【手続補正書】
【提出日】平成29年3月14日(2017.3.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料中の加水分解酵素の活性および／または量を評価する方法であって、
ａ）式（Ｉ）：
【化４９】
2016178939.tif 000001
の構造を有する加水分解酵素基質を、
加水分解酵素を含有するか、または加水分解酵素を含有すると疑われる試料と、該加水分解酵素が該試料中に存在する場合には該基質を切断する条件下で接触させて、式（ＩＩ）の構造を有するアリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子および式（ＩＩＩ）の構造を有する化合物
【化５０】
2016178939.tif 000002
［式中、
Ａは、芳香族基もしくは複素芳香族基、１−アルケン、または１−アルキンであり、そのそれぞれは、必要に応じて置換されており、
各Ｒは、独立に、Ｈ、または必要に応じて置換されているＣ１−Ｃ４アルキルもしくはアリールであり、
ｎは、１〜４の整数であり、そして
Ｘは、基質部分を含む基である］
を生成するステップと、
ｂ）該アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子の存在および／または量を評価して、該試料中の該加水分解酵素の活性および／または量を評価するステップと
を含む、方法。
【請求項２】
前記加水分解酵素が、エステラーゼ、ベータ−ガラクトシダーゼまたはグリコシダーゼである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子の存在および／または量を評価する前記ステップが、該アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子を酸化試薬で酸化させるステップを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子の存在および／または量が、酸素の存在下で、該アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子をアリールアルコールオキシダーゼまたは脂肪族アルコールオキシダーゼで酸化して、Ｈ２Ｏ２を生成し、該Ｈ２Ｏ２の存在および／または量を評価することによって評価される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子の存在および／または量が、ＮＡＤ＋またはＮＡＤＰ＋の存在下で、該アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子をアリールアルコールデヒドロゲナーゼまたはアルコールデヒドロゲナーゼで酸化して、ＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨを生成し、該ＮＡＤ＋、ＮＡＤＰ＋、ＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨの存在および／または量を評価することによって評価される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子の存在および／または量が、
ａ）該アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子を、酸素の存在下でアリールアルコールオキシダーゼまたは脂肪族アルコールオキシダーゼで酸化して、アリールアルデヒド分子または不飽和脂肪族アルデヒド分子およびＨ２Ｏ２を生成すること、
ｂ）該アリールアルデヒド分子または不飽和脂肪族アルデヒド分子を、ＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨの存在下でアリールアルコールデヒドロゲナーゼまたはアルコールデヒドロゲナーゼで還元して、該還元されたアリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子が、酸素の存在下で該アリールアルコールオキシダーゼまたは脂肪族アルコールオキシダーゼによって酸化されて、追加のアリールアルデヒド分子または不飽和脂肪族アルデヒド分子およびＨ２Ｏ２を生成する反応サイクルを形成すること、および
ｃ）該Ｈ２Ｏ２の存在および／もしくは量、またはＮＡＤＨ、ＮＡＤＰＨ、ＮＡＤ＋もしくはＮＡＤＰ＋の量を評価すること
によって評価される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
請求項１に記載の方法であって、前記加水分解酵素基質が、β−グリコシダーゼ基質分子の少なくとも一部を含み、前記加水分解酵素が、β−グリコシダーゼまたはベータ−ガラクトシダーゼである、方法。
【請求項８】
請求項７に記載の方法であって、前記アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子の存在および／または量を評価する前記ステップが、該アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子を酸化試薬で酸化させるステップを含む、方法。
【請求項９】
請求項７に記載の方法であって、前記アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子の存在および／または量が、該アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子を、酸素の存在下でアリールアルコールオキシダーゼまたは脂肪族アルコールオキシダーゼで酸化して、酸化されたアリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子およびＨ２Ｏ２を生成し、該Ｈ２Ｏ２の存在および／または量を評価することによって評価される、方法。
【請求項１０】
請求項７に記載の方法であって、前記アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子の存在および／または量が、該アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子を、ＮＡＤ＋またはＮＡＤＰ＋の存在下でアリールアルコールデヒドロゲナーゼまたはアルコールデヒドロゲナーゼで酸化して、ＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨを生成し、該ＮＡＤ＋、ＮＡＤＰ＋、ＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨの存在および／または量を評価することによって評価される、方法。
【請求項１１】
請求項７に記載の方法であって、前記アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子の存在および／または量が、
ａ）該アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子を、酸素の存在下でアリールアルコールオキシダーゼまたは脂肪族アルコールオキシダーゼで酸化して、酸化されたアリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子およびＨ２Ｏ２を生成すること、
ｂ）該酸化されたアリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子を、ＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨの存在下でアリールアルコールデヒドロゲナーゼまたはアルコールデヒドロゲナーゼで還元して、該還元されたアリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子が、酸素の存在下で該アリールアルコールオキシダーゼまたは脂肪族アルコールオキシダーゼによって酸化されて、追加の酸化されたアリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子およびＨ２Ｏ２を生成する反応サイクルを形成すること、および
ｃ）該Ｈ２Ｏ２の存在および／または量を評価すること
によって評価される、方法。
【請求項１２】
請求項１に記載の方法であって、前記加水分解酵素基質が、アルカリホスファターゼ基質分子の少なくとも一部を含み、前記加水分解酵素が、アルカリホスファターゼである、方法。
【請求項１３】
請求項１２に記載の方法であって、前記アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子の存在および／または量を評価する前記ステップが、該アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子を酸化試薬で酸化させるステップを含む、方法。
【請求項１４】
請求項１２に記載の方法であって、前記アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子の存在および／または量が、該アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子を、酸素の存在下でアリールアルコールオキシダーゼまたは脂肪族アルコールオキシダーゼで酸化して、酸化されたアリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子およびＨ２Ｏ２を生成し、該Ｈ２Ｏ２の存在および／または量を評価することによって評価される、方法。
【請求項１５】
請求項１２に記載の方法であって、前記アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子の存在および／または量が、該アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子を、ＮＡＤ＋またはＮＡＤＰ＋の存在下でアリールアルコールデヒドロゲナーゼまたはアルコールデヒドロゲナーゼで酸化して、ＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨを生成し、該ＮＡＤ＋、ＮＡＤＰ＋、ＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨの存在および／または量を評価することによって評価される、方法。
【請求項１６】
請求項１２に記載の方法であって、前記アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子の存在および／または量が、
ａ）該アリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子を、酸素の存在下でアリールアルコールオキシダーゼまたは脂肪族アルコールオキシダーゼで酸化して、酸化されたアリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子およびＨ２Ｏ２を生成すること、
ｂ）該酸化されたアリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子を、ＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨの存在下でアリールアルコールデヒドロゲナーゼまたはアルコールデヒドロゲナーゼで還元して、該還元されたアリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子が、酸素の存在下で該アリールアルコールオキシダーゼまたは脂肪族アルコールオキシダーゼによって酸化されて、追加の酸化されたアリールアルコール分子または不飽和脂肪族アルコール分子およびＨ２Ｏ２を生成する反応サイクルを形成すること、および
ｃ）該Ｈ２Ｏ２の存在および／または量を評価すること
によって評価される、方法。
【請求項１７】
請求項１〜１６のいずれかに記載の方法であって、
標的のアッセイ、単離および／または生成の一部として実施されるか、あるいは、
免疫アッセイ、タンパク質配列決定、核酸増幅、ハイブリダイゼーションまたは配列決定の一部として実施されるか、あるいは、
ＲＮＡまたはＤＮＡの配列決定をモニタするために使用される、
方法。