Original written by K. Ogura 001122
Last modified by H. Kumeta 180709

UNITY INOVA 操作マニュアル
1D 測定チュートリアル
NMR 装置の概要
NMR 装置は超伝導磁石，プローブ，分光計，およびコンピュータから構成される，極めてデリケートで高価な測定機器である．
超伝導磁石は，液体ヘリウム（4K）により冷却された超伝導コイルに大電流を封じ込めることにより，極めて強力な磁場を半永久的に維持している．
プローブは，超伝導磁石内部にあり，試料へ高周波パルスをアプライし，その応答を受信する．
分光計は，高周波パルスを制御し，プローブが受信したＮＭＲ信号をコンピュータに送る．
コンピュータは，測定命令を分光計に伝達し，分光計から送られてきた測定データを処理する．
超伝導磁石に関する注意事項
１．鉄（磁性体）の物体，磁気カード類や機械式腕時計をちかづけてはならない．
２．衝撃を与えたり，揺すってはならない．
測定までの流れ溶液タンパク質ＮＭＲを測定する際は，どの磁石メーカーの装置においても以下の共通の作業を行う．
サンプルの出し入れ
チューニングロック
シム調整
水消しおよびプロトン観測中心の設定
プロトン 90 度パルス幅調整
その他パラメータ調整である．装置環境の整備によってかなりの部分が自動化されており，特に最新の環境で整備が行き届いていればボタン操作数回であらゆる測定が可能となっている．ただし，このマニュアルではなるべく手動での操作で解説する．VNMR が開発の止まった古いソフトウェアであることも理由の一つであるが，測定者の理解や今後に体験するであろうトラブルについて対処できるよう技術力を向上させる意味もある．ご理解されたい．
表記の約束
コマンドライン入力は courier フォントで表記．
コマンドボタン実行は Impact フォントで表記．
ログブックについて
オペレーション机の上に灰色の表紙のログブックがある．装置を使用したひとは必ず記入する．装置がトラブルを起こしたときは，その症状と復帰手順（分光計リセットなど）を，トラブル対処ノートに必ず記入せよ．
1

基本的な操作体系
NMR 制御のためのソフトウェア VNMR は，Sun Microsystems 社製 UNIX マシンにて動作するプログラ
ムなので，UNIX の基本的な操作には慣れておくこと．
印刷物マニュアルについて
VNMR の印刷物マニュアルは多いが，以下のものが参考になる．
Getting Started
User Guide: Liquids NMR
Command and Parameter Reference
ウィンドウの説明
VNMR の画面は，すべてウインドウである．以下のウインドウがある．
・Acquisition Status
現在の装置の状態（測定状況，温度など）をリアルタイムでモニターするウインドウ．
・Acqi
サンプルの出し入れ，ロック，分解能調整をおこなうウインドウ．
・メインウインドウ
コマンドを入力したり，コマンドボタン（ボタンクリックによりコマンドを実行）を操作する．
・スペクトルウインドウ
スペクトルを表示するウインドウ．
・パラメータ表示ウインドウ
測定や処理のパラメータを表示するウインドウ．
マウスの説明左ボタン コマンドボタン実行など一般アクション用
中ボタン スペクトルの高さや位置を変えるときに使う
右ボタン スペクトル拡大時の右端設定や位相補正時に使う
入力の方法
基本的なコマンドはメニューバーのコマンドボタンが用意されているが，慣れてくるとあまり使わない．
キーボードからのコマンドライン入力がオペレーションの基本である．
数値入力の例
pw=10.5
パラメータ pw (pulse width)に数値 10.5 が入る．pw は単位 us をもっているので，pw は 10.5us となる．
d1=1.5-at
簡単な数値演算が可能である．この例では d1（積算間の待ち時間）に 1.5sec から at（データ取り込み時間）を引いた数値が設定される．
sw=12p
パラメータ sw (spectral width)に，現在の観測周波数の 12ppm に相当するスペクトル幅が設定される．
p は ppm 換算を表す接尾記号．
gain?
パラメータ名の後ろにハテナをつけると，そのパラメータの現在の設定値を表示する．
文字入力の例2

tn='H1'
文字列を入力するときにはシングルクォーテーションで囲む．この例では，tn （transmitter nuclei：
観測核）に 1H が設定される．
コマンドの連結
個別のコマンドをスペースで区切って連続入力できる
pl pscale pap page上の例では，スペクトル書き出し，スケールの書き出し，パラメータの書き出し，プリント実行を連続して実行したことになる
以前の入力の recall
キーボードの上矢印キーと下矢印キーで以前の入力の recall ができる．
パラメータ表示ウインドウの切り替え
パラメータ表示ウインドウはコマンドで切り替える．
dg

一般的なパラメータ群を表示する

dg1

処理パラメータ群を表示する

dg2

複雑な測定で dg に収まりきらないパラメータ群を表示する

dgp

３次元測定の処理パラメータ群を表示する

da

アレイ実験（後述）のパラメータを表示する

dgs

シム関連パラメータ群を表示する

1D 測定関連共通パラメータ
temp

温度（C）

spin

試料管回転数

sfrq

観測周波数（MHz）

tn
at

観測核（文字列）
Acquisition time (sec)npsw

サンプリングデータ点数（real + imag）
Spectral width (Hz)

nt

積算回数

ss

ダミースキャン回数

d1

スキャン毎の待ち時間（sec）

tof

観測中心（Hz）

gain

レシーバーゲイン（dB）

tpwr

観測パルス出力（dB）．63 のとき最大出力．-16 のとき最小出力．

dn

1st decoupler (2nd channel) の核（文字列）dfrq

1st decoupler (2nd channel)の周波数（MHz）

dof

1st decoupler (2nd channel)の観測中心（Hz）

dpwr

1st decoupler (2nd channel)のパルス出力（dB）

1D 処理関連共通パラメータlb

指数関数ウインドウ

sb

サインベル関数ウインドウ

sbs

サインベル関数ウインドウのシフト量gf

ガウス関数ウインドウ

gfs

ガウス関数ウインドウのシフト量3fn

FT するときのデータ点数で２のべき乗の数．fn>np の場合，自動的にゼロフィルされる

rp

０次の位相補正量

lp

１次の位相補正量rfl

スペクトル右端から基準までの距離（Hz）

rfp

基準化学シフト値（Hz）

sp

スペクトル表示の右端の点（Hz）

wp

スペクトル表示の幅（Hz）

vsvertical scale: スペクトルの高さ

sc

プロット開始点（mm）

wc

プロット幅（mm）

axis

軸スケールの単位 p: ppm, h: Hz

1D 測定関連コマンドi

試料を NMR 装置に入れる

e

試料を NMR 装置から出す

su

現在の測定パラメータを分光計にセットするaa

現在測定中の積算を中断する

dps

パルスシークエンスのタイミングチャートを画面に表示する

ga

測定開始と測定終了後に FT して画面表示する

go

測定開始

time

測定所用時間を計算する

1D 処理関連コマンド
wft

フーリエ変換する

ds

スペクトルを画面表示し，インタラクティブモードにするdc

ドリフトコレクションする

dscale スケールを表示する
fスペクトルの全領域を表示する

full

出力範囲を用紙全面にする

はじめにすること
測定を開始する前に，測定に使用する experiment（実験領域）を作成する必要がある．VNMR では，１
〜９９９９の experiment を使用することができる．これらはテンポラリーな実験領域であり他の使用者も自由に使用することができる．テンポラリーな experiment で測定を行ったあと，実験者個人のデータ保存
領域に保存する．
現在の experiment（カレントエクスペリメント）は画面上部中央に表示されている．はじめに，
explibexperiment のリストを表示するコマンドとし，現在の experiment 使用状況を確認する．
-----------------------------------------------EXPERIMENT DIRECTORY
1

81 presatR

Grb2 SH2 (DL)25432 gNhsqc

Vav nSH3

4

35 s2pul

9999 2345 gmapz

PROTON STANDARD PARAMETER
Gradient Shim
4

-----------------------------------------------この実行例では，ディスクに exp1，2，4，9999 が存在していることがわかる．自分が新しく測定を開始するときは，新しい experiment を作成し，そこに移動してから，測定条件などを設定すること．ここでは例
として，未使用で新しい experiment 700 を作成し，そこに移動するものとする．
cexp(700)

新しい experiment 700 を作成するコマンド

jexp700

exp700 に移動するコマンド

自分の測定とデータ処理が完了したら，その experiment は消去すること．ただし，カレントエクスペリメ
ントは消去できないので，他の exp に移動してから消去すること．exp9999 はグラジエントシム（後述）実行のための専用 experiment としているため，消去しない．なので，exp9999 に移動してから exp700を消去する．
jexp9999
delexp(700)exp700 を消去するコマンド

２番目にすること
次は温度コントローラの設定をする．UNITY では，試料管の有無に関わらず常に温度コントローラが動作している．もし，自分の試料が温度に敏感な場合は，あらかじめ，装置を自分の設定温度に調整しておく必要がある．現在の装置温度は，縦型のユニットの赤い LED でモニターできる．温度設定値を入力するには
temp=25または
temp
として，温度コントロールダイアログによる制御を行う．
温度設定値を確認するには
temp?
また，通常，試料管のスピンはかけないので，それを確認しておく（特にシゲミ管の場合、必ずスピンなし
とする）
．
spin?
画面上部に Spin Not Used と表示されれば OK．
つぎのコマンドを実行することにより，設定値が分光計にセットされる．
su
温度コントローラが動作して，装置が設定温度に到達するのを静かに待つこと（数分かかることもある）．
また，まれに温度設定を変更できないように固定化されている場合がある．
vttype?
として，vttype=2 であることを確認せよ（固定化されている場合は vttype=0 である）．
温度制御ユニットがなんらかの不具合（probe との結線が外れかかっている等）で制御できないことがまれにある．その際は，温度コントロールダイアログを開いて，Reset VT ボタンを押して１〜２分程度待ってから温度設定を行う．
試料管の出し入れe

試料管のイジェクトを実行するコマンド

により，装置を試料管イジェクト状態にせよ．磁石の試料管入り口からイジェクトエアが排出されることを確認すること．エアが排出されない場合，エアコンプレッサ故障の可能性があるので，管理者に連絡すること．以前の測定者により，装置内に試料管が残っていることがある．自分のサンプルを入れる前に十分注意
すること．

5

試料管をホルダに挿入し，ゲージで位置を調整する．Wilmad 社製試料管に液量 600uL の試料が入っている場合，ゲージ内の土台位置を 67mm にセットすること．shigemi 管の場合はゲージ内点
線の位置が検出コイル位置なのでその点線枠内にサンプル液部分が入っていること．試料管ホルダのＯリングは堅いものと緩いものが混在しているので，自分の試料管を挿入したときに，堅いと感じたら無理をせず，別のホルダに差し替えること．
緩く抜けやすい場合も同じ．特に shigemi 管は脆いので，無理な力をかけないこと．
試料管を試料管ホルダに正しくセットしたら，NMR 磁石の試料管入り口に静かに置く．このとき，ホルダを持った指をゆっくり離して，試料管が入り口付近で浮いていることを確認すること．エアコンプレッサ故
障の場合，エア圧が弱く，試料管を浮上状態に保持できないことがあり，その場合，試料管が装置内部に急激に落ち込み，試料管が装置内部で破損することがあるので注意すること．
i

試料管を装置にロードするコマンド

により，試料管をロードする．試料管が吸い込まれてから数秒後にコトリと音がしたら，試料管が正しくセットされたことを意味する．試料管がロードされたら，磁石の試料管入り口にガーゼを被せておくこと．ホ
コリ等の侵入防止である．
プローブのチューニング
測定試料溶媒のイオン強度の影響で，プローブのチューニングがずれる．よって，測定試料ごとにプロー
ブのチューニングを合わせないと，測定感度が低下したり，パルス幅が長くなる，等の不都合が生じる．したがって，試料を交換したときには必ずチューニングを調整すること．
H1R

1H 測定の標準条件を読み込むマクロを実行せよ．
su

測定条件を分光計にセットするコマンドを実行せよ．そのあと，磁石のそばに行き，プローブの 1H のチューニングをとること．チューニング時の配線は磁石のそばに漫画で図示してあるので，よく見て配線し，チューニングをとる．1H にはチューニング（T） とマッチング（M）の２個の調整ネジがある．チューニングをとり終わったら，配線を元のとおりに戻すこと．
もし，13C や 15N ラベル試料で，HSQC などの異種核測定をおこなうときは，13C や 15N のチューニング
も，いまのうちにとっておくこと．
シムファイルの読み込み（オプション）
最近の NMR 装置では，あとに述べる自動シム調整（グラジエントシム）の性能が向上したため，シムファ
イルの読み込みは省略して構わない．しかし，以下の場合には，シムファイルを読み込むことを推奨する．
(1) 自分の試料の液量が特殊な場合(2) 分光計起動直後の場合(3) プローブ交換直後の場合(4) グラジエントシムで分解能があがらないとき
UNITY INOVA 500 分光計（scorpio）で Wilmad 管試料（液量 600uL）を使用するときは，以下のよ
うに入力して，適切なシムファイルを読み込む．
rts('COLD_wilmad_600ul_040706')
上記以外の分光計では，以下の要領で適切なシムファイルを探して，読み込むこと．
6

-------------------------------------------------------------------------------シムファイルは/export/home/vnmr1/vnmrsys/shims ディレクトリに保管されている．UNIX のシェ
ルウィンドウにてファイルリストを見て，どのシムファイルを読み込むのが適切かを判断すること．ファイルの命名ルールは，プローブタイプ，試料管タイプ，作成日付，作成者を含むことである．
（例）COLD_shigemi_12mm_000321 （Cold probe，シゲミ管，液高 12mm，日付）-------------------------------------------------------------------------------シムファイルを読み込んだ時点では，ホストコンピュータにパラメータが読み込まれただけで，分光計には送信されていない．そのため，セットアップコマンド（su）を実行して，シム設定値をセットせよ．
load=y シム値も分光計に伝えるための一時フラグ（次の su まで有効）
su

分光計に測定パラメータ（シム値を含む）をセットするコマンド

重水素ロック
つぎは重水素ロックをかける．NMR サンプル管を取り囲んでいる静磁場は少しずつ変動するため，長時間の測定をかけたときに測定開始時と終了時とで同じ信号について観測される周波数が異なる（化学シフト値が異なる）．これをドリフトと言うが，測定中これを生じさせないようにするために，重水素信号を使用してデジタル補正をかけている．補正のための重水素のシグナルをとらえるように以下の操作を行う．この操作
を重水素ロックと呼ぶ．
コマンドボタン Acqi をクリックすると，Acqi ウインドウが現れる．Acqi ウインドウの LOCK ボタンをクリックすると，ウインドウが広がり，ロック信号をモニターする状態になる．LOCK ON 状態になっていたら，
OFF ボタンをクリックし，ロックを OFF にする．大抵は，左のような状態になる．

波のように見えていたら（左図），それは OFF RESONANCE 状態を意味しているので，周波数がゼロになる
ように Z0 値をスライダまたはボタンで調整し，右図の状態にすること．ボタンはマウスの右ボタンがプラ
ス方向，左ボタンがマイナス方向に割り当てられている．右図の状態になったら，LOCK の ON ボタンをクリックせよ．数秒後に LOCK がかかるはずである．LOCK がかかると，Acqi ウインドウの LOCK OFF だった
表示が LOCKED になる．重水素信号の S/N が悪く波が見にくいときは，lockgain 値をあげて適正値に設定すること．
重水素ロックがかかったら，画面上部の LOCK LEVEL 値を確認する．100 だとレシーバがオーバーフロー
しているので好ましくないし，あまりに小さい（20 以下）と以降のシム調整がやりにくいので，LOCK LEVEL
値が 40 から 60 の範囲内になるように，LOCKPOWER を調整する．
7

LOCKPOWER, LOCKGAIN, LOCKLEVEL の関係は，試料の重水素含量やシム調整の指標になる．後述のシム調整が完了した段階でこれらをログブックに必ず記載しておく．後日に同じサンプルについて測定するときに，同じ LOCKPOWER, LOCKGAIN を使用するようにすると良いだろう．
さいごに LOCKPHASE を調整し，LOCKLEVEL が最大になるようにせよ．LOCKPHASE は，分光計が動作しているあいだは変わらないので本来調整の必要はないが，分光計の電源 ON/OFF 時に LOCKPHASE が変わる
ので，念のため LOCKPHASE を調整すること（確認する程度でよい）．
これでロックはかかったので CLOSE をクリックせよ．Acqi ウインドウが消える．

シム調整その１：グラジエントシム
サンプル管の周囲は統一された静磁場環境下にあることが望ましいが，細かな環境の差から測定される位置によって同じ信号であっても観測される周波数が異なる（化学シフト値が異なる）．そのため，サンプル管の周囲には室温シムと呼ばれるサンプルを取り囲む磁場の調整用コイルがあり，どの観測点においても同じ周波数を示すようにこの室温シムを調整し，磁場の均一化を行う．この操作のことをシム調整（またはシム上げ）と呼ぶ．このシム調整のときに指標となるのが LOCKLEVEL である．LOCKLEVEL は重水素信号の高さを指しており，高さは磁場の均一性が良いほど高くなる．LOCKPOWER や LOCKGAIN は重水素信号へのパル
ス強度および出てきた信号の検出器の強さの設定値であるため，このどちらを上げても LOCKLEVEL は上がるが，これはシム調整にはならない．
シム調整の方法には，グラジエントシム（磁場勾配を利用した自動調整）と手動調整のふたつがある．最
初はグラジエントシムをおこなう．exp9999 はグラジエントシム専用の領域として運用しているので，exp9999 で一般の測定をおこなわないこと．
jexp9999を実行し，exp9999 に移動せよ．つぎに，コマンド
gmapsysを実行せよ．グラジエントシムをおこなうためのパラメータが設定される．
temp?
で温度設定を確認せよ．自分の試料温度と異なる場合
は temp=25 のように入力して，自分の試料温度を設定せよ．つぎにSet Params -> Find tof
をコマンドボタンにより実行せよ．分光計の測定が動き，すぐに終了し，こんな形状→ __|~~|__ のス
ペクトルが表示されるはずである．これは，磁場勾配をかけながら得られた試料管中の H2O の 1H-NMR スペクトルである．
表示された gzwin ならびに tof の値を手入力する．このとき，gzwin と tof を一つずつ入力すると，表示されていた値が消えてしまうので一行で入力すること．またシゲミ管の場合，gzwin の値は内管下端や上8げ底上端付近のガラス接触界面を含むため除外する必要がある．そのため表示された gzwin の値に 0.8 掛
けをする．例えば，表示が gzwin 55.3 tof -2158.0 であれば，
gzwin=55.3 * 0.8 tof=-2158とする．
つぎに，再びコマンド
gmapsysを実行せよ．そのあとコマンドボタン Autoshim on Z をクリックすると，グラジエントシム自動調整がスタートするので静かに待つこと．このとき gradient autoshiming fit failed のメッセージが表示され，分解能調整が中断した場合は，
gzwin?
で，パラメータ gzwin 値を確認し，設定値が 80 であれば 70 あるいは 60 のように gzwin 値を小さく設定し直して再び Autoshim on Z を実行すること．gzwin 値は，磁場のずれをカーブフィットさせるときのフィッ
ティング領域の幅を設定するパラメータである．
グラジエントシムが終了するまで，数分かかることもある．パラメータ表示部に rms error 値がつぎつぎと現れるが，この値が 1 以下になれば，自動シム調整は完了である．
グラジエントシムが正常に終了したら，Gradient autoshimming on Z done!というメッセージが表示される．グラジエントシムは最大で 10 回の繰り返し実行をおこなうが，最大回数に達してもシム調整が終了しない場合，エラーメッセージが表示され（Maximum iteration reached!），シム調整は失敗する．
その場合，いくつかの原因が考えられる．頻度の高い順に記載する．
１．サンプル管の位置が正しくない
２．シゲミ管サンプル液部分に気泡が入っている
３．液高が足りない
４．初期シム値に問題がある
５．装置の故障
１〜３については，サンプル管を取り出して確認を行うこと．２の気泡は小さなものを見逃すことがあるのでサンプル管を逆さまにしてみる等で確認すること．３の場合は溶媒を増やすまたはシゲミ管であれば内管をさらに上げて液高を増やす．４の場合は前述でオプションとした”シムファイルの読み込み”からやり直すこと．５の場合は管理者を呼ぶこと．
サンプルを取り巻く磁場の均一性が高いとき，グラジエントをかけながら得られる 1H スペクトルは綺麗な台形になるはずである．これを利用し，綺麗な台形になるように axial 方向のシムコイルを調整するのがグラジエントシムである．
グラディエントシムが完了したら，LOCK LEVEL 値が，シム調整前と比べてかなり大きくなっているはずである．また，ロックがはずれていることもある．Acqi により，Acqi ウインドウを表示させ，LOCK をクリックし，LOCK 関連のパラメータ（LOCK ON/OFF，LOCKPOWER，LOCKGAIN）を確認せよ．lockpower 値を変えて，LOCK LEVEL 値を 60～80 の範囲にすること．
シム調整その２：手動シム調整（オプション）
グラジエントシムでは axial 方向のチャンネル（Z1～Z6）のみ自動調整するので，radial 方向のシム
チャンネルは手動で調整しなければならない．ただし，とりあえずスペクトルを早く測定して，試料の状態を確認したい，という場合は，手動シム調整を省略してもよい．
手動シム調整で参照するのは，lock level の高さになる．サンプルを取り巻く磁場の均一性が高いほど，得られるシグナルはシャープになる．シグナルの体積は一定であるため，シャープになるほどシグナルの高さは高くなる．lock level は前述のように，重水素シグナルの高さであるため，これを参照しながらシム調整を行う．
Acqi ウインドウで SHIM をクリックするとシム調整用の画面になる．初期状態では，Z1～Z4 の course Z
9チャンネルが表示されているので，左すみの▼印をクリックし，low order XY チャンネルに表示を切り替
えよ．X1, Y1, XZ, YZ, XY の各項を調整し，LOCK LEVEL 値が最大になるようにせよ．再び course Z
チャンネルに戻り，Z1 と Z2 を調整せよ．LOCK LEVEL 値が，これ以上改善されないと感じたら，手動シム調整は終了である．CLOSE ボタンをクリックせよ．Acqi ウインドウが消える．
シム調整終了後，exp9999 から元の exp に移動する．
jexp700
１次元スペクトル測定
溶媒消去パルス付きの 1H-NMR 測定をおこなう．マクロコマンド
presatR

溶媒消去測定のマクロを実行せよ．自動的に測定パラメータが用意される．とりあえず，一度測定してみる．積算回数（nt）は 4に設定すること．
nt=4

積算回数を 4 に設定

ga

測定＆FT

測定中は，レシーバがオーバーフローしないことを確認すること．オーバーフローしたら，分光計モニタボ
ックスの赤色 LED が点灯する．さらに，画面上にも Receiver Overflow のメッセージが表示される．もし，オーバーフローしたら，直ちに Abort Acq ボタンまたはコマンド aa により積算を中断せよ．そのあと，レシーバーゲイン（gain）の数値を 8 程度小さく変更して，再測定（ga）すること．
測定が完了すると，スペクトルが画面に表示される．このあと位相補正するが，スペクトルの左右は全領域が見えていると位相補正作業しやすいので，
f

測定データの全領域を表示するにより，全領域を表示しておく．スペクトルの上下方向を拡大／縮小するには，中ボタンを押しながらマウスを上下にドラッグすればよい．あるいは，パラメータ vs 値を直接入力してもよい．
vs=10000
位相補正
NMR スペクトルは通常，吸収波形（Absorption
line shape）となるように位相補正を行ってから解析に用いる．大抵の場合，測定後にそのままフーリエ変換したスペクトルは分散波形（Dispersion line
shape）になっている．これを吸収波形になるようにするのが位相補正である．サンプル管の品質，サンプ
ル溶液の電導度，チューニングによって位相補正値は異なる．位相補正値には，０次と１次とある．０次位
相補正は取り込み開始時のデータ点のズレを補正するのに対し（右図上），１次位相補正は周波数依存的な位相のズレを補正する（右図下）．
コマンドボタン phase で位相補正モードにする．メチルプロトン領域（スペクトル右端）にて，マウスの左ボタンをクリックすると，信号の左右に２本の縦線が現れる．２本の縦線の間にマウスポインタを持っていき，左ボタン（course）または右ボタン（fine）を押しながらマウスを上下にドラッグしてメチルプロトン領域の信号が吸収波形になるよ
うに位相補正を行う．左ボタンマウスドラッグで上下に行き着いても正の吸収波形にならないときには，負の吸収波形（下向きの吸収波形）とし，rp=rp-180 にて波形を正負反転させる．rp の値が０次位相補正値10である．このとき，全ての領域で（特に水信号よりも左側の信号が）吸収波形になっていれば位相補正完了となる．コマンド ds で，位相補正状態から抜けること．
もし芳香環領域やアミド領域が吸収波形になってない場合は，１次の位相補正も必要になる．１次位相補正をするには，あらかじめ基準となる領域（pivot）を設定しておく必要がある．メチル領域の信号について位相補正したのちに，そのままメチルから遠く離れた領域（たとえば芳香環の領域）かつ２本の縦線の外側にて，左ボタンをクリックする．この操作により最初に表示されていた２本の縦線の中心が基準線＝pivotとなる．２本の縦線が芳香環領域に移り，この２本の縦線のあいだの領域で左ボタン（course）または右ボ
タン（fine）を押しながらマウスを上下にドラッグして芳香環領域が吸収波形になるように位相補正する．
このとき，pivot の効果によりメチル領域の吸収波形は保持される．位相補正が終わったら，コマンド dsで位相補正状態から抜けること．
意図せず１次位相補正を行ってしまった場合には，コマンド ds にて位相補正状態を抜けたあとに，
lp?
で１次位相補正値を確認する．これが０以外になっているとき，１次位相補正値が入っている．
lp=0
で，１次位相補正値を 0 としたのちに，再度上記の０次位相補正を行う．この補正を行うときに２本の縦線の間でのみマウス操作を行うこと（２本の縦線の外側でマウス操作すると１次位相補正がなされる）．
溶媒照射位置の微調整
溶液タンパク質 NMR では頻繁に 10% D2O / 90% H2O のように大量の H2O が存在している条件下にて測定を行う．タンパク質 NMR の信号は水信号に比べて非常に微弱であるため水信号の消去を行う．水信号の消去方法はいくつかあるが，presatR では，溶媒中の水信号をあらかじめ飽和させてから 1H-1D NMR の測定を行う．presatR コマンドを実行した直後（マニュアル通りに進めていれば、今の状態）の溶媒照射位置は管理者手持ちのサンプルで２５℃条件にて調整したものであり，サンプルおよび測定温度などによって若干異なっている．照射位置はパラメータ tof で設定されている．tof の調整方法は，
１．残っている水信号にカーソルを合わせてその位置を tof 値とする
２．tof の値をいろいろと変えて一番消える位置を探すの２種類がある．
１の方法は水信号を瞬時に見分けることができる人向けであるため，測定熟練者以上のみが使用可能とする．ds でマウスモードをカーソルモードにしたあと，水信号の両端にカーソルを合わせ expand ボタンにより拡大し，水信号のおよそ中心に一本だけカーソルを置く．コマンド nl によってピークトップにカーソルを自動移動させてから，movetof によって現在のカーソル位置を tof 値を設定する．その後，再度 ga によって測定を行い，オーバーフローしないことに留意しつつ，水信号が十分に消去できていることを確認する．
２の方法は初心者向けの手法である．以下の手順で行う．
あらかじめ設定されている基準となる tof 値を確認する．
tof?
最初に設定される tof 値は装置によって異なる値となっている．ここでは例として tof=-218 と表示されたものとする．この tof 値をいろいろと変えて溶媒信号が一番消える位置を探す．そのとき，array コマンドを使用する．array コマンドは，パラメータのアレイ化を対話的に設定できる．以下の例に倣って，tof をアレイ化する．ここでは-213 から-1 刻みで-223 までの 11 種類について測定することとしている．
（例）
array

アレイの起動parameter to be arrayed: tof

パラメータの名前を設定

enter number of steps in array: 11

要素の数を設定

enter starting value: -213

初期値を設定enter array increment: -1

刻み幅を設定11

また，array コマンドは質問される内容を先に打ち込んで設定させることもできる．矢印キーによるrecall を使い，わずかに設定値を変えたいとき等に便利なので，操作に慣れてきたら下記の例のようにすることが望ましい．
array('tof',11,-213,-1)
ここまで入力すると，画面にアレイ化されたパラメータが表示される．
ACQUISITION ARRAYS
array

tof

arraydim 10itof

1 -213
2 -214
3 -215
4 -216
5 -217
6 -218
7 -2198 -220
9 -221
10 -222
11 -223
リストされたパラメータが意図した値であることを確認せよ．コマンド dg で元のパラメータ画面に戻すこと．アレイ化したパラメータのリストはコマンド da でいつでも確認できる．
au
このコマンドによって測定が開始する．自動的にパラメータ tof を変えながら一連の測定が行われ，一つの測定が終わる毎に画面にスペクトルが追加表示されていく．その間，消えなかった水信号によるオーバー
フローに十分注意すること．オーバーフローした場合には，すぐさま測定を止め（コマンド aa），gain を下げること．全ての測定が終了したら，全スペクトルを並べて表示させる．あらかじめ，溶媒信号の高さを比較するために，パラメータ vs を小さくしてみよ（vs=vs/10 など）．そのあと
wft dssh

スペクトルを並べて表示するコマンドを実行せよ．

12

並べて表示させて，溶媒信号がもっとも小さくなっているスペクトルを確認し，そのときの tof 値を今後の測定に使用する．上の例では，８番目のデータがよければ，tof 値を下記のように設定する．
tof=-222のように直接設定するか，または，

tof=tof[8]のように要素の番号で設定してもよい．

最適な tof 値がわかったら，念のためもう一度，スペクトルを測定しておくとよいだろう．
ga
測定終了後に表示されたスペクトルは，dssh 実行直後なので横幅が狭くなっている．
fullを実行し，スペクトル表示領域を画面いっぱいに設定しておくこと．前節と同様に信号の位相補正をすること．溶媒信号が小さいことを確認せよ．溶媒信号が効率よく消去できていれば，レシーバーゲイン（gain）
を大きくすることができ，それは S/N の向上につながる．もし，さきほどパラメータ gain を小さくしていたのなら，gain を元通りにして，再測定（ga）する．得られたスペクトルでタンパク質由来の信号がよく観察できるように，vs の値を調整する．
90 度パルス幅の校正
90 度パルス幅は溶媒の電導度（塩濃度），タンパク質濃度，チューニングによって大きく変わる．これまでの測定では，パルス幅を適当に設定して測定していたが，本来，90 度パルス幅を厳密に決定しておく必要がある．特に溶液タンパク質の多次元 NMR では頻繁に 90 度および 180 度パルスを多用し，磁化の移動および展開をする．このとき 180 度パルスの幅は設定された 90 度パルス幅の２倍の値になっている．90 度パル
ス幅が正しく校正できていない場合，磁化の移動および展開のたびに磁化成分が分散されてしまい信号を得ることができなくなる．
一般に，360 度パルスを見つけて，その値を 1/4 倍した数値を 90 度パルスとする．360 度パルスは，信号がベースラインの下側から上側に移る点であり，理論的にはシグナルが観測されなくなるパルス幅なので判別がしやすい（下図参照）．

13

array コマンドを使用し,おおよその 90 度パルス幅や 360 度パルス幅を探索する．
array('pw',21,4,4)
au

pw を 4 us から 4 us 刻みで 84 us まで

タンパク質のシグナルをみるために，vs 値を調整する．また画面中央にベースラインがあると見やすくなる．
例えば，vs=10000
vp=50

ベースラインをおよそ画面の中央に移動させるコマンドとする．vs を変更したならば，再度スペクトルを描画する．
wft dssh dssl
このとき，９番目と１０番目（pw=36 のときと pw=40 のとき）の間で，下向きのスペクトルから上向きのスペクトルに変わったとする．再度，array コマンドで細かく探索するように設定する．
array('pw',21,36,0.2)
au
ここで信号がもっとも消失している pw 値が 360 度パルス幅になる．そのときの値を 1/4 倍することで 90度パルス幅とする．６番目（pw=37 のとき）がもっともシグナルが消失していたならば，
pw=pw[6]/4

現在設定されている６番目の pw を 1/4 倍すると設定すれば，pw に 90 度パルス幅が設定される．正しい 90 度パルス幅が確認できたら，念のためもう一度，スペクトルを測定しておくとよい．vp を変更しているのであれば，vp=0とせよ．また，full
によって全画面にスペクトルが表示されるようにせよ．
スペクトル幅の修正
現在の測定スペクトル幅（sw）は大きめに設定されているので，試料によっては，左右の信号のない領域が広すぎることがある．その場合には，パラメータ sw を小さくして，余白の領域を適切な大きさに修正しておくとよい．パラメータ sw を小さくしたときは，念のためもう一度，スペクトルを測定して，信号の折り返しがないか，また位相補正ができるか確認しておくこと．
本気の測定
観測中心，90 度パルス幅，スペクトル幅，レシーバーゲインが確認できたら，本気の測定をおこなう．積算回数（nt）を，試料濃度によるが 64～512 程度で適当に調節して測定開始せよ．
nt=64
14

go
データ処理
測定終了後，
フーリエ変換するコマンド

wftを実行すれば，スペクトルが得られる．もし，自分でウインドウ関数を調節したい場合は，以下の記述を参考にせよ．
使用できるウインドウ関数（参考）lb

指数関数ウインドウパラメータgf

ガウス関数ウインドウパラメータ，gfs そのシフト量sb

サインベル関数ウインドウパラメータ，sbs そのシフト量

上記のウインドウ関数を自由に組み合わせて使用できる．使用しない関数は，たとえば
lb='n' lb ウインドウ関数を無効にする設定のように Not used の設定にしておけば使用されない．
インタラクティブなウインドウ関数設定（参考）
画面上で，FID の形状とウインドウ関数を目で確認しながら，ウインドウ関数を設定できる．
wti
このコマンドにより，インタラクティブなウインドウ関数設定画面になる．この画面での制御は以下の通り．
ボタンコマンド

ウインドウ関数の種類の切り替え

マウス左ボタンウインドウ関数の調整

マウス中ボタン

FID またはスペクトルの高さ調整

マウス右ボタンスペクトルの表示／非表示の切り替え

フーリエ変換に関する補足説明（参考）フーリエ変換するときのデータ点数は２のべき乗でなくてはならない．そのパラメータ fn は実部と虚部の和である．fn=16384 の場合，実部 8192，虚部 8192 のデータ点からなっていることを示す．また，測定時のサンプリング点数（np）は２のべき乗である必要はなく，fn と np に差があれば，フーリエ変換の際に自動的にゼロフィルされる．
化学シフト基準値の設定基準としたい信号（ふつうは DSS）の位置にカーソルを移動させて（必要ならば左右を拡大して）からrl(0)

化学シフト基準値を設定するコマンドを実行すると，カーソル位置が 0ppm に設定される．試料中に DSS がなく，H2O を 4.78ppm に設定する場
合は，水の位置にカーソルを移動させてから，rl(4.78p)

化学シフト基準値を設定するコマンド（p は ppm を意味する接尾詞）

でよい．
上記の H2O を基準にした場合（rl(0)ではなく ppm で設定した場合），rfl=rfl-rfp rfp=0 を実行し，ゼロ ppm で基準をとったことにしておく必要がある．
ちなみに化学シフト基準値は以下の２パラメータでハンドリングされている．
rfl

スペクトル右端から基準位置までの距離（単位 Hz）

rfp

化学シフト補正値（単位 Hz）

化学シフト基準値が設定できたら，化学シフトスケールを画面上に表示させてみよ．
dscale

化学シフトスケールを表示するコマンド
15

スケールとスペクトルのベースラインが離れているときは，スペクトルの DC オフセットが大きいことが原因なので，DC オフセットを補正するコマンドdcを実行して，DC オフセットを補正すること．
コメント文の付加
スペクトルにコメント文を付加するには，コマンド text を使ってtext('1mM Lysozyme in H2O 25deg')のように実行せよ．コメント文には，測定データに含まれない情報を記述すること．テキストは単なる文字列なので，シングルコーテーションで囲むこと．空白があってもよい．
スペクトルの印刷
基本的に，画面で見えている範囲がそのまま印刷される．印刷範囲（左右方向）を設定するには，始まりの点（sp）と，そこからの幅（wp）の２パラメータを使用する．NMR では化学シフト値（ppm）が標準的なスケールなので，常に，ppm 単位で印刷するよう心がけること．たとえば， -1ppm から 11ppm の領域（12ppm
幅）を印刷する場合は，
sp=-1pwp=12pと設定すればよいが，１行ずつ設定すると，一時的に表示範囲を逸脱するので，
sp=-1p wp=12pのように，１行で続けて入力すること．印刷範囲（上下方向）を設定するには，上下の拡大率（vs）パラメータを使用する．
紙の上での出力領域は，以下の２パラメータで決まる．
sc

横方向の始まりの点（単位 mm）

wc

横方向の幅（単位 mm）

通常は，紙いっぱいに印刷するので，
sc と wc を用紙最大限になるように設定するコマンド

fullを実行しておくこと．

画面上のスペクトルが印刷のイメージと近いことを確認してから，
pl pscale pap pageのように，続けて実行せよ（pl: スペクトル，pscale: スケール，pap: パラメータ，page: 紙送り）．
スペクトルがプリンタに印刷される．チュートリアル測定の場合，プリントしたスペクトルを指導者に提出すること．もし紙へのプリントアウトではなく，ファイルに保存する場合には，
pl pscale pap page('/data/kumeta/160711_presatR.ps')のように，page コマンドの直後にスペースをあけずにカッコで'保存先/ファイル名'にて保存する．このとき，ファイルの拡張子は.ps（postscript ファイル）とすること．
測定データの保存測定データは自分用のディレクトリに保存すること．はじめに，カレントディレクトリを確認せよ．
pwd

カレントディレクトリを確認するコマンド

画面上段に，
Current directory = "/export/home/vnmr1/vnmrsys"のように表示される．
測定データは，
vnmrsys 直下の data ディレクトリにて個人別ディレクトリを作成し，その下に保存すること．はじめに Main Menu の File を実行せよ．すると，スペクトルウインドウ内にディレ
クトリ（ファイル）のリストが表示される．リスト中の目的のディレクトリをマウスでクリックしてディレ
16クトリ名を反転させ，Set Directory ボタンをクリックすると，そのディレクトリに移動できる．上の階層に移動するには，Parent をクリックすればよい．階層の移動のために，リスト表示されたディレクトリ名を反転させておいて，change ボタンをクリックすることもある．
その装置を使用しての初めての測定であれば自分のデータ保存用ディレクトリを作成する．
mkdir('/data/hoge')

いまの階層に新らしいディレクトリを作成するコマンド

hoge は個人を特定できるような名前とする．
データを保存する際には自分のデータ保存用ディレクトリに移動する．
cd('/data/hoge')
そこで適切な名前で測定データを保存する．
svf('160711_CN_LC3_1.6mM_pH7_presatR_libra')の要領で保存をします．保存する際の名前ルールは個々人の使いやすいようにしましょう．上記は管理者（久米田）の名前ルールである（日付_サンプルのラベル状況_サンプル名と状態_測定名_装置名）．
フ ァ イ ル （ デ ィ レ ク ト リ ） 名 は UNIX の ル ー ル に 従 っ て 命 名 す る た め ， ス ペ ー ス や 特 殊 な 文 字（!,@,?,/,%,[,],(,),#,*,&,~等）は使用しないこと．
ログブックへの記録
データを保存したら，ログブックに測定内容を記録すること．左ページには，日付，名前，試料名，溶媒，
測定温度，z0 値（z0?と実行するとわかる）を記入すること．右ページには，基本的なパラメータ（tof，sw，rfl，90 度パルス幅，LOCKPOWER，LOCKGAIN，LOCK LEVEL）と測定内容（presatR 測定）を記入すること．
使用後の後かたづけ
ログブックに記入し終わったら，つぎの測定（２次元測定など）に進む．あるいは，この試料での測定が完了したら，試料をイジェクトして後かたづけをすること．
e

試料管を装置からイジェクトするコマンド

試料がイジェクトされたら，試料管を抜き取り，入り口にガーゼをかぶせること．試料管はホルダから静かに外すこと．エア排出状態のままだとうるさいので，
i

試料管挿入状態にするコマンドを実行せよ．
装置使用後は，必ず自分の使用した experiment を消去すること．もし，自分が experint 700 を使用
していた場合，jexp1

自分が experiment 1 に移動する

delexp(700)experiment 700 の消去で消去できる．experiment はディスクにファイルとして存在しているので，放置しておくとディスクスペ
ースを圧迫する．experiment 使用後の消去を徹底すること．
測定データの読み込み
以前に保存した測定データを読み込むには，保存のときと同様に，Main Menu の File コマンドを利用して目的のディレクトリに移動してから，目的の測定データをマウスでクリックして反転させておいてから，Load
コマンドを実行すればよい．
以前の測定データに含まれるシム値を分光計にセットするには，Load で測定データを読み込んだあと，
load='y'su コマンドでシム値も送信するように設定するためのパラメータsu

分光計に測定条件をセットするコマンドを実行すればよい．通常時（load='n'）には，su コマンドはシム値を分光計に送らないので注意せよ．

17

Experiment Library について
experiment のあいだで，測定／処理条件を丸ごとコピーできる．たとえば，
mp(1,3)

パラメータを 1 から 3 に丸ごとコピーする

experiment library を使って，連続測定も可能である．ある experiment で測定開始後，別のexperiment へ移動して，そこから測定開始コマンド（ga または go）を実行すると，あとから実行した測
定は待ち行列に入り，先の測定が終了したあと，自動的に測定が開始される．測定が待ち行列に入っているかどうかは，ACQUISITION STATUS ウインドウで QUEUED の項目を見ればわかる．

18

UNITY INOVA 操作マニュアル
2D 測定チュートリアル（gNhsqc）
2D 測定関連パラメータ
sw1

F1 軸のスペクトル幅（Hz）

ni

F1 軸のデータ点数（実部のみ）

phase

Hypercomplex フォーマットにするためのパラメータ．2 次元測定時に phase=1,2 に設定

d2

展開時間初期値（sec）．通常は d2=0 に設定する．

f1180

half dwell 測定を行うためのフラグ．f1180=y で half dwell

2D 処理関連パラメータ
lb1

F1 軸指数関数ウインドウ

sb1

F1 軸サインベル関数ウインドウ（シフト量：sbs1）

gf1

F1 軸ガウス関数ウインドウ（シフト量：gfs1）

fn1

F1 軸のフーリエ変換するときのポイント数．fn1>ni*2 のとき，自動的にゼロフィルされる．

axis

軸スケールを設定するパラメータrp1

F1 軸の０次位相補正値

lp1

F1 軸の１次位相補正値

rfl1

F1 軸のスペクトル右端から基準位置までの距離（Hz）

rfp1

F1 軸の基準化学シフト値（Hz）

sp1

F1 軸のスペクトル表示の右端の位置（Hz）

wp1

F1 軸のスペクトルの表示幅（Hz）

trace

画面上で，どの軸を横軸側にするかを設定するパラメータsc2

印刷時の縦軸プロット開始点（mm）

wc2

印刷時の縦軸プロット幅（mm）

2D 測定関連コマンドtime

測定所要時間の見積もり

go

測定スタート2D 処理関連コマンド
wft1daF2 方向の FT を実行する

wft2da

F2 および F1 方向の FT を実行する（wft1da 実行後は F1 軸のみ）

cosbell1

F1 軸方向にコサインベルウインドウ関数を設定する

dconi

イメージマップ表示

dpconi

等高線表示（正信号のみ）

dpconbi

等高線表示（正負信号）

dispi

等高線表示（正信号のみ，20 本）

測定条件の設定
通常，測定条件はマクロによって設定する．各測定法に対応したマクロは別冊マニュアルに，測定法毎にファイルされているので，それらの説明書をよく読むこと．また，マクロを実行する前には，1H-NMR の
presatR 測定をおこない，以下のパラメータを正しく設定または校正されていなければならない．
19

観測中心（tof）
スペクトル幅（sw）
1H の 90 度パルス幅（pw）
上記の tof と sw における，化学シフト基準（rfl）．また，rfp=0 に設定されていること．
ここでは例として，1H-15N HSQC（gNhsqc）について説明する．presatR を測定し，上記パラメータが正しく設定されている experiment を残したおいたまま，experiment を作成し，移動する．ここでは exp700
番で presatR を測定したのちに，exp701 番で gNhsqc を測定することとする．
cexp(701)
jexp701
gNhsqcgNhsqc 測定パラメータをセットアップするマクロを実行せよ．しばらく待つと画面上のパラメータが変わり，gNhsqc 測定用パラメータが表示される．この時点での測定パラメータは，BioPack をインストールしたときの標準パラメータであり，自分の試料の測定条件とは異なっているので注意する．つぎに，setpar(expnum)マクロを実行し，パラメータを自分の測定条件に合わせる．setpar マクロは，presatR の experiment から tof, sw, pw, rfl, rfp, temp の設定値をコピーしたのち，適切な測定処理条件を自動設定するマクロである．
setpar(700)のように，引数として presatR 測定条件が格納されている experiment を指定すること．測定パラメータはこの時点で適切に自動設定される．
テスト１Ｄ測定
２Ｄ測定を仕込む前には，必ずテスト１Ｄ測定を行うこと．
ni=1
phase=1と設定せよ．2D 測定用のパルスシークエンスで 1D 測定がおこなえる．
gaを実行し，1D 測定＆FT をおこなうこと．測定中にレシーバーオーバーフローがないことを確認すること．
測定終了後，1D スペクトルが表示されるので，通常の 1D 測定と同様に位相補正をおこなうこと．０次位相補正値（lp）がゼロになることを確認すること．もし，lp に有限の数値を入れないと位相が合わないようなら，1D 測定チュートリアルマニュアルを見て，lp=0 で位相が合うように測定パラメータを設定しなおすこと．
S/N が悪い場合，積算回数（nt）を 4 から 8 または 16 のように 4 の倍数の数値を設定して，再測定してみ
る．
nt=4
２Ｄ測定
テスト１Ｄ測定で満足する結果が得られたら，２Ｄ測定を仕込む．
ni=256F1 方向のデータ点数

phase=1,2

Hypercomplex のための測定．アレイ化しているところがキモ．

f1180=yhalf dwell 測定のフラグ

rp1=90half dwell 測定時の F1 軸 0 次位相補正値

lp1=-180

half dwell 測定時の F1 軸 1 次位相補正値

上記のように２次元測定のためのパラメータを設定したら，time

測定所用時間の見積もりを実行せよ．標準条件では，所要時間は 40 分となる．
測定時間の増減は，パラメータ nt と ni で調節すること．測定所要時間が確認できたら，
20

go
で測定を開始する．測定して数分間は，レシーバーオーバーフローがないかどうか見守ること．測定の進捗状況は Acquisition Status ウインドウに表示される．測定が終わった transient (FID)はディスクに格納されているので，測定途中でも FT 等の処理は可能である．
測定途中で測定を中断するには，１次元測定と同様に，
aa または AbortAcq
で中断できる．測定中断した場合でも，FT 等の処理は通常と同じようにおこなうことができる．
２Ｄ処理
はじめに，
wft(1)
で，１本目の FID だけを FT せよ．すると，１本目のスペクトルが表示される．位相補正とウインドウ関数の設定を，通常の１次元測定時と同様におこなうこと．このときの位相補正値とウインドウ関数はすべての
FID の F2 軸方向に関して共通の処理条件となる．F2 軸方向の処理条件が確認できたら，wft1daを実行せよ．すべての FID の F2 方向の FT が行われ，画面上に２次元表示がなされる．画面表示のときに，”表示範囲を超えている”旨のエラーメッセージが表示されたら，full dconiを実行せよ．画面いっぱいの大きさに２次元マップが自動調整される．
つぎに，メニューコマンドの Trace をクリックせよ．２次元マップの上部に１次元スライススペクトルが現れる．スライス位置をマウス左ボタンで調節して，スライススペクトル部に信号の FID が表示されるようにせよ．そのあと，wtiを実行すると，インタラクティブなウインドウ関数設定画面になる．この画面で F1 方向のウインドウ関数を設定できる．F1 軸のウインドウ関数設定が終了したら，wft2daを実行せよ．F1 軸方向の FT がおこなわれる．
もし，すでに F2 軸／F1 軸両方のウインドウ関数が適切に設定されているとわかっていれば，wft1da を省略して，wft2da を実行すれば，F2 軸と F1 軸の同時 FT が実行される．
FT が完了すると，２次元スペクトルがイメージマップとして画面上に表示される．信号の高さを変えるにはパラメータ vs2d を調整するとよい．
２Ｄスペクトルの印刷印刷するスペクトル領域を設定する．1H-15N HSQC スペクトルでは，1H 軸に関してはアミド水素領域だ
け信号が現れるので，通常，1H 軸は 5ppm から 11ppm の領域を印刷すればよい．
sp=5p wp=6p

印刷領域の設定dconi

イメージマップ描画

で，スペクトル描画を更新せよ．
紙への出力サイズ設定は，
横方向：sc（プロット開始点），wc（プロット幅）
縦方向：sc2（プロット開始点），wc2（プロット幅）で設定する．通常は用紙サイズは最大値でいいので，
full

用紙サイズを最大に設定するコマンドを一度実行しておけばよい．
印刷するには，
21

pcon('pos',20,1.2) pap pageのように連続に実行すること．この例は，正信号のみ 20 本，1.2 のスペーシングで等高線を，パラメータ部とともに印刷する，という意味である．
２Ｄスペクトル描画コントロール（補足）以下は，描画のコントロール方法である．
スペクトルを全体表示するには
full をクリック．
スペクトルの縦軸と横軸を入れ替えるには教科書などでは，F2：横軸，F1：縦軸である．
trace='f2'

横軸 F2

trace='f1'

横軸 F1

で入れ替えられる．
表示領域を拡大するには
マウス左ボタンで拡大したい領域の左下遇を指定，マウス右ボタンで右上遇を指定してから，Expand をク
リック．
信号の高さを変えるには（方法 1）メニューコマンドの vs20%+と vs20%-をクリックする．
（方法 2）パラメータ vs2d を適当な数値に変えてから，dconi など描画コマンドを実行する．
（方法 3）スペクトル右側のカラーバーをクリックして，th（等高線 threshold）を変える．
描画コマンド一覧
dconi

イメージマップ表示

dpconi

等高線表示（正信号のみ）

dpconbi

等高線表示（正負信号）

dispi

等高線表示（正信号のみ，20 本）

スライスを見るにはスライススペクトルは，現在描画されている２Ｄスペクトルの横軸方向についてのみ，見ることができる．
メニューコマンドの Trace をクリックすると，２Ｄスペクトルの上部にスライス１次元スペクトルが表示される．スライス位置はマウス左ボタンで指定できる．
拡大範囲を ppm スケールで指定するにはF2 軸の拡大範囲については，１Ｄと同様にパラメータ sp と wp で指定できる．F1 軸については，パラメ
ータ sp1 と wp1 で設定する．
測定データの保存と読み込み
データの保存／読み出しは１Ｄと同様である．データ保存の際には，生 FID に加えて処理パラメータとシム値が同時に保存される．
測定後のあとかたずけ
さいごに，1D 測定チュートリアルに倣ってあとかたずけして，ログブックに記入して終了である．測定試料は，ホルダから静かにはずし，所定の位置に保管すること．

22

UNITY INOVA 操作マニュアル

3D 編

3D 測定用パラメータ
sw2

F2 軸のスペクトル幅

ni2F2 軸のデータ点数

phase2 Hyper Complex Format にするためのパラメータ．３次元測定時に phase2=1,2 に設定する．
3D 処理用パラメータ
fn2

F2 軸を FT するときのポイント数：２のべき乗でなくてはならない．fn2>ni2*2 の場合，自動的にゼロフィルされる
plane

画面表示のとき，どの面を表示するかを決めるパラメータ．plane='f1f3'または'f2f3'

3D 処理コマンド
wft1da('ni',1)F1F3 面 1 枚目の F3 軸方向の FT

wft2da('ni',1)F1F3 面 1 枚目の 2 次元 FT

wft1da('ni2',1)F2F3 面 1 枚目の F3 軸方向の FT

wft2da('ni2',1)F2F3 面 1 枚目の 2 次元 FT

ft3d('f1f3')

3 次元の FT を実行し，F1F3 面のスライスデータを生成する

dproj

3 次元スペクトルを 2 次元方向に投影して表示する

dsplane(#)#番目のスライスデータを表示する

測定条件設定通常，3 次元測定法において，測定条件はマクロコマンドにより適切に設定されるはずである．測定法別マニュアルを見て設定すること
テスト 1D 測定
ここでは exp700 番にて presatR を設定後,exp702 番にて HNCO（BioPack 名 ghn_co）を測定するものとする．
cexp(702)
jexp702ghn_cosetpar(700)
いきなりの 3 次元測定は危険なので，念のためテスト 1D 測定をおこなう．
ni=1
phase=1ni2=1phase2=1に設定すると，テスト 1 次元ができる．このあとは，通常の 1 次元測定と同様に，測定および処理をおこなうこと．積算回数に応じた s/n でスペクトルが得られることを確認すること．
テスト 2D 測定
テスト 1D 測定が成功しても，いきなりの 3 次元測定は危険なので，念のためテスト 2D 測定をおこなう．
テスト 2 次元測定には，F1F3 面での測定と F2F3 面の測定の二種類が考えられるが，一般的には，F1F3 面
でのテスト 2D 測定のみ実行しておけば十分である．
23

ni=64 （自分が測定したいデータ点数を入力すること）
phase=1,2ni2=1phase2=1に設定し，コマンド go で測定開始となる．測定完了後の処理は通常の 2 次元測定と同等で，wft2da などのコマンドで実行すればよい．
3D 測定開始
テスト 1D，テスト 2D ともに良好な結果が得られたら，いよいよ 3 次元測定を実行する．以下のように設
定する．
ni=64
phase=1,2
ni2=32phase2=1,2（上記の ni と ni2 は例なので，測定法ごとに適切な数値を設定すること）
さらに，パラメータ array が'phase2,phase'となっていることを確認すること．
array?
で確認する．逆順になっていたら，測定後のデータ処理に支障があるので，注意すること．
array='phase2,phase'と手で入力すれば修正できる．
測定開始前にコマンド time で測定所要時間を確認しておくこと．
測定開始はコマンド go で実行できる．go 実行後，実際に測定がスタートするまでに数十秒かかる．
3D 処理
UNITY/VNMR での 3D 処理は，測定が正常に完了したかどうかの確認のためにおこなう．精密なスペクト
ル解析には nmrPipe を使用すること．
最初の FID を FT する．
wft(1)
ここで，位相補正し，共鳴線が吸収波形になっていることを確認すること．
つぎに，F1F3 面の 1 枚目のデータを処理する
wft2da('ni',1)
ここで表示される 2 次元スペクトルが正常であることを確認すること．
つぎに F2F3 面の 1 枚目のデータを処理する
wft2da('ni2',1)
ここで表示される 2 次元スペクトルが正常であることを確認すること．
以上の 2 面のスペクトルが正常であると判断できたら，3 次元スペクトル全体の FT をおこなう．
ft3d('f1f3')
3 次元 FT には数分を要する．
ft3d done と getplane done が表示されたら，3 次元 FT は完了である．
3D データの表示
投影方向を指定する
plane='f1f3' または'f2f3'
自分が見たい面に応じて設定する．
dproj
24

自分が指定した方向の投影スペクトルが表示される．この投影スペクトルを印刷しておくとよいだろう．印
刷については，通常の 2 次元スペクトルと同様である．
測定データの保存
データに異常がなければ，測定データを 1 次元や 2 次元測定と同様の手順で保存すること．

25