P-1.食用担子菌の菌糸成長における木炭添加の効果（北大院農）○杉山諒司，玉井裕，矢島崇，宮本敏澄（北海道立林産試験場）原田陽

1.

緒言
木炭は燃料としての用途だけでなく多面的機能を持つ。その一つに土壌改良材としての機能があり，木炭施用によるカラマツ実生の発芽率と成長の向上 1），アキニレの老樹の地下部の細根形成の促進 2）といった植物の成長を補助する報告がある。植物だけでなく菌類に対しても木炭施用で菌根菌の成長促進が確認され，菌根形成も早まることから 3），菌糸活性剤的な働きが期待できる。
そこで本研究ではさらなる木炭の用途開発のひとつとして，きのこ栽培における木炭の有効性を検討した。

2. 実験方法
2.1 菌糸伸長試験
Table 1 Strain number of 23 species on mycelial growth test
カエデのおが粉（10 メッシ
Agrocybe cylindracea
ヤナギマツタケAC-1Wュパス）と米ぬか（20 メッシ
Auricularia auriculaキクラゲ
AA-1C
Flammulina velutipes
エノキタケ
FV-4Wュパス）を 3：1 もしくは 3：
FV-33 W2（絶乾重量比）で混合した
Ganoderma lucidum
マンネンタケ
GL-6C
GL-7C
基本培地に，砕いた市販のHericium erinaceum
ヤマブシタケ
HE-1C
カラマツ木炭（下川木炭，下Hypsizigus marmoreus
ブナシメジ
HM-888 C
Lepista nuda
ムラサキシメジ
LN-5W
川町森林組合）（10 メッシュ
Naematoloma sublateritium
クリタケ
NS-2Cパス）10％（w/w）を添加，
Pholiota aurivella
ヌメリスギタケモドキ
PA-1W
水道水を加えて含水率をPA-4W
Pholiota nameko
ナメコ
PN-6C65％に調整した。これをガPleurotus cornucopiae
タモギタケ
PC-1Cラス製シャーレに充填し，高Pleurotus dryinus
ツバヒラタケ
PDr-1 W
Pleurotus eryngii
エリンギ
PE-1C圧滅菌（121℃，30 分）した。
Pleurotus ostreatus
ヒラタケ
PO-1W
自然冷却後，PDA 培地で前PO-4
W
Pleurotus pulmonarius
ウスヒラタケ
PP-3W
培養した担子菌 19 種 23 菌株
Pleurotus salmoneostramineus
トキイロヒラタケ
PSa-1 W
（Table 1）の菌叢を直径 6
Sparassis crispa
ハナビラタケSC-1W
Stropharia
rugosoannulata
サケツバタケ
SR-1
Wmm のコルクボーラーで寒天
Termitomyces eurrhizus
オオシロアリタケ
TE-4
Wごと打ち抜き，菌叢面が培*
C:Culture strain
W:Wild strain
地と接するよう接種した。
23℃に設定した暗所にて培養を行い，直径 50－70mm 程度まで菌叢が伸長した際に菌叢直径を４方向から測定し，その平均値を記録した。

2.2 栽培試験
供試菌株はヒラタケ（Po-1），ウスヒラタケ，トキイロヒラタケ，エノキタケ（Fv-4），ブナシメジの 5 種を用いた。2.1 同様に培地を調製し，予備試験を元に木炭を適量（5－10％）添加した。ポリプロピレン製栽培ビン（450cc もしくは 800cc）に培地（270g もしくは 570g）を充填，高圧滅菌（121℃，60 分）を行い，自然冷却後に種菌を接種して，温度 23℃，暗所にて培養を行った。ブナシメジのみ菌糸蔓延後に追培養（熟成）を行った。培養後に芽出し操作を行い農業用マルチシート（700AG，デュポン TM タイベック）で覆い，蛍光灯照明下（100 lux 以下）で子実体原基の柄が 10 mm 程度伸長するまで管理した。以降，照度約 500 lux で子実体の生育を行い，菌傘の 8 分開きを目安に子実体を収穫した。収穫の際は傘径 10 mm 以上の子実体を有効とし，生重量と有効茎数を測定して子実体収量とした。また栽培期間を 3 段階に分けて，接種から菌まわりが完了するまでを菌糸蔓延日数，芽出し操作から子実体原基が形成するまでを原基形成日数，原基形成から収穫するまでを生育日数として記録した。
3. 結果と考察
3.1 菌糸伸長試験
Table 2 に菌糸伸長試験における担子菌 19 種
22 菌株の菌叢直径を示した。17 菌株で菌糸伸長の促進が認められた。木炭による効果の大きい順に，ブナシメジ，ヤナギマツタケ，ムラサキシメジ，トキイロヒラタケ，クリタケ，ヒラタケ（Po-4），マンネンタケ（Gl-6），
Fig. 1 Mycelial growth of
タモギタケ，キクラゲ，ヌメリスギタケモド
Termitomyces eurrhizus
キ（Pa-1），エリンギ，ヌメリスギタケモドキ
for 35 days after inoculation（Pa-4），エノキタケ（Fv-4），エノキタケ（Fv-33），ツバヒラタケ，ヒラタケ（Po-1），
ウスヒラタケとなった。一方でハナビラタケは菌糸成長が 90％に抑制された。オオシロアリタケについては木炭添加でのみ菌糸伸長が観察できた（Fig. 1）。今回，木炭が担子菌菌糸の伸長を促進させる結果が多い傾向にあったが，逆に抑制効果の認められたハナビラタケや，菌株間で異なる効果を示したマンネンタケ，全く影響のないヤマブシタケ，菌糸伸長が木炭添加でのみ確認できたオオシロアリタケなど菌種，菌株により影響が異なった。
Table 2

Mycelial growth test of 22 speices on the medium applied charcoal
Diameter of mycelial tuft (mm)The inoculation
Effect ofSpecies
charcoal (%)
Charcoal addition － Charcoal addition ＋period (day)*Hypsizigus marmoreus
40.3 ± 1.2
54.9 ± 1.217136*
Agrocybe cylindracea
42.3 ± 1.1
55.9 ± 0.911132*
Lepista nuda
45.6 ± 3.6
58.4 ± 6.233128*
Pleurotus salmoneostramineus
56.9 ± 4.5
72.6 ± 4.38128*
Naematoloma sublateritium
54.2 ± 1.5
67.0 ± 4.021124*
Pleurotus ostreatus (Po-4)
53.8 ± 0.9
66.3 ± 0.87123*
Ganoderma lucidum (Gl-6)
61.1 ± 4.6
72.8 ± 4.611119*
Pleurotus cornucopiae
56.6 ± 4.0
67.0 ± 5.717118*
Auricularia auricula
63.2 ± 3.6
74.0 ± 0.910117*
Pholiota aurivella （Pa-1)
63.2 ± 3.4
73.9 ± 3.617117*
Pleurotus eryngii
53.4 ± 1.1
61.4 ± 1.4
11115*
Pholiota aurivella （Pa-4）
52.9 ± 0.7
60.8 ± 0.716115*
Flammulina velutipes (Fv-4)
60.9 ± 1.6
69.1 ± 2.7
14114*
Flammulina velutipes (Fv-33)
62.9 ± 5.1
70.8 ± 3.5
13113*
Pleurotus dryinus
64.9 ± 3.3
72.4 ± 1.7
17112*
Pleurotus ostreatus (Po-1)
67.9 ± 3.2
74.9 ± 3.08110*
Pleurotus pulmonarius
62.0 ± 1.967.3 ± 1.98108
Sparassis crispa
49.8 ± 3.1
45.0 ± 2.0*3390
Pholiota nameko
66.8 ± 5.1
69.9 ± 6.015105Stropharia rugosoannulata
57.5 ± 5.5
62.5 ± 6.4
15109
Ganoderma lucidum (Gl-7)
61.5 ± 4.1
66.8 ± 2.5
12109
Hericium erinaceum
74.9 ± 2.0
74.5 ± 2.0
1099
Legend : Charcoal addition ‐ : Medium without charcoal, Charcoal addition + : Medium with 10 % charcoal* A significant difference at 0.05 levels, respectively.
Effect of charcoal (%) = Diameter of mycelial tuft (Charcoal addition +)/ Diameter of mycelial tuft (Charcoal addition －) ×100
Notes: Mean±S.D. (n = 3-5)

3.3 栽培試験
ヒラタケ（Po-1），ウスヒラタケ，トキイロヒラタケ，エノキタケ（Fv-4），ブナシメジの 5菌株を用いた栽培試験の結果を Table 3 に示した。
ヒラタケは菌糸蔓延日数と原基形成日数が短縮され，生育日数は長期化した。収量については生重量，有効茎数ともに減少した。ウスヒラタケは菌糸蔓延日数と原基形成日数が短縮され，総栽培期間は 2.9 日短縮された。トキイロヒラタケは菌糸蔓延日数と原基形成日数が短縮され，総栽培期間は 2.8 日短縮された。有効茎数に影響はなかったが生重量が減少し，子実体サイズが小型化した。エノキタケは生育日数のみ短縮され，総栽培期間は 1.8 日短縮した。ブナシメジは菌糸蔓延日数が短縮した。また熟成 0，10，30 日区において原基形成日数は短縮され，特に熟成0 日区で 4 日程度早く原基が形成された。一方で原基形成が短縮された試験区については生育日数が長期化した。総栽培期間は全ての熟成条件で７～10 日の短縮となった。
きのこ栽培において木炭は、栽培期間中の菌糸蔓延と原基形成を促進させ，結果として総栽培期間は多くの菌種，菌株で短縮された。過去のシイタケの菌床栽培において木炭が子実体の一斉発生を促した報告 4）からも木炭には菌糸伸長促進効果と共に，原基形成を促進させる効果がある。
また，木炭添加区において米糠の量が相対的に少ない（70－85％程度）にも関わらず収量はほぼ同等であった事から，生物的効率は向上したといえる。
以上の結果より，食用担子菌におけるカラマツ木炭添加は栽培期間の短縮と生物的効率の向上が期待できる。比較的栽培期間の長い菌種において，木炭添加はさらに有効な手法となる可能性がある。

参考文献
1) 田中優子：北海道大学大学院農学院 修士論文. (2003）
2) 前島重雄, 卯之原昇, 藤井英二郎, 長尾英幸：ランドスケープ研究 64，42-43 (2001)
3) 川端久仁子：北海道大学大学院農学院 修士論文(2008)
4) 石川洋一, 塩田敦史：栃木県林業センター年報 32，33-39 (2001)．

Table 3

Effect of charcoal addition to sawdust medium on mycelial growth, cultivation period, fruit body yield, and number of siginificant fruiting bodies
Period (days)
Fruiting body
Number ofSpecies
Charcoal addition Spawn
Primordia
Totalyieldsignificant
Aging
Maturation
Run
formationcultivation(FW g/bottle）
fruiting bodies－120
15.9 ± 4.7
6.5 ± 0.7
33.8 ± 4.0
26.4 ± 4.0
9.8 ± 1.8
Pleurotus ostreatus****+1011011.8 ± 3.9
7.7 ± 1.3
30.1 ± 4.0
22.6 ± 1.8
7.5 ± 2.0－120
7.1 ± 1.0
6.2 ± 0.6
24.9 ± 1.9
28.2 ± 3.8
5.4 ± 3.2
Pleurotus pulmonarius**+101106.0 ± 1.1
5.6 ± 0.8
22.0 ± 1.3
26.9 ± 5.8
6.8 ± 1.8
Pleurotus
160
6.3 ± 0.5
3.5 ± 0.8
23.9 ± 1.5
19.0 ± 3.5
18.8 ± 4.2***
salmoneostramineus+101404.8 ± 0.8
3.2 ± 0.4
21.1 ± 1.0
14.3 ± 4.4
15.9 ± 3.4－210
10.9 ± 1.5
8.5 ± 0.8
40.4 ± 1.3
79.3 ± 9.8
Flanmmulina velutipes**+521010.3 ± 1.1
7.3 ± 0.8
38.6 ± 1.1
78.0 ± 9.0－36
14.1 ± 2.8
17.1 ± 0.8
67.2 ± 2.5
88.9 ± 8.6
43.0 ± 4.90****+10289.7 ± 1.0
21.7 ± 1.3
59.4 ± 1.7
79.4 ± 3.4
27.7 ± 5.1－+1036281011.4 ± 0.5
10.4 ± 0.5－+10362820

10.5 ± 2.3
10.0 ± 0.9－+10362830

12.9 ± 1.6
10.0 ± 0.0*

18.2 ± 0.9
19.6 ± 0.5*

75.6 ± 0.8
68.0 ± 0.8*

94.8 ± 4.8
103.2 ± 7.1

44.4 ± 5.8
40.0 ± 7.1

82.9 ± 1.0
75.3 ± 0.7*

113.8 ± 12.0
114.8 ± 9.6

61.9 ± 7.7
54.1 ± 4.6

93.3 ± 2.3
83.8 ± 0.4*

110.5 ± 9.9
111.5 ± 7.7

63.0 ± 12.4
56.2 ± 7.9

Hypsizigus marmoreus
16.4 ± 1.7
17.3 ± 1.0*

14.4 ± 1.2
15.8 ± 0.4*

Legend : －: Medium without charcoal，+5 : Medium with 5 % charcoal，+10 : Medium with 10 % charcoal* A significant difference at 0.05 levels, respectively.
Notes: Mean±S.D. (n=10)