［ 解説 ］

教職員健診における血清高分子量型アディポネクチン濃度の測定（CLEIA法）
Serum high-molecular-weight form of adiponectin level measured
by CLEIA in health checkup of teachers and other workers
広瀬寛＊

後藤伸子＊

森正明＊

慶應保健研究，39（ 1 ），071 - 076，2021

要旨：アディポネクチン（ADPN）は脂肪細胞から分泌される善玉のホルモンで，細胞実験や動物実験で糖尿病や動脈硬化・腫瘍などを抑制し，百寿者では血中濃度が高いなど，抗加齢ホルモンとしての意義が注目されている。また，糖尿病マウスの脂肪細胞内でシステイン残基へのコハク酸結合により高分子量（HMW）型の産生が低下する機序が報告された。本研究では，40 ～ 65歳の教職員を対象に健診時に血清中の HMW-ADPN 濃度を測定し，その意義を断面研究で検討した。
当施設の定期健康診断を受診した 40 ～ 65 歳の教職員を対象に，血清 HMW-ADPN 濃度をCLEIA 法で測定した（株式会社エスアールエルに委託）。解析対象の日本人は男性 1 , 586 名，女性 1 , 019 名（平均年齢は男性 51 歳，女性 49 歳）であった。
（ 1 ）血清 HMW-ADPN 濃度の中央値は男性で 2.6μg/mL，女性で 4.9μg/mL であり，男女ともメタボリックシンドローム（MetS）群は非 MetS 群と比較して有意に低値であった。（ 2 ）男女とも，log [HMW-ADPN] は HDL-C や BNP，年齢とは正の相関が，BMI，腹囲，空腹時血糖，HbA1 c，血清 TG，赤血球数，ALT，γ-GTP，尿酸などと有意な負の相関が認められた。（ 3 ）男女ともに，運動習慣がある群の方が HMW-ADPN が高い傾向が認められた。（ 4 ）log [HMW-ADPN] を目的変数としたステップワイズ多重回帰分析では，HDL-C，尿酸，BMI，性別，BNP，γ-GTP，年齢，HbA1 c の順に採択された（F ≧10，P ＜0.0001，R 2＝0.417 ）。
以上より，血清 HMW-ADPN 濃度は HDL-C や女性，BNP，年齢とは正の，BMI や尿酸，γ-GTP，HbA1 c とは負の，それぞれ独立して有意な関係を示した。
keywords：アディポネクチン，HDL-コレステロール，糖尿病
adiponectin，HDL-cholesterol，diabetes mellitus

はじめに学で発見されたが 1 ），それとは独立して同年昭アディポネクチン（ADPN）は，脂肪細胞で和大学薬学部でヒトの血清から抽出された分子最も発現が多い蛋白質として 1996 年に大阪大

量約 28 , 000 のゼラチン結合蛋白（GBP28 ）と慶應義塾大学保健管理センター（著者連絡先）広瀬 寛 〒 223 - 8521＊

神奈川県横浜市港北区日吉 4 - 1 - 1―71 ―教職員健診における血清高分子量型アディポネクチン濃度の測定（CLEIA 法）

同一物質であった 2 ）。ADPN は善玉のホルモ

1.5 mg/dL ，白血球数≧12 , 000 /μL ，ヘモグロン様物質であり，細胞実験や動物実験で糖尿病

ビン（Hb）≦ 9.0 g/dL ，血小板数≧ 50×10 4 /μL（DM）や動脈硬化・腫瘍などを抑制する。また，

ま た は＜10 × 10 4 /μL ， 空 腹 時 血 糖（FPG）≧

喫煙者では血中濃度が低く，100 歳以上の百寿

170 mg/dL ，HbA1 c ≧ 8.0 % ，前立腺特異抗原者では血中濃度が高い（PSA）≧ 10 ng/mL ，脳性ナトリウム利尿ペプ3）など，長寿関連ホルモンとしての意義が注目されている。

チド（BNP）≧ 200 pg/mL ，腹囲データなし（ 44），5 ）ADPN の 特 徴 と し て は，（ 1 ）血 中 濃 度 は，名）。

男性よりも女性の方が高く，テストステロンが血清 HMW-ADPN 濃度の測定は株式会社エADPN の分泌を抑制することが報告されていスアールエルに委託し，CLEIA 法で行った 13 ）。

る。（ 2 ）肥大した脂肪細胞からは ADPN の分「高分子量アディポネクチン測定キット」は昭和

泌が低下する。（ 3 ）DM マウスの脂肪細胞内で大学薬学部の中野泰子先生と中外診断科学（現は ADPN のシステイン残基へのコハク酸結合

在，富士レビオ社）の共同開発であり，HMW-が増加することにより，高分子量（HMW）型

ADPN を特異的に認識し，熱処理の操作が不ADPN の産生が低下する機序が報告されてい要なのが特徴である 14 ），15 ）。2004 年から ELISAる 6 ）。ADPN は， 血 液 中 で 3 量 体 や 6 量 体 なキット 14 ），15 ） が，2010 年からは CLEIAキット 13 ）どの低分子量型および 12 量体や 18 量体などのが発売され，研究用に測定されている。

HMW 型として存在しているが ，アディポネ

なお，HMW-ADPN 濃度と生活習慣との関クチンの活性型は HMW 型であるという報告が連についての検討では，喫煙習慣は，喫煙なし

多くなされている。

vs. 現在あり，アルコール摂取は，週 4 回以下

我々は 2000 年ごろから，健常人や内分泌代

vs. 週 5 回以上，運動習慣は，一日平均 60 分未2）7）－9 ）

謝 領 域 に お い て ELISA 法 で 測 定 し た HMWADPN 濃度の意義を検討してきた

満 vs. 60 分以上の 2 群間で比較した。

。本

統計解析には，IBM SPSS ® Statistics ver. 22

研 究 で は，40 ～ 65 歳 の 本 学 教 職 員 を 対 象 に，（IBM Japan 社，東京）および StatView®ver.5.0 J

健 康 診 断 時 に 血 清 中 の HMW-ADPN 濃 度 を（SAS 社，米国）を使用した。男女別に，2 群

CLEIA 法間の HMW-ADPN 濃度はノンパラメトリック13 ）4 ），10 ）－12 ）で測定し，その意義を断面研究で検討した。の Mann-Whitney U 検 定 で 比 較 し た。 ま た，
対数変換後正規分布に近い血清 HMW-ADPN，対象と方法

中性脂肪（TG），ALT，γ-GTP，BNP は，そ当施設の定期健康診断を受診した 40 ～ 65 歳の教職員（信濃町地区を除く）を対象に，イの対数（log）を単相関・偏相関分析およびステップワイズ多重回帰分析に用いた。

ンフォームドコンセントが得られた方の血清

本研究は，「匿名化したデータを用いた観察HMW-ADPN 濃度を測定した。DM で治療中研究」として慶應義塾研究倫理委員会で承認さの 73 名および設定していた除外基準に合致しれた（承認番号 21 - 002，登録番号：201601 ）。

た 28 名 は 除 外 し， 解 析 対 象 の 日 本 人 は 男 性
1 , 586 名，女性 1 , 019 名（平均年齢は男性 51 歳，女性 49 歳）であった。
除外基準は，悪性疾患や炎症性疾患を持つ
人，膠原病や DM で治療中，または重度の肝障害・腎障害・血液疾患の人。検査データでは，
血 清 ALT≧150 IU/L ， ク レ ア チ ニ ン（Cr）≧―72 ―慶應保健研究（第 39 巻第 1 号，2021 ）結果

BNP，年齢の順に強く，また BMI，腹囲，（ 1 ）全対象の血清 HMW-ADPN 濃度の中央値

FPG，HbA1 c，血清 TG，赤血球数，ALT，は男性で 2.6μg/mL，女性で 4.9μg/mL であγ- GTP，尿酸（UA）などと有意な負の相り，男女ともメタボリックシンドローム（MetS）関が認められた（表 2 ）。

群では非 MetS 群と比較して有意に低値で（ 3 ）生活習慣に関する質問に回答が得られた男あった（表 1 ）。

性 1 , 522 名，女性 1 , 008 名において，喫煙・ア（ 2 ）男 女 と も，log [ HMW-ADPN ] と の 正

ルコール摂取・運動習慣の有無によるHMW-の相関は HDL- コレステロール（HDL-C），

ADPN 濃 度 の 検 討 で は， 男 女 と も に 運 動

表1

非メタボリックシンドローム（non-MetS）群とメタボリックシンドローム（MetS）群の血清高分子量型アディポネクチン（HMW-ADPN）濃度
男性

non-MetS

MetS

Pn （%）

1281（ 80.8 ）305（ 19.2 ）－2.8（ 2.1 ）2.0（ 1.3 ）< 0.0001

HMW-ADPN（μg/mL）
女性MetSP995（ 97.6 ）24（ 2.4 ）－4.9（ 3.3 ）2.95（ 1.4 ）< 0.0001

non-MetSn （%）
HMW-ADPN（μg/mL）n（%）または中央値（四分位範囲），P 値は Mann-Whitney U 検定による

表2

男性 1,586 名，女性 1,019 名における血清高分子量型アディポネクチン（HMW-ADPN）濃度と各因子との単相関および年齢・BMI で補正後の偏相関
男vs. log [HMW-ADPN]

性
年齢・BMI で補正後

女

性
年齢・BMI で補正後

r

Pr’

PrPr’

P

年齢

0.081

0.0012－－0.094

0.0026－－

体格指数（BMI）-0.351< 0.0001－－-0.381< 0.0001－－

腹囲-0.323< 0.0001-0.049NS-0.347< 0.0001-0.082NS

収縮期血圧-0.148< 0.0001-0.072NS-0.1160.0002-0.020NS

拡張期血圧-0.119< 0.0001-0.042NS-0.1000.0014-0.021

NS

空腹時血糖-0.132< 0.0001-0.0890.0004-0.158< 0.0001-0.1160.0002

ヘモグロビンA1 c-0.185< 0.0001-0.124< 0.0001-0.167< 0.0001-0.148< 0.0001

中性脂肪（log）-0.335< 0.0001-0.239< 0.0001-0.308< 0.0001-0.229< 0.0001

HDL-コレステロール0.385< 0.0001

0.290< 0.0001

0.443< 0.0001

0.329< 0.0001

LDL-コレステロール-0.150< 0.0001-0.0970.0001-0.156< 0.0001-0.0980.0017赤血球数-0.213< 0.0001-0.129< 0.0001-0.171< 0.0001-0.0980.0017

ALT（log）-0.294< 0.0001-0.154< 0.0001-0.097< 0.0001-0.022NS

γ-GTP（log）-0.215< 0.0001-0.123< 0.0001-0.215< 0.0001-0.079NS

クレアチニン-0.098< 0.0001-0.070NS-0.098

0.0018

0.028

NS尿酸

-0.214< 0.0001-0.129< 0.0001-0.135< 0.0001-0.133< 0.0001

BNP（log）

0.226< 0.00010.177< 0.0001

0.168< 0.0001

0.1080.0005

r ：相関係数，r’ ：偏相関係数，NS：P ＞ 0.00313（Bonferonni 補正）―73 ―教職員健診における血清高分子量型アディポネクチン濃度の測定（CLEIA 法）

P ＝0.0012 。

習 慣 が あ る 群 の 方 が HMW-ADPN が 高 い傾向が認められた（表 3 ，多重比較による（ 4 ）log [HMW-ADPN] を 目 的 変 数 と し た ス

Bonnferonni 補正をするとP ＜0.00833 が有意

テップワイズ 多 重 回 帰 分 析 で は，HDL-C，である）。また，運動習慣がない群とある群

UA，BMI， 性 別（女 性 ），BNP，γ-GTP，の 2 群間で，BMI や腹囲は男女ともに有意

年 齢，HbA1 c の 順 に 採 択 さ れ た（F ≧10，差は全くなかったが，HDL-C は運動習慣がP ＜0.0001，R 2 ＝ 0.417 ）（表 4 ）。

ある群の方が明らかに高値であった：中央値（四分位範囲）は，男性で 57（ 18 ）vs. 62（ 29 ），P ＜0.0001，女性で 70（ 21 ）vs. 75（ 22 ），表3

男性 1,522 名，女性 1,008 名における生活習慣の有無による血清高分子量型
アディポネクチン濃度（HMW-ADPN ，μg/mL）
男性なし

あり

P

喫煙
（現在の）

n （%）
HMW-ADPN

1 , 364（ 87.9 ）2.7（ 2.1 ）188（ 12.1 ）2.5（ 2.1 ）－0.109アルコール摂取（週 5 日以上）n （%）
HMW-ADPN

1 , 011（ 65.6 ）2.6（ 2.2 ）530（ 34.4 ）
2.7（ 2.2 ）－0.138運動（一日平均で 60 分以上）

n （%）
HMW-ADPN

1 , 045（ 68.2 ）2.6（ 2.1 ）487（ 31.8 ）
2.8（ 2.1 ）－0.015

女性なし

あり

P

喫煙
（現在の）

n （%）
HMW-ADPN

915（ 90.8 ）4.9（ 3.4 ）93（ 9.2 ）5.1（ 3.5 ）－0.759アルコール摂取（週 5 日以上）n （%）
HMW-ADPN

844（ 84.4 ）4.9（ 3.4 ）156（ 15.6 ）5.15（ 3.25 ）－0.233運動（一日平均で 60 分以上）

n （%）
HMW-ADPN

766（ 78.3 ）4.8（ 3.3 ）212（ 21.7 ）5.3（ 3.55 ）－0.032n（%）または中央値（四分位範囲），P 値は Mann-Whitney U 検定による表4

男女計 2,605 名における血清高分子量型アディポネクチン（HMW-ADPN）濃度を目的変数としたステップワイズ多重回帰分析
vs. log [HMW-ADPN]

標準回帰係数F値

P値

R 2 の変化

HDL-コレステロール

0.281

256.6

< 0.0001

24.4 %

尿酸-0.11936.9< 0.0001

8.9 %

BMI

-0.15870.6< 0.0001

2.9 %

女性

0.18488.7< 0.0001

2.3 %BNP（log）

0.110

44.3

< 0.0001

1.7 %γ-GTP（log）-0.09426.9< 0.0001

0.5 %

年齢0.10437.4< 0.0001

0.7 %ヘモグロビンA1 c-0.06415.4< 0.0001

0.3 %F ≧ 10，不採用：収縮期血圧，赤血球数，クレアチニン  R 2 ＝（ 0.646 ）2 ＝ 0.417

―

74 ―

慶應保健研究（第 39 巻第 1 号，2021 ）考察いる。さらに，米国人男性 798 名（ADPN 別 5

本研究は当大学の健康診断受診者を対象とし群からの心筋梗塞発症，6 年間の追跡研究 19 ））ており，健康意識が比較的高い集団と推測されには有意差があり，日本人冠動脈疾患患者 149る。高齢の対象者は，重篤な代謝疾患や心血管名における心血管イベントの発症（ 7 年間の追病，癌などの発症を免れた人たちとも考えられ跡研究 20 ））でも HMW-ADPN 低値（ELISA 法る。ADPN は心不全で上昇することが報告さで 2.6μg/mL 以下）は発症予測因子であった。

れており 16 ），本研究において BNP ≧ 200 以上

なお，CLEIA 法で測定した血清 HMW-ADPNは除外したが，HMW-ADPN は BNP と弱いなでは，同時測定の変動係数（CV）は 1.0 -2.2 % ，がらも正の相関が認められた。

日差変動も 1.7 -3.3 % であり 13 ），ELISA 法のそなお，HMW-ADPN を測定できない場合は，れぞれ 2.4 -3.0 % および 4.2 -5.1 % 14 ），15 ）と比較しその代用として腹囲や TG，HDL-C などが有用てかなり良好であった 5 ）。CLEIA 法で測定したと考えている。その根拠としては，我々が 2004

血清 HMW-ADPN 値は，検量物質値付けの見年に「メタボリックシンドローム予防プログラ直しにより従来のELISA 法の約 2 分の 1 であっム」として MetS の男性職員に対して行った保たが，ELISA 法との相関係数は 0.993（ n ＝185 ）健指導の介入で，食事制限をした人よりも運動と非常に良好であった 13 ）。また，その回帰式を増やした人達の方が多かったが，3 ヵ月後に（Y ＝ 0.504 X ＋ 0.172 ）から，ELISA 法による 2.6

BMI の有意な減少はなかったものの腹囲が平～ 2.65μg/mLはCLEIA 法 に よ る1.5μg/mL に均 1.6 cm 減少したことが挙げられる。TG は食相当することが分かった 5 ）。

前・食後ともに減少し，HMW-ADPN 濃度は以上まとめると，血中アディポネクチン濃度有意に増加したことから，BMI よりも腹囲やは遺伝や肥満，喫煙などで低下し，MetS や 2TG の減少が重要と考えられた 。

型糖尿病，心血管イベントの発症予測因子であ4）

今 回 の 断 面 研 究 か ら， 血 清 HMW-ADPNる。HMW-ADPN が ELISA 法 で 2.6μg/mL 以

濃度は HDL-C や女性，BNP，年齢とは正の，下（全 量 ADPN で は 4.0μg/mL 以 下 に 相 当 ），BMI や UA，γ-GTP，HbA1 c とは負の，それ2010 年以降の CLEIA 法で 1.5μg/mL 以下の者

ぞれ独立して有意な関係を示した。今後は，生は，生活習慣の改善などが必要と考えられる。

活習慣の改善などの大規模な介入研究が望まれる。

本論文の執筆に関連し，開示すべき利益相反

以前我々は，30 ～ 59 歳の非 MetS 男性教職員関係にある企業等はない。また，本論文の要旨

416 名における 6 年間の追跡調査で MetS 発症は，第 52 回日本動脈硬化学会シンポジウム 3の有無を検討した。ベースラインの HMW-

「アディポサイトカインの進歩」（ 2020 年 7 月

ADPN 低値（ELISA 法で 2.65μg/mL 以下）は17 日から 31 日までオンラインにて開催）で発BMI や 年 齢 の 高 値 と は 独 立 し て 悪 影 響 を 及表した。

12 ）

ぼしていた（ハザード比 1.561，95％信頼区間
1.051 - 2.292，P ＝ 0.028 ）12 ）。
他施設からの縦断研究では，非糖尿病の日系米国人から 2 型 DM の発症（男性 321 名，女性 445 名，平均 5.4 年の追跡研究 17 ））において，
HMW-ADPN 低値は 2 型 DM の発症予測因子であった。また，ADPN 低値と 2 型 DM 発症の関連は，大規模なメタ解析 18 ） でも報告されて―75 ―教職員健診における血清高分子量型アディポネクチン濃度の測定（CLEIA 法）

文献

fat distribution, and serum adiponectin levels

1 ）Maeda K, Okubo K, Shimomura I, et al. cDNA

in Japanese male patients with type 2 diabetes.
Metabolism 2002；51：314-317.

cloning and expression of a novel adipose specificcollagen-like factor, apM1（AdiPose Most12）Seino Y, Hirose H, Saito I, et al. High molecularabundant Gene transcript 1）. Biochem Biophys

weight adiponectin is a predictor of progression

Res Commun 1996；221：286-289.

to metabolic syndrome：a population-based 6-year
follow-up study in Japanese men. Metabolism2 ）Nakano Y, Tobe T, Choi MN, et al. Isolation

2009；58：355-360.

and characterization of GBP28, a novel gelatinbinding protein purified from human plasma. J13）Hayama S, Higuchi T, Miyakoshi H, et al.
Analytical evaluation of a high-molecular-weight

Biochem（Tokyo）1996；120：803-812.
3 ）Arai Y, Takayama M, Abe Y, et al. Adipokines（HMW）adiponectin chemiluminescent enzymeand aging （Review）. J Atheroscler Thromb

immunoassay. Clin Chim Acta 2010；411：2073–

2011；18：545-550.

2078.

4 ）Hirose H, Yamamoto Y, Seino-Yoshihara Y,14）Nakano Y, Tajima S, Yoshimi A, et al. A novel

et al. Serum high-molecular weight adiponectin,

enzyme-linked immunosorbent assay specific for

as a useful marker for the evaluation and carehigh-molecular-weight adiponectin. J Lipid Resof subjects with metabolic syndrome and related

2006；47：1572-1582.

disorders （Review）. J Atheroscler Thromb15）Tanita T, Miyakoshi H, Nakano Y. Performance

2010；17：1201-1211.

of ELISA for specific measurement of high-5 ）Hirose H. High-molecular-weight adiponectin

molecular-weight （HMW） adiponectin. Jand Ningen Dock：useful biomarker of metabolic
syndrome and related disorders （Review）.

Immunol Methods 2008；333：139-146.
16）von Eynatten M, Hamann A, Twardella D, etNingen Dock International 2014；1：7-15.

al. Relationship of adiponectin with markers of6 ）Frizzell N, Rajesh M, Jepson MJ, et al. Succination

systemic inflammation, atherogenic dyslipidemia，of thiol groups in adipose tissue proteins inand heart failure in patients with coronary heart

diabetes：succination inhibits polymerization andsecretion of adiponectin. J Biol Chem 2009；284：25772-25781.

disease. Clin Chem 2006 52：853-859.
17）Nakashima R, Kamei N, Yamane K, et al.
Decreased total and high molecular weight7 ）Waki H, Yamauchi T, Kamon J, et al. Impairedadiponectin are independent risk factors for themultimerization of human adiponectin mutants

development of type 2 diabetes in Japanese-

associated with diabetes：Molecular structure

Americans. J Clin Endocrinol Metab 2006；91：

and multimer formation of adiponectin. J Biol
Chem 2003；278：40352-40363.
8 ）Pajvani UB, Hawkins M, Combs TP, et al.

3873-3877.
18）Li S, Shin HJ, Ding EL, et al. Adiponectin levels
and risk of type 2 diabetes：a systematic review

Complex distribution, not absolute amount ofadiponectin，correlates with thiazolidinedionemediated improvement in insulin sensitivity. Jand meta-analysis. JAMA 2009, 302：179-188.
19）Pischon T, Girman CJ, Hotamisligil GS, et al.
Plasma adiponectin levels and risk of myocardial

Biol Chem 2004；279：12152-12162.
9 ）Kobayashi H, Ouchi N, Kihara S, et al. Selective
suppression of endothelial cell apoptosis by theinfarction in men. JAMA 2004；291：1730-1737.
20）Inoue T, Kotooka N, Morooka T, et al. High
molecular weight adiponectin as a predictor

high molecular weight form of adiponectin. Circof long-term clinical outcome in patients withRes 2004；94：e27-31.

coronary artery disease. Am J Cardiol 2007；10）Yamamoto Y, Hirose H, Saito I, et al. Correlation

100：569-574.

of adipocyte-derived protein, adiponectin withinsulin resistance index and serum HDLcholesterol, independent of body mass index in
the Japanese popula-tion. Clin Sci 2002；103：137-142.
11）Hirose H, Kawai T, Yamamoto Y, et al. Effectsof pioglitazone on metabolic parameters, body―76 ―