博士論文
マダイ放流種首の脂質蓄積に関する研究

平成 8 年4 月

海野徹也

目

緒

次

言

第1章 仔稚魚期における脂質蓄積過程
第1節 仔稚魚期の脂質蓄積部位
第2節 腹腔内脂肪組織の発達

第2章 着底後の形態変化と脂質蓄積
第1節 形態形成
第2節 脂質蓄積と放流サイズ
第3章 脂質蓄積と放流種苗の質
第1節 脂質蓄積と絶食耐性
第2節 魚体成分に及ぼす給餌率の影響

第4章.脂質蓄積と成長変異
第1節 成長と魚体成分
第2節 耳石標識法による成長履歴の推定
第5章 脂質蓄積からみた飼育方法の評価
第1節 成長および体成分に及ぼす選別飼育の影響
第2節 種苗放流に及ぼす音響馴致飼育の影響
総合考察

43

要

約

45

謝

辞

47

引用文献

48

英文要約

54

緒

言

緒
"捕る漁業から育てる漁業"という基本概念のる魚種で,種宙放流量は2000万尾に達しており(水もとで栽培型漁業が推進され,現在では海面養殖

産庁・自我協, 1995), 24都府県下の144機関によによる生産額は6100億円に達している'95養殖経り放流が実施されている(水産庁・日栽協,

営白書)。この海面養殖の生産者削ま遠洋漁業を上回

1995)。

り沖合漁業の生産額に匹敵しており,栽培漁業は放流効果を左右する要因は,大きく二つに大別

一応の成功を収めている('95養殖経営白書)。栽できる。一つは,放流種首の環境収容力に関係す

培漁業の成立には養殖の対象となる人工種苗の確る放流場所や時期の間鼻で,もう一つは種宙の質

煤,いわゆる種苗生産方法の確立が前提となる的関連である。放流場所の環境収容力についてはが,その基盤となる種菌生産技術の開発は決して

畔田(1986)が指摘するように,放流場所の天然マ

容易なものではなかったo一般に好化直後の仔魚

ダイ当歳魚の生活様式,餌料環境,他魚種との関は親から卵黄や油球などの内部栄養を受け継ぎ,係を含めた環境特性を検討する必要がある。まある程度の行動力や消化吸収能力を獲得し初期摂た,放流された種苗が生残するか否かは直接放流

餌に備えるが,内部栄養を吸収し終えて数日以内

効果に影響するだけに,放流種酉には養殖種苗とに摂餌が出来なければ死に至る。この数日間を無は異なる質的問題や至適放流サイズに関する知見

摂餌で過ごすと仔魚の摂餌能力は低下し,その後が必要となる。福原(1986)は既に種酉の質的問題

たとえ摂餌したとしても生残の可能性はない。

について言及しているが,現段階では放流種苗のBlaxter and Hempel(1963)は,この初期摂餌が遅質的評価や至適放流サイズに関する研究は非常にれた場合の仔魚の生残臨界時点を"pointofno

乏しく,マダイの放流サイズにしても144機関で

return と定義し,摂餌の不成立によって起こる
大量‑い死時期を"criticalperiod"とした。かつ10mmから154mm(.水産庁・日栽協, 1995)と一定の傾向はない。

ての種苗生産はこの"criticalperiod"の初期減耗.放流されたマダイの追跡調査は再捕率や天然魚をいかに克服するかが最大の問題であったが,シとの混獲率を中心に行われており,再挿されたマ

オミズツポワムシの初期飼料への応用とそれらのダイの摂餌生態や生理学的変化に関する知見も集

大量培養技術の確立によって種苗の初期減耗は回積されつつある。輿石・安永(1980)は,放流後の避され,人工種苗の生残率は大幅に向上した。そマダイの胃内容物分析調査より放流魚が放流海域の後,自然採卵法による大量の良質卵の確保,油の餌料環境に適応するまでには少なくとも7日間を脂酵母による㌣オミズツボワムシ‑の必須脂肪酸
強化,初期配合飼料の開発や餌料系列の確立によ要することを報告している。また,佐賀水試

り,種菌生産技術は飛躍的な向上を遂げ今日に至(1979),松宮・木曾(1982)による胃内容物組成の調査では,放流魚の摂餌が量的・質的に天然魚とっている。

同等になるには7日から10日間を要しており,人工栽培型漁業の基盤の一つとして期待されている的に飼育された種苗が自然環境に順応するにはかのが放流事業である。放流事業は既存資源への人なりの日数を要すると考えられる。一方,放流後=種苗の添加によって,それぞれの種の資源壷のの種苗の魚体成分では,肥満度(長崎永試, 1979),

かさあげを最終日的とする。種苗生産技術の向上

C/N比(立石, 1976),脂質( Nakagawaetal..

に伴い放流種苗の安定供給が可能になった現在で1991; Vitla‑Navarro etal., 1991)が急激に減少するは,資源培養を目的とした放流事業が全国各地で事・が知られている。摂餌生態が天然環境に順応行われ,放流の対象となる魚種も多様化しつつあし,肥満度や外部形態が天然魚と類似するには30る。水産庁・日本栽培漁業協会(日裁協)による平成日間を要する(長崎永軌1979;松宮ら, 1984)。野5年度の種苗放流実績(水産庁・日栽協, 1995)で外で放流種酉の消費する運動エネルギー量は捕食

は, 40種の海産種菌が放流されており,放流事業者からの逃避や索餌により人工飼育条件下に比べに対する埋符の大きさがうかがえる。放流事業の中でもマダイは需要や価格面から最も重要視されはるかに多いと考えられ,この間の摂餌不/lLや運動量増加によるエネルギー消費を放流前の蓄積脂蝣I緒賓によって補っていると考えらる

言

Tsukamotoet

することが明らかにされている(満場ら,1978)。

al. (1989)は放流後のマダイの初期減耗要因が,棉
食や飢俄による死亡であると指摘している。飢俄

Tsukamotoetal. (1989)も大きさの異なる穂首を放流した場合の小型種百の減耗を指摘し,これが他が被掃食圧を増大すること(Yin and Blaxter,1987)
からも,放流前のエネルギー蓄積は放流魚の生残魚種のみならず同種大型種苗による小型種苗の捕食である事を明らかにしたO このような研点かを左右する重要な要因で,放流サイズや種苗性のら,種苗の成長変異に伴った脂質蓄積に関する基指標となる。

礎的知見も必要である。

一方,集約的飼育では高い生残率を得ることがこのような背景のもとに,本研究ではマダイ放目的であるため天然環境に比べて非常に商い餌料

流種苗における脂質蓄積過程や絶食耐性を分析

密度が維持されている。また,食害,飢触,環境

し,これらを指標とし至適放流サイズや種苗の質要因の変動等の種苗の生残を脅かす条件は回避さについて検討した(第1,2および3章)。また,成長率れている。魚類の卵径や貯化仔魚の大きさには個の異なる種百聞で脂質蓄積状態を比較し,種苗の体変異が存在するが,種苗生産ではこのような変成長履歴と脂質蓄積に関する基礎的知見を得るこ異が飼育経過と共に拡大される(山岸,1964;とを目的とすると共に(第4章),脂質蓄積を指標に

Yamagishi, 1969)。そのため放流される種菌のサイ

種酉生産過程で生じた小型種苗に対する選別飼育

ズは飼育過程で生じた成長変異のため必ずしも均や,種甫放流に対する音響馴致飼育の有効性につ一ではない。このような大きさの異なる種苗を放いて検討した(第5章)0

流した場合,サイズによって著しく再輔率が低下

ー2‑

第1章 仔稚魚期における脂質蓄積過程

第1章 仔稚魚期における脂質蓄積過程
第1節 仔稚魚期の脂質蓄積部位
一般に魚類の初期生活史の中では,醇化仔魚が卵黄を吸収し外部栄養に依存し始める時期と,仔魚から稚魚‑と移行する時期が生理的にも生態的平均的な成長を示した5個体を組織学的観察のための試料とした。

にも最も変化が大きいと考えられる。このような組織学的観察発育段階の移行に伴う形態学的,生理学的知見はルマリン,もしくはプアン氏液で固定し,常法に採集した標本を直ちに10%中性ホ

種苗生産技術の確立や改善に大きく貢献してきよりパラフィン包埋後,厚さIOfxmの横断およびたOマダイにおいても仔稚魚期における外部形態

縦断切片を作製Lへマトキシリン・エオシン(HE)(福原, 1976a, 1976b; Fukuhara, 1985),内部形態染色を施した。

(Matsuoka, 1984; Matsuoka and lwai, 1984;

グリコーゲンの検出には,試料をジャンドール

Kitajiraaetal., 1985, 1993),行動様式(福原・国行,
1978;福原・岸田,1980),生理学的変化(田中,1969a,1969b,1971a;安楽・畔臥1973;滴井ら,

液で固定,骨法によりパラフィン包埋乳10/(m1992a, 1992b; Uematsu etal., 1992)に関する研究がなされてきた。

を施した。なお,グリコ‑ゲンの確認にはプレパの切片にMcManusのPeriodic acid scbiff反応(以下pAS反応)による染色およびへマトキシリン染色
ラートを唾液で処理後, PAS反応を行う対照試験

仔稚魚期の脂質は,形態的変化を伴う変態期でを併用して識別した。

減少することがニシン(福田ら,1986)やサケ(中野,1991)で知られている。これらの現象は,仔稚焦の脂質が発育段階移行のためのエネルギー源と.しルデヒドおよび2.25%パラホルムアルデヒドを含て利用されているだけでなく,いくつかの発育段

で一次固定し, 1%四酸化オスミウム液で90分間二階を経て体成長を営む仔稚魚にとって脂質が必須であることを示している。しかしマダイ初期発育

次固定を行った。アルコールで脱水後, Queto1

段階における脂質蓄横に関する研究は少なく,唯片を作製し,トルイジンブルーで染色した。

トルイジンブルー染色は,試料を2%グ)I,夕)i,ア
む0.1Mのリン酸壌衝液(pH,7.4)中で2日軌

4℃

812に包埋しウルトラミクロトームで厚さ1/=汀切〜,田中(1971b)によって硬骨魚類の一例として
脂質の吸収に関する研究が報告されている程度である。そこで本研究ではマダイ仔稚魚期における肝臓体積

脂質蓄積を消化系器官の発達過程との関連も含め
組織学的手法を用いて観察したO

ザーを用いコンピューターに入力し,三次元画像

HE染色を施した縦断連続切片を顕微鏡

ビデオ装置に出力し,肝臓組織の外形をデジタイ
解析ソフト(Nikon Cosraozone‑2S)を用いて立体再構
築し体積を求めた(Toyoda and Uematsu,1994)。

材料および方法
結供試魚1987年および1994年に広島県栽培漁菓麟
会で貯化し50 tの陸上水槽で飼育された仔稚魚を果貯化後6日目のマダイ仔魚の消化管には餌料生物が認められ,すでに活発な摂餌が開始されてい用いたO飼料系列は両年ともほぼ同一で,醇化後4日目から38日目まではシオミズツポワムシ, 20日た。この時点の食道は上皮細胞と環走筋の発達が目から37日目まではアルテミア幼生, 14日から52
日目までは配合飼料を投与した。飼育期間中の飼進み,柱状紺胞が規則正しく配列していた。輝臓は肝臓と隣接し,エオシンで濃染されるチモーゲ

育水温は1987年が18.7‑19.6℃で, 1994年が17.3

ン頼粒の存在が認められたことから,すでに活発‑19.5℃であり,両年の仔稚魚の成長は同等であった。試料の採取は醇化後6,ll,16,22,27,32,

な消化活動が営まれていると考えられる(Fig.la)。
肝臓は醇化後6日目には体腔前部の腹側に位置し,

37,42,47,52および56日目に行い,各ステージで肝臓紺胞数は非常に少ないものの,すでにグリ‑3‑

第1章 仔稚魚期における脂質蓄積過榎

Fig.l. Histomicrographs of digestive system in the posLIarval stage of red sea bream, a; Cross section
through the medium part of body of a 6‑day old larva. Larval esophagus, liver and pancreas differen血ted ina certain extent at this stage. Stained with H‑E. b; Cross section of the liver of a 6‑day old larva, showing
PAS‑positive glycogen granules. Stained with PAS and hematoxyline. c; Longitudinal section through theposterior part of the intes血e of an 1 1‑day old larV乱The intes血e produces PAS‑positive materials. Stainedwith PAS and hematoxyline. d; Cross section of the gut epithelium in the posterior part of the intes血e of an
1 1‑day old larva, showing many vacuoles in the epithelium cell. Stained with toluidine blue. E; esophagus, L; liver, P; pancreas.

コ‑ゲンと思われるpAS陽性の頼粒が認められた

た,体腔左側面に位置する輝臓中には脂肪細胞が(Fig.lb)。このようなグリコーゲン蓄積は醇化後6観察された(Fig.2c)0醇化後56日目になると肝膿が輝膿組織にまで発

日目以降終始確認されたが,仔魚期においては肝臓での脂質等横は観察されなかった。

達し,肝膿と輝膿が部分的に韓合した肝騨臓を形貯化後11日目になると消化管の上皮細胞は高さ成した(Fig.2d)。

を増し, PAS陽怪の粘液の分泌も確認された(Fig.lc)。腸後部の上皮細胞には多くの小空砲が密に分

Fig.3に仔稚魚期における肝臓体横の推移を示す。肝臓体横は成長に伴い徐々に増加したが,特布した細胞がみられた(Fig.lc)。この上皮細胞を拡大すると,核は細胞基底部付近に位置し,核上方に醇化後32日Hから37日目にかけては休債増加が顕著であった。

には大小多数の空胞が存在した(Fig.l d)。
醇化後32日目では胃は括約筋で覆われ胃腺が発

考察達し,幽門垂も分化していることから(Fig.2a),稚魚期への移行を完了していると思われる。このこ

マダイを含むいくつかの硬骨魚類において摂餌ろになると仔魚期に観察された腸上皮細胞の空砲

開始蘭には肝臓中のグリコーゲン事横は認められは認められなくなった。

ていない(田中,1969a)0 Lopez (1986)はマダイ仔
魚における肝膿中へのグリコーゲン蓄横を醇化後

醇化後37日目の稚魚の肝臓には脂質蓄横に起因すると思われる空胞が多くみられるようになり,

16日目で確認しているが,本研究では醇化後6日目

Sudan II脱色で脂肪滴が観察された(Fig.2b)。まー4‑

第1章 仔稚魚期における脂質蓄額過程
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Fig.2. Histomicrographs of the digestive organs of juvenile red sea bream, a; Cross section through themedium part of body of a 32‑day oldjuvenile. Gastric gland and pyloric caeca were developed. Stained with
H‑E. b; Cross section through the liver of a 37‑day old juvenile, showing fat accumulation which was
detected by Sudan III staining, c; Cross section through the medium part of body of a 37‑day old juvenile,
showing some adipocytes in the pancreas. Stained with H‑E. d; Cross section of the hepatopa皿creas of a56‑day old juvenile. Pancreatic tissue partly invaded into the liver. Stained with H‑E. A; adipocyte, G;
gastric gland, I; intes血e, L; liver, P; pancreas, Pc; pyloric caeca, St; stomach.

力を有していると考えられる。したがって肝臓中のグリコーゲンは摂餌開始直後に貯蔵されたものと考えられる。

ここ一J
7000=*蝣6000

仔魚後期のマダイ仔魚の腸管上皮細胞中には多数の空胞が認められた。田中(1971a, 1971b)によれば,これらの腸中部上皮細胞の空砲は摂餌開始

55000
ヽ一′′
Q>4000覧3000

後に出現し,活発に摂解している個体ほど分布密

男2000

度に嘗み,摂餌を中断された個体では時間の経過と共に消失する。 Iwai(1968, 1969)およびIwai
1 0

20

30

40

50

and Tanaka(1968)による一連の研究において,硬骨魚類で観察されるこれらの空地は脂肪粒子であ60

Days a社er hatching

る事が確認されている。したがってマダイ仔魚後期において腸中部上皮層は脂肪の吸収部位である

Fig.3. Changes in the liver volume in the earlystage of red sea bream. Data are shown as mean

とともに脂肪の貯蔵部位としても重要な役割を有and SD (n=5).

していると考えられている。しかしながらこれらの仔魚でグリコーゲン蓄棟がみられた。摂餌園始の勝上皮細胞の脂肪は肝化後32日目以降の個体で直後の仔魚の食道には柱状細胞が規則正しく配置
され,輝膿ではエオシンで浪染されたチモーゲンは認められなかった。一般に,マダイにおいて醇
化後30日前後は仔魚期から稚魚期への移行期であ瀕粒が存在していることから,消化系器官は機能る(Fukuhara,1985)。本研究でも醇化後32日目には,発達した胃腺と幽門垂を有していた。したが的にかなり発達し,種々の物質を消化吸収する能‑5‑

第1章 仔稚魚期における脂質蓄積過程ってこの時期に消化吸収機能は大幅に向上し,成開始時の段階では肝臓と輝膿はたがいに分離して魚と類似してくると考えられる。同時に仔魚後期
では腸上皮細胞が脂質蓄横部位として重要な役割いる(田中, 1969a)。醇化後56日目の個体では輝僻
組織の一部が肝臓組織中に見られ,いわゆる肝輝をしていたが,稚魚期になると肝臓や脂肪組織が臓を形成するが,このような器官形成は機能的側

主な蓄積部位になると考えられるO肝臓の体横がこの時期に急激に増加したのは脂肪等のエネル

面より,むしろ肝臓の体積増加に伴う構造上の問題に起因すると考えられる。

ギーを貯蔵したためであろう。 仔魚前期や摂餌16‑弗1章 仔稚魚期における脂質蓄構過程

第Z節 腹腔内脂肪組織の発達
腹腔内‑の脂質蓄積は滑化管周辺に脂肪組織が色された脂肪組織の形態を観察した。

形成される形で行われるが,これらの腹腔内脂肪組織は個々の脂肪細胞がコラーゲン繊維で結合した脂肪紳胞の集合体である(第2章2節)。魚類の腹腔光顕観察と体積 平均的な成長を示した5個体をブアン氏液で固定し,魚体サイズに応じて1日‑4日

内脂肪の脂質含量は噛乳類と同様(Fawcett, 1986;

間固定した。常法によりパラフィン包埋し,食道Johnson and Greenwood, 1988), 60%から80%が脂から虻門にかけて厚さ10/Jmの縦断連続切片を作
製し, HE染色した。

質で,その内の80%以上はトリグリセリドで占められている(Nakagawa et al., 1984, 1995; Nakagawa

脂肪組織の体積はToyoda and Uematsu (1994)の方法に従い,脂肪組織の外形をコンピューターにand Kasahara, 1986;萱野ら, 1990)。
これまでに腹腔内脂肪組織量と給餌量の関係が入力し,三次元立体再構築して体積を求めた。まスズキ(Hungetat., 1993),アユ(Yaoetal., 1994)

た,各発育段階毎の5個体について無作為抽出した50個以上の脂肪細胞径を測定した。成長に伴う脂肪組織の体積および細胞径の変動については,一で報告されている。こジマス幼魚では給餌量が脂肪の形態に及はす影響についての報告例もある(Bellardi etal.,1995)。また, in vitroにおける脂肪元配置分散分析(ANOVA)により有意差の検定を行った。

組織からの脂質動員能を指標に,飼料や飼育環境
がアユの生理状態に及ぼす影響を評価した例もある(Neraatipour et al., 1990; Nakagawa et al.,

通過型電子顕微鏡観嚢 試料を2%グ)i,タルアルデ

1995)。

ヒドと2.25%パラホルムアルデヒドを含む0.1Mリ

マダイにおいて腹腔内脂肪はエネルギー貯蔵器

ン酸親衛液(PH7.4)中で2日間, 4℃で一次固定し,官として重要で,中間育成当初の醇化後68日目の1%四酸化オスミウム液で90分間二次固定を行っ

マダイで発達した腹腔内脂肪組織を有すること(港野ら,1990)が確認されている。前節では仔魚からた。アルコール系列で脱水,透徹後,樹脂包埋した。ウルトラミクロトームで厚さ60nnlの超薄切片

稚魚に移行すると共に脂肪細胞が出現することがを作製し,酢酸ウラニルとクエン酸鉛の二重染色明らかとなったが,魚類における腹腔内脂肪組織の発達に関する研究は比較的少ない。本研究ではを施し,日立H‑60A型電子顕微鏡で加圧電圧80Kvで観察した。また,厚さ1!=‑1切片についてはトル

マダイ仔稚魚期における腹腔内脂肪組織の発達過程を組織学的に観察した。

イジンブルーで染色し光学顕微鏡下で観察したO結果

材料および方法
供試魚1994年に広島県栽培漁業協会で種苗生産

脂肪組織の発達 連続切片による光学顕横鏡観察で,脂肪細胞は将化後37日目の稚魚の輝備中で初された仔稚魚を供試魚とした。餌料系列は,貯化後4日目から38日目まではシオミズツポワムシ,

めて観察された。以下に消化管の発育区分(Fukuhara, 1985)に従った脂肪組織の発達過程を示す。

20日目から37日目まではアルテミア, 14日から50
日目までは配合飼料であった。飼育期間中の水温は17.3‑19.5℃であり,仔稚魚のサンプリングは(好化37日目、平均全長10.1mm)
消化管は食道から前腸部にかけて‑回転してい好化後6,ll,22,27,32,37,42,47,52および56日目に行い,以下の研寮に供した。

るが,前腸部から直腸にかけての消化管の形状はほぼ直線状であった(Fig.4a)。胃は発達した胃腺と脂肪組織の形態 試料を10%中性ホルマリン液で固定し,実体顕微鏡下で内臓部分を露出させ2%

初期の幽門垂を備えていた(Fig.5a)。胃腺や幽門垂の分化は仔魚から稚魚‑の移行期に形成されるこ

Sudan II工液に30分間浸漬したOその後、試料を70とから(田中,1971a), 37日目ではすでに仔魚から稚魚‑の移行を完了したものと思われた。脂肪紬%および95%アルコールで洗浄し,オレンジ色に染‑7‑

第1章 仔稚魚期における脂質蓄積過食

胞は右体側部の消化管回転部のほぼ中心に位置す
る輝膿中に認められた(Fig.4a, 5a)。光学顕微鏡による観察では,脂肪細胞の大部分は空胞で占吟られており(Fig.5b),これらの脂肪滴は四酸化オスミウムで黒色に浪染された(Fig.5c)。電顕観察では、細胞質は細胞周囲に狭い帯状をなし,幾分偏平に=→妄なった核が観察された(Fig.5d)。また,比故的小型の脂肪細胞では細胞質中に複数の脂肪滴を含むが(Fig.5e),これらは発達途中の細胞であると考えら

Fig.4. Schema丘c illustra6cms of typical adipose

れ,発達と共に脂肪滴は融合し中心怪の脂肪滴を形成すると考えられる。

tissue (shadow) in the four developmental stagesof red sea bream juveniles.
a; 37 day, TL‑10. lmm, b; 42 day, TL=12.3n皿,
c; 47 day, TL=13.5mm, d; 52 day, TL=16.8n皿.
Arrows on the lllustra丘ons of a, b, and d indicate(好化後42日、全長12.2mm)
消化管は,前腸から中腸都が後方に向かって隆起し始めた。脂肪組織は中腸と胃壁の間隙に沿っ

position of cross section shown in Fig.5a, Fig.6a,c, respectively,e; esophagus, i; intes血e, r; rectum, st; stomach.

て後方部へと伸長した(Fig.4b)。揮膿組織中の脂肪

Each scale indicates 1 n皿.

細胞は揮膿組織を周辺部に追いやるようにその数

Fig. 5. The adipocytes of 37‑day oldjuve血Ies of red sea bream, a: Cross section of medium part of the bodyas shown in Fig. 4a. Some adipocytes (arrowhead) appeared in the pancreas in right part of the body cavity.
Stained with H‑E. b: The adipocytes in the pa皿creatic tissue with high‑magniilca丘on. The cytoplasm of

adipocytes is a thin rim surrounding the lipid droplet. Stained with H‑E. c: Semi血n section of the adipocytes
in the pancreas. Note the presence of osmiophilic lipid droplets in adipocytes. Fixed with OsO4 and stained withtoluidine blue, d: Electron micrograph of adipocyte of red sea bream. The nucleus is displaced to one side ofcytoplasm by accumulated lipid droplet. Original magnification X 12,000. e: Electron micrograph of immatureadipocyte containing multiple lipid droplets. Original magnificationX 75,00. A; adipocyte, G; gastric gland, I;
intestine, L; liver, LD; lipid droplet, N; nucleus, P; pancreas, PC; pyloric caeca, S; spleen, St; stomach.

‑8‑

第1章 仔稚魚期における脂質蓄積過鍵Fig. 6. Localization of the adipose tissue of 42 and 52‑day old juveniles, a: Cross section of a 42‑day old
juvenile as shown in Fig.4b. The number of adipocytes in the pancreas increased. Stained with H‑E. b: The
adipose tissue with the digestive tract of a 42‑day old juvenile. The adipose tissue mass elongates along themid‑gut toward the rectum. Stained with Sudan III. c: Cross section of a 52‑day old juvenile as shown in
Fig.4d. The rectum was surrounded with adipose tissue. The pancreatic tissue (arrowheads) was on theextreme border of the well‑developed adipose tissue, d: The adipose tissue with digestive tract of a 52‑day
old juvenile. The adipose tissue enlarged so remarkably as to occupy the mid‑gut and the rectum.
A; adipose tissue, I; intestine, L; liver, P; pancreas, PC; pyloric caeca, R; rectum, St; stomach.

を増加した(Fig.6a)。醇化後37日目の脂肪組織は
Sudan III染色で検出されなかったが,このステー(醇化後52日、全長16.8mm)
前腸から直腸にかけての消化管は大きく屈折し

ジでは脂肪組織はSudan III液で染色されるようになった(Fig.6b)。

成魚の形状に類似してきた(Fig.4d)。脂肪組織は直腸を覆うように発達し,右体側の消化管のかなりの部分を覆うようになった(Fig.4d, 6c, 6d)。

(貯化後47日、全長13.5mm)
前腸から直腸にかけての消化管は大きくS字状に屈曲し,幽門垂も直腸付近まで伸長した(Fig.4c)。
この時期になると輝備中の脂肪租織も直腸の手前

脂肪組織の体積と細胞径 Fig. 7に成長に伴う脂肪まで発達した(Fig.4c)。

組織の体積は稚魚の成長と共に有意な増加を示し

組織の体横と平均脂肪細胞径の変化を示す。脂肪・9・

第1章 仔稚魚期における脂質蓄積過程てその数が増大する。脂肪細胞‑の脂肪蓄積は脂肪芽細胞の加入による細胞数の増加と(増殖型;
hyperplasic type),細胞自体が肥大する(肥大塑;hypertrophic type)かのどちらかによって行われているか,もしくはそれらの混合型によって行われている(Roncari and Van, 1978; Johnson andGreenwood, 1988)。魚類の脂肪組織‑の脂質蓄横に関する知見は非常に乏しいが, Bellardi etal.
(1995)はニジマス幼魚での脂肪組織‑の脂質蓄積に脂肪細胞自体の肥大と細胞数の増加が関与していることを指摘した。本研究において脂肪組織の体積は成長と共に増加したが,脂肪組織中の細胞自体の平均長径には有意な変化は認められなかった。したがって,発達初期の脂肪組織の成長には細胞の肥大より,むしろ脂肪芽細胞の加入による数的な増加が主に関与していると考えられる。
噛乳類の脂肪細胞は白色脂肪細胞と褐色脂肪細胞に大別される(Fawcett, 1986; Johnson andGreenwood, 1988)。白色脂肪細胞は脂肪組織の大Fig.7. Changes in adipose tissue volume (A) andtheir cell diameter (B) in the juvenile stage of red
sea bream. Data are shown as mean and SD.

部分を占め消化管周辺や筋繊維内に分布する。褐
色脂肪細胞はヒトでは新生児の肩甲間部にみられ血管系や神経系がよく発達している他細胞質はミトコンドリアを多く含んでいるO生後間もないた(ANOVA,p‑0.ll)。これに対して脂肪組織中の細胞の平均長径には有意な変化は認められなかっ晴乳類では白色脂肪組織と褐色脂肪組織を有している(Fawcett, 1986; Johnson and Greenwood,た(ANOVA, p‑0.52)。

1988)。発育初期のマダイ脂肪組織に褐色脂肪細胞が認められるか否かは興味が持たれたが,組織学考寅的な観察結果ではすべて白色脂肪細胞であった。
マダイ仔稚魚期の輝膿組織は腸管周辺部に偏在

硬骨魚類の仔魚期における脂肪の消化吸収機構

していることが田中(1969a)によって報告されているが,本研究で脂肪細胞は腸管周辺部に位置すは成魚とは異なり,腸中部上皮細胞が脂肪の吸収部位であると共に貯蔵部位としても重要な役割をはたす(田V, 1971b)。これらの腸上皮細胞に蓄積る輝膿組織中で認められた。脂肪組織は輝膿組織
中で発達し,最終的には聯臓組織を周辺部に追いされた脂肪粒子はマダイ仔魚においても認められやりながら腸管全体を覆う様子が観察された。こるが,稚魚への移行に伴い観察されなくなる(第1章1節)。これは稚魚期‑の移行に伴い脂肪の消化のような脂肪組織の発達様式は噛乳類とは大きく異なっており非常に興味深い。脂肪細胞の発達に吸収機構が成魚と類似することや(田中, 1971a,

よってそれらの周辺部に追いやられた輝膿組織でも活発なチモーゲン耕粒の分泌が認められること

1971b, 1975),腸上皮細胞に蓄摸された脂掛岬
膿や脂肪細胞に移送されるためである(第1章1節)0から,これらの輝膿細胞が脂肪組織の発達や脂肪一般に晴乳類では成熟した脂肪細胞は有糸分裂
せず,細繊維芽細胞棟の脂肪芽細胞の加入によっいては今後の研究諌轟である。

蓄積に関与している可能性もあるが,この点につ‑10‑

第2章 着底後の形態変化と脂質蓄積

第2章 着底後の形態変化と脂質蓄積
第1節

形態形成

仔稚魚期における形態的変化は発育段階を区分

部形態については,肝輝膿重量,内膿重量(肝輝するのに有効な手段である。そして発育段階の移行期には外部器官や内部器官の変化が伴うことが予想される。外部および内部諸器官の形態変化は

膿,腎臓および心臓は除く)および筋肉重量(可食部に相当),幽門垂から肛門までの腸管長を測定した。また筋肉比ならびに比内膿重量は以下の計算

単に形状が変化するだけでなく,それぞれの器官で求めた。

の機能的変化に結びつき,さらに行動や生態の変化と深く関連している場合が多い。マダイにおい筋肉比(%) =筋肉重量/体重×100
比内膿重量

%

‑内膜重量/体重×100ても仔魚から稚魚‑の移行に伴い鱗や斑紋が形成されるほか(福原,1976b,1984),消化系器官の変化

鰭面積の測定10%ホルマリン固定した試料の右が認められている(田中,1971a)。この時期のマダイの行動様式の変化は,浮遊生活から腐生生活に移体側を解剖用ナイフでそぎ取り,透明プラスチッ

行する(福鼠1984; Fukuharta, 1985)と共に遊泳力が飛躍的に向上する(福原・岸BB,1980,福原,

た。体表および各鰭の面積はコピーされた面積分の紙の重量を天秤で測定し,単位両横当たりの紙ク板に固定し複写機で体表および各鰭を複写し1984。

の重量から算出した。なお,体表面積は本来の魚
体体表の曲面面横ではなく2次元投射像の両横と一方,放流マダイ種苗は陸上水槽での一次飼育を経て海上の網生け費で集約的に中間育成されし,対鰭である腹鰭および胸掛ま左体側に位置す
る鰭の面積を測定した。

る。中岡育成は放流魚にとって最終段階の飼育の場であり,この時期の器官形成や変化を知ることはマダイの発育段階を把担するためや,天然海域

体側筋筋繊維径10%ホ)i,マリンで固定した試料への適応力を推定する重要な知見となる。そこでの背鰭基底前端部の背筋を切り出し,常法により

本研究では集約的に中間育成されたマダイ種宙のパラフィン包理を行い,体軸と垂直方向の厚さ約

外部形態ならびに内部形態の変化について調査す

10/…の組織切片(縦断面)を作製し, HE染色を施し検鏡した。筋繊維の計測は水平隔壁より背側ると共に,これらの形態変化とこの時期の生態や行動との関連について考察した。また,素堀池を部分について行い,白色筋(普通筋),桃色筋(中間筋),̲赤色筋(血合筋)の分類はMatsuoka (1984)による形態および分布様式の違いにより行った。筋繊維利用した自然環境に近い半粗放的条件下で飼育された種苗の外部形態についても調査した。
材料および方法

長径は‑個体について50個の筋繊維を無作為抽出
し,接眼マイクロメーターを用いて測定した。

集約的飼育による種首1989年に広島県水産試験

半粗放的飼育による種苗1987年に高知県栽培漁場の小割網(5×5×5m)で中間育成されていたマダイを試料とした。網生け貸からの試料の採集は業センターの飼育池(面積2,000m2,水深l‑2m)や天然のプランクトンや底生生物を餌として飼育されていたマダイ稚魚を醇化後44, 48, 55, 64,

定期的に実施される網替えの時に行い,貯化後
65, 76, 84および88日目に無作為に100尾程度を76および100日目に採集し,試料とした。採集は抽出し直ちに10%中性ホルマリンで固定した。なお,なるべく平均的な個体を抽出し以下の試料とした。

北原式プランクトンネット(目合GG54) ,たも網
(網口:40cm,目合:5mm)および巻き網を用いて毎回15:00時前後に行ったO測定項目は体長.体塞,口径とした。

ヽー＼rL

外部形態と内部形態 外部形態は体長,体重,体高,肛門長(吻から艦門までの長さ)を測定したO内‑ll‑

第2車 着底後の形態変化と脂質蓄積

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50

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40

Body

一ength

50

60

70

(mm)

Fig.8. Relationships between body length andFig‑9. Changes in muscle ratio, viscerosomatic

body depth, pre‑anal length and intestinal length

index and relative fin area during secondary

during secondary rearing of red sea bream.

rearing of red sea bream.

あったが,成長に伴い次第に増加し,体長40mm付
結

近で40%に達し,その後一定となったo比内膿重果

量は体長35mm付近まで渡やかに減少したが,35mm付近で7%となり,その後はほとんど変化しFig.8に中間育成期における体長に対する体高,なかった。また,体表面積に対する鰭面積の比率

肛門長および腸管長の関係を示すO体長(x)と体高は体長15mmで50%以上を示したが,成長と共に急激に減少し,体長30mm付近で30%台になり以後(y)の関係は高い相関関係を持つ直線で示された(y=0.432x・1.50, r=0.992,n=76)。また,体長(x)と肛門長(y)の関係も一本の直線式y=0.569x+1.061, r=

安定した。
成長にともなう白色筋・桃色筋・赤色筋の筋繊

0.995 (n=130)で示された。これに対して体長(Ⅹ)と腸管長(y)の関係は直線関係で示されたが,体長

維の平均長径をFig. 10に示す。白色筋繊維は体長
約10ramで約16/Lmであったが,成長と共に増加し35mm付近で変曲点が認められ, 35i‑1mまではy=

体長30mm以降約30!Lm前後で一定となった.赤色
筋繊維および桃色筋の平均長径の推移も白色筋と0.270x+8.427, r=0.370 (n‑43), 35mm以降は y=
0.936x 12.969, r=0.908 (n=77)で示されたo同様に体長30mm付近まで増加し,その後赤色筋でFig.9に体長に対する筋肉比,内膜重量比およびは13/Lm,桃色筋では18/Lnl程度で安定したo

鰭両横比を示す.筋肉比は体長15mmで10%程度で‑12‑

弟2章 着底後の形態変化と脂質蓄積考

寅

中間育成期における体表に対する鰭の面積の割

官
主合は成長に伴い減少したが,体長30mm前後で一定L‑Bとなった。福原(1976a)によるマダイの鰭の形態形成に関する研究でも鱒の分枝は体長30mmで完了することから,この時期に鰭の形態・機能が新し

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一つ
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い段階に逮したと考えられる。また,本研究で体長30mmでは白色筋や赤筋の筋繊維の平均長径が一

LL

1 0

20

30

Body

40

一ength50

定となることが明らかとなった。筋繊維の形態変化は遊泳株式の変化と密接な関係にあることがニ

60

(mm)

シン(Batty, 1984;禰臥1990)で報告されているが,この時期のマダイは鰭や筋肉の形態形成が完

Fig.10. Changes in muscle fiber diameter

了する時期であり,遊泳力も大幅に向上すると考during secondary rearing of red sea bream.

えられる。福原(1984)による租敗的飼育池での種
百の観察結果では,体長30mm前後までは表層と低昔層を生活水域として利用しているが, 30mmを越え

8

ると完全に腐生生活に移行する等,行動面の変化を伴なっている。

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さらにマダイの形態変化は体長30mm以降でも認^^められた。体長35mm前後では消化管長に変曲点が確認されたほか,比内膿重量が安定する時期でも

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20

40

60

あり,体長40mmでは筋肉比が一定となった。形態的な変化から,体長40mmで形態形成は完了し,ほ80

ぼ成魚の形態に類似すると考えられたO これまで
Body

一ength(mm)

述べてきたようにマダイの形態変化は体長30ramから40mmの間に多く,この時期が形態学的な転換期に相当すると考えられる。

Fig.ll. Relationship between body length andmouth size during semi‑extensive culture of red
sea bream.

天然環境に近い半租敗的飼育条件下で飼育された種百においても体長40mm付近で口径が変化した
那,口径の変化は食性の変化に対応している場合

高知県栽培漁業センターで半粗放的に中間育成されたマダイの体長と口径の関係をFig. 11に示す。体長(Ⅹ)と口径(y)の関係は体長40ram付近にが多い(代田,1970)c事実,天然海域におけるマダイの胃内容物調査によると,体長40mmを境に食性変曲点が存在し, 40mm以下ではy‑0.15x‑0.30, r=
0.997(n‑16)の回帰式を示したのに対し,体長が変化し浮遊性のコペボーダからやや大型種のヨコエビ主体食に移行する(今林ら,1975; ;木曽,1980;

40mm以上ではy=0.082x+2.40, r=0.993 (n=17)が得られた。

大森,1980)。天然海域では生活領嘘が拡大する時期でもあり(山口, 1978,先晩1979),稚魚から若魚期への移行期に相当すると思われる。

‑13‑

第2章 着底後の形態変化と脂質蓄積

第2節 脂質蓄積と放流サイズ
自然海域に放流されたマダイの放流効果は天然
魚との混獲率を中心に追跡されている。これに伴輝膿,腎臓および心澱は除く)を摘出し大きさに応じて15‑30尾の各組織をプールし分析に供した。

い再挿されたマダイの摂餌生態や形態学的変化に

筋肉中の水分・灰分は常法により,租タンパク質

関する知見も集模されつつある。輿石・安永はケルダール法で求めた全量素量に6.25を乗じて(1980)は,放流後のマダイの冒内容物分析調査より放流魚が放流海域の飼料環境に適応するまでに算出した。筋肉および肝輝膿の脂質はBligh andDyer (1959)らの方法に従いメタノール.クロロ

は少なくとも7日間を要することを報告している。

ホルム混液で抽出し重量法により求めた。腹腔内
脂肪組織中の脂質は摘出した内臓にアセトンを加また,松宮・木曾(1982)による胃内容物組成の調重では,放流魚の摂餌が量的・質的に天然魚と同えて24時間放置し,得られたアセトン溶液にn‑ヘ等になるには7日から10日間を要している。これらの知見は,人工的環境下で飼育された放流魚が,キサンと蒸留水を加えて脂質をヘキサン層に転溶
し,脂質を得た。なお,内臓の脂質含量は内臓重

放流後直には自然環境に適応できないことを示唆している。さらには捕食者からの逃避行動,索餌量に対する百分率で示した。

や潮流により放流魚の連動エネルギーは人工飼育条件下よりもはるかに高いと思われ,この間の摂実験

餌不足や運動量増加によるエネルギー消費を放流

プリングを行い,これを‑20℃で凍結保存し水分前の蓄積エネルギーで補う必要がある。放流後の含量および脂質クラス組成の分析に供した。各個

種宙の肥満度(長崎水試, 1979)やC/N比(立石,

体の水分含量を求めるため,乾燥器内で60℃で6時

1976),脂質(Nakagawa et al., 1991,VillaへNavarroetal.,1991)が急激に減少することからも,放流後間乾燥,さらに105℃で16時間乾燥して乾燥重量の環境変化が種苗に与える影響の大きさが推察でき,エネルギーの枯渇は放流後の生残に大きな影

従い,各個体毎の筋肉および肝聯臓組織O.oi‑

響をもたらす(Tsukamotoetal., 1989)。故に,放流前のエネルギー蓄横は放流魚の生残を左右する重小型ガラスホモジナイザーで試料を粉砕して行っ要な要因であり,放流サイズの指標の‑つとな級,脂質を含む下層のクロロホルム層を取り窒素る。本研究では中間育成期のマダイにおける脂質蓄積過程を追跡し,エネルギー蓄積から至適放流
サイズについて検討した。.

気流下で溶媒を除去乾固し適当量のエーテル,を加

1989年に広島県栽培漁業協会で中間育成

期間中のマダイより,貯化後67,82,94日目にサンを求めた。脂質の抽出はBligh andDyer (1959)に0.05gにメタノール・クロロホルム混液を加え,た。この混液を油過し,蒸留水を加え遠心分離

えた。この棟にして得られた脂質試料をヤトロン
社製クロマトロッドS一mに塗布Ln‑ヘキサン:
ジエチルエーテル:酢酸(80:20:1)で展開後,イ

材料および方法

アトロスキャンTH‑10 (ヤトロン社製)を用いて脂質クラス組成を分析した。また,腹腔内脂質の

実額l 放流種酉の脂質の存在状態を調べるため

脂質クラス組成を求めるため,試料にアセトンをに, 1987年に広島県栽培漁業協会で中間育成され加え24時間放置し脂質を抽出した。この混液を漣た放流直前の日齢95日のマダイを中性ホルマリン

過し,漣液にヘキサンと蒸留水を加え遠心分離で固定し,筋肉・肝輝膿については凍結切片を作後,脂質を含むヘキサン層を分取しイアトロスキ

製LsudanIIIならびにへマトキシリンによる二重ャンで分析した。また,一部の個体については魚染色を施し検錬した。また,腹腔内の脂肪組織はアルコール系列で脱水後,臨界点乾燥に供し,走体中の水分含量とトリグリセリド(以下TG)組成の比率を求めた。

査型電子顕微鏡で観察した。
一般成分と脂質成分の分析のための試料は,症

結

果

島県栽培漁業協会で中間育成中の種苗より醇化後
68,75,83,95日目に採集を行った。試料は分析まFig. 12に放流直前の種苗の筋肉および肝輝膿をで‑20℃で凍結保存した。筋肉,肝輝膿,内臓(肝SudanIFFで染色した組織像と,腸管を覆うように‑14‑

集2草 書底後の形態変イヒと脂質蓄積

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Fig.12. Lipid‑depository organs of 95‑day old red sea bream, a: Cross section though the whitemuscle, showing lipid accumulation. Stained with Sudan III. b: Cross section through thehepatopancreas. Stained with Sudan III. c: Scanning electronic microscopic photograph of the
mtrapentoneal adipose tissue.

Table 1. noximate composition (%) of red sea bream during secondary rearing
Body length (mm)27.2±5.4

Days after hatching

33.9ア5.640.8±4.5

68

75

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1.5

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1.4

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1.8

Hepatopanceas
Lipid

Nt

7.2

Intrapentoneal fat body
Lipid

5. 1

5.3

MuscleMoisture
Ash
Crude protein
Lipid

77.3

2.0

Body lengths are represented as mean and SD. Nt: not determined.

偏在する腹腔内脂肪組織の走査型電子顕微鏡写真を示す。白筋ではSudanIIIによってオレンジ色に90染色された脂肪は,筋繊維間の緒合組織中に多く検出された(Fig.12a)。さらに肝輝備中にも脂肪蓄

亘 85

°
°

.l.一

積は認められた(Fig.12b)。また,腸管の脂肪鼠織
では,個々の脂肪細胞がコラーゲン繊維と毛細血

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かがえる(Fig.12c)。したがって,放流マダイ種百の
主な脂肪蓄積部位が,筋札肝輝臓,腹腔内の脂

●●
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75

°●
°°

肪親織であることが判明した。
1 0

中間育成期間中の筋肉中の一般成分および肝輝20

膿と腹腔内脂肪組織中の脂質含量をTable lに示

30

40

50

Body length (mm)す。筋肉の脂賓含量は,平均体長27.2mm (68日齢)の種首では¥A で,成長と共に脂質含量は増加
し,平均体長40.8mm(83日齢)では2.CとなっFig. 13. Changes in moisture contents duringsecondary rearing of red sea bream.

た。平均体長53.5mm(95日齢,放流直前)の種苗

/‑ノ1ー

‑15‑

60

第2草 書底後の形態変化と脂質蓄積

成長と共に増加した。
Fig. 13に中間育成期の魚体中の水分含量を示す。水分含量は体長20mmでは80%前後であった
那,体長35mmでは76%まで減少し,その後一定となった。
Fig. 14に魚体中のTG組成比と水分含量の関係を示す。 TG組成比(Ⅹ)と水分含量(y)の間には
y= 0‑089x+79.857, r=0.761 (n=15)で示される負の相関関係が認められた。
Fig. 15に中間育成期間中の個体毎の筋肉と腹腔
内脂肪組織中のTG組成比を示す。筋肉中のTG組成比をみると,体長40mmまでは15%前後の個体がFig. 14. Relationship between triglyceride contents(percentage among total lipid) and moisture injuvenile red sea bream.

多く認められたが,体長40mm以上では2倍近い30%程度となり,その後安定した。腹腔内脂肪組織のTG組成は体長20mra頃では50%程度であったが,その後急激に増加し,体長35mm‑40mmでは50

平均約90%に達し,その後一定となったO

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一般に脂質含量と水分含量には負の相関関係が°°存在する事が知られているが,本研究ではTG組成

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20

30

40

50

比と水分含量にも負の相関が認められた。これは体内‑の脂肪蓄積がTGの形で行われているためで60あろう。魚体中の水分含量は成長と共に減少した
・・

芭 75
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が,体長35mm付近で一定となったことから, TG°、.‑v・...‑.

蓄積もこの付近で一定になるものと考えられる。
事実,筋肉中の脂質含量やタンパク質含量や,筋・・丁.で.'・

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肉や腹腔内脂肪組織のTGの組成比は体長35mmか

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ら40mmまでは増加傾向にあったが,それ以降はほ°25

ぼ一定の億を示した。このような脂質蓄横過程は半粗放的飼育条件下のマダイでも観察されており

°

9:

30

40

Body

一ength50(海野ら,1989),体長40mm付近でマダイの脂質蓄積
は新たな局面をむかえると考えられる。

60

(mm)

マダイにとって体長40mmは,外部ならびに内部
形態変化を完了し成魚の形態と類似するようになる時期であり,稚魚から若魚期の転換期に相当す

Fig.15. Changes in triglyceride contents(percentage among total lipid) in the muscle

ると考えられている(第2章1節)。この時期は,天and lntraperitonea] fat body (IPF) duringsecondary rearing of red sea bream.

然海域では食性が変化し(今林ら, 1975J大森,1980;木曾,1980),生活頚城を拡大する時期でもあの脂質含量は2.C で,体長40mm以降では脂質含量の増加は認められなかっ‑た。筋肉中のタンパクる(山口,1978;矢野,1979)。福田(1985)は生活額域を拡大する降海南のサケ稚魚で脂質蓄横が充実することを報告しているが,マダイにおいてもこ

質含量も成長と共に増加したが40mmサイズでほとんど一定となり,脂質含量と同様の傾向を示しのような脂質蓄横過程は,生活領域拡大のための備えであると思われる。

た.一方,肝輝腹中の脂質含量は測定数は少ない
が,概して増減が激しく特に一定の傾向は認めら

本研究では中間育成期のマダイ放流種宙の脂質れなかった。また,腹腔内脂肪組織の脂質含量は

16‑

第2串 着底後の形態変化と脂質蓄積蓄積過程を量的側面より検討したが,脂質蓄横を指標とした場合の最小放流サイズは体長40ramと結論できる。これまで放流種菌の至適放流サイズに関する研究は少ないが,福原(1975)は鱒の機能的側面から体長30mmを,高場ら(1978)は定着性より尾叉長50mmを提示している。今後は至適放流サ
イズを様々な側面より検討し,知見を蓄摸し総合的に決定する必要があろう。

17‑

第3章 脂質蓄積と放流種苗の質

第3章 脂質蓄積と放流種苗の質
第1節 脂質蓄積と絶食耐性
人工的に飼育された種菌が放流後の天然環境に実験II 1988年に平均体長22.5mm貯化後60日).

順応し摂餌できるまでにはかなりの日数を必要とし(輿石・安永1980;松宮・木曾,1982),この間の32.3mm (醇化後73日), 43.9mm (貯化後84日),
49.4mm (醇化後90日)の種百について絶食試験を実エネ)I,ギ‑を放流前の貯蔵エネ)i,ギ一によって補施した。絶食試験の種百収容尾数は各群につき100

わなければならない(Nakagawa et al, 1991; Villa・

尾と250尾の2つを設定した100尾収容水槽は生Navarretal.,1991)。このような観点から,放流種

残率を観察するために用い, 250尾収容水槽では絶宙のエネルギー蓄積量は放流サイズの決定や種宙食に伴う生物学的性状を追跡するため5日毎に10尾の質的基準の一つとなるO第2章では,種苗のエネから15尾の種苗を無作為抽出し,肥満度,比秤垂

ルギー源として重要な脂質の蓄横過程を調べた

量,比内膿重量を求めた。

が,無給餌生残日数も種菌の賓を評価する有効な統計学的比較は2群間が等分散の場合には二標本手段であるo しかしながら,放流種菌の無給餌生

t検定,等分散とみなせない場合にはWelcl一法によ

残日数,いわゆる絶食耐性についての研究例は少り有意差の検定を行った。

ない。本研究では,様々な成長段階における種苗の絶食耐性,絶食に伴う魚体の性状や脂質の変化

結について分析し,脂質蓄積と種甫性について考察した。

果

実験I Fig‑ 16に1987年の種苗の絶食条件下での生残率の推移を示す。 161mm群では絶食試験開始当材料および方法

初から生残率は急激に低下し12日目での生残率は10%程度であった。雑食耐性は成長と共に向上

実験I 1987年に広島県栽培漁業協会で中間育成中

し, 27mm群の17日目の生残率は25%となった。ま

の平均体長15.7mm好イヒ後54H), 27.2mm醇化後

た, 40mm群の種菌の21日目における生残率は85%68日), 40.8mra(貯化後83日i, 53.5mm(貯化後95日)の種苗200尾を0.5tパンライト水槽に収容し,そで, 54mm群では22日目でも95%以上であった。

れWoo, 16, 21, 22日間無給餌条件においた。死亡個体数の観察は1日3回実施し,死亡個体は適宜取り除いた。絶食試験期間中の水温は19.4‑24.9℃で,換永率は0.25t/hであった。また,絶食試験終了時にすべての個体をとりあげて, ‑20℃で保存し魚体成分の分析に供した。生物学的測定は各群20尾について行い,体重,体長,肝輝膿重量,
内臓重量を測定し,肥満度,比肝重量,比内膿重量を算出したO また,各群20尾をプ‑)i,し魚体成分の分析に供した。筋肉中の水分含量,灰分は常10法により,タンパク質はケルダール法,脂質はメ

15

20

25

Starvation period (day)タノール.クロロホルム抽出後(Bligl〕andDyer,
Fig.16. Survival rates of red sea bream at1959),重量法により測定した。脂質クラス組成はvarious growth slages during starvation in 1987.

イアトロスキャンで測定した。

‑18‑

弟3章 脂質蓄積と放流種苗の貿Table 2. Biological characteristics and proximate composition of red sea bream before and after
starvation at various growth stages

Days after hatching
68

83

95

Before After16days Before After21days Before After22days
Body length (mm) 27.2±5.42

30.8士1.57**

40.8±4.56

47.7±3.33***53.5±4.91

58.9±3.90***

Condition factor

2.27土0.33*

3.36±0.44

2.64:±0.24***

3.38土0.23

2.84±0.18***

Viscerosomatic ND

9.94士0.86

4.15±1.36***ll.9±2.71

4.23±0.65***

index (%)
Hepatos omati c ND
index (%)

1.35±0.33

0.39±0.21***1.18±0.46

0.32ァ0.15***81.0

3.39±0.38

Proximate composition (%)
MuscleMoisture

79.3

84.5

77.3

83.2

77.3

Ash

1.8

4.3

1.6

2.2

1.5

n

Crude protein

17.5

ll.0

19.1

13.8

19.2

16.4

Lipid

1.4

0.2

2.0

0.8

2.0

0.9

Hepatopancreas
Lipid

ND

ND

14.1

.

11.0

2.6

6.0

2.9

7.5

Intrapentoneal fat body
Lipid

5. 1

Data are shown as mean and SD (n=20). Significant differences from the vali;Ie before starvation are
shown as follows, **p<0.01, ***p<0.001. ND; not determined.

Table.2に27mm群, 40mm群, 54mra群をそれぞ群の筋肉と腹腔内脂肪組織中の脂質クラス組成のれ16日(生残率25%), 21日(生残率83%), 22日間変化を示す。租食に伴う各群の筋肉中の脂質クラ(生残率95%)絶食させた場合の魚体成分を示す。雑ス組成の変化をみると,いずれの群でもTGがエネ

食条件下でも各群の平均体長は有意に増加した

ルギー源として動月されていたが,遊離脂肪酸やが,肥満度,比肝重量,比内膿重量は有意に低下

コレステロールの組成比には大きな変化は認めらした。筋肉中の一般成分ではタンバク賓や脂質がれなかった。また,絶食が進行し,生残率の低か大きく減少した他,肝輝膿や腹腔内脂肪組織の脂った27mm群ではリン脂質も大きく減少した。一

質含量も大きく減少した。ただし,生残率が比較

方,腹腔内脂肪組織ではすべての群でTGが減少

的高い時点で絶食試験を中断した54mm群の脂質やし,遊離脂肪酸が増加した。

タンパク質の減少は他群と比べると小さかった。
Fig.17に絶食に伴う27mm群

40mm群

54mm

実験 Fig.18に平均体長22.5ram(醇化後60日),

intrapsritoneal fat body

∫

i

1

2

g5

王1

C

1コ

lロ

.与

普

27.2ォ蝣

40.3hb

Fig. 17. Influence of starvation in lipid level and lipid
class composition of red sea bream at various growtli
stages. The fish of 27.2, 40.8 and 53. 5mm in BL

0

1

20

30

40

50

Starvation period (day)were starved for 16, 21 and 22 days, respectively.
Left and right column represent before and after
starvation, respectively. TG;triglycerides, FA; freefatty acid, Cho; choresterol, PL; phospholipid.

Fig. 18. Survival rates of red sea bream atvarious growth stages during starvation in 1988.

19

第3車 脂質蓄積と放流種酉の質

IO

∈
∈

〉く
q〉

.1=

E

1.5

・*‑>

U
.a
a
≡
0

ロI
⊂
<0
>ヽ

一〇
0
也

∽1

9
監

<D
コ:

ロ1

ぎ

‑
̲i=

ー
〉く
q〉
D

.gl
q)
5

10
9

.≡

音
○
⊂n

」
ttl

8

g
0

7

g

6

>9

5

o

i̲̲

10

0
TS
a
tl・・.‑・

1 5

20

25

30

35

Starvation period (day)

l=

.9
・*一・

1⊃
⊂
C1

0

Fig.20. Changes in hepatosomatic index and
1 0

1 5

20

25

30

viscerosomatic index of 43.9mm size during
starvation. Data are shown in mean±SD (n=10‑3515). Significant differences against the iidtial
Starvation period (day)value are shown as follows, * p<0.05,
0.01, *** P<0.001.

** p<

Fig.19. Changes in body length , body weight andcondition factor of 43.9mm size fish duringの後も20日目まで減少した。また,絶食に伴う比

starvation. Data are shown in mean±SD (n‑10‑15).

肝重量および比内臓重量の推移をみると,両者とSignificant differences against the initial value areshown as follows, ** p<0.01, *** P<0.001.

も絶食5日巨=こは有意に低下し, 10日目までは大きく減少したが,その後はほとんど一定となったo

32.3mm(醇化後73日), 43.9mm(醇化後84日),
49.4mm(醇化後90日)のマダイ稚魚の絶食に伴う生絶食耐性と体長およびTGの関係1987年と1988

残率の推移を示す

23mm, 32i‑ira, 44mm, 49mm

年度の種菌の成長履歴や飼育条件はほぼ同様であ群の半数致苑日数はそれぞれ9, 22, 27.8, 34.5日であった。

ったため, 1987年度の16mm群と27mm群, 1988
年度の23mm, 32mm, 44mm, 49mm群の平均体長とFig. 19に44mm群の絶食に伴う体長,体重,舵絶食条件下での半数致死日数の関係をFig. 21に示

満度の変化を示し, Fig. 20に比肝重量,比内臓重す。体長(Ⅹ)と半数致死日数(y)との関係はy=0.823x‑量の推移を示す。体長は雑食条件下でも5日目には

7.041, r=0.984となる回帰直線で示された。

有意に増加し(pく0.01),その後も増加傾向を示し

絶食開始当初の23mm, 27mm, 32‑‑1叫44mm,

たO体重には絶食開始当初から25日目までは有意

49mm群の魚体垂IOOg当たりに含まれるTG量とな変化は認められなかったが, 30日目以降に有意半数致死日数との関係をFig. 22に示すo TG量(x)に増加した。この時期は44111111群の生残率が急激にと半数致死日数(y)の関係はy=22..117x+1.803, r=

減少する時期とほぼ一致している事から,比較的

0,968となる有意な直線剛帝で示された。

小型種苗が死亡し,大型種菌が生残していたためと思われる。肥満度は5日目には有意に減少し,そ‑20‑

第3章 脂質蓄積と放流種苗の質認された。したがって稚食時のエネルギー代謝は‑a

坂口・浜口(1981)が指摘するように魚種や発育段・芸 30

階よって異なることが予想される。

=I
∽

g
in

絶食期間中にマダイ種苗の比肝重量.比内臓重20量はいずれも急激に減少したが,これらの現象は

th・t

0

マダイ成魚の場合(Nakagawa and Kasahara, 1986)

賢10と一致した。絶食中の比肝重量の減少は主にグリ⊂⊃コーゲンや脂質がエネルギ‑源として消費された
1 0

20

30
Body

一ength4050

こと,また比内臓重量の減少は主に腹腔内脂肪がエネルギーとして消費されたことに起因すると考(mm)えられる。稜酉が餓死する時期の肥満度は1.7,比Fig.21. Relationship between body length of
red sea bream and days of starvatioǹ whensurvival rate became 50%.

肝重量は0.6%,比内臓重量は6%となっており,この時期には肝輝膿の萎縮による機能低下や筋タン
パク質の分解による遊泳力低下等もかなり進行していると思われる。
本研究において種苗の体長と絶食耐性には有意な直線関係が存在することが明らかにされたことから,種苗の大ききからある程度の雑食耐性が推定可能であると思われる。しかしながら塚本(1993)は10mm, 20mm, 40mmサイズのマダイの絶食による半数致死E]数はそれぞれ3日, 5B, 10

0.5

日であると報告しており,本研究結果とは大きく1.5異なる。これは種苗の生産機関が異なる場合ではTnglycerides (g/iOOg fish)

種苗の雑食耐性が体長のみでは推察しがたいことFig.22. Relationship between triglycerideを示唆している.一方,種菌のTG蓄横量と絶食耐contents of red sea bream and days of
starvation when survival rate became 50%.

性の間に有意な相関関係が認められた。これは成長と共に増加したTGが絶食条件下で選択的に消費されたためと考えられる。中野(未発表)は各生産

考機関の種苗の魚体成分を分析し,放流種苗のエネ

察ルギー蓄積が生産機関によって大きく異なること
一般に魚類の主要なエネルギー源は脂肪,タンを指摘しているが,上述した生産機関による絶食

バク質,グリコーゲンであるが,絶食条件下で脂耐性の差異は,種百のTG蓄積量の差異に起因して肪は優先的にエネルギーとして利用され,脂肪がいると思われる。

消費された後にタンパク質が消費される(Love,

マダイ放流種菌の質的評価法として,ハンドリ

1970)。このような現象は中野・白旗(1988)によングによる回復力(北島ら,1979),麻酔および乾出ってサケ稚魚で報告されており脂質が優先的かつに対する抵抗力(丸山ら,1986),核酸比(中野・白旗,

重要なエネルギー源であることがうかがえる。し1988),横臥行動(塚本, 1990, 1993;内田ら,1993)

かしながら,マダイ40mm群を絶食させた場合,す等が提唱されている。本研究において種首のTG蓄

べての体脂質がエネルギー源としてまだ消費され積は絶食耐性の目安となることから放流種苗の質てないにもかかわらず,体タンパク質の減少が確的指標の一つと考えられる。

‑21‑

第3章 脂質蓄積と放流種菌の質

第2節 魚体成分に及ぼす給餌率の影響
摂餌によって獲得されたエネルギーの一部は,(%),体高比=(体高/体長)×10,腹腔内脂肪組織比

生命を維持し成長を支えるための代謝活動に消費されるほか,体重増加分として体内に蓄積され(%) ‑(J麦腔内脂肪組織重量/体重)× 100,比腸管長‑
消化管長/体長を算出した。

る。故に脂質をはじめとする体内‑のエネルギー
蓄積は摂取エネルギーや成長とのバランスによっ

魚体成分分析 試験終了時に任意抽出した各区25て規定されると考えられる。事実,摂取エネル

尾を‑20℃で凍結保存し,魚体成分の分析に供しギーの差異は成長や魚体成分に影響を及ぼすことた。なお,分析は5尾分の各組織をプールして1回が,ベニザケ(Brett etalリ1969),こジマス(Elliott,1976),スズキ(Hungetal., 1993)等の魚種で知られ分とし,各区で計5回(25尾)測定した。筋肉中の水分・灰分は常法に従い,租タンパク質量はケルている。

ダール法で,脂質はメタノール・クロロホルム混

一方,マダイ放流種菌の生残は放流前の飼育方液で抽出し,重量法で脂質含量を分析した。ま法によって大きく左右されることが津村・山本

た,脂質については脂質クラス組成をイアトロス
キャンで分析し,各区25尾より抽出した脂質を(1993)によって報告されている。飼育環境が穂首に及ぼす影響についての研究は重要と考えられる那,飼育密度が体成分に及ぼす影響についての研プールし脂肪酸組成の分析に供した。脂肪酸組成の分析は,調製用TLCプレートでTGとリン脂質に

究(津村・山本,1993)がわずかにある程度であ分画し,脂肪酸メチルエステルをunisole3000 (ガる。

スクロ工業)を充填した2mのカラムを装着したガ本研究では,給餌量が種百の脂質蓄積状態や外部および内部形態に及ぼす影響について分析する

スクロマトグラフ(日立263‑30)で分析した。な
お脂肪酸の同定には標品(西尾工業社製)との比較おと共に,・摂餌量と成長や脂質蓄積との関係についよび各成分の相対保持時間の対数値と炭素数との直線関係を用いた。

て検討した。

材料および方法

絶食試験

試験終了時に6%給餌区と3%給餌区の稚魚80尾について絶食試験を行った。雑食試験中

供試魚 広島県栽培漁業協会の網生け業で中間育の水温は24.2‑25.5℃で換水率はO.lt/11とした。な

成中の平均体重0.69g (体長27.6mm, 64日齢)のマダイ種菌を実験に供した 0.5tパンライト水槽3

お, 1%給餌区については苑亡率が高く十分な数の魚が得られなかったため雑食試験は実施しなかった。

基に種酉各200尾ずつを分養し,一日に全魚体垂あたり6%(飽食相当量, 6%給餌区), 3% (3%給餌区), 1% (1%給餌区)の配合飼料(初期飼料協和

統計処理 生物学的性状と体成分について統計学

C‑2000,粒径2000/im),協和発酵=業株式会社)を投与した。給餌は6%および3%給餌区は1日

的比較を行った。実験開始当初と試験終了時の2群間の比較には,両者の間で等分散の検定を行い,3回に分けて, 1%給餌区は1日1回とした。飼育期
間は42日間で, 7日毎に各試験区より任意に30尾等分散の場合には二標本t検定,等分散とみなせずつとりあげ,得られた平均体重と生残尾数からた。また,試験終了時の3つの試験区の比較は給餌率を補正した。飼育期間中の水温は21.5‑

Fisher's PLSD法により危険率5%水準で有意差の25.9℃で,換水率は0.25t/hとした.

検定を行った。また,回帰係数の差の検定は共分ない場合にはWelch法により有意差の検定を行っ散分析法で行った。

生物学的性状 試験終了時に各区より60尾を任意抽出し,直ちに10%中性ホルマリンで固定し生物

結果

学的測定のための試料とした。測定項目は体重,
体長,体高,筋肉重量,肝輝膿重量,内臓重量,.

飼育結果と生物学的性状をTable に示すo試験

腹腔内脂肪組織重量,腸管長で,肥満度,筋肉比

終了時の各区の成長率は給餌率の低下と共に低下‑22‑

弟3車 脂質蓄積と放流種菌の質

Table 3. Biological characteristics of young red sea bream reared with different ration size

After feeding

6%BW/day

3 %BW/day l %BW/day(n=60)(n=59)(n=50)

Body length (mm)27.6±2.87

53.7±6.46

47.8土5.01

38.9±4.25

Body weight (g)0.69±0.21

1.76±0.58

5.40± 1.73

3.58±1.24

Growぬrate (%/day)

1.58

1.31

0.82

Survival (%)

78.5

77.5

38.0

1.76士0.10c*

Condition factor

1.87±0.10

2.10±0.16a*

1.98±0.13b

Muscle ratio (%)

19.5土3.0

38.0±2.4a*

33.5±2.8b*

30.7±3.8c*

Hepatosomatic index (%)

2.01土0.56

1.80士0.37a*

1.64ア0.35b*

1. 10土0.36c*

Viscerosomatic index (%)

10.32±1.72

9.62士1.27a

8.63ア1. 19b*

8.20士1.26b*

I PFratio (%)

ND

0.88±0.50a

0.23±0.24b

Tr

Body dep山ratio

4.20土0. 15

4.24±0. 16a

4.07±0. 13b*3.96+0. 12c*

Relative intestinal length

0.61±0.09

0.71土0.08a*

0.55±0.07b

0.57±0.07b

Values are shown as mean and SD. Values with different letters (a,b and c) have significant differences (p<0.05) among 3 rationgroups. Values with asterisk (*) have significant differences (p<0.05) when compered with initial values. IPF; intraperitoneal fat
body, ND; not dtermined, Tr; trace.

した。生残率は6%給餌区と3%給餌区の間で差異は認められなかったが, 1%給餌区の生残率は38%と極端に低い億となった。生物学的性状を試験開

巨

星
JZ

始時と試験終了時との間で比べてみると, 6%給餌

ち̲
q)
lt)

区の肥満度は試験開始時より有意に増加したが, 3%区では変化なく, 1%給餌区では有意に減少し

>ヽ

̀ロ
0
●●

た。また,各試験区の筋肉比は開始時より有意に上昇したが,上昇の程度は6%給餌区, 3%給餌
区,次いで1%給餌区の順で顕著であった。さらに
6%給餌区の比内膿重量と比体高は試験開始時と差はなかったが, 3%および1%給餌区は有意に低下した。比腸管長では6%給餌区で増加し,制限給餌
した2つの区では変化は認められなかった。

≡
≡
.1=
・*‑サ

lコ1
⊂

試験終了時の生物学的性状を各区で比較すると,給餌量の違いにより有意差が生じたのは,舵

̲壁
Id
⊂=

満'.7.怖巾Il∴ 比JJT申fil.眼aMr*‑jI剛岬稲川・.. II;葛d)

体高で,比内脹重量や比腸管長についても6%給餌
区と2つの制限給餌区の間で有意な差異が認められ・t・.・J

l=

た。
20

30

40

50

60

Fig.23に各区の体長と体高の関係並びに体長と腸管長の関係を図示した。各区の体長(Ⅹ)と体高(y)の関係は各区で以下のように高い相関関係を持つ
直線式で示された。

Body 一ength (mm)Fig.23. Relationship between body length anddepth, body length and intestinal lengthof red sea bream reared with different ration

6%給餌区; y‑0.368x+2.097, r‑0.961 (n‑60)
3%給餌区; y‑0.429x‑1.036, 】蝣=0.960 (n‑59)size.

1%給餌区; y=0.393x+0.130, r=0.966 (n=50)
これらの剛帝係数を統計学的に比較すると,傾き%給餌区と制限給餌区の間で有意差(I)く0.01)が認められた。

では6%給餌区と3%給餌区の間に, Y軸切片では6また,体長(x)と腸管長(y)の関係は以下のような

‑23‑

70

第3章 脂質蓄積と放流種苗の質

直線回帰式で示された(Fig.24)。

の傾きおよびy切片ともに各区の間で有意差(p(0.01)が認められた。

6%給餌区; y‑0.988x‑16.526, r=0.845 (n‑60)
3%給餌区 y‑0.882x‑9.309, r=0.801 (n‑59)
1%給餌区 y‑0.643x‑2.886, r=0.760 (n‑50)
これらの回帰係数を各区の間で比較すると,直線飼育試験終了時の魚体の一般成分をTable 4に示すo各試験区の試験当初と試験終了時の魚体成分を比較してみると,筋肉タンパク質含量は6%給餌

Table 4. Effect of ration size on proximate composition and triglyceride contents of young red sea bream

Ini

tial

After

feeding

6%BW/day

3 %BW/day l %BW/day

MuscleMoisture (%)

78.7士2.076.9±2. 1a

78.8士2. 1a

83.0土2.3b*

Ash (%)

1.9±0.2

1.6士0. 1a*

1.8士0.2a

2.0±0. 1c*

18. 1±0.5

20.3士0.5a*

18.8±0.6b

Crude protein (%)
Lipid (%)

1.2±0.3

Tnglyceride (mg/g)

0.96±0.4

1.2土0.3a 0.6士0.3b*4.54:± 1.6a*

14.8± 1.3c*
0.4±0.4b*

0.52±0.8b 0. 14±0.2c*

Hepatopancreas
Lipid (%)

9.9士3. 1

1 1. 1±2.4a

Tnglycerides (mg/g)

55.9±9.770.2±10.3a*

9.1±1.6

10.1±1.1a

7.5士2.1b

2.0±1.9c*

54.7±9.8

89.8±15.3a*

34.4±16.3b

3.6±4.8c*

9.0±2.8a

3.0±2.4b*

40.9±12.5b 1.9士3. 1c*

Intrapentoneal fat body
Lipid (%)
Tnglycendes (mgノg)

Values are shown as mean and SD (n=5). Values with differei‑t lettere (a,b and c) 1‑ave significant differences (p<0.05) among 3
ration groups. Values with asterisk (*) have significant differences (p<0.05) when compered with initial values.

Table 5. Fatty acid composition in the experimental diet and muscle triglycerides of red sea bream rearedwith different ration size

Diet

Initial

14:0

4.3

3.7

16:0

19.3

24.1

After

feeding

6 %BW/day

3 %BW/day

1 %BW!day

4.5

5.5

21.8

26.2

27.0

18: 0

5.2

8.5

8.9

8.3

8.7

22: 0

1.7

1.3

0.7

,

4.0

∑ Saturates

30.5

37.6

35.3

40.4

45.2

16: 1

5.0

5.6

4.5

5.6

6.2

18: I

18.9

24.5

24.9

23.2

24.7

20: 1

EM

9.3

7.1

6.2

5.8

22: 1

4.1

7.2

4.5

*m

3.4

∑ Monoenes

32.7

46.6

41.0

39.4

40. 1

16: 2

0.7

IK

Tr

lr

0.6

18: 2

10.5

5.5

10.3

9.2

8.5

0.9

Mf1

16: 3

Tr

1.1

0̲7

18: 3

SJE

0.7

0.9

0.9

0.9

20: 3

Tr

0.6

0.5

0.6

Tr

16: 4

Tr

0.9

Tr

Tr

Tr

20: 5

ll.0

1.8

3.3

2.5

1.3

2Z: 5

K

0.6

0.8

0.7

0.7

22: 6

9.1

4.6

7.2

5.0

2.8

∑ Polyenes

36.8

15.8

23.7

19.8

14.7

Tr; trace.

第3章 脂質蓄積と放流種苗の質

Table 6. Fatty acid composition in muscle phospholipids of young red sea bream reared with different
rationsize

Initial

After
6%BWノdayfeeding

3 %BW/day l %BW/day

14: 0

2.1

2.2

2.4

2.2

16: 0

19.0

17.0

18.6

17.4

18: 0

6.1

6.0

6.5

6.6

22: 0

I.7

0.7

1.3

1.6

∑ Saturates

28.9

25.9

28.8

27.8

16: 1

4.8

4.2

4.7

4.3

18: 1

17.2

18.4

18.0

18.6

20: 1

5.0

3.2

3.6

3.1

22: 1

1.9

:ォ:

1.2

HK

∑ Monoenes

28.9

26.6

27.5

26.9

18: 2

4.5

9.8

9.1

10.5

20: 2

Tr

0.6

0.6

Iff

16: 3

0.6

0.8

0.7

Tr

18: 3

Tr

0.8

0.6

0.9

20: 3

IE

2.1

1.8

2.3

20: 5

8.6

8.5

5.2

6.1

22: 5

2.6

2.7

2.0

1.3

22: 6

24.5

22.2

23.7

24.2

43.7

∑ Polyenes
Tr: trace.

TGの脂肪酸組成では,各区の間でモノエン酸の組
成には差異は認められなかったが, C20:5 C22:6
等のポ1)エン酸の比率は給餌率が高くなるにつれて高くなった。これに対して各区の筋肉中のリン脂質の脂肪酸組成には,給餌率の違いによる影響は認められなかった。以上の傾向は腹腔内脂肪組
織でも認められた。

20

40

Fig.24に6%給餌区および3%給餌区の絶食条件
下での生残率を示した。生残率が50%に低下する
日数は6%給餌区で約33日, 3%給餌区で24日であった。

Starvation period (days)
Fig.24. Starvation tolerance of young red sea
bream reared wim different ration siz.C.

考区で有意に増加し, 3%給餌区では変化なく, 1%察

マダイ種菌を魚体垂当たり1%の給餌率で飼育し給餌区では有意に減少した。同様の傾向は筋肉,た場合,タンパク質や脂質含量は試験開始当初に

肝輝膿および腹腔内脂肪組織中のTGで認められ比べ顕著に低下した。このような給餌条件下では,飼料中の脂質やタンパク質は基礎代謝のためた。また,試験終了時のこれらの成分は,各区の間で有意差が認められた。

に消費されたと思われる。輿石・安永(1980)はマ
ダイ稚魚の体重維持摂飼量が1.26%であったと報Table 5に飼料ならびに試験開始当初と試験終了時の各区の筋肉中のTGの脂肪酸組成を示し,告しているが,本研究では1 %の給餌率でも体重Table6に.)ン脂質の脂肪酸組成を示すo筋肉中のは2.5倍も増加している。これは配合飼料の質的差‑25‑

第3章 脂質蓄積と放流穏苗の質

日数はそれぞれ33日, 24日で,明らかに3%給餌区

異や比較的大型の種百が生残したためと思われる。

の絶食耐性が低いと言える。また広島県栽培漁業協会で中間育成された平均体長43mmの種酉の絶食

3%給餌区の場合,筋肉タンパク質含量は試験開始当初より減少したものの,脂質やTG等の成分は比較的維持されたことから推察すれば,この3%の給餌率は生命維持のための代謝エネルギー要求量

耐性は30日であり(第3章1節), 3%給餌区の稚魚の雑食耐性は,中間育成中の同サイズの種宙と比較しても明らかに低いと青えよう。この3%給餌区のをほほ満たしていると思われる。

低い絶食耐性は前節で示したようにTG蓄積の低さ

本研究においてそれぞれの給餌区の体長と体高の間に直線関係が存在したが,これらの相関関係に起因しているものと考えられる。
制限給餌が筋肉脂質の脂肪酸組成に及ぼす影響を統計的に比較した結果,各給餌区の間で有意差をみると,リン脂質の脂肪酸は給餌率の影響を受が認められた。また, 3%給餌区や1%給餌区の筋肉けなかったが, TGの脂肪酸組成ではC20:5 C22:6

比が6%給餌区に比べて明らかに低くなった。これ

等の高度不飽和脂肪酸の比率が給餌率の減少にしは制限給餌によって骨格筋の形成が停滞したためたがって減少した。一般にこれらの脂肪酸はマダイをはじめとする海産魚の必須脂肪酸で,特に細で,その影響が筋肉比や体高に反映されたと考えられる。また,内臓重量や腸管長にも給餌率の影

胞膜の構成成分である。とりわけ制限給餌ではこ響が認められたが,これは筋肉と同様に制限給餌

れら外因性の必須脂肪酸の摂取量は減少し,しかによって消化管の発・達が停滞したためと考えられる。

もリン脂質に優先的に取り込まれたため,上述のような脂肪酸組成を示したと考えられる。

6%給餌区と3%給餌区の絶食条件下での50%生残‑26‑

第4章 脂質蓄積と成長変異

第4葺 脂質蓄積と成長変異
第1節 成長と魚体成分
天然海域のマダイ仔稚魚の成長変異は人工的に魚を無作為抽出し,さらに2×2×2mの網生け費で飼育されたマダイよりも小さい事が知られている

配合飼料を1日3回投与し育成した。この飼育群(田中, 1982, 1993)。天然海域では成長の停滞した稚魚は捕食等にさらされやすく減耗の対象となが醇化73, 89, 96および111日,平均体長33.8±

り,結果的に成長はかなりそろうことになる(福原,となった時点で,大きさが同じになるように体長

1986; Houde, 1987)。一方,集約的飼育では高い生

約42.2± 1.5, 42.0±1.2, 42.9±1.3, 43.2±

残率を得ることを目的とするため天然環境に比べ1.2mmの種苗各10尾を選別し,以下の魚体成分分て非常に高い飼料密度が維持され,食害,飢餓,

析に供した。なお,飼育水温は22.6‑25.3℃であ

化学的環境要因の変動等の穂首の生残を脅かす条

33*

1.4, 41.3±1.9, 45.5±1.4, 52.9±1.7mm(n=30)

件は回避される。魚類の卵径や醇化仔魚の大きさにはある程度の個体変異が存在するが,種甫生産

魚体成分分析

体長,体重,肝臓重量,内臓重量の棟に保護された条件では,こうした変異が飼育および筋肉重量を測定し,生物学的性状として肥経過と共に拡大される(山岸,1964; Yaraagishi,

満度,比肝重量,比内漉重量,筋肉比を貸出し

1969)。

た。

同一日齢で魚体サイズの異なる放流マダイの魚筋肉および腹腔内脂肪組織の脂質含量はメタ体成分を比較した場合,小型種菌のエネルギーとノール・クロロホ)i,ム混液で脂質を抽出後(Btigh

しての脂質蓄横状態は大型種百より劣る(Umino etandDyer,1959),重量法によって求めた。脂質ク

al.,1991,1992)。しかしながら,これらの研究では

ラス組成はイアトロスキャンを用いて測定し, TG

分析に供した種苗の日齢が同じであっても魚体サを組織あたりの含量で示した。筋肉中のタンバク

イズが異なるため,発育段階の差異が脂質蓄積に質量はLowry法(Lowry etal., 1951)で,模酸含量は影響した可能怪がある。

中野(1988)の方法に従った。酸性フオスフア

本研究では,成長率の異なる種苗間での魚体成

タ‑ゼ(以下ACPase: EC 3.1.3.1)の活性は筋肉ホモ分を明らかにするために,実験Iでは同一のロッジネ‑トに酢酸寮衛液(pH2.8)を加えホモジナイズ

ト内で成長率の異なった種苗を用い,それらがし,遠心分離後の上清を租酵素液とした。基質と40mmサイズになった時点で脂質蓄横を含めた魚体

してp‑Nitrophenyl phosphateを加え25℃で30分

成分を分析した。さらに実験Ⅲでは,大きさの異なる種苗が共存した場合の摂餌量について検討し反応させ、,遊離したp‑Nitrophenol 量を測定し,組織中のタンパク質当たりの比活性で示した。

た。統計学的比較にはFisher'sPLSD法により危険率1%水準で有意差の検定を行った。
材料および方法

実験日.魚体サイズと摂餌量

実験t.成長率と魚体成分

摂餌実験1991年に広島県栽培漁業協会で中間育供試魚1990年に広島県栽培漁業協会で生産され成された種甫200尾を2基の屋外ltバンライト水たマダイ稚魚を,広島県水産試験場で中間育成し槽に収容し,配合飼料を1日3回飽食投与した。貯た。中間育成は海上の網生け貨(5×5×5m)に約2化後110日経過した時点で以下の実験に供した。

万尾の稚魚を収容し,オキアミとイカナゴの練り

i tパンライト水槽2基に平均体長73.7±0.77】11m

餌と配合飼料を一日6回投与した。醇化73日経過し(】11=100)の種首を200尾ずつ収容した。個体の摂餌た時点で中間育成中の網生け黄より約1000尾の稚量はTalbot. and Higgins(1983)の方法に従い,一定‑27‑

第4車 脂質蓄積と成長変異量の鉄粉を飼料中に混入させ魚に投与後, Ⅹ線投影

大型種蘭と平均体長62.6±5.1mmの小型種乱して胃内容物中の鉄瀞量から摂餌量を推定した。

限給餌区では平均体長85.5± 2.4millの大型種苗と試験用飼料の調製は,あらかじめ粒径をそろえて平均体長61.6±3.5mmの小型種宙をそれぞれ15尾

おいた鉄粉(300‑900!̀m)を飼料に対し5%の割合で混合した。さらに飼料に適当量の水を加えてずつについて,ソフテックス(ソフテックス株式会

制社, CMB‑2)を用いて軟Ⅹ線投影した。

造粒機で粒径5mmの円柱状のモイストペレットを
作製した。

結

果

一方の水槽では上記の試験飼料を飽食相当量給
餌し(飽食給餌区),他方には飽食量の50%に相当

成長率と魚体成分 成長率の異なるマダイ稚魚のする試験飼料を投与した(制限給餌区)。試験飼料

生物学的性状をTable 7に示す。肥満度は成長良好を投与した1時間後にすべての稚魚をとりあげ, 1

秤,通常成長群,成長不良群の間で有意な差異が%フェノキシエタノールで麻酔し,体重,体長を認められた。このような傾向は筋肉比においても測定後,飽食給餌区では平均体長80.9±3.8mmのTable 7. Comparison of biological characteristics of youiig red sea bream having different growth rate

Precoci
Body length ofsample (mm)42.2ア1.49

ousModerate42.0± 1.24

Ru

42.9± 1.29

nt

43.2± 1.24

(n= 10)(n= 10)(n= 10)(n=10)

Jul.21Aug‑4

Aug. 17

Aug.3 1

Days after hatching

73

87

96

111

Daily grow血rate(mm)

0.58

0.48

0.46

0.39

Average body length33.8±1.37

413±1.89

45.5±138

52.9土1.65(n=3 0)(11=30)3.36±0.44b

3. 12±0.70c

Sampling dateof sampling lot (mm)Condition factor(n=30)(n=3 0)3.54±0.22a

3.25±0. 16b(n=10)(n= 10)Viscerosomatic index (%)

1 0.2士0.79a

Hepatosomatic index (%)

1.50+0. 14a

Muscle ratio (%)

36.0± 1.2a(n= 10)(11= 1 0)8.79±0.70b

1 0.3土0.88a 1 0.3士0.57a(n= 10)(n= 10)(n=10)(n= 10)1.23±0.20b 1.77土0.42ab(n= 10)(n=10)

31.5±1.4b(11= 10(n=10)

1.51±0.3lab(nニ10)(n= 10)3 1.8±2.5b

28.7±2.9c(n= 10)(n=10)

Data are shown as mean and SD‑ Va一ues on the same line fol一owed by different letters are significantly different at p<0.01 level.

Table 8. Comparison of total lipid and triglyceride contents of young red sea bream having different
growth rate

Precoci
Daily growth rate (mm/day)

0.58

ous

Modera

0.48

te

0.46

Runt
0.39

Mus cleLipid (%)
Tnglycendes (mg/g tissue)

2. 17±0.51a 1.87±0. 18a

1.79±0.29a

1.24:±0.33b

2.2士0.9a

2.2±1,3a2.9±1.1a

1.0±1.Ob

1 1.72±2.42a

9.28±1.56ab

9.83±2.79ab

6.78±4. 62b

9.3ア2.9a

8.0±1.2a.8.2±3.1a

4. 1±3.7b

Intrapentoneal fat body
Lipid (%)
Triglycerides (mg/g tissue)

Data are shown as mean and SD (n=10). Values on the same line followed by different letters are significant一y different at
rxO.Ol 一evel.

‑28‑

第4章 脂質蓄積と成長変異

Table 9. Comparison in protein, nucleic acid and acid phosphatase (ACP) activity of young red sea
bream having different growth rates

Precocious

Moderate

0.58

0.48

0.46

Protein (mg/ lOOmg tissue)

18.2±0.77a

1 6.7土0.73ab

1 6.4±0.69ab

15.8±1.40c

RNA Og/100mg 也ssue)

77.6±6.35a

84.3±7.56a

68.2主2.59a

58.8± 10.5b

DNA (jAg/ lOOmg 也ssue)
Protein/DNA

14.5±0.64

15.0±0.62

12.9±0.75

14.3±2.26

1.25±0.08a

1.11±0.02b

1.27:±0.05a

1 ,00±0.06c

RNA/DNA

5.36±0.61a

5.63士0.55a

5.3 1±0. 17a

4.25±1.12b

ACPas e (unit/min/mg.protein)

1.06±0. 17a

0.72±0. 17a

3.16±0.43b

5.34:±0.99c

Daily growth rate (mm!day)

Runt
0.39

Data are showed as mean and SD (n=10). Values on the same line followed by different letters are significantly different at p<0.01
level.

群で有意差がみられた。
Table 9に筋肉中のタンパク質含量および核酸含量を示す。筋肉中のタンパク含量は成長率の低下に伴い低くなり,成長良好群と成長不良群の間に有意な差異がみられた

DNA含量は各群の間でほとんど一定であったが, RNA含量は成長不良群が有意に低くなった。その結果,成長不良群の、 RNA/DNA比は他群に比べて有意に低くなったO また, ACPase活怪は,成長の劣った群で比活性が高くなった。

Fig.25. Radiograph of young red sea bream.

魚体サイズと摂餌率 Fig. 25に鉄粉を含んだ試験

Unfed (A, upper) and fed fish (B, lower),

飼料を摂餌した個体と空胃個体の軟Ⅹ線写真を示

showing some iron particles in the stomach(arrow head). Scale bar=10mm

す。上が空胃個体,下が摂餌個体の投影像であるが,摂餌した個体では胃の中に鉄分影が映し出さ

託められ,成長の良い種百で比率が高くなった。

れた。なお,試験飼料重量(Ⅹ)と鉄粉数(y)との関また,比内臓重量は成長不良群が有意に低い値を係は y‑157.43x‑4,40,r‑0.994 (n=15)で示され示した。

たが,この回帰式を基に稚魚のⅩ線で投射された

Table 8に成長率の異なる群の筋肉および腹腔内

鉄粉数より,損餌率(%)=摂餌量/魚体重)×100

脂肪組織における脂質含量と組織当たりのTG含量を推定した。

を示す。成長不良群の筋肉中の稔脂質およびTG含Table lOに飽食給餌区と飽食量の50%に相当す

量は他群に比べて有意に低くなった。また腹腔内る試験飼料を投与した制限給餌区の大型種苗と小脂肪組織中の給脂質含量は成長良好群と成長不良

型種首の摂餌率を示す。飽食給餌の場合,大型種

Table 10. Feeding rate under the coexistence of large and small sized red sea bream in satiation andrestricted food supply

S ati ati on Res tn cted( l !2sati adon)
Large(n=15)
Body length (mm)Feeding rate (%)

8.09±0.38

2.57士1.04

S

mall

Large

Small

(n= 15)(n=15)

6.26±0.5且

8.55±0.24

6. 1 6±035

1.36士0.52

1.02±0.74

2.69±0,66‑29‑(n=15)

第4章 脂質蓄積と成長変異

酉の摂餌量は2.6%で,小型種百では2.7%となり,れるACPaseの活性は明らかに高いことからタンパ

両者の摂餌率に差異は認められなかった。一方,

ク質の分解速度が比較的商いと考えられる。

制限給餌の場合では,大型種苗の摂餌率は1.4 で

Jobling(1994)はタンパク質の合成能と分解能とのあったが小型種菌では空胃個体もみられ摂餌率はバランスが成長に関与している事を指摘してお1.0%となった。

り,特に成長の悪い個体ではタンパク質の合成能が低く,逆に分解能が高いことを示唆している。̀
考

この小型種百に特異的な代謝様式も成長停滞の要察因と考えられる。

本研究では,概して成長の停滞した種百ほど脂上述したような小型種百のタンバク質合成能の質やTG蓄棟の低い事が判明した。第3章2節では給低下と分解の上昇は栄養成分の浪費でもあり,成餌量と魚体成分との関係を調べたが,成長不良群

長の停滞につながる。 Li and Brocksen (1977)とでみられた成長の停滞と脂質蓄横の低下は,種苗

Ejike and Schreck (1980)はサイズ階級の下位に位を制限給餌飼育した場合と同様の現象である。事置するニジマス小型種苗は常に大型個体の威嚇や実,制限給餌による摂餌実験では小型種苗の摂餌

攻撃によりストレス蓄積状態にあり,この様な状率は大型種宙より明らかに低いことから,実際の態はホルモンバランスを崩壊させ,代謝活性の増種酉生産時でも体のサイズは種苗の摂餌量に依存大につながることを示唆している。種酉生産のよしていると思われる。

うな高密度飼育ではサイズ階級は増大し,小型種
苗は大型種苗からの威嚇や攻撃を受け,ストレス本研究で認められた様にサイズの異なる魚が共状態に陥りやすいと考えられる。

存した場合の小型個体の摂餌率の低下はメダカ(Magnuson, 1962),グッピー(名越,1967),ナマズ

高密度飼育による集約的生産では種宙の量的問(Randolph and Clemens, 1976),ニ ジ マ ス

題は解決されるものの,個体間の成長変異は助長(Yamagishi, 1962)で報告されている。これは,負され,必然的に本研究で明らかにされたような脂体の大きさによる社会的順位(以下サイズ階級; size‑

質蓄横に劣る小型種苗を生ずる。小型個体の脂質

hierarchy, Brown, 1946)が形成されるためで,飼育蓄横の低下は,サイズ階級による摂餌量の低下

密度の上昇や給餌量の低下によって拡大されや,代謝活性の増大による摂取エネ)L,ギ‑の過剰(Abbott and Dill,1988) ,小型種首の成長停滞の主要因と考えられている。

な消費が主要因であると結論される。このような問題の対策としては,低密度飼育によるサイズ階

一方,種菌生産過程で生じた小型個体のタンパ

級の親和や小型種苗の選別飼育が有効と思われ

ク質同化能は,明らかに大型種宙や通常の成長をる。成長変異の発現機構やサイズ階級の発現時期示した種宙より劣り,逆に細胞内分解の指標とさ等の解明が今後の研究課題となる。

‑30‑

第4章 脂質蓄積と成長変異

第2節 耳石標識法による成長履歴の推定
Pannella(1971)が耳石に数ミクロンオーダーの微細輪紋が存在し,これが日周輪であることを示全長と耳石長径 仔稚魚の全長と耳石長径(扇平石)との関係を調査する目的で,醇化後4, 10, 20,

唆して以来,この輪紋の形成周期や形成時期に関する研究が急速に進んだ。現在,この微細輪紋は22および40日目に飼育槽より約30‑100尾の仔稚
魚を無作為抽出した。各個体の全長を万能投影機

日周輪であることが多くの魚種で証明されており,マダイにおいても貯化後4日目に最初の輪紋がを用いて測定し実体顕微鏡下で扇平石を摘出した。耳石の頗微鏡写真より長径を算出して,全長形成される事がTsuji and Aoyama(1982)によって報告されている。特に仔稚魚の研究では,この輪との関係を調べた。

数を数えることにより貯化日や日齢査定が可能に去るほか,多岐にわたる履歴情報の解読がなされALC標識ている(麦谷, 1994)。
一方,魚卵,仔魚‑の大量標識法として塩酸テ
トラサイクリン やアリザリンコンプレキソン

径の間に有意な相関関係が認められたため,醇化

貯化後20日目になると,全長と耳石長

後22日目および40日目にALCによる耳石標識を施した。標識は桑田・塚本(1987)の方法に従い,仔魚を30ppmのALC溶液(pH,8.0)に24時間浸漬した。醇化後60日が経過した時点ですべての稚魚をとりあげた。この中より無作為抽出した約200尾の(alizarin complexone,以下ALC)による耳石標識法が開発された(Tsukamoto,1985, 1988;桑田・塚本,
1987)。耳石標識法とは魚を蛍光物質の標識剤溶液に浸漬し,耳石成長輪の形成過程で耳石中に取り込まれた標識の蛍光を利用する方法である。標識時に耳石の最外層にとりこまれリング状の蛍光標
識が形成されるが,そめ後,このリングの外側に全長を測定後,実体顕微鏡下で耳石(扇平石)を摘出し,蛍光顕徴錬下で耳石標識を観察した。観察紘,将化後22日目と40日目のALC標識が明瞭に観察できるまで,扇平石を0.3N塩鞍に捜漬し耳石表

耳石の新しい成長層が形成されていく。ある個体の耳石標識は耳石が成長しても変わることなく,面を徐々に溶解した。蛍光標識がはっきりと確認出来た時点で写真撮影を行い,醇化後22日および常に標識時の耳石サイズを示している。したがって,稚魚の全長と耳石サイズの間に相関関係が存40日目の耳石長径(ALC耳石リング径)を求めた。

在すれば,日数が経過した個体でもALC耳石径

統計処理 水立2群の差の検定では,両群間で等分は,標識処理時の魚体サイ声の指標となる。
前節では成長変異と種苗の体成分の差異を明ら散の検定を行い,等分散の場合にはt検定言等分
散とみなせない場合にはWelch法により有意差の検定を行った。

かにしたが,本節ではALCによる耳石標識法を利用しマダイ稚魚の成長履歴を推定し,成長変異ならびにサイズ階級の発現時期について考察した。

結果

材料および方法

全長と耳石径 Fig.26に醇化後4, 10および20日目における全長と耳石長径の関係を示す。醇化後4

供試魚1994年に広島県栽培漁業協会の網生け葺

日目には全長(x)と耳石長径(y)の間には相関で飼育中のマダイ親魚(雌雄各1尾)を用いて人工受精を行い受精卵を得た。約5000個の受精卵を0.5 t

関係は認められなかったが(y=0.025x+2.715, r‑
0.055,n=45),醇化後10日目では10%の危険率でポリカーポネイト水槽に収容し,醇化仔魚を得た。餌料系列は広島県栽培漁業協会の飼育マニュ

有意な相関が認められた(y‑0.042x+2.838, r‑

アルに従い,醇化後4日目から50日目までシオミズ

0.303,n=41)。 20日齢の仔魚では両者の関係は相関係数r‑0.973をもつ非常に有意な相関(y=ツポワムシ, 15日目から60日目までは配合飼札
20日目から50日目までアルテミアを与えた。飼育0.037x+3.543,n‑27)が認められたことから, 20
齢以降であれば耳石長径よりかなりの精度で全長

期間は60日で.飼育期間中の水温は17.1‑21.0℃が推定出来ると判断した。そのためALC標識は秤であった。

化後22日目と40Bに施したOなお,醇化後22日目‑31‑

第4章 脂質蓄積と成長変異

ノー一ヽ

E

S

L一

a
<u

メ.ヽ

F=

≡

.壁

S

て}

h̲

垂

B
<D

a

≡
.g
̀℃l

.*;

‑B
O

10

12

14

16

Total length (mm)Fig.27. Relationship between total length andotohth diameter on the 22nd and 40th day after
hatching.

と醇化後40日目における全長(Ⅹ)と耳石長径(y)の関係はy‑0.0398x+3.234, r=0.927 (n‑102)およ10

Total length (mm)びy=0.0235+4.004, r‑0.969 (n=50)で表された

Fig.26. Relationship between total length andotohth diameter in the early stage of red sea
bream.

(Fig. 2 7)。

成長履歴の推定 Fig.28に蛍光顔微鏡観察による60日齢の禰平石を示す。内側のALCリングが醇化
後22日目に標識されたもので,外側が好イヒ後40日目のものである。これらの標識は観察したすべての個体について明瞭に確認されたが,塩酸による
耳石表面の溶解が進行しすぎた個体もあったため一部の嗣査個体については耳石径の測定ができな
l>3&
60日齢の22および40日目のALCリング径を測定
し, Fig.27に示した全長と耳石径の直線関係式を利用して60日齢の好イヒ22日目と40日目の成長履歴を推定した。 60日齢の実測全長に対して40日目とFig.28. Micrograph of sagitta of 60‑day old
juvenile of red sea bream under UV light. Hsh
was marked with ALC twice on the 22nd and22日目の推定全長をプロットした図をFig.29に示す。 60日齢の実測全長(Ⅹ)と醇化後40日目にお40th day after hatching (arrowheads).

‑32‑

第4章 脂質蓄積と成長変異

ける推定全長(y)との関係は y=0.302x+8.195,
r‑0.780(n=156)で有意な(p<O.OOl)直線関直線関係が認められた(y=0.058x+4.894, r=0.431,

係で示された。また, 60日目における実測全長(x)n=138。

と22日目における推定全長(y)においても有意なFig.30に実測された22日齢における全長組成と60日齢の稚魚より推定された好化後22日目の全長∈楓成を示した。 22日に観測された平均全長は5.76±0.69mm (n‑301)で,これに対して60日齢の

E
y)
>ヽ
cd
T3
C)
^r

稚魚より推定された22日目の平均全長は6.29±

a

0.71mm (n‑138)で,両者の平均全長の闇には有」ト

意差(t‑7.375,pく0.001)が認められた。

局
=q

=1

」

1
a

魚体のサイズと耳石長径の間に有意な相関関係∈が存在することはマダイ(Tsukamoto et al., 1989),
スズキ(secor and Dean, 1989),タラ(Nishimura and

E
LO
>ヽ
【O
L事」

Yamada, 1988),キンギョ(Mugiya and Tanaka,
1992)等の多くの魚種で知られているが,これは耳石の成長が体成長に対応した形で進行している

討
co
̲」

B

8
E

ためである。また,摂餌量は体成長に反映される=コu

ため,間接的には摂餌量は耳石の大ききにも影響

̀局
二°]

̲.ど

を及ぼす(Volk et al.,1984; Zhang and Runham,

a
10

15

20

25

30

35

1992)。しかしながら,本研究では4日齢(摂餌開始時)のマダイ仔魚の全長と耳石長径には相関関

40

TL at 60 days(mm)

係は認められなかった。同様の現象はMetcalfe etal. (1992)によって摂餌開始直後の大西洋サケで報告されている。これらの発育初期における耳石サ
イズと体成長との間に関連性が認められない理由

Fig.29. Relationship between measured total
leng血on the 60th day and back‑calculated total
length on the 40th day (A), and 22nd day after

hatching

田). Dashed lines indicate

95%

は現在のところ不明であるが,最近の研究では耳confidence limit of the relationship.

石の大きさが必ずしも体成長だけでなく基礎代謝量の影響を受けることが明らかにされている(WrighH991)。摂餌開始時期の仔魚の代謝は非常に活発であり,しかもこれらの代謝は卵黄中の内部エネルギーのみに依存している事から,この時A̲

期の耳石サイズは個体のエネルギー量や代謝に影響されるものと考えられる。好化10日目で耳石とy.mii完∈・*'

20

全長との相関関係が認められるようになったのは,この時期の成長が活発な摂餌により営まれているためであろう。
3.5

4

4.5

5

5.5

6.5

7

7.5

8

本研究において輝北後22日目の全長と60日目の8.5

推定全長との間には有意な直線由係が認められTotal length (mm)た。これは好化後22日目までに形成された種宙のFig‑30. Size frequency distribution of measured

大きさの違いがその後の成長においても維持され

on the 22nd day after hatching and that of back‑ていることを示唆している。したがってこの時期

calculated from otolith reading of 60‑day oldの種菌のサイズの違いは社会的順位を反映し,サイズ階級を形成していると考えられる。実際に飼

red sea bream juveniles.

‑33‑

第4章 脂質蓄積と成長変異

育水槽内においても醇化後20B日頃から大型個体
が小型個体を追い散らす個体間干渉が観察された。

ての解明は今後の研究課題である。
60日齢の稚魚より推定された平均全長と将化後22日目の実測平均全長の間に有意な差異が認めら本研究において醇化後22日目に形成された成長

れたが,このことは醇化後60日目まで生存した個変異(growth depensation)は,後の成長過程においても維持されていることが明らかになったが,そ

体は,好化後22日目の時点では比較的大型であったことがわかる。換言すれば,成長の劣る小型種

れ以前の成長変異がいかに形成されるかは不明で

苗は種百生産過程において淘汰の危険にさらされある Yamagishi(1969)はマダイの成長変異が摂餌開始直後より顕著になることから,初期の摂餌やすいといえる。このようなサイズ依存性の死亡が成長変異の要因であることを指摘している。谷はTsukamoto etal. (1989)によって放流マダイでも報告されている.放流マダイでは,他魚種によ口(1986)はマダイの半兄弟群を飼育し,遺伝的差
異が成長差に影響することを立IiEしているO このる捕食圧の違いがサイズ依存性の死亡要顕と考えられているが,種百生産では大型種酉による攻撃

ように成長変異は初期の摂餌量の差や遺伝的な要や捕食が苑亡要因となっているのであろう。

素によって発現すると考えられるが,詳細につい‑34‑

第5章 脂質蓄積からみた飼育方法の評価

第5章 脂質蓄積からみた飼育方法の評価
第1節 成長および体成分に及ぼす選別飼育の影響
近年,種酉の生産技術は飛躍的に向上し,大量の餌料系列および給餌量は広島県栽培漁業協会のの種苗を限られた飼育施設で生産する集約的生産が可能になった。集約的生産では穂首の量的問題

飼育マニュアルに従い、好イヒ4日目よりナンノクは解決されたが、一方では飼育の経過と共に種苗からワムシと共に配合飼料を,さらに20日からはの成長差は助長される。第4車1節でこの様な種菌

乳化オイ)I,で栄養親化したアルテミアを給与し生産過程においてはエネルギー蓄積やタンパク質合成能の劣る成長不良魚が生じることを明らかにたO好化50日目に飼育密度を緩和するため, Lot. 1

した。また,この様な種宙は人工的な環境下でも飼育を継続したO醇化50B目以降は主に配合飼料

淘汰の危険にさらされやすい(第4章2節)ばかりか.共喰いによる歩留り低下の原因にもなっている。

を給与し,栄養強化のため適宜マダイ受精卵を与ロロブシスと油脂酵母で培養したワムシを, 15日

およびLot. 2より無作為抽出した約600尾についてえた。貯化後日数がLot. 1で76日目、 Lot. 2で65日目となる7月22日に穣苗を選別し,以下の試験に成長差拡大の対策として,経験的に種酉の大きさによる選別が一部の生産機関で行われている

供した。なお,この時のLot. 1群の平均体長は36.]±4.6mm、 Lot. 2群では29.9±5.4mmであった。

が,マダイに限らず選別飼育が後の成長に与える影響に関する知見は比較的少ない。ナマズにおい実験( :小型魚の選別と飼育 実験に供した種苗のては選別が小型個体の成長回復に有効であること

体長組成をFig. 31に示す。貯化後76日目のLot. 1よが報告されている(Randolph and Clemens, 1976;

り体長28.3‑34.8mm (平均体長31.8士2.0mm)の小Carmichael, 1994)。一方,加藤・坂本(1969)はニ
ジマス幼魚の選別後の飼育でも,小型魚の成長率

型種甫(以下S・1群)を70尾選別した。対照として醇
化後65日目のLot. 2より体長28.0‑‑34.8mm (31.7±は大型魚や中型魚のそれより劣ると報告した。同様の結論はJobling and Reinsnes (1986)によって報告されており,小型魚に対する選別効果の有無は

100

75

一致していない。
一般に,選別群の成長の良否は,異なるサイズ

L.
q)
.j〇

の無選別群やモード付近の中型魚と比較して評価されるが,大きさや発育段階が異なるため両者の

≡

50

25

13
t=
t=

成長の比較は困難である。そこで本研究では,マ

0

>ヽ

o
l=
q)
=l
ロ'
q)
t̲̲

ダイ種宙生産で生じた大型魚や小型魚に対し,同サイズの中型魚を異なるlotより選別し.両群を混合飼育することによって,選別が稚魚の成長や体成分に及ぼす影響について検討した。

100

n.1

LL

材料および方法
1 0

20

30

40

50

供試魚 広島県栽培漁業協会の親魚水槽より受精
Body length (mm)

直後の卵を採取し,それらを水温約17.0℃の貯化水槽に移し,仔魚を得た。 5月7日に貯化した仔魚(以下Lot. 1)および5月18日に好化した仔魚

Fig.3 1. Size distribution of original Lot 1 (76d, 36. 1(以下Lot.2)について,それぞれ約1万尾を0.5

medium size group of Lot 2 (M‑2, n=70, 31.7±

ア4.6inm) and Lot 2 (65d, 29.9±5.4tnm). Small sizegroup of Lot 1 (S‑1, n=70, 31.8士2.0mm) aild
1.9mm) were used communal stocking experimentm3ポリカーボネイト屋内水槽で飼育したo仔稚魚

for48 days.

‑35‑

第5章 脂質蓄積からみた飼育方法の評価

1.9mm)の中間サイズの種百(以下M‑2群)を70尾選別した。 S‑1群とM‑2群は別々の腹鰭を切除して標識結し,両群を混合して0.5tポリカーボネイ下水槽で小型群の成長と体成分 S・1群およびM‑2群の体長

48日間,配合飼料を1日3回飽食量を給与した。
実験日:大型群の選別と飼育

果

分布をFig. 33に示す。 sl群の体長は最大76.4mm,
最小40.3mmであった。対照としたM‑1群の体長範囲実験に供した種菌

は40.4mmから77.4mmであり,両群の体長組成に差異は認められなかった。

の体長組成をFig.32に示す Lot. 2より体長35.1‑41.6mm (37.4士1.6mm)の大型魚(以下L・2群)およ

S・1およびM‑2群の成長と魚体成分に及ぼす選別飼育の影響をTable llに示す。飼育期間中におけびLot. 1より体長35.0‑41.8mm (38.0±1.8mm)の中
間サイズの種苗(以下M‑1群)をそれぞれ70尾選別る両群の生残率および日間成長率に差異はなく,し,両群を混合して48日間飼育した。

飼育試験前後の変動係数にも差異は認められなかったO混合飼育前のS‑1群の筋肉脂質含量はM‑2群に比べて有意に低く, s i群の筋肉組織当りのTGの
聴対値はM‑2群のそれの1/6程度であった。しかし, s i群の筋肉脂質およびTG量は選別後の飼育に

L̲
qI
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冒
Ih̲

LL

1 0

20

30

40

40

50

45

50

55

60

65

70

75

80

Body 一ength (mm)Body length (mm)Fig.33. Size frequency distribution of small
Fig.32. Size distribution of original Lot 1 (76d,size (S‑1) and medium size (M‑2) groups

36.1±4.6mm) and Lot 2 (65d, 29.9±5.4 mm).

after communal stocking for 48 days.

Large size group of Lot 2 (L‑2, n=70, 37.4±

1.6mm) and medium size group of Lot 1 (M‑1, n=
70, 38・0ァ1.8mm) were used communal stocking
experiment for 48 days.

体成分分析 混合飼育前および飼育後の稚魚は‑20

L̲
CD
.a

℃で冷凍保存し,各群10尾を分析に供した。筋肉∈:コ⊂

タンパク賓はLowry法(Lowry etal., 1961)で比色

⊂
10

8‑

定量した。筋肉脂質はBligh and Dyer (1959)の方法に従いメタノール・クロロホルム系で抽出し,重量法により定量した。 TGの分析にはイアトロス

t=
q)
コ

夢

5

LL

キャンHT‑10を用いた。筋肉中の核酸含量は0Schmidt‑Thahhouser‑Schneider法を一部改変した中50

野(1989)の方法に準じて測定した。測定値の有意

55

60

65

70

75

80

Body length (mm)差の検定は, Student Hestを用いて危険率1%以下で行った。

Fig.34. Size frequency distribution of large
size (L^X) and medium size (M l) groups
after communal stocking for 48 days.

‑36‑

85

第5車 脂質蓄積からみた飼育方法の評価

M‑1群の体長範囲は,それぞれ50.1‑80.7mm, 51.0

よって有意に増加し,飼育終了時における両群の筋肉脂質含量およびTG量は等しくなった。選別時のS11群のRNA/DNA比はM・2群に比べて若干低かっ‑79.0mmであり,両群の体長組成に差異はなかった。

た。その後の飼育によって,両群のRNA/DNA比はTalbe 12にL‑2とM‑1群の成長および体成分に及上昇したが, S‑1群の上昇が顕著であった。その結果、飼育終了時のS・1群の核酸比はM・2群に比べて有意に高くなった。

ぼす選別飼育の影響を示す。飼育期間中における両群の生残率,日間成長率および変動係数に顕著

大型群の成長と体成分 飼育終了時におけるL‑2群

が,飼育後における両群のTG量はほぼ等しくなっとM‑1群の体長組成をFig. 34に示す。し2群およびた。一方,飼育前のし2群のRNA/DNA比はM‑1群

な差異は認められなかった。飼育試験前のL2群の筋肉脂質およびTG量はM‑1群に比べ若干高かった

Table 1 1. Muscle constituents of medium (M‑2) and small size (S‑1) groups of red sea bream after
communal stocking for 48 days

Initial

Final

M‑2

‑

M‑2

‑1

Body length (mm)31.7土1.931.8±2.062.7±9.0

63.3±8.8(n=70)( n=70)Body weight (g)0.93±0. 12

0.89±0. 15(n=64)
9.01土2.36(n=64)
9. 18士3.09(n=20)(n=20)(n=20)(n =20)

91.4

91.4

4.05

1.39

1.41

6. 15

14.31

13.9

2.7±0.30*

Survival (%)
Growth rate (%ノday)

Coefficient of variation (%)

Muscle constituents (n= 1 0)
Lipid (%)

2.5±0.25

2.2±0. 12a

2.5±0.32

Protein (mgノIOOmg)

18.2±2.49

1 7.4±2.48

20.7±3.09

19.5±3.00

7.6±2. 1 1

1.2±0.48a

9.7±4.42

1 1.8±4.00

3.0±0.67

2.5±0.70

8. l上o.89*

10.7±1.92a*

Tnglycerides (mg/g)
RNA!DNA ratio

Dat且are shown as mean and SD. Values with differe‑it letters (a) haveヲignificant differences (p<0.01) between two groups.
Values with asterisk (*) have significant differences (p<0.01) between initial and final values.

Table 12. Muscle constituents of medium (M‑1) and large size (し2) group of red sea bream after
communal stocking for 48 days

I

ni

ti

M‑l L‑
Body length (mm)38.0土1.8

1.68±0.13(11=20)Final

M l
37.4± 1.6

(n =70)Body weight (g)al(n=70)
1.70±0.15(n=20)

Survival (%)‑2

69.7±5.868.0±5.9(n=66)(n=68)

1 1.0土1.78

10.3±1.99(n=2 0)(n=20)

94.3

97. 1

Grow血rate (%/day)

3.71

1.22

1.24

Coefficient of variation (%)

4.76

8.26

8.66

Muscle constituents (n=10)
Lipid (%)

2.4±0.23

2.7±0.49

2.7±0.37

2.6±0.27

Protein (mg! l OOmg)

17.3±1.47

17.3±1.70

18.3±1.85

19. 1±2.67

Triglycendes (mg/g)
RNA/DNA ratio

5.2±3.36

7.8±3.389.9±2.37*

10.0土2.07

3.1±0.74

4.7±1.10a

8.7±1.26*

8.7±1.37*

Data are shown as mean and SD. Va】lies with different letters (a) have significant differences (p<0.01) between two groups.
Vallles with asterisk (*) have significant differences (p<0.01) between initial and fit】al values.

‑37‑

第5章 脂質蓄積からみた飼育方法の評価に比較して有意に高かったが,飼育終了時には差い関係があるRNA/DNA比の増加が,中型群より小異は滑失した。

型群で顕著であったことから.小型群の成長は選別以前より向上したと考えられ,種苗生産で生じ*た小型魚でも中型魚と同程度の成長能力を潜在的8に有すると考えられる。
大きさの異なる個体が共存した場合,餌環境をめぐりサイズ階級が生じ,その結果として小型個

選別前の大型群および中型群の日間成長率(%/day)はそれぞれ4.31および3.71であり,両者の相対的な成長率の差異が選別飼育後も継続されれ体の摂餌が阻害されることをマダイ種酉でも確認なる。また,小型群と中型群の選別飼育についてしたが(第4章2節),この様な小型種菌の社会的順
位が成長停滞の主要因と考えられる。それに対しも同様に,小型群の成長は中型群より遅延するとて選別は形成されていたサイズ階級を解消し,小考えられる。このような観点から,大型群や小型群の選別後の成長が対照の中型群と異なるか否か型魚の摂餌量を国復させ,さらに成長や脂質蓄稗について検討したO結果的には,大型群や小型群

中野・白旗(1988)はサケ稚魚を用い,種苗性の指標としてRNA/DNA比が有効であることを報告しば,大型群は中間群より良好な成長を示すことにの改善をもたらしたものと思われる。

の日間成長率は対照とした中型群と同等であった。したがって,サイズ選別による飼育環境の変た。また,蓄積脂質であるTGは、放流されたマダイが天然環境に適応するまでの主要なエネルギー化がマダイ幼魚の成長に影響したと推察される。

源として利用される(Nakagawaetal., 1991;津村・

コイ(中村・豊原,1955,1956,1957)や雌性発生ギンブナ(中西・小野里,1987)において、飼料に関わる飼育環境が仔魚の成長に大きく関与することが山本,1993)ほか,雑食耐性と深く関係していることから 種苗性の質的指標となる(第3車1節)。小型
種苗の選別飼育は成長のみならずRNA/DNAやTG

報告されている。サイズ選別が餌料環境に起因して生じたサイズ階級を解消するとすれば,本研究

蓄稗の増大を伴うことから,種苗性の向上にとっても有効な手段といえる。

緒某はコイヤギンブナと同様の事例と考えられる。

本研究では,平均体長を中心にして大型魚や小型魚を選別試験に供したが,トビやどリと称され小型群と中型群の混合飼育後の成長は同等であか,もしくは中型群の成長低下によるものかは不る成長変異の両端を形成する個体の試験や,選別時期とその効果に関する研究は今後の課題であ明である。タンパク質合成の指標であり成長と探る。

ったが,この現象が小型群の成長回復によるもの‑38‑

第5章 脂質蓄積からみた飼育方法の評価

第Z節 種苗放流に及ぼす音響馴致飼育の影響
放流効果の向上には,種苗の質的向上と共に自然海域における放流マダイの減耗の緩和が重要な

お,月巴満座の算出は尾叉長を基準に以下の計算に!サK*課題である。自然環境に適応するまでにはかなり

肥満度=(体重(ォ)/尾叉長[cm)5) × 100の減耗が予想され(北田・須乱1988),この期間の魚の生理状態が放流効果に深く関与していると同出し,脂質含量を求めた。脂質クラス組成の分析

時に,放流場所からの移動や分散も減耗要因と考にはイアトロスキャンTH‑10を用いた。筋肉の租

えられている(広島県,1991)。
一般に放流されたマダイは放流後の環境の激変

タンパク賓の測定はケ)I/ダ‑ル法によった。

組織の脂質はBligh and Dyer(1959)の方法で抽により損餌量が低下する(輿石・安永,1980;桧宮・結

木曾, 1982)。したがって放流種苗は自然環境に順応するまで摂餌不足を保有エネルギーで補う必要

果

放流海域の水温と放流後のマダイの成長をFig.35があり,脂質等の魚体エネルギーの追跡は放流魚の順応過程を知る重要な手がかりとなるに示す。本実験のマダイにおける放流から10日目(Nakagawa et al.,1991; Villa‑Navarro et al.,1991)。

0.40mm/日と級懐になったO放流直後より12月8日

音響馴致飼育は限られた海域‑の魚類の滞留率までの尾叉長増加は1.95mm/日となり,その後までの60日間の平均尾叉長増加は0.56mm/日であの向上や,飼育環境から天然群‑の加入を容易にamする目的で行われてきた(阪口ら,1975;長崎水試,
1989a,1989b)。本研究ではマタイを天然海域に放s

ド流する際の音響馴致給餌の有効性を特に脂質の蓄横状態を指標として検訂した。

l▼

く°
ラ
てJ
lも
Lil
Q
‑+
t=

材料および方法

l°
′̀}
(「

∈
∈
J=

供試魚1989年に広島県栽培漁菓協会で貯化し,

蝣+‑

tJI
C
AP

一次飼育したマダイを広島県水産試験場(安芸郡
音戸町)に運び中間育成した。 9月19日より10月3

一こロ
コ▼
lつ
u̲

日までの15日間,マダイ幼魚10β00尾(平均尾叉長102.7士6.9mm,平均体重27.4±5.6g)を同水産試射恥P、小剖桝に'KftL.水中‑・VU‑ ‑'j ll.1.]i*

051

26

44

68

Days ofler release

数200Hz、伝達範囲約1,000m)からの放声と同時にモイストペレットを自動給餌機を用いて投与した。投餌は1日当たり4回(9:00,ll:30,14:30,17:

Fig.35. Growth of red sea bream released intooo)行った。 10月3日に小割網を静かに開放してVertical bars indicate SD (n=10).

the natural water after acoustic conditioning.

マダイを付近の海域に放流し放声と投餌を開始し放流後の生物学的性状をTable 13に示す。放流

た。マダイの再輔は放流後68日目までの計6臥 ス

後はこれらの生化学的性状に顕著な変化はなく,

ピーカー付近より毎回10尾を釣り上げ分析に供した。

26日目に比肝重量に減少がみられた程度であった。
筋肉,肝輝膿,腹腔内脂肪組織の一般分析およ

生物学的性状と体成分 再補したマダイは直ちに‑20℃で凍緒し分析まで保存した.尾叉長,体び脂質クラス組成の分析結果をTable 14に示す。
放流後の筋肉成分に著しい変化は認められなかっ>li. 1日間ft'PE. IM掛rt吊.1:.し''順虻内mm純

た。また,放流当初の肝輝臓脂質は15.2%であった

重量を測定し,肥満嵐比内臓重量(%),比肝重量が,天然海域における時間的経過に伴い次第に減(%)および腹腔内脂肪組織比(%)を算出した。な

少する傾向がみられた。放流後の腹腔内脂肪組織‑39‑

第5章 脂質蓄積からみた飼育方法の評価

Table 13. Biological characteristics of red sea bream released after acoustic conditioning for feeding
into the natural water

Date Oct.2
Days

Oct.7

after

Oct. 1 2

lO

Oct.28

Nov. 1 5

26

44

Dec.8
68

releaseBody weight (g)27.4±5.

37.2±8.6

Condition factor

2.50土0. 14(n=10)

n=10)(n=10)

Viscerosomatic

8.77±0.85

9.99±1.74

10.03±0.83(11=10)index (%)

(n= 10)2.53±0. 15(n=5)

2.06±0.40

index (%)

2. 16土0.78

60.8±9.5

2.44±0.07(n=10)
8.66±0.58

2. 1 9士0.40(n= 10)68.4±6.8(n=10)

2.60土0. 13

2.42士0.90(n=10)(n=10)

9. 18± 1.03

10.0±0.90(n= 5)(n = 5)1.70±0.32

2.60±0.41(n= 5)

2.43土0.44(n=5)

IPF ratio (%)

48.9± 10.4
(11= 10)(n=10)
2.53±0. 12(n= 5)

Hep ato somati c

46.6±9.2(n=5)
2.65±0.50

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(n=5 )(n= 5)

2.74:±0.85

2.62±0.70

3. 18士0.67

2.40士0.56

3.33±0.21

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(n=5)

(11=5)

Data are shown as mean and SD. IPF; intraperitoneal fat body.

Table 14. Proximate and lipid class composition (%) of red sea bream released after acoustic
conditioning for feeding into the natural water

Date Oct.2

Oct.7

Days after release

Oct. 120

Oct.28

5

Nov. 15

Dec.8

10

26

44

68

74.6

Proximate composition
MuscleMoi sture

75.8

75.6

75.3

75.8

75.8

Ash

1.6

1.6

1.5

1.4

1.5

1.4

Crude protein

19.3

19.3

19.4

19.8

19.4

19.5

Lipid

3.3

SJfc

3.6

4.2

HE!

46

Hepatopancreas
15.2

Lipid
Intrapentoneal fat body

70.7

Lipid
'H

こ

しニ

ーニ

ー‑

・‑

∴

こ

=

ニー二

∵

‑

‑‑

一

一ここ

=

74.7
ニー

‑こI‑

こ‑

‑

‑

rニ

73.4
‑

・‑

こ・

‑

7

73.7
‑

‑‑

‑

=

・‑

1

‑‑

L二・一

69.6
こ‑

r‑

ここ

ニー

ニー

こ

78.2
こ一

一一

̲̲

Lipid class composition
MuscleTnglycerides

77.8

83.2

86.7

87.8

85.2

Free fatty acids

3.5

0.3

1.4

1.2

1.9

1.1

Chol esterol

MIS

0.2

0.3

0.2

0.1

0.2

Ph o s pholipi ds

18.5

15.3

ll.7

10.8

12.8

ll.4

Tn glycerides

71.5

74.4

78.7

49.3

64.9

55.3

Free fatty acids

21.4

16.7

9.5

35.9

12.9

28.8

Chol es terol

0.4

IX

0.2

IIII

0.4

1.4

Phospholipids

U.I

:ォ

ll.6

13.7

21.9

14.6

Tngl ycendes

96.7

97.5

97.0

98.3

96.9

98.6

Free fatty acids

0.8

0.6

0.6

0.3

0.7

0.3

Choi es ter・ol

0.5

0.3

0.5

0.2

0.4

0.7

Phospholipids

2.0

0.5

1.9

1.3

1.9

0.4

87.4

Hepatopancreas

Intrapen toneal fat body

…

.

.こ

j

l

第5章 脂質蓄積からみた飼育方法の評価の脂質に変化は認められなかった。
筋肉脂質の主成分であるTGは10月28日まで次第*ftに増加し,相対的にリン脂質および遊離脂肪酸の一般に音響馴致の効果として放流地点への定着割合が減少した。腹腔内脂肪組織の脂質クラス組
成はTGが常に95%以上を占め,遊離脂肪酸にも変性の増大があげられる(大分水試,1988;長崎水試,化はみられなかった(Table 14)。
筋肉の脂質量を単位体重当たりに換算し,その値の放流後の経日的変化をFig. 36に示す。構成脂質であるリン脂質量にはほとんど変化はなく一定であったが,貯蔵脂質であるTGは放流後増加し結果的に放流前より高値となったoFig. 37に筋肉,肝臓,腹腔内脂肪組織のTGの総量の放流後の変化を示す。貯蔵脂質量は一時減少したが,概して放流後次第に増加する傾向がみられた。放流後68日目のTG量は放流前の1.5倍に達LJn

1989a,1989b)。本実験の行われた海域はマダイ幼魚の生息環境として景適かどうかは不明である
が,放流直後から数日の間にわったって約半数近くの個体が放流地点に滞留していた(広島水試,
1989)ことから,音響馴致によって定着性が向上したと判断できる。
放流当初に観察された平均尾叉長の増加は中間
育成期のマダイ(広島水軌1985)と比較するとかな
り顕著であるが,これが放流魚の成長を反映しているとは考えがたい。この点については,小型個体が逸散して大型個体の再婿率が高かったためと考えられる(商場ら,1978)。
放流されたマダイの損餌生態や生理状態に関す
るこれまでの研究から,摂餌内容物が量的もしく̲C
t>は質的に天然魚に近づくまでに7日から10日間を巽

蝣*‑

tD
C)
C)

すると報告されている(輿石・安永,1980;栓宮・木管,1982)。一般に放流当初は環境の変化による摂餌量の低下から放流魚は飢俄状態にあり蓄横脂質

＼

菩1.0
号申

を消費しながらエネルギー不足を補うが,さらに飢俄が進行すると筋肉タンパク質も消費されるた

(U
LI
U)
⊃

め体重も減少する(Nakagawa et al.,1991)O北田.
須田(1988)は放流初期の減耗の大きいことを予測

2

0510

26

44

68

しているが,上述した飢紙による禰食圧の増大(Yinand Blaxter,1987)が初期減耗要因の一つと考えら

Doys ofler releaseれる。これに対して音響馴致後に放流したマ.ダイ
Fig.36. Changes in muscle lipid content and lipid
class composition of red sea bream released intoの場合には,従来の放流魚に認められたような肥満度や貯蔵脂質の減少は認められなかった。これthe natural water. PL, phospholipids; TG,
tnglycerides; Oth, others.

J=
tO
一=

は音響.馴致飼育によって,種菌の放流後の自然環
境‑の適応がスムーズに行われたためと考えられた。

5.0

瀬戸内海は冬期の水温が低いためにマダイは代

Os
C〉
o

謝が不活発となり摂餌量も低下するものと考えられる.勉冬期間には腹腔内脂肪組織や筋肉中のTG

＼
tコヽ
LO
Q)
T)

2.5

の減少が顕著であり,さらに構成脂質であるリン

」
['S
U
>、

脂質まで消費されるという厳しい環境下にある

Ch(Villa‑N.avarro et al.,1991)。それ故,越冬前のエネ

L芦
トー

0510

26

44

ルギー蓄積状態は趨冬中の生残に影響を及ぼす重68

要な要因となる。本実験におけるマダイの12月のDays ofler release

時点の脂質蓄横状態は良好であり,厳しい越冬期間に要求される十分なエネルギーを備えていると

Fig.37. Change in triglycerides (g/lOOg fish)of red sea bream released into the natural

考えられた。実際に,本海域での越冬後のマダイ

water. I, intraperitoneal fat body; M, muscle;L, hepatopancreas.

の再補率は越冬前に比べて激減するが(広島水試.

‑41‑

第5章 脂質蓄積からみた飼育方法の評価

1980),音響馴致放流されたマダイの越年前後の再捕尾数の割合は,従来の結果に比べ3倍から8倍も高くなることが報告されている(高場ら,1994)。

‑42‑

稔合考察

総合考察
第1章および2車では,放流マダイ種百の成長に(禰鼠1975),放流後の定着性から尾叉長50mm (商伴う脂質の蓄横過程を調査したが,結果を統合す

場ら,1978),被捕食実験から全長50mm島根県栽れば種宙の脂質蓄積段階は発育段階に応じた4段階

培漁業センター,1981)が提示されており,本研究に区分される。まず前期仔魚期では,親魚から受結果と近似している。今後,様々な側面より放流

け継がれた抽球や卵黄を摂餌開始までの生命維持

サイズを検討し,総合的にみた至適放流サイズをや諸器官の形成のために消費する。次に,摂餌を決定する必要があろうO

開始し内部栄養から外部栄養に切り替わる後期仔

放流サイズのほかに放流効果を左右する重要な魚期になると,後場の上皮細胞に脂質蓄積に伴う要因としては,種苗の質的問題がある。既に福原

空胞が認められるようになる。この段階では肝臓(1986)は種苗の質に関する検討の必要性を指摘し中への脂質蓄積や脂肪細胞は認められない。したていたが,量産技術に主眼がおかれ,質的評価にがって,後期仔魚期では腸上皮細胞が脂肪の吸収関する研究は後回しにされた傾向がある。中野や蓄積器官としても重要な役割を有している。マ(1993)は種酋性の定義を"形態的・生理的・生化

ダイの生活領域が浮遊生活から底生生活に移行する稚魚期では,胃や幽門垂の分化が完了し消化吸・学的健全性"を備え"種本来の行動特性"を持つ

収機能が向上し成魚と類似してくる。これに伴いては,ハンドリングによる回復力(北島ら,1979),

仔魚期に観察されていた腸上皮細胞での脂質蓄積

麻酔および乾山に対する抵抗力(丸山ら,1986),核は観察されなくなるが,肝臓中‑の脂質蓄横が観酸比(中野・白旗,1988),横臥行動(塚本,1.990.

察されるほか,脂肪細胞が発達し脂質蓄積部位は1993;内田ら,1993)等が提案されている。本研究

多様化する。さらに消化管が複雑な形を里し消化でTG量と絶食耐性には正の相関関係が認められた吸収能力が大幅に向上すると,筋肉,肝膿および(第3章1節)ことから, TG蓄積量は種苗性の指標と腹腔内脂肪組織中の脂質蓄積は量的にも増加すなろう。

種菌の質とし た。これまで種百の質的評価法としる。その後,脂質蓄積の量的増加は継続するが.

Nakagawa et al. (1991)は廃止塩田を利用した半体長40mmで脂質蓄積が量的にも質的にも充実す

租放的生産魚と集約的生産魚の間で雑食耐性を比る.このサイズは外部ならびに内部の器官形成を較した結果,半租政的生産魚の雑食耐性が高い事

完了し,形態的に成魚と類似するようになる時期を報告している。ただし半租敗的生産魚の癒脂質である。天然海域でも生活領域を拡大する時期でやTG蓄積は集約的生産魚と比較して決して高いもあり(山口,1987 ;矢軌1979),稚魚から岩魚への転換期に相当すると考えられる。

のではなかった。中野(1989)は両者の間の代謝括
怪を生化学的側面より分析し,代謝活性では集約

第3章1節では中間育成期間中における̀種苗の雑的生産魚の方が粗放的生産魚より大きいことを指食耐性を調査したが,絶食耐性は成長と共に向上摘した。すなわち,両者の絶食耐性の違いは蓄穣した。成長に伴う絶食耐性の向上は,第2車2節でエネルギーの消費速度の違いで説明できるO同様示した様に魚体中‑の活発な脂質蓄積に起因したものであろう。本研究の最終目的の一つは,マダな現象はBlaxter(1976)によって天然および人工生
産ニシンで報告されている。本研究では脂質やTGイ種菌の至適放流サイズを脂質蓄横から決定する蓄積より種苛性を検討したが,大量のエネルギー事であったが,体長40mmでは20日間絶食しても市費に対する適応性からも種苗性を検討する必要

生残率は90%以上を維持していた(第3章1節)。種苗が自然環境に適応するまでの日数が7日から10日とがある。

すれば(輿石・安永,1980;松宮・木曾,1982),この間の摂餌不足に対して十分対処できるサイズでもとそれらの体内‑の分配とのバランスによって規ある。これまで報告されたマダイ種宙の至適放流量)を獲得した種首がいて,一方では,成長を停

サイズをみると,鰭等の機能的側面から体長30mnl滞させたため余剰のエネルギーを脂質として体内魚の成長と脂質蓄横は摂取されたエネルギー量

蝣''・1.メ:‑43‑:日:ドI .'・iir/'iiii '摂∴;'t

・

・、.

総合考察

に蓄横し,また他方の種首では,摂取したエネル

化後22日目までに生じた成長変異はその後の飼育

ギーをほとんど基礎代謝や成長に分配したため脂過程でも維持される(第4章2節)。換言すれば,種菌質を蓄横できなかったと仮定すれば,その結果との成長変異は発育のごく初期に発現しているのでして成長の良い個体では脂質蓄積量が低く,逆にあるO本研究では成長変異の発現するメカニズム

成長の悪い個体が脂質蓄横に勝ることになる。実については検討していないが,初期の摂餌環境に際に,これらの現象は産卵直後の大西洋サケで報起因している場合(中村・笠原,1955,1956,1957;

告されている(Pedersen and Jobling, 1989;

Magnuson, 1962,中西・小野里, 1988)や,遺伝的Jobling,1994)。しかしながら,マダイ種菌の摂取エな要因(Magnuson, 1962;谷口,1986)によるものでネルギーを制限給餌によって制限した場合,栄養あろう。第5車1節では選別飼育が特に小型種菌の素が成長に優先的に分配されるため,脂質蓄積は成長回復に有効であることを示した。しかし先進されない(第3章2節)。これはHoutle(1987)の指摘する棟に,仔稚魚の成長速度は被禰食圧と密Jobli∫igand Reinsnes (1986)が指摘するように小型接な関係にあり,生残を決定する重要な要因であでも小型種百の成長は停滞し,選別効果は期待で種苗の成長が遺伝的な影響を受けていれば選別後るためであろう。換言すれば,種蘭の脂質等横はきないことになる。この点に関してUmino etal.

成長が順調な個体のみが獲得できると言える。し(1995)はクローンギンブナの成長に関する遺伝的たがって脂質蓄棟からみれば"発育と成長が順調

影響は成長と共に低下することを明らかにしていな種苗"が放流種苗として望ましい。

る。いずれにしてもサイズによる選別は,小型種

第4章1節では,実際の種苗生産では種菌の醇化

宙の摂餌量を回復し,成長だけでなく脂質蓄積を日数が同一でもその大きさは一棟ではないことに向上させるには極めて有効な手段と言える・。

着目し,種首の成長履歴と脂質蓄積の関係につい塚本(1990)は放流直後の種苗が環境の激変によて分析を行った。その結果,成長の良い種酉は脂って"パニック状態"に陥いる事を観察した.こ質蓄横状態も良好で,逆に,成長の停滞した種苗の異常な行動は種百の自然環境‑の適応の妨げとの脂質蓄積は相対的に低いことが判明した。さらなるほか,外敵からの捕食にさらされる危険性もに大きさの異なる種苗を共存させると,サイズ階含んでいる。これに対して種宙を放流環境にあら

級により小型個体(成長の停滞した個体)の摂餌

かじめ音響馴致し放流した場合,これまで報告さ量はかなり低下する。しかも制限給餌によってあれていたような放流直後の脂質の激減は観察される程度の成長率は維持されるが,脂質蓄穣のみななかった(第5章2節)。これは音響馴致飼育によっらず筋肉や消化系器官の発達は十分とは言えないて,種百が自然環境への適応をスムーズに行った(第3車2節)。成長とは単に体を伸ばすだけでなく,ためと思われる。固い網飼育によって環境に種苗諸器官の機能的発達を伴わなければならない。摂をあらかじめ馴致させて放流する方法(津村・山本.

餌量の低下は内部・外部器官の形態形成を停滞さ

1993)が示されているが,これらの方法は天然環境せることにもなり,ひいては成長の停滞という悪での種菌本来の石動特性を利用した合理的な放流

循環を生み出すものと思われる。

技術と言える。

耳石標識を用いた成長履歴の推定によれば,秤

44‑

要

要

約

約

沿岸魚類の資源の培養を目的とした放流事業がが,体長35mm以降で一定となった。体重に対する筋肉重量は体長15mmで10%程度であったが,成長に伴い増加し,体長40mm付近では40%となり成魚の比率に達した。また,体長に対する消化管長では体長35mm付近,口径では体長40mm付近に変曲点がみられたほか,筋繊維の平均長径も体長30mm

全国各地で行われ,対象魚種も多様化しつつある。中でもマダイは需要や価格面から我が国における放流事業の中心的魚種である。種苗の放流効
果を左右する要因としては放流場所,放流時期,
放流サイズ,種苗の質などがあげられる。養殖種付近で安定した。以上の結果からマダイの外部および内部形態は体長30ramから40mmで大きく変化することが明らかとなり,この時期が形態的な転換期に相当し,稚魚から若魚期への移行期と考えられた。
筋肉のタンパク質および脂質含量は体長40mmまで増加したが,それ以降では変化が認められなかった。魚体中の水分含量は体長15mmで80%以上を示したが,体長35mm以降77%前後となり,それ以降安定した。水分含量と脂質含量の間には負の相菌とは異なる放流種苗の質的問題や至適放流サイ
ズの検討は放流効果を高めることにつながる重要な課題である。一方,放流マダイの追跡調査では,放流されたマダイが自然環境に順化するまでかなりの日数を要することが明らかにされ,この間の摂餌不足によるエネルギーの枯渇が初期減耗要因の一つと考えられているo故に,放流種苗のエネルギー音横状態が放流後の生残を左右する重要な要因となっており,至適放流サイズや種菌の質の指標になりうると考えられる。本研究ではマ関関係が認められたことから,魚体の脂質蓄横量
も体長35mmから40mm付近で安定すると考えられた。さらに,筋肉脂質中のトリグリセリド(以下TG)の比率は中間育成当初で15%程度であった

ダイ仔稚魚期におけるエネルギー蓄横過程を脂質を中心に調べ,脂質蓄横から種苗の至適放流サイ
ズや種苗の質についての知見を得ることを目的とした。また,種苗の成長歴と脂質蓄積の関係,飼育方法と種苗の質的向上についても検討を加え

那,体長40mmでは2倍近い約30%に増加した。腹
腔内脂肪組織中のTGの比率は中間育成初期から急激に増加し,体長40mmの稚魚では90%程度となり成魚の組成比と等しくなった。以上の結果より,

Ale11)仔稚魚期もこおける脂質蓄積過程
肝臓へのグリコーゲンの蓄横は摂餌開始直後(醇化後6日)に認められたが,仔魚期を通じて肝膿での脂質蓄積や脂肪組織の形成は認められなか
ったO この時期に脂質の蓄横が唯一前腸の上皮細胞で観察されたことから,仔魚期では腸上皮細胞が主な脂質蓄積部位と考えられた。しかし仔魚から稚魚‑の移行と共に腸上皮細胞における脂質の蓄積は消失し,肝膿中での脂質蓄横や脂肪細胞の出現が観察されるようになった。
脂肪細胞は輝備中で発達し最終的には消化管を覆うように発達した。また,脂肪組織の体横が増加する間は,脂肪細胞の平均長径に有意な変化は認められなかった。これは脂肪組織の成長には細体長401‑1mまで成長すると脂質蓄積が量的・質的に充実することから,脂質の蓄積を指標とした場合の至適放流サイズは体長40mm以上と結論した。
3)脂質蓄積と種宙の質
種宙の無給餌生残日数はエネルギー蓄積状態と脂質動員能を直接反映するため放流サイズ決定の重要な指標と考えられる。そこで種百の無給餅生
残日数を調べた結果,体長15mmサイズの半数致死日数は7,1日であった。雑食耐性は成長と共に向上し,体長44mmサイズでは27.8日であったO体長
15‑50mmの種菌の体長(X)と半数致死日数(Y)の関係は有意な直線関係(y‑0.828x‑7.041
r=0.984)で示された。また,絶食により稚魚のタンパク質や脂質の著しい減少が認められたが,脂質の中でもTGの減少が顕著であり, TGが主

胞肥大より脂肪細胞数の増加が優先的に関与しているためと考えられた。

要なエネルギー源になっていることが判明した。
そこで稚魚1尾当たりのTG量(Ⅹ)と半数致死日数(y)の間を調べたところ,両者の間には有意

2)着底後の形態変化と脂質蓄積着底期以降における体表面横に対する鰭両横の比率は成長と共に減少し,体長30mm前後で安定しな直線関係(y=22.117x+1.803, r=0.968)が存在した。したがって.蓄横脂質TGは放流種百の健全た。体重に対する内臓重量も成長と共に減少した

‑45‑

要

性の指標になりうると考えられた。
マダイ稚魚を体重当たり6% (飽食) , 3%, Il(制限給餌)の給餌量で48日間飼育し,給餌量が種宙の成長,器官形成および脂質蓄積に及ぼす影響を調査したO飽食給餌区では,種苗の脂質蓄積
は成長と共に増大した。これに対し, 3%給餌区の体長は実験当初に比べ1.7倍に増加したが,脂質蓄積は先進されず絶食耐性も低下した。また, 3%制
限給餌群では肥満度や筋肉比のみならず体高比や約日齢の実測全長と22日目における推定全長は有意な正の相関関係で示された。この結果は,醇代後22日目における全長が60日目の全長に反映し, 22
日目に形成された成長差がその後も維持されたことを示唆するものである。また,肝化後22日目における仔魚の実測平均全長は, 60日齢の耳石より推定された平均全長より有意に小さかった。これは種苗生産過程で成長の劣る個体が淘汰されたためと考えられた。

消化管長比も飽食給餌群より有意に低い傍を示した。このことは,筋肉や消化管の発達は必ずしも成長と平行して営まれるものではなく,給餌条件の影響を受けることが示唆された。
4)脂質蓄積と成長変異
一般に種苗生産過程では飼育経過と共に個体の成長差が助長されるため,同じ日齢であって,も穂首の大きさは均一ではないO そこで異なる成長履
歴を持つ種首を体長が同サイズ(体長43mm)になった時点で,生物学的性状および脂質の蓄積状態を分析したOその結果,成長不良魚(43r に達す
るのに長時間を要した個体)の肥満度,筋肉比お5)脂質蓄積からみた飼育方法の評価
種菌の成長および魚体成分に及ぼす選別飼育の影響を調べるため,小型種百を日齢の異なるロットより選別した同じサイズの中型魚と混合し48日間飼育した.その結果,小型群の成長は中型群と等しくなり,飼育過程で生じた小型個体でも飼育環境を変えることによって成長が改善されうることが明らかとなった。また,遺別して飼育することによって小型魚のタンパク質合成能(RNA/DNA比)やTG蓄積が向上した。これらの結果は,これまで遺伝的要因が大きいと思われていた成長の良
し悪Lはむしろ飼育環境の影響を大きく受けると考えられた。

よび比内臓重量は,平均的な成長を示した群や成長の良好な群のそれらの値より有意に低い値を示したO また,筋肉タンパク監 総脂質およびTC.蓄積も同様の傾向を示したことから,同じ43】,1mサイ

放流後のマダイの生理状態に及ぼす音響馴致飼育の有効性を,放流魚の脂質の蓄積状態から調査した。中間育成中のマダイを周波数200Hzの水中スピーカーで15日間音響馴致し,放流後も音響馴
致下で給餌を続行した。音響馴致下での放流マダ
イには,馴致せずに放流したマダイで観察されるズでも成長率によって脂質蓄横に差異のあることが明らかとなった。
また,大きさの異なる2群の種菌を共存させ摂餌量を比較した結果,飽食給餌した場合には両者間の摂餌率に差異は認められなかったが,飽食量の半分の投餌量では小型種首の摂餌率は大型種首より低下した.よって小型種苗の脂質の蓄積不良
は,大きさの異なる種苗が共存したためにサイズ
階級,size‑llierarchy)が生じ,小型種首の摂餌が阻害されるためと考えられた。
60日齢の稚魚の成長履歴をアリザリンコンプレ
キソンによる耳石標放法により推定した結果, 60

ような肥満度や貯蔵脂質の急激な低下は認やられなかったo TGは放流後も増加し,鹿冬前には放流
直後の1.5倍に増加した。以上の結果,音響馴致飼
育は放流後のマダイの環境‑の順化を容易にし,さらに趨冬前の脂質蓄横を向上させることから,放流後の減耗を回避する点で極めて有効な方法と考えられた。

‑46‑

謝

謝

辞

辞

本学位論文をまとめるにあたり,広島大学生物料の捷供と多大なるご協力をいただいた,広島県生産学部,中川平介教授には長年にわたり有益な栽培漁業協会,広島県水産試験場,高知県栽培漁ご教示と励ましをいただいた。ここに深く感謝の業センター,広島大学附属水産実験所の大塚 攻

意を表します。学位論文執筆にあたり,有益なご助教授,泉 志郎氏に心から感謝致します0

助言をたまわった広島大学生物生産学部の難波憲

本学位論文は,昭和62年から平成7年にかけて広∴n¥t ・+:ォ:ォIi;n指. ‑>!^道教J"*"'.馴'1 ‑III

島大学生物生産学部,水産増殖学研究室で行った教授,荒井克俊助教授に感謝します。本研究に関研究をまとめたものである。その間に本学部水産して有益なるご助言をいただいた笠原正五郎広島

増殖学研究室に在籍された,ガプリエル・ゴメス

大学名誉教授,鈴木 亮前広島大学教授,黒倉・ディアス博士,大津正淳氏,中西 毅氏,武田寿東京大学助教授,水産庁中央水産研究所の中野

高明氏,若松 秀氏,水族生理学研究室の岡部正広博士,内田和男博士,広島県水産試験場の高也氏,浜田 稔氏,動物生態学研究室の糸崎博之

場 稔氏,広島県栽培漁業協会の佐藤 修氏,慶氏,水族病理学研究室の森 広一郎博士には実験

徳尚寿氏,高知県栽培漁業センターの山中弘雄氏

に際して多大なるご協力とご助言をいただいた。

に感謝します。また,研究に際して貴重な実験材

ここに深く感謝の意を表したい。

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英文要約

Studies on lipid accumulation in releasing red sea bream

Tetsuya umino

Recently, fish release projects have been routinely carried out to enhance and rehabilitate natural
resources of Japanese coastal waters. Red sea bream Pagrus major is one of the most important finfish
species for this sea farming program. There is a consensus that a major loss occurs in the released fish justafter released into natural waters due to insufficient food intake. Therefore, higher level of energy storage isrequired for seeds to be released. In particular, the lipid accumulation level of the seeds is considered as a
key indicator for setting up the optimum release size as well as for evaluating seed quality. In the present
study, the hpid accumulation of releasing red sea bream was investigated in relation to optimum releasing
size and seed quality. I also investigated the relationship between lipid accumulation and growth depensation,and the possibility of improvement of seed quality in relation to rearing conditions.

I. Lipid Accumulation in the Early Life Stage

Development of lipid depository‑organs
Glycogen first appeared in the liver on the 6th day after hatching. However, lipid accumulation in theliver was not observed during the postlarval stage. In this stage, the lipid accumulation was localized in thevacuoles of the epithelial cells in the intestine. Thus, the epithelial cells of the postlarval intestine are thought
to play an important role in lipid absorption and storage‑ Concurrently with the development of gastric glandand pyloric caeca, the lipid vacuoles in the intestinal epithelial cells disappeared. Lipid accumulation in theliver and the adipocytes were detected histologically on the 37th day after hatching・ This result indicates thatthe liver and adipose tissue develop to the lipid depository organs after fish grow into juvenile stage.

Development of the Adipose Tissue
The adipocytes were first observed in the pancreas of the 37‑day old juveniles. The volume of theadipose tissue increased in the pancreas with the progress of the growth of fish. However, there was noremarkable change in the average size of adipocytes during the early developmental stage. The results
suggest that the growth of the adipose tissue was exclusively caused by hyperplastic growth of adipocytes.

II. Morphological Development and Lipid Accumulation
During Secondary Culture

Morphological Development
Until 30‑35mm in body length, the relative fin area (%) (=total fin area / body surface area x 100) andviscerosomatic index (%) (=viscera weight ∫ body weight x 100) decreased with the progress of the growth offish and these parameters stable. Muscle ratio (%) (=muscle weight / body weight x 100) increased
parabohcally with growth, and the value reached constant level when body length (BL) reached 40mm. The
mouth size and intestinal length increased in proportion to the BL, showing a turning point of the coefficientat 35‑40mm in BL. These results revealed that morphological development in the juvenile fish is completed
at 40mm in BL, at which the developmental stages of red sea bream change fromjuvenile to young stage.

Lipid Accumulation and release size
Moisture content of the whole body gradually decreased until 35i‑lin in BL, and keep a constant level
thereafter. Muscle protein and lipid increased with growth of fish, and became stable at 40mm in BL.
Tnglycerides (TG) level among total lipid in the muscle increased with the progress of the growth and

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英文要約

reached 30% at 40mm in BL, which was two times higher than that measured before secondary culture. TG
level in the intraperitoneal fat body increased parabolically with growth, and reached constant level at 40mm
in BL. These results indicate that the development of lipid accumulation in red sea bream is almost
accomplished at 40mm in BL. 1Tierefore, it can be concluded that minimum releasing size would be at 40mm
from the standpoint of the lipid accumulation.

III. Lipid Accuぬulation and Seed Qualify

Lipid Accumulation and Starvation Tolerance
Fish at various growth stages were submitted for starvation test to assess the nutritional condition andseed quality. Starvation tolerance increased with growth. The TG, the level of which increased with growth,
was preferentially consumed during starvation with suppressing exhaustion of muscle protein. On the other

hand, average body length highly correlated to starvation tolerance (50% survival) wi血n the range of 15mm
to 50mm in BL. Moreover, excellent correlation was found between TG level (per 100 g fish) and starvation
tolerance. This result suggested that storage level of TG is a good parameter to evaluate seed quality.
Effect of Ration Size on Body ConstituentsThe effects of ration size, i.e. 6% (satiation), 3% and 1 % per body weight per day, on biologicalparameters and body constituents were investigated. When fish were fed 6% ration for 42 days, their storagelevel of energy such as protein, total lipid and TG, increased. When fish were reared with 3% ration, theirlipid accumulation was ir血bited while they experienced a body length gain 1.7 times. This indicated that
increasing the body length gain has priority over lipid accumulation in the dietary energy provided.
Conditiqn factor a且d muscle ratio decreased with decreasing ration size. Body depth and relative intestinal
length showed the same tendency. These results indicate that these indices are good parameters to assess thenutritional condition of young red sea bream.

IV. Lipid Accumulation and Growth Depensation

Growth and Body ConstituentsSome biological and biochemical characteristics were compared among fish having different growthrate (runts, moderately‑grown and precocious‑grown) of the same lot at a similar growth stage. Runts werecharacterized by a low muscle ratio and viscerosomatic index. Analytical results indicated that the runts
lacked energy reserves such as protein, lipid and TG On the other hand, RNA/DNA ratios of runty fish werealso lower, compared with the other groups. Low energy storage and protein synthesis of runts could be
explained by low food intake under the pressure of size hierarchy.

Estimation of Gγowth Process Using Otolith‑tagging

Growth process in seed production was estimated using otolith‑tagging with alizarin complexone(ALC). Fish size on the 60th day corresponded with that estimated from otolith reading of the 22nd day,This result indicates that the size‑differences is formed around on the 20th day after hatching and thedifferences is maintained during subsequent growth. The observed average total length on the 22nd day after
hatching was 5・76± 0.69mm (n=301). Back‑calculated total length estimated from 60‑day old juveniles was
6.29± 0.71mm (n=138), which is significantly bigger than observed one. This disparity in average size could
be caused by that smaller fish preferentially died or was killed during the culture in the tank.

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英文要約

V. Evaluation of Rearing Conditions in Relation to Lipid Accumillation

Effect of Size‑grading on Body Constituents and Growth
Two experiments were carried out using juvenile red sea bream of Lot 1 (76d, 36.1 ± 4.6mm, n=471)
and Lot 2 (65d, 29.9± 5.4mm, n=383). In experiment I, fish of a small size group (31.8± 2.0mm, n=70)
and a medium size group (31.7± 1.9mm, n=70) were selected from Lot 1 and Lot 2, respectively. These twogroups, after differently marked by fin‑cutting, were reared together for 48 days. In experiment II, a large
size group (37.4± 1.6mm, n=70) and a medium size group (38.1± 1.8mm, n=70), which were sorted out
from Lot 2 and Lot 1, respectively, were also reared・ No differences of size distribution and daily growth rate
were observed after 48 days rearing between the two groups in both experiments. The size‑grading resulted
in the enhancement not only of RNA/DNA ratio but also of lipid and TG accumulation in the small sizegroup. These results indicate usefulness of the size瑠rading for growth improvement especially in runts, andsuggest that runts have an ability of growth as well as medium size fish.

Usejulness of Acoustic Conditioning
Young red sea bream fed with artificial diet under the so‑called "acoustic conditioning" for 15 days infloating net cages were released into the natural water. The fish recaptured from the natural water were
subjected to determination of biological characteristics and body constituents. Any apparent reduction in
condition factor and storage level of lipid was not observed in the released fish, which was probably due toactive feeding under the acoustic conditioning. The released fish accumulated sufficient TG before
wintering. Thus, the acoustic conditioning for feeding before release was found available for increasing
stocking efficiency as to alleviate perturbed condition after releasing.

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