シンポジウムⅠ 輸血『輸血検査試薬のメーカー特性と解釈』
中島 康裕
株式会社カイノス【はじめに】
輸血検査において従来から行われている試験管法に対し、近年、デキストランゲルやガラスビーズをの反応）では２例（3.1％）でした。A 社装置の凝集強度が強い例もありますが、概して Erytra が強い傾向が得られております １）。

担体としたマイクロカラム遠心凝集法が開発され、RhD 血液型検査の比較では、前述したように本カ輸血検査の標準法の一つとして用いられています。

ードは２つの抗 D 試薬で、他社は１つの抗 D 試薬

カイノスは、グリフォルス社（スペイン）と提携し、ですが、254 例の陽性検体は全て｢４＋｣、５例の陰デキストランゲルを用いた 8 カラムの DG Gel カー

性検体はすべて凝集がみられず結果は一致しまし

ドを導入しました。

た １）。

ABO/RhD 血液型検査に使用される DG Gel カイ

なお、本カードには抗 AB のカラムと抗 D’のカラノス ABO/Rh(2D)カードの特徴とその性能についムを有していますが、それぞれの血液型の亜型で得て、当社またはご検討いただいた施設の結果を要約られた反応像について、発表時に紹介いたします。

して説明いたします。

【まとめ】【DG Gel カイノス ABO/Rh(2D)カードの特徴】

DG Gel カイノス ABO/Rh(2D)カードを用いた

ABO/RhD 血液型検査においては、他のカラム法

ABO 血液型検査オモテ検査は、現在我が国で使用さ試薬と異なり、オモテ検査には抗 A、抗 B と抗 ABれている他社のカラム凝集法との比較で同等の結果の３カラム、RhD 検査には抗 D と抗 D’の２カラムが得られ、ウラ検査においては多少なりとも強い凝とコントロール並びにウラ検査用の２カラムの８カ集が得られる傾向にあります。RhD 血液型検査でもラムを１つのカードとする独自の構成です。

同等の検査結果が得られました。

本カードの材質は透明性が高く、クリアな判定像

また、本カードの抗 AB や抗 D’は、抗 A、抗 B おを観察することができ、またデキストランゲルを使よび抗 D に使用されている抗体クローンと異なる用していることから流動性が低く、結果の安定性がことから、それぞれの試薬の反応性の再確認や亜型確保され、保存やコピーすることもできます。
また、の鑑別判定の補助としての情報を得ることも可能で

当社の全自動輸血検査装置の Erytra や WADianaす。

Compact、やマニュアル機器でも使用することが出

安全な輸血医療を実践する上で、DG Gel カイノ来ます。

ス ABO/Rh(2D)カードは輸血検査担当者以外でも【性能の検討】

簡単、確実な血液型検査実施に貢献します。

本カードを用いた全自動輸血検査装置 Erytra と他社（A 社）の全自動機との 259 例の ABO 血液型
オモテ検査の凝集強度比較の結果は、抗 A で 100％、参考文献

抗 B で 99.6％一致しており、寒冷凝集素の高値であ１）福吉葉子先生、他：全自動輸血検査装置 Erytra

った部分凝集が見られた１例を除き、両者の結果はの基礎的検討同等でした。ウラ検査の凝集一致度は A 1 赤血球で379-387、201494.6％、B 赤血球で 84.6％となりオモテ検査と異なり差異が見られました。Erytra で A 社装置より強い凝集が得られたのは A 型（B 型赤血球との反応）
で 21 例（17.2％）、B 型（A 型赤血球との反応）で7 例（13.5％）、O 型（A 1 型赤血球と B 型赤血球と医療と検査機器・試薬 37（３）：シンポジウムⅠ 輸血『輸血検査試薬のメーカー特性と解釈』
小野 昌樹
株式会社 イムコア 技術サポート部
輸血前検査として ABO 血液型検査、RhD 血液型検査、不規則抗体検査、交差適合試験があります。
それらの内で、ABO 血液型検査および RhD 血液型検査に使用するイムコア社の抗体試薬を紹介します。
ABO 血液型検査、RhD 血液型検査で使用する抗A 試薬、抗 B 試薬、抗 D 試薬には厚生労働省（当時、厚生省）の告示による血液型判定用抗体基準が存在し、抗 A 試薬、抗 B 試薬、抗 D 試薬は様々な規格を満たしている必要があります。たとえば、市販されている抗 A 試薬は青色に着色され、抗 B 試薬は黄色に着色されています。色調以外にも特異性試験、力価試験、凝集力試験があります。力価試験では参照品と同等以上の結果になる必要があります。表示事項にもルールがあり、血清である場合はヒトまたは動物種の記載、モノクローナル抗体の場合は抗体産生細胞の由来(ヒトまたは動物種)、ポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体の単独又は混合の別について記載する必要があります。
イムコア社の抗 A 試薬、抗 B 試薬はマウス由来のモノクローナル抗体で、血液型判定用基準抗体基準を満たした試薬で、通常の A 1 赤血球、B 赤血球、A 1 B赤血球に対し、試験管法で 4+の凝集を示します。また、亜型に対する反応や吸着解離等については、報告例を基に紹介します。イムコア社の抗 D 試薬はマウス/ヒト由来のモノクローナル抗体で、IgM 抗体とIgG 抗体のブレンド試薬です。IgM 成分は生理食塩液法で反応、IgG 成分は D 陰性確認試験で反応します。Partial D に対してはカテゴリーⅥと IgM 成分は反応せず、IgG 成分が反応するように設計されています。その他 Partial D との反応性に対しては報告例を基に紹介します。

シンポジウムⅠ 輸血『輸血検査試薬のメーカー特性と解釈』
吉田純平

オーソ・クリニカル・ダイアグノスティックス株式会社
IH テクニカルソリューションセンター
1975 年に Kohler と Milstein が、ヒツジ赤血球で免疫したマウス脾細胞とマウスミエローマ細胞を融合して得定結果についてのトラブルが発生した事象を聞くことがある。

たハイブリドーマ細胞が、抗ヒツジ赤血球凝集素を産以下に抗 A・抗 B モノクローナル抗体試薬間における生・分泌しながら増殖することを報告して以来、この細結果乖離が生じる原因として考えられる内容を記載し胞融合の手法を応用したモノクローナル抗体の作製がた。

行われ、さまざまな研究分野や臨床検査・治療の分野において用いられるようになった。輸血検査の分野にお亜型：使用しているクローンにより、正常な赤血球と変異いては、1980 年代はじめに数種類の血液型判定用モノ型との反応に極端な差があるケースが存在する。

a

クローナル抗体が作製されており、1984 年に抗 Le 、抗後天的な抗原性の変化：変異型との反応性に優れたモLeb、抗 H 及び抗 M モノクローナル抗体の国内販売がノクローナル抗体試薬の一部には、後天性 B開始された。ほぼ時期を同じくして、ABO 式血液型判（Acquired B）や Tn（Polyagglutination）といった B（A）定用試薬の製品化への広範な検討が諸外国で行われ、様抗原との交叉反応を示すものが存在する。

1985 年前後に承認・販売が開始された。国内においてB(A)・A(B)現象：ポリクローナル抗体試薬では検出できも 1987 年に厚生省(現在の厚生労働省)の｢血液型製剤なかった、非常に微弱な A 抗原や B 抗原を検出する判定用血清基準｣の改定がなされ，1988 年からモノクロことがある。

ーナル抗 A(抗 B)の販売が開始された。また、それに続いて 1989 年には抗 D モノクローナル抗体の製造・輸入が認可され、販売が開始された。

これらの内容は理論上わかっていても、実際に遭遇する機会は少なく、原因の究明に時間を要する場合が現在では複数の赤血球抗原に対するモノクローナル多い。そこで、本会では、非常に基本的な部分ではある抗体試薬が作製・市販され、患者検体における ABO 式が、弊社試薬の特徴・構成について再度解説し、日常及び Rh 式血液型検査のほとんどがモノクローナル抗体検査において異常反応が生じた際の一助になればと考によって行われるようになっている。このように一般的とえている。

なったモノクローナル抗体ではあるが、多くの書籍に記載されている抗原検出における反応態度や検査法は、ヒト由来ポリクローナルまたは動物免疫ポリクローナル血清によるものであり、モノクローナル抗体によるものは不十分であるといえる。この部分の記載が多くならない理由は、各社がある目的をもって開発・選択したモノクローナル抗体の特性がさまざまであり、「モノクローナル抗体試薬」と同一の範疇で括ることが現実的には出来ないことが挙げられる。この「モノクローナル抗体試薬の特性」についてメーカー側からの十分な説明がなされていないことと、使用される側における先述の同一範疇にできるものではないという事への認識が低いことから、ラボ間(自院と外注先若しくは他院)において、反応強度や判連絡先：お客様サポートセンター（0120-03-6527）

シンポジウムⅠ 輸血『輸血検査試薬のメーカー特性と解釈』
原邦雄

和光純薬工業株式会社 臨薬学術部
現在市販されているＡＢＯ血液型検査試験管用試薬は、一部を除きモノクローナル抗Ａおよび抗Ｂで構成されています。しかし、ＡＢＯ血液型亜型の命名については人由来抗血清で追加検査を行い決定されたもので、現状の亜型検査方法にモノクロ抗Ａ、抗Ｂを使用すると矛盾を生じる場合があります。当社は、人由来抗Ａ血清および抗Ｂ血清の販売経験は無く、動物免疫由来抗Ａ血清ワコー、抗Ｂ血清ワコーからモノクローナル抗Ａワコー（以下モノクロ抗Ａ）、モノクローナル抗Ｂワコー（以下モノクロ抗Ｂ）を販売している経緯もありますので、試薬特性について根拠を基にして説明したいと思います。
今回、当社モノクロ抗Ａおよびモノクロ抗Ｂの特性を中心に、つぎの亜型検査実施時の注意点について報告します。
《特性を有する亜型検査》①被凝集価②吸着解離試験③型物質検査（血清・唾液）④糖転移酵素活性⑤フローサイトメトリー測定
血液型検査用抗体はＡＢＯ血液型だけに限らず、Ｒｈ血液型やその他の血液型検査用試薬全般についてモノクローナル抗体が販売されるようになっているので、特性を熟知して使用しなければ検査結果に矛盾を生じるので注意をしてほしいと思います。

シンポジウムⅠ 輸血『輸血検査試薬のメーカー特性と解釈』
小黒 博之
バイオ・ラッドラボラトリーズ株式会社
現在、輸血検査の分野において血液型判定用試薬【抗グロブリン法用試薬】

を中心にモノクローナル抗体試薬が広く用いられて○AHG カード（ID-System 用試薬）、ダイアクローンいます。モノクローナル抗体試薬は抗体が認識するクームス（試験管法用試薬）

抗原エピトープや特性が試薬によって同一とは限らウサギ由来ポリクローナル抗 IgG 抗体とモノクロず、また従来のポリクローナル抗体試薬と反応性やーナル抗 C3d 抗体（Cell line:

各種精査時の反応条件等が異なる場合があります。

C139-9）を含みます。

本シンポジウムでは血液型判定用試薬を中心に当社のおもな輸血検査試薬(ID-System 用および試験管法用)の内容、特性等についてご説明いたします。
【血液型判定用試薬】〇 ABD カード(mono)（ID-System 用試薬）
IgM モノクローナル抗 A(Cell line:A5)，IgM モノ
クローナル抗 B(Cell line:G1/2)，IgM モノクローナ
ル抗 D(Cell line:LHM59/20(LDM3)，175-2)、コント
ロール・ウラ検査用バッファで構成されており、抗D は Partial DⅥ赤血球とは反応しません。専用の希釈液 ID-Diluent2（改良型低イオン強度溶液）を用いて赤血球浮遊液を作製します。
〇 ABD カード（ID-System 用試薬）
ヒト由来ポリクローナル抗 A,抗 B,抗 D,コントロール・ウラ検査用バッファで構成されており、専用の希釈液 ID-Diluent1（改良型ブロメリン液）を用いて赤血球浮遊液を作製します。
〇 ダイアクローン抗 A，抗 B，抗 D(試験管法用試薬)
各々IgM モノクローナル抗 A(Cell line:A5),IgM
モノクローナル抗 B(Cell line:G1/2),IgM/IgG モノ
クローナル抗 D(Cell line:TH-28(IgM),MS-26(IgG))であり、ダイアクローン抗 A,抗 B は、T 抗原などの潜在性抗原、後天性 B(acruired B)抗原とは反応せず、ABO 亜型検査として実施する吸着解離試験や唾液中型物質測定に使用可能です。ダイアクローン抗D は Partial DⅥ赤血球と間接抗グロブリン試験で反応します。各種 ABO 亜型赤血球との反応性については、同一表現型であっても遺伝子変異の違いなど個体差があるためかならずしも同一の反応性を示しません。

○IgG カード（ID-System 用試薬）、抗 IgG 血清（試験管法用試薬）
ウサギ由来ポリクローナル抗 IgG 抗体を含みます。
○ダイアクローン抗 C3d（試験管法用試薬）
モノクローナル抗 C3d 抗体（Cell line:C139-9）を含みます。