、変性した軸れることを、前回の毒性病理.学会で報告し、その変化は

索は無構造で濃染しているか、変性したミトコンドリア

実験的 thiamil〕e 欠乏症のマウスや、Ⅲisonidazole 投や小胞が貯留していた。まれに^した軸索があり、変与ラットに見られる変化に類似することを述ぺた。今回性小器官やライソゾームを含んでいた。やや太い有髄神

は、皿isonidazole および同じ 2 nitroimidazole 誘導経の髄鞘と軸索間が大きく拡張している像が見られた。

体である 1‑(4'・hydroxy 2'‑butenoxy) methy‑2‑nitro‑

これらの神経核は水腫に陥っており、神経細胞周囲およimidazole (RK・28)をビーグル犬に静脈内投与し、そのび神経線維やグリア細胞突起間に間隙が認められ、樹状神経組織を観察したので報告する。

突起周囲には変性したミトコンドリアを含む神経終末が雌ビーグル犬 20 匹を用い、 11匹には misonidazole

を 41,64,80.100 吃ノkg の用量で、 9匹には RK 28見られた。前庭神経核の変化は、小脳核におけるよりも軽度であった。

を 80,100,120 Π蠣/kg の用量で、 1日 1回連日静脈内

脊髄および末梢神経には厚切り切片で、ごく少数の変投与した。症状が明らかになったとき、あるいは6週間

件した軸索が認められたが、投与薬物との関係は明らか

投与後に麻酔下、大動脈起始部より全身を濯流固定し、ではなかつた。

脳および脊髄のバラフィン切片 LFBH・E 染色標本を作

64111g/kg 以上の投与群の小脳皮質では、少数のプル製したほか、小脳核、前庭神経核、脚内核、薄束核、脊キンエ細胞が変性し、萎縮して濃染あるいは腫脹して淡髄、末梢神経、骨格筋を樹脂包埋し、厚切り切片トルイ

染してぃた。分子厨には変性したプルキンエ細胞の樹状

ジンブルー染色標本の光顕的観察を行い、部は電顕的突起や多数の空胞が見られた。軽度な出血が、 80111g/k三に観察した。

投与群の2例および 10011唱/k宮投与群の1例の小脳皮(misonidazole 投与群)質にあった。その他、軽度な出血は 80 肥ノ地投与群の6411嘔/蚫以上の投与群では、投与開始後1から2週

1例の脈絡叢、髄灰白質にも見られた。

間に四肢の突っ張りが見られ、やがて背を丸めて起立したり突然後方に倒れるようになりこれに伴って症学も認(RK・28 投与群)められた。また倒れたままケージに体を押し付けるよう

100 昭ノ蚫投与群の3例のうち 1例、 120 11蠣/kg 投与にする例があり、流証、眼振を伴うことが多かった。

群の3例全例が神経症状を示したが、misonidazole 投病理学的には、 80 肥ノkg 投与群の1例の左側視床に与例に比べると軽度で、 80 叫ノ蚫投与群の3例は症状明らかな出血巣があった。脚内核付近の灰白質には明らを示さなかった。病理学的には、症状を示した例の小脳かな水腫が見られ、厚切り切片で水腫液はトルイジンブ

核および前庭神経核に misonidazole 投与例と同様の変

ルーに淡染した。また、脚内核付近の出血は、本例の他化が見られたが、脚内核、小脳皮質に変化はなかった。

チオフェン継続投与によるラット小脳虫部病変にっいて25.
0森

文秋,吉田泰二,高屋豪瑩

単複素環式5 角形化合物であるチオフェンは,有(弘前大学・医・脳研・神経病理)性で程度も軽度 中等度の俣害を示す小葉が多かった.

溶媒あるいは染料としての色素合成溶媒として用いら

その他の小葉では,病変分布は一定の傾向を示さず,れているが,一方では,チオフェン核を骨格にした誘モの程度は軽度であった.

導体が,消炎鎮痛剤,抗生剤などにも臨床応用されている.

小脳病変の組織学的特徴は.果粒細胞層の変性所見に加え,プルキンエ細胞層と分子層にも明肢な変性とチオフェンをラットに投与すると小脳障害を起こす

強い浮腫が観察された.この病変は,通常,小葉の腹こ とは,古くから知られていた. Herndon a968)はチ部および底部が優位に儒害され,小葉の頂部はしぱしオフェンにより#istaττat の小脳果粒細胞が選択的ば僖害から免れていた.病変部と健常部の境界は,明に変性・壊死をおこすこと,さらに,プルキンエ細胞,であった.病変が小さく限局する場合には,血管周分子層,血管にはほとんど影響しないことを報告して囲性の広がりをみせることもあった.重篤な、識障害いる.我々は,この小脳果粒細胞障害機序を解明すると痘塑を呈した急性例では,小脳の強い浮腫による肩目的て,チオフェンを高血圧自然発症ラット(SHR)に桃へルニアが認められた.小脳以外の大脳,脳幹,脊投与し,小脳障害を検討したところ,過去の報告にあ燧では光顕的に血管周囲の軽い浮腫以外ほとんど変化

る投与量より少ない量で,小脳皮質全層を侵し,極めは認められなかった.

て幢い浮腫を伴う境界鮮朋な病変を観察した.

こ うし

投与終了後,940日生存した例では,小脳病変

た初期病変の特徴は,血流傷害に基づく可能性を示唆

部に,マクロファージの出現.反応性血管の増生.反4 る結果と考えられたので,その光顕的および電顕的応性アストロサイトに著朋な GFA蛋白の発現亢進が所見を中心に報告する.

認められた.投与終了後 162[材料と方法]実験物として,生後 49

455日生存した例で526日

は,病巣内の浮腫は消失し,グリオーシスを呈していの高血圧自然発症ラット(SHR) 34 頭を使用した(高た.これら長期生存例 10 例中 4 例に小嚢胞形成が認

屋ら,1986).チオフェン 0.1 ml (15例)あるいはめられた.以上の時間の経過した例の病変分布も急性

0.15 ■I Q9例)を連日 24時間毎に合計 1期のモれとよく対応していた.

22 回まで後肢皮下に投与した(高屋ら,1987).投与開始から 1時間

345日後に濯浤固定した.小脳虫部を検索材料とした.

電顕的には,これまで知られている果粒細変性所
見に加え,今回の実験で投与後一定時間,小脳血管に
オスミウム親和性の油状物質の蓄積を認めた.この物[結果] 1 回のチオフェン投与では,症状の出現は認めず,連続的に投与することにより食欲不振,緩慢
な動作,運失調および症撃などをきたし,34 回の投与により識障害に陥り死亡に至る経過を示した.

質は,内皮細胞の管腔表面,飲み込み小胞,

ミ トコン

ドリアの膜周囲,および大したアストロサイトの胞
体内にも認められた.しかし,最終投与から 24時
後では,血管内腔の油状物質は消失していた.

0.1 01 あるいは 0.15 m1 投与群のラットで症状を[まとめ]チオフェン継続投与によるラット小脳病

呈した例の小脳病変は, 1 Ⅵadまでの小葉に広汎

変は,単にチオフェンの小脳果粒細胞に対する選択的な病変が出現していた.但し,0.15 m1 投与群では,毒性のみではなく,血管得害と中性偶害の両者によ

偶害の程度がより高度で均一であるのに対し,0.101

り形成されると考えられた.これらより中性実験を投与群では軽度 高度までさまざまな変化を示した.

施行する上では,薬物と同時に実動物への配慮が,Ⅵbc Xの各小葉では,ⅧおよびⅨCが傷害される目的とする実験モデルの確立に重要な役割を果たすと傾向か強く,病変も 1思われる.

Ⅵ a d の各小葉に比べ,限局

トロ《Cン→ぜンd》ラット 28日^^^キ登'手言式馬灸26.

昆゛庇コ才1プ、こに1コキ区ネ申糸呈^^しこーつし、てr0外舘あさひ、渋谷淳、小野寺博志、永岡隆晴、前川昭彦、林キ谷(国立衛試・病理)
トロペンゼンは黄色油状の液体で、アニリン等の染の増加と胸腺ならびに精重量の減少が認められ、組織料や香料の原料として、また工業用の溶剤として広く生産、使用されている。この物質は生体に対して強い障害性を有し、血液中でメトヘモグロビンを形成する他、肝臓、腎臓、精巣等の多くの臓器組織に毒性を示す事が知

学的には、骨髄の造血亢進および肝、牌における髄外造^血亢進と共に精細管の変性が認められた。以上の変化は何れも用量相関を持って認められたが、休薬終了時には回復ないし軽減した。

られている。中枢神経系への影響についても、ラットを

上記造血器、精巣の病変に加え、組織学的検におい用いた長期吸入暴露により、行動異常と共に中枢神経系て中枢神経系の病変が、125mE/k8群の雌雄全例で餓察さの浮腫性の病変を起こすことが報告されている。今回、れた。その発生部位はいずれも小脳核および橋被董の特

我々は既存化学物の安全性再評価の一環として、

定の神経核に限局しており、かつ両側性に認められた。

ラッ

トを用いての28日間反復投与試験を行った結果、ニト

これらの神経核の変化は海綿状病変を主体とし、病変がロペンゼンに特徴的な、血器、精巣の病変に加えて、 高強度の部位では周囲の白質組織にも波及しており、周囲用量群の雌雄全例において、小脳から橋被蓋にかけての特定の神経核に限局した病変を認め、興味深い知見が得れていたが、 neuronの三host の散在が認められ、神経細られたので報告する。

胞の変性、脱落が示唆された。病変部位にはmicr0創ia【方法】の浸潤がみられたが、反応性astrocytosiSは認められな白質組織の離解も認められた。神経細胞は比較的保持さ

6週齢のF344ラット雌雄各36匹を各群6匹として6かった。また、病変部にはへモジデリンの沈着およぴ軽群に分け、体重10OEあたり0.5m1 になるようにオリーブ油に溶解したニトロベンゼン(和光純薬工業)を、 125、度の血管増生が認められた。休薬終了時においてもほぽ同様の組織像が認められたが、海綿状態がほとんど認め

25、 5および0(オリーブ油のみ)mE/kEの用量で、胃ゾンデられず反応性のastrocyteの増生を示す症例もみられた。

を用い、 1日 1回、 28日間反復強制経口投与を行った。
是高用群(125m三ノkE)および対照群(omE/kE)では、投与期問終了後14日間休薬させる回復群を設けた。
実験期間中毎日動物の一般状態を観察し、最終投与日

一方、大脳、脊髄およぴ末梢神経にはH‑E染色標本による察では明らかな病変は認められなかった。
25mE/kg以下の群ではこれらの変化は認められなかった。

および休藁14日目に勳物を一晩絶食させ、翌日に工ー【考察)^

テル麻酔下で腹部大脈より採血後、屠殺.剖検した。
血液学的検査、血液生化学的検査を実施すると共に全臓器組織を 10%ホルマリンで固定し、常法に従ってH‑トロベンゼンの28日問経口反復投与により、造血器および精巣を中心とした毒性変化に加え、小脳から橋被蓋の特定の神経核に限局した器質的変化が察された。
本病変のみられた小脳から橋被蓋にかけての神経核は灰E染色標本を作製し組織学的に検索した。

白質と白質が交錯しており、 H‑E染色による検索では【結果】

一次的な障害の発生が白質組織であるか灰白質であるか

雌雄の125m三ノkE群で、ほぽ全例に投与後一時的にチアを鑑別するのは困難であった。この病変の発生機序としノーゼおよび自発運動の減少がみられ、投与3週目以後ては、脳微小循環レペルでの血行動態の異常や局所での歩行異常等の神経症状が察された。また、投与3週目より体重増加抑制が著明となり、投与4週目に雌の125m

toxiC な物質の産生、代謝異常等が考えられる。ニトロ

E/k'で 1 例が死亡した。

貧血を引き起こす事が知られているが、今回の実験では25昭ノk三以下の群では一般状態に異常は認められなかった。雌雄25肥ノkE以上の投与群において、血液学的検査で、ヘマトクリット値、血色素量および赤血球数の減少ならびにMCV、白血球数の増加がみられ、血液生化学的検
査では主として総コレステロールの増加が認められた。
肉眼所見では牌臓の大およぴ精巣の萎縮、肝、牌重量‑36‑

ベンゼンは強力なメトヘモグロピン形成能を有し、強い貧血性の低酸素症による他臓器への障害は軽微であった。
脳病変の局在は、その発生機序とも密接な関連を有すると考えられ、本病変の神経病理学的特徴やその発生機序について今後更に検討を加える予定である。

27.

ラツト20分間広範囲脳虚血における海馬の組織学的検索0田中俊光、稲津水

後藤銅星、佐藤良一、堀米子、杉尾和夫、林昌真(ヘキストジャパン 医薬総合研)(緒言)

CA1領域全体で虚血性変化が強くみられ、錐脳虚血モデルは種々の方法が考案され、モの体細胞のゴースト化、消失を認め、グリア浸潤

内、広範囲脳虚血モデルとして Pulsine11iが開が更に増加した。

発した両椎骨動脈を焼灼し更に両総頸動脈血流

錐体細の正常数は、対照と1、 3日後間ではを一時的に遮断させ脳虚血状態を一過性にラッ

有意な差は認められなかったが、フ、 14日後でトで起こさせる方法がある。この方法は、第一は有意に少していた.壊死數は、対照および

顕椎内を通過する椎骨脈を焼灼するため、均1日後ではみられず、 3、 7日後と経時的に増加

ーに完全な焼灼を行うのが建しいとされている。

していた。しかし、 14日後では壊死に陥った錐このため、杉尾らは直視できる第二頻椎部の椎体細胞消失のため減少していた. CA1領域に骨動脈を用いることにより均一に完全な焼灼がおける左右全錐体細胞数(正常、壊死数の合計)できる方法を開発した。

は7日後以降減少していた。

今回、この方法を用いラットで20分間血流を渡断した時の海馬における虚血性変化を検索し2,海馬CA 3 領域では、実験期間中、変化はみられなかった。

たので報告する。

3,海馬C A 4 領域では、対照、 1日後に変化は(材料と方法)認められなかった。 3日後から少数の神経細胞

今回、 10'齢 JC]:spraKue・D飾ley系雄ラットに初期の虚血性変化がみられ、 14日後においてを用いた。第二顕椎部の両側椎骨脈を電気針は少数のゴースト化、軽度のグリア浸潤が楓察で焼灼し24時間後、左右総頸脈をクリップでされたのみであった。

止め20分間血流を遮断させた。その後クリップ(まとめ)を外し再濯流させた。再液流 1、 3、フ、 14日後

Pulsine11iの方法を改良した杉尾らの方法をに剖検し脳を採取した。また、側椎骨動脈を用いてラットにおいて20分間血流を渡断した時焼灼しただけの動物を対照とした。剖検はネンの海馬における再流後の虚血性変化を検索しブタール麻酔後、心臓より1%ヘパリン加生理

た。 CA 1領域では、再濯流 3日後から虚血性食塩液、 10%燐酸綴衝ホルマリン液流固定後、変化の初期がみられ、 7日後ではこれらの変脳を採取し更に同一固定液中に浸漬固定した.

化が強くみられ、グリアの浸潤が観察された。

その後、病理組学的検索を行った。また、左14日間籬'すると、虚血性変化は更に広範囲に右海馬CA1領域1皿あたりの錐体細胞の正常

および、体細胞のゴースト化、消失がみられ数および壊死数を測定した。

グリアの浸潤も更に強く認められた。錐体細胞(結果)の正常数は経時的に減少し、 7日後まで壊死数

1,海馬CA1領域では、対照群では変化は認は増加した。壊死細胞を含めた全錐体細胞数はめられなかった。再濯流 1日後では、体細胞7日後以降減少していた。 CA4領域では、再の細胞質好塩基性化が極く一部にみられたが、

濯液後3日から少数の神細胞に虚血性変化がほとんどの細胞で変化は気察されなかった。 3

概察された.このような変化は、遅発性神経細日後では一部の錐体細胞で萎縮(細胞質の好酸

胞壊死と呼ばれるもので、杉昆らの開発した方性化、核の三角形化を伴った神経細胞の虚血性法を用いて短時聞虚血を起こさせた揚合、 PUI・変化の初期像)が観察された.7日後では、こSine1Ⅱの方法と同様に、軽度の一透性虚後のような変化が更に広範囲にわたり強く認めらにみられる神経細胞の変化を研究する上で有用

れグリア細胞の浸が観察された。 14日後ではなモデルであると考える。

マウスを用いたMPTP脳病変作出の試み

28.

0乾俊秀、山村高章、湯浅啓史、川合是彰、岡庭梓(田辺製薬・安全研)
M PT P(1ーメチルー4‑フェニル,‑1,2,3,6ーテトラ定した後パラフィン切片とし、通常の光顕的観察をヒドロピリジン)は黒質線条体系のドーパミン神経実施した。

を選択的に障害することから、近年注目されている ATpase活性の検出はC82'AT pase:And0らの..

化学物質である。ヒトおよびサルではM PT P投与方法a飴1)、 M82、AT pase(PH8.5):クエン酸鉛法、により容易にパーキンソン病様の症状ならぴに黒質 M82、AT P8Se(PH7.2):硝酸鉛法によった。
緻密の神経細胞の脱落がみられるのに対し、げっ[結果]

歯類では脳病変は起こりにくいとされている。我々は、パーキンソン病モデルとするため、 MPT Pを投与開始当初、動物は投与後2 3時間、沈静、

本実験に先立って行ったM PT Pの20m8/k8(体重)伏臥を示すのみで特異な神経症状は認められなかった。投与を重ねると投与直後の沈静は徐々に消失し、1日2回(6時問)4日の腹腔内投与では、神経症状ならぴに脳の組織学的変化は確認し得なかっ

1日2回投与では4日目、 1日1回投与では2週を越える頃より、過剰な運動(常に床を蹴り上げるた。いくつかの文献から、この投与条件は黒質および線条体のドーパミンレベルを下げるのに十分と思様にして歩行する、他の動物あるいは実験者の手の動きに大きく反応する等)が認められた。この変化

われたが、改めて動物が耐過し得る限界を求め、以下の実験のMPTP投与量を設定した。すべてのは投与後1 2時間に顕著であるが、翌日にも残存実験はS IC : dd Y雌マウスを用いて行った。
M PT Pを腹腔内投与レた場合、 10om8/k8以上の

現在、 3週周投与までの組織検索を行ったが、神マウスに腹腔内投与し黒病変の作出を試みた。

投与では、ほぽ全例が投与後1 2時に死亡した。 50mg/k8 投与では一部死亡伊」はみられるものの、十分な動物数を用すれぱ連続投与しても投与群の維持は可能と判した。従って、以下1回の投与していた。

経細胞およぴ柿怒線維の変性は観察されなかった。
唯一の変化として Ca2、AT pase活性の低下が疑われる所見が得られた。通常 C丑2、AT pase活性は黒質で特異的に高く、周囲組織とはっきりとしたコントラストを持っている。 M PT Pを 1日2回4日間

M PT Pは投与容が 10ml/k8(体重)となるよう投与あるいは1日1回2 3週間投与した個体ではこの濃淡の差が低下しているように思われた。この滅菌生理食液で溶解し、 50鴫/kg の投与で1日1回およぴ1日2回(6時間間隔)の投与を行った。

変化はわずかなもので、必ずしも明確なものではな
かったが、同時に反応を行った無処置対照動物より

1日2回投与群は動物の消耗が激しいため4日間の投与の後、全例を組検索にあてた。 1日1回投与

活性については差は気付かなかった。

は 50皿8/蚫とした。

も強い活性を示す個体はなか.つた。 M82゛AT P8Se

群にっいては週5日間の投与・2日間の休薬を繰返し、随時動物を穀処分し組織検索を行った。合わせCa2、が神経の刺激伝達に重要な役割を果たしていて 50m8/k81回投与後2、 6、 24時間の組検索もることはよく知られている。また、 ca2、AT paseは脳のシナプトゾーム分画に分布することが報告さ実施した。

酸緩 6%ショ糖加2%パラホルムアルデヒド溶液

れており、シナプスでの刺激伝達に関与しているものと考えられる。したがって、 M PT P投与によりで心臓より15分間港流固定した後、ただちに脳を取り出した。脳は正中矢状断し、 1側は 0.1Mカコジ

黒の C82、AT P8Se活性が低下するとすれぱ興味ある変化といえる。さらに、この変化の付けを行

ル酸緩衝6%ショ糖溶液で洗浄し、黒質を含む中脳の凍結切片を作製、 ATpase 活性の組化学的検

いたいと思う。

組織検索:動物を工ーテル麻酔し 0.1Mカコジル

出にあてた。 1側は4%中性緩衝ホルマリン液で固

‑38‑

29.

2・hydroxy舵thyl‑2゛ethyl・1,3・pr0皿nedi01 投与による中枢神経病変の病理組織像
ビーグル犬における脊随病変

0前田博、尾嵜清和、奈良問功(摂南大学)、鈴木義孝(岐阜大.)
我々は利尿作用とそれに基ずく脳圧低下作用を有す
る 2・hydroxymethyl・2・市ethyl・1,3・propanedl01 を長期問にわたって静脈内投与するとビーグル犬の大脳の全に軽快したが、爪先をひきずる異常歩行は35日後にも完全には消失しなかった。

組織学的所見:脊質における組織学的変化は、基本域に多発性のPale eosinoph11ic body (PEB)ないしは的に白質神経織維の軸案周囲腔の拡張、賛鞘の崩壊とSpheroid が形成され、これらが電顕的にヒトの大食細胞反応、グリア細胞の細胞質膨化、軸索の変性

infantne neuroaxonal dystr0山y の所見によく類似・膨化・消失、灰白質における Spheroid 形成等からした tubulo・vesicular or tubulo・filamentous pro・

機成されていた。変性・膨化に陥った軸索の一部は大f n es, i nterconnect i n呂所embranous structure ,脳に多発していた Pale eosinoiphilic bodyあるいは

mitochondria 並びに 81yc08en 8ranuleS 等の集積か

Spheroidと同様の染色性を示したが、好塩基性を示す

ら構成されることを既に報告した(第29回日本神経

ものあるいは穎粒状の形態を呈するものもあり、多数

病理学会:仙台,1988)。今回は、同時に認められたの神経織維では消失していた。磁鞘の崩壊はHE染色

脊価病変について、その組織像を中心に報告する。

本上でば必ずしも明かではなかったが、拡張した軸索周囲腔内に崩壊した鞘片を貪食したと思われる大喰材料および方法
8ないし 10 力月例のビーグル犬を雌雄各 11頭、胞が時折認められたことから、その存在が伺われた。
大喰細胞は多くが変性性であったが、時に小血管周囲

合計22頭用いた。このうち雌雄各7頭には上記薬剤に數個が集叢して認められた。変性神経繊維はおおむの450om8/k8/dayを 90日問にわたって静脈内投与し、ね散在性で、白質全体にわたって認められ、特定の神9頭(雄5頭、雌4頭)を投与終了時に、 5頭(雄2経路あるいは神経束には好発しなかった。また、少数頭、蝉3頭)をその後の 1力月の休薬に付した後屠殺

例では病変の程度は頸賛でやや軽微であったが、そのして検査に供した。投与には20%溶液を用い、 22.5

他の例では頸倣から腰倣の特定のレベルで病変の増強

mV蛇の割合で前腕皮静脈からの連日投与とした。まは認められなかった。灰白質における Spheroid は大た、雌雄各4頭には同一容量の生理食塩液を90日問脳に比較して極めて少数であった。なお、検索した限にわたって同様に静脈内投与し、対照例とした.これりでは全身の末梢神経には著変を欠いていた.

ら令例の第 1頸倣から第6 琶について、ーつぉきに

電顕的所見:光顕的に軸索周囲腔の拡張として認め各々の脊神経が分岐するレベルで根幹部神経を含むられた神経織維において、鞘はミエリン層板の配列

初片を作製した.90日問の薬剤投与後ならびに休薬

不整から崩壊に至る様々な変性過程にあった。軽度な後に屠殺した各 1例については、光顕的検査に加えて舗鞘変性を示す神経織維の軸案は萎縮性で、より高度

頸膨大部および腰膨大部の脊骸白質を電顕的に検索しな覧鞘変性に陥った神経繊維の大部分では軸索は消失

4‑0

結果

していた。

考察

症状:検体の薬理作用に基ずくと思われる多尿が初

大脳病変がPEBあるいはSpheroid 形成を主体とした回投与から全例に認められほか、投与初期から多くの軸索変性であったのに対して、脊骸病変の光顕的な変例が薬液注入中ないし注入終了時にかけて、全身筋肉化としては軸索周囲腔の拡張、賛鞘の崩壊とそれに対の撃縮を示した。また投与中期から後期にかけてほぽする大喰細胞反応、等からなる髄鞘の変化が顕著であ

全例に四肢の伸展、腰を落として爪先をひきずる異常

つた.しかし、電顕的検では変性神経繊維では頻繁歩行が加わり、ケージの隅にたたずむ、等の mentalに軸索が消失していた。大脳病変と脊価病変の組織像

depression を示唆する行動にもしばしば遭遇した。

の違いは、脊価白質における骸鞘変性と軸索変性の形

休薬によわ mental depresslonを示唆する症状は徐々態発生的関連を示唆していた。

Phenobarblta1投与による肝FinEer printの経時的変化に関する検討

30.

0豊岡正好,山本恭之,中舘豊,

三浦稔(三菱化成・安全性研)
細胞質内には好酸性封入体が認められ九。

〔緒言〕

肝のFin8er printは Phenobarbital ( P B ),電顕的には投与1週から滑面小胞体は顕著にPCB, DDT等の薬物代謝酵素を誘導する薬

増生し.好酸性封入体と一致してFin8er print剤の投与時や肝癌,肝炎時に肝細胞内に出現すが見られた。

,

ることが報告されている。本変化は形態的に小FinEer prlnt の形熊は投与初期には馬蹄状を胞休と連続し九構造が認められていることから,

呈し.周囲の網目状に増皇し九滑面小胞体と連小胞休増生との関連が示唆されている。しかし,続していた。中期には同心円状の渦巻き構造をその毒性的意義については細胞の楓能的適応な呈し,外層の腹は増生し九小胞体と連続していのか限局性細胞質変性なのかは明らかでない。

九。これら馬蹄状あるいは渦巻き状の Fin8er

今回,我々はその毒性的意雲考察の一助とす

Prlnt には中,じ、にミトコンドリア,ペルオキシ

る九め, P B を投与したビーグル犬における肝ゾーム,脂質を巻込む様に入れているものが多Flnger prlnt の経時的変化について,肝パイオ

数見られ九。後期にはより密な同心円状の渦巻プシー法を用いて検討したので報告する。

き構造を呈し,その周囲の滑面小胞体は消失し,〔実験材料および方法〕

グリコーゲン野に孤立して観察され九。また,
同時にライソゾームの増数,一部分ミエリン様1.試料

Phenobarbita1 は保栄薬工闇製を使用し九。

を呈する Flneer prlnt ,巨大ミエリン様造2.動物物が被察され,ライソゾームがFinger printの

6 頭のビーグル犬(Ridglan Farms lnc.より消化に関与していると思われる像も見られた。

購入,雄,6ケ月齢)を使用した。

、ーれら Finger prlnt は休薬 1 週で既に消失し.

滑面小胞体の増生は休薬3週で回復し九。

3.投与方法および期問
ゼラチンカプセルに充旗し九 P B を最初の 1

その他,投与8週から休薬1週に肝細胞細胞

週は30mg/ke,2 8週は50伽三/k8を1日

質内あるいは毛細胆管内に順様あるいは線維状

1回連日経口投与し,その後9週問休薬させた。

充実物が見られたが,詳細は不明であっ九。
〔まとめ)

4.病理検査投与 1,2,4,5.8 週および休薬 1,3,

1. phenobarbita1 により盤じ九肝の Flnger

6週に塩酸ケタミン麻酔下で,超音波診断装置

Print は増生した小胞体と連続し九層板状構造をガイドとして経皮的に肝バイオプシーを行い,を呈しており,小胞体増生の延長の変化である

休薬9週に剖検し九。肝組織は常法に従い光顕ことが確認され,休薬後速やかに消失した。
2.肝のFinger printの消失過程にはライソおよび電顕的に検査し九。

ゾームの関与が示唆され,生成から消失までの〔結果〕

光顕的には投与期間を通じ肝細胞は腫大し,

経時的変化は図1の如く推察され九。

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< i 'ニへ父Zjcj J・け＼、、ノつ'.四
馬蹄状

渦巻き状
図 1.

SER消失

@
一部ミエリン状,
ライソゾーム増数

肝Fin8er printの経時的変化^

巨大ミエリン様造物31.

ロヨ^イヒ^^^走己牙干,丙^ず)^ Im.しこよる'彦食市

0堺俊治.、泉澤伸行.、(,山之内製薬井上直美,、花田貴宣,、三木寿排,、

野村靖夫0

安全研、.麻布大・獣医病理)

薬物の毒性試験において貧血が原因と考えられる

^

馬童

糸吉

牙毛

肝細胞壊死に遭遇することがある.
貧血あるいは虚血によって肝細胞壊死が生ずるこ

1.血液および血衆生化学的所見とは広く知られていることであるが、血の程度と肝血液学的には、四塩化炭素の投与による影婆はな

細胞壊死の関係を論じた実験は少なく、我々のラットかったが、同時に採血した群では強い貧血状態(赤血を用いた実をみるくらいである.

球数3.2× 100/mm,、ヘマトクリット値 21%)となった.

我々は、貧血と肝細胞壊死の関係について検討を

血縦生化学的データは、別表に示すように四塩化炭素

続けているが、今回は、ラットに肝毒性物質として四投与群でG OT、 G P Tが対照に比して 2塩化炭素を投与しつつ、眼嵩静脈叢から持続的に採血値となったが、投与と同時に採血しても投与単独群と3 倍の高して貧血状態にせしめ、四塩化炭素による肝病変が変ほとんど同じ値を示した. A L P には、四塩化炭素投化し得るか否かを病理組織学的に検索し、貧血との関与あるいは採血の影馨がほとんどなかった係を検討したので、その結果を報告する.
2.肝の病理組織学的所見
^

^

ニオ王

之去

四塩化炭素投与群では、小葉中心部の肝細胞は腫大し、肝細胞の硝子様変性とともに壊死巣も散見.され

1.実験動物た.壊死した肝細胞にはカルシウムが沈着し、周開に7週齢の雄性F344ラットに飼料(CRF

1、

オリエンタル酵母)と上水道水を自由摂取させた.

組織球が浸澗して肉芽腫を形成していた.また、小葉
中心性に肝細胞内に脂肪滴が認められ、変化の強い例
ではほぽ禰漫性に認められた.中心静脈周辺あるいね

2.肝毒性物質の投与および貧血の惹起

中問帯には ba110on ce Πが散見され、核分裂像も散四化炭素(半井化学、オリーブ油と等量混合)

見された.

301/kぎ/日を 1 週閻に 2 回、 2 週間、皮下注射し大:.
その内の半数の動物については、エーテル麻酔下に眼方、四塩化炭素投与と伺時に採血した群では、脂肪変性が著明になり、ほとんどの例で肝細朋壊死巣が多数認められ、半数例では四塩化炭素投与単独群にど毎日採取した.

はみられなかった異物性多核戸細胞が填死部に出現しナ

嵩静より体重の1 2%に相当する血液をほとん

3.検査項目
1)血液学的検査

ま

δ゛>

と

赤血球数、ヘマトクリット値
2)血柴生化学的検査

肝毒性物質である四塩化炭素投与と同時に、眼寓

GOT、 GPT、アルカリフォスファターゼ( A L P )静叢から採血してラットを貧血状態にせしめると、血奬生化学的検査値に影響はなかったが、巣状の肝細3)肝の病理組織学的検査

胞壊死がより多くの物で広い範開に認められるとと実験終了後に工ーテル麻酔下に屠殺、剖検した.

もに、四塩化炭素投与単独群にはみられなかった異物

肝は燐酸緩衝10%ホルマリン液に固定後、常法通り

性多核巨細胞が出現し、四塩化炭素の投与による肝病にパラフィン切片を作り、 HE、 PASあるいはコッ

変が修飾されることが明かとなった.このことから、

サ銀染色を、また、凍結切片について0" red 0 染

薬物の毒性試で認められる貧血をともなった肝細胞色を施し、鏡検した.

壊死(肝障害)を評価する際には、貧血の関与を考慮に入れる必要性があることが強く示唆された.

血豪生化学的検査結果
肝の病理組織学的所見
Ⅱ

皿

G O T (1U/D

91.0士 19.フ

196.5 土 59.6

210.0土117.5

群

肝細胞壊死

脂肪変性

G P T (1U/D

48.8土 10.9

171.8土54.3

142.4士 81.9

四塩化炭素投与

十十A L P (KAU/dD

78.8士ユ.6

84.4土 21.9

98.1士 10.8

CCI'投与+採血

十十++1:対照、Ⅱ:四塩化炭素投与、Ⅲ:四塩化炭素投与+採血

多核巨細胞

+

32.

四塩化炭素長期吸入暴露によりラット、マウスに観察された肝病変などの比較

0片桐卓、長野嘉介、相磯成敏、山内勝彦、松本道男、

榎本一(中災防、日本バイオアッセイ研究センター)

ラット、マウスを用い四塩化炭素の全身的な吸人暴鴛

肝細胞腺腫の増加がみられ、肝細胞癌は125P師群は雄45

による癌原性試験 a04週問)を行なった。その結果の週、雌43週から、 25Ppm群では雄64週、雌58週から観察大要については別に蝦告したが、発癌標的組織の肝に肝された。肝細胞癌の形態は雌雄問、各度問で差は無く、細胞性腫癌、肝硬変、肝線維症の発生の差異等が観察さ殆どの例は索状構造を示し、少数例に腺様構造も認められたので蝦告する。

れた。

<試験方法>F344ラット、 BDF1マウス(日本チ十ールス

肝以外の組織では、ラットの場合、自然発生性の慢性リバー)雌雄各50匹/群を用いた。暴露条件として125腎症が雌雄共25Ppm以上の'度群で病変の増強が見られ、叩俳、 25叩m、 5叩mの3段階の'度に設定した四塩化炭素

四塩化炭素吸入暴露の影響が示唆された。マウスでは副含有空気を1日6時問、週5日問送気し、104週問全身暴鴛腎質も四塩化炭素の発癌標的組織となり,雄では25Ppm

した。また暴群と同じ環墳条件で対照群を飼育した。

以上の群、雌では125Ppm群に褐色細胞腫の高率発生が認

<結果>

められた。

D 非腫癌性病変一肝線維症と肝硬変<考察と結論>肝線維症:主として中心静脈問を結合する軽度な問質の四塩化炭素の全身性長期吸入暴露(104週)によりラツ増生を示した。なお、線維に沿って、セロイドの沈着、ト、マウス共に肝細胞腺腫、肝細胞癌が誘発された。ラ

肉芽組織の増生がみられ、小葉中心域周囲には程度の差

ツトでは殆どの例で肝硬変、少数例では肝線維症を伴っはあるが肝細胞の水腫様変性や脂肪変性が認められ、まていたが、マウスでは両病変を伴う例は錢察されなかった実質内に及ぶ細胆管の増生も観察された。

た。ラットでは肝硬変と共に肝細胞の変性病変なども生

肝硬変:再生結節は大小不同を示し結節中にグ氏鞘を含じ肝硬変の維持やその進展に肝障害因子の持続的暴露のむ多小葉性の偽小葉も認められた。また大きな結節では必要である事が不唆された(下地ら,第四回本学会発表)。

細胞配列や個々の細胞の異型性の性状から肝細胞腺腫とまた硬変儀小葉のいわゆる再生結節は構造、細胞両異型の鑑別が困蒸なものもあった。なお、各結節をとりまくを伴い、肝細胞腺腫や肝細胞癌の発生母地となるが、肝線維増生は比較的軽度であり、その一部にセロイドの沈

細胞腫癌の前段階的変化として指摘される増殖性、過形着を認めた。

成性病巣と本質的には同じであると考えられる。なおマウスにも四塩化炭素による肝障害性病変は観察されたがその他、前癌性病変として好塩基性肝細胞増殖巣の増加が高'度群の雄に、明細胞性肝細胞増殖巣、好酸性
肝細胞増殖巣、好塩基性肝細胞増殖巣それぞれの増加が線維化を含む修復性にラットとは差異がみられ、肝線維化や肝硬変の形成に至らなかったと考えられる。
表1 肝緬飽性^および麝硬変、肝隷雄症の発生數(ラウト・雌鹸)

4{ーー

))))
0 50 06941
歳5 14 5(2(ー

0

0
21

(

(2)

))))
89892

2
)
321
44(
(

2

32

30

0
0

45
(44)

(1)

0)

(1)

(+肝知胞癌)(+肝緬胞癌+軒知飽壁盛)

表2 肝細胞性腫癌病嚢および肝硬変、肝隷継症の発生数(マウス・腫雌)
250叩

44
27

33
17

125^
櫨
戯
50
50
47
16

00

50

00

0

50

00

18 0

0

0

肝隷鞭症
(+趣纂なし)

0

20

0

肝知胞腺腫

ーー

5P師
雄
哉
50 49

1

対照群
雄趣
50 50
22 0

有効動物数

79 0

マウス:125PP可群及び25Ppm群の雌雄とも肝細胞癌、0(+盛毎なし)+肝緬胞腔腫)肝硬変

く観察された。

0

0

肝纏繊症

0

(1)

(+肝叡胞点+肝靭馳豊騒)察された。肝細胞癌はすべて肝硬変あるいは肝線維症を伴っており、肝細胞癌の形態は、索状、腺様および充00

肝雫孝盛毎なし)+肝禦胞聾腫)(+肝籍胞癌)加がみられ、肝細胞癌は雄では73週、雌では50週から観実性の各型を含み、同一結節内に各型が混在する例も多0

ラット:125PP伽群の雌雄とも肝細胞癌、肝細胞腺腫の増012)腫癌性病変0

められなかった。マウスでは125P師群の雌1例を除き全群に肝硬変と肝線維症の形成は観察されなかった。

00分の例に複察された。5P伽及び対照群では両病変共に認

肝知胞癌
肝知胞腺腫

25P偉
鹸
旗
50
50

0

雄共、125P叩群に肝硬変、 25叩惰群には肝線維症が大部

有効動物數

10

細胞癌性病変を含め表1、表2に示した。ラツトでは雌

50伽
戯
櫨
50
50

刻望群
謹哉
50 50

ラット及びマウスに観察された肝病変の発生状況は肝1謹5

高濃度群の雌に特にめだって認められた。

48
5
0
(1)

ト

こーノ
上ギ 1m 才青プノレブ゛
キ・シン拶主興余 4> 謹式 '弓臭

0平野孝
〔目的]

二

C乏>

'フ一叉二才ラ

4

又力紹隹マ三'

ミ

33.

J二

そ》

足立数吉(家畜衛試)

AFB1濃度の減少が認められたが、 AFB,のみ投与群で丁フラトキシンは、強い毒性と発癌性を有する力は、高い値であった。

③組織学的変化:肝識の組織学的変化としては、

ビ毒である。近年、丁フラトキシン汚染飼料・食物の了フラトキシンの︑︑︑

0

一方、了ノレブ

ノ

ノ

レ

る

無毒化は重要な研究課題であこの摂取が問題となっている。

に丁フラトキシンB,(AFB゛が結合することがすで

a)細胆管の増生、 b)肝小葉辺緑性の肝細胞の空胞形
成、 C)肝小葉中心領域における肝細胞の壊死、の三点を指標として、検討した。 aで示された変化は、 Aに報告されているが、この丁ルブミンによる了フラ

FB1のみ投与群で、 6時間目に哉察されるが、 AFB.、B

トキシンの排除を動物で応用できないものかという

SA投与群では、 24時間目にならないと観察されない。

考えにもとずき、飼料を与えないでもよい生後24時間以内の幼雛を用い、 AFB1による急性毒性に対する
牛血清丁ルブミン(BSA)投与の影響を、化学的・組織学的に検討した結果について報告する

それ以後は、時閻の経過と共に、変化が著しくなった。 bで示された変化は、 AFB1 のみ投与群で、 6時間
目に既に見られ、 AFB.・BSA投与群では、 24時間目でも、霞察されなかった。 Cで示された変化は、 AFB,のみ投与群で、 24時間目に観察された。一方、 AFB,・B
SA投与群では、 24時聞目に、その様な変化はみられ[方法と材料]な力、つた。

生後24時間以内の幼雛(白色レグホン)を用いた。

AFB,のみ投与群及び AFB,‑BSA投与群の幼雛には、 AF[考察]

B1 を体重 lkE当り 3口g投与した。 AFB.・BSA投与群には、AFB1投与前に 0.5m1の 10%BSAを経口投与した。対照群には、 DMS0を投与した。投与後、 6,24.48,72時間目

化学的・組織学的所見として、 AFBI・BSA投与群とAFB1のみ投与群の間では、明らかに差が認められた。
この差異は、 BSAの投与によるものであると、解釈さに、心採血によって殺し、イソクエン酸脱水素酵素

れた。 BSAは、 AFB,に対し、結合部位を持っており、

acDH)の活性および、血紫中の AFB1 度を測定し生後48時間以内の幼雛では、腸管からの免疫グロプ

た。肝臓は、病理組織学的哉察を行った。

リン等の巨大分子を吸収しないことが知られてぃる。
そのため、本実験では、投与されたAFB1の一部は速[結果]

やかに前投与されていたBSAと結合し、消化管内にお①血紫ICDH活性:肝障害の指標としての ICDH活性は、実験の最後まで、徐々に上昇した。 A卜B,・BSA投

いて吸収される事なく、排除されるものと考えられた。

与群とAFB1のみ投与群の間では、 6時間目に差があった。 6時間目に、 AFB1のみ投与群では、有意の ICDH活性が検出されたが、 AFBI・BSA投与群て、は、検出されAFB1のみ投与群と'F81・BSA投与群の化学的.組織学的所見の比較なかった。

②血柴AFBI▲F田のみ授与群度

AFBI・B$A投与群

48

72

6

24

48

72

にD"活性

h1昇h

h 1喜11

1"'h

11i言h

10U

h1冬h

1"ιh

hl'h

AF田濃度

h1ιh

h1ぎh

hi客h

10U

h1客h IU ιh

10U

10U

その濃度の上昇が、認められた。しかし、その後、

AFBI・BSA投与群て、は、

空胞形成
壊死

+++

AFBI・BSA投与群とも、既に、

+++

細胆管増生

+++

AFB1 のみ投与群および++一

よって測定した。 6時間目に、

+++

24

+++

6

+一一

投与隆時間

AFB1濃度は、酵素免疫測定法に

34.

遺伝性肝炎(LEのラット肝の各種肝障害性薬物に対する感受性の検討
0上村裕洋、

高橋秀俊、坂本裕史、

遺伝性肝炎(LEC)ラットは、肝炎・肝癌

森道夫(札幌医大・病理)
肝障害性薬物: D‑Ea18CtoS如ine (200、の自然発症動物として、近交系で維持されて400、 800、および 1600 口宮/k三B明、 DEN ( 25、いる LonE‑EvanS 系のラットである。 LEC ラ

10o m8/kgBW)、 CCI' a、 2 mvkEBW)、およ

ツトは、生後正常に発育するが、 16 週前後

び aHyl alcoh01(1、 2 mM/k宮開)を腹腔内に黄痘を伴った急激な肝障害を発現し、重篤に 1 回投与し、 24時間後に採血解剖した。

な場合には短い経過で死に至る。死亡しなか得られた血液から血清を分雌し、 GOT およびつた個体は、黄痘から回するが、肝細胞

GPT を測定した。また摘出した肝は Carnoy

害が終生持続し、生後 1年以上経過したラツ

液固定し、常法により朋染色を行った。

トでは高率に肝癌の発生をみる。肝炎の発生

培養肝細胞に対する作用: 8遇の LEC

機序は不明であるが、他の系統のラツトとのおよび Fischer 344 ラット肝から、コラゲ

交配実験の結果、単一の常染色体劣性遺伝子

ナーゼ海流法によって初代培養肝細胞を得た。

によって支配されていることが明らかになっ

24時間後に、各の肝細胞障害性薬物を添ている。

加して培養を続け、培地中のし"を測定し肝炎発症前の LECラット肝に、既に各種
薬物代謝系の酵素偏倚が見いだされており、て肝細胞障害の指とした。
【結果と考察】これが肝炎・肝癌の発生に関与する可能性も

D Ealactosa■ine 投与によって、 LEC ラツ

示唆されている。今回我々は、 LEC ラツト肝トでは著しく強い肝障害が惹起されたが、肝の藥物代謝に関連した特性を理解するため、の薬物代謝系酵素を介して細胞害性が発現

癌原性物を含めた各種肝障害性薬物に対すされる DEN、 CCI'、 a11yl alcoh01 による肝る感受性を、生体内の代謝経路及び肝細胞障害の機序が比較的よく知られている薬物につ

害は、 LEA ラットより軽度であり、琵C ラ
ツト肝の薬物代謝素の低下といて、肝炎発症前の WCラットを用いて検D・Ea18Ctosamine に対する特異的に高い感受索した。なお対照として肝炎を発症しない性が示唆された。また初代培養肝細胞に対す

LEA ラットを用いた。

る作用でもιEC ラットで D一宮alactosamine【材料と方法】の害作用が強く現れ、 D‑Ealactosamine は動物:生後 8週齢の WC ラツトを使用し肝細胞に直接作用していることが示唆された。

た。なおコントロールとして、同週齢の LEA

各薬物による肝細胞障害は LEC、 LEA ラツト

ラットを使用した。

のいずれでも雄は雌より高度に現れた。

プタ血清投与により発生するラット肝硬変類似病変の検討

35.

0奥村正直,・.,広瀬雅雄.,七野裕2,星谷達2,津田洋幸'(.愛知衛研.生物,,名市大・医・ 1病理,'藤田学園・医・ 2 病理)(はじめに)

病理組織学的検索では,プタ血清を投与した第1ラット,マウスなどにおける実験的肝線維症あるい

第3のすべての群で肝実質内に小葉を分割する結合組は肝硬変を発生させるために,しぱしぱ四塩化炭素な織が増生し明瞭な偽小葉を構成してい九が,各群問にいしアルコールの投与が行われている。昨年の本学会

おいて線維化の状態に形態的な差異はみられず,実質において,われわれはラットにプタ血清を腹腔内投与

細胞の変性壊死像および炎症性細胞反応もほとんど認し肝硬変類似病変を発生させ,それがラット肝によるめられなかっ九。一方,四塩化炭素を投与した第 4 群

in viv0 発癌物質中期検索法の高感度化に有用となるでは大小不伺な偽小葉の形成がみられ,結合織の呈は可能性を報告し九。本研究では,肝線維化を促進し,プタ血清投与群より若干増加していると思われ九。同

肝硬変類似病変を惹起させるプタ血清中の因子を検索時に肝細胞の脂肪変性が小葉全体にび漫性に認められする目的で以下の実験を行う九。

部位にようては偽小葉内の肝細胞が壊死に陥る像も散(材料および方法)

見され九。なお,胖および腎においては被験群と対照

プタ血清は市販品( FIOW Lab., Lot NO.29241促3)

群とを比較しても著変は認められなかうた。また,対および自家製(国内産プタより作製)を用い九。また

照群においては異常所見は観察されなかっ九。

非働化したプタ血清を作製する九め市販のプタ血清を(まとめ)恒温槽中で56゜C30分加熱処理を行った.自家製プタ血

プタ血清がラット肝に対して肝硬変類似の線維化病

清は新鮮血を採取後遠心分離し,直ちに滝過滅菌を行

変を発生させることが確認された。同時に,血清中のつ九。なお,陽性対照としての四塩化炭素(東京化成

病変発現因子は,非働化による加熱の影響を受けない)は20%の濃度でオリープ油に溶解し九。

こと,さらには自家製の血清においてもその再現性が物は 6 週齢のF344雄性ラット(日本チ十ールス・

確認され九ことから肝線維化の起因成分はプタ血清中リバー)を20匹用い 1群 4 匹からなる 5 群に分けた。

に普遍的に存在すると考えられた.しかしながら炎症

図 1 に示すごとく,第 1群から第 3 群にそれぞれの血細胞反応を伴わないことや四塩化炭素により発生し九清をラット 1 匹当り0.5m1 を腹腔内に週 2 回 8 週問に肝病変と比較すると線維量と形態像に差異を認めた。

わたり腹腔内投与し,第4群には四塩化炭素を同様回

今後その発生機序を追求するとともに肝硬変病態モデ

数胃内投与し九。第 5 群は無処置対照群とした。動物ルとしての有用性についてさらに検討を加える必要がは実験終了後工ーテル麻酔下で屠殺剖検し,肝を中心

ある。 0
群

に病理組織学的に検索した。
(結果)

1‑3

表 1に示すごとく屠殺時の平均体重は,第 1から第43の各群において対照の第5群に比較してわずかに増5

ワママワワマワワマワワ▽マワワマワ▽マ▽マ
動

1から第 4 の各群で第 5群に比較して有意な増加が認の表面に若干の凹凸がみられたが,いずれも対照群に比較して顕著な差異ではなかった。

表1.屠殺時の平均体重および臆器重(g)
群体重肝
12345

おいて軽度の腫大が認められ,第 4群では肝の辺緑部

ブタ血清(1一市販,2・自家製, 3一非働化):四塩化炭素図 1.実験デザイン

められ,それは胖でも同様であうた。ま九,腎におい肉眼所見において,第 1から第4 群の肝および胖に物←マ: F344雄ラット(6週齢)

4群では逆に抑制される結果となうた。肝重量は,第

がわれ九。

8 (週)

↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓

加する傾向が認められたが,四塩化炭素を投与し九第ても肝や胖ほど顕著ではないものの同様な傾向がうか4胖

腎(右)腎(左)280.0 8.99* 0.乃** 1.01* 0.98
288.8* 0.22*" 0.69** 0.95 0.96
280.8 10.04** 0.66* 0.96 0.95
238.2 10.釘** 0.87*** 0.97 1.00

257.3 6.37

0.54

0.85 0.89

有意差;第 5 群と比較して*Pく0.05,** Pく0.01,***Pく0.001

APA系ハムスターにおけるストレプトゾトシンの急性毒性
0

韓志

36.

晋洙、乗松真理、菅原由憲、土井邦雄、光岡知足(東大、農)村克己、赤井弘幸、田村一利( 30ZO)
ストレフトソトシン(SZ)は最初抗剤として開T3群と雌のT3群て増加傾向を示し、トリグリセリド発されたが、現在ではもっぱら実験動物における糖尿は雄のT2、 T3群で有意に増加し、のT3群でも増加

・, 1 、.ハムスター傾向を示した。一方、腎機能障害の指標に関しては、
病誘発剤として利用されている。しかし、ハムスター
BUNが雄雌のT3群で増加傾向を示し、クレアチニンはにおいてはSZの応用伊1は少なく、毒性や糖尿病誘発量
雄のT3群で有意な増加および雌のT3群で増加傾向を等に関する基礎的検討を行った報告も希である。私達示した。電解質(山、 P、 Na、 CI)にっいては、雄のは比較的若い週齢から自然発症性に腎糸球体間質の肥厚傾向を示すAPA系シリアンハムスター(第78回日本病 T3群で有意な増加が、またのT3群で増加傾向力ー
理学会)にSZを投与し、糖尿病性腎症の早期作出を試められた。

みるに先立って、今回SZの急性毒性に関する検討を行病理組織学的所見:肝臓と腎臓の変化が最も目立ち、前者は雄雌のT2、つた。
く材料と方法>T3群に、後者は雄雌のT3群にそれぞれ共通して認められた。肝臓では肝細胞質の空胞形

3 力月齢のAPA系ハムスター雄、雌各 16 匹(平均体成が弾慢性に認められ、 PAS染色標本ではグリコゲン顯
重;雄126'、雌132E)を各々 4 群に分けて実験に供し粒の高度の減少もしくは消失がーめられた0 臓ではSZの投与量は予備実験のデータを参考に omE/k8( C )、 20皿'/kι( T D 、 40皿宮ノk'( T 2 )、および60七J‑0

連位尿細管上皮細胞の壊死・脱落、近位尿細管上皮細胞の彌慢性の空胞形成が認められた。一方、騨臓では、

m'/k8 ( T3)とし、腹腔内投与後3日目に剖検した。供雄の T2、 T 3群および雌の T3群で騨細胞の=胞形成
試物にっいては、毎日臨床観察と体重の潟定を行い、が散見され、免疫組織学的検索(ABC法)でインシユノ
剖検時には主要臓器重の欄定、尿検査を行うとともン顯粒の脱落、減少が認められた0 また、外分器腺上に、分航血清を用いた血液生化学的検査、全身臓器の皮細胞の萎縮および空胞形成も観察された0 モの他、病理組織学的検査およびT2群の肝腎瞭、騨臓の電雄雌のT3群で副腎髄質の毛細血管腔の拡張よらびに顕的検索を行った。
<結果>

臓のりンバ漣胞および胸腺皮質のりンパ球の壊死が認められた。

死亡率:雄のT3群の 1例が投与後3日目の朝、死亡電子顕微鏡学的所見:肝細胞で小胞体の増数、微小{空砲の増加、ミトコンドリアのCisternaeの消失およびしてぃるのが発見された。

臓噐重量:雄と雌のT3群て腎相対重の増加が、まマトリックスの電子寉度の増加、グノコゲン粒の・ハ'舌刃性などが認められた(図1)。また、騨においてはた、聰相対重量の減少が認められた。

尿検査所見:雄のT2、 T3群と雌のT3群で高尿糖値β細胞のインシュリン顯粒の消失がミ0められた(図2)0か認められた。

<結論>

以上、今回の検索によりAPA系ハムスターにおけるS

血液生化字的所見:血糖値は雄のT2、 T3群において有意に上昇し、雌においても T3群で増加傾向を示し Zの急性毒性の全貌が明らかになるとともに、 APA系ハた。肝細胞障害の指標であるGOTは雄雌の T3群で増加ムスターに糖尿病を惹起するには雄動物に40.'/',
傾向を示し、 GPTは雄T3群で有な増加を、またb.W.(i.P.)のSZを投与するのが適当であることが解っコレステロールは雄のT2、 T3群で有に増加し、雌のT3群で加傾向を示した。りン脂質は雄のT2、施中である。

T3群でも増加傾向を示した.血清脂質に関しては、総た。現在、ゴールデンハムスターでも同様の実験を

..

図 1.

肝細胞

図2

‑46‑

肺島細胞

、

.,

鳥

.

.

..

'、1:

37.

^永牽d》糸呈マ肖イヒ^白勺景多

むこ昌司',ーる^馬貪y丙王里^白勺石汗多巳

0永露博昭1・2),伊藤隆明2,,北村均2),脇坂美国",沢成好2) D資生堂研究所,2)横浜市大.医.一病
D 目的
多くの環境因子が肺腫癌発生に関与しているが,特にとんど差はなく,今回の実験条件では,タール経口投与
が肺腫癌発生を有意に促進する結果は得られなかった.

喫煙に対する社会的問題性は高く,実験的にも経気道性

しかし,多発腫癌の融合とみられる一葉全域の腫癌性置にその気道障害,腫癌発生促進作用等が認、められている.

換が,4NQ0 群の 2 例と,4NQ0十タール群の 5 伊信忍めら

一方,喫煙に際して吸煙による気道上皮への直接作用とれたが,単一腫癌として計数されている.それぞれほぼは別に,喫煙成分が経消化管性に吸収される経路が存在

全域が腫癌により置換されており,多発腫癌の融合も示する.当教室では,肺発癌因子が消化管あるいは他の経唆された.その他の主要臓器の病理組織学的検索結果お路から吸収され,血行性に気道上皮に作用して腫癌形成

よぴ肺の電顕検索の結果も含めて報告する.

に至る機構についての研究成果について報告してきたが,今回はタバコタール経口摂取のマウス肺腫癌発生に及ぼす影響ならぴに主要臓器の病理組織学的変化につぃて検討を行ったので報告する.
Ⅱ)実験材料およぴ方法

動物は 6 週齢の雄 ddY マウス 170 匹を用い,発癌物
質として側Q0 を用いた.投与は森の方法に準じて,実験開始時に 0.24 昭ノmouseを 1 回皮下投与した.タバコ
タールはマイルドセブンより採取したもの(日本たばこ産業株式会社提供)を,0.3 %にコーンオイルに溶解し,
1日 2 回週 12 回,胃ゾンデを用い 1 回に 30 吃/k8

T6ble lを強制経口投与した.実験デザインを Fi8 1 に示した.
無処置対照群,溶媒投与群,側Q0 投与群,側QO+タール
投与群およぴタール投与群の 5 群を殷けた.肺は 2%

Tot81 Dose of ciEarette T8r for 43 制eeks ( Meきn )GroupTot81 doseノロ0use

4N卯゛ Tar

813.5 闘T8r
( Sヨ即le788.0 能HILD SEVEN . t8r contents

Me8n/oouse/d8y
2.70 闘2.62 ヨ客14 0宮ノCi宮8rette

グルタールアルデヒドを気管より注入固定し,各葉を分T晶bl.2

難後,実体顕微鏡下にて発生腫癌数を計数すると共に腫Ⅲ)結果
マウス 1 匹あたりの平均タール総摂取量をTable 1 に示した.

26 週,52 週剖検時の肺腫癌の発生頻度,発生数をTable 2 に示した.26 週剖検群では,無処置対照群に比較してタール投与群で肪腫癌発生数の増加があり,発生促進傾向を認めたほか,タール群の 1 例では右肺上葉のほぽ全域が腫癌により置換され,多発腫癌の融合が示唆された.52 週群の対照群,溶媒群,タール単独群の 3
者間では,タール単独群の平均腫癌数に増加傾向を認めた.また,4NQ0 群と側QO+タール群間では,成績にほV CO"1r01
4"卯
4削00 ・ T.r
T計

就0.0「
言

行った.

CO"tr01

抽W昂おm部 W部

顕的検索も行った.他の臓器にっいては光顕的に検索を

姓に一部はオスミウム酸固定を経て,所定の如く包埋し電ε如

N部能記馳馳寓"

癌径の計測も行った.腫癌については,光顕的検索と共1"C1由M● of pU1閥間゛, TU■or ●.司"U.b.r of KodU1物 11村此側 I Hlcr0ネCO,1C ^叫U】t')

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0.40

之閃
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1 04

長期自発運動がラットに船よぼす影響

38.

0吉田緑、豊原俊治、田内清憲、滝沢隆安、今道友則(動繁研)

実験動物としてのラットは,限られた空問で飼育されは観察されず,重篤な慢性腎症が1例で認められただけてぃるが,本来広い空間を行動囲として活動する動物であった。運動群の雌は例数が少ないが,雄と同様の傾である。したがって,実験物としての飼育方法は,ラ向を示した。

ツト本来の運岳を満足しているとは言い難い。そこで主な死因と思われる下垂体前葉腺腫と慢性症についわれわれは,回転ケージを用い,ラットをほぼ一生涯自

て,生存例を含めた全例で検索し,その発生頻度を運動発運動させることによ1),ラットに与える自発動の影
響を検討した。今回は,死亡率および加齢性病変(特に群と対照群で比較した。その結果,下垂体前葉腺腫の病群と非運動群のほうが雌雄ともに発生頻度が低かった(表1)。

慢性症およぴ下垂体前葉腺腫)にっいて,変は運動群のほうが雌雄ともに軽度であり,慢性腎症も運群(対照群)で比較した。
表1

慢性腎症および下垂体前葉腺腫に船ける運動の効果

材料と方法
Wistar‑1mamichiラットを,運動群として雄20匹および雄

雌19匹,対照群(非運動群)として雄15匹およぴ雌18匹を供試した。運動群は,離乳後3週齢から円周がlmの

雌

運動群

対照群

運動群

対照群
8/18

8/20

10/15

5/19

と自由に住来でき,動物は自発的に運動できるように設

軽度

フ/8

フ/10

3/5

ν8

計されてぃる。対照群は,通常の個別ケージで飼育した。

高度

V8

3/10

2/5

フ/8

15/18

下垂体前葉腺腫

回転ケージで飼育した。この回転ケージは,個別ケージ

これらの動物は,餌およぴ水を自由摂取させ,雄はⅡ0週
慢性腎症

10/20

13/15

フ/19

各群のラットにっいて,飼育期間中の死亡を観察した。

軽度

5/10

ν13

4/フ

2/15

途中死亡・切迫殺例およぴ生存例は,病理組織学的に検索し,慢性症および下垂体前葉腺腫の発生頻度を求めた。また死因にっいても病理組織学的に検索した。

高度

5/10

12/13

3/フ

13/15

齢まで,雌はⅡ4 週まで飼育した。

考察
動群の雌雄ともに,対照群に比べ,体重増加抑制が観察された。したがって長期自発運動により,一生涯に結果

わたり体重増加が抑制されることが明らかになった。

実験開始直後から,対照群に比べ,運動群の雌雄とも死亡率は,動群の雄で低下した。これは,下垂体前に有意な体重増加抑制が察され,終了時まで明らかに

葉腺腫および慢性腎症を死因とする例が,動群でほと低値あるいは低値傾向が観察された。
雄の死亡は,運動群では106週齢まで出現せず,対照

んどみられなかったことに起因すると思われた。また,群では82週齢から出現した。また雌の死亡は,運動群では82週齢から出現し,対照群で71週齢出現した。雄の最終死亡率は群では3/20(15.0%)であり,対照群では9/15(60.0%)であった。また雌の最終死亡率は,動群で下垂体前葉腺腫船よぴ慢性腎症が運動群で軽減化したこ

は5/19(26.3%),対照群では8/18(44.4%)であった。

とも考えられるが,二炊的な体重増加抑制による可能性とから,長期自発運動が加齢性病変に影響を及ぼすと推察された。これらの自発運による加齢性病変の軽減化の原因は,自発動による代謝の変動等の一次的な影響

途中死亡・切迫殺例の死因は,対照群の雄9例中3例も大きく,今後さらに検討する予定である。
,

が脳底部を圧迫する致死的な下垂体前葉腺腫であり,6
例が重な性症であった。また対照群の雌8例中4例が致死的な下垂体前葉腺腫が,4例で重篤な性症が認、められた。しかし,運群の雄では下垂体前葉腺腫

‑48‑

39.

Physostie■ine, De"OS 投与によるラット下垂体中問部の変化
0今井俊夫,青木豊彦,細川暁,日比野信裕,福田極男,岡田雅昭,中野渡純一,五十嵐俊二(エーザイ舗.安全研)
はじめに

臓器重量: DFP投与群において,下垂体およぴ副腎の絶ラット下垂体中間部(PDの腺細胞は, proopi0■elano‑
Cortin(PO"のを共通の前体とする ACTH,MSH,ιPH,

対.相対重量が有意に増加した。

endorphin などを分泌し,食塩水投与,ストレスなどに

光顕検索:対照群のP1腺細胞は主として多角形で,細胞よりそれらの分泌機能が亢進することが知られている。

質の明るい細胞とやや暗い細胞を区別することができ允

しかし薬物投与によるP1の変化についての報告は極めてが(写真1), DFP投与により腺細胞は肥大して円形となり,少ない。

細胞質の明るい細胞が主体を占めるようになった(写真2)。またBrdU標識率の増加傾向が認められた。なお前葉,

今回我々は,コリンエステラーゼ(AchE)阻害作用を有するカルバミン酸エステル(physosti8■ine: PHY)およぴ

後葉に変化は認められなかった。

有機りン化合物(dyflos:肝P)をラットに投与し, P1腺細電顕検索:対照群においては細胞内に多数の分泌穎粒が胞の形態学的変化を検索した。

充満していたが, DFP投与により分泌穎粒が減少した。 4週問投与群においては更にゴルジ装値およぴ小胞体の発達がみられた。PHY投与群においても同様の傾向がみられ

実験材料およぴ方法

九が,比較的軽度であった。

PHY投与群 PHYは Physosti師ine sulfateを精製水にて0.4%溶液とし,ラット(SIC:SD,雄)に経口投与した。投与まとめ量および投与回数は 12 E8/kE/d8γを2日間(11週齢動物
使用),および8■ぎ/k8/d8γを4週間(6週齢動物)とした。

これまで, renin‑inhibitor である Propran0101

DFP投与群 DFPは diisopr叩γ1 "uorophosphateを落花(Kobay8Shiら,1976)や dopa ine一抑taeonist である

生油にて0.02%溶液とし,皮下投与した。投与量およぴ投

br0ヨ0criptine (stoecke1ら.198D により, P1腺細胞の与回数はI E/k'を単回(11週齢物,投与2日後屠殺),

小胞体増生など機能亢進を示す電顕的変化が誘発される

およびI E/k'/舶ekを4週間(6週物)とし九。

ことが報告されている。今回の実験により, DFPあるいはPHYは電顕的のみならず光顕的にも明らかなP1腺細胞の肥投与期間終了後,屠殺はぺントバルビタール麻酔下に大を誘発することが明らかとなり,更にはACTHの標的鳳て行い,大動脈より海流固定後,諸鳳器を摘出した。

器である副腎にも肥大がみられ九。

器重量:4週間投与群についてのみ下垂体,副腎,甲P1には多数のAch柞性のシナプスが存在し,AchE活性状腺および脳の重量を測定した。

も高いことが知られている(sar8hら,1983)。今回の実験

光顕検索:4週問投与群についてのみ10X中性綬衝ホルマリン溶液にて固定し, HE染色を施して病理組織学的でAchE阻害剤により他剤にはみられない著明なP1の機能

検索を行った。また Bro.odeoxyuridine(Brdu)の腹腔内亢進が誘発されたが,その原因としてAchの直接的な関与投与による瞬間標を行った。

が示唆された。

電顕検索: 1%グルタールアルデヒド溶液(PH7.4)にて潅
流固定後,2%グルタールアルデヒド溶液およぴオスミウ

ーゞ

.゛

,.

‑0.

ム酸による後固定を行った。酢酸ウラニル鉛混液の電子二重染色を施してH腺細胞の超微形態像を検索し九。

.
.

.

.
.

(写真D

.

.

(写真2)

.

..

.

.

、

嵐

.
.
.

.

.

が認められ九。

.

.,..

週間投与群のみの対照群と比較して約10%の体重増加抑制.

. ,一般状態: P"YあるいはDFP投与により一過性に全身骨格

.

.

..

.

実験結果

筋の線維束収縮あるいは流挺を呈する個体がみられ,4

.

.

働

.

Har卿1およびNorh祉卿1 によるラット腎毒性

40.

0 倉田靖,、小川久美子'、田中 光.、津田洋幸.、萩原昭裕'{名市大・医・1痛里'、藤田学園・医・ 2郷里り照群で1.5 士0.5mν411r であるのに対し、 harmanは8.2 士<はじめに>

H雛卿1およびnorh釘卿1 は野菜、タバコのタールやtryp・

2.2mV41r、nor1印卿1 では、フ.2 士2.2mV4tr とj勣Uし、尿toP1印の力喋分解物中に含まれる物質である。これらの変異

ι腫も両群で有意に低値を示した。また、生イヒ学的検査では原性はそれぞれ単独では陰性であるが、変異原性物質
ITrp p‑1,Trp・P 2)や既知の発癌物質化enzola]pyr印e,P・

始n脚およびnor11ar卿1 の1,ooopm般与群のN‑acetyl一β一dimetlW1釧inoazobeΠ2ene,2‑acety1師inofluorene)の変^、

尿糖の上昇および電解質(Na, K 等)の上昇を認めた。

活性をj曽幅させ、さらに変異原性が陰性の物質(即iline、DNA 合成(table l.).第2週ではh雛卿1の1,00OP師般与群に0・toluidine )でもnorhan卿1 の存在下では陽性を示すこと

尿細管上皮のBrdU標識率の有意な亢進を、nor1脚脚にはそ

D一宮IUC0勤linidase (NAG)、 1actate dewdr0目印ase lLDH)、

力蓮R告されている。以前、我々はnor1印'1間11 をラットに投与の傾向を認めた。 4週後では両者の1、00OPα般与群に亢進をしたところ腎尿細管の壊死ならびに炎症性の変化を観察し認めた。

た。今回は、ラットにおけるhar脚1およびnor1血'卿1 の短期

血液生イヒ学的検査:尿素窒素(BUN)、 cr田tinine(cr)等の有問投与による腎毒性について詳細に検討した。

意の上昇をharna1および叩r11ar卿1 の1,ooopm般与群に認め<方法>た。しかし、両者の50opm鮮では対照群と差はなかった。

6週齢のF344系雄ラット50匹を5群に分け第1群と 2群は痛聨且織学的検査.1{ar卿1およびnor11ar舶11 の1,ooopm般与

har卿1、第3群と 4群はnor11al'卿1 をそれぞれ1,000 および群に尿細管の変性および再生像と間質の炎症性細胞浸潤、50OP叩の濃度で飼料中に混じ投与した。第5群は基礎飼料の

条帛維化、尿細管の拡張と管腔内への好中球等の浸潤などの炎みの対照群とした。実験開始の2および4週後に各群の5匹

府斤見を雀見察し、 4週の屠殺動肋では2週に上嫩して病巣のずっを屠殺し、 br01110deoxyuridine 佃rdu)を用いた尿細管上拡大が認められた。 H紅卿1の1,00OP到僻では尿細管に結晶が皮細胞の標識率の測定および病理組織学的検索を行なっみられ、皮質ではその周辺に巨細胞の出現も伴っていた。した。また、各群の屠殺前には血液生化学的検査および実験のかし、 50opa僻では腎に病変を認めなかった。また、その他

1、3、5、フ、14および28日後に4時問の尿を採取し、尿量、の臓器にも著変を観察しなかった。

比重、電解質、PHの測定および生イ畔的検査を実施した。

<まとめ>

<結果>

1,00OP叩の始即印およびnor11ar胞1 投与は経時的な尿量の^斤見.各群の飼ネヰ摂取量に差はなかったが、摂水量では増加と尿比重の低下並びに尿生化学的検査のNAG、ゆH、尿1,00OP叩の始訂脚およびnor1印卿1投与群において実験の第糖、電解質の上昇と血中のBUN,cr のなどの増加を惹起し1週から各終了時まで対照群に↓嫩してほぽ2倍のj勣nがみた。また、病1里組織学的に病変は皮質から舗質全域に及ぶ変られた.体重ではこれらの群に1勤吋喘11力壤臻された。

性と再生像および炎症像を主体とした変化であり、さらに尿尿F斤見:投与開始後1日で、 mr卿1およびnor11ar脚1 を投与

裂謄士皮のDNA 合成の亢進もみられた。しかし、50OP師群

した全群に尿量の1勤口をを照したが、 5日目L膝の測定ではでは、これらの変化を認めず、腎毒性の鬪直は500 と1,000

両者の1,000叩m投与群のみにその増加を認め、 4 週では対P叩の間にあると考えられた。

Table l. DNA synthesis in R印al cortical Tubules in F344 Rats Fed 11ar^1 0r Nor1脚^
Test 口1師ical

Dose

NO. of

(P叩)

rats

1,000
500
Nor1Ⅷ'舶rl

1,000

Nor11笹'脚n

500

NO. of Brdu‑1abe1劇 Ce11S/所' at week
36.0士 8.9
1.6士 1.フContr01.

..

; Pく0.05 0r pく0.01, respectively.

4

2

55555

12345

翻

位'OUP

.

6.0士 1.4 '.

20.0士17.1

49.0士16.2

1.4士 1.1

4.8士 1.5 '

0.8土 1.1

5.5士 1.3 '゜ N師b臼's of a11iMl wae 4.

‑50‑

66.4土34.フ"41.

抗生質の投与による尿中NAG1割生の変動と腎の病理学的変化について
0川口隆.細川暁.岡田文弘・菅沼彭純・福田種男・日比野{言裕・富松幹夫・松原孝雄・中野渡純一・五十塵俊二(エーザイ・安全研)

尿細管上皮細胞内のライソゾーム酵素であるN・acetyl・CIUを示したが,光顕では近位尿細管上皮細胞内の好酸性穎粒のCosaminidase (NAG)は腎障害,特に尿細管上皮細胞障害増加が認められた。電顕的にも近位尿上皮細胞に好酸性の重要な指標のーつであると級告されている。アミノグリコ

顯粒に一致すると思われる lysoS伽aldeflseb圃y のおシド系抗生物質の腎毒性においては極めて鋭敏なマーカーエよび増大,AplcalvacuoleSの増加および拡張が認められたンザイムであることが知られているが,セファロスポリン系

が,腎障害を示唆する変化は認められなかった。近位尿細管

抗生物質についての報告は少ない。今回,種々のセファロス

上皮細胞内の好酸性穎粒のは投与期問に相関していた.

ポリン系抗生物質及びゲンタマイシンをラツトに投与した際,なお, EI040に対する抗体を作製し,免疫組織学的検索を実尿中NAG活性の変動及び機序について,比較検討したので施した結果,好酸性顎粒に7致してEI0如の存在が確認され

報告する。

た。

[材料と方法]〔考察]

動物は7 8週齢のSD系雄ラットを用いた。

腎障害が認められたGMとCERでは他のセファロスポリ

実験1ではセファロスポリン系抗生物質を用い, cefalo‑

ン系抗生質とは異なり,尿中NAGi舌性が投与7日前後にtln (C訂)1M偽18/k8, cefaloridi舵(CER) 5(加Vk8 (投与

活性ピークがあるものと推察され,病理組織所見より,細胞1週問まで750m8/k8), EI040 3卯mvk8 および 1(肋mz/k8

崩壊に伴う酵素の逸脱に起因すると思われた。

を連続静脈内投与した。投与期問は7,14および21日と一方, CET, CAZおよびEI040においては尿中NAG

して,各投与終了後に尿検査,血液検査及び病理学的検査を

活性の上昇と近位尿細管上皮細胞内の好酸性穎竝の四とが行った。実験2ではセフフロスポリン系抗生物質としてCef・

相関していたが,電顕的にlysoS伽alderlseb圃yの崩壊像おta21dlme (CAZ)300飢8ノ腿及び1卯0崩8/k8,アミノグリコシド

よび他の膜系の変性は認められず,腎障害を示唆する変化は系抗生物質としてGenW11Cln (倒) 5山18ノ臨を21日問連続認められなかった。特にEI040投与群では腎の増加が投の静脈内あるいは筋肉内投与し,投与1,フ,14,21日

与回数に比例せず,近位尿細管上皮細胞内の好酸性穎粒の増に尿検査を実施した。投与終了後,剖検し病理学的検査を行加のみが投与および投与回数に比例し,好酸性穎粒部位につた。

薬物の沈着が確認された。従って,今回の実験で見られた尿[結果]

中NAG活性の軽度の上昇にっいては,腎の障害性変化を不尿中NAG活性は, CET, CERおよびGM投与群で投唆するものではなく,腎尿細管において再吸収された薬物を

与7日目に有意な増加がみられ,特にCER投与群とGM投処理するために誘導されたlysoS伽肥の増加に起因しており与群で高値を示した。一方, CAZおよびEI040投与群ではいわゆる適応反応と考えられた。

投与期周に相応して増加が見られた。
病理学的変化について, GM投与群の投与21日目の観察では,腎の著しい増加とともに尿細管上皮の変性・壊死
および再生像が著明であった。一方,セファロスポリン系抗生質のCER投与群でもGM投与群と同様に腎の著しい増加,尿細管上皮の変性・壊死などの腎障害が認められた。
CET, CAZおよびEI040投与群では腎の工増加,

以上より.尿中NAG活性は近'管上皮細胞における細胞障害のマーカーだけでなく,尿細管における薬物の再吸収の程度を知る上で重要な指標となりうると思われた。

士音^i丘イ立長貢糸田^」ニ^糸田野包ここ才3Cナるブフドニミ寸フ■、^'肥主42.

一糸田牙包イヒ^白勺・糸田牙包,丙王里^白勺石升与老一

0濱田哲夫・藤原仁(産医大病理部) 、谷本昭英.井出良浩・有吉加代子・小出紀(同二病理)
カドミウム(cd)の毒性病理学的研究はその多くが以上より、 B131細胞を近位尿細管由来上皮細胞と同定

動物投与実験に依ってきたので、腎は全身臓器変化のした。このB131細胞を Cd mediumに暴露すると30分以ーつとして研究がなされ、組織学的ごは多数の報告が内に細胞質に小空胞が形成され、軽度の anisokaryo・ある。しかし、その標的細胞のーつである近位尿細管

Sis、核小体の明瞭化が認められた。 60分後にはさら上皮細胞に対する則の直接作用を検討した級告は少なにこれらの変化が著明となり、 B131細胞は細胞質に空い。今回、我々は培養イヌ近位尿細管上皮細胞にCd暴

胞化が目立ち、著明なanisocytosis、核縁の肥厚、核露を行い、経時的に細胞変化を観察、 cdの細胞化学的小体の著明化が見られた。またしばしば 2核あるいは分布と比較検討した。また、細胞内Cdの定を行い細3核を有する巨細胞化が注目された。この細胞質空胞

胞変化・cd分布と対照した。

は PAS染色、 oil red 0 染色共に陰性であった。 90分【材料と方法】

以上 Cd 祀diumに暴露すると、剖31細胞は収縮し核は

▲舮

処上

の

1立

ビーグル犬より摘出

濃染しスライドチ十ンバーから劍離するものが多くなした腎皮質を細切、コラゲナーゼ・ヒアルロニダーゼ

つた。細胞化学的にCdは30分以上の暴露でB131細胞内

消化後、 Richal・dson et al.の方法に基づき近位尿細に黄緑色の蛍光として認められた。 30分暴露では細胞

管上皮細胞を分雛・培養した。培養は 10%FBS加Ea81e'S

質にびまん性、一部穎粒状の黄緑色蛍光として認めら"倒を用い炭酸ガス培養器で行った。この培養細胞れた。 60分暴露では、細胞質の蛍光が強くなると共に(B131細胞)は酵素細胞学的、免疫細胞学的、電子顕核膜に一致して線状に蛍光がみられ、また核内にも斑

微鏡的検索により近位尿細管上皮細胞由来であること

状に蛍光がみられた。 90分以上の暴露では、収縮したを確認した。

細胞のほぽ全体が強い蛍光を発した。細胞内カドミウ

Cd累露:】 m" cd を含む培養液(則 mediu")で Pre・ムは、 30分以内に増加し 60分から120分の問でほぽ'、onfluen{の状態に培養された Slide・chaNber 上の一定量になった。

B131細胞を 15分、 30分、 60分、 90分、 120分問培し、【考案】cdの腎に対する急性毒性は、動物投与実験に位相差顕微鎖観察、 cd細胞化学、電顕的観察などを行

よると、急性尿細管壊死として出現する。今回のB131

つた。

細胞を用いたCd暴露実験はこの尿細管上皮細胞の壊死

Cd細胞化学: cdに暴露した B 1 3 1 細胞を10OXエタノ

性変化が、 cdの細胞に対する直接作用であることを確ールで脱水固定後、オキシン飽和エタノールで30分認した。すなわち近位尿細管上皮細胞はCdに暴霽され問、アンモニアでPHを8.5 に調整した0.28オキシン、ると、はじめに細胞質の空胞化ついで核の形態変化が2昭氷酢酸、 120m1蒸留水溶液で 30分問反応後、水
溶性封入剤で封入し、 Y・455 filterを用い蛍光顕微鏡

起こり壊死に陥る。この核の変化は、大小不同、核縁で観察した。

の肥厚、核小体の明瞭化、多核化など多彩で興味深い
形態異常を示した。さらにCdの細胞化学的証明は、近細胞内Cd定量:12 We11・plate上で培養した B131細胞

位尿細管上皮細胞のCdの細胞内取り込みと細胞内分布に一定時間Cd暴露後、印TA・trypsin液で剰離、細胞数を明らかにした。この結果、 cdは細胞質に主にびまんを算定後、長音波処理、 0.1N HC1を加え原子吸光分光性に証明されることから、大部分は Cytos01に存在す法によりCd'度を算定した。

ることが示唆された。また、核にも明瞭な蛍光が確認【結果】 B131細胞は、多稜形でシャーレの底面に接着された。この細胞化学的Cd細胞内分布は,subcenular

し単層で増殖した。 conflueηt の状態では、近位尿細fractionation (K.vaku.1984)による Cd分布とほぽー

管細胞に特徴的とされるdome (hemicyst)形成が明隙致した。

であった。また細胞膜には alkaline phosphatase が今後、このB131細胞を用いた長時問暴露実験、さら酵素細胞化学的かつ免疫染色にて証明された。さらに、にCdがおよぽす細胞内変化についての研究がCd の毒走査電顕にて、細胞表面にmicrovi1Πが観察された0性発現機序の解明に役立つであろう。

43.

イヒe羊尋勿^とこよる米青^奥章^q)折芳王里会,主白勺木余言寸(第3報)
一大量ビタミンB6投与によるラット精巣障害一0海道昌宣・井出良浩・小出紀(産医大二病理)、森晃爾(同環墳中毒)、濱田哲夫(同病院病理)【緒言】我々は様々な化学物質による精巣障害を検索ら消失しセルトリ細胞のみとなった精細管が多数見らし、第5回毒性病理学会にはエチレンオキサイドガスれ、わずかに残った成熟精子纏胞はほとんどが変性し、によるラット精巣障害について報告したが、最近、大変性、多核化したC018iやC即 Phaseの精子細胞、変性

量ビタミンB6投与による精巣萎縮を見いだし臓器重した精母細胞が多数見られた。また生殖細胞の減少のの変化、精子数等についてはの報告をしている。

著しい個体でLeydi8細胞の増加がみられた。 50o m8群

ビタミンB6の成人の最小必要量は一日2から4m8であも個体及び個々の精細管によって障害の程度に差はある。一方、大量ビタミンB6投与はホモシスチン尿症、るものの10oom8群と同様の障害がみられ、 6週問投与群

貧血、妊娠中毒、バーキンソン病、経口避妊薬によるで、成熟精子細胞の変性、脱落がある一方、 sta8e lx、

うつ症状その他の治療として使用されてきた。 1983年

X、×1になっても放出されない精子が認められた。 250にSchaumbur8らがビタミンB6大量投与によるヒトにおm8群の6週例では一部に少数の変性した成熟精子細胞がける感覚神経障害を蝦告した後、いくつかの大量投与見られたが、 125m8群には変化は見出されなかった。

による神経毒性の蝦告がされてきている。今回、精巣の傷害を光学及び電子顕微鏡的に解析し級告する。

電子顕微鏡的所見:電顕的にはセルトリ細胞の変化に注目した。 500及び10oom8群で、セルトリ細胞の障害が認められた。 2週問後で、多数のセルトリ細胞の細胞【材料と方法】暴奪群、対照群共に約30ogのウィス質が萎縮L、電子密度は上昇していた。また、小胞休、ター系雄ラットを用いた。各群それぞれ 6匹とし、暴・部ミトコンドリアが拡張してきていた。 6週問後では、鴛群にはビタミン B6(pyridox ine ・ HC D 125,250.500

障害は高度て小胞休の拡張の他にミトコンドリアの空

10oo mgノκ8 を一日一回、週 5日腹腔内投与を行った。

胞状変性が目立ち、生殖細胞彰取り囲とセルトリ細胞

対照群には同の生理的食塩水を投与した。2週問及び側突起の辺縁は不規則になっていた。細胞質が空胞状

6週問後、最終投与より約24時問後にジエチルエーテルに変性腫大したセルトリ細胞が散見され、少数ながら麻酔下に精巣を摘出し、重測定後、光学顕微鏡用と核のクロマチンが変性凝集したセルトリ細胞も見られしてブアン固定、 PAS染色を施し、電子顕微鏡用としてた。生殖細胞はしばしばセルトリ細胞の側突起なしに

2.篤グルタール及びオスミウムにて固定し、酢酸ウラ

お互い直接接触し、変性、多核化した生殖細胞も多数

ン、鉛染色を施して、形態学的検索を行った。

見られ、また多数の変性した生殖細胞が、セルトリ細胞に貪食されていた。

【結果】 1000陀群では投与開始後1‑3週問後より失調性歩行を呈し3匹は実験期問中に死亡した。 50om8, 1000

【まとめ】(D生殖細胞の変性、脱落は、生殖細胞の成鵬群では対照群に比し体重、精巣重量共に有意に減少

熟が進むにつれて高度てあり、また2週問投与群より6した。精巣上体重量は全ての投与群で対照群より減少

週問投与群の方が障害は高度てあった。光顕的に精子した。

の放出障害も見られたが、この放出障害はセルトリ細光学顕微鏡的所見:500,1000棚8群全例及び250m8投与群

胞の機能障害を推定させる。

の一部に精細管障害が認められた。 1000柁群では2週問(2)セルトリ細胞の明かな形態学的変化がビタミンB6

後精細管内の生殖細胞の脱落はあまりはっきりしない

50OP肌、 1000叩m/K8投与群で電顕的に認められた。セ

ものの、 acrosome phase後半及びmaturation phase削

ルトリ細胞の障害が生殖細胞障害に重要な影響を与え

半の成熟精子細胞はすでに大部分変性していた。また、ている可能性が示された。

Sta8e lx、 X、×1でも放出されない成熟精子細胞が認め(3)今回大量ビタミンB6による明瞭な末梢神経症状が出られた。一部で変性、多核化したC018iやCap phaseのる量より少ない量で明かな精巣障害が見いだされ、治精子細胞、壊死変性に陥った精母細胞が散見された。

療による大量ビタミンB6投与において神経毒性のみな6週問後では生殖細胞の変性脱落は著しく、精祖細胞すらず精巣毒性も注目する必要がある。

44.

船N/Kobラットにおける精巣の萎縮性病変について
0佐藤元信、古川文夫、篠田和俊、岡宮英明、今沢孝喜、今井田克己、高橋道人【緒言】(国立衛献.病理)2.電顕検索(ランタン.トレーサー法)

WBN/Kobラットは雄において廊の内・外分泌害を伴っ35週齢で屠殺した物の一部の精巣については、細切た自然発症糖尿病モデルであり、その他に白内障、腎症、後にカコジル酸緩衝液(0.1M, PH7.8)で胴整した1.0%硝神経症などを併発するが、精巣病変については知られて酸ランタンを含む2.0%グルタールアルデヒド溶液にて5いない。我々は、 WBN/Kobラットの精巣において、自然発時閻固定後、同濃度の硝酸ランタンを含むオスミウム酸

生の萎縮性病変を見いだし、それらが他の動物にみられで後固定を行なった。その後常法に従い切片を作製し、る加齢性の精巣病変とは異なった病態を示したので、報酢酸ウラン・クエン酸鉛の二重染色を施し鏡検した。

告する。

【結果および考察】【実験材料および方法】
実験にはWBN/kobラット雄(日本SLC)を用いた。固型

精巣の相対重量は10週齢で0.65%であったが40週齢において0.26%にまで減少した。

飼料及び水は自由摂取させ、フ,10,15.20,25,30,35

10週まではほとんどの精細管が正常であったが、週40,50週齢時に各々5匹を体重測定後、エーテル麻酔

齢が進むにつれて漸次、正常精細管の割合が減少し、50下にて瀉血屠殺し、精巣を摘出、重量を測定した。
1.光顕的検索

週齢では90%ほどが高度に萎縮していた。
35週齢における精細管の径は、正常と軽・中等度萎縮で精巣をプアン液にて固定後、常法に従ってパラフ'ン

は差がなかったが、高度萎縮では有意に減少していた。

切片を作製し、H[染色またはPAS染色を施して以下の項目

また、精上皮の厚さは、正常と比較して軽・中等度萎縮でにっいて病理組織学的検索を行なった。また、一部の動は有意に減少しており、これは造精細胞数の減少に起因物については屠殺 1時間前にBromodeoxyuridine(Brdu)のするものであった。

40 m8/k' b.W.を腹腔内投与し、精巣をユフーツクス(サPAS染色標本を用いた精細管基底膜の厚さの計測では、

クラ精機)で固定後、パラフィン切片を作製、抗BrdU抗正常が0.85μmであったのに対して、軽・中等度萎縮では体(DAKO)を用いABC法に従い免疫組織学的に染色、ヘマ1.23μm、高度萎縮では2.50μmと有意に肥厚していた。

トキシリンによる核染色も併せて行なった。
検索項目.精巣相対重量

StaEe ⅧにおけるBrdU陽性細胞数/セルトリ細胞数の値は、加齢により減少傾向を示した。このことより、週齢の進行に伴う細胞分裂能の低下が示唆された。

.Hモ染色標本にて、精細管をその萎縮の程度1こより正常、35週齢動物を用いたランタン.トレーサー法による電軽・中等度萎縮、高度萎縮の3つに分類し、それらの割

顕検索では、高度萎縮精細管においても、セルトリ細胞合を算出した。

間に形成されたtiEht junctionにてランタンの侵入が阻

軽・中等度萎縮:精上皮の空胞化が見られるが造精細胞は残存している精細管

高度萎縮:精上皮が主にセルトリ細胞のみから成り、造精細胞はほとんど消失している精細管

止されており、血液・精巣関門は維持されていることが示唆された。

精細管は上記のような萎縮性変化を示したが、ライデ'ツヒ細胞には著変を認めなかった。

.HE染色標本にて、 staEe Ⅷに相当する正常及び軽・中等

これまでにラット、マウス、ネコ等で精巣の自然発生

度萎縮精細管を選び、それらの短径と精上皮の厚さを病変が報告されており、それらは主に老齢動物を対故と計測、更に高度萎縮では精細管の短径を計測した。

したものである。しかし、今回の検索により、 WBNノκobラ.35週齢のPAS染色標本上にて、上記の如く3つに分類しツトでは若年齢より既に、造精細胞の減少による精巣萎た精細管につき、各々を2000倍に拡大して基底膜の厚縮が始まることが示された。この病変は造精細胞自身のさを計測し、萎縮程度との関係を調ぺた。

異常によるものなのか、あるいは他の要因(セルトリ細.BrdU肌本にて、 staEe Ⅷに相当する正常精細管について、 BrdU陽性細胞数/セルトリ細胞数の値を算出した。

胞の機能低下、ホルモン異常等)が関連しているのか、
今後の検討が必要である。

45.

WBN/Kob ラットιこ才b'ιナぞ,自実犬^^月華三ス乏^フー'ノレd>^王里
糸且糸哉^白勺キ矣言寸
0古川文夫・今沢孝喜・篠田和俊・佐藤元信・佐藤秀隆・高橋道人・林裕造(国立衛試.病理)

W8N/Kobラットはスイス.バーゼル老人研究所と西ドイ

では胞体が肩平化し、腺管様構造を示した。30週齢ではツ・ボン大学において50年問にわたって近交系繁殖の行腺房細胞の変化は更に高度となった。

われてきたWist討系由来のinbredラットである。雄にお内分泌組織であるラ氏島は5週齢でα細胞(ラ氏

いて初期には腫の外分泌障害を伴い加齢とともに糖尿、辺縁部の細胞)の一部が索状構造を示し、20週齢ではβ高血糖がみられ、また白内障、腎症、神経症などの糖尿細胞の腫大と小空胞変性が認められた。20週齢では図1病の合併症を引き起すことが知られ、これまでの糖尿病に示すようにラ氏島周辺部の出血と、その後維芽細胞モデルとは性質の異なる新しい自然発症糖尿病モデルとの増生が渦巻状にラ氏島を取り囲み、ラ氏島内にも線維いわれている。

増生が及んでいた。ラ氏数は週齢が進むにれて減少

このラットの廊炎発症の発生機序を解明する目的で初し、30週齢ではほとんどのラ氏島は線維増生により細分期の騨外分泌および内分泌組織を病理組織学的に検討し、割され本来のラ氏島の形態は認められなかった。
BrdUの取り込みを指標として騨組織における各細胞

またbr肌odeoxyuridine(Brd山による外分泌腺の再生能をの増生あるいは再生について検討した結果、外分泌組検討した。

では変性を示す時期においても腺房細胞の陽性率は低く、【実験材料および方法】

肉芽組織の線維細胞に高率な取り込みが認められた。こ雄WBN/Kobラット(日本SLのを用い、 5、 10、 20、 30週齢のことは、このラットにおける腺房細胞の再生能が非常に各時期5匹ずつを経時的に屠殺.解剖した。また、屠殺

に低いことを示唆するものと考えられた。

前にはBrdu (シグマ)を腹腔内に投与した。廊は10%およ【結語】

び原液のユワイクス(サクラ精機)で固定後、常法によリパラフィン包埋、薄切、ヘマトキシリン.エオジン染雄WBNノκobラットは5週齢からラ氏島に変化をきたし、色を施し病理組織学的に検討した。BrdUの免疫染色は抗20週齢から高度の線維化をともなう慢性輝炎像が認めら

BrdU抗体(DAKのを用いてStrept AB Kit ΦAKので染色しれた。この初期病変はラ氏周囲の出血であり、その後
炎症反応、線維化、ヘモジデリン沈着から脂肪置換へと検討を行った。

進行した。それにともないラ氏数は滅少し化、β胞【結果および考察】の変性も認められた。

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デリン沈着と脂肪置換が目立つようになり、廊炎の終息.︑.'︑.

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が認められ、一段と外分泌組織の荒廃が進行した像を示した。しかし、30週齢の時点になると浮腫、出血および、..." i‑胞の浸・、線維増生と線維組織内へのへモジデリン沈

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られた。20週齢では全例に高度の浮腫、出血、炎症性細炎症性細胞の浸潤、線維増生等はむしろ軽減し、ヘモジ

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病理組織学的には、騨外分泌腺は10週齢から小葉間に軽度の浮腫や出血、炎症性細胞の浸潤、線維増生が認め"...^..^"︑゛'ゞ1競1ヌ'●力゛、ニー

数血管に沿って認められ、同時に胖葉全体に顕著な萎縮が認められた。

一....

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肉眼的には5、 10週齢のラットの膝で著変を認めなかったが、20週齢以降のラットでは牌葉に褐色調の斑点が多'゛"','ぶだ、',3'1'CL.'、

腺房細胞には10と20週齢において好塩基性部分(エル01、ち:,,ニ、・ '.'を思わせる像を示した。
ガストプラズム)の空胞化がみられたほか、一部の小葉'ξ̲ 1

氏島周辺部の出血

46.

硫酸アトロピン反復投与によるラット勝胱、ハーダー腺、眼寓外涙腺<の影響
0田川義章、朝枝伸幸、岩井久和、早坂郁夫

組織学的検討一(鵠三和化学研究所・安全研)
および雌の 10omEノ露以上の投与群で認められ、体重比(緒言)

代表的な抗ムスカリン薬であるアトロピンの種々の臓重量の減少が雄の50omιノ寵投与群および雌の10omt/kι

器に対する薬理作用について多くの報告がなされている以上の投与群でみられた.組織学的には腺上皮細胞の萎が、反復投与した際の毒性変化にっいての報告は少ない。

縮が用量依存的にみられ、!oomE/捻以上の投与群では雌

今回、硫酸アトロピンをラットに反復経口投与したとこ

雄ほとんどの伊1に観察された。

ろ、病理組織学的に特徴的な変化が認められたので報告
(考察)

する.

勝胱は、副交感神経支配除去によりその膨満を来すと報告されており、また、尿貯留によって膨満した勝胱に(実験方法)

動物は雌雄の 7 週 S!C:SDラツト合計50例を用い

おいて、勝胱壁の平滑筋の肥大が報告されている。このた.硫酸アトロピンを 20.100,50omιノkι/d3y noml/kι)

ことから、本試験で認められた勝胱壁の肥厚は、抗ムスの割合で4週間反復強制経口投与し、対照群には蒸留水

カリン作用による尿貯留によって二次的に引き起こされを投与した.50omι/1ι投与群には雌雄各10例を、その他た可能性が考えられる.

ハーダー腺は、その腺腔内に褐色のポルフィリンおよの群には雌雄各5例を配した.500叫/距投与群の半数にっいては、投与2週間で途中屠殺し、その他の例ιこつび脂質などの分泌物を含有し、主としてコリン作性神

いては最終投与翌日に屠殺、剖検した.全身諸臓器を肉経によって支配されている.ラットにアセチルコリンを眼的に観察した後、眼寓外涙腺は重量を測定し、勝胱は投与すると薯しい流涙が惹起され、さらに、この流涙が内腔に中性緩衝ホルマリンを注入した.勝胱、ハーダー

アトロピン1、より阻害されることが報告されている。こ腺および眼窃外涙腺にっいては病理組織学的に検索した。

れらの事実から、本試験でみられたハーダー腺腔内の分泌物の貯留は、抗ムスカリン作用による分泌物の排出阻害に起因すると考えられる.また、腺腔の拡張は、分泌物が腺腔内に長期間貯留することにより、腺房が物理的に(結果)圧迫され、誘発されたとえられる。

投与期間中に薬物投与に起因する死亡は認められなかっ涙腺からの分泌は、コリン作動薬によって引き起こさた.

れ、この分泌がアトロピンによって阻害されることが報勝胱は肉眼的に、尿貯留による勝胱膨満と壁の肥厚が50omι/1ι投与群で2週、4週投与群ともに認められた。

告されている.このことは、本試験でみられた眼寓外涙

組織学的には、筋層の平滑筋の肥大および粘謨下層の結腺の萎縮も、抗ムスカリン作用によって誘発された可能合織線維の増加が、10omι/腺以上の投与群の多数で認め性を示唆している。しかし、その機序はハーダー腺の変られさらに粘蟆上皮の単純性過形成および粘腰下層にお化とは異なり、分泌物の排出抑制というより、むしろ分ける炎症性細胞浸'が、50omι/艶 4週投与群の雌1例

泌物の合成阻害が引き起こされ、その結果として腺上皮に認められた.

の萎縮がもたらされた可能性が示唆される.

ハーダー腺は肉眼的に、暗褐色化が硫酸アトロピン4(まとめ)

投与群で見された。組織学的に、ポルフィリンと考えられる褐色穎粒や分泌物の腺腔内への貯留が、硫酸ア

硫酸アトロピンの反復投与によってラツト勝胱、ハートロピン投与群のほとんどの例にみられ、腺腔の軽度なダー腺、眼寓外涙腺に抗ムスカリン作用に起因すると推拡張が用量依存的に認められた。腺上皮細胞の変性が、測される組学的変化が認められた。

10omι/kι投与群の雌および 50omι/琵 4週投与群の雄各1例に認められ、炎症性細胞授潤も散見された。
眼寓外涙腺では、絶対重岳の少が雄の全ての投与群‑56‑

CRJ:BDF1マウスの切歯に観察された自然発生性の形成異常及び腫癌類似病変

47.

0相磯成敏、長野嘉介、片桐卓、山内勝彦、松本 道男、榎本真(中災防、日本バイオアッセイ研究センター)
マウスの歯の自然発生病変に鬨する綴告は極めて稀

2)発生時期、発生率:形成異常病変は、雄では生後引であるが、我々は生後2年を経過した CRJ:BDF1マウス

週齢以降かなり高率に発見され、加による死亡動物のの切歯に多発する自然発生病変を観察したので報告する。

増加とともに発見例数及び程度が増加した。雌では生後85週齢以降に約3眺の発生率を示し、その程度は加齢と1 動物,飼育条件

共に強くなった。腫癖類似病変は生後85週齢以降で雄生後4週齢で日本チャールス・りバーより購入、癌原性の少数例に認められた。これらの病変は予備試験(3ケ月

試験の無処置対照群として生後U0週まで飼育した以下)で使用した動物には観察されなかった。 H0週

BDF1マウス雌雄各150例(3試験)について検索した。

までの総発生率は形成異常病変:雄 83×(125/15の、雌動物は当センター、バリアー施設内でステンレス金網

31%(47/15の、腫癌類似病変:雄 3奮(4/15の、雌 0/150

ケージによる単飼、固形飼料(CRF・D、市水(適過、紫外であり、雄の発生率が雌に比べて顕著に高かった。

線照射)を自由摂取させた。
2 標本作製,検索4 まとめ、考察

死亡・屠殺動物の上顎を10X中性燐酸緩衝ホルマリンで今回報告した病変は要約すると以下の特徴をもっ。

固定、脱灰後(5%蟻酸ホルマリン)、切歯の後端,切歯

1.老 CRJ:BDF1マウスの切歯に自然発生する。

乳頭,第臼歯の前端の3箇所で切出し、常法に従い

2.顕著な性差がある。雄>嵯

H.E.染色、鎖検を行なった。

3.肉眼観察では発見し難い。

4.病変の主体は象牙質の増生と歯根部背側でのエナ
3 結果

メル質・録牙質の歯慥方向への陪人像である。

D組織所見:組織学的検索で切歯・歯根部の象牙質の増5.進行したものは周辺組への圧迫、破壊を示し、生,歯覧腔の狭小化、エナメル質・象牙質の歯骸方向への腫癌に類似するが細胞の異型性は軽く、転移を見陪人像等の形成異常が観察された。さらに象牙質の増生ない。

が一層著しく、複雑に入組んだ塊状を呈し周囲上顎骨のマウスの歯牙病変(腫癌を含む)に関する蝦告は極破壊をきたす癖類似の病変も認められた。腫癌類似病

めて少なく、しかも下顎に関するものが多い。当施設

変には好塩基性の象牙芽細胞の増殖も目立つが、細胞では下顎の組織学的検査をルーチンとしない為、上顎異形は比較的軽度であった。形成異常を示す病変はそののみ組学的検索を行なったが、下顎にも同様の所見を程度により軽度、中程度、重度に分類した。これらの病見出す可能性もある。

変で軽度 中程度のものは主に切歯の後端,切歯乳頭の位で切出した標本に見られ、重度および腫癌に類似

なお、組学的検査に助言を戴いた徳島大学、歯学部

したものは病変が第一臼歯の前端の位で切出した標本

東富雄教授並びに東京医科歯科大学、口腔病理学教室にまで及んでいた.また多くは一対の上顎切歯で病相

山本教授、清野和夫講師に感謝する。

を左右異にした。
腫癌類似病変形成異常病変
解剖時期

検索動物数

(週齢)

雄

雌

雌

雄
軽度

中程度

重度

軽度

雌

雄

中程度

重度

12週齢

2

47 (31%)

ーー

25

2

379

1

125 (83×)

316

3

ーーーフ8

4

150

42261

0

1

150

40880
ーー29

ーー

,(%)

2

67168

48
60
72
84
96
108
Ⅱ0

4 (3×)

48.

老齢ラットの尾椎横突起外側に認められた軟骨組織について

0勝田修.・田子.・土谷稔'・並木正人'・板倉 智敏.('三菱化成安科研・'三菱化成総研・'北大)
るいは細胞浸潤等の炎症性変化が認められた。腫瘤に近接す
ラットの加齢に伴って発現する病変の中で多発する変化とる尾骨筋では筋線維はしぱししま萎縮し筋鞘核が反応性に増数

しては、心筋の線維化、腎症、肝臓の細胞増殖巣あるいは精巣の間細胞腫等がよく知られている.骨の加齢性変化としてしており、次第に増殖した結合組織で置換されていた。病変は骨硬化症等が報告されているが、他には充分な検索がなさの進行にっれて尾筋順および横突起は腫瘤と癒合し、外骨願れておらず、特に大腿骨・胸骨以外の骨変化にっいての検討から腫瘤に向かって骨驥組織の架像が認められた。
109週齢の雄以外の動物で肉眼的に腫瘤の認められたものはほとんどなされていない。

では軟骨形成のみられることは少なく、結合組織の増殖に留

今回演者らは発癌性試験に用いた雄ラットの大多数例で尾まる例が多かった。

椎外側に軟骨組織の形成を認め、病理学的に検討したのでそ上述の変化のほかに尾椎で加齢に伴0て増加する変化としの詳細にっいて報告する。また尾椎の加齢性変化にっいてもて、椎骨各所での外骨腹増生と石灰沈着による皮質骨骨縁の併せて報告する。

〔材料および方法〕検査に供した動物はNか月発癌性試

不整化、椎体線維輪部の増生、骨端軟骨の変性、尾筋順ある

験に用いられたF344/Ducrj炉344)ラットの雄190例、雌191例

いは筋周囲膜の肥厚および尾動脈内膜の肥厚が認められた。

で、計画屠殺時の週齡は109週齢であっえ。このほか57、18〔考察およびまとめ〕上記の結果から、尾椎横突起外側および9週齢のCrj:CD(SD)ラットの雄57例、雌37例にっいてにおける軟骨形成は、加就に伴って増殖した結合組織の軟骨も同様に検査した。

化生と思われた。ラットでは胴長とほぽ同じ長さの尻尾を支尾椎を含む全身魔器を10%りン酸緩衝中性ホルマリン液でえるため尾根部の筋肉が良く発達しており、それらの付着部固定し、第2 4尾椎は10%ギ酸ホルマリン液で脱灰ののちにはかなりの負荷が予想され、物理的な刺激で容易に軟骨化

通常の病理本作製を行った.

生が起こることが推測された。雌では軟骨形成は雄に比較す
るとはるかに少なく、他の加齢性変化と同じく明らかな性差(肉眼所見〕 F3"ラットのうち雄の179/190伊K94.2%)、があるものと思われた。

雌の19/191伊K 9.9%)で発現頻度に群差なく、第2および3
尾椎横突起の外側に1 7並大の半球状から半紡錘形の白色

このほか椎骨の加齢性変化として外骨藤の増生や椎体線維

固な腫瘤が一側あるいは両側性に認められ、特に第3尾椎輪部の増生が認められたが、これらは尾椎における変化であ部で顕著であった。これらは外銀からでは全く判らず、剖検り、今後は尾推以外の各部位における椎骨の変化にっいても時に初めて気付くものであった。腫瘤が形成されている部位検討を加えたい。

は解剖学的には尾骨筋終止部と尾筋険の付着部を共有しており、正常では筋膜織の合流のため白色感が増して認められF、る所であっ元。腫瘤の割面は白色から灰白色で透明感があり軟骨様を呈していた。軽度の変化は57週齢のSDラットの雄のV37伊KI0.8%)でも認められたが、同一週齡の雌およびそれより若齢のラットでは全く認められなかった.
〔組織所見〕腫瘤は尾椎横突起の外側に結合組織の結節性殖像として認めら才Σ、109週齢の雄では178/179例とほぽ全例でその中心部に軟骨組織が形成されていた(図D 。これらは均質な歴原線維間に軟骨細胞が散在性に認められるものから、トルイジン青染色でメタクロマジーを示す軟骨基質が明らかに増生しているものまで様々であ0た。腫瘤の周辺

図1.尾椎横突起外側における軟骨形成(cho)を示す。
OS:横突起 F :尾筋腰, M :尾骨筋.

部は肉芽様を呈しており、線維芽細胞や膝原線維が密に増殖し小血管も形成されていた。また時に出血、線維素の析出あ‑58‑PAS、アノレシアン青染色.

示説要旨
(P‑1

P‑32)

ι

こ2

ノレ
才し

犬る

グわ

一思

ビと

P・ 1.

言忍δt>

ら才τた:糸吉貿而,f生重力 j11戻^^,4乏

夏圭イヲⅡ

0紫垣武伸、一鬼勉、児玉龍平(バナファ ーム ・ラボラトリーズ)
蜂結節性動脈周囲炎は、中型あるいは小型の筋性動脈括にみられ、フィブリノイド壊死、新旧病変の混在等を症例 1

特徴とするが、イヌにおいてみられる事は希である。
今回、毒性試験に供されたビーグル犬2例に結節性動

本症例は、フィブリノイド壊死を含む血管全層に炎

脈周囲炎と思われる変化を認めたので、その病理学的症がみられた事、好中球主体の浸潤がみられた事、ま特徴を報告する。

た臨床症状として白血球数の増加および体重減少がみられた事などから結節性脈周囲炎と考えられた。ヒトにおいて、結節性脈周囲炎は、全身の中型ないし症例 1

フ力月航、ビーグル犬、雌。剖検時に左右心外膜

小型の筋性動脈に多発する系統的疾患である。 Arkinの面に散在性の灰白色腫瘤および腹腔内側の横隔膜に付

病期分類(Am.J.path01.1930,6:401 43Dによるとこの着した単発性の灰白色腫瘤として認められた。心臓の疾患は変性期、急性炎症期、肉芽期および治癒・癒痕

脛瘤は、周囲組織との境界は明瞭で、表面に軽度の出期よりなる。今回、本症例の右冠状脈および横隔膜血を伴い、横隔膜の腫瘤は20×10mmの充実性のものでの動脈にみられた中膜の著名なフィブリノイド壌死おあった。組織学的には、心臓の右冠状動脈において血よび内弾性板の破壊は、 ArkiΠによる分類の「急性炎症管内腔から内膜への好中球主体の細胞浸潤、内皮細胞期」に相当する変化、また腎臓の葉問脈にみられたの剥離、内弾性板の破懐、中膜のフィブリノイド壊死、内皮細胞の腫大および中膜の軽度のフィプリノイド壊

外膜から血管周囲にかけて好中球を主体とした細胞浸死は「変性期」ないし「急性炎症期」に相当するもの

潤が血管全周性にみられ、浸潤は一部心筋の組織にもと思われた。

及んでいた。浸潤細胞の中にはりンバ球、形質細胞、症例Ⅱ

組織球および線維芽細胞も少数みられた。横隔膜の脈にも冠状動脈とほほ同様の変化が認められた。また、臨床症状は認められなかったものの、腎臓の小葉間剖検時には変化がみられなかった腎の葉問動脈にお動脈に認められた内膜の肥厚、中膜から外膜にかけていて、内皮細胞の股大、内腹への好中球およびりンバの線維芽細胞の浸潤、血管周囲部の組織球および形質

球浸潤、中膜のフィブリノイド壊死、外膜から血管周細胞の浸潤は、 Arkinによる分類の「肉芽期」の変化に

囲にかけて好中球、組織球、りンバ球および形質細胞

近く、また胸腺にみられた内皮細胞の腫大、中膜のフの浸潤が血管周囲の一部に認められたが、フィプリノ

イブリノイド壊死、血管周囲部の形質細胞の浸潤は、

イド壊死、細胞浸潤は冠状動脈における変化より軽度

Arkinによる分類の「変性期」、「急性炎症期」および「肉芽期」に相当する変化が混在したものと考えられ、なものであった。

症例 1と同様に結節性動脈周囲炎と推察された。
症例Ⅱ

19力月齡、ビーグル犬、雌。剖検においては何ら変化は認められなかった。組織学的検査で、腎臓の小葉間脈に内腔の狭窄、内膜の麗厚、中膜から外膜にかけての線維芽細胞の浸潤、外膜から血管周囲部にかけて組織球および形質細胞の浸潤がみられた。また、胸腺の小動脈に内皮細胞の腫大、中膜の一部にフィブ
リノイド壊死、血管周囲部に形質細胞の浸潤が認めら
れた。

‑59‑

若ビーグル犬においてみられた皮脂腺過形成にっいてP・ 2.

0岡田雅昭,早川和宏,青木豊彦,日比野信裕,福田 種男,中野渡純一,五十嵐俊二(エーザイ愉・安全研)
犬の皮脂腺における腫は比較的ありふれた腫癌であ戻し電顕による検索では,細胞質内に大小不同の空るといわれている。しかし,著者らがこの数年について胞の存在が認められた。なお,免疫組織学的検索では検索したかぎりでは僅力、に二報しか報告されていない犬に対する Cross reaction があるかどぅか全く不明(Goldschmit,G餉g)。

であるため,その検査結果は参考データとしたい。

最近著者らは,当研究所では今までに経験のない極め

以上の結果より,本病変は皮脂腺の過形成と診断して珍しいと'思われる皮脂腺の過形成に遭遇したのでこ二た。

に報告する。

Goldsch■idt によれば,220例の皮脂腺腺腫の発生部
位は眼臆が最も多く45.隅で次いで頭頸部25.4%,前肢[材料鴬よび方法]

10.眺,後肢7.鵠,腹部3.2%ならびに胸部7.3%と報告し動物:ビーグル犬ある薬物の亜急、性毒性試験におけている。

る中間用量群の 1例で,雌である。吉城フ丁ーム

また Gaag は外耳炎との関連で皮脂腺の腫癌につい(岐阜県吉城郡)生産で,剖検時わずかにH力月であて述べている。それによると外耳炎は角化亢進と皮脂

つた。一般状態に船いて投与開始後1週間に薬物性腺および耳道腺の過形成,線維化,ならぴに形質細胞,の変化が投与各群に認められたが,その後は対照群

リンパ球,大食細胞の浸潤により特徴づけられるとし,を含めビーグル犬でよくみられる軟便や嘔吐が散発

外耳炎と診断された58例の平均年齢は6.58ナであった

的に認められただけで,特に異常は認められなかっと報告している。さらに外耳炎は長毛種で垂れ下がうた。

た耳を持った品種の犬に多いと報告している。

剖検時,本例において諸臓器組織に肉眼的に特にこれらの報告に比べると,我々の症例は年齡が1功月

異常は認められな六、うた。また,病理組織学的にし齢と極めて若く,また発生部位が腹部にめることなど

皮j阿以外には異常は認められなかった。
標本:腹部乳房付近の皮膚で, 10%中性緩衝ホルマリンより,稀有な症例であると考える。
[まとめ]にて固定後,常法に従いパラフィン包埋とし.切片

今回, H,月という極めて若いビーグル犬雌の腹部皮を作製した。

膚に発生した皮脂腺の過形成について報告した。

染色: H ・ E, P A S,コロイド鉄, Alcian blue (PH2.5),を実施し,また凍結切片を作製し脂肪染色を実施した。さらに免疫組織化学的にケラチン,ビメンチン.テスミン,

ワミ

.ー゛,

コラーウゞン typelv

およびSI00蛋白の証明も試み,なお,戻し電顕による検索も行った。

〔結果0

増生細胞は真皮内において毛包に近接して小葉単位に結節性に増生し,好酸性に染まる豊富な細胞質を持
ち.一部に空胞の存在を認める。核はまるく核小体は明瞭で,核質は淡明である。このような細胞が蜂の巣のように集積して増生している。増生巣の中心部に船いて PAS陽性の微細な穎粒が散見される。また
Alcian blue染色船よびコロイド鉄染色においては増生巣の外暦の細胞間マトリ・,クスが陽性を示すとともに,胞体内にも陽性を示す微細な顯粒が認められた。
なお,空胞は脂肪染色陽性であった。

‑60‑

P・ 3.

ビグル犬の肝細胞胞体内に認められた好酸性滴状封入体について

0井上尚子、木村均、菅沼和子、

和田浩(日本パイオリサーチセンター羽島研究所)にも異常は認められなかうた。

<はじめに>

約フケ月餅のビーグル犬の肝臓において、小葉中

2.剖検所見

心性の肝細胞内に好酸性の滴状封入体が観察された。

剖検前の体重は 8.2kgで外表所見に異常なし、肝ビーグル犬は、毒性試験に多く用いられている動物

臓の重量は 158.8gで他の臓器ともに異常な所見を認種にもかかわらず、充分な組織学的検討がなされてめなかう九。

いない点も多いと思われ、薬物等により誘発される

3.病理組織学的検査所見

巨大糸粒体を含む肝細胞封入体等についての報告も

光顕所見:肝臓のH.E.染色標本では、胞体内に好酸性滴状封入体を持つ肝細胞が小葉中心性に 認 めら少ない。
今回、演者らはこの症例の肝臓について、滴状封れ、封入体の大きさは肝細胞核と同大あるいはモれ

入体の性状および組織学的由来を明らかにする目的

以下であり、 1 つの胞体内に 1 ないし数個みられた。

で、光顕的、電顕的に検索し九結果、若干の知見を

封入体を有する肝細胞は明澄化を示すものが多く観得大ので報告する。

察され大。モのほかに異常と考えられる所見は認め<材料および方法>

られなかうた。各特殊染色の結果を表に示す。

材料の雌のビーグル犬は、動物生産施設において生産され、一般状態、体重測定、寄生虫検査、細菌

染

法

染

混合、 2種混合、パルボ)を受け、生後約5ケ月齢

P A S 反応陰性にて当試験施設に導入され九.その後 5 週問の予備

Toluidjne blue染色

青飼育期問を経て逢性試験に供され、約フケ月齢で計

Azan Ma110ry染色

淡赤 赤 櫁

画屠殺され九。試験群は薬物の影響を受けていない

Masson trichrohe染色

淡赤 赤

色

色

性

・ウィルス疫学検査、眼検査および予防接種(4 種

Phloxine tartr3Zine 染色

検査、血液学的検査、血液生化学的検査、尿検査、PTAH染色檀

LFB染色

中に一般状態、体重、摂餌摂水の測定、生理青赤

無処置対照群であうた。予備飼育を含め九試験期問

淡青 深青

腎機能検査、心笛図検査等を行う九。放血致死後剖
検され、肝臓は常法に従い 10%中性緩衝ホルマリン

電顕所見:封入体は単位二重膜で被包されており、で固定後、各葉についてパラフィン包埋ののち薄切、内部は比較的電子密度が高く、均質無構造状 顯粒

H. E.染色を施し九。その他、 PAS 反応、 TO】uidine状を示し、一部の封入体中には単位二重膜に沿うよ

blue染色、 A23n M3110ry染色、 Masson trichrome染

うに二重膜様の構造物が観察された。また、封入体

色、 Luxol fast blue(LFB)染色、 phloxine tartra‑は近接肝細胞内の糸粒体と類似性を示した。

Zine染色、 PT肌染色等の特殊染色を実施し、封入体<考察>の染色性の検討および正常肝組織との比較検討を行

ビーグル犬の肝においては低頻度ながら自然発生

う六。また、 10%中性緩衝ホルマリン固定材料のーのPAS陽性の胞体内封入体が報告されている。し部を工飛ン包埋後、超薄切片を作製し、ウラル

かし、今回観察された胞体内好酸性滴状封入体は P・鉛二重染色を施し透過型電子顕微鏡による観察を

AS陰性であり、糸粒体起源が強く示唆され、巨大

.

つ

一丁
ノイ

糸粒体由来と考えられ九。巨大糸粒体は種々の疾患<結果>において報告されているが、本例のごとく生化学的1.臨床所見および病理組織学的にも本変化以外に著変を認めて生産施設における諸検査に異常を認めていない。
ま六、試験期間中の一般状態、各測定および検査値

いない無処置例に出現したことは希であり、その病理発生の検討が必要と考える。

P・ 4.

両側視神経障害およぴ多臓器内褐色色素沈着を示したカニクィザルの一例

0田中蒸、鳥越徳雄,永田良一、(新日本科学病理部,毒性部、)、池田和彦(東京大学脳研病理)、横田真一(鐘淵化学工業医薬品事業部)

一般毒性試験において使用される大動物としては、従来ビーグルが主であったが、近年サルが漸次使われる機会が増えてきた.
当研究所では、カニクィザルを使用した毒性試験が数多く施行されてきたが、最近、偶発的で非常に稀なものと思われる病変(両側視神経障害&多臓器内褐色色素沈着)を示したカニクィザルを一匹経験したので報告する.

当該カニクィザルは、フィリピン原産でCharlesRNer

異常所見は観察されなかった.光学顕微鏡検査によって

0

●^

.
◆

令
0

Primat船社から購入した.推定年齢は、歯による判定で5才前後であった.このカニクィザルは、諸検査(ー
般状態、眼科学的検査、体重、摂餌量、臨床検査)で異常は認められなかった.剖検は、ペントバルビタール
ナトリウム麻酔下で放血致死後施行した.諸器官の重量は、正常範囲内であり、剖検時の肉眼観察では、特に本症例に特有な変化として、両側視神経障害と多臓器
内褐色色素沈着が認められた.
両倒件見神経障害.ー・イ則の視神絲は殆ど荒廃と,1'い',る程の激しい変性イ象で、クリューバー・バレラ染色にてミェリンはごくわずかしか残存しておらず、問質成分たる血管や線維及びグリア系の細胞が顕著に認められた(図 1).但し、一般的な意味での炎症像は見られなか
つた.障害部位は、強膜箭板より脳側で認められたが、大脳底部の視神経路及ぴ網膜には異常所見は観察されなかった.

他側の視神経には、同様の変化が一部に軽度ではあるが認められ、初期像と考えた.

多臓器内褐色色素沈着:沈着が認、められた部位は、中枢神経内神経細胞〔大脳、小脳のプルキニエ細胞及び歯状核(図2)、脊髄〕及び神経膝細胞、脈絡叢上皮、肝臓、心臓、甲状腺、上皮小体であった.なお、これらの器官において、細胞の障害像は認められなかった.腎臓、胖臓、りンバ節、骨髄、腸でも褐色色素が見られた
ものの、色調から、通常のカニクイザルに見られるもの
で、問題にしている色素とは別物と判断した.

.

この褐色色素は、ヘマトキシリン・エオジン染色で通常見られるりポフスチンよりも赤みが強かった.自家蛍
光及び脂肪染色は弱陽性であった.この色素の性質にっいては、更に特殊染色や電子顕微鏡的検査を行って検索する予定である.また、文献的考察もあわせて報告した

冬

‑62‑

図2

P・ 5.

F344ラットに多発した膝円蓋の嚢胞性拡張病変
大石裕司,松本正博,藤平司郎,中野一雄,三好幸二,岩波黄葵,藤井登志之(緒言〕(麟尺薬品,安研病理)〔考察〕

ラットの自然発生病変は広範囲に研究され数多く報告されてラットの鰹円蓋は、腔腔に突出した子宮頚を囲むように腔腔いるが、體の病変に関するものは殆ど見られない。今回我々は、が陥入したもので、深いものは背側の左右に位置する。その上腔円蓋(vagjnalfornix)の嚢胞性拡張を主とする特異的病変を皮は鰹と同じ重層上皮からなり、同様に性周期に反応する。本

F3"ラットに多数認め病理学的に検索したので報告する。

病変の内容物に好中球を主体とするものが散見されたが、角質〔材料と方法〕,脱落上皮が混在すること、好中球の全く見られないものの存在

動物は、医薬品の癌原性試験に供されたCrJ:F344/DU{Fischer

や、血液検査あるいは他臓器の病理学的検査結果から、感染に)の雌ラット250匹である。飼育は. S P Fバリアーシステム内で起因した膿癌ではなく、むしろ、性周期に対応した好中球が円

1ケージ当り4匹収容し上水道と粉末飼料(CA・1)を自由摂取させ蓋腔内に貯留したものと考えられた。また、この病変は、 92週た。109週齢で血液学的検査を実施後計画屠殺し、42以上の諸臓

齢までは全く認められなかったことや、ほぼ同一条件で飼育し器を病理組織学的に検査した。なお109週齢での生存率は84.4%

59週齢で屠殺した120例のF344ラットにも認められなっかたことで、被験物質による癌原性は全く認められなかつた。

から加齢性病変と考えられた。一般にラットの子宮頚部は加齢〔結果〕と共に線雑性に肌厚し、 Holfe(1942)によれば腔は加齢と共にコ剖検で対照群の16例を含む50例化O×)の子宮頚部のやや背側部

ラーゲンが増加する。従って、本病変は、加齢による子宮頚のすなわち骨盤腔内に1個あるいは在右に2個の結節性病変が観察

肥厚をはじめとする何等かの原因で生じた膝円蓋の開口部の狭された。大きさは、 2×2×2mmから10×10×10mmで、白色 黄緑色

窄、あるいは排出を上回る円蓋の過剰な角質・脱落上皮の産生緑色を呈し、表面は比較的平滑であった。これらは92週齢以降・好中球の浸潤に基づく変化であろうと考えられた。

のラットにみられ、週齢を増すとともに増加したが、群間の発F344ラットは広く毒性試験あるいは癌原性試験に凧いられ、生頻度に用量相関はなく、被験物質の影響は認められなかった。

その自然発生病変の報告も非常に多い。しかし、我々の検索し病理組織学的には、この結節性病変は腔円蓋の内容物を満たた範囲では、膝円蓋のこの病変に関する報告はまったく見あたした嚢胞性拡張であった。いずれも膝上皮と同様の重層上皮でらない。その原因として、飼育環境やブリーダーの差も考えら覆われ、不完全ながらもそれぞれの性周期に対応した性状を示れるが、本病変が骨盤腔内に位置するため、剖検時に恥骨結合したが、腔自体の性周期よりゃや遅れた像を呈するものが多かを切開し左右に充分広げ骨盤腔内の結合織を取り除き、子宮頚

つた。内容物の大部分は、通常の腔スメアー像を想起させる淡部の背側面まで詳細に観察しなければ発見できない点にあるの明な剥離上皮・角質・好中球を種々の割合で混在したものであつではないかと想像される。

た。しかし少数例では、角質以外の他の要衆は全く見られないものや、好中球を主とするものが見られ、あたかも類表皮嚢胞あるいは膿癌の像を呈していた。一部では、被毛の断片の混在したものや、両側性に病変を有する例では、左右の内容物が異なる例も見られた。これらの病変は、ごく狭い開口部を介してその内容物を子宮腔部に排出していた。更に、上皮の角化傾向

佃回の強いものでは隣接子宮口上皮に角質肥厚および異常角化を示す例も認められた。

密

この病変を有するラットの血液学的検査では、単核球性白血病を併発したⅡ例を除き、特徴的所見は得られず、臨床的にも12例に腔口よりの出血あるいは褐色液の流出が認められたが、いずれも子宮の内膜間質ポリープを併発する例で、本病変に特異的なものではなっかった。また、本試験ではF3"ラットで通常報告されている自然発生病変および腫癌が多数見られたが、この病変との関連性は明かではなかった。なお、卵巣は黄体や卵胞の数はやや少ないものの、ほぼ正常であった。

【肉眼像】
L:病変、 U:子宮、

【組織像】
V:腔、

B:勝胱、 N:正常円蓋P・ 6.

若齢F344ラットに認められた一側性視神経無形成症の一例

0渋谷一元,山手丈至,伊原三重子,工藤悟,田島正典(日生研)

医薬品の安全性評価において眼科学的検査は重要な検査項目

組織学的に,視神経欠損祖卵艮球では視神経乳鵡及び網膜中心の1つである。供試前の眼科学的検査によって眼科学的異常を血管系の無形成,網膜の低形成,異形成及びロゼット形成,毛示す動物を事前に試験系から除外しておくことは,安全性試験

様体の異形成,ならびに虹彩色素上皮の一部過形成が観察されの精度を上げる九めに重要である。若齢の実験動物における自た。硝子体内には,遊雛した小血管が観察され,軽度の出血を然発生性の眼科学的異常に関する報告は,先天的な眼科学的異伴っていた。視神経欠損側の網膜は,全層が低形成を示した。

常を示す疾患、モデル物に闌する報告を除けば非常に少ない。

特に,外側網状層,内穎粒層,内網状尼及び神経細胞層は重度

我々は,さきに若聯のSIC:wistarラットに飯察され九非定型的の低形成を示し,神経線維層は非薄で,ほとんど形成されていな一側性視神経無形成症について報告した(vet. path01.:26,

なかった。抗NSE 抗体の免疫組織化学的染色によって,神経線1989)。今回我々は,6週齡のFischer 344/Ducrj(F344)雌ラ

維層において明らかな神経線維は観察されなかった。視神経欠,ト1匹に一側性視神経無形成症を経験したので,その眼科学

損側の網険全層に対するこれら内層の比は,正常側及び正常対的所見及び視神経路の病理学的所見を報告する.

照の値に比べ明らかに低下してい九。神経細胞層における神経【材料及び方法】

細胞は,減数し,配列が諌であった。

症例は,安全性試験に使用するため日本チ市ールス・りバー

視神経管は,両側とも同じ大きさに開存してい九が.視神経

株式会社から5週齢で入したF3"ラットのうちの雌の一匹で欠損側の視神経管内及び眼寓内には,視神経線維束は観察されある。動物は,当所のバリアー・システム下の動物室で飼育し,なかっ允。

入荷後1週問の馴化期間中に眼科学的検査を実施した。眼科学

対側の視交叉及び視索の著明な低形成が観察された。これら的検査は,外額を肉眼的に観察し,前眼部をWelchA11yn 社製の部位に炎症性の細胞浸渦はなかった。Bodlan染色よって,低検眼鏡で韻察し九。散瞳荊を点眼し,散瞳させ九後,検眼鏡及形成部の神経線維の太さに変化は認められず,KB染色及び抗びκ0岫社製RC、2型眼底カメラで中問透光体及び眼底部を根察し腿P 抗体の免疫組織化学的染色によって,その部位の神経線維

九.眼科学的検査後,剖検し,眼球はプアン液で,視神経,脳に脱制像は糎察されなかった。また,抗GFAP抗体の免疫組織化

及び頭蓋骨を10%中性緩衝ホルマリンで固定した。眼球,視神学的染色によって,その部位にグリア線維の増殖も認められな経,脳ならびに脱灰後に頭蓋骨から切り出し九眼窟部及び視神かった。

経管部をパラフィン包埋後,間断連続切片を作成し, He伽toxy・

対側の外側膝状体及び上丘においても,低形成が観察された。

Hn and Eosin (HE)染色, Bodian染色, K1註νer・Barrera(KB)法

これらの神経核では,その領域の縮小に伴って神経細胞の配列及びPT朋染色を施した。一部のパラフィン切片について,免疫が不規則であった。これら神経核に分布する神経線維は,正常

組織化学的にグリア線維性酸性蛋白(GFAP),神経特異的エノラ

側に比ぺ明らかに減少し,神経線維束の配列が不規則となってーゼ(NSE)及びミエリン・ベーシック蛋白("BP)をPAP 法によいた。

つて染色した。怖標本において,網腹各層の厚さを光顕的にマ【考察】

イクロメーターを用いて計測し九。

F344ラットにおける一側性視神経無形成症の眼球及び視神経【結果】

路の病理組織学的特徴を述べ九。本症例は,視神経乳頭及び網眼科学的検査により,左側眼球眼底部は褐色暗翻で,視神経

膜中心血管系を欠いていたが.網膜神経細胞層に散在性ではあ

乳頭及び網腹中心動静脈の欠損が観察された。その他の眼科学

るが神経細胞が存在していえ九め,真の視神経無形成症の定義

的異常は認められなかウた。

剖検において,左側の視神経は眼球後極から視交叉まで完全に欠損していた。これに付随して,右側の視索の縮小が全域にわたり認められた。摘出した眼球は,左右とも同じ大きさであつた。その他の諸臓器に肉眼的巽常は認められなかった。

には合致しない。従って,非定型的一側性視神経無形成症と診断した。

F 344ラットの雌に発生したneuroectoder皿al tU口or と考えられる興味ある一例

P・フ.

0廣内康彦.,長嶋和郎2,岩田聖.,小池嘉秀.,小林和雄.,榎本眞.(.安評センター,2北大・ 2病)
実験動物における脳腫癌の自然発生は極めて稀で報告に集簸する部も殆どが細胞突起の発育を欠き、偽ロゼッ

例も少ない。F344系ラットでの発生率は、雌より雄に多ト形成も認められない。いずれの領域にも核分裂像は多く組織学的には星謬細胞由来の腫癌が多くを占める。今

数ではないが、認められた。血管は豊富であるが内皮細回我々は長期毒性試験に供したF3Uラットの雌の大脳後胞に明隙な反応性増殖は認められなかった。その他、血中央寄りに未分化な形態を示す診断困難な腫癌の発生を栓形成及び出血巣は観察されなかった。

認めたので、その病理形態学的特徴を報告する。

正常組織と腫癌細胞の墳界に接して存在する多核巨細(症例と検索方法)

胞はPAS染色で陽性を示した。

動物は、日本チャールズリバー株式会社より5週齢で購(免疫組織化学的検索の結果)

入、6週齢で通常の飼育環境下で毒性試験に共し89週齢でNSE ;一部陽性を示したが大部分は陰性であった。

死亡解剖した。

G FA ;腫癌周囲のreactlve astrocyteSが強く陽性を示

肉眼所見では、脳に軽度の腫脹を認めるのみで他の臓器に病変は観察されなかった。正中線にそった割面観察では5×6剛のほぽ楕円形の墳界明隙な灰白色結節を認めした。腫癌内で一部陽性を示すが、腫癌内に取り込まれた既存のastrocyteSと考えられた。
EMA ;陰性。

S・100 ;大型で疎の領域で一部陽性、小型で密な領域^0は散在性に陽性。

材料は常法に従い、10%中性緩衝ホルマリン固定、バラフィン包埋し H .E、 PAS、ポディアン、クリユーバ

MBP;PAS陽性の多核巨細胞に一致して陽性を呈し.バレラ染色等および免疫染色:即ちABC、 PAP法
によるN SE、 G FA、 EMA、 S ・100、 MB P染色(考察と結論)た0を行い光顕観察した。

組織発生の分化上の特徴を指標に、悪性度も老慮し検(組織学的所見)

討した結果、脊磁中心管造を模倣する真性ロゼットお大脳後中央を占め後葉側に発育した結節性の腫癌で、よび仏ロゼット形成を特徴的とする ependⅧoma,medul'

腫癌細胞は、一部浸渦性増殖を示すが大部分は圧排性発10blastoma,蜂窃状機造および石灰沈着等が特徴の0118・

育を示し、前方は大脳横裂に面し、正常部組織とは明隙

Odendrogli0伺a、核配列などに1寺徴を示すSchwann0揃a、W・に区分されている。側脳室の拡張、小脳の圧迫性萎縮をhorled cen arra偲eme"tなどを示すmenin8i師aのいずれ伴っていた。松果体は、肉眼所見で正常てあった。
腫癌細胞は比較的大型でやや疎な発育を示す領域と、にも相当しないと考えられた。また、松果体は肉眼的に正常を示し、本症例と相関はなかった。

小型で密な発育を示す領域とで構成されており、前者の未分化な母細胞原発、あるいは高度な退形成腫癌とさ領域では腫癌細胞は大小さまざまな類円形、紡鍾形およれる81ioblast0松に似る点もあるが、浸滴性発育像は本び多核巨細胞などより成り、多彩性を示す。核は比的症例では殆ど示さない。従って、組織形態および免疫染

明るく封人体を伴う珍奇な形態像を示すものも一部に見色等より未分化811a系の細胞の腫癌(primltive 81ioma)られた。細胞質はきわめて豊富なエオジン好性の胞体をに相当するが、細胞分化の方向が必ずしも明確でないこ持つものが多く一部に線維芽細胞様の像を呈するものもと、また、線維肉腫様の混在のあることから、 pri"iti・見られた。細胞配列は一般に不規則であるが、壊死巣をVe neuroectodermal tUⅧor wi th 81ia l d 1仟erentjatj・中心とする倦柵状配列も観察された。細胞突起の血管周Onと診断した。

囲への指向性は乏しく、真性ロゼットおよび偶ロゼツト
形成の明確なものは認められない。

小型で細胞密度の高い領域は胞質が乏しく、大部分
はクロマチンに富む核を持つ。大小様々な壊死巣周囲に倦柵状配列を示す部もあるが典型例は少ない。血管周囲研究協力者:山川誠己.萩原孝

P・ 8.

^憾直^^と^え.区コオ1そ, ^叉ソト^実犬、^^糸且糸哉王求.t生^月重(国立衛試.病理)0小笠原裕之,小野寺博志,永岡隆晴,外舘あさひ.渋谷淳,前川昭彦
近年ラットにおいてーつの独立疾患として組織球性肉という概念が提唱されている。現在この腫癌の原発部位
は主として肝あるいは皮下と考えられている。我々は以前 DonryUラットの自然発生腫癌にっいて報告した0 この
ラットは、他系統例えば F344ラットなどと比較して腫癌の臓器分布・発生率がかなり異なっており、その中に少数ても同様の腫癌細胞がびまん性あるいは結節状にし例ながら組織球性肉腫が認められた0性細胞の限局性増殖として認められた。

今回我々は、 DonryUラットの組織球性肉腫にっいてその頻度、発生部位および病理組織学的特徴を F344ラットの【考察】て認められ、まれに肺血管内に腫癌細胞の栓塞がみられた。 DonryU ラットと F344 ラットでは癌の組織学的所見に差異はみられなかった。また、これら腫癌性病変
以外に Donryu, F344 ラットともに少数例ながら骨続内に組織球性細胞の過形成がみられ、組織学的には組織球

これまでラットにおける組織球性肉腫の自然発生は主それと比較検討した。

として SD、"istar あるいは BD11 ラットにみられ、原【実験材料および方法】

発部位は肝あるいは皮下とされており、骨髄原発の組織

当所で自然発生腫癌の検索を目的として用いた雌雄各100 匹の DonryUラットおよび最近終了した5つの癌原性試験の対照群として用いた雌雄各 250 匹の F344/Ducrj
ラットにつぃて検索した。動物はバリアーシステム内で110 120 週まで飼育した。死亡または屠殺.剖枝した物にっいて全臓器を中性緩衝ホルマリンで固定後、常法球性肉腫については報告がない。

に従って組織標本を作製し検索した。

今回検索した組織球性肉と診断した全症例において骨髄に病変がみられた。また、他臓器には何ら病変がみられず、骨髄のみに前癌病変と考えられる組織球性細胞の限局性過形成を示す症例もあっナこ。以上のことはこの腫癌は骨髄が原発である可能性を示唆していると思われ【実験結果】

DonryUラット(有効動物数雄 95、雌 96)においては
雄5例(5.3%)、雌4例(4.2%)に組織球性肉腫の発生をみた。これに対し F344ラット(有効物数雄 244、
雌 243)では、雄3例(1.2%)、雌 1 例(0.4%)と少なく、今回みられた組織球性肉腫は、組織学的に軟部織に発生する悪性線維性組織球腫と類似していたが、storiform

Pattern を欠き、巨細胞も Touton 型巨細胞ではなく、
La肥hanS 型巨細胞であるなど,典型的な悪性線維性組織
球腫の組織像とは異なっていた。

る。しかし、肝や皮下あるいは骨髄を含む造血器系からの系統的発生の可能性も否定できない。今後さらに詳細な検討が必要である。

腫癌発生率に系統差が認められた。

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部に壊死、それを囲むように腫癌細胞の偽柵状配列などの所見もみられ、時に La幅hanS 型巨細胞の出現を認めた。多くの場合腫癌細胞は中等度の異型性を示し、また分裂像も多く見られた。時に腫癌細胞内に赤血球や色素などの貪食像が認められた。牌あるいはりンパ節においT'八欝

これら組織球性肉腫のみられたラットでは貧血が強く、剖検所見として肝、胖やりンパ節の腫大が見られたことにより全て白血病と珍断された。組織学的に骨髄は全例において空胞状あるいはスリガラス状の豊富な胞体を有する類円形または多角形の組織球性細胞で置換されていた(写真1)。肝においては腫癌細胞が類洞内にびまん性に浸潤する像(写 2)や小さな肉芽様結節あるいは大きな癌結節を形成する所見もみられた。腫癌が結節状に細胞は時に紡錘型を呈し、中心増殖した部分では、

跡にー'1炎、永、イtl;ミ,,;、Cイ、y＼'、、、ー.0fv 】Σ、'、'・'箏、争ν;'f/一永゛入之'ー、t
写真2

P・ 9.

NONマウスの自然発生腎病変について{ゞ時

志キ1岡義博,松 井

Nohobes゛‑no"dlnbetic (NON)マウフ、は

唖田
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Ot"JSO・dlHbpl.1(・{110n)マウスと同じく,牧野ρ,が近交系として確立し

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NON マウスの性格付けの一環と血築中尿素窒素,クレアチニン,グルコース,ユ,との問に差はなか「たまた,尿糖はどの例にもみられなかっナ、'f

し,腎糸球休応変を中心:、ニゲン,血清中及び尿中フィプリノーゲン分解物,

レステロール値には塞栓様物質保有例と非保有例

充 L ■) 11 、遒耘的に牝 1両系ば五に独ウ.し h 系統と老え ρJ 才、ι稔,゜牧野進(塩野義研,゜塩野義油日ラポ)^

3 の検討 .1' 子

1.

5.6 週齢(塞栓未発生週齢)の雌NON マウスを
1 群10匹ずつよりなる】一Ⅵ群に分け,4 力月問

1.練準環境下で飼育さカナ̲NONマウス183匹(雄にわたうて以下の処置をしん、1群;無処置対照,

84EU ,雌99匹・,3‑62 週齢)の肝,腎,肺,腰,顎下Ⅱ群;去勢,Ⅲ群;片腎摘出,Ⅳ群;去勢十腺,肺等につぃて, H・ミ及びPAS染色により組織学

testosterone propion8te(TP,20 mE/k8,週3回),的に検率した'.特徴的な変化は,腎糸球体毛細血

V 群;去勢+estradi01 17一β(400μ8/k8,週 3

管内に匹られ大エオジン淡染, PAS陽性の塞栓様構回).Ⅵ群;制限食(1 群の70X摂取)。処置期間終造物形成で商わ,13週齢以上で発生し,雄30%,雌

了周辺で臨床検査及び腎の病理検査を行「たⅥ

1眺0発*中でありた雌においてのみ腎近位尿細群で塞栓は形成されず,1‑V群での発生率は,

告直部の拡張 とそ の部位の上皮細胞質内に大小の雌50‑80%(雄50‑60%)であり 1̲、、他の特徴で勗る雌し)'りン滴 H1 現が 36χの頓度て,、られナ̲、,他に血における近位尿細管直部の拡張は,Ⅵ及びⅣ群で

乍 1司潤を 1:とナるりンバ珠の雫合か腎(雄47χ,雌はみられオ',Ⅱ,Ⅲ, V 群でけ 40‑90%でありた

14:゛, 1n'件.扣硫.雌21%),肺外分泌腺{雄眺,雌腎血管周囲のりンパ球築合には処置問の差けなかウ]2幻.肺伎佳2%.雌3%)にみられん。右腎孟の拡張

ナ、比川 13χ.雌7χで拐,/̲糸球体以外の病変の発,,以上の如く, NON マウスの諸器官を調べたとこ

生頻曜及び腎重量には,宴栓様物質保有例と非保ろ,13週以上で腎糸球体係蹄内にPAS陽性の脂質有例の問に差がなかウナ̲

様物質沈着を特徴とする腎病変が認められた 0

2.塞栓様物質の染色特性を調べたところ, PAS

この病変は制限食により完全に抑制きれ,発現要因

ゼ消化試験に抵抗性を示し,ペのーつに食餌性要因の関与が示唆された。他の特プシン消化により除性とな「た。ズダンⅢ,ズダ

徴である雌における近位尿細管直部の拡張は,制ン黒 B

限食あるいはTP投与により完全に抑制され,食餌

陽性は,

アミラ

二

強陽性を示し,脂質抽出処理により陰性とな「たコンゴーレッド,ワイゲルト(線維素染色), PTAH の各染色は陰性であ「た。 1EHは強陽性で,18G, C3 は弱陽性,フィプリノーゲンは陰性であ「た。
3.電顕的に,塞栓様物質は中等度電子密度の微細粒子(径30o n μまで)からなり,その内部は均質で脂質様であウ六。この物質は糸球体血管腔を押し拡げて詰まウてぃて,部分的に積屡状に配列していろとこ丁,もあウ h 。同じ形状の物質は血管腔内の仕力、,係蹄内皮側あるいはメサンギウム
領域内にも認められナ̲.アミロイドやフィプリン
鵬造は J'ご,れなかっナ'。
4.末梢血中の血小板数,血染中フィブリノ

性要因のほか男性ホルモンの閔与が考 え られナ

P・10.

培養末梢血単球によるチェンバースライドを用い た
薬物誘発性脂質症の形態学的スク リーニング法0杉本哲朗"、r木

繁生D、竹田泰久m、

士屋

陽子2)、

辻

紘一郎田

(中外製薬制安全研" ・応用 研2,、 C SK 実動研田)
種々の Catlonic amphiphilic drU8によってスの状態にして、光顕および電顕用の標本を作

脂質一薬物複合体がライソゾーム内に蓄積する製した。光顕的察には、カルシウム・ホルマ

脂質症が誘発されることが知られている0 そのリン固定を行った後、 Baker の方法に従ってりスクリ ーニ ング法のーつとして、ラツトの培養

ン脂質染色を施した。電顕的観察には、 2.5

腹腔マクロファージに薬物を暴露し、遠心法に%グルタールアルデヒドおよび1%オスミウム

より細胞をぺレット状にした後、電顕的に察酸固定後、エタノール上昇系列にて脱水し、倒する方法が報告されている。今回、採取の容易立法によりエポキシ樹脂包埋し、酢酸ウラン.

な末梢血単球を培養細胞として、さらにスライ

クエン酸鉛重染色を施した。

ドガラス上にチェンバーを備えた培養器具を利

1 0 ・5M の暴露条件で、光顕的にはりン脂質

用することで、簡便な形態学的スクリーニング

染色により濃青色に染まる陽性顯粒が細胞質内に多数観察され、それに対応して電顕的には層法を検討した。

ラット末梢血をへバリン採血し、 Nycoden2

板状を呈したミエリン様小体の形成が確認されNonocytes (Density:1.068 8/ml, Nye8aard &CO. AS)による比重遠心法で単球層を採取した0

た。 1 0 ・6M ではそれらの出現は非常に軽度でチャーチェンバースライトあった。 1 0 、'M では、細胞は死滅した0

カル

本法はマクロファージ化する性質を有する培( 4槽、 Lab Tek)

養末梢血単球を用いることから、細胞の採取が次いで、 RPM1 1640で洗浄後ティシユ^●に 1 06 / 0.5 m l /槽の細胞を C 02 イン

容易で種々の動物種での検討ができる。また、キュベーター内で3時問培養し、非付着性の細チェンバースライドを利用することによって、胞を除去して実験に供した。

①煩雑な操作を行うことなく標本作製が可能で脂質症を誘発することが知られている 4,4'・ある、②容易な光顕観察の結果を踏まえた後、Diethylethoxy・hexestr01を、チエンバースライ

さらに電顕的に確認する段階的な対応ができる、

ドの 4 槽にそれぞれ、 0、 1 0 、'、 1 0 、5 およ③同ースライド上で薬物濃度などの比び 1 0 ・6M の'度で暴露し、 2 4時問培した0

行える、などの利点を有し、スクリーニング法

培養後、チェンバーをはずしてスライドガラ‑68‑として有用性を発揮するものと思われる0

察がP・11.

Fischer344ラットの肝泡沫細胞に対するコレステロール負荷およびdiethY11祀Xyl phthautピ経口投与の影響
松本悦嗣矢本敬五十嵐功高岡雅哉加藤件和子松沼尚史

共(株)安全性研突所結果および考察旧的]
Fischer344 (F344)ラットの肝臓に泡沫細胞(FiR. 1,2)

コレステロール負荷群で鞠コレステロール,トリグリが観察され.加齢に伴ってその出現頻度が増加する、 こ

セリドおよびβ・りポ蛋白の値が高値を. DEHP経口投与の泡沫細胞の形態学的特徴と血中脂質との関連を明らか

群でトリグリセリドとβ・りポ蛋白が低値を示した.

にする目的で経餌的なコレステロールの負荷あるいは脂コレステロール負荷群ではグリソン鞘に検出される泡質低下剤投与の影響を検索した

沫細胞の数および面積が減少し.類洞内には検出されな材料および方法]

および面積の増加がグリソン鞘と類洞内の両方で認めら

自家生産のF344ラット(雌: b週齢)を用い,無処嵩女・t

れた.

か0た、DE肝を6箇月問投与した群では,泡沫細胞の数

照群. 1 %コレステロール添加粉末飼料給与群.

泡沫細胞の数と大きさは,血清中のトリグリセリドお

diethylh獣yl phthalaヒe ΦEHP)20 口又/kK/day経口般与群

よびβ・りポ蛋白の値が高いと減少し,低いと増加しての3群を設定し,3箇月問およびb箇月問投与を行った

いた.したがウて, F344ラットの肝臓に検出される泡沫

血液生化学的検査を行い,常法に従うて作製した肝臓の細胞の増減には脂質代謝が関与している可能性がある.

ヘマトキシリン・エオジン染色標本について.泡沫細胞

ただし.渋谷らa989)の報告ではラットの肺に認められの出現頻度を鏥検し..また.画像処理装声を用いて,泡る泡沫細胞は.血清のβ・りポ蛋白価が高いと増加して沫細胞の面積を計測した

いて,本実験結果とは一致しない,そこて.毒性病理学的な視点から肝臓の泡沫細胞と脂質代剛仍関連にりいー
さらに詳細な検討を行う

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3惇月6笛円対煎尉y/'
3前月6簡月月尋'ーーーーー^0Fiι.1 肝呈に習められむ泡沫紹胞

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コレステローノし貞荷昇

f344ラットの肝抱沫加鞄出覗頻撲に対する血用趣コレステローJレ盟の劃響Fil.1 Fi'.1の電瓢偉

0

血用峠コレステロール、、'1、ξ二
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P・12.

Acid1ゆase異常ラット(wolm田,病ラツト)の特性一血中脂質の変動一0岡崎啓幸,尾根田暁,畠中真吾,下園孝治,栗山勝、,吉田浩己(鹿児島大¥医学部L病理,、三内),永田良一(新日本科学毒性部)

ライソゾーム酵素のーつであるacid1ゆaseの先天性欠Sidase, N" acetyl・β一且IUC伽alnmidase,α・fUωSidase,

損により,コレステロールエステルが蓄積する疾患、にα、名Iucosidase,β・glucosidase,β・glucuronidase等のイ也

は,ほとんど一歳未満で死亡する予後不良のWolm即病のライソゾームのhydrolase の活性の低下は認められなと高りポ蛋白血症と若年性動脈硬化症が特徴的なコレ
ステロールエステル蓄積症がある.われわれは, Acid

かった.

Iipase欠損ラツトを発見し,維持している.今回はこacid1ゆase活性低下によりコレステロールエステル及びのラットの特性とコレステロール食の影響,特に,血中脂肪の変動について報告する.

トリグリセライドの蓄積が引き起こされたものと考えられる.肝細胞の脂肪変性は経時的に高度となり,肝細胞の壊死を伴い,血中のGOT, Gpr, LDH も著明に上昇する.ゆえに肝機能不全が直接の死因と考えられる.血中の総コレステロール量も幼若時に既に高いラツトが多いが,死亡時までには明瞭なる動脈硬化症は認められなかった.しかし, acid 1ゆase活性の低下は動脈硬化促進因子と考えられているので,このラツトは動脈硬化発症の素因を十分持ち合わせており,動脈硬化発症因子の検定用ラットになる可能性が高い.この検定用ラット作製の手始めとして,現在コレステロー
ル食で飼育中であり,その結果も併せて報告する.

1981年肝胖腫を呈した一匹の雄DonryUラツトが吉田により発見され,多くの交配の結果,同疾患ラットを生産する一対の親ラットが同定された.この疾患ラットは,離乳時すでに体重が小さく,また,腔開口も著しく遅延し,生後12 15週で死亡する.雄雌とも繁殖能力がないため,ヘテロで継代維持されてきた.ヘテ
ロラットでのbrother.sister交配試験の結果,この疾患、は常染色体劣性遺伝であった.肝臓及び胖臓は著明に重最力赴曽し.細.織学的には肝細胞は牢胞イkl,,班臓のK叩仟剖細胞,胖臓,りンパ節,腸管の細網内皮系細胞
は泡沫状を呈した.生化学的には疾患、ラットの肝臓では,特にトリグリセライドとコレステロールエステルが,胖臓ではコレステロールエステルが多量に認められた.

Sphinaomyelin, phosphaⅡdylcholine, phosphatidyl・

ethanolatnine等のPhospholipids, neU廿alglycosphingolipids
やgangliosideS量に異常は認められなかった. r'C]・
triolein,[MC】・choleS妃ryloleate等の Subsu'ateにヌ寸するacid
Iipaseの活性は肝臓及ぴ胖臓で著しく低下し,ヘテロラ
ツトでは中問値を示した.α・galactosidase,β・三alacto・

これらの結果より,このラットはライソゾームのP・13.

遺伝性肝炎(LEC)ラットの肝でみられる超微0加我雅代'.、高柵秀俊'水無瀬昂'、('札幌総合病理,

森道夫

造的変化

、

竹内雅也

、

小野江為則

札幌医大・病理)

遺伝性肝炎(LEC)ラットは、単一の常染
色体劣性遺伝子により支配された肝炎を発症

・包埋し、超薄切片を作製し、鉛ウラニル ^重染色を行った。

する疾患モデル動物として樹立され、近交系【結果】で維持されている Lon8・EvanS 系のラットで1.肝炎発症前ある。生後正常に発育するが、】6週齢前後

生後 6 週齢までは光顕的に著変は認められに黄痕を伴った急激な肝障害を発現し、重篤なかつた。電顕的には、核内のへテロクロマ

な場合には短い経過で死に至る。死亡しなか

チンが軽度の分散性を示していた。

つた個体では、黄痕は回復するが肝胞壊死

肝炎発症直前の 8から 12遇齢頃には、光が終生持続し、生後 1年以上経過した LEC

顕的にはごく僅かの肝細胞壌死と核分裂像、ラットでは高率に肝癌の発生をみる。

大型核などがみられた。電顕的には核へテロ

肝炎の本態や肝炎発生を支配する遺伝子のクロマチンの減少と明膝な核小体、細胞質で役割は末だ解明されていない。また電顕的には'面小胞体の増加を認めた。

は ViruS 粒子の存在は否定されているが、肝2.肝炎発症後細胞壌死の特徴や肝炎発症前の肝細胞の超微

光顕的には、急性肝炎時の LECラット肝で造的変化についての報告にも乏しい。今回

は、肝細胞は散在性に好酸性壊死に陥り、類われわれは、 LEC ラットの肝細胞の特徴を理

洞内には肝細胞に由来する好酸体が認められ解するために、肝炎発症前から経時的に肝組た。壊死に陥っていない肝細胞でも、核と細織を光顕的・電顕的に精査し、超微構造的変胞質の腫大が認められた。類洞には胆汁や赤化を検索したので報告する。

血球を食した Kupffer 細胞が認められたが、【材料と方法】

炎症細胞浸潤は軽度であった。

実験に使用した動物はいずれも、札幌医大

電顕的には、肝細胞核の著明な大が認め

実験動物施設の SPF 環境で維持・繁殖されてられ、核膜の不規則な陥入と核質にクロマチいる。肝炎発症前の LEC ラットでは凝乳直後ンの凝集がみられた。細胞質には変形した多の生後 4週齢から経時的に検索を行った。ま数の ミ トコンドリアやライソソームがみられ、たコントロールとして、 LEC ラットと同時に滑面小胞体が増加している肝細胞も散見され分されたが肝炎を発症しない系統である

た。また肝細胞間の毛細胆管の拡張が顕著で

ιEA ラットを使用した。

あった。

ラットは工ーテル麻酔下で開腹し、肝門脈から 2.5%Elut8raldehyde を潅流し肝を固定【まとめと考察】
顕的な検索により、 LEC ラットでは、肝した。固定した肝は0.1M cacodylate butfer炎発症後にみられる肝細胞壊死に随伴した変(フ% sucrose, PH 7.4,4ヤ)に浸漬し、一部化の他に、肝炎発症前からの変化として、核は光顕用に 10X ホルマリンで再固定し、パラ

クロマチンの分散異常と滑面小胞体の加がフィン包埋後 HE染色を行った。電顕用には、認められた。これらの所見は、肝炎発症後に2%OS0 で後固定したのち、常法により脱水出現する大型肝細胞との関連性が考えられた。

P・14.

遺伝性肝炎(琵のラット肝における低用量 diethylnitrosamine のinitiatlon

効果の検討

0高柵秀俊,・0、榎本克彦.、森道夫L、小野江為則
WCラットは、肝炎・肝癌自然発症動物とじ札幌医大・病理、

札幌総合病理)独群、肌単独群を設定した。肝組織をアセして近年開発された疾患モデル物である。

トン固定し、バラフィン切片を賊染色及び生後正常に発育するが、 16 週齢頃に黄痘を伴ABC 法により GST‑P 染色を行った。画像解

つた急激な肝障害を発現し、重篤な場合には析装置により GST・P 陽性細胞巣の数と大き短い経過で死に至る。死亡しなかった個体はさを測定した。

黄痘から回するが、肝細胞障害は終生持続

【結果】

する。

肝炎発症後琵C ラットの肝には、

NN+(AAF+PH)群の LEC ラットでは、

ιEA

Placental Elutathione s‑transferase

ラットの 10倍以上の多数の GSTP陽性巣(GST・P)陽性巣が出現する。 GST・P 陽性細胞が誘された。 AAF+PH 群の LEC ラツトは、巣の数と大きさは加齢とともに増加し、長期

GST・P 陽性細胞巣は LEA ラットより多数誘生存例では肝癌の発生が高率にみられる。
今回われわれは、 LECラットにおける肝癌

され、また AAF 単独群では LEC ラツトのみに少數の GST・P 陽性細胞巣が誘導された。

の発生機序を理解するために、低用量のD則単独群、 PH 単独群には GST・P 陽性巣はdiethylnitroS8mine (DEN)を用いた Solt‑

みられなかった。

Farber 法変法によって in北iated ce11 の出【考察】

現を検索したところ、多数の GST・P 陽性の前癌病変が誘導されたので報告する。
【材料と方法】

生後 8週齢の雌雄の WCおよび LEAラツ

比C ラットは DEN による initiati0Πに対して高い感受性を有していることが明らかとなった。従って環境中の微量な癌原物質によっても in辻iation を受け得ることが示唆
initiation を受けた肝細胞は、トを使用した。腹腔内に 10 mE/kE昨の DENされた。

を 1 回投与した、 2 週後に 0.02X acetyト

肝炎発症後の持続する増殖刺激による

aminofluorene (AAF)食を開始し、 AAF 食

Promotion 効果を受けて肝癌に進行すると考4日目に部分肝切除(P田を行い、 3日間のえられる。

AAF 食の後、普通食にもどし、 N 後 2 '目

initiation を受け易いことから、

LEC ラットはこのように
LEC ラツに肝臓を検索した("N+(AAF+PH)群)。対照

トを用いた肝発癌物質の短期検索が可能であ群として、 AAF+PH 群、 DEN 単独群、 AAF 単

ると考えられる。

3 '・Mt・DAB 投与無アルプミンラットのアルプミン陽性肝細胞に及ぽす

P・15.

Purom,cln Aminonucleo$idιの影響

0安藤利恵,、田中寿子,、吉田裕明.、鈴木昭男'、長瀬すみ'
U 慈恵医大:微細形態研、.同第 2 内科、'佐々木研)

Spr11Uι・D" 1ι!(SD)ラットから分齢確立された無アみ投与した対照群では無処凪対照群と差はみられなか

ルプミンラット則AR)の肝ではアルブミン陽性細胞

つたが、 DAB+PAN 投与群ではいずれの対照と比べても( Alb + heP110C"t)は、わずかにしか見られない。

Alb + heNtot!tt が著しく増加していた。また、ここのAlb + hepltoc!te は加齢や 3 '‑mιlh!1‑4 ‑di・の時点での血清アルプミンは PAN 投与前より PAN のみ

mtl"1一如in0き1北肌leM ( 3'‑Mt‑D船).2 一■Ceth!1‑の投与群. DA3+PAN 投与群ともに減少していた。尿ア如in011Uor 閲.(2 ‑ A A F )のような肝臓発癌剤等にルプミンは PAN のみの投与群では増加したが、 OAB'

よってその数が増加することが報告されている。

PAN 投与群では検出されなかうナこ。さらに、 30週目に今回アルプミンの代謝に異常をきたしナこ時、このよ

PAN を投与し、 1 週問後に検索した場合にも PAN のみ

うな Alh + hι" 10C!tt がどのように反応するかを調の投与群では Alb 十 h印ltot!tt の數は対照群とほとべるため、腎障害を引き起こすことが知られている

んど差がないのに対し、 DA8+PAN 投与群では著しい増Putom!cin 如i"onucltoside(PAN)の投与および5 6加が認められた。この時点では、 PAN のみの投与群、nt" T.clom!(5/6NI)を行い、アルプミン排池促進状熊 DAB+PAN 投与群ともに尿アルプミンは増加していた。
での肝細胞のアルプミン産生状熊を形態学的に検索しこれらのAlb + htP110C!1.の変動力ξPAN によるもた。
<材料および方法>動物は9Ⅱ週齢の雌N肌39 匹を2 群に分け、一方のなのか、あるいは、蛋白喪失によるものなのかを確認するため 5/6N1 を行うナこところ、 5/6N1 のみを行っには 0.06% 3 '・Me‑DAB混入飼料を、他方には基礎食た群およびDAB÷5/6N1 の群ともに尿蛋白の増加が認め(CE 2)を 20わよひ 301!ぎ与え元。 20週目に各 h 5 6N",られたが、 Alb + hepatocYte に関しては対照群と比PAN 投与を行った。 5/6N1 は血管結紫法により行い、べると対照とほぽ同數か、その数が減少しているもの

PAN は15ml/100ιb.ロ.を単回静脈内投与した。 5/6NIが多かうた。このことから肝でのAlb + hepltoc,1e

処置4 週問後およびPAN 投与1 週問後に屠殺し、血清の増加は蛋白喪失とは関連がないと考えられる。また、

アルプミン,尿アルプミン.肝のA}b + hepltoc,1e

PAN 単独投与では肝のAI、+ ht"10C!1e にほとんどの動向を調べナこ。さらに、 3 '・Mt・DABを 30週投与した影響を与えていないことから、 DAB と PAN の相乗作用

NAR と対照物に臥N を投与し、尿蛋白量がピークにあるいは相加作用により Alb + hι" toC11t の増加が近くなる 8日目に屠殺し、同様の検索を行った。

強められていると考えられ九。

血清および尿アルプミン母の測定は工lagle 『1di11
i.mⅡodi11U$ion 法により、また、肝臓でのアルプミンの証明は?A,法を用い、 10 × 10倍視野(肝細胞約1000個)中のAlb + hぞPltoc!te 数をカウントした。
<結果>
NAR では血清アルプミンは極めて少なかうナこ。しかし、 3'・Mι・OAB投与群では対照群に比べやや高い血清
アルプミンが検出された。一方、尿アルプミンは両群ともに検出されなかった。肝でのAlb +、tpltoc!tt
は 10週目で対照群が 1 視野に対し 8 個程度、 3'・Mt・
DAB 投与群において約60個、また、 30週目では対照群
で約20個、 3'・Mι・DAB投与群で100 個以上のA比+h.P110C!1tがみられた。これに対し、 PAN を投与し2週間後に検索した場合、 A1ト+ heNIOC!1.はPAN のP・16.

無アルブミンラ,トのAlb陽性肝細胞k及1ミす 3'・Me・DABの影響

0

玉井幸子,,田中寿子,,新谷稔',長瀬すみ.,鈴木昭男' (慈恵医大・微細形態研,,第一内科.,佐々木研')
長瀬らkよ b sprague Dawley rat よ b分礫確

しさらkNb卜CeH集籏巣の増加傾向もみられた。

立された無了ルプミンラ,ト(N肌)の肝臓Kは,了ル
プミンK対する抗体と反応する肝細胞(Alb+celDが対照群kおいて肝臓腫癌の発生は認められ左かったが,投与群では20週屠殺例の約15価(ン12),30週屠

極めて少数存在し,加齢Kとも衣ってその数が増加す

殺g*つ50多(V6),40週屠殺例(M)および休薬例(5る)の100多K冊醐重癌が観察された。発癌例の癌化し九る。女た 3 '‑methyl‑4‑dimethylaninoazobenzen(3'‑Me‑DAB)或V)は 2 ‑ acetylalninofluotene(2ム.AF)
左どの肝臓発癌剤投与kよってもその数が増加すると部分kは殆どAlb卜CeⅡは認められ衣かった。投与群の発癌例非癌部のAlb卜Ce11の分布と非発癌例のNbトとか報告されている。雄NARと比較して発癌率が低

CeⅡの分布を比較すると,非発癌例では発癌例の数

い雌NARK長期間 3'Me‑DABを投与し, Albke11数の変釦を経時的K検索し報告してきたが,今回休薬

倍のAlbkeⅡが認められ,投与期間の延長k伴ってkよる変化も加えて検討を行った。さらk前癌病変と考えられる創Utathion s‑trarlsferase placental

その数が増加して込た(Fig.1%一方Nb卜Ce11 と前癌病変との関連を検討するためK,連続切片を用Ⅵて
Nb+ceⅡと GST‑P+ce11巣の抗体反応部位を比較しform 陽性細胞巣(GST‑P+ωⅡ巣)とAlb卜CeⅡとのたが, GST‑P十CeⅡ巣内kは殆ど'Alb卜Ce11は認めら

関連、検討した。

れ左かった。す左わち発癌例では非癌部の前癌病変も<材料および方法>

増加するためkAlb卜CeH の比率が減少した可能性が9‑11週令の雌NAR(佐々木研究所)150匹を用込考えられた。

80匹は0.06多3'・Me・DAB混合飼料を40週間投与後40週間投与後12週間の休薬を実施したが,AlbkeⅡ

12週間休薬し,残b70匹は対照群として基礎飼料(CE 2)のみを与えた。との実験の一部kついて,経時的左肝臓組織変化kついて次のよう左検索を行った、
す赤わち両群とも実験開始後20,30,40および投与中
止12週後忙屠殺剖検し,肝臓を10傷ホルマリソで固の増数は不可逆的であb,発癌例の非癌部のA比+定後パラフィソk包埋し連続切片を作製した。とれらのCeⅡ数は著し仇増加を示し九。一方,発癌剤投与中
止後酵素マーカーの発現が低下し酵素表現型が正常化する傾向があるととが報告されているか,本実験kお
いても GST・P+ceH 巣は休薬k よ b 減少を示し,
Alb+ce11数の増加傾向とは逆の結果が得られた。

切片kはHE染色および次のよう左免疫組織化学染色

抗 glutathion s‑traDsferase placental form (GSTP)抗体(弘前大・佐藤清美教授よb供与)を用込
ABC法でGST・Pを検出した。

<結果>
Alb+ce11 数は,3'‑Me‑DAB投与群では 20,30,
4咽屠殺例および休薬例のⅥずれも対照群と比較してその数が急激k増加して仇た。 Nb卜CeⅡの多くは小葉

X●一﹂Φ厶一一ΦU十●一ぐ一0.0=

胞約 1,000個)内のAlb+ceⅡの数を測定した。また

勺一Φこヨを施した。 Arlti‑rat 21b叩in rabbit lgGを用いてalb血inの局在をPAP法で検出し,一定面積(肝細△・一△ Contr01

100

20

30

卯

能

Experimental period (weeks)
Flg.1

Increse of t he numher
In NAR induced W 3'

OM

投与群では投与期間の延長K伴ってAlb卜CeⅡか著増●^ Hepatoma
200

0

講造と関連たく散在性K分布して仇たが,3'‑Me・DAB
投与群では投与期間3岨以上の例k数個以上のAlb+
CeⅡが集籏するNbkeⅡ巣も散見された。加齢k伴い対照群kおいてもAlb→CeⅡ数は増加を示したが,0^ Non‑hepatoma

a比Umin Posilive ce11S
DAB

肝発癌物質の中期発癌性試験における

P・17.

フツ

ト肝GST‑P陽性細胞の三次元的解析

0加藤俊男 ,.立松正衛,.今井田克己,,山田真弓',伊東信行'('名市大・医・ 1 病理, 2国立衛試)<はじめに>

6時間、 4日、 1,2,3,4,6,8 週で物を屠殺し、肝切片

ステレオロジーの発達により、 glutathione s‑transの GST‑P 免疫染色を行い、 GST・P 陽性細胞 1個を‑fera$e placental form (GST‑P)陽性細胞の二次元計測

Single ceH および、直径 20 μm 以上のものを foci

値から、三次元解析が可能となってきた。三次元解析のとしてコンピューター画像解析により計測した。

換算式は、計測する細胞がそれぞれ独立し、その形状が球型である前提で組み立てられている。そこで今回、肝発癌物質の中期発癌性試験において、 GST・P 陽性巣<実験結果>
実験 1:
中期発癌性試験における GST・P陽性巣(foci)の、(foci)の二次元的定量と三次元的定量を比較し、さらに、次元換算による個数を以下のグラフに示した。有意差検

foci に至たる最も早期の変化である GST‑P陽性Si叩le定において二次元計測と一致した結果が得られた。

CeΠの指標としての有効性を、コンピューター画像解析
により検討した。
"門X゛汎健^■^<実験方法>
実験 1 は、 6 週齢の F344 雄ラット 240匹を、実験 11は、 6 週齢の F344 雄ラット 50 匹を使用し、以下に示
す 8週問の中期発癌性試験を行った。
Cコ Compbe1リι
巨■ Enznlann l,ミ^^^^^^^^^^
三汝元換訂.による川 GST、P円竹m冉数^^^^^^^^

実験 11:
肝臓当たりの GST‑P陽性 Single ceU と foci の個数を以下のグラフに示した。 single ceΠは 1週以降、
fociは 4週以降、ほぼ一定値を示した。

^^^^^"/房

.

<まとめ>
^
..

^

中期発癌性試験の foci 定里の有意差検定は、二次元計測で可能なことが明らかとなった。また、肝発癌籾期に出現する GST‑P陽性 Single ce11のほとんどは、三次被験物質として、実験 1 では 0.05% EHEN,0.1% PCB

元解析により、その後に出現してくる GST‑P陽性 foci

0.05% PB,0.005% Aldrin,2.0% BHA,0.2% BBN を、実に直接移行せず一部の Si叩leceΠが foci を形成する

験"では 0.02% 2・AAF を混餌投与した。

と考えられ、 single ceΠを指標として用いるには難点

DEN イニシエーション後、実験 1 は 8週で、実験 11 はのあることが示唆された。

P・18

鶏肝織珊枇混鯉雁晩舶糊胖松縄纈鰄畑究
0

小島

隆・武知

雅人

(三菱化成・安全性研)トの混合型肝癌の発生はアゾ色素などで誘発されるこ面にはbrush border型の微鞁毛が認められナこ0 ま光細胞質内とがよ く知られている。組織発生に関しては,肝細胞系およ

小器官は中等度の発達がみられた。エオジン隣染細胞と思わ

び胆管系細胞の衝突や多潜能の未熟細胞の関与などの諸説がれる細胞には核の著しいくびれ,細胞表面部の微鞁毛・核周

あるが,現在なおはっきりしていない。そして腺管部の電顕囲に多数の中問径フィラメント様物質および複雑な細胞膜陥的検討は数多く行われているが,免疫組織化学的検討は余り入がみられたが,分泌穎粒は認められなか0た0 モして細胞行われていない。今回.我々はDE N誘発で発生した混合型

質内小器官は乏しく未熟な細胞と思われた0

フツ

肝癌の特に腺管部にっいて免疫組織化学および電子顕微鏡的に検索し九ので報告する〔考察およびまとめ〕

以上の結果より今回のDEN誘発でみられ九混合型肝癌の〔材料および方法〕

腺管上皮の特徴は分泌穎粒をもっ腸管上皮様の細胞と未熟な動物は 6週令のS D系雄性ラットに10叶PMのdiethylnjtro・上皮細胞が混在してぃることであっ九。そして腺管部に形質Samine ( D E N )を 9 週問飲水投与後引き続いて0.05%の発現の異常として胎芽胎児性癌表現形質(胎盤型ALP

山enobarbltal p B )を 8 週問飲水投与後に屠殺し実験に

1厶盤型GST)の発現および異所的粘液癌表現形質供した肝臓は中性ホルマリン液固定後.パラフィン切片をの発現する特徴があウた。これらの組織像および酵素偏倚よ作製し, H.E.染色,31Ucian blue pAS染色を実施しナこ0 免疫

り厶回のDEN誘発でみられ六混合型肝癌の腺管部は癌細胞

組織化学的検索は抗胎盤型ALP抗体'抗胎盤型GST抗体.

の脱分化および異分化を示唆するものと考えられた0

抗CEA抗体および抗小腸型ALP抗体で実施した。電子顕微鏡的検索はホルマリン固定後の材料を一部オスミウム固定
し,通常の脱水包埋をおこない,超薄切片作製後,酢酸ウラン.クェン酸鉛染色し電顕観察をおこなった。

〔結果〕

索状肝癌に接続して腺管機造をとる部分がみられた。その腺管上皮は単層および多層立方上皮で.管腔面にaluci3n blu
PAS 両陽性顯粒が認められた。エオジン淡染で大きな胞体をもっ細胞もみられ未熟な腺管を形成していた。また,腺管部と肝癌との移行像的な部分もみられた。

免疫組織化学的には立方上皮では主に細胞表面部に抗胎盤型ALP抗体,抗胎盤型GST抗体および抗CEA抗体が陽性.抗小腸型A LP抗体は陰性であった。なお,未熟な腺管を形成している上皮および索状肝癌細胞はいずれの抗体にも陰性であう九。

電子顕微鏡的には立方上皮には光顕のaluci肌 Uue・PAS両陽性穎粒に一致して高電子密度の分泌顯粒がみられ,細胞表

C E A

P・19.

ウレタンの発がんりスクの評価

0有広光司、武島幸男、井内康輝、徳岡昭治(広島大・医.2病理)
はじめに

結果と考案

有効動物にっいては、実験開始後23週目に最も早期に肺腫蕩が発生したことより、23週以降の姥死例及ぴ実

ウレタン ethylca,ba,nate は、組成式 NH.C⑳C.H 、
分子量:89.1の化学物質で、エタノールと尿素の反応などにょり生成される。従来から、実験動物の催眠剤、麻酔験終了時の屠殺例とした。有効動物数は、600即m群ae
摂取量102mg/ka)44匹、 60即m群(同10m名/kg)50匹、 6Ppm

補助剤あるいは非水溶性薬剤の溶解補助剤などとして使用されてきたが、 Net固Shゆら a943)の報告以来、動物実群(同10mg/k8)50匹、 3Ppm群(同0.58mg/kg) 48匹、 0.6即m群(同0.095 mg/kg)49匹、対照群49匹であった。各群

験ではりンパ腫や白血病、肺腫傷、肝腫傷の発生が相次いで報告され、その発がん性が明らかにされてぃる。最近、カナダにおいて、種々の醸造酒中に微量なウレタンが含有されていること力井旨摘されたことから、ヒトへの暴露量を規制するための根拠となり得るウレタンの低用における発生腫傷とその有効動物に対する比率をTablelに示す。このうち肺腫癌及び肝血管性腫傷にっいて10gistic、皿obit、圦leib011の各数学的モデルを用いて算定したV.S.D.及びそのモデルの適合性の指標となる P"V田此及ぴ Chi・square value をTable 2に示す。
最も統計学的適合性に優れているモデルは肺腫蕩では 10gistic model、 jj干1匝傷では WeibUⅡ mode1であったが、それぞれから求めた VS.D.はほぼ近似した値となった。
これらの所見は、ウレタンの発がん性の標的臓器となった1姉、肝ではそれぞれその発がん機構が異なる可能性が呈での発がん性試験が望まれるに至った。そこでB6C3FI
マウスを用い、低用量のウレタンの長期経口投与実験を行ない、これらのマウスに発生した腫癌のうち川"匝傷を指標とした発がんりスクの評価は既に発表したが(第48回日本癌学会総会)、その他に肝の血管性j匝傷も多発したことから、その腫傷発生率からも各種の数学的モデル

あるが、標的臓器によって最適な数学的モデルを選択すを用いて VirωaⅡysafedose(V.S.D.)を求め、川ij匝傷のそれ

れぱ一定の V.S.D.を得られる可能性があることを示唆し、今後の発がん物質の動物実験の低用量外挿に際して有用との比較、検討を試みた。
Tab恰

Si1θS

な知見であるとぢえられる。

1 1nddence ol mlce W11h hlsl01091Ca11ypes 011Umors and olhθ1胎Sιon

Hisl010glca11ypes 011Umols

NO. and incidence (ツ0j ol miC8 Wilh tum0玲 inUlothane dose (ppm) 01
6

60

600

0
6

6

}
3)
7}

)

(2.1)

(2)
{8}

(4 )
②

②

②

8014000200100000

j

6 6 2
{
ー{
7038100010000000}

Pancreas
Skln
Hoad

②

0 4 4
ー
({

Slomech②328Sρ1θenHemangloma
An910salcoma
Lymphoma
Ma11gn丑n111bmu゛ hlstlocytoma
Heman9ioma
PepiⅡoma
Squamous C8" carcinoma
Hemangioma
Stealocy5toma mU11iP18X
H8mangioma

の 3

RES
S0負 11S5Uen佑Pθ11051S

4

Hepatoc011Ulal adenoma
Hepatoce11U恰r cerclnoma

8

Llver

Bmnchi010・alveolar edenoma
Adenocarclnoma
Focl of Cθ11U恰1日1181ra"on

9018000001010000

Lung

4052200000100010

06

0

34 168.の 42 (95.5)
0
6 (136)50の
9 ι18)
2 (4)
フ(14)
(9.1)
14)
20 (455)
2 川
11 {25}0
1 (23)
0
2
0

{4}
ι2}
②
(9.1)

Table 2. ES11maled vi貞Ua11y sale Doses (VSDS)10rlur四 tunめr
arld hepalic vesa」1a『{urmr1Π B6C3F miCθヨtrisk levelo! 10‑'
VSD

実験材料及び方法

4週齢のB6C3F,雄マウス 300匹(日本チャールス

mgkg body wu day
Sites

リバー社より購入、平均体重22.88)を2週問基礎食(CN・1、日本チャールス・りバー社製)で飼育した後、無作為に 50匹ずつ6群に分け、それぞれを600、 60、 6、 3、Lung

0.6即mの各濃度でウレタンを混入した蒸留水を飲料水とUver

して自由に経口摂取させる実験群とし、残る 1群は蒸留水を飲料水とする対照群とした。これらを70週問飼育した後屠殺し、病理組織学的検索に供した。

L09istic

P'obit

model

model

0.18×10‑,

0.92×10‑1(033)、(3.46)"(029)'(371)"

036 × 10‑,019 × 10‑1(020)'(6.03)"{0.0刀'(869)"'(pva杣e)"(chl・sq.1are value)

WeibU11
nlodel0.84 × 10‑フ(0023)'(954)"
072 × 10‑4
(0.39)'(4.14)"

P‑20.

エンドトキシンの一般毒性試験評価に及ぽす影響(その1)高木英利、原田寧、増田達樹、石嶋隆守、山下裕、村田晃子、下地尚史、川久保安朗、古川泰雄

日本レダリー(株)生研

エンドトキシン(以下ETX)は、グラム陰性捍菌のmg/kg)の単回投与 3日後に、 E T Xの各0.1 mE/繪及び細胞壁由来のりポポリサッカライドである。その生体へ

0.01、 0.1 m三/kg を投与、 24時問後に動物を屠殺して、の作用は多彩であり、標的臓器組織に直接的或は、ケミ

一般状態の変化、血液学的・血液生化学的検査、剖検及びカルメディエータ等を介して二炊的に作用を及ぽす。

光学的に組織学的検査を行った。

臨床の場では、抗生物質の汎用や手術時等のショック[試験成績]とETXの関連が推察されており、動物モデルを用

ETXの単回投与による、概略の致死量は3.om宮ノkgであいて、その本態を明らかにすべく多くの検討がされてり、 5.omE/繪では確実に動物が死亡することがわかった。

きた。

単回投与経時的試験では、投与0.5時問後から胃腸管粘膜

しかし、これらの関連について系統的に検討を加えたの出血、肝細胞好酸性穎粒出現が組織的に観察され、 2時報告は少なく、又、新薬開発時の一般毒性学的観点から

問後から網内系細胞の活性化や肝細胞壊死・血栓形成、リSystemiCな毒性を検討したものも少ない。
今回我々はETXについてラットを用いて単回投与毒性試験、反復投与毒性試験等を行ない、その毒性学的プンパ組織の減少など多くの組織で変化がみられ、血液学的にも白血球の初期の減少とその後の回復傾向や著しい血小板の減少が認められた.

ロフィールを明らかにすると共に、 AN I T (α一ηaph・反復投与試験では、1.omg/kgで死亡が認められ、組織学

thyl‑isothiocyanate )、及び GalN Φ・galactosamin・的には、心、肺、肝、腎、精巣、精巣上体、胸腺などのりe)による肝障害モデルにっいて、 ETXがこれらの毒性

ンパ組織、骨髄、眼球等で変化がみられた。全般に網内系を修飾するか否かも検討した。

の活性化が非常に明らかであったが、肝や腎等に高度の障[試験方法]

害はみられなかった.反復投与により新たにみられた所見

Crj.CD{SD}ラット、雄、 6

10週齢のものを本試験には、精巣の腫大と眼球内の出血であった。血液学的には用いた.動物は、恒温恒湿の無窓動物室で飼育し、照明舶Cの増加傾向、 RBC や血小板数の減少が、血液生化学的12時問/日、飼料は日本クレア社製放射線滅菌固型飼料には GPTの低下が認、められた.

、水はフィルター除菌上水道水を与えた。 ETXは、 S3

ANITとETX併用試験では、 ANIT単独で心、Imone11a typhimurium由来のものを生理食塩液に懸濁し

肺、肝、腎、りンパ組織等に剖検で変化がみられたが、特て用いた。

にETXの投与により肝への影響は増強されているものと単回投与試験は概略の致死量を求める試験及び経時的考えられる。血液生化学検査においてもTBIL、ALP、GOT、GPT

変化を把握する試験を行った。前者は、 ETXの0.1、等のパラメータのETX併用による上昇が認められた.

0.3、 1.0、 5.0蹴g/kgを静脈内投与して投与後24時間の致GalNとの併用試験においても、剖検で GalN単独ではほ死量を求めた。後者については、 ETXによる毒性変化

ぽ肝の変化がみられるのみであったが、 ETXの併用によについて確実に且つ経時的に知るために、致死量を超えり肝ばかりでなく、腎の腫大や胃粘膜の出血が新たにみらる10me/kE を単回投与し、 0.5、 1、 2、 4、 6時間後に動れるようになった.血液生化学検査においてもGOT、GPT、物を屠殺して血液学的及び病理学的検査を行った.

UN、ALPなどの上昇が併用により認められている。

反復投与試験は、 E T X の0.1、 0.3、 1.o m三/k8 を以上の成績に、電顕的検索を含む組織学検査成績、或は5日間連続して静脈内に投与して、一般状態の変化、血CC I'とETX併用等の成績を加え、 ETXの一般毒性

液学的及び血液生化学的検査、剖検及び光顕・電顕によ

試験での挙動を考察する。

る検査、組織化学的検査を行った。
肝障害モデルに対するETXの影響については、
A N I T (50及び150mg/kE)或は GalN (60、 200 、600

DMAB処置ラットに観察され九心臓肉腫

P・21.

中村厚、高橋智、岩崎省吾、白井智之、伊東信行(名市大・医・1病理)<はじめに>
ラットの心臓腫癌には fibroma, Anitshchow‑ceH

Case NO

わめて低い。 Alisonらは約 8 万匹のF344ラットを検索
し、 schwannomaを主とした心臓腫癌の頻度は0.1%であ系統
WistarW is ta r
SD
SD

生存期問
4 4 4 51234

Sarcoma,叫Xoma が報告されているが、その頻度はき

6週
7週
9週
2週

腫癌部位
左心耳
右心室
右心、至
左心耳、左心室つたと報告している。
今回、我々は多臓器発癌物質で芳香族アミンの

剖検所見

3,2'・di肌ethyl‑4・aminobiphenγ1 ΦMAB)を投与したラ腫癌は白色の結節病変として右室壁および心耳を中ツト前立腺癌実験系で、 wistarおよびSpraEue Dawley

心に観察された。特にCase1 では 20×15叩の巨大な腫系ラットに各2例の肉眼的に観察し得る心臓腫癌の発瘤が左心耳にみられた。case2では心爽水および胸水

生をみ九ので報告する。

の貯留も認められた。

<材料および方法>

病理組織学的所見

ラットは 6 週齢雄のF3U/Ducrj, ACI/N, crj:wis・

心内膜下に沿って広がる部位では2 数層の病巣を

tar, cr上CD(SD)および LEW/crj(しewis)の 5 系統、形成し、心筋層内に帯状に浸潤発育しており、腫癌細200 匹を用い、各系統ともそれぞれ2群に分けた。

胞は円形 卵円形のクロマチンに富んだ核と好塩基性

1 群では 0.75P仰 Ethinyl estradi01(E田含有飼料 1胞体からなる紡垂形ないし多角形を呈した。大きな腫週問→基礎飼料1週問のサイクルを10回繰り返し、癌性増殖を示している部位では、主として卵円形の核

毎回基礎飼料に戻した 2日後にコーンオイルに溶解しと好塩基性胞体からなる紡垂形細胞が交錯して束状にたDMA B を 50mg/ kg b.W.背部皮下に投与した。 2

配列し、心筋間への浸潤性増殖もきわめて高度であっ群は継続して基礎飼料で飼育し、 1群と同時期にDMABた。核分裂像も多く、異常分裂像も認め九。腫癌細胞

50鵬ノkE b.W.を皮下投与した。 10回のDMAB投与後は基は一部では棚状配列を呈し、嚢胞状病変あるいは壊死

礎飼料のみで、実験終了時まで飼育した。

も観察された。しかし、血管形成、明らかな渦巻状配

肉眼的に異常の観察されナこ心臓は常怯に従い、100。

列あるいは筋原性を示唆する好酸性の胞体は観察され緩衝ホルマリンで固定後、ヘマトキシリン・エオジン

なかった。さらに、明らかな貪食作用を示す腫癌細胞

染色標本を作製し、組織学的検索を実施すると共に、も認められなかった。C3Se4 での左室壁の腫癌は心内ケラチン、ビメンチン、アクチン、 S I00蛋白、α 1膜下のみに存在し、心内膜からの発生が示唆され九。

ーアンチトリプシンについて、 ABC法を用いて免疫組

免疫組織化学では4例とも同じょうな結果を呈した。

5

1●

,3

.

0

苫

織化学的に検索した。

ケラチンとα 1ーアンチトリプシンは完全に陰性であつナこ。しかし、ビメンチンは約50%の細胞が陽性で、アクチンは弱陽性 陽性で、特に心内膜下の部分で強く認められた。 S I00蛋白は20%前後に弱陽性を認め九〆^flh."γ1 "1'.d,01 ιモE.0 乃 0伽】
佳鵠{50 叩ん0 休豊座下投与1"6'週令 F3"'CI.胃1,1.1. sa Lf冒,,ト

実験デザイン

<結果>

心臓腫傷はWistarおよびSD系ラットで以下の各 2例に認められ九が、EE投与には関係なかった。

<まとめ>

本腫癌は紡錘形細胞を主体とした腫癌細胞が錯綜する束状配列を示し、 Alison らが報告した肌docardiac

SC加annoMの組織像に類似しており、なおかつ免疫組
織学的にS‑100蛋白が陽性であることから、これらの心臓腫癌はSC加a肌細胞由来の悪性腫癌と推察され九。

Adria111ycinおよびMitolwcinC の勝胱注入によるラット勝胱粘膜上皮の酬A合成および痛曇目織学的

P・22.

ならびに走査電顕、的変化

0 淘"恵美子、玉野静光、伊藤初美、白井智之、福島昭治(名市大・医・1痛里)DNA 合成 ITable l):Adri別Wcinおよて別itowcin C 投<はじめに>

抗癌斉11であるA由・i即lycinおよびMitomycin C は種々の癌の与群において、溶媒対照群および無処置対照群と比較して、治療に用いられ、勝胱癌に対しては、経尿道的な勝胱注入が

勝胱粘膜上皮におけるBrdⅡ標識細胞の有意な増加を観察し行なわれてぃる。また、これらの抗1毫斉11の勝胱注入はラツト
勝胱の二上登階発癌において、促進作用を発揮することが知られてぃる。そこで、これらの抗癌斉11そのものによるラット勝

た。また、溶媒対照群においても、無処置対照群と比較して、 DNA合成の軽度な上昇をみたが、繊十学的な有意差は認められなかった。

病1里組ま哉学的を腔(1曲lel).戀旦置対照群を除く全て

胱粘膜上皮に対する影響を追究するため、DNA 合成ならびにその形態学的変化について検ヨ寸した。

の群で単純,1坐邑升3成を観察し、 Adriawcin投与群では無処置<実験方法>

対照群と比駮してその発生は有意であった。また、6週齢のF344系雌ラット28匹を用い、各群を7匹とし、 4

A由・i印11ycinおよて則itolwcin C 投与群における勝胱粘1莫ヒ皮群に分けた。第 1 3 群にはAdri己mycin{1昭ノmlj、Mitolwcin c(0.5nwml)および溶媒対照群として生1里創豆水をそれぞれ実験開始時より週1回の割合で計4回、カテーテ

細胞は大型化し、核はクロマチンに富み、核型不整もしばし

ルを用いて経尿道的に腸胱注入{0.3ml}した。また、第4群
は無処置対照群とした。実験開始後4週目に全動肋を屠殺音11
検し、 br師odeoW山idine 田rdu)を用いた勝胱粘膜上皮細胞つ大。

ぱ観察された。また、細胞質の空胞化がみられた。これらの変化は溶媒対昭群および無処置対照群には全く認められなか
走査電顕、的餐腔 ITablel):単純,1坐畍3成の発生を霍鰹した全ての鮮で、腸胱の表層細胞の表面にPleomorphicの DNA合成の測定と伺聨"織学的ならびに走査電呈貞的検宗を

microvi11i、 short, unifurm microV111i、 Ropy or ιeafy

行なった。

microridgeS を観察し、特にA位'i聞lycinおよて則it0脚Cjn c<結果>

投与群においてはその病巣婁夕は顕著な1勤0身系した.

体重.AdrianycinおよびMitolwcin C 投与群では溶媒対照群あるいは無処置対照群と↓嫩して、 4週の時点で有意な体重1勤肺礁肋ミ認められた。

<まとめ>

Adria111ycinおよて則itolwcin C の腸胱注入は勝胱粘1莫ヒ皮の DNA合成を明らかにア雄させ、さらにi断3成病変をもたらしたこれらの腸胱粘膜上皮の増殖性変化がラット勝,光発癌に対して促進作用を惹起させるものと考えられた。

Table l.酬A synthesis arld Morph010gical C1印ges of Rat Bladder Epitheli師
NO. of focal S則 lesions with
NO. of

index

rats

1%)

SimpleWperplasia(%)

4.07土0.99 '

4 (80) a

36.5士12.0

58.0士5.フ

212.0士73.5

Iabeling
Treatment

Adri釧ycin
55MitonⅣCin c
SalinePle0肌orphic

Short,Ⅱrlif01司

microvi1Ⅱ

microvi11i

Ropy or leafy
microridges

1.88士0.74,C

3 {60}

15.5士 3.5

32.5士7.8

64.5 士 6.4

0.46士0.81

3160)

3.5士 0.フ

5.5士2.1

13.0士 5.フ

0.04士0.05

0Ⅳehicle)Untreated

5

0

0

0

キ; N師bers of rats eX印ηined were two in each 卑'OUP; Mearl arld sD for the average n師bas of foca1 1esions
Present in one‑11alf of each bladda
a, b; Pく0.05,0.ol as c0ヨ鵬red to untreated control value, respectively
C, d; Pく0.05,0.ol as compared to vehicle control value, respectively‑80‑P・23.

ノ、tコ^リド^ノレ手斐』チιこよるラ、ソト、T寸^f本育訂^

フ゜エコ.ラクヲーン'糸田月包Cフ>^巨支^昆頁白勺餐見雰美
築館男・須藤武・甲斐純子・福田種男・見上孝・中野渡純一(エーザイ・安全研)
1、ーパミンが下垂体のプロラクチン( P R L )産

以上の連投で対照群とほぽ同レベルに回復していた生細胞に直接作用し、 P R I.分泌を抑制することはのは、ドーバミン受容体遮断剤を連投することによよく知゛,れている.したかって、ドーパミン受容体

り、下垂体 P R L産生細胞のドーパミン受容体が増を遮断する薬剤は血中PnL値を上昇させ、長期投

え、ドーパミンに対する Supersensitlvity が生じ与した際には乳腺の増生性病変を引き起こすしのとているためと考えられているまた、下垂体中のP考えられている、しかしながら、ドーパミン受容体

R L'度は、ハロへりドール単回投与群では血中に遮断薬を投与・した際仍下垂体の形態的・機能的変化

放出されたPRLの累積量に反比例するように減少についてはほとんど報告されていない.今回、我々

するが、連続投与により回復することが明かとな「は典型的なドーパミン受容体遮断薬であるハロペリ

た.このことは、ハロベりドールの初回投与時にはドールをラ・・,トに投5 し、下垂休の P R L 産生細胞

下垂体の P R L がほとんど de nov0 合成されることについて免疫電顕的に観察し、その形態的変化と樋なく放出されるが、連続投与した際にはPRLの合能についての考寮をく力之た、

成活性が賦活化しているものと考えられる.

勿勺

動薬

オオ,斗とプデ涯ミ
S I C

SD系雌性ラット(7週齢)

2.下垂休の免疫電顕的観察
正常雌ラットの下垂体前葉PRL細胞は、分泌穎

ハロペりドールを 0.ぢメチルセルロース水

粒の形態から次の 3 型に分類されている. 1 型細胞溶液に懸濁し、 1 0 ■8/k'/day 投与しブ;:.

は約10onmのほぽ均一の大きさの球形穎粒を含実験群: A群単回投与30分径に剖検んだ細胞で、Π型細胞は150 250nmの大小

B群単回投り21時問後に剖検の球形穎粒を持った細胞であるⅢ型細胞は大型不C群一7回連続投与24時問後に剖検

規則形の穎粒( 2 5 0 5 0 o n m )を含む細胞でD 群一 2 8 回連続投ぢ・2 4時問後に剖検ある.対照群動物の下垂体前葉P R L陽性細胞は、対照群・n.弗メチルセルロース水溶液をⅢ型細胞がもっとも多く、次にⅡ型細胞が認められ、28回連続投与24時問後に剖検

1 型細胞はもうとも少なかった.ハロペりドール単対照群を含む上記 5 群について、血中および下垂体回投与 30分後においては、対照群動物と比べ形態

中の P R L レベルを R I A 法にて測定した.また、的差異を認めることはできなか0た.単回24時問

下垂体については、抗プロラクチン抗体を用いて免後においては、Ⅱ・Ⅲ型細胞の P R L陽性穎粒が明

疫電顕的に観寮した.

らかに減少しており、 1 型細胞には変化を認めなか

糸吉^才3 よ Uこ'.考'^1.血中および下垂体中プロラクチン

つた.7 回以上の連続投与群では、対照群同様Ⅲ型細胞がもっとも多く P R L陽性穎粒も増加していた.

ラットにハロペりドール 1 0 m'/k8 を単回投与し特徴としては、特にⅢ型細胞に WhorHn8 粗面小胞た際の血中PRL値は、投与30分後で対照群に比体が多く、明瞭な限界膜を欠いた amorphouSな穎粒

ぺ約 5 0 0 倍に上昇し、 2 4時問後においても約 2にPRL陽性のコロイド粒子が認められた.

00倍の血中PRL値であった.一方、 7回および以上の結果から、ラットにドーバミン受容体遮断

28回連続投与の最終投与24時冏後においては、剤であるハロペりドールを投与した際、①単回投与

血中PRL値は正常動物のそれ・とほぽ同レベルであでは下垂体前葉のⅡ・Ⅲ型PRL細胞からPRLがつた.下垂体中の P R L濃度は、単回投与 3 0分後

大量に血中に放出されるが、 p n L の de aoY0 合成

では対照群の約1 2、単回投与24時問後では約はほとんどなく、②連続投与した際には、 P R L細

1 5に減少していた.しかしながら、 7回および胞は P R L 合成が賦活化しており、ドーパミンに対28回投与24時問後においては対照群とほぽ同レ

し Supersensitivitγになっているものと考えられベルであった.血中プロラクチンレベルが、 1週問る.

m i n o ‑1,2,4 ‑t r i a z o l e 類似化合物のラツトにおける抗甲状腺作用

P・24.

安全性研究所]0高岡雅哉,宮腰昶宏,加藤佐和子,五十嵐功,松沼尚史〔三共(株)[目的]実験 1. 1n vitr0 におけるラット甲状腺ぺルオキシダ

3‑Amino‑1,2,4‑tri320le (A 丁Z )は甲状腺ぺルオーゼ(Thyroid peroxidase :TPO )活性阻害作用のキシダーゼ阻害作用により甲状腺毒性を発現する.この

比鞍:各化合物の TP0 活性阻害作用を三Uaiac01 を

ATZと類似した構造を有する化合物の甲状腺ぺルオキ

水素供与体として測定した.

シダーゼ活性阻害作用およぴ甲状腺腫大作用を構造相関実験 2.各化合物をラットに一回経口投与した揚合の的に比した.

TP0 活性阻害作用の比[材料と方法]

用量で投与し,投与 3,6,24時間後に甲状腺を採材

1.供試動物:当研究所およぴ日本チャールス'りバーでし TP0 活性値をタンパク(■8)当りに換算し比較した.

生産した F344 ラット雄 1 0 週齢を使用した.

ラットに 1.5 ■■ovkE の実験 3.各化合物をラットに連続経口投与した揚合の2.使用化合物,溶剤およぴ試薬:使用した化合物の化学

TP0 活性値およぴ甲状腺腫大作用の比較:各化合物を

構造を下図に示す.

1.5 mmovkg の用量で 7日間投与し,甲状腺を採材

ペルオキシダーゼ阻害およぴ甲状腺腫大作用がある既し重量を測定後 TP0 活性値の測定およぴ病理組織学

知化合物として 3‑amino‑1,2,4‑triazole ( A T Z ),的検査を実施した.

その基本骨格である 1,2,4‑triazole ( T Z ),以下 T Z[結果およぴ考察]を基本として,5 位にメルカプト基をもっ 3‑amino‑5‑

実験1,2およぴ3の結果をまとめて下表に示す.

mercapto‑1,2,4‑ triazole ( A M T Z ),5 位のメルカ

In vitr0 では, A T Z , A M T Z, M T Z , MM T Z

プト基がメチル化された3‑8mino‑5‑methylthio‑1,2,4‑に甲状腺ぺルオキシダーゼ活性阻害作用が観察され,triazole ( A M T T Z ),3 位がメルカプト基である

in viv0 でも甲状腺ぺルオキシダーゼ活性を阻害した.

3‑mercapLO‑1,2,4‑triazole (M、f乙),3位がメルカ

また,連続投与によって甲状腺腫大が観察され,病理組

プト基で 4 位がメチル化された 3‑mercapto‑4‑methyl‑

織学的にも甲状腺の機能低下およぴ甲状腺刺激ホルモン

1,2,4‑triazole (MMTZ)の6化合物( Aldrich )の分泌亢進を示唆する所見が認められた.

を用いた.

したがって, AMTZ, MTZ, MMTZにはATZ

また, in vitr0 試験の溶却」は蒸留水またはアセトンと同じような抗甲状腺作用があると判断した.

(和光純薬工業)を,水素供与体として EU8iac01(東これらの結果と化合物の構造を比較検討すると,甲状京化成)を使用した. 1n viv0 の溶剤は dimethyl

腺腫大の発現には 1,2,4‑triazole の 3 位にアミノ基あるいはメルカプト基が必要で,3 位がアミノ基である揚T4染色にはヒトサイロキシン(オーソ)を用いた.

合は 5位の置換基によって甲状腺への作用が軽減するこ

HTZ

HHTZ

置換葺

1" U冒tro

3位 4位 5位

山r倖;^矯性
阻割乍用

T2
AT2

NH,

AMT2

NH,

SH

AMTTZ

NH.

SCH,

MT2

SH

^TZ

SH CH,

1" UI‑

ル,伽1^廷性鳳寓作凧

^検査
ι甲状低崎膨既'F)

峯自投与^与^与X :{,用ナ'し.△:桶く吸嵐 0 暇嵐 0:中拝嵐◆:亘度使用した化合物‑82‑

XO0×0●

AHTTZ

N^N

化合物名

XOOX●ム'TZ

゛と^XOOX●ム

呼二tン"

三ン"

CHコ

とが明らかとなった.

XO0×0●

AHT2

H H
γ・;ン

N

州

TZ

イ卵, 0︑<

︑ぐ

"ゞン"

ン

Sulfoxide ( D M S O,和光純藁工業)を使用した.

コルチコステロイド剤のマウス皮下投与による骨格筋およぴ大脈への影誓

P・25.

0田中剛太郎山口修司水本隆章大杉芳孝入村兼司(大鵬薬中工業(株)安
1 序i用
コルチコステロイド剤によるヒトでの骨格筋、りンパ

系組織および副腎等に対する萎縮性変化あるいは電解質
代謝の異常等の副作用はよく知られ、その発生機序に関しては多数の報告がなされている。今回演者らはマウス
皮下にコルチコステロイド剤を単回大量投与することにより生じる畿性変化を病理組織学的および電顕的に検討した。その紬果、'文献的比較において反復投与とは異な検査と同部位(図1)の骨格筋と、大動脈弓を採取し電顕材料とした。標本作製は常法にしたがって、四酸化オス
ミウムによる二重固定を行い、染色は酢酸ウラニルあよび酢酸鉛の重染色を行った。
Ⅲ結果(病理組織学的検査)
1)骨挌筋各薬物投与群とも筋線維核の中心件移動、筋線緋の横る骨格筋の毒性発現過程が認められ、また蛾告例に乏し

紋消失、萎縮あるいは融解壊死等の変化が認められた。

いと思われる大動脈に変性壊死が認められた。
Ⅱ材料および方紘

これらの変化はび慢判:にi忽められるものでなく、単線維(病理組織学的検査)

性かつ多発性に認められる変化であった。

5週断のCD・1マウス(1CR,雄●日木チャ"ルズリバー')2)大動脈起始部および大動脈弓

計20匹を用い、各群5匹の計4群を設定した(爽】)'.
飼料は固形飼料CE‑2(日木クレア(株))を使用し、飼料と水は自由摂取させたコルチコステロイト剤として、プ酢酸メチルプレドニゾロンおよび酢酸ハイドロコルチ、」ン群のみに大動脈躍のフィフ'りノイド壊死が;忍められレド・'ゾU ン 1311木コ.ク・プソ、酢酸メチルブレド::ゾロ(磁子顕微鏡学的検査)

ンは日本アップジコン、酢酸ハイドロコルチゾンは和光

1)骨格筋

投リフU後て北.1筋線粧のグリコーゲン穎粒の増加、ミ純薬(株)より入手した。

単回皮下投与後、 6週問観察し、エーテル麻酔下て放血殺後剖に供した。全身を10%緩衝ホルマリンで固定後、図1に示す部位6力所の骨恪筋と、大動脈起始部
および大動脈弓を採取し鏡検材料とした標本作製は常法に従って、ハラフィン切片としH.E.染色を施した

トコントリアの軽度腫大、空胞形成が認められた。投、MH後ては紡釧灸 F ミトコンドリアの増加、ミトコンドリ
アクリステの消失、ミエリン様構造物の増加、筋小胞体の拡張が認められた投与21日後ではこれらの変化に加え局所的に筋フィラメントの不明瞭化、横行小管の明瞭化および空胞化が認められた

表1投与量(船ノk8BW 匹数

溶媒対照群

0

フレドニゾロン群

2)大動脈弓55

群

投与7日後では特記すべき変化は認められなかった。

投与14日後では中膜平滑筋細胞の細胞質内に多胞小体様空胞が観察され、ミトコンドリアの変徃が軽度に認められた投与21日後ではミトコンドリアクリステの消失、ミェリン様造物の増加、滑面小胞体槽の拡張等の変化

1395

酢酸メチル
プレドニゾロン群

2000

5

2000

0

酢酸ハイドロコルチゾン群が認められた
Ⅳ考察

溶媒はCHC・N3懸濁液を使用

コルチコステロイド剤は、反復投与では骨格筋の筋
フィラメントに変性を引き起こすが、ミトコンドリアの

誘

^

,ず

変性、筋小胞体の拡張等の変化は局所的かつ遅発性の変化であることが報告されている。本試験での単回大量投
与では、ミトコンドリアおよび筋小胞体の変化は早期かつ広範囲に認められるが、筋フィラメントは比較的保持されてぃることから、両者の毒性発現過程に相違が認め
られた。

図1

大動脈弓で認められた変化の発生機序は不明であるが、(電子顕微鏡学的検査)

計8匹を用い、単回皮下投与後21日問の観察期問中、7日目ごとに各2匹ずつを解剖した薬物は酢酸ハイドロコ

筋線維と同様の変化であるミトコンドリアの変性が認められ、モの変化過程も類似していることから、大動脈の変化の発生機序はタンパク代謝の異常等、骨格筋と共通

ルチゾン.2000吃ノk8を用いた。固定はグルタール、パラ

した要因が関係しているように思われる。

5週齢のCD・1マウス(1CR,雄:日本チャールズリバー)

ホルムアルデヒド混掖の還流固定で行い、病理組織学的‑83‑

P‑26.

エ.トヰニシ.キニ=ノキ斐'与ιこ Cにそ,ラ、ント雫吾Za^イヒa、'"くて>ー雫寄糸吉^4)庄丑彼女升多芹長^白勺雀見^右にらてトーιこフτ^5ヲキ斤0今沢孝喜.豊田和弘.佐藤秀隆.下地尚史・今井田克己・高橋道人(国立衛試・病理)【はじめに】

粧毛の消失あるいは陥凹などの超微形態学的変化も認め

腎石灰沈着およぴ腎結石は毒性試験においてもときどられた。また、 EQのみ投与した群よりもMNNGある

き見られる病変であるが、その発生要因については不明

いは塩化ナトリウムを前処置した群の方が小石灰片の数なことが多い。

も多く、結石形成もより明瞭であった。

エトキシキン(EQ)は抗酸化剤としてゴムの変質防元素分析により腎結石の成分はりン(P)とカルシウム

止あるいは飼料添加物として用いられている。ラットに(ca)がほとんどで、マグネシウム(Mg)、ナトリウム(Na)、EQを投与すると、腎に障害を示すが、ラットの二段階

塩素(CD、硫黄(S)等は微量で腎結石はいずれもりン酸石

胃発癌モデルを用いた実験では強度の腎乳頭部壊死とと灰石であることが推定された(Fig."。

もに腎の石灰沈着ならびに腎結石のみられることを既に報告した(第46回日本癌学会総会 1987.9.9)。

【考察】

今回、 EQにより誘発される腎石灰沈着と腎結石につ今回EQ投与によりみられた腎石灰化及び腎結石の基

いて、エネルギー分散型X線分析装置(SEM一印X)を用いて礎病変として、腎乳頭壊死があり、それに対する生体反検索し、これらの種類、形成状態、さらに細胞表面の変応として石灰化が生じたものと考えられる。

化を観察した。また、 N‑methyl‑N'‑nitro‑N‑nitros08U‑

ラットに自然発生的にみられた勝胱結石の分析結果を

anidine (MN N G)あるいは塩化ナトリウムによる前処

昨年報告したが、 MEおよびPの含量が多い傾向にあった。

置の腎結石の形成促進作用についても検討した。

今回の腎結石はMEをほとんど含まず、 caのピークが非常に高く、自然発生の勝胱結石とはその構成元素が明らか【実験材料と方法】に異なっていた。 EQ投与群では尿中Ca, Mgは減少し、動物は7週齢のWist鮎系雄ラット52匹を用い、 4群に分P は増加している(J Toxicol path01 1:185 191,1988)

け、第憎羊(16匹)と第2群(16匹)には、それぞれMN N Gが、結石成分は自然発生的にみられたものと異なり、リ(10om"/D含有飲料水および塩化ナトリウム(10%)含有固ン酸石灰石であり、また実験期間中の尿PHに変化が認め

型飼料を8週間前投与した。第3群(10匹)と第綿羊(10匹)にられず、 EQによる結石形成の機序に関してはさらに検は前処置を加えなかった。前処置終了後、第 1、第2お討の必要がある。
C●

よび第3群には1%EQ混合粉末飼料を32週間投与した。
第4群にはCRF・1固型飼料を実験終了時まで与え、コント定した。その後、縦断面において腎孟を中心{こ石灰沈着

Re己1:

Live:

‑10 keu

55

X‑ReY三006
00ーー

テル麻酔下で屠殺剖検し、腎臓を10%ホルマリン液にて固

SC

C'

N,

ロール群とした。実験開始後8、 9、 14、 20およぴ38週目に強制排尿時のPHを計測した。40週で全生存動物を工ー

Pre3eu1005 Remainirlg:
6χ 口e己dC'および結石の存在を実体顕微鏡で確認した。走査電顕による観察は各群2匹ずつ計8匹の腎について行った。

【結果】

実験終了時の生存物における腎石灰化あるいは結石の発生率は第1から3群のいずれにも80%以上の高頻度でみ.

られたが、第4群のコントロールでは1例もみられなかった。実験開始後8,9,14,20および38週問目の尿のPH値は6.5前後であり、ほとんど差がみられなかった。

SEM・印Xによる形態観察では、小石灰片および結石が腎杯および腎孟の細胞表面に付着しており、細胞表面の微FS=255▲

斗.010 keu
Ch 斗11=9.1 >23 Ct5Fi'.1 第 1群のMN NG゛E Q投与の腎結石の元素分析の結果である。尚、上段は元素分析能力全域でのスペク
トルを、下段は一部を拡大した図である。

P・27.

塩化メチル水銀の慢性毒性・発癌性に対するB6C3F1マウスの感受性=森国敏,平野雅裕,上田英夫,真板敬三,白須泰彦(残詔農薬研)

〔緒言〕

〔結果〕

化学物質の褐件毒性や発癌性を検索する九めに,マウスでは

10 叩m群では,後肢マヒを特徴とする神経症状が雄で59週以ICR,臥LB/C, C57肌やB6C3F]などの種々な系統が用いられてい後33例,雌で80週以後3例認められナこ。雄では,60週以後,著る。これらのうち, 1CR系マウスは化学物質の安全性評価のた

しい死亡率の増加および体重増加抑制が観察され九。神経症状

めの長期試験に古くから用いられている方,米国国立癌研

発現例においては中毒性中枢神経障害(大脳皮質および尾状核究所(NCD とNat】onal TO×1C010三y l,r08ram (NTP)は,神経細胞壊死)と末梢感覚神経障害(脊賊神経背根から末梢神

B6C3F1マウスは.その寿命が他に比ぺ長く,りンパ腫や血管系

経幹にわ九る有髄神経線維変性と背根神経節神経細胞壊死)が腫癌の自然発生頻度が止較的低いことから,朋C3F1マウスが長認められ九。その他,10 叩m群では慢性腎障害(雌雄),精巣

期毒性・発癌性試験に最も適していると結論し,この系統を用

萎縮と腺胃潰癌(雄)の発生頻度が対照群に比し有意に増加しいての長期試験の実施を推奨している。これらの系統間においた。増殖性病変では,腎の近位尿細管由来の腺腫/癌(16/60)て化学物質の毒性発現に本質的な差異はない巴考えられるが,と腎尿細管上皮過形成(14/6)が10 叩m群の雄において有意にそれらの感受性の強さには系統差のあることが一般に知られて増加した。近位尿細管上皮の変性・再生と間質線維化を特徴といる。この九め,目的とする毒性変化がどの系統により鋭敏にする慢性腎障害は,雄の2 叩m群においても発生頻度において発現されるかを検討することも重要である。

有意に増加した。

演者らは,塩化メチル水銀(MMD の慢性毒性および発癌性〔まとめ〕を検索する九めラットとマウスを用いた長期毒性実験を実施し下表に示したように, 1CR系マウスの実験では,10P叩群にてきた。これらの実験に.上わ, M枇苦 15ないい0 即m含有すろ

おいて腎の増殖件病変(雄),慢性腎障害(雌誹)や精単藻縮飼料を78週問以上投与され九 ICR糸雄マウスでは,腎上皮性腫が発生頻度において有意に増加し九が,神経症状,死亡案や体癌が誘発されることが確認された。さらに,この腎腫膓誘発に重には何ら影響はみられなかウ大。

はテストステロンが重要な役割を果たしていることがその後の実験で明確となっナこ。しかし,これらの実験成績は ICR系マウ

以上の結果から,MMC の腎毒性や腎発癌に対する感受性についてはB6C3Nと ICR系マウスとの問に明確な系統差はないが,

スを用いたものであり, B6C3nマウスが棚Cの慢性毒性や発癌

神経障害に対してはB6C3F1マウスのほうが ICR系マウスよわ感性に対して ICR系マウスよわ感受性が高いか否かは不明である。

受性が高いことが示唆された。

今回, MMC の慢性毒性・発癌性についてのにRとB6C3F1凸の系

T具bl.

C^P.「1卓on ot t0宝1にlt, or ^C jn a6CきF」●od lC員■IC●

統差を検討する九め,すでに実施された ICR系マウスの実験と山ヨ是冨roup lpP巨】
FI"dln'.

同一の投与量でB6C3F1マウスを用いた2与.間の混餌投与実験をイテつナこ。
〔材料と方法〕

ー゛堅、丁→墾一共ず

1罰Cld●nこ● of n●υroj0冨IC 具1卑Π卑,"ort昆12t,.

色06y W是」丘ht'

Food co"●U罪Ptユ00'

Chro"JC "●ohroP●th丁
丁●豊土ICU】●r tuoU1●r 皐troDh了
C1皐"dU1息r 冨t^.ch ulc.f

R■n具l tu、U1●f h丁P●rD1●畢'●R.".1.d.肌^.

器・組織を病理組織学的に検査した。

罰是Π●I C●rにユ"^●

0010

・切迫殺動物および投与 104週後の生存動物全例を剖検し,全C■「゛b■11●r "●Uron●1 Π是Cro'」鼻.

印' 23郭叩る飼料をマウスに 104週間自由摂取させた。投与期間中の死亡,■デユPh゛「●1 豊●"'or,」,●UroD●τ11,.

^0003^1000開始した。 MMC (純度99.3%)を10,2,0.4および0 叩m 含有すC●,●b,●l n魯UTO".1 ".cr0五1昆

印000υ20010

NO 0「"」C..冨."1".d

印"耶υ"郭7M5"

1"こ」d."t. of hl.t010'ユC.1 fl"dl"'卓社より購入し, 1群60匹の雌雄4群を設け,5週齢時に実験を,妻÷宅冥P

5尋 59
0

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●且電冨Ult匡 of Th. pr.昌.n亀ヨτUdy 'Πヨ603FI .ユCE
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D●Cr●●'●. N区I N0τ●乳●島ιΠ●d:ー:判0 '1写njflc."t ch田1'●

‑85‑

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^000^^0000
0600021ENO000

4 週説のB6C3F1マウス雌雄冬 240匹を日本チ+ールスリバー

IC武b■6C3FI

P・28.

、ニノト仁1コキ区ネ申糸呈^ネ申糸呈月器市田月包月重ιこーつし、てrd)^^糸且市哉^白勺木矣言寸

0 渋谷淳.小笠原裕之.小野寺博志・前川昭彦・林裕造(国立衛試.病理)

ラット中枢神経系神経膝細胞腫についての免疫組織学的研究の報告は少ない。今回、我々はラット神経膝細胞

ラット神経縢細胞腫で、ヒトと同様の免疫染色傾向が腫 22 例について、 GFAP, S‑100, vimentin, cytokera‑

得られなかったことから、ヒトで用いられている脳癌【まとめ】

tin の免疫染色を行い、それらの染色性について、ヒト

マーカーは、ラットでは診断上有用性に欠けると考えら

対照例2例と比較し、その診断マーカーとしての有用性れた。ラットに於いても、反応性の星状膝細胞増生ではにっいて検討を行ったので報告する。

GFAP が強陽性を示したが、星状謬細胞で、ヒト対照例【材料及び方法】

により発現すぺき蛋白が発現しないのか、或いは異常蛋と同様の免疫染色傾向が得られなかったことは、腫化F344/Ducrj ラット 1 8匹及び DonryU ラット 1 匹に白が発現している可能性がある。乏突起雁細胞腫及び混みられた自然発生神経膝細胞腫4例、 M刈もしくは[NU合型謬細胞で、星状膝細胞のマーカーである GFAP の

誘発神経膝細胞腫 18例のフォルマリン固定.パラフィ発現が散在性ではあるが認められたことは、ラット神経ン包埋材料について、 6FAP, vimentin, cytokeratin の膝細胞腫では混合型膝細胞が多く発生することと併せ3種類の中問径フィラメントおよび、 S‑100 蛋白の局在て、勝細胞腫癌の分化が不完全であることを窺わせる。

を、 ABC法にて免疫組織化学的に検索した。用いた抗表 1 ヒト対照例各 1例における免疫染色性
GFAP

S・100

抗 S‑100 抗体(ホ'りク0ーナ11、アドハ、ンス)であり、いずれもヒ星状勝細胞腫+++++トとラットで交差性が知られている。ヒト対照例として、

乏突起膝細胞腫

Vimentin

Cyt0サ
keratin

+一

診断名

+一

体は、抗 GFAP 抗体(ホ'りクローナル、 Bio‑sc ience products)、
抗 V i ment i n 抗体(モノク0ーナ11、 Transformat i on Res.1nc .)、抗 Cytokeratin 抗体(PKK‑1、モノクローナ1レ、 Lab3ystems)と、+それぞれ星状膝細胞腫(EradθⅢ)、乏突起腿細胞腫と診断された症例、各1例の手術材料を用いた。

表2

自然発生神経膝細胞腫での各免疫染色に対する陽性所見を示した例数

【結果】
診断名

GFAP

S・100

星状勝細胞腫0/2

ノノ/

自然発生例、化学物質誘発例共に、 GFAP, S・100 蛋白の発現が主体であり、混合型膝細胞腫に陽性例を多く認める傾向にあった。しかし、ヒト星状膝細胞腫症例でみられる様なビマン性に殆ど全ての細胞が強陽性を示す染色所見とは異なり、ラット各症例に於けるそれらの蛋白の発現は、腫癌内に弱陽性細胞が散在しているか、或は、それらの小集簾巣として認められるかのいずれかであり、共に同一腫癌内で重複して発現する傾向があった(表1,

混合型膝細胞腫

1/1

膝芽細胞腫

0/1

表3

Vimentin

Cyt07
keratin

0/2

0/2

0/1

0/1

0/1

0/1

MNUもしく1証NU誘発神経謬細胞腫での各免疫染色に対する陽性所見を示した例数2,3)。ヒト星状雁細胞腫のマーカーである GFAP は、検索した5例の星状謬細胞腫のうち1例が弱陽性であっ

GFAP

診断名

星状腿細胞腫乏突起勝細胞腫*
混合型謬細胞腫

3 6 9
1 2 8

を除いた2例に陽性像を認めた。また、ヒト星状膝細胞腫は Vimentin 弱陽性であったが、ラットでは全症例共陰性であった。 cytokeratin に関しては、化学物質で誘発された混合型膝細胞腫の9例中3例に弱陽性像を認め、それは GFAP の発現のみられた腫癌細胞と一致していた0

3 6 9
1 2 7

たのみで、逆に乏突起雁細胞腫のうち、4例のmicrotumor

S‑100

Vimentin

Cyt07

keratin

0/3

0/3

0/6

0/6

0/9

3/9

*陰性例4例は、 microtumorであった0

P・29.

ー^、ニノト棄斤生Eイ子雫音d>^手重レクチ'ンヨS"ミて》'コロイド金失ιこ京寸、弓一そ,罫妻^.,1生d>キ寅言寸(国立衛試・病理)0佐藤秀隆.豊田和弘.古川文夫.岡宮英明・今沢孝喜・高橋道人・林裕造
細胞や組織に存在している複合糖質は、発生過程での体(S・shaped body)が認められ、糸球体形成が続いてい細胞認識に重要な役割を果たし、また分化や加齢あるいることが窺われた。一方、皮髄境界部は極めて疎で、尿は腫癌化に際して変化することが知られている。これら

細管の発達も未熟であった。 6日目以降では皮質外層にを組織学的に検出するには従来、糖鎖やカルボキシル基

未熟な細胞群もS字体も認められず、新たな糸球体形成等の酸性基に基ずく方法、例えばアルシアン青やコロイは認めない。 PAS染色標本の観察によると皮質内層

ド鉄等が用いられてきたが、特定の糖構造を検出するにの糸球体は形態的に成熟しており、糸球体係蹄はコロイ

は酵素による消化等の方法によらねばならなかった。近ド鉄陽性に染まるが、外の糸球体ほど係蹄の形成も不年、特定の糖柵造と特異的に結合するレクチンが、特定明瞭で、コロイド鉄陰性と未熟であった。一方、近位尿の機能を有する細胞を識別しようとする際に極めて有用

細管はPAS陽性であるが、この時期では近位尿細管直であり、方法も簡便で特異性が高いと報告されている。

部を形態的に識別できなかった。

腎臓は、さまざまな複合糖質に富んでおり、レクチン

表1 に成熟ラット腎各部位の、表2に新生仔腎での各染色は腎各部位を識別するのに有用であるとされている。

種レクチンに対する染色態度を示した。近位尿細管の各

今回、ラット腎臓の成熟過程における種々のレクチンお種レクチンに対する染色性は、成熟ラットに比ぺて低下

よびコロイド鉄に対する染色性を成熟ラットのそれと比しており、生後10日目においても分化.成熟が完全に較検討した。

終7していないことが窺われた。一方、遠位尿細管は4【実験方法】

途中である2日目以前では、被膜直下のY字分岐部まで日以降成熟ラットと染色性に差を認めなかったが、成熟

F344ラット(日本チャールスリバー社)をバリヤの集合管が各種レクチンに陽性に染色された。

ーシステムの動物室にて飼育.交配した。生後 1,2,

皮質是外層に見られた未熟な細胞群やS字体は、いず4,6, 1 0日および5週目に2 5匹を屠殺、腎臓をれのレクチンでも染色されなかった。発生途中または未摘出い 0%緩衝ホルマリンにて固定し,常法に従いパ

熟な糸球体係蹄は、 RCA・1, WGAに対し陰性である

ラフィン包埋後、薄切片にH E, PAS,レクチン並びのに反し、未熟な糸球体の上皮細胞表層はRCA‑1,にコロイド鉄染色を行った。使用したレクチンはDBA,WGAに陽性であった。一方、成熟ラットでは糸球体係

P NA, RCA‑1, S BA, WG Aの5種類である。

蹄にのみにこれらが認められ、上皮細胞にみられなかったことから、シアル酸やガラクトース残基は上皮細胞の【結果及び考察】

形態の変化および成熟にともなって移動し、基底膜側に

生後1 4日の腎景外層には未熟な細胞群と共にS字偏在するようになることが示唆された。

表1

成熟ラット腎各部位のレクチンに対する染色性

++

+

++

++

ヘンレ(細)

+

++

++++

ヘンレ(太)
遠位尿細管

++

++

++

集合管

+++

++

++

遠位尿細管

+++++

++

+++

集合管

+++++++++++++++:弱陽性,++ :陽性, +++:強陽性

++
++

++

+一

近位尿細管

SBA WGA一一一一一一一

++

ボウマン嚢
+

一+一

++

上皮細胞

一一一一一+

ヘンレ(太)一一

ヘンレ(細)

++++

糸球体係蹄

一一一一一一

近位尿細管

++

一一

ボウマン嚢

DBA PNA RCAI

SBA WGA

一一一+一

+一一

一一一

上皮細胞

一一一

DBA PNA RCAI

糸球体係蹄

表2 新生仔ラット腎のレクチンに対する染色性

++
++
+++

+++

+++

P‑30.

チメロサール投与によるマウス footpad の炎症性反応
内田哲也,0内藤誠之郎,加藤博史,衛藤光明,茅野文利(国立予研,生物製剤)(目的)のととは,ワクチン接種後に起きる副反応について

チメロサールはワクチンの保存料として広く用い

考えるうえで,保存料としてのチメロサールの使用

られてぃるが,近年,ワクチン接種による過敏症反を再検討すべきもうーつの根拠となり得ると考えら才しる。

応にチメロサールが関与することを示唆する報告が少なくない。それらの報告は,チメロサルそのも
1メ0リのがアレルゲンとして働くことを示しており,チメロサルに対する生体の免疫応答によるものである

ル投与マウXのPa

00と考えられている。

本研究では,無感作マウスにチメロサールを投与
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用いて足跡の厚さを測定した。同時に各時間における

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0.01妬)を50μι注射(対照として,右下肢足踊にPBS のみ 50μι注射)し,1,2,3,6,24時間後にノギスを

、

＼.︑

(方法)
Bolb/0 マウス(8週齢,雌,5 匹/実験群)の左下
肢足踊に, PBSで希釈されたチメロサール溶液(0.1＼＼m

つたので報告する。

X0=﹄""幽コ●した時の注射局所における反応について検討を行な

'
HOUR生

注射局所の組織切片を作製して組織像を観察した。
(結果)
図一 1に示すように,各濃度のチメロサールの注射によって一様に注射後1時間をピークとする肺張1.

表ル投与マウスfootpadの組織所見

チメロサが観察された。この腫張はチメロサールの濃度に依存的であった。また,表一 1に示すように,組織所

井3

FOOTPAD

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L

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L

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見からも上のデータと関連して好中球の浸潤と浮腫が観察された。

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Ed邑..ー+(考察)
トキソイドワクチンに対する局所あるいは全身性Ihの反応は,通常,トキソイドのコンポーネントに起
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‑88‑

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いるが,本研究では,チメロサルに感作されていないマウスに投与するととによっても,局所に好中球の浸潤を伴なう腫張が起きることがわかった。と

PMN
Ed.0.

一一

原性の過敏症反応の原因になることは既に知られて

++

P MN

+一

それらを通じて感作されることによる,いわゆる医+++一眼液,コンタクトレンズ保存液等に添加されており,

++

++

εd.胴.

を示唆する報告も少なくない。
チメロサールは現在,保存料としてワクチン,点+▲+一れているチメロサールが過敏症反応を起こす可能性

PMN
Ed.畠.

一一

因するものであることが多いが,アジュバントとして用いられるアルミニウムや,保存料として用いら

Ed...

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闇od■r●t■P・31.

IES宏工CUI'AR S口壬:R01以冶ENIC ASSESS,侶1杠I LEYDIG CELL M(濃PHOL以;Y AND ,侶RCURY
DIS窄ミ1B〔】TION AF'珊R ME口旧Y【,MERC〔東Y f煎EAⅡ侶ln lN RATS

A. Roy chowdhury

Naヒiona1 1nstitute of occuP己tional Health, Almedab己d ,1ndi己エ^(XX貫ITI(湘: Epidemi010gical data elicited systemic disorders of methylme套CUTy (CH Hgcl) exposure. potenti己l effect ot cH Hgcl on sperfr1己togene‑S15 has been eSヒablished. present investigation5 Were unde辻aken to
己5Certaln、巾ether the sperπ旧togenic inhibition was paT'a11el with Leydig

Ce11 (【C) Impa1ビmerlt after cH Hgcl treatlnent.

撫1^IAI.S A即^: sixty five 鵬le T'己セS (age 30 士 2 days, weighing
70 士 5g) were used: Anir「日15 Were adninistered o (Group l」 controlJn = 25),5Ug (GrouP 11, n = 20) or lo ug (GrouP 111, n = 2B) CH Hgcl/Kg(i・P) daily for 151 301 60 and 90 days. serulrl from 己11 groups was storedat ‑20゜c for testosteT'one (T) determin己tion by RIA. eist010gy and lmrP110‑

Π槍try of lc weビe analysed 己t looo x.3早 hydT'oxy一△、‑steビ0id dehydビ0genase(3甲一HSD) activity was localized in fresh 12 Nrn cryostatiC 5ections (ー20゜C) of testis using dehydroepiandrosterone

己S

Substz'ate (PH 7.5).

MeビCury diS七てibution was S七Udied by autometa110gr己命ly 己nd the mercury
gralns were 5Canned 己t 1600 ×.

(X^工1玲1(^:1. DJ.sintegr己tion of lc was noted in GT・OUP 11I after 30days of cH Hgcl treatment.
2. decline in tc

1刃Pulation, in互ibition of 3P‑HSD activity,5ignificant

diminution in ser山I T levels and grad口al acC山Iulation ofindiC己ted steビ0idogeni.C ImP己lrrnent after cH Hgcl treatment
a peビiod of 90 days.

‑89‑

meぞCuryOverSprague・Dawley ラットにおける実験的肝癌誘発に影響をP・32.

及ぽす各種要因に関する研究
0李栄純、鄭滋永、李完揆(、ノウル大学・獣保科大学)【目的】【結果と考寮】

ラットにおいて化学的ι、:誘発される肝癌の餌究は、そ平均体重と一日飼料摂取量は実験開始の40週後からその組織字的バターノと発生様態がヒトの肝癌と頬似するの減少が顕筈であった。この峠因は肝癌と癌性柄変の発ことから最近、 1主目されている。木研究ては、ラ,:,トを育による障害と考えられる。肝癌の誘発物質であるDEHA

用いて化学的に誘発される肝癌の作出に影醤を及ぽす各のみ投与し'た笑験群て前癌性病変は45週後からも観寮さ

神要因を検討し,、肝癌モデノ!,ラットの最適の糸件を確立れた。これから一度誘発された前癌性病変は自然治癒さするのをその目的とした。

れずに残存し、その後 Promotor の体内進入によって促【材料と方怯】

化が促進されることか確認された。肝癌と癌性病変の発矣験動物は、肝癌誘弗率の年齢差を調へる先めに雄性生程度をlnitidtion, PTomotion および部分的肝翊除術

SptaKue・Dawley ラットの e 週齢(実検 U 、」 6 週齢(戈を1」なった処蘆群で比較しτ見ると、 55 週齢が 58 %の検 ID 鴬よび6 5 遅航(突検Ⅲ)を用いた。実検 1 とⅡは低い発生率をポ L,たのに対し、 6 過棚では 100 %の高い

4 つの GTOUPに、実検 lh は 3 つの GIOUPに分けられ、各発生率を示した。肝癌およひ癌性病変の数と面禎の給果実験群には実験開始日に lnltlat0τとして Dlethylnit‑

をTable 1 にボした。また、肝ω全体に対する癌と癌性rosamlne(DENA)を 1 回腹腔 11;i十射(20omg/kE, B. W.) 1̲

病変の而積を11゜ーゼノトとして Fig.1 ι:σミした。本突験で肝無を誌発させた。大験!ど"の GrouP 3,4 および尖誘発された肝癌の粗織学的形態は、肝細胞癌腫、胆管痛、

験川の Gro;.1P 2,3 にはその 2 週問1於から G i"!間 Promo・

川1管細胞癌および血管睡の4つに分架され六。將に肝細t0τとして 2‑Acethylamlnofju0τ師e(2‑AAF)を 0.02Z飼

胞1ι開.Eでは Pse11doaden0血a type か、胆管癌ては Wstic

料にまぜ給食させた。また、笑験 1 と 11 の Gro,JP 2,4おtypeか顕筈で南った。1市臓への肝症の転移が見られ、こよび実験Ⅲの GrouP3 には笑験開始3 遡問後に 2/3部分

れは肝癌の血管腔と胆管細胞癌腫および恕侘程度に関連的肝句」除術を行なった。以上の各実験 GTOUPは 45 逃Ⅱ剖

していた。

の飼育期間後に屠殺、剖検し、発生した肝癌の肉眼的お卯

画像分析裴遣を用いて定量的に分析し、統計学的に有意=冨御よび組織字的観寮を行なった,また、肝癌仍数と面禎をEX"n=゛nt l
E冨P.t地.nt Ⅱ
E冨P■r1冨●nt Ⅲ

性を検定した。
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士0.3 士0.6 士0.8

23.3^

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士1.37

士9.46

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NOD/shiJic(やせ型糖尿病)
ODS/shi Jd・od/od(vit.C合成能欠如
スンクス(Jic : SUN系)

ミニブタG

ネコ(1FFA CRED0産)
斤斤斤折

営業張張
京営出出

区ユ日本フレア株式会社

ビーグルイヌ・サル類

土阪幌台
才
木大札仙

ひとつの生命から末来を見つめる^L^^◇実験動物用飼料
一般動物用飼料
家畜・家禽試験用飼料
放射線滅菌飼料
特殊実験用配合飼料◇器具・機材・装置
各種飼育ケージ
各種飼育ラック
その他関連装置◇実験動物に関する受託業務
微生物・遺伝検査
飼料の分析・無菌検査
動物の受託生産
動物施設の受託管理◇コンサルタント及び情報サービス
施設の設計・プランニング
各種データ・,情報サービス

東京都目黒区葉台2‑20‑14第2いなりビル〒153 TEL03(791)0151(代)
大阪市西区京岡堀 1 ‑13‑2 藤原ビル〒550 TEL06(441)0755(代)
札幌市西区八軒 9 条西 10 ‑4 ‑24 〒063 TEL011(631) 2725
仙台市宮城野区銀杏町 14 12 〒9那 TEL022(295) 9731

実,験動物前怠合受託事業
.飼育管理

・動物実験

・検査・検疫

・系統維持

・環境管理

・機械・設備管理.事務・運営管理

・消毒業務

.イベント

.技術者教育.コンサルタント・開発・計画1.自社施設の飼育動物と設備の一括管理を任せたい。
2.即戦力として飼育管理・動物実験の技術者がほしい。

3.数時間勤務・祝祭日・年末年始・休日だけの勤務、忙しい時だけの技術者がほしい。
4.自社職員を教育・研修に出したい。
5.実験動物関連の情報を知りたい。
6.自社でセミナー・る刑彦会等を開催したい。

本

社〒164

ション在 j、U】仁すー^

西日本営撫所〒騒3

九州営築所〒引卜n

東京都中野区中野3‑4一Π
FAX03‑384‑9150
TEL脇・384‑9013
大阪府大阪市天王寺区悲田驍問8‑26
センターハイソ 903
TEL・FAX船一フ72‑6076
福岡県福岡市早良区内野1298占TεL鵠2‑8購心039 FAX092、804‑4351

加商は実験動物輸入のパイオニアとして20有余年にわたる豊富な経験と情報を駆使し、ユーザーの御希望に御応えしています。また、400人のスタッフを擁する米国大手受託試験機関1.R.D.C.社の日本総代理店としてハイレベルの各種安全性試験を斡旋し、さらに日本で入手因難な実験用器貝等、各種関連商品も取扱っております。

受託試験

実,

IR.D.C.社(U.S.A.)

ビーグル犬
HAZLETON、LRE(USA.)

国産犬

一般毒性i鵡貪
特殊毒性i鵡貪

大型ハウンド犬(US.A、)

ワイルドライフ社(U.S.A.)

サル

鳥^殻び蜜蜂のLD50、LC50:鵡矣
その他1菊朱毒1餐鵡貪

繁殖カニクイザル(フィ リヒン)
ノノ)
里性捕獲1剣麦ザル((中国)
繁殖アカゲザル
その他各種

クレメント社(U.S.A.)
FDA・EPA登録のコンサルタント

各種ラット・マウス (USA.)ネコ( 11 )

モルモット・マウス(国産)( 11 )

ウサギ
そのイ也各種加商
加商株式会社
物資部研究・開発課
東京都中央区日本橋2‑14‑9
TEL.( 03 ) 276 ‑7673 76刀
御一報下されば担当者が参上、御説明申し上げます噴霧感染装置頬卿・峡鵬
本装胃は、実験動物の病原微生物呼吸器感染実験や微細粒子、農薬等の呼吸器吸入実験等に用いられる呼吸器吸入装置てす。従来は、
オ、プライザーて発生させた煙霧を裴置の上部から導入しましたが、煙櫛は装置内で乱気流となって均一に拡散しなかったため、装置内の位置による動物の粒子吸入数のぱらつきが大きく、煙霧の拡散の不均一が顕著てした。
本装置は従来品の欠点を解消し、煙霧が装置内に均一に拡散し、しかも装置の組立から煙霧導入まてを短時間て行なうことがてきる画期的な装置てす。

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亀'

■特長
●小型だから場所をとりません●組立て式だから洗浄、収納が容易です●ラット、モルモット用/TS卜RM型●マウス用 TS卜M型

本社東京都千代田区岩本町2丁目 15番12号〒101 ΥEL.03(861)621K大代)TEL.0426(42)0570(代喪)TEL 0559(75)0975(代央)TEL0463(21)2974(代袈)TEL 0436(22)3乃8(代宍)

坑崎横峅

八三平干

子副塚葉

株式合社ラ也田 f里イヒ

IKD

●安全で操作が簡単です
皮 TEL0298 24 2681 代表
王 TEL0492 45)7831 代衷

丘 TEL 045 303)6621 代表)
枝 TEL0546 44)5551 代表

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■効能・効果プドウ球菌属、レンサ球菌属、ペプトストレプトコッカス属、ペプトコッカス属、大腸菌、シトロバクター属、クレプシエラ属、エンテロバクター属、セラチア属、

フロテウス属、インフルエンザ菌、バクテロイデス属のうち本剤感性菌による下記感染症■用法・用量
通常、成人にはセフゾナムナトリウムとして 1日 1 2 E (力価)を 2
回に分けて静脈内に注射する。通常、小児にはセフゾナムナト1jウムとして 1日40 80叫(力価)/k三を 3 4 回に分けて静脈内に注射する。
なお、年齢、症状に応じ適宜増減するが、難治性又は重症感染症にほ、◆敗血症◆紅門周囲癌◆骨髄炎、関節炎、外傷・手術創などの二次感染◆咽喉頭炎、急性気管支炎、肩桃炎(肩桃周囲炎、肩桃周囲膿癌)、慢性気
管支炎、気管支拡張症(感染時)、慢性呼吸器疾愚の二次感染◆腎孟腎炎、勝胱炎◆胆のう炎、胆管炎、肝癌◆腹膜炎(含、骨盤腹膜炎、ダグラス寓痢)◆子宮付属器炎、子宮内感染、骨盤死腔炎、子宮帝結合織炎、ハ
ルトリン腺炎◆髄膜炎

成人では 1日量を4 且(力価)まで増是し2 4回に分けて注射し、小児では 1日呈を20omR (力価)/kgまで増量し 3

4 回に分けて注射する。

静脈内投与に際しては、日本藁局方r注射用蒸留水」、日本薬局方「生理食塩液」又は日本薬局方「プドウ糖注射液」に溶解して緩徐に注射する。
点滴静注に際しては、補液に加えて30分 2時間で注射する.

※使用上の注意については、添付文をこ参照下さい。
製造

販^器製,;黙鏘④懇觀器繋鋭(資料請求先・学術情報部)

セフエム系抗生物質製剤"コスモ勘ン鳶嘉果
Cosmosin@

日抗用セフゾナムナトリウム(略号:CZ口N〕

基準収載
1989.5^〆、0倫雌゛隷既都。倫要̲..,.

゛゜化要研
新保幸太郎

所長

'r
'廖

鑾化合物安全性研究所磊に笥ゞ詣晋器':
SLC、BDFISLC・CDFISLC.B6C3FI●クロースドコロニー●
マウス SIC:ddY
SIC:1CR

ラット SICSD

受託生産
マウス

●ミュータント系●

C3H H eC3H H eHOS :Donryu●近交系.
マウス BALB/c crslc
C57BL/6 Cr slc
C3H/He slc
DBA/2 Cr slc
B I0

C57BL/ 10 sn slc

コンシェニック B I0.A/sgsn slc

B I0.BR/sgsn slc
日 10.D2/nsn slc
ラット F344/N SIC
WKAH/Hkm slc

Std:ddY

ラット

Std:wistar

Stdlwi5tar/ST
HOS :Donryu
モルモット

Std:Hartley

ウサギ

Std:NZW

ハムスター

Stdsyrlan

ラット

WBN Kob slc

その他

Conventiona1動小動物識別染料クイックカラーヘイン

ビークル犬東洋ビークル

実験動物診断EIA献薬(デンカ生研)

輪入検疫済カニクイザル
輸入繁殖カニクイザル

Strain 13 SIC

日本エスエルシー株式会社

SLC.NZBWFISLC、WBB6FI、W WV
MRL MPU・1Pr lpr

実験動物用床敷・ソフトチップ●交雑群●〒431‑11 静岡県.兵松市湖東町3371番地の8 合く0534 86 3 8

マウス

DA SIC
Gunrl rat slc

モルモット St『ain 2 SIC

風SιC

SIC MTV

患モデル動●クローズドコロニー●
マウス

SIC MTVPW SIC

Clean動物

SIC:wi5tar sT

AJ SI
AKR
CBA

ヌードマウス BALB/C'nu slc
KSN ヌードマウス

SIC:wista『

モルモツト SIC:H己rtleY
ウサキ SIC:NZW

今、

マウス

銑銑NJ

SιCの

実験動

SPF 物

'

L

11

嵩

安全性試験のパイオニア<受託項目>
般毒性試験変異原性試験
生殖・発生毒性試験局所刺激性試験
癌原性試験

般薬理試験

抗原性試験病理組緒晦本作製
他の試験については
直接お問い合わせ下さい

The center of Japan Bi010gical chemistry co., LTD.

株式会社日本生物化学センター
本社〒531 大阪市北区豊崎4丁目12‑17
T E L (船)373‑0208

研究所〒503・(拾岐阜県海津郡海津町福江52
T E L (05845)4‑5631(代表) F A X (05845)4‑5104

安全性試験受託施設

生技研 株式会社生物科学技術研究所
Hamamat5U seigiken Re5earch

研究所/静岡県浜松市葵町95・]0 丑0534(375348
中伊豆分室/静岡県田方郡中伊豆町筏場804‑56 含05588(3)2326

ι郎.

受言モる升究キ幾関オンラインシステ△によるデータ収集

弊杠の誠実、正確、信頼性が貴杠の二ーズに的確にお応え致しぎす
受託試験業務内容:一般毒性試験・生殖毒性試験・変異原性試験・抗原性試験・薬理試験

株式会社日本,rイ寛りサーチセニ牙一
羽島研究所〒501‑62 岐阜県羽島市福寿町間島6丁目104番地
TE

L.0583‑92‑6222

N国W 回『凹目回国V目1回回圃回回也
圖回目目国『回h ◎国回セ国『。1N◎.

受託試験の内容
團安全性試験
圏薬理試験
圏吸収・分布・代謝・排池試験
圏生物学的同等性試験
圏コンサルタント業務
駆論文投稿

恵庭研究所

くMR籍新薬開発研究所
ネ士
本
岩見沢研究所

恵庭研究所
東京支店

北海遊岩見沢市上幌向町559‑13
合(0126) 26‑3611(代表)北海道恵庭市戸磯421‑1
丑(0123) 34‑0111(代表)
東京都新術区西新宿39‑3第3梅村ビル4F
合(03) 374‑5407(代表)■受託項目■●病理組織標本の作製
及び検査(幾希●熊易●電子顕微鏡的検索●硬組織標本の作製●変異原性試験●その他

製^^吉'き'^^^吉'^^^寺ξ^^^^^^^^^^^^^^^^^^

t 試項目、内容などにっいては下記にご照会下さい。、

硬1担当者がご相談、ご説明に伺います。 N瓢^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^^、

奇株式会社組織科学研究所〒198 東京都青梅市黒沢2‑984
T E L :0428(74)4741
FAX :0428(74)4505

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SHIN NIPPON BIOMEDICAL LABORATOR旧S, LTD.

当社の特色
創業以来30年余りにわたって培われた技術と経験に基づき,各分野毎の専門スタッフが前醐床試験を実施致します。

国内最大規模を誇る大動物実験施設(ビーグル及びサル)での試験結果は委託者に定,平があり,また,諸外国における試験価格に競合するものと考えます。

生殖試験

変異原性試験

︑︑=

式会社
本社.研究所:〒891‑13 既児島県鹿児島郡吉田町宮之浦2438番地
ファクシミリ 0992‑94‑3印9
電話0992‑94‑2600(代表)東京支社:〒103 東京都中央区日本橋兜町20‑5 兜町八千代ヒル2階
電話03‑663‑5028(代表)

ファクシミリ03‑663‑5026

薬効薬理試験他

歩3抑PΦ匙Φ
伍価凱価避3
即3@血Φ匹Φ伍訂
直穿渉Φ避3@Φ起@0.,直lh.
【特殊染色】
アルシアンブルー・PAS染色、ギッター染色、

PTAH染色、,ザン染色、フォンタナマッソン染色

組織標本作製病理組織学検査

グリメリウス染色、ベノレリンブノレー染色、
コンゴーレッド染色、オノレセイン染色、
アルデヒドフクシン染色、コッサ染色、他。
【酵素抗体法】
CEA、NSE、MT I、MB I、 S I00、AFP、

Keratin、 Myoglobin、 Desmin、イ也。

薬理試験

櫛札幌総合病理研究所〒064

キし幌市中央区南12条西18丁目3‑17
Tel oH‑563‑6215

所長

小野江為則

研究部長

竹内雅也
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会

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6 回 H本毒病理'
講演要旨

ISTP
气ヨ夛フ

1990年2月13, He
札幌

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北12条

学術交流会館.北大正門

クラーク会館^゛y"゛j
スライドコンフ

アランス会場

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評張員会会坦
(北海道経済センタ

市民会館
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道新ホール

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植物園

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自治全館石貯全餓

目 冒§.■松札幌駅■■■■■亜■■■■■■■■■■■■.......

.一.一.一.

北大本部
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北海道大学

難 創成川

地下餓南北

会場案内図

雪まつり会場
ム昇

謎■

大通り公園

テレヒ塔

母性病理学会会場
(道新ヒル
^ 栓所
^

オすきの

消防局

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ヨーク松紐

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学会会場:札幌市中央区大通西3丁目6番地「道新ビル大通館」
T E L 0Ⅱ一221‑2422

講演会場:8階道新ホール
示説会場:7階A会議室<交通案内>・ J R 「札φ霧尺」より徒歩約15分
・地下鉄「大通駅」より徒歩3分

懇親会会場:札幌市東区北6条東9丁目 rサッポロビール園」
T E L 011‑742‑1531<交通案内>学会会場より貸切バスにて送迎

評議員会会場:札幌市中央区北1条西2丁目(時計台東となり)
北海道経済センターフ階「ニューキ帥知
T E L 011‑22]‑5359<交通案内>会場より徒歩3分
スライドコンファランス会場:キ帥晃市北区北8条西5丁目(北大正門入って左方ななめ向い)「才ヒ海道大学学1村交i充会貧官」<交通案内> J R「札φ霧尺」または地下鉄「北12条駅」より、それぞれ徒歩で約5分
会長
事務局

板倉智敏
札幌市北区北18条西9丁目
北海道大学獣医学部比較病理学講座
T E L 011‑フ]6‑2111(内線5]91 5194)
F A X 011‑717ーフ569