【誤訳訂正書】
【提出日】平成29年4月4日(2017.4.4)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】請求項１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【請求項１】
マイクロプレートリーダー（１）の生体細胞または培養物を調査する方法であって、
ａ）測定装置（６、７、８）と、照明源（９）及びイメージングカメラ（１０）と、受取装置（４）と、プロセッサー（１１’，１１”）と、を備えたマイクロプレートリーダー（１）を、提供するステップであって、
上記測定装置（６、７、８）は光軸（２１’,２１”,２１’’’）を有しており、
上記照明源（９）及びイメージングカメラ（１０）は、上記測定装置（６、７、８）の光軸（２１’,２１”,２１’’’）と平行な光軸（２０）を有しており、
上記受取装置（４）は、少なくとも１つのマイクロプレート（２）を受け取り、及び、少なくとも、上記測定装置の光軸（２１’,２１”,２１’’’）に対して、又は、上記照明源（９）及びイメージングカメラ（１０）の光軸（２０）に対して、マイクロプレートリーダー（１）内に、挿入されたマイクロプレート（２）を位置決めする、ステップと、
ｂ）挿入されたマイクロプレート（２）のウェル（３）を上記測定装置（６、７、８）の光軸（２１’,２１”,２１’’’）に対して上記受取装置（４）によって位置決めし、及び、上記測定装置（６、７、８）によって上記ウェル（３）内のインテグラル信号を定量的に測定する、ステップと、
ｃ）挿入されたマイクロプレート（２）の上記ウェル（３）を上記照明源（９）及びイメージングカメラ（１０）の光軸（２０）に対して上記受取装置（４）によって位置決めし、上記ウェル（３）を上記照明源（９）によって徹照し、上記ウェル（３）の底のイメージを上記イメージングカメラ（１０）によって作成する、ステップと、
ｄ）ステップｃ）のイメージされた底にある生体細胞または培養物のコンフルエンスを決定する、ステップと、
ｅ）ステップｂ）で測定された上記ウェル（３）の上記インテグラル信号を、ステップｄ）で決定された上記ウェル（３）内の生体細胞または培養物のコンフルエンスに、上記プロセッサー（１１’，１１”）によって関連付ける、ステップと、
ｆ）ステップｂ）の定量的測定を、決定された上記ウェル（３）内の生体細胞または培養物のコンフルエンスで、正規化する、ステップと、
を備えていることを特徴とする方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】請求項１５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【請求項１５】
マイクロプレートリーダー（１）であって、
ａ）上記マイクロプレート（２）の特定の上記ウェル（３）内の上記生体細胞または培養物の中あるいは表面上に存在する、または引き起こされる、または生成される少なくとも１つのインテグラル信号を検知するための少なくとも１つの測定装置（６，７，８）であって、光軸（２１’,２１”,２１’’’）を備えている上記測定装置（６，７，８）と、
ｂ）上記測定装置（６、７、８）の光軸（２１’,２１”,２１’’’）と平行な光軸（２０）を有している、照明源（９）及びイメージングカメラ（１０）と、
ｃ）少なくとも１つのマイクロプレート（２）を受け取り、及び、少なくとも、上記測定装置の光軸（２１’,２１”,２１’’’）に対して、又は、上記照明源（９）及びイメージングカメラ（１０）の光軸（２０）に対して、マイクロプレートリーダー（１）内に、挿入されたマイクロプレート（２）を位置決めする、受取装置（４）と、
を備え、
上記マイクロプレートリーダー（１）は、内部プロセッサー（１１’）を備えるか、または外部プロセッサー（１１”）に接続可能に形成されており、
このプロセッサー（１１’，１１”）は、上記受取装置（４）によって受け取られたマイクロプレート（２）のウェル（３）のインテグラル信号を、上記照明源（９）及び上記イメージングカメラ（１０）によってイメージングされたそのウェル（３）の底のイメージ、によって決定されたそのウェル（３）内の生体細胞または培養物のコンフルエンスと、比較するように、及び、そのウェルのインテグラル信号を、決定された上記ウェル（３）内の上記生体細胞または培養物のコンフルエンスで、正規化するように、構成されている、
ことを特徴とするマイクロプレートリーダー。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１３】
本発明に係る方法は、マイクロプレートの特定のウェル内の生体細胞または培養物がマイクロプレートリーダーの照明源によって徹照され、上記マイクロプレートのこれらの特定のウェル内の上記生体細胞または培養物の透過像は、上記マイクロプレートリーダーのイメージングカメラによって作成され、上記検知されたインテグラル信号の各々が、プロセッサーによって上記マイクロプレートの対応するウェル内の上記生体細胞または培養物の像と比較されると共に、これらの生体細胞のイメージされた数、付着、コンフルエンス（confluence）、または形態に関連付けられることを特徴としている。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００１５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００１５】
本発明に係るマイクロプレートリーダーは、さらに、照明をするための照明源と、上記マイクロプレートのこれらの特定の上記ウェル内の上記生体細胞または培養物をイメージするためのイメージングカメラと、検知された上記各インテグラル信号を上記マイクロプレートの上記対応するウェル内の上記生体細胞または培養物の像と比較するため、また、これらのインテグラル信号をこれらの生体細胞のイメージされた数、付着、コンフルエンス、または形態に関連付けるために構成されているプロセッサーとを備えることを特徴としている。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２５】
蛍光、ルミネセンス、吸光度、インピーダンスまたはインピーダンス変化のようなインテグラル信号は、細胞活性の測定として役立つ。これらの信号の強度の変化は、(例えば、細胞増殖に依存する)細胞数の変化と同様に細胞活性の変化に依存する。細胞数の決定は、細胞数でインテグラル信号を正規化（ノーマライゼーション）すること、したがって細胞活性の公平で自動化された獲得、を提供する。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２６】
マイクロプレートウェルの底の細胞または培養物のコンフルエンスの決定は、このマイクロプレートウェルの依然としてフリーな底面に対する培養物によってカバーされた底面の比率を、再現する。この比率も、同様に、細胞増殖による接着細胞で、培養物と関係したインテグラル信号を、正規化すること、したがって細胞活性の公平で自動化された獲得、を許容する。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２７】
マイクロプレートリーダーの生体細胞または培養物を調査するための発明に係る方法および対応するマイクロプレートリーダーは、概略図によって詳細に説明されている。この概略図は、選択された模範的な実施形態を示し、本発明の範囲を制限することを意図していない。
【図１】図１は、遮光された態様で閉じられうるチャンバーとして好ましくは形成されるサンプルチャンバー内にマイクロプレートを挿入しているときの第１の実施形態に係るマイクロプレートリーダーを通る縦断面を示している。
【図２】図２は、遮光されると共に気密された態様で閉じられうる密閉チャンバーとして好ましくは形成されているサンプルチャンバー内の選択されたマイクロプレートウェル内のインテグラル信号を検知している間、または、マイクロプレートウェルの顕微鏡イメージングをしている間の、第２実施形態に係るマイクロプレートリーダーを通る縦断面を示している。
【図３】図３は、遮光されると共に気密された態様で閉じられうる密閉チャンバーとして好ましくは形成されたサンプルチャンバー内で、選択されたマイクロプレートウェルのインテグラル信号を検知している間の第３実施形態に係るマイクロプレートリーダーを通る縦断面を示している。
【図４】図４は、ウェル底に取り付けられた典型的な電極、およびウェル壁に取り付けられた典型的な電極接触を備えるマイクロプレートウェルの平面図を示している。
【図５Ａ】図５Ａは、マイクロプレートのウェルを通る徹照の光路の略図であって、透過光線ビーム束の概略光路で従来の徹照を示している。
【図５Ｂ】図５Ｂは、マイクロプレートのウェルを通る徹照の光路の略図であって、透過光線ビーム束の概略光路で本発明の徹照を示している。
【図５Ｃ】図５Ｃは、マイクロプレートのウェルを通る徹照の光路の略図であって、透過光線ビームの概略光路で従来の徹照を示している。
【図５Ｄ】図５Ｄは、マイクロプレートのウェルを通る徹照の光路の略図であって、透過光線ビームの概略光路で本発明の徹照を示している。
【図６Ａ】図６Ａは、徹照されたウェルの写真であって、従来の照明の結果を示している。
【図６Ｂ】図６Ｂは、徹照されたウェルの写真であって、本発明の照明の結果を示している。
【図７Ａ】図７Ａは、図６Ａの写真におけるウェルの全体の直径にわたって従来の照明の輝度の分布を示している。
【図７Ｂ】図７Ｂは、図６Ｂの写真におけるウェルの全体の直径にわたって本発明の照明の輝度の分布を示している。
【図８】図８は、それぞれの場合において照明の正規化をした後の図７Ａおよび図７Ｂの２つの図の比較を示している。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３５】
好適なイメージングシステムは、中程度の分解能を達成するために中間の絞りを使用するときイメージングカメラ１０の光軸２０の方向における受取装置４の移動が使用されうるオートフォーカス装置をさらに備える。個々の細胞および培養物の表示が好ましく、さらに小さな粒子あるいは細胞組織がイメージされうる。これらの生体細胞の数のイメージングが特に好ましく、個々の細胞の付着、つまりウェル３の内面への細胞の付着およびこれらの細胞の形態に、特に注意が払われる。マイクロプレート２のウェル３内の培養物の付着、コンフルエンス、あるいは形態のイメージングが極めて好ましく、マイクロプレートウェル３の内面上の培養物のタームコンフルエンス（term confluence）は、細胞によって占められうるこれらのマイクロプレートウェルの内面の自由表面（free surface）に対する培養物によってカバーされた表面の比率を再現する。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００３６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００３６】
本発明に係るマイクロプレートリーダー１は、内部または統合されたプロセッサー１１’（図２および３参照）１１を備えるか、外部プロセッサー１１”（図１参照）に連結可能に構成されることをさらに特徴としている。したがって、そのようなプロセッサー１１’は、マイクロプレートリーダー１の電子制御装置内で統合されたマイクロプロセッサーになりえる。それはまた、供給されたパソコンのプロセッサー１１”を使用するように、あるいは供給される。プロセッサー１１’、１１”が、検知されたインテグラル信号の各々をマイクロプレート２の対応するウェル３内の生体細胞のイメージと比較するために、およびこれらの生体細胞または培養物のイメージされた数、付着、コンフルエンス、あるいは形態に、これらのインテグラル信号を関連づけるために構成されていることが重要である。好ましくは、そのようなプロセッサー１１’，１１”は、適切な画像処理ソフトウェアの起動によって、および適切な信号処理ソフトウェアの起動によって、この仕事を実行できるようになる。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４７】
マイクロプレートリーダー１の生体細胞または培養物を調査するための本発明に係る方法は、マイクロプレート２の特定のウェル３内の生体細胞または培養物が、マイクロプレートリーダー１の照明源９で照らされ、インテグラル信号が事前に、またはその後に、測定装置６，７，８によって、これらの特定のウェル３内で検知されるという点に一方では特徴がある。マイクロプレートリーダー１の生体細胞または培養物を調査するための本発明に係る方法は、マイクロプレートリーダー１のイメージングカメラ１０でマイクロプレート２のこれらの特定のウェル３内の生体細胞または培養物のイメージが作成されるという点に他方では特徴がある。しかしながら、特に、マイクロプレートリーダー１の生体細胞または培養物を調査するための本発明に係る方法は、検知されたインテグラル信号の各々が、プロセッサー手段１１’，１１”によって、マイクロプレート２の対応するウェル３内の生体細胞の、事前に、またはその後に記録された画像と比較され、これらの生体細胞または培養物のイメージされた数、付着、コンフルエンス、または形態に関連しているという点に特徴がある。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５９】
マイクロプレートリーダー１は、スクリーン１５を好ましくは備えている。このスクリーン１５は、動作状態、測定結果、顕微鏡画像の表示のためのものである。また、スクリーン１５は、検知されたインテグラル信号とマイクロプレート(２)のそれぞれのウェル３内の生体細胞または培養物の対応するイメージとの比較、およびこれらの生体細胞または培養物のイメージされた数、付着、コンフルエンスあるいは形態の比率によって生じる表示のためのものである。スクリーン１５は、タッチセンサ式のスクリーンまたはタッチスクリーンとして好ましくは形成されている。スクリーン１５は、マイクロプレートリーダー１の操作パラメーターを調節または変更するため、および生成された結果を処理および保存するためのインターフェースとしても使用されうる。
【誤訳訂正１２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６１】
図４は、典型的な電極１７’，１７”の選択を示している。これらの電極の材料は、生体細胞または培養物の付着、コンフルエンス、あるいは形態に、できる限り、好ましくは全く影響を及ぼさない。例えば、図４に示すように、電極１７’，１７”は、同じまたは異なるように構成でき、表面を完全にカバーするか、エリアまたはアレイだけをカバーできる。
【誤訳訂正１３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００６８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００６８】
図５Ｃは、透過光線ビーム２９の概略光路で従来の徹照を示している。開口絞り３０（図５Ａ参照）の小さな開口を使用するとき、オブジェクティブ３４によって結像されたサンプルエリアの外部の領域を通常照らす境界ビームは、外側にそれて、ウェル底の外側の領域にぶつからず、または図示するように、オブジェクティブ３４によって捕らえることができず、イメージングチップ３５によって記録できない。したがって、結果として生じるイメージの中で、外側への劇的な輝度減少をもたらす。この輝度減少は、連続的なイメージプロセシングによって、単に部分的に数学上補償できる。結果として生じる輝度減少は、ウェルの外側の領域における細胞のコンフルエンスのカウント、または測定の信頼性低下に結びつく。
【誤訳訂正１４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７０】
図５Ｄは、透過光線ビーム束２９の概略光路で本発明に係る徹照を示している。照明円錐２９の境界ビームは、液体の曲面においてより大きな角度で衝突する。それらは、外側へのより弱い偏向を受け、それにより、光２９がカメラ１０のオブジェクティブ３４に入ってもよく、また、イメージングチップ３５によって検知できる方法で、ウェル底の境界領域を照らす。これはかなり弱い輝度勾配に帰着する。コントラストは、ウェル３の外側の領域でさえ、より優れている。また、さらにウェルの外側の領域における細胞のコンフルエンスのカウント、または測定を信頼できるように行うことは可能である。
【誤訳訂正１５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００７７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００７７】
図８は、それぞれの場合において照明の正規化をした後の図７Ａおよび図７Ｂの２つの図の比較を示している。従来と本発明のイメージングの結果のこの直接比較のために、露光時間の違いが正規化されている。このグラフでは、横座標は、１ｍｍの距離内のウェル底の位置を示している。また、縦座標は対数目盛で輝度値（濃淡値）を示している。破線は従来の照明を表わしている。太線は、大きな開口絞りを有する本発明の照明を表わしている。大きな開口絞りを有する本発明の照明におけるウェル境界への輝度の消滅は、約２０フォールド（fold）になる。対照的に、通常の従来の照明におけるウェル境界への輝度の消滅は、約５００フォールドになる。このことは、大きな開口絞りを有する照明で、境界領域（通常の照明は、図示したように可能でない領域）における利用可能なシグナルに結びつく。小さい開口数と見なされるのは、１−３ｍｍの範囲の開口を有する開口絞り３０である。大きな開口数と見なされるのは、５−９ｍｍの範囲の開口を有する開口絞り３０である。特に好ましくは、最大開口数において、直径９ｍｍの開口を有する開口絞り３０である。