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3T:VCEAF

O: 7
N DGB:HLR

マウス生殖工学関連試薬

商品概要
マウス生殖工学関連試薬は貴重な遺伝子改変マウスの凍結精子品質・体外受精率・過剰排卵数を改善します。

関連器具
精子輸送

卵子輸送

CARD冷蔵輸送キット

CapillaryLength(8 – 10 cm)
Glass Pasteur(Containing cotton plug toprevent pollution vention)

トライアングルカセット Short
マイクロピンセット
トライアングルカセット LongMouthpiece

Silicon tube (60 cm)

マイクロ剪刃
精子保存
ストロー

胚操作器具セット

ストロー操作
シリンジ

お問合せ先
TEL : 0942(82)6519 FAX : 0942(85)3175
E-mail: fertiup@kyudo.co.jp URL : http://www.kyudo.co.jp/

プログラム総会

１３：３０～１３：５０

１３：５５

開会挨拶

１４：００～１４：５０会長：横山 峯介

特別講演 １

座長：宮地 均ほ乳類性決定のエピジェネティック制御機構
立花誠 先生（大阪大学大学院生命機能研究科 エピゲノムダイナミクス研究室)

１４：５０～１５：００ 休憩

１５：００～１５：５０

特別講演 ２

座長：鈴木 宏志

ウシ体外受精卵の生産・普及活動および供給システムの開発
濱野晴三 先生（一般社団法人家畜改良事業団 家畜改良技術研究所）

１５：５０～１６：００

休憩

１６：００～１７：０５（発表１０分質疑応答３分）
一般講演

座長：安齋 政幸

１. 無菌マウスの計画的生産（16:00-16:13）○石倉知征 1、大縄悟志 2 、松田正史 1、近藤隆 1、手塚知栄子 1、飯塚裕介 1、辰巳宏美 1、川元由里衣 1、山本貴子 1、長谷川孝徳 1（1 国立研究開発法人理化学研究所生命医科学研究センター（IMS)、
2 慶応義塾大学医学部微生物学・免疫学教室）
２. マイクロ流路チップ・セルソーターを用いた精子選別に関する技術開発（16:13-16:26）○中尾聡宏 1、竹尾 透 1、渡邊仁美 2、近藤 玄 2、中潟直己 1(1 熊本大学生命資源研究・支援センター (CARD) 資源開発分野、
2 京都大学ウイルス・再生医学研究所統合生体プロセス分野)
３. ヤンバルクイナ精子の形態について（16:26-16:39）○田島淳史 1、伊達孝、杉田平三 2、木崎恒男 2、小林和夫 3、長嶺隆 4、
中谷裕美子 4、玉那覇彰子 4、向真一郎 4、金城道男 4、石川尚人 1、
浅野敦之 1、山本以智人 5、大沼学 6

1

(1 筑波大、2 多摩動物公園、3 恩賜上野動物園、4NPO 法人どうぶつたちの病院沖縄、
5 やんばる野生生物保護センター/ウフギー自然館、6 国環研)
４. ゲノム編集時における定型外翻訳機構を利用したミトコンドリア選択的欠損マウスの開発（16:39-16:52）○守田匡伸（東北大学大学院医学系研究科 環境医学分野）
５.CRISPR/Cas9 システムによる ROSA 遺伝子への KI（16:52-17:05）○宮地均（京都大学ウイルス・再生医科学研究所）

１７：０５～１７：１５ 休憩

１７：１５〜１７：４５（発表１０分質疑応答５分）
企業セッション

座長：中潟 直己

Ａ. 非アルコール性脂肪肝炎における血中 TAGE 測定の有用性（17:15-17:30）
土田 翔太（Bloom Technology 株式会社）Ｂ. 生殖工学に関するサポート事業について（17:30-17:45）
三小田伸之（九動株式会社）

閉会挨拶

１８：００～２０：００

副会長：浜野晴三

懇親会

北里大学白金キャンパス内「レストラン白金」
参加費：会員・非会員 4,000 円、学生 1,000 円。

※次回のお知らせ※第３８回動物生殖工学研究会
２０１９年１２月７日（土）予定
場所：北里大学白金キャンパス

2

特別講演

1
ほ乳類性決定のエピジェネティック制御機構
立花 誠
大阪大学大学院生命機能研究科 エピゲノムダイナミクス研究室

我々人間も含め、多くのほ乳類の性は遺伝的に決定する、というのが通念である。性染色体の型が XY であれば雄に、XX であれば雌になる。Y 染色体上の遺伝子 Sry（Sexdetermining region Y）は、ほ乳類の雄化に必須な遺伝子である。未分化性腺が精巣へと分化するためには、Sry が胎児性腺の特定期間に、かつその量がある閾値を超えるように発現することが必須である。Sry の発現が上記の条件を満たさなかった場合には、未分化性腺は卵巣へと分化する。この特徴的な Sry の発現がどのようなメカニズムにより生み出されるのか、これまでよく分かっていなかった。
真核生物のヌクレオソームを構成するタンパク質の 1 つであるヒストンは、アセチル化、リン酸化、メチル化などの様々な化学修飾を受け、遺伝子発現制御やその他のクロマチンの高次機能に深く関わっている。ヒストン H3 の 9 番目のリジン（H3K9）は、転写の抑制に働くエピジェネティックマークとして知られている。我々は、H3K9 の脱メチル化酵素の 1 つである Jmjd1a の機能を調べる目的で、そのノックアウト（KO）マウスを作成した。全く予期しなかったことに、XY, Jmjd1a-KO マウスでは雄から雌への性転換が高頻度で起きていることが分かった。マウスでは受精後 11.5 日の胎児の性腺で Sry の発現がピークを迎えるが、Jmjd1a-KO マウス胎児では Sry の発現が顕著に低下していた。いくつかの詳細な解析により、我々は Jmjd1a が Sry の転写を直接制御していることを示した。Jmjd1a は、Sry 遺伝子座の抑制的なエピジェネティック修飾を外すことでその転写活性化を援助していると考えられる。「酵素反応がほ乳類の性決定に重要である」という知見は世界的にも初であり、本研究成果は「性は受精のときに決定する」という一般的な概念の再考につながった。
その後の解析により、Jmjd1a の他にも様々なエピゲノム関連因子が Sry の発現制御に関わっていることを示す知見を得ている。本講演では、マウスの性を決めるエピゲノム制御の役割について、最新の知見を交えて紹介したい。

3特別講演２
ウシ体外受精卵の生産・普及活動および供給システムの開発
濱野晴三
一般社団法人家畜改良事業団 家畜改良技術研究所

ウシでの体外受精の試験研究は、人工授精が繁殖手法として普及していたこともあり、本格化したのは 30 年程前である。背景には平成 3 年に牛肉の輸入自由化が始まるに当り、国内生産農家の収益を保つため、我国固有の遺伝資源である黒毛和種の生産を乳牛の腹を借りて行うことを目途に発展した。一方、生産した胚移植は畜産新技術と呼ばれた時代であり、普及途上にあった。
体外受精卵の生産は、偽妊娠誘起処理を施した家兎卵管への仮移植から完全体外培養系へと移行期にあり、かつ高品質で大量生産を可能とする技術系の開発を目指すと共に、胚移植による子牛生産が活発に行われることを想定した。現在では体外受精という言葉自体が浸透しているが、当時は試験管ベービーと称さなければ概念の理解は得られなかった時代であり、「素晴らしい技術だが、隣家の牛に使ってくれ」と言われた生産者の言葉は今でも記憶に刻まれており、普及に軸足を置く必要性を感じた。
高品質な体外受精卵を大量生産するという目標に向かい、卵子の効率的な採取方法、成熟培養条件の設定、種雄牛毎の精子侵入率の違いの解消、発生培養等の各工程の精査を繰り返すことにあったが、共同試験によりβメルカプトエタノール(βME)を培地へ添加することが培養環境の改善につながり優良な胚盤胞を大量に生産する手法となった。
体外受精卵の凍結保存技術は、移植技術者が簡易に行える手法に焦点を定めたが、融解操作が浸透するまでに時間を要し、移植後の受胎率は惨憺たる結果となった。そこで、高度に発達した宅配システムを利用した胚の輸送方法の開発に着目し、38℃を維持する輸送器の開発と全国への供給体制を整えた。また、輸送培地にもβME の添加は多大な効果をもたらした。体外受精卵供給システムを確立しても供給個数は伸び悩んだが、体外受精由来産子の肥育後の枝肉成績が評価され、好調な産肉成績は家畜市場での子牛売買を徐々に定着させ、胚の供給個数も徐々に増加した。
しかし、牛海綿状脳症や口蹄疫の発生、世界的な金融危機は消費者の牛肉の購入欲を冷やし、その反動は子牛の売買へと波及し胚の供給個数にも影響した。また、テロの発生により輸送器内のバッテリーが航空貨物に搭載できなくなり、広域利用に陰りが射した。
その窮地は、iPS 細胞の輸送システムの確立に脱することができた。
現在は体外受精と言う言葉が定着し、利用方向も受益者により様々な提言がもたらされる状況へと発展を遂げているが、解決すべき問題も少なからずあることは事実である。
生産した胚盤胞が移植技術者の手を借り、子牛が無事に生まれること。即ち、繁殖技術の到達点には必ず子孫を得ることという考え方を持ちながら、普及定着までに四半世紀もの時間を要したが、一つの繁殖技術として定着したと感じている。今後も良質な胚生産の拡がりと、生産者と共に利用の展開を踏まえていきたい。

4

一般講演

１
無菌マウスの計画的生産○石倉知征 1、大縄悟志 2 、松田正史 1、近藤隆 1、手塚知栄子 1、飯塚裕介 1、
辰巳宏美 1、川元由里衣 1、山本貴子 1、長谷川孝徳 1（1 国立研究開発法人理化学研究所生命医科学研究センター（IMS)、2 慶応義塾大学医学部微生物学・免疫学教室）

当研究センターでは2005年から重度の免疫不全マウス飼育に伴い、ビニールアイソレーターを導入した。その後、腸内細菌が健康や寿命に深く関わっていることが明らかになってきたことから、無菌マウスやノトバイオートマウスを用いた研究を行うためにビニールアイソレーター利用の需要が高まり、2010年から無菌マウスの維持管理サービスに加え2014年から無菌マウス作製をセンターの支援業務に導入している。導入開始から、利用需要は高く、常に稼働率は100％に近い状態で推移している。2014年
から開始した無菌マウスの作製は研究者からの依頼に応じ、必要な時に必要な匹数を供給してきた。すでに40系統を超えるに至ったが、すべにおいて無菌化に成功している。
無菌検査はまず直接塗沫（新鮮糞便のグラム染色)で鏡検を行い、次いで培養検査（クックドミート培地、チオグリコレート培地、ポテトデキストロースブロス培地、ハートインヒュージョンブロス培地）によって菌の有無の確認を行っている。
無菌化依頼系統はC57BL/6J,6Nといった近交系統を用いた老化実験や、遺伝子と腸内細菌の関係や行動実験のために最近では遺伝子組み換えマウスの無菌化が大半を占めている。計画的に無菌化を進めるために、IVF、凍結胚による個体復元といった生殖工学技術が不可欠である。本発表では当施設における無菌マウスの計画的生産について紹介したい。
また、飼育スペース（アイソレーターの設置場所）不足が慢性化しており従来の小型ビニールアイソレーター(W1,200xD600xH500)を約半分のサイズの特小型ビニールアイソレーター(W600xD600xH600)に改良しスペースの確保が実現化できた。またアイソレーター運用方法の改良点も紹介したい。

5

一般講演

２

マイクロ流路チップ・セルソーターを用いた精子選別に関する技術開発○中尾聡宏 1、竹尾 透 1、渡邊仁美 2、近藤 玄 2、中潟直己 1
1 熊本大学生命資源研究・支援センター (CARD) 資源開発分野
2 京都大学ウイルス・再生医学研究所統合生体プロセス分野

哺乳動物の精子は、雌性生殖道内を通過する過程で精子が選別され、最終的に少数の精子が卵子に到達し、受精が完了する。精子の選別は、受精過程における重要な現象であり、受精の分子メカニズムの解明や生殖工学技術の改良に繋がる重要な鍵となると考えられる。精子選別に関する研究を行うためには、細胞分離に汎用されるセルソーターの利用が有効であるが、マウス精子は物理的ダメージを受け易く、従来のセルソーターでは運動能を維持したまま精子を回収することが非常に困難であった。そこで本研究では、精子選別研究の前段階として、細胞への侵襲性が低いことで知られているマイクロ流路チップを用いたセルソーターを用いて、マウス精子選別における有用性を評価した。
さらに、本技術を用いて精子選別に関する基礎的検討を行った。 精子および卵子はC57BL/6J 系統の雌雄成熟マウスより回収した。精子は、マイクロ流路チップ・セルソーターを用いて散乱光により回収し、回収精子の運動率、体外受精および人工授精における受精能を評価した。また、得られた胚の体外培養成績および移植による産子への発生率を評価した。精子選別では、蛍光色素 PNA Lectin-FITC による先体反応精子の染色を行い、選別精子の運動能および受精能を評価した。 マイクロ流路チップ・セルソータ
ーは、運動精子を回収することが可能であった。回収した精子は、体外受精により二細胞期胚が得られた。また、得られた胚は、胚移植により正常に産子へと発生した。また、マイクロ流路チップ・セルソーターにより蛍光標識した精子を選別することが可能であった。さらに、選別した精子から体外受精により二細胞期胚が得られた。

以上の結果から、マイクロ流路チップ・セルソーターは、マウス精子の運動能および受精能を維持した状態で、精子の選別が可能であることが示された。本技術は、受精の分子メカニズムの解明や新規生殖工学技術の開発に応用することが期待できる。

6

一般講演

３
ヤンバルクイナ精子の形態について○田島淳史 1、伊達孝、杉田平三 2、木崎恒男 2、小林和夫 3、長嶺隆 4、
中谷裕美子 4、玉那覇彰子 4、向真一郎 4、金城道男 4、石川尚人 1、
浅野敦之 1、山本以智人 5、大沼学 6(1 筑波大、2 多摩動物公園、3 恩賜上野動物園、4NPO 法人どうぶつたちの病院沖縄、
5 やんばる野生生物保護センター/ウフギー自然館、6 国環研)

［目的］絶滅が危惧される希少野生動物を飼育下で繁殖することは、遺伝資源を保存するために重要である。その中でも生息地が特定の地域に限定されている固有種は、生育環境の変化により個体数が減少する危険性が高いことから飼育下で人工繁殖させる必要性は高い。ヤンバルクイナ(Gallirallus okinawae)は、沖縄県沖縄島北部のやんばる地域に生息する固有種であり、新種記載 (Yamashina and Mano, 1981) された際の個体数は約 1,800 羽であったが、その後の調査により生息数が 1,000 羽以下に減少していることが明らかになった(環境省 2008)。そこで環境省はヤンバルクイナを絶滅危惧 IA 類に指定し、同地域に専用の保護施設を設立し人工飼育および飼育下繁殖に取り組んできた。そこで、本研究は、ヤンバルクイナの人工繁殖技術確立を目指した基礎研究として、同施設で飼育されている雄個体から精液を採取し、精子の形態を観察した。
［方法］環境省ヤンバルクイナ飼育・繁殖施設(沖縄県国頭郡国頭村安田)で飼育されているヤンバルクイナのうち、17 羽の雄から精液採取を試みた。採取された精液はニワトリ精液用の希釈液で希釈した後、エタノールで固定し光学顕微鏡で形態観察を行った。
［結果］ヤンバルクイナ精子 100 匹を観察した結果、その形態はニワトリ精子と類似しており、正常精子の全長は 57.9±0.6μm であった。一部に首曲がり精子、短尾精子が観察された。
［まとめ］本研究の結果から、ヤンバルクイナの精液採取は極めて困難であること、精子の形態はニワトリに類似しているがやや小型であることが明らかになった。

7

一般講演

４
ゲノム編集時における定型外翻訳機構を利用したミトコンドリア選択的欠損マウスの開発
守田匡伸

東北大学・院医・環境医学分野

CRISPR/Cas システムに代表されるゲノム編集法はその簡便さと効率の高さからの ES細胞を用いた従来の遺伝子改変動物作製を一変させた。ゲノム編集法は ES 細胞を必要としないことから ES 細胞が単離されていない動物種や植物、細菌まで幅広く応用されている。様々な遺伝子改変が行われる中で、ゲノム編集によって本来の AUG 以外から翻訳が開始する現象である定型外翻訳が生じ、想定外の翻訳産物が発現することが報告されている。本研究ではこの定型外翻訳を利用し、ミトコンドリア局在を示すタンパク質局在を制御しミトコンドリア選択的欠損マウスの作製・解析を試みた。
硫化水素が生体内で酵素的に生成されことが示唆されているがその生合成と代謝系には未だに不明な点が残されている。硫化水素の代謝には sulfide-quinone reductase(SQR)の関与が想定されているが、その代謝メカニズムや生理的機能は不明である。また、我々は SQR がミトコンドリアの膜電位形成とエネルギー代謝であるイオウ呼吸の維持に深く関わることを明らかにしつつある。SQR タンパク質はミトコンドリアに局在していることから CRISPR/Cas システムを用いて、SQR のミトコンドリア局在が阻害された SQR 機能不全マウスを作製した。翻訳開始 ATG を含む 14bp が欠損した SQR ゲノム編集マウス（SQRΔN 変異マウス）はメンデル則にしたがって出生し、外見に異常を伴わないが、生後 3 週間以降より成長遅延を示し、ほとんど体重増加を示さないまま、生後3 ヶ月以内に死亡した。SQRΔN 変異マウスにおいて SQR タンパク質の発現及び細胞内局在を調べたところ、本来と異なる位置から翻訳が開始する定型外翻訳により、SQR のミトコンドリア移行シグナルが欠損し、SQR のミトコンドリア局在が損なわれていることが示された。さらに、SQRΔN 変異 MEF ではイオウ代謝に依存した膜電位形成、すなわち電子伝達系機能が顕著に損なわれていることが分かった。また、電顕解析からは肝臓や骨格筋におけてミトコンドリアの膨張や空胞形成が観察された。CRIPSR/Cas システ
ムによるゲノム編集により、SQR の細胞内局在を変化させ、細胞質において SQR の硫化水素解毒代謝機能は維持したままでミトコンドリアの電子伝達系への電子・プロトン供給機能を阻害することで、イオウ呼吸が選択的に抑制された極めてユニークなエネルギー代謝異常マウスの開発に成功した。

8一般講演５
CRISPR/Cas9 システムによる ROSA 遺伝子への KI◯宮地均 1、北野さつき 1、伊藤克彦 2、生田宏一 11 京都大学ウイルス・再生医科学研究所、2 京都大学大学院医学研究科

CRISPR/Cas9 システムはマウスを始め他の種においても多くの成果を上げており、ゲノム編集技術の主流となっている。
我々は、京都大学ウイルス・再生医科学研究所附属感染症モデル研究センターのサービスとして、CRISPR/Cas9 システムを用いて遺伝子編集マウスの作製を行っている。
これまで、主に Mashiko ら（2013）（伊川研）の方法に準じて実施してきた。具体的には Addgene から入手したプラスミド px330 に標的配列を挿入し、最終濃度 5ng/uL または 10ng/uL に調製し、環状でマウス受精卵の前核にインジェクションを行なっている。
この方法で標的部位ゲノムの単純欠損を持つマウスは、効率良く作製する事が可能であった。また、同時に合成塩基配列をインジェクションする事で、２−３塩基の置換（アミノ酸の点変異）を持つマウスも、比較的効率良く作製する事が可能であった。一方、数十塩基配列を標的部位にノックインさせたマウスは、上記に比べ頻度が低い傾向にあるが、作製可能であった。しかし、数キロベースの塩基配列を、標的部位にノックインさせる事はかなり難しい状況であった。
そこで、我々はプラスミドではなく、Cas9 タンパク質、crRNA、tracrRNA および、それぞれ 1kbp 程度の相同領域をつけて環状にしたドナーDNA を同時にインジェクションする事により、数キロベースの塩基配列を、標的部位にノックインさせる事に成功した。まだ成功例は少ないが、今回の紹介が、ゲノム編集マウス作製の参考になれば幸いである。

9企業セッション Ａ
非アルコール性脂肪肝炎における血中 TAGE 測定の有用性
土田 翔太
Bloom Technology 株式会社
終末糖化産物(Advanced Glycation End-products: AGEs)はタンパク質と糖及び糖代謝中間産物が非酵素的に反応し、生成される構造物である。これまで様々な糖由来のAGEs が 報 告 さ れ て き た が 、 そ の 中 で も グ リ セ ル ア ル デ ヒ ド か ら 形 成 さ れ るAGEs(Glycer-AGEs, Toxic AGEs: TAGE)が強い細胞障害性を有している事が竹内らによって見出された。また、TAGE は強い細胞障害性をもつだけでなく、糖尿病及びその合併症、非アルコール性脂肪肝炎(non-alcoholic steatohepatitis: NASH)、不妊症、癌、アルツハイマー病などの疾患の患者血清において TAGE 量が増加する事が示されており、TAGE 量測定が様々な疾患のバイオマーカーとなる可能性が示唆されてきた。しかし、TAGE はタンパク質に形成された低分子構造であるため、ポリクローナル抗体を作製する際のロット間差が大きい事が問題となっていた。そこで我々は TAGE の低分子構造を特異的に認識するマウスモノクローナル抗体産生株の樹立を行い、ポリクローナル抗体での TAGE 測定と相関関係を示す測定法の確立に成功した。
NASH は脂肪肝から進展する疾患である。現在、本邦において脂肪肝患者は 1000 万人、その内 100～200 万人が NASH へと進行すると推定されており、食生活の欧米化と運動不足から今後も増加すると考えられている。NASH は発症後、肝硬変、肝がんと予後不良な疾患へと進行するため、早期発見・早期治療が必要である。しかし、NASH の診断には侵襲性が高い肝生検が必要であるため、低侵襲性の新たな診断法の確立が求められている。
そこで本研究では NASH 診断において血中 TAGE 量測定が有用かを検討するため、NASH病態モデルマウスの 1 つである STAM マウスの経時的な病態の変化と血中 TAGE 量の推移を評価した。
STAM マウスは生後 1.5 日の C57BL/6J 雄にストレプトゾトシンを投与、離乳後に高脂肪食で飼育した。また、対照群は生後 1.5 日の C57BL/6J 雄に生理食塩水を投与、通常食で飼育した。これまでの報告で STAM マウスは 6 週齢で脂肪肝を発症し、8 週齢で NASH、10 週齢で線維化、12 週齢で肝がんへと進行すると報告がされているため、4、6、8、10、12 週齢の各週齢で採血、肝臓を回収し、血中 TAGE 量と肝臓の組織変化を評価した。その結果、対照群と比較して、STAM マウスは 4 週齢の時点からすでに血中 TAGE 量が有意に高値であり、その後 8 週齢まで増加傾向にあるが、10 週齢、12 週齢ではそれ以上の増加が認められなかった。これらの結果から、血中 TAGE 量は糖尿病の時点ですでに高値であり、その後脂肪肝、NASH へと病態が進行するにつれてさらに増加する事が明らかになった。以上の結果より、NASH の診断において、血中 TAGE 量測定が有用である事が示唆された。

10企業セッション Ｂ
生殖工学に関するサポート事業について
九動株式会社
三小田 伸之弊社は、これまで、マウス生殖工学における試薬と、偽妊娠マウスの提供、生殖工学を利用したマウスの繁殖と供給を手がけてきた。その概要とサービスについてご紹介したい。

生殖工学関連試薬の製造と販売
熊本大学生命資源研究・支援センター動物資源開発研究施設(CARD)・資源開発分野の技術指導の元、マウス精子凍結保存液、マウス精子前培養培地、体外受精培地、胚凍結融解試薬ならびにマウス過剰排卵誘発剤を製造販売している。これらの試薬については熊本大学からライセンス提供を受けて CARD シリーズとして販売している。

偽妊娠マウスの作製と供給
生殖工学技術を用いて得られた胚を生体に復元するために、偽妊娠マウスが必要である。弊社においても偽妊娠マウスを作製し、各研究機関に提供してきた。近年、免疫不全動物をバックグラウンドとする体外受精由来胚を生体に復元する必要性から、偽妊娠マウス雌親の微生物学的管理が求められてきた。弊社は、これらのニーズに対応するため、ビニールアイソレーター内にて偽妊娠マウスを作製し供給する方法を用いている。

これら体外受精、胚移植、偽妊娠マウスの微生物管理により、病態モデルマウスの大量供給を行っている。

11

MEMO

12

For laboratory use only

Product OutlineCARD HyperOvaⓇ （特許第5927588）は従来の過剰排卵誘起法（PMSG、hCG）と比較して、より⾼効率に排卵を誘発する超過剰排卵誘起剤です。従来法ではマウス1匹あたり平均20個程度（C57BL/6J）の卵⼦しか得られませんでしたが、CARD HyperOvaⓇを⽤いると従来法の3〜4倍の卵⼦を得ることが可能となります。

Effects of CARD HyperOva®
Ⅰ．使用動物数の削減（3Rsへの寄与）
採卵に⽤いるメスの数を1/3〜1/4に削減することが可能となります。
Number ofovulated oocytes

120

CARD HyperOva®

100

PMSG, hCG
806040200
C57BL6/J

BALB/c ByJ

C3H/HeJ

DBA/2JFVB/NJ

CD1・ 4週令メス個体へCARD HyperOvaⓇもしくはPMSG 7.5 IUを投与後、48時間後にhCG 7.5 IU を投与。hCG投与後、17時間後排卵された 卵子をそれぞれ回収しました。
・ 本データは国立大学法人熊本大学生命資源研究・支援センター資源開発分野教授 中潟直己先生および講師 竹尾透先生の文献より掲載しました。

II. 遺伝子改変マウスの作製、保存の効率化少ないメスマウスから従来より多くの卵⼦を排卵させることで、体外受精や胚移植が簡便となります。
III. 貴重な遺伝子改変マウスへの応用
貴重な遺伝⼦改変マウスにおいても、CARD HyperOvaⓇ を⽤いることで、少数のメスから多数の卵⼦が得られ、胚の⼤量作製が可能となります。
お問合せ先TEL : 0942(82)6519 FAX : 0942(85)3175
E-mail: fertiup@kyudo.co.jp URL : http://www.kyudo.co.jp/