プロファイルリスト
１．病

ACUTE HEPATOPANCREATIC NECROSIS DISEASE (AHPND)（=EMS/AHPND）
急性肝すい臓壊死病

名Vibrio parahaemolyticus の変異株

２．病 原 体a) 分 類b) 形 態c) 特 徴

ビブリオ科（Vibrionaceae）
ビブリオ属（Vibrio）
桿菌
グラム陰性菌。
主に肝膵臓に病変を示す1)。
実験感染では浸漬攻撃、経口投与により感染成立1)。自然感染においても経口および同居感染が主と考えられている１）。
これまで、感染エビを消費することによる人体への影響は報告されていない1)。
病原因子はゲノムDNAではなく、プラスミドDNAに由来する2, x)。 Ｘ）S.Tinwongger et al. 2016

３．地理的分布中国、マレーシア、タイ王国、ベトナム、メキシコ1)、フィリピン5, 6)

４．宿ウシエビ(Penaeus monodon )、ホワイトレッグシュリンプ（Liptopenaeus vannamei ）、コウライエビ(Fenneropenaeus chinensis )1)（クルマエビに対する病原性は不明だが、ビブリオ属の細菌による疾病がクルマエビにも存在すること、また、本菌の病原性がその他の項に示すように菌体外に分泌される毒物によるものだとすれば、クルマエビに対しても病原性を持つ可能性がある。）

主５．発生情報a) 潜伏期間―b) キャリアーc) 感染経路・水平感染d) ベクター―e) 蔓延状況（死亡率、罹患率な・稚エビの池収容後10日～30日で発症する1)。
ど）f) 感染ステージ ・ポストラーバ、稚エビ・4月から7月までの乾季に発生する傾向がある。 過剰な給餌、低品質な種苗、水質の悪化、低品質餌g) 感染要因料、藻類の繁茂あるいは枯死が発生につながる可能性がある7, 8)。
６．症状a) 臨床症状b) 組織検査

７．検 査 法・肝膵臓が色素を失い白色化する1)。
・肝膵臓が委縮し、硬化する1)。
・外骨格の軟化、腸管内消化物が不連続であったり、もしくは無い1)。
・肝膵臓に黒点や黒筋が認められることがある1)。
・重篤感染エビは底に沈む1)。
・肝膵臓のR、B、F細胞の減少に続くE細胞の分裂活性の減少を伴う、急性的な進行性委縮が認められる
1)。
・病変は近位(口側)から遠位(肛門側)に進展し、R、B、F、E細胞の機能障害、肝膵臓細管粘膜細胞の顕著な核肥大を示し、肝膵臓細管内腔で包囲化され崩壊する1)。
・崩壊した肝膵臓細胞より放出された基質は細菌増殖を助長し、重度の二次的細菌感染を引き起こす。
末期には肝膵臓は完全に崩壊する1)。
・肝膵臓細管上皮細胞の初期の崩壊および二次的細菌感染への進展に付随し、顕著な細管内血球凝集、血球による壊死した肝膵臓細管の包囲化あるいは肝膵臓細管のより近位部におけるメラニン化が起きる1)。
・生きたエビを用い、ダビッドソン液で固定した稚エビ全体を用いる1)。

a) 標的器官・肝膵臓b) 簡易検査法 無しc) サーベーラン
PCR、シークエンススd) 確定診断
PCR、シークエンス（参考）細菌分離
培養細胞/分離
TCBS寒天培地培地
培養条件
25～30℃、通性嫌気性
CPE/コロニー性
緑色のコロニーを形成（白糖非分解）状その他

（参考）PCRDNA 抽出法

市販のDNA抽出キット＜nested ＰＣＲ検査（ポリメラーゼ連鎖反応法）＞9）
1stステップ プライマ－セット (AP4)AP4-F1: 5’-ATG-AGT-AAC-AAT-ATA-AAA-CAT-GAA-AC-3’
AP4-R1: 5’-ACG-ATT-TCG-ACG-TTC-CCC-AA-3'
プライマー、産物 PCR産物 1269 bp
サイズ
2ndステップ プライマ－セット (AP4)AP4-F2: 5’-TTG-AGA-ATA-CGG-GAC-GTG-GG-3’
AP4-R2: 5’- GTT-AGT-CAT-GTG-AGC-ACC-TTC-3’
PCR産物 230 bp

８．対プロトコル

反応条件（1stステップ）
94℃ 2分94℃ 30秒 , 55℃ 30秒, 72℃ 90秒 (ｘ 30 サイクル）
72℃ 2分反応条件（2ndtステップ）
94℃ 2分
94℃ 20秒 , 55℃ 20秒, 72℃ 20秒 (ｘ 25 サイクル）a) 殺菌・滅菌方法

一般的な消毒剤に感受性を示す。数週間（菌数に依存）の冷凍あるいは55℃で5分や80℃で1分の加熱処理により増殖能は失われる1)。
15分の酸性処理（ph 5）により増殖能を失う1)。
汽水で9日間、海水で18日間生存可能1)。

策b) ワクチンc) その他―

９．発生事例2009年に中国で確認。2010年にベトナムで、2011年にマレーシアで、2012年にタイで、2013年にメキシコ
で、2014年にフィリピンで発症が確認されている1, 5, 6)。

10．その他・本疾病は病原菌が，特定の毒素をコードするプラスミドを有する場合に引き起こされる。毒素のみでも本疾病の症状が再現される。菌がV. parahaemolyticus 以外の種に同定されてもこのプラスミドを持っていれば，本疾病の病原菌となりうる。

出典1) 国際獣疫事務局（OIE）水棲生物委員報告書（甲殻類疾病）：
http://www.oie.int/fileadmin/Home/eng/Internationa_Standard_Setting/docs/pdf/Aquatic_Commission/AHPND_DEC_2013.pdf
2) 近藤秀裕・Sasiwipa Tinwongger・Porranee Proespraiwong・Rapeepat Mavichak・Sasimanas Unajak・野崎玲子・廣野育生（2014）：タイのバ
ナメイエビより分離されたEMS/AHPND原因Vibrio parahaemolyticusのゲノム解析. 平成26年度日本魚病学会.
3) T.W. Flegel, C.F. Lo（2013）：「急性肝すい臓壊死病原因菌検出用プライマーに関する通知」
http://www.biotec.or.th/en/images/stories/Workshops/2013/Announcement_AHPND%20Detection%20Method.pdf4)Tran, L., L. Nunan, R. M. Redman, L. L. Mohney, C. R. Pantoja, K. Fitzsimmons, and D. V. Lightner (2013) Determination of the infectiousnature of the agent of acute hepatopancreatic necrosis syndrome affecting penaeid shrimp. Dis. Aquat. Org ., 105, 45-55.
5）DE LA PEÑA L.D., CABILLON N.A., CATEDRAL D.D., AMAR E.C., USERO R.C., MONOTILLA W.D., CALPE A.T., FERNANDEZ D.D. &SALOMA C.P. (2015). Acute hepatopancreatic necrosis disease (AHPND) outbreaks in Penaeus vannameiand P. monodon cultured in thePhilippines. Dis. Aquat. Org., 116, 251–254
6）DABU I.M., LIM J.J., ARABIT P.M.T, ORENSE S.J.A.B., TABARDILO J.A., CORRE V.L. & MANINGAS M.B.B. (2017). The first record ofacute hepatopancreatic necrosis disease in the Philippines. Aquacult. Res., 48, 792–799
7）FAO (2013). Report of the FAO/MARD Technical Workshop on Early Mortality Syndrome (EMS) or Acute Hepatopancreatic Necrosis
Syndrome (AHPNS) of Cultured Shrimp (under TCP/VIE/3304), 2013. Hanoi, Viet Nam, 25–27 June 2013. , FAO Fisheries and Aquaculture
Report No. 1053, Rome, Italy, 54 p8）NACA (2012). Report of the Asia Pacific emergency regional consultation on the emerging shrimp disease: Early mortality syndrome(EMS)/acute hepatopancreatic necrosis syndrome (AHPNS), 9–10 August 2012 , Published by the Network of Aquaculture Centres in
Asia-Pacific, Bangkok, Thailand.
9）DANGTIP S., SIRIKHARIN R., SANGUANRUT P., THITAMADEE S., SRITUNYALUCKSANA K., TAENGCHAIYAPHUM S., MAVICHAK R.,
PROESPRAIWONG P. & FLEGEL T.W. (2015). AP4 method for two-tube nested PCR detection of AHPND isolates of Vibrioparahaemolyticus. Aquaculture Rep., 2, 158–163