LC/MS概要
ー質量分析計のデータ取得技法ー
エムエス・ソリューションズ㈱代表取締役(株)プレッパーズ 代表取締役
浜松医科大学細胞分子解剖学講座特任研究員

質量分析コンサルタント

髙橋 豊
2024年7月26日 質量分析講習会

エムエス・ソリューションズ(株) https://www.sitsuryobunsekiya.com/
質量分析に関するコンサルティング、技術指導、セミナー、LC/MS用脱塩チューブ開発

事業開始ː2010年8月
コンサルティング・技術指導等実績
・医薬基盤研究所
・国立医薬品食品衛生研究所
・早稲田大学理工学部
・ENEOS株式会社
・味の素株式会社 他30機関以上

(株)プレッパーズ www.preppers.business
事業開始ː2019年4月

質量分析イメージング、LC/MSの受託事業

発起人挨拶

事業内容

「不老不死を目指した知財を世に出す」
それが弊社のミッションです。
私たちは超高齢化社会に備え（プレップ）して、老化や老化関連疾患の予防、診断、治療の研究を進めています。まずはその中で培われた質量分析とイメージングをコアにした生体分子の同定、観察、操作の技術を世の中に還元しつつ、いずれはよりヒトに直結した技術や製品を世に出して行くことが発起人 瀬藤光利

我々のミッションです。

代表挨拶「質の高い質量分析データを提供する」
それが私たちの想いです

イメージング質量分析の受託事業
使用装置
MALDI
Bluker Solarix (FT-ICRMS)
Ultraflex (TOFMS)
Shimadzu IMScope (IT-TOFMS)

DESI
Waters Xevo QTOF
Xevo TQ-XS
K. Tamura, M. Horikawa, S. Sato, H. Miyake and M. Setou, Oncotarget. 2019; 10:1688-1703

近年、IMSやLC/MSに用いられる質量分析計の発展には目覚ましいものがあります。様々なアプ

LC/MS受託事業

リケーションに対応した専用ソフトも次々と開発され、誰でも簡単に分析結果を取得できるよう使用装置になりました。しかし、装置やソフトに任せて得取締役社長

髙橋 豊（浜松医科大学発ベンチャー）

られた結果が正しいとは限りません。私達は、生データをしっかり確認し、信頼性の高いデータを提供します。

Thermo Q-Exactive
Bluker Solarix (FT-ICRMS)
Waters Synapt (Q-TOFMS)
Xevo TQ-XS

内容➢質量分析計のデータ取得方法➢MS/MSの種類

質量分析計のデータ取得方法
TOF, Orbtrap. FT-ICRでは原理的に使えない➢マススペクトルを取得する（安定な）マススペクトルを取得するための電圧走査のこと✓ 主としてイオン源で生成したイオンを検出する方法✓ MS/MS

フルスキャンマススペクトルなどと呼ばれる全部で５種類➢マススペクトルを取得しない✓ 選択イオンモニタリング（selected ion monitoring, SIM）
✓ 選択反応モニタリング（selected reaction monitoring, SRM）

MS/MSの種類
MS2

MS1
M1
イオン M2
M3

M2

CID
m1,m2,m3m1m2m3

検出器

イオン源
特定イオンを選択

イオンの分解生成イオンの分離・検出

CID: Collision Induced Dissociation 衝突誘起解離

M2

m1 + n1

M1

m1 (+ n1)

M1(m1) + n1

m2 + n2

M2

m2 (+ n2)

M2(m2) + n2

m3 + n3

M3

M3

プロダクトイオン分析（スキャン） プリカーサーイオンスキャン
選択反応モニタリング（SRM）

コンスタントニュートラルロススキャン（コンスタントニュートラルマスゲインスキャン）

プロダクトイオン分析, SRM

全てのMS/MS装置で可能

その他3種、～～～スキャン

MS2が電圧走査型のMS/MS装置でのみ可能

最も汎用されるMS/MSの種類➢定性分析

プロダクトイオン分析（スキャン）

プロダクトイオンスキャン： QqQ, IT（ポールトラップ）, Sector
MS2が電圧走査（スキャン）可能なMS/MS装置の場合

プロダクトイオン分析： Q-TOF, Q-Orbitrap, Q-FTICR
➢定量分析

SRM

間違い易い用語
スキャン、スキャンスピード
スキャン：マススペクトルを取得するための電圧掃引のこと
スキャンスピード：1枚のマススペクトルを取得するのに要する時間
これらの用語が使えるのは・・・⇒ マススペクトル取得のために電圧掃引するタイプの質量分析部のみ

四重極、イオントラップ、セクター ⇒ ○プロダクトイオンスキャン

Orbitrap, ICR, TOF ⇒プロダクトイオン分析

原理的に正しくない用語は使わない方が良い！

プロダクトイオン分析の種類➢プリカーサーイオンを指定する方法
PRM (parallel reaction monitoring)
MS/MS

ThermoWaters, Bruker➢プリカーサーイオンを指定しない方法
DDA (data dependent acquisition)
設定条件に合致したイオンを自動でプリカーサーイオンとして認識（イオン強度、本数など）
プロダクトイオン分析

DIA (data independent acquisition)
設定したm/z 幅のイオンをまとめてMS/MS（プロダクトイオン分析）
TWATH (Sciex), SONAR (Waters)

DDA (data dependent acquisition)
強度
1500★1 閾値の設定をいくつにするか？
★2 Dynamic Exclusionの設定

マススペクトル

TICクロマトグラム1000

m/z

プロダクトイオンスペクトル

主として、高強度のバックグラウンドイオンや同じイオンを繰り返しプリカーサーイオンとして選択しないための機能閾値(1000)

保持時間

m/z

★2-1 一度にいくつのプロダクトイオンスペクトルを取得するか⇒ 近接するピークへの対応★2-2 排除する時間をどうするか⇒ 異性体、同一ピーク中で複数ポイントを取得する場合への対応

DDAの問題プリカーサーイオンの取りこぼし

DIA (data independent acquisition)

設定したm/z 幅のイオンをまとめてMS/MS（プロダクトイオン分析）
混ざった状態のプリカーサーイオン

混ざった状態のプロダクトイオン

両者の紐づけが必要

クロマトグラムデコンボリューション

参考資料• マススペクトロメトリーってなあに（質量分析学会編、国際文献印刷社）• これならわかるマススペクトロメトリー（化学同人）• マススペクトロメトリー関連用語集（web版：http://www.mssj/index-jp.html）• 現代質量分析学（化学同人）• 液クロ龍、彪、犬、武、文の巻（液クロ研究懇談会編、丸善）• 液クロを上手につかうコツ（液クロ研究懇談会編、丸善）• 液クロ実験 How to マニュアル（液クロ研究懇談会編、みみずく舎）• LC/MS, LC/MS/MSの基礎と応用（液クロ研究懇談会編、オーム社）• LC/MS, LC/MS/MSのメンテナンスとトラブル解決（液クロ研究懇談会編、オーム社）