日呼吸誌●原1（1），20123

著

血清アスペルギルス沈降抗体検査症例の臨床的検討
安藤陽一郎ａ高田昇平ｂ北里裕彦ｂ,ｃ

田尾義昭ｂ

松永和子ｃ

伊勢信治ｂ

緑ａ

星野友昭ｃ

川崎雅之ｂ

相澤久道ｃ

久保田

要旨：2009年2～12月に国立病院機構福岡東医療センターでAspergillus immunodiffusion system（MicrogenBioproducts Ltd., UK）のキットを用いて血清アスペルギルス沈降抗体検査を施行した症例について，沈降線を認めた症例（「あり」例）における沈降線数や診断名，また偽陽性や偽陰性の頻度などについて検討した．
「あり」例 24 例中，沈降線数が 2 本以上を示した 21 例のうち 16 例は慢性肺アスペルギルス症（chronicpulmonary aspergillosis：CPA）であったが，偽陽性が疑われる症例を 4 例認めた．沈降線を認めなかった
症例 99 例中 85 例が非アスペルギルス症症例であったが，初回検査時に偽陰性を示した CPA 症例も 4 例みられた．非アスペルギルス症を対照とした CPA における本検査について，陽性判定基準を沈降線数 2 本以上とすれば感度 78.9％，特異度 95.6％など最良の結果を示した．
キーワード：アスペルギルス沈降抗体，肺アスペルギルス症，感度，特異度
Aspergillus precipitating antibody，Pulmonary aspergillosis，Sensitivity，Specificity

緒言を集積しレトロスペクティブに検討した．
血清アスペルギルス沈降抗体検査：血清中の Aspergil-

肺アスペルギローマ（pulmonary aspergilloma：PA）

lus fumigatus に対する抗体（主に IgG）を二重拡散法になど，慢性肺アスペルギルス症（chronic pulmonary as-よって検出するものであり，検査キットとして Aspergil-pergillosis：CPA）の臨床診断における，血清アスペル

lus immunodiffusion system（Microgen Bioproducts

ギルス沈降抗体検査の有用性はすでに国内外で認識されLtd., UK）を使用した．Fig. 1 に示すように，検査プレーている1）〜8）が，我が国では本検査が保険適応外のためか，トのウェルの中央部に患者血清を，①〜⑥の部位にマその陽性判定基準や検査精度についてのデータは少ない．

ニュアルに従って濃度調整した A. fumigatus 抗原試薬を，今回我々は，国立病院機構福岡東医療センター臨床検査

C1〜C3 に陽性および陰性コントロールを注入し，約 48部において血清アスペルギルス沈降抗体検査を施行した

時間インキュベートの後，検査技師が目視判定し沈降線症例における臨床的検討を行った．の数を確認した．

目的と方法

本研究における主な評価項目は，①検査時に沈降線を認めた症例（「あり」例）における，沈降線の本数と診

目的：血清アスペルギルス沈降抗体検査の陽性判定基

断名との対比，ならびに検査偽陽性症例の検討，②沈降準や検査精度について自験例を用いて検討し，陽性と判線を認めなかった症例（「なし」例）についての検討，定すべき沈降線の数や，結果判定上の注意点などについ特に検査結果が偽陰性を示した症例の評価，③非アスペて明らかにする．
対象と方法：当院において，血清アスペルギルス沈降抗体検査結果における沈降線数の記録を開始した 2009年 2 月から同年 12 月にかけて，本検査を施行した症例
連絡先：北里 裕彦〒811‑3195 福岡県古賀市千鳥 1‑1‑1ａ

国立病院機構福岡東医療センター臨床検査部

ｂ

同ｃ

呼吸器内科

久留米大学医学部内科学呼吸器・神経・膠原病内科部門（E-mail: kita-sir1028@jcom.home.ne.jp）（Received 28 Feb 2011/Accepted 25 Aug 2011）

ルギルス症症例を対照とした CPA 症例の初回検査時における本検査の感度，特異度，陽性的中率，陰性的中率の評価，とした．
な お CPA は PA， 慢 性 壊 死 性 肺 ア ス ペ ル ギ ル ス 症（chronic necrotizing pulmonary aspergillosis：CNPA）に大別し，その診断は本邦の深在性真菌症ガイドライン7）の記述や，Kitasato ら8），Camuset ら9）による CPA 診断基準，Kohno らによる CNPA の診断基準10）に基づき患者主治医により行われ，さらに診断の妥当性について後日，それぞれの著者らにより再評価された．

日呼吸誌

41（1），2012

Fig. 1 Aspergillus precipitating antibody testing.（A）A summarized figure of the Aspergillus immunodiffusion
system.（B）A typical example of a positive result for an Aspergillus precipitating antibody. Six precipitationarcs（arrows）are visible.

Table 1 Number of the precipitation arcs of 24 patients with positive results of Aspergillus
precipitating antibody and their characteristics
Number of precipitation arcs

Number of patients

13232
114464

Patient disease
CPA（during antifungal therapy）:1*Bronchial asthma: 1
Middle lobe syndrome: 1
CPA（PA）:2
CPA: 7（PA 3, CNPA 4**）
Nontuberculous mycobacterium: 2
Bronchial asthma: 1
COPD and bacterial pneumonia: 1
CPA: 3（PA 1, CNPA 2）
ABPA: 1*
CPA: 4（PA 2, CNPA 2）

CPA, chronic pulmonary aspergillosis; PA, pulmonary aspergilloma; CNPA, chronic necrotizing pulmonaryaspergillosis; ABPA, allergic bronchopulmonary aspergillosis. *These patients were excluded from thestatistical analysis. **One patient had a negative result at the first testing, and he was incorporated into thefalse-negative group.

結果1．集積症例数

アスペルギルス症（allergic bronchopulmonary aspergillosis：ABPA）などの肺アスペルギルス症を示唆する所見を認めず，偽陽性例と判断した．沈降線数が 2 本の前述の期間中に本検査を施行した症例数は，計 117 症

症例は 2 例とも CPA（PA）であり，沈降線数が 3 本以例，141 回分（沈降線「あり」例：24 例 29 回分，「なし」

上 を 示 し た 症 例 19 例 中，CPA が 14 例（PA 7 例，例：99 例 112 回分，重複症例含む）であった．

CNPA 7 例），ABPA が 1 例（後述の統計学的処理から2．各種検討結果は除外）であった．ただし，CNPA の 1 例は以前の 21）「あり」例 24 例の初回陽性時における，沈降線の回の検査では検査陰性であったものが陽性化した症例で本数と診断名との対比（Table 1）あり，後述の「偽陰性例」に組み入れた．また残る 4 例認められた沈降線の数は，
1 本：3 例，2 本：2 例，3 本：は，喘息 1 例，非結核性抗酸菌症（nontuberculous my-

11 例，4 本：4 例，6 本：4 例であった．沈降線数が 1

cobacterial infection：NTM）2 例，慢性閉塞性肺疾患

本の症例 3 例については，抗真菌薬投与中の CPA 1 例（後（chronic obstructive pulmonary disease：COPD）に合述の統計学的処理からは除外）を除けば喘息 1 例，中葉併した細菌性肺炎 1 例であり，検査結果の偽陽性，もし症候群 1 例と，いずれも CPA やアレルギー性気管支肺くはアスペルギルス属菌の一時的感染とその自然治癒をアスペルギルス沈降抗体検査の臨床的検討

Table 25Characteristics of 99 patients with negative results of Aspergillus precipitating antibody

Number of patients

Patient profile85

No Aspergillus-related diseases

7*3**
4CPA（during or postantifungal therapy）
Nonaspergillosis patients who had positive results at the first testing
Patients with CPA（PA: 1, CNPA: 3）who had false-negative results at the first testing*These patients were excluded from statistical analyses. **These patients were incorporated into the false-positive group.

Table 3

Statistical analysis of serum Aspergillus precipitating antibody testing
Antibody（＋）

Positive judgment criteria ≧ one precipitation arc
CPA
15
Nonaspergillosis
6Total21
Sensitivity
Specificity
Positive predictive value
Negative predictive value

485
89

1991
110

487
91

1991
110

687
93

1991
110

78.9％
95.6％
78.9％
95.6％

Positive judgment criteria ≧ three precipitation arcs
CPA
13
Nonaspergillosis
4Total17
Sensitivity
Specificity
Positive predictive value
Negative predictive valueTotal

78.9％
93.4％
71.4％
95.5％

Positive judgment criteria ≧ two precipitation arcs
CPA
15
Nonaspergillosis
4
Total
19
Sensitivity
Specificity
Positive predictive value
Negative predictive value

Antibody（−）

68.4％
95.6％
76.5％
93.5％

みていた可能性が疑われた（ただし，病変が小さいか他

2 例については陰性のまま現在まで経過観察中である．

疾患にマスクされ，持続的感染がすでに成立している可

3）非アスペルギルス症症例を対照とした，CPA 症例

能性も否定はできない）が，後述の統計学的処理においの初回検査時における本検査の感度，特異度，陽ては「偽陽性例」に組み入れた．

性的中率，陰性的中率の評価（Table 3）

2）「なし」例 99 例について（Table 2）

前述の症例群から，①同一症例の 2 回目以降の複数回症例中，後日の再検討の結果，真の陰性（非アスペル検査分，②検査時すでに治療中もしくは治療後の CPAギルス症）と考えられたものは 85 例であり，治療中も症例，③ ABPA 症例を除外し，①未治療・初回検査時しくは治療後の各種肺アスペルギルス症も 7 例みられたの CPA 症例，②非アスペルギルス症と考えられた症例が，後述の統計学的処理からは除外した．また前述の偽の 2 種に大別して再集計を行った．

陽性症例の経過中陰転化をみたものが 3 例（1 例：初回その結果としては，CPA 症例 19 例（PA 9 例，CNPA検査時の沈降線 1 本，2 例：沈降線 3 本）あったが，こ10 例，［沈降抗体検査結果］沈降線なし：4 例，沈降線れも偽陽性症例に結果を包括させた．

数 2 本：2 例，3 本以上：13 例），非アスペルギルス症

本検査が偽陰性を示したと考えられたものは 4 例（PAと考えられた症例 91 例（［沈降抗体検査結果］沈降線な1 例，CNPA 3 例）認められ，うち 2 例（PA，CNPA

し：85 例， 沈 降 線 数 1 本：2 例，3 本 以 上：4 例 ），計各 1 例）は経過中の検査陽転化を認めたものの，CNPA110 例となった．沈降線数 1 本以上をすべて陽性と判定

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した場合の感度，特異度，陽性的中率，陰性的中率を算

本邦における血清アスペルギルス沈降抗体の検査手技や出 す る と， 感 度 78.9％， 特 異 度 93.4％， 陽 性 的 中 率

CPA 患者における陽性率について，池本らはかつて PA71.4％，陰性的中率 95.5％となった．また陽性判定基準

における血清アスペルギルス沈降抗体検査の陽性率はを沈降線数 2 本以上に設定した場合の値はそれぞれ，80％以上であったと報告した5）．最近の報告では，小川

78.9％，95.6％，78.9％，95.6％，3 本以上を陽性とするとらも CPA 患者における血清アスペルギルス沈降抗体検68.4％，95.6％，76.5％，93.5％となった．以上の結果より，査の陽性率は約 80％であったと述べている6）．ただし本陽性判定基準は沈降線数を 2 本以上とするのが妥当と考邦報告例では，検査手技や陽性判定基準に関する記載がえられた．なお，この陽性判定基準において，初回検査明確でなかったり，手技の標準化がなされていないなど時における本検査の陽性率を疾患別に表すと，PA での問題があり，手技が標準化された検査キットを用いて88.9％（8/9），CNPA で 70％（7/10）であった．の血清アスペルギルス沈降抗体検査についての詳細な報考告は，我々が検索しえたかぎり本邦ではこれまでみられ察ない．今回の研究の結果，本キットの陽性判定基準を沈慢性肺アスペルギルス症（CPA）は，肺結核後遺症，降線数 2 本以上に設定した場合に感度 78.9％，特異度COPD，気管支拡張症など既存の肺疾患，あるいは糖尿95.6％など最良の結果が得られることが示唆された．

病，アルコール依存症，慢性肝疾患，全身性ステロイド

本研究はレトロスペクティブな調査に基づくものであ投与などの免疫状態低下が基盤に存在する患者に発症し，り，事後的なバイアスの可能性を否定しえないほか，問空洞形成，菌球，浸潤影，胸膜肥厚像など多彩な画像所

題点・要注意点として以下のようなものが挙げられる．

，日本における深在性真菌症の（1）沈降線数が 3 本以上であっても偽陽性の可能性を

7）
では，CPA は肺診断・治療ガイドライン（2007 年版）

否定できない症例が時に存在するため，CPA の診断はアスペルギローマ（PA）と慢性壊死性肺アスペルギル

画像所見や臨床経過を含め総合的に評価する必要がある

ス症（CNPA）の 2 種類に大別されている．CPA 症例でこと．

は真菌の微生物学的証明がしばしば困難であり7）8）11）〜13），（2）逆に，CPA であっても偽陰性を呈する例が（特アスペルギルス抗体やアスペルギルス抗原による血清学に CNPA で）散見され，かつ初回検査時には陰性で後的診断に頼らざるをえないケースも多い．CPA の臨床日の再検査時に陽転化を認める症例も存在するため，1

診断における，血清アスペルギルス沈降抗体検査の有用回の検査のみの陰性所見によって CPA を否定すべきで見を呈する疾患であり

4）7）性については以前より認識されており，近年我々も，1）〜7）ないと考えられる8）こと．

CPA 患者における血清アスペルギルス沈降抗体検査の（3）本研究の CPA 症例は微生物学的確定例が少なく陽性率が，アスペルギルス抗原のそれより優れているこ（今回，喀痰や気管支洗浄液の培養にてアスペルギルスとを報告した ．しかし我が国において本検査はいまだ属菌を同定できた症例は CPA 19 例中 4 例であり，その保険適応でなく，その陽性判定基準や検査精度について同定結果は，A. fumigatus 1 例，A. niger 1 例，Aspergil-

本邦のデータは少ない．かつて Coleman らは，30 人のlus spp．2 例であった），微生物学的検討や，non-fumig-

8）

PA 患者を含む計 60 人の各種肺アスペルギルス症患者

atus のアスペルギルス属菌に対する本キットの有用性ににおける血清アスペルギルス沈降抗体検査の陽性率はついての評価が十分でないこと．

82％，特に PA では 93％に達すると報告した2）．Kurup（4）本キットではまれに製品不良（寒天への気泡混入らは，17 人の PA 患者を含む計 75 人の血清を沈降抗体やプレートからの寒天剥離など）が存在すること（本キッ法など 4 種類のアスペルギルス抗体検査法にて測定し，トの輸入販売元であるコスモ・バイオ株式会社によると，いずれの検査においても各種肺アスペルギルス症におけ製品不良の報告頻度は全体の 1％弱との回答であった）．

る陽性率は 90％前後であったと報告した3）．また上記 17

これらの問題点について明確にするためにも今後の継人において，沈降抗体検査では全員が強陽性を示し，一続的な検討が必要と考えられた．

方で検査結果が弱陽性にとどまった症例についてはそのしかしながら CPA，特に CNPA は抗真菌薬による薬多くが非アスペルギルス症症例であった．今回我々が使物療法が必要な疾患であり，近年，ボリコナゾール9），用した検査キットである Aspergillus immunodiffusion

ミカファンギン14）などの有効性も示唆されている．早期

system は，これらの論文の検査技法に準拠したもので診断・早期治療が病勢コントロールのためにも望ましいあり，アスペルギルス沈降抗体の検査方法としても，キッと思われる以上，CPA の早期診断の一助となりうるとト化され手技の標準化がなされていること，市販されて考えられる本検査のさらなる普及が期待される．

いるため入手が比較的容易であること，海外におけるエビデンスが存在することなどの利点を有している．なお，

アスペルギルス沈降抗体検査の臨床的検討

結語

CPA の臨床診断における，Aspergillus immunodiffusion system キットを用いた血清アスペルギルス沈降抗体検査は，陽性判定基準を沈降線数 2 本以上と設定すれば感度，特異度，陽性的中率，陰性的中率のいずれも最良の結果を示すことが示唆され，その保険適応が望まれる．ただし偽陽性・偽陰性例の存在などには注意する必要があると考えられた．
本研究の要旨は真菌症フォーラム第 11 回学術集会（平成22 年 3 月，東京）にて発表した．
謝辞：本研究に際しご協力を賜りました，国立病院機構福岡東医療センター臨床検査部

浜田寛子様，伊藤健輔様に深double diffusion と counterimmunoelectrophoresisとの比較．真菌と真菌症 1977; 18: 119‑24.
6）小川賢二，奥村欣由，二改俊章，他．慢性型肺アスペルギルス症の臨床的検討およびエラスターゼ阻害物質の検討．日医真菌会誌 2006; 47: 171‑8.
7）深在性真菌症のガイドライン作成委員会編．深在性真菌症の診断・治療ガイドライン 2007．東京：協和企画．2007.
8）Kitasato Y, Tao Y, Hoshino T, et al. Comparison ofAspergillus galactomannan antigen testing with a
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9）Camuset J, Nunes H, Dombret MC, et al. Treatmentof chronic pulmonary aspergillosis by voriconazole

謝いたします．

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8日呼吸誌1（1），2012

Abstract

A retrospective clinical study about the serum Aspergillus precipitating antibody
testing in our hospital
Yoichiro Ando a, Yasuhiko Kitasato b,c, Yoshiaki Tao b, Kazuko Matsunaga c, Shinji Ise b,Shohei Takata b, Midori Kubota a, Tomoaki Hoshino c, Masayuki Kawasaki b and Hisamichi Aizawa ca

Department of Clinical Laboratory, National Hospital Organization Fukuoka-Higashi Medical Centerb
Department of Respirology, National Hospital Organization Fukuoka-Higashi Medical Centerc
Division of Respirology, Neurology, and Rheumatology, Department of Internal Medicine,
Kurume University School of Medicine

The objective of our retrospective clinical study was to investigate the validity of serum Aspergillus
precipitating antibody testing（using the Aspergillus immunodiffusion system［Microgen Bioproducts Ltd., UK］）
to diagnose chronic pulmonary aspergillosis（CPA）.We gathered records of patients who required this test in ourhospital from February to December in 2009. We examined the number of precipitation arcs, diagnoses of thepatients, and frequencies of “false-negative” cases in “positive-result” patients and of “false-positive” cases in“negative-result” patients. In 24 positive-result patients, most showing more than two precipitation arcs in the test
were patients with CPA, but it was doubtful that some were false-positive. In 99 negative-result patients, 85 were
thought to be nonaspergillosis, but 4 with CPA showed false-negative results of this test at the first inspection. For
the serodiagnosis of CPA, this test showed the best results if the positive judgment criteria were set as more than
two precipitation arcs, such as sensitivity of 78.9％ and a specificity of 95.6％. We consider this test useful for theclinical diagnosis of CPA.