トランスフェクション試薬 製品ガイド
DNA / RNA トランスフェクション

エレクトロポレーション
2019年5月改訂版◆ 低毒性かつ高い導入効率を実現◆ 遺伝子発現解析やタンパク質生産に対応した多彩な製品ラインナップ
ポリマー／リポソーム
（陽電荷）
複合体形成
DNA／RNA（陰電荷）

エンドサイトーシス
細胞質

リソソームとの融合や浸透圧差により膜が開裂

核THE TRANSFECTION EXPERTS

Mirus Bio 社は、新たな in vitroトランスフェクション試薬の開発と販売を目的として、1995 年にウィスコンシン大学の 3 人の研究者、Jon A. Wolﬀ、Vladimir Budker、James E. Hagstromらにより設立されました。設立から現在に至るまで、有機化学者、分子生物学者、細胞生物学者、生物学者などのエキスパートで構成されたチームによる科学的な発見と開発に基き、高効率で細胞毒性の低いトランス
フェクション試薬を提供し続けています。

目次

P2～3

DNA／siRNA／miRNA／RNP を培養細胞へトランスフェクション

P4～7

DNA を培養細胞へトランスフェクション

P7

mRNA／ウイルスRNA／オリゴヌクレオチドを培養細胞へトランスフェクション

P8

DNA／siRNA をマウス生体内へ導入

P9～10

ウイルス産生用

P11エレクトロポレーション★本パンフレットで紹介している実験例は、Mirus Bio 社で取得したデータです（弊社取得データ除く）。

TransIT-X2® Dynamic Delivery System

DNA / siRNA / miRNA / RNP★ 無料サンプル配布中！

● siRNA／miRNA やプラスミド DNA を導入可能● 正常初代細胞など様々な細胞に使用可能● 細胞毒性が低く、培地交換不要● 動物由来成分フリー● 優れたコストパフォーマンス
● Cas9 と sgRNA の複合体（RNP）の導入にも使用可能

製品コード

価格（税別）

0.3 ml容量MIR6003¥23,000

0.75 ml

MIR6004¥58,000

1.5 mlMIR6000¥93,500

1.5 ml×5

MIR6005¥399,000

1.5 ml×10

MIR6006¥713,000

初 代 細 胞 を 含 む 様 々 な 細 胞 に 、D N A お よ び s i R N A ／ m i R N A を 高 効 率 に 導 入 す る た め の 遺 伝 子 導 入 試 薬 で す 。D N A とsiRNA/miRNA のコトランスフェクションにも使用することができます。
また、ゲノム編集を行うための Cas9 タンパク質と sgRNA の複合体（RNP）の導入にも有効であることが確認されました。

■ TransIT-X2® と Cas9 タンパク質の組み合わせによる効率的なゲノム編集
TransIT-X2 および他社ゲノム編集専用トランスフェクション試薬を使用し、Guide-it Recombinant Cas9（製品コード 632641）と sgRNA の複合体（RNP）を ZsGreen1 発現 293T 細胞に導入して ZsGreen1 ノックアウト実験を行った（sgRNA は ZsGreen1 遺伝子に対して設計）。
フローサイトメーターで ZsGreen1 陰性細胞をカウントし、ノックアウト効率を評価した。NT は無処理の細胞を示す。
TransIT-X2 では条件 B および C で 50％以上のノックアウト効率が認められ、他社製品を用いた場合と比較して高いノックアウト効率を示した。

（弊社取得データ）

ノックアウト効率（%）

6050

Cas9 (μg)

40sgRNA (ng)

A
1.5

B
1.5

C
1.5

D
0.5

E
1.5

150

300

600

125

300

30
20
10
0

A

B

40.3%
P2

53.4%
P3

P2

ZsGreen1-2-

C

TransIT-X2

D

51.8%
P3

P2

他社専用試薬

P2

NT
2.7%

8.1%

7.4%
P3

E

P3

P2

P3

P2

P3

※グラフの値は n＝2 の平均値を表示。 条件 D は他社専用試薬のプロトコール通り

Mirus 社 トランスフェクション試薬 製品ガイド

■ TransIT-X2® Dynamic Delivery System は、様々な細胞で高い遺伝子発現レベルを示します。
TransIT-X2® Dynamic Delivery System

TransIT-X2 または他社試薬を用いてルシフェラーゼ発現プラス
ミド DNA を各細胞にトランスフェクションし、24 時間後にルシフェラーゼアッセイを行った。
41 種類の細胞のうち 36 種類の細胞で、TransIT-X2 は他社試薬と同等以上の結果を示した。‡を付けた細胞では、比較した試薬間で 2 倍以上の発現量の差が見られた。

A549‡
AsPC-1
BHK-21‡
BJ‡

HCC38
HEK 293‡
HMEC（epithelial）
HUVEC‡

Immortalized Keratinocytes‡
FreeStyle™ 293-F
AU565
MDA-MB-468‡
BxPC-3
MDCK‡
COS-7
NHDF‡
HeLa
DI-TNC1
NIH3T3
HCT 116
DU-145
L929‡
MCF-7
HepG2‡
LNCaP‡
MDA-MB-231
HCC1143‡ PC-12
PC-3
RAW 264.7
T47D‡
BT-20
Caco-2C2C12CFPAC-1‡
CHO-K1‡

28

8

他社試薬

5

Keratinocytes‡
MDA-MB-453
Neuro-2a
SH-SY5Y
SK-N-MC■ 各種株化細胞および初代細胞へのトランスフェクションが高効率
10090

T r a n s I T - X 2 を 用 い て 、A 5 4 9 、C H O - K 1 、H e p G 2 、M D C K 、
LNCaP、PC-12、ヒト乳腺上皮細胞（HMEC）および正常ヒト皮膚線
維芽細胞（NHDF）に EGFP 発現プラスミド DNA をトランスフェク
ションした。
トランスフェクションは 96 ウェルプレートで培養した各細胞に対して 0.2～0.4 μl の本試薬と 0.1 μg の DNA（試薬 ： DNA 比＝
2：1 または 3：1、4：1）を用いて行い、48 時間後にフローサイト
メーターを用いて測定を行った（n=3）。

EGFP Positive（%）

80
70
60
50
40
30
20
10
0

A549 CHO-K1 HepG2 MDCK LNCaP PC-12 HMEC* NHDF**indicates primary cell types

8,000,000

50

7,000,000

45
40

6,000,000

35

5,000,000

30

4,000,000

25

3,000,000

20
15

2,000,000

10

1,000,000

5

0

2:1

3:1

4:1

5:1

1.5:1

TransIT-X2

3:1

4:1

5:1

1.5:2:1 2:2:1

他社製品 A

3:2:1

他社製品 B0

4:2:1■ 細胞傷害性（%）■ Luciferase（RLU）■ 高い遺伝子発現効率と低い細胞毒性（他社試薬との比較）
TransIT-X2 または他社トランスフェクション
試薬 A、B を用いて、ヒト肺胞基底上皮腺癌細胞（A549）にルシフェラーゼ発現プラスミド
をトランスフェクションした。
トランスフェクションには 96 ウェルプレートで培養した細胞と 0.1 μg のプラスミド DNA
を使用した。横軸に試薬：DNA 比を示す。
ルシフェラーゼ発現（棒グラフ）と LDH 活性レベル（折れ線：細胞傷害性）はトランスフェク
ション 24 時間後に測定した。
RLU：Relative Light UnitsCA■ siRNA のノックダウン効率（他社試薬との比較）
100

GAPDH および AHA1 に対する siRNA とネガティブコントロール
siRNA を TransIT-X2 または他社試薬 A を用いて正常ヒト皮膚線維芽細胞（NHDF）にトランスフェクションした。
トランスフェクションは、6 ウェルプレートで培養した細胞に対して、
4 μl の TransIT-X2 または 6 μl の他社試薬 A と 25 nM の siRNA を使用して行った。
48 時間後、リアルタイム PCR にて 18S rRNA に対する GAPDH および AHA1 の相対発現量を測定し、ネガティブコントロールによりノーマ
ライズを行った。

Knockdown（%）

90
80
70
60
50
40
30
20
10
0

TransIT-X2
siRNA Target

他社製品 AGAPDHTransIT-X2

他社製品 A

AHA1

Mirus 社 トランスフェクション試薬 製品ガイド-3-

TransIT®-LT1 Transfection Reagent

DNA● 様々な細胞に DNA を高効率に導入可能● 細胞毒性が低く、培地交換は不要● 豊富な実績あり● iPS 細胞へのリバーストランスフェクションにも使用可能★ 無料サンプル配布中！

製品コード

価格（税別）

0.4 ml容量MIR2304¥36,000

1 ml

MIR2300¥55,000

1 ml×5

MIR2305¥222,000

1 ml×10

MIR2306¥415,000

一般的な
操作フロー

1 本のチューブで試薬と DNA を混合し（15～30 分）
、
完全培地
（血清含）
で培養している細胞（50～70% コンフルエントが望ましい）に添加するだけです。
培地交換の必要はありません。

■ 高い発現効率と低い細胞毒性402,500,000

Luciferase（RLU）

2,000,000

30
25

1,500,000

20
1,000,000

15
10500,000

細胞傷害性（%）

35TransIT-LT1 と他社トランスフェクション試薬を用いて、HepG2 細胞にルシフェラーゼ発現プラスミドをト
ランスフェクションした。
トランスフェクションは、96 ウェルプレート培養した細胞と 0.1 μg のプラスミドを使用して行った。横軸に、試薬：DNA 比を示す。
ルシフェラーゼの発現（棒グラフ）と LDH 活性レベル（折れ線：細胞傷害性）をトランスフェクション 24 時間後に
測定した。

5
0

2:1

細胞
のみ

3:1

4:1

TransIT-LT1

1.5:1

3:1

5:1

他社製品 A

1.5:1:1 3:1:1 5:1:1 1.5:1 2.5:1 3.5:1

他社製品 C0

他社製品 D■ ヒト iPS 細胞への遺伝子導入例
1.3×106個のiPS細胞にZsGreen発現プラスミドをリバーストランスフェクションにより導入した。48時間後に位相差【A】および蛍光【B】顕微鏡にて観察を行った。フローサイトメーターによる解析【C】も同時に実施した。99.55%の細胞でZsGreenの発現が確認できた。
【A】

【B】

【C】 682

Count

512

99.55%

341
171
0
101

操作フロー

102

103

104 105 106
1-AFL

リバーストランスフェクション:「核酸 - トランスフェクション試薬複合体」に細胞を添加①核酸 - トランスフェクション
試薬複合体を培養器へ②細胞を添加・細胞がシングルの状態
・dish底面に接着していない⇒複合体を取り込む膜表面積が大きい

複合体
細胞◆ リバーストランスフェクションの実験プロトコールの詳細は、弊社ウェブカタログを参照してください。

-4-

107

Mirus 社 トランスフェクション試薬 製品ガイド

TransIT®-293 Transfection ReagentDNA★ 無料サンプル配布中！

● HEK 293 細胞に最適化したトランスフェクション試薬● 75～85％の遺伝子導入効率を実現● 組換えレトロ／レンチウイルスやアデノ随伴ウイルス作製に使用可能

TransIT®-Insect Transfection Reagent

製品コード

価格（税別）

0.4 ml容量MIR2704¥38,000

1 ml

MIR2700¥60,000

1 ml×5

MIR2705¥257,000

1 ml×10

MIR2706¥473,000DNA● Sf9、High Five、S2 など幅広い昆虫細胞株へのトランス
フェクションが可能● 高いバキュロウイルス産生能● 培地交換不要の簡便プロトコール● 動物由来成分不含★ 無料サンプル配布中！

製品コード

価格（税別）

0.4 ml容量MIR6104¥24,000

1 ml

MIR6100¥48,000

1 ml×5

MIR6105¥197,000

1 ml×10

MIR6106¥363,000

ベクター調製が短時間で簡単！発現の難しいタンパク質の収量アップに！

flashBAC™ バキュロウイルス発現システム● プラーク精製が不要なワンステップの発現ベクター構築● ウイルスストックが短期間で取得可能（7 ～ 10 日）
製

品

名

量

製品コード

価格（税別）

flashBAC™ Baculovirus
Expression System

基本システム。
AcMNPVのキチナーゼ遺伝子を欠損することにより、タンパク質発現や分泌を改善。
ほとんどの核や細胞質タンパク質の発現に。

特

長

5回

MIR6115¥49,000

flashBAC™ ULTRA Baculovirus
Expression System

キチナーゼ、
カテプシン、
p10、p74、p26遺伝子を欠損させた最新型ﬂashBACベクター。
核、
細胞質、
膜、
分
泌タンパク質で発現が困難なタンパク質も発現可能

5回

MIR6135¥132,000■ その他、細胞株に特化したトランスフェクション試薬
製品

名適用できる細胞株や細胞タイプ

導入効率

TranslT®-BrCa Transfection Reagent
MCF-7, MDA-MB-231,
MDA-MB-453, MDA-MB-468,
T47D

40-80%

TranslT®-CHO Transfection Kit
CHO-K1 and related

50-60%

TransIT-HeLaMONSTER Transfection Kit®

HeLa and related

50-60%

TranslT®-Jurkat Transfection Reagent
Jurkat, Jurkat-E6, RAW264.7,
THP-1, K562, andother lymphoid cell lines

10-25%

TranslT -Keratinocyte Transfection Reagent®

Immortalized Keratinocyte

20-30%

容★ 無料サンプル配布中！

DNA
容

量

製品コード

価格（税別）

0.4 mlMIR5504¥40,000

1 ml

MIR5500¥62,000

1 ml×5

MIR5505¥262,000

1 ml×10

MIR5506¥504,000

0.4 mlMIR2174¥41,000

1 ml

MIR2170¥64,000

1 ml×5

MIR2175¥278,000

1 ml×10

MIR2176¥515,000

0.4 mlMIR2904¥41,000

1 ml

MIR2900¥64,000

1 ml×5

MIR2905¥278,000

1 ml×10

MIR2906¥515,000

0.4 mlMIR2124¥41,000

1 ml

MIR2120¥64,000

1 ml×5

MIR2125¥280,000

1 ml×10

MIR2126¥515,000

0.4 mlMIR2804¥40,000

1 ml

MIR2800¥62,000

1 ml×5

MIR2805¥263,000

1 ml×10

MIR2806¥505,000

Mirus 社 トランスフェクション試薬 製品ガイド-5-

TransIT-PRO® Transfection Kit

DNA★ 無料サンプル配布中！

● 浮遊培養の CHO 細胞、HEK 293 細胞用● 少ない条件検討で再現性の高いタンパク質発現を実現● 優れたコストパフォーマンス

容

量

製品コード

価格（税別）

1 ml

MIR5700¥67,500

10 ml

MIR5760¥535,000■ TransIT-PRO® Transfection Kit を使用したヒト IgG1 の高発現例【A】400浮遊培養 CHO 細胞での高タイター抗体生産

Day 3

Human Fc (µg/L)

Day 5

TransIT-PRO ： PRO Boost Reagent ： DNA（1：1：1）、25 kDa
linear PEI ： DNA（6：1）
、
FreeStyle MAX ： DNA（1：1）の各条件で、
FreeStyle CHO-S 細胞に一過性に遺伝子導入してヒト IgG1 を産生させた。
プラスミド DNA（CMV プロモーター下で発現）は 1 ml 培養液につき1 μg を使用し、0.5×106 細胞 / ml でトランスフェクションを行った。

Day 7

300

200

【A】3、5、7 日後に培養上清を human IgG-Fc sandwich ELISA により測定

100【B】7 日後の上清をウェスタンブロット法により解析。S1、S2、S3 はIgG スタンダード 1.6 mg/L、3.2 mg/L、6.3 mg/L を示す。

0
TransIT-PRO＋
PRO Boost Reagent【B】

ー

25 kDa linear PEI

PRO PEIFSS1FreeStyle MAX

S2TransIT-PRO を用いた遺伝子導入により、FreeStyle MAX を用いて遺伝子導入した場合と同等以上のヒト IgG1 高発現が認められた。

S3

hlgG1

優れたコストパフォーマンスでタンパク質大量生産に最適

CHOgro® Expression System

DNA● 浮遊培養の CHO 細胞用● 条件検討不要で高いタンパク質発現が可能● トランスフェクション試薬、細胞培養用培地などを含むオールインワン● 全てのコンポーネントが動物由来成分フリー● 優れたコストパフォーマンス

■ 浮遊 CHO 細胞において高密度培養が可能
80

10

70
60

8

50
6

40
30

4

20

2

Viability（%, dotted lines）

Million cells / ml（solid lines）

90

12

0

CHOgro Growth
FreeStyle CHO Growth
CHOgro Viability
FreeStyle CHO Viability

100

14

浮遊 CHO 細胞（FreeStyle CHO-S cells）を CHOgro Expression
Medium または FreeStyle CHO Expression Medium に、細胞密度0.5×106 cells/ml にて 40 ml 分培養した（125 ml フラスコ使用）。
細胞数のカウントと細胞生存数（ヨウ化プロピジウム染色による）の計
測結果を左図に示す。

10
0

1

製

2

品

3

4

5

Day post seeding

名

6

7

8

0

内

CHOgro® Expression
System容・CHOgro Expression Medium
・CHOgro Complex Formation Solution
・Poloxamer 188 Solution
・L-Glutamine
・TransIT-PRO Transfection Reagent

容
1 L×2
100 ml100 ml100 ml
1 ml

量

製品コード

価格（税別）

1 Kit

MIR6260¥100,000※細胞とタンパク質発現ベクターは別途ご準備ください。

-6-

Mirus 社 トランスフェクション試薬 製品ガイド

DNA★ 無料サンプル配布中！

● トランスフェクションが困難な細胞や初代細胞などにも高効率で導入● 細胞毒性が低く、培地交換は不要● 動物由来成分フリー

容■ 初代ヒト小気道上皮細胞への高効率導入

製品コード

価格（税別）

0.4 ml量MIR5404¥36,500

1 ml

MIR5400¥72,500

1 ml×5

MIR5405¥315,000

1 ml×10

MIR5406¥580,000

900,000

TransIT-2020 を用いて、初代ヒト小気道上皮細胞（HSAEpic）に GFP 発現プラスミドをトランスフェク
ションし、24 時間後に蛍光顕微鏡を用いて GFP の発現を確認した。

70■ 高い発現効率と低い細胞毒性
TransIT-2020 と他社トランスフェクション試薬を用いて、ヒト臍帯静脈内皮細胞（HUVEC）にルシフェラーゼ発現プラスミドをトランスフェクションした。
トランスフェクションは、96 ウェルプレート培養した細胞と 0.1 μg のプラスミドを使用して行った。横軸に、試薬：DNA 比を示す。
ルシフェラーゼの発現（棒グラフ）と LDH 活性レベル（折れ線：細胞傷害性）をトラン
スフェクション 24 時間後に測定した。

TransIT®-mRNA Transfection Kit

Luciferase（RLU）

800,000

60

700,000

50

600,000
500,000

40

400,000

30

300,000

20

200,000

細胞傷害性（%）

TransIT®-2020 Transfection Reagent

10

100,000
0

2:1

3:1

4:1

1.5:1 3:1

5:1

1.5:1:1 3:1:1 5:1:1

TransIT-2020

他社製品 A

他社製品 C

量

製品コード

0

mRNA / viral RNA● mRNA やウイルス RNA など、様々な RNA の導入が可能● 低い細胞毒性● 血清培地も使用可能で、トランスフェクション後の培地交換が不要

TransIT-TKO® Transfection Reagent

容

価格（税別）

0.4 mlMIR2225¥65,000

1 ml

MIR2250¥113,000

1 ml×5

MIR2255¥472,000

1 ml×10

MIR2256¥889,000

容

製品コード

価格（税別）

0.4 mlMIR2154¥48,000

1.5 mlMIR2150¥74,000

1.5 ml×5

MIR2155¥325,000

1.5 ml×10

MIR2156¥598,000siRNA● 短い二本鎖 RNA（siRNA）の導入が可能● siRNA とプラスミド DNA の co-transfection が可能● 低い細胞毒性● 血清培地も使用可能で、トランスフェクション後の培地交換が不要

量【A】Hela 細胞に TransIT-TKO を用いて、Label IT siRNA
Tracker で蛍光標識した二本鎖 siRNA を導入した（0.5 nM/wellin 12 well plate）。24 時間後に細胞を固定し、共焦点顕微鏡（Zeiss LSM 510）で観察した。

90
80
70
60
50
40
30
20
10

C
XR

Fl
uo

C

y5

re
sc
ei
n
ho
da
m
in
e

0
y3

赤：Alexa Fluor 546 Phalloidin を用いて actin を染色
青：TO-PRO-3 を用いて核を対比染色
緑：Label IT siRNA Tracker Fluorescein-labeledsiRNA duplexes

100

C

【B】

T
Re r a n
ag s I T
en -T
t A KO
U lon
nl
e
ab
el
ed

【A】

Target Gene Expression（%）■ 標識 siRNA を用いた効率的な導入とノックダウン効果

Labeled siRNA【B】CHO-Luc 細胞（ﬁreﬂy luciferase 安定発現株）へ TransIT-TKO を用いて
ﬁreﬂy luciferase に対する siRNA を導入した。
siRNA はそれぞれラベルなし、Label IT siRNA Tracker Cy3、
Cy5、
Fluorescein または CX-Rhodamine で標識したものを用いた。
グラフは、5 nM anti-ﬁreﬂy luciferase siRNA を導入
して 24 時間後の ﬁreﬂy luciferase の発現率を示す。
Mirus 社 トランスフェクション試薬 製品ガイド-7-

TransIT® Hydrodynamic Delivery System

DNA / siRNA● マウスの尾静脈に注射するだけの簡単な手法で、マウス生体内のさまざまな組織に核酸（DNA、siRNA）
を効率よく、再現性良く導入可能● 肝臓で高い発現が期待できるほか、脾臓、腎臓、肺、心臓などの実質細胞への導入も可能
製

品

名

導入可能な核酸

特

徴

容

量

製品コード

価格（税別）

TransIT®-QR Hydrodynamic
Delivery Starter Kit

siRNA、DNA

尾静脈注射後のマウスの心拍出量の減少を最小限にし、マウスを迅
速に回復

10回

MIR5210¥25,500

TransIT®-EE Hydrodynamic
Delivery Starter Kit

DNA

上記製品に比べて約2～3倍の高い遺伝子発現レベルだが、マウスの回復に要する時間がやや長い。

10回

MIR5310¥27,500

45,000Total Luciferase Activity/Organ（ng）

Total Luciferase Activity/Liver（ng）■ 各臓器への導入効率の比較
40,00035,00030,00025,00020,00015,00010,0005,000
0TransIT-QR

10TransIT-EE

TransIT-EE と TransIT-QR Hydrodynamic Delivery
Solution を用いて、ルシフェラーゼ遺伝子を搭載した発現プ
ラスミド DNA（pCIluc、CMV プロモーター使用）10 μg をマ
ウスの尾静脈から注射し、24 時間後の各臓器（肝臓、脾臓、肺、心臓、腎臓）におけるルシフェラーゼ活性を測定した。

8
6
4
2
0

SpleenLung

TransIT-QR

Heart

KidneyTransIT-EE

in vivo 遺伝子導入用ベクター

pLIVE™ Vector シリーズ
● マウスの尾静脈注射により、マウス肝臓での長期間の発現が可能● 2 種類のコントロール用ベクターを用意
製品

名pLIVE™ Vector
pLIVE™ Vector/lacZ Control Vector Kit
pLIVE™ Vector/SEAP Control Vector Kit
pLIVE™ Vector Complete System (All 3 Vectors)

容

量

製品コード

価格（税別）20 μg

MIR5420¥77,000

各20 μg

MIR5520¥98,000

各20 μg

MIR5620¥98,000

各20 μg

MIR5320¥122,000■ pLIVE™-lacZ Vector を用いたマウス肝臓組織のβ-galactosidase 染色【A】【B】
p L I V E - l a c Z V e c t o r を 、T r a n s I T - Q R
Hydrodynamic Delivery Solution( 製品コード
MIR5240) を用いて ICR マウスの尾静脈に注射した 。注 射 2 4 時 間 後 の 肝 臓 組 織 を 用 い て 、β - G a l
Staining Kit を用いて X-Gal で染色した。細胞は、ヘマトキシリンおよびエオシン Y でそれぞれ核およびサイトプラズムの対比染色を行った。
【A】pLIVE-lacZ Vector を導入した組織【B】pLIVE Vector（negative control）を導入した組織の染色結果-8-

Mirus 社 トランスフェクション試薬 製品ガイド

レンチウイルス産生用TransIT -Lenti Transfection Reagent®

● 機能性レンチウイルス粒子の高生産● 培地交換不要の簡便プロトコール● 動物由来成分不含★ 無料サンプル配布中！

製品コード

価格（税別）

0.3 ml容量MIR6603¥23,000

0.75 ml

MIR6604¥55,000

1.5 mlMIR6600¥87,000

1.5 ml×5

MIR6605¥377,000

1.5 ml×10

MIR6606¥690,000■ 高ウイルスタイター
140,000,000

6 ウェルプレート中の接着性
293T/17 細胞に GFP 発現レンチウ
イルスベクターとパッケージング Mix
を、TransIT-Lenti Transfection
Reagent、他社製品 A、他社製品 B、
25 kDa ポリエチレンイミン（PEI）また は リ ン 酸 カ ル シ ウ ム 法（ C a P O 4ppt）によりコトランスフェクションした。培養上清を 0.45 μm フィルターで濾過後、293T/17 細胞への感染によりウイルスタイターを測定した。感染 72 時間後に GFP 発現細胞をフロー
サイトメーターにより測定した。

Functional Titer（TU/ml）

120,000,000

100,000,000

80,000,000

60,000,000

40,000,000

20,000,000

0TransIT-Lenti

他社製品 A

他社製品 B

25kDa PEICaPO 4 ppt■ 作製レンチウイルスベクターの導入効率
【A】

【B】

35

GFP Positive（%）

30
25
20
15
10
5
0

TransIT-Lenti
Generated Virus

他社製品【A】TransIT-Lenti Transfection Reagent または他社製品を使用し、GFP 発現レンチウイルスベクターから組換えレンチウ
イルス粒子を作製した。パッケージング細胞の培養上清を 0.45
μm フィルターでろ過後、凍結した。
96 ウェルプレートで培養した運動神経細胞へ、各 1 μl のレンチウイルス溶液で感染した。
72 時間後に GFP 陽性率をフローサイトメーターで測定した。

【B】35 mm ディッシュで培養した運動神経細胞に、TransIT-Lenti
Transfection Reagent を用いて作製したレンチウイルスを感染した。
72 時間後に蛍光顕微鏡で観察した。

高力価レンチウイルスを調製するためのパッケージング試薬【 Lentiviral High Titer Packaging Mix 】とTransIT®-Lenti Transfection Reagent をセットで用いた際のモニター結果を、
弊社ウェブサイトで公開しています。
こちらも是非ご覧ください。
レンチウイルスベクター モニター結果
検索

Mirus 社 トランスフェクション試薬 製品ガイド-9-アデノ随伴ウイルス産生用TransIT -VirusGEN® Transfection Reagent● アデノ随伴ウイルス（AAV）、レンチウイルスを高タイ
ターで産生● HEK293T 細胞培養システム（接着培養および浮遊培養）に対応● 幅広い培養スケールで使用可能

容■ HEK293T 細胞（接着性および浮遊性）における AAV 産生
AAV Production in Suspension 293-F Cell Culture【B】
Functional Titer（TU/ml original culture）

Functional Titer（TU/ml original culture）【A】5.E + 06
4.E + 06

3.E + 06

2.E + 06

1.E + 06

0.E + 00

TransIT-VirusGEN 他社製品 A

他社製品 B★ 無料サンプル配布中！

量

製品コード

価格（税別）

0.3 mlMIR6703¥24,000

0.75 ml

MIR6704¥57,000

1.5 mlMIR6700¥90,000

1.5 ml×5

MIR6705¥390,000

1.5 ml×10

MIR6706¥710,000

トランスフェクション試薬の比較
AAV Production in Adherent 293T/17 Cell Culture

4.E + 07

3.E + 07

2.E + 07

1.E + 07

0.E + 00

25 kDa PEITransIT-VirusGEN 他社製品 A

他社製品 B

25 kDa PEITransIT-VirusGEN Transfection Reagent（reagent：DNA（vol：wt）＝2：1）、
他社製品 A、他社製品 B、
25 kDa ポリエチレ
ンイミン（PEI）を用いて、浮遊培養した FreeStyle 293-F 細胞（FreeStyle F17 Medium で培養）
【 A】、または接着培養した293T/17 細胞【B】に pAAV-hrGFP、
pAAV-RC、
pAAV-Helper（1：1：1 ratio, 1.5 μg/ml, Agilent Technologies）
をトラン
スフェクションした。
抽出したウイルスを HT1080 細胞に感染させ、48 時間後に GFP の発現をフローサイトメーターにより測定した。
Functional titer は GFP 陽性細胞が 20％未満となるウイルス希釈率より求めた。
エラーバーは 3 ウェルの標準偏差を示す。

■ AAV 産生時の培養スケールの検討
7.E + 06
6.E + 06
5.E + 06
4.E + 06
3.E + 06
2.E + 06
1.E + 06
0.E + 00

Culture Volume:
Culture Vessel:【B】AAV Production in Adherent 293T/17 Cell Culture
Functional Titer（TU/ml original culture）

Functional Titer（TU/ml original culture）【A】AAV Production in Suspension 293-F Cell Culture

3.5.E + 07
3.E + 07
2.5.E + 07
2.E + 07
1.5.E + 07
10.E + 06
5.E + 06
0.E + 00

2 ml
100 ml6-well plate shaking 250 ml flask shaking

Culture Volume:
Culture Vessel:

2 ml
6-well plate

10 ml
10 cm dish

異なる培養容器、培養液量で浮遊培養した FreeStyle 293-F 細胞（FreeStyle F17 Medium で培養）
【A】、または接着培養した293T/17 細胞【B】に、TransIT-VirusGEN を用いて pAAV-hrGFP、pAAV-RC、pAAV-Helper（1：1：1 ratio, 1.5 μg/ml,
Agilent Technologies）
をトランスフェクションした（reagent：DNA（vol：wt）＝2：1）。
抽出したウイルスを HT1080 細胞に感染させ、48 時間後に GFP の発現をフローサイトメーターにより測定した。
Functional Titer は、
GFP 陽性細胞が 20％未満となるウイルス希釈率より求めた。
エラーバーは 3 ウェル／フラスコ／ディッシュの標準偏差を示す。

-10-

Mirus 社 トランスフェクション試薬 製品ガイド

Ingenio® Electroporation Kit

DNA / RNA / RNP● 遺伝子導入困難な細胞への高効率なエレクトロポレーションを実現● キュベット式エレクトロポレーション装置のほとんどに適合● 優れたコストパフォーマンス

Ingenio® Electroporation Kit は、核酸導入が困難な哺乳類細胞、特に初代細胞に対して、高い核酸導入効率と低毒性を実現する独自のエレクトロポレーション用試薬です。キットには 0.2 cm または 0.4 cm のキュベット、Cell Dropper が含まれます。

12-72 hours
細胞を採取して数を計測。
遠心分離し、Ingenio エレクト
ロポレーション試薬に再懸濁DNAを添加して、DNAと細胞の混合液をキュベットに移す

製品

エレクトポレーション後、すぐに細胞を培地に移す

12 ～ 72 時間培養

アッセイを行う★ 無料サンプル配布中！

名

容Ingenio Electroporation Kit with 0.2 cm cuvettes
Ingenio® Electroporation Kit with 0.4 cm cuvettes
Ingenio® Electroporation Solution
®

量

製品コード

価格（税別）

50回

MIR50115¥69,000

50回

MIR50116¥69,000

50回

MIR50114¥42,000

Ingenio Electroporation Kit は、Lonza 社（amaxa Nucleofector Device）、Bio-Rad 社（Gene Pulser Xcell Electroporator）、BTX 社などが販売するキュベット式エレクトロポレーション装置に適合します。詳細はウェブカタログをご覧ください。

■ ヒト iPS 細胞への高効率エレクトロポレーション
【B】

344

Count

【A】

458

【C】

85.38%

229

115

0
101

102

103

104

105

106

107

Green-A

2×106 個の iPS 細胞を用いて、Ingenio Electroporation Kit と Amaxa Nucleofector II 装置によりプラスミド DNA の導入を行った。
8 μg ZsGreen 発現プラスミド（Clontech）を導入した後、0.33×106 細胞／well となるように 6 ウェルプレートへ播種した。
24 時間後に位相差【A】と蛍光【B】顕微鏡観察を行った。さらにフローサイトメーター解析【C】も同時に行った（黒ライン：非導入細胞、緑ライ
ン：トランスフェクション細胞）。
85.38％の細胞で ZsGreen の発現が確認できた。

【関連製品】
製品

名

容

核酸標識試薬Label IT® siRNA Tracker™ Fluorescein Kit without
Transfection Reagent
Label IT® Plasmid Delivery Control, Cy®3
Label IT Cy 5 Labeling Kit
®

®

量

製品コード

価格（税別）

50 μg用MIR7216¥64,000

10 μg

MIR7904¥29,000

1 Kit（25 μg用）

MIR3725¥45,000

100 μg632641¥20,000

1 Kit

Y00305¥350,000

1 Kit

Y30010¥59,800

ゲノム編集
Guide-it™ Recombinant Cas9 (Electroporation-Ready)
iPSC 関連
Cellartis® human iPS cell line 18 (ChiPSC18) Kit
Cellartis DEF-CS™ 500 Culture System
®

ラ 営 使

ラ 製品のご購入に際して、ライセンス確認書のご提出が必要となります。
営 営利施設の場合、ご購入前にライセンス（有償）を取得する必要があります。詳細はお問い合わせください。
使 製品のご購入に際して、「Cellartis human iPS cell line の使用に関する確認書」のご提出が必要となります。
Mirus 社 トランスフェクション試薬 製品ガイド -11-

トランスフェクション・エレクトロポレーション試薬のサンプル評価をご紹介♪
◆ 使用した結果はどうでしたか？

◆ 評価いただいた感想やデータなど（一例）

TransIT-X2®

TransIT®-LT1
期待以上だった

うまくいかな
かった

18％

28％

うまくいかなかった

T 大学 O 様
製品名（製品コード）期待以上だった

TransIT-Lenti Transfection Reagent（MIR6610）11％25％

Q1. 導入した核酸は？

期待通りだった

期待通りだった

54％

64％

plasmid DNA
Q2. 導入した細胞は？
Lenti-X 293T Cell Line

TransIT®-Lenti

うまくいかなかった

期待以上だった

8％

うまくいかなかった

期待以上の結果だった
期待以上だった

21％
期待通り
だった

Q3. 評価の結果はどうでしたか？

TransIT®-293

Q4. 今後、採用しますか？

21％

採用する方向で検討する

42％

Q5. 使ってみた感想や評価結果をお願いします

期待通りだった50％

他社製品2種と比較した結果、
高力価のレンチウイルスを得ることができた。
結果：レンチウイルスタイターを示す（複数の実験結果の平
均値）
。

58％

Ingenio ® Electroporation Kit
with 0.2 cm cuvettes

TransIT-HelaMONSTER ®

25％

期待通りだった

期待通りだった

75％

63％

感想やデータをウェブページで随時更新しています！

『遺伝子導入試薬TransIT-Lenti

ReagentA

ReagentB

1.93.E+07

2.13.E+0.6

4.51.E+0.6

簡単な実験の流れ：Lenti-X 293T Cell Line へTransIT-Lenti または、他社製品を用いてレンチウイルス
ベクターとパッケージングベクターをコトランスフェク
ションし、培養上清を 0.45 μm フィルターで濾過後、濃縮し、qPCR にて測定した。

13％

25％

オンラインツール

Average

期待以上だった

うまくいかなかった

うまくいかなかった

トランスフェクション サンプル評価

検索

ウェブサイトのタイトル（下記の青字）で検索、もしくは、以下の QR コードを読み取り、アクセスしてください。

選択ガイド（Mirus 社）』

実験目的別に、標的細胞に最適な試薬がぱっとわかる表を掲載！
無料サンプルお申込みフォームともリンクしています。

Search Reagent Agent ®
The Mirus Transfection Database『TransIT® シリーズ 無料サンプルお申込みフォーム』

Enter Cell Type:

小容量サイズを無料でお試しいただけます。
複数の種類のお申込みも可能です。

『遺伝子導入試薬

検索ツール

Select Nucleic Acid:

Reagent Agent』

SHOW RECOMMENDATIONS

細胞と導入する核酸の種類を選択して入力すれば、推奨試薬を表示します。
※TransIT シリーズの各製品ページからご利用いただけます。

・本パンフレットで紹介した製品はすべて研究用として販売しております。
ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。
また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
・タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
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・本パンフレットに記載された社名および製品名は、特に記載がなくても各社の商標または登録商標です。
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