46%

目

次

はじめに
病原真菌研究部門 真菌感染分野

3

病原真菌研究部門 系統・化学分野

14

病原真菌研究部門 真菌資源開発分野

21

病原真菌研究部門 生態分野

25

分子機能研究部門 機能形態分野

28

分子機能研究部門 高分子活性分野

37

分子機能研究部門 活性応答分野

48

病原真菌・放線菌管理室（微生物保存事業報告）

49

Review Article（生態分野）
Feng-Yan Bai: Recent developments in molecular typing of Candida albicans

53

Review Article（活性応答分野）
渋谷和俊 : 遺伝子解析を用いた真菌症の病理診断法

62

平成 20 年度共同利用研究・共同利用研究会一覧66

平成 19 年度共同利用研究報告69

平成 20 年度共同利用研究会報告97

第 22 回千葉大学真菌医学研究センター講習会

101

第 4 回千葉大学真菌医学研究センター外国人講習会

102

第 4 回千葉大学真菌医学研究センター公開市民講座

103

講演会（第 114 回 〜 第 118 回）

1042008 真菌医学研究センター報告会

105

真菌医学研究センター 2008 年度ベスト論文賞

106

は

じ

め

に

地球の構成員である我々は , 単独では生活ができないことを , 実例を持って知ったのが世界的な連鎖型不況

でした . 経済のグローバル化により , 米国の金融危機が世界経済に与えた影響は大きく , 世界中で多くの失業者が出ています . 世界は新たな知恵を出して , この 100 年に一度の変化に対応することが求められています .
我々の研究においても , 学問の継続性の問題ではどうにもならない , 新たな流れが生じています .

国立大学が法人化してから 5 年が経過し , 間もなく 6 年目を迎えようとしています . 真菌医学研究センター

は , 外部評価を受けて , それに基づいて新しい改革が進みつつありますが , 大きな改革の一つとして , セン
ター長の選考方法が変わりました . 大学内に外部の有識者を含む拡大センター長選考委員会が設けられることになり , これにより , センターおよび大学の内外からのセンター長の選考が可能となりました . 千葉大学の 2
つの全国共同利用研究施設が同じ体制となりますが , これらは , 学長の指導力の強化が , その目指すところです . これまでになかった新しい体制で , 真菌医学研究センターは進むことになりますが , センター全職員が一丸となって更に発展に向って進むことが期待されます .

文部科学省は , 国公私立大学を通じた共同利用・共同研究を推進するために , 全国の共同利用･共同研究拠点の制度的な位置付けを明確にするために , 学校教育法施行規則に新たな規定を設け , 文部科学大臣による共同利用･共同研究拠点の認定の基準や手続き等を定める告示が制定されました . これらに基づき , それぞれのセンターは , 共同利用・共同研究拠点化を目指して申請を行うことになります . その期限が 3 月末であり , 真
菌医学研究センターもその準備を進めています .

真菌医学研究センターは国家プロジェクトであるナショナルバイオリソースプロジェクト（NBRP）では ,中核機関として二期目に入っていますが , 21 年度からは当センターと大阪大学では代表者が変わるなど新たな体制に移って行きます . リソースの重要性は , 認識されていますが , これらの急激な変化は , 時には貴重な資源の逸失にも繋がりかねないことにもなりますので , 慎重に進むことが必要です .

科学技術振興調整費「真菌症原因菌の疫学的研究と真菌症対策拠点形成」事業は , この 3 月をもって終わりになります . この事業の成果を発表する機会として , 8 月に長春で , China-Japan Pan Asia Pacific Mycology Fo-

rum と共同で , 病原真菌とマイコトキシンに関する国際的なシンポジウムを開催し , 盛会裏に終わることが出来ました . 日本からは , 講演者以外に科学技術振興機構（JST）の担当者にも出席していただきました . 本シン
ポジウムの開催については , 中国の北京大学病院の李 若瑜教授 , 中山大学医学院の席 麗艶教授 , 吉林大学
基礎医学院の王 麗教授 , 貴陽医学院の王 和教授など関係者の全面的なご協力をいただきました .
人事面では , 教員の定員については , 定員削減の対象となっており , 若い研究者の採用もなく , 極めて厳しい状況が続いています . センター長として責任を痛感していますが , 新しいセンター長のもとで , 若い人の採用が進むことを切に希望しています . 活性応答分野の客員教授には , 東邦大学医学部病院病理学の渋谷和俊先
生に , また外国人客員教授には , 中国科学院微生物研究所の白 逢彦先生に来ていただき研究・教育に参加していただきました . 20 年の 3 月 31 日付で事務長の菱木一夫が定年退職になり , 4 月 1 日付で後任に附属病院
から小網政敏が着任しました . また , 総務担当の吉田敏文が附属病院への異動に伴い平野秀行が着任し , 会計担当の伊藤 浩が附属図書館への異動に伴い , 新たに中川光治及び非常勤職員として緑川治夫が着任しました . 高分子活性分野の技術職員である矢澤勝清が定年退職となりましたが , 非常勤職員として病原真菌・放線菌管理室に採用となりました .
平 成 20 年 12 月
千葉大学真菌医学研究センター長

三

上

襄

病原真菌研究部門 真菌感染分野（ Department of Pathogenic Fungi, Division of Fungal Infection ）教授 : 亀井克彦○学内委員目標・策定委員会委員 , 学内評価委員会専門部会（研究活動等）委員 , 海洋バイオシステム研究センター連絡協議会委員 , 国際教育開発センター連絡協議会委員 , 国際展開企画室国際交流連絡会委員（ 3月まで）, 研究用微生物安全管理委員会委員（ 3 月ま菌学会 , 日本感染症学会 , 日本化学療法学会 , 日本細菌学会 , 日本臨床微生物学会 , 日本環境感染学会 , 日

本防菌防黴学会 , 室内環境学会 , International Societyfor Human and Animal Mycology, American Society for
Microbiology○受 賞

分担 : 真菌症フォーラム第 9 回学術集会奨励

で）, 国際展開企画室国際交流連絡会委員（ 3 月まで）,

賞 : 豊留孝仁 , 安達禎之 , 渡辺

本部設置準備委員会委員 , 亥鼻地区安全衛生委員会委

る宿主 AP-1 活性化と TNF-α産生についての解析」

医学研究院大学院教育委員会委員 , 亥鼻地区防災対策

哲 , 落合恵理 , 大野

尚仁 , 亀井克彦「Aspergillus fumigatus により誘導され員（安全衛生管理者）, 千葉大学附属病院 ICT, 真菌医（2008. 2. 9）

菌研究部門の危害防止主任者

Toyotome T, Adachi Y, Watanabe A, Ochiai E, Ohno N,

学研究センター安全衛生管理者・作業主任者 , 病原真○センター内委員 総務委員会委員 , 共同利用委員会委員長（ 3 月まで）, 微生物・保存管理施設運営委員会
委員長 , 自己点検・評価委員会委員 , 倫理審査委員会
副委員長 , 研究推進チームメンバー , 組織・機能改善委員会委員長 , 研究部門連絡会委員 , 微生物管理保存

WG 委員長 , 個人評価 WG 委員長 , 市民相談等対応
グループメンバー , 拠点申請検討会委員 , 運営協議会
委員 , 教員会議委員 , 共焦点レーザー顕微鏡システムの調達に関する仕様策定委員○学協会への貢献

日本医真菌学会評議員・学術集会委

員 , 日本感染症学会編集委員・評議員 , 日本化学療法
学会抗真菌薬臨床評価委員（呼吸器系）・深在性真菌症に対する抗真菌剤の適正使用等のガイドライン作成
委員 , 日本臨床微生物学会編集・ホームページ委員会

分担 : 千葉大学真菌医学研究センターベスト論文賞 :Kamei K「Activator protein 1 is triggered by Aspergillus
fumigatus beta-glucans surface-exposed during specificgrowth stages」Microb Pathog 44（2）: 141-150, （2007.
12. 28）

分担 : 日本農芸化学会 B. B. B. 論文賞 : Oarada M,

Gonoi T, Tsuzuki T, Igarashi M, Hirasaka K, Nikawa T,
Onishi Y, Toyotome T, Kamei K, Miyazawa T, Nakagawa
K, Kashima M, Kurita N 「 Effect of dietary oils on

lymphocyte immunological activity in psychologicallystressed mice」（2008. 3. 26）○その他

東京医科大学兼任教授 , 福島県立医科大学非常勤講師 , 千葉大学発ベンチャー株式会社ファースト
ラボラトリーズ顧問 , ヤンセンファーマ株式会社

トラコナゾール内用液臨床試験に係る効果安全性評価

員 , 日本呼吸器学会代議員 , Mycopathologia 編集委員

委員 , ヤンセンファーマ株式会社

集委員 , 真菌症フォーラム世話人 , 関東深在性真菌症

委員（ 3 月まで）, Journal of Infection and Chemotherapy 編研究会世話人・会長 , 肺真菌症研究会世話人 , 関東医ガイドライン作成委員会世話人 , 関東呼吸器真菌症研○学協会への貢献

ペルギルス症学会）Scientific Committee & Faculty○所属学会

日本内科学会 , 日本呼吸器学会 , 日本医真

千葉大学

独立安全性評価

准教授 : 佐野文子
○センター内委員

究会世話人 , Advances Against Aspergillosis（国際アス製造販売後調査に係る医学専門家 , 萬有製薬株式会社

真菌懇話会幹事・世話人 , 千葉真菌症研究会代表世話
人 , 千葉真菌症カンファレンス世話人 , 深在性真菌症

イ

教員会議委員 , 総務委員会委員 , 共

同利用委員会委員 , 広報委員会委員

日本医真菌学会評議員○国および地方公共団体への貢献

千葉県獣医師会感染症研究委員会委員○所属学会

真菌医学研究センター報告

日本医真菌学会 , 日本菌学会 , 日本感染症

第 12 巻20083

学会 , 日本熱帯医学会 , 獣医疫学会 , 人と動物の共通

特任教員 : 豊留孝仁

狂犬病臨床研究会 , 獣医史学会 , International Society

技術補佐員 : 落合恵理

Microbiology

技術補佐員 : 井上京子

感染症研究会 , 日本臨床微生物学会 , 日本細菌学会 ,技術職員 : 鎗田響子

for Human and Animal Mycolegy, American Socioty for

技術補佐員 : 佐藤綾香 , 髙山明子

助教 : 栗田啓幸

大学院医学薬学府

博士課程 : 永吉

優○センター内委員

有害廃棄物委員

大学院医学薬学府

博士課程 : 村田佳輝

○学協会への貢献

日本医真菌学会評議員

大学院医学薬学府

博士課程 : 高橋英雄

日本医真菌学会 , 日本農芸化学会

大学院医学薬学府

修士課程 : 岩崎

○所属学会
○受賞

彩

分担 : 日本農芸化学会 B. B. B. 論文賞 : Oarada

M, Gonoi T, Tsuzuki T, Igarashi M, Hirasaka K, Nikawa

研究概要（共同研究を含む）

Nakagawa K, Kashima M, Kurita N「Effect of dietary oils

1 ．ヒストプラズマ症における抗ヒストプラズマ抗体検

T, Onishi Y, Toyotome T, Kamei K, Miyazawa T,
on lymphocyte immunological activity in psychologicallystressed mice」（2008. 3. 26）

助教 : 大荒田素子○学内委員

セクシャルハラスメント防止委員会委員○センター内委員

共用備品委員 , 防災対策委員 , 放射線同位元素委員 , 光熱水料節減プロジェクト WG 委員

○所属学会

日本農芸化学会 , 日本栄養・食糧学会 , 日

出法の改良
現在市販されているヒストプラズマ症検査・診断薬では検出している Histoplasma capsulatum 抗原は H 及び M
抗原タンパク質のみである . 我々は新たな抗原候補を探索し , 得られた情報を元にした新たな抗ヒストプラズマ
抗体検出法の研究を進めている . これまでに生体内寄生形態である酵母形の H. capsulatum を材料とし , 界面活性剤を用いた表層タンパク質抽出法による新規抗原の検索

本食品免疫学会 , 日本油化学会を行ってきた . その結果 , この方法により得られた抽出

M, Gonoi T, Tsuzuki T, Igarashi M, Hirasaka K, Nikawa

含まれていることを確認し , さらにこれらタンパク質をNakagawa K, Kashima M, Kurita N「Effect of dietary oils

溶性ながら抗原タンパク質の大量発現と精製に成功して○受賞

代表 : 日本農芸化学会 B. B. B. 論文賞 : Oarada

T, Onishi Y, Toyotome T, Kamei K, Miyazawa T,
on lymphocyte immunological activity in psychologicallystressed mice」（2008. 3. 26）

助教（兼任）: 渡辺○学内委員哲附属病院 ICT 委員 , 附属病院病院感染管理委員 , 附属病院保険委員 , 附属病院ベッドマネー
ジャー委員 , 附属病院手術部小委員○所属学会

日本内科学会 , 日本呼吸器学会 , 日本感染症学会 , 日本医真菌学会 , 日本細菌学会 , 日本結核病

物に患者血清によって認識される抗原タンパク質が複数
質量分析法により同定を行った . これらタンパク質は不おり , ヒストプラズマ症迅速診断の開発・改良に向けた有用な抗原候補として , 現在 ELISA 等への応用を試みている . また , 共同利用研究において可溶性抗原タンパ
ク質の精製を試みている .

2 ．β - グルカン受容体 Dectin-1 を含む宿主側の Aspergillus

fumigatus 認識受容体に関する研究

近年 , 感染初期の自然免疫応答が注目を浴びている .

学会 , 日本臨床微生物学会 , 日本病理学会

細菌やウイルスでは病原体を認識する受容体について盛症カンファレンス世話人

はその研究は緒についたばかりである .

○学協会への貢献 千葉真菌症研究会世話人 , 千葉真菌○その他

千葉大学医学部附属病院感染症管理治療部助教
非常勤講師 : 高橋容子（きさらづ皮膚科クリニック）
非常勤講師 : 多部田弘士（船橋市立医療センター呼吸器内科）

4んに研究が行われている . しかしながら , 真菌について
我々は樹状細胞株 DC2.4 細胞に A. fumigatus を感染させると宿主側転写因子 AP1 の活性化が惹起されることを見出した . この AP-1 活性化は A. fumigatus 膨化分生

子において最も強く惹起された . 膨化分生子表面にβ グルカンが露出されることを確認し , β - グルカン受容

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

体 Dectin-1 が AP-1 活性化に重要と推測した . 種々の実してきた . 本年は室内環境内に多く浮遊する菌種を用合することによって AP-1 活性化が惹起されることを明を進めた . その結果 , S. chartarum, Aspergillus fumigatus お験より , Dectin-1 が A. fumigatus 表面のβ - グルカンと会らかとし , さらに Dectin-1 細胞質ドメインで会合する

Syk チロシンキナーゼが AP-1 活性化に重要であることも確認した . また , 宿主細胞からの TNF- α産生にもβ グルカン認識による Dectin-1/Syk/AP-1 のシグナルが重要であることを示した . 現在 , Syk チロシンキナーゼ下流で本シグナル伝達に関わっていると考えられる MAP
キナーゼについても解析を進めるとともに , Dectin-1 以
外の A. fumigatus 認識受容体を探索する試みも開始して

い , 本病変形成の菌種間差および菌株間差について検討
よび Cladosporium cladosporioides では , 各々複数の株で同様の肺動脈病変が形成されることを確認した . このう
ち , C. cladosporioides では本病変形成に大量の胞子を必要とする株もあった . これらに対し , Penicillium citrinum, P.

chrysogenum ではこの病変形成は認められず , 菌種により
本病変の形成能が異なる可能性が示された . 更に菌種および菌株を増やして本病変形成の検討を行っている .

一 方 , S. chartarum お よ び A. fumigatus の マ イ コ トいる .

キ シ ン 産 生 性 を 検 討 し た と こ ろ , S. chartarum か ら

3 ．Aspergillus fumigatus 成長に血清成分が及ぼす影響について系統解析を行ったところ , S. chartarum とされ侵 襲 性 肺 ア ス ペ ル ギ ル ス 症 で は 肺 の 血 管 内 に A.

fumigatus が侵入している像が認められ , より重篤な播種性アスペルギルス症では血行性に多臓器へと菌が播種する . また , 感染局所では出血を伴うことも多く , A.

fumigatus と血液は感染過程において多くの接点を有し

trichothecene を検出した . さらに S. chartarum の複数株ていた菌株は S. chartarum と S. chlorohalonata の 2 種に大別された（系統・化学分野／矢口准教授との共同研究）.
これら菌種の相違と本病変形成との関係については , 今
後更に検討を進めたい .

また , 本病変の形成機序を検討するためにヒト肺動脈ている . 我々はこれまでにウシ胎児血清もしくはヒト

血管内皮細胞または血管平滑筋細胞を S. chartarum の胞

く亢進しバイオフィルム様の構造を構築することを報

産生の増加を認めた . また , S. chartarum 投与モデルに血清を含有した培地において A. fumigatus 成長が著し告してきた . 血清成分の中ではウシ血清アルブミンがA. fumigatus の生育を促進することが報告されているが , 我々の検討ではウシ血清アルブミン単独添加では血清のような十分な生育促進効果が認められなかった .
そこで血清中に含まれるウシ血清アルブミン以外の A.

子洗浄液に曝露したところ , 前者の培地中において IL-8

Rho-kinase inhibitor の長期経口投与を行ったところ , 肺動脈 remodeling が有意に抑制されることが示された . 今

後 , 肺血管病変の形成における cytokine や RhoA/Rho-kinase 経路の関与についての検討を予定している .

fumigatus の生育を促進する因子について解析を行った .

5 ．人獣共通真菌症に関する研究

ンパク質を分離し , 培地に添加したところ , A. fumigatus

動物 , 産業用動物等の真菌症の症例検討 , 疫学 , 診断・促進因子が含まれることが明らかとなった . これを質量1 ）ヒト 6 名 , ネコ 4 頭の Arthroderma vanbreuseghemii の

小麦胚凝集素レクチンカラムに結合する血清中の糖タの生育が促進され , 分離した糖タンパク質画分中に生育分析で検討した結果 , このタンパク質が Fetuin A である

ことが確認された . 現在 , 血清やその成分が A. fumigatus
生育に及ぼす影響について更に詳細に検討を行ってい

ペット , 動物園水族館・学校飼育動物 , 魚介類 , 野生治療法の開発などを行っている .

集団感染例で分離された株は , 全て同一の遺伝子型であり , 人獣共通真菌感染症として問題となった .
そこで野良猫の皮膚糸状菌症原因菌保有率を調べるる.

ため , 公園に生息している野良ネコ 80 頭を調査し4 ．真菌の吸入による肺高血圧症に関する研究

症原因も含めて今後検討する予定である .

たところ , 現在 , 全て陰性であった . 他の共通感染

これまでに Stachybotrys chartarum の胞子を経気管的に2 ）沖縄美ら海水族館で飼育されているイルカの一部はび狭窄 , 右室圧の上昇が生じることを確認し , これら百個噴出している個体がいる事から , 免疫不全の基反復投与したマウスで肺動脈壁中膜・内膜の肥厚およがヒトの肺高血圧症に非常に類似していることを確認

千葉大学

呼気より病原性酵母 Candida spp. を 1 呼気あたり数
礎疾患をもつ観客が至近距離で接触することは危険

真菌医学研究センター報告

第 12 巻20085

であることが示唆された . また分離された病原性酵より新種であることが判明した . 2 菌株は コロニー表面

飼育職員と共通する遺伝子型の存在が判明した .

たが , これらを含む形態的特徴 , 最高発育温度 , ゼラチ

母の遺伝子型を分子疫学的に解析したところ環境 ,3 ）畜産領域に置ける日和見真菌症原因菌の生態として , 沖縄県のニワトリ飼育関係者からニワトリから感染したと推測される皮膚糸状菌症が発生した事を受け , 養鶏場 , 学校飼育ニワトリを調査している .
また , ウシの Scopulariopsis brevicaulis による感染例を経験した .

4 ）獣医師のヒストプラズマ症に関する認識アンケート
調査の結果 , ヒストプラズマ症の病名と原因を正しく理解している獣医師が約 2/3, 仮性皮疽がヒスト
プラズマ症の病型で , ウマの場合は届け出伝染病であり国内症例も発生していることの知識を有する獣医師は 1 割以下であった . 今後 , ヒストプラズマ症
は我が国に土着で存在する唯一の高度病原性真菌症の虞があることを周知・徹底する必要性がある .

5 ）我が国のヒストプラズマ症土着症例がウマの仮性皮
疽の異種寄生として存在する可能性が分子疫学的に示唆されている . また , かつて , 主にアフリカに分の形状 , 分生子の大きさおよび形成能において差があっン分解能 , シクロヘキシミド感受性等の生理学的性状は O. gallopava と鑑別不能であった . 薬剤感受性はミカファンギンに対し O. gallopava より感受性が低かった .
病原性は O. gallopava が脳に強い親和性を持つのに比し ,主な病巣は腎臓であり脳の病変は軽微であった . この 2菌株のリボゾ−マル RNA 遺伝子配列は , small subunit-

ITS1-5.8S-ITS2-large subunit の 1696 bp で 100％一致し ,同一菌種であった . 一方 O. gallopava との相同性は ITS
領域で 79.2％ , D1D2 領域で 95.9％であった .

以上の結果よりこの 2 菌株を新種と判定し , 現在 CBSの de Hoog 博士の協力で新種登録の準備を進めている .

研究成果の発表
1 ．著書
1 ）亀井克彦（分担）: 最新臨床検査項目辞典 , 櫻林郁之介 , 熊坂一成監修 , 医歯薬出版 , 2008. 3. 20.

布すると言われている variety が我が国にも存在す

2 ）亀井克彦（分担）: 輸入真菌症 . 「皮膚科サブスペ

た国内感染と思われるイヌ症例より検出された遺伝皮膚真菌症スペシャリストへの第一歩」, 望月る事が示唆されていたことがあったが , 最近経験し子型は , アフリカ特有の variety であった . よって分子疫学的に我が国にもこのアフリカ特有の遺伝子型の存在が支持された .

シャリティーシリーズ
宮地良樹 , 清水

病原真菌感染防御能と宿主の栄養状態に関する研究の一環として , Paracoccidioides brasiliensis（Pb）感染症に及ぼす宿主のタンパク質摂取レベルの影響について検討した . 標準レベルのタンパク質を含む餌を摂取した実験

2008.

だ餌を摂取したマウスで , 予想に反して Pb 菌に対する抗菌活性能が増強した . 感染に伴う標的臓器での炎症メ
ディエーターの産生量が , 低タンパク質摂取により抑制

WORD 感染症

第 2 版 , 山口恵三 , 戸塚恭一編 ,入真菌症 . 「人と動物の共通感染症ミニ知識

ガイダンス」, 東京都中医師会感染症予防検討協議会編 ,社団法人 東京都獣医師会 , 東京 , pp. 60-65, 2008.

6 ）佐野文子（分担）: ミニレクチャー

人獣共通感染症 . 「 1 冊でわかる皮膚真菌症皮真菌症スペシャリ
ストへの第一歩」, 望月
56-57, 2008.

2 ．原著

箱根の温泉流入河川水より Ochroconis gallopava 関連菌

英文

千葉大学

哲也編 , pp. 313-318, 南江堂 ,5 ）佐野文子（分担）: 皮膚糸状菌症 , 日和見真菌症 . 輸究として 2004 年に分離された 2 菌株は , 以下の研究結果

改訂第pp. 252-253, 先端医学社 , 2008.

されたことが , 増強の一因と示唆された .

7 ．河川から分離された Ochroconis 属新菌種に関する研隆,4 ）亀井克彦 , 矢口貴志（共著）: PCR 法（真菌）. KEY動物（マウス）と比べて , 低レベルのタンパク質を含ん6

宏編 , pp. 78-79, 文光堂 , 2008.

3 ）亀井克彦（分担）: 医真菌学 . 医科細菌学
4 版 . 笹川千尋 , 林

6 ．病原真菌感染防御能に及ぼす食餌タンパク質の影響

1 冊でわかる皮膚真菌症

隆編 , 文光堂 , 東京 , pp.

1 ）Toyotome T, Adachi Y, Watanabe A, Ochiai E,

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

Ohno N, Kamei K: Activator protein 1 is triggered by

9 ）Kano R , S ano A, Makimura K, Watanabe S,

specific growth stages. Microb Pathog 44: 141-150,

genotype of Arthroderma benhamiae. Med Mycol 46:

Aspergillus fumigatus beta-glucans surface-exposed during
2008.（査読有）Nishimura K, Yamaguchi H, Hasegawa A. A new
739-744, 2008.（査読有）2 ）Oarada M, Tsuzuki T, Gonoi T, Igarashi M, Kamei

10）Ogawa S, Shibahara T, Sano A, Kadota K, Kubo M:

Nakagawa K, Kurita N: Effects of dietary fish oil on

brevicaulis in a Japanese Black calf. J Comp Pathol 138:

K, Nikawa T, Hirasaka K, Ogawa T, Miyazawa T,
lipid peroxidation and serum triacylglycerol levels in

Generalized hyperkeratosis caused by Scopulariopsis
145-150, 2008.（査読有）psychologically stressed mice. Nutrition 24: 67-75,

11）Hirasaka K, Tokuoka K, Nakao R, Yamada C, Oarada

3 ）Ochiai E, Kamei K, Watanabe A, Nagayoshi M, Tada

Nikawa T: Cathepsin C propeptide interacts with

2008.（査読有）M, Imagawa T, Ishidoh K, Okumura Y, Kishi K,

Y, Nagaoka T, Sato K, Sato A, Shibuya K: Inhalation

intestinal alkaline phosphatase and heat shock cognate

protein 70 in human Caco-2 cells. J Physiol Sci 58:

of Stachybotrys chartarum causes pulmonary arterial

hypertension in mice. Int J Exp Pathol 89: 201-208,2008.（査読有）105-111, 2008.（査読有）

和文4 ）Mochizuki T, Kawasaki M, Anzawa K, Fujita J,1 ）服部憲幸 , 織田成人 , 仲村将高 , 安部隆三 , 中田

K: Epidemiology of sporadic（ non-epidemic ）cases

sodium 投与中に Trichosporon asahii 感染を生じた重Ushigami T, Takeda K, Sano A, Takahashi Y, Kamei
of Trichophyton tonsurans infection in Japan based on
PCR-RFLP analysis of non-transcribed spacer region

孝明 , 大島拓 , 仲村志芳 , 亀井克彦 : Micafungin症急性膵炎の 1 例 . 日外感染症会誌 5（1）: 79-83,
2008.（査読有）of ribosomal RNA gene. Jpn J Infect Dis 61: 219-222,

2 ）上原雅江 , 佐野文子 , 鎗田響子 , 亀井克彦 , 羽毛5 ）Takahashi H, Takahashi-Kyuhachi H, Takahashi

子 : タイ人 AIDS 患者の菌血症例から分離された

2008.（査読有）Y, Yarita K, Takayama A, Inomata T, Sano A,
Nishimura K, Kamei K: An intrafamilial transmissionof Arthroderma benhamiae in Canadian porcupines（Erethizon dorsatum）in a Japanese zoo. Med Mycol 46:465-473, 2008.（査読有）6 ）Sugiyama K, Sano A, Murakami M, Ogawa T,

Mishima H, Otake H, Kamei K, Sugiyama: Three
isolations of Chaetomium globosum from erythematous

epilation of canine skin. Med Mycol 46: 505-510,
2008.（査読有）7 ）Kikuchi K, Sugita T, Makimura K, Urata K, Someya T,

Sasaki T, Kamei K, Niimi M, Hiramatsu K, Uehara Y:
Is Histoplasma capsulatum a native inhabitant of Japan?
Microbiol Immunol 52: 455-9, 2008.（査読有）8 ）Kobayashi H, Sano A, Aragane N, Fukuoka M, Tanaka

M, Kawaura F, Fukuno Y, Matsuishi E, Hayashi
S. Disseminated infection by Bipolaris spicifera in an

immunocompetent subject. Med Mycol 46: 361-365,
2008.（査読有）千葉大学

田牧夫 , 井出京子 , 永井啓子 , 高山義浩 , 西村和

Penicillium marneffei. 真 菌 誌 49（3）: 205-209, 2008.

（査読有）3 ）塩原順子 , 御子柴舞子 , 境澤香里 , 光楽文生 , 林
宏一 , 宇原久 , 斉田俊明 , 春日恵理子 , 松本竹久 ,佐 野 文 子 , 西 村 和 子 : Exophiala moniliae に よ る 黒

色分芽菌症の 1 例 . 皮膚科の臨床 50（8）: 696-972,
2008.（査読有）4 ）井隼ミキ , 山下

厚 , 溝本朋子 , 香本頴利 , 吉田正

明 , 佐野文子 : 漢方生薬配合薬の抗真菌活性と牛白癬の治療効果 . 日獣会誌 61（2）: 136-138, 2008.（査読有）

3 ．総説・解説・その他
1 ）亀井克彦 , 落合恵理 : 住宅環境に生息する病原性カ
ビ , 特にマイコトキシン産生カビによる真菌症について . Mycotoxins 58（1）: 47-51, 2008.

2 ）亀井克彦 : 特集−深在性真菌症

稀に見られる真菌とその感染症 . アニムス 2008 冬 51号 p. 40-44,
2008.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200873 ）亀井克彦 : 海外旅行と真菌症−その注意点 . 医学のよびヒストプラズマ症など輸入真菌症国内発生状況

4 ）亀井克彦 : コクシジオイデス症 . 最新医学 63（ 6マ症のスクリーニングに関する研究

5 ）亀井克彦 : 真菌の同定と保存の現状 : 日本のネット

研究費補助金新興・再興感染症研究事業「深在性真あゆみ 225（3）: 232-236, 2008.

の調査

月増刊号）: 1188-1207, 2008.

ラズマ症の血清診断法に関する研究 . 厚生労働科学

ワーク . 真菌誌 49（3）: 187-189, 2008.

菌症と輸入真菌症に関する新しい検査法と抗真菌薬

6 ）亀井克彦 , 矢口貴志 : 真菌の検査法

培養・同定 .

Medical Technology 36（7）: 695-700, 2008.

7 ）山口英世（司会）, 亀井克彦 , 渋谷和俊 , 福田隆浩 :非アスペルギルス性糸状菌真菌症の動向と対策〜接合菌症を中心として〜 . 深在性真菌症〜 SFI Forum〜 4（2）: 4-14, 2008.

8 ）豊留孝仁 , 渡辺

哲 , 亀井克彦 : ゲノムプロテオー

2 . 肺線維症症例に潜在するヒストプラズ
3 . ヒストプの開発 , 並びに病原因子の解明に向けたポストゲノ
ムの基盤的研究」平成 19 年度総括・分担研究報告書 pp. 33-40, 2008.

17）渋谷和俊（分担）, 亀井克彦（研究協力者）: 報告書
真菌感染と特性疾患− Stachybotrys chartarum 吸入と原発性肺高血圧症との関連について− . 厚生労働科
学研究費補助金難病疾患克服研究事業「特性疾患

ム解析による真菌病原因子の解明と抗真菌薬創薬のの微生物的原因究明に関する研究」平成 19 年度総への期待 . 日本臨床 66（12）: 2255-2260, 2008.

括・分担報告書 pp. 61-65, 2008.

9 ）亀井克彦 : 肺フザリウム症 . 別冊日本臨床別症候群シリーズ

新領域

No. 8 呼吸器症候群（第 2 版）I−その他の呼吸器疾患を含めて− , p. 178-180, 2008.

10）亀 井 克 彦 : 肺 コ ク シ ジ オ イ デ ス 症 . 別 冊 日 本 臨
床新領域別症候群シリーズ

No. 8 呼吸器症候群（第 2 版）I −その他の呼吸器疾患を含めて− . pp.
172-174, 2008.

11）渡辺

哲 , 猪狩英俊 , 亀井克彦 : 肺ノカルジア症 .

別冊日本臨床新領域別症候群シリーズ

No. 8 呼吸器症候群（第 2 版）I −その他の呼吸器疾患を含めて− . pp. 246-248, 2008.

12）渡辺

4 ．学会・シンポジウム・研究集会での招待講演
1 ）亀井克彦 : 教育セミナー

難治性真菌感染症とその対策 . 第 57 回日本感染症学会東日本地方学術集会 ,第 55 回日本化学療法学会東日本支部総会合同学会 ,プログラム・抄録集 p. 71, さいたま , 10 月 23 〜 24
日 , 2008.

2 ）亀井克彦 : 特別シンポジウム

カビによるアレル

ギーとその他の疾患について . 平成 20 年室内環境学会総会・研究発表会 , 講演集 p. 45-48, 船堀 , 12
月 1 〜 2 日 , 2008.

哲 , 豊留孝仁 , 亀井克彦 : ヒストプラズマ症 .

3 ）佐野文子 : 顕微鏡でわかる Zoonosis「真菌症につ吸器症候群（第 2 版）I −その他の呼吸器疾患を含定する」, 日本小動物獣医師学会（東京）, 講演集 p.

別冊日本臨床新領域別症候群シリーズ

No. 8 呼めて− . pp. 184-187, 2008.

13）亀井克彦 : 原因菌と治療薬を巡って . Jpn J Antibiot

いて : 肉眼 , 顕微鏡 , 臭覚？を動員して原因菌を同
48-52, 7 月 19 〜 20 日 , 2008.

4 ）渡辺哲 : シンポジウム「環境内真菌と疾患」 ICT

61（5）: 349-352, 2008.

の立場から見た院内真菌症の現状 . 第 29 回関東医

仁 , 永吉31 日 , 2008.

14）渡辺

哲 , 橋本佳江 , 日暮浩実 , 落合恵理 , 豊留孝
優 , 亀井克彦 : 深在性真菌症起因菌の病

原因子の探索〜 Aspergillus fumigatus を中心として〜 .
真菌誌 49（4）: 263-267, 2008.

15）佐野文子（分担）: 報告書

動物由来真菌症等の診断 , 予防法に関する研究 . 厚生労働科学研究費補助
金 新興・再興感染症研究事業「動物由来感染症の真菌懇話会 , プログラム / 抄録集 p. 29, 東京 , 5 月
5 ）豊留孝仁 , 渡辺

哲 , 亀井克彦 : 宿主からの攻撃に対する Aspergillus fumigatus の戦略−具有する飛び道具と鎧− . 第 52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌49（増 1 ）: 52, 長崎 , 9 月 10 〜 11 日 , 2008.

6 ）永吉

優 , 渡辺哲 , 多田裕司 , 長岡鉄太郎 , 佐藤

コントロール法の確立に関する研究」, 平成 19 年度

弘一 , 笠原靖紀 , 田邉信宏 , 渋谷和俊 , 亀井克彦 ,16）亀井克彦（分担）: 報告書 1 . コクシジオイデス症おの形成に関与する因子の検討 . 第 48 回日本呼吸器研究成果報告書 pp. 169-198, 2008.

8

千葉大学

栗山喬之 : Stachybotrys chartarum による肺血管病変

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

学会学術講演会 , 日呼吸会誌 46（増）: 257, 神戸 , 6
月 15 〜 17 日 , 2008.

7 ）清水公徳 , 李
敬悦 , 渡辺皓曼 , 吉見啓 , 田中千尋 , 阿部

哲 , 亀井克彦 , 山口正視 , 川本進:

Cryptoccocus neoformans の環境適応に関与する二成分
シグナル伝達系の解析 . 第 52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 102, 長崎 , 9 月 10 〜 11
日 , 2008.

真菌症フォーラム第 9 回学術集会 , プログラム／抄録集 p. 123-124, 東京 , 2 月 9 日 , 2008.

4 ）村田佳輝 , 井上敬子 , 武藤伸吾 , 林

肇 , 高橋英雄 , 高山明子 , 鎗田響子 , 亀井克彦 , 佐
野文子 : 小動物における消化管穿孔に伴った真菌性腹膜炎 4 症例 . 平成 19 年度日本獣医師会学会年次大会（香川）, 抄録集 p. 251, 高松 , 2 月 9 〜 11 日 ,2008.

5 ）豊留孝仁 , 渡辺

5 ．一般発表

大輔 , 熊谷哲 , 落合恵理 , 田口英昭 , 亀井克

彦 : Aspergillus fumigatus 成長に血清が与える影響に国際学会1 ）Toyotome T, Adachi Y, Watanabe A, Ochiai E,

Ohno N, Kamei K: Superface-exposed β -glucans ofAspergillus fumigatus trigger the activation of activator
protein 1. 3rd Advances Against Aspergillosis, Abstract
Book p114, Maiami, USA, January 16-19, 2008.

2 ）Itano EN, Fredrich AL, Marquez AS, Kaminami

MS, Nagashima LA, Massuda TYC, Sano A, Ono
MA: High-molecular-mass（HMM）fraction in clinical

ついての解析 . 第 82 回日本感染症学会総会学術講演会 , 感染症誌 82（臨増）: 240, 松江 , 4 月 17 〜 18
日 , 2008.

6 ）落合恵理 , 亀井克彦 , 永吉

優 , 渡辺哲 , 豊留孝

仁 , 渋谷和俊 : Stachybotrys chartarum による肺動脈病
変の形成におけるマウス系統差について . 第 82 回
日本感染症学会総会学術講演会 , 感染症誌 82（臨増）: 241, 松江 , 4 月 17 〜 18 日 , 2008.

7 ）渡辺

哲 , 猪狩英俊 , 渡辺正治 , 中村安孝 , 村田正isolated Paracoccidioides brasiliensis: XXXIII Congress of

太 , 長谷川敦 , 戸来依子 , 佐藤武幸 , 亀井克彦 : 当

of Clinical Immunology, Riberão Preto, Brazil, October

向 . 第 82 回日本感染症学会総会学術講演会 , 感染

3 ）Nagashima LA, Leonello PC, Sano A, Kamei

8 ）長谷島伸親 , 山元正之 , 小田智三 , 松島秀和 , 竹澤

hemaglutination activity of Arthrographis kalrae

血症の 1 例 . 第 82 回日本感染症学会総会学術講演

the Brazilian Society for Immunology: II Extra Section
22, 2008.

K, Nishimur a K, Itano EN: Hemol y tic andantigens. XXXIII Congress of the Brazilian Society for

Immunology: II Extra Section of Clinical Immunology,
Riberão Preto, Brazil, October 22, 2008.

国内学会

1 ）福田砂織 , 阿部教行 , 中村彰宏 , 亀井克彦 : 当院で分離同定したヒストプラズマ症の一例 . 第 19 回日本臨床微生物学会総会 , 日臨微誌 17（4）: 155, 東
京 , 1 月 26 〜 27 日 , 2008.

2 ）落合恵理 , 亀井克彦 , 佐藤綾香 , 渡辺
仁 , 永吉哲 , 豊留孝

優 , 渋谷和俊 : マウス肺動脈病変形性における胞子処理及び菌種の相違による影響 . 真菌症フォーラム第 9 回学術集会 , プログラム／抄録集 p.
132, 東京 , 2 月 9 日 , 2008.

3 ）豊留孝仁 , 安達禎之 , 渡辺

哲 , 落合恵理 , 大野尚

仁 , 亀井克彦 : Aspergillus fumigatus により誘導される宿主 AP-1 活性化と TNF- α産生についての解析 .

千葉大学

院における真菌分離状況と注射用抗真菌薬の使用動症誌 82（臨増）: 243, 松江 , 4 月 17 〜 18 日 , 2008.

信治 , 亀井克彦 : Candida intermedia によるカンジダ
会 , 感染症誌 82（臨増）: 245, 松江 , 4 月 17 〜 18
日 , 2008.

9 ）鳴嶋善聡 , 田中昭成 , 山崎和俊 , 田口英昭 , 亀井克

彦 , 鵜川昌弘 , 中室克彦 : 新規機能性抗菌剤の開発 .
日本医療・環境オゾン研究会第 13 回研究講演会 ,会報 15（2）: 28, 東京 , 4 月 20 日 , 2008.

10）渡辺哲 , 照井慶太 , 齋藤

武 , 菱木知郎 , 吉田

英生 , 戸来依子 , 猪狩英俊 , 佐藤武幸 , 亀井克彦 :Aureobasidium pullulans によるカテーテル感染が疑われた一例 . 第 13 回千葉真菌症研究会学術講演会 ,千葉 , 6 月 28 日 , 2008.

11）田中玲子 , 亀井克彦 , 五ノ井
貴志 , 三上透 , 横山耕治 , 矢口

襄 : NBRP・ナショナルバイオリソー

スプロジェクト「病原微生物」真菌・放線菌 . 日本
微生物資源学会第 12 回大会 , 千葉 , 6 月 30 日〜 7
月 2 日 , 2008.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008912）高橋英雄 , 植田啓一 , 宮原弘和 , 内田詮三 , 鎗田響
子 , 村田佳輝 , Eiko Itano-Nakagawa, 高山明子 , 猪俣智夫 , 矢口貴志 , 佐野文子 , 亀井克彦 : イルカの呼気 , スタッフおよび飼育環境から分離された病原性酵母の分子疫学的解析 . 第 52 回日本医真菌学会
総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 76, 長崎 , 9 月 10 〜
11 日 , 2008.

13）村田佳輝 , 高橋英雄 , 佐野文子 , 亀井克彦 : Web 登

23 〜 24 日 , 2008.

21）清水公徳 , 李
悦 , 渡辺皓曼 , 吉見啓 , 田中千尋 , 阿部敬

哲 , 亀井克彦 , 山口正視 , 川本進: 病

原性酵母 Cryptococcus neoformans は二成分シグナル伝達系を介して外部環境を感知する . 第 91 回日本細菌学会関東支部総会 , 講演抄録集 p. 25, 千葉 , 10 月
23 〜 24 日 , 2008.

録されている ITS 領域 rDNA 配列に基づいたヒス

22）佐野文子 , 高橋英雄 , 村田佳輝 , 亀井克彦 : 日本固菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 76, 長崎 , 9 月

日本熱帯医学会大会・第 23 回日本国際保健医療学

トプラズマ症の分子疫学的解析 . 第 52 回日本医真10 〜 11 日 , 2008.

14）田 口 英 昭 , 渡 辺哲, 豊留孝仁, 佐藤綾香, 落

有のヒストプラズマ症原因菌の遺伝子型 . 第 49 回
会学術大会（東京）, プログラム抄録集 p. 126, 東京 ,10 月 25 〜 26 日 , 2008.

合 恵 理 , 亀 井 克 彦 : Aspergillus fumigatus に 対 す る23）佐野文子 , 高橋英雄 , 村田佳輝 , 亀井克彦 : 小動物

回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 80,

認識調査 . 第 8 回人と動物の共通感染症研究会学術

caspofungin と voriconazole の併用効果の検討 . 第 52
長崎 , 9 月 10 〜 11 日 , 2008.

15）高橋容子 , 佐野文子 , 西村和子 , 亀井克彦 : 千葉県
内の 1 中高一貫校相撲部における最近 2 年間の皮
膚糸状菌症について . 第 52 回日本医真菌学会総会 ,真菌誌 49（増 1 ）: 95, 長崎 , 9 月 10 〜 11 日 , 2008.

16）佐野文子 , 高橋英雄 , 村田佳輝 , 亀井克彦 : 小動物
臨床獣医師を対象としたヒストプラズマ症に関する調査 . 第 52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 100, 長崎 , 9 月 10 〜 11 日 , 2008.

17）西村和子 , 佐野文子 , 鎗田響子 : 神奈川県の温泉河

臨床獣医師を対象としたヒストプラズマ症に関する集会 , 講演要旨集 p. 9, 東京 , 11 月 1 日 , 2008.

24）渡辺哲 : 進行食道がんに合併した肺アスペルギル

ス症の切除例 . 第 3 回呼吸器感染症ネットワーク in

CHIBA, 千葉 , 11 月 6 日 , 2008.

25）落合恵理 , 永吉

優 , 佐藤綾香 , 渡辺

哲 , 豊留孝

仁 , 渋谷和俊 , 亀井克彦 : 環境内真菌の吸入と難治性肺疾患の発症に関する検討 . 平成 20 年室内環境学会総会・研究発表会 , 講演集 p. 202-203, 船堀 ,12 月 1 〜 2 日 , 2008.

26）三上

襄 , 本田武司 , 江崎孝行 , 平山謙二 , 亀井

川水から分離された Ochroconis 属の新種 . 第 52 回日

克彦 , 五ノ井透 , 横山耕治 , 矢口貴志 , 田中玲子 :崎 , 9 月 10 〜 11 日 , 2008.

な支援を目指して . 第 31 回日本分子生物学会年会 ,本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 81, 長18）落合恵理 , 亀井克彦 , 佐藤綾香 , 永吉

優 , 渡辺哲 , 豊留孝仁 , 渋谷和俊 : 真菌胞子の吸入と肺動脈
壁肥厚の形成について . 第 52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 104, 長崎 , 9 月 10 〜 11
日 , 2008.

19）田村

純 , 福井翔 , 佐野文子 , 村田佳輝 , 平山和子 , 谷山弘行 , 廉澤

剛 : 全身症状を伴う難治性の真菌症を呈した犬の 1 例 , 平成 20 年度日本小動物獣医学会（北海道）, p. 22, 9 月 12 〜 13 日 , 2008.

20）豊留孝仁 , 渡辺

NBRP「病原微生物」: 新たな感染症研究への迅速第 81 回日本生化学会合同大会（BMB2008）特別企

画「ナショナルバイオリソースプロジェクト , 神戸 ,12 月 9 〜 12 日 , 2008.

共同研究
1 ．国際共同研究
1 ）佐野文子（代表）: パラコクシジオイデス症の迅速遺伝子診断法の検討 , Eiko Nakagawa Itano 凖教授

哲 , 田口英昭 , 落合恵理 , 亀井克（ブラジル連邦共和国パラナ州立ロンドリーナ大学の同定 . 第 57 回日本感染症学会東日本地方学術集2 ）鎗田響子（代表）: 河川から分離された Ochroconis 属

彦 : Aspergillus fumigatus 成長を促進する血清中因子会 , 第 55 回日本化学療法学会東日本支部総会合同

10

学会 , プログラム・抄録集 p. 155, さいたま , 10 月

千葉大学

生物科学研究所）.

新菌種に関する研究 , Sybren de Hoog 博士（オラン

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

ダ Centraalbureau voor Schimmelcultures）.

東京 , 11 月 22 日 , 2008.

7 ）亀井克彦 : 特別講演座長 . 第 7 回関東深在性真菌症

2 ．共同利用研究以外の国内共同研究

研究会 , 東京 , 11 月 22 日 , 2008.

1 ）佐野文子 : 沖縄美ら海水族館で飼育されているイル

カ , マナティー , ウミガメの真菌症対策 , 植田啓一 ,宮原弘和 , 内田詮三（沖縄美ら海水族館）.

2 ）佐野文子 : 病理組織からの遺伝子検出による真菌症診断 , 木村久美子 , 播谷

教育活動
講義

亮（動衛研）, 木村雅友

亀井克彦 : 1 ）医学部（細菌学）: 授業テーマ「病原真3 ）佐野文子 : 複合漢方薬のウシ白癬菌症に対する治療

マ「真菌感染症（深在性）」, 3 ）薬学部（微生物学・（近畿大医学部病理）.
効果

西片奈保子（（財）宮崎県産業支援財団）.

4 ）佐野文子 : 鳥類由来と考えられる皮膚糸状菌症原因菌の生態調査 , 細川篤（琉球大）.

5 ）佐野文子 : 分子生物学的手法を用いた魚類病原真菌の同定に関する研究 , 畑井喜司雄（日獣大）.

感染症学）: 授業テーマ「真菌学（1）」「真菌学（2）」,4 ）看護学部（病態学 II

微生物学・免疫学）: 授業

テーマ「真菌と真菌感染症」, 5 ）大学院医学薬学府
博士課程（特別講義「研究方法論」）: 授業テーマ「微生物の取り扱いと感染事故」, 6 ）同博士課程（真菌感染症学）: 授業テーマ「医真菌学特論」「医真菌学演習」「医真菌学実習」, 7 ）同修士課程（基礎医科学）:

国際交流

授業テーマ「生体防御医学特論」, 8 ）融合科学研究

1 ．海外渡航1 ）亀井克彦 : アメリカ合衆国 , マイアミ , 3rd Advances

Against Aspergillosis に出席のため , 1 月 15 〜 22 日 ,2008（研究推進費）.

2 ）豊留孝仁 : アメリカ合衆国 , マイアミ , 3rd Advances

Against Aspergillosis に出席 , 演題発表のため , 1 月
15 〜 22 日 , 2008（生体防御機能奨学寄附金）.

1 ）亀井克彦 : アスペルギルスの病原性因子

座長 . 真2008.

2 ）亀井克彦 : ランチョンセミナー 11 司会 . 第 82 回

日本感染症学会総会学術講演会 , 松江 , 4 月 18 日 ,2008.

3 ）亀井克彦 : 当番世話人 . 第 29 回関東医真菌懇話会 ,真菌・原虫 2座

長 . 第 48 回日本呼吸器学会学術講演会 . 日呼吸会
誌 46（増）: C-111, 神戸 , 6 月 15 〜 17 日 , 2008.

5 ）亀井克彦 : ランチョンセミナー 2 座長 . 第 52 回日本医真菌学会総会 , 長崎 , 9 月 10 日 , 2008.

6 ）亀井克彦 : 会長 . 第 7 回関東深在性真菌症研究会 ,千葉大学

授業テーマ「病原真菌の基礎とその感染症の臨床像」,
10）福島県立医科大学（微生物学）: 授業テーマ「病原真菌と真菌症」, 11）長崎大学熱帯医学研究所熱帯医学研修課程 : 授業テーマ「真菌性疾患」, 12）同大
学院医歯薬学総合研究科熱帯医学専攻修士課程（特別講義）: 授業テーマ「Tropical fungal infections」.

症学分野）, 2 ）千葉大学大学院自然科学研究科（真菌症フォーラム第 9 回学術集会 , 東京 , 2 月 9 日 ,4 ）亀井克彦 , 宮崎義継 : 肺感染症

科（真菌感染機構論）, 9 ）東京医科大学（微生物学）:

佐野文子 : 1 ）千葉大学大学院医学薬学府（真菌感染学会等活動（主催学会 , 座長 , コンビーナーなど）

東京 , 5 月 31 日 , 2008.

菌と真菌症」, 2 ）医学部（感染症ユニット）: 授業テー

菌感染学）, 3 ）普遍教育コア 8 生命科学（真菌感染に対する生体防御機構）, 4 ）コア科目（真菌（かび）と人とのかかわり合い）.

社会活動
テレビ・ラジオ1 ）亀井克彦 : TBS テレビ「ニュース 23」で真菌に由来する疾患や病原性に関するインタビューと環境
内から採取した真菌の培養写真を提供 , 取材日 6 月
24 日 , 2008.

センター講習会

1 ）亀井克彦 : 第 20 回病原真菌講習会講師「真菌感染症概論」（講義）, 「真菌のバイオハザード」（講義）,
7 月 8 〜 11 日 , 2008.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻

2008112 ）渡辺哲 : 第 20 回病原真菌講習会講師「臨床材料の取り扱い」（講義）, 「薬剤感受性試験法」（講義）,「測定と解析」（実習）, 7 月 8 〜 11 日 , 2008.

講演など

1 ）亀井克彦 : 難治性の深在性真菌症に対する最近のア

外部資金
科学研究費補助金1 ）亀井克彦（分担）: 平成 20 年度厚生労働科学研究費補助金新興・再興感染症研究事業「深在性真菌症とプローチ−糸状菌感染を中心に . 第 14 回南大阪感

輸入真菌症に関する新しい検査法と抗真菌薬の開2 ）亀井克彦 : 深在性真菌感染症〜原因菌と治療薬を基盤的研究」, 平成 19 〜 21 年度 , 400 万円（間接経染症フォーラム , 大阪 , 2 月 16 日 , 2008.

発 , 並びに病原因子の解明に向けたポストゲノムの巡って〜 . 第 4 回東京血液感染症セミナー , 東京 ,費 0 円）.

3 月 13 日 , 2008.

3 ）亀井克彦 : Endemic mycoses（いわゆる輸入真菌症）の臨床 . 第 33 回国際小児保健研究会 , テーマ : 「国際保健を目指す小児科医に必要な感染症の臨床」,
東京 , 4 月 26 日 , 2008.

4 ）亀井克彦 : 難治性の深在性真菌症に対する最近のア2 ）亀井克彦（分担）: 平成 20 年度厚生労働科学研究費補助金新興・再興感染症研究事業「COPD 等における難治性感染症の病態把握等に関する研究」, 平
成 20 〜 22 年度 , 200 万円（間接経費 0 円）.

3 ）亀井克彦（研究協力者）: 平成 20 年度厚生労働省科学研究費補助金難治性疾患克服研究事業「特定疾患プローチ〜糸状菌感染を中心に〜 . 第 2 回佐倉・北の微生物学的原因究明に関する研究」, 平成 20 〜 225 ）亀井克彦 : 難治性深在性真菌症における最近の動4 ）亀井克彦 , 豊留孝仁 : 2007 年シオノギ創薬イノベー

総地区感染症セミナー , 佐倉 , 6 月 25 日 , 2008.

向 . 第 6 回血液・腫瘍セミナー , 津 , 7 月 11 日 ,2008.

6 ）亀井克彦 : 呼吸器真菌症−診断と治療の pitfalls − .
第 41 回千葉呼吸器感染症研究会 . 千葉 , 7 月 18 日 ,2008.

7 ）亀井克彦 : 難治性深在性真菌症における最近の動

年度 , 100 万円（間接経費 0 円）.

ションコンペ FINDS 共同研究 , 平成 19 〜 20 年度 ,270 万円（間接経費 130 万円）.

5 ）亀井克彦（連携協力者）: 平成 20 年度科学研究費補助金（研究基盤 C）「肺・気道の免疫応答における新しい Toll 様受容体関連シグナル分子の意義」, 平
成 17 〜 20 年度 , 0 円 .

向 . 第 10 回新潟血液疾患真菌症フォーラム , 新潟 ,6 ）亀井克彦（分担）: 平成 20 年度科学研究費補助金8 ）亀井克彦 : 難治性の深在性真菌症に対する最近のア

育状況とペット飼育に関連する疾患に関する研究」,

7 月 25 日 , 2008.

プローチ〜糸状菌感染を中心に〜 . VFEND 発売 3
周年記念講演会 , 東京 , 8 月 30 日 , 2008.

9 ）亀井克彦 : 原因菌から見た肺真菌症の動向 . 第 30

（研究基盤 C）「在宅療養者宅等におけるペットの飼
平成 17 〜 20 年度 , 0 円 .

7 ）亀井克彦（分担）: 独立行政法人科学技術振興機構
平成 20 年度先端計測分析技術・機器開発事業「高回記念呼吸器感染症京都セミナー , 京都 , 9 月 20

性能バイオセンシングシステムの開発」, 平成 20 〜10）亀井克彦 : 深在性真菌症における最近の動向 . 第 48 ）佐野文子（分担）: 厚生労働省新興・再興感染症研

日 , 2008.

回北海道小児血液真菌症研究会 , 札幌 , 10 月 31 日 ,22 年度 , 670 万円（間接経費 201 万円）.

究事業「動物由来感染症のコントロール法の確立に2008.

関する研究−伴侶動物等に由来する真菌症等の診第 2 回大阪真菌症研究会 , 大阪 , 11 月 5 日 , 2008.

（平成 20 年度は 380 万円）.

11）亀井克彦 : アスペルギルス症とその周辺疾患 update.
12）亀井克彦 : 最近の病原真菌と抗真菌薬を巡って . 第10 回東北呼吸器真菌症研究会 , 仙台 , 11 月 15 日 ,2008.

断 , 予防法に関する研究」, 平成 18 年度〜 20 年度

9 ）豊留孝仁 : 平成 20 年度科学研究費補助金（若手研究 B）「Aspergillus fumigatus 各形態を認識する宿主因子の探索」, 80 万円（間接経費 24 万円）.

その他の外部資金

1 ）亀井克彦 : 奨学寄附金「真菌症の発生機序及び治療

12

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

法の研究」および , 「真菌症の診断及び治療法の研究」, 3 社から総額 700 万円 .

2 ）亀井克彦 : 奨学寄附金「真菌症の診断及び治療法の研究」, 高橋容子（きさらづ皮膚科クリニック）, 70
万円 .

千葉大学

3 ）佐野文子 : 海洋博覧会記念公園管理財団

調査研

究・技術開発助成事業 49 万円 .

4 ）渡辺哲 : 奨学寄附金「病院内における深在性真菌症の発症状況と抗真菌薬の使用動向の推移についての調査・研究」, 1 社から 100 万円 .

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200813

病原真菌研究部門 系統・化学分野（ Department of Pathogenic Fungi, Division of Phylogenetics）

教授 : 五ノ井○学内委員透

大学院医学薬学府（医学系運営）委員会委

員 , 大学院融合科学研究科教授会委員 , 光熱水料削減
プロジェクト部局リーダー , 情報化推進企画室図書館
専門部会亥鼻分館分科会委員○センター内委員

運営協議会委員 , 教員会議委員 , 総務委員会委員 , 図書 WG 長 , 共用備品委員会委員長 ,扱主任者 , 防災対策委員会委員 , 研究推進チーム委員 ,微生物管理保存 WG 委員 , 個人評価 WG 委員○学協会への貢献○所属学会

日本医真菌学会編集委員会幹事

日本医真菌学会 , 日本菌学会 , 日本微生物資源学会 , 日本分子生物学会 , 日本臨床環境医学会 ,日本感染症学会 , American Society for Microbiology○受賞

分担 : 第 97 回日本病理学会総会学生ポスター

ククリス部局システムマネージャー , 共同利用委員

賞 : 古賀俊輔 , 古屋充子 , 高橋葉子 , 田中玲子 , 安福

研究部門連絡会委員

島健三 , 中谷行雄 : 臨床病理所見から Birt-Hogg-Dube

長 , 自己点検・評価委員会委員 , 倫理審査委員会委員 ,○学協会への貢献○所属学会

日本放線菌学会理事

日本医真菌学会 , 日本微生物資源学会 , 日

本細菌学会 , 日本放線菌学会 , 日本分子生物学会○受賞

分担 : Award for Excellence to Authors Publishingin Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry in 2007.

和弘 , 吉野一郎 , 熊坂利夫 , 岸本充 , 谷澤徹, 廣症候群が疑われ , 分子生物学的検討によって診断が確定した多発性肺嚢胞の検討 . 金沢 , 2008 年 5 月 15 〜
17 日 .

技術職員（医学薬学府博士課程）: 松澤哲宏
非常勤講師 : 堀江義一（千葉県立中央博物館）

Oarada M, Gonoi T, Tsuzuki T, Igarashi M, Hirasaka K,

非常勤講師 : 安西弘行（茨城大学遺伝子実験施設 教授）

Nakagawa K, Kashima M, Kurita N.（2008. 3. 26）

実験補助員 : 土屋由紀子

Nikawa T, Onishi Y, Toyotome T, Kamei K, Miyazawa T,
准教授 : 矢口貴志
○学内委員

大学院融合科学研究科博士課程 : 芝崎あずさ（2008. 4 〜）
大学院医学薬学府修士課程 : 弘

生涯学習推進委員会委員○センター内委員

研究機関研究員 : 松尾高稔（2008. 5 〜）

教員会議委員 , 総務委員会委員 , 共

佑介

大学院医学薬学府修士課程 : 志賀祐介（2008. 4 〜）

用備品委員会委員 , 共同利用委員 , 微生物・保存管理

大学 院医学薬学府特別研究生 : 山田暁洋（2008. 4 〜委員会委員 , 自己点検・評価委員会委員 , 将来計画委

千葉 大学真菌医学研究センター外国人研究生 : Juhaer

相談等対応グループ , 光熱水量削減プロジェクト WG

千葉大学真菌医学研究センター外国人研究生 : Yordan

施設運営委員会委員 , 有害廃棄物委員会委員長 , 広報員会委員 , 図書 WG 委員 , 実験動物 WG 委員 , 市民
委員 , 機種選定委員○学協会への貢献

日本菌学会・評議員・将来計画構想委員会委員・関東支部幹事○所属学会

日本医真菌学会 , 日本微生物資源学会 , 日

本菌学会 , 日本顕微鏡学会 , マイコトキシン学会 ,Mycological Society of America

助教 : 田中玲子○学内委員

放射性同位元素委員会専門委員会委員○センター内委員

微生物・保存管理室施設運営委員会

2008. 10）

Mijiti（〜 2008. 7）

Khaedir（2008. 10 〜）

研究概要（共同研究を含む）
1 ．病原性放線菌の分子系統および同定法の確立

Nocardia, Gordonia などの病原性放線菌について遺伝子配列などを基にした分類・同定法を開発し , 菌種間の分子系統学的な関連を明らかにしている .

委員 , 放射性同位元素委員会委員 , 放射性同位元素取

14

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

2 ．病原性放線菌の二次代謝産物生合成遺伝子の解析
二次代謝産物の生合成に用いられるポリプレニル 2リン酸合成酵素などをプローブとして , 様々なノカルジ
ア菌株ゲノムのスクリーニングを行い , 二次代謝産物合成遺伝子の探索を進めている . 新規化合物の探索や化合物生合成経路の解明に役立つと期待される .

菌 Byssochlamys, Talaromyces, Hamigera, Neosartorya などの系統解析および形態の詳細な検討を実施し , 菌学的な位置づけを明らかにした . 耐熱性菌各属のみに特異的な塩基配列の探索により新たにプライマーを設計し , 迅速に識別できる方法を PCR, LAMP 法で開発した .
7 ．病原酵母の疫学的研究

3 ．レクチン・マイクロアレイを用いた真菌細胞表面糖鎖の解析
各種のレクチンをスライドグラスに貼り付けたレクチ
ン・マイクロアレイを用いて , 病原性酵母を中心とした真菌細胞表面糖鎖の種類 , 相対的な量を種・属横断的に解析している . 菌の感染機構等の解明に役立つと期待される .

4 ．DNA マイクロアレイを用いた真菌同定システムの開発

DNA マイクロアレイを用い , 短時間で簡便に病原真菌など酵母・カビを同定できるシステムを開発している.

新 た に 寄 託 さ れ た イ ヌ 分 離 株 で あ る Malassezia

pachydermatis について , RAPD-PCR 法を用いた genotyping
により疫学的検討を行った . 4 種類のプライマーを用いて13 種類にタイプ分けできたが , テストした 59 株のうち ,44 株がほぼ同じタイプに属し , 残りの 15 株でそれぞれ特徴的なタイプが示された . 同一株の中にタイプの異なる細胞が混在していないかどうかを確認するために単コロニー培養したところ , 混在は否定された . また , 同一個体
より繰り返し分離された菌株（採取時期や部位が異なっている）では , 1 組だけ異なったタイプとなったが , その他はすべて同じタイプであった . 本分離株はすべて皮膚病変からの分離で , 愛玩動物としてのイヌを介したヒト
あるいは他個体への伝播が本手法により解明可能である

5 ．病原性 Aspergillus および関連菌の分類学的研究ことが示された .

院内感染が疑われた Candida albicans については , 株識

当センターに保存されている Aspergillus fumigatus を研

別ツールの改良（μTGGE の応用）により , 新生児 ICU

伝子による系統解析を実施した . A. fumigatus とは系統

児の 2 名とその母親が同一タイプの株であり , 他の 1 名

究材料とし , β-tubulin, hydrophobin, calmodulin, actin 遺的に異なる A. lentulus, A. udagawae は , 薬剤感受性の違いから臨床上問題となっている . これら 3 種を迅速に識で同時期に発症した 3 名の新生児のカンジダ症は , 双生
は別タイプであることが判明した .

別できる方法を PCR, LAMP 法で開発した . 非典型的

8 ．病原真菌の系統分類学的研究

udagawae との近縁菌の交配試験による菌学的位置付け

保存の Exophiala 属菌株の見直しを行った . また , これEmericella および関連菌の分類学的研究では , β-tubulin,

なっていなかった菌株を中心に系統関係の見直しを行っ

統と子のう胞子の微細構造 , 最高生育温度との相関性を

因菌を中心に系統解析と疫学的検討を行っている . 今回な A. fumigatus の分布調査を日本 , 中国などで行い , N.
を検討している .

新種（Exophiala xenobiotica）の報告を受けて , センターまで本属菌種として同定されていたものの種名が明確にhydrophobin, aflR 遺伝子による系統解析を実施し , 分子系ている . また , 新疆医科大学との共同研究で頭部白癬原検討した . 分子系統と形態は一部相関が確認された . 分の共同研究では , 日本では分離例が非常に少ない菌株

子系統的に既知種とは区別された菌種は , その他の性状（Trichophyton schoenleinii, Microsporum ferrugineum）が多数の違いのある E. nidulans, E. ruglosa の迅速識別法を検討しる.

を検討した結果 , 新種と考えられた . さらに , 薬剤感受性ている .

6 ．耐熱性菌の多相分類および検出法の開発寄託されたので , より信頼性の高い系統解析が期待され

9 ．酵母・カビのもつイオン・チャネル , RNA 干渉関連遺伝子などの機能解析

食品の製造過程で事故原因菌として問題となる耐熱性

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200815

3 ．総説・解説・その他

研究成果の発表1 ）矢口貴志 , 田中玲子 : 病原真菌の分類と系統解析 .

1 ．著書
1 ）矢口貴志 : 菌類と動物・ヒト . 菌類のふしぎ

形とはたらきの驚異の多様性（国立科学博物館編）東海
大学出版 . 東京 . pp.132-135, 2008.

2 ）矢口貴志 : 真菌 . 新 GMP 微生物試験法（佐々木次雄 , 棚元憲一 , 川村邦夫編）じほう . 東京 . pp.
138-157, 2008.

3 ）亀井克彦 , 矢口貴志 : PCR 法（真菌）. KEYWORD

感染症第 2 版（山口惠三 , 戸塚恭一編）先端医学社 .
東京 . pp. 252-253, 2008.

日本臨床 66（12）: 2261-2267, 2008.

2 ）矢口貴志 , 高島昌子 , 川崎浩子 , 槇村浩一 : 病原真菌研究におけるカルチャーコレクションの役割と利用法 . 真菌誌 49（3）: 221-228, 2008.

3 ）亀井克彦 , 矢口貴志 : 真菌の検査法

培養・同定 .

Medical Technology 36（7）: 695-700, 2008.

4 ．学会・シンポジウム・研究集会での招待講演
国際学会1 ）Gonoi T: Microsatellite typing of Cryptococcus neoformans

var. grubii. China-Japan Pan Asia Pacific Mycology

2 ．原著

Forum Symposium, Proceedings p. 56 , Changchun,

英文China, Jul. 28 - Aug. 2, 2008.

1 ）Oarada M, Tsuzuki T, Gonoi T, Igarashi M, Kamei

2 ）Yaguchi T: Classification of the genus Neosartorya based

T, Nakagawa K, Kurita N: Effects of dietary fish oil

Society of Thailand, Proceedings pp.4-5, Phitsanulok,

K, Nikawa T, Hirasaka K, Ogawa T, Miyazawa
on lipid peroxidation and serum triglyceride levels inon morphology. 25th Annual Conference Microscopy
Thailand, Jan. 9 - 11, 2008.

psychologically stressed mice. Nutrition 24: 67-75,

3 ）Yaguchi T: Identification of pathogenic Aspergillus.

2 ）Hanafy A, Kaocharoen S, Jover-Botella A, Katsu

Symposium, Proceedings p.210, Changchun, China,

2008.（査読有）M, Iida S, Kogure T, Gonoi T, Mikami Y, Meyer

W: Multilocus microsatellite typing for Cryptococcus

neoformans var. grubii. Med Mycol 46（7）: 685-696,
2008.（査読有）3 ）Nakadate S, Nozawa K, Sato H, Horie H, Fujii Y,

Nagai M, Hosoe T, Kawai K, Yaguchi T, Fukushima

K: An antifungal cyclic depsipeptide, eujavanicin A,
isolated from Eupenicillium javanicum. J Nat Prod 71:
1640-1642, 2008.（査読有）4 ）Kang Y, Iida S, Yamamoto S, Kogure T, Tanaka R,

Mikami Y: Trf 4 is a useful gene for discriminationof Candida tropicalis from other medically important

Candida species. Jpn J Med Mycol 49: 39-43, 2008.

（査読有）
邦文

1 ）大内健嗣 , 佐藤友隆 , 吉澤奈穂 , 杉浦
圭介, 矢口貴志, 畑

丹 , 永尾康樹: 外傷後に生じた皮膚 Pseudallescheria boydii 感染症の 1 例 . 真菌誌 49:119-124, 2008.（査読有）16China-Japan Pan Asia Pacific Mycolog y Forum
Jul. 28 - Aug. 2, 2008.

4 ）Yaguchi T, Horie Y, Matsuzawa T, Tanaka R, Abliz P,

Hui Y: Polyphasic taxonomy of pathogenic Aspergillus

fumigatus and related species in Japan and Xinjiang,
China. China-Japan Pan Asia Pacific Mycology Forum

Symposium, Proceedings p.53, Changchun, China, Jul.
28 - Aug. 2, 2008.

国内学会

1 ）矢口貴志 : 病原真菌の分類 , 同定における最近の動向とトピックス . 第 96 回関西真菌懇談会 . 神戸 , 7
月 26 日 , 2008.

2 ）矢口貴志 : 真菌同定の最新の傾向と問題点−形態 ,色と分子系統の関連− . 日本微生物系統分類研究会
第 28 回年次大会 , 東京 , 9 月 26 日 , 2008.
5 ．一般発表
国際学会1 ）Matsuzawa T, Yaguchi T, Tanaka R, Horie Y, Hui Y,

Abliz P: Polyphasic analysis of the genus Emericella andnew species. China-Japan Pan Asia Pacific Mycology

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

Forum Symposium, Proceedings p.198, Changchun,
China, Jul. 28 - Aug. 2, 2008.

2 ）Hong SB, Varga J, Frisvad JC, Yaguchi T, Samson RA:

Polyphasic taxonomy of Aspergillus section fumigati andits teleomorph Neosartorya. The 2008 meeting of the

Mycological Society of America. Pennsylvania, USA,
Aug. 9 - 13, 2008.

3 ）Koga S, Furuya M, Takahashi Y, Tanaka R, Yasufuku

K, Yamaguchi A, Yoshino I, Kumasaka T, Nakatani

Y: A case of multiple pulmonary cysts associated with
Birt-Hogg-Dubé gene mutation. 1 st International

Symposium on Birt-Hogg-Dubé Syndrome, Denmark,Sep. 4 - 6, 2008.

国内学会
1 ）岡

千寿 , 前田浩 , 五ノ井透 , 三上襄 : DNA

2008.

7 ）志保沢里奈 , 大楠悦子 , 田中玲子 , 五ノ井上透, 三襄 : 病原真菌同定用のオリゴアレイについて .

第 13 回千葉真菌症研究会学術講演階 , 千葉 , 6 月
28 日 , 2008.

8 ）田中玲子 , 亀井克彦 , 五ノ井
貴志 , 三上透 , 横山耕治 , 矢口

襄 : NBRP・ナショナルバイオリソー

スプロジェクト「病原微生物」−真菌・放線菌 . 日
本微生物資源学会第 15 回大会 , 日本微生物資源学
会誌 24: 56, 千葉 , 7 月 1 〜 2 日 , 2008.

9 ）Zhu J, Hanafy A, Gonoi T, Meyer W, Mikami Y:

Strain typing for Cryptococcus neoformans var. grubii byanalysis of multilocus microsatellites. 日本微生物資源学会第 15 回大会 , 日本微生物資源学会誌 24: 65,
千葉 , 7 月 1 〜 2 日 , 2008.

マイクロアレイ関連技術の開発 . 平成 19 年度ライ10）Mijiti J, Tanaka R, Pu XM, Erfan A, Yaguchi T:会バイオテクノロジー分科会合同研究発表会 , つくpatients in Xinjiang, China. 日本微生物資源学会第フサイエンス分野融合会議・ライフサイエンス部
ば , 1 月 31 日 , 2008.

2 ）岡千寿 , 前田浩 , 五ノ井透 , 三上襄 : DNA

マイクロアレイ関連技術の開発 . 平成 19 年度ライ
フサイエンス分野融合会議・ライフサイエンス部会
バイオテクノロジー分科会成果・事例発表会 , つくば , 2 月 1 日 , 2008.

3 ）古賀俊輔 , 古屋充子 , 高橋葉子 , 田中玲子 , 安福和
弘 , 吉野一郎 , 熊坂利夫 , 岸本充 , 谷澤徹, 廣

島健三 , 中谷行雄 : 臨床病理所見から Birt-Hogg-

Dubé 症候群が疑われ , 分子生物学的検討によって診断が確定した多発性肺嚢胞の検討 . 第 97 回日本
病理学会総会 , 金沢 , 5 月 15 〜 17 日 , 2008.

4 ）弘祐介 , 松澤哲宏 , 細谷幸一 , 中山素一 , 徳田

一 , 矢口貴志 : 耐熱性 Talaromyces 属および関連菌の系統分類と検出法の検討 . 日本菌学会第 52 回大会 ,講演要旨集 p. 52, 三重 , 5 月 30 〜 6 月 1 日 , 2008.

5 ）松澤哲宏 , 矢口貴志 , 堀江義一 , 田中玲子 , 五ノ井
透 : Emericella 属の多相分類と新種について . 日本菌学会第 52 回大会 , 講演要旨集 p. 63, 三重 , 5 月 30
〜 6 月 1 日 , 2008.

6 ）矢口貴志 , 堀江義一 , 松澤哲宏 , 田中玲子 , Abliz,

Paride, Hui, Yan: Aspergillus section Fumigati に分類される非 A. fumigatus について . 日本菌学会第 52 回

大会 , 講演要旨集 p. 93, 三重 , 5 月 30 〜 6 月 1 日 ,千葉大学

Genotyping of Candida albicans isolated from AIDS
15 回大会 , 日本微生物資源学会誌 24: 65, 千葉 , 7
月 1 〜 2 日 , 2008.

11）弘

佑介 , 松澤哲宏 , 細谷幸一 , 中山素一 , 徳田

一 , 矢口貴志 : 耐熱性 Talaromyces 属および関連菌の系統分類と検出法の検討 . 日本微生物資源学会第15 回大会 , 日本微生物資源学会誌 24: 69, 千葉 , 7
月 1 〜 2 日 , 2008.

12）五ノ井上透 , 武田健二郎 , 志賀祐介 , 松澤哲宏 , 三

襄 : gyrB 遺伝子による Nocardia 属菌群の分類（multilocus sequence typing を目指して）. 2008 年度
日本放線菌学会 , 山梨 , 7 月 10 〜 11 日 , 2008.

13）矢口貴志 , 松澤哲弘 , 弘

佑介 , 田中玲子 : 病原性

Aspergillus fumigatus および関連菌種の多相分類と迅
速同定法の検討 . 第 2 回アスペルギルス研究会 , 千
葉 , 7 月 19 日 , 2008.

14）若菜大悟 , 細江智夫 , 板橋武史 , 河合賢一 , 矢口貴

志 , 滝澤香代子 , 福島和貴 : Malbranchea filamentosaから得られる新規セスキテルペンの構造 . 第 55 回
日本生薬学会 , 長崎 , 7 月 19 〜 20 日 , 2008.

15）板 橋 武 史 , 細 江 智 夫 , 河 合 賢 一 , 矢 口 貴 志 :Neosartorya 属菌の新種とプロファイルされた

A159 菌株の成分研究 . 第 55 回日本生薬学会 , 長崎 ,7 月 19 〜 20 日 , 2008.

16）松澤哲宏 , 矢口貴志 , 田中玲子 , 堀江義一 , 五ノ井

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200817

透 : Emericella 属の多相分類と新種について . 第 5 回
真菌分子細胞研究会 , 千葉 , 8 月 21 〜 22 日 , 2008.

17）五ノ井透 : 病原性放線菌の国内同定システムの確

立と運用 . 第 2 回真菌ワープ研究会 , 千葉 , 8 月 23
日 , 2008.

18）五ノ井三上

透 , ハナフィアメド , メーヤーウィランド ,襄 : Cryptococcus neoformans var. grubii のマイク

ロサテライト多型とその世界分布 . 第 52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 84, 長崎 , 9
月 10 〜 11 日 , 2008.

19）神戸俊夫 , 服部尚生 , 田中玲子 , 知花博治 : RPS/

26）中山素一 , 朱弘

丹 , 細谷幸一 , 矢部信一 , 徳田 一 ,

祐介 , 松澤哲宏 , 矢口貴志 : 飲料におけるカビ ,酵母の迅速検査法および検出菌の遺伝子解析による迅速識別・同定法の確立 . 日本防菌防黴学会第 35

回年次大会 , 要旨集 p. 177, 浜松 , 9 月 11 〜 12 日 ,2008.

27）窪田宜昭 , 長岡浩 , 窪田正昭 , 窪田代子 , 矢口貴志 : 銀微粒子の粒子径制御と抗真菌活性について . 日本防菌防黴学会第 35 回年次大会 ,要旨集 p. 133, 浜松 , 9 月 11 〜 12 日 , 2008.

28）五 ノ 井

透 , Ahmed Hanafy, Wiland Meyer, 三 上

ALT およびマイクロサテライトに基づいた Candida

襄 : Multilocus microsatellite sequence による病原性酵

52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）:

91 回日本細菌学会関東支部会 , 千葉 , 10 月 23 〜 24

albicans のタイピングの評価と genotype variation. 第86, 長崎 , 9 月 10 〜 11 日 , 2008.

20）矢口貴志 , 弘

祐介 , 松澤哲宏 , 田中玲子 , 細谷幸

一 , 中山素一 , 徳田

一 : 病原性 Aspergillus section

Fumigati の分類と識別法の検討 . 第 52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 81, 長崎 , 9 月
10 〜 11 日 , 2008.

21）矢口貴志 , 堀江義一 , 松澤哲宏 , 田中玲子 , Paride

Abliz, Hui Yan: 病原性 Aspergillus fumigatus の系統解
析と形態 . 第 52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 81, 長崎 , 9 月 10 〜 11 日 , 2008.

22）松澤哲宏 , 矢口貴志 , 堀江義一 , 田中玲子 , 五ノ井
透 : 病原性 Emericella 属菌の特異的・迅速的な検出法の開発 . 第 52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 82, 長崎 , 9 月 10 〜 11 日 , 2008.

23）弘祐介 , 松澤哲宏 , 細谷幸一 , 中山素一 , 徳田

一 , 矢口貴志 : 耐熱性 Talaromyces 属および関連菌の系統分類と識別法の検討 . 第 52 回日本医真菌学会
総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 81, 長崎 , 9 月 10 〜
11 日 , 2008.

24）Tanaka R, Mijiti J, Yaguchi T: Genotyping of Candida

albicans isolated from AIDS patients in Xinjiang, China.
第 52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1号）: 84, 長崎 , 9 月 10 〜 11 日 , 2008.

25）細谷幸一 , 中山素一 , 徳田一, 弘祐介 , 松澤哲

宏 , 矢口貴志 : 食品危害耐熱性カビ主要 4 属の迅
速識別・同定技術の確立 . 日本防菌防黴学会第 35

母 Cryptococcus neoformans 多型性の世界分布解析 . 第
日 , 2008.

29）矢口貴志 , 川良

希 , 上田成一 , 宇田川俊一 : 変敗

果実加工品から分離されたカビ Neosartorya laciniosaの同定と耐熱性 . 第 29 回日本食品微生物学会学術総会 , 講演要旨集 p. 53, 広島 , 11 月12 〜 13日 ,2008.

30）矢口貴志 , 弘

祐介 , 松澤哲宏 , 田中玲子 , 細谷幸

一 , 中山素一 , 徳田

討 . 第 29 回日本食品微生物学会学術総会 , 講演要
旨集 p. 54, 広島 , 11 月 12 〜 13 日 , 2008.

31）細谷幸一 , 中山素一 , 徳田一, 弘祐介 , 松澤哲

宏 , 矢口貴志 : 食品危害耐熱性カビ主要 4 菌種同定法

1 . PCR 法の確立 . 第 29 回日本食品微生物学会学術総会 , 講演要旨集 p. 55, 広島 , 11 月12 〜 13
日 , 2008.

32）弘祐介 , 矢口貴志 , 松澤哲宏 , 細谷幸一 , 中山素一 , 徳田法

一 : 食品危害耐熱性カビ主要 4 菌種同定

2 . LAMP 法による高度化と分子系統解析 . 第

29 回日本食品微生物学会学術総会 , 講演要旨集 p.
56, 広島 , 11 月12 〜 13日 , 2008.

33）三上

襄 , 本田武司 , 江崎孝行 , 平山謙二 , 亀井

克彦 , 五ノ井透 , 横山耕治 , 矢口貴志 , 田中玲子 : 新たな感染症研究への迅速な支援を目指して .

BMB2008, 神戸 , 12 月 9 〜 12 日 , 2008.

2008.

千葉大学

一 : Aspergillus section fumigatus

関連菌種の形態 , 分子系統の相違と迅速同定法の検回年次大会 , 要旨集 p. 176, 浜松 , 9 月 11 〜 12 日 ,18

規 , 滝澤香

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

Changchun 出 席 の た め , 7 月 28 日 〜 8 月 5 日 ,共同研究2008（科学技術振興調整費 , 奨学寄付金）.

1 ．国際共同研究
1 ）矢口貴志 , 田中玲子 : 中央アジアにおける真菌症原5 ）矢口貴志 , 田中玲子 : 中華人民共和国 , ウルムチ ,新疆医科大学附属第一病院皮膚科

因菌および関連菌の生態研究（文部科学省科学研究費補助金）, 恵

艶教授 , 中華人民共和国 , 新疆医科

艶教授とのため , 10 月 17 日 〜 28 日 , 2008（科学研究費補助

大学附属第一病院皮膚科 .

2 ）矢口貴志 , 田中玲子 : 新疆ウイグル地区における病恵

共同研究の打ち合わせ , 討議 , 研究サンプル収集の金）.

原真菌の形態と系統解析による分類研究（五峯ライ

2 ．海外研究者の受け入れ

フサイエンス研究助成）, Juhaer Mijiti 助教授 , 中華1 ）Yordan Khaedir（インドネシア , インドネシア大学医

人民共和国 , ウイグル人民病院皮膚科 .

ノ井2 ．共同利用研究以外の国内共同研究
1 ）田中玲子 : 生体試料を用いた民族識別法における指標の研究 , 桜田宏一博士 , 警視庁科学警察研究所 ,佐藤慶太講師 , 鶴見大学歯学部 .

2 ）田中玲子 : Trichosporon 属の系統分類的再評価 , 今西
由巳博士 , NBRC.

3 ）田中玲子 : Birt-Hogg-Dube 症候群の確定診断のための分子生物学的検討 , 古屋充子准教授 , 横浜市立大学医学部 .

4 ）田中玲子 , 松澤哲宏 , 宇野潤 , 五ノ井透 , 三上襄 : Malassezia 属菌の免疫不活化作用に関する研究 ,齊藤隆博士 , 山崎学部）, 2008 年 10 月〜（文部科学省）国費留学生（五晶博士 , 独立行政法人理化学民病院）, 〜 7 月 24 日 , 2008（五峯ライフサイエン
ス研究助成）, 共同研究（矢口貴志）.

3 ）Abliz Paride 助教授（中華人民共和国 , 新疆医科大学附属第一病院）, 11 月 17 日 〜 12 月 17 日 , 2008

（科学研究費補助金）, 共同研究（矢口貴志）.

学会等活動（主催学会 , 座長 , コンビーナーなど）
コンビーナー , 座長
1 ）Yaguchi T: Workshop. The recent progress on theidentification of clinically important fungi. China-

研究所・免疫アレルギー科学総合研究センター .

Japan Pan Asia Pacific Mycology Forum Symposium,
Changchun, China, Jul. 28 - Aug. 2, 2008.

座長

国際交流

1 ）Gonoi T: Symposium. Medical Mycology. China-

1 ．海外渡航Japan Pan Asia Pacific Mycology Forum Symposium,

1 ）矢 口 貴 志 : タ イ , バ ン コ ッ ク , The 25th Annual

Conference of the Microscopy Society of Thailand
2008（科学研究費補助金）.

2 ）矢 口 貴 志 : ア メ リ カ , マ イ ア ミ , 3rd Advances

Against Aspergilosis に出席 , 情報収集のため , 1 月
15 〜 21 日 , 2008（奨学寄付金）.

3 ）矢口貴志 : 中華人民共和国 , ウルムチ , 新疆医科大学附属第一病院皮膚科

恵艶教授との共同研究の打ち合わせ , 討議のため , 2 月 17 日 〜 28 日 , 2008

（科学研究費補助金）.

透 , 矢口貴志 , 松澤哲宏 : 中華人民共和国 ,長 春 , Japan-China Pan Asia Pacific Mycology Forum,

千葉大学

Changchun, China, Jul. 28 - Aug. 2, 2008.

に出席 , 招待講演 , 情報収集のため , 1 月 6 〜 11 日 ,4 ）五ノ井透）.

2 ）Juhaer Mijiti 助教授（中華人民共和国 , ウイグル人

教育活動
講義1 ）五ノ井透 : 千葉大学大学院医学薬学府医科学専攻修士課程（先端生命科学）.

2 ）矢口貴志 : 千葉大学大学院自然科学専攻修士課程（融合科学3 ）五ノ井

真菌分子細胞生物学）

透 , 矢口貴志 : 千葉大学普遍教育（真菌（カビ）と人との関わり合い）.

4 ）矢口貴志 , 田中玲子 : 千葉大学医学部微生物実習 .
5 ）矢口貴志 : 千葉大学園芸学部細胞工学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008192 ）田中玲子（代表）, 矢口貴志（分担）: 基盤研究 C

社会的活動

18510201 病原真菌の系統分類学的および生態学的

新聞など
1 ）身近な病原

かびに注意（2008 年 6 月 12, 19 日）.

上 , 下 . 日本農業新聞

センター講習会

1 ）矢口貴志 , 田中玲子 : 第 22 回病原真菌講習会講師

研究 , 平成 18 〜 20 年度（平成 20 年度は 90 万円 ,（間接経費 27 万円））.

その他の外部資金1 ）矢口貴志（分担）: （財）発酵研究所第 1 回特定研究助成 ｢ 我が国における微生物の多様性解析とインベ（2008 年 7 月 8 〜 11 日）.

ントリーデータベースの構築−亜熱帯地域と冷温帯

on Pathogenic Fungi and Actinomycetes in MMRC in

は 100 万円）.

2 ）五 ノ 井透 , 矢 口 貴 志 , 田 中 玲 子 : 5th Workshop

2008, July 15 - 18, 2008.

講演など

1 ）Yaguchi T: Polyphasic taxonomy for pathogenic fungi.

地域の比較から , 平成 19 〜 21 年度（平成 20 年度
2 ）矢口貴志 , 田中玲子（分担）: ナショナルバイオリ
ソースプロジェクト「病原微生物」, 平成 19 〜 23
年度 .

Lecture at Kunyang University. Daejeon, Korea, 2008.

3 ）矢口貴志 , 田中玲子（分担）: 科学技術振興調整費

2 ）Yaguchi T: Polyphasic taxonomy for pathogenic fungi.

国際共同研究 : 真菌症原因菌の疫学的研究と真菌症

6. 19.

Lecture at KACC, NIAB. Suwon, Korea, 2008. 6. 20.

アジア科学技術協力推進戦略・地域共通課題解決型
対策拠点形成 , 平成 18 〜 20 年度 .

特許

共同研究

1 ）「PCR 法による耐熱性カビ 4 属の検出 , アスペルギ1 ）矢口貴志（代表）: 花王（株）平成 20 年度

ルス

フミガタス類縁菌の検出方法」など関連計 7

件.

受託研究

1 ）矢口貴志（代表）: 独立行政法人農業生物資源研究所

科学研究費補助金1 ）矢口貴志（代表）田中玲子（分担）: 基盤研究 B
中央アジアにおける真菌症原因菌および関連菌の生態研究 , 平成 18 〜 21 年
度 .（平成 20 年度は 330 万円（間接経費 99 万円））.

20

害カビの迅速同定識別法確立に関する研究 , 154 万円（間接経費 46 万円）.

外部資金

18405005 海外学術調査

食品危

千葉大学

平成 20 年度

農業生物資源ジーンバンク事業が保存する Aspergillus 属及び Penicillium 属菌類の学名更新 , 50 万円 .

奨学寄附金1 ）矢口貴志（代表）リファイン（株）30 万円 .

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

病原真菌研究部門 真菌資源開発分野（ Department of Pathogenic Fungi, Division of Fungal Resources and Development）

准教授 : 横山耕治
○学 内委員

総合メディア基盤センター運用専門委員 ,

亥鼻地区ネットワーク連絡会議委員 , 亥鼻地区職員駐車場地域利用委員 , 部局情報管理者○学外委員 日本医真菌学会評議員 , 日本マイコトキシ
ン研究会幹事○センター内委員 総務委員会委員 , 共同備品委員会委
員 , 共同利用委員会委員 , 微生物・保存管理施設委員
会委員 , 広報委員会委員 , 放射性同位元素委員会委員

長 , 自己点検・評価委員会委員 , 地域連携委員会委員 ,研究推進チーム委員 , 個人評価 WG 委員 , 光熱水量節減プロジェクト WG 委員○所 属学会

日本医真菌学会 , 日本細菌学会 , 日本菌学会 , 日本微生物資源学会 , 日本農芸化学会 , 日本マ
イコトキシン学会 , International Society of Human andAnimal Mycology

非常 勤講師 : 村山琮明（北里大学

北里生命科学研究

所＆大学院感染制御科学府）

9. 21）〜 7. 20）

ターでチトクローム b 遺伝子解析により分離株の同定を行った . 貴陽医学院とは , この訪問で部局間交流協定
を結ぶことで同意された . このプロジェクトは , 平成 20
年度で終了するが , 今後も病原真菌の疫学 , 生態の研究を続ける（横山耕治 , 王

麗 , 各務清美 , 屋久玲子）.

2 ．病原真菌の疫学的 , 生態学的研究

a ．中国東北部における真菌感染症調査および真菌症疫学 , 生態研究

日中医学協会奨学寄付金（2006 年単年度）獲得をきっ
かけに , 中国吉林省長春

吉林大学白求恩医学院を訪問

し , 真菌症の調査を行っており , 振興調整費の支援で ,長春に於いてシンポジウムを開催した . 今後も共同研究を発展させ真菌症の疫学と病原真菌の生態に関する研究を継続する（横山耕治 , 王麗, 賀丹 , 各務清美 , 屋

b ．真菌の個体識別法を用いた病原真菌の疫学 , 生態学

技術補佐員 : 屋久玲子

外国人研究員 : 張

壌の採取を行い吉林大学で真菌の分離作業を行い , セン久玲子）.

技術補佐員 : 各務清美
外国人研究員 : 王

した . 長春−吉林大学 , 貴陽−貴陽医学院を訪問し , 土的研究

麗 （中国吉林大学）（2008. 9. 7 〜
雲峰（中国吉林大学）（2008. 7. 13

真 菌 の 個 体 識 別 法 に 一 つ で あ る AFLP（Amplified

Fragment Length Polymorphisms）解析により , 輸入真菌症原因菌 P. marneffei の感染株の由来を明らかにし , 患者が感染した地域を推定できた . この方法を皮膚真菌症
原因菌 M. canis に応用し解析したが , 増幅バンドの数が研究概要多すぎたためパターンに特徴が示せなかった . 今後は ,1 ．真菌症原因菌の疫学的研究と真菌症対策拠点形成に , 菌株の個体識別は真菌症疫学にとって重要な要素で文部科学省・振興調整費−アジア科学技術協力の戦略的推進・地域共通課題解決型国際共同研究−プロジェ
クトにおいて , 「研究課題 : 真菌症原因菌の疫学的研究と真菌症対策拠点形成」で , これまでの実績と取り組みが評価され , 研究調査が進められることになった . 今年

増幅バンドを制限する方法を用いて再度解析する . さら
あり , 株間類縁関係解析に AFLP 解析は欠かせないので , 現在進めている Aspergillus section Nigri や他の菌群に応用して , 真菌症の疫学 , 真菌の生態の研究を進める（横山耕治 , 王

麗 , 各務清美）.

は , 長春市吉林農業大学で行なわれた日中菌学フォーラ

3 ．病原真菌の及び関連菌のチトクローム b 遺伝子解析

開催した . 吉林大学においては日中共同研究会議を開催

チトクローム b 遺伝子の解析は , 継続し行われている

ムにおいて , マイコトキシンと医真菌のシンポジウムを

千葉大学

a ．病原真菌の同定・系統解析および真菌症の迅速診断

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200821

研究テーマで , すでに病原性の Aspergillus 属菌 , Candida

す Candida tropicalis や二形性を示す病原真菌との遺伝子 ,菌 , Cryptococcus neoformans var. neoformans, var. gattii,

山耕治 , 各務清美 , 岩口伸一 , 村山琮明）.

表している。真菌症原因菌の迅速診断のためのプライ

5 ．真菌資源の長期安定保存法の開発

属 菌 , Cryptococcus 属 菌 , Rhodotorula 属 菌 , Exophiala 属

Trichosporon 属菌については , 8 年間で 15 報の論文を発
マーセットなどの特許を千葉大学から申請し , 迅速診断

遺伝子発現の研究から真菌の病原性を明らかにする（横菌糸形細胞は , 酵母形や分生子と異なり乾燥保存にはに係わる申請数は , 5 件となった . 昨年は , 希に真菌症耐えにくく , 保存中に死滅する場合が多い , 特に分生子菌群の解析を進めている . これらの菌群には既存の燥保存には耐えられない , そこで , 乾燥前の処理に工夫を起こす Aureobasidium, Geotrichum, Graphium, Beauveria

PCR プライマーでは増幅できない菌種 , 株を含むため
プライマーの設計を行っている . 今年は , 病原菌でもありごく一般的な環境菌でもある Alternaria 属菌を中心にを作らない株や作りにくい種においては , 従来の L- 乾を凝らし , 分散媒や乾燥保護剤を検討して L- 乾燥で保存できる方法を開発した . このテーマで（財）発酵研究
所から研究助成（平成 16 年 9 月 〜 19 年 3 月）を受け解析を行った . 本属菌は多くの種を含むが形態的な特徴

た . 自作のコルクボーラーを用いて , 培地ごと L- 乾燥さ

どないことが明らかになった . 健康に関連している環境

菌株が保存可能となった . しかし , 一部の株にはこの保も乏しく , DNA シーケンスによる DNA 型も種の数ほ菌やマイコトキシン産生菌の DNA 型解析を進め , 真菌同定の精度を高め , 保存菌の品質確保に努める . 輸入真菌症の原因菌を中心に , 既存 PCR プライマーの評価と新たにプライマーの設計を検討している . DNA マイク
ロアレーによる迅速同定化に関する検討も続けている（横山耕治 , 王

麗 , Biswas KS, 賀

丹 , 各務清美）.

b ．真菌の進化系統解析

既に解析の済んでいる病原真菌と関連菌のチトクロー

ム b 遺伝子からアミノ酸配列を推定し , 真核生物のチトクローム b のアミノ酸配列と比較し , 化石年代 , 地質年
代とを考慮して , 各真菌の進化系統を推定している . 化
石年代から推定する場合に , 現存種の古代化石なのか絶せる方法を用いて , 従来の L- 乾燥法では保存できない存法が適用できないため , 更に検討している（横山耕治 ,伊藤純子）.

研究成果の発表
1 ．原著1 ）Iwaguchi S, Suzuki M, Sakai N, Yokoyama K, Suzuki

T: The loss of parts of chromosome 7 followed by theinsertion of URA cassette into RB2 on MRS in Candida
albicans strain CAI-4. Med Mycol 46: 655-63, 2008.
2 ．総説・解説・その他

滅種の化石なのかの判定は困難であるが , 誤差を考慮し1 ）横山耕治 , 川上裕司 , 陰地義樹 , 久米田裕子 , 高橋

様式を進化と関連して考慮すべきであることが考えられ離株のオクラトキシン産生性 . Mycotoxins 58（2）:て推定している . 成長様式 , 繁殖様式など生物種固有のた . 生物におけるミトコンドリア遺伝子 , 核遺伝子 , 形
態発現を総合的に考察して真菌の進化の謎を解明する（横山耕治 , 各務清美 , 高橋治男 , 王

麗 , Biswas KS）.

4 ．病原性発現遺伝子 , 形態形成関連遺伝子の解析

Candida albicans の二形性に関する研究を続けており ,本菌の遺伝子をスライドグラスにプリントしてマイクロアレーの作成を試みている . DNA マイクロアレーは ,遺伝子発現を調べるために有効な手法であるが , 遺伝子の発現制御やリン酸化などによるシグナル伝達などの変化は解析しにくい . このため放射性同位元素を用いた解析を含めて今後検討する予定である . 形態変換能を示

22

千葉大学

治男 : ぶどう園における section Nigri の分布と分143-149, 2008.

2 ）横山耕治（分担）: 振興調整費成果報告書（2007 年度）.

3 ．学会・シンポジウム・研究集会での招待講演
国際学会（ワークショップ）
1 ）Yokoyama K: Epidemiology of Penicillium marneffei.

Special Symposium: China-Japan Medical Mycology
Project in Asia. China-Japan Pan Asia Pacific Mycology
Forum, Changchun July 28 - August 5, 2008.

2 ）Wang L, Yokoyama K, Dan HE, Yang YQ, Liu JH:

Identification of Aspergillus fumigatus and diagnosis of

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

aspergillosis. Special Symposium: China-Japan Medical

共同研究

Mycology Forum, Changchun July 28 - August 5, 2008.

1 ．国際共同研究

Mycology Project in Asia. China-Japan Pan Asia Pacific3 ）Dan HE, Yokoyama K, Takahashi H, Onji Y, Wang

1 ）横山耕治 : チトクローム b 遺伝子に基づく菌類の同producing strain and section Nigri isolated from soil

2 ）横山耕治 : チトクローム b 遺伝子に基づく酵母類の

L: Clasification and myctotoxin production of aflatoxinand agricultural product in China. Special Symposium:
China-Japan Medical Mycology Project in Asia. ChinaJapan Pan Asia Pacific Mycology Forum, Changchun
July 28 - August 5, 2008.

4 ．一般発表

教授（中国 吉林大学）.

同定と系統解析 . Biswas SK 博士（アメリカ合衆国
ペンシルバニア医科大学）.

3 ）横山耕治 : 中国東北部における真菌症原因菌の疫学的研究と真菌症対策拠点形成

的研究と真菌症対策拠点形成

1 ）横山耕治 , 川上裕司 , 陰地義樹 , 久米田裕子 , 高橋治男 : ぶどう園における section Nigri の分布と分離
株のオクラトキシン産生性 . 日本マイコトキシン学会第 63 回学術講演会 , シンポジウム , 東京 , 1 月 11
日 , 2008.

一般講演

麗 , 各務清美 , 横山耕治 : チトクローム b 遺伝子に基づく Alternaria 属菌の系統解析 . 第 52 回日本

医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 83, 長崎 ,9 月 10 日〜 11 日 , 2008.
穎倩 , 矢沢

勝清 , 横山耕治 , 三上

襄 : 中国貴陽医学院で分離された病原性酵母の分類学的研1 号）: 84, 長崎 , 9 月 10 日〜 11 日 , 2008.

3 ）横山耕治 , 各務清美 , 賀丹, 王麗 : 希な真菌症

原因菌を含む Aspergillus section Nigri のチトクローム

b 遺伝子解析による生態学的研究 . 第 52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 84, 長崎 , 9
月 10 日〜 11 日 , 2008.

麗, 横 山 耕 治: 皮 膚 糸 状 菌

Microsporum canis の AFLP 解析による疫学的研究 .
第 52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1号）: 85, 長崎 , 9 月 10 日〜 11 日 , 2008.

5 ）岩 口麗教授（中国伸 一, 横 山 耕 治, 鈴 木

孝 仁: 病 原 真

李

若瑜

教授（中

国 北京大学）.

5 ）横山耕治 : 中国東南部における真菌症原因菌の疫学的研究と真菌症対策拠点形成 , 席
国広州

麗艶

教授（中

中山大学）.

6 ）横山耕治 : 中国南西部における真菌症原因菌の疫学的研究と真菌症対策拠点形成 , 王

和

教授（中国

貴陽医科大学）.

7 ）横山耕治 : 中国西部における真菌症原因菌の疫学的研究と真菌症対策拠点形成 , 恵

艶

教授（中国

新疆医科大学）.

8 ）横山耕治 : 中国南西部における真菌症原因菌の疫学的研究と真菌症対策拠点形成 , Paride Abliz 助教授（中国

究 . 第 52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊

4 ）各 務 清 美 , 王

王4 ）横山耕治 : 中国東中部における真菌症原因菌の疫学

シンポジウム2 ）康麗吉林大学）.

国内学会

1 ）王定と系統解析 . 王

新疆医科大学）.

国際交流
1 ．海外渡航1 ）横山耕治 : 真菌症原因菌の疫学的研究と真菌症対策
拠点形成（文部科学省振興調整費）中国吉林省長春市吉林大学白求恩医学院 , 農案 , 松原 , 藩陽 2 月 24
日 〜 3 月 2 日 , 2008.

2 ）横山耕治 : 真菌症原因菌の疫学的研究と真菌症対策
拠点形成（文部科学省振興調整費）中国吉林省長春市吉林大学白求恩医学院 , 北京 , 杭州 6 月 15 日 〜
22 日 , 2008.

菌 Aspergillus fumigatus 由 来 の 揮 発 性 有 機 化 合 物

3 ）横山耕治 : 真菌症原因菌の疫学的研究と真菌症対策

52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）:

市吉林大学白求恩医学院 , 吉林農業大学 7 月 27 日

（Microbial Volatile Organic Compounds; MVOCs）. 第103, 長崎 , 9 月 10 日〜 11 日 , 2008.

千葉大学

拠点形成（文部科学省振興調整費）中国吉林省長春〜 8 月 3 日 , 2008.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008234 ）横山耕治 : 真菌症原因菌の疫学的研究と真菌症対策

Japan Medical Mycology Project in Asia, China-Japan

拠点形成（文部科学省振興調整費）中国吉林省長

Pan Asia Pacific Mycology Forum, Changchun July

春市吉林大学白求恩医学院 , 貴陽医科大学 , 威海 10

28-August 5, 2008.

月 12 日 〜 10 月 19 日 , 2008.

教育活動

2 ．海外研究者の受け入れ

講義

横山耕治
1 ）張

雲 峰（ 中 国 吉 林 大 学 ）, 2008 年 7 月 13 日 〜2008 年 7 月 20 日 , 外国人向け病原真菌講習会参加 ,（2007）.

共同研究 .

2 ）横山耕治 : 普遍教育 .

9 月 21 日 , 共同研究 .

外部資金

2 ）王

麗

教授（中国吉林大学）, 2008 年 9 月 7 日〜

学会等活動（主催学会 , 座長 , コンビーナーなど）
1 ）横山耕治 : Organizing Committee: China-Japan Pan Asia

Pacific Mycology Forum, Changchun July 28-August 5,
2008.

2 ）横山耕治 : Chair person: Special Symposium: China-

241 ）横山耕治 : 医学部 4 年次医学生命科学特論・研究

千葉大学

その他の外部資金
1 ）横山耕治（分担）: 文部科学省振興調整費 . プログ
ラム名 : アジア科学技術協力の戦略的推進地域共通
課題解決型国際共同研究 . 課題名 : 真菌症原因菌の疫学的研究と真菌症対策拠点形成 .

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

病原真菌研究部門 生態分野
（ Department of Pathogenic Fungi, Division of Ecology）

外国人客員教授 : 白 逢彦
（中国科学院微生物研究所

研究員（教授）, 副主任）

○学会および社会における活動等

Editorial Board Member: FEMS Yeast Research; Acta
Microbiologica Sinica; Mycosystema; Journal of Fungal
Research and Bulletin of Biology.

Memberships: Mycological Society of China; Chinese
Society for Microbiolog y ; American Society for
Microbiology.

Vice Director of the CAS Key Laboratory of Systematic
Mycology and Lichenology.

研究概要（共同研究を含む）

Society for Microbiology.

1 ．抗真菌剤の作用機序と形態変化の研究

Vice Director of the Committee on Mycology, Chinese
助教 : 田口英昭

上市されている全身投与可能な抗真菌剤の最適な併○学内委員 亥鼻地区職員等駐車区域利用者委員会 , 亥

鼻地区 ISO 実行委員会 , 光熱水料節減リーダー会議 ,亥鼻地区光熱水料節減委員会 , 亥鼻地区職員等駐車区
域利用者委員会平成 20 年度会計監査員 , 亥鼻地区平
成 20 年度 ISO 内部監査員○センター内委員 共用備品委員会 , 微生物・保存管理

用方法を検討 .
2 ．シード化合物の抗真菌効果の研究
自然界からのシード化合物と既存の抗真菌剤との薬剤効果の比較および併用による抗真菌効果の検討 .

施設運営委員会 , 有害廃棄物委員会 , 放射性同位元素

3 ．真菌の同定および分子疫学的研究の為の基礎的研究

書 WG, 光熱水量節減プロジェクト WG, 微生物管理ない真菌の同定を目的に , 分子生物学的手法による同委員会 , 防災対策委員会 , 組織・機能改善委員会 , 図保存 WG○学協会への貢献

日本医真菌学会評議員○国および地方公共団体への貢献

千葉市環境影響評価

審査会委員 , 千葉大学・千葉市の共同研究事業「水辺づくりにおける市民と行政のパートナーシップ形成」○所属学会

日本感染症学会 , 日本医真菌学会 , 日本防菌防黴学会 , 日本内分泌撹乱化学物質学会 , 日本臨床
微生物学会

技術職員 : 滝澤香代子
非常勤講師 : 久米光（日本医科大学・客員教授）

形態学 , 生理生化学的手法による同定では確定でき定法を検討している . また急務事項でもある感染経路の特定のための疫学的クライテリアを探索している .

研究成果の発表
1 ．著書
英文1 ）Fan SR, Bai FY, Liao QP, Li J, Liu XP, Liu ZH:

Genotype distribution of Candida albicans strains
associated with differenct conditions of vulvovaginal

candidiasis, as revealed by microsatellite typing. Sex
Transm Infect 84: 103-106, 2008.（査読有り）

2 ）Li J, Fan SR, Liu XP, Li DM, Nie ZH, Li F, Lin

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

25

H, Huang WM, Zong LL, Jin JG, Lei H, Bai FY:
Biased genotype distributions of Candida albicans strains
associated with vulvovaginal candidosis and candidalbalanoposthitis in China. Clin Infect Dis 2008. （inpress）（査読有り）

3 ）Liu XP, Fan SR, Bai FY, Li J, Liao QP: Atifungal

susceptibility and genotypes of Candida albicans

strains from patients with vulvovaginal candidiasis.
Mycoses 2008 . （ Published online, OI: 10 . 1111 /j.1439-0507.2008.01539.x）（査読有り）

4 ）Wang QM, Li J, Wang SA, Bai FY: R apid

differentiation of phenotypically similar yeast species bysingle-strand conformation polymorphism of ribosomal

DNA. Appl Environ Microbiol 74: 2604-2611, 2008.

（査読有り）5 ）Ji ZH, Bai FY: Ogataea ganodermae sp. Nov., amethanol-assimilating yeast apecies isolated f rom

children undergoing sequential HIV therapies. Med
Mycol 2008. in press.（査読有り）
2 ．一般発表1 ）豊留孝仁 , 渡辺

哲 , 落合恵理 , 田口英昭 , 亀井克

彦 : Aspergillus fumigatus 成長に血清が与える影響についての解析 . 第 82 回日本感染症学会 , 講演抄録 p.
240, 島根 , 4 月 17 〜 18 日 , 2008.

2 ）田 口 英 昭 , 渡 辺哲, 豊留孝仁, 落合恵理, 佐

藤 綾 香 , 亀 井 克 彦 : Aspergillus fumigatus に 対 す る

caspofungin と voriconazloe の併用効果の検討 . 第 52回日本医真菌学会総会 . 真菌誌 49（増刊 1 号）
: 80,
長崎 , 9 月 10 〜 11 日 , 2008．

3 ）豊留孝仁 , 渡辺

哲 , 田口英昭 , 落合恵理 , 亀井克

彦 : Aspergillus fumigatus 成長を促進する血清中因子の同定 . 第 57 回日本感染症学会東日本地方会 , 抄
録集 p. 170, 大宮 , 10 月 23 〜 24 日 , 2008.

basidiocarps of Ganoderma sp. Int J Syst Evol Microbiol

4 ）鳴嶋善聡 , 田中昭成 , 山崎和俊 , 佐藤綾香 , 田口英6 ）Wang QM, Bai FY: Molecular phy logeny of菌剤の開発 . 第 13 回日本医療環境オゾン研究会 ,58: 1502-1506, 2008.（査読有り）

basidiomycetous yeasts in the Cryptococcus luteolus lineage（ Tremellales ）based on nuclear ribosomal RNA andmitochondrial cytochrome b gene sequence analyses:

proposal of Derxomyces gen. nov. and Hannaella gen.
nov., and description of eight novel Derxomyces species.

昭 , 亀井克彦 , 鵜川昌弘 , 中室克彦 : 新規機能性抗東京 , 4 月 20 日 , 2008.

5 ）窪田宣昭 , 長岡規 , 滝澤香

代子 , 矢口貴志 : 銀微粒子の粒子径制御と抗真菌活性について . 日本防菌防黴学会第 35 回年次大会 .
要旨集 p. 133. 静岡 , 9 月 11 〜 12 日 , 2008．

FEMS Yeast Research 8: 799-814, 2008.（査読有り）

6 ）滝澤香代子 , 田中博二 , 新矢恭子 , 小菅旬子 , 福

phylloplane yeasts belonging to the genus Dioszegia

Schizophyllum commune の同定 . 第 52 回日本医真菌7 ）Wang QM, Jia JH, Bai FY: Diversity of basidiomycetous（ Tremellales ）and description of Dioszegia athyrium

sp. nov., Dioszegia cream sp. nov. and Dioszegia

zingshanensis sp. nov. Antonie van Leeuwenhoek 93:
391-399, 2008.（査読有り）

8 ）Wang SA, Bai FY: Saccharomyces arboricolus sp. nov.,a new yeast species from tree bark. Int J Syst Evol

島和貴: イヌの骨髄炎起因菌として分離された学会総会 . 真菌誌 49（増刊 1 号）: 85, 長崎 , 9 月 10
〜 11 日 , 2008．

共同研究
1 ．国際共同研究

Microbiol 58: 510-514, 2008.（査読有り）

1 ）自然界からのシード化合物の抗真菌効果の研究 ,Candida hainanensis sp. nov., Candida heveicola sp. nov.

2 ）病原性放線菌の同定に関する研究 . 席9 ）Wang SA, Jia JH, Bai FY: Candida alocasiicola sp. nov.,

and Candida musiphila sp. nov., novel anamorphic,
ascomycetous yeast species isolated from plans. Antonie

Park JC 准教授 , 韓国 , 延世大学医学部 .（田口）van Leeuwenhoek 94: 257-265, 2008.（査読有り）

Smith SN, Vilela MS: Oral candidiasis of HIV-infected

千葉大学

麗艶教授 ,

中国中山大学附属第二医院皮膚科 .（滝澤）10）Melo NR, Taguchi H, Culhari VP, Kamei K, Mikami Y,

26

浩 , 窪田正昭 , 窪田

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008社会的活動

外部資金センター講習会

奨学寄附金1 ）第 22 回病原真菌講習会講師「β - グルカンによる

1 ）滝澤香代子（分担）: リファイン株式会社 , 20 万円．

診断」（田口）.

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200827

分子機能研究部門 機能形態分野（ Department of Molecular Function, Division of Ultrastructure and Function）

教授 : 川本進○学内委員 大学院医学系運営委員会委員 , 大学院融合

者 , 両立支援室室長○センター内委員

教員会議委員 , 総務委員会委員 , 共科学研究科教授会委員 , 学内評価委員会委員 , 分析セ用備品委員会委員 , 共同利用委員会委員 , 広報委員会

議会委員 , バイオメデイカル研究センター教員会議委

委員 , 地域連携委員会委員 , 将来計画委員会委員 , 光

ンター連絡協議会委員 , アイソトープ実験施設連絡協
員 , 遺伝子組換え実験安全委員会委員 , 遺伝子組換え

実験安全主任者 , 分子機能研究部門危害防止主任者 ,機能形態分野作業主任者 , 海外協定校コンタクトパー
ソン（ハンガリー共和国デブレツェン大学）, 亥鼻地区留学生担当教員○センター内委員

委員（年報担当 WG 委員長）, 自己点検・評価委員会
熱水料削減プロジェクト WG 委員 , 国際規制物質（酢酸ウラニル）管理者 , 個人情報保護担当者○学協会への貢献

日本顕微鏡学会（本部監事・Journalof Electron Microscopy 編集委員・技術認定試験委員会
委員・微生物研究部会幹事・本部評議員・関東支部

運営協議会委員 , 教員会議委員 , 総

幹事・関東支部評議員）, 日本医真菌学会評議員 , 日

員長 , 倫理審査委員会委員長 , 研究推進チームチームof the American Biographical Institute s distinguished

務委員会委員 , 広報委員会委員長 , 地域連携委員会委
リーダー , 自己点検・評価委員会委員 , 研究部門連絡

本菌学会評議員 , 日本メンデル協会評議員 , Member

Research Board of Advisors, USA.

会委員 , 再審査制度検討委員会委員 , 実験室内感染事○所属学会

達関係委員○受賞

故調査委員会委員 , 共焦点レーザー顕微鏡システム調○学協会への貢献

日本顕微鏡学会 , 日本医真菌学会 , 日本菌学会 , 日本植物形態学会

日本医真菌学会（Japanese Journal of

1 ）（代表）日本顕微鏡学会第 64 回学術講演会 , 優秀ポ部評議員・関東支部評議員・関東支部活性化推進委

山清人 , 菅原敬信 , 永山國昭 : 氷包埋したインフル

Medical Mycology, Editorial Board）, 日本細菌学会・本員会委員 , 日本生化学会・本部評議員・本部代議員・
関東支部幹事・関東支部運営委員・関東支部副読本作成委員会委員 , 日本神経化学会評議員 , ニューヨー

ク科学アカデミー会員 , 酵母細胞研究会運営委員 ,Mycopathologia（Associate Editor）○所 属学会

日本細菌学会 , 日本医真菌学会 , 日本菌学会 , 日本生化学会 , 日本分子生物学会 , 日本神経化スター賞 . 山口正視 , 岡田

エンザウイルスの位相差電子顕微鏡観察 . 京都 , 5
月 22 日 , 2008.

2 ）（代表）第 5 回真菌分子細胞研究会・第 2 回真菌ワープ研究会 , ベストプレゼンテーション賞（ポスドク・教員の部）. 山口正視 : 凍結置換電顕法による酵母細胞のストラクトーム解析 . 千葉 , 8 月 22
日 , 2008.

学会 , 日本神経科学学会 , 酵母細胞研究会 , American○そ の他Society of Microbiology, International Society for Human

助教 : 伊藤恵美子

Society for Biochemistry and Molecular Biology, Americanand Animal Mycology, Society for Neuroscience, NewYork Academy of Sciences○その他

横浜市立大学医学部

法人・総合画像研究支援 正会員

客員教授 , 認定 NPO○学 内委員28○センター内委員正会

動物 WG 委員 , 図書委員会委員 , 有

害廃棄物委員会委員 , 放射性同位元素委員会委員○学協会への貢献 Association of Official Analytical Chemist（AOAC）メンバー

真菌医学研究センター教員系過半数代表

千葉大学

認定 NPO 法人・綜合画像研究支援

員・研究協力者 , キトロギア会員○所属学会

准教授 : 山口正視

仁 , Radostin Danev, 西真菌医学研究センター報告

International Society on Toxicology

第 12 巻2008

助教 : 清水公徳
○センター内委員

総務委員会委員 , 微生物･保存管理

施設運営委員会委員 , 防災対策委員会委員 , 研究推進チーム委員 , 個人評価 WG 委員 , 光熱水料削減プロ
ジェクト WG 委員○学協会への貢献○所属学会

日本菌学会評議員・広報幹事

日本菌学会 , 日本医真菌学会 , 日本細菌学会 , 糸状菌分子生物学研究会 , 糸状菌遺伝子研究会 ,Fungal Genetics Conference○その他

産業技術総合研究所

外来研究員

技術職員 : 大楠美佐子
非常勤講師 : 明石

敏（大正製薬株式会社医薬研究所・

開発薬理研究室次席研究員・グループマネージャー）
非常勤講師 : 園田智子（横浜市立大学医学部）
特任教員 : Eric V. Virtudazo
日本 学術振興会外国人特別研究員 : Zuzana Moranova（2008. 10 〜）

C. neoformans には , 他の酵母には見られない , 特異な細胞周期制御現象が観察され , 本酵母の病原性にも深く関わっていると思われる . 我々はこれまでに , C.

neoformans の細胞周期制御の中心に位置する Cdk1（サイクリン依存性キナーゼ 1 ）とそれと相互作用する制御
因子 cyclin について分子クローニングを行い , 解析を進めている . それらの分子間相互作用を明らかにするために , タンパク質間相互作用のモデリングなど in silico 解を行い , ウェットデータとの組み合わせなどでこれらの細胞周期制御の分子機構について考察している . また ,脱リン酸化酵素 Cdc25 分子についても , 分子クローニン
グ , 機能解析を進めている .

3 ．Cryptococcus neoformans の低酸素状態応答遺伝子の同C. neoformans は肺 , で感染後 , 脳髄膜へ移行して病原技術補佐員 : 岡田 仁

性を発揮して行く際 , 高酸素環境から低酸素環境への実験補助員 : 相田直子（2008. 11 〜）

酸素欠乏ストレス条件に打ち勝って増殖して行く . 我々

皓曼大学院融合科学研究科修士課程 : 清水析

定 , 解析

技術補佐員 : 大畑美穂子（〜 2008. 10）

大学院医学薬学府博士課程 : 李2 ．Cryptococcus neoformans の細胞周期制御の分子機構解は , 本菌ゲノムへのランダム挿入遺伝子変異体を構築

誠大学院医学薬学府修士課程 : 山口哲朗（〜 2008. 9）

し , 変異体の低酸素状態への応答解析などを通して , 本菌において低酸素ストレス応答に関与する遺伝子の同定

園芸学部 : 並木侑一（2008. 4 〜）を目指している . 今後 , 同定された遺伝子群のうち , ヒ

大使 館推薦国費外国人研究留学生 : Jon Ander Ochoa

剤標的遺伝子候補にもなり得る .

日本大学生産工学部 : 増田恵美（2008. 4 〜）
de Eribe Casas（〜 2008. 3）

トには存在しない遺伝子が見出されれば , 新規の抗真菌4 ．Cryptococcus neoformans の薬剤耐性機構の分子解析

近年 , C. neoformans の薬剤耐性株が分離されクリプ研究概要（共同研究を含む）

トコックス症の治療効果にも影響を及ぼしており薬剤

1 ．Cryptococcus neoformans のプロテオーム解析

耐性獲得の分子機構解析は重要である . 我々は AIDS

動 , タンパク質スポットの解析 , アミノ酸配列解析 , 質

fluconazole について感受性試験を実施し , 更に , 感受性

C. neoformans 細胞破砕抽出液を用いて , 二次元電気泳量分析 , データベース解析などプロテオーム解析を進めつつある . また , 酵母プロテオームの変動を探索する目患者などから分離された臨床分離株 100 株を用いて ,株 , 耐性株間の比較プロテオーム解析を行い , アガロー
ス二次元電気泳動で有意に違いのみられたスポットをイ

的で , 酵母破砕抽出液のタンパク質発現デイファレン

ンゲル消化後 , 質量分析計（LC-MS/MS）にて同定しスポットの検索 , 同定 , 解析を進めている . 各種培養条

いて , 更に検討を進めている .

シャル解析法（DIGE）を行い , 発現量の増減の顕著な
件の相違などによるタンパク質発現量の差異について比較プロテオーム解析を行い , 考察を進めている .

た . 耐性株と感受性株の選別に有用なマーカー候補につ

5 ．低温位相差電子顕微鏡による微生物の構造観察
岡崎統合バイオサイエンスセンターの永山國昭教授との共同研究で , インフルエンザ A ウイルスは , 外皮の構

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200829

造から 3 つのタイプが存在すること , 糖タンパク質スパ

酵素阻害作用のレベルの違いから導かれる両トキシンのイクはウイルス 1 個あたり 450 本存在すること , リボ核

性質を明らかにする .

した（J Struct Biol 162: 271-276, 2008, 2008 年 5 月日本

10．Cryptococcus neoformans の 二成分シグナル伝達系の分

この成果は , 毎日新聞（2008 年 4 月 6 日）および NHK

C. neoformans の 二 成 分 シ グ ナ ル 伝 達 系 構 成 因 子

タンパク質は 1 ＋ 7 の配置をとることなどを明らかに
顕微鏡学会学術講演会で優秀ポスター賞を受賞）. また ,

子遺伝学的解析サイエンス ZERO（2008 年 12 月13 日 , 18 日 , 19 日）（HHK および RR）をコードする各遺伝子計 9 個につい的で , トモグラフィー（電子線断層撮影）を行っている .

くに RR 遺伝子 CnSKN7 および CnSSK1 二重破壊株をで報道された . 現在 , さらに立体構造を明らかにする目

6 ．酵母のストラクトーム解析
2006 年 , 細胞の電子顕微鏡レベルのすべての定量的 ,三次元的構造情報を , structome と呼ぶことを提唱したて遺伝子破壊による機能解析を行ってきた . 本年は , と取得し , これらの遺伝子がフルジオキソニル耐性 , 浸透
圧感受性 , 高温感受性および病原性に対して相加的に機能していることを明らかとした .

（Current Trends in Microbiology 2: 1-12）. 本年は , サッカ

11．C. neoformans の Hsp コード遺伝子の機能解析

超薄切片を作製する方法を開発した（論文投稿中 , 2008

ドする遺伝子 CnPDR131 , CnPDR132 , CnPDR133 各遺ン賞を受賞）. 現在 , 32 個の細胞の連続切片撮影に成功

結果 , CnPDR133 遺伝子破壊株は低温での生育が極端にロミセス細胞の自然な形態を保ったまま , 効率よく連続
年 8 月真菌分子細胞研究会でベストプレゼンテーショ
しており , G1 期の細胞のストラクトーム解析を開始し

C. neoformans の熱ショックタンパク質（Hsp）をコー

伝子について遺伝子破壊による機能解析を行った . その遅延するとともにフルシトシンに対する高い感受性を示

た.

した .

7 ．Candida glabrata のキチン合成遺伝子の機能解析

研究成果の発表

高分子活性分野の知花班との共同研究で , キチン合成

遺伝子である CHS3 の欠損株を用いて , 微細形態学的側

1 ．原著

面から解析を行っている . 本年は , 凍結置換法を用いて ,1 ）Takeuchi T, Yoshida Y, Fukaya S, Sakimura K,

た菌体の細胞壁を再生させ , その再生過程における形態

T: Enhanced long-term depression induction and

細胞微細構造の解析を行ったほか , プロトプラスト化し学的差異などの解析を行った .

Kawamoto S, Watanabe M, Mishina M, Hirano
optokinetic response adaptation on mice lacking

Delphilin. PLoS ONE 3（5）: e2297（pp. 1-11）, 2008.

8 ．藻類由来の食中毒の解析（査読有）パリトキシンの論文は投稿中 . 下痢性貝毒の原因毒で2 ）Yamaguchi M, Danev R, Nishiyama K, Sugawara

マウスを使った病理モデル実験は終了し , 残る 3 番目のmicroscopy of ice-embedded influenza A virus. J Struct

ある , オカダ酸グループ , ペクテノトキシングループのイエッソトキシングループについて実験を行なっている.

Biol 162: 271-276, 2008（査読有）.

3 ）Kitahara H, Kobayashi Y, Yamaguchi M, Fujimoto

9 ．タンパク脱リン酸化酵素阻害剤としてみたオカダ酸とアオコの毒ミクロシスチン -LR の作用の解析

両者のモードオブアクションは PP1, PP2A 酵素阻害で説明されている . いずれに対してもミクロシスチンの方が高レベルの活性があるため , 両者の肝臓への病理作用とその代謝過程産物のペプチドの動態を明らかにし ,30

K, Nagayama K: Zernike phase contrast electron

千葉大学

Y, Nameki M, Nakayama T, Kuroda N, Komuro I:
Damage to polymer of undelivered sirolimus-eluting

stents. J Invasive Cardiol 20: 130-133, 2008（査読有）.

4 ）Ito E., Suzuki T, Oshima Y, Yasumoto K: Studies ofdiarrhetic activity on pectenotoxin-6 in the mouse andrat. Toxicon 51: 707-716, 2008（査読有）.

5 ）Ozaki K, Ohta A, Iwata C, Horikawa A, Tsuji K, Ito E,

真菌医学研究センター報告

第 12 巻

2008

Ikai Y, Harada K: Lysis of cyanobacteria with volatilea pathogenic yeast Cryptococcus neoformans by electron

2008（査読有）.

Forum. Abstract p. 57, Changchun, China. Jul 27-Aug.

organic compounds: Chemosphere 71: 1531-1538,
6 ）Tanaka E, Shimizu K, Imanishi Y, Yasuda F, Tanaka

C: Isolation of basidiomycetous anamorphic yeast-

like fungus Meira argovae found on Japanese bamboo.
Mycoscience 49: 329-333, 2008（査読有）.
2 ．総説 , 解説 , その他
1 ）川本進 : 新規タンパク質を発見 , そして , 命名 :内藤記念科学振興財団時報 81: 29, 2008.

2 ）山口正視 , 岡田

仁 , Radostin Danev, 西山清人 , 菅

原敬信 , 永山國昭 : 位相差電子顕微鏡によるウイル
ス観察 . 顕微鏡 43（2）: 115-120, 2008.

3 ）山口正視 : シンポジウムのまとめ B-21 Mycology

and parasitology（Frontier studies in fungal research）.

microscopy. Japan-China Pan Asia Pacific Mycology
5, 2008.

4 ）Shimizu K: Signal transduction pathways involvedin environmental responses in the human pathogen

Cryptococcus neoformans. Japan-China Pan Asia Pacific

Mycology Forum. Abstracts p. 137, Changchun, China,
July 28-31, 2008.

5 ）Shimizu K, Li H-M, Yoshimi A, Tanaka C, Abe K,

Watanabe A, Kamei K, Yamaguchi M, Kawamoto
S: Two component signaling system in Cryptococcus
neoformans is involved in sensing high temperature, highosmolarity and antibiotics. 2008 Japan-Korea Fungal

Genetics and Biology Conference. Abstracts p. 63-64.
Kanazawa, Japan, November 19-20, 2008.

顕微鏡（第 16 回国際顕微鏡学会会務記録） 42（捕国内学会冊）: 93, 2008.

1 ）山口正視 , 岡田

4 ）山口正視 : シンポジウムのまとめ B-21 Mycology

and parasitology（Frontier studies in fungal research）.
第 16 回国際顕微鏡学会議（IMC16）記念集 : 93,
2008.

5 ）山口正視 : 第 1 回ワークショップの前半のまとめと感想 . 可視化技術の最前線 04 〜 06: 123-124. 認定

NPO 法人総合画像研究支援 . 東京 , 2008.

3 ．学会・シンポジウム・研究集会での招待講演
国際学会1 ）Kawamoto S, Virtudazo E, Ohata M, Ohkusu M,

Takeo K: Molecular approach to understanding cell

regulation in a pathogenic yeast Cryptococcus neoformans.

China-Japan Pan Asia Pacific Mycology Forum,

仁 , 大楠美佐子 , 川本進 : 酵母

サッカロミセス細胞のストラクトーム解析 . 日本顕微鏡学会第 64 回学術講演会 , 発表要旨集 : 18. 京
都 , 5 月 21 〜 23 日 , 2008.

2 ）山口正視 : 位相差電子顕微鏡によるウイルス観察 .
日本顕微鏡学会第 52 回シンポジウム , 発表要旨
集 , 顕微鏡 43（Supplement 1）: 98-101. 千葉 , 10 月
17 〜 18 日 , 2008.

3 ）清水公徳 : ヒト病原性酵母 Cryptococcus neoformans のシグナル伝達系と病原性 . 農芸化学会 2008 年度大会 . 講演要旨集 p. シ27. 名古屋 , 3 月 27 〜 29 日 ,2008.

4 ．一般発表
国際学会

Changchun 2008 Changchun, China, July 28-August 5,

1 ）Kawamoto S, Virtudazo E, Ohkusu M, Sonoda T,

2 ）Kawamoto S, Virtudazo E, Ohata M, Ohkusu M,

functional analysis of cell control genes in Cryptococcus

2008.

Shimizu K, Yamaguchi M, Miklos I, Sipiczki M,
Moranova Z, Raclavsky V, Takeo K: Towards molecularunderstanding of cell cycle regulation and cell signalingin Cryptococcus neoformans. 7th International Conference

Miyagi Y, Okuda K, and Takeo K: Structural andneoformans. 2008 Annual Meeting American Society
for Biochemistry and Molecular Biology（Experimental

Biology 2008）, San Diego, California, USA, Apr. 5-9,
2008.

on Cryptococcus and Cryptococcosis. Nagasaki, Sep.

2 ）Eribe Casas J, Virtudazo E, Li H-M, Shimizu K,

3 ）Yamaguchi M: Dynamics of the spindle pole body in

Cryptococcus neoformans: complications and solutions.

11-14, 2008.

千葉大学

Yamaguchi M, Kawamoto S: RNA interference in

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200831

RNAi World Congress, Boston, USA, Apr. 30- May 2,10）Yamaguchi M, Okada H, Danev R, Nishiyama K,3 ）Ohkusu M, Ohata M, Shimizu K, Kawamoto S:

electron microscopy of ice-embedded influenza A virus.

2008.

Influences of capsule thickness onthe physiology andvirulence in Cryptococcus neoformans. 7th International
Conference on Cr yptococcus & Cr yptococcosis.

Sugawara K, Nagayama K: Zernike phase contrast
39 th NIPS International Symposium Frontiers ofBiological Imaging , pp. 106, Okazaki, Japan, Nov.
10-12, 2008.

Program and abstracts p. 80, Nagasaki, Japan, Sep.

11）Ito E, Yasumoto T: Desulfated yessotoxin causes fatty4 ）Virtudazo EV, Ohata M, Ohkusu M, Miklos I,

mice: 13th International Conference on Harmful Algae,

11-14, 2008.

Sipiczki M, Takeo K, Kawamoto S: Cloning andfunctional analysis of the Cryptococcus neoformans

degeneration and delayed intestinal fluid accumulation in

Program and abstracts p. 56. Hong Kong, China, Nov.
3-7, 2008.

Cdc25/Mih1 phosphatase homologue. 7th International

12）Miura D, Oba A, Shintani T, Shimizu K, Nishimura

Program and abstracts p. 108, Nagasaki, Japan, Sep.

regulates gene expression of ABC transporters andConference on Cryptococcus and Cryptococcosis.
11-14, 2008.

5 ）Ohata M, V ir tudaz o EV, Ohkusu M, Takeo

K, Kawamoto S: Analysis of the role of upstream

M, Gomi K: The novel transcription activator AtrR
contributes to azole resistance in filamentous fungi, 5thInternational Aspergillus Meeting（Asperfest）. abstracts
p. 11, Edinburgh, UK, Apr. 5-8, 2008.

ORFs in the regulation of CnCln 1 expression in13）Miura D, Oba A, Shintani T, Shimizu K, Nishimura

on Cryptococcus and Cryptococcosis. Program andregulates gene expression of ABC transporters andCryptococcus neoformans. 7th International Conference
abstracts p. 96, Nagasaki, Japan, Sep. 11-14, 2008.

6 ）Moráňova Z, Husičková V, Ohkusu M, Kawamoto

S, Rac lavský V: Study of hypoxia response in

Cryptococcus neoformans. 7th International Conference
on Cryptococcus and Cryptococcosis. Program andabstracts p. 116, Nagasaki, Japan, Sep. 11-14, 2008.

7 ）Yamaguchi M, Ohkusu M, Kawamoto S: Dynamics

of the spindle pole body during the cell cycle in
Cryptococcus neoformans examined by freeze-substitution
electron microscopy. 7 th International Conference

M, Gomi K: The novel transcription activator AtrR
contributes to azole resistance in filamentous fungi, 9thEuropean Conference on Fungal Genetics. abstracts p.
162, Edinburgh, UK, Apr. 5-8, 2008.

14）Shimizu K, Li H-M, Yoshimi A, Tanaka C, Abe K,

Watanabe A, Kamei K, Yamaguchi M, Kawamoto
S: High temperature, high osmolarity and antibiotics
are sensed through two component signaling system in
Cryptococcus neoformans. 7th International Conference on

Cryptococcus & Cryptococcosis. Program and abstracts
p. 96, Nagasaki, Japan, Sep. 11-14, 2008.

on Cryptococcus and Cryptococcosis. Program and15）Shimizu M, Shimizu K, Li H-M, Ohkusu M,

8 ）Yamaguchi M, Okada H, Ohkusu M, Kawamoto S:

resistance in Cryptococcus neoformans. 7th International

abstracts p. 106, Nagasaki, Japan, Sep. 11-14, 2008.

Structome of yeast cells by freeze-substitution and serial

ultrathin sectioning electron microscopy. 9 th Asia-

Pacific Microscopy Conference, Jeju, Republic of Korea,
Nov. 2-7, 2008.

9 ）Yamaguchi M, Okada H, Danev R, Nishiyama K,

Conference on Cr yptococcus & Cr yptococcosis.
Program and abstracts p. 80, Nagasaki, Japan, Sep.
11-14, 2008.

国内学会
1 ）川本

進 , Virtudazo EV, 大楠美佐子 , 竹尾漢治 , 田Sugawara K, Nagayama K: Zernike phase contrast

村9th Asia-Pacific Microscopy Conference, Jeju, Republic

第 2 回真菌ワープ研究会 , 千葉 , 8 月 21 日 , 2008.

electron microscopy of ice-embedded influenza A virus.
of Korea, Nov. 2-7, 2008.

32

Kawamoto S: Analysis of genes involved in drug

千葉大学

裕 , Moranova Z, Raclavsky V: 病原酵母クリプ

トコックスの細胞周期制御の分子的理解に向けて .
2 ）大 楠 美 佐 子 , 清 水 公 徳 , 川 本

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

進 : Cryptococcus

neoformans の莢膜の厚さと性状および病原性に与えルエンザウイルス（写真コンクール）. 日本顕微鏡

京都 , 3 月 24 〜 26 日 , 2008.

月 21 〜 23 日 , 2008.

る影響 . 第 81 回日本細菌学会総会 , 抄録集 p. 169,
3 ）大楠美佐子 , 大畑美穂子 , 清水公徳 , 川本進: 莢

膜の厚さが変異した Cryptococcus neoformans 株の性状および病原性 . 第 52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 101, 長崎 , 9 月 10 〜 11 日 ,2008.

4 ）大楠美佐子 , 大畑美穂子 , 清水公徳 , 川本進: 病

原性酵母 Cryptococcus neoformans の莢膜の厚さが性状
および病原性に与える影響 . 第 91 回日本細菌学会
関東支部総会 , 講演抄録集 p. 24, 千葉 , 10 月 23 〜
24 日 , 2008.

5 ）Virtudazo EV, Ohkusu M, Ohata M, Miklos I,

Sipiczki M, TakeoK, Kawamoto S: Structural andfunctional analysis of the single G1 cyclin CnCln1 in
Cryptococcus neoformans. 第 91 回日本細菌学会関東支部総会 , 講演収録集 p. 26. 千葉 , 10 月 23 〜 24 日 ,2008.

6 ）ヴィルトゥダゾ・エリック , 大畑美穂子 , 大楠美佐子 , Ida Miklos, Matthias Sipiczki, 竹尾漢治 , 川本進 . Cryptococcus neoformans の Cdc25 ホスファターゼ
ホモログのクローニングと構造機能解析 . 第 52 回

日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 103,
長崎 , 10 月 10 〜 11 日 , 2008.

7 ）大畑美穂子 , ヴィルトゥダゾ・エリック , 大楠美佐子 , 竹尾漢治 , 川本進 . Cryptococcus neoformansの 細 胞 周 期 制 御 に お け る G1 サ イ ク リ ン 遺 伝 子

upstreamORF の役割 . 第 52 回日本医真菌学会総会 ,真菌誌 49（増刊 1 号）: 102, 長崎 , 10 月 10 〜 11 日 ,学会第 64 回学術講演会 , 発表要旨集 , 243, 京都 , 511）山田博之 , 水野和重 , 角

泰人 , 御手洗聡 , 山口正

視 : 急速凍結固定置換法（サンドイッチ法）による結核菌の透過電子顕微鏡観察 . 日本顕微鏡学会第64 回学術講演会 , 発表要旨集 , 45, 京都 , 5 月 21 〜
23 日 , 2008.

12）山口正視 , 岡田

仁 , 大楠美佐子 , 川本進 : 酵母

サッカロミセス細胞のストラクトーム解析 . 日本微生物資源学会第 15 回大会 , 要旨集 , 62, 千葉 , 6 月
30 日〜 7 月 2 日 , 2008.

13）山口正視 : 凍結置換電顕法による酵母細胞のストラ
クトーム解析 . 第 5 回真菌分子細胞研究会・第 2 回

真菌ワープ研究会 , プログラム・要旨集 , 12, 千葉 ,8 月 22 日 , 2008.

14）山口正視 , 大楠美佐子 , 川本進 : 酵母細胞のスト

ラクトーム解析 . 千葉大学オープンリサーチ . 千葉

大学オープンリサーチ 2008, 34, 千葉 , 9 月 6 日 ,2008.

15）山口正視 , 大楠美佐子 , 川本進 : 酵母細胞のスト

ラクトーム解析 . 第 52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 101. 長崎 , 9 月 10 〜 11 日 ,2008.

16）山田博之 , 御手洗聡 , 水野和重 , 近松絹代 , 角泰

人 , 山口正視 : 急速凍結置換固定法（サンドイッチ法）で調整した結核菌体の透過電子顕微鏡観察 .
第 40 回日本臨床分子形態学会 , 福岡 , 10 月 3 日 ,
2008.

17）清水

誠 , 清水公徳 , 李皓曼 , 川本進 : 病原性

2008.

酵母 Cryptococcus neoformans の薬剤耐性に関与する遺Fujimoto Y, Aioi S, Himi T, Komuro I: Damage to

旨集 p. 80, 津 , 5 月 31 〜 6 月 1 日 , 2008.

8 ）Kitahara H, Kobayashi Y, Yamaguchi M, Nameki M,

polymer of sirolimus-eluting stents. 第 72 回日本循環器学会総会・学術集会 , 福岡 , 3 月 29 日 , 2008.

9 ）山口正視 , 岡田

仁 , Radostin Danev, 西山清人 , 菅

原敬信 , 永山國昭 : 氷包埋したインフルエンザウ
イルスの位相差電子顕微鏡観察 . 日本顕微鏡学会
第 64 回学術講演会 , 発表要旨集 , 198, 京都 , 5 月
21 〜 23 日 , 2008.

10）山口正視 , 岡田

仁 , Radostin Danev, 西山清人 , 菅

原敬信 , 永山國昭 : 位相差電子顕微鏡で見たインフ

千葉大学

伝子の機能解析 . 第 52 回日本菌学会大会 . 講演要18）清水公徳 , 李
敬悦 , 渡辺皓曼 , 吉見哲 , 田中千尋 , 阿部

哲 , 亀井克彦 , 山口正視 , 川本進:

Cryptococcus neoformans の環境適応に関与する二成分
シグナル伝達系の解析 . 第 52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 102, 長崎 , 9 月 10 〜 11
日 , 2008.

19）清水誠 , 清水公徳 , 李皓曼 , 大楠美佐子 , 川本進 : 病原性酵母 Cryptococcus neoformans の薬剤耐性に関与する遺伝子の研究 . 第 52 回日本医真菌学会総真菌医学研究センター報告

第 12 巻200833

会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 102, 長崎 , 9 月 10 〜 11
日 , 2008.

20）清水公徳 , 李2 ）山口正視 : 低温位相差電子顕微鏡によるインフルエ

原性酵母 Cryptococcus neoformans は二成分シグナル伝

バイオサイエンスセンター , 西山清人上級研究員 ,哲 , 亀井克彦 , 山口正視 , 川本進: 病達系を介して外部環境を感知する . 第 91 回日本細菌学会関東支部総会 , 講演抄録集 p. 25, 千葉 , 10 月
23 〜 24 日 , 2008.

21）清水公徳 , 李
悦 , 渡辺皓曼 , 吉見哲 , 田中千尋 , 阿部敬

哲 , 亀井克彦 , 山口正視 , 川本進: 病

原性酵母 Cryptococcus neoformans の二成分シグナル伝
達系に関する分子遺伝学的解析 . 第 8 回糸状菌分子生物学研究会 , 講演要旨集 p. 81, 金沢 , 11 月 17 〜
18 日 , 2008.

進, 山 口 正 視, 清 水 公 徳, 大 楠 美 佐 子:

potential pathogenic factors.（ Hungarian-JapaneseIntergovernmental S&T Cooperation Programme ）,Matthias Sipiczki 教授 , Ida Miklos 准教授 , ハンガ
リー共和国 , デブレツェン大学遺伝学教室 .

進 , Eric Virtudazo: G1 Cdk1-cyclin ホモログ

遺伝子のクローニングと解析 , Matthias Sipiczki 教
授 , Ida Miklos 准教授 , ハンガリー共和国 , デブレ
ツェン大学遺伝学教室 .

3 ）川 本進 , Zuzana Moranova, 大 楠 美 佐 子 , Eric

Virtudazo: Cryptococcus neoformans の hypoxia への応答
研究 , Vladislav Raclavsky 博士 , チェコ共和国 , パラ
ツキー大学医学歯学部微生物学教室 .

4 ）川本

進 , 山口正視 : Cryptococcus neoformans の細胞周期解析法に関する研究 , Vladislav Raclavsky 博士 ,チェコ共和国 , パラツキー大学 .

5 ）山口正視 : 真菌の細胞骨格に関する細胞生物学的研

究 , Marie Kopecka 准教授 , Miroslav Gabriel 准教授 ,Augustin Svoboda 教授 , チェコ共和国 , マサリク大学医学部 .

テントポリマーの損傷についての研究 , 小室一成教
授 , 小林欣夫副部長 , 千葉大学医学部附属病院 .

4 ）山口正視 : 結核菌の急速凍結法による電子顕微鏡観
察 , 山田博之研究員 , 財団法人結核予防会結核研究所.

5 ）山口正視 : 分裂酵母シゾサッカロミセスの胞子形成
過程の電子顕微鏡観察 , 高木智子研究員 , 日本女子

進 , 大楠美佐子 : Cryptococcus neoformans のプ

千葉大学

国際交流
1 ．海外渡航1 ）川本

進 : アメリカ合衆国 , サンデイエゴ , 米国生

化学・分子生物学学会年会に出席 , 発表のため , 4
月 4 〜 10 日 , 2008（研究推進）.

2 ）川本進 : 中国 , 長春 , 日中菌学フォーラムに出席 ,座長 , 発表のため , 7 月 27 日〜 8 月 3 日 , 2008（科学技術振興調整費）.

3 ）山口正視 : 中国 , 長春 , 日中菌学フォーラムに出席 ,発表のため , 7 月 27 日〜 8 月 3 日 , 2008（科学技術振興調整費）.

4 ）山口正視 : 韓国 , 済州島 , 第 9 回アジア・太平洋

顕微鏡学会議に出席 , 発表のため , 11 月 2 〜 7 日 ,2008（科学研究費補助金）.

5 ）清水公徳 : 中国 , 長春 , 日中菌学フォーラムに出席 ,発表のため , 7 月 27 日〜 8 月 3 日 , 2008（科学技術振興調整費）.

2 ．海外研究者の受け入れ
1 ）Zuzana Moranova（チェコ共和国パラツキー大学医学歯学部）, 2008 年 10 月〜 2009 年 8 月 , 日本学術

2 ．共同利用研究以外の国内共同研究
1 ）川本

3 ）山口正視 : 冠動脈石灰化病変におけるサイファース

究 , 東江昭夫研究員 , 東京都臨床医学研究所 .

Regulators of cell cycle and transcription in yeasts as2 ）川本菅原敬信部長 , 化学及血清療法研究所 .

6 ）清水公徳 : Aspergillus fumigatus のプロテアソーム研

1 ．国際共同研究
1 ）川 本

ンザウイルスの構造観察 , 永山國昭教授 , 岡崎統合

大学 .

共同研究

34

立大学国際総合科学研究科 .

哲 , 田中千尋 , 阿部敬

悦 , 渡辺皓曼 , 吉見ロテオミクス解析 , 平野久教授 , 山中結子 , 横浜市振興会外国人特別研究員（欧米短期）受け入れ , 共
同研究（川本真菌医学研究センター報告

第 12 巻進）.

2008

2 ）Jon Ander Ochoa de Eribe Casas（スペイン）, 2006 年
4 月〜 2008 年 3 月 , 大使館推薦国費外国人研究留学生受け入れ , 共同研究（川本進）.

2 ）Gyula Batta（ハンガリー , デブレツェン大学）, セミ
ナー開催 , 10 月 26 〜 30 日 , 2008（川本進）.

3 ）Matthias Sipiczki 教 授（ ハ ン ガ リ ー , デ ブ レ ツ ェン大学）, 共同研究 , 11 月 12 〜 16 日 , 2008（川本進）.

進 : China-Japan Pan Asia Pacific Mycology Forum,

Changchun 2008, 座長 , Changchun, China, July 28-August
5, 2008.

2 ）川本 進 : 7th International Coference on Cryptococcus

and Cryptococcosis, 組 織 委 員 , お よ び 招 待 講 演Nagasaki, September 11-14, 2008.

3 ）川本

千葉大学大学院融合科学研究科博士前期課程（真菌分子細胞生物学）, 博士後期課程（真菌分子細胞生物学）, 横浜市立大学大学院医学研究科（分子生
医学部看護学科（微生物学）.

2 ）山口正視 : 千葉大学大学院医学薬学府博士課程（真菌細胞生物学 , 超微形態学）, 千葉大学自然科学研

究科博士後期課程（生命機構学 , 高次生体制御学 ,
形態応答学）, 千葉大学普遍教育（授業科目 : 真菌（カビ）と人との関わり合い , 真菌の形態）, 千葉大
学園芸学部（授業科目 : 応用細胞工学 , 細胞の構造と電子顕微鏡）.

進 : 第 15 回日本微生物資源学会総会 , 優秀害）, 千葉大学園芸学部（授業科目 : 応用細胞工学 ,日 , 2008.

進 : 第 91 回日本細菌学会関東支部総会 , 座

長 , 千葉 , 10 月 23 〜 24 日 , 2008.

6 ）川本

進 : 千葉大学大学院医学薬学府医科学専攻修士課程（先端生命科学）, 博士課程（真菌感染症学）,

3 ）清水公徳 : 千葉大学普遍教育（授業科目 : 真菌（カ発表者選考委員会委員長 , 千葉 , 6 月 30 日〜 7 月 2
5 ）川本

1 ）川本

進 : 第 81 回日本細菌学会総会 , 座長 , 真菌の生理・病原性 , 京都 , 3 月 24 〜 26 日 , 2008.

4 ）川本

講義

体防御学）, 横浜市立大学医学部医学科（微生物学）,

学会等活動（主催学会 , 座長 , コンビーナーなど）
1 ）川本

教育活動

進 : 第 53 回ぶどう球菌研究会 , 座長 , 東京 ,9 月 18 〜 19 日 , 2008.

7 ）山口正視 : 日本顕微鏡学会第 32 回関東支部講演会「顕微鏡の挑戦 : 目で観る生命科学・物質科学」. 実
行委員会委員 . 東京 , 3 月 8 日 , 2008.

8 ）山口正視 : The China-Japan Pan Asia Pacific Mycology

Forum 2008 , Member of organizing committee.
Changchun, China, July 28 - August 5 2008.

9 ）山口正視 : 日本微生物資源学会第 15 回大会実行委
員会委員 . 千葉 , 6 月 30 日〜 7 月 2 日 , 2008.

10）山口正視 : 日本顕微鏡学会第 52 回シンポジウム実行委員会委員 . 千葉 , 10 月 17 日〜 18 日 , 2008.

11）清水公徳 : The China-Japan Pan Asia Pacific Mycology

Forum 2008, Member of steering committee, Changchun,
China, July 28 - August 5 2008.

ビ）と人との関わり合い , 真菌による食品への被真菌の二次代謝）, インターンシップ生受け入れ 1
名（日本大学生産工学部応用化学科）.

社会的活動
新聞・テレビ1 ）山口正視 : インフルエンザウイルス

詳細な姿撮影成功 . 毎日新聞（全国版）2008 年 4 月 6 日 .

2 ）山口正視 : 新型インフルエンザ

感染爆発に備えろ . 電顕写真提供 . NHK サイエンス ZERO2008

年 12 月 13 日 , 18 日 , 19 日 .

センター講習会1 ）川本

進 : 第 3 回病原真菌外国人講習会「Workshop

on Medical Mycology」 講 師 . 「Proteome analysis andnew techniques in molecular medical mycology」（2008.
7. 18）.

2 ）川本進 : 第 22 回病原真菌講習会講師「法律から見た真菌の取扱い（感染症新法・危険度分類）」（2008. 7. 11）.

3 ）山口正視 : 第 22 回病原真菌講習会講師「真菌細胞概論」（2008. 7. 8）.

4 ）山 口 正 視 : 第 4 回 病 原 真 菌 外 国 人 講 習 会 講 師

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200835

「Electron microscopy of fungal cells」（2008. 7. 17）.

特許1 ）Jon Ander Ochoa de Eribe Casas, 川本

進 : アメリカ 合 衆 国 特 許（U. S. Provisional Patent, Application#61039906）出願 : 2008 年 3 月（2008）.

2 ）I nve n t i on o f p C r y p t o RNA i p l a s m i d f o r RNA

interference in Cryptococcus neoformans.

その他

1 ）川本

進（地域連携委員会委員長）: 真菌医学研究センター主催公開市民講座「カビ !? 〜そろそろ気になりますね〜 Part 3」, 千葉 , 5 月 18 日 , 2008.

酵母サッカロミセス細胞のストラクトー

ム解析 , 平成 19 〜 20 年度（平成 20 年度は直接経費 160 万円 , 間接経費 48 万円）.

その他の外部資金1 ）川本進（代表）: 日本学術振興会外国人特別研究員（欧米短期）事業「病原酵母クリプトコックの細胞周期制御の分子解析 : 低酸素状態応答遺伝子の同定」平成 20 〜 21 年度（平成 20 年度 , 250 万円）.

2 ）川本進（分担）: 文部科学省科学技術振興調整費 ,アジア科学技術協力推進戦略・地域共通課題解決型
国際共同研究真菌症原因菌の疫学的研究と真菌50 万円）（代表 : 三上科学研究費補助金

3 ）川本

襄）.

進（分担）: 文部科学省研究推進経費「新興進（代表）: 文部科学省科学研究費補助金（基真菌症・放線菌症の対策に関する基礎研究」（代表 :の分子解析」平成 20 〜 22 年度（平成 20 年度 , 直4 ）清水公徳（代表）: 研究支援プログラム（科学研究

盤 C）「病原真菌クリプトコックス細胞の生存と死接経費 150 万円（間接経費 45 万円））.

36

19570053

基盤研究 C症対策拠点形成 , 平成 18 〜 20 年度（平成 20 年度 ,

外部資金

1 ）川本

2 ）山口正視（代表）: 科学研究費補助金

千葉大学

三上

襄）.

費補助金への申請支援）, 90万円 .

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

分子機能研究部門 高分子活性分野（ Department of Molecular Function, Division of Molecular Biology and Therapeutics）○その他

教授 : 三上襄○学 内委員

教育研究評議会委員 , 部局長連絡会議委

員 , 大学法人化対応委員 , 自己点検・評価委員会委員 ,ベンチャー企業「ファーストラボラトリー」

顧問
准教授 : 知花博治

施設整備委員会委員 , 放射線同位元素委員会委員 , セ○学内委員 遺伝子組換え実験安全委員会委員 , スペー

術共同研究推進会議委員 , 部局情報システム管理責任○センター内委員

クシャルハラスメント防止委員会委員 , 先端的科学技

ス・コラボレーション・システム事業実施委員会委員
教員会議委員 , 総務委員会委員 , 広

者 , 亥鼻地区埋蔵文化財調査委員会委員 , 亥鼻地区安報委員会委員 , 共同利用委員会委員 , 自己点検・評価

員 , 医学研究科（医学系運営）委員会委員 , 劇物毒物

員 , センター報告会 WG 長 , 研究推進チーム委員 , 組

全衛生委員会委員 , 大学院自然科学研究科教授会委等管理責任者 , 真菌医学研究センター運営協議会議
長 , 国立大学附置研究所・センター長会議委員○センター内委員 真菌医学研究センター長 , 運営協議

会議長 , 教員会議議長 , 総務委員会議長 , 自己点検・評価委員長○学 協会への貢献

日本細菌学会評議員 , 日本医真菌学会理事・編集委員長 , 日本放線菌学会理事・編集
委 員 , 日 本 微 生 物 資 源 学 会 理 事 , Microbiology and

Immunology（associate editor）○国および地方公共団体への貢献

千葉県薬剤師会検査センター評議員 , 大学共同利用機関法人国立遺伝学研究所「大腸菌小委員会および NBRP 大腸菌運営委員
会委員 , 知的基盤創世・利用促進研究開発事業「新規委員会委員 , 地域連携委員会委員 , 個人評価 WG 委
織機能改善委員会委員 , 将来計画委員会委員 , 光熱水
量削減プロジェクト WG 委員 , 機種選定委員 , 放射性同位元素委員会委員○所 属学会

日本微生物ゲノム学会 , 日本分子生物学会 , 日本細菌学会 , 日本医真菌学 , 酵母細胞研究会 ,酵母遺伝学フォーラム , アメリカ微生物学会 , アメリ
カ遺伝学会
○受賞
1 ）微生物資源学会ポスター賞 , 知花博治 , 上野圭吾 ,中山浩伸 , 宇野潤 , 三上襄「Candida glabrata の全ゲノムから抽出した抗真菌薬標的候補遺伝子の機能解析」（2008. 7. 2）2 ）医真菌学会論文賞（共著）

抗真菌剤（抗カビ剤）開発のための標的遺伝子知的基○その他

盤研究開発」研究計画評価委員会委員 , 生物遺伝資源

助教 : 宇野琉球大学医学部非常勤講師
潤委員会委員 , NBRP- 情報運営委員会委員 , 理化学研究○学内委員 動物実験委員会委員 , 医学部付属動物実験

員 , 日本学術会議特任連携会員○センター内委員 共用備品委員会委員 , 微生物保存管

所バイオリソースセンター微生物材料検討委員会委○所属学会日本細菌学会 , 日本医真菌学会 , 日本放線菌学会 , 日本微生物資源学会 , 日本菌学会 , ISHAM○受賞

1 ）日 本 微 生 物 資 源 学 会 ポ ス タ ー 賞 Zaki S, Ibrahim

N, Aoyama K, Shetaia Y, Abdel-Ghany KM Mikami

Y: 「Epidemiology of dermatophyte infections in Cairo,
Egypt（2008. 7. 2）

2 ）日本微生物資源学会

第 15 回日本微生物資源学会

総会ポスター賞（知花博治等）（共著）

千葉大学

運営委員会

理施設運営委員会委員 , 有害廃棄物委員会委員 , 防災対策委員会委員 , 図書 WG 委員 , 実験動物 WG 委員 ,
光熱水料節減プロジェクト WG 委員○学協会への貢献

日本医真菌学会評議会委員・標準化委員会委員 , 日本細菌学会評議会委員○所属学会

日本医真菌学会 , 日本細菌学会 , 日本化学療法学会 , 日本薬学会 , 日本防菌防黴菌学会○受 賞

第 15 回日本微生物資源学会総会ポスター賞（共著）

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200837

○その他

東邦大学薬学部非常勤講師 , 危険物保安監督

者 , 普通第一種圧力容器取扱い作業主任者 , 安全衛生
作業主任者

非常勤講師 : 石渡堅一郎（医療社団法人六治会）
非常勤講師 : 佐藤謙一（元第一製薬株式会社研究所・所長）
非常 勤講師 : 鈴木健一朗（独立行政法人

製品評価技術基盤機構）（2008.
鍵（中国貴陽医学院講師）

外国人研究員 : Sherif Mohamed Zaki（エジプロアイン
シャム大学講師）（〜 2008. 7）

N. cyriacigeorgica 2, N. otitidiscaviarum 2 株）であった . 台

2 ．Gordonia および Nocardia 属の放線菌の新種の提案

2007 年までに臨床及び環境から分離された Gordonia

属と疑われる全 35 株について , 16S rRNA 遺伝子を解既知菌株との相同性が 98％以下であった . これら 4 株
は , Gordonia 属では 16S rRNA 遺伝子の相同性から新研究支援員 : 加藤直子（〜 2008. 6）

種であることが考えられた . そこで , ミコール酸 , メナ

研究支援員 : 島田五月

キノン , 脂肪酸 , GC 含量を測定した結果 , これら 4 株

技術補佐員 : 大岩真理（2008. 7 〜）

は Gordonia 属の特徴を示していた . 既知菌株とのハイ技術補佐員 : 大畑美穂子

博士課程（学振特別研究員－ DC1）:

上野圭吾
大学院医学薬学府

博士課程 : 康

大学院医学薬学府

修士課程 : 青山一紀

大学院医学薬学府

修士課程 : 志保沢里奈

大学院医学薬学府

修士課程 : 田中博子

大学院医学薬学府

修士課程 : 三谷宏樹

真菌医学研究センター

Saccharopolyspora sp. 1 株 , N. araoensis 1 株 , N. asiatica 1 株 ,得られた株が 31 株あった . しかし , その他の 4 株は要（2008. 3 〜）

研究支援員 : 木下妻智子

大学院医学薬学府

sp. 1 株 , Mycobacterium sp. 1 株 , Streptomyces sp. 2 ,析した . その結果 , 既知菌種との相同性が 99.9％以上

研究支援推進員 : 向後弘子
受託研究員 : 笹本

（Brevibacterium sp. 2 株 , Gordonia sp. 1 株 , Micrococcus

であった（青山 , 矢沢）.

特任教員 : 大野道代（2008. 7 〜）
1 〜）

た . 国 外 か ら の 同 定 依 頼 は タ イ の NIH か ら 14 株

り , その内訳は N. brasiliensis 4 株 , N. cyriacigeorgica 1 株

学（2008. 5 〜）

外国 人研究員 : 朱

株 , Streptomyces sp. 1 株 , Tsukamurella sp. 3 株 で あ っ

湾 CDC からは Nocardia について 5 株の同定依頼があ非常勤講師 : 福島和貴
特任教員 : 松浦

sp. 4 株 , Corynebacterium sp. 1 株 , Mycobacterium sp. 2

ブリダイゼーションの結果は , 50％以下であり , さらに
生理生化学的性状からも近縁種と異なる特徴を示した
ため , 新種として提案する準備を進めている . 2006 年

穎倩8 月に臨床より分離され , 放線菌症が疑われた患者由

来 Nocardia 株について , 形態観察 , メナキノン , 脂肪酸 ,GC 含量 , ミコール酸分析 , 生理生化学的性状の解析を行った結果 , Nocardia 属の菌種であることが確認された .

研究生 : 田渕史晃（2008. 4 〜）

16S rRNA 遺伝子を用いた相同性の検索の結果 , 既知菌種との相同性が 97.6％あった . 既知菌株とのハイブリダ
イゼーションの結果 , 50％以下であり , 新種として扱う

研究概要（共同研究を含む）

ことが適当であると判断した（青山 , 康 , 矢澤）.

1 ．医療機関の依頼に基づく病原性放線菌の同定

3 ．病原放線菌 Rothia 属のキノロン耐性機構の解析

2008 年に同定した病原性放線菌は現在まで 86 株でRothia 属はグラム陽性で , ミコール酸およびジアミノ

あり , 本邦の医療機関から依頼を受け同定した病原ピメリン酸を含有しない , 好気性の病原放線菌である .

株 : N. araoensis（ 1 株）, N. arthritidis（ 1 株）, N. asiatica

されている . 我々の調査では 1997 年から年間 1 〜 2 件

性放線菌は総数 67 株であった . 内訳は Nocardia が 56

（ 4 株 ）, N. beijingensis（ 4 株 ）, N. brasiliensis（ 3 株 ）,N. cyriacigeorgica（ 2 株）, N. elegans（ 6 株）, N. farcinica（22 株）, N. nova（ 5 株）, N. otitidiscaviarum（ 5 株）, N.

transvalensis（ 1 株）, N. wallacei（ 2 株）, 他に Actinomadura

38

千葉大学

現在 , 6 種知られており , そのうち 3 種で病原性が確認の割合で分離されており , 注目すべきことは 20 代の年
齢的に若い方や基礎疾患のないヒトにも感染があることである . 当センターで保存されている Rothia 属 17 株を用い , 薬剤感受性試験を行った . その結果 , Rothia 属に

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

はペニシリン系薬剤や ST 合剤など多くの薬剤が有効な化することを確認した . ホモロジーモデリング , ドッキ剤やセフェム系薬剤 , アミノグリコシド系薬剤に耐性がた , 248 位の Ser と 311 位の His をそれぞれ Ala に置換ことが確認された . しかし , 一部の株で , キノロン系薬見られた . キノロン系薬剤は臨床での使用頻度が高いことから , Rothia 属におけるキノロン系薬剤の耐性機構を解明したところ , キノロン系薬剤の耐性機構において多く見られる DNA gyrase 上の変異が確認された（青山）.

4 ．アゾール系抗真菌剤の Nocardia farcinica に対する生育阻害作用メカニズムの解明

N. farcinica において , いくつかのアゾール系抗真菌剤

ング解析により得られた構造から , 活性中心と予測されした変異体を作出し , それぞれの酵素活性への影響を調べた . S248A では Kcat が約 15 倍減少し , H311A では

UDP-Glucose との Km が 6 倍増加した . このことから ,248S は基質の修飾に重要な残基であり , 311H は酵素とUDP-Glc の結合に重要であることが判明した . また , これにより , 予測された構造の妥当性が支持された . 現在 ,この酵素の結晶化も試みている（志保沢）.

は生育阻害効果を示す . さらに濃度を上げることで殺6 ．Cryptococcus sp. nov., isolated from the Cassia tree inのはミコナゾール等のイミダゾール類では観察されたA strain isolated from the tropical shower tree in south

菌効果も観察されている . また , 生育阻害作用を示すもIndia

が , トリアゾール類では確認できなかった . これは , イ

India fits the general morphological and physiologicalであることが考えられた . これらの仮説を基に , 膜損傷

analyses of the sequences of the D 1 /D 2 regions and the

ミダゾール抗真菌剤で観察される , 膜障害性によるもの
に関する実験と , 真菌での標的酵素であるチトクローム

P450 酵素群に関する実験を行った .

膜損傷については , 細胞内 ATP 量の減少と細胞外ATP 量の増加により , 細胞内 ATP の流出が観察され ,膜損傷が起きていることが示唆された . 更に , 細胞内ATP の流出が始まる濃度は MIC と相関のとれる濃度であった . チトクローム P450 酵素群が標的である可能性については , 真菌の ERG11 に最も相同性の高い cyp51を過剰発現 , 遺伝子破壊を行ったが , 薬剤感受性に変化が見られなかった . 更に , 他のチトクローム P450 遺伝子についても過剰発現を行ったが , 薬剤感受性に差は見られなかった . これらのことから , アゾール剤のNocardia への作用は , 真菌とは異なる作用メカニズムであることが示唆され , 薬剤添加の結果として ATP 流出が起きていることも明らかとなった（志保沢）.

5 ．抗結核剤 rifampicin のグルコシル化による耐性機構

characterization of the genus Cryptococcus. Phylogenetic

adjacent internal transcribed spacer（ITS）regions of thelarge-subunit rDNA of this strain place it into the Tremellales
clade of the Hymenomycetes. On the D1/D2 phylogenetic

tree, the closest phylogenetic relatives of this strain are
C. podzolicus and Bullera ninhbinhensis. But the type strainof Cryptococcus sp. differs from C. podzolicus and Bullera
ninhbinhensis. In terms of the ITS1-5.8S-ITS2 sequence

data for this new isolate, it is different from C. podzolicus by
29 bp substitutions and from Bullera ninhbinhensis by 33 bp

substitutions respectively. The physiological characteristics
distinguishing the novel species from other Cryptococcus
species are obviously presented（康）.

7 ．Candida pararugosa（ tentative name ）nov., a sister

species of C. rugosa isolated from pneumonic patient inGuiyang, China

During the clinical yeasts study in Guiyang, a novel

Nocardia brasiliensis はリファンピシンの 21 位の水酸

Candida strain was isolated from a patient from the local

り , 南アフリカビッツ大学との共同研究により , その耐

phylogenetic relatives of this strain are C. rugosa and C.

基をグリコシル化することで不活化する耐性機構があ性遺伝子が明らかとなっている . この耐性遺伝子がコードしている , リファンピシングリコシルトランスフェ
ラーゼの機能解析を行った . この遺伝子を過剰発現ベ
クターに組み込み , 大腸菌で発現させた酵素を用い , リ
ファンピシンと反応させた所 , リファンピシンを不活

千葉大学

hospital. On the D 1 /D 2 phylogenetic tree, the closest
pseudorugosa, both of which are isolated from environment as

well. But the type strain of Cryptococcus species, differs from C.
rugosa by 5 bp and from pseudorugosa by 25 bp substitutions
and mismatches, respectively. In terms of the ITS1-5.8SITS2 sequence data for this new isolate, it is different from

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200839

C. rugosa by 36 bp substitutions, and from C. pseudorugosa bydifferent base positions in the internal transcribed spacer

68 bp substitutions, respectively. Other tests of fungal growth（ITS1-5.8S-ITS2）region, C. gattii strains were classified

were processed（康）.

as ITS type 8, was isolated from an AIDS patient in Brazil.

condition including the assimilation test and vitamin free test

8 ．Gordonia sp. nov., isolated with G. araii from a patientwith bacterial pneumonia in Japan

G. araii（IFM 10211）, a novel species（proposed in 2006）

was isolated from Japanese patient with bacterial pneumonia.
In August 18, 2003, a new Gordonia sp IFM 10348 was
isolated from the same Japanese patient after the treatment of
levofloxacin. This strain was suspected as a reference strain of

into six genotypes. A new genotype of C. gattii, designated

The ITS type 8 strain is closely related to the ITS type 4

strain, which has been frequently isolated in Brazil and theUSA, but which shows ITS-signatured nucleotide differenceat each nucleotide position. The ITS type 8 strain is also

differentiated from all heretofore reported ITS types of C.
gattii strains in the RAPD band patterns and IGS sequence
information（康 , 田中）.

G. araii but with higher drug resistant towards levofloxacin

11．Multilocus microsatellite typing of environmental andon Gordonia interspecies relationship based on gyrB and secA1

C. neoformans var. grubii isolates f rom Brasil: 52

and levofloxacin. During the period of our taxonomic study

clinical isolates of the C. neoformans var. grubii

genes, we found the similarities between this strain IFM

environmental isolates and 39 clinical isolates of the var.

16S rRNA, 82.0％ in gyrB and 83.7％ in secA1 genes. Withprevious study, among these strains, 36 strains were classified

10348 and the type strain of G. araii showed only 96.6％ in

the comparison of its sequence data based on the above three
genes and those both derived from GenBank and submitted
in this study, the similarities between the strain IFM 10348

and other Gordonia specie show the enough discrimination todifferentiate it from other Gordonia species（康）.

9 ．GyrB and secA1 genes as useful taxonomic characteristics

According to their sequence data, the phylogenetic trees ofGordonia gyrB and secA1 genes were built and analyzed using
software, Clustal W（1.83）. The gyrB and secA1 phylogenies

showed agreement with that constructed using 16S rRNA
gene sequences. The degrees of divergence of the gyrB andgrubii were classified into 11 MLMT types. Compared theinto new MLMT types（9 types）. 39 clinical isolates of thevar. grubii were numbered into following 9 MLMT types:

MLMT-2 type（4 strains）, 12（3 strains）, 13（19 strains）,
14（1 strain）, 17（5 strains）, 31（1 strains）, 32（3 strains）,
33（2 strains）and 35（1 strain）. MLMT-13 type was amajor type among the clinical isolates, but such type was
not observed in environmental isolates. In 52 environmental

strains of the var. grubii, MLMT-36 type was a major one,
followed by MLMT-2 type（9 strains）, and their prevalence
frequencies were 47.4 and 17.3％ respectively. MLMT-36
type was not discovered from clinical strains（朱 , 大楠）.

secA1 genes were approximately 3.4 and 1.7 times greater,

12．Multilocus microsatellite typing of the var. grubii fromshowed more discriminatory power than either the secA1 orPrevalence of one major type of the var. grubii strain wasrespectively, than that of 16S of rRNA gene. The gyrB gene

China and Japan

16S rRNA gene, facilitating clear differentiation of any two

confirmed in the isolates from environments and clinicalthat gyrB and secA1 gene sequences are useful as markers forin China and Japan（82 . 5 , and 92 . 9％ respectively ）. In

Gordonia species using gyrB gene analysis. Our data indicate
phylogenetic study and identification at the species level of thegenus Gordonia（康 , 武田）.

10．New ITS genotype of Cryptococcus gattii isolated from an

AIDS patient in Brazil

Based on combinations of nine variable nucleotides at nine

40

千葉大学

isolates of C. neoformans. MLMT-17 type was prevalent
comparison with our previous study, one new type（MLMT-2type）was found in Japan, and 6 new types were found in

China following as MLMT-14, MLMT-16, MLMT-29,
MLMT- 40 , MLMT- 41 and MLMT- 42 . The major
MLMT-17 was found in the environmental strains as well as
the clinical strains（朱 , 大楠 , 劉）.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

13．放線菌の生物活性二次代謝産物に関する研究
病原性放線菌を中心に抗菌活性物質の探索を目的にスクリーニング系を立ち上げて , 活性物質の探索をした . また , 医学部田村 裕准教授と上野が , in silico の手法により , 生育必須タンパクに対する抗真菌ペプチドの設計と合成ならびに評価などを開始した（上野）（論文行った . 被検菌として , Micrococcus luteus, Mycobacterium

執筆中）. 本年は , C. glabrata のハイスループットなマウを用いて , センターの臨床分離株について活性の有無をれた抗真菌薬の標的候補の Tet 株の感染時実験を行った

smegmatis, Gordonia bronchialis および Corynebacterium xerosis

ス感染実験系を構築し , in vitro 解析によって見いださ検討した . その結果 , サイクリック系のペプチド化合物（三谷 , 宇野 , 木下 , 笹本 , 上野）（論文執筆中）. その結とが明らかにとなり , 論文投稿した（青山 , 矢沢）.

性高いペプチドを設計 , 合成し , 解析を現在 , 進めてい14．Candida glabrata フェノームプロジェクト（知花）14-3を単離して , 構造解析を行った結果 , 新規物質であるこ本プロジェクトでは , C. glabrata の全遺伝子について果をもとに見いだされた有力候補タンパクに対して親和る（上野）.

第3章

病原性・常在性の研究 : 感染宿主との相互作用を解析する目的で真菌が宿主に対してファースト

組換え株を構築し , 機能解析を行うことにより , 病原真コンタクトを行う細胞壁に着目した . 昨年は , 細胞壁の用研究として①抗真菌薬の開発 , ②常在性と病原性のし , 組換え株の構築を開始した（三谷 , 上野）. 今年は ,ネットを介して情報を発信し , 世界中の病原真菌の研究て薬剤耐性を含む , 様々なストレス耐性度 , 細胞壁の形

菌の普遍性と多様性を見いだすことをめざしている . 応
解明 , ③医学・工学的利用などの研究を進め , インターの発展のために貢献する事をめざしている . 2008 年の各サブプロジェクトの進捗状況を以下に記す .
14-1

第1章

全遺伝子（5,300）の組換え株構築 : C.

glabrata の全遺伝子を網羅的に解析するためには , より精度の高いゲノム情報とアノテーション情報が必要になった . そこで , 本年は未同定遺伝子 , 定量的発現解析 , 遺伝子開始点 , アンチセンス遺伝子などの情報獲得を目的とした網羅的 cDNA 5 解析を行った . cDNAは INITIA 法を用い , シークエンス解析にはイルミナ社

solexa（次世代シークエンサー）を用いた . 約 100 万リー
ドのタグ配列を , 鈴鹿高専青山俊弘先生 , 中山浩伸先生

合成に関する遺伝子情報をゲノムから 140 遺伝子抽出
140 遺伝子の組み換え株を完成させ , これらの株を用い質の変化などの表現型の解析を行った（三谷 , 上野）. 今
後は , 感染モデル系の構築と , 組み換え株を用いて各種
細胞壁構成成分に対する宿主のレセプター解析を進め
る.

14-4

第４章

応用工学的研究 : これまでのカンジダ

フェノムプロジェクトの研究過程では , 解糖系を始めとする代謝系の組換え株も多く構築して来た . これらの株を用いて , エタノールやビタミンなど有用産物の生産至適条件の解析を行い , さらに , プロモーター操作などの技術開発 , 高生産株スクリーニング系の開発などを進めている（笹本 , 松浦 , 大野 , 小暮）.

とともに解析を進め , ゲノム情報のリアノテーションを

15．抗真菌作用増強物質および免疫賦活物質の探索果得られた知見を基に網羅的に組換え株の構築を進めて用を増強する物質をチェッカーボード法により農薬 , 抗行った . 現在論文執筆中である（知花 , 上野）. 解析の結おり , 本年は C. glabrata の遺伝子 , 約 500 について組換え株の作製を構築した（木下 , 上野 , 三谷 , 笹本 , 大岩 ,加藤 , 島田）. また , 組換え機構の解析（上野）, 組み換えツールの開発（上野 , 松浦 , 小暮）, 組換え株の保存・分譲システム（大岩 , 木下 , 島田）を研究開発中である .
14-2

第2章

抗真菌薬の開発 : 昨年までに , 全ゲノム5,300 の中から抽出した 187 の標的候補遺伝子について

糸状菌・酵母に対してポリエン抗生物質の抗真菌作
原虫薬および駆虫薬などを探索した . 薬剤の併用により抗非定型細菌 , 原虫薬の中に相乗作用が若干観察される物質を見いだした . 免疫賦活物質は , インド由来植物
樹皮から Candida albicans と Cryptoccocus neoformans およびAspergillus fumigatus の in vivo 実験で感染防御効果を示す
NJ8a と NJ8b を見いだした（宇野）.

テットプロモーターを各遺伝子の 5 領域に導入した株（Tet 株）を体系的に構築し , 各遺伝子の生育に対する抑制効果の即効性や殺菌性などを in vitro で定量的に解析

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200841

infected children undergoing sequential HIV therapies.

研究成果の発表

Med Mycol 2008, in press.

1 ．著書
1 ）明見能成 , 三上襄（分担）: 口腔臨床に必要な真7 ）Ishiyama H, Kozawa S, Aoyama K, Mikami Y,

Fromont J, Kobayashi J: Halichonadin F and the

菌学 , pp. 11-17, 尾崎登喜雄編『口腔内科学』飛鳥Cu（I）complex of halichonadin C from the sponge

出版社 , 2008.

2 ）三上襄（分担）: 放線菌関連菌− , pp. 390-391,「医科細菌学−改訂第 4 版」, 笹川千尋 , 林
堂 , 2008.

3 ）三上襄（分担）: 微生物の辞典（渡辺倉書店 , 2008.

4 ）宇野

Halichondria sp. J Nat Prod 71: 1301-1303, 2008（査.
読有）

哲也 , 南江8 ）Myoken Y, Sugata T, Mikami Y, Murayama SY, Fujita

信他編 , 朝samples of patients with hematologic malignancies

潤（分担）: 真菌感染症 . pp. 525-535, 百瀬弥

寿徳編 , ファーマシュチカルノート , 医学評論社 ,2008.

Y: Identification of Aspergillus species in oral tissue

by in situ hybridization: a preliminary report. J Oral
Maxillofac Surg 66: 1905-1912, 2008（査読有）.

9 ）Kubota T, Ito J, Mikami Y, Fromont J, Kobayashi J:

Nakijiquinones G-I, new sesquiterpenoid quinones frommarine sponge. Bioorg Med Chem 16（16）: 7561-7564,

2 ．原著論文

2008（査読有）.

英文1 ）Hayashi Y, Matsuura N, Toshima H, Itoh N, Ishikawa

10）Kang Y, Tanaka H, Moretti MR, Mikami Y: New ITS

genotype of Cryptococcus gattii isolated from an AIDS
patient in Brazil. Microbiol Immunol 2008, in press.

J, Mikami Y, Dairi T: Cloning of the gene cluster

responsible for the biosynthesis of brasilicardin A, aunique diterpenoid. J Antibiot 61: 164-174, 2008（査.
読有）

3 ．総説・解説・その他学術刊行物
1 ）三上

2 ）Hanafy A, Kaocharoen S, Jover-Botella A, Katsu

M, Iida S, Kogure T, Gonoi T, Mikami Y, Meyer

W: Multilocus microsatellite typing for Cryptococcus

解析とそれらの基づく同定診断法の開発 . Jpn J Med

Mycol 49: 151-155, 2008.

2 ）三上

neoformans var. grubii. Med Mycol 46: 685-696, 2008.

原微生物−特に病原真菌と病原放線菌について− .

Biophia 4（4）: 53-56, 2008.

J, Kobayashi J: Nagelamides K and L, dimeric3 ）三上Lett 10: 2099-2102, 2008（査読有）.

4 ）長Y, Takaishi Y, Mikami Y, Kobayashi J: Petiolins5 ）毛利bromopyrrole alkaloids from sponge Agelas species. Org
4 ）Tanaka N, Kubota T, Ishiyama H, Araki A, Kashiwada

襄（分担）: 病原体等安全取扱・管理指針（共同編纂）, 日本細菌学会編 , 2008年 .

環 , 豊田美香 , 中山浩伸 , 知花博治 , 上西秀則 ,Richard A Caderon: 真菌誌 49: 281-86, 2008.
忍 , 渡辺晋一 , 楠

俊雄 , 渋谷和俊 , 西山彌

A-C, phloroglucinol derivatives f rom Hypericum

生 , 阿部美智子 , 宇野

5619-5623, 2008（査読有）.

医真菌学会標準化委員会提案 2007−．真菌誌 49:

pseudopetiolatum var. kiusianum. Bioorg Med Chem 16:

池田玲子 , 安部

5 ）Ono M, Kobayashi Y, Shibata T, Maruyama D, Sung-

Won K, Watanabe T, Mikami Y, Tobinai K: Nocardia
exalbida brain abscess in a patient with follicularlymphoma. Int J Hematol 88: 95-100, 2008（査読有）.

6 ）Melo NR, Taguchi H, Culhari VVP, Kamei K, Mikami

Y, Smith SN, Vilela MMS: Oral candidiasis of HIV

42

襄 : NBPR（ナショナルバイオリソースプロ

ジェクト）紹介−感染症研究に必須のリソース : 病（査読有）3 ）Araki A, Kubota T, Tsuda M, Mikami Y, Fromont

襄 : 病原真菌の分子系統分類および遺伝子型

千葉大学

潤 , 小栗豊子 , 前崎繁文 ,茂 : 爪白癬の治療について−日本

1-4, 2008.

4 ．学会・シンポジウム・研究集会での招待講演
国際1 ）Mikami Y: Overview「 Epidemiological research on

pathogenic fungi in China and development of research

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

bases for mycotic infetion 」. China-Japan Pan Asia

microsatellite analysis in Cryptococcus neoformans var.

2 ）Hiroji Chibana, Phenome Project in Candida glabrata,

Mycology Forum Symposium, Changchun Jul 27-Aug 5,

Pacific Mycology Forum Symposium. 2008.

GCD yeast club, Minneapolis USA, 2008. 9. 17.

国内

ド , 三上透 , ハナフィーアメド , メーヤーウイラン
襄 : Cryptococcus neoformans var. grubii のマ

イクロサテライト多型とその世界分布 . 第 52 回日本医真菌学会総会プログラム・抄録集 p. 84, 長崎 ,9 月 10 日〜 11 日 , 2008.

ワークショップ・セレクッテッド1 ）知花博治 , 上野圭吾 , 笹本
弘 , 宇野ジェクト

潤 , 三上要 , 中山浩伸 , 青山俊

襄 : 病原真菌フェノームプロ

第 1 章 - Candida glabrata - を用いた抗真菌ゲノム創薬 -, 第 2 回日本ゲノム微生物学会

セレクテッドオーラル , 大阪 , 3 月 6 〜 8 日 , 2008.

2 ）田辺公一 , 中山浩伸 , 知花博治 , 宮崎義継 , 新見昌
一 : 病原真菌の ABS タンパク質の抗真菌耐性との関わり , 第 81 回日本細菌学会総会 , ワークショッ

プ , 発表要旨抄録集 p. 62. 京都 , 3 月 24 〜 26 日 ,2008.

3 ）Chibana H, Ueno K, Sasamoto K, Mitani H, Tamura

Y, Aoyama T, Kinoshita S, Kato N, Uno J, Nakayama
H, Mikami Y: Target prioritization and lead generation

for development of antifungal drug based on Candida
glabrata phenome project. The 8th Awaji Interational

Forum on Infection and Immunitiy, selected oral,
Abstracts p. 111, Awaji, Sep 7-11, 2008.

4 ）田辺公一 , 中山浩伸 , 山越

2008.

3 ）Chibana H, Sasamoto K, Ueno K, Aoyama T, Kinosita

シンポジュウム
1 ）五ノ井grubii from the world. China-Japan Pan Asia Pacific

智 , 知花博治 , 新見昌

一 , 宮崎義継 : Candida glabrata ステロールトランス
ポーターのアゾール耐性化における役割 , 第 52 回
医真菌学会総会 , セレクテッドシンポジウム , 発表
要旨抄録集 p. 28. 長崎 , 9 月 10, 11 日 , 2008.

5 ．一般発表

S, Nakayama H, Uno J, Mikami Y: Drug target
selection as the first goal of Candida glabrata functional

genomics. Japan-China Pan Asia Pacific Mycology

Forum Symposium, Abstract p. 58, Changchun, China,
Jul 27-Aug. 5, 2008.

国内学会

1 ）田中玲子 , 亀井克彦 , 五ノ井
貴志 , 三上透 , 横山耕治 , 矢口

襄 : NBRP・ナショナルバイオリソー

スプロジェクト「病原微生物」−真菌・放線菌 . 日
本微生物資源学会第 15 回大会要旨集 p. 37, 千葉 , 6
月 30 日〜 7 月 2 日 , 2008．

2 ）Zaki S, Ibrahim N, Aoyama K, Shetaia Y, Abdel-

Ghany K, Mikami Y: Epidemiology of dermatophyte
infections in Cairo, Egypt. 日本微生物資源学会第 15

回大会要旨集 p. 38, 千葉 , 6 月 30 日〜 7 月 2 日 ,2008．

3 ）Zhu J, Hanafy A, Gonoi T, Meyer W, Mikami Y:

Strain typing for Cryptococcus neoformans var. grubii byanalysis of multilocus microsatellites. 日本微生物資源学会第 15 回大会要旨集 p. 39, 千葉 , 6 月 30 日〜 7
月 2 日 , 2008．

4 ）志保沢里奈 , 小暮高久 , 三上

襄 : アゾール系抗真菌剤 clotrimazole の Nocardia farcinica における標的分子の探索 . 日本微生物資源学会第 15 回大会要旨集

p. 39, 千葉 , 6 月 30 日〜 7 月 2 日 , 2008．

5 ）青山一紀 , 矢澤勝清 , 三上襄 : 新たに臨床材料から分離された Rothia sp. について . 日本微生物資源学会第 15 回大会要旨集 p. 39, 千葉 , 6 月 30 日〜 7
月 2 日 , 2008．

6 ）田中博子 , 山本摂也 , 三上

襄 : 嫌気性細菌の生産する二次代謝産物の研究 . 日本微生物資源学会第国際学会1 ）Luo Z, Kang Y, Wang H, Mikami Y: Morphologicaland taxonomic studies on pathogenic yeasts isolated from

Guizhou, China. China-Japan Pan Asia Pacific Mycology
Forum Symposium, Changchun Jul 27-Aug, 2008.

2 ）Gonoi T, Hanafy A, Meyer W, Mikami Y: Multilocus

千葉大学

15 回大会要旨集 p. 39, 千葉 , 6 月 30 日〜 7 月 2 日 ,2008．

7 ）岩澤真理 , 外川八英 , 松江弘之 , 三上襄 : Nocardia

brasiliensis による皮膚ノカルジア症の 2 例 . 第 52 回
日本医真菌学会総会プログラム・抄録集 p. 92, 長
崎 , 9 月 10 日〜 11 日 , 2008.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200843

8 ）宮崎久美子 , 大圃詩子 , 照井

正 , 青山一紀 , 三上襄 : リンパ型スポロトリコーシスの 1 例 . 第 52 回

日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 93,
長崎 , 9 月 10 日〜 11 日 , 2008.

9 ）康穎倩 , 矢沢勝清 , 横山耕治 , 三上

襄 : 中国貴陽医学院で分離された病原性酵母の分類学的研究 .
第 52 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 49（増刊 1号）: 84, 長崎 , 9 月 10 日〜 11 日 , 2008.

10）三上

襄 , 五ノ井透 : 千葉大学オープンリサーチ

2008. 人や動物に病気を起こすカビ , 酵母 , 病原放線菌の研究（平成 20 年 9 月 6 日 , 千葉大学

けやき会館（西千葉キャンパス）.

11）知花博治 , 宇野

潤 , 田村裕 : 真菌フェノームプ

ロジェクト第 2 章 : 標的の決定とインシリコ抗真菌ペプチドの創出 . 特定領域研究「感染現象のマトリックス」班会議 , 東京 , 1 月 12 日〜 13 日 , 2008.

12）上野圭吾 , 田村

裕 , 中山浩伸 , 知花博治 , 三上

襄 : Candida フェノームプロジェクトから抗真菌剤の設計へ−コンピュータを活用した抗真菌剤の設計− . 第 6 回感染症沖縄フォーラム , 沖縄北谷 , 要旨
集 p. 21, 2 月 14 日〜 16 日 , 2008.

13）中山浩伸 , 田辺公一 , 青山俊弘 , 竹森大樹 , 知花博
治 , 新見昌一 : 病原真菌 Candida glabrata のステロー
ルとランスポータの発現機序 . 第 6 回感染症沖縄フォーラム , 沖縄北谷 , 要旨集 p. 18, 2 月 14 日〜
16日 , 2008.

14）上野圭吾 , 中山浩伸 , 三上襄 , 知花博治 : Candida

フェノームプロジェクトによる標的の選定とコンピュータによる抗真菌剤の設計 . 第 81 回日本細菌学会総会 , 発表要旨抄録集 p. 167. 京都 , 3 月 24
日〜 26 日 , 2008.

15）知花博治 , 上野圭吾 , 笹本

要 , 木下妻智子 , 三谷宏樹 , 小暮高久 , 加藤直子 , 宇野
中山浩伸 , 三上潤 , 青山俊弘 ,襄 : カンジダフェノームプロジェ

クトにおける網羅的遺伝子組み換え株の構築 . 日本

微生物資源学会第 15 回大会 , 発表要旨抄録集 p. 62.
千葉 , 6 月 30 日〜 7 月 2 日 , 2008.

16）三谷宏樹 , 上野圭吾 , 知花博治 , 三上

襄 : Candida

glabrata を用いた細胞壁合成遺伝子の網羅的機能解析 . 第 5 回真菌分子細胞研究会 要旨集 p. 1, 千葉 ,8 月 21 日〜 22 日 , 2008.

17）中川元斗 , 上野圭吾 , 岩田哲郎 , 青山俊弘 , 知花

44

千葉大学

博治 , 中山浩伸 : 病原性 Candida glabrata の GDP-mannose 合成遺伝子の機能解析 . 第 5 回真菌分子
細胞研究会
2008.

要旨集 p. 2, 千葉 , 8 月 21 日〜 22 日 ,18）上野圭吾 , 田村

裕 , 中山浩伸 , 三上襄 , 知花博治 : コンピューターシュミレーションによるペプチ
ド性リード化合物の設計 . 第 5 回真菌分子細胞研究会

要旨集 p. 4, 千葉 , 8 月 21 日〜 22 日 , 2008．

19）青山俊弘 , 上野圭吾 , 三谷宏樹 , 田渕史晃 , 中山浩
伸 , 知花博治 : Candida glabrata における RNA5 末
端塩基配列の解析 . 第 5 回真菌分子細胞研究会

要

旨集 p. 6, 千葉 , 8 月 21 日〜 22 日 , 2008.

20）田渕史晃 , 上野圭吾 , 三上襄 , 知花博治 : クオラ

ムセンシングに関る遺伝子の網羅的解析− Candida

glabrata をモデルとして− . 第 5 回真菌分子細胞研究会

要旨集 p. 8, 千葉 , 8 月 21 日〜 22 日 , 2008.

21）田辺公一 , 名木稔 , 中山浩伸 , 知花博治 , 宮崎義

継 , 新見昌一 : 病原真菌ステロールトランスポー
ターの出芽酵母での発現解析 . 第 5 回真菌分子細
胞研究会
2008.

要旨集 p. 13, 千葉 , 8 月 21 日〜 22 日 ,22）中山浩伸 , 田辺公一 , 青山俊弘 , 岡野

誠 , 知花博治 , 新見昌一 : 病原真菌 Candida glabrata のステロー
ル輸送機構の解明 . 第 5 回真菌分子細胞研究会

要

旨集 p. 14, 千葉 , 8 月 21 日〜 22 日 , 2008.

23）岡野

誠 , 田辺公一 , 青山俊弘 , 知花博治 , 新見昌

一 , 中山浩伸 : Candida glabrata のステロールトラン
スポーター AUS1 を制御する転写因子の検索 . 第 5回真菌分子細胞研究会
日〜 22 日 , 2008.

要旨集 p. 8, 千葉 , 8 月 2124）知花博治 , 三谷宏樹 , 笹本

要 , 上野圭吾 , 田村

裕 , 青山俊弘 , 木下妻智子 , 加藤直子 , 大岩真理 ,宇野潤, 中山浩伸, 三上

襄 : Candida glabrata

フェノームプロジェクト第 2 章標的の探索から抗真菌約の創出へ . 第 2 回真菌ワープ研究会

要旨集

p. 34, 千葉 , 8 月 23 日 , 2008.

25）菅波晃子 , 上野圭吾 , 安達禎之 , 知花博治 , 田村
裕 : in silico 分子進化法による抗真菌薬の創製 . 第 2回真菌ワープ研究会
日 , 2008.

26）知花博治 , 宇野

要旨集 p. 35, 千葉 , 8 月 23

潤 , 中山浩伸 , 青山俊弘 : カンジ

ダ酵母における網羅的発現制御株の構築と応用−病

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

原性ゲノム機能学− . 特定領域「ゲノム 4 領域 2008
年度合同班会議」神戸 , 8 月 25 日〜 27 日 , 200827）知花博治 , 宇野潤 , 中山浩伸 , 青山俊弘 : カンジ

ダ酵母における網羅的発現制御株の構築と応用−病
原性ゲノム機能学− . 微生物ゲノム合同班会議 , 金
沢 , 11 月 12 日〜 14 日 , 2008.

28）岡

千寿 , 前田浩 , 五ノ井透 , 三上襄 : DNA

マイクロアレイ関連技術の開発 . 平成 19 年度ライ
フサイエンス分野融合会議・ライフサイエンス部
会バイオテクノロジー分科会合同研究発表会 , つくば , 1 月 31 日 , 2008.

29）岡

千寿 , 前田浩 , 五ノ井透 , 三上襄 : DNA

マイクロアレイ関連技術の開発 . 平成 19 年度ライ
フサイエンス分野融合会議・ライフサイエンス部
会バイオテクノロジー分科会合同研究発表会 , つくば , 2 月 1 日 , 2008.

30）五 ノ 井

透 , Ahmed Hanafy, Wieland Meyer, 三 上

襄 : Multilocus microsatellite sequence による病原性酵母 Cryptococcus neoformans 多型性の世界分布解析 . 第
91 回日本細菌学会関東支部会 , 千葉 , 10 月 23日〜
24日 , 2008.

31）五ノ井上透 , 武田健二郎 , 志賀祐介 , 松澤哲宏 , 三

襄 : gyrB 遺伝子による Nocardia 属菌群の分類（multilocus sequence typing を目指して）. 2008 年度
日本放線菌学会 , 山梨 , 7 月 10 日 〜 11 日 , 2008.

32）三上襄 , 本田武司 , 江崎孝行 , 平山謙二 , 亀井

克彦 , 五ノ井透 , 横山耕治 , 矢口貴志 , 田中玲子 : 新たな感染症研究への迅速な支援を目指して .

BMB2008, 神戸 , 12 月 9 日〜 12 日 , 2008.

襄 : 抗酸菌の薬剤不活化に関する研究 : Eric

アフリカ．

襄 : 病原性放線菌および真菌の分子分類学的研究 : N. Poonwan 博士 , タイ国立衛生研究所 , タイ．

襄 : 病 原 真 菌 Cryptococcus の 系 統 解 析 : W.

Meyer 准教授 , シドニー大学病院 , オーストラリア .

4 ）三上Berman 教授 , アメリカ合衆国 , ミネアポリス , ミネ
ソタ大学 .

6 ）知花博治 : Candida の分子生物学的の研究 , Richard

Cannon 教授 , ニュージーランド , ダニーデン , オタゴ大学 .

2 ．共同利用研究以外の国内共同研究
1 ）田中玲子 , 松澤哲宏 , 宇野潤 , 五ノ井透 , 三上襄 : Malassezia 属菌の免疫賦活化作用に関する研究 ,斉藤

隆 , 山崎晶 , 独立行政法人理化学研究所・

免疫アレルギー科学総合研究センター .

2 ）知花博治 : Candida の薬剤耐性機構に関する研究 ,新見昌一 , 田辺公一・国立感染症研究所 , 中山浩
伸・鈴鹿高専 .

国際交流
1 ．海外渡航1 ）三上

襄 : 文部科学省科学技術振興調整費 : 真菌症

原因菌の疫学的研究と真菌症対策拠点形成 , 中国吉林大学（長春）, 7 月 27 日〜 8 月 3 日 , 2008.

2 ）三上

襄 : 文部科学省科学技術振興調整費 : 真菌症

原因菌の疫学的研究と真菌症対策拠点形成 , 貴陽医学院（貴州）, 10 月 12 日〜 19 日 , 2008.

3 ）三上

襄 : 二国間共同実験（学術振興会）, 共同実

験の開始のため南アフリカウイットウオータース大学訪問 , 11 月 7 日〜 16 日 , 2008.

化加速プログラム」カンジダを用いた真菌病原因子

R. Dabbs 教授 , ウイットウオータース大学教授 , 南3 ）三 上5 ）知花博治 : Candida の分子生物学的の研究 , Judithポリス）, 文部科学省「平成 20 年度大学教育の国際

1 ．国際共同研究

2 ）三上

ル.

4 ）知花博治 : アメリカ合衆国 , ミネソタ大学（ミネア

共同研究

1 ）三上

Branchini 教授 , カンピーナス大学医学部 , ブラジ

襄 : 病原真菌の疫学的研究 : M. L. Moretti-

千葉大学の網羅的研究 , 7 月 9 〜 7 月 25 日 , 2008.

5 ）知花博治 : 中国吉林大学 , 文部科学省「平成 20 年
度大学教育の国際化加速プログラム」カンジダを用いた真菌病原因子の網羅的研究 , 7 月 27 〜 8 月 3
日 , 2008.

6 ）知花博治 : アメリカ合衆国 , ミネソタ大学（ミネア
ポリス）, 文部科学省「平成 20 年度大学教育の国際化加速プログラム」カンジダを用いた真菌病原因子の網羅的研究 , 8 月 28 〜 9 月 8 日 , 2008.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008457 ）知花博治 : アメリカ合衆国 , ミネソタ大学（ミネア
ポリス）, 文部科学省「平成 20 年度大学教育の国際

2008.

3 ）宇野

化加速プログラム」カンジダを用いた真菌病原因子の網羅的研究 , 9 月 13 〜 10 月 3 日 , 2008.

8 ）知花博治 : ニュージーランド , オタゴ大学（ダニーデン）, 文部科学省「平成 20 年度大学教育の国際化

千葉大学けやき会館 , 千葉 , 6 月 30 日〜 7 月 2 日 ,2008.

4 ）向後弘子 : 日本微生物資源学会第 15 回実行委員 ,
千葉大学けやき会館 , 千葉 , 6 月 30 日〜 7 月 2 日 ,加速プログラム」カンジダを用いた真菌病原因子の網羅的研究 , 11 月 16 〜 12 月 16 日 , 2008.
2 ．海外研究者の受け入れ
1 ）Youtaro Shibayama 院生（南アフリカウィットウォー

潤 : 日本微生物資源学会第 15 回実行委員 ,2008.

5 ）知花博治 : 第 81 回細菌学会総会コンビーナー .

6 ）知花博治 : 第 6 回感染症沖縄フォーラム実行委員 .

7 ）知花博治 : 第 5 回真菌分細胞研究会・真菌ワープ研究会実行委員長 .

タース大学）12 月 18 日 , 2007 〜 1 月 18 日 , 2008.

8 ）大野道代 : 第 5 回真菌分細胞研究会・真菌ワープ研

2 ）Eric Dabbs 教授（南アフリカウィットウォータース

9 ）上野圭吾 : 第 5 回真菌分細胞研究会・真菌ワープ研（二国間共同研究費）, 共同研究 .

大学）12 月 24 日 , 2007 〜 1 月 18 日 , 2008.（二国究会実行委員 .
究会実行委員 .

間共同研究費）, 共同研究 .

3 ）朱

鍵

外国人研究員（中国貴陽医学院病院講師）

1 月 7 日 , 2008 〜 .（中国内陸部人材育成事業経費）,
研修および共同研究 .

4 ）Maria Luiza Branchinii 教授（ブラジルカンピーナス

教育活動
講義
1 ）三上

襄 : 千葉大学大学院医学研究科（真菌感染症

大学）, 1 月 21 日〜 2 月 2 日 , 2008.

学分野−高分子活性学）, 千葉大学大学院自然科学

学）4 月 20 日〜 28 日 , 2008.（ブラジルカンピーナ

答論 I）, 千葉大学大学院自然科学研究科博士前期課5 ）Ademar Yamanaka 教授（ブラジルカンピーナス大
ス大学経費）, 大学間交流協定 .

6 ）Sherif Mohamed Zaki 講師（エジプトアインシャム大学）〜 7 月 16 日 , 2008.

7 ）Jiang Yanping 医師（中国

北京第一病院）7 月 13

日〜 20 日 , 2008.

8 ）Thanpicha Thongin 技師（タイ国立衛生研究所）7
月 13 日〜 21 日 , 2008.

9 ）Sugitra Manakul 主任（タイ国

スラッタニ地域病院）7 月 13 日〜 21 日 , 2008.

程（分子生態機能学）, 普遍講義（真菌（かび）と人との関わり合い）.

2 ）知花博治 : 千葉大学普遍教育 , 真菌とくらし , 真菌のゲノムと応用 , 2 コマ . 琉球大学医学部講義 , 微
生物学（細菌学）2 コマ , 千葉大学園芸学部講義 1
コマ , 千葉大学大学院自然科学研究科特論 , 真菌活性応答論 , 真菌（かび）と人との関わり合い , 平成
18 年 12 月 14 日 , 21 日 .

3 ）宇野10）Natteewan Poonwan 部長（タイ国立衛生研究所）7
月 13 日〜 26日 , 2008.

潤 : 真菌（かび）と人との関わり合い（選択毒性）平成 18 年 11 月 13 日 , 東邦大学薬（薬物治療学−感染症）.

インターンシップ生（実習生）の受け入れ

学会等活動（主催学会 , 座長 , コンビーナーなど）
1 ）三上

研究科博士後期課程（分子生態機能学−真菌感染応

襄 : 日本微生物資源学会第 15 回大会長 , 千葉大学けやき会館 , 千葉 , 6 月 30 日〜 7 月 2 日 ,1 ）志思沢里奈 , 三上
年 7 月〜 9 月）.

2008.

2 ）知花博治 : 日本微生物資源学会第 15 回事務局長 ,千葉大学けやき会館 , 千葉 , 6 月 30 日〜 7 月 2 日 ,

46

千葉大学

襄 : 日本大学生産工学部応用化学科の 3 年生 1 名を実験の実習生として（平成 20

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

用ゲノム」カンジダ酵母における病原性ゲノム機

社会的活動1 ）知花博治 : 市民公開講座「カビ !?」実行委員 .
2 ）宇野潤 : 市民公開講座「カビ !?」実行委員 .

センター講習会1 ）三上

襄 : 第 22 回病原真菌講習会講師「病原性放線菌」（2006. 7. 26）.

2 ）三上
3 ）宇野
特許

潤 : 第 22 回病原真菌講習会世話人 .

同出願 .

2 ）「カンジダ・グラブラータ（C. glabrata）を用いるエ
タノール製造方法」.

カンジダフェノームプロジェクト第 2 章 : 標的の決定とインシリコ抗真菌ペプチドの創出 , 平成 19 〜
20 年度（平成 20 年度は 790 万円）.

1 ）三上

襄（代表）
: 日本学術振興会 2 国間交流事業 :南アフリカとの共同研究 , 病原性放線菌 Nocardia 及び関連菌の薬剤感受性に関する研究 , 平成 18 年 ,19 年度（平成 20 年度の 6 月までは 30 万円）.

2 ）知花博治（分担）: 文部科学省「平成 20 年度大学教育の国際化加速プログラム」カンジダを用いた真菌3 ）知花博治（代表）: 民間との共同研究 , 株式会社大正

製薬 平成 19 〜 20 年度 ,（平成 20 年度は 91 万円）.

科学研究費補助金
襄（代表）: 科学研究費補助金

C 19590441

基盤研究

ゲノム情報に基づく病原性放線菌

Nocardia の新しい同定法の確立 , 平成 18 年〜 20 年

（平成 20 年度は 130 万円 , 含む間接経費 39 万円）.

襄（代表）: 平成 20 年度文部科学省科学技術振興調整費「真菌症原因菌の疫学的研究と真菌症対策拠点形成」（平成 20 年度は 2,051 万円 , 含む間接
経費 615 万円）.

3 ）三上

5 ）知花博治（代表）: 特定領域「感染マトリックス」

病原因子の網羅的研究（282 万円）

外部資金

2 ）三上

20 〜 21 年度（平成 20 年度は 580 万円）.

その他の外部資金

襄 : 病原真菌外国人講習会 .

1 ）「糖鎖認識受容体の新規用途」−理化学研究所との共1 ）三上

能学−網羅的遺伝子発現制御株の構築と応用 , 平成襄（代表）: ナショナルバイオリソースプロ

ジェクト「病原微生物」（平成 20 年度は 910 万円 ,含む間接経費 83 万円）.

4 ）知花博治（代表）, 宇野潤（分担）: 特定領域「応千葉大学4 ）知花博治（分担）: 独立行政法人新エネルギー・産業技術総合開発機構（NEDO）バイオマスエネル
ギー高効率転換技術開発（先導技術開発）平成 19
年 〜 20 年（平成 20 年度は 391万円 , 含む間接経費
51 万円）.

5 ）知花博治（分担）: 「千葉県持続可能な国際都市づくりのための新たな担い手育成支援事業」（平成 20 年
度 400 万円）.

6 ）知花博治（代表）: 沖縄県「先端バイオ研究基盤高度化事業」平成 20 〜 22 年度（平成 20 年度は 475
万円）.

7 ）知花博治（代表）: （株）Biomaterial in Tokyo 受託研
究 :（51万円 , 含む間接経費 9 万円）.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200847

分子機能研究部門 活性応答分野（ Department of Molecular Function, Division of Biological Specification）

本年度の客員教授は , 東邦大学医学部病院病理部教授

渋谷和俊博士が就任した . 渋谷教授の最近の業績は以下の通りである .

センターでの 20 年度の共同研究
Stachybotrys chartarum 吸 入 と 原

発性肺高血圧症に関する病理学的教授 : 渋谷和俊（客員）検討
従来 , 当センターと共同で環学会および社会における活動等
1 ）日本医真菌学会理事 , 評議員 , 用語委員 , 標準化委
員 , 疫学調査委員 , ウェブサイト運営委員 , 日本病

境 内 に 多 く 存 在 す る Stachybotrys

chartarum を マ ウ ス に 経 気 管 的に投与することによって肺高血

理学会学術評議員 , Pathology International 編集委員

圧症が惹起されることを明らかにし , このモデルの病大学（中国）客員教授 , （千葉大学真菌医学研究セ

trichothecene 類等の S. chartarum が産生する生物活性物

2 ）秋田大学大学院医学研究科非常勤講師 , 上海中医薬ンター客員教授）3 ）真菌症フォーラム世話人 , 関東医真菌懇話会世話人 , 肺真菌症研究会世話人

4 ）厚生労働省科学研究費補助金新興・再興感染症研究事業「深在性真菌症と輸入真菌症に関する新しい検査法と抗真菌薬の開発 , ならびに病原因子の解明に向けたポストゲノムの基盤的研究」分担研究者

5 ）厚生労働省研究費補助金難治性疾患克服研究事業「特定疾患の微生物学的原因究明に関する研究」分
担研究者

態について検討を行ってきた . 本年度の共同研究では ,質が肺循環動態撹乱に強く関与している可能性が示さ
れ , 難治疾患の一つである原発性肺高血圧症の病態解明の一助となる知見として評価されている .

研究成果の発表
原著1 ）Ochiai E, Kamei K, Watanabe A, Nagayoshi M, Tada

Y, Nagaoka T, Sato K, Sato A, Shibuya K. Inhalationof Stachybotrys chartarum causes pulmonary arterial

hypertension in mice. Int J Exp Pathol 89: 201-8,
2008.

48

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

病原真菌・放線菌管理室（微生物保存事業報告）（ Culture Collection of Pathogenic Fungi and Actinomycetes）

技術職員 : 伊藤純子

びアンプルの作製）, 既に登録されている菌株のアンプ研究支援推進員 : 大楠悦子

ルの補充や菌株情報の整備（データベースの更新）を

研究支援推進員 : 佐海知子

行っている . 本年の新規登録は真菌が 1,471 株 , 放線菌

非常勤技術職員 : 矢澤勝清が 100 株であった . またナショナルバイオリソースプロ

ジェクトの支援により研究用菌株の分譲業務も担当し ,その分譲実績は以下の表に示すとおりである .

業務概要

技術職員の矢澤勝清が平成 20 年 3 月 31 日をもって病原真菌・放線菌管理室は , 真菌 , 放線菌の保存と維持管理を主な業務とし , 新規登録株の受付（台帳およ2008 年

退職後 , 非常勤技術職員として引き続き放線菌の同定や管理業務を担当している .

分譲件数と分譲株数

件数（株数）

国内

国外

合計

菌

35（562）5（119）

40（681）

放線菌

17（165）1（

18（166）

真千葉大学

真菌医学研究センター報告1）

第 12 巻2008

49

2008 年

患者検体から分離された菌株の同定

患者検体から分離された菌株で起因菌の可能性の高いもののみを示す .
真菌

放線菌

Acremonium strictum

Actinomadura sp.（3）Arthroderma vanbreuseghemii

Brevibacteriun aureum

Arthrinium sp.

Brevibacterium linens

Aspergillus caelatus

Corynebacterium sp.

Aspergillus flavus

Gordonia hydrophobica

Aspergillus niger（2）Micrococcus luteus

Candida glabrata（2）Mycobacterium conceptiomense
Mycobacterium sp.（2）Candida guilliermondii
Candida lusitaniae

Nocardia farcinica

Nocardia araoensis（2）Candida tropicalis
Ceriporia lacerata

Nocardia araoensis

Cryptococcus curvatus

Nocardia arthritidis

Cunninghamella bertholletiae（3）Nocardia asiatica（4）Nocardia beijingensis（12）Emericella nidulans var. lata

Nocardia cyriacigeorgica（5）Exophiala dermatitidis

Nocardia elegans（5）Exophiala xenobiotica

Nocardia farcinica（19）Fonsecaea pedrosoi

Nocardia nova（4）Fusarium solani

Nocardia otitidiscaviarum（6）Malassezia slooffiae

Microsporum gallinae

Nocardia transvalensis

Nocardia wallacei（2）Phanerochaete sordida
Pichia holstii

Saccharopolyspora gloriosa

Rhizopus oryzae

Streptomyces carpaticus

Scedosporium apiospermum

Streptomyces diastatochromogenes

Schizophyllum commune

Streptomyces sp.

Tsukamurella inchonensis（2）Trichoderma sp.

Trichophyton verrucosum

合計

31 件

Tsukamurella tyrosinosolvens
（

50

千葉大学

合計

81 件

）: 同定株数（記載がない場合は 1 菌株）

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

保存菌株の原産国別分類

North America

976

Canada

113

Cuba

11

Gulf of Mexico

1

Jamaica3

1

Bahamas243

Costa Rica
Dominican Republic1

Honduras5

Mexico29

Panama

4

USA

554

Nicaragua

2

Puerto Rico

9

South America

2,204

Brazil

1,963

18

Argentina

16

Chile

Colombia

61

French Guiana

5

Peru

3

Uruguay7

Ecuador

7

Guyana3

Surinam4

Venezuela

117

Argeria

1

Congo

1

219

AfricaCentral African Republic

1

Egypt

59

Gabon

1

Ethiopia

2

Ghana

19

Ivory Coast

6

Madagascar

4

Guinea

4

Kenya

8

千葉大学

Malawi3

Mozambique4

Nigeria

12

Somalia2

Morocco2

Namibia1

Rwanda2South Africa

68

Togo

1

Zaire

10

Sudan

3

Uganda4
1

Zimbabwe

6,905

Asia

2

Bhutan3

Ceylon

1,076

China

87

India

Indonesia

32

Iraq

1

Japan

5,075

Korea

43

Malaysia

4

Nepal

8

Saudi Arabia

2

Iran

5

Israel4
1

Kazakhstan
Kuwait5

Myammar1

Pakistan

8

Sri Lanka

55

Taiwan72

1

Tadzjikistan
Thailand385

Uzbekistan

3

Turkey9Vietnam23

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200851

1,627

Rumania

Belgium

20

Slovakia

32

Bulgaria

3

Sweden

35

UK

195

USSR

5

Europe44

Austria

Bohemia1

Croatia

1

Czech Republic

331

Denmark

23

Estonia

1

Czechoslovakia

16

Eritrea1Finland241

Germany127

Hungary

46

Irish Republic

1

67

France3

GreeceIreland

2

Italy

113

Netherlands

153

1

Luxembourg
Norway16

Portugal

16

7

Poland

52

千葉大学

2

Russia

25

Spain

64

Switzerland

28

Ukraine6

Yugoslavia

1
196

Oceania

Antarctic Ocean

14

Australia

77

New Zealand

68

Philippines

2

Solomon Islands

7

Tonga

1

Antarctica

19

Bougainville island

1

Papua New Guinea

4

Samoa

1

Tahiti2
2,344

unknown

14,471total

真菌医学研究センター報告

第 12 巻

2008

Review Article

Recent Developments in Molecular Typing of Candida albicans
Feng-Yan Bai（Department of Pathogenic Fungi, Division of Ecology）

Guest Professor of the Medical Mycology Research Center, Chiba University（2008）.
Present address: Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing, China
E-mail: baify@im.ac.cn

Introduction

C. albicans have been described. The most commonly used

occurs as a commensal microorganism in the mucosa ofrecently developed molecular typing or DNA fingerprinting

Candida albicans is a dimorphic fungus which usuallyhumans. It can be found in the intestinal and urogenitaltracts and in the oral cavities of healthy individuals. The

methods will be discussed in this review, with the focus on
strategies.

species is also the most common opportunistic fungal

Biotying Based on Phenotypic Charactersas oral and vaginal candidiasis to fatal, systematic diseasereferred to as biotyping methods, were first employed forthree-quarters of all healthy women experience at least one

properties is one of the first biotyping strategies used topathogen of humans. It causes from benign infections suchin immunocompromised or critically ill patients. Nearly
episode of candida vulvovaginitis during their lifetime and1）about 5-10% endure recurrent bouts of the disease . Due tothe growing population over the last two to three decades oftransiently or permanently immunocompromised patients,
invasive infections caused by C. albicans have become anincreasingly important clinical problem. It is recognized
as the fourth leading cause of nosocomial infections

2,3）

. As

a result of the difficulties in the early accurate diagnosisof systemic candidiasis, a limited number of suitable andeffective antifungal drugs and the increasing drug resistanceof the etiologic agents, mortality rates f rom systemic
candidiasis remain high4）. Even mucosal infections caused

by C. albicans, such as vaginal candidiasis, often constitute a

The methods based on phenotypic characteristics,

strain typing of C. albicans. Serotyping based on antigenic
discriminate among C. albicans strains. This strategy was used

to type strains for a few decades and three serotyping methods
were established for C. albicans, including Hasenclever s

antisera HSN1 and HSN25,6）, the Iatron Candida Checkfactor 6 typing antiserum（IF6）7）, and agglutination withthe monoclonal antibody H98）. However, the discriminatory
power of these methods is limited. Separation of an entire

species into a few groups does not provide meaningful
resolution for the majority of epidemiological questions to beaddressed. In addition, it was found that antigen expression

could be affected by phase of growth and culture conditions,which placed in question the serotyping methodology7,9）.

Odds and Abbott in the early 1980 s developed amanagement problem because of the high rate of recurrence.

complex biotyping protocol for distinguishing among Candida

and pathogenesis of both mucosal and invasive candidiasis

physiological assays10,11）. The assays testing for growth at

Fundamental issues with regard to diagnosis, epidemiology,
remain to be elucidated.

In addition to improved therapy, the rapid and accurate

identification of the disease-causing strains is crucial for
diagnosis, clinical treatment and epidemiological studies
of candidiasis. A variety of methods for typing strains of

千葉大学

species and among strains of a species based on a set of
pH 1.4; production of secreted acid proteinase; resistanceto flucytosine, boric acid, and safranin; assimilation ofurea, sorbose, and citrate; and sensitivity to high salt wereoriginally developed for discriminating among species. Four

additional assays, including resistance to tetrazolium salts,

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200853

sodium periodate, and cetrimide and growth on MacConkey

among the gene products of different alleles for a number

among strains within a Candida species. The protocol was

C. albicans using MLEE on 29 isolates. Thirteen exhibitedagar, were then used as supplement tests for discrimination
modified by Childress et al.

12）

to make it more amenable togeneral use. This biotyping strategy was effectively used in a
13）

number of epidemiological studies . However, the system

was found to have poor interlaboratory reproducibility14）; theuse of the biotyping method in clinical research is therefore
limited.

In addition to the serotyping and biotyping methods

mentioned above, a number of other typing methods basedon phenotypic characters have been used for C. albicans

strain discrimination, namely morphotyping, sugar
assimilation typing, killer yeast typing, resistotyping, and13）of loci. For instance, Pujol et al.17） tested 21 enzymes ofvariability and were therefore used in the analysis. This study
demonstrated further that if enough markers are used, MLEE
will reveal microevolution within strains17）. The technique has
been effectively used to fingerprint C. albicans and a numberof other Candida species13,18）. Although the enzyme patterns
detected by MLEE are actually phenotypes, the protocol
outperforms several popular DNA fingerprinting methods inassessing genetic relatedness among strains.

The shortcomings of this method include: i ）it isrelatively time-consuming, because at least 10 enzymes thatprovide variability among isolates must be analyzed; ii）it

drug susceptibility typing . Although theoretically theassays the variability at protein level, so that much variation

biotyping methods have fundamental problems that limit

substitutions do not necessarily change the amino acidphenotype reflects genetic background of an organism,
their use in epidemiological investigation. First, results of thetests, even the expression of serotypes, can be easily affected
7,8）

by growth conditions . If the growth conditions and timeof cell harvesting are not precisely controlled and duplicatedamong experiments and laboratories, intralaboratory andinterlaboratory reproducibility of the results obtained frombiotyping methods will be compromised. Second, a numberof general phenotypes of C. albicans undergo spontaneous
high-f requency switching

15 , 16）, which may result inphenotypic differences for the same strain grown under thesame conditions.

at the nucleotide level may go undetected because nucleotide

composition; and iii）changes in amino acid composition
do not necessarily change the electrophoretic mobility of theprotein and, as a consequence, alleles that are considered tobe the same protein alleles from different individuals may
represent different gene alleles.

Electrophoretic Karyotyping

The numbers of chromosomes in the cell as well as

deviations from the basic number provide useful information
for genetics and systematics of organisms. The use of theinformation in fungi was hampered because of the difficultyin counting the chromosomal number in fungal cells by using

Multilocus Enzyme Electrophoresis

Multilocus enz y me electrophoresis （ MLEE ）cytological methods as usually used in higher plants andanimals. The invention of pulsed-field gel electrophoresis

assesses isozyme or allozyme polymorphism by starch gel（ PFGE ）and other similar systems in the middle ofisoelectric focusing under native conditions. The enzymes are

sized DNA fragments of the yeast genome can be readilyelectrophoresis, polyacrylamide gel electrophoresis, orvisualized in the gels by specific enzyme staining procedures.
This method directly reflects allelic differences at defined loci.
Any enzyme（protein）that can be selectively stained can be
the target of analysis. If the protein bands are variable, they

are considered to be alleles on the basis of mobility. Bothalleles in a diploid can be observed; thus, the method canassess codominant markers in diploids for each locus. If
enzymes are carefully selected, MLEE can discriminate

54

千葉大学

1980 s partially resolved the problem 19）. Chromosome-separated according to size in a gel with the PFGE
apparatus such as contour-clamped homogeneous electricfield gel electrophoresis（CHEF）and can be visualized byethidium bromide staining. The chromosomal numbers andgenome sizes of many fungi have been estimated by using
this method 20）. A striking discovery is that most fungal
species have rather variable karyotypes among strains. The

polymorphism has been observed in both asexual and sexual

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

fungi and most likely results from both mitotic and meiotic

mitochondrial DNA（mDNA）or nulear rDNA, or, morelength polymorphism（ CLP ）has been employed fornuclear DNA is subjected to gel electrophoresis after being

processes. The phenomenon which is called chromosome
fingerprinting of yeast strains.

Electrophoretic karyotyping has been used extensively

for C. albicans strain typing

13）. Sangeorzan et al.

21）

demonstrated that patterns generated by electrophoretic

karyotyping were highly reproducible among experiments,
relatively insensitive to preparation methods within the samelaboratory, and unaffected by high-frequency phenotypic

switching. Electrophoretic karyotyping has been shown tobe the most powerful method for Saccharomyces cerevisiae

strain typing 22）, however, its discriminatory ability forfrequently, through two indirect approaches. First, the total
digested with a particular restriction enzyme, transferred toa membrane by southern blotting and then hybridized witha radioisotope-labeled particular DNA probe; the banding
pattern is finally visualized by radiography. The second

approach called PCR-RFLP is simpler: a specific gene or
DNA fragment is amplified by PCR and then digested
with particular restriction enzymes; the fragments are thenseparated by gel electrophoresis and visualized by ethidium
bromide staining.

RFLP analysis has been extensively applied to

C. albicans strains is limited because of the relatively lower

fingerprint strains and to assess population structure, mode

chromosomes of the species. The protocol can not distinguish

related species13,18,25）. A variety of probes have been developed

chromosomal number and larger molecular sizes of individual

chromosomal DNA molecules with slight differences in sizes.
The discriminatory power of electrophoretic karyotyping asa fingerprinting method can be increased dramatically bydigesting chromosome-length DNA with endonucleases priorto PFGE23,24）. By increasing the complexity of the patternin this way, electrophoretic karyotyping could serve as aneffective fingerprinting system.

Restriction Fragment Length Polymorphism
Analysis

Restriction fragment length polymorphism（RFLP）

is one of the first molecular methods used to assess genetic

diversity or relatedness of strains within a pathogenic fungal
species. RFLP analysis shows the DNA sequence variation

by electrophoretic banding patterns of DNA samples which
are digested by one or more restriction enzymes. Restriction
enzymes recognize very specific sequences of nucleotides inDNA. DNAs from different individuals rarely have exactly

the same array of restriction sites and distances between thesesites. By cutting a DNA sample with a particular restriction

enzyme, DNA fragments of different length are obtained.
These f ragments are separated by gel electrophoresis,
resulting in a pattern of bands that is unique for the particular
DNA being analyzed. Any region of DNA（ locus ）canbe used for RFLP analysis. Restriction patterns can beof reproduction, and microevolution of C. albicans andincluding single-gene probes, rDNA probes, mDNA
probes, and repetitive and complex DNA probes26）. DNA

fingerprinting with the complex probe Ca3 has revealed five C.

albicans clades with geographical specificity: clades I, II, III,SA and E. Clade SA is relatively specific to or highly enrichedin South Africa; clade E is relatively specific to Europe;and clade II is absent in the Southwest USA and SouthAmerica. The results of these studies also have identified
clade-specific drug resistance. The majority of isolates withinclade I are moderately or highly resistant to 5-fluorocytosine,
while the great majority of isolates within the four otherclades（II, III, SA, E）are not26）. These results showed thepromising of RFLP analysis with complex DNA probes inassessing the population structure of C. albicans worldwide.
However, the use of this method is limited by the complexityof analysis procedure, the need of radioisotopes and the

difficulty in inter-laboratory comparison. RFLP analysis
without hybridization probes, especially PCR-RFLP isstraightforward and easy to use without the requirement ofspecial equipment. However, the discriminative power of theanalysis is usually limited and sequence differences occurred

outside the restriction sites can not be detected, consequently,
fragments with identical sizes do not necessarily have identicalsequences.

generated directly if the target exists in multiple copies, e.g.

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

55

Randomly Amplified Polymorphic DNA

sequence polymorphisms of internal fragments from multiple

or arbitrarily primed PCR（ AP-PCR ）analysis assays

bacteria）allows high levels of discrimination between isolates.

Randomly amplified polymorphic DNA（ RAPD ）DNA sequence variation in PCR priming regions. RAPD
analysis uses one short PCR primer（ca. 10 bp）and a low
annealing temperature to generate several f ragments in

one amplification. Nucleotide substitutions in the PCR
priming regions, particularly the 3' ends, can prevent primer
annealing and PCR amplification, resulting in the differencesin PCR products. Amplicons are separated on an agarose gelhousekeeping genes（usually six to eleven are required for
A major advantage of MLST over other typing methods isthat sequence data can be easily shared among laboratories
in different countries and continents, thus permitting theestablishment of one expanding online global database foreach species concerned, and enabling exchange of moleculartyping data via the Internet for global epidemiology30）.

Although not formally called MLST, the method has

and stained with ethidium bromide. RAPD is technically

been used by mycologists to study basic evolutionary featuresby increasing the number of oligonucleotide primers that

usefulness of MLST for characterization of clinical isolates

simple but its resolving power can be dramatically increased
provide variability among independent isolates. It often

detects variation among isolates that are invariant with RFLP
analysis, and thus has evolved as the most popular method

for DNA fingerprinting the infectious fungi, including C.
13,18,25）

albicans and other Candida species. However, a numberof shortcomings of RAPD analysis must be considered.

The main drawback of RAPD analysis is poor

reproducibility. The problem may occur not only amonglaboratories but also within a laboratory over time. Almost
every technical aspect of PCR can affect reproducibility of

RAPD analysis. Another problem is that bands of equal

electrophoretic mobility may not be homologous. Rieseberg27）
demonstrated that a disturbingly large fraction（13%）of

RAPD bands with equal mobility from hybrid plants were nothomologous. Sequencing of the RAPD bands has been used
to confirm their identity28,29）.

of pathogenic fungi31-34）. Bougnoux et al.35） examined theof C. albicans. They sequenced the internal regions（loci）of
six selected housekeeping genes of C. albicans and observed

a wide variety of genotypes among the isolates studied. The

high frequency of heterozygosity increased sequence diversity
at each locus, thus allowed the identification of a greaternumber of genotypes or diploid sequence types（DSTs）. The

results showed that MLST is a highly discriminatory andreproducible method for unambiguous characterization of
C. albicans. The method was then validated and optimized
for C. albicans36,37）, as a consequence, a set comprising thefragments of seven housekeeping genes CaAAT1a, CaACC1,
CaADP1, CaMPIb, CaSYA1, CaVPS13, and CaZWF1b

is recommended for MLST with C. albicans（Table 1）. A
central internet database（http://calbicans.mlst.net）has been

set up for deposition and analysis of C. albicans MLST datafrom any global source.

Robles et al.38） assessed the value of MLST relative toMultilocus Sequence Typing

those of other DNA fingerprinting tools including RAPD,

developed for clone identification or strain typing offor discriminating among strains of C. albicans. The results

Multilocus sequence typing（ MLST ）was initially30）

pathogenic bacteria . The method analyses nucleotide

MLEE and RFLP with Ca3 probe hybridization techniquesdemonstrated that the discriminatory power of MLST

polymorphisms of the sequences of approximately 500 bp（99.6%）was higher than those of the other three methods

locus, the different sequences present within a species arefrom the digestive tract of individuals within different families

internal fragments（loci）of housekeeping genes. For eachassigned as distinct alleles. The alleles at each of the sequenced

loci define an allelic profile or sequence type of an isolate.
Each isolate of a species can therefore be unambiguously
characterized by a series of alleles at the housekeeping locistudied. The direct assignment of alleles based on nucleotide

56

千葉大学

compared. MLST analysis of C. albicans isolates recovered
revealed intrafamilial transmission and microevolutions of

the species. The data showed frequent colonization of a

subject or several members of the same family by geneticallyindistinguishable or genetically close isolates. The geneticallyclose isolates differed by loss-of-heterozygosity events at one

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第 12 巻2008

Table 1. A set of gene fragments recommended as an international standard for multilocus sequence typing of C. albicans
Locus

Gene product

Chromosome

AAT1a

Asparate aminotransferase

2

ACC1

Acetyl-coenzyme A carboxylase

3

ADP1

ATP-dependent permease

1

MPIb

Mannose phosphate isomerase

2

SYA1

Alanyl-RNA synthetase

6

VPS13

Vacuolar protein sorting protein

4

ZWF1b

Glucose-6-phosphate dehydrogenase

1

Primer sequence（5 → 3 ）
Fwd
Rev
Fwd
Rev
Fwd
Rev
Fwd
Rev
Fwd
Rev
Fwd
Rev
Fwd
Rev

ACTCAAGCTAGATTTTTGGC
CAGCAACATGATTAGCCCGCAAGAGAAATTTTAATTCAATG
TTCATCAACATCATCCAAGTG
GAGCCAAGTATGAATGATTTG
TTGATCAACAAACCCGATAATACCAGAAATGGCCATTGC
GCAGCCATGCATTCAATTATAGAAGAATTGTTGCTGTTACTGGTTACCTTTACCACCAGCTTT
TCGTTGAGAGATAATCGACTTACGGATGGATCTCCAGTCCGTTTCATTTGATCCTGAAGCGCCATTGATAAGTACCTGGAT

Ampliconsizes（bp）
478
519
537
486
543
741
702

or several of the MLST loci, suggesting the high frequency

microsatellites have been increasingly used as molecular

39 , 40）organisms. The technique exploits the hypervariability ofof microevolutions of commensal diploid C. albicans throughthe loss of heterozygosity. MLST on a panel of 416

isolates of C. albicans from separate sources recognized apopulation structure comprising four major clades and eightminor clades41）. The relationship between clades of isolates
and their properties of clinical relevance was showed fromthe data obtained. Different clades of C. albicans may differ
significantly in the proportions of isolates from blood, theoropharynx, the vagina, and other sites. When a larger
panel of C. albicans isolates（1 , 391）were subjected for

42）

MLST, the number of clades recognized increased to 17 .
ABC types（based on the presence or absence of an intron

in rDNA43））and geographical origins showed statisticallysignificant variations among clades, but anatomical source

and antifungal susceptibility data were not significantly
associated. Computational haplotype analysis of the genefragments sequenced for MLST showed a high frequency ofrecombination events, which suggests that C. albicans isolates
had mixed evolutionary histories resembling those of a sexually42）

reproducing species . In addition to nucleic housekeeping
genes, mitochondrial genes have been demonstrated to bepromising targets for genotyping and population genetics of C.
44）

albicans .

markers for population genetics and genotyping of different
DNA regions made of 10 to 20 or more tandem repeatsof nucleotide couplets, triplets, or quadruplets. Several
polymorphic microsatellite loci have been identified in
the genome of C. albicans and used in strain typing of

the species（Table 2）45-49）. The microsatellite loci EF345）,
CDC3, and HIS346） locate near coding regions, while theloci ERK1, 2NF1, CCN2, CPH2, and EFG147） locate
inside coding regions. More recently, several microsatellite
loci called CAI, CAIII, CAV, CAVI, and CAVII locatedin noncoding regions have been employed for strain typingof C. albicans48,49）. The polymorphisms of microsatellite lociare usually detected using GeneScan or alike analysis with anautomatic DNA sequencer and quantitatively designated byeither the total lengths of the alleles45,46） or the total numberof repeat units in the alleles48,49）. The quantitative designation

has the same advantages as MLST in inter-laboratory data
sharing and comparisons and database construction.

The discriminatory power for C. albicans strain typing

with the microsatellites located near or inside coding regions

was between 0.77（for CDC3）and 0.91（for HIS3）. A
higher value（0.97）was obtained when combining three loci

（CDC3, EF3, and HIS3）in a single multiplex amplification

Microsatellite Analysis

In recent years, short tandem repeats（ STRs ）or

千葉大学

reaction46）. Among the microsatellites used for C. albicans
strain typing so far, the locus CAI located in a noncoding

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第 12 巻200857

Table 2. Microsatellites in the genome of C. albicans that have been characterized for strain typing of the species
Locus
CDC3

Chromosome
1（AGTA）nRepetitive motif

EF3

5（TTTC）n（TTC）n

HIS3

2

（ATTT）nERK1-（CAGGCT）n（CAAGCT）n（CAA）nCAI

4（GCCGCA）n（CTT）n（CAA）2CTG（CAA）nCAIII

5（GAA）nCAIV-（ATT）nCAV

3（ATT）nCAVI2（TAAA）nCAVII

1（CAAAT）n

Primer sequence（5 → 3 ）Fwd
CAGATGATTTTTTGTATGAGAAGAARevCAGTCACAAGATTAAAATGTTCAAG
Fwd
TTTCCTCTTCCTTTCATATAGAARev
GGATTCACTAGCAGCAGACA
Fwd
TGGCAAAAATGATATTCCAA
Rev
TACACTATGCCCCAAACACA
Fwd
CGACCACGTCATCAATAGAAATCG
Rev
CGTTGAATGAAACTTGACGAGGGG
Fwd
ATGCCATTGAGTGGAATTGG
Rev
AGTGGCTTGTGTTGGGTTTTFwd
TTGGAATCACTTCACCAGGARevTTTCCGTGGCATCAGTATCA
Fwd
TGCCAAATCTTGAGATACAAGTG
Rev
CTTGCTTCTCTTGCTTTAAATTG
Fwd
TGCCAAATCTTGAGATACAAGTG
Rev
CTTGCTTCTCTTGCTTTAAATTG
Fwd
ACAATTAAAGAAATGGATTTTAGTCAG
Rev
TGCTGGTGCTGCTGGTATTA
Fwd
GGGGATAGAAATGGCATCAARevTGTGAAACAATTCTCTCCTTGC

region appeared to be the most polymorphic one, exhibiting

GeneSan analysis in the detection of point mutations in theanalysis has revealed three different levels of polymorphism

analysis can reveal the three different levels of polymorphism

a discriminator y power of 0 . 97 alone 48 , 49）. Sequencein microsatellites, （i）the total lengths or the number of

repeats, （ii）the structure of the repeated region, and（iii）
point mutations outside the repeated region48）. In addition

to the high cost, sequencing of microsatellites of C. albicans
is a complicated procedure, because C. albicans is a diploidorganism and the microsatellite loci are mostly heterozygous,
thus can not be sequenced directly. GeneScan techniquewhich accurately determines DNA fragment sizes is therefore

commonly used in microsatellite analysis of C. albicans.
The method can only detect the first level of microsatellite
polymorphism, but the second and third levels of variation
may contribute to further differentiation of C. albicans strains.
Li and Bai

50）

investigated an alternative approach toreveal the polymorphisms of microsatellites by utilizing thetechnique of single-strand conformation polymorphism（ SSCP ）, a technique initially developed for point

mutation detection in human DNA

51,52）. Strain typing ofa panel of 76 independent clinical isolates by PCR-SSCP

analysis of CAI achieved a discriminatory power of 0.9950）.
Sequence comparison showed the advantage of SSCP over

58

千葉大学

microsatellite50）. The study demonstrated that PCR-SSCP
in microsatellites simultaneously, thus being a powerful andeconomical approach for rapid strain typing of C. albicans.
Genotyping of C. albicans strains associated with different
conditions of vulvovaginal candidosis（VVC）using PCR-

SSCP analysis of CAI revealed for the first time that most C.
albicans strains causing VVC possessed specific genotypes andthat the genotype distribution of C. albicans strains correlatedwith the severity of VVC53）. The result provides a new clue
and approach to elucidating the infection source of VVC.

The genotype distributions of C. albicans strains

associated with VVC of women and balanoposthitis of men
and strains from various extragenital sites were investigatedfurther by using GeneScan analysis of CAI54）. The result
showed that the CAI genotypes of independent C. albicans
strains isolated f rom extragenital sites were mostly of

individual specificity. In contrast, strains associated with
VVC were mainly concentrated to a few genotypes, with CAI
genotypes 30−45 and 32−46 being the most common. The

distribution frequencies of C. albicans strains with the twodominant genotypes were significantly correlated with the

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

severity of VVC. A similar genotype distribution pattern of

isolates f rom nonhospitaliz ed normal c arr iers,

revealed. The genetic similarity of strains with the dominant

immunocompromised patients with or without acquired

C. albicans strains associated with balanoposthitis was also
genotypes associated with both VVC and balanoposthitis was
confirmed by sequence analysis of three housekeeping genes
54）

CaADP1, CaSYA1 and CaVPS13 . The results suggest i）theexistence of vaginopathic C. albicans strains with enhanced

virulence and tropism for the vagina; ii）the high possibility

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第 12 巻2008

61

Review Article

遺伝子解析を用いた真菌症の病理診断法
渋

谷

和

俊

（千葉大学真菌医学研究センター活性応答分野客員教授・
東邦大学医学部病院病理学講座）

1 ．はじめに
高度医療の発展に伴い , 深在性（内臓）真菌症の発生

頻度は経年的に増加傾向にある . 日常の病理診断においては真菌要素の検出による確定診断は言うまでもなく ,適切な真菌化学療法を施行する観点から , 菌種の推定を行うことが望ましい . しかし , 病理組織内では治療や宿特異性に関する検討を行った結果 , アスペルギルス症の原因となる主たる Aspergillus 属の菌を検出することが可能であった . Afut-1 遺伝子領域を標的とした場合においては A. fumigatus を特異的に検出できることを確認して
おり , 同じアスペルギルス属でありながら , ポリエンマ
クロライド系抗真菌剤に抵抗性を示すことで知られてい主の反応等により , 感染した真菌が必ずしも典型的な菌る A. terreus を否定できる点で有用性が高い .

くない . そのため病理診断に応用可能な迅速で精度の高報が豊富で , 属あるいは菌種内での保存性が高い rRNA

近年 , Polymelase Chain Reaction（PCR）法を基幹としが期待できる . プローブの標識は , 通常の核酸の 5 末端形態を示すとは限らず , 菌種の推定は困難な場合が少ない診断技術の開発が望まれている .

た核酸増幅法による分子生物学的解析法を深在性真菌症の診断に応用する試みが盛んに行われている . 病理・細胞診断領域においては真菌遺伝子の検出を目的とした

In situ hybridization（ISH）法も確立されつつあり , 今後 ,真菌症診断のための有力な補助診断法となる可能性がある.

本稿では我々がこれまで取り組んできた病理診断材料を用いた in situ hybridization（ISH）法および PCR 法に焦点を当て言及する .

PNA プローブを使用する場合は , 菌種ごとの配列情を標的としている . rRNA はコピー数が多く感度の上昇に相当する N 末端に二つのリンカーを介して合成時にFITC を標識しており , 15 〜 18 mer の長さで設計している . 我々はこれまで , Candida（C.）albicans 26S rRNA 3 ）および Fusarium（F.）属 28S rRNA（未発表データ）を標的とした PNA プローブを使用した ISH 法を行ってきた .
これらのプローブで C. albicans と F. solani をそれぞれ特異的に検出できることをマウス感染モデルにおいて確認した .

PNA プローブは , N- グリシンを骨格としてそれらが酸アミド結合（ペプチド結合）でオリゴマーを形成し2 ．In situ hybridization 法

ISH 法のプローブとして , 我々は PCR プローブおよび Peptide Nucleic Acid（PNA）プローブを使用している .
真菌の病原因子をコードする病原遺伝子は菌種を特徴づけるマーカー遺伝子として使用可能な事は知られており , PCR プローブを利用してそれらを標的としている .

ている通常の核酸のアナログで , 強い結合力が特徴である . 既にこれまでの検討で , PNA プローブが特異性と迅速性に優れていることが立証されており , 今後新たな菌種特異的プローブの開発と信頼性の立証を企図している.

通常病理診断で利用されるホルマリン固定パラフィン

このプローブは PCR 反応により fluorescein isothiocyanate

材料に ISH 法を応用する際には , 標本の前処理が必須の方法を使用して , これまで Aspergillus（A） fumigatus の形成される架橋反応により埋没した標的核酸を露出させ（FITC）標識塩基を取り込む事で標識を施している . こ
1）である . これはホルマリンによる周囲の蛋白質との間でalkaline proteinase（ALP : 583bp） および retrotransposon

る操作である . 我々は 1 mM EDTA（pH8.0）溶液によ2）を施すことにより , 良好な結果を得ている . A. fumigatus

Afut-1 の long terminal repeat（LTR）遺伝子領域（245bp）を標的として ISH 法を行っている . マウス感染モデルを用いた ALP 遺伝子領域を標的とした ISH 法において

62

千葉大学

る加熱処理と Proteinase K（10 μg/ml）による二重処理
感染マウスにおける Afut-1 ISH 法において , 種々の溶液

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

を用いた加熱処理の効果を検討したところ , 高い pH 値

ゾーム関連遺伝子群を対象としているものが散見され色細胞診標本に応用する際は EDTA 溶液による軽い処を用いた報告が多い . 我々は Aspergillus 属 , Fusarium 属 ,の溶液による加熱処理が有効であった . Papanicolaou 染

る 4 , 5 ）. 感度と特異性を高める観点から nested PCR 法

理が有効である . 過剰な処理は細胞の剥離が顕著であっ

Pseudallescheria 属 , 接合菌 , A. fumigautus など属および種

た.

病理標本中において , 標的としている真菌の rRNAの保存度を評価することは必須の操作である . 我々は
28S rRNA を標的とした際 , 多くの真菌を検出し得る

Panfungal PNA プローブを設計して利用している . このプローブは我々が使用している他の菌種特異的 PNA プ

特異的プライマーを準備しておくことで , 形態診断に基づいた PCR 法を行っている . F. solani 感染マウスのホルマリン固定パラフィン切片において , ALP プローブによる ISH 法と Fusarium 属の 5.8S rRNA, ITS2, 28S rRNA
遺伝子領域に対する PCR 法 4 ）を施行した例を示す（図2 ）. ALP プローブによる ISH 法は陰性であるが , PCR

ローブと同様の条件で設計しているので , ハイブリダイ

法にて Fusarium 属に特異的な 329 bp の明瞭なバンドが利用する事ができる（図 1 ）.

た PNA プローブによる ISH 法と PCR 直接塩基配列決

ゼーション可能な rRNA の保存度の評価と条件設定に検出された . さらに , Fusarium 属 28S rRNA を標的とし定法により同領域の塩基配列を検証した（図 3 ）.

この他 , ITS 領域を対象とした直接塩基配列決定法 6 ）や標的遺伝子を簡便に定量的増幅が可能であるリアル
タイム PCR 法を病理診断材料に応用した報告も少数なが ら み ら れ る 7 ）. Loop-mediated isothermal amplification（LAMP）法は熱変性を必要とせず , 一定温度で核酸を増幅する . 真菌症の診断にも応用されている安価で迅速な核酸増幅法であり 8 ）, 病理・細胞診断材料にも応用が期待される .

図1

28S rRNA を標的とした Panfungal PNA プローブによる RNA の保存度の検討 . A. terreus（下段左）はPanfungal ISH 法の染色強度から , 十分に RNA は保存されている事が想定される . 一方 , Fusarium spp.
28S rRNA を標的とした PNA プローブによる ISH
法では陰性である . F. solani ではともに陽性である .

3 ．PCR 法

PCR 法に供するための真菌 DNA 抽出法において , 真菌は強固な細胞壁を有するため , Proteinase K による組織の溶解処理のみでは十分な収量が得られない場合がある . 我々は溶菌酵素 Lyticase を用いることで良好な結果

図2を得ている . A. fumigatus の分離培養菌から作製したホルマリン固定パラフィン切片を用いて Lyticase の至適濃度を検討した結果 , 50 〜 100 U/100μl で効果が得られた . 他にサンプルの加熱処理も効果的で収量の増加が期待できる . 我々は状況により両者を使い分けている .

F. solani 感染マウスにおける検出例 . 肺組織のホルマリン固定パラフィン切片を用いた ALP 遺伝子を標的とした ISH 法（下段左）と特異的プライマーを用いた PCR 法 . （下段右）Fusarium 属 5.8S rRNA,ITS 2, 28S rRNA 遺 伝 子 領 域 に 対 す る PCR 法 で明瞭な 329 bp のバンドが観察された（Lane 4）. A.
fumigatus ALP 遺伝子を標的とした ISH 法では陰性であった．

通 常 の PCR 法 を 病 理 診 断 材 料 に 応 用 し た 報 告 は

rDNA や Internal Transcribed Spacer（ITS）領域などリボ

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻

2008

63

図3

Fusarium 属 28S rRNA を標的とした PNA プローブ
による ISH 法（上段右）と PNA プローブをリバースプライマーとした際の PCR 所見（上段左）, PCR

図5

直接塩基配列決定法により同領域の塩基配列を検証した（図下段）.

4 ．病理診断材料を使用した ISH 法と PCR 法の実際
日常の病理診断材料に応用した例を以下に示す . A.

fumigatus による侵襲性肺アスペルギルス症により死亡した慢性骨髄性白血病患者の剖検症例における肺組織のホルマリン固定パラフィン切片に対して , ALP 遺伝子を標的とした ISH 法と種々のプライマーを用いた PCR 法を施した . Aspergillus 属を検出可能な ALP ISH 法において菌体に明瞭なシグナルが観察された . また , Aspergillus 属

接合菌症患者の剖検症例における検出例 . 脳組織のホルマリン固定パラフィン切片を用いた ALP プ
ローブによる ISH 法（下段左）と特異的プライマーを用いた PCR 法（下段右）. 接合菌の 18S rRNA 遺伝子に対する nested PCR 法（Lane 5）で特異的なバンドが得られた . A. fumigatus ALP 遺伝子を標的とした ISH 法では陰性であった．

電気泳動図
M: サイズマーカー ; Lane1: Aspergillus 属 18S rRNA 遺伝
子 ; Lane 2: A. fumigatus ALP 遺伝子 ; Lane 3: A. fumigatus
Afut-1 遺伝子 ; Lane 4: Fusarium 属 5.8S rRNA, ITS 2, 28SrRNA 遺伝子 ; Lane 5: 接合菌 18S rRNA 遺伝子 ; Lane 6:
Pseudallescheria 属 5.8S rRNA, ITS2 遺伝子 .

の 18S rRNA に対する nested PCR 法 9 ）で 236 bp の特異的なバンドが検出された（図 4 ）.

全身性の接合菌症により死亡した悪性リンパ腫患者の剖検症例における検出例を示す . 脳組織のホルマリ
ン固定パラフィン切片に対して , ALP プローブによるISH 法と特異的プライマーを用いた PCR 法を施行した .
ALP ISH 法は陰性であったが , 接合菌の 18S rRNA 遺伝子を標的とした nested PCR 法 5 ）で 175 bp の特異的なバンドが得られた（図 5 ）.

長期に亘るホルマリン固定や極端に死後時間が長い剖

検例等の組織では , DNA の断片化が亢進し , 遺伝子の増幅が不可能になる恐れがあるので , 陽性および陰性対象実験による検体の質的評価は , 診断への応用には必須の過程であろう . 我々はヒトβ -globin 遺伝子および真図464

慢性骨髄性白血病患者の剖検症例における検出例 .
肺組織のホルマリン固定パラフィン切片を用いた
ALP プローブによる ISH 法（下段左）と特異的プライマーを用いた PCR 法（下段右）. Aspergillus 属の 18S rRNA 遺 伝 子 を 標 的 と し た nested PCR 法（Lane 1）で特異的な 236 bp のバンドが得られた . A.
fumigatus ALP 遺伝子を標的とした ISH 法では陰性であった .

千葉大学

菌の 28S rRNA 遺伝子を標的とした PCR 法を同時に施行して検体の評価を行っている . また , Aspergillus 属菌をはじめ多くの糸状菌は環境中に広く汚染菌として生息しており , いうまでもなく非無菌的に処理されている病
理・細胞診断材料を用いた PCR 法で陽性の結果が得られたとしても , その評価は慎重に行う必要がある . この

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

ようなことから病理診断材料を用いた PCR 法においてG D, H a l l G S, A l e x a n d e r B D, Pr o c o p G W:

病理診断学的立場から , PCR 法が有するコンタミネー

nucleic acid fluorescent in situ hybridization probe forは形態学的診断と関連づけて判断すべきである . 我々は10）

ションや真菌の DNA 抽出の困難さ と言った欠点をISH 法が補うことが出来ると考え , 両者を併用している.

Multicenter evaluation of a Candida albicans peptide

characterization of yeast isolates from blood cultures. J
Clin Microbiol 43: 2909-2912, 2005.

4 ）Hue FX, Huerre M, Rouffault MA, de Bievre C:

Specific detection of fusarium species in blood and5 ．おわりに
抗真菌薬の感受性は概ね原因真菌の分子系統学的分類

tissues by a PCR technique. J Clin Microbiol 37（8）:2434-2438, 1999.

に基づく分類群に一致しており , 適切な真菌化学療法を5 ）Bialek R, Konrad F, Kern J, Aepinus C, Cecenas L,

定は重要である . しかし , 分子生物学的解析法を病理・E, Lass-Flörl C, Rickerts V: PCR based identification

施す観点から病理・細胞診断標本上においても菌種の同細胞診断材料に応用した報告は少なく , 今後 , 使用するプローブやプライマーの選定をはじめ , ホルマリン固定
パラフィン材料や Papanicolaou 染色細胞診断材料を利用する際の手技の標準化が望まれる .

また , 本法を病理・細胞診標本上において Aspergillus

属菌と形態学的に鑑別が難しい非 Aspergillus 性糸状菌である P. boydii（Scedosporium apiospermum）また , 事実上補Gonzalez GM, Just-Nübling G, Willinger B, Presterl
and discrimination of agents of mucormycosis andaspergillosis in paraffin wax embedded tissue. J Clin
Pathol 58（11）: 1180-1184, 2005.

6 ）Lau A, Chen S, Sorrell T, et al.: Development andclinical application of a panfungal PCR assay to detectand identify fungal DNA in tissue specimens. J Clin
Microbiol 45: 380-385, 2007.

助診断法が存在しない接合菌症などに展開することが ,7 ）Rantakokko-Jalava K, Laaksonen S, Issakainen J,

本稿で紹介した知見の一部は , 厚生労働省科学研究補

J: Semiquantitative detection by real-time PCR of

今後の重要な課題と考えている .

助金「新興・再興感染症研究事業

輸入真菌症等真菌症の診断・治療法の開発と発生動向調査に関する研究」な
らびに「難治性疾患克服事業

特定疾患の微生物学的原因究明に関する研究」（いずれも平成 17 年度 , 18 年度
および 19 年度）の補助により遂行された研究によることを記す .
文

Vauras J, Nikoskelainen J, Viljanen MK, Salonen

Aspergillus fumigatus in bronchoalveolar lavage fluids
and tissue biopsy specimens from patients with invasive

aspergillosis. J Clin Microbiol 41（9）: 4304 - 4311 ,2003.

8 ）Uemura N, Makimura K, Onozaki M, Otsuka Y,

Shibuya Y, Yazaki H, Kikuchi Y, Abe S, Kudoh
S: Development of a loop-mediated isothermal

献1 ）Hanazawa R, Murayama SY, Yamaguchi H: In-situ

amplification method for diagnosing Pneumocystis
pneumonia. J Med Microbiol 57: 50-57, 2008.

detection of Aspergillus fumigatus. J Med Microbiol 49:

9 ）Skladny H, Buchheidt D, Baust C, Krieg-Schneider2 ）Neuveglise C, Sarfati J, Latge JP, Paris S: Afut1, aSpecific detection of Aspergillus species in blood and285-290, 2000.

retrotransposon-like element from Aspergillus fumigatus.
Nucleic Acids Res 24: 1428-1434, 1996.

3 ）Wilson DA, Joyce MJ, Hall LS, Reller LB, Roberts

千葉大学

F, Seifarth W, L eib-Mösch C, Hehlmann R:
bronchoalveolar lavage samples of immunocompromised

patients by two-step PCR. J Clin Microbiol 37（12）:3865-3871, 1999.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200865

平成 20 年度共同利用研究・共同利用研究会一覧
研究課題

共同利用研究Aspergillus section Nigri の分子分類などによる類別とオク
ラトキシン産生

共同利用研究 A
研究課題

’
08-06

髙橋治男（千葉県衛生研究所）

’
08-01

陰地義樹（奈良県保健環境研究センター）

環境内真菌の吸入と非感染性ヒト疾患との関連に関する

大橋正孝（奈良県生活環境部）

研究田端節子（東京都健康安全研究センター）

渋谷和俊（東邦大学医学部）

久米田裕子（大阪府立公衆衛生研究所）

亀井克彦（千葉大学真菌医学研究センター）

川上裕司（（株）エフシージー総合研究所）
横山耕治（千葉大学真菌医学研究センター）

研究課題

’
08-02

Aspergillus 及び関連菌の分子系統解析と形態学的研究と研究課題

堀江義一（千葉県立中央博物館）

機構解析

の比較研究

矢口貴志（千葉大学真菌医学研究センター）

野村文夫（千葉大学大学院医学研究院）
川本

研究課題

’
08-07

Cryptococcus neoformanas 薬剤耐性のスクリーニングと分子

’
08-03

進 , 大楠美佐子（千葉大学真菌医学研究センター）

病原酵母の株識別法の検討

研究課題

神戸俊夫（名古屋大学大学院医学系研究科）

海洋生物を素材とした抗真菌物質の探索

田中玲子 , 知花博治（千葉大学真菌医学研究センター）

小林淳一（北海道大学大学院薬学研究院）

研究課題

三上

襄（千葉大学真菌医学研究センター）

’
08-04

Candida albicans 脂肪酸不飽和化酵素遺伝子破壊株のアレ研究課題

村山琮明（北里大学北里生命科学研究所）

望月

イ解析

横山耕治 , 知花博治（千葉大学真菌医学研究センター）
研究課題

’
08-08

’
08-09

Trichophyton tonsurans の分子疫学的研究
隆 , 河崎昌子 , 藤田純（金沢医科大学）

亀井克彦 , 高橋容子 , 佐野文子（千葉大学真菌医学研究セ
ンター）

’
08-05

病原真菌 Candida. tropicalis の二形性変換のゲノム・ネッ

研究課題

トワーク

真菌から得られる新規生理活性化合物の探索

鈴木孝仁 , 岩口伸一（奈良女子大学理学部）

河合賢一 , 細江智夫 , 板橋武史（星薬科大学）

横山耕治（千葉大学真菌医学研究センター）

’
08-10

野沢幸平（奥羽大学薬学部）

矢口貴志（千葉大学真菌医学研究センター）

66

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻

2008

研究課題

’
08-11

研究課題

’
08-18

DNA マイクロアレイ技術を用いた病原真菌検出技術の臨床材料より分離した放線菌の二次代謝産物に関する研岡原田健一（名城大学薬学部）

確立

千寿（千葉県産業支援技術研究所）

五ノ井透（千葉大学真菌医学研究センター）

研究課題

究
石川

勉（千葉大学大学院薬学研究院）

三上襄（千葉大学真菌医学研究センター）

’
08-12

真菌症原因菌に対するカテキン誘導体の影響評価

研究課題

玄

千葉大学附属病院における深在性真菌症症例の動向

丞烋（京都大学再生医科学研究所）

高鳥浩介（東京農業大学）
朴

猪狩英俊 , 渡邉

奉柱（国立医薬品食品衛生研究所）

’
08-13

カイコ幼虫の感染モデルを用いた Cryptococcus neoformansの病原性遺伝子の同定
関水和久 , 垣内
川本

力（東京大学大学院薬学系研究科）

進 , 清水公徳（千葉大学真菌医学研究センター）

研究課題

哲 , 渡辺正治（千葉大学医学部附属病院）

亀井克彦（千葉大学真菌医学研究センター）

田口英昭 , 亀井克彦（千葉大学真菌医学研究センター）
研究課題

’
08-19

’
08-14

研究課題

’
08-20

宿主による Aspergillus fumigatus 認識機構の解明
安達禎之（東京薬科大学薬学部）

亀井克彦 , 豊留孝仁（千葉大学真菌医学研究センター）
研究課題

’
08-21

真菌の産生するマイコトキシンの分析に関する研究
小西良子（国立医薬品食品衛生研究所）

病原真菌 Cryptococcus neoformans サイクリン依存性キナー

亀井克彦（千葉大学真菌医学研究センター）

田村裕（千葉大学大学院医学研究院）

研究課題

川本

進（千葉大学真菌医学研究センター）

ヒト遺体より分離された真菌相の解析と鑑識への応用のゼの構造機能相関

’
08-22

検討
研究課題

’
08-15

Candida albicans 脂肪酸不飽和化酵素遺伝子破壊株の形態

徳留省悟 , 石井清（獨協医科大学）

矢口貴志（真菌医学研究センター）

学的解析

村山琮明（北里大学北里生命科学研究所）

研究課題

山口正視 , 川本

Cryptococcus neoformans の分子間相互作用解析

研究課題

進（千葉大学真菌医学研究センター）

’
08-23

奥田研爾 , 園田智子（横浜市立大学大学院医学研究科）

’
08-16

川本

亜硝酸塩を代謝する真菌の超微細構造

進 , 大楠美佐子（千葉大学真菌医学研究センター）

高谷直樹（筑波大学大学院生命環境科学研究科）

研究課題

山口正視 , 川本

病原糸状菌の薬剤排出系 ABC トランスポーター遺伝子

研究課題

進（千葉大学真菌医学研究センター）発現に関与する転写因子の機能解析

’
08-17

五味勝也（東北大学大学院農学研究科）

Candida glabrata の増殖形態変化調節機構の解析渡部俊彦 , 松本達二 , 三上

健 , 小笠原綾子（東北薬科大山口正視 , 知花博治 , 川本進（千葉大学真菌医学研究セ

学）

’
08-24

川本

進 , 清水公徳（千葉大学真菌医学研究センター）

ンター）

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻

2008

67

研究課題

’
08-25

真菌と細菌の菌種間相互作用に関与する分子の免疫電子研究課題

顕微鏡的解析
池田玲子（明治薬科大学）
山口正視 , 川本
研究課題

進（千葉大学真菌医学研究センター）

’
08-B1

H. capsulatum 抗原の可溶化タンパク質の発現技術の確立とその利用

瀧口正樹（千葉大学大学院医学研究院）

’
08-26

ヤシオオオサゾウムシ外部共生酵母の特定と生態の解明
畑

共同利用研究 B

高木広明 , 草野賢一（（株）プロテイン・エクスプレス）
亀井克彦（千葉大学真菌医学研究センター）

邦彦（鹿児島大学農学部）

川本

進 , 大楠美佐子（千葉大学真菌医学研究センター）

研究課題

’
08-27

放線菌・細菌由来のキトサン加水分解酵素の抗菌活性についての研究安藤昭一 , 齋藤明広（千葉大学大学院融合科学研究科・園芸

研究課題

’
08-B2

Candida glabrata の ス テ ロ ー ル 合 成 系 異 常 を 利 用 し た
farnesol トランスポーター解析
長環（福岡歯科大学）

中山浩伸 , 青山俊弘（鈴鹿工業高等専門学校）
知花博治（千葉大学真菌医学研究センター）学部）

西田芳弘（千葉大学大学院園芸学研究科・園芸学部）
三上

襄 , 山口正視（千葉大学真菌医学研究センター）

研究課題

’
08-28

研

究

会

研究会 1

病原性のカビが持つテルペノイド生合成遺伝子群の解析
大利徹（富山県立大学工学部）

三上襄（千葉大学真菌医学研究センター）

名称 : 真菌分子細胞研究会

課題 : 真菌研究のための情報交換
研究会 2

研究課題

’
08-29

名称 : 第 2 回アスペルギルス研究会

植物由来の抗真菌物質の探索

課題 : アスペルギルス症をはじめとした本菌に由来する

深井俊夫（横浜薬科大学）
宇野

潤 , 三上ンター）

68

疾患に関する研究の討議を行う

襄 , 知花博治（千葉大学真菌医学研究セ

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

平成 19 年度

共同利用研究報告

研究課題 ’
07－01

Aspergillus fumigatus の病原性に関する研究
石

橋

大

槻

関

根

渡

辺

亀

井

正

己（千葉大学大学院薬学研究院）
祟（千葉大学大学院薬学研究院）

利一（城西国際大学薬学部）
哲（千葉大学附属病院感染症管理治療部）

克彦（千葉大学真菌医学研究センター , 真菌感染分野）

研究成果
現在最も重要な病原真菌の一つと考えられる Aspergillus

fumigatus の病原性を検討する目的で , 本菌培養上清をシ
リカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて分画し , 各
画分をマウスマクロファージに対する細胞傷害活性を測定した . 活性が残存している画分について , 更に HPLC

究も含め過去さまざまな研究成果がある . 今回明らかとなった物質はいずれも gliotoxin とは構造が異なり , また
本画分には gliotoxin を含まれていない . よって本画分に含まれる , gliotoxin 以外の物質が細胞傷害活性を有する
可能性が強く示唆された .

今回分析対象となった試料は極めて少量であり , 計画を用いて成分分析を行ったところ , 複数の物質の存在がしていた in vivo, in vitro による細胞傷害性・組織傷害性を行うことができた . 本菌培養上清中に含まれる細胞傷

上清からの活性物質収集を行い , 各化合物の活性の確認

明らかとなり , そのうちのいくつかの化合物の構造決定
害性物質として主要なものの 1 つは gliotoxin であり , 千葉大学真菌医学研究センター真菌感染分野における研確認実験を行うことはできなかったが , 今後さらに培養を行いたい .

研究課題 ’
07－02

真菌細菌の菌種間相互作用における超微細構造池田玲子（明治薬科大学微生物学教室）

山

口

正

視（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

川本進（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

研究成果
Cryptococcus neoformans と他の菌種との相互作用に着目したところ , Staphylococcus aureus 細胞が C. neoformans へ

千葉大学

付着し , C. neoformans の死滅が誘導される現象を見いだした . そこで , 両細胞の付着に関与する各細胞表層物質の解析を行った結果 , C. neoformans 側では莢膜多糖

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200869

類の主成分グルクロノキシロマンナン（GXM）の主鎖

and a glycolytic enzyme of Staphylococcus aureus to

わっていることが示された . 一方 , S. aureus 側では , 解Bacteriol 189: 4815-4826, 2007.

α（- 1→3）-mannan の 3 残基（M3）以上が相互作用に関contact-mediated killing of Cryptococcus neoformans. J

糖系酵素のひとつであるトリオースリン酸イソメラーゼ

学会発表（TPI）が付着因子として同定された . そこで , GXM の1 ）Ikeda R, Saito F, Matsuo M, Kurokawa K, Sekimizu K,

た . すなわち , S. aureus 細胞と GXM, 抗 GXM ウサギ抗mannan backbone of cryptococcal glucuronoxylomannan

S. aureus 細胞への結合を免疫電子顕微鏡法により検討し
体 , 金コロイド標識プロテイン A を順次反応させ走査電子顕微鏡で観察した . その結果 , S. aureus 細胞表層にGXM との反応を示す金粒子が観察された . しかし , さらに最適な反応条件を検討して設定する必要があった .

研究発表

Yamaguchi M and Kawamoto S: The contribution of theand a glycolytic enzyme of Staphylococcus aureus tocontact-mediated killing of Cryptococcus neoformans.
The 7th Awaji International Forum on Infection and
Immunity, Awaji Island, September 1-5, 2007.

2 ）池田玲子 , 斉藤史人 , 松尾美記 , 黒川健児 , 関水和
久 , 山口正視 , 川本

原著論文1 ）Ikeda R, Saito F, Matsuo M, Kurokawa K, Sekimizu

K, Yamaguchi M, Kawamoto S: Contribution of the
mannan backbone of cryptococcal glucuronoxylomannan

進 : 細菌 Staphylococcus 付着による病原真菌 Cryptococcus の死滅誘導−真菌・細菌
相互作用の新規分子機構 . BMB 2007（第 30 回日本
分子生物学会年会・第 80 回日本生化学会大会

合同大会）, 横浜 , 12月 11 〜 15日 , 2007.

研究課題 ’
07－03

人獣共通真菌症の症例検討 :ふれあい動物園 , 学校飼育動物などの真菌保有率の調査猪股智夫（麻布大学獣医学部獣医学科実験動物学研究室）

佐

野

文

子（千葉大学真菌医学研究センター , 真菌感染分野）

亀

井

克

彦（千葉大学真菌医学研究センター , 真菌感染分野）

研究概要
本研究は , 人獣共通真菌感染症の観点から動物の深在性真菌症 , 皮膚糸状菌症 , 日和見真菌症等の症例を収態が低下している場合 , 至近距離での接触は , このような病原性酵母を吸入する危険性が示唆された .

また , イルカ類の呼気から分離された病原性酵母の遺集・検討し , 分子疫学的解析を加える . 特に , 動物園飼

伝子型は飼育関係者および飼育環境由来株の間で共通す物の真菌症を検討することである . 平成 19 年度は , 今 ,からの影響が示唆された .

育動物でふれあいコーナーに関係した動物 , 学校飼育動注目されている海産哺乳類とのふれあいによる共通感染

るものが確認され , 飼育関係者および観客を含めた環境症の危険について示唆および注意を喚起するために沖縄

研究成果

美ら海水族館を選び , イルカの呼気および飼育環境の病

原著論文

原真菌保有率を解明することにした .

その結果 , イルカは個体によっては 1 呼気あたり数百個の病原性酵母を吹き上げていることが判明し , 免疫状

70

千葉大学

1 ）Takahashi H, Takahashi-Kyuhachi H, Takahashi

Y, Yarita K, Takayama A, Inomata T, Sano A,
Nishimura K, Kamei K: An intrafamilial transmission

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

of Arthroderma benhamiae in Canadian porcupines

股智夫 , 矢口貴志 , 佐野文子 , 亀井克彦 : イルカの465-473, 2008.

性酵母の分子疫学的解析 . 第 52 回日本医真菌学会（Erethizon dorsatum）in a Japanese zoo. Med Mycol 46:

呼気 , スタッフおよび飼育環境から分離された病原学会発表

総会 , 真菌誌 49（増刊 1 号）: 76, 長崎 , 9 月 10 〜

1 ）高橋英雄 , 植田啓一 , 宮原弘和 , 内田詮三 , 鎗田響

11 日 , 2008.

子 , 村田佳輝 , Eiko Itano-Nakagawa, 高山明子 , 猪

研究課題 ’
07－04

ヒト遺体より分離された真菌の分類・同定
徳

留

石

井

矢

口

省

悟（獨協医科大学医学部法医学教室）
清（獨協医科大学医学部生物学教室）

貴志（千葉大学真菌医学研究センター , 系統・化学分野）

研究成果
ヒト遺体に生育する真菌はしばしば発見される現象であるが , 法医学の観点からほとんど研究されていない .
そこで , ヒト遺体に生育する真菌のフローラおよび生活環の特徴の解明を試みた .

白骨化したもしくは乾燥が進んだサンプルは , エタ

ノール処理により表面に付着している雑菌を殺菌し , 検には , 種差は見られなかった . 水分量が少なくなった検体からは Eurotium 属の他に好塩性を示す Scopulariopsis 属が分離された .

今後は , 検体数を増やし遺体の分解段階と出現する真菌の相関から , 遺体が遺棄されてからの時間経過の推測に繋げたい .

体内部に侵入した真菌の分離を試みた . 水分量の多いサ

研究発表など）を分解していると考えられる真菌の分離を試み

1 ）Ishii K, Hitosugi M, Yaguchi T, Tokudome S: The

ンプルは , 表面殺菌を行なわず , 検体表面（皮膚 , 筋肉
た . 本年新たに 5 検体の遺体から真菌の分離を実施した . 遺体の分解の程度 , 水分量により分離されてくる真菌が異なったが , 同一遺体の各部位から分離される真菌

千葉大学

原著論文

importance of forensic mycology. Legal Medicine 9:287, 2007.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200871

研究課題 ’
07－05

病原酵母のプロテオーム解析
奥田研爾（横浜市立大学大学院医学研究科分子生体防御学）

園

田

智

子（横浜市立大学大学院医学研究科分子生体防御学）

川本進（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

大楠美佐子（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

研究成果
モ デ ル 酵 母 Saccharomyces cerevisiae の ゲ ノ ム 解 読 は ,1996 年 , 真核生物としては , 他の生物種に先駆けて最も早く完了しており , 近年 , 病原酵母 Candida albicans,

Cryptococcus neoformans などについても , それらのゲノム解読が完了している . 我々は , このような状況を踏まえ ,各病原酵母のプロテオーム解析を行って , 分子レベルでの分類系統学的な検討 , 病原因子の作用機構の解析 , ま
た , 「ゲノム・プロテオーム創薬」を目指して , 抗真菌行っている . 更に , 比較プロテオーム解析を行うべく ,DIGE 解析法についても検討している . 酵母プロテオー
ムの変動を探索する目的で , 酵母破砕抽出液のタンパク
質発現デイファレンシャル解析法（DIGE）を行い , 発
現量の増減の顕著なスポットの検索 , 同定 , 解析を進めている . 各種培養条件の相違などによるタンパク質発現量の差異について比較プロテオーム解析を行い , 考察を進めている .

剤の開発及び作用機作の解析等に本手法を活用するた研究発表

め , プロテオーム解析を進めている .

学会発表

C. neoformans 細 胞 破 砕 抽 出 液 を 用 い て , 二 次 元 電1 ）Kawamoto S, Virtudazo E, Ohkusu M, Sonoda T,

析 , 質量分析 , データベースでの検索 , 同定などの解

analysis of cell control genes in Cryptococcus neoformans.

気泳動 , タンパク質スポットの解析 , アミノ酸配列解
析を進めており , 切り出したタンパク質スポットを in-gel digestion 後 , LC/MS/MS 法などによりデータベースと照合しつつ , それらのタンパク質を同定することを

72

千葉大学

Miyagi Y, Okuda K, Takeo K: Structural and functional
Experimantal Biology 2008（2008 Annual Meeting ofAmerican Society for Biochemistry and Molecular Biology）,
San Diego（USA）, 2008.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

研究課題 ’
07－06

Trichophyton tonsurans 感染状態の形態学的 , 細胞生物学的検討
比留間

政太郎（順天堂大学練馬病院）

川本進（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

大楠美佐子（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

研究成果
症状は目立ちにくいが , 非常に感染力が強く , 短期間討することを目的とした .

患者頭部に感染している Trichophyton tonsurans 細胞をで広がる特徴のある「新型水虫」とも言うべき , 白癬菌

採取して細胞状態の解析を試みた . 患者に ヘアブラシ

果 , 柔道など格闘技選手の間で体部白癬 , 頭部白癬になについて検討したところ , 界面活性剤を添加したバッ

Trichophyton tonsurans が外国から日本に持ち込まれた結る人が急増して問題になっている . この菌は感染力が強
く , 家族・友人に伝染し易く , 一度感染すると治りにく
い . また , 特に頭に全く症状がないのに , 多量の菌が寄生している保菌者（無症候性キャリアー）が多く , 危険な感染源となっている . しかるに , 本菌の宿主への感染時の形態学的 , 細胞学的状態の基礎的な知見はいまだ乏
しく , 今回 , 頭部などへの感染時 , 本菌がどのような細胞状態で存在しているのかを , 形態学的 , 細胞学的に検を使用してもらい , このブラシより菌体を回収する方法
ファーを入れたビーカーにブラシを直接入れ , 数分間攪拌後 , 遠心分離する方法が最も適していた . また , 集菌した菌をファンギフローラで処理後 , 蛍光顕微鏡で観察したところ , 細胞壁の厚い菌体が観察され , 細胞周期状態の解析には細胞壁の酵素処理が必要であることが示唆され , 酵素処理に適した各種条件を試み , また , 細胞周期の状態を検討するとともに形態などを解析した .

研究課題 ’
07－07

共生・寄生性二形性真菌の形態と生態に関する研究
畑邦

彦（鹿児島大学農学部）

川本進（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

大楠美佐子（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

研究成果
真菌類における菌糸・酵母の二形性は様々な分類群・生態群中に存在しており , 真菌類の形態形成を考察する上で重要な問題の一つとなっている . とりわけ医真菌学は普遍的に存在しており , 特に植物と昆虫の寄生菌や共生菌ではしばしば見られるが , 森林環境における二形性の意義は十分明らかになっていない .

報告者らは , 当研究センターにおいて以前行っていたでは良く知られており , 環境中では菌糸 , 体内では酵母

共同利用研究において , いわゆるアンブロシア菌と黒色置を占めている . その一方 , 森林においても二形性真菌から , 寒天培地・液体培地という基質の物理的な特性がとして生育する病原菌はヒトの病原菌の中でも重要な位

千葉大学

真菌を中心に培養形態の観察を行ったが , それらの結果

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200873

これら二形性真菌の形態形成に重要な意味を持つことを示した . 今回の共同利用研究においては , 前回の成果を更に深めるべく , 昆虫に寄生または共生する森林性の真態自体が観察されず , 単純に生態のみではこれらの傾向を説明できないことが明らかとなった .

なお , この年はこれまでのデータより学会への成果発菌類を中心に事例を増やすことを試みた .

表を行っている（1）.

主な対象として行った液体培地および寒天培地における研究発表

培養試験では , B. bassiana においては液体培地における原著論文

昆虫病原菌 Beauveria bassiana および Nomuraea rileyi を酵母化が観察され , 基質への反応についてアンブロシア1 ）畑

菌などの昆虫関連菌における結果と同様な傾向が見られ

邦彦 , 大楠美佐子 , 川本進 , 曽根晃一 ; 森林性二形性真菌の培養形態 , 九州森林研究 60: 9-12,

たが , 同じ昆虫病原菌である N. rileyi においては酵母形

2007.

研究課題 ’
07－08

真菌が生産する抗アスペルギルス物質の研究深井俊夫（東邦大学薬学部）

宇野潤（千葉大学真菌医学研究センター , 高分子活性分野）

三上襄（千葉大学真菌医学研究センター , 高分子活性分野）

研究成果
本研究は , 前年度までに有用物質探索用のため教室に保存されていた ITANO 株（Penicillium pseudocitrinum）
から抗菌活性成分は 3 種見出し , その中で最も多く存

albicans お よ び Cryptococcus neoformans 等 に 広 く 抗 真 菌
作 用 を 示 し た . こ れ ら の 物 質 は fluconazole を 除 い た

miconazole, ketoconazole, itraconazole, voriconazole などのアゾール系抗真菌薬と併用により抗真菌作用の増強が観在 す る 物 質 を 精 製 分 離 し ITANO-LP（microsphaerone

察された .

ルス属と一部の白癬菌に強く抗真菌活性を示した . さ

チェッカーボード法により農薬 , 抗原虫薬および駆虫薬

活性物質 4 種を見いだし , その中の主要成分 Strobilurin

原虫薬の中に相乗作用が若干観察される物質を見いだしA）を単離した . この物質の抗真菌活性は , アスペルギ
ら に , H16-109N 株（Strobilurus trullisatus） か ら 抗 真 菌A（C16H18O3） を 精 製・ 分 離 し た . Strobilurin A は ,Aspergillus fumigatus, Tricophyton mentagrophytes, Candida

74

千葉大学

本年は , これらの物質の抗真菌作用を増強する物質をなどに広げ探索した . 薬剤の併用により抗非定型細菌 ,た.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

研究課題 ’
07－09

環境内真菌の吸入と非感染性ヒト疾患との関連に関する研究渋谷

和俊（東邦大学医学部）

亀

井

克

彦（千葉大学真菌医学研究センター , 真菌感染分野）

研究成果

研究発表

ヒトの生活環境内には多様な真菌が存在しており ,原著論文

我々は日常的にこれらの吸入を繰返している . しかし ,1 ）Ochiai E, Kamei K, Watanabe A, Nagayoshi M,

推測されるものの , その影響については明らかになっof Stachybotrys chartarum causes pulmonary arterial

真菌の吸入はヒトに様々な影響を与えていることがていない点が多くある . これまでに我々が見いだした

Stachybotrys chartarum 胞子の経気管的反復投与によるマ
ウス肺高血圧の惹起もその一つであり , 発症の条件や機序等に関しては未解明な部分が多い . そこで本研究では , S. chartarum と肺高血圧症との関連について , 病変形
成頻度の確認や病変形成条件等について検討を進めるとともに , 環境内から S. chartarum よりも高頻度に検出される真菌による本病変形成についても予備的検討を行っ

Nagaoka T, Sato K, Sato A, Shibuya K: Inhalation

hypertension in mice. Int J Exp Path 89: 201-208,
2008.

学会発表

1 ）落合恵理 , 亀井克彦 , 永吉

優 , 渡辺哲 , 豊留孝

仁 , 渋谷和俊 : Stachybotrys chartarum 単回投与によるマウス肺高血圧症の形成に関する検討 . 第 81 回日本感染症学会 , 京都 , 2007. 4.

2 ）永吉

優 , 多田裕司 , 長岡鉄太郎 , 佐藤弘一 , 笠原た.

靖紀 , 田辺信宏 , 栗山喬之 , 渋谷和俊 , 亀井克彦 :70％の高い再現性をもってマウスで肺動脈病変が形成さ発されるマウス肺高血圧に関する検討 . 第 47 回日

まず , S. chartarum の経気管的反復投与ではおよそれることを確認した . 次いで , 投与を反復せず , 単回投与した場合にも投与する胞子数を多くすることで低頻度ながら同病変が形成されることを明らかにした . また ,Stachybotrys chartarum の反復気管内投与によって誘本呼吸器学会学術講演会 , 日呼吸会誌 45（増）: 292,
東京 , 2007. 5.

3 ）永吉

優 , 落合恵理 , 佐藤綾香 , 渡辺

哲 , 多田S. chartarum の胞子をメタノール処理または凍結融解処

裕司 , 長岡鉄太郎 , 佐藤弘一 , 笠原靖紀 , 田辺信

ノール処理をした場合には肺動脈病変が形成されないこ

chartarum の 反 復 気 管 内 投 与 に よ り 惹 起 さ れ る理によって死菌にしてマウスに反復投与すると , メタとから , メタノールによって除去される何らかの物質が本病変形成に関与している可能性が示唆された . 一方 ,Penicillium citrinum および Cladosporium cladosporioides を 1株ずつ用いてマウスに反復投与し , 肺への影響を検討したところ , S. chartarum と等量の胞子数ではどちらの菌種でも肺動脈病変の形成は認められなかった .

宏 , 栗 山 喬 之 , 渋 谷 和 俊 , 亀 井 克 彦 : Stachybotrys
マ ウ ス 肺 高 血 圧 に 関 す る 検 討 . 第 1 回 iPUC-II（Integrated Pulmonary Circulation Research-II）, 東京 ,2007. 6.

4 ）落合恵理 , 亀井克彦 , 渡辺

哲 , 永吉優 , 豊留孝

仁 , 渋谷和俊 : Stachybotrys chartarum 胞子のメタノー
ル処理とマウス肺動脈病変の形成について . 第 51回日本医真菌学会総会 , 高山 , 真菌誌 48（増刊 1号）: 90, 11 月 , 2007.

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200875

研究課題 ’
07－10

分子生物学的手法を用いた魚類病原真菌の同定に関する研究畑

井喜司雄（日本獣医生命科学大学獣医学部魚病学教室）

和

田

新

平（日本獣医生命科学大学獣医学部魚病学教室）

佐

野

文

子（千葉大学真菌医学研究センター , 真菌感染分野）

亀

井

克

彦（千葉大学真菌医学研究センター , 真菌感染分野）

研究成果
日本における魚類養殖は , 年々養殖対象魚種が増え ,過密で飼育される傾向にある . このことに関係し , 病気の発生は大きな問題となっている . その中で , 真菌病の発生も少なくない . 特に , 日本人は魚介類を生食するこれ , 現在 , 新種記載を含めて検討している .

また関連菌種として , 養殖魚から分離された非定型抗酸菌を実験的にマウスに接種し , 病原性を検討したとこ
ろ , 哺乳類に対する病原性は低いことが示唆された .

とが多いため , それらが真菌に汚染されていることは十研究発表

定に関する研究は十分になされていない . とくに , 分子

1 ）Y. Muraosa, K. Morimoto, A. Sano, K. Nishimura,

病気の早期診断にも重要な検討課題である . また , 日本

noduliformans gen. et sp. nov., isolated from white

分に考えられる . しかし , 魚類から分離される真菌の同生物学的手法を用いた研究は , 菌の同定だけではなく ,近海で漁獲される魚介類や水族館などで飼育されている魚類にも真菌病が発生しているが , それらに関しても原因菌が特定されているものは少ない .

国内の魚類真菌症の症例収集 , 原因菌分離 , 培養法の研究および形態的手法による分類同定に遺伝子解析を加え , 魚病真菌症の原因菌の同定と系統学的解析により ,今まで報告されていなかった菌種による感染が示唆さ

76

千葉大学

原著論文

K. Hatai: A new peronosporomycete, Halioticida

nodules in the abalone Haliotis spp. f rom Japan.
Mycoscience 50, 2009（in press）.

2 ）C. Munchan, O. Kurata, S. Wada, K. Hatai, A. Sano,

K. Kamei, N. Nakaoka: Exophiala xenobiotica infection

in cultured marine fish, striped jack Pseudocaranx dentex
in Japan. Journal of Fish Diseases, 2009（accepted）.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

研究課題 ’07－11

家畜・家禽等の真菌症の病原学的および病理学的診断木

村

久美子（動物衛生研究所細菌・寄生虫病研究チーム／牛病理ユニット）播

谷亮（動物衛生研究所細菌・寄生虫病研究チーム／牛病理ユニット）

芝

原

友

幸（動物衛生研究所研究チーム／豚病理ユニット）

佐

野

文

子（千葉大学真菌医学研究センター , 真菌感染分野）

三

上

亀

井

襄（千葉大学真菌医学研究センター , 高分子活性分野）
克彦（千葉大学真菌医学研究センター , 真菌感染分野）

研究概要
真菌感染症は人獣共通感染症のひとつであり , 日和見

感染症としても重要である . 家畜・家禽においても多数発生がみられるが , ウイルスあるいは細菌性の感染症に比べると軽視される傾向があるため , その発生実態は明床所見, 菌分離成績, 病理組織学的検査結果から

Scopulariopsis brevicaulis 感染症との総合判断した . 今後 ,出来る限り , 培養を試み , 培養菌体との整合性により ,診断精度を向上させようと考えている .

らかにされていない . また , 生前診断が困難なため的確

研究発表

病原学的診断法において , 平成 15 年度より 3 年間

1 ）朴な採材が為されず , 原因菌が不明な場合も多い .

行った共同研究において遺伝子診断による接合菌の種の特定がある程度可能となった .

病理学的診断法については , パラフィン包埋した真菌

原著論文
天鎬 , 吉田英二 , 佐野文子 , 木村久美子 , 安藤貴朗 , 渡辺大作 , 大塚浩通 , 小山田敏文 : 黒毛和種
牛における Absidia corymbifera と Candida tropicalis の重感染症 . 日本獣医師会雑誌 60: 497-500, 2007.

リファレンスアレイを用いた検索により , 抗アスペルギ

2 ）Ogawa S, Shibahara T, Sano A, Kadota K, Kubo M:

ルギルス属菌の検出に有用であることを明らかにした .

brevicaulis in a Japanese Black calf. J Comp Pathol 138:

ルス抗体を用いた免疫組織化学的手法が , 数種のアスペ
また , 接合菌症との鑑別にも免疫組織化学的手法は有用である .

病原学的および病理学的診断法を組み合わせることにより , 今後 , 病原真菌の種を同定することも期待できる .
さらに , 新たなる真菌感染症の野外例を診断し , 臨

千葉大学

Generalized hyperkeratosis caused by Scopulariopsis
145-150, 2008.

3 ）Naota M, Shimada A, Morita T, Kimura K, Ochiai

K, Sano A: Granulomatous pericarditis associated withsystemic mucormycosis in a finless porpoise（Neophocaena
phocaenoides）. J Comp Pathol 140: 64-66, 2009.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200877

研究課題 ’
07－12

Aspergillus 及び関連菌の分子系統解析と形態との比較研究
堀江

義一（千葉県立中央博物館）

矢

口

貴

志（千葉大学真菌医学研究センター , 系統・化学分野）

研究成果
Aspergillus fumigatus およびその関連テレオモルフである
Neosartorya 属は , 真菌症原因菌として重要である . 当セン
ターに保存されている Aspergillus fumigatus およびその関連
菌を研究材料とし , β-tubulin, hydrophobin, calmodulin 遺伝子による系統解析を実施した . Fumigati 節は 5 つのク

specimens in Japan. Jpn J Med Mycol 48: 37-46, 2007.

学会発表

1 ）Yaguchi T, Tanaka R, Matsuzawa T, Horie Y:

Polyphasic classification on Aspergillus section Fumigati.
The 24th Annual Conference of the Microscopy Societyof Thailand, Bangkok. February 14-16, 2007

ラスターに分かれ , A. fumigatus, A. lentulus, A. viridinutans2 ）矢口貴志 , 堀江義一 , 松澤哲宏 , 田中玲子 : 遺伝子と系統的に近縁であった . A. fumigatus 関連菌は分子系統

日本菌学会第 51 回大会 , 講演要旨集 p. 67, つくば ,とは系統的に異なる菌群が見出され , Neosartorya udagawaeと分生子の微細構造 , 生育温度 , マイコトキシン生産性

解析による Neosarorya 属の評価と新分類について .
5 月 26 〜 27 日 , 2007.

との間には相関が見られたが , 薬剤耐性においては差が3 ）矢口貴志 , 伊藤純子 , 田中玲子 , 松澤哲宏 , 堀江義

日本 , 中国などで行い , N. udagawae との近縁菌の交配試の分類とその性状 . 第 51 回日本医真菌学会総会 ,認められなかった . 非典型的な A. fumigatus の分布調査を
験による菌学的位置付けを検討している .

透 : 病原性 Aspergillus section Fumigati

真菌誌 48（増刊 1 号）: 71, 高山 , 11 月 9 〜 10 日 ,
2007.

研究発表

4 ）矢口貴志 , 松澤哲宏 , 田中玲子 , Abliz Paride, Hui

原著論文1 ）Yaguchi T, Horie H, Tanaka R, Matsuzawa T, Ito J,

Nishimura K: Molecular phylogenetics of multiple genes
on Aspergillus section Fumigati isolated from clinical78

一 , 五ノ井

千葉大学

Yan, 堀江義一 : 中国乾燥地帯における Aspergillus
fumigatus と Neosartorya の分布と系統解析 . 第 51 回

日本医真菌学会総会 , 真菌誌 48（増刊 1 号）
: 70,
高山 , 11 月 9 〜 10 日 , 2007.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

研究課題 ’
07－13

病原酵母の株識別法の検討
神戸俊夫（名古屋大学大学院医学研究科）

田

中

玲

子（千葉大学真菌医学研究センター , 系統・化学分野）

知

花

博

治（千葉大学真菌医学研究センター , 高分子活性分野）

研究成果
初年度（平成 18 年度）にデザインした 2 種類のプラ
イマーセット（P-II と AS-I）を用い , 同一患者のカン
ジダ感染部位および非感染部位（常在部位）より分離した Candida albicans と , 同一患者から時間経過を追って分

果 , RPS に由来する DNA 増幅パターンでは区別困難な株のいくつかはフラグメント解析により区別された . 逆に , グラグメント解析で区別できない株が RPS 領域により区別可能となった .

離した C. albicans について , RPS 領域に基づくタイピン

研究発表

部位に関係なく同じ増幅パターンを示した . これは , 同1 ）服部尚生 , 田中玲子 , 知花博治 , 富田グを行った . 結果 , 同一患者由来の C. albicans は , 分離
一患者由来の複数の株間でも同じであった . これに対し , 患者間で比較すると , 明らかに増幅パターンが各患者で異なり , C. albicans のタイプは各個人にユニークであることが分かった . さらに , RPS type の安定性（保存性）を , 時間経過（ 6 ケ月から 2 年）を追って分離した株を使って調べた結果 , いずれの例も , 分離期間を通して同じ増幅パターンを示した . さらに , C. albicans マイ

クロサテライト（ 4 カ所）のフラグメント解析を行い ,P-II および AS-I による PCR タイピングと比較した . 結

学会発表
靖 , 神戸俊 夫 : 反 復 配 列 RPS と 内 部 反 復 配 列 ALT を 標的とした PCR によるカンジダ・アルビカンスの

genotyping. 第 51 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌
48（増刊 1 号）: 33, 高山 , 11 月 9 〜 10 日 , 2007.

2 ）服部尚生 , 田中玲子 , 知花博治 , 富田

靖 , 神戸俊夫 : RPS およびマイクロサテライトに基づいた C.

albicans の株識別 . 第 32 回東海医真菌懇話会 , 名古屋 , 2 月 9 日 , 2008.

研究課題 ’
07－14

Candida albicans 不飽和化酵素遺伝子破壊株のアレイ解析
村山

琮

明（北里大学大学院感染制御科学府 & 北里生命科学研究所）

横

山

耕

治（千葉大学真菌医学研究センター , 真菌資源開発分野）

知

花

博

治（千葉大学真菌医学研究センター , 高分子活性分野）

研究成果
CaFAD2 破壊株のアレイ解析の t 検定で 4 倍以上の変化のあった 15 遺伝子 , 多重検定で 1.5 倍以上の変化

千葉大学のあった 34 遺伝子を , real-time PCR で確認した . ギ酸
脱水素酵素 , カタラーゼ , 菌糸形成に関わる転写因子

EFG1 など , 13 の遺伝子の発現が低下していた . EFG1

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

79

破壊株を低酸素条件下で長期培養すると多価不飽和脂肪

酸素下などのストレス条件下で機能していることが示唆

酸の量が低下しているとの報告がある . CaFADs は , 低される .

研究課題 ’
07－15

病原真菌 Candida tropicalis の二形性変換のゲノム・ネットワーク
鈴木孝仁（奈良女子大学理学部）

岩

口

伸

一（奈良女子大学理学部）

横

山

耕

治（千葉大学真菌医学研究センター , 真菌資源開発分野）

研究成果
不完全真菌 Candida tropicalis（C. tropicalis）は , ヒトや動物の体内からも分離され , 近縁種の Candida albicans と共に日和見真菌感染症の原因菌としても知られている .

albicans の MAP キナーゼと非常に高い相同性を示した .
そこで , C. albicans の DNA マイクロアレイ解析システ
ムを用いて , C. tropicalis の菌糸形成過程において遺伝子
発現レベルの変化する遺伝子について網羅的な調査を行また , アゾール系抗真菌剤に対して , 高度の耐性を示す

うことを計画した . C. tropicalis は C. albicans とは異なり ,グルコースを炭素源とする合成液体培地にエタノール

伝子発現を解析することが可能である . 本研究では野生ために臨床において問題となっている . C. tropicalis は ,を 2.5％添加すると高率に菌糸（偽菌糸）を誘導することが可能である . 酵母型と菌糸型の間の二形性変換能力
は , 病原性に必要であることが示唆されている .

C. tropicalis の近縁種である C. albicans では , ゲノムプ

ロジェクトが完了 , ポストゲノムシークエンスプロジェ
クトが進行しており , その一環として DNA マイクロアレイによる遺伝子発現の網羅的な解析が可能となっている . 現在千葉大学真菌医学研究センターでは , C.

albicans のマイクロアレイ解析システムが稼働している .
C. tropicalis と C. albicans の遺伝子の相同性は高く , 我々が単離した C. tropicalis の MAP キナーゼ CtEK1 も C.

80

千葉大学

経時的に菌糸形成過程を追跡できるため , 各過程での遺株の対照培養 , エタノール添加培養から mRNA を調製
し , Cy3, Cy5 で標識した cDNA を C. albicans の DNA マ
イクロアレイへハイブリダイゼーションさせ , どのような遺伝子が発現しているかを調べた . 培養初期 , 中期について , 対照培養とエタノール添加培養の比較を行ったところ , 異なる ORF が発現していることが明らかとなった . しかしながら , 発現量に上昇あるいは低下の見られた ORF はいずれも既知の遺伝子と相同性の認められないものであった . 今後はリアルタイム PCR 法によりその変動を詳細に検討する必要がある .

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

研究課題 ’
07－16

研究課題 : Aspergillus section Nigri の分子分類などによる類別とオクラトキシン産生髙

橋治

男（千葉県衛生研究所）

横

山

耕

治（千葉大学真菌医学研究センター , 真菌資源開発分野）

一

戸

正

勝（東京家政大学）

陰地

義樹（奈良県衛生研究所）

大

橋

正

孝（奈良県衛生研究所）

田

端

節

子（都立衛生研究所）

久米田

裕

子（大阪府公衆衛生研究所）

研究成果
山梨県内のブドウ園土壌 , 浮遊菌 , ブドウ果およびワイナリー製造環境からの section Nigri の分離と分離株のオクラトキシン産生

ブドウ園の土壌や浮遊菌などから 140 株 , また , ワイ

A 産生性が認められたが , 他の株には認められなかった.

中国落花生畑土壌 A. niger 分離株のオクラトキシン産

生性

中国広州の落花生畑土壌から分離され , チトクローム

ナリーの製造環境など 28 株 , 計 168 株の section Nigri を

b の遺伝子解析により A. niger と同定された 5 株についを行った . その結果 , ブドウ園の土壌 , 浮遊菌などでは微量の産生が認められた他は , 非産生であった .

分離し , チトクローム b などによる遺伝子解析から同定

A. japonicus が大部分（約 80％）を占め , A. niger がこれに次いだ（19％）. これに対して , ワイナリー製造環境でて , オクラトキシン産生性を調べた . その結果 , 1 株に走査電顕を用いた section Nigri の同定

使用培地は , ツァペック・ドックス平板培地が , 麦芽

は A. niger が優位を占め（74％）, A. japonicus（約 16％）寒天培地やポテトデキストロース寒天培地よりも適し ,ワイナリー製造環境から , それぞれ 1 株 , 計 2 株が分離類などから通常分離される , A. carbonarius, A. niger およがこれに次いだ . A. carbonarius は , ブドウ園の浮遊菌とされた . これらの分離株から , A. niger 10 株 , A. japonicus
8 株 , A. carbonarius 2 株を選びオクラトキシン産生性を調べた . その結果 , A. carbonarius 2 株にオクラトキシン

千葉大学

培養日数も分生子がよく成熟する 7 日間が適した . 食品
び A. japonicus の類別が可能であり , 同定に有効な手段であった .

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200881

研究課題 ’
07－17

Cryptococcus neoformanas 薬剤耐性のスクリーニングと分子機構解析野村文夫（千葉大学大学院医学研究院分子病態解析学）

川本進（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

大楠美佐子（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

研究成果
Cryptococcus neoformans は免疫不全患者 , 特に AIDS 患

にて , 同定を進めている . 感受性試験の結果 , 感受性の母である . 近年 , C. neoformans の薬剤耐性株が分離され（50 mM Tris-HCl pH 9 . 0 , 2 mM EDTA ･2 Na, 1 mM

が , その研究例は非常に少なく , 薬剤耐性獲得の分子機

わない . アガロース二次元電気泳動は , 7.5％ - 12％勾配者に重篤な日和見感染を引き起こすことのある病原性酵
クリプトコッカス症の治療効果に影響を及ぼしている
構解析は重要である . そこで本研究では抗真菌剤に対する薬剤耐性株と感受性株のプロテオーム解析を行い , その選別に有用なマーカー候補を見出すことを目的としている .

AIDS 患者など槊ら分離され潟株 100 株を用いて ,fluconazole（FLCZ） に つ い て Clinical and Laboratory
Standards Institute（CLSI）に準じた感受性試験を実施した . 感受性株・ 4 株 , 耐性株・ 4 株を用いて , タンパ

低い株 16 株 , 感受性の高い株 84 株となった . 条件検討の結果 , タンパク質抽出溶液には homogenizing buffer

phenylmethylsulfonyl fluoride）を用い , アセトン沈殿は行ゲル , タンパク質量は 400 μg となった . この至適条件を用いて , 感受性株 4 株と耐性株 4 株の比較を行った結果 , 感受性株で増加し潟スポット , 耐性株で増加し潟ス
ポット , 各数個が認められ , 同定を進めつつある . そしてこれらのタンパク質が耐性株と感受性株の選別に有用なマーカーとして臨床に応用でき , 実用的なマーカーであるのか考察を進めている .

ク質発現解析を行う為の条件検討（タンパク質抽出溶

研究発表

液 , アセトン沈殿の有無 , 二次元電気泳動に用いるゲル学会発表の濃度及びタンパク質量）を行った . 条件検討により得られた至適条件に基づき , それぞれの株をアガロー
ス二次元電気泳動で比較し , 有意に違いのみられたス

ポットをインゲル消化後 , 質量分析計（LC-MS/MS）

82

千葉大学

1 ）大楠美佐子 , 石井知里 , 清水
文夫 , 川本誠 , 戎野棟一 , 野村進 : 病原性酵母 Cryptococcus neoformansの薬剤感受性測定法に関する検討 , 第 18 回日本臨
床微生物学会総会 , 長崎 , 2 月 17 〜 18 日 , 2007.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

研究課題 ’
07－18

海洋生物を素材とした抗真菌物質の探索
小

林

三

上

淳

一（北海道大学大学院薬学研究院）
襄（千葉大学真菌医学研究センター , 高分子活性分野）

研究成果
海綿 Agelas sp. より単離したブロモピロールアルカロ
イド Nagelamide 類 J 〜 L に抗菌活性ならびに抗真菌活性が , また , 海綿 Penares sp. より単離した penaresidin Aのアゼチジン環部分の可能なジアステレオマーを合成した結果 , 一部のジアステレオマーに抗菌活性ならびに抗真菌活性が認められた .

一方 , 軟体サンゴ Cespitularia taeniata より単離した数種の Verticillene タイプのジテルぺン化合物に抗菌活性 ,抗真菌活性が認められた . さらに , ヒカゲノカズラ科植物やミソハギ科植物より単離した数種のアルカロイド
や , オトギリソウ科植物より単離したフロログルシノー
ル誘導体に抗真菌活性が認められた .

今後は , 特異性の高い抗真菌活性を示す化合物の探索を継続して行う予定である .

bromopyrrole alkaloid from a sponge Agelas species. Org
Lett 9: 2369-2371, 2007.

3 ）Ohshita K, Ishiyama H, Takahashi Y, Ito J, Mikami Y,

Kobayashi J: Synthesis of penaresidin derivatives and its

biological activity. Bioorg Med Chem 15: 4910-4916,
2007.

4 ）Watanabe K, Kubota T, Shinzato T, Ito J, Mikami Y,

Kobayashi J: Sarusubine A, a new dimeric Lythraceae

alkaloid from Lagerstroemia subcostata. Tetrahedron Lett
48: 7502-7504, 2007.

5 ）Shen Y-C, Cheng Y-B, Kobayashi J, Kubota T,

Takahashi Y, Mikami Y, Ito J, Kuo Y-H: Nitrogen-containing verticillene diterpenoids from Taiwanese softcoral Cespitularia taeniata. J Nat Prod 70, 1961-1965,
2007.

6 ）Tanaka N, Kubota T, Ishiyama H, Araki A, Kashiwada

Y, Takaishi Y, Mikami Y, Kobayashi J: Petiolins

研究発表

A-C, phloroglucinol derivatives f rom Hypericum

原著論文1 ）Ishiuchi K, Kubota T, Mikami Y, Obara Y, Nakahata

N, Kobayashi J: Complanadines C and D, new dimericalkaloids from Lycopodium complanatum. Bioorg Med
Chem 15: 413-417, 2007.

2 ）Araki A, Tsuda M, Kubota T, Mikami Y, Fromont

J, Kobayashi J: Nagelamide J, a novel dimeric

千葉大学

pseudopetiolatum var. kiusianum. Bioorg Med Chem 16:
5619-5623, 2008.

7 ）Araki A, Kubota T, Tsuda M, Mikami Y, Fromont

J, Kobayashi J: Nagelamides K and L, dimericbromopyrrole alkaloids from sponge Agelas species. Org
Lett 10: 2099-2102, 2008.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200883研究課題 ’
07－19

Nocardia 属細菌が持つイソプレノイド生合成遺伝子資源の探索
大利徹（富山県立大学工学部）

三上襄（真菌医学研究センター , 高分子活性分野）

研究成果
分子機能研究部門高分子活性分野・三上襄らにより分離・同定された Nocardia 属放線菌は , Streptomyces 属
細菌には見られない特異的な構造を持つ二次代謝産物を生産する . 中でも , 三上襄らにより取得されたジテルペン化合物 , brasilicardin A は , ジテルペン骨格に芳香

今回 , この中の isoprenoid cyclase 遺伝子を破壊することにより , これら遺伝子群が実際に brasilicardin A の生産に関与することの証明を試みた . 通常 , 放線菌の形質転換はプロトプラスト・PEG 法で行われるが , Nocardia

brasiliensis IFM 0406 株はプロトプラスト化が困難なた
め接合による遺伝子導入と相同組換えによる遺伝子破環 , L-rhamnose とアミノ酸誘導体が付加したユニーク壊を行った . 上図の DNA 断片中 , isoprenoid cyclase 遺のリード化合物として有用である . 従って , その生合成

合ベクターに導入した . 接合後 thiostrepton 耐性株を取な構造を有し , その生理活性も特異であることから医薬遺伝子を取得・改変する事により新規な関連化合物の生産を誘導することは大変興味深い . そこでこれまでに ,brasilicardin A 生産菌である Nocardia brasiliensis IFM 0406
株から , ジテルペン化合物の共通出発原料であるゲラニ
ルゲラニル 2 リン酸を生成する酵素（イソペンテニル 2リン酸を 4 つ縮合し , 炭素数 20 の直鎖状前駆体を生成する）遺伝子を取得し , その周辺領域を探索することにより , 以下の brasilicardin A 生合成遺伝子クラスターと推定される DNA 断片を取得している .
Amino- GGDP
Isoprenoidp450
trans. synthasecyclaseHydroxy
FAD-mono
2,3benzoate
ox䌹genasedihydroxyoctaprenyl
benzoatetrans.
AMP ligase

84

伝子のみを thiostrepton 耐性遺伝子で置換したのち接得し PCR で確認した結果 , 何れの耐性株も予想通り

isoprenoid cyclase 遺伝子のみが thiostrepton 耐性遺伝子と置換されていた . そこでこれらの破壊株を培養した結果 , brasilicardin A の生産性は消失していたことから上記

isoprenoid cyclase 遺伝子が brasilicardin A の生産に関与することを証明できた .

研究発表
原著論文
1 ）Hayashi Y, Matsuura N, Toshima H, Itoh N, Ishikawa

OxidaseGlycosyltrans.

3-Amino5-hydroxy
Benzoatesynthase

千葉大学

O-Methyl
Trans.

J, Mikami Y and Dairi T: Cloning of the gene cluster
responsible for the biosynthesis of brasilicardin A, aunique diterpenoid. J Antibiot 61: 164-174, 2008.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

研究課題 ’
07－20

高度病原真菌 Coccidioides 属のトポイソメラーゼ遺伝子（TOP2 ）による同定法の研究
安藤昭一（千葉大学大学院自然科学研究科）

雨

宮

良

幹（千葉大学園芸学部）

斉

藤

明

広（千葉大学園芸学部）

三

上

矢

沢

襄（千葉大学真菌医学研究センター , 高分子活性分野）
勝清（千葉大学真菌医学研究センター , 高分子活性分野）

研究成果
わが国では輸入真菌症が問題となっており , その中でも最も重要な感染症としてコクシジオイデス症がある . 原因菌である Coccidioides immitis と C. posadasii は危
険度レベルが 3 にランクされる病原菌であり , 2 菌種とも形態的な特徴はなく早期の同定が困難で , また検査室等での取り扱いが危険であることから遺伝子レベルで迅
速な同定法の開発が望まれる . 本研究では機能遺伝子のTOP2 及び TRF4 に着目し , 原因菌の菌種を簡易的で迅
速に同定法する方法を開発した .

その結果 , TOP2 遺伝子では , C. posadasii は開発したプライマーでは , 700 bp を , また C. immitis では 400 bp

千葉大学に増幅バンドが観察され , TRF4 遺伝子では , 500 bp と250 bp にバンドが観察された . このプライマーセットを混ぜプライマーミックスとして使用し , PCR 上で他菌種と Coccidioides 属を分類するだけではなく , Coccidioides
属の 2 種を同定することが可能となった .

さらに今年度は , 新たに C. immitis の ITS 領域の塩基配列を使った DNA チップを作製することができた . この DNA チップは他の 4 種の高度病源真菌とは反応せず , 区別も可能であったが , C. immitis と C. posadasii との区別は不可能であった . 本 DNA チップは , 肉眼的にも検出が可能でありその応用研究を進めている（共同研
究者 : 伊藤淳二 , 亀井克彦 , 佐野文子）.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200885

研究課題 ’
07－21

カンジダ酵母の遺伝子の組換え技術に基づく機能解析
長環（福岡歯科大学）豊田美香（福岡歯科大学）

中山浩

伸（国立鈴鹿工業高等専門学校）

青

山

俊

弘（国立鈴鹿工業高等専門学校）

水

野

貴

之（徳島文理大学）

宮

川洋

三（山梨大学工学部）

小笠原

綾子（東北薬科大学）

知花

博治（千葉大学真菌医学研究センター , 高分子活性分野）

三上襄（千葉大学真菌医学研究センター , 高分子活性分野）

研究成果
Candida glabrata は , 好気的条件でエルゴステロールを合成している場合は外からステロールを取り込まないという教科書的な知識に反し , 培地に加えた血清中の

研究発表
原著論文
1 ）Nakayama H, Tanabe K, Bard M, Hodgson W, Wu S,

Takemori D, Aoyama T, Kumaraswami N, Metzler L,

ステロールを細胞内に輸送し , さらにアゾール剤耐性

Takano Y, Chibana H, Niimi M: The Candida glabrataputative sterol transporter gene CgAUS 1 protects cellsを示した . 我々は変異体解析の結果 , このステロール輸
送を ABC トランスポーター CgAUS1 が担うことを明らかにした . また , この遺伝子の破壊株では , 血清による

against azoles in the presence of serum. J Antimicrob
Chemother 60: 1264-72, 2007.

アゾール耐性化が起こらなくなることも明らかできた .

2 ）Cho T, Aoyama T, Toyoda M, Nakayama H, Chibana発現が誘導されることから , 本真菌の感染機構と何ら

albicans genes by both farnesol and high cell density at an

さらに , 血清添加で ABC トランスポーター CgAUS1 のH, Kaminishi H: Transcriptional changes in Candida

かの関わりがある事が示唆された . そこで , CgAUS1 の発現を制御する転写因子を同定するために , 出芽酵母から知見を参考にゲノム情報を用いて候補遺伝子を選定し , それらの破壊株を作成し , それらの中から , フル

early stage of morphogenesis in N-acetyl-D-glucosamine
medium. Jpn J Med Mycol 48: 159-167, 2007.

3 ）Ueno K, Uno J, Nakayama H, Sasamoto K, Mikami

Y, Chibana H: Development of a highly efficient gene

コナゾールによるエルゴステロール合成阻害が血清の

targeting system induced by transient repression of

YKU80 expression in Candida glabrata. Eukaryot Cell 6:

添加によって回避さない株を同定することで , 絞り込みを行った . 結果 , Zn-finger モチーフをもつ転写因子（CAGL0F07865g）が候補として見つかった . さらに ,ドキシサイクリンを添加することによってステロール要求性になる条件変異株（tet-ERG9）でこの遺伝子を破壊したところ , 血清添加培地中でドキシサイクリン感受性となり , CAGL0F07865g が CgAUS1 の発現制御を行う因子であることが , 強く示唆された .

86

千葉大学

1239-47, 2007.

総説

1 ）長

環 , 青山俊弘 , 豊田美香 , 中山浩伸 , 知花博

治 , 上西秀則 , Richard A Calderone: Candida albicansの quorum-sensing 分子 farnesol. Jpn J Med Mycol 49:
281-286, 2008.

学会発表

1 ）Niimi K, Maki K, Hatakenaka K, Niimi M, Nakayama

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

H, Chibana H, Monk BC, Cannon RD: Clinicallysignificant micafungin resistance in Candida glabratarequires mutations in both FKS 1 and FKS 2 . 9 th

プ , 京都 , 3 月 24 〜 26 日 , 2008.

10）上野圭吾 , 中山 浩伸 , 三上襄 , 知花博治 : Candida

フェノームプロジェクトによる標的の選定とコン

Candida and Candidosis, New Jersey USA, March

ピューターによる抗真菌剤の設計 . 第 81 回日本細2 ）Nakayama H, Tanabe K, Okano M, Aoyama T,11）C h i b a n a H , S a s a m o t o K , U e n o K , Aoy a m aof sterol transporter AUS1 in Candida glabrata. The 8h

Functional genomics in pathogenic fungi Candida24-28, 2008.

Chibana H, Miyazaki Y, Niimi M: Characterization

Awaji International Forum on Infection and Immunity, p.
126, Awaji, Sep. 7-11, 2008.

3 ）田辺公一 , 名木稔 , 中山浩伸 , 山越

智, 臺

由

菌学会総会 , 京都 , 3 月 24 〜 26 日 , 2008.

T, Kinoshita S, Uno J, Nakayama H, Mikami Y:
glabrata achieved to prioritization of antifungal targets.
The 7th Awaji International Forum on Infection and
Immunity, p. 125, Awaji, Sep. 1-5, 2007.

紀 , 知花博治 , 新見昌一 , 宮崎義継 : Candida glabrata

12）Nakayama H, Bard M, Tanabe K, Aoyama T, Takemori

化 . 第 31 回日本分子生物学会年会・第 81 回日本生Takano Y, Chibana H, Niimi M: The Candida glabrata

ステロールトランスポーターによるアゾール剤耐性化学会大会合同大会（BMB2008）, 神戸 , 12 月 9 〜
12 日 , 2008．

4 ）知花博治 , 宇野潤 , 青山俊弘 , 中山浩伸 : カンジ

ダ酵母における網羅的発現制御株の構築と応用−
病原性ゲノム機能学− . 平成 20 年度特定ゲノム 4領域・領域横断微生物研究会 , 金沢 , 11 月 12 〜 14
日 , 2008．

5 ）中山浩伸 , 田辺公一 , 青山俊弘 , 岡野

誠 , 知花博治 , 新見昌一 : 病原真菌 Candida glabrata のステロー
ル輸送機構の解明 . 第 5 回真菌分子細胞研究会 , 千
葉 , 8 月 21 〜 23 日 , 2008．

6 ）青山俊弘 , 上野圭吾 , 三谷宏樹 , 田渕史晃 , 中山浩
伸 , 知花博治 : Candida glabrata における RNA5 末端

塩基配列の解析 . 第 5 回真菌分子細胞研究会 , 千葉 ,8 月 21 〜 23 日 , 2008．

D, Hodgson W, Wu S, Kumaraswari N, Metzler L,
sterol transporter CgAUS1 protects against azole toxicity
in the presence of serum. The 7th Awaji Interational

Forum on Infection and Immunitiy, Abstracts p. 126,
Awaji, Sep. 1-5, 2007.

13）倉内寿孝 , 上野将明 , 小笠原綾子 , 渡部俊彦 , 三上健 , 山口正視 , 知花博治 , 松本達二 : Candida

glabrata 増殖形態に及ぼす亜硫酸ナトリウムの影響 .
第 51 回日本医真菌学会総会 , 真菌誌 48（増刊 1号）: 93, 高山 , 11 月 9 〜 10 日 , 2007.

14）岩田哲郎 , 長

環 , 西川和範 , 青山俊弘 , 上野圭吾 ,知花博治 , 中山浩伸 : 病原性酵母 Candida glabrataにおける GDP-mannose pyrophosphorylase 遺伝子の機能解析 . 第 30 回日本分子生物学会プログラム p.
781, 横浜 , 12 月 11 〜 15 日 , 2007.

15）長

環 , 豊田美香 , 知花博治 , 中山浩伸 , 小倉理恵

7 ）中山浩伸 , 田辺公一 , 知花博治 , 新見昌一 : 病原真子 , 上 西 秀 則 : Candida albicans の Quorum-sensing

発現機序 . 第 2 回細菌学若手コロッセウム , 葉山 , 8

ワークショップ 6 , 発表要旨集 p. 63, 大阪 , 3 月 26

菌 Candida glabrata のステロールトランスポータの月 3 〜 5 日 , 2008．

8 ）知花博治 , 上野圭吾 , 笹本

〜 28 日 , 2007．

要 , 木下妻智子 , 三谷16）中山浩伸 , 田辺公一 , 新見昌一 , 知花博治 : 病原

襄 : カンジダフェノームプロジェ

ターを介したアゾール耐性機構 . 第 80 回日本細菌

宏樹 , 小暮高久 , 加藤直子 , 宇野
中山浩伸 , 三上

分子に対する初期応答 . 第 80 回日本細菌学会総会

潤 , 青山俊弘 ,クトにおける網羅的遺伝子組換え株の構築 . 日本微生物資源学会第 15 回大会 , 千葉 , 6 月 30 日〜 7 月
2 日 , 2008．

9 ）田辺公一 , 中山浩伸 , 宮崎義継 , 知花博治 , 新見昌
一 : 病原真菌 ABC タンパク質の抗真菌薬耐性との関わり . 第 81 回日本細菌学会総会 , ワークショッ

千葉大学

性真菌 Candida glabrata のステロールトランスポー学会総会ワークショップ 1 , 発表要旨集 p. 52, 大
阪 , 3 月 26 〜 28 日 , 2007．

17）小山友嗣 , 川良香 , 宇野襄 , 中山浩伸 , 飯村

潤 , 知花博治 , 三上

穣 , 宮川洋三 : 病原性酵母

Candida に対する抗真菌剤の標的候補 : 必須遺伝子群の分離と同定 . 第 51 回日本医真菌学会総会セレ

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200887

クテッドシンポジウム , 真菌誌 48（増刊 1 号）: 73,
高山 , 11 月 9 〜 10 日 , 2007.

18）宮川洋三 , 宇野

潤 , 知花博治 , 三上襄 , 中山浩

伸 : 病原性酵母 Candida 抗真菌剤の標的候補 , 必須
遺伝子群の分子生物学的解析 . 第 80 回日本細菌学会総会 , 発表要旨集 p. 190, 大阪 , 3 月 26 〜 28 日 ,2007．

19）中山浩伸 , 岩田哲郎 , 長

環 , 青山俊弘 , 上野圭

吾 , 知花博治 : 病原性酵母 Candida glabrata におけるGDP-mannose pyrophosphorylase 遺伝子の解析 . 第 4回真菌分子細胞研究会 , 要旨集 p. 11, 千葉 , 8 月 26
〜 27 日 , 2007.

20）青 山 俊 弘 , 中 山 浩 伸 , 知 花 博 治 : Candida glabrata
データベース . 第 4 回真菌分子細胞研究会 , 要旨集

p. 24, 千葉 , 8 月 26 〜 27 日 , 2007.

21）中山浩伸 , 田辺公一 , 知花博治 , 青山俊弘 , 新見昌
一 : Candida glabrata ステロールトランスポーター

AUS1 の機能発現 . 第 51 回日本医真菌学会総会 ,真菌誌 48（増刊 1 号）: 65, 高山 , 11 月 9 〜 10日 ,2007.

研究課題 ’
07－22

Trichophyton tonsurans の分子疫学的研究
望

月隆（金沢医科大学 環境皮膚科学部門 , 同 総合医学研究所 , 皮膚真菌学部門（ノバルティ
ス

河

崎

昌

ファーマ））子（金沢医科大学 環境皮膚科学部門 , 同 総合医学研究所 , 皮膚真菌学部門（ノバルティ
スファーマ））藤田純（金沢医科大学 環境皮膚科学部門）

亀

井

克

彦（千葉大学真菌医学研究センター , 真菌感染分野）

高

橋

容

子（千葉大学真菌医学研究センター , 真菌感染分野）

佐

野

文

子（千葉大学真菌医学研究センター , 真菌感染分野）

研究成果
核 ribosomal RNA 遺伝子の NTS 領域の分子多型の検討により , 多くの真菌において種内変異の検出が試みられている . 近年格闘技競技者の間で集団感染の out breakが知られている好人性皮膚糸状菌 Trichophyton tonsuransにおいても , 先に我々は NTS I 型から VI 型の 6 型が認められ , 格闘技競技者からの分離株については , この
うち NTS I, II, III 型のみが認められることを報告した（Mochizuki T, et al, Jpn J Infect Dis 60: 188-, 2007）. 今
回は散発例（診断時 , 格闘技との関係が伺い知る事のできなかった例）における菌の origin を明らかにするため ,散発例分離株を収集し , これら 10 株について分子疫学的検討を行った . 方法は以前の報告（Mochizuki T, et al,
Jpn J Infect Dis 60: 188-, 2007）と同様である . 菌より

88

千葉大学

抽出した全細胞 DNA を鋳型とし , NTS 領域を PCR で増幅し , これを制限酵素 Mva I ならびに Ava I で消化したのち電気泳動のパターンを観察して型分けを行った .

primer pair は L663（5 -TTCTAGGCTCCCAACCAC）な

ら び に R 1145（5 -ACAAGGGCGGAACTATCAGAC）
を用いた . 新しい分子型と思われたものは定法に従って

L663-R1145 産物の塩基配列を決定の上 , 制限酵素消化後の泳動パターンの予測を試み , 実際のパターンとの比較を行った . その結果 , 散発例 10 株は NTS III を除く 5型 , ならびに今回新たに検出された 2 型の合計 7 型に分類されること , このうち NTS IV 型が最も多い事が明らかになった . NTS I 型は , 乳児からの分離株であるが後に母親が柔道の引退選手である事 , またこれを契機に母親に NTS I 型の菌による頭部白癬が認められた事より ,真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

格闘技集団から社会への蔓延を証拠づける事例として注

研究発表目される . 現在も格闘技から新たに分離 , 集積された菌

原著論文

株について分子疫学的検討を継続中であるが , 散発例分離株について論文を作成した .

1 ）Mochizuki T, Kawasaki M, Fujita J, Ushigami

T, Takeda K, Sano A, Takahashi Y, Kamei K:
Epidemiology of sporadic（ non-epidemic ）cases ofTrichophyton tonsurans infection in Japan based on RFLP
analysis of non-transcribed spacer region of ribosomal
RNA gene. Jpn J Infect Dis, 2009（in press）.

研究課題 ’
07－23

真菌から得られる新規生理活性化合物の探索
河合賢一（星薬科大学薬学部 , 薬化学教室）

野

沢

幸

平（奥羽大学薬学部 , 薬化学分野）

細

江

智

夫（星薬科大学薬学部 , 薬化学教室）

板

橋

武

史（星薬科大学薬学部 , 薬化学教室）

矢

口

貴

志（千葉大学真菌医学研究センター , 系統・化学分野）

研究成果

研究発表

新たに分離した菌株の培養エキスを使用して生物活性

原著論文

試験法を併用ながら TLC, HPLC 等で成分の検索を行

1 ）Nakadate S, Nozawa K, Horie H, Fujii Y, Nagai

合物の構造については , NMR をはじめとする種々のス

Fukushima K: Eujavanicols A-C, decalin derivatives

い , 活性成分を含めた新規化合物の単離を行なった . 化
ペクトルデータの解析 , 化学反応および X 線結晶解析
等を併用して決定した . 得られた新規化合物について毒性試験をはじめとする各種活性試験を実施し , 医薬品のリード化合物としての可能性の検討を行う予定である .

M, Tomoo Hosoe T, Kawai K, Takashi, Yaguchi T,
f rom Eupenicillium javanicum. J Nat Prod 70 :
1510-1512, 2007.

学会発表

1 ）中楯

奨 , 野沢幸平 , 堀江

均 , 藤井祐一 , 佐藤

本年 , Eupenicillium javanicum IFM 54704 株から単離され博泰 , 細江智夫 , 河合賢一 , 矢口貴志 , 福島和貴 :の検討を行なった .

プシペプチド . 第 127 回日本薬学会 , 講演要旨集 4:

た新規物質の構造を確定し , 抗真菌活性 , 構造活性相関

Eupenicillium javanicum の産生する新規抗真菌環状デ109, 富山 , 3 月 28 〜 30 日 , 2007.

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200889

研究課題 ’
07－24

DNA マイクロアレイ技術を用いた病原真菌検出技術の確立
岡
五ノ井

千

寿（千葉県産業支援技術研究所）
透（千葉大学真菌医学研究センター , 系統・化学分野）

研究成果
病原真菌検出用マイクロアレイのモデル系として

Candida 属の系統分類を目的としたマイクロアレイ・チップを試作し , 真菌センターの保有菌株を用いて C.

albicans, C. glabrata, C. krusei, C. parapsilosis, C. tropicalisの 5 菌種について検討した .

を広げて実験を行っている . さらに , アゾール系の抗真菌剤に対する耐性機構の 1 つとして報告されている C.

albicans の ERG11 遺伝子の SNP 検出についても実験を行い , 試作した DNA マイクロアレイの有用性について検討する予定である .

C. albicans IFM 40107, C. glabrata IFM 5768, C. krusei

研究発表のゲノム DNA を調製し , これらを試料として ITS 領域1 ）岡

IFM 5462, C. parapsilosis IFM 5774, C. tropicalis IFM 5446

学会発表
千寿 , 前田浩 , 五ﾉ井透 , 三上襄 : DNAを PCR によって蛍光ラベル化した . これらの蛍光ラベ

マイクロアレイ関連技術の開発 . 千葉県産業支援

ゴ・プローブ 1 ）を搭載した菌種判別アレイにハイブリダ

2007.

ル化 DNA をそれぞれの菌種に対応する ITS 領域のオリイズさせ , 蛍光を検出することにより , 上記の Candida
属の 5 菌種の判別が試作したマイクロアレイ・チップ
で可能であることを確認した . さらに , 真菌センターとの共同研究成果である DNA マイクロアレイ・チップ

技術研究所
2 ）岡

研究成果発表会 , 千葉市 , 8 月 7 日 ,千寿 , 前田浩 , 五ﾉ井透 , 三上襄 : DNA

マイクロアレイ関連技術の開発（第 2 報）. 千葉県産業支援技術研究所 研究報告 No. 5: 10-13, 2007.

3 ）岡千寿 , 前田浩 , 五ﾉ井透 , 三上襄 : DNAの再利用技術（特願 2006-120641「プローブポリヌクレ

マイクロアレイ関連技術の開発 . 平成 19 年度 ライ

この菌種判別アレイにおいては , 1 枚のアレイスライド

バイオテクノロジー分科会

オチド固定化担体の再生方法」）についても実験を行い ,で 5 回以上の再利用が可能であることを明らかにした .

なお , DNA マイクロアレイの試作において , アレイ・

フサイエンス分野融合会議・ライフサイエンス部会
くば市 , 2 月 1 日 , 2008.

4 ）岡

千寿 , 前田浩 , 五ﾉ井

成果・事例発表会 , つ透 , 三上襄 : DNA

スポッターを , また , 蛍光の検出においては , マイクロマイクロアレイ関連技術の開発 . 平成 19 年度ライた.

バイオテクノロジー分科会合同研究発表会 , つくば

アレイ・スキャナー等の真菌センターの機器を使用しこれらの実験結果を踏まえて , 現在 , 対象となる菌株

90

千葉大学

フサイエンス分野融合会議・ライフサイエンス部会
市 , 1 月 31 日 , 2008.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

研究課題 ’
07－25

真菌症原因菌に対するカテキン誘導体の影響評価
玄丞烋（京都大学再生医科学研究所）

高

鳥

浩

介（国立医薬品食品衛生研究所）

田

口

英

昭（千葉大学真菌医学研究センター , 生態分野）

亀

井

克

彦（千葉大学真菌医学研究センター , 真菌感染分野）

EGCg（Epigallocatechin 3-O-gallate）の細胞膜親和性とは EGCg と同程度であり将来的な臨床応用の可能性を糸状菌である Trichophyton mentagrophytes 6 株 , Trichophytonを示唆するものではなかった . 今後は EGCg と現在上安定性を高める目的で合成された誘導体を用いて , 皮膚

rubrum 6 株 , Microsporum canis 6 株に対する抗真菌効果を検討した .

得られた MIC 値を比較したところ , いずれの菌株でも M. canis および T. mentagrophytes に対する抗真菌効果認めた . T. rubrum に対しては他の 2 菌種と比較し効果
市されている全身投与可能な抗真菌剤との併用効果について評価し , EGCg によるカンジダ症に対する新たな治
療法の可能性について検討する .

研究課題 ’
07－26

カイコ幼虫の感染モデルを用いた Cryptococcus neoformansの病原性遺伝子の同定
関水和久（東京大学大学院薬学系研究科）

伊

藤

貴

浩（東京大学大学院薬学系研究科）

川

本

清

水

進（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）
公徳（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

研究成果

カイコ幼虫を真菌の病原性解析のための感染モデル生物

関水らの研究グループは , 「カイコ幼虫による感染モデル」が , 黄色ブドウ球菌 , レンサ球菌など細菌類に対する病原性解析モデルとして適用できることを既に報告してとして用い , 「カイコ幼虫による真菌感染モデル」を真菌の新しい病原性解析法として開発しつつある .

本研究の目的は , 病原性真菌 Cryptococcus neoformans のいる（Mol Microbiol 56: 934-944, 2005 など）. 本研究では ,カイコ幼虫を用いた病原性検定法を確立するとともに ,ることを明らかにし , 病原性真菌 Cryptococcus neoformans のの網羅的解析により , この菌の病原性発現機構を分子レ

まず , 野生型 Cryptococcus neoformans がカイコ幼虫を殺傷す
カイコ幼虫を用いた病原性検定法を確立しつつある . 細菌類と同様に真菌類についてもそれが可能であるという知見を得ており , 従来のマウス等の代替実験生物として ,千葉大学

本菌の病原性遺伝子を同定する点にある . 病原性遺伝子
ベルで明らかにできるであろう . また , 同定された遺伝子の産物は , 抗真菌治療薬の標的となり得ることが期待される .

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200891

研究課題 ’
07－27

病原性 Cryotococcus neoformans サイクリン依存性
キナーゼの構造機能相関田村裕（千葉大学大学院医学研究院生命情報学）

川本進（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

研究成果
病原真菌 Cryptococcus neoformans の細胞周期を制御している中心分子 , サイクリン依存性キナーゼ Cdk1 の , 制

御因子サイクリンとの結合部位 PSTAIRE モチーフは ,他の生物種に於いて極めて高い保存性を示しているにも関わらず , 本菌では例外的に PSTSIRE に変異している .
そこで , この変異による細胞周期制御の分子機構の特徴
を , タンパク質立体構造の観点から理論的 , 実験的に解を活用することにより構築した . 続いて , Cdk/CnCln1
ならび Cdk/CnCln2 の結合構造に関する計算化学的実験を行い , それらの予想結合構造を構築すると共にその際の予想結合力を算出した .

今後は , 本菌より分子クローニングした各遺伝子の発現ベクターを用いてタンパク質の発現と , 分子間相互作用解析装置等を用いた解析と検証を行う .

明 , 検証することを目的とする . 構造生物学的 , バイオ

研究発表

分子生物学的実験による解析 , 検証とを行って , 検討を1 ）川本

インフォーマテイックスによる理論的解析と生化学的 ,学会発表
進 , E. Virtudazo, 大楠美佐子 , 竹尾漢治 , 田

進めた .

村 裕 , Z. Moranova, V. Raclavsky: 病原酵母クリプ

G1 サイクリンである CnCln1 ならび G2/M サイクリン

第 2 回真菌ワープ研究会 , 千葉 , 8 月 21 日 , 2008.

本年度は , 病原真菌 Cryptococcus neoformans の Cdk1 とである CnCln2 の立体構造をバイオインフォマティクス

トコックスの細胞周期制御の分子的理解に向けて .

研究課題 ’
07－28

Candida albicans 不飽和化酵素遺伝子破壊株の形態学的解析
村山

琮

明（北里大学大学院感染制御科学府 & 北里生命科学研究所）

山

口

正

視（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

川本進（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

研究成果
30℃培養の対数増殖期において , CaFAD2, CaFAD3破

壊株及び復帰株の増殖速度 , および透過型電子顕微鏡による観察を行った . どちらの温度においても , 増殖速度 ,透過型電子顕微鏡による観察で , 破壊株と復帰株の間で

92

千葉大学

差異は認められなかった . しかし , トランスクリプトー
ム解析をし , real-time PCR でその発現を確認したとこ
ろ , ギ酸脱水素酵素 , カタラーゼ , 菌糸形成に関わる転写因子 EFG1 などの遺伝子の発現が低下していた . 発現の変化のあった遺伝子をみると , 細胞内オルガネラで行

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

われる種々の代謝系に本遺伝子の破壊が関わっているこ

ム解析 . 第 51 回日本医真菌学会総会 , 高山 , 11 月 9とが推測された .

〜 10 日 , 2007.

研究発表

2 ）村山琮明 , 山口正視 , 生方公子 : Candida albicans 脂

学会発表1 ）村 山 琮 明 , 山 口 正 視 , 川 本
原肪酸不飽和化酵素遺伝子 CaFAD2 及び CaFAD3 破進, 新見昌一, 梶壊株の遺伝子発現の比較と表現型観察 . 第 81 回日

将 : Candida albicans 脂肪酸不飽和化酵素遺伝子

本細菌学会総会 , 京都 , 3 月 24 〜 26 日 , 2008.

（CaFADs）破壊株の表現型とトランスクリプトー

研究課題 ’
07－29

Candida albicans バイオフィルム特異遺伝子破壊株の微細構造
杉

田

山

口

川

本

隆（明治薬科大学微生物学教室）
正視（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）
進（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

研究成果
バイオフィルムは菌体と菌体外分泌多糖から構成される膜であり , 薬剤耐性化をもたらす . Candida albicans のバイオフィルム（BF）特異遺伝子を見出すために , BFと planktonic（PK）状態での遺伝子発現を , サブトラク
ション法および DNA マイクロアレイを用いて解析した . 見出された BF 関連遺伝子を破壊したころ , 破壊株の BF 形成能は PK に比べて有意に低下した . バイオ
フィルム形成過程を電子顕微鏡を用いて比較観察したが遺伝子破壊株の微細構造に大きな変化は認められなかった.

研究課題 ’
07－30

亜硝酸塩を代謝する真菌の超微細構造高谷直樹（筑波大学生命環境科学研究科）

山

口

正

視（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

川本進（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

研究成果
Aspergillus 属などの真菌は , 生育のための窒素源として硝酸塩や亜硝酸塩を利用可能である . また , 嫌気条件
下では , これらをアンモニアへと還元する . そこで , 本
研究では , A. nidulans をモデルとして真菌の多様な亜硝

千葉大学

酸塩代謝・応答に焦点を当て , その機構解明を目指している . A. nidulans の亜硝酸耐性を付与する遺伝子として , ポルホビリノーゲンデアミナーゼ（PBG-D）をコードする AN0121 を単離した . 本遺伝子を増強させた形質転換体（PD1 株）の細胞抽出液中の亜硝酸塩還元酵素

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

93

（Nir）活性も約 7 倍上昇していた . PD1 株では , 野生型

ヘム生合成経路に含まれる酵素であり , Nir はシロヘム

発芽阻害を示さなかった . また , 透過型電子顕微鏡を用することにより PBG-D 活性が上昇しシロヘムの生成量

株で見られる亜硝酸塩による菌糸の形態異常や分生子のいて , この時の細胞内超微細構造を観察したところ , 野生株が異常な細胞内構造を示すのに対して , PD1 株のそれは正常であることが明らかとなった . 現在のところ ,PBG-D と Nir の関係の詳細は不明であるが , PBG-D はを構造内に有していることから , AN0121 の発現が上昇が増える可能性が考えられる . また , A. nidulans は , 高濃度の亜硝酸塩に曝露されたとき , Nir の働きによって亜硝酸塩を消費し , 亜硝酸に耐性化すると予想される。

研究課題 ’
07－31

Candida glabrata の増殖形態変化調節機構の解析
松

本

達二（東北薬科大学 , 微生物学教室）

三

上

渡

部

俊

彦（東北薬科大学 , 微生物学教室）

小笠原

綾子（東北薬科大学 , 微生物学教室）

山

口

正

視（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

知

花

博

治（千葉大学真菌医学研究センター , 高分子活性分野）

川本健（東北薬科大学 , 微生物学教室）

進（千葉大学真菌医学研究センター , 機能形態分野）

研究成果
我々は , C. glabrata を亜硫酸ナトリウム存在下で培養すると , 菌が肥大化する現象を見出した . この菌体の肥大化は , 増殖速度の低下と細胞壁強度の低下を引き起こす可能性があり , これまで知られている抗真菌剤の作用から , 亜硫酸ナトリウム処理による C. glabrata の肥大化とは異なる機構で菌に障害を与えている可能性が示唆

学会発表された . 本研究では , C. glabrata の肥大化現象の発生要1 ）渡部俊彦 , 上野将明 , 小笠原綾子 , 三上因の解析を行った . その結果 , 亜硫酸ナトリウム処理された C. glabrata の増殖能は著しく低下し , 肥大化した菌
体では , その細胞強度も低下していた . 肥大化した菌体の構造を , 透過型電子顕微鏡で解析したところ , 液胞の肥大と , 細胞壁構造の崩壊が確認された . これらの結果

94

千葉大学

は , 細胞内圧の上昇と細胞壁強度の低下が要因であると推察された .

研究発表
健 , 山口正視 , 知花博治 , 松本達二 : Candida glabrata の亜硫酸ナトリウム処理による細胞壁崩壊現象の解析 .
第 82 回日本細菌学会 , 名古屋 , 3 月 12 日〜 14 日 ,2009.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

研究課題 ’
07－32

臨床材料より分離した放線菌の二次代謝産物に関する研究
原

田

健

石

川

勉（千葉大学大学院薬学研究院）

三上襄（千葉大学真菌医学研究センター , 高分子活性分野）

矢

沢

勝

一（名城大学薬学部）

清（千葉大学真菌医学研究センター , 高分子活性分野）

研究成果
病 原 性 放 線 菌 IFM 0757 株 は , 分 類 学 的 な 研 究 から , 本邦では希なノカルジア症の起因菌である Nocardia

pseudobrasiliensis と 同 定 さ れ た . 本 菌 株 の 培 養 液 は ,Mycobacterium smegmatis などのグラム陽性菌に対して活性を示す物質を生産することが明らかになったことから , 培養液を菌体とロ液に分け , Diaion HP-20 にて吸着
し , MeOH で溶出し , AcOEt で抽出した . 活性成分をシ
リカゲルカラムにより精製して , さらに液クロやゲルろ過での精製をくり返すことにより 3 L の培養液から 3.9

mg の活性成分を得た .

千葉大学

本化合物は , その詳細な解析から thiopeptide 系の新規化合物で分子量 1160 で , 加水分解よりスレオニンとサ
イアゾール環を含むバリンは , L- 体であることも明らかになった .

本 化 合 物 は , 抗 酸 性 の 病 原 性 細 菌 で あ る Gordonia

bronchialsis や Corynebacterium xerosis, さ ら に あ る 種 のNocardia 等に極めて強い活性を示すことが明らかになり , その後の研究から rifampicin 耐性の Mycobacterium

tuberculosis に対しても強い活性があることが確認された .

本化合物の構造と活性については , 現在論文を作成中である（共同研究者 : 向井真菌医学研究センター報告

第 12 巻

2008

啓）.

95

2007 年度

共同利用研究報告書
発年

2007 年2008 年2009 年

原

著

論

文

14

6

4

学

会

発

表

27

17

1

説

0

1

0

総

96

表

研究成果集計累計

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008平成 20 年度

共同利用研究会報告

1 ．第 2 回小動物真菌症症例検討会

2 ）臨床的に簡便な , 皮膚の真菌検査法 : 伊東彰仁（千葉県獣医師会京葉支部）（代表 : 池田忠生−日本大学医学部 , 世話人 : 亀井克彦
（佐野文子））

本症例検討会は千葉 , 東京 , 埼玉 , 静岡 , 沖縄から獣医師 , 動物医療関係者等 18 名により , 平成 20 年 1 月 12日（土）14 : 30 - 17 : 00 に開催され , 小動物等の真菌症症例および検査方法 4 題と特別講演 1 題が発表された .
＜プログラム＞

座長 : 高橋英雄（エイランドおゆみの動物病院 , 千葉大
学真菌医学研究センター）3 ）小動物における消化管穿孔に伴った真菌性腹膜炎の4 症例の検討 : 村田佳輝（むらた動物病院 , 千葉大

学真菌医学研究センター）4 ）膿性鼻汁を主訴とした犬のアスペルギルス症の一例 : 兼島

開会の言葉 : 池田忠生（日本大学医学部）

孝（みずほ台動物病院・埼玉県 , 琉球動物医療センター・沖縄県）

Ⅰ．症例検討Ⅱ．特別講演座長 : 村田佳輝（むらた動物病院 , 千葉大学真菌医学研

座長 : 池田忠生（日本大学医学部）究センター）

1 ）沖縄美ら海水族館で飼育されているイルカの呼気 ,深在性真菌症の臨床と研究の現状 :亀井克彦（千葉大学真菌医学研究センター）

飼育スタッフ口腔内および飼育環境より分離された

C. albicans と C. tropicalis の分子疫学的解析 : 高橋英雄（エイランドおゆみの動物病院 , 千葉大学真菌医

閉会の言葉 : 兼島孝（みずほ台動物病院・埼玉県 , 琉

球動物医療センター・沖縄県）

学研究センター）

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻200897

2 ．第 2 回アスペルギルス研究会開催（亀井）4 ）「病原性糸状菌の鑑別を目的とした新規 PNA プ
ローブの検討」

わが国のアスペルギルス症研究者を一堂に会して , 研究成果を発表し討議する目的で開始されたアスペルギル
ス会は昨年初めて開催されたが , 今年は第 2 回目として当センターで行われた . Closed で行われた会であるにもかかわらず , 飛び入りの参加などがあり , 東北地方から九州まで全国から約 30 名の方々が参加された .

研究テーマはアスペルギルスの細胞としての基礎的な菌学から , アスペルギルス症の最新の診断・治療方法まできわめて多岐にわたっていたが , 各方面の研究者が自由に討論しあうというこの会の特色が生かされた形となった .

大変好評であり , 2009 年はさらに発展された形での東邦大学病院病理学講座◯中山晴雄 , 篠崎

稔 , 大久保陽一郎 , 渋谷和俊

5 ）「アスペルギルス ELISA 抗原検査の臨床的評価」
長崎大学第二内科◯泉川公一 , 高園貴弘 , 三原
今村圭文 , 関栁原克紀 , 河野雅文 , 掛屋

特別発言

茂

智 , 西條知見

弘 , 山本喜裕

国立病院機構東京病院呼吸器内科◯鈴木純子6 ）「空洞切開術後に生じたアスペルギルス肺炎の 1 例」

開催が予定されている .

国立病院機構近畿中央胸部疾患センター呼吸器外

日時 : 2008 年 7 月 19 日（土）13 : 00 - 17 : 00

◯桂

場所 : 当センター講堂

科 , 同臨床研究センター感染症研究部 *浩 , 大瀬尚子 , 松村晃秀 , 中村幸生

北原直人 , 伊藤則正 , 阪口全宏 , 鈴木克洋 *代表 : 倉島篤行（複十字病院呼吸器科）

追加発表「肺アスペルギローマに対する空洞切開」

発表演題は以下のとおりである .

◯井内敬二

開会の挨拶 : 複十字病院呼吸器内科

国立病院機構近畿中央胸部疾患センター呼吸器外科

倉島篤行（代表）1 ）「Aspergillus 属が産生する病原因子としてのエラス
ターゼと新規エラスターゼ阻害因子の基礎的研究」
名城大学薬学部 , 国立病院機構東名古屋病院呼吸器内科*◯奥村欣由 , 小川賢二 , 打矢恵一 , 小森由美子

7 ）「膀胱癌に対する BCG 膀胱内注入療法中に発症したアレルギー性気管支肺アスペルギルス（ABPA）の 1 例」

大阪赤十字病院呼吸器科
◯黄

*

二改俊章

文禧（ファン ムンヒ）, 網谷良一

8 ）「造血器腫瘍患者のアスペルギルス症対策の臨床試
験」

2 ）「慢性肺アスペルギルス症マウスモデルの開発」
長崎大学第二内科◯高園貴弘 , 泉川公一 , 三原
今村圭文 , 関栁原克紀 , 河野雅文 , 掛屋

智 , 西條知見茂

弘 , 山本喜裕

自治医科大学附属さいたま医療センター血液科◯大島久美 , 神田善伸
閉会の挨拶 : 千葉大学真菌医学研究センター
懇親会3 ）「病原性 Aspergillus fumigatus および関連菌種の多相分類と迅速同定法の検討」

千葉大学真菌医学研究センター◯矢口貴志 , 松澤哲弘 , 弘98

佑介 , 田中玲子

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

亀井克彦

第 5 回真菌分子細胞研究会 , 感染現象のマトリックス
第 2 回真菌ワープ研究会

7 ）永尾潤一（福岡歯科大学機能生物化学講座感染生物学分野）Candida albicans のクオラムセンシングを介

日時 : 8 月21日 - 23日

した病原性発現における新規ストレス応答遺伝子

場所 : 真菌医学研究センター A 棟 B1 講堂
代表者 : 国立感染症研究所
世話人 : 高分子活性分野

における RNA5 末端塩基配列の解析

MSI3 の機能解析

8 ）田渕史晃（千葉大学真菌医学研究センター高分子活

新見昌一性）クオラムセンシングに関る遺伝子の網羅的解析

知花博治〜 Candida glabrata をモデルとして〜

9 ）松澤哲宏（千葉大学真菌医学研究センター系統・化

真菌分子細胞研究会は , 情報交換 , 共同研究の推進 ,若手研究者の育成を目的に開催されており , 5 回目を迎学）Emericella 属の多相分類と新種について10）弘佑介（千葉大学真菌医学研究センター系統・化

えた今回は 30 演題の発表があった . 今回は特に学部生

学）耐熱性 Talaromyces 属および関連菌の系統分類が顕著であり , 参加者の投票によって選ばれた 3 名に優11）上野将明（東北薬科大学微生物学教室）赤色酵母

や大学院生などの若手研究者の発表技術のレベルアップ
秀発表賞が授与された .

科研費特定領域研究「感染現象のマトリックス」が共催する真菌ワープ研究会とジョイント形式で開催しており , 前回に引き続き , 領域長と検出法の検討

Rhodotorula rubra の培養温度の変化における栄養要
求性の違いについて

12）山口正視（千葉大学真菌医学研究センター機能形

野本明男先生 , 事務局長

態）凍結置換電顕法による酵母細胞のストラクトー

な意見交換がなされた . 最後に野本領域長より感染症研

13）田辺公一（国立感染症研究所生物活性物質部）病原北潔先生をお招きし , 多くのコメントを頂き , 活発

究における基礎研究の重要性が強調されたこと受けて ,参加者一同真菌における感染症基礎研究の発展を誓い合
いながら閉幕となった .

真菌ステロールトランスポーターの出芽酵母での発現解析14）中 山 浩 伸（ 鈴 鹿 工 業 高 等 専 門 学 校 ） 病 原 真 菌

実行委員として高分子活性分野

大野道代 , 上野圭

吾 , 島田五月 , 三谷宏樹 , 木下妻智子 , 松浦
要 , 田渕史晃が担当した .

学 , 笹本1 ）三谷宏樹（千葉大学真菌医学研究センター高分子活性）Candida glabrata を用いた細胞壁合成遺伝子の網
羅的機能解析

2 ）中 川 元 斗（ 鈴 鹿 工 業 高 等 専 門 学 校 ） 病 原 酵 母

Candida glabrata の GDP-mannose 合成遺伝子の機能
解析3 ）石橋健一（東京薬科大学薬学部免疫学教室）真菌細胞壁β - グルカンに対するモノクローナル抗体の結合性と活性4 ）上野圭吾（千葉大学真菌医学研究センター高分子活性）コンピューターシミュレーションによるペプチ
ド性リード化合物の設計
5 ）吉 見ム解析

Candida glabrata のステロール輸送機構の解明

15）岡野誠（鈴鹿工業高等専門学校）Candida glabrataのステロールとランスポータ AUS1 を制御する転写
因子の検索
16）名木

稔（国立感染症研究所生物活性物質部）血清

添加による Candida albicans のアゾール剤非感受性化メカニズムの解明（第 2 回真菌ワープ研究会）
17）川本進（千葉大学真菌医学研究センター機能形態）病原酵母クリプトコックスの細胞周期制御の分子的理解に向けて
18）三 上健（ 東 北 薬 科 大 学 微 生 物 学 教 室 ）Candida

albicans 増殖形態の呼吸経路による制御

19）五ノ井透（千葉大学真菌医学研究センター系統・

化学）病原性放線菌の国内同定システムの確立と運啓（ 東 北 大 学 未 来 科 学 技 術 共 同 研 究 セ ンター）糸状菌ゲノム情報を利用した抗真菌剤創薬標的解析システムの構築
6 ）青山俊弘（鈴鹿工業高等専門学校）Candida glabrata

千葉大学

用20）水野貴之（徳島文理大学工学部）C. glabrata の鶏常在化システムの構築と予防医学 , スクリーニングへの応用

真菌医学研究センター報告

第 12 巻20089921）荒川明子（京都大学皮膚科）Candida への免疫反応

ベストプレゼンテーション賞−慢性粘膜カンジダ症患者の解析から−学生の部

22）安達禎之（東京薬科大学薬学部免疫学教室）真菌
β - グルカンに対する免疫認識分子の反応特異性

三谷宏樹（千葉大学真菌医学研究センター高分子活性分野）

23）川上和義（東北大学大学院医学系研究科）クリプト

上野

圭吾（千葉大学真菌医学研究センター高分子活性分野）

コックス感染における Th1-Th2 バランスと TLR 及

松澤哲宏（千葉大学真菌医学研究センター系統・化学分野）

び C-type lectin receptor による制御機構24）長ポスドク・教員の部

環（福岡歯科大学歯学部感染生物学）病原真菌におけるクオラムセンシング機構センサーの探索

永尾

潤一（福岡歯科大学機能生物化学講座感染生物学分野）

将（東京工業大学大学院生命理工学研究科）

山口

正視（千葉大学真菌医学研究センター機能形態分野）

脂質分子が関与する Candida albicans の病原性発現中山

浩伸（鈴鹿工業高等専門学校応用生物化学）

25）梶原
機構

26）新見昌一（国立感染症研究所）Candida glabrata を用

特別招待者

いた抗真菌薬の標的の選出−真菌のステロール恒常

東江

昭夫（東京都臨床医学総合研究所）

性のメカニズムの解明からのアプローチ−

野本明男（東京大学大学院医学系研究科微生物学教室）

27）山田剛（帝京大学医真菌研究センター）白癬菌へ

北潔（東京大学大学院医学系研究科生物医化学教室）のテトラサイクリン系抗生物質による遺伝子発現制
参加者

御システムの導入
28）阿 部 敬 悦（ 東 北 大 学 未 来 科 学 技 術 共 同 研 究 セ ン横山耕治（千葉大学真菌医学研究センター真菌資源分野）

ター）Aspergillus 属糸状菌ゲノム情報を活用した感

矢口貴志（千葉大学真菌医学研究センター系統・化学分野）

宇野潤（千葉大学真菌医学研究センター高分子活性分野）

29）知花博治（千葉大学真菌医学研究センター高分子活豊留孝仁（千葉大学真菌医学研究センター真菌感染分野）

性）Candida glabrata フェノームプロジェクト

大野

道代（千葉大学真菌医学研究センター高分子活性分野）

松浦

学（千葉大学真菌医学研究センター高分子活性分野）

染関連因子の探索

第2章 標的の探索から抗真菌薬の創出へ30）田村裕（千葉大学大学院医学研究院生命情報科

学）in silico 分子進化法による抗真菌薬の創製

100

千葉大学

芝崎あずさ（千葉大学真菌医学研究センター系統・化学分野）
迫あゆみ（千葉大学大学院 自然科学研究科）

仙石祐美子（千葉大学大学院 自然科学研究科）

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

第 22 回千葉大学真菌医学研究センター講習会
担当 : 宇野病原真菌講習会は , 病原真菌・放線菌の基本的取り扱

プログラム :

いの知識と技術を習得するために , 本センターが実習を（講師 : 亀井克彦 , 山口正視 , 矢口貴志 , 渡辺

開催している . 本年度は第 22 回目で , 累積受講生は 280

勝清 , 横山耕治 , 伊藤純子 , 川本

中心にして実施している講習会で , 年 1 回定員 12 名で名余になる . 本年も定員の 3 倍を超える応募があり , 講
習は好評の内に終了した .

響子 , 田口英昭 , 田中玲子 , 西村和子 , 三上進）

内容（実習・講義）: 病原性酵母

臨床材料の取り扱い（渡辺）

会場 : 千葉大学真菌医学研究センター講習会室

性試験法

基本手技（矢口）

病原性アスペルギル

皮膚科領域真菌症原因菌
病原性接合菌襄 , 矢沢真菌感染症概論（亀井）
真菌細胞概論（山口）

原真菌

哲 , 鎗田

7 月 8 日（火） オリエンテーション（宇野）期日 : 平成 20 年 7 月 8 日（火）〜 7 月 11 日（金）ス潤輸入および新興病

病原性放線菌

薬剤感受性試験法（渡辺・鎗田）

薬剤感受

菌株保存法

β- グルカンによる診断（田口）7 月 9 日（水） 主な病原性酵母（田中）

主な病原性糸状菌（矢口）職種内訳 : 臨床検査関係（病院・企業）

6名

7 月 10 日（木） 皮膚科領域真菌症原因菌（西村）

教育関係

3名

病原性放線菌（三上・矢沢）

行政関係

1名

バイオ関連企業（検査を除く）

2名

DNA ア レ イ に よ る 病 原 真 菌 の 同 定（三上）

7 月 11 日（金） 輸入真菌症と新興真菌症原因菌（横地域別受講者 : 関東（東京を除く）

2名

山）

東京

6名

菌株保存法（横山・伊藤）

中部

1名

法律から見た真菌取扱い（川本）近畿

1名

真菌のバイオハザード（亀井）

四国

1名

九州・沖縄

1名

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008101

第 4 回千葉大学真菌医学研究センター外国人講習会
担当 : 横山耕治

外国人講習会は 4 回目となり , タイ国から 2 名 . 中国

Practice: Laboratory techniques（ Dr.

真菌の同定と取り扱いについての講義と実習が行われPractice: Lecture and observation ofから 3 名の参加者と中国の 2 名の見学者を迎えて , 病原た.

Yaguchi）

Aspergillus and related fungi（Dr. Yaguchi）

7 月 16 日（水） Practice: Observation of pathogenic

期間 : 2008 年 7 月 15 日（火）〜 18 日（金）場所 : 千葉大学真菌医学研究センター

yeasts（Dr. Tanaka）

講習会室

Lecture: Dermatophytes and dematiaceous
fungi（Dr. Nishimura）

参加者 :Practice: Dermatophytes andタイ国

dematiaceous fungi（ Dr. Nishimura）

Thanpitcha Thongin （National Institute of Health）
Sujitra Manakul（Suratthani Regional Hospital）

Jiang Yan-Ping（Peking University First Hospital）

中

国

Chen Yan

Zhang Yun-feng
5名

Lecture & Practice: Emerging fungal
pathogens（Dr. Yaguchi）

7 月 17 日（木） Practice 1: Electron microscopic observation（Dr. Yamaguchi）（The First affiliated Hospital ofPractice 2: Scanning electron microscopic

Xinjiang Medical University）

observation（Dr. Yaguchi）（Normaan Bethune Medical School

L ecture and Practice:

Jilin University）

identification by physiological andchemotaxonomic methods（ Dr. Poonwan N, Dr. Gonoi, Dr.

見学者：
中Yazawa and Ms. Kang）

国

Juhaer Mijiti
Zhu Jian
2名
プログラム :

（講師 : 三上（The People Hospital of Xinjiang）

7 月 18 日（金） Lecture & practice: Molecular identificationof pathogenic fungi（Dr. Yokoyama）（The affiliate hospital of Gui Yang

Lecture: Proteomic analysis and new

Medical College）

techniques in molecular medical mycology（Dr. Kawamoto）

Lecture and practie: Application of
microarray for the identification of

襄 , 矢口貴志 , 亀井克彦 , 田中玲子 , 横山

耕治 , 西村和子 , 山口正視 , 矢沢勝清 , 五ノ井
本

進 , Natteewan Poonwan）

pathogenic fungi透, 川（Ms. Shiboswawa, Ms. Ohkusu, and

Dr. Gonoi, Dr. Mikami）

Closing ceremony with Tea party:

7 月 15 日（火） Introduction of this work shop: Dr.

With Drs. Nishimura, Mikami, Poonwan,

Mikami

Kamei, Kawamoto, Gonoi, Yamaguchi,

Lecture: Basic mycology（Dr. Yaguchi）

Yokoyama, Yaguchi and Tanaka

Lecture: Laboratory diagnosis（ Dr.

Visit the Central Clinical Laboratory in

Kamei）

102

Nocardia

千葉大学

真菌医学研究センター報告

Chiba University Hospital

第 12 巻2008

第 4 回千葉大学真菌医学研究センター公開市民講座開催
2008 年 5 月18日（日）, 西千葉キャンパスけやき会館

にて第 4 回目となる真菌医学研究センター主催の公開

講演内容 :

湿度の高い季節がある我が国ではカビは非常に身近な

市民講座を開催した . 参加者は約 230 名を数え , 会場か存在である . 食物に生えたり家の中に入り込んできたり

関心の高さがうかがえた .

作られる酒 , 味噌 , 醤油などの発酵食品は我が国の食生ら寄せられた多くの質問から , カビに対する一般市民のテーマ :「カビ !? 〜そろそろ気になりますね〜 Part 3」
演

題 : カエルツボカビってどんな生き物 ?
宇根有美（麻布大学獣医学部病理学研究室准教授）
皮膚につくカビ−真菌とスキントラブル
松丸薫巳（持 田 ヘ ル ス ケ ア 株 式 会 社 学 術 マ ネ ージャー）

活になくてはならないものとなっている . さらに植物 ,動物が土に還っていくプロセスを考えれば地球環境にカビの存在は必要欠くべからざるものである . このように , ヒトの生活にとって , カビは良い面と悪い面とがあることは良く知られている . 本講座では , まず , 麻布大
学 , 宇根准教授が , 世界的規模の両生類の絶滅 , 減少に関係する新興病原体とされ , 最近 , 日本でも演者自身らがそれによるカエルの大量死を初めて発見 , 報告した ,カエルツボカビについて , その経緯などを講演した . 次

カビってクスリの材料に ?
三上するカビは嫌われているが , 一方でカビの力を利用してに , 持田ヘルスケア株式会社 , 松丸学術マネージャーが ,襄（千葉大学真菌医学研究センター長）

水虫 , たむし , フケ症など , ヒトのスキントラブルの原因となっている , 真菌による皮膚疾患や , それらをどう防いだらよいかなどについて紹介し , 更に , 三上真菌医学研究センター長は , カビがクスリの材料としてどのよ
うに役立っているかなどについて , 本研究センターの研究成果なども交えて解説した .

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻

2008

103

講
第 114 回会（第 114 回〜第 118 回）

1 月 28 日

第 117 回 10 月 28 日

場所 : センター講堂

場所 : センター講堂

麹菌の低水分環境への適応現象& Molecular Biology, University of Debrecen,

原

清一博士（キッコーマン株式会社）（担当 : 三上
第 115 回演

Gyula Batta襄）

Hungary）

Transcriptional regulation of the fission yeast cell2 月 28 日

separation

場所 : センター講堂

Maria Luiza Morettii 教 授（ ブ ラ ジ ル・ カ ン
ピーナス大学医学部）（担当 : 川本

第 116 回場所 : センター講堂

襄）

日英菌学会交流講演会

Geoffrey M. Gadd 教授（ The University of

3 月 10 日

Dundee; College of Life Sciences）

場所 : センター講堂

関水和久教授（東京大学大学院薬学系研究科
微生物薬品化学）カイコ幼虫の真菌感染モデルを用いた病原性遺伝子の探索（担当 : 川本進）

第 118 回 11 月 14 日

Candidemia and Candidiasis（担当 : 三上博 士（Department of Genetics

演題 :Fungi as geoactive agents; metal, radionuclide

and mineral transformations and relevance toweathering, elemental cycles and bioremediation

Geoff Robson 博士（The University of進）

Manchester; Faculty of Life Sciences）
演題 :Programmed cell death in filamentous fungi（担当 : 横山耕治）

104

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

2008 真菌医学研究センター報告会
日時 : 平成 20 年 12 月 26 日
会場 : B1 講堂

12 : 50 〜 17 : 30

真菌医学研究センター報告会は , 毎年最終金曜日に開真菌資源 , 生態分野
横山耕治

准教授

田口英昭

助教

催され , 今回で第 4 回目を迎えた . 本会はセンター教員

機能形態分野の情報交換を目的として「研究の総括・業績・その他活川本動」について「報告と目標」の発表を行っており , セン

山口正視

准教授

清水公徳

助教

ターの研究方向性を決める上で重要な場となっている .

進

教授

伊藤恵美子

助教

系統・化学分野
五ノ井教授

真菌感染分野

矢口貴志

透

准教授

亀井克彦

教授

田中玲子

助教

佐野文子

准教授

松澤哲宏

栗田啓幸

助教

松尾高稔

大荒田素子

芝崎あずさ

渡辺

弘

佑介

豊留孝仁

志賀祐介

落合恵理

高分子活性分野
三上

襄

助教

哲

助教

報告会ワーキンググループ

教授

知花博治

知花博治

准教授

伊藤恵美子

宇野

助教

滝澤香代子

潤

松澤哲宏
鎗田響子

千葉大学

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008105

真菌医学研究センター 2008 年度ベスト論文賞
研究者の研究意欲の向上を目指して , 昨年度に創設したベスト論文賞については , 2 年目となる今年も研究には修了することが出来ることになっています .

残念ながら , 今年度は教員については , 推薦が有りま推進チームのリーダーとサブリーダー（川本教授 , 亀せんでしたが , すでに理化学研究所や阪大との共同研

相当で , 落合恵理さんの論文『Inhalation of Stachybotrys

菌に関する研究で , その病原性の発現に C-type レクチ

井教授）に選考を依頼しました . その結果 , ポスドク

chartarum causes pulmonary arterial hypertension in mice』と ,博士課程の院生の康穎倩の論文『Trf4 is a useful genefor discrimination of Candida tropicalis from other medicallyimportant Candida species を含む 3 報の原著』の推薦がありましたので , 2008 年度のベスト論文賞として , 発表
し , 1 月 5 日に授与式を行いました .

落合さんの論文は , 真菌胞子の吸入による肺高血圧症に関する研究で , Stachybotrys chartarum の胞子を経気管的に反復投与したマウスで肺動脈壁中膜・内膜の肥厚究として , 当センターの教員が行ったマラセチア属真ンである Mincle が関与していることを明らかにした研究成果で , 米国科学アカデミー紀要『Proceedings of the

National Academy of Sciences』1 月 19 日の週にオンライン掲載されるなど , 新しい分野での研究も進展しています.

今後 , センターの教員が世界的な研究を積極的に進めて , 選考委員会が困る程の成果がでることを期待しています .

および狭窄 , 右室圧の上昇が生じることを確認し , これ（B）ポスドク : 落合恵理

見したことに基づく研究です . この研究はその後更に発Y, Nagaoka T, Sato K, Sato A, Shibuya K: Inhalation of

らがヒトの肺高血圧症に非常に類似していることを発展し , 室内環境内に多く浮遊する真菌の菌種を用い , 本
病変形成の菌種間差および菌株間差について検討を進
め , S. chartarum, Aspergillus fumigatus および Cladosporium

cladosporioides では , 各々複数の株で同様の肺動脈病変が形成されることを確認するなど , 新たな知見が見出された優れた研究で , ヒト疾患モデルとして治療にも通じる
将来が楽しみな研究です .

康さんの研究は , 病原真菌の新しい同定法の開発

や , 病原真菌クリプトコックスの新しい遺伝子型の発見の論文です . さらには , 康さんは , 病原放線菌である Gordonia について , これまで分類に用いてきた 16S

Ochiai E, Kamei K, Watanabe A, Nagayoshi M, Tada
Stachybotrys chartarum causes pulmonary arterial hypertension
in mice. Int J Exp Pathol 89: 201-208, 2008.

（C）院生 : 康穎倩1 ）Kang Y, Iida S, Yamamoto S, Kogure T, Tanaka R,

Mikami Y: Trf 4 is a useful gene for discriminationof Candida tropicalis from other medically important
Candida species. Jpn J Med Mycol 49: 39-43, 2008.

2 ）Kang Y, Takeda K, Yazawa K, Mikami Y: Phylogenetic

studies of Gordonia species based on gyrB and secA1 gene
analyses. Mycopathologia, 2008, in press.

rRNA 遺伝子情報による分類や同定方法より優れた分類3 ）Kang Y, Tanaka H, Luiza Moretti M, Mikami Y: New

系を構築した論文です . 康さんは , これらの研究で , 医AIDS patient in Brazil. Microbiol Immunol 2008, in

体系としての gyrB や secA1 遺伝子を用いた新しい分類体
学薬学府の博士課程の 1 年間の短縮が認められて , 3 月

106

千葉大学

ITS genotype of Cryptococcus gattii isolated from anpress.

真菌医学研究センター報告

第 12 巻2008

―――――――― 編 集
川

本

委

員

会 ――――――――進（分子機能研究部門

機能形態分野・委員長）

佐 野
大荒田

文
素

子（病原真菌研究部門
子

真菌感染分野）矢口貴志（病原真菌研究部門

系統・化学分野）

横山

耕治（病原真菌研究部門

真菌資源開発分野）山

口

正視（分子機能研究部門

機能形態分野・ワーキンググループ長）

知

花

博

治（分子機能研究部門

高分子活性分野）

平成 21 年 3 月発行
編集発行者

千葉大学真菌医学研究センター〒 260-8673
千葉市中央区亥鼻 1 丁目 8 番 1 号
電話
印刷社

043（222）7171（代）

株式会社

正

文

社

〒 260-0001
千葉市中央区都町 1−10−6
電話

千葉大学

043（233）2235（代）

真菌医学研究センター報告

第 12 巻

2008

107

POST

千葉大学真菌医学研究センター

御中Medical Mycology Research Center（MMRC），
Chiba University
1－8－1

Inohana，Chuo-ku，Chiba 260-8673
Japan

郵 便 は が き

千葉市中央区亥鼻１丁目８番１号

２６０ ８６７ 3〒260-8673

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№

千葉大学真菌医学研究センター報告 第12巻 受領書
Annual Report of Medical Mycology Research Center（MMRC），
Chiba University，No.12（2008）
日付 Date:機 関
名Institution: 
－
）
所 在
地（〒
Address : 
１．この刊行物を今後も必要とします
Further issues of this publication are wanted.
２．この刊行物を必要としません
This publication is no more wanted.
署
名
Signature:46%