(57)【要約】生体材料マトリックス及びポリマー材料を含む止血用具であって、ポリマー材料を溶媒と組み合わせること、ポリマー材料と溶媒との組合せを生体材料に適用すること、溶媒を除去すること、及びポリマー材料の有効層を生体材料に保持して、創傷の処置における止血用具の性能を強化することによって作成される、止血用具。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体材料のマトリックスとポリマー材料とを含む止血スポンジであって、
前記ポリマー材料が前記生体材料の少なくとも１つの表面を一様にコーティングしており、前記用具が熱応力によってもたらされる分解物を実質的に含まない、止血スポンジ。
【請求項２】
前記生体材料が、コラーゲン、ゼラチン、フィブリン、酸化セルロース、多糖、キトサン、及びそれらの誘導体からなる群から選択される、請求項１に記載の止血スポンジ。
【請求項３】
前記生体材料がコラーゲンである、請求項２に記載の止血スポンジ。
【請求項４】
前記ポリマー材料が反応性ポリエチレングリコールである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の止血スポンジ。
【請求項５】
前記ポリマー材料が単一の親水性ポリマー架橋剤である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の止血スポンジ。
【請求項６】
止血用具を製造する方法であって、
生体材料マトリックスの多孔質スポンジを用意するステップ、
懸濁液、溶液、又は粉末の形態のポリマー材料を用意するステップ、
前記ポリマー材料を溶媒と組み合わせるステップ、
前記ポリマー材料と前記溶媒との組合せを、前記生体材料マトリックスの少なくとも１つの表面と接触させるステップ、
前記溶媒を除去するステップ、及び
前記ポリマー材料のコーティングを前記生体材料マトリックスに保持するステップ
を含む、方法。
【請求項７】
前記ポリマー材料が反応性ポリエチレングリコールである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記溶媒が非プロトン性有機溶媒である、請求項６又は７に記載の方法。
【請求項９】
前記溶媒が酸性プロトン性溶媒である、請求項６又は７に記載の方法。
【請求項１０】
印刷、噴霧、塗装、膜接着、及びそれらの組合せからなる群から選択される方法によって、前記ポリマー材料と前記溶媒との前記組合せを前記生体材料マトリックスと接触させる、請求項６〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記ポリマー材料と前記溶媒との前記組合せがガスアシスト噴霧器によって前記生体材料マトリックスに噴霧される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記生体材料マトリックスに保持されている前記ポリマー材料の前記コーティングが２〜２０ｍｇ／ｃｍ２の厚さを有する、請求項６〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
生体材料マトリックスとポリマー材料とを含む止血用具であって、
前記ポリマー材料を溶媒と組み合わせるステップ、
前記ポリマー材料と前記溶媒とを前記生体材料マトリックスに適用するステップ、及び
その後、前記溶媒を除去するステップ
を経て、前記ポリマー材料が前記生体材料マトリックスと安定に結合している、止血用具。
【請求項１４】
前記ポリマー材料が反応性ポリエチレングリコールである、請求項１３に記載の止血用具。
【請求項１５】
前記溶媒が非プロトン性有機溶媒である、請求項１３又は１４に記載の止血用具。
【請求項１６】
前記溶媒が酸性プロトン性溶媒である、請求項１３又は１４に記載の止血用具。
【請求項１７】
印刷、噴霧、塗装、膜接着、及びそれらの組合せからなる群から選択される方法によって、前記ポリマー材料と前記溶媒とが適用される、請求項１３〜１６のいずれか一項に記載の止血用具。
【請求項１８】
前記ポリマー材料と前記溶媒とがガスアシスト噴霧器によって前記生体材料マトリックスに噴霧される、請求項１７に記載の止血用具。
【請求項１９】
前記ポリマー材料が２〜２０ｍｇ／ｃｍ２の厚さを有する、請求項１３〜１８のいずれか一項に記載の止血用具。
【請求項２０】
不純物を実質的に含まない、請求項１３〜１９のいずれか一項に記載の止血用具。
【発明の詳細な説明】
【背景】
【０００１】
止血パッドは、創傷治癒を改善するために又は出血を止めるために長年使用されてきた。止血パッドは、生物学的糊又は組織シーラントとして作用する物質の中でも、コラーゲン、ゼラチン、又は酸化セルロースなどの生物学的材料から構成することができる。コラーゲンパッドに関して、止血の作用機序は、血小板の凝集及び活性化、活性化された血小板の表面でのトロンビンの形成、並びにトロンビンのフィブリノーゲンに対する触媒作用による止血性フィブリン凝塊の形成に基づく。止血パッド又はシートの止血作用を改善するために、パッドに止血の因子を含めることができる。例えば、フィブリノーゲン及び／又は第ＸＩＩＩ因子を含めることができる。フィブリンを形成するフィブリノーゲン、及び活性な第ＸＩＩＩａ因子（フィブリンに架橋して安定なフィブリン凝塊を得る）を形成する第ＸＩＩＩ因子に対して酵素的に作用するトロンビンも、パッドに、又は独立した成分として含めることができる。
【０００２】
米国特許第８，７０３，１７０号は、性能を改善するために追加のポリマーでコーティングされた又は追加のポリマーに含浸された止血性生体材料を記載している。これらの生体材料は、創傷に適用されたときに血塊をいっそう強固にするためのマトリックスを実現する三次元構造を有する、柔軟なコラーゲンパッドを含む。パッドは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ＮＨＳ−ＰＥＧ、又は別のＰＥＧ誘導体でコーティング又はこれらに含浸させることができる。パッドは、現在の技術水準において公知のもの又は市場で入手可能なもの、例えばヘモパッチ治癒用止血剤（Ｈｅｍｏｐａｔｃｈ  Ｈｅａｌｉｎｇ  Ｈｅｍｏｓｔａｔ）と同様に作用する。
【０００３】
国際公開第２００４０２８４０４号は、乾燥状態で提供される、合成コラーゲン又はゼラチン及び求電子架橋剤から構成される組織シーラントを記載している。この組成物を適切なｐＨで湿らせると、２つの成分間の反応が生じ、閉鎖性を有するゲルが形成される。そのようなシーラントは、現在の技術水準で公知の又は市場で入手可能な２成分シーラント（複数の求電子基を有する試薬及び複数の求核基を有する試薬から構成される）、例えばコシール（Ｃｏｓｅａｌ）（商標）と本質的に同様に作用する。一実施形態において、シーラントの２成分（求電子架橋剤及び合成コラーゲン／ゼラチン）は生体材料にコーティングされる。
【０００４】
国際公開第９７／３７６９４号は、コラーゲン及び均一に分布した血液凝固のアクチベーター又はプロアクチベーターに基づく止血スポンジを開示している。止血スポンジは、風乾又は凍結乾燥され得る乾燥形態で提供される。しかしながら、なお少なくとも２％の含水量を有する。
【０００５】
米国特許第４，６００，５７４号において、フィブリノーゲン及び第ＸＩＩＩ因子と組み合わされたコラーゲンに基づく組織接着剤が記載されている。この材料はすぐに使用可能な凍結乾燥形態で提供される。フィブリノーゲン及び第ＸＩＩＩ因子は、平坦なコラーゲン材料にフィブリノーゲン及び第ＸＩＩＩ因子を含む溶液を含浸させ、前記材料を凍結乾燥させることによって、コラーゲンと組み合わされる。
【０００６】
米国特許第５，６１４，５８７号は、多官能的に活性化された合成親水性ポリマーを使用して架橋したコラーゲンを含む生体接着性組成物、並びにそのような組成物を使用して第１の表面と第２の表面との間の接着を行う方法であって、第１及び第２の表面のうちの少なくとも１つが天然の組織表面でもよい、方法を論じている。
【０００７】
機械的に破壊されて物性が変化したコラーゲン含有組成物が米国特許第５，４２８，０２４号、同第５，３５２，７１５号、及び同第５，２０４，３８２号に記載されている。これらの特許は、一般には原繊維性及び不溶性コラーゲンに関する。注射用コラーゲン組成物が米国特許第４，８０３，０７５号に記載されている。注射用骨／軟骨組成物が米国特許第５，５１６，５３２号に記載されている。水中に懸濁することができ、特定の表面電荷密度を有する５μｍ〜８５０μｍの範囲の大きさの乾燥粒子を含むコラーゲンに基づく送達マトリックスが国際公開第９６／３９１５９号に記載されている。１μｍ〜５０μｍの粒径を有し、創傷被覆材を形成するエアロゾル噴霧剤として有用なコラーゲン調製物が米国特許第５，１９６，１８５号に記載されている。コラーゲン組成物を記載している他の特許としては、米国特許第５，６７２，３３６号、及び同第５，３５６，６１４号が挙げられる。
【概要】
【０００８】
本明細書に開示される、スポンジ、パッチ、パッド、シーラントを含めた例示的な止血用具及びそのような用具を製造する方法は、出血の停止及び創傷治癒に特に好適である。止血用具及び外科用シーラントはまた、従来の外科技術による出血又は他の体液若しくは空気の漏出の制御が有効ではない又は実用的ではない処置にも有用である。
【０００９】
創傷治癒のための繊維状生体材料のこれまでのパッド、特にコラーゲンパッドは、止血障害を有する状態（例えば、ヘパリン化後）では止血を誘導することができなかったということが見出されている。本発明による用具は止血を改善する。さらに、本発明による用具は、創傷に適用されたとき、組織への強い密着を示す。本発明の用具は、創傷への適用後、改善された膨潤挙動、すなわち低膨潤をさらに示す。
【００１０】
さらなる態様は、そのようなスポンジ又は用具を製造する方法に関する。
【００１１】
本発明は、本発明に従って製造される止血用具を含む。
【００１２】
一態様において、本発明の実施形態は止血パッドを包含する。例示的なパッドは、生体材料のマトリックス及び反応基を有する１つの親水性ポリマー成分を含み得る。生体材料及びポリマー成分は、ポリマー成分の反応性が保持されるように、互いに結合することができる。生体材料及びポリマー成分は、ポリマー成分が生体材料の前記マトリックスの表面にコーティングされるように、若しくはマトリックスにポリマー材料を含浸させるように、又はその両方となるように結合することができる。ポリマー材料は、溶媒と組み合わせて、生体材料の表面に噴霧又は印刷することができる。溶媒は次いで除去され、ポリマー材料でコーティングされた生体材料が残る。生体材料は、コラーゲン、ゼラチン、フィブリン、多糖、例えばキトサン、合成生分解性生体材料、例えばポリ乳酸又はポリグリコール酸、及びそれらの誘導体を含み得る。親水性ポリマーは、ポリアルキレンオキシドポリマーであり得、特に好ましいのは、ＰＥＧを含むポリマー、例えば多求電子ポリアルキレンオキシドポリマー、例えば多求電子ＰＥＧ、例えばペンタエリスリトールポリ（エチレングリコール）エーテルテトラスクシンイミジルグルタレートである。場合によっては、生体材料はコラーゲンでもよく、ポリマー成分はペンタエリスリトールポリ（エチレングリコール）エーテルテトラスクシンイミジルグルタレートでもよい。ポリマー形態は、コラーゲンにコーティングすることができる。場合によっては、生体材料はコラーゲンであり、ポリマー成分はペンタエリスリトールポリ（エチレングリコール）エーテルテトラスクシンイミジルグルタレートであり、ポリマー形態はコラーゲンに含浸される。
【００１３】
一実施形態において、生体材料はＰＥＧ又はその誘導体でコーティングされる。ＰＥＧは、ＰＥＧを溶解する融点の低い非反応性溶媒と組み合わされ、次いで溶媒とＰＥＧとの組合せが、一様な又はパターニングされたコーティングでマトリックスの表面に噴霧又は印刷される。溶媒は次いで除去され、ＰＥＧ層が残る。一実施形態において、溶媒は低圧又は低温蒸発によって除去される。
【００１４】
一実施形態において、熱処理は用具の製造に必要とされない。
【００１５】
開示される止血用具及び製造方法の追加の特徴及び利点は、以下の詳細な説明に記載され、また詳細な説明から明らかになるであろう。
【００１６】
当業者は、以下に開示される全ての実施形態は特定の実施形態の例であるが、一般的発明概念を必ずしも限定しないということを容易に理解するであろう。さらに、全ての例示的な実施形態は、相互に排他的でない場合、任意の組合せの本発明の全ての態様及び実施形態に基づいて読み取ることができる。当業者によって認識される全ての均等物又は明らかな変更若しくは修正は本発明に含まれる。
【本発明の詳細な説明】
【００１７】
以下の略語が使用される。
ＣＯＨ１０２  ペンタエリスリトールポリ（エチレングリコール）エーテルテトラスクシンイミジルグルタレート
ＣＯＨ２０６  ペンタエリスリトールポリ（エチレングリコール）エーテルテトラチオール
ＥｔＯＨ  エタノール
ＰＥＧ  ポリエチレングリコール
ＰＥＴ  ポリエチレンテレフタレート
【００１８】
本発明の目的は、生体材料、及び生体材料に適用されるポリマー材料又は成分を備える止血用具である。生体材料は繊維状生体材料であってもよい。用具は、ポリマー材料を溶媒と組み合わせること、ポリマー材料と溶媒とを生体材料に適用すること、及び溶媒を除去して、ポリマー材料のコーティングを生体材料に残すことによって作製される。
【００１９】
生体材料は、コラーゲン、タンパク質、生体ポリマー、又は多糖であることが好ましい。生体材料は、コラーゲン、ゼラチン、フィブリン、酸化セルロース、多糖、例えばキトサン、及びその誘導体からなる群から選択される生体材料であることが好ましく、コラーゲン及びキトサンからなる群から選択される生体材料であることがより好ましく、コラーゲンであることが特に好ましい。
【００２０】
用具は、損傷部位に適用されたときに体液を吸収することができる生体材料の多孔質ネットワークである。さらに、用具は通常、柔軟であり、様々な形状の多様な組織及び場所に適用するのに好適である。
【００２１】
本発明に使用されるコラーゲンは、多孔質又は繊維状マトリックスに加工することができる液状、ペースト状、繊維状、又は粉末状のコラーゲン材料に由来する材料を含む、ゲルを形成するのに好適な任意のコラーゲンに由来し得る。スポンジ生産のためのコラーゲンゲルの調製は、例えば欧州特許第０８９１１９３号（参照によって本明細書に組み込まれる）に記載されており、ゲル形成が起こるまでの酸性化及びその後のｐＨ中和を含み得る。ゲル形成能又は溶解性を改善するために、コラーゲンは、乾燥したときに安定なスポンジを形成する性質が低下しない限り、（部分的に）加水分解又は改変されていてもよい。
【００２２】
本発明によるコラーゲンスポンジは、好ましくは、コラーゲン膜の密度と比較して低い密度を有する。膜の密度が１ｃｍ３当たり約６５０ｍｇ超であるのに対し、コラーゲンスポンジの密度は１ｃｍ３当たり約５〜約１００ｍｇであることが好ましい。本発明による特に好ましいコラーゲンスポンジは、マトリスチプト（Ｍａｔｒｉｓｔｙｐｔ）（登録商標）の名前で販売されているものである。
【００２３】
スポンジマトリックスのコラーゲン又はゼラチンは、好ましくは動物起源、好ましくはウシ又はウマ起源である。しかしながら、患者が異種タンパク質に対して過敏症である場合は、ヒトコラーゲンを使用してもよい。スポンジのさらなる成分は好ましくはヒト起源であり、これによってスポンジは、特にヒトへの適用に好適なものとなる。
【００２４】
一実施形態において、スポンジの多孔質ネットワークを形成する繊維状生体適合性ポリマーのマトリックス材料は、乾燥した多孔質スポンジの１〜５０％、１〜１０％、好ましくは約３％を構成する（ｗ／ｗ％）。
【００２５】
一実施形態において、繊維状生体材料は、マトリックスに付着した流体吸収性粒状材料の粒子を有する。流体吸収性粒状材料は、架橋ポリマーでもよい親水性ポリマー成分を含み得る。
【００２６】
好ましい実施形態において、ポリマー成分は架橋剤である単一の親水性ポリマー成分であり、以下では「材料」と称する。親水性ポリマー成分は架橋剤、特にポリアルキレンオキシドポリマーであってもよい。ＰＥＧを含むポリマーが特に好ましい。前記材料の反応基は好ましくは求電子基である。
【００２７】
本発明による親水性ポリマー架橋剤の好ましい求電子基は、タンパク質のアミノ基、カルボキシ基、チオール基及びヒドロキシ基に対して反応性の基、又はそれらの混合物である。
【００２８】
好ましいアミノ基特異的反応基は、ＮＨＳエステル基、ＮＢＳエステル基、イミドエステル基、アルデヒド基、カルボジイミドの存在下のカルボキシ基、イソシアネート、又はＴＨＰＰ（ベータ−［トリス（ヒドロキシメチル）ホスフィノ］プロピオン酸）であり、特に好ましいのは、ペンタエリスリトールポリ（エチレングリコール）エーテルテトラスクシンイミジルグルタレート（＝ペンタエリスリトールテトラキス［１−１’−オキソ−５’−スクシンイミジルペンタノエート−２−ポリ−オキソエチレングリコールエーテル（＝ＮＨＳ−ＰＥＧ））、特にＭＷが１０，０００のＮＨＳ−ＰＥＧである。
【００２９】
好ましいカルボキシ基特異的反応基は、カルボジイミドの存在下のアミノ基である。好ましいチオール基特異的反応基は、マレイミド（ｍａｌｅｉｉｍｉｄｅ）又はハロアセチルである。好ましいヒドロキシ基特異的反応基は、イソシアネート基である。
【００３０】
親水性架橋剤の反応基は、同一（ホモ官能性）であっても異なっていて（ヘテロ官能性）もよい。親水性ポリマー成分は、２つの反応基（ホモ二官能性若しくはヘテロ二官能性）又は３つ以上の反応基（ホモ／ヘテロ三官能性以上）を有することができる。
【００３１】
特別な実施形態において、材料は、好ましくはＰＥＧを含む合成ポリマーである。ポリマーは、組織との架橋及び組織への密着に好適な活性側基を含むＰＥＧの誘導体でもよい。反応基によって、親水性ポリマーは、血液タンパク質、及び組織表面タンパク質をも架橋する能力を有する。生体材料との架橋も可能である。
【００３２】
多求電子ポリアルキレンオキシドは、２つ以上のスクシンイミジル基を含むことができる。多求電子ポリアルキレンオキシドは、２つ以上のマレイミジル基を含むことができる。多求電子ポリアルキレンオキシドは、ポリエチレングリコール又はその誘導体であることが好ましい。好ましい実施形態において、ポリマー成分は、ペンタエリスリトールポリ（エチレングリコール）エーテルテトラスクシンイミジルグルタレート（＝ＣＯＨ１０２、またペンタエリスリトールテトラキス［１−１’−オキソ−５’−スクシンイミジルペンタノエート−２−ポリ−オキソエチレングリコール］エーテル）である。
【００３３】
一実施形態において、以下で「材料」と称されるポリマー材料は、第１の架橋成分と、反応を可能にする条件下で第１の架橋成分と架橋する第２の架橋成分とを含む２つのプレポリマーの混合物、又は前記スポンジとの結合において形成されたポリマーである。
【００３４】
前記第１及び／又は第２の架橋成分は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）の誘導体、例えば所与の条件下で反応することができる誘導体を含むことがより好ましい。架橋成分のうちの１つは、組織と共有結合的に反応可能であることが好ましい。
【００３５】
止血剤として使用するスポンジに好適なそのような材料は、例えば国際公開第２００８／０１６９８３号（参照によって全体が本明細書に組み込まれる）に開示されており、コシール（登録商標）の商標で市販されている。好ましい材料は、それ自体補助的な止血を媒介し、漏出領域を機械的に閉鎖するのに好適となり得る。そのような材料は、例えば、生体吸収性ポリマー、特に体液に暴露されると架橋して凝固するポリマーである。さらなる実施形態において、材料は吸収性及び／又は生体適合性であり、対象、特にヒト対象によって、６か月未満、３か月未満、１か月未満、又は２週間未満に分解され得る。
【００３６】
好適なポリマー材料は、第１の架橋成分、反応を可能にする条件下で第１の架橋成分と架橋する第２の架橋成分を含むことができ、第１及び第２の架橋成分は架橋して層を形成する。
【００３７】
第１の架橋成分は複数の求核基を含むことができ、第２の架橋成分は複数の求電子基を含むことができる。生物学的流体と接触すると、又は反応を可能にする他の条件で、第１及び第２の架橋成分は架橋して、間隙を有する多孔質マトリックスを形成する。
【００３８】
一部の態様において、材料の第１の架橋成分はｍ個の求核基を有する多求核ポリアルキレンオキシドを含み、第２の架橋成分は多求電子ポリアルキレンオキシドを含む。多求核ポリアルキレンオキシドは、２つ以上の求核基、例えば、ＮＨ２、−ＳＨ、−ＯＨ、−Ｈ、−ＰＨ２、及び／又は−ＣＯ−ＮＨ−ＮＨ２を含むことができる。場合によっては、多求核ポリアルキレンオキシドは２つ以上の第一級アミノ基を含む。場合によっては、多求核ポリアルキレンオキシドは２つ以上のチオール基を含む。多求核ポリアルキレンオキシドは、ポリエチレングリコール又はその誘導体でもよい。場合によっては、ポリエチレングリコールは２つ以上の求核基を含み、求核基は第一級アミノ基及び／又はチオール基を含み得る。多求電子ポリアルキレンオキシドは、スクシンイミジルエステル（−ＣＯ２Ｎ（ＣＯＣＨ２）２）、カルボン酸（−ＣＯ２Ｈ）、アルデヒド（−ＣＨＯ）、エポキシド（−ＣＨＯＣＨ２）、イソシアネート（−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ）、ビニルスルホン（−ＳＯ２ＣＨ＝ＣＨ２）、マレイミド（−Ｎ（ＣＯＣＨ）２）、及び／又はピリジルジスルフィド（−Ｓ−Ｓ−（Ｃ５Ｈ４Ｎ））などの求電子基を２つ以上含むことができる。多求電子ポリアルキレンオキシドは、２つ以上のスクシンイミジル基を含んでいてもよい。多求電子ポリアルキレンオキシドは、２つ以上のマレイミジル基を含んでいてもよい。場合によっては、多求電子ポリアルキレンオキシドは、ポリエチレングリコール又はその誘導体でもよい。
【００３９】
ある特定の実施形態において、第１及び／又は第２の架橋成分は、好ましくはＰＥＧを含む合成ポリマーである。ポリマーは、組織との架橋及び組織への密着に好適な活性側基を含むＰＥＧの誘導体でもよい。接着剤は、スクシンイミジル基、マレイミジル基、及び／又はチオール基を含むことが好ましい。２つのポリマーの構成において、１つのポリマーはスクシニル基又はマレイミジル基を有することができ、第２のポリマーは第１のポリマーの基に結合することができるチオール基又はアミノ基を有することができる。これらの又は追加の接着剤の基は組織への密着を容易にすることができる。接着剤層は１つ又は複数の架橋した成分を含んでいてもよい。
【００４０】
ポリマー材料、例えば前述したような改変されたＰＥＧ材料は、生体材料の０．５〜５０ｍｇ／ｃｍ２、好ましくは、生体材料、例えばコラーゲンの２〜２０ｍｇ／ｃｍ２の範囲で存在する。
【００４１】
スポンジは全体として、生分解性でｉｎ  ｖｉｖｏでの生物学的分解に好適である、又は生体吸収性、すなわちｉｎ  ｖｉｖｏで吸収することができる。完全な吸収は、重要な細胞外断片が残っていないことを意味する。生分解性材料は、生体系から除去することができる及び／又は生体系に化学的に取り込むことができる単位に生物学的に分解され得るという点で、非生分解性材料とは異なる。好ましい実施形態において、特定の材料、すなわちマトリックス材料又はスポンジは全体として、対象、特にヒト対象によって、６か月未満、３か月未満、１か月未満、２週間未満に分解され得る。
【００４２】
一実施形態において、スポンジは、適用される組織への密着を強化する材料を、前記スポンジの少なくとも１つの表面に連続又は不連続の層の形態で有する。
【００４３】
本発明の用具は、好ましくは２．５ｍｍ未満、より好ましくは約１ｍｍ〜約２．５ｍｍの全体厚さを有する。
【００４４】
本発明の用具は、好ましくは、最小侵襲手術において、例えば腹腔鏡手術適用のために使用される。
【００４５】
用具は乾燥されてもよく、乾燥後、スポンジは少なくとも０．５（ｗ／ｗ百分率として）の含水率を有することができる。ある特定の実施形態において、スポンジはフリーズドライ又は風乾され得る。
【００４６】
用具は、例えば米国特許第５，７１４，３７０号（参照によって本明細書に組み込まれる）に開示されているように、フィブリノーゲン、トロンビン、又はトロンビン前駆体を含む、血液凝固のアクチベーター又はプロアクチベーターをさらに含むことができる。トロンビン又はトロンビンの前駆体は、それぞれ、トロンビン活性を有するタンパク質、及び血液と接触したとき又は患者に適用された後にトロンビン活性を誘導するタンパク質として理解される。トロンビン活性は、トロンビン活性（ＮＩＨ単位）又は対応するＮＩＨ単位を生じるトロンビン等価活性として表される。スポンジの活性は、１００〜１０．０００、好ましくは５００〜５．０００でもよい。以下では、トロンビン活性は両方、すなわちトロンビンの活性又は任意の等価活性を含むものとして理解される。トロンビン活性を有するタンパク質は、アルファトロンビン、メイゾトロンビン、トロンビン誘導体、又は組換えトロンビンからなる群から選択されてもよい。好適な前駆体は、プロトロンビン、任意選択でリン脂質と一緒になった第Ｘａ因子、第ＩＸａ因子、活性化プロトロンビン複合体、ＦＥＩＢＡ、内因系若しくは外因系凝固の任意のアクチベーター若しくはプロアクチベーター、又はこれらの混合物からなる群から選択される可能性がある。
【００４７】
本発明による止血用具は、さらなる生理学的物質と一緒に使用してもよい。例えば、用具は、好ましくは、薬理活性物質、とりわけ抗線維素溶解物質、例えば、プラスミノーゲンアクチベーターインヒビター、又はプラスミンインヒビター、又は線維素溶解物質の不活性化因子をさらに含む。好ましい抗線維素溶解物質は、アプロチニン又はアプロチニン誘導体、アルファ２−マクログロブリン、プロテインＣ又は活性化プロテインＣのインヒビター又は不活性化因子、プラスミンに結合しており、天然基質と競合的に作用する基質模倣物、及び線維素溶解活性を阻害する抗体からなる群から選択される。
【００４８】
さらなる薬理活性物質として、抗生物質、例えば、抗細菌物質又は抗真菌物質を、本発明による用具と一緒に、好ましくは用具に均一に分布した成分として使用してもよい。成長因子及び／又は鎮痛成分などのさらなる生理活性物質も本発明の用具に存在することができる。そのような用具は、例えば創傷治癒に有用となり得る。特定の酵素又は酵素阻害剤とのさらなる組合せが好ましく、該組合せにより、用具の吸収を調節する、すなわち促進又は阻害することができる。特定の酵素又は酵素阻害剤には、コラゲナーゼ、コラゲナーゼのエンハンサー又は阻害剤がある。また、好適な保存剤を用具と一緒に使用することができる、又は用具に含有することができる。
【００４９】
一実施形態は、血液凝固のアクチベーター又はプロアクチベーターを唯一の活性成分として含有する止血用具の使用に関するが、血液凝固の速度、止血、並びに閉鎖の質、例えば引張強度、内部（接着）強度、及び耐久性に影響を及ぼすさらなる物質を含んでいてもよい。
【００５０】
内因系又は外因系凝固を強化又は改善する凝血促進物質、例えば、血液凝固の因子若しくは補因子、第ＸＩＩＩ因子、組織因子、プロトロンビン複合体、活性化プロトロンビン複合体、又は複合体の一部、プロトロンビナーゼ複合体、リン脂質、及びカルシウムイオンを使用してもよい。正確な閉鎖が必要とされる外科的処置の場合、止血用具を患者に適用した後及び血塊形成が影響を受ける前の作業時間を延長することが好ましい場合がある。血塊形成反応の延長は、本発明による用具が血液凝固のインヒビターを適切な量でさらに含む場合、確実になるだろう。インヒビター、例えば、任意選択でヘパリンと一緒になったアンチトロンビンＩＩＩ、又は他の任意のセリンプロテアーゼインヒビターが好ましい。
【００５１】
材料の局所不安定性又は凝固能亢進を防ぐために、そのような添加剤、特にトロンビン又はトロンビンの前駆体を材料にむらなく分布させることも好ましい。おそらくは均一な混合物におけるトロンビンとコラーゲンとの密接な接触のために、一定の含水量を有していても、トロンビン活性は驚くほど安定である。にもかかわらず、ポリオール、多糖、ポリアルキレングリコール、アミノ酸、又はそれらの混合物からなる群から好ましくは選択されるトロンビン安定剤を本発明に従って使用してもよい。ソルビトール、グリセロール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、グルコース若しくはサッカロースなどの単糖若しくは二糖、又はトロンビン活性を安定化させることができる任意の糖若しくはスルホン化アミノ酸の例示的な使用が好ましい。約６．０のｐＨが好ましい。
【００５２】
別の実施形態において、液体を吸収することができる、生体適合性で吸収性のヒドロゲルが本発明の用具に含有される。
【００５３】
本発明は、本発明による用具を備える創傷保護材も提供する。用具及び全ての追加の層は、すぐ使用できる創傷保護材中に好適な寸法で備えることができる。用具及び／又は保護材は、適応症に応じて、好ましくは少なくとも３ｍｍ若しくは少なくとも５ｍｍ、及び／又は最大で２０ｍｍの厚さを有するスポンジパッド又はシートでもよい。比較的厚い柔軟なスポンジを創傷に適用する場合は、さらなる創傷分泌物の吸収に対する障害として作用し得るフィブリンが形成される前に、血液及びフィブリノーゲンをスポンジ全体で吸収することができるということが重要である。
【００５４】
本発明の別の態様は、
ａ）  生体材料のマトリックスを含む用具を用意するステップ、
ｂ）  非反応性溶媒と組み合わせた、懸濁液、溶液、又は粉末の形態のポリマー材料を用意するステップ、
ｃ）  ｂ）の材料が前記用具の少なくとも１つの表面に存在するようにａ）とｂ）とを接触させるステップ、
ｄ）  溶媒を除去して、ポリマー材料を用具の少なくとも１つの表面に残すステップ、及び、任意選択で、
ｅ）  ステップｄ）で得られた用具を乾燥させるステップ
を含む、多孔質の止血用具を製造する方法に関する。
【００５５】
乾燥は、フリーズドライ又は風乾を含んでいてもよく、流体の揮発性成分を除去することを含む。
【００５６】
溶媒とポリマー材料との組合せは、ローラー塗布（ｒｏｌｌｉｎｇ）、噴霧、印刷、塗装によって、又は膜密着を介して生体材料と接触させることができる。一実施形態において、ガスアシスト噴霧器又はガスレス噴霧器のいずれかを使用する。
【００５７】
ポリマー材料が粉末形態で適用される場合、最終的な結晶化ステップを使用してもよい。ポリマー材料が可溶化形態で適用される場合、ポリマー材料は生体材料に直接噴霧してもよい。
【００５８】
ポリマー材料は、生体材料マトリックスを２〜２０ｍｇ／ｃｍ２の範囲で覆うことができる。
【００５９】
一実施形態において、エアロゾル化した反応性ＰＥＧを、ＰＥＧの反応性を保持するようにコラーゲン又は別の生体材料に噴霧する。噴霧は短時間で行われることが好ましい。
【００６０】
溶媒は非反応性溶媒であってもよい。溶媒は、生体適合性溶媒であることが好ましい場合がある。一実施形態において、溶媒は、アセトン、トルエン、ジクロロメタン、クロロホルム、酢酸エチル、ジメチルスルホキシドなどの非プロトン性有機溶媒である。溶媒はまた、エタノール、メタノール、又はイソプロパノールなどのアルコールであってもよい。プロトン性溶媒を使用する場合、一実施形態において、プロトン性溶媒は酸性化される。溶媒の組合せを使用してもよい。
【００６１】
好ましい実施形態において、溶媒は、アセトン、酢酸エチル、ジメチルホルムアミド、又はジメチルスルホキシドでもよい。
【００６２】
一実施形態において、溶媒は、高流量ガス、光、熱、又は真空を使用することによって除去可能である。一実施形態において、溶媒は真空チャンバにおいて除去可能である。
【００６３】
一実施形態において、溶媒をフラッシュオフして、ポリマー材料を残すことができる。
【００６４】
止血用具を製造する方法のある特定のステップは、不活性雰囲気で実施することができる。一実施形態において、用具は不活性雰囲気で滅菌及び処理される。一実施形態において、用具は不活性雰囲気において包装される。別の実施形態において、製造工程全体は不活性雰囲気で行われる。
【００６５】
本発明は、円滑な適用において、生体材料マトリックスにわたってポリマー材料の一様な又はパターニングされた粒子溶解を可能にする。ポリマー材料を適用する方法は適切な厚さのコーティングをもたらし、止血用具の創傷表面への密着を強化する。方法はまた、止血用具の標準的な製造方法と比較して廃棄物を低減する。さらに本発明は、製造中、熱処理が必要とされず、用具に対する熱応力要因の危険性が除去されているため、標準的な方法よりも安全である。
【００６６】
方法は、ポリマー材料の生体材料への（例えば、ＰＥＧのコラーゲンへの）効果的な浸透をさらに可能にし、生体材料の組織への密着を改善する。一様なコーティングを、他の方法によるよりも効果的に達成することができる。方法はまた、不純物を最小限にしつつ、標準的な製造方法と比較して増強した、ポリマー材料の生体材料マトリックスへの浸潤も可能にする。結果として得られる用具は、熱応力から生じる分解物を実質的に含まない。
【００６７】
さらなる態様において、本発明は、上記の本発明による方法によって得られる止血用具を提供する。止血用具について上述した全ての実施形態は、上記の本発明による方法によって得られる止血用具に対するものとして理解することもできる。
【００６８】
本発明はまた、上記の本発明による方法によって得られる、生体材料のマトリックス及びポリマー材料を含む止血用具を投与するステップを含む、損傷を処置する方法も提供する。損傷は、創傷、大量出血、傷害組織、及び／又は出血組織を含み得る。
【００６９】
本発明は以下の実施例によって、それに限定されることなく、さらに例示される。
【実施例】
【００７０】
実施例１：２つの反応性ＰＥＧの酸性溶液で処理したコラーゲンスポンジ
１０ｍｇ／ｃｍ３、３５ｍｇ／ｃｍ３、７０ｍｇ／ｃｍ３、及び１００ｍｇ／ｃｍ３のＰＥＧ濃度を有するＣＯＨ１０２とＣＯＨ２０６との酸性水溶液（ｐＨ３．０、ＨＣｌ）（ＣＯＨ１０２とＣＯＨ２０６は１：１）を、アセトン、酢酸エチル、ジメチルホルムアミド、又はジメチルスルホキシドなどの好適な溶媒と組み合わせて調製する。該溶媒の溶液を、市販の９×７ｃｍのウシコラーゲンスポンジ（マトリスチプト（登録商標））に噴霧する。
【００７１】
溶媒をフラッシュオフして、組織化されたパターンの反応性ＰＥＧのコーティングをコラーゲンに残す。
【００７２】
凍結乾燥後、乾燥したスポンジは、乾燥剤と一緒に水蒸気不透過性の小袋に入れてもよく、例えば２５ｋＧｒａｙでさらにガンマ線滅菌してもよい。
【００７３】
工程全体は不活性環境で行われる。
【００７４】
実施例２：２つの反応性ＰＥＧのＥｔＯＨ溶液で処理したコラーゲンスポンジ
ＣＯＨ１０２及びＣＯＨ２０６を完全に無水のＥｔＯＨに溶解する。１０ｍｇ／ｃｍ３、３５ｍｇ／ｃｍ３、７０ｍｇ／ｃｍ３、及び１００ｍｇ／ｃｍ３のＰＥＧ濃度（ＣＯＨ１０２とＣＯＨ２０６は１：１）を、好適な溶媒と組み合わせて調製する。該溶媒の溶液を、市販の９×７ｃｍのウシコラーゲンスポンジ（マトリスチプト（登録商標））に噴霧する。
【００７５】
コラーゲン材料を真空チャンバに入れ、溶媒を除去する。
【００７６】
乾燥したスポンジは、乾燥剤と一緒に水蒸気不透過性の小袋に入れてもよく、例えば２５ｋＧｒａｙでガンマ線滅菌してもよい。
【００７７】
実施例３：コラーゲン／反応性ＰＥＧ構成物の作成
様々な濃度（２．１５ｍｇ／ｃｍ３、４．３ｍｇ／ｃｍ３、及び７．２ｍｇ／ｃｍ３のウシ真皮コラーゲン、並びに７．２ｍｇ／ｃｍ３、１４．３ｍｇ／ｃｍ３、２８．６ｍｇ／ｃｍ３、及び５７．３ｍｇ／ｃｍ３のＰＥＧ（ＣＯＨ１０２とＣＯＨ２０６は１：１）濃度を含有する２２ｍｌの酸性水溶液（ｐＨ３．０、ＨＣｌ）を、好適な溶媒と組み合わせて調製する。
【００７８】
溶媒をフラッシュオフして、組織化されたパターンの反応性ＰＥＧのコーティングをコラーゲンに残す。
【００７９】
凍結乾燥後、乾燥したスポンジは、乾燥剤と一緒に水蒸気不透過性の小袋に入れてもよく、例えば２５ｋＧｒａｙでさらにガンマ線滅菌してもよい。
【００８０】
実施例４：２層コラーゲン／反応性ＰＥＧ構成物の作成
１１ｍｌ及び２２ｍｌの、実施例３に記載の酸性コラーゲン／ＰＥＧ溶液（ｐＨ３．０、ＨＣｌ）を、ＰＥＴトレイに充填し、直ちに−２０℃で凍結する。氷相の上面に１１ｍｌ又は２２ｍｌの、ｐＨ３．０（ＨＣｌ）の１％ウシ真皮コラーゲン溶液を適用し、得られた構成物をフリーズドライする。
【００８１】
乾燥したスポンジは、乾燥剤と一緒に水蒸気不透過性の小袋に入れてもよく、例えば２５ｋＧｒａｙでガンマ線滅菌してもよい。
【００８２】
実施例５：反応性ＰＥＧでのコラーゲンスポンジの均一なコーティング
ＣＯＨ１０２とＣＯＨ２０６との１：１粉末混合物を、市販のコラーゲンスポンジ又は実施例１、２、３、及び４に記載の方法のうちの１つに従って作成されたスポンジの１つの表面に均一に分布させる。２ｍｇ／ｃｍ２、７ｍｇ／ｃｍ２、１０ｍｇ／ｃｍ２、１４ｍｇ／ｃｍ２、及び２０ｍｇ／ｃｍ２のＰＥＧ量をコーティングに使用する。ＰＥＧ粉末混合物を溶媒と組合せ、コラーゲンに噴霧、塗装、又は印刷する。溶媒をフラッシュオフして、コラーゲンをＰＥＧで一様にコーティングする。次いでスポンジを凍結乾燥する。
【００８３】
乾燥したスポンジは、乾燥剤と一緒に水蒸気不透過性の小袋に入れてもよく、例えば２５ｋＧｒａｙでガンマ線滅菌してもよい。
【００８４】
実施例６：反応性ＰＥＧでのコラーゲンスポンジの不連続コーティング
ＰＥＧと溶媒との溶液をコラーゲンに噴霧、印刷、又は塗装する前に格子をコラーゲンスポンジの表面に配置してパッドの表面が部分的にＰＥＧ粉末によって遮蔽され部分的に覆われないようにすることを除いては、実施例５に記載されているようにパッドを作成する。５ｍｍ及び１０ｍｍのメッシュサイズを有する格子状配列を使用して、分布後に除去する。溶媒の除去、粉末の固着、包装、及び滅菌は、実施例５に記載のものである。
【００８５】
これらの試作品は、コラーゲンの凝血促進活性のために凝固が生じるコラーゲンパッドへの、血液のより良好な浸透を可能にする。反応性ＰＥＧにより、パッドの創傷表面との接着は確実となる。
【００８６】
実施例７：コラーゲンと架橋ＰＥＧとの構成物の作成
ａ）ウシコラーゲンスポンジに、溶媒と組み合わせた反応性ＰＥＧであるＣＯＨ１０２及びＣＯＨ２０６（１：１）を、ダブルシリンジ及びガス駆動型噴霧ヘッドから構成される市販の噴霧塗布用具（デュプロスプレー（Ｄｕｐｌｏｓｐｒａｙ）、Ｂａｘｔｅｒ）により噴霧する。１つのシリンジは溶媒と組み合わせたｐＨ３．０のＣＯＨ１０２及びＣＯＨ２０６を含有し、第２のシリンジはｐＨ９．４の緩衝液を含有する。２つのＰＥＧ成分の重合は、デポジション直後、コラーゲンの表面で生じる。次いで、溶媒を除去する。スポンジは真空チャンバで乾燥してもよい。
【００８７】
ｂ）コラーゲンスポンジを実施例１に記載されているように酸性ＰＥＧ溶液で処理する。２つのＰＥＧ成分とコラーゲンマトリックスとの架橋を開始するために、湿潤スポンジを塩基性の緩衝系で処理し、後に凍結乾燥してもよい。
【００８８】
実施例８：反応性ＰＥＧでのキトサン／ゼラチンスポンジの連続コーティング
ＣＯＨ１０２とＣＯＨ２０６との１：１粉末混合物及び溶媒を、市販のキトサン／ゼラチン（キトスキン（Ｃｈｉｔｏｓｋｉｎ）（登録商標）、Ｂｅｅｓｅ  Ｍｅｄｉｃａｌ）スポンジの１つの表面に均一に分布させる。１４ｍｇ／ｃｍ２のＰＥＧ量をコーティングに使用する。ＰＥＧ粉末混合物をスポンジの表面に固着させ、溶媒を除去する。次いでスポンジを凍結乾燥する。
【００８９】
乾燥したスポンジは、乾燥剤と一緒に水蒸気不透過性の小袋に入れてもよく、例えば２５ｋＧｒａｙでガンマ線滅菌してもよい。
【００９０】
実施例９：反応性ＰＥＧでの酸化セルロース布のコーティング
溶媒と組み合わせたＣＯＨ１０２とＣＯＨ２０６との１：１粉末混合物を、噴霧、印刷、又は塗装を介して市販の酸化セルロース布（トラウムステム（Ｔｒａｕｍｓｔｅｍ）（登録商標）、Ｂｉｏｓｔｅｒ）の１つの表面に分布させる。１４ｍｇ／ｃｍ２のＰＥＧ量をコーティングに使用する。次いで溶媒をフラッシュオフしてスポンジを凍結乾燥する。
【００９１】
乾燥したスポンジは、乾燥剤と一緒に水蒸気不透過性の小袋に入れてもよく、例えば２５ｋＧｒａｙでガンマ線滅菌してもよい。
【００９２】
実施例１０：前臨床適用
実施例に従って作成されたスポンジを、肝臓擦過モデルのヘパリン化ブタ（１．５倍ＡＣＴ）で試験する。回転研削盤を用いて、１．８ｅｍの直径を有する円形の出血創傷を肝葉の表面に創製する。３×３ｃｍのスポンジを適用し、生理食塩水緩衝液に浸漬したガーゼと共に、２分間、創傷に適度に押し当てる。ガーゼの除去後、良好な止血性能が達成される。
【００９３】
実施例１１：断面及び純度
実施例に従って作成されたスポンジを二分する。断面は、ポリマー材料を固着させる他の方法と比較して（例えば、熱処理と比較して）より深い、ポリマー材料の生体材料への浸透深さを実証する。粒状物質及び重金属試験を実行し、実施例に従って作成されたスポンジが不純物をほとんど有しないことを実証する。
【手続補正書】
【提出日】平成31年4月2日(2019.4.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
止血用具を製造する方法であって、
生体材料マトリックスの多孔質スポンジを用意するステップ、
懸濁液、溶液、又は粉末の形態のポリマー材料を用意するステップ、
前記ポリマー材料を溶媒と組み合わせるステップ、
噴霧又は印刷によって、前記ポリマー材料と前記溶媒との組合せを、前記生体材料マトリックスの少なくとも１つの表面と接触させるステップ、
前記溶媒を除去するステップ、及び
前記ポリマー材料のコーティングを前記生体材料マトリックスに保持するステップ
を含み、
前記ポリマー材料が単一の反応性ポリエチレングリコールであり、
熱処理なしで行われる、方法。
【請求項２】
前記生体材料が、コラーゲン、ゼラチン、フィブリン、酸化セルロース、多糖及びキトサンからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記生体材料が、コラーゲンである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記ポリマー材料が、ＮＨＳ−ＰＥＧである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記溶媒が非プロトン性有機溶媒である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記溶媒が酸性プロトン性溶媒である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記ポリマー材料と前記溶媒との前記組合せがガスアシスト噴霧器によって前記生体材料マトリックスに噴霧される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記生体材料マトリックスに保持されている前記ポリマー材料の前記コーティングが、前記生体材料の２〜２０ｍｇ／ｃｍ２の範囲で存在する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記溶媒が蒸発によって除去される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
生体材料マトリックスとポリマー材料とを含む止血用具であって、
前記ポリマー材料を溶媒と組み合わせるステップ、
噴霧又は印刷によって前記ポリマー材料と前記溶媒とを前記生体材料マトリックスに適用するステップ、及び
その後、前記溶媒を除去するステップ
を経て、熱処理なしで前記ポリマー材料が前記生体材料マトリックスと安定に結合しており、
前記ポリマー材料が単一の反応性ポリエチレングリコールである、止血用具。
【請求項１１】
前記生体材料が、コラーゲン、ゼラチン、フィブリン、酸化セルロース、多糖及びキトサンからなる群から選択される、請求項１０に記載の止血用具。
【請求項１２】
前記生体材料が、コラーゲンである、請求項１１に記載の止血用具。
【請求項１３】
前記ポリマー材料が、ＮＨＳ−ＰＥＧである、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の止血用具。
【請求項１４】
前記溶媒が非プロトン性有機溶媒である、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の止血用具。
【請求項１５】
前記溶媒が酸性プロトン性溶媒である、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の止血用具。
【請求項１６】
前記ポリマー材料と前記溶媒とがガスアシスト噴霧器によって前記生体材料マトリックスに噴霧される、請求項１０〜１５のいずれか一項に記載の止血用具。
【請求項１７】
前記ポリマー材料が、前記生体材料の２〜２０ｍｇ／ｃｍ２の範囲で存在する、請求項１０〜１６のいずれか一項に記載の止血用具。
【請求項１８】
前記生体材料及び前記ポリマー材料の熱処理によってもたらされる不純物を実質的に含まない、請求項１０〜１７のいずれか一項に記載の止血用具。
【国際調査報告】
2020509802.tif 000002
2020509802.tif 000003