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第2回学術集会

講>更要日集京

1986年2月7,8日東第2回毒性病理研究会一学術集会

会

2

日場程

1

期

昭和 61年2月7日(金),8日(土)3

国立公衆衛生院講堂(東京都港区白金台4‑6‑1)日

2月7日(金) 9

25

9:30

開会あいさつ(会長)930 12:35

13

40 14:00

総会

14

00 14:50

特別講演

演題

15:00 17:30 シンボジウム
17:40 19:30

懇親会

2月8日午前9:30 12:45 一般演題
12:45 12:50 閉会あいさつ(副会長)4.

お願い口参加費を予納した方は受付で名札(参加章)を受取り,会期中は必ず左胸にっ
けてください。予納しなかった方は参加費(6,000円)を受付で支払って名札を受取ってください。

ロー般演題の講演時問は1題10分,討論時間は約3分で、時問の配分は座長にお任かせ致しますので指示に従ってください

ロスライドは 35mm版に限り,プロジェクターは各2台用意します。
5.

会場への交通案内①国電・山の手線目黒駅から
都バス・大井競馬場ゆき,永代橋ゆき,東京駅南口ゆき:約5分・日
吉坂上下車。

・日本橋三越ゆき:約S分・医科研西門下車。
②国電・山の手線または京浜東北線品川駅から:
都バス・目黒駅ゆき:約12分・日吉坂上下車。
③地下鉄・日比谷線広尾駅から

都バス・目黒駅ゆき:約10分・医科研西門下車。

フ゜ログラム特別講演(第 1日:2月7日 14:00 14:5の司会:西山保一(北里大・医)Education, continuing Education and lssues in Toxic010gic path010gy
Dr. Michae11atropoulos(Medical Research Division American cyanamid co.)

シンポジウム(第1日

2月7日 15

毒性変化と電子顕微鏡 15:00 16:30〕司会

00 17

30)

田島正典旧生研)・後藤直彰(山口大・農)SI.毒性試験における肝の電顕検査
渡辺満利(実験動物中央研)
S2.抗生物質による腎障害の形態学的特徴を例として
矢本敬・松沼尚史(三共・安全研)
S3.神経吉村慎介・今井清(食品薬品安全センター泰野研)

B.毒性変化と酵素組織化学〔16:30 17:3の司会:板倉智敏(鳥取大・農)・土井邦雄(東大.農)S4.肝臓・・ーーニ木力夫・杉本哲朗(中外製薬・開発研)
S5.腎臓一ーー安藤孝夫・宮嶌宏彰(武田薬品・中研)(時間は講演20分,討論10 に配分してありますが進行は司会者にお任せ致します)般[1 3] 930 10:10

演題第 1日:2月7日(金)座長 :土井邦雄(東大・農)F344/SIC ラットにおける石灰沈着について
今井俊介,森本純司,清塚康彦,螺良義彦(奈良医大・2病理)2.

マウスにおけるメチルナフタレンによる肺の毒性について

小西陽一,江見葉子,村田芳明,伝田阿由美,白岩和巳(奈良医大・がんセ・腫癌病理)3.

Paraquat の毒性作用

mitochondria (ca++‑ATpase 活性の阻害平井圭一,藤本和、, 伊野木清三,上田忠司,小川和朗、(金沢医大・解剖,、京都大・医・解音のB 5] 10:10 10:50 座長:岡庭梓(田辺製薬.安全研)
4.

F344 ラットにおける食道拡張症

真板敬三,平野雅裕,原田孝則,白須泰彦(残留農薬研)

5.

食塩長期投与によるラット胃粘膜の病理組織学的変化
長谷川良平,古川文夫,豊田和弘,佐藤秀隆,高橋道人(国立衛試・病理)

6.

下痢性貝毒による実験的中毒症の病理形態
寺尾清D 伊藤恵美子D 安元健幻(D千葉大活性研,の東北大.農)[フ 9] 10:50 11:30 座長:後藤直彰(山口大・農)完全静脈栄養法によるラットのメチオニン欠乏時の病理学的変化
栗栖和信,川口義郎,長根芳文,長沢孝二郎,川島裕造(大塚製薬・研究開発)

有機溶媒furfura1単回経口投与のラッ団干に及ぽす影響
清水昭男・蟹沢成好(横浜大・医・病理)

プタ血清反復投与マウス胆管病変のα一naphthylisothiocyanate(ANIT)処置による増強

中山裕之D.士井手肱隹・本庄和人・前田尚久・土居千代・光岡知足・藤原公策"(東大農.
実験動物, D家畜病理)[10 12] 11:30 12:10 座長

宮嶌宏彰(武田薬品・安全研)

10.ラット腎及び勝胱への Na.NTA・ H.0及びH.NTA による影響
北堀吉映,日浅義雄,(奈良医大・1病理)

11. N・methylnitrosourea誘発の奇形性水小頭症ラット前頭葉の電顕的観察
相内聖峰,小林賢一,佐久間貞重(アップジョン・総合研)

12.有機水銀投与ラットにおける聴覚障害一病理変化と聴性誘発電位一阿部敏男,山本正樹,森島英喜,花安百合子,千葉祐広,宮嶌宏彰(武田薬品・中研)[13 14] 12

10 12:35

座長:真板敬三(残留農薬研)

13.ラットの Galactose 白内障の形態発生について
和田功,福島登美子,湊良雄,武下政一,岡庭

14.

梓(田辺製薬・安全研)

イヌにおけるジンクピリチオン誘発網膜症について

乾俊秀,久世博,高田博,堀正樹,岡庭梓(田辺製薬・安全研)一般演題第2日目

2月8日(土)[15 17] 9:30 10:10 座長:榎本真(安評センター)
15.老齢F344 ラットの自然発生腫癌

花田貴宣,堺俊治,岡宮英明,三木寿雄(山之内製薬,安全研)

16.ラットにおける N‑nitroso‑bis(2‑hydroxypropyl)amine (BHP)
関連物質の腹腔内1回投与による発癌性の比較検討
横瀬喜彦,牧野剛緒,伝田阿由美,高橋精一,小西陽一(奈良医大・がんセ・腫傷病理)

17. N‑ethyl・N・nitrosourea新生仔期 1回投与により誘発される腫癌の動物種差及び系統差について

内藤正志,伊藤明弘(広大・原医研・癌)[18 20] 10:10 10:50 座長ン」、西陽一(奈良医大)
18.ハムスターにおけるタバコ煙の 24力月慢性吸入毒性・発癌性に対するビタミンC投与の効果

原田孝則,北澤利明,榎本秋子,真板敬三,白須泰彦(残留農薬研)

19.ラット前胃腫傷の形態学的研究

玉野静光,福島昭治,増井恒夫,柴田雅朗,伊藤信行(名市大・医・一病)20.市販 BHA (2‑t・BHA,3‑t‑BHA の混合物),2・t・BHA,3・t‑BHA および BHT投与
によるハムスター前胃初期病変の比較

宮田幸忠,広瀬雅雄,増田あっ子,小木曽正,伊藤信行(名市大・医・病)[21 2幻 1050 1115 座長:林裕造(国立衛試)

21.ラット肝発癌過程における胎盤型 glutathione s‑transferase (GST‑P)とγ一glutamyltransferase (γ一GT)の指標酵素としての検討
立松正衛,米良幸典,倉田靖,山下隆生,津田洋幸(名市大・医・一病)

22.マウス肝芽細胞腫の形態学的特徴とα一fetoproteinおよびケラチンの検索
里チ々山孝, G. ReznikD, T. J. BucciD, F. FU11ertonのJ. M. W'ard幻(武田薬品.中研,"PAI/NCTR,のNCTR/FDA,幻NCI/NIH)[23 25] 11

15 11:55

座長:蟹沢成好(横浜市大・医)23. EHEN ラツト腎腫癌性病変部の glutathione s‑transferase の各分子種, glucose‑6‑phosphate dehydr0又enase およびγ glutamyltranspeptidase の各酵素表現型の組織
化学的観察

井上忠志,津田洋幸,朝元誠人,白井智之,立松正衛(名市大・医・一病)

24.ウラシル投与によるラット勝胱結石と可逆性跨胱乳頭腫症の発生
田川義章,白井智之,福島昭治,広瀬清信,伊藤信行(名市大・医・一病)

25.勝胱発癌過程における間質の形態学的変化
荒井昌之,日比野勤(藤田学園大・衛生・病理)[26 29] 11

55 12:45

座長:伊東信行(名古屋市大・医)26.ニトロソ尿素によるラット卵巣セルトリ細胞腫の発生
前川昭彦,小野寺博志,谷川廣行,菅野純(国立衛試・病理)27. X線, MNU及び性ホルモンのラット乳腺腫癌発生への効果。特に組織学的特徴につぃて伊藤明弘,内藤正志,渡辺敦光(広大・原医研)28.カニクイザルの肺転移を伴う乳腺部基底細胞癌

中島信明,真板敬三,白須泰彦(残留農薬研)

29.ラットにおける Dipheny1発癌性試験中にみられた骨肉腫の移植につぃて
白岩和巳',堤雅弘',宮内義純",三井宜夫',田村一手小,玉井幸子,小西陽一.(奈良医大・'がんセ・腫傷病理,'整外)SI

毒性試験における肝の電顕検査
渡辺満利(実中研 .前臨床研)

電顕が細胞の微細構造の研究に用いられ,

しばしぱ遭遇し困るのが4の場合である。こ1945年に Porヒθr らが日凱doplasmic r6ticU1如をれを毒性変化と解釈するかどうかは別として,観察し命名してから今年でちょうど40年にな

多くの場合,このような変化の発現機序を明る。その間の電顕ならびにその応用技術の発らかにするための研究を進めて行けないのが達は急速であり,透過型をはじめ走査型,超現状であろう。このような時,類似変化の報

高圧電顕, X 線微小分析,フリーズレプリカ

告例と対比させ,その変化の意義を類推しな法,凍結乾燥法,組織化学,オートラジオグ

ければならないことが多い。そこで,薬物にラフィー,画像解析法などが開発されてきた。

起因した肝細胞小器官の形態的変化につぃて

現在ではこのような電顕技術が薬物の毒性研

われわれが経験した例および報告例の中から究にも盛んに用いられているが,ここでは広

いくつかを紹介し,毒性試験において肝の微く利用されている透過型篭顕に限って話を進

細構造変化を解釈するうぇでの参考としたい。

めたい。

なお薬物起因性の肝細胞小器官の変化の代表

毒性発現機序の研究において電顕は有力な的なものとして以下の変化が観察されてぃる。

武器であり,顕所見が肝の毒性発現機序解明の糸口となったものも多い。しかし,薬物

薬物に起因した肝細胞小器官の変化

による肝の微細構造の変化はさまざまなもの

a.細胞膜が報告されており,それらの変化が小器官のVacuolar i力Vaainati0力, microvi11iの bleb

ナ杉:j或, microvi11i 1肖^ 0

いかなる機能状態を反映しているのか明らかでないものも少なくない。日常の電顕検査に

b .核および核小体

おいてもそのような像に遇することが多い。

Perichrom3tin granUθの増加, pseudo‑

一般毒性試験においては,標的臓器が判明しinclusions,核 d、体の解離( Sθ宮re8ati0訂),ていない時点で肝の顕検査を行わなければ核小体の断裂(fル即伽t.tion)。

ならないことが多く,その結果,肝の微細構

0.小胞体造に変化が観察されるケースとして以下のよ

拡張および空胞形成(V..ioulaもion),粗面

うな場合がみられる。

小胞体のりポゾームの離脱,減少,滑面

1.肝機能検査・光顕所見のうぇで肝障害が認められる場合。

小胞体の増生,d2.肝以外が毒性の標的臓器であり,二炊

hyP日此rophy , mθ8a1旦iもOchondria), Cry8t ‑3.肝の微細榔造の変化が薬物の代謝.排

a110id i口CIU8ionB (paracry8士a11D1θ

池に関連した適応性変化である場合。

どに詔められない場合。
このようなケースのうち1および2について

は,変化の意味するところは明瞭である。3と4の場合を毒性変化とするかどうかにつぃては難しい問題であるが,3については変化の発現機序を解釈するのは容易である。最もmaもθrial), C 3 沈着。
8

れに関連すると思われる変化が他臓器なトコンドリア

増加,減少,膨イヒ(.we11in宮),肥大(的に肝の変化が生じている場合。

4.肝の微細構造に変化がみられるか,そミ

membra赴θ WhorlB O

マイクロ

増力Ⅱ,減少, matrica1 もUbU1θ8,血atrical,P〕、ates , crysta110id。
f .ライソゾーム

Pericahalicular dense body の増力Ⅱ,四eloid
bodi88, tocal cyヒ0pla8mic de宮radation(rcD)。
巳.ゴノレジ装置

増生,ciS士θ血3B およびマθ8iC1θの拡張。

S2

毒性変化と電子顕微鏡

抗生物質による腎障害の形態学的特徴を例として
三

0 矢本

敬,

松沼尚史(

共・安全研)
以上は,モデル実験による毒性発見の標的臓器における変化の経時的な追跡例である。機能
新規化学物質のヒトに対する安全性を評価す

異常あるいは光学顕微鏡的な変化が把握できなるための情報を得る目的で,実験動物に多量かい段階で二次水解小体の増加という形態変化をつ繰り返し投与して,その発現し九毒性変化を

電子顕微鏡はとらえることが可能であり,かつ,解析する毒性試験が行われる。被験化学物質の時間の経過と共に不可逆の変化に進行し光学顕

代謝あるいは排池の経路と関連して,肝臓や腎微鏡で明確に検出記述できるようになる過程を臓は毒性発現の標的臓器になる場合が多い。投示すことができ九。

与依存性をひとつの指標として,被験化合物

電子顕微鏡を用いて毒性変化を解析する場合に起因した変化を抽出するのであるが,解析おの利点は,ここで示した腎臓のモデルで明らか

よび評価上問題となるのは,機能異常と形能異なように,毒性発現の初期変化とその経過を把常の関連およびモの回復性である。形態学的な握できるということである。電子顕微鏡を用い変化については,正常造からの逸脱を病理学て明らかにし九情報と,機能異常を検出する九的な手法に基づいて評価を行う。この場合,変めの生化学的な指標および光学顕微鏡的変化と化の闇値を求め安全性に関する境界量を推測す
る時に,初期変化を把握する手段の精度が問題を合わせ考えることによって,毒性発現機序あるいは不可逆な形態変化に進行する過程を総合となる。光学顕微鏡観察により,この初期変化的に評価することが可能となるであろう。しかを半定量的に提示することが難しい場合がある。

し,当然のことではあるが電子顕微鏡では極め

このような場合の形態変化を,経過を追跡しなて限られた範囲に関する情報の提示しかできながら評価する時に電子顕微鏡が有力な道具となる。ここでは,抗生物質による腎臓の障害をモ

試験では,まず光学顕微鏡による標的臓器の特デルとして電子顕微鏡の有用性およびその限界定が重要であると考える。

について考える。

7 週齢のラット(F 3 4 4,雄)にゲンタミ
シン( schering co u. S . A.)を90叫/ k9/

day および45叫/kg/day 皮下投与した。投与日数は,0, 1,2,4,フ,10日間で,それぞれの投与日数別に各々2匹を用い九。軽麻酔下で放血致死させ,九だちに腎臓を摘出し,常法に従って浸漬固定して標本を作製した。透過型電子顕微鏡(J EM‑10 O C X Ⅱ)を用いて近位尿細管上皮細胞を観察し,一定倍率の写真を撮影して,二次水解小体の数および面積を測定した(ディジタイザー,武藤工業)゛その結果,二次水解小体は,投与後24時間で既にその数が増加してぃ九。投与日数が増えるに伴い,二次水解小体は数と大きさを増し九。これらの変化には,経過時間および投与量に依存する傾向が明らかであった。

いということを常に念頭において,日常の毒性S3

癒性変化と電子顕微鏡

神経0吉村愼介・今井清(食品薬品安全セ ンター秦野研)
毒性試験に電顕がよく利用され、より詳細な変化が観察されるようになつてきているが光顕と異なり、改善されたが、 中枢では骸絹のミェリン層間の剥が生じた。

多数の標本を作製するのは困難であり、観察できる

容倣はラツトでは横断する方向に切り出し、その面積も光顕とは比べものにならないほど少ない。まままフラツト型のポリエチンカプセルに包埋したが、た、観察するのにも多くの時間を要する。そこで電イヌでは横断スライスを 3 つに分割した後、包埋し顕的観察は、光顕ではとらえにくい微な変化、あた0変化が明らかな時は厚切りトルイジンプルー染

るいはより詳細な変化を明らかにしたい時に有効な色標本で光顕的に充分変化がとらえられ、その中か手段である。また 3rtifact の出やすぃ組織あるいら必要な部分をトリミングし超薄切片を作製した。

は組織片が小さく通常の方法による光顕での観察がキノホルムを投与したイヌの場合、脊髄では後半身容易でない組織には1孤顕を利用すぺきである。

よりの知神経線維が上行するG011 索に変性の見神経組繊は比較的 artifaC土の生じやすぃ組織でられることが多く、遠位部の顕骸により強く現れた。

あるが、中枢神経ことに脳神経に見られる病変は注

一方、運動神経では、腰艦に強い変化が見られた。

意深く観察すれぱ通常の光顕でも認議することが可神経細胞における変化は、キノホルム投与例では能であり、しかも脳神経系では病変の局在を明確に明らかではなかったが、ラツトにおける薬物誘発性しておく必要があるので、この点に関しては電顕はリン脂質症の際に脊髄神経節や、腸管の Auerb3Ch

むしろ不向きであると考えられる。一方、末梢神経神経の神経細胞に細胞質内封入体が多数形成され、においては良好な光顕標本を作製するのが容易でな

小脳のプルキンエ細胞にも少数が認められた。

<、また arもifact との鑑別が困難で、しかも得ら末梢神経でも坐骨神経から足底神経に至るまで、れる材料は非常に少であることから光顕的に判定

厚切りトルイヅンプルー染色標本でかなりょく変化

し得る所見は著しく限定されるので、電顕の利用価をとらえることができ、特にエタノールで分別する値が極めて高い組織の 1 つと考えられる。

と神経線維間の膝原線維が脱色され、髄鞘がく染

演者は、厚生省特定疾患スモン調査研究班での研まって観察しやすい。しかし、軸索内の構造や無骸

究、あるいは一般毒性試験において神経組織を電顕

神経線維の変化を見るには超薄切し、電顕的に観察的に韻察する機会を得たので、そのときに用いた方

しなければならない。さらに末梢の神経終末になる

法およびいくっかの薬物による毒性変化を紹介すると厚仞り切片では充分には観察できず、そのうぇ神とともに2‑3の問題点を提起したい。

経終末を探りあて標本にするのは客易ではない。効神経組織の観察、特に電顕による観察を行うには、率よく電顕観察を行うためにいくつかの方法を試みた
0より artif3C土の少ない標本を得るため、遜流固定が必要である0通常、神経組織の固定には大動脈起運動神経が筋に付着する部位は運動終板と呼ばれ始部に力 ニユーレ を挿入して、全身を涯流する方法

るが、厚切り切片でその部位を捜し出すのは容易でがとられている。涯流は固定液の入つた容器を高くない0 そこで温流固定後、時計ビンセツトで筋をほ持ち上げて落差を利用するか、あるいは送液ポンプ

ぐし、十から十数本の筋線維の束にして、フセチルを用いるが、'ンプの場合は脈流が発生するため、コリンエステラーゼの酵素組織化学的染色をごく短

これを消去する装置が必要であると思われる。固定

時間行うと、運動終板のある部位が染め出される。

液を湘流する前に、ヘパリンを加えた緩生理食塩

反応陽性部位は 1本の筋線維に 1個、隣り合う筋線

水で血液の洗浄を行うと、より確実に固定が行える。

維にも並んで見られるので、この部位をトリミング

固定液は 0.1 M りン酸緩衝した 4 %パラホノレムフノレ

して包埋すると、かなり効率よく運動終板を観察す

デヒドと、 2.5 %グルターノレアノレデヒドの等曇混合ることができた。

液を用いた 0 温流固定により、 artifact はかなり

知覚神経の終末として、例えば筋紡錘は太い筋肉

では分布密度が低く、多数の厚切り切片を作製して捜し出さねばならない。しかし、細い筋ではかなり検出しやすく、中足骨に付着するように位置する骨間筋の標本をっくることにより、筋紡錘を標本にできる確率は増した。皮に分布する終末はいくっかあるが、メルケル細胞およびそれに付着する神経軸索を観察するには、イヌでは実体顕微鏡で毛盤を捜し、その部位を標本にすることで確実に見出せた 0
しかし、ラットでは毛盤は小さく、実体顕微鏡下では見出せなかった。イヌの毛包の外根鞘周囲にある柵状神経終末は、厚切り切片では白く抜けて見える
ので、モの部位を超薄切した 0

以上、演者の行った方法、経験した所を述べた。

通常の毒性試験の解剖時に同時に電顕用に広い範囲の神経組織を採取するのは困難で、特に神経症状の認められる様な場合には別に電顕用の動物を用意するのが望ましいと思われる。採材部位については、末梢神経はどれほど遠位まで観察する必要があるか<︑一概に言及すること 才できな

クな

とも坐骨

神経だけというより、脛骨神経や筋間を走行する神経線維などの観察も必要と思われる0毒性変化と酵素組織化学S4^肝0 二木力夫

杉本哲朗

肝細胞は,その有する複雑富な襖能を反映して,組化学的に追求される酵素は多にわたり,また,各(中外製薬・

発)第二に,細胞の代謝機能の変化を追求する場合が考えられ,

は小葉内glucose‑6‑phosphate dehydTogenase leucinに規則性をもって分布していることが知られている。病変肝でalninopeptidase , phosphorylaseなどが加わる。しは,このような規則性は乱れ,反応の増強,減弱,局在のかし,肝癌研究における 7 ‑glutalnyltranspeptidase

変化,反応の形状変化が生じる。一的には,肝小葉内のによる形偏倚の検出などは特異な例で,代謝能の変化を

壊死部は酵素活性が消失し,細巣の周辺の肝細胞および追求できるは,従来の酵素活性の証明に基づいた手法では変性ことに脂肪変性におちいった細胞では酵素活性は減弱する

必ずしも多くない。この方面の研究では,酵素蛋白の局在をとされている。

証明する免疫組化学的な方法が応用されっつぁり,特に,通常,肝の性変化を検討する際の酵素組化学の応用と,肝ミクロソームでの薬物の代謝的活性化による脂過酸化のしては,ね二つに整理することができると思われる.

亢進が肝毒性の原因のーつとして重要視されてきている中で,第一に,各細胞内ノ」屠官における指標素の局在性変化を明

グルタチオン代謝に関しても関らかにして,一般の形態学でみられる病態を小器官レベルでのの組織化学的なアブロー

チが可能になってきている.

病的変化として認識する場合があげられる。検索の目的に応じ

廂過酸化を誘起する薬として小葉中心性のおよび脂て,対となる髪選択することになるが,ーに,膜系肪化をきたす四塩化炭素はよく知られ,マイクロソームの電子である adenosine tTiphosphatase , alkaline伝達系でフリーラジカルであるトリクロルメチルが生成され,Phosphatase ,5Lnucleotidase ,ゴルジ装やライ

これが Prooxidant として働き,膜りン脂質の多不飽和ソゾームに関与する acid phosphatase,esterase,

脂肪が過酸化を受けるとされているが,これら脂過酸化

β一glucuronidase ,ミトコンドリアにおける脱水素酵素に対してグルタチオン関連酵素のなかでも特に'一型グルタ

Succinate dehydTogenase ,ノ」、胞体に関与するオン(GSH)を酸化型グルタチオン(GSSG)に変換する

glucose‑6‑phogphatase ,ペルオキシゾームに関与す

glut己thione peroxidase は防御因子として重要なCatalase , peroxidase などが比較的頻繁に用いられ役割を果たしていると考えられている。最近,東海大学医学ていると思われる。過去,このような級点から,代表的な肝障部.渡辺慶一教授のもとで,四化炭素投与ラットにっいて,害物である四塩化炭素, Dーガヲクトサミン,エチオニン,

glutathione peToxidase の肝小内および肝細胞内

チオアセタミド,クロフィブレートなどについて広範な研究

分布が検討され,脂肪肝発生,強化における脂質過化の意輯

がなされている.病的状態に至るまでの韻察,特に初期変化究明が試みられているので紹介してみたい。また,我々もの棲能面での把握において,酵組織化学のもっ有用性は言う

過酸化を誘起するとされているアセトアミノフェンにっいて,に及ばサ',えば,四塩化炭素では小胞体の変化と相まってグルタチオン関酵棄の免疫化学的な鰻察を進めているの

glucose‑6‑phosphatase の減少が早期より起こることがで,その成綬もあわせて報告する。

実されている。前二者の肝を中心に,先人の追献の範囲内に過ぎないが,我々の知見をまじえて,主要な各指の変化を甍理してみたい。

S5

毒性変化と酵素組織化学安藤孝夫,宮嶌宏彰腎臓(武田薬品・中研)

1.始めK

毒性試験kおける酵素組織化学的検査の目的は,各種臓器忙おける酵素活性を組織化学的K検出し,その染色性の強さおよび局在托つ仇て毒性との関係を比較検討するととKある。

諸種薬剤の毒性試験Kお仇て,腎臓は最も毒性が起とbやすぃ臓器のひとつである。その原因は,腎臓が各種薬剤Kおける主要左代謝排池経路の1つであるとと,循環血液量が極めて豊富左とと,物質ある仇は電解質の吸収排池k関連して薬剤が腎実質内ある仏は尿細管の管腔内K蓄積しやす仇とと,尿濃縮能K関連して薬剤濃度が高立るととたどが考えられ,腎毒性発現
は腎臓の機能と構造k密接K関与してⅥる。腎臓は形
態学的忙は皮質と航質k分けられ,糸球体,尿細管,
間質組織から構成されて仏る。尿細管はさらK,近位尿細管(曲部と直部; SI, S.と S8 ),ヘンνの係蹄(細い部と大仏部),遠位尿細管,および集合管から構成さ

AOP活性は近位尿細管上皮で強く,光顕的kは穎粒状であるが,電顕的Kは活性はライソゾーム内部K認められる。近位尿細管は糸球体の位置からSb s.(曲部), S3(直部)の 3部位K分類され,ラットでは上皮細胞内のライソゾームの数は部位托よって異たbs,>
S.>S3 で,ACP活性の強さ S.>S.>S3 とよく対応して込る。セファロリジン左どセファロ系抗生物質は主として近位尿細管の曲部上皮のACP活性を増加させるがとれは薬剤が上皮細胞内K入力,ライソゾームK取b
込まれてへテロライソゾームを形成するととkよると考えられる。立た,ゲンタマイシンやカナマイシンのよう左マクロライド系抗生物質を投与すると,近位尿細管の曲部上皮内KACP活性が増加すそM とれは,細胞内K取込立れた抗生剤が細胞質内の膜障害をおとし障害された膜が,ライソゾーム内K取り込立れて,光顕的Kは好塩基性穎粒の沈着として認められ,電顕的
Kはミェリン像を示すライソゾームの増加として認めれ,吸収排池ある仇は尿濃縮機構k対応したそれぞれられる。

の特徴的衣細胞構造を備えて仏る。たとえぱ,同じ尿ALP活性は尿細管の中では近位尿細管の刷子縁K認められる。電顕的Kは活性は刷子縁の微蔽毛表面k認められる。近位尿細管以外の尿細管kはA上P活性が認細管上皮でも近位尿細管ではライソゾームとミトコン
ドリアが豊富であb,ヘンレ係蹄の太込部と遠位尿細管では基底陥入膜とミトコンドリフが豊富でライソゾームが少たく,それぞれ多様た細胞内小器管分布を示められ左仏ととから,近位尿細管の標的酵素としてし以上の尿細管あるいは上皮細胞の特徴を十分忙把握しばしば用仇られて仇る。薬剤が血中から糸球体を通過
し尿中K排池される場合,近位尿細管上皮の刷子縁は薬剤と直接的K接触し,影響をうける。水銀,ウラた上で評価するととが重要である。

ウムおよびカドミウム左どの重金属を投与したb,実2.腎臓kおける酵素組織化学

験的虚血Kお仏てもALP活性の低下が認められるが,とれらの変化は, V、ずれも刷子縁が障害を受けて剥躍'

現在では,腎臓K関する多くの酵素Kついて組織化消失した結果と考えられる。

している。従って腎臓の酵素組織化学検査K際しては学的検出方法が確立されている。本報告では,ライソ

SDH活性は近位および遠位尿細管上皮およびへン

ゾームの標的酵素として酸性ホスファターゼ(A吐d
Ph08P顛もase, ACP),刷子縁の標的酵素としてアルカ
リホスフプターゼ( A]ka].立ne phosphatase, A上P ),ν係蹄上行脚太仇部上皮K強Ⅵ活性が認められる。とれらの尿細管は仇ずれもミトコンドリフが豊富で好気的である。SDH活性の低下は尿細管上皮の変性'壊死

ミトコンドリアの標的酵素としてコハク酸脱水素酵素

K際して認められるが,とのようた場合,

トコンド(succinate dehydr08enese, SDH ),基底陥入膜の標

リアの呼吸障害あるいは酸化的りン酸化阻害があるも的酵素として K依存性ウワバイン感受性Pーニトロフのと考えられる。一般K,病変が巣状K発現するとエニノレホスファターセ、(K‑de声nden土.ouaわ日立n‑

SDH活性も巣状K消失し,正常部位との境界は明瞭とSensj̲土立Ve p‑11」.trophenyl phosphatese, K‑NPP

左る。

ase)およびその他の酵素Kつ込て概略を述べる。

K‑Nppase活性は遠位尿細管上皮お、よびへンν係蹄上行脚太い部上皮k強く認められる。電顕的kは活性は,基底陥入膜の細胞質側k認められる。とのK・
Nppese活性は反応液からKを除くと消失し, Na,

認められ72時間後で最高と左b,146時間後では抵ぽ正常K回復した。腎臓の割面では餓質外帯内層を中心として糧色の沈着物が投与3時間目よb明瞭K認め

Kーアデノシントリホスファターゼ(Na,K‑adenosinR‑られた。沈着物は葉酸の色調と類似しておb,葉酸,力riphosphetase, Na, K‑ATpase )の特異的β且害斉1」でその代謝物女たは両者の混在と考えられた。腎臓kおあるウワバインkよって抑制される。従って, K‑NPP

ける3時間後の未固定凍結切片の無染色標本や通常のase活性は N&,K‑ATpase反応系のK依存性の部分であHE標本の観察では,餓質外帯内層のへンレ係蹄上行脚るととが明らか忙されて仇る。クロールサイアザイドの太仇部k糧色結晶の著し仇沈着が認められ,髄質外帯内層および皮質の遠位尿細管k軽度から中等度の沈着が認められた。乳頭部では 24時間後か4コ1炎黄色の結およびフロセマイドのよう左利尿剤や葉酸を投与した

腎ではK・Nppase活性の低下が認められるが,本酵素活性の低下は基底陥入膜忙障害が生じた結果と老えられる0 現在のととろ組織化学的忙遠位尿細管およびへンレ上行脚太仏部上皮k特異性の高仇酵素活性の検出

法は少た仏が, K・Nppaseはとれら尿細管上皮忙最も特異性の高仏酵素の1つと考えられる。

晶が認められたが,とれは尿細管の上部で沈着した結晶が溶解ある仏は崩壊して乳頭部へ移動した結果と考えられた。仇ずれの部位Kお仏ても72時間では結晶は著しく減少し, 144時間では消失した。血液尿素窒素(Blood 11rea n北r0邑en, BUN)は経時的忙増加し,との他,小胞体の標的酵素としてグノレコース 6 ホス

72時間後を最高として下降し,144時間後では抵1まフプターゼ( Glucose ‑6 ‑ phosP11atase , G 6 Pase ),正常k回復した。とれらの変化は尿細管内結晶の出現やその程度とよく対応し,尿細管閉塞kよる尿素排池

コ'ノレジ装置の標的酵素としてチアミンピロホスファターゼ( 1hiami11e pyrophoS廷latase, Tppase )圭、よび
マイクロボディーの標的酵素としてカタラーゼ(C且力a1且鵠, ca)があb,それぞれの目的k応じた酵
素活性kつ仇て組織化学的k検索するととが必、要であの阻害忙由来すると考えられた。
以上の葉酸大量投与kよる腎尿細管の変化をK・
Nppase 活性を指標として酵素組織学的k観察した。

る。以上の概要を下表k要約した。

投与3時間後では, K‑Nppase活性の軽微た低下がみられ,24時間後では広範囲忙わたって著し仇低下が認められた。 72時間以降では腎尿細管の全域kわたっ

表1て経時的0てK・Nppase 活性の回復がみられ,基底陥入フツトの腎臓kおける酵素活性の強さと局在
尿細管の部位近位遠位へンν集合管

A C P

ライソゾーム

A L P

刷子縁

S D H

ミトコンドリア

K‑Nppase

基底陥ス膜

士

士

標的4器管尿細管尿細管大仇部彼質)
H

酵素

士

升+

州

什州

"士

‑ H

H

3.実験的閉塞腎とK‑Nppase活性の酵素組織化学
ビタミンB',類似化合物である葉酸の大量単回投与kよって閉塞腎が誘発される。葉酸の 250mg/5m13影重
炭酸水素ナトリウム,乃管を 8 10 週齢の雄Wlst8rラ
ツトの腹腔内k単回投与し,3,24,72 および144時

間後K腹大動脈から採血し,腎臓を採取した。剖検では腎臓の腫大・祖色,重量の増加が投与3時間後から膜や尿細管上皮の強仇再生が認められた。立た,K‑Nppase を生化学的k定量したととろ酵素組織化学的変化と抵ぽ同様左経時変化が得られた。しかし,生化学的検索では変化した尿細管の部位を特定するととはでき左仏。

酵素組織化学的検査は加 S北Ukおψナる酵素活性の変化を知るととkよって,毒性変化を機能の面から解析できる点で重要であると考える。

F344/SIC ラットにおける石灰沈着について

今井俊介,森本純司,清塚康彦,螺良義彦(奈良医大・2病理)

マウス,ラツト等の実験動物の臓器に自然発生した検索したラットにおいては,甲:伏腺,骨に臓器への石石灰沈着につしてはEaton,吉田らの報告があるが,灰化を起こすような所見は観察されなかった。また,
その報告伊」はわずかである。特に石灰沈着は病的変化上皮小体においては過形成を認めたものの,発生頻度の強いあらわれと考えられることより,体系だった研も低く,特に明らかな石灰沈着との相関はみられなか究は必要と思われる。
今回,我々はF344/SIC ラットを用L、て塩化ナトリ

イつ、0

石灰変性は壊死巣,酸欠乏状態さらに動脈硬イゆ寺のウムと塩化カリウムの2年間にわたる慢性毒性試験を代謝の低下した※H織ι、配,められるか,病理発生的には行なった。その際,各臓器にみられた石灰沈着の発生いずれも局所性あるいは,全身性のアルカローシスに頻度および,発生部位にっき観察し,病理学的検討をよっこ口,カルシウムが溶けよい・するものとー、̲,"'考えられてぃる。起生する要因としては,妊娠,出産行なったのでここに報告する。
動物は静岡実験動物農協より生後4週齢のF344 '゜"の発生成因については不明な点が多し、。いずれにして/SICラツトの雄300匹を購入し実験に供した。E請は,、""'

当大学の空調動物室で行なし,飼料と水道水を自由に、、̲ー摂取させた。

うに,石灰沈着の発生率とその臓器分布において,対投与は飼料混入にょった0 オリエンタル酵母K.Kの照群と実験群との間では有意な差はみられず,本実験
MF粉末飼料を基礎飼料として,表に示した如く実験にみられた石灰沈着は自然発生と考・られる。実験動群を構成して2年間の毒性実験を開始し九。

物における石灰沈着の自然発生についての系統だった動物はすべて屠殺後剖検し,臓器はすべて20%ホ報止例は少ない EatonらはC3H系マウスにっし、て,ルマリンで固定した。通常の如く,パラフィン切片を作また最近吉田らもC3H系マウスにおいて,肺臓が最も
製し,

ー、.モ,

トキシリンーエオジン染色( H,E染色),

コッサ染色を施した。

石灰沈着が多い臓器であること,また老齢経産マウス
ほど高率であると報告してし、る。ラットでは,経産ラ各臓器に観察された石灰沈着の発生頻度および発生ツトで腎臓,心臓,動脈壁の石灰沈着にっいて報告さ部位にっいては表に示した。まず1群の対照群から6 れてし、る。本実験にみられた石灰沈着の起こりゃすい

群のKCI+NaC1相乗群までいずれの群においても,臓器およびその分布の結果は,ほぽ文献に報口されて石灰沈着の発生頻度,部位においても差はみられず,いる結果と一致するものである0 たたヲ回の結果より

特に飼料混入による影はみられない。臓器別では,石'沈着の大部分のラツトは2年時の屠殺時のラツト
精巣,肺臓,腎臓,,D臓,脳,および動脈の順に石灰つ、小、,でっこ、、、をえと n によ老沈着は多くみられた。特に精巣と姉臓は高頻度である。゜

組織学的には精巣では大部分精細管上皮内である。肺ハ心゜
臓でば太い肺動脈壁での限局した石灰沈着が30%以C急τCifi● lesion5 i11 the oTE飢S of F344/SIC Tot5
fed KC1 驫11d/or Nacl上であった。また,肺胞内での骨形成(ossification),

1

3

18

14

4 5
5

2

2

1

0

4

3

3

1

6

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ー

6

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16

フ

50

2

ATtel},: twlica !1堤dia

50

1tubul.
aTte1γ..C丑Pi11aty.
'choroid ple刈5

50

50

0

あった。大動脈では中膜に石灰沈着がみられた。今回

丁e5tis

2キ
21

50

1

動脈壁にみられた。脳ではすべて毛細血管か脈絡膜でtubuleaTte1γ

VI

41

50

3

心臓でも同じく病巣は広範囲であり,心筋組織およびKidrleyV2

び尿細管上皮に著しく広範囲に石灰沈着がみられた。

HeaTt 凱γ叱ardi山1
arte1γ1ν413

つた場合に陽性と断定した。腎臓では,腎動脈壁およ

且Iveolar wa11

Um宮 日τte1γ

111
H

3

染色では暗赤色穎粒状であり, KOS訟反応では黒く染

11

0.2"

2

脈にも広範囲に石灰沈着がみられた。石灰沈着は,H.E

ContT012

さらに肺胞壁にそって線状に沈着したいわゆる病変の隅.
程度が高度な例も6%認められた。この際には,肺動山虹。貼.ヤ'.゜'

1

1

0

0

2

マウスにおけるメチルナフタレンによる肺の毒性について

0小西陽一,江見葉子,村田芳明,伝田阿由美,白岩和巳(奈良医大.がんセ'腫癌病理)
結

メチルナフタレンは,合成繊維の染色の時に染浴

果

脂質性肺炎の発生頻度とその様式に添加するキャリアーとして広く用いられている物質・である。メチルナフタレンは,0とβ一玲om町の混合実験一1における脂質性肺炎の発生頻度は,実験開始後61週にて第1群では0/14匹(0%),第 2 群体として使用されているが 0‑isomer である 1 ーメ
チルナフタレンは灯用石油による媒煙の一成分であるでは3/11匹(27%),第3群では31/32匹(97%)
ことも判明している。本実験の目的は,雌マウスの皮であった。実験開始後105週での頻度は,第 1群はにメチルナフタレンを塗布しその毒性にっいて検索 0/22匹(0%),第2群は16/16匹aoo%)で第3することにある。その結果,高率に内因性脂質性肺群のマウスは全て61週にて屠殺した。脂質性肺炎の炎の発生をみたので報告する。
材料と方法

発生様式を実験一1より検索すると,脂質性肺炎は
第1群ではいずれの時期に屠殺したヤウスの肺には動物は,体重209前後のB'C.E雌マウスを用いた。みられず,第2群では20週にて6/16匹(60%)で,メチルナフタレンは,実験一 1ではアセトン 1机ιに対30週以降では100%に発生し,第3群では5週にてして 5.97叫の混合液を,実験一1では 11.88叫の混合

2/5匹(40 %),20週以降では 100%であった。脂液を作製しバリカンにて剃毛したマウスの背部皮膚に質性肺炎が100%発生に要するメチルナフタレンの量
週2回の割合で局所塗布を行った。実験期間中は,週1回の割合で体重を測定し,屠殺は工ーテル麻酔下で行ない全臓器にっし、て病理組織学的に検索した。
実験一 1では,第1群は対照群でアセトンのみをと期間は,第2群ではマウス体重kg当たり7128叫で30週を要し,第3群では9504叫で20週を要した。
病理学的所見脂質性肺炎は,肉眼的に限局した灰白色の多発性塗布した群,第2と3群はそれぞれマウスの体重k9 結節として認められた。組織学的には,肺胞腔内に当たり59.7卿と H8.8叫のメチルナフタレンを塗布した群とした。マウスは61週と 105週で屠殺した。実多数の泡沫様細胞が蓄積され,この細胞の崩壊によるコレステリン結晶の析出がみられた。時には巨細験一1では,第1群は対照群でアセトンのみを塗布し胞の形成もみられた。これ"らの病変に近接して,代性と老えられる局所的肺胞拡張の像がみられた。
た群,第2 と3群はそれぞれマウスの体重kg当たり
Ⅱ8.8叫と237.6叫のメチノレナフタレンを塗布した群と電顕的には,飾胞1型細胞は損傷されず,1型細胞した。マウスは経時的に実験開始後 5,10,20,30,如の増殖か著しく,腫大した細胞質内にはラメラ封入と50週に屠殺した。
体が大型化し,増数していた。又,崩壊しつっある細胞からはラメラ封入体の肺胞腔への放出も見られ屠殺時には,マウスの全臓器を中性ホルマリンにた。
固定し,組織学的検索のための資料とした。電顕的生化学的所見観察のための肺は,実験一nの30週にて屠殺した動
中性脂質とりン脂質の分析よりメチルナフタレンを物より採取し,グルタル・アルデハイドで前固定を行塗布したマウスの肺では,トリグリセライドとコレ
い,その後オスミウム酸にて後固定を施した。資料は脱水ののち,エポキシ樹脂に包埋して超薄切片を作製L酢酸ウラニル飽和50%アルコール溶液及びレテノレの出現かみられた。又,レシチンの上昇も認め

イノルド鉛染色液による二重染色を施し,日立軌12られた。

透過型電顕にて観察した。

生化学的検索は,実験一1の50週で屠殺したマウスの肺を用いて行った。肺よりF乢側らの方法で総脂質を抽出し,中性脂肪とりン脂質について薄層クロマト
グラフィーで分析し九。

ステロールとの上昇がみられ,コレステロールエス

結ロロ

以上の結果よりB'C.F.系雌マウスにおけるメチル
ナフタレンの毒性は,この薬剤を皮膚へ塗布することにより脂質性肺炎として把握された。

3

Pa,aquat の毒性作用: m北Ochoodria ca+LATpa80 活性の阻害平井圭一,藤本和,伊野木清三,上田忠司,小川和朗(金沢医大.解音1」,*京大.医.解音ID〔目的〕

除草剤アa"oqua力(1,f‑ dimethyl‑4,イー bipyrf‑
dylium ; TQ)は肺及び他の器忙重篤衣急、性傷害を与え死k至らしめる。 PQの毒性作用機構忙つ仇ては, PQ frθθ radicalB の生成ととれ忙続く

24時間目頃kは1型細胞及び他の問質系細胞の変性が観察された。

肝細胞の傷害:PQ投与6時間後忙中心性k肝細胞Mtの変性が観察され,傷害されたMもの電顕組

8UP6roxide8 やhydtoxy radicalSの発生カミ生体

織化学的赤Cゞ'LATP舶e活性が低下した。形質膜
CゞトーATアa.e 活性は残存した。

内脂質の過酸化を引き起とすためと信じられて込る。

正常心筋及び肝の電顕組ヒ学的C'トーATP郎e

しかし 8Uperoxide di8mU土aBe (SOD)やCa力ala8e

活性:10皿M caaι,でM力忙強V、CゞトーATpa..活性カミの投与が実験動物や培養細胞のPQ毒性を何ら防ぎ検出され,同時k筋原線維,筋形質膜kも活性がみ得ず, inV北r0の小胞体脂質の過酸化反応をとれ

らの 8CavBn8●,が抑制した仏とと,OH.の8Cav.ngo,

られた。10mM PQの添加でMtの活性のみが特異的k阻害された。肝細胞で、同様であった。SODのである dim.もhylthi0吐θaはむしろアQ毒性を増大

添加はアQの作用忙影響し左かった。

するとと等が報告されておb,活性0.説のみでは

分籬心筋MものATpa.θ活性と Cゞトイオンの取りPQの毒性作用を説明でき左い。我々はモQ がラッ

込み:分離M力の CゞトーATア舶θ活性は PH9 10皿M

ト肺胞1型細胞や肝細胞を壊死させるとと,その初期km北Ochond,ia(Mt)が特異的忙破壊されるとCaC厶で最大活性を示し,1mM PQで強く阻害されたo oliEomycin は影響し赤かった。 M4'トーATアa8eとを見出した。本研究は, PQの標的がMt であ力,

活性はPH9 0J皿M M底0ι.で最大活性を示し,oli‑

特kMtのC'トーATpa舶活性を直接阻害する可能性

底omycin で阻害されたが, PQは何ら影春し友かっを報告する。

たO Mt 内への Cゞトイオンの取ク込みは lmM PQで強〔方法〕

く抑制された。込ったんMt内に取b込立れたCa升

肺の形態変化:SDラットの雄成獣の尾静脈から40叫/k9 の PQ ( 2 Cι塩; 1CI PI,C ,回nEland のイオンはA23187, CAMP で再びMt 外へ放出されたが, PQは影響し左かった。

提供)を 1回投与し,時間を追って肪を 81此釘・〔考察・結論〕

eldeh了'de (GA)‑0.0'‑u aCθ力aもe で 3 重固定し,超微形態の変化を電顕観察した。

最近アQがM力の酸化的力ん酸化反応を抑制し,肝の形態変化: wi8tar ラット k lo0刀誓/kgpQ を

NADH脱水素酵素活性忙影響を与えるとする報告がみられており,本研究から、PQが直接Mt忙作用す1回腹腔内投与し,肝細胞の超微形態の変化を電顕るととが示された。 CゞトーATpa8日活性の阻害のみで観察した。

電顕組織化学的Cざ、‑ATP郎.活性の検出: PON・

細胞死忙至るとは考え忙くいが,実験結果はE。艮kfのmald●hyde‑GA で短時間固定した肝及び心筋切対する毒性を示唆しておク, Mt機能の全体的左障
害が引き起とされるととが考えられ, PQ毒性作用

片kつ仇て C'ヒ・ATP..0 活性(10mM COCι.,3皿Mの重要左機構の可能性が推定される。(科学研究費

ATP ,2皿M pb‑citrate, PH 9.4 )を検出した。

59370037 の助成k よる。)

分離Mt の CゞトーATP08e, MξLATpa.θ活性の検出:
冊gし釘ラット心筋からMtを分離し,C'トイオンの取血i五み,ATPの分解を^法,DCアC法,りンモリフデン法で検出した。
(結果〕

踵上皮の傷害:PQ投与6時間後忙肺胞1型細胞のM力の膨化, Mt穎粒の消失がみられ,時間と共k

害は増強した018時間後忙胞体は壊死脱落した。

F344 ラットにおける食道拡張症
貞板敬三残留農薬研に発生し九。

1978年か'ク 1983年に門44うツトを用いて 2

Number of esopbagectasls

年間の慢性・発癌性試験を 12種類実施しナこと

each

In

10t of ani爪a15゛ころ,胃の噴門建壁を伴う食道拡張症が対照群を含む全用量群に発生し九。今回は本疾患

ABCDEFGHIJKの症状,剖検・組織所見を述ぺるとともに,発生時期と動物のロット間における発生頻度の差について報告する。動物は 4 週齢で購入し,室温24土 1'C .湿度55土 10%,照明14時
問に調節されたハ'りアー内で,金網床ケージに 5 匹飼育とし,粉末飼料による経餌投与を実施し允。水は給水ビンで与えた。症状は端部湿潤,鼻をクスクスいわゼる"鼻風邪"様症状で始まり,くしゃみと異常呼吸音を呈MaleFemale

フ/'78

0/17

0/25

10/'78

2/16

6/12

1/'79

2/13

3/19

8/'79

9/16

23/29

3/'80

1/15

11/21

4/'80

1/11

12/22

5/'80

6/15

フ/17

9/.80

2/10

14 /'20

3/,81

3/19

5/12

5/'81

5/19

フ/19

8/,81

1/ 4

3/14

10/'81

0/15

2/13

し九。 5・6週問後には大きなくしゃみとともに軟泥状の食塊を鼻より噴出し,ケージお二

よび動物室の床を汚した。この頃より動物はflfty aniTna15 0f both 5exe5 a110tted

゛゛

被毛粗造,ロ 頸部汚濁,赤色眼脂付着,下to eac" 10t at initiation of the 5セUdY(anlma15 Wlth esophagecta52.5)/{anlma15
found dead oT ki11ed in extτ巳mis duTlng

゛゛.
゛

腹部膨満を呈し体重滅少が顕著になるが,食Incldence官゛

Bitth
month

Lot
NO .

the study)

欲はむしろ亢進し昼間でも餌函に取り付いて

Pezcent incidence of esophagect己Sis
留

いるのがみられ允。胃ゾンデを挿人すると噴門部でとどまり,その後の侵人は完全に阻止

^.1.

忙

^ 1‑1.
伽され九。櫂病物と 2 週間同居させ九若齢動

闇物では肺炎をも九らす病原体の感染は証明さ舶れなかった。剖検では食道が箸しく拡張し,詩

内部に軟泥状の粉末飼料が充満していた。ま卸碑

た,肺には大小の無気肺巣が認められ,た。組.
'

織学的には化膿性炎症が肺,中耳および鼻腔に観察され允が,末梢神経および中枢神経に

'

C

.

電

,

'

昆

」

官

L

Age diS七τibution of e50phagectasis

は本疾患の症状に一致した病変はなかっ九。
山1.
^

雌ラソトでの発生は雄ラットに比し高かった。

^

9】、 1m

^

劇 肋

^

11 、
'】、

は對照群の雌ラットの 23/50例が本疾患で姥

'1 、

51

飢 如

死した。本涙患の大部分は70週齢以降の動物
12

^1.

^
.

^

..

性試験のそれぞれで異なってい九。最大例で肋M印関

本疾患の発生率は,今回検索し九 12の慢性毒101 ‑"05

食塩長期投与によるラット胃粘膜の病理粗織学的変化

0長谷川良平,古川文夫,豊田和弘,佐藤秀隆,高橋道人(国立衛試・病理)
疫学的研究により多の食塩摂取による胃癌の発生ど増幅される傾向にあった。
促進が指摘されていたが、最近、実験的に高濃度の食
3Hーチミジンによる標識率は、腺胃全体に上昇し、塩が2段階胃発癌のイニシエーションとプロモーショ正常の 1.4 6.フィ立に達していた,胃底腺領域では増ンの両段階において増酋もしくは促進的に作用するこ殖帯の増大と下方への移動が明らかであった。走査型とが明らかにされた。今回は、食塩の長期投与及び1 電顕では胃底腺.幽門腺領域を問わず表層の被覆細胞回経口投与によるラツト胃粘膜の変化を病理粗織学的の萎縮や鮒脱がび慢性に認められたが、粘膜固有層が検索を中心に種々の方法で検討した。
<実験方法>

露出するような著しい変化は見られなかった。透過型
電顕では、被細胞に多数の空胞やライソゾームの増

7週齢の納Sta「系雄ラツトを用い、食塩(Nacl)を大化、ミトコンドリアの腫大が認.められ、生理的な上10%の割り合いで飼料に混合し固形飼料として自由皮の脱落に比して食塩では変性.壊死が促進されていに摂取させた。投与開始後5,10,20,及び30 た。
週に5ないい0匹ずっを屠殺し、食道より10%緩 ODCの活性はΥN'NGの1回経口投与で上昇する

ホルマリン、冷アセトン、又は2%グルタールアルが、 1回の飽和食塩水投与によっても3 16時問でデヒドを注入して胃を固定した。胃は、前胃を含め、上昇を示し、早期に正常値に復帰した。同時忙測定し前壁、後壁、小側から十二指腸にかけて長軸方向にたD A合成も食塩投与によって増加した。 2.5%の沿って約10切片を切出しパラフィン包埋標本を作製食塩水11戒を経口投与すると、最表層のPAS陽性粘した。グルタールで固定した標本は、腺胃の胃体部と液層は融解し被上皮が露出することが詔.められた。
幽門腺部より走査型、透過型標本及び同時にパラフィ<考察>
ン包埋標本を作製した。パラフィン包埋標本は、通常食塩による胃の傷虫は腺胃全域に認められたが、他の病理粗織学的検索のほか、各種粘液染色、パラドキの粘膜傷宝物質と同様に前胃との境界で顕著で南った。
シカル'コンカナバリンA (conA)染色及びぺプシノ胃底腺領域では胃底腺の萎縮、副細胞及び増殖帯のーゲンアイソザイム1(P鯛)の免疫粗織化学を施行増大、腺禽上皮の増生がび慢性に認められ、幽門腺領した。一部の動物には、屠殺1時問前に 100μCvgの域での変化に比し著明であった。しかし走査電顕像やHーチミジンを腹腔内に投与し胃粘膜の標識率を検索した。

ODC活性、 DNA合成の所見は、腺胃全域に同程度の傷害が及ん'でいたことを示しており、病理組織学的

また、 5週齢F‑344系雄ラツトを用い、飽和食変化が幽門腺より胃底腺領域で著明で防ったのは、両塩水を1回経口投与して、胃粘膜におけるオルニチン領域問の粗織学的特性の違いによるものと考えられる。
脱炭酸酵素(OCD)の活性とDNA合成の変動にっいて検討した。
<結果>

全経過を通して胃内粘液の増がみられた。粗織学
的には5週においてすでに限局性のびらんと腺禽上皮
の増生が腺胃にび慢性に認められ、特に前胃との境界に沿って著明であった。粘液染色で、胃底腺領域にび
慢性に酸性粘液の増加が見られ、conA染色により副細胞の増生と胃底腺細胞の萎縮が顕著であった。このことはPg1染色により一層明らかで商った。この様な変化は、全経過を通して大差は見られなかったが、びらんを伴う腺禽上皮の増殖は、食塩の投与期間が長いほの病理形態学的研究
実験的海産毒.下痢性貝毒による 実験的中毒症の病理形態

6

寺尾清、伊藤恵美子(千葉大活性研)安元健(東北大農学部)
下痢性貝毒症は1979年東北大安元らによ

ホノレムアノレデヒドグルタールアルデヒド、 1%O S I
で二重固定し、エポキシ樹脂包埋後酢酸ウランクエン酸

つて報告され、ムラサキイガイを始めとした多くの類の二枚貝の摂食によって生ずる下痢症であって、我国を始め地中海沿岸諸国などに広鉛で染色し、日立H70O Hで検索した。

く発生している。その臨床症状は、下痢、吐き第 1実験(DTX‑1投与実験)投与群の小腸上皮

気、腹病、おう吐、脱力感などを主なものとしている。1980年安元らはこの中毒症の原因
毒素は、ムラサキイガイの餌となっている植物の超微形態変化は3期に分けることができる。第1性プランクトンDinophysis

fortii結果期(じゅう毛固有層内血管の透過性増大期)第 2 期(吸収上皮細胞の変性、壊死期)第 3期(じゅう毛
表面からの細胞群の剥雛、びらん、'よう形成期)でが産生することを明らかにした。さらに毒化ある。このうち 500 300 μ g/k g投与群では第ムラサキイガイの中腸腺から、原因物として1期が投与5分以内に、第2期は30分、第3期は1時

はポリエーテル脂肪酸誘導体である D inophys

問以内に全例に出現した。 200 100 μg/kgでは,t Ox in群 3 成分( DTX‑1 オカダ酸 DTX
3) とポリエーテルラクトンである P e c t e n o

第1期が 1時間、第 2 期が 3時間、第 3 期が 6時間以t o x i n群 2 成分( PTX I、 PTX 2)が分雛出現するだけで、第 3 期はみられなかった。

内に出現し允。 50μg/'kg群では第 1、 2 期が軽度に精製されている。今回われわれは、これら毒素

第 2 実験(P T X‑1 投与実) 1000 μ g/k gのうち DTX‑1とPTX‑1のマウスに対する影投与後2時間以内に 60%のマウスは死亡した。剖検にを検索した。

より肝のい腫張と赤色変化がみられた。組織学的に肝を除いた諸臓器には著変はみられなかった。肝の被

、ー

材料と方法
トキシン:

DTX‑1、および PTX‑1は毒化ムラ

膜下の肝細胞および小葉末しょう部の肝細胞には著しい

サキイガイの中腸腺から安元の方法によって分空胞変性があり、所によって空胞内に赤血球と線維素

離、精製された。

が充満してい九。電顕的にこれらの空胞はDisseく

実験動物:C3Hマウス、およびICRマウス

うならびに類洞と交通し、類洞壁を形成する内皮細胞の授乳マウス(平均体重 9.5 g )の透過性の異常なこう進のために、類洞内の血液成分

実方法:実験1、授乳マウス計60匹に、生理食塩水中に溶解したDTX‑1を腹くう内投与により、 500、 400、 300、 200、 100およが肝細胞内へ流入したことを示唆している。空胞内壁

び 50μg/kgを注射し、 5分の酸性ムコ多糖類の存在も、空胞がD isseくうを形成する肝細胞膜の反、を裏付ける所見である06時間の間に経

従来、下痢性貝毒の名のもとに一括して考えられ九

時的に屠殺した。なお、生理食塩水 0.1 m 1 を病変も、その毒性成分であるポリエーテル脂肪酸と、腹くう内に注射した 1 0 匹を対照群とした 0

ポリェーテルラクトンで各々異っ九病理組織像を示す

実験2、授乳マウス計30匹に生理食塩水に溶解したPTX‑1を同様腹くう内投与により1000、700、 500μg/kgを注射し、実 1と同様経時的に屠殺した。
形態学的検索:頸椎捻転により屠殺した動物は、直ちに解剖し、全内臆器を中性ホルマリンに固定し、主要臓器のパラフィン切片を作り、HE、 PAS、a2an Ma110ry染色を行った。
又、小腸、肝、胃などから小片を採取し 2%パラ

ことが明らかにな0た。

7

完全静脈栄養法によるラットのメチオニン欠乏時の病理学的変化

0栗栖和信、川口義郎、長根芳文、長沢孝二郎、川島裕造(大塚製薬工場研究開発部)
アミノ酸は栄養上極めて重要な物質であるが、Met‑Free群の特徴的な組織学的変化は、肝単一のアミノ酸欠乏による影響については、動物

臓および肺臓に認められた。すなわち肝臓では肝実験において純粋な欠乏飼料をつくることが困難

細胞の淡明化、腫大、脂肪化、核および核小体のであることから、その影響を明確にすることが極腫大であり、肺臓では腺房細胞の萎縮と核小体のめてむずかしいとされており、形態面からの報告

腫大であう九。肝細胞のグリコーゲンの蓄積によについても断片的である。一方、近年完全静脈栄る淡明化、腫大は 4日後で最も著明であり、 7日

養法(TPN法)の進歩により、栄養輸液のみで生後では軽減、 14日後ではほとんど認められなかっ体の維持向上に必要な栄養素の補給が可能となった。脂肪化は、 4日後では小脂肪滴が軽度かっびている。

まん性に認められ、 7日後では脂肪滴が大型化、演者らは、含硫アミノ酸欠乏時の影を検討す

増数し、びまん性ないし小葉中心性に認められ、る一環として、メチオニンを除いたアミノ酸輸液

14日後では更に高度となり小葉中心性に認めらを唯一の窒素源としたTPN法により検討し九のれた。核小体の腫大は、 4日後では軽度であり、で報告する。

フ、 14日後では核の腫大を伴ってより高度となった。一方、肆臓の腺房細胞は、 4、 7日後ではチ

材料と方法

モーゲン穎粒の減少を伴う軽度な萎縮と核小体の動物はウイスター系ラット(6週齢、雄)を、投腫大が認められ、 14日後では若干高度となった。

与輸液はVuj‑ N型処方からメチオニンを除いた回復試験では、 7日投与の場合肝細胞の軽度な脂アミノ酸輸液を含むT P N液(Met Free)を用肪化がみられ九のみであり、 14日投与では脂肪い、市販のVuj‑ N型処方のアミノ酸輪液から成化の明らかな減は認められないが、核および核

るTP N液(対照輸液)と比較検討しナニ。グルコ

小体の腫大は回復傾向を示しナこ。詳臓の腺房細胞

ス、電解質、ビタミン量は、両T P N液とも同一

は、回復試験によりいずれも回復した。

となるようにし九。投与は顕静脈より左前大静脈

本実験でみられた肝臓および肺臓の変化は、ア

起始部にカテーテルを留置し、マイクロチューブ

ミノ酸利用の低下に帰せられよう。すなわち、脂ポンプで持続投与した。投与カロリー量は250

肪肝は利用されるアミノ酸に対する相対的な力

Cal/kE/daγとし九。投与期間は、 4 、フ、 1 4

ロリーの過剰、また肝細胞からの脂質の搬出の低日とし、 1週問の回復試験として、フ、 1 4日の下により発現したものと考えられた。また、核小投与終了時に対照液に切り換えた。動物は投与

体の腫大は、他の必須アミノ酸欠乏でもみられておよび回復試験終了時に剖検し、組織学的検査、いることから必ずしも明らかではないが、 rR N

血液検査等にっいて実施した。

A前駆体のメチル化の低下とも考えられている。
メチオニン欠乏による肺臓の変化は、我々の知る結果と考察

対照液群に比べMet‑Free群では、体重が減少し窒素出納も負で推移したが、死亡はみられなかった。血清生化学的検査では、アルブミン、血糖、脂質の減少が特徴的であっ九。これらの変化はいづれも回復試験により回復した。

限りでは報告されていない。しかしアミノ酸利用の低下により影響を受け易いことは充分推察される。ま九核小体の腫大も肝臓と伺様のメカニズム
によるものと考えられた。

8

有機溶媒fudura1単回経口投与のラ*ト肝に及ぼす影響
清水昭男蟹沢成好(横浜市大・医・病理)

我々は先の第4回癌学会総会に於いて、 furfuralや2核肝細胞も散在性に見られ九。

長期経口投与によるラ"ト実験肝硬変症の生成

いずれの群にも線維化は無かった。

(中原ら、 1941年、 Gann)を追試、報告した0 生

考案: Fudural(C.H.OCHO)は淡黄色、揮発性

成した肝硬変においては帯状の壊死は前景に無く、の有機溶媒で、工業的な使用の他、日本酒などに含その生成過程はヒト肝硬変に類似したものと考えまれてぃる。長期投与によりラ"トに肝硬変を生じられた。

ることが知られ、我々も報告したが、その急性経口

今回我々は、fud山a1実験肝硬変の基礎病変を探る目的で、 fudura1単回経口投与の肝'に及ぼす形態

投与が肝にいかなる変化を生じるかについてはその学的変化を経時的に観察したので報告する。

報告,ま少な、゛。

今回furfura1単回経口投与において見られた特徴

験に供した。うち4匹.を実験開始時に対照として脱的変化は散在性の肝細胞壊死と再生像であり、これは四塩化炭素による帯状の壊死とは対照的であった0血屠殺した。ラット32匹に、蒸留水により100倍希

最も壊死の頻度が高いのは、投与後6時間と比較的早釈したfurfural(和光純薬、試薬特級)を50mg/Kg

期であり、以後時間の経過と共に再生が進行すると

体重、金属性経口胃ゾソデを用いて強制的に経口投考えられナこが、このことはfurfura1の代謝の速さを与し、投与後6,12,48時間後に、各8匹、ずつを脱血屠

示唆すると思われ、約2時間とされる生物学的半減期

材料と方法:6週例雄ウィスター系ラ"ト36匹を実殺した。屠殺後肝重量を測定、プアソ液にて固定しの短かさとも一致する所見であった。fudura1投与

た後、各葉より最大割面を含む1片を採取しパラフィ
ソ切片を作成した。切片は H.E.染色、及びアザソ・
マロリー染色にて光顕的に観察した。また屠殺時ににより各種の肝酵素系の増減をきたすことが報告さ
れてぃるが、標的細胞内小器官については未だ明かでは無い。電顕的検索を現在進めており、その結果

外側左葉の一部を電顕用として採取し、グルタールも合bせ報告する予定である。

固定、オスミウム酸後固定後、工飛ソ・フラルダイ
ト樹脂に包埋した。超薄切片はクェソ酸鉛、酢酸ウ.

写真1
H.E.染色、50仲

ラソの二重染色にて観察した。
結果:いずれの群に於いても肉眼的に肝および全身諸臓器に著変は見られなかった0

光顕的には投与各群で散在性に、好酸性肝細胞変性、壊死から Councilman小体形成に至る、単細胞

写真2
H.E.染色、50倍性の変性・壊死像が認められ(写真1)同時に同じ
く散在性の核分裂像の増加が見られた(写真2)。
両者共にその数は投与後6時間群で最も多く、12、見られた両者の1個体当たりの平均数を図Ⅱこ示す。

1
1
▲

?ι
1

'1

10

︑

●1●

局在は認められ無かった0投与後24、48時間群に於いては上記に加えて、分裂後の像と思われる小型でやや核の腫大した肝細胞〒 1一 1 '間による差は見られず、また各葉においても小葉中心部、周辺部、中間帯にほぼ同様の頻度でみられ、

0ーーー核分裂像▲20,ーいた。各群における無作為に抽出した強拡20視野にこれら好酸性変性・壊死像は各葉均等に分布し葉肝験性小体ーー'ーーー

図1

M如

24時間でやや減少し、48時問群では著明に減少して

6

12

24

Ⅱ

"OU伐

ブタ血清反復投与マウス胆管病変のα一naphthylisothiocy3nate

9( A N I T )処置kよる増強

0中山裕之1)・士井邦雄・本庄和人・前田尚久・土居千代.光岡灸促
農原公策1)(東大農・実験壷1物, D家畜病理)
臓器毒性を評価する場合,司斐忙は正常動吻が使用さかとの物質k相当して仇た。胆管周囲結合組織は増生しれるが,当該臓器の既存の病態がイ畔物質の処置姪よわ好酸球やプラズマ細胞の浸潤がみられた。とのよう衣胆どのよう忙修飾されるかを調べる必要も生ずる。今回は管の病変は大口径胆管でより強かった。肝実質kは変化
そのモデルとして,異種取1物血清投与忙よる胆管病変かは左かった。

胆管障害剤であるα一naphthy] isothiocyanate(ANIT)

週腹腔内投与( SS群), AN IT 30 mg/kgを週2A群(図3)では,胆管上皮の軽度過形成部がみられ,
大口径胆管のどく一部でSS群と同様の上皮細胞内好酸性滴状物がみられた。胆管周囲結合兆且織は増生し,りン
パ球'ブラズマ細胞左どの浸潤かみられた。電顕では胆管上皮細胞k著変はみられ左かった。肝実質忙は巣吠の回4週経口投与( A群),立たはプタ血清とAN ITの凝固壊死が散見された。

処置忙よってどのよう忙修飾されるかを検討した。
〔材料・方法〕 4週齢雄d d Yマウス( 21 22g )60匹を4群π分け,正常プタ血清0.1m1を週2回4両方を投与(SS十A群)した。残りの一群は無処置対

SS+A群(図4 )では, SS群と抵ぽ同様の病変が照(C群)とした0 投与終了後2日忙マウスを屠殺して,観祭されたが,その程度はSS群より強く,とくk胆血
体重,肝・牌重量を測定した。血清忙っいては総、コレス
テローノレ値を唄1」定し,肝を光顕および電顕で観祭した。
〔成績〕屠殺時の肝一体重比はSS+A群で吼鰭羊よb
やや増力口しており,牌一体重比はSS群とSS+A群で周囲結合組織の増生はSS群, A群のそれより顕著であつた。肝実質kはA群でみられた壊冱線が散見された。
〔考察〕ブタ血清反復投与kよる胆管病変はANITの併用忙よって増強された。との胆管病変は増生した周はC群の2倍であった0血清総コレステロール値は各群囲結合組織への好酸球浸潤kよって特徴づけられるととで差が左かった。

から,アレルギー性の組織破壊か考えられ,とれがAN

SS群の光顕観祭(図1)では,軽度 中程度の胆管IT投与kよわさら忙進行・する、のと思われた。上皮細上皮過形成がみられ,上皮細胞囚k滴状または針状の好胞の好酸性滴状物質はANIT単ぢ虫投与のマウス忙、み酸性物質っヲ乞清し,^βでは管腔内kもみられた。電顕(図2)では,均一物質を容れて著しく扣漲したRERられることから,胆管障害4糖象生じた二次的変化であると考えられた。

4〆

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図3
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図2

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10 ラット腎及び勝胱へのNa3NTA・H.0及び1弘NTAによる影響
北堀吉映,日浅義雄,小西登,下山丈人(奈良医大・一病理)勝胱発癌 Promoter である aKorbate, saccharin,

実験結果。‑ph印ylph印。1等はそれ単独よりもSodNm 塩の方 1.飼料並びに飲料水の摂取状況がより顕著に促進効果を示し,勝胱発癌P,omot町はNa.NTA・H.0, H.NTA共に2%投与群で飼料摂取

即d山m塩であることが重要な要素であることを示唆抑制がみられ同様に体重抑制も認められた0 飲のさせる報告がなされている。

摂取はNa3NTA・H.0の2%投与群で体重1009当り18.0

我々は既にNa.NTA.H.0が勝胱並びに腎の発癌に抗ι旧の摂で"し'口三'、‑2Pルmotion作用を有すことを報告している。
今回, NTAの釣diom塩並びに酸が腎並びに勝胱に及ぽす影について実験を行ったので報告する。
実験材料及び方法

^^^

2.尿検査

尿PH値についてはNゐNTA・H.0の2%及び1%投与
群で6週目より明らかな上昇が認められ9週時では各々 8.0 0.2 及び7.2士0.2 (対照群:6.4士0.3)であった。

1.試湘ト氏NTAを投与した群は各濃度共に対照群と比べやや低
Na.NTA・H.0: Trisodiom nithlotriacetate 値脚、は1司様な値を全期間を通じ示した。尿中電解質
monohydrate .

H3NTA : Nitrilot riacetic ac id .

いずれも半井化学K.K.から購入した。
2.実験方法の変動は, Na.NTA・H.0並びにH3NTA共にCa,C1 に投与濃度に比例し低下を示し,逆にZ0 の著明な増加が認められた。尿中N0のぢ脆増加はN..NTA・H.0投
与群のみ投与濃度に比例していた。
3. Autoradi0宮raphy

動物は静岡実験動物から購入した雄Wistar系ラツ
Na3NTA・H.0投与での勝胱上皮のlabeling index
ト36匹を用い, Na3NTA・H.0並びにH.NTAを各々 2ツ0,は1% 0.259般与群で増加し各々023,0.10,及び0.15

1%,0.5ψ。,0.25%,0.125%及び0 %含有食を各群 3 (対照群:0.03)であった。 H.NTA投与群では 2%投
匹ずっ9週間の投与を行った。飼育期間中は体重実験食及び飲料水の消費量を測定した。
3.尿検査

尿PH及び尿沈澄は3,6及び9週時のほぽ一定時間にぢ脆直後尿から検査した。更に9週時ιよ尿中Na,

K, CI, ca, R Mg及びZnを24時間蓄尿から定量を行った。
4.生化学的検査

全ての動物の血清中TP,NG, BUN,尿峻クレア
チニン, Na, K, CI, ca, P, Mg及びZnを検査した。
5. Autoradiography〔ma加1一泊〕山mM加0 を体重,当り1"C,を髄内投与し,2時間後屠殺し固定包埋後サクラNR‑M.
乳剤で3週間の感光後勝胱上皮について5000個ル火上をCount いabeling indeXを求めオこ06.腎並びに勝胱の病理組織学的検査

与群のみ増加し 024(対照群:0.04)であった。

4.腎並びに勝胱の病理組織学的所見
腎に及ぽす両者α凌化ιま翌こ近位^管上皮^の空胞
イk高濃度の一部ιこ空則ヒ石弁半なったhyperplasia力泳ら
れ hyperplasia は Simple hゆerplasia及ひ、adenom‑ato゛s hypeゆlasia に分類した。出現頻度はNa3NTA・H.0投与群で Simple hyperplasia力:2%,1%及び0.5%投与で各々 3/3,3/3 及び 1/3 にみられaden‑
Omatous hyperplasiaは2%投与のみに2心に認められた。 H.NTA投与でも同様にSimple hyperplasia

は2%,1%及び0.5%に出現し各々3/3,3/3及びレ3
であっオこ。 adenomatous hyperplasiaは2%投与群のみで3/3 にみられた。

要約と考察
腎並びに勝胱に及ぽすNTAのSodium塩及び酸の影
響差について検討した。
腎の組織変化は空胞変性を中心とした変化で両物
質n,号ιこき晝1包イヒ, simple hyperplasia及.びadnomatous

腎は左右各々 4分割」し K訂n0兆ky固定冷アセト hypuP1鉛ねの出現頻度に差は認められなかっナ、しかン固定,更にグルタール固定を行った0 同様に勝胱もし勝胱上皮のねbeli,蠣 iode"及び尿中PH上昇にはNa.
Karnowky並びにグルタール固定を行った。光顕的検 NTA・H.0とH.NTAの間に明らかな差が認められた。
索のための標本は通常H・E染色で,更に腎切片はG
GT染色も行った。

11

N‑meもhylnitrosoure3誘発の奇形性水小頭症ラット前頭葉の竃顕的翻察
゜相内聖峰,小林賢一,佐久間貞重(アップヅヨン.総合研)

核酸合成阻害剤であるN‑meThy1れitrosourea(MN山誘発の奇形性水小頭症ラット壯脳神経細.

るいは淡明化した基質が存在した。多くの神経突起の空隙kは星状膝細胞が介在して仇たが,胞の発達異常(第16回日本実験動物学会,1981,乏突起膨細胞と思われる細胞
第98回日本獣医学会,1984)のみ右らず,脈絡た。

叢,上衣,クモ膜等の脳脊倣液循環系k 、異常とれらの結果は,不完全え神経組織の構築を示す奇形性小頭症ラットkおいて,脳kキ、ける
他の炎症'変性疾病と同様k グリア系細胴の関与が大きL(ととを示唆して仏ると考えられた。

をきたすととは既k靴告した(第97回日本獣医学会,1984)。今回は前頭葉大脳皮質kつ込て
電顕的k観察し,併せて抗GFA蛋白および抗S‑
100蛋白抗体k よる免疫組織化学的検索を行ったので,その結果を報告ナる。
<材料と方法>5mg/k倉のMNUを Wlstar系妊娠13日目のラット
k単回腹腔内投与して得た水小頭症r13週齢および12週齢雄ラットを検索材料とした。 3兜グルタ
ルアルデヒ

ーハラホノレムアノレデヒ ドkよb湘流固定後採取した前頭葉大脳皮質を電顕
観繋用k ,女た,免疫組織化学的検索kは12週
齢のホルマリ'ン固定した同組織のパラフィン切
片立たは凍結切片多用いGlial fibri11ary
acidj.c protein (GFAP, rabbit 3nti‑ human

GFAP, orもh0社)と S‑10o pr0もein (rabbit
anti‑ hum3n s‑10o pr0もein, DAK0社) k つしへて検討した。
<結果>

3週齢の前頭葉大脳皮質では既k神経細胞数の減少および配列異常が認められた。神経細駒はクロマチンの減少した核および細駒質内小器官
k乏し仇細胞質から成って L(た。 Ne口ropilek は

淡明左基質を有する神経突起が散見された。12
週齢では,神経細胞および神経線維の薯しい減少.配列異常ととも k , GFAP柱たはS‑100蛋白
陽性を示ナ多くのグリア系細胞が認められた。
多くの神縫細駒kは核内クロマチンが不規則k分布してL(た。細胞内小器官は比較的良く発達してLハたが,細胞質内kはしぱい土短管状を呈した粗面小胞体が誌められた。 Ne口ropileでは神経突起の配列が単純化,且っ,疎と左 b,突起
内 k 1才多くの腫大・縮したミトコンドリ了,

不完全衣ツナプス小駒,電子密度の高仇物質あ12

聴覚障害モデルラット kおける病理変化と聴性誘発電位

0 阿部敏男,山本正樹,森島英喜,花安百合子,千葉祐広,宮嶌宏彰(武田薬品'中研)
k神経細胞の萎縮,神経周囲腔の拡大及び軽度左海綿目的

聴覚障害モデルとしては通常ある種の抗生物質左ど状態が認められた0 小脳では皮質穎粒細胞の核濃縮,
壊死及び脱落がみられたが,フ゜ノレキンエ細胞にはとくの化合物を投与したモノレモットがよく用仇られる0病理学的kは大脳や鯛牛たどの感覚細胞k変化がみら k変化は認められ衣かった0 口形体の蛤牛神経背側核
れ,中枢性や内耳性の障害が発現する。とのよう赤病及び腹働核忙は変化が認められず,蝿牛Kおいても基変発現部位と聴覚機能との関連を検索するととは聴覚定回転から頂回転k至るラセソ器の内'外有毛細胞並伝導系を知る上できわめて重要であるが,実験動物をびkラセン神経節k異常は認められ衣かった0 脊髄k
用仏たとの種の報告は殆んど無仇。そとで今回は,各はとくk変化は衣かった。中毒症状を示さ左仏動物で種毒性試験k汎用されてⅥるラットを用込て,有機水は,大脳k上記同様の変化がみられたが,小脳を含む
銀投与時kおける聴覚障害kつ仇て,関連諸臓器の病他の部位k異常は認められたかった0
理組織学的検索と無麻酔・無拘束時の聴性誘発電位の聴性誘発電位測定では,中毒症状のラットにお仏て測定を行込,障害部位の特定と両者の関連kつ仏て検 C即のN,波潜時の延長及びP. N振幅の低下傾向が認められ,大脳皮質聴覚領野の障害が示唆された0
一方, ABRの変化ではP.波港時の延長及び武 P.間

討した。
方法

JCI:岨Sも.rラット(雄:330 4208 )を用V、,塩隔の延長が認めら'れたが,鯛牛有毛細胞k由来するCM

化メチル水銀(MMC)2叫<g/day を15日間連日腹腔内波k異常の無いととから,鯛牛神経(ラセン神経節)かへ投与した。とれらの動物kは投薬開始約1週間前k,ら鯛牛神経核k至る経路の障害が示唆された0 中母症

頭頂部下縁Kネジ電極を埋め込み固定し,との電極を状を示さた込動物では,潜噌介して,無麻酔・無拘束状態下kおける聴性皮質誘発められた0電位(cortlcal evoked poten力lal:CEP )及び聴性脳考察

幹反↓む( audj.tory わra立れ Stem respon6e : ABR; CM,

各種の実験動物k有機水銀を投与すると大脳及び小已 P')を導出記録した。測定時kは,動物忙刺激音脳の皮質k病理変化が発現するととが知られて仏る0として持続 0.]mseCのクリック音(90dBP9SPI)を与今回の実験でも同様の変化が認められ,大脳皮質の変え,導出電位はシグナルフ゜ロセッサーkて, CEPは 100 化が早期k出現する傾向牝あった0 大脳皮質の障戸は回, ABRは150回同期加算し記録した。誘発電位の測同部位k由来する佃PK、明確k把えられ,両者は良定は投薬期間中は1週毎k計 2回,投薬期間終了後はく対応していた。モルモットでは鯛牛外有毛細胞の変同様に計3回実施した。休薬21日後k動物を剖検し,性及び鯛牛神経突起の障害が報告されて込るが, フツ

大脳,小脳,台形体,脊髄及び鍋牛を10影中性緩衝ホトの内耳k同様の変化は把えられ左かった0 とれは,
ノレマリン液k固定し,パラフィン包埋後薄切し, H・E,動物種kよって感又性k差があるためか,投薬期間がB。dian及びKユ̲込Ver‑BarNraの各染色を行い鏡検した短かかったととk起因すると考えられるが, ABRk変

対側の蝿牛kつⅥては,走査電子顕微鏡概察のため忙化がみられているととから,内耳kつ仇てはさらk詳
上記固定後,更K 2.5免グノレタールアノνデヒド及び 1 兜オ細左検索が必要と考えられる0 以上, MMC中毒ラツト
スミウム酸で固定し,型の如く標本作製し,金蒸着のの聴覚毒性では大脳皮質聴覚野及び鯛牛神経から同神
経核k至る経路の障害の関与が示唆された0 叉,今回実施した病理検索法と聴性誘発電位測定法の併用は実後k検索した。
、。果

MMC投与ラット12例中 7例忙は休薬 7 ]0日よb 験動物での聴覚毒性試験k有用た方法と考えられる0
運動失調,後肢交叉等の水銀中毒ラットk特徴的症状が認められた。病理組織学的検査では,中毒症状のラ
トkおいて大脳の聴覚領野を含む皮質第1層 Ⅲ層
ツ

‑20‑

13

ラットのGalactose 白内障の形態発生kつ仏て
0和田功,福島登美子,湊良雄,武下政一,岡庭梓(田辺製薬安全研)

ラット0てGalactose 投与忙よる実験的白内障を作

やや混濁を呈して仇た.組織学的k前面では上皮が成し,経時的忙肉眼および病理組織学的観察を行っ多層化Lた部位が多く認められた.赤道部では表層た.

部k位置する核帯の線維の膨化が認められ,後極方SIC‑wistar 系雄ラット(体重 50

80 タ) 60 匹

向忙向って核帯の線維がわずかk増殖して込た.浅を使用し,50 価 Galactose 混飼群および対照として層皮質は全域k亘って穎粒状忙崩壊し,空隙が目立

Galactose を添加し左仇普通粉末飼料( CRF‑1)

つた.皮質深層およぴ水晶体核の線維は正常像を呈給与群を設けた.水晶体の観察はMYDRIN旦Pで散して込た

瞳後,検眼鏡(ナイツ BX‑13)で行V、,水晶体の21日後:検眼鏡的忙褐色の犠造物は消失し,水晶撮影忙は眼底カメラ( KOWA, RC‑2)を用仇た

体中央部は白濁し,周辺部はやや混濁して込た.組

動物は投与開始後 3,フ,14,21,38 および 162日

織学的k前面の上皮の多層化が抵ぽ全城k亘って認

目忙各群5匹ずつ殺処分した.両側眼球は摘出後められた.赤道部では核帯の線維の膨化およぴ後極Davidson 液(エタノール 300 机ι,酢酸 100 机ι,10方向への線維の増殖が顕薯k認められた.全域の浅多中性緩衝ホルマリン液 200 畆,蒸留水 300机ι)k層皮質では線維の穎粒状崩壊k加えて,液化巣が認2週間浸潰固定後,常法k従ってパラフィン包埋し,められた.全域の深層皮質では著しく膨化した線維水晶体の前後極方向k切片を作成して, HE染色を

内k種々の大きさの穎粒が充満し始めた.水晶体核施して鏡検した.必要k応じて過ヨウ素酸シツフ法,

kお仇ては皮質深層と同様の病変が認められた.
..

MASSON染色GOMOR1変法およびアザン染色を38日後:検眼鏡的忙水晶体は全域忙亘って白濁し施して鏡検Lた.水晶体の検眼鏡的および病理組織

た.組織学的k後面浅層皮質は赤道部核帯と連衣る

学的所見の推移は以下の通bである

増殖Lた線維で占められていた.その他の浅層皮質

3日後:検眼鏡的k赤道部k治うて暗褐色の構造

では液化巣が広範囲k亘って認められた.
..

物が認められた.組織学的k赤道部浅層皮質では線162日後:検眼鏡的k水晶体は全域k亘ってスリ

維の膨化および空胞化衣らび忙線維間忙小空隣が認

ガラス様を呈した.前面では被膜の高度の肥厚たらめられたが,赤道部の表層k位置tる核帯の線維は

びk限局性の膨降が認められた.上皮細胞は一層と正常像を呈して込た.さらk前面および後面の浅層

左り,一部で消失が認められた.前面浅層皮質では皮質では線維の膨化が認められたが,後面ではその赤道部の核帯と連絡する線維の変性・壊死が認めら程度は軽度であった.

れた.後面浅層皮質では被膜忙接して認められる鳥●■

7日後:検眼鏡的k赤道部から前極方向kかけて

平左線維細胞を残Lて,線維の殆んどが変性・壊死

褐色のレース状雛造物の増幅が認められた.組織学

ある込は穎粒状化して込た.全域の皮質深層は液化

的k赤道部浅層皮質は変性した線維細胞,微細穎粒巣と化して恥た.との液化巣は水晶体核k女で達し

および空隙で占められたが,表層部忙位置tる核帯てし、た.

の線維は正常像を呈して仇た.前面では上皮の配列は不規則で,深層k向って限局的忙多層化し,とれらの上皮細胞内πは小空胞が認められた.前面の浅層皮質では線維の膨化は著しく左b,との様な膨化した線維が癒合し,塊状を呈して込た.後面浅層皮質では線維の膨化が目立ち,小空隙が後極付近忙立
で達Lて込た

14日後:検眼鏡的k褐色構造物は不明瞭と衣b,

イヌにおけるジンクピリチオン誘発網症について

14,U

0乾俊秀、久世博、田博、堀 正樹、岡庭梓(田辺製薬・安全性研究所)
ジンクピリチオン(ZPT)投与によりイヌ、ネコ等に病の眼底の反射光が減弱した状を示した。
ERGの波高の低下は、眼圧の低下にいて比較的早期より変が発現することはよく知られている。我々はピーグル犬を用いた藥物の毒性試験を日常務としており、々の眼検を実施してぃるが、いまだに眼に特異的に病変をおこす薬物に認められた。また、眼底の異常が検眼で確認し得なくとも、したことはない。近年、物の安全性を評価する上で感器高度な網病変を持っにおいても、後まで認められなかっ性が重視されてきてぃることもあり、ビーグル犬のZPT誘発眼病変をモデルとして、々の眼検査手技の検討を行った。現在までZPT眼性にして、眼底所見あるいは眼球の病理検所見の報告は見られるものの、気生理学的検から視神経

ERGの異常を示す例が見られた。ERG各波の潜時延長は、た。 VEPの変化は、 ERGの異常と同時期あるいは3週間程度経遇してから認められた。 VEPの異常もERGと同様で波の低下のみで潜時延長は認められなかった。
剖検時の肉眼的検では、視神経乳の上方、網の中央部

および脳の病理学的検索まで加えた総合的な報告は見られないに類円形の白濁、浮部が見られた。組学的検索において、

ので、モの概饗を報告する。

投与初期の変化は絡壁紙に限定され、壁紙の走行の乱れお方法:8 9力月齢の雄ビーグル犬を使用し、 ZPT 50%

よび壁紙細胞の膨化、色素上皮細胞の空形成といった変性性溶液を40 A8ノ由yの投与で週3回(3日問連続投与、 4日間休藥)の割合で3ないし9回経口投与した。投与と平行して、の変化であった。さらに病変が進むと、壁紙細胞の壊死.脱落

体、餌、行等の一般状の察のほか、眼検として一部外穎粒の崩壊が見られた。また、捍錐状体への著しい

前眼部査(対光反射を含む)、眼カメラによる題常ならびに炎症細胞潤および'出液の貯留により、網はしぱしぱ同部

蛍光眼底検、眼圧定、網図(ERG)および視誘発位(VEP)の気生理学的を実施した。剖検は、 3回投与例においても、脈絡壁紙を欠く部位の眼球内にはほとんど

後2およぴ21日、 6回投与後2日、 9回投与後7、 15およぴ21

異常は認められなかった。

日に、ペントバルピタール麻酔下で頭部を10%中性ホルマリン液で流固定した後実施し、眼球、視神経、脳を中心とした全投与終了後2週問以上経'した例および低投与で長期問投与した例では、脈絡壁紙の存在したと思われる部位で、壁紙身諸臓器の光顕的検索ならびに細護、視神経の電顕的検索を行

および

つた。

内と絡血板が疎な結合織により直接連していた。眼VEPの異常発現は日数を要したため、少数の物に10ないとともに薯しい好中球澗を示し、網誤にも捍錐状体および位で剥を示した。しかし、このに度な病変の認められたの捍鎧状体、外顎粒が消失し、残存した熊の底の光反射被少は、こういった状熊に陥った部位に見られるもし20 /kψ由y(週3 4回投与)の投与で2力月程度の経口のと思われた。このな部位では網験内の神経細胞も滅少し投与を行ない、 VEPおよぴERGの異常を確認した後剖検していると思われた。

9回以上の投与で、経過が1力月程度に及ぷ例では、視神経た。

結果:網病変の発現までに要した投与および病変の程度

およぴ視索の神経線維変性が認められた。これはVEPの異常
発現と時期的にほぽ一致するものであった。病変は、軸索の変には個体差が大きかったが、概ね次のに要約された。
限底検により、変化の速い例では3回投与で、網下に点性・脱落および髄鞘の肥・断裂で、視神経乳頭から外膝状状出血および液様物の貯留が認められた。この様な例では蛍光体にまで認められた。外状体の神経細には異常は認めら

色素を脈内投与し察すると、血外への蛍光色素の漏出おれず、網膜神経節細から出た神経線維が次の接合をするまよぴ色素留時間の延長が見られた。さらに投与を続行するとでの変化と思われた。ま九、網に病変の見られない例でも、網は剥し、孔径も広がった。病変の度な例では、網軽度ながら明らかに視神経の変性が認められた。

は完全に制し、光りを当てても孔はいたままで、歩行時以上の組変化の推移から、眼球内の病変は特異的にに物にぷっかるなどの異常が見られた。また、眼底の異常が気された脈絡壁紙の病変より波及したものと考えられ、壁紙のづかれるのとほぼ同時期に眼圧の低下が'められた。

発達部位にほぼ隈局されていた。 ERGおよびVEPの変化が投与を下げて長期投与した例では、網剥麟等の度な変潜時の延長ではなく振幅の滅少であるのも、網および視神経化に至らずに、軽度な点状出血、浮などが所を移して消の変化が限局性のものであることの現れであると思われた。し長を繰り返した。モの後、眼底の反射光が滅彊して黒っぽくな

かし一方、剖検時に網謨および脈に組学的異常が認めらり、脈絡股壁紙の障が窺われた。

れない例においても、軽度ながら視神経の変性が認められた。

投与量に関連なく、網が制したような例でも、投与を中止すると1 2週間で網下の出血およぴ浮腫が消失し、同このような例では、壁紙の度な病変から二次的に網膜の神経細胞がされたとは考え難いと思われた。

‑22‑

老齢F344ラットの自然発生腫癌

150花田宣,堺俊治,岡宮英明,三木寿雄(山之内製薬,安全性研究所)

我々は長期毒性試のべースラインデータを得る目的'消化器系,肝以外の腫癌は少なかった。肝では98 週

で,長期育したF344ラットについて病理学的検索を実令以降に Neoplastic nodule 及び, Hepatoce11U lar

施中である。今回は肉眼所見記録の明らかな雄 149 例,

Carcin0鵬が認められ,しかも雄に多い傾向を示した。

雌 139例を組織学的に検査し,観察された自然発生腫癌'泌尿器系、泌尿器の腫癌は少なかった。腎孟原発と考の主な類と経時的発生頻度について報告する。

えられた Transitiona l ce11 Carc inoma の 1 伊】では縢,肝,及び肺への広範な転移を示した。その他,135 週令

4'材料と方法,"にはNephroblastomaと,腎の問にほぽ漫性に拡がる

ラツト(F344/Du crDを5週令で入し,温度 23士2 て

Lip0伽touS 加mor がそれぞれ 1例みられた。勝胱の上湿度 55土10×(換気回数約16回/hr),室内灯の照明

皮系腫癌は認められなかったが,稀に勝胱壁のLeiomyo・

は8:00 から21:00 までの13時問のバリヤーシステムのSarcoma がみられた。

飼育墳のもとで金性ケージ内に2匹ずっ収容した。

'生殖器系,精巣の lnterstitial ce" tumor は最も放射線滅菌された固形 1料(CRF・1,日本チ十ールス.リ

発生率の高い腫癌であり,早いもので73週令,また135

バー株式会社)を自由に与え,紫外線滅菌装置を'過し

週令には100%の発生率を示した。これら癌の中には,た上水道水を自動給水装置より自由に摂取させた。

Semin0船乃至 Rete testiSを想起させるもみられた。

2回の予定剖として112週令と135週令の生存例及び雌では 83 週令からEnd師etrial stromal tumor が比較

途中死亡例と瀕死期殺例の全てのラットにっいて解剖的多くみられた。低頻度ながら Adenoma, Leiomy仙a,

し,病理組学的に検した。

Leiomyosarcoma,及びEndometrial stromal sarc0口a 等
カゞみられた。卵巣にはGranulosa cen tumor, cranulo.

<<(結果
担

)))

動物は雄147例(98.7X),雌117例(84.2%)であった。

Sa、theca ce11 加mor, serosal adenoma 等力ゞみられた。
また,の 1例では,卵由来が考えられるGranulosa
CeΠ加morと思われる腫が,腹内でも特に卵巣周辺'皮膚及び乳腺,では雄に比較して自然発生皮膚腫癌部を中心として洲性の癌塊を形成しており,肺と右は少ないようであった。皮下では Fibroma, Lip0船及心室内に転移巣がみられた。 preputiavclitora1 81andび組球性が目立った.乳腺の癌は71週令から

adenoma は雌雄にほぽ同数みられた。

Fibroaden0閲aが多く発生した。 Adenocarcinoma はH3週

'内分泌系、内分泌癌の中では下垂体前葉癌が令以降にみられた。

も発生頻度が高く,フ7週令以降にみられ,炊いで副腎'造血器系,F344ラツトに多く発生するといわれる造血腫癌,甲状腺C細胞,そして縢ラ氏癌等が漸次器癌が発生した。 Ly即ho a/Leuk即iaとしてまとめた白増加する傾向を示した。加えて,低頻度ながら,副腎の血病性癌の中には, Mononuclear cen leukemja, Lym・

Gan81ioneuroma,甲状腺池胞上皮腫癌などがみられた。

Phatic leuke四ia, Hyeloid leukemia 及び Nali8nant'中枢神経系,発生率は低いが, clioma, Neuroblast・

Iy叩hoa 等が含まれている。早いものでは,71 週令かOma,及び Granular ce" tunor 力工みられた。

らその発生がみられた。

'その他,雄では腹腔内に拡がるNesolheli0船が比較'運動器系,下顎骨と椎骨にOste0訟rcoma,大腿部には的多くみられた。またの 1例では,原発染の不明な頸

分類不能な肉(synovial ce11 Sarco a?)が発生し骨組部の悪性癌がみられ Gan81ionceΠ由来がわれた。

の破を伴っていた。

'呼吸器系,肺の原発腫癌の発生率は低かったが,Ⅱ2週令以降に Alveolar/bronchiolar carcinoma がみられた。
また原発の不明な Chord伽a の肺転移を4例でみた。

碣部には, osteosarcoma及び, Hemangiosarc0田a 等力1
みられた。

16

ラヅトにおける N‑nihosobis ( 2‑hydroxypropyl) amine ( BHP)関連物質の1気腔内1回投与による発癌性の比較検討。横瀬喜彦,牧野剛緒,伝田阿由美,高橋精一,小西陽一(奈良医大'がんセ ・腫癌病理)において 0/12(0%),1/11(9%),4/9("%)の近年,肺癌は増加の傾向を示し,中でも非喫煙者に多い末梢型腺癌発生の要因に関する研究の必要頻度であった。細気管枝一肺胞領域では腺腫と主に性は提唱されている。 BHPはbiS及びtris(2・hyd一腺癌の発生かみられた。腺癌はBHP, MHP, BOP,
r。xyP如Pyl)amineより人工的に生成されるもので, HPOPそれぞれの低及び高濃度投与群において4/10(如ツ。),フ/10(70%); 0/9(0%),4/9("%);
ラットの肺に高率に腺癌を発生せしめる。 b玲及びtris (2‑hyd羚Xypropyl) amine は,ゴム,洗剤,写 1/10(10%),10/10(100%); 5/10(50%),3/

真乳剤及び化粧品等の製造過程で広く使用されてしる。 6(50%)の頻度で発生した。 NDN岱1の低,中及び高濃度投与群ではそれぞれ0/12(0%),2/Ⅱ(18BHP はラットの生体内でN‑nit,osomethyl(2‑hyd‑の。),2/9(22%)の頻度で発生した。腺癌につしてroxypropyl ) amine (MHP ), N‑nitrosobis (2‑O×ー
Opropyl)amine(BOP), N‑nihoso(2‑hydroxypro'、はBHP, MHP, BOP, HPOPそれぞれの低及び高濃Pyl)(2‑O×opropyl) amine (HPOP),及びN‑nit‑度投与群において 3/10(30の0),8/10(80%);1/
roso‑2,6‑dimethylmorphoHne(NDMM)に代謝さ9( 11ツ。),3/9 ( 30%); 0/0( 0 の、0),0/0( 0%);れることは知られている。今回,我々は主として肺2/10(20%),2/6(33の0)の頻度で発生した。 ND
MMでは高濃度投与群においてのみ1/9(11%)のを中心にBHP及びその関連物質の発癌性にっいて比較検討したので報告する。
頻度で認、められた。腺肩平上皮癌はBHPの低及び高動物は6週令のWiS始r系雄ラットを用い,それぞ濃度投与群とNⅡ{P及びNDMMの高濃度投与群とHP
OPの低濃度投与群に発生がみられ,その頻度はそれ
ぞれ 1/10( 10 %),4/10(40 の0); 1/9( 11%); 1
3000叫, MHPでは44.6及び89.2昭, BOPでは53.4 /9(U%);1/10(10%)であった。肩平上皮癌は及び 106.8叫, HPOPて.は 212:1及び424叫, NDNNでMHP低濃度投与群とHPOP低濃度投与群にて発生がみられ,その頻度は 1/9(11%),1/10(10%)では110.4,220.8及び441.6叩とした。各物質は生理食れの物質に対し, 1群のラットの匹数は,10 12 匹とした。投与量は体重kg当り, BHPでは 1000 及び塩水に溶解せしめ,ラットの腹腔内へ1回投与した0 あった。
対照群には生理食塩水のみを投与した。動物は処置
肺以外の臓器では甲状腺に腫傷の発生がみられた0
後55週目に屠殺解剖し, Hematoxylin‑Eosin染色
BHP, NⅡIP, BOP, HPOPそれぞれの低及び高濃度標本にて腫傷発生を検索した。姉にっいては,肺全投与群における発生頻度は7/10(70%),10/10
体を5脚巾に切り出し,それぞれにっいて標本作製をして検索した。

最終動物匹数は,各群とも6 12匹であった0 最
終体重は各群とも対照群に比べ有意に減少しており,中でもHPOPの低及び高濃度投与群はBHPの低及び高濃度投与群に比べ,各々有意な減少を示していた0( 100 %); 3/9( 30 の0),6/9( 67の、0); 3/10(30%),
6/10(60%); 8/10(80ツ0),5/6(83%)であった0
NDNNの低,中及.び高濃度投与群におし、てはそれぞれ 1/12(8%),1/11(9%),1/9(11%)の頻度で腫傷発生がみられ九。

以上の結果より, BHP及びその関連物はラツトの肺重量では, NDMMの低濃度投与群を除いて,各群腹腔内へ1回投与することにより,投与濃度に依存
とも対照群に比べ有意に増加していたが,各物質間で比較してみると差は認めなかった0
肪での腫傷発生頻度は,対照群では0%であった0

した腫傷発生を起こし,又, L、ずれも肺を第 1に,次いで甲状腺を標的とすることが判明した0各物質投与君羊てU)^はBHP, MHP, BOP, HPOP それぞれの低及び高濃度投与群において6/10(60の0),9/10(90 %); 2/9(22 %),6/9( 67 ψ0); 1/10
(10 %),10/10 ao0の0); 5/10(50 %),3/6 (50%)であっナこ。 NDNNでは低,中及び高濃度投与群
‑24‑

17

N‑Ethyl、N‑nitル釦山舶新生仔期 1 回投与により誘発される腫癌の動物種差及び系統差にっいて

内藤正志,0伊藤明弘(広大原医研癌)〔はじめに〕

N‑mh0釣山伽( ENU )は新生仔期のラットに 1

糸且^雪旦は互t伊」 alve010genic adenoma てキあっナこ力ξ
1例は胸腔内転移を認めた。悪性りンパ腫が約20%の動物に認められたが,これらの多く回投与することにより,高率に神経系の腫傷が誘発されることが知られていろ。一方ENUは胸腺原発である thymio lymphom.であった。
神経系の腫癌発生は低頻度(約10%)で,組

トロソウレア系の発癌剤である N‑.tbyl‑

を新生存期のマウス及びMO"goli卸 g町bⅡ(ジャ織型は中枢神経系では。1i。d印d如 li。m.末梢神ビル)に投与した時は標的臓器が異なり,経系は OMP1貼tk 此hw。即。m.の像をハした。

より多彩な腫癌か誘発きれる。今回これら
ENU誘発腫癌の動物の種差及び系統差による発生頻度,組織型の差にっいて報告すろ0(実験方法〕

Wi■t訂/F山th(WF)系, Loog ‑E松鵬( L E )系,
及び Fi託ha (F344)系の各ラット, A/H。系マ

他に雄マウスでは肝腫癌が約50%の動物に認められ,その組織像は hype叩lastic nodule であった。
ビル③ジャービルにおけろ腫癌発生:ジャにおいても神経系腫癌が発生したか,これらは主に中枢神経系の腫癌で組織型は 01地。d印d‑ウス及び非近交系のジャービルの各新生仔に, m li。m.の像を示し,発生頻度は31%あっ
40御/加体重の ENUを背部皮下に 1 回のみ投
与し,ラットは6力月間,マウス及びジャた。皮ふの黒色の腫癌が四肢,'口周囲に認められ,その発生頻度は22%,組織型は m。1印。

ビルは 1年間観察し, 10%ホルマリンで濯流 m。であった。下顎の腫癌も6 %の動物ミ
固定後,全身解剖を行い,腫癌発生部位及びれたが,その組織像は。m。1。1郎。m。つこ。

主要臓器の組織学的検索を行った。

腎腫癌が 6 %の動物で認められたが,その組〔結果〕

織像は hom.giom.であった。

①ラットにおける腫冴発生:ラ,トにおいて〔結は,神経系の腫癌が多発し,その頻度は各系

UlthMte carcinogen であり,酵素系を'Z、要と語

において 97 %以上であった0 中枢神経系の腫せす全身のDNAと結△し発癌性を尓すと考、
癌は各系のラットで同様に高率で,脳腫癌はられるENU を,新生仔期に 1 回投与しこ時,
82%以上であった0 脳腫癌の組織型はoligod印d一腫癌発生の頻度には系統差があり,標的臓器

m三liom.が主体で, m辻od gliomo,及び 0始P1おーには種差が認められた。発癌実験こ際し,
tio gli0噂も認められた0 末梢神経系の腫癌発物種差,系統差の選択が重要であることを入生頻度は系統差が認められ, LE系は高感受性すと同時に,この差の原因を究明すろこ.
(89 %), WF及びF3"系ラットは低感受性

発癌機序の解明の手掛りになると考えられる(22 %と 21 %)であった。これらの腫癌の組織
型はほぽ全例 aoaplastic Khwaonomaであった。
次に発生頻度が高いのは腎腫癌で,その発生頻度は 0 % 16%であった。組織型はm郎釦一
Chymal tulnor力ゞ多く, n即11roblastoma 力ゞ少数認
められた。

②A

He マウスにおける腫癌発生:ENU投与

により高頻度に発生したのは肺腫癌であった。
その頻度は 82.6 %以上で,全肪野に多発し,1個体あたり8 個以上の腫癌が認められた。

0

18

ハムスターにおけるタバ'コ煙の2肋月t尉生吸入諸生・発畜性に対するビタミンC投与の効果
0原田孝則・』U罫1」明・榎朴大子・真板敬三 白須泰彦磯留農薬研)雄のゴールデンハムスターに1日2回,30本分のタハ'コ煙を4勿数力匂勢重群において有意に1勣口した。しかし.認められナこ腫

Hambur8 Π型 Smoklng "achlneを用い 104湾剖(24力月)にわ

傷の大音畍は良1甥動高(ポリープ,孚恒団重)であり,癌の発現たり暴露すると共に,ビタミンCを1%の割合で混餌投与し,は3 フ%の低率であった。一方,ビタミンC投与群では,

タパ'コ煙のt尉生吸入調生・発喜性に対するビタミンC投与の効

1僻舗莫の炎症および上皮過升ラ成.肺胞マクーフブージの1曽加お果を稠査し九。

よび細気管支上皮の腺キ満断,成の発生頻度力哨意に掘歸11された。

^において,食餌肋率の低下を伴う体重1曽胴聯11力認め以上の様に,タパ'コ煙をハムスターに24力月にわ九る長婿剖

られ九が,ビタミソC投与の効果はなかった。死亡率には凹重

暴露し九結果,剣空,噛貝および肺に喫煙に起因する種々の非の,は特に認められなかったが,ビタミンC投与群の死亡率

1動高1生病変カモ惹起されること力伴1朔した。特に, U廊ヨでは士波はその他の群に比ぺ低い傾向を示した。病僻旦舘洋的には,タ過形成に加えポリープおよび鞭弸重などの1重傷1制丙変力趣〒発し,バコ煙暴露に起因する種々の病変力中勢亜群の呼吸器彩旦織に認担瓏凱重傷弱勧の発生頻度は23 33%に達しナこ。しかし,癌のられ特に上部気道(鋼主喉頭)に好発しナこ。では鼻炎,

発現は3 フ%の低率であった。一方,ビタミソCは嘘葬に起U抵瓣胡奏の扇平上皮イ畦および上皮過牙3成,り献では喉頭炎

因するの炎症および上皮過升,成,肺胞マクロフ丁ージの増粘膜のj脚,肩平上皮イ歴主角化亢進お'よび上皮過形成,肺で加および細気管支上皮の腺様過形成に対し扣削勵果を示すこと

はマクロフ丁ージの1勣口および細気管支上皮の1泉様過升ラ成力幅が示唆されナこ。しかし,1重傷1生病変の発現に対しては1眺1助果

頻度にを賤されナこ。1重傷1幽丙変では,空および欄貝に喫煙にι詩与られなかっナこ。

より生じ九と考えられ闘動高の発住力電忍めら松担晦期瑚動

‑26‑

19

フツ

ト前胃腫傷の形熊学的研究

0玉野静光,福島昭治,増井恒夫. 柴田雅朗,伊東信行(名市大・医・一病)

前胃の自然発生腫傷はラット、マウス等では極めて稀であるが、化学物質による前胃腫癌誘BHA, MNNG およびH削投与で肩平上皮癌が誘発された。また、 HNNG投与の 1 例に平滑筋肉腫を発の報告は多い。そこで今回、前胃に発癌性を観察した。いずれの化学物質投与で観察された示す代表的な化学発癌物質である洲NG,"則お

腫傷も、組織学的形態はほぽ類似していた。すよび4・胆0 による前胃細胞のほか、我々が最近なわち、乳頭腫では著明な角化を伴った萩細胞

酸化防止剤の開A により誘発したラット前胃腫層の乳頭状増殖と基底細胞層の増殖を認め、肩傷の形態学的特徴を比較検討した。

平上皮癌では核異型と分裂像を伴い、粘膜筋板

ラット前胃の腫傷をTable 1 に示した方法でを越えて崇膜まで浸潤増殖し、癌真珠の形成を誘発した。すなわち、 BHA では胎44 ラットを用認める高分化型肩平上皮癌の形態を示してぃた。

いて、箆濃度の固型飼料を104週間与え、 112週

また、癌細胞が角化を形成せず、一定の構造をまで観察した。"NNGでは、 wistar系またはF344

作ることなく、漫性に増殖した未分化型の肩系ラットにそれぞれ250 または 150m8/kE b.W.

平上皮癌も認められた。更にBHA 投与で誘発さを 1 回、強制経口投与し、認週問観察した。

れた腫傷では、腫傷の一部において肩平上皮の粘膜下から筋層への陥入がしばしぱ観察された。

NNU では、門44系ラットに20M8/kg b.".を週 2回、 4 週間腹腔内投与し、以後36週まで観察し

この他、いずれの化学物質投与によっても、肩た。 4・NQ0 では、 20%エタノール水溶液で0.1%平上皮の上皮過形成が認められた。

とし、その l m1を週 1 回、 20週問Wistar系ラッさらに、 BHA のラット前胃癌発生について用トに強制経口投与し、以後40週まで観察した。

量依存性の有無を検討した結果、腫傷の発竺に

謡歯類の胃は食道から引き続く前胃部と十二明らかな用量効果が観察されるとともに、上皮

指腸に続く腺胃部とが、前胃粘膜の隆起によっの過形成、乳頭腫を経て肩平上皮癌が発生するて形成され九境界縁Hmitiog rid3eで明瞭に区過程が確認された。

分されている。前胃粘膜は口腔や食道と同一のTabl e l Material s and method s

組織構造を示し、上皮は軽度に角化している。

Dose
IeYe]

BHA

21

4・NQO 0.1×,
I m l / ra t

前胃全体が腫傷性に肥厚している例や漫性にP

20mg/kg.ー150mg/kg

MNU

9

MNNG

■1

潰傷の形成を伴った例も時に認められる。更に、250mgノ如

diet

1

3

呈した求リープ状腫傷が大半を占めるが、癌性

MNNG

In

g

2

無茎の涜状、カリフラワ一状あるいは繊毛状を4噴門部に近い H"itin8 rid8e近縁が大多数で、

Admiηistration
Rout

9

ObserYation

Duratlon

Per'iod(wks)

104 Wks

1 12

2 2 6
5 5 3

Test
CheTn.

1

2% BHA投与でみられた前胃腫傷の発生部位は、

Expt$ingleSingletwlce aWeek for
4 Wks

40

Once aWeek for20 wks

大小のポリーフ'状腫傷を認めることもある。
削NG投与の前胃腫傷は'漫性で特に好発部位はTable 2 Neoplast,c lesions in 十orestomach
Exptて乳頭腫と肩平上皮癌を、非上皮性腫傷として平滑筋肉腫を認め、その頻度をTable 2 に示した。全ての化学物質で高頻度に乳頭腫が発生し、

18(34

13( 59.の2( 93

18 F34410( 55.6)2(114

34 F344

18 Wlst己r20( 58.8)
14 7フ.8

3( 8

5

0

0

1 ( 4 5)0

組織学的観察の結果、前胃の上皮性腫傷とし52(10の

22 W15tar

0

た腫傷はHNNG投与の場合と類似していた。

52 F34420

して成育している。"刈や4・NQ0 投与で発生しNO . of forestom己C h l es i0ηSιeiomyo、
SCC

Papi110maのの"幻状あるいはカリフラワ一状の灰白色ポリープとE千十ective
NO. of rat5

1

無く、大小様々の大きさで、有茎、無茎の乳頭

己Metastasis to the re9,0ηa1 1ymph node(2 rats)

20

市販BHA (2、t、BHA,3、t"BHAの混合物),2・t・BHA,3・t・BHAおよびBHT投与によるハムスター前胃初期病変の比較

0宮田幸忠、,広瀬雅雄,増田あっ子,小木曽正,伊東信行(名市大'医'一病)
目的:抗酸化剤である butylated hydroxy・
anlsole (BHA)は2・tert・isomer (2・t・BHA)と基底膜、 HOH 力く0.01,0,1.12,0.56,0.17,
0.44C"でSeH が 4 週目に初めて0.16師の範囲に

3、tert、isomer (3・BHA)の混合物であ町、ラッ,忍められたのに対し、 3・t・BHA 群では"iH がト、ハムスターの前胃に発癌性を示すことが知

0.82,0.67,5.25,3.40,1.31,1.32Cm、"OHられている。本実験では2・t・BHA,3・t・BHAおよ

力く0,0,1.58,2.44,3.44,3.63Cm、 seH 力く0,

び市販の Cr,de BHA をハムスターに投与し、前 0,0.30,1.95,2.79,3,55、 PLが 3,4 週目
胃に対する作用の比較検討を行うとともに、前にそれぞれ0.22,0.31C,,,、 cr"de BHA 群では胃に発墜し九初期病変を詳細に検討した。また
フツ ト、マウス前胃に発癌性を示さないbuty・

HiH 力く0,0.28,1.14,3.15,3.12,2.91、 seH

カ{0,0,0.08,3.97, 1.66,5.10、 PL力く 4 週

Iated hydroxyt01"ene (BHT)のハムスター前胃目0.14と、 3、t BHA およびCrude BHA力く2・t・BHAに対する作用とも比較検討した。

よりはるかに強い変化を示した。なお対照群は実方法.7 週令雄Syrian Golde"ハムスタ"1H 力{0.12,0.56,0.15,0.13,0.12,0.03でに Cr"de BHA (和光純薬; 98 %以上3・t・BHA,"OHが0,0,0.06,0.07,0.03,0.03であり、1 %以下2、t、BHA を含む)、 2、t、朋A (住友化学; BHT 群ではHIH が対照群よりやや高値を示すの
純度> 99.9 %)、 3・t・BHA (住友化学;純度>みであった。 hyperplasia には著しい角化と、99.9 %)、および BHT (和光純薬;純度> 98 %)角化物内、粘膜内、粘膜下に著しい好中球を主をそれぞれ 1 %の1 度でオリェンタルM F 粉末体とした炎症性細胞汝潤がみられ、初期には上基礎飼料に混じて投与した。投与後1,3,フ,皮の脱落も多く観察された。オートラジオグラ
14,21,28日目に各群 3 匹ずっ0.1"ci/10oe b"ムを用いた前胃基底細胞核の標識率は2・t・BHAの.H、th"idlneを腹腔内投与し、投与後 1時問

では 1,3,フ,14,21,28日目それぞれ13,で屠殺剖検し、前胃を組織学的ならびにオート

16,25,23,20,18であるのに対し、 3・t・BHA

ラジオグラムを用いて検討した。前胃の病変のでは16,21,34,22,22,29、 crude BHA では

解析にはオリンパスー池上通信社製のC010r

18,24,29,31,20,27で対照群では13,22,

Video lm3ge processor を用いた 0

19,14,17,15、肌T群では 7日目以降17,15,

結果:肉眼的に2、t・肌A および3・t・BHA 群には

19,14で3、t・BHA, crude BHAで高く、 2・t・BHA

厚い苔状の物質の付着をともなった前胃粘膜のがやや低く、 BHT では対照群レベルで組織像を肥厚が 1 週目以降、 crude BHA 群では 3日目以裏付ける結果が得られ九 0
降に小蛮側、食道付近の腺胃境界部を中心とし采吉 1合て認められたが、その変化は3・t・BHA. crode

1. BHA をハムスターに投与すると極めて早期

BHA 群の方が2、t、肌A 群よりはるかに著しく、から炎症反応や上皮の障害をともなったhyper・
BHT 群ではこの様な変化は全く認められなかっ

Plasiaが出現する。

た。組織学的に前胃に発生した変化をhyper・

2. BHA 投与早期からみられる炎症反応や上皮PlaslaとPapiHomato"s lesion (PD に分類し、の障害はhyperP13Sia やPLの発生に関与していhyperplasia を上皮の厚さによりさらに似ildる可能性が強い。

hyperplasia (再iH,<0.1mm), moderate hyper・

3. BHA による前胃腫傷の発生は2・t・BHA によ

Plasia("OH,0.1 0.5mm), severe hyperpla・Sia (seH,>0.5m")に分類すると、 2・t・BHA 群

えられる。

では"iH が 1,3,フ,14,28日目それぞれ

4. BHT はハムスター前胃に対し発癌作用を示

0.75,0.26,1.02,1.53,1.08,1.95Cm/10cm

さないと考えられる。

るものではなくむしろ3・t・BHA によるものと考

e

r
e

a

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0

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0

ナ
(
ι

ト

1

2

ラッ

とT

γ

としての検討0立松正衛,米良幸典,倉田靖,山下隆生,津田洋幸(名市大・医・一病)
我々の環境中には極めて多くの肝に癌原性を 22.5:14.6,3 群は0.02:ND,0.10:ND,0.11.
示す物質が認められている。これらの物質の毒

ND,0.16:0.09 および2.2.1.0 でBHA 投与中は性を含めた癌原性の検索には肝の発癌過程を正 T・GT が門脈周囲の肝細胞に誘導され、増殖巣
しく把握する必要があり、肝の前癌病変の陽性の決定ができなかった(ND)。 4 群は0.36.ND,
マーカーとして 7 ・ElutaMyl transferase (γ0.41:ND,0.38:ND,0.48:0.18および15.9:6.0

GT), epoxide hydrolase (EH)が、また陰性マで肌T投与中も T・GTが正常肝細胞に誘導され、カーとしてglucose・6・phosphatase (G・6・増殖巣の決定ができなかった。 5 群は0.21.

Pase)やnucleotide polyphosphatase (ATpase) 0.09,0.30:0.08,0.27:0.12,0.29:0.13 およが広く用いられてきた。一方、これらのマーカ

び10.2:3.8であった。肝細胞癌が 1群.35週では、種々の化学物質の投与により正常肝細胞

5 例(50.0%),50週で 12例(92.3%)、 2 群:50でも誘導されたり活性が低下するため、正確な週で 4 例(21.1%)、 5群.30週で 1例(6.フ%)マーカーとして必ずしも機能しない場合があり、認められたが、 3 および 4 群では癌の発生が認より正確なマーカーが求められていた。我々はめられなかった。連続切片でのGST・Pおよび T

Glutathio"e s・transferase の胎盤型(CST・P)

GTの増殖巣の一致率では、 GST・P および 7 、GTが新しいマーカーとなり得る事を見出したので、ともに陽性を示すものが各群ともに90 94%,
その有用性の検索のため、肝発癌過程において

GST・P 陽性,フ・GT 陰性のもの力{10y GT 陽性巣とGST・P 陽性巣を組織化学的およP 陰性,γ、GT 陽性のものは1%以下であった。

び免疫組織化学的に比較検討を行った。

肝細胞癌では索状高分化型肝細胞癌18例(69.2

方法.フーツシャー系雄ラット(7 週令) 230

6%で GST、%),索状中分化型 1 例(33.3%)および腺様性肝匹に、 Diethylnitrosamine ΦEN)20ome/kEを細胞癌 3 例(75.0%)が両者とも陽性であり、索i.P.し、 2 週後に0.02% N・2・Fluorenylaceta・状高分化型 8 例(30.8%),索状中分化型 2 例

mide (2、FAA) a群),0.05% phe"obarbltal(66.フ%),腺様性肝細胞癌 1 例(25.0%)および充(PB)(2 群),2.眺 B"tylated hy兪Oxyaniso】e

実性肝細胞癌 2 例(100%)力くGST・P のみ陽性で(BHA)(3群),0.5X Butylated hy山Oxytoluene

あり、γ・ GTのみ陽性の肝細胞癌は認められな(BHT)(4群)を 6 週問投与し、コントロール

かった。

(5群)には基礎食のみ投与した。発癌過程を促

以上の結果、ω各群ともすべての段階で T進するため、すぺての動物に第 3 週で肝部分切 CT染色と比べGST・P 免疫染色がより明瞭に増殖除を行った。観察は50週まで行い、動物を4,6,巣を識別できる。②肝細胞癌においてもCST・P
8,12,20,35 および50週で屠殺し、肝を摘出は陰性化しない。(3)フ・GT は抗酸化剤(BHA,

して病理組織学的に検索した。冷アセトン固定 BHT)により増殖巣以外の肝細胞においても著明を行った組織の 3 連続切片を作成し、それぞれに誘導されるが、 GST・P では増殖巣以外の肝細HE染色、 T・GT組織化学染色、およびGST・P 免胞においても誘導されるがその程度は弱く増殖

疫組織化学染色を行い、肝変化を画像解析装置

巣との識別は容易にできる。④2・FAA, PB はコを用いて定量的に解析した。

ントロ

結果. CST・P およびγ・GT 陽性巣の肝句片 1
鯆当りの面積は4,6,8,12 および50週の順で

ルと比較し有意の差でGST・P 陽性巣の形成を促進し、朋A は形成を抑制し、その程度
は肝細胞癌形成と相関した。

1 群は 15.5.11.1,60.4.52.5,63.4.50.1,

これらの事実はGST・P がγ・GT にかわり得る

67.6.43.フ,90.6.40.0、 2 群は0.32:0.16,

すぐれた新しい肝癌発生過程の指標酵素である

0.53:0.38,0.81:0.39,0.80:0.41 および事を示唆していると考える。

22

マウス肝芽細胞腫の形態学的特徴と α一 fotop,otoi0 およびケラチンの検索
野々山孝(武田薬品中研), G. Re.nik ( PA I/NCTR ), T. J. Buoci(PAI/NCTR),
F. FU11erto"( NCTR/FDA ), J. M. ward ( NC I/N IH )
︺

︹

緒言

配列して仏た。とれら腫傷細胞の集籏した中央部に肝芽細胞腫(HB)は,自然発生腫傷として,または血管が認められた。細胞分裂像は個体差があうた

ENUやDDTたどの化学物質の投与kよbある種のが,比較的多ぐみられた。との他k,多くの例で,マウスk発現する。我々は,先に,肩平上皮への分空胞化した細胞質と卵円形の核を有する多角形の細化を示すマウスHBの 1例を報告したが,その他k胞と上述の紡錘形の細胞から左る網工状の区域が認は 1973年KTON即"らの報告があるのみで,そのめられ,髄外造血像も散見された。

Originをはじめ,不明た点が多い。診断学的にも,22例中 3例k肩平上皮への分化が,他の2例忙

Poorly differenti8ted cbolangio C3rcinom8, ch018n‑

骨組織を伴うた腫傷性結合織がみられた。立た,

gioma あるV、は an unusual tumor7女どの名称力;用Vへ

HBの肺への転移が2例k認められた。

られ,議論の多Ⅵ腫傷の 1つである。本報告では,

電顕的観察では,最も多くみられた腫傷細胞kお2.ootyl.mi"ofl"ONO.( 2 ‑AAF )の発癌試験k

ける細胞内小器官の発達は乏しぐ,糖原穎粒および

おⅥて発現したHBを光顕左らびk電顕的に観察し,滑面小胞体は抵とんどみられたかったが,遊離りボ

その形態的特徴を明らかKす'るとと、k,腫癌細胞

ゾームは豊富であうた。細胞は,互に密接し,毛細k裏、けるα一 f.toP如toi"(AFP )およびケラチンの胆管, tight i如otio",デスモゾーム様構造カミ散見

存在を免疫組織化学的k検索した。

された。立れk,細胞質内にぺノレオキシゾーム様小〔材料と方法)体がみられた。光顕でみられた紡錘形の細胞kは,動物は,米国国立毒性研究所(NCTR)で実施さ束状あるいは封入体状に配列した中間径線維が認めれた2‑AAFと飼料および系統との発癌Kおける相られた。女た,とれらの細胞群k隣接赤仏し混在し互関係を研究するために実施された2年間の発癌試て,極めて異型赤核と乏しⅥ細胞内小器官と多量の験に用仇られたB6C3F1およびBALB/0 マウスの細線維をもつ腫傷細胞もみられ,周囲には謬原線維

うちHBの認められた22例を用Ⅵた。

が認められた。網工形成を示す細胞は,上述のⅥず

込ずれの例も立ずHE切片を作製し検鏡した。また,電顕的観察のため,上記22例のうち10例のホノレマリン固定の肝臓を細切し,オスミウム酸で再固れかの細胞と類似した微細形態を示し,加えて拡張した細胞間隙および類洞構造が認められた。

免疫組織化学的検索では, AFPは検索した16例

定後エポン包埋し,二重染色を施し,検鏡した。女仇ずれも陰性であう九。一方,ケラチンは,肩平上た,腫癌細胞におけるAFPおよびケラチン検出のた皮への分化を示した2例を含め 16例中 7例k陽性

め 16例のホノレマリン固定パラフィン包埋切片を,細胞が認められた。烏平上皮への分化を示さ衣い例

ウサギ抗マウスAFP抗体およびウサギ抗ヒト表皮では,ケラチン陽性細胞はしばしば塊状あるいは腺

角質層ケラチン抗体を用V、, A BC法kよわ染色し様構造を示した。

た。

(結果および結論〕

以上の成績から,マウスHBは bipoto"ti.1(上皮性細胞および間葉性細胞の両方k分化する能力をも腫傷はHE標本では,非腫傷性の圧迫された肝組つ)左肝芽細胞から生じ,とれら両者の種々の分化織と明らかk区別され,数種のタイフ゜の細胞から構度を示す腫傷細胞から構成されるととが示唆された。

成され,しぱしば大嚢胞や拡張した血管を伴うて込

HB細胞は,いずれ、AFP陰性であったが,とれた。主たる腫傷細胞は,卵円形の大き左核と塩基性

は,微細形態が示す様k,マウスHB細胞が,ビトのわずか衣細胞質を有し,島状K集籏していた。別のそれに比べ,よb幼若であることが一因であるとのタイフ゜は,や、豊富左好酸性細胞質と不整左核を考えられる。

もつ紡錘形の細胞で,ロゼットある仏はりボン状k

23

EHEN ラット腎腫傷性病変部のElutatMone s・transferase の各分子種、 8加Cose・6‑pho・Sphate dehydrogenase および T ・ΞIutamyl transP即tldaseの各酵素表現型の組織イヒ学的観察

0井上忠志,津田洋幸,朝元誠人,

白井智之,立松正衛(名市大・医・一病)

化学発癌物質による腎上皮性腫傷の組織発生と前癌病変の指標となる酵素偏倚巣の追求は、

瞭に染色された。一方、 GST・B および 7・GT は減少あるいは陰性を示した。この変異尿細管で腎発癌および修飾物質の短期スクリーニング法

は、 PAS との 2 重染色により刷子縁の染色性のの開発やヒトの腎癌の早期診断のうえで重要な減少・消失等の正常よりの移行像が観察された。

課題である。酵素組織化学的な T・ENtamyl・腺腫では、腫傷の増殖が進展し周囲組織を圧迫

transpeptidaS巳やalkaline phosphatase等の活するに従って GST・A の結合は弱くなり、 GST・B,

性に表現形質の特徴の報告をみるが、これらはC, Pもほとんど陰性を示す一方、 G6P酬は陽性

いずれも陰性マーカーであることから前癌病変を示すものが多く観察された。そして腺癌では、部の指標としては必ずしも有用ではなかった。

G6P醐が陽性を示すものがみられたが、それ以そこで本実験では、解毒の第2相に関与する

外は全て陰性であった。

Elutathione s・transferase の各分子種および一脂肪代謝に重要な役割を果たす81"cose・6・

考察と要約:変異尿細管では、 GST・A, C, D

Phosphate dehydroge"ase の局在を、免疫組織
化学的に検索し、前癌病変部に対する指標とし

およびG6PDH が陽性を示し、このうちGST・A がての有用性および組織発生について追求した。

最も明膝であった。この変異尿細管はPAS との2重染色により、組織発生的に近位尿細管由来であることが示された。腺腫では、酵素表現型

方法:6 週令の門44系雄ラット、 25匹を用い、N、ethyl、N、hydroxyethylnltrosamine (EHEN)をの不安定性が観察されたが、G6PN は陽性を示すものが多くみられた。また腺癌では、 G6PDH

0.1%の濃度で飲料水に添加して 2 週問投与し、以外は全て陰性を示した。

その後水道水に戻して29週後に屠殺した。腎臓以上より、近位尿細管からの移行を示す変異は冷アセトンにて固定後パラフ'ン包埋し、連尿細管ではGST・A が、腎腺腫および腺癌では続切片を用いてToluidi"e b1四(TB)、 perl・G6P開がそれぞれ指標酵素として有用であり、Odic、acid schlff (PAS)染色、酵素組織化学的腎においても肝と同様にPe"tose・phosphate

なγ・glutamyl tr3nspeptidase ( T ・GT), al・

Path判ay の重要性が明らかにされた。

kaH ne phosphatase (ALP)染色、および免疫組
織化学的なelucose、6・phosphate dehydrogena・Se (G6PDH)、 Elutathione s‑transferase (GST)のA, B, C, D, P の各染色を行うと共に必要に応じ、 PAS と GST あるいはG6PDH との 2 重染色を行い、同一病変部での種々の酵素表現型の特性と相互の関連について観察した。

結果.正常尿細管では、 GST・A は遠位の、GST・B は近位の、 GST・C およびDは集合管の、GST・P 近位および遠位の、そしてG6P酬は遠位のそれぞれの胞体に、またγ・CT は近位の刷子縁に限局して高濃度に分布した。初期の前癌病変である変異尿細管では、 GST・A, C, D および
G6PDH が陽性を示し、このうちGST・A が最も明

24

ウラシル投与によるラット勝胱結石と可逆性勝胱乳頭腫症の発生
0田川義章,白井智之,福島昭治,

広瀬清信,伊東信行(名市大・医・一病)

ラットやマウスの勝胱粘膜上皮は物理的刺激れた。 3%uraci1 30 週投与群では跨胱壁を貫通によって容易に増殖性変化を起こすことが知らして袋状の粘膜増生があり、結石による勝胱憩

れている。特に結石形成性物質の投与による勝室形成と考えられた。また5例中1例に細胞異胱腫傷では、原因がその物質自身の発癌性なの型性が高度で、細胞分裂像も多く、移行上皮癌

か、結石形成の結果なのかが常に問題となる。

と診断しうる乳頭状腫傷が認められた。尿管上本研究では、結石により発生する勝胱粘膜腫傷

皮もoracH投与により種々の乳頭状発育を示し、の生物学的特性の一端の解明のため、 uraC11の概ね乳頭状過形成であったが、勝胱付近部では投与による勝胱結石の形成と跨胱乳頭腫症の発増殖はより強く、突起の 2 吹分岐のある乳頭腫

生およびそれらの可逆性を病理学的に検討し九。

もみられた。 3%"raci1 30 週投与群では尿管上方法.動物は 6 週令F3"雄ラット30匹を用い、皮の異型性を1例に認めた。勝胱粘膜上皮の走飼料にUraci1を3%と 1%の各濃度で混入した。 1

査電顕像では、直走あるいは曲走する粘膜隆起

群の15匹には3%uraci1含有食を、 2 群の15匹にが相互に融合し、毛細血管網様であった。表層は1%uraci1含有食を最長30週問与えた。 1 群の細胞は不規則な多角型の石状配列をとり、細一部のラットは16週目より UracH を含まない基胞表面には無数のShort uniform microvilHや礎食で飼育した。各群15週目と30週目で屠穀し、ropy r0Ⅱnded microridgeS力く観察され、 pleo・結石の有無と勝胱粘膜病変を検索した。

morphic microvilHも少な力、ら3"壹忍められた。

結果:3%uracH投与群では15週および30週と透過電顕像では表層細胞表面には大小様々なもに全例の勝胱内に黄白色の無数の結石が充満

microvilH力{あり、胞体内にtonof111aⅧents,

し、勝胱の拡張および両側尿管の肥厚と内腔のm itochondr iaS や rjbosomeS 力{豊富にあり、拡張を認め、種々の程度の水腎症を合併していfuciform vesicleの減少を豆忍めた。中鳥町細胞にた。拡張した尿管内にも少数の小結石が観察さ

はノ」、さいrounded veslcleSや豊富なmitochond・

れ九。赤外線吸収度分析から結石はUacH自体

riaS や r ibosoMeS および tonofi11amen tS 力くみらであることが判明した。勝胱壁は全体にわたるれた。

3%uracH 15 週投与後、基礎食で 15週問飼育粘膜の不規則な肥厚を示し、特に勝胱頂部付近
で著明であった。組織学的には勝胱壁全体におした群では 5 例中 1例にわずかな小結石を認め

よぷ粘膜の著明な乳頭状増殖を示し、乳頭腫症

たのみで、乳頭腫症は5例全例に全く認められと呼ぷべき状態であった。勝胱粘膜は6 8層

ず、軽度の単純性過形成あるいは乳頭状結節状の細胞眉から成り、細い毛細血管とわずかな線

過形成をみたに過ぎなかった。なお、 1例に孤維性結合織からなる問質を伴って不規則な乳頭

立性の小乳頭腫を 1 個認めた。 1%uracH投与群状配列をとり、樹枝状の分岐や乳頭状突起の相では30週目の10例中 1 例の小結石形成と過形成

互の橋形成も多くみられた。構成細胞は正常移以外には務胱粘膜の増殖性変化を認めなかった。

行上皮よ町も胞体がやや大きく、核もやや大型

要約と考察: uraci1の投与によって発生したで円形ないし卵円形を示し、大小不同性や異型

ラット勝胱乳頭腫は形成された結石の物理的刺性は無く、ほぽ均一な形熊像を示した。乳頭腫激の結果と考えられ、その大半は結石の消失と症上皮の最表層は一層の肩平な細胞でわれ、ともに可逆性に消失し、結石による移行上皮の正常移行上皮に類似する分化傾向を示した。粘乳頭腫は可逆性であることが示された。しかし

膜の基底部では細胞分裂像が散見され、上皮細長期間のUracH投与で癌の発生をみたことは、胞の増殖亢進状熊を示唆した。粘膜下層はやや結石自体の発癌性を示唆している。

肥厚し浮腫状であり、小円形細胞浸潤が散見さ
‑32‑

25

^月光^^^手呈ここ才3Cナる"打斎乞,キ^.;之.,日上ヒ里予董力

実験的勝胱腫の発生過程における組織学
的検索は種々行われているが,そのほとんどが移行上皮細胞の変化に関するもので,問質組織との関連性において癌発生経過を検索した報告は乏しい。ゆえに,我々は勝胱癌の比較的早い時期における問組織の推移を額察し,早期診断の指標となり得る変化を検索することを目的として,以下の実を行った。

d)升多鬼冥^白勺^イヒ<^旺,^ 1毒1・律i..,丙王里)投与12週目以のラットで,経時的に痢は大きくなりBBN投与を中止しても,52

週目では勝胱内腔のほぽ全体を占める癌の発生が認められた。

光顕的に,BBN投与4週目では移行上皮の単純性過形成が見られ,この時期より対照群に比して毛血管の増加が見られ,6週目には上皮の乳頭状および結節状過形成が見られ,多数の毛血管は多層化した粘膜内に実験方法並びに材料入し,12週以降では,毛細血は乳頭状の6 週令の Fischer344系雄ラット(日本チ ヤールズ.りバー社) 1 0 0 匹を使用し,以下の2群を作成した。第1 は70匹を用い,

N'加tyl、N、(4・hydroxybutyl)nitroS師ine (BBN)(東京化成)を0.05%の割合で飲料水に混じ, 1 3 週問投与し,以後'常料水で飼育した。第 2 群は 3 0 匹で,通常飲料水のみを投与した対照群とした.いずれの群も,オリエンタルM F 固型飼料を自由に摂取させた。動物は実験開始より 2,4,

6,フ,8, 10,

各時期に,実,,5

睡癌内で樹枝状に枝別れしたものが多数認められた。

電顕的には,BBN投与4週目より移行上
皮の基底膜に軽度の屈曲(鋸歯状変化)とその周辺の毛血の内皮細胞には窓現急(
Fenestration)が見られ,6 週以降ではそれらの変化はさらに著明となり,また内皮細胞
基底膜における多層化も見られた。
線維細胞もBBN投与期問が延長すると,腰原線維とともに増加傾向がみられた。52

12,26,52週目のは5匹,対照群は3匹を屠殺し,勝胱を中心に主要臓器の癌性病変について検索を行った。

週目の勝胱癌の下方への発育部では基底膜の断裂や,そこから基底細胞の一部突出が見られ,その下方では線維細胞がそれらを取り巻いて発育している部も見られた。

光顕的には勝胱移行上皮基底膜周辺の毛細血の増生數および粘膜下組織にっいて観察を行った0 さらに,電顕的韻察では勝胱基底
膜周辺の毛細血管内皮胞,線維芽細胞および腰原線維などにっいて検索を行った.

考察

勝胱癌発生過程において,特徴ある早期の変化として表層細胞の表面に不挫の小粧

毛様突起の存在が注目されているが,まだ小粧毛様突起の見られない早期において移行上結果

実期冏中,動物の体重増加は対照の第2群に比し第1群で軽度の抑制傾向がみられたが,肝,腎の重量およびその体比には著明な差は認められず,また主要臓器には癌性病変の見られた動物はなかった。

皮の基底膜に鋸歯状変化と毛血の窓現象が認められたことは,腫癌発生の電顕的な早期変化のーつとして指標となり得る変化と考られる。また,尿中BBN代謝産物は表層細胞のみならサ',より深部の問組織にも影響を与えることが推測された。

肉眼的に勝胱腫癌が見られたのは,BBN

‑33‑

26

ニトロソ尿素によるラット卵巣セルト1ノ細胞腫の発生

0前川昭彦、小野寺博志、谷川廣行、菅野純国立衛試・病理

卵巣腫は特にその複雑な粗織発生のため、良き動エオジンに淡染する、しばしば空胞状の豊富よ胞体及物モデルの確立が望まれているが、今日までひと卵巣び卵円形の核を有する背の高い細胞の管状迫よりょ腫癌のモデルとしての実験的ラット卵巣腫癌の研究はり、これら腺昌は薄い線維性私口織で囲まれ、全体と少ない。今回我々はNーニトロソ尿素によりラットでして皐丸の精細呂に類似する構迫を呈してした0 この

高率に卵巣セルト1ノ細胞腫の発生をみたので報告する。腺昌の形や大きさは腫傷により異より、時に細胞内あ<実験材料・方法>
ラット

るいは管腔内にエオジン及びPAS に好染する硝子体を10週雌性DonryUラット(日本ラット)認めた。核分裂像は一般に少なかった0 穎粒膜細胞腫

料: CE‑2 (日本クレア)
発癌物質: N・エチル・N・ニトロソ尿素( ENU )と合併した症例においては、1つの腫癌結節内に典型的なセルト1ノ細胞腫から穎粒膜細胞腫に特徴的な像まN、プロピル、N、ニトロソ尿素(PNU)でが混在してみられ、時としてセルトリ細胞腫、穎粒

実験方法:実験1:400卯mのENU水溶液を40匹膜細胞腫あるもは両者の口併を区別するよのラットに飲料水として15成/ravdayを4週問投与。もみられた0

一般忙ラットに於ては卵巣腫傷の自然発生は稀で、
実験Ⅱ:オリーブ油に溶解したPNUを80匹のラツ、小"トに胃ゾンデで20卿/Kg1回経口投与。投与後、かっ粗織学的にはそら穎"
実験1,Ⅱ共に動物を2群に分け、一方は0.25%フ工膜一莢膜細胞腫で南り、両らこ
ニルブタゾン添加飼料を2年間投与し、他方は基本飼の大邵分は検体投与に起因するえら 0料で飼育した。これら実験群以外に100匹を無処置ルトノ細胞腫と穎土正対照群として用いた。各群とも実験開始後110週まおもても認めらており、「ら C 土
で経過観察し後全生存動物を屠殺、実験を終了した。例は、これらがハに生殖索、士の投与により成熟したラツト卵巣中に存在する未分化<実験結果及び考察>

細胞が両方向へ同時に分化した事を示している。
実験1,Ⅱ共に卵巣腫癌の高率な発生をみたが、フ'゜

エニルプタゾン投与と卵巣腫癌との関係は認められな＼ーニトロノ尿、側ゆ g
かったため、両実験群ともそれぞれ1つの群としてまして知らてしるガ、"ことめて集計した。卵巣腫癌の発生率は実験群1:48.5 まで報口が゛力っこ0 、゜セルトリ細胞腫の報告がなされ、今回の我々の報告と%(16/33)、実験群Ⅱ:51.3%(39/76)で南り、両実験群の間に差異は認められなかった。これに対し無処置対併せ、これらENUやPNUはラツト、"照群の発生率は2.1%(2/96)であった。卵巣腫癌を持発させうる事は確実であると心る0こ、、こ
つた物の平均生存日数は、実験群1:52.フ(46‑74)れらニトロノ尿素による卵巣力口よ週、実験群Ⅱ:78.6(61‑109)週、対照群:109.5(109 かった理由のーつとして、従,が・110)週であった。これら卵巣腫傷に加え、両実験群を用いてなされた事が考えられる。

には子宮、下垂体、乳腺や消化管の腫癌及び白血病等「回見られた卵巣腫癌の内分泌'ご"で南り、現在検討中であるが、これらの実験系はひとが多く発生した。

卵巣腫癌の多くは片側性で、肉眼的には球形、卵円卵巣セルトノ細胞腫のモデルとして極めて有用である
形南るいは不規則な形を呈し、大きさもさまざまで、と考えらる0
割面は充実状を呈したが時に胞や出血が見られた。
粗織学的にはこれら卵巣腫癌の多くはセルトリ細胞腫
南るいはセルト1ノ細胞腫と穎粒膜細胞腫の合併した腫癌であった。これに対し無処置対照群のそれは全て穎
粒膜細胞腫であった。典型的なセルト1ノ細胞腫では、

X線, MNU及び性ホルモンのラット乳腺腫癌発生への効果。特に組織学的特徴について

27

0伊藤明弘,内藤正志,渡辺敦光(広大原医研癌)
目的:実験的乳腺腫癌,特にラット乳腺は放とE2 或いはTの併用により発癌率はや、増加

射線,各橦化学発癌物質,性ホルモンを用いしている(現在実験中)。誘発乳癌組織はて多くの研究がなきれている。 X線に関して

MNU単独ではX線と同様加、10一円Pi11町型,

は全身及び部分照射が可能なこと,乳線組織

MNU とTの併用でも MNUと同型を尓し,入INU,

が内分泌環境の変化に応じて様々の様相を呈と E2では次のE2 単独で述べるΦmpod t0加1釘し,発癌処置に対応する状態を変え得ること,仏此血oma が発現した。

誘発腫癌が外部より容易に融知可能であり経 3. E2の慢性投与:本処置群ではその単独,
時点観察,腫癌径の計測などに適しており数値化が可能なことなどが挙げられる。
本報告ではX線全身照射,N‑m.thyloi廿0.0町舶

X線, MNUとの併用にか、わらずF344 ラット
では 100 %, W F゛ラットでは 50%以上に下垂体腫癌(1妃m0丘血即O pml.othめmo)が発現した。

(MNU)及び性ホルモン(舶t沌印又は t舶t舶t。‑ E2 単独による乳癌発生率は F344 では 0 %,mm)投与を行って誘発したラット乳腺腫癌

W/F゛では 55 %であり, X線との併用ではについて主に形態学的特性について宿主内分泌環境と関連して述べる

F344で18%,W F゛で75%と増加した。

誘発腫癌は両系とも同型の oom那Ct t゛、1訂 C訂一方法と結果:生後 7 週令のF3"及びW F゛
dmm0 であり, E2 の慢性投与による形態学
ラットを用いた。 2 GyのX線全身照射,入nlU 的特徴と考えられた。
040 御/kg1回静脈注射及び2.5 5.0御の17B一結論
0.t始di01( E 2)又は t郎t舶tom"0 (1)を含有した

1.生後約 50日令の雌雄 F344 及び W/F"

Ch01郎te,0I P.Ⅱot を皮下に埋没投与し,3 力月

ラットを用いて 2 GyのX線全身照射,40御沸gに 1 回新しく交換した。観察期間は 3 ‑9 力体重のMNU1 回静注,及びE2 又はTの単独月であった。

又はX線或いはMNUとの併用での投与を行っ..

1. X線全身照射:2GyのX線全身 1回照射た。誘発乳癌の組織型はX線, MNU単独投与

では F344 で 4 %, W/F゛で 13 %と低率を示しでは主として加加10一伽Pi11訂y 0訂oioomo,E 2 の単た0 誘発乳癌は加加10‑P■PⅡ1釘y0釘0血om.で,比独,他発癌物質との併用では⑳mp.ct t゛加1訂
較的腫癌細胞に富み,転移形成は示さなかっ伽此mom0 であった。又, X線照射ラットではた0 又, X線単独, E2 との併用ラットに特徴 E2 の有無にか、わらず fi址0.demm.が多発し的に発生する f山,伽d.即m.が挙げられる。本腫た。この結果はX線の自然発生腫癌の増強効

癌はラット自然発生腫癌が fi址0血印om.であり,果と考えられた。
腺癌が棚であろことより, X線照射は f山m‑
.d印om.発生の増強効果も考えられる。この腫

癌組織内に散在性に od印omot0山 1飴io0 が出現する。この変化は大別して一層の腺上皮より成るもの,多層化したものが認められる。後者はE2 の併用に一致して認められる組織であり, E2 により甜印omoto゛.な増殖が, X線により fibmmot0山な増殖が起ることが示唆きれた。
2. MNU静脈内投与:40御加体重の MNU

生後 55日令の雌ラットに 1回投与,3 力月後より 1 2 ケの乳癌発生を認めた。更にNⅡ、1U
‑35‑

28

カニクィザルの肺転移を伴う乳腺部基底細胞癌
0中島信明,真板敬三,白須泰彦(残留農薬研)

サルにおいて皮膚の表皮に由来する腫傷の腫瘤が多発し,肺実質の大部分を置換してい

報告・は数例についてなされているが,演者等るのを認めた。これらの腫溜は数力所で胸壁の知る限りではカニクィザル("acaca irus )と癒着していた。ま光,肝の方形粂に直径 7における伺腫傷の祁告例はない。

mmの暗稠色結節を認め九。

今回演者等は,」3才(推定年齢.以下同)組繊学的に,乳腺剖班重瘤組織はクロマチンの雌のカニクィザルに肺への転移を伴う基底に富ん光円形あるいは栴円形の核を持ち細胞

細胞癌の発生を経験し光ので,その病理学的質に乏しいほぼ均一な上皮性細胞から成って検査結果について報告する。

おり,表層部は索状あるいは小葉構造,深部

本症例はマレーシア原産で,実験動物愉入

は細胞が充実性に配列する構造を木した。よ業者を経由して他の 22韻の動物と共に繁殖用

盾部には、好酸性の細胞質に富んだ有練細胞として導入し九ものであり.導人時5才であ類似の細胞から成る索状榊造も認められ九。

つ九。導入後は温度 24士 2 'C ,湿度 55士 10%.

方,肺の幢紹組織を構成する細胞は乳腺部

照明 14時問/日,換気 12回/時間(オール幢樹を構成する細胞と比較して大型で,核はエアー方式)に設定した動物室

クロマチンに乏しく豊富な好酸性の細胞質を内のケージ( W60OX D60OX H70omm )に収容し,有しており,有練細胞に類似した細胞が大勢

日本クレア製飼料 C"κ・1,りンゴおよびレモンを占めてい九。また肺では,細胞の大小不同を一定量ずつ毎日給与した。水は水道水を自あるいは biZ討reな大型細胞の出現等異型性由に摂取させ九。本動物は導入後 5年4 力打を示す傾向が強かった。有糸分裂は両腫傷にの間に4度の出産と味育を経験し九。

頻繁に観察された。以上の所見から,本症例

フレッシュ

幢惣は,導入後 7年8 力月目に左乳頭上部に位置する2悃の錫卵大皮下硬結部として発の腫傷を噛市転移を伴う皮基底細胞癌」と診断し九。

見され九。動物は腫樹発見時頃より食欲不帳

剖検時肝に認められ火結節は.組織学的にに陥り,体重が漸次減少して健康時の約 1/2は厚い結合織で包まれたのう胞であり,1矩傷にまで低下し,腫樹発見後 5 力月目に衰弱の転移巣ではなかった。

死亡した。この間呼吸器症状等の特別な症状は観察されなかったが,腫溜は次第に増大膨隆し,表面は商度な出血,潰傷形成および化服をボした。

剖検時,乳腺剖州紺は 9 × 5 × 3 如の大きさを呈し,圖度の潰傷形成のために内部が露出していた。腫溜の割面は多結箇"生で硬く,実質部は灰白色を呈した。乳腺に付属するりンパ節に変化はみられなかっ九。その他の剖検所見としては,肺の全葉に灰白色の大小硬29 ラットにおけるDiph印y1発癌性試験中にみられた骨肉腫の移植にっして0白岩和巳1,堤雅弘1 宮内毅純1三井宜夫1 田村一利1玉井幸子}小西陽一1(奈良医大.1がんセ.腫矧丙理 2弼、ト)

核分裂像や多核巨細胞の出現および腫傷性軟骨の形成も認められた(図 3)。
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し,周辺部はやや軟かく,水分に富んだ灰黄白色の部よりなっていた(図 1)。

一式.武︑なった黄褐色の部と,その周囲の硬い骨性の部を有''U'上1.、

増大して,生後約41週令の時点で40×35×30仰の大きさに達した。軟X線撮影にて,著明な骨破壊と骨形成像を認め,骨肉腫と診断し,下腿切断を施行した。 X線上,肺等の他臓器への転移は認められなか
つた。腫癌組織は,肉眼的には,中心部に出血を伴

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ているので,その詳細について報告する。

原発腫傷はFischer34VNSIC 系生後約 35 週令の雄ラツトの左足関節を中心に発生した。担腫癌ラットの体重は, 1.5 力月間で約80g低下し,腫傷は漸次

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今回我々は, Dipheny1を経口投与し,その発癌性
試験期間中に観察された自然発生と考えられる骨肉腫を見い出し,手術的に腫傷を摘出して,同系ラットの背部皮下への移植に成功し,その継代を行なっ

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図3

移植には,6週令の同系雄ラソトを用いた。
腫傷組織を無菌的に 1飢角に細切し,骨を形成しているかたい組織片数個を選んで,移植針にて,背部皮下に移植した。移植は現在第5代継代中である。
第4代までの"0山me‑d卯bli"g tim.および移植率
は,それぞれ1多植第 1代12.3日,41.フ%,第 2代5.6
日,75 %,第 3 代 4.2日,フフ.8 %,第 4 代 42日,
75%であった。継代腫傷の組織像は, L、ずれも原発腫傷と同様の組織像を示し,他臓器への転移は認められてし、な、、。なお原発腫癌をもっていたラットは
現在,生1鄭り81週令で生存中である。

図1

組織学的には,中心部は,出血・壊死を呈し,その周囲に,腫癌性類骨および骨形成がみられ(図2),
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図2

これらに接して異型性を伴なった腫傷細胞が存在し,
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大阪(06)341‑3788.福岡(092)441‑7343・名古尾(052)932 0485・仙台(0222)63‑5131
中四国(0862)23‑0324・札(011)222 5831

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薬価基準収載(注射用塩酸ミノサイクリン)■点滴注用ミノマイシンの効能・効果●●●●●●●■●●●

有効菌種●アシネトバクター(Acinetobacter)、シュードモナス・セパシア(pseudomonas cepacia)、シュード
モナス'マルトフィリア(pseudomonas maltophilia)、シュードモナス.フルオレッセンス(pseud。、
monas fluorescens)、フラボノくクテリウム(Flavobacterium)、クラミジア●他の抗生剤に耐性で本剤に感性の次の菌種

黄色ブドゥ球菌、溶血性連鎖球菌、肺炎球菌、大腸菌、クレブシェラ、エンテロバクター、緑菌、モラー・アクセンフェルド菌、インフルエンザ菌
適応症◇敗血症、菌血症.◇癌、蜂織炎、膿癌、肩桃炎◇気管支炎、気管支拡張症の感染時、肺火
原発性非定型肺炎、オウム病◇腹炎◇腎孟腎炎、腰胱炎■用法・用点滴静脈内注射は、経口投与不能の患者及び救急の場合に行い、経口投与が可能になれば経口用剤{二きりかえる。

通常成人には、初回塩酸ミノサイクリン 100 20ome(力価)、以後12時問ない L24時問:とに10omg(力価)を補液に溶かして点滴静脈内注射する。
<注射液製法>本剤 1バイアル〔塩酸ミノサイクリン10omg(力価)〕に注射用蒸留水(日局)5m1を加えて溶解する。
注射前にこの溶液を 10om1ない L50om1の 5 %プドゥ糖液(日局)、生理食塩液(日局)、りンゲルj'(日局)、果糖注射液(日局)、15%マンニトール液、アミノ酸注射液等の補液のいずれかで希釈する。

調製し大注射液は4時問以内に使用し終えること。
<注射方法>

本剤の点滴静脈内注射の速度は、 1分問に20m1をこえないようにする。
難使用上の注.は製品添付文を:参照ください。

^・・ 日本レダリー株式会社
東京都中央区京 1丁目10番3号

販吉武田薬品工業株式会社
大阪市東区道修町2丁目27番地

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世界で数々の業を生んだ、
チャールズ・りバーの実動物。
Charles RiV凹の実験動物は、世界て景も多くの科学者に使われています。その実験結果は科学の進歩に貢献しているぱかりてなく、有効性や安全性の評価基準に、各国の企業や政府機関て、最も広く採用されています。

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日本チャヅレス・りノや株式会社
本社.木飼育センター〒243‑02神奈川県厚木市下古沢795番地
日野飼育センター
大阪出張所

合0462(47)8331〒529‑16滋賀県蒲生郡日野町下駒月735番地含07貼5(3)1281〒550 大阪市西区立売掘1‑1トフ(永和産業ビル)丑06(543)3901●弊社の正式英名称は CharlesRiuerJ会Pa11,1nc.です

動物にっいてのお問合せ、で注文は受注センター(合0462(47)8331)で承ります。

社製

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イツ

ヒストマティックモデル266MP

自包埋
肌断"1幽

"削'1^1ⅢⅡ馴"闇【特徴】●マイクロプロセツサーコントローノレの採用により、プログラムが簡単に組め、吏に付随操作も、より簡易化されました。

●処理槽が4リッターになり、大量かっ大きな組織の処理がて'きるようになりました。最大296カセッ
ト(Histo pr即カセット)処理て'きます。
●従来のクローズドシステムに加え、新機構フィル
ターシステムの採用により、検体と作業の安全化を追求しました。
●最終工程終了時にプロセスデータがフ゜りントア
ウトされますのて処理工程が、確認tきるようになりました。(オプション)
椛馴劇1

1Ⅲ1削Ⅲ

ヒストマティックステイナーモデル172

自染色装111^11H削Ⅷ則"Ⅲ

1Ⅲ欄"^脚」1剛

nm航1"11"^11

凱Ⅲm桝剛1"1閲ml^#^mm【特徴】●マイクロフ゜ロセッサーにより、18種類の薬液槽、水槽、ドライヤーの中から、24]二程まて、任意に
フ゜ログラムてfきます。

●電子メモリーにより3種類の染色フ゜ログラムを記
憶させておくことがマ,きます。
●染色進行状態がデジタル表示されますのて'、残り時問等、一目てわかります。
●プログラムは正面にあるキー司ξードてデイプレ
イをみながら染色順序、時間、水洗、乾燥等を.

乱

簡単に入力てきます。

●水洗システムは、オーパツロー式ι、循環式の2通りの使用がて'きます。

関連製品としてー・・ー●自包埋装
ヒストマテイックモデル166MP●固定・包埋用カラーカセット
ヒストプレップ

総発売元

株式餅士」じユコサΥ工フユ
社所所所所
業業案
営営営営
阪幌州
本大札九冲

PA3CO

●パラフィン溶融器●フローテーションバス(湯浴式)●スライドゥオーマー(加熱板式)〒104 京都中央区八丁垢2・3・2 小林ピル本館3F TEL 03・553・5212E"〒5卸大販市西区西本町 1・107 2新松凹ビルフF TEL 備・5お.】51闘"〒^札幌市中央区北 1 条西3‑3・31 古久柤ピル印3 TEL011‑231.0095〒8】2 福田市博多区博多駅 2・4・30 いわきビル'伽号 TEL.仭2‑471‑5900〒^糊市若扶 2 ‑3 ‑】1 轟円ビルフF YEL^・67・'808

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医薬品

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セリーングリーンは鱗屑形成の低下,除去に効果がある二硫化セレンを含有する薬用シャンプーです.
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豪効能・効果,用法・用および使用上の注は製品の添付文をこらんください.

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皮膚疾患治
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スタッフ235名.タの役害那本
実験動物受託総合管理、飼育管理・動物実験.

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ざまな実験動物二ーズに応え、皆様方のお役に立つことを願っております

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受託試験項目.一般毒性試験●生殖試験●繁殖試験●発癌性試験,●サルを用いた毒性試験●仔イヌを用いた毒性試験●試験のお問い合わせは研究所・企画管理部までおいします。

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株式会社生物科学技研究所
研究所ノ静岡県浜松市葵町95‑10
TEL0534‑37‑5348H勺

中伊豆分室/静岡県田方郡中伊豆町筏場804‑56
TEL05588‑3‑2326H勺

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信頼にたる研究報告
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<受託項目>
一般毒陛試'験
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遺伝毒性試験

生殖試,験
世代試験
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局所刺激性試験
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病理組織標本作成

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ス・ラット・ハムスター用SHR‑SPラッ用
モルモット・ウギ用

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イヌ
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嶽御一報いた光き次第試供品及

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です。サンプルはわずかに3"しから、しかも実験動物に従って、
測定メソードを自由にプログラム化する事が出来ます。又、血、の反応曲線をTVモニターに同時に映し出すことが出来ます。ルーチン検
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かな幸せ﹄へのお手仏い

三共は、世界的科学者高峰讓吉博士が発見した消化剤タカヂアスターゼを発売してスタートしまけ、。以 86
年、ビタミン、抗生物質、抗がん剤などの医薬品をはじめ、農薬、イ踏庄品、食品の開発、販売を通じて、皆様の健康と幸せづくりに全力を注いて来ました。これからも来るべき新世紀へ向って力強い歩みを続けて参ります。
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全自動写真撮影装置を内蔵。今まてにない多様なシステム性と操作性て画象解析、分光測光なεの将来的研究二ーズにも充分対応。電動6ケ穴レ.

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蔵フ川レム面と同じ像が観察てきるー
眼レフ式ファインダー、視野数26.5φの超広視野なε随所に最先端のメカ
ニズムが生きています。しかも、35mm2

園^台+大版1台+TVカメラ1台計4台<仕様>.超広視野接眼(視野數26.5φ)●鏡定常装付●6ケ穴動レポルパー●右下共軸ハンドル大型ステージ.各糧フィルター内蔵.撮影レンズ4種類内蔵●全自動写真撮影装内蔵●35mmハーフサイズ撮影、スケール
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八芳園
レストラン

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(中華)

花ずし

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医科学研生協食{正門房玉丈三っ)

バス停(日吉坂上,医科研前)
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2号館

獣医学石t窒垂口'聚軒(中華)聚芳園(中華)ノゞ;ス千亨(医科研西門)凶
目黒ステーションビノレ6 F(和・洋・中華)8 F レストラン

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ナルビノレ

BF (和・・中華)

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駅

東急目黒駅