(57)【要約】  本発明は、磁性粒子であって、各粒子がポリマーマトリックスおよび少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）を含み、該ポリマーマトリックスが少なくとも１つの架橋されたポリマーを含み、そして該磁性粒子が１〜６０マイクロメートルの範囲の粒子サイズを有する、前記磁性粒子に関する。さらに、本発明は、こうした粒子を調製する方法、該方法によって得られうるかまたは得られる粒子に関する。さらに、本発明は、流体中の少なくとも１つの分析物の定性的および／または定量的決定のためのこれらの磁性粒子の使用に関する。さらに、本発明は、流体試料中の少なくとも１つの分析物を決定するための方法であって、本発明の磁性粒子または本発明の方法によって得られる磁性粒子を、少なくとも１つの分析物を含むかまたは含むと推測される流体試料と接触させる工程を含む、前記方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリマーマトリックス（Ｐ）および少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コアを含む磁性粒子であって、該ポリマーマトリックスが超架橋されたポリマーを含み、そして該磁性粒子が、ＩＳＯ  １３３２０にしたがって決定した際に、５〜４０マイクロメートルの範囲の粒子サイズを有する、前記磁性粒子。
【請求項２】
前記ポリマーマトリックスが、ＩＳＯ  １５９０１−３にしたがって決定した際に、１００ｎｍより小さい、好ましくは５０ｎｍより小さいかまたはこれに等しい孔サイズを有する孔を含む、請求項１の磁性粒子。
【請求項３】
ＩＳＯ  １５９０１−３にしたがって決定した際に、前記ポリマーマトリックス（Ｐ）中に存在するすべての孔の少なくとも９０％が１０ｎｍより小さい孔サイズを有し、そして該ポリマーマトリックス中に存在するすべての孔の少なくとも５０％が５ｎｍより小さい孔サイズを有し、好ましくは該ポリマーマトリックス（Ｐ）が５０ｎｍより大きい孔サイズを有するマクロ孔を含まない、請求項２の磁性粒子。
【請求項４】
ＩＳＯ  ９２７７にしたがって決定した際に、５０〜２５００ｍ２／ｇの範囲のＢＥＴ比表面積を有する、請求項２または３の磁性粒子。
【請求項５】
少なくとも１Ａ  ｍ２／ｋｇ、好ましくは少なくとも１０Ａ  ｍ２／ｋｇの飽和磁化を有する、請求項１〜４のいずれか一項の磁性粒子。
【請求項６】
超常磁性である、請求項１〜５のいずれか一項の磁性粒子。
【請求項７】
前記少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）が、少なくとも１つの磁性ナノ粒子、好ましくは少なくとも１つの酸化鉄ナノ粒子、より好ましくはＦｅ３Ｏ４ナノ粒子を含む、請求項１〜６のいずれか一項の磁性粒子。
【請求項８】
前記磁気コア（Ｍ）が、少なくとも１つのナノ粒子およびコーティングＣ１を含む、より好ましくはこれらからなる、請求項７の磁性粒子。
【請求項９】
前記少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）が、超粒子を含み、好ましくは超粒子からなり、そしてコーティングＣ１を含んでもよい、請求項１〜６のいずれか一項の磁性粒子。
【請求項１０】
前記超粒子が凝集ナノ粒子からなる、請求項９の磁性粒子。
【請求項１１】
前記超粒子が凝集ナノ粒子、そして好ましくは２０より多い凝集ナノ粒子、そしてより好ましくは１００〜１５０万のナノ粒子からなる、請求項９または１０の磁性粒子。
【請求項１２】
前記少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）が、超粒子、および少なくとも１つのコーティングＣ２を含み、好ましくはこれらからなり、該コーティングが好ましくはナノ粒子表面上に沈着し、そして該コーティングＣ２が、好ましくはジカルボン酸、ジカルボン酸塩、ジカルボン酸誘導体、ポリアクリル酸、ポリアクリル酸塩、ポリアクリル酸誘導体、トリカルボン酸、トリカルボン酸塩、トリカルボン酸誘導体、アミノ酸、アミノ酸塩、アミノ酸誘導体、表面活性剤、表面活性剤の塩、脂肪酸、脂肪酸塩および脂肪酸誘導体からなる群より選択される、請求項９〜１１のいずれか一項の磁性粒子。
【請求項１３】
前記少なくとも１つのコーティングＣ１が、界面活性剤、シリカ、シリケート、シラン、ホスフェート、ホスホネート、ホスホン酸、およびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される、請求項７〜１２のいずれか一項の磁性粒子。
【請求項１４】
前記ポリマーマトリックス（Ｐ）が、適切なモノマー構築ブロックを架橋剤である少なくとも１つのモノマー構築ブロックの存在下で共重合することを含む方法によって得られるかまたは得られうるコポリマーを含む、ここで好ましくはすべてのモノマー構築ブロックの５〜９０体積％が、架橋剤、より好ましくはジビニルベンゼンである、請求項１〜１３の磁性粒子。
【請求項１５】
ポリマーマトリックス（Ｐ）および少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を含む磁性粒子を調製する方法であって、該ポリマーマトリックス（Ｐ）が少なくとも１つの架橋ポリマーを含み、該磁性粒子がＩＳＯ  １３３２０にしたがって決定した際に５〜４０マイクロメートルの範囲の粒子サイズを有し、該方法は：
（ｉ）少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を提供し、
（ｉｉ）ポリマー前駆体分子を提供し、
（ｉｉｉ）（ｉｉ）記載のポリマー前駆体分子を、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）の存在下で重合させ、それによって、ポリマーマトリックス（Ｐ１）中に包埋された、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を含む粒子を形成し、ここで該ポリマーマトリックス（Ｐ１）は好ましくは架橋されたポリマーを含み、より好ましくは架橋されたポリマーからなる、そして
（ｉｖ）（ｉｉｉ）で得たポリマー粒子のポリマーマトリックス（Ｐ１）を超架橋して、
磁性粒子を生じる
工程を含む、前記方法。
【請求項１６】
前記（ｉｖ）における超架橋が、フリーデル・クラフツ反応を通じて実行される、請求項１５の方法。
【請求項１７】
請求項１５または１６の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子。
【請求項１８】
流体中の少なくとも１つの分析物の定性的および／または定量的決定のための、請求項１〜１４のいずれか一項の磁性粒子、あるいは請求項１７の磁性粒子の使用。
【請求項１９】
前記分析物が、ステロイド、ビタミン、薬剤、糖、有機化合物、タンパク質、核酸、糖およびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される、請求項１８の使用。
【請求項２０】
流体試料中の少なくとも１つの分析物を決定するための方法であって：
ａ）請求項１〜１４または請求項１７のいずれか一項の磁性粒子を、少なくとも１つの分析物を含むかまたは含むと推測される流体試料と接触させ；そして
ｂ）前記磁性粒子に結合した少なくとも１つの分析物を決定する
工程を含む、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、磁性粒子であって、各粒子がポリマーマトリックス（Ｐ）および少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）を含み、該ポリマーマトリックスが少なくとも１つの架橋されたポリマーを含み、そして磁性粒子が１〜６０マイクロメートルの範囲の粒子サイズを有する、前記磁性粒子に関する。さらに、本発明は、こうした粒子を調製する方法、および前記方法によって得られうるかまたは得られる粒子に関する。さらに、本発明は、流体中の少なくとも１つの分析物の定性的および／または定量的決定のためのこれらの磁性粒子の使用に関する。さらに、本発明は、流体試料中の少なくとも１つの分析物を決定するための方法であって、本発明の磁性粒子または本発明の方法によって得られる磁性粒子を、少なくとも１つの分析物を含むかまたは含むと推測される流体試料と接触させる工程を含む、前記方法に関する。
【発明の概要】
【０００２】
磁性粒子は、ヒト試料から分析物を捕捉するための優れたツールである。例えば抗体で被覆されている際、これらの粒子は分析物を特異的に捕捉可能であり、これを光学的技術によって検出することも可能である。磁気特性は、これらが、診断系に対して容易で、迅速で、そして安価な自動化を可能にし、そしてさらに時間が掛かる遠心分離および濾過工程を回避するため、非常に重要である。ここで、超常磁性物質は、外部磁場が適用された際にのみ磁化を示すため、より多くの注目を集めてきている。外部磁場の非存在下では、磁化はゼロであるように見える（「記憶効果」なし）。例えばＥＰ２００３４５５Ａ１およびＥＰ２０１５０７４Ａ１は、ＬＣ／ＭＳ系上で磁性粒子を用いることによる、ヒト試料からの分析物の抽出を記載する。
【０００３】
ヒト試料から分析物を濃縮するためには、磁性粒子上の高比表面積が必要である。表面積を１０００ｍ２／ｇより多く増加させるために、磁性粒子を多孔性マトリックスでコーティングする必要がある。これは通常、磁性粒子を多孔性シリカまたは酸化チタンマトリックス内に包埋することによって行われる。１つの欠点は、シリカおよびチタンが高密度であることであり、これはフィルム厚の増加とともに、磁化の減少を導く。さらに、シリカまたは酸化チタンを用いることによって、メソ孔（孔＞２ｎｍ）系しか発展可能でないが、特に、小さい分析物に関しては、マイクロ孔（孔＜２ｎｍ）の材料が好ましい。さらに、タンパク質およびリン脂質が巨大なメソ孔内に吸着され、これはＬＣ／ＭＳ系において、問題が多いマトリックス効果を生じる。
【０００４】
濃縮ワークフローＭＳ技術内の粒子の自動化のための１つの重要な要件は、ハイスループットのための迅速な磁気分離（＜５ｓ）である。粒子サイズおよび飽和磁化が非常に重要な特性である。したがって、高い飽和磁化（＞５Ａ  ｍ２  ｋｇ−１）および巨大なサイズ（＞２μｍ）を有する粒子が必要である。さらに、系をロバストにするため、粒子のキャリーオーバーを回避しなければならない。したがって、粒子は、高い磁化および１μｍより大きな粒子サイズを持たなければならない。
【０００５】
マイクロ孔を含むポリマーマトリックスを有する粒子は、例えば、Ｙａｎｇら  Ｐｏｌｙｍ．  Ｃｈｅｍ．，  ２０１３，  ４，  １４２５におけるものである。Ｙａｎｇらにしたがって、酸化鉄ナノ粒子はまず、オレイン酸でコーティングされ、そしてその後、ミニエマルジョン重合を通じて、ポリスチレンマトリックス内に包埋される。高比表面積に到達するため、ナノ粒子は最終的に、触媒としてＦｅＣｌ３を、そして多孔性依存架橋試薬としてジメトキシメタンを利用して、フリーデル−クラフツ反応によって超架橋される。生じる粒子は平均１００ｎｍのサイズおよび４．１Ａ  ｍ２  ｋｇ−１の飽和磁化を有する。粒子は、水から有機分子を抽出するために、そしてまたイブプロフェン薬剤送達を制御するための薬剤キャリアーとして有用と記載されるが、これらは、比較的小さい粒子サイズならびに低い飽和磁化しか示さず、このためこれらは自動化プロセスには不都合である。
【０００６】
Ｘｕらは、約３００ｎｍの粒子サイズを持つクエン酸安定化酸化鉄ナノ粒子の合成を記載する（Ｓ．  Ｘｕら  Ｐｏｌｙｍ．  Ｃｈｅｍ．，  ２０１５，  ６，  ２８９２）。これらのクエン酸安定化ナノ粒子は、メタクリル酸３−（トリメトキシシリル）プロピル（ＭＥＭＯ）でコーティングされ、そしてソープフリーエマルジョン重合を通じて、ポリスチロールシェルで覆われる。この技術で、１つのナノ粒子がポリマー粒子内に包埋される。第二の重合において、別の層が粒子上に形成される。この重合は、シード膨潤重合（ｓｅｅｄｅｄ  ｓｗｅｌｌｉｎｇ  ｐｏｌｙｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ）と称され、そして異なるモノマー組成を含有する。最後の工程として、孔形成触媒としてＦｅＣｌ３を用いた超架橋反応によって、多孔性を形成する。しかし、このプロセスを用いると、約４００ｎｍのサイズにしか到達できず、飽和磁化は１４．１Ａ  ｍ２  ｋｇ−１である。
【０００７】
したがって、好適な粒子、特に自動化プロセスに有用な粒子に対する必要性がなおある。
発明の要旨
したがって、比較的大きい粒子サイズならびに比較的高い飽和磁化を持つ多孔性磁性粒子を提供することが本発明の目的である。この問題は、独立特許クレームの特徴を持つ本発明によって解決される。個々にまたは組み合わせて達成可能である本発明の好適な開発は、従属クレーム中、および／または以下の明細書および詳細な態様に提示される。
【０００８】
以下で用いるような用語「有する（ｈａｖｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」または「含まれる（ｉｎｃｌｕｄｅ）」あるいはその任意の恣意的な文法的変形は、非排他的な方式で用いられる。したがって、これらの用語は、これらの用語によって導入される特徴に加えて、この文脈で記載される実体に、さらなる特徴はまったく存在しない状況、および１またはそれより多いさらなる特徴が存在する状況の両方を指してもよい。例えば、表現「ＡはＢを有する」、「ＡはＢを含む」および「ＡにはＢが含まれる」は、Ｂに加えて、Ａに他の要素がまったく存在しない状況（すなわちＡはもっぱらそして排他的にＢからなる状況）、ならびにＢに加えて実体Ａに１またはそれより多いさらなる要素、例えば要素Ｃ、要素ＣおよびＤまたはさらにさらなる要素が存在する状況の両方を指してもよい。
【０００９】
さらに、用語「少なくとも１つ」、「１つまたはそれより多く」、あるいは、特徴または要素が１回または１回より多く存在してもよいことを示す類似の表現は、典型的には、それぞれの特徴または要素を導入する際に一度だけ用いられるであろう。その後は、大部分の場合、それぞれの特徴または要素に言及する際、それぞれの特徴または要素が１回または１回より多く存在してもよいという事実にもかかわらず、表現「少なくとも１つ」または「１つまたはそれより多く」は反復されないであろう。
【００１０】
さらに、以下で用いるような用語「好ましくは」、「より好ましくは」、「具体的に」、「より具体的に」、「特に」、「より明確に」または類似の用語は、別の可能性を制限することなく、随意の特徴と組み合わせて用いられる。したがって、これらの用語によって導入される特徴は、随意の特徴であり、そしていかなる意味でも、請求項の範囲を制限するとは意図されない。本発明は、当業者が認識するであろうように、別の特徴を用いることによって実行可能である。同様に、「本発明の態様において」または類似の表現によって導入される特徴は、本発明の別の態様に関するいかなる制限も伴わず、本発明の範囲に関するいかなる制限も伴わず、そしてこうした方式で導入される特徴と、本発明の他の随意のまたは随意でない特徴とを組み合わせる可能性に関するいかなる制限も伴わずに、随意の特徴であると意図される。
【００１１】
本発明の第一の側面において、ポリマーマトリックス（Ｐ）および少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）を含む、磁性粒子であって、ポリマーマトリックスが少なくとも１つの架橋されたポリマーを含み、そして磁性粒子が、ＩＳＯ  １３３２０にしたがって決定した際に、１〜６０マイクロメートルの範囲の粒子サイズを有する、前記磁性粒子を開示する。
【００１２】
さらなる側面において、本発明は、ポリマーマトリックス（Ｐ）および少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）を含む磁性粒子を調製する方法、および前記方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子に関し、該ポリマーマトリックス（Ｐ）が少なくとも１つの架橋されたポリマーを含み、前記磁性粒子が、ＩＳＯ  １３３２０にしたがって決定した際に、１〜６０マイクロメートルの範囲の粒子サイズを有し、該方法が：
（ｉ）少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を提供し、
（ｉｉ）ポリマー前駆体分子を提供し、
（ｉｉｉ）少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）の存在下で、（ｉｉ）記載のポリマー前駆体分子を重合させ、それによって、ポリマーマトリックス（Ｐ１）中に包埋された、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を含む粒子を形成し、そして
（ｉｖ）（ｉｉｉ）で得たポリマー粒子のポリマーマトリックス（Ｐ１）を超架橋して、
磁性粒子を生じる工程を含む。
【００１３】
第三の側面において、本発明は、流体中の少なくとも１つの分析物の定性的および／または定量的決定のための、上述のおよび下記の磁性粒子の使用、あるいは上述のおよび下記の方法によって得られうる磁性粒子の使用に関する。
【００１４】
さらに、本発明は、流体試料中の少なくとも１つの分析物を決定するための方法であって、本発明の磁性粒子、または本発明の方法によって得られる磁性粒子を、少なくとも１つの分析物を含むかまたは含むと推測される流体試料と接触させる工程を含む、前記方法に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】図１は、１〜２０のナノ粒子（１０ａ）およびコーティングＣ１（１０ｂ）を含む１つの磁気コア（Ｍ）（１０ａ＋１０ｂ）、ならびにポリマーマトリックス（Ｐ）（１１）を含む磁性粒子の模式図である。
【図２】図２は、各々、１〜２０のナノ粒子（１０ａ）およびコーティングＣ１（１０ｂ）を含む、１より多い、すなわち３つの磁気コア（Ｍ）（１０ａ＋１０ｂ）、ならびにポリマーマトリックス（Ｐ）（１１）を含む、より好ましい磁性粒子の模式図である。
【図３】図３は、ポリマーマトリックス（Ｐ）（１１）、ならびにコーティングＣ２（１０ｃ）でコーティングされている多数のナノ粒子（１０ａ）の凝集に際して形成される超粒子からなる１つの磁気コア（Ｍ）であって、さらにコーティングＣ１（１０ｂ）を有する前記磁気コア（Ｍ）を含む、磁性粒子の模式図である。
【図４】図４は、ポリマーマトリックス（Ｐ）（１１）、ならびにコーティングＣ２（１０ｃ）でコーティングされている多数のナノ粒子（１０ａ）の凝集に際して形成される超粒子からなる１より多い磁気コア（Ｍ）であって、さらにコーティングＣ１（１０ｂ）を有する前記磁気コア（Ｍ）を含む、より好ましい磁性粒子の模式図である。
【図５】図５は、Ｘｕらによって合成された、異なるサイズを持つ粒子に関する計算飽和磁化を示す。
【図６】図６は、試料分析に関する、本明細書に記載するようなビーズを用いた濃縮ワークフローを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
磁性粒子
本発明にしたがった磁性粒子は、ＩＳＯ  １３３２０にしたがって決定した際に、１〜６０マイクロメートルの範囲の粒子サイズを有する。より好ましくは、粒子サイズは、５〜５５マイクロメートルの範囲、より好ましくは１０〜５０マイクロメートルの範囲、より好ましくは１５〜４５マイクロメートルの範囲、より好ましくは２０〜４０マイクロメートルの範囲、そして特に２０〜３５マイクロメートルの範囲である。好ましい態様にしたがって、本発明にしたがった磁性粒子は、ＩＳＯ  １３３２０にしたがって決定した際に、５〜４０マイクロメートルの範囲の粒子サイズを有する。
【００１７】
上述のように、本発明にしたがった磁性粒子は、ポリマーマトリックス（Ｐ）および少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）を含む。本発明の好ましい態様にしたがって、磁性粒子は、１より多い磁気コア（Ｍ）を含み、すなわち各粒子は、好ましくは少なくとも１つ、そして好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を含む。磁気コア（Ｍ）は、１またはそれより多い磁性ナノ粒子、例えば１〜２０の磁性ナノ粒子、好ましくは１〜１０、より好ましくは１〜５、そして最も好ましくは１〜３の磁性ナノ粒子を含む。あるいは、該磁性粒子は、２０より多いナノ粒子、そして好ましくは１００〜１５０万のナノ粒子、より好ましくは７５０〜７５０，０００のナノ粒子、より好ましくは１，７５０〜３２０，０００のナノ粒子、特に９０，０００〜３２０，０００のナノ粒子を含む。
【００１８】
したがって、本発明はまた、上述のような磁性粒子、ならびに上述の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子に関し、ここで粒子は少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を含む。特に好ましい態様にしたがって、磁性粒子、ならびに上述の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子は、少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）およびポリマーマトリックス（Ｐ）からなる。
【００１９】
好ましくは、磁気コア（Ｍ）の量は、最終粒子の望ましい飽和磁化飽和が達成されるように選択される。好ましくは、本発明にしたがった磁性粒子、あるいは上述の方法によって得られるかまたは得られうる粒子は、少なくとも１Ａ  ｍ２／ｋｇの飽和磁化を有する。好ましくは、飽和磁化は、ＡＳＴＭ  Ａ  ８９４／Ａ  ８９４Ｍにしたがって決定した際に、少なくとも１Ａ  ｍ２／ｋｇ、より好ましくは少なくとも２Ａ  ｍ２／ｋｇ、より好ましくは少なくとも３Ａ  ｍ２／ｋｇ、より好ましくは少なくとも４Ａ  ｍ２／ｋｇ、より好ましくは少なくとも５Ａ  ｍ２／ｋｇ、より好ましくは少なくとも６Ａ  ｍ２／ｋｇ、より好ましくは少なくとも７Ａ  ｍ２／ｋｇ、より好ましくは少なくとも８Ａ  ｍ２／ｋｇ、より好ましくは少なくとも９Ａ  ｍ２／ｋｇ、そして特に少なくとも１０Ａ  ｍ２／ｋｇ、例えば１０Ａ  ｍ２／ｋｇ〜２０Ａ  ｍ２／ｋｇの範囲、より好ましくは１０Ａ  ｍ２／ｋｇ〜３０Ａ  ｍ２／ｋｇの範囲である。
【００２０】
本発明の粒子は、原則として、いかなる幾何的形状であってもよいが、好ましくは、粒子は実質的に球状である。本明細書において、用語「実質的に球状」は、好ましくはカットされていない（ｎｏｎ−ｆａｃｅｔｅｄ）、または実質的に鋭い角を含まない丸い形状を持つ粒子を指す。特定の態様において、実質的に球状の粒子は、典型的には３：１または２：１未満の平均アスペクト比、例えば１．５：１未満、または１．２：１未満のアスペクト比を有する。特定の態様において、実質的に球状の粒子は、約１：１のアスペクト比を有してもよい。アスペクト比（ＡＲ）は、最大直径（ｄｍａｘ）およびそれに直交する最小直径（ｄｍｉｎ）の関数と定義される（ＡＲ＝ｄｍｉｎ／ｄｍａｘ）。直径は、ＳＥＭまたは光学顕微鏡測定を通じて決定される。
【００２１】
上述のような磁性粒子、ならびに上述の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子の、ＢＥＴ比表面積は、好ましくは、ＩＳＯ  ９２７７にしたがって決定した際に、５０〜２５００ｍ２／ｇの範囲である。より好ましくは、磁性粒子のＢＥＴ比表面積は、１００〜１５００ｍ２／ｇの範囲、そして特に３００〜１０００ｍ２／ｇの範囲である。
【００２２】
本発明の好ましい態様にしたがって、上述のような磁性粒子、ならびに上述の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子は、超常磁性である。用語「超常磁性」は、当業者に知られ、そして特に単一磁気モノドメインよりも小さい粒子に関して遭遇される磁気特性を指す。こうした粒子は、全体の磁化の最大値、別名（ｄｕｂｂｅｄ）飽和磁化に到達するまで、外部磁場を適用した際に、安定して配向される。これらは、磁場を除去すると緩和し、室温では磁気履歴現象を持たない（残留磁気なし）。外部磁場の非存在下で、超常磁性粒子は、二極配向（ニール緩和）および粒子位置（ブラウン緩和）の熱変動により、非永続的な磁気モーメントを示す。
【００２３】
磁気コア（Ｍ）
上述のように、本発明にしたがった磁性粒子は、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、そして好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を含む。好ましくは、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）は、金属、金属カーバイド、金属ニトリド、金属スルフィド、金属ホスフィド、酸化金属、金属キレートおよびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される化合物を含む。少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）はまた、金属、例えば金、銀、白金、または銅を含む合金も含んでもよい。
【００２４】
各磁気コア（Ｍ）が、上述の群の２つまたはそれより多くの混合物、すなわち金属、金属カーバイド、金属ニトリド、金属スルフィド、金属ホスフィド、酸化金属、金属キレートおよびその２つまたはそれより多くの混合物を含んでもよいことが理解されるものとする。さらに、２つまたはそれより多くの異なる金属、２つまたはそれより多くの異なる酸化金属、２つまたはそれより多くの異なる金属カーバイド、２つまたはそれより多くの異なる金属ニトリド、２つまたはそれより多くの異なる金属スルフィド、２つまたはそれより多くの異なる金属ホスフィド、２つまたはそれより多くの異なる金属キレートの混合物が想定されうる。
【００２５】
さらに、本発明にしたがった磁性粒子が、１より多い磁気コア（Ｍ）を含む場合、単一粒子中に存在する磁気コア（Ｍ）の各々は、同じであってもよいしまたは互いに異なってもよいことが理解されるものする。好ましくは、１つの磁性粒子中に含まれるすべての磁気コア（Ｍ）は同じである。
【００２６】
より好ましくは、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）は、酸化金属または金属カーバイドを含む。
好ましい態様において、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）は、少なくとも１つの遷移金属を含む、金属、金属カーバイド、金属ニトリド、金属スルフィド、金属ホスフィド、酸化金属、または金属キレートを含む。本発明にしたがった好ましい遷移金属には、限定されるわけではないが、クロム、マンガン、鉄、コバルト、ニッケル、亜鉛、カドミウム、ニッケル、ガドリニウム、銅、およびモリブデンが含まれる。より好ましくは、金属、金属カーバイド、金属ニトリド、金属スルフィド、金属ホスフィド、酸化金属、または金属キレートは、少なくとも鉄を含む。より好ましくは、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）は、酸化鉄、特にＦｅ３Ｏ４、α−Ｆｅ２Ｏ３、γ−Ｆｅ２Ｏ３、ＭｎＦｅｘＯｙ、ＣｏＦｅｘＯｙ、ＮｉＦｅｘＯｙ、ＣｕＦｅｘＯｙ、ＺｎＦｅｘＯｙ、ＣｄＦｅｘＯｙ、ＢａＦｅｘＯおよびＳｒＦｅｘＯからなる群より選択される酸化鉄を含み、式中、ｘおよびｙは、合成法に応じて多様であり、そして式中、ｘは好ましくは１〜３の整数であり、より好ましくは２であり、そして式中、ｙは好ましくは３または４である。最も好ましくは、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）はＦｅ３Ｏ４を含む。
【００２７】
したがって、本発明はまた、上述のような磁性粒子、ならびに上述の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子であって、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）が酸化鉄を含むものに関する。最も好ましくは、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）はＦｅ３Ｏ４を含む。
【００２８】
磁気コア（Ｍ）は、ナノ粒子およびコーティングＣ１を好ましくは含み、より好ましくはこれらからなる。
ナノ粒子
ナノ粒子は、好ましくは、粒子の磁性、好ましくは超常磁性を示す部分である。ナノ粒子は時にまた、本明細書において「磁性ナノ粒子」とも称される。
【００２９】
好ましくは、少なくとも１つのナノ粒子は、少なくとも１つの磁性、好ましくは超常磁性ナノ粒子、および随意に、１つのコーティング、例えばコーティングＣ２を含み、好ましくはこれらからなる。
【００３０】
本明細書において、用語「ナノ粒子」は、少なくとも１つの寸法が１００ナノメートル未満である、すなわち１００ｎｍ未満の直径を有する粒子を指す。好ましくは、本発明にしたがったナノ粒子は、ＴＥＭ測定にしたがって決定した際に、１〜２０ｎｍ、好ましくは４〜１５ｎｍの範囲の直径を有する。したがって、好ましい態様にしたがって、本発明はまた、上述のような磁性粒子、ならびに上述の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子であって、該磁性粒子が、少なくとも１つのナノ粒子および随意に１つのコーティング、例えばコーティングＣ２を含む少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）を含むものにも関する。
【００３１】
各ナノ粒子（単数または複数）は、ＴＥＭ測定にしたがって決定した際に、好ましくは、１〜２０ｎｍ、好ましくは４〜１５ｎｍの範囲の直径を有する。好ましくは、少なくとも１つの磁性ナノ粒子は超常磁性である。
【００３２】
磁気コア（Ｍ）は、１つのみのナノ粒子または１より多いナノ粒子を含んでもよい。１つの態様において、磁気コア（Ｍ）は、１〜２０のナノ粒子を含む。別の態様において、磁気コア（Ｍ）は、１００〜１５０万のナノ粒子、より好ましくは７５０〜７５０，０００のナノ粒子、より好ましくは１，７５０〜３２０，０００のナノ粒子、特に９０，０００〜３２０，０００のナノ粒子を含む。ナノ粒子は、磁気コアとして、個々の（すなわち別個の）粒子の形で存在してもよいし、またはこれらはいくつかのナノ粒子からなる凝集体であってもよい。これらの凝集体は、含まれるナノ粒子の数に応じて、異なるサイズを有してもよい。典型的には、以下により詳細にさらに記載される、いわゆる超粒子（ｓｕｐｒａｐａｒｔｉｃｌｅ）が形成される。１００またはそれより多いナノ粒子を含む磁気コアの場合、ナノ粒子は、典型的にはこうした超粒子を形成する。
【００３３】
１〜２０のナノ粒子を含む磁気コア（Ｍ）
第一の態様にしたがって、磁気コア（Ｍ）は、１〜２０の磁性ナノ粒子および随意にコーティングＣ２を含み、好ましくはこれらからなり、すなわち１つの磁性ナノ粒子と随意にコーティングＣ２が、磁気コア（Ｍ）のナノ粒子を形成する。典型的には、磁気コアは、１〜２０の磁性ナノ粒子、好ましくは１〜１０、より好ましくは１〜５、そして最も好ましくは１〜３のナノ粒子を含む。
【００３４】
好ましくは、この場合、ナノ粒子は、金属、金属カーバイド、金属ニトリド、金属スルフィド、金属ホスフィド、酸化金属、金属キレートおよびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される化合物を含み、より好ましくはこれらからなる。各ナノ粒子が、上述の群の２つまたはそれより多くの混合物、すなわち金属、金属カーバイド、金属ニトリド、金属スルフィド、金属ホスフィド、酸化金属、金属キレートおよびその２つまたはそれより多くの混合物を含んでもよく、好ましくはこれらからなってもよいことが理解されるものとする。さらに、２つまたはそれより多くの異なる金属、２つまたはそれより多くの異なる酸化金属、２つまたはそれより多くの異なる金属カーバイド、２つまたはそれより多くの異なる金属ニトリド、２つまたはそれより多くの異なる金属スルフィド、２つまたはそれより多くの異なる金属キレート、あるいは２つまたはそれより多くの異なる金属ホスフィドの混合物が想定されうる。より好ましくは、ナノ粒子は、酸化金属または金属カーバイドを含み、より好ましくはこれらからなる。好ましい態様において、金属は遷移金属である。本発明にしたがった好ましい遷移金属には、限定されるわけではないが、クロム、マンガン、鉄、コバルト、ニッケル、亜鉛、カドミウム、ニッケル、ガドリニウム、銅、およびモリブデンが含まれる。最も好ましくは、金属は鉄である。
【００３５】
したがって、特に好ましい態様にしたがって、ナノ粒子は、酸化金属、最も好ましくは酸化鉄、特にＦｅ３Ｏ４を含み、より好ましくはこれらからなる。
この態様にしたがって、１より多い磁気コア（Ｍ）が磁性粒子中に存在する場合、これらの磁気コア（Ｍ）が互いに凝集しないことが好ましい。好ましくは、これらの粒子は、ポリマーマトリックス内に、実質的に均一に分布する。
【００３６】
超粒子を含む磁気コア（Ｍ）
第二の好ましい態様にしたがって、磁気コア（Ｍ）は、２０より多いナノ粒子、そして典型的には１００より多いナノ粒子を含み、ここでこれらのナノ粒子は、好ましくは互いに凝集して超粒子を形成する。より好ましくは、この場合、磁気コア（Ｍ）は、凝集しコーティングされたナノ粒子からなる超粒子を含む。好ましくは、この場合、磁気コア（Ｍ）は、１００〜１５０万のナノ粒子、より好ましくは７５０〜７５０，０００のナノ粒子、より好ましくは１，７５０〜３２０，０００のナノ粒子、特に９０，０００〜３２０，０００のナノ粒子の間を含む、超粒子を含む。好ましくは、各ナノ粒子は、少なくとも１つのコーティングＣ２でコーティングされる。好ましくは、この場合、磁気コア（Ｍ）は、したがって、互いに凝集しているコーティングされたナノ粒子からなる超粒子を含み、好ましくはこれらからなり、ここで、ナノ粒子は少なくとも１つのコーティングＣ２でコーティングされ、そしてコーティングは好ましくは、ナノ粒子の表面上に沈着する。超粒子はまた、好ましくはコーティングＣ１でもコーティングされていてもよい。
【００３７】
したがって、本発明のこの第二の好ましい態様にしたがって、本発明にしたがった磁性粒子は、２０より多い磁性ナノ粒子、そして好ましくは１００〜１５０万のナノ粒子を含み、前記ナノ粒子は、少なくとも１つの超粒子を形成する。超粒子中のナノ粒子は各々、典型的には、少なくとも１つのコーティングＣ２でコーティングされ、そして超粒子は、典型的には、少なくとも１つのコーティングＣ１でコーティングされる。
【００３８】
好ましくは、コーティングＣ２は、各ナノ粒子の少なくとも部分、好ましくは全表面を覆うコーティングである。好ましくは、やはりこの場合でも、各ナノ粒子は、金属、金属カーバイド、金属ニトリド、金属スルフィド、金属ホスフィド、酸化金属、金属キレートおよびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される化合物を含み、より好ましくはこれらからなる。各ナノ粒子が、上述の群の２つまたはそれより多くの混合物、すなわち金属、金属カーバイド、金属ニトリド、金属スルフィド、金属ホスフィド、酸化金属、金属キレートおよびその２つまたはそれより多くの混合物を含んでもよいことが理解されるものとする。さらに、２つまたはそれより多くの異なる金属、２つまたはそれより多くの異なる酸化金属、２つまたはそれより多くの異なる金属カーバイド、２つまたはそれより多くの異なる金属ニトリド、２つまたはそれより多くの異なる金属スルフィド、２つまたはそれより多くの異なる金属キレート、あるいは２つまたはそれより多くの異なる金属ホスフィドの混合物が想定されうる。より好ましくは、超粒子中の各ナノ粒子は、酸化金属または金属カーバイドを含み、より好ましくはこれらからなる。好ましい態様において、金属は遷移金属である。本発明にしたがった好ましい遷移金属には、限定されるわけではないが、クロム、マンガン、鉄、コバルト、ニッケル、亜鉛、カドミウム、ニッケル、ガドリニウム、銅、およびモリブデンが含まれる。最も好ましくは、金属は鉄である。特に好ましい態様にしたがって、超粒子中に含まれる各ナノ粒子は酸化金属ナノ粒子、最も好ましくは酸化鉄ナノ粒子、特にＦｅ３Ｏ４ナノ粒子である。
【００３９】
したがって、本発明はまた、上述のような磁性粒子、ならびに上述の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子であって、磁気コア（Ｍ）が、凝集した少なくとも２０のナノ粒子からなる超粒子を含みまたは好ましくは該超粒子からなり、ここでナノ粒子が好ましくは少なくとも１つのコーティングＣ２でコーティングされている、前記磁性粒子にも関する。
【００４０】
好ましくは、随意の少なくとも１つのコーティングＣ１を含む磁気コア（Ｍ）は、ＤＬＳ（ＩＳＯ  ２２４１２）にしたがって決定した際に、８０〜５００ｎｍ、より好ましくは１５０〜４００ｎｍ、そして最も好ましくは２００〜３００ｎｍの範囲の直径を有する。
【００４１】
コーティングＣ２
コーティングＣ２として、一般的に、当業者に知られる任意のコーティングが想定されうる。しかし、好ましくは、コーティングＣ２は、ジカルボン酸、トリカルボン酸、ポリアクリル酸、アミノ酸、表面活性剤および脂肪酸からなる群の少なくとも１つのメンバーから選択される。したがって、上述の群には、言及する化合物の塩および誘導体、例えばエステルおよびポリマーが含まれると理解されるものとする。したがって、コーティングＣ２は、好ましくは、ジカルボン酸、ジカルボン酸塩、ジカルボン酸誘導体、トリカルボン酸、トリカルボン酸塩、トリカルボン酸誘導体、ポリアクリル酸、ポリアクリル酸塩、ポリアクリル酸誘導体、アミノ酸、アミノ酸塩、アミノ酸誘導体、表面活性剤、表面活性剤の塩、脂肪酸、脂肪酸塩および脂肪酸誘導体からなる群の少なくとも１つのメンバーより選択される。
【００４２】
本明細書において、用語、コーティングされたまたはコーティングは、磁性ナノ粒子または超粒子コアおよびコーティングＣ２またはＣ１、あるいは存在する場合、２つまたはそれより多いコーティングの間の、吸着、ファンデルワールスおよび／または非極性基相互作用（例えば化学吸着または物理的吸着）、または共有結合のプロセスを指すよう用いられる。
【００４３】
好ましくは、脂肪酸、脂肪酸塩または脂肪酸誘導体として、超粒子の表面に結合し、それによって好ましくは超粒子を安定化させることが可能である、こうした化合物が選択される。コーティングＣ２として使用される脂肪酸は、好ましくは、末端カルボキシル基（−ＣＯＯＨ）および磁性粒子表面への高アフィニティ吸着（例えば化学吸着または物理的吸着）を有する、８〜２２の炭素原子を含有するアルキル基の単一の鎖である。脂肪酸は、ナノ粒子の磁化を有意に減少させうる酸化および／または水の存在下での加水分解からの磁性粒子コアの保護（Ｈｕｔｔｅｎら（２００４）Ｊ．  Ｂｉｏｔｅｃｈ．  １１２：４７−６３）；ナノ粒子コアの安定化等を含む、多数の機能を有する。用語「脂肪酸」には、飽和または不飽和、そして特に不飽和脂肪酸が含まれる。例示的な飽和脂肪酸には、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、エナント酸、カプリル酸、ペラルゴン酸、カプリン酸、ウンデシル酸、トリデシル酸、ペンタデシル酸、マルガリン酸、ノナデシル酸、ヘネイコシル酸、ベヘン酸、トリコシル酸、リグノセリン酸、ペンタコシル酸、セロチン酸、ヘプタコシル酸、モンタン酸、ノナコシル酸、メリシン酸、ヘナトリアコンチル酸、ラクセロン酸、サイリック酸（ｐｓｙｌｌｉｃ  ａｃｉｄ）、ゲド酸（ｇｅｄｄｉｃ  ａｃｉｄ）、セロプラスチック酸、ヘキサトリアコンチル酸、ヘプタトリアコンタン酸、およびオクタトリアコンタン酸等が含まれる。例示的な不飽和脂肪酸には、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、アラキドン酸、ヘキサデカトリエン酸、ステアリドン酸、エイコサトリエン酸、エイコサテトラエン酸、エイコサペンタエン酸、ヘネイコサペンタン酸、ドコサペンタエン酸、クルパノドン酸、ドコサヘキサエン酸、テトラコサペンタエン酸、テトラコサヘキサエン酸、カレンジン酸、エイコサジエン酸、ドコサジエン酸、アドレン酸、ドコサペンタエン酸、テトラコサテトラエン酸、テトラコサペンタエン酸、５−ドデセン酸、７−テトラデセン酸、パルミトレイン酸、バクセン酸、パウリン酸、１５−ドコセン酸、１７−テトラコセン酸、エライジン酸、ゴンドイン酸、ミード酸、エルカ酸、ネルボン酸、ルーメン酸、カレンジン酸、ジャカル酸、エレオステアリン酸、カタルプ酸、プニカ酸、ルメレン酸（ｒｕｍｅｌｅｎｉｃ  ａｃｉｄ）、パリナリン酸、ボセオペンタエン酸、ピノレン酸、ポドカルプ酸等が含まれる。脂肪酸は、合成でもよいし、または確立された方法を用いて天然供給源から単離されてもよい。さらに、脂肪酸は、脂肪酸エノールエステル（すなわちアセトンのエノール型と反応した脂肪酸）、脂肪エステル（すなわち一価アルコールのアルキル基によって置換された活性水素を含む脂肪酸）、脂肪アミンまたは脂肪アミド、あるいは特に好ましい態様において、上述のような脂肪アルコールなどの誘導体であってもよい。特に好ましい脂肪酸はオレイン酸である。
【００４４】
表面活性剤は、本発明の背景において、両親媒性、すなわち疎水性基および親水性基の両方を含有する、有機化合物である。好ましくは、超粒子表面に結合し、それによって好ましくは超粒子を安定化させることが可能な表面活性剤が選択され、適用に応じて、多様な鎖長、親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）値および表面電荷を持つ表面活性剤を使用してもよい。好ましくは、本発明にしたがった表面活性剤は、四級アンモニウム塩、アルキルベンゼンスルホネート、スルホン酸リグニン、ポリオキシルエトキシレート、または硫酸エステルである。表面活性剤の限定されない例は、臭化セチルトリメチルアンモニウム、塩化セチルトリメチルアンモニウム、ノニフェノールポリエトキシレート（すなわち、ＮＰ−４、ＮＰ−４０およびＮＰ−７）、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム、ラウリル硫酸アンモニウム、ラウレス硫酸ナトリウム、ミレス硫酸ナトリウム、ドキュセート、パーフルオロオクタンスルホネート、パーフルオロブタンスルホネート、リン酸アルキル−アリールエーテル、リン酸アルキルエーテル、ステアリン酸ナトリウム、２−アクリルアミド−２−メチルプロパンスルホン酸、パーフルオロノナン酸アンモニウム、ラウレス硫酸マグネシウム、パーフルオロノナン酸、パーフルオロオクタン酸、リン脂質、ラウリル硫酸カリウム、アルキル硫酸ナトリウム、ドデシル硫酸ナトリウム、ラウリン酸ナトリウム、ラウロイルサルコシン酸ナトリウム、ノナノイルオキシベンゼンスルホン酸ナトリウム、パレス硫酸ナトリウム、塩化ベヘントリモニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ブロニドックス、臭化ジメチルジオクタデシルアンモニウム、塩化ジメチルジオクタデシルアンモニウム、塩化ラウリルメチルグルセト−１０ヒドロキシプロピルジモニウム、オクテニジン二塩酸、オラフルール、Ｎ−オレイル−１，３−プロパンジアミン、塩化ステアラルコニウム、水酸化テトラメチルアンモニウム、臭化トンゾニウム、セトマクロゴール１０００、セトステアリルアルコール、セチルアルコール、コカミドＤＥＡ、コカミドＭＥＡ、デシルポリグルコース、ココアンホ二酢酸二ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、ポリエチレングリコールイソセチルエーテル、オクチルフェノキシポリエトキシエタノール、ラウリルグルコシド、マルトシド、モノラウリン、ミコサブチリン、ノノキシノール、オクタエチレングリコールモノドデシルエーテル、Ｎ−オクチルベータ−Ｄ−チオグルコピラノシド、オクチルグルコシド、オレイルアルコール、ペンタエチレングリコールモノドデシルエーテル、ポリドカノール、ポロキサマー、ポリエトキシル化獣脂アミン、ポリリシノール酸ポリグリセロール、ポリソルベート、ソルビタン、モノラウリン酸ソルビタン、モノステアリン酸ソルビタン、トリステアリン酸ソルビタン、ステアリルアルコール、サーファクチン、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、Ｔｗｅｅｎ  ８０、コカミドプロピルベタイン、コカミドプロピルヒドロキシスルタイン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ヒドロキシスルタイン、酸化ラウリルジメチルアミン、レシチン、酸化ミリスタミン、ペプチタージェント（ｐｅｐｔｉｔｅｒｇｅｎｔ）、ラウロアンホ酢酸��トリウムおよびビス（２−エチルヘキシル）スルホコハク酸エステルである。
【００４５】
用語「アミノ酸」は、本発明の意味内で使用した際、天然または非天然アミノ酸またはアミノ酸誘導体、ならびにアミノ酸の塩を指す。好ましくは、超粒子の表面に結合し、それによって好ましくは超粒子を安定化させることが可能なアミノ酸を選択する。例示的なアミノ酸には、システイン、メチオニン、ヒスチジン、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、リジン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、セレノシステイン、ピロリジン、システイン、デヒドロアラニン、エンデュラシジジン、ランチオニン、ノルバリンおよびその誘導体が含まれる。
【００４６】
用語「ジカルボン酸」は、本発明の意味内で用いた際、２つのカルボン酸官能基を含有する炭化水素または置換炭化水素（すなわちＲ１−（Ｃ（Ｏ）ＯＨ）２）を指し、式中、Ｒ１は（ａ）０〜１８の炭素単位を含有する直鎖炭化水素、あるいは（ｂ）芳香環または非芳香環のいずれかとして、３〜８の炭素単位を含有する環状炭化水素である。該用語には、脂肪酸の塩および誘導体、例えば脂肪酸のエステルが含まれる。代表的なジカルボン酸は、例えばプロパン二酸、ブタン二酸、ペンタン二酸、ヘキサン二酸、ヘプタン二酸、オクタン二酸、ノナン二酸、デカン二酸、ウンデカン二酸、ドデカン二酸、ヘキサデカン二酸、マレイン酸、フマル酸、グルタコン酸、トラウマチン酸、ムコン酸、グルチン酸、シトラコン酸、メサコン酸、リンゴ酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、タルトロン酸、酒石酸、ジアミノピメリン酸、糖酸、メソシュウ酸、オキサロ酢酸、アセトンジカルボン酸、アラビナン酸、フタル酸、イソフタル酸、テレフタル酸、ジフェン酸、２，６−ナフタレンジカルボン酸である。
【００４７】
用語「トリカルボン酸」は、本発明の意味内で、３つのカルボン酸官能基を含有する炭化水素または置換炭化水素（すなわちＲ１−（Ｃ（Ｏ）ＯＨ）３）を指し、式中、Ｒ１は（ａ）３〜１８の炭素単位を含有する直鎖炭化水素、あるいは（ｂ）芳香環または非芳香環のいずれかとして、３〜８の炭素単位を含有する環状炭化水素である。該用語には、脂肪酸の塩および誘導体、例えば脂肪酸のエステルが含まれる。代表的なトリカルボン酸は、例えばクエン酸（２−ヒドロキシプロパン−１，２，３トリカルボン酸）、イソクエン酸（１−ヒドロキシプロパン−１，２，３トリカルボン酸）、アコニット酸（プロプ−１−エン−１，２，３トリカルボン酸）、プロパン−１，２，３−トリカルボン酸、トリメリト酸（ベンゼン−１，２，４−トリカルボン酸）、トリメシン酸（ベンゼン−１，３，５−トリカルボン酸）、オキサロコハク酸（１−オキソプロパン−１，２，３−トリカルボン酸）またはヘミメリト酸（ベンゼン−１，２，３−トリカルボン酸）である。好ましくは、トリカルボン酸は、サイトレート、すなわちクエン酸の塩および誘導体を含むクエン酸である。
【００４８】
好ましくは、Ｃ２は、クエン酸、ヒスチジン、ＣＴＡＢ、ＣＴＡＣ、オレイン酸ナトリウム、ポリアクリル酸あるいはその２つまたはそれより多くの混合物（それぞれの塩または誘導体を含む）からなる群より選択される。したがって、本発明はまた、上述のような磁性粒子、ならびに上述の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子であって、磁気コア（Ｍ）が、好ましくは少なくとも１つのコーティングＣ２を含む凝集磁性粒子からなる超粒子からなり、少なくとも１つのコーティングＣ２が、サイトレート、ヒスチジン、ＣＴＡＢ、ＣＴＡＣ、オレイン酸ナトリウム、ポリアクリル酸あるいはその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される、前記磁性粒子にも関する。
【００４９】
好ましくは、コーティングＣ２の量は、Ｃ２および超粒子の合計の総重量に基づいて、１〜８０重量％の範囲、より好ましくは５〜７０重量％の範囲、より好ましくは１０〜５０重量％の範囲、最も好ましくは２０〜４０重量％の範囲である。
【００５０】
コーティングＣ１
上述のように、磁気コア（Ｍ）は、好ましくは磁性ナノ粒子およびコーティングＣ１を含み、より好ましくはこれらからなる。したがって、本発明はまた、上述のような磁性粒子、ならびに上述の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子であって、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）がコーティングＣ１をさらに含む、前記磁性粒子にも関する。
【００５１】
コーティングＣ１は、好ましくは、磁気コア（Ｍ）の表面上に沈着する。コーティングＣ１および磁気コア（Ｍ）の間には、さらなる分離層が存在していてもよいが、好ましい態様にしたがって、Ｃ１は磁気コア（Ｍ）上に直接コーティングされることが理解されるものとする。
【００５２】
好ましくは、コーティングＣ１は、磁気コア（Ｍ）の全表面上を取り巻く。
原則として、当業者に知られる任意の適切なコーティングを使用してもよい。好ましくは、コーティングＣ１は、界面活性剤、シリカ、シリケート、シラン、ホスフェート、ホスホネート、ホスホン酸、およびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される。
【００５３】
したがって、本発明はまた、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）を含む上述のような磁性粒子、ならびに上述の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子であって、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）が少なくとも１つのコーティングＣ１を含み、そしてコーティングＣ１が、界面活性剤、シリカ、シリケート、シラン、ホスフェート、ホスホネート、ホスホン酸、およびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される、前記磁性粒子にも関する。
【００５４】
好ましくは、コーティングＣ１は、シリカ、オルトケイ酸テトラエチル、メタクリル酸３−（トリメトキシシリル）プロピル、ビニルトリメトキシシラン、ビニルトリエトキシシラン、アリルトリメトキシシラン、アリルトリエトキシシラン、トリエトキシビニルシラン、アクリル酸３−（トリメトキシシリル）プロピル、トリメトキシ（７−オクテン−１−イル）シラン、トリメトキシメチルシラン、トリエトキシメチルシラン、エチルトリメトキシシラン、トリエトキシ（エチル）シラン、トリメトキシフェニルシラン、トリメトキシ（２−フェニルエチル）シラン、トリメトキシ（プロピル）シラン、ｎ−プロピルトリエトキシシラン、イソブチル（トリメトキシ）シラン、イソブチルトリエトキシシラン、ビニルホスホン酸、ビニルホスホン酸ジメチル、ビニルホスホン酸ジエチル、アリルホスホン酸ジエチル、アリルリン酸ジエチル、（２−メチルアリル）ホスホン酸ジエチル、オクチルホスホン酸、ブチルホスホン酸、デシルホスホン酸、ヘキシルホスホン酸、ヘキサデシルホスホン酸、ｎ−ドデシルホスホン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、およびアラキジン酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、エナント酸、カプリル酸、ペラルゴン酸、カプリン酸、ウンデシル酸、トリデシル酸、ペンタデシル酸、マルガリン酸、ノナデシル酸、ヘネイコシル酸、ベヘン酸、トリコシル酸、リグノセリン酸、ペンタコシル酸、セロチン酸、ヘプタコシル酸、モンタン酸、ノナコシル酸、メリシン酸、ヘナトリアコンチル酸、ラクセロン酸、サイリック酸、ゲド酸、セロプラスチック酸、ヘキサトリアコンチル酸、ヘプタトリアコンタン酸、オクタトリアコンタン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、アラキドン酸、ヘキサデカトリエン酸、ステアリドン酸、エイコサトリエン酸、エイコサテトラエン酸、エイコサペンタエン酸、ヘネイコサペンタン酸、ドコサペンタエン酸、クルパノドン酸、ドコサヘキサエン酸、テトラコサペンタエン酸、テトラコサヘキサエン酸、カレンジン酸、エイコサジエン酸、ドコサジエン酸、アドレン酸、ドコサペンタエン酸、テトラコサテトラエン酸、テトラコサペンタエン酸、５−ドデセン酸、７−テトラデセン酸、パルミトレイン酸、バクセン酸、パウリン酸、１５−ドコセン酸、１７−テトラコセン酸、エライジン酸、ゴンドイン酸、ミード酸、エルカ酸、ネルボン酸、ルーメン酸、カレンジン酸、ジャカル酸、エレオステアリン酸、カタルプ酸、プニカ酸、ルメレン酸、パリナリン酸、ボセオペンタエン酸、ピノレン酸、ポドカルプ酸およびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される。
【００５５】
好ましくは、各磁気コア（Ｍ）は、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）の総重量に基づいて、１〜４０重量％、好ましくは２〜１５重量％、より好ましくは５〜１０重量％の量でコーティングＣ１を含む。
【００５６】
本発明の１つの好ましい態様にしたがって、コーティングＣ１は、ビニルまたはアクリル基を含む。
ポリマーマトリックス（Ｐ）
上述のように、各粒子は、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）に加えて、ポリマーマトリックス（Ｐ）を含む。
【００５７】
好ましくは、ポリマーマトリックス（Ｐ）は、多孔性ポリマーマトリックス、好ましくは、ＩＳＯ  １５９０１にしたがって決定した際に、１００ｎｍより小さい、より好ましくは１００ｎｍより小さい、より好ましくは９０ｎｍより小さい、より好ましくは８０ｎｍより小さい、より好ましくは７０ｎｍより小さい、より好ましくは６０ｎｍより小さい、より好ましくは５０ｎｍより小さいかまたはそれに等しい、例えば０．５ｎｍ〜５０ｎｍの範囲の、好ましくは１〜２０ｎｍの範囲の孔サイズを有する孔を含む多孔性ポリマーマトリックスである。
【００５８】
したがって、本発明はまた、上述のような磁性粒子、ならびに上述の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子であって、ポリマーマトリックス（Ｐ）が、ＩＳＯ  １５９０１にしたがって決定した際に、１００ｎｍより小さい、好ましくは５０ｎｍより小さいかまたはそれに等しい孔サイズを有する孔を含む多孔性ポリマーマトリックスである、前記粒子にも関する。
【００５９】
好ましくは、ＩＳＯ  １５９０１にしたがって決定した際に、ポリマーマトリックス中に存在するすべての孔の少なくとも９０％は、１０ｎｍより小さい孔サイズを有し、そしてポリマーマトリックス中に存在するすべての孔の少なくとも５０％は、５ｎｍより小さい孔サイズを有する。
【００６０】
特定の好ましい態様にしたがって、ポリマーマトリックスは、マクロ孔、すなわち５０ｎｍより大きい孔サイズを有する孔を含まない。
好ましくは、粒子は、粒子の総重量に基づいて、４０〜９８重量％の範囲、より好ましくは５０〜９５重量％の範囲、より好ましくは６０〜９０重量％の範囲、そして最も好ましくは７０〜８５重量％の範囲の量でポリマーマトリックス（Ｐ）を含む。
【００６１】
ポリマーマトリックス（Ｐ）は、好ましくは、スチレン、官能化スチレン、ビニルベンジルクロリド、ジビニルベンゼン、ビニルアセテート、メチルメタクリレートおよびアクリル酸からなる群より選択される少なくとも２つの異なるモノマー構築ブロックの重合を含む方法によって得られるかまたは得られうるコポリマーを含む。好ましくは、コポリマーは、以下のモノマー：
【００６２】
【化１】
2020519856.tif 000002
【００６３】
であって、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５が、互いに独立に、−Ｎ３、−ＮＨ２、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｆ、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＯ２、−ＳＨ２、−ＳＯ２、−Ｒ’（ＯＨ）ｘ、−Ｒ’（ＣＯＯＨ）ｘ、−Ｒ’（ＣＯＯＲ’’）ｘ、−Ｒ’（ＯＲ’’）ｘ、−Ｒ’（ＮＨ２）ｘ、−Ｒ’（ＮＨＲ’’）ｘ、−Ｒ’（ＮＲ’’Ｒ’’’）ｘ、−Ｒ’（Ｃ１）ｘ、−Ｒ’（Ｉ）ｘ、−Ｒ’（Ｂｒ）ｘ、−Ｒ’（Ｆ）ｘ、Ｒ’（ＣＮ）ｘ、−Ｒ’（Ｎ３）ｘ、−Ｒ’（ＮＯ２）ｘ、−Ｒ’（ＳＨ２）ｘ、−Ｒ’（ＳＯ２）ｘ、アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキルからなる群より選択され、そしてＲ’、Ｒ’’、Ｒ’’’が、互いに独立に、アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ハライド、水素、スルフィド、ナイトレートおよびアミンからなる群より選択され、そしてｘが１〜３の範囲の整数である、前記モノマーからなる群より選択される少なくとも２つの異なるモノマー構築ブロックの重合を含む方法によって得られるかまたは得られうる。
【００６４】
原則として、当業者に知られる任意のポリマーが使用可能である。好ましくは、ポリマーマトリックスは、架橋されたポリマーを含み、このポリマーは、より好ましくは、架橋剤である、したがって生じるポリマーにおいて架橋が達成される剤である、少なくとも１つのモノマー構築ブロックの存在下で、適切なモノマー構築ブロックを共重合する工程を含む方法によって得られるかまたは得られうるものである。ポリマーを架橋するための適切な剤は当業者に知られ、そしてこうした剤には、限定されるわけではないが、構築ブロック、例えばジビニルベンゼン、ビス（ビニルフェニル）エタン、ビス（ビニルベンジルオキシ）ヘキサン、ビス（ビニルベンジルオキシ）ドデカンおよびこれらの誘導体が含まれる。
【００６５】
特に好ましい態様にしたがって、ジビニルベンゼンが、架橋剤として使用される。
好ましくは、ポリマーマトリックスは、すべてのモノマー構築ブロックの５〜９０体積％が架橋剤である、モノマー構築ブロックを共重合する工程を含む方法によって得られるかまたは得られうる。
【００６６】
好ましくは、生じるポリマーにおいて、少なくとも５％の架橋度が得られる。
少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）は、好ましくはポリマーマトリックス中に包埋される。用語「包埋される」は、この背景において、磁気コアが、好ましくはポリマーマトリックスによって完全に取り囲まれることを意味するよう意味される。あるいは、該コアは、ポリマーマトリックスによって部分的に取り囲まれていてもよい。しかし、この場合、ポリマーマトリックスは、磁気コアを固定する。
【００６７】
上述のように、好ましい態様にしたがって、粒子は、少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を含む。この場合、粒子中に存在する各磁気コア（Ｍ）は、ポリマーマトリックス（Ｐ）中に包埋されると理解されるものとする。したがって、本発明はまた、上述のような磁性粒子、ならびに上述の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子であって、少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）がポリマーマトリックス中に包埋されている、前記粒子にも関する。
【００６８】
超架橋
より好ましくは、ポリマーマトリックスＰは、上述のような少なくとも２つの異なるモノマー構築ブロックの重合を含み、それによって好ましくは架橋されたポリマーが得られる方法によって得られるかまたは得られうる架橋されたコポリマーであって、さらに超架橋されている前記の架橋されたポリマーを含む。したがって、より好ましくは、ポリマーマトリックスは、超架橋されたポリマーを含み、特に超架橋されたポリマーからなる。
【００６９】
用語「超架橋された」は、本明細書において、強固な三次元ネットワークを生じる多数の架橋タイプを指す。好ましくは、超架橋は、架橋されたポリマーを化学反応に供し、それによって超架橋されたポリマーを得ることによって達成される。したがって、ポリマーマトリックス（Ｐ）は、化学反応により、超架橋剤を伴いまたは伴わずに、ポリマーをさらに超架橋することによって得られるかまたは得られうるポリマーマトリックスである。ポリマーを超架橋するために適した剤が当業者に知られ、そしてこれには、限定されるわけではないが、ジクロロエタン、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、ジクロロベンゼン、トリクロロベンゼン、ジクロロアルカン、ジブロモアルカン、ジヨードアルカン、トリクロロアルカン、トリブロモアルカン、トリヨードアルカン、ジメトキシメタン、ジメトキシエタンおよびその２つまたはそれより多くの混合物が含まれる。
【００７０】
好ましくは、超架橋は、架橋されたポリマーマトリックスをフリーデル−クラフツ反応、特に本明細書の以下に記載するようなフリーデル−クラフツ反応に供することによって達成される。
【００７１】
表面官能化
少なくとも１つの磁気コアＭおよびポリマーマトリックス（Ｐ）を含む磁性粒子は、表面修飾をさらに含んでもよいことが理解されるものとする。粒子表面、したがって、ポリマーマトリックス（Ｐ）の表面は、好ましくは、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、ジエチルアミノエタノール、Ｒ−ＳＯ２−ＯＨ、−ＮＨ２、Ｒ−ＳＯ２−ＯＨ、−ＲＮＨ、−Ｒ２Ｎ、−Ｒ３Ｎ＋−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ４Ｈ９、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ１８Ｈ３７、−Ｃ６Ｈ５、−Ｃ６Ｈ９ＮＯ６、フェニル−ヘキシル、ビ−フェニル、ヒドロキシアパタイト、ボロン酸、ビオチン、アジド、エポキシド、アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アミノ酸、−ＣＯＯＲ、−ＣＯＲ、−ＯＲ、抗体およびその断片、アプタマー、核酸、および受容体タンパク質またはその結合ドメインからなる群より選択される少なくとも１つの基で官能化される。好ましくは、これらの基は、ポリマーマトリックスの適切な官能基に共有結合される。こうした修飾を実行する方法は、当業者に知られる。
【００７２】
磁性粒子を調製するための方法
上述のように、本発明はまた、ポリマーマトリックス（Ｐ）および少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を含む磁性粒子を調製するための方法であって、ポリマーマトリックス（Ｐ）が少なくとも１つの架橋されたポリマーを含み、磁性粒子が１〜６０マイクロメートルの範囲の粒子サイズを有し、該方法が：
（ｉ）少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を提供し、
（ｉｉ）ポリマー前駆体分子を提供し、
（ｉｉｉ）少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）の存在下で、（ｉｉ）記載のポリマー前駆体分子を重合させ、それによって、ポリマーマトリックス（Ｐ１）中に包埋された、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を含む粒子を形成し、ここでポリマーマトリックス（Ｐ１）は好ましくは架橋されたポリマーを含み、より好ましくは架橋されたポリマーからなる、そして
（ｉｖ）好ましくは、（ｉｉｉ）で得た粒子のポリマーマトリックス（Ｐ１）を超架橋して、
磁性粒子を生じる工程を含む、前記方法にも関する。
【００７３】
好ましくは、（ｉｉｉ）において、少なくとも磁気コア（Ｍ）はマトリックス内に包埋されている。
工程（ｉ）
上述のように、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）は、好ましくは、金属、金属カーバイド、金属ニトリド、金属スルフィド、金属ホスフィド、酸化金属、金属キレートおよびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される化合物を含む。少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）はまた、金属、例えば金、銀、白金、または銅を含む合金も含んでもよい。より好ましくは、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）は、酸化金属または金属カーバイドを含み、より好ましくは少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）は、酸化鉄、特にＦｅ３Ｏ４、α−Ｆｅ２Ｏ３、γ−Ｆｅ２Ｏ３、ＭｎＦｅｘＯｙ、ＣｏＦｅｘＯｙ、ＮｉＦｅｘＯｙ、ＣｕＦｅｘＯｙ、ＺｎＦｅｘＯｙ、ＣｄＦｅｘＯｙ、ＢａＦｅｘＯおよびＳｒＦｅｘＯからなる群より選択される酸化鉄を含み、式中、ｘおよびｙは、合成法に応じて多様であり、そして式中、ｘは好ましくは１〜３の整数であり、より好ましくは２であり、そして式中、ｙは好ましくは３または４であり、そして最も好ましくは、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）はＦｅ３Ｏ４を含む。
【００７４】
したがって、本発明はまた、上述のような方法、および前記方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子にも関し、ここで少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）は、酸化金属または金属カーバイドを含み、より好ましくは少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）は、酸化鉄、特にＦｅ３Ｏ４、α−Ｆｅ２Ｏ３、γ−Ｆｅ２Ｏ３、ＭｎＦｅｘＯｙ、ＣｏＦｅｘＯｙ、ＮｉＦｅｘＯｙ、ＣｕＦｅｘＯｙ、ＺｎＦｅｘＯｙ、ＣｄＦｅｘＯｙ、ＢａＦｅｘＯおよびＳｒＦｅｘＯからなる群より選択される酸化鉄を含み、式中、ｘおよびｙは、合成法に応じて多様であり、そして式中、ｘは好ましくは１〜３の整数であり、より好ましくは２であり、そして式中、ｙは好ましくは３または４であり、そして最も好ましくは、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）はＦｅ３Ｏ４を含む。
【００７５】
上述のように、磁気コア（Ｍ）は、磁性ナノ粒子およびコーティングＣ１を好ましくは含み、より好ましくはこれらからなる。
好ましくは、工程（ｉ）は：
（ｉ．１）少なくとも１つの磁性ナノ粒子を提供し、そして
（ｉ．２）少なくとも１つの磁性ナノ粒子を、コーティングＣ１であって、好ましくは、界面活性剤、シリカ、シリケート、シラン、ホスフェート、ホスホネート、ホスホン酸、およびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される、前記コーティングＣ１でコーティングして、
磁気コア（Ｍ）を生じる
工程を含む。
【００７６】
（ｉ．１）中の磁性ナノ粒子は、少なくとも１つの磁性、好ましくは超常磁性ナノ粒子および随意にコーティングＣ２を含み、好ましくはこれらからなる。
したがって、工程（ｉ．１）は、少なくとも１つのナノ粒子の提供を含む。
【００７７】
磁性ナノ粒子を提供する方法は、当業者に知られ、そして例えば、Ｌｕ，  Ｓａｌａｂａｓ，  Ｓｃｈｕｔｈ，  Ａｎｇｅｗ．  Ｃｈｅｍ  Ｉｎｔ．  Ｅｄ．  ２００７，  ４６，  １２２２−１２４４に記載され、そのそれぞれの内容は本明細書に援用される。
【００７８】
特にＦｅ３Ｏ４ナノ粒子の場合、酸化Ｆｅ（ＩＩ）およびＦｅ（ＩＩＩ）は、水性媒体、好ましくはアルカリ水性媒体から沈殿して、それぞれのナノ粒子を生じる。
各磁気コア（Ｍ）が、少なくとも１つの磁性ナノ粒子を、随意にコーティングＣ１とともに含む、上述の第一の好ましい態様にしたがって、工程（ｉ．１）はしたがって、少なくとも１つの磁性ナノ粒子を、随意にコーティングＣ１とともに提供して、磁気コア（Ｍ）を形成する工程を含む。好ましくは、この場合、磁性ナノ粒子は、コーティングＣ２を含まない。本発明のこの第一の好ましい態様にしたがって、本発明にしたがった磁性粒子は、好ましくは１〜２０の磁性ナノ粒子を含む。
【００７９】
この態様にしたがって、１より多い磁気コア（Ｍ）が磁性粒子中に存在する場合、これらの磁気コア（Ｍ）が互いに凝集しないことが好ましい。好ましくは、これらの粒子は、ポリマーマトリックス内で、実質的に均一に分布する。
【００８０】
したがって、本発明はまた、上述のような方法、ならびに上述のような磁性粒子に関し、ここで工程（ｉ）は：
（ｉ．１）少なくとも１つの磁性ナノ粒子を、随意にコーティングＣ２とともに提供して、少なくとも１つの磁性ナノ粒子を生じ、そして
（ｉ．２）少なくとも１つの磁性ナノ粒子を、コーティングＣ１であって、好ましくは、界面活性剤、シリカ、シリケート、シラン、ホスフェート、ホスホネート、ホスホン酸、およびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される、前記コーティングＣ１でコーティングして、
磁気コア（Ｍ）を生じる
工程を含む。
【００８１】
上述の第二の好ましい態様にしたがって、磁気コア（Ｍ）、すなわち好ましくは各磁気コア（Ｍ）は、２０より多いナノ粒子、好ましくは１００〜１５０万のナノ粒子、より好ましくは７５０〜７５０，０００のナノ粒子、より好ましくは１，７５０〜３２０，０００のナノ粒子、特に９０，０００〜３２０，０００のナノ粒子を含む。より好ましくは、ナノ粒子は、凝集しコーティングされたナノ粒子からなる少なくとも１つの超粒子を形成する。好ましくは、前記超粒子は、少なくとも１つのコーティングＣ１でコーティングされる。好ましくは、この場合、超粒子は、少なくとも１つのコーティングＣ１でコーティングされ、ここでコーティングは、好ましくは超粒子表面上に沈着する。したがって、超粒子は、好ましくは、コーティングＣ１でコーティングされる。超粒子内の各ナノ粒子が、好ましくは、例えばコーティングＣ２でコーティングされることが理解されるものとする。工程（ｉ．１）は、したがって、２０より多いナノ粒子の提供を含み、該方法は、前記ナノ粒子を凝集させ、それによって、少なくとも１つの超粒子を形成し、そして随意に少なくとも１つのコーティングＣ１で各超粒子をコーティングする工程をさらに含む。
【００８２】
したがって、本発明はまた、上述の方法、ならびに上述のような磁性粒子にも関し、ここで、工程（ｉ）は：
（ｉ．１）
（ｉ．１．１）好ましくはコーティングＣ２を伴う、２０より多いナノ粒子を提供し、
（ｉ．１．２）前記ナノ粒子を凝集させ、それによって超粒子を形成し、そして
（ｉ．２）少なくとも１つの超粒子を、コーティングＣ１であって、好ましくは、界面活性剤、シリカ、シリケート、シラン、ホスフェート、ホスホネート、ホスホン酸、およびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される、前記コーティングＣ１でコーティングして、
磁気コア（Ｍ）を生じる
工程を含む。
【００８３】
この場合、各磁気コア（Ｍ）は、好ましくは、互いに凝集している、少なくとも２１のコーティングされたナノ粒子、好ましくは１００〜１５０万のナノ粒子、より好ましくは７５０〜７５０，０００のナノ粒子、より好ましくは１，７５０〜３２０，０００のナノ粒子、特に９０，０００〜３２０，０００のコーティングされたナノ粒子からなる超粒子を含む。
【００８４】
（ｉ．１．１）および（ｉ．１．２）は、超粒子が直接提供される反応を通じて、単一工程で実行されてもよいことが理解されるものとする。
超粒子を提供するための方法が当業者に知られ、そして例えば、Ｌｉｕら，  Ａｎｇｅｗ．  Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｔ．  Ｅｄ．  ２００９，  ４８，  ５８７５−５８７９に記載されており、該文献のそれぞれの内容は、本明細書に援用される。
【００８５】
特に、Ｆｅ３Ｏ４ナノ粒子を含む超粒子の場合、合成は、好ましくは上昇した温度、例えば１５０℃〜２５０℃の範囲の温度での、そして好ましくは増加した圧、例えば２〜１０バールの圧での、ＦｅＣｌ３の部分的還元を含んで、Ｆｅ３Ｏ４超粒子を得てもよい。
【００８６】
上述のように、コーティングＣ２は、それによって、ジカルボン酸、ジカルボン酸塩、ジカルボン酸誘導体、ポリアクリル酸、ポリアクリル酸塩、ポリアクリル酸誘導体、トリカルボン酸、トリカルボン酸塩、トリカルボン酸誘導体、アミノ酸、アミノ酸塩、アミノ酸誘導体、表面活性剤、表面活性剤の塩、脂肪酸、脂肪酸塩および脂肪酸誘導体からなる群の少なくとも１つのメンバーより選択される。
【００８７】
ナノ粒子または超粒子をコーティングする方法は、当業者に知られる。コーティングは、好ましくは、超粒子の合成中にｉｎ  ｓｉｔｕで実行される。
工程（ｉｉ）
工程（ｉｉ）において、ポリマー前駆体分子を提供し、すなわち重合後にそれぞれのポリマーを生じる、モノマー構築ブロックを提供する。
【００８８】
好ましくは、（ｉｉ）におけるこれらのポリマー前駆体分子は、スチレン、官能化スチレン、ビニルベンジルクロリド、ジビニルベンゼン、ビニルアセテート、メチルメタクリレートおよびアクリル酸からなる群より選択され、より好ましくは、以下のモノマー：
【００８９】
【化２】
2020519856.tif 000003
【００９０】
であって、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５が、互いに独立に、−Ｎ３、−ＮＨ２、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｆ、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＯ２、−ＳＨ２、−ＳＯ２、−Ｒ’（ＯＨ）ｘ、−Ｒ’（ＣＯＯＨ）ｘ、−Ｒ’（ＣＯＯＲ’’）ｘ、−Ｒ’（ＯＲ’’）ｘ、−Ｒ’（ＮＨ２）ｘ、−Ｒ’（ＮＨＲ’’）ｘ、−Ｒ’（ＮＲ’’Ｒ’’’）ｘ、−Ｒ’（Ｃ１）ｘ、−Ｒ’（Ｉ）ｘ、−Ｒ’（Ｂｒ）ｘ、−Ｒ’（Ｆ）ｘ、Ｒ’（ＣＮ）ｘ、−Ｒ’（Ｎ３）ｘ、−Ｒ’（ＮＯ２）ｘ、−Ｒ’（ＳＨ２）ｘ、−Ｒ’（ＳＯ２）ｘ、アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキルからなる群より選択され、そしてＲ’、Ｒ’’、Ｒ’’’が、互いに独立に、アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ハライド、水素、スルフィド、ナイトレートおよびアミンからなる群より選択される、前記モノマーからなる群より選択される。
【００９１】
工程（ｉｉｉ）
工程（ｉｉｉ）において、（ｉｉ）記載のポリマー前駆体分子を、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）の存在下で重合させて、それによって、ポリマーマトリックス（Ｐ１）に包埋された、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を含む粒子を形成し、ここで、ポリマーマトリックス（Ｐ１）は、上におよび以下に記載するような、架橋されたポリマーを好ましくは含み、より好ましくはこうした架橋されたポリマーからなる。この架橋されたポリマーマトリックスＰ１は、次いで、好ましくは工程（ｉｖ）においてさらに超架橋されて、ポリマーマトリックスＰを生じる。
【００９２】
（ｉｉｉ）における重合は、好ましくは懸濁重合である。用語「懸濁重合」は、水に比較的不溶性であるポリマー前駆体分子が水相において液体小滴として懸濁されている系を指す。通常、懸濁を維持するために懸濁剤が使用され、そして生じるポリマーは、分散した固相として得られる。モノマー構築ブロックは、懸濁重合系において直接分散されてもよいが、モノマーとともに、混合物を含めて、ｎ−ヘプタン、イソオクタン、シクロヘキサン、ベンゼン、トルエン等の炭化水素溶媒または希釈剤が一般的に使用される。
【００９３】
懸濁重合系において、重合されるべきモノマー混合物は、通常、モノマー、または望ましい場合、モノマー溶液中のポリマー、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、溶媒、および使用する場合はイニシエーターを含む。
【００９４】
したがって、工程（ｉｉｉ）は、好ましくは：
（ｉｉｉ．１）（ｉｉ）記載のポリマー前駆体分子、（ｉ）記載の少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、少なくとも１つの有機溶媒、少なくとも１つのイニシエーターおよび水相、ならびに随意の添加剤を含む組成物（Ａ）を提供し、ここで有機溶媒は水と混和せず、そして
（ｉｉｉ．２）組成物（Ａ）を攪拌して、エマルジョン（Ｂ）を生じる、ここでエマルジョンは好ましくは水中有機溶媒エマルジョンである
工程を含む。
【００９５】
好ましくは、（ｉｉｉ）における重合は、アゾビス（イソブチロニトリル）（ＡＩＢＮ）、２，２’−アゾジ（２−メチルブチロニトリル）（ＶＡＺＯ６７）、１，１’−アゾビス（シアノシクロヘキサン）（ＶＡＺＯ８８）、ベンゾイルペルオキシド（ＢＰＯ）、２，２’−アゾビス（２−アミジノプロパン）二塩酸（ＡＡＰＨ）および４，４’−アゾビス（４−シアノペンタン酸）（ＡＣＶＡ）からなる群より選択されるイニシエーターの存在下で実行される。
【００９６】
モノマーおよび少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）は、好ましくは、随意に少なくとも１つの懸濁剤を含有する水溶液中に懸濁される。使用する水の量は、使用する反応剤のタイプ、攪拌手段等に応じて非常に多様でありうるが、最終懸濁混合物は、好ましくは、水を含む全混合物の総重量に基づいて、約５〜６０重量パーセントのモノマー構築ブロックを含有する。
【００９７】
方法は、液体中液体分散を伴い、そして別個の固形粒子の形で最終産物を提供するため、懸濁重合系において、添加剤として、多様な懸濁剤を使用してもよい。懸濁剤には、不溶性カーボネート、シリケート、タルク、ゼラチン、ペクチン、デンプン、セルロース誘導体、不溶性ホスフェート、ＰＶＡ、塩、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＰＶＰ等が含まれる。好ましくは、（ｉｉｉ）における重合は、いかなる界面活性剤の非存在下で行われる。
【００９８】
重合のために使用する時間は、望ましい変換の程度または度合いのために十分でなければならず、そして多様な反応パラメータ、例えば使用する温度に応じて、数分から何時間も、例えば４８時間まで、広い範囲に渡って多様である可能性もある。好ましくは、工程（ｉｉｉ）は、１時間〜３０時間、好ましくは１時間〜８時間の範囲の時間、実行される。
【００９９】
使用する温度は、少なくとも、熱重合を実現するか、または用いる場合は、反応の開始を提供するフリーラジカルイニシエーターの分解を引き起こすために十分であり、好ましくはポリマーのゲル形成を引き起こしうる温度未満である。使用する温度は、好ましくは、約０℃〜１００℃、好ましくは４０〜９０℃の範囲である。
【０１００】
攪拌は、好ましくは、オーバーヘッド攪拌装置で実行される。
好ましくは、ポリマーマトリックス（Ｐ１）は、架橋されたポリマーを含み、このポリマーは、より好ましくは、架橋剤でポリマーを共重合することによって得られるかまたは得られうるものである。ポリマーを架橋するために適切な剤が当業者に知られ、そしてこれには、限定されるわけではないが、ジビニルベンゼン、ビス（ビニルフェニル）エタン、ビス（ビニルベンジルオキシ）ヘキサン、ビス（ビニルベンジルオキシ）ドデカンおよびその誘導体が含まれる。
【０１０１】
特に好ましい態様にしたがって、架橋剤として、ジビニルベンゼンを使用する。好ましくは、ポリマーマトリックス（Ｐ１）は、ポリマーの総量に基づいて、５〜９０体積％の架橋剤でポリマーを架橋することによって得られるかまたは得られうる。
【０１０２】
工程（ｉｖ）
ポリマーマトリックス（Ｐ１）は、好ましくは、さらなる工程（ｉｖ）において超架橋される。さらなる工程（ｉｖ）が実行されない場合、ポリマーマトリックス（Ｐ１）は、好ましくはポリマーに対応する。しかし、特に好ましい態様にしたがって、好ましくはフリーデル−クラフツ反応によって、（ｉｖ）において超架橋を実行する。本出願の目的のための、用語「フリーデル−クラフツ反応」は、Ｃｈａｒｌｅｓ  ＦｒｉｅｄｅｌおよびＪａｍｅｓ  Ｃｒａｆｔｓによって開発された、芳香族求電子置換反応によって芳香環に置換基を付着させるための周知の反応タイプを指し、そしてこれには、フリーデル−クラフツ反応の２つの主なタイプ：アルキル化反応およびアシル化反応が含まれる。好ましくは、本発明においてアルキル化を使用してもよい。こうした反応は、通常、適切な触媒、例えばルイス酸の存在下で行われる。
【０１０３】
好ましくは、ＦｅＣｌ３、ＺｎＣｌ２、ＡｌＣｌ３、ＢＦ３、ＳｂＣｌ５、ＳｎＣｌ４、ＴｉＣｌ４、ＳｉＣｌ４からなる群より選択されるルイス酸を含む、より好ましくはこうしたルイス酸からなる触媒の存在下で、（ｉｖ）を実行する。より好ましくは、触媒はＦｅＣｌ３、ＺｎＣｌ２、又はその混合物を含む、より好ましくは触媒はＦｅＣｌ３、ＺｎＣｌ２、又はその混合物からなる。
【０１０４】
好ましくは、（ｉｖ）における超架橋は、−３０℃〜１２０℃の範囲の温度で行われ、より好ましくは、（ｉｖ）における超架橋は、８０℃未満またはそれに等しい温度、例えば−３０℃〜８０℃の範囲の温度で行われる。
【０１０５】
より好ましくは、（ｉｖ）は、７０℃未満、より好ましくは６０℃未満、より好ましくは５０℃未満、より好ましくは４０℃未満、より好ましくは３０℃未満の温度、例えば好ましくは−３０℃〜３０℃の範囲の温度、より好ましくは−２０℃〜３０℃の範囲の温度、より好ましくは−２０℃〜３０℃の範囲の温度、より好ましくは−１０℃〜３０℃の範囲の温度、より好ましくは０℃〜３０℃の範囲の温度、そして最も好ましくは１０〜３０℃の範囲の温度で実行される。反応中、温度は一定にまたは段階的に変化してもよいし、あるいは本質的に一定に維持されてもよい。温度を変化させる場合、温度が常に、１２０℃に等しいかそれ未満、１００℃未満、８０℃未満、および好ましくは７０℃未満、より好ましくは６０℃未満、より好ましくは５０℃未満、より好ましくは４０℃未満、より好ましくは３０℃未満の温度に、例えば好ましくは−３０℃〜３０℃の範囲の温度、より好ましくは−２０℃〜３０℃の範囲の温度、より好ましくは−２０℃〜３０℃の範囲の温度、より好ましくは−１０℃〜３０℃の範囲の温度、より好ましくは０℃〜３０℃の範囲の温度、そして最も好ましくは１０〜３０℃の範囲の温度で維持されることが理解されるものとする。
【０１０６】
架橋は、当業者に知られる任意の適切な溶媒によって実行されてもよく、そして好ましくは、ジクロロエタン、トルエン、アセトニトリル、ＤＭＦ、エチルエーテル、ＴＨＦ、ベンゼン、キシレン、ジオキサン、アルカン、ジクロロメタン、クロロホルム、クロロベンゼン、四塩化炭素、ＮＭＰ、ジクロロベンゼン、トリクロロベンゼン、エーテル、シクロアルカン、有機ハライドあるいはその２つまたはそれより多くの混合物を含む溶媒中で実行される。より好ましくは、（ｉｖ）における架橋は、ジクロロエタン、トルエン、アセトニトリル、ＤＭＦ、エチルエーテル、ＴＨＦ、ベンゼン、キシレン、ジオキサン、アルカン、ジクロロメタン、クロロホルム、クロロベンゼン、四塩化炭素からなる群より選択される溶媒中で実行される。
【０１０７】
好ましくは、（ｉｖ）における反応は、ジクロロエタンまたは他の有機ハライド中では行われない。より好ましくは（ｉｖ）における反応は、ジクロロエタンまたは他の有機ハライドを含む溶媒中では実行されない。
【０１０８】
特に、（ｉｖ）における反応は、少なくともＴＨＦ、アセトニトリル、ＤＭＦ、ジオキサンまたはトルオールを含む溶媒中で実行される。より好ましくは、（ｉｖ）は、ＴＨＦ、アセトニトリル、ＤＭＦ、ジオキサン、トルオールおよびその２つまたはそれより多い混合物からなる群より選択される溶媒中で実行される。
【０１０９】
好ましくは、（ｉｖ）における反応は、４時間またはそれ未満、例えば１０分〜２時間、より好ましくは３０分〜１．５時間、より好ましくは４５分〜１時間の範囲の時間、実行される。
【０１１０】
好ましくは、（ｉｖ）における反応は、不活性大気下で行われ、さらにより好ましくは、（ｉｖ）における反応中、不活性ガスが混合物中に流される。好ましくは、不活性ガスは窒素および／またはアルゴンである。
【０１１１】
随意の工程（ｖ）
上述の工程に加えて、方法は、１またはそれより多いさらなる工程を含んでもよい。特に、方法は、（ｉｉｉ）または（ｉｖ）にしたがって得られるポリマー粒子の表面を官能化する工程を含んでもよい。
【０１１２】
したがって、本発明はまた、上述のような方法、ならびに上述の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子であって、該方法が：
（ｖ）（ｉｉｉ）または（ｉｖ）記載のポリマー粒子の表面を官能化する
工程をさらに含むものにも関する。
【０１１３】
好ましくは、この工程において、ポリマー粒子は、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、ジエチルアミノエタノール、Ｒ−ＳＯ２−ＯＨ、−ＮＨ２、Ｒ−ＳＯ２−ＯＨ、−ＲＮＨ、−Ｒ２Ｎ、−Ｒ３Ｎ＋−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ４Ｈ９、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ１８Ｈ３７、−Ｃ６Ｈ５、−Ｃ６Ｈ９ＮＯ６、フェニル−ヘキシル、ビ−フェニル、ヒドロキシアパタイト、ボロン酸、ビオチン、アジド、エポキシド、アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アミノ酸、−ＣＯＯＲ、−ＣＯＲ、−ＯＲ、抗体およびその断片、アプタマー、核酸、ポリマーおよび受容体タンパク質またはその結合ドメインからなる群より選択される基で官能化される。
【０１１４】
ポリマー粒子を官能化するための方法が、当業者に知られ、そして例えば、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  第２版，  Ｇ．  Ｔ．  Ｈｅｒｍａｎｓｏｎに記載され、その開示内容は、本明細書に援用される。
【０１１５】
好ましくは、この工程は、少なくとも、適切な塩基、例えばＫＯＨでの粒子の処理（ＯＨ官能化）を含む。あるいは、官能化はＣＯＯＨ官能化、Ｃｘ官能化またはエポキシ官能化であってもよい。前記官能化に関するさらなる詳細はまた、以下の付随する実施例に提供される。
【０１１６】
使用／分析法
上述の磁性粒子および上述の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子は、好ましくは、流体中の少なくとも１つの分析物の定性的および／または定量的決定のために用いられる。
【０１１７】
用語「定性的」決定は、本明細書において、流体中の少なくとも１つの分析物の存在または非存在を決定することを指す。さらに、該用語はまた、分析物の性質の評価を含んでもよく、すなわち、分析物の同定または分析物が属する化学分子のクラスの同定を含んでもよい。
【０１１８】
磁性粒子への少なくとも１つの分析物の結合を可能にするために十分な時間および十分な条件下で、流体試料を磁性粒子に接触させ、続いて残った流体試料を磁性粒子から除去し、そして少なくとも１つの分析物が磁性粒子に結合しているかどうかを決定することによって、少なくとも１つの分析物の存在または非存在を決定してもよい。分析物が磁性粒子に結合しているかどうかを決定するため、粒子に結合した化合物を適切な技術によって溶出させてもよく、そして続いて、溶出物中の少なくとも１つの分析物の存在または非存在を決定してもよい。あるいは、少なくとも１つの分析物の結合を、直接、すなわち磁性粒子に結合したまま決定してもよい。
【０１１９】
分析物を磁性粒子から溶出させた後、少なくとも１つの分析物または該分析物が属する化学クラスの同定を、適切な分析法、例えば質量分析、ＵＶ−ｖｉｓ、ＮＭＲ、ＩＲまたは生化学法、例えばＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ等によって行ってもよい。あるいは、表面官能化に用いる剤の種類に応じて、特定の分析物のみが結合することも可能である。例えば、抗体の場合、抗体の特異性のため、分析物の化学的性質があらかじめ決定される。
【０１２０】
用語「定量的」は、本明細書において、流体試料中に含まれる少なくとも１つの分析物の絶対量または相対量を決定することを指す。
定性的決定に関して上述するように、少なくとも１つの分析物の量を決定してもよい。しかし、磁性粒子から分析物を溶出した後、溶出物中の量を決定するものとする。あるいは、結合した分析物の量を直接決定してもよい。
【０１２１】
上記を考慮し、本発明はまた、流体試料中の少なくとも１つの分析物を決定するための方法であって：
（ａ）本発明にしたがった磁性粒子あるいは本発明の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子を、少なくとも１つの分析物を含むかまたは含むと推測される流体試料と接触させ；そして
（ｂ）前記磁性粒子から溶出した少なくとも１つの分析物を決定する
工程を含む、前記方法もまた意図する。
【０１２２】
典型的には、この背景において言及される決定は、定性的または定量的決定である。
典型的には、方法の工程（ａ）を、磁性粒子への少なくとも１つの分析物の結合を可能にするために十分な時間および十分な条件下で行う。したがって、好ましくは、工程（ａ）において、分析物の少なくとも一部、好ましくはすべてが粒子に結合する。決定が定量的決定である場合、好ましくは、流体試料中に存在する実質的にすべての分析物が粒子に結合する。
【０１２３】
好ましくは、工程（ａ）はさらに：
（ａ１）少なくとも１つの分析物の少なくとも一部が結合している磁性粒子を、好ましくは少なくとも１つの該分析物を溶出させない条件下で洗浄し；そして／または
（ａ２）少なくとも１つの分析物の溶出を可能にするために適した条件下で、磁性粒子から少なくとも１つの分析物を溶出させる
工程を含む。
【０１２４】
より具体的には、（ｂ）における定性的または定量的決定は、磁性粒子上の結合した分析物の存在または非存在の決定、あるいは磁性粒子に結合した分析物の量の決定を含んでもよい。
【０１２５】
（ａ１）における洗浄工程を単一洗浄工程として実行してもよいことが理解されるものとする。あるいは、１より多い洗浄工程を実行してもよい。
より具体的には、定性的決定は、工程（ａ）および／または（ｂ）の一部として、以下のさらなる工程：
−少なくとも１つの分析物が磁性粒子に結合しているかどうかの決定
を含んでもよい。
【０１２６】
本発明の磁性粒子または本発明の方法によって得られうる磁性粒子を用いると、好適には、上に論じるように、適用中の前記流体のマトリックスキャリーオーバーが減少する。
本発明の磁性粒子または本発明の方法によって得られる磁性粒子によって決定しようとする分析物、あるいは前述の使用にしたがって決定しようとする分析物は、好ましくは、生物学的流体試料、環境試料または化学的化合物の混合物の溶液中に存在する化学的化合物である。したがって、本発明にしたがって言及される流体試料は、好ましくは：体液、液体または溶解環境試料および化学的化合物の混合物の溶液からなる流体群より選択される。
【０１２７】
好ましい態様において、流体試料は、本明細書において、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの評価目的のために得た生物学的試料を指す。本発明の方法において、流体試料または患者試料は、好ましくは、任意の体液を含んでもよい。
【０１２８】
好ましい流体試料は、全血、血清、血漿、気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬ）、上皮内層液（ＥＬＦ）、尿または痰であり、血漿または血清が最も好ましい。
用語、流体試料には、獲得後、任意の方法、例えば試薬での処理、可溶化、または特定の構成要素、例えばタンパク質もしくはポリヌクレオチドに関する濃縮によって操作されている生物学的試料が含まれる。典型的には、流体試料は液体試料である。
【０１２９】
流体試料は、例えば、全血、血清、患者から回収された抗体または血漿であってもよい。流体試料は、好ましくは全血、血清または血漿である。１つの態様において、試料は臨床試料である。別の態様において、試料は診断アッセイにおいて用いられる。
【０１３０】
流体試料の性質に応じて、異なるクラスの化学的化合物が検出されるものとする。好ましくは、本発明にしたがった分析物は、ステロイド、糖、ビタミン、医薬品を含む薬剤および濫用薬物、有機化合物、タンパク質、核酸およびその２つまたはそれより多くの混合物の群より選択されてもよい。こうした分析物は、中心的に生物学的試料中に生じる。しかし、これらはまた、環境試料に存在していてもよい。
【０１３１】
流体試料中の分析物を決定するための前述の適用は、好ましくは、診断目的、薬物濫用試験、環境制御、食品安全性、品質管理、精製または製造プロセスを適用してもよいし、またはこうした目的に関与する。診断適用において、分析物の定性的または定量的決定は、分析物が、例えば疾患または医学的状態のバイオマーカーである場合、診断を補助することも可能である。同様に、環境変化の指標である分析物の定性的または定量的評価は、汚染を同定するか、または環境変化の評価を行うことを補助しうる。食品安全性ならびに製造または精製プロセスは、指標分析物の定性的または定量的決定によって管理されうる。こうした指標はまた、品質管理の一般的な側面と関連して、例えばまた製品の貯蔵安定性評価において、決定されることも可能である。
【０１３２】
好ましくは、分析物は、質量分析、ＵＶ−ｖｉｓ、ＮＭＲ、ＩＲによって決定される。
本発明の知見を要約すると、以下の態様が特に好ましい：
１．  ポリマーマトリックス（Ｐ）および少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コアを含む磁性粒子であって、ポリマーマトリックスが少なくとも１つの架橋されたポリマーを含み、そして磁性粒子が、ＩＳＯ  １３３２０にしたがって決定した際に、１〜６０マイクロメートルの範囲の粒子サイズを有する、前記磁性粒子。
【０１３３】
２．  ポリマーマトリックスが、ＩＳＯ  １５９０１−３にしたがって決定した際に、１００ｎｍより小さい、好ましくは５０ｎｍより小さいかまたはそれに等しい孔サイズを有する、態様１の磁性粒子。
【０１３４】
３．  ＩＳＯ  １５９０１−３にしたがって決定した際に、ポリマーマトリックス（Ｐ）中に存在するすべての孔の少なくとも９０％が、１０ｎｍより小さい孔サイズを有し、そしてポリマーマトリックス中に存在するすべての孔の少なくとも５０％が、５ｎｍより小さい孔サイズを有し、好ましくはポリマーマトリックス（Ｐ）は、５０ｎｍより大きい孔サイズを有するマクロ孔を含まない、態様２の磁性粒子。
【０１３５】
４．  ＩＳＯ  ９２７７にしたがって決定した際に、５０〜２５００ｍ２／ｇの範囲のＢＥＴ比表面積を有する、態様２つまたは３の磁性粒子。
５．  ＡＳＴＭ  Ａ８９４／Ａ  ８９４Ｍにしたがって決定した際に、少なくとも１Ａ  ｍ２／ｋｇ、好ましくは少なくとも１０Ａ  ｍ２／ｋｇの飽和磁化を有する、態様１〜４のいずれか一項の磁性粒子。
【０１３６】
６．  少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）が、金属、金属カーバイド、金属ニトリド、金属スルフィド、金属ホスフィド、酸化金属、金属キレートおよびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される化合物を含む、態様１〜５のいずれか一項の磁性粒子。
【０１３７】
７．  少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）が、酸化金属または金属カーバイド、より好ましくは酸化鉄、特にＦｅ３Ｏ４、α−Ｆｅ２Ｏ３、γ−Ｆｅ２Ｏ３、ＭｎＦｅｘＯｙ、ＣｏＦｅｘＯｙ、ＮｉＦｅｘＯｙ、ＣｕＦｅｘＯｙ、ＺｎＦｅｘＯｙ、ＣｄＦｅｘＯｙ、ＢａＦｅｘＯおよびＳｒＦｅｘＯからなる群より選択される酸化鉄を含み、式中、ｘおよびｙは、合成法に応じて多様であり、そして式中、ｘは好ましくは１〜３の整数であり、より好ましくは２であり、そして式中、ｙは好ましくは３または４であり、そして最も好ましくはＦｅ３Ｏ４を含む、態様１〜６のいずれか一項の磁性粒子。
【０１３８】
８．  超常磁性である、態様１〜７のいずれか一項の磁性粒子。
９．  少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）が、少なくとも１つの磁性ナノ粒子、好ましくは少なくとも１つの酸化鉄ナノ粒子、より好ましくはＦｅ３Ｏ４ナノ粒子を含む、態様１〜８のいずれか一項の磁性粒子。
【０１３９】
１０．  前記の少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）が、磁性ナノ粒子およびコーティングＣ１を含む、より好ましくはこれらからなる、態様９の磁性粒子。
１１．  少なくとも１つの磁性ナノ粒子が、ＴＥＭ測定にしたがって決定した際に、１〜２０ｎｍ、好ましくは４〜１５ｎｍの範囲の直径を有する、態様９または１０の磁性粒子。
【０１４０】
１２．  少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）が、超粒子を含み、好ましくは超粒子からなり、そして随意にコーティングＣ１を含む、態様１〜８のいずれか一項の磁性粒子。
１３．  前記超粒子が、凝集ナノ粒子からなり、そして好ましくは２０より多い凝集ナノ粒子からなり、そしてより好ましくは１００〜１，５００，０００（１５０万）のナノ粒子からなる、態様１２の磁性粒子。
【０１４１】
１４．  各ナノ粒子が、少なくとも１つのコーティングＣ２でコーティングされ、コーティングが好ましくは、ナノ粒子表面上に沈着し、
そしてコーティングＣ２が、好ましくはジカルボン酸、ジカルボン酸塩、ジカルボン酸誘導体、トリカルボン酸、トリカルボン酸塩、トリカルボン酸誘導体、アミノ酸、アミノ酸塩、アミノ酸誘導体、表面活性剤、表面活性剤の塩、ポリアクリル酸、ポリアクリル酸塩、ポリアクリル酸誘導体、脂肪酸、脂肪酸塩および脂肪酸誘導体からなる群より選択される、
態様１３の磁性粒子。
【０１４２】
１５．  少なくとも１つのコーティングＣ２を含む超粒子が、ＤＬＳにしたがって決定した際に、８０〜５００ｎｍ、好ましくは１５０〜４００ｎｍ、そして最も好ましくは２００〜３００ｎｍの範囲の直径を有する、態様１２〜１４のいずれか一項の磁性粒子。
【０１４３】
１６．  少なくとも１つのコーティングＣ１が、界面活性剤、シリカ、シリケート、シラン、ホスフェート、ホスホネート、ホスホン酸、およびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される、態様１０〜１５のいずれか一項の磁性粒子。
【０１４４】
１７．  コーティングＣ１が、シリカ、オルトケイ酸テトラエチル、メタクリル酸３−（トリメトキシシリル）プロピル、ビニルトリメトキシシラン、ビニルトリエトキシシラン、アリルトリメトキシシラン、アリルトリエトキシシラン、トリエトキシビニルシラン、アクリル酸３−（トリメトキシシリル）プロピル、トリメトキシ（７−オクテン−１−イル）シラン、トリメトキシメチルシラン、トリエトキシメチルシラン、エチルトリメトキシシラン、トリエトキシ（エチル）シラン、トリメトキシフェニルシラン、トリメトキシ（２−フェニルエチル）シラン、トリメトキシ（プロピル）シラン、ｎ−プロピルトリエトキシシラン、イソブチル（トリメトキシ）シラン、イソブチルトリエトキシシラン、ビニルホスホン酸、ビニルホスホン酸ジメチル、ビニルホスホン酸ジエチル、アリルホスホン酸ジエチル、アリルリン酸ジエチル、（２−メチルアリル）ホスホン酸ジエチル、オクチルホスホン酸、ブチルホスホン酸、デシルホスホン酸、ヘキシルホスホン酸、ヘキサデシルホスホン酸、ｎ−ドデシルホスホン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、およびアラキジン酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、エナント酸、カプリル酸、ペラルゴン酸、カプリン酸、ウンデシル酸、トリデシル酸、ペンタデシル酸、マルガリン酸、ノナデシル酸、ヘネイコシル酸、ベヘン酸、トリコシル酸、リグノセリン酸、ペンタコシル酸、セロチン酸、ヘプタコシル酸、モンタン酸、ノナコシル酸、メリシン酸、ヘナトリアコンチル酸、ラクセロン酸、サイリック酸、ゲド酸、セロプラスチック酸、ヘキサトリアコンチル酸、ヘプタトリアコンタン酸、オクタトリアコンタン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、アラキドン酸、ヘキサデカトリエン酸、ステアリドン酸、エイコサトリエン酸、エイコサテトラエン酸、エイコサペンタエン酸、ヘネイコサペンタン酸、ドコサペンタエン酸、クルパノドン酸、ドコサヘキサエン酸、テトラコサペンタエン酸、テトラコサヘキサエン酸、カレンジン酸、エイコサジエン酸、ドコサジエン酸、アドレン酸、ドコサペンタエン酸、テトラコサテトラエン酸、テトラコサペンタエン酸、５−ドデセン酸、７−テトラデセン酸、パルミトレイン酸、バクセン酸、パウリン酸、１５−ドコセン酸、１７−テトラコセン酸、エライジン酸、ゴンドイン酸、ミード酸、エルカ酸、ネルボン酸、ルーメン酸、カレンジン酸、ジャカル酸、エレオステアリン酸、カタルプ酸、プニカ酸、ルメレン酸、パリナリン酸、ボセオペンタエン酸、ピノレン酸、ポドカルプ酸およびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される、態様１０〜１６のいずれか一項の磁性粒子。
【０１４５】
１８．  コーティングＣ１が、好ましくは界面活性剤またはシリカコーティングである、態様１６または１７の磁性粒子。
１９．  少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）が、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）の総重量に基づいて、１〜４０重量％、好ましくは２〜１５重量％、より好ましくは５〜１０重量％の量のコーティングＣ１を含む、態様１０〜１８のいずれか一項の磁性粒子。
【０１４６】
２０．  コーティングＣ１が界面活性剤であり、そして少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）が、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）の総重量に基づいて、１〜１５重量％、好ましくは５〜１０重量％の量のコーティングＣ１、好ましくはオレイン酸コーティングを含む、態様１０〜１２のいずれか一項の磁性粒子。
【０１４７】
２１．  コーティングＣ１がビニルまたはアクリル基を含む、態様１０〜１６のいずれか一項の磁性粒子。
２２．  少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を含む、態様１〜２１のいずれか一項の磁性粒子。
【０１４８】
２３．  ポリマーマトリックス（Ｐ）が、適切なモノマー構築ブロックを、架橋剤である少なくとも１つのモノマー構築ブロックの存在下で共重合することを含む、ここで好ましくはすべてのモノマー構築ブロックの５〜９０体積％が、架橋剤、より好ましくはジビニルベンゼンである、方法によって得られるかまたは得られうる架橋されたコポリマーを含む、態様１〜２２のいずれか一項の磁性粒子。
【０１４９】
２４．  共重合において、少なくとも５％の架橋度のポリマーが得られる、態様２３の磁性粒子。
２５．  ポリマーマトリックスが、スチレン、官能化スチレン、ビニルベンジルクロリド、ジビニルベンゼン、ビニルアセテート、メチルメタクリレートおよびアクリル酸からなる群より選択される少なくとも２つの異なるモノマー構築ブロックの重合を含む方法によって得られるかまたは得られうるコポリマーを含み、モノマー構築ブロックが、好ましくは、以下のモノマー：
【０１５０】
【化３】
2020519856.tif 000004
【０１５１】
であって、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５が、互いに独立に、−Ｎ３、−ＮＨ２、−Ｂｒ、−Ｉ、−Ｆ、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＲ’Ｒ’’Ｒ’’’、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＯＲ’、−ＣＯＯＲ’、−ＮＯ２、−ＳＨ２、−ＳＯ２、−Ｒ’（ＯＨ）ｘ、−Ｒ’（ＣＯＯＨ）ｘ、−Ｒ’（ＣＯＯＲ’’）ｘ、−Ｒ’（ＯＲ’’）ｘ、−Ｒ’（ＮＨ２）ｘ、−Ｒ’（ＮＨＲ’’）ｘ、−Ｒ’（ＮＲ’’Ｒ’’’）ｘ、−Ｒ’（Ｃ１）ｘ、−Ｒ’（Ｉ）ｘ、−Ｒ’（Ｂｒ）ｘ、−Ｒ’（Ｆ）ｘ、Ｒ’（ＣＮ）ｘ、−Ｒ’（Ｎ３）ｘ、−Ｒ’（ＮＯ２）ｘ、−Ｒ’（ＳＨ２）ｘ、−Ｒ’（ＳＯ２）ｘ、アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキルからなる群より選択され、そしてＲ’、Ｒ’’、Ｒ’’’が、互いに独立に、アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ハライド、水素、スルフィド、ナイトレートおよびアミンからなる群より選択される、態様１〜２４のいずれか一項の磁性粒子。
【０１５２】
２６．  １またはそれより多いモノマー構築ブロックが互いに架橋されている、態様２５の磁性粒子。
２７．  少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）が、ポリマーマトリックス中に包埋されている、態様１〜２６のいずれか一項の磁性粒子。
【０１５３】
２８．  少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）およびポリマーマトリックス（Ｐ）を含む、態様１〜２７のいずれか一項の粒子。
２９．  粒子の表面が、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、ジエチルアミノエタノール、Ｒ−ＳＯ２−ＯＨ、−ＮＨ２、Ｒ−ＳＯ２−ＯＨ、−ＲＮＨ、−Ｒ２Ｎ、−Ｒ３Ｎ＋−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ４Ｈ９、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ１８Ｈ３７、−Ｃ６Ｈ５、−Ｃ６Ｈ９ＮＯ６、フェニル−ヘキシル、ビ−フェニル、ヒドロキシアパタイト、ボロン酸、ビオチン、アジド、エポキシド、アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アミノ酸、−ＣＯＯＲ、−ＣＯＲ、−ＯＲ、抗体およびその断片、アプタマー、核酸、および受容体タンパク質またはその結合ドメインからなる群より選択される少なくとも１つの基で官能化されている、態様１〜２８のいずれか一項の磁性粒子。
【０１５４】
３０．  実質的に球状の粒子である、態様１〜２９のいずれか一項の磁性粒子。
３１．  ポリマーマトリックス（Ｐ）および少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を含む、磁性粒子を調製する方法であって、ポリマーマトリックス（Ｐ）が、少なくとも１つの架橋されたポリマーを含み、磁性粒子が、ＩＳＯ  １３３２０にしたがって決定した際に、１〜６０マイクロメートルの範囲の粒子サイズを有する、
該方法は：
（ｉ）少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を提供し、
（ｉｉ）ポリマー前駆体分子を提供し、
（ｉｉｉ）少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）の存在下で、（ｉｉ）記載のポリマー前駆体分子を重合させ、それによって、ポリマーマトリックス（Ｐ１）中に包埋された、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を含む粒子を形成し、ここでポリマーマトリックス（Ｐ１）は好ましくは架橋されたポリマーを含み、より好ましくは架橋されたポリマーからなる、そして
（ｉｖ）好ましくは、（ｉｉｉ）で得たポリマー粒子のポリマーマトリックス（Ｐ１）を超架橋して、
磁性粒子を生じる
工程を含む、前記方法。
【０１５５】
３２．  （ｉｉｉ）において、少なくとも磁気コア（Ｍ）がマトリックス内に包埋されている、態様３１の方法。
３３．  （ｉｖ）における超架橋が、フリーデル・クラフツ反応を通じて実行される、態様３１または３２のいずれか一項の方法。
【０１５６】
３４．  （ｉｖ）における超架橋が、−３０〜１２０℃の範囲の温度で実行される、態様３３の方法。
３５．  （ｉｖ）における超架橋が、ＦｅＣｌ３、ＺｎＣｌ２、Ａ１Ｃ１３、ＢＦ３、ＳｂＣｌ５、ＳｎＣｌ４、ＴｉＣｌ４、ＳｉＣｌ４およびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択されるルイス酸を含む、より好ましくはこれらからなる触媒の存在下、より好ましくはＦｅＣｌ３またはＺｎＣｌ２またはその混合物を含む、より好ましくはこれらからなる触媒の存在下で、実行される、態様３１〜３４のいずれか一項の方法。
【０１５７】
３６．  （ｉｖ）における超架橋が、ジクロロエタン、トルエン、アセトニトリル、ジオキサン、ＤＭＦ、エチルエーテル、ＴＨＦ、ベンゼン、キシレン、アルカン、ジクロロメタン、クロロホルム、クロロベンゼン、四塩化炭素、ＮＭＰ、ジクロロベンゼン、トリクロロベンゼン、エーテル、シクロアルカン、有機ハライドおよびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される溶媒中、より好ましくは、ジクロロエタン、トルエン、アセトニトリル、ＤＭＦ、エチルエーテル、ＴＨＦ、ベンゼン、キシレン、アルカン、ジクロロメタン、クロロホルム、クロロベンゼン、四塩化炭素、ジオキサンからなる群より選択される溶媒中、より好ましくはＴＨＦ、アセトニトリル、ＤＭＦ、ジオキサンおよびトルエンからなる群より選択される溶媒中で実行される、態様３１〜３５のいずれか一項の方法。
【０１５８】
３７．  （ｉｖ）における超架橋が、ジクロロエタン、ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素、ジクロロベンゼン、トリクロロベンゼン、ジクロロアルカン、ジブロモアルカン、ジヨードアルカン、トリクロロアルカン、トリブロモアルカン、トリヨードアルカン、ジメトキシメタン、ジメトキシエタンおよびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される架橋剤で実行される、態様３１〜３６のいずれか一項の方法。
【０１５９】
３８．  方法がさらに：
（ｖ）（ｉｉｉ）または（ｉｖ）記載のポリマー粒子の表面を官能化する
工程をさらに含む、態様３１〜３７の方法。
【０１６０】
３９．  工程（ｖ）において、ポリマー粒子が、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、ジエチルアミノエタノール、Ｒ−ＳＯ２−ＯＨ、−ＮＨ２、Ｒ−ＳＯ２−ＯＨ、−ＲＮＨ、−Ｒ２Ｎ、−Ｒ３Ｎ＋−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ４Ｈ９、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ１８Ｈ３７、−Ｃ６Ｈ５、−Ｃ６Ｈ９ＮＯ６、フェニル−ヘキシル、ビ−フェニル、ヒドロキシアパタイト、ボロン酸、ビオチン、アジド、エポキシド、アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アミノ酸、−ＣＯＯＲ、−ＣＯＲ、−ＯＲ、抗体およびその断片、アプタマー、核酸、および受容体タンパク質またはその結合ドメインからなる群より選択される基で官能化される、態様３８の方法。
【０１６１】
４０．  （ｉｉｉ）における重合が懸濁重合である、態様３１〜３９のいずれか一項の方法。
４１．  （ｉｉｉ）における重合が、アゾビス（イソブチロニトリル）（ＡＩＢＮ）、２，２’−アゾジ（２−メチルブチロニトリル）（ＶＡＺＯ６７）、１，１’−アゾビス（シアノシクロヘキサン）（ＶＡＺＯ８８）、ベンゾイルペルオキシド（ＢＰＯ）、２，２’−アゾビス（２−アミジノプロパン）二塩酸（ＡＡＰＨ）および４，４’−アゾビス（４−シアノペンタン酸）（ＡＣＶＡ）からなる群より選択されるイニシエーターの存在下で実行される、態様３１〜４０のいずれか一項の方法。
【０１６２】
４２．  工程（ｉｉｉ）が：
（ｉｉｉ．１）（ｉｉ）記載のポリマー前駆体分子、（ｉ）記載の少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、少なくとも１つの有機溶媒、少なくとも１つのイニシエーターおよび水相を含む組成物（Ａ）を提供し、ここで有機溶媒は水と混和せず、そして随意に、水は少なくとも１つの添加剤を含む、そして
（ｉｉｉ．２）組成物（Ａ）を攪拌して、エマルジョン（Ｂ）を生じる、ここでエマルジョンは好ましくは水中有機溶媒エマルジョンである
工程を含む、態様３１〜４１のいずれか一項の方法。
【０１６３】
４３．  前記の少なくとも１つの添加剤が：不溶性カーボネート、シリケート、タルク、ゼラチン、ペクチン、デンプン、セルロース誘導体、不溶性ホスフェート、ＰＶＡ、塩、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、およびＰＶＰからなる群より選択される、態様４２の方法。
【０１６４】
４４．  攪拌がオーバーヘッド攪拌装置で行われる、態様４２または４３の方法。
４５．  （ｉｉｉ）における重合がいかなる界面活性剤の非存在下で実行される、態様２９〜４３のいずれか一項の方法。
【０１６５】
４６．  工程（ｉｉｉ）が、１時間〜３０時間、好ましくは１時間〜８時間の範囲の時間、実行される、態様３１〜４５のいずれか一項の方法。
４７．  工程（ｉｉｉ）が、０℃〜１００℃、好ましくは４０℃〜９０℃の範囲の温度で実行される、態様３１〜４６のいずれか一項の方法。
【０１６６】
４８．  工程（ｉ）が：
（ｉ．１）少なくとも１つの磁性ナノ粒子を提供し、そして
（ｉ．２）少なくとも１つの磁性ナノ粒子をコーティングＣ１でコーティングし、該コーティングＣ１は、好ましくは、界面活性剤、シリカ、シリケート、シラン、ホスフェート、ホスホネート、ホスホン酸、およびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される、
少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）を生じる
工程を含む、態様３１〜４７のいずれか一項の方法。
【０１６７】
４９．  工程（ｉ）が：
（ｉ．１．１）少なくとも１つのコーティングＣ２を伴う、２０より多いナノ粒子、そして好ましくは少なくとも２１のナノ粒子を提供し、
（ｉ．１．２）２０より多いナノ粒子を凝集させ、それによって超粒子を形成し、そして
（ｉ．１．３）随意に、少なくとも１つのコーティングＣ１で、（ｉ．２）記載の超粒子をコーティングして
少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）を生じる
工程を含む、態様４８の方法。
【０１６８】
５０．  少なくとも１つのコーティングＣ２が、ジカルボン酸、ジカルボン酸塩、ジカルボン酸誘導体、ポリアクリル酸、ポリアクリル酸塩、ポリアクリル酸誘導体、トリカルボン酸、トリカルボン酸塩、トリカルボン酸誘導体、アミノ酸、アミノ酸塩、アミノ酸誘導体、表面活性剤、表面活性剤の塩、脂肪酸、脂肪酸塩および脂肪酸誘導体からなる群より選択される、態様４９の方法。
【０１６９】
５１．  態様３１〜５０のいずれか一項の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子であって、好ましくは実質的に球状の粒子である、前記磁性粒子。
５２．  流体中の少なくとも１つの分析物の定性的および／または定量的決定のための、態様１〜３０のいずれか一項の磁性粒子または態様５１記載の磁性粒子の使用。
【０１７０】
５３．  前記分析物が、ステロイド、糖、ビタミン、薬剤、有機化合物、タンパク質、核酸、糖およびその２つまたはそれより多くの混合物の群より選択される、態様５２の使用。
【０１７１】
５４．  前記分析物が、態様１〜３０の磁性粒子または態様５１記載の磁性粒子によって濃縮される、態様５２または５３の使用。
５５．  前記分析物が、質量分析、ＵＶ−ｖｉｓ、ＮＭＲ、ＩＲによって決定される、態様５２〜５４のいずれか一項の使用。
【０１７２】
５６．  前記流体が：体液、液体または溶解された環境試料および化学的化合物の混合物の溶液からなる流体群より選択される、態様５２〜５５のいずれか一項の使用。
５７．  態様１〜３０のいずれか一項の磁性粒子または態様５１記載の磁性粒子が、前記流体のマトリックスキャリーオーバーを減少させる、先行する態様の使用。
【０１７３】
５８．  流体中の少なくとも１つの分析物の前記定性的および／または定量的決定が、診断目的、薬物濫用試験、環境制御、食品安全性、品質管理、精製または製造プロセスに関与する、態様５７の使用。
【０１７４】
５９．  流体試料中の少なくとも１つの分析物を決定するための方法であって：
ａ）本発明の磁性粒子または本発明の方法によって得られる磁性粒子を、少なくとも１つの分析物を含むかまたは含むと推測される流体試料と接触させ；そして
ｂ）前記磁性粒子に結合した少なくとも１つの分析物を決定する
工程を含む、前記方法。
【０１７５】
６０．  方法の工程ａ）が、少なくとも１つの分析物の磁性粒子への結合を可能にするために十分な時間および十分な条件下で実行される、態様５９の方法。
６１．  工程ａ）が：
ａ１）少なくとも１つの分析物の少なくとも一部が結合している磁性粒子を、好ましくは少なくとも１つの該分析物を溶出させない条件下で洗浄し；そして／または
ａ２）少なくとも１つの分析物の溶出を可能にするために適した条件下で、磁性粒子から少なくとも１つの分析物を溶出させる
工程をさらに含む、態様５９または６０の方法。
【０１７６】
６２．  前記決定が、磁性粒子上の結合した分析物の存在または非存在の決定、あるいは磁性粒子に結合した分析物の量の決定を含む、態様５９〜６１のいずれか一項の方法。
本発明のさらに随意の特徴および態様は、好ましい態様の続く説明において、好ましくは従属請求項と組み合わせて、より詳細に開示されるであろう。ここで、それぞれの随意の特徴は、当業者が理解するであろうように、単独の方式で、ならびに任意の恣意的な実現可能な組み合わせで、達成可能である。本発明の範囲は、好ましい態様に制限されない。態様を模式的に図に示す。ここで、これらの図中の同一の参照番号は、同一のまたは機能的に匹敵する要素を指す。
【０１７７】
本明細書に引用するすべての参考文献は、本明細書に特に言及する開示内容、ならびにその全体に関して、本明細書に援用される。
【実施例】
【０１７８】
以下の実施例は、本発明を単に例示するものとする。これらは、どんなものであれ、本発明の範囲を限定するとは見なされないものとする。
実施例１：ビーズの調製
シリカコーティング磁性ナノ粒子（Ｉ）
一般的な方法において、４３ｇのＦｅＣｌ２・４Ｈ２Ｏ（０．２２ｍоｌ）および７０ｇのＦｅＣｌ３（０．４３ｍоｌ）を、攪拌下で２Ｌの水に添加し、そして７０℃に加熱した。１２５ｍＬのＮＨ４ＯＨ（Ｈ２Ｏ中、２８％）を添加し、そして１０分後、黒い沈殿物を磁石で分離した。上清を廃棄し、そして磁性ナノ粒子を水で５回洗浄した。ナノ粒子を、超音波下で、２Ｌのエタノールに再懸濁し、そして４Ｌの反応装置に移した。総体積を、エタノールで３．２Ｌまで満たし、そして攪拌下で、テトラエトキシシラン（ＴＥＯＳ；５０ｍＬ；０．２２ｍоｌ）およびエタノール（３５０ｍＬ）の混合物を１滴ずつ添加した。２５℃で２４時間攪拌した後、ナノ粒子を磁石で分離し、そして上清を廃棄した。ＴＥＯＳでコーティングしたナノ粒子をエタノールで３回洗浄し、そして超音波下で、２Ｌのエタノールに再懸濁した。ナノ粒子を４Ｌの反応装置に移し、そして総体積をエタノールで３．１Ｌに満たした。混合物を５０℃に加熱し、そして攪拌下で、［３−（メタクリロイルオキシ）プロピル］トリメトキシシラン（ＭＥＭＯ；７７ｍＬ；０．３２ｍоｌ）、イソブチル（トリメトキシ）シラン（ＩＳＯ；３３ｍＬ；０．１７ｍоｌ）およびエタノール（３９０ｍＬ）の混合物を１滴ずつ添加した。５０℃で２４時間攪拌した後、ナノ粒子を磁石で分離し、そして上清を廃棄した。ＭＥＭＯ／ＩＳＯでコーティングしたナノ粒子をエタノールで２回洗浄し、そしてエタノール中で保存して、シリカコーティング磁性ナノ粒子（１）（５０ｇ）を得た。
【０１７９】
界面活性剤コーティング磁性ナノ粒子（２）
一般的な方法において、１２６ｇのＦｅＣｌ２・４Ｈ２Ｏ（０．６３ｍоｌ）および２４８ｇのＦｅＣｌ３（１．５３ｍоｌ）を、攪拌下で３Ｌの水に添加し、そして５５℃に加熱した。４６０ｍＬのＮＨ４ＯＨ（Ｈ２Ｏ中、２８％）を添加し、そして１５分後、黒い沈殿物を磁石で分離した。上清を廃棄し、そして磁性ナノ粒子を水で３回洗浄した。磁性ナノ粒子を、２０００ｍＬに再懸濁し、そしてＮａＯＨ（１０Ｍ）でｐＨを７〜９に調整した。３０分間超音波処理した後、懸濁物を４Ｌの反応装置に移し、そして１Ｌの水を添加した。攪拌しながら１２０ｍＬのオレイン酸を添加し、そして懸濁物を２５℃で４５分間攪拌した。磁性ナノ粒子を磁石で分離し、そして上清を廃棄した。界面活性剤でコーティングしたナノ粒子を水およびエタノールで３回洗浄し、そしてエタノール中で保存して、界面活性剤コーティング磁性ナノ粒子（２）（２０３ｇ）を得た。
【０１８０】
シリカコーティング磁気超粒子（３）
一般的な方法において、４４ｇのＦｅＣｌ３・６Ｈ２Ｏ（０．１６ｍоｌ）を、８００ｍＬのエチレングリコールに溶解し、そして高圧反応装置に移した。９．７ｇのクエン酸ナトリウム（０．０３７ｍоｌ）および５１．９ｇの酢酸ナトリウム（０．６３ｍоｌ）を添加し、そして高圧反応装置を密封した。混合物を、１６０℃で２時間、および２００℃で１８時間、攪拌しながら処理した。形成されたナノ粒子を磁石で分離し、そして上清を廃棄した。磁性ナノ粒子をエタノールで３回、そして水で５回洗浄して、磁気超粒子（１３．３ｇ）を得た。１０ｇの超粒子を、超音波下で、２Ｌ反応装置中、１５００ｍＬのエタノールに再懸濁し、そして攪拌しながら、テトラエトキシシラン（ＴＥＯＳ；１５ｍＬ；６８ｍｍоｌ）およびエタノール（５０ｍＬ）の混合物を１滴ずつ添加した。２５℃で２０時間攪拌した後、超粒子を磁石で分離し、そして上清を廃棄した。ＴＥＯＳコーティング超粒子をエタノールで２回洗浄し、そして超音波下で、１３００ｍＬのエタノールに再懸濁した。混合物を６５℃に加熱し、そして攪拌下で、［３−（メタクリロイルオキシ）プロピル］トリメトキシシラン（ＭＥＭＯ；１４ｍＬ；５９ｍｍоｌ）、イソブチル（トリメトキシ）シラン（ＩＳＯ；６ｍＬ；３１ｍｍоｌ）およびエタノール（１８０ｍＬ）の混合物を１滴ずつ添加した。５０℃で１６時間攪拌した後、超粒子を磁石で分離し、そして上清を廃棄した。ＭＥＭＯ／ＩＳＯでコーティングした超粒子をエタノールで３回洗浄し、そしてエタノール中で保存して、シリカコーティング磁気超粒子（３）（１０ｇ）を得た。
【０１８１】
磁性ポリマー粒子（４）
一般的な方法において、６５０ｍＬの水を、機械的攪拌装置を含む２Ｌのガラス反応装置に添加した。１３．５ｇのＰＶＡを添加し、そして完全な溶液になるまで攪拌した。１０ｇの（１）、（２）または（３）を磁石で分離し、そして上清を廃棄した。磁性ナノ粒子をトルエンで１回洗浄し、そして次いで１６８ｍＬのトルエンに再懸濁した。２３．６ｍＬのジビニルベンゼン（０．１７ｍоｌ）および２３．６ｍＬの塩化ビニルベンジル（０．１７ｍоｌ）を添加し、そして混合物を１時間、超音波処理した。３．８４ｇの２，２’−アゾビス（２−メチルブチロニトリル）（２０ｍｍоｌ）を添加し、そして混合物を、迅速な攪拌下で、ＰＶＡ溶液に移した。混合物を８０℃に加熱し、そして反応を４時間続けた。形成された磁性ポリマー粒子を磁石で分離し、そして上清を廃棄した。粒子を水およびメタノールで３回洗浄し、そしてイソプロパノール／水（１０／９０  ｖ／ｖ）に再懸濁して、磁性ポリマー粒子（４）（５２．３ｇ）を得た。
【０１８２】
多孔性磁性ポリマー粒子（５）
一般的な方法において、５ｇの（４）を磁石で分離し、そして上清を廃棄した。磁性ナノ粒子を超架橋溶媒（ジクロロエタン、トルエン、ＤＭＦ、ＭｅＣＮ、ジオキサンまたはＴＨＦ）で３回洗浄し、そして次いで、選択した溶媒中、６０ｍＬに再懸濁した。懸濁物を３０分間攪拌し、そして次いで８０℃に加熱した。この温度に到達したら、触媒（ＦｅＣｌ３またはＺｎＣｌ２；１２ｍｍоｌ）を添加し、そして懸濁物を通じて窒素をバブリングした。１時間後、粒子を磁石で分離し、そして上清を廃棄した。粒子をエタノールで５回洗浄して、多孔性磁性ポリマー粒子（５）（４．８ｇ）を得た。
【０１８３】
ＯＨ官能化多孔性磁性ポリマー粒子（６）
一般的な方法において、４．８ｇの（５）を、合成し、そして６０ｍＬ  ＫＯＨ溶液（Ｈ２Ｏ中、６Ｍ）中に懸濁したものとして用いた。懸濁物を６０℃で１６時間攪拌した。粒子を磁石で分離し、そして上清を廃棄した。ｐＨ７に到達するまで、粒子を水で数回洗浄して、ＯＨ官能化多孔性磁性ポリマー粒子（６）（４．８ｇ）を得た。
【０１８４】
ＣＯＯＨ官能化多孔性磁性ポリマー粒子（７）
一般的な方法において、１ｇの（６）を、合成し、そして２０ｍＬ  ＮａＣｌＯ溶液（Ｈ２Ｏ中、１０〜１５％の利用可能塩素）中に懸濁したものとして用いた。懸濁物を６０℃で１．５時間攪拌した。粒子を磁石で分離し、そして上清を廃棄した。粒子を水で３回洗浄して、ＣＯＯＨ官能化多孔性磁性ポリマー粒子（７）（１ｇ）を得た。
【０１８５】
Ｃｘ官能化多孔性磁性ポリマー粒子（８）
一般的な方法において、１ｇの（７）を、合成し、そしてＭＥＳ緩衝液（２−モルホリン−４−イルエタンスルホン酸；０．１Ｍ；ｐＨ５．０）で２回洗浄したものとして用いた。粒子を、４０ｍＬ  ＭＥＳ緩衝液（０．１Ｍ；ｐＨ５．０）に再懸濁し、そして６．６ｍＬのＥＤＣ溶液（３−（エチルイミノメチレンアミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルプロパン−１−アミン；Ｈ２Ｏ中、１０％  ｗ／ｗ）および３９．６ｍＬのスルホ−ＮＨＳ溶液（Ｎ−ヒドロキシスルホスクシンイミド；Ｈ２Ｏ中、０．０３Ｍ）を添加した。懸濁物を１１℃で３５分間攪拌した。粒子を磁石で分離し、そして上清を廃棄した。粒子をＭＥＳ緩衝液で２回洗浄し、そして４６ｍＬのＣｘＨ２ｘ＋１−ＮＨ２溶液（ｘ＝４、５、８または１０；エタノール中、１／６  ｖ／ｖ）および４９．５ｍＬのリン酸カリウム緩衝液（０．１Ｍ；ｐＨ７．５）を添加した。懸濁物を２５℃で２．５時間攪拌した。この粒子を磁石で分離し、そして上清を廃棄した。粒子をエタノールで３回、そしてリン酸カリウム緩衝液（０．０２Ｍ；ｐＨ７．０）で２回洗浄して、Ｃｘ官能化多孔性磁性ポリマー粒子（８）（１ｇ）を得た。
【０１８６】
エポキシ官能化多孔性磁性ポリマー粒子（９）
一般的な方法において、１ｇの（６）を、合成し、そして１０ｍＬ  ＤＭＦに懸濁したものとして用いた。２０ｍＬのエピクロロヒドリンおよび１０ｍＬのＮａＯＨ溶液（Ｈ２Ｏ中、３．５Ｍ）を添加した。懸濁物を４０℃で２２時間攪拌した。粒子を磁石で分離し、そして上清を廃棄した。粒子を水で数回洗浄して、エポキシ官能化多孔性磁性ポリマー粒子（９）（１ｇ）を得た。
【０１８７】
以下の粒子を調製した：
表１：調製された粒子
【０１８８】
【表１−１】
2020519856.tif 000005
【０１８９】
【表１−２】
2020519856.tif 000006
【０１９０】
特徴づけ法
粒子サイズ分析のため、Ｈｙｄｒｏ  ２０００を伴うＭａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ  ２０００（Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を用いた。測定前に、試料を水またはエタノールに懸濁した。
【０１９１】
表面積および孔サイズ分析のため、Ａｕｔｏｓｏｒｂ  ｉＱ（Ｑｕａｎｔａｃｈｒｏｍｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を用いた。活性化のため、真空下、９５℃で１２時間、試料を脱気した。
【０１９２】
磁化測定のため、７４０４−Ｓ  Ｍａｇｎｅｔｏｍｅｔｅｒ（Ｌａｋｅ  Ｓｈｏｒｅｓ  Ｃｒｙｏｔｒｏｎｉｃｓ）を用いた。
濃縮ワークフローＭＳ技術内の粒子の自動化のための１つの重要な要件は、ハイスループットのための迅速な磁気分離（＜５ｓ）である。粒子サイズおよび飽和磁化は非常に重要な特性である。したがって、高飽和磁化（＞１  Ａ  ｍ２  ｋｇ−１）および巨大サイズ（＞２μｍ）を有する粒子が必要である。さらに、系のロバストネスのため、粒子のキャリーオーバーを回避しなければならない。したがって、粒子は、高い磁化および１μｍより大きい粒子サイズを持つ必要がある。
【０１９３】
これが、磁性ポリマー粒子の今記載した合成経路の主な問題である。Ｙａｎｇらの方法は、低い飽和磁化（４．１  Ａ  ｍ２  ｋｇ−１）を伴う小さい粒子（＜１００ｎｍ）の合成を示す。これらの粒子は、小さい粒子サイズおよび低い磁化特性のため、自動化の要件を満たさない。エマルジョン重合によって、１μｍより大きい粒子を生じることは困難であり、必要な特性を持つ粒子の産生のためのこの合成法の潜在能力は低い。Ｘｕらは、高い飽和磁化（１４．１Ａ  ｍ２  ｋｇ−１）を伴う小さい粒子（約４００ｎｍ）の合成を示す。この方法では、１つのみのＦｅ３Ｏ４−ＮＰコアがポリマー粒子あたりに包埋されている（単一コア）という事実のため、より大きな粒子は、ポリマーシェルを増加させることによってしか産生できず、これは、飽和磁化の劇的な減少を導く。図５は、Ｘｕらによって合成された異なるサイズを持つ粒子に関する計算飽和磁化を示す。例えば２μｍのサイズを持つ粒子の合成に関して、飽和磁化は、１Ａ  ｍ２  ｋｇ−１未満であり、そして１０μｍに関しては、０．０１Ａ  ｍ２  ｋｇ−１未満であろう。磁化のこの重大な損失は、極端に長い分離時間を導き、これはハイスループット自動化には許容されない。したがって、これらの粒子は、低い磁化特性を導く小さい粒子サイズおよび単一コアのミクロン未満の粒子の合成であるため、自動化の要件を満たさない。
【０１９４】
重合後、粒子において多孔性を生じ、そしてしたがって高い表面積を生じるために必要な超架橋反応がある。１つの欠点は、この化学反応中のＨＣｌの蓄積（ｂｕｉｌｄｉｎｇ）である。ＨＣｌは、Ｆｅ３Ｏ４−ＮＰを攻撃し、そしてしたがって粒子の磁化を低下させる。この反応工程のため、Ｆｅ３Ｏ４−ＮＰのコーティング厚およびコーティングのタイプが非常に重要である。Ｙａｎｇらは、オレイン酸でのコーティングを用い、そしてＸｕらは、Ｆｅ３Ｏ４−ＮＰをサイトレートで保護する。
【０１９５】
実施例２：磁気ビーズを用いた分析物捕捉
分析物捕捉
ビーズ評価後、図６に例示するように、ビーズは濃縮ワークフローを経た。試験試料として、スパイク処理された血清プールを用い、ここで、スパイク処理された分析物を以下の表２に列挙する。
【０１９６】
表２：ＣＰＳ粒子で試験された分析物のリスト
【０１９７】
【表２】
2020519856.tif 000007
【０１９８】
試料の調製
関心対象の１３の分析物を、分析物不含ヒト血清プール内にスパイク処理することによって、試料を調製した。内部標準溶液は、ターゲット分析の同位体標識類似体を含有するメタノール／水  ５０：５０  ｖ／ｖ混合物であった。
【０１９９】
ビーズ抽出
各試料に関して、血清１００μＬを、５０ｍｇ／ｍＬの濃度の水中のビーズ懸濁物５０μＬと混合し、そして穏やかな回転条件下で室温で５分間平衡化させて、分析物が粒子の全表面にアクセス可能であるようにした。２５ＯＨ−ビタミンＤ３を分析する場合、１００μＬの前処理溶液を混合物に添加し、そして１５分間インキュベーションする、さらなる工程が含まれた。次いで、上清を廃棄し、そして磁気ビーズを２００μＬの水で２回洗浄した。水中、７０：３０  ｖ／ｖの１００μＬアセトニトリル／２％ギ酸で溶出を行った。次の工程において、８０μＬ溶出物をバイアルから抜き取り、そしてＨＰＬＣバイアルに移し、ここで、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析の前に、５μＬ内部標準溶液を添加した。
【０２００】
回収
外部較正によって定量化を行った。このため、純正（ｎｅａｔ）溶液中で検量線を記録した。スパイクされた量に対して、溶出物分画中の計算濃度を比較することによって、回収率を計算した。
【０２０１】
特徴づけすべきさらなる側面は：
【０２０２】
【表３】
2020519856.tif 000008
【０２０３】
にしたがって分類されるような、残渣タンパク質に関する溶出物純度であった。
ほぼすべての試料に関して、残渣タンパク質は１％未満であり、マトリックス効果の除去に関して優れた結果を示した。
【０２０４】
以下の表３は、上に提示する異なるビーズタイプの捕捉特性を示す。見られうるように、異なるモノマー構成では、異なる分析物クラスに関する捕捉効率が変化し、テイラード・ビーズ設計の可能性が提供される。
【０２０５】
表３：異なるビーズの捕捉特性
【０２０６】
【表４−１】
2020519856.tif 000009
【０２０７】
【表４−２】
2020519856.tif 000010
【図１】
2020519856.tif 000011
【図２】
2020519856.tif 000012
【図３】
2020519856.tif 000013
【図４】
2020519856.tif 000014
【図５】
2020519856.tif 000015
【図６】
2020519856.tif 000016
【手続補正書】
【提出日】令和1年12月12日(2019.12.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリマーマトリックス（Ｐ）および少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コアを含む磁性粒子であって、該ポリマーマトリックスが超架橋されたポリマーを含み、そして該磁性粒子が、ＩＳＯ  １３３２０にしたがって決定した際に、５〜４０マイクロメートルの範囲の粒子サイズを有する；
ここで、該粒子の表面が、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、ジエチルアミノエタノール、Ｒ−ＳＯ２−ＯＨ、−ＮＨ２、Ｒ−ＳＯ２−ＯＨ、−ＲＮＨ、−Ｒ２Ｎ、−Ｒ３Ｎ＋−ＣＨ３、−Ｃ２Ｈ５、−Ｃ４Ｈ９、−Ｃ８Ｈ１７、−Ｃ１８Ｈ３７、−Ｃ６Ｈ５、−Ｃ６Ｈ９ＮＯ６、フェニル−ヘキシル、ビ−フェニル、ヒドロキシアパタイト、ボロン酸、ビオチン、アジド、エポキシド、アルキル、アリール、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、アミノ酸、−ＣＯＯＲ、−ＣＯＲ、−ＯＲ、抗体およびその断片、アプタマー、核酸、および受容体タンパク質またはその結合ドメインからなる群より選択される少なくとも１つの基で官能化されている、
前記磁性粒子。
【請求項２】
前記ポリマーマトリックスが、ＩＳＯ  １５９０１−３にしたがって決定した際に、１００ｎｍより小さい、好ましくは５０ｎｍより小さいかまたはこれに等しい孔サイズを有する孔を含む、請求項１の磁性粒子。
【請求項３】
ＩＳＯ  １５９０１−３にしたがって決定した際に、前記ポリマーマトリックス（Ｐ）中に存在するすべての孔の少なくとも９０％が１０ｎｍより小さい孔サイズを有し、そして該ポリマーマトリックス中に存在するすべての孔の少なくとも５０％が５ｎｍより小さい孔サイズを有し、好ましくは該ポリマーマトリックス（Ｐ）が５０ｎｍより大きい孔サイズを有するマクロ孔を含まない、請求項２の磁性粒子。
【請求項４】
ＩＳＯ  ９２７７にしたがって決定した際に、５０〜２５００ｍ２／ｇの範囲のＢＥＴ比表面積を有する、請求項２または３の磁性粒子。
【請求項５】
少なくとも１Ａ  ｍ２／ｋｇ、好ましくは少なくとも１０Ａ  ｍ２／ｋｇの飽和磁化を有する、請求項１〜４のいずれか一項の磁性粒子。
【請求項６】
超常磁性である、請求項１〜５のいずれか一項の磁性粒子。
【請求項７】
前記少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）が、少なくとも１つの磁気ナノ粒子、好ましくは少なくとも１つの酸化鉄ナノ粒子、より好ましくはＦｅ３Ｏ４ナノ粒子を含む、請求項１〜６のいずれか一項の磁性粒子。
【請求項８】
前記磁気コア（Ｍ）が、少なくとも１つのナノ粒子およびコーティングＣ１を含む、より好ましくはこれらからなる、請求項７の磁性粒子。
【請求項９】
前記少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）が、超粒子を含み、好ましくは超粒子からなり、そしてコーティングＣ１を含んでもよい、請求項１〜６のいずれか一項の磁性粒子。
【請求項１０】
前記超粒子が凝集ナノ粒子からなる、請求項９の磁性粒子。
【請求項１１】
前記超粒子が凝集ナノ粒子、そして好ましくは２０より多い凝集ナノ粒子、そしてより好ましくは１００〜１５０万のナノ粒子からなる、請求項９または１０の磁性粒子。
【請求項１２】
前記少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）が、超粒子、および少なくとも１つのコーティングＣ２を含み、好ましくはこれらからなり、該コーティングが好ましくはナノ粒子表面上に沈着し、そして該コーティングＣ２が、好ましくはジカルボン酸、ジカルボン酸塩、ジカルボン酸誘導体、ポリアクリル酸、ポリアクリル酸塩、ポリアクリル酸誘導体、トリカルボン酸、トリカルボン酸塩、トリカルボン酸誘導体、アミノ酸、アミノ酸塩、アミノ酸誘導体、表面活性剤、表面活性剤の塩、脂肪酸、脂肪酸塩および脂肪酸誘導体からなる群より選択される、請求項９〜１１のいずれか一項の磁性粒子。
【請求項１３】
前記少なくとも１つのコーティングＣ１が、界面活性剤、シリカ、シリケート、シラン、ホスフェート、ホスホネート、ホスホン酸、およびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される、請求項７〜１２のいずれか一項の磁性粒子。
【請求項１４】
前記ポリマーマトリックス（Ｐ）が、適切なモノマー構築ブロックを架橋剤である少なくとも１つのモノマー構築ブロックの存在下で共重合することを含む方法によって得られるかまたは得られうるコポリマーを含む、ここで好ましくはすべてのモノマー構築ブロックの５〜９０体積％が、架橋剤、より好ましくはジビニルベンゼンである、請求項１〜１３の磁性粒子。
【請求項１５】
ポリマーマトリックス（Ｐ）および少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を含む磁性粒子を調製する方法であって、該ポリマーマトリックス（Ｐ）が少なくとも１つの架橋されたポリマーを含み、該磁性粒子がＩＳＯ  １３３２０にしたがって決定した際に５〜４０マイクロメートルの範囲の粒子サイズを有し、該方法は：
（ｉ）少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を提供し、
（ｉｉ）ポリマー前駆体分子を提供し、
（ｉｉｉ）（ｉｉ）記載のポリマー前駆体分子を、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）の存在下で重合させ、それによって、ポリマーマトリックス（Ｐ１）中に包埋された、少なくとも１つの磁気コア（Ｍ）、好ましくは少なくとも２つの磁気コア（Ｍ）を含む粒子を形成し、ここで該ポリマーマトリックス（Ｐ１）は好ましくは架橋されたポリマーを含み、より好ましくは架橋されたポリマーからなる、そして
（ｉｖ）（ｉｉｉ）で得たポリマー粒子のポリマーマトリックス（Ｐ１）を超架橋して、
磁性粒子を生じる
工程を含む；
ここで、（ｉｖ）における反応は、ジクロロエタンまたは他の有機ハライドを含む溶媒中では実行されない；
ここで、該方法はさらに：
（ｉｉｉ）または（ｉｖ）記載のポリマーポリマー粒子の表面を官能化する
工程を含む、前記方法。
【請求項１６】
前記（ｉｖ）における超架橋が、フリーデル・クラフツ反応を通じて実行される、請求項１５の方法。
【請求項１７】
請求項１５または１６の方法によって得られるかまたは得られうる磁性粒子。
【請求項１８】
流体中の少なくとも１つの分析物の定性的および／または定量的決定のための、請求項１〜１４のいずれか一項の磁性粒子、あるいは請求項１７の磁性粒子の使用。
【請求項１９】
前記分析物が、ステロイド、ビタミン、薬剤、糖、有機化合物、タンパク質、核酸、糖およびその２つまたはそれより多くの混合物からなる群より選択される、請求項１８の使用。
【請求項２０】
流体試料中の少なくとも１つの分析物を決定するための方法であって：
ａ）請求項１〜１４または請求項１７のいずれか一項の磁性粒子を、少なくとも１つの分析物を含むかまたは含むと推測される流体試料と接触させ；そして
ｂ）前記磁性粒子に結合した少なくとも１つの分析物を決定する
工程を含む、前記方法。
【国際調査報告】
2020519856.tif 000017
2020519856.tif 000018
2020519856.tif 000019