第１８回知的財産翻訳検定＜第１０回和文英訳＞
１級 バイオテクノロジー 標準解答
※問 2「フローサイトメーター」の訳語を”a flow cytometer”に訂正いたしました。
（2015.10.19）【背景技術】
加齢臭は、アルデヒド類に分類されるノネナールが主な原因成分であることが知られている。アルデヒド分解酵素はミトコンドリアが保有しており、加齢によりミトコンドリアの機能が低下するとアルデヒド分解酵素の働きが低下する。これにより、ノネナールの分解が不全となり、結果としてノネナールが体外に出され、これが加齢臭の原因となる。
加齢臭は不快なものとされ、特に中高年世代にとっては大きな関心事であり、加齢臭を抑制する組成物の開発が望まれている。
加齢臭を抑制するものとして、例えば、特許文献１には、食用担子菌類の有機酸含有親水性溶媒抽出物を有効成分として含有する組成物、特許文献２には、水およびブドウ糖を含有する組成物が記載されている。
また、ミトコンドリアＤＮＡはアンチエイジングと関係していることが報告されている。

The main component causing the aging odor has been known to benonenal that is classified as an aldehyde. Mitochondria have an aldehyde
dehydrogenase; and when mitochondrial function has been reduced withaging, activity of the aldehyde dehydrogenase decreases accordingly. Thus
nonenal comes to be insufficiently metabolized, resulting in release from thebody and causing the aging odor.
The aging odor is thought to be unpleasant and is a great concern tothe middle-aged and older generations in particular. The development ofcompositions suppressing the aging odor has been desired.
For example, a composition comprising, as an effective ingredient, anorganic acid-containing hydrophilic solvent-extract of an edible
basidiomycete and a composition comprising water and glucose are describedas suppressors of the aging odor in Patent literatures 1 and 2, respectively.
Furthermore, mitochondrial DNA was reported to be involved inanti-aging.

問２【実施形態】
コルヒチンを処理した苗条を再生させることにより、バナナ植物体を得ることができる。苗条の再生の手法は、周知である。得られたバナナ植物体に倍数性植物以外が混在する場合には、フローサイトメーターにより目的の倍数性植物を選抜することが可能である。得られた倍数性植物は、稔性花粉を産出することが期待される。
一旦、稔性花粉を産出する倍数性植物が得られれば、その稔性花粉を野生型バナナ属植物へ受粉することにより、バナナ属植物の品種改良を行うことができる。野生型バナナ属植物としては、例えば、芭蕉、糸芭蕉、ヒメ芭蕉などが挙げられる。芭蕉、糸芭蕉
は、耐寒性であるため、これらバナナ属植物との交配により、稔性回復させたバナナ属植物に耐寒性を付与することが可能であり、これにより、例えば、食用バナナ属植物を育成しうる地域を拡大でき、その果実である食用バナナの収穫量の増大を図ることも可能となる。

Banana plants may be obtained by regenerating colchicine
treated shoots. The method for regeneration of shoots iswell-known. In case that the resultant banana plants arecontaminated with non-polyploid plants, the intended polyploid
plants may be selected with a flow cytometer. The resultant
polyploid plants are expected to produce fertile pollen.
After the polyploid plant producing fertile pollen is obtained,
pollination of the fertile pollen to wild type plants of thegenus Musa allows development of improved cultivars of the genus
Musa. Examples of wild type Musa plants include Musa basjoo,Musa liukiuensis and Musa coccinea.
M. basjoo and M.
liukiuensis are cold tolerant. Cross fertilization between M.
basjoo or M. liukiuensis and a fertility-restored Musa plantcan give cold tolerance to the Musa plant. Thus, as an exampleof the result, regions for cultivating edible Musa plants canbe extended and a yield amount of edible banana fruits can beincreased.

問３
【実施例】
第３染色体上のシクロピアゾン酸生合成遺伝子クラスターに含まれる遺伝子として、ｃｐａＣ及びｃｐａＤが予想される。従って、本発明で同定されたＰＫＳ－ＮＲＰＳ遺伝子、及びそれら遺伝子の系統的な破壊を行った。
各遺伝子破壊に先立ち、シクロピアゾン酸生産株における、遺伝子破壊効率を上げるために、アスペルギルス・オリゼ ＮＢＲＣ４１７７株における非相同組換えに関わるタンパク質Ｋｕ７０の遺伝子を破壊した株、Ａ４１７７Ｋ株を作製し、さらに形質転換用選択マーカーとしてオロチジン－５’－リン酸デカルボキシラーゼをコードするＰｙｒＧ遺伝子を用いるために、ＰｙｒＧ遺伝子の一部が欠損したＤＮＡ断片配列を用いて、５’－ホスホオロチジン酸耐性を指標とし、プロトプラストＰＥＧ法を用いる当業者に公知の手段で形質転換を行い、一部欠損したＰｙｒＧ配列を保持する株、Ａ４１７７ＫＰ株を取得した。これらＫｕ７０およびＰｙｒＧ遺伝子の破壊に用いたＤＮＡ断片は、前述の Aspergillus oryzae RkuN16ptr1 株のゲノム配列よりＰＣＲにより増幅したＤＮＡ断片を用いた。
cpaC and cpaD are anticipated to be included in the cyclopiazonic acidbiosynthesis gene cluster on the third chromosome.

Thus, these genes as well as

PKS-NRPS genes identified according to the invention were systematicallydisrupted.
Prior to the gene disruption, A4177K strain was produced by disrupting thegene encoding Ku70 protein involved in non-homologous recombination inAspergillus oryzae NBRC4177 strain in order to increase efficiency of the genedisruption in the cyclopiazonic acid-producing strain. In order to use PyrG geneencoding orotidine-5-monophosphate decarboxylase as a selection marker fortransformation, the A4117K strain was transformed with a DNA fragment having apartially defective PyrG gene by the protoplast-PEG method known to those in theart and an A4177KP strain having a partially defective sequence of the PyrG gene
was obtained using orotidine 5'-monophosphate resistance as a marker.

For

disruption of the Ku70 and PyrG genes, DNA fragments amplified by PCR on thebasis of the genome sequence of the aforementioned Aspergillus oryzae RkuN16ptr1
strain were used.

問４【特許請求の範囲】【請求項１】
多孔質体に播種された軟骨細胞を培養する工程、又は多孔質体に播種された軟骨細胞に分化する幹細胞を軟骨細胞に分化して軟骨細胞を培養する工程と、前記軟骨細胞が培養された前記多孔質体を被検体に移植する工程とを含む、骨の損傷部位の治療方法。
【請求項２】
前記軟骨細胞に分化する幹細胞は、間葉系幹細胞であることを特徴する請求項１に記載の骨の損傷部位の治療方法。
【請求項３】
前記多孔質体に播種された前記軟骨細胞、及び前記多孔質体に播種された前記軟骨細胞に分化する幹細胞は、他人、又は動物から採取された軟骨細胞又は軟骨細胞に分化する幹細胞に基づくものであり、当該採取された軟骨細胞、及び当該採取された幹細胞は、急凍結処理による脱細胞化がされていることを特徴とする請求項１に記載の骨の損傷部位の治療方法。

1.
A therapeutic method for a site of injury in a bone,comprising the steps of:culturing chondrocytes seeded on a porous body, orallowing stem cells seeded on a porous body and capable ofdifferentiating into chondrocytes, to differentiate into thechondrocytes and culturing the chondrocytes;
transplanting the porous body on which the chondrocytes
are cultured to a subject.
2.
A therapeutic method for a site of injury in a boneaccording to claim 1, characterized in that the stem cells
capable of differentiating into the chondrocytes aremesenchymal stem cells.
3.
A therapeutic method for a site of injury in a boneaccording to claim 1, characterized in that the chondrocytes
seeded on the porous body and the stem cells seeded on the porous
body and capable of differentiating into the chondrocytes, arederived from chondrocytes and stem cells capable ofdifferentiating into chondrocytes, respectively, obtained
from another individual or an animal, and the obtained

chondrocytes and stem cells are decellularized with flash
freezing.