    HeLa 細胞内在性 hAgo2 の抗 hAgo2
モノクローナル抗体による染色パターン〔総 説〕
塩見美喜子 ……… 2「ヒト Argonaute2(hAgo2) に対するモノクローナル抗体の作製」「自動最適化を利用したポジティブリスト制対応の通知法メソッドの開発」

川俣公彦、大関由利子 ……… 5
岡村嘉之 ……… 8「GC/MS によるポジティブリスト農薬の一斉分析」〈生 薬 の は な し〉佐竹元吉 ……… 14「世界の薬用植物」〈テクニカルレポート〉「無細胞タンパク質合成試薬キット TransdirectTM insect cell の紹介」

江連

徹 ……… 10

「細胞培養のための添加因子としての絹タンパク質セリシン」

寺田

聡 ……… 12

吉田貴三子 ……… 19「ポジティブリスト関連品目の LC/MS/MS 分析」〔化学大家〕
島尾永康 ……… 32「ヘルマン・ヴァルター・ネルンスト」〔製品紹介〕
有機合成

生化学

パラジウム - ポリエチレンイミン …………………… 20
メタセシス触媒 ………………………………………… 20
光学分割剤 ……………………………………………… 21

抗ヒト AGO2，モノクローナル抗体 ……………… 4
マグナビート㈱ Therma-Max …………………… 26
Thermo 社 細胞培養用培地 ｢XtenTM PF-1｣ ……… 27
ポリアクリルアミドゲル「スーパーセップ TM」 …… 28
ストレプトアビジン …………………………………… 28
耐熱性酵素 ｢ キチナーゼ ｣ …………………………… 29
タンパク質サイズマーカー …………………………… 36

環境・分析

生薬試験用標準品 ……………………………………… 18
ワコーパック ワコーシル -Ⅱ 3C18 HG…………… 19
積水化学㈱ マグピア TMPCB 測定システム ……… 21
ポジティブリスト関連品目 …………………………… 22
残留農薬試験用 農薬標準品 ………………………… 24
ズダン・パラレッド標準品 …………………………… 24
RoHS 対応用試薬 ……………………………………… 25
プレセップ ポリアミド C-200 タイプ M ………… 26
ワコーゲル 50NH2 …………………………………… 26

遺伝子㈱島津製作所 TransdirectTM insect cell …………… 11
スピンクリーナー，低分子用 ………………………… 29
抗GFP，モノクローナル抗体 ……………………… 30
マイクロアレイ標識用基質 …………………………… 30
Evrogen 社 H2O2 検出タンパク質発現ベクター … 31
機

器

富士通㈱

CELLINJECTORTM CI-2000 …………… 27〔お知らせ〕
第 22 回 Wako ワークショップ開催のご案内 ……………………………… 4
細胞培養添加因子 ｢ セリシン ｣ サンプルのご案内…………………………13

1

R

esearchヒト Argonaute2（hAgo2）に対するモノクローナル抗体の作製
徳島大学

はじめに
RNAi は、1998 年に Fire らによって
1）線虫を用いた研究より発見された 、ゲノム機能研究センター

子がmiRNAによって制御されているとは RNAi を遺伝子治療法や薬そのもの予測される。その他、siRNAが転写レとして用いる試みが盛んに行われる様

ベルでRNA silencingを行うという報告になり、臨床試験もすでに始まっていもあるが、詳細なメカニズムは不明で

4）

る 。

あ る。 最 近、HeLa 細 胞 を 用 い た 研
究により、hAgo 2はP-body（processing

RNAi 分子経路

body）と呼ばれる局所に集積する事が 示 さ れ た 10）。P-bodyに はmRNA分出来る事を特徴とする現象である。その後の研究により、RNAi は線虫に限哺乳動物細胞内に導入された、ある解因子が凝集しており、そこでmRNA

らず、植物やショウジョウバエ、そいは細胞内で発現された２本鎖RNA分解が行われる。hAgo 2だけでなく、して酵母といった多くの生物種で起こは、まず２本鎖siRNA（siRNA duplex）

siRNAやその標的mRNAもP-bodyに局る事が示された。しかし、しばらくとなる 3）。この生成反応を担う酵素は在する事が示された。hAgo 2に結合すの間、哺乳動物細胞では RNAi を起こ

RNaseIII ドメインタンパク質Dicer でるタンパク質GW182もP-bodyに局在す

す事は不可能であると考えられていあ る。 細 胞 内 でDicer は ２ 本 鎖RNAるタンパク質であり、GW182の発現をた。哺乳動物細胞では、２本鎖 RNA

結 合 タ ン パ ク 質 TRBP と 複 合 体 を抑制するとhAgo 2のP-bodyへの集積がの細胞内導入によってインターフェロ

形 成 す る 5）。Dicer/TRBP 複 合 体 は、起こらなくなり、RNAiも効かなくなる。

ン応答、そして細胞死を導くからであsiRNA duplex生 成 後、 こ れ に 結 合 しRNAi自身はP-bodyで起こるという考える 2）。その間、RNAi メカニズムの基てRNP複合体（RISC-loading complex :方が強く示唆される様になった。

礎研究は、主に線虫とショウジョウバ

RLC）となる。RLCにはArgonaute 2（ヒエを用いて着実に進んだ。その結果、トAgo 2 : hAgo 2）も含まれ、hAgo 2に細胞内に導入された２本鎖 RNA は、

よってRLC中のsiRNA duplexは １ 本 鎖

RNAi 反応過程において21塩基対ほどのとなる 6）。この１本鎖化反応は、まず、我々の研究室では最近 hAgo 2 モノ

小さいRNA（short-interfering RNA :siRNA duplexの両末端の対合性の強弱

クローナル抗体を作成した。これまで

siRNA）にプロセスされる事、siRNAの違いを認識する 7）。１本鎖化反応後、の hAgo 2 に関する知見は、殆どの場を直接細胞内に導入する事によっても対合性の弱い方に５末端が位置してい合細胞内で強制発現した hAgo 2 を基効果的に RNAi を起こせる事、そして、たsiRNAがhAgo 2（ひいてはRISC）にとして得られている。例えば、哺乳

siRNA を引き金分子として用いれば、取り込まれ、RNAi過程下流において動物細胞で発現する Argonaute タン

哺乳動物細胞においても細胞死を伴う

機 能 す る。 も う 一 方 のsiRNAは、 細

パク質のうち、標的 mRNA 切断活性

事なく RNAi を行う事が出来ることが胞質中で分解されてしまう。siRNAをを有するのは hAgo 2 のみであると報示された 3）。これはまさに画期的な報

取 り 込 ん だhAgo 2は、 そ のsiRNAを告されているが 11）、これも強制的に発告であった。哺乳動物細胞では、従2美喜子に広がった。特に医療産業界において２本鎖 RNA の細胞への導入によって特定遺伝子の発現を配列特異的に抑制

塩見

hAgo2 抗体として標的mRNAを現させた hAgo 2 を用いた結果であり、来、ある特定の遺伝子の機能を知るた

探し、それに結合して切断する。切断内在性 hAgo 2 に実際に標的 mRNA 切

めには、それを欠損させるノックアウ

されたmRNAは、細胞内ではRNaseの断活性があるかどうかは、これまで示ト法が用いられてきている。遺伝子自餌食となり、さらに分解されてしまう

されていない。hAgo 2 の生化学的解身を欠失させるこの方法では、目的のために、それを鋳型とした翻訳は起こ

析を今後さらに進めるためにも、特遺伝子発現を完全に抑制出来るが、行

らず、よってRNAiを遺伝子発現抑制

異抗体が必要である、と我々は考え程が煩雑であり、高価、時間を有する経路の一つとする。RNAiの様に小さた。Argonaute タ ン パ ク 質 は PAZ ド

等の欠点を持ち合わせている。ノック

いRNA分子がとなってメインと PIWI ドメインを有する事をアウト法の代わりになる、簡便な、し起こる遺伝子発現抑制機構を総称して特徴とする 12）。PAZ はタンパク質の

ガイド分子

トリガー
8）

かも効果的な手法が多くの研究室で待RNA silencingと 呼 ぶ 。RNAi以 外 で中ほどに、PIWI は C 末端に位置する。

ち望まれていた。そこで登場したのがはmicroRNA（miRNA）による翻訳抑

これまでの Argonaute 構造解析から

RNAi で あ る。RNAi を 用 い れ ば、 標

制機構がよく知られている 9）。ヒトでsiRNA を最初に受け取るドメインは的遺伝子の発現を完全に抑制する事はは約500種のmiRNAがこれまでにデー

PAZ で あ る が、RNAi が 進 む に つ れ

出来ないものの、効率よく、しかも高タベース上に登録されている。一つのてそれは PIWI ドメインに移行するとい特異性を伴って遺伝子発現を抑える

miRNAが複数の遺伝子を標的とする事されている。PIWI ドメインの立体構事ができるため、その応用利用は急速を考えると、総合的には相当数の遺伝

造は RNaseH のそれと酷似しており、

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

図１．hAgo 2抗体を用いたWestern解析
結果
HeLa 細 胞 抽 出 液を 作 成 し、hAgo 2
抗 体 で Western を行った。期待される分子量のところにバンドが検出され た。hAgo 2 組 換えタンパク質に反応 し、hAgo 1 組 換えタンパク質には、反応しない事は確
認済みである。

図２．hAgo 2 抗体による HeLa細胞の免疫染色HeLa 細胞を hAgo2 抗体で免疫染色した。hAgo2 は強制発現していない。内在性hAgo2 タンパク質の P-body
へ の 局 在 が、 観 察 さ れ る。
細胞質も弱いながら均一に染色されている。P-body は
黄色矢頭で示されている。

る事が判った。細胞質全体に渡った染ジ ョ ウ バ エ RNAi 因 子 に 対 す る モ ノ

色パターンも弱いながら確認できた。

クローナル抗体を作成し、それらをRNaseH 活性中心に位置する必須アミ

hAgo 2 は普段は細胞質中に局在する用いて研究を進め、成果を発表してノ酸も、Argonaute-PIWI ドメインにが、siRNA を介して標的 mRNA と結きた。例えば 2005 年には、S 2 細胞よ14）

おいて高く保存されている 。実際、合した後は P-body へ移動するというり 免 疫 沈 降 し た 内 在 性 dAGO 2 に 標

標的 mRNA を切断するのも PIWI ドメ

説と一致する。続いて、HeLa 細胞抽的 mRNA を 切 断 す る 活 性（Slicer 活

インの役目である事が明らかとなって出液からの免疫沈降を試みたところ、性）がある事を示した 15）。ごく最近でいる 。一方、Argonaute の N 末端領

期待通りに hAgo 2 が得られる事が明は、ショウジョウバエ卵巣から免疫沈域にはこういった機能性保存領域が無らかになった。hAgo 2 には miRNA が降 し た Piwi タ ン パ ク 質（Argonaute

い。そこで我々は、hAgo 2 の N 末端、結合する事は、強制発現した hAgo 2

ファミリーのサブグループ PIWI 群に

約 150 アミノ酸に相当するペプチド部を用いたこれまでの解析から判って属するメンバーの一つ）には、siRNA

分を GST に連結した組換えタンパク

いたが、我々の実験で免疫沈降されたと も miRNA と も 質 を 異 に す る 小 分

質を作成し、抗原として用いる事にし内在性 hAgo 2 にも miRNA（miR- 21）

子 RNA「repeat-associated siRNAた。数回のマウス投与後、良好な免疫が 結 合 し て い る 事 が Northern 法 に（rasiRNA）」が特異的に結合している反応が得られた。マウスのリンパ細胞

よ っ て 確 認 出 来 た。 今 後、 内 在 性

事 を 明 ら か に し た 16）。Piwi は、 こ れを回収し、それをミエローマ細胞と融hAgo 2 に結合する miRNA の網羅的解までの遺伝学的解析から、生殖細胞合させる事によってハイブリドーマを析を進める予定である。次に、マウスの新生、維持に関与している事が示得 た。 数 日 後、ELISA 及 び Western

Argonaute 2（mAgo 2） へ の 反 応 性されていたが、その分子経路は未知法によって hAgo 2 抗体産生細胞を選を検討した。マウス 3 T3 細胞の細胞であった。我々の研究から、Piwi は、択し、その後、細胞のクローン化を抽出液を作成し、Western 解析を行っrasiRNA を介して、おそらく rasiRNA行った。この様にして hAgo 2 モノク

たところ、mAgo 2 には反応しない事の前駆体に相当する transposon 遺伝

ローナル抗体（産生細胞）は誕生を迎が明らかになった。hAgo 2 と mAgo 2子や染色体上のその他の反復配列領域

えた（図１）。

のアミノ酸配列相同性を確認してみたからの転写産物、もしくは遺伝子そのところ、抗原として用いた 150 アミノ

ものに作用する事によって、遺伝子発酸中、8 アミノ酸だけが進化の過程で現制御を行っているのではないか、と置換していた。ちょうどそれらアミノ示唆された。さらには、その制御が生酸が集中する領域が hAgo 2 抗体エピ

殖細胞の新生、維持に重要なのではな

トープであると予想される。

いか、と推測された。今後も生物種を13）

hAgo2 抗体の性状
hAgo 2 抗体が Western のみならず、細胞免疫染色に使用出来るかどうかを検 討 し た（ 図 ２）
。HeLa 細 胞 で 強 制発現した hAgo 2 は P-body に局在する

問わず RNA silencing 諸因子に対するおわりに事が報告されているが（前述）、HeLa
細胞内在性 hAgo 2 も P-body に局在す抗体を作成し、それを有効に活用して
RNA silencing の分子経路メカニズム

我々は、これまで、種々のショウ

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

を解明していきたいと考える。

3

〔参考文献〕（2005）.
5） Gregory, R. I. et al . : Cell , 123 , 631 - 640

11）Liu, J. et al . : Science , 305 , 1437 - 1441（2004）.

1） Fire, A. et al . : Nature , 391 , 806 - 811（1998）.

6） Rand, T. A. et al . : Cell , 123 , 621 - 629（2005）.

12）Carmell, M. A. et al . : Genes Dev ., 16 , 2733 -2） Gil, J. and Esteban, M. : Apoptosis , 5 ,7） Tomari, H. and Zamore, P. D. : Genes Dev .,107 - 114（2000）.
3） Elbashir, S. M. et al . : Nature , 411 , 494 - 498

8） Hammond, S. M. : FEBS Letter , 579 , 5822 -（2001）.

（2004）.
14）Song, J-J. et al . : Science , 305, 1026- 1032
15）Miyoshi, K. et al . : Genes Dev ., 19 , 2837 -

5829（2005）.

4） Dykxhoorn, D. M. and Lieberman, J. : Cell ,2742（2002）.
（2005）.
13）Yuan, Y-R. et al . : Mol. Cell , 19, 405- 419

19 , 517 - 529（2005）.

9） Ambros, V. : Nature , 431 , 350 - 355（2004）.

2848（2005）.

（2005）.
10）Liu, J. et al . : Nature Cell Biol. , 7, 1261- 1266

126 , 231 - 235（2006）.

.
16）Saito, K. et al . : Genes Dev ., Epub Aug 1（2006）

RISC（RNA induced silencing complex）

P-body（processing body）

RNAi 経路において中心的な役割を示す複合体。ガイド
siRNA と結合した hAgo2 を含んでいる。初期、RISC が標的
mRNA の切断をするとされていたが、その後の解析からその中に含まれる hAgo2 が実際に標的を切断する酵素因子（Slicer）である事が示された。ショウジョウバエを用いた解析からは、RISC は 80S 程の大きさであると報告されている（holo-RISC）。miRNA を含む RISC を miRISC と呼んだりする。

細胞質内に存在するタンパク質と mRNA の凝集体。mRNA分解因子である Xrn1 やデキャッピング酵素 Dcp1/Dcp2 などが多く含まれる。リボソームを含まない。翻訳の基質とならない mRNA がここに集まり分解される。あるいは特定の mRNA を 翻 訳 の 場 か ら 回 避 状 態 に 置 く 役 割 を 担 う。
GW-body とも呼ばれる。ダイナミックな凝集体であり、ス
トレス、翻訳抑制によって細胞質内の数は増加する。

P roducts
抗ヒト AGO 2，モノクローナル抗体
免疫原：組換えヒト AGO2
形

実用希釈倍数： Western blot

状：10％グリセリンを含む TBS 溶液

１： 100 − 1：200

Immunoprecipitation

精製法：培養上清からアフィニティー精製

１： 50

Immunocytochemistry １： 20 − 1： 50

特異性：ヒト AGO2 に特異的
コード No.
016-20861

品

第 22 回 Wako ワークショップ
9：50 〜17：30
開催場所：全電通ホール
東京都千代田区神田駿河台３−６
TEL ：03−3219−2211
総合企画：東京大学大学院農学生命科学研究科
細胞生化学研究室

教授

塩田

邦郎

参加申込先：和光ホームページよりお申し込み下さい。
URL ：http://www.wako-chem.co.jp
員：300 名（申込先着順）

参 加 費：無料
問合せ先：和光純薬工業株式会社

試薬営業本部

学術部 / ワークショップ係
TEL ：03−3270−8243

4

規

格

免疫化学用

容 量
50 μℓ

希望納入価格（円）30,000「新たな生命科学、エピジェネティクスの可能性」◎ 講演プログラム ◎開会挨拶□はじめに（10：00〜10：20）【エピジェネティクスの時代】

開催日時：平成 18 年 11 月 24 日（金）定名Anti Human AGO2, Monoclonal Antibody

和光純薬
東大院農

塩田

邦郎

私たちの身体は、全て同じゲノム情報を持つ数百種類の細胞から構成されている。細胞の多様性は、ゲノム配列だけでは理解できない。様々な生命現象、特に健康と病気に、遺伝子制御の記憶装置̶エピジェネティクス̶の光を当てる。

□エピジェネティクスの基礎（10：20〜12：40）【DNA メチル化による哺乳類胚発生エピジェネティクス制御】【ヒストンメチル化と生命機能制御】【生殖細胞の特性を規定するエピジェネティック制御】【胎盤のエピジェネティクス】□エピジェネティクス異常とがん（13：40〜15：25）【エピジェネティクス機構による細胞制御と病態】【がんにおける DNA 修復遺伝子のエピジェネティックな発現抑制機構】【過去の発がん因子暴露と将来の発がんリスクマーカーとしての DNA メチル化】□エピジェネティクスと慢性疾患（15：55〜17：05）【うっ血性心不全を特徴づけるエピジェネティック変化】【小児自閉症治療に向けたエピジェネティクス研究の展開】□おわりに（17：05〜17：20）
閉会挨拶

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

理研 CDB
京大ウイ研
東北大加齢研
東大院農

岡野 正樹
眞貝 洋一
松居 靖久
田中
智

熊大発生研
佐賀大医
国立がんセ研

中尾 光善
副島 英伸
牛島 俊和

自治医大
山梨大院医工
東大院農
和光純薬

間野 博行
久保田健夫
塩田 邦郎

R

esearch
自動最適化を利用したポジティブリスト制対応の通知法メソッドの開発
アプライドバイオシステムズジャパン株式会社 アプライドマーケット事業部 マーケティング部
質量分析システム事業部 アプリケーションサポート部

川俣 公彦
大関由利子

するデータを得るために最適なハードウエ

はじめに

アとソフトウエアとはどのような物かということに主眼を置きソフトウエア及びハー

今年５月29日より食品に残留する農薬

ドウエアの開発を行ってきました。今回ごおよび動物用医薬品の規制が大幅に変更に紹介させていただきます自動最適化を利用なりました。いわゆるポジティブリスト制

した通知法メソッド開発もその一環であ（図１）がスタートしたことはこの分野にり、既にポジティブリスト制に対応されて携わっている方であれば多くの方がご存じいる方にとっても、また、これから対応をかと思いますが、残念ながら一般消費者やされる方にとってもこのメソッドが有益な分野外の方にとっては今ひとつ浸透してい物であると考えております。

ないように感じます。しかし、食品会社、通知法の概要分析会社、食品輸入会社といったところからのお問い合わせは法律施行後も益々増加しており、今回の制度が与えた影響の大きまずはこの通知法について簡単に説明

さもさることながら、実際の現場ではどのします。ここで言う通知法とはポジティブ

ように対応してよいのか混乱しているケー

リスト制に対して厚生労働省が通知した農スも珍しくありません。

薬や動物用医薬品の一斉分析法であり、分

一方、私ども分析機器メーカーにとっApplied Biosystems/MDS SCIEX
3200 Q TRAP® LC/MS/MS システム

メソッドの開発手順

析対象や使用機器によりいくつかの種類がて今回のポジティブリスト制はビジネスあります。弊社が取り扱っているLC/MS

それでは今回弊社で実施致しました通チャンスでもあり各メーカーがこぞってポ（/MS）に関係する通知法は平成17年11月

知法ⅠおよびⅡのメソッド開発について

ジティブリスト制対応を謳い、セミナー

29日に制定された「食品に残留する農薬、説明させて頂きます。メソッド開発にはや学会等で盛んにPRしている状況でも飼料添加物又は動物用医薬品の成分である

Applied Biosystems/MDS SCIEX の 3200あります。そのような状況のなかで我々物質の試験法について（一部改正）」の第Q TRAP® LC/MS/MSシ ス テ ム を 用 い、Applied Biosystems/MDS SCIEXはこのポ２章に一斉試験法として「LC/MSによる標準試薬は和光純薬工業株式会社製の標準

ジティブリスト制に対して単純なハードウ

農薬等の一斉試験法Ⅰ」および「一斉試験試薬サンプル（各単品農薬20ppmを希釈

エアのスペックや、ソフトウエアの機能だ法Ⅱ」として定められ、通知法Ⅰで42種したもの）を使用してメソッド開発を行いけではなく、すべてのお客様が真に必要と類、通知法Ⅱで25種類（いずれも異性体ました。

ポジティブリスト制とは・ポジティブリスト制導入以前
厚生労働省HPより抜粋

農薬、飼料添加物及び動物医薬品
食品の成分に係わる規格（残留基準）が定められているもの

食品の成分に係わる規格（残留基準）が定められていないもの

250農薬、33動物医薬品等に残留基準を設定を含む）の農薬一斉分析法が該当します。

メソッド開発の流れとしては最初に標通知法そのものにはサンプルの前処

準試薬をシリンジポンプで一定流速にて理 方 法、 移 動 相 条 件、 定 量 限 界、 測 定MSに導入し、各電圧値を最適化した単成

イ オ ン 等 の 情 報 が 記 さ れ て い ま す が、分のメソッドを作成後、各成分のメソッド

LC/MS/MSの細かい条件についてはそれを合わせて一斉分析用メソッドを作成しまぞれのメーカーに合わせた最適条件を見つす。

け出す必要があります。
残留基準を超えて農薬等が残留する食品の流通を禁止

標準サンプルの最適化はAnalyst® ソフ
トウエアの機能の一つであるQuantitative

農薬等が残留していても基本的に流通の規制はない

Optimizationを用いて実施します。Quantita-

・ポジティブリスト制導入後

tive Optimizationは分析に必要な装置の各

厚生労働省HPより抜粋

電圧パラメーターを自動的に最適化してく

農薬、飼料添加物及び動物医薬品
食品の成分に係わる規格（残留基準）が定められているもの
ポジティブリスト制の施行までに、現行
法第7条第１項に基づき、農薬取締法に基づく基準、国際基準、欧米の基準等を踏まえた暫定的な基準を設定

食品の成分に係わる規格（残留基準）が定められていないものれる機能で、一成分当たりおおよそ２〜３

厚生労働大臣が指定する物質

分でパラメーターが最適化されます。ここ
人の健康を損なうおそれのない量として厚生労働大臣
が一定量(0.01ppm)を告 示

で最適化される電圧パラメーターは化合物

人の健康を損なうおそれのないことが 明らかであるものを告示（特定農薬等）

依存であり移動相や流量にはほとんど影響

登録等と同時の残留基準設定など、残留基準設定の促進

残留基準を超えて農薬等が残留する食品の流通を禁止

されません。一方で各ガス量やヒーター温一定量を超えて農薬等が残留する食品の流通を禁止

度といったイオン化効率に関わるパラメー

ポジティブリストの対象外

ターは移動相の組成、pH、流速及び化合物の熱安定性に依存しております。これら

図１．

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

5

のパラメーターも同じように自動的に設定

１成分に対して６つのMRMトランジショ

つかの問題が発生する可能性があります。

することが可能ですが、多成分一斉分析のンをモニター出来るようにメソッドを開発

一つはイオンサプレッションという問題

場合化合物ごとに実施する必要はありませしています。

で、特にESI法でイオン化を行う際にこのん。

もう一つの確認方法としてスペクトル問題が発生する可能性があります。イオン

Quantitative Optimizationで実際にどのライブラリを用いた方法があります。3200

サプレッションとはある成分がイオン化すようなパラメーターを決定するのかを示し

Q TRAP® LC/MS/MSシステムをはじめる際に他の成分も一緒に存在しているとイた図が（図２）になります。Quantitativeとするリニアイオントラップ機能を持つ

オン化の競争反応が起こり、単成分でイオ

OptimizationはMRMトランジション（プ

弊社のLC/MS/MSを用いれば、定量限界

ン化させたときよりも強度が低く（高く）リカーサーイオン＞プロダクトイオンの組

値程度の濃度であってもリニアイオント

観測されるという現象です。実際の食品分

み合わせ）を複数作成することが可能です

ラップ機能により定量分析と同時に、プ析においては食品由来の夾雑物がイオンサ

が、それでは食品残留物質分析においてど

ロダクトイオンのスペクトル（MS/MSス

プレッションの原因になることがほとんどのくらいMRMトランジションを作成すべ

ペクトル）を高感度で取得することが可で一斉分析の際、実際にカラムを通した時きでしょうか？

能（図３−４）であるため、事前に標準品の保持時間を考慮して食品由来の夾雑物とある農薬や動物用医薬品が「検出されのMS/MSスペクトルをライブラリに登録

各成分がなるべく分離するように移動相のた」と判断する方法として一般的に行われし、MS/MSスペクトルを比較することで条件を決定したり、サンプル濃度を薄くしているのが、１成分に対してMRMトラン

比較的簡単に結果の査証を取ることが可能

たり、場合によっては成分を取捨選択する

ジションを２つモニターし、これらのイオです。

ことも必要となります。

ンの強度比率が設定した基準値以内に入っ

もう一つはデータ取り込み時間（Dwell

留意点ているということでその存在を確認する方タイム）の設定です。多成分になればなる法です。しかしながら２つのMRMトラン

ほど１成分当たりのデータ取り込み時間をジションだけでは複雑なマトリックス（夾このようにして作成されたメソッドを少なくする必要があります。定量分析を雑物）を持つ食品分析において同じMRM

組み合わせ、１つのメソッドにすることで行う際には１つのピークに最低でも10ポ

トランジションを持つイオンが十分存在し一斉分析用のメソッドが完成します。しかイント以上とることが必要です。もし100うるため、最終的な確認用として弊社ではしながら単純に組み合わせただけではいく

成分の一斉分析を行う場合、１成分当たり20msecのDwellタイムで分析すると単自動最適化されるパラメータす。この場合、成分ピークが20秒以内で・ DP(Declustering Potential)
・ FP(Focusing Potential)・ EP(Entrance Potential)
・ CE(Collision Energy)
・ CXP(Collision cell Exit Potential)
Q0

Q1

四重極
DP
FP

EP

CE=Q0-RO2

Q2

純に計算して２秒に１ポイント得られま
溶出するとピーク内ポイントが10ポイン

プリカーサーイオン
オプティマイズトに満たず、定量するにはポイントが少な
プロダクトイオン
オプティマイズQ3

四重極 o rトラ
トラッ
ップ

CXP=RO2-RO3

図２．

四重極スキャンモードとEPIスキャンモード
Q3

電圧を連続的に変化させてイオンをスキャンするので発生したイ
オンが無駄になる

Q3スキャンモード
Q3（Liner Ion Trap)

発生したイオンを Q3 部でトラップした後にスキャンをするので高効率で検出することが可能

自動的にスペクトル取得

EPIスキャンモード

図３．

6

図４．

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

LINAC ® コリジョンセル

LINAC®コリジョンセルの効果

Collision Cell 出口

Collision Cell 入り口± 4V : A
A± 6V : B

A
B

B+1.5V Field Gradient

A

B

B

感度の低下

LINAC® なし
Time

A

Center Line

Center Line

Field ≫ 5.75 V

Field ≫ 4.25V

Q1
300
270
350
540
420

Q2

Q3
85
85
200
200
150

クロストーク

LINAC® ありTime・コリジョンセルの四重極を傾けて配置して電場勾配を掛けることにより、コリジョンセルを通過するイオンのスピードが通常のコリジョンセルの時よりも早く
なる。

図５．

Q1
300
270
350
540
420

Q2 : LINAC®

Q3
85
85
200
200
150

Q2（コリジョンセル）でイオンの通過速度が低下すると存在しないはずのイオンがピークとして検出されてしまったり（上記図で 270＞85 や 540＞200）検出されるべきイオンが検出されずに感度低下してしまったりする原因となるが、LINAC® コリジョンセルでイオンを加速すると感度低下及びクロストークを防ぐことが出来る。

すぎるのでこの場合Dwellを短くする必要があります。一方でDwellタイムを短くし

図６．

すぎるとコリジョンセル内にプロダクトイ
オンが残留するため感度の低下を招いた
り、次の成分由来のプロダクトイオンとに、まとめたメソッドはConvert Method

最後にというスクリプトを使用することでの混交（クロストーク）が起こり、成分のApplied Biosystems/MDS SCIEX の API

区別が出来なくなったりする可能性があり

今回、作成された通知法メソッドで一シリーズ及びQ TRAP® シリーズのすべてます。そのためApplied Biosystems/MDS

斉分析した例が（図７）になります。初のLC/MS/MS用に変換することが可能で

SCIEXのLC/MS/MSにはコリジョンセル

めに触れたとおりメソッドは成分ごとす。このConvert Methodで変換されたメ内のプロダクトイオンを加速して排出するに作られておりますので一斉分析を行う

ソッドは変換後の装置の特性が考慮され

LINAC コリジョンセルを搭載し、クロスにはメソッドを一つにまとめる必要がているため、良好な感度で分析を行うこと

トークが発生しにくくする工夫をしておりあります。このようなときMerge MRMが可能です。また分析条件が変更になったます（図５−６）。また、Q ３の値が同一

Methodsというスクリプト（ソフトウエア

場合（カラムや溶離液条件の変更）には解である成分のデータ取得の順番を離してメの機能）を用いると成分ごとに作成された

析用メソッドの各成分の保持時間の情報

ソッドを組むことでもクロストークのリスメソッドを選択するだけで１つのメソッ

を書き換える必要があります。このとき、クを低減できます。

ドにまとめることが簡単にできます。さら多成分分析であればあるほどメソッド上®

で１成分毎に手直しするのは大変ですが、Create Text File from Quan Methodというスクリプトで解析用メソッドをテキス
ト形式にすることで、MS Excelなどで容易に編集することができます。
こういったスクリプトは弊社では正式に動作保証しておりませんので使用に関してはあくまでも自己責任になりますが、
Analyst® ソフトウエアを便利にお使いい
ただけるツールとして配布しておりますので是非ご活用ください。
最後になりますが今回のメソッド開発に多大なるご協力をいただきました和光純薬
工業株式会社様に感謝申し上げます。
通知法一斉分析例（10ppb）
3200 Q TRAP® LC/MS/MS システムを用いて分析「ポジティブリスト関連品目 農薬混合液」
商品の詳細は P. 22 をご参照下さい。

図７．

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

7

R

esearch
GC/MS によるポジティブリスト農薬の一斉分析
株式会社島津製作所

応用技術部

東京カスタマーサポートセンター

嘉之

輸入食品の増大や、食品中への農薬薬等の一斉分析法１）にて示されているテーション GCMSsolution Ver 2. 50 に搭等の残留に関する消費者の不安の高まり

農薬を基に調合されており、GC/MS に載されている SIM テーブル自動作成機

等から、平成 15 年５月に食品衛生法がより食品残留農薬一斉分析を実施する際

能により行った。SIM テーブル自動作成

改正され、一定量以上の農薬、動物用医に便利な試薬である。PL -1-1〜PL - 6-1,

では煩雑な手入力を必要とせず SIM 分

薬品及び飼料添加物（以下「農薬等」と

PL -9-1, PL -10-1を全て混合すると、この析条件設定を行うことができるため、農略）が残留する食品の販売等を禁止す

混合溶液（以下 PL 混合溶液とする）は薬等の多成分一斉分析では非常に有効なる制度、いわゆるポジティブリスト制度

約 250 成分の混合標準液が調製できる。

機能である。SIM テーブルの自動作成機

が平成 18 年５月 29 日より施行されていPL 混 合 液 を 1 mg/L に 調 製 し、 島 津 製

能により作成した二つの SIM メソッド

る。本制度の導入にあたり、現在世界的作 所 GCMS-QP 2010 に て ス キ ャ ン 測 定により測定したクロマトグラムを Fig. 2に使用されている約 800 の農薬等についを行ったトータルイオンクロマトグラ

および Fig. 3 に示した。このメソッドにて残留基準値が設定され、対象となる物

ムを Fig. 1 に示した。スキャンモードはより約 250 成分の SIM 一斉分析が可能で質数は今後も増加すると考えられる。効MS 測定条件の設定が容易であり、定性あったことから、農作物試料（玄米）に率的な分析のために、農薬等の検出にお能力が優れているが、感度では選択イオ

よる添加回収試験を行った。試料の前処

いて固相カートリッジを使用した前処理

ン検出法（SIM）が優れている。SIM の理は厚生労働省より通知された「農作物方法と共に、多成分一斉分析が可能であ

条件設定ではピークが近接した成分を同１）に従って行っ
GC/MS 一斉分析試験法」

る質量分析計（MS）が一斉分析試験法

一グループとし、ピーク間隔の空きによた。添加回収試験の結果を Fig. 4 に示しとして採用された。農薬多成分一斉分析

り幾つかのグループ分けを行う。PL 混

た。マトリクス効果により回収率が高くを行う際に、農薬標準品を単品として全合液の分析では対象成分が連続的に溶出求められた農薬が幾つか認められたが、て揃えることは費用面と維持管理におしピーク間隔の隙間が確認できず、一度ほとんどの成分が回収率 70 〜 120 % の範いて非常に負担が大きいため、試薬メーに全成分の測定を行う SIM メソッドの囲内で良好な回収率であった。幾つかのカーから販売されている混合標準品が広作成は困難であったため、二回の測定で農薬では回収率が低かったが、これらはく利用されている。和光純薬工業より発全成分に対応したメソッドを作成した。

畜水産物一斉分析法にて検討された農薬

売された農薬混合液 PL シリーズは平成二分割した各 SIM メソッドの分析条件

で、農作物一斉分析試験法では回収でき

17 年度に通知された GC/MS による農設定は島津製作所 GCMS 制御ワークスなかったと考えられる。

Fig. 1. 和光純薬 PL シリーズ 1mg/L 混合標準溶液スキャン測定トータルイオンクロマトグラム8

岡村

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

Fig. 4. 玄米添加回収試験結果

Fig. 5. AART 評価結果
Fig. 2. 和光純薬 PL シリーズ 100μg/L 混合標準溶液メソッド 1 SIM 測定クロマトグラム

あ る。GCMSsolution Ver. 2. 50 で は 保
持指標を用いた保持時間自動補正機能（Automatic Adjustment of Retention
Time : AART）を世界で初めて搭載した。AART による保持時間自動補正は

n - アルカンの標準品を一度測定し、この結果から保持時間の理論値を算出する。PL シリーズ混合溶液測定における
AART 理論値と実測値との差を Fig. 5に示した。この差は最大でもわずか 0. 03
分程度（約 1 . 8 秒）であった。AART では非常に精度の高い保持時間補正が可能
であり、この高精度な保持時間補正を利用して SIM テーブルを自動で再編集させることもできる。AART の利用によりカラムメンテナンス後やカラム交換での設定修正が軽減され、高精度な測定を
Fig. 3. 和光純薬 PL シリーズ 100μg/L 混合標準溶液メソッド 2 SIM 測定クロマトグラム

維持することができる。最新の GC/MS
による農薬多成分一斉分析では、この様

GC/MS に よ る 食 品 残 留 農 薬 分 析 にガラスインサートは定期的に交換を行な機構を利用することにより、高い分析

おいては夾雑成分を多く含む実試料をうことで性能維持が可能であり、カラ精度を維持して行うことが可能である。

対 象 と す る た め、 注 入 口 ガ ラ ス イ ン

ムの汚染や劣化の対処にはカラム切断

サートとカラムのメンテナンスが重要

が 有 効 で あ る。 し か し、 カ ラ ム の 切である。注入口ガラスインサートの汚断により保持時間が変動してしまうた

染は主に分解性の高い農薬に影響を及め、目的成分の同定をやり直す必要がぼし、カラムの汚染や劣化はピーク形ある。さらに、SIM テーブルを再編集

状の悪化を引き起こす。いずれも対象

しなければならないため、カラムメン「ポジティブリスト関連品目 農薬混合液」

成分の感度や測定精度を低下させる。

テナンスは避けたいというのが本音で商品の詳細は P. 22 をご参照下さい。

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）〔参考文献〕
１）h t t p : / / w w w . m h l w . g o . j p / t o p i c s /bukyoku/iyaku/syoku-anzen/
zanryu3 /dl/ 051129 - 1 .pdf

9echnical Report
無細胞タンパク質合成試薬キット TransdirectTM insect cell の紹介
株式会社

無細胞タンパク質合成系とは

江連

徹となっている。この合成量は、これまで唯TransdirectTM の特徴

一の動物細胞由来であったウサギ網状赤TM

生命の設計図とも言えるゲノム情報がTransdirect は既存の試薬キットとは多くの生物種で解読される中、ポストゲ

異なり、バキュロウイルスを用いた組みノム研究として、遺伝子産物であり生命換えタンパク質生産にも広く利用されて現象の中心的役割を担うタンパク質の機いるSf 21昆虫細胞（Spodoptera frugiperda

能解析が重要となってきている。タンパ

卵巣細胞由来）の抽出液を利用している。

ク質の翻訳後修飾や相互作用、立体構造抽出方法や抽出時に添加する試薬を工夫の情報を得ることは生命現象を解明するすることで、抽出液は無色透明で複数回上で重要な手がかりとなるが、このようの凍結融解に対しても安定となっている。

無細胞タンパク質合成法には、DNAな機能解析を行う上では対象タンパク質

ウサギ網状赤血球の系でみられるようなを鋳型とし、転写と翻訳を共役させる反を「つくる技術」が鍵となる。これまで

多量に含まれるヘモグロビンの影響で可応法（以下共役反応）とmRNAを鋳型とは大腸菌や培養細胞などを利用したタン視光線が吸収され、タンパク質の光学測定して翻訳反応のみを行う反応法がある。

パク質生産系が主流であったが、最近はが困難になるといったこともない。

TransdirectTM のタンパク質合成法は後者

血球の系と比較して10倍以上の値である.）。
（Wako Biowindow , 73, 7（2006）

実 験 例
リンク法による無細胞タンパク質合成

細胞抽出液を用いて試験管内で合成を行

また本キットには、高効率にタンパク質となるが、従来ウサギの系などにおいて

う無細胞タンパク質合成系も利用される合成を行うための専用発現ベクター pTD 1共役反応を行ってきた研究者にとって、ようになってきた。

（Accession Number：AB 194742）を添付

mRNAの精製は時間もかかり、操作も煩

無細胞タンパク質合成系は、翻訳にしている２）。無細胞タンパク質合成系にお雑であるという意見を聞く機会が多い。そ必要な成分（リボソームや翻訳因子な

いては、開始コドン上流に位置し翻訳をこで我々は、このmRNAの精製を省略すど）を含む細胞抽出液と目的タンパク質促進する効果を示す塩基配列が知られている反応法（リンク法）について検討した。

をコードするmRNAや基質となるアミノる。ウサギ網状赤血球系におけるβ-グロビ

mRNAの精製が必要な最も大きな理由

酸、反応に必要なエネルギー源などを混

ン遺伝子リーダー配列やコムギ胚芽系におとして、転写反応液中のマグネシウム塩

合した溶液中でタンパク質を合成する手ける植物ウイルスΩ配列がそれにあたる。

の濃度が挙げられる。通常、市販のRNA法である（mRNAの代わりにDNAを鋳型

我々は、これらの配列も含めSf 21細胞抽

大量合成キットは、T 7RNAポリメラーとし、転写と翻訳を共役させることもあ

出液に適合する塩基配列の検索を行い、ゼなどのファージ由来RNAポリメラーゼ

る）。生細胞を用いる発現系と比較すると、バキュロウイルスの一種であるMnNPVを利用しており、この転写反応液中には操作が簡便であり、複数のタンパク質の（Malacosoma neustria nucleopolyhedrovirus）

高濃度のマグネシウム塩が含まれている。

共発現が容易、細胞毒性のあるタンパクのポリヘドリン遺伝子５ 非翻訳領域中に一方で、翻訳反応におけるマグネシウム

質でも合成可能、非天然アミノ酸の導入

最も効果のある配列を見出した。pTD 1

塩の至適濃度は低濃度であり、またタンが容易など、複数の利点を有している。

には、この翻訳促進配列（Polyhedrin ５

パク質合成活性がマグネシウム塩の濃度

これまで様々な生物材料より調製したUTR）をはじめ、mRNA合成用T 7プロに強く依存しているため、転写反応液は抽出液を用いて研究が行われてきており、モーター配列、マルチプルクローニングサ

直接使用できず、mRNAの精製が必要と

現在では大腸菌、小麦胚芽、ウサギ網状イト（MCS）、polyA領域などのmRNA合されてきた。そこでリンク法では、転写

赤血球を用いたものが試薬キット化され成からタンパク質合成に関わる全ての因子

反応液を直接タンパク質合成に使用する

市販されている。近年、この技術は日本が含まれている。

際、EDTAを添加することで過剰なマグを中心として活発に研究が行われ、大腸

10

島津製作所

さらに、反応バッファは複数のモデル+

2+

ネシウムイオンをキレートし、通常では菌や小麦胚芽を用いた系は合成量が飛躍

タンパク質を用いて、特にK やMg イ

低下してしまうタンパク質合成効率の改的に向上し、RIによる機能解析用途だけ

オン濃度を調整することで基本的にどの善を試みた。

ではなく、タンパク質を取得する用途そタンパク質でも最適な合成が行えるようのものに利用されるようになってきていに至適化されている。

方 法る。我々は、タンパク質を取得可能なレ

このようにTransdirectTM は、安定な細T 7 RiboMAXTM Express Large Scale

ベルを目標として、近年タンパク質生産

胞抽出液と至適化された発現ベクター、反RNA Production Systemを用いてmRNA

系として注目を集める昆虫細胞から調製

応バッファとの組合せによって、非常に効を合成した。この転写反応液２μLを直した抽出液を用いて、昆虫細胞由来の無率のよいタンパク質合成を行うことがで接使用し、50μLスケールにてリンク反細胞タンパク質合成系構築に取り組み試

きる（反応液１mLあたり30−50μg）世応を行った。反応液組成を表１に示す。

薬キット化した１）。

界で初めての昆虫細胞由来の試薬キット

その際に、25mM EDTAを表２に示す

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

表１．リンク反応における反応液組成

表２．EDTA 溶液の添加量と反応液中での最終濃度mRNA 合成反応液
Reaction Buﬀer
4 mM Methionine
Insect Cell Extract
25 mM EDTA 溶液
滅菌蒸留水

EDTA 最終濃度〔mM〕
25 mM EDTA 添加量
〔μL〕

２μL
15μL
1μL
25μL
表２参照
50μLに調整

0
0

0.5
1

ラクトシダーゼ活性を測定し、精製した相対合成量（%）

8 0 .0

コントロールした。反応終了後、β-ガ

2.0
4

2.5
5

mRNA 合成反応液
Reaction Buﬀer
4 mM Methionine
Insect Cell Extract
25 mM EDTA 溶液
滅菌蒸留水

1 0 0 .0中における濃度を０mMから2. 5mMに

1.5
3

表３．リンク反応における最適反応液組成

1 2 0 .0

割合で反応液に添加し、EDTAの反応液

1.0
26 0 .0

２μL
15μL
1μL
25μL
３μL
４μL

4 0 .02） Suzuki, T. et al . : Performance of expression
vector, pTD 1 , in insect cell-free translation

2 0 .0mRNAを用いた場合と比較した（図１）。

（2006）.
system. , J. Biosci. Bioeng ., 102 , 69 - 71
0 .0
Purified
mRNA

結 果

0mM

0 .5 m M

1mM

1 .5 m M

2mM

2 .5 m M

反応液中のE D T A 濃度

上記キットを用いた場合、反応液中の

図１．

EDTA濃度は1. 5mMが至適であり、精この他、mRNAの濃度を調節するこ

製したmRNAを用いた場合の約85％の合とにより多量体タンパク質を任意の組成成量を見込めることが明らかとなった。

で合成できる例（Wako Biowindow , 75, 7

リンク法における至適反応液組成を表３（2006）.）、イヌ膵臓ミクロソーム膜の添加に示す。またリンク法に用いるRNA大量により糖鎖修飾されたタンパク質が合成

合成キットについて制限はなく、CUGA 7

できる例などがある。また最近、反応液

in vitro Transcription Kit（㈱ニッポンジー

から還元剤を除去することでジスルフィン）を用いることも可能である。ただし、ド結合を有するタンパク質も活性型で取キットによって、EDTAの至適濃度が多得可能であることがわかった。これらの少異なる可能性があるため、今回の実験

実験例はWEBサイトで閲覧可能であるの

例のような至適化を予備実験として行う

で、是非一度御覧いただきたい。

ことを推奨する。

http://www.wako-chem.co.jp/siyaku/info/

このようにTransdirectTM は、ウサギ網状赤血球の系と比べ合成量も多く、従来ウサギの系などにおいて共役反応を行っ

gene/article/TransdirectInsectCell.htm〔参考文献〕
1） Ezure, T. et al . : Cell-free protein synthesisてきた研究者にとっても使いやすい仕様

system prepared from insect cells by freeze-となっている。

（2006）.
thawing. , Biothecnol. Prog ., in press

Sf21 昆虫細胞：
ヨトウガである
卵
巣細胞由来の培養細胞である。昆虫細胞
は哺乳類細胞と異なり無限に細胞分裂を繰り返すことができるうえ、培養にはCO2 インキュベーターも必要としないた
め扱いやすく、バキュロウィルスを用いた組み換え蛋白質生産の手法が確立するとともに広く利用されるようになった。

糖鎖修飾：
多くの蛋白質は、DNA の遺伝子情報からｍRNA を経て蛋白質に翻訳された後、さらに糖鎖や脂質、リン酸の付加など
様々な修飾（翻訳後修飾）を受け、生理活性を持つことが知られている。これら
翻訳後修飾の中で糖鎖がもたらす機能を解明する生理学的および病理学的研究
は、ポストゲノム研究の重要課題の一つと位置付けられ、現在、各研究機関によって精力的に研究が行われている。

P roducts
昆虫細胞由来 無細胞タンパク質合成試薬キット
キット内容● Insect Cell Extract

５本● Reaction Buﬀer

１本１本●４mmd/ℓ Methionine

１本● 0 . 5 μg/μℓ Control DNA● 0 . 5 μg/μℓ pTD 1 Vector

１本●取扱説明書コード No.
634-07601

メーカーコード
292-30000-91

品
TransdirectTM insect cell

名

容 量
1Kit

希望納入価格（円）27,000容 量
5 反応用

希望納入価格（円）
9,000

関連商品

RNA 大量合成キット
コード No.
304-14641

品
CUGA7 in vitro Transcription Kit

和光純薬時報名Vol.74, No.4（2006）

11

echnical Report
細胞培養のための添加因子としての絹タンパク質セリシン
福井大学大学院

工学研究科

寺田

こと１, ２）、また細胞凍結液に利用すると有効であることを見いだし３, ４）、その利

現在、動物細胞培養を利用した産業が用可能性を検討してきた。セリシンは急速に展開されている。すなわち、抗体絹（カイコの繭）由来であって哺乳動物

医薬やエリスロポエチンなどのいわゆる由来でないこと、また絹糸は手術糸とし

バイオ医薬品は、いわゆる翻訳後修飾のて永年の利用実績があること、さらに、理由で動物細胞培養によって生産されてほとんど活性を損なうことなくオートクいる。また、培養皮膚や幹細胞移植、ガ

レーブ滅菌できることから、安全性の極ンに対する養子免疫といった再生医療やめて高い因子であると考えている。

細胞治療の分野では、単離された有用細セリシンはフィブロインと共にカイ胞を培養下で増幅したり、あるいは活性

コ繭糸の主成分をなしており、分子量化したのち、細胞そのものを利用していは数十万に及んでいる。セリシンの特る。このような目的で実施される細胞培

徴はアミノ酸組成にある。すなわちモ

養では、培養効率が高いことは当然のこ

ル組成の１/ ３をセリンが占め、アスパととして、「感染の懸念のない」安全性

ラギン酸とグリシンがそれぞれ１/ ６ずが何より重視される。

つとなっており、８％のトレオニンが10% FBS

50

0

50

100

150

200

培養時間 (hours)

図１．生細胞密度の経時変化
100

無添加
0.1%セリシン
10% FBS

50

0

0

50

100

150

200

培養時間 (hours)

そういう観点から、「牛胎仔血清」にそれに続く。このようなアミノ酸組成

かわる因子の探索が求められている。

が原因となっているのか、SDS 電気泳ヒトを含め細胞培養のための培地には、動後のクマシーブルー染色では不鮮明の、検討したすべての細胞株に対してグルコースやアミノ酸といった基質だなバンドしか得られない。また、プロ有効であった １, ２）。いくつか列挙する

けでなく、いわゆる成長因子の添加がテアーゼによる分解も受けにくいといと、ミエローマ P 3 U1、これを親株に不可欠である。成長因子にはインスリ

われている。

樹立されたハイブリドーマ 2 E3 -O、ヒ

図２．生存率の経時変化

ンやトランスフェリン、サイトカイン

ところで、繊維産業においてカイコ

トヘパトーマ HepG2、ラットインスリ

類など多数が知られているが、これら繭糸（生糸）から絹糸をえる工程を精ノーマ Rin5 F、線維芽細胞 BALB 3 T3、既知の因子だけでなく未知因子も細胞練とよんでいる。この精練工程はアルHEK293、HeLa、CHO などである。な

培養には重要である。そのため、既知・

カリ沸騰水に生糸を数時間浸しセリシ

お、 増 殖 促 進 に は 0 . 01 %（w./vol.） 以

未知を問わず多様な増殖因子を豊富にンを除去する作業である。われわれが上のセリシン濃度が必要で、最適な濃含む牛胎仔血清は、培養添加因子とし細胞培養に利用しているセリシンはこ

度はおよそ 0 . 1％である。

て広汎に利用されているのが実状であの工程で除かれたセリシンを精製した

また、ラット膵臓に由来するランゲる。このように牛胎仔血清は細胞培養標品を用いている。高度に精製されたルハンス島に対しても、セリシンを添には有効であるものの、BSE（いわゆセリシンは、すでに化粧品に配合され加したところ、無血清下での体外培養る狂牛病）などの感染が懸念され、医るなどして利用されている。そして精期間を延長し、インスリン分泌を持続療を目的とした細胞培養では「無血清」

練工程を経て得られたセリシンは、熱する効果を示した５）。

培養が大きな課題となっている。

とアルカリによる加水分解を受けておそのため、「無血清」さらには「哺乳り、分子量でいうと数千から数万程度動物由来の因子を全く含まない」培地のさまざまな大きさのポリペプチドのが大いに期待されている。すでにいく集合体となっている。

が、まだまだ馴化に時間を要するなど、

４

ハイブリドーマ細胞によるモノ
クローナル抗体生産系への適用

セリシンを用いた無血清培養が実際

つかそのようなものが開発されている

３ セリシンによる細胞増殖促進効果に有効かを検討する目的で、ハイブリ
ドーマ細胞によるモノクローナル抗体

問題が多い。
われわれはこれまでに、さまざまな生産系を対象に検討した。基礎培地と細胞に対するセリシンの作用を調べてして、日本製薬のダイゴ T 培地を選択きた。とくに無血清下での細胞増殖にし、①ダイゴ T 培地（日本製薬）のみ、

われわれは、セーレン株式会社と共ついては、増殖能を持つ細胞に対して② 0 . 1 % セ リ シ ン 含 ダ イ ゴ T 培 地、 ③

同で絹タンパク質セリシンに細胞増検討したところ、効果に差はあるもの

10％ FBS を添加したダイゴ T 培地、の２ 絹タンパク質セリシン

12

無添加
0.1%セリシン

100

0

生存率 (％)

１ 動物細胞培養の現状

生細胞密度 (万cells/ml)

殖 促 進 作 用・ 細 胞 死 抑 制 作 用 が あ る

聡和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

無血清下で効率的なベクター生産を行

400

抗体濃度 (μg/ml)ができない問題点があった。

うことができた６）。

無添加
0.1%セリシン

これに対して、セリシンはオートク
レーブ滅菌を受けてもほとんどその活

10% FBS

おわりに 再生医療・細５胞治療への貢献の期待

200

性が損なわれない。これは、セリシン
はその調製の過程で沸騰水でのアルカ
リ処理を受けており、すでに加水分解

さらに、セリシンは細胞凍結にも有されている。そのため、オートクレー

培養時間 (hours)

効である３, ４）。現在のところ、さまざま

ブ滅菌をあらためて受けても分解が進

図３．培養上清中の抗体濃度な細胞凍結液が開発されているが、もっまず、機能が保持されると考えられる。

とも一般的な凍結液は牛胎仔血清に

このような特性から、とくに細胞治

0

0

50

100

150

200

3 つの条件で、比較した。

10 %（vol./vol.）のジメチルスルホキシド

療や再生医療分野での細胞培養に適し大部分の基礎培地では、血清かそのを添加したものである。血清を含む凍た添加因子としてセリシンが大いに貢代替因子を添加しないと細胞は数日以

結液は、やはり医療目的に使う細胞に献できるのではないかと期待している。

内に死滅する。ダイゴ T 培地のみの培

対しては利用しがたい。そこで、基礎

養では４日目には細胞がほぼ死滅した。

培地などにセリシンを添加することで一方、0 . 1％セリシン含ダイゴ T 培地で無血清の細胞凍結液が構築できないか

は生細胞密度・生存率がともに改善が検討したところ、１％（w./vol.）のセリ見られたが、10％ FBS 含ダイゴ T 培地

シン添加で良好な無血清凍結液を構築

H. : Journal of Bioscience and Bioengineering , 100,には劣っていた（図１，２）。一方、抗できた。また、市販の凍結液にセリシ

667（2005）.

体産生については、セリシンを添加しンを添加するだけで細胞凍結解凍後のた培養は血清添加したものとほぼ同等

生存率を改善できる場合もあった。

〔参考文献〕
1） Terada, S., Nishimura, T., Sasaki, M., Yamada,H. and Miki, M. : Cytotechnology , 40, 3（2002）.
2） Terada, S., Sasaki, M., Yanagihara, K. and Yamada,3） 寺田聡、熊谷智彰、小川亜希子、石村純一、三木正雄、尾崎克之、佐々木真宏、山田英幸：低温医学，29，１（2003）．

の産生を示した（図３）。そのことは細このように、セリシンは、動物細胞胞１個当たりでの抗体産生量がセリシ

培養の無血清化に貢献することができ

Biotechnology and Applied Biochemistry , 42, 183

ンを添加した場合の方が大きいことをる。さらに優れた特性として、セリシ（2005）.

示している。

ンはオートクレーブにより滅菌するこ

5） Ogawa, A., Terada, S., Kanayama, T., Miki,

モノクローナル抗体の生産系以外にとができる。大部分のタンパク質はオー

M., Morikawa, M., Kimura, T., Yamaguchi, A.,

も、セリシンを利用することで細胞培

トクレーブによって変性し、活性が消養の無血清化に成功している。HEK293

失するため、ろ過滅菌が一般的な滅菌細胞を利用したアデノウイルスベク法である。しかしながらろ過滅菌ではand Yamada, H. : Biotechnology and Applied

ター生産のシステムに適用したところ、

マイコプラズマなどを完全に除くこと

Biochemistry , 45 , 59（2006）.

4） Sasaki, M., Kato, Y., Yamada, H. and Terada, S. :Sasaki, M. and Yamada, H. : Journal of Biosci-

ence and Bioengineering , 98, 217（2004）.
6） Yanagihara, K., Terada, S., Miki, M., Sasaki, M.

試 作 品 の ご 案 内細胞増殖・細胞凍結に有効な添加因子
セリシン
本品は、セーレン（株）製造の高純度セリシンです。無血清培地に添加することにより細胞増殖促進作用、細胞死抑制作用があると報告されています。また、無血清凍結液としても有効であることが確認されています。
ご希望の方には、試作品（1g）をご用意しておりますのでご照会下さい。
〔照会先〕当社代理店・営業担当者もしくは下記
和光純薬工業（株） 試薬開発部
サンプル係
FAX : 06−6201−5965
E-mail : yasuhiro.takeda@wako-chem.co.jp

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

13

−⑥

世 界 の 薬 用 植 物
お茶の水女子大学生活環境研究センター

はじめに1987 年に出された WHO のアルマータ
宣言で、薬用植物が健康増進のために重ダミHoutunia cordata を飲んで元気を回等がある。また、化学医薬品を服用して復してきました。

いる患者がセイヨウオトギリソウを飲んこれだけでは口から入って排泄する

で、副作用や薬効が減退した例も報告さ

消化器系統しか治せません。日本人の知れている。

恵に中国の医学の利用法が加わり、多くの薬用植物が使われるようになりまし

Ⅰ 薬用植物の利用している。

た。日本を代表する花のキクやサクラ
も薬用植物です。キクChrysanthemum

は、伝統医療として薬用植物の有用性と安全性に関して多くのガイドラインを出元吉

薬用植物の誤用による腎臓疾患の報告要であるので、各国は広く薬用植物を用いるように述べている。その後の WHO

佐竹（1）薬用植物・ハーブとは何をさすのか、その効用は

moriforium の花は目の疾患に用いる漢方処方に配合されます。サクラの樹皮は伝統医療のある国は、各国の健康増進

薬用植物は人類の営みのあるところに小児の咳止めに用いられています。園プログラムで安全な利用方法を打ち出しは必ず存在するので、その数は身の回り

芸植物ではユリの球根、ボタンPaeoniaてきた。

の約１割と考えられます。これらの植物

montan の 根 皮、 シ ャ ク ヤ クPaeonia

伝統医療の導入が遅れていたアメリカ

は各民族が固有に持っていたものであっ

latifolia の根、キキョウの根、果物類では 1994 年に医療費の増大を抑える新方

たが、文明の交流で広く世界に知られるはモモPrunus perisica とアンズPrunus

式をつくった。これは医薬品と食品の間ものになったものもあります。

armeniaca var. ansu の 種（ 仁 ）、 ウ メに薬用植物、ビタミン、ミネラル等をお身の回りの薬用植物を考えてみる

Prunus mume の 果 実、 カ キDiospyros

いて、予防的医薬品を利用し易くしたダと、私たちは何時も元気でいればよい

kaki の蔕（ヘタ）、ミカンの果皮等があ

イエッタリーサップルメントである。

のですが、たまには体をこわすことがります。日本の薬用植物を考えてみるとこのような薬用植物の利用拡大は、十あります。その時用いたのが、身近な自分たちで見つけて伝承的に使われてき分な安全性の検証がないままに急速に利植物です。例えば、お腹が痛いときにたものと中国の体系化された医学が持ち用が拡大したために健康障害を起こす例

はセンブリSwertia japonica を飲み、下込んだ薬用植物の二つがあります。

が見られている。アメリカでのマオウの痢 の 時 に は ゲ ン ノ シ ョ ウ コGeranium

体系化された医学の薬物としては大量使用による死亡例やヨーロッパでのthunergii を飲み、便秘の時には、ドク四大文明発祥の地にそれぞれ医学があり、エジプト文明及びメソポタミヤ文明（B.C. 3000 年頃から）から、ギリシャ、
ローマ文明を経由して西洋医学やアラブ医学に発展しています。インダス文明（B.C. 2500 年頃より）はアユルベー
ダ 医 学 に、 中 国 文 明（B.C. 2000 年 頃 よシャクヤクPaeonia latifoliaり）は漢方医学（中医学）に発展していセンブリSwertia japonica

ます。これらの医学で用いられたのが、ケシPapaver somniferum のアヘン、ジギタリスDigitaris purupurea 、カンゾウ

Glycyrrhiza glabra, G. uralensis 、ゲンチ
アナ等がギリシャの文献に見られます。
ケシPapaver somniferum

センナCassia angustifolia

ゲンノショウコGeranium thunergii

センナCassia angustifolia やインドジャ
ボクRauvolfa serpentine はアユルベーダ
医学で、ニンジンPanax ginseng 、ダイ
オウRheum palmatum 、オウレンCoptis

japonica 、トウキAngelica actiloba は漢方医学で使われています。
体系化された医学の無い地域や体系に含まれていない植物は個々に伝承さエキナケアEchinachea angustifolia

マリアアザミSilybum mariana

ドクダミHoutunia cordata

14

れ、現在まで受け継がれています。たとえば、アマゾンやアンデスの民間薬はこ

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

−⑥

れに属します。ヨーロッパに持ち込まれがあります。

います。2000 年の売上高は４兆３千億

西洋医学で使われるようになったトコン

各国はそれぞれ固有の薬用植物を利円（Secretariats of the Convention on

Cephaelis ipecacuanha やキナヒCincona

用しているが、大航海時代にヨーロッパ

Biological Diversity（CBD）.）ですが、こsp. があります。現在でも広く用いられの人達が世界の隅々まで進出した時に持の５年間にアメリカが規格の整備によりている薬用植物は多くは伝承薬に属しまち込んだ薬用植物が一見現地名のような急増しています。

す。例えば、インドネシアの民間薬ジャ

名前で一人歩きしている例もあります。

ムウは多くの薬用植物を利用してきていたとえば、ゲンチアナ根Gentiana lutea

ます。アメリカインディの民間薬であるはヨーロッパの胃腸薬ですが、日本で薬用植物は人類の営みのあるところに

エキナケアEchinachea angustifolia 、マはリンドウ（竜胆）Gentiana scabr var.

は必ず存在するので、その数は膨大なも

リアアザミSilybum mariana やノコギリ

buergeri をゲンチアナの代用に用いたこのと思われます。先にあげたアメリカのヤシは広く世界各国で利用されるようにとがあり、南米のペルーでは現地名ヘル例のように、世界各国の薬用植物の数はなってきました。これらのものの多くがカ ン ブ レGentianella albrosea を ゲ ン チ

およその目安として、分布種約 300 , 000

ハーブとして、薬品市場や健康食品市場

アナの代用に用いてきました。これらは種の約１割の 30 , 000 種が薬用といえまで流通しています。

同じ科の植物ですが、ワレリアナはセす。たとえば、日本では高等植物が約

イヨウカノコソウValeriana oﬃcinale が5 , 500 種で、その中の薬用植物は約 400

基原植物ですが、日本ではカノコソウ種です。

（2）薬用植物の名前（3）世界の薬用植物の数

世界に薬用植物は何種類ありますか

Valeriana fauriei で同じカノコソウ科で世界の自然の宝庫アマゾンにはそのと聞かれることがあるのですが、これにすが、ペルーアンデスではキク科の植物16％が分布しているので、約 8 , 000 種の答えるのはなかなかむずかしいことでAperaria coerulescens を 用 い て い ま す

薬用植物があっても不思議ではありませす。私たち人類が薬として使用したもの（写真）。

ん。Harvard 大学の民族植物学者 R. E.

が薬用植物であるとしても、個々の民族文字で表現されてきた地域は、薬用

Schultes（1990）の調査によると北西部

は個々の名前で呼んで利用してきていま

植物の数を数えることが出来ますが、文

アマゾン（ペルー、エクアドル、コロン

す。たとえば、日本と中国と韓国が婦人字文化のない地域では現在その地域の薬

ビア、ブラジル）だけでも 145 科 1 , 516

病の薬と用いている生薬「当帰」は、そ用植物をリストアップする研究が盛んに

種類の薬用植物があると報告していまれぞれの国が異なる 3 種の薬用植物を用行われています。まだ学名のない植物もす。

いています。

あり、その数は推測することしか出来

日本ではトウキAngelica acutiloba で、ないのです。身の周りの植物を薬用に用

中 国 で はAngelica sinensis 、 韓 国 で はいたことから考えると、それらの植物のAngelica gigas です。ヨーロッパには類似

10％ぐらいが薬用と思われます。

したアンゲリカ根Angelica archangelica

当帰 トウキAngelica acutiloba

しかし、広く利用されているものは約
1 , 000 種位にすぎません。
（4）世界の薬用植物と医学

薬用植物を使わずに化学薬品のみに

伝統薬物を大きく２つに分けてみる頼っている人は世界の人口の 20％位にと、一つは体系化された医学での薬物すぎなく、多くは薬用植物を用いた治療と、もう一つは体系化された医学のないを行っています。身の廻りの植物を薬地域や体系に含まれていない薬物で、そとして用いている国は発展途上国の殆の植物は個々に伝承され、現在まで受けどです。一方、薬用植物を製剤として継がれています。

医療に使われている国もあります。最前者は世界の四大文明発祥の地で使わも多いのはドイツで、日本、中国、韓れてきた薬用植物で、エジプト文明及び国、フランス、アメリカ等も多く使ってメソポタミヤ文明（B.C. 3000 年頃から）から、ギリシャ・ローマ文明を経由して西洋医学やアラブ医学に発展し、そこで用いられた薬用植物でハーブとされるカ
ミツレ、ラベンダー、ゲンチアナなどです。インダス文明（B.C. 2500 年頃より）はアユルベーダ医学となり、インドジャ

アンデスの薬草売りの左に置いてあるワレリ
アナと呼ばれる植物Aperaria coerulescens

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

ボク、セイロンケイヒなど多くの薬用植物が用いられています。

15

−⑥

中国文明（B.C. 2000 年頃より）は漢方医学（中医学）に発展して、多くの薬用植物、たとえばダイオウ、ケイヒ、
シャクヤク、カンゾウなどが治療に用いられています。
後者は文明がありましたが文字文化がなく、薬用植物に関する情報が一部しか伝承されていないため、新大陸のマヤやインカ文明では薬物名だけが民間薬として残っています。大航海時代に多くの

上薬の甘草

中薬の麻黄

（6）中国の薬用植物

文明が入り込み、独自の治療体系となっ中国の薬の歴史は古く、殷の遺跡の甲たインドネシアの民間薬ジャムウ、その骨文に記載があり、馬王堆の遺跡（B.C. 160

他、自分たちの経験から多くの薬用植物

年）からは52種類の病気に242種類の薬が見い出され使われてきました。アマゾ物を使用した記載が見られます。

ンのインディオの薬草、アフリカの民

また、紀元１〜２世紀頃に作られたと間薬などこれらに関する成書（African

いう神農本草経には、365品目の薬物がEthonbotany）が出版されています。日

上中下の３種類に区別して記載されてい本のセンブリやゲンノショウコなどの民ます。上薬（朱砂、人参、甘草、地黄、間薬も後者に属します。

朮、柴胡、遠志、石斛、桂枝、龍骨、麝

下薬の植物のモモと生薬の桃仁香、牛黄など120品目）は無毒で滋養強（5）文明の交流と薬用植物

壮に用い、中薬（石膏、生姜、葛根、当エジプト文明及びメソポタミヤ文明

帰、麻黄、芍薬、貝母、淫羊 、牡丹皮、（B.C. 3000年頃から）で用いた薬にはア

厚朴、鹿茸、犀角など120品目）は発病

しかし、天然物は構造が複雑なため

ロエ、ケシ、ゲンチアナ、ローズマリー、を抑え、下薬（附子、半夏、大黄、桔梗、に、合成よりは天然物に頼っているもの

カミツレ、センナ、トリカブト、ヒマシ

夏枯草、桃仁、杏仁、など125品目）はがまだまだあります。下剤に用いるセン

油、ヤナギなどがあります。インダス文

有毒で病気の治療に用いるとされていま

ノシドはセンナの葉の成分で、アントラ

明（B.C. 2500 年頃より）に用いた薬にはす。現在、中国で薬用植物とされている

キノンが２個結合した構造をしていま

シタン、ニッケイの類があり、中国文明

種類は約5, 000種といわれています。

す。合成されていないニチニチソウの成の漢方医学ではダイオウ、カンゾウ、ブクリョウなどが用いられてきました。

く用いられています。

分ビンクリスチンは小児がんの治療薬と（7）化学医薬品と薬用植物して知られています。ケシからのモルヒ

中国の医学は日本には６〜７世紀に導化学医薬品といわれるものの中にはネやコデインはこの構造からヒントから入され、和漢医学として江戸時代に完成

モルヒネやコデインのように、植物（ケ

作られ合成モルヒネ類が末期がんの疼痛されました。和漢薬として知られている

シ）の成分がそのまま使われているもの

薬として広く用いられています。センノ

オウレン、トウキ、センキュウなど国内もありますが、植物成分の構造からヒン

シド（センナの成分）は老人の慢性便秘の植物を医学体系に用いるようになりまトを得た医薬品も多数あげられます。

薬としての需要があります。マオウのエ

した。

16

コカインを取るコカノキ

たとえば、ヤナギの樹皮は、ギリシャ

フェドリン、トコンのエメチン、ホミカ

文明の交流を表した例として、不老長

本草では腹痛やリューマチの治療薬であのストロファンチン、ヤボランジーのピ

寿の薬と思われたザクロ（最近までは駆り、中国の神農本草経では下薬で、歯痛

ロカルピン等があります。また一部は麻虫剤として使われていた）があります。

の薬でしたが、ヨーロッパでマラリヤの薬として乱用されているヘロイン、コカ

ザクロはペルシャ原産で、エジプトで治療薬・キナ皮が入手困難な時、代用とインなどもあります。

栽培され、ギリシャ・ローマを経て中国してこれを用いたところ解熱作用が見ら（紀元前２世紀頃）に渡り、平安時代にれました。この薬効成分の解明は 1827

渡来した植物です。アロエやウイキョウ

年、Goodman によりサリシンとして構もギリシャ・ローマを経由して唐の時代

造 が 決 ま り、1899 年 に Dreser に よ り、に中国へ伝えられたものです。

この化合物からアセチルサルチル酸が合マオウは漢方処方に配合される植物

成され、現在でもアスピリンの名前で広ですが、1995 年頃からアメリカでは肥和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

Ⅱ 薬用植物の利用拡大による副作用（1）マオウの問題

−⑥満防止を期待してダイエッタリーサップ
ルメントとして利用されました。マオウの成分であるエフェドリン類の取りすぎで、呼吸困難や覚醒作用により死亡例が頻発しました。2002 年、大リーグ、オリオールズのスティーブ・ベクラー投手（23）が春季キャンプ中に熱射病で死亡した問題で、症状を引き起こした疑いのあるエフェドラが使用禁止となりました。

セイヨウオトギリソウHypericum perforatum L.

カワ Piper methysticum

OH

重篤な肝臓障害 4 例が報告されました。

O

HO

2002 年にはカワ含有製品の販売を禁止（2）アリストロキア酸による腎臓障害しました。

1992 年、ベルギーで中葯製剤を利用

2001 年 11 月ドイツの薬剤・医薬品連していた人が腎臓障害を起こしたとの報邦研究所は、同製品による 24 例の肝臓告が医学雑誌のランセットに記載されま障害を発表、許可を取り消す意向を表明した。原因は中国産のウマノスズクサ属

しました。診断は、肝機能不全、肝炎、の植物の蔓に含まれるアリストロキア酸

肝硬変で、死亡 1 例、肝臓移植 3 例が含で有ると判明されました。1997 年日本

まれます。2002 年ドイツ保健省はカワでも関西地方で起きた腎臓障害は同様の製品を処方薬としました。

HO
HO

CH3
CH3

OH

O

HO

ヒペリシンの構造式

光によって励起し易い構造をしています。
欧米では化学薬品を服用している患

植物に起因することが明らかにされ、欧オランダ保健省は、2001 年、カワラ

者が不安からセイヨウオトギリソウを服

米等は生薬の輸入に対して、アリストロ

クトンの薬理作用を考慮すると濃縮法に用することが多くあります。しかし、薬キア酸の含有の恐れのある生薬には、含よる製法は医薬品に相当するので、ラベ効の低下を招き、その薬物は気管支拡張

有しないデータが義務付けられました。

ルへの警告文の記載を義務付けました。

薬、血液凝固防止薬、免疫抑制剤、強心薬、抗てんかん薬、抗不整脈薬、経口避

日本では薬局方の一般情報に分析法を記載して、これに対応しました。

（4）セイヨウオトギリソウの医薬品

妊薬、抗 HIV 薬等でした。日本でも医との併用による健康障害

薬品安全情報として、セイヨウオトギリ（3）カ ワ Kava（ 別 名：kava-kava,

セ イ ヨ ウ オ ト ギ リ ソ ウHypericum

kawa, kawa-kawa） 製 品 に よperforatum L.（写真）は抗鬱を目的に利る肝臓障害用されています。成分はヒペリシンやプコショウ科のカワPiper methysticum

ソイドヒペラシンが含有され、これらはOに一度の祭礼の時に服用するもので、利のように食べられたことがあります。最Oヨーロッパではカワが自然食品コーナー

佐竹らはカワのアメリカ市場品を収集

近、海外でシンフィツム（いわゆるコン

O5,6-dihydro-4-methoxy-6-styryl-2H-pyran-2-one

図１．成分カワラクトンの一つカワイン

し、カワの成分カワイン（図１）類のカ

dihydromethysticine

ワラクトンを分析しました。その結果、

tetrahydroyangonin
yangonindehydrokawainラフ１）、乱用すれば健康障害の可能性

kawaindihydrokawainが推測されました。これを受けて、厚生
労働省は 2001 年３月の通知で、医薬品され、これが原因と考えられるヒトの肝静脈閉塞性疾患等の健康被害例が多数報告されています。特に幼児については、
この原因はコンフリー等に含まれるピロ
リジジンアルカロイドでありました。
日本においてコンフリーを使用した健康食品等がインターネットを使って販売

１回量 １日量

１回量 １日量 １回量

１回量

１回量

１回量 １回量

１回量

１回量2000 年にスイスで、カワ Kava 製品と因果関係ありと認められる可能性が高い

フリー）を継続的に服用する製品が市販より感受性が高いとの報告がありました。

methysticine

成分の含有用量のバラツキが大きく（グに区分しました。

（5）コンフリーの健康障害
サキ科の草本植物で、かつて国内で山菜用は限られた範囲内でした。アメリカや

ました。

ました。

コンフリー Symphytum oﬀcinale はムラはポリネシアの民間薬で、現地では、年や薬局で精神的不安な人に販売されてきソウの服用に関して医療機関に通達されされていることが確認されており、食品安全委員会は、日本においてコンフリー

グラフ１．カワの６種のラクトンと含有量

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

が家庭菜園等で栽培されていると情報も

17

−⑥

と知られていますが、有毒成分のアコニチンを加水分解による弱毒化して、加工ブシと称して漢方処方に配合されています。有毒植物を無毒化しているのがワラビです。ワラビには発ガン物質プタキロ
サイドが含有されていますが、あく抜き

オクトリカブト
Aconitum japonicumをすることで、プテロシンの骨格に付い志賀高原のコンフリー Symphytum oﬀcinaleている糖が切れて、続いて３員環が開裂あり、栽培又は野生化しているコンフ

して無毒化されます。日本人の持っていリーを摂食することによる健康被害が生る伝統的知識がいかに大切かを証明した

じる可能性も否定できないことから、広例です。

く国民一般に対し、コンフリーを摂食す

H
H3CH2Cら更に医療の中で重要な役割を示すようになると思われます。

おわりに

O

H

N

O
H3CO
OCH3

二つのエステル結合を持ったアコニチンの構造式
OH

漢方薬もその作用メカニズムが少しず

O
Hつ解明されてきています。また、化学薬
薬用植物は有効成分が緩和な作用を

OH

CH3

O
H

HO

実を行っており、薬用植物資源がこれか

た。

O

OCH3

近年各国は薬用植物に対する規格の充ることのリスクについて注意喚起しまし

OCH3

HO

品では治療困難な疾病に漢方薬を使う医持つものと強い作用を持つものがありま師も増えてきています。医学教育の中です。緩和な作用のある植物は多くのハー「和漢薬の知識を持つこと」がコアの教ブと言われるものであり、強い作用をも育になったので、５年後には漢方薬は日

つものには、有毒植物と呼ばれることも

O
OH
OH

本の医学の中で存在感が出てくると思わある植物に多い。トリカブトは有毒植物

O

HO

OH

ワラビの発ガン物質プタキロサイドれます。

生薬試験用標準品
このたびプラエルプトリン A、ノダケニン生薬標準品をラインアップしました。本品は有効成分を分離精製した標準品で、HPLC 法での純度は 98% 以上です。プラエルプトリン A、ノダケニンはゼンコ（Peucedani Radix）の有効成分です。白花ゼンコ、紫花ゼンコは、中国全土、日本国内に生息するセリ科の植物で、根を乾燥させたもの
は、昔より解熱、去痰、鎮咳薬として漢方薬に配合され、使用されてきました。

プラエルプトリン A

ノダケニン

本 品 は「 白 花 ゼ ン コ 」 の 確 認 試 験 用 標 準 品 で す。
Chen, Z. X. らにより 1979 年に報告されました１）。
起

源：Peucedanum praeruptorum Dunn.

CAS No.：73069-25-7〔参考文献〕O
H3C

Acta Pharm. Sin ., 14 ,O

486（1979）.

コードNo.
168-22231
148-08331

182） 有 馬 純 三： 薬 誌 , 48 ,

CH3
CH3

O
O

源：Angelica decursiva Franch. et Savat.

〔参考文献〕O
CH31） Chem, Z. X., Huang,
B. S. and Zeng, Q. F. :起CAS No.：495-31-8

OH3C

本品は「紫花ゼンコ」の確認試験用標準品です。最初に有馬純三により単離されました２）。

88（1927）.

HO
O
OH
OH

OH

O
O

O

O

C20H24O9＝408.40

O

C21H22O7＝386.40

品
Praeruptorin A Standard
Nodakenin Standard

名

和光純薬時報

規 格
生薬試験用
生薬試験用

Vol.74, No.4（2006）

容 量
10mg
5mg

希望納入価格（円）
35,00035,000echnical Report
ポジティブリスト関連品目の LC/MS/MS 分析
和光純薬工業株式会社

吉田貴三子

試薬研究所

平 成 18 年 ５ 月 29 日 か ら「 食 品 衛 生

器のメソッドについて、各農薬標準液のまで短くした時のクロマトグラムを図4法等の一部を改正する法律」（平成 15

直接注入による各農薬のMS/MS検出条に示しましたが、分離を損なうことなく

年５月 30 日公布）、いわゆるポジティ

件の最適化と溶離液を使用したイオン化

短時間分析が可能となり、スクリーニン

ブリスト制がスタートしました。厚生

条件を検討しました。その検討結果に基グ分析として効果があるものと考えてい労働省が通知した農薬や動物用医薬

づいて、農薬混合液PL- 7、PL- 8をメタます。

品の一斉分析法（通知法）において、

ノールで0. 1ppmに稀釈して分析しまし〔参考文献〕

HPLC 法による農薬の一斉分析条件は、た。その時のクロマトグラムを図１〜３

1）「食品衛生法等の一部を改正する法律」（平「LC/MS による農薬等の一斉試験法Ⅰ」に、検出イオンと各農薬の相対保持時間（対象農薬 42 種類）、「LC/MS による農薬等の一斉試験法Ⅱ」（対象農薬 25 種成 15 年 5 月 30 日公布）．
2）「食品中に残留する農薬、飼料添加物又は動を表１、２にまとめて示しました。

物用医薬品の成分である物質の試験方法につ

さらに、カラムサイズを2. 0×100 mm

いて（一部改正）」（平成 17 年 11 月 29 日公布）．

類）が定められています。通知法には
1.8×105

1.8×105

1.6×105

1.6×1055

1.4×105

8.0×104
6.0×104
4.0×104

なりが少なく実試料分析におけるマト
リクスの影響を抑える効果が期待できます。このため、HPLC カラムの性能とMS/MS 検出条件の最適化は、定量精度

2

4

6

8

10

12

14 16 18
Time, min1.5×105

Intensity, cps

Intensity, cps

形状がシャープであるほど各成分の重1.0×105

0.0

1,000
800
600
400
200
0

14

13

5.0×104

1.5×105

5

10

15
20
Time, min
15

19 21

1.0×105

25

24

5

10

15
20
Time, min

25

30

29

5

10

15
20
Time, min

25

30

20

1.5×105
1.0×105

5.0×104
0.0

30

26

5.0×104
0.0

2.0×104
1.5×104
1.0×104
5.0×103
0.0
1,000
800
600
400
200
0

12
5

3

22

24

10

15
20
Time, min
27
18

10

15
20
Time, min

合 液PL- 7、PL- 8（p. 22「 農 薬 混 合 液 」

1.2×105

5

10

15
20
Time, min

試料とし、カラムの選定を目的に通知法

25

30

25

30

25

30

7

1.1×105
1.0×105
9.0×104
8.0×104
7.0×104
6.0×104

通りのHPLC条件（UV検出）で分離状

5.0×104

況を比較しました。その結果、ピーク形

3.0×104

4.0×104

状と分離の状況からWakopak® WakosilII 3C 18 HG、2. 0×150mmカラムが最適と判断しました。次に、MS/MS検出

432.0×104

21

4

1.0×10

0.0

2

4

6

9 10

6
5
8

8
10

1

品
®

名

Wakopak Wakosil-II 3C18 HG ( セ )

18

20

22

24

7
3

2.6×104
2.4×104

Intensity, cps

2.2×104
2.0×104
1.8×104
1.6×104
1.4×1044

1.2×104
1.0×10483

8.0×105,6

6.0×1033

4.0×10

2.0×103
0.0

2

4

6

8

10

12 14
Time, min

16

18

20

22

24

Fig. 3. PL-8- 1 pos（8 sample）
カラムサイズ
2.0 φ× 150mm
2.0 φ× 100mm

数 量
1本
1本

1

2

3

4

5

6

7

8

9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

Column size : 2.0 × 100mm

Table 1. PL-7-1（30 sample）
Ⅰ-30sample(PL- 7- 1)
Peak No.

Analyte Peak Name

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30

Thiamethoxam
Clothianidin
Chloridazon (PAC)
Thiacloprid
Thiabendazole
Azamethiphos
Dimethirimol
Isoxaﬂutole
Azinphos-methyl
Pyriftalid(E )-Ferimzone(Z )-Ferimzone
Methoxyphenozide
Iprovalicarb
Chromafenozide
Butafenacil
Simeconazole
Oryzalin
Cyazofamid
Naproanilide
Fenoxycarb
Anilofos
Cyﬂufenamid
Pyrazolynate (Pyrazolate)Indoxacarb (Indoxacarb-MP)
Benzofenap
Furathiocarb
Cloquintocet-mexyl
Milbemectin A 3
Abamectin B 1 aAnalyte Mass Ranges (amu)Parent292. 0250. 0222. 1253. 0202. 1325. 0210. 2360. 1318. 0319. 1255. 2255. 2369. 2321. 2395. 2475. 1294. 1347. 1325. 1292. 1302. 2368. 1413. 0439. 0528. 1431. 0383. 2336. 2551. 3890. 6

Daughter
211. 2132. 177. 2126. 0175. 1183. 171. 1251. 1132. 2139. 191. 2
91. 2
149. 2119. 1175. 1331. 170. 1288. 2108. 2171. 388. 1
199. 1295. 291. 1203. 2105. 2
195. 3238. 2337. 4305. 3

Mode
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+

AnalyteRetention
Time (min)2×150mm
5. 4
6. 4
7. 4
8. 3
10. 3
11. 0
13. 7
14. 2
14. 9
15. 2
16. 0
16. 0
16. 3
16. 8
16. 8
16. 8
17. 0
17. 1
17. 2
17. 5
17. 6
18. 0
18. 4
18. 7
18. 8
19. 4
19. 6
19. 9
21. 5
21. 5

AnalyteRetention
Time (min)2×100mm
4. 0
4. 7
5. 3
5. 9
7. 0
7. 4
8. 8
9. 0
9. 5
9. 6
10. 1
10. 1
10. 2
10. 6
10. 5
10. 5
10. 7
10. 7
10. 8
11. 0
11. 0
11. 3
11. 6
11. 7
11. 8
12. 2
12. 4
12. 6
13. 7
13. 7

AnalyteRetention
Time (min)2×150mm
5. 1
5. 8
6. 5
11. 1
11. 6
11. 6
14. 4
15. 6
5. 6
5. 8
7. 1
7. 6
8. 5
8. 7
10. 1
11. 5
12. 2
12. 4
14. 4
15. 0
15. 0

AnalyteRetention
Time (min)2×100mm
3. 9
4. 4
4. 9
7. 4
7. 7
7. 7
9. 1
9. 8
4. 2
4. 3
5. 1
5. 4
6. 0
6. 1
6. 9
7. 6
7. 9
8. 0
9. 1
9. 4
9. 4

Table 2. PL-8-1（21 sample）

2

2.8×104[MS/MS Conditions]
ESI, MRM
IonSpray Voltage : 5,500V(pos), − 4,500V(neg)Temperature : 400℃
Curtein Gas : 20
CollisonGas : 3
Ion Source Gas 1 : 50
Ion Source Gas 2 : 80
System : 3200Q TRAP
（ABI)

16

Fig. 2. PL-8- 1 neg（13 sample）
3.0×104[HPLC Conditions]
Column : Wakopak® Wakosil-II 3C18 HG
Eluent : A) 5mmol/ℓ CH3COONH4 in H2OB) 5mmol/ℓ CH3COONH4 in CH3OH
Time program :Column size
2.0 × 150mm 2.0 × 100mm
B conc.
0-1 min.
0-0.6 min.
15-40%
1-3.5 min.
0.6-2.1 min.
40%
3.5-6 min.
2.1-3.6 min.
40-50%
6 -8 min.
3.6-4.2 min.
50-55%
8 -17.5 min. 4.2-10.5 min.
55-95%
17.5-30 min. 10.5-18 min.
95%
30-40 min.
18-28 min.
15%
Flow rate : 0.2mℓ/min. at 40℃
Injection vol. : 0.1ppm、3μℓ

12,13
11

12 14
Time, min

0.0Time, min1.3×105

Intensity, cps

参照：各単品農薬20ppm）を稀釈して6.0×104

Fig. 4. PL-7- 1 pos（30 sample）

30

Column size : 2.0 × 150mm

1.4×105

8.0×10430

16
5

そこで、私たちは、通知法Ⅰ対象農

1.5×105

28

25

Fig. 1. PL-7- 1 pos（30 sample）

中の21種類をそれぞれ混合した農薬混

26

11,12
8 17 20 2223
6 7 104 5289や再現性に重要な要素と考えられます。
薬の中の30種類、通知法Ⅱ対象農薬の1.0×105

2.0×104

0.0

Intensity, cps

また、HPLC カラムにおいてもピーク

1.2×105

4.0×104

2.0×104

Intensity, cps

装置で個別に設定する必要があります。

1.0×105

Intensity, cps

が、MS/MS 検出条件などは各施設の1.2×105

Intensity, cps

出限界などの情報は公開されています

Intensity, cps

1.4×10Intensity, cps

HPLC 条件及び MS/MS 検出イオン、検希望納入価格（円）47,000照 会

カラムタイプはデュポン (D) 及びウォーターズ (W)

和光純薬時報 Vol.74, No.4（2006）

Ⅱ-21sample(PL- 8- 1)
Peak No.

Analyte Peak Name

1
2
3
4
5
6
7
8
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13

Flumetsulam
Thifensulfuron-methyl
Florasuram
Cloransulam-methyl
Diclosulam
Thidiazuron
Forchlorfenuron
Haloxyfop
Gibberellin (Gibberellin A 3 )Fluroxypyr
4-Chlorophenoxyacetic Acid ( 4-CPA)
Bromoxynil
1 -Naphthaleneacetic Acid
Cloprop
Ioxynil
Triclopyr
Mecoprop (MCPP)
Dichlorprop
MCPB
Aciﬂuorfen
Fomesafen

Analyte Mass Ranges (amu)Parent326. 1388. 0360. 0430. 0406. 0221. 0248. 1362. 1345. 0252. 9184. 9275. 7184. 9198. 9369. 7255. 8213. 0232. 9227. 0359. 9437. 0

Daughter
129. 1167. 2129. 3398. 1161. 1102. 1129. 2316. 2142. 9194. 7126. 980. 8141. 0126. 7126. 8197. 9140. 7160. 9140. 9316. 1
195. 0

Mode
+
+
+
+
+
+
+
+
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−
−

「ポジティブリスト関連品目 農薬混合液」
商品の詳細は P.22 をご参照下さい。

19

ew Products〔参考文献〕

官能基選択的接触還元触媒

１）Rylander, P. N. :パラジウム−ポリエチレンイミン【Pd/PEI】
Pd/PEI はポリエチレンイミンポリマーに Pd が担持された触媒です。

, Academic Press, NewYork（1985）.
２）231 st ACS National Meeting, Atlanta, GA, United States, March
26 - 30 , 2006 , ORGN- 568（2006）.
３）Sajiki, H., Hattori, K. and Hirota, K. :., 63 , 7990（1998）.

４）Sajiki, H., Ikawa, T. and Hirota, K. :NHCH 2 CH 2

NCH 2 CH 2x

コード No.

CH 2 CH 2 NH 2 y., 44 , 8437（2003）.

名

規

容量

希望納入価格（円）

1g
5g

8,000
26,000容量

希望納入価格（円）

1g
5g
25g
1g
5g

4,000
13,50040,0004,500
14,000

関連商品

Pd/PEI

MeOH

アルキンからアルケンへの選択的部分水素化は合成化学、及び触媒の選択性発現の観点から興味が持たれています。一般にアルキンからアルケンへの選択的部分水素化は極めて困難で、鉛を触媒毒として用いた Lindlar 触媒が知られていますが、鉛の毒性により環境負荷が高く、また一置換アルキンには適応できないといった欠点があります 1）。本品は、窒素性塩基を多く含む

コード No.

品

名

規

格

163-21441
Palladium-Activated Carbon Ethylenediamine
169-21443
有機合成用【Pd/C（en）】
Complex（Pd3.5 〜 6.5%）
161-21442
167-22181
Palladium-Fibroin【Pd/Fib】
有機合成用
163-22183

新規メタセシス触媒

担体として利用することで、これらの問題を解決しました 2）。ごジクロロ（3- フェニル -1H - インデン -1- イリデン）ビス（トリシクロヘキシルホスフィン）ルテニウム（Ⅳ）

好評を頂いております、Pd/C（en）3），Pd/Fib 4） と使い分けるこ

メタセシス触媒はオレフィンのみに反応し、オレフィン結

ポリエチレンイミンポリマーを、パラジウムの強い触媒毒かつとにより種々の還元性官能基変換が可能です。

特合の組替えによって C−C 結合を形成する効率的で有用な触媒です。応用範囲の広い有機合成法として医薬品、ポリマー

長応用、新素材の工業的製法に多いに期待されています。

●アルキンからアルケンへの選択的部分水素化

本触媒は空気中で安定であり、RCM（閉環メタセシス）反●末端アルキンの部分水素化

応において高い活性を示します 1）。

反 応 例

RCM 反応は非常に複雑な構造を持つ天然物の全合成にお■ Partial Hydrogenation of di-substituted Alkynes
Ph

Ph

Ph

97%

Ph

CO2 H
96%

CO2 Et

HO
3

OH

100%

100%

100%

■ Partial Hydrogenation of mono-substituted Alkynes
OH

OBn

Ph
91%

Cl

PCy3

PCy3

Ph

反 応 例
Ts

NHCbz

96%

CAS No. : 250220-36-1
C51H76Cl 2P2 Ru = 923.07

Ru
Cl

2

3

いて、鍵反応としてその威力を発揮します 2）。

94%
OH

Ts

OH
88%

93%

N

Ru-cat.

N

CH2 Cl2 , 2h, 20℃

CO2H

触媒活性の比較

84%

OBn

OH

HO
84%

yield 98%

CO2Bn
OBn

100%
N

alkyl- -Cbz

aromatic- -Cbz

Pd/Fiboleﬁne
Ar-X

BOC
yield 87%

〔参考文献〕

R-CO2 Bn
ArCOR

epoxideN
BOC

Benzyl alcohol

Pd/C(en)
R-OBn

OH

Ru-cat.

Reducible Functionalities

Pd/C

R-OTBDMS(TES)

Pd/PEIAr-NO2 R-N

3acetylene

１）Fürstner, A. et al . :., 4811 , 7（2001）.

２）Fürstner, A. et al . :., 320 , 9（2003）.

コード No.

和光純薬時報品

名規格041-29971 Dichloro（3-phenyl-1 -inden-1-ylidene）bis有機合成用
047-29973 （tricyclohexylphosphine）ruthenium（Ⅳ）＊ Cooperated with Umicore20

格161-22221
Palladium-Polyethyleneimine【Pd/PEI】 有機合成用
167-22223

Polyethyleneimine(PEI)
Pd(OAc) 2 /H 2

品

Vol.74, No.4（2006）

容量

希望納入価格（円）1g
5g

10,00040,000ew Products
特新規光学分割剤（S ）-5- アリル -2- オキサビシクロ [3.3.0] オクト -1（8）- エン

長●簡便：簡単な操作で定量測定が可能●迅速：前処理から測定まで約２時間

本品は新規なアルコ−ル用光学分割剤です。これまでに難しかったアルコ−ルやチオ−ルの分割に幅広く適用できます。

長●高感度：測定下限 0 . 2 mg/kg（絶縁油）

測定原理●適度な沸点のため、蒸留で回収・精製が可能

展開●化学的に安定な骨格の炭化水素構造

PCB類似物質●不斉点が４級炭素のためラセミ化の心配がない

テストラインの磁性量計測

低C10H 14O = 150.22

分 割 例
アルコ−ル

【PCB標準曲線】

サンプルパッド
吸収パッド
テストラインコントロール
ライン

O

⊿Rf

OH

0.064

操作手順

0.074

絶縁油試料→ DMSO 抽出→ヘキサン抽出

0.083（DMSO：ジメチルスルホキシド）→硝酸銀シリカ処理→ DMSO 転溶（測定試料）

SH

■測
OH

定
磁性粒子標識抗体バイアル

0.139

N3

磁性粒子標識抗体

OH品

名011-20671（S ）-5-Allyl-2-oxabicyclo[3.3.0]oct-1（8）-ene017-20673

規

格

光学分割用

容量

希望納入価格（円）

1g
5g

8,000
25,000

前処理
試料

溶解液

0.061

Cl

①

PCB

①

磁性粒子を標識に用いた PCB 簡易磁気アッセイ法
マグピア

テストラインコントロールライン

ＰＣＢ測定システム

混合液●イムノクロマト法と磁気アッセイ法による絶縁油の PCB

試料滴下部

概

①磁性粒子標識抗 体バイアルに溶解液及び
前処理済みの試料を順次添加②
イムノクロマトデバイス

TM

高●磁性粒子で標識した抗ＰＣＢ抗体と試料中のＰＣＢを
試料中のPCB濃度
反応させ、続いて、
ＰＣＢ類似物質（テストライン）と競合反応を行う●テストラインでは、
ＰＣＢと反応していない抗ＰＣＢ抗体が捕捉されることから、試料（混合液）中のＰＣＢ濃度に応じた磁性量（磁性粒子標識抗体捕捉量）を示す＊コントロールラインは測定が正常に行われたことを確認する■試料の前処理OH

コード No.

展開

混合液

テストラインの磁性量

特（前処理 約 70 分、測定時間 約 45 分）

要

汚染濃度を簡便・迅速に定量できる簡易測定システムです②①の混合液をイムノクロマト
デバイスの 試料滴下部に滴
下し、
４０分 間
展開

展開部

③

● PCB 汚染濃度のスクリーニング検査に適しています③滴下４０分後、専用測定装置
で磁性量を測定し、
ＰＣＢ濃度
を算出

●検出には磁気測定を利用し、高感度を実現しています

キット構成●イムノクロマトデバイス（①）
10 個

専用測定装置：マグピアTMPCBリーダー●磁性粒子標識抗体（②）
10 本●溶解液（③）

コード No.

品

名

規

格

容

量

希望納入価格（円）306-31561 マグピア TMPCB ラピッドテスト PCB測定用 １キット（１０テスト） 69,000
303-31571 マグピア TMPCBリーダー
PCB測定用１台
2,860,000

1本※マグピア：商標登録出願中

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）21

ew Products
ポジティブリスト 関連品目

ポジティブリスト制度対応

食品衛生法などの一部を改正する法律（平成 15 年法律第 55 号）により、食品に残留する農薬、動物用医薬品または飼料添加物に関し、ポジティブリスト制度が導入されました。

混合液
平成 18 年 5 月 29 日にポジティブリスト制度が施行されました。厚生労働省よりこの制度に対応した一斉試験法が通達されています（食安発第 1129002 号）。当社では、この一斉試験法に対応した各種混合液を販売しています。

高速液体クロマトグラフ用

本品の組合せにより、一斉試験法に記載されているほと

動物用医薬品標準品

んどの成分を揃えることができます。

HPLC で分析する際に使用できる動物用医薬品の標準品（一部、一斉試験法記載の成分で、混合液に含まれていない成分があります。）

を商品化しました。これからも順次、品目を増やしていく

対応商品（略号）
農・PL-1、農・PL-2、農・PL-3、農・PL-4、
農・PL-5、農・PL-6、農・PL-11
LC/MS による農薬等の一斉試験法 Ⅰ（農産物） 農・PL-7
LC/MS による農薬等の一斉試験法 Ⅱ（農産物） 農・PL-8
GC/MS による農薬等の一斉試験法（畜水産物） 農・PL-1、農・PL-2、農・PL-3、農・PL-9、「筋肉、脂肪、肝臓、腎臓及び魚介類」
農・PL-11
GC/MS による農薬等の一斉試験法（畜水産物） 農・PL-1、農・PL-2、農・PL-3、農・PL-9、「乳、卵及びはちみつ」
農・PL-10、農・PL-11
HPLC による動物用医薬品等の一斉試験法Ⅰ（畜水産物） 動・PL-1、動・PL-2
HPLC による動物用医薬品等の一斉試験法Ⅱ（畜水産物） 動・PL-2

予定です。
■ブロチゾラム標準品
H3C
Br

一斉試験法（食安発第 1129002 号による）

GC/MS による農薬等の一斉試験法（農産物）

N
N

S

N
N
Cl

C15H10BrClN4S＝393.69■セファロニウム二水和物標準品
O

H
N

O

H

S

■ 農薬混合液 PL-1-1（農・PL-1）

S
N

N

NH 2

+

O
O

O

成分名

・2H2O

-

C20H18N4O5S2・2H2O＝494.54■ジアベリジン標準品
H
2
C

MeO
MeO

成分一覧
No. は「食品中に残留する農薬等の暫定基準（最終案）」に記載されているそれぞれの成分の番号です。

NH2
N
NH2

N

C13H16N4O2＝260.29

アジンホスメチル
アトラジン
β-エンドスルファン
オキサジアゾン
オメ
トエート
クレソキシムメチル
クロルピリホスメチル
クロルフェナピル
シフルトリン
ジフルフェニカン
ジメ
トエート

No.
32
39
112
118
132
166
194
195
272
274
290

成分名

スピロキサミン
チオベンカルブ
テフルトリン
テルブトリン
テルブホス
トリフルラリン
ノルフルラゾン
ビフェントリン
ピレトリン
フェナミホス
フェナリモル

32 種
No.
300
355
375
381
382
403
440
473
497
504
505

成分名

フェンプロピモルフ
フルシトリネート
フルバリネート
プロシミドンtrans - ペルメトリン
cis - ペルメトリン
ペンコナゾール
ペンディメタリン
マラチオン
メチダチオン■ 農薬混合液 PL-2-1（農・PL-2）■マラカイトグリーンしゅう酸塩標準品

成分名-(COO)22 ・ 2(COOH)2
H3C

CH3
N+
CH3

N
CH3

2

C52H54N4O12＝927.00■ロニダゾール標準品
CH3
O2N

N

成分名

NH2

C6H8N4O4＝200.15

N
コード No.

品

名021-15341 Brotizolam Standard

規

格

容量

希望納入価格（円）

高速液体クロマトグラフ用 200mg 15,000

032-19691 Cephalonium Dihydrate Standard 高速液体クロマトグラフ用 200mg 10,000
高速液体クロマトグラフ用 200mg
132-15141 Malachite Green Oxalate Standard 高速液体クロマトグラフ用 200mg

22

成分名

トリアジメノール
トリアレートピラクロホス
ピリプロキシフェン
ビンクロゾリン
フェニトロチオン
フェンチオン
フェンブコナゾール
ブプロフェジン
フルキンコナゾール
フルリドン

31 種
No.
387
391
480
491
499
506
516
521
535
552
572

成分名

プロパルギット
プロピコナゾール
プロピザミドプロポキスル
ヘキサジノン
ホスメット
ミクロブタニルメ
トキシクロルメ
トラクロール■ 農薬混合液 PL-3-1（農・PL-3）

O
O

No.
50
アラクロール
イソフェンホスオキソン 70
70
イソフェンホス71
イソプロチオラン
92
エチオン
151
カルボフラン161
キントゼン
クロルフェンビンホス 197
268
ジフェノコナゾール
278
シプロコナゾール
テトラクロルビンホス 367

048-29621 Diaveridine Standard

9,000

180-02011 Ronidazole Standard

高速液体クロマトグラフ用 200mg 10,000

7,000

和光純薬時報γ-BHC（リンデン）
アセタミプリド
アレスリン
エトプロホスα- エンドスルファン
オキシフルオルフェン
キノキシフェン
クロルピリホスクロロベンジレート
シハロトリン

Vol.74, No.4（2006）

No.
成分名
現01 シペルメ
トリン
35 シマジン
57
ダイアジノン
102 テブコナゾール
112 デルタメ
トリン
127 トリアジメホン
156 トリアゾホス
193 パラチオン
207 パラチオンメチル
263 ビテルタノール

No.
524
554
561
576
619
619
620
631
652
674

No.
586
587
588
594
609
640
655
678
685

29 種
No.
280
283
343
370
379
388
390
450
451
467

成分名

ピリダベン
ピリミホスメチル
フィプロニル
フェンバレレート
フェンプロパトリン
フルトラニルプロパニル
プロフェノホス
ブロモプロピレート

No.
487
494
503
519
523
558
583
589
602

ew Products■ 農薬混合液 PL-4-1（農・PL-4）
成分名

No.
成分名
現01 イマザメタベンズメチルエステル
β-BHC
現01 イミベンコナゾール
δ-BHC
現20 ウニコナゾール P
ジエトフェンカルブ
現35 エタルフルラリン
トルクロホスメチル
ピリミノバックメチル（ ）現45 エトキサゾール
ピリミノバックメチル（ ）現45 クロルタールジメチル
現50 ジクロラン
ブタクロール
現53 ジメテナミ
プレチラクロールド
現58 ジメピペレート
メフェナセット
現62 テクナゼン
レナシル
24
アザコナゾール
テトラジホン
41 トラロメ
アニロホス
トリン
48
アメ
トリン
ハルフェンプロックス

37 種
No.
80
87
89
91
96
191
244
289
292
363
369
379
454

成分名

ピリダフェンチオン
ピロキロン
フェントエート
フサライド
ブピリメートフルアクリピリム
ホスチアゼート
ホスファミドンメビンホス
メフェンピルジエチル
モノクロトホス

No.
現03
EPN
現04
イソプロカルブ
現08
エスプロカルブ
現21
ジクロシメット
ジメチルビンホス（ ） 現25
現26
シメ
トリン
現31
テニルクロール
現34
トリシクラゾール
現40
ビフェノックス
ピリフェノックス（ ） 現43
現48
フェンスルホチオン
現54
プロチオホス
現57
ベンフレセート

37 種

成分名

No.
現59
メプロニル
現追加 1
カズサホス
22
アクリナトリン36
アセトクロール
66
イソキサチオン75
イプロベンホスイミベンコナゾール脱ベンジル体 87
100
エトフェンプロックス
200
クロルプロファム
286
ジメタメ
トリン
341
ゾキサミド
342
ターバシル
368
テトラコナゾール

成分名

No.
399
トリブホス
ピラフルフェンエチル 484
495
ピリメタニル510
フェノチオカルブ
フルチアセットメチル 557
フルミクロラックペンチル 568
581
プロパクロール
598
プロメ
トリン
603
ブロモホス
614
ベナラキシル635
ホサロン■ 農薬混合液 PL-6-1（農・PL-6）
成分名

α-BHC
エディフェンホス
カフェンストロール
シハロホップブチル
チフルザミドトルフェンピラド
ピリフェノックス（ ）ピリブチカルブ
フェノキサニル
プロヒドロジャスモン
XMC
オキサジキシル
キナルホス

No.
成分名
現01 キノクラミン
現11 シアナジン
現16 シアノホス
現24 ジクロフェンチオン
現29 ジクロホップメチル
現36 ジフェナミ
ド
現43 テブフェンピラド
現44 トリフロキシストロビン
現47 ナプロパミ
ド
現55 ニトロタールイソプロピル
20
パクロブトラゾール
119 ピペロホス
155 ピラゾホス

37 種
No.
157
221
223
238
243
265
373
404
421
432
446
476
482

成分名

フェノトリン
ブタミホス
フラムプロップメチル
フルミオキサジン
プロパジン
ブロマシル
ブロモブチドヘキサコナゾール
ベノキサコル
ベンフルラリン
メフェノキサム■ 農薬混合液 PL-7-1（農・PL-7）
成分名

アザメチホス
アジンホスメチル
アニロホス
アベルメクチン B1a
イソキサフルトール
イプロバリカルブ
インドキサカルブ
オリザリン
クロキントセットメキシル
クロチアニジン

No.
27
32
41
42
67
74
88
134
170
176

成分名

クロマフェノジド
クロリダゾンシアゾファミド
シフルフェナミド
シメコナゾール
ジメチリモール
チアクロプリド
チアベンダゾール
チアメ
トキサム
ナプロアニリド

成分名

ピラゾリネート
ピリフタリド
フェノキシカルブ
フェリムゾン（ ）フェリムゾン（ ）ブタフェナシル
フラチオカルブ
ベンゾフェナップ
ミルベメクチン A3メ
トキシフェノジド■ 農薬混合液 PL-8-1（農・PL-8）
成分名

No.
3
1- ナフタレン酢酸
4- クロロフェノキシ酢酸 11
16
MCPB
21
アイオキシニル
28
アシフルオルフェン
181
クロプロップクロランスラムメチル 185

成分名

No.

No.
237
ジクロスラム245
ジクロルプロップ
281
ジベレリン
357
チジアズロンチフェンスルフロンメチル 359
393
トリクロピル456
ハロキシホップ

成分名クロロネブ
ジフェニルアミン
ビオレスメ
トリン
ピペロニルブトキシド
ピリミカルブファムフール

No.
483
490
508
513
513
529
539
628
657
679

21 種

成分名

成分名

フルメツラムフルロキシピルブロモキシニル
フロラスラムホメサフェン
ホルクロルフェニュロン
メコプロップ■ 農薬混合液 PL-9-1（農・PL-9）
14
EPTC
73
イプロジオン73
イプロジオン代謝物
82
イマザリル
103
エトリジアゾール
エンドスルファンスルフェート 112

No.
511
530
541
567
582
595
601
608
615
633
672

30 種
No.
183
186
220
273
285
288
347
350
352
420

No.
570
573
599
605
642
646
661

18 種
No.
208
267
462
475
492
501

■ 農薬混合液 PL-10-1（農・PL-10）
成分名

アセフェートアゾキシストロビン
アルジカルブ

No.
37
38
54

成分名

アルドキシカルブ
カルバリル
チアベンダゾール

9種
No.
55
144
350

成分名

No.
629
672
686

ベンダイオカルブ
メタラキシルメ
トリブジン■ 農薬混合液 PL-11-1（農・PL-11）
成分名, '-DDT, '-DDT, '-DDD, '-DDE
エンドリン

No.
13
13
13
13
114

成分名

trans - クロルデン
cis- クロルデン
オキシクロルデン
ジコホール
ディルドリン

15 種
No.
192
192
192
250
361

成分名

No.

361
アルドリン
ヘキサクロロベンゼン 607
617
ヘプタクロル
ヘプタクロルエポキシド（isomerA） 617
ヘプタクロルエポキシド（isomerB） 617■ 動物用医薬品混合液 PL-1-1（動・PL-1）■ 農薬混合液 PL-5-1（農・PL-5）
成分名

No.
486
498
518
528
534
545
637
638
689
690
696

成分名

No.

フェノキサプロップエチル 507
512
フェノブカルブ
519
エスフェンバレレート555
フルシラゾール
575
プロクロラズ591
プロペタンホス

和光純薬時報

成分名

No.
2-アセチルアミノ-5-ニトロチアゾール 957
アレスリン
エプリノメクチンB1a 104
107
エマメクチン B1a
153
キシラジン
168
クレンブテロール
169
クロキサシリン190
クロルスロン310
スルファセタミド

成分名ダノフロキサシン
チアムリン
チルミコシン
デキサメタゾン
テメホス
トリクロルホン
ヒドロコルチゾン
ピリメタミンファムフール

No.
346
351
360
362
378
394
470
496
501

25 種
成分名

■ 動物用医薬品混合液 PL-2-1（動・PL-2）
成分名

No.

5-プロピルスルホニル-1H 11
ベンズイミダゾール-2-アミン
99
エトパベート
137
オルメ
トプリム
213
α-トレンボロン
213
β-トレンボロン
酢酸メレンゲステロール 214
スルファキノキサリン 304
スルファクロルピリダジン 306

コード No.

No.
307
スルファジアジン
308
スルファジミジン309
スルファジメ
トキシン
311
スルファチアゾール
312
スルファドキシン
314
スルファニトラン
316
スルファピリジン
スルファメ
トキサゾール 319
スルファメトキシピリダジン 320

24 種

成分名

品

名

No.
512
574
606
695
698
704
708

フェノブカルブ
プレドニゾロン
フロルフェニコール
モネンシン
モランテル
リファキシミン
リンコマイシン

成分名

スルファメラジン
スルファモノメ
トキシン
ゼラノール
チアベンダゾール
チアンフェニコール
トリメトプリムレバミゾール

容

量

No.
321
323
339
350
353
411
712

希望納入価格（円）165-22263
農薬混合液 PL-1-1（各 20μg/mℓ アセトン溶液）
169-22261

1mℓ
1mℓ×5A

20,00040,000162-22273
農薬混合液 PL-2-1（各 20μg/mℓ アセトン溶液）
166-22271

1mℓ
1mℓ×5A

20,00040,000169-22283
農薬混合液 PL-3-1（各 20μg/mℓ アセトン溶液）※ 1
163-22281

1mℓ
1mℓ×5A

20,00040,000166-22293
農薬混合液 PL-4-1（各 20μg/mℓ アセトン溶液）※ 1
160-22291

1mℓ
1mℓ×5A

22,00045,000169-22303
農薬混合液 PL-5-1（各 20μg/mℓ アセトン溶液）
163-22301

1mℓ
1mℓ×5A

22,00045,000166-22313
農薬混合液 PL-6-1（各 20μg/mℓ アセトン溶液）
160-22311

1mℓ
1mℓ×5A

22,00045,000163-22323
農薬混合液 PL-7-1（各 20μg/mℓ アセトニトリル溶液）
167-22321

1mℓ
1mℓ×5A

15,00045,000160-22333
農薬混合液 PL-8-1（各 20μg/mℓ アセトニトリル溶液）
164-22331

1mℓ
1mℓ×5A

12,00035,000167-22343
農薬混合液 PL-9-1（各 20μg/mℓ アセトン溶液）
161-22341

1mℓ
1mℓ×5A

15,00030,000164-22353
農薬混合液 PL-10-1（各 20μg/mℓ アセトン溶液）
168-22351

1mℓ
1mℓ×5A

10,00020,000558-90541 農薬混合液 PL-11-1（各 20μg/mℓ アセトン溶液）※ 2

1mℓ×5A

50,000227-01593
動物用医薬品混合液 PL-1-1（各 20μg/mℓメタノール溶液）
221-015911mℓ
1mℓ×5A

20,00040,000220-01603
動物用医薬品混合液 PL-2-1（各 20μg/mℓメタノール溶液）
224-01601

1mℓ
1mℓ×5A

20,00040,000※１ 農薬混合液 PL-3-1 及び農薬混合液 PL-4-1 は特定毒物のためご購入の際は、「特定毒物研究者許可証」が必要となります。
※２ 農薬混合液 PL-11-1 は第 1 種特定化学物質のため、ご購入の際は、「確約書」が必要となります。

Vol.74, No.4（2006）23

ew Products■テクナゼン標準品

残留農薬試験用
農薬標準品■アシフルオルフェン標準品
CAS No.：50594-66-6
Cl
COOH
化学名：5（2-Chloro-α,α,α-triﬂuoro-p tolyloxy）-2-nitrobenzoic Acid
F3C
O
NO2
含 量：98.0% 以上（cGC）
外 観：わずかにうすい黄褐色粉末
C14H7ClF3NO5＝361.66
溶解性：水 120
（mg/ℓ，23-25℃）．アセトン
600、エタノール 500、ジクロロメタン 50、キシレン、ケロセン <10（g/kg, 25℃）．

CAS No.：117-18-0
化学名：1,2,4,5-Tetrachloro-3-nitrobenzene
含 量：98.0% 以上（cGC）
外 観：白色結晶〜結晶性粉末
溶解性：水 0.44（mg/ℓ，20℃）．エタノー
ル 40（g/ℓ, 25℃）
．

NO2
Cl

Cl

Cl

Cl

C6HCl4NO2＝260.89■トルクロホスメチルオキソン標準品
CAS No.：97483-08-4
化学名：O -2,6-Dichloro-p -tolyl O ,O Dimethyl Phosphate
含 量：98.0% 以上（cGC）
外 観：白色粉末

ClO
H3C■ブタミホスオキソン標準品

O

P

Cl

CAS No.：56362-05-1
化学名：O -Ethyl O -6-Nitro-m -tolyl sec Butylphosphoramidate
含 量：98.0% 以上（cGC）
外 観：わずかにうすい黄色結晶性粉末

C9H11Cl2O4P＝285.06

NO2
O

CH3
N

O

P

C CH2CH3
H

H

O
H3C

CH2CH3

C13H21N2O5P＝316.29■カルボキシン標準品
CAS No.：5234-68-4
化学名：5,6-Dihydro-2-methyl-1,4oxathiine-3-carboxanilide
含 量：98.0% 以上（cGC）
外 観：白色粉末
溶解性：水 199、アセトン 177、ジクロロメタ
ン 353、メタノール 88、酢酸エチル
93（mg/ℓ，25℃）
.

OCH3

OCH3

コード No.

CH3

S

CONH

C12H13NO2S= 235.30

名

規

格

容量

希望納入価格（円）

残留農薬試験用 200mg 12,000024-15571 Butamifos Oxon Standard

残留農薬試験用 100mg 30,000

034-19771 Carboxin Standard

残留農薬試験用 200mg

030-19751 Chloroxuron Standard

残留農薬試験用 200mg 10,000044-29601

O

品

010-20521 Aciﬂuorfen Standard

1,1-Dichloro-2,2-bis(4-ethylphenyl)ethane Standard

9,500

残留農薬試験用 200mg 11,000

081-08311 Hexazinone Standard

残留農薬試験用 200mg 12,000

118-00533 Kresoxim-methyl Standard

残留農薬試験用 100mg 18,000

136-15161 MPP Oxon Sulfoxide Standard

残留農薬試験用 100mg 25,000

209-16441 Tecnazene Standard

残留農薬試験用 200mg

202-16551 Tolclofos-methyl Oxon Standard

残留農薬試験用 100mg 30,000

8,500■クロロクスロン標準品
CAS No.：1982-47-4
化学名：3-[4（4-Chlorophenoxy）
phenyl]1,1-dimethylurea
含 量：98.0% 以上（HPLC）
外 観：白色、結晶性粉末〜塊

高速液体クロマトグラフ用

O
Cl

O

NHCN(CH3)2

C15H15ClN2O2＝290.74

ズダン・パラレッド標準品
ズダンⅠ〜Ⅳ、パラレッドは日本、欧米において食品への添加■ 1,1- ジクロロ -2,2- ビス（4- エチルフェニル）エタン標準品
CAS No.：72-56-0
化学名：1,1-Dichloro-2,2-bis（4-ethylphenyl）
ethane含 量：98.0% 以上（cGC）
外 観：白色、結晶〜結晶性粉末、及び塊

C2H5

CH

C2H5

CHCl2

CAS No.：842-07-9
化学名：1-Phenylazo-2-naphthol
含 量：98.0% 以上（HPLC）
外 観：黄みの赤色、粉末または塊
溶解性：水に不溶。エタノール、アセトン、ベンゼンに可溶。

■ヘキサジノン標準品
CH3N(H3C)2N

品はHPLCで分析する際に使用できる標準品です。
■ズダンⅠ標準品

C18H20Cl2＝307.26

CAS No.：51235-04-2
化学名：3-Cyclohexyl-6（dimethylamino）
1-methyl-1,3,5-triazine-2,4（1H ,3H ）-dione含 量：98.0% 以上（cGC）
外 観：白色結晶性粉末〜粉末
溶解性：水 33、クロロホルム 3880、メタノー
ル 2650、ベンゼン 940、ジメチル
ホルムアミド 836、アセトン 792、ト
ルエン 386、ヘキサン （g/kg,
3
25℃）
.

が認められていない油溶性の合成色素（アゾ色素）です。本

O

HO
N N

C16H12N2O＝248.28
NN■ズダンⅡ 標準品
CAS No.：3118-97-6
化学名：1（2,4-Dimethylphenylazo）-2-naphthol
含 量：98.0% 以上（HPLC）
外 観：暗赤褐色、粉末または塊
溶解性：水に不溶。エタノール、アセトン、クロロホルムに可溶。

O

C12H20N4O2＝252.31■クレソキシムメチル標準品
CAS No.：143390-89-0
化学名：Methyl（E ）-2-Methoxyimino-2-[2（o -tolyloxymethyl）
phenyl]acetate
含 量：99.0% 以上（cGC）
外 観：白色〜うすい褐色、結晶性粉末〜粉末

CH3
O

HO
H3C

CH3

C18H16N2O＝276.33■パラレッド標準品
O

O

H3C

CH3

N
O

C18H19NO4＝313.35

CAS No.：6410-10-2
化学名：1（4-Nitrophenylazo）-2-naphthol
含 量：98.0% 以上（HPLC）
外 観：黄色〜黄みの赤褐色、結晶性粉末
〜粉末

HO
O2 N

24

H3C
O
H3C

N N

C16H11N3O3＝293.28■ MPP オキソンスルホキシド標準品
CAS No.：6552-13-2
化学名：O ,O -Dimethyl O -3-Methyl-4methylsulﬁnylphenyl Phosphate
含 量：98.0% 以上（cGC）
外 観：白色結晶性粉末〜粉末

N N

S

O

P(OCH3 )2

O

C10H15O5PS＝278.26

和光純薬時報コード No.

容量

希望納入価格（円）193-14131 SudanⅠ Standard

高速液体クロマトグラフ用

200mg

8,000

190-14141 SudanⅡ Standard

高速液体クロマトグラフ用

200mg

8,000

160-22171 Para Red Standard

高速液体クロマトグラフ用

200mg

9,000

Vol.74, No.4（2006）

品

名

規

格

ew Products
コード No.

RoHS 対応用試薬
平成 18 年 7 月より、欧州連合（EU）において、「RoHS指令」が施行されました。「RoHS 指令」とは、あらゆる電子機器を対象に、特定有害物質の使用を制限するものです。制限対象となる特定有害物質は、鉛（Pb）、水銀（Hg）、 カ ド ミ ウ ム（Cd）、 六 価 ク ロ ム（Cr 6 +）、 ポ リ ブ
ロモビフェニル（PBB）、ポリブロモジフェニルエーテル（PBDE）の６物質です。
このたび当社では、特級試薬 57 品目、容量分析用試薬
４品目に、それぞれ RoHS 指令の規制対象である６物質の規格項目を追加した、「RoHS 対応用試薬」61 品目を発売しましたので、ご活用下さい。

特長●特級・容量分析用の規格に、RoHS 指令の規制対象となる６物質を追加

規 格 例
カドミウム（Cd）……………………………… 10 ppm 以下
水銀（Hg）……………………………………… 10 ppm 以下
鉛（Pb）………………………………………… 100 ppm 以下
クロム（Cr）…………………………………… 10 ppm 以下
臭素系難燃剤……………………………………… 1 ppm 以下
コード No.

016-20805
012-20807
013-20795
019-20797
013-20815
010-20825
016-20827
014-20845
017-20835
013-20837
021-15645
027-15647
020-15615
026-15617
024-15635
020-15637
027-15625
023-15627
038-20085
034-20087
031-20075
037-20077
034-20065
030-20067
045-29935
048-29925
044-29927
041-29915
047-29917
042-29945
048-29947
046-29965
055-07515
051-07517
052-07525
058-07527

品

名Acetic Acid
Acetone
28% Ammonia Solution
25% Ammonia Solution
Ammonium Acetate
Ammonium Sulfate
Boric Acid
1-Butanol
2-Butanone
2-(2-Butoxyethoxy)ethanol
Chloroform
Citric Acid Monohydrate
Copper (Ⅱ) Sulfate Pentahydrate
Diammonium Hydrogen Citrate
Dichloromethane,-Dimethylformamide

Dimethyl Sulfoxide
Disodium Hydrogenphosphate
Ethanol (99.5)
Ethanol (95)

規

格

容量

希望納入価格（円）500mℓ 1,020
20kg
照会
500mℓ
900
RoHS対応用
14kg
照会
RoHS対応用 500mℓ
850
500mℓ
850
RoHS対応用
18ℓ
照会
RoHS対応用 500g 1,650500g 近日発売
RoHS対応用
20kg 近日発売
500g 近日発売
RoHS対応用
20kg 近日発売
500mℓ 1,130
RoHS対応用14kg
照会
500mℓ 1,050
RoHS対応用14kg
照会
500mℓ 1,900
RoHS対応用15kg
照会
500mℓ 1,350
RoHS対応用25kg
照会500g 1,750
RoHS対応用20kg
照会
500g 近日発売
RoHS対応用
15kg 近日発売
RoHS対応用 500g 近日発売
500mℓ 1,250
RoHS対応用20kg
照会
500mℓ 近日発売
RoHS対応用
15kg 近日発売
500mℓ 近日発売
RoHS対応用
18kg 近日発売
RoHS対応用 500g 1,900500mℓ 2,000
RoHS対応用18ℓ
照会
500mℓ 2,000
RoHS対応用
18ℓ
照会
RoHS対応用

和光純薬時報058-07505
054-07507
059-07535
055-07537
064-04845
060-04847
073-05215
079-05217
070-05225
076-05227
082-08405
088-08407
089-08415
085-08417
086-08425
083-08435
080-08445
086-08447
099-05415
095-05417
133-15235
139-15237
141-08365
148-08375
144-08355
140-08357
159-02625
169-22565
165-22567
161-22525
167-22505
163-22507
168-22535
164-22537
162-22555
164-22515
160-22517
165-22545
164-22495
160-22497
166-22575
162-22577
198-14365
194-14367
195-14375
191-14377
199-14395
195-14397
191-14355
197-14357
199-14415
195-14417
196-14425
193-14435
192-14385
198-14387
192-14405
198-14407
205-16585
201-16587
205-16605
201-16607
202-16595
208-16597
206-16635
202-16615
208-16617
209-16625
205-16627
245-00815
241-00817

品

名

規

格

容量

希望納入価格（円）500mℓ 1,170
15kg
照会
500mℓ 1,400
Ethylene Glycol
RoHS対応用
18kg
照会
500mℓ
900
Formaldehyde Solution
RoHS対応用18kg
照会
500mℓ 1,700
Glycerol
RoHS対応用20kg
照会
500g 近日発売
Glycine
RoHS対応用
10kg 近日発売
500mℓ
980
Hexane
RoHS対応用12kg
照会
500mℓ 近日発売
Hydrochloric Acid
RoHS対応用
23kg 近日発売
1mol/ℓ Hydrochloric Acid
RoHS対応用 500mℓ 近日発売
0.1mol/ℓ Hydrochloric Acid
RoHS対応用 500mℓ 近日発売
500mℓ
920
Hydrogen Peroxide
RoHS対応用20kg
照会
500g 近日発売
Iron (Ⅱ) Sulfate Heptahydrate
RoHS対応用
20kg 近日発売
500mℓ
770
Methanol
RoHS対応用
14kg
照会
Nickel (Ⅱ) Chloride Hexahydrate RoHS対応用 500g 近日発売
Nickel (Ⅱ) Sulfate Hexahydrate
RoHS対応用 500g 近日発売
500mℓ 近日発売
Nitric Acid (1.38)
RoHS対応用
25kg 近日発売
Oxalic Acid Dihydrate
RoHS対応用 500g 近日発売
500mℓ 1,100
Petroleum Ether
RoHS対応用
18ℓ
照会
PhenolRoHS対応用 500g 1,750
500mℓ 近日発売
Phosphoric Acid
RoHS対応用
25kg 近日発売
500g 近日発売
Potassium Chloride
RoHS対応用
20kg 近日発売
Potassium Dihydrogenphosphate RoHS対応用 500g 1,500500g 近日発売
Potassium Hydroxide
RoHS対応用
20kg 近日発売
Potassium Iodide
RoHS対応用 500g 近日発売
500mℓ
900
2-Propanol
RoHS対応用14kg
照会
500mℓ 2,800
Pyridine
RoHS対応用17kg
照会500g 近日発売
Sodium Carbonate
RoHS対応用
20kg 近日発売
500g
950
Sodium Chloride
RoHS対応用20kg
照会
500g 近日発売
Sodium Dihydrogenphosphate Dihydrate RoHS対応用
20kg 近日発売
500g 近日発売
Sodium Hydrogen Carbonate
RoHS対応用
15kg 近日発売
500g 近日発売
Sodium Hydroxide
RoHS対応用
20kg 近日発売
1mol/ℓ Sodium Hydroxide Solution RoHS対応用 500mℓ 近日発売
0.5mol/ℓ Sodium Hydroxide Solution RoHS対応用 500mℓ 近日発売
500g 近日発売
Sodium Sulﬁte
RoHS対応用
20kg 近日発売
500mℓ
980
Sulfuric Acid
RoHS対応用30kg
照会
500mℓ 1,700
Tetrahydrofuran, no Stabilizer
RoHS対応用15kg
照会
500mℓ 近日発売
Tetrahydrofuran, with Stabilizer
RoHS対応用
15kg 近日発売
500mℓ
860
Toluene
RoHS対応用15kg
照会
p -Toluenesulfonic Acid Monohydrate RoHS対応用 500g 近日発売
500mℓ 1,950
Triethylamine
RoHS対応用14kg
照会500g 近日発売
Trisodium Citrate Dihydrate
RoHS対応用
10kg 近日発売
500mℓ 1,020
Xylene
RoHS対応用
15kg
照会
Ethyl Acetate

Vol.74, No.4（2006）

RoHS対応用25

ew Products
特試料前処理用®

プレセップ ポリアミド C-200 タイプ M (2g/25mℓ)

長●非常に高感度（ミクロンサイズ磁気ビーズの 10 倍）●タンパク質精製などの処理時間が大幅に短縮（約 30 秒）

プレセップ ® ポリアミドはポリアミド樹脂を充てんした●細胞分離に使用した場合、細胞への負荷が非常に小さい

シリンジ型カラムです。充てん量２g のポリアミドカラム●磁気分離を行った後の再分散性が良好であり、洗浄操作

は葛根湯エキスの成分であるペオニフロリンの定量試験に●磁気ビーズの表層を親水処理しているため、自然沈降しおける試料前処理などに使用されています。
コード No.

品

名

規が容易（磁気カラム不要）

格容量

希望納入価格（円）296-64901 Presep®Polyamide C-200 Type M（2g/25mℓ） 試料前処理用 10 個×5 37,500

ない

使 用 法

カラム充てん剤
ワコーゲル

®

目的物質を
次の工程へ

50NH2

ご好評頂いておりますカラム充てん剤ワコーゲル ® シ

®

サンプル

リーズに、新たにアミノプロピル基を修飾したシリカゲ
ル「ワコーゲル ® 50 NH 2」を追加しました。中圧、フラッ
シュ、オープンクロマトグラフィー及び固相抽出カラム用の充てん剤としてご使用いただけます。

添加 加温 磁気回収

：

®

上清除去

：目的物質

冷却 再分散：目的外物質デ ー タ■ Therma-Max® と市販磁気カラムを用いた、形質転換したプロトプラストの分離効率の比較

規格

粒度（38 〜 63 μm）：70％以上pH（100 g /ℓ 水浸液 ,25℃）：8 . 5 〜 11 . 5

実用試験：試験適合
コード No.

239-02311
231-02315

品

名Wakogel® 50NH2

規格

カラムクロマトグラフ用

容量

希望納入価格（円）

100g

8,000

500g

28,000

新発売 !! ナノテクを用いた磁気ビーズの革命®

Therma-Max

Therma-Max® は熱応答性高分子を磁性ナノ粒子表面に固定化した画期的な新規磁気ビーズです。磁性ナノ粒子
は粒子が小さいため、磁気分離がきわめて困難でしたが、
Therma-Max® はわずかな温度変化で凝集し、容易に磁気Therma-Max ® で分離後のプロトプラスト●形質転換したプロトプラスト

市販磁気カラムで分離後のプロトプラスト●形質転換していないプロトプラスト

分離することが可能です。また、従来のミクロンサイズの
磁気ビーズに比べて、約 100 nm と非常に小さいため、結合容量、特異性、分散性に優れています。

コード No. メーカーコード

品名

容量 磁気回収温度 希望納入価格（円）631-09791 TML001 Therma-Max® LA Avidin

1mℓ

42℃

39,800638-10291 TML002 Therma-Max® LC Carboxylic acid 1mℓ

42℃

19,800631-10301 TML003 Therma-Max® LA Avidin (30)

1mℓ

30℃

39,800638-10311 TML004 Therma-Max® LAm Amine

1mℓ

42℃

19,800635-10321 TML005 Therma-Max® LPA Protein A

1mℓ

42℃

19,800632-10331 TML006 Therma-Max® LPG Protein G

1mℓ

42℃

19,800容量

希望納入価格（円）1台

16,800

関連商品®

Therma-Max の凝集後の磁気回収及び分散26

和光純薬時報コード No.

メーカーコード

638-09941

TMM001

品

Magna-Stand 6

名

1.5mℓまたは 2.0mℓチューブ 6 本用の磁気スタンド

Vol.74, No.4（2006）

ew Products
メーカーコード

ハイブリドーマ培養用培地（無タンパク・動物由来成分不含）11-430-0100V
11-430-0500V
11-430-1000V

品

名XtenTM PF-1

容量

希望納入価格（円）100 mℓ500 mℓ1000 mℓ

照 会
照 会
照 会

XtenTM PF-1
細胞培養に一般的に使用されている基本培地に生物由来
成分（血清やタンパク）を添加して培養した細胞から生産される抗体には不純物が多く、精製に労力を要します。また、動物血清を用いると抗体の生産量やその力価がロット

細胞へのマイクロインジェク
ションを身近にします
CELLINJECTORTM CI-2000
これまで、血液・免疫系細胞のような浮遊細胞へのマイク

間でバラツキが出てきます。
本品は、モノクローナル抗体の生産用に特別に調製しロインジェクションは、２本のマイクロマニピュレータを用た無タンパク、動物由来成分不含の液体培地で、マウス、い、細胞をピペットで吸引する一方で、キャピラリを挿入すのハイブリドーマの培養が行えます。

るという、職人技を必要とする作業でした。セルインジェク＊１: 脂質依存性細胞には脂質を加える必要が有ります。

ター CI- 2000 は、微細孔を持つシリコンチップを用いて細胞ラットやヒト特＊１を自動的に吸引捕捉し、独自に開発したシャーレステージ、長●組成がすべて明らかで、タンパクや動物由来成分を含まない

マイクロマニピュレータを用いて、高速マイクロインジェク
ションを実現しました。オペレーターは、導入物質を充てんしたキャピラリと専用シャーレを装置にセットし、浮遊細胞●ロット間差がなく一定の性能が得られる

をシャーレ上に滴下するだけで、マイクロインジェクション

●培養液からの精製プロセスが容易であるを行うことができます。

● L- グルタミン不含である

使 用 法❶ 細胞を専用シャーレに供給

１．本品：200mmol/ℓ L-Glutamine = 98：2 容量で混合する
２．T - フラスコに培養初期の細胞濃度が 3 × 105 〜 5 × 105 個 /mℓになるのに必要な量の本品溶液を加える
３．CO2 濃度 5 〜 10％、37℃で 3 時間以上インキュベートする
４．冷凍庫から細胞を取り出し、37℃の水浴ですばやく溶解する
５．溶解細胞溶液を T- フラスコに良く分散するように振り混ぜながら、ゆっくりと加える
６．CO2 インキュベーターを用い、37℃で培養する❷ 捕捉圧を加え、微細孔に細胞捕捉❸ 余剰細胞を培地で押し流し除去❹ 自動マイクロインジェクションデ ー タ■ XtenTMPF-1 による Sp2/0-9D5 細胞の培養結果と産

特

700

3,000

600

2,500

500

2,000

400

1,500

300

1,000

200
100

500

0

0

0 1 2 3 4 5 6 7 8(日)(1,000 cells/mℓ)(mg/ℓ）

出されるモノクローナル抗体量Mab IgG（mg/ℓ）
細胞数（cells/mℓ）（pg IgG /cell/hr）

1.00
0.80
0.60
0.40
0.20
0.00
DMEM +
10%FBS

XtenPF-1

G社製品C

H社製品

G社製品P

長

●浮遊細胞の吸引捕捉、キャピラリ先端の位置調整などの作業を自動化●浮遊細胞へのマイクロインジェクションで１細胞あたり
最速 0.8 秒、30 分で約 1,000 細胞の処理が可能● 35mm シ ャ ー レ 上 に 培 養
した付着細胞の画像をコン
ピューター画面に表示させ、遺伝子などを導入したい細■時間当たり抗体生産効率の比較
1.20❺ 専用シャーレ取り出し・培養 負圧維持

細胞種：Sp2/0-9D5 ATCC 番号
CRL2347
生成物：IgG‐9D5：抗マウス SCAP 抗体
培 養：標準的プロトコルに従い、本品溶液 40mℓに細胞初期濃度
2 × 105 細胞 /mℓとなるように Sp2/0-9D5 細 胞 を T-150
フ ラ ス コ に 加 え、CO2 濃 度
5％、37℃で培養した。
G 社、H 社製品についてはメー
カー推奨方法に従って調製し、同条件下で培養を行った。

和光純薬時報胞をマウスで選択するだけで、マイクロインジェクショ
ンをすることが可能
メーカーコード

品

名

容

量

希望納入価格（円）PW09140-B030 CELLINJECTORTM CI-2000
１台
30,000,000
PW09140-C070 蛍光オプションユニット
１式
6,000,000
PW09140-E005 捕捉専用シャーレ（浮遊細胞用） １箱（5 個入）
45,000Vol.74, No.4（2006）27

ew Products■ SuperSepTMHG, 10−20％ゲルを用いた SDS-PAGE

ポリアクリルアミドゲル

分子量 (k)1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

スーパーセップ TM

180
116
97
79

スーパーセップ TM は、タンパク質や核酸の電気泳動用ポリアクリルアミドプレキャストゲルです。ゲル中にSDS が含まれておりませんので、SDS を含む緩衝液を用

42

いると SDS-PAGE、SDS 不含の緩衝液を用いると Native-

30

PAGE に使用可能です。

特

20
14
6.5

長

●保存安定性が優れている（使用期限は品目により製造日
から６〜９ヶ月）

ゲル：SuperSepTMHG, 10 - 20％, 12 well［コード No. 199 - 13631］
サンプルバッファー：Sample Buﬀer Soln.（× 2 , 2 -ME ＋）●再現性が優れている［コード No. 196 - 11022］●ウェル容積が大きく、サンプルのアプライ量が多い●ウエスタンブロッティングにおいて、タンパク質のPVDF

泳動バッファー：Running Buﬀer Soln.（× 10）［コード No. 184 - 01291］
染色：Quick-CBB PLUS［コード No. 178 - 00551］
サンプル：Lane 1：Molecular Weight Marker, Low Range

膜への転写効率が優れている［コード No. 294 - 63101］

Lane 2 , 9 , 10：Molecular Weight Marker, Middle Range● HG タイプのゲルは、新製法により高分離を実現［コード No. 131 - 14511］

Lane 5 , 6 , 11 , 12：Molecular Weight Marker, Wide Range

プレートサイズ：［コード No. 296 - 63301］

100（H）×100（W）×3（T）（mm）
ウェル容積：
35μℓ（12well），25μℓ（17well）＊推奨アプライ量 10μℓ

Lane 3 , 4 , 7 , 8 大腸菌由来タンパク質
コード No.

品
TM

192-12901 SuperSep
濃縮ゲル：５％7 . 5％ , 12 well

■ SuperSepTMHG, 5−20％ゲルを用いた SDS-PAGE
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

分子量 (k)10 枚 12,000

20,000〜130,000 10 枚 12,000（50〜500）

TM
10％ , 17 well
193-12931 SuperSep
濃縮ゲル：５％
TM
SuperSep
12 . 5％ , 12 well
190-12941

116
97
79
42

42

30

30

20
17
6.5
3.5

20
14
6.5
TM

ゲル：SuperSep HG, 5−20％ , 12 well［コード No. 195 - 13611］
サンプルバッファー：Sample Buﬀer Soln.（× 2 , 2 -ME ＋）

14,000〜80,000（30〜300）

濃縮ゲル：５％

濃縮ゲル：５％180

10 枚 12,000TM
12 . 5％ , 17 well
197-12951 SuperSep
濃縮ゲル：５％
TM
SuperSep
15％ , 12 well
194-13061
TM

191-13071 SuperSep
濃縮ゲル：５％

希望納入価格（円）40,000〜200,000 10 枚 12,000（100〜2,000）

TM
7 . 5％ , 17 well199-12911 SuperSep
濃縮ゲル：５％
TM
196-12921 SuperSep 10％ , 12 well

濃縮ゲル：５％泳 動 例6,000〜60,000（20〜300）

15％ , 17 well

194-12961 SuperSepTM 5 - 20％ , 12 well
191-12971 SuperSepTM 5 - 20％ , 17 well
198-12981 SuperSepTM 10 - 20％ , 12 well
195-12991 SuperSepTM 10 - 20％ , 17 well

10 枚 12,000
10 枚 12,000
10 枚 18,000
10 枚 18,000

10,000〜200,000 10 枚 12,000（50〜750） 10 枚 12,000
10,000〜130,000 10 枚
（50〜500） 10 枚
14,000〜80,000
10 枚（30〜300）
10,000〜200,000
10 枚（50〜750）

190-13301 SuperSepTM 12 . 5％ , 2 D ※197-13291 SuperSepTM 5 - 20％ , 2 D ※195-13611 SuperSepTM HG, 5 - 20％ , 12 well192-13621 SuperSepTM HG, 5 - 20％ , 17 well199-13631 SuperSepTM HG, 10 - 20％ , 12 well
196-13641 SuperSepTM HG, 10 - 20％ , 17 well

12,00012,00018,00018,00010,000〜200,000 10 枚 15,000（50〜750） 10 枚 15,000
10,000〜130,000 10 枚 15,000（50〜500） 10 枚 15,000※ 2 D とは、2 次元電気泳動の 2 次元目（SDS-PAGE）に使用するゲルです。

各種標識用（HRP, ASP など）に［コード No. 196 - 11022］

泳動バッファー：Running Buﬀer Soln.（× 10）［コード No. 184 - 01291］
染色：Quick-CBB PLUS［コード No. 178 - 00551］
サンプル：Lane 1：Molecular Weight Marker, Low Range［コード No. 294 - 63101］

Lane 4 , 9 , 10：Molecular Weight Marker, Middle Range［コード No. 131 - 14511］

Lane 5 , 6 , 11 , 12：Molecular Weight Marker, Wide Range

ストレプトアビジン，組み換え体
ストレプトアビジンは４量体タンパク質であり、構成する
サブユニットはそれぞれ１分子のビオチンと結合します。本品は大腸菌組換えタンパク質由来の凍結乾燥品になります。
ビオチン結合能：10 〜 20 units/mg
コード No.

［コード No. 296 - 63301］

品

名190-14261 Streptavidin, recombinant

Lane 2 , 3 , 7 , 8 大腸菌由来タンパク質28

分画分子量範囲
容量（核酸の bp）

名

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

規

格

生化学用

容

量

10mg

希望納入価格（円）

50,000ew Products
Primer 除去性能の確認

耐熱性酵素シリーズ① GAPDH 遺伝子をクローニングした pUC 系 Plasmid を

キチナーゼ

鋳型として pUC/M13 Primer（22mer）による 2 サイク

本品は、超好熱性古細菌Pyrococcus furiosus から得られたキチナーゼです。βキチンのみならず、これまで酵素的分解の難しかったαキチンに対しても強力な分解活性を示②スピンクリーナーによる Primer 除去（control はスピします。

ンクリーナーを通さない）

CH2OH

結晶性キチン③GAPDH 特異的 Primer を添加し、25 サイクルの PCR 増幅④電気泳動による確認

OH
OH

キチナーゼ

OH
NHCOCH3

アセチルグルコサミン（基質によりアセチルキトビオシドを生成することがあります）

特ル PCR 増幅（Primer はほとんど残っている状態）＊ここで得られる PCR 産物は GAPDH 遺伝子特異的 Primerを用いた PCR 産物より約 200bp サイズが大きい＊ pUC/M13 Primer が除去されている場合 860bp の 1 バンドになり除去されていなければ 1,060bp と 860bp の 2 バンドになる（下泳動写真）
C

S

M

長

● Pyrococcus furiosus 由来●最適温度 85℃

pUC Primerを用いたPCR産物 →GAPDH Primerを →用いたPCR産物

分 解 例

←←

1,060bp
860bp

C : Control（スピンクリーナーを使用していない）S : スピンクリーナー
M : マーカー（OneSTEP Ladder100,
0.1-2.0kbp）［コードNo.317-05244］

比較データ■ 500bp, 1,500bp 断片（各１μg）の回収率を測定

左：本品未添加右：本品添加後 85℃で３時間加温
コード No.

品

名

規

格

034-19891 Chitinase, Thermostable, recombinant, Solution 生化学用容量

希望納入価格（円）1mℓ 30,000

PCR 後のプライマー除去に最適！
■回収サンプルの Nested PCR

スピンクリーナー，低分子用
本品はゲルろ過担体が充てんされた低分子DNA除去用ス
ピンカラムです。PCRや制限酵素の反応後に使用し、フェノール−クロロホルム抽出、エタノール沈殿などの工程なしで、次工程の反応に進めます。Buﬀer交換、脱塩などのク
リーンアップ、PCRプライマーの除去にご使用下さい。

特〈Nested PCR〉
1 st PCR（2 サ イ ク ル：Primer の
ほとんど残った状態）
GAPDH-pGEM TEasy Vector（ pUC 系 Plasmid ）pUC/M 13 Primer

長●試料は希釈されずに回収●微量遠心機で使用可能●操作時間は 10 分以内

コード No.

品

名Nested PCR（35 サイクル）
1 st PCR product
GAPDH Primer↓
1 % Agarose gel 電気泳動
規

格

容量

希望納入価格（円）195-14451 Spin Cleaner for Low Molecular Weight 遺伝子研究用 20 個 13,000

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）29

ew Products
免疫沈降及び組織染色用

マイクロアレイ標識用基質

抗 GFP，モノクローナル抗体

アミノアリル - UTP

本品は、野生型 GFP 及びA. victoria （オワンクラゲ）

アミノアリル - dUTP

由来の GFP variants に特異性を示すモノクローナル抗体

ビオチン -11- dUTP

で、免疫沈降や免疫組織化学染色に使用できます。

アミノアリル UTP, dUTP は蛍光色素の間接標識のため

長に逆転写あるいは RNA 増幅時に使用されます。蛍光物質● 高い GFP 回収率の取り込みに優れたアミノアリル化修飾をしてあるため、●安価

任意の蛍光物質を標識後にマイクロアレイ解析する場合な

特どにご使用いただけます。Biotin- 11 -dUTP はビオチン標
免疫動物：マウス

識済みであり、PCR，cDNA 合成反応時などのラベリング

クローン No.：mFX73

反応に使用いただけます。各種 DNase, RNase チェックを

サブクラス：IgG2a･κ

行っており貴重なサンプルの分解の心配がありません。

使用量： 免疫沈降…１〜５μg /５μℓ Sepharose

特免疫組織化学染色…0.5 〜１μg / mℓ
濃長

● DNase, RNase 活性チェック済み

度：約１mg/mℓ

交差性：野生型 GFP 及び A.victoria（オワンクラゲ）由来
Oの GFP variants と特異的な交差性を示す。
HN
O

O

P

O

P

HO
O−

O

P

O−

使 用 例

O−

3Na＋

一次抗体：Anti-GFP 抗 体（mFX 73）
1 μg / mℓ + Anti-Serotoninserum（１: 500）
二次抗体：Cy 3 標識 Anti-mouse 抗体（１: 200）+ ビ オ チ ン 標 識
Anti-rabbit IgG（１: 200）/
ABC complex（１: 100）
検 出：DAB/ 蛍光

三谷昌平助教授）〔参考文献〕

C12H17N3 O15P3Na3 = 605.17

O
HN
O

O

P

P

HO

O

N
O

O

O−

NH2

O

P
O

O
O−

O−

3Na＋

Aminoallyl-dUTP
C12H17N3O14P3Na3 = 589.17

HO

O

O

セロトニン陽性の少数ニューロンと、頭部のたくさんのニューロ
ンの細胞体及び突起が染色されている。
（データ提供：東京女子医科大学

Aminoallyl-UTP

HO HO

抗セロトニン抗体との二重染色
線虫株：unc -18（e 81）；unc -18 ::EGFP の L4 幼虫
固 定：4%パラホルムアルデヒド/
1 % グルタルアルデヒドにより４℃で o/n 固定

N
O

O

O

O

NH2

O

HN
O

O

P
HO

O

P

O−

O

P

O−

N
H

HN

NH

H

H
S

N
O

O

O

O

H
N
O

※本品は、非変性のタンパク質とは反応しますが、熱、化学的に変性したタンパク質に対しては極めて反応性が低いため、ウエスタンブロッティングには使用できません。

O−

3Na＋

１）Prasher, D. C. et al . : Gene , 111 , 229（1992）.

Biotin-11-dUTP
C28H41N6O17P3SNa3 = 927.61

HO２）Zhen, M. and Jin, Y. : Nature , 401 , 371（1999）.
３）Nakagawa, M. et al . : J. Cell Sci ., 114 , 1829（2001）.

コード No.

４）Fukata, M. et al . : Mol. Cell Biol ., 21 , 2165（2001）.
コード No.

品

名012-20461 Anti Green Fluorescent Protein,018-20463 Monoclonal Antibody

30

規

格

遺伝子研究用容量

希望納入価格（円）100μℓ

30,000100μℓ×5 120,000

和光純薬時報

品

名

規

格

容

量

希望納入価格（円）014-20661 Aminoallyl-UTP Solution

分子生物学用 50μℓ
（2.5μmol）

25,000012-20721 Aminoallyl-dUTP Solution

分子生物学用 100μℓ（2.5μmol）

25,000021-15581 Biotin-11-dUTP Solution

分子生物学用 50μℓ
（50nmol）

30,000Vol.74, No.4（2006）

ew Products■ HyPer 発現細胞におけるアポトーシス検出

H2O2 特異的検出用
蛍光タンパク質センサー

HyPer発現（細胞質）HyPer発現（ミトコンドリア）

Apo2L/TRAIL添加後
176 min

Apo2L/TRAIL添加後
176 min

Apo2L/TRAIL添加後
200 min

Apo2L/TRAIL添加後
200 min

HyPer 発現ベクター
活性酸素種には、スーパーオキシド（Ｏ−・
、過酸化水
2 ）
、一重項酸素素（H２O２）、ヒドロキシルラジカル（・OH）（１O ２）などがありますが、この他に脂質の酸化により生成する脂質ペルオキシルラジカル（LOO・）や脂質ヒドロ
ペルオキシド（LOOH）なども広義の活性酸素種として知られています。
HyPer は、細胞内の H２O２ を特異的かつ高感度に検出可能な蛍光タンパク質で、細胞内で直接遺伝子発現が可能で
す。

特

長

●特異的かつ高感度に H２O２を検出可能●細胞内 H２O２量に相関した蛍光強度の測定が可能●直接細胞内で発現可能●補因子としての細胞内化学物質が不要
励起スペクトル

HyPer 発現 HeLa 細胞培養液への Apo2 L/TRAIL 添加後の経時変化モニタリング
A， B：HyPer-Cyto vector 導入細胞
C，D：HyPer-dMito vector 導入細胞
TMRM（Tetramethylrhodamine methyl ester）：ミトコン
ドリア特異的赤色蛍光ラベリング試薬（20 nmol/ℓ）
Apo 2 L/TRAIL：アポトーシス誘導タンパク質（400 ng/mℓ）
Apo 2 L/TRAIL 添加後 200 分
B：176 分後（A）と比較して、アポトーシスによりミトコンドリアの赤色蛍光シグナルが減少。それに対して、細胞質中で HyPer の緑色蛍光を検出。
D：ミトコンドリア中で HyPer の緑色蛍光シグナルを検出（C では未検出）。
→アポトーシスに伴う H２O２発生のモニタリングに最適。

タンパク質：HyPer

分子量：52,000〔参考文献〕

蛍光色：緑

Belousov, V. V., Fradkov, A. F., Lukyanov, K. A., Staroverov, D. B., Shakhbazov,
K. S., Terskikh, A. V. and Lukyanov, S. : Nat. Methods , 3（4）,281（2006）.

蛍光スペクトル

励起波長λEx（nm）：420，500

コード No. メーカーコード

蛍光波長λEm（nm）
：516

品

名

容 量 希望納入価格（円）556-88631 FP 941 pHyPer-Cyto vector（細胞質発現用） 20μg 126,000553-88641 FP 942 pHyPer-dMito vector（ミトコンドリア局在用） 20μg 126,000
550-88651 FPS 01 HyPer vector set（FP 941･FP 942のベクターセット） 1 セット 168,000

発現ベクター■細胞質発現ベクター■ミトコンドリア局在ベクター

ライセンスについて
Notice to Purchaser :Evrogen Fluorescent Protein Products（the Products）areavailable to Purchasers for non-commercial non-for-profit
research use. With purchase of the Products, Purchaser isgranted a worldwide, non-exclusive, royalty-free, limited
license to use the Products for non-commercial life science
research only. Such license speciﬁcally excludes the right tosell or otherwise transfer the Products, its components orderivatives to third parties and any uses or activities（or the
results therefrom）that themselves generate revenue for the
Purchaser.
For commercial use of the Products please contact Evrogenat license@evrogen.com for license information.

デ ー タ■ H２O２による HyPer の励起スペクトルの変化
1：H2O2 なし
2：H2O2 25nmol/ℓ
3：H2O2 100nmol/ℓ
4：H2O2 250nmol/ℓ

HyPer を含む溶液に、各濃度のH２O２を添加することによって、励起スペクトルが変化する。
→ H２O２ センサーとして利用可能である
ことを示す。

和光純薬時報Evrogen Fluorescent Proteins Licensing Program :Evrogen oﬀers ﬂuorescent proteins（TurboGFP, Phi-Yellow,
and JRed, patent applications pending）for commercial
use under a license. Our Licensing Program is a costeﬀective and ﬂexible way for customers to obtain a varietyof licensing options for internal use, providing services tothird parties, manufacturing of novel products or otherapplications. Quick and convenient evaluation of Evrogen
ﬂuorescent protein-based technologies is easily available bypurchase of ﬂuorescent protein vectors of interest.
For license information please contact Evrogen atlicense@evrogen.com.

Vol.74, No.4（2006）31化学大家 404
ヘルマン・ヴァルター・ネルンスト （1864 . 6 . 25 〜 1941 . 11 . 18）
科学史家

島尾

永康

トヴァルトに対して、ボルツマンに学ん

生立ち・修業時代（1864 〜 1887）

だネルンストは原子、分子を重視した。

西プロイセンのブリーセン（現、ポー

題名のアヴォガドロ説とは、無限の可ランドのワブレズノ）という小さな町で能性を生み出す分子論の豊饒の象徴であ生まれた。父はプロイセンの判事で、特る。この本はエッティングスハウゼンに権的で裕福な家庭だった。ギムナジウム捧げられている。35 年間に 15 版を重ね

時代は、文学、詩、古典に大きな才能をた。1894 年、ネルンストはミュンヘン発揮した。文学と演劇とくにシェイク大学から、ボルツマンがウィーン大学へ

スピアへの興味は生涯続いた。化学への移ったので後任の理論物理学教授に招か興味もこのころからで、家の地下室に実れた。駆け引き上手のネルンストはこの験室をもっていた。大学時代は聴きたい機会を利用してゲッティンゲン大学に物講義を求めて、いくつかの大学を転々と理化学教授職の創設と物理化学・電気化した。第１学年はチューリッヒでウェー学研究室の新設とを物にした。そればか

バーの物理学を、第２学年はベルリン

りか、もしゲッティンゲンに物理化学・でヘルムホルツの熱力学を聴き、第３電気化学研究室が実現しなかった場合

学年は再びチューリッヒで過ごし、第は、ベルリン大学の物理学教授とすると４学年はボルツマンを慕ってグラーツに赴き、自然現象の原子論的解釈を学ん

図１．ネルンスト、40 歳。署名。

ン大学とゲッティンゲン大学の人事はプだ。ボルツマン門下のエッティングスハ

濃度変化は浸透圧の変化に比例する。第ロイセン文部省の管轄下にあり、優秀なウゼンがネルンストにとって師と友を兼

二、電極の物質には固有の「溶解圧」が人材を集めて両大学を有力な大学にするねた存在となり、両者は共同研究をおこある。熱力学と電気化学的溶液理論とをのが意図的な政策だったのである。つぎなってエッティングスハウゼン・ネルン

結びつけた決定的に重要なこの研究にの 11 年間、ネルンスト研究室は世界中

スト効果を発見した。熱の流れのある導よって、20 代半ばで急速に国際的名声の研究者を引きつける一大研究センター

体板に磁場を熱の流れと垂直に作用させを得た。さらに、水とベンゼンとの間のに発展した（図２）。同時代のドイツのると、もとの熱流と磁場とに垂直の方向

安息香酸の分配を研究して、互いに混じ他の教授とは異なり、ネルンスト研究室に電位差を生じるという熱磁気効果であり合わない二液にわたって一つの溶質がには女性も多かった。ネルンストはライる。これを発展させて博士学位はヴュル

溶けるとき、溶質の量に関係なく一定のプツィッヒ時代に 23 篇の論文を発表しツブルクのコールラウシュの下で取った割合で分配されるという、ネルンストのたが、ゲッティンゲン時代の論文数は門（1887）。コールラウシュのところでは、分配則を出した（1891）。その実用例の下生の論文を含めて約 360 篇である。神アレニウスとエミール・フィッシャーが一つは生体の異なる部分への物質の分配

経生理学で重要な、電気的神経刺激閾に研究仲間だった。そのアレニウスがネルの分析である。たとえば、エーテルは、

ついてのネルンストの法則（1899）は、ンストをオストヴァルトに紹介した。

水性の媒質である血液よりも、脂肪質に電流がイオンの移動と細胞膜近辺での濃富む脳や神経組織に集中しやすいことが度変化を生じ、それが可逆電極になると明らかにされている。

いう観点にもとづいている。アンモニ

ライプツィッヒ時代（1887 〜 1891）
オストヴァルトはライプツィッヒ大

ア合成の研究では、ハーバーの大気圧、ゲッティンゲン時代（1891 〜 1905）

1000℃で収量 0 . 01％と比べて、ネルンを助手にした。ネルンストの生涯にとっゲッティンゲン大学の物理学の員外教

ストは 50 気圧、685℃で収量 1％の好結てこれは物理学から物理化学への重大な授になった（1891）。同じ大学の外科学果を得たが（1907）、熱定理の問題に取転換点となった。かれは物理化学の問題

教授の娘エンマ・ローマイヤーと結婚しりつかれていたので、それ以上アンモニに専念し、１年足らずのうちに溶液への（1892）、２男３女をもうけた。就任後まアの研究を追究しなかった。

電解質の拡散の法則を導き出し（1888）、もなく出版した『アヴォガドロ説と熱大 幸 勇吉（1867 〜 1950、京都帝大物

化学電池の起電力と電池の電解質の濃力学の見地からの理論化学』（1893）は、

理 化 学 教 授、1904 〜 1927） は、1901 年

度とを関係づけるネルンストの式に到達

わずか４年前に出たばかりのオストヴァ

９月からネルンストの下に１ヵ年留学しした（1889）。これに到達するには、かルトの『一般化学概説』（1889）とは明た。まず練習実験としてネルンストのれは次の２つのオリジナルなアイデアを確な一線を画している。原子、分子の実考案した誘電定数測定法の実験をおこな結びつけた。第一、電池反応の電解質の在を疑問視してそれを使わなかったオス

い、研究実験は員外教授ケーンの指導で学の教授になると、ただちにネルンスト

32

いう念書さえ取っていた。当時、ベルリ

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

図２．ゲッティンゲン大学物理化学教室（1895 年開設）。晩年の（83歳の）大幸の回想によれば、ネルンスト家は１階を公邸として住んでおり、2 階と地下室が研究室で、1 階の他の部分にも研究室があったかもしれないという。ネルンストが使用した（1896 〜 1905）後、タンマン（1908 〜 1930）、さらにオイケン（1929 〜 1950）が引き継いだ。

図３．ネルンストと大幸勇吉（1902 年 3 月）。

電解酸素発生の過電圧の測定をした。電をつけて使用された（図４）。カーボン

解水素の研究は多いが、酸素はこれが初電球に比べて費用がかかり、構造が複雑めてという。次はネルンストの指導で、であるという難点があったが、効率は希薄水溶液と純水を半リットルずつ銀器

断然すぐれていた。ネルンストは次々に容れ、その氷点の 0 . 01℃という微小に新しい電球が出現することを予想したな差をサーモカップルと電流計で測定しのか、抜け目なく特許使用料とせず、現た。それぞれ物理化学誌と無機化学誌で金一時払いの 100 万マルクという巨額で発表した（図３）。

特許権を A. E. G. 社（アルゲマイネ・エ

窒素ガス入り電球を発明することになる

レクリツィテート・ゲゼルシャフト）に（1913）。

ネルンスト電灯

図４．ネルンスト電灯（Ｂタイプ）。

売った。1898 年のライプツィッヒ大学

ネルンストは特許権で得た金のうちネルンストは実用的な問題にも発明物理化学研究室の新築費が 35 万マルク

4 万マルクで研究室を増築し、別荘を買の才があった。エディソン発明のカーボだったことを考えれば、100 万マルクがい、当時のヨーロッパではまだ珍しかっン電球の最高温度が低く、効率が良くな

いかに大金だったかが分かる。同社の社た自動車を購入した。ゲッティンゲン

いことを見て、ジルコニウムとイットリ

長ラーテナウはネルンストの科学者としでの第一号だった。次々に 17 台買った。

ウムとエルビウムのそれぞれの酸化物ての偉大さばかりでなく、その商才をも大幸が留学した頃ネルンストは 3 台所有

を 90：７：３の重量比で混合して作っ

高く買っていた。ネルンスト電灯は数年しており、そのうち 1 台は蓄電池自動車

た、長さ約１インチ、幅 32 分の１イン後に出現したタングステン・フィラメンだった。鉛蓄電池についての講義のとき

チの棒状のセラミックスを発光体として

ト電球と電球用の真空ガラス容器の安価には、教室の前庭に引き出して説明し2000℃まで加熱するネルンスト電灯を発な製造に圧倒された。しかし A. E. G. 社

た。ネルンストが大幸を誘い、自ら運転明した（1897）。この発光体は室温ではは 1909 年の生産停止まで 800 万個を生産して、郊外の気球の見物に連れて行って電気を導かないので、マッチの焔を当てした。欧米諸国でかなり普及し、日本でくれたこともある。ベルリンのファンて予熱し導体にする必要があった。１分も製品化され、短期間ではあるが販売さ

ト・ホフとライプツィッヒのオストヴァ

で発光体に電流が通じ始め、数秒後に強れた。大幸はある教室員集会で、ネルンルトがネルンストを訪問したとき、ネル

い白熱光を出す。単位電力当たりの明る

スト電灯の最初から最近までの発達過程

ンストは自ら運転して駅に出迎えた。物さはエディソン電球をはるかに上回っの各種が天井から吊るされて輝いている

理化学の世界的 3 大家が同乗して駅を出た。のちの改良型では白金線コイルで予のを見た。ネルンストはアメリカ人留学

たとき、冗談好きなファント・ホフは、熱し、予熱が終わるとコイルは自動的に生、ラングミュア（Ph.D. ゲッティンゲ

これで事故が起これば物理化学は全滅だ

遮断される構造になった。酸化物である

ン、1906）、に白熱金属線への気体の影といった。ネルンスト夫妻は接待好き

から真空中で点灯する必要はないが、球響を研究させた。のちにラングミュアはで、賑やかな派手なことが好きだった。

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

33

光化学
現代の光化学はアインシュタインの
光化学当量の法則（1912）を出発点とする。それによれば、最初の光化学反応で分子が１個の光量子を吸収すると、二次反応では光の供給を必要としない。この
図 ５．1905 年、 ベ ル リ ン 大 学 に 赴 任するとき、一家を挙げてオペル
車に乗ってベルリンまでドライ
ブした（背景はゲッティンゲン
大学物理化学教室）。

H 2 と Cl 2 から HCl が生成される反応では、１量子につき百万個という膨大な数の HCl 分子を生じる。これをどう解釈す

郊外の田舎のレストランへ教室員全員を正しく、低温ではより正確であると限定るかが問題となった。ネルンストはこれ招待したときは、往復とも軽便鉄道の機した。ヘルムホルツは反応熱のうち、仕を、次々に新しい Cl 原子と H 原子を交関車の前面には N 列車と大書した板が下事に転換できるエネルギーとしての自由互に生じる「連鎖反応」という単純で巧げられた。1904 年、40 歳で早くも古参

エネルギーの概念を導入した。これを用妙なアイデアによって説明した（1918）。

の優れた科学者に与えられる国家的栄誉いればベルトロの原理では、全エネル称号である枢密顧問官を受けた（図１）。

ギー（反応熱）と自由エネルギーは等し

1911 〜 13 年 に 留 学 し た イ ギ リ ス 人

ゲッティンゲン時代はネルンストの生涯い。しかし吸熱反応のような例外があっパーティントンによると、ネルンストはで最も幸福で実り多い時代だった。

た。ネルンストは、この原理は常温では小柄で肉付きの良い人物で、鼻めがねを近似的であるが、絶対零度あたりでは真

かけ、モーニングで正装して銀行家か

ベルリン時代（1905 〜 1933）

であるという考えに到達し、自由エネル

重役実業家のような格好で、毎日、実1905 年、ネルンストはベルリン大学

ギーと全エネルギーとの差は、温度の低験室に現れて全員に言葉をかけ、研究に（現、フンボルト大学）の物理化学教授

下とともに減少し、絶対零度では等しく進展があるかと聞いたという。ネルンス（〜 1922）となり、翌年、ブンゼン通り

なるという仮説を発表した。わずかな事

トは熟達した実験家で、装置設計にも長の第二化学教室を引き継いで物理化学

実にもとづいての大胆な飛躍であった。

じ、マイクロバランス、真空熱量計、小教室と改称した。プランクがネルンス

その後 1914 年の戦争勃発までの８年間、型水素液化装置などを作った。ネルントを強く推したのである。ネルンスト

ベルリン大学物理化学教室の総力をあストは、大きな、複雑な、高価な装置をは自ら運転して家族と一緒に車でベルげて、その実験的検証に当たり、低温物嫌った。大きい装置を組み立ててしまっ

リンへ赴任した（図５）。

性の研究で大きな成果を挙げた。もっぱ

たパーティントンは、２, ３日話し掛け

ら実験的証拠を追求していたところ、ネてもらえなかった。講義はジョークや研

熱定理

34

法則は多くの反応では成立した。しかしルンストとは別個にアインシュタインが究者の回想談を交えた、全く個性的なもネルンストの最大の業績であるこの量子論を用いて出した比熱の理論によっのだった。話が最近の科学研究、とくに基本的問題の思索と研究はゲッティンゲて、熱定理は理論的にも裏付けられた。

自らの研究や解釈に及ぶと詳細をきわめ

ン時代におこなわれたので、すでにベル1910 年、プランクはエントロピーを用たので、学生たちには物理化学のほとん

リン大学に赴任していたネルンストは、

いて熱定理を再定式化し、すべての純

どはネルンスト研究室で生み出されたよ1905 年 12 月 23 日、わざわざゲッティン

物質のエントロピーは絶対零度では０うに思われた。ネルンストの試験は平易

ゲン科学アカデミーに戻って発表した。

になるとした。これによって熱力学第だった。「知識は研究の死である」といそれが「熱的測定による化学平衡の計算

三法則として確立された。しかしネル

うのがモットーだったからである。

について」（1906）と題する 40 頁の熱定

ンスト自身はエントロピーという用語

企業家的才能においてもネルンストは理、のちに熱力学の第三法則へと発展すを嫌い、エントロピーを使わない表現

科学界で抜群だった。工業家ソルヴェー

る古典的論文である。化学工業の発達にに固執して自己の先取権を強く主張し、を説得し、22 人の著名科学者を招集しつれて化学反応の親和力の測定が重要と第三法則の発見を早くから自負していてソルヴェー会議を発足させたのはネルなった。トムセンとベルトロはそれぞれた。1912 年、ネルンストはあらゆる温ンストである（1911）。

別個に熱化学の測定をおこなって、同じ度のうち絶対零度には特別の熱力学的ヴィルヘルム皇帝とはきわめて親密なく反応熱を親和力の尺度と考えた。ベル

意義があるとして、絶対零度到達不能間柄だったから、カイゼル・ヴィルヘル

トレはその原理は固体間の反応ではほぼの原理を発表した。

ム研究所の設立もネルンストが主導した

和光純薬時報Vol.74, No.4（2006）

（1911）。光量子説を出してはいたが、また。ヒトラーの政治を嫌い、ナチスの勢だ無名の 34 歳のアインシュタインを特力が学界に及ぶことをとくに嫌った。科別教授としてベルリンへ招くのにも大い学学士院でナチス党党歌演奏のとき起に尽力した（1913）。

立しなかった。長女ヒルデはユダヤ人化

1914 年に戦争が勃発すると、ネルン

学者ハインツ・カーンに嫁いでいた。69

ストも軍国熱に浮かされて従軍すると言歳で退官した後は、シレジアのツィベレ

い出して研究室を混乱させた。自身の小（現、ポーランドのラウジッツ）の、多さな車を運転して、ベルギーのマルヌま

数の広大な湖と池がある約 122 万坪の私で軍隊と一緒に行動したが、いち早く敗有地で余生を送った。化学者として最戦を予見した。息子は二人とも戦死。著

大の業績は化学熱力学である。物理化学

書、『新しい熱定理の基礎』（1917）の序の問題の完璧な理論的把握ではかれに及文の冒頭で、「ギリシャやローマの先人

ぶものはなかった。自動車であれ量子論

は哲学に慰めを求めたが、今日、悲しみ

図６．ネルンスト、60 歳。

に満ちた現実から逃避するには理論物理学ほど相応しいものはない、」と述べた。

大戦後からヒトラー台頭まで（1919 〜 1933）

であれ新奇な物やアイデアには素早く飛びついた。物理化学の後継教授マック

20 年代後半には天体化学物理学、星のス・ボーデンシュタインによれば、ネル

温度と圧力における気体の比熱、星の進

ンストは狩人のように、真なるものへの化などの論文を発表した。熱力学第二法

異常に鋭敏な鼻をもち、加えて、難しい則によって予言される宇宙の熱死という事柄をかれ自身にも、われわれにも目に大戦の前後はドイツ人のノーベル想念には同調できず、宇宙は定常的状態

見えるように表現する空想力に恵まれて賞受賞が最も多い時期だった。ラウエにあるとした。宇宙は絶えず変動していいた。この具象性がかれの仕事の重要な（1914）、ヴィーン（1914）、ヴィルシュ

るが、エネルギー低下は、新星の出現特徴であるという。ドイツの伝統的な大テ ッ タ ー（1915）、 ハ ー バ ー（1918）、などのエネルギー創造によって相殺され学教授・枢密顧問官のイメージとはほどシュタルク（1918）、プランク（1919）、

る。新たなエネルギー源としては、まだ

遠く、型破りの人物だった。賭け事好き

ネルンスト（1920）、アインシュタイン

エーテルの存在を認めていたネルンスト（ベルリンのカジノの常連）、芝居好き、（1922）。敗戦後は革命、インフレ、政治は、「光エーテルのゼロ・ポイント・エ

派手な社交家だった。シェイクスピア好情勢の不安があったにもかかわらず、や

ネルギー」を要請した。ベルリン時代のみは、単位の命名に関する会議で、流率がて戦前に劣らぬ科学の盛況をつくりだ

論文数は門下生のものを含めて約 340 篇の単位としてフォルスタッフ（シェイク

した。傑出した物理化学者がベルリンにである。

スピアの作品に登場する肥満の喜劇的老集中し、世界でも類がなかった。大戦後

この時期に駐米大使就任への要請もから 1933 年までが物理化学の最盛期であった。情勢分析に長じ、産業界との関ある。研究機関はいずれも国立で、予係も密接だったからであろうが、その話算は過剰でなく適切で、ベルリン大学、には乗らなかった。ネルンストの第二のBodenstein, M. : Walther Nernst, Ber. Deut.

シャルロッテンブルク工科大学、カイ発明であるネオ・ベヒシュタイン・ピ

Chem. Gesel ., 79 〜 104（1942）. ; Partington, J. R.,

ザー・ヴィルヘルム研究所、国立物理工アノ（1922）は、小型の装置で発生させ学研究所が互いに近い距離にあり、それた音を電子増幅して、グランド・ピアノ

らの首長はいずれもきわめて優れた科学の効果を出せるという楽器である。し者だった。ネルンストはベルリン大学学

かし音楽のセンスのなかったネルンスト

学の領域』、第３巻、12 号、549 〜 555（1949）.；メ

長（1921 〜 22）を務めたあと、国立物理のこの楽器は不評であり、商業的にもンデルスゾーン、藤井かよ他訳：『ネルンストの工学研究所の所長（1922 〜 1924）となっ成功しなかった。本人はこのような科世界』（岩波書店）（1976）．
；ネルンスト著、松浦

たが、かれの行政はうまくいかず、２年

学外活動を「楽しい物理学」（physique

でさっさと辞任してベルリン大学物理学

amusante）と呼んでいた。

教授兼ディレクター（1924 〜 1933）になった（図６）。熱定理を研究中の 1912

騎士）を提案したことにも現れている。
〔参考文献〕The Nernst Memorial Lecture, J. Chem. Soc .,2853 〜 2872（1953）. ; Hiebert, E. N., Hermann
Walther Nernst, Dic. Sc. Biogr ., Vol. XV, 432 〜
453.；大幸勇吉：「化学者としての予の思出」
、
『化

良平訳：
「熱測定からの化学平衡の計算について」『化学の原典：化学熱力学』156 〜 201 ,（日本化学会編）（1984）；山本義隆：『熱学思想の史的展開』（現代数学社）（1987）．
；日本電球工業会編集発行：

隠棲（1933 〜 1941）

年から宇宙にも関心をもっていたが、学

ドイツ科学の盛衰とベルリンの興亡

長就任講演として、『最近の研究を考慮とネルンストの一生は重なる。ヒトラーに入れた宇宙構造』（1921）をおこない、の台頭とネルンストの引退は期を一にし

和光純薬時報 Vol.74, No.4（2006）『日本電球工業史』（1963）．
；http//www.ner nst.de/35

電気泳動用タンパク質サイズマーカー
プレステインマーカー ( ①〜② )未着色マーカー ( ④〜⑦ )本品は、あらかじめ色素と結合させたマーカーです。泳動中の進行状況の確認や、転写時の状態の確認に適しています。

本品は、還元アルキル化処理を施したマーカーです。
シャープなタンパク質バンドが得られます。

 低分子領域から高分子領域までカバーしたプレステイン
マーカーⅡを発売しました。
分子量 (k)NEW

240 blue
140 blue
100 blue

分子量 (k)分子量 (k)70 orange

分子量 (k)140 blue

50 blue

100 blue
35 blue

70 blue
50 pink

25 orange

7 blue①プレステインⅡ

17

15 blue

6.5
3.5②プレステインウエスタン用マーカー ( ③ )

180

116

116
97
79

79

79

42

42

30

30

20

20
20 blue

200

30

30

30 blue15 blue

分子量 (k)42

42

40 blue

20 blue

分子量 (k)

20

17

14

14
6.5

④低分子量

⑤中分子量

⑥高分子量

⑦ワイドレンジ

銀染色用マーカー ( ⑧〜⑪ )

本品は、免疫グロブリンと結合能を持つリコンビナント

本品は、銀染色用に最適化されたマーカーです。含まタンパク質（プロテイン G）が含まれるマーカーです。ウれるマーカータンパク質は還元アルキル化されているた

エスタンブロット用のマーカーとしてご利用いただけます。

め、シャープなタンパク質バンドが得られます。

分子量 (k)分子量 (k)分子量 (k)分子量 (k)

79

180
110

150
120

79

100
80
60
50
42
35
25

分子量 (k)
180
110
97
79

42

42

30

30

20

20

16

14

42

42

30

30

20

16

6.5
16

③ウエスタン
NEW

①
②
③
④
⑤
⑥
⑦
⑧
⑨
⑩
⑪

コード No.
239-02291
230-02221
233-02211
294-63101
131-14511
134-14501
296-63301
196-14001
193-14011
190-14021
197-14031

品 名WIDE-VIEWTM Prestained Protein Size Marker Ⅱ
WIDE-VIEWTM Prestained Protein Size Marker
WIDE-VIEWTM Western Size Marker
Molecular Weight Marker, Low Range
Molecular Weight Marker, Middle Range
Molecular Weight Marker, High Range
Molecular Weight Marker, Wide Range
Silver Stain MW Marker, Low Range
Silver Stain MW Marker, Middle Range
Silver Stain MW Marker, High Range
Silver Stain MW Marker, Wide Range

14
6.5

⑧低分子量
規 格
電気泳動用
電気泳動用
電気泳動用
電気泳動用
電気泳動用
電気泳動用
電気泳動用
電気泳動用
電気泳動用
電気泳動用
電気泳動用

⑨中分子量

⑩高分子量

容 量
500μℓ（約 100 回用）
500μℓ（約 100 回用）
250μℓ（約 50 − 250 回用）
1 mℓ用（約 200 回用）
1 mℓ用（約 200 回用）
1 mℓ用（約 200 回用）
1 mℓ用（約 200 回用）
6 mℓ用（約 600 回用）
6 mℓ用（約 600 回用）
6 mℓ用（約 600 回用）
6 mℓ用（約 600 回用）⑪ワイドレンジ

希望納入価格（円）20,00018,00020,000
9,800
9,800
9,800
9,800
12,00012,00012,00012,000

収載されている試薬は、試験・研究の目的にのみ使用されるものであり、家庭用、医療用など他の用途には用いられません。
記載希望納入価格は本体価格であり消費税などが含まれておりません。

和光純薬時報 Vol. 74 No. 4
2006 年 10 月 15 日 発行
発行責任者
編集責任者
発 行 所

36

印

刷

所

松田知憲
鰐部梢子
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