NBRP Zebrafish
News Letter March 2023
平素より、ナショナルバイオリソースプロジェクト（NBRP）・ゼブラフィッシュの活動にご協力いただき、ありがとうございます。代表機関である理化学研究所・脳神経科学研究センターからニュースレターを配信いたします。NBRPゼブラフィッシュ第5期1年目がもうすぐ終わろうとしております。最近は特にリソース寄託のご依頼を多くいただいており嬉しく思っております。
来年度も、ご協力のほどよろしくお願い申し上げます。

利用者の声
国立循環器病研究センター研究所の菊地和先生に小型魚類研究にまつわるお話とNBRPゼブラフィッシュに関するお声をいただきました。
菊地 和
国立循環器病研究センター研究所
心臓再生制御部kikuchi@ncvc.go.jp
私は2019年に国立循環器病研究センター研究所、心臓再生制御部（旧・再生医療部）の部長として着任しました。
現在は段々と増えてきたラボメンバーとともに（図1）、ゼブラフィッシュを用いた再生研究と全身が透明な新規小型魚類モデルであるダニオネラの確立に取組んでいます。本稿を執筆する機会をいただき、私と小型魚類研究の関わりを振り返ってみました。
私と小型魚類モデルとの出会いは2005年に遡ります。大学院を2003年に修了し、Duke大学免疫学部でポスドクを始めて約2年が経過した頃でした。細胞の分化制御に興味があった私は、当時マウスを用いた血球分化の研究に取組んでいました。論文も出て順調と言える状況でしたが、毎日FACSのドットを眺めるうち、もう少しビジュアルな研究をやってみたいと思うようになりました。そんなある日、何となくセミナーに出席すると、知らないPI が心臓再生について発表しています。話を聞くうちにゼブラフィッシュの成体を用いた研究であると分かりました。前例がないため、研究は初期段階に止まっていましたが、限られたデータから仮説を構築し、メカニズムに迫ろうとする発表に感銘を受けました。学生に誰かと尋ねると、KenPossという細胞生物学部で独立したばかりの若手PIだと言います。ぜひ直接話を聞いてみ
図1 心臓再生制御部メンバー。後列中央が筆者。
たいと思いメールしたところ、オフィスに来いとすぐに返事がありました。
厳しいPIだと話す学生もいて緊張しましたが、対面するとKenはとても穏やかな人物でした。非常に謙虚で若干自虐的ですらあったのですが、自分の研究に静かな自信を持つ様子が非常に印象的で、ぜひ一緒に働いてみたいと思いながら話していました。すると、「心臓再生のプロジェクトはラボで誰もやる人材がいない」と嘆くではありませんか。
Kenの発表は私の周囲でも評判でしたので、ポジションの空きはないものと早合点しており、人材不足と聞いて驚き、同時にチャンスだと思いました。一瞬、色々な不安が頭をよぎりましたが、こういうチャンスは二度とないと思い、「すぐ移動するのでぜひ自分にやらせて欲しい」と伝えました。私の決意を聞いたKenは驚きつつも、嬉しそうに返事をしたのですが、それが「お前が大量殺人者（mass murderer）じゃなければ採用する」という変な返事だったので、一瞬当惑したのを憶えています。

Poss研では最初に大まかなテーマと方向性を話し合い、その後は各自が自由に研究を進めていました。進捗と展望は3ヶ月に一回程のペースで回ってくるラボミーティングで発表します。分野を変えた私には全てが新鮮で、毎日夜遅くまで実験し、自分が担当のラボミーティングには毎回徹夜で準備して臨みました。取組むプロジェクトは漠然としたもので、最初から論文の最終形が想定できるものではなく、試行錯誤の結果段々と形が見えてきます。ラボミーティングで核心的なデータを発表すると、そのままKenのオフィスで論文の方向性を話し合います。ノートを前に、二人で科学的に面白い展開やデータの組合せ方を色々考えると、今後必要となる実験がはっきりします。死んでいたデータや役立たずのトランスジェニックに、新たな意義を再発見することも多々ありました。私はこのミーティングが一番好きな時間で、この時に学んだことが今の自分の研究を支えていると思います。
論文が幾つか出るとPIポジションへの応募を薦められるようになりました。日本に帰る気もあまりなかったため、お声がかかるままにいくつかインタビューを受けました。結果、オーストラリアのシドニーにあるビクター・チャン心臓研究所という、小振りでアットホームな研究所に行くことにしました。アメリカに残らなかった理由の一つは、当時Kenは怒濤の勢いで活躍しており、国を変えた方が独立性を確立しやすいと感じたためです。また、インタビューで訪れたシドニーも非常に美しい都市で、とても気に入っていたことも重要な理由でした。
ビクター・チャンでは人件費とゼブラフィッシュの飼育費を維持するため、とにかくグラントの獲得に必死でした。当時はオーストラリアのグラント成功率が過去最低を記録しており、研究室を閉じて辞めていった友人PIが何人もいます。世界的な風潮でしょうが、オーストラリアでも臨床よりの研究が望まれており、ゼブラフィッシュの研究プロジェクトを通す作業は大変でした。私のオフィスの隣にはRichard Harveyという世界的に有名な心臓発生研究者がオフィスを構えていました。Richardは厳しい状況をものともせず、サメのようなどん欲さでグラントを獲得し、常時ポスドクを10人以上確保して自分の研究を遂行します。私は一番調子のいい時でポスドク3名、通常は1名の低空飛行です。そのRichardが誰もいない週末に、ひとりオフィスでグラントの一言一句に細心の注意を払い、ひたすら推敲に打ち込む姿を目の当たりにして、研究を継続することの厳しさを学びました。
オーストラリアは他の地域と隔絶している
Danionella cerebrum
ためか、国内で盛んに研究会を開催しています。その際に複数のゼブラフィッシュ研究者から、国立循環器病研究センター（国循）の望月直樹部長（現・所長）の名前が度々会話にあがりました。そのつながりが発展
Tyrosinase-/し、思いがけず2019年に国循へ移動することになりました。国循では新しいスタートには新しいテーマが相応しいと考え、一つはマウスを用いた心臓再生研究、もう一つはビジュアルな研究への憧れを追求し、ダニオネラを用いたイメージング研究を開始す
図2 野生型（上）および色素欠損型（下）のダニオネラ成魚。
ることにしました。ダニオネラはゼブラフィッ
Benjamine Judkewitz博士 (Humboldt大学)より分与。
シュの近縁種ですが、稚魚だけではなく、成魚でさえも全身が透明な小型魚類です（図2）。組織損傷時の全身応答や臓器連関、病態の形成と進展、成体組織の維持に関わる幹細胞機能などを、生きたままに解析できる可能性を秘めています。組織透明性の維持機構を遺伝学的に解析できる可能性がある点も、非常に興味深いと思います。
国循に着任後、資金を集めてゼブラフィッシュの飼育ラックの拡充を進めていましたが、その際に望月所長から「透明メダカ」に興味があるか、と尋ねられたのがダニオネラを知ったきっかけです。「メダカもいいですねー」などと気楽に返事をして飼育法を調べていたのですが、Humboldt大学のJudkewitza博士から送られてきたパッケージを開けると、それは全然メダカではありませんでした。透明でとても美しい小型魚類が出てきて、ラボのメンバーも一気にやる気になりました。現在は大規模飼育を開始してから一年ほど経ち、トランスジェニックも出始め、今後の展開を大変楽しみにしています。
国循に着任後は小型魚類研究会に参加し、光栄にも2022年の研究会を主宰することが出来ました。研究会に参加された皆さまにはこの場を借りて改めてお礼申し上げます。また、NBRPゼブラフィッシュの運営委員会にも参加させていただき、そこで初めてのこのプロジェクトの貢献度の高さを知りました。提供リソースの質と公共の精神が高いレベルで両立している、世界に誇るべきプロジェクトだと思います。今後もこのプロジェクトが適切に維持され、発展して行くように、私も微力ながら貢献させていただきたいと思います。
私はたまたま小型魚類研究の道に入りましたが、今まで続けてきた結果、様々な研究者との出会いを通じて成長することができました。また、日本に移動してからも、すぐに素晴らしい小型魚類研究コミュニティの一員となれたことは大変幸運なことと思います。今後ともどうぞよろしくお願い致します。

寄託募集-あ な た も 寄 託 を し ま せ ん か –理化学研究所脳神経科学研究センターは、ゼブラフィッシュ系統保存の代表機関であり、20万尾収容できる施設を設けております。外部研究機関からの系統の寄託受け入れを進んで行なっておりますので、遠慮をせずにぜひ寄託をしてください。寄託する際、寄託者の知的財産権は保護されます。
-凍 結 精 子 保 存 が 可 能 で す –凍結精子保存は系統のバックアップに最適です。魚をお送り頂けましたら、こちらで速やかに処理しサンプルを保存致します。処理する魚の条件は、健康な雄魚3〜5匹を目安としております。5匹から人工授精45回分のサンプルが確保できる計算です。
凍結精子サンプルは理化学研究所脳神経科学研究センターと基礎生物学研究所で相互バックアップ保存することにより災害対策をしており、「預けて安心!」です。
臨機応変に対応させていただきますので、お気軽にご相談ください。お待ちしております。

お知らせ-料金表が改正されます–
2023年4月1日より、理化学研究所脳神経科学研究センターの料金表が改正されます。理化学研究所では任期制職員の給与制度の変更に伴った人件費単価の変更および物品費の単価の変更があり、提供実費手数料に改正の必要が生じました。何卒ご理解のほどよろしくお願いいたします。
新料金表
単位
成魚
卵
卵（凍結）
箱代
カイロ代
繁殖代

手数料（円）
学術研究機関 非学術研究機関

系統
系統
系統
発送
発送系統

7,4007,33015,48051054031,770

14,80014,660
30,9601,0201,080
63,540実施機関
NBRPゼブラフィッシュは下記の3機関で実施しております。
- 代表機関 国立研究開発法人 理化学研究所・脳神経科学研究センター
代表者 岡本 仁- 分担機関 大学共同利用機関法人 情報・システム研究機構
代表者 川上 浩一- 分担機関 大学共同利用機関法人 自然科学研究機構
代表者 東島 眞一

ニュースレターに関する連絡先：
理化学研究所・脳神経科学研究センター
意思決定回路動態研究チーム
岡本 仁 (hitoshi.okamoto@riken.jp)〒351-0198 埼玉県和光市広沢2-1
Phone:048-467-9712 Fax:048-467-9714