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Carna Newsletter
FGFR�を標的とした胆管がん治療薬の開発

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～副作用と薬剤耐性獲得の克服～

胆管がん(Cholangiocarcinoma; CCA)は、肝細胞がんに次いで�番目に多い原発性肝がんであり、がん関連死亡の ~�% を占めています �)。外科的切除が有効な根治的治療とされていますが、切除後に再発を認める症例が多く、また症状が現れない患者が多い (~��%) 為、診断が進行後期となり切除に至らない症例も少なくありません �)。この様な背景から胆管がんの治療では薬物療法が大きな役割を果たすと期待されています。

FGFR� 融合遺伝子陽性胆管がん
ここ数年、胆道がんに対してゲノミクスに基づいた治療法が急速に進歩しており、中でも FGFR� 融合タンパク質 を 標 的 と し た 肝 内 胆 管 が ん ( intrahepaticcholangiocarcinoma; iCCA ) の治療に関心が寄せられています。FGFR�融合遺伝子はiCCA患者の�� - ��%という高い頻度で見られます �)�) (Fig.�)。Pan - FGFR 阻害剤(pemigatinib, inﬁgratinib 及び futibatinib)が第II相試験における科学的根拠を基にFGFR� 融合遺伝子陽性
胆管がんの治療薬として FDA から承認を受けていますが、FGFR� 及 び FGFR� 阻 害 に よる 副 作 用、並 び に
FGFR� on- target耐性変異の獲得といったネガティブな側面により薬剤から得られる恩恵が制限されています�)�)。

副作用およびFGFR�薬剤耐性変異
Pan- FGFR 阻害剤に最もよく見られる副作用は FGFR�
阻害による高リン血症と FGFR� 阻害による下痢です。
FGFR� を阻害すると腎 臓 でリン が 再 吸 収されます。
Pan- FGFR阻害剤の第II相試験においてCCA患者の��%から ��%で血中リン濃 度の上昇が 報告されています�)�)�)。高リン血症に対しては食事制限やリン吸着薬によって管理する必要があり、場合によってはpan-FGFR阻害剤の投与量を減らす、もしくは治療を中止することもあります �)�)。

FGFR�の薬剤耐性変異の獲得は、FGFR阻害剤による治療後に病状が進行したFGFR�遺伝子異常陽性iCCA患者に高い頻度 ( 約��%) で確認され、V��� gatekeeper変異及びN���, E���, K��� molecular brake 変異がその多くを占めます 9)。ヒンジ領域に隣接する gatekeeper
部位でのアミノ酸置換は薬物と FGFR� の相互作用に影響を与えます。また N���(αC helixとβ� strandの間のloop), E���(ヒンジ領域 ) 及び K���(β� strand) の � つのアミノ酸残基は非リン酸化 FGFR� において水素結合のネットワークを形成し、FGFR�を自己阻害状態に保ちます(Fig.�) ��) が、これらのアミノ酸が変異するとこのネットワークが壊れ、FGFR� は恒常的に活性化されます��)��)。
これらの問題を解決すべく、現在、副作用及び FGFR�
薬剤耐性変異を克服することが期待される阻害剤の開発が進められています。

FGFR阻害剤の開発
RLY- ���� (Lirafugratinib) はFGFR�選択的にP- loop の先端に位置する C���と共有結合する阻害剤であり、長時間分子動力学シミュレーションを通して観察された
FGFR� とその他の FGFRs の構造動力学の違いを利用してデザインされました。P - loop はFGFR� においては可動範囲が広く素早い動きを示しますが、FGFR�では動きがそれほどダイナミックではありません。RLY - ����の可逆的な結合はこれらの違いを利用し、FGFR� に対

カルナバイオサイエンス株式会社〒���-���� 神戸市中央区港島南町�-�-� BMA�F078-302-7091（営業部直通）
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してP- loopを硬く伸長した状態にして共有結合を形成しにくくしますが、FGFR�に対してはP- loop の構造にほとんど影響を与えないため、共有結合形成を可能にします。この FGFR�との 効 率 的 な 共 有 結 合 形 成 によりRLY - ���� は FGFR� への高い選択性を得ます �)�) 。

KIN-���� は V���F gatekeeper 変異体を含む多くの獲得 耐 性 変 異体 を阻害するようデ ザインされました。
Gatekeeper は、キナーゼドメインの N - lobe と C - lobeを結ぶヒンジ領域に隣接するβ strand 上に位置し、この部位が大きなフェニルアラニン残基に変異するとキナーゼタンパク質のバックポケット領域が狭くなるため、このスペースを結合部位とする化合物は結合できなくなりま す。こ の 問 題 を 克 服 す る た め、KIN - ���� は、gatekeeper 残 基 付 近 の 立 体 的 な か さ を 減 ら し、activation loop上にある DFG のアスパラギン酸残基の主鎖 NH と強力に相互作用するよう設計されました。また KIN- ���� はアクリルアミドを含み、P- loop上の C���と共有結合し、FGFR�を不可逆的に阻害します��)��)。

RLY - ����とKIN - ����は共に、in vitroにおいてFGFR�のgatekeeper変異体やmolecular brake変異体の活性を阻害すること、並びにこれらの FGFR� 耐性変異体を持つ Xenograft model において腫瘍形成を抑制することが示され、RLY - ���� に至っては臨床試験において有意な血中リン濃度の上昇を起こすことなく、iCCA 患者の腫 瘍を退 縮させたことが 報 告されています �)��)��)。
RLY - ���� と KIN- ���� を含む FGFR 阻害剤開発の近年の進展により、FGFR を狙った治療はがん標的治療の最前線に位置付けられるようになりました。
Carna 提供 FGFR� 阻害剤開発サポート製品/サービス・キナーゼタンパク質製品

弊社では FGFR� 変異体タンパク質製品及びその他のFGFRタンパク質製品を多数取り揃えております。

( FGFR�変異体タンパク質製品 ) (Table.� )・Gatekeeper 変異体：V���F, V���I, V���L・Molecular brake変異体：N���D, N���H, N���K,E���A・共有結合部位変異体：C���A・� 重 変 異 体 ( 共 有 結 合 部 位 及 び gatekeeper)：C���A/V���I, C���A/V���L
・FGFR阻害剤投与後耐性を獲得し病状が進行した iCCA
患者に高頻 度で同定された変異体：M���I, M���L,L���V, K���M, M���I/M���L (これらは現在開発中)(FGFRタンパク質製品）
・FGFR�, FGFR�, FGFR�����.��.��
全製品自社内で製造されており、GSTタグ製品の他にN 末端にビオチン分子を � つだけラベリングしたビオチン 化 タ ン パ ク 質 製 品、並 び に 活 性 化 未 処 理(non-activated)のビオチン化タンパク質製品もご提供しております。活性評価のみならず結合評価を含む幅広い生化学アッセイでご活用いただけます。

Table �. FGFR� variant's sensitivity to FGFR inhibitors(S, Sensitive; R, Resistance) �)�)��)��)��)��)FGFR2 Variant Pemigatinib Infigratinib Futibatinib
V564F

R

R

R

Lirafugratinib/RLY-4008

KIN-3248

SS

V564I

S, RRSSS

V564L

RR

S, RS

SN549DRR

S

S

N.D.

N549H

S

S

S

S

S

N549K

R

R

S

S

S

E565A

S, R

S, R

S

S

S

C491A

N.D.

S

N.D.

N.D.

N.D.

M537I

S

S

S

S

S

L617V

S

R

S

S

S

K659M

S, R

S, R

S

S

S

M537I/M538L

S

S

S

N.D.

S

・アッセイキット製品 (MSA)( N.D.; No data)

・生化学 ( セルフリー ) プロファイリング／スクリーニン
グアッセイ受託サービス

・NanoBRET™ TE Intracellular キナーゼアッセイサー
ビス ( セルベースアッセイ )info@carnabio.com までお気軽にお問合せ下さい。

引用 :�) Nat Rev Gastroenterol Hepatol. ����; ��(�): ���-���. Banales
JM.
�) Annu Rev Med. ����; ��: ���-���. Vogel A.
�) Cancer Discov. ����; �(�): ���-���. Wu YM.
�) Cancer Discov. ����; ��(�): ����-����. Subbiah V.
�) P r o c N a t l A c a d S c i US A . � � ��; � � �(�): e � ��� �� �� � � .
Schönherr H.
�) J Clin Oncol. ����; ��(�): ���-���. Javle M.
�) Lancet Oncol. ����; ��(�): ���-���. Abou-Alfa GK.
�) J Clin Oncol. ����; ��: ����. Goyal L.
�) Clin Cancer Res. ����; ��(�): ���-���. Wu Q.
��) Cells. ����; �(�): ���. Dai S.
��) Mol Cell. ����; ��(�): ���-���. Chen H.
��) Nat Commun. ����; ��(�): ����. Spahn S.
��) J Med Chem. ����; ��(�): ����-����. Tyhonas JS.
��) Clin Cancer Res. ����; ��(��): ����-����. Balasooriya ER.
��) N Engl J Med. ����; ���(�): ���-���. Goyal L.
��) Proc Natl Acad Sci USA. ����; ���(��): E����-��. Tan L.

このニュースレターの中で論文から引用した情報の日本語翻訳文はカルナバイオサイエンス社が作成しました。

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