(57)【要約】  呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）感染に対する防御免疫を誘導するための、アデノウイルスベクターを用いる組成物、ワクチン及び方法が記載される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）抗原性呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）タンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量の第１アデノウイルスベクターを含む第１組成物と、
（ｉｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量の第２アデノウイルスベクターを含む第２組成物と
を含む組み合わせワクチンであって、前記組成物の１つは、プライム組成物であり、及び他の組成物は、ブースト組成物である、組み合わせワクチン。
【請求項２】
（ｉｉｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量の第３アデノウイルスベクターを含む第３組成物
を更に含み、前記組成物の１つは、プライム組成物であり、及び他の組成物は、ブースト組成物である、請求項１に記載の組み合わせワクチン。
【請求項３】
前記第１及び第２アデノウイルスベクターは、配列番号１又は２のアミノ酸配列を有するＲＳＶ  Ｆタンパク質をコードする核酸を含む、請求項１又は２に記載の組み合わせワクチン。
【請求項４】
前記第３アデノウイルスベクターは、配列番号１又は２のアミノ酸配列を有するＲＳＶ  Ｆタンパク質をコードする核酸を含む、請求項２又は３に記載の組み合わせワクチン。
【請求項５】
前記アデノウイルスベクターは、組換えＡｄ２６ベクターである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組み合わせワクチン。
【請求項６】
対象においてＲＳＶに対する免疫応答を誘導する方法であって、
（ｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量の第１アデノウイルスベクターを含む第１組成物を前記対象に投与することと、
（ｉｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量の第２アデノウイルスベクターを含む第２組成物を前記対象に投与することと
を含む方法。
【請求項７】
（ｉｉｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量の第２アデノウイルスベクターを含む第３組成物を前記対象に投与すること
を更に含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記第１組成物（ｉ）における前記アデノウイルスベクターは、配列番号１又は２のアミノ酸配列を有するＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含み、及び前記第２組成物（ｉｉ）における前記アデノウイルスベクターは、配列番号１又は２のアミノ酸配列を有するＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含み、任意選択的に、組成物（ｉｉｉ）における前記アデノウイルスベクターは、配列番号１又は２のアミノ酸配列を有するＲＳＶ  Ｆタンパク質をコードする核酸を含む、請求項６又は７に記載の方法。
【請求項９】
前記アデノウイルスベクターは、Ａｄ２６ベクターである、請求項６〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記方法のステップ（ｉ）及びステップ（ｉｉ）は、１〜１２週間間隔、好ましくは２〜１０週間、より好ましくは４〜８週間、より好ましくは４又は８週間間隔で実施される、請求項６〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記方法のステップ（ｉｉ）及びステップ（ｉｉｉ）は、１〜１２週間間隔、好ましくは２〜１０週間、より好ましくは４〜８週間、より好ましくは４又は８週間間隔で実施される、請求項６〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記対象は、約０〜２４ヶ月の月齢、好ましくは約０〜１２ヶ月の月齢、より好ましくは約０〜６ヶ月の月齢、より好ましくは２〜６ヶ月の月齢の小児である、請求項６〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
ステップ（ｉ）は、約０〜２ヶ月の月齢の乳児で実施される、請求項６〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記第１組成物は、約２ヶ月の月齢の乳児に投与され、及び前記第２組成物は、約３又は４ヶ月の月齢の前記乳児に投与される、請求項６〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記第１組成物は、約２ヶ月の月齢の乳児に投与され、及び前記第２組成物は、約３又は４ヶ月の月齢の前記乳児に投与され、及び前記第３組成物は、約４又は６ヶ月の月齢の前記乳児に投与される、請求項６〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＲＳＶ感染に対する防御免疫を誘導するための組成物、ワクチン及び方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）は、５歳未満の乳児及び小児における重篤な急性呼吸器疾患の最も重要な原因と考えられる。世界的に、２００５年において、ＲＳＶは、５歳未満の小児で推定３４０万人の入院の原因であった。更に、２００５年において、６６，０００〜１９９，０００人の５歳未満の小児がＲＳＶ関連急性下気道感染（ＬＲＴＩ）により死亡し、これらの死の９９％が発展途上国で発生した。それにも関わらず、先進国におけるＲＳＶによる疾病負荷は大きく、小児期のＲＳＶ感染は、喘鳴、気道過敏症、喘息の発症につながる。米国（ＵＳ）において、感染比率は、月齢１２ヶ月未満の小児では６８．８％であり、２歳までの間で８２．６％である。事実上、全ての小児が月齢２４ヶ月までに少なくとも１回感染し、約半分が２回の感染を経験した。米国において、５歳未満の小児におけるＲＳＶ感染は、毎年５７，０００〜１７５，０００人が入院し、５００，０００人が救急処置室を訪れ、およそ５００人が死亡する原因である。１歳未満の小児において、ＲＳＶは、気管支炎の最も重要な原因であり、ＲＳＶによる入院は、月齢６ヶ月未満の小児の中で最も高い。重篤なＲＳＶ疾患の主要な危険因子は、早産であり、心臓又は肺の併発疾患である。他の危険因子としては、家庭内の兄弟姉妹、性別が男であること及び母乳育児の不足が挙げられる。
【０００３】
最も重篤な疾患は、乳児期の初期感染時に発生することが明らかであるが、症候性の上気道感染症（ＵＲＴＩ）は、一生を通じて発生する。一生を通じて、ＲＳＶは、繰り返し個体を再感染させ、再感染は、ＲＳＶによる感染が永続的な防御免疫を誘導しないか、又はウイルスの変化が免疫システムの回避を可能にするという事実による可能性があると仮定される。
【０００４】
小児に加えて、高齢者、免疫不全者及び慢性心肺状態にある人において、ＲＳＶは、呼吸器感染の重要な原因である。長期間の看護施設において、ＲＳＶは、毎年５〜１０％の居住者に感染し、かなりの割合の肺炎率（１０〜２０％）及び死亡率（２〜５％）を伴うと推定される。ＲＳＶ負荷に関する疫学研究において、米国では、毎年ＲＳＶで１１，０００人の高齢者が死亡していると推定された。
【０００５】
ＲＳＶワクチン開発への高い疾病負荷及び強い関心にも関わらず、ＲＳＶに対する認可されたワクチンがない。１９６０年代において、ホルマリン不活化ＲＳＶ（ＦＩ−ＲＳＶ）ワクチンは、幼児の呼吸器疾患の憎悪（ＥＲＤ）と関連しており、ワクチン接種を受けた個体が、対照群と比較して、ＲＳＶを介した重度のＬＲＴＩの比率を上昇させることにより特徴付けられた。ＦＩ−ＲＳＶワクチンに加えて、いくつかの弱毒生ＲＳＶワクチン及びサブユニットＲＳＶワクチンが動物モデル及びヒトの研究で試験されてきた。弱毒生ワクチンは、とりわけ、乳児において、過剰な弱毒化及び不十分な弱毒化に関連する困難により、免疫性試験が行われてきた。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
いくつかのワクチン候補は、複製不能ベクターを含む様々なプラットフォーム技術に基づいて開発中である。しかしながら、ＲＳＶに対する認可された防御用ワクチンは、依然として存在しない。そのため、ＲＳＶウイルスに対する免疫応答を誘発する安全で効果的なワクチンに対する要求が満たされていない。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする複製不能ベクターの様々なプライム−ブーストの組み合わせにより、異なるターゲット集団、特に幼児において、ＲＳＶウイルス感染に対する効果的な免疫防御が生成されることが本発明において見出される。
【０００８】
したがって、本発明の１つの一般的な態様は、
（ｉ）抗原性呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）タンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第１組成物と、
（ｉｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第２組成物と
を含む組み合わせワクチンであって、組成物の１つは、プライム組成物であり、及び他の組成物は、ブースト組成物である、組み合わせワクチンに関する。
【０００９】
別の態様において、本発明は、
（ｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第１組成物と、
（ｉｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第２組成物と、
（ｉｉｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第３組成物と
を含む組み合わせワクチンであって、組成物の１つは、プライム組成物であり、及び他の組成物は、ブースト組成物である、組み合わせワクチンに関する。
【００１０】
本発明の別の一般的な態様は、ＲＳＶウイルスに対する防御免疫応答を生じさせるための、抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第１組成物と、抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第２組成物との使用に関する。
【００１１】
本発明の別の態様は、ＲＳＶウイルスに対する防御免疫応答を生じさせるための、抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第１組成物と、抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第２組成物と、抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む第３組成物との使用に関する。
【００１２】
本発明の好ましい実施形態において、第１組成物（ｉ）におけるアデノウイルスベクターは、配列番号１又は２のアミノ酸配列を有する抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含み、及び第２組成物（ｉｉ）におけるアデノウイルスベクターは、配列番号１又は２のアミノ酸配列を有する抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む。
【００１３】
別の好ましい実施形態において、第３組成物におけるアデノウイルスベクターは、配列番号１又は２のアミノ酸配列を有するＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む。
【００１４】
特定の実施形態において、抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸は、配列番号３又は４の核酸配列を含む。
【００１５】
更に、本明細書に記載の組成物は、キットで実施され得ると考えられる。例えば、一実施形態において、本発明は、
（ｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第１組成物と、
（ｉｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第２組成物と、任意選択的に、
（ｉｉｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第３組成物と
を含むキットを含み得る。
【００１６】
好ましい実施形態において、本発明は、本明細書に記載されるとおりの組み合わせワクチン、キット又は使用に関し、ここで、組成物（ｉ）におけるアデノウイルスベクターは、配列番号１又は２のアミノ酸配列を有するＲＳＶ  Ｆタンパク質をコードする核酸を含み、組成物（ｉｉ）におけるアデノウイルスベクターは、配列番号１又は２のアミノ酸配列を有するＲＳＶ  Ｆタンパク質をコードする核酸を含む。
【００１７】
別の実施形態において、組成物（ｉｉｉ）におけるアデノウイルスベクターは、配列番号１又は２のアミノ酸配列を有するＲＳＶ  Ｆタンパク質をコードする核酸を含む。
【００１８】
好ましい実施形態において、組成物（ｉ）、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）におけるアデノウイルスベクターは、配列番号１のアミノ酸配列を有するＲＳＶ  Ｆタンパク質をコードする核酸を含む。
【００１９】
特定の実施形態において、抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸は、配列番号３又は４の核酸配列を含む。
【００２０】
好ましい実施形態において、アデノウイルスベクターは、組換えＡｄ２６（ｒＡｄ２６）ベクターである。
【００２１】
本発明の１つの更なる一般的な態様は、対象においてＲＳＶウイルスに対する免疫応答を誘導する方法であって、
（ｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第１組成物を対象に投与することと、
（ｉｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第２組成物を対象に投与することと、任意選択的に、
（ｉｉｉ）ＲＳＶウイルスの抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第３組成物を対象に投与することと
を含む方法に関する。
【００２２】
好ましい実施形態において、第１、第２及び任意選択的な第３組成物におけるアデノウイルスベクターは、配列番号１又は２のアミノ酸配列を有する抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む。
【００２３】
特定の実施形態において、抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸は、配列番号３又は４の核酸配列を含む。
【００２４】
好ましい実施形態において、組成物（ｉ）、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）におけるアデノウイルスベクターは、配列番号１のアミノ酸配列を有するＲＳＶ  Ｆタンパク質をコードする核酸を含む。
【００２５】
好ましい実施形態において、本発明の方法において使用されるアデノウイルスベクターは、組換えＡｄ２６ベクターである。
【００２６】
特定の実施形態において、第２組成物は、第１組成物の１〜１２週間後、好ましくは２〜１０週間後、より好ましくは４〜８週間後に投与される。
【００２７】
好ましい実施形態において、第２組成物は、第１組成物の４週間後（すなわち１ヶ月後）又は８週間後（すなわち２ヶ月後）に投与される。
【００２８】
特定の実施形態において、第３組成物は、第２組成物の１〜１２週間後、好ましくは２〜１０週間後、より好ましくは４〜８週間後に投与される。
【００２９】
好ましい実施形態において、第３組成物は、存在する場合、第１組成物の４週間後（すなわち１ヶ月後）又は８週間後（すなわち２ヶ月後）に投与される。
【００３０】
本発明の好ましい実施形態において、方法は、抗原性ＲＳＶタンパク質を発現する免疫学的有効量のＡｄ２６ベクターを用いた第１（例えば、プライム）ワクチン接種、続いて前記抗原性ＲＳＶタンパク質を発現する免疫学的有効量のＡｄ２６ベクターを用いた第２（例えば、ブースト）ワクチン接種を含む。
【００３１】
本発明の別の実施形態において、方法は、抗原性ＲＳＶタンパク質を発現する免疫学的有効量のＡｄ２６ベクターを用いた第１（例えば、プライム）ワクチン接種、続いて抗原性ＲＳＶタンパク質を発現する免疫学的有効量のＡｄ２６ベクターを用いた第２（例えば、ブースト）ワクチン接種、続いて抗原性ＲＳＶタンパク質を発現する免疫学的有効量のＡｄ２６ベクターを用いた第３（例えば、ブースト）ワクチン接種を含む。
【００３２】
好ましい実施形態において、前記ＲＶＳ抗原性タンパク質は、融合前コンフォメーションのＲＳＶ  Ｆタンパク質、好ましくは配列番号１又は２、好ましくは配列番号１のアミノ酸配列を含むＲＳＶ  Ｆタンパク質である。
【００３３】
特定の好ましい実施形態において、対象は、小児、例えば０ヶ月〜約２４ヶ月の月齢の乳児又は嬰児である。特定の実施形態において、対象は、０〜約１２ヶ月の月齢の小児であり、好ましくは、対象は、約２〜６ヶ月の小児である。
【００３４】
好ましい実施形態において、第１組成物は、出生時の乳児に投与される。
【００３５】
別の好ましい実施形態において、第１組成物は、約０〜８週の乳児、特に約１、２、３、４、５、６、７又は８週の乳児に投与される。
【００３６】
好ましい実施形態において、第１組成物は、約２ヶ月の月齢の乳児に投与される。
【００３７】
好ましい実施形態において、第１組成物は、約２ヶ月の月齢の乳児に投与され、及び第２組成物は、約３又は４ヶ月の月齢の前記乳児に投与される。
【００３８】
別の好ましい実施形態において、第１組成物は、約２ヶ月の月齢の乳児に投与され、及び第２組成物は、約３又は４ヶ月の月齢の前記乳児に投与され、及び第３組成物は、約４又は６ヶ月の月齢の前記乳児に投与される。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
本明細書で使用する場合、「対象」は、本発明の実施形態による方法によって試験されることになるか又は試験されたあらゆる動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを意味する。用語「哺乳動物」は、本明細書で使用する場合、あらゆる哺乳動物を包含する。哺乳動物の例としては、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタ、ネコ、イヌ、マウス、ネズミ、ウサギ、モルモット、サル、ヒト等、より好ましくはヒトが挙げられるが、これに限定されない。
【００４０】
本明細書で使用する場合、用語「防御免疫」又は「防御免疫応答」は、ワクチン接種された対象が、このワクチン接種を行った対象の病原性因子による感染を防除できることを意味する。通常、「防御免疫応答」が発現された対象は、軽度〜中程度の臨床症状を発現するにすぎないか又は症状を全く発現しない。通常、特定の因子に対する「防御免疫応答」又は「防御免疫」を有する対象は、前記因子による感染の結果として死亡しない。
【００４１】
「アジュバント」及び「免疫刺激剤」という用語は、本明細書では同義的に使用され、免疫系の刺激を引き起こす１種以上の物質と定義される。これに関連して、アジュバントは、本発明のアデノウイルスベクターの免疫応答を増強させるために使用される。
【００４２】
組換えアデノベクター、特にＡｄ２６プライム、続いてＡｄ２６ブーストを用いる同種のプライム−ブーストの組み合わせは、幼児のＲＳＶウイルスに対する防御免疫応答の生成に驚くほど効果的であることが本発明において見出された。加えて、ワクチンは、呼吸器疾患の憎悪をもたらさず、そのため安全である。
【００４３】
本発明によるアデノウイルスは、アデノウイルス（Ａｄｅｎｏｖｉｒｉｄａｅ）科に属し、好ましくはマストアデノウイルス（Ｍａｓｔａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ）属に属するものである。それは、ヒトアデノウイルスであり得るが、他の種に感染するアデノウイルス、例えば、以下に限定されないが、ウシアデノウイルス（例えば、ウシアデノウイルス３、ＢＡｄＶ３）、イヌアデノウイルス（例えば、ＣＡｄＶ２）、ブタアデノウイルス（例えば、ＰＡｄＶ３若しくは５）又はシミアンアデノウイルス（チンパンジーアデノウイルス若しくはゴリラアデノウイルスなどのサルアデノウイルス及び類人猿アデノウイルスを含む）でもあり得る。好ましくは、アデノウイルスは、ヒトアデノウイルス（ＨＡｄＶ又はＡｄＨｕ；本発明では種の指示なしにＡｄに言及される場合にヒトアデノウイルスを意味し、例えば、簡略表記の「Ａｄ５」は、ヒトアデノウイルス血清型５であるＨＡｄＶ５と同じものを意味する）又はチンパンジー若しくはゴリラアデノウイルスなどのシミアンアデノウイルス（ＣｈＡｄ、ＡｄＣｈ又はＳＡｄＶ）である。
【００４４】
最も進んだ研究は、ヒトアデノウイルスを用いて実施されており、本発明の特定の態様に従ってヒトアデノウイルスが好ましい。特定の好ましい実施形態において、本発明による組換えアデノウイルスは、ヒトアデノウイルスに基づく。好ましい実施形態において、組換えアデノウイルスは、ヒトアデノウイルス血清型５、１１、２６、３４、３５、４８、４９又は５０に基づく。本発明の特に好ましい実施形態によると、アデノウイルスは、血清型２６又は３５の１つのヒトアデノウイルスであり、より好ましくは、アデノウイルスは、血清型２６の１つのヒトアデノウイルスである。
【００４５】
これらの血清型の利点は、ヒト集団における低い血清陽性率及び／又は低い既存の中和抗体力価である。組換えＡｄ２６ベクターの調製は、例えば、国際公開第２００７／１０４７９２号パンフレット及びＡｂｂｉｎｋ  ｅｔ  ａｌ．，（２００７）Ｖｉｒｏｌ  ８１（９）：４６５４−６３（それらの両方は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。Ａｄ２６の例示的なゲノム配列は、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＥＦ１５３４７４及び国際公開第２００７／１０４７９２号パンフレットの配列番号ｌに見出される。組換えＡｄ３５ベクターの調製は、例えば、米国特許第７，２７０，８１１号明細書、国際公開第００／７００７１号パンフレット及びＶｏｇｅｌｓ  ｅｔ  ａｌ．，（２００３）Ｊ  Ｖｉｒｏｌ  ７７（１５）：８２６３−７１（それらの全ては、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。Ａｄ３５の例示的なゲノム配列は、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＡＣ＿  ００００１９及び国際公開第００／７００７１号パンフレットの図６に見出される。
【００４６】
シミアンアデノウイルスは、一般に、ヒト集団における低い血清陽性率及び／又は低い既存の中和抗体力価も有し、チンパンジーアデノウイルスベクターを使用した相当量の研究が報告されている（例えば、米国特許第６０８３７１６号明細書；国際公開第２００５／０７１０９３号パンフレット；同第２０１０／０８６１８９号パンフレット；同第２００１／０８５９８４号パンフレット；Ｆａｒｉｎａ  ｅｔ  ａｌ，２００１，Ｊ  Ｖｉｒｏｌ  ７５：１１６０３−１３；Ｃｏｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ，２００２，Ｊ  Ｇｅｎ  Ｖｉｒｏｌ  ８３：１５１−５５；Ｋｏｂｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ，２００６，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ３４６：３９４−４０  Ｉ；Ｔａｔｓ  ｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ  １５：６０８−１７；Ｂａｎｇａｒｉ及びＭｉｔｔａｌによるレビュー，２００６，Ｖａｃｃｉｎｅ  ２４：８４９−６２；並びにＬａｓａｒｏ及びＥｒｔｌによるレビュー，２００９，Ｍｏｌ  Ｔｈｅｒ  １７：１３３３−３９も参照されたい）。したがって、他の好ましい実施形態において、本発明による組換えアデノウイルスは、シミアンアデノウイルス、例えばチンパンジーアデノウイルスに基づく。特定の実施形態において、組換えアデノウイルスは、シミアンアデノウイルス１、７、８、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７．１、２８．１、２９、３０、３１．１、３２、３３、３４、３５．１、３６、３７．２、３９、４０．１、４１．１、４２．１、４３、４４、４５、４６、４８、４９、５０又はＳＡ７Ｐ型に基づく。
【００４７】
本発明による特定の実施形態において、アデノウイルスベクターは、２つの希少な血清型：Ａｄ２６及びＡｄ３５からのカプシドタンパク質を含む。典型的な実施形態において、ベクターは、組換えＡｄ２６又はＡｄ３５ウイルスである。「アデノウイルスカプシドタンパク質」は、特定のアデノウイルスの血清型及び／又は向性の決定に関与する、アデノウイルス（例えば、Ａｄ２６又はＡｄ３５）のカプシドのタンパク質を指す。アデノウイルスカプシドタンパク質は、典型的には、ファイバー、ペントン及び／又はヘキソンタンパク質を含む。本明細書で使用する場合、「Ａｄ２６カプシドタンパク質」又は「Ａｄ３５カプシドタンパク質」は、例えば、Ａｄ２６又はＡｄ３５カプシドタンパク質の少なくとも一部を含むキメラカプシドタンパク質であり得る。特定の実施形態において、カプシドタンパク質は、Ａｄ２６又はＡｄ３５のカプシドタンパク質全体である。特定の実施形態において、ヘキソン、ペントン及びファイバーは、Ａｄ２６のもの又はＡｄ３５のものである。したがって、本発明において使用され得るベクターは、Ａｄ２６又はＡｄ３５カプシドタンパク質（例えば、ファイバー、ペントン又はヘキソンタンパク質）を含む。当業者であれば、Ａｄ２６又はＡｄ３５のカプシドタンパク質全体が本発明のベクターで使用されることが必須でないことを理解するであろう。したがって、Ａｄ２６又はＡｄ３５カプシドタンパク質の少なくとも一部を含むキメラカプシドタンパク質が本発明のベクターで使用され得る。少なくとも１つのカプシドタンパク質がＡｄ２６又はＡｄ３５から誘導される限り、本発明のベクターは、ファイバー、ペントン及びヘキソンタンパク質がそれぞれ異なる血清型から誘導されるカプシドタンパク質も含み得る。特定の実施形態において、ファイバー、ペントン及びヘキソンタンパク質は、それぞれＡｄ２６又はそれぞれＡｄ３５から誘導される。当業者であれば、複数の血清型から誘導される要素を単一組換えアデノウイルスベクターで組み合わせ得ることを理解するであろう。したがって、異なる血清型から望ましい特性を組み合わせるキメラアデノウイルスを生成することができる。したがって、いくつかの実施形態において、本発明のキメラアデノウイルスは、温度安定性、アセンブリ、アンカリング、生産収率、リダイレクトされたか又は改良された感染、標的細胞でのＤＮＡの安定性などの特徴を有するＡｄ２６及びＡｄ３５の血清型の既存の免疫の不存在を組み合わせることができた。
【００４８】
特定の実施形態において、本発明で有用な組換えアデノウイルスベクターは、主に又は完全にＡｄ２６から又はＡｄ３５から誘導される（すなわち、ベクターは、Ａｄ２６又はＡｄ３５である）。いくつかの実施形態において、アデノウイルスは、複製欠損であり、例えば、これは、このアデノウイルスがゲノムＥ１領域に欠失を含むためである。本発明のアデノウイルスに関して、Ａｄ２６又はＡｄ３５から誘導されるもののために、Ａｄ５など、ヒトサブグループＣのアデノウイルスのＥ４−ｏｒｆ６を有するアデノウイルスのＥ４−ｏｒｆ６コード配列を交換することが典型的である。これは、Ａｄ５のＥ１遺伝子を発現するよく知られた補完細胞株、例えば２９３細胞、ＰＥＲ．Ｃ６細胞などにおけるそのようなアデノウイルスの増殖を可能にする（例えば、Ｈａｖｅｎｇａ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，Ｊ  Ｇｅｎ  Ｖｉｒｏｌ  ８７：２１３５−４３；国際公開０３／１０４４６７号パンフレットを参照されたい）。特定の実施形態において、アデノウイルスは、抗原をコードする核酸がクローニングされている、Ｅ１領域中に欠失を有し、且つＡｄ５のＥ４  ｏｒｆ６領域を有する血清型３５のヒトアデノウイルスである。特定の実施形態において、アデノウイルスは、抗原をコードする核酸がクローニングされている、Ｅ１領域中に欠失を有し、且つＡｄ５のＥ４  ｏｒｆ６領域を有する血清型２６のヒトアデノウイルスである。Ａｄ３５アデノウイルスに関して、例えば、ｐＩＸ開始コドンの直接上流の２４３ｂｐ断片（Ｂｓｕ３６Ｉ制限部位によって５’末端で標識される）など、ｐＩＸオープンリーディングフレームの直接上流の１６６ｂｐ又はこれを含む断片など、アデノウイルスのＥ１Ｂ  ５５Ｋオープンリーディングフレームの３’末端を保持することが典型的であるが、これは、ｐＩＸ遺伝子のプロモータがこの領域に部分的に存在することから、アデノウイルスの安定性を高めるためである（例えば、Ｈａｖｅｎｇａ  ｅｔ  ａｌ，２００６，ｓｕｐｒａ；国際公開第２００４／００１０３２号パンフレットを参照されたい）。
【００４９】
典型的には、本発明で有用なベクターは、組換えアデノウイルスゲノム全体を含む核酸（例えば、プラスミド、コスミド又はバキュロウイルスベクター）を用いて生成される。したがって、本発明は、本発明のアデノウイルスベクターをコードする単離された核酸分子も提供する。本発明の核酸分子は、ＲＮＡの形態又はクローニングによって得られるか若しくは合成により産生されるＤＮＡの形態であり得る。ＤＮＡは、二本鎖又は一本鎖であり得る。
【００５０】
本発明に有用なアデノウイルスベクターは、典型的には、複製欠損である。これらの実施形態において、ウイルスは、ウイルスの複製に極めて重要な領域、例えばＥ１領域の欠失又は不活性化によって複製欠損にする。領域は、例えば、目的の遺伝子（通常、プロモータに連結されている）を挿入することによって実質的に欠失又は不活性化され得る。いくつかの実施形態において、本発明のベクターは、Ｅ２、Ｅ３若しくはＥ４領域などの他の領域内における欠失又はプロモータに連結されている異種遺伝子の挿入を含有し得る。Ｅ２−及び／又はＥ４−変異型アデノウイルスに関して、一般的には、Ｅ２−及び／又はＥ４−相補性細胞株が組換えアデノウイルスを生成するために使用される。アデノウイルスのＥ３領域内の変異では、Ｅ３が複製に必要とされないため、細胞株によって補完される必要はない。
【００５１】
本発明のアデノウイルスベクターを十分な量で生成するため、パッケージング細胞株が典型的には使用される。パッケージング細胞は、複製欠損ベクター内に欠失又は不活性化されているこれらの遺伝子を含む細胞であり、したがって細胞内でのウイルスの複製を可能にする。好適な細胞株としては、例えば、ＰＥＲ．Ｃ６、９１１、２９３及びＥ１  Ａ５４９が挙げられる。
【００５２】
上記に示したとおり、好ましい実施形態において、本発明によるアデノベクターは、抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む。第１組成物におけるアデノウイルス、及び第２組成物におけるアデノウイルス、及び第３組成物におけるアデノウイルスは、同一であるか又は異なり得る。好ましい実施形態において、第１及び第２組成物におけるアデノウイルス並びに任意選択的な第３組成物におけるアデノウイルスは、同一である。
【００５３】
特定の実施形態において、抗原性ＲＳＶタンパク質は、ＲＳＶ融合（Ｆ）タンパク質である。ＲＳＶ  Ｆタンパク質は、広く中和抗体を誘発することができる魅力的なワクチン候補となっているＲＳＶ株間で保存されている。ＲＳＶ  Ｆタンパク質は、ウイルス膜と宿主細胞膜とを融合させることによって感染を促進する。融合プロセスにおいて、Ｆタンパク質は、不安定な融合前コンフォメーションから安定な融合後コンフォメーションに不可逆的にリフォールディングする。ＲＳＶ  Ｆタンパク質の不安定性のために、ＲＳＶ  Ｆタンパク質は、未成熟のままより安定な融合後コンフォメーションにリフォールドする傾向を有する。この現象は、溶液中及びビリオン表面上のいずれの場合にも現れるタンパク質に固有の特徴である。しかしながら、ヒト血清では、大部分のＲＳＶ中和抗体は、融合前コンフォメーションのＲＳＶ  Ｆに向かう。したがって、本発明の好ましい実施形態において、抗原性ＲＳＶタンパク質は、融合前コンフォメーションのＲＳＶ  Ｆタンパク質である。
【００５４】
本発明の好ましい実施形態において、第１、第２及び任意選択的な第３組成物におけるアデノウイルスベクターは、ＲＳＶ融合（Ｆ）タンパク質、好ましくは融合前コンフォメーションのＲＳＶ  Ｆタンパク質、好ましくは配列番号１又は２、好ましくは配列番号１のアミノ酸配列を有するＲＳＶ  Ｆタンパク質をコードする核酸を含む。
【００５５】
必要に応じて、ＲＳＶタンパク質をコードする異種遺伝子は、処置された宿主（例えば、ヒト）における適切な発現を確実にするためにコドン最適化することができる。コドン最適化は、当該技術分野において広く適用されている技術である。典型的には、異種遺伝子をアデノウイルスゲノムのＥ１及び／又はＥ３領域にクローニングする。
【００５６】
特定の実施形態において、ＲＳＶ融合前Ｆタンパク質をコードする核酸分子は、配列番号３又は４の核酸配列を含む。
【００５７】
異種ＲＳＶ遺伝子は、アデノウイルス由来のプロモータ（例えば、Ｍａｊｏｒ  Ｌａｔｅ  Ｐｒｏｍｏｔｅｒ）の制御下に置かれ得る（すなわち作動可能に連結され得る）か、又は異種プロモータの制御下に置かれ得る。好適な異種プロモータの例としては、ＣＭＶプロモータ及びＲＳＶプロモータが挙げられる。好ましくは、プロモータは、発現カセット内部の目的の異種遺伝子の上流に位置する。
【００５８】
本発明の組成物は、当該技術分野において周知の方法に従ってワクチン（「免疫原性組成物」とも称される）として処方することができる。このような組成物は、免疫応答を増強させるためのアジュバントを含み得る。製剤における各々の構成成分の最適な比は、本開示を考慮して、当業者に周知の技術によって決定することができる。免疫原性組成物の調製及び使用は、当業者に周知である。本発明による共投与に好適なアジュバントは、潜在的に安全であり、耐容性が良好であり、大衆に有効であるものでなければならず、ＱＳ−２１、ＭＰＬ−ＳＥ、ＣｐＧ  ＯＤＮ、Ａｌｕｍ及びＭＦ５９が挙げられる。投与され得る他のアジュバントとしては、レクチン、成長因子、サイトカイン及びリンホカイン、例えばα−インターフェロン、γインターフェロン、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（ｇＣＳＦ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ｇＭＣＳＦ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０及びＩＬ−１２又はこれらのコード核酸が挙げられる。また、例えば、Ｃ４結合タンパク質（Ｃ４ｂｐ）のオリゴマー化ドメインと目的抗原との融合物をコードする異種核酸を使用すること（例えば、Ｓｏｌａｂｏｍｉ  ｅｔ  ａｌ，２００８，Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ  ７６：３８１７−２３）により、ベクターコード化アジュバントを使用することも可能である。特定の実施形態において、本発明の組成物は、例えば、水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウム、リン酸カリウムアルミニウム又はそれらの組み合わせの形態のアルミニウムをアジュバントとして１用量当たり０．０５〜５ｍｇ、例えば０．０７５〜１．０ｍｇのアルミニウム含有量の濃度で含む。
【００５９】
本発明の組成物は、薬学的に許容される賦形剤、担体、緩衝剤、安定剤又は当業者に周知の他の物質を含み得る。このような物質は、無毒性でなければならず、活性成分の効力を阻害してはならない。担体又は他の材料の厳密な性質は、投与経路、例えば筋肉内、皮下、経口、静脈内、皮膚、粘膜内（例えば、腸）、鼻腔内又は腹腔内経路に依存し得る。
【００６０】
本発明は、プライム及びブースト投与するために、１つ以上のアデノウイルスベクターを使用して、対象においてＲＳＶウイルスに対する免疫応答をプライム及びブーストする方法を提供する。
【００６１】
本発明の１つの一般的な態様によれば、対象においてＲＳＶウイルスに対する免疫応答を誘導する方法は、
（ｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第１組成物を対象に投与することと、
（ｉｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第２組成物を対象に投与することと、任意選択的に、
（ｉｉｉ）抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含む免疫学的有効量のアデノウイルスベクターを含む第３組成物を対象に投与することと
を含む。
【００６２】
好ましい実施形態において、後のステップは、前のステップの１〜１２週間後、好ましくは２〜１０週間後、より好ましくは４〜８週間後に実施される。より好ましい実施形態において、後のステップは、前のステップの４又は８週間後に実施される。
【００６３】
好ましい実施形態において、ステップ（ｉｉ）は、ステップ（ｉ）の４週間後（すなわち１ヶ月後）又は８週間後（すなわち２ヶ月後）に実施される。
【００６４】
好ましい実施形態において、ステップ（ｉｉｉ）は、ステップ（ｉｉ）の４週間後（すなわち１ヶ月後）又は８週間後（すなわち２ヶ月後）に実施される。
【００６５】
本明細書で使用される対象は、好ましくは、哺乳動物、例えばげっ歯類、例えばマウス、コットンラットなど、又は非ヒト霊長類、又はヒトである。好ましくは、対象は、ヒト対象である。
【００６６】
特定の好ましい実施形態において、対象は、小児、例えば０ヶ月〜約２４ヶ月の月齢の乳児又は嬰児である。特定の実施形態において、対象は、０〜約１２ヶ月の月齢の小児であり、好ましくは、対象は、０〜６ヶ月の月齢、好ましくは約２〜６ヶ月の小児である。
【００６７】
好ましい実施形態において、第１組成物は、出生時の乳児に投与される。
【００６８】
別の好ましい実施形態において、第１組成物は、約０〜８週の乳児、特に約１、２、３、４、５、６、７又は８週の乳児に投与される。
【００６９】
好ましい実施形態において、第１組成物は、約２ヶ月の月齢の乳児に投与される。
【００７０】
好ましい実施形態において、第１組成物は、約２ヶ月の月齢の乳児に投与され、及び第２組成物は、約３又は４ヶ月の月齢の前記乳児に投与される。
【００７１】
別の好ましい実施形態において、第１組成物は、約２ヶ月の月齢の乳児に投与され、及び第２組成物は、約３又は４ヶ月の月齢の前記乳児に投与され、及び第３組成物は、約４又は６ヶ月の月齢の前記乳児に投与される。
【００７２】
対象は、血清陰性又は血清陽性であり得る。血清陽性の対象は、典型的には、ＲＳＶへの事前暴露を示す、血清抗体又は血清中の他の免疫マーカーの有意なレベルを示す。特定の実施形態において、対象は、血清陰性の対象であり、すなわちＲＳＶへの事前暴露を示す、血清抗体又は血清中の他の免疫学的マーカーの有意なレベルを示さない。
【００７３】
本方法による好ましい実施形態において、Ａｄ２６ベクターは、プライムに使用され、その後、Ａｄ２６ベクターを用いた１つ以上のブーストステップが続く。好ましくは、ブースト組成物は、プライム後１〜１２週間、より好ましくはプライム後４又は８週間で投与される。好ましい実施形態において、ブースト組成物は、プライム後８週間で投与される。別の好ましい実施形態において、ブースト組成物は、プライム後４週間で投与される。
【００７４】
ヒトへの投与のために、本発明は、薬学的に許容される担体又は賦形剤とともにアデノウイルスベクターを含む組成物を使用し得る。これに関連して、「薬学的に許容される」という用語は、担体又は賦形剤が、使用する用量及び濃度において、それらが投与される対象に望ましくない又は有害な影響を引き起こさないことを意味する。このような薬学的に許容される担体及び賦形剤は、当該技術分野でよく知られている（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ［１９９０］；Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｓ．Ｆｒｏｋｊａｅｒ  ａｎｄ  Ｌ．Ｈｏｖｇａａｒｄ，Ｅｄｓ．，Ｔａｙｌｏｒ＆Ｆｒａｎｃｉｓ［２０００］；及びＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｋｉｂｂｅ，Ｅｄ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ［２０００］を参照されたい）。精製されたアデノベクターは、好ましくは、滅菌溶液として処方されて投与されるが、凍結乾燥製剤を利用することも可能である。滅菌溶液は、滅菌ろ過又は当該技術分野でそれ自体知られている他の方法によって調製される。その後、溶液は、凍結乾燥されるか又は医薬投与容器に充填される。溶液のｐＨは、一般にｐＨ３．０〜９．５、例えばｐＨ５．０〜７．５の範囲内である。アデノベクターは、典型的には、薬学的に許容される好適な緩衝液を有する溶液中にあり、溶液は、塩も含み得る。任意選択的に、アルブミンなどの安定剤が存在し得る。特定の実施形態において、洗浄剤が添加される。特定の実施形態において、組成物は、注射可能な調整物中に配合され得る。例えば、アデノウイルスは、Ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ  Ｗｏｒｌｄ  Ｓｔａｎｄａｒｄ（Ｈｏｇａｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａ  ｓｔａｂｌｅ  ａｄｅｎｏｖｉｒａｌ  ｖｅｃｔｏｒ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ，Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  Ｍａｒｃｈ  ２００２，ｐ．４３−４８）にも使用される緩衝液：２０ｍＭトリスｐＨ８．２５ｍＭ  ＮａＣｌ、２．５％グリセロール中に保存され得る。ヒトへの投与に好適である有用な別の製剤緩衝液は、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、２ｍＭ  ＭｇＣｌ２、２５ｍＭ  ＮａＣｌ、ショ糖１０％ｗ／ｖ、ポリソルベート−８０  ０．０２％ｗ／ｖである。他の多くの緩衝液を使用できることが明らかであり、保存及び精製（アデノ）ウイルス調製物の医薬品としての投与に好適な製剤のいくつかの例は、例えば、欧州特許第０８５３６６０号明細書、米国特許第６，２２５，２８９号明細書及び国際特許出願の国際公開第９９／４１４１６号パンフレット、同第９９／１２５６８号パンフレット、同第００／２９０２４号パンフレット、同第０１／６６１３７号パンフレット、同第０３／０４９７６３号パンフレット、同第０３／０７８５９２号パンフレット、同第０３／０６１７０８号パンフレットに見出すことができる。
【００７５】
別の好ましい実施形態において、国際公開第２０１５／０４０００２号パンフレットに記載されているようなアデノウイルス製剤が使用される。したがって、本発明の好ましい実施形態において、抗原性ＲＳＶタンパク質をコードする核酸を含むアデノウイルスベクターを含む第１、第２及び任意選択的な第３組成物は、組換えアデノウイルス；クエン酸塩濃度が約５ｍＭ〜３０ｍＭの範囲のクエン酸塩緩衝剤；ヒドロキシプロピル−ベータ−シクロデキストリン（ＨＢＣＤ）濃度が約１％（ｗ／ｗ）〜１０％（ｗ／ｗ）の範囲のＨＢＣＤ；塩、例えば約２０ｍＭ〜約２００ｍＭの濃度の塩化ナトリウム；及び非イオン性界面活性剤、例えば約０．００５％（ｗ／ｗ）〜約０．５％（ｗ／ｗ）の範囲の濃度のポリソルベート−８０を含み、ここで、前記製剤は、ｐＨ５．５〜６．５の範囲を有する。
【００７６】
特定の実施形態において、組成物は、約５．７〜６．３の範囲のｐＨを有し、約５〜３０ｍＭの範囲の濃度のクエン酸塩；１％（ｗ／ｗ）〜１０％（ｗ／ｗ）の範囲の濃度のＨＢＣＤ；２０ｍＭ〜２００ｍＭの範囲の濃度のＮａＣｌ；約０．０１％（ｗ／ｗ）〜０．０５％（ｗ／ｗ）の範囲の濃度のポリソルベート−８０を含む。
【００７７】
特定の実施形態において、組成物は、約１５ｍＭの範囲の濃度のクエン酸塩；約５％（ｗ／ｗ）の濃度のＨＢＣＤ；約７５ｍＭの濃度のＮａＣｌ及び約０．０３％（ｗ／ｗ）の濃度のポリソルベート−８０を含む。
【００７８】
特定の実施形態において、組成物は、約０．１％（ｗ／ｗ）〜１％（ｗ／ｗ）の範囲の濃度のエタノールを更に含む。
【００７９】
好ましい実施形態において、組成物は、約１５ｍＭの濃度のクエン酸塩；約５％（ｗ／ｗ）の濃度のＨＢＣＤ；約７５ｍＭの濃度のＮａＣｌ、約０．０３％（ｗ／ｗ）の濃度のポリソルベート−８０及び約０．４％（ｗ／ｗ）の濃度のエタノールを含む。
【００８０】
ベクターを含む免疫原性組成物の投与は、典型的には筋肉内又は皮下である。しかしながら、静脈内、皮膚、皮内又は経鼻などの他の投与様式も同様に想定され得る。免疫原性組成物の筋肉内投与は、アデノウイルスベクターの懸濁剤を注射するためのニードルを使用することにより行われ得る。代替手段は、組成物を投与するための無針注射デバイス（例えば、Ｂｉｏｊｅｃｔｏｒ（商標）の使用）又はワクチンを含有している凍結乾燥粉末剤の使用である。
【００８１】
アデノウイルスベクターを含有する免疫原性組成物を対象に投与すると、抗ＲＳＶウイルス免疫応答が対象において生じる。検出可能な免疫応答を誘導するのに十分な組成物の量を「免疫原的有効用量」と定義する。以下に示すように、本発明の免疫原性組成物は、体液性及び細胞媒介性免疫応答を誘導する。典型的な実施形態において、免疫応答は、防御免疫応答である。
【００８２】
アデノウイルスベクターの生成及びこのような粒子の免疫原性組成物への任意選択的な製剤化後、ベクターは、個体、特にヒト又は他の霊長類に投与され得る。投与は、ヒト又は別の哺乳動物、例えばマウス、ラット、ハムスター、モルモット、ウサギ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ウマ、ウシ、ロバ、サル、イヌ又はネコに対するものであり得る。非ヒト哺乳動物への送達は、治療目的である必要はないが、実験の状況、例えばアデノウイルスベクターに対する免疫応答の機構の究明に使用するためであり得る。
【００８３】
１つの例示的なレジメンにおいて、アデノウイルスベクターは、約１０４〜１０１２ウイルス粒子／ｍｌの濃度を含有する約１００μｌ〜約１０ｍｌの範囲の容量で投与される（例えば、筋肉内）。好ましくは、アデノウイルスベクターは、０．２５〜１．０ｍｌの範囲の容量で投与される。より好ましくは、アデノウイルスベクターは、０．５ｍｌの容量で投与される。
【００８４】
典型的には、アデノウイルスは、ヒト対象に１回の投与で約１０９〜約１０１２ウイルス粒子（ｖｐ）の量、より典型的には約１０１０〜約１０１２ｖｐの量で投与される。ヒトアデノウイルスベクターは、約１０７ｖｐ／ｍｌ、１０８ｖｐ／ｍｌ、１０９ｖｐ／ｍｌ、１０１０ｖｐ／ｍｌ、５ｘｌ０１０ｖｐ／ｍｌ、１０１１ｖｐ／ｍｌ又は１０１２ｖｐ／ｍｌの濃度で投与され得る。好ましい実施形態において、アデノウイルスベクターは、約１ｘ１０１１ｖｐの量で投与される。別の好ましい実施形態において、アデノウイルスベクターは、約５ｘ１０１０ｖｐの量で投与される。
【００８５】
組成物は、必要に応じて、活性成分を含有する１つ以上の単位投薬形態を含むものであり得るキット、パック又はディスペンサーで提示され得る。キットは、例えば、金属又はプラスチックのホイル、例えばブリスターパックを含み得る。キット、パック又はディスペンサーに投与のための使用説明書を付随させ得る。
【実施例】
【００８６】
次の実施例は、説明するために提供されるが、特許請求される本発明を限定するものではない。
【００８７】
実施例１
１８〜５０歳の成人、ＲＳＶ−血清陽性及びＲＳＶ−血清陰性の１２〜２４ヶ月の月齢の幼児におけるＡｄ２６．ＲＳＶ．ｐｒｅＦの安全性、耐容性及び免疫原性を評価するために、臨床研究をヒトにおいて実施する。
【００８８】
この研究で評価されたアデノウイルスワクチン候補は、Ａｄ２６．ＲＳＶ．ｐｒｅＦ、配列番号：１のアミノ酸配列を有する呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）Ａ２から誘導される融合前コンフォメーション安定化Ｆタンパク質（ｐｒｅ−Ｆ）についてコードするデオキシリボ核酸導入遺伝子を含有する複製不能アデノウイルス血清型２６（Ａｄ２６）である。
【００８９】
安全性は、要求に基づく局所及び全身の有害事象、要求に基づかない有害事象及び重篤な有害事象の収集並びに身体検査により評価される。加えて、標準的な化学的パラメータ、血液学的パラメータ（凝固パラメータを含む）及び尿分析パラメータは、複数の時点で評価され得る。免疫原性は、免疫原性アッセイを使用して評価し、表１及び表２にまとめた。
【００９０】
【表１】
2020519663.tif 000002
【００９１】
【表２】
2020519663.tif 000003
【００９２】
配列
本発明の核酸分子によってコードされるＲＳＶ融合前Ｆタンパク質のアミノ酸配列
配列番号１：ＲＳＶ  ｐｒｅＦ２．２アミノ酸配列：
【化１】
2020519663.tif 000004
配列番号２：ＲＳＶ  ｐｒｅＦ２．１アミノ酸配列：
【化２】
2020519663.tif 000005
【００９３】
本発明の好ましい核酸分子のヌクレオチド配列
配列番号３：ＲＳＶ  Ｆ  ｐｒｅ−Ｆ２．２融合前タンパク質をコードするコドン最適化核酸
【化３】
2020519663.tif 000006
配列番号４：ＲＳＶ  Ｆ  ｐｒｅ−Ｆ２．１融合前タンパク質をコードするコドン最適化核酸
【化４】
2020519663.tif 000007
【配列表】
2020519663000001.xml
【国際調査報告】
2020519663.tif 000012
2020519663.tif 000013
2020519663.tif 000014
2020519663.tif 000015