* 2024年3月改訂(第2版)
2018年 12月作成

HISTOFINE
研究用試薬

ヒストファイン
製造販売元

第一抗体

抗ヒトc-kit 遺伝子産物ポリクローナル抗体(AT 用)〒 1 0 4 -8 4 0 2
東京都中央区築地 6-19-20
TEL. 03(3248)2208 FAX. 03(3248)2243(動物種：ウ サギ）
包装： 50テ スト(6.5mL)

Code：AT1339-1■本品は、自動染色装置ヒストステイナーAT用の試薬 第一抗体である。
■ 特異性及び抗原分布：ヒ ト c- kit 遺 伝 子 産 物 (分 子 量 145kDa)と 特 異 的 に 反 応 す る 。c- kit 遺 伝 子 産 物 は SCF(Stem cellFactor)の レ セ プ タ ー で あ り 、結 合 す る こ と に よ り 未 分 化 造 血 前 駆 細 胞 の 増 殖 と 分 化 、肥 満 細 胞 の 増 殖 誘 導 、メラノサ イ ト や 生 殖 細 胞 の 移 動 や 分 化 が 認 め ら れ る 。c- kit 遺 伝 子 産 物 は 、肥 満 細 胞 や Cajalの 介 在 細 胞 (Interstitial cellsof Cajal；ICCs)由 来 と 考 え ら れ て い る 消 化 管 の GIST (Gastrointestinal stromal tumor)、精 上 皮 腫 /未 分 化 胚 細 胞
腫 や 肥 満 細 胞 由 来 腫 瘍 の 大 部 分 及 び 悪 性 黒 色 腫 や 肺 癌 の 一 部 な ど で 発 現 が み ら れ る 。正 常 で は 、肥 満 細 胞 や 精 細 管 、乳管上皮、胃の壁細胞、神経膠細胞、メラノサイトの一部に発現がみられる。
■ 製 法 ： ① 免 疫 原 ・ ・ ・ ヒ ト c- kit 遺 伝 子 産 物 の C末 端 ペ プ チ ド 。
②免疫法・・・免疫原をウサギに免疫して抗血清を得ている。
■ 精製法： ウ サ ギ 抗 血 清 よ り 、 上 記 ペ プ チ ド で ア フ ィ ニ テ ィ ー 精 製 し て い る 。
1.内容
第 一 抗 体 ・ ・ ・ 抗 ヒ ト c- kit 遺 伝 子 産 物 ポ リ ク ロ ー ナ ル 抗 体 (動 物 種 ： ウ サ ギ )。
液状。
ウ シ 血 清 ア ル ブ ミ ン (BSA)と 、 0.1％ ア ジ 化 ナ ト リ ウ ム を 含 む リ ン 酸 緩 衝 生 理 食 塩 水 (PBS)中 に て 、 即 時 使 用 可 能 な
抗体濃度に希釈済み。
1バイアル中に6.5mLを含む。
* 2.使 用 目 的組 織 ・ 細 胞 中 の ヒ ト c- kit 遺 伝 子 産 物 の 染 色 。 GISTの 判 別 に 有 用 。
ホルマリン固定パラフィン包埋切片の免疫染色に使用できる。
研究用としてのみ使用すること。
* 3.使 用 方 法1) 本品を他の試薬とともに試薬ラック(AT 用)にセットする。各試薬のボトルキャップを外す。
2) ヒストステイナーAT の操作法に従って染色を開始する。
3) 染色終了後、セットした試薬はすみやかにボトルキャップをして、試薬ラック(AT 用)ごと取り出し 2－8℃で保存する。
* 4.染 色 方 法 の 設 定

組織切片の場合、試薬の反応温度、反応時間を下記に設定する。
《タイプ：HRP Heat》
プロトコル名c-kit-ATDewax

TRDewax Buffer TRtypeN-AT

温度(℃)

ブロッキング

試薬名101

Bufferc-kit-AT

第一抗体
第一抗体
反応時間(分) 反応温度 (℃)
2025■参考：上述の染色条件で良好な染色が得られない場合は、裏面を参照してください。

5.貯法及び使用上の注意
1. 2－8℃保存。
2. 使用期限はラベルに記載されているので使用前に確認すること。
3. 使用後は速やかに冷蔵保存すること。
4. 異なるロットの試薬や他製品の試薬を混ぜたりしないこと。
6.取 扱 い 上 (危 険 防 止 )の 注 意
1. 使用期限の過ぎた試薬は使用しないこと。
*2. 本品に関する化学物質の安全情報は安全データシート(SDS)を参照すること。
3. 本品を吸い込んだり、眼、口、皮膚、衣類などへの接触を避けること。
4. 本品の廃棄の際には、各施設や地域及び国のルールに従い、適切に廃棄すること。
5. 本品は、動物由来成分を含むので、取扱いに注意が必要である。
*6. 本品にはアジ化ナトリウムが含まれている。アジ化ナトリウムは水道管に含まれる銅、鉛との反応によって爆発の危険性があるので、多量の水とともに洗い流すこと。
*7. ヒト由来の検体は、感染の恐れがあるので適切な取扱い及び廃棄法を用いるとともに、免疫染色を実施するにあたって、関連技術及び操作法に充分習熟しておかなければならない。

7.参 考 文 献(1) Matsuda R, et al. Expression of the c-kit protein in human solid tumors and in corresponding fetal and adult normal tissues. Am JPathol. 1993 Jan;142(1):339-46.
(2) Tsuura Y, et al. Preferential localization of c-kit product in tissue mast cells, basal cells of skin, epithelial cells of breast, small celllung carcinoma and seminoma/dysgerminoma in human: immunohistochemical study on formalin-fixed, paraffin-embedded
tissues. Virchows Arch. 1994;424(2):135-41.
(3) Yamataka A, et al. A lack of intestinal pacemaker (c-kit) in aganglionic bowel of patients with Hirschsprung's disease. J Pediatr
Surg. 1995 Mar;30(3):441-4.
(4) Yamataka A, et al. Lack of intestinal pacemaker (C-KIT-positive) cells in infantile hypertrophic pyloric stenosis. J Pediatr Surg.
1996 Jan;31(1):96-8; discussion 98-9.
(5) Yamataka A, et al. Localization of intestinal pacemaker cells and synapses in the muscle layers of a patient with colonic
hypoganglionosis. J Pediatr Surg. 1996 Apr;31(4):584-7.
(6) Yamataka A, et al. Intestinal pacemaker C-KIT+ cells and synapses in allied Hirschsprung's disorders. J Pediatr Surg. 1997
Jul;32(7):1069-74.
(7) Arber DA, et al. Weiss LM. Paraffin section detection of the c-kit gene product (CD117) in human tissues: value in the diagnosis ofmast cell disorders. Hum Pathol. 1998 May;29(5):498-504.
(8) Kindblom LG, et al. Gastrointestinal pacemaker cell tumor (GIPACT): gastrointestinal stromal tumors show phenotypiccharacteristics of the interstitial cells of Cajal. Am J Pathol. 1998 May;152(5):1259-69.
(9) Yamataka A, et al. Abnormal distribution of intestinal pacemaker (C-KIT-positive) cells in an infant with chronic idiopathic
intestinal pseudoobstruction. J Pediatr Surg. 1998 Jun;33(6):859-62.
(10) Hirota S, et al. Gain-of-function mutations of c-kit in human gastrointestinal stromal tumors. Science. 1998 Jan 23;279(5350):577-80.
(11) Ernst SI, et al. KIT mutation portends poor prognosis in gastrointestinal stromal/smooth muscle tumors. Lab Invest. 1998
Dec;78(12):1633-6.
(12) Komuro T, et al. Ultrastructural characterization of the interstitial cells of Cajal. Arch Histol Cytol. 1999 Oct;62(4):295-316.
(13) 秋濱 玄 他. Gastrointestinal stromal tumor の組織発生及び悪性度の解析. 岩手医誌. 1999;51:381-390.
(14) Natkunam Y, et al. Utility of paraffin section immunohistochemistry for C-KIT (CD117) in the differential diagnosis of systemic
mast cell disease involving the bone marrow. Am J Surg Pathol. 2000 Jan;24(1):81-91.
(15) Maeyama H, et al. Familial gastrointestinal stromal tumor with hyperpigmentation: association with a germline mutation of thec-kit gene. Gastroenterology. 2001 Jan;120(1):210-5.
*■参考：組織の固定状況等により、下記のいずれか又は複数の染色条件を変更することで、良好な染色が得られる場合がある。

ただし、組織へのダメージや偽陽性化、偽陰性化が起こるおそれがあるため、研究者自身の責任において至適条件をよく検討すること。
■染色強度をより強くしたい場合
・ 抗 原 賦 活 化 の 「 温 度 (℃ )」 を 101℃ か ら 103℃ へ 上 げ る 。
・「 第 一 抗 体 反 応 時 間 (分 )」 を 20分 か ら 30分 へ 延 長 す る 。
・「 第 一 抗 体 反 応 温 度 (℃ )」 を 25℃ か ら 37℃ へ 上 げ る 。
・抗原賦活化の処理時間を長くする。
注 ：「 TR」 の 試 薬 が 、 ス ラ イ ド 1 枚 の 染 色 に 対 し て 2 テ ス ト 分 必 要 で す 。
《タイプ：HRP Heat》から《タイプ：Special》に変更を行います。
《タイプ：Special》の登録、設定は、弊社にて行いますのでご連絡ください。
■染色強度をより弱くしたい場合
・ 抗 原 賦 活 化 の 「 TR」 を TRtypeN-ATか ら TRpH9-AT又 は TRpH6-ATに 変 更 す る 。
(TR-typeN(AT用)(Code：AT1539-1)の替わりにTR-pH9(AT用)(Code：AT1534-1)又はTR-pH6(AT用)(Code：AT1535-1)を用いる。)
・ 抗 原 賦 活 化 の 「 温 度 (℃ )」 を 101℃ か ら 96℃ へ 下 げ る 。
■内因性ペルオキシダーゼに起因するバックグラウンド染色がみられる場合
・「 ブ ロ ッ キ ン グ 」 を Bufferか ら H2O2-ATに 変 更 す る 。
(過 酸 化 水 素 水 (AT用 )(Code： AT1524-1)を 用 い る 。 )