栃木農試研報No.21：9〜14（1976）

点滴比重測定法による麦汁エキスの測定について
一育種試験のための醸造用品質検定法一

川口数美＊・赤羽根朋子・関口忠男
1緒

言

ベンゼンとケロシンを用い，シリンダーの下部

二条オオムギ育種における醸造用品質の検定
はEBC（EuropeanBreweryConvention）2）法

へ比重の大きい液（ブロムベンゼン）を入れ，に準じて行われてきたが，この方法では測定に静かに注ぐ．この時両液は混じり合わずに二層非常に大きな労力がかかる．そこで著者らは品に分離した状態となる．この二層の液をシリン質検定方法の省力化を目的として一連の検定方

ダーの下部から順次段階的に静かにかくはんす法，とくに麦汁エキス，ジアスターゼカ，粗タると，シリンダーの内部に二つの液による比重ンパク質含量の測定法などの改良に努めてきた．の勾配が生じる．この比重勾配管に試料（ブロ麦汁エキスの測定にっいては，現在，多くのムベンゼンやケロシンに不溶性のもの）を1滴次にこの上から比重の小さい液（ケロシン）をC法に準じて麦汁抽出を行った

滴下すると，試料は比重勾配を作っている液体のち，ピクノメーターあるいは比重球を用いてと比重が等しくなった位置で停止する．そこで比重を測定し，さらにエキスに換算するという比重勾配管に比重既知の標準液と比重未知の試方法をとっている，これらの方法の難点は比重料とを滴下し，標準液の停止位置を知ることによ測定に時間を要することと，約50〜100mlの麦汁を必要とすることである．そのため育成初期

り比重未知の液体の比重を求めることができる．

世代のように1系統が極少量で多数の系統の測ごとに少しずつ勾配に変化が生じ，また作成時定を行わねばならないような場合には，上述ののかくはんの仕方によって勾配が等間隔にでき比重測定法を用いるわけにはいかない．そこでないなどの難点があり，その都度標準液を滴下し著者らは比重測定の原理をふまえながら操作のなければならない不便さがある．そこで著者らは簡便化を図るとともに，少量の麦汁で精度をあ1本のシリンダーの中に縦の勾配を作らずに，まり落とさずに測定を可能にする方法を検討しブロムベンゼンとケロシンの混合比を変えた14た．その結果，Atkinら1）の比重勾配管法を参本のシリンダー（比重管）を段階的に用意し，考に新たなエキス測定法をあみ出すことができ各比重管内の混合液をよくかくはんし，比重管たのでこの新手法を点滴比重測定法と名づけ，内に比重の勾配が生じないように、した後，試料育成地ではEB

しかし，この比重勾配管法は液体を滴下する

本報告で，この新手法の測定方法と麦汁エキスを点滴してみる方法で比重が測定できるかどう測定への応用を報告する．

かの検討を行った．

1．

II 点滴比重測定法について
点滴比重測定法はAtkinら1)の開発した比重測定器具及び試薬

液温を20℃に保って測定を行うために，恒温水そうと透明塩化ビニル製水そうとをLABO−tube）法のPUMPて直結し，20℃の水を循環させて透明水変法というべきものである．比重勾配管法は次そう中の液温を一定にじてその中に比重管を並べのような手順である．まず比重の異なるブロムた．比重管は標本ビン（内径6cm、，高さ20cm）勾配管（specificgravitygradient＊現農事試験場

一9一を用い，混合液を15cm前後の高さまで入れた．

Gx：未知の比重管の該当エキス値

標準液は硫酸銅溶液をAtkinらの方法に準じてSa：標準液の軽い方のエキス値作成したものを比重球によって比重測定した．

Sb：標準液の重い方のエキス値（SaとSb

ブロムベンゼンは和光純薬d＝1．49を，ケロシは隣りあった比重の標準液である）

ma：標準液の軽い方の停止位置番号

ンは和光純薬d＝0．79を用いた．

mb：標準液の重い方の停止位値番号

2． 比重管内の混合液調整とその比重決定
ブロムベンゼン・ケロシンの混合比率と，比（ma≦3＜mb）

重，エキスとの関係はAtkinらの表を参考にしこの方法により標準液を用いて比重管の該当それに準じて調整を行った．なお実際にはエキス（％）を測定することが目的であるため本報

エキス値を決定し，また同時にこの混合液を直告では比重はすべてエキス値に換算した．混合

接比重球を用いて比重測定を行い，エキス値に液はほぼ完全に混じり合うように素早く何度も換算して両者の数値の比較を行った．その相関かくはんを行うが，標準液で検定すると混合液関係を第2図に示した．この結果調整を行ったの計算上の値と若干差があった．そこで，ブロ比重管のエキス値は，比重管の内部でほぼ均一ムベンゼンやケロシンをさらに数滴加え，所定であり，実際の値とほとんど差がないことが認の比重になるように調整を行った．混合液はエめられた．したがって前記のような数式で数値キス値に換算して74．5〜84．5％の間でつ．5〜0．9を決定することは，標準液や比重管のエキス値％程度の間隔をおくように順次調整した．なお，の間隔がLO％以下のように小さい場合には誤標準液はその比重を麦芽水分5％相当のエキス差の範囲もさらに狭くなり，検定に用いること値として換算（EC法plato表使用）して，ができると予想された．なお，比重管のエキスエキス値で72．5〜86．5％の間を0．5％間隔にな

値はエキス値決定後1日経過すると0．2％程度るように調整したもので変化していることがある．この変化はケロシン

B1が気化することや，混合液が完全にかくはんさある．

2≧

標準液を用いての比重34垂れていないためと考えられる．したがって，未管の該当エキス値の決定は次の方法で行った．まベンゼン・ケロシン混合た．この位置番号によって未知の比重管の該当

Y富1．06X十α55
r＝菖0，99．●．

7

エキス値を求めることができる．すなわち，未7下し，その停止位置によって第1図のような番号をつけ重みづけをし8液に標準液を1滴ずつ滴此重疎漏定法による呂ギス値︵％

第1図試料の停止
位置番号

ず比重管の各々のブロム

8584

●

知の比重管の該当エキス値（Gx）は次の式により求められる．

747578808284

標準瀧より算出した呂ギス鐘（％）

3＿ma

第2図 比重管における比重球と標準液より算出

Gx＝Sa十 mb．ma（Sb−Sa）

したエキス値の比較

一10一

知試料のエキス値を測定する際には，かならず

1．

測定直前に比重管の該当エキス値を決定してお同一麦汁のエキス値についての比重球測定法と点滴比重測定法との比較かねばならない．その方法は，常に特定の標準同一試料を用いて比重球測定法によるエキスぐ液が特定の位置に停止するように，ブロムベン値と点滴比重測定法による値との相関関係を検ゼンあるいはケロシンを極少量ずつ滴下して調討した．

整を行えばよい．

3．

1）

実験材料及び実験方法

比重未知の試料のエキス値の決定方法

250gの原麦から製造した麦芽のうちから25

比重未知の液体のエキス値は前述の方法でエ9をひょう量し，第3図に従って麦汁を抽出し，キス値を定めた比重管にそれぞれ未知の液体を測定に供した．抽出は2回反復で行い，比重球1滴ずつ滴下し，その浮沈によって値を決定しによって測定した後同じ溶液を点滴比重測定法た．未知の液体のエキス値（Ex）は次式によりに供し，エキス値を求めた．

2）

求めることができる．

実験結果及び考察

比重球及び点滴比重測定法によるエキス値のExニGa十 na十nb−4 （Gb−Ga）

4

相関関係を第4図に示した．図にみられるよう

Ex：未知の液体のエキス値

88

Ga：軽い方の比重管のエキス値
比重球測定法によるエキス値︵％

Gb：重い方の比重管のエキス値
na：軽い方の比重管での麦汁停止位置番号

nb：重い方の比重管での麦汁停止位置番号

呼

未知の試料のエキス値は未知の試料にもっと

●

8●

マ

〆●

（na＞3≧nb）●

Y＝099X→・α35
r＝α95●●

も近似した軽い比重管と重い比重管のエキス値から求める．

m76

点滴比重測定法による麦汁エキスの測定

78

8082

点滴比重翻定法によるエやス値について％）第4図 同一麦汁における比重球と点滴比重両測定法問のエキス値の比較麦芽微粉

水50mI

種離賜

一圃20分毎
掘とうfill up
全重2259

一一一回ろ液…回一一50m

2回25g抽出麦汁

因定︑×ー

品測品誤一…匝｝一一一㎞栓
水密

水190mJ

要19精秤

2回戻す

重球測定法

1ε抽出麦汁」点滴比重測定法

第3図

27

174．42

6．46

65．65串零

1

4．52

4．52

45．94串＊

27

2．35

0．87

56

5．52

0．098

定法間内の種内ろ液2m

自由度平方和分散分散比

種法法差定
ヌ259精秤

第1表 同一麦汁を用いた時の分散分析

麦汁の抽出方法について注．＊

一11一ll翻撰）乞345％水準で有意＊＊1％水準で有意に相関係数は0．95＊＊＊で非常に高く，回帰係数も場合として換算しエキス値を求め，点滴比重測ほぼ1に近い．次に反復試験の分散分析の結果

定法の値と比較したところ，rニ0．95榊というを第1表に示したが，これによると比重球測定高い相関を得た．相関関係を第5図に示す．こ法と点滴比重測定法とでは，測定値間に有意なの時の回帰式をもとに，点滴比重測定法による差が認められた．また二つの測定法での誤差のエキス値と比重球測定法によるエキス値との関分散を調べたところ，点滴比重測定法の誤差が係を，ビール麦が一般に示すエキス値の範囲74地重球測定法より大きいことがわかった。

〜84％付近で求めたところ，点滴比重測定法に一方，測定法別にそれぞれのLDを求めたとよるエキス値から1．5％を減じると比重球によころ，比重球測定法では0．42，また点滴比重測るエキス値に近似的な値を示すことがわかった．

定法では0．74という結果を得た．比重球測定法

このように点滴比重測定法によるエキス値が高Sと比べると点滴比重測定法の方が誤差が大きい

めに出る理由としては，糖化を行う際に，1gが，相関が極めて高く，LDは0．74という値抽出の場合最初に全量の水を入れ抽出するためであることなどから，従来比重球測定法でも反に糖化が良く進行するということや，25g抽出

復間におけるエキス値の差が0．5％以下は，の時のヒうに最後に一定量に重量を調整するこS

誤8差とみており，誤差の範囲を1．O％以下とみな

ωせるような試験の場合には相対的なエキス値の●●●●点滴比重測定法との間に高い相関があることが●●●同一抽出液の測定の場合には比重球測定法と

●●

8●
7

同一麦芽からの抽出法を変えた場合の麦汁エキス値の比較

●
8

2．

比重球捌定法によるエキス値︵％︶できるものと考えられる．

8

関係を知るうえで，点滴比重測定法が十分利用

7

Y＝1．02X−a19
r＝；095●●●わかった．ところで点滴比重測定法では材料の●少ない原麦から作った少量の麦芽のエキス値を74測定するところにその意義がある．したがってまず少量の麦芽からの抽出液を点滴比重測定法76808284

第5図 同一麦芽での抽出法を変えた場合におけるエキス値の比較で測定し，従来からの方法によるエキス値との第2表 同一麦芽を用いた時の分散分析比較を行った．

要

実験材料及び実験方法

自由度平方和分散分散比

因

麦芽は250gで製麦したものを用い，従来の品

種25g麦芽での抽出方法の他に，多少その操作を測簡単にし，1gでの抽出を行った．抽出法の比

品種×測定法較は第3図に示す通りである．反復はそれぞれ

誤定法

差91∩コ201）78

点演比重測定法によるエキス億（％）

251．1

27．90

384．78＊＊

3．36

3．36

46．34＊＊

2．79

0．31

1．450．0725

2回とした．

2）

実験結果及び考察

10α515α0515）

点滴比重測定の際の標準液は麦芽水分5％相10当のエキス値として計算してあるため，比重球によって測定した比重をすべて麦芽水分5％の一12一注．＊＊

0．9350．0935L816Ns

1％水準で有意NS有意差なし

8とがないため，水分がごく微量蒸発している場、●合など，水分補足による定量化がないことなど

才●

7

るLSDは0．48，点滴比重測定法では0．62という●●はなかった．また比重球測定法での品種におけ●7たが，誤差分散は2つの測定法間で大きな開き●結果であり，前述の試験結果とほぼ同じであっ
776の段階差を設けてエキスの高低を判別するよう

Y騙LI

gX一且9，23r冨α88●●●7882808486

点資比重欄窪法による呂浄ス値（％）

な試験の場合には十分利用できるといえよう．

3．

●●た．したがって，相対的に各系統間で1％程度●ノ第2表に示すように測定法間で有意な差があっ8

比重線釦定法にょるエやス億︵％︶

次に，反復試験の分散分析を行ったところ，8があげられる．

第6図

同一原麦を用い製麦法を変えた麦芽のエキス値の比較

同一原麦での製麦およぴ抽出法を変えた場合におけるエキス値の比較を行った．反復は2回である．

前記二つの試験により麦芽を1gで抽出して2）

実験結果及び考察

も点滴比重測定法により充分エキス値が測定で二つの測定法によるエキス値の相関関係を第きることがわかった．ところで今までの試験に6図に示した．この結果r＝0．88＊＊と相関係数

用いた麦芽はすべて250g製麦による材料であはやや低くなった．しかし，その寄与率は約77るが，実際問題として少量の麦芽で抽出を行わ％であ｝），初期世代のエキス測定にはこの4gなければならないのは原麦が少量しかない場合製麦の点滴比重測定法によるエキス測定を用いがほとんどである．これは育成初期世代の材料ることができよう．相関関係が今までに比ぺての場合に特にいえることである．そこで極少量低くなったことは，製麦過程で浸麦時の水分調（4911株で約8g採取でき，そのうち4g整をしないことによる誤差，また，乾燥工程のは次代の種子とする）で麦芽製造を行い，その際4gという極少量のため温度に250gの時よ

麦芽1g（原粒4gから約3gの麦芽ができ，19をエキス，19をジアスターゼ力測定に供り極端に影響されてしまうこと、さらに前述した1g抽出による誤差などが加算された結果とする）で麦汁を抽出し，点滴比重測定法により考えられる．なおこの時のLSDは1．08であっエキス値を求めるという一連の操作によるもの

たが74〜84％というほとんどのビール麦が示すが，従来からの方法によるエキス値との間でどエキス値の範囲で2％程度の間隔，すなわち5のような関係にあるかの検討を行った．

〜7段階程度でエキス値の高低を判別する際に

1）

実験材料及び実験方法は利用できるであろう．なお，この時実際のエ250g製麦の材料は25gエキス抽出ののち比

キス値は回帰式から，74〜84％の範囲では点滴重球によるエキス測定を行った．また4g製麦比重測定法によるエキス値から3．5％を減じたの材料は1gエキス抽出ののち点滴比重測定法値とほぼ近似している．によ1）測定を行った．なお250g製麦法では原麦の吸水速度を測定し43％の浸麦度になるようIV総合考察

浸麦時間を決めているが，4g製麦では材料が少量の液の比重を測定するためにAtkinら1）少ないため平均的な浸麦時間（58時間）で浸麦による比重勾配管法を参考にし，点滴比重測定

一13一

法について検討した．

点滴比重測定法の比重管はブロムベンゼン・V

摘

要ケロシンの混合液であり，それに不溶性の液体育種試験のためのビールムギ醸造用品質検定

であれば混合液の比重が既知の時2mJ程度で測法確立に関する試験の一貫として簡便な麦汁エ定が可能である．またこの比重管は比重勾配管

キス値の測定法について検討し次の結果を得た．

1．とは異なり，1本の管内で縦の勾配による比較ではなく，1本の比重管が一定のエキス値を示2．

すものとし，横に比重の段階ができるように比重勾配を14本の管で作成したため，各々の管にこの方法は比重管1本につき1滴あれば測定でき2mJの試料で測定可能である．

3．

おけるエキス値は，比重管内でほぽ均一である．
したがって標準液で若干調整を行うことにより，ブロムベンゼン，ケロシンの混合液を用い，新たに点滴比重測定法を開発した．

従来の比重測定法の麦汁エキス値と比較したところ結果は次のようであった．

1）

一度準備したブロムベンゼンとケロシンの混合同一麦汁を用いた場合，二つの測定法間で相関が非常に高い（rニ0．95脚）．

液は長時間測定に用いることができ，きわめて

2）経済的である．

極少量の液量で測定が可能であることがわかったので，麦汁について比重球測定法と点滴比同一麦芽を用い少量抽出（1g）した

場合，従来の抽出法（25g）での値と相関が高かった（r＝0．95＊料）．

3）

重測定法の両法でのエキス値の比較を行った．

同一原麦を少量製麦（4g）後，少量この結果，少量の原麦を材料として製麦したの抽出（1g）し，点滴比重測定法により測定しち1gの麦芽を糖化させてエキス値を求めたとても従来の測定法とで相関が認められた

ころ，従来の測定法とでかなり高い相関があり，（r＝0．88＊＊）．

LS

4．

Dを考慮し2％ほどの間隔で段階を設けてエキス値の高低を知るには充分利用できること5．

がわかった．

点滴比重測定法で，測定の精度を高め，また点滴比重測定法はエキス値に換算して2％間隔程度の相対的な比較に有効である．◆

1日当り80点測定でき試料は2mJ程度で充分である．

日変化を極力避けるために，比重管における標準液の停止位置を常に一定であるように，ブロ本試験の実施にあたり一部に従事した栃木分

ムベンゼンあるいはケロシンを少量加えて調整場久保野実技師，藤井敏男技師，並びに園芸特を行う必要がある．この調整は慣れるまでにす

産課鈴木忠技師の各位に対し厚く謝意を表する．

こし時間を要するが，それでも従来は1日当り40点の測定点数であったものが，点滴比重測定

引法では80点が測定でき，抽出液も2mZ程度で良1．Atkin，L．，Lいという利点がある．

Wallerstein

醸造用品質の育成初期世代からの選抜が可能
か否かは育成者にとって興味がある課題であるが，この点滴比重測定法が確立したので，今後はそのような問題も解決できることになろう．

2・European

用文献
StoneandRBrewery

Convention（1963）

PublishingEdition）

Company．

Amsterdam−London−New

一14一

Gray（1948）

Lab．Co㎜，11，281〜288．

Analytica−EBC（SecondElsvierRYork．