(57)【要約】  本明細書では、約０．１〜１０ｍｍの平均サイズを備える多糖粒子を含む組成物が開示される。これらの粒子は、少なくとも、（ｉ）約５０重量％〜９０重量％の水若しくは水溶液、及び（ｉｉ）α−１，３−グリコシド結合を含み、及び少なくとも約１００の重量平均重合度（ＤＰｗ）を有する、約１０重量％〜５０重量％の不溶性α−グルカン又はその不溶性カチオン性エーテルを含む。更に、これらの組成物を調製する方法、並びにこれらを保管及び／又は移動させるためのシステムが開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
約０．１〜１０ｍｍの平均サイズを備える粒子を含む組成物であって、前記粒子は、少なくとも
（ｉ）約５０重量％〜９０重量％の水若しくは水溶液、及び
（ｉｉ）約１０重量％〜５０重量％の不溶性α−グルカン又は前記不溶性α−グルカンの不溶性カチオン性エーテルを含み、
前記不溶性α−グルカンは、α−１，３−グリコシド結合を含み、及び少なくとも１００の重量平均重合度（ＤＰｗ）を有する組成物。
【請求項２】
前記不溶性α−グルカンは、少なくとも約５０％のα−１，３−グリコシド結合を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記粒子は、約３０重量％〜４５重量％の前記不溶性α−グルカン又はその不溶性カチオン性エーテルを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記組成物は、粉末状である、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記不溶性α−グルカンは、少なくとも水、スクロース及び不溶性α−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を含む反応組成物中で酵素的に生成される、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記粒子は、第１組成物を粒子形成装置と接触させる工程によって生成され、前記第１組成物は、少なくとも（ｉ）約５０重量％〜９０重量％の水若しくは水溶液、及び（ｉｉ）約１０重量％〜５０重量％の不溶性α−グルカンを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記第１組成物は、前記不溶性α−グルカンのケーキである、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
前記粒子は、前記不溶性α−グルカンを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
請求項１に記載の組成物を調製する方法であって：
（ａ）少なくとも（ｉ）約５０重量％〜９０重量％の水若しくは水溶液、及び（ｉｉ）約１０重量％〜５０重量％の不溶性α−グルカン又は前記不溶性α−グルカンの不溶性カチオン性エーテルを含む第１組成物を提供する工程、及び
（ｂ）約０．１〜１０ｍｍの平均サイズを備える前記第１組成物の粒子を提供する工程を含む方法。
【請求項１０】
前記第１組成物は、前記不溶性α−グルカンのケーキである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
工程（ｂ）は、前記第１組成物と粒子形成装置とを接触させる工程であって、任意選択的に、前記粒子形成装置は、前記第１組成物が強制的に移動させられる複数の０．１ｍｍ〜１０ｍｍの通路を含み、及び任意選択的に更に、前記粒子形成装置はスクリーンを含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
請求項１に記載の組成物を保管及び／又は移動させるためのシステムであって、前記システムは、１つの容器であって、前記容器の底部部分に配置された少なくとも１つの開閉可能な排出口を備える容器を含み、前記容器の少なくとも一部分は前記排出口に向かってテーパ付けされており、及び前記組成物は前記容器内にあり、前記排出口が開放している場合は前記容器の外へ連続的に流出する容器を含むシステム。
【請求項１３】
前記容器は、ホッパー、ビン、サイロ又はバルクバッグである、請求項１２に記載のシステム。
【請求項１４】
前記排出口の前記最小断面積は、少なくとも約４インチのスパンを有する、請求項１２に記載のシステム。
【請求項１５】
前記容器の前記少なくとも一部分のテーパリングは、垂直から少なくとも３０度である、請求項１２に記載のシステム。
【請求項１６】
請求項１に記載の組成物を輸送するためのシステムであって、前記システムは、導管及び前記導管に通して前記組成物を輸送するためのガスを含み、任意選択的に前記システムの作動圧は、約５〜１０５絶対ｐｓｉであり、及び任意選択的に前記ガスは、空気若しくは不活性ガスであるシステム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる米国仮特許出願第６２／５７１，９９５号明細書（２０１７年１０月１３日出願）及び同第６２／７２５，５３２号明細書（２０１８年８月３１日出願）の利益を主張するものである。
【０００２】
本開示は、多糖材料の分野に含まれる。例えば、本開示は、好都合な流動特性を有する不溶性α−グルカン粒子を含む組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
多糖を様々な用途に使用することが望まれているため、研究者らは、生分解性であり、且つ再生可能に供給される原料から経済的に製造することができる多糖を探求してきた。そのような多糖の１つは、α−１，３−グリコシド結合を有することを特徴とする不溶性グルカンポリマーであるα−１，３−グルカンである。このポリマーは、例えば、ストレプトコッカス・サリバリウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）から単離されたグルコシルトランスフェラーゼ酵素を使用して調製されている（非特許文献１）。又、例えば、特許文献１は、酵素により生成されたα−１，３−グルカンからの紡糸繊維の調製を開示した。様々な他のグルカン材料も又、新規若しくは強化された用途を開発するために研究されてきた。例えば、特許文献２は、混合α−１，３及びα−１，６結合を有する数種の不溶性グルカンの酵素的合成について開示している。
【０００４】
典型的には、高含水量を備えるバルク粒状材料は、例えばそのような材料を用いた下流操作（例えば、保管及び輸送）にマイナスの影響を及ぼし得る低流動性等の不良な材料取り扱い特性を有する。高水分のバルク材料を取り扱うためには、高額で複雑な装置が概して必要とされる。本明細書に開示した、多糖をベースとする材料に関するこの問題の解決策は、好都合な流動特性を備える高水分の不溶性α−グルカン組成物である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許第７００００００号明細書
【特許文献２】米国特許出願公開第２０１５／０２３２８１９号明細書
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｓｉｍｐｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  １４１：１４５１−１４６０，１９９５
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
１つの実施形態では、本開示は、約０．１〜１０ｍｍの平均サイズを備える粒子を含む組成物であって、粒子が少なくとも（ｉ）約５０重量％〜９０重量％の水若しくは水溶液、及び（ｉｉ）約１０重量％〜５０重量％の不溶性α−グルカン又はその不溶性カチオン性エーテルを含み、ここで不溶性α−グルカンが、α−１，３−グリコシド結合を含み、及び少なくとも１００の重量平均重合度（ＤＰｗ）を有する組成物に関する。
【０００８】
別の実施形態では、本開示は、本明細書に開示した組成物を調製する方法であって、（ａ）少なくとも（ｉ）約５０重量％〜９０重量％の水若しくは水溶液、及び（ｉｉ）約１０重量％〜５０重量％の不溶性α−グルカン又はその不溶性カチオン性エーテルを含む第１組成物を提供する工程、及び（ｂ）約０．１〜１０ｍｍの平均サイズを備える第１組成物の粒子を提供する工程を含む方法に関する。
【０００９】
別の実施形態では、本開示は、本明細書に開示した組成物を保管する及び／又は移動させるためのシステムであって、そのシステムは、１つの容器であってその容器の底部部分に配置された少なくとも１つの開閉可能な排出口を備える容器を含み、その容器の少なくとも一部分は排出口に向かってテーパ付けされており、組成物が容器内にあり、排出口が開放している場合は容器の外へ連続的に流出するシステムに関する。
【００１０】
別の実施形態では、本開示は、本明細書に開示した組成物を輸送するためのシステムであって、導管及びその導管に通して組成物を輸送するためのガスを含み、任意選択的にシステムの作動圧は約５〜１０５絶対ｐｓｉであり、及び任意選択的にガスは空気若しくは不活性ガスであるシステムに関する。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
引用する全ての特許文献及び非特許文献の開示は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００１２】
特に開示しない限り、本明細書で用いられるような用語「１つの（ａ）」及び「１つの（ａｎ）」は、１つ以上（すなわち、少なくとも１つ）の言及される特徴を包含することを意図する。
【００１３】
存在する場合、全ての範囲は、特に記載しない限り、包括的且つ結合可能である。例えば、「１から５」（即ち、１〜５）の範囲が挙げられる場合、挙げられた範囲は、「１から４」、「１から３」、「１〜２」、「１〜２及び４〜５」、「１〜３及び５」等を含むものと解釈すべきである。
【００１４】
用語「α−グルカン」、「α−グルカンポリマー」等は、本明細書では同じ意味で用いられる。α−グルカンは、α−グルコシド結合によって一緒に連結されたグルコースモノマー単位を含むポリマーである。代表的な実施形態では、本明細書のα−グルカンは、少なくとも約８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％のα−グリコシド結合を含む。本明細書のα−グルカンポリマーの例としては、α−１，３−グルカンが挙げられる。
【００１５】
用語「ポリα−１，３−グルカン」、「α−１，３−グルカン」、「α−１，３−グルカンポリマー」等は、本明細書では同じ意味で用いられる。α−１，３−グルカンは、グリコシド結合により一緒に連結されているグルコースモノマー単位を含むポリマーであり、ここでグリコシド結合の少なくとも約３０％は、α−１，３である。特定の実施形態におけるα−１，３−グルカンは、少なくとも約９０％又は９５％のα−１，３グリコシド結合を含む。本発明のα−１，３−グルカンにおける他の結合の大部分又は全ては、典型的にはα−１，６であるが、一部の結合は更にα−１，２及び／又はα−１，４であってもよい。
【００１６】
用語「グリコシド結合（ｇｌｙｃｏｓｉｄｉｃ  ｌｉｎｋａｇｅ）」及び「グリコシド結合（ｇｌｙｃｏｓｉｄｉｃ  ｂｏｎｄ）」、「結合」等は、本明細書では同じ意味で使用され、炭水化物（糖）分子を別の炭水化物等の別の基に結合させる共有結合を意味する。本明細書で使用する用語「α−１，３−グリコシド結合」は、隣接α−Ｄ−グルコース環上の炭素１及び３を介してα−Ｄ−グルコース分子を相互に結合するタイプの共有結合を意味する。本明細書で使用する用語「α−１，６−グリコシド結合」は、隣接α−Ｄ−グルコース環上で炭素１及び６を介してα−Ｄ−グルコース分子を相互に結合する共有結合を意味する。本明細書のグルカンポリマーのグリコシド結合は、「グルコシド結合」も呼ぶこともできる。本明細書では、「α−Ｄ−グルコース」は、「グルコース」と呼ばれる。
【００１７】
本明細書のα−グルカンのグリコシド結合プロファイルは、当分野において公知の任意の方法を使用して決定され得る。例えば、結合プロファイルは、核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法（例えば、１３Ｃ  ＮＭＲ又は１Ｈ  ＮＭＲ）を使用する方法を用いて決定され得る。使用され得るこれらや他の方法は、例えば、参照により本明細書に組み込まれるＦｏｏｄ  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓ：Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｓ．Ｗ．Ｃｕｉ，Ｅｄ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  ３，Ｓ．Ｗ．Ｃｕｉ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，Ｔａｙｌｏｒ  ＆  Ｆｒａｎｃｉｓ  Ｇｒｏｕｐ  ＬＬＣ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，ＦＬ，２００５）に開示されている。
【００１８】
本明細書の大きなα−グルカンポリマーの「分子量」は、重量平均分子量（Ｍｗ）又は数平均分子量（Ｍｎ）として表すことができ、それらの単位はダルトン又はグラム／モルである。或いは、大きなα−グルカンポリマーの分子量は、ＤＰｗ（重量平均重合度）又はＤＰｎ（数平均重合度）として表すことができる。オリゴ糖等のより小さいα−グルカンポリマーの分子量は、典型的には、α−グルカン内に含まれるグルコースの数を単に指す、「ＤＰ」（重合度）として提供され得る。高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）又はゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ）による等の、これらの様々な分子量の測定値を算出するための様々な手段は、当分野において公知である。
【００１９】
用語「粒子」、「微粒子」、「顆粒」、「粒」、「薄片」等の用語は、本明細書では同じ意味で使用される。本明細書の粒子は、約０．１〜１０ｍｍ（ミリメートル）の平均サイズ（又は平均公称寸法）を有する。用語「微粒子状」、「粒状」等の用語は、本明細書の不溶性グルカン（若しくはそのカチオン性エーテル）の粒子を特徴付けるために使用され得る。一部の態様における粒子サイズは、粒径及び／又は最長粒子寸法の長さを意味し得る。平均サイズは、例えば、少なくとも５０、１００、５００、１０００、２５００、５０００若しくは１００００個以上の粒子の直径及び／又は最長粒子寸法の平均に基づき得る。
【００２０】
用語「粉末状」及び類似の用語は、本明細書では粒状の不溶性グルカン（若しくはそのカチオン性エーテル）を質感及び／又は外観において粉末に似ていると特徴付けるために任意選択的に使用され得る。「粉末」は、概して２０重量％未満（典型的には１５、１０、５、３、１、０．５若しくは０．１重量％未満）の含水量を備える、微細なサラサラの粒子の状態に小さくされた任意の固体物質であると定義されている。用語「粉末状」は、本明細書に開示した組成物が少なくとも約５０重量％の水若しくは水溶液を有するので、上記に定義した粉末とは区別される。
【００２１】
本明細書の「粒子形成装置」等の用語は、フィルターケーキ等の不溶性グルカン（又はそのカチオン性エーテル）のより大きな形態／調製物から不溶性グルカン（若しくはそのカチオン性エーテル）の粒子を調製するために使用され得る任意の装置を意味する。
【００２２】
用語「グルコシルトランスフェラーゼ」、「グルコシルトランスフェラーゼ酵素」、「ＧＴＦ」、「グルカンスクラーゼ」等は、本明細書では同じ意味で使用される。本明細書のグルコシルトランスフェラーゼの活性は、生成物であるα−グルカン及びフルクトースを製造するための基質スクロースの反応を触媒する。ＧＴＦ反応の他の生成物（副生物）には、グルコース、様々な可溶性グルコ−オリゴ糖及びロイクロースが含まれ得る。グルコシルトランスフェラーゼ酵素の野生型形態は、概して、（Ｎ末端からＣ末端の方向に）シグナルペプチド（典型的には、切断プロセスにより除かれる）、可変ドメイン、触媒ドメイン及びグルカン結合ドメインを含有する。本明細書のグルコシルトランスフェラーゼは、ＣＡＺｙ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ−Ａｃｔｉｖｅ  ＥｎＺｙｍｅｓ）データベース（Ｃａｎｔａｒｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．３７：Ｄ２３３−２３８，２００９）によると、グリコシドヒドロラーゼファミリー７０（ＧＨ７０）の下に分類される。
【００２３】
「酵素反応」、「グルコシルトランスフェラーゼ反応」、「グルカン合成反応」、「反応組成物」、「反応調製物」等の用語は、本明細書では同意味で使用され、概して、最初に水、スクロース、少なくとも１種の活性グルコシルトランスフェラーゼ酵素及び任意選択的に他の成分も含む反応を指す。
【００２４】
本明細書の不溶性α−グルカン（若しくはそのカチオン性エーテル）の「ケーキ」は、少なくとも（ｉ）約５０重量％〜９０重量％の水若しくは水溶液、及び（ｉｉ）約１０重量％〜５０重量％の不溶性α−グルカンを含む凝縮形、圧縮（ｃｏｍｐａｃｔｅｄ）形、充填形、圧搾形及び／又は圧縮（ｃｏｍｐｒｅｓｓｅｄ）形にある調製物を指す。一部の態様におけるケーキは、「フィルターケーキ」又は「ウェットケーキ」と呼ぶことができる。
【００２５】
用語「体積によるパーセント」、「体積パーセント」、「体積％」、「ｖ／ｖ％」等は、本明細書では同じ意味で用いられる。溶液中の溶質の体積によるパーセントは、次式：［（溶質の体積）／（溶液の体積）］×１００％を使用して決定できる。
【００２６】
用語「重量によるパーセント」、「重量パーセント（重量％）」、「重量−重量百分率（％ｗ／ｗ）」等は、本明細書では同じ意味で用いられる。重量によるパーセントは、組成物、混合物又は溶液中に物質が含まれるときに質量基準での物質の百分率を指す。
【００２７】
ポリペプチドアミノ酸配列に関して本明細書で使用される用語「配列同一性」、「同一性」等は、参照により本明細書に援用される、米国特許出願公開第２０１７／０００２３３６号明細書に定義及び決定されている通りである。
【００２８】
本明細書で使用する「水性液体」、「水性流体」等の用語は、水若しくは水溶液を指すことができる。本明細書の「水溶液」は、１種以上の溶解塩を含むことができ、一部の実施形態では、最大全塩濃度は、約３．５重量％であり得る。本明細書の水性液体は、典型的には、液体中の唯一の溶媒として水を含むが、水性液体は、任意選択的に、水に混和する１種以上の他の溶媒（例えば、極性有機溶媒）を含み得る。従って、水溶液は、少なくとも約８０重量％の水を有する溶媒を含み得る。
【００２９】
「不溶性（ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ）」、「水不溶性（ａｑｕｅｏｕｓ−ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ）」、「水不溶性（ｗａｔｅｒ−ｉｎｓｏｌｕｂｌｅ）」（及び同様の用語）（例えば、不溶性α−１，３−グルカン）であるグルカン又はそのカチオン性エーテル誘導体は、水若しくは他の水性条件では溶解しない（又は認め得るほどには溶解しない（ここで、水性条件は、任意選択的に、４〜９（例えば、６〜８）のｐＨ及び／又は約１〜８５℃（例えば、２０〜２５℃）の温度を有することを更に特徴とする）。対照的に、「可溶性（ｓｏｌｕｂｌｅ）」、「水溶性（ａｑｕｅｏｕｓ−ｓｏｌｕｂｌｅ）」、「水溶性（ｗａｔｅｒ−ｓｏｌｕｂｌｅ）」等である本明細書の所定のオリゴ糖等のグルカン（例えば、８未満のＤＰを備えるα−１，３−グルカン）は、これらの条件下で感知可能に溶解する。
【００３０】
α−グルカンエーテル、特に「カチオン性α−グルカンエーテル」に関して本明細書で使用する用語、例えばカチオン性α−１，３−グルカンエーテルは、参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２０１６／０３１１９３５号明細書に規定されている。本明細書で使用する用語「置換度」（ＤｏＳ）は、α−１，３−グルカンエーテルの各モノマー単位（グルコース）中の（エーテル結合を介して正荷電有機基で）置換されたヒドロキシル基の平均数を指す。本明細書の不溶性カチオン性α−１，３−グルカンエーテルは、一部の態様ではより高いＤｏＳ（＞０．３）は可溶性カチオン性α−１，３−グルカンエーテルと結び付けられ得るので、約０．３（例えば、０．００１〜０．３）までのＤｏＳを有し得る。
【００３１】
本明細書で使用する、正荷電有機基は、他の原子若しくは官能基（例えば、「置換アルキル基」）で置換された１個以上の水素原子を有する、１つ以上の炭素の鎖（「炭素鎖」）を意味するが、ここで１つ以上の置換は、正荷電基による置換である。正荷電有機基が正荷電基との置換に加えて更に１つの置換を有する場合、そのような追加の置換は１つ以上のヒドロキシル基、酸素原子（それによりアルデヒド基若しくはケトン基を形成する）、アルキル基及び／又は追加の正荷電基とであってよい。正荷電有機基は、それが１つ以上の正荷電基を含むので、正味の正荷電を有する。「正荷電基」、「正荷電イオン基」、「カチオン基」等の用語は、本明細書では同じ意味で使用される。正荷電基は、１つのカチオン（正荷電イオン）を含む。正荷電基の例としては、置換アンモニウム基、カルボカチオン基及びアシルカチオン基が挙げられる。
【００３２】
本明細書の用語「出口（ｏｕｔｌｅｔ）」、「排出口」、「出口（ｅｘｉｔ）」等の用語は、開放している場合、材料が容器から出ること（容器からの排出）を許容し得る開閉可能な開口部を意味する。１つ以上の排出口は、典型的には容器の底部又はさもなければ底部部分の他の場所に配置され得る。一部の態様では、排出口の「直径」は、排出口の最小断面積の直径（出口が円形の場合）又は最長直径（出口が楕円形の場合）を意味する。本明細書の排出口は、典型的には容器の下方に突き出る（向いている）。
【００３３】
本明細書の用語「テーパ付き」等は、排出口に向かう容器の一部分の狭小化（例えば、段階的及び／又は一様な狭小化）を意味する。そのような狭小化は、典型的には排出口の最小断面積に向かって下方へ伸びる。本明細書で使用する「垂直からの角度」は、テーパリングの相対勾配（ｓｔｅｅｐｎｅｓｓ）を特徴付ける。テーパリングの勾配は、垂直からの角度が減少するにつれて増加する；例えば、垂直から６０度のテーパリングは、垂直から３０度のテーパリングよりも急勾配ではない（即ち、グレードがより低い）。垂直からの０度はテーパリングがないことを表すと理解すべきである。任意選択的に、「水平からの角度」は、テーパリングを記載するために使用することができ、垂直からの角度を９０度から単純に減じることによって計算される。
【００３４】
本明細書の１つ以上の排出口を有する「容器」は、典型的には本開示の少なくとも約１００ｋｇ（キログラム）の不溶性αグルカン粒子を保持／保管する、及び／又は輸送するために好適である。
【００３５】
本明細書で使用する「ｐｓｉａ」（絶対ｐｓｉ（ポンド／平方インチ絶対圧力））は、大気圧よりむしろ真空に比較した圧力の単位を意味する。大気圧は、例えば、１４．７絶対ｐｓｉである。５絶対ｐｓｉの圧力は、例えば、部分真空を特徴とする。
【００３６】
用語「単離（された）」は、自然には発生しない形態又は環境にある物質（又はプロセス）を意味する。単離物質の非限定的例としては、本明細書の粒状の不溶性グルカン等（並びにそれを調製するために使用された酵素的反応及び他のプロセス）の任意の非天然型物質が挙げられる。本明細書に開示した実施形態は、合成／人工である（ヒトの介入／関与がなかったら製造できなかったであろう）、及び／又は天然型ではない特性を有すると考えられる。
【００３７】
本明細書で使用する用語「増加した」は、増加した量又は活性が、それと比較される量又は活性より少なくとも約１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、５０％、１００％又は２００％多い量又は活性を指すことができる。用語「増加した」、「上昇した」、「増強された」、「〜より多い」、「改善された」等の用語は、本明細書では同じ意味で使用される。
【００３８】
高水分のバルク材料を取り扱うためには、高額で複雑な装置が概して必要とされる。本明細書に開示した、多糖をベースとする材料に関するこの問題の解決策は、好都合な流動特性を備える高水分の不溶性α−グルカン組成物である。
【００３９】
本開示の所定の実施形態は、約０．１〜１０ｍｍの平均サイズを備える粒子を含むか又は粒子から成る組成物に関する。これらの粒子は、少なくとも、（ｉ）約５０重量％〜９０重量％の水若しくは水溶液、及び（ｉｉ）約１０重量％〜５０重量％の不溶性α−グルカン又はその不溶性カチオン性エーテルを含むか又はそれらから成り、ここで不溶性α−グルカンは、α−１，３−グリコシド結合を含み、及び少なくとも１００の重量平均重合度（ＤＰｗ）を有する。そのような高水分の不溶性α−グルカン組成物は、より経済的な保管及び輸送プロセスを可能にする好都合な流動特性を有する。
【００４０】
本明細書の組成物は、約０．１〜１０ｍｍの平均サイズを備える粒子を含む。一部の態様では、粒子の平均サイズは、約０．１〜７、０．１〜６、０．１〜５、０．１〜４、０．１〜３、０．１〜２、０．５〜７、０．５〜６、０．５〜５、０．５〜４、０．５〜３、０．５〜２、１〜７、１〜６、１〜５、１〜４、１〜３、１〜２、１〜１０、２〜１０、２〜８、２〜６、２〜４、４〜１０、４〜８、４〜６、６〜１０、６〜８、８〜１０、５〜１０、５〜７、６〜７、１、２、３、４、５、６、７、８、９若しくは１０ｍｍである。これらのサイズ範囲の何れかの粒子の単離は、例えば、適切なサイズのメッシュ／ふるいを使用して実施できる。これらのツールは、更に粒子サイズを決定／確証するためにも使用できる。本開示の組成物の粒子は、一部の態様では、約７、６、５、４、３若しくは２ｍｍ又はそれ以下である。一部の態様における粒子サイズは、任意選択的に１、２、３、４、５、６、７、８、９及び／又は１０ｍｍの通路を備えるスクリーン／ふるい（例えば、おろし金）を含む粒子生成装置に通して（又は粒子形成装置について下記で記載する通路に通して）不溶性α−グルカンを強制的に通過させることによって生成される粒子サイズによって特徴付けることができる。この方法で生成される粒子は、典型的には、通路のサイズと同等又はそれ以下のサイズにある。
【００４１】
本明細書の組成物中の粒子は、約５０重量％〜９０重量％の水若しくは水溶液を含む。一部の態様では、粒子は、約５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、５０〜９０、５０〜８０、５０〜７０、５０〜６０、５５〜８０、６０〜９０、６０〜８０、６０〜７０、５５〜６５、５５〜８０又は７０〜８０重量％の水若しくは水溶液を含み得る。そのような粒子は高含水量を有するが、それらを含む組成物はスラリー、コロイド状懸濁液の形態又は他の液体／流体形にはない。むしろ、一部の態様における組成物は、外観及び／又は質感において粉末状（粉末に似ている）であると特徴付けることができるが、本組成物の粒子は、典型的な粉末よりはるかに多い液体含水量を有する（上記の定義を参照されたい）。
【００４２】
水若しくは水溶液は、本明細書の粒子中に含まれる。一部の態様における水溶液は、（検出可能な）溶存糖を有していないか又は約０．１〜１．５、０．１〜１．２５、０．１〜１．０、０．１〜．７５、０．１〜０．５、０．２〜０．６、０．３〜０．５、０．２、０．３、０．４、０．５若しくは０．６重量％の溶存糖を有する。そのような溶存糖としては、例えば、スクロース、フルクトース、ロイクロース及び／又は可溶性グルコ−オリゴ糖を挙げることができる。一部の態様における水溶液は、１種以上の塩／緩衝液（例えば、Ｎａ＋、Ｃｌ−、ＮａＣｌ、リン酸塩、トリス、クエン酸塩）（例えば、≦０．１、０．５若しくは１．０重量％）及び／又はグルコシルトランスフェラーゼ反応条件について下記に列挙するようなｐＨ（例えば、ｐＨ６．０〜８．０）を有し得る。一部の態様では、本明細書の水溶液の溶媒は、約又は少なくとも約８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、９９．５若しくは１００重量％の水を含み得る；溶媒の残りは、例えば、極性有機溶媒であってよい。
【００４３】
本明細書の組成物中の粒子は、約１０重量％〜５０重量％の不溶性α−グルカン及び／又はその１種以上の不溶性カチオン性エーテルを含む。一部の態様では、粒子は、約１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、１０〜５０、１０〜４０、１０〜３０、１０〜２０、２０〜５０、２０〜４５、２０〜４０、２０〜３０、３０〜５０、３０〜４０、４０〜５０、３０〜４５、３５〜４５、３７．５〜４２．５、３５〜４０若しくは４０〜４５重量％の不溶性α−グルカン及び／又はその１種以上の不溶性カチオン性エーテルを含む。一部の態様における粒子は、不溶性α−グルカンを含み、そのカチオン性エーテルを含まない（及びその逆も同様である）。不溶性α−グルカンは、一部の態様では誘導体化されていない（例えばエステル化のように化学的に修飾されていない）。
【００４４】
本明細書の組成物中の粒子は、水及び不溶性α−グルカン（及び／又はその不溶性カチオン性エーテル）並びに任意選択的に上記に開示した他の成分（例えば、溶存糖、塩、緩衝剤及び／又は極性有機溶媒）の何れかを含むか又はそれらから成る。本明細書の粒子は、典型的には、約０．５、０．１若しくは０．０５重量％未満（又は検出可能な量未満）の例えば充填剤（例えば、木材、パルプ若しくは任意の他の固体物質）若しくは可塑剤（例えば、グリセロール）等の任意の他の物質を含むか又は全く含まない。
【００４５】
本明細書の粒子を含む組成物は、例えば、約４〜３０、１０〜３０、１５〜３０、２０〜３０、２５〜３０、１５〜２５若しくは２０〜２５℃の温度にあってよい。一部の実施形態では、粒子（例えば、輸送コンテナ内におけるようにバルク量で存在する粒子）を含む組成物の重量は、少なくとも約１００、２００、２５０、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１１００若しくは１２００ｋｇ又は少なくとも約１、１．５、２、２．５、５、１０、２０、２５、５０、７５若しくは１００（米国若しくはメートル）トンであり得る、及び／又は約５０〜５５０ポンド／平方フィートの圧縮後に約３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、３５〜４２、３５〜４０、３７〜４２若しくは３７〜４０ポンド／立方フィートの密度を有し得る。重要なことに、そのような高い重量及び／又は密度にある粒子の実施形態は、（下記で記載する）商業的サイズ／バルク容器からの連続的流動性を示す。本明細書のサラサラのバルク材料（即ち、何らかの圧縮手技を受けていない組成物）の密度は、例えば、約３１〜３８、３１〜３７、３２〜３８若しくは３２〜３７ポンド／立方フィートであり得る。
【００４６】
一部の態様における粒子は、α−１，３−グリコシド結合を含み、及び少なくとも１００の重量平均重合度（ＤＰｗ）を有する約１０重量％〜５０重量％の不溶性α−グルカンを含み得る。一部の態様では、不溶性α−グルカンの構成的グリコシド結合の少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％若しくは１００％（又は、５０％〜１００％の間の任意の整数）は、α−１，３結合である。従って、一部の態様では、不溶性α−グルカンは、約５０％、４０％、３０％、２０％、１５％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％若しくは０％未満（又は、０％〜５０％の間の任意の整数値）のα−１，３ではないグリコシド結合を有する。典型的には、α−１，３ではない結合は、殆ど又は全部がα−１，６である。ポリマー内では分岐点を形成する所定の結合の発生率はより低いので、α−グルカン内に存在するα−１，３結合のパーセンテージが高くなる程α−グルカンが直鎖状である確率が高くなることを理解すべきである。従って、１００％のα−１，３結合を備える不溶性α−グルカンは、完全に直鎖状であると考えられる。所定の実施形態では、不溶性α−グルカンは、分岐点を有していないか又はポリマー内のグリコシド結合のパーセントとして約５％、４％、３％、２％又は１％未満の分岐点を有する。分岐点の例としては、α−１，３結合骨格から生じるα−１，６、α−１，２及びα−１，４分岐点が挙げられる。
【００４７】
本明細書の不溶性α−グルカンは、一部の態様では、少なくとも約１００のＤＰｗ又はＤＰｎの分子量を有し得る。一部の実施形態におけるＤＰｗ又はＤＰｎは、少なくとも約１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１１００若しくは１２００（又は、１００〜１２００の間の任意の整数）であり得る。α−グルカンのＤＰｗ又はＤＰｎは、任意選択的にこれらの数値の任意の２つの間の範囲（例えば、１００〜１２００、４００〜１２００、７００〜１２００、１００〜１０００、４００〜１０００、７００〜１０００）として表示し得る。
【００４８】
本明細書のα−グルカンは、本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ反応の条件（例えば、ｐＨ４〜８、下記を参照）等の非苛性水性系内で不溶性である。一般に、本明細書の水性状況におけるグルカンポリマーの溶解度は、その結合プロファイル、分子量及び／又は分岐度に関連する。例えば、≧９５％の１，３結合を備えるα−１，３−グルカンは、概して、２０℃の水性条件において８以上のＤＰｗで不溶性である。一般に、分子量が増大するにつれて、α−１，３−グルカン不溶性のために必要とされるα−１，３結合のパーセンテージは減少する。
【００４９】
一部の実施形態では、不溶性α−グルカンは、少なくとも約３０％のα−１，３結合、並びにα−グルカン中のα−１，３結合及びα−１，６結合の両方の合計を１００％にするパーセンテージのα−１，６結合を含む。例えば、α−１，３結合及びα−１，６結合のパーセンテージは、それぞれ、約３０〜４０％及び６０〜７０％であり得る。一部の態様では、少なくとも約３０％のα−１，３結合を含む不溶性α−グルカンは、直鎖状である。少なくとも約３０％のα−１，３結合を含む不溶性α−グルカンを生成するためのグルコシルトランスフェラーゼは、参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２０１５／０２３２８１９号明細書に開示されている。
【００５０】
一部の実施形態における不溶性α−グルカンは、（ｉ）少なくとも約１０００００ダルトンの分子量を備える（例えば、少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％のα−１，６結合を備える）デキストランを含む骨格、及び（ｉｉ）少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％のα−１，３−グルコシド結合を含むα−１，３−グルカン側鎖を有するコポリマー（例えば、グラフトコポリマー）の形態であり得る。そのようなコポリマーは、参照により本明細書に組み込まれる国際特許出願公開第２０１７／０７９５９５号パンフレットに開示された通りであり得る。
【００５１】
上記の任意の結合プロファイル及び／又は分子量プロファイルは、例えば、本明細書では本明細書の不溶性α−グルカンを適切に特徴付けるために結合され得る。一部の態様では、そのようなα−グルカンの結合及び／又は分子量プロファイルは、それらの全部が参照により本明細書に組み込まれる下記の刊行物：米国特許第７００００００号明細書及び同第８８７１４７４号明細書、米国特許出願公開第２０１５／０２３２８１９号明細書及び国際特許出願公開第２０１７／０７９５９５号パンフレットの何れかに開示されている通りであり得る。上記の実施形態の不溶性α−グルカンは、例えば、下記に開示したグルカン合成反応プロセスの何れかの生成物であり得る。
【００５２】
本明細書の不溶性α−グルカンは、水溶性であるアルテルナン（交互１，３及び１，６結合）を含んでいない。本明細書の不溶性α−グルカンは、典型的には不活性容器中（典型的には無細胞条件下）で酵素的に引き出されるが、細胞壁（例えば、真菌細胞壁）からは引き出されない。
【００５３】
一部の態様における不溶性α−グルカンは、少なくとも水、スクロース及び不溶性α−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を含む反応組成物中で酵素的に生成され得る。そのような酵素反応物は、上記に開示した任意の不溶性α−グルカン分子（例えば≧９０％若しくは≧９５％のα−１，３−結合）を生成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を使用することができる。
【００５４】
不溶性α−グルカンを生成するための所定の実施形態におけるグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、例えば、米国特許出願公開第２０１４／００８７４３１号明細書、同第２０１７／０１６６９３８号明細書、同第２０１７／０００２３３５号明細書及び同第２０１８／００７２９９８号明細書（米国特許出願第１５／７０２，８９３号明細書）（それらの全部が参照により本明細書に組み込まれる）の何れかに開示されたアミノ酸配列を含み得る。そのような配列の例としては、米国特許出願公開第２０１４／００８７４３１号明細書に開示されている配列番号２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２６、２８、３０、３４若しくは５９と１００％同一であるか又は少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９８．５％、９９％若しくは９９．５％同一であり、及びグルコシルトランスフェラーゼ活性を有する配列が挙げられる。米国特許出願公開第２０１４／００８７４３１明細書に開示された配列番号２、４、８、１０、１４、２０、２６、２８、３０若しくは３４を有するグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、一部の態様では少なくとも約９０％のα−１，３−グリコシド結合を含む不溶性α−１，３−グルカンを合成することができる。
【００５５】
所定の態様におけるグルコシルトランスフェラーゼ酵素のアミノ酸配列は、その酵素が所定量のスクロース基質からより多くの生成物（不溶性α−グルカン及びフルクトース）とより少ない副生物（例えば、グルコース、例えばロイクロース等のオリゴ糖）とを生成するように改変されている。例えば、本明細書のグルコシルトランスフェラーゼの触媒ドメインの１、２、３、４個又はそれ以上のアミノ酸残基を改変／置換すると、より多くの生成物（不溶性α−グルカン及びフルクトース）を生成する酵素を得ることができる。
【００５６】
本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ酵素は、細菌等の任意の微生物源に由来し得る。細菌グルコシルトランスフェラーゼ酵素の例は、ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）種、ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）種又はラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）種に由来する酵素である。ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）種の例としては、Ｓ．サリバリウス（Ｓ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、Ｓ．ソブリナス（Ｓ．ｓｏｂｒｉｎｕｓ）、Ｓ．デンチロウセッティ（Ｓ．ｄｅｎｔｉｒｏｕｓｅｔｔｉ）、Ｓ．ダウネイ（Ｓ．ｄｏｗｎｅｉ）、Ｓ．ミュータンス（Ｓ．ｍｕｔａｎｓ）、Ｓ．オラリス（Ｓ．ｏｒａｌｉｓ）、Ｓ．ガロリティクス（Ｓ．ｇａｌｌｏｌｙｔｉｃｕｓ）及びＳ．サングイニス（Ｓ．ｓａｎｇｕｉｎｉｓ）が挙げられる。ロイコノストック（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）種の例としては、Ｌ．メセンテロイデス（ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）、Ｌ．アメリビオスム（ａｍｅｌｉｂｉｏｓｕｍ）、Ｌ．アルゲンチナム（ａｒｇｅｎｔｉｎｕｍ）、Ｌ．カルノスム（ｃａｒｎｏｓｕｍ）、Ｌ．シトレウム（ｃｉｔｒｅｕｍ）、Ｌ．クレモリス（ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、Ｌ．デキストラニカム（ｄｅｘｔｒａｎｉｃｕｍ）及びＬ．フルクトサム（ｆｒｕｃｔｏｓｕｍ）が挙げられる。ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）種の例としては、Ｌ．アシドフィルス（Ｌ．ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、Ｌ．デルブリュッキイ（Ｌ．ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）、Ｌ．ヘルベチクス（Ｌ．ｈｅｌｖｅｔｉｃｕｓ）、Ｌ．サリバリウス（Ｌ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、Ｌ．カゼイ（Ｌ．ｃａｓｅｉ）、Ｌ．クルバツス（Ｌ．ｃｕｒｖａｔｕｓ）、Ｌ．プランタルム（ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、Ｌ．サケイ（ｓａｋｅｉ）、Ｌ．ブレビス（Ｌ．ｂｒｅｖｉｓ）、Ｌ．ブフネリ（Ｌ．ｂｕｃｈｎｅｒｉ）、Ｌ．フェルメンタム（Ｌ．ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）及びＬ．ロイテリ（Ｌ．ｒｅｕｔｅｒｉ）が挙げられる。
【００５７】
本明細書の反応組成物の温度は、必要に応じて制御することができ、例えば、約５〜５０℃、２０〜４０℃、３０〜４０℃、２０〜３０℃、２０〜２５℃、２０℃、２５℃、３０℃、３５℃若しくは４０℃とすることができる。
【００５８】
本明細書の反応組成物中のスクロースの初期濃度は、例えば、約２０〜４００ｇ／Ｌ、７５〜１７５ｇ／Ｌ又は５０〜１５０ｇ／Ｌであり得る。一部の態様では、初期スクロース濃度は、少なくとも約５０、７５、１００、１５０若しくは２００ｇ／Ｌであるか又は約５０〜６００ｇ／Ｌ、１００〜５００ｇ／Ｌ、５０〜１００ｇ／Ｌ、１００〜２００ｇ／Ｌ、１５０〜４５０ｇ／Ｌ、２００〜４５０ｇ／Ｌ若しくは２５０〜６００ｇ／Ｌである。「スクロースの初期濃度」は、全ての反応成分（例えば、少なくとも水、スクロース、グルコシルトランスフェラーゼ酵素）が添加／結合された直後の反応組成物中のスクロース濃度を意味する。
【００５９】
所定の実施形態における反応組成物のｐＨは、約４．０〜９．０、４．０〜８．５、４．０〜８．０、５．０〜８．０、５．５〜７．５又は５．５〜６．５であり得る。一部の態様では、ｐＨは、約４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５又は８．０であり得る。ｐＨは、リン酸塩、トリス、クエン酸塩又はそれらの組み合わせを含むがそれらに限定されない、好適な緩衝剤の添加又は組み入れによって調整又は制御され得る。本明細書の反応組成物中の緩衝剤濃度は、例えば、約０．１〜３００ｍＭ、０．１〜１００ｍＭ、１０〜１００ｍＭ、１０ｍＭ、２０ｍＭ又は５０ｍＭであり得る。
【００６０】
グルコシルトランスフェラーゼ反応物は、本明細書に開示の１つ以上の反応条件を適用するために好適な任意の容器（例えば、不活性容器（ｖｅｓｓｅｌ／ｃｏｎｔａｉｎｅｒ）に含有させられ得る。一部の態様における不活性容器は、ステンレス鋼製、プラスチック製若しくはガラス製であり得る（又は、これらの構成要素の２つ以上を含み得る）、及び特定の反応物を含有するのに好適なサイズであり得る。例えば、不活性容器の体積／容積（及び／又は本明細書の反応組成物の体積）は、約又は少なくとも約１、１０、５０、１００、５００、１０００、２５００、５０００、１００００、１２５００、１５０００若しくは２００００リットルであり得る。不活性容器は、任意選択的に、撹拌装置を装備することができる。例えば上記の特徴の何れかを使用すると、本明細書の単離された反応物を特徴付けることができる。
【００６１】
本明細書の反応組成物は、例えば、１種、２種又はそれ以上のグルコシルトランスフェラーゼ酵素を含有することができる。一部の実施形態では、反応組成物中に１種のみ又は２種のグルコシルトランスフェラーゼ酵素が含まれる。本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ反応物は、無細胞（例えば、細胞が全く存在しない）であり得る、及び典型的には無細胞である。
【００６２】
所定の実施形態における反応の完了は、視覚的に（例えば、不溶性α−グルカンがもはや蓄積しない）、且つ／又は溶液中に残ったスクロース（残留スクロース）の量を測定することによって決定できるが、この場合、少なくとも約９０％、９５％又は９９％のスクロース消費率は反応完了を指示し得る。一部の態様では、反応は、そのスクロース含量が約２〜５ｇ／Ｌ以下にある場合に完了したと見なし得る。開示したプロセスの反応は、例えば、約１時間〜約２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、３６、４８、６０、７２、９６、１２０、１４４又は１６８時間に渡り実施され得る。反応は、任意選択的に、グルコシルトランスフェラーゼ活性を（例えば、少なくとも約６５℃へ少なくとも約３０〜６０分間加熱することによって）停止させるために終了させる、及び／又はさもなければ処理することができる。
【００６３】
本明細書の不溶性α−グルカンを合成するために好適な他の条件及び／又は成分の例は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２０１４／００８７４３１号明細書、同第２０１７／０１６６９３８号明細書及び同第２０１７／０００２３３５号明細書に開示されている。
【００６４】
本明細書のグルコシルトランスフェラーゼ反応において生成された不溶性α−グルカンは、典型的には、（ｉ）約５０重量％〜９０重量％の水若しくは水溶液、及び（ｉｉ）約１０重量％〜５０重量％の不溶性α−グルカンを含むケーキとして単離される。そのようなケーキは、任意選択的にフィルターケーキ若しくはウェットケーキとして特徴付けることができ、及び本開示の粒子を調製するために使用できる（下記を参照されたい）。ケーキ調製のために不溶性α−グルカンを単離する工程は、少なくとも遠心分離（ケーキはペレット化グルカンである）及び／又は濾過（ケーキは濾過グルカンである）の工程を含み得る。例えば、本明細書のウェットケーキは、漏斗、フィルター（例えば、回転真空ドラムフィルター、クロスフローフィルター、スクリーンフィルター、ベルトフィルター、スクリュープレス若しくは膜の圧搾能力有り若しくは無しのフィルタープレス等の表面フィルター；或いはサンドフィルター等のデプスフィルター）及び／又は遠心分離を使用して得ることができる；濾過は、例えば、重力、真空若しくは加圧濾過によってでよい。単離は、任意選択的に、更に遠心分離及び／又は濾過α−グルカンを１回，２回又はそれ以上に渡り水若しくは他の水性液体で洗浄する工程を含み得る。洗浄容積は、任意選択的に、例えば、不溶性α−グルカンを生成ずるために使用されたグルコシルトランスフェラーゼ反応物の容積の少なくとも約１０〜１００％であり得る。洗浄は、所望に応じて、置換又は再スラリー洗浄による等の様々な方式で実施され得る。一部の態様では、生じたケーキの水性部分は、（検出可能な）溶存糖を有していないか又は約０．１〜１．５、０．１〜１．２５、０．１〜１．０、０．１〜．７５、０．１〜０．５、０．２〜０．６、０．３〜０．５、０．２、０．３、０．４、０．５若しくは０．６重量％の溶存糖を有する。そのような溶存糖としては、例えば、スクロース、フルクトース、ロイクロース及び／又は可溶性グルコ−オリゴ糖を挙げることができる。本明細書の不溶性α−グルカンは、典型的には、その酵素的合成後及びそれを粉末形に加工処理する前に乾燥させられない；従って、本明細書のα−グルカンは、任意選択的に一度も乾燥させられていないと特徴付けることができる。
【００６５】
一部の態様における粒子は、不溶性α−グルカンの約１０重量％〜５０重量の不溶性カチオン性エーテルを含み得る。そのようなエーテルは、例えば、本明細書に開示した任意の不溶性α−グルカンのカチオン性エーテル誘導体であり得る。単純に１つの例として、エーテル誘導体化のためのα−１，３−グルカンは、（ｉ）約、若しくは少なくとも約９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくは１００％のα−１，３結合、及び／又は（ｉｉ）約、若しくは少なくとも約１００、２５０、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１１００、１２００、５００〜１２００、５００〜１１００、５００〜１０００、５００〜９００、５００〜８００、８００〜１２００、８００〜１１００、８００〜１０００若しくは８００〜９００のＤＰｗを有し得る。典型的には単一タイプの不溶性カチオン性エーテルが使用され得るが、２つ以上のタイプの不溶性カチオン性エーテルが任意選択的に使用され得る。一部の態様では、不溶性カチオン性エーテルは１つのタイプの正荷電有機基を含むが、他方他の態様では、不溶性カチオン性エーテルは２つ以上のタイプの正荷電有機基を含む。
【００６６】
本明細書の不溶性カチオン性α−グルカンエーテルのＤｏＳ（正荷電エーテル基を備える）は、例えば、約（又は０．００１〜約）０．３、０．２９、０．２８、０．２７、０．２６、０．２５、０．２４、０．２３、０．２２、０．２１、０．２、０．１５若しくは０．１又は約０．０１〜０．３、０．０１〜０．２５、０．０１〜０．２、０．０１〜０．１５、０．０１〜０．１、０．０５〜０．３、０．０５〜０．２５、０．０５〜０．２、０．０５〜０．１５若しくは０．０５〜０．１までであってよい。正荷電基は、例えば、本明細書に参照により組み込まれる米国特許出願公開第２０１６／０３１１９３５号明細書に開示されている何れかであってよい。正荷電基は、例えば、置換アンモニウム基を含み得る。置換アンモニウム基の例は、第一級、第二級、第三級及び第四級アンモニウム基である。アンモニウム基は、１つ、２つ若しくは３つのアルキル基（例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、ブチル基、ペンチル基、ヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基、ノニル基、デシル基）で置換され得る。置換アンモニウム基の基の１つは、グラフトコポリマーへのエーテル結合内に１個の炭素又は１本の炭素鎖を含み、そのような炭素若しくは炭素鎖は、例えば、−ＣＨ２、−ＣＨ２ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−若しくは−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−であってよい。この状況における炭素若しくは炭素鎖は、任意選択的に１個の酸素原子（例えば、アルコール基）及び／又はアルキル基（例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル）との少なくとも１つの置換を有し得る。一部の態様における１つ以上の正荷電有機基は、トリメチルアンモニウムヒドロキシルプロピル基（構造Ｉ
【化１】
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（式中、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４のそれぞれはメチル基である）であり得る。
【００６７】
本開示の所定の実施形態は、本明細書に記載した粒子を含む組成物を調製する方法に関する。そのような方法は：（ａ）少なくとも（ｉ）約５０重量％〜９０重量％の水若しくは水溶液、及び（ｉｉ）約１０重量％〜５０重量％の不溶性α−グルカン又はその不溶性カチオン性エーテルを含む第１組成物を提供する工程、並びに（ｂ）（例えば、第１組成物を好適な粒子形成装置と接触させる工程によって）約０．１〜１０ｍｍの平均サイズを備える第１組成物の粒子を提供する工程を含み得る。そのような方法は、任意選択的に、本明細書では不溶性α−グルカン（又はその不溶性カチオン性エーテル）粒子形成法であると特徴付けることができる。
【００６８】
本明細書の不溶性α−グルカン粒子形成法において使用するための第１組成物は、例えば、上記に開示した不溶性α−グルカンのケーキ（例えば、フィルターケーキ若しくはウェットケーキ）であり得る。そのようなケーキは、約５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、５０〜９０、５０〜８０、５０〜７０、５０〜６０、６０〜９０、６０〜８０、６０〜７０、５５〜６５、５５〜８０若しくは７０〜８０重量％の水若しくは水溶液を含み得る。一部の実施形態におけるケーキ中の水溶液は、（検出可能な）溶存糖を有し得ないか又は約０．１〜１．５、０．１〜１．２５、０．１〜１．０、０．１〜０．７５、０．１〜０．５、０．２〜０．６、０．３〜０．５、０．２、０．３、０．４、０．５若しくは０．６重量％の溶存糖を有し得る。そのような溶存糖としては、例えば、スクロース、フルクトース、ロイクロース及び／又は可溶性グルコ−オリゴ糖を挙げることができる。一部の態様におけるケーキ中の水溶液は、１種以上の塩／緩衝剤（例えば、Ｎａ＋、Ｃｌ−、ＮａＣｌ、リン酸塩、トリス、クエン酸塩）（例えば、≦０．１、０．５若しくは１．０重量％）及び／又はグルコシルトランスフェラーゼ反応条件について上記に列挙したようなｐＨ（例えば、ｐＨ６．０〜８．０）を有し得る。一部の態様では、本明細書の水溶液の溶媒は、約又は少なくとも約８０、８５、９０、９５、９６、９７、９８、９９、９９．５若しくは１００重量％の水を含み得る；溶媒の残りは、例えば、極性若しくは有機溶媒であってよい。不溶性α−グルカン又はその不溶性カチオン性エーテルのケーキは、例えば、約１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、１０〜５０、１０〜４０、１０〜３０、１０〜２０、２０〜５０、２０〜４０、２０〜３０、３０〜５０、３０〜４０、４０〜５０、３０〜４５、３５〜４５、３７．５〜４２．５、３５〜４０若しくは４０〜４５重量％の不溶性α−グルカン又はその不溶性カチオン性エーテルを含み得る。そのようなケーキは、水及び不溶性α−グルカン（及び／又はその不溶性カチオン性エーテル）並びに任意選択的に上記に開示した他の成分（例えば、溶存糖、塩、緩衝剤及び／又は極性有機溶媒）の何れかを含み得るか又はそれらから成る可能性がある。本明細書のケーキは、典型的には、約０．５、０．１若しくは０．０５重量％（又は検出可能な量を含まない）の例えば充填剤（例えば、木材、パルプ若しくは任意の他の固体物質）又は可塑剤（例えば、グリセロール）等の任意の他の物質を含むか又は全く含まない。
【００６９】
不溶性α−グルカン粒子形成法は、（ｂ）約０．１〜１０ｍｍの平均サイズを備える第１組成物の粒子を提供する工程を含む。水は、典型的にはこの工程中には加えられない（即ち、第１組成物中に既に存在する水に加えて水は添加されない）。一部の態様における粒子を提供する工程は、第１組成物（例えば、不溶性α−グルカンのケーキ）を好適な粒子形成装置と、約０．１〜１０ｍｍの平均サイズを備える粒子が生成されるように接触させる工程を含み得る。この粒子形成工程は、任意選択的に造粒又は粒子状化であると特徴付けることができる。一部の態様における粒子形成工程は、所定の平均サイズ範囲の粒子が直接的に調製されるように実施され得る；これは、例えば、適切なサイズ寸法を備える好適な粒子形成装置を使用して実施することができる。追加して、若しくは又は、所定の平均サイズ範囲の粒子は、好適なサイズ選択ツール（例えば、スクリーン／ふるい）を粒子の集団に適用することによって調製され得る。工程（ｂ）において生成された平均粒子サイズは、例えば、上記に列挙したそれらのサイズ／範囲の何れかであってよい。粒子の形成は、任意選択的に、最初に切り刻まれ、粉々にされ、及び／又はさもなければケーキより小さい破片に壊されている不溶性α−グルカンのケーキを使用して実施され得る。
【００７０】
一部の態様における粒子形成装置は、例えば、シュレッダー、シェーバー、グレーター、タンブラー、スクリーン、ふるい、グラインダー又はミルであってよい。１つ以上の粒子形成装置は、要望通りに使用され得る。一部の態様における粒子形成装置は、それを通して第１組成物（例えば、不溶性α−グルカンのケーキ）が強制的に通過させられる複数の０．１ｍｍ〜１０ｍｍの通路を含む。そのような装置の例としては、スクリーン若しくはふるい（例えばグレーターのスクリーン若しくはふるい）が挙げられる。本明細書のスクリーン／ふるいの通路の寸法（例えば、メッシュサイズ）は、例えば、平均粒子サイズについて上記に列挙した寸法の何れかであってよい。例えば、スクリーン／ふるいは、おおよそ１、２、３、４、５、６、７、８、９及び／又は１０ｍｍの通路を有し得る。更に、例えば、スクリーン／ふるいは、下記の（所定の商業的に利用可能なスクリーン／ふるいに対応する）おおよその通路サイズ：９．５、８．０、６．７、６．４、６．３、５．７、５．７、４．８、４．０、３．４、２．８、２．４、２．０、１．７、１．４、１．２、１．０、０．８、０．７、０．６、０．５、０．４、０．３５、０．３、０．２５、０．２、０．１５若しくは０．１ｍｍを備えるメッシュを有し得る。更に例えば、スクリーン／ふるいは、下記の：３／８インチ、５／１６インチ、０．２６５インチ、１／４インチ、Ｎｏ．３  １／２、Ｎｏ．４、Ｎｏ．５、Ｎｏ．６、Ｎｏ．７、Ｎｏ．８、Ｎｏ．１０、Ｎｏ．１２、Ｎｏ．１４、Ｎｏ．１６、Ｎｏ．１８、Ｎｏ．２０、Ｎｏ．２５、Ｎｏ．３０、Ｎｏ．３５、Ｎｏ．４０、Ｎｏ．４５、Ｎｏ．５０、Ｎｏ．６０、Ｎｏ．７０、Ｎｏ．８０、Ｎｏ．１００若しくはＮｏ．１２０の米国ふるい／メッシュ表示を備えるメッシュを有し得る。本明細書のスクリーン／ふるいの通路は、典型的には正方形又は別の四角形の通路であるが、これらの通路は一部の態様では他の形状（例えば、円形／楕円形）であってよい。
【００７１】
本開示の所定の実施形態は、本明細書に記載した粒子を含む組成物を保管する及び／又は移動させるためのシステムに関する。そのようなシステムは、１つの容器であって、その容器の底部部分に配置された少なくとも１つの開閉可能な排出口を備える容器を含み、その容器の少なくとも一部分は排出口に向かってテーパ付けされており、組成物は容器内にあり、排出口が開放している場合は容器の外へ連続的に流出する容器を含む。
【００７２】
本明細書の容器は、典型的には、少なくとも約１００、２００、２５０、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１１００若しくは１２００ｋｇ又は少なくとも約１、２、５、１０、２０、２５、５０、７５若しくは１００（米国若しくはメートル）トンの本開示の不溶性α−グルカン粒子を保持／保管するために好適である（容積を有する）。本明細書の容器は、任意選択的に、その容器が使用される方法に任意選択的に依存して、商業的（市販のサイズの）容器、バルク容器、保管容器、輸送用若しくは貨物輸送用コンテナ等の用語として特徴付けることができる。容器は、ビン（例えば、剛性壁のビン）、ホッパー、サイロ、フレキシブル中間バルクコンテナ（ＦＩＢＣ）（別名、バルクバッグ；例えば、Ｓｕｐｅｒ  Ｓａｃｋｓ（商標））又は大量（例えば、少なくとも１００ｋｇ）の本明細書に開示した粒子を保管及び／又は輸送するために好適な他の容器であってよい。一部の態様では、容器の内壁（即ち、粒子と接触する表面）は、金属（例えば、ステンレス綱）又はプラスチック（容器の壁がプラスチックであるか又は容器がプラスチックライナーを有する）から製造され得る。一部の容器（例えば、ホッパー若しくはサイロ）は、例えば出口コーン（上向きの密閉先端を備える円錐形インサート）及び／又は出口の上方に支持されて出口と同心性である開放出口を備える内部漏斗（別名、重円錐構造）等の内部構成成分を含有し得る。
【００７３】
本明細書に開示したシステムは、任意選択的に、不溶性α−グルカン（若しくはその不溶性エーテル）粒子を生成及び／又は保管するための施設を含み得る；その中の容器は、任意選択的に、固定容器であると特徴付けることができる。そのようなシステムは、一部の例では、工場及び／又は保管施設であると見なすことができる。一部の実施形態では、システムは、本明細書に開示した粒子を輸送するための要素、例えばトラック（例えば、トラクタートレーラー）又は電車／鉄道車両を含み得る；その中の容器は、任意選択的に、輸送用又は貨物用コンテナであると特徴付けることができる。
【００７４】
本明細書の容器は、容器の底部部分に配置された少なくとも１つの開閉可能な排出口を有する。例えば、１、２、３、４個又はそれ以上の出口が存在してよい。典型的な実施形態では、排出口は容器の底側に配置されており、容器が単一出口を有する場合は、中心に配置される（２つ以上の出口を備える容器においては、それらは典型的には最長底部寸法の中心軸に沿って等間隔にある）。しかし、出口は、一部の態様では容器の底部部分から側面方向に突き出ることができる。本明細書の出口は、典型的には、円形、楕円形、正方形（又は別の四角形）又は三角形である。
【００７５】
容器の少なくとも一部分は、その１つ以上の排出口に向かってテーパ付けされている。テーパリングの水平断面積（仮想薄片）は、典型的には出口と同一形状であるが、必ずしも同一形状ではない。１つの排出口を備える容器は、任意選択的にその全垂直長さ若しくは大多数（例えば、≧８０又は９０％）のその垂直長さに沿ってテーパ付けされているか又はテーパリングは、容器の垂直長さのより小さい部分（例えば、≦８０、７０、６０、５０、４０、３０、２０又は１０％）を表す可能性がある。本明細書の単一出口の実施形態における出口の形状は、典型的には、容器の水平断面積（仮想薄片）の形状と同一である。一部の実施形態では、出口に向かうテーパリングは、垂直から少なくとも約６０、５５、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、２５〜５０、３０〜５０、２５〜４５若しくは３０〜４５度である。一部の態様におけるテーパリングは、（ｉ）単一傾斜（テーパの開始部から出口の端部までの垂直定数からの角度）であり得る、（ｉｉ）２つ以上の傾斜（垂直からのテーパリングのより大きな角度が垂直からのより小さな角度に出口に近付く各傾斜遷移部で出会う）を有し得るか又は（ｉｉｉ）徐々に増加する傾斜（出口に近付くより少ない急勾配からより大きな急勾配への傾斜曲線）を有し得る。
【００７６】
一部の態様における排出口の最小断面積は、約又は少なくとも約４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１４、１６、１８、２４、３０、３６、４２、４８、４〜４８、８〜４８、１０〜４８、４〜３６、８〜３６、１０〜３６、４〜２４、８〜２４、１０〜２４、４〜１８、８〜１８、１０〜１８、４〜１２、８〜１２、１０〜１２、４〜１０、８〜１０又は４〜８インチの範囲を有する。そのような範囲は、任意選択的に、それぞれ円形若しくは楕円形である出口を備える直径若しくは最長直径であると言うことができる。三角形、四角形又は他の非円形出口の範囲は、典型的には、出口断面積の最長寸法（又は内部寸法の何れか長い方）である。
【００７７】
一部の態様における排出口は、パイプ、チューブ、ホース、シュート、シリンダー又はダクト等の導管に操作可能に連結され得る。そのような操作可能に連結された導管は、容器の物理的部分（例えば、容器本体と溶接されているか又はさもなければ連続しているパイプ）又はさもなければ出口と連絡している別個の装置／機序であり得る。操作可能に連結された導管は、例えば、容器（ｃｏｎｔａｉｎｅｒ）から異なる容器（ｖｅｓｓｅｌ）への粒子の流出を方向付けるのに役立ち得る。操作可能に連結された導管の最小断面積の範囲は、典型的には、出口の最小断面積の範囲より小さくない。
【００７８】
本明細書の排出口は、例えば材料を容器内に入れるために使用される上部開口部若しくは上側開口部等の容器の任意の他の開口部又はワイヤー（例えば、電源コード）、機械的装置又は検出／監視装置等の補助機能の進入／位置決めを可能にする開口部と混同されてはならない。
【００７９】
本明細書の容器は、排出口が開放している場合に容器からの本明細書に開示した粒子の流出を促進する装置（「流動促進装置」）を有し得るか又は欠如し得る。一部の態様における容器は、（ｉ）流動促進装置を含んでいないか又は（ｉｉ）流動促進装置を含むが、この装置は排出口が開放している場合に粒子を容器から流出させるために能動的であることは必要とされない。流動促進装置は、バイブレーター、ジャイレーター、機械的攪拌器（例えば、スクリューフィーダー）、空気圧装置（例えば、空気大砲、空気枕）又は例えば、作動させられた場合に容器の排出口を通して粒子の流動を刺激する任意の他の装置若しくは作動を含み得る。流動促進装置は、任意選択的に、一部の実施形態では「ライブボトム」装置であると特徴付けることができる。流動促進装置は、容器の内側（例えば、本明細書に開示した粒子と直接接触している）又は外側（しかし連絡している）に配置することができる。一部の態様では、流動促進装置は、容器からの粒子の流動を開始させるために約１、２、３、４若しくは５秒間未満に渡り活性化／作動させることができ、その時間の後には流動が継続される（及び流動促進装置のスイッチはオフのままにされる）。本明細書に開示した粒子の連続的流動は、容器を完全に空にする又は例えば（流動終了後に）保持能力容積の多くとも５％、４％、３％、２％、１％、０．５％若しくは０．１％である粒子の体積しか容器内に残さない（流動促進装置の連続的作動を必要としない）途絶されない流動を意味する。本明細書に開示した粒子は、典型的には、粒子が容器から流出する間にブリッジ／アーチ、ラットホール及び／又は壁を形成しない；一部の態様では、そのような粒子構造は一時的に形成される可能性があるが、しかし流動が継続するにつれて容易に粉々になる。バルク材料のブリッジ／アーチは、出口の開口部を横断して発生するブリッジ／アーチ構造である。ラットホールは、バルク材料を出口に導く自立式円形構造である。本明細書の粒子の流動は、粒子材料の流動を促進する任意の構成成分／成分の添加を必要としない。本明細書の連続的流動は、道路若しくは鉄道輸送中の粒子沈降等の本明細書に開示した粒子を圧縮する活動の一様な追跡を実現することが企図されている。
【００８０】
本明細書に開示した粒子を保管及び／又は輸送する方法は、少なくとも、粒子を保持する容器を提供する工程、及び粒子が容器から継続的に流出することを可能にするための容器の排出口を開放する工程を含み得る。上記又は下記の実施例において記載した任意の特徴は、任意選択的にそのような方法を特徴付けることができる。
【００８１】
本開示の所定の実施形態は、本明細書に記載した粒子を含む組成物を輸送するためのシステムであって、導管に通して組成物を輸送するための導管及びガス（起動ガス）を含むシステムに関する。任意選択的に、システムの作動圧は、約５〜１０５絶対ｐｓｉである、及び／又は起動ガスは、空気若しくは不活性ガスである。このシステムは、例えば、本明細書に開示した容器を充填するために又は本明細書に開示した粒子をその保管及び／又は輸送後に容器内に移動させるために使用され得る。このシステムは、任意選択的に、空気圧式搬送システムとして特徴付けることができる。本明細書の導管は、パイプ、チューブ、ホース、シュート、シリンダー、ダクト又はその他の類似の装置／ハードウエアであり得る。
【００８２】
本明細書の空気圧式搬送システムの作動圧は、任意選択的に、大気圧（１４．７絶対ｐｓｉ）を除く約５〜１０５絶対ｐｓｉであり得る。そのような圧力は、導管内で適用することができ、それにより本明細書に開示した粒子を導管内に押したり／引いたりする（即ち、粒子を運搬する）ことができる。一部の態様では、作動圧は、それにより粒子の減圧気送を許容する大気圧より下（例えば、約５〜１０若しくは５〜１４絶対ｐｓｉ）であってよい。一部の態様では、作動圧は、陽圧流動を許容する、大気圧より上（例えば、約１５〜３５、１５〜３０、２０〜３５若しくは２０〜３０絶対ｐｓｉ）であってよい。作動圧は、例えば、真空、ブロワー又は圧縮空気装置を使用してシステムに提供され得る。本明細書の空気圧式搬送システムにおいて使用されたガスは、例えば、空気又は不活性ガスであってよい。本明細書の不活性ガスは、本明細書の不溶性α−グルカンと反応しない（又はさもなければそれを包含する反応を惹起しない）。好適な不活性ガスの例としては、窒素、二酸化炭素及びアルゴンが挙げられる。
【００８３】
本明細書に開示する組成物及び方法の非限定的な例には、下記が挙げられる：
１．  約０．１〜１０ｍｍの平均サイズを備える粒子を含む組成物であって、粒子が少なくとも（ｉ）約５０重量％〜９０重量％の水若しくは水溶液、及び（ｉｉ）約１０重量％〜５０重量％の不溶性α−グルカン又はその不溶性α−グルカンの不溶性カチオン性エーテルを含み、ここで不溶性α−グルカンは、α−１，３−グリコシド結合を含み、及び少なくとも１００の重量平均重合度（ＤＰｗ）を有する組成物。
２．  不溶性α−グルカンは、少なくとも５０％のα−１，３−グリコシド結合を有する、実施形態１に記載の組成物。
３．  粒子は、約３０重量％〜４５重量％の不溶性α−グルカン又はその不溶性カチオン性エーテルを含む、実施形態１又は２に記載の組成物。
４．  組成物は、粉末状である、実施形態１、２又は３に記載の組成物。
５．  不溶性α−グルカンは、少なくとも水、スクロース及び不溶性α−グルカンを合成するグルコシルトランスフェラーゼ酵素を含む反応組成物中で酵素的に生成される、実施形態１、２、３又は４に記載の組成物。
６．  粒子は、第１組成物を粒子形成装置と接触させる工程によって生成され、ここで第１組成物は少なくとも（ｉ）約５０重量％〜９０重量％の水若しくは水溶液、及び（ｉｉ）約１０重量％〜５０重量％の不溶性α−グルカンを含む、実施形態１、２、３、４又は５に記載の組成物。
７．  第１組成物は、不溶性α−グルカンのケーキである、実施形態６の組成物。
８．  粒子は、前記不溶性α−グルカンを含む、実施形態１、２、３、４、５、６又は７に記載の組成物。
９．  実施形態１〜８の何れかに記載の組成物を調製する方法であって：（ａ）少なくとも（ｉ）約５０重量％〜９０重量％の水若しくは水溶液、及び（ｉｉ）約１０重量％〜５０重量％の不溶性α−グルカン又はその不溶性α−グルカンの不溶性カチオン性エーテルを含む第１組成物を提供する工程、及び（ｂ）約０．１〜１０ｍｍの平均サイズを備える第１組成物の粒子を提供する工程を含む方法。
１０．  第１組成物は、不溶性α−グルカンのケーキである、実施形態９の方法。
１１．  工程（ｂ）は、第１組成物と粒子形成装置を接触させる工程であって、任意選択的に、ここで粒子形成装置は第１組成物が強制的に移動させられる複数の０．１ｍｍ〜１０ｍｍの通路を含み、及び任意選択的に更に、粒子形成装置はスクリーンを含む、実施形態９又は１０に記載の方法。
１２．  システムは、１つの容器であって、その容器の底部部分に配置された少なくとも１つの開閉可能な排出口を備える容器を含み、その容器の少なくとも一部分は排出口に向かってテーパ付けされており、組成物は容器内にあり、排出口が開放している場合は容器の外へ連続的に流出する容器を含む、実施形態１〜８の何れかに記載の組成物を保管及び／又は移動させるためのシステム。
１３．  容器は、ホッパー、ビン、サイロ又はバルクバッグである、実施形態１２に記載のシステム。
１４．  放出出口の最小断面積は少なくとも約４インチの範囲を有する、実施形態１２又は１３に記載のシステム。
１５．  容器の少なくとも一部分のテーパリングは、垂直から少なくとも６０度である、実施形態１２、１３又は１４に記載のシステム。
１６．  システムは、導管及びその導管に通して生成物を輸送するためのガスを含み、任意選択的にシステムの作動圧は約５〜１０５絶対ｐｓｉであり、及び任意選択的にガスは空気若しくは不活性ガスである、実施形態１〜８の何れかに記載の組成物を輸送するためのシステム。
【実施例】
【００８４】
以下の実施例において、本開示の実例を更に示す。これらの実施例は、本発明の特定の好ましい態様を示しているが、単に説明の目的でのみ示されていると理解されるべきである。上記の考察及びこれらの実施例から、当業者は、開示された実施形態の本質的な特徴を確認することができ、それらの精神及び範囲を逸脱することなく、開示された実施形態を様々な使用及び条件に適合させるために様々な変更及び修正を行うことができる。
【００８５】
実施例１
高含水量を備える粒状のα−グルカン調製物
この実施例では、高含水量を備える粒状のα−グルカン組成物を調製することについて記載する。特に、粒状のα−１，３−グルカン試料は、約２５若しくは４０重量％（即ち、それぞれ７５若しくは６０重量％の水を含む）の固体含量を用いて生成された。
【００８６】
不溶性α−１，３−グルカンを（高収率で）生成するアミノ酸改質Ｓ．サリバリウス（Ｓ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）グルコシルトランスフェラーゼ酵素を含む反応物を調製した。手短には、例えば、米国特許出願公開第２０１７／０１６６９３８号明細書、同第２０１７／０００２３３５号明細書及び同第２０１８／００７２９９８号明細書（米国特許出願第１５／７０２，８９３号明細書）（それらの全部は参照により本明細書に組み込まれる）に記載された方法に類似する方法で、水、スクロース、緩衝剤及びアミノ酸改質グルコシルトランスフェラーゼ酵素を含むグルカン合成反応を実施した。反応後、α−１，３−グルカン生成物（不溶性、約１００％のα−１，３結合、約１０００のＤＰｗ）の試料を濾過し、大部分のフルクトース及び他の残留糖を除去するために洗浄し、フィルタープレスを使用して約２５若しくは４０重量％の固体へ圧搾した。生じたグルカンフィルターケーキは、それぞれ約７５若しくは６０重量％の水及び約０．４重量％の糖を含有していた。各フィルターケーキを切り刻み、その後６ｍｍのグレーターを用いて平均径が約１／４インチの顆粒にグレーティングした。高含水量を有するにも関わらず、どちらの粒状のα−１，３−グルカン試料も、それぞれ粉末状の外観を有していた。
【００８７】
実施例２
粒状のα−グルカンの流動性
本実施例は、上記の実施例１において調製した粒状のα−１，３−グルカン試料の流動性の試験について記載する。
【００８８】
サイロ、ホッパー及び保管容器からのバルク固体材料の流動性は、その材料を保管庫から取り出して下流プロセスへ送達する容易さに重大な影響を及ぼし得る。流動性が不良な材料は、排出を促進するために極めて大きな努力を必要とする可能性があり、保管容器の排出開口部を完全に遮断するか又はフレキシブル中間バルクコンテナ（ＦＩＢＣ法、別名バルクバッグ又はＳｕｐｅｒ  Ｓａｃｋｓ（登録商標））からの排出を拒絶する可能性がある。バルク固体の機械的特性（凝集強さ、バルク密度及びプロセス装置の壁面に対する摩擦）は、被験物に適用される圧縮力の量に伴って変動するであろう。事実上全てのバルク材料は、圧縮力の増大に伴って凝集強さを獲得し、圧縮状態で保持された場合、多くは長期間に渡って更に強度を獲得するであろう。バルク密度は、圧縮力に伴って増加する。プロセス装置に対する摩擦係数は、一定値であり得るか又は圧縮力が増加すると変動する可能性がある。
【００８９】
本明細書で参照により組み込まれるＪｅｎｉｋｅ（Ｓｔｏｒａｇｅ  ａｎｄ  Ｆｌｏｗ  ｏｆ  Ｓｏｌｉｄｓ，Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  １２３  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｕｔａｈ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｓｔａｔｉｏｎ，１９６４）は、凝集強さ、バルク密度及び壁面摩擦の測定値をホッパーからのバルク材料の易流動性の排出のために必要な出口サイズの推定値に変換させるための方法を提供している。凝集強さは、重力が（バルク密度からの）流動を促進する間の流動を妨害するように作用する。壁面摩擦は、ホッパー内の流動パターンを決定する。（例えば、この考察のために、ホッパーは、出口開口部に向かって収束する断面積を有する剛性容器であってよい。伝統的なサイロは、典型的には、底部ではホッパー区間及びその上方にある直線壁の垂直区間を有する）。流動特性が不良な材料は、より大きなホッパー出口を必要とするが、時々は強度に必要とするであろう。Ｊｅｎｉｋｅの計算は、ホッパーの形状、サイズ及び充填レベル並びにその上方の任意の垂直伸張部に対応する圧縮応力でのバルク固体の特性の測定を必要とする。
【００９０】
Ｊｅｎｉｋｅは、ホッパーからバルク固体が排出される場合の２つの考えられる流動パターンのタイプについて記載している。「マスフロー（ｍａｓｓ  ｆｌｏｗ）」では、出口から任意の材料が引き出される場合は常にホッパーの全含量が動作中である。バルク固体は、壁面に沿って滑る。「ファンネルフロー（ｆｕｎｎｅｌ  ｆｌｏｗ）」では、ホッパーの壁面に対するバルク固体の摩擦は、その領域内での流動を防止する。その代わりに、バルク固体はホッパーの中心部分に向かって自然に滑り落ちる。流動パターンによってバルク固体に負荷される応力のために、マスフローホッパーは、ファンネルフローホッパーにおいて使用された出口よりも感知できるほど小さい出口から排出するであろう。マスフロー型ホッパー内では、出口が小さ過ぎる場合には、バルク固体が出口の開口部を超えるアーチ形を許容して流動閉塞が発生し得る。ファンネルフローホッパー内では、流動パターンはラットホール又はパイピングとして公知の異なる種類の封鎖をもたらし得る。ラットホールは、ホッパーの出口を取り囲んでいるバルク固体の自立式円形構造である。マスフローパターン及びファンネルフローパターンの両方について、ホッパーの出口が、アーチ又はラットホール（それぞれ）が虚脱することを引き起こすために十分に大きい場合に、排出が発生するであろう。しかし、流動が不良な固体については、必要とされる出口寸法は、非現実的なほど大きい可能性がある。実際に、アーチ形閉塞物を防止することと比較して、ラットホール閉塞物を防止するためには、はるかに大きなホッパー出口の使用が必要とされる。従って、ラットホール化の回避は、粒子状生成物の開発業者及びプロセス設計者にとって重要な問題である。
【００９１】
ホッパー区間の壁面に対するバルク固体の摩擦は、ホッパー壁面の傾斜と組み合わせると、固体が壁面に沿って滑る（マスフロー）か又は壁面の領域内で停滞したままである（ファンネルフロー）かを決定する。マスフローは、ほぼ常に望ましいが、必要とされる垂直高さのためにホッパーの構造を作成するには非現実的である程急勾配であるホッパー壁面を必要とする場合がある。そびえ立つ壁面を備えるホッパーは、可動式装置においても、及び更により浅いデザインの周囲に設計されている可能性がある現行のバルク取り扱いシステムへの組み込みにおいても非現実的である。
【００９２】
Ｊｅｎｉｋｅの手技は、最初は特定のバルク固体のための、重要な計算結果である必要なホッパーの傾斜角及び出口寸法を備える、ビスポーク型ホッパーを設計するための手段であることが意図された。しかし、様々なホッパーにおいて使用され得るバルク固体の流動性を評価する場合又は２つのバルク固体の流動性を相互に比較する場合、定義された形状及び充填レベルの仮想サイロ内で必要とされるであろう臨界出口直径を決定することが好都合であろう。臨界直径より大きな出口を備えるホッパーは、排出するであろう。この決定は、マスフローサイロ（その中ではアーチ形を克服するための出口直径が計算される）又はそのために臨界ラットホール直径が計算されるファンネルフローサイロのために実施され得る。各場合において、出口直径の単位は、比例してより不良な流動性を示すより大きな直径を必要とする出口を備えて、線形である。Ｊｅｎｉｋｅ法における理論的限界のために、試験及び計算は、実際のサイロ直径を超えるラットホール直径を示す可能性がある。しかし、これらの結果は、比較目的のためには依然として有用である。実際に、実行する上で、臨界ラットホール直径はサイロ直径に近付くか又は超える場合は、重力流は不可能となる可能性があり、大規模外部流動促進装置（例えば、振動放出メカニズム）が必要とされるであろう。
【００９３】
Ｊｅｎｉｋｅ手技は、伝統的には、参照により本明細書に組み込まれるＡＳＴＭ規格Ｄ６１２８−１６若しくはＤ６７７３−１６に記載されたもの等の二軸式剪断セルから得られる凝集強さ及びバルク密度の数値を利用する。これらの試験からの結果は、引き続いてＪｅｎｉｋｅ法を使用して解釈される。しかし、臨界ラットホール直径の推定値は、コンピューター制御Ｊｏｈａｎｓｏｎ  Ｈａｎｇ−Ｕｐ  Ｉｎｄｉｃｉｚｅｒ（登録商標）（Ｂｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｕｌｋ  Ｓｏｌｉｄｓ  Ｈａｎｄｌｉｎｇ  １４：１６４−１７１；参照により本明細書に組み込まれる）によってより能率的に得ることができる。この装置は、使用者が仮想サイロ直径を入力することを可能にし、本システムは、必要とされる試験条件を計算し、試験を遂行する。結果は、仮想サイロについての臨界ラットホール直径である。Ｊｏｈａｎｓｏｎ装置では、試料は、浅い垂直の円筒形の型内に閉じ込められ、その後にサイロ内で遭遇するであろう負荷に対応する下向きの応力で圧縮される。圧縮後、型の底部の中心部分から二重底が取り除かれ、圧縮試料を支持する環状レッジを残す。プローブは次に、シリンダー内に上部から挿入される。プローブの下方への運動は、圧縮試料のプラグを型の底部にある穴を通して推し進める。型の底部からプラグを押し出すために必要な力が測定される。試料の剪断強さは、プローブの寸法及び力の測定から推定し、ラットホール直径を計算するために使用することができる。
【００９４】
２種の固体含量（上記の実施例１で生成した４０若しくは２５重量％、サイズが４ｍｍを超える粒子は除去されている）での粒状のα−１，３−グルカンについての流動性試験結果は、下記の表１に表示した。試験結果は、更に、流動特性が不良である便宜的な参照材料である１０倍に粉末化した糖（即ち、粉砂糖）についても表示した（表１）。９６ｍＬ（最大容積）試験セルを備えるＪｏｈａｎｓｏｎ  Ｈａｎｇ−ｕｐ  Ｉｎｄｉｃｉｚｅｒ（登録商標）を使用して、各試験は、周囲温度（約７０°Ｆ）で研究室規模で短時間圧縮した各試料を用いて実施し、次に（「即時に」）試験したか又は試験前の９６０分間までに渡り適用した圧縮力を用いて実施した。試験条件は、直径が１０フィートである典型的なサイロをシミュレートした。
【００９５】
【表１】
2020536995.tif 000003
【００９６】
表１内のデータは、粒状のα−１，３−グルカンの４０重量％の固体形が不良であると考えられるが、粉砂糖よりは相当に良好である初期（「即時」）流動性を有することを示している。しかし、６０分間以上に渡り負荷下で粒状の４０重量％のα−１，３−グルカンの保管後、臨界ラットホール直径は劇的に増大し、負荷下の追加の時間は更に臨界ラットホール直径の増加を生じさせた。形成されたラットホールのサイズを前提にすると、表１に記載の結果は、商業的サイズのホッパー又は他の大きな保管容器からの粒状のα−１，３−グルカンの連続的流動を許容するためには、全体として大きな出口直径（例えば、少なくとも約１４フィート）が必要になるであろうことを示唆している。
【００９７】
４ｍｍ以下の粒子サイズを備える粒状の４０重量％及び２５重量％のα−１，３−グルカンのサラサラとしたバルク密度は、それぞれ約３７及び３２ポンド／立方フィートであると測定された。約１５〜２０、６５〜７０、２６０〜２６５若しくは５２０〜５２５ポンド／立方フィートの圧縮後のこれらの４０及び２５重量％の材料のバルク密度はそれぞれ、４０重量％の材料については約３７、３８、４０及び４２であり、２５重量％の材料については約３３、３５、３８及び４２であった。
【００９８】
先行する試験結果（表１）に基づくと、２５〜４０重量％の固体グルカンにおけるホッパー排出には厳しい困難が予想された。予想される困難に適応するために、周囲温度（約７０°Ｆ）での試験は、Ｍｅｔａｌｆａｂ  Ｐｏｓｉｂｉｎ（登録商標）（Ｍｅｔａｌｆａｂ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  Ｈａｎｄｌｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｖｅｒｎｏｎ，ＮＪ）として公知の積極的なホッパー排出装置を用いて実施した。Ｐｏｓｉｂｉｎ（登録商標）は、全直径回転式ライブボトム排出装置が装備されたポータブルホッパーである。全ホッパー区間は、スイッチをオン及びオフできる電動式偏心振動器に接続されている。ビンの内径は僅かに３６インチより小さく、その側壁の高さはおおよそ５３インチであり、約３５立方フィートの作業能率を提供する。回転式ライブボトムを用いた場合に典型的であるように、ビンの内側にはビン出口の数インチ上方に円錐形のバッフルプレートが存在した。バッフルの下方には、直径が約１０インチ（０．８フィート）の出口があった。ホッパーの壁面及び円錐形のバッフルプレートは、それらが重力によって排出される場合はファンネルフローパターンが予想されるように、極めて浅い傾斜を有していた。
【００９９】
Ｐｏｓｉｂｉｎ（登録商標）の出口は、機械的に閉塞され、その後実施例１で調製したサラサラとした粒状の４０重量％のα−１，３−グルカンをビンに負荷した（粒子は除去しなかった）。追加の圧縮応力（約３０ポンド／立方フィート）（即ち、グルカン材料自体の重量によって既に存在している圧縮応力に追加して）は、ビンの底部部分における総圧縮応力が約１５０〜２００ポンド／立方フィートであるように、負荷されたグルカンの上部にコンクリートブロックを積み重ねることによって適用した。重りは、数時間までの期間に渡り適用した；この圧縮からの粒状のα−グルカンの密度は、約４０ポンド／立方フィートであると推定された。指定時間後、コンクリートの重りを取り除き、その機械的停止具を取り除くことによって出口を開放した。数回のトライアルのそれぞれにおいて、ビンからのグルカンの重力排出は、振動式排出機序のスイッチを決して入れない場合でさえ、出口を開放すると直ちに始まった。グルカンは、ビンが空になるまでビンから流出し続けた。この結果は、ビンの直径０．８フィートの出口は上記の検査室規模の試験結果（表１）から示唆された流動のために必要であると予想された１４フィート（又はそれ以上）の出口よりはるかに小さかったので、完全に予想外であった。類似のＰｏｓｉｂｉｎ（登録商標）流動試験の結果は、（６ｍｍのグレーターの代わりに）３ｍｍのグレーターを使用して調製されていた４０重量％の粒状のα−１，３−グルカンを使用して得た。
【０１００】
別の試験では、ビンに４０重量％の粒状のα−１，３−グルカンを再装填し、重りを用いて再負荷し、一晩（おおよそ１５時間）放置した。翌朝、出口の機械的閉塞物をスライドして外したが、ビンは即時には排出を開始しなかった。振動器のモーターに約２秒間電圧を加えると、その後流動が直ちに開始され、（振動式排出メカニズムにそれ以上電圧を加えなくても）ビンが空になるまで持続した。
【０１０１】
ホッパーの振動式ライブボトム（排出メカニズム）は、振動がバルク材料の圧縮及びその後の排出問題を引き起こし得るので、ビンの出口を閉鎖したまま作動させてはならない。高速道路輸送において発生し得る振動のシミュレーションとして、ライブボトムを使用してビン内のグルカンの滞留量を振動させた。この試験では、Ｐｏｓｉｂｉｎ（登録商標）に４０重量％の粒状のα−１，３−グルカン（しかし追加の重量は負荷しなかった）を充填し、その後ライブボトムを連続２分間に渡り作動させ、その後スにイッチを切ったが、その全ての間、ビンの出口は機械的に閉塞させたままであった。作業の停止後、機械的ブロックを取り外すと、流動を開始させるための振動器の使用を必要とせずにビンは完全に排出した。従って、本明細書の粒状のグルカンは、典型的にはそれらの輸送後に他のタイプのバルク材料に影響を及ぼす流動性の問題を作り出すことなく容器内で輸送され得ることが企図されている。
【０１０２】
ＦＩＢＣ（バルクバッグ）法は、パレット上の単一包装内の約１トンまでのバルク材料を輸送するための経済的方法であり得る。バッグは、フレキシブルな壁面を有し、底部出口注ぎ口を通して排出するためにフレームから吊り下げられている。バッグの底部は、ほぼフラットである。従って、排出流動パターンは、ファンネルフローである。生成物は、数カ月間待機した後の使用のためにバッグ内に滞留することができる。特にハイスループット作動において、排出を促進するためにバッグを機械的に振動させるか又は揉み出すことは不都合である。しかし、上記の検査室規模の流動性試験に基づくと（表１）、粒状の２５〜４０重量％のα−１，３−グルカンが充填されたバルクバッグを排出させる際の困難が予想された。
【０１０３】
直径が１９インチ（１．６フィート）の出口注ぎ口を備える２つのバルクバッグを試験した。これらのバッグは僅かに円錐形の底部を有していたので、それらがパレットから持ち上げられた場合は、底部は浅いホッパー形を形成した。これらのバッグには４０重量％の粒状のα−１，３−グルカンを充填し、その後に４８時間保管してから排出試験を実施した。排出させるために、バッグは、フォークリフト付トラックを用いてビンの上方に吊り下げた。その後、各バッグの注ぎ口を開放すると、その後にバッグは迅速に排出した。バッグは、バッグからの粒状のグルカンの大部分の流動を促進するために刺激又は任意の他の形態の撹拌を必要としなかった。この空にする工程後、少量の残留材料は、少し振動させると各バッグの隅から容易に排出された。グルカンの流動によるこの容易な除去は、上記で考察した理由のために予想外であった。
【０１０４】
実施例３
粒状のカチオン性α−グルカンエーテルの流動性
この実施例は、粒状のカチオン性エーテル誘導体化α−１，３−グルカンの流動性の試験について記載している。
【０１０５】
（上記の実施例１に記載したものに類似するグルコシルトランスフェラーゼ反応において生成された）不溶性α−１，３−グルカンは、３−クロロ−２−ヒドロキシプロピル−トリメチルアンモニウムクロリドを使用してエーテル誘導体化した。生じたカチオン性エーテル誘導体であるトリメチルアンモニウムヒドロキシプロピルα−１，３−グルカンは、水不溶性であり、０．１５未満の置換度（ＤｏＳ）を有していた。０．３未満のＤｏＳを有し得る不溶性カチオン性α−１，３−グルカンエーテルは、例えば、米国特許出願公開第２０１６／０３１１９３５号明細書（参照により本明細書に組み込まれる）の開示に従い、それに従ってα−１，３−グルカン対カチオン性エーテル化剤の比率を調整することによって調製した。
【０１０６】
カチオン性α−１，３−グルカンエーテル試料を水で洗浄し、その後に上記の実施例１に記載した手順に類似する手順に従って粒状化した。各粒状試料は、粉末状の外観及び３８〜４０重量％の固体含量を有していた。粒子サイズは、実施例１で生成した非誘導体化α−１，３−グルカン粒子の粒子サイズと同様であった。
【０１０７】
流動性の評価は、粒状のカチオン性α−１，３−グルカン試料のそれぞれについて実施した。実施例２におけるような自動化Ｊｏｈａｎｓｏｎ  Ｈａｎｇ−Ｕｐ  Ｉｎｄｉｃｉｚｅｒ（登録商標）を使用する代わりに、ポータブル試験スタンド（ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｋｒａａｎ  ａｎｄ  Ｓｃａｒｌｅｔｔ，  Ｐｒｏｃ．ｏｆ  ＰＡＲＴＥＣ  ９５  ａｎｄ  ３ｒｄ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ−Ｓｔｏｒａｇｅ  ａｎｄ  Ｆｌｏｗ  ｏｆ  Ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ  Ｓｏｌｉｄｓ，Ｎｕｒｅｍｂｅｒｇ，１９９５，ｐｐ．５７−６８；参照により本明細書に組み込まれる）を使用して、圧縮応力及び圧縮応力が印加される時間の量の関数としての圧縮グルカンエーテル試料の剪断強さを測定した。Ｊｏｈａｎｓｏｎ装置を用いた場合と同様に、下向きの応力を浅い円筒形の型内に密閉した試料に印加した。しかし、ポータブル試験機とともに、下向きの応力を直径が４フィートのサイロ又はホッパー内で遭遇するであろう応力に対応する鉄の重りを用いて印加した。ある期間の後、型の底部の中心部分と同様に、重りを取り除いた。型の底部を通して圧縮カチオン性グルカンエーテル試料のプラグを押すために必要な（グラム重量で測定した）力を次に測定した。類似の試験材料について、ポータブル試験機において測定した剪断力は、Ｊｏｈａｎｓｏｎ装置からのラットホール指数と直接的に相関している。
【０１０８】
粒状のカチオン性グルカンの試料を１、６０、３６０及び９００分間の圧縮時間について試験した。繰り返し試験（通常は試験期間それぞれについて５試料）を実施した。比較として、実施例２において試験した粒状の非誘導体化α−１，３−グルカン生成物を同一条件下で試験した。表２は、各試験について（グラム重量で測定した）平均剪断強さを示している。
【０１０９】
【表２】
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【０１１０】
ポータブルの試験機は、固定具内の試料のプラグの重量よりも少ない剪断力を決定することはできない。この場合には、プラグの重量は、おおよそ２６ｇである。非誘導体化α−１，３−グルカンを試験する際には、各試料は型の底部の中心部分が取り除かれた時点に固定具の底部から落下するので、従ってプローブからの力は必要とされなかった。
【０１１１】
表２は、粒状のカチオン性α−１，３−グルカンエーテル試料が、類似の圧縮時間後に粒状の非誘導体化α−１，３−グルカン試料よりも実質的に高い剪断強さを有したことを示している。実施例２において考察したように、表１に記載のデータは、粒状の非誘導体化α−１，３−グルカンが取り扱い時に実質的なラットホール化問題を経験するであろうことを予想させるであろう。結果として、粒状のカチオン性α−１，３−グルカンを取り扱う場合の一層より深刻なラットホール化問題が予想されるであろう。しかし驚くべきことに、カチオン性α−１，３−グルカンエーテルは、感知できる困難を伴わずに一連の取り扱い及び加工処理装置を通して加工処理できるであろうことが見出された。これらの装置は、ベルトコンベヤー、スクリューコンベヤー、スクリューフィーダー及びフライス盤を含んでいた。加工処理順序の１つの部分では、カチオン性α−１，３−グルカンエーテルは、幅７インチ、長さ１２インチの長方形の出口を備える上部が３フィート×３フィート及び高さ２７インチであるピラミッド型ホッパー内に装填された。この形状を備えるホッパーは、ファンネルフロー排出パターンを有するであろう。出口の下方の標準型スクリューコンベヤーはホッパーに排出した。このホッパー内のカチオン性α−１，３−グルカンエーテルの何らかのラットホール化を克服するには、剪断強さデータ（表２）が深刻な流動問題が存在する可能性を予測したにもかかわらず、極めて僅かな介入しか必要としなかった。
【国際調査報告】
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