チューブ用発光測定装置

AB-2270 Luminescencer Octa

ATTO Luminometers
アトー株式会社は1980年にHPLC用の発光検出器を製品化したのを最初に、1991年には化学発光を利用した培養細胞活性測定法の装置開発を分担し、発光を自動計測できるマイクロプレートリー
ダ ー“Luminescencer”を 1994年 に製品 化し ま した。その後、1997年に汎用小型ルミノマイクロプ
レートリーダー“Luminescenser JNR”、2001年には、試験 管用 の“Luminescencer PSN”を製 品 化し、発光計測メーカーとして品揃えを進めてきました。
1991年以降は、発光イメージングシステム、活性酸素測定法、発光スペクトル測定法、多色同時発光の分離解析法、ホタルLucifease反応機構、分泌型Luciferaseとその発光基質、発光計測の標準化に向けた光子数計測法、近赤外発光測定技術など、応用技術だけでなく基礎技術の開発にも注力してきました。
このような背景から開発された “ATTO LuminescerOcta” は、最 初 に 開 発 し た“Luminescencer”から数えて８機種目の製品でし
た の で、“Octa” を 付 記 し ま し た。本 機 は、“Luminescencer PSN”の後継機としての位置づけですが、高感度化を実現した高性能な発光測定装置です。

High Sensitive & Versatile Luminometer

概要

Luminescencer Octa

Luminescencer OCTA は試験管中の試料の計測に最適化された発光測定装置（ルミノメーター）です。400~670nmまでの様々な発光を計測できる低ノイズのフォトンカウン
ティング技術に発光の測定効率を極限まで追求した光学系を加えることによって高感度化を実現し、繰り返し分注精度の高いポンプによって再現性の高い測定が行えるようになりました。さらに、色違いの発光が同一サンプル中に混在する場合であっても、独自のフィルタリング機能によって、それぞれの発光を分離計測することが可能です。計測には、外径12mm、長さ55mmの試験管、1.5mLの遠心チューブが利用できます。

特長●

幅広いダイナミックレンジ(8桁)●

高感度→ルシフェラーゼでは1zmol(10-21moles)まで検出することができます。

●

瞬時発光から長時間計測→計測時間は最大2000秒と長時間に対応しました。計測分解能は100msec（計測時間100秒まで）と瞬時発光にも対応しています。

●

400～670nmの広い発光波長計測範囲→赤色の発光を感度良く測定できます。

●

分注ポンプ内蔵→発光試薬や刺激剤などを試料に自動添加することができます。

●

三色発光の自動解析機構→フィルター(560LP、600LP)の自動切換により最大3色まで発光波長成分を分離解析できます。

●

室温+5℃～40℃の加温機能（オプション）→細胞、組織などを最適な温度条件下で測定することができます。

Simple Operation
１ 計測条件設定
タッチパネルで計測条件を設定します。

４ 計測
STARTキーを押すと、設定した計測条件に従って、ポンプ分注と同時に計測が開始されます。設定した計測時間が経過すると、計測値とカイネティクスの結果がプリントアウトされます。

AB-2270-----------------------Unknown Analysis-----------------------2008/01/15 16:20
Sample Name:[TEST123456789012]

2 発光試薬の準備

Protocol:Single
Blank-Dark-Calibration-File
0 :[(Unused)

ポ ン プ と 配 管 の デッ ド ボ リ ウム が 少 な く（約500μL）、少量の試薬で計測を行えます。

]

No. 1/ 50
Meas
F0: 876543210
78654

32020

Sample name:[TEST123456789012]
2008/12/24 16:31

５ Excelによるファイル読み込み
3 サンプルのセット
試験管にサンプルをとり、試験管ホルダーにセットします。

検量線作成、デュアルレポーターアッセイで使われる比率計算などの解析メニューが標準装備されています。USBケーブルでPCと接続すると、計測値、解析値等がCSVファイル形式でPCにダウンロードできます。

Basic Specification
３種類の計測モード

Dual

計測モードはBasic, Single, Dual から選択できます。
発光計測時間は１秒～2000秒、リーピート回数は最大99回です。

BasicSingle

計測までの待ち時間
ポンプ分注量
計測時間
リピート計測設定

発光量積算時間

4,000,000

2種類の試料容器

3,500,000

RLU

3,000,000

測定容器には外径12ｍｍ長さ55mmの試験管または1.5mLの遠心チューブが利用できます。10-7 M ATP
25μLとLuciferase溶液25μLをそれぞれの容器にとり、10sec間発光量を計測したとこ,ろ、計測値に大きな違いは見られませんでした。（遠心チューブを用いる場合は、ポンプの自動分注は使えません。）

2,500,000
2,000,000
1,500,000
1,000,000
500,0000
外径１２ｍｍ１．５ｍL

試験管

遠心チューブ

計測モード

試薬分注試薬分注用のポンプには繰り返し精度と分注スピードに優れたプランジャー型ポンプが使われています。このポンプで300μLずつ50回の分注を行った結果、CV値は0.057％であり、分注精度が優れていることが示されました。

北米産ホタルLuciferaseの安定発光を利用してLuminescencerOCTAの測定再現性を確認しました。10秒間の発光量を10回計測した結果、CV 値 は 1.1％ で し た。こ の 時 の 測 定 値 は 約74000、ダークカウント値は約100でした。酵
素活性の不安定性による影響は若干受けるものの、再現よく発光を計測することができます。

0.50.45

100000

0.3

80000

0.25
0.20.15RLU

分注量（g）

0.40.35

0.1

60000
40000

0.050161116212631

ポンプ分注量の秤量結果

36414620000
012345678910Application Data
ATP Assay

Luciferase Assay
Luciferase の検 出感 度を 計測 した 結果 で す。

ATP の 検 出 感 度 を 計 測 し た 結 果 で す。

Luminesccencer Octaを使用するとLuciferase

Luminesccencer Octa で は ATPは 少 な く と もは少なくとも1zmoles(10-21moles)まで検出する1amoles(10-18 moles)まで検出することが可能ことが可能です。また直線性ダイナミックレンジです。また直線性ダイナミックレンジはlog8<と幅はlog7と幅広い濃度のサンプルを定量的に計測で広い濃度のサンプルを定量的に計測できます。

きます。
Luciferase assay (Luminescencer Octa)

ATP assay (Luminescencer Octa)

1.E+09
1.E+081.E+07
1.E+05

RL URLU

1.E+06
1.E+04
1.E+03
1.E+02
1.E+01
1.E+00
1E-23

1E-21

1E-19

1E-17

1E-15

1E-13

1.E+081.E+07
1.E+06
1.E+05
1.E+04
1.E+03
1.E+02
1.E+01
1.E+00
1E-19

1E-17

1E-15

1E-13

1E-11

1E-09

ATP (moles)

Luceferase (moles)【実験方法】【実験方法】

ルシフェラーゼ希釈液を55mmチューブに80μL

ATP検出用ルシフェラーゼ反応液を55mmチューずつ分注し、Luciferase希釈溶液を20μLずつ添

ブに90μLずつ分注し、ATP希釈溶液を10μLず

加 しま し た。すば やく 混合 後、Luminescencer

つ 添 加 し ま し た。す ば や く 混 合 後、Octaにセットし、2秒後から10秒間の発光積算

Luminescencer Octaにセットし、2秒後から10値を計測しました。

秒間の発光積算値を計測しました。

活性酸素消去能の測定
10090

消去能を簡単に測定することができます。

80【実験方法】
キサンチンとキサンチンオキシダーゼを用いてスーパーオサイドを生成させ、これに抗酸化成分を添加し相対発光強度

お茶に含まれるカテキンなどの抗酸化成分の活性酸素

70605040ます。さらにスーパーオキサイドと反応性が高い発光

30

試薬MPECを添加し発光量を計測します。抗酸化物質

20の添加前（コントロール）と添加後 の結果から スー10

パーオキサイド消去能を求めることができます。

01nmoleのEpigallocatechin Gallate, Vitamin C, 水溶性Vitamin E 誘導体のスーパーオキサイド消去能を比較した結果です。お茶に含まれるカテキンに優れたスーパーオキサイド消去能のあることがわかります。

Control100

Epigallocatechin
1.74

Vitamin C0.3

Vitam in E42.8

Application DataLuminescecer Octaには３色ルシフェラーゼ発光の自動解析機能があります。まず、Tripluc（TOYOBO）ルシフェラーゼの単色ごとの直線性を確認しTriple Reporter Assay

ました。各色とも良好な直線性が確認できます。次に、SLGの濃度を一定にして、SLOとSLRの混合比率を変え発光量を計測し、この計測値をもとに各色の濃度を解析しました。この結果から、同一サンプル中に混在する3色の発光を同時に計測できることが分ります。3色のルシフェラーゼ遺伝子をレポー
ターとして使用すれば、それぞれの遺伝子の発現量を同一の細胞で計測するこRLUとが可能です。
1.0E+09
SLG
1.0E+08
1.0E+07
1.0E+06
1.0E+05
1.0E+04
1.0E+03
1.0E+02
1.0E+01
1.0E+00
0.00001SLO

SLR0.001

0.110

Enzyme Concentration (μg/mL)

Triplucの直線性

3色発光の自動解析機能
Luminescecer Octa には2種類のフィルターを透過する発光量を計測して3種類のLuciferase発光量を求める
色分離機能が搭載されています。3色のルシフェラーゼの 発 光 ピ ー ク 波 長 は、そ れ ぞ れ SLG: 540nm, SLO:570nm, SLR: 625nm（波 長 は 要 確 認）（ベ ク タ ー はTOYOBO社から入手）です。SLOとSLGの発光を良く透過するフィルターを用いた測定値とSLRを良く透過するフィルターを用いた測定値とフィルター用いない通常の測 定 値か ら、各 色の 発光 量を 計算 しま す。（特 許 第4052389号）

Triplucの３色混合測定

Specification

関連製品

型式・名称

AB-2270
ルミネッセンサーOcta

AB-2270-R
ルミネッセンサーOcta（ポンプなし）

商品コード3511035

3511036

測定容器

φ12×55mmチューブ／1.5mL遠心チューブ検出器

光電子増倍管計測方法

光電子増倍管によるフォトンカウンティング方式

感度10-18mole ATP, 10-21mole Luciferase

ダイナミックレンジ

8桁（ATP）

測定波長(全光測定時)

350～670nm

注入口セプタム付扉

フィルター

F0：なし(全光） F1：O56 F2：R60

色分離機構

フィルター自動切換機構測定により、最大3色まで分離可

貴重な発光試薬を容器上部か分注ポンプ

らマイクロシリンジを使ってインジェクションできます。

なし

プリンタ

24桁サーマルプリンタ内蔵

計測時間

1～2000秒(単色光測定時)
1～600秒(波長分離測定時)/フィルターリピート機能

各計測モードで使用可能 最大99回インターバル(計測時間含む)設定：計測時間～3600秒※1

温調機能※2オプション

プレインキュベーション・
ディレイタイム

0～3600秒

計測モード

Basic/Single/Dual フィルター自動切換機構のON/OFF可能

データ保存

計測結果200ファイル保存可能
キャリブレーション9ファイル保存可能
データ転送プログラムでPCへ保存可能(Windows）※3

AB-2350 Phelios
プレート用ルミノメータ

プランジャー型1台内蔵(25～300μL)
25μLステップ
分注再現性：CV <1%(300μL)

操作

パネルシート・キースイッチ操作

保護機能

チューブ検知/扉開閉検知/フォトマル保護機能
250mm(W)×310mm(D)×176mm(H)

サイズ・質量7.5kg

7.0kg
AC100V 50/60Hz 50VA

電源

※1：計測スタート～次回計測スタートの間隔をインターバルとします。
※2：温調機能はオプションです。
※3：データ転送には別途USBケーブルが必要です。
ルミネッセンサーOcta本体・・・・１台データ転送プログラムソフトウエア(Windows)・・・・１本標準構成品

試験管/遠心チューブ兼用ホルダー・・・・１個
ルミネッセンサー用ロールペーパー・・・・２巻
片側フィッティングチューブ(20cm)・・・・１本ACケーブル・・・・１本 取扱説明書・・・・１冊

Octa用途別適応表

アッセイの種類
マルチカラールシフェラーゼアッセイ
ルシフェラーゼアッセイ
デュアルルシフェラーゼアッセイ
長時間測定（ライブセルアッセイなど）
活性酸素測定 （生細胞）
カルシウムイオン濃度測定
抗酸化能測定 （CLETA-S他）
ELISA ・ イムノアッセイ
ATPアッセイ
生菌測定 （BactoLumix）

AB-2270

AB-2270-R

○
○○×△
○
○
△
○
○

○
○
○
×△×△
△○△