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関税中央分析所報 第 47 号

イムノクロマト法を用いた薬物検査キットの評価
藤井 友和*、大類 仁*、佐貫 薫*、倉嶋 直樹*、池原裕可里*
Evaluation of Drug Test Kit based on Immuno-Chromatography
Tomokazu FUJII*, Hitoshi ORUI*, Kaori SANUKI*, Naoki KURASHIMA* and Yukari IKEHARA**Central Customs Laboratory, Ministry of Finance
6-3-5, Kashiwanoha, Kashiwa, Chiba 277-0882, JapanTo raise the precision of screening for illegal drugs in the control site of Customs, as a technique to reinforce simple
chemical reagents which uses color reaction, in this study we examined the detection limit concentration, cross reaction(false reaction), etc. of a drug test kit based on the immuno-chromato method. Any of the test kits for methamphetamine,
amphetamine, MDMA and opiates were able to detect the target with high sensitivity and selectively, and the test kit forcannabis was able to detect cannabis selectively although sensitivity was low. It is considered that the drug test kit based on
the immuno-chromato method is very useful in the control site of Customs.
れらの尿検査用検査キットが税関の取締現場で薬物判定のための１．緒言検査手段として使用することができれば、検査精度の更なる向上が期待される。

税関の取締・検査現場で発見された、覚せい剤や麻薬、大麻等

そこで本研究においては、市販のイムノクロマト法による薬物の「不正薬物」と嫌疑される物品については、呈色反応を利用し検査キットについて、検出限界濃度、誤反応（交差反応）についた試験（呈色試験）により、不正薬物か否かのスクリーニングをて調査し、税関での使用に有効か否かを検討したので報告する。

行っている。しかし、呈色試験は不正薬物以外の物質にも陽性を２．実示す場合があるため、呈色試験を補完する方法の導入が求められ験ている。
近年、特定の成分に対する選択性と感度の高さから、免疫学的測定法（イムノアッセイ）を利用した簡便な検査法が注目されている。イムノアッセイとは、測定したい物質（抗原）を動物の体内に入れて抗体を作らせ、それを取り出して検査キットに組み込み、抗原と抗体が特異的に結合することを利用して、検査対象物

２．１ 薬物検査キット
Fastect II Drug Screen Dipstick Test：Branan Medical Corporation 製（USA）（メタンフェタミン用、アンフェタミン用、MDMA 用、あへん用及び大麻用）

中の抗原の有無を判定する方法であり、食品中のアレルゲン検査や尿中の不正薬物の検査等の幅広い分野で利用されている。
尿中の薬物検査キットについては、イムノアッセイとクロマト

２．２ 試料
メタンフェタミン用、アンフェタミン用、MDMA 用及びあへんグラフィーを併用したイムノクロマト法が主に用いられており、用検査キットで使用した試料を、Table 1 に示す。大麻用検査キッ

操作の簡便さと判定の容易さから、その市場は拡大している。こトで使用した試料を、Table 2 に示す。

* 財務省関税中央分析所 〒277-0882 千葉県柏市柏の葉 6-3-5

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イムノクロマト法を用いた薬物検査キットの評価

Table 1 Samples for methamphetamine, amphetamine, MDMA and opiates test kit

Classification

Drugs (20 kinds)

SampleHeroinBuprenorphine hydrochloride
Cannabis resin
Codein phosphate
Dihydrocodein phosphate
Ethylmorphine hydrochloride
Ephedrine hydrochloride
Acetylsalicylic acidp-Acetamide phenol
dl-Adrenalin
4-Amino antipyrine
1-Amino-4-phenyl butane
3-Amino-1-phenyl butane

Ketamine
Lefetamine
MBDB
MDA
MDMA
Mefenorex hydrochloride
3-Hydroxy tyramine hydrochloride
Ibuprofen
Isobutyl benzene
Mephentermine
2-(4-Methoxyphenyl) ethylamine
Methylamine hydrochloride
3,4-Methylenedioxy phenylethylaminehydrochloride
N-Methylphenylethylamine(R)-(+)-ß-Methylphenylethylamine

AnilineChemical reagent for
general studies (41 kinds)

Commercial medical
supplies (6 kinds)
Foods (4 kinds)

Amino acids (27 kinds)

Methamphetaminehydrochloride
dl-Methylephedrine
Morphine hydrochloride
dl-Norephedrine
OpiumPhentermine

d-Amphethamine sulfate

Benzylamine
Caffeine
dl-p-Chloroamphetamine
l-a-Narcotinehydrochloride
Dehydroacetic acid
5-Nitrobarbituric acid
Dextromethorphan
Papaverine hydrochloride
p-Dimethylaminobenzaldehydel-Phenylalaninol
3,4-Dimethoxy phenylethylamine
2-Phenylethylamine
Ethylamine hydrochloride
3-Phenylpropylamine
ContacPL granule
Pavulon S gold fine grain
KefralYin qiao sanShoseiryuto
Worcester sauceSeaweed tea （Powder）
Soy sauceß-Alanine
Glutaminel-Alanined-Glutaminic acid
4-Aminobutyric acid
Glycine(R)-(-)-2-Aminobutyric acidl-Histidinel-Argininel-Hydroxyproline
dl-Asparagine
l-Isoleucine
dl-Aspartic acidl-Methionine
l-Cysteinel-Leucinel-Cystinel-Lysine hydrochloride

Procaine
dl-Synephrine
TolueneTyramine
Acid dye
Basic dye
Direct dye
Disperse dye
Reactive dye
Vat dyePigment

Poppy seed (Bean-jam bread)l-Ornithine hydrochloridel-Phenylalanine(L)-(-)-Proline
l-Serine
l-Theanine(L)-(-)-Threonine
dl-Tryptophanl-Tyrosine
l-Valine

Table 2 Samples for cannabis test kit

Classification
Drugs (2 kinds)
Cigarette (5 kinds)

Tea (21 kinds)

Foods (3 kinds)

SampleCannnabis (Keep in CCL)
Seeds of cannnabis
Cabin
Hi-Lite
Hope
Seven stars
Marlboro
Banaba tea
Ginkgo tea
Mulberry leaf tea
Sri Lankan green tea （with lemon）
Bear bamboo grass tea
Green tea
Persimmon leaf tea
Taiwanese tea
Dokudami tea
Job's tears tea
Psidium tea
Tian Cha
Eucommia ulmoides tea
Loquat tea
Red tea
Field horsetail tea
Masala tea
Rooibos tea
Gimnema sylvesta tea
Mate tea
Sri Lankan green tea （with jasmine）
Seeds of cannabis (in seven-spice chili pepper)
Cannnabis beer (not drug)
Toasted laver

２．３ 測定２．３．１ 反応限界濃度及び交差反応の検討
２．３．１（1） メタンフェタミン用、アンフェタミン用、MDMA 用及びあへん用検査キット
10 mg/ml の濃度で試料を蒸留水に溶解又は分散させたものを、測定試料溶液の原液とした。

検査キットの試験方法は、試料原液に検査キットの先端を 10秒浸積した後、3 分間水平に静置し、判定ラインの有無により該否を判定した。
測定試料原液で陽性反応が出た場合は、原液を 10 倍に希釈して再び検査キットによる試験を行った。この操作を検査キットが陰性を示すまで繰り返し行った。

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関税中央分析所報 第 47 号(a) The result is positive when there is a red line in the "C" region and no line in the "T" region.

(b) The result is negative when there are two red lines, one in the "C" region and the other in the "T" region.
Fig.1 Examples of judgment: (a) positive result, (b) negative result

２．３．１（2） 大麻用検査キット
試料 100 mg に 2 %炭酸ナトリウム水溶液を 1 ml 加え、測定試料溶液の原液とし、２．３．１と同様に検査キットが陰性反応をTable 3 Minimum concentration of detection using methamphetamine test kit

Concentration
100 ng/ml

示すまで試験を繰り返した。

10 µg/ml

２．３．２ 溶媒の影響の検討

100 µg/ml

溶媒に蒸留水又は水道水を用いた場合における目的薬物の検出限界濃度について、比較検討した。

３．結果及び考察

1 mg/ml

３．１ 反応限界濃度及び交差反応の検討結果
３．１．１ メタンフェタミン用検査キット
結果を Table 3 に示す。なお、10 mg/ml で陰性のものは記載していない（以下 3.1.4 まで同じ）。目的成分であるメタンフェタミンは、100 ng/ml の濃度で選択的に検出できた。10 µg/ml 以上の濃度では、主にメタンフェタミンの類似構造を有するアミン系化合物に対し、交差反応が確認された。

10 mg/ml

SampleMethamphetamine hydrochloride
MDMAPMMA
Ephedrine hydrochloride
MBDB
Mephentermine
dl-Methylephedrine
MDA
dl-Synephrine
Procaine
N-Phenylethylamine
d-Amphethamine sulfate
Phentermine
Mefenorex hydrochloride
2-Phenylethylamine
Ethylamine
Diethyl amine
Triethyl amine
3,4-Dimethoxy phenylethylamine2-(4-Methoxyphenyl) ethylamine(R)-(+)-ß-Methylphenylethylamine
Tyramine

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イムノクロマト法を用いた薬物検査キットの評価

３．１．２ アンフェタミン用検査キット

３．１．４ あへん用検査キット

結果を Table 4 に示す。目的成分であるアンフェタミンは、1

結果を Table 6 に示す。あへん並びにあへん中の麻薬成分であるµg/ml の濃度で選択的に検出できた。100 µg/ml 以上の濃度では、モルヒネ、エチルモルヒネ、コデイン、ヘロイン及びジヒドロコ

主にアンフェタミンの類似構造を有するアミン系化合物に対し交デイン（以下、あへん類と略記する）は、100 ng/ml～1 µg/ml の濃差反応が確認された。

度で選択的に検出できた。
市販風邪薬の一つが陽性反応を示したが、これは成分として含Table 4 Minimum concentration of detection using amphetamine test kit

有する、ジヒドロコデインに反応したためと考えられる。
その他、Concentration
1 µg/ml

1 mg/ml 以上の濃度で、アミン系化合物に対し交差反応を示した。

100 µg/ml

1 mg/ml

10 mg/ml

Sampled-Amphethamine sulfate
MDATyramine
Phentermine
2-Phenylethylamine
3-Amino-1-phenylbutane
3,4-Dimethoxy phenylethylamine
2-(4-Methoxyphenyl) ethylaminel-Phenylalaninol
MDMAEthylamine
Diethyl amine
Triethyl amine
2-(4-Chlorophenyl) ethylamine

３．１．３ MDMA 用検査キット
結果を Table 5 に示す。目的成分である MDMA は、10 µg/ml の濃度で選択的に検出できた。100 µg/ml 以上の濃度では、主にMDMA の類似構造を持つ化合物に対し、交差反応が確認された。

Table 6 Minimum concentration of detection using opiates test kit

Concentration
100 ng/ml

1 µg/ml
100 µg/ml
1 mg/ml
10 mg/ml

３．１．５ 大麻用検査キット
結果を Table 7 に示す。なお、100 mg/ml で陰性のものは記載していない。大麻以外の試料について交差反応を示すものは無く、目的物質である大麻を選択的に検知できた。

Table 5 Minimum concentration of detection using MDMA test kit

Concentration
10 µg/ml
100 µg/ml

1 mg/ml

10 mg/ml

Sample
MDMAMDAMBDB
Methamphetamine hydrochloride
Mefenorex hydrochloride
2-Phenylethylamine
3-Phenylpropylamine
1-Amino-4-phenylbutane
3-Amino-1-phenylbutane
2-(4-Chlorophenyl) ethylamine
2-(4-Methoxyphenyl) ethylamine3,4-Methylenedioxy phenylethylaminehydrochloride
N-Methylphenylethylamine(R)-(+)-ß-Methylphenylethylamine
d-Amphethamine sulfate
Ephedrine hydrochloride
Phentermine
Ethylamine
Diethyl amine
Triethyl amine
3,4-Dimethoxy phenylethylaminel-Phenylalaninol
Benzylamine
Tyramine

SampleOpium
Morphine hydrochloride
Ethylmorphine hydrochloride
Codein phosphate
HeroinDihydrocodein phosphate"Pavulon S gold fine grain"
Triethyl amine
Ethylamine
Diethyl amine
Procaine

Table 7 Minimum concentration of detection using cannabis test kit

Concentration
1 mg/ml
10 mg/ml
100 mg/ml

SampleCannabis resin （The surface）Cannabis resin （The inside）
Cannabis seed （Gathered by cannabis grass）

３．２ 溶媒の影響の検討結果
水道水を使用した場合の結果を Table 8 に示す。溶媒を水道水とすると、蒸留水を使用した場合と比較して感度が低下した。
３．３ 総括評価
今回使用した検査キットは主に尿検査用のものであるが、大麻用検査キット以外は目的成分の水溶液に対しても高い感度を示した。
抗原抗体反応では、類似構造を有する化合物に対して交差反応を示すことが一般的に指摘されているが、本研究で使用した検査キットにおいても同様の傾向を示した。特に高濃度領域では、非該当薬物を薬物であると誤認する可能性が高いことが示唆された。
また、メタンフェタミン用、アンフェタミン用及び MDMA 用の検査キットでは、チラミン等のいわゆる腐敗アミン類に対しても交差反応を示した。従って、腐敗した又は腐敗のおそれのある貨物を検査対象とする場合は、注意を要すると考えられる。

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関税中央分析所報 第 47 号

Table 8Concentration of detection limit dissolved in distilled water and tap water

Test kit

Reagents

Methamphetamine test kit
Amphetamine test kit
MDMA test kit

Methamphetamine hydrochloride
d-Amphethamine sulfate
MDMA
HeroinMorphine hydrochloride
Codein phosphate
Ethylmorphine hydrochloride
OpiumOpiates test kit

いずれの検査キットにおいても、低濃度では目的成分を選択的に検出できることから、水溶液の濃度を適切に調整することが重要である。従って、今後は税関の取締現場における本検査キットの良好な使用方法を確立する方針である。
なお、大麻用検査キットについては、他の薬物の検査キットと比較して感度が低かった。これについては様々な原因が考えられる。しかしながら、大麻を選択的に検出できたことから、税関の取締現場に有効な手法と考えられる。

４．要

約

本研究では、税関の取締現場における不正薬物のスクリーニン
グの精度を高めるため、呈色反応を利用した簡易試薬を補強する手法として、イムノクロマト法による薬物検査キットの検出限界濃度、交差反応等について検討した。メタンフェタミン用、アンフェタミン用、MDMA 用及びあへん用のいずれの検査キットにおいても目的成分を高い感度で選択的に検出でき、大麻用検査キットについては、感度は低いながら大麻を選択的に検出できた。ゆえにイムノクロマト法を用いた薬物検査キットは、税関の取締現場において非常に有用であると考えられる。

Concentration of detection limit
Distilled water
Tap water
100 ng/ml
10 µg/ml
1 µg/ml
10 µg/ml
10 µg/ml
10 µg/ml
1 µg/ml
1 µg/ml
100 ng/ml
1 µg/ml
100 ng/ml
100 ng/ml
100 ng/ml
100 ng/ml
100 ng/ml
10 µg/ml