January 2002

Vol.70 No.1

高濃度←−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−−ブランク

共存物質の影響を受けにくいタンパク質の定量キット

Protein Blot Assay Kit wako
タンパク質定量用
タンパク質を効率的に PVDF 膜へブロットさせて、色素の発色によりタンパク質濃度を測定するキットです。

特 長  SDS（4%）や Triton X-100（2%）などの共存物質の影
響を抑える。
 定量範囲は 1 Blot を 20FL とした場合、0.4 〜 8Fg。
 液相法と比較して、タンパク質の種類による色調の差が少ない。
 発色試液はガラス、プラスチック器具への汚染が少ない。

キット構成 ・PVDF 膜・ろ紙・ブロッティング溶液
・洗浄液
・発色試液
・BSA 標準液 （2mg/mL）（96 Blot 用／ 480 Blot 用）
1 枚／ 5 枚
4 枚／ 20 枚
30mL ／ 150mL
30mL ／ 150mL
60mL ／ 310mL
1mL ／ 1mL

291-57001

96Blot 用

8,000 円297-57003

480Blot 用

28,000 円

詳しくは、p.22 をご参照下さい。

Wako

目 次
百年前の化学━━━━━━━━━━━━━━「1902 年の化学を顧みて」
芝
哲夫 ………2
総 説 ━━━━━━━━━━━━━━━━━「水質検査における大腸菌群検査 −新たな特定酵素基質培地−」 山縣 文夫 ……10シリーズ━━━━━━━━━━━━━━━━＜ Talking of LAL ＞「第 46 話 最近のカブトガニ事情」
土谷 正和 ……16
＜ How to 組織イメージング＞「第 6 回 非上皮性腫瘍（3）線維性組織の腫瘍」
石川喜美男、三瓶 接子、宮 哲正、
久川 芳三、牛込新一郎 ……………… 6＜脳科学一口メモ＞「パーキンソン病とその治療薬」
北村 佳久 ……20
テクニカルレポート━━━━━━━━━━━「ポリマ ー系親水性逆相抽出カラム PresepRPP の使用例 血中濃度モニタリング薬物分
析の前処理」
吉田貴三子 ……14
新製品フラッシュ━━━━━━━━━━━━
プロテインブロットアッセイキットワコー …1,22
キッコーマン ㈱ ルシフェール、ルシ パック、
ルミテスター …………………………………5
カルキトックス TM ……………………………84% パラホルムアルデヒド−りん酸緩衝液、グリ
セリン、ネオブルー ……………………………9
ELMEX AquaTest …………………………12
エストラジオール分析用溶媒、クロロフェノー
ル類標準品、農薬標準品、フタル酸エステル
分析用標準品 ………………………………13
昭 和 電 工 ㈱ Shodex 固 相 抽 出カートリッジ、
シコニン誘導体 ……………………………15
MIMOTOPES 社 固相有機合成用担体ランタ
ン 新型水溶性グラフトポリマー ……………17
Molecular Probes 社 チラミドシグナル増感検出キット ……………………………………18
DFI …………………………………………19
イノシトールりん脂質代謝関連物質 ………21
オリエンタル酵母㈱ エコスクエア …………23
リンパ球分離溶液（ヒト用）、㈱ シバヤギ レビス® インスリン- マウス（U タイプ ）…………24
ホスホイノシチド 3- キナーゼ p110C, ヒト , 組換え体 , 溶液、発色基質溶液 / 錠剤、㈱ ニッポン
イージーティー カスタムオリゴ合成サービス………………………………………………25
指示薬溶液 …………………………………26
ネガティブゲル染色 MS キット ……………27
プレ セップ® RPP、プレ セップ® -C アルミナ………………………………………………28

1
1

10

1902 年の化学を顧みて大阪大学名誉教授 芝放射性崩壊説が提唱されトリウムX が発見される

気をジュール-トムソン効果と断熱膨媒でそれに代る同等の活性を見出し素を分離するクロード式装置が発明さた 7）。

れ、Air Liquid 社の設計によって完成

手の F.Soddy がトリウムの放射能の崩された。
ドイツの C. V. Linde もこの年、

壊 現 象 を 詳 し く研 究 し、こ の 年、空気液化により酸素の大量採取を行っPhilosophical Magazine 誌上に The
Cause and Nature of Radioactivityている。

で、後にラジウムの同位体とわかるトリ
ウ ム X を 発 見 し、放 射 性 崩 壊 が

Nt=N0 ・e-kt の一次反応に従うという法3）

則を見出した 。

は鉄―マンガン―ビスマスの混合触張の原理で液化し、それを蒸留して窒イギリスの E. Rutherford とその助と題する論文を発表した 1、2）。その研究

アンモニアから硝酸を得るアンモ
ニア酸化法が開発される

Wi. Ostwald がアンモニアと酸素を白金触媒下で短時間で反応させることによって工業的に硝酸を得る方法を完成させた 4、5、6）。これをオストワルドのアンモニア酸化法といわれる。この方法は F. Haber と C. Bosch の空中窒素固定法と結びついて、19 世紀末のチリ硝石枯渇による硝酸供給に対する不安を解消する化学の勝利の基となった反応である。しかし Ostwald はこの触媒に高価な白金を使用していたのに

写真 2. Wi. Ostwald

対して、後に C. Bosch と A. Mittasch

写真 1. E. Rutherford

ギップスが統計力学書を著した
アメリカの J. W. Gibbs が熱力学の化学への応用を志し、この年に大著

Elementary Principles in Statistical
Mechanics を著し、統計熱力学の基礎を築いた。

空気液化による窒素、酸素の分離が行われる
フランスの G. Claude によって、空2

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

哲夫

写真 3. ドイツ Grossbothen の Ostwald の研究所 Haus Energie

触媒反応機構の定量的証明が行われる

蛋白質の鎖状ポリペプチド説が提唱される

W. Federlein は亜燐酸が過硫酸カ

F. Hofmeister 12）と E. Fischer13）

リウムとヨウ化水素の触媒で燐酸に酸が蛋白質はアミノ酸が酸アミド結化される反応において、はじめて触媒合によって鎖状に連結した構造のの中間反応機構の定量的証明に成功

分子であることをはじめて提唱し、

8）

した 。

Fischer はこれをポリペプチドと呼んだ。このポリペプチド説を実証す

活性水素定量法が開発されるるために Fischer は 1907 年にロイ
シン 3 分子とグリシン 15 分子を順

水酸基の活性水素はグリニヤール

次結合して、オクタデカペプチドを試薬マグネシウムヨードメチルと反応

合成し、蛋白質に類似する性質をさせて発生するメタンによって定量す認め、今日のペプチド化学の基礎ることができることが、L. Tschugaeff

を 築 い た 14）。そ れ に よって、E.

によってはじめて指摘された 9）。後にによって、この方法を定量化することをFischer はペプチド化学の父といわれ て い る。そ し て こ の 年、E.
Fischer は糖、プリンの合成の研究

試み、図 1 のような装置を使って、発生によってノーベル化学賞を受賞ししたメタンをガスビュレットに集めて体た。

T. Zerewitinoff は Tschugaeff の奨め

積を測定するという活性水素定量法を確立した 10）。さらに Zerewitinoff はこの定量法がカルボキシル基、スルフヒ

写真 4. 実験室における E. Fischer

ドリル基、アミノ基、イミノ基にも適用できることを証明した 11）。

ヒドロキシプロリン発見される

E. Fischer がゼラチンの加水分解物
中に蛋白質の構成アミノ酸としてはそれまで知られていなかった L- ヒドロキ
シプロリンを発見した 15）。このアミノ酸はゼラチンやコラーゲンなどの限られた蛋白質中にのみ存在するが、ゼラチ
ン中の含量は約 14％と多い。その水酸基の立体配置は 1940 年に至って金子武夫によって決定された 16）。

ペプチド合成のアジド法が開発される

T. Curtius によって、N 保護アミノ酸ヒドラジドに亜硝酸の作用で得られるアジドを用いて、現在でもペプチド結合形成反応に使われているアジド法が開発された 17）。
図 1.

Zerewitinoff の活性水素測定装置

写真 5. T. Curtius

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）3

ホルモンの呼称生まれる

光を顕微鏡で観察する限外顕微鏡を発明し、普通の顕微鏡では見えないコ

イギリスの生理学者 E. H. Starling

ロイド粒子を観察することに成功した。

乳酸の研究や幾何異性の研究を行と W. M. Bayliss は腸粘膜からセクレ

Zsigmondy はこの研究によって 1925

い、ライプチッヒ大学学長を務めたチンというペプチドが分泌され、膵臓

年のノーベル化学賞を受賞した。

Johannes Adolf Wislicenus（1835―1902）が 12 月 6 日に享年 67 歳で死去

からの膵液の分泌による消化を促進することを見出し、神経伝達とは異なる
化学物質による情報伝達があることをした。

油脂硬化法が開発される発見した。Starling はこのような化学

W. Norman は液状の不飽和脂肪酸

情報伝達物質のことをギリシア語の刺のオレイン酸をニッケル触媒を用いる

激するという意味の hormone ホルモ

接触水素化によって、固体の脂肪酸のニトロセルロースとニトログリセリン

ンと呼ぶことを提唱した。この 1 年前

ステアリン酸に変えることにはじめてから無 煙 火 薬コー ダ イトを 発 明し、

18）

エーベル逝くに高峰譲吉によって結晶化されてい成功した。この油脂硬化法はマーガ

ローヤルソサイエティ、ロンドン化学

たアドレナリンもホルモンであることにリンや石鹸製造に直ちに応用されて、会会長を務めた Frederick Augustus

19）

なった。

大きい工業的価値をもたらした染色体が遺伝子そのものであることが指摘されたコッパース式コークス炉作られる

メンデルの遺伝の法則は 1865 年にの高温乾留に用いられるコッパースの提唱されて以来、長く無視されていたコークス炉がこの年に作られた。この。

ドイツの H. Koppers によって石炭が、1900 年になって、H. De Vries ら

炉は多くの改良が加えられて、現在でによって再発見された。一方、細胞分も広く使用されている。

裂 に お け る 染 色 体 の 役 割 が W.

Flemming や E. van Beneden に よ って研究されていたが、1902 年にアメリカの遺伝学者 W. S. Sutton によって、わが国に電気化学工業始まる
野口遵、藤山常一らが三居沢にカー

染色体こそが メンデルの遺伝因子でバイト製造所を設立し、150W、電気あることが指摘された。

炉 1 基で操業を開始した。わが国の電気化学工業の初めである。

志賀潔が化学療法剤トリパンレッ
ドを発見

六桜社が設立される

ドイツの P. Ehrlich の化学療法の研杉浦六右衛門により新宿角筈に六究の助手を務めていた志賀潔が色素

桜社が設立され、生田益雄により印画

トリパンレッドに睡眠病の病原体のトリ紙の製造が開始された。小西六写真

パノゾーマを殺す作用があることを発工業の起こりである。

見した。化学療法の最初の研究といえる。

限外顕微鏡発明される

4

ウィスリツェヌス逝く

わが国ではじめて板ガラス製造が行われる
島 田 孫 市 が 岩 崎 俊 弥と提 携し て

ドイツの化学者 R.A. Zsigmondy は創った大阪の島田硝子製造所においコロイド粒子により光が散乱するティて、板ガラスの展延装置が完成して、ンダル現象を利用して、コロイド溶液

日本ではじめて板ガラスの製造が開に送られた光線の直角の方向の散乱始された。

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

Abel（1827―1902）がこの年 9 月 6 日に 75 歳で逝去した。
〔参考文献〕
1）Rutherford, E., Soddy, F. : Phil. Mag.,4, 370, 569（1902）.
2）Rutherford, E., Soddy, F. : J. Chem.
Soc., 81, 321（1902）.
3）Rutherford, E., Soddy, F. : Phil. Mag.,5, 445, 561, 576（1903）.
4）Ostwald, Wi. : Brit. P. 8 3000（1902 /1903）.
5）Ostwald, Wi. : US. P. 858 904（1902 /
1907）.
6）Ostwald, Wi. : Chemiker-Zeitg., 27,457（1903）.
7）Bosch, C., Mittasch, A. : D. R. P. 283
824（1914 / 1915）.
8）Federlein, W. : Z. Physik. Chem., 41,565（1902）.
9）Tschugaeff, L. : Ber., 35, 3912
（1902）.
10）Zerewitinoff, Th. : Ber., 40, 2023
（1907）.
11）Zerewitinoff, Th. : Z. Anal. Chem.,
50, 680（1911）.
12）Hofmeister, F. : Naturw. Rundschau,
17, 529, 545（1902）.
13）Fischer, E. : Chemiker-Ztg., 26, 939（1902）.
14）Fischer, E. : Ber., 40, 1754
（1907）.
15）Fischer, E. : Ber., 35, 2660
（1902）.
16）金 子 武 夫 : 日 本 化 学 会 誌、61, 207（1940）.
17）Curtius, T. : Ber., 35, 3226
（1902）.
18）Norman, W. : D. R. P. 141 029（1902 /1903）.
19）Hefele, J. : Chemiker-Ztg., 76, 769（1952）.

ルシフェラーゼによる衛生検査
ルシフェラーゼによる衛生検査
ルシフェール／ルシパック＆ルミテスター
従来の衛生検査は微生物を培地で増殖させてその数を測定していたため、検査の結果が出るまでに 2 日から数日を要していましたが、キッコーマンの ATP 測定試薬は、迅速・簡単・高性能。その場での測定を可能にしました。

■ ATP 測定・関連試薬キット〔ルシフェールの特長〕● ATP 抽出効率が高く、再現性の良い微生物測定が可能です。
● ATP 消去剤の併用で手軽に高感度の微生物測定が可能です。

ルシフェール 250 プラス
本 品 は、ル ミテ スタ ーを 用 い て
10-16mol の ATP まで測定が可能です。
高性能 ATP 抽出試薬が付属しており、夾雑物の多い試料でも高い抽出効果で再現性の良い微生物測定が行えます。
ATP 消去剤を併用して測定の妨害となる微生物以外の ATP を分解する
ことにより、最大で大腸菌にして 1,000

個 /mL（100 個 / 測定 ）までの微生物測定が可能です。
〔キット内容〕
 発光試薬50 回用× 5
50 回用× 5
50 回用× 5

 溶解液
 ATP 抽出試薬
300-09231

37,500 円

250 回用■ 清浄度検査キット
ルシパックⅡ〔特 長〕〔使用法〕● 綿 棒 一 体 型 で、簡 単・ス ピ ー
1
ディーにふき取り検査ができます。
● 作業者の手指や製造環境の清浄管
理にお使い頂けます。

2

3

4

綿棒ホルダーを持ち、綿棒を本体より引き抜きます。

検査対象物が乾燥している場合
は、
あらかじめ綿棒、または、
検査対
象物を水道水などで濡らします。

検査対象のふき取りを行います。

綿棒を本体に戻し、青いホル
ダーをゆっくりと上の切り込
みの所まで押し込みます。

5

6

7

8
ENTER

303-09221

100 回用ルシパック全体を数回振り下ろし、液を落とします。

29,000 円

溶け残った発光試薬を十分に溶かします。

測定チューブをスリットの部
分から折るようにして、本体から取り外します。

そのチューブをルミテスターの測定室に入れて、カバーを閉じます。ENTERボタンを押します。

■ ポータブルルミノメーター
ルミテスター C-100N〔特 長〕● 小型・軽量…大きさはビデオカセットサイズ、重さは 700g。
● 高感度・ワイドダイナミックレンジ…4 × 10-13 〜 1 × 10-6mol/L● 簡単・迅速…サンプルをセットしスタートボタンを押すだけ。
10 秒で測定できます。
307-09361
1台
550,000 円〔関連商品〕
コード No.
品
名307-09241 ルシフェール HS セット
302-09291 ルシフェール 250
304-09251 ルシフェール ATP 消去剤
301-09261 ルシフェール ATP 標準試薬302-09311 ルシフェール BH
306-09331 ルシフェール CT

容

量

100 回用250 回用250 回用
20 回用
22 回用
55 回用

希望納入価格（円）40,00031,00025,0005,000
20,00022,000

コード No.
品
名309-09321 ルシフェール Milk
303-09341 ルシフェール Meat
308-09531 ルシフェールサルモネラ
308-09411 専用プリンター
ルミチューブ 3.5ml 用
300-09351（1,000 本入り ）容量

100 回用
100 回用
45 回用
1台
1個

希望納入価格（円）45,00038,00039,00030,00012,000

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

5

第 6 回 非上皮性腫瘍（3）線維性組織の腫瘍線維組織から発生する腫瘍には、数多くあるが、ここでは紙面の都合上代表的な腫瘍について解説する。
線維腫
膠原線維主体の良性腫瘍で、皮膚の真皮や鼻咽頭などに発生しやすい。豊富な膠原線維の間に、紡錘形の線維芽細胞が見られる。一般的に硬い腫瘍を形成するが、脂肪を含む軟らかいものもある。また、球状〜太い線維状に増生した弾性線維が膠原線維と混在して見られる弾性線維腫も線維腫の 1 種で、高齢者の肩甲骨下に発生することが多い。これらの腫瘍の診断には、鍍銀染色、マッソ
ントリクロー ム染 色、エラスチ カワン
ギーソン染色などが用いられる。その他、神経線維腫などもあり、鑑別としてクリューバー・バレラ染色、ボディアン−石川法などの神経染色法が、また抗体とし

6

KIA 株式会社 ケーアイエー細胞病理研究所 石川喜美男、三瓶宮
哲正、久川株式会社 保健科学研究所
牛込新一郎
京浜予防医学研究所 診断病理センターて S-100 蛋白が用いられる。
線維肉腫
線維芽細胞から発生する悪性腫瘍で、皮下組織、軟骨、骨などに発生しやすい。
分化型では組織学的に、異型性を示す
紡錘形の線維芽細胞が充実性に束を形
成 し、魚 骨 様 形 態 像 herring-bonepattern を示すことが多い。組織像では太い膠原線維の間に、核異型や核分裂像のある腫瘍細胞が束状に配列して見られる。鍍銀染色で、膠原線維は褐色の太い荒縄状に見えることが多い。電顕像
では、膠原線維の間に存在する腫瘍細胞の粗面小胞体（r-ER）が発達、拡張しているのが特徴である。また、細胞密度の高い低分化型では膠原線維は少なく細網線維が多く見られる。腫瘍細胞の中には、HE 染色やマッソントリクローム染
色などで好酸性に染まる筋線維芽細胞も見られることもある。

接子
芳三

隆起性皮膚線維肉腫
腹壁などの幹に好発し、皮膚の表面に隆起状に発育する腫瘍。稀に遠隔転移をきたす場合もあり、良悪性の境界あるいは中間群に位置する。腫瘍は全体にわ た って 特 徴 的 な 花 むしろ模 様
storiform pattern を作る。鍍銀染色では、特に明瞭である。
悪性線維性組織球腫
一般的に組織球性腫瘍とされている悪性腫瘍だが、組織学的に種々の像を呈する。線維芽細胞様の紡錘形細胞と多形性を示す組織球様の性質をもつ細胞が、膠原化した基質の間に見られることが多い。鍍銀染色などで、花むしろ状配列 storiform pattern が多くの例で見られる。免疫学的検索では A − AT、A −ACT および CD68 などが陽性を示すことが多く、電顕像にもライソゾームが発達し組織球的性格が見られる。

図 1. 線維腫 左：HE 染色、右：マッソン・トリクローム染色 × 4．
皮膚に発生した腫瘍で、長い紡錘形の線維細胞や線維芽細胞からなる。全体的に膠原線維に富み、硬い腫瘍である。左では、膠原線
維が青色に染色され豊富なことが分かる。

図 2. 弾性線維腫 左：HE 染色、右：エラスチカ・ワンギーソン染色 × 4．
左では膠原線維に混じって、球状〜太い線維状の弾性線維が桃色に増生しているのが分かる。右では、弾性線維が黒紫色〜黒褐色、膠原線維は赤色、血管中膜の平滑筋線維は黄色に染色されている。

図 3. 線維肉腫 左：HE 染色、右：鍍銀染色 × 10．
左では束状に配列した腫瘍細胞は、herring-bone pattern を示している。右では豊富な膠原線維が褐色に染色される。

図 4. 線維肉腫（前図と同一症例） 透過型電子顕微鏡（以下 TEM と略）
× 2000.
細胞密度の高い部分の TEM 像で、核小体を認める腫瘍細胞の核は、不整形を示している。細胞の粗面小胞体（r − ER）は発達、拡張しているのが線維芽細胞の特徴でもある。

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

図 5. 線維肉腫 左：HE 染色、右：マッソン・トリクローム染色 × 4．
写真の中心部では、細胞密度が高い。右では中心が好酸性に染色され筋線維芽細胞が増殖している。

図 6. 線維肉腫（前図と同一症例） 左：鍍銀染色、右：酵素抗体法（desmin 抗体） × 4．
左では、周辺は膠原線維が豊富なため、褐色の中心部は黒色に鍍銀され、細網線維が豊富である。右は desmin で陽性を示す筋線維由来の細胞を認める。

図 7. 線維肉腫（前図と同一症例） × 20．
膠原線維の発達した部分で、腫瘍細胞は束状に配列し、核異型が目立つ。右では膠原線維は太い荒縄状に見える。細網線維はわずかに認められる。

図 8. 線維肉腫（前図と同一症例） 左：HE 染色、右：鍍銀染色 × 20．
比較的細胞密度の高い部分で核異型のある腫瘍細胞が増殖している。前図に比較し、右では膠原線維に乏しく、細網線維を多く認められる。

図 9. 線維肉腫（前図と同一症例） 左：マッソン・トリクローム染色（図 5右の拡大）、右：鍍銀染色 × 20．
左では核異型の強い腫瘍細胞の細胞質が好酸性に染色された筋線
維由来の細胞が認められる。右では膠原線維よりも細網線維が豊富である。

図 10. 線維肉腫（前図と同一症例） TEM 像 左：× 2000、右：× 7000．
線維芽細胞の腫瘍細胞の中に混じって、筋線維芽細胞も見られる。
粗 面 小 胞 体 r − ER が 発 達 し た 細 胞 質 に は 6nm 〜 10nm のmyofilaments が認められる。また、この細線維の中には密度の高い
細線維（focal desity）を有した部分も認められる。右はその拡大像である。この myofilaments はマッソン・トリクローム染色で好酸性に染色される。

図 11. 隆起性皮膚線維肉腫 肉眼像 × 1．
真皮、皮下を侵す線維性腫瘍で、皮膚表面に隆起している。

図 12. 隆起性皮膚線維肉腫 左：HE 染色、中：マッソン・トリクローム染色、右：鍍銀染色 × 10.
この腫瘍の特徴的な像である、花むしろ模様を認める。右の鍍銀像
では、この形態が明瞭に分かる。

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

7

図 13. 悪性線維性組織球腫 左：HE 染色 × 10、右：鍍銀染色 × 20．
大小不同のある腫瘍細胞が多数認められ、クロマチンの増量したもの、核異型のあるものなど多彩な像を示している。右では、膠原線維が褐色調に見え「花むしろ状配列 storiform pattern」を呈している。

図 14. 悪性線維性組織球腫（前図と同一症例） 酵素抗体法（左：ビメンチ
ン抗体、右：CD68 抗体） × 20．
ビメンチン抗体では陽性に染まる線維芽細胞様の腫瘍細胞が多数認められる。右では大型の多核の組織球様細胞が組織球系マーカーである CD68 抗体に強陽性を示している。

図 15. 悪性線維性組織球腫（前図と同一症例） TEM 像 × 2000.
拡張し発達した粗面小胞体を認め線維芽細胞の特徴を示す。腫瘍細胞内にはライソゾーム（Ly）や細胞突起が見られ、組織球様の性格ももっている。

図 16. 悪性線維性組織球腫（前図と同一症例） TEM 像 × 2000.
多核で核異型のある腫瘍細胞の細胞質にはライソゾームが認めら
れ、細胞膜には小足が認められる。また、粗面小胞体も発達し、線維芽細胞由来の性格ももっている。

〔参考文献〕
1）石川栄世 , 遠城寺宗知 , 牛込新一郎 他 : 軟部腫瘍アトラス . 東京文光堂 . 第一版第一刷 . 1989.
2）石川喜美男 , 三瓶接子 他 : 軟部腫瘍の免疫組織化学と電顕像−低分化な軟部腫瘍への応用−. 第 20 回日臨技病理研修会テキスト . 1994.
3）田所衛 , 石川喜美男 , 三瓶接子 他 : 実践病理組織細胞学カラー図鑑 . HBJ. 1997.

脱脂もできる脱灰液
KalkitoxTM（カルキトックス TM）
病理研究用
脱灰の前処理として、骨、歯は十分ります。カルキトックス TM は低温脱灰に固定されていることが重要である上、 （4℃ 冷蔵庫内）も可能です。脱灰完了
脂肪組織を多く含む骨組織は脱灰液

後は、硫酸ナトリウム溶液で数時間〜の浸透をよくするためにアルコール系

一晩中和処理し、十分水洗して下さい。

列等による脱脂が必要とされています。

その後は、脱水・中間剤処理・パラフィ

本品、カルキトックス TM はある程度のン包埋へと工程を進めて下さい。

脱脂作用も兼ね備えた脱灰液として〔組

そのままお使い頂けます。また、低温脱灰が可能であり、免疫染色にも適し

図 1. 大腸がん（腺がん）の骨転移 HE 染色 × 20.
（低温脱灰）
核はヘマトキシリンに細胞質はエオシンに染色されている。粘液や骨は淡青色に染色されている。

成〕

塩酸、EDTA を主成分として調製し
ています。

ています。
〔保存方法〕〔使用法〕

25℃ 以下保存

固定処理された組織を脱灰液カル
キトックス TM に浸漬します。脱灰液は112-00651

1L

3,600 円

通常、組織重量の約 50 〜 100 倍量を

図 2. 同一症例 酵素抗体法（変異型がん抑制遺伝子 p53 抗体） × 20.（低温脱灰）腫瘍細胞の核に陽性を示している。

使用し、途中、新しい液に交換するこ（写真提供とをお勧めします。脱灰時間は約一晩ですが、組織の大きさにより多少異な8

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）〔関連商品〕 脱灰中和剤
コード No.
196-11985

品 名
5% 硫酸ナトリウム溶液

株式会社ケーアイエー細胞病理研究所
石川喜美男先生）

規 格
病理研究用

容

量

500mL

希望納入価格（円）3,000

4% Paraformaldehyde Phosphate Buffer Solution
組織固定用
酵素組織化学・免疫組織化学用、また電子顕微鏡検査用固定液としてパラホル■ 染色例

ムアルデヒドを使用した各種固定液が知られていますが、中でも 4％パラホルム
アルデヒド- りん酸緩衝液は最も汎用で基本的な固定液です。免疫染色法ではタンパク系抗原の固定に使用されます。
本品は調製済みですので非常に便利です。
■ 組成
パラホルムアルデヒド（組織固定用グレードを使用）…… 20gヒトリンパ節（L-26）× 40

0.1mol/L りん酸緩衝液（pH 7.4）……………………… 500mL

163-20145

500mL

2,300 円075-04751

250mL

照

蛍光顕微鏡用封入剤
Glycerol
蛍光顕微鏡用
蛍光抗体法の標本作製時に使用さ〔規格〕

れる低蛍光ブランクの封入剤です。各含量（GC）：99.0% 以上

種グリセリン系封入剤調製用の他、蛍実用試験：試験適合

光標識二次抗体の溶解時、また保存液にも使用されます。

青色シリカゲル青色シリカゲル会

コバルトフリー

Neo BLUE
本品は、有機系色素をインジケーターとして含有する青色シリカゲルです。
従来の塩化コバルトを使用したタイプと比較して、より安全にご使用いただけます。
吸湿による色の変化は、従来通り青色から赤色です。

吸湿前

相対湿度 20％

相対湿度 50％

再生法：100 〜 130℃ で 3 時間乾燥
コード No.
145-07361
143-07367
142-07371
140-07377
149-07381
147-07387

品

名

Neo BLUE，1 〜 2mm （粒度 1.18 〜 1.7mm：60％以上）
Neo BLUE，2 〜 4mm （粒度 1.7 〜 4mm：90％以上）
Neo BLUE，3 〜 5mm （粒度 3.35 〜 4.75mm：80％以上）

容

量

500g
13kg
500g
13kg
500g
13kg

希望納入価格（円）
照

会

照

会

照

会

照

会

照

会

照

会

〔関連商品〕（インジケーター：塩化コバルト）
コード No.

品

名191-00445

Silica Gel, Small Granular（1 〜 2mm）blue（with moisture indicator）

192-00475

Silica Gel, Medium Granular（2 〜 4mm）blue（with moisture indicator）

198-00477
199-00505
195-00507

Silica Gel, Large Granular（3 〜 6mm）blue（with moisture indicator）

容

量

500g
500g
12.5kg500g
12.5kg

希望納入価格（円）
1,470
1,250
照

会

1,350
照

会

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）9水質検査における大腸菌群検査―新たな特定酵素基質培地―
財団法人 東京顕微鏡院 立川研究所 山縣

1. はじめにに調べられています。一方の大腸菌群は先に述べた糞口サークル、即ち糞便性の病原菌を含む汚水などによって汚染されているかどうかを知るために検査されています。
消化器系病原菌の汚染指標菌としては、病原菌の存在と並行することなど幾つかの条件がありますが、水系が糞便汚染された場合に大腸菌群は条件に合致する他の汚染指標菌よりも多数存在するため、上水の安全性確保観点から最適の指標と考えられています。

文夫

便を来しますし、陰性に準じて利用し続けていて陽性であった場合には大きな問題となりかねません。
1989 年、アメリカ Environmental
Protection Agency（EPA）は MMO− MUG（Minimal Medium ONPG −MUG 培地）法を正式に採用しました 4）。
この方法は従来の大腸菌群の定義とは離れて、乳糖の分解に欠かせない
B‐ガラクトシダーゼ活性が陽性であることを新たな定義と考えたものです。
B‐ガラクトシダーゼ活性により培地中（o‐ニトロフェニル‐B‐D‐ガの ONPG
ラクトピラノシド）を栄養素として発育できる菌が存在すれば培地色が黄変ことを指標にしています。
する（図‐2）
さらに、目的菌の増殖に必要な最少の栄養素だけを含む培地として他の菌の発育を抑制します。この方法では大腸菌群を構成する最も重要な菌種である大腸菌の一部が乳糖分解時にガスを産生せず、従来法では陰性となる問題を解決できます。この例のように
MMO − MUG 法では従来法よりも広い範囲の菌を陽性として捕らえると考

上水（飲料水）の供給源として水道を普及させた最も強い動機の一つがいわゆる「消化器系伝染病」の蔓延といわれています。例えばコレラは 19
世紀以降だけで 6 回の Pandemie が知られており、その余波で我が国でも明治時代に大流行があり、年間 10 万人以上の死者を出したことが 2 回も記録されています。我が国の代表的な経口伝染病である赤痢（現在は 2 類感染症に分類されます）は 1960 年代を節目として急速に患者数が減少しました2. 大腸菌群とその検査法が、その理由は患者の強制隔離よりも
糞口サークルを遮断できる生活環境
大腸菌群は 従来からの定義では、を実現したことにあると考えられてい「グラム陰性、無芽胞の桿菌で、乳糖
ます 1）。 この遮断に水道の整備が大きを分解して酸とガスを産生する好気性な役割を果たしたことは明らかです。
または通性嫌気性の菌」とされていま
しかし、最近でも飲料水による集団す。この定義は一群の属、種などに共感染症がしばしば認められています。
通するものではないため、同じ菌種で
例えば 1982 年に井戸水によるカンピも菌株毎に当てはまるものとそうでな
ロバクターと毒素原性大腸菌の混合いものがあります。水を試料とする場
感染があり、7,751 名の患者が発生し合には LB − BGLB 法（乳糖ブイヨン
ました。その後も時々水系感染による−ブリリアントグリーン乳糖胆汁ブイヨ
カンピロバクター症が報告されていま
ン培地法）で検査をす。1998 年に飲料水を介して 700 名
行うことが一般的で3倍濃度LB培地
試料水50ml 推定試験
以上の集団赤痢の流行がありましたし、 す。その概略を図‐1
36±1℃､48時間±3時間
1999 年には長野県で 15 世帯 73 名にに示します。試験はガス産生
3 段階からなり、その供給されていた小規模水道による腸BGLB培地
確定試験
培養時間は推定試験
管出血性大腸菌 O157 の流行が見られました。水道から供給される「水」はで 48 時 間、確 定 試
36±1℃､48時間±3時間
験 で 48 時 間、完 全
微生物学的に見て安全性が保証されガス産生試験で 24 ＋ 48 時間ていることが重要となります。
となりますので、培上水に関連する微生物試験には目EMB寒天平板培地
完全試験
養時間だけでも計 7
的別に、水質基準項目、原水の汚染指36±1℃､24時間±2時間
日間となります 2）,3）。
標、水の異臭味及び着色、水道施設へ
明らかな陰性の場合の障害、などがあり、種々の微生物にLB培地
普通寒天斜面培地
は 2 日で結果が得ら
ついて検査が行われています。このな
36±1℃､48時間±3時間れますが、疑陽性とかで最も重要なものが、水道法による
ガス産生
グラム染色
なると 1 週間以上も水質基準に収載されている一般細菌必要となり、最終的と大腸菌群の二つです。一般細菌はグラム陰性､無芽胞､桿菌
乳糖分解に陰性の場合でもそ原水が様々な処理を受け、最後に確実
図‐1. LB − BGLB 法の概略の間は陽性に準じてな塩素処理などの消毒を受けたか、
推定試験、確定試験、完全試験の各段階毎に使用する培地、判定基準、培養時間を示す。
扱えば水の利用に不その質が保たれているかを知るため

10

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

CH2OH
NO2
O
HO
H
O
OH H
H
H
H
OH

CH2OH
O OH
HO
H
OH H
H
H
H
OH

β‐ガラクトシダーゼ
加水分解
pH 7〜8o‐ニトロフェニル‐β‐D‐
ガラクトピラノシド（ONPG)
（無色）

NO2

+

HO

o‐ニトロフェノール

β‐D‐ガラクトース（黄色）

図‐2. β‐ガラクトシダーゼによる ONPG の加水分解と o‐ニトロフェノールの遊離による黄
色への発色
H

COOH
O
H
OH H

O

O

H

β‐グルクロニダーゼ
加水分解

H

HO

O

OH

COOH
O OH
H
OH H
H
HO
H
OH

HO

H

O

O

+
CH3

CH3
4‐メチルウンベリフェリル‐β‐D‐
グルクロニド（MUG)（無色）β‐D‐グルクロン酸

4‐メチルウンベリフェロン（青紫色の蛍光）図‐3. β‐グルクロニダーゼによる MUG の加水分解と 4‐メチルウンベリフェロンの遊離による蛍光（青紫色）の発生

針では 1996 年に発行された追補の参考に、発色（発光）酵素基質法として数種類の合成酵素基質が収載されており 7）、数社から粉末培地やキットとして市販されています。これらは既に広く利用されています。
2001 年版の上水試験方法には、こうした特定酵素基質を組合せた大腸菌群検査法が新たに 3 方法追加収載（表‐
され、合計 4 方法となっています。
1）
今回の上水試験法の改訂に際して
X‐GAL − MUG 法 8）のキット 2 種を中心に検討に参加する機会を得ました。
それぞれのキットには特性があり、標準菌株を用いた検討でキットによって検出し難い菌株がそれぞれにあることが明らかとなりましたが、全体としては基準とする MMO − MUG 法とほぼ一致する結果となりました。各地の水
道原水を用いた検討で、X‐GAL −MUG 法キットは MMO − MUG 法のキットとよく相関する結果を得ました。
特定の原水で 24 時間培養では陽性となり難いとの指摘もありましたが、標準菌株での検討から推測できるように、キット間の特性の差が影響したものであり有意の差ではないと考えています。
さらに、X‐GAL − MUG 法キットの一つに、基本試薬組成は変更せずにピルビン酸などを添加して（ピルビン酸添加 X‐GAL − MUG 法 9）キットとは組成が異なります）損傷菌の発育支持能力を高めたキット（AquaTest 10）

えられています。したがって、MMO
普及しているとは言い難い状況にあり− MUG 法と従来法では結果が乖離ます。
することもありますが、B‐ガラクトシ
ダーゼは乳糖の分解に関与する特異3. 特定酵素基質培地
酵素であり、乳糖非分解の B‐ガラクトONPG や MUG は特定の酵素によシダーゼ陽性菌は潜在的乳糖分解菌
り分解されるため「特定酵素基質」と呼と考えられるため、より確実に大腸菌群を検出できるとも考えられています。 ばれています。特定酵素基質としては
他に B‐ガラクトシダーゼの基質として何よりこの方法では 24 時間で従来法
X‐GAL（5‐ブロモ‐4‐クロロ‐3‐インドの確定試験の結果に相当する結果がリル‐B‐D‐ガラクトピラノシド）や得られるため、大幅な時間短縮が可能
PNPG、MAGENTA‐GAL などが、となりました。さらに、MUG が大腸菌
B‐グルクロニダーゼの基質として X‐に特異な酵素とされる B‐グルクロニ
GLUC も知られています。X‐GAL はダーゼの基質であるため、大腸菌が我が国でも食品検査の分野ではおよ
存在すれば MUG（4‐メチルウンベリ
が分解さフェリル‐B‐D‐グルクロニド）
そ 10 年前から MUG と組合せて迅速れて青紫色の蛍光を発する 4‐メチルな大腸菌群・大腸菌検出試薬として利ウンベリフェロンとなる（図‐3）ため、用されてきています。食品衛生検査指24 時間後に蛍光を調べること
表-1. 特定酵素基質法として上水試験方法 2001 年版に収載された 4 方法の組成
で大腸菌の有無を知ることも（上水試験方法 2001 年版より一部を改変して使用）5）
できます 。
MMO-MUG 培地
IPTG 添加X‐GAL‐MUG 培地 ピルビン酸添加
こ の MMO − MUG 法 は
ONPG-MUG 培地
X‐GAL‐MUG 培地
ONPG
X‐GAL
X‐GAL
1992 年に水質基準に関する β‐ガラクトシダーゼの基質 ONPG
IPTG
IPTG
IPTG
β‐グルクロニダーゼの基質
MUG
MUG
MUG
MUG
省令で追加採用され（1993 年
他の栄養素
トリプトーストリプトース
ペプトン
6）
版の上水試験方法 に収載さトリプトファン
トリプトファン
ソルビトール
ピルビン酸 Naれました。
）、従来法とともに利
塩類
塩化 Na
塩化 Na
塩化 Na
塩化 Na
塩化 Ca
硝酸 K
用 さ れ て き ま し た。現 在、硫酸 NH3
硫酸 NH3
MMO − MUG 法は培地を構
硫酸 Mg
硫酸 Mg
硫酸 Mn
成する成分の一つが一般には
硫酸 Zn
亜硫酸 Na
入手できないため 1 社のみが
その他
ソラニウム
ラウリル硫酸 Na
ラウリル硫酸 Na
ラウリル硫酸 Na
発売しており、比較的高価な
アンホテリシン B
緩衝剤
HEPES
TMAO
リン酸ニ水素 K
リン酸ニ水素 Kため、その迅速・正確・簡便とHEPESNa
リン酸水素ニ K
リン酸水素ニ K
いった特長にも関わらず広く pH
7.3 ± 0.1
6.2 ± 0.1  7 〜 8 6.8 ± 0.1
7.1 ± 0.2

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）11

4. おわりに

35

35

AquaTest 10
MMO-MUG法

30

P法
LB法

25
20
15
10

AquaTest 10
MMO-MUG法30
陽性管数（30本中）陽性管数（30本中）を 新 た に 検 討しまし た。対 照 に は
MMO − MUG 法、ピルビン 酸添加
X‐GAL − MUG 法（以下「P 法」）、LB
法（LB − BGLB 法のうち推定試験部分のみを 2 倍濃度 LB 培地で実施）を用いました。
図‐4 は大腸菌群で最も重要な菌種の E.coli、図‐5 は C.freundii での結果の 1 例です。菌の濃度はおよそ103 個 /mL、菌に損傷を与えるため約0.15 mg/L の塩素で 0 〜 300 秒処理してあります。同じ菌種でも菌株により成績は多少異なりますが、基本的には
図‐4、5 に示すとおり、MMO − MUG
法及び P 法との間では 37℃、24 時間
培養後の結果に有意の差は見られません。本誌 Vol.69 No.4 にお示しした
ように、他の大腸菌群を代表するような菌種でも有意差は見られません。
水道の原水となる河川水 5 種を用いての結果も本誌 Vol.69 No.4 で御紹介しましたが、その際同時に測定した蛍光の有無で大腸菌に限った MPN を求め、MMO − MUG 法と比較した結果を表‐2 に示します。塩素 180 秒接
触後の MPN はほとんど 1.8 未満とな
る た め 省 略 し まし た が、MMO −MUG 法及び P 法と比べて同等かそ
れ以上の値が得られ、大腸菌の検出に優れた能力を有していると考えられま
す。

P法
LB法

25
20
15
10

5

5

0

0
0

15

30

60

120

300

0

15

塩素接触時間（秒）

30

60

120

300

塩素接触時間（秒）図-4. 4方法間の陽性管数の比較（E.coli）

図-5. 4方法間の陽性管数の比較（C.freundii）

図‐4,5. E.coli と C.freundii の約 103 個 /ml の菌液を AquaTest 10、MMO − MUG 法、P 法、
LB 法（2 倍濃度 LB 培地）の各培地 30 本に 10ml ずつ投入し、37℃ 24 時間後（LB 法は 48 時間後）に陽性となった培地数を表す。横軸は菌を約 0.15mg/l の濃度の塩素で処理した時間を表す。
表‐2. 5 種の河川水を用い、塩素処理前について 5 本法による大腸菌の MPN を求めた。判定は 37℃ 24 時間後に行なった。測定は各試料につき 2 回ずつ行なった。
試料 1
1 回目
2 回目

試料 2
1 回目
2 回目

試料 3
1 回目
2 回目

試料 4
1 回目
2 回目

試料 5
1 回目
2 回目

AquaTest 10

2

0

70

22

17

13

0

0

0

0

P法

2

0

11

6.8

4.5

7.8

0

0

0

4

MMO‐MUG 法

0

0

17

14

21

6.8

0

0

0

2

とから、黄色の o‐ニトロフェノールを遊離する ONPG に比べて試料の持つ背景色の影響を受け難く、判定のし易い検査方法が利用できるようになりました。また、MMO − MUG 法のキットに比べて X‐GAL 系のキットは遥かに使用し易い価格です。手間はかかるが経済的と考えられている従来の LB− BGLB 法と比べても、培地の作製に必要な手間や試薬、器具、機器、スペースなどの費用を考慮し、結果が24 時間で得られることや確定試験が必要ないことなどを考え合わせると、
X‐GAL を用いた検査キットは経済性にも優れており、迅速性と正確性を考えるとむしろ望ましい検査方法であると思われます。

〔参考文献〕
1）小 張 一 峰 p8 〜 15 健 康と環 境 No.1
1987 編集発行：財団法人東京顕微鏡院
2）上水試験方法 2001 年版
発行所：社団法人日本水道協会
3）上水試験方法 解説編 2001 年版
発行所：社団法人日本水道協会
4）Federal Register, 54 P27544 〜 27568& P29998 〜 30002, 1989
5）Edberg,S.C., et al; Appl. Environ.
Microbiol. 54 P1595 〜 1601, 1988
6）上水試験方法 1993 年版
発行所：社団法人日本水道協会
7）食品衛生検査指針 追補 2 1996 年
監修 厚生省生活衛生局
発行所：社団法人 日本食品衛生協会
8）Brenner, K. P., et al; Appl. Environ.
Microbiol. 59 P3534 〜 3544, 1993
9）小高 秀正 ; Nissui Technomedia, 4 P36〜 52, 2001

今回の改訂により大腸菌群の検査
方法に複数の特定酵素基質法が収載されましたので、検査する側の選択の幅が広がりましClO
た。特に、B‐ガ
Br
CH2OH
CH2OH
Cl
Cl
O
O
H
OH
OH
OH
ラクトシダーゼ
OH
O
Br
Br
N
H
H
OH H
OH H
N
+
の基質として青
H
H
H
H
H
N
N
H
H
酸 化 BrOH
OH
β‐ガラクトシダーゼ
OH
H
色のインジゴ系
Cl
5-ブロモ-4-クロロ-3-インドリル-β-D-ガラクトピラノシド
β-D-ガラクトース 5-ブロモ-4-クロロ-3-インドリン
ブロモ-クロロ-インディゴ
色素を遊離する（青色）
X-GAL
X‐GAL（図‐6） 図‐6. β‐ガラクトシダーゼによる X‐GAL の加水分解と 5‐ブロモ‐4‐クロロ‐3‐インドリンの遊離から酸化縮合によるブ
ロモ‐クロロ‐インディゴの生成による青色への発色が認められたこ

水中の大腸菌群・E. coli 検査用培地（X-Gal-MUG 培地（ピルビン酸ナトリウム添加））
コード No.
305-09421
302-09431

12

メーカーコード
AT-10
AT-50

品
AquaTest 10
AquaTest 50

名

容

量

10mL 用× 200 本入
50mL 用× 100 本入

希望納入価格（円）28,00040,000※サンプルご希望の方は、資料請求カードにてお申込み下さい。
和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

環境中のエストラジオールの分析に！

〔関連商品〕 環境分析用溶媒

Dichloromethane

コード No.

エストラジオール分析用

品

名

500mL
500mL

1,900

015-17825 Acetonitrile
041-28055 Dichloromethane

500mL

2,600

048-28065 Diethyl Ether
Ethyl Alcohol055-06895（99.5）
085-07655 Hexane

500mL

4,200

500mL

4,000

500mL
500mL

1,800

018-17815 Acetone

環境ホルモンの一つと言われているエストラジオール分析の際の抽出溶媒としてお使いいただけます。
安定剤： 2-Methyl-2-butene
0.0005 〜 0.005％〔規 格〕
含量（GC）：99.0％以上
エストラジオール分析適合性：適合043-28375

2,700 円

500mL

量 希望納入価格（円）

容135-13855 Methanol

2,600

1,800

クロロフェノール類標準品
クロロフェノー ル 類 は、2,4-D や

2,4,5-T といった農薬の中間体等、各種製品原料として製造されています。
しかしこれらは、難 分 解 性であるといった性質から、しばしば完全に焼却処分されずダイオキシン類の前駆物
質となることが知られています。また、これらの物質は、上水試験法でも基準項目として測定されているものもあり
ます 1）。
この度、当社ではクロロフェノール類の標準品、サロゲート類を在庫しま

非標識クロロフェノール類
コード No.
505-34371
509-34391
505-37311
501-34611
049-26611
508-34621
506-34421
505-34631
502-34641
509-34651
506-34661
503-34671
503-34431
203-15481
504-34461
501-34471
508-34481
505-34491
161-08301

メーカーコード
A-013
A-014
A-015
A-016
−
A-018
A-019
A-020
A-021
A-022
A-023
A-024
A-025
−
ERT-039
DLM-2428-0.1
ULM-2429-0.1
ULM-2430-0.1
−

品
名
規 格
2-Chlorophenol〔ACS〕−
3-Chlorophenol〔ACS〕−
4-Chlorophenol〔ACS〕−
2,3-Dichlorophenol〔ACS〕−
2,4-Dichlorophenol Standard
環境分析用
2,5-Dichlorophenol〔ACS〕−
2,6-Dichlorophenol〔ACS〕−
3,4-Dichlorophenol〔ACS〕−
3,5-Dichlorophenol〔ACS〕−
2,3,4-Trichlorophenol〔ACS〕−
2,3,5-Trichlorophenol〔ACS〕−
2,3,6-Trichlorophenol〔ACS〕−
2,4,5-Trichlorophenol〔ACS〕−
2,4,6-Trichlorophenol Standard
残留農薬試験用
3,4,5-Trichlorophenol〔CER〕−
2,3,4,5-Tetrachlorophenol 〔CIL〕−
2,3,4,6-Tetrachlorophenol 〔CIL〕−
2,3,5,6-Tetrachlorophenol 〔CIL〕−
PCP Standard
残留農薬試験用

100mg
100mg
100mg
100mg
500mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
100mg
200mg
100mg
100mg
100mg
100mg
200mg

容

量

品
名
2-Chlorophenol（ring − D4,99%）
2,4-Dichlorophenol（ring-D3,98%）
2,4-Dichlorophenol（ring-D4,98%）
2,4,5-Trichlorophenol（ring-D2,98%）
2,4,6-Trichlorophenol（ring-D2,98%）
13
Pentachlorophenol（ C6,99%）

100mg
100mg
100mg
100mg
10mg
10mg

希望納入価格（円）
3,600
3,600
3,600
3,600
5,000
3,600
3,600
3,600
3,600
3,600
3,600
3,600
3,600
照 会
10,00014,40014,40014,4005,000

サロゲート類した。
〔参考文献〕
1）「上水試験方法」，p468，（日本水道協会）（2000）.

コード No.
502-34381
502-34401
509-34411
500-34441
507-34451
508-34501

メーカーコードDLM-1638-0.1
DLM-1359-0.1
DLM-1669-0.1
DLM-2143-0.1
DLM-3093-0.01
CLM-661-0.01

容
〔CIL〕
〔CIL〕
〔CIL〕
〔CIL〕
〔CIL〕
〔CIL〕

量

希望納入価格（円）18,80031,90034,10053,80018,80034,100

ACS:AccuStandard Inc., CER:Cerilliant, CIL:Cambridge Isotope Laboratories, Inc.

農薬標準品

追加 2 品目！

フタル酸エステル分析の標準品 追加！

Bifenazate Standard

Famozadone Standard

残留農薬試験用

残留農薬試験用外 観：白色結晶性粉末
溶解性（20℃）：水 3.76mg/L

外 観：白色粉末
溶解性（20℃）：水 0.243mg/L（pH 5）、 フタル酸エステル試験用
水 0.111mg/L（pH 7）、ア セ ト ン〔規 格〕
274g/L、ジクロロメタン 239g/L
含量（cGC）：98.0％以上

Di-n-octyl Phthalate
StandardO
NHNHCOOCH(CH3)2

O

OCH3
O

O

O

C

O(CH2)7CH3

N
HN

C

O(CH2)7CH3

O

C17H20N2O3 ＝ 300.35

026-14671

200mg

20,000 円

C22H18N2O4 ＝ 374.39

068-04201

200mg

20,000 円

C24H38O4 ＝ 390.56

044-28361

1g

8,000 円和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

13

ポリマー系親水性逆相固相抽出カラム Presep-RPP の使用例
血中濃度モニタリング薬物分析の前処理
和光純薬工業株式会社

近年、HPLC 及び GC 分析の試料前処理法として固相抽出法は、簡便性、迅速性、省力化の点で有用性が高く、従来の液液抽出法に代わって普及し
てき ています。充 て ん 剤として は、ODS シリカゲル充てん剤が多く使用されていますが、固相抽出する目的成分によって充てん剤中の残存シラノー
ル基や微量金属イオンの影響を受けやすいものがあります。Presep-RPP
は ODS と同様に逆相的な挙動を示す
スチレンジビニルベンゼン- ポリメタ
クリレート系の親水性ポリマーを充てんしたカートリッジカラムで、ODS 充
てん剤に比較して①極性化合物の保持が大きい、②塩基性化合物の吸着が少ない、③使用可能な pH 範囲が広い、などの利点があり、ODS シリカゲ
ル充てん剤では回収困難であった成分の固相抽出に最適です。
血中濃度のモニタリングが必要とされ ている薬 物 分 析の前 処 理として、
Presep-RPP を使用し良好な回収率を得ることができました。以下に塩基性の薬物である抗不整脈薬、プロカイン
アミドとその代謝物 N- アセチルプロ
カインアミドの血中濃度分析例をご紹

mAU

標準液

標準添加血清

17.5

17.5

15

15

12.5

12.5
2

10
7.5

7.5

5

5

2.5

2.5

0

0

0

5

1

10

1

10

min

0

2

5

10

min

Sample1 Procainamide HCl
2 N-Acetyl Procainamide HCl

HPLC conditions
Column
WS-II 5C18 RS, 4.6 × 150mm
Eluent
CH3CN/20mM Na2HPO4,
NaH2PO（pH7.6）=13/87（v/v）
4
Flow rate
1.0ml/min. at 40℃
Detections UV 254nm
Injection vol. 10[lStd. sol.
5[g/ml（CH3OH）
Fig.
2.
Fig 2.
Table 1.

固相抽出カラム※
Presep-RPP（60mg）※商品については p.28をご参照下さい。

抽出条件
固相抽出カラムコンディショニング： ① CH3OH 3ml② りん酸緩衝液

123ml

回収率（%）
Procainamide
N-Acetyl Procainamide
n=4
平均回収率（%） CV（%） 平均回収率（%） CV（%）
標準液
101.6
2.3
97.6
2.9
牛血清添加
96.1
4.3
95.0
2.1

Table 2. 薬物回収率（標準液：n=4）

血清検体：血清1ml＋りん酸緩衝液1ml混合してカラムに通す。
（薬物標準品を5[g添加）
洗浄：りん酸緩衝液

1ml

薬

物

名

平均回収率（%）CV（%）

1dl-Propranolol Hydrochloride

99.3

0.5

2

Doxepin Hydrochloride

100.3

0.7

脱水：空気 or N2ガスを5分間

3

Trimipramine Hydrochloride

96.9

1.5

溶出：CH3OH 1ml

4

Theophirin

100.3

0.9

HPLC 10[l5p-Acetamidophenol

98.8

0.8

※りん酸緩衝液：20mMりん酸緩衝液（pH 7）※血清：牛胎児血清

6Caffeine

100.2

1.0

7

Sulfamerazine

100.7

0.4

8

Salicylamide

100.8

0.3

Fig. 1.

14

peutic Drug Monitoring）で示されている治療域濃度の測定が可能でした。
また、同様の抽出条件で、Table.2に示した薬物なども血清中から除タン
パクし回収することができます。
最適サイズのカラム選択により、目的成分、濃度、検体量、分析方法、など諸条件に合わせた効果的な前処理が可能となると考えます。

介します。固相抽出カラムで血清の前処理、除タンパク後、溶出した薬物をHPLC 法で分析しました。
Fig.1 に抽出条件を、Fig.2 に HPLC
分析例を Table.1 に回収率結果を示しました。
ODS シリカゲル充てんの固相抽出
カラムでは高回収率が難しいプロカイ
ンアミドのような塩基性薬物も良好に
回 収 することが で き TDM（TheramAU

試薬研究所 吉田貴三子

固相抽出条件

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

サンプル前処理用
サンプル前処理用
Shodex 固相抽出カートリッジ
環境ホルモン・薬物前処理用 SPEC EDS-1 シリーズ
● 環境ホルモン
フェノール性の OH 基を有する物質やエストラジオール抱合体の濃縮に有
用です。
● 薬物
生体液中の薬物及びその代謝物を高い回収率で得ることができます。また、タンパク質などの夾雑成分除去率が高いため、LC ／ MS 分析用の前処理
カートリッジとして好適です。
充てん剤：N- ビニルアセトアミド含有親水性共重合体（50 Fm ）コード No.
633-03151
630-03161
637-03171
630-03183
631-03191
634-03201

品
名Shodex SPEC EDS-1 500-6
Shodex SPEC EDS-1 250-6
Shodex SPEC EDS-1 100-3
Shodex SPEC EDS-1
50-3
Shodex SPEC EDS-1
50-1
Shodex SPEC EDS-1
25-1

仕 様
500mg/6ml
250mg/6ml
100mg/3ml
50mg/3ml
50mg/1ml
25mg/1ml

容量30 個 / 箱
30 個 / 箱
50 個 / 箱
100 個 / 箱
100 個 / 箱
100 個 / 箱

希望納入価格（円）36,00030,00030,00035,00035,00028,000

カビ毒のクリーンアップ用 MycoSep シリーズ
● アフラトキシン#224、#226、及び #228（香辛料にも使用可）は、飼料
や食品中のアフラトキシンの精製に有用です。コンディショニングは不要です。わずか 30 秒のワンプッシュ操作だけで充分です。
● トリコテセン系カビ毒#225 、#227 をお試し下さい。
コード No.
631-03211
638-03221
635-03231
632-03241
639-03251
636-03261
633-03271

品
名
MycoSep#224
MycoSep#226
MycoSep#228
MycoSep#225
MycoSep#227
MultiSep#227
MultiSep#228

抽出液: アフラトキシン: 抽出液中の妨害成分

充
て
ん
剤
30秒
クリーンアップ

抽
出
液

充
て
ん
剤

MycoSepタイプ（プランジャータイプ）

仕 様（25 個／箱入り）
MycoSep#226 のハーフサイズ
逆相＋陽イオン交換＋陰イオン交換
逆相を強化した #226 充てん剤
MycoSep#227 のハーフサイズ
逆相＋陽イオン交換＋陰イオン交換＋活性炭
MycoSep#227 のシリンジタイプ
MycoSep#228 のシリンジタイプ

30秒
クリーンアップ

MultiSepタイプ（シリンジタイプ）

適 用
希望納入価格（円）アフラトキシン（少量試料用）
37,500
アフラトキシン（一般用）
37,50040,000
アフラトキシン（香辛料用）
トリコテセン（小麦用）
37,500
トリコテセン（穀物用）
37,500
トリコテセン（穀物用）
40,000
アフラトキシン（香辛料用）
40,000MycoSep 、MultiSep は、Romer Labs, Inc. の商標です。

生理活性の研究、生理活性の研究、標準品に標準品にシコニン誘導体
紫紺から抽出したナフトキノン系赤色〔規 格〕
含量（HPLC）：98.0% 以上色素です。抗菌作用、抗腫瘍作用、抗溶解性：アセトン 2mg/mL

本品はムラサキの根を乾燥した硬〔参考文献〕
Hashimoto, S., Man, Xu., Masuda, Y.
et al : J. Biochem., 125, 17（1999）.

炎症作用等が知られています。
コード No.
NEW

018-19191

NEW

093-04891

NEW

083-07891
191-08681

品

名Acetylshikonin（Source：Lithospermum erythrorhizon）

Isobutyrylshikonin（Source：Lithospermum erythrorhizon）

β-Hydroxyisovalerylshikonin（Source：Lithospermum erythrorhizon）

Shikonin Standard

規

格

容

量

希望納入価格（円）

生化学用

10mg

24,000生化学用

10mg

24,000生化学用

10mg

24,000

生薬試験用

10mg

20,000

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）15

和光純薬工業株式会社 土谷

第 46 話正和

最近のカブトガニ事情

ご存じのようにリムルス試薬（LAL）

護団体等の働きもあって、このようなアメリカの Limulus 属とアジアの 3 種

最近、アメリカの National Marine
Fisheries Service （NMFS）と National Oceanic and Atomospheric
Administration（NOAA）は「デラウ
エア湾の河口半径 30 海里の海域でカ類の Tachypleus 属の 4 種類が知られブトガニの捕獲を禁止する。
」旨の規めているようで、漁師もカブトガニをています。和光純薬の LAL 製品の原定 を Federal Register に 掲 載しまし

捕獲する量を年々減らされているようは、カブトガニの血球から製造されます。カブトガニはアメリカ大陸の東側
及びアジア大陸の東側に生息しており、

1）

規定ができてきたということのようです。
すでに、アメリカ東海岸の各州でも、餌のためのカブトガニの捕獲制限を始料は、アメリカカブトガニから製造さた 。この目的はカブトガニの生息数です。1999 年には 250 万匹ものカブト

れています。今回は LAL の原料であを減らさないようにするためですが、ガニが餌として捕獲されていたとのるカブトガニのアメリカ事情をご 紹介

なぜカブトガニの生息数が問題になっデータもあるようで、これを年々減らし

しましょう。

ているのでしょう。その理由は、渡り鳥ていく計画が進行しているようです。

LAL 製造方法は、各メーカーで異です。渡り鳥はデラウエア湾で休息をこれらの規制に LAL 製造用のカブなりますが、基本的には「カブトガニのとるそうです。そのときの餌が、なんトガニは含まれていないようですが、血球を取り出して浸透圧差で内容物をとカブトガニの卵だそうで、ここで十LAL 用に捕獲する業者は別に捕獲に抽出する」というものです。カブトガニ

分餌を食べて休養をとった後、さらに関する条件や報告義務が課せられてからは心臓採血で血リンパ液を採取し、目的地へと旅立つそうです。さて、そいます。「LAL は必要だからカブトガ

血球を集めます。カブトガニは開放血のカブトガニですが、実は LAL を製ニは捕ってもよいけれど、無理な取り管系を有するため、採血された後も臓造するためよりも遙かに多い数のカブ方をせず、ちゃんと生きたまま返しな

器内に血液が残るため、この採血で死トガニが捕獲され、ウナギや貝の餌とさいよ」というところかもしれません。

ぬというわけではありません。実際、して殺されているのです。カブトガニ

カブトガニは、前述のように心臓採

アメリカの LAL 製造業者は、採血後が減ると海岸の卵が減る。卵が減ると血でも死にませんが、弱っているときのカブトガニを海に返しています。

渡り鳥が困る。ということで、野鳥の保に水が汚かったりすると死んでしまいます。日本のように、水質汚染や干拓などの環境変化で生息数が激減する
場合もあり、水質規制や自然保護の遅れているアジア産カブトガニも心配です。LAL を用いたエンドトキシン試験
法の国際調和も行われ、LAL の重要
性はますます高まってきています。ア
メリカで養殖されているウナギは、主に日本向けだそうです。カブトガニの数が減らないよう、我々も何かするべきなのでしょうか。でも、ウナギはおいしいですよね。
〔参考文献〕
1）Federal Register,（2001）.

66,

8906-8911

次回は「第 47 話 エンドトキシン試
験の国際調和」の予定です。

16

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

固相有機合成用担体 ランタン
新型水溶性グラフトポリマー シリ−ズ
■水溶性のターゲット → アクリルアミド型ポリマーに担持したランタン製品シリーズ ━━RAM

ミモト−プス社の新世代固相有機合
成用担体ランタンの適応範囲を更に広げるために、水 溶 性グラフトポリ
マーに担持した各種リンカーを揃えました。合成対象が親水性、例えばペプチド系でかつ長鎖になる可能性がある
ため、リンカー配置密度をあえて希薄化するなど工夫を加えています。
ポリスチレン型と同様に D 型 L 型がありますが、D 型でも loading 量は、小さいものがあります。
メーカーコード
SP-PA-L-NOF-008
SP-PA-D-NOF-018
SP-PA-L-RAM-008
SP-PA-D-RAM-018
SP-PA-L-HMP-008
SP-PA-D-HMP-018
SP-PA-L-TRH-008
SP-PA-D-TRH-018
SP-PA-L-HYP-008
SP-PA-D-HYP-018
SP-PA-L-BAL-008
SP-PA-D-BAL-018

TRH
O
O

N
H

O

NH-Fmoc
N
H

MeO

OMe

HMP

BAL
O
O

N
H

OH

O

CHO
OMe

品

名

合成量
8 micromole
18 micromole
8 micromole
18 micromole
8 micromole
18 micromole
8 micromole
18 micromole
8 micromole
18 micromole
8 micromole
18 micromole

SynPhase-PA-D-series, Non-Functionalized
SynPhase-PA-D-series, Rink Amide Linker
SynPhase-PA-D-series, Hydroxymethylphenoxy
Linker
SynPhase-PA-D-series, Trityl Alcohol Linker
SynPhase-PA-D-series, Hyperlabile Linker
SynPhase-PA-D-series, Backbone Amide Linker

名容

SynPhase-PS D-series Lantern Starter Kit（ポリスチレンポリマー担持）
SynPhase-PA D-series Lantern Starter Kit
EA-SK-U-PAD（親水性ポリアクリルアミドポリマー担持）EA-SK-U-PSD

量

ピン数

100
100
100
100
100
100
100
100
100
100
100
100

希望納入価格（円）69,00069,00093,00093,00093,00093,00093,00093,00093,00093,000132,500
132,500━━━━━━━━━━━━━━━━

使いやすくするためのキットを発売します。ランタンは、籠（lantern）のような形をした新しいタイプの固相合成用の小型のピンで、従来の SPOC 製品の大型マクロシリーズより多い合成量を実現しました。このキットひとつで一通りの反応ができるように器具を揃えてあります。本品により、更に大量の合成処理が容易になり
ます。
品

OMe

O

N
H

■初めてランタンを使ってみたい → スターターキット

メーカーコードOH

希望納入価格（円）

1 セット

94,000

1 セット

94,000〔キット内容〕
D 型ランタン 5 種類

各 20 個Aminomethylated, Chloromethylated,
Rink Amide Linker, Hydroxymethylphenoxide, Backbone Amide Linker

2個専用の反応用ガラス容器
2個
ドレン用穴付キャップ
1個
洗浄専用ガラス容器
Stemholder（ピンを支えるホルダー）1 個
12 個
色付ピン
96 穴ポリプロピレン容器
1個■大量に処理したい → アッセンブリキット ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━
実際にランタン製品を数多く処理するとピンの切り離しや取りつけに意外と時間がかかる場合があります。その悩みを解消するため、一括で 96 ピンのプレートに一斉に付けたり外したりする器具が便利です。
2 種 SynPhase Press と Stem Recycler に別れ、それぞれ付属品とセットでご提供します。

SynPhase Press： 万力型の製品中心に組まれており、ランタンとステムを一括で装着する道具です。各パーツの組合せでAssembly kit1 と Assembly kit2 があります。詳細は取扱説明書内に説明あります。
Stem Recycler： トランステムと 96 ピンプレートからの一括取外し専用器具です。
製品は、各器具の組合せにより 4 通
り準備しております。
※ 参考資料として、キットの取扱説明書（マニュアル）を用意していますので、ご請求下さい。

メーカーコードEAISRSP1EAISRSP2EAISASP3
EAISUSP4

品
名SynPack1（TranSort+Assembly kit 1+Stem Recycler）
SynPack2（TranSort+Assembly kit 2）
SynPack3（Assembly kit 1+Stem Recycler）
SynPack4（TranSort+Assembly kits 1/2+Stem Recycler+Jumbo Color Pack）

アッセンブリキットの具体的な組合せによる価格は、別途ご 相談させていただきますので、担当営業にお問合せ下さい。
和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

17

チラミド

シグナル増感検出キット®

本品は Tyramide Signal Amplification（TSA）法に MPI 社の高性能蛍光プローブ Alexa Fluor dye を組合せたキットです。
免疫組織化学でのタンパク質検出や FISH での核酸を高感度に検出できます。
〔測定原理〕TSA 法は、HRP の酵素反応を利用
し、in situ での標的タンパク質や核酸を高密度標識して高感度に検出する
酵素増幅検出法です。
1．標的タンパク質や標的核酸に抗体やプローブを結合させ、続いてHRP 標識した二次プローブを結合させます。
2．HRP は蛍光標識またはビオチン
標識 tyramide を活性化 tyramide
ラジカルに変換します。
3．活性化 tyramide ラジカルは近接の求核性残基に共有結合し、標的タンパク質や核酸を高密度標識
します。

KEY
Dye
HRP

Dye

Dye

Ag

H2 O2

= primary antibody

Dye= horseradish peroxidase（HRP）−labeled secondary antibody
Dye

Dye

= target antigen

Dye

Dye

= fluorescent or biotinylated
tyramide derivativeDye= activated tyramide derivativeAg= protein tyrosine sidechains

Schematic representation of the TSA detection method applied to immunolabeling of anantigen.

〔特 長〕● HRP で多くの tyramide 基質が活性化されるため、シグナル増幅が得られます。
● 微量の抗体やハイブリダイゼーションプローブを高感度に検出できます。
● 発現量の少ない遺伝子の検出ができます。
● 非特異的反応によるバックグラウンドシグナルが抑えられるために、一次抗体を希釈することができます。
● FISH での最適プローブ濃度は従来の 1/2 から 1/10 です。
● 蛍光顕微鏡、電子顕微鏡での使用では、TSA は DAB（diaminobenzidine）と置き換えることができます。

TSA キットは下記の通り、蛍光色素、ビオチン標識プロー
ブと HRP 標識プローブとの組合せがあります。
Horseradish Peroxidase Conjugate
Labeled Tyramide

Alexa Fluor 350
Pacific Blue
Alexa Fluor 488
Oregon Green 488
Alexa Fluor 532
Alexa Fluor 546
Alexa Fluor 568
Alexa Fluor 594
Alexa Fluor 647
Biotin-XX

Ex/Em ‡

Anti-mouse Anti-rabbit
Streptavidin
IgG
IgG（host=goat）（host=goat）

347/442405/455
495/519496/524
531/554556/573579/604
591/617650/668−

T-20917
T-20920
T-20912
T-20919
T-20918
T-20913
T-20914
T-20915
T-20916
T-20911

T-20927
T-20930
T-20922
T-20929
T-20928
T-20923
T-20924
T-20925
T-20926
T-20921

T-20937
T-20940
T-20932
T-20939
T-20938
T-20933
T-20934
T-20935
T-20936
T-20931‡ Ex/Em=Fluorescence Excitation/Emission maxima in nm.

18

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

Fluorescence in situ hybridization detected by Tyramide Signal
Amplification. Chromosome spreads were prepared from thecultured fibroblast cell line MRC-5 and hybridized with abiotinylated α-satellite probe specific for chromosome 17. The
probe was generated by nick translation in the presence of
ChromaTide biotin-11-dUTP（C-11411）. For detection by TSA,
hybridized chromosome spreads were labeled using TSA Kit #22
with HRP-streptavidin and Alexa Fluor 488 tyramide（upper panel）
or using TSA Kit #23 with HRP-streptavidin and Alexa Fluor 546
tyramide（lower panel）. After counterstaining with DAPI（D-1306）,
images were obtained using filters appropriate for DAPI, FITC or
TRITC.
〔次頁に続く〕コード No.
508-45111
505-45121
502-45131
509-45141
506-45151
503-45161
500-45171
507-45181
504-45191
507-45201
504-45211
501-45221
508-45231
505-45241
502-45251
509-45261
506-45271
503-45281
500-45291
503-45301
500-45311
507-45321
504-45331
501-45341
508-45351
505-45361
502-45371
509-45381
506-45391
509-45401

メーカーコード
T-20911
T-20912
T-20913
T-20914
T-20915
T-20916
T-20917
T-20918
T-20919
T-20920
T-20921
T-20922
T-20923
T-20924
T-20925
T-20926
T-20927
T-20928
T-20929
T-20930
T-20931
T-20932
T-20933
T-20934
T-20935
T-20936
T-20937
T-20938
T-20939
T-20940

品
名TSA Kit #1 with HRP goat anti-mouse IgG and biotin-XX tyramide
TSA Kit #2 with HRP goat anti-mouse IgG and Alexa Fluor 488 tyramide
TSA Kit #3 with HRP goat anti-mouse IgG and Alexa Fluor 546 tyramide
TSA Kit #4 with HRP goat anti-mouse IgG and Alexa Fluor 568 tyramide
TSA Kit #5 with HRP goat anti-mouse IgG and Alexa Fluor 594 tyramide
TSA Kit #6 with HRP goat anti-mouse IgG and Alexa Fluor 647 tyramide
TSA Kit #7 with HRP goat anti-mouse IgG and Alexa Fluor 350 tyramide
TSA Kit #8 with HRP goat anti-mouse IgG and Alexa Fluor 532 tyramide
TSA Kit #9 with HRP goat anti-mouse IgG and Oregon Green 488 tyramide
TSA Kit #10 with HRP goat anti-mouse IgG and Pacific Blue tyramide
TSA Kit #11 with HRP goat anti-rabbit IgG and biotin-XX tyramide
TSA Kit #12 with HRP goat anti-rabbit IgG and Alexa Fluor 488 tyramide
TSA Kit #13 with HRP goat anti-rabbit IgG and Alexa Fluor 546 tyramide
TSA Kit #14 with HRP goat anti-rabbit IgG and Alexa Fluor 568 tyramide
TSA Kit #15 with HRP goat anti-rabbit IgG and Alexa Fluor 594 tyramide
TSA Kit #16 with HRP goat anti-rabbit IgG and Alexa Fluor 647 tyramide
TSA Kit #17 with HRP goat anti-rabbit IgG and Alexa Fluor 350 tyramide
TSA Kit #18 with HRP goat anti-rabbit IgG and Alexa Fluor 532 tyramide
TSA Kit #19 with HRP goat anti-rabbit IgG and Oregon Green 488 tyramide
TSA Kit #20 with HRP goat anti-rabbit IgG and Pacific Blue tyramide
TSA Kit #21 with HRP streptavidin and biotin-XX tyramide
TSA Kit #22 with HRP streptavidin and Alexa Fluor 488 tyramide
TSA Kit #23 with HRP streptavidin and Alexa Fluor 546 tyramide
TSA Kit #24 with HRP streptavidin and Alexa Fluor 568 tyramide
TSA Kit #25 with HRP streptavidin and Alexa Fluor 594 tyramide
TSA Kit #26 with HRP streptavidin and Alexa Fluor 647 tyramide
TSA Kit #27 with HRP streptavidin and Alexa Fluor 350 tyramide
TSA Kit #28 with HRP streptavidin and Alexa Fluor 532 tyramide
TSA Kit #29 with HRP streptavidin and Oregon Green 488 tyramide
TSA Kit #30 with HRP streptavidin and Pacific Blue tyramide

包

装

1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット
1 キット

TSA：Tyramide Signal Amplification

希望納入価格（円）74,00088,00088,00088,00088,00088,00088,00088,00088,00088,00074,00088,00088,00088,00088,00088,00088,00088,00088,00088,00074,00088,00088,00088,00088,00088,00088,00088,00088,00088,0001 キット：50 〜 150 スライド用

新規ふっ素化剤
2,2-Difluoro-1,3-dimethylimidazolidine【DFI】
有機合成用
2,2-Difluoro-1,3-dimethylimidazolidine（DFI）は高選択性の新規ふっ素化剤で、熱安定性に優れており、広範囲な有機合成反応に使用可能で、幅広い応用が期待できます。また、既存のふっ素化剤に比べて取扱いが容〔DFI の特長〕
・ アルコ−ル、カルボン酸、アルデヒド、ケトン等の官能基をもつ化合物と反応して高選択的にふっ素化合物を生成。
・ A 位にメチレンを有するカルボニル化合物をアセチレン化合物に変換する事が可能。
・ n- ヘキサンから非プロトン性極性溶媒までの幅広い溶媒と相互に溶解。

易で価格も安価です。
〔DFI の反応例〕

F●アルコールとの反応

F

H3C

CH3
N

N

n-C8H17OH

Cas No. 〔220405-40-3〕
10mL

4h

n-C8H17F

収率97.3％●アセチレン生成反応

C5H10F2N2 = 136.14

048-28401

室温

アセトニトリル

HO

照

CH3

84℃

O

アセトニトリル

5h

HO

収率
92.8％

会

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

19

12
脳科学一口メモ◯パーキンソン病とその治療薬
京都薬科大学

パーキンソン病（PD）は黒質緻密層のドパミン（DA）神経細胞が変性・脱病態生理学教室 北村

佳久

L-DOPADA神経毒
DA

落し、安静時振戦・筋強剛・無動 / 寡
動・姿勢反射障害などの症状を特徴とする。その病因として、老化・酸化スト

DA受容体（D1, D2, D3）
Pael-R

レス・ミトコンドリア障害・DA 神経毒なプロテアソーム

1,2）

。

Bcl-2
Bcl-x

本稿では、最近の PD 研究ならびにそチトクロームc
活性酸素?

?
UCH-L1

カスパーゼの治療薬について概説したい。

変性タンパク質の蓄積・凝集PD 発症はほとんどが孤発性であるが、一部の家族性 PD およびパーキン
ソニズム（AR-JP、瀬川病、FTDP-17など）の解析から、関連遺伝子としてA-synuclein、parkin、UCH-L1、GCH1、tau などが同定されている 1,3-5）。PD
の特徴的な病理所見として Lewy 小体がある。これには、A-synuclein、ユビ キ チ ン、parkin、UCH-L1、synphilin-1、cytochrome c、などが含ま

症状改善

DA神経
細胞死

図 1．DA 神経細胞とその変性?
Lewy小体→，促進； ┤，抑制

定されている 8-10）。また、in vitro 実験系

治療効果は L-DOPA に勝るものはな

では Pael-R の蓄積により小胞体ストレス

く、DA アゴニストの単独投与からスが発生し、細胞死が引き起こされることタートし、L-DOPA を最後の切り札とが 明らかにされている 。しかし、A-して 温 存させる試み がされ ている。

9）

synuclein は DA 神経細胞だけでなくPD 様症状を呈する疾患は多数あり、れており 1,6,7）、細胞内蛋白質の品質管

他の神経細胞にも多く発現している。

このため PD とパーキンソニズム（PD理・分解機構の異常が推定される。日症候群）は臨床的に区別されている。

本の研究グループの精力的な解析に

Lewy 小体がなぜ DA 細胞を好んで形成されるのか、また AR-JP ではどより原因遺伝子が parkin であると解のような構造物として変性蛋白質が蓄受性も異っている。今後の PD 研究に

発症原因の違いにより L-DOPA の感明された常染色体劣性若年発症パー積するのか、今後の研究に期待したい。

より、DA 神経細胞死ならびに Lewy

キンソニズム（AR-JP）
では、黒質 DA

一方、PD 治療薬は血液- 脳関門を小体形成のメカニズムが解明されれ神経細胞の脱落は起こるが、興味深い通過できる DA 前駆物質の L-DOPA

ば、副作用の少ない L-DOPA の代替

ことに Lewy 小体は出現しない

3,4）

。最

が 1960 年代に臨床応用され、問題解薬および各症状に対する改善薬の開近、parkin にはユビキチンリガーゼ

決 され た か に み え た。し かし、L-

発が進むこととなる。PD 解明・治療に（E3）機能がありプロテアソームによるDOPA の長期投与により副作用と考向け、さらなる解析が進められている。

蛋白質分解系に関与することが明らかえられるジスキネジア出現など問題がとなった。AR-JP の parkin 遺伝子で新たに生じ始めた。このため、DA のは loss-of-function 型変異が起こって生成代謝経路および受容体アゴニス

おり、何らかの蛋白質が分解されず蓄トの研究が進み、現在では D1、D2、積されるものと考えられている。ここまD3 受容体アゴニストおよび MAO-B
抑制薬、DA 遊離促進薬などが開発・で研究が進むと、次の課題は 1）A-20

α-synuclein

ミトコンドリア

ど様々な要因が想定されているが、未だ その詳細は解明されていない

parkin

臨床応用されている 11,12）。これらの治

synuclein と parkin はどのような関係
DA 神経細胞死はどのにあるのか、2）

療薬には、ラジカルスカベンジャーなようにして引き起こされるのか、という

ど抗酸化作用、Bcl-2、Bcl-x の発現増点に絞られてくる。

加作用などを示すものがあり 11-15）、in

現在までに parkin の基質としてグリコ

vitro 系では神経保護作用が証明されシル化 A-synuclein（ASp22）、parkin-ている。しかし、臨床的には、まだ神

associated endothelin receptor-like受容体（Pael-R）、CDCrel-1 などが同経保護作用を示すかどうか明らかでは

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

なく、今後の解析が待たれる。また、〔参考文献〕
1）Dunnett S.B., and Bj¨orklund A. :Nature, 399 Suppl., A32（1999）
2）Betarbet, R., et al. : Nature Neuroci.,
3, 1301（2000）
3）Mizuno, Y., Hattori, N. & Mori, H. :Biomed. Pharmacother., 53, 109（1999）
4）Kitada, T., et al. : Nature, 392, 605（1998）
5）Ichinose, H., et al. : Nature Genet. 8,236（1994）6）Spillantini, M.G., Crowther, R.A.,
Jakes, R., Hasegawa, M. & Goedert
M. : Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95,6469（1998）
7）Engelender, S., et al. : Nature Genet.,
22, 110（1999）8）Shimura, H., et al.: Science, 293, 263（2001）

9）Imai, Y., et al.: Cell, 105, 891（2001）
10）Zhang, Y., et al.: Proc. Natl. Acad.
Sci. USA, 97, 13354（2000）
11）Ogawa, N. : Eur. Neurol. 34（Suppl. 3）,
20（1994）

12）Hagan, J.J., Middlemiss, D.N.,
Sharpe, P.C. & Poste, G.H. : Trends
Pharmacol. Sci., 18, 156（1997）13）Kitamura, Y., et al. : Mol. Pharmacol.,54, 1046（1998）

14）Takata K., Kitamura Y., Kakimura J.,
Kohno Y. & Taniguchi T. : Brain Res.
872, 236（2000）
15）Kakimura J., et al. : Eur. J.
Pharmacol., 417, 59（2001）

イノシトールりん脂質代謝関連物質
イノシトールりん脂質は微量ながら速やかに代謝され、細胞内情報伝達に重要な役割を担っています。この代
謝回転ではまず、ホスファチジルイノ
シトール 4,5- 二りん酸【PI（4,5）P2】がホルモンや神経伝達物質などのアゴニスト刺激で活性化されたホスホリ
パーゼ C によって分解され、イノシ
トール 1,4,5- 三りん酸（IP3）とジアシ
コード No.
542-01491
545-01501
543-01781
541-01461
540-01791
546-01771

500Fg
200Fg
500Fg
1mg
200Fg
200Fg

希望納入価格（円）48,00045,00050,00036,00050,00050,000

生化学用

200Fg

50,000

生化学用

500Fg

57,000

生化学用

200Fg

50,000

生化学用

200Fg

50,000

生化学用

200Fg

50,000

生化学用

200Fg

45,000

生化学用
生化学用
生化学用
生化学用
生化学用
生化学用
生化学用

200Fg
1mg
200Fg
200Fg
200Fg
500Fg
200Fg

照 会
25,000
照 会
照 会
照 会
30,000照 会

コード No.
品
名（1,3,4,5）P（Synthetic）】
349-05861 DL-myo-Inositol 1,3,4,5-Tetraphosphate Tetrapotassium Salt【Ins4347-05781（1,4,5）P（Synthetic）】
DL-myo-Inositol 1,4,5-Triphosphate Tripotassium Salt【Ins3343-05783

容

544-01831
543-01801547-01821
541-01841

NEW
NEW
NEW

549-01881545-01481
546-01891
548-01851
545-01861548-01471
542-01871

コード No.
299-57301
542-01011
299-56701
019-18761
016-18771
014-18951
011-18961
013-16101
017-16481
014-17591
010-16851

品〔規 格〕
凍結乾燥品、合成品
含量（NMR）：98% 以上

容

544-01451

NEW

駆体だけでなく、それ自身細胞骨格制
御やタンパク質の機能修飾を引き起こすことが知られ、また 3 位にりん酸が入ったイノシトールりん脂質群の作用ががんとの関連から注目されています。
この度品揃えを充実しました。

規 格
生化学用
生化学用
生化学用
生化学用
生化学用
生化学用

540-01811

NEW

ルグリセロール（DG）の 2 つのセカン
ドメッセンジャーを産生します。この結果、IP3 は小胞体からのカルシウムイ
オンの動員を引き起こし、また DG は
プロテインキナーゼ C を活性化し、各
種 生 理 反 応 を 促しま す。近 年、PI（4,5）P2 がセカンドメッセンジャーの前

名（1,4）P2】
D-myo-Inositol 1,4-Diphosphate Tetrapotassium Salt【Ins（4,5）P2】
D-myo-Inositol 4,5-Diphosphate Tetrapotassium Salt【Ins（1,3,4）P3】
D-myo-Inositol 1,3,4-Triphosphate Hexapotassium Salt【Ins（1,4,5）P3】
D-myo-Inositol 1,4,5-Triphosphate Hexapotassium Salt【Ins（1,5,6）P3】
D-myo-Inositol 1,5,6-Triphosphate Hexapotassium Salt【Ins（2,4,5）P3】
D-myo-Inositol 2,4,5-Triphosphate Hexapotassium Salt【InsD-myo-Inositol 1,2,5,6-Tetraphosphate Octapotassium Salt
【Ins
（1,2,5,6）P4】
D-myo-Inositol 1,3,4,5-Tetraphosphate Octapotassium Salt
【Ins
（1,3,4,5）P4】
D-myo-Inositol 1,3,4,6-Tetraphosphate Octapotassium Salt
【Ins
（1,3,4,6）P4】
D-myo-Inositol 1,4,5,6-Tetraphosphate Octapotassium Salt
【Ins
（1,4,5,6）P4】
D-myo-Inositol 3,4,5,6-Tetraphosphate Octapotassium Salt
【Ins
（3,4,5,6）P4】
D-myo-Inositol 1,3,4,5,6-Pentaphosphate Decapotassium Salt
【Ins
（1,3,4,5,6）P5】（diC16）【PI（3）P】
L-α-Phosphatidyl-D-myo-Inositol 3-Monophosphate（diC16）【PI（4）P】
L-α-Phosphatidyl-D-myo-Inositol 4-Monophosphate（diC16）【PI（5）P】
L-α-Phosphatidyl-D-myo-Inositol 5-Monophosphate（diC16）【PI（3,4）P2】
L-α-Phosphatidyl-D-myo-Inositol 3,4-Diphosphate（diC16）【PI（3,5）P2】
L-α-Phosphatidyl-D-myo-Inositol 3,5-Diphosphate（diC16）【PI（4,5）P2】
L-α-Phosphatidyl-D-myo-Inositol 4,5-Diphosphate（diC16）【PI（3,4,5）P3】
L-α-Phosphatidyl-D-myo-Inositol 3,4,5-Triphosphate

品
名Phosphorylated Tau Immunohistostain Kit
Tau Protein, Human, recombinant, Solution
Amyloid β-Protein Immunohistostain Kit
Amyloid β-Protein（1-40）（Trifluoroacetate）
Amyloid β-Protein（1-42）（Trifluoroacetate）
Amyloid β-Protein（1-40）（Hydrochloride）
Amyloid β-Protein（1-42）（Hydrochloride）
Anti Human bcl-2,Monoclonal Antibody
Anti Rat bcl-2,Monoclonal Antibody
Anti Human bcl-x,Monoclonal Antibody
Anti Human bcl-xL,Monoclonal Antibody

規 格
免疫組織染色用
生化学用
免疫組織染色用
生化学用
生化学用
生化学用
生化学用
免疫化学用
免疫化学用
免疫化学用
免疫化学用

容

量

量

100Fg
100Fg
1mg

量

100 回用
50Fg
50 回用
1mg
0.5mg
1mg
1mg
100Fg
100Fg
100Fg
100Fg

希望納入価格（円）18,80015,00036,000

希望納入価格（円）52,00025,00090,00036,00038,00048,00052,00032,00030,00035,00035,000

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）21

共存物質の影響を受けにくいタンパク質の固相法による定量キット
Protein Blot Assay Kit wako
本キットはピロガロールレッド- モリブデン錯体（Pyromolex）発色法による測定キットです。従来の比色法に比べて SDS な
どの界面活性剤の影響を受けにくいことが最大の特長です。
〔発色原理〕
ピロガロールレッドがモリブデン酸と結合し 470nm に吸収極大を持つ赤色錯体 Pyromolex を形成します。この錯体は酸性下でタンパク質と結合すると波長がシフトし青紫色（604nm ）を呈します。600nm 付近の吸光度を測定することにより、標準タ
ンパク質の検量線をもとに試料中の総タンパク質量を求めます。
〔測定原理〕
サンプル中のタンパク質を特殊なブロッティング溶液を用い、効率的に PVDF 膜へブロットさせます。PVDF 膜を洗浄後、Pyromolex で PVDF 膜上のタンパク質を染色するとタンパク質-Pyromolex の複合体を形成し、青紫色を呈します。デンシト
メーターや CCD カメラにより染色強度を読み取り、濃度を測定します。
〔共存物質の影響〕〔検量線の作成例〕

共存物質の影響を受けない共存物質最大濃度

BSA standard曲線（Range: 0-20[g / blot）

固相法（Sample : IgG）

共存物質

1.2

BSA standard直線範囲（Range: 0-4[g /blot）

1
0.8
拡大図

0.6
0.4

1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

3.5

4

4.5

BSA
（[g /blot）

0.2
0
0

5

10

15

20

25

BSA
（[g / blot）〔タンパク質の種類による染色強度の差〕
（％）
100
固相法
液相法

50

0

c
e
A
in
in
or
en
BS hibitog oglob lbum hrom ozym
rin
s
a
c
In
Ly
em
Fib
Ov
yto
sin
H
C
p
Try

IgG

in

ps

Try

各タンパク質量（5[g/blot）

コード No.
291-57001
297-57003

品

Guanidine-HCl
Urea
Ammonium Sulfate
KCl
NaCl
MgCl2
Sodium Azide
GlycerolGlucoseSucroseEDTA
DTT
Mercaptoethanol
Tris
HEPES
MOPS
SDS
SLS
CTAB
CHAPS
Tween 20
Tween 80
Triton X-100
Briji 35名

規

1mol/l4mol/l1mol/l1mol/l1mol/l0.1mol/l
1%50%
1mol/l50%
0.2mol/l
0.8mol/l
2mol/l0.5mol/l
1mol/l1mol/l
4%
2%
0.05%
1%
0.05%
0.1%
2%
1%

格

容

0.5mol/l
6mol/l1mol/l1mol/l4mol/l1mol/l0.2%
99%0.5mmol/l
40%
0.1mol/l
1mol/l1mol/l2mol/l0.1mol/l
0.2mol/l
0.02%

0.1%
0.1%

量

96Blot 用
480Blot 用タンパク質定量用

Protein Blot Assay Kit wako

液相法（Protein Blot Assay Kit wako ）（Protein Assay Rapid Kit wako ）1.4
シグナル強度（600nm）

シグナル強度（600nm）

1.6

希望納入価格（円 ）8,000
28,000

迅速・簡便なタンパク質の液相法による定量キット
Protein Assay Rapid Kit wako

ワンステップ！！

本キットはピロガロールレッド−モリブデン錯体（Pyromolex）発色法
による測定キットです。操作が簡単でルーチンのタンパク質の定量に

発色試液
3.0mL

50FL
試料

お薦めします。
〔特 長〕① 定量はワンステップで約 20 〜
25 分で完了② 定量範囲は 60 〜 2,000Fg/mL
コード No.
293-56101
299-56103

22

よく混合し室温で20分間放置 発色試薬はガラス、プラスチッ
ク器具への汚染が少ない
品

Protein Assay Rapid Kit wako

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

名

吸光度600nmを測定

規格タンパク質定量用容量

100 回用400 回用

希望納入価格（円）4,000
11,000

組換え大腸菌用フィルム培地
エコスクエア
本品は均一乾式フィルムの Ready to Use の培地です。組換え大腸菌の薬剤耐性株の検出、Blue/White スクリーニン
グやコンピテントセル法またはエレクトロポレーション法による形質転換体の分析、選択に使用できます。
〔製品形態〕〔操作の概略〕 コンピテントセル法

 上部フィルムには、TTC 指示薬とゲル化剤を、下部フィルムには、培地栄養成分、pH 指示薬及びゲル化剤を塗布しています。

プラスミドDNAまたはLigation試料DNA

（横）
× 95
（縦）
×1
（厚さ）mm サイズ：77

DNA、
コンピテントセル混合物＋コンピテントセル（100[l）0℃、30分間静置
42℃、45秒間ヒートショック処理＋S.O.C.培地（900[l）、37℃、1時間（Shaking）

 質量：2.7g〔特 長〕● Ready to Use 培地→培地調製が不要される● TTC 指示薬によりコロニーが染色（Red）
コロニーから発生した酸が pH 指示薬を黄色に変色→コロニー

50〜100[l※＋80mmol/lりん酸バッファー（pH 7.4） で1ml
（抗生物質 or X-gal/IPTGを必要に応じて添加しておく）にメスアップの検出が容易1ml（形質転換体＋薬剤）
フィルム培地にプレート（詳細は使用説明書に記載）
37℃、一晩培養（20枚まで重ねて培養できる）
コロニーの検出、選択● フィルム培地なのでコンパクト→保管、培養、保存のスペースをとらない（LB プレートの 1/30 の容積）、廃棄が容易● コロニーの増殖性能は、LB プレートと同等→ 37℃、18 ± 4 時間
でコロニー検出、釣菌可能に● コロニー数 15 〜 150/ フィルム培地の範囲で、LB プレートとの相関性あり→ LB プレートのデータが再現可能※ りん酸バッファーの代わりにLetheen Blothを使用すると、コロニーの増殖が早くなります。但し、Blue/White選択に用いる場合は、Letheen Bloth入りりん酸バッファーを使用下さい。

〔保存〕2 〜 8℃

※ 開封後は結露防止のため室温（24℃ 以下）に保存し、1 ヶ月以内を目安に使いきって下さい。

〔手〔実施例〕 JM100 菌株順〕 （注意：フィルムを室温にもどしてからご使用下さい ）2. 上部フィルム・カバーを持ち上げて1mlの試料を培地の中心に接種します。

1. 平らな台の上にフィルムを置きます。

● Ampicilin 添加（50[g/ml）37℃ で 23 時
間培養
コロニー数：150
3. 気泡が入らないようにフィルムカバーをゆっくりかぶせます。

4. 培養液を均一に広げ、ゲル化されるまで待ちます。

〔培養・選択・回収〕

5. フィルム・カバー側を上にして水平にインキュベーター内に置き、培養します。
20枚まで重ねて培養できます。

注意

6. フィルム・カバー側の培地から竹串など先端の尖った釣菌用の器具でコロニーを選択・回収することができます。

1）培養液の pH は 6.5 〜 7.5 の範囲内で使用して下さい。
2）チオ硫酸またはくえん酸の入った培地・緩衝液は使用しないで下さい。

コード No.
308-51781
304-51783
302-51784

メーカーコード
MB640101
MB640105
MB640110

品
Eco Square

名● X-gal/IPTG 添加 37℃ で 23 時間培養
コロニー数：320
青色コロニー：non-Insert DNA
赤色コロニー：Insert DNA を含む
包装

25 枚× 1
25 枚× 525 枚× 10

希望納入価格（円）3,000
14,50027,500

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）23

リンパ球分離用
Lymphocyte Separation Medium 1077（for Human）
免疫化学用

Ficoll 400 及び Sodium Diatrizoate

は滅菌済みですので、そのまま使用〔規格〕

からなるリンパ球分離溶液です。密度することができます。分離したリンパ密

度：1.077 ± 0.001g/mL

勾配によりヒト血液から単核球（リンパ球は細胞障害性試験、FACS 分析等

エンドトキシン：0.1EU/mL 以下

球、単球）の分離に用いられます。本品に用いられます。
126-04871

100mL × 6

照会

高感度マウスインスリン測定キット
レビス® インスリン−マウス（U タイプ）
わずか 5[l の血清から約 4 時間で絶食時から正常時のマウスインスリンの濃度が測定できます！
〔特長〕● 高感度、幅広い測定範囲（39pg/mL 〜 2,500pg/mL）● 微量検体（血清、血漿 5FL）から測定可能● 短時間（約 4 時間）で測定可能〔キット構成〕● 優れた再現性● 抗インスリン抗体固相化プレート

96well（8 × 12）500FL● 標準インスリン溶液
60mL
● 緩衝液
20FL
● ペルオキシダーゼ−アビジン結合物
10FL● ビオチン結合抗インスリン抗体
10mL● 発色剤（TMB）
10mL● 反応停止液
50mL● 濃縮洗浄液（10 ×）● 検体の前処理は不要● プレートはセパレートタイプ● すべての試薬が溶液で即座に使用可能〔精度〕● 同時再現性試験（n=5）C.V 値 2.17%● 日差再現性試験（n=3）C.V 値 1.27%● 添加回収試験（n=2）95.8 〜 109%
〔インスリン- マウス（U タイプ）
検量線例〕

〔インスリン- マウス（U タイプ）
低濃度域検量線例〕

2.0

0.30

0.25

Abs. 450/620nm

Abs. 450/620nm

1.5

1.0

0.5

0.0

0.20

0.15

0

0.10

500 1,000 1,500 2,000 2,5000Insulin(pg/ml)

コード No.
633-03411

AKRIN-031

50 100 150 200 250 300 350

Insulin(pg/ml)

メーカーコード

各1本

品

名

®

〔絶食時マウス インスリン値〕
条件： Balb/c マウス 6 週齡 ♂
48 時間絶食（血清検体）
検体

インスリン値（pg/ml）N=2

1

83.5

2

110

3

80.9

4

117

5

105

6

105

7

93.3

8

136

容

量

96 回用

Lbis Insulin-Mouse（U-Type）

希望納入価格（円）62,000〔関連商品〕

24

コード No.

メーカーコード

639-03131

AKRIN-030

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

品
Lbis® Insulin-Rat（U-Type）

名

容

量

96 回用

希望納入価格（円）62,000Phosphoinositide 3-Kinase p110γ, Human, recombinant, Solution
生化学用
ホスホイノシチド 3- キナーゼは、PI、PI（4）P、PI（4,5）P2 の 3 位の水酸基をりん酸化する酵素です。産生されるりん脂質は cAMP や IP3と同様にセカン
ドメッセンジャーとして働きます。1B
型 PI3- キナーゼは p110C の触媒サブユニットと p101 のアダプターサブユ

ニットからなり、G タンパク質（GBC）にム、0.5mmol/L 塩化マグネ
よって活性化されます。
シウム、50% グリセリン（実績値）
活 性 ： 4.5nmoles/min/mg
起 源 ： sf9 昆虫細胞で発現させた（C 末
全長ヒト PI3K p110C〔参考文献〕
Leopoldt, D. et al. : J. Biol. Chem.,
端に His6 を融合）
273,
7024
（1998）.
形 状 ： 25mmol/L HEPES、pH 7.4、
168-20531 10Fg
（10FL） 50,000 円
100mmol/L 塩 化 ナ ト リ ウ

ELISA
ELISA やブロッティングにやブロッティングに発色基質溶液 / 錠剤
生化学用です。ELISA、組織染色、ブロッティ
ング等にご利用下さい。

ペルオキシダーゼ、アルカリフォス
ファターゼの発色基質溶液及び錠剤

Solution〔保存条件〕 2 〜 10℃・遮光保存〔使用期限〕 1 年

Tablet

コード No.

品
名酵 素
TMB Solution
546-01911
Peroxidase（Microwell）
TMB Solution
543-01921
Peroxidase（Membrane）
2,2'-Azino-bis（3ethylbenzothiazoline549-01901
Peroxidase
6-sulfonic Acid）
Solution

用

途

容

ELISA
Histochemistry
Blotting
ELISA

547-01941 BCIP/NBT Solution

Histochemistry
Alkaline
phosphatase Blotting

540-01931 pNPP Solution

Histochemistry
Alkaline
phosphatase Blotting

量 希望納入価格（円） コード No.
品
名040-27001
12,000100mL
DAB Tablet 5mg/ 錠
046-27003
049-22831
12,500100mL
DAB Tablet 10mg/ 錠
045-22833
151-02141
OPD Tablet 2mg/ 錠
157-02143
11,000100mL
158-02151
OPD Tablet 5mg/ 錠
154-02153
155-02161
OPD Tablet 10mg/ 錠
12,500100mL
151-02163
158-01671
154-01673 OPD Tablet 13mg/ 錠
11,000100mL
152-01674
152-02171
OPD Tablet 30mg/ 錠
158-02173

酵

素

用 途
Histochemistry
Blotting
Histochemistry
Peroxidase
Blotting
Peroxidase

Peroxidase ELISA
Peroxidase ELISA
Peroxidase ELISA
Peroxidase ELISA
Peroxidase ELISA

容

量

50 錠
100 錠
50 錠
100 錠
50 錠
100 錠
50 錠
100 錠
50 錠
100 錠
50 錠
100 錠
2,000 錠50 錠
100 錠

希望納入価格（円）9,000
16,0009,500
16,500
5,500
9,000
5,600
9,200
5,600
9,200
6,000
9,800
130,000
6,000
9,800

ニッポンイージーティー カスタムオリゴ合成サービス
ニッポンイージーティーでは、この度カスタムオリゴ合成サービスを開始しました。
ニッポンイージーティーは遺伝子工学用試薬メーカーのニッポンジーンとユーロジェンテック（本社 ベルギー）が設立しをスピンオフしたメンバーが設立したジョイントベンチャーです。ユーロジェンテックは 1985 年にリエージュ大学（ベルギー）
たバイオベンチャーで、ゲノミクス及びプロテオミクスの領域での製品やサービスを提供しています。ニッポンイージー
ティーはユーロジェンテック社の持つビジネス及びオリゴヌクレオチド製造のノウハウを最大限に生かし、高品質のオリゴヌク
レオチドをご提供します。
〔特 長〕〔スタンダード〕〔価 格〕● 100Fmol/L の水溶液（MilliQ）でお0.05Fmole スケール
100 円
● 1mer届け（スタンダードタイプ）
脱塩● 即日合成、翌日出荷
2,000 円● カートリッジ精製
100Fmol/L 水溶液（Milli Q）● リーズナブルな価格
1,000 円
● 基本料金15 〜 35mer まで（現在キャンペーン期間中につき● 脱塩処理済み※上記以外のオリゴマーをご希望の場合は、無料）
お問合せ下さい。
※スタンダードタイプ、インターネットで〔納 期〕
午後 2 時までの受注分の場合です。収量不足等で、再合成となった場合は変更になります。その場合は e-mail または FAX
でご連絡します。

〔保証 OD〕
スタンダードカートリッジ精製

月
受注日

火
出荷日
受注日

水
納品日
出荷日
受注日

木

金

納品日
出荷日
受注日

納品日
受注日

5OD
2OD

翌週月

翌週火

出荷日
出荷日

納品日
納品日

＊ご注文方法＊siyaku.com（現在作業中）またはニッポンイージーティーのホームページ（http://www.negt.com）からご注文下さい。大量のご注文の場合は、ホームページ上のご注文フォーム（Excel）
をご利用下さい。FAX でのご注文の場合は、ホームページ上のご注文フォーム
（PDF）
をご利用
下さい。
和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）25

指示薬溶液JIS K 8001 に収載されている滴定用指示薬を中心に汎用性の高い指示薬を多数取揃えました。
100mL 包装については滴下用褐色瓶を採用しましたので、使い易い包装になっています。
（★印の製品は 100mL 包装について滴下瓶を使用していません）

滴定用指示薬
コード No.
013-19141
010-19151
020-11411
022-11415
026-14551
020-14571
022-14575
027-14581
027-14601
029-14605
025-14641
036-18511
030-18531
034-18551
045-28391
066-04241
099-04871
096-04881
139-14051
136-10781
138-10785
139-10771
131-10775
130-14101
137-14111
139-14115
131-14131
146-07391
149-07401
146-07411
169-20561
166-20571
160-20591
162-20595
167-15731
169-15735
160-20611
208-11771
200-11775
201-11761
203-11765
212-01081
214-01085248-00741

品

名0.1w/v％ アリザリンレッド S 溶液
6w/v％ 硫酸アンモニウム鉄（Ⅲ）溶液

規 格
滴定用
滴定用

0.1w/v％ ブロモフェノールブルーエタノール（50）溶液

中和滴定用

0.1w/v％ ブロモクレゾールグリーンエタノール（50）溶液

滴定用

ブロモクレゾールグリーン- メチルレッド・エタノール溶液

滴定用

0.05w/v％ ブロモクレゾールパープルエタノール（20）溶液

滴定用

0.1w/v％ ブロモチモールブルーエタノール（50）溶液

滴定用

BANASS- ブリリアントエロー・メタノール（90）溶液★
0.1w/v％ クルクミンエタノール溶液
0.1w/v％ クレゾールレッドエタノール（20）溶液
0.1w/v％ クロロフェノールレッドエタノール（20）溶液
1w/v％ ジフェニルアミン硫酸溶液★
1.5w/v％ フェロイン溶液
0.18w/v％ インジゴカルミン溶液★
4.2w/v％ 硝酸鉄（Ⅲ）溶液
0.1w/v％ メチルエローエタノール（90）溶液

滴定用
滴定用
滴定用
滴定用
滴定用
滴定用
−
滴定用
滴定用

0.1w/v％ メチルオレンジ溶液

中和滴定用

メチルオレンジ- キシレンシアノール FF・エタノール（50）溶液

中和滴定用

メチルオレンジ- キシレンシアノール FF- フェノールフタレイン・エタノール（70）溶液

滴定用

0.1w/v％ メチルレッドエタノール溶液

滴定用

メチルレッド- メチレンブルー・エタノール溶液
0.2w/v％ p- ニトロフェノール溶液
0.1w/v％ ニュートラルレッドエタノール（70）溶液
ニュートラルレッド- ブロモチモールブルー・エタノール溶液
1w/v％ パラロゾール酸エタノール（50）溶液
0.1w/v％ ピロカテコールバイオレット溶液

滴定用
滴定用
滴定用
滴定用
滴定用
滴定用

0.1w/v％ フェノールフタレインエタノール（90）溶液

滴定用

1.0w/v％ フェノールフタレインエタノール（90）溶液

中和滴定用

0.1w/v％ フェノールレッドエタノール（20）溶液

滴定用

0.1w/v％ チモールフタレインエタノール溶液

中和滴定用

0.1w/v％ チモールブルーエタノール（50）溶液

中和滴定用

0.2w/v％ ウラニン溶液

滴定用

0.1w/v％ キシレノールオレンジ溶液

滴定用

容

量

100mL
100mL
100mL
500mL
100mL
100mL
500mL
100mL
100mL
500mL
100mL
100mL
100mL
100mL
100mL
100mL
100mL
100mL
100mL
100mL
500mL
100mL
500mL
100mL
100mL
500mL
100mL
100mL
100mL
100mL
100mL
100mL
100mL
500mL
100mL
500mL
100mL
100mL
500mL
100mL
500mL
100mL
500mL
100mL

希望納入価格（円）
1,700
1,700
1,800
2,300
1,900
1,900
4,200
1,800
1,600
2,800
3,000
2,200
1,700
1,800
2,700
3,000
1,800
2,100
1,800
1,700
2,200
2,700
5,000
2,500
1,800
3,500
2,000
1,800
1,800
2,200
1,900
2,300
1,700
2,800
1,600
2,700
1,700
1,900
2,800
1,900
2,600
1,600
3,000
1,700

pH 試験用指示薬
コード No.
023-14561
025-14565
024-14591
024-14611
026-14615
028-14631
037-18541
031-18561
038-18571
136-14061
130-14081
134-14121
136-14125
138-14141
163-20601
167-20621
203-15501
207-15521

26

品

名

規

格

0.04w/v％ ブロモクレゾールグリーン溶液

pH 試験用

0.04w/v％ ブロモクレゾールパープル溶液

pH 試験用

0.04w/v％ ブロモチモールブルー溶液

pH 試験用

0.04w/v％ ブロモフェノールブルー溶液
0.04w/v％ クレゾールレッド溶液
0.04w/v％ クロロフェノールレッド溶液
0.1w/v％ コンゴーレッド溶液
0.05w/v％ メチルエローエタノール溶液
0.1w/v％ メチルオレンジ溶液

pH 試験用pH 試験用pH 試験用pH 試験用pH 試験用pH 試験用

0.04w/v％ メチルレッド溶液

pH 試験用

0.04w/v％ メタクレゾールパープル溶液
0.04w/v％ フェノールフタレインエタノール（40）溶液
0.04w/v％ フェノールレッド溶液
0.1w/v％ チモールフタレインエタノール溶液
0.04w/v％ チモールブルー溶液

pH 試験用pH 試験用pH 試験用pH 試験用pH 試験用和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

容

量

100mL
500mL
100mL
100mL
500mL
100mL
100mL
100mL
100mL
100mL
100mL
100mL
500mL
100mL
100mL
100mL
100mL
100mL

希望納入価格（円）
1,600
2,900
1,700
1,200
2,100
1,600
1,700
1,700
1,700
1,800
1,700
1,500
3,000
1,700
1,700
1,700
1,900
1,800

タンパク質染色がたったの 10 分、ペプチドマスフィンガープリント（PMF）OK
ネガティブ ゲル染色 MS キット
アクリルアミドゲルにより泳動分離したタンパク質をネガティブ染色すると、ゲルのバックグラウンドが白濁し、バンドの透明な像が得られます。泳動像は黒い紙を背景にして確認します。本品は、CBB 染色に比べ時間短縮及び高感度化しており、
ブロッティング前の分離チェックの他、タンパク質が不必要な修飾を受けませんのでシークエンスや質量分析のバンドの切り出しに有効です。
〔特〔キット構成〕長〕

 5 〜 10 分で銀染色と同等の高感度① 染色液 A
② 染色液 B

（3ng まで検出可能）

③ 脱色液
1

2

3

4

5

6

lane 1 ： 1.6ng（BSA）
lane 2 ： 3.25ng
lane 3 ： 15ng
lane 4 ： 75ng
lane 5 ： 300ng
lane 6 ： 600ng

500mL × 1 本
500mL × 1 本
500mL × 1 本

保存条件：室温保存
Q

A

Q. なぜバックグラウンドが白濁するのですか？
A. バックグラウンドでは、染色液 A に含まれるイミダ
ゾール誘導体の水素原子が染色液 B に含まれる硫酸亜鉛の Zn に置換され白濁します。一方、タンパク質
バンドは一般的に電荷を持っておりイミダゾール誘導体に Zn が置換されるのを阻害します。

 タンパク質が色素による修飾を受けずペプチドマス
フィンガープリンティングに最適
アクリルアミドゲルで電気泳動後の rat muscle glycogen phosphorylase をネガティブ染色し、50ng のバンドを切り出してトリプシンで in-gel 消化後、質量分析した。

Q. プレステインマーカーや有色タンパク質を染色するとどうなりますか？
A. バックグラウンドが白濁し、マーカーは通常の染色を示します。

a : rat phosphorylase (97k)b : bovine serum albumin (68k)c : hen egg white ovalbumin (45k)
d : bovine carbonic anhydrase (31k)lane 1 : 50ng
lane 2 : 100ng
lane 3 : 150ng

Q. 染色後のゲルを乾燥して保存できますか？
A. できません。乾燥しないように適当な量の蒸留水が入ったポリ袋中、冷蔵で 3 週間安定です。
Q. 染色時の温度条件は？
A. 室温で染色して下さい。銀染色のような温度管理は必要ありません。
Q. 染色前に固定する必要はありますか？
A. 必要ありませんが、50% エタノールで 5 分間固定す
るとより高感度に染色できます。
Q. 商品名の MS の意味は？
A. Mass Spectrometry（質量分析）の略です。泳動分離したタンパク質バンドは染色色素の修飾を受けず、質量分析に使用できますので商品名としました。

（データ提供：大阪府立母子保健総合医療センター研究所
和田芳直先生）A

 ウエスタンブロット可能 染色後 2 週間冷蔵保存でもプロテオーム解析 OK 染色・脱色の繰り返し可能Q〔参考文献〕
Fernandez-Patron,C. et al.：Anal. Biochem., 224, 263（1995）.

コード No.

品

293-57701

Negative Gel Stain MS Kit

名

規

格

電気泳動用

容

量

20 回用

希望納入価格（円）11,000

和光純薬時報 Vol.70, No.1（2002）

27

和
光
純
薬
時
報
第
七
十
巻

試料前処理用シリンジタイプ固相抽出カラム
Presep® RPP

第一号

複雑な組成の試料から目的の物質のみを抽出する方法として、固相抽出法は簡便で溶媒使用量も少ないといった利点をもちます。

Presep® RPP はポリマー素材を改良したスチレンジビニルベンゼン- ポリメタク
リレートを充てん剤として採用したシリンジタイプ固相抽出カラムです。シリカ系
充てん剤と比較して、極性化合物の保持が大きく、塩基性化合物の相互作用による吸着が少ないといった利点をもちます。
生体試料中の薬物分析、環境分析など幅広い分野での適用が可能です。
〔特 長〕● 優れた回収率、再現性● 幅広い pH 範囲（pH 1 〜 14）で使用可能
コード No.
294-36851
290-36951
290-37051

平均細孔径

細孔容積

比表面積

9nm

1.2ml/g

600m2/g

平均粒子径®

プレセップ RPP（60mg/3ml）®
プレセップ RPP（200mg/6ml）®
プレセップ RPP（500mg/6ml）

30[m
60[m

品
名
®
Presep RPP（60mg/3ml）®
Presep RPP（200mg/6ml）®
Presep RPP（500mg/6ml）

規 格
試料前処理用
試料前処理用
試料前処理用

10 個× 5
10 個× 5
10 個× 5

容

量

品
名
®
Presep -Agri®
Presep けいそう土（1g/6ml）®
Presep けいそう土（2g/15ml）®
Presep けいそう土（4.5g/25ml）

規 格
残留農薬試験用
試料前処理用
試料前処理用
試料前処理用

10 個× 5
100 本
100 本
100 本

希望納入価格（円）
照 会
照 会
照 会

〔関連商品〕
コード No.
291-26851
292-35051
298-35151
294-35251

容量

希望納入価格（円）38,00022,00024,00026,000

試料前処理用カートリッジタイプ固相抽出カラム
Presep® -C アルミナ
ご好評いただいております、カートリッジタイプ固相抽出カラムプレセップ ® -C
シリーズに、新たにアルミナが加わりました。塩基性アルミナを充てん、環境分
析・食品分析などの各種試料のクリーンアップ・目的成分の濃縮にお使いいただけます。
また、製品は充てん状態試験をはじめとする厳重な品質管理を行っております
ので再現性がよく、安心してご利用いただけます。
コード No.
290-32051

品®
Presep -C Alumina

名規 格
試料前処理用

10 個× 5

容量

規 格
試料前処理用
試料前処理用
試料前処理用
試料前処理用
試料前処理用

10 個× 5
10 個× 5
10 個× 5
10 個× 5
10 個× 5

希望納入価格（円）
照 会〔関連商品〕
コード No.
294-31851
290-31951
292-32251
296-32151
296-32651

品
名®
Presep -C Silicagel®
Presep -C Florisil®
Presep -C C18（ODS）®
Presep -C Na2SO4®
Presep -C Agri（Short）

容量

希望納入価格（円）25,00025,00025,00025,00038,000

収載されている試薬は、試験・研究の目的にのみ使用されるものであり、家庭用、医療用等他の用途には用いられません。

コード No. が 54＊−＊＊＊＊＊の商品は、Wako Chemicals USA, Inc. で製造されたものです。
記載価格は希望納入価格であり消費税等は含まれておりません。

発行所

28

和光純薬工業株式会社〒 540-8605
大阪市中央区道修町三丁目 1 番 2 号
TEL. 06-6203-3741（代表）

発 行 日
発行責任者
編集責任者
印 刷 所

2002 年 1 月15日
岸 井 松 司大 西 礼 子
共進社印刷株式会社