［明治薬科大学研究紀要 43, 1-20（2014）］

放線菌の自己耐性機構
─ 特にβ‐ラクタム抗生物質を中心に ─

小河原宏HO Bio研
明治薬科大学総

Review

説[明治薬科大学研究紀要 43, 1-20 (2014)]

放線菌の自己耐性機構－特に β‐ラクタム抗生物質を中心に－
小河原宏

HO Bio 研
明治薬科大学
1．はじめに今をさかのぼる約 40 年前は新しい抗生物質の探索もままならず、一方で薬剤耐性が問題になりつつある時期であった。当時私が所属していた国立予防衛生研究所（国立予研、現国立感染症研究所）抗生物質部（梅沢濱夫部長）では、β‐ラクタム剤に対する主要な耐性機構である β‐ラクタマーゼに対する阻害剤 1)を探索していた。そのようなわけで私も β‐ラクタマーゼ阻害剤のスクリーニングに従事しつつ、β‐ラクタム抗生物質の世界に足を踏み入れることになった。そうはいってもそのうちの何を研究するかについて考えつつ、誰も行っていない β‐ラクタム抗生物質に対する自己耐性を行ってみたいと思うようになった。それ以来、β‐ラクタマーゼ特に放線菌の β‐ラクタマーゼと β‐ラクタム剤の標的であるペニシ
リン結合蛋白質（PBP）を、その自己耐性の面から研究することになった。本総説では最近全ゲノム配列が解明された放線菌の遺伝子について、放線菌の PBP および β‐ラクタマーゼに関する解析を中心に述べる。その前に自己耐性一般と、β‐ラクタム抗生物質の生合成と自己耐性の関係について考察する。以前の研究については、参考文献 2)を参照願いたい。なおもう一つの主要な研究テーマであったチロシンキ
ナーゼの阻害剤については著書 3) に纏めたので、それを参照して頂けると有難い。これに関連して、我々が発見した蛋白質チロシンキナーゼ阻害剤であるイソフラボンの 1 種ゲニステインに関する論文 4)の被引
用回数は、長年にわたり世界のトップテンを占めていたこと（Fig. 1）、現在多方面のシグナル伝達系が解明されておりシグナル伝達系全盛時代であるが、この解明にこのゲニステインが試薬として大きく貢献できたことを付記したい。

Figure 1. 総合評価

大学ランキング. 日本のバイオ研究論文の被引用回数­− 1 −

2．自己耐性について
放線菌特に Streptomyces 属放線菌は、β‐ラクタムを含む多くの抗生物質を生産することで知られる、
高 G＋C 含有グラム陽性細菌である。抗生物質は細菌を標的とするため、生産菌のうちでも β‐ラクタム
抗生物質であるペニシリンやセファロスポリンを生産する真菌と異なり、放線菌は少なくともその生産時期に自分自身を防御するために耐性機構を働かせねばならない。これが自己耐性であり、現在までにテト
ラサイクリン 5, 6)、マクロライドであるオレアンドマイシン 7)、抗癌剤であるミスラマイシン 8)、アミノグリコシドであるカスガマイシン 9)（これらはいずれも ABC トランスポーターが関与）、マクロライドのメ
チマイシン 10)（23S rRNA のグリコシル化）、ヌクレオシドのカプラマイシン 11) やアミノグリコシドのリン酸化 12, 13)、ストレプトスリシンやアミノグリコシドのアセチル化 14-16) などが報告されている。この自己耐性は Streptomyces 以外の放線菌例えばフォーチミシン生産菌の Micromonospora17)やグリコペプチド生産菌の Amycolatopsis18)、サーファクチン 19) やサブチリン 20)、バチトラシン生産菌である Bacillus 21)（グラム陽性菌）や、カリマンタシンやバツミン生産菌である Alcaligenes22)や Pseudomonas23)（いずれもグラム陰性のプロテオバクテリア）でも報告されている。これら自己耐性に関与する遺伝子は、一般にその抗生物質生合成遺伝子クラスターの中あるいはそれに隣接して存在している 11, 24-25)。
抗生物質の耐性機構としては 7 種が考えられているが 26-27)、そのうち自己耐性では主に抗生物質本体の化学修飾による不活性化、標的部位の修飾、輸送蛋白質による抗生物質の排出が関与している。しかし 1つの機構で十分な耐性機構を付与しているとは限らず、2 種以上の機構が関与していることも多い。例えばパロモマイシン生産菌である Streptomyces rimosus forma paromomycinus においては抗生物質のアセチル化とリン酸化が関与しているし 28)、カナマイシン生産菌である Streptomyces kanamyceticus においては標的であるリボソームの修飾と抗生物質のアセチル化が関与している 29)。またハイグロマイシン A 生産菌である Streptomyces hygroscopicus において自己耐性に関与すると考えられるリン酸化酵素遺伝子 hyg21 を不活性化すると、不活性化株のハイグロマイシン A に対する感受性は親株と変わらずに、ハイグロマイシン
生産性が 90%以上減少することが報告されている 30)。
3．β‐ラクタム系抗生物質の生合成
β‐ラクタム系抗生物質は、その化学構造から大きく 5 群に分類される（Fig. 2）。放線菌（Streptomyces
および Nocardia）はこのいずれの群の抗生物質も生産する。これら抗生物質のうちペニシリンとセファロ
スポリン、セファマイシン群は共通の経路を経由して生合成される（Fig. 3）。放線菌を含む細菌では aatA
／penDE 遺伝子を持たないので、ペニシリン骨格（イソペニシリン N およびペニシリン N）を生合成できてもペニシリン G を生合成できない。また真菌ではイソペニシリンエピメラーゼ遺伝子は cefD1（アシル
CoA シンテターゼ、609 アミノ酸からなる）と cefD2（イソペニシリン N CoA エピメラーゼ、383 アミノ酸からなる）の 2 個の遺伝子から構成されているが、細菌では cefD（エピメラーゼ、S. clavuligerus の蛋
白質で 398 アミノ酸からなる）1 個の遺伝子からなるし、ペニシリン N よりデアセチルセファロスポリン
C（DAC）の合成は真菌では 1 個の遺伝子（cefEF、332 個のアミノ酸からなるデアセチルセファロスポリ
ン C シンテターゼ／ヒドロキシラーゼをコード）で賄っているが、細菌ではデアセトキシセファロスポリ
ン C（DAOC）までは CefE 遺伝子（311 個のアミノ酸からなるデアセトキシセファロスポリン C シンター
ゼをコード）、デアセチルセファロスポリン C（DAC）までは別の cefF 遺伝子（318 個のアミノ酸からなるデアセトキシセファロスポリン C ヒドロキシラーゼ）が担当している（Fig. 4）。更に真菌では、セファ
マイシン合成系の遺伝子である cmcH、cmcI および cmcJ 遺伝子が存在しない。
クラブラン酸は放線菌である Streptomyces clavuligerus により生合成される（Fig. 5）が、その生合成遺伝子クラスターはセファマイシン生合成遺伝子クラスターと共にスーパークラスターを構成している（Fig. 6）。この遺伝子クラスターの両端に自己耐性に関与すると考えられるペニシリン結合蛋白質が存在­− 2 −

し（SCLAV_4179、SCLAV_4180 および SCLAV_4214, 他に SCLAV_4198 にもう一つ存在する）、更に β‐ラクタマーゼが SCLAV_4187 に存在している（実際にこれら遺伝子が自己耐性に関与しているかどうかは不明である）。興味あることに、このクラブラン酸の骨格であるクラバム生合成遺伝子とパラログ遺伝子
クラスターが、S. clavuligerus の染色体の別領域（SCLAV_2920 から SCLAV_2935）とプラスミド上（Fig.
7 ） に 存 在 す る 31) 。 こ の ク ラ ブ ラ ン 酸 合 成 酵 素 と 相 同 な 遺 伝 子 ク ラ ス タ ー （ SCLAV_p1074 か ら
SCLAV_p1079）が、1.8Mb の巨大直鎖状プラスミド（pSCL4）上に存在することは、最近の全ヌクレオチ
ド配列の決定により確認された 32）。即ち S. clavuligerus においては、染色体上のセファマイシン‐クラブ
ラン酸生合成遺伝子クラスターの他に、クラブラン酸生合成遺伝子様クラスターが染色体の別の場所とプラスミド上に存在することになる。そのほかこの巨大プラスミド上にはクラバム生合成遺伝子様の配列が
1 カ 所 （ SCLAV_p1508 か ら SCLAV_p1510 ） 存 在 し 、 更 に 二 次 代 謝 産 物 生 合 成 遺 伝 子 ク ラ ス タ ー（SCLAV_4740 から SCLAV_4758）に存在する SCLAV_4749 は、アミノ酸残基 6842 個からなる巨大非リボ
ソーム性ペプチドシンテターゼをコードするが、その C 末端側 6514 から 6842 位のアミノ酸配列は β‐ラクタマーゼをコードしていること（PFAM00144）が推定されている 32）。
一方、放線菌 Streptomyces cattleya においてはセファマイシン生合成遺伝子クラスターともう一つの β‐ラクタムであるカルバペネム型のチエナマイシン生合成遺伝子クラスターに関して、前者が染色体上に存在 す る の に 対 し （ Fig. 8 ； SCAT_5676 か ら SCAT_5692 ）、 後 者 は プ ラ ス ミ ド 上 （ SCAT_p0820 か ら
SCAT_p840）に存在し、S. clavuligerus の場合と異なっている 33-34) 。チエナマイシンは放線菌である S.
cattleya により生合成されるが、カルバペネム骨格はグラム陰性の植物病原菌である Erwinia などでも生合成される 35)。

Figure 2. The five main classes of β-lactam antibiotics.

Figure 3. Biosynthetic pathways of fungal penicillin G andcephalosporin C and bacterial cephamycin C.

­− 3 −

Figure 4. Construct of penicillin/cephalosporin biosynthetic gene clusters in fungi and bacteria.
Abbreviations: A. nidulans : Aspergillus (Emericella) nidulans ; P. chrysogenum: Penicillium chrysogenum; A. chrysogenum:
Acremonium chrysogenum; S. clavuligerus: Streptomyces clavuligerus ; N. lactamdurans : Nocardia lactamdurans; L. lactamgenus :Lysobacter lactamgenus.

Figure 5. Clavulanic acid and 5S clavam biosynthetic pathways in Streptomyces clavuligerus.

­− 4 −

Figure 6. Clavulanic acid and cephamycin biosynthetic gene clusters in Streptomyces clavuligerus.
Gene names, amino acid numbers of the products and their functions are shown in the Figure.

Figure 7. Clavulanic acid paralog gene cluster in pSCL4 plasmid.

Figure 8. Cephamycin biosynthetic gene cluster in Streptomyces cattleya chromosome.

­− 5 −

4．放線菌のペニシリン結合蛋白質（PBP）
ペニシリン結合蛋白質（PBP）は、N 末端ドメインの構造と機能からクラス A、クラス B およびクラス
C の 3 群に分類される 36-37）。このうちクラス A とクラス B の PBP は共に、C 末端領域にペプチドグリカ
ン骨格で隣接するグリカン鎖間のペプチド交差を触媒するトランスペプチダーゼドメインを有する。そのほかクラス A PBP は N 末端領域に交差グリカン鎖の伸長を触媒するグリコシルトランスフェラーゼ活性ドメインを持つのに対し、クラス B PBP ではこのドメインを欠いている。クラス C PBP は低分子量 PBPとも呼ばれ、カルボキシペプチダーゼ活性を持ち、主にペプチドグリカンの成熟化およびリサイクリングに関与し、生育に必須と考えられていないので、以後の考察からは除外する。
表 1 に現在全ゲノム配列が決定されている放線菌のうち Streptomyces 24 種を含む 92 種のゲノムサイズ、
そのゲノムが環状か直鎖状か、PBP の数、PBP のタイプ、クラス A およびクラス B への帰属、その菌の特徴を纏めた。また Clustal X で作成したこれら PBP の系統樹を Fig. 1S および Fig. 2S に纏めた。ここでAcidimicrobium ferrooxidans DSM 10331 および Kytococcus sedentarius DSM 20547 を除きいずれの菌もクラス A およびクラス B の PBP を有しているが、種によって PBP の数が 2 個から 13 個と極めてバラエ
ティーに富んでいる。特に Streptomyces 属放線菌は際だって多く、10 個以上の PBP を有している。興味あることに、調べた Streptomyces 24 種の内 14 種ではクラス B の PBP 遺伝子が直列に 2 個配列しており、
しかも両者が類似しているのみでなく（E 値が 1e-50 以下）、1 種（S. clavuligerus）を除き連続した遺伝子
群の PBP のアミノ酸配列それ自身も極めて類似し、系統樹で同一のクラスターに属している。例えば、S.
albus の SSHG_03834 と SSHG_03835 の E 値は 2.6e-58 であり、S. avermitilis の SAV_3603 と SAV_3604 のE 値は 2.9e-64 であり、S. coelicolor の SCO_3156 と SCO_3157 の間の E 値は 3.7e-46 である。さらに S.
clavuligerus および S. pristinaespiralis を除く 12 種の連続配列間での相同性も高く、系統樹で同じクラス
ターに属し、例えば S. albus の SSHG_03834 と S. coelicolor の SCO_3156 間の E 値は 6.9e-72 でアミノ酸配列がきわめて類似する。S. clavuligerus では、並列した 2 個の PBP（SCLAV_4179 と SCLAV_4180）間の類似性が低く（E 値で 5e-12）、しかも遺伝子は逆方向を向いている。これら S. clavuligerus の 2 個の PBP は、
セ フ ァ マ イ シ ン ‐ ク ラ ブ ラ ン 酸 生 合 成 遺 伝 子 ク ラ ス タ ー の 端 に 位 置 し て い る 。 更 に 、 こ の PBP（SCLAV_4179）は S. cattleya のセファマイシン生合成系の端に位置する PBP（SCAT_5676）と極めて類似性が高く（E 値で 8.4e-186）、セファマイシン生合成遺伝子クラスターが両者間で伝達され、その後複雑な遺伝子組換えが起き現在の遺伝子構成になったことが推定される（Fig. 6 と Fig. 8 の遺伝子構成の比較および Fig. 9）。またはそのアミノ酸配列類似性の高さ（Fig. 10）から、生合成遺伝子が伝達された後に、極めて最近 PBP 遺伝子が伝達されたとも考えられる。この SCLAV_4179 は SCLAV_4180 に比較してペニ
シリン G に対する親和性が低く、その生育に必須と報告されている 38）。
興味あることに、この SCLAV_4179 に類似する PBP はここで解析した Streptomyces 属細菌全てに存在し、しかも β-ラクタムを生合成する S. clavuligerus および S. cattleya では 2 個存在し（それぞれ SCLAV_4179と SCLAV_1774 および SCAT_5676 と SCAT_1730 で、SCLAV_4179 と SCLAV_1774 の間の E 値は 2.8e-136、
SCAT_5676 と SCAT_1730 の間の E 値は 2.9e-141 で極めて類似している）、β-ラクタムに対する自己耐性で機能していることが想像される 39)。この SCLAV_4179 で Blast 検索すると、類似のアミノ酸配列を持つ蛋白質として多くの Streptomyces 属の PBP が最初に検索されるが、続いて検索される Frankia、Kribbella、Nocardioides 、 Thermomonospora 、 Nocardiopsis 、 Janibacter 、 Intrasporangium, Acidothermus, Dermacoccus,
Conexibacter, Halothermothrix, Dialister, Pelosinus, Atopobium, Olsenella などは β‐ラクタムに低親和性の PBPと 類 似 性 の 高 い PBP を 持 つ こ と か ら β- ラ ク タ ム に 耐 性 で あ る こ と が 推 定 さ れ る 40) 。 こ の う ち
Halothermothrix, Dialister, Pelosinus（これらは低 G＋C グラム陽性菌）を除く種は高 G＋C グラム陽性菌である。
S. clavuligerus においてセファマイシンあるいはクラブラン酸生合成遺伝子クラスター内あるいはその近­− 6 −

くに存在する PBP は SCLAV_4179, SCLAV_4180, SCLAV_4198（以上クラス B）, SCLAV_4214（クラス C）、
SCLAV_2887（クラス A）, SCLAV_2947（クラス B）で、プラスミド p SCL4 のパラログ中のクラバム生合成遺伝子クラスター領域（SCLAV_1050 から SCLAV_1100）には PBP らしき配列は見当たらない。
S.cattleya においてもセファマイシンあるいはチエナマイシン生合成遺伝子クラスター内あるいはその近傍に存在する PBP は SCAT_5676 および SCAT_5691 のみで、チエナマイシン生合成遺伝子クラスター内には
PBP らしき配列は見当たらない（β‐ラクタマーゼ遺伝子は SCAT_p0838 に存在する）。
Streptomyces 属放線菌の PBP に隣接して蛋白質キナーゼが存在することは、特筆すべきことである。例
えば SSHG_02907、SAV_4338、SBI_05406、SCATT_30800、SCAT_3089 、SCLAV_2946、SMCF_8885、
SCO_3848、SFLA_3201、SSFG_03588、SGM_3503、SSRG_03159、SGR_3725、SHJG_5218、SSPG_03807、
SSDG_03054 、 SCAB_45561 、 SACTE_3284 、 SSEG_02705 （ SSEG_09019 に 隣 接 ）、 SVEN_3632 、
STRVI_0274 などである。興味あることに、隣接する PBP はすべて系統樹で同じクラスターに属し、一方の蛋白質キナーゼのアミノ酸配列は互いにきわめて類似し、例えば SCATT_30800 と SSEG_02705 間の E
値は 3e-93、SCATT_30800 と SSHG_02907 間の E 値は 3.2e-102 である（Fig. 11）。特に N 末端半分は殆ど同一といっても良いほどである。この群の蛋白質キナーゼについてモチーフデータベースである Pfam41)で検索すると、いずれもキナーゼドメイン 1 個と、β-ラクタム結合ドメインであり、ペプチドグリカンのセンサとして機能していると考えられている PASTA（penicillin-binding protein and serine/threonine kinaseassociated）ドメイン 42, 43) 4 個から構成されている。一方の PBP に関しては、少なくとも S. coelicolor
A3(2)および S. clavuligerus のクラス A およびクラス B PBP ともに PASTA ドメインは見当たらない 44)。一方で蛋白質キナーゼが細胞分裂や細胞の形態形成調節に関与することが Streptomyces、Corynebacterium や
Mycobacterium で知られているが 45-47)、蛋白質キナーゼと PBP との関係は明らかにされていない。

Figure 9. Comparison of cephamycin biosynthetic gene clusters in
Streptomyces clavuligerus and Streptomyces cattleya.

­− 7 −

Figure 11. Phylogenetic tree of protein kinases
from Streptomyces constructed by using Sco4049 as
an out-group.

Active sites are marked with square boxes.
Figure 10. Comparison of amino acidsequences of SCLAV_4179 and SCAT_5676.

5．放線菌の β‐ラクタマーゼ
β‐ラクタマーゼは β‐ラクタム系抗生物質の β‐ラクタム環の加水分解を触媒する酵素で、病原菌ではその薬剤耐性の面から広く研究されている。しかし非病原性の細菌である放線菌や枯草菌、藍藻類なども
β‐ラクタマーゼを生産する。これら β‐ラクタマーゼについては昨年の明治薬科大学紀要に纏めたので、それを参照していただきたい 48)。
6．β‐ラクタム抗生物質に対する自己耐性
β‐ラクタム抗生物質の自己耐性については、ペニシリンが広く用いられる以前に単離した放線菌でもほとんどの Streptomyces 属放線菌で β‐ラクタマーゼが構成的に、β‐ラクタム生産と無関係に生合成されていること、Streptomyces 属放線菌の PBP のペニシリン G に対する親和性が極端に低いことから、PBP が主たる役割を果たしていると考えられている 2, 49-50)。
セファマイシンおよびクラブラン酸を生合成する Streptomyces clavuligerus において自己耐性に関与する
可 能 性 の あ る 蛋 白 質 と し て は 、 PBP （ SCLAV_4179, SCLAV_4180, SCLAV_4198, SCLAV_4214 ，
SCLAV_2887 および SCLAV_2947）、β‐ラクタマーゼ（SCLAV_4187, SCLAV_4749）、排出蛋白質およびABC トランスポーター（SCLAV_4183, SCLAV_4192, SCLAV_2930）および阻害剤蛋白質（SCLAV_4455 お
よび SCLAV_4723）および阻害剤様蛋白質(SCLAV_4202) が考えられる。セファマイシン生合成遺伝子ク
ラスター中に存在する SCLAV_4202 に関しては詳細な研究がないが、SCLAV_4455（Doran ら 51)が報告した β‐ラクタマーゼ阻害剤蛋白質 BLIP）は各種のクラス A β‐ラクタマーゼを pM から µM 範囲の親和性で阻害する 52)。またこの遺伝子（bli）の破壊株および bli 遺伝子およびクラブラン酸非生産二重変異株は­− 8 −

蛋白質性 β‐ラクタマーゼ阻害活性を示さないことから、S. clavuligerus には β‐ラクタマーゼ阻害蛋白質
は BLIP のみしか存在しないこと、bli 遺伝子を破壊してもクラバン以外の二次代謝産物の生産に影響しな
いこと、増殖および分化時の細胞形態、胞子形成に影響しないことが示唆されている 53)。興味あることに、BLIP の産生はセファマイシン C およびクラブラン酸生合成遺伝子クラスター中のレギュレーターccaR（SCLAV_4204）の欠損変異株でダウンレギュレートされることが報告されており、β‐ラクタマーゼ阻害剤蛋白質 BLIP の生産調節と β‐ラクタム生産調節の間に何らかの関連があることが示唆される 53)。しかし詳細については不明である。PBP に関しては SCLAV_4179 がペニシリン B に対する親和性が特に低い
ことが報告されているので、自己耐性に関与していることが極めて高い。即ち S. clavuligerus がクラブラン酸を多量に産生しても、自己のペプチドグリカンを生合成できるものと推定される。同様にセファマイ
シンとチエナマイシンを産生する S. cattleya においても、SCLAV_4179 と相同性が極めて高い SCAT_5676
が自己耐性で主要な役割を果たしていることが推定される。このことと関連して先に述べた SCLAV_4179に相同性な PBP を持つ Frankia、Kribbella、Nocardioides、Thermomonospora、Nocardiopsis、Janibacter、Intrasporangium 、 Acidothermus 、 Dermacoccus 、 Conexibacter 、 Halothermothrix 、 Dialister 、 Pelosinus 、Atopobium、Olsenella などの PBP 生産の程度と β‐ラクタム耐性の関連性に興味が持たれる。
7．SCLAV_4179 の分子モデリングと薬剤耐性
ここでセファマイシンおよびクラブラン酸を生合成する Streptomyces clavuligerus における、β-ラクタム
自己耐性に関与する蛋白質候補である SCLAV_4179 の分子モデルと薬剤耐性について考察する。現在アミノ酸配列が明らかにされた蛋白質の分子モデル予測は、アミノ酸配列を基に配列同一性の高い結晶構造既知の蛋白質の分子モデルと比較することにより行われる。ここでは Imperial College London の Kelly らが開発した Phre254)を用い、分子構造予測を行った。Phyre2 は目的の蛋白質のアミノ酸配列から PSI-Blast により蛋白質の各位置の変異傾向を読み取り、隠れ Markov モデルデータベースの分子構造既知の蛋白質の隠れ Markov モデルと照合することで、目的の蛋白質のアミノ酸配列を Confidence（信頼性）によりランク付けする。これにより分子モデルを推定することで、分子構造既知の蛋白質と 15%以下の配列同一性を持つ蛋白質でも正確な分子モデルが予測できるとされる。実際に SCLAV_4179 について行うと、MRSA のセフォタキシムが結合した PBP3 B 鎖の結晶構造（PDB コード: 3vsl_B）を鋳型として用いた分子モデル
が、Confidence=100.0%、%i.d.=23、カバー率=86%のトップランキングモデルとして選択された（Fig. 12A
および Fig. 12B）。ほかの PBP を鋳型とした分子モデル例えば S. pneumoniae の PBP2b（PDB コード：
2wad_B）、S.pneumoniae の PBP2x（PDB コード：1pmd_A）あるいは Pseudomonas aeruginosa の PBP3（PDB コード：3oc2_A）を鋳型として得られたモデルでもほぼ分子構造的にきわめて類似し、特に N 末端の頭部領域を除く立体構造はほとんど同一といっても良いほどである（いずれの PBP を用いて得られた分子モデルは Confidence=100.0%）。それゆえ、以下 3vsl_B55)を鋳型として得られた分子モデルを基に議論する。得られた分子モデルの鋳型の結晶構造との比較を、Fig. 13A および Fig. 13B に示した。また鋳型の二次構造と比較しての、得られた分子モデルの推定二次構造を Fig. 14 に示す。ここで得られた推定二次構造は、Chou-Fasman 法 56) およびコンセンサス予測法 57) での結果と良い一致を示す。358SIFK361、412SCD414 および 612KTS614 により構成される活性部位ポケットは大腸菌の PBP4 などに比較して狭いが立体構造的に塞がれておらず、十分小さい β-ラクタムとの反応に適した位置に存在している。この点は反応速度定数の比較から、β-ラクタム耐性には Michaelis 複合体の形成ではなくアシル化 PBP 中間体の形成が重要であるという MRSA の PBP2a の場合と類似する 58)。また S. pneumoniae の PBP2b および PBP1aの高度耐性獲得に重要である β3 と β4（対応する SCLAV_4179 領域はそれぞれ 607-613 位および 625-630位）を連結するリンカー 59) および PBP2x の高度耐性獲得で重要とされる α4-α5 ループ 60) （対応するSCLAV_4179 領域で 386-411 位）は、活性部位の入り口の両側に位置しており、その柔軟性が β-ラクタム­− 9 −

耐性に重要であると考えられる。更に、このモデルには 328-345 位の 18 残基および 470-506 位の 37 残基が現れておらず、この領域がどのような構造をしているかは耐性との関連から興味ある点である。
SCLAV_4179 のアミノ酸配列の基本骨格はクラス B PBP のもの 61) であり、モチーフ 1 (β2n/β3n)：64RGX3DX2G-99aa-モチーフ 2 (β6n)：172RXYPX2-36aa-モチーフ 3 (αi)：214GX2GXEX3D-31aa-モチーフ 4(βh)：255GX7DX3Q-39aa-モチーフ(β2)：307TGX3AX4PSXDX-36aa-モチーフ 5 (α2)：358SX2K-50aa-モチー
フ 6 (α4／α5)：412SXN-197aa-モチーフ 7 (β3)：612KXG で構成されている。しかし、その活性部位（モチーフ 5、6 および 7）のアミノ酸配列はきわめて特異な配列をしている。例えば、SX2K 配列では多くのPBP では STXK であるが SCLAV_4179 では SIFK であり、SXN 配列はほとんどが SS/DN であるの対しSCD であり、KT/SG 配列は KTS となっている。これは S. clavuligerus の 12 個の PBP で比較しても STXK
以外は SCLAV_1774 の SIFK と SCLAV_4179 の SIFK、SCLAV_2947 の SPFK のみであり、SXN ではSCLAV_4179 と SCLAV_1774 のみが SCD であり、KTG 配列では SCLAV_4179 のみが KTS となっている。
S. pneumoniae の感受性菌（R6）と耐性菌（Sp328）の PBP2x の比較からそのアミノ酸変異率は N 末端で16%の変動であるのに対し、C 末端では 31%の変動、活性中心部で 26%と C 末端および活性部位付近での変異率が高い。特にリンカー領域では 64%に達する 60)。類似のことは PBP2b、PBP1a および S. aureus のPBP3 でも見られる。更にコアを形成する β1 から β5 までの 5 本の β-シートではほとんど変異が起きていない 62, 63)。このことを考慮に入れ、SCLAV_4179 での耐性に関与すると思われるアミノ酸について考える。
PBP2x の 337STMK の 338T が A/G/P/S に変異すると、T の OH 基の 340K および 547K（KT/SG 配列のK）および水分子との安定な水素結合が消失し、全体としてより柔軟な構造をとり、アシル化効率が減少するといわれる。これはほかの PBP についても同様である。また PBP2x の 339M（SX2K 領域）は耐性菌の PBP では F に変異している。SCLAV_4179 ではこれに対応する T の位置は I で占められ、更に M の位
置は F となっており、この二つのアミノ酸残基が耐性に関与している可能性が極めて高い。また PBP2xでは 547KSGTAQ552 の Q が耐性菌で E に変異しているが、SCLAV_4179 では 612KTSTAE617 となっており、この変異に相当する変化が起きている。耐性菌である MRSA の PBP3 でも 618KTGTAE623 である。
ただ PBP2a では 615KTGTAE620 である。以上のことを纏めると、SCLAV_4179 の β-ラクタムに対する耐性には、活性部位入り口の両側に位置する β3 と β4 を連結するリンカーおよび α4-α5 ループの柔軟性と、活性部位 SX2K、SXD および KXG 領域のアミノ酸の変異が大きく関与しているものと推定される。なおStreptomyces clavurigerus の SCLAV_4198（pcbR）を欠損すると β-ラクタムに対する耐性が減少することか
ら、この PBP が β-ラクタム耐性に関与することが示唆されている 50)が、詳細は不明である。
PBP のうちクラス B1 PBP は一般に β-ラクタムに対する親和性が低いといわれている 63)。しかし、
SCLAV_4179 はアミノ酸配列アラインメントおよび系統樹での比較からクラス B1 よりクラス B4 あるいは
B5 に近い。

­− 10 −

Figure 12A. Molecular model of
SCLAV_4179 based on 3vsl_B as a template.

Figure 12B. Molecular model of
SCLAV_4179 based on 3vsl_B as a template.

Active sites are marked with red (358SIFK361), orange red

Active sites are marked with red (358SIFK361), orange red(412SCD414) and orange (612KTS614). Amino acidnumbers are inserted in the Figure.

(412SCD414) and orange (612KTS614). The model can be viewed
in 3D by using a software such as Jmol (http://jmol.sourceforge.net/),
Chimera(http://www.cgl.ucsf.edu/chimera/index.html)

andDeepView Swiss PDB Viewer (http://spdbv.vital-it.ch/ ).

Figure 13A. Comparison of molecular models of
SCLAV_4179 (brown) and 3vsl_B (light blue).

Figure 13B. Comparison of molecular models of
SCLAV_4179 (brown) and 3vsl_B (light blue).

Active sites are marked with red (358SIFK361), orange red

Active sites are marked with red (358SIFK361), orange red(412SCD414) and orange (612KTS614). Amino acid

(412SCD414) and orange (612KTS614). β3-β4 linker andnumbers and secondary structures are inserted in the

α4-α5 loop are shown in green (SCLAV_4179) and yellow

Figure. β3-β4 linker and α4-α5 loop are shown in green(3vsl_B). The models can be viewed in 3D by using a(SCLAV_4179) and yellow (3vsl_B). Prefix ‘B’ in amino

software such as Jmolacid numbers and secondary structures indicates those of

Chimera (http://www.cgl.ucsf.edu/chimera/index.html) andthe template (3vsl_B).

DeepView Swiss PDB Viewer (http://spdbv.vital-it.ch/).

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(http://jmol.sourceforge.net/),Figure 14. Comparison of predicted secondary structure of SCLAV_4179
and template known secondary structure and their amino acid sequences.
Secondary structure confidence is indicated by red (high) to blue (low). A green twist shows α-helix and a blue arrow shows βstructure.

­− 12 −

8．おわりに以上、β-ラクタム抗生物質を中心に、放線菌における自己耐性について述べてきた。この研究の出発点になったのは、Streptomyces 属放線菌について β-ラクタマーゼ生産をスクリーニングすると、β-ラクタム
生産およびペニシリン G に対する耐性とは無関係に殆どの Streptomyces 属放線菌が β-ラクタマーゼを構成的に多量に産生すること 64)、β-ラクタム生産放線菌のペニシリン結合蛋白質（PBP）の存在パターンを標
識ペニシリン G を用いたオートラジオグラフィーで検討すると、大腸菌や枯草菌では数日で結果が得られるにもかかわらず、放線菌では数月～半年を要したこと 49)であった。以前放線菌の β-ラクタマーゼの論文の原稿の校閲のため梅沢濱夫先生をお訪ねしたとき、先生は原稿を見て直ちに、「昔青カビでペニシリンを培養していたとき、放線菌を混入させたら培養はいっぺんにだめになってしまうと云われていたものである」といわれたのを思い出す。殆どの放線菌は β-ラクタマーゼを生産するので、混入するとせっかく生産されたペニシリンがいっぺんで分解されてしまうと云うことが、経験的に知られていたのである。それ以来 40 年近くが経過し、β-ラクタム抗生物質の自己耐性が遺伝子のレベル、分子のレベルで議論できるようになったのは大変な進歩である。50 年以上前に大学院に入学して、蛋白質の X 線結晶解析に非常な興味を覚え、わざわざ理学部に出かけていって当時大阪大学から特別講義に来られた仁田勇教授のお話をわからないながらも熱心に拝聴し、先生の分厚い X 線結晶解析の著書をむさぶり読んだのを、今更のように思い出す。蛋白質の X 線結晶構造はミオグロビンについて、英国の Kendrew らにより 1958 年（著者が大学を卒業した年）に報告された 65)のが初めてである。本論文の最後に分子モデリングを考察したのは、この延長線にあるものである。
β-ラクタム抗生物質の自己耐性についていえば、本論文は 1981 年に Microbiological Reviews 誌で総説 27)を発表してから 33 年ぶりの報告となった。その間に大きな進歩があったとはいえ、最初の目的の一つである病原菌の β-ラクタム抗生物質への薬剤耐性と放線菌の自己耐性の関連性が十分に解明されていないこと、また病原菌の薬剤耐性が克服されていないことは残念である。これは細菌とヒトの頭脳比べの問題であり、永遠に解決できないことなのかもしれない。
参考文献
1. Drawz, S. M. and Bonomo, R. A.: Three decades of β-lactamase inhibitor. Clin. Microbiol. Rev. 23: 160-201,
2010.
2. 小河原宏：抗生物質の自己耐性と生合成調節機構の遺伝生化学. Yakugaku Zasshi 121: 193-213, 2001.
3. 小河原宏：イソフラボンとシグナル伝達－化学から骨粗鬆症・成人病・癌まで－. 廣川書店、2007.

4. Akiyama, T., Ishida, J., Nakagawa, S., Ogawara, H., Watanabe, S., Itoh, N., Shibuya, M. and Fukami, Y.
Genistein, a specific inhibitor of tyrosine-specific protein kinases. J Biol. Chem. 262: 5592-5595, 1987.
5. Dairi, T., Aisaka, K., Katsumata, R. and Hasegawa, M.: A self-defense gene homologous to tetracycline
effluxing gene essential for antibiotic production in Streptomyces aureofaciens. Biosci. Biotechnol. Biochem.
59: 1835-1841, 1995.
6. Yu, L, Yan, X, Wang, L, Chu, J, Zhuang, Y, Zhang, S and Guo, M.: Molecular cloning and functional
characterization of an ATP-binding cassette transporter OtrC from Streptomyces rimosus. BCM Biotechnol. 12:52, 2012.
7. Rodríguez, A. M., Olano, C., Vilches, C., Méndez, C.and Salas, J. A.: Streptomyces antibioticus contains at least
three oleandomycin-resistance determinants, one of which shows similarity with proteins of the ABC-transportersuperfamily. Mol. Microbiol. 8: 571-582, 1993.
8. Fernández, E., Lombó, F., Méndez, C. and Salas, J. A.: An ABC transporter is essential for resistance to theantitumor agent mithramycin in the producer Streptomyces argillaceus. Mol. Gen. Genet. 251: 692-698, 1996.

­− 13 −

9. Ikeno, S., Yamane, Y., Ohishi, Y., Kinoshita, N., Hamada, M., Tsuchiya, K. S. and Hori, M.: ABC transporter
genes, kasKLM, responsible for self-resistance of a kasugamycin producer strain. J. Antibiot (Tokyo). 53: 373384, 2000.
10. Zhao, L., Beyer, N. J., Borisova, S. A. and Liu, H. W.: β-glucosylation as a part of self-resistance mechanism inmethymycin/pikromycin producing strain Streptomyces venezuelae. Biochemistry 42:14794-14804, 2003.
11. Yang, Z., Funabashi, M., Nonaka, K., Hosobuchi, M., Shibata, T., Pahari, P. and Van Lanen, S. G: Functional
and kinetic analysis of the phosphotransferase CapP conferring selective self-resistance to capuramycin
antibiotics. J. Biol. Chem. 285: 12899-12905, 2010.
12. Janssen, G. R., Ward, J. M. and Bibb, M. J.: Unusual transcriptional and translational features of theaminoglycoside phosphotransferase gene (aph) from Streptomyces fradiae. Genes Dev. 3: 415-429, 1989.
13. Nakano, M. M., Kikuchi, T., Mashiko, H. and Ogawara, H.: Analysis of the promoter region of the cloned
kanamycin resistance gene (kmr) from Streptomyces kanamyceticus. J Antibiot (Tokyo). 42: 413-422, 1989.
14. Ohnuki, T., Imanaka, T. and Aiba, S.: Self-cloning in Streptomyces griseus of an str gene cluster for
streptomycin biosynthesis and streptomycin resistance. J. Bacteriol. 164: 85-94, 1985.
15. Haupt, I., Thrum, H. and Noack, D. : Self-resistance of the nourseothricin-producing strain Streptomyces noursei.
J Basic Microbiol. 26: 323-328, 1986.
16. Hotta, K., Ishikawa, J., Ogata, T. and Mizuno, S. : Secondary aminoglycoside resistance in aminoglycosideproducing strains of Streptomyces. Gene. 115: 113-117, 1992.
17. Ohta, T. and Hasegawa, M.: Analysis of the self-defense gene (fmrO) of a fortimicin A (astromicin) producer,
Micromonospora olivasterospora: comparison with other aminoglycoside-resistance-encoding genes. Gene 127:636-69, 1993.
18. Schäberle, T. F., Vollmer, W., Frasch, H. J., Hüttel, S., Kulik, A., Röttgen, M., von Thaler, A. K., Wohlleben, W.
and Stegmann, E.: Self-resistance and cell wall composition in the glycopeptide producer Amycolatopsis
balhimycina. Antimicrob. Agents Chemother. 55: 4283-4289, 2011.
19. Tsuge, K., Ohata, Y. and Shoda, M.: Gene yerP, involved in surfactin self-resistance in Bacillus subtilis.
Antimicrob. Agents Chemother. 45: 3566-3573, 2001.
20. Klein, C. and Entian, K. D.: Genes involved in self-protection against the lantibiotic subtilin produced by
Bacillus subtilis ATCC 6633. Appl. Environ. Microbiol. 60: 2793-2801, 1994.
21. Neumüller, A. M., Konz, D. and Marahiel, M. A.: The two-component regulatory system BacRS is associatedwith bacitracin 'self-resistance' of Bacillus licheniformis ATCC 10716. Eur. J. Biochem. 268: 3180-3189, 2001.
22. Mattheus, W., Masschelein, J., Gao, L. J., Herdewijn, P., Landuyt, B., Volckaert, G. and Lavigne, R.: The
kalimantacin/batumin biosynthesis operon encodes a self-resistance isoform of the FabI bacterial target. Chem.
Biol. 17: 1067-1071, 2010.
23. Yanagisawa, T. and Kawakami, M.: How does Pseudomonas fluorescens avoid suicide from its antibiotic
pseudomonic acid?: Evidence for two evolutionarily distinct isoleucyl-tRNA synthetases conferring self-defense.
J. Biol. Chem. 278: 25887-25894, 2003.
24. Wang, Y., Chen, Y., Shen, Q. and Yin, X. : Molecular cloning and identification of the laspartomycin
biosynthetic gene cluster from Streptomyces viridochromogenes. Gene 483: 11-21, 2011.
25. Kumagai, T., Koyama, Y., Oda, K., Noda, M., Matoba, Y. and Sugiyama M. : Molecular cloning andheterologous expression of a biosynthetic gene cluster for the antitubercular agent D-cycloserine produced by
Streptomyces lavendulae. Antimicrob. Agents Chemother. 54: 1132-1139, 2010.

­− 14 −

26. Davis, B. D. and Maas, W. K.: Analysis of the biochemical mechanism of drug resistance in certain bacterial
mutants. Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 38: 775-785, 1952.
27. Ogawara, H.: Antibiotic resistance in pathogenic and producing bacteria, with special reference to β-lactam
antibiotics. Microbiol. Rev. 45: 591-619, 1981.
28. Pérez-González, J. A., López-Cabrera, M., Pardo, J. M.and Jiménez, A.: Biochemical characterization of twoclonedresistancedeterminants

encodingaparomomycin

acetyltransferase

andaparomomycin

phosphotransferase from Streptomyces rimosus forma paromomycinus. J. Bacteriol. 171: 329-334, 1989.
29. Nakano, M. M., Mashiko, H. and Ogawara, H.: Cloning of the kanamycin resistance gene from kanamycinproducing Streptomyces species. J. Bacteriol. 157: 79-83, 1984.
30. Dhote, V., Gupta, S., and Reynolds, K. A.: An O-phosphotransferase catalyzes phosphorylation of hygromycin A
in the antibiotic-producing organism Streptomyces hygroscopicus. Antimicrob. Agents Chemother. 52: 35803588, 2008.
31. Tahlan, K., Anders, C., Wong, A., Mosher, R. H., Beatty, P. H., Brumlik, M. J., Griffin, A., Hughes, C., Griffin,J., Barton, B. and Jensen, S. E.: 5S clavam biosynthetic genes are located in both the clavam and paralog geneclusters in Streptomyces clavuligerus. Chem. Biol. 14:131-142, 2007.
32. Medema, M. H., Trefzer, A., Kovalchuk, A., van den Berg, M., Müller, U., Heijne, W., Wu, L., Alam, M. T.,
Ronning, C. M., Nierman, W. C., Bovenberg, R. A., Breitling, R. and Takano, E.: The sequence of a 1.8-mb
bacterial linear plasmid reveals a rich evolutionary reservoir of secondary metabolic pathways. Genome Biol.
Evol. 2: 212-24, 2010.
33. Rodríguez, M., Núñez, L. E., Braña, A. F., Méndez, C., Salas, J. A. and Blanco, G.: Mutational analysis of thethienamycin biosynthetic gene cluster from Streptomyces cattleya. Antimicrob. Agents Chemother. 55:16381649, 2011.
34. Núñez, L. E., Méndez, C., Braña, A. F., Blanco, G. and Salas, J. A.:The biosynthetic gene cluster for the βlactam carbapenem thienamycin in Streptomyces cattleya.

Chem. Biol. 10:301-311, 2003.

35. Coulthurst, S. J., Barnard, A. M. and Salmond, G. P.: Regulation and biosynthesis of carbapenem antibiotics inbacteria. Nat. Rev. Microbiol. 3: 295-306, 2005.
36. Sauvage, E., Kerff, F., Terrak, M., Ayala, J. A.and Charlier, P.: The penicillin-binding proteins: structure androle in peptidoglycan biosynthesis. FEMS Microbiol. Rev. 32:234-258, 2008.
37. Macheboeuf, P., Contreras-Martel, C., Job, V., Dideberg, O. and Dessen, A.: Penicillin binding proteins: key
players in bacterial cell cycle and drug resistance processes. FEMS Microbiol. Rev. 30:673-691, 2006.
38. Ishida, K., Hung, T. V., Liou, K., Lee, H. C., Shin, C. H.and Sohng, J. K.: Characterization of pbpA and pbp2
encoding penicillin-binding proteins located on the downstream of clavulanic acid gene cluster in Streptomyces
clavuligerus. Biotechnol. Lett. 28: 409-417, 2006.
39. しかし SCLAV_4179 および SCAT_5676 と異なり、SCLAV_1774 と SCAT_1730 の近傍には β‐ラクタ
ム生合成に関与する遺伝子は存在せず、これらが自己耐性に関与しているかどうかは不明である。ただその近傍（SCLAV_1773 から SCLAV_1777 および SCAT_1729 から SCAT_1733 まで）にペプチドグ
リカン生合成に関与すると思われる mre 蛋白質遺伝子が存在し、しかも相当する蛋白質同士の相同性は極めて高い。
40. SCLAV_4179 による BLAST 検出で相同性順位が低い Streptomyces roseosporus NRRL11379 の PBP（ZP_04708259、740 アミノ酸からなる）との相同性が 3.9e-161 であるのに対し、Olsenella uli DSM
7084 の PBP2（YP_003800853、677 アミノ酸からなる）との相同性は 9.7e-51 であり、ENHANCED
BLAST 検索された Pseudomonas putida CSV86 の PBP2（ZP_19212830、630 アミノ酸からなる）との­− 15 −

相同性は 4.2e-36 であるので、アミノ酸の数もかなり異なることと合わせ、どの程度の耐性を示すかは不明である。
41. http://pfam.janelia.org/
42. Yeats, C., Finn, R. D., and Bateman, A.: The PASTA domain: β-lactam-binding domain. Trends in Biochem. Sci.
27: 438-440, 2002.
43. Young, T. A., Delagoutte, B., Endrizzi, J. A., Falick, A. M. and Alber, T: Structure of Mycobacterium
tuberculosis PknB supports a universal activation mechanism for Ser/Thr protein kinases. Nature Struct. Biol.
10: 168–174, 2003.
44. Streptococcus pneumonia のクラス B の PBP（アクセション No. SP0336）や Mycobacterium tuberculosisのクラス A の PBP（アクセション No. C70791）では PASTA ドメインがそれぞれ 2 個および 1 個存在する。更に Actinobacteria である Nocardia（アクセション No. WP_019931711）や Rhodococcus（アクセション No.016884523）の PBP でも 1 個ずつの PASTA ドメインが存在する。
45. Hempel, A. M., Cantlay, S., Molle, V., Wang, S. B., Naldrett, M. J., Parker, J. L., Richards, D. M., Jung, Y. G.,
Buttner, M. J. and Flärdh, K.: The Ser/Thr protein kinase AfsK regulates polar growth and hyphal branching in
the filamentous bacteria Streptomyces. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 109: E2371-E2379, 2012.
46. Fiuza, M., Letek, M., Leiba, J., Villadangos, A. F., Vaquera, J., Zanella-Cléon, I., Mateos, L. M., Molle, V. andGil, J. A.: Phosphorylation of a novel cytoskeletal protein (RsmP) regulates rod-shaped morphology in
Corynebacterium glutamicum. J. Biol. Chem. 285: 29387-29397, 2010.
47. Molle, V. and Kremer, L.: Division and cell envelope regulation by Ser/Thr phosphorylation: Mycobacterium
shows the way. Mol. Microbiol. 75: 1064-1077, 2010.
48. Ogawara, H.: Molecular phylogenetics of β-lactamases in Actinobacteria. 明治薬科大学研究紀要. 42: 1-18,
2013.
49. Ogawara, H., Horikawa, S.: Penicillin-binding proteins of Streptomyces cacaoi, Streptomyces olivaceus, andStreptomyces clavuligerus. Antimicrob. Agents Chemother. 17, 1-7, 1980.
50. Paradkar, A. S., Aidoo, K. A., Wong, A. and Jensen, S. E.: Molecular analysis of a β-lactam resistance geneencoded within the cephamycin gene cluster of Streptomyces clavuligerus J. Bacteriol. 178: 6266-6274, 1996.
51. Doran, J. L., Leskiw, B. K., Aippersbach, S. and Jensen,

S. E.: Isolation and characterization of a β-lactamase-inhibitory protein from Streptomyces clavuligerus and cloning and analysis of the corresponding gene. J.
Bacteriol. 172: 4909-4918, 1990.
52. Brown, N. G. and Palzkill, T.: Identification and characterization of β-lactamase inhibitor protein-II (BLIP-II)
interactions with β-lactamases using phage display. Protein Enz. Des. Sel. 23: 649-478, 2010.
53. Thai, W., Paradkov, A. S. and Jensen, S. E. : Construction and analysis of β-lactamase-inhibitory protein (BLIP)
non-producer mutants of Streptomyces clavuligerus. Microbiology 147: 325-335, 2001.
54. Kelley, L. A. and Sternberg, M. J. E.: Protein structure prediction on the web: a case study using the Phyre server.
Nature Protocols 4: 363-371, 2009.
55. Yoshida, H., Kawai, F., Obayashi, E., Akashi, S., Roper, D. I., Tame, J. R. and Park, S. Y. : Crystal structures of
penicillin-binding protein 3 (PBP3) from methicillin-resistant Staphylococcus aureus in the apo and cefotaximebound forms. J. Mol. Biol. 423: 351-364, 2012.
56. Chou, P. Y. and Fasman, G. D.: Prediction of protein conformation. Biochemistry 13, 222-245, 1974.
57. http://npsa-pbil.ibcp.fr/cgi-bin/npsa_automat.pl?page=/NPSA/npsa_seccons.html
58. Lim, D. and Strynadka, N. C.: Structural basis for the β-lactam resistance of PBP2a from methicillin-resistant
Staphylococcus aureus. Nat. Struct. Biol. 9: 870-876, 2002.

­− 16 −

59. Contreras-Martel, C., Dahout-Gonzalez, C., Martins, A. dos S., Kotnik, M., Dessen, A.: PBP active site
flexibility as the key mechanism for β-lactam resistance in pneumococci. J. Mol. Biol. 387: 899-909, 2009.
60. Dessen, A., Mouz, N., Gordon, E., Hopkins, J., Dideberg, O. : Crystal structure of PBP2x from a highly
penicillin-resistant Streptococcus pneumoniae clinical isolate: a mosaic framework containing 83 mutations. J.
Biol. Chem. 276 : 45106-45112, 2001.
61. Goffin, C. and Ghuysen, J.-M.: Multimodular penicillin-binding proteins: an enigmatic family of orthologs andparalogs. Microb. Mol. Biol. Rev. 62: 1079-1093, 1998.
62. Contreras-Martel, C., Job, V., Di Guilmi, A. M., Vernet, T., Dideberg O. and Dessen, A.: Crystal structure of
penicillin-binding protein 1a (PBP1a) reveals a mutational hotspot implicated in β-lactam resistance inStreptococcus pneumoniae. J. Mol. Biol. 355: 684-696, 2006.
63. Job, V., Carapito, R., Vernet, T., Dessen, A. and Zapun, A.: Common alterations in PBP1a from resistant
Streptococcus pneumoniae decrease its reactivity toward β-lactams: structural insights. J. Biol. Chem. 283: 48864894, 2008.
64. Ogawara H.: Production and property of beta-lactamases in Streptomyces. Antimicrob. Agents Chemother. 8:402-408, 1975.
65. Kendrew, J. C., Bodo, G., Dintzis, H. M., Parrish, R. G., Wyckoff, H. and Phillips, D. C.: A three-dimensionalmodel of the myoglobin molecule obtained by x-ray analysis. Nature 181: 662-666, 1958.
Supplemental files
http://www.my-pharm.ac.jp/koho/education/index.html
Figure 1S. Phylogenetic tree of 254 class A penicillin-binding proteins from 92 Actinobacteria constructed by using
Sco4049 (β-lactam acylase/penicillin-binding protein in Streptomyces coelicolor A3 (2) ) as an out-group.
Figure 2S. Phylogenetic tree of 366 class B penicillin-binding proteins from 92 Actinobacteria constructed by using
Sco4049 as an out-group.

­− 17 −

Table1. The numbers and types of putative PBP genes.
Bacteria

Acidimicrobium ferrooxidans

Prefix

Genome size

AFER

2.16 (Ci)

3

B3

ACEL

2.44 (Ci)5

A2; B3AMIS

8.77 (Ci)8A5; B3AMIR

8.25 (Ci)6

A3; B3

AS9A

4.74 (Ci)5

A2; B3AAUR

4.60 (Ci)6

A2; B4BCAV

4.67 (Ci)5

A2; B3BAD

2.09 (Ci)4

A2; B2

Bifidobacterium animalis subsp.
BLA
lactis AD011

1.93 (Ci)3

A1; B2

Bifidobacterium animalis subsp.
BLC1
lactis BLC1

1.94 (Ci)4

A2; B2BBPR

2.21 (Ci)4

A2; B2BBIF

2.19 (Ci)4

A2; B2

HMPREF9228

2.33 (Ci)4

A2; B2

Bifidobacterium breve UCC2003 BBR

2.42 (Ci)4

A2; B2

Bifidobacterium dentium Bd1

BDP

2.64 (Ci)4

A2; B2

Bifidobacterium longum subsp.
infantis 157F

BLIF

2.40 (Ci)4

A2; B2

Bifidobacterium longum subsp.
infantis ATCC 15697

BLIJ

2.83 (Ci)4

A2; B2

Bifidobacterium longum subsp.
longum F8

BIL2.38 (Li)2

A1; B1

Bifidobacterium longum subsp.
longum JCM 1217

BLLJ

2.39 (Ci)4

A2; B2CACI

10.47 (Ci)8

A1; B7DIP

2.49 (Ci)5

A2; B3NCGL

3.31 (Ci)5

A2; B3CP106

2.28 (Ci)5

A2; B3CP10022.34 (Ci)5

A2; B3CP42022.34 (Ci)5

A2; B3CRES

2.6 (Ci)

6

A2; B4Frankia alni ACN14a

FRAAL

7.50 (Ci)7

A3; B4Frankia sp. CcI3

FRANCCI3

5.43 (Ci)7

A3; B4Frankia sp. EuI1c

FraEuI1c

8.82 (Ci)8A3; B5

HMPREF0424

1.62 (Ci)4

A2; B2

DSM 10331

Acidothermus cellulolyticus 11B

Actinoplanes missouriensis 431

Actinosynnema mirum DSM

43827

Amycolicicoccus subflavus
DQS3-9A1

Arthrobacter aurescens TC1

Beutenbergia cavernae DSM

12333

Bifidobacterium adolescentis
ATCC 15703

Bifidobacterium bifidum
PRL2010Bifidobacterium bifidum S17

Bifidobacterium breve ACS-071V-Sch8b

Catenulispora acidiphila DSM
44928

Corynebacterium diphtheriae
NCTC 13129

Corynebacterium glutamicum
ATCC 13032

Corynebacterium
pseudotuberculosis 1/06-A
Corynebacterium
pseudotuberculosis 1002
Corynebacterium
pseudotuberculosis 42/02-A
Corynebacterium resistens DSM
45100

Class A PBP

No. of PBP Type of PBP

Gardnerella vaginalis 409-05

Class B PBP

Comment

0089, 0769, 1250

ferrous-iron-oxidizing, moderately thermophilic, acidophilic bacteria;

2004, 2135

0020, 0751, 1004

a moderately thermophilic, aerobic, cellulolytic bacterium originally recoveredfrom the acidic hot springs

10850, 39800, 60090, 78300,
80960

00450, 15180, 71610

aerobic, motile, filamentous, sporulating bacterium; produces actaplanin,azacytidine, D-xylose isomerase; degrades flavonoids and natural rubber;

0235, 5121, 7034

0023, 5772, 5886

a producer of nocardicin; Pseudonocardineae

0253, 2577

0033, 4146, 4510

isolated from a saline soil contaminated with crude oil; no mycolic acids andMK-8 was the major menaquinone

3369, 3416

0030, 1704, 3184, 4181

reduce hexavalent chromium; found in extreme environments: deep
subsurface soils, arctic sea and radioactive waste tanks; catabolize a variety ofxenobiotic compounds; used in the bioremediation

0604, 4182

0028, 0389, 2416

isolated from cave soil; no mycolic acid; not acid-fast, non-motile, non-sporeforming and a rod-coccus growth cycle; peptidoglycan contains lysine inposition 3 of the peptide subunit and an interpeptide bridge of L-LYS+ L-GIu.

0157, 1336

0040, 1107

normal inhabitants of healthy human and animal intestinal tracts

0208

0077, 0782

an anaerobic Gram-positive lactic acid bacterium commonly found in the gutsof healthy humans; utilize nondigestible oligosaccharides

0209, 1314

0079, 1166

0401, 1743

0104, 0550

0427, 1684

0137, 0574

0187, 1410

0067, 0606

0176, 0487

0069, 1263

0244, 1801

0040, 1548

0139, 0411

0048, 1329

0174, 2144

0078, 0867

14530

18970

0150, 0394

0060, 1278

1390

0037, 1307, 1448, 1656, 5826,
6659, 7282

an aerobic, free-living, nonmotile, acidophilic Gram-positive bacterium;
resistant to lysozyme; peptidoglycan type is A3gamma ll-Dpm-Gly

0298, 2294

0055, 1497, 1604,

Gram-positive, nonmotile rods; produces the diphtheria toxin; isolated fromsoil, plant material, waste water, and dairy products

0274, 2884

0042, 1933, 2084

unusual outer membrane approximately 8nm thick; mycolic acidarabinoglactan-peptidoglycan polymer form the cell wall

0194, 1992

0032, 1278, 1380

a facultative intracellular pathogen; causes caseous lymphadenitis in
animals； pleomorphic forms: coccoids and filamentous rods; non-sporulating,non-capsulated, non-motile bacterium; it has fimbriae

0200, 2034

0035, 1298, 1397

0198, 2027

0034, 1288, 1387

2033, 2137

0042, 0263, 0788, 1250

highly resistant to antimicrobial agents; anaerobic, rod-shaped, nonomitile,nonsporulating, mesophile

1281, 6546, 6857

1919, 2190, 5852, 6753

aerobic, filament-shpaed, nonmitile, sporulating, nitrogen-fixing; differentiate
into sporangium and vesicles (specialized cell for nitrogen-fixation), containlipid components called hopanoids. Hopanoids

0754, 4277, 4526

1214, 1409, 3641, 4434

0346, 6058, 7178

0085, 1014, 1303, 1960, 2368

0304, 1277

0032, 1107­− 18 −

utilizes milk oligosaccharides, produces fucosidases; anaerobic, nonhalophilic, Gram-positive bacterium; hexose metabolism: phosphoketolase
pathway (bifid shunt)a facultative anaerobic, rod-shaped, free-living Gram-variable bacterium; arisk factor for the acquisition of HIV;

Gardnerella vaginalis HMP9231
HMPREF9231

1.73 (Ci)4

A2; B2

GOALK

5.07 (Li)7A2; B5GPOL

5.67 (Ci)6

A2; B4ISOVA

3.31 (Ci)5

A2; B3KRAD

4.76 (Li)5A2; B3KSE

8.78 (Li)8

A4; B4KRH

2.7 (Ci)

3

A1; B2KSED

2.79 (Ci)

3

B3

LXX

2.58 (Ci)6

A4; B2

MICAU

7.03 (Ci)9A6; B3

HMPREF0573

2.15 (Ci)4

A2; B2MAV

5.48 (Ci)5

A2; B3JTY

4.37 (Ci)5

A2; B3ML

3.27 (Ci)5

A2; B3RV

4.41 (Ci)5

A2; B3NAMU

6.06 (Ci)4

A1; B3

Nocardia farcinica IFM 10152

NFA

6.02 (Ci)8A3; B5

Nocardioides sp. JS614

NOCA

4.99 (Ci)6

A2; B4PAZ

2.49 (Ci)4

A2; B2PPA

2.56 (Ci)4

A2; B2

HMPREF0675

2.5 (Ci)

4

A2; B2

RSAL33209

3.16 (Ci)4

A1; B3RER

6.52 (Ci)8A3; B5

HMREF0733

2.51 (Ci)3

A1; B2

SACAZ

4.76 (Ci)4

A2; B2SVIR

4.31 (Ci)4

A2; B2

SACMA

5.97 (Ci)5

A2; B3SACE

8.21 (Ci)7

A4; B3SARE

5.79 (Ci)7A5; B2

STROP

5.18 (Ci)7A5; B2SHEL

3.17 (Ci)3

A1; B2

Gordonia alkanivorans NBRC
16433

Gordonia polyisoprenivorans
VH2

Isoptericola variabilis 225

Kineococcus radiotolerans
SRS30216

Kitasatospora setae KM-6054

Kocuria rhizophila DC2201

Kytococcus sedentarius DSM
20547

Leifsonia xyli subsp. xyli str.
CTCB07Micromonospora aurantiaca
ATCC 27029

Mobiluncus curtisii ATCC 43063

Mycobacterium avium 104

Mycobacterium bovis BCG str.
Tokyo 172

Mycobacterium leprae TN

Mycobacterium tuberculosis
H37Rv

Nakamurella multipartita DSM

44233

Propionibacterium acnes 266

Propionibacterium acnes
KPA171202

Propionibacterium acnes SK137

Renibacterium salmoninarum
ATCC 33209

Rhodococcus erythropolis PR4
Rothia dentocariosa ATCC
17931

Saccharomonospora azurea NA128

Saccharomonospora viridis DSM

43017

Saccharomonospora marina
XMU15
Saccharopolyspora erythraea
NRRL 2338

Salinispora arenicola CNS-205

Salinispora tropica CNB-440

Slackia heliotrinireducens DSM

20476

1162, 1288

0015, 1089

00350, 01250

00210, 00240, 00270, 01580,
01900

isolated from tar-contaminated soil/marine sediment; use alkanes as a carbon
source07230, 49200

00240, 05610, 20210, 27800

isolated from soil of a rubber tree plantation and from fouled water inside a
decayed automobile tire; degrade natural and synthetic poly(cis-1,4-isoprene)rubber;2701, 3000

0021, 1284, 2892

a cellulolytic bacterium isolated from the termite hindgut; biofuels, biomass
conversion; rod-shaped, motile0429, 4341

0073, 0475, 3205

an aerobic, coccoid bacterium isolated from a high-level radioactive waste cell;
resitant to ionizing γ-radiation and desiccation; dramatic change in colonymorphology over prolonged incubation

27750, 36430, 38960, 59840

26130, 39410, 46160, 46190,

an aerobic, soil-habiting mycelial gram-positive bacterium isolated from oil;produce bafilomycin B1 and bafilomycin A1, 2, specific inhibitors of vacuolar
ATPase; LL-and meso-DAP

04490

14880, 20650

a coccoid, halotolerant, phenol-degrading gram-positive bacterium isolated
from the rhizosphere of narrowleaf cattail; amino acid transporters and drug
efflux pumps

00200, 09230, 16620

a free-living, nonmotile, human opportunistic pathogen; grows as
spherical/coccoid; produces monesin A and B; isolated from varing
environments:such as human skin and groundwater02090,03600, 05450, 23190

00230, 15320

an aerobic, rod-shaped, Gram-positive bacterium, causes ratoon stunting
disease and affects sugarcane; a plant pathogen; no endospore or motility; anunusual cell wall peptidoglycan with 2,4-diaminobutyric acid

3350, 4230, 4961, 5144,
5927, 6271

0098, 4478, 5070

metabolic versatility like nitrogen fixation, exhibit saphrophytic (living off
dead tissues) and symbiotic lifestyles, ubiquitous in the environment, degrade
plant cell walls and fibers; spore formation; bioremediation

10708, 10751

10644, 11576

an anaerobic, rod shaped Gram-positive bacterium found in the humanvagina0071, 0446

0020, 2330, 3723

Mycobacterium avium complex (MAC), causes a serious infection in people
with advanced AIDS; mycolic acid-arabinoglactan-peptidoglycan polymer form
the cell wall;

0051, 3742

0016, 2174, 2881

a major cause of tuberculosis in animal species and man; an unusual outermembrane approximately 8nm thick,the outer membrane and the mycolic
acid-arabinoglactan-peptidoglycan polymer form the cell wall

2308, 2688

0018, 0908, 1577

An unculturable very slow-growing, acid-fast, obligate intracellular bacterium;
non-motile and rod-shaped; responsible for leprosy.

0050, 3682

0016, 2163, 2864

Acid-fast, obligate aerobic, non-motile, rod-shaped bacterium, the causative
agent of tuberculosis; persists in a dormant or latent form for years

0707

0079, 2190, 3930

an obligately aerobic chemoorganotrophic, polysaccharide-accumulating grampositive bacterium isolated from active sludge;

03390, 55490, 55570

820, 17600, 18430, 41160, 54970

a gram-positive, filamentous-growing soil saprophyte;0326, 4676

0024, 3069, 3462, 4600

an aerobic mesophillic gram-positive bacterium; grows on media containing
vinyl chloride (VC) and ethane; monooxygenase system plays a major role inthe VC starvation response01380, 22310

01980, 08010

0126, 2149

0185, 0752

3139, 5213

3226, 3820

an anaerobic, non-spore forming, gram-positive bacterium; produces propionicacid; non-toxigenic; a common resident of the pilosebaceous (hair follicle)
glands of the human skin; acne vulgaris

2795

2241, 2500, 2891

a gram-positive, rod-shaped bacterium that causes the bacterial kidneydisease in salmonids;

04630, 58380, 58990

00300, 10660, 10670, 25560,
35580

aerobic, gram positive, capable of morphological differentiation; broard
metabolic diversity; desulphurization of fossil fuels, production of acrylamide
and extracellular polysaccarides; bioremediation

10478

10948, 11665

an aerobic, pleomorphic, coccoid- to rod-shaped bacterium frequently isolated
from the human oral cavity

02388, 02721

01210, 02813

aerobic, gram-negative bacteerium; aerial mycelium and single spores;
degrades hemicellulose

36250, 39340

24950, 33330

aerobic,gram-negative bacterium; typical mycelium morpphology of
Saccharomonospora ; found in hot compost and hay, its spores cause farmer’slung disease bagassosis and humidifier fever; metabolize pentachlorophenol

5053, 5737

0205, 1393, 2176

aerobic, gram-positive bsacterium;forms substrate and aerial mycelia, nonmotile; isolated from ocean sediment; degrades hemicellulose; contains anunusually large number of glycosyltransferases

0314, 0385, 6352, 7356

0046, 5864, 5990

aerobic,filaaament-shpaed, nonmotile, sporulating, free-living gram-positivebacteerium; produces erythromycin

3240, 3923, 4021, 4796, 5078 0051, 3444

isolated from tropical marine sediment; produces staurosporine andnifamycin; requires seawater for growth3015, 3548, 3639, 4354, 4560 0046, 3218

resides in ocean sediments; requires seawater for growth; produces
salinosporamide A, a potent inhibitor of the 20S proteasome;08350

a nonmotile, obligate anaerobe, pyrrolizidine alkaloids metabolizer grampositive bacterium, isolated from the rumen of a sheep;

08800, 14210­− 19 −Streptomyces albus J1074

SSHG

6.62 (Li)10

A4; B6SAV

9.03 (Li)13

A6; B7

Streptomyces bingchenggensis
BCW-1

SBI

11.94 (Li)12

A6; B6

Streptomyces cattleya
N RRL8057

SCAT

6.28 (Li)11

A4, B7SCATT

6.28 (Li)11

A4; B7

SCLAV

6.76 (Li)12

A3; B9SMCF

8.48 (Li)11

A3; B8SCO

8.67 (Li)13

A4; B9SFLA

7.34 (Li)12

A4; B8SSFG

8.22 (Li)10

A4; B6SGM

7.71 (Li)10A5; B5

SSRG

7.36 (Li)12

A4; B8SGR

8.55 (Li)10

A4; B6

SHJG

10.15 (Li)11

A5; B6SSPG

8.19 (Li)11

A3; B8SSDG

8.13 (Li)11

A3; B8SROSN1

7.76 (Li)10

A4; B6

Streptomyces scabiei 87.22

SCAB

10.15 (Li)11

A4; B7

Streptomyces sp. SirexAA-E

SACTE

7.41 (Ci)11

A4; B7SSEG

9.31 (Li)10

A4; B6SVEN

8.23 (Li)10

A4; B6

STRVI

10.66 (Ci)11

A5; B6SSQG

8.55 (Li)11

A5; B6

8.22 (Li)10

A4; B6SROS

10.34 (Ci)11

A4; B7

TFU

3.64 (Ci)4

A2; B2

TBIS

4.19 (Ci)10

A4; B6TCUR

5.64 (Ci)8A4; B4

Tropheryma whipplei str. Twist TWT

0.93 (Ci)3

A1; B2

Tropheryma whipplei TW08/27

TW

0.93 (Ci)3

A1; B2

TPAU

4.38 (Ci)7

A2; B5

Streptomyces avermitilis MA-

4680

Streptomyces cattleya
DSM46488

Streptomyces clavuligerus
ATCC27064
Streptomyces coelicoflavus
ZG0656

Streptomyces coelicolor A3(2)Streptomyces flavogriseus
ATCC33331

Streptomyces ghanaensis ATCC
14672

Streptomyces griseoaurantiacus
M045

Streptomyces griseoflavus
Tu4000Streptomyces griseus subsp.
griseus NBRC 13350
Streptomyces hygroscopicus
subsp. jinggangensis 5008

Streptomyces lividans TK24

Streptomyces pristinaespiralis
ATCC 25486

Streptomyces roseosporus NRRL
11379

Streptomyces sviceus ATCC

29083

Streptomyces venezuelae ATCC

10712

Streptomyces violaceusniger
Tu4113

Streptomyces viridochromogenes
DSM 40736

Streptomyces zinciresistens K42 SZNStreptosporangium roseum DSM
43021

Thermobifida fusca YX

Thermobispora bispora DSM
43833

Thermomonospora curvata DSM
43183

Tsukamurella paurometabola
DSM 20162

01811, 02961, 03197, 04158

01149, 01599, 02906, 03834,
03835, 04427

nonmotile, aerobic, sporulating, gram-positive bacterium;

3225, 4294, 4423, 4583,
5179, 7219

2952, 3603, 3604, 4339, 5458,
6116, 6387

soil and water Gram positive filamentous bacteria, produces avermectin, ahuman and veterinary medicine;

03076, 04174, 05361, 05810,
06697, 09068

02283, 04376, 05407, 06233,
07119, 07873

a soil bacterium; the largest bacterial genome that has been sequenced todate; produces milbemycin, an anthelmintic macrolide

1929, 2889, 3140, 3906

0768, 1207, 1730, 1901, 3088,
4153, 5676

produces thienamyci, cephamycin C, penicillin N and fluorinated metabolites

19200, 28790, 31330, 38910

07700, 12070, 17240, 18950,
30790, 41420, 56770

2006, 2887, 3942

1087, 1301, 1774, 2276, 2947,
4154, 4179, 4180, 4198

clavulanic acid, cephamycin C, deacetoxycephalosporin C, penicillin N; cannot
use glucose as a carbon source, because it lacks a glucose transport system,
has all the enzymes of the urea cycle

1708, 4389, 7595

3764, 4686, 7469, 7795, 7796,
8190, 8286, 8884

produces novel acarviostatin family α-amylase inhibitors;

2897, 3580, 3901, 5039

1875, 2090, 2608, 3156, 3157,
3771, 3847, 4013, 5301

a filamentous, high G-C, gram-positive bacterium; degrades chitin, takes partin the nitrogen cycle;

2228, 3158, 3398, 4003

0559, 1988, 3202, 3620, 3741,
4275, 4730, 4938

an aerobic, Gram-positive bacterium isolated from soil; produces cellulases
and xyanases

02387, 02608, 03635, 04479

02394, 03587, 04216, 04217,
04765, 05266

aerobic, filamentous, nonmotile, high-GC Gram-positive bacterium, which
produces moenomycin

0550, 6740, 1814, 3549, 4216 0325, 3502, 4547, 5988, 5989

isolated from marine sediment, produces manumycin and chinikomycin;

02182, 02879, 03203, 03961

01957, 03076, 03158, 03705,
03706, 04177, 04634, 04850

anaerobic, filemantous, nonmotile, free-living, gram-positive bacterium

2494, 3341, 3679, 4647

2203, 3726, 4232, 4340, 4934,
5621

anaerobic, filemantous, nonmotile, free-living, gram-positive bacterium;
produces streptomycin

3853, 4373, 5171, 5432, 6136 3336, 4100, 4627, 4628, 5219,
6411

produces validamycin;

02649, 03751, 04641

02381, 03670, 03808, 03892,
04382, 04383 , 04919, 05673

a gram-positive, filamentous, soil bacterium00591, 04208, 06322,

02572, 02766, 03053, 06246,
06247, 07051, 07138, 07139

aerobic, filamentous,nonmotile, gram-negative, sporulating bacterium;
produces pristinamycin

12023, 17747, 19666, 23998

05995, 09849, 13775, 14509,
17500, 25622

aerobic, filamentous, nonmotile, gram-positive bacterium

33601, 41401, 56801, 64431

10101, 29591, 45551, 53611,
53621, 60051, 70631

aerobic, filamentous,nonmotile, sporulating bacterium; an important plant
pathogen; produces phytotoxins called thaxtomins: pathogenicity island

2371, 3027, 3329, 4291

1307, 1519, 2029, 2618, 2701,
3283, 4532

aerobic, filamentous, nonmotile, sporulating free-living bacterium

01073, 07525, 03439, 04164

00010, 00011, 00733, 01896,
09019, 09517,

aerobic, filamentous, nonmotile, sporulating free-living bacterium

2646, 3350, 3677, 4705

1522, 1745, 2386, 2985, 3631,
4995

aerobic, filamentous, nonmotile, sporulating free-living bacterium; produces
chloramphenicol,

1350, 2314, 3845, 8252, 9005 0275, 1135, 3190, 7171, 7897,
7904

aerobic, filamentous, motile, sporulating, mesophilic, bacterium; produces
spirofungin, antifungal agent

02328, 02941, 03901, 04279,
05113

01781, 02628, 03242, 03243,
03958, 05348

aerobic, filamentous, nonmotile, sporulating bacterium;

06389, 16730, 18682, 28493

02952, 10458, 13352, 17932,
18819, 22026

aerobic, filamentous, nonmotile, nonsporulating, halophilic
bacterium;isolated from soil from a zinc and copper mine

2902, 3010, 8177, 9363

0113, 1441, 1456, 2864, 3583,
4062, 7683,

aerobic, filamentous, nonmotile, sporulating, mesophilic bacterium; produces
angucycline, an inhibitor of the endothelin-converting enzyme

0570, 3097

1416, 2475

aerobic, rod-shaped,nonmotile, sporulating, moderate thermophilic soil
bacterium; degrades organic material and dcllulose; Farmer's lung, Mushroom
worker's disease, Respiratory infection

0195, 1426, 3106, 3566

0053, 0796, 1401, 1685, 1727,
2465

aerobic, filamentous, nonmotile, sporulating, thermophilic bcterium

1026, 1268, 4921, 4955

0065, 1542, 2932, 4002

an aerobic, cellulolytic, thermophilic Gram-positive bacterium; produces a
number of industrially important compounds like cellulase, alpha-amylase,and polygalacturonate lyase

0705

0222, 0776

aerobic, rod-shaped, nonmotile, nonsporulating, mesophilic bacterium;
deficient in amino acid metabolisms, the lack of clear thioredoxin andthioredoxin reductas; causes Whipple's disease;

0722

0548, 0787

a gram-positive, filamentous, aerobic, soil dwelling actinomycete. It is thecausative agent of the Whipple's disease3939, 4192

0029, 0349, 1690, 2652, 3973

obligate aerobic, rod-shaped, nonomotile, nonsporulating , mesophilic
bacterium; isolated from ovaries of Cimex lectularius; a human opportunistic
pathog­− 20 −