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Table１ Lethal eﬀects of antifouling compounds on oyster embryo/&K/&/&

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カキ発生に与える
有機スズ代替防汚剤の影響
第79回学術講演会
２００９年９月１８日
メルパルク広島広島市衛生研究所○常政 典貴神戸大学大学院 海事科学研究科
岡村 秀雄

研究の背景と目的・ 有機スズ化合物は、高い環境残留性、毒性及び生物蓄積性から使用が禁止されている。
・ 有機スズ化合物に代わる代替物質の研究が行われ、現在はそれらが使われている。
・本研究は、代替防汚剤の環境安全性を明らかにすることを目的とする。

Structures of antifouling compounds
SCH3N
CH3
H3C C HN
CH3Irgarol

NN

NO

NH CN

CH2CH2ClO

Cl
ClO
CH3NHCN
CH3Diuron

ClSZnpt

SZn
SO
N

Sea-Nine 211

N C8H17-n

N･B(C6H5)3

uPBP

２.１ 試薬及び実験材料
・供試防汚剤は、Irgarol 1051(ｲﾙｶﾞﾛｰﾙ)、Diuron(ｼﾞｳﾛﾝ)、Sea-nine211（シーナイン）とした。
また比較のために、uBu、uPuの試験も行った。
・カキは、五日市埋立地沖の防波堤に付着しているものを用いた。

カキ採取地点
五日市埋立地○採取地点

２.２ 実験機器
・生物顕微鏡はOLYMPUS CK40を使用し、100倍で検鏡した。
・写真撮影時には、画像解析ソフトSHIMADZU moticam2000を使用した。

2.3 毒性試験の手順
・人工海水は、ダイゴ人工海水SPをイオン交換水に溶解して作成し、２時間程度ばっ気した。
・取り出した生殖器は、雄の場合はシャーレに取り、冷蔵庫に保管した。雌の場合は、人工海水を入れたビーカーの上に目の細かいネットを敷き、その上で切開し、人工海水で洗いながら卵を取り出した。
・卵は、人工海水で数回洗浄した。
・供試物質はｼﾞﾒﾁﾙﾎﾙﾑｱﾐﾄﾞに溶解後、人工海水で希釈し、多段階の濃度に調整した。

2.3 毒性試験の手順つづき・試験溶液を24穴ﾏｲｸﾛﾌﾟﾚｰﾄに1mlずつ入れた。同濃度につき3ウェルを用いた。
・成熟卵を各ウェルに25μℓずつ入れた。
・精子を人工海水で1000倍に希釈し、各ウェルに25μℓずつ入れた。
・２時間後、ウェルを顕微鏡で観察し、卵の発生状況を200個確認した。
・24時間後、ﾎﾙﾏﾘﾝ溶液で固定後、顕微鏡で観察し、D型幼生の奇形の有無と、幼生にならなかった卵の数を合計200個確認した。

実験前のカキ卵

実験開始後２時間後のカキ受精卵0100(μm)

発生が進んでいるカキ受精卵発生が見られないカキ卵(Sea-Nine211,1.0ppb,2hour)(uBu,100ppb,2hour)

実験開始後２時間後のカキ受精卵(uBu,1ppb,2hour）(uBu,１０ppb,2hour）

実験開始24時間後のカキ受精卵0100(μm)

D型幼生となったカキ受精卵発生が進んでいないカキ受精卵(Control,24hour)(Sea-Nine211,100ppb,24hour)毒 性 の 比 較uable Leathal effects of antifouling compounds to oyster embryo（μｇ/ℓ）

Sea-nine211
uPu
uBu
DiuronIrgarol

2hLC104.3(4.0-4.5)
4.1(3.9-4.3)
2.7(2.6-2.9)>1000>100024h
LC5027(24-30)
13(12-14)
14(13-16)>1000>1000

LC10 ： １０％の個体が死亡する濃度

LC10LC50
1.3(1.2-1.3)
13(11-15)
1.4(1.4-1.5)
2.5(2.4-2.7)
0.69(0.64-0.70) 3.3(2.9-3.7)>1000>1000>1000>1000
LC50 : ５０％の個体が死亡する濃度Ｄ型幼生

正常なＤ型幼生

奇形を生じたＤ型幼生(Control,24hour)(uBu,5ppb,24hour)

Ｄ型幼生

正常なＤ型幼生

奇形を生じたＤ型幼生

24時間後の生存率と奇形率（μg/l）（μg/l）

24時間後の生存率と奇形率（μg/l）（μg/l）

まとめ・カキ受精卵を用いて、ｲﾙｶﾞﾛｰﾙ、ｼﾞｳﾛﾝ、ｼｰﾅｲﾝ、uBu、ＴＰＴの毒性試験を行った。
・ｲﾙｶﾞﾛｰﾙ、ｼﾞｳﾛﾝの毒性は弱く、ｼｰﾅｲﾝはＴＰＴとほぼ同程度の毒性があることが明らかとなった。
・生き残ったD型幼生のほとんどが奇形となっており、その後の発生に影響が出る可能性が示唆された。

Structures of antifouling compounds
SCH3

SCH3N
CH3
H3C C HN
CH3Irgarol

NN

NH CN

CH2CH2NCH3
H3C C HN
CH3M1NNH2NClClO
CH3NHCN
CH3Cl

Sea-Nine 211
ClDiuronOS

N C8H17-n