原著論文

診療と新薬 2020; 57: 876-882

シルクフィブロインのHDL コレステロール増加作用の検証：

診療と新薬 Web

無作為化二重盲検クロスオーバー試験サブグループ解析

渡會伸治 1）／渡會雪絵 2）／𠮷川育矢 3）／長島孝行 4）／板倉弘重 5）

はじめに臓病などの循環器障害の診断や経過の判定に重要な役割を果たしている。

コレステロールは，体内にある脂質（脂肪）の一HDL-C は増えすぎたコレステロールを回収して種で，血管の強化や維持，副腎皮質ホルモンや性ホ血管壁に入り込んだコレステロールを取り除き，肝ルモンの原料，また，脂肪の消化を助ける胆汁酸の臓へもどして最終的に胆汁→糞便に排泄する働きを主成分としてヒトの体には必要不可欠の物質であ担い，その血中濃度が高いほど動脈硬化性疾患にかる。また，コレステロールは元々体内で合成されるかりにくいということから「善玉コレステロール」もので，食事から摂取される量は体内で作られるコと呼ばれている。HDL-C は，喫煙，肥満，運動不レステロール量の 1/3 〜 1/7 と言われている。しか足のそれぞれによって低下し，HDL-C の不足によし，食生活の乱れや運動不足，食事の欧米化などにるリスクは，動脈硬化の原因となることが知られてよって血液中のコレステロールが過剰になると，血いる。コレステロールが高いと心血管疾患のリスク

管の壁に付着して血管を詰まらせる動脈硬化症などを増加させることは疑う余地のない事実であるが，血管障害を中心とする生活習慣病の原因となる。生HDL-C の低値もまた，LDL-C の高値以上に心血管活習慣の改善を行わずにこの状態を放置している疾患のリスクを増加させることが Framingham 試と，心筋梗塞や脳梗塞を発症するリスクが高まるこ験 3）を代表とする多くの大規模疫学研究・臨床試験とが知られている。日本動脈硬化学会は，動脈硬化によって明らかにされている。また，HDL-C は組性疾患へのリスクを減らすような生活習慣，運動，織の過剰なコレステロールを引き抜くこと以外に多食事を改善する包括的管理が大切であることを提唱

面的な抗動脈硬化作用が多く認められている 4）5）。

している 1）。

HDL-C を増やすには，バランスのとれた食事，運総コレステロール（TC）には，LDL コレステ

動，禁煙を心がけて経過を観察し，健康の維持・増ロール（LDL-C），HDL コレステロール（HDL-C），

進を期待する目的で健康食品をうまく取り入れるこその他のコレステロールがすべて含まれている。とが求められ，近年，HDL-C を増やす機能を持っ2）

Sugiyama ら は，24 年 間 の コ ホ ー ト ス タ デ ィ ー

た健康食品や食品成分が上市されている 6）〜 8）。

で，日本人の心血管疾患予防のためには，TC 値のシルクフィブロインには，これまでの臨床試験管理が重要であると結論し，TC は，動脈硬化や心で，その多孔性，難消化性の特長によって，脂質代謝能を改善する効果が確認されている 9）10）。筆者ら

1）石川町内科クリニック 院長
2）石川町内科クリニック 医師
3）ドクターセラム株式会社 代表取締役
4）東京農業大学農学部農学科 教授
5）芝浦スリーワンクリニック 名誉院長

は，中性脂肪（TG）を基準として選択した被験者を対象とした無作為化二重盲検クロスオーバー試験で，シルクフィブロインには有意な TG 低下作用および HDL-C 増加作用があることを報告している 11）

診療と新薬・第 57 巻

表1

第 9 号（2020 年 9 月）

21 （877）

被験食品の原材料および栄養成分

シルクフィブロイン（シルクタンパク質），果糖ぶどう糖液糖，還元澱粉糖化物，ピーチ濃縮果汁，米胚芽・大豆発

原 材 料

酵抽出エキス，ゲル化剤（キサンタンガム，ローカストビーンガム，カラギーナン，ペクチン），酸味料，香料

栄養成分（1 包 10 g 当たり）エネルギー 8.6 kcal，タンパク質 0.19 g，脂質 0.01 g，炭水化物 2 g，ナトリウム 14.4 mg（以下，「当該試験」という）。

は疑いがある者

本研究では，シルクフィブロインによる HDL-C⑦ スクリーニング検査及び摂食前検査のバイタの増加作用に着目し，その作用を検証するためにルサイン値が，最高血圧 150 mmHg ≦または150 万人のメガスタディーで定義された健康人の男

最低血圧 90 mmHg ≦，心拍数 100 bpm ＜ま女別，年齢階級別 TC の基準範囲12）に基づいて，

たは＜ 40 bpm に該当する者「当該試験」の被験者の中から本研究の被験者を選⑧ 急性疾患を有する者択した。主要アウトカムに HDL-C を設定し，TC，⑨ 腎機能障害を有する者（血清クレアチニンがLDL-C および TG を副次的アウトカムとしてサブグループ解析をしたので報告する。
対象と試験方法
1．被験者選択
被験者は，石川町内科クリニック倫理審査委員会での審査および承認を得て，ヘルシンキ宣言に基づ

1.2 mg/dL 以上または無尿症）⑩ 臨床的に重大な肝疾患を有する者⑪ スクリーニング検査，摂食前検査で貧血傾向がみられる者⑫ 被験食品摂食前 1 カ月以内または 4 カ月以内にそれぞれ 200 mL および 400 mL を超える採血（献血など）をされた者

く倫理的原則を遵守した当該試験の実施前に，臨床⑬ 臨床試験中に試験責任医師の指示に従えない

試験責任医師から試験の目的と方法について十分な者，または臨床試験を完了させることがない

説明を受け，書面による同意を得ている年齢が 20と疑われる者

歳以上の男女である。対象は，当該試験で合併症や⑭ 臨床試験終了時まで禁煙ができない者

服薬経験並びに被験食品にアレルギー反応がなく臨⑮ その他，臨床試験責任医師が本試験参加に「不床試験責任医師が「適格」と総合的に判断し，A適」と判断された者

群，B 群とも摂取前期の試験食品摂取前の TC の基

なお，石川町内科クリニックで，診察（問診），準範囲を満たし，かつ以下の除外基準に該当しない

身体計測，血圧，脈拍，体温測定，採血，採尿，心A 群 8 名，B 群 9 名の合計 17 名を選択した。

電図検査を実施し，被験者管理等の試験実施体制を【除外基準】

整備した。

① 本試験開始前 4 カ月（120 日）以内に他の治験，臨床試験に参加した者

2．試験食品および摂取方法
被験食品は，長島らの方法（製法特許第 4074923② 薬物乱用の既往または疑いがある者号）に従って作製した 1 包宛内容量 10 g のゼリー

③ 中性脂肪値およびコレステロール値を下げるタイプで，シルクフィブロインとして 200 mg を含薬を服用している者④ 1 カ月（30 日）以内に中性脂肪値を下げる特定保健用食品を摂取している者

有したものを用いた。被験食品の原材料および栄養成分を表 1 に示した。プラセボ食品は，被験食品と外見上見分けがつかないように調整し，味，香⑤ 臨床試験責任医師によって過度のアルコールり，色調，内容量を被験食品に合わせた。試験食品およびカフェインを摂食していると判断されの摂取方法は，1 回 1 包を 1 日 3 回毎食前に 8 週間た者連続摂取とした。

⑥ 被験食品の原材料等にアレルギーの既往また22 （878）

診療と新薬・第 57 巻

表2試験デザイン

摂取前期
摂取前同意の取得○

スクリーニング検査○

問診，身体測定，血液・尿検査
試験食品
摂取第 9 号（2020 年 9 月）

摂取休止

摂取後期

摂取休止

0W

2W

4W

期間
8W （2 週間） 0W

2W4W

期間終了
8W （2 週間）

○

○

○

○

○

○

○

○

A群

被験食品

プラセボ食品B群

プラセボ食品

被験食品

症状日誌記録フォローアップ（電話）○3．試験デザイン

5．安全性評価

試験は，無作為化二重盲検クロスオーバー試験と医師による問診，症状日誌および血液検査値（白した。すなわち，第三者が作成した割付け表に従っ

血球数，赤血球，血色素量，ヘマトクリット，血小て無作為に被験者を A 群と B 群の 2 群に分け，摂板 数， リ ン パ 球， 白 血 球 分 画， 空 腹 時 血 糖 値，取前期では A 群に被験食品，B 群にはプラセボ食AST，ALT，γ-GTP，ALP，総ビリルビン，総タ品を摂取させた。2 週間の摂取休止期間の後，摂取

ンパク，アルブミン，尿酸，クレアチニン，尿素窒

後期として，A 群にはプラセボ食品を，B 群に被験素），ならびに尿検査値（ウロビリノーゲン，蛋食品を摂取させた（表 2）。

白，糖，潜血）から有害事象を評価した。

スクリーニング検査では，身長・体重測定，血6．統計解析

圧・脈拍・体温測定，心電図測定，胸部 X 線検査，

数値は，平均値 ± 標準誤差で示し，検定の有意採血，採尿，問診の後，対象者全員に被験食品 1 包

水準は P ＜ 0.05 および P ＜ 0.01 とした。統計解析を摂食させて，アレルギー反応の有無を確認した。

ソフトは，JMP12.0.1（SAS Institute Inc.）を用い

また，血液検査は，株式会社保健科学，尿検査は石た。

川町内科クリニックにてそれぞれ実施した。

被験食品の効果は摂取前値と各時点の変化量につ

試験期間中，被験者には食事，運動等通常の生活いて，群効果，時期効果を考慮した分散分析，被験習慣を維持することを義務づけ，症状日誌に，発現食品の摂取前値と各時点の効果および各時点におけした自覚症状および暴飲暴食や過度の運動，医薬品る被験食品とプラセボ食品間の効果についてはそれや健康食品の摂取の有無などを記録させ，来院時にぞれ，対応のある t-検定，スチューデントの t-検定

臨床試験責任医師が問診により確認した。また，試を用いて比較し評価した。

験食品摂取終了後に経過観察期間を設け，2 週間後結に電話で自覚症状の有無を確認するためのフォローアップを実施した。

果

1．被 験 者

4．有効性評価

被験者は，同意を取得した 20 歳以上の男女で，

1）主要評価項目

試験食品前期摂取前の TC の基準範囲を満たし，臨HDL-C を試験食品摂取前後の変化量で評価した。

床試験責任医師によって最終的に「適格」と判断さ2）副次的評価項目れた 17 名（A 群 8 名，B 群 9 名）で，この 17 名をTC，LDL-C，TG を試験食品摂取前後の変化量解析対象被験者として確定した。表 3 に解析対象で評価した。

被験者の背景を示した。解析対象被験者は，いずれの項目においても A 群と B 群の間に有意な差を認

診療と新薬・第 57 巻

表3

第 9 号（2020 年 9 月）

解析対象被験者の背景
全体

A群

B群

（n ＝ 17）（n ＝ 8）（n ＝ 9）名歳
cm
kgkg/m 2（12/5）
47 ± 3165.9 ± 2.6
75.5 ± 4.2
27.3 ± 1.2（5/3）
47 ± 5163.9 ± 2.9
77.3 ± 6.1
28.7 ± 1.7（7/2）
46 ± 5168.0 ± 4.3
73.9 ± 6.4
26.0 ± 1.70.4902
0.9052
0.39670.69850.2561

HDL コレステロール

mg/dL

53 ± 549 ± 657 ± 90.4744

総コレステロール
LDL コレステロール
中性脂肪mg/dL
mg/dL
mg/dL

206 ± 4119 ± 6211 ± 22209 ± 7129 ± 7
197 ± 27

204 ± 6111 ± 9223 ± 38

0.51840.13310.5702

検査項目

単位人数（男／女 ※）年 齢
身 長
体 重BMI

数値は平均値 ± 標準誤差

(mg/dL)
6(mg/dL)
15*p ＜ 0.05

P ＝ 0.0032*

1025P ＝ 0.0214*

0P ＝ 0.0310*

TC

HDL-C

P値

スチューデントの t- 検定（※：χ2 検定）

40−2−5−4− 10−6− 150W

2W4W

被験食品摂取時（n ＝ 8）

図10W8W

プラセボ食品摂取時（n ＝ 9）2W

被験食品摂取時（n ＝ 8）

HDL-C 変化量推移

4W8W

プラセボ食品摂取時（n ＝ 9）

図 2 TC 変化量推移(mg/dL)
15(mg/dL)
40

10200TG

5LDL-C23 （879）

0−5− 20− 40− 60− 10− 80− 100− 150W

2W

被験食品摂取時（n ＝ 8）

図34W8W

プラセボ食品摂取時（n ＝ 9）

LDL-C 変化量推移めなかった。

0W2W

被験食品摂取時（n ＝ 8）

4W8W

プラセボ食品摂取時（n ＝ 9）

図 4 TG 変化量推移

コレステロール値について群効果と時期効果を検定2．無作為化二重盲検クロスオーバー法の妥当性したところ，P 値はそれぞれ P ＝ 0.5148 および P

摂取前期と後期のそれぞれの摂取前（0 W）の総＝ 0.0823 でいずれも有意ではなく，したがって，

24 （880）

診療と新薬・第 57 巻

第 9 号（2020 年 9 月）

本研究は「当該試験」と同様にクロスオーバーデザインとして適切に評価できるものと判断された。
3．有効性評価
HDL-C 変化量は，被験食品の摂取によって時間の経過と共に増加し，摂取 8 週間後では，摂取前と比べて統計学的に有意な増加が確認された（P ＝0.0032）。またプラセボ食品摂取時と比べても摂取4 週間後，摂取 8 週間後にそれぞれ統計学的に有意な増加が確認された（P＝0.0310，P=0.0214）（図 1）。
TC および LDL-C 変化量では，プラセボ食品摂取時との間で有意ではなかったが，それぞれ上昇抑写真 1 シルクフィブロインの脂肪吸着多孔性構造（電顕）制・減少傾向がみられた（図 2，図 3）。TG 変化量は，プラセボ食品摂取時との間で有意ではなかったに基づいて選択された被験者にシルクフィブロインが，被験食品の摂取によって摂取 2 週間後には減少を摂取させた。その結果，HDL-C の有意な増加作し，その減少は摂取 8 週間後まで持続した（図 4）。

用が明らかとなり，また有意ではなかったが TG の4．安全性評価低下作用も確認された。小林ら 17） は，シルクパウ

試験食品摂取時のすべての解析対象被験者に臨床

ダーには腸管への吸収阻害による中性脂肪と胆汁酸上問題となるような他覚的所見および自覚症状は認の糞中排出促進作用があることをラットの実験で報められなかった。また，肝・腎機能などの血液検査告している。また，Um ら 18）は，マウスの実験でシ値ならびに尿検査値に異常所見は観察されなかっルクフィブロインによる顕著な HDL-C の増加，た。

TG の減少，糞中 TG の有意な増加が観察されたこ
考とにより，シルクフィブロインには脂質代謝を改善察する作用があると結論しており，本結果との一致がシルクフィブロインは，蚕の繭からとれるシルク示唆された。阿部ら 19）20）は，シルクフィブロインのプロテインのフィブロインのみを特殊な製法により難消化性について，シルクフィブロインの主な組成13）〜 15）。シ

アミノ酸であるセリン（SER），グリシン（GLY），ルクフィブロインには，電子顕微鏡レベルでは多孔アラニン（ALA）を指標としてヒト小腸透過性試

質の非常に複雑な形状をしたナノレベルの基本構造

験モデルを用いた腸管内吸収試験を実施したとこ（写真 1）および体内で消化されにくい難消化性のろ，シルクフィブロインの吸収率は約 3％であった

性質があり，18 種類の必須アミノ酸が含まれていことを確認し，その約 97％が便より排泄されるこ健康食品として分離精製したものである

16）

る 。この複雑な多孔性の空間には吸脂性があるたと，また，そのメカニズムは多孔性の吸着構造にあめ，体内の余分なコレステロールや脂肪を閉じ込めることを報告している。一般に TG が低くなるとて，また，難消化性という性質から吸着したまま乳HDL-C が増えることが知られており，本研究で確化させた状態で体外に排出させる機能がある。

認された HDL-C の増加および TG の減少は，シル

一般に，生活習慣病の発症リスクは，人間ドックや健康診断による血液検査の結果に基づいて評価さクフィブロインの持つ脂肪吸着排泄機能の働きによるものと考えられた。

れ，他に合併症や多剤服用などの危険因子がない場

陳ら 21） は，ラットで確認されたシルクフィブロ合は，食事や運動など生活習慣を見直しながら経過

インの顕著な血中コレステロール増加抑制効果は，観察をすることが求められ，健康維持・増進を期待

シルクフィブロインの消化過程で生成する未消化ペする目的でいわゆる健康食品を摂取するケースもあプチドが胆汁酸と相互作用をすることで腸管循環をる。

阻害するためであると予想した。また平尾ら 22） は本研究では，150 万人のメガスタディーで定義さフィブロインによる血清 TC の低下は，消化過程で12）ペプチドと結合した胆汁酸を糞便として排泄するこれた健康人の男女別，年齢階級別 TC の基準範囲

診療と新薬・第 57 巻

第 9 号（2020 年 9 月）

25 （881）とで腸肝循環を阻害して血中コレステロールを低下り健康的な方向に数値が動いていることを示すものさせるのではないかと推察している。本研究では，であり，シルクフィブロインが HDL-C 低値によるプラセボ食品摂取時に比べて有意ではなかったが，リスクの軽減に寄与し，「HDL-C が低めの人」の健TC の増加抑制・減少作用が確認されたことは，シ康の維持・増進に貢献できる可能性が示唆された。

ルクフィブロインの持つ多孔性，難消化性の特長に

利 益 相 反よるものと考えられた。一般に TG が低くなるとLDL-C が減ることが知られている。本研究で確認

本研究の費用は，ドクターセラム株式会社が負担した。

された LDL-C 増加抑制・減少作用は，TG の低下

参 考 文 献作用とのバランスで得られた結果であることが示唆

1）日本動脈硬化学会：動脈硬化性疾患予防ガイドライン
2012 年版．

された。
以 上， シ ル ク フ ィ ブ ロ イ ン の 摂 取 に よ っ て
HDL-C が有意に増加することが検証された。これ

2）Sugiyama D, Okamura T, Watanabe M, et al: Risk ofHypercholesterolemia for Cardiovascular Disease and
the Population Attributable Fraction in a 24-year

は，シルクフィブロインの持つ脂肪吸着多孔性構造

Japanese Cohort Study. Atheroscler Thromb 2015; 22:

ならびに体内で消化されにくい難消化性の性質に

95-107.

よって，TC，LDL-C および TG がそれぞれの代謝の過程でバランス良く複合的に作用した結果と考えられ，シルクフィブロインが HDL-C を増やすこと

3）Gordon T, Castelli WP, Hjortland MC, et al: Highdensity lipoprotein as a protective factor against
coronary heart disease. The Framingham Study. Am JMed 1977; 62: 707-14

で健康の維持・増進に貢献できる可能性が示唆され

4）朔啓二郎，上原吉就，三浦伸一郎，他；新規動脈硬化た。また，本研究において有害事象の発現はなく，

分 子 イ メ ー ジ ン グ の 開 発． 福 岡 大 学 研 究 部 論 集 F2

肝機能，腎機能などの血液検査値，尿検査値に異常所見はなく，本研究の条件下でのシルクフィブロイン摂取による安全性が確認されたものと考えられた。

2015.
5）Barter P: The role of HDL-cholesterol in preventing
atherosclerotic disease. Eur Heart J Suppl 2005: 7（Supplement F）, F4-F8.
6）Blum A, Merei M, Karem A, et al: Eﬀects of tomatoes

結論

本研究では，これまでの臨床試験の結果からシルon the lipid proﬁle. Clin Invest Med 2006: 29: 298-300.
7）Shen YC, Chen SL, Wang CK; Contribution of tomato
phenolics to antioxidation and down-regulation of bloodlipids. J Agric Food Chem 2007; 55: 6475-6481.

クフィブロインの HDL-C 増加作用に着目して，

8）Azantsa B, Kuate D, Chakokam R, et al: The eﬀect of

150 万人のメガスタディーの結果から健康人の男女

extracts of Irvingia gabonensis （IGOB131） and別，年齢階層別 TC の基準範囲に基づいて被験者をDichrostachys glomerata（DyglomeraTM）on body

選択し，無作為化二重盲検クロスオーバー試験のサ

weight and lipid parameters of healthy overweight

ブグループ解析によって，シルクフィブロインのparticipants. Functional Foods in Health and Disease.
2015; 5: 200-208.

HDL-C 増加作用を検証した。その結果，シルクフィ

9）上野紘郁，長島孝行，𠮷川育也：血糖および脂質に対ブロインの有意な HDL-C 増加作用が明らかとなっするシルクフィブロインの臨床的効果．FOOD Style

た（P ＝ 0.0032）。また，TC および LDL-C の増加抑制・低下作用ならびに TG 低下作用が確認された。このことは，シルクフィブロインの脂肪吸着多2015；19：20-24．
10）Ueno H, Nagashima T, Yoshikawa I: Eﬀect of silk ﬁbroinon improvement of lipid and glucose metabolism inhumans. Int J Integ Medicine, 2011; 25-31.

孔性構造および難消化性の性質によって脂質代謝が11）渡會伸治，渡會雪絵，𠮷川育矢，他：シルクフィブロ

改善された結果と考えられた。安全性については，

イン長期摂取による脂質代謝改善効果の検証．診療と有害事象は発現せず，また，理化学的，血液生化学

新薬 2017；54：586-592．

的検査，尿検査の結果に臨床上問題となる異常は観察されなかった。

12）日本人間ドック学会：新たな健診の基本検査の基準範囲 日本人間ドック学会と健保連による 150 万人のメガスタディー．2014 年 4 月

以 上， シ ル ク フ ィ ブ ロ イ ン の 摂 取 に よ っ て13）Nagashima T, Akai H: Ultrastructure of liquid ﬁbroin in

HDL-C の有意な増加が明らかとなったことは，よthe silk glands of silkworm, Bombyx mori. Int J Wild

26 （882）

診療と新薬・第 57 巻

Silkmoth & Silk 1993; 13: 35-38.

第 9 号（2020 年 9 月）18）U m I C , R i c o C a t h e r i n e W , K w e o n K Y , e t a l :14）Akai H, Nagashima T, Aoyagi S: Ultrastructure ofEnhancement of Lipid Metabolism and Antioxidant

posterior silk gland cells and liquid silk in indian tasar

Defense Status in Mice Fed with High Fat Dietsilkworm, antheraea mylitta drury（Lepidoptera:Supplemented with Antheraea pernyi Silk Fibroinsaturnidae）. Int J Insect Morphol Embryol 1993; 22:

Powder. Int J Indust Entomol 2011; 22: 95-100.

497-506.
15）Hess S, van Beek J, Pannell LK: Acid hydrolysis of silk19）阿部博幸，長島孝行，𠮷川育矢：シルクフィブロインによる糖尿病腎症における腎機能低下抑制作用の研究．

ﬁbroins determination of the enrichment of isotopically

第 16 回国際個別化医療学会学術集会（2013 年 5 月）．

labeled amino acids using precolumn derivatization and20）H i d a l g o I J , H i l l g r e n K M , G r a s s G M , e t a l :high-performance liquid chromatography-electrospray

Characterization of the Unstirred Water Layer in Caco-2ionization‒mass spectrometry, Analytic Biochem 311:

Cell Monolayers Using a Novel Diffusion Apparatus.

19-26, 2002.
16）社内資料「シルクフィブロインのアミノ酸組成」
17）小林謙一，松本雄宇，廣田弥里，他：脂肪食ラットにおけるシルク（家蚕・野蚕）パウダーの排便促進効果
お よ び 糞 中 脂 質 排 泄 促 進 効 果． 日 本 食 生 活 学 会 誌
2014；25：185-190．

Pharmaceutical Research, 1991; 8: 222-227.
21）陳開利，井浦克弘，高野亮，他：ラットの血中コレステロール濃度低下に対するフィブロイン投与の効
果，日蚕雑 1993；62：56-60．
22）平尾和子，五十嵐喜治，シルクフィブロインの特性と食品への利用．日本調理科学会誌 2013；46：54-58．