2022年6月24日改訂

ST-L400トレーニングテキスト（ソフトVer.2.2.1.8対応）

目次
1. 研修内容
2. 分析の準備
3. 分析（固相抽出操作）
4. サンプルの測定
5. 日常メンテナンス
6. エラー発生時の対応

7. 問い合わせ

2

1．研修内容

全自動固相抽出装置ST-L400をもちいて、STQ法の分析を行うこと。
※サンプル、標準品、その他消耗品等はお客様でご準備下さい。

32．分析準備①サンプルの準備②固相の準備③溶媒の調整

4

2.

分析準備

①サンプルの準備
STQ法抽出フロー
試料 10g (穀類 5g + 水 10mL)

アセトニトリル

10mL

ホモジナイズ
NaCl（食塩）

1g

クエン酸3Na2水和物

1g

クエン酸水素2Na1.5水和物

0.5g

MgSO4（無水硫酸ﾏｸﾞﾈｼｳﾑ）4g
撹拌（手で振とう 1分間）

遠心分離（3500rpm

5分間）

アセトニトリル層分取

1mLに定容GC-MS/MS(orGC-MS)

2mLに定容LC-MS/MS

2mL※GC-B(2106),LC(2106)共通

52.

分析準備

②固相の準備
メソッド

固相

対象作物

GC-B1

C18-50×2、PSA-30

夾雑成分の少ない作物

GC-B2

C18-50×2、PSA-30、
GCK-20（GCS-20）

色素の多い作物

C18-50×2、PSA-30、SAX-30

脂肪酸の多い作物

C18-50×2、PSA-30、SI-30

カフェインの多い作物

C18-50×2、PSA-30、SI-30、GCK-20（GCS-20）

色素およびカフェインの多い作物

C18-50×2、PSA-30、SAX-30、GCK-20（GCS-20）

色素および脂肪酸の多い作物

GC-B3

LC

C18-50、C18-30、PSA-30

6

2.

分析準備

③溶媒の準備GC法••••

10%（w/w）塩化ナトリウム水溶液：塩化ナトリウム50 gを超純水450 mLに溶解
アセトニトリル-水（9/1）混液：アセトニトリルと水を体積比9:1で混合
アセトン‐ヘキサン(15/85)混液：アセトンとヘキサンを体積比15:85で混合
0.1%ポリエチレングリコール300（PEG300）＋1 ppmフェナントレンd体/アセトン：①PEG300を1 g、1000 ppmフェナントレンd体/アセトン溶液1 mLを100 mLメ
スフラスコに分取し、アセトンで100 mLに定容②①をアセトンで10倍希釈

LC法
•
•

2%ギ酸含有アセトニトリル(用時調製)：ギ酸2 mLをアセトニトリル100 mLに溶解
アセトニトリル-水（8/2）混液：アセトニトリルと水を体積比8:2で混合10倍希釈

LC法検量線作成用混合溶媒（用時調製）•

アセトニトリル-2%ギ酸含有アセトニトリル-［アセトニトリル-水（8/2）］-水（1/1/1/1）：アセトニトリル、2%ギ酸含有アセトニトリル、アセトニトリル‐水（8/2）、水を体積比で1:1:1:1で混合※酸性農薬が分析対象外の場合は2%ギ酸含有アセトニトリルはアセトニトリルに変更して下さい。
※LC-MS/MS測定では測定液組成が感度やピーク形状に影響するため標準液はサンプルと同じ組成液での調製を推奨します。

7

2.

分析準備

②固相の準備ーGC-B法精製イメージ
親水性（極性）

液液分配

疎水性（無極性）
PSA,SAX精製

極性夾雑物

・遊離高級脂肪酸・色素

イオン性夾雑物

対象農薬
SI精製
カフェイン

平面構造夾雑物

C18精製

液液分配

無極性夾雑物
クロロフィル
高級脂肪酸エステル
高級アルコール
ステロール類

トリグリセリド（脂肪）糖類・水溶性の夾雑物

C18
農薬保持

GCK精製

8

参考（ST-L300準拠）①サンプルの準備②固相の準備③溶媒の調整2.

分析準備①サンプルの準備（ST-L300準拠）
STQ法抽出フロー
試料 10g (穀類 5g + 水 10mL)

アセトニトリル10mL(P.5と共通のため省略)
アセトニトリル層
分取GC-B(1502)

抽出液1mL
ACN/W(1/1)1mL

LC (1502)

抽出液2mL
1mLに定容GC-MS/MS(orGC-MS)

4mLに定容LC-MS/MS

10

2.

分析準備

②固相の準備（ST-L300準拠）
メソッド

固相

対象作物

GC-B1

C18-30、C18-50、PSA-30、

夾雑成分の少ない作物

GC-B2

C18-30、C18-50、PSA-30、
GCK-20（GCS-20）

色素の多い作物

C18-30、C18-50、PSA-30、
SAX-30脂肪酸の多い作物

C18-30、C18-50、PSA-30、SI-30

カフェインの多い作物

C18-30、C18-50、PSA-30、SI-30、GCK-20（GCS-20）

色素およびカフェインの多い作物

C18-30、C18-50、PSA-30、
SAX-30、GCK-20（GCS-20）

色素および脂肪酸の多い作物

GC-B3

LC

C18-30、C18-50、PSA-3011

2.

分析準備

③溶媒の準備（ST-L300準拠）
GC法
••
•
•

10%（w/w）塩化ナトリウム水溶液：塩化ナトリウム50 gを超純水450 mLに溶解
アセトニトリル-水（8/2）混液：アセトニトリルと水を体積比8:2で混合
アセトン‐ヘキサン(15/85)混液：アセトンとヘキサンを体積比15:85で混合
0.1%ポリエチレングリコール300（PEG300）＋1 ppmフェナントレンd体/アセト
ン：①PEG300を1 g、1000 ppmフェナントレンd体/アセトン溶液1 mLを100 mLメ
スフラスコに分取し、アセトンで100 mLに定容②①をアセトンで10倍希釈

LC法••

0.4%ギ酸含有メタノール(用時調製)：ギ酸400 µLをメタノール100 mLに溶解
メタノール-水（8/2）混液：メタノールと水を体積比8:2で混合10倍希釈

LC法検量線作成用混合溶媒（用時調製）•

アセトニトリル- 0.4%ギ酸含有メタノール-［メタノール-水(8/2)］-水（1/1/1/1）：アセトニトリル、 0.4%ギ酸含有メタノール、メタノール-水(8/2)、水を体積比で1:1:1:1で混合※酸性農薬が分析対象外の場合は0.4%ギ酸含有メタノールはメタノールに変更して下さい。
※LC-MS/MS測定では測定液組成が感度やピーク形状に影響するため標準液はサンプルと同じ組成液での調製を推奨します。

12

3．分析（固相抽出操作）①装置の起動⑦溶媒をセット②ソフトウェアの起動⑧乾燥ガス圧の確認③サンプルを装置にセット⑨扉の確認④シーケンスの作成-PCモード⑩処理の実行⑤検体情報の入力⑪シーケンスの保存⑥固相をトレーにセット⑫シーケンスの作成-タブレットモード

13

3.

分析（固相抽出操作）①装置の起動

「ON」

「OFF」

本体の電源をオンにしてください※必ずソフトを起動するより先に本体の電源をONにしてください。
※画像は開発中のものです。
実際の装置とは異なることがあります。

14

3.

分析（固相抽出操作）②ソフトウェアの起動
PCモード※タブレットモード切替ボタン

ST-L400ソフト※ソフトより先に本体の電源をONにしてください。

※PCモード切替ボタン

タブレットモード
ST-L400ソフトは前回終了した時点のモードで起動されます。
PCモードで終了した場合…次回起動時はPCモードで起動
タブレットモードで終了した場合…次回起動時はタブレットモードで起動

15

3.

分析（固相抽出操作）③サンプルを装置にセット

サンプルトレーにバイアル・試験管をセットしてください。

サンプルトレー1番を手前に移動させます。
〃

6番を手前に移動させます。

〃11番を手前に移動させます。

16

3.

分析（固相抽出操作）④シーケンスの作成-PCモード
1
3

2 シーケンスに追加したいメソッドを選択

4

5① ファイル選択ウィンドウにチェックを入れます。
② シーケンスに追加したいメソッドを選択します。
③

ボタンでシーケンスにメソッドを登録します。

④ 前処理を実施するメソッドにチェックを入れます。

⑤ 必要に応じて先処理・後処理を選択します。

先処理が必要な場合その日の初めに装置を使用するとき。
GC-B法→LC法などメソッドを変更した最初。
前回の処理がライン洗浄を行ったまま終了したとき。
シリンジが途中で停止している場合。

後処理が必要な場合その日の最後に装置を使用する場合。
GC-B法→LC法などメソッドを変更する前。
溶媒に酸または塩を使用した場合。

17

3.

分析（固相抽出操作）⑤検体情報の入力※※必要に応じて検体情報を入力してください。
（未入力でも実行可能です。テキスト形式で自由に記入できます。）

18

3.

分析（固相抽出操作）⑥固相をトレーにセット
1020

後

前

1

A B C DE
トレー①（左）11
アーム部

A B C DE
トレー②（右）トレー①の1行目から固相を使用するため、装置にセットする場合は手前に詰めて並べてください。

19

3.

分析（固相抽出操作）

使用固相例
AB

C

D

GCB1(2106)

C18-50

C18-50

PSA-30

GCB2(2106)

C18-50

C18-50

PSA-30

GCK-20GCB3(2106)

C18-50

C18-50

PSA-30

GCK-20LC(2106)

C18-50

C18-30

PSA-30動物薬

C18-50

C18-30

PSA-30ｸﾞﾘﾎｻｰﾄ

PBX-10SCX-30

PSA-50

ﾏﾗｶｲﾄｸﾞﾘｰﾝ

C18-30SCX-30

ｱﾌﾗﾄｷｼﾝ

C18-50

C18-50

PSA-30

GCB1(1502)

C18-30

C18-50

PSA-30

GCB2(1502)

C18-30

C18-50

PSA-30

GCK-20

GCB3(1502)

C18-30

C18-50

PSA-30

GCK-20

LC(1502)

C18-30

C18-50

PSA-30E

SI-30

SCX-30SI-30固相を装置にセットしてください。
※ 上表は一例です。
実際の前処理に応じた固相をご使用ください。

20

3.

分析（固相抽出操作）⑦溶媒をセット
配管番号

GC-B(2106)

S1-2
S1-3

LC(2106)

動物薬水（洗浄）水（洗浄）ACN/W(9/1)

S1-4

ｱﾌﾗﾄｷｼﾝｸﾞﾘﾎｻｰﾄ

ﾏﾗｶｲﾄｸﾞﾘｰﾝ

水（洗浄）

水（洗浄）

水（洗浄）

ACN/W(1/1)
ギ酸ACN

GC-B(1502)

LC(1502)
水（洗浄）ACN/W(8/2)

ギ酸ACN

ギ酸MeOH

S1-5

MeOH/W(1/9)

S1-6

0.14%NH3/W NH3/ACN(1/9)

S2-L

AT/HEX(15/85)

S3-L

アセトン

AT/HEX(15/85)
アセトン

アセトン

アセトン

S4-L

ACN

ACN

ACN

S5-L

ACN/W(8/2)

ACN/W(8/2)

水水

S6-L

水

S7-1

水（洗浄）

S7-2

10%NaCl水

アセトン

アセトン

アセトン

ACN

アセトン
ACN
MeOH/W(8/2)

水水

水水水

水

水（洗浄）
10%NaCl水

使用溶媒例※ 上表は一例です。
実際の前処理に応じた溶媒をご使用ください。

※ 廃液チューブが廃液受けに差し込まれていることを確認して下さい。

21

3.

分析（固相抽出操作）⑦溶媒をセット（参考：配管名称図）

S7-2
S1-3V3V2V1

S1-4

S1-2

S1-5

S1-6

S7-1

S6-L

S7S5-LS6S4-LS5S3-LS4S2-L

S3S2

S1

22

3.

分析（固相抽出操作）⑧乾燥ガス圧の確認• ガス圧が0.4MPa以上であることを確認してください。
※0.3MPa以下の場合、ガス圧メーターが赤色になります。

• ガスの元栓が開放されていることを確認して下さい。

23

3.

分析（固相抽出操作）⑨扉の確認• 扉が閉じていることを確認して下さい。
※扉を開いたまま処理を実行すると大変危険です。

24

3.

分析（固相抽出操作）⑩処理の実行1. サンプルの準備が完了していることを確認してシーケンスを実行して下さい。

25

3.

分析（固相抽出操作）⑪シーケンスの保存
1234① メニューボタンを押します。
② 「上書き保存」または「名前を付けて保存」を選択します。
③ ファイル名を入力します。 （「名前を付けて保存」の場合）④ 「保存」ボタンを押します。

26

3.

分析（固相抽出操作）⑫シーケンスの作成-タブレットモード
2

1

345 4

5784
6

27

4．サンプルの測定①サンプルの取り出し②サンプルの定容③サンプルの測定

28

4.

サンプルの測定①サンプルの取り出し

サンプルトレーからバイアル・試験管を取り出してください。

サンプルトレー1番を手前に移動させます。
〃6番を手前に移動させます。

〃11番を手前に移動させます。

29

4.

サンプルの測定②サンプルの定容

メス試験管の標線に合わせて定容して下さい。
GC-B(2106),(1502)共通・・・アセトン/ヘキサンで1mLに定容（2倍希釈）LC (2106) ・・・水で2mLに定容（4倍希釈）LC (1502) ・・・水で4mLに定容（4倍希釈）※必要に合わせて濃縮・希釈して下さい。
30

4.

サンプルの測定③サンプルの測定サンプルを測定用バイアルに移し、測定機器で分析して下さい。
分析機器の使用方法はそれぞれのメーカーにお問い合わせ下さい。

31

5．日常メンテナンス
頻度：毎日① シリンジの緩みの確認②

装置の清掃・洗浄頻度：半年～1年③ シリンジの交換④

シリンジバルブの交換⑤

バルブローターシールの交換

頻度：1年～2年⑥ アームロボットのアブソバッテリー交換⑦

固相連結部、サンプルトレー部のバッテリー交換⑧

ファンフィルターの交換

頻度：4年⑨ アームロボットのメモリバッテリー交換
32

消耗品リスト
No.

製品型番

製品名

入数

単位

交換推奨

1AB-1040-047

L400用シリンジ（大） 25mL

1本

１年

2AB-1040-060

L400用シリンジ 2.5mL（XC/XP）

1本

１年

3AB-1040-050

L400用シリンジ（大） 2.5mL

1本

１年

4AB-4010-003

バルブ接続用ナット 1/16Long 10本入

1袋

必要に応じて5AB-4010-002

バルブ接続用ナット 1/16Short 10本入

1袋

必要に応じて6AB-4010-004

バルブ接続用フェラル 1/16 10個入

1袋

必要に応じて7AB-4040-017

1/16HEXフラットシール 10個入

1袋

必要に応じて8AB-4040-018

1/16HEXフラットシールフェラル 10個入

1袋

必要に応じて9AB-4040-013

Mノズル用Oリング

5個

必要に応じて10AA-4040-002

Mノズルシール（横）2個

１年

11LA-4020-003

トラップ管

1本

１年

12AB-4010-007

ローターシール 6方ﾊﾞﾙﾌﾞ用

1個

１年

13AB-4010-009

ローターシール 8方バルブ用1個

１年

14AB-4010-014

ローターシール 4方バルブ用

1個

１年15AB-4010-010

ステーター 6方バルブ用

1個

3年

16AB-4010-012

ステーター 8方バルブ用

1個

3年

17AB-4010-015

ステーター 4方バルブ用

1個

3年

18AB-4040-004

L400用バッテリー(ｱｰﾑ・縦・回転ﾛﾎﾞｯﾄ用)6本入

1

袋

1年

19AB-4040-024

ロボット用メモリーバッテリー

1個

3年

20

PB-4010-001

シリンジポンプ用セラミックバルブ 3ポート

1個

1年

21AB-4040-014

シリンジポンプ用バルブ 3ポート

1個

1年

22AB-4040-015

シリンジポンプ用バルブ プレート付き 1-3ポート

1個

1年

23AB-4040-016

シリンジポンプ用バルブ 1-6ポート

1個

1年

24AB-4040-025

ﾛﾎﾞｯﾄ用ﾌｨﾙﾀｰ 80mm角 5枚入

1

袋

1年

25AB-4040-026ﾛﾎﾞｯﾄ用ﾌｨﾙﾀｰ 120mm角 5枚入

1袋

1年33

5.

日常メンテナンス①シリンジの緩みの確認

シリンジ接続部

プランジャー固定金具

1. 装置稼働前に必ずシリンジ接続部およびプランジャー固定金具に緩みがないことを確認してください。
2. 緩みがみられた場合は増し締めしてください。

34

5.

日常メンテナンス②装置の清掃・洗浄装置内部に汚れや塩の析出などが見られる場合は、装置の清掃を実施して下さい。
※危険ですので必ず装置の電源を切って作業して下さい。

キムワイプを水で湿らせて機内を水拭きしてください。

汚れが落ちにくい場合、更にアセトンで拭き清掃してください。
35

5.

日常メンテナンス③シリンジの交換

1. シリンジポンプに接続されている配管を取り外して下さい。
2. シリンジの留め具を取り外してください。
3. シリンジ交換ボタンを押してプランジャーを下げて下さい。

4. シリンジを取り外して下さい。
5. シリンジを取り付けて留め具を締めて下さい。
6. シリンジの原点復帰を行って下さい。
36

5.

日常メンテナンス④シリンジバルブの交換1. 配管とシリンジを取り外して下さい。

2. 工具でネジを緩めてシリンジバルブを手前に引き抜いて下さい。
3. 新しいシリンジバルブを取り付けて下さい。
4. 配管とシリンジを取り付けて下さい。

37

シリンジバルブ交換の際の注意点①・ シリンジの締め過ぎにご注意ください
シリンジ接続部は金属でできており、セラミックや樹脂製のバルブに接続する
際に締め過ぎてしまうとバルブのネジ穴（下図赤丸部分）がつぶれてしまいバ
ルブの交換が必要になります。手締めでしっかりと接続してください。
※しっかりと締めてもエアーが混入する場合はシリンジを交換してください。
改善されない場合はバルブの交換が必要です。

シリンジを締めすぎるとネジ穴がつぶれてしまいます。

図1

樹脂製シリンジバルブ（左：正面、右：シリンジ接続部）

シリンジバルブ交換の際の注意点②• バルブ交換の際はバルブ固定ネジに緩みがないようご注意ください。(図2)
ネジに緩みがあると溶媒が装置内部に入り込み装置が故障する場合があります。(図3)
必ず緩みがないよう取り付けを行い、液漏れや空気混入がみられないことを確認してから装置をご使用ください。
2mmの6角レンチ使用
右上左下の2本プラスドライバーを使用
左右2本2mmの6角レンチ使用
左右2本(穴の奥)2mmの6角レンチ使用
右上左下の2本(穴の奥)

図2 各シリンジバルブを固定しているネジ（左からシリンジ7、6、2、1）

図3

液漏れにより装置内部に塩の析出したシリンジポンプ

5.

日常メンテナンス⑤バルブローターシールの交換

1. 6角レンチでボルトを緩めてステーターフェースを取り外します2. ローターシールにボルトを取り付けて手前に引抜きます。

3. 新しいローターシールを取り付けます。（位置決めのピンに注意）
4. ステーターフェースを取り付けます。(位置決めのピンに注意)
5. 6角レンチでボルトを締めてステーターフェースを取り付けます。

40

5.

日常メンテナンス⑥アームロボットのアブソバッテリー交換

1. コントローラー部右側のパネルを取り外します。6か所のネジを緩めることで取り外しが可能です。

2. バッテリーカバーを取り外してバッテリーを露出させます。
3. バッテリーを新品と交換します。
4. 装置カバー類を取り付けます。

41

5.

日常メンテナンス⑦固相連結部、サンプルトレー部のバッテリー交換

1. コントローラー部背面のパネルを取り外します。4か所のネジを緩めることで取り外しが可能です。

2. アブソバッテリーカバーを取り外してバッテリーを露出させます。
3. アブソバッテリーを新品と交換します。
4. 装置カバー類を取り付けます。

42

5.

日常メンテナンス⑧ファンフィルターの交換

1.固定つめで引っかかっているのでカバーを強く引っ張ると取り外せます。
2.80mmフィルターを交換する場合は、四隅のねじを外してフィルターカバーを取り外してください。

3. 内側にもう一つフィルターが設置されているのでカバーを強く引っ張って取り外し、80mmフィルターを取り付けてフィルターカバーを閉じてください。

4.取り外しと逆の手順でフィルターを取り付けて作業終了です。
43

5.

日常メンテナンス

フィルターカバー取付時の注意事項
フィルターカバーは取付向きがあります。必ず正しい方法で取り付けてください。

正：溝とつめを合わせる

誤：溝とつめを合わせない

カバー固定溝

カバー固定つめ

カバー固定溝

カバー固定つめフィルター土台

フィルターカバーフィルター土台フィルターカバー

44

5.

日常メンテナンス⑨アームロボットのメモリバッテリー交換

1. コントローラー部右側のパネルを取り外します。6か所のネジを緩めることで取り外しが可能です。

2. メモリバッテリーカバーを取り外してバッテリーを露出させます。
3. メモリバッテリーを新品と交換します。
4. 装置カバー類を取り付けます。

45

6．エラー発生時の対応①装置のリセット②

ログファイルの表示

46

6.

エラー発生時の対応①装置のリセット
1

2

3

8

7

1. 装置の電源をOFF
2. ソフトの終了
3. ノズル類を初期位置にもどす
4. 使用済み固相を廃棄する（各ノズルやP4通液部などに固相が残っていないことを確認する）
5. 装置の電源をON（電源OFFから10秒以上経過後）
6. ソフトを起動
7. アームを最上部へ移動する（最上部にある場合は動かない）
8. アームをホームポジションに移動する（配管を巻き込まないよう注意）
47

6.

エラー発生時の対応(参考)各ポジション一覧

Lノズル仮置き台
サンプル吸引時Lノズルの持替

Mノズル(乾燥ポート)48

6.

エラー発生時の対応②ログファイルの表示
1

2
エラー例①ロボットアーム

エラー例②シリンジポンプ

エラー例③その他の不具合（エラー表示なし）
・ 液漏れ
・ 最終溶出量が少ない

1. サンプルリストのタブに切り替える
2. ログのチェックを入れる

49

7．問い合わせ製品の不具合や故障の際には、購入時の販売店・代理店または以下の連絡先に問い合わせください。
株式会社アイスティサイエンス
サポートサービス部
Tel：073-475-0033
e-mail：as-support@aisti.co.jp※お問い合わせ時に製品名と製造番号をお伺いすることがありますのでご準備ください。
製品名：

全自動固相抽出装置 ST-L400

製造番号：50