EasyConvenient

ATTO EzLabel FluoroNeo でより簡単 ＆ 便利に！

仕様タ ン パ ク 質
蛍光標識キット

キ ッ ト 内 容

WSE-7010 (2332333)

タンパク質蛍光標識キット

EzLabel FluoroNeo イージーラベルフルオロネオ①標識用緩衝液 (SDS 含 ) Sample buffer (5x): 12 mL②蛍光ラベル化剤 Labeling reagent: 10 mg③還元剤 Reducing agent (DTT): 300 mg④分子量マーカー MW marker : 600 μ L

イ ー ジ ラ ベ ル

WSE-7010 EzLabel FluoroNeo（220, 116, 97, 66, 45, 30, 20.1, 14.4kDa）⑤タンパク質抽出溶液
容量2,000 サンプル分

フ ル オ ロ ネ オ

RIPA Lysis buffer: 10 mL

１サンプル（20 μ L）に 5 μ L 使用時

ア プ リ ケ ーション

SDS-PAGE、2 次元電気泳動、ウエスタンブロッティング、免疫沈降 等

保存

冷凍 -20℃

価格33,800 円

１年 （未開封時）～電気泳動をカンタンに！！～WSE-7010 EzLabel FluoroNeo
技術資料「ゲル染色フリー」でもっと時短！
もっと簡単！

染脱色不要／時間短縮！電気泳動後のゲルを染色せずにすぐ検出！
高感度検出／簡単操作！サンプルバッファーを変えるだけで蛍光標識ＯＫ！

関連製品

染脱色不要
EzLabel FluoroNeoで標識したタンパク質は、電気サンプルの加熱処理に泳動が終了したらすぐに検出が可能です。ゲルの染色脱色操作は不要です。廃液も出ません。

ブロックインキュベーター
WSC-2610 MyMiniBLOCK (マイミニブロック)
温度範囲：室温＋5℃~100℃
ブロック：0.5mL/1.5mLチューブ用など各種
価格：本体59,800円 ブロック：14,800円

小型・省スペース
加温タイプのブロックインキュベータ
ブロック各種あり

高感度検出

青色(Blue)LEDを使用して検出すると銀染色と同等以上の高感度かつ定量的に検出が可能です。

EzLabel FluoroNeoの高感度検出に

LED照射装置
WSE-5510/5520 VariRaysⅠ/Ⅱ (バリレイズⅠ/Ⅱ）
LED光源：青465nm 半値幅30nm
緑520nm 半値幅40nm
赤630nm 半値幅20nm
価格：220,000円
電源BOX：20,000円

EzLabel FluoroNeoの撮影にゲルドキュメンテーションシステム
WSE-5300A Printgraph CMOS I (All In One)
タッチパネル制御、ゲル撮影装置
カメラ：高感度モノクロCMOSカメラ
データ：6メガピクセル
無線LAN機能搭載
励起光源：紫外線照射装置、CyanRed光源
白色光源：白色透過光源
プリンタ：感熱プリンタ
価格：1,705,000円

１台で3種類のLEDを搭載
落射式で膜の検出も可能
EzLabel FluoroNeo、SYBR dye、
SYPRO dyeなど青色(Blue)LEDで励起可能な各種蛍光物質の検出に対応可能

簡単な操作

タンパク質の蛍光標識は、電気泳動サンプル処理
時にラベル化試薬を加えて加温するだけで完了します。

Webページ「蛍光染色各種撮影データ」

1サンプル＝17円

EzLabel FluoroNeo １キットで2,000サンプルのタッチパネル操作・制御する、高解像度ゲル撮影装置です。
一体型でスマートに、操作性もUP。各種光源やプリンターも付属。

※ EzLabel FluoroNeo の撮影・比較データをアトーWebサイトにて公開中！ご参照ください。 https://www.atto.co.jp※ アトーでは、SDS-PAGEをはじめとする各種電気泳動用装置、ブロッティング装置、試薬、消耗品等を取り揃えています。
電気泳動やウエスタンブロッティング、ゲル撮影などに関するお問い合わせは弊社までご連絡ください。
ご用命は下記販売特約店までお問い合わせください。

各製品の詳細はアトー株式会社までお問い合わせください。

蛍光標識が可能です。１サンプルあたりのコストは約17円です。（標準的操作において）

写真：タンパク質溶液をEzLabel FluoroNeoで標識後、SDS-PAGE、BlueLEDで検出

製品概要「EzLabel FluoroNeo」はタンパク質溶液と混ぜて加温するだけで、タンパク質中のアミノ基を蛍光標識します（37~95℃で反応）。電気泳動用調製液（サンプルバッファー）を本品に置き換えることで蛍光標識が可能です。１サンプルあたりの価格は「約 16 円」と、染色試薬同様にリーズナブルにご提供します。
電気泳動後に BlueLED あるいは UV で励起すれば、すぐに検出・撮影できます。ゲルの染色・脱色操作は不要です。BlueLED による励起ならガラスプレートからゲルを取り出さずに検出でき、銀染色レベルの高感度検出が可能です。検出（観察）後は、そのままウエスタンブロット解析（膜上での検出、抗体との反応）にも利用可能です。
「EzLabel FluoroNeo」によるタンパク質の蛍光標識は、バンドの移動度にほとんど影響しません。

2023 年価格改定版
2023.9原理・使用方法

データ例

蛍光標識・検出の原理<イメージ図>青色(Blue)励起光 470nm

EzLabel FluoroNeoがアミノ基Convenient

蛍光標識による移動度の変化はほとんどありません
CBB 染色EzLabel FluoroNeo

Easy

ATTO EzLabel FluoroNeo でより簡単 ＆ 便利に！

標識

アミノ基に結合蛍光 (Blue LED:470nm） 蛍光 (UV：312nm）

未標識

標識

未標識

標識

EzLabel FluoroNeo で標識した分子量マーカーは未標識の分子量マーカーとほとんど移動度が変わりません（CBB 染色画像比較）。
EzLabel FluoroNeo で 標 識 し た サ ン プ ル は、BlueLED を 使 用 す る こ と で
CBB 染色よりも高感度検出が可能です。蛍光検出では UV を使用した場合よりも BlueLED を使用したほうがより高感度で検出可能です。

未標識→ EzLabel FluoroNeo は BlueLED 検出がお勧めです。
→ BlueLED なら、ガラスプレートからゲルを外さずに検出が可能です。
標識・未標識で移動度の差がほとんどなし。

タンパク質溶液に「EzLabel FluoroNeo」（蛍光ラベル化剤）を加えて混合します。

蛍光 530nm

37～95℃で加温

タンパク質

サンプル溶液を加温(37～95℃)すると、溶液中の「EzLabel FluoroNeo」がタンパク質の「アミノ基」に結合します。

BlueLED・UVのいずれでも検出可能。
(BlueLEDのほうが高感度）

銀染色を超える高感度検出が可能

電気泳動やブロッティング後、青色(Blue)
LED光源などで励起すると530nmをピークとする黄緑色の蛍光を発します。

１ 2

3 4 5 6 7 8 9 10 11 １ 2

3 4 56789 10 11 １ 23 4

5 6 7 8 9 10 112201169766

蛍光標識→SDS-PAGE→蛍光検出の流れ① 蛍光標識試薬を添加

45302014③ 還元剤を添加 *銀染色

EzLabel FluoroNeo・BleuLED④ 95℃ 3 分間加熱 *② 95℃ 3 分間加熱

電気泳動後
すぐに蛍光検出

CBB 染色EzLabel FluoroNeo で蛍光標識したタンパク質は、ウエスタンブロッ

EzLabel FluoroNeoで標識したタンパク質のウエスタンブロット解析①
タンパク質
サンプル溶液サンプル
調製完了（BlueLED，UV）

ウエスタンブロット解析※② 加熱温度と時間についての目安
37℃・・・30分以上 65℃・・・5～30分
・BlueLEDで蛍光を検出した後、ウエスタンブロッティングが可能です。
・ゲルは、CBB染色や銀染色も可能です。
・SDS-PAGE、非還元SDS-PAGE、PAGE、2次元電気泳動などに利用可能です。

Webで動画公開中！

1②2341234③④1

1234

ト解析の結果、レーン 3、4 に Smad 2 あるいは Actin のシグナル⑤23412342201169766

抗体反応ブ45ロッテ
ｨ
ン
グ

30
2014ゲル・CBB 染色 ゲル・蛍光検出

PVDF 膜・蛍光検出

Smad 2Actin
ウエスタンブロット・発光検出

Lane1：未標識 Lane2：EzLabel FluoroNeo標識
Lane2：未標識 Lane4：EzLabel FluoroNeo標識

製品の特長
✓

電気泳動終了後、すぐに検出可能✓

ゲルの染色・脱色操作が不要✓

サンプル処理バッファーを EzLabel FluoroNeo に換えるだけで蛍光標識可能✓

蛍光標識したサンプルは遮光・冷凍保存可能（最大 3 ヶ月）✓

蛍光標識しても PAGE のバンドの移動度はほとんど変わりません。

✓

BlueLED（青色 LED）ならガラスプレートのまま高感度検出が可能です✓

蛍光観察後、ウエスタンブロット解析（膜へ転写、膜上の蛍光検出、抗体との反応）が可能✓

観察後のゲルは、CBB 染色や銀染色が可能✓

キットには、タンパク質抽出用 RIPA Lysis Buffer 、分子量マーカーが付属します。

BlueLED(470nm) や UV（330nm）で励起可能です。[ 励起波長 : 330nm/470nmData
本キット付属の分子量マーカー（レーン１＝ 2 μ g/mL）の 1/2 希釈系列を作製し、EzLabel FluoroNeo で蛍光標識後、電気泳動したのち BlueLED で検出しました。また同じサンプルを電気泳動したのち、銀染色または CBB 染色で検出しました。

ウエスタンブロット可能（膜上で蛍光検出、抗体反応による特異的検出）⑤ 電気泳動＊非還元の場合は不要

蛍光標識終了EzLabel FluoroNeo の蛍光検出と、銀染色、CBB 染色の感度比較を行いました。それぞの検出限界は赤点枠で囲んだレーンです。
EzLabel FluoroNeo は検出感度が高く、ダイナミックレンジが広いため、定量解析にも最適です。

最大蛍光波長 : 530nm]が検出されました。また、EzLabel FluoroNeo で標識したタンパク質は電気泳動終了後やブロッティング終了後などに容易にパターンの確認や定量解析が可能です。
Data
本キット付属の「RIPA Lysis buffer」を用いて、HepG2 細胞から抽出液を作製し、分子量マーカータンパク質とともに EzLabel FluoroNeo でサンプル処理 ( 蛍光標識 ) しました。
上記サンプルを SDS-PAGE 後、泳動パターンを CBB 染色 ( ① )、BlueLED で蛍光検出( ② ) したのち、PVDF 膜に転写しました。転写後の膜を BlueLED で蛍光検出 ( ③ ) 後、抗 Smad2 ウサギモノクローナル抗体 ( ④ ) および、抗 Actin マウスモノクローナル抗体( ⑤ ) を用いてウエスタンブロット解析を行ないました。
サンプル：Lane1・2：分子量マーカー、Lane3・4：細胞抽出液
蛍光標識：Lane1・3：未標識、Lane2・4：EzLabel FluoroNeo で蛍光標識
本試薬はアミノ基を修飾します。特定の抗体での検出結果に影響が出る場合があります。

全タンパク質ノーマライズへの利用
全タンパク質HKP

作業時間を短縮します。染色廃液処理が不要です。

※

通常の SDS-PAGE 用サンプル処理とほとんど同じ操作です。

転写後の PVDF 膜
蛍光検出

CBB 検出

Tf ■ 3ng ■ 2ng ■ 0.6ng ■ 0.3ng※ハウスキーピングタンパク質

ウェスタンブロッティングなどで得られたデータは、ハウスキー
ピングタンパク質の発現量などでノーマライズを行うのが一般的ですが、組織の違いや発生のステージ、細胞分裂などの影響を受けるため、必ずしも一定ではありません。ハウスキーピングタン
パク質の発現量の代わりに、補正用のデータとして『全タンパク質（Total Protein）』の利用が推奨されてきています。具体的には転写した膜上のタンパク質を可視化し、全タンパク質量を求めて利用します。
技術資料
Data
ノーマライズHeLa 抽 出 タ ン パ ク 質 に Transferrin を 添 加 し た も の を サン プ ル と し、 泳 動・ ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ テ ィ ン グ し た 結 果 をCSAnalyzer 4 で解析し、全タンパク質およびハウスキーピングタンパク質のシグナル値をもとにノーマライズした結果 で す。 理 論 値 は 実 際 に HeLa 抽 出 タ ン パ ク 質 に 添 加 し たTransferrin タンパク質量の相対値です。ブロットから得られる全タンパク質量のデータは、ハウスキーピングタンパク質と同様にデータノーマライズに使用できます。