（【短報】）

産業動物

接合菌が肝臓に壊死桿菌症様病巣を形成した黒毛和種子牛の 例
田中佑典 ）

豊留孝仁 ）猪熊壽）

片山堀内雅之 ）古林与志安 ））帯広畜産大学獣医学研究部門（〒）十勝 NOSAI（〒‐‐帯広市稲田町西

帯広市川西町基線

要享輔 ）番地謙一 ）渡邉線））

約

黒毛和種 日齢の雌子牛の剖検時に、肝臓実質に多発する直径約 cm 大の黄白色菊花状壊死巣を認め、その特徴的な肉眼病変から、感染による肝臓多発性巣状壊死を疑った。しかし、その後の病理組織学的検査および分子生物学的検査の結果から、肝臓病変は接合菌の一種であるの感染によって生じたものであることが確認された。肝臓多発性巣状壊死は、壊死桿菌症をはじめ細菌感染性のものが多く報告されているが、鑑別診断に真菌感染症も加える必要があると考えられた。
キーワード：黒毛和種牛、肝臓多発性巣状壊死、壊死桿菌症、
北獣会誌

牛の肝臓における巣状壊死はと畜検査や剖検時に偶発，〜（）病理学的検査結果的に観察されることが多い病変である。特に、肝臓の直径数 cm 程度の円形〜菊花状の多発性の巣状壊死は、壊）病理解剖検査

死桿菌（）感染によって形

肝臓の全葉において、直径 ．〜 ． cm 大の菊花状〜成される特徴的な病変の一つと考えられており、診断的円形の黄白色巣状病変が、表面および割面に多発してい価値は高いとされている［ 、］。著者らは、肝臓全葉に多た（図発性巣状壊死を認めた黒毛和種子牛の）。同病巣の割面は黄白色を呈していた。また、症例を経験し、その特徴的な肉眼病変から壊死桿菌症を疑った。しかし、そのあとの病理学的検査結果から、接合菌の一種であるの感染による肝臓多発性巣状壊死と診断した。接合菌が壊死桿菌症様の肉眼病変を形成することは、診断上有用な知見と考えられたのでここに報告する。

症例

症例は黒毛和種の雌子牛で、きを認め、日齢より後躯のふらつ日齢で起立不能となった。以降、症状に改善が認められず、 日齢で帯広畜産大学に搬入され、剖図検に供された。

．肝臓実質で認められた多発性巣状壊死（スケール＝ cm）

全葉にわたって直径 ．〜 ． cm 大の菊花状、円形の黄白色巣状壊死病変が多発している。
連絡責任者：堀内〒

北獣会

雅之
‐

帯広畜産大学獣医学研究部門
帯広市稲田町西

TEL：−誌）

（−線

FAX：−

−

E-mail : horiuchi@obihiro.ac.jp

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第一胃と第四胃の粘膜面には直径 ．〜cm 大の糜爛と栓が散発していた（図）。また、壊死巣のごく一部の潰瘍が多発していた。後躯のふらつきの原因となりうる領域で、中腔状を呈する真菌が観察された（図所見として、腹大動脈の分岐部から外腸骨動脈の大腿部一胃および第四胃の潰瘍病変部では、好中球主体の炎症にかけてのcm の器質化した血栓、両後肢の筋肉細胞が筋層に至るまで多量に浸潤し、同部では中腔状をの壊死が観察された。本症例のふらつきや起立不能の臨呈する真菌も認められた。その他、主要臓器に著変は認

床症状は塞栓症によるものと考えられたが、その詳細はめられなかった。

〜

Anraku らが報告した［ ］。剖検時、胸腺の発達は正常で）。第肝臓、および第一胃と第四胃における病原体を確認するためにグラム染色、ワルチン・スターリー染色、PASあり、その他主要臓器で著変は観察されなかった。
）病理組織検査

染色、グロコット染色を実施した。その結果、肝臓の壊定法による HE 染色による検索では、肝臓では肉眼変

死巣内において PAS 染色陽性、グロコット染色で強染）。

される真菌が、HE 染色で観察されたものよりも多数観壊死巣では、好中球とリンパ球を主体とする炎症細胞が察された。これら真菌は薄い壁に囲まれ中腔状を呈してびまん性に浸潤していた（図おり、菌幅は化と一致して、壊死巣が多発性に観察された（図）。肝内静脈には微小血〜µm と不均一であった。また、菌糸は直角〜鋭角に不規則に分岐していた（図）。真菌は、主に壊死巣内に分布していたが、血管壁への浸潤も散見された。また、第一胃および第四胃では、潰瘍部において PAS 染色で陽性を示し、グロコット染色で強染され図 ．肝実質における壊死巣（HE 染色、スケール＝µm）
壊死巣内には豊富な細胞成分の浸潤が認められ、壊死巣内は一様ではない。

図 ．肝内静脈で観察された血栓（HE 染色、スケール＝ µm）

図．肝実質における壊死巣の拡大像（HE 染色、スケール＝ µm）

壊死巣内には、壊死細胞、核崩壊産物が観察された他、好中球とリンパ球をはじめとする炎症細胞がびまん性に浸潤していた。

図 ．肝臓壊死巣に認められた真菌（HE 染色、スケール＝ µm）
北獣会誌

（）

（）

桿菌症の肉眼病変と類似していると Uzal らによって指摘されており、肉眼的な鑑別は困難とも報告されている［ ］。肝臓に発生する壊死の多くは−（％）お よ び（−％）といった細菌感染に由来するものであり［ ］、本症例も肝臓の多発性巣状壊死という肉眼所見からは-感染による壊死桿菌症が強く疑われた。しかし、その後の検査から感染による病変であることが明らかとなり、組織学的検査の重要性が再確認された。
感染と壊死桿菌症の鑑別には組織学的検査が必須であると考えられるが、今回、当初の組織学的検
図 ．肝臓壊死巣内に認められた真菌（グロコット染色、スケール＝ µm）

査では真菌の観察は困難であった。そこで、本症例と壊真菌は不整な角度に分岐しており、不整な菌幅に囲まれ中腔状を呈していた。

死桿菌症の組織病変の相違を検討した。壊死桿菌症の肝臓の巣状病変部は、組織学的には好酸性均質無構造領域の壊死巣として観察され、白血球などの細胞成分はそのる真菌が観察された。それら真菌は、肝臓で認められた壊死巣周囲を取り囲み、周囲の肝組織から明瞭に区画すものと形態学的特徴が一致した。グラム染色およびワルる［ ］。それに対して本症例では、壊死巣の内部への炎

チン・スターリー染色を行ったが、肝臓の壊死巣では明症細胞のびまん性浸潤が観察された。この壊死巣の組織確な細菌は観察されなかった。

病変の違いは、壊死桿菌症との鑑別に有用であると考え）分子生物学的検査られた。また、Uzal らは、病理組織検査で確認された真菌を同定するために分子の鑑別には、感染と壊死桿菌症感染時に形成される血栓および生物学的検査を行った。パラフィン包埋された壊死巣を血管炎の所見の有無が有用であるとしている［ ］。本症含む肝臓の組織から、NucleoSpinTissue（Macherey-

例においても多発性の微小血栓が確認されており、UzalNagel, Germany）を用いて DNA を抽出し、ITS5 ＆ ITSらの報告と矛盾しないものであった。本症例のように、

4 プライマーセットを用いて、ITS 領域を EmeraldAmp

HE 染色のみの組織検査では真菌が明瞭に認められない

PCR Master Mix（タカラバイオ、滋賀）を用いた PCR

ような症例であっても、壊死巣内への炎症細胞の浸潤がによって増幅した［ 、］。得られた認められた場合や、血栓、血管炎が認められた症例では、bp の増幅産物をダイレクトシークエンス法によって塩基配列を解析し、PAS 染色とグロコット染色を実施することが組織診断

BLAST（https : //blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi）にを行ううえで必要と考えられた。

-

本症例では、第一胃および第四胃で観察された真菌は、として登録されている複数の遺伝子配列

肝臓で観察された真菌と形態学的に一致していた。また、より相同性を解析した。今回得られた塩基配列は、と−は土壌中に生息する真菌であることから［ ］、％の相同性があった。

考

経口的に摂取された真菌が、第一胃および第四胃の糜察爛・潰瘍部から侵入し、門脈経由で肝臓に達したと推察

BLAST 解析での高い相同性により、今回確認された真菌は接合菌の一種であると判断した。

は、特にオセアニア地域における成牛の流産や子された。
をはじめとする接合菌症の発症には、宿主の免疫機構が密接に関係しており、医学領域では悪性腫牛の肺炎の原因として獣医学上の問題となっている［ ］。

瘍の存在、骨髄移植、薬剤の静脈内投与など、免疫を低また、まれにではあるが、肝臓で直径 ．〜 ． cm のさ下させる背景がある場合に重篤化しやすいと報告されてまざまな大きさの壊死が肝実質に多発することが報告さいる［ ］。本症例では、胸腺の発達は正常であり、個体れている［ ‐ ］。わが国では牛における本菌の感染例はの免疫低下を示唆する所見は得られず、免疫機能の状態肝臓に病巣を形成した例が報告されており［ ］、北海道でも新生子牛の小脳、肝臓、腎臓などへの感染例の報告がある［ ］。
北獣会誌

による肝臓の肉眼病変は、壊死（）と発病との因果関係は不明であった。
以上のように、本症例で肝臓に認められた壊死桿菌症様の多発性巣状壊死は、真菌感染症と診断された。肉眼（）332, Academic, San Diego US (1990)

検査は、病理学的検査のうち重要な行程の一つである。
しかし、本症例のように特徴的な肉眼病変を呈した症例［ ］Uzal FA, Connole MD, OʼBoyle D, Dobrenov B,

であっても、確定診断には組織学的検査を実施すること

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北獣会誌（）