(57)【要約】  α４β７インテグリンのアンタゴニスト、より具体的には式（Ｉ）の化合物などの環状ペプチドアンタゴニストが本明細書に記載されている。2020519633.tif 000016【選択図】図４
2020519633.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の化合物であって、
【化１】
2020519633.tif 000015
式中、
Ｒ１が、Ｈ、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルケニル、または複素環であり、これらの全てが、任意に１つ以上の置換可能な位置で、１つ以上の好適な置換基で置換されており、
Ｒ２およびＲ３がそれぞれ独立して、タンパク質構成または非タンパク質構成α−アミノ酸のアミノ酸鎖であり、
ただし、Ｒ２およびＲ３は互いに共有結合して環を形成してもよく、またはＲ１と共有結合して環状第二級アミンを形成してもよいことを条件とし、
Ｒ４が、Ｈ、低級アルキル、ベンジル、アルケニル、低級アルキルオキシ、アリール、ヘテロアリール、複素環、−Ｃ（Ｏ）Ｒ＊＊＊＊（Ｒ＊＊＊＊は独立して、アルキル、アリール、ヘテロアリール、アミノ、アミノアルキル、アミノアリール、アミノヘテロアリール、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシから選択される）、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ、または−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり、これらの全てが、任意に１つ以上の置換可能な位置で、１つ以上の好適な置換基で置換されているか、
またはＲ５もしくはＲ６とともに、Ｎ−Ｒ４であるそのＮ末端を有するタンパク質構成または非タンパク質構成アミノ酸の環状側鎖であり、前記タンパク質構成または非タンパク質構成アミノ酸は、好適な置換基で置換されてもよく、
Ｒ５およびＲ６が独立して、前記Ｎ−Ｒ４である前記そのＮ末端を有するタンパク質構成または非タンパク質構成α−アミノ酸の前記アミノ酸側鎖から選択されるか、またはＲ４と環状側鎖を形成してもよく、
立体中心１＊および２＊がそれぞれ独立して、ＲおよびＳから選択され、
Ｚが、アミノ酸のアミノ末端であり、−Ｃ＝Ｏ−に隣接するＬが、アミノ酸のカルボキシ末端であり、ＬがＺおよび−Ｃ＝Ｏ−とともに、以下の式を有するペプチドであり、
Ｘｙ−Ｘｚ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３
式中、Ｘｙが、タンパク質構成または非タンパク質構成アミノ酸であり、
Ｘｚが、存在しないか、またはタンパク質構成もしくは非タンパク質構成アミノ酸であり、
Ｘ１が、ロイシンまたはｔｅｒｔ−ブチル−Ａｌａであり、
Ｘ２が、Ａｓｐであり、
Ｘ３が、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、ＭｅＴｈｒ、ａｌｌｏＴｈｒ、Ａｂｕ、Ｔｈｒ（ＯＢｎ）、Ｖａｌ、またはａｌｌｏＩｌｅである、化合物。
【請求項２】
Ｒ１がＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２またはＲ３が、Ｒ１と共有結合して、Ｎ末端としてＮＲ１を有するプロリンを形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２およびＲ３が、両方Ｈではない、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２およびＲ３がそれぞれ独立して、タンパク質構成または非タンパク質構成α−アミノ酸のアミノ酸鎖からなる群から選択される、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２およびＲ３が、それぞれＨおよびＣＨ３であるか、またはその逆である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２またはＲ３が、−ＣＨ２−Ｓ−Ｒｓであり、Ｒｓが低級アルキル、低級アミノアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルケニル、または複素環から選択され、これらの全てが、任意に１つ以上の置換可能な位置で、１つ以上の好適な置換基で置換されており、好ましくは、Ｒｓが、フェニルもしくは低級アルキルで置換されたフェニル、ハロゲン、または低級アミノアルキルである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ４がＨである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ４およびＲ５またはＲ６のいずれかが環を形成し、そのＮ末端としてＮ−Ｒ４を有するプロリン残基をもたらす、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
ｎが１である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
ＺがＬおよび−Ｃ＝Ｏとともに、化合物１〜１９のうちのいずれか１つに示されるとおりである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｘ１がＬｅｕである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｘ２がＡｓｐである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
Ｘ３がＴｈｒである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５】
Ｘ３がＶａｌである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１６】
Ｘ３がＩｌｅである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１７】
ＸｙおよびＸｚがそれぞれ独立して、タンパク質構成または非タンパク質構成のα−アミノ酸である、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｘｚが、タンパク質構成または非タンパク質構成のβ−アミノ酸である、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９】
ＸｙおよびＸｚがそれぞれ一級アミノ酸である、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０】
Ｘｙが、（１，２−シス−ＡＣＨＣ）、（２，４−ジクロロ−ＭｅＰｈｅ）、（２，４−ジクロロ−Ｐｈｅ）、（２−アミノメチル−ｄＰｈｅ）、（２−アミノメチル−Ｐｈｅ）、（２−アザ−Ｐｈｅ）、（２−ブロモ−Ｐｈｅ）、（２−ＣＦ３−Ｐｈｅ）、（２−クロロ−Ｐｈｅ）、（２−フルオロ−ＭｅＰｈｅ）、（２−フルオロ−Ｐｈｅ）、（２−ヨード−ｄＰｈｅ）、（２−ヨード−Ｐｈｅ）、（２−フェニル−ｄＰｈｅ）、（２−フェニル−Ｐｈｅ）、（３，３−ジフェニル−Ａｌａ）、（３，４，５−トリフルオロ−Ｐｈｅ）、（３，４−ジメトキシ−Ｐｈｅ）、（３，５−ジブロモ−Ｔｙｒ）、（３−アミノメチル−４−ブロモ−安息香酸）、（３−アミノメチル−４−モルホリニル−安息香酸）、（３−アミノメチル−４−ピペリジニル−安息香酸）、（３−アミノメチル−５−ブロモ−安息香酸）、（３−アミノメチル−６−ブロモ−安息香酸）、（３−アミノメチル−安息香酸）、（３−アミノメチル−ｄＰｈｅ）、（３−アミノメチル−Ｐｈｅ）、（３−アザ−ｄＰｈｅ）、（３−アザ−Ｐｈｅ）、（３−ベンゾチエニル−Ａｌａ）、（３−ベンゾチエニル−ｄＡｌａ）、（３−ヨード−Ｐｈｅ）、（３−フェニル−ｄＰｈｅ）、（３−フェニル−Ｐｈｅ）、（４−アミノ−ｄＰｈｅ）、（４−アミノメチル−ｄＰｈｅ）、（４−アミノメチル−Ｐｈｅ）、（４−アミノメチル−Ｐｈｅ）−還元、（４−アミノ−Ｐｈｅ）、（４−アザ−ｄＰｈｅ）、（４−アザ−Ｐｈｅ）、（４−グアニジノ−Ｐｈｅ）、（４−ヨード−Ｐｈｅ）、（Ｎ−ベンジル−３−アミノメチル−安息香酸）、（Ｎ−ベンジル−Ｇｌｙ）、（Ｎ−メチル−３−アミノメチル−安息香酸）、（ピペリジン−４−アミノ−４−カルボン酸）、（ビニル−Ｂｒ−Ｌｅｕ）、［（２−ピペラジニル−２−フェニル）−ｄＰｈｅ］、［（２−ピペラジニル−２−フェニル）−Ｐｈｅ］、［１−（Ｓ）−イソインドリン−カルボン酸］、［２−（２，５−ジメチル−イソオキサゾール）−ｄＰｈｅ］、［２−（２，５−ジメチル−イソオキサゾール）−Ｐｈｅ］、［２−（２，６−ジメチルフェニル）−Ｐｈｅ］、［２−（２−ブロモ−３−ピリジル）−Ｐｈｅ］、［２−（２−クロロ−６−メトキシフェニル）−Ｐｈｅ］、［２−（２−メトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［２−（２−ピリジル）−４−チアゾリル−Ａｌａ］、［２−（２−トリフルオロメトキシ−フェニル）−ｄＰｈｅ］、［２−（３−ブロモ−２−ピリジル）−Ｐｈｅ］、［２−（３−メトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［２−（３−ピリジル）−４−チアゾリル−Ａｌａ］、［２−（３−ピリジル）−Ｐｈｅ］、［２−（３−キノリニル）−Ｐｈｅ］、［２−（４−メトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［２−（４−ピリジル）−４−チアゾリル−Ａｌａ］、［２−（４−ピリジル）−Ｐｈｅ］、［２−（４−キノリニル）−Ｐｈｅ］、［２−（５−キノリニル）−ｄＰｈｅ］、［２−（５−キノリニル）−ＭｅＰｈｅ］、［２−（５−キノリニル）−Ｐｈｅ］、［２−（５−キノリニル）−Ｐｈｅ］−還元、［２−（アミノ−ベンジル）−４−チアゾリル−Ａｌａ］、［２−（ベンゾチアゾール−５−イル）−Ｐｈｅ］、［２−［２，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］−Ｐｈｅ］、［２−［３−（１−ピペラジニル）フェニル］−Ｐｈｅ］−ｂｅｔａＨｏｍｏＬｙｓ、［２−［４−（１−ピペラジニル）フェニル］−Ｐｈｅ］、［２−ヨード−Ｐｈｅ］、［３−（２，６−ジメトキシ−フェニル）−ｄＰｈｅ］、［３−（２，６−ジメトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［３−（２，６−ジメチル−フェニル）−Ｐｈｅ］、［３−（２−アミノベンジル−４−チアゾリル）−Ａｌａ］、［３−（２−クロロ−６−メトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［３−（２−メトキシ−フェニル）−ｄＰｈｅ］、［３−（２−メトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［３−（２−チエニル）−ｄＡｌａ、［３−（２−トリフルオロメトキシ−フェニル）−ｄＰｈｅ］、［３−（２−トリフルオロメトキシ］−フェニル）−Ｐｈｅ］、［３−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［３−（３’−ピリジル）−Ａｌａ］、［３−（４−キノリニル）−ｄＰｈｅ］、［３−（４−チアゾリル）−Ａｌａ］、［３−（４−チアゾリル）−Ａｌａ］−還元、［３−（４−チアゾリル）−ｄＡｌａ］、［３−（５−キノリニル）−ｄＰｈｅ］、［３−（ベンゾチアゾール−５−イル）−Ｐｈｅ］、［３−（キノリン−４−イル）−Ｐｈｅ］、［３−アミノメチル−（４−メチルピラゾール−３−イル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（２，５−ジメトキシ−フェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（２，５−ジメチル−イソオキサゾール）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（２−アミノメチルフェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（２−フルオロ−ピリジル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（３−アミノメチルフェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（３−アザ−フェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（３−ＣＦ３−フェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（３−Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（３−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ジアリールエーテル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（３−キノリニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（３−チオフェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（４−アミノメチルフェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（４−アザ−フェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（４−カルボキシ）−フェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（４−ヒドロキシ−フェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（４−Ｎ，Ｎ−ジメチル−カルボキサミド−フェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（４−ピリジル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（４−キノリニル）］−安息香酸、［３−アミノメチル−４−（５−ピリミジニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（５−キノリニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（ピペロニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［（２，３，４−トリ−メトキシ）−フェニル］−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［２−（１−ピペラジニル）フェニル］−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［２−（３−（ピペリジン−４−イルメトキシ）フェニル］−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［３−（１−ピペラジニル）フェニル］−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［４−（１−ピペラジニル）フェニル］−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［４−（１−ピペラジニル）−フェニル］−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［４−（１−ピペラジニル−４−ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ６４７）フェニル］−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［４−（１−ピペラジニル−４−ＦＩＴＣ）フェニル］−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［５−（２，４−ジメチル）チアゾール］−安息香酸］、［３−アミノメチル−５−（４−アザ−フェニル）−安息香酸］、［４−（２，６−ジメチル−フェニル）−Ｐｈｅ］、［４−（２−クロロ−６−メトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［４−（２−メトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［４−（２−トリフルオロメトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［Ｎ−メチル−３−アミノメチル−４−（４−キノリニル）−安息香酸］、１Ｎａｌ、２Ｉｇｌ、２Ｎａｌ、Ａｉｃ、ａｌｐｈａＭｅＰｈｅ、Ａｔｃ、ｂｅｔａＨｏｍｏＬｙｓ、ｂｅｔａｈｏｍｏＭｅｔ、ｂｅｔａＨｏｍｏＰｈｅ、Ｂｉｐ、Ｃｈａ、Ｃｈｇ、ｃｙｃｌｏＬｅｕ、ｄ２Ｉｇｌ、Ｄａｐ（Ｃｂｚ）、ｄＡｒｇ、ｄｈｏｍｏＰｈｅ、ｄＬｙｓ、ｄＭｅｔ、ｄＮｌｅ、ｄＯｒｎ、ｄＯｒｎ（ジメチル）、ｄＰｉｐ、ｄＰｒｏ、ｄＳｅｒ（ＯＢｎ）、ｄＴｉｃ、ｄＴｉｑ、ｄＴｒｐ、ｄＴｙｒ、ｄＴｙｒ（ＯＡｌｌｙｌ）、ｄＴｙｒ（ＯＢｎ）、Ｆ、Ｈ、Ｈｉｓ（Ｂｎ）、ＨｏｍｏＰｈｅ、Ｈｙｐ、Ｈｙｐ（ＯＢｎ）、Ｉｇｌ、Ｋ、Ｍ、ＭｅＭｅｔ、ＭｅＰｈｅ、ｍｅｔａＹ（Ｏｐｒ）、ＭｅＴｙｒ、Ｎｖａ、Ｏｒｎ（アセトアミド）、Ｏｒｎ（ベンズアミド）、Ｏｒｎ（エチルカルバメート）、Ｏｒｎ（メタンスルホンアミド）、Ｏｒｎ（ペンチルアミド）、Ｐ、Ｐｈｅ−還元、Ｐｉｐ、Ｒ、Ｔｉｃ、Ｔｙｒ（２−メトキシジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（２−トリルジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（３，４−ジフルオロジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（３，４−ジメチルジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（３−ＣＯ２Ｍｅジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（３−フルオロジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（３−メトキシジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（３−メチルジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（４−ＣＦ３ジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（４−ＣＯ２Ｈジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（４−ＣＯ２Ｍｅジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（４−フルオロジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（４−メトキシジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（ＯＡｌｌｙｌ）、Ｔｙｒ（ＯＰｈ）、Ｗ、またはＹである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２１】
Ｘｚが、ｄＴｈｒ、Ｐ、ｄＰｒｏ、Ｓａｒ、ｃｙｃｌｏＬｅｕ、ｄＬｙｓ、ｄＡｒｇ、ｄＳｅｒ、Ｐｉｐ、ｄＴｉｃ、ｄＰｉｐ、Ｈｙｐ、ｄＨｙｐ、（シス−ｄＨｙｐ）、ｄＭｅＬｙｓ、ｄＮｌｅ、ｄＭｅＡｒｇ、Ｇ、Ａ、ｄＡｌａ、ｄＶａｌ、ｄＰｒｏ、Ａｚｅ、ｂｅｔａＨｏｍｏＰｒｏ、２Ａｂｚ、ｂｅｔａＨｏｍｏＩｌｅ、ｄｂｅｔａＨｏｍｏＰｒｏ、ｂｅｔａＨｏｍｏＮｌｅ、ＭｅｂｅｔａＨｏｍｏＬｙｓ（Ｍｅ）２、（３−アミノメチル−４−ブロモ−安息香酸）、［３−アミノメチル−４−（４−アザ−フェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（２，５−ジメチル−イソオキサゾール）−安息香酸］、または［３−アミノメチル−４−（３−アミノメチル−フェニル）−安息香酸］である、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２２】
Ｘｚが、ｂｅｔａＨｏｍｏＬｙｓではない、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２３】
Ｘｚが、β−アミノ酸ではない、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２４】
前記化合物が２１員環を含む、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２５】
化合物１〜１９のうちのいずれか１つである、請求項１に記載の化合物。
【請求項２６】
一緒に共有結合した請求項１〜２５のいずれか一項に記載の複数の化合物を含む多量体。
【請求項２７】
前記複数の化合物が全て同一である、請求項２６に記載の多量体。
【請求項２８】
二量体である、請求項２６または２７のいずれか一項に記載の多量体。
【請求項２９】
三量体である、請求項２６または２７のいずれか一項に記載の多量体。
【請求項３０】
四量体である、請求項２６または２７のいずれか一項に記載の多量体。
【請求項３１】
五量体である、請求項２６または２７のいずれか一項に記載の多量体。
【請求項３２】
前記化合物が、リンカーによって結合されている、請求項２６〜３１のいずれか一項に記載の多量体。
【請求項３３】
前記化合物が、Ｒ４、Ｒ５／Ｒ６または、Ｘｙに関連する炭素で一緒に結合されている、請求項２６〜３２のいずれか一項に記載の多量体。
【請求項３４】
請求項１〜３３のいずれか一項に記載の化合物または多量体を薬学的に許容される担体とともに含む薬学的組成物。
【請求項３５】
経口送達用に製剤化された、請求項３４に記載の薬学的組成物。
【請求項３６】
局所送達用に製剤化された、請求項３４に記載の薬学的組成物。
【請求項３７】
非経口送達用に製剤化された、請求項３４に記載の薬学的組成物。
【請求項３８】
患者の炎症または自己免疫疾患を治療する方法であって、治療的有効量の、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の化合物を前記患者に投与することを含む、方法。
【請求項３９】
前記炎症または自己免疫疾患が胃腸系である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
α４β７インテグリンの生物学的機能に関連する患者の状態を治療する方法であって、治療的有効量の、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の化合物を前記患者に投与することを含む、方法。
【請求項４１】
前記状態または疾患が、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、潰瘍性大腸炎、クローン病、セリアック病（非熱帯性スプルー）、血清陰性関節症に関連する腸症、顕微鏡的大腸炎、コラーゲン性大腸炎、好酸球性胃腸炎、放射線療法もしくは化学療法に関連する大腸炎、直腸結腸切除術および回腸嚢肛門吻合術後に生じる嚢炎、胃腸癌、膵炎、インスリン依存性糖尿病、乳腺炎、胆嚢炎、胆管炎、胆管周囲炎、慢性気管支炎、慢性副鼻腔炎、喘息、原発性硬化性胆管炎、胃腸管でのヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染、好酸球性喘息、好酸球性食道炎、胃炎、大腸炎、顕微鏡的大腸炎、移植片対宿主病、放射線療法もしくは化学療法に関連する大腸炎、白血球接着不全−１などの先天性免疫障害に関連する大腸炎、慢性肉芽腫性疾患、糖原病１ｂ型、ヘルマンスキー・パドラック症候群、チェディアック・東症候群、およびウィスコット・アルドリッチ症候群、様々な形態の胃腸癌、骨粗鬆症、関節炎、多発性硬化症、慢性疼痛、体重増加、またはうつ病である、請求項３８および４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
前記状態が炎症性腸疾患である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記炎症性腸疾患が潰瘍性大腸炎である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記炎症性腸疾患がクローン病である、請求項４２に記載の方法。
【請求項４５】
患者における疾患または状態を治療する方法であって、治療有効量の、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の化合物を前記患者に投与することを含み、前記疾患または状態が、ウイルスまたはレトロウイルスの局所または全身感染である、方法。
【請求項４６】
前記ウイルスまたはレトロウイルスが、エコーウイルス１および８、エコーウイルス９／Ｂａｒｔｙ  Ｓｔｒａｉｎ、ヒトパピローマウイルス、ハンタウイルス、ロタウイルス、アデノウイルス、口蹄疫ウイルス、コクサッキーウイルスＡ９、ヒトパレコウイルス１、またはヒト免疫不全ウイルス１型である、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
患者の疾患または状態を治療する方法であって、治療有効量の、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の化合物を前記患者に投与することを含み、前記疾患または状態が、Ａ型、Ｂ型、もしくはＣ型肝炎、肝性脳症、非アルコール性脂肪性肝炎、肝硬変、静脈瘤出血、ヘモクロマトーシス、ウィルソン病、チロシン血症、α−１−アンチトリプシン欠乏症、肝細胞癌、肝癌、原発性胆汁性胆管炎、原発性胆汁性硬化症、胆道疾患、または自己免疫性肝炎である、方法。
【請求項４８】
前記化合物が、α４β７インテグリンのＭＡｄＣＡＭへの結合を阻害する、請求項３８〜４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４９】
前記化合物が、α４β７インテグリンのＭＡｄＣＡＭへの結合を選択的に阻害する、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記患者がヒトである、請求項３８〜４９のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
この出願は、２０１７年５月１０日に出願された米国仮特許出願第６２／５０４３０９号の優先権を主張し、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、α４β７インテグリンのアンタゴニスト、より具体的には環状ペプチドアンタゴニストに関する。
【背景技術】
【０００３】
インテグリンは、細胞−細胞および細胞−細胞外マトリックス（ＥＣＭ）相互作用の架橋となる膜貫通受容体である。誘発される場合、インテグリンは、ＥＣＭの化学組成物および機械的状態などの内部への化学経路（シグナル変換）を誘発する。
【０００４】
インテグリンは、２つの異なる鎖（α（アルファ）およびβ（ベータ）サブユニット）を有する偏性ヘテロ二量体である。
【０００５】
α４β７インテグリンはリンパ球に発現し、粘膜リンパ器官の高内皮細静脈に存在する粘膜アドレシン細胞接着分子（ＭＡｄＣＡＭ）へのその結合を介して、Ｔ細胞が腸関連リンパ組織にホーミングする原因となる。
【０００６】
特定のインテグリン−リガンド相互作用の阻害剤は、様々な自己免疫疾患の治療のための抗炎症剤として有効であることが示されている。例えば、α４β７に対して高い結合親和性を示すモノクローナル抗体は、クローン病などの胃腸の自己炎症／自己免疫疾患、および潰瘍性大腸炎に対する治療上の利点を示している。
【０００７】
炎症状態および／または自己免疫疾患を予防または治療するための改善されたα４β７アンタゴニストを開発する必要がある。
【０００８】
環状ペプチド（ナセルリン）を作製する特定の方法は、出願人のＰＣＴ公開番号第ＷＯ２０１０／１０５３６３号に記載されている。α４β７インテグリンのナセルリンアンタゴニストは、出願人のＰＣＴ特許出願番号第ＰＣＴ／ＣＡ２０１６／０００２７４号に記載されている。α４β７インテグリンの多量体ナセルリンアンタゴニストは、出願人の米国仮特許出願第６２／４２１，１１７号に記載されている。
【発明の概要】
【０００９】
一態様では、式（Ｉ）の化合物が提供され、
【化１】
2020519633.tif 000003
式中、
Ｒ１は、Ｈ、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルケニル、または複素環であり、これらの全てが、任意に１つ以上の置換可能な位置で、１つ以上の好適な置換基で置換されており、
Ｒ２およびＲ３はそれぞれ独立して、タンパク質構成または非タンパク質構成α−アミノ酸のアミノ酸鎖であり、
ただし、Ｒ２およびＲ３は互いに共有結合して環を形成してもよく、またはＲ１と共有結合して環状第二級アミンを形成してもよいことを条件とし、
Ｒ４は、Ｈ、低級アルキル、ベンジル、アルケニル、低級アルキルオキシ、アリール、ヘテロアリール、複素環、−Ｃ（Ｏ）Ｒ＊＊＊＊（Ｒ＊＊＊＊は独立して、アルキル、アリール、ヘテロアリール、アミノ、アミノアルキル、アミノアリール、アミノヘテロアリール、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシから選択される）、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ、または−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり、これらの全てが、任意に１つ以上の置換可能な位置で、１つ以上の好適な置換基で置換されているか、
またはＲ５もしくはＲ６とともに、Ｎ−Ｒ４であるそのＮ末端を有するタンパク質構成または非タンパク質構成アミノ酸の環状側鎖であり、タンパク質構成または非タンパク質構成アミノ酸は、好適な置換基で置換されてもよく、
Ｒ５およびＲ６は独立して、Ｎ−Ｒ４であるそのＮ末端を有するタンパク質構成または非タンパク質構成α−アミノ酸の前記アミノ酸側鎖から選択されるか、またはＲ４と環状側鎖を形成してもよく、
立体中心１＊および２＊はそれぞれ独立して、ＲおよびＳから選択され、
Ｚは、アミノ酸のアミノ末端であり、−Ｃ＝Ｏ−に隣接するＬが、アミノ酸のカルボキシ末端であり、ＬがＺおよび−Ｃ＝Ｏ−とともに、以下の式を有するペプチドであり、
Ｘｙ−Ｘｚ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３
式中、Ｘｙは、タンパク質構成または非タンパク質構成アミノ酸であり、
Ｘｚは、存在しないか、またはタンパク質構成もしくは非タンパク質構成アミノ酸であり、
Ｘ１は、ロイシンまたはｔｅｒｔ−ブチル−Ａｌａであり、
Ｘ２は、Ａｓｐであり、
Ｘ３は、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、ＭｅＴｈｒ、ａｌｌｏＴｈｒ、Ａｂｕ、Ｔｈｒ（ＯＢｎ）、Ｖａｌ、またはａｌｌｏＩｌｅである。
【００１０】
一態様では、本明細書に記載の化合物または多量体を薬学的に許容される担体とともに含む薬学的組成物が提供される。
【００１１】
一態様では、患者の炎症または自己免疫疾患を治療する方法であって、治療有効量の、本明細書に記載の化合物または多量体を患者に投与することを含む方法が提供される。
【００１２】
一態様では、α４β７インテグリンの生物学的機能に関連する患者の状態を治療する方法が提供され、方法は、治療的有効量の、本明細書に記載の化合物または多量体を患者に投与することを含む。
【００１３】
一態様では、治療有効量の、本明細書に記載の化合物または多量体を患者に投与することを含む、患者の疾患または状態を治療する方法が提供され、疾患または状態は、ウイルスまたはレトロウイルスの局所または全身感染である。
【００１４】
一態様では、治療有効量の、本明細書に記載の化合物または多量体を患者に投与することを含む、患者の疾患または状態を治療する方法が提供され、疾患または状態は、Ａ型、Ｂ型、もしくはＣ型肝炎、肝性脳症、非アルコール性脂肪性肝炎、肝硬変、静脈瘤出血、ヘモクロマトーシス、ウィルソン病、チロシン血症、α−１−アンチトリプシン欠乏症、肝細胞癌、肝癌、原発性胆汁性胆管炎、原発性胆汁性硬化症、胆道疾患、または自己免疫性肝炎である。
【００１５】
他の態様では、上記の疾患および状態を治療または予防するための、本明細書に記載の化合物または多量体の使用が提供される。
【００１６】
他の態様では、上記の疾患および状態を治療または予防するための医薬品の調製における、本明細書に記載の化合物または多量体の使用が提供される。
【００１７】
他の態様では、上記の疾患および状態を治療または予防する際に使用するための、本明細書に記載の化合物または多量体が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
本発明の好ましい実施形態のこれらおよび他の特徴は、添付の図面および表を参照する以下の詳細な説明においてより明らかになるであろう。
【図１】本出願の代表的な化合物１〜６を示す。
【図２】本出願の代表的な化合物７〜１２を示す。
【図３】本出願の代表的な化合物１３〜１５を示す。
【図４】本出願の代表的な多量体化合物１６〜１７を示す。
【図５】本出願の代表的な多量体化合物１８〜１９を示す。
【図６】インテグリンα４β７を発現するヒト細胞株のＭＡｄＣＡＭ−１でコーティングされたプレートへの接着を阻害する化合物の能力を示す。インテグリンα４β７を発現するＲＰＭＩ８８６６細胞のＭＡｄＣＡＭ−１でコーティングされたプレートへの接着の阻害の用量応答曲線。エラーバーは標準偏差を示す。
【図７】インテグリンα４β１を発現するヒト細胞株のＶＣＡＭ−１でコーティングされたプレートへの接着を阻害する化合物の能力を示す。インテグリンα４β１を発現するＲＡＭＯＳ細胞のＶＣＡＭ−１でコーティングされたプレートへの接着の阻害の用量反応曲線。エラーバーは標準偏差を示す。
【図８】全血リガンド置換アッセイを用いて測定した化合物受容体占有率（ＲＯ）を示す。代表的な実験における、α４β７Ｔｈ記憶細胞へのＭＡｄＣＡＭ結合の阻害の用量応答曲線。エラーバーは、化合物番号１６の重複データポイントの標準偏差を示す。
【図９】全血リガンド置換アッセイを用いて測定した化合物受容体占有率（ＲＯ）を示す。代表的な実験における、α４β７陰性Ｔｈ記憶細胞へのＭＡｄＣＡＭ結合の阻害の用量応答曲線。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
以下の説明では、本発明の完全な理解を提供するために、多数の特定の詳細が記載される。しかしながら、これらの特定の詳細なしで本発明が実施され得ることが理解される。
【００２０】
一態様では、式（Ｉ）の化合物が提供され、
【化２】
2020519633.tif 000004
式中、
Ｒ１は、Ｈ、低級アルキル、アリール、ヘテロアリール、アルケニル、または複素環であり、これらの全てが、任意に１つ以上の置換可能な位置で、１つ以上の好適な置換基で置換されており、
Ｒ２およびＲ３はそれぞれ独立して、タンパク質構成または非タンパク質構成α−アミノ酸のアミノ酸鎖であり、
ただし、Ｒ２およびＲ３は互いに共有結合して環を形成してもよく、またはＲ１と共有結合して環状第二級アミンを形成してもよいことを条件とし、
Ｒ４は、Ｈ、低級アルキル、ベンジル、アルケニル、低級アルキルオキシ、アリール、ヘテロアリール、複素環、−Ｃ（Ｏ）Ｒ＊＊＊＊（Ｒ＊＊＊＊は、アルキル、アリール、ヘテロアリール、アミノ、アミノアルキル、アミノアリール、アミノヘテロアリール、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシから独立して選択される）、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）Ｒ、または−Ｃ（Ｏ）Ｒｃであり、これらの全てが、任意に１つ以上の置換可能な位置で、１つ以上の好適な置換基で置換されているか、
またはＲ５もしくはＲ６とともに、タンパク質構成または非タンパク質構成アミノ酸の環状側鎖は、Ｎ−Ｒ４であるそのＮ末端を有し、前記タンパク質構成アミノ酸または非タンパク質構成アミノ酸は、好適な置換基で置換されてもよく、
Ｒ５およびＲ６は、Ｎ−Ｒ４であるそのＮ末端を有するタンパク質構成または非タンパク質構成α−アミノ酸の前記アミノ酸側鎖から独立して選択されるか、またはＲ４と環状側鎖を形成してもよく、
立体中心１＊および２＊はそれぞれ独立して、ＲおよびＳから選択され、
Ｚは、アミノ酸のアミノ末端であり、−Ｃ＝Ｏ−隣接するＬが、アミノ酸のカルボキシ末端であり、ＬがＺおよび−Ｃ＝Ｏ−とともに、以下の式を有するペプチドであり、
Ｘｙ−Ｘｚ−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３
式中、Ｘｙは、タンパク質構成または非タンパク質構成アミノ酸であり、
Ｘｚは、存在しないか、またはタンパク質構成または非タンパク質構成アミノ酸であり、
Ｘ１は、ロイシンまたはｔｅｒｔ−ブチル−Ａｌａであり、
Ｘ２は、Ａｓｐであり、
Ｘ３は、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、ＭｅＴｈｒ、ａｌｌｏＴｈｒ、Ａｂｕ、Ｔｈｒ（ＯＢｎ）、Ｖａｌ、またはａｌｌｏＩｌｅである。
【００２１】
本明細書で使用される場合、「アミノ酸」という用語は、アミン基、カルボン酸基、および変化する側鎖を含む分子を指す。アミノ酸は、タンパク質に一般的に見出される２０個のアミノ酸だけでなく、当業者に知られている非標準アミノ酸および非天然アミノ酸誘導体も含むことを意味し、したがって、これらに限定されないが、アルファ、ベータ、およびガンマアミノ酸を含む。ペプチドは、少なくとも２個のアミノ酸のポリマーであり、標準、非標準、および非天然のアミノ酸を含み得る。ペプチドは、２個以上のアミノ酸のポリマーである。本明細書において以下の略語が使用される。
【表１−１】
2020519633.tif 000005
【表１−２】
2020519633.tif 000006
【表１−３】
2020519633.tif 000007
【表１−４】
2020519633.tif 000008
【００２２】
本発明の文脈で使用される「好適な置換基」という用語は独立して、Ｈ；ヒドロキシル；シアノ；メチル、エチル、プロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、ヘキシルなどの低級アルキルなどのアルキル；メトキシ、エトキシなどの低級アルコキシなどのアルコキシ；フェノキシなどのアリールオキシ；ビニル；ヘキセニルなどのアルケニル；アルキニル；ホルミル；ＣＦ３、ＣＣｌ３などを含む低級ハロアルキルなどのハロアルキル；ハロゲン化物；フェニルおよびナフチルなどのアリール；チエニルおよびフラニルなどのヘテロアリール；Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂなどのアミド（ＲａおよびＲｂは、低級アルキル、アリール、またはベンジルなどから独立して選択される）；Ｃ（Ｏ）−Ｃ６Ｈ５などのアシル；−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ３などのエステル；Ｏ−Ｂｎなどのエーテルおよびチオエーテル；チオアルコキシ；ホスフィノ；ならびに−ＮＲａＲｂ（ＲａおよびＲｂは、低級アルキル、アリール、またはベンジルなどから独立して選択される）を含むことを意味する。本発明の文脈で使用される好適な置換基は、本発明のプロセスによる所望の生成物の形成を妨げない置換基を示すことを意味することを理解されたい。
【００２３】
本発明の文脈で使用される場合、本明細書で単独でまたは別の置換基と組み合わせて使用される「低級アルキル」という用語は、１〜６個の炭素を含む非環状の、直鎖または分岐鎖アルキル置換基を意味し、例えば、メチル、エチル、１−メチルエチル、１−メチルプロピル、２−メチルプロピルなどを含む。この用語の同様の使用は、炭素原子の数に関して「低級アルコキシ」、「低級チオアルキル」、「低級アルケニル」などについて理解されるべきである。例えば、本明細書で使用される「低級アルコキシ」には、メトキシ、エトキシ、ｔ−ブトキシが挙げられる。
【００２４】
「アルキル」という用語は、低級アルキルを包含し、また、例えば、７〜１０個の炭素原子を有する非環状の、直鎖または分岐鎖アルキル置換基などの６個を超える炭素原子を有するアルキル基を含む。
【００２５】
本明細書で使用される「アリール」という用語は、単独でまたは別の置換基と組み合わせて、芳香族単環系または芳香族多環系を意味する。例えば、「アリール」という用語は、フェニルまたはナフチル環を含み、蛍光（例えば、アントラセン）または放射性標識およびそれらの誘導体などのより大きな芳香族多環系も含み得る。
【００２６】
本明細書で使用される「ヘテロアリール」という用語は、単独でまたは別の置換基と組み合わせて、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を含み、かつ芳香族系を形成する５、６、または７員不飽和複素環を意味する。「ヘテロアリール」という用語は、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を含む５、６、または７員不飽和複素環を含む多環式芳香族系も含む。
【００２７】
本明細書で使用される「シクロアルキル」という用語は、単独でまたは別の置換基と組み合わせて、例えば、これらに限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、およびシクロヘプチルを含むシクロアルキル置換基を意味する。
【００２８】
本明細書で使用される「シクロアルキル−アルキル−」という用語は、シクロアルキルラジカルが直接結合しているアルキルラジカルを意味し、これらに限定されないが、シクロプロピルメチル、シクロブチルメチル、シクロペンチルメチル、１−シクロペンチルエチル、２−シクロペンチルエチル、シクロヘキシルメチル、１−シクロヘキシルエチル、および２−シクロヘキシルエチルを含む。「アルキル」または「低級アルキル」という用語の同様の使用は、アリール−アルキル−、アリール−低級アルキル−（例えば、ベンジル）、−低級アルキル−アルケニル（例えば、アリル）、ヘテロアリール−アルキル−、および本明細書において使用されるものなどについて理解されるべきである。例えば、「アリール−アルキル−」という用語は、アリールが結合しているアルキルラジカルを意味する。アリール−アルキル−の例には、これらに限定されないが、ベンジル（フェニルメチル）、１−フェニルエチル、２−フェニルエチル、およびフェニルプロピルが挙げられる。
【００２９】
本明細書で使用する場合、「複素環」という用語は、単独でまたは別のラジカルと組み合わせて、窒素、酸素、および硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子を含む３〜７員飽和または不飽和（芳香族を含む）環状化合物からの水素の除去によって得られる一価のラジカルを意味する。そのような複素環の例には、これらに限定されないが、アジリジン、エポキシド、アゼチジン、ピロリジン、テトラヒドロフラン、チアゾリジン、ピロール、チオフェン、ヒダントイン、ジアゼピン、イミダゾール、イソオキサゾール、チアゾール、テトラゾール、ピペリジン、ピペラジン、ホモピペリジン、ホモピペラジン、１，４−ジオキサン、４−モルホリン、４−チオモルホリン、ピリジン、ピリジン−Ｎ−オキシド、またはピリミジンなどが挙げられる。
【００３０】
本明細書で使用される「アルケニル」という用語は、単独でまたは別のラジカルと組み合わせて、２個以上の炭素原子を含む不飽和の、非環状直鎖ラジカルを意味することが意図され、その少なくとも２つは二重結合によって互いに結合される。そのようなラジカルの例には、これらに限定されないが、エテニル（ビニル）、１−プロペニル、２−プロペニル、および１−ブテニルが挙げられる。
【００３１】
本明細書で使用される「アルキニル」という用語は、２個以上の炭素原子を含む不飽和の、非環状直鎖ラジカルを意味することが意図され、その少なくとも２つは三重結合によって互いに結合される。そのようなラジカルの例には、これらに限定されないが、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、および１−ブチニルが挙げられる。
【００３２】
本明細書で使用される「アルコキシ」という用語は、単独でまたは別のラジカルと組み合わせて、ラジカル−Ｏ−（Ｃ１−ｎ）アルキルを意味し、アルキルは、１個以上の炭素原子を含む上に定義されるとおりであり、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、１−メチルエトキシ、ブトキシ、および１，１−ジメチルエトキシを含む。上記のように、ｎが１〜６の場合、「低級アルコキシ」という用語が適用されるが、「アルコキシ」という用語は、「低級アルコキシ」ならびにｎが６より大きい（例えば、ｎ＝７〜１０）アルコキシ基を包含する。本明細書で単独でまたは別のラジカルと組み合わせて使用される「アリールオキシ」という用語は、−Ｏ−アリールを意味し、アリールは上記のように定義される。
【００３３】
保護基（ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  ｇｒｏｕｐ）または保護基（ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｇｒｏｕｐ）は、その後の化学反応で化学選択性を得るために分子に導入される置換基である。多くの保護基が当技術分野で既知であり、当業者は、本明細書に記載の方法に関連して組み込まれ、使用できる保護基の種類を理解するであろう。「保護基に基づくペプチド合成」、典型的には固相ペプチド合成では、所望のペプチドが構築ペプチド鎖へのアミノ酸部分の段階的な付加により調製される。固相合成で最も広く使用される２つのプロトコルは、アミノ保護基としてｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）または９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）を用いる。アミノ保護基は一般に、合成手順中の望ましくない反応からアミノ基を保護し、後で除去してアミンを露出させることができる。一般に使用されるアミノ保護基は、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ（１９９９）に開示されている。アミノ保護基には、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ピバロイル、ｔ−ブチルアセチル、２−クロロアセチル、２−ブロモアセチル、トリフルオロアセチル、トリクロロアセチル、ｏ−ニトロフェノキシアセチル、アルファ−クロロブチリル、ベンゾイル、４−クロロベンゾイル、４−ブロモベンゾイル、４−ニトロベンゾイルなどのアシル基；ベンゼンスルホニル、ｐ−トルエンスルホニルなどのスルホニル基；ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）、ｐ−クロロベンジルオキシカルボニル、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル、２−ニトロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニル、３，４−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、３，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、２，４−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、２−ニトロ−４，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、３，４，５−トリメトキシベンジルオキシカルボニル、１−（ｐ−ビフェニリル）−１−メチルエトキシカルボニル、アルファ−，アルファ−ジメチル−３，５−ジメトキシベンジルオキシカルボニル、ベンズヒドリルオキシカルボニル、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ジイソプロピルメトキシカルボニル、イソプロピルオキシカルボニル、エトキシカルボニル、メトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル（Ａｌｌｏｃ）、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル、２−トリメチルシリルエチルオキシカルボニル（Ｔｅｏｃ）、フェノキシカルボニル、４−ニトロフェノキシカルボニル、フルオレニル−９−メトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、シクロペンチルオキシカルボニル、アダマンチルオキシカルボニル、シクロヘキシルオキシカルボニル、フェニルチオカルボニルなどのアルコキシまたはアリールオキシカルボニル基（保護アミンでウレタンを形成する）、ベンジル、トリフェニルメチル、ベンジルオキシメチルなどのアラルキル基、およびトリメチルシリルなどのシリル基が挙げられる。アミン保護基には、フタロイルおよびジチオス��シンイミジルなどの環状アミノ保護基も含まれ、これらはアミノ窒素を複素環に組み込む。典型的には、アミノ保護基には、ホルミル、アセチル、ベンゾイル、ピバロイル、ｔ−ブチルアセチル、フェニルスルホニル、Ａｌｌｏｃ、Ｔｅｏｃ、ベンジル、Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、およびＣｂｚが挙げられる。当面の合成作業に適切なアミノ保護基を選択して使用することは、十分に当業者の技術の範囲内である。
【００３４】
いくつかの実施形態では、Ｒ１はＨである。他の実施形態では、Ｒ２またはＲ３は、Ｒ１と共有結合して、Ｎ末端としてＮＲ１を有するプロリンを形成する。
【００３５】
いくつかの実施形態では、Ｒ２およびＲ３は、両方Ｈではない。
【００３６】
いくつかの実施形態では、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ独立して、タンパク質構成または非タンパク質構成α−アミノ酸のアミノ酸鎖からなる群から選択される。
【００３７】
いくつかの実施形態では、Ｒ２およびＲ３は、それぞれＨおよびＣＨ３であるか、またはその逆である。
【００３８】
いくつかの実施形態では、Ｒ２またはＲ３は、−ＣＨ２−Ｓ−Ｒｓであり、Ｒｓが低級アルキル、低級アミノアルキル、アリール、ヘテロアリール、アルケニル、または複素環から選択され、これらの全ては、任意に１つ以上の置換可能な位置で、１つ以上の好適な置換基で置換されており、好ましくは、Ｒｓは、フェニルもしくは低級アルキルで置換されたフェニル、ハロゲン、または低級アミノアルキルである。
【００３９】
いくつかの実施形態では、Ｒ４はＨである。他の実施形態では、Ｒ４およびＲ５またはＲ６のいずれかは、環を形成し、そのＮ末端としてＮ−Ｒ４を有するプロリン残基をもたらす。
【００４０】
いくつかの実施形態では、ｎは１である。
【００４１】
いくつかの実施形態では、ＺはＬおよび−Ｃ＝Ｏとともに、化合物１〜１９のいずれか１つに示されるとおりである。
【００４２】
いくつかの実施形態では、Ｘ１はＬｅｕである。
【００４３】
いくつかの実施形態では、Ｘ２はＡｓｐである。
【００４４】
いくつかの実施形態では、Ｘ３はＴｈｒである。
【００４５】
いくつかの実施形態では、Ｘ３はＶａｌである。
【００４６】
いくつかの実施形態では、Ｘ３はイソロイシンである。
【００４７】
いくつかの実施形態では、ＸｙおよびＸｚはそれぞれ独立して、タンパク質構成または非タンパク質構成のα−アミノ酸である。
【００４８】
いくつかの実施形態では、Ｘｚは、タンパク質構成または非タンパク質構成のβ−アミノ酸である。
【００４９】
いくつかの実施形態では、ＸｙおよびＸｚはそれぞれ一級アミノ酸である。
【００５０】
いくつかの実施形態では、Ｘｙは、（１，２−シス−ＡＣＨＣ）、（２，４−ジクロロ−ＭｅＰｈｅ）、（２，４−ジクロロ−Ｐｈｅ）、（２−アミノメチル−ｄＰｈｅ）、（２−アミノメチル−Ｐｈｅ）、（２−アザ−Ｐｈｅ）、（２−ブロモ−Ｐｈｅ）、（２−ＣＦ３−Ｐｈｅ）、（２−クロロ−Ｐｈｅ）、（２−フルオロ−ＭｅＰｈｅ）、（２−フルオロ−Ｐｈｅ）、（２−ヨード−ｄＰｈｅ）、（２−ヨード−Ｐｈｅ）、（２−フェニル−ｄＰｈｅ）、（２−フェニル−Ｐｈｅ）、（３，３−ジフェニル−Ａｌａ）、（３，４，５−トリフルオロ−Ｐｈｅ）、（３，４−ジメトキシ−Ｐｈｅ）、（３，５−ジブロモ−Ｔｙｒ）、（３−アミノメチル−４−ブロモ−安息香酸）、（３−アミノメチル−４−モルホリニル−安息香酸）、（３−アミノメチル−４−ピペリジニル−安息香酸）、（３−アミノメチル−５−ブロモ−安息香酸）、（３−アミノメチル−６−ブロモ−安息香酸）、（３−アミノメチル−安息香酸）、（３−アミノメチル−ｄＰｈｅ）、（３−アミノメチル−Ｐｈｅ）、（３−アザ−ｄＰｈｅ）、（３−アザ−Ｐｈｅ）、（３−ベンゾチエニル−Ａｌａ）、（３−ベンゾチエニル−ｄＡｌａ）、（３−ヨード−Ｐｈｅ）、（３−フェニル−ｄＰｈｅ）、（３−フェニル−Ｐｈｅ）、（４−アミノ−ｄＰｈｅ）、（４−アミノメチル−ｄＰｈｅ）、（４−アミノメチル−Ｐｈｅ）、（４−アミノメチル−Ｐｈｅ）−還元、（４−アミノ−Ｐｈｅ）、（４−アザ−ｄＰｈｅ）、（４−アザ−Ｐｈｅ）、（４−グアニジノ−Ｐｈｅ）、（４−ヨード−Ｐｈｅ）、（Ｎ−ベンジル−３−アミノメチル−安息香酸）、（Ｎ−ベンジル−Ｇｌｙ）、（Ｎ−メチル−３−アミノメチル−安息香酸）、（ピペリジン−４−アミノ−４−カルボン酸）、（ビニル−Ｂｒ−Ｌｅｕ）、［（２−ピペラジニル−２−フェニル）−ｄＰｈｅ］、［（２−ピペラジニル−２−フェニル）−Ｐｈｅ］、［１−（Ｓ）−イソインドリン−カルボン酸］、［２−（２，５−ジメチル−イソオキサゾール）−ｄＰｈｅ］、［２−（２，５−ジメチル−イソオキサゾール）−Ｐｈｅ］、［２−（２，６−ジメチルフェニル）−Ｐｈｅ］、［２−（２−ブロモ−３−ピリジル）−Ｐｈｅ］、［２−（２−クロロ−６−メトキシフェニル）−Ｐｈｅ］、［２−（２−メトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［２−（２−ピリジル）−４−チアゾリル−Ａｌａ］、［２−（２−トリフルオロメトキシ−フェニル）−ｄＰｈｅ］、［２−（３−ブロモ−２−ピリジル）−Ｐｈｅ］、［２−（３−メトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［２−（３−ピリジル）−４−チアゾリル−Ａｌａ］、［２−（３−ピリジル）−Ｐｈｅ］、［２−（３−キノリニル）−Ｐｈｅ］、［２−（４−メトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［２−（４−ピリジル）−４−チアゾリル−Ａｌａ］、［２−（４−ピリジル）−Ｐｈｅ］、［２−（４−キノリニル）−Ｐｈｅ］、［２−（５−キノリニル）−ｄＰｈｅ］、［２−（５−キノリニル）−ＭｅＰｈｅ］、［２−（５−キノリニル）−Ｐｈｅ］、［２−（５−キノリニル）−Ｐｈｅ］−還元、［２−（アミノ−ベンジル）−４−チアゾリル−Ａｌａ］、［２−（ベンゾチアゾール−５−イル）−Ｐｈｅ］、［２−［２，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］−Ｐｈｅ］、［２−［３−（１−ピペラジニル）フェニル］−Ｐｈｅ］−ｂｅｔａＨｏｍｏＬｙｓ、［２−［４−（１−ピペラジニル）フェニル］−Ｐｈｅ］、［２−ヨード−Ｐｈｅ］、［３−（２，６−ジメトキシ−フェニル）−ｄＰｈｅ］、［３−（２，６−ジメトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［３−（２，６−ジメチル−フェニル）−Ｐｈｅ］、［３−（２−アミノベンジル−４−チアゾリル）−Ａｌａ］、［３−（２−クロロ−６−メトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［３−（２−メトキシ−フェニル）−ｄＰｈｅ］、［３−（２−メトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［３−（２−チエニル）−ｄＡｌａ、［３−（２−トリフルオロメトキシ−フェニル）−ｄＰｈｅ］、［３−（２−トリフルオロメトキシ］−フェニル）−Ｐｈｅ］、［３−（３，４−ジフルオロ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［３−（３’−ピリジル）−Ａｌａ］、［３−（４−キノリニル）−ｄＰｈｅ］、［３−（４−チアゾリル）−Ａｌａ］、［３−（４−チアゾリル）−Ａｌａ］−還元、［３−（４−チアゾリル）−ｄＡｌａ］、［３−（５−キノリニル）−ｄＰｈｅ］、［３−（ベンゾチアゾール−５−イル）−Ｐｈｅ］、［３−（キノリン−４−イル）−Ｐｈｅ］、［３−アミノメチル−（４−メチルピラゾール−３−イル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（２，５−ジメトキシ−フェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（２，５−ジメチル−イソオキサゾール）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（２−アミノメチルフェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（２−フルオロ−ピリジル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（３−アミノメチルフェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（３−アザ−フェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（３−ＣＦ３−フェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（３−Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（３−Ｎ，Ｎ−ジメチル−ジアリールエーテル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（３−キノリニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（３−チオフェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（４−アミノメチルフェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（４−アザ−フェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（４−カルボキシ）−フェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（４−ヒドロキシ−フェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（４−Ｎ，Ｎ−ジメチル−カルボキサミド−フェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（４−ピリジル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（４−キノリニル）］−安息香酸、［３−アミノメチル−４−（５−ピリミジニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（５−キノリニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（ピペロニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［（２，３，４−トリ−メトキシ）−フェニル］−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［２−（１−ピペラジニル）フェニル］−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［２−（３−（ピペリジン−４−イルメトキシ）フェニル］−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［３−（１−ピペラジニル）フェニル］−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［４−（１−ピペラジニル）フェニル］−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［４−（１−ピペラジニル）−フェニル］−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［４−（１−ピペラジニル−４−ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ６４７）フェニル］−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［４−（１−ピペラジニル−４−ＦＩＴＣ）フェニル］−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−［５−（２，４−ジメチル）チアゾール］−安息香酸］、［３−アミノメチル−５−（４−アザ−フェニル）−安息香酸］、［４−（２，６−ジメチル−フェニル）−Ｐｈｅ］、［４−（２−クロロ−６−メトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［４−（２−メトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［４−（２−トリフルオロメトキシ−フェニル）−Ｐｈｅ］、［Ｎ−メチル−３−アミノメチル−４−（４−キノリニル）−安息香酸］、１Ｎａｌ、２Ｉｇｌ、２Ｎａｌ、Ａｉｃ、ａｌｐｈａＭｅＰｈｅ、Ａｔｃ、ｂｅｔａＨｏｍｏＬｙｓ、ｂｅｔａｈｏｍｏＭｅｔ、ｂｅｔａＨｏｍｏＰｈｅ、Ｂｉｐ、Ｃｈａ、Ｃｈｇ、ｃｙｃｌｏＬｅｕ、ｄ２Ｉｇｌ、Ｄａｐ（Ｃｂｚ）、ｄＡｒｇ、ｄｈｏｍｏＰｈｅ、ｄＬｙｓ、ｄＭｅｔ、ｄＮｌｅ、ｄＯｒｎ、ｄＯｒｎ（ジメチル）、ｄＰｉｐ、ｄＰｒｏ、ｄＳｅｒ（ＯＢｎ）、ｄＴｉｃ、ｄＴｉｑ、ｄＴｒｐ、ｄＴｙｒ、ｄＴｙｒ（ＯＡｌｌｙｌ）、ｄＴｙｒ（ＯＢｎ）、Ｆ、Ｈ、Ｈｉｓ（Ｂｎ）、ＨｏｍｏＰｈｅ、Ｈｙｐ、Ｈｙｐ（ＯＢｎ）、Ｉｇｌ、Ｋ、Ｍ、ＭｅＭｅｔ、ＭｅＰｈｅ、ｍｅｔａＹ（Ｏｐｒ）、ＭｅＴｙｒ、Ｎｖａ、Ｏｒｎ（アセトアミド）、Ｏｒｎ（ベンズアミド）、Ｏｒｎ（エチルカルバメート）、Ｏｒｎ（メタンスルホンアミド）、Ｏｒｎ（ペンチルアミド）、Ｐ、Ｐｈｅ−還元、Ｐｉｐ、Ｒ、Ｔｉｃ、Ｔｙｒ（２−メトキシジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（２−トリルジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（３，４−ジフルオロジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（３，４−ジメチルジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（３−ＣＯ２Ｍｅジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（３−フルオロジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（３−メトキシジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（３−メチルジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（４−ＣＦ３ジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（４−ＣＯ２Ｈジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（４−ＣＯ２Ｍｅジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（４−フルオロジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（４−メトキシジアリールエーテル）、Ｔｙｒ（ＯＡｌｌｙｌ）、Ｔｙｒ（ＯＰｈ）、Ｗ、またはＹである。
【００５１】
いくつかの実施形態では、Ｘｚは、ｄＴｈｒ、Ｐ、ｄＰｒｏ、Ｓａｒ、ｃｙｃｌｏＬｅｕ、ｄＬｙｓ、ｄＡｒｇ、ｄＳｅｒ、Ｐｉｐ、ｄＴｉｃ、ｄＰｉｐ、Ｈｙｐ、ｄＨｙｐ、（シス−ｄＨｙｐ）、ｄＭｅＬｙｓ、ｄＮｌｅ、ｄＭｅＡｒｇ、Ｇ、Ａ、ｄＡｌａ、ｄＶａｌ、ｄＰｒｏ、Ａｚｅ、ｂｅｔａＨｏｍｏＰｒｏ、２Ａｂｚ、ｂｅｔａＨｏｍｏＩｌｅ、ｄｂｅｔａＨｏｍｏＰｒｏ、ｂｅｔａＨｏｍｏＮｌｅ、ＭｅｂｅｔａＨｏｍｏＬｙｓ（Ｍｅ）２、（３−アミノメチル−４−ブロモ−安息香酸）、［３−アミノメチル−４−（４−アザ−フェニル）−安息香酸］、［３−アミノメチル−４−（２，５−ジメチル−イソオキサゾール）−安息香酸］、または［３−アミノメチル−４−（３−アミノメチル−フェニル）−安息香酸］である。
【００５２】
いくつかの実施形態では、ＸｚはｂｅｔａＨｏｍｏＬｙｓではない。
【００５３】
いくつかの実施形態では、Ｘｚはβ−アミノ酸ではない。
【００５４】
いくつかの実施形態では、化合物は２１員環を含む。
【００５５】
いくつかの実施形態では、化合物は、化合物１〜１９のうちのいずれか１つである。
【００５６】
一態様では、一緒に共有結合した本明細書に記載の複数の化合物を含む他量体が提供される。
【００５７】
多量体のいくつかの実施形態では、複数の化合物は全て同一である。
【００５８】
いくつかの実施形態では、多量体は二量体である。
【００５９】
いくつかの実施形態では、多量体は三量体である。
【００６０】
いくつかの実施形態では、多量体は四量体である。
【００６１】
いくつかの実施形態では、多量体は五量体である。
【００６２】
多量体のいくつかの実施形態では、化合物はリンカーによって結合されている。
【００６３】
多量体のいくつかの実施形態では、化合物は、Ｒ４、Ｒ５／Ｒ６、またはＸｙに関連する炭素で一緒に結合されている。
【００６４】
一態様では、本明細書に記載の化合物または多量体を薬学的に許容される担体とともに含む薬学的組成物が提供される。
【００６５】
本明細書で使用される「薬学的に許容される塩」という用語は、合理的な利益／リスク比に見合ったものであり、それらの意図される用途に効果的である、過度の毒性、刺激、およびアレルギー反応のない疾患の治療に好適な、水溶性または油溶性または分散性の本発明の化合物の塩または双性イオン形態を表す。塩は、化合物の最終的な単離および精製中に、またはアミノ基を好適な酸で処理することにより別々に調製することができる。代表的な酸付加塩には、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、ジグルコン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩（イセチオネート）、乳酸塩、マレイン酸塩、メシチレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフチレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバレート、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、パラトルエンスルホン酸塩、およびウンデカン酸が挙げられる。また、本発明の化合物中のアミノ基は、メチル、エチル、プロピル、およびブチルの塩化物、臭化物、およびヨウ化物；硫酸ジメチル、ジエチル、ジブチル、およびジアミル；デシル、ラウリル、ミリスチル、およびステリルの塩化物、臭化物、およびヨウ化物；ならびにベンジルおよびフェネチルの臭化物で四級化することができる。治療上許容される付加塩の形成に使用され得る酸の例には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、およびリン酸などの無機酸、ならびにシュウ酸、マレイン酸、コハク酸、およびクエン酸などの有機酸が挙げられる。特定の実施形態において、本明細書に記載されるペプチド化合物のいずれかは、塩形態、例えば、酢酸塩である。
【００６６】
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容可能な担体」とは、生理学的に適合する、任意のおよび全ての、溶媒、分散媒、コーティング、抗細菌剤および抗真菌剤、等張剤、および吸収遅延剤などを意味する。薬学的に許容される担体の例には、水、生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノールなどのうちの１つ以上、ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。多くの場合、組成物中に等張剤、例えば、糖類、マンニトール、ソルビトールなどの多価アルコール、または塩化ナトリウムを含むことが好ましいであろう。薬学的に許容される担体は、湿潤剤または乳化剤、防腐剤または緩衝剤などの少量の補助物質をさらに含んでもよく、これらは薬理学的薬剤の貯蔵寿命または効果を高める。
【００６７】
いくつかの実施形態では、薬学的組成物は、経口送達、局所送達、または非経口送達用に製剤化される。
【００６８】
一態様では、患者の炎症または自己免疫疾患を治療する方法であって、治療有効量の、本明細書に記載の化合物または多量体を患者に投与することを含む方法が提供される。
【００６９】
いくつかの実施形態では、炎症または自己免疫疾患は胃腸系である。
【００７０】
一態様では、α４β７インテグリンの生物学的機能に関連する患者の状態を治療する方法が提供され、方法は、治療有効量の、本明細書に記載の化合物または多量体を患者に投与することを含む。
【００７１】
いくつかの実施形態では、状態または疾患は、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、潰瘍性大腸炎、クローン病、セリアック病（非熱帯性スプルー）、血清陰性関節症に関連する腸症、顕微鏡的大腸炎、コラーゲン性大腸炎、好酸球性胃腸炎、放射線療法もしくは化学療法に関連する大腸炎、直腸結腸切除術および回腸嚢肛門吻合術後に生じる嚢炎、胃腸癌、膵炎、インスリン依存性糖尿病、乳腺炎、胆嚢炎、胆管炎、胆管周囲炎、慢性気管支炎、慢性副鼻腔炎、喘息、原発性硬化性胆管炎、胃腸管でのヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染、好酸球性喘息、好酸球性食道炎、胃炎、大腸炎、顕微鏡的大腸炎、移植片対宿主病、放射線療法もしくは化学療法に関連する大腸炎、白血球接着不全−１などの先天性免疫障害に関連する大腸炎、慢性肉芽腫性疾患、糖原病１ｂ型、ヘルマンスキー・パドラック症候群、チェディアック・東症候群、ウィスコット・アルドリッチ症候群、様々な形態の胃腸癌、骨粗鬆症、関節炎、多発性硬化症、慢性疼痛、体重増加、またはうつ病である。
【００７２】
好ましくは、状態は、炎症性腸疾患、さらに好ましくは、潰瘍性大腸炎またはクローン病である。
【００７３】
一態様では、治療有効量の、本明細書に記載の化合物または多量体を患者に投与することを含む、患者の疾患または状態を治療する方法が提供され、疾患または状態は、ウイルスまたはレトロウイルスの局所または全身感染である。
【００７４】
いくつかの実施形態では、ウイルスまたはレトロウイルスは、エコーウイルス１および８、エコーウイルス９／Ｂａｒｔｙ  Ｓｔｒａｉｎ、ヒトパピローマウイルス、ハンタウイルス、ロタウイルス、アデノウイルス、口蹄疫ウイルス、コクサッキーウイルスＡ９、ヒトパレコウイルス１、またはヒト免疫不全ウイルス１型である。
【００７５】
一態様では、治療有効量の、本明細書に記載の化合物または多量体を患者に投与することを含む、患者の疾患または状態を治療する方法が提供され、疾患または状態は、Ａ型、Ｂ型、もしくはＣ型肝炎、肝性脳症、非アルコール性脂肪性肝炎、肝硬変、静脈瘤出血、ヘモクロマトーシス、ウィルソン病、チロシン血症、α−１−アンチトリプシン欠乏症、肝細胞癌、肝癌、原発性胆汁性胆管炎、原発性胆汁性硬化症、胆道疾患、または自己免疫性肝炎である。
【００７６】
いくつかの実施形態では、化合物は、α４β７インテグリンのＭＡｄＣＡＭへの結合を阻害する。
【００７７】
いくつかの実施形態では、化合物は、α４β７インテグリンのＭＡｄＣＡＭへの結合を選択的に阻害する。
【００７８】
いくつかの実施形態では、患者はヒトである。
【００７９】
他の態様では、上記の疾患および状態を治療または予防するための、本明細書に記載の化合物または多量体の使用が提供される。
【００８０】
他の態様では、上記の疾患および状態を治療または予防するための医薬品の調製における、本明細書に記載の化合物または多量体の使用が提供される。
【００８１】
他の態様では、上記の疾患および状態を治療または予防する際に使用するための、本明細書に記載の化合物または多量体が提供される。
【００８２】
本明細書で使用される場合、「疾患」、「障害」、および「状態」という用語は、交換可能に使用され得る。
【００８３】
本明細書で使用される場合、「阻害」、「治療」、「治療する」、および「改善する」は交換可能に使用され、例えば、症状の停滞、生存期間の延長、症状の部分的または完全な改善、および対象、例えば、哺乳動物の状態、疾患、または障害の部分的または完全な根絶を指す。
【００８４】
本明細書で使用される場合、「予防する」または「予防」は、（ｉ）対象、例えば、哺乳動物において、特にそのような対象がその状態になりやすいが、それを有するとはまだ診断されていない場合に、疾患、損傷、または状態が起こるのを予防または阻害すること、または（ｉｉ）対象において起こる疾患、傷害、または状態が起こる可能性を低減することを含む。
【００８５】
本明細書で使用される場合、「治療有効量」とは、所望の治療結果を達成するのに必要な投与量および特定の期間で有効な量を指す。薬理学的薬剤の治療有効量は、個体の疾患状態、年齢、性別、および体重、ならびに個体における所望の応答を誘発する薬理学的薬剤の能力などの要因によって変化し得る。治療有効量は、薬理学的薬剤のいかなる毒性または有害な効果よりも治療的に有益な効果を上回る量でもある。
【００８６】
いくつかの実施形態では、化合物は、経口、静脈内、腹膜、皮内、皮下、筋肉内、くも膜下腔内、吸入、気化、噴霧、舌下、頬側、非経口、直腸、膣、および局所からなる群から選択される投与形態によって投与される。
【００８７】
いくつかの実施形態では、化合物は開始用量として投与され、その後１回以上の用量が続き、任意の２回の用量間の最小間隔は１日未満の期間であり、用量の各々は化合物の有効量を含む。
【００８８】
いくつかの実施形態では、化合物の有効量は、以下、ａ）α４β７インテグリン分子上のＭＡｄＣＡＭ結合部位の約５０％以上の飽和；ｂ）細胞表面でのα４β７インテグリン発現の約５０％以上の阻害、ならびにｃ）α４β７分子上のＭＡｄＣＡＭ結合部位の約５０％以上の飽和および細胞表面でのα４β７インテグリン発現の約５０％以上の阻害、からなる群から選択される以下のうちの少なくとも１つを達成するのに十分な量であり、ｉ）１日２回以下の投与頻度と一致する期間にわたって飽和が維持されるか、ｉｉ）１日２回以下の投与頻度と一致する期間にわたって阻害が維持されるか、またはｉｉｉ）飽和および阻害はそれぞれ、１日２回以下の投与頻度と一致する期間にわたって維持される。
【００８９】
いくつかの実施形態では、化合物は、２４時間、１時間毎、４時間毎、１日１回、１日２回、１日３回、１日４回、１日おき、毎週、隔週、および毎月からなる群から選択される間隔で投与される。
【００９０】
実施形態の上記開示はまた、様々な実施形態のあらゆる全ての組み合わせも含むと考えられる。本発明の利点は、以下の実施例によりさらに説明される。本明細書に記載される実施例およびそれらの特定の詳細は、例示のみのために提示され、本発明の特許請求の範囲に対する制限として解釈されるべきではない。
【実施例】
【００９１】
方法と材料
合成全般
以下のプロトコル例は、本明細書に記載の化合物の各々を合成するために使用した。スキーム１は、化合物８への一般的な合成経路を示す。
スキーム１．
【化３】
2020519633.tif 000009
【００９２】
樹脂結合直鎖ペプチドＡの合成
２−クロロトリチル樹脂（０．１ｍｍｏｌ、充填＝１．０ｍｍｏｌ／ｇ、０．１ｇ）およびＦｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ（３当量）を含む混合物に、ＤＣＭ（１０ｍＬ）、続いてＤＩＥＡ（４．０当量）を滴下の様式で添加した。樹脂を１．５時間穏やかに撹拌した。ＭｅＯＨ（０．１ｍＬ）を添加して、残りの反応性２−クロロトリチル基をエンドキャップし、樹脂を３０分間穏やかに撹拌し、次いで、排出させた。Ｆｍｏｃ保護ペプチド樹脂を、ＤＭＦ中の２０％ピペリジンで３０分間処理した。Ｆｍｏｃ保護基を除去した後、樹脂を排出し、ＤＭＦ（５Ｘ５ｍＬ）で洗浄した。ＤＭＦ（１ｍＬ）中のＦｍｏｃアミノ酸（３当量）、ＨＡＴＵ（２．８５当量）、およびＤＩＰＥＡ（３当量）を１時間使用して、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、およびＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨを導入するために、標準のＦｍｏｃ固相ペプチド化学を用いた。ニンヒドリン発色反応によりカップリング反応を監視した。樹脂を、ＤＭＦ（３００ｍＬ）中のＦｍｏｃ−３−アミノメチル−４−ブロモ安息香酸（１．５当量；ＰＣＴ第ＰＣＴ／ＣＡ２０１６／０００２７４号に従って調製）、ＨＡＴＵ（１．５当量）、およびＤＩＰＥＡ（３当量）で１時間処理した。Ｆｍｏｃ保護ペプチド樹脂を、ＤＭＦ中の２０％ピペリジンで３０分間処理した。Ｆｍｏｃ保護基を除去した後、樹脂を排出し、ＤＭＦ（５Ｘ５ｍＬ）で洗浄した。ＤＭＦ（１ｍＬ）中のＦｍｏｃアミノ酸（３当量）、ＨＡＴＵ（２．８５当量）、およびＤＩＰＥＡ（３当量）を１時間使用して、標準のＦｍｏｃ固相ペプチド化学を用いてＦｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨを導入した。カップリング後、樹脂をＤＭＦ（５Ｘ１００ｍＬ）で洗浄した。Ｆｍｏｃ保護ペプチド樹脂を、ＤＭＦ中の２０％ピペリジンで３０分間処理した。Ｆｍｏｃ保護基を除去した後、樹脂を排出し、ＤＭＦ（５Ｘ５ｍＬ）で洗浄した。最後のステップの後、樹脂をＭｅＯＨ（３Ｘ１００ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させた。
【００９３】
樹脂からの直鎖ペプチドＡの切断
ペプチド樹脂（１０ｇ）を、穏やかに撹拌しながら０．５時間、切断カクテル（２０％ＨＦＩＰ／８０％ＤＣＭ、１Ｌ）で処理した。切断カクテルを３Ｌエルレンマイヤーフラスコ中に収集した。樹脂を穏やかに撹拌しながら０．５時間、切断カクテル（２０％ＨＦＩＰ／８０％ＤＣＭ、１Ｌ）で再び処理した。切断カクテルを同じ３Ｌ三角フラスコ中に収集した。合わせた切断カクテル溶液を減圧下で濃縮して、粗直鎖ペプチドＡ（４．５ｇ）を送達した。
【００９４】
環化
粗直鎖ペプチドＡ（４．５ｇ）をＤＣＭ（５Ｌ）に溶解し、ＤＩＥＡ（４当量）およびＨＡＴＵ（２当量）で処理した。混合物を室温で０．５時間撹拌した。直鎖ペプチドの変換をＬＣＭＳによって監視した。揮発性物質を減圧下で濃縮して、粗環状ペプチド、化合物Ａ（５ｇ）を送達した。
【００９５】
鈴木クロスカップリング
５つの反応を並行して実施した。粗化合物Ａ（１ｇ  １．２ｍｍｏｌ）の混合物、および４−（４−Ｂｏｃ−ピペラジノ）フェニルボロン酸ピナコールエステル（９３１ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）をマイクロ波反応容器で合わせ、室温で１，２−ジメトキシエタン（５．４ｍＬ）およびエタノール（１．２ｍＬ）に溶解した。水（１．２ｍＬ）を溶液に添加し、続いてＮａ２ＣＯ３（２５４ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）を添加した。反応フラスコを窒素ガスで５〜１０分間流し、Ｐｄ（Ｐ（Ｐｈ）３）４（２７７ｍｇ  ０．２４ｍｍｏｌ）を充填した。チューブを密封し、マイクロ波下で、１２０℃で１０分間加熱した。ＬＣ−ＭＳは、環状ペプチドの完全な消費および所望のｍ／ｚを有する１つの主要ピークを示した。反応混合物をセライトパッドで濾過して、Ｐｄ（Ｐ（Ｐｈ）３）４を除去した。セライトパッドをＴＨＦで洗浄し、溶媒を真空下で除去して、淡黄色の粗固体、化合物Ｂを得た。
【００９６】
包括的な脱保護
粗製の、完全に側鎖が保護された化合物Ｂを、５００ｍＬの切断緩衝剤（ＴＦＡ：ＤＣＭ＝１：１）で処理し、１時間撹拌した。揮発物質を減圧下で濃縮し、完全に脱保護された化合物８（７ｇ）を送達した。
【００９７】
精製
粗化合物８を分取逆相ＨＰＬＣ（Ａ：Ｈ２Ｏ中０．０７５％ＴＦＡ；Ｂ：ＡＣＮ）にかけ、精製された環状ペプチドのＴＦＡ塩を生成した。２回目の分取逆相ＨＰＬＣ処理（Ａ：Ｈ２Ｏ中１ｍｍｏｌ／Ｌ  ＮＨ４ＨＣＯ３；Ｂ：ＡＣＮ）は、凍結乾燥後、残留ＴＦＡの全ての痕跡を除去し、白色固体として化合物８を「無塩」形態（８００ｍｇ）として送達した。
【００９８】
化合物８の二量化：化合物１６の合成
【化４】
2020519633.tif 000010
無水ＴＨＦ（１ｍＬ）中ジフェン酸（１２．１ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液を塩化オキサリル（１０μｌ）で処理し、続いてＤＭＦ（５μｌ）で処理した。得られた懸濁液を２５℃で撹拌し、１時間かけて黄色の溶液になった。フラスコをアルゴンで流すことにより、揮発性物質を除去した。得られた黄色の固体を無水ＤＣＭ（３ｍｌ）に溶解し、化合物８（９５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、２．４当量；無塩形態）で処理した。ＤＩＰＥＡ（１．６ｍＬ、１．２５ｍｍｏｌ、２５．０当量）を混合物に滴下で添加した。反応をＬＣ−ＭＳによって監視した。３０分後、揮発物質を真空下で除去し、粗物質を分取逆相ＨＰＬＣ（Ａ：Ｈ２Ｏ中０．０７５％ＴＦＡ、Ｂ：ＡＣＮ）により精製した。化合物１６を白色固体（９．４ｍｇ）として単離した。
【００９９】
化合物８の二量化：化合物１８の合成
【化５】
2020519633.tif 000011
ＡＣＮ（１ｍＬ）中化合物８（１２０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ、２．７当量；無塩形態）、１，３−ビス（ブロモメチル）ベンゼン（１２．８ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ、１当量）、およびＤＩＰＥＡ（０．１ｍＬ）の懸濁液を２５℃で１時間撹拌した。揮発性物質を真空下で除去し、粗物質を分取逆相ＨＰＬＣ（Ａ：Ｈ２Ｏ中０．０７５％ＴＦＡ、Ｂ：ＡＣＮ）により精製した。化合物１８を白色固体（４．２ｍｇ）として単離した。
【０１００】
インテグリンα４β７−ＭＡｄＣＡＭ−１  ＥＬＩＳＡ競合アッセイ
９６ウェルＭｉｃｒｏｌｏｎプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ、６５５００１）を、炭酸緩衝剤（５０ｍＭ、ｐＨ９．６）中１μｇ／ｍｌの組換えインテグリンα４β７（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、５３９７−Ａ３−０５０）の溶液を１ウェルあたり１００μｌでコーティングした。プレートを４℃で一晩インキュベートした。溶液を除去し、２５０μｌのブロッキング緩衝剤（５０ｍＭのトリス、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＭｎＣｌ２、１％のＢＳＡ、０．０５％のＴｗｅｅｎ）をウェルに添加した。次に、プレートを室温で１時間インキュベートした。プレートを洗浄緩衝剤（５０ｍＭのトリス、１００ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＭｎＣｌ２、０．０５％のＴｗｅｅｎ）で３回洗浄した。各ウェルに、アッセイ緩衝剤で希釈した５０μｌの化合物を、化合物連続希釈プレートから移すことにより添加した。アッセイ緩衝剤（５０ｍＭのトリス、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＭｎＣｌ２、０．１％のＢＳＡ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ）中０．１μｇ／ｍｌの濃度で５０μｌ組換えＭＡｄＣＡＭ−ＦＣ（Ｒ＆Ｄシステム、６０５６−ＭＣ−０５０）を各ウェルに添加した。プレートを室温で振盪（３００ｒｐｍ）しながら２時間インキュベートして、結合平衡に達した。次に、プレートを洗浄緩衝剤で３回洗浄し、アッセイ緩衝剤中で１：２０００に希釈した１００μｌ抗ヒトＩｇＧ  Ｆｃ特異的ＨＲＰ（Ａｂｃａｍ、Ａｂ９７２２５）を各ウェルに添加した。プレートを撹拌しながら室温で１時間インキュベートした。次いで、プレートを３回洗浄し、次いで１００μｌの１，３’，５，５’−テトラメチルベンキシジエ（ＴＭＢ、ＫＰＬ  ５１２０−００８３）を各ウェルに添加した。５０μｌの１Ｍ  Ｈ２ＳＯ４を添加することにより、２分間のインキュベーション後に反応を停止し、吸光度を４５０ｎＭで読み取った。
【０１０１】
インテグリンα４β１−ＶＣＡＭ−１競合ＥＬＩＳＡ
９６ウェルＭｉｃｒｏｌｏｎプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ、６５５００１）を、炭酸緩衝剤（５０ｍＭ、ｐＨ９．６）中０．５μｇ／ｍｌ組換えインテグリンα４β１（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、５３９７−Ａ３−０５０）の溶液の１ウェルあたり１００μｌでコーティングした。プレートを４℃で一晩インキュベートした。溶液を除去し、２５０μｌのブロッキング緩衝剤（５０ｍＭのトリス、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＭｎＣｌ２、１％のＢＳＡ、０．０５％のＴｗｅｅｎ）をウェルに添加した。次に、プレートを室温で１時間インキュベートした。プレートを洗浄緩衝剤（５０ｍＭのトリス、１００ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＭｎＣｌ２、０．０５％のＴｗｅｅｎ）で３回洗浄した。各ウェルに、アッセイ緩衝剤で希釈した５０μｌの化合物を、化合物連続希釈プレートから移すことにより添加した。アッセイ緩衝剤（５０ｍＭのトリス、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＭｎＣｌ２、０．１％のＢＳＡ、０．０５％Ｔｗｅｅｎ）中０．１μｇ／ｍｌの濃度で５０μｌ組換えＶＣＡＭ−Ｆｃ（Ｒ＆Ｄシステム、８６２−ＶＣ−１００）を各ウェルに添加した。プレートを室温で振盪（３００ｒｐｍ）しながら２時間インキュベートして、結合平衡に達した。次に、プレートを洗浄緩衝剤で３回洗浄し、アッセイ緩衝剤中で１：２０００に希釈した１００μｌ抗ヒトＩｇＧ  Ｆｃ特異的ＨＲＰ（Ａｂｃａｍ、Ａｂ９７２２５）を各ウェルに添加した。プレートを撹拌しながら室温で１時間インキュベートした。次いで、プレートを３回洗浄し、次いで１００μｌの１，３’，５，５’−テトラメチルベンキシジエ（ＴＭＢ、ＫＰＬ  ５１２０−００８３）を各ウェルに添加した。５０μｌの１Ｍ  Ｈ２ＳＯ４を添加することにより、２分間のインキュベーション後に反応を停止し、吸光度を４５０ｎＭで読み取った。
【０１０２】
インテグリンα４β７−ＭＡｄＣＡＭヒト細胞接着アッセイ
ＲＰＭＩ８８６６ヒト細胞（Ｓｉｇｍａ＃９５０４１３１６）は、１０％のＦＢＳ（Ｓｅｒａｄｉｇｍ）および１の％ペニシリン−ストレプトマイシンを添加したＲＰＭＩ  １６４０培地（ＨｙＣｌｏｎｅ  ＳＨ３００２７．１）で培養した。９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ、３６０３）を、コーティング緩衝剤（５０ｍＭの炭酸ナトリウム、ｐＨ９．６）中の０．２５μｇ／ｍｌのヒト組換えＭＡｄＣＡＭ−１  Ｆｃキメラ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、６０５６−ＭＣ−０５０）溶液を１００μｌ／ウェルでコーティングした。プレートを４℃で一晩インキュベートし、１ウェルあたり１５０μｌの洗浄緩衝剤（ＰＢＳ中０．０５％のＴｗｅｅｎ  ２０）で２回洗浄し、１ウェルあたり２５０μｌのブロッキング緩衝剤（ＰＢＳ中１％の脱脂粉乳）でブロックし、室温で２時間インキュベートした。ＲＰＭＩ８８６６細胞を、５ｍＭのカルセインを含むＰＢＳに１０００万個の細胞／ｍｌで再懸濁し、５０ｍｌチューブ内で、３７℃で３０分間インキュベートした。ＰＢＳを添加してチューブを充填し、細胞を遠沈し、ＲＰＭＩ  １６４０培地に再懸濁して２００万個／ｍｌにした。化合物を、結合緩衝剤（１．５ｍＭのＣａＣｌ２、０．５ｍＭのＭｎＣｌ２、５０ｍＭのトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５）中で連続希釈することにより希釈し、２倍の濃度で１ウェルあたり５０μｌの最終体積にした。プレートを３００μｌのＰＢＳで１回洗浄し、５０μｌの化合物および５０μｌの細胞（１００，０００個の細胞）を各ウェルに移し、プレートを、３７℃、５％のＣＯ２の暗所で４５分間インキュベートし、細胞接着を可能にした。プレートを反転させ、ペーパータオルで吸い取ることにより空にし、ＰＢＳで、２回手動で洗浄した。次いで、１００μｌのＰＢＳを各ウェルに添加した。プレートリーダー（Ｔｅｃａｎ  Ｉｎｆｉｎｉｔｅ  １０００）を使用して、蛍光を読み取った（Ｅｘ４９５／Ｅｍ５１５）。用量応答を計算するために、細胞を含まない対照ウェルの蛍光値を各試験のウェルから差し引いた。
【０１０３】
インテグリンα４β１−ＶＣＡＭヒト細胞接着アッセイ
ＲＡＭＯＳヒト細胞（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１５９６）は、１０％のＦＢＳ（Ｓｅｒａｄｉｇｍ）および１％のペニシリン−ストレプトマイシンを添加したＲＰＭＩ  １６４０培地（ＨｙＣｌｏｎｅ  ＳＨ３００２７．１）で培養した。９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ、３６０３）を、コーティング緩衝剤（５０ｍＭの炭酸ナトリウム、ｐＨ９．６）中の０．２５μｇ／ｍｌの組換えヒトＶＣＡＭ−１  Ｆｃキメラ（Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ、８６２−ＶＣ−１００）溶液を１００μｌ／ウェルでコーティングした。プレートを４℃で一晩インキュベートし、１ウェルあたり１５０μｌの洗浄緩衝剤（ＰＢＳ中０．０５％のＴｗｅｅｎ  ２０）で２回洗浄し、室温で１時間１ウェルあたり２５０μｌのブロッキング緩衝剤（ＰＢＳ中１％の脱脂粉乳）でブロックした。ブロッキングステップ中、ＲＡＭＯＳ細胞を、５ｍＭのカルセインを含むＰＢＳに１０００万個の細胞／ｍｌで再懸濁し、５０ｍｌチューブ内で、３７℃で３０分間インキュベートした。ＰＢＳを添加してチューブを充填し、細胞を遠沈し、ＲＰＭＩ  １６４０培地に再懸濁して２００万個／ｍｌにした。化合物を、結合緩衝剤（１．５ｍＭのＣａＣｌ２、０．５ｍＭのＭｎＣｌ２、５０ｍＭのトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５）中で連続希釈することにより希釈し、２倍の濃度で１ウェルあたり５０μｌの最終体積にした。プレートを３００μｌのＰＢＳで１回洗浄し、５０μｌの化合物および５０μｌの細胞（１００，０００個の細胞）を各ウェルに移し、プレートを、３７℃、５％のＣＯ２の暗所で４５分間インキュベートし、細胞接着を可能にした。プレートを反転させ、ペーパータオルで吸い取ることにより空にし、ＰＢＳで、２回手動で洗浄した。最後の洗浄の後、１００μＬのＰＢＳをウェルに添加し、プレートリーダー（Ｔｅｃａｎ  Ｉｎｆｉｎｉｔｅ  １０００）を使用して、蛍光を読み取った（Ｅｘ４９５／Ｅｍ５１５）。用量応答を計算するために、細胞を含まない対照ウェルの蛍光値を各試験のウェルから差し引いた。
【０１０４】
インテグリンα４β７−ＭＡｄＣＡＭマウス細胞接着アッセイ
ＴＫ−１マウスＴ細胞リンパ腫細胞株（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ２３９６）を、１０％のＦＢＳ（Ｓｅｒａｄｉｇｍ）および１％のペニシリン−ストレプトマイシンを添加したＲＰＭＩ  １６４０培地（ＨｙＣｌｏｎｅ  ＳＨ３００２７．１）で培養した。９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ、３６０３）を、コーティング緩衝剤（５０ｍＭの炭酸ナトリウム、ｐＨ９．６）中の０．２５μｇ／ｍｌの組換えマウスＭＡｄＣＡＭ−１  Ｆｃキメラ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、９９３−ＭＣ−０５０）溶液を１００μｌ／ウェルでコーティングした。プレートを４℃で一晩インキュベートし、１ウェルあたり１５０μｌの洗浄緩衝剤（ＰＢＳ中０．０５％のＴｗｅｅｎ  ２０）で２回洗浄し、１ウェルあたり２５０μｌのブロッキング緩衝剤（ＰＢＳ中１％の脱脂粉乳）でブロックし、室温で２時間インキュベートした。ＴＫ−１細胞を、５ｍＭのカルセインを含むＰＢＳに１０００万個の細胞／ｍｌで再懸濁し、５０ｍｌチューブ内で、３７℃で３０分間インキュベートした。ＰＢＳを添加してチューブを充填し、細胞を遠沈し、ＲＰＭＩ  １６４０培地に再懸濁して２００万個／ｍｌにした。化合物を、結合緩衝剤（１．５ｍＭのＣａＣｌ２、０．５ｍＭのＭｎＣｌ２、５０ｍＭのトリス−ＨＣｌ、ｐＨ７．５）中で連続希釈することにより希釈し、２倍の濃度で１ウェルあたり５０μｌの最終体積にした。プレートを３００μｌのＰＢＳで１回洗浄し、５０μｌの化合物および５０μｌの細胞（１００，０００個の細胞）を各ウェルに移し、プレートを、３７℃、５％のＣＯ２の暗所で４５分間インキュベートし、細胞接着を可能にした。プレートを反転させ、ペーパータオルで吸い取ることにより空にし、ＰＢＳで、２回手動で洗浄した。次いで、１００μｌのＰＢＳを各ウェルに添加した。プレートリーダー（Ｔｅｃａｎ  Ｉｎｆｉｎｉｔｅ  １０００）を使用して、蛍光を読み取った（Ｅｘ４９５／Ｅｍ５１５）。用量応答を計算するために、細胞を含まない対照ウェルの蛍光値を各試験のウェルから差し引いた。
【０１０５】
ヒトＣＤ４＋インテグリンα４＋β７−陰性メモリー初代Ｔ細胞における分析物競合アッセイ
初代細胞の受容体占有率（ＲＯ）は、フローサイトメトリーを使用して、選択された細胞集団に結合したビオチン化ヒト組換えＭＡｄＣＡＭ−１−ＦＣまたはヒト組換えＶＣＡＭ−１−Ｆｃの量を測定することにより決定した。ヒト組換えＭＡｄＣＡＭ−１−ＦＣまたはヒト組換えＶＣＡＭ−１−ＦＣ（Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ）を、市販の試薬およびプロトコル（Ｐｉｅｒｃｅ）を使用してビオチン化した。
【０１０６】
全血を、ヘパリンナトリウムチューブでヒトのドナーから収集した。１００μＬの体積の血液を化合物および４ｍＭのＭｎＣＬ２とともに室温で１時間インキュベートした。細胞を１ｍＬの１倍ＤＰＢＳカルシウムマグネシウムフリー（ＣＭＦ）（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で２回洗浄し、１００μＬのＤＰＢＳ  ＣＭＦに再懸濁した。
【０１０７】
ビオチン化ヒト組換えＭＡｄＣＡＭ−１−ＦｃまたはＶＣＡＭ−１−Ｆｃを飽和濃度で添加し、室温で１時間インキュベートした。次いで、２ｍＬの体積の１倍ＢＤ  ＦＡＣＳ  Ｌｙｓｅ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を添加し、混合物を室温で、暗所で８〜１２分間インキュベートして赤血球を溶解した。細胞を１ｍＬの染色緩衝剤ＦＢＳ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で洗浄し、４ｍＭのＭｎＣｌ２を含む１００μｌの染色緩衝剤ＦＢＳ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）に再懸濁した。ビオチン化ｒｈＭＡｄＣＡＭ−１を１２００ｎｇ／ｍＬの飽和濃度で適用して、試験物品の結合と競合させ、室温で１時間インキュベートした。次いで、細胞を１ｍＬの染色緩衝剤ＦＢＳで洗浄し、１００μｌの染色緩衝剤ＦＢＳに再懸濁した。細胞を１μｌのストレプトアビジンＡＰＣ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ  ０．２ｍｇ／ｍｌ）およびメモリーＴヘルパーａ４ｂ７陽性細胞サブセットの検出用の抗体のパネルとともに室温で、３０分間暗所でインキュベートした。また、以下の抗体をそれぞれ５．０μｌ使用した；ＣＤ４５  ＦＩＴＣ（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ  ２００μｇ／ｍｌ）、ＣＤ２９  ＡＰＣ  Ｃｙ７（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ  １００μｇ／ｍｌ）、Ｉｎｔｅｇｒｉｎ  ｂｅｔａ７ＰＥ、（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ濃度５０μｇ／ｍＬ）、ＣＤ４９ｄ  Ｖ４２１（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ  ５０μｇ／ｍＬ）、ＣＤ３  Ｖ５１０（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ  ３０μｇ／ｍＬ）、ＣＤ４  ＰＥＣｙ７（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ  １００μｇ／ｍＬ）、ＣＤ４５ＲＯ  ＰｅｒＣＰ、（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ  ２００μｇ／ｍＬ）。次いで、細胞を染色緩衝剤ＦＢＳで洗浄し、フローサイトメーター（ＢＤ  ＦＡＣＳＣａｎｔｏ（商標）フローサイトメーターおよびＢＤＦＡＣＳＤｉｖａ（商標）ソフトウェア）で取得するために１５０μＬの染色緩衝液ＦＢＳに再懸濁した。ＦＡＣＳデータを、前方散乱と側方散乱に基づいて電子ゲーティングによって取得した。サイトメーターを、各チューブで２０，０００イベントを収集するように設定した。細胞集団を、以下のマーカー、ＣＤ４５＋、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ４５ＲＯ＋、ＣＤ４９ｄ＋、インテグリンβ７、ビオチン化リガンドを使用して決定した。
【０１０８】
化合物ＲＯを、それぞれビオチン化ｒｈＭＡｄＣＡＭ−１またはｒｈＶＣＡＭ−１を結合するインテグリンβ７＋またはインテグリンβ７−ｌｏ細胞の数の減少と定義した。
【０１０９】
受容体占有率を、以下の式で計算した：１００−（（化合物を含むリガンド陽性細胞％／リガンド陽性細胞ＤＭＳＯ％）＊１００）。リガンドおよび化合物は、抗インテグリン抗体について競合せず、α４β７陽性メモリーＴ細胞の検出を妨害しなかった。
【０１１０】
結果および議論
図１〜５に表される化合物を上記の方法に従って合成した。化合物の選択は、ＨＰＬＣ、質量分析、およびＮＭＲを使用して特徴付けた（データには示さず）。いくつかの場合によっては、第１世代の合成および精製から単離された化合物（バッチ１）は、ＨＰＬＣクロマトグラムにおいて複数のピークを生成する。それらの例のいくつかでは、第２および／または第３世代の合成ならびに精製を行い、ＨＰＬＣクロマトグラムにおいて本質的に単一ピークを呈したバッチ２および／またはバッチ３の物質をもたらした。バッチ１、バッチ２、およびバッチ３の指定は、ＨＰＬＣ、質量分析、およびＮＭＲデータに示される（表示なし）。
【０１１１】
競合アッセイ
２つのリガンド競合アッセイ（ＭＡｄＣＡＭ−１／α４β７およびＶＣＡＭ−１／α４β１）における化合物の結果を表１に示す。
【０１１２】
細胞接着競合アッセイ
ＲＰＭＩ８８６６、ＲＡＭＯＳ、およびＴＫ−１細胞接着競合アッセイにおける化合物の結果を表１および２に示す。
【０１１３】
受容体占有率
全血リガンド置換アッセイにおける化合物の結果を表１および３に示す。
【０１１４】
インテグリンα４β７およびα４β１に対する化合物の結合親和性および選択性
一連の生化学、細胞ベース、およびエクスビボのアッセイを使用して、α４β７−インテグリンに対する単量体および二量体化合物の結合効力を測定した。多量体化合物は、概して、生化学および細胞アッセイにおいて、それらの構成単量体よりも強力であった。
【０１１５】
ヒトインテグリンα４β７を発現するＲＰＭＩ８８６６細胞がＭＡｄＣＡＭ−１でコーティングされたプレートに接着するのを防ぐ試験物品の能力を測定した。多量体化合物は、概して、細胞接着を阻害する能力においてそれらの構成単量体よりも強力であった。例えば、化合物１６および化合物８は、同等のＲＰＭＩ８８６６細胞接着アッセイにおいて、それぞれ約６ｎＭおよび約２０２ｎＭのＩＣ５０値を有していた（図６；表１および２）。多量体化合物はまた、概して、ヒトインテグリンα４β１を発現する細胞に対してインテグリンα４β７を発現する細胞（ＲＰＭＩ８８６６）の接着を阻害するそれらの能力において、構成単量体よりも選択的であった（ＲＡＭＯＳ；図７；表１および表２）。例えば、多量体化合物１６は、約６ｎＭのＩＣ５０値を有するＲＰＭＩ８８６６細胞における接着を阻害し、約２１ｎＭのＩＣ５０値を有するＲＡＭＯＳ細胞における接着を阻害したが（インテグリンα４β７に有利に、アッセイ間で３．５倍の差）、単量体化合物８は、約２０２ｎＭのＩＣ５０値を有するＲＰＭＩ８８６６細胞における接着を阻害し、約４５１ｎＭのＩＣ５０値を有するＲＡＭＯＳ細胞における接着を阻害した（インテグリンα４β７に有利に、アッセイ間で２．２倍の差）。まとめると、単量体の多量体化により、細胞接着の阻害が増加し、ならびに細胞接着の阻害の選択性が増加し、インテグリンα４β１よりもインテグリンα４β７が有利であった。
【０１１６】
興味深いことに、単量体化合物および多量体化合物の間の結合親和性の違いは、ＥＬＩＳＡ  α４β７結合アッセイでは明白ではなかった。例えば、単量体化合物８は、約２４ｎＭのＥＬＩＳＡ  α４β７  ＩＣ５０を呈したが、二量体化合物１６は、約８ｎＭのＥＬＩＳＡ  α４β７  ＩＣ５０値を呈した（表１）。結合活性が細胞内の多量体化合物の結合効力を高めることは可能である。
【０１１７】
ヒト全血中のインテグリンα４β７への結合に関するリガンド競合アッセイでも同様の結果を得た（表１および３）。化合物の受容体占有率は、フローサイトメトリーを使用してビオチン化ｒｈＭＡｄＣＡＭ−１に結合することができるα４β７＋メモリーＴヘルパー細胞の割合を測定することにより決定した。多量体化合物は、単量体化合物よりも強力なα４β７陽性初代細胞でＭＡｄＣＡＭ−１と競合することができた。様々なリンカーを含む単量体は、構成単量体よりも効果的に競合することを示した。例えば、二量体化合物番号１６、１８、および１９は、約６、約２５、および約２６０ｎＭのＩＣ５０値を呈したが、対応する親単量体化合物番号８については、比較的弱い濃度応答曲線が得られた（図８；表３）。これは、単量体化合物の細胞への非特異的結合の結果であり得る。
【０１１８】
ヒトＣＤ４＋インテグリンα４＋β７−ｌｏメモリー初代Ｔ細胞における検体競合アッセイによって測定される場合の受容体占有率は、全血で、α４β１よりもα４β７に有利に、かなりの効力および選択性を有する多量体化合物を特定した。単量体化合物８は、α４β７で比較的弱いＲＯ（ＩＣ５０＞４μＭ）を呈し（図８、表１および３）、α４β１よりも選択性はなかった。同様のプロファイルを単量体化合物１１および１４について記録した。対照的に、多量体化合物１６は、特に、α４β１に対して強いα４β７ＲＯ（ＩＣ５０約６ｎＭ）および強い（アッセイ間で約１１倍の差のＩＣ５０）選択性を呈した（図９、表１および３）。多量体化合物１８および１９は、サブマイクロモルα４β７  ＲＯ  ＩＣ５０値、ならびにα４β１に対する選択性も呈した。
【０１１９】
マウス細胞の接着を評価するために、ヒト細胞との比較のために、マウスインテグリンα４β７を発現するマウスＴＫ−１細胞株を用いた（表１）。単量体態化合物８は、マウスα４β７含有細胞接着（より弱い接着）およびヒトα４β７含有細胞接着（より強い接着）の間のＩＣ５０において約１０倍の差を呈した。多量体化合物は、概して、単量体化合物８よりもマウスおよびヒトの細胞接着の間に低い不一致を呈した。例えば、多量体化合物１６、１７、および１８は、マウスα４β７含有細胞接着において約２８、約９７、および約６８ｎＭのＩＣ５０値を示したが、ヒトα４β７含有細胞接着において約６、約１９、および約８ｎＭのＩＣ５０値を呈した。１つの例外は、単量体化合物１９であり、これはマウスα４β７含有細胞接着において１．８８３μＭのＩＣ５０値を呈したが、ヒトα４β７含有細胞接着において約２５ｎＭのＩＣ５０値を示した。
【０１２０】
本発明の好ましい実施形態が本明細書で説明されているが、本発明の精神または添付の特許請求の範囲から逸脱することなく、それらへの変更が行われ得ることを当業者は理解するであろう。以下の参照一覧にあるものを含む、本明細書に開示される全ての文書は、参照により組み込まれる。
【表２】
2020519633.tif 000012
【表３】
2020519633.tif 000013
【表４】
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【図１】
2020519633.tif 000017
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【国際調査報告】
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