マラリアについて
狩野 繁之
国立国際医療研究センター研究所
熱帯医学・マラリア研究部

Malaria・・・
Mal + aria
=bad air
悪い空気

瘴気説
Hippocrates (460-375 BC)

Discovery of malaria parasites (1880)

Discovery of the vector mosquito (1897)

Sir Ronald Ross [1857-1932]©S. KANOCharles Louis Alphonse Laveran(1845-1922)
ノーベル生理学・医学賞[1907年](Nobel Lecture, December 12, 1902)

Primate malarias

サヘラントロプス・チャデンシス

病

名

感染原虫種

熱帯熱マラリア

熱帯熱マラリア原虫
Plasmodium falciparum

三日熱マラリア

三日熱マラリア原虫
P. viviax

四日熱マラリア

四日熱マラリア原虫
P. malariae

卵形マラリア

卵形マラリア原虫
P. ovale（二日熱マラリア）（サルマラリア原虫の１種）
P. knowlesi

Plasmodium knowlesi(Clin Microbiol Rev. 2013, 26:165.)

主なサルマラリア原虫のヒトへの感染性

川合覚：モダンメディア 56(6):139, 2010
Baird JK: Mlaria zoonoses. Travel Med Infecct dis 7:269-277,2009

NCGMで経験したサルマラリア症例２例目 (2018)
患者：日本人男性 年齢：68歳
渡航歴：2017年10月〜2018年２月2日、フィリピン パラワン島
病歴：2月7日より倦怠感、発熱があり、2月14日にNCGM病院に転院。血液塗
抹標本観察の結果、Plasmodium knowlesi 様の虫体を寄生率0.062%で認めた。
Takaya S, Kutsuna S, Suzuki T, Komaki-Yasuda K, Kano S, Ohmagari N. Case Report: Plasmodium knowlesi Infection withRhabdomyolysis in a Japanese Traveler to Palawan, the Philippines. Am J Trop Med Hyg. 2018 Oct;99(4):967-969

Nested PCRの結果

検体 PC NC NC 検体 PC NC NC 検体 PC NC NC 検体 PC NC NC 検体 PC NC NC 検体 PC NC NC

Pf primer

Pv primer

Pf: 熱帯熱マラリア原虫
Pv: 三日熱マラリア原虫
Poc: 卵形マラリア原虫(Plasmodium ovale curtisi)
Pm: 四日熱マラリア原虫

Poc primer

Pm primer

Pk primer

Pow primer

Pk: Plasmodium knowlesi サルマラリア原虫
PC: 陽性コントロール
NC: 陰性コントロール
標的領域：18S rRNA遺伝子
Pow: 卵形マラリア原虫(Plasmodium ovale wallikeri)

第７病日までの熱型表

毎日熱マラリア
二日熱マラリア主なサルマラリア原虫のヒトへの感染性

川合覚：モダンメディア 56(6):139, 2010Baird JK: Mlaria zoonoses. Travel Med Infect dis 7:269-277,2009

40%-5.6%-7.7%2025 75%2030 90%
Burden of malaria(2022.11.30)

Target％ reduction

Endemic in 85 countries (including the territory of French Guiana)
95% of the episodes and 96% of the deaths
were reported in Sub-Saharan Africa (29 countries).
80% of the deaths in the region are among children under age 5

WHOがマラリアの患者発生がなくなったことを認定した国々

GTS ターゲット
China, El Salvador (2021)
Azerbaijan, Belize,Tajikistan (2023)

Cabo Verde (2024.1.12)

2007
1987
1972
1955

None

7 ヶ国と1 地域2030≥35 ヶ国≥20 ヶ国2025
2020
2015 Kyrgyzstan and Sri Lanka (2016 ),５カ国:

Uzbekistan and Paraguay (2018),
Argentina and Algeria (2019)アラブ首長国連邦(2007),モロッコ (2010),
トゥルクメニスタン (2010),
アルメニア (2011),
モルジブ (2015)

世界マラリア撲滅計画 15 ヶ国 1 地域（台湾1965)

少なくとも３年連続で地域のマラリア患者発生が０であった国々＝マラリアが排除（eliminate）されたと考える
Proprietary and confidential — do not distributeby 2024, edited by Kano(2023)(2023)

Belize (2023)
Cabo Verde(2024)

Maldives (2015)

マラリアの診断法
１．顕微鏡による塗抹標本観察法
１）ギムザ染色法
２）アクリジンオレンジ染色法
２．マラリア原虫／ＤＮＡ／タンパク等検出法
１）PCR法（DNAを増幅して検出）
２）LAMP法（DNAを増幅して検出）
３）RDT法：迅速診断テスト(原虫特異的HRP-II, pLDH蛋白検出)
４）XN-31法（フローサイトメトリー法）
３．抗体検査法
１）間接蛍光抗体法（IFAT）
２）酵素免疫測定法（ELISA）

血液塗抹標本（スメアー）の作り方② 引きガラスをすーっと移動して血液を展開する①45度

feather edge③
風乾
メタノール固定

スライドグラスの端に血液を一滴落とす

ギムザ染色末梢血塗抹標本の顕微鏡検査
ギムザ原液をリン酸緩衝液(pH7.2)で10% (v/v)に 希 釈 し 、10分間 染色後、 油浸レンズを用いて(100x10倍) 顕微鏡下に観察し、赤血球に寄生した原虫を確認する。
原虫が確認できた場合には、形態学的に原虫種を同定し、赤血球寄生率 (％) を求める。
陰性の判定は、少なくても赤血球10万個を数える。

a 熱帯熱マラリア原虫
b 三日熱マラリア原虫
c 四日熱マラリア原虫
d 卵形マラリア原虫寄生率の算出方法
接眼レンズのグリッド

1. 赤血球が均一に散らばった視野を探す
2. グリッド内の赤血球数を数える
3. グリッド内の感染赤血球数を数える
4. 2つのカウンターを使って、グリッド内の感染赤血球数と視野数を数える
1つの赤血球に2つの原虫が感染している場合1感染赤血球と数える
例）1視野当り200個の赤血球10視野で40個の感染赤血球40

X 100 = ２ %200 X 10
未感染赤血球

顕微鏡像 (倍率 100x10)

マラリア原虫感染赤血球

イムノクロマト法（Rapid Diagnostic Tests: RDTs）

LAMP （Loop-mediated Isothermal Amplification ）Cycling amplification steplight

UV light

多項目自動血球分析装置 XN-31

Switch on

1 minute

MI-RBC: Malaria Infected RBC

多項目自動血球分析装置 XN-31

マラリア は「感染症の予防及び感染症の患者に対する医療に関する法律」における全数届出の4類感染症に分類されているが、その届出基準の検査方法として、「感染症法に基づく医師及び獣医師の届け出について」では、
1)「顕微鏡下でのマラリア原虫の証明、かつ、原虫種の確認による病原体の検出」、
または2)「PCR法による病原体の遺伝子の検出」の2つの方法を定め、マラリアが疑われる有症状の患者または無症状の病原体保有者を診断した場合と記載されている。

過去のフロー

現在のフロー
臨床症状あり問 診

臨床症状あり

臨床検査

・現症

問 診

・血算・生化学・その他合併症の検査（発熱・頭痛・・）

・既往歴（過去のマラリア？）

・渡航期間（現地滞在期間、帰国後何日目？・・）

臨床検査

・現症

・血算
・生化学
・その他合併症の検査（発熱・頭痛・・）

・既往歴（過去のマラリア？）

RDT

・渡航期間
（現地滞在期間、顕微鏡検査

帰国後何日目？・・）

・渡航地

RDT
顕微鏡検査

フローサイトメトリー法(XN-31)

・渡航地
PCR検査

（アジア、アフリカ、非流行熱帯地・・・）（アジア、アフリカ、核酸増幅検査
PCR, LAMP

非流行熱帯地・・・）

医師の確定診断

医師の確定診断届け出

治療方針の決定“直ちに”

届け出
治療方針の決定

全数届出４類感染症

都道府県知事にCharacteristics of the malaria diagnostic tests

SensitivityTimerequiredField
friendliness■メファキン 「ヒサミツ」錠275（塩酸メフロキン275mg） 827.90円/錠■塩酸キニーネ 末■マラロン 配合錠 (2013年2月薬価収載・発売） 484.30円/錠（1錠中にアトバコン250mg及びプログアニル塩酸塩100mgを含有する)
マラロン 小児用配合錠 （2016年6月27日発売）（1錠中にアトバコン62.5mg及びプログアニル塩酸塩25mgを含有する
体重 5kg 以上 11kg 未満の小児のマラリア治療及び体重 11kg 以 上 40kg 以下の小児のマラリア予防に対応する薬剤）■プリマキン錠15ｍｇ「サノフィ」（2016年5月薬価収載・6月発売）（プリマキンリン酸塩15mg）2211.80円/錠
■リアメット 配合錠

242.30円/錠（2016年12月19日 国内製造販売承認､2017年3月7日発売）（1錠中にアルテメテル20mg/ルメファントリン120mgを含有する）

G6PD欠損男性の分布状況

Luzzatto & Notaro: Science 293:442-443, 2001

G6PD欠損症検出試験
材料と方法
１）患者全血5μL。
２）使用検査試薬：DOJINDO G6PD Assay kit

原理：glucose-6-phospate dehydrogenase(G6PD)の酵素活性の有無を色の変化で判別する。

1.の患者全血と検査試薬（G6PDの基質＋発色試薬）を混和して反応させたものが、3.のG6PD正常者全血と検査試薬（G6PDの基質＋発色試薬）を混和して反応させたものと同じ赤色を呈したので、この被験者はG6PD活性が正常だと判定された。
３）方法
下記の通り患者全血と検査試薬を混和し、37℃で15分〜30分間インキュベートした.
陽性コントロールとしてG6PD正常者の全血を用いた。
1. 患者全血5μL ＋G6PDの基質＋発色試薬
2. 患者全血5μL＋発色試薬
3. 正常者全血5μL ＋G6PDの基質＋発色試薬（陽性コントロール）
4. 正常者全血5μL＋発色試薬（陰性コントロール）
5.
G6PDの基質＋発色試薬（試薬のみの色の確認）
6.
発色試薬（試薬のみの色の確認）

8-aminoquinolines
Half-lives

Approved in the USA for the anti-relapse therapy of P. vivax malaria
in patients≧16 y.o. in July 2018 =Krintafel TM= 150mg

Chloroquine
35-40$
Tafenoquine
6 hours

15 daysDay of treatment

123Approved in the USA for the Short-term (<6 months) prophylaxis of all species of malaria
in patients≧18 y.o. in Aug 2018 =Week

Arakoda TM= 100mg 19.13$

3 days-1 Pre-travel

0Travel1Travel2

Post-travel 3

アルテミシン耐性の分布状況の把握

WHO, 2013

Dondorp et al, Nat Rev Microbiol 8: 272-80, 2010
WHO, 2014

374:25, 2453-64, June 23, 2016

Impact factor 2016/2017: 72.406

186 K13 alleles
108 non-synonymous mutations

59 malaria-endemic countries
13,157 blood samples

CSPSSP
SSA

Pre-erythrocytic
Vaccine
肝内型ワクチンMSPAMA
TransmissionblockingVaccine
伝播阻止ワクチン

RESA
EMP
SERA
Pf230
Pfg27
Pfs28

Blood-stage
Vaccine
赤内型ワクチンSchematic representation of the CSP and the RTS,S vaccine.

J Clin Invest. 2010; 120(12):4168–4178

(2021) 11:10792

03-3202-7287 熱帯医学・マラリア研究部 狩野繁之