2015 年度日本顕微鏡学会電子顕微鏡二級技士技術認定試験問題
問 1．大きさの順で正しいのはどれか．

問 9．四酸化オスミウム水溶液の調製で正しいのはどれか．

1．リボソーム＜ウイルス＜ゾウリムシ＜ミトコンドリア

Ａ．調製はドラフト内で行い，保護眼鏡や手袋を使用する

2．リボソーム＜ウイルス＜ミトコンドリア＜ゾウリムシ

Ｂ．結晶から調製する際，アンプルを洗剤またはアセトン等で洗浄する

3．ウイルス＜リボソーム＜ミトコンドリア＜ゾウリムシ

Ｃ．不純物の混入があると溶液が淡黄色に変わる

4．ウイルス＜リボソーム＜ゾウリムシ＜ミトコンドリア

Ｄ．調製後は室温で保存する

5．リボソーム＜ミトコンドリア＜ウイルス＜ゾウリムシ

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

問 2．最も直径が小さいものはどれか．

問 10．四酸化オスミウムで正しいのはどれか．

1．微小管

1．蒸気は無毒である

2．アクチンフィラメント

2．常温では淡黄またはほとんど無色の針状結晶である

3．核膜孔

3．純水に溶解すると溶液はアルカリ性になる

4．ペルオキシソーム

4．強力な還元剤である

5．鞭毛

5．組織への浸透性は良い

問 3．動物細胞で正しいのはどれか．

問 11．正しいのはどれか．

Ａ．小胞体は膜総量の半分以上を占めている

Ａ．脱水を充分に行うには試料をできるだけ大きくする

Ｂ．ミトコンドリアの内膜には ATP 合成に関与する酵素が存在する

Ｂ．試料の収縮を防ぐには高濃度の脱水剤を最初から使用する

Ｃ．ゴルジ装置はトランス側が形成面といわれる

Ｃ．アセトンで脱水した場合，置換剤を経ずにエポキシ樹脂に包埋できる

Ｄ．ライソソームには塩基性領域で活性を持つ酵素が多く含まれる

Ｄ．低濃度のエタノールで脱水する際は低温で行う

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

問 4．植物細胞で正しいのはどれか．

問 12．正しいのはどれか．

Ａ．細胞小器官の中でミトコンドリアと色素体にだけ DNA が存在する

Ａ．脱水剤の分子量が小さいほど脱水は速い

Ｂ．ミトコンドリアと葉緑体で ATP が合成される

Ｂ．アクリル系樹脂で包埋するときはアセトンで脱水するとよい

Ｃ．二次代謝産物の蓄積や細胞の膨圧の維持において液胞が関与する

Ｃ．脱水中に最も流出しやすいのはタンパク質である

Ｄ．リグニンやスベリンの沈着などにより肥厚した一次細胞壁を形成する

Ｄ．脱水中にブロック染色すると脂質が溶出しにくくなる

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

問 5．二重の生体膜を持つ細胞小器官はどれか．

問 13．包埋剤で正しいのはどれか．

Ａ．小胞体

Ａ．エポキシ系樹脂は重合時の収縮が大きい

Ｂ．葉緑体

Ｂ．アクリル系樹脂は紫外線重合ができる

Ｃ．ミトコンドリア

Ｃ．アクリル系樹脂は酸素の存在下で重合できる

Ｄ．ペルオキシソーム

Ｄ．メタクリレート系樹脂は重合時の収縮が大きい

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

問 6．固定剤で正しいのはどれか．

問 14．低温で紫外線を用いて重合できる樹脂はどれか．

Ａ．グルタルアルデヒド１分子には二つのアルデヒド基がある

Ａ．Lowicryl K4M

Ｂ．過マンガン酸カリウムはリボソームを固定できない

Ｂ．Epon 812

Ｃ．四酸化オスミウムはリン脂質を固定できない

Ｃ．アラルダイト系樹脂

Ｄ．通常，弱酸性で使用する

Ｄ．LR White

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

問 7．４％ホルムアルデヒド／ 0.1 M リン酸緩衝液（pH 7.2）を 200 ml 作

問 15．切片や支持膜との接着性を高めるグリッドの処理はどれか．

製する手順で正しいのはどれか．

Ａ．温める

Ａ．パラホルムアルデヒド 8 g を量りとり，蒸留水を約 90 ml 加える

Ｂ．カーボン蒸着する

Ｂ．0.2 M リン酸緩衝液を 100 ml 加える

Ｃ．グロー放電照射する

Ｃ．蒸留水を加えて 100 ml にする

Ｄ．ネオプレンゴムのトルエン溶液を滴下する

Ｄ．1 N NaOH を適量加え，パラホルムアルデヒドを溶解させる

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ
問 16．樹脂切片の干渉色で，紫，灰，青，銀，金のうち，切片厚が２番Ｅ．60 ～ 70° C に加温しながら撹拌する
1．ＡＢＣＤＥ

2．ＡＣＤＢＥ

3．ＡＤＢＥＣ

目に薄いものはどれか．

4．ＡＥＤＣＢ

5．ＡＥＢＤＣ6．ＡＣＢＤＥ1．紫問 8．揮発性が高くガス固定としても使用できる固定剤はどれか．

2．灰

Ａ．グルタルアルデヒド

3．青Ｂ．タンニン酸

4．銀

Ｃ．四酸化オスミウム

5．金

Ｄ．アクロレイン

問 17．薄切された切片が切削方向に圧縮される原因はどれか．

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ａ．試料ブロックの締め付けがゆるい（ 1 ）Ｂ．ナイフの逃げ角が小さい

Ｃ．グルコース 6-ホスファターゼ―小胞体

Ｃ．切削速度が速い

Ｄ．酸性ホスファターゼ―ライソソーム
1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ｄ．ナイフが鋭利でない
1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

問 27．ペルオキシダーゼの検出法で使用する試薬はどれか．

問 18．超薄切片にチャターが起こる原因はどれか．

Ａ．水酸化ナトリウムＡ．ナイフの刃角が小さい

Ｂ．クエン酸鉛

Ｂ．ナイフの逃げ角が小さい

Ｃ．3,3’-ジアミノベンチジン

Ｃ．薄切面が大きい

Ｄ．過酸化水素1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ｄ．切削速度が速い
1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

問 28．免疫電顕法の包埋前染色法の手順で正しいのはどれか．

問 19．薄切の際に試料ブロック面が濡れる原因として正しいのはどれか．

Ａ．４％ホルムアルデヒド液で固定

Ａ．薄切面の面積が小さい

Ｂ．１％四酸化オスミウム溶液で固定

Ｂ．切削速度が速い

Ｃ．エポキシ樹脂包埋

Ｃ．ナイフ背面に水が付着している

Ｄ．超薄切片作製Ｄ．ボートの液面が高すぎる

Ｅ．免疫反応1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ
問 20．電子染色で正しいのはどれか．

1．ＡＢＣＤＥ

2．ＡＢＣＥＤ

3．ＡＢＥＣＤ

4．ＡＥＢＣＤ

5．ＡＣＢＤＥ

6．ＡＣＢＥＤ

Ａ．四酸化オスミウムは固定剤であるが染色剤でもある

問 29．免疫電顕法の包埋後染色法で正しいのはどれか．

Ｂ．鉛染色は主に核質を染める

Ａ．切片は銅グリッドに載せる

Ｃ．鉛染色は 10 分以上行うのがよい

Ｂ．二重標識は不可能である

Ｄ．鉛塩は二酸化炭素と反応して沈殿を生じることがある

Ｃ．標識物質としてコロイド金が使用される

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ｄ．LR White はエポキシ樹脂よりも抗原性の保持に優れている

問 21．切片染色に用いる飽和酢酸ウラニル水溶液で正しいのはどれか．

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ａ．溶解度（飽和度）は 20° C で 20％である

問 30．免疫電顕法でコロイド金標識プロテイン A を使用する場合，適し

Ｂ．１ヶ月前に作製したものは染色性が低下する

た１次抗体はどれか．

Ｃ．使用済み染色液は，回収して繰り返し使用できる

1．IgM

Ｄ．使用時にフィルターでろ過すると，試料汚染を防ぐのに有効である

2．IgG

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

3．Fab

問 22．準超薄切片作製で正しいのはどれか．

4．F(ab)’2

Ａ．浸漬固定をした試料は中心部の切片を作製する

5．Fc

Ｂ．固定の良好な部位は染色液で淡染される

問 31．凍結技法で正しいのはどれか．

Ｃ．厚さ 0.5–1.5 μm 程度の切片を作製する

Ａ．浸漬法の冷媒として液体窒素が適している

Ｄ．切片をスライドガラス上の水滴に浮かべ加熱して貼りつける

Ｂ．氷晶が大きくなると細胞の微細形態を破壊する

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ
問 23．準超薄切片でよく使用される染色剤はどれか．

Ｃ．凍結速度が十分に速いとガラス状氷の状態が得られる
ｄ．含水量が高いほど氷晶形成がおこりにくい
1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ａ．トルイジンブルー
Ｂ．ヘマトキシリン

問 32．急速凍結法で正しいのはどれか．

Ｃ．エオシン

Ａ．ガラス状氷とは，凍結試料中に氷晶がある状態である

Ｄ．メチレンブルー

Ｂ．無固定試料はグリセリン浸漬後に凍結する

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ
問 24．透過電子顕微鏡の操作で正しいのはどれか．

Ｃ．金属圧着法では冷却した純銅を使用する
Ｄ．塩類濃度が高い試料では氷晶形成は起こりにくい
1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ａ．高倍率で焦点を合わせれば倍率を下げてもそのまま撮影できる
Ｂ．高倍率で非点補正をすれば倍率を下げてもそのまま撮影できる

問 33．オートラジオグラフィーで正しいのはどれか．

Ｃ．対物絞りの位置をかえても非点収差は変化しない

Ａ．α 線の飛程は β 線より短い

Ｄ．対物絞りの径を小さくすると像の散乱コントラストが高くなる

Ｂ．乳剤中の臭化銀粒子に放射性同位元素で潜像を形成させる

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ
問 25．デジタル画像ファイルの保存形式で正しいのはどれか．

Ｃ．潜像は放射線のイオン化力が強いほどよく形成される
Ｄ．放射能活性が半分に減少する時間を減衰期という
1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ａ．TIFF 形式は可逆圧縮で保存できる
Ｂ．JPEG 形式は可逆圧縮で保存できる

問 34．金属コーティング膜で誤っているのはどれか．

Ｃ．TIFF 形式は画像を劣化させたくないときに使用する

1．試料のチャージアップを防止する

Ｄ．JPEG ファイルのサイズは，同一画像の TIFF ファイルよりも大きい

2．二次電子の発生効率を高める

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

3．試料深部から二次電子を発生させる

問 26．細胞構造とその指標酵素の組合せで正しいのはどれか．

4．金，白金パラジウム，オスミウムなどを使用する

Ａ．アルカリホスファターゼ―核膜

5．電子線照射による試料損傷を軽減する

Ｂ．5’-ヌクレオチダーゼ―ミトコンドリア

問 35．走査電顕像で正しいのはどれか．

（ 2 ）Ａ．電子線の入射方向に対して試料表面が傾斜していると，二次電子の発Ｃ．加速電圧の変動により色収差を生じる

生量が少なくなる

Ｄ．色収差の影響は電界放出型電子銃を使用しても軽減できない
1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ｂ．試料端（エッジ）や突起物は平坦な部分よりも明るくなり，高いコントラストを示す

問 44．透過電顕像のコントラストで正しいのはどれか．

Ｃ．原子番号が大きいほど，二次電子発生効率は小さくなる

Ａ．加速電圧を高くすると散乱コントラストが低くなる

Ｄ．チャージアップ（帯電）は，試料表面を金属コーティングし導電性をＢ．対物絞りの径を小さくすると散乱コントラストが高くなる

良くすることで防ぐことができる

Ｃ．位相コントラストは焦点外れ量に依存しない

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ｄ．同じ物質であれば位相コントラストは試料の厚さに依存しない

問 36．電子で正しいのはどれか．

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ａ．エネルギーが高いほど波長が短い

問 45．電顕観察時の試料汚染の防止で正しいのはどれか．

Ｂ．陽子の約 2,000 倍の質量をもつ

Ａ．鏡体をベーキングして真空をよくする

Ｃ．磁界中を移動する電子に働く力はブラッグの法則に従う

Ｂ．O リングには真空グリースを十分につける

Ｄ．エネルギーの違いは色収差の原因となる

Ｃ．可能な場合は試料の加熱乾燥等を行う

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ｄ．試料台は素手で触れてもよい

問 37．電子銃で正しいのはどれか．

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ａ．電界放出型電子銃は熱電子放出型電子銃より高真空環境を必要とする

問 46．走査電顕像で正しいのはどれか．

Ｂ．陽極には正の高電圧が印加されている

Ａ．エッジコントラストを軽減するため二次電子を検出した

Ｃ．LaB6 陰極は室温で電子を放出させる

Ｂ．組成コントラストを得るため反射電子を検出した

Ｄ．ウェーネルト電極には負のバイアス電圧が印加される

Ｃ．チャージアップの影響を軽減するため二次電子を検出した

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ｄ．試料表面の微細な形状を観察するため二次電子を検出した

問 38．透過電子顕微鏡の電子レンズで正しいのはどれか．

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ａ．励磁電流が増加すると焦点距離は短くなる

問 47．写真フィルムで正しいのはどれか．

Ｂ．第１コンデンサーレンズはスポットサイズの調整に使用される

Ａ．写真特性曲線の傾きが大きいほど感度が高い

Ｃ．対物レンズの像面に位置する絞りが対物絞りである

Ｂ．乳剤層の厚さが薄いほど解像度は高い

Ｄ．対物レンズの物面（試料面）に位置する絞りが制限視野絞りである

Ｃ．写真作用は光化学反応によって生じる

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ｄ．乳剤層中に含まれる銀粒子が大きいほどコントラストは高い

問 39．走査電顕試料作製法で正しいのはどれか．

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ａ．帯電を防ぐために試料作製後に導電染色を行う

問 48．CCD カメラのデジタル画像で正しいのはどれか．

Ｂ．導電染色の効果として二次電子発生効率が向上する

Ａ．デジタル画像の最小構成単位を画素（Pixel，ピクセル）という

Ｃ．金属コーティングの効果として二次電子発生効率が向上する

Ｂ．画素サイズが大きいほどダイナミックレンジは狭くなる

Ｄ．コーティングの粒子は，金，金パラジウム，白金パラジウム，白金，

Ｃ．1,024 × 1,024 の記録媒体の総画素数は，約 10 万画素である

カーボンの順に大きくなる

Ｄ．画素に入力した光情報は電気信号に変換されて出力信号となる

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ
問 40．正しいのはどれか．

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ
問 49．元素分析法で正しいのはどれか．

Ａ．１気圧は 760 Torr である

Ａ．エネルギー分解能は WDS より EDS が高い

Ｂ．圧力は気体分子が壁に与える力の総和である

Ｂ．EDS は WDS に比べプローブ電流を多くする

Ｃ．１気圧は 105 Bar である

Ｃ．凹凸のある試料を EDS で分析した

Ｄ．１気圧は約 105 Pa である

Ｄ．絶縁物の分析を行う場合はカーボンなどを蒸着する

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

問 41．抵抗加熱蒸着法で正しいのはどれか．

問 50．正しいのはどれか．

Ａ．シャドーイングに使用される

Ａ．原子間力顕微鏡は試料内部構造の情報が得られる

Ｂ．大気中で蒸発した物質を試料表面に付着させる方法である

Ｂ．共焦点レーザー顕微鏡像から三次元立体構造の構築ができる

Ｃ．金属蒸着ではタングステンフィラメントに蒸発用金属線を巻きつける

Ｃ．走査トンネル顕微鏡は絶縁体試料の観察ができる

方法がある

Ｄ．油浸対物レンズを用いると光学顕微鏡の分解能は向上する
1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ

Ｄ．金属バスケットを用いて高融点金属を蒸着できる
1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ
問 42．正しいのはどれか．
Ａ．回折収差はレンズをいかに改良しても取り除くことができない
Ｂ．回折収差を小さくするには小さな孔径の絞りを使用する
Ｃ．球面収差を小さくするには小さな孔径の絞りを使用する
Ｄ．対物レンズの球面収差は分解能にほとんど影響しない
1．ＡとＢ 2．ＡとＣ 3．ＡとＤ 4．ＢとＣ 5．ＢとＤ 6．ＣとＤ
問 43．正しいのはどれか．
Ａ．非点収差は非点補正装置を使って補正する
Ｂ．非点収差は絞りの汚れや光軸の調整不良だけが原因である（ 3 ）2015 年度日本顕微鏡学会電子顕微鏡技術認定試験問題一級技士Ⅰ（生物）
問１～問６は全問解答し，問７～問 12 はその中から４問を選んで解答しなさい．なお，選択しなかった問の解答欄には，大きく × 印を記入しなさい．

【必須問題】

び，記号で答えなさい．（10 点）

図 1．図はラット肝臓の光顕写真（準超薄切片のトルイジンブルー染色）

う操作が脱水である．四酸化オスミウムで固定した試料では，（と電顕写真である．次の設問に答えなさい．光顕写真のスケールバーははあまり固定されていないため，エタノールを用いての脱水操作の過程

200 μm，電顕写真のスケールバーは 1 μm を示している．（10 点）で（２）される．脱水操作過程での（に，（３）濃度のエタノールでは，（樹脂包埋するためには組織の水分を除去する必要があり，そのために行

水には（

５

２

）で脱水した方がよい．脱）もよく用いられるが，エタノールより（５を必要とせず，直接樹脂と混合できる．ただし，（（

８５）系樹脂には，親水性の（９））をなるべく抑えるため

４

く脱水が不完全になりやすい．包埋に際して，（
素によって重合阻害を起こすため（

１

６

）しやす

）は，（
８

７

）剤

）系樹脂は，酸）の使用は避けた方がよい．
）や疎水性の（ 10

）などが

ある．
【語群】
Ａ．アクリルＦ．Lowicryl HM20

Ｅ．吸湿

Ｇ．膨張

Ｈ．飽和脂肪酸

Ｋ．アセトン

Ｌ．低

Ｎ．アラルダイト
Ｒ．収縮

Ｃ．LR White

Ｂ．メタクリレート

Ｄ．乾燥

Ｊ．不飽和脂肪酸

Ｍ．高

Ｐ．氷温

Ｓ．抽出

Ｑ．室温

Ｔ．ジメチルホルムアミド

Ｗ．置換
問 3．次に示す超薄切時のトラブルの原因を記しなさい．（10 点）
１）切片がリボンにならず，１枚１枚バラバラに切れてくる
２）切片にナイフマークが入る
３）切片に切削方向と直角にチャターが入る
４）ブロックの切削面がぬれる（水引き）
問 4．次の文章中の（）にあてはまる最も適切な語句を語群から選び，記号で答えなさい．（10 点）
透過電子顕微鏡の画像記録方法には，（録システムと，（

２

）や（

３

１

）を使用したアナログ記）を使用したデジタル記録システムがある．後者は薬剤を用いた現像処理が不要であり，その後の画像解析も簡便であることから近年増加傾向にある．
（

３）の場合，電子線像は（換される．その変換された（（

６

５）カップリング方式と（４）で検出され（５）に変）を撮像素子に伝達する方式には，
７）カップリング方式の２種類がある．
ま た， カ メ ラ の 取 り 付 け 位 置 に よ り，（（

９８）マウントカメラと）マウントカメラとに分類される．前者は，広い視野での観察が可能なので，大蛍光板と同じ感覚で使用できるが，
（

10

）が入り

やすい．一方，後者は，視野範囲がフィルムより著しく狭いが，その分（10）が小さい．

【語群】
Ａ．イメージングプレート

Ｂ．トップ

Ｃ．歪み

１）図ａで中央部分の染色が弱いのはなぜか．説明しなさい．

Ｄ．非点２）図ｂと図ｃの電顕写真はホルムアルデヒドあるいはグルタルアルデヒ

Ｇ．可視光像ドで固定したものである．ホルムアルデヒドで固定したものはどちらか．

Ｋ．レンズ

Ｌ．X 線像記号で答えなさい．

Ｎ．サイド

Ｐ．CCD カメラ

３）そのように判断した理由を記しなさい．

問 5．Ａ～Ｆは，ある組織切片上のライソソーム中の酵素活性を金属塩法

問 2．次の文章中の（を用いて電子顕微鏡レベルで検出する手順を示す．次の設問に答えなさ）にあてはまる最も適切な語句を語群から選（ 4 ）Ｅ．シンチレータ

Ｆ．明視野像

Ｈ．写真フィルム

Ｊ．ボトム

Ｍ．アンダー
Ｑ．ファイバーい．（10 点）

Ａ．糸球体内皮細胞

Ａ．ホルムアルデヒド単独，またはホルムアルデヒドとグルタルアルデヒ

Ｃ．糸球体上皮細胞（タコ足細胞） Ｄ．尿細管

ドの混合液にて固定後，（ⅰ）緩衝液で洗浄する

２）走査電子顕微鏡で組織の断面を観察するための割断法を簡単に説明しＢ．（ⅱ）（なさい．また，さらに細胞内小器官を観察する方法を簡単に説明しなさ

ａ）等で厚さ（ｂ）µm 程度の切片を作製する

Ｂ．糸球体基底膜
Ｅ．集合管

Ｃ．（ⅲ）基質を含む反応液に浸漬する

い．

Ｄ．蒸留水で洗浄後，後固定

３）動物組織では，細胞間質に線維が存在するため，細胞や組織が直接観Ｅ．エタノールによる脱水後，エポキシ樹脂包埋察できないことがある．それらの線維成分を取り除く方法を簡単に説明し

Ｆ．超薄切片作製後，（ⅳ）電子染色

なさい．

１）（

問 8．図ａはある上皮細胞シートを示している．図ｂはアの矢じり部分の

ａ

），（

ｂ

）に適当な語句を記しなさい．

２）下線部（ⅰ）について，緩衝液の種類によって使用できないものがあ拡大である．接着装置（細胞間結合装置）のところで超薄切片を作製しる．その緩衝液を挙げ，理由を述べなさい．

ている．
（1）この接着装置は細胞周囲をベルトのように取り巻いている

３）下線部（ⅱ）について，なぜ切片を作製する必要があるのか．理由を（ア，矢印と矢じり；イ，矢じり）．細胞間にはわずかの間隙が見られる．

述べなさい．

細胞質では接着装置に接して（2）細い線維束が密に走っている．スケー

４）下線部（ⅲ）について，反応液調製時に注意すべき点を二つ挙げなさ

ルバーは 1 μm を示している．（10 点）

い．
５）下線部（ⅳ）について，染色前に無染色切片も併せて観察する方が良い．その理由を述べなさい．
６）得られた反応が特異的反応か否かを判別するために陰性対照実験を行いたい．その方法を記しなさい．
問 6．次の文章中の（）にあてはまる最も適切な語句を語群から選び，記号で答えなさい．（10 点）
免疫組織化学とは，（

１）を利用して，組織や細胞中の（の局在を検出する手法である．免疫電顕では，（

３ ）や（で標識した抗体が利用される．直接法では標識物を（させるのに対して，間接法では（
（

７

５

２

）

４

）

）に結合

）や IgG の Fc 部分を認識する

６）が汎用される．微細構造の保存には，ホルムアルデヒドに低濃度（0.01 ～ 0.5％）の（８）を加えることが多い．非特異的染色の低減には，未反応アルデヒド基のクエンチングや（

９）によるブロッキングが有効である．反応が弱い場合には加熱処理による（ 10

）も有

効である．
【語群】
Ａ．抗原抗体反応

Ｂ．酵素反応Ｄ．架橋反応Ｅ．タンパク質

Ｇ．一次抗体Ｈ．二次抗体

Ｋ．HRP

Ｌ．GFP

Ｊ．抗原

Ｍ．金コロイド
Ｐ．プロテイン A

Ｎ．Ｇタンパク質
Ｒ．オスミウム

Ｃ．抗原賦活化
Ｆ．脂質

Ｓ．酢酸ウラニル

１）この接着装置（下線部１）の名称は何か．語群から選び，記号で答え

Ｑ．タンニン酸

なさい．

Ｔ．グルタルアルデヒド

Ａ．ギャップ結合

Ｗ．牛血清アルブミン

Ｄ．接着帯

Ｂ．ヘミデスモソーム

Ｃ．デスモソーム

Ｅ．閉鎖帯

２）細い線維束（下線部２）の名称は何か．語群より選び，記号を解答欄に記入しなさい．

【選択問題】

Ａ．グリアフィラメント

Ｂ．ケラチンフィラメント

Ｃ．アクチンフィ

ラメント
問 7．図はラット腎臓の割断面の走査電顕像である．図ｂは図ａの四角で

Ｄ．微小管囲んだ部分の拡大である．次の設問に答えなさい．（10 点）

３）この接着装置では，下線部２の線維束とは別なフィラメントが共同しＥ．ニューロフィラメント

て細胞の運動や収縮を起こしている．この別なフィラメントとは何か．名称を書きなさい．
４）図ａのアスタリスク（＊）で示される細胞小器官の名称とその働きを説明しなさい．
問 9．図は共生窒素固定が行われるインゲンマメ根粒の透過電顕像である．根粒の感染域には感染細胞（下側の細胞）と非感染細胞（上側の細胞）がある．根粒組織片を尿酸と DAB で処理する酵素細胞化学法を行う
ことにより，尿酸酸化酵素とカタラーゼが共局在する構造に電子密度の高い物質が沈着した．次の設問に答えなさい．スケールバーは 1 μm を示し
１）矢印で示した構造の名称を語群から選び，記号で答えなさい．

ている．（10 点）（ 5 ）最も適した支持膜を一つ選び記号で答えなさい．
Ａ．100 メッシュグリッドに貼った薄いカーボン膜
Ｂ．200 メッシュグリッドに貼った薄いカーボン膜
Ｃ．400 メッシュグリッドに貼った薄いフォルムバール膜
Ｄ．マイクログリッドに貼った薄いコロジオン膜
Ｅ．マイクログリッドに貼った薄いプラズマ重合ナフタレン膜
３）この写真はどのような方法を行った後に撮影されたものか，方法の名称を答えなさい．
４）この試料を作製するための具体的手順を説明しなさい．
問 12．図は液体培地で培養したある細菌の走査電顕像である．この菌はマクロファージなどの貪食細胞に取り込まれ，貪食細胞内で生存・増殖することができる細胞内寄生菌である．次の設問に答えなさい．（10 点）１）電子密度の高い物質が沈着した構造（*）は何か，その名称と判断した理由を書きなさい．
２）DAB 法で電子密度の高い物質を生成する原理を簡単に書きなさい．
問 10．図はアズキ発芽子葉に見られる子葉細胞の透過電顕像である．次の設問に答えなさい．（10 点）

１）スケールバーが示す長さとして適当なものはどれか．記号で答えなさい．また，その長さを選択した理由を簡潔に述べなさい．
Ａ．200 nm

Ｂ．2 μm

Ｃ．20 μm

Ｄ．200 μm２）液体培養した菌を走査電子顕微鏡で観察するための一般的な試料調製
手順を順序立てて箇条書きで説明しなさい．

１）写真中のＡ～Ｅの細胞小器官の名称を記入しなさい．
２）アズキ発芽子葉を固定・包埋するときの留意すべき点を簡単に説明しなさい．
問 11．図は A 型インフルエンザウイルスの 22 万倍の電顕写真である．次の設問に答えなさい．（10 点）

１）スケールバー（22 mm）の示す長さとして適当なものはどれか．記号で答えなさい．
Ａ．1 nmＢ．10 nmＣ．100 nmＤ．1 μm

Ｅ．10 μm２）高倍率で撮影する場合には，支持膜の選択が重要である．次のうち，（ 6 ）2015 年度日本顕微鏡学会電子顕微鏡技術認定試験問題一級技士Ⅱ（鏡体・共通技術）
問１～問７は全問解答し，問８～問 13 はその中から３問を選んで解答しなさい．なお，選択しなかった問の解答欄には，大きく × 印を記入しなさい．

【必須問題】

る．含水試料の観察では，試料温度を下げて水の（問 1．次の文章は電子レンズの収差について記述したものである．文章中

【語群】

の（

Ａ．試料前処理Ｂ．二次電子

Ｄ．電子ビーム

Ｅ．飽和蒸気圧10）を試料室圧力に近づけることで観察中の水の蒸発を抑制できる．
）にあてはまる最も適切な語句を語群から選び，記号で答えな

さい．（10 点）
電子線の（１）の変動，磁界レンズの（ンズの電極電圧の変動，電子の初速度の（（４（）によって生じる収差が（１５３は速い電子よりも強く曲げられるために（
６）の変動，電界レ），試料中での電子の）である．

）が変動した場合，電子の速度に（対して生じる（

２

３

５

８

）が生じ，遅い電子）が生じる．軸外の点に）は，像の倍率と回転角（磁界レンズのとき）が７）とＬ．偏向コイル

Ｍ．対物レンズＰ．相互作用理と，特徴を３つ簡単に記しなさい．（10 点）
問 5．EDS のメリットを WDS と比較して簡潔に２つ記しなさい．（10 点）
問 6．次の測定圧力範囲で使用される真空計の名称を記載し，その測定原理を簡潔に記しなさい．（10 点）
問 7．次の文章中の（９）は球面収差とともに無視できな

い．

Ｑ．高真空型走査電子顕微鏡

問 4．熱電子放出型電子銃と電界放出型電子銃について，解答欄に動作原）と呼ぶ．高倍率の像を観察する場合，光軸調整が良好である限）は無視できるが，（Ｆ．焦点合わせＪ．低真空型走査電子顕微鏡

６

り，（）にあてはまる最も適切な語句を語群から選び，記号で答えなさい．（10 点）電子の初速度の（３）が原因で生じる（

５）は，（を 高 め る か， 熱 電 子 源 よ り も 電 子 の 初 速 度 の（
（

Ｋ．無蒸着

Ｈ．電子銃

Ｎ．コントラスト電子の速度によって異なるために生じ，それぞれの収差を（（Ｇ．反射電子Ｃ．コンデンサーレンズ

10

３

１

）

）が小さい

）を用いることにより軽減できる．

【語群】

試料近傍にある（

減らすことができる．装置の排気系として（）と（３

Ａ．バラツキ

Ｂ．均一性

Ｄ．球面収差Ｅ．回折収差Ｆ．色収差の使用油の蒸気圧は（Ｇ．歪像収差Ｈ．非点収差Ｊ．軸外色収差

め，（Ｋ．軸上色収差

Ｌ．倍率色収差

Ｎ．電界放出型電子源
Ｒ．励磁電流（Ｍ．回転色収差

Ｐ．加速電圧）分子が電子衝撃により重合して試料に堆積
２

み合わせがある．（
Ｃ．エネルギー損失１することで試料が汚染するので，ガスの分圧が（５Ｑ．ビーム電流４）がある．ポンプの使い方の注意点として，たとえば（
４

６

７

３

）

）ので，低圧では蒸気の逆流が多くなるた）が動作する範囲で，圧力が高いうちに（作用があり，動作中は（
際は（

）の組

）は，低真空から排気可能で，代表的なものに

本排気に切り替えるのが望ましい．（

Ｓ．熱電子放出型電子源

３）ほど，汚染を

３

４

４

）による

）には，一種のダイオード）の油の逆流を防ぐが，ヒーター切れの）本排気を停止する必要がある．駆動部などの潤滑や真空問 2．透過電顕像のコントラストについて，以下の問いに答えなさい．

封止に（（10 点）とに使用する（

１）対物レンズの後焦点面に対物絞りを挿入することによって得られる像視できない場合，（のコントラストを何というか．

るが，（

２）１．で得られた像のコントラストを向上するにはどのようにすればよ（いか．方法を二つ記しなさい．

より試料が汚れるので，実験中は，温度を低く保つように注意が必要であ

10

８

９

）が使われるが，粘度や蒸気圧などに応じて，パーツご８）を使い分ける必要がある．装置からの汚染が無９）を利用すれば，試料汚染を防ぐことができ）が試料ホルダーに触れると，汚染がひどくなったり，）が生じたりする．また，（

９３）試料と相互作用せずに透過した電子波と相互作用により散乱した散乱

る．

波の干渉による像のコントラストを何というか．

【語群】

４）試料の端や孔の部分で観察されるフレネル縞のコントラストは，不足Ａ．窒化物系ガス

Ｂ．高い

焦点（アンダーフォーカス）と過焦点（オーバーフォーカス）ではどのよ

Ｄ．油拡散ポンプ

Ｅ．炭化水素系ガス

うに見えるか．

Ｇ．シリコングリース

問 3．次の文章中の（）にあてはまる最も適切な語句を語群から選び，記号で答えなさい．（10 点）
走 査 電 子 顕 微 鏡 は，（（

３１） か ら 放 出 さ れ た 電 子 を（）で細く絞って得られた電子線を（

４

２

）と

）を用いて二次元的）が室温に戻るとガス放出に

Ｃ．ジェット噴流型
Ｆ．直ちに

Ｈ．真空グリース

Ｊ．ゆっくりと

Ｋ．酸化物系ガス

Ｌ．冷却トラップ

Ｍ．エタノール

Ｎ．加熱ヒーター

Ｐ．試料ドリフト

Ｑ．低い

Ｒ．油回転ポンプ

Ｓ．スパッタイオンポンプ

Ｗ．試料からのガス出し

Ｔ．回転翼型

Ｘ．ダイヤフラムポンプに試料表面を走査する．真空中で電子線を物体（試料）表面に照射すると，電子と試料の（

５

）により（

陰極線蛍光などが発生する．（
（

６

６

），（

７

），特性 X 線，）は試料表面の微細構造観察に，

７ ）は試料の組成コントラストの観察に用いられる．一般的に走査電子顕微鏡は，10–4 ～ 10–5 Pa 程度の真空度で観察することから，水分を【選択問題】

含む試料は乾燥が必要である．しかし近年，含水試料をそのまま観察できる（

８）が開発され製品化されている．本装置を用いると，チャージ

アップが軽減されるメリットがあることから，（

９）観察が可能であ問 8．走査トンネル顕微鏡がレンズを使用せずに試料表面の拡大像を得ることのできる理由を説明しなさい．（10 点）（ 7 ）問 9．次の文章中の（）にあてはまる最も適切な語句を語群から選び，記号で答えなさい．（10 点）
走査電顕観察で電子線の入射方向に対して試料表面が（ると，二次電子や反射電子の発生量が（試料表面の（
量が最も（

４

２

）なり（

１
３

）してい
）なるが，

）と入射電子の方向が一致したとき，二次電子の発生５と一致させることで（７）なる．これを（

６）効果という．この効果によ

Ａ．傾斜

Ｂ．拡大

Ｄ．加速電圧
Ｇ．放射状

Ｃ．ブライトネス

Ｅ．電流

Ｋ． 電圧

Ｌ．対物絞りＮ．直線的較的平坦で凹凸が小さい試料では，試料台を傾斜させることによりコント

Ｒ．回転

ラストを（

問 12．次の文章中の（）ことができる．

また，試料端や突起物は二次電子放出に対する（

８）が平坦な部分２）なり，試料端や突起物が極端に（ントラストを示す．これを（９３）なることで，高いコ）効果という．反射電子観察ではこの効果は極めて少ない．加速電圧が高くなると，この効果によりこれらの部
10分の（）が見えなくなることがある．

Ｑ．伸縮

Ｔ．スクリーン）にあてはまる最も適切な語句を語群から

粒 体 分 散 法 を 考 え る 場 合， 粒 体 を 球 状 と す る と， 試 料 技 術 上 は
（

１

），（

２

），（

３

は一般に，表面活性が（）の３種類に分類できる．（

５）である．（２）のサイズのものは，（るものと，付着力の強いものがある．（

Ａ．多く

Ｂ．少なく

Ｄ．垂直に

Ｒ．側面

）によって落ち）のものは，（

７

）が弱

Ｆ．明るく

法を考える必要がある．いずれにせよ，粒子のサイズが（Ｌ．低める

Ｎ．無効面積３

６

く，たいていの場合落下するので，支持膜に固定するためには何らかの方

Ｈ．法線方向

Ｋ．高める

）の粒体

Ｃ．傾斜

Ｅ．暗く

Ｇ．水平方向１４ ），一度支持膜に付着すると，風を吹き付

けても水で洗っても落ちないという特徴があるので，分散させることは（【語群】

Ｐ．ワブラー
Ｓ．歪曲

Ｊ．投影レンズ

Ｍ．励磁電流選び，記号で答えなさい．（10 点）に比べて広いため，この部分からの二次電子の放出量は平坦な表面よりも（Ｆ．試料ホルダー

Ｈ．対物レンズり，表面の凹凸が大きい試料はコントラストがつきやすく，試料表面が比７）軸調整が完了する．

【語群】

Ｊ．傾斜角

Ｍ．有効表面Ｐ．微細構造）方が取処理上重要で，水にぬれない粒体はコロジオン膜の（

９

Ｑ．組織

分散させる．粉末を支持膜にふりかけて両者の（）だけで付着させ）にあてはまる最も適切な語句を語群から

【語群】

Ｓ．エッジ

10

るのであり，これを（問 10．次の文章中の（８

り扱いは容易である．粒径の大小を問わず，水に対するぬれやすさは試料

選び，記号で答えなさい．（10 点）

Ａ．大きく

１）電子線が結晶に入射すると規則的に並んだ原子により散乱され干渉波

Ｄ．0.5 μm 以下が生じる．この現象を（

）と呼ぶ．

Ｇ．小さく

２）１）で得られた図形から結晶の方位や原子面間隔などを知ることがで

Ｋ．表面活性きる．この図形のことを（

Ｎ．まちまちである

１
２

）と呼ぶ．

３）１）で得られた図形は，単結晶の場合は斑点となり，多結晶の場合

Ｒ．撥水性）を利用して）とよぶ．

Ｂ．数ミクロン程度

Ｃ．親水性

Ｅ．そろっている

Ｈ．付着力

９

Ｆ．応力

Ｊ．10 μm 以上

Ｌ．表面状態

Ｍ．容易Ｐ．困難

Ｑ．ふりかけ法

Ｓ．分散法

はリング状のパターンとなる．また，生物試料のような非晶質試料で

問 13．表は写真フィルムにおける現像処理過程を順に示している．表のは，ハロー状のパターンとなる．多結晶の場合のリング状のパターンを

（

（

３

）と呼ぶ．

４）原子面間隔 d の結晶に波長 λ の電子線が原子面と θ の角度で入射すると，2d sinθ の光路差のとき反射波が強めあう．電子の反射に係るこの条
件を（

４

）と呼ぶ．

５）４）の単結晶から得られる図形の斑点を形成する電子のみが通過する
ように対物絞りを設定して得られる像を（

５

１

処理過程

Ｂ．暗視野回折

Ｇ．デバイシェラーリング
Ｋ．ブラッグ条件

Ｅ．菊池像

Ｆ．電子回折パターン

１

２

）

（

３

）

10 ～ 20 分

18 ～ 21°C

30 ～ 60 分

8 ～ 23°C （ ９ ）フィルムが互いにくっつかないよう
に注意する

（

Ｍ．暗視野像）に）軸の調整を行う．（

２

）の（

３

）

）を周期的に変動させるとその変動に伴い，スクリーン上の像はある１点を中心にして（４）に広がったり縮んだりする動きを示す．この時の不動点を（１）軸と呼ぶ．電子ビームの（５）調整により，（

６）中心と一致させることで（

１）軸調整が完了する．

一方，（

７
８

１

）軸を（

）軸調整は，数万倍程度までの観察時に行う軸調整法で）の（３）機能を利用して（

８

）の（

９

）を

周期的に変動させると，その変動に伴い，スクリーン上の像がある点を中
心にして（

10

）する．この時の（ぶ．電子ビームの（10５ ）調整により，（） （ ７ ）
処理液の温度に注意する

２

あてはまる最も適切な語句を語群から選び，記号で答えなさい．（10 点）
高分解能観察時には，
（

６

（

Ｊ．格子像

問 11．透過電子顕微鏡の軸調整について述べた次の文章の（機能を利用して（

作業の要点

（

５

）

（

温度

18 ～ 21°C （）という．

Ｈ．逆格子リング

Ｌ．明視野像時間） 処理液により異なる

Ｃ．電子回折Ｄ．電子チャネリングパターン）に適切な文言を入れなさい．（10 点）

１

水洗

Ａ．明視野回折

10

（

【語群】

ある．（

）～（

）中心を（
７

７

）軸を（

）軸と呼
６

）中心

（ 8 ）

４

）

～ 60°C８）撹拌しむらを生じないようにする
処理時間は長すぎないようにする

温度に注意する（ 10 ）