2.クビレミドロ保全に向けた検討（室内培養実験の取り組み状況）
2.1 培養技術の必要性と実験の目的
生育地の保全及び移植や新たな生育地創出に取り組むと同時に、現地における偶発的な消失の危険を回避するため、室内培養技術が重要である。
環境影響評価書においては、埋立てにより消失するクビレミドロの保全措置として、移植とともに室内増殖技術開発試験を実施することとしている。これは、クビレミドロの分布が限られた狭い範囲にあり、気象撹乱等偶発的な自然変動の影響で減耗、消失することへの対応として、現地での移植実験等の取り組みとともに、人為的に制御された環境下での種苗確保のために培養技術を必要としたものである。本実験はこれに基づき、室内培養によってクビレミドロの自律的な再生産を実現し、種の保全を図ることを目指すことを目的としている。

2.2 室内培養実験の目標
本実験は、人工環境下におけるクビレミドロの自律的、安定的な再生産の実現を最終的な目標としている。
クビレミドロは夏季には夏眠卵の形態で砂中で過ごし、水温の低下する季節に出芽して春先にかけて干潟上に房状の藻体を形成する。こうした生活環は海藻類のなかでも特異的であり、培養条件は生育段階ごとに異なると推測される。そこで、本実験では、生活史を通したクビレミドロの自律的、安定的再生産の実現を最終的な目標としながら、当面の目標として、生育段階ごとの育成技術の確立を目指している。

2.3

室内培養実験のこれまでの成果概要と現在の取り組み状況

これまでに、発育段階ごとの育成実現に取り組み、人工環境下において全生活環を再現することができた。今後はその安定的・自立的な再生産実現に向け、各生育段階ごとの生残・成長率の向上に取り組んでいる。
クビレミドロの室内培養実験は、大量かつ安定的に培養する技術の開発のための大型水槽、大型プールによる培養実験と、より詳細な生育適正条件を把握するためのシャーレ内での培養実験を行っている（図 2.3-1）。
これまでに図 2.3-1 に示す両方の実験系において全生活環を再現させることができている。
室内のシャーレによる実験では、平成 18 年度に成熟した藻体から得た卵から藻体が育成
し、平成 19 年度になって成熟した。また、本種の生息環境に近い生態系を再現し、それを安定的に維持する屋外実験プールで種苗培養、管理試験も平成 18 年度から行っている。室
内実験に比べてより現地に近い状態で管理できることと種苗管理の規模の拡大を図れており、大量の種苗生産に向けた取り組みを実施している。

19

培養実験

＜目的＞
生育段階別の適正条件の把握＜目的＞
大量かつ安定的に培養する技術の開発（シャーレ内で歩留り向上に向けた生育条
件の詳細把握、種の保存のための取り組み）＜これまでの成果＞
水温等を管理し、卵から育成させた藻体の成熟を確認。卵の保存、出芽には水温管理が重要であることを確認
シャーレ内において全生活環を再現（屋外実験プールでの自律的な生産を目指す）＜これまでの成果＞
底質ごと移植した天然卵から多くの藻体が育成し、その後多くの第二世代を確認した（過年度専門部会にて報告済み）（過年度専門部会にて報告済み）＜現在の取り組み＞
・ 安定した生活環の再現に向けて、水
温設定や水温変換のタイミングを変えた育成試験

図 2.3-1＜現在の取り組み＞
・ 第二世代の成熟状況の確認と継代飼育の可能性検討。
・ 室内で培養した卵の屋外プールへの移植。
・ 大量の卵の確保に向けた藻体育成
管理。

クビレミドロ培養実験の取り組みと主な成果

20

2.4 培養実験の結果概要（過年度調査結果を含めた培養実験結果）（1）培養実験項目
培養実験は、図 2.3-1 に示したとおり生育段階ごとの最適な生育条件を把握するための室内実験と多くの種苗を自立的、安定的に生産するための屋外実験に分けて取り組んでいる。実験項目およびその目的を表 2.4-1 に示す。

表 2.4-1 実験概要
実験場所
室内実験

実験項目

目的

内容

恒 温 庫 内 で の ①卵保存実験

各生育段階別の適 設定水温、海水のゆらぎ

実験

正条件の把握

②出芽実験

付与③出芽後生育実験
生育段階別適正条 温度設定

④藻体生育実験件 を 反 映 し て 、 種 自然に近い状況設定
苗藻体まで育成
屋外実験

屋 外 実 験 プ ー ⑤生育実験

大量種苗生産手法 自然生育環 境と同様の

ルで実施

の確立

生態系が安定して維持されている実験プールでの
大量培養

⑥卵移植

効率的な卵移植手 播種する卵数と藻体生育
法の検討

21

数の関連把握1）卵保存実験ア）目的
卵を保存する際の最適な条件（とくに水温とその変換のタイミング）を把握する。
イ）方法・結果卵を形成している成熟藻体をその周辺の砂ととも広口シャーレに収容し、20℃または
自然環境温度（26〜28℃：5〜8 月）に設定した恒温庫の中で保存した。卵数は生存卵である白色卵を計測した。
その結果、水温 20℃設定の実験区では 8 割以上が生残したが、水温を制御していない
実験区では減耗が大きく、8 月には 3 個/g 以下となった。以上から、卵は水温の上昇とともに減耗するため、20℃程度に水温を下げて保存させることが有効であることがわかった。
実験プールや自然生育域の卵数の変化を調査しているが（表 2.4-5 参照）、比較する
期間が多少異なっているものの、実験プールでは 6 月から 9 月で生残率が約 10％、自然生育域では数％であるため、これらと比較して卵の生残率が室内保存の方が高かった。
また、卵保存時に卵と海水のみでは卵が珪藻に覆われ死滅するものが多かったが、砂とともに収容すると珪藻の影響を軽減できたことから、卵の保存は底質とともに収容し温度管理を行うのが有効である。

写真 2.4-1 卵の保存状況

表 2.4-2 卵の保存状況結果（H18 年度実施）
卵の保存水温

水温制御
（20℃）
水温未制御
（25〜27℃）

生残卵数（個／g 砂）

生残率

6月

7月

8月

6.0

5.7

5.1

85％

9.1

8.1

2.5

27％

22

2） 出芽実験ア）目的
室内実験における卵の管理については、20℃条件下で卵の生残率が高いが、20℃の設定のままでは出芽率が低いことが確認されてきた。このことから卵を 20℃で保管した
後、いくつかの水温条件に設定し発芽状況を確認し、最適な発芽条件を把握するために実施した。

写真 2.4-2 実験状況

イ）方法・結果
出芽実験結果を表 2.4-3 に示す。
出芽率が比較的高かった実験区は、8 月頃に一度自然の干潟水温と同程度（30℃程度）まで約 1 カ月間昇温させたのちに 20℃で飼育した実験 2〜4 であった。
さらに、実験 2 と実験 3 では 20℃に下げるタイミングが実験 2 のほうが 1 カ月遅かったが、出芽のピーク時期も約 1 カ月遅れていた。
以上から、出芽率を高めるには一度高温（28〜30℃）にさらすことが効果的である
ことがわかった。また、20℃に下げてから 1 カ月ほどで出芽のピークがみられており、出芽時期は水温変化によって誘引されることがわかった。

表 2.4-3 出芽実験状況

実験 No.

実験 1

水温（℃）

平成 19 年度

実験に用いた
出芽前
出芽時
卵の保管時
（ろ過海水中） （ろ過海水中）(砂中)（H19.8）（H19.8〜11）（H19.5〜8）

出芽率

めた出芽率

（卵保管期間の減耗は含
まない）（卵保管時期の減耗は
含まない）

13％

2〜13％

20

20

20

平成 18 年度を含(出芽ピーク：不明瞭
9/2〜10/29)

実験 2

実験 3

実験 4

20
自然水温
（22〜29℃）

自然水温

20（28〜30℃） （H19.9.2 降温）
自然水温

20

（28〜30℃） （H19.8.2 降温）

自然水温

自然水温

自然水温

（22〜29℃）（28〜30℃）（20〜30℃）

23

19％

19％

(出芽ピーク：10/22-29)

20％

20〜36％(出芽ピーク：9/10)

16％(出芽ピーク：不明瞭
9/20-10/2)

16〜32％

3) 出芽後生育実験（揺らぎの効果確認）ア）目的
糸状体及び藻体を用いて、藻体の生長促進及び藻体の形状変化や成熟するための条
件のひとつとして「海水のゆらぎ」の効果を確認することを目的とした。
イ）方法・結果
天然生育域から未成熟藻体を採取し、100ml の三角フラスコ内に収容して、振とう器による振とうやエアレーションによる容器内の流れを付与した。
表 2.4-4 海水の揺らぎによる実験条件

実験 No.

水温

砂

振とう

実験 a

20〜22℃

○

なし

実験 b

20〜22℃○

エアレーション

実験 c

20〜22℃

○

振とう器

場所
恒温庫内

平成 18 年 2 月に糸状体の長さは 8〜10mm の藻体を 100ml 三角フラスコに収容した。
21 日後ではすべての実験区で生育し続けたが、エアレーションを行っていない実験 a、c の藻体は上に大きく伸び、エアレーションを行っている実験 b では丸い形状を維持していた。水を循環することで球状が維持されることがわかった。また、すべての実験
区で造精器が確認された。なお、糸状体を用いた実験では生育が維持できなかった。
【実験 a】エアレーションなし

開始時

3 月 6 日（21 日目）
糸状体の長さは 25mm に伸びた。
造精器が確認された。
藻体の色相は実験開始時に比べて薄く黄緑色となった。

【実験 b】エアレーションあり

開始時

3 月 6 日（21 日目）
糸状体の長さは約 10mm で球状が維持された。
造精器が確認された。
藻体の色相は実験開始時に比べて薄く黄緑色となった。

24【実験 c】振とう器による振とう

開始時

3 月 6 日（21 日目）
糸状体の長さは 25mm に伸びた。
造精器が確認された。
藻体の色相は実験開始時に比べて薄く黄緑色となった。

4) 藻体生育実験ア）目的
実験室の温度管理下において大型シャーレ内で出芽、藻体の生育、成熟といった一連の生活史が再現できるか確認するために実施した。
イ）方法・結果
大型のシャーレに成熟藻体を底質とともに収容し、恒温庫内で卵の数を確認しながら、出芽、藻体の生育、成熟について観察した。

写真 2.4-4 実験開始状況
結果を下表に示す。前述の出芽実験で示したとおり、卵が発芽し糸状体へ育成する最適な条件は把握されつつあるが、糸状体から球状藻体へ育成条件は年によって安定していない。その中でも、数は少ないものの、平成 16 年度には 20℃に設定した実験区で卵から育成した藻体に造精器の形成を確認しており、平成 18 年度には自然水温で飼育し卵から育成した 4 つの藻体に生卵器、造精器が形成され成熟を確認した。
以上のように、シャーレ内においても本種の全生活環の再現ができており、今後、糸状体から球状藻体への育成条件を解明することでより安定して本種の室内での管理が可能となる。
表 2.4-5 藻体育成実験結果
水温（℃）
実験番号

卵保存時
(5〜9 月)

出芽前
（8 月）

出芽時
(9〜11 月)

藻体育成時
(12 月〜)

生育状況（過年度の同調査結果含む）

・ 同設定で 10 月まで藻体の生育が確認された。卵から育成した藻体に造精器
実験 1
20
20
20
20
を確認した（H17）。
・ 糸状体は確認されなかった（H18）
糸状体は確認されるが、藻体への育成は
自然
実験 2
20
20
20
（28℃）
確認されなかった（H19）。
糸状体は確認されるが、その後の藻体の
自然
自然
20
20
実験 3
（22→28℃）（28℃）
成育は確認されなかった（H18）。
・糸状体は確認されるが、その後の藻体
自然
自然
自然
実験 4
20
の成育は確認されなかった（H18）。
（22→28℃）（28℃）（28→25℃）
・糸状体は確認されなかった（H19）。
・10 月に確認された糸状体が翌年 7 月まで生育した。
自然
自然
自然
自然
・11 月に砂中に糸状体を確認し、4 月に実験 5（25→20℃）（22→28℃）（28℃）（28→25℃）
まとまりを持った 3 つの藻体を確認。6
月に造精器、生卵器を確認（H18）。
注）水温の「自然」とはその時期の天然生育域の水温とほぼ同じ水温に設定した。
H17、H18 はそれぞれ年度を示す。

25

5）屋外実験プールにおける生育実験ア）目的
屋内施設では再現が困難な温度変化や光条件を補うとともに大量種苗生産を想定
して、安定した砂泥質環境が創出されている屋外実験プールを用いて、クビレミドロの卵を底質とともに移植した。
イ）方法
平成 18 年 10 月に卵を含む砂床を屋外実験プールへ移植した。移植後は、実験プー
ルの水温等を測定するとともに、成熟期には原則として生卵器や造精器の形成状況を観察した。卵期には 2 ヵ月ごとに 3×3cm の底質中の卵を選別、計数した。
ウ）結果①藻体の成熟平成 18 年 10 月に卵を底質ごと移植し、翌年 4 月には生卵器、造精器が確認され成熟しているのが確認された。その後、6 月 27 日にはすべての藻体が枯死流失した。このような成熟の変化は自然分布域の泡瀬海域とほぼ同様であった。
また、室内では出芽しなかった卵の入った容器を別途 12 月に屋外実験プールへ移設
した実験においても、翌年 4 月には 10 藻体が確認され、その後成熟し、底質中には卵が確認された。室内では藻体育成のための条件が不足していることが考えられた。

②卵夏眠期
水槽内の砂を観察したところ、6 月には 18.9 個/cm2、8 月には 6.7 個/cm2 の卵が砂中に確認された。その後 9 月、10 月には 2 個/cm2、0.9 個/cm2 と砂中に確認される卵数は徐々に少なくなった。自然分布域である泡瀬、屋慶名地区でも 9 月以降、砂中で確認される卵は減少しているが、実験プールの方が卵の密度が高く、生残率も高かった。（表 2.4-6）。

表 2.4-6 屋外実験プールと自然生育域の卵数の変化
調査時期
屋外実験プール内の卵数（2007 調査）

5 月、6 月2

9月
2

18.9 個/cm （6 月）

2.0 個/cm （生残率 11%）

泡瀬地区生育域の卵数（2002 調査）

11.1 個/cm2（6 月）

0.4 個/cm2（生残率 4%）

屋慶名地区生育域の卵数（2007 調査）

約 3.7 個/cm2（5 月）

0.05 個未満/cm2（生残率約 1%）【参考

自然生育地の卵数】※生残率は、5 月、6 月の卵数に対する 9 月の卵数の割合

26表 2.4-7 夏季の屋外実験プールの塩分、水温等
月

塩分

6月

33.3〜34.6

水温26.8〜27.7℃

その他
卵：18.9 個/cm2
小型海草類が流失しはじめた。

8月

30.2〜33.8

27.9〜30.7℃

卵：6.7 個/cm2
ほとんどの小型海草類が流失した。

９月

33.8〜34.5

27.4〜29.6℃

卵：0.9 個/cm2（10 月）

10 月
11 月 34.7〜35.1

卵：2 個/cm2（９月）22.2〜27.3℃-③第二世代の藻体の生育平成 19 年 12 月 11 日に第二世代にあたる新たなクビレミドロ藻体が確認された。12 月
26 日から定点を設け、50cm×50cm コードラート内の藻体数をカウントした。同年 12 月に 144 個、平成 20 年 1 月には 184 個、同年 2 月には 262 個、同年 3 月に 248 個の藻体が確認された。
また、水槽全面について 10×10cm に区切り藻体数または被度を観察し、生育範囲や密度が徐々に広がっていく様子を確認した。

27

表 2.4-7 屋外実験プールの第二世代藻体生育状況（平成 19 年 12 月〜平成 20 年 3 月）
平成 19 年

藻体の出現数はまだ少なく、分布はまばら

12 月 26 日

平成 20 年被度、藻体数分布図

1 月 28 日

生育範囲を 10cm 四方のメッシュに区分し分布状況を色分けした

28
2 月 22 日

3月5日
凡例
10×10cm の藻体数、または被度
藻体数が 1 個
藻体数が 2〜9 個（低密度）
藻体数が 10 個以上（高密度）
被度 25％以上

④第二世代藻体の成熟平成 20 年 3 月 5 日に一部の藻体において成熟が確認された。
成熟状況

生卵器

造精器

平成 20 年 3 月 5 日
写真 2.4-5
表 2.4-8

実験プール内の第二世代成熟状況

実験プール内の 1 つの藻体（20mm）から確認された造精器、生卵器数
採取場所

採取した日

3 月 30 日

4 月 11 日

屋外実験プール

造精器数

3352

355

生卵器数

1762

1407

底質に含まれていた卵

266

636

2028

2043

一つの藻体由来と考えられる卵数⑤平成 18 年度と 19 年度の生育状況の比較
平成 19 年 3 月は卵の移植時に同時に移植された小型海草とともにクビレミドロの藻体が確認されたが、その後小型海草は夏季に消失し、平成 20 年 3 月はクビレミドロのみが生育している。クビレミドロの藻体は、平成 19 年 3 月は約 50 藻体/0.25ｍ2 であったが、平成 20 年 3 月は約 250 藻体/0.25ｍ2 が確認され、昨年度よりも多くの藻体が育成している。
このように、静穏な自然の生育域を再現することで、多くの藻体が再生産を繰り返す
ことが確認されたことから、クビレミドロの安定的な生育には場の静穏性が非常に重要な条件であると考えられる。

写真 2.4-6藻体生育状況の比較

平成 19 年

平成 20 年

2

2

月

月

13

22

日

日

3

3

月

月

10

5

日

日

29

6）屋外実験プールへの卵移植①ア）目的
卵期に移植することにより、人工環境下での管理期間が少なく効率化につながることから、室内で確保した卵の移植手法を検討するため屋外実験プールへ卵のみの移植を行
った。

イ）方法
平成 19 年 8 月 17 日から順次、卵を屋外大型水槽における 60×60cm（5cm メッシュ）内に移植した。移植した位置は図 2.4-2 のとおりであった。移植は、B-5、C-5 のような並列枠と、卵が飛散することを勘案して、単独枠では 1 枠おきに行った。
クビレミドロの藻体が確認された後、原則的に 2 週間に 1 回藻体の位置及び大きさを記録した。

移植地点全体移植後の塩ビ管を抜いた状況

写真 2.4-6

卵移植の状況A B C D E F G H I J
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

○
△
△
▲▲

○
○

●●
○

凡例
記号
移植期日
一枠あたりの卵数○ 平成19年8月17日
500○ 平成19年8月17日
100△ 平成19年9月21日
200● 平成19年9月26日
500▲ 平成19年9月27日
500

コンクリート壁

図 2.4-2

卵の移植場所と数

30ウ）結果
平成 19 年 8 月から 9 月にかけて卵を移植し、12 月 11 日から卵を移植した枠を中心に藻体が確認された。平成 20 年 1 月 8 日には移植箇所の周辺でも藻体が多く確認されるようになり、藻体の分布は移植箇所を中心に 20cm 以内の範囲に分布していた。
移植枠以外から確認された理由としては、風による水の流れ以外に、卵移植時に周囲にも多少流出したためと考えられた。
移植箇所を中心に多くの藻体の生育が確認されたことから、砂の移動がほとんどない場所では、多くの卵をまくことで、確実に出芽し藻体に生長することが確認された。
以上から、種苗生産には本実験プールのような静穏な環境での実施が適している。

表 2.4-10

移植枠における藻体の大きさ（長径）
単位:mm

観察期日
移植期日
H19.9.27
H19.9.27
H19.9.26
H19.9.26
H19.9.21
H9.9.21
H19.8.17
H19.8.17
H19.8.17
H19.8.17

B-5
C-5
D-6
E-6
G-2
G-3
I-1
I-3
I-5
I-7

平成18年
12月11日 12月26日
13
4
3-14
5-15
5-9
6-25
4-6
4-12
4-13
13-17
7-19
4-5
5-6

注）表中の数字は

最小-最大

1月8日
6-18
8
14
31
16
13-17
36
5-16
4-10

を示す

31

1月28日

36
56
10-26
19-22
53
8-18
5-7

平成19年
2月7日
26
22
20
60
30
55
55
15-19
12-22

2月22日
8-26
14-24
55
70
8-31
55
63
12-23
13-24

3月5日
15-26
16-25
58
74
15-32
55
64
48
12-25

表 2.4-11

卵移植箇所の藻体の分布状況

平成 19 年
12 月 11 日

平成 20 年
1月8日

2月7日

3月5日

※メッシュは 5cm 四方327）屋外実験プールへの卵移植②（卵の逸散抑制のための植木鉢を用いた移植）ア）目的
大量の卵数を移植する場合、前述の塩ビパイプによる手法では逸散することが考えられたことから、植木鉢を利用して逸散を抑制するとともに移植する卵数と発現する藻体数との関係を把握することとした。

イ）方法
平成 19 年 10 月 26 日に屋慶名地区において採取した砂において、クビレミドロの卵があると考えられる表層から 3cm の深さまでの砂を除去した。そこに、室内で保管していた異なる個数の卵を移植し、これらを収容した植木鉢を屋外水槽内に設置した。
卵はろ過海水とともにピペットを用いて播種した。播種した卵数は 100、200、500 個であり、各卵数を播種した植木鉢をそれぞれ 7 鉢設定した。植木鉢の大きさは直径 10cmであり、卵数 1.3、2.5、6.4 個/cm2 であった。

卵の播種状況

植木鉢設置状況

写真 2.4-7

卵移植状況

ウ）結果
平成 19 年 10 月に卵を移植後、平成 20 年 3 月 5 日までには表 2.4-12 に示すような藻体数が確認された。藻体の確認された鉢数は卵 100 個収容した鉢で 2 鉢、卵 200 個収容した鉢で 4 鉢、卵 500 個収容した鉢で 6 鉢であり、卵数が多いほど形成された藻体数、藻体が育成した鉢数が多かった。また、卵 100 個収容の鉢で約 0.6％、卵数 200 個収容の鉢で約 1.1％、卵数 700 個収容の鉢で 1.1％の卵が藻体まで生育することが確認され、卵数に対する育成した藻体数の比率は約 1％であった。一方、卵を多く播種した鉢では育成した藻体の平均長径が小さいことも確認された。このことから、当該手法及び今回用いた鉢の面積（78.5cm2）に対しては発芽率が最も高かった 200 個程度の卵の移植が適当と考えられた。
また、植木鉢を用いない卵移植は本実験より 1〜2 カ月早い平成 19 年 8 月、9 月に実施したが、藻体は同時期に大きな塊となったことから移植時期は 10 月頃が適当であると考えられた。

33

表 2.4-12卵数設置した試料数

植木鉢移植の状況

藻体が確認さ

全藻体数

藻体発現率

藻体の大きさ(%)（長径(mm)）（一鉢あたり）

れた鉢数

100

2（29%）

4

0.6

9.5

4（57%）

18

1.3

8.8

6（86%）

39

1.1

7.5

200

7鉢

500

卵数に対する育成した藻体数の比率

表 2.4-13

平均 1.0％藻体の生育状況（植木鉢内の卵移植）

藻体の確認された鉢のうち藻体数の最 藻体の確認された鉢のうち藻体数の最もも少ない鉢の状況（3 月 5 日）

多い鉢の状況（3 月 5 日）

卵
100
個
2 藻体

2 藻体

2 藻体

6 藻体

2 藻体

11 藻体

卵
200
個

卵
500
個

34

表 2.4-14
生育段階
卵の保存

生育段階別の生育条件に関するこれまでの実験成果
生育条件に関する実験成果
・ 水温 20℃の保存で生残率が良い。

・ 温度管理は、6 月頃までは 20℃で行い、夏季の間（10 月頃まで）や出芽前までは、自然生育域の温度を想定した28℃で保存するのが有効である。
・ ろ過海水で保存すると卵が珪藻に覆われ斃死卵が増えるた
め、砂中で保存するとよい。
・ ろ過海水で保存する場合は、頻繁な海水の交換が必要。
出芽期

・ 水温を 8 月以降に 28℃から 20℃に下げると出芽を誘引できる（水温降下後約 1 カ月で糸状体が確認できる）
・ 卵を 20℃のまま保存した場合出芽率は低く、出芽に移行す
る前に水温を 27〜30℃に上げる（一度一定温度以上にさらす）ことで出芽率が高くなる（約 25％）。

糸状体・ ろ過海水中の培養では生育が良くないが、砂中で培養すると生育が良く効果的。

藻体（育成期）・ エアレーションで藻体周辺の海水の流れを作ることにより、藻体は球状を維持した。
・ 光合成を目安とした藻体活性試験では、酸素発生量は 20℃、
10,000lux で多かった。
・ これまで、室内では糸状体から藻体への育成数が少ないた
め、この時期に必要な水温や光条件など何らかの生育条件
が室内飼育下では不足していると考えられる。

藻体（成熟期）・ 未成熟藻体は、室内の培養管理下でも成熟した。
・ 20℃、10,000Lux（12 時間明暗）で培養し成熟が確認された。

35

表 2.4-15

人工環境下におけるクビレミドロの生活環の再現状況

第一世代

クビレミドロ

第二世代

第三世代

の生活史

実験区

実験期間

卵

糸状体

藻体

成熟藻体

糸状体

卵

藻体

成熟藻体

卵
糸状体

シャーレ

天然の成熟藻体を恒温庫で管理（温度管理）

室内

20℃に下げると出芽を誘引できた。
自然の温度に合わせた設定でも、水温低下に併せて 11 月ごろには出芽を確認。

糸状体確認

4 つの藻体が育成

シャーレ内で造精器、生卵器を形成

成熟藻体数が少なかったため、底質中の卵は間もなく

生卵器

出芽せず

H18.5〜
H19.6

確認されなくなる

造精器
天然の成熟藻体を恒温庫で管理

室内恒温庫・
屋外の実験

底質中から卵を選別し屋外実験プールへ
卵のみ移植

プール併用

36

H19.8

砂中から卵を確認

卵の移植場所から多くの草体が育成（H20.2）

屋外実験プールに播種
H19.12 出芽を確認

継続中

H19.5〜
継続中(H20.7 現)多くの藻体の成熟を
確認

屋外
屋外の実験
プール

天然生育域の底質を移植。
（砂中に卵確認）（実験プールでは水面から肉眼での確認は困難）

多くの藻体（約 50 藻体/0.25m2）が育成

造精器、生卵器形成

夏季の間も砂中の卵を確認(9 月：0.14 個/g 砂）（実験プールでは水面から肉眼での確認は困難）

第一世代よりも多くの藻体（248 藻体/0.25m2）が育成成熟を確認（H20.3） 6 月時点でほとん
どの藻体は枯死したが、砂中には卵
を確認
拡大

継続中

H18.10〜
継続中(H20.7 現)

（2）室内培養実験と屋外実験で得られた成果の活用
1）室内施設の利点と課題①利点：温度管理が容易なため卵の保存、発芽期のコントロールが可能
卵の保存や出芽には、水温が関与していることがわかってきている。また、図 2.4-3に示したとおり卵期が 1 年のうち半分以上と長く、その期間は台風も来襲する時期にあたるため、拡散し生育範囲や密度が大きく変化することが考えられる。そのため大きく減耗する可能性のある卵期に一部の卵を室内で管理することで保存が可能であり、今後自然生育範囲の減少や新たに整備予定の人工干潟等における偶発的な消失を防ぐことができる。
また、生残率の向上など種苗の生産の効率化に向けた最適な生育条件の解明には、室内実験が有効である。

②課題：糸状体から藻体への生育環境の再現
室内で出芽した糸状体は、ある程度の大きさまでは生育するものの、球状の藻体まではなかなか生育しない。屋外水槽では糸状体が藻体まで生育していることから、水温の日変化や光条件などが室内では再現できていないと考えられる。室内で管理した卵や出芽後の糸状体を屋外へ移すことで、その後良好に生育しつづけることから、現時点ではこの時期には屋外へ展開することが有効である。

2）屋外施設における利点と課題①利点：屋外実験プールで多くの藻体の継代飼育が可能
屋外実験プールのような静穏な環境では、卵を移植後三世代にわたり藻体の飼育が実現できており、室内では再現が難しい糸状体から藻体へも育成も良好である。目標としていた自立的、安定的な生育、種苗の生産に近い状況が形成されている。より多くの藻体や卵を確保や管理の面から、室内実験に比べ屋外の実験施設は有利である。

②課題：閉鎖的な環境であるため、偶発的な消失が起こりうる
限られた大きさの中で飼育しているため、大雨による塩分低下や日照による塩分や水温の上昇、そのほか予想外の環境変化によって藻体や卵が大きく減少する可能性がある。

37

2.5 自然生育域におけるクビレミドロ生活史に関する調査

1）初期生活史の解明ア）目的
クビレミドロの保全に資するため、未だ未解明な部分の多い本種の野外生育地における初期生活史について、屋慶名地区で調査を行った。

イ）方法
平成 19 年 5 月から平成 20 年 2 月にかけて月 1 回以上、屋慶名地区のクビレミドロ生育地から 10×10cm（100ｍ2）深さ 1cm の砂を持ち帰り、顕微鏡下で卵や出芽体の個数をカウントした。

写真 2.5-1

自然生育域の底質採取状況

ウ）結果得られた結果は以下のとおりである。
・ 干潟での受精卵の密度は、平成 19 年 5 月時点では 10cm 四方で約 370 個に達したが、平成
19 年 9 月以降では 5 個未満に減少した（図 2.5-2）。
・ 卵の発芽は、まず仮根部が形成され、次いで緑色の地上部が形成されることが確認された。
仮根部の発芽は 10 月下旬から確認され、12 月中旬から緑色の地上部が確認された。
・ 球状の藻体は 1 月上旬には目視できるサイズ（約 5ｍｍ）に成長しており、球状の藻体には発芽後約 70 日で達することが分かった。
・ 干潟での受精卵の分布密度は非常に低いこと、球状藻体の仮根部は糸状体同士が癒合していることから、球状藻体は 1 つの卵を起源として形成されていると結論できる。
・ 無性生殖細胞が起源と考えられる発芽体が初めて確認された。

38

水温
40

30

30

20

20

塩分

水温（℃）

塩分
40

10

10
4月

5月

5月

6月

7月

8月

9月 10月 11月 12月 1月

2月

3月

平成 20 年

平成 19 年
計測日

図 2.5-1受精卵などの数

受精卵などの数（300cm2（10cm×10cm×3 枠）あたり）

30
1200

屋慶名地区のクビレミドロ生育地の水温塩分変化

1110
〜
〜
〜〜

受精卵
発芽体（仮根のみ）
発芽体（地上部、仮根）

25

20

15

10

5

0
5月 2日

6月 29日 7月 28日

8月 30日 9月 26日 10月 30日 11月 13日 11月 27日 12月 11日 12月 26日 1月 11日 1月 24日

2月 11日調査日

図 2.5-2

屋慶名地区のクビレミドロの卵、発芽体の確認数の変化

写真 2.5-2

発芽体の状況（左：8 月 30 日、右：11 月 13 日）
39

2月 25日写真 2.5-3

1 月 24 日に確認された無性生殖細胞を起源とすると考えられる発芽体

【参考】

40

生殖器官の発達

球状群体形成発芽体や幼株の出現

発芽体や幼株の出現

底質で休眠する受精卵
１月

２月

３月

４月

図 2.5-3

５月

６月

７月

８月

９月

１０月

自然生育域でみられるクビレミドロの生活史

41

１１月

１２月

2.6

今後のクビレミドロ増殖技術開発の取り組み
クビレミドロの増殖技術開発に向けては、これまでに蓄積されてきた知見や室内施

設、屋外施設の利点・課題を踏まえ、それぞれの利点を生かして室内と屋外を組み合わせて種苗の生産に取り組むことが効果的である。
平成 19 年度までに、屋外の実験プールでは多くの第 3 世代にあたる卵が確認されており、引き続き多くの藻体の育成、再生産が期待される。しかし、屋外の解放空間で飼育しているため、夏季の台風や日照によっては飼育環境が大きく変わる可能性がある。
一方、室内では、夏季の卵生残率が高いと考えられること、また、一定の発芽率が期待できる卵の保存条件が概ね把握されつつあることから、卵期は室内の安定した環
境下における保存も有効であると考えられる。
したがって、クビレミドロの培養手法としては、屋外の大型の施設で効率的に種苗生産を行うとともに、生育状況が管理しにくい夏季の卵期においては、偶発的な消失を防ぐために室内においてもその卵の一部を、把握された最適な条件で管理すること
が種の保存のためにも有効であると考えられる。

室内施設で確実性の向上：

大型の屋外施設で多くの種苗を屋外では、とくに卵期に偶発的な効率的に生産：消失が起こりうる。それを避ける

室内では、糸状体から藻体へ安定した育ために、温度管理が容易な室内成がみられないことから、屋外施設で安において最適条件下で卵を一部定的、自立的に多くの種苗生産を継続す保存する。

⑤成熟、卵の形成

クビレミドロの生活環①卵（夏眠）

④藻体形成

②卵出芽
③糸状体
の生育

室内施設で最適生育条件の把握：
効率的な種苗の生産、確保に向けた最適な生育条件の解明に取り組む

図 2.7-1

室内と屋外を組み合わせた種苗生産および卵の管理
42