【手続補正書】
【提出日】平成29年5月26日(2017.5.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
蛍光性指標を励起発光させる励起光を測定対象物に照射する光源と、
前記励起光により励起された前記蛍光性指標の拡大された光像を得ることができる拡大光学系と、
前記拡大光学系で得られた前記測定対象物の光像を撮像して撮像画像データを得る撮像装置と、
前記拡大光学系のフォーカス位置を調整するフォーカス制御部とを有する光学顕微鏡と、
前記撮像画像データから測定対象となる細胞を選別し、選別された測定対象である細胞に対して前記蛍光性指標の観測を行い、生体細胞内の１分子の動態を計測する解析部とを備えた、光学顕微鏡システム。
【請求項２】
前記光学顕微鏡は、前記励起光を照射する照射光学系において、前記拡大光学系の対物レンズにおける焦点位置と共役点となる位置に配置された、前記励起光の少なくとも一部を遮蔽する遮蔽部材を備え、
前記解析部が、前記遮蔽部材の光像に基づいて前記対物レンズのフォーカス位置を判断し、前記フォーカス制御部により前記光学顕微鏡のオートフォーカス動作が行われる請求項１に記載の光学顕微鏡システム。
【請求項３】
前記照射光学系が、全反射照明と対物レンズの光軸上からの落射照明との２つの照射方法での前記測定対象物の照射が可能であり、前記遮蔽物の光像に基づく前記光学顕微鏡のオートフォーカス動作を前記対物レンズの光軸上からの落射照明下で行い、前記測定対象物の１つの蛍光指標の動態測定のための撮像画像の取得を、全反射照明下で行う、請求項２に記載の光学顕微鏡システム。
【請求項４】
前記解析部が、前記撮像画像に対して二値化処理を行って前記撮像画像の二値化情報を取得し、前記フォーカス制御部によるフォーカス調整動作に伴う前記二値化情報の変化から前記拡大光学系におけるオートフォーカス動作が行われる、請求項２または３に記載の光学顕微鏡システム。
【請求項５】
前記解析部が、前記二値化情報を用いて前記撮像画像における前記遮蔽部材の境界部分のコントラストを数値化し、前記数値化されたコントラスト値が最も大きくなる位置が前記拡大光学系におけるフォーカス位置であると判断する請求項４に記載の光学顕微鏡システム。
【請求項６】
前記解析部が、測定視野内に配置された、少なくとも一方向において規則性を有する光学パターンを撮像した前記撮像画像から、前記撮像画像の所定範囲内での前記光学パターンの位置間隔を求め、得られた位置間隔の平均値を用いて前記撮像倍率情報を取得する請求項１〜５のいずれかに記載の光学顕微鏡システム。
【請求項７】
前記解析部が、前記撮像画像の所定範囲内での前記光学パターンの位置間隔から前記撮像画像における二次元の座標位置を特定し、前記特定された二次元の座標位置から、複数の撮像画像を並べて配置した撮像画像を取得する、請求項６に記載の光学顕微鏡システム。
【請求項８】
前記光学顕微鏡は、光学的分光手段と前記光学的分光手段で分光されて得られた波長の異なる複数種類の光像それぞれからの撮像画像を取得可能な複数の撮像光学系を備え、
前記解析部は、測定視野内に配置された、少なくとも一方向において規則性を有する光学パターンを撮像して得られた前記複数の撮像光学系による撮像画像を用いて、各撮像光学系による前記撮像画像間の位置情報の誤差を補正する補正値を取得し、
前記補正値を用いて前記複数の撮像光学系により得られた撮像画像の誤差を補正する請求項１〜７のいずれかに記載の光学顕微鏡システム。
【請求項９】
前記解析部が、透過光による前記測定対象物の光像から得られた撮像画像から、各ピクセルについての分散値／平均値画像であるＣＶ画像を作成し、得られた前記ＣＶ画像に対して二値化処理を行って前記測定対象となる細胞の選別を行う、請求項１〜８のいずれかに記載の光学顕微鏡システム。
【請求項１０】
前記解析部は、前記透過光による前記測定対象物の光像を取得する際に、前記フォーカス制御部を制御して、デフォーカス状態の撮像画像を含む複数の撮像画像を取得し、取得した複数の前記撮像画像の合成画像に基づいて前記測定対象となる細胞の選別を行う、請求項９に記載の光学顕微鏡システム。
【請求項１１】
前記解析部が、同一の測定対象物についての全反射照明下における撮像画像と対物レンズの光軸上からの落射照明下における撮像画像とを取得し、これら２つの撮像画像の相関係数に基づいて当該撮像対象物の発現状態を判断する、請求項１〜１０のいずれかに記載の光学顕微鏡システム。
【請求項１２】
前記請求項１〜請求項１１のいずれかに記載された光学顕微鏡システムと、
それぞれに被測定物を収容可能な複数個のウェルを有するウェルプレートを移送し、各ウェルを順次前記拡大光学系の対物レンズ視野に配置可能なウェル移送手段と、
前記ウェル移送手段を制御して、それぞれのウェル内の測定対象物における生体細胞１分子の動態を計測するスクリーニング制御部とを備え、
各ウェル内に位置する複数の測定対象物における生体細胞１分子の自動スクリーニングを可能とするスクリーニング装置。
【請求項１３】
前記ウェルと前記拡大光学系の対物レンズとの間の油浸オイルを供給するオイル供給装置をさらに備え、
前記オイル供給装置は、前記油浸オイルを供給する一系統のオイル供給系と、前記油浸オイルを排出する二系統のオイル排出系を有し、前記二系統のオイル排出系のうち少なくとも一系統が前記油浸オイルを吸引排出するオイル排出系である請求項１２に記載のスクリーニング装置。
【請求項１４】
前記ウェルと前記拡大光学系の対物レンズとの間に配置されるオイルアダプタをさらに備え、
前記オイルアダプタは、
前記油浸オイルを前記オイルアダプタと前記対物レンズとの間の間隙部に供給する前記オイル供給系に接続されたオイル供給ケーブルと、
前記供給された油浸オイルを前記オイルアダプタの上面側から吸引排出する前記オイル排出系に接続されたオイル吸引ケーブルと、
前記オイルアダプタの周辺部分に形成された溝部内の前記油浸オイルを排出する前記溝部の底面に形成されたオイル排出ケーブルとを備えた、請求項１３に記載のスクリーニング装置。
【請求項１５】
前記スクリーニング制御部は、前記光学顕微鏡から得られる前記撮像画像に基づいて、前記ウェルプレートが有する複数のウェルの中心位置を予め認識してウェル中心情報を取得し、前記ウェル中心情報に基づいて前記ウェル移送手段を制御する請求項１２〜１４のいずれかに記載のスクリーニング装置。
【請求項１６】
前記ウェル内の前記測定対象物それぞれに、所定のタイミングで異なる刺激を与えることができる測定環境制御手段をさらに備える請求項１２〜１５のいずれかに記載のスクリーニング装置。
【請求項１７】
ウェルと拡大光学系の対物レンズとの間の油浸オイルを供給するオイル供給装置であって、前記油浸オイルを供給する一系統のオイル供給系と、前記油浸オイルを排出する二系統のオイル排出系を有し、前記二系統のオイル排出系のうち少なくとも一系統が前記油浸オイルを吸引排出するオイル排出系である、オイル供給装置。
【請求項１８】
ウェルと拡大光学系の対物レンズとの間に配置されるオイルアダプタであって、
油浸オイルを前記オイルアダプタと前記対物レンズとの間の間隙部に供給するオイル供給系に接続されたオイル供給ケーブルと、
前記供給された油浸オイルを前記オイルアダプタの上面側から吸引排出するオイル排出系に接続されたオイル吸引ケーブルと、
前記オイルアダプタの周辺部分に形成された溝部内の前記油浸オイルを排出する前記溝部の底面に形成されたオイル排出ケーブルとを備えた、オイルアダプタ。