［清水ら：生薬の鏡検に関する研究（第４報）［医薬品医療機器レギュラトリーサイエンス，PMDRS,］
53（4），353〜362（2022）］▲

財団 Information
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報告書

令和 2 年度「日本薬局方の試験法等に関する研究」研究報告＊6
生薬の鏡検に関する研究（第４報）

清水 聖子＊1，金井 千恵子＊1，塩田 寛子＊1，鈴木 淳子＊1，茂木 友里＊1，高橋 美佐子＊1，
浦出 朋子＊1，稲葉 涼太＊1，荒金 眞佐子＊1，中村 耕＊1，斎藤 厳利＊1，湯澤 勝廣＊1，
長澤 明道＊1，田中 和良＊1，中嶋 順一＊1，鈴木 俊也＊1，鈴木 仁＊1，高野 昭人＊2，
川原 信夫＊3, ＊ 4，丸山 卓郎＊5，徳本 廣子＊5，猪又 明子＊1，守安 貴子＊1

Study of Microscopic Examination for Crude Drugs (Part 4)
Seiko SHIMIZU ＊1, Chieko KANAI ＊1, Hiroko SHIODA ＊1, Atsuko SUZUKI ＊1, Yuri MOTEKI ＊1,
Misako TAKAHASHI ＊1, Tomoko URADE ＊1, Ryota INABA ＊1, Masako ARAGANE ＊1,
Kou NAKAMURA ＊1, Itsuki SAITO ＊1, Katsuhiro YUZAWA ＊1, Akemichi NAGASAWA ＊1,
Kazuyoshi TANAKA ＊1, Jun’ichi NAKAJIMA ＊1, Toshinari SUZUKI ＊1, Jin SUZUKI ＊1,
Akihito TAKANO＊2, Nobuo KAWAHARA＊3,＊4, Takuro MARUYAMA＊5, Hiroko TOKUMOTO＊5,
Akiko INOMATA ＊1 and Takako MORIYASU ＊1

Summary
In the Japanese Pharmacopoeia (JP), microscopic examination of crude drugs is very important to decide whether or notthey conform to the required specifications. Observations of morphology, the size of organs or cells, and the cell contents
form a key part of the JP criteria.
However, in the absence of visual information, such as schematic drawings or illustrations for each crude drug,considerable experience is needed to observe and identify internal morphology by means of microscopic observation.
Therefore, the aims of this study were as follows: (1) to investigate the external morphological characteristics ofspecimens of Notopterygium, (2) to collect images of the section for the specimens of Notopterygium or commercial
Notopterygium, (3) to examine how the kind of original plant or the method used to prepare crude drugs from the raw
materials affects the appearance, and (4) to interpret the internal anatomical characteristics with the aid of these images in
the context of the JP.
Key words
The Japanese Pharmacopoeia, Crude Drugs, Microscopic Examination, Identification, Tissue Sections, InternalMorphology, Notopterygium.
＊ 1 東京都健康安全研究センター薬事環境科学部 東京都新宿区百人町 3‑24‑1（〒 169‑0073）
Tokyo Metropolitan Institute of Public Health, 3‑24‑1 Hyakunincho, Shinjuku‑ku, Tokyo 169‑0073, Japan＊ 2 昭和薬科大学薬用植物園薬用植物資源研究室 東京都町田市東玉川学園 3‑3165（〒 194‑8543）
Showa Pharmaceutical University, 3‑3165 Higashi‑Tamagawagakuen, Machidashi, Tokyo 194‑8543, Japan＊ 3 国立研究開発法人医薬基盤・健康・栄養研究所薬用植物資源研究センター 茨城県つくば市八幡台 1‑2（〒 305‑0843）
Research Center for Medicinal Plant Resources, National Institute of Biomedical Innovation, Health and Nutrition, 1‑2 Hachimandai,
Tukuba, lbaraki 305‑0843, Japan＊ 4 高知県立牧野植物園 高知県高知市五台山 4200‑6（〒 781‑8125）
The Kochi Prefectural Makino Botanical Garden, 4200‑6 Godaisan, Kochishi, Kochi 781‑8125, Japan＊ 5 国立医薬品食品衛生研究所 神奈川県川崎市川崎区殿町 3‑25‑26（〒 210‑9501）
National Institute of Health Sciences, 3‑25‑26 Tonomachi, Kawasaki‑ku, Kawasaki, Kanagawa 210‑9501, Japan＊ 6 本研究は一般財団法人医薬品医療機器レギュラトリーサイエンス財団の令和 2 年度「日本薬局方の試験法等に関する研究」事業により行ったものである．

Pharmaceutical and Medical Device Regulatory ScienceVol. 53 No. 4（2022）

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353

［清水ら：生薬の鏡検に関する研究（第４報）］

1

Table 1

緒言
検体

形態

産地

A

全形

甘粛省

全形

青海省

日本薬局方（日局）に収載されている生薬の性状の項には，鏡検について記載がある．日局の一般試
験法生薬試験法〈B＊

実験に使用した試料〉に基づいて鏡検を行うが，

基原

（

1）

切片の作成方法については具体的な規定がない ．

C

全形

四川省

不明

そのため試験者は観察対象物の性質等を十分に理解

D

全形

四川省

不明

した上で切片を作成する必要がある．

E

刻み

中国

不明

また，観察対象物の内部形態が，日局各条の記載

F

刻み

中国

不明

に合致しているか否かを判断するためには，性状の

G

刻み

中国

不明

項の内部形態に関する専門的な記載を読み解き，観

）

＊生薬標本

察像との対応関係を理解する必要がある．
したがって鑑別を行う試験者は植物や生薬に精通していることが求められるが，試験者の育成や技術

検画像を取得した．必要に応じて，ヨウ素試液によの継承が難しく，鑑別時に参考となる画像が少ない

る染色を行った．観察は明視野及び偏光装置を用いという課題がある．

て行った．

そこで，日局収載生薬を鑑別する際に参考となる
画像取得を目指し，国立研究開発法人医薬基盤・健2.3 装置康・栄養研究所薬用植物資源研究センター及び国立

密閉式自動固定包埋装置 Tissue‑Tek VIP6，パラ

医薬品食品衛生研究所生薬部（国立衛研）と連携し，フィン包埋ブロック作製装置 Tissue‑Tek TEC プラ

パラフィン切片作成法を用いた切片画像の収集を試

ス，自動染色装置 Tissue‑Tek DRS‑2000（いずれもみ，現在までに，カンゾウ，サイコ等の 8 生薬につ

サクラ精機株式会社製），滑走式ミクロトーム TU‑

いて日局の記載と鏡検画像との対応関係を明らかに

213（大和光機工業株式会社製），電動正立顕微鏡

してきた 2〜4）．

DM3000，顕微鏡用カメラ DFC295，画像解析ソフ

本報告ではキョウカツについて切片を作成し，鏡検画像と日局の記載について比較し，対応関係につト Leica Application Suite V3（いずれも Leica 製）を使用した．

いて検討した．

3
2

実験方法

結果及び考察

3.1 全形生薬の外観及び横切面の観察結果「キョウカツ」は日局18 5）において，2.1 試料

Ting ex H. T. Chang又はキョウカツは国立衛研により収集された全形生薬 4
検体（A〜D），及び 2021 年に東京都内で流通していた市販品（刻み）3 検体（E〜G）を用いた（Table 1）．

Boissieu（）の根茎及び根と規定

され，生薬の性状の項には「本品はやや湾曲した円柱形〜円錐形を呈し，長さ 3〜10 cm，径 5〜20 mm，
ときに根茎は分枝する．外面は黄褐色〜暗褐色であ2.2 方法全形生薬について，目視により外観及び横切面をる．根茎はその頂端にやや円形にくぼんだ茎の跡が観察し，日局等と照合しながら部位の確認を行っあり，ときには短い茎の残基を付け，外面には隆起

た．

した節があり，節間は，通例，短い．節にはいぼ状
2）

既報 に準じ，全形生薬及び市販品検体を 10% 中突起となった根の跡がある．根の外面には粗い縦じ

性緩衝ホルマリン液に浸漬して固定した後，厚さわ及びいぼ状突起となった側根の跡がある．質は軽10μm のパラフィン切片を作成した．切片を日局一くややもろくて折りやすい．横切面には多くの放射般試験法生薬試験法〈

354

1）

〉に準じて観察し ，鏡医薬品医療機器レギュラトリーサイエンス状の裂け目があり，皮部は黄褐色〜褐色，木部は淡Vol. 53 No. 4（2022）

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黄色〜淡灰黄色，髄は灰白色〜淡褐色を呈し，ルーペ視するとき，皮部及び髄には油道による褐色の細D を根と判断した．
今回観察した全形生薬では，検体によって外観が大きく異なっていたが，節及び横切面の髄の有無に点を認める．
」と記載されている．
根茎及び根の外部形態に関する記述はあるが，鏡より根茎及び根を区別できた．キョウカツには様々

検に関する記載では，具体的な観察部位が示されてな形態の生薬が知られていることから8, 9），今後更いない．そこで本研究では，まず，全形生薬の外観に多くの検体の外観を確認し，必要に応じて，日局

及び横切面を観察し，日局及び中国薬典等の記載との記載を現状に合わせることが望ましいと考える．

比較することにより，根茎及び根の区別を検討した．次に，根茎及び根を判別した検体について，鏡3.2 全形生薬の鏡検結果検を行い，日局の記載と照合した．

「キョウカツ」の性状の項には「本品の横切片を鏡Fig. 1 に全形生薬の外観及び横切面の画像を示す．

検〈〉するとき，最外層は数層〜10 数細胞層のコルク層からなり，その内側に数細胞層の厚角組織

検体 A（Fig. 1‑A1）はやや湾曲した円柱状を呈し，がある．皮層には多数の油道があり，大きいもので

長さ 8 cm，径 6〜14 mm であり，頂端に茎の跡を認は径が 300μm に達する．また皮層には放射状に大めた．外面は暗褐色であり，節が環状に隆起し，節きな伱間がある．髄にも油道があり，大きいもので間は明瞭であった．横切面（Fig. 1‑A2）では，多数

は径が 500μm に達する．柔組織中には単粒及び 2の放射状の裂け目があり，皮部及び髄には油道に由〜3 個の複粒のでんぷん粒を含む．」と記載されてい来する褐色の細点を認めた．また，皮部は黄褐色〜

る5）．この記載と鏡検して得た画像との対応関係を

褐色，木部及び髄は淡黄色であった．外部形態的特

検討した．

6）

徴が中国薬典 のの記載と一致していたことから，検体 A をFig. 2 に検体 A の横切片の鏡検画像を示す．

の根茎と判断した．

検体 A の横切片では，最外層は数細胞層のコル

検体 B（Fig. 1‑B1）は，円柱形〜円錐形を呈し，

ク層からなり，その内側の二次皮層は，二次師部及長さ 12 cm，径 15〜42 mm であった．頂端には多数

び柔組織からなっていた（Fig. 2‑A3a, A3b, A4）．日の茎の跡があり，茎の残基も認められた他，根と推局に記載されている厚角組織については後述する．

定される組織が複数ついていた．外面は灰褐色であ二次皮層には放射状に大きな細胞間伱及び放射状にり，B3 付近では節に由来する隆起を認めず，所々

並 ぶ 多 数 の 油 道 が 確 認 さ れ た（Fig. 2‑A3a, A3b,に，いぼ状の突起を認めた．B2 の位置における横A5）．形成層の内側の二次木部を偏光下で観察する

切面では，皮部は淡黄色〜淡褐色，木部及び髄は淡と，道管が明るく光り確認が容易であった（Fig. 2‑

黄色であった（Fig. 1‑B2）．B3 の位置における横切．木部の内側の中心部には髄を認A3b, A6a, A6b）

面では，皮部は淡褐色，木部は淡黄色で，髄は認め

め，髄にも多数の油道が確認された（Fig. 2‑A3c）．

られなかった（Fig. 1‑B3）．外部形態的特徴が中国

二次皮層の柔細胞中に存在するでんぷん粒は，偏光

6）

薬典 の

（

7）

のシノニム ）の下での十字の模様を確認することが難しかったが，記載と一致していたことから，検体 B をヨウ素試液で青紫色に染色され，でんぷん粒であるの根茎及び根と判断した．

ことを容易に確認することが可能であった（Fig.

検体 C（Fig. 1‑C1）は円柱状を呈し，長さ 6 cm，

2‑A7）．

径 10〜16 mm であった．外面は褐色であり，節がFig. 3に検体 Bの横切片の鏡検画像を示す．根茎で環状に隆起していた．横切面の形状は検体 A と類は 検 体 Aと同 様 の 組 織を 確 認した（Fig. 3‑B4a〜

似しており，中央部に髄を認めた（Fig. 1‑C2）．以B4d）．根では根茎とほぼ同様の組織を認めたが，上のことから，検体 C を根茎と判断した．

中央部には一次木部を認め，髄は認められなかった

検体 D（Fig. 1‑D1）はやや湾曲した円錐形を呈し，（Fig. 3‑B5a〜B5d）．

長さ 6 cm，径 3〜7 mm であった．外面は灰褐色で，Fig. 4 に検体 C 及び D の横切片の鏡検画像を示

いぼ状の突起が認められた．横切面では，髄は認めす．検体 D に髄が認められないことを除き，検体 Cられなかった（Fig. 1‑D2）．以上のことから，検体及び D においても検体 A と同様の組織を確認した．

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Fig. 1

全形生薬の外観及び横切面

A1：検体 A の外観，A2：検体 A の横切面，B1：検体 B の外観，B2, B3：検体 B の横切面，C1：検体 C の外観，C2：検体 Cの横切面，D1：検体 D の外観，D2：検体 D の横切面．

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A3a

A5
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⣽⬊㛫㝽

A3b

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A6a

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㐨⟶
㧊

A3c

A6b

㧊
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Ἔ㐨

A7

A4
ࢥࣝࢡᒙ

㟷⣸Ⰽ࡟
ᰁⰍࡉࢀࡓ
࡛ࢇ࡫ࢇ⢏

Fig. 2

検体 A の横切片の鏡検画像

A3a~3c：全体像，A4：コルク層〜二次皮層，A5：二次皮層，A6a：二次木部，A6b：二次木部（偏光装置），A7：二次皮層の柔組織（ヨウ素試液）．

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B4a

ࢥࣝࢡᒙ

B5a

ࢥࣝࢡᒙ
Ἔ㐨

஧ḟ⓶ᒙ

஧ḟ⓶ᒙ
⣽⬊㛫㝽

Ἔ㐨

B4b

B5b
⣽⬊㛫㝽
஧ḟ⓶ᒙ
஧ḟ⓶ᒙ

஧ḟᖌ㒊
ᙧᡂᒙ

Ἔ㐨
஧ḟᮌ㒊

B4c

㐨⟶

B5c

஧ḟᖌ㒊
஧ḟ⓶ᒙ
ᙧᡂᒙ

஧ḟᮌ㒊

஧ḟᮌ㒊
㐨⟶

B4d

B5d

஧ḟᮌ㒊

Ἔ㐨
㧊

Fig. 3୍ḟᮌ㒊

検体 B の横切片の鏡検画像

B4a~4d：根茎，B5a~5d：根．

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C3a

D3

C3b

㧊

Fig. 4

検体 C 及び D の横切片の鏡検画像
C3a, 3b：検体 C，D3：検体 D．

細胞が集合しており，厚角組織が明瞭に確認できた

3.3 市販品の鏡検結果
市販品である検体 E〜G は，不整形に切断されて（Fig. 6‑B6）．ただし，厚角細胞か否か判別が難し

おり，外面から部位を判別することは難しかった．

い細胞も存在した（Fig. 6‑B7）．他の検体では，一

そこで，各検体から横切面中央部の髄の有無を確認

部で厚角細胞及び厚角組織が認められたが（Fig.

できるものを選別し，鏡検を行った．

6‑A8, C4, D4），判別が難しい細胞が多かった．厚Fig. 5 に検体 E〜G の横切片の鏡検画像を示す．

角組織については，引き続き検討が必要であると考検体 E〜G は，髄を認めないものと，認めるもの

える．

が混在しており，根と根茎が混合されたものである
ことを確認した．また，髄の有無を除き，検体 Aと同様の組織を確認した．

3.5 油道のエピセリウム細胞について
Fig. 7 に検体 A 及び B の横切片における二次皮層

日局の記載について，「根茎に由来するものでは髄を認める．髄にも油道があり，大きいものでは径の鏡検画像を示す．
とでは油道のエピセリウム

が 500μm に達する．」とするなど，根茎に特化した細胞の形状に違いが認められると報告されてい記載がわかるようにすることが望ましいと考える．

る 11）．基原が判明している検体 A 及び B の油道を観察した結果，検体 A（Fig. 7‑A9）に比べ，検体 B ではエピセリウム細胞の大きい油道が確認された3.4 厚角組織について
Fig. 6 に検体 A〜G の横切片におけるコルク層付（Fig. 7‑B8, B9）．ただし，同一検体の観察において近の鏡検画像を示す．

もエピセリウム細胞の大きさに幅が認められ，エピ「キョウカツ」では，コルク層の内側に，細胞の互

セリウム細胞の確認が難しい油道も存在した．これ

いに接する角隅が肥厚した厚角細胞が集合した厚角らのことから，基原種の判別には他の情報も含めて

組織

10）

5）

行う必要があると考える．

があるとされている ．

検体 B では，隣接する細胞の角隅が肥厚した厚角

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E1

F1

G1

E2a

F2a

G2

㧊

E2b

F2b
㧊

㧊

E3

F3

G3

E4a

F4

G4a

E4b

G4b

Fig. 5

検体 E~G の横切片の鏡検画像

E1, 2a, 2b：検体 E（根茎），E3, 4a, 4b：検体 E（根），F1, 2a, 2b：検体 F（根茎），F3, 4：検体 F（根），G1, 2：検体 G（根茎），G3, 4a, 4b：
検体 G（根）．

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A8

D4
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B6

E5
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B7

F5
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ࢥࣝࢡᒙ

C4

G5

ࢥࣝࢡᒙ

ࢥࣝࢡᒙ

ཌゅ⣽⬊

Fig. 6

検体 A~G の横切片におけるコルク層付近の鏡検画像

A8：検体 A，B6：検体 B（根茎），B7：検体 B（根），C4：検体 C，D4：検体 D，E5：検体 E（根），F5：検体 F（根茎），G5：検体 G（根）．

4

像を収集し，日局各条の「キョウカツ」の鏡検の記結論

載との対応関係について検討した．

今回，キョウカツについて，基原種の明らかな 2

その結果，髄は根茎でのみ認められた．また，日検体を含む 4 検体の全形生薬の外部形態を観察し，

局記載の厚角組織については，厚角組織か否か判別

日局等の記載と比較し，根茎及び根を判別した．

が難しい検体が存在した．

次にそれらの切片を作成し，根茎及び根の鏡検画

市販品 3 検体の観察の結果，根茎及び根に由来す

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A9

B9
Ἔ㐨
Ἔ㐨
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⣽⬊࢚ࣆࢭ࣒ࣜ࢘
⣽⬊B8Ἔ㐨࢚ࣆࢭ࣒ࣜ࢘
⣽⬊Fig. 7

検体 A 及び B の横切片における二次皮層の鏡検画像

A9：検体 A，B8：検体 B（根茎），B9：検体 B（根）．

山卓郎，徳本廣子，猪又明子，守安貴子．生薬の鏡検るものが混在していることが明らかになった．
これらの結果から，日局の記載について，追記が望ましい箇所及び検討が必要な課題を明らかにしに関する研究（第 3 報）
．医薬品医療機器レギュラトリー
サイエンス．2021，52（8），p.679‑689.
5）厚 生 労 働 省． 第 十 八 改 正 日 本 薬 局 方．2021，p.1914‑
1915.

た．

6）国家葯典委員会編．中華人民共和国葯典（2020 年版）第文

1 部．中国医葯科技出版社．2020，p.190‑191.

献1）厚生労働省．第十八改正日本薬局方．2021，p.134‑137.
2）植村望美，中嶋順一，鈴木淳子，清水聖子，茂木友里，
高橋美佐子，浦出朋子，金井千恵子，荒金眞佐子，中村耕，湯澤勝廣，長澤明道，田中和良，鈴木俊也，鈴木仁，高野昭人，川原信夫，猪又明子，守安貴子．生
薬の鏡検に関する研究．医薬品医療機器レギュラト
リーサイエンス．2019，50（7），p.420‑427.
3）清水聖子，中嶋順一，鈴木淳子，植村望美，茂木友里，
高橋美佐子，浦出朋子，金井千恵子，荒金眞佐子，中村耕，湯澤勝廣，長澤明道，田中和良，鈴木俊也，鈴木仁，高野昭人，川原信夫，猪又明子，守安貴子．生
薬の鏡検に関する研究（第 2 報）
．医薬品医療機器レギュ
ラトリーサイエンス．2020，51（9），p.476‑484.
4）中嶋順一，清水聖子，金井千恵子，塩田寛子，鈴木淳子，植村望美，茂木友里，高橋美佐子，浦出朋子，荒金眞佐子，中村耕，斎藤厳利，湯澤勝廣，長澤明道，
田中和良 , 鈴木俊也，鈴木仁，高野昭人，川原信夫，丸362

医薬品医療機器レギュラトリーサイエンス

7）She, Menglan（Sheh, Meng‑lan）; Mark, F. Watson. 27.
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