飼料研究報告 Vol. 44 (2019)

202

調査資料

2 動物質性飼料原料等の腸球菌の薬剤耐性モニタリング調査（平成 30年度）
浅尾 美由起 *，奥山 紀子 *Monitoring Results of Antimicrobial Resistance of Enterococci Isolated from Feed Ingredients(in the Fiscal Year 2018)
Miyuki ASAO * and Noriko OKUYAMA *( * Fertilizer and Feed Inspection Department, Food and Agricultural Materials Inspection Center)
We have made an antimicrobial susceptibility test on enterococci isolated from soybean meal andanimal byproducts ingredients.
In order to isolate the enterococci from samples, their selective enrichment culture in AC broth,selective culture on Enterococcosel agar and two-time pure isolations on Brain Heart Infusion agar
were conducted in due order. Then isolated gram-positive cocci were detected by the cultivationin Heart Infusion broth with 6.5 % NaCl. Having confirmed the biochemical characteristics ofthe catalase test, PYR test, mobility and pigment production, enterococci was identified withRapid ID 32 STREP API. The minimum inhibitory concentration (MIC) was subsequently
measured by using the broth micro-dilution method according to the guideline of the Clinical andLaboratory Standards Institute (CLSI).
Isolation rate of enterococci from soybean meal, fish meal, poultry by-product meal, and pork andpoultry meat and bone meal (MBM) were 45.5 %, 25.5 %, 16.0 % and 37.5 % respectively.
The
most common strain was Enterococcus faecalis (E. faecalis) at 35.7 % (20 of 56 strains) followedby E. faecium at 32.1 % (18 of 56 strains). The antimicrobial resistance rates were 0.0 % to15.0 % (E. faecalis), 0.0 % to 61.1 % (E. faecium) and 0.0 % to 22.2 % (other strains).
Key words: soybean meal; fish meal; poultry by-product meal; pork and poultry meat and bonemeal (MBM); Enterococcus faecalis; Enterococcus faecium; antimicrobial susceptibility
testing; broth microdilution method; minimum inhibitory concentration (MIC); antimicrobial
resistance rates
キーワード：大豆油かす；魚粉；チキンミール；豚鶏混合肉骨粉；Enterococcus faecalis；Enterococcus faecium ； 薬 剤 感 受 性 試 験 ； 微 量 液 体 希 釈 法 ； MIC （ 最 小 発 育 阻 止 濃度）；薬剤耐性率1緒

言

近年，新規の抗菌剤の開発が滞っている中で，薬剤耐性菌による感染症の増加が世界的に懸念されている．このため，WHO は 2015 年 5 月の総会で薬剤耐性に対する国際行動計画を採択し，これを受け，日本では関係省庁・関係機関等がワンヘルス・アプローチ（人と動物等の保健衛生の一体的な推進）の視野に立ち，協働して集中的に取り組む「薬剤耐性（AMR）対策に関するアクシ*

独立行政法人農林水産消費安全技術センター肥飼料安全検査部

動物質性飼料原料等の腸球菌の薬剤耐性モニタリング調査

203ョンプラン 2016-2020」 1) を策定した．畜産分野の主な取組は「慎重使用の推進等の強化，薬剤耐性の動向調査・監視を強化，養殖水産動物用医薬品の使用に専門家が関与する仕組みを導入，アジア地域における国際協力の強化」がある 2)．このうち，薬剤耐性菌の動向調査は平成 11 年度から
健康動物由来食品媒介性病原細菌及び指標細菌の全国的な薬剤耐性調査を JVARM（動物由来薬剤耐性菌モニタリング）として実施し，独立行政法人農林水産消費安全技術センターは，腸球菌を担当している．
JVARM では農場（平成 11 年度から平成 27 年度）や，と畜場及び食鳥処理場（平成 24 年度から）で採材した直腸便又は盲腸便から分離される腸球菌を対象としている一方で，飼料から分離される腸球菌については，海外において鶏用飼料と原料からの分離率が，それぞれ 100 %と 66 %で，耐性率が，それぞれ 1.2~69.1 %と 0.1~59.8 %であったという報告 3)はあるが，日本における，飼料から分離される腸球菌の分離率や耐性の動向に関する知見や研究事例が少ないことから，本調査を実施した．

22.1

試

実験方法

料

平成 30 年 4 月から平成 31 年 1 月までの 10 ヶ月間の間に，大豆油かす，魚粉，チキンミール及び豚鶏混合肉骨粉を微生物試験用の試料の採取方法 4)で採取した．採取場所は大豆油かす及び輸入魚粉については配合飼料工場，その他については各製造事業場であった．試料受け入れ後から試験開始までは，冷蔵で保存し，採材後 2 週間以内に試験に供した．
2.21)

試

薬

水は RFD240RA（アドバンテック製）により蒸留した蒸留水（JIS K 0211 の 5213 に定義された蒸留水）を用いた．なお，調製に用いた試薬は，等級があるものは特級を用いた．

2)

生理食塩液
塩化ナトリウム溶液（0.9 w/v%）を 121 °C で 15 分間高圧蒸気滅菌した．

3)

1.6 w/v%ブロモクレゾールパープルエタノール溶液
ブロモクレゾールパープル 0.8 g を無水エタノール 47.5 mL に溶かし，蒸留水 2.5 mL を加えて調製した．遮光して，室温で保存した．

4)

AC 培地
AC ブイヨン基礎培地（日水製薬製）50.5 g 及びアジ化ナトリウム（和光純薬工業製）0.25 g
を蒸留水 1000 mL に溶かし，500 mL 培養瓶に 250 mL 分注して，121 °C で 15 分間高圧蒸気滅菌した．

5)

エンテロコッコセル寒天培地（以下「ECS 培地」という．）
ECS 培地（Difco 製）56 g を蒸留水 1000 mL に溶かし，121 °C で 15 分間高圧蒸気滅菌した．
これを 60 °C まで冷却した後，ペトリ皿に一様に広がるように 15 mL 分注し，水平に静置して凝固させた後，倒置してふたをわずかにずらし，37 °C で 1 時間静置して培地表面を乾燥させた．

6)

ブレインハートインフュージョン寒天培地（以下「BHI 寒天培地」という．）
BHI Agar（Difco 製）52 g を蒸留水 1000 mL に溶かし，121 °C で 15 分間高圧蒸気滅菌した．
以下，5)によった．

飼料研究報告 Vol. 44 (2019)204

グラム染色液7)

フェイバーG「ニッスイ」（日水製薬製）の染色液 A（ビクトリアブルー），脱色液（ピクリン酸・エタノール液）及び染色液 B（サフラニン）
6.5 w/v%塩化ナトリウム加ハートインフュージョン培地（以下「6.5 %NaCl 加 HI 培地」とい8)

う．）
HI Broth（Difco 製）25 g，塩化ナトリウム 65 g，ブドウ糖 1 g 及び 1.6 %ブロモクレゾール
パープルエタノール溶液 1 mL を蒸留水 1000 mL に溶かした．これを小試験管に 3 mL 程度分注し，121 °C で 15 分間高圧蒸気滅菌した．
ミュラーヒントン半流動培地（以下「MH 半流動培地」という．）

9)

Muller Hinton Broth（Difco 製）21 g 及び Bacto-Agar（Difco 製）2.5 g を蒸留水 1000 mL に溶かした．これを小試験管に 3 mL 程度分注し，121 °C で 15 分間高圧蒸気滅菌した後，高層に凝固させた．
過酸化水素水（30 %）を 10 倍希釈した．

10)

3 v/v%過酸化水素水

11)

スワブカラー「イワキ」PYR（イワキ製）

12)

Rapid ID32 STREP API（シスメックス・ビオメリュー製）

13)

ミュラーヒントン半流動培地（以下「MH 半流動培地」という．）
Muller Hinton Broth（Difco 製）21 g 及び Bacto-Agar（Difco 製）2.5 g を蒸留水 1000 mL に溶かした．これを小試験管に 3 mL 程度分注し，121 °C で 15 分間高圧蒸気滅菌した後，高層に凝固させた．
14)

20 w/v% スキムミルク（以下「20 %スキムミルク」という．）
スキムミルク（Difco 製）20 g を蒸留水 1000 mL に溶かし，中試験管に 2 mL 程度分注し，121 °C で 15 分間高圧蒸気滅菌した．
15)

薬剤感受性試験用フローズンプレート‘栄研’（オーダープレート）（栄研化学製）
培地には Ca2+及び Mg2+を添加した Muller Hinton Broth を用いた．供試薬剤と薬剤濃度域については Table 1 のとおり．試薬受け入れ後から使用までは，−80 °C で保存した．
Table 1Group

Kind, concentration range and break point of antimicrobial agentsRangeBreak Point
Antimicrobial agent
Abbreviation(μg/mL)(BP)Aminoglycosides

Dihydrostreptomycin

DSM

0.25~

512

128

Aminoglycosides

KM

0.25~

512

128

Fluoroquinolones

Kanamycin
Enrofloxacin

ERFX

0.12~

644

Lincomycins

128

Lincomycin

LCM

0.12~

256

Macrolides

Erythromycin

EM0.12~

1288 a)Macrolides

Tylosin

TS0.12~25664

Penicillins

Ampicillin

ABPC

0.12~

12816 a)Tetracyclines

Oxytetracycline

OTC

0.12~

6416a) Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing of CLSI16)

ハートインフュージョン寒天培地（以下「HI 寒天培地」という．）
HI Agar（Difco 製）40 g を蒸留水 1000 mL に溶かし，121 °C で 15 分間高圧蒸気滅菌した．

動物質性飼料原料等の腸球菌の薬剤耐性モニタリング調査

205以下，5)によった．
17)

トリプチケースソイ培地（以下「TSB 培地」という．）
トリプチケースソイ（Difco 製）30 g を蒸留水 1000 mL に溶かし，小試験管に 4 mL 程度分注し，121 °C で 15 分間高圧蒸気滅菌した．
2.3

装置及び器具1)

ペトリ皿：ガンマ滅菌済み，内径 90 mm，高さ 20 mm のもの

2)

白金耳：ポリプロピレン製，ガンマ滅菌済み，1 μL ディスポループ

3)

インキュベーター：庫内温度を 35~45 °C（管理精度：± 1 °C）に設定できるもの

4)

その他：試験に用いた器具のうち，培地及び菌液に接触するものは，乾熱滅菌又は高圧蒸気滅菌済みのもの

2.4
1)

分離及び同定方法
選択増菌培養分析試料 25 g を量って AC 培地に入れ，振り混ぜた後，37 °C で 18~24 時間培養した．

2)

選択分離培養選択増菌培養液の 1 白金耳を ECS 培地に画線塗抹し，倒置して 37 °C で 48~72 時間培養した．

3)

純粋分離培養
ECS 培地表面の腸球菌と疑われる集落（周囲が黒褐色又は黒色帯で，中心が半透明のコロニー）を 2 個釣菌し，それぞれ生理食塩液 15 μL 程度に懸濁した．各懸濁液の 1 白金耳をBHI 寒天培地に画線塗抹し，倒置して 37 °C で 18~24 時間培養した．
培養後，BHI 寒天培地表面の集落を 1 個釣菌し，上記と同様に操作した．

4)

確認培養
BHI 寒天培地表面の集落を 1 個釣菌し，MH 半流動培地に穿刺した後，6.5 % NaCl 加 HI 培地に接種した．MH 半流動培地は 37 °C で 18~24 時間，6.5 % NaCl 加 HI 培地は 45 °C で 18~24時間培養した．

5)

確認同定
上記 2 種類の確認培地，グラム染色，カタラーゼ試験，PYR で Table 2 の生化学的性状を確認した．

飼料研究報告 Vol. 44 (2019)

206

Biochemical confirmation test of Enterococcus

Table 2Biochemical confirmation

CultureCulture mediuma)

High NaCl concentration

18~24 h at 45 ± 1 °C

HI broth with 6.5 w/v%NaCl

High temperature

18~24 h at 45 ± 1 °C

Motility

18~24 h at 37 ± 1 °C

HI broth with 6.5 w/v%NaCl
Mueller-Hinton semisolid agara) Heart Infusion

Biochemical confirmation

Reagent

Gram stain

Faber G " Nissui "Catalase test

3 v/v% hydrogen peroxide water

PYR test

Swab color " IWAKI " PYR

Pigmentation－a)

Character ofEnterococcus+++ / -Character ofEnterococcus
Gram positive++ / -Strains presumed to be enterococci in property tests are identified by Rapid ID32 STREP API

グラム染色

スライドグラスをエタノールに一晩以上浸漬し，バーナーで軽く焼き，冷ました．

その上に，2 回目の純粋分離培養塗抹用の菌液 10 μL を分注し，薄く広げた．乾燥後，火炎固定した塗抹面に染色液 A を十分添加し，1 分間静置した．染色液を水洗後，脱色液で染色
液 A の青色が溶け出さなくなるまで脱色した．脱色液を水洗後，塗抹面に染色液 B を十分添加し，1 分間静置した．染色液を水洗後，ろ紙で水気をふき取り，光学顕微鏡で観察した．
カタラーゼ試験

純粋分離培養した菌を少量かき取り，スライドグラス上に 1 滴滴下した 3v/v%過酸化水素水と混和し，発泡の有無を確認した．
PYR 試験

添加試薬 1 を 1 滴滴下したテストスワブで純粋分離培養した菌をかき取り，菌塊の色を観察する．常温で 3~5 分静置後，添加試薬 2 を 1 滴滴下し，色の変化を観察した．
上記の生化学的性状で腸球菌の性状を示した菌について，Rapid ID32 STREP API で菌種同定を行った．
Rapid ID32 STREP API

サスペンションメディウム 2 mL に McFarland 濁度 4 になるように菌を接種した．調製した菌液をプレートの各カップに 55 μL ずつ分注し，蓋をして 37 °C で4~4.5 時間培養した．キットの添付文書のとおりに判定し，判定結果を APIWEB 同定ソフト
フェアに入力し，菌種同定を行った．菌種同定された菌株は，HI 培地と 20 %スキムミルクを等量ずつ混合した保存用培地で−80 °C で保存した．
2.51)

薬剤感受性試験（微量液体希釈法）
精度管理株
Staphylococcus aureus ATCC 29213，Enterococcus faecalis ATCC 29212，Escherichia coli ATCC25922，Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 を精度管理株として被験菌株と同時に試験し，精度管理株の MIC（最小発育阻止濃度：Minimum Inhibitory Concentration）が Table 3 の規格値に入ることを確認した．

動物質性飼料原料等の腸球菌の薬剤耐性モニタリング調査

207

Table 3

Quality control limit of quality control strains
Quality control strains
Antimicrobial
Staphylococcus aureus Enterococcus faecalis Escherichia coli Pseudomonas aeruginosa
agent
ATCC 29213
ATCC 29212
ATCC 25922
ATCC 27853
DSM1－216 － 64
1－44 － 32a)
1－416 － 64
1－4*KMa)≦ 0.125
0.12 － 1< 0.125
*ERFX
≧ 256
≧ 256
LCM
0.25 － 48 － 32a)0.25 － 1
1－ 4**EMa)
0.5 － 4
0.5 － 4> 32> 32TSa)
0.5 － 2
0.5 － 2
2－8
*
ABPC
≦OTC
14 － 160.25 － 2
2 － 16*: No quality control limita) Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing (CLSI)
2)

菌液の調製
保存菌株を HI 寒天培地に画線塗抹し，倒置して 37 °C で 18~24 時間培養した．HI 寒天培地
表面の集落を 4~5 個釣菌し，TSB 培地に接種し，37 °C で 18~24 時間培養した．培養後の TSB培地を滅菌生理食塩液で 10 倍希釈し，McFarland 濁度 1 に合わせ，その菌液をさらに滅菌生理食塩液で 10 倍希釈して，フローズンプレート接種用の菌液とした．

3)

フローズンプレートへの接種及び培養2)で調製した菌液（全量）をトランスファーセットのトレイに入れ，96 ピンプレートを浸し，96 ピンプレートをフローズンプレートの容器に接種した．フローズンプレートに蓋をして，35 °C で 16~20 時間培養した．

4)

判定
リーディングミラーの上にフローズンプレートを置き，肉眼的に懸濁又は沈殿が認められない場合及び沈殿物があっても 1 mm 未満で 1 個の場合は発育阻止とみなした．接種菌の発育が阻止された薬剤の最低濃度を MIC とした．
なお，分離同定から感受性試験までの概要を Scheme 1 に示した．

飼料研究報告 Vol. 44 (2019)208

Selective enrichment
weigh 25 g sample
add to 250 mL AC Brothincubate for 18~24 h at 37 °C
Selective isolation
plate out the culture obtained in selective-enrichment broth to Enterococcosel agar
incubate for 18~24 h at 37 °C
Pure isolation (first)
inoculate typical or suspicious colonies of Enterococci to Brain Heart Infusion (BHI) agar
incubate for 18~24 h at 37 °C
Pure isolation (second)
plate out the colonies to BHI agar
incubate for 18~24 h at 37 °C
Culture confirmation
inoculate the colonies with wire
Mueller-Hinton semisorid agar
incubate for 18~24 h at 37 °C
Heart Infusion (HI) broth with 6.5 % NaCl
incubate for 18~24 h at 45 °C
Biochemical confirmation
gram stain
catalase test
PYR test
Identification of Enterococcus
Rapid ID32 STREP APIStore at −80 °C in 20 % skim milk
Antimicrobial susceptibility testing
plate out the stock strains to HI agar
incubate for 18~24 h at 37 °C
inculate several colonies to Trypticase Soy Brothincubate for 18~24 h at 37 °C
dilute the culture solution into 100 times with autoclaved physiological saline
inoculate to Frozen Plate
incubate for 16~20 h at 35 °C
Determining MIC

Scheme 1

Antimicrobial susceptibility testing of Enterococcus spp. isolated
from feed ingredients

33.1

結果及び考察

分離状況
平成 30 年 4 月から平成 31 年 1 月までに採取した試料の点数や分離された試料の点数等はTable 4 のとおりである．腸球菌はほ乳動物の腸管内の常在菌であるが，外界へ排出された後も生残性が高く，また，ほ乳動物以外に鳥類，は虫類，昆虫，植物，土壌，水環境等にも生息している．今回採取した飼料原料は一般的に製造工程において加熱や加圧，溶媒抽出等が行われるた

動物質性飼料原料等の腸球菌の薬剤耐性モニタリング調査

209

め，加工後から袋詰めされるまでの間又は保管若しくは輸送の間に汚染されたと考えられる．
Isolation of Enterococcus (for each feed ingredient)b)Number of
Number of
Isolated
Number ofa)
samples
positive
Enterococcirate (%)
Soybean meal
331545.521
Fish meal
551425.5
20
Poultry by-product meal
25416.06c)
16637.59
Pork and poultry MBMTotal129395630.2a) Ratio of the number of samples to the number of the test samplesb) Isolated up to 2 strains from 1 samplec) Meat and bone meal
Table 4

次に，分離された腸球菌の菌種を Table 5 に示す．最も多かったのは E. faecalis が 20 株で，次いで E. faecium が 18 株であった．飼料の種類別では，大豆油かすからは 6 菌種，動物質性飼料原料からは主に 2 菌種が分離された．腸球菌は Table 6 のように菌種により生息域 5)が異なる．
試料により分離された菌種が異なる明確な要因は不明だが，汚染のされやすさ（作業者，ハエなどの昆虫，ネズミなどの害獣との接触）などの違いがあると考えられる．
Number of Enterococcus spp. isolated from each feed ingredient
E. avium E. gallinarum E. casseliflavus
Soybean meal
356114Fish meal
881000
Poultry by-product meal
600000Pork and poultry MBM
351000Total
20188114a) Judged " Identification to the genus " by Rapid ID32 STREP API
Table 5E. faecalis E. faecium E. hirae

Table 6a)3004Species of the genus Enterococcus and their currently known habitats5)
Species
Known habitats
Human pathogen
E. faecalis

Human, animal (multiple), plant, insect

Yes

E. faecium

Human, animal (multiple), plant, insect

Yes

E. hirae

Animal (multiple), plant

E. avium

Human, animal (multiple)

Yes

E. gallinarum

Human, animal (multiple), insect

Yes

E. casseliflavus Plant, soil, human, animal (multiple)

3.2

E. sp.
1Yes

薬剤感受性試験の結果
試料 39 点から分離された腸球菌 56 株（1 試料から最大 2 株分離）の薬剤感受性試験の結果をTable 7 に，耐性を示した菌株の詳細を Table 8 に示した．
MIC は細菌の発育が認められなかった濃度の最小値である．MIC50 及び MIC90 はそれぞれ

飼料研究報告 Vol. 44 (2019)210

50 %及び 90 %の菌株の発育を阻止した MIC である．MIC90 が低い場合は，大部分の株が感受性（一部耐性菌が出現している場合もある），MIC 50 が高い場合は，大部分が耐性化していると判断できる．また，MIC90 と MIC50 の幅が広い場合は，耐性株が増加，あるいは，耐性化傾向にあると考えられる 6)．
今回分離された全ての菌株が ERFX，ABPC 及び TS に感受性であった．KM，EM 及び OTCに対する耐性率はそれぞれ E. faecalis で 10.0 %，0.0 %及び 15.0 %，E. faecium で 61.1 %，33.3 %及び 0.0 %，その他の菌種で 11.1 %，22.2 %及び 5.6 %であり，菌種により耐性の傾向に違いが見られた．その他の薬剤に対しては耐性株が 0~1 株であり，特に違いは見られなかった．
耐性を示した菌種は E. faecium が 11 株で最も多かった．2 薬剤への多剤耐性菌は，E. faecium
で 6 株，E. faecalis で 2 株，E. sp.で 2 株であり，3 薬剤への多剤耐性菌は E. faecalis で 1 株あった．
Table 7

Antimicrobial susceptibility of enterococci 56 isolates from each feed ingredientE. faecalis (n = 20)

MIC50

MIC90

E. faecium (n = 18)

Resistance(μg/mL) (μg/mL) Number (%)

MIC50

MIC90

others (n = 18)

Resistance(μg/mL) (μg/mL) Number (%)

MIC50

MIC90

Resistance(μg/mL) (μg/mL) Number (%)

DSM646415.032

64

00.0

32

64

00.0KM

32

64

210.0

128

256

1161.1

32

256

211.1

ERFX

1100.0

1

100.0

0.5

100.0LCM

32

64

15.0

16

32

00.0

16

32

00.0EM

2

4

00.0

4

8

6

33.3

0.3

8

4

22.2

TS

2

4

00.0

8

16

00.0

2

800.0

ABPC

1

100.0

1

2

00.0

0.5

2

00.0

OTC

164

3

15.0

0.5

100.0

0.5

1

15.6

Table 8Antimicrobial resistance patterns in Enterococcus spp. isolated from feed ingredients

Soybean mealE. faecium

Antimicrobial
resistance pattern
KM

Soybean mealE. faecium

KM

Fish mealE. faecium

KM

Soybean mealE. faecium

KM, EM

Fish mealE. faecium

KM

Soybean mealE. faecium

KM, EM

Fish mealE. faecium

KM, EM

Kind of feed ingredientSpecies

Kind of feed
ingredientFish mealE. faecalis

Antimicrobial
resistance
OTC, LCM

Species

Soybean mealE. faecium

KM, EM

Fish mealE. faecium

KM, EM

Soybean mealE. casseliflavus

OTC

Fish mealE. faecium

KM, EM

Soybean mealE. sp.

KM, EMFish mealE. sp.

EM

Poultry by-product mealE. faecalis

KM, OTC

Fish mealE. sp.

EM

Poultry by-product mealE. faecalis

KM, DSM, OTC

Fish mealE. sp.

KM, EM

Pork and poultry MBM

E. faecium

KM

4まとめ

平成 30 年 4 月から平成 31 年 1 月までの 10 ヶ月の間に，採取した飼料原料（大豆油かす，魚粉，チキンミール及び豚鶏混合肉骨粉）から分離した腸球菌の同定と微量液体希釈法による薬剤感受性試験を行い，飼料原料における腸球菌の薬剤耐性の実態調査を行った．

動物質性飼料原料等の腸球菌の薬剤耐性モニタリング調査

1)

211

大豆油かす，魚粉 ，チキンミール及び豚 鶏混合肉骨粉からの腸 球菌の分離率は，それ ぞれ
45.5 %，25.5 %，16.0 %及び 37.5 %であった．

2)腸球菌の菌種は植物質性原料と動物質性原料で異なり，大豆油かすからは 6 菌種，その他の動物質性飼料原料からは主に 2 菌種が分離された．最も多かった菌種は E. faecalis で 35.7 %（56株中 20 株），次いで E. faecium が 32.1 %（56 株中 18 株）であった．

3)

薬 剤 感 受 性 試 験 の 結 果 は ， KM，EM 及 び OTC に 対 す る 耐 性 率 は そ れ ぞ れ E. faecalis で10.0 %，0.0 %及び 15.0 %，E. faecium で 61.1 %，33.3 %及び 0.0 %，その他の菌種で 11.1 %，22.2 %及び 5.6 %であり，菌種により耐性傾向が異なった．ERFX，ABPC 及び TS に対しては全ての菌株が感受性を示した．

4)

耐性を示した菌種は E. faecium が 11 株と最も多く，多剤耐性菌は，E. faecium で 6 株，E. faecalis で 3 株，E. sp.で 2 株であった．

文1)

献

公益社団法人日本動物用医薬品協会：薬剤耐性（AMR）対策の推進について －動物用抗菌剤の慎重使用－，平成 29 年 3 月 (2017).

2)

農林水産省：薬剤耐性対策アクションプランについて，
http://www.maff.go.jp/j/syouan/tikusui/yakuzi/pdf/setsumei_shiryo.pdf, cited 9 Apr. 20193)

Paulo Martins da Costa, Manuela O., Alexandra B., Paulo Vand Fernando B.: Antimicrobial resistancein Enterococcus spp. and Escherichia coli isolated from poultry feed and feed ingredients, Vet Microbiol,
120, 122-131 (2007).

4)

農林水産省畜産局長通知：飼料等検査実施要領の制定について，昭和 52 年 5 月 10 日，52 畜 B
第 793 号 (1977).

5)

Muruleedhara N. Byappanahalli, Meredith B. Nevers, Asja Korajkic, Zachery R. Staley, Valerie J.
Harwood: Enterococci in the Environment, Microbiol Mol Biol Rev, 76, 685-706 (2012).

6)

動物用抗菌剤研究会：最新データ(2013).

動物用抗菌剤マニュアル第 2 版，平成 25 年 4 月 12 日