陸の水（Limnology in Tokai Region of Japan）74 : 43 - 48（2016）

報告（Report）

愛知県西三河地域から採集されたヒラマキガイ属3種：
形態と遺伝子情報による解析川瀬基弘1)・松原美恵子2)・森山昭彦2)
Three species of the genus Gyraulus from West Mikawa Area, Aichi Prefecture, Japan:
Analysis of shell morphology and mitochondrial COI gene sequences
Motohiro KAWASE1), Mieko SUZUKI-MATSUBARA2) and Akihiko MORIYAMA2)
摘要

愛知県西三河地域39地点から採集されたヒラマキガイ属は，殻の形態およびミトコンドリア COI 遺伝子の解析から，ヒラマキミズマイマイ，ヒメヒラマキミズマイマイ，ミズコハクガイの3種に分類された。ミトコンドリア COI 遺伝子の情報を伴う愛知県内からのヒメヒラマキミズマイマイとミズコハクガイの正式な記録は初めてである。
キーワード：ヒラマキミズマイマイ，ヒメヒラマキミズマイマイ，ミズコハクガイ，ヒラマキガイ属，ミトコン
ドリア COI 遺伝子，愛知県西三河
Key words: Gyraulus chinensis，Gyraulus pulcher，Gyraulus soritai，Gyraulus，mitochondrial COI gene，West Mikawa
Area, Aichi Prefecture（2016年5月5日受付；2016年8月19日受理）
るが，使用されたヒメヒラマキミズマイマイの試料は岐阜県はじめに瑞浪市の1点を除いて岐阜市産に偏っており，愛知県産の試

日本産ヒラマキガイ属 Gyraulus は，肥後・後藤（1993）

料が分析されていないことから愛知県内にヒメヒラマキミズによれば10種が報告されている。本属各種は殻径が5 mm 前

マイマイが分布するか否かについては疑問が残る。つまり，後の微小種が多く，東海地方では殻の形態からヒラマキミズ

これまでに愛知県内から記録されたヒメヒラマキミズマイマ

マイマイ Gyraulus chinensis Dunker, 1854，ヒメヒラマキミズ

イはヒラマキミズマイマイの幼貝などの誤同定の可能性があ

マイマイ Gyraulus pulcher（Mori, 1938）およびミズコハクガ

ることも完全に否定できない。

イ Gyraulus soritai Habe, 1976の採集記録が報告されている（河そこで本研究では西三河地域のヒラマキガイ属各種の生息

辺，2002；川瀬ほか，2011，2012；守谷・河辺，2013；高柳，状況を把握するために，同地域においてヒラマキガイ属をサ2014；川瀬，2016；など）。ただし，ヒラマキミズマイマインプリングし，殻形態により同定するとともに，誤同定を防とヒメヒラマキミズマイマイについては，同サイズの個体をぐために分子系統解析をあわせて行った。
村瀬幸雄氏には PCR ならびに DNA 塩基配列を決定する識別するのが困難であることも指摘されている（増田・内山，2004）。

にあたりお世話になった。ここに記して厚く御礼申し上げる。

川瀬ほか（2016）では殻の大きさから同定されたヒラマキミズマイマイとヒメヒラマキミズマイマイが，ミトコンドリ
ア COI 領域の解析でも同一の結果になることが示されてい1)
2)〒467-0867 名古屋市瑞穂区春敲町2-13 愛知みずほ大学人間科学部〒467-8501 名古屋市瑞穂区瑞穂町山の畑1 名古屋市立大学大学院システム自然科学研究科生物多様性研究センター

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Ⓒ2016

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川瀬基弘ほか賀）を用い，PCR 酵素には，Speed STAR HS DNA Polymerase

試料採取と方法（タカラバイオ株式会社 , 滋賀）を使用した。また，LCO1490と HCO2198（Folmer et al., 1994）をプライマーとして用いた。

試料採取は，主に西三河地域および周辺地域の水田で行い，メッシュサイズ0.5mm の篩と目合いの細かなフィッシュネッ

反応条件は，94℃1分の加熱後，98℃5秒 /50℃15秒 /72℃10秒

トを用いて水草に付着するヒラマキガイ属を採集した（表を30サ イ ク ル，72℃5分， ま た は，94℃40秒 /46℃40秒 /72℃1）。形態分類には Mori（1938），Habe（1976）および増田・

1分 を5サ イ ク ル，94℃40秒 /51℃40秒 /72℃ １ 分 を35サ イ ク

内山（2004）を用いて同定した。

ル，72℃5分 で 行 っ た。PCR 産 物 は ExoSAP-IT（Affymetrix,煮沸して肉抜きをした軟体部から腹足の一部（数 mg）を切CA）で 精 製 し た 後，BigDye Terminator v3.1Cycle Sequencing

り取り，DNeasy Blood & Tissue Kit（QIAGEN, Hilden），またKit（Applied Biosystems, CA）を用いて蛍光ラベルし，Applied

は，Asahida et al.（1996）の方法で genomic DNA を抽出・精製

Biosystems 3500xL Genetic Analyzer（Applied Biosystems, CA）にし，PCR により COI 遺伝子（658bp）を増幅した。PCR には，より塩基配列を決定した。
分子系統樹は解析ソフト MEGA6（Tamura et al., 2013）を用TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice（タカラバイオ株式会社 , 滋

表1. ヒラマキガイ属3種とそれに関連する貝類標本の採集情報
Table 1. Collecting localities and date of 3 species in Gyraulus and the related species.
和名

ヒラマキミズマイマイ

ミズコハクガイヒメヒラマキミズマイマイ

ヒロマキミズマイマイ
カワコザラガイ（外群）

採集地点
愛知県豊田市四ツ松町十明山
愛知県豊田市中当町スズ原
愛知県豊田市久木町東洞
愛知県豊田市御作町
岐阜県岐阜市古市場東町田
岐阜県岐阜市島栄町
岐阜県岐阜市福光西
愛知県新城市四谷
愛知県名古屋市中川区東かの里町
愛知県名古屋市港区新茶屋
愛知県名古屋市中村区城屋敷町
愛知県名古屋市守山区太田井
愛知県名古屋市北区楠町大字喜惣治新田
愛知県豊田市東萩平町
愛知県豊田市下山田代町上弓沢
愛知県西尾市室町茅野
愛知県西尾市小島町二ケ崎
愛知県西尾市花蔵寺町五貫目
愛知県西尾市志籠谷町
愛知県豊田市上高町［上高湿地］
愛知県豊田市矢並町［矢並湿地］
愛知県豊田市山中町［恩真寺湿地］
愛知県豊田市下山田代町上弓沢
愛知県岡崎市保久町猪戻
岐阜県岐阜市岩崎
岐阜県瑞浪市釜戸町2673
岐阜県瑞浪市釜戸町町屋
岐阜県岐阜市雛倉2丁目
岐阜県岐阜市雛倉3丁目
岐阜県岐阜市彦坂
岐阜県岐阜市岩利6丁目
岐阜県岐阜市佐野
岐阜県岐阜市安食3丁目
岐阜県岐阜市粟野西8丁目
岐阜県岐阜市雛倉3丁目
愛知県西尾市花蔵寺町五貫目
愛知県岡崎市保久町猪戻
愛知県西尾市小島町山内
愛知県豊田市大池町［牛尾池］＋：1～9，＋＋：10～20，＋＋＋：＞20Ⓒ2016

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44緯度35.0793
35.184335.158635.1943
35.459435.4274
35.453435.0492
35.134735.103735.1715
35.1992
35.2365
35.2001
35.0180
34.8565
34.885434.850934.881135.121235.0838
35.117735.018035.016435.4770
35.411835.4057
35.520535.5259
35.496335.503135.5168
35.4938
35.492335.5259
34.850935.0164
34.8825
35.1122

経度
137.3106137.5159
137.3412
137.2395
136.7399
136.7287
136.7668
137.5666
136.8174
136.8008
136.8409
136.9896
136.9027
137.3311
137.2998
137.0924
137.0953
137.0860
137.0852
137.2418
137.2164137.2460
137.2998
137.2945
136.7810
137.3079
137.2977
136.6995
136.7023
136.7336
136.7409
136.7244
136.7260
136.7691
136.7023
137.0860
137.2945
137.0905
137.1220

採集日
2010年9月2日
2011年7月16日
2011年7月16日
2011年8月14日
2011年9月1日
2012年5月18日
2012年6月8日
2012年8月8日
2012年8月16日
2012年8月16日
2012年8月16日
2012年9月3日
2013年7月28日
2013年8月31日
2015年8月18日
2015年7月26日
2015年5月1日
2015年7月26日
2015年4月11日
2012年10月26日
2015年8月10日
2015年8月10日
2015年8月18日
2015年8月18日
2010年9月1日
2011年6月4日
2011年7月16日
2011年8月12日
2011年8月12日
2011年8月12日
2011年8月12日
2011年8月12日
2011年9月9日
2011年9月9日
2011年8月12日
2015年7月26日
2015年8月18日
2015年5月31日
2011年3月9日

採集個体数＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋

愛知県西三河地域から採集されたヒラマキガイ属
いて，近隣結合法（Neighbor-Joining 法）により作成した。また，確率（％）を示す。本研究では，70% 以上のブートストラッ

遺伝子距離の算出は Kimura 2-parameter 法で行い，各ノードプ値が得られた系統樹形を概ね正しいと考えた。

における信頼性を評価するため1,000回のブートストラップ解析を行った。数字は結合の信頼度を表すブートストラップ

図1. ヒラマキガイ属3種とヒロマキミズマイマイ．1, 2. ヒラマキミズマイマイ (1, 殻径5.1 mm，2, 殻径3.5 mm)，3, 4. ヒメヒラマキミズマ
イマイ (3, 殻径2.1 mm，4, 殻径2.2 mm)，5. ヒロマキミズマイマイ ( 殻径3.2 mm)，6. ミズコハクガイ ( 殻径2.4 mm)．
Fig.1. Three species of Gyraulus and Menetus dilatatus. 1, 2. Gyraulus chinensis (1, shell diameter: 5.1 mm，2, shell diameter: 3.5 mm), 3, 4. Gyraulus
pulcher (3, shell diameter: 2.1 mm，4, shell diameter: 2.2 mm), 5. Menetus dilatatus (shell diameter: 3.2 mm), 6. Gyraulus soritai (shell diameter: 2.4 mm).

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川瀬基弘ほか
スタラップ値100% で，それぞれ独立したクレードを形成し結果および考察ており，形態的分類が，COI の塩基配列によっても裏付けら

カワコザラガイ Laevapex nipponica（Kuroda, 1947）を外群れた。ヒラマキミズマイマイでは COI 遺伝子に対して12種として，ヒラマキミズマイマイ（図1－1, 2），ミズコハクガのハプロタイプが検出されたので，G. chinensis A ～ L と名イ（図1－6），ヒメヒラマキミズマイマイ（図1－3, 4）およ付けた（表2）。同様にミズコハクガイのハプロタイプ２種をびヒロマキミズマイマイ（図1－5）におけるミトコンドリア

G. soritai A と B，ヒメヒラマキミズマイマイのハプロタイプ

COI 遺伝子の分子系統樹を作成した（図2）。ヒラマキガイ

9種を G. pulcher A ～ I，ヒロマキミズマイマイのハプロタイ属の COI 遺伝子の系統樹には，近年発見された（吉成ほか，プ１種を M. dilatatus A とした。

2010；川瀬ほか，2016）近縁属外来種のヒロマキミズマイマ

ヒラマキミズマイマイとヒメヒラマキミズマイマイは異なイ Menetus dilatatus（Gould, 1841）や周辺地域のヒラマキガイるクレードに分かれた（図2）。殻形態によりヒラマキミズマ属のサンプルも併せて表示した。ヒラマキミズマイマイ，ヒイマイに同定された個体はいずれも１つのクレードにまとめ

メヒラマキミズマイマイ，ミズコハクガイの3種は，ブートられた。ヒラマキミズマイマイはハプロタイプ G. chinensis

表2. COI ハプロタイプ分析をした標本の採集情報
Table 2. List of COI haplotypes of 3 species in Gyraulus analyzed.
和名COI ﾊﾌﾟﾛﾀｲﾌﾟ
G. chinensis A
G. chinensis B
G. chinensis C
G. chinensis D

ヒラマキミズマイマイ

G. chinensis E
G. chinensis F
G. chinensis G
G. chinensis H
G. chinensis I
G. chinensis J
G. chinensis K
G. chinensis L

ミズコハクガイ

G. soritai A
G. soritai B
G. pulcher A
G. pulcher B
G. pulcher C
G. pulcher D

ヒメヒラマキミズマイマイ

G. pulcher E
G. pulcher F
G. pulcher G
G. pulcher H
G. pulcher I

ヒロマキミズマイマイ
カワコザラガイ（外群）Ⓒ2016

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M. dilatatus A

採集地
愛知県名古屋市中川区東かの里町
愛知県西尾市室町茅野
愛知県西尾市小島町二ケ崎
岐阜県岐阜市古市場東町田
愛知県西尾市室町茅野
愛知県西尾市花蔵寺町五貫目
愛知県豊田市中当町スズ原
愛知県豊田市御作町
愛知県豊田市久木町東洞
愛知県名古屋市港区新茶屋
愛知県名古屋市中村区城屋敷町
岐阜県岐阜市島栄町
岐阜県岐阜市福光西
愛知県名古屋市北区楠町大字喜惣治新田
愛知県名古屋市守山区太田井
愛知県豊田市東萩平町
愛知県西尾市志籠谷町
愛知県豊田市四ツ松町十明山
愛知県豊田市下山田代町上弓沢
愛知県新城市四谷
愛知県豊田市上高町［上高湿地］
愛知県豊田市矢並町［矢並湿地］
愛知県豊田市山中町［恩真寺湿地］
愛知県豊田市下山田代町上弓沢
愛知県岡崎市保久町猪戻
岐阜県岐阜市安食3丁目
岐阜県瑞浪市釜戸町町屋
岐阜県岐阜市雛倉3丁目
岐阜県岐阜市粟野西8丁目
愛知県岡崎市保久町猪戻
岐阜県岐阜市岩崎
岐阜県瑞浪市釜戸町2673
岐阜県岐阜市彦坂
岐阜県岐阜市雛倉2丁目
岐阜県岐阜市岩利6丁目
岐阜県岐阜市佐野
愛知県西尾市花蔵寺町五貫目
愛知県岡崎市保久町猪戻
愛知県西尾市小島町山内
愛知県豊田市大池町［牛尾池］

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分析数1111111111111111511111133111111111111151愛知県西三河地域から採集されたヒラマキガイ属
A ～ L の違いにかかわらず，殻径は3.5～6.0 ㎜程度の個体がとが増田・内山（2004）により指摘されているが，今回の調多く，より小型で殻径が1.5～2.0 ㎜程度のヒメヒラマキミズ

査結果で得られた両種はサイズの違いにより識別が可能であマイマイ（ハプロタイプ G. pulcher A ～ I）とは，殻のサイズり，分子系統解析の結果も形態分類による結果と一致していにより識別できた。Mori（1938）の記載では，ヒメヒラマキた。従って，両種が充分に成長した季節に調査を行えば，ヒミズマイマイはヒラマキミズマイマイより小さく，周縁部がメヒラマキミズマイマイをヒラマキミズマイマイの幼貝に誤角張らない（キール状にならない）ことで容易に区別できる

同定する可能性は低く，形態分類のみでも同定できると言えとされている。同サイズの個体を識別するのが困難であるこる。なお，ヒラマキミズマイマイと比較して，ヒメヒラマキ

G. chinensis A
G2869
100

G0476
G.
chinensis B
G2870
G.
chinensis C

79

G0369
G. chinensis D

43

G0370
G.
chinensis E
97

75

G1530
G. chinensis F

40

G1531
G. chinensis G

87

G1485
G. chinensis H
G1492
G. chinensis I

ヒラマキミズマイマイ㻌 100
99

SDNCU-A1938
G.
chinensis J G2795
G0187G. chinensis K

76
72

G2885
G.
chinensis L
G1615
G.
soritai A
100

ミズコハクガイ㻌
97

43

G2892
G.
soritai B

G0368
G. pulcher A

42

G.
pulcher B
G0391

59

G0480
G. pulcher C
G2896
G. pulcher D

ヒメヒラマキミズマイマイ㻌
10082

G0175
G.
pulcher E
G0397
G. pulcher F49

ヒロマキミズマイマイ㻌

G. pulcher G
G0390

66

G0392
G.
pulcher H

71

G2872
G.
pulcher I

G2796
M. dilatatus A
G0283
out1
カワコザラガイ（外群）

0.02

図2. ヒラマキガイ属の COI 遺伝子の近隣結合法による分子系統樹．各ノードの信頼性は，各ノードに1000回試行した時のブートストラップ値 (%) で示した。
Fig.2. The Neighbor-joining tree of COI sequences of 3 species in Gyraulus.
Values at nodes are bootstrap values (%) after 1000 repetitions.

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川瀬基弘ほか
Series Biology, 14: 279-300, pls., 12-18.

ミズマイマイは COI 領域の変異が少なかった。
湿地性希少種のミズコハクガイは，川瀬（2016）で得られ

守谷茂樹・河辺訓受 (2013): 三重県，愛知県で確認されたミズコハクガイ．かきつばた , 38: 50-51.

た東海丘陵湧水湿地群（矢並湿地，上高湿地，恩真寺湿地）のサンプルと豊田市下山田代町および岡崎市保久町で得られ高柳茉友子 (2014): 矢作川上中流域に生息する淡水産貝類．
矢作川研究，18: 5-11.

た個体を分析したところ，2つの異なる塩基配列が得られた（G. soritai A と B）。ただし，同一地点で得られた複数個体（豊Tamura, K., Stecher, G., Peterson, D., Filipski, A. and Kumar, S.

田市下山田代町上弓沢，岡崎市保久町猪俣）の塩基配列は完(2013): MEGA6: Molecular Evolutionary Genetics Analysis

全に同じであった。

version 6.0. Molecular Biology and Evolution, 30(12): 27252729.

近縁属のヒロマキミズマイマイについては1地点で5サンプルを分析したのみであるが，塩基配列は5個体とも一致した。

吉成 暁・野村卓之・増田 修 (2010): 近年日本で確認された

本研究により愛知県西三河地域には，ヒラマキガイ属

外来ヒラマキガイ科貝類．兵庫陸水生物，61/62: 155-164.

Gyraulus としてヒラマキミズマイ，ヒメヒラマキミズマイマ（担当編集委員：野崎健太郎，椙山女学園大学教育学部）

イ，ミズコハクガイの3種が分布することが明らかになり，ミトコンドリア COI 遺伝子の解析によっても裏付けられた。

引用文献
Asahida, T., Kobayashi, T., Saitoh, K. and Nakayama, I. (1996):
Tissue preservation and total DNA extraction from ﬁsh stored atambient temperature using buffers containing high concentrationof urea. Fisheries science, 62(5): 727-730.
Folmer, O., Black, M., Hoeh, W., Lutz, R. and Vrijenhoek, R.
(1994): DNA primers for amplification of mitochondrial
cytochrome c oxidase subunit I from diverse metazoan
invertebrates. Molecular Marine Biology and Biotechnology,
3(5): 294-299.
Habe, T. (1976): New land and freshwater snails (mollusca)from Japan. Bulletin of the National Science Museum, seriesA(Zoology), 2(4): 225-228.
肥後俊一・後藤芳央 (1993): 日本及び周辺地域産軟体動物総目録．エル貝類出版局，八尾市．
河辺訓受 (2002): 石巻山周辺淡水貝観察調査会報告－愛知県でミズコハクガイを初記録－．かきつばた , (28): 31-32.
川瀬基弘 (2016): 東海丘陵湧水湿地群に生息する貝類．矢作川研究，20：13-16.
川瀬基弘・早瀬善正・市原 俊 (2011): 豊田市に生息する淡水産貝類．陸の水 , 48：9-16.
川瀬基弘・村瀬文好・早瀬善正・市原 俊・森山昭彦・家山
博史 (2012): 岐阜市に生息する淡水産貝類．陸の水 , 54：33-42.
川瀬基弘・鳥居亮一・松原美恵子・森山昭彦 (2016): 西尾市
で発見されたヒロマキミズマイマイと近縁種について．新編西尾市史研究，2：60-63.
増田 修・内山りゅう (2004): 日本産淡水貝類図鑑2，汽水域を含む全国の淡水貝類．ピーシーズ，東京．
Mori, S. (1938): Classification of the Japanese Planorbidae.
Memoirs of the College of Science, Kyoto Imperial University,Ⓒ2016

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