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沼津工業高等専門学校研究報告
第 53 号，2019 年 1 月

香煎茶加工したオクミドリ碾茶，ベニフウキ緑茶，ベニフウキ紅茶，セイロン紅茶の糖吸収抑制作用
芳野恭士 *1・窪田巧輝 *1・杉本奈央 *1・清水篤 *2

Suppressive Effects of Kosencha-processed 'Okumidori' tencha, 'Benifuuki' green tea,
'Benifuuki' black tea, and Ceylon black tea on Absorption of Saccharides
Kyoji YOSHINO *1, Kohki KUBOTA *1, Nao SUGIMOTO *1, Atsushi SHIMIZU *2
Abstract: In this study, we investigated the suppressive effects of Kosencha-processed teas
prepared from green tea, Tencha (a kind of green tea), and black tea on the absorption ofsaccharides. Kosencha-processed tea is a secondary fabricated tea product which is made by atreatment with high temperature and high pressure. In in vitro study, the inhibitory functionsof the extracts prepared from ‘Yabukita’ green tea, ‘Okumidori’ Tencha, and ‘Benifuuki’ green
tea on rat small intestinal-glucosidase activities were stronger than those of Benifuuki black
tea and Ceylon black tea. These functions of the extracts from the Kosencha-processed teas
tended to be lower than those of the corresponding original teas. The strongest functions wereobserved in cases of Okumidori Tencha. In in vivo study, starch and sucrose were orally
administered simultaneously with the extracts of Okumidori Tencha and its Kosencha to
4-week-old male ddY mice. The oral administration of the extracts of Okumidori Tencha and its
Kosencha suppressed the elevations of the plasma glucose levels as well as Yabukita green tea
and its Kosencha. No distinct effects on the activities of mouse small intestinal amylase,
maltase, and sucrase were observed. Kosencha-processed teas could be a novel beneficial
beverage for inhibiting the absorption of saccharides.
Key Words: Camellia sinensis, Leaf, Kosencha, Green tea, Black tea, Saccharide

１．はじめに茶は、その栽培方法の違いにより「煎茶」や「覆い茶」

茶（Camellia sinensis L.）は、世界中で摂取されているなどがあり、また、摘採後の発酵による 1 次加工で「緑茶」、飲料の 1 つである。日本における茶の生産量は、平成 17「烏龍茶」、「紅茶」が製造される。さらには、これら 1 次年まで急激に増加し、その後は微減して一定となっている

加工茶を原料として2 次加工を行うことで、「プーアル茶」[1]。この生産量の増加は、緑茶飲料の消費拡大によるものや「香煎茶」といった加工茶が製造されている。香煎茶加であり、現在、緑茶飲料の約 85%がペットボトル容器で製工は、緑茶などの 1 次加工茶を飽和水蒸気下で高温（160造されている[2]。緑茶飲料の生産量は、経年変動の少ない～200℃）、高圧処理するものであり、茶の渋味の軽減と香他の茶飲料を大きく上回っている[3]。一方で、日本におけばしさの付加、クリームダウン現象の防止、一般細菌や耐る緑茶の栽培品種は‘ヤブキタ’が 75%を占めており、他熱性菌の殺菌が期待される[4]。の品種はなかなか増加しない状況にある[1]。今後、消費者

我々は、これまでにヤブキタ緑茶と烏龍茶、それにこれの多様な需要に合わせて、味、香り、色の違い、機能性のらを香煎茶加工した茶葉エキスについて、糖消化酵素活性違い、食品に添加する形状等、様々な栽培品種や加工方法の阻害作用があることを報告してきた[4,5]。そこで、今回の利用が求められるものと考えられる[1,3]。

は‘オクミドリ’を栽培品種とする覆い茶の一種である碾
茶、国内紅茶用の栽培品種である‘ベニフウキ’から製造*1 物質工学科
Department of Chemistry & Biochemistry*2 サンダイヤ株式会社
Sundia Co., Ltd.

された緑茶と紅茶、それに一般的なセイロン紅茶の 4 種について、それぞれ香煎茶加工したものを用いて、その糖消化酵素活性の阻害作用について検討した。

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２．材料および方法
２．１ 茶の試料およびその抽出物の調製

第 53 号

各抽出物の葉からの収量は、ヤブキタ緑茶 18.5 %(w/w)、その香煎茶 26.0%、 オクミドリ碾茶 21.0 %、その香煎茶31.4 %、ベニフウキ緑茶 25.7%、 その香煎茶 31.5%、ベ

ヤブキタ緑茶、オクミドリ碾茶、ベニフウキ緑茶、ベニ

ニフウキ紅茶 31.3 %、その香煎茶 21.4 %、セイロン紅茶

フウキ紅茶、セイロン紅茶およびこれらを香煎茶加工した22.3%、 その香煎茶 18.6%である[6]。ヤブキタ緑茶、オ茶は、香煎茶研究会より供与された。それぞれの茶葉 20 g

クミドリ碾茶、セイロン紅茶の収量はほぼ違いが見られなに、2.5 L の熱水を加え 10 分間抽出した。抽出液をろ紙でいが、ベニフウキでは特に紅茶での収量が他よりも多い。

ろ過後、ろ液を凍結乾燥することでそれぞれの抽出物を得

また、碾茶を含む緑茶では香煎茶加工により収量が増加すた。

るのに対し、紅茶では香煎茶加工で低下する。
AB

C

DEFG

H

I

J

図 1 各種茶葉とその抽出物の外観
A ヤブキタ緑茶, B ヤブキタ緑茶香緑茶, C オクミドリ碾茶, D オクミドリ碾茶香煎茶, E ベニフウキ緑茶,
F ベニフウキ緑茶香煎茶, G ベニフウキ紅茶, H ベニフウキ紅茶香煎茶, I セイロン紅茶,
J セイロン紅茶香煎茶

香煎茶加工したオクミドリ碾茶，ベニフウキ緑茶，ベニフウキ紅茶，セイロン紅茶の糖吸収抑制作用

図 1 に、各種茶とその抽出物の写真を示す。緑茶と碾茶では、香煎茶加工で茶葉および抽出物の褐色化が見られたが、紅茶では抽出物の色が薄くなった。

43に従った。
マウスを 1 群 5 匹に分け、それぞれにスターチまたはスクロースの 160 mg と、茶抽出物 100 mg を含む水溶液 0.5 mL を経口投与した。投与 30 分後、エーテル麻酔

２．２ in vitro での茶抽出物の糖消化酵素活性阻害作用下でマウスの心臓より採血し、血漿を調製した。血漿グの測定[7]ルコース濃度は、前述の臨床検査用キットを用いて測定

シグマ社製のラット小腸アセトンパウダー50 mg にした。茶の抽出物と糖の両方を含まない水のみを投与し0.1 M リン酸緩衝液(pH6.5)15 mL を加え、超音波処理た対照群、糖のみを含む水溶液を投与した糖投与群も用を 2 分間行った後、遠心分離を行った。
得られた上清を、意した。茶抽出物としては、ヤブキタ緑茶、ヤブキタ緑糖消化酵素である-グルコシダーゼの溶液として用いた。

茶香煎茶、オクミドリ碾茶およびオクミドリ碾茶香煎茶

基質(マルターゼ活性を測定する場合には 2%マルトーを用いた。

ス水溶液、スクラーゼ活性を測定する場合には 4%スク

また、マウス小腸における糖の消化酵素活性を、次のよロース水溶液)0.4 mLに、-グルコシダーゼ溶液0.5 mL、うに測定した。前項の実験において、茶の抽出物と糖の投評価試料溶液(茶抽出物溶液またはコントロールとして与 30 分後に、マウスの小腸上部を約 10 cm の長さで採取水)0.1 mL を加え、37℃で 30 分間反応させた。反応後、し、生理食塩水で 20%ホモジネートを調製した後、反応溶液に 0.05N 水酸化ナトリウム溶液 1 mL を添加、11,000×g で 30 分間遠心分離した。得られた上清を粗酵素混合して反応を停止させた。この溶液のグルコース濃度液とし、糖の消化酵素の活性を測定した。粗酵素液に基質を和光純薬工業社製臨床検査用測定キット、グルコースとしてスターチまたはスクロースを加えたときに生成すCⅡ-テストワコーを用いて測定した。
茶抽出物としては、るグルコース量を前述の臨床検査用キットで測定し、マル

ヤブキタ緑茶、ヤブキタ緑茶香煎茶、オクミドリ碾茶、ターゼ＋アミラーゼおよびスクラーゼの活性を、小腸 1 g

オクミドリ碾茶香煎茶、ベニフウキ緑茶、ベニフウキ緑あたり 1 時間に生成するグルコースの mg 数で表記した。

茶香煎茶、ベニフウキ紅茶、ベニフウキ紅茶香煎茶、セマウスの実験データは、平均±標準偏差で表記した。

イロン紅茶およびセイロン紅茶香煎茶を用いた。反応時

実験群間の平均値の差の有意性については、一元配置分間 0 分の試料として、上記の操作とは別に、基質、酵素散分析法(one-way ANOVA)で解析し、続けて Tukey のおよび評価試料を混合した直後に反応を停止させた溶液

多重比較法を用いて検定した。p<0.05 を統計学的に有意を用意し、グルコース濃度の測定を行った。なお、-グであるとした。

ルコシダーゼ溶液は、使用する当日に調製したものを用いた。以下の式を用いて、酵素活性の阻害率を算出し、各茶水抽出物について 50%阻害濃度(IC50 値)を求めた。
同じ実験を 3 回行い、平均±標準偏差を求めた。
阻害率(%) (C30)  (C0)  (I30)  (I0)  100
(C30)  (C0)

C0：コントロールの反応時間 0 分の吸光度(505 nm)

３．結果および考察
３．１ in vitro での茶抽出物の糖消化酵素活性阻害作用
オクミドリ碾茶、ベニフウキ緑茶、ベニフウキ紅茶、セイロン紅茶、および比較対照としてのヤブキタ緑茶とそれらの香煎茶の抽出物について、ラット小腸マルターゼおよ

C30：コントロールの反応時間 30 分の吸光度( 〃 )びスクラーゼの活性に対するIC50 値を測定した結果を図 2

I0：評価試料添加の反応時間 0 分の吸光度( 〃 )に示す。

I30：評価試料添加の反応時間 30 分の吸光度( 〃 )いずれの茶抽出物もマルターゼとスクラーゼの活性を阻害したが、香煎茶加工することによりその活性が低下す

２．３ マウスの糖吸収に対する茶抽出物の影響[7]る傾向が見られた。ただし、２．１に示したように緑茶お日本 SLC 社より購入した、4 週齢の雄性 ddY 系マウ

よび碾茶では香煎茶加工により抽出物の収量が増加するスを用いた。マウスは、12 時間間隔で照明が点灯・消灯ことから、同重量の茶葉で飲用した場合には、これら糖消する 25℃の部屋で飼育し、実験中は水道水と実験動物用化酵素の活性に対する作用の差は軽減されるものと予想標準飼料を自由に摂取させた。実験の全期間を通じて、される。

実験動物の取り扱いは、文部科学省「研究機関等におけ茶の 1 次加工方法の違いで比較すると、いずれの糖消化る動物実験等の実施に関する基本指針」に準じた｢沼津工酵素活性に対する阻害作用も、緑茶と碾茶の方が紅茶に比業高等専門学校における動物実験に関する指針｣の規定較して強いことがわかった。
この結果は、
in vitro での- グ

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第 53 号方が製造されている。また、ベニフウキ緑茶を香煎茶加工

ヤブキタ緑茶

マルターゼ

〃 香煎茶

した場合、メチル化カテキンの約 65%が残存する[11]。オ
クミドリ碾茶のマルターゼおよびスクラーゼ活性の阻害

オクミドリ碾茶

作用は、これら 2 種の緑茶よりも強かった。碾茶は、摘採〃 香煎茶

前に茶樹を被覆して栽培する覆い茶の 1 種であり、生葉を蒸して柔捻せずに乾燥させて製造する。香ばしいかぶせ香

ベニフウキ緑茶とアミノ酸含量の高さが特徴で、これを粉末にすると抹茶〃 香煎茶になる。近年、煎茶の生産量が漸減しているのに対し、碾

ベニフウキ紅茶

茶を含む覆い茶の生産量は、粉末として食品に添加する等〃 香煎茶の利用もあってか、主生産地の近畿および東海地方においセイロン 紅茶て増加している[12]。2 種の紅茶の中では、マルターゼおよびスクラーゼのいずれにおいても、セイロン紅茶の方が〃 香煎茶

ベニフウキ紅茶よりもその活性阻害作用が強かった。
0200
400
IC 5０ 値（g/mL）

ヤブキタ緑茶スクラーゼ

２．３ マウスの糖吸収に対する茶抽出物の抑制作用
in vitro でのラット小腸マルターゼおよびスクラーゼの〃 香煎茶

活性阻害作用が強かったオクミドリ碾茶とその香煎茶にオクミドリ碾茶ついて、スターチまたはスクロースを単回経口投与したマウスでの、茶抽出物の同時投与における血糖値上昇抑制作〃 香煎茶用について検討した。比較対照として、ヤブキタ緑茶とそベニフウキ緑茶の香煎茶についても同様の検討を行った。結果を図 3(A)〃 香煎茶に示す。

ベニフウキ紅茶

スターチおよびスクロースともに、糖のみを投与したマ〃 香煎茶

ウスの血糖値は対照群に比較して上昇する傾向が見られた。スターチの投与では、用いた 4 種の茶抽出物のいずれセイロン紅茶も血糖値の上昇を抑制する傾向が見られたが、特にオクミ〃 香煎茶

ドリ碾茶で有意な効果が認められた。スクロースの投与で
0500
1000
IC 5０ 値（g/mL）は、用いた 4 種の茶抽出物のいずれも血糖値の上昇を有意に抑制したが、やはりオクミドリ碾茶の効果が最も強かっ

図 2 ラット小腸マルターゼ活性およびスクラーゼ活性にた。オクミドリ碾茶香煎茶の効果は、ヤブキタ緑茶香煎茶

対する 10 種の茶抽出物の阻害作用よりも強かった。これらの結果から、オクミドリ碾茶とそ平均値±標準偏差．N=3．の香煎茶は、ヤブキタ緑茶とその香煎茶に比較して強い糖吸収抑制作用が期待できるものと考えられる。

ルコシダーゼ活性に対する阻害作用が紅茶よりも緑茶でこのときのマウス小腸の糖消化酵素活性を測定した結強い、また、ラットにおける糖吸収抑制作用も紅茶よりも果を図 3(B)に示す。スターチを投与したマウスの小腸では、緑茶で強い[8]というこれまでの報告と一致している。

スターチを基質としたときのグルコースの生成量は、各群次に栽培品種の違いで比較すると、2 種の緑茶では、マ間で著しい差は認められず、対照群に比較してオクミドリルターゼ活性に対する阻害作用はヤブキタよりもベニフ香煎茶投与群でのみ有意に高い値が見られた。スクロース

ウキで、スクラーゼ活性に対する阻害作用はベニフウキよを投与したマウスの小腸では、スクロースを基質としたとりもヤブキタで、それぞれ強かった。ベニフウキは国産のきのグルコースの生成量は、対照群に比較して有意に低か紅茶用栽培品種として開発されたものであり、ヤブキタにった。4 種の茶抽出物投与群では、スクロース投与群に比比較してカテキン含量が高い[9]だけでなく、その茶葉には較して低下する傾向が見られた。しかし、スターチ、スク抗アレルギー作用を持つメチル化カテキンが含まれていロースのいずれの実験でも、4 種の茶抽出物を投与したマる[10]。メチル化カテキンは、ベニフウキを発酵させて紅ウス小腸の糖消化酵素の活性の高さと in vitro でのその活茶にすると低減することから、現在、その緑茶と紅茶の両性阻害作用の強さとの間に一定の関係は認められず、茶抽

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香煎茶加工したオクミドリ碾茶，ベニフウキ緑茶，ベニフウキ紅茶，セイロン紅茶の糖吸収抑制作用(A)

p<0.05対照

対照

スターチスクロース+ヤブキタ緑茶+ヤブキタ緑茶+ 〃 香煎茶+ 〃 香煎茶
p<0.05+オクミドリ碾茶+ 〃 香煎茶0(B)

p<0.05+ 〃 香煎茶

p<0.050

対照

対照

スターチ

スクロース

+ヤブキタ緑茶+ヤブキタ緑茶+ 〃 香煎茶+ 〃 香煎茶+オクミドリ碾茶+オクミドリ碾茶
p<0.050

p<0.05+オクミドリ碾茶

100200
血糖値（mg/dL）+ 〃 香煎茶

p<0.0550100150
血糖値（mg/dL）

200

p<0.05+ 〃 香煎茶

24681012小腸マルターゼ活性（Glu mg/mL）

0123小腸スクラーゼ活性（Glu mg/mL）

図 3 各種茶抽出物の糖投与マウスの血糖値と小腸糖消化酵素活性に対する作用平均値±標準偏差．N=5．糖投与群との有意差を図中に示した．
出物が示したマウス血糖値上昇抑制作用への糖消化酵素ール成分が関与しているものと考えられる。しかし、それ活性阻害作用の影響については明確にはならなかった。こぞれの茶抽出物の作用の強さの違いに関係する成分は、今

れは、マウス小腸の糖消化酵素活性が上昇しなかったためのところ明確になっておらず、香煎茶加工された茶抽出物に茶抽出物のそれに対する阻害作用が評価し難かったたの有効成分も含め、その解明は今後の課題である。

めと考えられる。in vitro で観察されたこれら茶抽出物の糖消化酵素活性阻害作用は、マウスにおける糖吸収抑制作用の一部には寄与しているものと予想される。
茶の糖吸収抑制作用に関わる成分としては、ポリフェノ４．参考文献[1] 根角厚司 (2014): 第 29 回茶学術研究会講演会講演要ールがある。ヤブキタ緑茶の葉中にはカテキン類の単量体

旨, pp.67-70.

が約 15%含まれており[9]、その糖消化酵素活性阻害作用が[2] 戸田雅雄 (2009): 食品と容器, 50, 618.

知られている[13]。紅茶にも、単量体のカテキン類は緑茶[3] 原 征彦 (2013): 茶学術研究会公開シンポジウム「世の約 40%は残存している[14]。また、紅茶に含まれるカテ界のお茶事情 甘くないお茶の広がり」, pp.21-24.

キン 2 量体のテアシネンシン A、ウーロンテアニンガレー[4] 芳野恭士, 清水康夫, 他 (2015): New Food Industry,

ト、さらにはテアフラビン類にも、糖消化酵素活性阻害作

57, 1-10.

用や糖吸収抑制作用がある[15-17]。本研究で用いた茶抽出[5] 芳野恭士, 善養寺優香, 他 (2016): 沼津高専研究報告,

物中の総ポリフェノール量は、ヤブキタ緑茶、オクミドリ

50, 87-90.

碾茶、ベニフウキ緑茶はほぼ同程度であり、これらより少[6] 芳野恭士, 杉本奈央, 他 (2018): J. Technol. Educ., 25,ないベニフウキ紅茶とセイロン紅茶はやはり同程度であ37-45.

る[6]。これらのことから、緑茶、碾茶および紅茶に認めら[7] K. Yoshino, Y. Miyauchi, et al. (2009): Biosci.

れる糖吸収抑制作用には、それぞれに含まれるポリフェノ

Biotechnol. Biochem., 73, 1096-1104.

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沼津工業高等専門学校研究報告

第 53 号[8] 吉川友佳子, 松浦寿喜, 他 (2006): 日本食品化学学会

1939-1945.

誌, 13, 51-55.

[14] 芳野 恭士, 原 征彦 (1993): 沼津高専研究報告, 27,[9] 山本(前田)万里, 佐野満昭, 他 (2001): 日本食品科学

87-91.

工学会誌, 48, 64-68.

[15] T. Matsui, T. Tanaka, et al. (2007): J. Agric. Food[10] 佐野満昭, 芳野恭士 (2013): 内分泌・糖尿病・代謝内Chem., 55, 99-105.

科, 36, 303-308.

[16] 福井祐子, 岩下 孝, 他 (2008): 天然有機化合物討論[11] 清水康夫 (2014) : 交流, 53, 20-21.

会講演要旨集 50, pp.475-480.

[12] 農林水産省統計部 (2014/2016): 作物統計.

[17] 芳野恭士, 中戸川 奨, 他(2012): 沼津高専研究報告,[13] Y. Hara, M. Honda (1990): Agric. Biol. Chem., 54,46, 331-336.