診療と新薬・第 50 巻

第 12 号（2013 年 12 月）

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バルサルタン錠（MSG303）の自然発症高血圧ラットにおける降圧作用の検討及びSD ラットにおける急性毒性試験
Meiji Seika ファルマ株式会社

矢 來 幸 弘蓮 沼 恵 子

平 塚 一 幸梅 木 祐 仁要柴 崎 義 明

旨Meiji Seika ファルマ株式会社が開発中の MSG303（以下，試験製剤）は，選択的 AT1 受容体ブロッカーであり，高血圧症治療薬であるディオバン Ⓡ錠 80 mg（ノバルティス ファーマ株式会社：以下，標準製剤）と有効成分を同量含有する同一剤型の後発医薬品である。
本稿では，自然発症高血圧ラット（SHR）を用いて，試験製剤の降圧作用を標準製剤と比較した。
また，両製剤の非臨床における安全性確認試験として，SD 系雄性ラットを用いた急性毒性試験を実施した。
1）SHR を用いた降圧作用の検討
SHR に試験製剤及び標準製剤を，有効成分であるバルサルタンとして 30 mg/kg の用量で 1 日 1 回，3 日間反復経口投与し，最終投与 5 日後まで血圧を測定した。試験群は，陰性対照群（溶媒投与群），試験製剤群及び標準製剤群の 3 群とし，各群 6 匹使用した。血圧の測定は覚醒下で非観血的に行い，評価には収縮期血圧を用いた。その結果，試験製剤，標準製剤ともに，初回投与 1 時間後から血圧が有意に低下し，投与期間中は効果が持続した。最終投与終了後は徐々に血圧が回復し，両製剤とも最終投与 5 日後には陰性対照群と同程度にまで回復した。投与終了後に投与前値よりも血圧が高くなるようなリバウンド現象は観察されなかった。一方，試験製剤群と標準製剤群との比較では，試験期間を通じて有意な差は認められなかった。
2）SD 系ラットを用いた急性毒性試験
SD 系ラットに試験製剤及び標準製剤を，有効成分であるバルサルタンとして 300 mg/kg の用量で単回経口投与し，急性期の毒性を評価した。試験群は，陰性対照群（溶媒投与群），試験製剤群及び標準製剤群の 3 群とし，各群 3 匹使用した。その結果，いずれの群にも死亡は認められず，投与後の一般状態にも変化は認められなかった。体重は，両製剤ともに陰性対照群と同様に推移し，差は認められなかった。投与から 7 日後に実施した剖検では，いずれの群にも毒性所見は認められなかった。
以上，SHR を用いた降圧作用の検討及び SD 系ラットを用いた急性毒性試験において，MSG303 はディオバン Ⓡ錠 80 mg と同様の降圧作用及び安全性を有していることが明らかとなり，臨床においてディオバン Ⓡ錠 80 mg と同様な治療効果を発揮することが期待される。
キーワード：バルサルタン，高血圧症，後発医薬品

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成 18 年 6 月 1 日）
「厚生労働省の所管する実施機

は じ め に関における動物実験等の実施に関する基本方針」を

バルサルタンはアンジオテンシンⅡ受容体阻害薬

遵守し，Meiji Seika ファルマ株式会社「動物実験（ARB）として，高血圧症治療に用いられている。

管理に関する指針」に従い，動物実験管理委員会でバルサルタンはアンジオテンシンⅡ受容体のサブタ審査・承認された方法で実施した。

イプである AT1 受容体に選択的に結合し，昇圧因4．試験方法子として作用するアンジオテンシンⅡに対して拮抗

4-1．SHR を用いた降圧作用の検討することにより，降圧作用を示すと考えられてい体重 292 〜 329 g，12 〜 13 週齢で収縮期血圧が1）180 mmHg 以上の雄性 SHR を用いた。試験群は，

Meiji Seika フ ァ ル マ 株 式 会 社 が 開 発 中 の陰性対照群，試験製剤群及び標準製剤群の 3 群とMSG303（以下，試験製剤）は，先発医薬品である

し，各群 6 匹を使用した。試験製剤及び標準製剤

る 。

Ⓡ

ディオバン 錠 80 mg（以下，標準製剤）と有効成を，バルサルタンとして 30 mg/kg の用量で，午前分であるバルサルタンを同量含有する同一剤型の後11 時頃に 1 日 1 回，3 日間反復経口投与した。投発医薬品である。

与容量は 10 mL/kg とした。陰性対照群には溶媒で本稿では，試験製剤の降圧作用について，自然発ある 0.5％メチルセルロース溶液を同様の方法で投症高血圧ラット（SHR）を用いて，標準製剤と比与した。最終投与の翌日より 5 日間の休薬期間を設較検討を行った。また，両製剤の非臨床における安けた。

全性を確認するために，SD 系ラットを用いた急性血圧測定は非観血自動血圧測定装置（BP-98A，株式会社ソフトロン）を用いて尾動脈の収縮期血圧毒性試験を行った。

を測定した。測定時点は，投与期間中は投与 1 時間

Ⅰ．材料及び試験方法前（午前 10 時頃），投与 1，3 及び 6 時間後とし，休薬期間中は午前 10 時頃に 1 日 1 回とした。血圧1．使用薬剤試験製剤として MSG303（Meiji Seika ファルマⓇ

測定中の SHR の保定装置は 38℃に設定した。

株式会社）を，標準製剤としてディオバン 錠 80

4-2．SD 系ラットを用いた急性毒性試験mg（ノバルティス ファーマ株式会社）を使用し

体重 179 〜 196 g，6 週齢の雄性 SD 系ラットをた。各製剤をメノウ乳鉢及び乳棒を用いて磨砕し，用いた。試験群は，陰性対照群，試験製剤群及び標0.5％メチルセルロース溶液を溶媒として懸濁液を準製剤群の 3 群とし，各群 3 匹を使用した。約 17調製した。

時間の絶食後，試験製剤または標準製剤を，バルサ2．使用動物

ルタンとして 300 mg/kg の用量で単回経口投与し

SHR を用いた降圧作用の検討では，11 週齢の雄た。投与容量は 10 mL/kg とした。陰性対照群には性 SHR（SHR/NCrlCrlj，日本チャールス・リバー

溶媒である 0.5％メチルセルロース溶液を同様の方株式会社）を 7 日間の検疫 ･ 馴化飼育の後，12 〜法で投与した。投与翌日より 7 日間の休薬期間を設13 週齢で試験に供した。急性毒性試験には，5 週けた。

齢の雄性 SD 系ラット（Crl:CD(SD)，日本チャール試験期間中は生死を含む一般状態観察及び体重測ス・リバー株式会社）を 7 日間の検疫 ･ 馴化飼育の定を行い，休薬最終日にイソフルラン麻酔下でラッ後，6 週齢で試験に供した。

トを放血安楽死させた後，剖検を行った。剖検の対動物は温度 23 ± 2℃，相対湿度 55 ± 10％，換気

象臓器は脳，心臓，脾臓，肺，気管，食道，胃，小回数 10 回以上 / 時，照明時間 7:00 〜 19:00 の環境

腸，大腸，膵臓，肝臓，腎臓，副腎，膀胱，精巣，下で飼育し，飲料水は塩素濃度 2 ppm 前後の塩素

前立腺，精嚢，胸腺，甲状腺，腸間膜リンパ節，皮殺菌水を，飼料は固型飼料 CRF-1（オリエンタル

膚及び大腿部骨格筋とし，肉眼的観察を行った。

酵母工業株式会社）を自由摂取させた。
3．動物倫理本試験は，厚生労働省通知 科発第 0601001 号（平5．統計学的処理
SHR を用いた降圧作用の検討において，収縮期血圧値の平均値及び標準誤差を算出した。各測定時

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Vehicle control

Systolic Blood Pressure (mmHg)

5（1159）Administration

Test formulation, 30 mg/kg
220

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Standard formulation, 30 mg/kg

200
180

＊ ＊＊
＊＊＊＊＊＊
＊

160
140＊＊
＊＊＊

＊ ＊＊
＊＊

＊
＊＊＊
＊＊

＊ ＊＊＊＊＊

＊ ＊＊
＊＊＊
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＊ ＊＊
＊＊＊

＊ ＊＊
＊＊＊
＊
＊

120
Day1100−6 0 6＊ ＊＊＊＊＊Day2Day3Day4Day6Day5Day7Day812 18 24 30 36 42 48 54 60 66 72 78 84 90 96 102 108 114 120 126 132 138 144 150 156 162 168
Time after ﬁrst administration (hr)Figure 1 Eﬀect of test formulation and standard formulation on systolic blood pressure (SBP) in SHR
Each value represents the mean ± SE (n ＝ 6).
SBP was analyzed using Tukey s test for three groups at the same time points.
P < 0.05 (two-tail) was considered statistically signiﬁcant; ＊ P < 0.05, ＊＊ P < 0.01 and ＊＊＊ P < 0.001 vs vehicle control group
No signiﬁcant diﬀerence between test formulation group and standard formulation group.

Table 1 The change in clinical observation in SD rats treated with test formulation and standard formulation
Day1 (The day of administration)

2345678Time after administration (hr)GroupFindings

Pre0-0.2

136Vehicle Control(0.5％ MC)

n33333333333

3

No remarkable changes

333333333333Test formulation
300 mg/kg

n33333333333

3

No remarkable changes

333333333333

Standard formulation
300 mg/kg

n333333333333No remarkable changes

333333333333n, Number of animals

点において，陰性対照群，試験製剤群及び標準製剤時点において有意に低値であった。投与終了後は，群すべての群間で，Tukey type の多重比較検定を最終投与 1 日後及び 2 日後の収縮期血圧が低値で実施した。検定には EXSAS Ver.8.0（株式会社アーあったものの，最終投与 5 日後では陰性対照群と試ムシステックス）を使用し，有意水準は両側 5％と験製剤群又は標準製剤群の間で有意な差は認められした。

なかった。一方，試験製剤群及び標準製剤群の比較
Ⅱ．結果

では，収縮期血圧に本試験期間を通じて有意差は認められなかった。

1．SHR を用いた降圧作用の検討

2．SD 系ラットを用いた急性毒性試験

試験製剤群及び標準製剤群の収縮期血圧は，陰性いずれの群にも，投与日から剖検日まで死亡は認

対照群に比べて，初回投与 1 時間後から有意に低値

め ら れ ず， 一 般 状 態 の 異 常 も 認 め ら れ な か っ たであった（Figure 1）。投与期間中はすべての測定（Table 1）。体重は試験製剤群及び標準製剤群とも6（1160）

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第 12 号（2013 年 12 月）に，陰性対照群と同様に推移し，差は認められなバウンド現象が観察されないことが明らかとなってかった。剖検において，いずれの群にも毒性所見はいる 1）。本稿においても，試験製剤及び標準製剤の認められなかった。

両剤でリバウンド現象は認められなかった。一方，

Ⅲ．考試験製剤と標準製剤の比較では，すべての測定時点

察において統計学的な有意差は認められず，試験期間

Meiji Seika フ ァ ル マ 株 式 会 社 が 開 発 中 のMSG303 は，選択的 AT1 受容体ブロッカーでありⓇを通じて同様の血圧の推移をたどった。
さらに，安全性評価として試験製剤及び標準製剤

高血圧症治療薬であるディオバン 錠 80 mg（ノバの急性毒性を評価した。試験製剤，標準製剤ともにルティス ファーマ株式会社）の後発医薬品である。

SD 系雄性ラットにバルサルタンとして 300 mg/kg

後発医薬品は，「後発医薬品の生物学的同等性試験の用量で経口投与し，一般状態観察，体重測定及びガイドライン」に従い製剤評価（溶出試験及びヒト剖検を行った。その結果，一般状態に変化はなく，での生物学的同等性試験）を実施し，先発医薬品と体重の推移及び剖検に異常は認められなかった。な

同等であることが認められ，製造販売承認される医お，本試験の投与用量 300 mg/kg は，成人の体重薬品である。さらに，後発医薬品はこれら承認申請を 60 kg として換算した場合，18000 mg/man（ ＝に必要なデータの他に，可能な限り品質や治療効300 mg/kg×60 kg）となり，ディオバン Ⓡ錠の臨床果，副作用に関する情報提供が必要と考えられる。

での 1 日最高用量 160 mg 2） の 100 倍以上の用量と本稿では先発品と同様の有効性および安全性が得ら考えられる。

れるか検討した。

以上，SHR を用いた降圧作用の検討及び SD 系Ⓡ

MSG303 を試験製剤，ディオバン 錠 80 mg を標

ラットを用いた急性毒性試験において，MSG303準製剤とし，SHR を用いて降圧効果を評価した。

はディオバン Ⓡ錠 80 mg と同様の降圧作用及び安全試験製剤及び標準製剤をバルサルタンとして 30性を有していることが明らかとなり，臨床においてmg/kg の用量で 1 日 1 回，3 日間反復経口投与した

ディオバン Ⓡ錠 80 mg と同様な治療効果を発揮する

ところ，初回投与 1 時間後から血圧が有意に低下ことが期待される。

し，投与期間中は効果が持続した。最終投与終了後

文

献は，最終投与 2 日後まで血圧が低値であったものの，徐々に血圧が回復し，最終投与 5 日後には陰性対照群と同程度にまで回復した。ディオバン Ⓡ 錠
は，2 腎 性 片 側 狭 窄 型 高 血 圧 モ デ ル ラ ッ ト 及 びSHR などの動物モデルを用いた評価において，投与終了後に投与前値よりも血圧が高くなるようなリ

1）木村雅昭，三谷博信，磯村八州男：アンジオテンシンⅡ受容体拮抗薬，バルサルタン（ディオバン Ⓡ）の薬理学的特性および臨床効果．日薬理誌 2002; 120: 353-360
2）ディオバン Ⓡ錠，添付文書，ノバルティス ファーマ株式会社