【手続補正書】
【提出日】平成29年4月4日(2017.4.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液試料の平均細胞体積を測定する方法であって、
血液のアリコートを付着させて顕微鏡スライド上に単層を形成することによって試料を調製することと、
複数の照射波長の入射光で前記試料を照射し、前記試料の１つ以上の二次元画像を得ることとを備え、前記１つ以上の二次元画像は、前記複数の入射波長の各々において少なくとも１つの画像を備え、さらに
前記１つ以上の画像の中に候補赤血球の組を同定することと、
前記候補赤血球の組から代表赤血球の組を同定することと、
前記代表赤血球の組の中の各血球毎に体積を測定することと、
前記代表赤血球の組の中の前記血球の各々の前記体積に基づいて前記試料の平均細胞体積を測定することとを備える、方法。
【請求項２】
前記試料の前記１つ以上の二次元画像は１つよりも多くの二次元画像を備え、前記１つよりも多くの二次元画像の各々は前記試料中の異なる場所に対応する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記試料の前記１つ以上の二次元画像の各々１つは、前記試料から反射されるまたは前記試料を透過する入射光に対応する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記試料の前記１つ以上の二次元画像の少なくともいくつかは、前記試料から現われかつ電磁スペクトルの青色領域に中心波長を有する光に対応する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記代表赤血球の組の各構成要素毎に、
前記構成要素に対応する画素の組を同定することと、
前記構成要素の周領域に対応する前記画素の組のサブセットを同定することと、
前記画素の組から画素の前記サブセットを除去することとをさらに備える、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
画素の前記サブセットは３画素以上の幅を有する周領域に対応する、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記代表赤血球の組を同定することは、
前記候補赤血球の組の各構成要素毎に、前記構成要素に対応する画素の組を同定することと、
前記画素の組に基づいて前記構成要素の面積および周を測定することと、
前記面積に対する前記周の２乗の比率がしきい値よりも大きい場合は前記代表赤血球の組から前記構成要素を排除することとを備える、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記候補赤血球の組の各構成要素毎に、
前記構成要素の凸包を測定することと、
前記凸包で囲まれる面積を測定することと、
前記構成要素の前記面積に対する前記凸包によって囲まれる前記面積の比率がしきい値を超える場合は、前記代表赤血球の組から前記構成要素を排除することとをさらに備える、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記候補赤血球の組の各構成要素毎に、前記構成要素の前記面積が選択された面積範囲外にある場合は、前記候補赤血球の組から前記構成要素を排除することをさらに備える、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記代表赤血球の組の中の各血球毎に体積を測定することは、各血球毎に、
前記血球に対応する画素の組に関連付けられる光学濃度の和を算出することによって前記血球の合計光学濃度を測定することと、
前記画素の組の間の平均および最大光学濃度値を測定することと、
前記平均および最大光学濃度値に基づいて前記体積を算出することとを備える、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記平均および最大光学濃度値ならびにオフセット値に基づいて前記体積を算出することをさらに備える、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
体積が分かっている参照細胞の１つ以上の画像に基づいて前記オフセット値を定めることをさらに備える、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記二次元画像の少なくとも１つは、電磁スペクトルの赤色領域中に中心波長を有する入射光に対応し、前記二次元画像の少なくとも１つは、前記電磁スペクトルの青色領域中に中心波長を有する入射光に対応する、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記二次元画像の少なくとも１つは、前記電磁スペクトルの黄色領域中に中心波長を有する入射光に対応し、前記二次元画像の少なくとも１つは、前記電磁スペクトルの緑色領域中に中心波長を有する入射光に対応する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記１つ以上の二次元画像は、４つの異なる照射波長の各々において少なくとも１つの画像を備える、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記代表赤血球の組の中の各血球毎に、
各照射波長毎に、前記照射波長での前記試料の前記二次元画像の１つから前記血球に関連付けられる画素の組を同定することと、
各照射波長毎に、前記照射波長に対応する同定された前記画素の組について平均および最大光学濃度値を測定することと、
各照射波長毎に、前記平均および最大光学濃度値に基づいて前記血球の波長固有体積を算出することと、
前記照射波長に対応する前記波長固有血球体積から前記血球の前記体積を測定することとをさらに備える、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記代表赤血球の組の中の各血球毎に、
前記二次元画像の１つから前記血球の面積を測定することと、
各照射波長毎に、前記平均および最大光学濃度値ならびに前記血球の前記面積に基づいて前記血球の波長固有体積を算出することとをさらに備える、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記代表赤血球の組の中の各血球毎に、
各照射波長毎に、前記照射波長での前記試料の前記二次元画像の１つから前記血球に関連付けられる画素の組を同定することと、
各照射波長毎に、前記照射波長に対応する同定された前記画素の組に関連付けられる光学濃度の和を算出することによって前記血球についての合計光学濃度を測定することと、
各照射波長毎に、前記照射波長に対応する前記同定された画素の組についての平均および最大光学濃度値を測定することと、
各照射波長毎に、前記平均および最大光学濃度値に基づいて前記血球の波長固有体積を算出することと、
前記照射波長に対応する前記合計光学濃度および前記波長固有血球体積から前記血球の前記体積を測定することとをさらに備える、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記照射波長に対応する前記合計光学濃度と前記波長固有血球体積との重み付け線形結合として前記血球の前記体積を測定することをさらに備える、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
自動化血液分析装置の動作条件を判定する方法であって、
前記装置が請求項１に記載の前記方法を用いて対照組成物についての平均細胞体積を測定するように前記装置を動作させることと、
前記対照組成物についての前記平均細胞体積の参照値と前記平均細胞体積の測定値とを比較して前記装置の前記動作条件を判定することとを備える、方法。
【請求項２１】
前記対照組成物についての前記平均細胞体積の前記測定値と前記参照値との間の差を求めることと、
前記差がしきい値を超える場合は前記装置を再校正することとをさらに備える、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記装置を再校正することは、血液試料の参照の組から、代表赤血球の組の中の各血球毎に前記体積を測定するのに用いる複数の重み係数を定めることを備える、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
血液分析装置の動作条件を判定するための方法であって、
対照組成物中の複数の細胞の各々１つ毎に、前記血液分析装置の電子プロセッサを用いて、
前記細胞に入射する照射放射の波長に対応する少なくとも１つの光学濃度値を測定し、
前記細胞に関連付けられる平均および最大光学濃度値に基づいて前記細胞に入射する前記照射放射の前記波長に対応する少なくとも１つの細胞体積値を測定し、かつ
前記少なくとも１つの光学濃度値と前記少なくとも１つの細胞体積値とを組合わせてヘモグロビン含有量値を測定することと、
前記電子プロセッサを用いて、前記複数の細胞の各々１つの前記ヘモグロビン含有量値に基づいて前記対照組成物の平均細胞ヘモグロビン値を測定することと、
前記電子プロセッサを用いて、前記対照組成物の測定平均細胞ヘモグロビン値と参照平均細胞ヘモグロビン値との間の差を求めることによって、前記対照組成物の前記参照平均細胞ヘモグロビン値を前記対照組成物の前記測定平均細胞ヘモグロビン値と比較することと、
前記電子プロセッサを用いて前記差を差のしきい値と比較することと、
前記差が前記差のしきい値を超える場合に前記装置を再校正することとを備える、方法。
【請求項２４】
前記複数の細胞の各々１つ毎に、前記電子プロセッサを用いて、
前記細胞の面積を測定し、かつ
前記細胞の前記面積および前記細胞の平均光学濃度値に基づいて前記少なくとも１つの細胞体積値を測定することを備える、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記複数の細胞の各々１つ毎に、前記電子プロセッサを用いて、前記細胞の前記面積および前記細胞の前記平均光学濃度値に基づいて前記少なくとも１つの光学濃度値を測定することを備える、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記複数の細胞の各々１つ毎に、前記電子プロセッサを用いて、前記細胞の前記面積と、前記少なくとも１つの光学濃度値と、前記少なくとも１つの細胞体積値とを組合わせることによって前記ヘモグロビン含有量値を測定することを備える、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
前記組合わせることは、前記少なくとも１つの光学濃度値と前記少なくとも１つの細胞体積値との線形結合として前記ヘモグロビン含有量値を算出することを備える、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記複数の細胞の各々１つ毎に、
複数の画素を備える前記細胞の画像を得ることと、
前記電子プロセッサを用いて前記複数の画素から前記細胞の前記面積を測定することとを備える、請求項２４に記載の方法。
【請求項２９】
前記複数の細胞の各々１つ毎に、前記電子プロセッサを用いて、
前記複数の画素から前記細胞の周を測定し、かつ
前記周に基づいて、前記平均細胞ヘモグロビン値を測定するのに用いた前記複数の細胞から前記細胞を排除するか否かを判断することを備える、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記複数の細胞の各々１つ毎に、前記電子プロセッサを用いて、前記細胞の前記面積を面積値の範囲と比較することによって、前記平均細胞ヘモグロビン値を測定するのに用いた前記複数の細胞から前記細胞を排除するか否かを判断することを備える、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記複数の細胞の各々１つ毎に、前記電子プロセッサを用いて、１つの細胞体積値、１つの光学濃度値、および１つのヘモグロビン含有量値を測定することを備える、請求項２３に記載の方法。
【請求項３２】
前記１つの細胞体積値および前記１つの光学濃度値は照射放射の１つの波長に対応する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記複数の細胞の各々１つ毎に、前記電子プロセッサを用いて、複数の細胞体積値、複数の光学濃度値、および複数のヘモグロビン含有量値を測定することを備える、請求項２３に記載の方法。
【請求項３４】
前記複数の細胞体積値および前記複数の光学濃度値は照射放射の複数の波長に対応する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
平均細胞ヘモグロビン値を測定するためのシステムであって、
複数の細胞の各々１つに照射放射を向けるように構成される照射源と、
前記複数の細胞の各々１つからの放射を計測するように構成される検出器と、
表示装置と、
前記検出器に結合される電子プロセッサとを備え、前記電子プロセッサは、
計測された前記放射に対応する前記検出器から計測信号を受信し、
前記複数の細胞の各々１つ毎に、
前記照射放射の波長に対応する少なくとも１つの光学濃度値、
前記細胞に関連付けられる平均および最大光学濃度値に基づいて前記照射放射の前記波長に対応する少なくとも１つの細胞体積値、ならびに
前記少なくとも１つの光学濃度値と前記少なくとも１つの細胞体積値とを組合わせることによってヘモグロビン含有量値を測定し、
前記複数の細胞の各々１つの前記ヘモグロビン含有量値に基づいて前記平均細胞ヘモグロビン値を測定し、
前記表示装置上に前記複数の細胞の少なくともいくつかの画像を表示し、かつ
前記画像の各々１つ毎に、前記表示装置上の前記画像の上に重ねられた前記複数の細胞の対応の１つの前記平均細胞ヘモグロビン値を表示するように構成される、システム。
【請求項３６】
前記電子プロセッサは、前記複数の細胞の各々１つ毎に、
前記細胞の面積を測定し、かつ
前記細胞の前記面積および前記細胞の平均光学濃度値に基づいて前記少なくとも１つの細胞体積値を測定するように構成される、請求項３５に記載のシステム。
【請求項３７】
前記電子プロセッサは、前記複数の細胞の各々１つ毎に、
前記細胞の前記面積および前記細胞の前記平均光学濃度値に基づいて前記少なくとも１つの光学濃度値を測定するように構成される、請求項３６に記載のシステム。
【請求項３８】
前記電子プロセッサは、前記複数の細胞の各々１つ毎に、前記細胞の前記面積と、前記少なくとも１つの光学濃度値と、前記少なくとも１つの細胞体積値とを組合わせることによって前記ヘモグロビン含有量値を測定するように構成される、請求項３６に記載のシステム。
【請求項３９】
前記組合わせることは、前記少なくとも１つの光学濃度値と前記少なくとも１つの細胞体積値との線形結合として前記ヘモグロビン含有量値を算出することを備える、請求項３８に記載のシステム。
【請求項４０】
前記電子プロセッサは、前記複数の細胞の各々１つ毎に、１つの細胞体積値、１つの光学濃度値、および１つのヘモグロビン含有量値を測定するように構成され、前記１つの細胞体積値および前記１つの光学濃度値は前記照射放射の１つの波長に対応する、請求項３５に記載のシステム。
【請求項４１】
赤血球の体積を測定する方法であって、
（ａ）複数の照射波長の入射光で前記血球を照射することと、
（ｂ）各照射波長に対応する前記血球の少なくとも１つの二次元画像を得ることと、
（ｃ）各照射波長毎に、前記血球についての平均光学濃度および最大光学濃度を測定することと、
（ｄ）前記血球の面積を測定することと、
（ｅ）各照射波長毎に、前記血球の前記面積ならびに前記照射波長に対応する前記血球についての前記平均光学濃度および最大光学濃度に基づいて前記血球の体積を測定することと、
（ｆ）各照射波長毎に、前記血球の前記面積および前記照射波長に対応する前記血球についての前記平均光学濃度に基づいて前記血球についての積分光学濃度を測定することと、
（ｇ）前記血球の前記面積と、前記照射波長の各々に対応する前記血球の前記体積と、前記照射波長の各々に対応する前記血球についての前記積分光学濃度との重み付けられた組合せに基づいて前記血球の前記体積を測定することとを備える、方法。
【請求項４２】
血液の試料からの複数の赤血球について（ａ）から（ｇ）を繰返して、前記複数の血球の各々毎に体積を測定することと、
前記複数の血球の各々毎に前記体積から前記試料の平均血球体積を測定することとをさらに備える、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
各々それぞれの血球毎に、前記それぞれの血球の前記面積が２０平方ミクロンよりも小さい場合、前記平均細胞体積の測定から前記それぞれの血球を排除することをさらに備える、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
各々それぞれの血球毎に、前記それぞれの血球の前記面積が８０平方ミクロンよりも大きい場合、前記平均細胞体積の測定から前記それぞれの血球を排除することをさらに備える、請求項４２に記載の方法。
【請求項４５】
前記照射波長に対応する前記最大光学濃度に対する前記平均光学濃度の比率に基づいて各々の照射波長での前記血球の前記体積を測定することをさらに備える、請求項４１に記載の方法。
【請求項４６】
前記照射波長での前記最大光学濃度と補正係数との和に対する前記平均光学濃度の比率に基づいて各々の照射波長での前記血球の前記体積を測定することをさらに備える、請求項４１に記載の方法。
【請求項４７】
前記最大光学濃度と前記補正係数との前記和に対する前記平均光学濃度の前記比率にオフセット値を加算して各々の照射波長での前記血球の前記体積を測定することをさらに備える、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
血液試料の参照の組から前記補正係数および前記オフセット値の値を求めることをさらに備える、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記複数の照射波長は少なくとも３つの照射波長を備える、請求項４１に記載の方法。
【請求項５０】
前記複数の照射波長は、５７５ｎｍから６００ｎｍの間の少なくとも１つの波長と、５２５ｎｍから５７０ｎｍの間の少なくとも１つの波長と、４００ｎｍから４７５ｎｍの間の少なくとも１つの波長とを備える、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記複数の照射波長は少なくとも４つの照射波長を備える、請求項４１に記載の方法。
【請求項５２】
前記複数の照射波長は、６２０ｎｍから７５０ｎｍの間の少なくとも１つの波長と、５７５ｎｍから６００ｎｍの間の少なくとも１つの波長と、５２５ｎｍから５７０ｎｍの間の少なくとも１つの波長と、４００ｎｍから４７５ｎｍの間の少なくとも１つの波長とを備える、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
自動化血液分析装置の動作条件を判定する方法であって、
前記装置が請求項４２に記載の前記方法を用いて、対照組成物についての平均細胞体積を測定するように前記装置を動作させることと、
前記対照組成物についての前記平均細胞体積の参照値を前記平均細胞体積の測定値と比較して前記装置の前記動作条件を判定することとを備える、方法。
【請求項５４】
前記対照組成物についての前記平均細胞体積の前記測定値と前記参照値との間の差を求めることと、
前記差がしきい値を超える場合は前記装置を再校正することとをさらに備える、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記装置を再校正することは、血液試料の参照の組から、複数の細胞の面積と、照射波長の各々に対応する前記複数の細胞の体積と、前記照射波長の各々に対応する前記複数の細胞についての積分光学濃度とに基づいて前記試料の前記平均細胞体積を測定するのに用いられる複数の重み係数を定めることを備える、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
赤血球の体積を測定するためのシステムであって、
複数の照射波長の入射光で前記血球を照射するように構成される照射源と、
各照射波長に対応する前記血球の少なくとも１つの二次元画像を得るように構成される検出器と、
（ａ）各照射波長で前記血球についての平均光学濃度および最大光学濃度を測定し、
（ｂ）前記血球の面積を測定し、
（ｃ）各照射波長毎に、前記血球の前記面積ならびに前記照射波長に対応する前記血球についての前記平均光学濃度および最大光学濃度に基づいて前記血球の体積を測定し、
（ｄ）各照射波長毎に、前記血球の前記面積および前記照射波長に対応する前記血球についての前記平均光学濃度に基づいて前記血球の積分光学濃度を測定し、
（ｅ）前記血球の前記面積と、前記照射波長の各々に対応する前記血球の前記体積と、前記照射波長の各々に対応する前記血球についての前記積分光学濃度との重み付けられた組合せに基づいて前記血球の前記体積を測定するように構成される電子プロセッサとを備える、システム。
【請求項５７】
前記電子プロセッサは、血液の試料からの複数の赤血球について（ａ）から（ｅ）を繰返して前記複数の血球の各々毎に体積を測定し、かつ
前記複数の血球の各々毎に前記体積から前記試料についての平均細胞体積を測定するようにさらに構成される、請求項５６に記載のシステム。
【請求項５８】
前記複数の照射波長は、５７５ｎｍから６００ｎｍの間の少なくとも１つの波長と、５２５ｎｍから５７０ｎｍの間の少なくとも１つの波長と、４００ｎｍから４７５ｎｍの間の少なくとも１つの波長とを備える、請求項５６に記載のシステム。
【請求項５９】
自動化血液試料調製システムをさらに備える、請求項５６に記載のシステム。
【請求項６０】
前記電子プロセッサは、各々それぞれの血球毎に、前記それぞれの血球の前記面積が２０平方ミクロンよりも小さい場合、前記平均血球体積の測定から前記それぞれの血球を排除するようにさらに構成される、請求項５７に記載のシステム。
【請求項６１】
前記電子プロセッサは、各々それぞれの血球毎に、前記それぞれの血球の前記面積が８０平方ミクロンよりも大きい場合、前記平均血球体積の測定から前記それぞれの血球を排除するようにさらに構成される、請求項５７に記載のシステム。
【請求項６２】
前記電子プロセッサは、前記照射波長に対応する前記最大光学濃度に対する前記平均光学濃度の比率に基づいて各々の照射波長での前記血球の前記体積を測定するようにさらに構成される、請求項５６に記載のシステム。
【請求項６３】
前記電子プロセッサは、前記最大光学濃度と補正係数との和に対する前記平均光学濃度の前記比率にオフセット値を加算して、各々の照射波長での前記血球の前記体積を測定するようにさらに構成される、請求項６２に記載のシステム。
【請求項６４】
前記電子プロセッサは、血液試料の参照の組から前記補正係数の値および前記オフセット値を求めるようにさらに構成される、請求項６３に記載のシステム。
【請求項６５】
前記複数の照射波長は少なくとも３つの照射波長を備える、請求項５６に記載のシステム。
【請求項６６】
前記複数の照射波長は少なくとも４つの照射波長を備える、請求項５６に記載のシステム。
【請求項６７】
前記複数の照射波長は、６２０ｎｍから７５０ｎｍの間の少なくとも１つの波長と、５７５ｎｍから６００ｎｍの間の少なくとも１つの波長と、５２５ｎｍから５７０ｎｍの間の少なくとも１つの波長と、４００ｎｍから４７５ｎｍの間の少なくとも１つの波長とを備える、請求項６６に記載のシステム。
【請求項６８】
前記試料は対照組成物であり、前記電子プロセッサは、
前記対照組成物の平均血球体積を測定し、かつ
前記対照組成物の前記平均血球体積の参照値を前記平均血球体積の測定値と比較して、前記システムを備える装置の動作条件を判定するようにさらに構成される、請求項５７に記載のシステム。
【請求項６９】
前記電子プロセッサは、
前記対照組成物の前記平均血球体積の前記測定値と前記参照値との間の差を求め、かつ
前記差がしきい値を超える場合は前記装置を再校正するようにさらに構成される、請求項６８に記載のシステム。
【請求項７０】
前記電子プロセッサは、血液試料の参照の組から、前記複数の血球の前記面積と、前記照射波長の各々に対応する前記複数の血球の前記体積と、前記照射波長の各々に対応する前記複数の血球についての前記積分光学濃度とに基づいて前記試料の前記平均血球体積を測定するのに用いられる複数の重み係数を定めることによって前記装置を再校正するようにさらに構成される、請求項６９に記載のシステム。