宮城教育大学

環境教育研究紀要

第 17 巻 (2015)

閉鎖性ため池の有機汚濁バックグラウンド評価に関する実験法
三品 佳子＊・三好 直哉＊＊・村松 隆＊＊＊
Experimental Method for the Evaluation of Background of Organic Contaminationin Closed Ponds
Yoshiko MISHINA, Naoya MIYOSHI, and Takashi MURAMATSU
要旨：閉鎖性のため池水の腐乱化の原因となる有機汚濁バックグラウンド（生物に由来した物質による恒常的な有機汚濁のレベル）を評価するための実験法を検討した。これは、化学的酸素要求量測定、クロロフィル測定、腐植物質の特性分析（起源分析と分子量測定）の結果をもとに、有機汚濁のバックグラウンドをため池の実態を反映したモデル（ため池モデル） に当てはめ、汚濁化の将来予測に活用するものである。

キーワード：

ため池 有機汚濁

富栄養化

腐植質

1. はじめに

２．閉鎖性ため池の水環境

著者らは，生物による生産活動が盛んな閉鎖性た2-1. 有機汚濁と富栄養化

め池の実態把握を目的に、水中の腐植物質に着目し一般に、湖沼へ流入する”よごれ”は、図１に示すよた汚濁分析を行っている。1),2) ため池は，解放性の一

うに、人の生活活動に由来するもの、動植物の生態系時貯水池や雨水集積型の貯留池などの水塊で、水量、に由来するもの、地質鉱物に由来るものを考えることが水の停滞性、内部生産性（主に生物による）の違いにできる。しかし、公園池では、人が安全に立ち入るためよって、汚濁の状況が異なってくる。本研究で調査対の周辺環境整備が進められており、人の生活や産業象としている水塊は、雨水集積および地下水浸透型のから排出されるよごれはほとんど無い。閉鎖性ため池

閉鎖性ため池で、そのひとつに人の生活空間に近接(公園池も含む)のよごれの主要なものは、自然起源のした公園池も含まれる。3) これらのため池の内部とその中でも特に植物に由来したものである。

周辺では、独自の生態系がつくられており、通常は汚植物由来の物質による有機汚濁の進行は、図２に濁化と自浄のバランスが保たれ、顕著なよごれは起ら示すようなプロセスを経る。水中での栄養塩類量の増ないが、気象変化などの外的要因により、池内の食物連鎖に乱れが生じると、アオコなどの富栄養化現象がことから、定期的な水質監視が望まれる。
本論文では、閉鎖性ため池の実態や特性を探り、水洗剤
農薬

重金属
一般無機物

産業（廃棄）

有機肥料，塩類

植物

植物プランクトン
腐植物質（フミン酸やフルボ酸）
植物起源物質・無機物

人為由来みられる。特に、人の暮らしに密接した公園池では、有機汚濁が進み、水の腐乱による健康被害も懸念される

生活活動

よごれ

環境保全を目的とした水質モニタリングの方法につい自然由来

動物て述べる。
地質・鉱物

図１

タンパク質、糖類、核酸類
動物腐乱由来の物質
鉱物の風化溶解
土砂、粘土等

よごれの種類とその由来――――――――――――――――――――――――――――――――――――――――――――――――――――――＊＊＊＊
宮城教育大学理科教育講座、 ＊＊宮城県中新田高等学校
宮城教育大学環境教育実践研究センター― 63 ―

閉鎖性ため池の有機汚濁バックグラウンド評価に関する実験

加が一次生産者（植物プランクトン）を発生・増殖させするが、難分解性のものは、ゆっくりと自然分解しながる。その結果、水の透明度が悪化し水中植物の光合ら一部がヘドロ化し、ため池の低土へ移動して長期に成が弱まる。水の嫌気化が進み有機汚濁、富栄養化、わたって有機汚濁のバックグラウンドを形成することに腐乱化が促進される。図２から分かるように、有機汚濁なる。 従って、水中から、動物由来の分解物（核酸類、と富栄養化は密接な関連性（汚濁の相乗協復性）をもタンパク質、糖類などの易分解性有機物）や植物由来っている。の腐植物質（フルボ酸やフミン酸、その他ヒューミン等）を検出し、存在量などについて知見を得ることは、有機水の富栄養化

栄養塩類（N,P）の流入

汚濁の潜在性や進行の可能性を類推する上で重要で藻類の大繁殖（アオコ）

N,P濃度の増加・生物吸収ある。

透明度の低下生物の死
有機物の溶存量増加
非生物分解・沈降

水の有機汚濁化
有機物の内部
生産、進入による溶解・溶存

微生物分解
無機物と有機物（よごれ）

リンの溶出
水質の悪化
（低土質の嫌気化）

貧酸素化

易生物分解性物質（生物による捕食・吸収）

有害ガスの発生(メタン、硫化水素等)

図２

遅い

水中に停滞・蓄積

生物浄化（化学変化、形態変化を伴う）

１次生産者の増加

有機汚濁と富栄養化

難生物分解性物質（生物による捕食・吸収されにくい）

有機汚濁の種類の増加、進行
食物連鎖固体数の増加（増殖・繁殖）2-2．有機汚濁バックグラウンドと腐植物質

図３

植物由来の腐植物質（フルボ酸類、フミン酸類など）

生物由来物質の動態 4)は、ため池の有機汚濁の年次的な緩やかな増加傾向の原因となる。すなわち、これらの物質は微生物分解さ３．水質モニタリングれにくく、水中に溶存もしくは沈降堆積（ヘドロ化）する。

3-1.調査項目

その結果、有機汚濁のバックグラウンドとして、汚濁をため池の有機汚濁の現状を調査し、有機汚濁のバッ長期化させる。ため池での腐植物質の生成と変移の概クグラウンドを評価するために用いられる調査項目を図

要を図３に示す。これは、内部生産性の高いため池に４に示す。項目を現地測定項目（変化しやすい指標項おいてよく認められる変移である。

目で、採水時にモニターしなければならない項目）と採ため池で生物（動物と植物）が死に至ると、それらが水後、分析室・実験室に持ち帰り、分析する項目に分微生物分解（動物の腐乱、植物の腐植）し、その過程けている。ため池の実態と調査目的に照らしあわせ分で生じた分解物（無機物と有機物）が種々の形態（有析する場合の選択肢となる。

機物の場合は溶存態や粒子状など）で水中に拡散しなお、図４に示した現地測定項目については、調査ていく。無機物の場合は、一部に栄養塩類として植物時・調査場所の環境条件を直接反映しており、バックの生長に利用されるが、食物連鎖における一次生産グラウンドの評価・解釈と関わりなく基礎データとして測（植物プランクトンの発生と増殖）も始まる。それに引き定しておくことが望ましい。図４に示した、測定項目の続く高次の連鎖過程で生物個体数の増加を招く。一中で図３のプロセスを調査するための代表的な項目を方、有機物は、図３に示すように、易生物分解性物質と抽出し、それらを図５に示す。

難生物分解性物質有機として水中に拡散していく。易生物分解性のものは食物連鎖過程で比較的早く消失

有機物については、化学的酸素要求量（COD）、生物化学的酸素要求量（BOD）、全有機炭素（TOC）の― 64 ―― 70 ―

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第 17 巻 (2015)

水温：溶存酸素の飽和値の把握（水温によって溶存する酸素量が決まっている）
pH ：水環境が中性付近かどうか（生物の生息に適した環境になっているかどうか）
導電率(EEC)：水中の塩類濃度が通常（河川等）とどの程度に異なるか。安定した供給濁度(Turb)：濁りの程度。光が十分水中に届いているか。
溶存酸素（DO)：水中に溶存する酸素量。好気的環境か嫌気的環境かという解釈
酸化還元電位（ORP）：水の酸化性（酸素が多い）、還元性（酸素欠乏状態）の把握
流速：水の流れがあるかどうか。停滞性か流水性か。

現地測定

ため池の水

■有機汚濁項目
１．化学的酸素要求量（COD)：有機物による水の汚濁の程度を知る
２．生物化学的酸素要求量（BOD）：生物分解性の有機物による水の汚濁の程度を知る
３．全有機炭素量（TOC）：溶解性および懸濁性有機物の量はどれくらいか。
４．溶解性有機物量（DOC）：溶解性の有機物がどの程度含まれているかを知る。
■富栄養化関連項目
５．窒素態：全窒素(Total_N)、アンモニア性窒素(NH3/N)、亜硝酸性窒素(NO2/N)、硝酸性窒素(NO3/N)がどれくらいか。
６．Total_P : 全リン ：水中にリン酸態がどの程度含まれているか
７．Chl_a クロロフィルa：水中の植物プランクトン量の多少把握

実験室測定■起源分析・有機物特性評価項目
８．EEMS : 有機物分画による三次元蛍光分析：有機物の起源分析、外来性・内部生産性の評価
９． Gel_C : ゲルろ過クロマトグラフィー：分子量分画、生物分解性有機物か難分解性有機物か■無機成分分析項目
10．IC : イオンクロマトグラフィー：陽イオン・陰イオンの種類と定量
11．Si : ケイ素の定量（ケイ酸イオン分析）
12．Hardness : 水の硬度の測定：軟水か硬水かの識別
13．Metal ions : その他必要に応じて（鉄、重金属、その他）■ 農薬・油分、その他 必要に応じて選択される

図４

水質モニタリング項目 5)

測定が有効である。例えば COD 測定で、試料中の溶易生物分解性の有機物については、生分解が進み解 性 有 機 物 （ 溶 存 態 有 機 物 ） （ Dissolved Organicやすいため定量的な扱いは避ける。一方、難生物分Substance）に着目するならば、試料水を孔径 1μm の解性の有機物については、吸着クロマトグラフィーによガラスろ紙（ex. Whatman GF/F）でろ過し、ろ液を溶解る酸・アルカリ分画と三次元蛍光分析（EEMS）による同性（溶存態）有機物試料として分析すればよい。得られ定、ゲルろ過クロマトグラフィー法(Gel_C)による分子量る結果を CODDOS とし、未ろ過の試料水について測定分析を行う。１） クロロフィルは水の富栄養化状態を指した CODTOT との差（CODTOT - CODDOS）が粒子状有標するもので重要である。

機炭素と植物プランクトンによる影響と考え、有機物による水の濁りの程度や水中植物の光合成効果の阻害要素の指標として使える。

ため池に有機汚濁が恒常的に存在し、そこに生態生物の死IC,EEC,DO,ｐH,系がつくられていれば、汚濁物質の一部は生物の栄微生物分解無機物有機物養源となっている。ため池には生態系の維持に必要な

COD,BOD,TOC

水温 ,ORP

EEMS, Gel_C
易生物分解性物質

難生物分解性物質

酸塩基分画と蛍光測定
NH3/N
NO2/N
NO3/N
Total_N

3-2．ため池モデル

Chl_a
植物プランクトン

う有機汚濁バックグラウンドとは、生物に由来した恒常水中に停滞・蓄積的な有機汚濁の程度（レベル）を指すものである。富栄

有機汚濁の種類の増加、進行養化や水の腐乱化が進行しやすいため池では有機汚

濁度、透明度、色度、臭い、SS、蒸発残留物

Total_P

一定の割合の汚濁が存在することになる。本研究で言有機体濁バックグラウンドは高い。有機汚濁バックグラウンドのレベルを評価することで、汚濁の起こりやすさを把握で

図５

汚濁プロセスと測定項目きる。

― 65 ―

閉鎖性ため池の有機汚濁バックグラウンド評価に関する実験

光

栄養塩類

植物植物プランクトン（１次生産）

CO2
O2

食物連鎖

死骸・排泄

動物プランクトン（１次消費・２次生産）
O2

水性昆虫・魚・・・

腐植

好気的微生物分解

表層
生産層

有機物
（親水性、懸濁態）
水温躍層

有害ガス（メタン、硫化水素）
リンの放出

O2の消費

分解・沈降
微生物分解

嫌
気的

難分解性

深水層分
解層

沈降・堆積（ヘドロ）

図６ ため池モデル （一層モデル）

このバックグラウンドの解釈には、ため池の実態に合水中に含まれる有機物を酸化分解するのに必要なったモデル（ため池モデル）が必要である。このモデル

酸化剤の量を求め、酸化剤の消費量を酸素の消費量

は、ため池の水質の動態（指標値の推移や変動）を合に置き換え、水中に含まれる有機物量の大小を評価理的に解釈するのに役立つ。最も単純なモデルを図６する。よく行われる方法に酸性過マンガン酸カリウム法に示す。解釈の精度を高めるには、水温躍層が段数がある。通常 JIS 規格（JIS K 0102）で分析方法が定め的に複数ある多層モデルを考えるとよい。一層モデルられているが、より簡易な方法も考案されている。電量は、実態把握の確度は低下するが、構造が単純な分、滴低法 6)による迅速分析法は JIS 法にはないが、JIS 法考えやすいという特徴をもっている。の結果と相関関係がよい。図７に電量滴定法の概要を

このモデルを用いた解釈は、①栄養塩類の供給に示す。

よる生産者（植物プランクトン）の過剰繁殖、②池内生態系による物質生産性の加速化・バックグラウンドを超

4-2．生物化学的酸素要求量

BOD（Biochemical

えた有機汚濁の進行、③水中植物の光合成効果の低Oxygen Demand)

下と水の嫌気化、④アオコの発生・富栄養化、⑤生物水中に含まれる有機物を水中の微生物が捕食し、好の死・難生物分解性有機物の生成・停滞・沈降、⑥ヘ気性の環境下で微生物が繁殖する。微生物の繁殖にドロ化と嫌気性分解、⑦嫌気的環境下のリンの放出、溶存酸素が消費される。採水直後の試料水の水温を⑧有機汚濁の循環・年次的変動、⑨有機汚濁バックグ

20℃、pH7 に調整し、撹拌しながら”ばっ気”する。ｐH7

ラウンドの正の成長などの理解に適用できる。に調整した試料水（調整液）の溶存酸素量（DO1）を測定する。調整液を数本（２本から３本）の酸素びん（100mL）に分け入れ、20℃暗所で 5 日間放置する。５４．水質分析の実際
4-1.

化学的酸素要求量Demand）

COD（Chemical Oxygen

日 後 の 溶 存 酸 素 量 (DO2) を 求 め 、 DO1-DO2 の 値 をBOD(mg/L)とする。DO 値は DO メーターを用いる。

― 66 ―

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図７

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電量滴定による COD 測定手順

電解セルに所定量の試料水（５ｍL)と酸化剤（1/40ＮKMnO4）（０．５ｍL)、鉄（Ⅲ）ミョウバン・硫酸銀・硫酸・リン酸の混合溶液（２ｍL)を加え（ｃ）、ヒーター内で撹拌しながら所定時間加熱する（ｄ）。その後水温を６０℃程度に下げて電量滴定を行う(e)。 試料をセットして自動的に処理が進行し、測定結果が出るまで約８分。

4-3.

クロロフィル a

図８a は、公園池の表面にアオコが大発生した際の様子を示したものである。池表面を藻類（アナベナ、ミクロキスティス）が覆い（図８ｂ)、強烈なカビ臭が漂っていた。採水後、植物プランクトンの細胞からクロロフィルa を抽出し、クロロフィル蛍光を測定しクロロフィル濃度を求めると、図８ｃのような結果が得られた（１０はアオコ発生が観測された時期である）。
図９にクロロフィルの分析手順を示した。試料水 100
ｍL～200ｍL(a)の所定量をガラスろ紙（ｂ）（WhatmanGF/F)でろ過する。ろ液ｃを植物プランクトンを除いた溶存態有機物試料として CODDOS の測定に利用する。
なお、ろ過にはアスピレーター（ゆるやかに減圧）を用

図８いた。 ガラスろ紙に張り付いた植物プランクトンを遠沈管（ｄ）に移し(ガラスろ紙ごと入れる)、これに N,N-ジメ― 67―

公園池の富栄養化状態
a：岩沼市朝日山公園荒井堤のアオコ(H25.9)
b:アオコの光学顕微鏡写真（300 倍）
c:抽出したクロロフィル濃度の経月変化閉鎖性ため池の有機汚濁バックグラウンド評価に関する実験

図９

クロロフィルの分析手順 7)

a: メスシリンダー（試料水 １００ｍL～２００ｍL）, b:外径 25mm 円形ガラスろ紙（GF/F), c:500mL メジュームビン,d: 遠沈管（50mL）, e:遠心分離(3000rpm/min), f:1mL ポリエチレンスポイト、蛍光測定セル,g：ターナー蛍光光度計

チルホルムアミド 10ｍL を加え、遠沈管を振り、ガラスろば、分離時間を短縮することができる。B の操作ではカ紙が遠沈管内の溶液中に白濁分散したら、そのまま遠ラムを逆向きにして、吸着帯からの溶出時間を短縮し心分離機にかけ（e）、ろ紙のガラス繊維を沈降凝集さている。

せる。遠沈管の溶液表面部分をスポイトで吸い上げ、

図 1１の A 分画（酸分画）と B 分画（アルカリ分画）は測定セルに移してクロロフィル蛍光強度を測定する。ク

図１０の分画で得た溶出液について測定した３次元蛍

ロロフィル濃度は、予め作成しておいた検量線データ

光スペクトルである。A 分画では動物由来の親水性成（クロロフィル a 濃度と蛍光強度の関係を表す）を用い分（タンパク質様物質と呼ぶ）の存在が認められ、B 分て算出される。

画では腐植物質（フミン酸類でフミン質様物質と呼ぶ）の存在が認められた。図３（図５）に示した物質移動（循4-4.

生物由来分解有機物の分画環）過程で、水の有機汚濁を進行させる。

これは、図５に示す易生物分解性有機物（糖類や核酸、タンパク様物質）と難生物分解性有機物（フミン質、フルボ酸など）の存在を、カラム分離（分画実験）し、分8)4-5.

生物由来分解有機物の構造特性するものである(図１０)。こ

水中に腐植物質（主に水生植物、植物プランクトン

れは吸着カラムを用いて、分画１（糖類・核酸・タンパク由来の物質）が多くなると、水の BOD が低値にもかか質等の親水性化合物群）と分画２（主にフミン酸類）にわらず COD が高値（腐植質の難分解性による）化する分ける方法である。カラム充填剤は非イオン性の交換現象がみられる。腐植物質には、酸にとけやすい（酸樹脂 DAX-8 (Suplite)である。展開溶媒の液性と樹脂によって沈殿しにくい）フルボ酸類（hulvic like）と、酸にに対する基質の吸着力の違いを利用して分離する方とけにくい（アルカリで沈殿しにくい）フミン酸類(humic

法で、ゆっくりとした流路の中で行われる（50ｍL の試like)があり、これらがため池中などに多量に存在し長料で約１時間の実験となる）。試料水を予め、ロータリ期に渡って停滞蓄積すると、ヘドロ化や水の腐乱化をーエバポレーターで濃縮し、試料水量を減量しておけ引き起こす。これらの有機化合物の構造特性を調べる

画成分の蛍光特性を検出― 68 ―

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図 10

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生物由来分解有機物の分画

分画 A:酸分画 （流速 1mL/min)
分画 B:アルカリ分画(流速 0.2～0.4mL/min)
連続分画： A の分画操作の後、カラムを逆向きに変え B の分画操作を行う。
a: 自 作 カ ラ ム （ 内 径 10mm, カ ラ ム 長 10cm の ガ ラ ス 管 、 両 端 に ガ ラ ス フ ィ ル タ ー （ GF/F) を ア ダ プ タ ー で 固 定 、 充 填 剤 ：DAX-8Suprlite）,b: 試料水（ガラスフィルターGF/F でろ過した液）,c:HCl 水溶液(pH2),d: カラム通過液（糖、核酸、タンパク質等の親水性・塩基性の有機物が含まれる酸性溶液）,e: 流速調整コック ｆ: 0.1NNaOH 水溶液（10mL)(吸着物の溶離液）,g：f シリコンチューブ（内径 2mm)の先端に内径 0.1mm のシリコンチューブを取り付け、流速をおよそ 0.2mL～0.4mL に減速して溶離）,h:溶離液（フルボ酸やフミン酸等の酸性成分が含まれるアルカリ溶液）

図１１

分画成分の３次元蛍光スペクトル― 69 ―

閉鎖性ため池の有機汚濁バックグラウンド評価に関する実験

図 12 簡易型ゲルろ過クロマトグラフィー
a: ゲルカラム（ガラス管）, b:送液ポンプ（1.0mL/min), c:溶離液（溶媒：脱気済の蒸留水）,
d: Uｖ－フローセル（セル長 0.2cm）,e:フラクションコレクター

ことは、有機汚濁の動態を推論するのに有意義である。

ゲルろ過クロマトグラフィーによる分離では、孔の異なそのための方法にゲルろ過クロマトグラフィーがある。

るゲルを用いて(ゲルの種類と量を変えて)実験すると、

図１２に示すように、ゲルろ過クロマトグラフィーは、成分の分子量について確度の高い結果が得られる。

一定の大きさの孔をもった微細な多孔質ビーズ（高分

図１２A,B,C に示したゲルろ過カラムは、カラム充填剤子樹脂ゲル）をカラムに詰め(a)、カラム先端に少量のとカラム管の大きさを変えたものである。カラム A は充試料水を充填し、水を溶媒としてカラムの上側から下填剤として Sephadex G15（分画可能な分子量範囲は側へ展開していく。試料中の有機成分はビーズの孔を分子量 1500 以下）を用いており、腐植成分の分離に巡りながらカラムを通過していくが、有機成分の分子サおよそ 3 時間を要する。カラム A,B,C の特性は、標準

イズがビーズの孔より大きい場合は、有機成分は孔の試料としてブルーデキストリン（平均分子量 200 万）とシ中に入れない。ビーズの隙間を通して展開溶媒の流アノコバラミン（ビタミン B12、分子量 1350）を用いて、速にあわせてカラムを通過するだけなので、カラムからそれぞれ各成分の保持時間から評価する。カラム C は、抜け出す時間は短い。一方、分子サイズがビーズの孔およそ１時間で測定結果が得られる。保持時間が短いより小さい場合は、有機成分が樹脂の孔の中を巡りな分、シャープなクロマトグラムを観測でき、実用的なカラがらカラム内を移動するので、見かけの行路長は長くムである。カラム B はカラム C に比べると測定時間が長なり、カラムから抜け出す時間も長くなる。このように、く(約３時間）かかるが、成分の分離の程度がよく、混合有機成分のカラム内に滞在する時間（保持時間）を観試料の分離実験に利用することができる。

測すれば、その成分の分子サイズ（およその分子量）を求めることができる。

― 70 ―

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0.14

カラムA

５．まとめ

Absorbance

0.12

公園池のような閉鎖性ため池の富栄養化と有機汚濁化は、水塊の腐乱化（腐乱性水系への移行）を生み0.1出す。公園池が人の暮らしに密接した閉鎖性の高いため池であり、環境保全の立場から、ため池の水環境0.08（豊かな生態系による自浄能力を発揮した池）を監視
0.06
020

4060
80
retention time /min

100120するための水質モニタリングは有用である。

140

本研究では、閉鎖性ため池の汚濁の実態把握と将0.17

来予測に、「有機汚濁バックグラウンド」という概念を導

absorbanceカラムB
0.15

入し、バックグラウンドのレベルを評価する分析法とし0.13て、有機汚濁指標、富栄養化関連項目（クロロフィル）、0.11

腐植物質の特性評価（起源分析と分子量測定）の項目0.09を取り上げた。得られる結果をため池モデルに当ては0.07

め、ため池の実態や保全に向けた環境理解に役立つことを確かめた。

0.05
020406080
100120retantion time /min

140160180

引用文献及び脚注

0.2

0.18

カラムC
absorbance

0.16

0.14

0.12

0.1

0.08

0.06
020

40

60

80
100
120
retantion time /min

140160180

図１3 ゲルろ過クロマトグラフ（カラム A,B,C)
カラム A: 充填剤 SephadexG15 （分子量 1500 以下）
カラム長 300mm カラム管（外径 350mm 内径 26mm）
カラム B: 充填剤 SephadexG50 （分子量 5000 以下）
カラム長 300mm カラム管（外径 350mm 内径 26mm）
カラム C: 充填剤 SephadexG50 （分子量 5000 以下）
カラム長 160mm カラム管（外径 190mm 内径 14mm）１） 三品佳子・三好直哉・村松隆, 2014,ため池水中の溶存態有機物の分画と同定に関する実験法の開発（II）-腐植物質の物
性 評 価 に 関 す る 簡 易 実 験 法 -, 環 境 教 育 研 究 紀 要 、 16,
pp.1-6,２）三好直哉・三品佳子・村松隆、2013, ため池水中の溶存態有機物の分画と同定に関する実験法の開発,環境教育研究
紀要、15, pp. 49-55
3）例えば、丸田沢ため池（仙台市泉区上谷刈）、荒井堤（岩沼市朝日山公園）のようなため池である。
4)国立環境研究所編,2001,湖沼において増大する難分解性有機物の発生原因と影響評価に関する研究報告, 国立環境研究所特別研究報告, pp 1-39.
5)日本分析化学会北海道支部編,1995,水の分析第４版（化学同人）
6)荒川 豊,北田茂 1994,電量滴定法を用いた COD 測定技術,
衛生工学シンポジウム論文集, 2: 31-36.
7)富栄養化状態により異なる。富栄養化が顕著に現れている場
合は 50ｍL 程度でよい。
8)福島武彦, 中島俊之,今井章雄, 松重一夫, 尾崎則篤, 2001,
EEMS による水中の溶存有機物の特性解析, 水環境学会
誌,24 巻, pp. 686 – 692.

展開水流速 1.0mL /min 展開溶媒 蒸留水
UV モニター λ=220nm Cell : 2mm フローセル
標準試料 1.0mL (ブルーデキストリン（BD6mg/10mL）水溶液
1mL と シ ア ノ コ バ ラ ミ ン （ B12 6.2mg/10mL ） 水 溶 液
0.5mL の混合水溶液 1mL （BD 0.7 ＋ B12 0.4）)― 71 ―