(57)【要約】皮膚の外見を改善するために、脱色マスカダイン（ビティス・ロツンディフォリア（Vitis rotundifolia））ポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカン、およびブドウ種子抽出物の組み合わせを用いて製造された組成物を各々含む5つの要素を使用する、スキンケアレジメンが開示される。5つの要素は、トナー、昼用モイスチャライザー、夜用モイスチャライザー、クレンザー、およびセラムを含む。有効量のこれら5つの要素の適用により皮膚の外見を改善するスキンケア法も開示される。2020519642.tif 000013
2020519642.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
5つの要素を別個の容器に含む組み合わせであって、5つの要素が、トナー組成物、昼用モイスチャライザー組成物、夜用モイスチャライザー組成物、クレンザー組成物、およびセラム組成物であり、
各要素が、
（i）液体マスカダインポマース抽出物を生成するように、液体ブロンズマスカダインポマース抽出物を液体紫マスカダインポマース抽出物と組み合わせて含む、脱色マスカダイン（ビティス・ロツンディフォリア（Vitis rotundifolia））ポマース溶媒抽出物であって、
（a）ブロンズマスカダインポマース抽出物および紫マスカダインポマース抽出物が水性抽出物であり、
（b）ブロンズマスカダインポマース抽出物および紫マスカダインポマース抽出物の混合がマスカダインポマース抽出物内でのエラグ酸の溶解を促進し、
（c）ブロンズマスカダインポマース抽出物および紫マスカダインポマース抽出物がろ過および発酵された抽出物であり、かつ
（d）マスカダインポマース抽出物が少なくとも約2％のポリフェノール含量を有する、
脱色マスカダイン（ビティス・ロツンディフォリア）ポマース溶媒抽出物；
（ii）ベータ・グルカン；ならびに
（iii）ブドウ種子抽出物
を含む、組み合わせ。
【請求項２】
トナー組成物が、
トナー組成物の重量で、約0.001％〜約1.0％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、
トナー組成物の重量で、約0.000001％〜約0.1％のベータ・グルカン、および
トナー組成物の重量で、約0.00001％〜約0.01％のブドウ種子抽出物
を含む、請求項1記載の組み合わせ。
【請求項３】
昼用モイスチャライザー組成物が、
昼用モイスチャライザー組成物の重量で、約0.001％〜約1.0％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、
昼用モイスチャライザー組成物の重量で、約0.0001％〜約0.1％のベータ・グルカン、および
昼用モイスチャライザー組成物の重量で、約0.00001％〜約0.01％のブドウ種子抽出物
を含む、請求項1または2記載の組み合わせ。
【請求項４】
夜用モイスチャライザー組成物が、
夜用モイスチャライザー組成物の重量で、約0.001％〜約1.0％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、
夜用モイスチャライザー組成物の重量で、約0.000001％〜約0.1％のベータ・グルカン、および
夜用モイスチャライザー組成物の重量で、約0.00001％〜約0.01％のブドウ種子抽出物
を含む、請求項1〜3のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項５】
クレンザー組成物が、
クレンザー組成物の重量で、約0.001％〜約1.0％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、
クレンザー組成物の重量で、約0.000001％〜約0.1％のベータ・グルカン、および
クレンザー組成物の重量で、約0.00001％〜約0.01％のブドウ種子抽出物
を含む、請求項1〜4のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項６】
セラム組成物が、
セラム組成物の重量で、約0.01％〜約10.0％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、
セラム組成物の重量で、約0.00001％〜約1.0％のベータ・グルカン、および
セラム組成物の重量で、約0.0001％〜約0.1％のブドウ種子抽出物
を含む、請求項1〜5のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項７】
トナー組成物が、
トナー組成物の重量で、約0.001％〜約0.05％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、
トナー組成物の重量で、約0.000001％〜約0.01％のベータ・グルカン、および
トナー組成物の重量で、約0.0001％〜約0.001％のブドウ種子抽出物
を含む、請求項1〜6のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項８】
昼用モイスチャライザー組成物が、
昼用モイスチャライザー組成物の重量で、約0.01％〜約0.05％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、
昼用モイスチャライザー組成物の重量で、約0.001％〜約0.01％のベータ・グルカン、および
昼用モイスチャライザー組成物の重量で、約0.0001％〜約0.001％のブドウ種子抽出物
を含む、請求項1〜6のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項９】
夜用モイスチャライザー組成物が、
夜用モイスチャライザー組成物の重量で、約0.01％〜約0.05％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、
夜用モイスチャライザー組成物の重量で、約0.000001％〜約0.01％のベータ・グルカン、および
夜用モイスチャライザー組成物の重量で、約0.0001％〜約0.001％のブドウ種子抽出物
を含む、請求項1〜8のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項１０】
クレンザー組成物が、
クレンザー組成物の重量で、約0.01％〜約0.05％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、
クレンザー組成物の重量で、約0.000001％〜約0.01％のベータ・グルカン、および
クレンザー組成物の重量で、約0.0001％〜約0.01％のブドウ種子抽出物
を含む、請求項1〜9のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項１１】
セラム組成物が、
セラム組成物の重量で、約0.1％〜約0.5％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、
セラム組成物の重量で、約0.00001％〜約0.1％のベータ・グルカン、および
セラム組成物の重量で、約0.005％〜約0.1％のブドウ種子抽出物
を含む、請求項1〜10のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項１２】
5つの要素の少なくとも1つが、日焼け止め剤をさらに含む、請求項1〜11のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項１３】
5つの要素の少なくとも1つが、パンテノール、ビタミンA、ビタミンC、ビタミンE、スーパーオキシドジスムターゼ、またはそれらの任意の組み合わせをさらに含む、請求項1〜12のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項１４】
5つの要素の少なくとも1つが、要素の重量で、
約0.0001％〜約1.0％のパンテノール、
約0.00005％〜約1.0％のビタミンA、
約0.00001〜約0.1％のビタミンC、
約0.001％〜約1.0％のビタミンE、
約0.00000001％〜約0.1％のスーパーオキシドジスムターゼ、
またはそれらの任意の組み合わせ
を含む、請求項13記載の組み合わせ。
【請求項１５】
5つの要素の少なくとも1つが、アスコルビルリン酸マグネシウムを含む、請求項13または14記載の組み合わせ。
【請求項１６】
5つの要素の少なくとも1つが、酢酸ビタミンEを含む、請求項13〜15のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項１７】
5つの要素の少なくとも1つが、パルミチン酸ビタミンAまたはレチノールを含む、請求項13〜16のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項１８】
5つの要素の少なくとも1つが、ミヤコグサ（lotus japonicus）抽出物、チョウセンゴミシ（schizandra chinensis）果実抽出物、または両方をさらに含む、請求項1〜17のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項１９】
5つの要素の各々における脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の紫マスカダインポマース抽出物に対するブロンズマスカダインポマース抽出物の比が、約0.1〜約10（重量対重量）の範囲である、請求項1〜18のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項２０】
5つの要素の各々における脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の紫マスカダインポマース抽出物に対するブロンズマスカダインポマース抽出物の比が、約0.3〜約3（重量対重量）の範囲である、請求項19記載の組み合わせ。
【請求項２１】
5つの要素の各々における脱色マスカダインポマース溶媒抽出物が、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の重量で、約7％〜約10％のポリフェノールおよび約5％未満の単糖を含み、縮合タンニンが、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の総ポリフェノール含量の約10％未満である、請求項1〜20のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項２２】
5つの要素の各々における脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の総ポリフェノールが、少なくとも約85％の、縮合タンニン以外のポリフェノールからなる、請求項1〜21のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項２３】
5つの要素の各々における脱色マスカダインポマース溶媒抽出物が、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の重量で、約0.5％〜約5％の繊維、約7％〜約14％のタンパク質、約0.05％〜約3％の脂肪、および約15〜約20％の有機酸をさらに含む、請求項1〜22のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項２４】
5つの要素の各々における脱色マスカダインポマース溶媒抽出物が、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の重量で、約1％〜約2％の繊維、約7％〜約8％のタンパク質、約0.5％〜約1.5％の脂肪、および約15.5〜約16.5％の有機酸をさらに含む、請求項23記載の組み合わせ。
【請求項２５】
5つの要素の各々における脱色マスカダインポマース溶媒抽出物のフェノール系内容物が、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の重量で、約2〜約3％のエラグ酸および約30〜約31％の没食子酸を含む、請求項1〜24のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項２６】
5つの要素の各々における脱色マスカダインポマース溶媒抽出物のフェノール系内容物が、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の重量で、約2〜約3％のエラグ酸、約3〜約4％のエラグ酸グリコシド、約30〜約31％の没食子酸、約2〜約3％のケルセチン、約10〜約11％のガロタンニン、約7〜約8％のエラジタンニン、約29〜約30％のプロアントシアニジン、約4〜約5％のアントシアニン、約2〜約3％のカテキン、および約6〜約7％のフェノール酸を含む、請求項22記載の組み合わせ。
【請求項２７】
5つの要素の少なくとも1つにおける紫マスカダインポマース抽出物が、ホール紫マスカダインブドウの抽出物、ホールブドウ以外由来の紫マスカダインポマースの抽出物、または両方を含む、請求項1〜26のいずれか一項記載の組み合わせ。
【請求項２８】
請求項1〜27のいずれか一項記載の組み合わせの有効量を皮膚に適用する工程を含み、該組み合わせの5つの要素の各々が、皮膚の外見を改善するのに十分な期間適用される、スキンケア法。
【請求項２９】
皮膚表面が、顔の皮膚表面である、請求項28記載のスキンケア法。
【請求項３０】
皮膚の外見の改善が、
皮膚のしわの深さ、皮膚のしわの数、皮膚のしわの長さ、または皮膚のしわの幅
の少なくとも1つの減少を含む、請求項28記載のスキンケア法。
【請求項３１】
しわが、眼窩周囲のしわ、額のしわ、または頬のしわである、請求項30記載のスキンケア法。
【請求項３２】
皮膚の外見の改善が、
皮膚の粗さの減少、皮膚の滑らかさの増加、皮膚の輝きの増加、皮膚の堅さの増加、皮膚のたるみの減少、皮膚の色合いの均等性の増加、毛穴サイズの減少、または皮膚の色素過剰の減少
の少なくとも1つを含む、請求項28記載のスキンケア法。
【請求項３３】
5つの組み合わせが、
（a）少なくとも約1週間、少なくとも1日1回、
（b）少なくとも約1週間、少なくとも1日2回、
（c）少なくとも約12週間、少なくとも1日1回、
（d）少なくとも約12週間、少なくとも1日2回、
皮膚に適用される、請求項28〜32のいずれか一項記載のスキンケア法。
【請求項３４】
（a）午前に、有効量の第1適用のクレンザー組成物を皮膚に適用する工程、
（b）第1適用クレンザー組成物を皮膚から洗い流す工程、
（c）工程（b）の後に、有効量の昼用モイスチャライザー組成物および有効量のセラム組成物を適用する工程、
（d）有効量の第2適用のクレンザー組成物を皮膚に適用する工程、
（e）第2適用のクレンザー組成物を皮膚から洗い流す工程、
（f）有効量のセラム組成物、トナー組成物および有効量の夜用モイスチャライザー組成物を皮膚に適用する工程
を含み、
工程（a）〜（c）および（d）〜（f）は約8〜約16時間の間隔をあける、請求項28〜32のいずれか一項記載のスキンケア法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、参照により本明細書に組み入れられる2017年5月12日に出願された米国仮出願番号62/505,549の恩典を主張する。
【０００２】
分野
本開示は、トナー（toner）、昼用モイスチャライザー（day moisturizer）、夜用モイスチャライザー（night moisturizer）、クレンザー（cleanser）、および／またはセラム（serum）の要素を含む皮膚処置用の組み合わせに関する。各要素は、脱色マスカダイン（ビティス・ロツンディフォリア（Vitis rotundifolia））ポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカン、およびブドウ種子抽出物を含む。これらの組み合わせを用いて皮膚の外見を改善する方法も開示される。
【背景技術】
【０００３】
背景
活性酸素種（ROS）は、好気代謝の副産物であり、したがってヒトおよびその他の生物において継続的に生成される。ヒトはまた、環境源、例えば大気汚染、日光および食事からもROSにさらされる。ROSには異なる化学形態が存在するが、それらはすべて、皮膚におけるそれらを含む細胞構成要素および高分子の構造および機能に対して有害な作用をもたらす。皮膚の加齢プロセスは複雑であり、時間的要因および環境的要因の両方が関与する。皮膚の最外層である表皮は、化学的および生物学的傷害に対するバリアを提供する。表皮の1つの機能は、より深い皮膚層へのROSの浸透を調整することである。
【０００４】
時間と共に、表皮において新しい皮膚層を生成する速度は低下し、それによって皮膚は徐々に薄くなる。これは、有害な刺激、例えば、ダメージを与える環境因子からの十分な保護を提供するという表皮の能力を低下させ得る。弱体化したバリアは、例えば、皮膚のしわとして顕在化し得るコラーゲンおよびエラスチンの変性を引き起こし得、ROSの浸透性を増大させ得る。有害な刺激から回復する表皮の能力もまた、年齢と共に低下する。
【０００５】
ブドウ抽出物は、有益な抗酸化特性を有することが知られている。マスカダインブドウは、例えば、フラボノイド（例えば、フラボノール、アントシアニンおよびフラバノン、ならびにプロアントシアニジンとして公知のフラバン-3-オールおよびそれらのオリゴマー）ならびに非フラボノイド（例えば、フェノール酸、タンニンおよびスチルベン誘導体、例えばレスベラトロール）を含む、様々な生物活性ポリフェノール化合物を含む。フラボノイドの生物学的効果は、フリーラジカル捕捉、細胞のシグナル伝達経路および遺伝子発現に対する有益な効果、ならびに急速かつ異常に増殖する哺乳動物細胞の細胞分裂周期に対する選択的干渉によるものであると考えられる。
【０００６】
米国特許第4,272,544号（特許文献1）は、4つのスキンケア製品：スキンクレンザー配合物、スキントニック、スキンクリーム、およびスキンローション配合物の適用および使用を開示している。米国公開特許出願番号第2004/0191330号（特許文献2）は、ハイドレーティングウォッシュ、トナーアストリンジェント、眼用クリーム、アルファヒドロキシ、およびベータヒドロキシ酸を含む顔用セラム、日焼け止め剤を含む昼用クリーム、ならびに麦芽粕蝋およびツルマメ（Glycine Soja）（ダイズ）タンパク質を含む夜用クリームを含むスキンケアレジメンを開示している。スキンケアレジメンにおける複数の要素の使用は、コラーゲンおよびエラスチンの生成を強化し得、フリーラジカルを減少させ得る。しかし、細線（fine line）およびしわ（wrinkle）を減少させることができ、かつ皮膚の外見を改善することができるさらなるスキンケアレジメンに対する要望がなおも存在する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】米国特許第4,272,544号
【特許文献２】米国公開特許出願番号第2004/0191330号
【発明の概要】
【０００８】
要旨
脱色ブドウポマース溶媒抽出物を用いる皮膚の外見を改善するための方法および組成物が、本明細書に開示される。脱色ブドウポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含む組成物の使用は、例えば、しわの深さを減少させることによって、しわの数を減少させることによって、しわの長さを減少させることによって、しわの幅を減少させることによって、皮膚の粗さを減少させることによって、皮膚の滑らかさを増加させることによって、皮膚の輝き（radiance）を増加させることによって、皮膚の堅さを増加させることによって、皮膚のたるみを減少させることによって、皮膚の色合いの均等性を増加させることによって、毛穴サイズを減少させることによって、皮膚の色素過剰を減少させることによって、またはこれらの改善の組み合わせによって、皮膚の外見を改善し得る。要素の組み合わせを使用するスキンケア法が、開示されている。適用割合は、1または数週の間の、1日に1回または2回であり得るが、これらに限定されない。いくつかの態様において、5つの要素：トナー、昼用モイスチャライザー、夜用モイスチャライザー、クレンザー、およびセラムを含む組み合わせが使用される。
【０００９】
脱色ブドウ溶媒抽出物の生産における進歩により、スキンケア製品用を含む、局所調製物におけるそのようなブドウ抽出物の使用が可能となっている。本開示は、低い縮合タンニン含量を有しつつ、ポリフェノールおよび所望の抗酸化活性を抽出物中に実質的に保存している脱色ブドウポマース抽出物を含む組成物を提供する。いくつかの例において、脱色抽出物は、ブロンズおよび／または紫マスカダイン（ビティス・ロツンディフォリア）ブドウポマースから得られる。本開示の組成物はまた、ブドウ種子抽出物およびベータ・グルカンを含む。
【００１０】
特定の例において、組成物は、有効量の脱色マスカダイン（ビティス・ロツンディフォリア）ポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含み、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、液体マスカダインポマース抽出物を生成するよう液体紫マスカダインポマース抽出物と混合された液体ブロンズマスカダインポマース抽出物を含み、（a）ブロンズマスカダインポマース抽出物および紫マスカダインポマース抽出物は溶媒抽出物であり、（b）ブロンズマスカダインポマース抽出物および紫マスカダインポマース抽出物の混合は、マスカダインポマース抽出物におけるエラグ酸の溶解を促進し、（c）ブロンズマスカダインポマース抽出物および紫マスカダインポマース抽出物はろ過および発酵された抽出物であり、（d）マスカダインポマース抽出物は少なくとも約2％のポリフェノール含量を有する。皮膚の外見の改善に使用するための、これらの要素の組み合わせも開示される。したがって、皮膚、例えば顔の皮膚の外見を改善するための方法が開示される。
【００１１】
本発明の上記およびその他の目的、特徴および利点は、添付図面を参照して進められる以下の詳細な説明からより明らかとなるであろう、
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図1は、しわの数、長さ、幅、面積および深さの減少を参照する、12週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に目の下の皮膚の健康の改善を示すヒト対象の比率を示すグラフである。
【図２】図2は、図1の対象における目の下の皮膚の健康の改善度を示すグラフである。
【図３】図3は、しわの数、長さ、幅、面積および深さの減少を参照する、12週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に目尻（crow's feet）の皮膚の健康の改善を示すヒト対象の比率を示すグラフである。
【図４】図4は、図3の対象における目尻の皮膚の健康の改善度を示すグラフである。
【図５】図5は、皮膚の粗さの深度、最大および平均粗さ、および皮膚の滑らかさを参照する、12週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に皮膚の粗さの改善を示すヒト対象の比率を示すグラフである。
【図６】図6は、図5の対象における皮膚の粗さの改善度を示すグラフである。
【図７】図7は、8週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に皮膚の堅さの改善を示す対象の比率（左側バー）および皮膚の堅さの改善度（右側バー）を示すグラフである。
【図８】図8は、2つのグラフを示しており、1つは1、2、4、8および12週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に顔全体のしわの分析により測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率（左側バー）であり、もう1つは皮膚の健康における対応する平均改善率（右側バー）である。
【図９】図9は、2つのグラフを示しており、1つは1、2、4、8および12週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に眼窩周囲のしわの分析により測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率（左側バー）であり、もう1つは皮膚の健康における対応する平均改善率（右側バー）である。
【図１０】図10は、2つのグラフを示しており1つは1、2、4、8および12週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に額のしわの分析により測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率（左側バー）であり、もう1つは皮膚の健康における対応する平均改善率（右側バー）である。
【図１１】図11は、2つのグラフを示しており、1つは1、2、4、8および12週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に頬のしわの分析により測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率（左側バー）であり、もう1つは皮膚の健康における対応する平均改善率（右側バー）である。
【図１２】図12は、2つのグラフを示しており、1つは1、2、4、8および12週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に皮膚全体の健康の分析により測定される改善を示す対象の比率（左側バー）であり、もう1つは皮膚格付け専門家による目視の格付けにより決定される皮膚の健康における対応する平均改善率（右側バー）である。
【図１３】図13は、2つのグラフを示しており、1つは1、2、4、8および12週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に皮膚の質感の分析により測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率（左側バー）であり、もう1つは皮膚の健康における対応する平均改善率（右側バー）である。
【図１４】図14は、2つのグラフを示しており、1つは1、2、4、8および12週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に皮膚の輝きの分析により測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率（左側バー）であり、もう1つは皮膚の健康における対応する平均改善率（右側バー）である。
【図１５】図15は、2つのグラフを示しており、1つは1、2、4、8および12週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に皮膚の堅さの分析により測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率（左側バー）であり、もう1つは皮膚の健康における対応する平均改善率（右側バー）である。
【図１６】図16は、2つのグラフを示しており、1つは1、2、4、8および12週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に皮膚のたるみの分析により測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率（左側バー）であり、もう1つは皮膚の健康における対応する平均改善率（右側バー）である。
【図１７】図17は、2つのグラフを示しており、1つは1、2、4、8および12週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に皮膚の色合いの均等性の分析により測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率（左側バー）であり、もう1つは皮膚の健康における対応する平均改善率（右側バー）である。
【図１８】図18は、2つのグラフを示しており、1つは1、2、4、8および12週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に顔全体の毛穴サイズの分析により測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率（左側バー）であり、もう1つは皮膚の健康における対応する平均改善率（右側バー）である。
【図１９】図19は、2つのグラフを示しており、1つは1、2、4、8および12週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に顔全体の皮膚の色素過剰の分析により測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率（左側バー）であり、もう1つは皮膚の健康における対応する平均改善率（右側バー）である。それらの領域におけるより強い色素沈着を示す、顔面の暗色のしみまたはまだら状のしみを示した皮膚を、色素過剰であるとみなした。
【図２０】図20は、12週間の以下の例示的なスキンケアレジメン後に13の特定のパラメータにおいて皮膚の健康の改善が認められた対象の比率を示すグラフである。
【図２１】図21は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を製造するために使用されるプロセスの1つの態様における、ポリフェノール含量を実質的に保存しつつ縮合タンニン含量を低下させる例示的な抽出法のフローチャートである。
【図２２】図22は、図21の方法を実行するためのシステムの概要図である。
【図２３Ａ】図23A〜23Bは、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を製造するために使用されるプロセスの1つ態様を用いてタンニン含量を低下させる前の処理前マスカダインポマース抽出物（23A）および後の脱色抽出物（23B）におけるポリフェノールのクロマトグラフィープロフィールの対比トレースである。処理前抽出物の所望のポリフェノールプロフィールが維持されつつ、縮合タンニンのレベルが脱色抽出物において大きく低下している。
【図２３Ｂ】説明は図23Aに記載の通り。
【図２４】図24は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を用いたエラスターゼ阻害試験の結果を示すグラフであり、エラスチン減少を阻害することによる皮膚の弾力性に対する効果を示しめしている。
【図２５】図25は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を用いたコラゲナーゼ阻害試験の結果を示すグラフである。向上したコラゲナーゼ阻害は、皮膚におけるコラーゲン損失を回避することにより皮膚の堅さを改善する。
【図２６Ａ】図26A〜26Bは、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を用いた、トロロックス当量（TE）で示される、フリーラジカル捕捉力を測定するDPPHアッセイの結果を示しており、TE値が高いほど、抗酸化力が大きい。図26Bに示されるように、100 mcg/mlのTMEは、185 mcgのトロロックスと同じ抗酸化力を示し、これにより、DPPHアッセイによって測定される場合、TMEがトロロックスよりも1.85倍強力な抗酸化物質であることが示された。トロロックスは、抗酸化物質試験において対照物質として使用される公知の強力な抗酸化物質である。
【図２６Ｂ】説明は図26Aに記載の通り。
【図２７Ａ】図27A〜27Bは、TT二量体アッセイの結果を示す。図27Aは、紫外線B波（UVB）曝露前の1％脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の前処置がDNA損傷を完全に防いだことを示す。抽出物は、陽性対照（1 mMトロロックス）よりも良好であった。UVB曝露後の1％脱色マスカダインポマース溶媒抽出物処置（後処置）もまた、DNA損傷の45％減少を示し、これによりDNA修復に対する効果が示唆され、前処置および後処置の両方において、0.1％からの効果は1％よりも低かった。
【図２７Ｂ】図27A〜27Bは、TT二量体アッセイの結果を示す。図27Bは、さらなる結果を示す。TMEは、0.25％で、未処置対照との比較でTT二量体形成の有意な減少（38％）を示した。GSE＋グルカンは、対照との比較で有意な減少を示さなかった。GSE＋グルカンをTMEと組み合わせた場合、TT二量体形成の減少はより有意であり（69％減少および44％減少）、これにより、そのすべてが開示される組み合わせの要素に含まれる、これらの成分の併用効果が示唆された。
【図２８】図28は、UVB曝露後の細胞生存率を示しており、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、未処置細胞と比較して細胞生存率を有意に増加させ、その増加は、陽性対照処置である20μMトロロックスで見られる増加よりも大きかった。
【図２９】図29は、色素過剰を軽減する能力を示す、異なる濃度の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の下でのチロシナーゼ阻害を示す。
【図３０】図30は、脱色局所マスカダインポマース抽出物（TME）と脱色されなかった経口投与マスカダインポマース抽出物（OME)の間のTT二量体DNA損傷比較アッセイのグラフであり、0.09％および0.009％のポリフェノールを含むOMEとTMEの間でDNA損傷の減少に関して統計的な差がみられなかった。OMEは、先行米国特許第8,568,804号、米国特許第9,132,162号および米国特許第9,173,916号に開示される抽出物である。
【図３１】図31は、OME（未脱色、●）およびTME（脱色済み、■）の両方が用量関連様式で終末糖化産物（AGE）形成の阻害に関して優れた活性（効果）を示したことを示すグラフである。AGE形成の最大阻害は、両方の抽出物において、15〜20μgポリフェノール／mlの濃度で95〜100％に達した。しかし、OMEは、AGE形成を50％阻害するのに必要とされる濃度（IC50)によって示されるように、TMEよりも強力であった。OMEのIC50値は、0.65μgポリフェノール/mlであり、TMEのIC50値は、3.94μgポリフェノール/mlであった。これは、タンニンがAGE阻害活性に寄与しているものの、TME中に残存する他のマスカダインポリフェノールも、タンパク質の糖化の阻害に関して、OMEにおいて見出されたのと同等に効果的であることを示唆している。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
詳細な説明
有効量の脱色マスカダインポマース（ビティス・ロツンディフォリア）ポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含む組成物、ならびに皮膚の外見を改善するためのそれらの組み合わせとしての使用が、本明細書に開示される。これらの組み合わせを用いて皮膚の外見を改善するスキンケア法がさらに開示される。この組成物はさらに、皮膚の外見を改善するのに十分な量で存在する他の成分、例えばパンテノール、ビタミンA、CおよびE、スーパーオキシドジスムターゼ、チョウセンゴミシ（schizandra chinensis）抽出物、ミヤコグサ（lotus japonicus）抽出物またはそれらの組み合わせを含み得る。皮膚の外見の改善は、しわの深さ、長さ、幅もしくは数の減少；皮膚の粗さ、皮膚のたるみ、毛穴サイズもしくは皮膚の色素過剰の減少；および／または皮膚の滑らかさ、輝き、堅さもしくは皮膚の色合いの均等性の増加によって測定され得る。
【００１４】
I. 用語
以下の用語および方法の説明は、本開示をより分かりやすく説明するためおよび本開示を実施する上で当業者の手引きをするために提供される。「または、もしくは」という用語は、文脈がそうでないことを明確に示していない限り、言及されている二者択一の要素のうちの単一の要素または2つ以上の要素の組み合わせを表す。本明細書で使用される場合、「含む（comprises）」は、「含む（includes）」を意味する。したがって、「AまたはBを含む（comprising A or B）」は、追加要素を排除せず、「A、B、またはAおよびBを含む（including A, B, or A and B）」を意味する。
【００１５】
そうでないことが説明されていない限り、本明細書で使用されるすべての技術および科学用語は、本開示の属する技術の分野における通常の知識を有する者に広く理解されているのと同じ意味を有する。本開示の実施または試験には本明細書に記載されているのと同様または同等の方法および材料を使用することができるが、以下には適当な方法および材料が記載される。そうでないことが示されていない限り、すべての百分率および比率は、重量基準で算出されている。「約」という用語は、ある値の特定範囲内の量を表す。例えば、「約」具体的分子量またはグラム量は、その分子量またはグラム量の5％以内を示す。非限定的な例において、「約」100グラムは、95グラム〜105グラムを表す。加えて、「約」具体的百分率は、0.05％以内を表す。非限定的な例において、「約」2％は、1.95％〜2.05％を表す。
【００１６】
そうでないことが言及されていない限り、技術用語は、従来的用法にしたがい使用される。分子生物学における一般用語の定義は、Benjamin Lewin, Genes V, Oxford University Press発行, 1994（ISBN 0-19-854287-9）；Kendrew et al. (編), The Encyclopedia of Molecular Biology, Blackwell Science Ltd.発行, 1994（ISBN 0-632-02182-9）；およびRobert A. Meyers (編), Molecular Biology and Biotechnology: a Comprehensive Desk Reference, VCH Publishers, Inc.発行, 1995（ISBN 1-56081-569-8）で見いだされ得る。
【００１７】
本開示の様々な態様の閲覧を容易にするため、以下の特定の用語の説明を提供する。
【００１８】
投与：任意の有効な経路により対象に薬剤を提供するまたは与えること。例示的な投与経路は、局所、経口、注射（例えば、皮下、筋内、皮内、腹腔内、静脈内および腫瘍内）、舌下、経皮、経鼻、局所および吸入経路を含むがこれらに限定されない。
【００１９】
抗酸化組成物：抗酸化活性を有する組成物。
【００２０】
抗酸化有効量：その量の組成物を投与した対象において抗酸化効果を誘導するのに十分な量。
【００２１】
クレンザー：化粧品、死んだ皮膚細胞、油分、よごれおよびその他の遊離物質を皮膚の表面から取り除くよう配合されたスキンケア製品。クレンザーは通常、皮膚レジメンにおける最初の要素であり、トナー、セラムおよび／またはモイスチャライザーの適用前に使用される。クレンザーは、皮膚との接触により液化し得るジェル、または油と水の乳濁物であり得る。クレンザーは、ジェル、液体、ワイプ、クリームまたはローションを含むがこれらに限定されない様々な形態を有し得、発泡性または非発泡性であり得る。
【００２２】
組み合わせ：順に皮膚に適用されたときに、皮膚の外見を改善するために協働で作用する、通常別個の容器に収容される、2つまたはそれ以上の別個の要素。組み合わせは、2つ、3つ、4つ、5つまたは6つの別個の組成物（要素）を含み得る。組み合わせは、トナー組成物、昼用モイスチャライザー組成物、夜用モイスチャライザー組成物、クレンザー組成物およびセラム組成物を含み得る。
【００２３】
昼用モイスチャライザー：日焼け止め剤、例えば、例えば約20、約30、約40または約50の等級の日焼け防止指数（SPF）を有する日焼け止め剤を含むモイスチャライザー。昼用モイスチャライザーは通常、午前の皮膚レジメンにおける最後の要素であり、クレンザー、トナーおよび／またはセラムの適用後かつ化粧品の適用前に使用され得る。
【００２４】
脱色：「脱色」抽出物は、参照物よりも着色が少ないものを表し、着色の非存在を必要とするものではない。「脱色」抽出物は、本明細書で使用される場合、縮合タンニンのレベルが低下しており、かつ赤ブドウ、赤ブドウ抽出物および赤ワインにおいて縮合タンニンに関連するタイプの暗色の着色が少ない抽出物を表す。
【００２５】
有効量：単独でまたはさらなる薬剤（例えば、さらなる抗酸化物質）と共に、所望の応答を誘導する組成物の量。有効量は、単回量として、または複数回量として、例えば毎日、投与され得る。しかし、有効量は、処置する対象、処置する状態のタイプおよび投与の様式に依存し得る。
【００２６】
賦形剤：組成物の活性成分のための担体として使用される不活性物質。賦形剤は、活性成分を含む配合物を増量するため、簡便かつ正確な投与を実現するため、活性成分を安定化させるため、ならびに送達システムを光学的および／または感覚刺激的に許容可能にするために使用される物質を含み得る。薬学的賦形剤の例は、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、脱脂粉乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノール等を含む。
【００２７】
抽出物：植物またはその一部分の1つもしくは複数、例えばその果実もしくは種子の活性成分の少なくともいくつかの溶液またはその他の調製物。本明細書に開示される抽出物は、溶媒抽出物であり、種子は、種子から活性成分を取り出すために、液体抽出溶媒（例えば、熱水）に曝露される。溶媒抽出によって最初に得られる抽出物は、乾燥形態に変換され得るが、それもまた「抽出物」とみなされ得る。「水性」または「水」抽出物は、水を用い、他の溶媒（例えば、エタノール）を用いない溶媒抽出によって得られる抽出物を表す。
【００２８】
フラボノイド：植物の二次代謝産物のクラス。フラボノイドは、植物内に広く分布している食用ポリフェノール化合物の重要なグループを構成する。4000を超える科学的に特有のフラボノイドが、植物源、例えば果実、野菜、マメ、木の実、種子、ハーブ、スパイス、花において、および飲料、例えば茶、ココア、ビール、ワインおよびブドウジュースにおいて同定されている。
【００２９】
乾燥重量基準で、ブドウ種子は、約4〜約8％のフラボノイドを含む。ブドウ種子中のフラボノイドは、主としてフラバン-3-オール、特に(+)-カテキン、(-)-エピカテキンおよび(-)-エピカテキン 3-ガラート、ならびにそれらの複合体を表す。ブドウ種子においてフラバン-3-オールは、単量体、オリゴマーまたは多量体形態で存在する。2つまたはそれ以上の化学的に連結されたフラバン-3-オール単量体は、プロアントシアニジンまたはオリゴマー性プロアントシアニジン（「OPC」）と呼ばれ、プロシアニジンおよびプロデルフィニジンを含む。2つの単量体を含むOPCは、二量体と呼ばれ、3つの単量体は三量体、4つの単量体は四量体、5つの単量体は五量体等と呼ばれる。オリゴマーは、2〜10の鎖長を有し、多量体は、10を超える鎖長の要素を表す。したがって、ブドウ種子抽出物においてオリゴマーは、例えば、二量体および三量体を含み、多量体は、50〜100という多数の単位を有し得ることが証明されている。
【００３０】
フラボノイドは、ブドウ種子だけでなく、果皮、果汁およびパルプを含むブドウのすべての部分に存在する。ポリフェノール化合物を、ブドウ種子またはブドウポマース抽出物を含むブドウ抽出物として商業的に使用するために、これらの化合物は、より濃縮された形態でブドウから分離される必要がある。大規模な調査は、それが若々しい皮膚、細胞の健康、弾力性および柔軟性を促進することから、ブドウ抽出物、例えばブドウ種子抽出物が健康の多くの面で有益であることを示唆している。他の研究は、プロアントシアニジンが、日光によるダメージからの身体の保護、視力の改善、関節、動脈および身体組織、例えば心臓の柔軟性の改善、ならびに毛細血管、動脈および静脈を強固にすることによる血液循環の改善を助けることを示している。
【００３１】
皮膚の外見の改善：皮膚の外見および／または印象に視覚的および／または物理的に測定可能な利益をもたらすことであり、皮膚における年齢の皮膚科学的兆候の出現を減少させる、予防するまたは遅らせることを含み得る。皮膚の加齢の皮膚科学的兆候は、皮膚のしわ形成、皮層の菲薄化、弾力性および水和レベルの低下、ならびに色素沈着および赤みの増加を含む。脱色組成物および方法を用いて提供され得る利益は、しわの深さ、長さ、幅もしくは数の減少；皮膚の粗さ、皮膚のたるみ、毛穴サイズもしくは皮膚の色素過剰の減少；および皮膚の滑らかさ、輝きまたは明るさ、堅さ、弾力性もしくは皮膚の色合いまたは着色の均等性の増加を含むがこれらに限定されない。
【００３２】
モイスチャライザー：皮膚の最外層に潤いを与えるよう配合され、皮膚への成分の局所送達のための媒体として作用し得るスキンケア製品。モイスチャライザーは、皮膚の表面に水分損失を減少させる被膜を形成することによる、潤いを与えるよう空気中から水分を引き寄せることによる、または皮膚の表面に潤い因子を与えることによるものを含む、異なる作用様式を有し得る。モイスチャライザーは、乳濁物または粘性の半固体であり得る。
【００３３】
マスカダインブドウ（ビディス・ロツンディフォリア）：米国南東部原産であり、デラウェアからメキシコ湾にかけてならびに西方へ向かってはミズーリ、カンザス、オクラホマおよびテキサスまでの自然で見いだされるブドウ。マスカダインは、米国南東部の温暖、多湿な条件に十分に適応している。その果実は、ヨーロッパおよびアメリカブドウに特徴的な大きくぎっしり詰まった束とは大きく異なり、3〜40粒の小さく緩やかな房を形成する。丸みのある、1〜1-1/2インチの果実は、厚く丈夫な果皮を有し、最大5つの堅い楕円形の種子を含む。色の面では、その果実は緑色がかったブロンズ色からブロンズ色、ピンク色がかった赤色、紫色およびほぼ黒色の範囲である。それらは、本明細書で言うところの赤ブドウとみなされる。
【００３４】
Black Beauty、Black Fry、Darlene、Fry、Higgins、Jumbo、Scuppernong、Sugargate、Summit、SupremeおよびSweet Jenny等の雌（雌しべ）品種ならびにCarlos、Cowart、Dixieland、Dixie Red、Fry Seedless、Magnolia、Nesbitt、Noble、Redgate、RegaleおよびSterling等の自家受精品種を含む、多くの異なるマスカダインブドウ品種が入手可能である。
【００３５】
例えば、マスカダインブドウのブロンズ色品種は、Carlos、Chowan、Doreen、Higgins、Magnolia、Nevermiss、Pamlico、Roanoke、Scuppernong、SterlingおよびSummit栽培品種を含むものと、当業者によって特定されている。紫色品種は、ブロンズ色品種よりも暗色の果皮を有し、Albermarle、Bountiful、Cowart、GA-1、Hunt、NC-1、Noble、Regale、TarheelおよびJumboを含む。紫色品種の一部は、黒色品種とも称される。
【００３６】
ホールマスカダインブドウの植物化学的な構成要素は、ビティス・ビニフェラ（Vitis vinifera）と異なる。マスカダインは、高いエラグ酸、没食子酸およびフラボノイドグリコシド濃度によって識別される高い総フェノール含量を有する。マスカダインブドウにおけるエラグ酸の存在は、特有であり、遊離エラグ酸、エラグ酸グリコシド、メトキシル化誘導体、およびエラジタンニンの形態で見出される。別の特有の特徴は、マスカダインで観察されるアントシアニン化合物である。非アシル化形態のデルフィニジン、シアニジン、ペツニジン、ペオニジンおよびマルビジンの（3-グルコシドではなく）3,5-ジグルコシドとしての存在により、これらの化合物およびこのブドウ中に存在する他のアントシアニンからの自然の色の影響は、この紫色品種から得られる果汁およびポマースに暗紫色を与える。紫ポマース抽出物はアントシアニンを含むが、ブロンズポマース抽出物は含まない。
【００３７】
ブロンズおよび紫マスカダインブドウにおいて見出される赤色および紫色のアントシアニンは、抗酸化特性を有するポリフェノール化合物である。紫色およびブロンズマスカダインブドウは、様々な他のフラボノイドクラスのポリフェノールを含み、フラバン-3-オールおよびそれらのオリゴマーが最も豊富なクラスであり、フラボノールがホールマスカダイン中に存在する2番目に豊富なフラボノイドである。マスカダイン果皮画分に関して報告されている主要なフェノールは、（降順に）エラグ酸、ミリセチン、ケルセチンおよびケンペロールであり、種子に関して報告されているのは、エピカテキン、カテキンおよび没食子酸である（Pastrana-Bonilla et al. J. Agric. Food Chem. 51: 5497-5503, 2003）。
【００３８】
マスカダインブドウは、ポマースおよび果汁を含む。「ホールブドウ以外」は、その果汁の少なくとも一部が抽出されたマスカダインブドウを含み、いくつかの例において、そのブドウ中の本来の果汁の約95％未満または約90％未満を含む。
【００３９】
夜用モイスチャライザー：化学的な日焼け止め剤を含まないモイスチャライザー。夜用モイスチャライザーは通常、午後の皮膚レジメンの最後の要素であり、クレンザー、トナーおよび／またはセラムの適用後に使用され得る。
【００４０】
薬学的に許容される媒体：本開示において有用な薬学的に許容される媒体（担体）は、従来的なものである。Remington's Pharmaceutical Sciences, by E. W. Martin, Mack Publishing Co., Easton, PA, 19th Edition (1995)は、1つまたは複数の組成物、例えば1つまたは複数のブドウ抽出組成物、および本来であればそのブドウ抽出物と共に見出されないであろう追加の天然または非天然薬学的作用物質の薬学的送達に適した組成物および配合物を記載している。薬学的に許容される担体の使用は、それによって製造される製品が、薬学的用途でのみ有用であることを暗示するものではない。むしろ、それは、その製品が対象への投与または対象による摂取、例えば局所組成物に適していることを暗示している。特定の態様において、媒体は、局所組成物のための担体、例えば液体、ジェル、泡、クリーム、軟膏またはローションである。特に有用な媒体は、局所組成物に関して薬学的または美容的に許容されるもの、例えば1つまたは複数の水性システム、グリセリン、C1〜4アルコール、脂肪アルコール、脂肪エーテル、脂肪エステル、ポリオール、グリコール、植物油、鉱物油、リポソーム、層状脂質物質、シリコーン油、水またはそれらの任意の組み合わせである。
【００４１】
局所組成物、例えば本明細書に開示される局所組成物の場合、マスカダインブドウ抽出組成物は、任意の適当な製品形態で配合され得る。そのような製品形態は、エアゾールスプレー、分散物、乳濁物、発泡物、ジェル、液体、ローション、ムース、軟膏、パッチ、ポマード、粉末、ポンプスプレー、固形物、溶液、スティックまたはウェットティッシュを含むがこれらに限定されない。担体はまた、様々な既存のスキンローション、ジェル、クリーム、軟膏、トナー、クレンザー、モイスチャライザーまたは日焼け止め剤であり得、これにマスカダインブドウ抽出物が所望の濃度、例えば重量で約0.025％〜約0.25％で添加される。
【００４２】
ポリフェノール：ブドウおよびココア由来のポリフェノールは、心血管機能および認知的健康の両方を向上させることが見出されている。フラバノール（フラバン-3-オールとも呼ばれる）が、主要なブドウ種子およびココアポリフェノールであり、このクラスのフェノール化合物は、単量体種、例えばカテキンおよびエピカテキンからオリゴマー（しばしばプロアントシアニジンと称される）からポリマー（しばしばタンニンまたは縮合タンニンと称される）まで及ぶ。「フェノール」という用語は、当技術分野においておよび本明細書においてポリフェノールという用語と言い換え可能に使用される。
【００４３】
ポリフェノールは、果皮、果汁およびパルプを含むブドウの他の部分にも存在する。ブドウにおける最高濃度のポリフェノールは、ブドウ種子中に存在する。ブドウ種子は、ワイン醸造所およびブドウジュース工場の廃棄物である。これらの種子は、脂質、タンパク質、炭水化物および品種に依存して約4〜約8％のポリフェノール（乾燥重量）を含む。ブドウ種子抽出物は、早期老化、疾患および変性から身体を保護することができる。
【００４４】
ポマース：果汁抽出後に残る果皮、種子およびパルプ。1つの例において、ポマース抽出物は、ブロンズマスカダインポマース抽出物、紫マスカダインポマース抽出物またはそれらの組み合わせである。多くの異なる品種のマスカダインブドウポマースが、出発物質として利用可能であり、それらは雌（雌しべ）品種、例えばBlack Beauty、Black Fry、Darlene、Fry、Higgins、Jumbo、Scuppernong、Sugargate、Summit、SupremeおよびSweet Jennyならびに自家受精品種、例えばCarlos、Cowart、Dixieland、Dixie Red、Fry Seedless、Magnolia、Nesbitt、Noble、Redgate、RegaleおよびSterlingを含む。マスカダインポマースは、抗酸化特性を有する、没食子酸およびエラグ酸を含む、フェノール化合物を含む。
【００４５】
ポマースは、ブドウの果汁の少なくとも約90％または少なくとも約95％を含むホールブドウ中に存在し得、または果汁を取り出すためにブドウが圧搾された後、ポマースは、実質的に単離され、本質的にポマースのみからなり得る。
【００４６】
ポマース単独：例えばブドウの圧搾によって果汁を取り出したブドウのポマース部分。本明細書で使用される場合、「ポマース単独」は、その重量の百分率で約1％以下の果汁を含むポマースを表す。いくつかの態様において、ポマース単独は、その重量の百分率で約0.5％以下の果汁を含む。
【００４７】
精製された：精製されたという用語は完全な純粋さを必要とするのではなく、それは相対的な用語であることが意図されている。したがって、例えば、精製された物質は、その自然環境、例えば果実（例えば、ブドウ）中にある同物質よりも濃縮されているものである。1つの態様において、調製物は、その物質がその調製物の全体量の少なくとも約5％（例えば、少なくとも約10％、少なくとも約20％、少なくとも約30％、少なくとも約40％、少なくとも約50％、少なくとも約70％、少なくとも約80％、少なくとも約90％、少なくとも約95％、少なくとも約98％または少なくとも約99％であるがこれらに限定されない）となるよう精製される。
【００４８】
範囲：範囲に関して、「x〜yの範囲」または「x〜y」という用語は、xとyの間の任意の値およびその終点値であるxおよびyを含む。
【００４９】
赤ブドウ：赤ブドウは、一般に赤ワインの元となるブドウであり、かつ一般に白ワインの元となる白ブドウよりも高レベルのタンニンを有するブドウである。「赤ワイン」は、暗色のワインの一般用語である。ワインの色の決定は、分光高度計およびLab色空間におけるインデックスの計算を用いてワインの色を評価するための方法を提供するInternational Organization of Vine and Wineにしたがい行われ得る。赤ワインの元となるブドウの例は、Syrah、Merlot、Cabernet Sauvignon、Malbec、Pinot Noir、Zinfandel、Sangiovese、BarberaおよびMuscadineを含む。マスカダインブドウ（ビティス・ロツンディフォリア）は、熟した状態で、ブロンズ色〜暗紫色〜黒色の範囲の色を有する。
【００５０】
レジメン：本明細書で使用される場合、レジメンは、皮膚の外見を改善するための体系的な処置実務である。レジメンは、1つまたは複数の要素、例えば、トナー、昼用モイスチャライザー、夜用モイスチャライザー、クレンザーおよびセラムの皮膚への定期的な適用を含み得る。皮膚は、1日に1回、要素の1つもしくはすべてを用いて処置され得、または要素は、1日に複数回、例えば午前および午後に適用され得る。例えば、昼用モイスチャライザーが午前に適用され得、夜用モイスチャライザーが午後に適用され得る。通常、レジメンは、複数回の適用を含む。
【００５１】
選択的抽出：選択的抽出は、標的（例えば、縮合タンニン）の優先的抽出を表す。いくつかの態様において、選択的抽出は、標的が抽出される主な種であることを意味する。
【００５２】
セラム：成分を皮膚の深部まで送達するよう配合されたスキンケア製品。したがってセラムは通常、より高濃度の活性成分を含み、モイスチャライザーの適用前に皮膚をきれいにするために直接適用される。セラムは、低粘性および油分よりも高い比率の水分を有し得る。
【００５３】
スキンケア組成物：皮膚の健康的、審美的および／または美容的な見た目を改善し得る活性成分を有する局所組成物。そのような改善は、例えば、時間による老化、ホルモンによる老化および光による老化等の要因によって引き起こされる老化の皮膚科学的兆候の減少；皮膚の脆弱性、毛穴サイズ、コラーゲンおよび／またはエラスチンの喪失の減少；細線および／またはしわを含む線および／またはしわの出現および／または深さの減少；色素過剰の減少；皮膚の色合い、輝き、透明性および／または張りの改善；皮膚のたるみの減少；抗酸化活性の促進；皮膚の堅さ、膨らみ、質感、しなやかさおよび／または柔らかさの改善；プロコラーゲンおよび／またはコラーゲン産生の改善によって示され得る。
【００５４】
対象：ヒトおよび獣医学的対象、例えばネコ、イヌまたはウマを含むコンパニオンアニマルの両方を含むカテゴリーである生きた多細胞脊椎生物。皮膚の外見を改善するためのスキンケアレジメンまたは皮膚のケア方法を実施する対象は、そのような改善からの利益を享受し得る対象、例えば活性酸素種により引き起こされる組織損傷を埋め合わせするまたは加齢の兆候もしくは皮膚の老化に伴う他の状態を減少させることを望む対照である。
【００５５】
タンニン：タンパク質、アミノ酸およびアルカロイドに結合してこれらを沈殿させる天然ポリフェノール生分子。「タンニン」という用語は、本来、動物の皮膚を皮革になめすのに使用されたオーク由来の木材なめし剤の使用を表す。しかし、タンニンという用語は、植物、例えば赤ブドウ種子、種子および茎において見出される約500〜3,000超（没食子酸エステル）および最大約20,000（プロアントシアニジン）の範囲の分子量を有する大型のポリフェノール化合物に広く適用される。それらの化学組成に基づき、植物タンニンは、加水分解性タンニンおよび縮合タンニンまたはフラボノイドに分類される。加水分解性タンニンは、重合した単純なフェノール物質、例えば没食子酸のおよびそれらの二量体（二没食子酸、エラグ酸）のエステルである。加水分解性タンニンはさらに、加水分解後に没食子酸を生じるガロタンニン、および加水分解後にエラグ酸を放出するエラジタンニンに分類され得る。加水分解性タンニンとは対照的に、縮合タンニンは、加水分解により分解されない。逆に、酸性媒体中で熱にさらされると、それらは徐々に重合し、赤色の非晶質アントシアニン色素、またはフロバフェンと呼ばれる高分子量の不溶性黄褐色産物を形成する。
【００５６】
トナー：皮膚をきれいにし毛穴サイズを減少させるよう配合されたスキンケア製品。いくつかの態様において、トナーは、クレンザーの後かつセラムまたはモイスチャライザーの適用前に適用され得る。トナーは、低い粘性および油分より高い比率の水分を有し得る。
【００５７】
局所適用：局所的に適用される作用物質は、皮膚の特定の表面領域にのみ適用され、体全体に適用されない。特定の例において、組成物は、皮膚の、改善された効果が望まれる領域、例えば目の周囲の目尻領域に適用される。例えば、組成物は、顔の皮膚に局所適用され得る。皮膚への適用が意図されている局所組成物は、「皮膚用組成物」である。
【００５８】
限外ろ過：力（例えば、圧または濃度勾配）により半透過性膜を通じた分離を行うタイプの膜ろ過。限外ろ過膜は典型的に、膜の分子量カットオフ（MWCO）により特徴づけられる。高分子量の懸濁固形物および溶質は、膜滞留物に保持され、水および低分子量の溶質は、膜通過液として膜を通過する。限外ろ過プロセスには異なるタイプのモジュールが使用され得る。そのようなモジュールの例は、プラスチックまたは紙製チューブの内側に配置されたポリマー膜を使用するチューブ型要素；複数の中空ファイバーを含む中空ファイバー設計；平らな膜シートが中心の穴あきチューブの周囲に巻き付けられている薄いメッシュ状スペーサー材によって分離され、管状スチール製加圧容器ケースに収められているらせん巻きモジュール；ならびにろ液を通過させるメッシュ様部品によって分離された平らなプレート上に配置された膜を使用するプレート・フレーム組み立て品である。
【００５９】
単位用量：個々にまたは共同で所望の効果、例えば治療効果を生じるよう計算された既定量の活性物質を含む物理的に独立した単位。所望の効果または活性、例えば皮膚の外見の改善を提供するために、単一の単位用量または複数の単位用量が使用され得る。1つの例において、単位用量は、所望の量の抗酸化物質を含む。異なる例において、単位用量は、しわの深さ、しわの数、しわの長さ、しわの幅、皮膚の粗さ、皮膚のたるみ、毛穴サイズもしくは皮膚の色素過剰の量を減少させる；皮膚の滑らかさ、皮膚の輝きもしくは明るさ、皮膚の堅さ、皮膚の色合いの均等性を増加させる；またはそれらの任意の組わせの、皮膚の所望の量の薬剤を含む。別の例において、単位用量は、複数回分の既定用量の活性物質を含む。
【００６０】
II. スキンケアレジメンにおいて使用される組み合わせ
加齢ならびにROS、日光および大気汚染からのものを含む、皮膚に対する損傷を与える刺激への曝露の影響が知られているため、これらの有害な因子からの保護を提供し、皮膚の外見を改善する効果的な製品が求められている。本明細書に開示されるスキンケアレジメンおよび方法において使用される5つの要素は、適用したときに同時に皮膚の外見を効果的に改善する様々な成分を消費者に受け入れられる形式で組み合わせることによってこれらの目的を達成する。
【００６１】
本明細書に記載される組み合わせの5つの要素の各々は、低い縮合タンニン含量を有する脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含む。脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を用いて生成された局所組成物は、皮膚にとって有益なポリフェノールプロフィールを有するが、この組成物は、それらの低い縮合タンニン含量のために相対的に脱色されている。本明細書で使用される場合、「低い縮合タンニン含量」は、重量で約10％またはそれ未満の縮合タンニン含量を意味する。この組成物は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含む。この組成物は、皮膚の外見を改善する、例えばしわの深さ、長さ、幅もしくは数を減少させる、皮膚の粗さを減少させる、皮膚のたるみを減少させる、弾力性を増加させる、毛穴サイズを減少させる、皮膚の色素過剰を減少させる、皮膚の滑らかさを増加させる、皮膚の輝きを増加させる、皮膚の明るさを増加させる、皮膚の堅さを増加させる、皮膚の色合いを均等にするおよび／または皮膚の着色を均等にする5要素システム（組み合わせ）で使用される。これらの組成物は、順に適用される。
【００６２】
A. 脱色マスカダインポマース溶媒抽出物
本明細書に開示される組み合わせおよび方法において使用される組成物は、脱色されていないマスカダインポマース抽出物と比較して低いレベルの縮合タンニン含量を有する脱色マスカダインポマース抽出物を含む。タンニンは、多くのタイプの植物に広く分布している。タンニンは、葉、芽、種子、根および茎組織で見出され得る。タンニンは、単子葉植物（Wikipediaによれば、44科）および双子葉植物（Wikipediaによれば、180科）で見出され、かつ裸子植物および被子植物で見出される。以下の双子葉植物のすべての種がタンニンを含む：カエデ科（Aceraceae）、マタタビ科（Actinidiaceae）、ウルシ科（Anacardiaceae）、ベニノキ科（Bixaceae）、カンラン科（Burseraceae）、シクンシ科（Combretaceae）、フタバガキ科（Dipterocarpaceae）、ツツジ科（Ericaceae）、スグリ科（Grossulariaceae）およびヤマモモ科（Myricaceae）。イバラモ科（Najadaceae）およびガマ科（Typhaceae）（単子葉植物）のすべての種も、タンニンを含む。縮合タンニン（プロアントシアニジン、ポリフラボノイドタンニン、カテコール型タンニン、ピロカテコール型タンニン、非加水分解性タンニンまたはフラボランを含む）は、シリブカガシ（Ltihcarpus glaber）、サクラ種（Prunus sp）、アカケブラチョ（Schinopsis lorentzil）、モリシマアカシア（Acacia mollissima）、ヨーロッパブドウ（Vitis vinifera）およびコミフォラ・アンギオエンシス（Commiphora angioensis）等の植物種で見出される。マツ樹皮およびトウヒ樹皮は、縮合タンニンを含む。維管束植物（Vascular plants）（例えば、維管束植物（Tracheophytes）、維管束植物（vascular plants））もまた、縮合タンニンを含む。脱色された植物抽出物は、縮合タンニンを含む任意のこれらの植物の脱色されていない処理前抽出物と比較して低い縮合タンニン含量を有する。
【００６３】
いくつかの態様において、植物抽出物は、ブドウポマース抽出物、例えば、非限定的に、縮合タンニンを含むマスカダイン（ビティス・ロツンディフォリア）ブドウポマース抽出物である。いくつかの非限定的な例において、植物抽出物は、縮合タンニンを含む赤ブドウポマース抽出物である。特定の態様において、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、（マスカダインブドウに特有の）エラグ酸の溶解度が向上したブロンズおよび紫マスカダインブドウの組み合わされた抽出物である液体マスカダインポマース抽出物から生成される。本明細書に開示される任意のプロセスによって得られる組み合わされたマスカダインブドウポマース処理前抽出物は、抽出物に暗色を付与するレベルの縮合タンニンを有する。
【００６４】
PCT公開番号WO 2010/014870、PCT公開番号WO 2010/014873、米国特許第8,568,804号、米国特許第9,132,162号および米国特許第9,173,916号（これらの5つすべての文献もまた、参照により本明細書に組み入れられる）の出願人の開示の中で議論されているように、エラグ酸溶解度が改善されたマスカダイン抽出物は、ブロンズおよび紫マスカダインポマース抽出物を組み合わせることによって取得され得る。混合抽出物を生成する様々な方法、例えば、紫マスカダインポマース抽出物に対するブロンズマスカダインポマース抽出物の比が約0.1〜約10（重量対重量）、例えば約0.3〜約3（重量対重量）の範囲となるようブロンズマスカダインポマース抽出物と紫マスカダインポマース抽出物を混合するもの、が開示されている。特定の例において、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、そのような組み合わされた処理前抽出物から調製される。
【００６５】
組み合わされた処理前抽出物は、ブロンズおよび紫マスカダインブドウの個別抽出およびその後の抽出物の混合により、または所望の比で組み合わされたブロンズおよび紫マスカダインブドウの同時抽出により生成され得る。開示される例において、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、処理前の組み合わされた液体マスカダインポマースの水性抽出物である。
【００６６】
PCT公開番号WO 2010/014870、PCT公開番号WO 2010/01487、米国特許第8,568,804号、米国特許第9,132,162号および米国特許第9,173,916号は、処理前マスカダインポマース抽出組成物が、改善された抗酸化活性を有することを開示している。脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を含む組成物を製造する方法は、少なくとも約2％のポリフェノール含量を有するマスカダイン（ビティス・ロツンディフォリア）ポマース抽出物と少なくとも約5％の最低純度のマスカダイン以外の供給源由来のトランス・レスベラトロールを、マスカダインポリフェノール対トランス・レスベラトロールの比が約0.1/1〜約10/1（重量対重量）の範囲となるよう組み合わせる工程を含む。脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を含む組成物を製造する方法は、少なくとも約2％のポリフェノール含量を有するマスカダイン（ビティス・ロツンディフォリア）ポマース抽出物と少なくとも約5％の最低純度のマスカダイン以外の供給源由来のトランス・レスベラトロールを、マスカダインポマース抽出物対トランス・レスベラトロールの比が約0.2/1〜約50/1（重量対重量）、例えば、約20/1〜約50/1（重量対重量）、例えば約18対約1（重量対重量）を含む、約5/1〜約50/1（重量対重量）の範囲となるよう組み合わせ、それによって抗酸化活性を有するマスカダインポマース抽出物およびトランス・レスベラトロールの混合物を生成する工程を含む。
【００６７】
いくつかの態様において、処理前液体抽出物における紫マスカダインポマース抽出物に対するブロンズマスカダインポマース抽出物の比は、約0.1〜約10、例えば約0.3〜約3の範囲である。例えば、ブロンズマスカダインポマース抽出物対紫マスカダインポマース抽出物の比は、約2.75対約1（重量対重量）、約2.5対約1（重量対重量）、約2.25対約1（重量対重量）、約2対約1（重量対重量）、約1.5対約1（重量対重量）または約1対約1（重量対重量）である。他の例において、その比は、約10対約1、約7.5対約1、または約5対約1である。本明細書で使用される場合、「約」という用語は、±0.5と定義される。特定の例において、ブロンズマスカダインポマース抽出物対紫マスカダインポマース抽出物の比は、約2.25対約1（重量対重量）である。
【００６８】
特定の態様において、組み合わされた処理前マスカダイン（ビティス・ロツンディフォリア）ポマース液体抽出物は、少なくとも約2％のポリフェノール含量を有する。例えば、ポリフェノール含量は、少なくとも約3％、少なくとも約3.5％、少なくとも約4％、少なくとも約4.5％、少なくとも約5％、少なくとも約6％、少なくとも約7％、少なくとも約8％、少なくとも約10％、少なくとも約12％または少なくとも約14％である。特定の例において、組み合わされた処理前マスカダイン（ビティス・ロツンディフォリア）ポマース液体抽出物は、約4％のポリフェノール含量を有する。
【００６９】
いくつかの態様において、開示される組み合わされた処理前液体マスカダインポマース抽出物は、液体中約20％〜約50％の固形物、例えば少なくとも約25％、少なくとも約30％、少なくとも約35％、少なくとも約37％、少なくとも約40％、少なくとも約42％、少なくとも約44％、少なくとも約46％または少なくとも約48％の固形物を含む。特定の態様において、組み合わされた処理前抽出物は、液体中約40％の固形物を含む。
【００７０】
液体ポマース処理前抽出物は、任意の抽出方法、例えば加圧下での圧搾または溶媒を用いた抽出によって取得され得る。特定の例は、例えばアルコール、水（例えば熱水）またはアルコールと水の組み合わせを用いた溶媒抽出である。
【００７１】
抽出物はさらに、抽出された糖を除去するために発酵され得る。1つの例において、発酵は、ブロンズマスカダインポマースおよび紫マスカダインポマースを抽出した後であるが、ブロンズマスカダインポマース抽出物と紫マスカダインポマース抽出物を組み合わせて液体マスカダインポマース抽出物を生成する前に行われる。他の例において、発酵は、ブロンズマスカダインポマース抽出物と紫マスカダインポマース抽出物を所望の抽出後比（例えば、非限定的に、約2：25〜約1のブロンズ対紫比）で組み合わせた後に行われる。
【００７２】
発酵は、当業者に公知の任意の方法によって行われ得る。例えば、酵母および酵母栄養分がポマースに添加され、そして残留する糖分がエタノールに変換されるまで発酵が継続され得る。1つの例において、1倍（未濃縮）抽出物1000ガロンあたり2ポンドの酵母が添加され；発酵は典型的に3日後に完了する。他の例において、酵母の量および／または株ならびに発酵の期間および温度は、当業者に公知の個々の方法にしたがい変更され得る。いくつかの例において、ポマース抽出物中の残留物を除去するおよび／もしくは沈殿させるためまたは抽出収率を改善するために酵素が使用される。そのような酵素の例は、Scott Laboratories等の販売元から市販されているペクチナーゼまたはアスペルギルス・ニガー（Aspergillus niger）由来の酵素ブレンドを含む。これらの酵素は、発酵前または発酵中にポマース抽出物に添加され得る。
【００７３】
いくつかの態様において、ブロンズマスカダインポマース抽出物および紫マスカダインポマース抽出物は、発酵前および／または後にろ過される。ろ過は、当業者に公知の一般的方法にしたがい行われ得る。特定の例において、抽出物は、適当なメッシュサイズのふるい、例えばUSPメッシュ（典型的に120メッシュ）または同等の布製フィルター（例えば、Millipore Corporationから市販されているフィルター）を通じてろ過される。
【００７４】
特定の態様において、液体マスカダインポマース抽出物の調製はさらに、各抽出物が液体中約20％〜約50％の固形物、例えば少なくとも約25％、少なくとも約30％、少なくとも約35％、少なくとも約37％、少なくとも約40％、少なくとも約42％、少なくとも約44％、少なくとも約46％または少なくとも約48％の固形物を含むよう、ブロンズマスカダインポマース抽出物および紫マスカダインポマース抽出物を濃縮する工程を含む。特定の態様において、抽出物は、各抽出物が液体中約40％の固形物を含むよう濃縮される。本明細書に開示されるサンプル濃縮方法を含む、一般的に公知となっているサンプル濃縮方法が、ブロンズおよび紫抽出物を濃縮するために使用され得る。
【００７５】
脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を調製する上記方法の例のいずれにおいても、ホール紫ブドウを紫ポマースと置き換えることができる。紫マスカダインポマース抽出物は、（a）ホール紫マスカダインブドウの抽出物；（b）ホールブドウ以外由来の紫マスカダインポマースの抽出物；または（c）（a）および（b）の混合物を含み得る。ホール紫ブドウは、ブドウポマース以外由来のアントシアニンの供給源であるブドウ果汁を含み、そしてホールブドウから溶媒抽出されたとき、これらのアントシアニンは、ブロンズおよび紫マスカダインブドウ抽出物の混合物におけるエラグ酸の溶解度を驚くほど向上させることが見出されている。しかし、アントシアニンの追加の供給源はまた、紫マスカダインブドウ以外、例えばブルーベリー、ブラックベリーまたはラズベリーの有色果実または有色果実の副産物よっても提供され得る。いくつかの例において、アントシアニンは、果実加工工程の生産物、例えば果汁濃縮物、または果実加工工程の副産物、例えば果実ピューレ加工工程から分離される果皮由来である。
【００７６】
脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、処理前抽出物を脱色プロセスに供することによって処理前抽出物から調製され得る。マスカダインブドウポマース抽出物のタンニン含量を削減する脱色プロセスの例が、図21に示されている。処理前物質は、マスカダインポマース抽出液濃縮物1である。この例において、濃縮物1は、米国特許第8,512,771号および同第9,173,916号に記載されるように約40〜約45％固形物である。濃縮物1は、純水を添加することによって約10％未満固形物になるよう希釈され、約8％固形物溶液2が生成される（固形物率は約2〜約10％の範囲であり得る）。溶液2は、約130〜約135゜Fに加熱され、物質を浄化するために精密ろ過装置3を通される。精密ろ過プロセスは、処理前物質が非常に低レベルの固形物（約2〜約5％）となるまで希釈されている場合により効果的であり、加熱もまたこのプロセスを助ける。この具体例において、精密ろ過装置3は、その後の限外ろ過処理4のための準備として溶液から微生物および懸濁粒子を除去する0.45ミクロン孔サイズおよび200,000ダルトン（または200 kDa）のNMWCOの機械的フィルターである。浄化された抽出物は、第1段階の限外ろ過工程を開始する前に、貯蔵タンク中でただちに＜50゜Fまで冷却される。
【００７７】
冷却および浄化された抽出物は、次に、1000ダルトン（または1 kDa）の標準的な名目分子量カットオフの限外ろ過膜を用いる限外ろ過処理4に供され、5で膜通過液（画分A）が得られる。画分Aは、約1000未満の分子量を有する化合物を含み、主として有機酸、糖およびミネラルを含むが、驚くべきことに約1％未満のフェノール化合物も含む。これらのフェノール化合物は、微量のフェノール酸およびフラボノイド、例えば没食子酸およびケルセチンを含む。最大約1,000ダルトンの分子量を有する分子が限外ろ過膜を通過することができるが、この画分は、おそらくフェノール酸と処理前物質中に含まれる他の分子、おそらく繊維との間の物理化学的相互作用により、極少量のフェノール酸成分を含むことが予想外に見いだされた。この予想外の発見は、最低約500ダルトンから最大約5000ダルトン（または5 kDa）の標準的な名目分子量カットオフの限外ろ過膜を使用して得ることができる。画分Aは、他の製品において「マスカダイン」型フレーバー要素として利用され得るが、この物質は、本明細書に記載される局所組成物に使用される脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を調製するプロセスにおいては廃棄される。
【００７８】
低分子量限外ろ過（上記）から残存する膜滞留物（限外ろ過膜を通過しない物質）は、およそ2％固形物濃度になるよう純水で再構成され、30 kDaカットオフ限外ろ過膜を用いた第2の限外ろ過プロセス6に供される。得られる膜滞留物7（画分C）は廃棄され、脱色マスカダインポマース抽出物を含む膜通過液8（画分B）は、脱色局所組成物へのさらなる処理のために保持される。画分Cは主に、重合した縮合タンニン、タンパク質および繊維を含む。これに対して、画分Bは、ポリフェノールが濃縮されており（約9〜約10％乾燥重量）、糖類が少なく（乾燥重量で約4％未満）、重合性縮合タンニン含量が大きく減少している（最低でも初期縮合タンニン含量の約70％の減少が起こる）。最大約30,000ダルトンの分子量を有する分子は限外ろ過膜を通過することができるので、重合性縮合タンニンの少なくとも約70％が、おそらく物理化学的相互作用により、画分Cに残存することが予想外に見いだされた。この予想外の発見は、最低約25,000ダルトン（25 kDa）から最大約100,000ダルトン（または100 kDa）の標準的な名目分子量カットオフの限外ろ過膜の使用によるものであり得る。
【００７９】
画分Bはまた、繊維（約1.0％）、タンパク質（約7.8％）、脂肪（約0.1％）および有機酸（約16.0％）を含む。重合性縮合タンニンが濃縮された画分Cは、様々な製品において抗酸化物質の供給源として利用され得るが、この物質は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の調製プロセスにおいては廃棄される。脱色プロセスにおけるこの時点で、マスカダイン果実抽出物である画分Bは、最小限の糖含量（乾燥重量で約4％未満）を有し、重合性縮合タンニンが大きく減少している。画分Bは、強力なポリフェノールを含むが、縮合タンニンの除去およびその最小限の糖含量により茶色への変色の可能性がほとんどまたは全くないという理由から、スキンケア製品において有用である。局所的使用のための様々な配合物に導入されたとき、淡い茶色は検出されない。
【００８０】
膜通過液8（画分B）は、スキンケア製品において望ましくない臭気成分（バターのような／酵母のような臭い）を除去するために、重量対重量基準で約0.3％の活性炭でそれを処理することによってさらに処理される。活性炭を用いた処理後、画分Bは、すべての残留する活性炭を除去するために最終精密ろ過プロセス9に供される。精密ろ過後、溶液は、乾燥後の流動性粉末化を促進するための酸化マグネシウムを用いた無機化の前に約30〜約40％固形物に濃縮される10。酸化マグネシウムは、抽出物中に存在するすべての有機酸のマグネシウム塩を形成させる無機化プロセスを完全に促進するために乾燥重量基準で約7.0％の投入量で濃縮物に添加される。最後に、生成物は、均一な粒子サイズを提供する乾燥／粉末化11に供される。この粉末化段階で、生成物のケーキングを防ぐために二酸化ケイ素が添加される。
【００８１】
処理前物質と比較して、画分Bは、上記プロセスに供したとき、質量が約75〜約80％減少するが、ポリフェノール含量は約35〜約40％しか減少しない。したがって、同等質量基準で画分Bを処理前物質と比較すると、画分Bにおいて生じる非タンニンポリフェノール含量の減少は、わずか約18〜約20％である。したがって、画分Bにおけるポリフェノールの主な損失は、重合性縮合タンニンの化学クラスに起因するものであり、他のポリフェノール化学クラスの損失は実質的に検出されなかった（図23のクロマトグラフを参照のこと）。したがって、画分Bは、平均で、約9％のマスカダインポリフェノール（主に非タンニン）を含み、処理前物質は、平均で、約14％の、タンニンおよび非タンニンの両方のマスカダインポリフェノールからなるポリフェノールを含む。表1〜3は、処理前物質 対 上記プロセスにより生成される脱色抽出物の、栄養素およびポリフェノール含量の比較を示し、図23は、クロマトグラフ比較を提供する。
【００８２】
表1は、処理前物質および脱色抽出物の（乾燥抽出物の％で表される）栄養素プロフィールを比較している。栄養素プロフィールは非常に似ているが、処理前物質の質量減少により、タンパク質および単純糖等の一部栄養素クラスの濃縮がみられる。とはいうものの、脱色抽出物の最終単純糖（単糖）含量は、非常に低く（約4％未満〜約5％未満）、したがって局所適用される製品における使用に適している。
【００８３】
（表１）処理前および脱色マスカダイン抽出物の栄養素プロフィール
2020519642.tif 000003
【００８４】
表2は、乾燥重量基準で、各抽出物の総ポリフェノール含量を示しており、ポリフェノール含量を、縮合タンニン含量および縮合タンニン以外のポリフェノールの含量にさらに分類している。表2に示されるように、総ポリフェノール含量は脱色抽出物において約35％低い（90対140 mg/g乾燥重量）が、脱色抽出物の縮合タンニン含量は、処理前抽出物で見いだされるものよりも少なくとも約70％低い（6対21 mg/g乾燥重量）。したがって、ポリフェノール損失の大部分（およそ80％）は、縮合タンニンの除去に起因するものであり、これにより上記プロセスを用いた場合の他のポリフェノールに対する縮合タンニンの優先的除去が確認される。
【００８５】
（表２）処理前および脱色マスカダイン抽出物のポリフェノール含量
2020519642.tif 000004
*没食子酸当量アッセイ（UV/VISを通じた総ポリフェノール） - UV/VISを通じた縮合タンニンアッセイ = 非縮合タンニン含量
【００８６】
図23のクロマトグラフに示されるように、かつ主要／特徴的なマスカダインポリフェノールがプロファイルされている表3でさらに示されているように、脱色抽出物は、処理前物質で見いだされるすべの主要ポリフェノール（表4に列挙されている）（フェノール酸、フラボノイド、アントシアニンおよび加水分解性タンニン）を保持している。分析法を用いて、処理前抽出物中の総ポリフェノールのおよそ30％（140 mg中43.84 mg）が、単一のフェノールクラスおよび／または化合物と測定され、これらを脱色抽出物における対応するクラス／化合物と比較した。
【００８７】
表3に示されるように、重要な（およびいくつかの例においては特有の）マスカダインポリフェノールクラス、例えばフェノール酸、エラグ酸、没食子酸、エラジタンニン、およびガロタンニンが、脱色抽出物において検出可能であり、いくつかの例において、選択された化合物、例えば没食子酸の割合が増加していた。したがって、2つの抽出物間のポリフェノール含量の主たる相違は、縮合タンニン含量の約70％減少である。まとめると、縮合タンニン含量が減少し、それに加えて単純糖が低レベルであるため、脱色画分Bは、典型的使用量の局所用配合物に添加される場合にスキンケア用途に適する。これらの配合物は、スキンケアに使用されるものであり、保管される場合も、製品が時間と共に茶色に変化するまたは暗色化することがない点でより安定的である。
【００８８】
（表３）処理前および脱色マスカダイン抽出物のポリフェノールプロフィール
2020519642.tif 000005
【００８９】
（表４）主なマスカダインブドウポリフェノール
2020519642.tif 000006
【００９０】
縮合タンニンのレベルを選択的に低下させる上記の抽出方法は、有利なことに、高レベルの縮合タンニンの存在が原因となる欠点を回避しつつ、皮膚に有益な他のポリフェノールのレベルを保存または向上させる。
【００９１】
特定の態様において、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、ブロンズおよび紫マスカダインポマースの液体抽出物の組み合わせである。脱色マスカダインポマース溶媒抽出物のいくつかの態様において、紫マスカダインポマース抽出物に対するブロンズマスカダインポマース抽出物の比は、約0.1〜約10（重量対重量）、例えば約0.3〜約3（重量対重量）の範囲である。
【００９２】
いくつかの例において、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物のフェノール成分は、約2〜約3％のエラグ酸および約30〜約31％の没食子酸、例えば、約2〜約3％のエラグ酸、約3〜約4％のエラグ酸グリコシド、約30〜約31％の没食子酸、約2〜約3％のケルセチン、約10〜約11％のガロタンニン、約7〜約8％のエラジタンニン、約29〜約30％のプロアントシアニジン、約4〜約5％のアントシアニン、約2〜約3％のカテキンおよび約6〜約7％のフェノール酸を含む。
【００９３】
脱色マスカダインポマース溶媒抽出物に使用される紫マスカダインポマース抽出物は、ホール紫（ビティス・ロツンディフォリア）マスカダインブドウの抽出物、ホールブドウ以外由来の紫マスカダインポマースの抽出物、またはその両方からなり得る。
【００９４】
特定の態様において、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、抽出物の重量で、約7％〜約10％のポリフェノール、例えば約9％〜約10％のポリフェノール、および約5％未満の単糖類、例えば約4％未満の単糖類を含み得る。特定の例において、脱色マスカダイン（ビティス・ロツンディフォリア）ポマース溶媒抽出物は、脱色抽出物の重量で、約9％〜約10％のポリフェノール含量を有し、約4％未満の単糖類を含む。
【００９５】
いくつかの非限定的な例において、縮合タンニンは、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の総ポリフェノール含量の約10％未満である。さらなる非限定的な例において、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物中の脱色マスカダイン（ビティス・ロツンディフォリア）ポマース溶媒抽出物の総ポリフェノールは、少なくとも約85％、例えば少なくとも約90％の、縮合タンニン以外のポリフェノールからなる。
【００９６】
脱色マスカダイン（ビティス・ロツンディフォリア）ポマース溶媒抽出物はさらに、ブドウポマース由来の天然成分を含み得る。例えば、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、抽出物の重量で、約0.5％〜約5％の繊維、約7％〜約14％のタンパク質、約0.5％〜約3％の脂肪および約15％〜約20％の有機酸を含み得る。特定の例において、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、各々抽出物の重量による百分率で、約0.5％〜約2％または約1％〜約2％の繊維、約7％〜約9％または約7％〜約8％のタンパク質、約0.05％〜約1％または約0.5％〜約1.5％の脂肪および約15％〜約17％または約15.5％〜約16.5％の有機酸を含む。
【００９７】
B. さらなる成分
ベータ・グルカンは、ベータ-D-グルコースを含む天然多糖類であり、特定の穀物、酵母、細菌および真菌の細胞壁において見出される。いくつかの例において、ベータ・グルカンは、穀物から抽出される。特定の例において、ベータ・グルカンは、エンバグであるアベナ・サチバ（Avena sativa）を含むオーツ麦から抽出される。特定の例において、ベータ・グルカンは、約0.5〜約1.0 x 106 Daの分子量を有する。ベータ・グルカンは、グルコースの多糖類であり得、1，4および1，3の両方のベータグリコシド結合を含み得る。
【００９８】
いくつかの態様において、ベータ・グルカンは、皮膚の平滑化、皮膚の保湿、線維芽細胞の成長および／またはコラーゲンの合成の刺激、瘢痕の変色の減少、ならびに免疫防御の刺激を含むがこれらに限定されない、健康上の利益を提供する。
【００９９】
ブドウ種子抽出物は、ホールブドウ種子から得られ、有益な食事成分を含む。ブドウ種子は、ワイン醸造所およびブドウジュース工場の廃棄物である。これらの種子は、繊維、脂質、タンパク質、炭水化物および通常、品種に依存して約4〜約8％のポリフェノール（乾燥重量）を含む。ビティス・ビニフェラブドウ種子抽出物を含む市販のブドウ種子抽出物は、しばしば、乾燥重量の百分率で約70〜約95％のポリフェノールを提供するよう標準化される。
【０１００】
本明細書に開示される組成物に含まれるブドウ種子抽出物は、ビティス・ビニフェラブドウ種子抽出物であり得る。いくつかの例において、ブドウ種子抽出物は、約70％未満の総ポリフェノール含量を有し、いくつかの例において、ポリフェノール含量は約50％未満である。特定の例において、ブドウ種子抽出物は、約38〜約50％のポリフェノール、約9〜約12％の繊維、約1〜約2％のタンパク質、約25〜約30％の糖類および約1％未満の脂質を含む。
【０１０１】
態様において、組成物は、組成物の総重量に基づく百分率で、約0.001％〜約1.0％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、例えば約0.01％〜約0.5％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、または約0.025％〜約0.25％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を含む。特定の例において、組成物は、局所組成物の総重量に基づく百分率で、約0.000001％〜約1.0％のベータ・グルカン、例えば約0.000005％〜約0.1％のベータ・グルカン、または約0.00005％〜約0.05％のベータ・グルカンを含む。いくつかの例において、組成物は、局所組成物の総重量に基づく百分率で、約0.0001％〜約1.0％のベータ・グルカン、例えば約0.0001％〜約0.1％、約0.0005％〜約0.1％のベータ・グルカン、または約0.00005％〜約0.05％のベータ・グルカンを含む。さらなる例において、組成物は、組成物の総重量に基づく百分率で、約0.00001％〜約0.1％のブドウ種子抽出物、例えば約0.0001％〜約0.05％のブドウ種子抽出物、または約0.0002％〜約0.01％のブドウ種子抽出物を含む。
【０１０２】
この組成物の態様は、組成物の重量に基づく百分率で、約0.001％〜約1.0％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、0.000001％〜約1.0％のベータ・グルカン、および約0.00001％〜約0.1％のブドウ種子抽出物を含み得る。例えば、組成物は、組成物の重量で、約0.01％〜約0.5％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.000005％〜約0.1％のベータ・グルカン、および約0.0001％〜約0.05％のブドウ種子抽出物を含み得る。さらなる例において、組成物は、組成物の重量で、約0.025％〜約0.25％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.00005％〜約0.05％のベータ・グルカン、および約0.0002％〜約0.01％のブドウ種子抽出物を含む。
【０１０３】
開示される組成物は、さらなる成分を含み得る。ビタミン、例えばビタミンEは、局所適用後に皮膚をより柔らかくかつより滑らかにし、日光および他の環境汚染物質のダメージ効果の一部を相殺し得ることが示されている。パルミチン酸ビタミンAは、より滑らかな皮膚を形成し、細胞のターンオーバーのプロセスの強化を助けることが示されている。この強化は、より若く見える皮膚細胞をその表面に移動させることにより、皮膚の最も外側の死んだ層の皮膚を取り除く。抗酸化活性を有することが知られている成分、例えばビタミンCおよびスーパーオキシドジスムターゼまたは皮膚を若返らせる成分と考えられるもの、例えばミヤコグサ抽出物およびチョウセンゴミシ果実抽出物もまた、本明細書に開示される任意の組成物に含まれ得る。
【０１０４】
本明細書に開示される組成物はまた、ビタミンA（レチノールおよびそのアナログ、例えばパルミチン酸レチニル）ならびに／またはビタミンE（トコフェロールおよびそのアナログ、例えば酢酸トコフェリル）を含み得る。特定の例において、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含む組成物はまた、有効量のビタミンA、ビタミンEまたはビタミンAおよびEの両方を含む。特定の開示される態様において、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含む組成物はさらに、皮膚に適用されたときに皮膚の外見を改善するのに十分な量で存在するパンテノール、ビタミンC（およびそのアナログ、例えばリン酸アスコルビルマグネシウム、パルミチン酸アスコルビル等）および／またはスーパーオキシドジスムターゼを含む。
【０１０５】
いくつかの態様において、組成物は、組成物の重量で、約0.0001％〜約0.5％のビタミンA、例えば約0.0005％〜約0.01％；約0.00001〜約0.1％のビタミンC、例えば約0.0001％〜約0.001％；約0.001％〜約1.0％のビタミンE、例えば約0.01％〜約0.1％；約0.0001％〜約1.0％のパンテノール、例えば約0.0005％〜約0.05％；約0.00000001％〜約0.1％のスーパーオキシドジスムターゼ、例えば約0.0000001％〜約0.001％またはそれらの任意の組み合わせを含む。ビタミンC、Aおよび／またはEを含む組成物の非限定的な例において、ビタミンCはリン酸アスコルビルマグネシウムの形態であり得、ビタミンAはパルミチン酸ビタミンAの形態であり得、ビタミンEは酢酸ビタミンEの形態であり得る。
【０１０６】
ミヤコグサおよび／またはチョウセンゴミシ果実の抽出物を含む組成物を用いて生成される要素の非限定的な例において、組成物は、その組成物の重量で、約0.01％〜約5.0％のミヤコグサ抽出物、例えば約0.05％〜約0.5％を含む。組成物は、その組成物の重量で、約0.001％〜約5.0％のチョウセンゴミシ果実抽出物、例えば約0.01％または約0.3％を含み得る。1つの例において、組成物は、その組成物の重量で、約0.5％のミヤコグサ抽出物および約0.01％のチョウセンゴミシ果実抽出物を含む。さらなる例において、組成物は、その組成物の重量で、約0.05％のミヤコグサ抽出物および約0.3％のチョウセンゴミシ果実抽出物を含む。
【０１０７】
特定の例において、パンテノール、ビタミンC、AもしくはE、スーパーオキシドジスムターゼ、ミヤコグサおよび／もしくはチョウセンゴミシ果実の抽出物、またはパンテノール、ビタミンC、AおよびE、スーパーオキシドジスムターゼ、ミヤコグサ抽出物およびチョウセンゴミシ果実抽出物の任意の組み合わせを含む組成物は、皮膚に局所適用されたときに、皮膚の外見を改善し得る。
【０１０８】
The CTFA International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook（2004および2008）は、本明細書に開示される組成物および方法において使用され得る様々な化粧品成分を開示している。任意のこれらの化粧品成分が、本明細書に開示される、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を含む任意の組成物に含まれ得る。
【０１０９】
開示される要素は、香料（人工および天然）、染料および色成分（例えば、Blue 1、Blue 1 Lake、Red 40、二酸化チタン、D&C青4号、D&C緑5号、D&Cオレンジ4号、D&C赤17号、D&C赤33号、D&C紫2号、D&C黄10号およびD&C黄11号、ならびに酸化鉄）、吸着剤、滑沢剤、溶媒、モイスチャライザー（例えば、軟化剤、被膜形成剤、および皮膚の天然保湿機構に影響する薬剤を含む）、撥水剤、UV吸収剤（物理的および化学的な吸収剤、例えばアボベンゾン、二酸化チタン、酸化亜鉛等）、エッセンシャルオイル、微量金属（例えば、亜鉛、カルシウムおよびセレニウム）、抗刺激剤（例えば、ステロイドおよび非ステロイド抗炎症剤）、植物抽出物（例えば、アロエベラ、カモミール、キュウリ抽出物、イチョウ（ginkgo biloba）、朝鮮人参およびローズマリー）、抗微生物剤、抗酸化物質（例えば、トコフェロール）、キレート剤（例えば、フィチン酸ナトリウムおよびエチレンジアミンジコハク酸三ナトリウム）、防腐剤（例えば、フェノキシエタノール、カプリリルグリコールおよびクロルフェネシン）、pH調整剤（例えば、水酸化ナトリウムおよびクエン酸）、吸収剤（例えば、オクテニルコハク酸トウモロコシデンプンアルミニウム、カオリン、トウモロコシデンプン、カラスムギデンプン、シクロデキストリンおよびゼオライト）、皮膚美白（bleaching）および美化（lightening）剤（例えば、ヒドロキノンおよび乳酸ナイアシンアミド）、加湿剤（humectant）（例えば、グリセロール、ソルビトール、尿素およびマンニトール）、角質除去剤（exfoliant）、防水剤（例えば、ステアリン酸水酸化マグネシウム／アルミニウム）、皮膚コンディショニング剤（例えば、アロエ抽出物、アラントイン、ビサボロール、セラミド、ジメチコン、ヒアルロン酸およびグリチルリチン酸ジカリウム）を含み得る。これらの成分のいくつかの非限定的な例が、以下に提供される。
【０１１０】
UV吸収剤または日焼け止め剤：日焼け止め剤は、本明細書に開示されるモイスチャライザーに含まれ得る。日焼け止め剤は、単独では、紫外線照射の有害な作用から皮膚を完全に保護することができない場合がある。本明細書に記載される組成物を用いて製造される任意のスキンケア要素は、日焼け止め剤および／またはUV吸収剤をさらに含み得る。いくつかの態様において、5つの要素の少なくとも1つは、日焼け止め剤、例えばSPF約15〜50の日焼け止め剤をさらに含む。1つの態様において、昼用モイスチャライザーは、約20、約25、約30、約35、約40、約45または約50のSPFを有し得る日焼け止め剤をさらに含む。
【０１１１】
本発明の組成物と組み合わせて使用され得るUV吸収剤は、化学的および物理的な日焼け防止剤を含む。使用され得る化学的日焼け防止剤の非限定的な例は、サリチレート（サリチル酸ホモメチル、サリチル酸ベンジル、サリチル酸グリコール、サリチル酸イソプロピルベンジル等）、アントラニレート、ウロカニン酸エチル、ホモサレート、ジベンゾイルメタン誘導体（例えば、アボベンゾン）、オクトクリレン等を含む。物理的日焼け防止剤の非限定的な例は、金属酸化物（例えば、二酸化チタンおよび酸化亜鉛）を含む。
【０１１２】
保湿剤：保湿剤は、本明細書に開示されるクレンザー、トナー、セラムまたはモイスチャライザーに含まれ得る。本明細書に記載される任意の組成物および要素と共に使用され得る保湿剤の非限定的な例は、アミノ酸、コンドロイチン硫酸、ジグリセリン、エリスリトール、フルクトース、グルコース、グリセリン、グリセロールポリマー、グリコール、1,2,6-ヘキサントリオール、ハチミツ、ヒアルロン酸、水添ハチミツ、加水分解水添デンプン、イノシトール、ラクチトール、マルチトール、マルトース、マンニトール、天然保湿因子、プロパンジオール、ポリグリセロールソルビトール、ピロリドンカルボン酸の塩、PCAカリウム、グルクロン酸ナトリウム、PCAナトリウム、ソルビトール、スクロース、トレハロース、尿素およびキシリトールを含む。
【０１１３】
保湿剤の他の例は、アセチル化ラノリン、アセチル化ラノリンアルコール、アラニン、藻類抽出物、アロエ・バーバデンシス（aloe barbadensis）、アロエ・バーバデンシス抽出物、アロエ・バーバデンシスジェル、ウスベニタチアオイ（althea officinalis）抽出物、アプリコット（プルナス・アーメニアカ（prunus armeniaca））核油、アルギニン、アスパラギン酸アルギニン、アルニカ・モンタナ（arnica montana）抽出物、アスパラギン酸、アボガド（パーセア・グラチッシマ（persea gratissima））油、バリアスフィンゴ脂質、ブチルアルコール、蜜蝋、ベヘニルアルコール、ベータ・シトステロール、カバノキ（ヨーロッパダケカンバ（betula alba））樹皮抽出物、ルリジサ（ボラゴ・オッフィシナリス（borago officinalis））抽出物、ブッチャーブルーム（ナギイカダ（ruscus aculeatus））抽出物、ブチレングリコール、キンセンカ（calendula officinalis）抽出物、キンセンカ油、キャンデリラ（ユーフォルビア・セリフェラ（euphorbia cerifera））蝋、キャノーラ油、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、カルダモン（ショウヅク（elettaria cardamonum））油、カルナウバ（ブラジルロウヤシ（copernicia cerifera））蝋、ニンジン（ノラニンジン（daucus carota sativa））油、ヒマシ（トウゴマ（ricinus communis））油、セラミド、セレシン、酢酸セチル、オクタン酸セチル、パルミチン酸セチル、カモミール（ローマンカモミール（anthemis nobilis））油、コレステロール、コレステロールエステル、ヒドロキシステアリン酸コレステリル、クエン酸、クラリー（クラリセージ（salvia sclarea））油、ココア（テオブロマ・カカオ（theobroma cacao））バター、（カプリル／カプリン酸）ヤシアルキル、ココナツ（ココヤシ（cocos nucifera））油、コラーゲン、コラーゲンアミノ酸、トウモロコシ（ジー・メイズ（zea mays））油、脂肪酸、デシルグルコース、オレイン酸デシル、ジメチコンコポリオール、ジメチコノール、アジピン酸ジオクチル、コハク酸ジオクチル、ヘキサカプリル酸／ヘキサカプリン酸ジペンタエリスリチル、DNA、エリスリトール、エトキシジグリコール、リノール酸エチル、ユーカリ・グロブルス（eucalyptus globulus）油、マツヨイグサ（メマツヨイグサ（oenothera biennis））油、脂肪酸、ゼラニウム・マキュラタム（geranium maculatum）油、グルコサミン、グルタミン酸グルコース、グルタミン酸、グリセリン、グリセロール、ジステアリン酸グリセリル、ヒドロキシステアリン酸グリセリル、ラウリン酸グリセリル、リノール酸グリセリル、ミリスチン酸グリセリル、オレイン酸グリセリル、ステアリン酸グリセリル、ステアリン酸グリセリルSE、グリシン、ステアリン酸グリコール、ステアリン酸グリコールSE、グリコサミノグリカン、ヘーゼル（アメリカハシバミ（corylus americana））ナッツ油、ヘーゼル（セイヨウハシバミ（corylus avellana））ナッツ油、ヘキシレングリコール、ヒアルロン酸、ハイブリッドサフラワー（ベニバナ（carthamus tinctorius））油、水添ヒマシ油、水添ココグリセリド、水添ココナツ油、水添ラノリン、水添レシチン、水添パームグリセリド、水添パーム核油、水添ダイズ油、水添牛脂グリセリド、水添植物油、加水分解グリコサミノグリカン、加水分解ダイズタンパク質、ヒドロキシル化ラノリン、ヒドロキシプロリン、ステアリン酸イソセチル��ステアロイルステアリン酸イソセチル、オレイン酸イソデシル、イソステアリン酸イソプロピル、ラノリン脂肪酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸イソプロピル、イソステアラミドDEA、イソステアリン酸、乳酸イソステアリル、ネオペンタン酸イソステアリル、ジャスミン（ソケイ（jasminum officinale））油、ホホバ（バクサス・チネンシス（baxus chinensis））油、コンブ、ククイ（アレウリテス・モルッカーナ（aleurites moluccana））ナッツ油、ラクトアミドMEA、ラベンダー（真正ラベンダー（lavandula angustifolia））油、レシチン、レモン（シトラス・メディカ・リモナム（citrus medica limonum））油、リノール酸、リノレン酸、マカデミア・ターニフォリア（macadamia ternifolia）ナッツ油、マルチトール、カモミール（カモミラ・レキュチタ（chamomilla recutita））油、セスキステアリン酸メチルグルコース、メチルグルセス-20、メチルシラノールPCA、乳酸ミリスチル、ミリスチン酸ミリスチル、プロピオン酸ミリスチル、ジカプリル酸／カプリン酸ネオペンチルグリコール、オクチルドデカノール、ミリスチン酸オクチルドデシル、ステアロイルステアリン酸オクチルドデシル、ヒドロキシステアリン酸オクチル、パルミチン酸オクチル、サリチル酸オクチル、ステアリン酸オクチル、オレイン酸、オリーブ（オレア・ユーロパエア（olea europaea））油、オレンジ（シトラス・オーランチウム・ダルシス（citrus aurantium dulcis））油、パーム（ギニアアブラヤシ（elaeis guineensis））油、パルミチン酸、パンテチン、パンテノール、パンテニルエチルエーテル、PCA、モモ（プルナス・パーシカ（prunus persica））核油、ピーナツ（ラッカセイ（arachis hypogaea））油、ペンタデカラクトン、ペパーミント（メンタ・ピペリタ（mentha piperita））油、リン脂質、ポリアミノ糖縮合物、ポリグリセリル-3-ジイソステアレート、ポリグリセリル-4カプレート、ポリクオタニウム-24、ポリソルベート20、ポリソルベート40、ポリソルベート60、ポリソルベート80、ポリソルベート85、ミリスチン酸カリウム、パルミチン酸カリウム、ジパルミチン酸ピリドキシン、レチノール、パルミチン酸レチニル、コメ（オリザ・サチバ（oryza sativa））ブラン油、RNA、ローズマリー（マンネンロウ（rosmarinus officinalis））油、ローズ油、サフラワー（ベニバナ（carthamus tinctorius））油、セージ（サルビア・オッフィシナリス（salvia officinalis））油、サンダルウッド（ヒャクダン（santalum album））油、セリン、血清タンパク質、ゴマ（セサマム・インディカム（sesamum indicum））油、シアバター（ブチロスペルマム・パーキィ（butyrospermum parkii））、ヒアルロン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム、PCAナトリウム、ポリグルタミン酸ナトリウム、ステアロイル乳酸ナトリウム、ラウリン酸ソルビタン、オレイン酸ソルビタン、オリーブ油脂肪酸ソルビタン、パルミチン酸ソルビタン、セスキオレイン酸ソルビタン、ステアリン酸ソルビタン、ソルビトール、ダイズ（ツルマメ（glycine soja））油、スフィンゴ脂質、スクアラン、スクアレン、MEAステアリン酸ステアラミド、ステアリン酸、ステアロキシジメチコン、ステアロキシトリメチルシラン、ステアリルアルコール、グリチルレチン酸ステアリル、ヘプタン酸ステアリル、ステアリン酸ステアリル、��マワリ（ヘリアンタス・アヌース（helianthus annuus））種子油、ヒマワリ種子蝋、スイートアーモンド（プルナス・アミグダラス・ダルシス（prunus amygdalus dulcis））油、トコフェロール、酢酸トコフェリル、リノール酸トコフェリル、トリベヘニン、ネオペンタン酸トリデシル、ステアリン酸トリデシル、トリステアリン、尿素、植物油、水、蝋、コムギ（トリチカム・ブルガレ（triticum vulgare））胚芽油、およびイランイラン（イランイランノキ（cananga odorata））油を含む。
【０１１４】
構造剤（structuring agent）：任意の開示される組成物は、構造剤を含み得る。構造剤は、特定の例において、組成物の安定性に寄与する流動学的特徴を組成物に提供するのを補助する。他の例において、構造剤はまた、乳化剤または界面活性剤として機能し得る。構造剤の非限定的な例は、ステアリン酸、パルミチン酸およびそれらの混合物を含む。
【０１１５】
エッセンシャルオイル：エッセンシャルオイルは、本明細書に開示される任意の組成物に含まれ得る。エッセンシャルオイルは、ハーブ、花、木および他の植物由来の油を含む。そのような油は典型的に、植物の細胞の間に小滴として存在し、当業者に公知の様々な方法（例えば、水蒸気蒸留、アンフルラージュ（すなわち、脂肪を用いる抽出）、浸漬、溶媒抽出、または機械プレス）によって抽出され得る。これらのタイプの油が空気にさらされると、それらは蒸発する傾向がある（すなわち、揮発油）。結果として、多くのエッセンシャルオイルは無色であるが、時間と共にそれらは酸化しより暗色化し得る。エッセンシャルオイルは、水に不溶であり、アルコール、エーテル、固定油（植物）および他の有機溶媒に溶解する。エッセンシャルオイルにおいて見いだされる典型的な特徴は、約160℃〜約240℃の沸点および約0.759〜約1.096 g/mLの範囲の密度を含む。
【０１１６】
エッセンシャルオイルは典型的に、その油が発見された植物により命名される。例えば、ローズ油またはペパーミント油は、それぞれ、バラまたはペパーミント植物由来である。使用され得るエッセンシャルオイルの非限定的な例は、ゴマ油、マカダミアナッツ油、ティーツリー油、イブニングプリムローズ油、スパニッシュセージ油、スパニッシュローズマリー油、コリアンダー油、タイム油、ピメントベリー油、ローズ油、アニス油、バルサム油、ベルガモット油、ローズウッド油、シダー油、カモミール油、セージ油、クラリセージ油、クローブ油、サイプレス油、ユーカリ油、フェンネル油、シーフェンネル油、フランキンセンス油、ゼラニウム油、ジンジャー油、グレープフルーツ油、ジャスミン油、ジュニパー油、ラベンダー油、レモン油、レモングラス油、ライム油、マンダリン油、マジョラム油、ミルラ油、ネロリ油、オレンジ油、パチョリ油、コショウ油、黒コショウ油、プチグレン油、パイン油、ローズオットー油、ローズマリー油、サンダルウッド油、スペアミント油、スパイクナード油、ベチバー油、ウィンターグリーン油またはイランイランを含む。当業者に公知の他のエッセンシャルオイルもまた、本開示との関係で有用であることが想定される。
【０１１７】
増粘剤：増粘剤は、本明細書に開示される任意の組成物に含まれ得る。増粘物質およびゲル化剤を含む増粘剤は、組成物の粘性を増大させる物質を含む。増粘物質は、組成物中の活性成分の効果を実質的に変化させずに組成物の粘性を増大させ得るものを含む。増粘物質はまた、本明細書に記載される組成物および要素の安定性を増大させ得る。本発明の特定の局面において、増粘物質は、水添ポリイソブチレンまたはトリヒドロキシステアリン、またはそれらの混合物を含む。
【０１１８】
本開示において使用され得るさらなる増粘剤の非限定的な例は、カルボン酸ポリマー、架橋ポリアクリレートポリマー、多糖類およびゴムを含む。カルボン酸ポリマーの例は、架橋剤が2つまたはそれ以上の炭素・炭素二重結合を含み、多価アルコール由来である、アクリル酸、置換アクリル酸ならびにこれらのアクリル酸および置換アクリル酸の塩およびエステル由来の1つまたは複数のモノマーを含む架橋化合物を含む（米国特許第5,087,445号；同第4,509,949号；同第2,798,053号；CTFA International Cosmetic Ingredient Dictionary、第4版、1991年、第12および80頁を参照のこと）。美容利用可能なカルボン酸ポリマーの例は、スクロースまたはペンタエリスリトールのアリルエーテルで架橋されたアクリル酸のホモポリマーであるカルボマー（例えば、B.F.Goodrich製のCarbopol（商標）900シリーズ）を含む。架橋ポリアクリレートポリマーの非限定的な例は、カチオン性および非イオン性ポリマーを含む。1つの態様において、増粘物質は、アクリレート／C10〜C30アルキルアクリレートクロスポリマーを含む。特定の態様において、増粘物質は、ヒドロキシエチルアクリレートとアクリロイルジメチルタウリンナトリウムのコポリマーを含む。例は、米国特許第5,100,660号；同第4,849,484号；同第4,835,206号；同第4,628,078号；同第4,599,379号に記載されている。
【０１１９】
多糖類の非限定的な例は、セルロース、カルボキシメチルヒドロキシエチルセルロース、酢酸プロピオン酸カルボン酸セルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシエチルエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルヒドロキシエチルセルロースおよびそれらの混合物を含む。別の例は、セルロースポリマーのヒドロキシ基がヒドロキシアルキル化（好ましくは、ヒドロキシエチル化またはヒドロキシプロピル化）されヒドロキシアルキル化セルロースを形成し、これがさらにエーテル結合を通じてC10〜C30直鎖または分枝鎖アルキル基で修飾されているアルキル置換セルロースである。典型的に、これらのポリマーは、C10〜C30直鎖または分枝鎖アルコールとヒドロキシアルキルセルロースのエーテルである。他の有用な多糖類は、3単位ごとに（1-6）結合グルコースを含む（1-3）結合グルコース単位の直鎖を含むスクレログルカンを含む。
【０１２０】
本明細書に記載される組成物および要素で使用され得るゴムの非限定的な例は、アカシア、寒天、アルギン、アルギン酸、アルギン酸アンモニウム、アミロペクチン、アルギン酸カルシウム、カラギーナンカルシウム、カルニチン、カラギーナン、デキストリン、ゼラチン、ゲランガム、グアーガム、グアー塩化ヒドロキシプロピルトリモニウム、ヘクトライト、ヒアルロン酸、水和シリカ、ヒドロキシプロピルキトサン、ヒドロキシプロピルグアー、カラヤゴム、コンブ、ローカストビーンガム、ナットウガム、アルギン酸カリウム、カラギーナンカリウム、スクレロチウムガム、カルボキシメチルデキストランナトリウム、カラギーナンナトリウム、トラガカントゴム、キサンタンゴムおよびそれらの混合物を含む。
【０１２１】
防腐剤：任意の開示される要素は、防腐剤を含み得る。本開示において使用され得る防腐剤の非限定的な例は、フェノキシエタノール、クロルフェネシン、カプリリルグリコールまたはそれらの組み合わせを含む。
【０１２２】
皮膚美化剤：任意の開示される要素は、皮膚美化剤を含み得る。本発明において使用され得る皮膚美化剤の非限定的な例は、グリチルリチン酸ジカリウム、アスコルビルグリコシド、ナイアシンアミド、リコリス抽出物またはそれらの組み合わせを含む。
【０１２３】
薬学的成分：任意の開示される要素は、薬学的に活性な薬剤を含み得るが、いくつかの態様において、開示される要素は、薬学的に活性な薬剤を含まない。薬学的に活性な薬剤の非限定的な例は、抗ニキビ剤、酒さを処置するために使用される薬剤、鎮痛剤、麻酔剤、抗ヒスタミン剤、非ステロイド抗炎症薬を含む抗炎症剤、抗生物質、抗真菌剤、抗ウイルス剤、抗微生物剤、抗癌剤、抗疥癬虫剤、抗シラミ剤、抗新生物剤、制汗剤、かゆみ止め剤、抗乾癬剤、抗脂漏剤、生物学的に活性なタンパク質およびペプチド、熱傷処置剤、焼灼剤、色素除去剤、脱毛剤、おむつかぶれ処置剤、酵素、毛髪成長刺激剤、DFMOならびにその塩およびアナログを含む毛髪成長遅延剤、止血剤、角質溶解剤、口内炎処置剤、単純疱疹処置剤、歯および歯周処置剤、光増感剤、皮膚保護／防護剤、ホルモンおよびコルチコステロイドを含むステロイド、日焼け処置剤、日焼け止め剤、経皮活性物質、経鼻活性物質、いぼ処置剤、創傷処置剤、ならびに創傷治癒剤を含む。
【０１２４】
III. 配合
減少した縮合タンニン含量を有する脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、様々なスキンケア製品、例えば、オイルクレンザー、セラム濃縮液、昼用モイスチャライザー、クラリファイング・トナーおよび夜用皮膚再生モイスチャライザーに組み込まれ得る。これらの各々は、別々の容器で提供され得る。スキンケア製品は、皮膚表面に適用されたときに皮膚の加齢の特定の兆候を減少させ、皮膚の外見を改善し得るよう組み合わせて使用され得る。非限定的な例において、皮膚表面は、顔面の皮膚表面である。
【０１２５】
これらの組成物は、すべてのタイプの美容的および皮膚科学的に許容される媒体に組み込まれ得る。適当な媒体の非限定的な例は、乳濁物（例えば、油中水、水中油中水、水中油、水中シリコーン、シリコーン中水、油中水中油、シリコーン中水中油乳濁物）、クリーム、ローション、溶液（水性および含水アルコールの両方）、無水塩基（例えば、リップスティックおよび粉末）、ジェルならびに軟膏を含む。さらなる成分、例えば、非限定的に、カチオン性界面活性剤、封鎖剤（occlusive agent）、加湿剤もしくはシリコーン含有化合物、またはそれらの任意の組み合わせ、が含まれ得る。例示的なさらなる成分は、上記の通りである。
【０１２６】
脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含む組成物はまた、香料、防腐剤、色素、軟化剤および物理的反射材、ならびにその存在が美容的またはその他の観点で所望され得る任意の他のクラスの物質を含み得る。組成物は、液体、ジェルまたは半固体の形態であり得る。要素のタイプおよび量の選択は、組成物の性質、すなわち、ジェルまたは半固体によって決定され、それは美容科学者の技能の範囲内で行われることである。例えば、本発明の半固体組成物には、その液体組成物よりも多量の油または蝋が組み込まれる。
【０１２７】
キットもまた、本開示の特定の局面において使用されることが想定される。例えば、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含む組成物が、キットに含まれ得る。キットは、各々が組み合わせの要素を含む1つまたは複数の容器を含み得る。容器は、ボトル、金属チューブ、ラミネートチューブ、プラスチックチューブ、ディスペンサー、加圧された容器、防護された容器、パッケージ、コンパートメント、リップスティック容器、小型容器、化粧品組成物を保持することができる化粧用パン、または他のタイプの容器、例えば注射器もしくはその中で分散物もしくは組成物または所望のボトル、ディスペンサーもしくはパッケージが保持される吹き込み成型されたプラスチック容器を含み得る。キットおよび／または容器は、その表面に証印を含み得る。証印は、例えば、単語、フレーズ、略語、写真またはシンボルであり得る。
【０１２８】
容器は、既定量の本明細書に記載される任意の組成物または要素を分配し得る。他の態様において、容器は、所望量の組成物を分配するよう絞り出され得る（例えば、金属、ラミネートまたはプラスチックチューブ）。特定の態様において、容器は、組成物を染み込ませた、皮膚への単位用量の適用のために使用される繊維パッド、例えばコットンパッドを含み得る（例えば、トナーパッド）。組成物は、スプレー、エアゾール、液体、流体または半固体として分配され得る。容器は、スプレー、ポンプまたは絞り出し機構を有し得る。キットはまた、キット要素を使用するためおよび容器内に含まれる任意の他の組成物の使用のための指示書を含み得る。指示書は、組成物の適用、使用および管理方法の説明を含み得る。パッケージ同封物は、典型的に、適応、用法、用量、投与、禁忌および／または使用の際の警告についての情報を含む化粧品の市販パッケージに通常含まれる指示書を含む。指示資料は、電子形式で記述され得る（例えば、コンピュータディスクもしくはコンパクトディスク）、または視覚的なものであり得る（例えば、映像ファイル）。
【０１２９】
A. クレンザー
クレンザー組成物は、化粧品、死んだ皮膚細胞、油分、よごれおよびその他の遊離物質を皮膚の表面から取り除くために皮膚に適用されるスキンケア製品である。クレンザーは、液体、ジェルまたは半固体の形態であり得る。1つの態様において、クレンザーは、皮膚と接触した際に液化するジェルとして配合される。クレンザー組成物は、水分、および毛穴の詰まりを取り油分を除去し得る界面活性剤を含み得る。界面活性剤（surfactant）としても公知の界面活性剤（detergent）は、アニオン性、カチオン性、非イオン性または両性イオン性であり得る。クレンザーはまた、発泡剤、pHバランス剤および他の薬学的に許容される担体を含み得る。
【０１３０】
クレンザー組成物は、例えば、水、グリセリン、界面活性剤、ポリマー、防腐剤および香料を含み得る。いくつかの態様において、クレンザーは、クレンザー組成物の重量基準で、約50％〜約90％の水、例えば、約50％、約55％、約60％、約65％、約70％、約80％または約85％の水を含む組成物である。特定の態様において、クレンザー組成物は、組成物の重量で、約1％〜約10％の界面活性剤、例えば約2％〜約8％、例えば約2％、約3％、約4％、約5％、約6％、約7％または約8％の界面活性剤を含む。1つの態様において、クレンザーは、組成物の重量で、約1％〜約25％の湿潤剤、例えば約1％、約5％、約10％、約15％、約20％または約25％の湿潤剤を含む。さらなる態様において、クレンザーは、組成物の重量で、約1％〜約5％の乳化剤、例えば約1％、約2％、約3％、約4％または約5％の乳化剤を含む。さらなる態様において、クレンザーは、組成物の重量で、最大約1％の防腐剤、例えば約0.1％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。1つの態様において、クレンザーは、組成物の重量で、最大約1％の香料、例えば約0.1％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。
【０１３１】
特定の態様において、クレンザー組成物は、クレンザー組成物の重量基準で、約60％〜約80％の水、例えば約60％、約65％、約70％、約75％または約80％を含む。1つの態様において、クレンザーは、約1％〜約10％のデシルグルコース、例えば約1％、約3％、約5％、約7％または約10％を含む。特定の態様において、クレンザー組成物は、約5％〜約15％のグリセリン、例えば約5％、約7％、約10％、約12％または約15％を含む。さらなる態様において、クレンザーは、約1％〜約10％のメチルグルセス-20、例えば約1％、約3％、約5％、約7％または約10％を含む。いくつかの態様において、クレンザーは、約1％〜約5％のポリグリセリル-4カプレート、例えば約1％、約2％、約3％、約4％または約5％を含む。さらなる態様において、クレンザーは、約0.1％〜約1％のアクリレート/C10〜C30アルキルアクリレートクロスポリマー、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。なおさらなる態様において、クレンザーは、約0.1％〜約1％の香料、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。さらなる態様において、クレンザーは、約0.1％〜約1％の防腐剤、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。成分は、組み合わせて含まれ得る。
【０１３２】
いくつかの例において、クレンザー組成物は、組成物の重量に基づく比率で、約0.001％〜約1.0％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.000001％〜約0.1％のベータ・グルカンおよび約0.00001％〜約0.1％のブドウ種子抽出物を含む。例えば、クレンザー組成物は、組成物の重量で、約0.01％〜約0.05％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.00001％〜約0.01％のベータ・グルカンおよび約0.0001％〜約0.001％のブドウ種子抽出物を含む。特定の態様において、クレンザー組成物は、組成物の重量で、約0.025％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.00005％のベータ・グルカンおよび約0.0005％のブドウ種子抽出物を含む。さらなる態様において、クレンザーは、組成物の重量に基づく比率で、約0.001％〜約1.0％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.0001％〜約0.1％のベータ・グルカンおよび約0.00001％〜約0.1％のブドウ種子抽出物を含む組成物である。
【０１３３】
クレンザー組成物において使用されるブドウ種子抽出物は、水性ブドウ種子抽出物であり得る。1つの態様において、クレンザー組成物において使用されるベータ・グルカンは、水溶液である。
【０１３４】
本明細書に開示されるクレンザー組成物はまた、ビタミンAを含み得る。ビタミンAは、レチノールおよびそのアナログ、例えばパルミチン酸レチニルの形態で存在し得る。例えば、クレンザー組成物は、約0.00005％〜約1.0％のビタミンA、例えば約0.0001％〜約0.01％を含む。特定の態様において、クレンザー組成物は、組成物の重量で、約0.0005％のビタミンAを含む。
【０１３５】
本明細書に開示されるクレンザー組成物はまた、ビタミンEを含み得る。ビタミンEは、トコフェロールおよびそのアナログ、例えば酢酸トコフェリルの形態で存在し得る。例えば、クレンザー組成物は、約0.001％〜約1.0％のビタミンE、例えば約0.005％〜約0.05％を含む。特定の態様において、クレンザー組成物は、組成物の重量で、約0.01％のビタミンEを含む。
【０１３６】
本明細書に開示されるクレンザー組成物はまた、ビタミンCを含み得る。ビタミンCは、アスコルビン酸塩およびそれらのアナログ、例えばリン酸アスコルビルおよびパルミチン酸アスコルビルマグネシウムの形態で存在し得る。例えば、クレンザー組成物は、約0.00001％〜約0.1％のビタミンC、例えば約0.0005％〜約0.05％を含む。特定の態様において、クレンザー組成物は、組成物の重量で、約0.0001％のビタミンCを含む。
【０１３７】
本明細書に開示されるクレンザー組成物はまた、パンテノールを含み得る。例えば、クレンザー組成物は、約0.0001％〜約1.0％のパンテノール、例えば約0.0005％〜約0.05％を含む。特定の態様において、クレンザー組成物は、組成物の重量で、約0.001％のパンテノールを含む。いくつかの態様において、クレンザー組成物は、約0.001％〜約1.0％のパンテノール、例えば約0.002％〜約0.05％を含む。
【０１３８】
本明細書に開示されるクレンザー組成物はさらに、スーパーオキシドジスムターゼを含み得る。例えば、クレンザー組成物は、約0.00000001％〜約0.1％のスーパーオキシドジスムターゼ、例えば約0.0000005％〜約0.05％を含む。特定の態様において、クレンザー組成物は、組成物の重量で、約0.0000001％のスーパーオキシドジスムターゼを含む。いくつかの態様において、クレンザー組成物は、約0.00001％〜約0.1％のスーパーオキシドジスムターゼ、例えば約0.00005％〜約0.01％を含む。
【０１３９】
特定の例において、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含むクレンザー組成物はまた、皮膚に局所適用されたときに皮膚の外見を改善するのに十分な量で存在する、有効量のビタミンA、ビタミンE、パンテノール、ビタミンCまたはスーパーオキシドジスムターゼの少なくとも1つを含む。1つの例において、クレンザー組成物は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカン、ブドウ種子抽出物、ビタミンA、ビタミンE、パンテノール、ビタミンCおよびスーパーオキシドジスムターゼを含む。
【０１４０】
5つの要素を含む開示される組み合わせのさらなる態様において、クレンザー組成物は、クレンザー組成物の重量で、約0.01〜約0.05％または約0.02〜約0.04％、例えば約0.02、約0.025、約0.03、約0.035または約0.04％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を含む。さらなる態様において、クレンザー組成物は、重量で、約0.00001〜約0.0001％または約0.00002〜約0.00009％、例えば約0.00002、約0.00003、約0.00004、約0.00005、約0.00006、約0.00007、約0.00008または約0.00009％のベータ・グルカンを含む。いくつかの態様において、クレンザー組成物は、重量で、約0.001〜約0.01％または約0.002〜約0.0009％、例えば約0.002、約0.003、約0.004、約0.005、約0.006、約0.007、約0.008または約0.009％のベータ・グルカンを含む。1つの態様において、クレンザー組成物は、重量で、約0.0001〜約0.001％または約0.0002〜約0.0009％、例えば約0.0002、約0.0003、約0.0004、約0.0005、約0.0006、約0.0007、約0.0008または約0.0009％のブドウ種子抽出物を含む。さらなる態様において、クレンザー組成物は、重量で、約0.0001〜約0.1％または約0.0002〜約0.0009％、例えば約0.0002、約0.0003、約0.0004、約0.0005、約0.0006、約0.0007、約0.0008または約0.0009％のビタミンAを含む。さらなる態様において、クレンザー組成物は、重量で、約0.00005〜約0.01％または約0.00009〜約0.0005％、例えば約0.00009、約0.0001、約0.0002、約0.0003、約0.0004または約0.0005％のビタミンCを含む。なおさらなる態様において、クレンザー組成物は、重量で、約0.005〜約0.1％または約0.009〜約0.05％、例えば約0.009、約0.01、約0.02、約0.03、約0.04または約0.05％のビタミンEを含む。いくつかの態様において、クレンザー組成物は、重量で、約0.0002〜約0.05％または約0.0009〜約0.005％、例えば約0.0009、約0.001、約0.002、約0.003、約0.004または約0.005％のパンテノールを含む。なおさらなる態様において、クレンザー組成物は、重量で、約0.00000005〜約0.00001％または約0.00000009％〜約0.0000005％、例えば約0.00000009、約0.0000001、約0.0000002、約0.0000003、約0.0000004または約0.0000005％のスーパーオキシドジスムターゼを含む。成分は、組み合わせて含まれ得る。したがって、クレンザー組成物は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカン、ブドウ種子抽出物、ビタミンA、ビタミンC、ビタミンE、パンテノールおよびスーパーオキシドジスムターゼをこれらの濃度で含み得る。このクレンザー組成物は、トナー組成物、昼用モイスチャライザー組成物、セラム組成物および／または夜用モイスチャライザー組成物と共に使用され得る。
【０１４１】
B. トナー
トナー組成物は、皮膚を洗浄し、毛穴サイズを減少させるために皮膚に適用され、また皮膚のpHバランスを回復させ得るスキンケア製品である。トナー組成物は、液体またはジェルの形態であり得る。1つの例において、トナー組成物は、皮膚への適用を容易にするよう、コットンパッドに吸収される液体として配合される。トナー組成物は、水および加湿剤、ならびにアルコール、例えばエタノール、消毒剤、収れん剤、石けん、脂質または界面活性剤、ならびに他の薬学的に許容される担体を含み得る。収れん剤は、皮膚の組織を収縮させて毛穴サイズを減少させ得るが、皮膚の乾燥も引き起こし得る。石けん、脂質および界面活性剤は、皮膚の表面をきれいにするそれらの能力のために含まれ得る。
【０１４２】
トナー組成物は、例えば、水、界面活性剤、モイスチュアライザー、アルコール、香料および防腐剤を含み得る。いくつかの態様において、トナー組成物は、トナー組成物の重量基準で、約60％〜約99％の水分、例えば、約60％、約70％、約80％、約90％、約95％または約99％を含む。特定の態様において、トナー組成物は、トナー組成物の重量で、最大約1％の界面活性剤、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。1つの態様において、トナー組成物は、トナー組成物の重量で、約1％〜約10％の湿潤剤、例えば約1％、約3％、約5％、約8％または約10％を含む。さらなる態様において、トナーは、トナー組成物の重量で、最大約5％のアルコール、例えば約0.5％、約1％、約2％、約3％、約4％または約5％を含む。さらなる態様において、トナー組成物は、トナー組成物の重量で、最大約1％の防腐剤、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。1つの態様において、トナー組成物は、トナー組成物の重量で、最大約1％の香料、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。
【０１４３】
特定の態様において、トナー組成物は、トナー組成物の重量基準で、約80％〜約99％の水、例えば、約80％、約85％、約90％、約95％または約99％を含む。1つの態様において、トナー組成物は、約1％〜約10％のグリセリン、例えば約1％、約3％、約5％、約8％または約10％を含む。特定の態様において、トナー組成物は、約0.1％〜約5％のアルコール、例えば約0.1％、約0.5％、約1％、約2％、約3％、約4％または約5％を含む。さらなる態様において、トナー組成物は、約0.1％〜約1％のポリソルベート20、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。なおさらなる態様において、トナー組成物は、約0.1％〜約1％の香料、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。さらなる態様において、トナー組成物は、約0.1％〜約1％の防腐剤、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。成分は、組み合わせて含まれ得る。
【０１４４】
いくつかの例において、トナー組成物は、組成物の重量に基づく比率で、約0.001％〜約1.0％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.000001％〜約0.1％のベータ・グルカンおよび約0.00001％〜約0.01％のブドウ種子抽出物を含む。例えば、トナー組成物は、組成物の重量で、約0.01％〜約0.05％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.00001％〜約0.01％のベータ・グルカンおよび約0.0001％〜約0.001％のブドウ種子抽出物を含む。特定の態様において、トナー組成物は、組成物の重量で、約0.025％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.00005％のベータ・グルカンおよび約0.0005％のブドウ種子抽出物を含む。1つの態様において、トナー組成物は、組成物の重量に基づく比率で、約0.001％〜約1.0％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.0001％〜約0.1％のベータ・グルカンおよび約0.00001％〜約0.01％のブドウ種子抽出物を含む。
【０１４５】
トナー組成物において使用されるブドウ種子抽出物は、水性ブドウ種子抽出物であり得る。1つの態様において、トナー組成物において使用されるベータ・グルカンは、水溶液である。
【０１４６】
本明細書に開示されるトナー組成物はまた、ビタミンAを含み得る。ビタミンAは、レチノールおよびそのアナログ、例えばパルミチン酸レチニルの形態で存在し得る。例えば、トナー組成物は、約0.00005％〜約1.0％のビタミンA、例えば約0.0001％〜約0.01％を含む。特定の態様において、トナー組成物は、組成物の重量で、約0.0005％のビタミンAを含む。
【０１４７】
本明細書に開示されるトナー組成物はまた、ビタミンEを含み得る。ビタミンEは、トコフェロールおよびそのアナログ、例えば酢酸トコフェリルの形態で存在し得る。例えば、トナー組成物は、約0.001％〜約1.0％のビタミンE、例えば約0.005％〜約0.05％を含む。特定の態様において、トナー組成物は、組成物の重量で、約0.01％のビタミンEを含む。
【０１４８】
本明細書に開示されるトナー組成物はまた、ビタミンCを含み得る。ビタミンCは、アスコルビン酸塩およびそれらのアナログ、例えばリン酸アスコルビルおよびパルミチン酸アスコルビルマグネシウムの形態で存在し得る。例えば、トナー組成物は、約0.00001％〜約0.1％のビタミンC、例えば約0.0005％〜約0.05％を含む。特定の態様において、トナー組成物は、組成物の重量で、約0.0001％のビタミンCを含む。
【０１４９】
本明細書に開示されるトナー組成物はまた、パンテノールを含み得る。例えば、トナー組成物は、約0.0001％〜約1.0％のパンテノール、例えば約0.0005％〜約0.05％を含む。特定の態様において、トナー組成物は、組成物の重量で、約0.001％のパンテノールを含む。1つの態様において、トナー組成物は、約0.001％〜約1.0％のパンテノール、例えば約0.005％〜約0.05％を含む。
【０１５０】
本明細書に開示されるトナー組成物はさらに、スーパーオキシドジスムターゼを含み得る。例えば、トナー組成物は、約0.0000001％〜約0.1％のスーパーオキシドジスムターゼ、例えば約0.000005％〜約0.05％を含む。特定の態様において、トナー組成物は、組成物の重量で、約0.000001％のスーパーオキシドジスムターゼを含む。1つの態様において、トナー組成物は、約0.00001％〜約0.1％のスーパーオキシドジスムターゼ、例えば約0.00005％〜約0.01％を含む。
【０１５１】
特定の例において、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含むトナー組成物はまた、皮膚に局所適用されたときに皮膚の外見を改善するのに十分な量で存在する、有効量のビタミンA、ビタミンE、パンテノール、ビタミンCまたはスーパーオキシドジスムターゼの少なくとも1つを含む。1つの例において、トナー組成物は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカン、ブドウ種子抽出物、ビタミンA、ビタミンE、パンテノール、ビタミンCおよびスーパーオキシドジスムターゼを含む。
【０１５２】
5つの要素を含む組み合わせのさらなる態様において、トナー組成物は、トナー組成物の重量で、約0.01〜約0.05％または約0.02〜約0.04％、例えば約0.02、約0.025、約0.03、約0.035または0.04％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を含む。さらなる態様において、トナー組成物は、重量で、約0.00001〜約0.0001％または約0.00002〜約0.00009％、例えば約0.00002、約0.00003、約0.00004、約0.00005、約0.00006、約0.00007、約0.00008または約0.00009％のベータ・グルカンを含む。さらなる態様において、トナー組成物は、重量で、約0.001〜約0.01％または約0.002〜約0.009％、例えば約0.002、約0.003、約0.004、約0.005、約0.006、約0.007、約0.008または約0.009％のベータ・グルカンを含む。さらなる態様において、トナー組成物は、重量で、約0.0001〜約0.001％または約0.0002〜約0.0009％、例えば約0.0002、約0.0003、約0.0004、約0.0005、約0.0006、約0.0007、約0.0008または約0.0009％のブドウ種子抽出物を含む。さらなる態様において、トナー組成物は、重量で、約0.0001〜約0.1％または約0.0002〜約0.0009％、例えば約0.0002、約0.0003、約0.0004、約0.0005、約0.0006、約0.0007、約0.0008または0.0009％のビタミンAを含む。なおさらなる態様において、トナー組成物は、重量で、約0.00005〜約0.01％または約0.00009〜約0.0005％、例えば約0.00009、約0.0001、約0.0002、約0.0003、約0.0004または約0.0005％のビタミンCを含む。さらなる態様において、トナー組成物は、重量で、約0.005〜約0.1％または約0.009〜約0.05％、例えば約0.009、約0.01、約0.02、約0.03、約0.04または約0.05％のビタミンEを含む。さらなる態様において、トナー組成物は、重量で、約0.0002〜約0.05％または約0.0009〜約0.005％、例えば約0.0009、約0.001、約0.002、約0.003、約0.004または約0.005％のパンテノールを含む。いくつかの態様において、トナー組成物は、重量で、約0.0000005〜約0.0001％または約0.0000009％〜約0.000005％、例えば約0.0000009、約0.000001、約0.000002、約0.000003、約0.000004または約0.000005％のスーパーオキシドジスムターゼを含む。成分は、組み合わせて含まれ得る。したがって、トナー組成物は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカン、ブドウ種子抽出物、ビタミンA、ビタミンC、ビタミンE、パンテノールおよびスーパーオキシドジスムターゼをこれらの濃度で含み得る。このトナーは、クレンザー、昼用モイスチャライザー、セラムおよび／または夜用モイスチャライザーと共に使用され得る。
【０１５３】
C. 昼用モイスチャライザー
モイスチャライザー組成物は、皮膚の最外層に潤いを与えるために皮膚に適用されるスキンケア製品であり、追加成分、例えば日焼け止め剤および／または加湿剤も含み得る。モイスチャライザー組成物は、日焼け止め剤を含む昼用モイスチャライザーであり得る。1つの態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、SPF約15〜約50、例えば約15、約20、約25、約30、約35、約40、約45または約50のSPFの日焼け止め剤を含む。特定の非限定的な態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、SPF約50の日焼け止め剤を含む。
【０１５４】
モイスチャライザーは、皮膚にすでに存在する潤いの損失を減少させるよう皮膚の表面に皮膜を形成することによる、皮膚の潤いを増大させるよう大気中から水蒸気を誘引することによる、または皮膚表面に湿潤因子を添加することによる、の最大3つの一般的方法で皮膚に作用し得る。モイスチャライザー組成物は、液体、ジェルまたは半固体の形態であり得る。1つの例において、モイスチャライザー組成物は、乳濁物として配合される。皮膚モイスチャライザーは、皮膚をより柔らかくかつより柔軟にし得る。モイスチャライザー組成物は、加湿剤、脂質、油分、界面活性剤および薬学的に許容される担体を含み得る。加湿剤は、水分損失を減少させることにより、また大気中の水分を皮膚に誘引することによりの両方により、皮膚の潤いレベルを増大させ得る。グリシン、尿素およびコラーゲンは、モイスチャライザー組成物に組み込まれ得る加湿剤である。
【０１５５】
特定の例において、昼用モイスチャライザー組成物は、水、湿潤剤、日焼け止め剤、皮膚コンディショナー、増粘剤、防腐剤および香料を含む。いくつかの態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、昼用モイスチャライザー組成物の重量基準で、約30％〜約70％の水、例えば、約30％、約40％、約50％、約60％または約70％を含む。特定の態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、昼用モイスチャライザー組成物の重量で、約0.1％〜約30％の日焼け止め剤、例えば約0.1％、約1％、約5％、約10％、約15％、約20％、約25％または約30％を含む。1つの態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、昼用モイスチャライザー組成物の重量で、約1％〜約20％の湿潤剤、例えば約1％、約5％、約10％、約15％または約20％を含む。さらなる態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、昼用モイスチャライザー組成物の重量で、約0.1％〜約6％の増粘剤、例えば約0.1％、約0.5％、約1％、約2％、約3％、約4％、約5％または約6％を含む。1つの態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、昼用モイスチャライザー組成物の重量で、最大約8％の皮膚コンディショニング剤、例えば約0.5％、約1％、約2％、約3％、約4％、約5％、約6％、約7％または約8％を含む。さらなる態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、昼用モイスチャライザー組成物の重量で、最大約2％の防腐剤、例えば約0.1％、約0.5％、約1％、約1.5％または約2％を含む。1つの態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、昼用モイスチャライザー組成物の重量で、最大約1％の香料、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。
【０１５６】
特定の態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、昼用モイスチャライザー組成物の重量基準で、約40％〜約60％の水、例えば約40％、約45％、約50％、約55％または約60％を含む。1つの態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、約1％〜約10％のグリセリン、例えば約1％、約3％、約5％、約8％または約10％を含む。特定の態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、約5％〜約10％のホモサレート、例えば約5％、約6％、約7％、約8％、約9％または約10％を含む。さらなる態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、約1％〜約8％のオリーブ油脂肪酸ソルビタン、例えば約1％、約2％、約3％、約4％、約5％、約6％、約7％または約8％を含む。いくつかの態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、約0.1％〜約5％のシリカ、例えば約0.1％、約0.5％、約1％、約2％、約3％、約4％または約5％を含む。さらなる態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、約0.1％〜約1％のキサンタンガム、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。なおさらなる態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、約5％〜約15％のオクトクリレン、例えば約5％、約8％、約10％、約12％または約15％を含む。特定の態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、約0.1％〜約5％のアボベンゾン、例えば約0.1％、約0.5％、約1％、約2％、約3％、約4％または約5％を含む。1つの態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、約0.1％〜約8％のジメチコン、例えば約0.1％、約0.5％、約1％、約2％、約3％、約4％、約5％、約6％、約7％または約8％を含む。なおさらなる態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、約0.1％〜約1％の香料、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。さらなる態様において、昼用モイスチャライザーは、約0.5％〜約2％の防腐剤、例えば約0.5％、約0.8％、約1％、約1.5％または約2％を含む。成分は、組み合わせて含まれ得る。
【０１５７】
いくつかの例において、昼用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量に基づく比率で、約0.001％〜約1.0％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.0001％〜約0.1％のベータ・グルカンおよび約0.00001％〜約0.01％のブドウ種子抽出物を含む。例えば、昼用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量で、約0.01％〜約0.05％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.001％〜約0.01％のベータ・グルカンおよび約0.0001％〜約0.001％のブドウ種子抽出物を含む。特定の態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量で、約0.025％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.005％のベータ・グルカンおよび約0.0002％のブドウ種子抽出物を含む。
【０１５８】
昼用モイスチャライザー組成物において使用されるブドウ種子抽出物は、水性ブドウ種子抽出物であり得る。1つの態様において、昼用モイスチャライザー組成物において使用されるベータ・グルカンは、水溶液である。
【０１５９】
本明細書に開示される昼用モイスチャライザー組成物はまた、ビタミンEを含み得る。ビタミンEは、トコフェロールおよびそのアナログ、例えば酢酸トコフェリルの形態で存在し得る。例えば、昼用モイスチャライザー組成物は、約0.001％〜約1.0％のビタミンE、例えば約0.005％〜約0.05％を含む。特定の態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量で、約0.01％のビタミンEを含む。
【０１６０】
本明細書に開示される昼用モイスチャライザー組成物はまた、ビタミンCを含み得る。ビタミンCは、アスコルビン酸塩およびそれらのアナログ、例えばリン酸アスコルビルおよびパルミチン酸アスコルビルマグネシウムの形態で存在し得る。例えば、昼用モイスチャライザー組成物は、約0.00001％〜約0.1％のビタミンC、例えば約0.0005％〜約0.05％を含む。特定の態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量で、約0.0002％のビタミンCを含む。
【０１６１】
本明細書に開示される昼用モイスチャライザー組成物はまた、パンテノールを含み得る。例えば、昼用モイスチャライザー組成物は、約0.0001％〜約1.0％のパンテノール、例えば約0.0002％〜約0.01％を含む。1つの態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、約0.001％〜約1.0％のパンテノール、例えば約0.002％〜約0.5％を含む。特定の態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量で、約0.0005％のパンテノールを含む。
【０１６２】
本明細書に開示される昼用モイスチャライザー組成物はさらに、スーパーオキシドジスムターゼを含み得る。例えば、昼用モイスチャライザー組成物は、約0.00001％〜約0.1％のスーパーオキシドジスムターゼ、例えば約0.0005％〜約0.05％を含む。特定の態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量で、約0.0002％のスーパーオキシドジスムターゼを含む。
【０１６３】
特定の例において、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含む昼用モイスチャライザー組成物はまた、皮膚に局所適用されたときに皮膚の外見を改善するのに十分な量で存在する、有効量のビタミンE、パンテノール、ビタミンCまたはスーパーオキシドジスムターゼの少なくとも1つを含む。1つの例において、昼用モイスチャライザー組成物は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカン、ブドウ種子抽出物、ビタミンE、パンテノール、ビタミンCおよびスーパーオキシドジスムターゼを含む。
【０１６４】
5つの要素を含む開示される組み合わせのいくつかの態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、昼用モイスチャライザー組成物の重量で、約0.01〜約0.05％または約0.02〜約0.04％、例えば約0.02、約0.025、約0.03、約0.035または約0.04％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を含む。特定の態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、重量で、約0.001〜約0.01％または約0.002〜約0.009％、例えば約0.002、約0.003、約0.004、約0.005、約0.006、約0.007、約0.008または約0.009％のベータ・グルカンを含む。いくつかの態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、重量で、約0.0001〜約0.001％または約0.0002〜約0.0009％、例えば約0.0002、約0.0003、約0.0004、約0.0005、約0.0006、約0.0007、約0.0008または約0.0009％のブドウ種子抽出物を含む。1つの態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、重量で、約0.00005〜約0.01％または約0.00009〜約0.0005％、例えば約0.00009、約0.0001、約0.0002、約0.0003、約0.0004または約0.0005％のビタミンCを含む。さらなる態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、重量で、約0.005〜約0.1％または約0.009〜約0.05％、例えば約0.009、約0.01、約0.02、約0.03、約0.04または約0.05％のビタミンEを含む。さらなる態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、重量で、約0.0002〜約0.05％または約0.0003〜約0.0007％、例えば約0.0003、約0.0004、約0.0005、約0.0006または約0.0007％のパンテノールを含む。なおさらなる態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、重量で、約0.00005〜約0.01％または約0.00009％〜約0.0005％、例えば約0.00009、約0.0001、約0.0002、約0.0003、約0.0004または約0.0005％のスーパーオキシドジスムターゼを含む。成分は、組み合わせて含まれ得る。したがって、昼用モイスチャライザー組成物は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカン、ブドウ種子抽出物、ビタミンC、ビタミンE、パンテノールおよびスーパーオキシドジスムターゼをこれらの濃度で含み得る。この昼用モイスチャライザーは、クレンザー、トナー、セラムおよび／または夜用モイスチャライザーと共に使用され得る。
【０１６５】
D. 夜用モイスチャライザー
夜用モイスチャライザー組成物は、皮膚表面を保護するバリアを提供するよう皮膚に適用され、皮膚へのさらなる成分の局所送達のための媒体として作用し得るが、化学的日焼け止め剤を含まないモイスチャライザー組成物である。夜用モイスチャライザー組成物は、液体、ジェルまたは半固体の形態であり得る。1つの例において、夜用モイスチャライザー組成物は、油および水の半固体乳濁物として配合される。夜用モイスチャライザー組成物は、本明細書に記載されるように、夜用モイスチャライザー組成物が、例えば日焼け止め剤を含むことによる日焼け保護を提供せず、皮膚表面下の深部までアンチエイジング成分、例えばビタミンAを浸透させるよう設計されている点で、昼用モイスチャライザー要素と相違する。夜用モイスチャライザー組成物を含むモイスチャライザー組成物は、皮膚をより柔らかくし得、また水分を皮膚内で維持するためのバリアを形成し得る。夜用モイスチャライザー組成物は、加湿剤、脂質、油、界面活性剤および薬学的に許容される担体を含み得る。夜用モイスチャライザー組成物の使用は、頻繁かつ激しい洗浄に起因する皮膚の乾燥を防ぎ得る。夜用モイスチャライザー組成物はまた、グリセロール、乳化剤および防腐剤を含み得る。
【０１６６】
特定の例において、夜用モイスチャライザー組成物は、水、湿潤剤、pH調整剤、皮膚コンディショナー、増粘剤、防腐剤および香料を含む。いくつかの態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、夜用モイスチャライザー組成物の重量基準で、約40％〜約95％の水、例えば、約40％、約50％、約60％、約70％、約80％、約90％または約95％を含む。特定の態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、夜用モイスチャライザー組成物の重量基準で、約0.1％〜約45％の湿潤剤、例えば約0.1％、約1％、約5％、約10％、約15％、約20％、約25％、約30％、約35％、約40％または約45％を含む。1つの態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、夜用モイスチャライザー組成物の重量基準で、約0.1％〜約1％のpH調整剤、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。さらなる態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、夜用モイスチャライザー組成物の重量基準で、約0.1％〜約1％の増粘剤、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。1つの態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、夜用モイスチャライザー組成物の重量基準で、約1％〜約8％の皮膚コンディショニング剤を含む。さらなる態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、夜用モイスチャライザー組成物の重量基準で、最大約1％の防腐剤、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。1つの態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、夜用モイスチャライザー組成物の重量基準で、最大約1％の香料、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。
【０１６７】
特定の態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、夜用モイスチャライザー組成物の重量基準で、約50％〜約85％の水、例えば約50％、約55％、約60％、約65％、約70％、約75％、約80％または約85％を含む。1つの態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、約5％〜約15％のグリセリン、例えば約5％、約10％または約15％を含む。特定の態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、約1％〜約10％のシアバター、例えば約1％、約3％、約5％、約8％または約10％を含む。さらなる態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、約1％〜約8％のジメチコン、例えば約1％、約2％、約3％、約4％、約5％、約6％、約7％または約8％を含む。いくつかの態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、約0.1％〜約1％の水酸化ナトリウム、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。さらなる態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、約1％〜約10％のステアロイル乳酸ナトリウム、例えば約1％、約3％、約5％、約8％または約10％を含む。なおさらなる態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、約1％〜約8％のカプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、例えば約1％、約2％、約3％、約4％、約5％、約6％、約7％または約8％を含む。特定の態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、約0.1％〜約2％のヒマワリ種子蝋、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％、約1.0％、約1.5％または約2％を含む。1つの態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、約0.1％〜約1％のアクリレート/C10〜C30アルキルアクリレートクロスポリマー、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。なおさらなる態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、約0.1％〜約1％の香料、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。さらなる態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、約0.1％〜約1％の防腐剤、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。成分は、組み合わせて含まれ得る。
【０１６８】
いくつかの例において、夜用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量に基づく比率で、約0.001％〜約1.0％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.000001％〜約0.1％のベータ・グルカンおよび約0.00001％〜約0.01％のブドウ種子抽出物を含む。例えば、夜用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量で、約0.01％〜約0.05％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.00001％〜約0.01％のベータ・グルカンおよび約0.0001％〜約0.001％のブドウ種子抽出物を含む。特定の態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量で、約0.025％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.00005％のベータ・グルカンおよび約0.0005％のブドウ種子抽出物を含む。さらなる態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量で、約0.025％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.005％のベータ・グルカンおよび約0.0005％のブドウ種子抽出物を含む組成物である。
【０１６９】
夜用モイスチャライザー組成物において使用されるブドウ種子抽出物は、水性ブドウ種子抽出物であり得る。1つの態様において、夜用モイスチャライザー組成物において使用されるベータ・グルカンは、水溶液である。
【０１７０】
本明細書に開示される夜用モイスチャライザー組成物は、ビタミンAを含む。ビタミンAは、レチノールおよびそのアナログ、例えばパルミチン酸レチニルの形態で存在し得る。例えば、夜用モイスチャライザー組成物は、約0.00005％〜約1.0％のビタミンA、例えば約0.0001％〜約0.01％を含む。特定の態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量で、約0.0005％のビタミンAを含む。
【０１７１】
本明細書に開示される夜用モイスチャライザー組成物はまた、ビタミンEを含み得る。ビタミンEは、トコフェロールおよびそのアナログ、例えば酢酸トコフェリルの形態で存在し得る。例えば、夜用モイスチャライザー組成物は、約0.001％〜約1.0％のビタミンE、例えば約0.01％〜約0.5％を含む。特定の態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量で、約0.1％のビタミンEを含む。
【０１７２】
本明細書に開示される夜用モイスチャライザー組成物はまた、ビタミンCを含み得る。ビタミンCは、アスコルビン酸塩およびそれらのアナログ、例えばリン酸アスコルビルおよびパルミチン酸アスコルビルマグネシウムの形態で存在し得る。例えば、夜用モイスチャライザー組成物は、約0.00001％〜約0.1％のビタミンC、例えば約0.0005％〜約0.05％を含む。特定の態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量で、約0.0001％のビタミンCを含む。
【０１７３】
本明細書に開示される夜用モイスチャライザー組成物はまた、パンテノールを含み得る。例えば、夜用モイスチャライザー組成物は、約0.001％〜約1.0％のパンテノール、例えば約0.005％〜約0.05％を含む。特定の態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量で、約0.01％のパンテノールを含む。
【０１７４】
本明細書に開示される夜用モイスチャライザー組成物はさらに、スーパーオキシドジスムターゼを含み得る。例えば、夜用モイスチャライザー組成物は、約0.0000001％〜約0.1％のスーパーオキシドジスムターゼ、例えば約0.000005％〜約0.05％を含む。1つの態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、約0.00001％〜約0.1％のスーパーオキシドジスムターゼ、例えば約0.0005％〜約0.05％を含む。特定の態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量で、約0.000001％のスーパーオキシドジスムターゼを含む。
【０１７５】
本明細書に開示される夜用モイスチャライザー組成物はまた、チョウセンゴミシ果実の抽出物を含み得る。例えば、夜用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量で、約0.001％〜約5.0％のチョウセンゴミシ果実抽出物を含む。特定の態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、約0.3％のチョウセンゴミシ果実抽出物を含む。
【０１７６】
いくつかの態様において、夜用モイスチャライザー組成物はまた、ミヤコグサの抽出物を含む。例えば、夜用モイスチャライザー組成物は、組成物の重量で、約0.001％〜約0.5％のミヤコグサ抽出物を含む。特定の態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、約0.01％〜約0.1％、例えば約0.05％のミヤコグサ抽出物を含む。いくつかの態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、約0.3％のチョウセンゴミシ果実抽出物および約0.05％のミヤコグサ抽出物を含む。
【０１７７】
特定の例において、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含む夜用モイスチャライザー組成物はまた、皮膚に局所適用されたときに皮膚の外見を改善するのに十分な量で存在する、有効量のビタミンA、ビタミンE、パンテノール、ビタミンC、スーパーオキシドジスムターゼ、チョウセンゴミシ果実抽出物またはミヤコグサ抽出物の少なくとも1つを含む。1つの例において、夜用モイスチャライザー組成物は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカン、ブドウ種子抽出物、ビタミンA、ビタミンE、パンテノール、ビタミンC、スーパーオキシドジスムターゼ、チョウセンゴミシ果実抽出物およびミヤコグサ抽出物を含む。
【０１７８】
5つの要素を含む開示されるスキンケアレジメンのさらなる態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、夜用モイスチャライザー組成物の重量で、約0.01〜約0.05％または約0.02〜約0.04％、例えば約0.02、約0.025、約0.03、約0.035または約0.04％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を含む。特定の態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、重量で、約0.00001〜約0.0001％または約0.00002〜約0.00009％、例えば約0.00002、約0.00003、約0.00004、約0.00005、約0.00006、約0.00007、約0.00008または約0.00009％のベータ・グルカンを含む。いくつかの態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、重量で、約0.001〜約0.001％または約0.002〜約0.009％、例えば約0.002、約0.003、約0.004、約0.005、約0.006、約0.007、約0.008または約0.009％のベータ・グルカンを含む。さらなる態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、重量で、約0.0001〜約0.01％または約0.0002〜約0.0009％、例えば約0.0002、約0.0003、約0.0004、約0.0005、約0.0006、約0.0007、約0.0008または約0.0009％のブドウ種子抽出物を含む。1つの態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、重量で、約0.0001〜約0.1％または約0.0002〜約0.0009％、例えば約0.0002、約0.0003、約0.0004、約0.0005、約0.0006、約0.0007、約0.0008または約0.0009％のビタミンAを含む。さらなる態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、重量で、約0.00005〜約0.01％または約0.00009〜約0.0005％、例えば約0.00009、約0.0001、約0.0002、約0.0003、約0.0004または約0.0005％のビタミンCを含む。なおさらなる態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、重量で、約0.05〜約0.5％または約0.09〜約0.25％、例えば約0.09、約0.095、約0.1、約0.15、約0.2または約0.25％のビタミンEを含む。いくつかの態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、重量で、約0.002〜約0.5％または約0.009〜約0.05％、例えば約0.009、約0.01、約0.02、約0.03、約0.04または約0.05％のパンテノールを含む。なおさらなる態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、重量で、約0.0000005〜約0.0001％または約0.0000009％〜約0.000005％、例えば約0.0000009、約0.000001、約0.000002、約0.000003、約0.000004または約0.000005％のスーパーオキシドジスムターゼを含む。なおさらなる態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、重量で、約0.001〜約1％または約0.1〜約0.5％、例えば約0.1、約0.2、約0.3、約0.4または約0.5％のチョウセンゴミシ果実抽出物を含む。特定のさらなる態様において、夜用モイスチャライザー組成物は、重量で、約0.001〜約1％または約0.01〜約0.05％、例えば約0.01、約0.02、約0.03、約0.04または約0.05％のミヤコグサ抽出物を含む。成分は、組み合わせて含まれ得る。したがって、夜用モイスチャライザー組成物は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカン、ブドウ種子抽出物、ビタミンA、ビタミンC、ビタミンE、パンテノール、スーパーオキシドジスムターゼ、チョウセンゴミシ果実抽出物およびミヤコグサ抽出物をこれらの濃度で含む。この夜用モイスチャライザーは、クレンザー、トナー、セラムおよび／または昼用モイスチャライザーと共に使用され得る。
【０１７９】
E. セラム
セラム組成物は、生物学的に活性な成分を皮膚層の深部まで送達するために皮膚に適用されるスキンケア製品である。この理由から、セラム組成物は通常、より高濃度の活性成分を含む。セラム組成物は、液体、ジェルまたは半固体の形態であり得る。1つの例において、セラム組成物は、低粘性の液体として配合され、油よりも高い比率の水を含む。特定の態様において、セラム組成物は、皮膚の表面から深部に浸透するよう配合される。セラム組成物は、ポリアルキルシロキサンを含む合成または天然油、ならびに乳化剤、例えばアルコール、例えばエタノール、液体、pHバランス剤、および他の薬学的に許容される担体を含み得る。皮膚の深層へのセラム組成物の吸収を向上させ得る成分、例えばペンチレングリコールエタノール、ヘキサカプリル酸またはヘキサカプリン酸ジペンタエリスリチルおよびプロパンジオールもまた添加され得る。
【０１８０】
セラム組成物は、例えば、水、湿潤剤、pH調整剤、皮膚コンディショナー、増粘剤、界面活性剤、防腐剤および香料を含み得る。いくつかの態様において、セラム組成物は、セラム組成物の重量基準で、約50％〜約95％の水、例えば、約50％、約55％、約60％、約65％、約70％、約75％、約80％、約85％、約90％または約95％を含む。特定の態様において、セラム組成物は、セラム組成物の重量基準で、約2％〜約20％の湿潤剤、例えば約2％、約5％、約10％、約15％または約20％を含む。1つの態様において、セラム組成物は、セラム組成物の重量基準で、約0.1％〜約1％のpH調整剤、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。さらなる態様において、セラム組成物は、セラム組成物の重量基準で、約0.1％〜約4％の増粘剤、例えば約0.1％、約0.5％、約1％、約2％、約3％または約4％を含む。1つの態様において、セラム組成物は、セラム組成物の重量基準で、約2％〜約10％の皮膚コンディショニング剤、例えば約2％、約3％、約4％、約5％、約6％、約7％、約8％、約9％または約10％を含む。いくつかの態様において、セラム組成物は、セラム組成物の重量基準で、約1％〜約15％の界面活性剤、例えば約1％、約5％、約8％、約10％、約13％または約15％を含む。さらなる態様において、セラム組成物は、セラム組成物の重量基準で、最大約2％の防腐剤、例えば約0.1％、約0.5％、約0.8％、約1％、約1.3％、約1.5％、約1.8％または約2％を含む。1つの態様において、セラム組成物は、セラム組成物の重量基準で、最大約1％の香料、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。
【０１８１】
特定の態様において、セラム組成物は、セラム組成物の重量基準で、約60％〜約90％の水、例えば約60％、約70％、約80％または約90％を含む。1つの態様において、セラム組成物は、約2％〜約10％のグリセリン、例えば約2％、約5％、約7％または約10％を含む。特定の態様において、セラムは、約2％〜約10％のポリソルベート20、例えば約2％、約5％、約7％または約10％を含む。さらなる態様において、セラム組成物は、約2％〜約10％のジメチコン、例えば約2％、約5％、約7％または約10％を含む。いくつかの態様において、セラム組成物は、約0.1％〜約1％の水酸化ナトリウム、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。さらなる態様において、セラム組成物は、約1％〜約3％のポリソルベート60、例えば約1％、約1.5％、約2％、約2.5％または約3％を含む。なおさらなる態様において、セラム組成物は、約2％〜約10％のプロパンジオール、例えば約2％、約5％、約7％または約10％を含む。特定の態様において、セラム組成物は、約0.1％〜約3％のヒドロキシエチルアクリレート／アクリロイルジメチルタウリンナトリウムコポリマー、例えば約0.1％、約0.5％、約1％、約1.5％、約2％、約2.5％または約3％を含む。1つの態様において、セラム組成物は、約0.1％〜約1％のアクリレート/C10〜C30アルキルアクリレートクロスポリマー、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。なおさらなる態様において、セラム組成物は、約0.1％〜約1％の香料、例えば約0.1％、約0.3％、約0.5％、約0.8％または約1％を含む。さらなる態様において、セラム組成物は、約0.5％〜約1.5％の防腐剤、例えば約0.5％、約0.8％、約1％、約1.3％または約1.5％を含む。成分は、組み合わせて含まれ得る。
【０１８２】
いくつかの例において、セラム組成物は、組成物の重量に基づく比率で、約0.01％〜約10.0％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.00001％〜約1.0％のベータ・グルカンおよび約0.0001％〜約0.1％のブドウ種子抽出物を含む。例えば、セラム組成物は、組成物の重量で、約0.1％〜約0.5％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.0001％〜約0.1％のベータ・グルカンおよび約0.005％〜約0.1％のブドウ種子抽出物を含む。特定の態様において、セラム組成物は、組成物の重量で、約0.25％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.0005％のベータ・グルカンおよび約0.01％のブドウ種子抽出物を含む。いくつかの態様において、セラム組成物は、組成物の重量で、約0.25％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、約0.05％のベータ・グルカンおよび約0.01％のブドウ種子抽出物を含む組成物である。
【０１８３】
セラム組成物において使用されるブドウ種子抽出物は、水性ブドウ種子抽出物であり得る。1つの態様において、セラム組成物において使用されるベータ・グルカンは、水溶液である。
【０１８４】
本明細書に開示されるセラム組成物は、ビタミンAを含み得る。ビタミンAは、レチノールおよびそのアナログ、例えばパルミチン酸レチニルの形態で存在し得る。例えば、セラム組成物は、約0.00005％〜約1.0％のビタミンA、例えば約0.001％〜約0.1％を含む。特定の態様において、セラム組成物は、組成物の重量で、約0.01％のビタミンAを含む。
【０１８５】
本明細書に開示されるセラム組成物はまた、ビタミンEを含み得る。ビタミンEは、トコフェロールおよびそのアナログ、例えば酢酸トコフェリルの形態で存在し得る。例えば、セラム組成物は、約0.01％〜約10.0％のビタミンE、例えば約0.05％〜約5％を含む。特定の態様において、セラム組成物は、組成物の重量で、約0.1％のビタミンEを含む。
【０１８６】
本明細書に開示されるセラム組成物はまた、ビタミンCを含み得る。ビタミンCは、アスコルビン酸塩およびそれらのアナログ、例えばリン酸アスコルビルおよびパルミチン酸アスコルビルマグネシウムの形態で存在し得る。例えば、セラム組成物は、約0.0001％〜約1.0％のビタミンC、例えば約0.0005％〜約0.5％を含む。特定の態様において、セラム組成物は、組成物の重量で、約0.001％のビタミンCを含む。
【０１８７】
本明細書に開示されるセラム組成物はまた、パンテノールを含み得る。例えば、セラム組成物は、約0.001％〜約1.0％のパンテノール、例えば約0.005％〜約0.5％を含む。特定の態様において、セラム組成物は、組成物の重量で、約0.05％のパンテノールを含む。
【０１８８】
本明細書に開示されるセラム組成物はさらに、スーパーオキシドジスムターゼを含み得る。例えば、セラム組成物は、約0.000001％〜約1.0％のスーパーオキシドジスムターゼ、例えば約0.00005％〜約0.5％を含む。いくつかの態様において、セラム組成物は、約0.0001％〜約1.0％のスーパーオキシドジスムターゼ、例えば約0.005％〜約0.5％を含む。特定の態様において、セラム組成物は、組成物の重量で、約0.00001％のスーパーオキシドジスムターゼを含む。
【０１８９】
本明細書に開示されるセラム組成物はまた、ミヤコグサおよび／またはチョウセンゴミシ果実の抽出物を含み得る。例えば、セラム組成物は、組成物の重量で、約0.001％〜約5.0％のチョウセンゴミシ果実抽出物を含む。特定の態様において、セラム組成物は、約0.01％のチョウセンゴミシ果実抽出物を含む。例えば、セラム組成物は、組成物の重量で、約0.01％〜約5.0％のミヤコグサ抽出物を含む。特定の態様において、セラム組成物は、約0.5％のミヤコグサ抽出物を含む。いくつかの態様において、セラム組成物は、約0.01％のチョウセンゴミシ果実抽出物および約0.5％のミヤコグサ抽出物を含む。
【０１９０】
特定の例において、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含むセラム組成物はまた、皮膚に局所適用されたときに皮膚の外見を改善するのに十分な量で存在する、有効量のビタミンA、ビタミンE、パンテノール、ビタミンC、スーパーオキシドジスムターゼ、チョウセンゴミシ果実抽出物またはミヤコグサ抽出物の少なくとも1つを含む。1つの例において、セラム組成物は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカン、ブドウ種子抽出物、ビタミンA、ビタミンE、パンテノール、ビタミンC、スーパーオキシドジスムターゼ、チョウセンゴミシ果実抽出物またはミヤコグサ抽出物を含む。
【０１９１】
5つの要素を含む開示される組み合わせのさらなる態様において、セラム組成物は、セラム組成物の重量で、約0.1〜約0.5％または約0.2〜約0.4％、例えば約0.2、約0.25、約0.3、約0.35または約0.4％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を含む。1つの態様において、セラム組成物は、重量で、約0.0001〜約0.001％または約0.0002〜約0.0009％、例えば約0.0002、約0.0003、約0.0004、約0.0005、約0.0006、約0.0007、約0.0008または約0.0009％のベータ・グルカンを含む。いくつかの態様において、セラム組成物は、重量で、約0.01〜約0.1％または約0.02〜約0.09％、例えば約0.02、約0.03、約0.04、約0.05、約0.06、約0.07、約0.08または約0.09％のベータ・グルカンを含む。さらなる態様において、セラム組成物は、重量で、約0.005〜約0.05％または約0.01〜約0.04％、例えば約0.01、約0.02、約0.03または約0.04％のブドウ種子抽出物を含む。さらなる態様において、セラム組成物は、重量で、約0.0001〜約0.1％または約0.005〜約0.05％、例えば約0.005、約0.006、約0.007、約0.008、約0.009、約0.01、約0.02、約0.03、約0.04または約0.05％のビタミンAを含む。さらなる態様において、セラム組成物は、重量で、約0.0005〜約0.05％または約0.0009〜約0.005％、例えば約0.0009、約0.001、約0.002、約0.003、約0.004または約0.005％のビタミンCを含む。なおさらなる態様において、セラム組成物は、重量で、約0.05〜約0.5％または約0.09〜約0.25％、例えば約0.09、約0.095、約0.1、約0.15、約0.2または約0.25％のビタミンEを含む。なおさらなる態様において、セラム組成物は、重量で、約0.002〜約0.5％または約0.009〜約0.05％、例えば約0.009、約0.01、約0.02、約0.03、約0.04または約0.05％のパンテノールを含む。追加のさらなる態様において、セラム組成物は、重量で、約0.000005〜約0.0005％または約0.000009％〜約0.00005％、例えば約0.000009、約0.00001、約0.00002、約0.00003、約0.00004または約0.00005％のスーパーオキシドジスムターゼを含む。いくつかの態様において、セラム組成物は、約0.001〜約1％または約0.01〜約0.05％、例えば約0.01、約0.02、約0.03、約0.04または約0.05％のチョウセンゴミシ果実抽出物を含む。特定のさらなる態様において、セラム組成物は、約0.01〜約5％または約0.1〜約0.5％、例えば約0.1、約0.2、約0.3、約0.4または約0.5％のミヤコグサ抽出物を含む。成分は、組み合わせて含まれ得る。したがって、セラム組成物は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカン、ブドウ種子抽出物、ビタミンA、ビタミンC、ビタミンE、パンテノール、スーパーオキシドジスムターゼ、チョウセンゴミシ果実抽出物およびミヤコグサ抽出物をこれらの濃度で含み得る。このセラム組成物は、クレンザー、トナー、夜用モイスチャライザーおよび／または昼用モイスチャライザーと共に使用され得る。
【０１９２】
IV. 皮膚の外見を改善するスキンケアレジメンおよび方法
本明細書に開示される5つの要素の1つ、2つ、3つ、4つまたは5つすべての局所適用は、加齢の兆候の改善を含む皮膚の外見を改善し得、皮膚全体の健康に有益であり得る。したがって、本明細書に開示される要素の1つ、2つ、3つ、4つまたは5つの組み合わせを使用する方法が開示される。トナー組成物、昼用モイスチャライザー組成物、夜用モイスチャライザー組成物、クレンザー組成物およびセラム組成物を含む有効量の5つすべての要素の組み合わせを、加齢の少なくとも1つの兆候を有する皮膚表面に適用することによって、加齢した皮膚の外見を改善する工程を含む、スキンケア法の態様が示されている。1つまたは複数の要素、例えば、2つ、3つ、4つまたは5つすべての要素の組み合わせが、加齢の少なくとも1つの兆候の外見を改善するのに十分な期間、適用される。要素の少なくとも1つまたはすべての適用は、皮膚の健康を改善するため、例えば日光への曝露または他の有害な環境刺激からのダメージを軽減するため、皮膚におけるそれらのダメージ効果を減少させるために使用され得る。開示される方法は、皮膚に対するROSおよび他の環境曝露、例えば大気汚染および紫外線照射の影響を減少させ得る。重金属を含む都市環境における大気汚染である都市ダストは、例えば、金属が混入した空気に曝露される都市部で生活および労働を行っている人々にとって、皮膚の健康への脅威となり得る。本明細書に開示される1つ、2つ、3つ、4つまたは5つすべての要素の局所適用は、都市ダストからの皮膚ダメージを減少させ得る。
【０１９３】
いくつかの態様において、開示される方法は、実施例に示されるアッセイおよび分析によって測定されるように皮膚の健康を改善するよう、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含む1つまたは複数の組成物を使用することを含む。開示される脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、5ステップの組み合わせで使用される場合、皮膚の処置において有益である抗酸化特性を有するポリフェノールのレベルを保存または改善している点で有利である。
【０１９４】
開示される組成物および方法は、皮膚の外見を改善するために使用される。この方法は、有効量の1つ、2つ、3つ、4つまたは5つすべての要素を皮膚に適用することを含む。2つ、3つ、4つまたは5つの要素の組み合わせが、皮膚に適用され得る。いくつかの態様において、皮膚の加齢の少なくとも1つの兆候が改善される。皮膚の外見の改善は、例えば、皮膚に存在するしわの深さ、長さ、幅または数、ならびに皮膚の粗さ、たるみ、毛穴サイズ、色素過剰、滑らかさ、輝きまたは明るさ、堅さおよび皮膚の張りの均等性を分析することによって決定され得る。皮膚に対する利益の決定は、これらの特性の分析によって評価され得、客観的な身体的測定および主観的な自己評価をを含み得る。身体的測定は、皮膚を機械的に膨らませることができる程度を測定する機器、例えば、キュートメーター、および画像化システム、例えばVISIA顔色分析システムにより行われる測定を含むがこれらに限定されない。
【０１９５】
いくつかの態様において、スキンケア法は、5つの要素を含む組み合わせを適用することを含む。適用される組成物は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含み、これらの組成物は皮膚の健康および皮膚の外見を改善し得る。本明細書に開示される方法の使用は、内因的（例えば、年齢的）および外因的（例えば、環境的）な皮膚のダメージを改善し得る。十分な期間の有効量の1つまたは複数の開示される組成物の皮膚への適用は、皮膚の外見の測定可能な改善を提供する。
【０１９６】
早期老化の兆候を示す皮膚は、開示される方法を用いて処置され得る。早期老化の兆候を示す皮膚は、対象の身体の任意の場所に存在し得る。最も関心対象となる皮膚表面は、通常、顔の皮膚表面および首および胸部の表面を含む、典型的に衣類によって覆われない皮膚表面である。例えば、皮膚表面は、頬、額および眼窩周囲の表面を含む顔の皮膚表面であり得る。眼窩周囲の表面は、目の下および目尻領域を含むがこれらに限定されない。これらのいずれも、開示される方法を用いて処置され得る。
【０１９７】
いくつかの態様において、顔の皮膚は、開示される方法を用いて処置される。例えば、皮膚は、眼窩周囲、額または頬領域のものであり得る。皮膚は、処置される対象の年齢より年上の皮膚において通常見られるダメージを示す点で、早期老化している皮膚であり得る。いくつかの態様において、皮膚は、対象の年齢よりも5、6、7、8、9、10、11、12、13、14または15歳年上に見える。1つの非限定的な例において、皮膚は、対象が約25歳であり得るにもかかわらず約30歳であることを示す環境的またはその他のダメージを有し得る。いくつかの態様において、皮膚は、都市ダストによるダメージを受けている。
【０１９８】
要素は、レジメンと呼ばれる規則的な処置スケジュールにしたがい皮膚に適用され得る。5つの要素の1つまたは複数、例えば、1つ、2つ、3つ、4つまたは5つすべての要素、の規則的かつ一貫的な適用により、皮膚の外見が改善される。各要素は、上で詳細に開示されている。任意の開示されるクレンザー、トナー、昼用モイスチャライザー、セラムおよび夜用モイスチャライザーは、任意の組み合わせで使用され得る。
【０１９９】
いくつかの態様において、この方法は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含む5つの要素の皮膚への適用を含む。いくつかの態様において、この方法は、皮膚への定期的な適用を含む。1つの態様において、少なくとも1つの要素は、約24時間に1回（1日1回）適用される。いくつかの態様において、少なくとも1つの要素は、約1日2回（every about twice daily）適用される。適用間の時間は様々であり得、約8、約9、約10、約11、約12、約13、約14、約15、約16、約17、約18、約19、約20、約21、約22、約23または約24時間であり得る。特定の態様において、少なくとも1つの要素が午前に1回適用され、別の要素が午後に1回適用される。
【０２００】
別の態様において、5つの要素は、約24時間ごとに1回（1日1回）適用される。いくつかの態様において、5つの要素は、約1日2回適用される。適用間の時間は様々であり得、約8、約9、約10、約11、約12、約13、約14、約15、約16、約17、約18、約19、約20、約21、約22、約23または約24時間であり得る。特定の態様において、5つの要素のうちの少なくとも1つが午前に1回適用され、5つの要素のうちの別の1つが午後に1回適用される。
【０２０１】
本明細書に開示される任意のスキンケア法において、5つすべての要素が各処置で適用される必要はない。例えば、5つの要素のあるサブセットは1日1回適用され得、5つの要素のあるサブセットは1日2回適用され得る。特定の態様において、クレンザーおよびセラム要素は各々1日2回、例えば午前と午後に適用され、昼用モイスチャライザー、トナーおよび夜用モイスチャライザー要素は各々1日1回適用される、例えば昼用モイスチャライザーは午前にのみ適用され、夜用モイスチャライザーおよび／またはトナーは午後にのみ適用される。別の態様において、昼用モイスチャライザーは午前に適用され、夜用モイスチャライザーは午後に適用される。別の態様において、昼用モイスチャライザー組成物は環境への曝露の前に適用され得、夜用モイスチャライザー組成物は午後に適用され得る。
【０２０２】
いくつかの態様において、この方法は、（a）午前に、有効量の第1適用クレンザー組成物を皮膚に適用する工程、（b）第1適用クレンザー組成物を皮膚から洗い流す工程、（c）工程（b）の後に、有効量の昼用モイスチャライザー組成物および有効量のセラム組成物を適用する工程、d）有効量の第2適用クレンザー組成物を皮膚に適用する工程、（e）第2適用クレンザー組成物を皮膚から洗い流す工程、（f）有効量のトナー組成物、セラム組成物および有効量の夜用モイスチャライザー組成物を皮膚に適用する工程を含み、工程a〜cおよびd〜fが約8〜約16時間、例えば8、9、10、11、12、13、14、15または16時間の間隔をあけて行われる。工程a〜cは午前に行われ得、工程d〜fは午後に行われ得る。
【０２０３】
本明細書に開示される任意のスキンケア法において、5つの要素は、任意の順で皮膚に適用され得る。さらなる態様において、クレンザー、セラムおよび昼用モイスチャライザーは午前に適用され、夜用モイスチャライザー、トナーおよび任意でセラムは、午後に適用される。1つの例において、クレンザー、セラム、トナーおよび昼用モイスチャライザーは、同時に、その順で適用される。
【０２０４】
いくつかの態様において、クレンザー組成物が最初に適用され、皮膚が洗い流される。クレンザーは、1日1回、2回、3回、4回または5回使用され得る。いくつかの非限定的な例において、クレンザーは、1日1回または2回使用され、その後に皮膚から洗い流される。さらなる非限定的な例において、クレンザーは午前に使用され、皮膚から洗い流される。
【０２０５】
さらなる態様において、午前に、クレンザー組成物が最初に適用され、皮膚が洗い流される。クレンザー組成物を洗い流した後、セラム組成物および昼用モイスチャライザー組成物が、任意の順で適用される。午後に、クレンザー組成物が最初に適用され、皮膚が洗い流される。クレンザー組成物を洗い流した後、夜用モイスチャライザーおよびトナーが、任意の順で適用される。
【０２０６】
さらなる態様において、クレンザー組成物を洗い流した後に、トナー組成物およびセラム組成物が（任意の順で）適用される。1つの非限定的な例において、トナーは、セラムより前に皮膚に適用される。別の非限定的な例において、セラムは、トナーより前に皮膚に適用される。いくつかの態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、トナー組成物および／またはセラム組成物の適用後に皮膚に適用される。昼用モイスチャライザーが使用されるいくつかの態様において、昼用モイスチャライザー組成物は、環境への曝露の前に（すなわち、午前に）適用され得る。
【０２０７】
夜用モイスチャライザー組成物の適用は、クレンザー、トナー、セラムおよび／または昼用モイスチャライザー組成物から分離され得る。例えば、夜用モイスチャライザー組成物は、午後に、例えば就寝時または夕食時に皮膚に適用され得る。
【０２０８】
スキンケア法は、加齢の少なくと1つの兆候が改善する任意の期間、適用され得る。例えば、有効量の5つの要素は、少なくとも約1日、少なくとも約1週間、少なくとも約2週間、少なくとも約4週間、少なくとも約8週間、または少なくとも約12週間、皮膚に適用され得る。有効量の5つの要素は、1、2、3、4、5または6ヶ月間適用され得る。いくつかの態様において、5つの要素は、少なくとも約1週間、少なくとも1日1回、皮膚表面に適用される。さらなる態様において、5つの要素は、少なくとも約1週間、少なくとも1日2回、皮膚表面に適用される。さらなる態様において、5つの要素は、少なくとも約12週間、少なくとも1日1回、皮膚に適用される、または少なくとも約12週間、少なくとも1日2回、皮膚表面に適用される。
【０２０９】
本明細書に示される任意のスキンケア法のいくつかの態様において、加齢した皮膚の外見の改善は、皮膚のしわの深さ、皮膚のしわの数、皮膚のしわの長さ、または皮膚のしわの幅の少なくとも1つの減少を含む。特定の態様において、しわは、眼窩周囲のしわ、額のしわ、または頬のしわである。本明細書に示される任意のスキンケア法のさらなる態様において、加齢した皮膚の外見の改善は、皮膚の粗さの減少、皮膚の滑らかさの増加、皮膚の輝きの増加、皮膚の堅さの増加、皮膚のたるみの減少、皮膚の色合いの均等性の増加、毛穴サイズの減少、または皮膚の色素過剰の減少の少なくとも1つを含む。
【０２１０】
皮膚の改善はまた、以下の少なくとも1つを含み得る：顔の線を目立たなくすること、顔の線および／またはしわをふっくらした感じにすること、眼窩下の線および／または眼窩周囲の線の外見を改善すること、目尻の外見を改善すること、しわ、特に頬、額（例えば、目と目の間の垂直のしわ、目の上の水平のしわ）および／または口周囲にある顔のしわ、特に深いしわ（wrinkles）、しわ（fold）またはしわ（crease）を見えにくくおよび／または見えなくすること、皮膚の柔軟性を改善すること、細かいおよび／または深い線、しわ（fold）およびしわ（crease）を減少させるおよび／または消すこと、皮膚を滑らかにすること。改善された皮膚の質を測定する方法は、当技術分野で公知である。例えば、米国特許第6,866,856号および同第6,682,763号を参照のこと。
【０２１１】
光沢、透明感および明度を強くする、柔らかさ、柔軟性および滑らかさを含む、皮膚の質感が改善され得る。主観的および客観的に測定され得る皮膚のさらなるおよび重要な質は、皮膚の緩み、または逆に皮膚の緊張、ならびに皮膚の肌触り上の細かい線および粗い線の存在および規模を含むがこれらに限定されない。
【０２１２】
1つの態様において、この方法は、5つの要素の組み合わせの使用を含み、要素は、トナー組成物、昼用モイスチャライザー組成物、夜用モイスチャライザー組成物、クレンザー組成物およびセラム組成物であり、各要素は、（i）液体マスカダインポマース抽出物を生成するよう液体ブロンズマスカダインポマース抽出物と液体紫マスカダインポマース抽出物を含み、a）ブロンズマスカダインポマース抽出物および紫マスカダインポマース抽出物が水性抽出物であり、b）ブロンズマスカダインポマース抽出物および紫マスカダインポマース抽出物の混合物がマスカダインポマース抽出物内でのエラグ酸の溶解を促進し、c）ブロンズマスカダインポマース抽出物および紫マスカダインポマース抽出物がろ過および発酵された抽出物であり、d）マスカダインポマース抽出物が少なくとも約2％のポリフェノール含量を有する、脱色マスカダイン（ビティス・ロツンディフォリア）ポマース溶媒抽出物、（ii）ベータ・グルカン、ならびに（iii）ブドウ種子抽出物を含み、皮膚表面への5つの要素の適用により皮膚の外見が改善される。いくつかの態様において、皮膚表面は、顔の皮膚表面である。特定の態様において、トナー組成物、昼用モイスチャライザー組成物、夜用モイスチャライザー組成物およびクレンザー組成物の各々は、トナー、昼用モイスチャライザー、夜用モイスチャライザーまたはクレンザー組成物の重量で、約0.001％〜約1.0％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、トナー組成物、昼用モイスチャライザー組成物、夜用モイスチャライザー組成物またはクレンザー組成物の重量で、約0.000001％〜約0.1％のベータ・グルカンおよびトナー組成物、昼用モイスチャライザー組成物、夜用モイスチャライザー組成物またはクレンザー組成物の重量で、約0.00001％〜約0.01％のブドウ種子抽出物を含む。さらなる態様において、セラム組成物は、セラム組成物の重量で、約0.01％〜約10.0％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、セラム組成物の重量で、約0.00001％〜約1.0％のベータ・グルカン、およびセラム組成物の重量で、約0.0001％〜約0.1％のブドウ種子抽出物を含む。
【０２１３】
1つの態様において、開示される方法は、トナー組成物、昼用モイスチャライザー組成物、夜用モイスチャライザー組成物および／またはクレンザー組成物の使用を含み、トナー組成物、昼用モイスチャライザー組成物、夜用モイスチャライザー組成物および／またはクレンザー組成物の各々は、トナー、昼用モイスチャライザー、夜用モイスチャライザーまたはクレンザー組成物の重量で、約0.01％〜約0.05％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、トナー、昼用モイスチャライザー、夜用モイスチャライザーおよび／またはクレンザー組成物の重量で、約0.00001％〜約0.01％のベータ・グルカン、ならびにトナー組成物、昼用モイスチャライザー組成物、夜用モイスチャライザー組成物および／またはクレンザー組成物の重量で、約0.0001％〜約0.001％のブドウ種子抽出物を含む。さらなる態様において、セラム組成物は、セラム組成物の重量で、セラム組成物の重量で、約0.1％〜約0.5％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、セラム組成物の重量で、約0.0001％〜約0.1％のベータ・グルカン、およびセラム組成物の重量で、約0.005％〜約0.1％のブドウ種子抽出物を含む。
【０２１４】
本明細書に開示される方法で使用される要素のいずれも、さらなる成分を含み得る。いくつかの態様において、5つの要素の少なくとも1つは、パンテノール、ビタミンA、ビタミンC、ビタミンE、スーパーオキシドジスムターゼ、ミヤコグサ抽出物、チョウセンゴミシ果実抽出物または上記成分の任意の組み合わせをさらに含む。さらなる態様において、5つの要素のすべてが、パンテノール、ビタミンA、ビタミンC、ビタミンE、スーパーオキシドジスムターゼ、ミヤコグサ抽出物、チョウセンゴミシ果実抽出物または上記成分の任意の組み合わせをさらに含む。特定の態様において、ビタミンCはリン酸アスコルビルマグネシウムの形態であり、ビタミンEは酢酸ビタミンEの形態であり、ビタミンAはパルミチン酸ビタミンAまたはレチノールの形態のいずれかである。
【０２１５】
いくつかの態様において、5つの要素の少なくとも1つは、組成物の重量で、約0.001％〜約1.0％のパンテノール、約0.00005％〜約1.0％のビタミンA、約0.00001〜約0.1％のビタミンC、約0.001％〜約1.0％のビタミンE、約0.00001％〜約0.1％のスーパーオキシドジスムターゼ、またはそれらの任意の組み合わせを含む。
【０２１６】
いくつかの態様において、5つの要素の少なくとも1つは、ミヤコグサ抽出物、チョウセンゴミシ果実抽出物または両方をさらに含む。特定の態様において、5つの要素の少なくとも1つは、日焼け止め剤を含み、これは例えば、約50のSPFを有し得る。この要素は、昼用モイスチャライザーであり得る。
【０２１７】
1つの態様において、開示されるスキンケア法は、トナー、昼用モイスチャライザー、夜用モイスチャライザー、クレンザーおよび／またはセラム要素を含む組み合わせの使用を含み得、
A）トナー組成物は、トナー組成物の重量で約0.025％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.00005％のベータ・グルカン、重量で約0.0005％のブドウ種子抽出物、重量で約0.0005％のビタミンA、重量で約0.0001％のビタミンC、重量で約0.01％のビタミンE、重量で約0.001％のパンテノール、および重量で約0.000001％のスーパーオキシドジスムターゼを含み、
B）昼用モイスチャライザー組成物は、昼用モイスチャライザー組成物の重量で約0.025％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.005％のベータ・グルカン、重量で約0.0002％のブドウ種子抽出物、重量で約0.0002％のビタミンC、重量で約0.01％のビタミンE、重量で約0.0005％のパンテノール、および重量で約0.0002％のスーパーオキシドジスムターゼを含み、
C）夜用モイスチャライザー組成物は、夜用モイスチャライザー組成物の重量で約0.025％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.00005％のベータ・グルカン、重量で約0.0005％のブドウ種子抽出物、重量で約0.0005％のビタミンA、重量で約0.0001％のビタミンC、重量で約0.1％のビタミンE、重量で約0.01％のパンテノール、重量で約0.000001％のスーパーオキシドジスムターゼ、重量で約0.3％のチョウセンゴミシ果実抽出物、および重量で約0.05％のミヤコグサ抽出物を含み、
D）クレンザー組成物は、クレンザー組成物の重量で約0.025％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.00005％のベータ・グルカン、重量で約0.0005％のブドウ種子抽出物、重量で約0.0005％のビタミンA、重量で約0.0001％のビタミンC、重量で約0.01％のビタミンE、重量で約0.001％のパンテノール、および重量で約0.0000001％のスーパーオキシドジスムターゼを含み、
E）セラム組成物は、セラム組成物の重量で約0.25％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.0005％のベータ・グルカン、重量で約0.01％のブドウ種子抽出物、重量で約0.01％のビタミンA、重量で約0.001％のビタミンC、重量で約0.1％のビタミンE、重量で約0.05％のパンテノール、重量で約0.00001％のスーパーオキシドジスムターゼ、重量で約0.01％のチョウセンゴミシ果実抽出物、および重量で約0.5％のミヤコグサ抽出物を含む。
【０２１８】
別の態様において、開示されるスキンケア法は、トナー、昼用モイスチャライザー、夜用モイスチャライザー、クレンザーおよび／またはセラム要素を含む組み合わせの使用を含み得、
A）トナー組成物は、トナー組成物の重量で約0.04％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.00001％のベータ・グルカン、重量で約0.0001％のブドウ種子抽出物、重量で約0.0001％のビタミンA、重量で約0.0005％のビタミンC、重量で約0.05％のビタミンE、重量で約0.005％のパンテノール、および重量で約0.000005％のスーパーオキシドジスムターゼを含み、
B）昼用モイスチャライザー組成物は、昼用モイスチャライザー組成物の重量で約0.04％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.00001％のベータ・グルカン、重量で約0.0005％のブドウ種子抽出物、重量で約0.0005％のビタミンC、重量で約0.05％のビタミンE、重量で約0.0001％のパンテノール、および重量で約0.000005％のスーパーオキシドジスムターゼを含み、
C）夜用モイスチャライザー組成物は、夜用モイスチャライザー組成物の重量で約0.04％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.00001％のベータ・グルカン、重量で約0.0001％のブドウ種子抽出物、重量で約0.0001％のビタミンA、重量で約0.0005％のビタミンC、重量で約0.4％のビタミンE、重量で約0.003％のパンテノール、重量で約0.000003％のスーパーオキシドジスムターゼ、および重量で約0.5％のチョウセンゴミシ果実抽出物を含み、
D）クレンザー組成物は、クレンザー組成物の重量で約0.04％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.00001％のベータ・グルカン、重量で約0.0001％のブドウ種子抽出物、重量で約0.0003％のビタミンC、重量で約0.05％のビタミンE、重量で約0.003％のパンテノール、および重量で約0.000005％のスーパーオキシドジスムターゼを含み、
E）セラム組成物は、セラム組成物の重量で約0.4％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.0001％のベータ・グルカン、重量で約0.03％のブドウ種子抽出物、重量で約0.05％のビタミンA、重量で約0.005％のビタミンC、重量で約0.5％のビタミンE、重量で約0.001％のパンテノール、重量で約0.00003％のスーパーオキシドジスムターゼ、重量で約0.05％のチョウセンゴミシ果実抽出物、および重量で約0.3％のミヤコグサ抽出物を含む。
【０２１９】
さらなる態様において、開示されるスキンケア法は、トナー、昼用モイスチャライザー、夜用モイスチャライザー、クレンザーおよび／またはセラム要素を含む組み合わせの使用を含み得、
A）トナー組成物は、トナー組成物の重量で約0.01％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.0003％のベータ・グルカン、重量で約0.0001％のブドウ種子抽出物、重量で約0.0003％のビタミンA、重量で約0.0005％のビタミンC、重量で約0.05％のビタミンE、重量で約0.003％のパンテノール、および重量で約0.00005％のスーパーオキシドジスムターゼを含み、
B）昼用モイスチャライザー組成物は、昼用モイスチャライザー組成物の重量で約0.04％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.0001％のベータ・グルカン、重量で約0.0005％のブドウ種子抽出物、重量で約0.0005％のビタミンC、重量で約0.0003％のパンテノール、および重量で約0.0005％のスーパーオキシドジスムターゼを含み、
C）夜用モイスチャライザー組成物は、夜用モイスチャライザー組成物の重量で約0.01％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.0003％のベータ・グルカン、重量で約0.0001％のブドウ種子抽出物、重量で約0.0005％のビタミンC、重量で約0.2％のビタミンE、重量で約0.0005％のパンテノール、および重量で約0.1％のチョウセンゴミシ果実抽出物を含み、
D）クレンザー組成物は、クレンザー組成物の重量で約0.01％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.0003％のベータ・グルカン、重量で約0.0001％のブドウ種子抽出物、重量で約0.0001％のビタミンA、重量で約0.0005％のビタミンC、重量で約0.004％のパンテノール、重量で約0.0000005％のスーパーオキシドジスムターゼ、および重量で約0.1％のチョウセンゴミシ果実抽出物を含み、
E）セラム組成物は、セラム組成物の重量で約0.05％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.005％のベータ・グルカン、重量で約0.03％のブドウ種子抽出物、重量で約0.05％のビタミンA、重量で約0.005％のビタミンC、重量で約0.3％のビタミンE、重量で約0.002％のパンテノール、重量で約0.00005％のスーパーオキシドジスムターゼ、重量で約0.03％のチョウセンゴミシ果実抽出物、および重量で約0.4％のミヤコグサ抽出物を含む。
【０２２０】
さらに別の態様において、開示されるスキンケア法は、トナー、昼用モイスチャライザー、夜用モイスチャライザー、クレンザーおよび／またはセラム要素を含む組み合わせの使用を含み得、
A）トナー組成物は、トナー組成物の重量で約0.025％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.005％のベータ・グルカン、重量で約0.0005％のブドウ種子抽出物、重量で約0.0005％のビタミンA、重量で約0.0001％のビタミンC、重量で約0.01％のビタミンE、重量で約0.01％のパンテノール、および重量で約0.0001％のスーパーオキシドジスムターゼを含み、
B）昼用モイスチャライザー組成物は、昼用モイスチャライザー組成物の重量で約0.025％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.005％のベータ・グルカン、重量で約0.0002％のブドウ種子抽出物、重量で約0.0002％のビタミンC、重量で約0.01％のビタミンE、重量で約0.005％のパンテノール、および重量で約0.0002％のスーパーオキシドジスムターゼを含み、
C）夜用モイスチャライザー組成物は、夜用モイスチャライザー組成物の重量で約0.025％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.005％のベータ・グルカン、重量で約0.0005％のブドウ種子抽出物、重量で約0.0005％のビタミンA、重量で約0.0001％のビタミンC、重量で約0.1％のビタミンE、重量で約0.01％のパンテノール、重量で約0.0001％のスーパーオキシドジスムターゼ、重量で約0.3％のチョウセンゴミシ果実抽出物、および重量で約0.05％のミヤコグサ抽出物を含み、
D）クレンザー組成物は、クレンザー組成物の重量で約0.025％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.005％のベータ・グルカン、重量で約0.0005％のブドウ種子抽出物、重量で約0.0005％のビタミンA、重量で約0.0001％のビタミンC、重量で約0.01％のビタミンE、重量で約0.01％のパンテノール、および重量で約0.0001％のスーパーオキシドジスムターゼを含み、
E）セラム組成物は、セラム組成物の重量で約0.25％の脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、重量で約0.05％のベータ・グルカン、重量で約0.01％のブドウ種子抽出物、重量で約0.01％のビタミンA、重量で約0.001％のビタミンC、重量で約0.1％のビタミンE、重量で約0.05％のパンテノール、重量で約0.001％のスーパーオキシドジスムターゼ、重量で約0.01％のチョウセンゴミシ果実抽出物、および重量で約0.5％のミヤコグサ抽出物を含む。
【０２２１】
いくつかの態様において、この（これらの）要素で使用される脱色マスカダイン（ビティス・ロツンディフォリア）ポマース溶媒抽出物は、本明細書に開示されるようにして調製される。いくつかの態様において、5つの要素の各々における脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の紫マスカダインポマース抽出物に対するブロンズマスカダインポマース抽出物の比は、約0.1〜約10（重量対重量）の範囲である。特定の態様において、5つの要素の各々における脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の紫マスカダインポマース抽出物に対するブロンズマスカダインポマース抽出物の比は、約0.3〜約3（重量対重量）の範囲である。
【０２２２】
さらなる態様において、この（これらの）要素に含まれる脱色マスカダインポマース溶媒は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の重量で、約7％〜約10％のポリフェノールおよび約5％未満の単糖類を含み、縮合タンニンは、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の総ポリフェノール含量の約10％未満である。1つの態様において、5つの要素の各々における脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の総ポリフェノールは、少なくとも約85％の、縮合タンニン以外のポリフェノールからなる。これらの要素に含まれる脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の重量で、約0.5％〜約5％の繊維、約7％〜約14％のタンパク質、約0.05％〜約3％の脂肪および約15〜約20％の有機酸をさらに含む。さらなる態様において、5つの要素の各々における脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の重量で、約1％〜約2％の繊維、約7％〜約8％のタンパク質、約0.5％〜約1.5％の脂肪および約15.5％〜約16.5％の有機酸をさらに含む。
【０２２３】
なおさらなる態様において、この（これらの）要素の各々における脱色マスカダインポマース溶媒抽出物のフェノール系内容物は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の重量で、約2〜約3％のエラグ酸および約30〜約31％の没食子酸を含む。例えば、1つの態様において、5つの要素の各々における脱色マスカダインポマース溶媒抽出物のフェノール系内容物は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の重量で、約2〜約3％のエラグ酸、約3〜約4％のエラグ酸グリコシド、約30〜約31％の没食子酸、約2〜約3％のケルセチン、約10〜約11％のガロタンニン、約7〜約8％のエラジタンニン、約29〜約30％のプロアントシアニジン、約4〜約5％のアントシアニン、約2〜約3％のカテキン、および約6〜約7％のフェノール酸を含む
【実施例】
【０２２４】
V. 実施例
各要素が脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物の組み合わせを含む、5つの要素（トナー、昼用モイスチャライザー、夜用モイスチャライザー、クレンザーおよびセラム）を含むスキンケアレジメンおよび方法は、実施例に示されるアッセイおよび分析試験により示されるように、皮膚の外見を改善し得る。
【０２２５】
皮膚に対する脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の作用様式を示す例示的な結果が、実施例1および図24〜32に示されている。脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を含む組成物の、抗酸化特性を含む、有益な効果が、エラスターゼ、コラゲナーゼ、DPPH、TT二量体、ケラチン生成細胞生存率およびチロシナーゼ試験に関して図24にまとめられている。これらの試験は、以下に記載されるようにして行った。
【０２２６】
スキンケレジメンおよび方法における5つの要素の使用に関する例示的な結果が、実施例2および図1〜20に示されている。これらの分析において使用したアッセイおよび試験は、皮膚に存在するしわの深さ、長さ、幅または数ならびに皮膚の粗さ、たるみ、毛穴サイズ、色素過剰、滑らかさ、輝きまたは明るさ、堅さおよび皮膚の色合いの均等性を含む複数のパラメータの評価により証明されるように、5つの要素の使用による統計的に有意な皮膚の外見の改善を実証した。これらのパラメータは、以下に記載されるようにして分析および／または定量した。
【０２２７】
皮膚格付けパラメータは、皮膚の健康および外見の総合評価、ならびに皮膚の輝き、質感、しわ形成、皮膚の色合い／着色の均等性、粗さ、毛穴サイズおよび堅さの分析を含む。これらのパラメータを、訓練された皮膚格付け担当者により標準化された尺度で格付けし、彼らは、以下の数値の定義：0＝なし（可能性のある最良の状態）；1〜3＝軽度；4〜6＝中等度；7〜9＝重度（可能性のある最悪の状態）、にしたがう改定版グリフィス10点尺度を用いて皮膚を評価し、皮膚の状態をより正確に表現するために必要に応じて中間点の尺度を使用した。以下のパラメータを、示されている尺度の評価基準を用いて評価した。
【０２２８】
2020519642.tif 000007
【０２２９】
生体計測機器による測定のために、以下の手順を使用した。以下の生体計測機器による測定に参加させる前に、対象を、周囲温度および湿度条件に順応させるために、病院内の指定の部屋で少なくとも15分間休息させた。指定の部屋は、約68〜約75゜Fの温度および約35〜約65％の範囲の相対湿度で維持した。指定の控室および／または機器測定室の温度および湿度を、適用可能な研究訪問の間、1時間ごとに記録した。測定を行うことができなかった場合、対象の数、場所、時点、機器および可能であれば理由を、注記として記録し提出した。
【０２３０】
キュートメーター測定：基準時、第1週、第2週、第4週、第8週および第12週に、1回のキュートメーター測定を、右眼窩骨（眼の中心直下）で行った。キュートメーターMPA 580（Courage + Khazaka, Germany）を用いて、皮膚の粘弾性（すなわち、堅さおよび弾力性）を測定した。この機器により、皮膚の小さな領域に真空を適用し、皮膚の弾力反応を測定した。測定の間、プローブを90°の角度で維持した。
【０２３１】
約8 mmプローブ（標準設定）を通じて、約300 mbarの負圧を適用および解放した。測定は約30秒間継続し、その間に約5秒間のオン（真空）時間および約10秒間のオフ（皮膚の解放）時間のサイクルを2回繰り返した。吸引の適用および解放の間のプローブへおよびプローブからの皮膚の動きを記録した。伸展性、復元力、純粋な弾力性および生物学的な弾力性／堅さの量を記録した。
【０２３２】
色彩色差計測定：色彩色差計測定は、基準時、第1週、第2週、第4週、第8週および第12週に、各対象の左頬の中心部で（眼の隅部から下に延ばした線と鼻の底部を水平に通る線の交差点で）行った。この装置は、3回の測定を行い、平均値を生成し、これを記録した。色彩色差計CR-400（Konica Minolta, Japan）をD65光源に設置した。皮膚の色を評価するために、以下のデータを色彩色差計によって収集した：L*値は、黒〜白のグレイスケールにおける相対的な輝度を表し；スコアは、皮膚の色合いが明るくなるほど増加した。
【０２３３】
画像化手順を、以下に記載した。撮影手順の前に、病院職員が、研究手順に記載されるように対象が化粧をしていないきれいな顔であることを確認した。対象は、撮影される領域から装飾品を取り外し、撮影を行う前に病院内の大気条件に対して少なくとも約15分間平衡化させられた。対象は、髪が顔にかからないように黒色または灰色の艶なしのヘッドバンドを提供され、適切なヘッドバンドの配置について指導を受けた。対象は、黒色の艶なしのシャツまたは対象の衣類を覆う黒色もしくは灰色の艶なしの衣類を提供された。
【０２３４】
VISIA画像：対象は、眼を静かに閉じ、中間的な笑わない表情をするよう指示された。対象は、中心、右側および左側視点の、各撮影のために、注意深く配置された。基準時、第4週、第8週および第12週に、Canon Mark II 5Dまたは6DデジタルSLRカメラ（Canon Incorporated, Tokyo, Japan）を搭載したVISIA CRフォトステーション（Canfield Imaging Systems, Fairfield, New Jersey）を以下の照明条件を用いて、各対象の顔全体デジタル画像（右側、左側および中心視点）を撮影した：標準照明1＝可視（明）；標準照明2＝可視；標準照明3＝目尻領域に対するレーキ光；垂直偏光；平行偏光またはUVスポット（青）。
【０２３５】
VisioScan画像：VisioScan VC 98（Courage + Khazaka electronic GmbH）は、高い解像度を有するUVA光（約340〜約400 nm）ビデオカメラであり、これを用いて皮膚の表面を直接的に研究した。画像は、皮膚の表面の質感および乾燥を捕捉する。画像化領域は、約480 x 約640ピクセルの解像度の約6 mm x 約8 mmとした。VisioScanソフトウェアを用いて、右頬の皮膚の粗さに関して画像を計算および分析した。画像は、基準時、第1週、第2週、第4週、第8週および第12週に撮影した。
【０２３６】
実施例1. 皮膚に対する脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の有益な効果を示すバイオアッセイ
様々なバイオアッセイが、皮膚に対する脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の作用様式を実証した。エラスターゼ、コラゲナーゼ、DPPH、TT二量体、ケラチン生成細胞生存率およびチロシナーゼ試験で、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を含む例示的なスキンケア組成物の有益な効果が示された。これらの試験は、ヒト皮膚モデル（MatTek EPIDERM（商標））において、以下のように実施した。
【０２３７】
MatTek EPIDERM（商標）モデルは、多層化された、高度に分化したヒト表皮モデルを形成するよう培養された正常なヒト由来表皮ケラチン生成細胞を利用する。微細構造分析は、インビボ表皮に特徴的なパターンで配置されたケラトヒアリン顆粒、トノフィラメント束、デスモソームおよび細胞間ラメラ脂質層を含む多層角質層の存在を明らかにした。成熟表皮特異的分化マーカー、例えばプロ・フィラグリン、K1/K10サイトケラチン対、インボルクリンおよびI型表皮トランスグルタミナーゼが、このモデルにおいて特定された。MatTek EPIDERM（商標）モデルはまた、有糸分裂的におよび代謝的に活性である。
【０２３８】
エラスターゼおよびコラゲナーゼ阻害アッセイ：ヒト皮膚線維芽細胞を培養し、エラスターゼ酵素の供給源として使用した。この酵素を、エラスターゼ緩衝液に細胞を溶解させ、溶解産物の可溶性部分を保持することによって線維芽細胞から部分精製した。次いで、この線維芽細胞溶解産物の一部分を、試験物質および合成性エラスターゼ基質であるSuc-(Ala3)-p-ニトロアニリン（STANA）と共にインキュベートした。エラスターゼは、この基質に対して、p-ニトロアニリンを放出するよう作用し、これを分光光度計を用いて約405 nmの波長で吸光度を測定することによって検出することができる。エラスターゼ酵素の阻害は、阻害されない酵素との比較で、放出されたp-ニトロアニリンの量の減少によって示される。
【０２３９】
マトリクスメタロプロテイナーゼ1（MMP-1）は、その潜在形態で約52〜約56 kDのおおよその分子量を有する細胞外プロテアーゼである。プロ酵素の切断により、約22〜約46 kDのMMP-1が活性酵素となり、コラーゲン、ゼラチンおよびエンタクチンを含む多くの基質を分解することができる。ヒトの皮膚において、増加したMMP-1活性は、いくつかの疾患状態、UV照射への曝露を通じてまたは自然老化プロセスの一部として誘導され得る。これによって、MMP-1によるコラーゲンの分解がその置換速度を上回る不均衡な状態が形成され得る。したがって、MMP-1活性を阻害する物質は、有益であり得る。MMP-1活性の阻害剤をスクリーニングするため、ヒト組み換えMMP-1を、チオペプトリド（thiopeptolide）基質、阻害剤候補および5,5'-ジチオビス（2-ニトロ安息香酸）（DTNB）の存在下でインキュベートする。チオペプトリド基質がMMP-1によって分解されると、それはスルフヒドリル基を放出し、これはDTNBと反応することができ、2-ニトロ-5-チオ安息香酸を形成し、これを約412 nmで分光検出することができる。したがって、MMP-1活性は、約412 nmでの吸光度に比例し、阻害剤の存在下で、この吸光度は低下する。
【０２４０】
DPPHアッセイ：このアッセイは、安定なラジカルである2,2-ジフェニル-1-ピクリルヒドラジル（DPPH）に対する抗酸化物質の捕捉活性の測定に基づく。フリーラジカルであるDPPHは、約517 nmで強い吸収を示し、この吸収は、DPPHが抗酸化化合物と反応し、ヒドラジンに変換されると低下する。DPPHアッセイは、ラジカル化合物が安定であり、かつ他のラジカル捕捉アッセイにおけるように生成する必要がないという理由から、抗酸化物質の捕捉活性を評価する有効かつ簡単なアッセイとみなされている。
【０２４１】
TT二量体アッセイ：多層化された、高度に分化したヒト表皮モデルを形成するよう培養された正常なヒト由来表皮ケラチン生成細胞からなるMatTek EPIDERM（商標）皮膚モデルをこの研究に使用した。この組織を、UVB曝露前に試験物質を用いて一晩局所的に処置する（予防を評価するための前処置グループ）か、またはUVB曝露後に一晩処置した（修復を評価するための後処置グループ）。曝露および処置後、EPIDERM（商標）組織からDNAを抽出し、チミン二量体含量についてELISAベースの方法を用いてアッセイした。
【０２４２】
ケラチン生成細胞生存率に対する紫外線B照射曝露：ヒト表皮ケラチン生成細胞を、試験物質で約24時間処置し、次いでUVB光（およそ50 mj/cm2）の線量に曝露した。次いで、細胞生存率の変化を、UVB曝露から約24時間後に、MTTアッセイを通じて決定した。MTTアッセイは、細胞の生存を反映する細胞の代謝活性の比色分析である。生存細胞はMTTを取り込むことができ、これはその後にミトコンドリアによって還元され、不溶性の紫色のホルマジン結晶を形成する。次いでイソプロパノールを用いてこれらの結晶を細胞から抽出し、分光的に定量する。紫色の強度は、生存細胞の数に正比例し、試験物質の毒性に反比例する。
【０２４３】
チロシナーゼ阻害アッセイ：精製されたチロシナーゼ酵素を、L-DOPAを含むリン酸ナトリウム緩衝液中に混合し、試験物質と共にインキュベートした。約30分間のインキュベート後に、（チロシナーゼ活性を反映する）DOPAクロムに変換されたL-DOPAの量を、比色アッセイを通じて評価する。コウジ酸が、チロシナーゼ阻害の陽性対照である。
【０２４４】
結果：図24は、エラスターゼ阻害試験の結果を示し、エラスチン減少を阻害することによる皮膚の弾力性に対する潜在的効果を実証している。図25は、コラーゲン減少を回避することにより皮膚の堅さを維持する能力を示すコラゲナーゼ阻害試験の結果を示す。図26は、トロロックス当量で示されるフリーラジカル捕捉力を測定するDPPHアッセイの結果を示しており、TE値が高いほど、抗酸化力が大きい。脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、約1500トロロックス当量よりも高い抗酸化活性を提供した。
【０２４５】
図27は、UVB曝露前の約1％マスカダイン抽出物前処置がDNA損傷を完全に予防したTT二量体アッセイの結果を示す。脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、陽性対照（1 mMトロロックス）よりも優秀であり、UVB曝露後の約1％マスカダイン抽出物処置（後処置）もDNA損傷の約45％減少を示し、これによりDNA修復に対する効果が示唆され、約0.1％からの効果は前および後処置の両方において約1％よりも低かった。図28は、紫外線B曝露後の細胞生存率を示し、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、未処置細胞と比較して細胞生存率を有意に増加させ、その増加は約20μMトロロックスにおける場合よりも良好でさえあった。図29は、色素過剰を予防する能力を示唆する、チロシナーゼ阻害を示す。脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、チロシナーゼを実質的に阻害することができ、望まれない加齢または曝露に関連する皮膚の色素沈着を回避するのを助けると考えられる。
【０２４６】
図30は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物が処理前抽出物のDNA保護活性を保持していることを示す比較アッセイである。図30は、脱色局所マスカダインポマース抽出物（TME）と脱色しなかった経口投与マスカダインポマース処理前抽出物（OME）の間のTT二量体DNA損傷比較アッセイのグラフである。OMEは、米国特許第8,568,804号、米国特許第9,132,162号および米国特許第9,173,916号に開示される抽出物である。TMEおよびOMEは両方とも、未処置グループと比較して、TT二量体形成の減少により測定される皮膚組織におけるUV傷害により引き起こされるDNA損傷を有意に防いだ。DNA損傷の減少に関して、OMEとTMEの間に統計学的な差はなかった。
【０２４７】
まとめると、局所スキンケア製品において重量で約0.00001％〜約1％、例えば、非限定的に、重量で約0.025％〜約0.25％の濃度で使用される開示される脱色マスカダインポマース溶媒抽出物は、低下したレベルの縮合タンニンを有し得、また、皮膚修復力の向上および皮膚細胞生存率の上昇を含む、皮膚の弾力性および皮膚の堅さの改善、暗色のしみの形成の減少、フリーラジカル捕捉による抗酸化活性の改善、および紫外線B光からの保護に関連する特性を示す。抽出物の脱色は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物における全体的なフェノールプロフィールの維持により、抽出物の皮膚保護特性に有意に影響しない。
【０２４８】
脱色マスカダインポマース溶媒抽出物はタンパク質の糖化を阻害する。終末糖化産物（AGE）は、酸化ストレスにより加速するプロセスである、細胞性および循環性のタンパク質および脂質への糖分子の付加によって生成される。様々なAGE分子が体内で検出されており、重要なことに、AGEレベルの増加は、疾患、例えば糖尿病、神経変性、関節炎および慢性炎症障害に関連する。さらに、AGEの蓄積が正常な老化プロセスの根底にあり、AGEレベルが実年齢と共に上昇するだけでなく、寿命を延ばす介入（例えば、カロリー制限）がAGEレベルを減少させることが、多数の証拠によって示唆されている。AGEレベルは、年を取るにつれ皮膚において増加し、コラーゲンおよび他の皮膚タンパク質の糖化が、老化した皮膚の見目および機能の変化に寄与すると言われている。
【０２４９】
現在の研究は、AGEが2つの機構を通じて細胞の老化および機能障害に寄与することを示唆している。第1に、糖は、タンパク質に損傷を与え、正常な機能を妨害し、細胞生存率を低下させ得る。第2に、AGEは、それらの終末糖化産物受容体（RAGE）との相互作用を通じて、危害を及ぼす炎症サイクルを開始すると考えられ、RAGEの活性化は、最終的に細胞死に導く複数の炎症経路を誘導する。
【０２５０】
すべてではないがいくつかのポリフェノールは、AGEタンパク質の形成を阻害することが示されている。したがって、低下したタンニンレベルを含む脱色局所マスカダイン溶媒抽出物（TME）がタンパク質の糖化を阻害する能力を保持しているかどうかを決定した。そのために、TMEの効果を、元の／経口マスカダイン抽出物（OME）のそれらと比較した。AGEの形成は、Farrar et al., BioFactors 30: 193-200, 2007に記載される標準的な蛍光アッセイの改良版を用いて測定した。簡単に説明すると、血清アルブミンを、リン酸緩衝液中でフルクトースと共に約37℃で約72時間インキュベートし、蛍光強度を約370/440の励起／発光波長で測定する。（μgポリフェノール/ml緩衝液に標準化された）様々な濃度のマスカダイン抽出物を対照媒体と比較し、結果を対照（媒体）サンプルにおいて生成されるAGE形成のパーセント阻害で表す。
【０２５１】
図31に示されるように、OMEおよびTMEの両方ともに、AGE形成の阻害に関して、用量関連様式で優れた活性（効果）を示した。両方の抽出物において、AGE形成の最大阻害は、約15〜約20μgポリフェノール/mlの濃度で約95〜約100％に達した。しかし、OMEは、AGE形成を約50％阻害するのに必要とされる濃度（IC50）により示されるように、TMEよりも強力であった。OMEのIC50値は約0.65μgポリフェノール/mlであり、TMEのIC50値は約3.94μgポリフェノール/mlであった。このことは、タンニンがAGE阻害活性に寄与するものの、TME中に残存する他のマスカダインポリフェノールも、タンパク質の糖化の阻害に関してOMEにおいて見いだされたのと同等に効果的であることを示唆している。
【０２５２】
実施例2. 脱色マスカダインポマース溶媒抽出物を含む組成物を用いるスキンケアレジメンおよび方法の有効性研究
各要素が脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物の組み合わせを含む5つの要素のスキンケアにおける効果を評価するために、ヒト対象を用いる研究を行った。この研究には、約30〜約65歳の年齢範囲の57名の女性（28名のカフカス人女性おおよび29名のアジア人女性）が参加した。各対象に、合計12週間、表5Aおよび5Bに記載される範囲の成分を含むクレンザー、トナーパッド、セラム、昼用モイスチャライザーおよび夜用モイスチャライザースキンケア製品を用いるスキンケア処置計画を実施した。各対象を、訓練された皮膚格付け担当者が、研究開始時（すなわち、第0週）ならびに1、2、4、8および12週後に皮膚の健康について評価した。
【０２５３】
（表５Ａ）5つの要素の組成物において使用される成分範囲1
2020519642.tif 000008
1示されている比率は総組成物の重量の重量比率である
2TMEは開示される脱色局所マスカダイン溶媒抽出物である
3パルミチン酸レチニルとして
4リン酸アスコルビルマグネシウムとして
5酢酸トコフェロールとして
【０２５４】
（表５Ｂ）5つの要素の組成物において使用されるさらなる成分範囲1
2020519642.tif 000009
1示されている比率は総組成物の重量の重量比率である
2TMEは開示される脱色局所マスカダイン溶媒抽出物である
3パルミチン酸レチニルとして
4リン酸アスコルビルマグネシウムとして
5酢酸トコフェロールとして
【０２５５】
この研究において、各対象は、午前にクレンザー、セラムおよび昼用モイスチャライザー製品を、午後にクレンザー、トナーパッド、セラムおよび夜用モイスチャライザー製品を使用した。12週間の最後に、各対象は、彼女らが認識した皮膚の健康に関する自己評価質問表を埋めた。このレジメンは、12週間の研究の間、十分に対象に許容されるものであった。
【０２５６】
訓練された職員が、以下の表6に列挙される10の格付けパラメータに関して対象の皮膚の健康を評価した。4つの皮膚健康パラメータ：メラニンレベル、復元力、弾力性および皮膚の粗さ、は器具を用いて評価した。この研究の結果は、いくつかの皮膚健康パラメータが、1週間という短い処置の間に、統計的に有意な改善を示したことを示している。
【０２５７】
（表６）皮膚の健康を決定するために評価したパラメータ
2020519642.tif 000010
【０２５８】
粗さに関する機器計測の結果は、すべての皮膚の粗さパラメータ（粗さ深度、最大粗さ、平均粗さおよび皮膚の滑らかさ）が、2週間の処置後に統計的に有意な改善を示し、これは研究の最後（12週）まで継続して改善し、より滑らかな皮膚を示すことを示した。しわの画像分析は、4週間の処置後に統計的に有意な改善を示し、これが目の下の領域（しわの数、長さ、幅、面積および深さ）については研究の最後（12週）まで持続した。キュートメーターを用いて得られたデータは、皮膚の伸展性（堅さ）に関して、8週間の処置後に統計的に有意な改善を示した。
【０２５９】
格付けパラメータの結果は、多くのパラメータにおける統計的に有意な改善が、1または2週間の処置後から始まり研究の最後（12週）まで継続して見られたことをを示している。皮膚の質感、輝きおよび全体的な健康パラメータは、1週間で改善を示した。顔全体のしわ、眼窩周囲のしわ、額のしわ、頬のしわ、毛穴サイズ、皮膚の色合い（色）の均等性、堅さおよび粗さパラメータは、2週間の処置後に改善した。全体的な色素過剰のパラメータは、4週間の処置後に改善した。たるみおよび堅さパラメータは、8週間の処置後に改善した。目の下および目尻のパラメータは、12週間の処置後に改善した。この有効性研究の結果が、以下の表7にまとめられている。
【０２６０】
（表７）処置時間に対する統計的に有意な改善を示すパラメータ
2020519642.tif 000011
*堅さ（伸展性）は、8週間の処置後にのみ統計的に有意な改善を示したが、12週間後には示さなかった。
【０２６１】
12週間の研究期間の間の様々な時点の様々な皮膚パラメータに関するデータが図1〜19に示されている。対象の自己評価質問表の結果が図20に示されている。
【０２６２】
図1に示されるように、56名の対象における目の下のしわの数（数え）、長さ、幅、総サイズ（面積）および深さは、約12週間の処置後に改善した。詳細に、対象の約64％はしわの数の減少を示し、対象の約68％はしわの長さの減少を示し、対象の約61％はしわの幅の減少を示し、対象の約66％はしわの面積の減少を示し、対象の約68％はしわの深さの減少を示した。
【０２６３】
図2に示されるように、約12週間の処置後の図1の56名の対象における皮膚の健康の改善率が、対象における目の下のしわの数（数え）、長さ、幅、総サイズ（面積）および深さに関して示されている。詳細に、しわの数の減少度は約9％であり（p=0.01）、しわの長さの減少度は約15％であり（p<0.001）、しわの幅の減少度は約8％であり（p=0.043）、しわの面積の減少度は約15％であり（p＜0.001）、しわの深さの減少度は約8％であった（p=0.04）。
【０２６４】
図3に示されるように、56名の対象における目尻領域のしわの数（数え）、長さ、幅、総サイズ（面積）および深さは、約12週間の処置後に改善した。詳細に、対象の約57％はしわの数の減少を示し、対象の約68％はしわの長さの減少を示し、対象の約52％はしわの幅の減少を示し、対象の約63％はしわの面積の減少を示し、対象の約45％はしわの深さの減少を示した。
【０２６５】
図4に示されるように、約12週間の処置後の図3の56名の対象における皮膚の健康の改善率が、対象における目尻領域のしわの数（数え）、長さ、幅、総サイズ（面積）および深さに関して示されている。詳細に、しわの数の減少度は約6％であり、しわの長さの減少度は約7％であり（p=0.027）、しわの幅の減少度は約5％であり、しわの面積の減少度は約5％であり、しわの深さの減少度は約1％であった。
【０２６６】
図5に示されるように、57名の対象における粗さ深度、最大粗さ、平均粗さおよび皮膚の滑らかさは、約12週間の処置後に改善した。詳細に、対象の約93％が粗さ深度の減少を示し、対象の約91％が最大粗さの減少を示し、対象の約88％が平均粗さの減少を示し、対象の約81％が皮膚の滑らかさの増加を示した。
【０２６７】
図6に示されるように、約12週間の処置後の図5の57名の対象における皮膚の健康の改善率が、対象における粗さ深度、最大粗さ、平均粗さおよび皮膚の滑らかさに関して示されている。詳細に、粗さ深度の減少度は約27％であり（p＜0.001）、最大粗さの減少度は約26％であり（p＜0.001）、平均粗さの減少度は約28％であり（p＜0.001）、皮膚の滑らかさの増加度は約26％であった（p＜0.001）。
【０２６８】
図7に示されるように、この研究の52名の対象の約69パーセントは、キュートメーターを用いて測定されたように、約8週間の処置後に皮膚の堅さの改善を示し、これらの対象における皮膚の堅さの改善度は、約14％であった（p=0.002）。
【０２６９】
図8の左グラフにおいて、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の顔全体のしわの分析によって測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率が、左グラフに示されている。このデータは、約1週間後に対象の約5％が顔全体分析において顔全体のしわの改善を示し、約18％が約2週間後に改善を示し、約44％が約4週間後に改善を示し、約76％が約8週間後に改善を示し、約88％が約12週間後に改善を示したことを示している。
【０２７０】
図8の右グラフは、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の顔全体のしわの分析によって測定される対象の皮膚の健康の平均改善率を示している。このデータは、約1週間後の平均改善率が統計的に有意でなく、約2週間後の平均改善率が約2％であり（p＜0.001）、約4週間後の平均改善率が約5％であり（p＜0.001）、約8週間後の平均改善率が約9％であり（p＜0.001）、約12週間後の平均改善率が約12％であった（p＜0.001）ことを示している。
【０２７１】
図9の左グラフにおいて、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の眼窩周囲のしわの分析によって測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率が示されている。このデータは、約1週間後に対象の約9％が眼窩周囲のしわの改善を示し、約27％が約2週間後に改善を示し、約49％が約4週間後に改善を示し、約78％が約8週間後に改善を示し、約90％が約12週間後に改善を示したことを示している。
【０２７２】
図9の右グラフは、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の眼窩周囲のしわの分析によって測定される対象の皮膚の健康の平均改善率を示している。このデータは、約1週間後の平均改善率が統計的に有意でなく、約2週間後の平均改善率が約3％であり（p＜0.001）、約4週間後の平均改善率が約6％であり（p＜0.001）、約8週間後の平均改善率が約10％であり（p＜0.001）、約12週間後の平均改善率が約13％であった（p＜0.001）ことを示している。
【０２７３】
図10の左グラフにおいて、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の額のしわの分析によって測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率が示されている。このデータは、約1週間後に対象の約9％が額のしわの改善を示し、約38％が約2週間後に改善を示し、約67％が約4週間後に改善を示し、約87％が約8週間後に改善を示し、約88％が約12週間後に改善を示したことを示している。
【０２７４】
図10の右グラフは、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の額のしわの分析によって測定される対象の皮膚の健康の平均改善率を示している。このデータは、約1週間後の平均改善率が統計的に有意でなく、約2週間後の平均改善率が約4％であり（p＜0.001）、約4週間後の平均改善率が約7％であり（p＜0.001）、約8週間後の平均改善率が約11％であり（p＜0.001）、約12週間後の平均改善率が約12％であった（p＜0.001）ことを示している。
【０２７５】
図11の左グラフにおいて、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の頬のしわの分析によって測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率が示されている。このデータは、約1週間後に対象の約5％が頬のしわの改善を示し、約20％が約2週間後に改善を示し、約51％が約4週間後に改善を示し、約82％が約8週間後に改善を示し、約86％が約12週間後に改善を示したことを示している。
【０２７６】
図11の右グラフは、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の頬のしわの分析によって測定される対象の皮膚の健康の平均改善率を示している。このデータは、約1週間後の平均改善率が統計的に有意でなく、約2週間後の平均改善率が約2％であり（p＜0.001）、約4週間後の平均改善率が約6％であり（p＜0.001）、約8週間後の平均改善率が約14％であり（p＜0.001）、約12週間後の平均改善率が約16％であった（p＜0.001）ことを示している。
【０２７７】
図12の左グラフにおいて、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の全体的な健康的な皮膚の外見の分析によって測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率が示されている。このデータは、約1週間後に対象の約14％が全体的な健康的な皮膚の外見の改善を示し、約46％が約2週間後に改善を示し、約78％が約4週間後に改善を示し、約93％が約8週間後に改善を示し、約93％が約12週間後に改善を示したことを示している。
【０２７８】
図12の右グラフは、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の全体的な健康的な皮膚の外見の分析によって測定される対象の皮膚の健康の平均改善率を示している。このデータは、約1週間後の平均改善率が約1％であり（p=0.008）、約2週間後の平均改善率が約4％であり（p＜0.001）、約4週間後の平均改善率が約8％であり（p＜0.001）、約8週間後の平均改善率が約12％であり（p＜0.001）、約12週間後の平均改善率が約14％であった（p＜0.001）ことを示している。
【０２７９】
図13の左グラフにおいて、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の皮膚の質感の分析によって測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率が示されている。このデータは、約1週間後に対象の約28％が皮膚の質感の改善を示し、約55％が約2週間後に改善を示し、約82％が約4週間後に改善を示し、約91％が約8週間後に改善を示し、約98％が約12週間後に改善を示したことを示している。
【０２８０】
図13の右グラフは、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の皮膚の質感の分析によって測定される対象の皮膚の健康の平均改善率を示している。このデータは、約1週間後の平均改善率が約3％であり（p＜0.001）、約2週間後の平均改善率が約6％であり（p＜0.001）、約4週間後の平均改善率が約10％であり（p＜0.001）、約8週間後の平均改善率が約14％であり（p＜0.001）、約12週間後の平均改善率が約17％であった（p＜0.001）ことを示している。
【０２８１】
図14の左グラフにおいて、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の皮膚の輝きの分析によって測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率が示されている。このデータは、約1週間後に対象の約46％が皮膚の輝きの改善を示し、約66％が約2週間後に改善を示し、約87％が約4週間後に改善を示し、約94％が約8週間後に改善を示し、約95％が約12週間後に改善を示したことを示している。
【０２８２】
図14の右グラフは、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の皮膚の輝きの分析によって測定される対象の皮膚の健康の平均改善率を示している。このデータは、約1週間後の平均改善率が約4％であり（p＜0.001）、約2週間後の平均改善率が約6％であり（p＜0.001）、約4週間後の平均改善率が約10％であり（p＜0.001）、約8週間後の平均改善率が約12％であり（p＜0.001）、約12週間後の平均改善率が約14％であった（p＜0.001）ことを示している。
【０２８３】
図15の左グラフにおいて、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の格付け専門家による皮膚の堅さの分析によって測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率が示されている。このデータは、約1週間後にいずれの対象も皮膚の堅さの改善を示さず、約13％が約2週間後に改善を示し、約38％が約4週間後に改善を示し、約82％が約8週間後に改善を示し、約88％が約12週間後に改善を示したことを示している。
【０２８４】
図15の右グラフは、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の皮膚の堅さの分析によって測定される対象の皮膚の健康の平均改善率を示している。このデータは、約1週間後の平均改善率が統計的に有意でなく、約2週間後の平均改善率が約1％であり（p=0.016）、約4週間後の平均改善率が約4％であり（p＜0.001）、約8週間後の平均改善率が約9％であり（p＜0.001）、約12週間後の平均改善率が約10％であった（p＜0.001）ことを示している。
【０２８５】
図16の左グラフにおいて、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の皮膚のたるみの分析によって測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率が示されている。このデータは、約1週間後および約2週間後にいずれの対象も皮膚のたるみの改善を示さず、約9％が約4週間後に改善を示し、約57％が約8週間後に改善を示し、約75％が約12週間後に改善を示したことを示している。
【０２８６】
図16の右グラフは、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の皮膚のたるみの分析によって測定される対象の皮膚の健康の平均改善率を示している。このデータは、約1週間後および約2週間後の平均改善率が統計的に有意でなく、約4週間後の平均改善率が約1％であり（統計的に有意でない）、約8週間後の平均改善率が約6％であり（p＜0.001）、約12週間後の平均改善率が約8％であった（p＜0.001）ことを示している。
【０２８７】
図17の左グラフにおいて、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の皮膚の色合いの均等性の分析によって測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率が示されている。このパラメータは、皮膚の不均等性および脱色の違いを反映するものである。このデータは、約1週間後にいずれの対象も皮膚の色合いの均等性の改善を示さず、約20％が約2週間後に改善を示し、約45％が約4週間後に改善を示し、約63％が約8週間後に改善を示し、約70％が約12週間後に改善を示したことを示している。
【０２８８】
図17の右グラフは、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の皮膚の色合いの均等性の分析によって測定される対象の皮膚の健康の平均改善率を示している。このデータは、約1週間後の平均改善率が統計的に有意でなく、約2週間後の平均改善率が約2％であり（p=0.022）、約4週間後の平均改善率が約5％であり（p＜0.001）、約8週間後の平均改善率が約7％であり（p＜0.001）、約12週間後の平均改善率が約8％であった（p＜0.001）ことを示している。
【０２８９】
図18の左グラフにおいて、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の顔全体の毛穴サイズの分析によって測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率が示されている。このデータは、約1週間後に対象の約2％が毛穴サイズの改善を示し、約11％が約2週間後に改善を示し、約31％が約4週間後に改善を示し、約44％が約8週間後に改善を示し、約56％が約12週間後に改善を示したことを示している。
【０２９０】
図18の右グラフは、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の顔全体の毛穴サイズの分析によって測定される対象の皮膚の健康の平均改善率を示している。このデータは、約1週間後の平均改善率が統計的に有意でなく、約2週間後の平均改善率が約1％であり（p=0.031）、約4週間後の平均改善率が約4％であり（p＜0.001）、約8週間後の平均改善率が約5％であり（p＜0.001）、約12週間後の平均改善率が約7％であった（p＜0.001）ことを示している。
【０２９１】
図19の左グラフにおいて、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の色素過剰の分析によって測定される皮膚の健康の改善を示す対象の比率が示されている。このパラメータは、強い、集中した、および／または目視で検出可能である暗色またはまだらな皮膚のしみの違いを反映するものである。このデータは、約1週間後にいずれの対象も色素過剰の改善を示さず、約7％が約2週間後に改善を示し、約26％が約4週間後に改善を示し、約44％が約8週間後に改善を示し、約56％が約12週間後に改善を示したことを示している。
【０２９２】
図19の右グラフは、約1、約2、約4、約8および約12週間の処置後の色素過剰の分析によって測定される対象の皮膚の健康の平均改善率を示している。このデータは、約1週間後および約2週間後の平均改善率が統計的に有意でなく、約4週間後の平均改善率が約3％であり（p＜0.001）、約8週間後の平均改善率が約5％であり（p＜0.001）、約12週間後の平均改善率が約7％であった（p＜0.001）ことを示している。
【０２９３】
図20に示されるグラフは、57名の対象のうち、約12週間の研究処置後に13の特定のパラメータに関して皮膚の健康の改善が見られた者の比率を示している（すべてのパラメータがp＜0.001を有する）。このデータは、有意な数の対象が13のパラメータで評価される皮膚の健康の改善を見せたことを示している。詳細に、対象の約93％は皮膚の質感に関して改善を見せ、対象の約79％は皮膚の色合いに関して改善を見せ、対象の約75％は毛穴サイズに関して改善を見せ、対象の約72％は皮膚の色素過剰に関して改善を見せ、対象の約86％は皮膚の輝きに関して改善を見せ、対象の約84％は細線に関して改善を見せ、対象の約81％は皮膚のしわに関して改善を見せ、対象の約93％は全体的な皮膚の健康に関して改善を見せ、対象の約86％は皮膚の堅さに関して改善を見せ、対象の約74％は皮膚のたるみに関して改善を見せ、対象の約91％は皮膚の保湿レベルに関して改善を見せ、対象の約81％は皮膚が若々しく見えるという点で皮膚の外見に関して改善を見せ、対象の約67％は実年齢よりも約1歳以上若く見える点で皮膚の改善を見せた。
【０２９４】
したがって、各々脱色マスカダインポマース溶媒抽出物、ベータ・グルカンおよびブドウ種子抽出物を含む組成物を含む5つの要素（トナー、昼用モイスチャライザー、夜用モイスチャライザー、クレンザーおよびセラム）を皮膚に適用することにより皮膚の外見を改善する開示されるスキンケアレジメンおよび方法は、脱色マスカダインポマース溶媒抽出物の濃度が重量で約0.001％〜約1.0％である場合、ベータ・グルカンの濃度が重量で約0.0001％〜約1.0％であり、およびブドウ種子抽出物の濃度が重量で約0.00001％〜約0.01％である場合、皮膚の健康の様々なパラメータにより測定されるように皮膚の外見を有意に改善することができる。これらの5つの要素は、低レベルの縮合タンニンを有する組成物を含む。
【０２９５】
実施例3. 組成物の有効性を示すDNAマイクロアレイ研究
メタロチオネイン（MT）の遺伝子発現は、多種の刺激（例えば、金属への曝露または酸化ストレス）により誘導され、インビボおよびインビトロの両方で、過剰量の有毒金属への曝露に起因するダメージから細胞を保護するための金属の解毒手段として広範囲の金属（例えば、鉛、水銀、ヒ素、アルミニウム、カドミウム等）に結合することが知られている。メタロチオネイン遺伝子発現は、都市ダストに曝露されると増加する。開示されるスキンケア法は、金属、例えば鉛およびアルミニウムに対するその結合特性により、空気中の金属に対するヒト皮膚ケラチン生成細胞の被覆／防護／保護効果を示し、したがって重金属が皮膚に直接接触または直接浸透しないよう阻止することにより皮膚の健康に利益をもたらす。
【０２９６】
局所マスカダイン抽出（TME）組成物は、都市ダストの下で共処置されたときヒト皮膚ケラチン生成細胞におけるMT遺伝子発現を低下させ、これ対して、MT遺伝子発現は、都市ダスト1649bのみ（TMEなし）に曝露されることによって増加した。この結果は、都市ダスト中の金属がMT遺伝子発現の増加を誘発したが、TME組成物が、皮膚ケラチン生成細胞に対する金属の直接接触を阻止することによってMT遺伝子発現を低下させたことを示唆している。開示されるスキンケア法は、皮膚の健康に利益をもたらし、空気中の金属に起因する有害な効果を防ぐ保護効果を提供する。学説により束縛されるものではないが、この効果は、特に、組成物が、例えば汚染された空気への曝露の前に毎日、皮膚に適用されたときに、皮膚に対する金属の直接接触を減少させ得る。TME処置後に、都市ダスト粉末1649b（Sigma）中に存在する水溶性の鉛およびアルミニウム種の減少が見られた。
【０２９７】
異なる遺伝子の発現の変化をスクリーンするためにDNAマイクロアレイが使用され得る。培養ヒトケラチン生成細胞を、都市ダスト単独にまたは試験物質と共に都市ダストに曝露した。試験物質は、TMEプラス7つの活性物質（ベータ・グルカン、ブドウ種子抽出物、パンテノール、ビタミンA、ビタミンC、ビタミンEおよびスーパーオキシドジスムターゼ）であった。
【０２９８】
24時間のインキュベーション時間の後、細胞から総RNAを抽出し、一連の酵素誘導増幅反応を通じて、アレイハイブリダイゼーションにおいて使用するのに適したこのmRNAのアンチセンスコピーを得た。RNAを蛍光標識し、DNAマイクロアレイと一晩ハイブリダイズさせた。ハイブリダイゼーション反応の後、遺伝子発現の変化を決定するために、アレイスキャナを用いてアレイをスキャンした。その方法は以下に開示されている。
【０２９９】
ヒトケラチン生成細胞の細胞培養：ヒト表皮ケラチン生成細胞を培養フラスコに播種し、37±2℃および5±1％ CO2の下で成長させた。コンフルエンスに達したら、細胞を、都市ダストのみまたは都市ダストと試験物質（YOUTH Complex中0.1％局所マスカダイン抽出物（TME）＋7つの他の活性物質［1. トコフェロールを含むパルミチン酸レチニルとしてのビタミンA：0.0005％；2. 酢酸トコフェリルとしてのビタミンE：0.01％；3. ベータ・グルカン：0.005％；4. ブドウ種子抽出物：0.0002％；5. リン酸アスコルビルマグネシウムとしてのビタミンC：0.0001％；6. ビタミンB5（パンテノール50％として）：0.01％；7. スーパーオキシドジスムターゼ：0.0001％］）のいずれかを補充した培養培地で処置した。別のフラスコの細胞を、培養培地のみで処置し、未処置対照として用いた。細胞を37±2℃および5±1％ CO2で24時間インキュベートした。インキュベート期間が終わったら、培養培地を吸引により取り除き、細胞を冷リン酸緩衝生理食塩水で1回洗浄した。洗浄液を取り除いた後、700μlのチオシアン酸グアニジン溶解液を添加することによって細胞を溶解させた。
【０３００】
RNAの単離（Ambion RNAQUEOUS（商標）キット）：上記のようにして調製された細胞溶解産物に、等量の64％エタノールを添加し、内容物を混合するようフラスコを揺動した。混合後、最大700μlの混合物をガラス繊維カートリッジに移し、このカートリッジを1.5 ml収集チューブに入れ、カートリッジを14,000 RPMで1分間遠心分離した。流出液を破棄し、残存混合物をフィルターカートリッジに入れ、すべての混合物が処理されるまで遠心分離プロセスを繰り返した。その後にこのフィルターカートリッジに700μlの洗浄溶液1（1回）および500μlの洗浄溶液2（2回）を適用し、各洗浄液がカートリッジを通過するよう14,000 RPMで1分間遠心分離することによってこのフィルターを洗浄し、ガラス繊維に結合したRNAから残留細胞片を除去した。各洗浄の後、流出液を廃棄した。最終洗浄の後、フィルターカートリッジ内の残留洗浄溶液を除去するために洗浄溶液を用いずに1回の最終回転を行った。カートリッジ内のガラス繊維に結合したRNAを、カートリッジに30μlのTris-EDT A緩衝液（10 mM Tris-HCl、1 mM EDT A、70〜80℃に事前加熱）を適用し、新しい収集チューブにおいて14,000 RPMで1分間カートリッジを遠心分離することによって溶出させた。細胞溶解産物および小さな組織から調製されるサンプルの場合、追加の30μlの事前加熱TE緩衝液を用いて溶出プロセスを繰り返した。大きな組織（すなわち、全厚組織）から調製されるサンプルの場合、溶出プロセスをさらに2回繰り返した。RNAが溶出した後、RIBOGREEN（商標）アッセイを用いてその濃度を定量した。
【０３０１】
RNA濃度アッセイ（分子プローブ（RIBOGREEN（商標）アッセイ）：RIBOGREEN（商標）試薬は、DMSO中ストック溶液として提供された。使用前に、この試薬をTE緩衝液で2000倍希釈した。このRNAアッセイは、試験するサンプルあたり200μlの希釈されたRIBOGREEN（商標）試薬および標準のための1 mlの試薬を必要とした。調製後、希釈された試薬を遮光して保存した。大腸菌（E.coli）由来の精製リボソームRNAを以下の濃度に希釈することによって一連のRNA標準を調製した：2μg/ml、1μg/ml、200 ng/ml、40 ng/mlおよび0 ng/ml（ブランク）。アッセイ実施前に、上記のようにして調製したRNAサンプルをTE緩衝液で1000倍希釈した。RNAアッセイのために、100μlの希釈されたサンプルまたは標準を96ウェルプレートのウェルに移した。サンプルおよび標準を、二連でアッセイした。サンプル／標準をプレートに添加した後、100μlの希釈されたRIBOGREEN（商標）アッセイ試薬をウェルに添加し、プレートを穏やかに混合し、5〜10分間、遮光しつつインキュベートした。このインキュベーションの後、プレートを、480 nmの励起波長および525 nmの発光波長を用いて蛍光測定装置により読み取った。
【０３０２】
mRNAの増幅（Ambion MESSAGEAMP（商標） aRNAキット）：
第1鎖のcDNA合成：第1鎖の合成を開始するため、各サンプルにおいて5μgの総RNAを600μl PCRチューブに添加し、チューブ内の液体の総量をDEPC H2Oで12μlに調整した。各チューブに1μlのT7 Oligo（dT）プライマーを添加し、チューブを70±2℃で10分間インキュベートしてRNAを変性させ、その後に氷上においてプライマーをmRNAのポリA末端にアニールさせた。冷却後、2μlの10 x 第1鎖緩衝液、1μlのRNAse阻害剤および4μlのdNTPミックスを各チューブに添加し、そしてチューブを42℃の下に置いた。チューブが温められたらすぐに、1μlの逆転写酵素を添加し、そしてチューブを2時間、42±2℃に戻した。この2時間の後に、チューブを軽く遠心分離してすべての液体をチューブの底に集め、ついで氷上に置いた。
【０３０３】
第2鎖の合成およびcDNAの精製：第2鎖のcDNAの合成のために、以下の物質を（この順で）上記チューブに添加した：63μl DEPC H2O、10μl 10 x 第2鎖緩衝液、4μl dNTPミックス、2μl DNAポリメラーゼおよび1μlのRNAse H。チューブを混合し、ついで16±2℃で2時間インキュベートした。2時間のインキュベーションの後、十分量のDEPC H2Oを50±2℃に温め、cDNA精製フィルターカートリッジを少なくとも5分間50μlのcDNA結合緩衝液で平衡化させた（サンプルあたり1つのカートリッジ）。サンプルがインキュベートを終了した後、250μlのcDNA結合緩衝液を各チューブに添加し、十分に混合した。PCRチューブの内容物をcDNA精製フィルターカートリッジに移した。このカートリッジを収集チューブに入れ、10,000 RPMで1分間遠心分離した。通過液を廃棄し、650μlのcDNA洗浄溶液をカートリッジに添加した。このカートリッジを再度遠心分離し、通過液を廃棄し、ついで洗浄緩衝液がフィルターから完全に取り除かれたことを確実にするために少なくとも1回遠心分離した。10μlの事前加熱したDEPC H2Oをフィルターに適用し、フィルターを新しいチューブ内で、10,000 RPMで1分間遠心分離することによってcDNAを溶出させた。総量16〜18μlのcDNA溶液を得るためにこの溶出を少なくともさらに1回行った。
【０３０４】
aRNAを合成するためのインビトロ転写およびaRNAの精製：cDNA溶液に以下のものを添加することによって、インビトロ転写を開始させた：3μlの50 mM aaUTP、12μlのATP/CTP/GTPミックス（25 mM）、3μlの50 mM UTP、4μlの10x反応緩衝液、および4μlのT7酵素ミックス。チューブを混合し、ついで37±2℃で6〜14時間インキュベートした。インキュベーションの後、十分量の溶出溶液を50〜60℃に温め、aRNAフィルターカートリッジを100μlのaRNA結合緩衝液で少なくとも5分間平衡化させた。インキュベーション期間の最後に、350μlのaRNA結合緩衝液をサンプルチューブに添加し、十分に混合した。追加の250μlの無水エタノールも各チューブに添加した。ついでこの混合物をaRNAフィルターカートリッジに移し、カートリッジを収集チューブに挿入し、10,000 RPMで1分間遠心分離した。通過液を廃棄し、650μlのaRNA洗浄緩衝液をカートリッジに添加し、その後に10,000 RPMで1分間遠心分離した。流出液を廃棄した後、すべての微量の洗浄緩衝液を除去するために、最後に1回カートリッジを遠心分離した。ついでカートリッジを新しい収集チューブに移し、25μlの事前に温めておいた溶出溶液をカートリッジに添加した。このカートリッジを室温で2分間インキュベートし、ついで10,000 RPMで1分間の遠心分離によってaRNAを溶出させた。この溶出を、総量45〜50μlのaRNA溶液となるようさらに1回行った。aRNAの終濃度を、上記のRIBOGREEN（商標）アッセイによって決定した。
【０３０５】
aRNA：色素カップリング反応：色素カップリング反応のために、2μgのaRNAを減圧乾燥し、4.5μlのカップリング緩衝液に懸濁した。ついで5.5μlの色素ミックス（Cy3またはCy5）を添加し、混合物を暗所、室温で30分間インキュベートした。このインキュベーションの後、2.5μlの4Mヒドロキシルアミンを添加し、混合物を暗所、室温でさらに15分間インキュベートした。
【０３０６】
標識されたaRNAの精製：標識されたaRNAを精製するため、microcon YM-30フィルターカラムを収集チューブに挿入し、400μlのTE緩衝液で満たした。Cy3およびCy5プローブを混合し（各々12.5μl）、ついでmicroconフィルターに添加し、TE緩衝液と十分に混合した。このフィルターを12,000 RPMで8分間遠心分離し、流出液を廃棄した。ついでこのカラムを400μlのTE緩衝液で2回洗浄し、毎回流出液を廃棄した。最後の洗浄の後に、フィルターカラムを逆さにして新しい収集チューブに設置し、12,000 RPMで2分間遠心分離してプローブを回収した。
【０３０７】
マイクロアレイハイブリダイゼーションおよび洗浄（Agilent Technologies Microarrays）：ハイブリダイゼーションのために、（Agilent Technologies In Situ Hybridization Kitを補充した）11μlの10x対照標的RNAを30μlのDEPC水および2.2μlの25x Agilent Fragmentation Bufferと混合した。この混合物を、ハイブリダイゼーションオーブン内でおよそ30分間、65℃でインキュベートした。インキュベーションの後、55μlのAgilent Hybridization Bufferを、上記のように調製した蛍光aRNAプローブと共に添加した。Agilent SUREHYB（登録商標）ハイブリダイゼーションチャンバーを、このチャンバーの底半分にガラスガスケットスライドを挿入することによって準備した。インキュベーションの後、ハイブリダイゼーション混合物（およそ110μl）をガラスガスケットスライドに適用し、Agilent Microarray Chipを、このガスケット上に下向きに配置し、ハイブリダイゼーション溶液がガラスガスケットスライドとチップのマイクロアレイ面の間にサンドイッチされるようにした。ついでチャンバーの上半分を取り付け、連結用つまみねじを締めた。チャンバー内で良好な泡形成があったことを確認した後、それをおよそ17時間、ハイブリダイゼーションオーブン内に置いた（65℃および4 RPMで回転）。ハイブリダイゼーション期間の後、マイクロアレイ／ガラスガスケットをSUREHYB（登録商標）チャンバーから取り出し、50 mlの洗浄溶液1（室温、6x SSC、0.005％ Triton X-102）中に入れた。ガスケットがマイクロアレイからはずれて落ちた後、アレイを、磁気撹拌プレート上の300 mlの新しい洗浄溶液1に移した。このアレイを洗浄しつつ、溶液を中程度の速度で10分間混合し、ついで5分間、300 mlの洗浄溶液2（0.1x SSX、0.005％ Triton X-102、4℃）に移した。最後の洗浄の後、アレイを500 RPMで5分間遠心分離し、乾燥させた。
【０３０８】
マイクロアレイのスキャンおよび分析：このマイクロアレイを、Axon GENEPIX（登録商標）41 00Aスキャナーを10μmに設定したスキャン解像度で用いてスキャンし、GENEPIX（登録商標）Proソフトウェアを用いて分析した。初期スキャン時に、cy5/cy3画像カウント比が0.9〜1.1の間になるよう、スキャナーのPMTゲインを調整した。
【０３０９】
計算
RNA RIBOGREEN（商標）アッセイ：RIBOGREEN（商標）アッセイの標準曲線を作成するために、標準におけるμg/mlでの既知のRNA濃度に対して相対蛍光単位をプロットし、これらのデータ点に最もフィットする直線を生成するよう回帰分析に供した。試験物質および未処置サンプルについての平均RFU値を用いて各サンプルに存在するRNAの量を概算した。
【０３１０】
マイクロアレイの計算：遺伝子発現のレベルは、マイクロアレイ上のプローブ付加遺伝子マーカーの蛍光強度に関連する。Cy3およびCy5プローブを作製する際に標識効率に差が生じる可能性があるので、これら2つの各色素間の蛍光測定を、遺伝子発現の変化を評価する前に正規化した。マイクロアレイの蛍光強度を、グローバルノーマリゼーションに供した。両方の色素についての総蛍光シグナルを、両色素の総強度の比率を1にする補正因子を用いて正規化した。
【０３１１】
ケラチン生成細胞を、開示される組成物および都市ダストを用いて処置するか、または処置せず、都市ダストに曝露するのみとした。その結果を以下に示す。
【０３１２】
2020519642.tif 000012
【０３１３】
2018年4月30日時点で利用可能なすべてのGENBANK（登録商標）アクセッション番号を、参照により組み入れる。
【０３１４】
これらの結果は、メタロチオネイン遺伝子発現が、TMEを追加の活性物質（上記参照）と共に使用したときに減少したことを示している。これは、開示される組成物が、金属曝露から、例えば重金属を含む都市ダストから皮膚細胞を保護することを証明している。これらの結果は、皮膚細胞に対する組成物の保護効果を示している。
【０３１５】
開示される発明の原理が適用され得る多くの可能性のある態様に鑑みて、例示されている態様は本発明の好ましい例にすぎず、本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきでないことが理解されるべきである。そうではなく、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によって定義されるものである。したがって本発明者らは、本発明者らの発明として、これらの特許請求の範囲および精神に含まれるすべてを特許請求する。
【図１】
2020519642.tif 000014
【図２】
2020519642.tif 000015
【図３】
2020519642.tif 000016
【図４】
2020519642.tif 000017
【図５】
2020519642.tif 000018
【図６】
2020519642.tif 000019
【図７】
2020519642.tif 000020
【図８】
2020519642.tif 000021
【図９】
2020519642.tif 000022
【図１０】
2020519642.tif 000023
【図１１】
2020519642.tif 000024
【図１２】
2020519642.tif 000025
【図１３】
2020519642.tif 000026
【図１４】
2020519642.tif 000027
【図１５】
2020519642.tif 000028
【図１６】
2020519642.tif 000029
【図１７】
2020519642.tif 000030
【図１８】
2020519642.tif 000031
【図１９】
2020519642.tif 000032
【図２０】
2020519642.tif 000033
【図２１】
2020519642.tif 000034
【図２２】
2020519642.tif 000035
【図２３Ａ】
2020519642.tif 000036
【図２３Ｂ】
2020519642.tif 000037
【図２４】
2020519642.tif 000038
【図２５】
2020519642.tif 000039
【図２６Ａ】
2020519642.tif 000040
【図２６Ｂ】
2020519642.tif 000041
【図２７Ａ】
2020519642.tif 000042
【図２７Ｂ】
2020519642.tif 000043
【図２８】
2020519642.tif 000044
【図２９】
2020519642.tif 000045
【図３０】
2020519642.tif 000046
【図３１】
2020519642.tif 000047
【国際調査報告】
2020519642.tif 000048
2020519642.tif 000049
2020519642.tif 000050
2020519642.tif 000051