平成17年度

試験研究成果概要

秋田県農林水産技術センター
総合食品研究所

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–15–
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–16–
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NH

COOH
O

N
H

O

OH
CH2OH
O
HO
OH
O

B:uracil

A:caffeic acid

0.097%

0.013%O
HN(CH2)n
OH
OH

CH2OH
O
O
OH
OH



O

OH(CH2)7CH3

C: cerebroside (mix.) 0.037%

CH2OH
O
O
OH

OH
OH

CH2
C

O AcylCH2 O Acyl

E: DGDG

0.044%

Acyl ;
16:0(Pal) 4.0 %18:0(Ste) 6.2 %
18:1(Ole) 3.3 %
18:2(Lin) 8.6 %
18:3(Lnn) 77.9 %(CH2)12CH3
8

O

OH

H

OH

HN

H

HO

Z

O

OH

CH2
OH

E
(CH2)7CH3

OH

OH

D:aralia-cerebroside(cryst. single compound) 0.0028%

H2C

O

Acyl

H: free fatty acid

C

O

Acyl

J: fatty acid methyl ester

H2C

O

Acyl

F: triacylglycerol (TAG)

0.013%

0.55%

O



1.35%

I: sterol mix.

0.010%

K: 1,1-dibutoxylbutane (rac.)
0.057%

L: squalene
G: (pending) 0.0040%

Fig. 1–17–
  

0.012%

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ࠄࠇߚ‫ޕ‬䊶㩷 ߎࠇ߹ߢߦᒰ⎇ⓥᚲߢන㔌ߐࠇߚ޿ߊߟ߆ߩൻว‛ߦߟ޿ߡ‫ޔ‬//2 㒖ኂᵴᕈࠍ᷹ቯߒߚ߇‫ޔ‬ᵴᕈߪ⹺߼ࠄࠇߥ߆ߞߚ‫ޕ‬



–18–
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Inhibitory Effect (%)
๺ฬ
ቇฬ
ࠬࠡ࠽
Equisetum arvense
25.7

࠯ࡦࡑࠗ
Osmunda japonica
6.5
ࡢ࡜ࡆ
Pteridium aquilinum
16.0
ࠢࠨ࠰࠹࠷
Matteuccia struthiopteris
74.1ࡒࡗࡑࠗ࡜ࠢࠨ Laportea macrostachya
64.5࠙ࡢࡃࡒ࠰࠙
38.2
Elatostema umbellatumࠗ࠲࠼࡝
Reynoutria japonica
78.7
ࠡࠪࠡࠪ
Rumex japonicus
65.3
࠾࡝ࡦ࠰࠙
Anemone flaccida
52.3࠙ࠬࡃࠨࠗࠪࡦ Asiasarum sieboldii
48.0ࠦࡦࡠࡦ࠰࠙
Cardamine leucantha
67.4
ࡢࠨࡆ
26.6
Wasabia japonica
59.1࠻࡝ࠕ࡚ࠪࠪ࠙ࡑ Astilbe thunbergii
ࡗࠣ࡞ࡑ࠰࠙
Rodgersia podophylla
76.8
ࠢ࠭
34.5
Pueraria lobataࡕࡠࡋࠗࡗCorchorus olitorius
42.8
࠙࠼
14.8
Aralia cordata
43.3
࠲࡜ࡁࠠ
Aralia elataࠦࠪࡖࠢAnthriscus sylvestris
7.4
Angelica ursina-354.0ࠛ࠱࠾ࡘ࠙ࡂࡑࡏ࠙ࡈ࠙
Glehnia littoralis-92.6
࠮࡝
Oenanthe javanica
18.8ࡅ࡟ࡂ࡝࠰࠙
Symphytum officinale
26.5
࠾ࡢ࠻ࠦ
Sambucus sieboldiana76.2࠷࡞࠾ࡦࠫࡦ
Codonopsis lanceolata
-18.0
ࡕࡒࠫࠟࠨ
Cacalia delphiniifolia
67.8
ࡎࡦ࠽
Cacalia hastata-36.1
Cirsium japonicum
69.3
ࡁࠕࠩࡒ
ࡈࠫࠕࠩࡒ
Cirsium purpuratum
97.2
ࡈࠠPetasites japonicus
65.1
ࠝ࠾ࡁࠥࠪ
Sonchus asper
90.7
ࡁࡆ࡞Allium grayi
18.2
ࠞ࠲ࠢ࡝
Erythronium japonicum
63.3
ࡁࠞࡦ࠱࠙
Hemerocallis fulva
65.1ࠦࡂࠡࡏ࠙ࠪ
Hosta albo-marginata
51.4ࠝࠝࠡࡃࡏ࠙ࠪ Hosta montana
35.1
ࠪࠝ࠺
Smilax riparia
27.1
ࡒ࡚࠙ࠟ
Zingiber mioga
18.7
ࠕ࠽ࠕࠝࠨ
Ulva pertusa
3.3
ࡒ࡞
Codium fragile
78.2
ࠕࡒࠫࠣࠨ
Dictyota dichotoma
47.6
ࠛ࠱ࡗࡂ࠭
Dictyopteris divaricata
98.5
ࠗࠪࡕ࠭ࠢ
Sphaerotrichia divaricata
27.9ࠤ࠙࡞ࠪࠣࠨ
Desmarestia viridis
78.7
࠷࡞ࠕ࡜ࡔ
Ecklonia stolonifera
67.4
ࡢࠞࡔ
Undaria pinnatifida-36.1ࡈࡒࠬࠫࡕࠢ
Sargassum confusum
64.5
ࠗ࠰ࡕࠢ
Sargassum hemiphyllum
90.5
ࠕࠞࡕࠢ
Sargassum horneri
24.0ࡗ࠷ࡑ࠲ࡕࠢ
Sargassum patens
74.1࠙ࡒ࠻࡜ࡁࠝ
Sargassum thunbergii
46.6
࡛࡟ࡕࠢ
Sargassum siliquastrum
88.3
ࡑࠢࠨ
Gelidium elegans
69.3࡚ࠠ࠙ࡁࡅࡕ
Grateloupia okamurae
63.3
ࡈ࠳࡜ࠢ
Grateloupia lanceolata
97.2ࡎ࠰ࡃࡒ࡝ࡦ
Solieria tenuis
67.8
ࠝࠧࡁ࡝
Gracilaria vermiculophylla
-15.4
ࠝࠠ࠷ࡁ࡝
Ahnfeltiopsis flabelliformis
35.1
࠷ࡁࡑ࠲
Chondrus ocellatus
50.5
ࡈࠪ࠷࠽ࠡ
Lomentaria catenata
51.4
ࠗࠡࠬCeramium kondoi
29.9
ࠦࡁࡂࡁ࡝
Laingia pacifica
65.1ࠗ࠰ࡓ࡜ࠨࠠ
Symphyocladia latiuscula
93.4
ࠕࡑࡕ
Zostera marina-19.3

Interfering Effect (%)
14.5
0.6
12.7
72.5
12.2
18.5
47.2
45.7
42.1
43.0
34.1
17.4
42.9
41.1
12.4
-5.8
3.0
1.9
-34.8
-164.9
-61.3
21.2
14.0
79.6
-24.7
39.1
-17.6
53.0
93.8
50.5
76.0
22.4
64.4
58.3
57.1
32.1
38.6
1.1
2.5
6.9
18.8
16.7
14.9
9.4
85.2
19.3
38.7
29.7
19.5
25.4
48.1
53.7
60.0
34.2
46.4
8.7
33.0
52.5
25.6
14.3
27.4
7.1
60.6
61.1

Inhibitory
11.1
5.9
3.3
1.6
52.2
19.7
31.5
19.6
10.2
5.0
33.4
9.2
16.1
35.7
22.1
48.6
11.9
41.4
42.2
-189.1
-31.3
-2.5
12.5
-3.4
6.6
28.7
-18.6
16.3
3.4
14.6
14.7
-4.2
-1.1
6.8
-5.7
3.0
-11.4
17.6
0.8
71.3
28.8
81.8
12.9
69.3
-17.8
-55.4
25.8
60.7
4.5
48.7
-1.6
34.5
9.3
29.1
50.8
59.1
-48.5
-17.3
24.9
37.0
2.5
58.0
32.8
-80.4






















ᶏ⮺
















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–62–

⴫㧝 Paenidase ߩ♖⵾__________________________________________________________________________________________
Total activity

Total protein

Specific activity

Purification

Yield

(U)

(mg)

(U/mg)(-fold)(%)___________________________________________________________________________________________
Culture medium

1500

5090

0.29

   1

Ammonium sulfate1320

    737

1.79

6.2

88.0

DEAE batch1034

    419

2.47

8.8

68.9

Sephacryl S-100 HR

733

4.2

17.5

60.3

48.9

DEAE-Sepharose FF
1st Mono Q P-I

100

583

2.5

233      803      38.9

*1

129

0.159

811

2800

8.6

*2

222

0.144

1540

5310

14.8

102

0.043

2370

8170

6.8

187

0.065

2880

9930

12.5

P-II

2nd Mono Q P-I*1
P-II

*2

__________________________________________________________________________________________
Paenidase activity was measured using Suc-[D-Asp]-MCA as a substrate.
P-I, paenidase I; *2P-II, paenidase II.

Relative activity (%)

P-I

P-II

*1

(kDa)
97.0 66.0 -

㪈㪇㪇

(A)

㪏㪇
㪍㪇
㪋㪇

㪧㪸㪼㫅㫀㪻㪸㫊㪼㪄㪠㪧㪸㪼㫅㫀㪻㪸㫊㪼㪄㪠㪠

㪉㪇
㪇
㪌㪅㪌

㪍

㪍㪅㪌

45.0 -

㪎

㪎㪅㪌

㪏

㪏㪅㪌

㪐

㪐㪅㪌

Residual activity (%)

pH

30.0 20.1 -

(B)
㪈㪇㪇

㪧㪸㪼㫅㫀㪻㪸㫊㪼㪄㪠㪧㪸㪼㫅㫀㪻㪸㫊㪼㪄㪠㪠

㪏㪇
㪍㪇
㪋㪇
㪉㪇
㪇

14.1 -

䋲䋰㷄 䋳䋰㷄 䋴䋰㷄 䋵䋰㷄 䋶䋰㷄 䋷䋰㷄          

Temperature࿑㧝 2CGPKFCUG+++ ߩ 5&52#)'     ࿑㧞 2CGPKFCUG+++ ߩ⥋ㆡ᷷ᐲ # ߣ᷷ᐲ቟ቯᕈ $ ⴫㧞 2CGPKFCUG+++ ߩၮ⾰․⇣ᕈ______________________________________________________________________
Substrates

Proteinase/peptidases

Relative activity (%)
Paenidase I

Paenidase II______________________________________________________________________
Suc-[D-Asp]-MCA

DAEP

100

100

Arg-MCACathepsin H

<0.1

<0.1

Bz-Arg-MCA

Trypsin

<0.1

<0.1

Boc-Gln-Ala-Arg-MCA

Trypsin

<0.1

<0.1

Pro-Phe-Arg-MCA

Kallikrein/Proteasome

<0.1

<0.1

Ac-Tyr-Val-Ala-Asp-MCA Caspase-1

0.7

0.4

Ac-Asp-Glu-Val-Asp-MCA Caspase-3/7/8

1.8

1.2

Ac-Val-Glu-Ile-Asp-MCA

0.5

0.3

Caspase-6______________________________________________________________________
Final substrate concentration was 0.5 mM.

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平成17年度 試験研究成果概要
発 行

平成19年1月

発行者

秋田県農林水産技術センター総合食品研究所〒010-1623
秋田市新屋町字砂奴寄4-26
tel 018-888-2000㈹ fax 018-888-2008
http://www.arif.pref.akita.jp

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