Mar. 2020

〈原

THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

73―1

1（ 1 ）

著〉

2010 年〜2014 年に近畿地区から分離されたペニシリン低感受性 Streptococcus agalactiae の検出率およびその薬剤感受性率と莢膜抗原血清型別に関する検討
佐賀根祐子 1）・釆野貴代子 1）・藤田拓司 1）・
福田修久 1）・前出卓也 1）・小松

方 2）

ファルコバイオシステムズ総合研究所・検査グループ微生物1）

天理医療大学医療学部臨床検査学科

2）（2019 年 12 月 2 日受付）

2010 年から 2014 年の 4 年間に近畿地区の 427 医療機関から当社に提出された臨床検体より分離した 10,797 株の group B Streptococcus（GBS; Streptococcus agalactiae）
について，ペニシリンに感受性が低下した株（PRGBS: Group B streptococci with

reduced penicillin susceptibility）の分離頻度を調査した。その結果，506 株の PRGBSが検出された。PRGBS の分離頻度は，材料別に呼吸器系材料 5.8%（500/8,590），血液培養 2.4%（6/250），GBS スクリーニングを目的とした膣分泌物材料 0%（0/1,957）であった。さらに，125 株の PRGBS および 307 株のペニシリン感性 GBS（PSGBS）
をランダムに抽出し，薬剤感受性率および莢膜抗原血清型別の調査を行った。薬剤感
受性率では，PRGBS では vancomycin および meropenem 以外は低率であったのに対し，PSGBS では PRGBS と比較して全薬剤とも高率であった。材料別の莢膜抗原血清型と検出頻度の関係は，血液培養由来 86 株のうち，PRGBS 6 株の内訳は III 型が50.0% と最も多く，次いで Ia 型 33.3%，Ib 型 16.7%，一方 PSGBS 80 株の内訳は，Ib
型が 40.5% と最も多く，次いで III 型 19.0%，Ia 型および VI 型が 13.9% であった。呼吸器系材料由来株のうち，PRGBS 119 株の内訳は III 型が 53.7% と最も多く，次いでIb 型 25.6%，Ia 型 13.2%，一方 PSGBS 96 株の内訳は VI 型が 34.7% と最も多く，次いで III 型 29.5%，Ib 型 24.2% であった。GBS スクリーニングを目的とした膣分泌物材
料では，PSGBS 131 株の内訳は Ib 型が 24.4% と最も多く，次いで III 型 22.9%，Ia 型

22.1%，II 型 13.7% であった。今回の検討で，GBS スクリーニングを目的とした培養法からは PRGBS は検出されなかったが，医療関連感染対策や母子感染対策の観点から，今後の動向の監視が必要と考えられる。

2（ 2 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

序文

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対象と方法

Group B Streptococcus（ GBS; Streptococcus

1. 対象

agalactiae）は，しばしば健常人の腸管や泌尿生殖2010 年 9 月から 2014 年 10 月の 4 年間に近畿地器にコロニゼーションし，新生児の敗血症および区の 427 医療機関から当社に提出された臨床検。さらに，免疫不体 よ り 分 離 し た 10,797 株（呼 吸 器 系 由 来 8,590

全や糖尿病，担癌患者等に対する各種感染症の原

株，血液培養由来 250 株および GBS スクリーニン。GBS による感染症

グを目的とした膣分泌物材料由来 1,957 株）の治療にはペニシリン系抗菌薬が第一選択薬として

GBS を対象とした。また，材料ごとの PRGBS の用いられていることが多いが，近年，Penicillin

分 離 頻 度 を 検 討 す る 目 的 と し て， PCG の MIC

Binding Protein（PBP）のアミノ酸置換によってが ≧0.25 μg/mL を 示 し た 506 株 を PRGBS 群，

ペ ニ シ リ ン に 感 受 性 が 低 下 し た 株（PRGBS:≦0.12 μg/mL を示した 10,291 株を PSGBS 群としGroup B streptococci with reduced penicillinて調査した。

髄膜炎の筆頭原因菌である
因菌としても重要である

1〜3）

4,5）

susceptibility）の 出 現 が 報 告 さ れ た。こ れ ら

莢膜抗原血清型別および薬剤感受性率の調査の 報 告 を 受 け，Clinical and Laboratory Standards

は，乱数表を使用してランダムに抽出した 432 株

6,7）Institute（CLSI）では，β 溶血性連鎖球菌に対する （PRGBS 群 125 株，PSGBS 群 307 株）を対象とし
薬剤感受性試験のコメントの中で，penicillin G

た。材 料 ご と の 内 訳 は，血 液 培 養 由 来 86 株

（PCG）の MIC が＞0.12 μg/mL，あるいは ampicillin （PRGBS 6 株，PSGBS 80 株），呼吸器系由来 215（ABPC）の MIC が＞0.25 μg/mL と判定される菌株株（PRGBS 119 株，PSGBS 96 株），GBS スクリー

は非感受性と報告するとの追記がなされた 8）。 ニングを目的とした膣分泌物材料 131 株（PSGBS
ま た European Committee on Antimicrobial

131 株）であった。

Susceptibility Testing（EUCAST）では PCG の耐性
ブレイクポイントの設定に至った 9）。ペニシリンを含むβ-ラクタム系薬に低感受性あるいは耐性を

2. 方法
す べ て の GBS は， 5% ヒ ツ ジ 血 液 寒 天 培 地

獲得した株の出現は，今後の GBS による感染予 （BD）を用いて集落を得た。また，GBS の同定は
防および治療の面で大きな問題となる可能性があ

ランスフィールド分類を用いたラテックス凝集法る。今回我々は，その出現率を明らかにすべく過による型別で B 群に凝集したものとし，同定試薬

去 4 年間の分離調査を行った。また，呼吸器系材にはセロアイデン ® ストレプトキット（栄研化学料，血液培養および GBS スクリーニングで分離

株式会社）を用いた。

し た ペ ニ シ リ ン 感 性 GBS （PSGBS: penicillin

GBS 莢膜抗原血清型は，Poyart らの方法 10）に

susceptible group B streptococci）と PRGBS をラン

従って PCR 法による莢膜型別関連遺伝子の検出

ダムに抽出し，薬剤感受性率および莢膜抗原血清を行い，血清型の Ia，Ib，II，III，IV，V，VI，VII型について調査を行った。

および VIII を識別した。
薬剤感受性測定は，CLSI M100-S2111）に準拠した微量液体希釈法にて MIC 測定を実施した。極
東ウマ溶血液加ミュラーヒントンブロス（極東Mar. 2020

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73―1

3（ 3 ）

製 薬 工 業 株 式 会 社）を 用 い，35°C, 16〜20 時 間

PSGBS n＝307）を対象として，薬剤感受性率お好気培養後に判定を行った。精度管理株としてよび莢膜抗原血清型別の調査を行った。

Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 を用いた。

薬剤感受性率と莢膜抗原血清型の関係を Table

1 に示した。PRGBS 群では vancomycin（VCM）お結果

よび meropenem（MEPM）以外の抗菌薬の感受性率は低率であった。さらに Ia 型（n＝18）では

10,797 株を対象とした PRGBS の分離頻度を材

他の血清型の感受性率と比較して多くの抗菌薬料別に調査した。呼吸器系材料 5.8%（500/8,590）， で低く，特に ceftriaxon（CTRX），clarithromycin
血液培養 2.4%（6/250），GBS スクリーニングを目 （CAM）， clindamycin （CLDM）， levofloxacin
的とした膣分泌物材料 0%（0/1,957）となり，検 （LVFX）および tetracycline（TC）に対しての感出された PRGBS 506 株 うち 500 株（98.8%）が呼受性率が 0%，次いで ABPC で 16.7%，cefotaxime

吸器系材料であった。

（CTX）
で 22.2% であった。PSGBS 群では，PRGBS

ラ ン ダ ム に 抽 出 し た 432 株（PRGBS n＝125,

群と比較して全薬剤とも感受性率は高かったが，Table 1 Susceptibility rate（ % ）between penicillin-resistant S.agalactiae（ PRGBS ）andpenicillin-susceptible S.agalactiae（PSGBS）in each serotype

4（ 4 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

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Table 2 Relationship between specimen and capular serotype in penicillin-resistant S.agalactiae（PRGBS）and penicillin-susceptible S.agalactiae（PSGBS）

LVFX で 56.7%，TC で 34.2% であった。血清型別剤 感 受 性 率 は， VCM お よ び MEPM は 100% でで 50% 以下の感受性率を示したのは，LVFX で Ibあった。CAM，TC および LVFX は 0%，ABPC お型および VI 型，TC で Ia 型，II 型，III 型および V

よ び CTX は 50%， CTRX は 16.7%， CLDM は型であった。

33.3% であった。

材料別の莢膜抗原血清型と検出頻度の関係

考察を Table 2 に 示 し た。血 液 培 養 由 来 株 の う ち，

PRGBS 6 株の内訳は III 型が 50.0% と最も多く，次いで Ia 型 33.3%，Ib 型 16.7% であった。PSGBS

本研究は，登録衛生検査所に 427 施設の医療機

80 株の内訳は，Ib 型が 40.5% と最も多く，次いで関から提出された 10,000 検体を超える患者由来

III 型 19.0%，Ia 型および VI 型が 13.9% であった。 材料を用い，PRGBS の分離率を検討したもので呼吸器系材料由来株のうち，PRGBS 119 株の内訳ある。

は III 型が 53.7% と最も多く，次いで Ib 型 25.6%，

PRGBS の 由 来 材 料 は 呼 吸 器 系 材 料 が 全 体 のIa 型 13.2%，PSGBS 96 株の内訳は VI 型が 34.7%

98.8% を占め，血液培養からも 1.2%（6 株）検出と 最 も 多 く，次 い で III 型 29.5%，Ib 型 24.2% でされた。一方，GBS スクリーニングを目的としたあった。GBS スクリーニングを目的とした膣分泌膣分泌物からは検出されなかった。PRGBS の耐物 材 料 で は PRGBS の 分 離 を 認 め な か っ た が， 性メカニズムは PBP 遺伝子変異の蓄積によるも

PSGBS 131 株の内訳は Ib 型が 24.4% と最も多く， ので，特に PBP2X（penicillin binding protein 2X）
次 い で III 型 22.9%， Ia 型 22.1%， II 型 13.7% でに多くの変異を認めると Kimura および Nagano らあった。

が報告している 6,7）。また，Longtin らはペニシリ

血液培養由来の PRGBS 6 株について，莢膜抗ンの長期経口投与後に PBP1a および 2a に変異が原血清型別および薬剤感受性率を調査した。莢膜生じたことにより PRGBS が出現したと報告して

抗 原 血 清 型 別 は，III 型 3 株（50.0%）， Ia 型 2 株

いる 12）。呼吸器系材料から PRGBS が高頻度に（33.3%）および Ib 型 1 株（16.7%）であった。薬出現する意義については不明であるが，長期あMar. 2020

THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

るいは頻回にわたる抗菌薬使用が変異の蓄積

73―15（ 5 ）

いる。Yoon らが 19 年にわたり韓国の乳幼児からにつながっている可能性があると考えられる。 分離した GBS の血清型を，III 型（44.6%），V 型

Morozumi らの国内における成人の侵襲性 GBS 感 （28.6%）， Ia 型（14.3%）， Ib 型（10.7%）， VI 型染症（n＝443）の検討では，PBP2X のアミノ酸置 （1.8%）と報告し，III 型や V 型が多いとしてい換をもつ PRGBS が 2%（9 株）検出されたと報告

る 23）。しかし，この研究では PRGBS は検出されしている 13）。また，Hua らの小児 157 例の血流まなかった。成人の侵襲性 GBS 感染症から分離さた は 髄 液 由 来 の GBS 薬 剤 感 受 性 の 検 討 で は， れる血清型については，Morozumi らの報告では

PCG の感受性率は 98.9% であり，1.1% の非感性

Ib 型（39.5%），V 型（16.0%），III 型（13.8%），VI。Sigaúque ら型（9.5%），Ia 型（8.6%）であった 13）。Björnsdóttir

は，モザンビーク南部の新生児 GBS 感染症由来

らの報告では，Ia 型（22.8%），V 型（17.2%），IIIの GBS 35 株を調査した結果，7 株の PRGBS が検型（16.6%），Ib 型（14.5%），II 型（13.8%）であっ。さらに，Moroi らはた 24）。GBS スクリーニングから分離される血清

日本の妊婦の膣／直腸スワブより得られた 477 株

型 に つ い て は，国 内 で は Ueno ら の 報 告 で V 型株が含まれていたと報告している

出されたと報告している

14）

15）

の GBS 臨床分離株の中から，ペニシリンは感性 （19.1%）， Ib 型（18.6%）， III 型（16.2%）， VI 型
であるがセファロスポリン系薬の MIC 値が上昇 （14.9%）および Ia 型（14.6%）であった 22）。海外した株が 5 株検出されたと報告している 16）。一方
で，侵襲性 GBS 感染症

17,18）の 報 告 で は， Teatero ら の 米 国 の 報 告 で III 型

や GBS スクリーニン （25%），Ia 型（23%），V 型（19%），II 型（13%），において PRGBS は検出されなかったと

Ib 型（9%）， IV 型（5%）お よ び VI 型（1%）での報告も多数存在する。現在のところ，国内におあった 25）。Belard らの中央アフリカのガボンの報

いては新生児侵襲性 GBS 感染症および GBS スク

告で V 型（30.3%），Ib 型（22.9%），Ia 型（12.8%），

リーニングについて PRGBS が検出されたとの報

II 型（6.4%）であり，血清型 IV，VI，VII，XIII

告はないが，すでに PBP 変異を伴ったセファロス

および XI は検出されなかった 26）。我々の成績

ポリン系薬の MIC 値の上昇や，海外における新生

で は， Ib 型 が 24.4% と 最 も 多 く，次 い で III 型

グ

19〜22）児 GBS 感染症由来株の中に PRGBS が含まれてい （22.9%），Ia 型（22.1%），II 型（13.7%）であり，ることから，今後我が国においても新生児や妊婦

国内および海外の既報と一致または類似している

GBS スクリーニングから既報と同様の株が分離ものはなかった。

される可能性があるため，モニターが必要であると考えられる。

PRGBS の薬剤感受性率については，Seki らがEM の 感 受 性 率 が 28.9%， LVFX の 感 受 性 率 が

莢膜抗原血清型について，国内で実施された

4.4% と報告している 27）。我々の成績でも，EM とPRGBS 関連文献と比較すると，今回の検討で最同系統の CAM の感受性率が 8.0%，LVFX の感受も多く検出した III 型の分離率は，Kimura らの報性率が 7.2% と低率であった。PRGBS の約 90% が

告 で 57.1% ， Morozumi ら の 報 告 で 55.6% で あ

CAM，LVFX および TC 耐性であったことから，，我々の成績と同等であった。一方，Nagano

多剤耐性を示す GBS が検出された場合は PRGBSらの報告では III 型は分離されておらず，VI 型がの可能性を視野に入れる必要があると考えられ多く検出されており，今回の検討とは異なる成績

る。

6）

り

13）

であった 。早期新生児 GBS 感染症から分離され血清型別の薬剤感受性については Yoon らが Vる血清型については，III 型が多いことが知られて型の EM および CLDM の感受性率が最も低かっ7）

6（ 6 ）THE JAPANESE JOURNAL OF ANTIBIOTICS

たとしており，血清型別での薬剤感受性率の違いについて報告をしている 23）。我々の成績では，

PRGBS 群の Ia 型で CTRX，CAM，CLDM，LVFX
お よ び TC に 対 し て の 感 性 率 が 0% で あ っ た。

PSGBS 群においても，特定の血清型で著しい感
受性率の低下は認められず，Yoon らの報告とは異なる結果であった。
今回の成績から PRGBS 出現の特徴をまとめると，由来材料は呼吸器系材料が非常に多かった。
血清型は III 型が最も多く，次いで Ib 型および Ia型であった。さらに薬剤感受性率は CAM 8.0%，

CLDM 30.4%， LVFX 7.2% お よ び TC 10.4% であった。今回の検討のリミテーションは，当社が登録衛生検査所という特性上，PRGBS が検出された患者の基礎疾患や使用抗菌薬など，詳細な症 例 検 討 に 至 る こ と が で き な い こ と で あ り，

PRGBS の臨床的意義については不明である。さ
らに，今回の検討では GBS の血清型および薬剤感受性についてのみの比較となり，その他の病原因子についての検討は行っていない。GBS の病原
因 子 に つ い て は，血 清 型 の 他 に ク ロ ー ン 複 合
体 28,29）が知られている。その他にも，細胞に障害を与える因子（β-hemolysin/cytolysin），宿主の免疫機構から回避するための因子（C5a peptidase）など重要ないくつかの因子が同定されており 30），
今後の分子生物学の発展に伴ってより詳細に解析されていくものと思われる。
今回の検討で，GBS スクリーニングを目的とした培養法からは PRGBS は検出されなかったが，医療従事者から妊婦や新生児へ伝播する可能性も考えられるため，今後の PRGBS の拡散が懸念される。医療関連感染対策や母子感染対策の観点から，今後の動向の監視が必要と考えられる。
利益相反
申告すべきものなし

73―1

Mar. 2020

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as well as its rates of antimicrobial susceptibility andcapsular antigen serotype
Yuko Sagane1）, Kiyoko Uneno1）, Takuji Fujita1）,
Nobuhisa Fukuda1）, Takuya Maede1）and Masaru Komatsu2）
1）

Technical Section of Microbiology, General Laboratory,
FALCO Biosystems, Ltd.
2）
Department of Clinical Laboratory Science, division of Health Science,
Tenri Health Care University
We investigated the detection rate of group B streptococci with reduced penicillin
susceptibility（PRGBS）in the Kinki region of Japan from 2010 to 2014. We isolated 10,797
samples of group B Streptococcus（GBS; Streptococcus agalactiae）strains from clinicalmaterials submitted to our laboratory by 427 medical institutions for identiﬁcation of bacteria
during this 4-year period. As a result, 506 strains of PRGBS were detected. The detection rates of
PRGBS strains in the respiratory tract, blood culture, and GBS screening of vaginal swabs were
5.8%（500/8590）, 2.4%（6/250）, and 0%（0/1957）, respectively. Furthermore, we randomly
extracted 125 strains of PRGBS and 307 strains of penicillin-sensitive GBS（PSGBS）andinvestigated rates of antimicrobial susceptibility, and capsular antigen serotype. The antimicrobial
susceptibility rate of PRGBS was low except for vancomycin and meropenem, whereas that for
PSGBS was high for all drugs. We also investigated the relation between the capsular antigen
serotype by material and detection frequency. From blood cultures, the most frequent serotype in
6 strains of PRGBS was III（50.0%）, followed by Ia（33.3%）and Ib（16.7%）, and that in 80
strains of PSGBS was Ib（40.5%）, followed by III（19.0%）Ia and VI（13.9%）. From therespiratory tract, the most frequent serotype in 119 strains of PRGBS was III（53.7%）, followedby Ib（25.6%）and Ia（13.2%）, and that in 96 strains of PSGBS was VI（34.7%）, followed by III（29.5%）and Ib（24.2%）. From GBS screening of vaginal swabs, the most frequent serotype in
131 strains of PSGBS was Ib（24.4%）, followed by III（22.9%）, Ia（22.1%）, and II（13.7%）,
whereas PRGBS was not detected at all. We consider monitoring of future trends to be necessary
from the viewpoints of the control of medically related infections and mother-to-child infections.