(57)【要約】  本出願は、Ｔ細胞活性化のＶドメイン免疫グロブリン含有サプレッサー（ＶＩＳＴＡ）に酸性ｐＨで特異的に結合する抗体、およびがん治療におけるそれらの使用に関する。一部の実施形態では、抗体は、酸性ｐＨではヒトＶＩＳＴＡに特異的に結合するが、中性または生理的ｐＨではヒトＶＩＳＴＡに有意には結合しない。【選択図】図１Ａ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
酸性条件でｈＶＩＳＴＡに特異的に結合する単離された抗体。
【請求項２】
酸性条件でｈＶＩＳＴＡに特異的に結合するが、中性または生理的条件では有意には結合しない、請求項１に記載の単離された抗体。
【請求項３】
酸性条件では、中性または生理的条件でのそのＫＤの１０分の１以下のＫＤで、ｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１または２に記載の単離された抗体。
【請求項４】
酸性条件では、中性または生理的条件でのそのＫＤの１００分の１以下のＫＤで、ｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項５】
酸性条件では、中性または生理的条件でのそのＫＤの１０００分の１以下のＫＤで、ｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項６】
中性または生理的条件では、１０−５Ｍまたはそれよりも大きなＫＤでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項７】
中性または生理的条件では、１０−４Ｍまたはそれよりも大きなＫＤでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜６のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項８】
中性または生理的条件では、１０−３Ｍまたはそれよりも大きなＫＤでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項９】
酸性条件では、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１０】
酸性条件では、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜９のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１１】
酸性条件では、１０−９Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１２】
酸性条件では、１０−７またはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡに結合し、中性または生理的条件では、１０−４またはそれよりも大きなＫＤでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１３】
酸性条件では、１０−７またはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡに結合し、中性または生理的条件では、１０−５またはそれよりも大きなＫＤでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１４】
酸性条件では、中性または生理的条件でのそのｋｏｆｆの５分の１以下のｋｏｆｆで、ｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１５】
酸性条件では、中性または生理的条件でのそのｋｏｆｆの１０分の１以下のｋｏｆｆで、ｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１６】
酸性条件では、中性または生理的条件でのそのｋｏｆｆの５０分の１以下のｋｏｆｆで、ｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１７】
酸性条件では、中性または生理的条件でのそのｋｏｆｆの１００分の１以下のｋｏｆｆで、ｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１８】
酸性条件では、７×１０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１９】
酸性条件では、５×１０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項２０】
酸性条件では、３×１０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項２１】
酸性条件では、１０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項２２】
酸性条件では、７×１０−４ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項２３】
酸性条件では、５×１０−４ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項２４】
酸性条件では、３×１０−４ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項２５】
酸性条件では、１０−４ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項２６】
酸性条件では、７×１０−５ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項２７】
酸性条件では、５×１０−５ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項２８】
酸性条件では、３×１０−５ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項２９】
酸性条件では、１０−５ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項３０】
中性または生理的条件では、１０−３ｓ−１またはそれよりも大きなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜２９のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項３１】
中性または生理的条件では、３×１０−３ｓ−１またはそれよりも大きなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項３２】
中性または生理的条件では、５×１０−３ｓ−１またはそれよりも大きなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項３３】
中性または生理的条件では、７×１０−３ｓ−１またはそれよりも大きなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項３４】
中性または生理的条件では、１０−２ｓ−１またはそれよりも大きなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項３５】
中性または生理的条件では、３×１０−２ｓ−１またはそれよりも大きなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜３４のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項３６】
中性または生理的条件では、５×１０−２ｓ−１またはそれよりも大きなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜３５のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項３７】
中性または生理的条件では、７×１０−２ｓ−１またはそれよりも大きなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜３６のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項３８】
中性または生理的条件でのｈＶＩＳＴＡに対する抗体の結合は、例えばＳＰＲにより検出可能ではない、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項３９】
酸性条件では、５×１０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆで、および中性または生理的条件では、７×１０−３ｓ−１またはそれよりも大きなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜３８のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項４０】
酸性条件では、１０−４ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆで、および中性または生理的条件では、１０−２ｓ−１またはそれよりも大きなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜３９のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項４１】
酸性条件では、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび５×１０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆで、および生理的条件の中性では、１０−６Ｍまたはそれよりも大きなＫＤおよび７×１０−３ｓ−１またはそれよりも大きなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜４０のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項４２】
酸性条件では、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび３×１０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆで、および生理的条件の中性では、１０−６Ｍまたはそれよりも大きなＫＤおよび１０−２ｓ−１またはそれよりも大きなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜４１のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項４３】
酸性条件では、１０−１２〜１０−８ＭのＫＤおよび１０−４〜５×１０−３ｓ−１のｋｏｆｆで、ならびに生理的条件の中性では、１０−７〜１０−４ＭのＫＤおよび３×１０−３〜１０−２ｓ−１またはそれよりも大きなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜４２のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項４４】
酸性条件では、１０−１２〜１０−８ＭのＫＤおよび１０−４〜５×１０−３ｓ−１のｋｏｆｆで、ならびに生理的条件の中性では、１０−７〜１０−４ＭのＫＤおよび３×１０−３〜１０−２ｓ−１またはそれよりも大きなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡに結合し、１０−７またはそれよりも小さなＫＤでｃｙｎｏ  ＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜４３のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項４５】
ｐＨ６．９では、ｐＨ７．４における場合の１０分の１以下のＫＤで、および／またはｐＨ６．５では、ｐＨ７．４における場合の１００倍分の１以下のＫＤで、およびｐＨ６．０では、ｐＨ７．４における場合の１０００分の１以下のＫＤでｈＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜４４のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項４６】
ｃｙｎｏ  ＶＩＳＴＡに結合する、請求項１〜４５のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項４７】
酸性状態では、生理的条件と比べてより高い親和性でｃｙｎｏ  ＶＩＳＴＡに結合する、請求項４６に記載の単離された抗体。
【請求項４８】
酸性条件では、１０−８またはそれよりも小さなＫＤおよび／または１０−２またはそれよりも小さなｋｏｆｆで、ならびに生理的条件では、１０−６またはそれよりも大きなＫＤおよび／または１０−２またはそれよりも大きなｋｏｆｆでｃｙｎｏ  ＶＩＳＴＡに結合する、請求項４５〜４７のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項４９】
酸性条件は、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨを有する条件である、請求項１〜４８のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項５０】
酸性条件は、６．０〜６．５のｐＨを有する条件である、請求項１〜４９のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項５１】
中性条件は、７．０のｐＨを有する条件である、請求項１〜５０のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項５２】
生理的条件は、７．３５〜７．４５のｐＨを有する条件である、請求項１〜５１のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項５３】
生理的条件は、７．４のｐＨを有する条件である、請求項１〜５２のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項５４】
ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞などのヒトＴ細胞に対するｈＶＩＳＴＡの結合を阻害する（アンタゴニスト抗体である）、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項５５】
ｐＨ７．０未満のｐＨを有する条件で、ヒトＴ細胞に対するｈＶＩＳＴＡの結合を阻害する、請求項５４に記載の単離された抗体。
【請求項５６】
ｈｕＰＳＧＬ−１に対するｈＶＩＳＴＡの結合を阻害する、請求項１〜５５のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項５７】
ｐＨ７．０未満のｐＨを有する条件で、ｈｕＰＳＧＬ−１に対するｈＶＩＳＴＡの結合を阻害する、請求項５６に記載の単離された抗体。
【請求項５８】
ヘパラン硫酸プロテオグリカン類に対するｈＶＩＳＴＡの結合を阻害する、請求項１〜５７のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項５９】
ｐＨ７．０未満のｐＨを有する条件で、ヘパラン硫酸プロテオグリカン類に対するｈＶＩＳＴＡの結合を阻害する、請求項５８に記載の単離された抗体。
【請求項６０】
ｐＨ７．０未満のｐＨを有する条件は、ｐＨ７．０未満のｐＨを有し、免疫刺激が望ましい、対象の腫瘍または任意の疾患域である、請求項５５、５７、または５９のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項６１】
Ｔ細胞活性化を刺激する、請求項１〜６０のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項６２】
ｐＨ７．０未満のｐＨを有する条件で、ヒトＴ細胞活性化を刺激する、請求項６１に記載の単離された抗体。
【請求項６３】
ＶＩＳＴＡ媒介性細胞間接着を低減する、請求項１〜６２のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項６４】
ＶＩＳＴＡの活性化を刺激する（アゴニスト抗体である）、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項６５】
ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞などのヒトＴ細胞に対するｈＶＩＳＴＡの結合を刺激する、請求項１〜５３および６４のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項６６】
ｐＨ７．０未満のｐＨを有する条件で、ヒトＴ細胞に対するｈＶＩＳＴＡの結合を刺激する、請求項６５に記載の単離された抗体。
【請求項６７】
ｈｕＰＳＧＬ−１に対するｈＶＩＳＴＡの結合を刺激する、請求項１〜５３および６４〜６６のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項６８】
ｐＨ７．０未満のｐＨを有する条件で、ｈｕＰＳＧＬ−１に対するｈＶＩＳＴＡの結合を刺激する、請求項６７に記載の単離された抗体。
【請求項６９】
ヘパラン硫酸プロテオグリカン類に対するｈＶＩＳＴＡの結合を刺激する、請求項１〜５３および６４〜６８のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項７０】
ｐＨ７．０未満のｐＨを有する条件で、ヘパラン硫酸プロテオグリカン類に対するｈＶＩＳＴＡの結合を刺激する、請求項６９に記載の単離された抗体。
【請求項７１】
ｐＨ７．０未満のｐＨを有する条件は、ｐＨ７．０未満のｐＨを有し、免疫阻害が望ましい、対象の自己免疫（例えば、関節リウマチおよび狼瘡）環境、炎症部位、または任意の疾患域である、請求項６６、６８、または７０のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項７２】
カニクイザルにおいて少なくとも５００日の平均滞留時間を有する、請求項１〜７１のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項７３】
それが投与される対象の末梢血中のＶＩＳＴＡ陽性細胞、例えば好中球に有意には結合しない、請求項１〜７２のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項７４】
それが投与される対象の末梢血中のＶＩＳＴＡ陽性細胞、例えば好中球を有意には枯渇させない、請求項１〜７３のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項７５】
酸性ｐＨではｈＶＩＳＴＡに結合するが、中性または生理的ｐＨでは結合しないように操作されている、請求項１〜７４のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項７６】
ＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３の１〜８つのアミノ酸を、グルタミン酸、アスパラギン酸、またはヒスチジン残基と置換することにより操作されている、請求項７５に記載の抗体。
【請求項７７】
Ｐ１−０６１０２９のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／もしくはＣＤＲ３、またはＰ１−０６１０２９と比べてＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／もしくはＣＤＲ３に１〜６つもしくは１〜８つのアミノ酸差異を含むその変異体を含み、最大で１、２、または３つのアミノ酸変異が、どの１つのＣＤＲにも存在する、請求項１〜６３および７２〜７６のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項７８】
Ｐ１−０６１０２９のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、またはＰ１−０６１０２９と比べてＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／もしくはＣＤＲ３に１〜６つもしくは１〜８つのアミノ酸差異を含むその変異体を含む、請求項７７に記載の抗体。
【請求項７９】
アミノ酸変異は、グルタミン酸残基（Ｅ）、アスパラギン酸残基（Ｄ）、またはヒスチジン残基（Ｈ）への置換である、請求項７７または７８に記載の抗体。
【請求項８０】
−  ＧＦＴＸ１Ｘ２ＤＸ３ＡＭＨを含み、式中、Ｘ１はＤもしくはＬであり、Ｘ２はＥもしくはＤであり、およびＸ３はＥもしくはＹであるＣＤＲ１（配列番号４６３）、
−  ＧＩＸ４ＷＸ５ＳＸ６Ｘ７ＩＧＹＡＤＳＶＫＧを含み、式中、Ｘ４はＤもしくはＮであり、Ｘ５はＤもしくはＮであり、Ｘ６はＤ、Ｅ、Ｈ、もしくはＡであり、およびＸ７はＤ、Ｅ、Ｈ、もしくはＮであるＣＤＲ２（配列番号４６４）、および／または
−  ＶＰＧＹＳＸ８ＧＷＩＤＡＸ９ＤＸ１０を含み、式中、Ｘ８はＥ、Ｈ、もしくはＧであり、Ｘ９はＥ、Ｄ、もしくはＦであり、およびＸ１０はＤ、Ｅ、もしくはＶであるＣＤＲ３（配列番号４６５）
を含む、請求項７７〜７９のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項８１】
−  ＧＦＴＸ１Ｘ２ＤＸ３ＡＭＨを含み、式中、Ｘ１はＤもしくはＬであり、Ｘ２はＥもしくはＤであり、およびＸ３はＥもしくはＹであるＣＤＲ１（配列番号４６３）、
−  ＧＩＸ４ＷＸ５ＳＸ６Ｘ７ＩＧＹＡＤＳＶＫＧを含み、式中、Ｘ４はＤもしくはＮであり、Ｘ５はＤもしくはＮであり、Ｘ６はＤ、Ｅ、Ｈ、もしくはＡであり、およびＸ７はＤ、Ｅ、Ｈ、もしくはＮであるＣＤＲ２（配列番号４６４）、および
−  ＶＰＧＹＳＸ８ＧＷＩＤＡＸ９ＤＸ１０を含み、式中、Ｘ８はＥ、Ｈ、もしくはＧであり、Ｘ９はＥ、Ｄ、もしくはＦであり、およびＸ１０はＤ、Ｅ、もしくはＶであるＣＤＲ３（配列番号４６５）
を含む、請求項８０に記載の抗体。
【請求項８２】
Ｘ３はＥであり、Ｘ９はＥである、請求項８０または８１に記載の抗体。
【請求項８３】
Ｘ２はＥであり、Ｘ７はＥであり、および／またはＸ８はＨである、請求項８０〜８２のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項８４】
Ｘ２はＥであり、Ｘ７はＥであること、およびＸ８はＨであることのうちの２つまたはそれよりも多くが満たされる、請求項８３に記載の抗体。
【請求項８５】
Ｘ２はＥであり、Ｘ７はＥであり、およびＸ８はＨである、請求項８４に記載の抗体。
【請求項８６】
Ｘ６はＥである、請求項８０〜８５のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項８７】
Ｘ６はＡである、請求項８０〜８５のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項８８】
Ｘ１はＬであり、Ｘ４はＮであり、Ｘ５はＮであり、および／またはＸ１０はＶである、請求項８０〜８６のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項８９】
Ｘ１はＬであること、Ｘ４はＮであること、Ｘ５はＮであること、および／またはＸ１０はＶであることのうちの２つまたはそれよりも多くが満たされる、請求項８８に記載の抗体。
【請求項９０】
Ｘ１はＬであること、Ｘ４はＮであること、Ｘ５はＮであること、および／またはＸ１０はＶであることのうちの３つまたはそれよりも多くが満たされる、請求項８９に記載の抗体。
【請求項９１】
Ｘ１はＬであり、Ｘ４はＮであり、Ｘ５はＮであり、および／またはＸ１０はＶである、請求項９０に記載の抗体。
【請求項９２】
Ｘ１０はＤである、請求項８０〜９１のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項９３】
Ｘ９はＥである、請求項８０〜９２のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項９４】
Ｘ２はＥであり、Ｘ４はＤであり、および／またはＸ６はＥである、請求項８０〜９３のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項９５】
Ｘ２はＥであること、Ｘ４はＤであること、および／またはＸ６はＥであることのうちの２つまたはそれよりも多くが満たされる、請求項９４に記載の抗体。
【請求項９６】
Ｘ２はＥであり、Ｘ４はＤであり、およびＸ６はＥである、請求項９５に記載の抗体。
【請求項９７】
Ｘ１はＬであり、Ｘ３はＹであり、Ｘ５はＮであり、Ｘ７はＮであり、および／またはＸ８はＧである、請求項８０〜９６のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項９８】
Ｘ１はＬであること、Ｘ３はＹであること、Ｘ５はＮであること、Ｘ７はＮであること、および／またはＸ８はＧであることのうちの２つまたはそれよりも多くが満たされる、請求項９７に記載の抗体。
【請求項９９】
Ｘ１はＬであること、Ｘ３はＹであること、Ｘ５はＮであること、Ｘ７はＮであること、および／またはＸ８はＧであることのうちの３つまたはそれよりも多くが満たされる、請求項９８に記載の抗体。
【請求項１００】
Ｘ１はＬであること、Ｘ３はＹであること、Ｘ５はＮであること、Ｘ７はＮであること、および／またはＸ８はＧであることのうちの４つまたはそれよりも多くが満たされる、請求項９９に記載の抗体。
【請求項１０１】
Ｘ１はＬであり、Ｘ３はＹであり、Ｘ５はＮであり、Ｘ７はＮであり、およびＸ８はＧである、請求項１００に記載の抗体。
【請求項１０２】
抗体は、Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５，Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ，Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、またはＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、またはＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦまたはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３を含む、請求項７７〜１０１のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１０３】
Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ，Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、またはＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦまたはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む、請求項１０２に記載の抗体。
【請求項１０４】
Ｐ１−０６１０２９のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む、請求項７７〜１０３のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１０５】
Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ，Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、またはＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦまたはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのアミノ酸配列と、少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、または９９％同一であるアミノ酸配列を含むＶＨを含む、請求項１〜６３および７２〜１０４のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１０６】
Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ，Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、またはＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、またはＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦまたはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨを含む、請求項１〜６３および７２〜１０４のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１０７】
Ｐ１−０６１０２９のアミノ酸配列と、少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、または９９％同一であるアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項１〜１０６のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１０８】
Ｐ１−０６１０２９のＶＬを含む、請求項１０７に記載の抗体。
【請求項１０９】
Ｐ１−０６１０１５のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／もしくはＣＤＲ３、またはＰ１−０６１０１５と比べてＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／もしくはＣＤＲ３に１〜６つもしくは１〜８つのアミノ酸差異を含むその変異体を含み、最大で１、２、または３つのアミノ酸変異が、どの１つのＣＤＲにも存在する、請求項１〜６３および７２〜７６のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１１０】
Ｐ１−０６１０１５のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、またはＰ１−０６１０１５と比べてＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／もしくはＣＤＲ３に１〜６つのアミノ酸差異を含むその変異体を含み、最大で１、２、または３つのアミノ酸変異が、どの１つのＣＤＲにも存在する、請求項１０９に記載の抗体。
【請求項１１１】
アミノ酸変異は、グルタミン酸残基（Ｅ）、アスパラギン酸残基（Ｄ）、またはヒスチジン残基（Ｈ）への置換である、請求項１０８または１０９に記載の抗体。
【請求項１１２】
−  ＧＦＴＦＸ１Ｘ２Ｘ３ＭＨを含み、式中、Ｘ１はＥ、Ｄ、Ｈ、もしくはＳであり、Ｘ２はＨもしくはＹであり、およびＸ３はＤもしくはＡであるＣＤＲ１（配列番号４６６）、
−  Ｘ４Ｘ５ＷＸ６ＤＧＳＸ７Ｘ８Ｘ９Ｘ１０ＡＤＳＶＫＧを含み、式中、Ｘ４はＥ、Ｈ、もしくはＩであり、Ｘ５はＤもしくはＩであり、Ｘ６はＤもしくはＹであり、Ｘ７はＤもしくはＮであり、Ｘ８はＤ、Ｈ、もしくはＫであり、Ｘ９はＤ、Ｈ、もしくはＹであり、およびＸ１０はＥもしくはＹであるＣＤＲ２（配列番号４６７）、および／または
−  ＤＸ１１Ｘ１２ＦＹＸ１３Ｘ１４ＹＹＤＦＸ１５を含み、式中、Ｘ１１はＥもしくはＳであり、Ｘ１２はＥもしくはＧであり、Ｘ１３はＤ、Ｅ、もしくはＳであり、Ｘ１４はＤもしくはＳであり、およびＸ１５はＤ、Ｅ、もしくはＹであるＣＤＲ３（配列番号４６８）
を含む、請求項１０８〜１１１のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１１３】
−  ＧＦＴＦＸ１Ｘ２Ｘ３ＭＨを含み、式中、Ｘ１はＥ、Ｄ、Ｈ、もしくはＳであり、Ｘ２はＨもしくはＹであり、およびＸ３はＤもしくはＡであるＣＤＲ１（配列番号４６６）、
−  Ｘ４Ｘ５ＷＸ６ＤＧＳＸ７Ｘ８Ｘ９Ｘ１０ＡＤＳＶＫＧを含み、式中、Ｘ４はＥ、Ｈ、もしくはＩであり、Ｘ５はＤもしくはＩであり、Ｘ６はＤもしくはＹであり、Ｘ７はＤもしくはＮであり、Ｘ８はＤ、Ｈ、もしくはＫであり、Ｘ９はＤ、Ｈ、もしくはＹであり、およびＸ１０はＥもしくはＹであるＣＤＲ２（配列番号４６７）、および
−  ＤＸ１１Ｘ１２ＦＹＸ１３Ｘ１４ＹＹＤＦＸ１５を含み、式中、Ｘ１１はＥもしくはＳであり、Ｘ１２はＥもしくはＧであり、Ｘ１３はＤ、Ｅ、もしくはＳであり、Ｘ１４はＤもしくはＳであり、およびＸ１５はＤ、Ｅ、もしくはＹであるＣＤＲ３（配列番号４６８）
を含む、請求項１０８〜１１２のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１１４】
Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２、またはＰ１−０６８７５４のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３を含む、請求項９８〜１０２のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１１５】
Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２、またはＰ１−０６８７５４のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む、請求項１１４に記載の抗体。
【請求項１１６】
Ｐ１−０６１０１５のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む、請求項９８〜１１５のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１１７】
Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２、またはＰ１−０６８７５４のアミノ酸配列と、少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、または９９％同一であるアミノ酸配列を含むＶＨを含む、請求項９８〜１１６のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１１８】
Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２、またはＰ１−０６８７５４のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨを含む、請求項９８〜１１７のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１１９】
Ｐ１−０６１０１５のアミノ酸配列と、少なくとも９０％、９５％、９７％、９８％、または９９％同一であるアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項９８〜１１８のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１２０】
Ｐ１−０６１０１５のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項１１９に記載の抗体。
【請求項１２１】
ｈＶＩＳＴＡのヒスチジンリッチ領域にまたは付近に結合する、請求項１〜１２０のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１２２】
６．０〜６．５のｐＨを有する条件で、ｈＶＩＳＴＡのヒスチジンリッチ領域にまたは付近に結合する、請求項１２１に記載の単離された抗体。
【請求項１２３】
ｈＶＩＳＴＡに対する結合をめぐって、Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ，Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、またはＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２またはＰ１−０６８７５４のＶＨおよびＶＬを含む１つまたは複数の抗体と競合または交差競合する、請求項１〜１２２のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１２４】
以下のアミノ酸残基：Ｔ３５、Ｙ３７、Ｋ３８、Ｔ３９、Ｙ４１、Ｒ５４、Ｔ６１、Ｆ６２、Ｑ６３、Ｌ６５、Ｈ６６、Ｌ６７、Ｈ６８、Ｈ６９、Ｆ９７、Ｌ１１５、Ｖ１１７、Ｉ１１９、Ｈ１２１、Ｈ１２２、Ｓ１２４、Ｅ１２５、Ｒ１２７の１つまたは複数が突然変異されているｈＶＩＳＴＡに有意には結合しない、請求項１〜１２３のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１２５】
配列番号１または２からなるｈＶＩＳＴＡには結合するが、以下のアミノ酸残基：Ｔ３５、Ｙ３７、Ｋ３８、Ｔ３９、Ｙ４１、Ｒ５４、Ｔ６１、Ｆ６２、Ｑ６３、Ｌ６５、Ｈ６６、Ｌ６７、Ｈ６８、Ｈ６９、Ｆ９７、Ｌ１１５、Ｖ１１７、Ｉ１１９、Ｈ１２１、Ｈ１２２、Ｓ１２４、Ｅ１２５、Ｒ１２７の１つまたは複数が突然変異されているｈＶＩＳＴＡに有意には結合しない抗体。
【請求項１２６】
以下のアミノ酸残基：Ｔ３５、Ｙ３７、Ｋ３８、Ｔ３９、Ｙ４１、Ｒ５４、Ｔ６１、Ｆ６２、Ｑ６３、Ｌ６５、Ｈ６６、Ｌ６７、Ｈ６８、Ｈ６９、Ｆ９７、Ｌ１１５、Ｖ１１７、Ｉ１１９、Ｈ１２１、Ｈ１２２、Ｓ１２４、Ｅ１２５、Ｒ１２７の２、３、４、５つ、またはそれよりも多くが突然変異されているｈＶＩＳＴＡに有意には結合しない、請求項１〜１２５のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１２７】
前記以下の残基の１つまたは複数が、表１５に示されている対応する残基の１つに突然変異されているｈＶＩＳＴＡに結合しない、請求項１２４〜１２６のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１２８】
例えば、ｉｃＩＥＦにより測定して、６．５〜６．８の等電点（ｐＩ）を有する、請求項１〜１２７のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１２９】
低凝集、例えば、実施例で決定されている‘０２９、‘７６１、または‘７６７の凝集と同様であるかまたはより低い凝集を示す、請求項１〜１２８のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１３０】
例えば、実施例で決定されている‘０２９、‘７６１、または‘７６７の粘度と同様であるかまたはより低い粘度を示す、請求項１〜１２９のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１３１】
例えば、実施例で決定されている‘０２９、‘７６１、または‘７６７の流体力学的半径と同様であるかまたはより低い流体力学的半径を示す、請求項１〜１３０のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１３２】
例えば、実施例で決定されている‘０２９、‘７６１、または‘７６７のＴｍ１と同様であるかまたはより高いＴｍ１を示す、請求項１〜１３１のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１３３】
例えば、実施例で決定されている‘０２９、‘７６１、または‘７６７の高分子量種の量と同様であるかまたはより低い高分子量種の量を示す、請求項１〜１３２のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１３４】
ＩｇＧ抗体である、請求項１〜１３３のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１３５】
ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、またはＩｇＧ４抗体（任意選択でＳ２２８Ｐを有するＩｇＧ４）である、請求項１３４に記載の単離された抗体。
【請求項１３６】
エフェクターレス抗体である、請求項１〜１３５のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１３７】
定常領域は、抗体のエフェクター機能を低減する、野生型重鎖定常領域の１〜５つの突然変異を含む、請求項１３６に記載の単離された抗体。
【請求項１３８】
抗体の定常領域は、ＩｇＧ１．３、ＩｇＧ１．１であるか、またはＰ２３８Ｋ置換を有するＩｇＧ１である、請求項１〜１３７のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１３９】
エフェクター機能を有する、請求項１〜１３５のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１４０】
アフコシル化されている（例えば、アフコシル化ＩｇＧ１抗体である）、請求項１３９に記載の単離された抗体。
【請求項１４１】
定常領域は、抗体のエフェクター機能を増強する１〜５つの突然変異を含む、請求項１３９または１４０に記載の単離された抗体。
【請求項１４２】
全長抗体である、請求項１〜１４１のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１４３】
抗体の抗原結合性断片である、請求項１〜１４１のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１４４】
多量体（例えば、二量体または三量体）抗体である、請求項１〜１４３のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１４５】
別の分子に連結されている（例えば、共有結合的に）、請求項１〜１４４のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１４６】
他の分子は、標識である、請求項１４５に記載の単離された抗体。
【請求項１４７】
他の分子は、ペプチドである、請求項１４５または１４６に記載の単離された抗体。
【請求項１４８】
抗体薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）である、請求項１〜１４７のいずれか一項に記載の単離された抗体。
【請求項１４９】
請求項１〜１４８のいずれか一項に記載の抗体をコードする単離された核酸。
【請求項１５０】
請求項１〜１４９のいずれか一項に記載の抗体の重鎖および／または軽鎖をコードする単離された核酸。
【請求項１５１】
請求項１〜１５０のいずれか一項に記載の抗体の重鎖をコードする核酸、および抗体の軽鎖をコードする核酸を含む組成物。
【請求項１５２】
請求項１４９〜１５１のいずれか一項に記載の単離された核酸を含む細胞。
【請求項１５３】
抗体を調製するための方法であって、抗体が発現される条件で請求項１５２に記載の細胞を培養することを含む方法。
【請求項１５４】
請求項１〜１５２のいずれか一項に記載の単離された抗体、核酸、組成物、または細胞、および薬学的に許容される担体を含む組成物。
【請求項１５５】
第２の治療剤を含む、請求項１５４に記載の組成物。
【請求項１５６】
第２の治療剤は、免疫賦活剤である、請求項１５５に記載の組成物。
【請求項１５７】
免疫刺激剤は、免疫抑制分子、例えばＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４、およびＬＡＧ−３のアンタゴニストであるか、または免疫刺激分子、例えばＧＩＴＲおよびＯＸ４０のアゴニストである、請求項１５６に記載の組成物。
【請求項１５８】
がんを有する対象を治療するための方法であって、対象に、免疫応答を刺激する、および／またはＶＩＳＴＡアンタゴニスト抗体である、請求項１〜１５２および１５４〜１５７のいずれか一項に記載の治療的有効量の組成物または単離された抗体を投与することを含む方法。
【請求項１５９】
対象は、がんの腫瘍にＶＩＳＴＡ陽性細胞を有する、請求項１５８に記載の方法。
【請求項１６０】
細胞は、ＶＩＳＴＡ陽性浸潤リンパ球性（例えば、Ｔ細胞）または骨髄単球性細胞である、請求項１５９に記載の方法。
【請求項１６１】
対象は、まず、腫瘍中のＶＩＳＴＡ陽性細胞の存在について試験される、請求項１５８〜１６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６２】
第２の療法を施すことをさらに含む、請求項１５８〜１６１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６３】
第２の療法は、放射線療法、外科手術、または第２の作用剤の投与である、請求項１６２に記載の方法。
【請求項１６４】
第２の療法は、第２の作用剤であり、第２の作用剤は、免疫賦活剤である、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１６５】
免疫賦活剤は、免疫抑制分子、例えばＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４、およびＬＡＧ−３のアンタゴニスト、または免疫刺激分子、例えばＧＩＴＲおよびＯＸ４０のアゴニストである、請求項１６４に記載の方法。
【請求項１６６】
対象の感染性疾患（例えばウイルス疾患）を治療するための方法であって、対象に、免疫応答を刺激する、および／またはＶＩＳＴＡアンタゴニストである、請求項１〜１５２および１５４〜１５７のいずれか一項に記載の治療的有効量の組成物または単離された抗体を投与することを含む方法。
【請求項１６７】
炎症、炎症性状態、および自己免疫疾患、移植片対宿主病、または免疫応答の低減から利益を得る疾患を治療するための方法であって、対象に、免疫応答、例えばＴ細胞活性化を阻害するか、またはＶＩＳＴＡアゴニストである、請求項１〜１５２および１５４〜１５７のいずれか一項に記載の治療的有効量の組成物または単離された抗体を投与することを含む方法。
【請求項１６８】
ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するＡｂを特定するための方法であって、試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ、あるいはｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤのＩｇＶドメインを含むかまたは配列番号２のアミノ酸２０〜９５、２０〜７０、３５〜７０〜１２７、もしくは３５〜１２７を含むその断片を含むポリペプチドと、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨで接触させること、およびポリペプチドに１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで結合する試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを選択することを含む方法。
【請求項１６９】
ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて５×１０−３ｓｅｃ−１またはそれよりも小さなＫｏｆｆでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するＡｂを特定するための方法であって、試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ、あるいはｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤのＩｇＶドメインを含むかまたは配列番号２のアミノ酸２０〜９５、２０〜７０、３５〜７０、もしくは３５〜１２７を含むその断片を含むポリペプチドと、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨで接触させること、およびポリペプチドに５×１０−３ｓｅｃ−１またはそれよりも小さなＫｏｆｆで結合する試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを選択することを含む方法。
【請求項１７０】
ｐＨ６．５にて、ｐＨ７．０と同様の親和性でｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに特異的に結合するＡｂを特定するための方法であって、
ａ．  試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ、あるいはｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤのＩｇＶドメインを含むかまたは配列番号２のアミノ酸２０〜９５、２０〜７０、もしくは３５〜７０、もしくは３５〜１２７を含むその断片を含むポリペプチドと、ｐＨ６．５で接触させること、
ｂ．  試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを、（ａ）のポリペプチドとｐＨ７．０で接触させること、および
ｃ．  ｐＨ６．５およびｐＨ７．０にて、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでポリペプチドに結合する場合、試験Ａｂを選択すること
を含む方法。
【請求項１７１】
ｐＨ６．５にて、ｐＨ７．０における場合より高い親和性でｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するＡｂを特定するための方法であって、
ａ．  試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ、あるいはｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤのＩｇＶドメインを含むかまたは配列番号２のアミノ酸２０〜９５、２０〜７０、３５〜７０、もしくは３５〜１２７を含むその断片を含むポリペプチドと、ｐＨ６．５で接触させること、
ｂ．  試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを、（ａ）のポリペプチドとｐＨ７．０で接触させること、および
ｃ．  ｐＨ６．５にて、ｐＨ７．０における場合の２分の１以下のＫＤまたはｋｏｆｆで、ポリペプチドに結合する場合、試験Ａｂを選択すること
を含む方法。
【請求項１７２】
がんの処置に使用するための、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに特異的に結合するＡｂを特定するための方法であって、
ｃ．  ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに特異的に結合するＡｂを、請求項１６８〜１７１に記載の方法などにより特定すること、および
ｄ．  ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨで、腫瘍モデルの免疫応答を始動もしくは増強するかまたは腫瘍増殖を阻害する（ａ）のＡｂを選択すること
を含む方法。
【請求項１７３】
工程（ｂ）は、Ｔ細胞活性を測定することを含む、請求項１７２に記載の方法。
【請求項１７４】
Ａｂの抗腫瘍効果を測定することをさらに含む、請求項１７２または１７３に記載の方法。
【請求項１７５】
ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するＡｂの抗腫瘍効能を向上させるための方法であって、
ａ．  ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、所望の値未満の親和性でｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するＡｂを準備する工程、
ｂ．  Ａｂの重鎖または軽鎖の１〜５つのアミノ酸残基を、異なるアミノ酸残基で置換し、１〜５つのアミノ酸残基は、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤとの接触残基である工程、
ｅ．  （ｂ）で得られたＡｂが、（ａ）のＡｂと比べて、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに対してより高い親和性を有するか否かを決定する工程、および
ｆ．  ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するＡｂを得るのに十分なラウンドの回数だけ、工程（ａ）〜（ｃ）を繰り返す工程
を含む方法。
【請求項１７６】
ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するＡｂの抗腫瘍効能を向上させるための方法であって、
ａ．  ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、所望の値未満の親和性でｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するＡｂを準備すること、
ｂ．  （ａ）のＡｂの変異体のライブラリーであって、各変異体は、Ａｂの重鎖または軽鎖における１〜５つのアミノ酸残基の、異なるアミノ酸残基による置換を含み、１〜５つのアミノ酸残基は、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤとの接触残基であるライブラリーを調製すること、
ｃ．  ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、（ｂ）の変異体のライブラリーのＡｂを選択すること、および
ｄ．  （ｃ）のＡｂの抗腫瘍効能を腫瘍モデルにて試験すること
を含む方法。
【請求項１７７】
ヒトＶＩＳＴＡ  ＥＣＤに結合する抗体の薬物動態を向上させるための方法であって、例えばｐＨ６．５と等しいかまたはそれよりも低い酸性条件でヒトＶＩＳＴＡに結合する抗体の能力を増強することを含む方法。
【請求項１７８】
ヒトＶＩＳＴＡに結合し、より長い半減期（良好な薬物動態学的特質）を有する抗体を選択するための方法であって、例えばｐＨ６．５と等しいかまたはそれよりも低い酸性条件でヒトＶＩＳＴＡに結合する抗体を選択することを含む方法。
【請求項１７９】
ｈＶＩＳＴＡに結合する抗体の効能を向上させるための方法であって、抗体の１つまたは複数のＶＨ  ＣＤＲのアスパラギン酸、グルタミン酸、および／またはヒスチジン残基の数を増加させて、酸性ｐＨにおけるｈＶＩＳＴＡに対する抗体の結合を増強することを含む方法。
【請求項１８０】
ｈＶＩＳＴＡに結合し、ヒト血液中で長い半減期を有し、および／または腫瘍環境中のＴ細胞を刺激する抗体を単離するための方法であって、ｈＶＩＳＴＡに結合する抗体のライブラリーを、酸性ｐＨでは結合するが、中性ｐＨでは結合しないものについてスクリーニングすることを含む方法。
【請求項１８１】
生理的ｐＨで結合する抗体を対抗選択することを含む、請求項１６８〜１８０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８２】
ＶＩＳＴＡアンタゴニストまたはＶＩＳＴＡアゴニストのいずれかである抗体を選択することをさらに含む、請求項１６８〜１８１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８３】
ＶＩＳＴＡとＶＩＳＴＡ共受容体との相互作用、および／またはＶＩＳＴＡとＴ細胞もしくは骨髄単球性細胞との相互作用（interation）を阻害する抗体を選択することを含む、請求項１６８〜１８２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８４】
Ｐ１−０６８７６１またはＰ１−０６８７６７の特質の１つまたは複数を有する抗体を選択することをさらに含む、請求項１６８〜１８３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８５】
試料中のＶＩＳＴＡを検出するための方法であって、試料を、請求項１〜１４８のいずれか一項に記載のＶＩＳＴＡ抗体と接触させることを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、Ｔ細胞活性化のＶドメイン免疫グロブリン含有サプレッサー（ＶＩＳＴＡ）に酸性ｐＨで特異的に結合する抗体、およびがん治療におけるそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｔ細胞活性化のＶドメインＩｇ含有サプレッサー、すなわちＶＩＳＴＡは、骨髄単球性細胞および他の白血球により発現されるＢ７ファミリーの免疫受容体の共阻害性メンバーである。しかしながら、ＶＩＳＴＡが免疫応答を抑制する機序はよく理解されていない。
【０００３】
本発明者らは、ＶＩＳＴＡが、他の既知免疫受容体とは異なり、酸性ｐＨにてその対抗受容体に選択的にエンゲージし機能するが、生理的ｐＨ（例えば、７．３〜７．４）では活性が非常に低いことを見出した。したがって、ＶＩＳＴＡは、血中を循環する細胞を妨害せずに、または非炎症性非酸性組織に滞留せずに、腫瘍床または炎症部位などの酸性微小環境において免疫応答を抑制する可能性がある。加えて、本発明者らは、抗ＶＩＳＴＡ抗体を、ＶＩＳＴＡ自体の酸性ｐＨ選択性と同様に、酸性ｐＨではＶＩＳＴＡに選択的に結合するが、生理的ｐＨではほとんどまたはまったく結合しないように操作することができることを見出した。こうした酸性ｐＨ選択的抗体は、生理的ｐＨでＶＩＳＴＡに結合する抗体に比べて、がんなどの疾患を治療するための望ましい特質を提供することができる。
【発明の概要】
【０００４】
本開示は、酸性ｐＨで（例えば、酸性条件で）、ヒトＶＩＳＴＡ（「ｈＶＩＳＴＡ」または「ｈｕＶＩＳＴＡ」）などのＶＩＳＴＡの細胞外ドメイン（ＥＣＤ）に特異的に結合する抗体に関する。また、本開示は、酸性ｐＨではｈＶＩＳＴＡなどのＶＩＳＴＡの細胞外ドメイン（ＥＣＤ）に特異的に結合するが、中性または生理的ｐＨではほとんどまたはまったく結合しない抗体に関する。本発明者らは、本明細書において、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤアミノ酸配列は、多くの保存ならびに非保存ヒスチジン残基を含み、ＶＩＳＴＡのＥＣＤにおけるヒスチジン残基の頻度は、他のＢ７ファミリーメンバーおよび他の免疫グロブリンスーパーファミリーメンバーと比べて非常に高いことを認識した。（図１Ａおよび１Ｂを参照。）アミノ酸ヒスチジンは、溶液中で約６．５のｐＫａを有する。これは、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨでは、タンパク質内のヒスチジン残基が、多くの場合でプロトン化されており、したがって正に荷電されているが、ｐＨ６．５よりも高いｐＨでは、次第に非プロトン化され、電荷が中性になることを意味する。腫瘍微小環境および炎症組織は酸性であることが多いため、こうした微小環境に見出されるＶＩＳＴＡタンパク質は、ヒスチジン残基が少なくとも部分的にプロトン化されている可能性がある。本明細書で考察されているように、本発明者らは、ヒスチジンプロトン化が、ＶＩＳＴＡの立体構造、表層構造、および／または電荷密度に影響を及ぼす可能性があり、ひいては、それにより受容体−リガンド相互作用および抗体結合の両方のｐＨ特異的またはｐＨ選択的エピトープが生成される可能性があるという仮説を立てた。酸性ｐＨで結合するが、中性または生理的ｐＨでは結合しない抗体でＶＩＳＴＡを標的とすることにより、循環中のおよびリンパ系器官滞留性の骨髄単球性細胞による標的媒介性薬物動態を防止し、腫瘍微小環境における抗体ＰＫ、受容体占有、および活性を向上させることができる。また、酸性ｐＨ選択的抗体は、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、およびペイロード（抗体−薬物コンジュゲート）の送達などの、治療モダリティの場合、循環中ではなく腫瘍内にて、標的細胞に対するＶＩＳＴＡ抗体の特異性を向上させることができる。
【０００５】
２０１８年２月２８に出願された、優先権主張米国特許仮出願第６２／６３６，７４６号には、幾つか図面のカラー版が提供されている。その優先権出願ファイルは、本出願の公開により入手可能になっており、カラー図面のコピーは、必要な料金を支払えば請求により、米国特許商標局から提供されることになるはずである。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
【図１Ａ】ＶＩＳＴＡの細胞外ドメインが、非常に高頻度のヒスチジン残基を含み、そうしたヒスチジン残基の多くは保存されており、そうしたヒスチジン残基の少なくとも一部は、受容体−リガンド結合に関与することができることを示す図である。また、免疫グロブリンドメイン含有タンパク質のグラフであり、各タンパク質の細胞外ドメインアミノ酸残基の数がＸ軸にプロットされており、各タンパク質の細胞外ドメイン内のヒスチジン残基の頻度がＹ軸にプロットされている。各データポイントのサイズは、各タンパク質の細胞外ドメインのヒスチジン残基の総数に対応する。
【図１Ｂ】ＶＩＳＴＡの細胞外ドメインが、非常に高頻度のヒスチジン残基を含み、そうしたヒスチジン残基の多くは保存されており、そうしたヒスチジン残基の少なくとも一部は、受容体−リガンド結合に関与することができることを示す図である。また、ヒト、カニクイザル（ｃｙｎｏｍｏｌｇｕｓ  ｍａｃａｑｕｅ）、およびマウスＶＩＳＴＡの細胞外ドメインのアラインされたアミノ酸配列を示す。シグナルペプチド（Ｓｉｇ）および膜貫通ドメイン（ＴＭＤ）配列位置には印が付けされている。３つの種すべてにわたって保存されているヒスチジン残基は、太字および下線で示されており、ヒトおよびシノルモグス・マカク（cynolmogus macaque）にわたって保存されているヒスチジン残基は、太字のみで示されている。
【図１Ｃ】ＶＩＳＴＡの細胞外ドメインが、非常に高頻度のヒスチジン残基を含み、そうしたヒスチジン残基の多くは保存されており、そうしたヒスチジン残基の少なくとも一部は、受容体−リガンド結合に関与することができることを示す図である。また、ヒトＶＩＳＴＡ免疫グロブリンドメインの三次元構造のモデルを示す。ヒスチジン残基は、球棒型トレースとして示されている。
【図２Ａ】ＶＩＳＴＡの細胞外ドメインのヒスチジン残基が、生理的ｐＨではなく酸性ｐＨにて対抗受容体選択性を付与するモデルを示す図である。また、ヒスチジン残基のピロールアンモニウム基（ＮＨ）のプロトン化の欠如と存在とが平衡状態にあることを示す。溶液中でのヒスチジンのｐＫａは、６．５である。これは、ヒスチジン残基が、ｐＨ６．５およびそれよりも低いｐＨでは、より高いｐＨよりもプロトン化されている可能性がより高く、したがって正に荷電されている可能性がより高いことを示す。
【図２Ｂ】ＶＩＳＴＡの細胞外ドメインのヒスチジン残基が、生理的ｐＨではなく酸性ｐＨにて対抗受容体選択性を付与するモデルを示す図である。また、ＶＩＳＴＡが、酸性ｐＨで、Ｐ−セレクチン糖タンパク質リガンド１（ＰＳＧＬ−１）または他の対抗受容体およびリガンド（「ＶＩＳＴＡ−Ｒ」）に選択的にエンゲージするモデルを示す。したがって、生理的ｐＨではなく酸性ｐＨにてＶＩＳＴＡの細胞外ドメインに結合する抗体は、ＶＩＳＴＡ活性の阻害または調節に重要である可能性がある。
【図３】腫瘍浸潤性マクロファージ、樹状細胞、好中球、ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞、ＣＤ４＋制御性Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、およびＢ細胞上のＶＩＳＴＡ表面発現のレベル（抗ＶＩＳＴＡ抗体染色の平均蛍光発光強度（ＭＦＩ））を示す図である。ＶＩＳＴＡは、多数の腫瘍浸潤性白血球、特に骨髄細胞上に発現される。腫瘍微小環境は酸性であることが多く、ＶＩＳＴＡは、対抗受容体およびリガンドとエンゲージすることが可能である。
【図４Ａ】ＶＩＳＴＡが、酸性ｐＨでは白血球およびＰＳＧＬ−１に選択的に結合するが、中性ｐＨではほとんどまたはまったく結合せず、この結合は、抗ＶＩＳＴＡ抗体によるブロックすることができることを示す図である。図４Ａの左側は、活性化ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞に結合する蛍光コンジュゲート組換えＶＩＳＴＡ多量体の代表的なヒストグラムを示す。塗潰しヒストグラムは、より濃い灰色からより薄い灰色に向かってｐＨ７．０、６．５、６．４、６．３、６．１、および６．０での結合を示す。一部のヒストグラムには、それらの対応するｐＨが表記されている。ｐＨ６．０で結合する非ＶＩＳＴＡコントロール多量体は、塗潰無しヒストグラムとして示される。右側には、２つのドナーに由来する活性化ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞に結合するＶＩＳＴＡ（円形）およびコントロール（三角形）多量体の様々なｐＨにおける平均ＭＦＩがグラフ化されている。
【図４Ｂ】ＶＩＳＴＡが、酸性ｐＨでは白血球およびＰＳＧＬ−１に選択的に結合するが、中性ｐＨではほとんどまたはまったく結合せず、この結合は、抗ＶＩＳＴＡ抗体によるブロックすることができることを示す図である。図４Ｂは、ｐＨ６．０およびｐＨ７．４にて末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）に結合する組換えＶＩＳＴＡ多量体の代表的なヒストグラムを示す。塗潰しヒストグラムは、より濃い灰色からより薄い灰色に向かって、ｐＨ６．０での、ＣＤ１９＋Ｂ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ５６＋ＮＫ細胞、およびＣＤ１４＋単球に対する結合を示す。塗潰無しの実線境界線および点線境界線ヒストグラムは、ｐＨ７．４での、それぞれＰＢＭＣリンパ球および単球に対する結合を示す。
【図４Ｃ】ＶＩＳＴＡが、酸性ｐＨでは白血球およびＰＳＧＬ−１に選択的に結合するが、中性ｐＨではほとんどまたはまったく結合せず、この結合は、抗ＶＩＳＴＡ抗体によるブロックすることができることを示す図である。図４Ｃは、抗体（正方形）または非ＶＩＳＴＡ特異的アイソタイプ一致コントロール抗体（円形）をブロックする抗ＶＩＳＴＡの存在下での、活性化ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞に対する代表的な組換えＶＩＳＴＡ多量体の結合を示す。抗体濃度は、対数スケールでプロットされている。非線形回帰曲線も示されている。三角形は、組換えＶＩＳＴＡ多量体で染色されなかった活性化ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞に由来するバックグランドシグナルを示す。
【図４Ｄ】ＶＩＳＴＡが、酸性ｐＨでは白血球およびＰＳＧＬ−１に選択的に結合するが、中性ｐＨではほとんどまたはまったく結合せず、この結合は、抗ＶＩＳＴＡ抗体によるブロックすることができることを示す図である。また、ヒトＰＳＧＬ−１を発現するようにトランスフェクトされたヘパラン硫酸欠損チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞（系統ｐＧＳＤ−６７７、アメリカンタイプカルチャーコレクション）にｐＨ６．０で結合する組換えＶＩＳＴＡ多量体の代表的な二次元フローサイトメトリープロットを示す。多量体結合は、図４Ｃで示されている抗ＶＩＳＴＡブロックキング抗体の存在下および非存在下で実施した。組換えＶＩＳＴＡ多量体で未染色のままだった細胞は、コントロールとして示されている。ＰＳＧＬ−１抗体染色がＹ軸にプロットされており、ＶＩＳＴＡ多量体染色がＸ軸にプロットされている。
【図４Ｅ】ｐＨ６．０およびｐＨ７．４にてマウス脾細胞に結合する組換えマウスＶＩＳＴＡ−Ｆｃ融合タンパク質の代表的なヒストグラムを示す。塗潰しヒストグラムは、より濃い灰色からより薄い灰色に向かって、ｐＨ６．０での、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ１１ｂ＋骨髄細胞、およびＣＤ４＋Ｔ細胞に対する結合を示す。塗潰無しのヒストグラムは、ｐＨ７．４での全脾細胞に対する結合を示す。
【図５Ａ−５Ｂ】ＶＩＳＴＡが、酸性ｐＨにてＴ細胞抑制および細胞間接着を優先的に媒介し、両効果が、抗ＶＩＳＴＡブロッキング抗体により逆行させることができることを示す図である。Ａは、ｐＨ６．０および７．０における、ｈＶＩＳＴＡまたはベクターコントロールを発現する２９３Ｔ細胞（ｙ軸にプロットされている）と、ｘ軸の細胞表面ヘパラン硫酸を内因的に発現するＣＨＯ細胞との間の代表的な細胞間コンジュゲート形成を示す。Ｂは、抗ＶＩＳＴＡブロックキング抗体、抗ＶＩＳＴＡ非ブロックキング抗体、またはアイソタイプ一致非ＶＩＳＴＡ特異的コントロール抗体の存在下でｐＨ６．０にて形成された同じ細胞間の細胞コンジュゲートの頻度を示すグラフである。
【図５Ｃ−５Ｄ】ＶＩＳＴＡが、酸性ｐＨにてＴ細胞抑制および細胞間接着を優先的に媒介し、両効果が、抗ＶＩＳＴＡブロッキング抗体により逆行させることができることを示す図である。Ｃは、ｈＶＩＳＴＡおよび抗ヒトＴ細胞受容体アゴニスト抗体ＯＫＴ３の単鎖可変断片を発現する２９３Ｔ細胞（「人工抗原提示細胞」）と共に種々のｐＨで共培養した後で、ＮＦｋＢルシフェラーゼレポーターを発現するジャーカット（ヒトＴ細胞株）細胞により生成されたルシフェラーゼ活性の代表的なプロットを示す。抗ＶＩＳＴＡブロックキング抗体（正方形）またはアイソタイプ一致非ＶＩＳＴＡ特異的コントロール抗体（円形）を、共培養細胞に添加した。Ｄには、図５Ａの中で示されているデータが、コントロールと比べた、抗ＶＩＳＴＡ抗体処置によるルシフェラーゼシグナルの倍数増としてプロットされている（「効果サイズ」）。
【図６Ａ】ＶＩＳＴＡを、細胞内エンドソーム、特にＲａｂ１１＋再循環エンドソームに見出すことができ、ＶＩＳＴＡは、エンドソーム輸送により細胞表面へとおよび細胞表面から再循環することができることを示す図である。図６Ａは、ヒトＶＩＳＴＡを発現する２９３Ｔ細胞内での、ＶＩＳＴＡ、Ｒａｂ５（初期エンドソームマーカー）、Ｒａｂ７（後期エンドソームマーカー）、およびＲａｂ１１（再循環エンドソームマーカー）の共局在化を示す。
【図６Ｂ】ＶＩＳＴＡを、細胞内エンドソーム、特にＲａｂ１１＋再循環エンドソームに見出すことができ、ＶＩＳＴＡは、エンドソーム輸送により細胞表面へとおよび細胞表面から再循環することができることを示す図である。図６Ｂは、ヒト単球内でのＶＩＳＴＡおよびＲａｂ１１の共局在化を示す。細胞内ＶＩＳＴＡは、Ｒａｂ１１＋再循環エンドソームと共局在化されている。ＶＩＳＴＡ抗体と同じアイソタイプの非ＶＩＳＴＡ結合コントロール抗体（「ｃＡｂ」）は、単球に対する検出可能な結合を示さない。
【図６Ｃ】ＶＩＳＴＡを、細胞内エンドソーム、特にＲａｂ１１＋再循環エンドソームに見出すことができ、ＶＩＳＴＡは、エンドソーム輸送により細胞表面へとおよび細胞表面から再循環することができることを示す図である。図６Ｃは、ｐＨ７．４（黒色）、６．７（より濃い灰色）、および６．（より薄い灰色）における、組換えＶＩＳＴＡに対する３つの抗ＶＩＳＴＡ抗体の結合を示す。
【図６Ｄ】ＶＩＳＴＡを、細胞内エンドソーム、特にＲａｂ１１＋再循環エンドソームに見出すことができ、ＶＩＳＴＡは、エンドソーム輸送により細胞表面へとおよび細胞表面から再循環することができることを示す図である。図６Ｄは、カテプシンＢ感受性リンカーおよび細胞傷害ペイロードを有する同じ抗ＶＩＳＴＡ抗体１（逆三角形）、２（円形）、および３（正方形）、または非ＶＩＳＴＡ特異的コントロール抗体（三角形）による死滅に対する、ＶＩＳＴＡ発現急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）細胞株の感受性を示す。細胞生存率（ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ  ＬＵ）がＹ軸にプロットされており、抗体濃度がＸ軸にプロットされている。
【図６Ｅ】ＶＩＳＴＡを、細胞内エンドソーム、特にＲａｂ１１＋再循環エンドソームに見出すことができ、ＶＩＳＴＡは、エンドソーム輸送により細胞表面へとおよび細胞表面から再循環することができることを示す図である。図６Ｅには、抗ＶＩＳＴＡ抗体３のｈＶＩＳＴＡ結合が、酸性ｐＨで結合不良を示さない操作された変異体（「ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂ３ｃ」）のｈＶＩＳＴＡ結合に対して比較されている。
【図６Ｆ】ＶＩＳＴＡを、細胞内エンドソーム、特にＲａｂ１１＋再循環エンドソームに見出すことができ、ＶＩＳＴＡは、エンドソーム輸送により細胞表面へとおよび細胞表面から再循環することができることを示す図である。図６Ｆは、抗ＶＩＳＴＡ抗体３（正方形）および３ｃ（菱形）の力価を比較した抗体薬物−コンジュゲートアッセイを示す。
【図６Ｇ】ＶＩＳＴＡを、細胞内エンドソーム、特にＲａｂ１１＋再循環エンドソームに見出すことができ、ＶＩＳＴＡは、エンドソーム輸送により細胞表面へとおよび細胞表面から再循環することができることを示す図である。図６Ｇは、エンドソーム輸送のスキームを示し、ＶＩＳＴＡは、初期エンドソームおよび再循環エンドソームにより、細胞表面へとおよび細胞表面から再循環する。
【図７Ａ】抗ＶＩＳＴＡ抗体変異体ライブラリーをどのように設計したか、および酸性ｐＨ選択的抗体を得るためにどのようにスクリーニングしたかを示す図である。図７Ａは、スクリーニング用’０２９ライブラリーを生成するために、抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体クローンＰ１−０６１０２９（’０２９と省略される）のＶＨ  ＣＤＲ３になされたアミノ酸置換を示す。ＶＩＳＴＡのヒスチジンリッチ領域に対する酸性ｐＨでの結合を潜在的に向上させるために、ライブラリーでは、負荷電アミノ酸であるアスパラギン酸およびグルタミン酸ならびにｐＨ応答性ヒスチジンの置換を可能にした。Ｘ＝Ｈ、Ｄ、またはＥ。角括弧付き配列は、不安定性の導入を回避するために合成から除去した。１〜２つの突然変異を有するＰ１−０６１０２９  ＨＣＤＲ３の合計６４７個のユニーク配列を合成した。
【図７Ｂ】抗ＶＩＳＴＡ抗体変異体ライブラリーをどのように設計したか、および酸性ｐＨ選択的抗体を得るためにどのようにスクリーニングしたかを示す図である。図７Ｂは、’０２９ライブラリーを反復スクリーニングし、酸性ｐＨ選択的抗体変異体を選択する手順を示す。Ｒは、選択ラウンドを示す。
【図７Ｃ】抗ＶＩＳＴＡ抗体変異体ライブラリーをどのように設計したか、および酸性ｐＨ選択的抗体を得るためにどのようにスクリーニングしたかを示す図である。図７Ｃは、９ラウンドの選択後の変異体プールを示す、代表的な二次元フローサイトメトリープロットデータを示す。ＶＩＳＴＡ結合がＹ軸にプロットされており、変異体抗体発現がＸ軸にプロットされている。種々の抗体濃度およびｐＨでの結合データが示されている。
【図７Ｄ】抗ＶＩＳＴＡ抗体変異体ライブラリーをどのように設計したか、および酸性ｐＨ選択的抗体を得るためにどのようにスクリーニングしたかを示す図である。図７Ｄは、ｐＨ６．０および７．４における、ヒトＶＩＳＴＡに対するＰ１−０６１０２９およびその子孫クローンの結合のダイアグラムを示す。
【図７Ｅ】抗ＶＩＳＴＡ抗体変異体ライブラリーをどのように設計したか、および酸性ｐＨ選択的抗体を得るためにどのようにスクリーニングしたかを示す図である。図７Ｅは、ｐＨ６．０における、ヒトＶＩＳＴＡに対するＰ１−０６１０２９およびその子孫クローンの解離速度のダイアグラムを示す。
【図７Ｆ】抗ＶＩＳＴＡ抗体変異体ライブラリーをどのように設計したか、および酸性ｐＨ選択的抗体を得るためにどのようにスクリーニングしたかを示す図である。図７Ｆは、ｐＨ６．０およびｐＨ７．４における、ヒトＶＩＳＴＡに対する抗体Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６７、およびＰ１−０６１０２９のＳＰＲ結合データを示す。
【図８Ａ−８Ｂ】ＶＩＳＴＡ抗体Ｐ１−０６８７６１およびＰ１−０６８７６７のｐＨ選択的細胞結合、ブロックキング、およびエフェクター活性を示す図である。ＡおよびＢは、ヒトＶＩＳＴＡを異所的に発現するラージ細胞に対する、酸性ｐＨ選択的抗体Ｐ１−０６８７６１（図８Ａ）およびＰ１−０６８７６７（図８Ｂ）結合の平均蛍光発光強度を示す。細胞を、およそｐＨ６．０（円形；図８Ａで最も上方にある曲線）、６．１（正方形；３番目に上方にある曲線）、６．２（三角形；２番目に上方にある曲線）、６．４（逆三角形；ｐＨ６．１曲線に近い４番目に上方にある曲線）、６．６（菱形；下から４番目の曲線）、７．０（円形；下から３番目の曲線）、７．２（正方形；下から２番目の曲線）、および８．１（塗潰無しの三角形；図８Ａで最も下方の曲線）にて染色した。結合は、蛍光コンジュゲート抗ヒトＩｇＧ二次抗体で検出した。
【図８Ｃ】ＶＩＳＴＡ抗体Ｐ１−０６８７６１およびＰ１−０６８７６７のｐＨ選択的細胞結合、ブロックキング、およびエフェクター活性を示す図である。図８Ｃは、ヒトＶＩＳＴＡを異所的に発現するラージ細胞に対する、３１２５ｎｇ／ｍＬのＰ１−０６８７６７（円形）およびアイソタイプ一致非特異的コントロール抗体（三角形）の種々のｐＨにおける結合を示す。「ｐＨ５０」、つまりＰ１−０６８７６７結合の５０％が失われるｐＨは、およそ６．６である。
【図８Ｄ】ＶＩＳＴＡ抗体Ｐ１−０６８７６１およびＰ１−０６８７６７のｐＨ選択的細胞結合、ブロックキング、およびエフェクター活性を示す図である。図８Ｄは、ヒト単球に対する、アイソタイプ一致非特異的コントロール抗体（塗潰しおよび塗潰無し円形は、それぞれｐＨ７．０および６．０）、抗ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂ２（「コントロール」、図６Ｃを参照、塗潰しおよび塗潰無し正方形は、それぞれｐＨ７．０および６．０）、Ｐ１−０６８７６１（塗潰しおよび塗潰無し三角形は、それぞれｐＨ７．０および６．０）、およびＰ１−０６８７６７（塗潰しおよび塗潰無し逆三角形は、それぞれｐＨ７．０および６．０）結合の平均蛍光発光強度（ＭＦＩ）を示す。結合は、蛍光コンジュゲート抗ヒトＩｇＧ二次抗体で検出した。
【図８Ｅ】ＶＩＳＴＡ抗体Ｐ１−０６８７６１およびＰ１−０６８７６７のｐＨ選択的細胞結合、ブロックキング、およびエフェクター活性を示す図である。図８Ｅは、ｐＨ６．０では、活性化ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞に対する組換えＶＩＳＴＡ多量体結合が、Ｐ１−０６１０２９（正方形）、Ｐ１−０６８７６１（三角形）、およびＰ１−０６８７６７（逆三角形）により同等にブロックされたが、非ＶＩＳＴＡ特異的コントロール抗体（円形）は、ＶＩＳＴＡ結合をブロックしなかったことを示す。
【図８Ｆ】ＶＩＳＴＡ抗体Ｐ１−０６８７６１およびＰ１−０６８７６７のｐＨ選択的細胞結合、ブロックキング、およびエフェクター活性を示す図である。図８Ｆは、生理的ｐＨでは、抗体依存性細胞性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）の媒介における、Ｐ１−０６８７６１（三角形）およびＰ１−０６８７６７（逆三角形）の力価が低減されたことを示す。Ｐ１−０６１０２９（正方形）、非ＶＩＳＴＡ特異的ポジティブコントロール抗体（円形）、および非ＶＩＳＴＡ特異的陰性コントロール抗体（菱形）も示されている。全標的細胞のパーセンテージとしての標的細胞のＮＫ細胞特異的溶解がＹ軸にプロットされており、抗体濃度がＸ軸にプロットされている。非線形回帰曲線も示されている。
【図９】カニクイザルにおける、酸性ｐＨ選択的抗ＶＩＳＴＡ抗体の薬物動態（ＰＫ）が増強されたことを示す図である。この図は、ＶＩＳＴＡ抗体２（「コントロール」、円形、図６Ｃを参照）、ＶＩＳＴＡ抗体３（「酸性ｐＨ感受性」、正方形、図６Ｃを参照）、またはＰ１−０６８７６７（三角形）で処置したカニクイザルの経時的な血清抗体濃度を示す。
【図１０Ａ】酸性ｐＨ選択的抗ＶＩＳＴＡ抗体’７６１および’７６７における突然変異が結合に及ぼす影響を示す図である。図１０Ａは、ｐＨ７．４、ｐＨ６．７、およびｐＨ６．０におけるＰ１−０６８７６１復帰突然変異体の動力学的結合データ、およびＰ１−０６８７６１に対する復帰突然変異の位置を示す。
【図１０Ｂ】酸性ｐＨ選択的抗ＶＩＳＴＡ抗体’７６１および’７６７における突然変異が結合に及ぼす影響を示す図である。図１０Ｂは、ｐＨ７．４、ｐＨ６．７、およびｐＨ６．０におけるＰ１−０６８７６１復帰突然変異体の動力学的結合データ、およびＰ１−０６８７６７に対する復帰突然変異の位置を示す。
【図１１Ａ】種々の抗ＶＩＳＴＡ抗体のエピトープビニング（epitope binning）およびマッピングを示す図である。図１１Ａは、Ｐ１−０６１０２９およびＶＩＳＴＡ抗体コントロールと比較した、Ｐ１−０６８７６１およびＰ１−０６８７６７のＶＩＳＴＡエピトープ競合を示す。
【図１１Ｂ−１１Ｃ】種々の抗ＶＩＳＴＡ抗体のエピトープビニング（epitope binning）およびマッピングを示す図である。ＢおよびＣは、非ブロックキングｈＶＩＳＴＡ抗体（ｍＡｂ１；図１１Ｃ）と比較した、表１４に列挙されているブロックキングｈＶＩＳＴＡ抗体（図１１Ｂ）の全エピトープ残基の図示を示す。アミノ酸残基６６（Ｈ）および１６２（Ａ）は、分子の向きを表すために示されている。ヒスチジン残基は灰色であり、エピトープ残基は黒色である。
【図１２Ａ−１２Ｃ】以下の画像化キャピラリー等電点電気泳動（ｉｃＩＥＦ）データを示す図である：図１２Ａ：Ｐ１−０６１０２９、図１２Ｂ：Ｐ１−０６８７６１、および図１２Ｃ：Ｐ１−０６８７６７。主要な種（主ｐＩ）ならびにｐＩマーカーの等電点が示されている。
【図１３Ａ】’０２９および’０１５子孫クローンの可変領域のアラインメントを示す図である。図１３Ａは、’０２９およびその子孫クローンの可変領域のアミノ酸配列のアラインメントを示す。
【図１３Ａ−１】図１３Ａの続きである。
【図１３Ｂ】’０２９および’０１５子孫クローンの可変領域のアラインメントを示す図である。図１３Ｂは、’０１５およびその子孫クローンの可変領域のアミノ酸配列のアラインメントを示す。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
定義
本出願では、「または」の使用は、別様の記載がない限り、「および／または」を意味する。多項従属クレームの状況では、「または」の使用は、１つよりも多くの先行独立クレームまたは択一形式の従属クレームのみを参照する。用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、および「有する（ｈａｖｉｎｇ）」は、本明細書では同義的に使用することができる。本発明によると、「単離された」分子は、その自然環境から取り出された分子である。そのため、用語「単離された」は、分子が精製された範囲を必ずしも反映しない。
【０００８】
用語「ポリペプチド」は、アミノ酸残基のポリマーを指し、最小長には限定されない。「タンパク質」は、１つまたは複数のポリペプチドを含んでいてもよい。アミノ酸残基のそのようなポリマーは、天然または非天然アミノ酸残基を含んでいてもよく、これらに限定されないが、アミノ酸残基のペプチド、オリゴペプチド、二量体、三量体、および多量体が挙げられる。全長タンパク質およびそれらの断片は両方とも、本定義により包含される。また、こうした用語は、ポリペプチドの発現後修飾、例えば、グリコシル化、シアリル化、アセチル化、およびリン酸化などを含む。さらに、本発明の目的では、「ポリペプチド」または「タンパク質」は、タンパク質が所望の活性を維持する限り、天然配列に欠失、付加、および置換（一般には性質が保存的）などの修飾を含む、それぞれポリペプチドまたはタンパク質を指す。こうした修飾は、部位特異的突然変異誘発によるものなど、意図的であってもよく、またはタンパク質を産生する宿主の突然変異もしくはＰＣＲ増幅によるエラーによるものなど、偶発的であってもよい。タンパク質は、２つまたはそれよりも多くのポリペプチドを含んでいてもよい。
【０００９】
「ＶＩＳＴＡ」は、Ｔ細胞活性化のＶドメイン免疫グロブリン含有サプレッサータンパク質の略語であり、Ｂ７ファミリーの免疫チェックポイント制御因子のメンバーである。ＶＩＳＴＡは、ＰＤ−１ホモログ（ＰＤ１Ｈ）、Ｂ７−Ｈ５、Ｃ１０ｏｒｆ５４、分化ＥＳＣ−１（differentiation of ESC-1）（Ｄｉｅｓ−１）、血小板受容体Ｇｉ２４前駆体、およびデスドメイン１α（ＤＤ１α）としても知られている。用語「ｈＶＩＳＴＡ」または「ｈｕＶＩＳＴＡ」は、本明細書では、ヒトＶＩＳＴＡタンパク質を指す。シグナルペプチドを含むｈＶＩＳＴＡのアミノ酸配列は、配列番号１に提供されており、シグナルペプチドを含まない配列は、配列番号２に提供されている。（下記の配列表を参照されたい。）ＶＩＳＴＡの細胞外ドメインもしくは「ＥＣＤ」または「ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ」は、細胞外空間に位置するＶＩＳＴＡタンパク質の部分を指し、ｈＶＩＳＴＡの場合、配列番号２のアミノ酸１〜１６２を含む。（図１Ｂも参照されたい。）ｈＶＩＳＴＡの「ＩｇＶドメイン」部分は、配列番号２の残基５〜１３５を含む。
【００１０】
用語「リーダーペプチド」または「リーダー配列」は、哺乳動物細胞からのポリペプチド分泌を促進する、ポリペプチドのＮ末端基に位置するアミノ酸残基の配列を指す。リーダー配列は、ポリペプチドが哺乳動物細胞から搬出されると切断されて、成熟タンパク質が形成される。リーダー配列は、天然であってもよくまた合成であってもよく、付着されているタンパク質に対して異種性であってもよくまたは同族性であってよい。
【００１１】
用語「抗体」または「Ａｂ」は、本明細書では、最も幅広い意味で使用され、これらに限定されないが、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、および所望の抗原結合活性を示す限り抗体断片を含む、種々の抗体構造を包含する。本明細書で使用される場合、この用語は、少なくとも重鎖の相補性決定領域（ＣＤＲ）１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびに少なくとも軽鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む分子であって、抗原に結合することが可能な分子を指す。用語  抗体は、これらに限定されないが、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、および（Ｆａｂ’）２などの、抗原に結合可能な断片を含む。また、用語「抗体」は、これらに限定されないが、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、およびマウス、カニクイザルなどの種々の種の抗体を含む。
【００１２】
用語「重鎖」または「ＨＣ」は、少なくとも重鎖可変領域を含み、リーダー配列を有するまたは有していないポリペプチドを指す。一部の実施形態では、重鎖は、重鎖定常領域の少なくとも部分を含む。用語「全長重鎖」は、重鎖可変領域および重鎖定常領域を含み、リーダー配列を有するまたは有しておらず、Ｃ末端リジン（Ｋ）を有するまたは有していないポリペプチドを指す。
【００１３】
用語「重鎖可変領域」または「ＶＨ」は、重鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）１、重鎖のフレームワーク領域（ＦＲ）２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、およびＣＤＲ３を含む領域を指す。また、一部の実施形態では、重鎖可変領域は、ＦＲ１の少なくとも部分および／またはＦＲ４の少なくとも部分を含む。下記で指定されているように、一部の実施形態では、重鎖ＣＤＲ１は、本明細書のＶＨ配列番号の残基２６〜３５を含み、重鎖ＣＤＲ２は、本明細書のＶＨ配列番号の残基５０〜６６を含み、重鎖ＣＤＲ３は、本明細書のＶＨ配列番号の残基９９〜１１０を含む。他の実施形態では、指定されている場合、重鎖ＣＤＲ１は、カバット残基３１〜３５に対応し、重鎖ＣＤＲ２は、カバット残基５０〜６５に対応し、重鎖ＣＤＲ３は、カバット残基９５〜１０２に対応する。例えば、Kabat Sequences of Proteins of Immunological Interest（１９８７年および１９９１年、ＮＩＨ、ベテスダ、メリーランド州）を参照されたい。一部の実施形態では、重鎖ＣＤＲは、下記の配列表または表２など、本明細書で指定されている通りである。
【００１４】
用語「軽鎖」または「ＬＣ」は、少なくとも軽鎖可変領域を含み、リーダー配列を有するかまたは有していないポリペプチドを指す。一部の実施形態では、軽鎖は、軽鎖定常領域の少なくとも部分を含む。用語「全長軽鎖」は、軽鎖可変領域および軽鎖定常領域を含み、リーダー配列を有するまたは有していないポリペプチドを指す。
【００１５】
用語「軽鎖可変領域」または「ＶＬ」は、軽鎖ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＨＶＲ２、ＦＲ３、およびＨＶＲ３を含む領域を指す。また、一部の実施形態では、軽鎖可変領域は、ＦＲ１および／またはＦＲ４を含む。下記で指定されているように、一部の実施形態では、軽鎖ＣＤＲ１は、本明細書のＶＬ配列番号の残基２４〜３５を含み、軽鎖ＣＤＲ２は、本明細書のＶＬ配列番号の残基５１〜５７を含み、軽鎖ＣＤＲ３は、本明細書のＶＬ配列番号の残基９０〜９８を含む。他の実施形態では、指定されている場合、軽鎖ＣＤＲ１は、カバット残基２４〜３４に対応し、軽鎖ＣＤＲ２は、カバット残基５０〜５６に対応し、軽鎖ＣＤＲ３は、カバット残基８９〜９７に対応する。例えば、Kabat Sequences of Proteins of Immunological Interest（１９８７年および１９９１年、ＮＩＨ、ベテスダ、メリーランド州）を参照されたい。一部の実施形態では、軽鎖ＣＤＲは、配列表など、本明細書で指定されている通りである。
【００１６】
「キメラ抗体」は、重鎖および／または軽鎖の部分が、特定の供給源または種に由来し、重鎖および／または軽鎖の残りは、異なる供給源または種に由来する抗体を指す。一部の実施形態では、キメラ抗体は、第１の種（マウス、ラット、カニクイザルなど）に由来する少なくとも１つの可変領域、および第２の種（ヒト、カニクイザルなど）に由来する少なくとも１つの定常領域を含む抗体を指す。一部の実施形態では、キメラ抗体は、少なくとも１つのマウス可変領域および少なくとも１つのヒト定常領域を含む。一部の実施形態では、キメラ抗体は、少なくとも１つのカニクイザル可変領域および少なくとも１つのヒト定常領域を含む。一部の実施形態では、キメラ抗体の可変領域はすべて、第１の種に由来し、キメラ抗体の定常領域はすべて、第２の種に由来する。
【００１７】
「ヒト化抗体」は、非ヒト可変領域のフレームワーク領域の少なくとも１つのアミノ酸が、ヒト可変領域に由来する対応するアミノ酸で置換されている抗体を指す。一部の実施形態では、ヒト化抗体は、少なくとも１つのヒト定常領域またはその断片を含む。一部の実施形態では、ヒト化抗体は、Ｆａｂ、ｓｃＦｖ、（Ｆａｂ’）２などである。
【００１８】
「ヒト抗体」は、本明細書で使用される場合、ヒトで産生される抗体、ＸｅｎｏＭｏｕｓｅ（登録商標）などのヒト免疫グロブリン遺伝子を含む非ヒト動物で産生される抗体、およびファージディスプレイなどのインビトロ法を使用して選択され、抗体レパートリーが、ヒト免疫グロブリン配列に基づく抗体を指す。
【００１９】
「ＶＩＳＴＡ抗体」または「抗ＶＩＳＴＡ抗体」は、本明細書で使用される場合、酸性ｐＨなどの少なくとも一部の条件下でＶＩＳＴＡに特異的に結合する抗体を指す。一部の実施形態では、抗体は、酸性ｐＨなどの少なくとも一部の条件下でヒトＶＩＳＴＡタンパク質に特異的に結合することを示す「ｈｕＶＩＳＴＡ抗体」または「抗ｈｕＶＩＳＴＡ抗体」であってもよい。ＶＩＳＴＡの細胞外ドメイン（ＥＣＤ）に特異的に結合するＶＩＳＴＡ抗体は、例えば、「ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ抗体」と称される場合がある。
【００２０】
一部の実施形態では、抗体は、中性および／または生理的ｐＨよりも酸性ｐＨにて、より高い親和性でＶＩＳＴＡに結合することができる。一部の実施形態では、抗体は、酸性ｐＨでは、より高い親和性でＶＩＳＴＡに結合することができ、中性および／または生理的ｐＨでは、無視できる程度にしかまたは非特異的にしか結合することができない。
【００２１】
タンパク質、例えばＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に対する抗体結合の「ＫＤ」または「解離定数」は、タンパク質、例えばＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に対する抗体の親和性または特異的結合の尺度である。より低いＫＤは、より高いＫＤよりも結合または親和性の向上を示す。ＫＤは、抗体およびポリペプチドの、「解離速度」またはｋｏｆｆまたはｋｄと「会合速度」またはｋｏｎまたはｋａとの間の比で構成される。解離速度および会合速度は、２つの結合パートナーが、系において会合および解離する速度である。したがって、解離速度がより遅く、会合速度がほぼ一定のままである場合、より高い全体的親和性、したがってより低いＫＤに結び付く。本明細書で使用される場合、特定の値「またはそれよりも低い」ｋｏｆｆは、ｋｏｆｆまたは「解離速度」が、指定されている通りであるか、または指定されている速度よりも遅いことを示す。
【００２２】
用語「特異的結合」または「特異的に結合する」または類似の用語は、抗体およびそのポリペプチド標的などの２つのポリペプチドの結合のＫＤが、同じ条件下で存在する２つの無作為ポリペプチド間の場合よりも低いことを意味する。言い換えれば、ＫＤは、系におけるポリペプチドの非特異的凝集によるものよりも低い。
【００２３】
一部の実施形態では、抗体は、特定のｐＨまたはｐＨ領域にて、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。「酸性」ｐＨは、本明細書では、一般に７．０未満のｐＨを指し、「塩基性」ｐＨは、一般に７．０よりも高いｐＨを指し、「中性」ｐＨは、一般に約７．０のｐＨを指す。「生理的ｐＨ」は、本明細書では、通常の（つまり非癌性の）生理的状態におけるｐＨ、例えば、約７．４など、７．３５から７．４５まで、または７．３から７．４までを指す。本明細書では、ＶＩＳＴＡおよびＶＩＳＴＡ結合パートナーまたはＶＩＳＴＡおよびＴ細胞などの２つの分子の結合の状況で使用される「酸性条件で結合する」または「生理的条件で結合する」などの語句は、それぞれ、酸性ｐＨで結合することおよび生理的ｐＨで結合することを指す。
【００２４】
リガンド（または受容体）の「結合をブロックする」または「結合を阻害する」抗体、または受容体（またはリガンド）のみまたは細胞に対する競合抗体を参照する場合、コントロールと比較して統計学的に有意な全体的減少、例えば、５０％またはそれよりも大きな全体的な減少、例えば、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、またはそれよりも大きな全体的な減少が存在する場合、結合はブロックされている。「抗ＶＩＳＴＡブロックキング抗体」は、例えば、酸性ｐＨなどの少なくとも一部の条件下で、ＰＳＧＬ−１または別のＶＩＳＴＡリガンドまたは受容体またはヘパラン硫酸プロテオグリカン類に対するＶＩＳＴＡの結合をブロックすることができるものである。
【００２５】
「腫瘍モデル」は、本明細書で使用される場合、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ抗体の生物活性を研究するために使用することができるインビボ前臨床アッセイを指し、異種移植片または天然マウス腫瘍アッセイ系を含む。一部の場合では、腫瘍モデルにより、抗体での処置時に腫瘍サイズまたは増殖を追跡すること、および／または抗体が免疫応答を始動または増強したか否かを決定するために、特定のタイプのＴ細胞またはＮＫ細胞などの腫瘍中の免疫細胞の存在を追跡することが可能になる場合がある。
【００２６】
用語「免疫刺激剤」は、本明細書で使用される場合、共刺激性分子を含む免疫刺激性分子のアゴニストとして作用するか、または共阻害性分子を含む免疫阻害性分子のアンタゴニストとして作用するかのいずれかにより免疫系を刺激する分子を指す。免疫刺激性分子または免疫阻害性分子は、ＶＩＳＴＡまたは別のＢ７ファミリーメンバーまたは下記にさらに記載されているような別の分子などの免疫チェックポイント制御因子であってもよい。免疫刺激剤は、抗体もしくは抗体断片、他のタンパク質、またはワクチンなどの生物製剤であってもよく、または低分子薬であってもよい。「免疫刺激性分子」は、免疫応答を増強、刺激、誘導、またはそうでなければ「オンにする」ように作用する受容体またはリガンドを含む。本明細書で定義される免疫刺激性分子は、共刺激性分子を含む。「免疫阻害性分子」は、免疫応答を低減、阻害、抑制、またはそうでなければ「オフにする」ように作用する受容体またはリガンドを含む。本明細書で定義される免疫阻害性分子は、共阻害性分子を含む。そのような免疫刺激性および免疫阻害性分子は、例えば、Ｔ細胞などの免疫細胞に見出されるか、またはＮＫ細胞などの自然免疫に関与する細胞に見出される受容体またはリガンドであってもよい。
【００２７】
ペプチド、ポリペプチド、または抗体配列に関する「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」および「相同性」は、配列をアラインし、必要に応じてギャップを導入して、最大の配列同一性パーセントを達成した後の、特定のペプチドまたはポリペプチド配列のアミノ酸残基と同一である、候補配列のアミノ酸残基のパーセンテージであると規定され、いかなる保存的置換も、配列同一性の一部とはみなされない。アミノ酸配列同一性パーセントを決定するためのアラインメントは、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ、またはＭＥＧＡＬＩＧＮＴＭ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアなど、公的に利用可能なコンピューターソフトウェアを使用して、当該技術分野の技術内にある種々の様式で達成することができる。当業者であれば、比較されている配列の完全長にわたって最大アラインメントを達成するために必要な任意のアルゴリズムを含む、アラインメントを測定するための適切なパラメーターを決定することができる。
【００２８】
用語「始動する」または「増強する」は、任意の事象（タンパク質リガンド結合など）の開始もしくは増加、または任意の生物活性（免疫応答など）もしくは表現型特性の開始もしくは増加、またはその活性もしくは特性の開始もしくは発生、度合い、もしくは可能性の増加を指す。「始動する」または「増強する」は、基準と比較して、活性、機能、および／または量を開始または増加させることを指す。始動または増強は、完全である必要はない。例えば、ある特定の実施形態では、「増強する」とは、２０％またはそれよりも大きな全体的増加を引き起こす能力を意味する。別の実施形態では、「増強する」とは、５０％またはそれよりも大きな全体的増加を引き起こす能力を意味する。さらに別の実施形態では、「増強する」とは、７５％、８５％、９０％、９５％、またはそれよりも大きな全体的増加を引き起こす能力を意味する。
【００２９】
用語「阻害」または「阻害する」は、より一般には、任意の事象（タンパク質リガンド結合など）の減少もしくは中断、または任意の表現型特性の減少もしくは中断、またはその特性の発生、度合い、もしくは可能性の減少または中断を指す。「低減する」または「阻害する」は、基準と比較して、活性、機能、および／または量を減少、低減、または停止させることである。阻害または低減は、完全である必要はない。例えば、ある特定の実施形態では、「低減する」または「阻害する」とは、２０％またはそれよりも大きな全体的減少を引き起こす能力を意味する。別の実施形態では、「低減する」または「阻害する」とは、５０％またはそれよりも大きな全体的減少を引き起こす能力を意味する。さらに別の実施形態では、「低減する」または「阻害する」とは、７５％、８５％、９０％、９５％、またはそれよりも大きな全体的減少を引き起こす能力を意味する。
【００３０】
「治療」は、本明細書で使用される場合、ヒトにおける疾患の治療剤の任意の投与または塗布を包含し、疾患、または疾患の進行、または１つもしくは複数の病徴を阻害すること、疾患、またはその進行、または１つもしくは複数のその症候を阻害もしくは遅延すること、その発症を停止させること、疾患またはその症候の１つまたは複数を部分的にまたは完全に軽減すること、あるいは疾患の１つまたは複数の症候の再発を予防することを含む。
【００３１】
用語「対象」および「患者」は、本明細書では同義的に使用され、ヒトを指す。
【００３２】
用語「有効量」または「治療的有効量」は、例えば、１つまたは複数の症候を部分的にまたは完全に軽減するための、対象の疾患または障害の治療に有効な薬物の量を指す。一部の実施形態では、有効量は、投薬量および所要期間で所望の治療的または予防的結果を達成するのに有効な量を指す。
【００３３】
用語「がん」は、本明細書では、異常に高レベルの増殖（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）および増殖（ｇｒｏｗｔｈ）を示す一群の細胞を指すために使用される。がんは、良性であってもよく（良性腫瘍とも呼ばれる）、前悪性であってもよく、または悪性であってもよい。がん細胞は、固形がん細胞であってもよく、または白血病がん細胞であってもよい。用語「腫瘍増殖」は、本明細書では、がんのサイズまたは範囲の対応する増加に結び付く、がんを含む細胞（複数可）による増殖（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）または増殖（ｇｒｏｗｔｈ）を指すために使用される。
【００３４】
本明細書の治療方法に適用可能ながんの例としては、これらに限定されないが、癌、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、および白血病が挙げられる。そのようながんのより多くの特定の非限定的な例としては、以下のものが挙げられる：扁平上皮がん、小細胞肺がん、下垂体がん、食道がん、星状細胞腫、軟組織肉腫、非小細胞肺がん（扁平上皮細胞非小細胞肺がんを含む）、肺の腺癌、肺の扁平上皮癌、腹膜のがん、肝細胞がん、胃腸がん、膵臓がん、膠芽細胞腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、肝がん、乳がん、結腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓がん、腎細胞癌、肝臓がん、前立腺がん、外陰部がん、甲状腺がん、肝細胞癌、脳がん、子宮内膜がん、精巣がん、胆管癌、胆嚢癌、胃（ｇａｓｔｒｉｃ）がん、メラノーマ、および種々のタイプの頭頸部がん（頭頸部の扁平上皮癌を含む）。
【００３５】
１つまたは複数のさらなる治療剤「と組み合わせた」投与は、同時（同時的）および任意の順序の連続（順次）投与を含む。
【００３６】
「薬学的に許容される担体」は、対象に投与するための「薬学的組成物」を共に含む治療剤に使用するための、当該技術分野で従来からある無毒性の固体、半固体、または液体の充填剤、希釈剤、カプセル化材料、処方助剤、または担体を指す。薬学的に許容される担体は、使用される投薬量および濃度でレシピエントに無毒性であり、製剤の他の成分と適合性である。薬学的に許容される担体は、使用される製剤に適切である。例えば、治療剤が経口投与される場合、担体は、ゲルカプセルであってもよい。治療剤が皮下投与される場合、担体は、理想的には、皮膚に対して刺激性ではなく、注射部位反応を引き起こさない。
【００３７】
「化学療法剤」は、がんの治療に有用な化学化合物である。本明細書の方法で投与することができる化学療法剤の例としては、これらに限定されないが、以下のものが挙げられる：チオテパおよびＣｙｔｏｘａｎ（登録商標）シクロスホスファミド（cyclosphosphamide）などのアルキル化剤；ブスルファン、インプロスルファン、およびピポスルファンなどのスルホン酸アルキル類；ベンゾドパ（benzodopa）、カルボコン、メツレドパ（meturedopa）、およびウレドパ（uredopa）などのアジリジン類；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド（trietylenephosphoramide）、トリチイレンチオホスホルアミド（triethiylenethiophosphoramide）、およびトリメチロールオメラミン（trimethylolomelamine）を含むエチレンイミン類およびメチルアメラミン類（methylamelamines）；アセトゲニン類（特に、ブラタシンおよびブラタシノン）；カンプトテシン（合成アナログトポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン、およびビセレシン合成アナログを含む）；クリプトフィシン類（特に、クリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成アナログｋＷ−２１８９およびＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンギスタチン；クロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノブエンビキン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードなどのナイトロジェンマスタード類；カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、およびラニムヌスチン（ranimnustine）などのニトロス尿素（nitrosurea）類；エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特に、カリケアマイシンガンマ１ＩおよびカリケアマイシンオメガＩ１（例えば、Agnew、Chem Intl. Ed. Engl.、３３巻：１８３〜１８６頁（１９９４年）を参照）などの抗生物質；ダイネミシンＡを含むダイネミシン；クロドロネートなどのビスホスホネート類；エスペラミシン；ならびにネオカルチノスタチン発色団および関連色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン類、アクチノマイシン、アウトラマイシン（authramycin）、アザセリン、ブレオマイシン類、カクチノマイシン、カラビシン（carabicin）、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモミシニス（chromomycinis）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標）ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、およびデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣなどのマイトマイシン類、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン類、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（potfiromycin）、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン（rodorubicin）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；メトトレキサートおよび５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などの代謝拮抗剤；デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサートなどの葉酸アナログ；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリンアナログ；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジンなどのピリミジンアナログ；カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲン類；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎剤；フロリン酸（frolinic acid）などの葉酸補給剤；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキサート（edatraxate）；デフォファミン（defofamine）；デメコルチン；ジアジクオン；エルフォルニチン（elfornithine）；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダイニン（lonidainine）；メイタンシンおよびアンサマイトシンなどのメイタンシノイド類；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール（mopidanmol）；ニトラエリン（nitraerine）；ペントスタチン；フェナメット；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖複合体（ＪＨＳ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、ユージーン、オレゴン州）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン類（特に、Ｔ−２トキシン、ベラクリンＡ、ロリジンＡ、およびアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（gacytosine）；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド類、例えば、Ｔａｘｏｌ（登録商標）パクリタキセル（Ｂｒｉｓｔｏｌ−  Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、プリンストン、ニュージャージー州）、Ａｂｒａｘａｎｅ（登録商標）クレモフォールフリー、パクリタキセルのアルブミン操作ナノ粒子製剤（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ、シャウムベルク、イリノイ州）、およびＴａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）ドキセタキセル（doxetaxel）（Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ、アントニー、フランス）；クロランブシル（chloranbucil）；Ｇｅｍｚａｒ（登録商標）ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；シスプラチン、オキサリプラチン、およびカルボプラチンなどの白金アナログ；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（登録商標）ビノレルビン；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロネート；イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ、ＣＰＴ−１１）（５−ＦＵおよびロイコボリンによるイリノテカンの治療レジメンを含む）；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ  ２０００；ジフルオロメトルヒルオルニチン（difluorometlhylornithine）（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド類；カペシタビン；コンブレタスタチン；ロイコボリン（ＬＶ）；オキサリプラチン治療レジメン（ＦＯＬＦＯＸ）を含むオキサリプラチン；ＰＫＣ−アルファ、Ｒａｆ、Ｈ−Ｒａｓ、ＥＧＦＲの阻害剤（例えば、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標）））、および細胞増殖を低減するＶＥＧＦ−Ａ、ならびに上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸、または誘導体。
【００３８】
本明細書の方法で投与することができるさらなる非限定的な例示的化学療法剤としては、以下のものが挙げられる：例えば、タモキシフェン（Ｎｏｌｖａｄｅｘ（登録商標）タモキシフェンを含む）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、およびＦａｒｅｓｔｏｎ（登録商標）トレミフェンを含む、抗エストロゲン剤および選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）など、がんに対するホルモン作用を調節または阻害するように作用する抗ホルモン剤；例えば、４（５）−イミダゾール類、アミノグルテチミド、Ｍｅｇａｓｅ（登録商標）酢酸メゲストロール、Ａｒｏｍａｓｉｎ（登録商標）エキセメスタン、フォルメスタニ（formestanie）、ファドロゾール、Ｒｉｖｉｓｏｒ（登録商標）ボロゾール、Ｆｅｍａｒａ（登録商標）レトロゾール、およびＡｒｉｍｉｄｅｘ（登録商標）アナストロゾ−ルなどの、副腎でのエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤；およびフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、およびゴセレリンなどの抗アンドロゲン類；ならびにトロキサシタビン（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシンアナログ）；アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に、例えば、ＰＫＣ−アルファ、Ｒａｌｆ、およびＨ−Ｒａｓなど、異常な（abherant）細胞増殖に関与しているシグナル伝達経路の遺伝子の発現を阻害するもの；ＶＥＧＦ発現阻害剤（例えば、Ａｎｇｉｏｚｙｍｅ（登録商標）リボザイム）およびＨＥＲ２発現阻害剤などのリボザイム；遺伝子治療ワクチン、例えば、Ａｌｌｏｖｅｃｔｉｎ（登録商標）ワクチン、Ｌｅｕｖｅｃｔｉｎ（登録商標）ワクチン、およびＶａｘｉｄ（登録商標）ワクチン）などのワクチン；Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ｒＩＬ−２；Ｌｕｒｔｏｔｅｃａｎ（登録商標）トポイソメラーゼ１阻害剤；Ａｂａｒｅｌｉｘ（登録商標）ｒｍＲＨ；ならびに上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸、または誘導体。
【００３９】
「抗血管新生剤」または「血管新生阻害剤」は、血管新生、脈管形成、または望ましくない血管透過性を直接的または間接的のいずれかで阻害する低分子量物質、ポリヌクレオチド（例えば、阻害性ＲＮＡ（ＲＮＡｉまたはｓｉＲＮＡ）を含む）、ポリペプチド、単離されたタンパク質、組換えタンパク質、抗体、またはそれらのコンジュゲートもしくは融合タンパク質を指す。抗血管新生剤は、血管新生因子またはその受容体に結合し、その血管新生活性をブロックする作用剤を含むことが理解されるべきである。例えば、本明細書の方法で投与することができる抗血管新生剤としては、以下のものを挙げることができる：血管新生剤に対する抗体または他のアンタゴニスト、例えばＶＥＧＦ−Ａに対する抗体（例えば、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））またはＶＥＧＦ−Ａ受容体（例えば、ＫＤＲ受容体またはＦｌｔ−１受容体）に対する抗体、Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標）（イマチニブメシル酸塩）などの抗ＰＤＧＦＲ阻害剤、ＶＥＧＦ受容体シグナル伝達をブロックする低分子（例えば、ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２８４、ＳＵ６６６８、Ｓｕｔｅｎｔ（登録商標）／ＳＵ１１２４８（スニチニブリンゴ酸塩）、ＡＭＧ７０６、または例えば国際公開第２００４／１１３３０４号に記載のもの）。抗血管新生（anti-angiogensis）剤としては、天然血管新生阻害剤、例えば、アンギオスタチン、エンドスタチンなども挙げられる。例えば、KlagsbrunおよびD'Amore（１９９１年）Annu. Rev. Physiol.  ５３巻：２１７〜３９頁；StreitおよびDetmar（２００３年）Oncogene  ２２巻：３１７２〜３１７９頁（例えば、悪性メラノーマの抗血管新生治療が列挙されている表３）；Ferrara & Alitalo（１９９９年）Nature Medicine  ５巻（１２号）：１３５９〜１３６４頁；Toniniら（２００３年）Oncogene  ２２巻：６５４９〜６５５６頁（例えば、既知の抗血管新生因子が列挙されている表２）；Sato（２００３年）Int. J. Clin. Oncol.８巻：２００〜２０６頁（例えば、臨床治験に使用された抗血管新生剤が列挙されている表１）を参照されたい。
【００４０】
「増殖阻害剤」は、本明細書で使用される場合、細胞（ＶＥＧＦを発現する細胞など）の増殖を、インビトロまたはインビボのいずれかで阻害する化合物または組成物を指す。したがって、本明細書の方法で投与することができる増殖阻害剤は、Ｓ期の細胞（ＶＥＧＦを発現する細胞など）のパーセンテージを著しく低減するものであってもよい。増殖阻害剤の例としては、これらに限定されないが、Ｇ１停止およびＭ期停止を誘導する作用剤など、細胞周期進行を（Ｓ期以外の地点で）ブロックする作用剤が挙げられる。古典的なＭ期ブロッカーとしては、ビンカ類（ビンクリスチンおよびビンブラスチン）、タキサン類、ならびにドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシン、エトポシド、およびブレオマイシンなどのトポイソメラーゼＩＩ阻害剤が挙げられる。また、Ｇ１を停止させる作用剤は、Ｓ期停止にスピルオーバーする。例えば、タモキシフェン、プレドニゾン、ダカルバジン、メクロレタミン、シスプラチン、メトトレキサート、５−フルオロウラシル、およびａｒａ−ＣなどのＤＮＡアルキル化剤。さらなる情報は、MendelsohnおよびIsrael編、The Molecular Basis of Cancer、第１章、題名「Cell cycle regulation, oncogenes, and antineoplastic drugs」Murakamiらによる（W.B. Saunders、フィラデルフィア、１９９５年）、例えば、１３頁に見出すことができる。タキサン類（パクリタキセルおよびドセタキセル）は、両方ともイチイ（ｙｅｗ  ｔｒｅｅ）に由来する抗がん薬である。ヨーロッパイチイ（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ｙｅｗ）に由来するドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ）は、パクリタキセル（Ｔａｘｏｌ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）の半合成アナログである。パクリタキセルおよびドセタキセルは、チューブリン二量体からの微小管の構築を促進し、解重合を防止することにより微小管を安定させ、それにより、細胞の有糸分裂の阻害がもたらされる。
【００４１】
用語「抗腫瘍性組成物」は、少なくとも１つの活性治療剤を含む、がんの治療に有用な組成物を指す。治療剤の例としては、これらに限定されないが、以下のものが挙げられる：例えば、化学療法剤、増殖阻害剤、細胞傷害性剤、放射線療法で使用される作用剤、抗血管新生剤、がん免疫治療剤、アポトーシス剤、抗チューブリン剤、およびがんを治療するための他の作用剤、例えば、抗ＨＥＲ−２抗体、抗ＣＤ２０抗体、上皮増殖因子受容体（ＥＧＦＲ）アンタゴニスト（例えば、チロシンキナーゼ阻害剤）、ＨＥＲ１／ＥＧＦＲ阻害剤（例えば、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））、血小板由来増殖因子阻害剤（例えば、Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標）（イマチニブメシル酸塩））、ＣＯＸ−２阻害剤（例えば、セレコキシブ）、インターフェロン、ＣＴＬＡ４阻害剤（例えば、抗ＣＴＬＡ抗体イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ（登録商標））、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１阻害剤（例えば、ＯＰＤＩＶＯ（登録商標）、ＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）、ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ（登録商標）、ＢＡＶＥＮＣＩＯ（登録商標）、ＩＭＦＩＮＺＩ（登録商標））、ＴＩＭ３阻害剤（例えば、抗ＴＩＭ３抗体）、サイトカイン、以下の標的：ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３、ＥｒｂＢ４、ＰＤＧＦＲ−ベータ、ＢｌｙＳ、ＡＰＲＩＬ、ＢＣＭＡ、ＣＴＬＡ４、ＴＩＭ３、またはＶＥＧＦ受容体、ＴＲＡＩＬ／Ａｐｏ２の１つまたは複数に結合するアンタゴニスト（例えば、中和抗体）、ならびに他の生物活性剤および有機化学剤など。これらの組合せも、本開示に含まれる。
【００４２】
酸性ｐＨにてＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに特異的に結合する抗体
ＶＩＳＴＡは、そのＥＣＤに多数のヒスチジン残基を有するため、そのフォールディングおよび全体的な構造、ならびに抗体などのリガンドの結合に使用可能な表面は、酸性ｐＨでは、中性ｐＨ、特にヒスチジンのｐＫａであるｐＨ６．５付近と比較して異なる可能性がある。腫瘍微小環境は一般に酸性であり、抗体は、そうした微小環境でＶＩＳＴＡに結合するためには、表面ヒスチジン残基の少なくとも一部が、プロトン化されている可能性がより高い酸性ｐＨにて、ＶＩＳＴＡに対して特異的に結合する必要がある可能性がある。
【００４３】
下記の配列表には、シグナルペプチドを有するまたは有していないヒトＶＩＳＴＡ（ｈＶＩＳＴＡ）のアミノ酸配列（配列番号１および配列番号２（成熟ｈＶＩＳＴＡ）が、それぞれ提供されている。シグナルペプチドは、配列番号１のアミノ酸残基１〜３２で構成されている。細胞外ドメイン（ＥＣＤ）は、配列番号２のアミノ酸残基１〜１６２からなる）。ＩｇＶドメインは、配列番号１のアミノ酸残基３７〜１６７および配列番号２のアミノ酸残基５〜１３５で構成されている。ストーク領域は、配列番号１のアミノ酸残基１７２〜１９４および配列番号２のアミノ酸残基１３６〜１６２であり、膜貫通ドメインは、配列番号１のアミノ酸残基１９５〜２１６および配列番号２のアミノ酸残基１６３〜１８４である。配列番号１のアミノ酸残基１８７および配列番号２の１５５（太字および下線）は、ＤまたはＥのいずれであってもよく、ｈＶＩＳＴＡの多型を表わす。その残基は、太字および下線で示されている。したがって、配列番号１および配列番号２は、その残基におけるヒト多型の両方を包含する。ＶＩＳＴＡのＥＣＤのヒスチジン残基は、灰色で網掛けされている。
【００４４】
抗ＶＩＳＴＡ抗体（Ａｂ）は、例えば、ＶＩＳＴＡのＩｇＶドメイン、または例えば配列番号２のアミノ酸２０〜９５、２０〜７０  ３５〜７０、３５〜９５、３５〜１２７、もしくは３７〜１２５を含むｈＶＩＳＴＡに由来する領域を含む、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤまたはその断片に、酸性ｐＨで特異的に結合することができる。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ７．０未満のｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ６．８未満のｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ６．５未満のｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ６．３未満のｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ６．０未満のｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ５．８未満のｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ５．５未満のｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ５．３未満のｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ５．０未満のｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。
【００４５】
ある特定のＡｂは、ｐＨ５．０〜ｐＨ７．０の範囲内のｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定のＡｂは、ｐＨ５．０〜ｐＨ６．５の範囲内のｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定のＡｂは、ｐＨ５．０〜ｐＨ６．０の範囲内のｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定のＡｂは、ｐＨ５．５〜ｐＨ７．０の範囲内のｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定のＡｂは、ｐＨ５．５〜ｐＨ６．５の範囲内のｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定のＡｂは、ｐＨ６．０〜ｐＨ６．５の範囲内のｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。
【００４６】
また、本明細書には、ＶＩＳＴＡのＩｇＶドメイン、または例えば配列番号２のアミノ酸２０〜９５、２０〜７０  ３５〜７０、３５〜９５、３５〜１２７、もしくは３７〜１２５を含むｈＶＩＳＴＡに由来する領域を含むｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤまたはその断片などのＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−６Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで結合するＡｂが提供される。一部の実施形態では、Ａｂは、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで結合する。一部の実施形態では、Ａｂは、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで結合する。一部の実施形態では、Ａｂは、１０−９ＭのＫＤで結合する。一部の実施形態では、Ａｂは、１０−１０Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで結合する。例えば、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。
【００４７】
また、本明細書では、６．０〜６．５のｐＨ領域内にて１０−６Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合するＡｂが提供される。一部の実施形態では、Ａｂは、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫDで結合する。一部の実施形態では、Ａｂは、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫDで結合する。一部の実施形態では、Ａｂは、１０−９ＭのＫＤで結合する。一部の実施形態では、Ａｂは、１０−１０Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで結合する。例えば、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、６．０〜６．５のｐＨ領域内にて、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。さらに、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、６．０〜６．５のｐＨ領域内にて、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、６．０〜６．５のｐＨ領域内にて、１０−９Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合することができる。
【００４８】
また、本明細書には、ＶＩＳＴＡのＩｇＶドメイン、または例えば配列番号２のアミノ酸２０〜９５、２０〜７０  ３５〜７０、３５〜９５、３５〜１２７、もしくは３７〜１２５を含むｈＶＩＳＴＡに由来する領域を含むｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤまたはその断片などのＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に、２５℃または３７℃のいずれかで、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−５ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆで結合するＡｂが提供される。一部の実施形態では、Ａｂは、２５℃または３７℃のいずれかにて、１０−４ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆを有する。一部の実施形態では、Ａｂは、２５℃または３７℃のいずれかにて、２  １０−４ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆを有する。一部の実施形態では、Ａｂは、２５℃または３７℃のいずれかにて、５  １０−４ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆを有する。一部の実施形態では、Ａｂは、２５℃または３７℃のいずれかにて、７  １０−４ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆを有する。一部の実施形態では、Ａｂは、２５℃または３７℃のいずれかにて、１０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆを有する。一部の実施形態では、Ａｂは、２５℃または３７℃のいずれかにて、２  １０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆを有する。一部の実施形態では、Ａｂは、２５℃または３７℃のいずれかにて、５  １０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆを有する。一部の実施形態では、Ａｂは、２５℃または３７℃のいずれかにて、７  １０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆを有する。一部の実施形態では、Ａｂは、２５℃または３７℃のいずれかにて、１０−２ｓ−１のｋｏｆｆを有する。一部の実施形態では、Ａｂは、２５℃または３７℃のいずれかにて、１０−１ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆを有する。例えば、Ａｂは、２５℃または３７℃のいずれかで、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合することができる。Ａｂは、２５℃または３７℃のいずれかで、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆで、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに特異的に結合することができる。さらに、Ａｂは、２５℃または３７℃のいずれかで、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−２ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合することができる。
【００４９】
本明細書では、ＶＩＳＴＡのＩｇＶドメイン、または例えば配列番号２のアミノ酸２０〜９５、２０〜７０  ３５〜７０、もしくは３５〜９５、３５〜１２７、もしくは３７〜１２５を含むｈＶＩＳＴＡに由来する領域を含むｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤまたはその断片などのＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に、例えば、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、（ｉ）１０−６Ｍもしくはそれよりも小さな、１０−７Ｍもしくはそれよりも小さな、１０−８Ｍもしくはそれよりも小さな、１０−９Ｍもしくはそれよりも小さな、または１０−１０Ｍもしくはそれよりも小さなＫＤで、および（ｉｉ）１０−５ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−４（または２、５、もしくは７  １０−４）ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−３（または２、５、もしくは７  １０−４）ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−２ｓ−１もしくはそれよりも小さな、または１０−１ｓ−１もしくはそれよりも小さなｋｏｆｆ速度で結合するＡｂが提供される。例えば、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび１０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆ速度で、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび１０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆ速度で、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび１０−２ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆ速度で、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。例えば、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび１０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆ速度で、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合することができる。Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−９Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび１０−３ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆ速度で、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合することができる。Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−９Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび１０−２ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆ速度で、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合することができる。Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび１０−４（または２、５、もしくは７  １０−４）ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆ速度で、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合することができる。Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび１０−５（または２、５、もしくは７  １０−５）ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆ速度で、ｈＶＩＳＴ��−ＥＣＤに結合することができる。Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−９Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび１０−４（または２、５、もしくは７  １０−４）ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆ速度で、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合することができる。Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−９Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび１０−５（または２、５、もしくは７  １０−５）ｓ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆ速度で、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合することができる。
【００５０】
本明細書では、２５℃または３７℃で、例えば、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０４Ｍ−１ｓ−１よりも高いｋｏｎで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合するＡｂが提供される。一部のそのような実施形態では、Ａｂは、１０５Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎで結合することができる。一部のそのような実施形態では、Ａｂは、１０６Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎで結合することができる。一部のそのような実施形態では、Ａｂは、１０７Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎで結合することができる。例えば、Ａｂは、例えば、２５℃または３７℃で測定して、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０６Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。例えば、Ａｂは、例えば、２５℃または３７℃で測定して、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０６Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎで、ｈＶＩＳＴＡのＥＣＤに結合することができる。
【００５１】
本明細書では、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に、例えば、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、（ｉ）１０−６Ｍもしくはそれよりも小さな、１０−７Ｍもしくはそれよりも小さな、１０−８Ｍもしくはそれよりも小さな、１０−９Ｍもしくはそれよりも小さな、または１０−１０Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、および（ｉｉ）１０４Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０５Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０６Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０７Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎで結合するＡｂが提供される。例えば、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび１０６Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎ速度で、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。例えば、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび１０６Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎ速度で、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。例えば、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび１０６Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎ速度で、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合することができる。例えば、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび１０６Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎ速度で、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合することができる。
【００５２】
一部の実施形態では、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ならびに１０−５ｓ−１もしくはそれよりも小さな、２  １０−５ｓ−１もしくはそれよりも小さな、５  １０−５ｓ−１もしくはそれよりも小さな、７  １０−５ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−４ｓ−１もしくはそれよりも小さな、２  １０−４ｓ−１もしくはそれよりも小さな、５  １０−４ｓ−１もしくはそれよりも小さな、７  １０−４ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−３ｓ−１もしくはそれよりも小さな、２  １０−３ｓ−１もしくはそれよりも小さな、５  １０−３ｓ−１もしくはそれよりも小さな、７  １０−３ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−２ｓ−１もしくはそれよりも小さな、または１０−１ｓ−１もしくはそれよりも小さなｋｏｆｆで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。一部の実施形態では、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−９Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ならびに１０−５ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−４ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−３ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−２ｓ−１もしくはそれよりも小さな、または１０−１ｓ−１もしくはそれよりも小さなｋｏｆｆで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。一部のそのような実施形態では、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−１０Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ならびに１０−５ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−４ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−３ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−２ｓ−１もしくはそれよりも小さな、または１０−１ｓ−１もしくはそれよりも小さなｋｏｆｆで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。
【００５３】
一部の実施形態では、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ならびに１０４Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０５Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０６Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０７Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。一部の実施形態では、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ならびに１０４Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０５Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０６Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０７Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。一部の実施形態では、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−９Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ならびに１０４Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０５Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０６Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０７Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。一部のそのような実施形態では、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−１０Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ならびに１０４Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０５Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０６Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０７Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。
【００５４】
一部の実施形態では、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ならびに例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−５ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−４ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−３ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−２ｓ−１もしくはそれよりも小さな、または１０−１ｓ−１もしくはそれよりも小さなｋｏｆｆで、および例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０４Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０５Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０６Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０７Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。一部の実施形態では、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ならびに例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−５ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−４ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−３ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−２ｓ−１もしくはそれよりも小さな、または１０−１ｓ−１もしくはそれよりも小さなｋｏｆｆで、および例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０４Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０５Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０６Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０７Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。一部の実施形態では、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−９Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ならびに例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−５ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−４ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−３ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−２ｓ−１もしくはそれよりも小さな、または１０−１ｓ−１もしくはそれよりも小さなｋｏｆｆで、および例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０４Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０５Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０６Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０７Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。一部のそのような実施形態では、Ａｂは、６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−１０Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ならびに例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０−５ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−４ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−３ｓ−１もしくはそれよりも小さな、１０−２ｓ−１もしくはそれよりも小さな、または１０−１ｓ−１もしくはそれよりも小さなｋｏｆｆで、および例えば、２５℃または３７℃で測定して、１０４Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０５Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０６Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高い、１０７Ｍ−１ｓ−１またはそれよりも高いｋｏｎで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。
【００５５】
上記にも記載したように、上記の実施形態の一部では、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質は、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤであるか、または例えばＩｇＶドメインなどのｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤの部分である。上記の実施形態の一部では、Ａｂは、配列番号２のアミノ酸２０〜９５を含むエピトープに特異的に結合することができる。上記の実施形態の一部では、Ａｂは、配列番号２のアミノ酸２０〜７０を含むエピトープに特異的に結合することができる。上記の実施形態の一部では、Ａｂは、配列番号２のアミノ酸３５〜９５を含むエピトープに特異的に結合することができる。上記の実施形態の一部では、Ａｂは、配列番号２のアミノ酸３５〜７０を含むエピトープに特異的に結合することができる。上記の一部の実施形態では、エピトープは、残基２０〜９５、２０〜７０、３５〜９５、または３５〜７０に由来する配列番号２の上記部分の１つだけでなく、配列番号２の残基９５〜１０５などの配列番号２の別の部分も含む三次元エピトープである。ある特定の実施形態では、Ａｂは、国際公開第２０１５／０９７５３６号に記載のＡｂが結合するｈＶＩＳＴＡのエピトープに結合する。例えば、Ａｂは、ｈＶＩＳＴＡに対する結合をめぐって、国際公開第２０１５／０９７５３６号に開示されているＡｂと競合または交差競合することができる。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ヒトＶＩＳＴＡの立体構造エピトープに結合する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ヒトＶＩＳＴＡの配列番号２の残基１０３〜１１１および配列番号２の１３６〜１４６を含むかまたはそれら内に存在する立体構造エピトープに結合する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ヒトＶＩＳＴＡの配列番号２の残基２４〜３６、５４〜６５、および１００〜１０２を含むかまたはそれら内に存在する立体構造エピトープに結合する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ヒトＶＩＳＴＡのＦＧループのアミノ酸残基を含む立体構造エピトープに結合する。一部の実施形態では、Ａｂは、配列番号２のアミノ酸残基３５〜１２７および／または３７〜１２５を含むポリペプチドに結合する。一部の実施形態では、Ａｂは、配列番号２のアミノ酸残基３５０〜１２７を含むＶＩＳＴＡ  ＥＣＤポリペプチドまたはその部分に結合するが、抗体は、置換（１）が下記のアミノ酸残基：Ｔ３５、Ｙ３７、Ｋ３８、Ｔ３９、Ｙ４１、Ｒ５４、Ｔ６１、Ｆ６２、Ｑ６３、Ｌ６５、Ｈ６６、Ｌ６７、Ｈ６８、Ｈ６９、Ｆ９７、Ｌ１１５、Ｖ１１７、Ｉ１１９、Ｈ１２１、Ｈ１２２、Ｓ１２４、Ｅ１２５、Ｒ１２７、および配列番号２の１つの置換であるか、または（２）が、下記アミノ酸残基：Ｙ３７、Ｔ３９、Ｒ５４、Ｆ６２、Ｑ６３、Ｈ６６、Ｌ１１５、Ｖ１１７、Ｉ１１９、Ｓ１２４、もしくはＥ１２５の１つの置換であるアミノ酸置換を含むＶＩＳＴＡ  ＥＣＤポリペプチドまたはその部分には結合しないかまたは低減された親和性で結合する。一部の実施形態では、抗ＶＩＳＴＡ抗体は、本明細書に記載されている、例えば実施例に示されている抗体と同じ結合特性（または有意に同じ結合特性）を有する。
【００５６】
上記の抗体の一部は、ｐＨに依存して、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に対する結合親和性に差異を示す場合がある。酸性条件では、例えばｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨでは、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合するある特定のＡｂは、中性および／またはアルカリ性ｐＨでも同様の親和性で、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する（つまり、それらは「汎結合体」である）。例えば、一部のそのようなＡｂは、ｐＨ６．５およびｐＨ７．０の両方にて（例えば２５℃または３７℃の一定の温度で）１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができ、その場合、ｐＨ６．５におけるＫＤは、ｐＨ７．０におけるＫＤの１．５倍以内である。一部のそのようなＡｂは、ｐＨ６．５およびｐＨ７．０の両方にて（例えば２５℃または３７℃の一定の温度で）１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができ、その場合、ｐＨ６．５におけるＫＤは、ｐＨ７．０におけるＫＤの１．５倍以内である。一部のそのようなＡｂは、ｐＨ６．５およびｐＨ７．０の両方にて（例えば２５℃または３７℃の一定の温度で）１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合することができ、その場合、ｐＨ６．５におけるＫＤは、ｐＨ７．０におけるＫＤの１．５倍以内である。
【００５７】
酸性条件では、例えばｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合するある特定のＡｂは、中性、生理的、および／またはアルカリ性条件では、より低い親和性でＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる（「ｐＨ感受性結合体」または「ｐＨ感受性Ａｂ」）。酸性条件では、例えばｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨでは、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合するある特定のＡｂは、中性、生理的、および／またはアルカリ性条件では、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に対する結合が、有意ではなく、例えばほぼ検出不能であってもよい。例えば、一部の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ６．５では１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ｐＨ７．０および／またはｐＨ７．４では１０−８Ｍまたはそれよりも大きなＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。一部の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ６．５では１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ｐＨ７．０および／またはｐＨ７．４では、ｐＨ６．５でのＫＤよりも１．５倍を超えてより高いＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。ある特定の実施形態では、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０における場合の１．５分の１、２分の１、５分の１、１０分の１、２０分の１、５０分の１、１００分の１、３００分の１、５００分の１、１０００分の１、または５０００分の１以下のＫＤで（例えば２５℃または３７℃の一定温度にて）ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合するｐＨ感受性Ａｂが提供される。例えば、一部の場合では、Ａｂは、ｐＨ６．０では、ｐＨ７．０および／またはｐＨ７．４またはそれよりも高いｐＨと比べて、１．５分の１、２分の１、５分の１、１０分の１、２０分の１、５０分の１、１００分の１、３００分の１、５００分の１、１０００分の１、または５０００分の１以下のＫＤで（例えば２５℃または３７℃の一定温度にて）ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合する。
【００５８】
ある特定の実施形態では、Ａｂは、酸性条件では、中性、生理的、またはアルカリ性条件でのｋｏｆｆと比べてより低いｋｏｆｆでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、酸性条件では、例えば、２５℃または３７℃で測定して、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０および／またはｐＨ７．４でのｋｏｆｆの１．５分の１、２分の１、５分の１、１０分の１、２０分の１、５０分の１、１００分の１、または１０００分の１以下のｋｏｆｆでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合するＡｂが提供される。言い換えれば、解離速度は、中性ｐＨよりも酸性ｐＨでより遅い。例えば、一部の実施形態では、Ａｂは、例えば２５℃または３７℃で測定して、ｐＨ６．０では、ｐＨ７．０および／またはｐＨ７．４と比べて、１．５分の１、２分の１、５分の１、１０分の１、２０分の１、５０分の１、１００分の１、または１０００分の１以下のＫｏｆｆ速度で、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、例えば、２５℃または３７℃で測定して、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．４でのＫｏｆｆの１．５分の１、２分の１、５分の１、１０分の１、２０分の１、５０分の１、１００分の１、または１０００分の１以下のＫｏｆｆで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合するＡｂが提供される。一部の実施形態では、Ａｂは、例えば、２５℃または３７℃で測定して、ｐＨ６．０では、ｐＨ７．４と比べて、１．５分の１、２分の１、５分の１、１０分の１、２０分の１、５０分の１、１００分の１、または１０００分の１以下のＫｏｆｆ速度で、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、例えば、２５℃または３７℃で測定して、ｐＨ６．０〜６．５では、ｐＨ７．０〜７．４でのＫｏｆｆの１．５分の１、２分の１、５分の１、１０分の１、２０分の１、５０分の１、１００分の１、または１０００分の１以下のＫｏｆｆで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合するＡｂが提供される。
【００５９】
ある特定の実施形態では、Ａｂは、酸性条件では、中性、生理的、またはアルカリ性条件と比べてより高いｋｏｎでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、例えば、２５℃または３７℃で測定して、酸性条件では、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０および／または７．４でのＫｏｎよりも少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍、または１０００倍高いＫｏｎでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合するＡｂが提供される。例えば、一部の実施形態では、Ａｂは、例えば、２５℃または３７℃で測定して、ｐＨ６．０では、ｐＨ７．０および／またはｐＨ７．４よりも、少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、１００倍、または１０００倍高いＫｏｎで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。
【００６０】
ある特定の実施形態では、Ａｂは、少なくとも１つのヒスチジン残基、例えば、配列番号１のＨｉｓ９８がプロトン化されるｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨ、例えばｐＨ６．０〜ｐＨ６．５であると予想される、ＥＣＤのほとんどのヒスチジン残基がプロトン化されるｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する。
【００６１】
酸性ｐＨでの結合親和性が高いままである限り、酸性ｐＨと比べて中性、生理的、またはアルカリ性ｐＨでより高い親和性で、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合するＡｂも本明細書に包含される。例えば、Ａｂが、ｐＨ７．０では、ｐＨ６．５における場合の１．５分の１、２分の１、５分の１、１０分の１、２０分の１、５０分の１、１００分の１、３００分の１、５００分の１、１０００分の１以下のＫＤで結合する場合でも、Ａｂは、ｐＨ６．５およびｐＨ７．０の両方で、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。
【００６２】
本明細書には、このセクションの上記の特質の１つまたは複数を共有するＡｂも包含される。特定のＫＤ、ｋｏｆｆ、ｋｏｎ、具体的なエピトープなどの上記の特質は、分離して取り扱われるべきではない。したがって、Ａｂは、上記に記載されている配列番号２の領域の１つを含むエピトープに結合することができ、また、上記に記載のように、異なるｐＨでのそのＫＤ、ｋｏｆｆ、ｋｏｎの挙動の１つまたは複数により示されるような汎結合性またはｐＨ感受性またはｐＨ選択的結合特質を有していてもよい。
【００６３】
上記の実施形態のいずれかでは、Ａｂは、例えば、全長抗体（つまり、全長重鎖（Ｃ末端リジンを有するまたは有していない）および全長軽鎖を含む）であってもよく、もしくはＦａｂ断片、Ｆａｂ’断片、（Ｆａｂ’）２断片、ｓｃＦｖ断片、Ｆｖ断片などの抗原結合断片であってもよく、またはＡｂは、キメラ、ヒト化、もしくはヒト抗体であってもよく、またはＡｂは、二重特異性もしくは多重特異性抗体であってもよい。
【００６４】
所与のｐＨにおけるＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に対するＡｂの結合良好性の決定は、いくつかの異なる方法を使用して実施することができる。例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）アッセイなど、表面プラズモン共鳴法（ＳＰＲ）によるものがある。例示的なＳＰＲアッセイは、１つまたは幾つかの抗体を、捕捉試薬が固定化されているＣＭ４センサチップで捕捉すること（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）抗ヒトＦｃ捕捉キット、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅカタログ＃ＢＲ−１００８−３９、またはＢｉａｃｏｒｅ（登録商標）抗マウス捕捉キット、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅカタログ＃ＢＲ−１００８−３９を使用して）、および濃度系列のＶＩＳＴＡ抗原を被分析物として流して、所望のｐＨのランニングバッファーでの結合動力学および親和性を決定することを含む。一実施形態では、０．１ｎＭ〜５００ｎＭの範囲（例えば、０．１ｎＭ、１ｎＭ、１０ｎＭ、１００ｎＭ、５００ｎＭ）の２〜５つの濃度のＶＩＳＴＡを、３０ｕＬ／分の流速で注入し、会合時間を最大４分間とし、解離時間を最大１０分間とする。結合サイクル間に、それぞれの捕捉キットの製造業者の使用説明書に従って、捕捉表面を再生する。データはすべて、参照フローセルおよびブランク注入を使用して二重参照される。単純な１：１動力学によるデータを、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ２００評価ソフトウェアを使用して、質量移動のラングミュア結合モデルにフィッティングする。また、実施例に記載されているＳＰＲ方法を使用してもよい。
【００６５】
ＶＩＳＴＡ  ＥＣＤポリペプチドに対するＡｂの親和性は、それらの表面に、ＶＩＳＴＡ  ＥＣＤポリペプチド、ＰＳＧＬ−１、またはヘパラン硫酸を発現する細胞を使用して決定することができる。この方法は、フローサイトメトリーを含み、細胞に結合しているＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに対するＡｂの結合が、所与のｐＨ、例えばｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨで決定される。例示的なフローサイトメトリーアッセイは、以下を含む。ｈＶＩＳＴＡ  ＥＣＤを異所的に発現する２９３Ｔ細胞または他の細胞を、望ましいｐＨに、例えば、ＭＥＳでｐＨ６．０に、またはＨＥＰＥＳでｐＨ７．４に調整されたＨＢＳＳ＋１％ＢＳＡからなるバッファーに再懸濁する。ｈＶＩＳＴＡに対するＡｂ（例えば、ヒトＩｇＧ）を、およそ２０μｇ／ｍＬから系列希釈し、再懸濁した細胞と共に４℃で３０分間インキュベートする。その後、細胞を、同じバッファーで２回洗浄し、所望のｐＨ、例えば、６．０または７．４のｐＨを維持し、一次抗体（例えば、ヒトＩｇＧ）を認識し、低ｐＨで安定的なフルオロフォア−コンジュゲート二次抗体と共にインキュベートする。その後、細胞を上記と同様に洗浄し、固定せずに直ちにＢＤ  Ｆｏｒｔｅｓｓａまたは他のフローサイトメーターで取得した。ＶＩＳＴＡ  ＥＣＤポリペプチドに対するＡｂの親和性は、実施例に記載されているように決定することができる。
【００６６】
ある特定の実施形態では、ｈＶＩＳＴＡ  ＥＣＤに結合するＡｂは、例えば細胞上のその結合パートナー（例えば、ＶＩＳＴＡ受容体）に対するｈＶＩＳＴＡの結合をブロックする。阻害またはブロッキングは、１００％であってもよく、または少なくとも９９％、９５％、９０％、８５％、８０％、７５％、もしくは５０％であってもよい。ある特定の実施形態では、Ａｂは、酸性ｐＨ、例えばｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合し、その結合パートナーに対するＶＩＳＴＡの結合を、少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または１００％など、少なくとも５０％阻害する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ７．０未満のｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、その結合パートナーに対するＶＩＳＴＡの結合を少なくとも５０％阻害する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ６．８未満のｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、その結合パートナーに対するＶＩＳＴＡの結合を少なくとも５０％阻害する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ６．５未満のｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、その結合パートナーに対するＶＩＳＴＡの結合を少なくとも５０％阻害する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ６．３未満のｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、その結合パートナーに対するＶＩＳＴＡの結合を少なくとも５０％阻害する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ６．０未満のｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、その結合パートナーに対するＶＩＳＴＡの結合を少なくとも５０％阻害する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ５．８未満のｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、その結合パートナーに対するＶＩＳＴＡの結合を少なくとも５０％阻害する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ５．５未満のｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、その結合パートナーに対するＶＩＳＴＡの結合を少なくとも５０％阻害する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ５．３未満のｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、その結合パートナーに対するＶＩＳＴＡの結合を少なくとも５０％阻害する。ある特定の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ５．０未満のｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、その結合パートナーに対するＶＩＳＴＡの結合を少なくとも５０％阻害する。
【００６７】
ある特定のＡｂは、ｐＨ５．０〜ｐＨ７．０の範囲内のｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、その結合パートナーに対するＶＩＳＴＡの結合を少なくとも５０％阻害する。ある特定のＡｂは、ｐＨ５．０〜ｐＨ６．５の範囲内のｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、その結合パートナーに対するＶＩＳＴＡの結合を少なくとも５０％阻害する。ある特定のＡｂは、ｐＨ５．０〜ｐＨ６．０の範囲内のｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、その結合パートナーに対するＶＩＳＴＡの結合を少なくとも５０％阻害する。ある特定のＡｂは、ｐＨ５．５〜ｐＨ７．０の範囲内のｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、その結合パートナーに対するＶＩＳＴＡの結合を少なくとも５０％阻害する。ある特定のＡｂは、ｐＨ５．５〜ｐＨ６．５の範囲内のｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、その結合パートナーに対するＶＩＳＴＡの結合を少なくとも５０％阻害する。ある特定のＡｂは、ｐＨ６．０〜ｐＨ６．５の範囲内のｐＨで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、その結合パートナーに対するＶＩＳＴＡの結合を少なくとも５０％阻害する。結合の阻害は、実施例に記載されているように決定することができる。
【００６８】
ＶＩＳＴＡ結合パートナーは、ヒトＰＳＧＬ−１などのＰＳＧＬ−１であってもよい。ヒトＰＳＧＬ−１アイソフォームの配列は、配列番号３〜１０として本明細書に提供されている。また、それは、例えば、ある特定の細胞上に存在するヘパラン硫酸プロテオグリカン類であってもよい。
【００６９】
ＶＩＳＴＡ結合パートナーに対する結合の阻害は、ＶＩＳＴＡ（またはＶＩＳＴＡ  ＥＣＤ、またはＶＩＳＴＡ  ＩｇＶドメイン、またはＶＩＳＴＡ陽性細胞）の、ＶＩＳＴＡが結合する細胞、例えばＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、活性化されているか否かに関わらず）、ＮＫ細胞、またはＶＩＳＴＡが結合する他の細胞に対する結合の阻害を、抗体の存在下または非存在下で測定することにより決定することができる。抗体が、その結合パートナー、または結合パートナーを発現するＴ細胞に対するＶＩＳＴＡの結合を阻害する否かを決定するために使用することができる例示的な実験は、フローサイトメトリーアッセイであり、例えば、以下を含むアッセイである。ドナー血液に由来するヒト末梢血単核細胞、バフィーコート、またはｌｅｕｋｏｐａｋを、望ましいｐＨに、例えばＭＥＳでｐＨ６．０に、またはＨＥＰＥＳでｐＨ７．４に調整されたＨＢＳＳ＋１％ＢＳＡで構成されているバッファーに再懸濁する。その後、細胞を、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃと融合されたｈＶＩＳＴＡ  ＥＣＤ（ＶＩＳＴＡ−Ｆｃ）からなる２０μｇ／ｍＬ組換えキメラタンパク質、および様々な濃度の候補ＶＩＳＴＡブロッキング抗体またはコントロール抗体と共に、４℃で３０分間インキュベートする。その後、細胞を、同じバッファーで２回洗浄して、所望のｐＨ、例えば６．０または７．４のｐＨを維持し、ＶＩＳＴＡ−Ｆｃを認識するが、候補ブロッキング抗体またはコントロール抗体を認識せず、低ｐＨで安定的であるフルオロフォア−コンジュゲート二次抗体と共に、４℃でさらに３０分間インキュベートする。その後、細胞を上記と同様に洗浄し、固定せずに直ちにＢＤ  Ｆｏｒｔｅｓｓａまたは他のフローサイトメーターで取得した。結合の阻害は、例えば、実施例に記載されているように決定することができる。
【００７０】
具体的な実施形態では、本明細書に記載のＡｂは、抗原特異的免疫応答などの免疫応答を始動または増強することができる。ある特定の実施形態では、Ａｂは、特に、腫瘍微小環境に見出されるものなどの酸性ｐＨで、Ｔ細胞活性を刺激する。Ｔ細胞活性の刺激は、例えば、混合リンパ球反応（ＭＬＲ）で、またはインビトロアッセイで、抗原提示細胞（天然または人工）およびＴ細胞を用いて測定することができる。また、Ｔ細胞活性の刺激は、例えば、実施例に記載されているジャーカットアッセイを使用して測定することができる。
【００７１】
具体的な実施形態では、本明細書に記載のＡｂは、細胞接着を阻害する。阻害は、実施例に記載のように測定することができる。
【００７２】
また、抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂの活性は、特に、腫瘍微小環境などで見出されるような酸性ｐＨにおける単球アッセイ、ＡＤＣＣアッセイ、およびＡＤＣＰアッセイで示すことができる。
【００７３】
ある特定の実施形態では、抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂは、腫瘍モデル、例えばヒトＶＩＳＴＡノックイン腫瘍モデルにおいて腫瘍増殖を阻害する。
【００７４】
本明細書の実施例に示されているように、抗体の薬物動態学的（ＰＫ）特質、つまり半減期を増強するなどのためのエンドソームでの抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂの再循環には、抗ＶＩＳＴＡ抗体が酸性条件にてＶＩＳＴＡに結合することが必要である。したがって、本明細書でさらに記載されているような、低ｐＨで、例えば６．５またはそれよりも低いｐＨでＶＩＳＴＡに結合する抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂは、酸性ｐＨではＶＩＳＴＡに結合しないＶＩＳＴＡ抗体と比べて、より長い許容可能な半減期を有することも予想される。
【００７５】
例示的なｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ結合Ａｂ
本明細書では、生理的ｐＨまたは中性ｐＨに比べて、酸性ｐＨ（例えば、酸性条件）で優先的にｈＶＩＳＴＡ（ＥＣＤ）に結合するＡｂが提供される。
【００７６】
ある実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（「ＶＨ」）を含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＨを含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、Ｐ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５または以下のものなどのそれらの子孫のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３を含むＶＨを含む：Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ。こうした種の各々のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３は、下記の配列表に提供されている上記抗体種の各々のＶＨ配列のアミノ酸２６〜３５位（ＶＨ  ＣＤＲ１）、５０〜６６位（ＶＨ  ＣＤＲ２）、および９９〜１１０位（ＶＨ  ＣＤＲ３）を含む。また、下記の配列表に提供されている上記抗体種のＶＨ配列の各々のＣＤＲは、下線および太字で示されている。
【００７７】
ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＨを含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、以下のもの１つのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＨを含む：Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ。こうした種の各々のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３は、下記の配列表に提供されている上記抗体種の各々のＶＬ配列のアミノ酸２４〜３５位（ＶＬ  ＣＤＲ１）、５１〜５７位（ＶＬ  ＣＤＲ２）、および９０〜９８位（ＶＬ  ＣＤＲ３）を含む。また、そうした配列のＣＤＲは、下線および太字で示されている。
【００７８】
ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書に提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３を含むＶＨ、ならびに本明細書に提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３を含むＶＬを含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書に提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＨ、ならびに本明細書に提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬを含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、Ｐ１−０６１０２９、またはＰ１−０６１０１５、またはＰ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦなどのそれらの子孫のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３を含むＶＨ��ならびにＰ１−０６１０２９、またはＰ１−０６１０１５、または、Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦなどのそれらの子孫のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬを含む。
【００７９】
一部の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、
（ａ）Ｐ１−０６１０２９のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６１０２９のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｂ）Ｐ１−０６１０１５のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６１０１５のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｃ）Ｐ１−０６８７５７のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７５７のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｄ）Ｐ１−０６８７５９のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７５９のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｅ）Ｐ１−０６８７６１のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｆ）Ｐ１−０６８７６３のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６３のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｇ）Ｐ１−０６８７６５のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６５のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｈ）Ｐ１−０６８７６７のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６７のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｉ）Ｐ１−０６８７６９のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６９のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｊ）Ｐ１−０６８７７１のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７７１のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｋ）Ｐ１−０６８７７３のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７７３のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｌ）Ｐ１−０６８７７５のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７７５のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｍ）Ｐ１−０６９０５９のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６９０５９のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｎ）Ｐ１−０６９０６１のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６９０６１のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｏ）Ｐ１−０６９０６３のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６９０６３のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｐ）Ｐ１−０６９０６５のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６９０６５のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｑ）Ｐ１−０６９０６７のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６９０６７のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｒ）Ｐ１−０６９０６９のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６９０６９のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｓ）Ｐ１−０６９０７１のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６９０７１のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｔ）Ｐ１−０６９０７３のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６９０７３のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｕ）Ｐ１−０６９０７５のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６９０７５のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｖ）Ｐ１−０６９０７７のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６９０７７のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｗ）Ｐ１−０６８７３６のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７３６のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｘ）Ｐ１−０６８７３８のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７３８のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｙ）Ｐ１−０６８７４０のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７４０のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｚ）Ｐ１−０６８７４２のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７４２のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ａａ）Ｐ１−０６８７４４のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７４４のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｂｂ）Ｐ１−０６８７４６のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７４６のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｃｃ）Ｐ１−０６８７４８のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７４８のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｄｄ）Ｐ１−０６８７５０のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７５０のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｅｅ）Ｐ１−０６８７５２のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７５２のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｆｆ）Ｐ１−０６８７５４のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７５４のＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｇｇ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５ＡのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５ＡのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｈｈ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００ＧのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００ＧのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｉｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６ＮのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６ＮのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｊｊ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６ＮのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６ＮのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｋｋ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０ＤのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０ＤのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｌｌ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｍｍ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００ＧのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００ＧのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｎｎ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００ＧのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００ＧのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｏｏ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６ＮのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６ＮのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｐｐ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｑｑ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｒｒ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｓｓ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｔｔ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｕｕ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２ＹのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２ＹのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｖｖ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５ＡのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５ＡのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｗｗ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６ＮのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６ＮのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｘｘ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２ＹのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２ＹのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｙｙ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００ＧのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００ＧのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｚｚ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ａａａ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２ＶのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２ＶのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｂｂｂ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２ＮのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２ＮのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｃｃｃ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５ＡのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５ＡのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｄｄｄ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２ＶのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２ＶのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｅｅｅ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２ＶのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ１０２ＶのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｆｆｆ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５ＡのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５ＡのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｇｇｇ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２ＮのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２ＮのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｈｈｈ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２ＶのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２ＶのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｉｉｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０ＤのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０ＤのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｊｊｊ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｋｋｋ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２ＶのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２ＶのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｌｌｌ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｍｍｍ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｎｎｎ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ、
（ｏｏｏ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含むＶＬ。
を含んでいてもよい。
【００８０】
この場合も、下記の配列表には、ＩｇＧ１．３重鎖定常領域を有する上記に列挙されている抗体の重鎖および軽鎖可変領域配列ならびに全長重鎖および軽鎖配列が提供されており（異なるＨＣ定常領域が表に注記されていない限り）、それらのＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびにＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３の位置はアミノ酸残基により示されており、各ＶＨおよびＶＬ配列のＣＤＲは太字および下線で示されている。したがって、例えば、配列表に示されている配列番号６７の太字および下線のアミノ酸により示されているように、Ｐ１−０６１０２９のＶＨ  ＣＤＲ１は、配列番号６７のアミノ酸２６〜３５を含み、ＶＨ  ＣＤＲ２は、配列番号６７のアミノ酸５０〜６６を含み、ＶＨ  ＣＤＲ３は、配列番号６７のアミノ酸９９〜１１０を含むなどである。
【００８１】
ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨを含む。本明細書で提供されている特定の抗体種の個々のＶＨ配列は、配列表に列挙されている。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、Ｐ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５または以下のものなどのそれらの子孫のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨを含む：Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＨ  ＣＤＲのアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含み、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＨと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨを含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含むＶＨを含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨを含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、Ｐ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５または以下のものなどのそれらの子孫のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨを含む：Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８��５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ。
【００８２】
ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬを含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、Ｐ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５または以下のものなどのそれらの子孫のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬを含む：Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＬ  ＣＤＲのアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含み、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＬを含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列に、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を含むＶＬを含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬを含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、Ｐ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５または以下のものなどのそれらの子孫のＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬを含む：Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８��６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ。
【００８３】
ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、および本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬを含む。ある特定のこうした実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、Ｐ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５またはＰ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦなどのそれらの子孫のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬを含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、Ｐ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５またはＰ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦなどのそれらの子孫のＶＨおよびＶＬのアミノ酸配列を含むＶＨおよびＶＬを含む。
【００８４】
ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＨ  ＣＤＲのアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびに本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＬ  ＣＤＲのアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含み、また、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂのいずれかの対応するＶＨおよびＶＬに、各々、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬを含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書に提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂの６つすべてのＣＤＲを含み、また、Ｐ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５またはＰ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７��７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦなどのそれらの子孫のＶＨおよびＶＬなどの抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂの対応するＶＨおよびＶＬに、各々、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  ＡｂのいずれかのＶＨおよびＶＬのアミノ酸配列からなるＶＨおよびＶＬを含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、各々が、Ｐ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５または以下のものなどのそれらの子孫のＶＨおよびＶＬのアミノ酸配列からなるＶＨおよびＶＬを含む。Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１���０ｆＦ。
【００８５】
抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、
（ａ）Ｐ１−０６１０２９のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６１０２９のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｂ）Ｐ１−０６１０１５のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６１０１５のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｃ）Ｐ１−０６８７５７のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７５７のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｄ）Ｐ１−０６８７５９のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７５９のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｅ）Ｐ１−０６８７６１のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｆ）Ｐ１−０６８７６３のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６３のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｇ）Ｐ１−０６８７６５のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６５のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｈ）Ｐ１−０６８７６７のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｉ）Ｐ１−０６８７６９のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６９のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｊ）Ｐ１−０６８７７１のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７７１のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｋ）Ｐ１−０６８７７３のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、および−０６８７７３のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｌ）Ｐ１−０６８７７５のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７７５のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｍ）Ｐ１−０６９０５９のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６９０５９のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｎ）Ｐ１−０６９０６１のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６９０６１のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｏ）Ｐ１−０６９０６３のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６９０６３のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｐ）Ｐ１−０６９０６５のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６９０６５のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｑ）Ｐ１−０６９０６７のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６９０６７のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｒ）Ｐ１−０６９０６９のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６９０６９のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｓ）Ｐ１−０６９０７１のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６９０７１のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｔ）Ｐ１−０６９０７３のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６９０７３のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｕ）Ｐ１−０６９０７５のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６９０７５のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｖ）Ｐ１−０６９０７７のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６９０７７のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｗ）Ｐ１−０６８７３６のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７３６のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｘ）Ｐ１−０６８７３８のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７３８のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｙ）Ｐ１−０６８７４０のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７４０のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｚ）Ｐ１−０６８７４２のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７４２のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ａａ）Ｐ１−０６８７４４のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７４４のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｂｂ）Ｐ１−０６８７４６のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７４６のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｃｃ）Ｐ１−０６８７４８のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７４８のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｄｄ）Ｐ１−０６８７５０のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７５０のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｅｅ）Ｐ１−０６８７５２のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７５２のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｆｆ）Ｐ１−０６８７５４のＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７５４のＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｇｇ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５ＡのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｈｈ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００ＧのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｉｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６ＮのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｊｊ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６ＮのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｋｋ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０ＤのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０ＤのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｌｌ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｍｍ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００ＧのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｎｎ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００ＧのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｏｏ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６ＮのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｐｐ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｑｑ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｒｒ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｓｓ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｔｔ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｕｕ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２ＹのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２ＹのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｖｖ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５ＡのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｗｗ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６ＮのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｘｘ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２ＹのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２ＹのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｙｙ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００ＧのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｚｚ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ａａａ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２ＶのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｂｂｂ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２ＮのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２ＮのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｃｃｃ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５ＡのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｄｄｄ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２ＶのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｅｅｅ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ１０２ＶのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｆｆｆ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５ＡのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｇｇｇ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２ＮのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２ＮのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｈｈｈ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２ＶのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｉｉｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０ＤのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０ＤのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｊｊｊ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｋｋｋ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２ＶのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｌｌｌ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｍｍｍ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
（ｎｎｎ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ、
または
（ｏｏｏ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ
を含んでいてもよい。
【００８６】
抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、
（ａ）Ｐ１−０６１０２９のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６１０２９のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６１０２９のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｂ）Ｐ１−０６１０１５のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６１０１５のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６１０１５のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｃ）Ｐ１−０６８７５７のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７５７のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７５７のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｄ）Ｐ１−０６８７５９のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７５９のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７５９のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｅ）Ｐ１−０６８７６１のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｆ）Ｐ１−０６８７６３のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６３のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６３のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｇ）Ｐ１−０６８７６５のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６５のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６５のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｈ）Ｐ１−０６８７６７のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６７のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６７のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｉ）Ｐ１−０６８７６９のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６９のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６９のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｊ）Ｐ１−０６８７７１のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７７１のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７７１のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｋ）Ｐ１−０６８７７３のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７７３のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７７３のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｌ）Ｐ１−０６８７７５のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７７５のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７７５のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｍ）Ｐ１−０６９０５９のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６９０５９のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６９０５９のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｎ）Ｐ１−０６９０６１のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６９０６１のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６９０６１のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｏ）Ｐ１−０６９０６３のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６９０６３のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６９０６３のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｐ）Ｐ１−０６９０６５のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６９０６５のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６９０６５のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｑ）Ｐ１−０６９０６７のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６９０６７のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６９０６７のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｒ）Ｐ１−０６９０６９のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６９０６９のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６９０６９のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｓ）Ｐ１−０６９０７１のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６９０７１のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６９０７１のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｔ）Ｐ１−０６９０７３のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６９０７３のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６９０７３のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｕ）Ｐ１−０６９０７５のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６９０７５のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６９０７５のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｖ）Ｐ１−０６９０７７のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６９０７７のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６９０７７のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｗ）Ｐ１−０６８７３６のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７３６のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７３６のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｘ）Ｐ１−０６８７３８のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７３８のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７３８のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｙ）Ｐ１−０６８７４０のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７４０のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７４０のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｚ）Ｐ１−０６８７４２のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７４２のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７４２のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ａａ）Ｐ１−０６８７４４のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７４４のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７４４のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｂｂ）Ｐ１−０６８７４６のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７４６のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７４６のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｃｃ）Ｐ１−０６８７４８のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７４８のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７４８のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｄｄ）Ｐ１−０６８７５０のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７５０のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７５０のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｅｅ）Ｐ１−０６８７５２のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７５２のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７５２のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｆｆ）Ｐ１−０６８７５４のＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７５４のＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７５４のＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｇｇ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５ＡのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５ＡのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５ＡのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｈｈ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００ＧのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００ＧのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００ＧのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｉｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６ＮのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６ＮのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６ＮのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｊｊ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６ＮのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６ＮのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６ＮのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｋｋ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０ＤのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０ＤのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０ＤのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｌｌ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｍｍ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００ＧのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００ＧのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００ＧのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｎｎ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００ＧのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００ＧのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００ＧのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｏｏ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６ＮのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６ＮのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６ＮのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｐｐ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｑｑ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｒｒ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｓｓ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｔｔ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｕｕ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２ＹのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２ＹのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２ＹのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｖｖ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５ＡのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５ＡのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５ＡのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｗｗ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６ＮのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６ＮのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６ＮのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｘｘ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２ＹのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２ＹのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２ＹのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｙｙ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００ＧのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００ＧのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００ＧのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｚｚ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ａａａ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２ＶのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２ＶのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｂｂｂ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２ＮのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２ＮのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２ＮのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｃｃｃ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５ＡのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５ＡのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５ＡのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｄｄｄ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２ＶのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２ＶのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｅｅｅ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２ＶのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２ＶのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ１０２ＶのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｆｆｆ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５ＡのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５ＡのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５ＡのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｇｇｇ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２ＮのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２ＮのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２ＮのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｈｈｈ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２ＶのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２ＶのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｉｉｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０ＤのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０ＤのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０ＤのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｊｊｊ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｋｋｋ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２ＶのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２ＶのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｌｌｌ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｍｍｍ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、
（ｎｎｎ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列、または
（ｏｏｏ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのＶＨ  ＣＤＲを含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨおよびＶＬと、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＶＨおよびＶＬアミノ酸配列
を含んでいてもよい。
【００８７】
抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、
（ａ）Ｐ１−０６１０２９のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６１０２９のＶＬからなるＶＬ、
（ｂ）Ｐ１−０６１０１５のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６１０１５のＶＬからなるＶＬ、
（ｃ）Ｐ１−０６８７５７のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７５７のＶＬからなるＶＬ、
（ｄ）Ｐ１−０６８７５９のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７５９のＶＬからなるＶＬ、
（ｅ）Ｐ１−０６８７６１のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１のＶＬからなるＶＬ、
（ｆ）Ｐ１−０６８７６３のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６３のＶＬからなるＶＬ、
（ｇ）Ｐ１−０６８７６５のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６５のＶＬからなるＶＬ、
（ｈ）Ｐ１−０６８７６７のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６７のＶＬからなるＶＬ、
（ｉ）Ｐ１−０６８７６９のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６９のＶＬからなるＶＬ、
（ｊ）Ｐ１−０６８７７１のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７７１のＶＬからなるＶＬ、
（ｋ）Ｐ１−０６８７７３のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７７３のＶＬからなるＶＬ、
（ｌ）Ｐ１−０６８７７５のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７７５のＶＬからなるＶＬ、
（ｍ）Ｐ１−０６９０５９のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６９０５９のＶＬからなるＶＬ、
（ｎ）Ｐ１−０６９０６１のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６９０６１のＶＬからなるＶＬ、
（ｏ）Ｐ１−０６９０６３のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６９０６３のＶＬからなるＶＬ、
（ｐ）Ｐ１−０６９０６５のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６９０６５のＶＬからなるＶＬ、
（ｑ）Ｐ１−０６９０６７のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６９０６７のＶＬからなるＶＬ、
（ｒ）Ｐ１−０６９０６９のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６９０６９のＶＬからなるＶＬ、
（ｓ）Ｐ１−０６９０７１のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６９０７１のＶＬからなるＶＬ、
（ｔ）Ｐ１−０６９０７３のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６９０７３のＶＬからなるＶＬ、
（ｕ）Ｐ１−０６９０７５のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６９０７５のＶＬからなるＶＬ、
（ｖ）Ｐ１−０６９０７７のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６９０７７のＶＬからなるＶＬ、
（ｗ）Ｐ１−０６８７３６のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７３６のＶＬからなるＶＬ、
（ｘ）Ｐ１−０６８７３８のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７３８のＶＬからなるＶＬ、
（ｙ）Ｐ１−０６８７４０のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７４０のＶＬからなるＶＬ、
（ｚ）Ｐ１−０６８７４２のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７４２のＶＬからなるＶＬ、
（ａａ）Ｐ１−０６８７４４のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７４４のＶＬからなるＶＬ、
（ｂｂ）Ｐ１−０６８７４６のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７４６のＶＬからなるＶＬ、
（ｃｃ）Ｐ１−０６８７４８のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７４８のＶＬからなるＶＬ、
（ｄｄ）Ｐ１−０６８７５０のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７５０のＶＬからなるＶＬ、
（ｅｅ）Ｐ１−０６８７５２のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７５２のＶＬからなるＶＬ、
（ｆｆ）Ｐ１−０６８７５４のＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７５４のＶＬからなるＶＬ、
（ｇｇ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５ＡのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｈｈ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００ＧのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｉｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６ＮのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｊｊ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６ＮのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｋｋ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０ＤのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０ＤのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｌｌ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｍｍ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００ＧのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｎｎ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００ＧのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｏｏ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６ＮのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｐｐ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｑｑ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｒｒ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｓｓ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｔｔ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｕｕ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２ＹのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２ＹのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｖｖ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５ＡのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｗｗ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６ＮのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｘｘ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２ＹのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２ＹのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｙｙ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００ＧのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｚｚ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ａａａ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２ＶのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｂｂｂ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２ＮのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２ＮのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｃｃｃ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５ＡのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｄｄｄ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２ＶのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｅｅｅ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ１０２ＶのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｆｆｆ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５ＡのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｇｇｇ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２ＮのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２ＮのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｈｈｈ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２ＶのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｉｉｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０ＤのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０ＤのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｊｊｊ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｋｋｋ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２ＶのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｌｌｌ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｍｍｍ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
（ｎｎｎ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列からなるＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列からなるＶＬ、
または
（ｏｏｏ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列を含むＶＨ、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＬのアミノ酸配列を含むＶＬ
を含んでいてもよい。
【００８８】
ある特定の実施形態では、抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂは、
Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの
（１）ＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３の１つまたは複数、
（２）ＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、
（３）ＶＨ、
（４）ＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３の１つまたは複数、ならびにＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３の１つまたは複数、
（５）ＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびにＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、
または
（６）ＶＨおよびＶＬ
などの、上記および本明細書の他所に記載されている抗体の可変領域および／または可変領域ＣＤＲ１〜３のいずれかを含み、抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂは、下記のセクションに記載されているような、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４抗体などのＩｇＧ抗体またはその修飾型でもある。一部の実施形態では、定常領域は、エフェクター機能を有し、一部の実施形態では、定常領域は、エフェクターレスである。ある特定の実施形態では、定常領域は、ＩｇＧ１．３の定常領域である。
【００８９】
ある特定の実施形態では、抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂは、
Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの、
（１）ＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３の１つまたは複数、
（２）ＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、
（３）ＶＨ、
（４）ＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３の１つまたは複数、ならびにＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３の１つまたは複数、
（５）ＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびにＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、
または
（６）ＶＨおよびＶＬ
などの、上記および本明細書の他所に記載されている抗体の可変領域および／または可変領域ＣＤＲ１〜３のいずれかを含み、
下記の特性の１つまたは複数をさらに含む：
−  酸性ｐＨで、例えばｐＨ６．０またはｐＨ６．５で、ｈＶＩＳＴＡに、例えばＥＣＤのヒスチジンリッチ領域または配列番号２のアミノ酸残基３５〜１２７を含むポリペプチドに特異的に結合すること、
−  生理的ｐＨまたは中性ｐＨでは、例えばｐＨ７．４またはｐＨ７．０では、ｈＶＩＳＴＡに対する、例えばＥＣＤのヒスチジンリッチ領域または配列番号２のアミノ酸残基３５〜１２７を含むポリペプチドに対する有意な結合を欠如すること、
−  酸性ｐＨで、例えばｐＨ６．０またはｐＨ６．５で、ｃｙｎｏＶＩＳＴＡに、例えばＥＣＤのヒスチジンリッチ領域に特異的に結合すること、
−  生理的ｐＨまたは中性ｐＨで、例えばｐＨ７．４またはｐＨ７．０で、ｃｙｎｏ  ＶＩＳＴＡに対する、例えばＥＣＤのヒスチジンリッチ領域に対する有意な結合を欠如すること、
−  配列番号２を有するｈＶＩＳＴＡ  ＥＣＤと比べて、以下のアミノ酸：Ｔ３５、Ｙ３７、Ｋ３８、Ｔ３９、Ｙ４１、Ｒ５４、Ｔ６１、Ｆ６２、Ｑ６３、Ｌ６５、Ｈ６６、Ｌ６７、Ｈ６８、Ｈ６９、Ｆ９７、Ｌ１１５、Ｖ１１７、Ｉ１１９、Ｈ１２１、Ｈ１２２、Ｓ１２４、Ｅ１２５、Ｒ１２７の１つまたは複数に置換を有するｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤへの結合が低減していること、
−  ｈＶＩＳＴＡに対する結合をめぐって、Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６７、および／またはＰ１−０６１０１５と交差競合すること、
−  酸性ｐＨで、例えばｐＨ６．０またはｐＨ６．５で、ヒトＴ細胞に対するｈＶＩＳＴＡの結合を阻害すること、
−  酸性ｐＨで、例えばｐＨ６．０またはｐＨ６．５で、ＰＳＧＬ−１に対するｈＶＩＳＴＡの結合を阻害すること、
−  カニクイザルで少なくとも３５０時間の平均滞留時間、
−  Ｔ細胞活性化を刺激すること、
−  ＶＩＳＴＡ媒介性の細胞間接着を阻害すること、および
−  ヒト腫瘍細胞の試料または炎症ヒト組織の試料中でｈＶＩＳＴＡに特異的に結合すること。
【００９０】
ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂのいずれかの重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）を含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、Ｐ１−０６１０２９．ＩｇＧ１．３（配列番号６９）、Ｐ１−０６８７５７．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７５９．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６３．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６５．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６９．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７７１．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７７３．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７７５．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０５９．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０６１．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０６３．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０６５．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０６７．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０６９．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０７１．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０７３．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０７５．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０７７．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６１０１５．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７３６．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７３８．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７４０．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７４２．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７４４．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６６．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７４８．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７５０．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７５２．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７５４．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３などのＩｇＧ１．３重鎖定常領域を含む、下記の配列表に示されているようなＰ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５またはそれらの子孫の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。
【００９１】
ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、ＩｇＧ１．３重鎖定常領域を含む、本明細書で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂのいずれかの重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、および本明細書中で提供されている抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂのいずれかの軽鎖のアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、Ｐ１−０６１０２９．ＩｇＧ１．３（配列番号６９）、Ｐ１−０６８７５７．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７５９．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６３．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６５．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６９．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７７１．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７７３．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７７５．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０５９．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０６１．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０６３．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０６５．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０６７．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０６９．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０７１．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０７３．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０７５．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６９０７７．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６１０１５．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７３６．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７３８．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７４０．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７４２．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７４４．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６６．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７４８．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７５０．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７５２．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７５４．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７���７＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３などのＩｇＧ１．３ＨＣ定常領域を含む、Ｐ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５またはそれらの子孫のＶＨのアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５の軽鎖のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【００９２】
抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、
（ａ）Ｐ１−０６１０２９．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列（配列番号６９）を含む重鎖、およびＰ１−０６１０２９の軽鎖アミノ酸配列（配列番号７０）を含む軽鎖、
（ｂ）Ｐ１−０６１０１５．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６１０１５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｃ）Ｐ１−０６８７５７．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５７の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｄ）Ｐ１−０６８７５９．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５９の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｅ）Ｐ１−０６８７６１．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｆ）Ｐ１−０６８７６３．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６３の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｇ）Ｐ１−０６８７６５．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｈ）Ｐ１−０６８７６７．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｉ）Ｐ１−０６８７６９．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６９の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｊ）Ｐ１−０６８７７１．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７７１の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｋ）Ｐ１−０６８７７３．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７７３の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｌ）Ｐ１−０６８７７５．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７７５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｍ）Ｐ１−０６９０５９．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０５９の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｎ）Ｐ１−０６９０６１．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６１の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｏ）Ｐ１−０６９０６３．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６３の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｐ）Ｐ１−０６９０６５．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｑ）Ｐ１−０６９０６７．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６７の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｒ）Ｐ１−０６９０６９．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６９の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｓ）Ｐ１−０６９０７１．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０７１の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｔ）Ｐ１−０６９０７３．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０７３の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｕ）Ｐ１−０６９０７５．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０７５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｖ）Ｐ１−０６９０７７．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０７７の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｗ）Ｐ１−０６８７３６．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７３６の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｘ）Ｐ１−０６８７３８．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７３８の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｙ）Ｐ１−０６８７４０．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４０の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｚ）Ｐ１−０６８７４２．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４２の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ａａ）Ｐ１−０６８７４４．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４４の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｂｂ）Ｐ１−０６８７４６．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４６の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｃｃ）Ｐ１−０６８７４８．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４８の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｄｄ）Ｐ１−０６８７５０．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５０の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｅｅ）Ｐ１−０６８７５２．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５２の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｆｆ）Ｐ１−０６８７５４．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５４の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｇｇ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｈｈ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｉｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｊｊ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｋｋ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｌｌ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｍｍ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｎｎ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｏｏ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｐｐ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｑｑ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｒｒ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｓｓ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｔｔ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｕｕ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｖｖ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｗｗ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｘｘ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｙｙ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｚｚ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ａａａ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｂｂｂ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｃｃｃ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｄｄｄ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｅｅｅ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｆｆｆ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｇｇｇ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｈｈｈ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｉｉｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｊｊｊ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｋｋｋ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｌｌｌ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｍｍｍ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｎｎｎ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、または
（ｏｏｏ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖
を含んでいてもよい。
【００９３】
抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、
（ａ）Ｐ１−０６１０２９のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含む重鎖（ＨＣ）、ならびにＰ１−０６１０２９のＬＣ  ＣＤＲを含む軽鎖（ＬＣ）、ならびにＰ１−０６１０２９．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｂ）Ｐ−０６１０１５のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６１０１５のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６１０１５．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｃ）Ｐ１−０６８７５７のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７５７のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７５７．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｄ）Ｐ１−０６８７５９のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７５９のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７５９．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｅ）Ｐ１−０６８７６１のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｆ）Ｐ１−０６８７６３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６３のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６３．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｇ）Ｐ１−０６８７６５のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６５のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６５．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｈ）Ｐ１−０６８７６７のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６７のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６７．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｉ）Ｐ１−０６８７６９のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６９のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６９．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｊ）Ｐ１−０６８７７１のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７７１のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７７１．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｋ）Ｐ１−０６８７７３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７７３のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７７３．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｌ）Ｐ１−０６８７７５のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７７５のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７７５．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｍ）Ｐ１−０６９０５９のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６９０５９のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６９０５９．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｎ）Ｐ１−０６９０６１のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６９０６１のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６９０６１．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｏ）Ｐ１−０６９０６３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６９０６３のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６９０６３．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｐ）Ｐ１−０６９０６５のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６９０６５のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６９０６５．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｑ）Ｐ１−０６９０６７のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６９０６７のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６９０６７．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｒ）Ｐ１−０６９０６９のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６９０６９のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６９０６９．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｓ）Ｐ１−０６９０７１のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６９０７１のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６９０７１．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｔ）Ｐ１−０６９０７３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６９０７３のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６９０７３．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｕ）Ｐ１−０６９０７５のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６９０７５のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６９０７５．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｖ）Ｐ１−０６９０７７のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６９０７７のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６９０７７．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｗ）Ｐ１−０６８７３６のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７３６のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７３６．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｘ）Ｐ１−０６８７３８のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７３８のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７３８．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｙ）Ｐ１−０６８７４０のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７４０のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７４０．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｚ）Ｐ１−０６８７４２のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７４２のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７４２．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ａａ）Ｐ１−０６８７４４のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７４４のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７４４．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｂｂ）Ｐ１−０６８７４６のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７４６のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７４６．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｃｃ）Ｐ１−０６８７４８のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７４８のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７４８．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｄｄ）Ｐ１−０６８７５０のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７５０のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７５０．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｅｅ）Ｐ１−０６８７５２のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７５２のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７５２．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｆｆ）Ｐ１−０６８７５４のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７５４のＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７５４．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｇｇ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５ＡのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｈｈ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００ＧのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｉｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６ＮのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｊｊ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６ＮのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｋｋ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０ＤのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｌｌ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｍｍ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００ＧのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｎｎ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００ＧのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｏｏ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６ＮのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｐｐ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｑｑ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｒｒ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｓｓ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｔｔ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｕｕ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２ＹのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｖｖ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５ＡのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｗｗ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６ＮのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｘｘ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２ＹのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｙｙ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００ＧのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｚｚ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ａａａ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２ＶのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｂｂｂ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２ＮのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｃｃｃ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５ＡのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｄｄｄ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２ＶのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｅｅｅ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ１０２ＶのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｆｆｆ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５ＡのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｇｇｇ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２ＮのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｈｈｈ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２ＶのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｉｉｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０ＤのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｊｊｊ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｋｋｋ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２ＶのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｌｌｌ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｍｍｍ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、
（ｎｎｎ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列、または
（ｏｏｏ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣのＨＣ  ＣＤＲを含むＨＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＬＣ  ＣＤＲを含むＬＣ、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３のＨＣおよびＬＣと、それぞれ、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるＨＣおよびＬＣアミノ酸配列
を含んでいてもよい。
【００９４】
一部の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、
（ａ）Ｐ−０６１０２９．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ−０６１０２９の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｂ）Ｐ１−０６１０１５．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６１０１５の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｃ）Ｐ１−０６８７５７．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５７の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｄ）Ｐ１−０６８７５９．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５９の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｅ）Ｐ１−０６８７６１．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｆ）Ｐ１−０６８７６３．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６３の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｇ）Ｐ１−０６８７６５．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６５の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｈ）Ｐ１−０６８７６７．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｉ）Ｐ１−０６８７６９．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６９の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｊ）Ｐ１−０６８７７１．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７７１の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｋ）Ｐ１−０６８７７３．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７７３の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｌ）Ｐ１−０６８７７５．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７７５の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｍ）Ｐ１−０６９０５９．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０５９の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｎ）Ｐ１−０６９０６１．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６１の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｏ）Ｐ１−０６９０６３．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６３の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｐ）Ｐ１−０６９０６５．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６５の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｑ）Ｐ１−０６９０６７．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６７の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｒ）Ｐ１−０６９０６９．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６９の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｓ）Ｐ１−０６９０７１．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０７１の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｔ）Ｐ１−０６９０７３．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０７３の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｕ）Ｐ１−０６９０７５．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０７５の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｖ）Ｐ１−０６９０７７．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０７７の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｗ）Ｐ１−０６８７３６の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７３６の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｘ）Ｐ１−０６８７３８．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７３８の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｙ）Ｐ１−０６８７４０．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４０の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｚ）Ｐ１−０６８７４２．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４２の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ａａ）Ｐ１−０６８７４４．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４４の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｂｂ）Ｐ１−０６８７４６．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４６の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｃｃ）Ｐ１−０６８７４８．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４８の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｄｄ）Ｐ１−０６８７５０．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５０の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｅｅ）Ｐ１−０６８７５２．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５２の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｆｆ）Ｐ１−０６８７５４の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５４の軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｇｇ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｈｈ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｉｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｊｊ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｋｋ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｌｌ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｍｍ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｎｎ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｏｏ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｐｐ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｑｑ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｒｒ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｓｓ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｔｔ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｕｕ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｖｖ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｗｗ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｘｘ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｙｙ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｚｚ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ａａａ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｂｂｂ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｃｃｃ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｄｄｄ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｅｅｅ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｆｆｆ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｇｇｇ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｈｈｈ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｉｉｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｊｊｊ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｋｋｋ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｌｌｌ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｍｍｍ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｎｎｎ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖、または
（ｏｏｏ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ．ＩｇＧ１．３の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖のアミノ酸配列からなる軽鎖
を含んでいてもよい。
【００９５】
一部の実施形態では、本開示は、
上記に列挙されている（ａ）〜（ｏｏｏ）の重鎖のアミノ酸配列からなる重鎖およびその後に続くＬｙｓ残基、ならびに
上記に列挙されている（ａ）〜（ｏｏｏ）の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖を含み、
重鎖および軽鎖アミノ酸配列は、上記に列挙されている（ａ）〜（ｏｏｏ）の中の同じ抗体種から選択される、抗ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂを企図する。
【００９６】
一部の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、本明細書の抗体種のＶＨアミノ酸配列を含む重鎖アミノ酸配列を含んでいてもよいが、本明細書の配列表のＨＣ配列（および配列番号１６３を参照）に提供されているような、ＩｇＧ１．３重鎖定常領域ではなく、抗体は、ヒトＩｇＧ１アロタイプｆ（ＩｇＧ１ｆ）（配列番号１８２）などのヒト野生型ＩｇＧ１定常領域、またはＩｇＧ１．１ｆ（配列番号１８３）などの修飾ヒトＩｇＧ１定常領域、またはＩｇＧ１．Ｐ２３８Ｋ（配列番号１８４）などの修飾ヒトＩｇＧ１定常領域などの、異なる重鎖定常領域配列を含んでいてもよい。したがって、本開示の実施形態としては、
（ａ）（ｉ）Ｐ１−０６１０２９のＶＨのアミノ酸配列（配列番号６７）および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６１０２９の軽鎖アミノ酸配列（配列番号７０）を含む軽鎖、
（ｂ）（ｉ）Ｐ１−０６１０１５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６１０１５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５７の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５９の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６３の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６９の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７７１の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７７３の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７７５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｍ）（ｉ）Ｐ１−０６９０５９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０５９の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｎ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６１の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｏ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６３の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｐ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｑ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６７の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｒ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６９の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｓ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０７１の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｔ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０７３の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｕ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０７５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｖ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０７７の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｗ）（ｉ）Ｐ１−０６８７３６のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７３６の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｘ）（ｉ）Ｐ１−０６８７３８のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７３８の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｙ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４０のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４０の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｚ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４２のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４２の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ａａ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４４のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４４の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｂｂ）Ｐ１−０６８７４６の重鎖のアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、ならびにＰ１−０６８７４６の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｃｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４８のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４８の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｄｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５０のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５０の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｅｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５２のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５２の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｆｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５４のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５４の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｇｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｈｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｉｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｊｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｋｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０ＤのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｌｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｍｍ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｎｎ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｏｏ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｐｐ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｑｑ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｒｒ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｓｓ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｔｔ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｕｕ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２ＹのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｖｖ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｗｗ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｘｘ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２ＹのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｙｙ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｚｚ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ａａａ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｂｂｂ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｃｃｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｄｄｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｅｅｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｆｆｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｇｇｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｈｈｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｉｉｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０ＤのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｊｊｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｋｋｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｌｌｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｍｍｍ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｎｎｎ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、または
（ｏｏｏ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖
を含む抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂが挙げられる。
【００９７】
本開示のある特定の実施形態としては、
（ａ）（ｉ）Ｐ１−０６１０２９のＶＨのアミノ酸配列（配列番号６７）および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６１０２９の軽鎖アミノ酸配列（配列番号７０）からなる軽鎖、
（ｂ）（ｉ）Ｐ１−０６１０１５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６１０１５の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５７の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５９の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６３の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６５の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６９の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７７１の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７７３の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７７５の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｍ）（ｉ）Ｐ１−０６９０５９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０５９の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｎ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６１の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｏ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６３の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｐ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６５の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｑ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６７の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｒ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６９の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｓ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０７１の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｔ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０７３の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｕ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０７５の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｖ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０７７の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｗ）（ｉ）Ｐ１−０６８７３６のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７３６の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｘ）（ｉ）Ｐ１−０６８７３８のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７３８の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｙ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４０のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４０の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｚ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４２のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４２の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ａａ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４４のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４４の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｂｂ）Ｐ１−０６８７４６の重鎖のアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、ならびにＰ１−０６８７４６の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｃｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４８のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４８の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｄｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５０のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５０の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｅｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５２のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５２の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｆｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５４のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５４の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｇｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｈｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｉｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｊｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｋｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０ＤのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｌｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｍｍ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｎｎ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｏｏ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｐｐ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｑｑ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｒｒ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｓｓ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｔｔ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｕｕ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２ＹのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｖｖ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｗｗ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｘｘ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２ＹのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｙｙ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｚｚ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ａａａ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｂｂｂ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｃｃｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｄｄｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｅｅｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｆｆｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｇｇｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｈｈｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｉｉｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０ＤのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｊｊｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｋｋｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｌｌｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｍｍｍ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｎｎｎ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
または
（ｏｏｏ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列からなる重鎖、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖
を含む抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂであって、
ＶＨのＣ末端アミノ酸および配列番号１８２のＮ末端アミノ酸がペプチド結合を形成する抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂが挙げられる。
【００９８】
一部の実施形態では、本開示は、
（ｉ）上記に列挙されている（ａ）〜（ｏｏｏ）のＶＨ、（ｉｉ）配列番号１８２、および（ｉｉｉ）Ｌｙｓ残基のアミノ酸配列からなり、ＶＨのＣ末端アミノ酸および配列番号１８２のＮ末端アミノ酸は、ペプチド結合を形成し、配列番号１８２のＣ末端アミノ酸は、ＬｙｓのＮ末端に接合されている重鎖、および
上記に列挙されている（ａ）〜（ｏｏｏ）の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖
を含む抗ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂであって、
ＶＨおよび軽鎖アミノ酸配列は、上記に列挙されている（ａ）〜（ｏｏｏ）の中の同じ抗体種から選択される、抗ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂを企図する。
【００９９】
本開示のある特定の実施形態としては、
（ａ）（ｉ）Ｐ１−０６１０２９のＶＨのアミノ酸配列（配列番号６７）および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、ならびにＰ１−０６１０２９の軽鎖アミノ酸配列（配列番号７０）を含む軽鎖、
（ｂ）（ｉ）Ｐ１−０６１０１５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６１０１５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５７の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５９の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６３の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６９の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７７１の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７７３の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７７５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｍ）（ｉ）Ｐ１−０６９０５９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０５９の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｎ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６１の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｏ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６３の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｐ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｑ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６７の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｒ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６９の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｓ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０７１の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｔ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０７３の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｕ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０７５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｖ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０７７の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｗ）（ｉ）Ｐ１−０６８７３６のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７３６の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｘ）（ｉ）Ｐ１−０６８７３８のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７３８の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｙ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４０のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４０の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｚ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４２のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４２の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ａａ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４４のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４４の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｂｂ）Ｐ１−０６８７４６の重鎖のアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、ならびにＰ１−０６８７４６の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｃｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４８のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４８の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｄｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５０のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５０の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｅｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５２のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５２の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｆｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５４のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５４の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｇｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｈｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｉｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｊｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｋｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０ＤのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｌｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｍｍ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｎｎ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｏｏ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｐｐ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｑｑ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｒｒ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｓｓ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｔｔ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｕｕ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２ＹのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｖｖ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｗｗ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｘｘ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２ＹのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｙｙ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｚｚ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ａａａ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｂｂｂ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｃｃｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｄｄｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｅｅｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｆｆｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｇｇｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｈｈｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｉｉｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０ＤのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｊｊｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｋｋｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｌｌｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｍｍｍ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｎｎｎ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
または
（ｏｏｏ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含む重鎖、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖
を含む抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂが挙げられる。
【０１００】
本開示のある特定の実施形態としては、
（ａ）（ｉ）Ｐ１−０６１０２９のＶＨのアミノ酸配列（配列番号６７）および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、ならびにＰ１−０６１０２９の軽鎖アミノ酸配列（配列番号７０）からなる軽鎖、
（ｂ）（ｉ）Ｐ１−０６１０１５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６１０１５の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５７の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５９の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６３の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６５の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６９の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７７１の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７７３の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７７５の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｍ）（ｉ）Ｐ１−０６９０５９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０５９の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｎ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６１の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｏ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６３の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｐ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６５の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｑ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６７の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｒ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６９の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｓ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０７１の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｔ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０７３の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｕ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０７５の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｖ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０７７の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｗ）（ｉ）Ｐ１−０６８７３６のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７３６の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｘ）（ｉ）Ｐ１−０６８７３８のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７３８の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｙ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４０のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４０の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｚ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４２のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４２の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ａａ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４４のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４４の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｂｂ）Ｐ１−０６８７４６の重鎖のアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、ならびにＰ１−０６８７４６の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｃｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４８のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４８の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｄｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５０のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５０の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｅｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５２のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５２の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｆｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５４のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５４の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｇｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｈｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｉｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｊｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｋｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０ＤのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｌｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｍｍ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｎｎ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｏｏ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｐｐ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｑｑ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｒｒ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｓｓ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｔｔ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｕｕ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２ＹのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｖｖ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｗｗ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｘｘ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２ＹのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｙｙ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｚｚ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ａａａ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｂｂｂ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｃｃｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｄｄｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｅｅｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｆｆｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｇｇｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｈｈｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｉｉｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０ＤのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｊｊｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｋｋｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｌｌｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｍｍｍ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｎｎｎ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、または
（ｏｏｏ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８３のアミノ酸配列からなる重鎖、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖
を含む抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂであって、
ＶＨのＣ末端アミノ酸および配列番号１８３のＮ末端アミノ酸が、ペプチド結合を形成する抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂが挙げられる。
【０１０１】
一部の実施形態では、本開示は、
（ｉ）上記に列挙されている（ａ）〜（ｏｏｏ）のＶＨ、（ｉｉ）配列番号１８３、および（ｉｉｉ）Ｌｙｓ残基のアミノ酸配列からなり、ＶＨのＣ末端アミノ酸および配列番号１８３のＮ末端アミノ酸は、ペプチド結合を形成し、配列番号１８３のＣ末端アミノ酸は、ＬｙｓのＮ末端に接合されている重鎖、および
上記に列挙されている（ａ）〜（ｏｏｏ）の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖
を含む抗ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂであって、
ＶＨおよび軽鎖アミノ酸配列は、上記に列挙されている（ａ）〜（ｏｏｏ）の中の同じ抗体種から選択される、抗ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂを企図する。
【０１０２】
本開示のさらなる実施形態としては、
（ａ）（ｉ）Ｐ１−０６１０２９のＶＨのアミノ酸配列（配列番号６７）および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、ならびにＰ１−０６１０２９の軽鎖アミノ酸配列（配列番号７０）を含む軽鎖、
（ｂ）（ｉ）Ｐ１−０６１０１５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６１０１５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５７の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５９の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６３の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６９の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７７１の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７７３の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７７５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｍ）（ｉ）Ｐ１−０６９０５９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０５９の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｎ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６１の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｏ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６３の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｐ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｑ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６７の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｒ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０６９の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｓ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０７１の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｔ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０７３の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｕ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０７５の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｖ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６９０７７の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｗ）（ｉ）Ｐ１−０６８７３６のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７３６の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｘ）（ｉ）Ｐ１−０６８７３８のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７３８の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｙ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４０のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４０の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｚ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４２のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４２の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ａａ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４４のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４４の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｂｂ）Ｐ１−０６８７４６の重鎖のアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、ならびにＰ１−０６８７４６の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｃｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４８のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７４８の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｄｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５０のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５０の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｅｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５２のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５２の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｆｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５４のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７５４の軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｇｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｈｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｉｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｊｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｋｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０ＤのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｌｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｍｍ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｎｎ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｏｏ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｐｐ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｑｑ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｒｒ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｓｓ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｔｔ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｕｕ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２ＹのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｖｖ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｗｗ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｘｘ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２ＹのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｙｙ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｚｚ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ａａａ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｂｂｂ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｃｃｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｄｄｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｅｅｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｆｆｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｇｇｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｈｈｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｉｉｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０ＤのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｊｊｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｋｋｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｌｌｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｍｍｍ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、
（ｎｎｎ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖、または
（ｏｏｏ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含む重鎖、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列を含む軽鎖
を含む抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂが挙げられる。
【０１０３】
本開示のまたさらなる実施形態としては、
（ａ）（ｉ）Ｐ１−０６１０２９のＶＨのアミノ酸配列（配列番号６７）および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、ならびにＰ１−０６１０２９の軽鎖アミノ酸配列（配列番号７０）からなる軽鎖、
（ｂ）（ｉ）Ｐ１−０６１０１５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６１０１５の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５７の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５９の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６３の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６５の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６９の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７７１の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７７３の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７７５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７７５の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｍ）（ｉ）Ｐ１−０６９０５９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０５９の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｎ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６１の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｏ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６３の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｐ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６５の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｑ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６７の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｒ）（ｉ）Ｐ１−０６９０６９のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０６９の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｓ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７１のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０７１の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｔ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７３のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０７３の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｕ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７５のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０７５の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｖ）（ｉ）Ｐ１−０６９０７７のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６９０７７の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｗ）（ｉ）Ｐ１−０６８７３６のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７３６の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｘ）（ｉ）Ｐ１−０６８７３８のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７３８の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｙ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４０のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４０の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｚ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４２のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４２の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ａａ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４４のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４４の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｂｂ）Ｐ１−０６８７４６の重鎖のアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、ならびにＰ１−０６８７４６の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｃｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７４８のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７４８の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｄｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５０のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５０の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｅｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５２のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５２の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｆｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７５４のＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７５４の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｇｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｈｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｉｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｊｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｋｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０ＤのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｌｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｍｍ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｎｎ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｏｏ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｐｐ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｑｑ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｒｒ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｓｓ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｔｔ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｕｕ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２ＹのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｖｖ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｗｗ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｘｘ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２ＹのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｙｙ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００ＧのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｚｚ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ａａａ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｂｂｂ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｃｃｃ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｄｄｄ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｅｅｅ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｆｆｆ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｇｇｇ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２ＮのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｈｈｈ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｉｉｉ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０ＤのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｊｊｊ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５ＡのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｋｋｋ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２ＶのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｌｌｌ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｍｍｍ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
（ｎｎｎ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、およびＰ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖、
または
（ｏｏｏ）（ｉ）Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦのＶＨのアミノ酸配列および（ｉｉ）配列番号１８４のアミノ酸配列からなる重鎖、ならびにＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦの軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖
を含む抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂであって、
ＶＨのＣ末端アミノ酸および配列番号１８４のＮ末端アミノ酸が、ペプチド結合を形成する抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂが挙げられる。
【０１０４】
一部の実施形態では、本開示は、
（ｉ）上記に列挙されている（ａ）〜（ｏｏｏ）のＶＨ、（ｉｉ）配列番号１８４、および（ｉｉｉ）Ｌｙｓ残基のアミノ酸配列からなり、ＶＨのＣ末端アミノ酸および配列番号１８４のＮ末端アミノ酸は、ペプチド結合を形成し、配列番号１８４のＣ末端アミノ酸は、ＬｙｓのＮ末端に接合されている重鎖、および
上記に列挙されている（ａ）〜（ｏｏｏ）の軽鎖アミノ酸配列からなる軽鎖
を含む抗ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂであって、
ＶＨおよび軽鎖アミノ酸配列は、上記に列挙されている（ａ）〜（ｏｏｏ）の中の同じ抗体種から選択される、抗ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂを企図する。
【０１０５】
一部の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、Ｐ１−０６１０２９のアミノ酸ＶＨ配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるアミノ酸ＶＨ配列を含んでいてもよく、抗体は、少なくとも１つの残基がＤ、Ｅ、またはＨで置換されている、Ｐ１−０６１０２９のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、Ｐ１−０６１０２９のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３の各々は、Ｄ、Ｅ、またはＨで置換された１、２、または３つの残基を含む。一部の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、Ｐ１−０６１０２９のアミノ酸ＶＨ配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるアミノ酸ＶＨ配列を含んでいてもよく、抗体は、ＣＤＲ１のアミノ酸４、５、または７位に１つまたは２つのＤまたはＥ残基を含むＶＨ  ＣＤＲ１を含み、ＣＤＲ２の３、５、６、または７位に１、２、または３つのＤ、Ｅ、またはＨ残基を有するＶＨ  ＣＤＲ２を含み、および／またはＣＤＲ３の６、１２、または１４位に１、２、または３つのＤ、Ｅ、またはＨ残基を有するＶＨ  ＣＤＲ３を含む。（これら実施形態内に入る抗体の例は、下記の表５を参照されたい。）そのような場合、軽鎖可変領域は、Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３��Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦなどの、Ｐ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５またはそれらの子孫のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３を含んでいてもよく、および／または軽鎖可変領域は、Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦなどのＰ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５またはそれらの子孫の軽鎖可変領域と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であってもよい。
【０１０６】
一部の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、Ｐ１−０６１０１５のアミノ酸ＶＨ配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるアミノ酸ＶＨ配列を含んでいてもよく、抗体は、少なくとも１つの残基がＤ、Ｅ、またはＨで置換されている、Ｐ１−０６１０１５のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、Ｐ１−０６１０１５のＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３の各々は、Ｄ、Ｅ、またはＨで置換された１、２、または３つの残基を含む。一部の実施形態では、抗ｈＶＩＳＴＡ  Ａｂは、Ｐ１−０６１０１５のアミノ酸ＶＨ配列と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であるアミノ酸ＶＨ配列を含んでいてもよく、抗体は、ＣＤＲ１のアミノ酸６、７、８、および９位に１つまたは２つのＤ、Ｅ、またはＨ残基を含むＶＨ  ＣＤＲ１を含み、および／またはＣＤＲ２の１、２、４、または８〜１１位に１、２、または３つのＤ、Ｅ、またはＨ残基を有するＶＨ  ＣＤＲ２を含み、および／またはＣＤＲ３の２、３、６、７、または１２位に１、２、または３つのＤ、Ｅ、またはＨ残基を有するＶＨ  ＣＤＲ３を含む。（これら実施形態内に入る抗体の例は、下記の表６を参照されたい。）そのような場合、軽鎖可変領域は、Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿��１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦなどの、Ｐ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５またはそれらの子孫のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３を含んでいてもよく、および／または軽鎖可変領域は、Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７５７、Ｐ１−０６８７５９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６３、Ｐ１−０６８７６５、Ｐ１−０６８７６７、Ｐ１−０６８７６９、Ｐ１−０６８７７１、Ｐ１−０６８７７３、Ｐ１−０６８７７５、Ｐ１−０６９０５９、Ｐ１−０６９０６１、Ｐ１−０６９０６３、Ｐ１−０６９０６５、Ｐ１−０６９０６７、Ｐ１−０６９０６９、Ｐ１−０６９０７１、Ｐ１−０６９０７３、Ｐ１−０６９０７５、Ｐ１−０６９０７７、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６８７３６、Ｐ１−０６８７３８、Ｐ１−０６８７４０、Ｐ１−０６８７４２、Ｐ１−０６８７４４、Ｐ１−０６８７６６、Ｐ１−０６８７４８、Ｐ１−０６８７５０、Ｐ１−０６８７５２  Ｐ１−０６８７５４、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｈ１００Ｇ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ５６Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ５６Ｎ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ３２Ｙ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｈ１００Ｇ、Ｐ１−０６８７６１＿Ｅ３２Ｙ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ５２Ｎ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ５５Ａ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ＿Ｄ１０２Ｖ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ５５Ａ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｄ５２Ｎ＿Ｅ１００ｆＦ、Ｐ１−０６８７６７＿Ｅ１００ｆＦ、またはＰ１−０６８７６７＿Ｅ３０Ｄ＿Ｅ１００ｆＦなどのＰ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５またはそれらの子孫の軽鎖可変領域と、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一であってもよい。
【０１０７】
一部の実施形態では、そのような修飾された抗ｈＶＩＳＴＡ  Ｐ１−０６１０２９またはＰ１−０６１０１５子孫は、以下の特性の１つまたは複数を有する：
−  酸性ｐＨで、例えばｐＨ６．０またはｐＨ６．５で、ｈＶＩＳＴＡに、例えばＥＣＤのヒスチジンリッチ領域または配列番号２のアミノ酸残基３５〜１２７を含むポリペプチドに特異的に結合すること、
−  生理的ｐＨまたは中性ｐＨでは、例えばｐＨ７．４またはｐＨ７．０では、ｈＶＩＳＴＡに対する、例えばＥＣＤのヒスチジンリッチ領域または配列番号２のアミノ酸残基３５〜１２７を含むポリペプチドに対する有意な結合を欠如すること、
−  酸性ｐＨで、例えばｐＨ６．０またはｐＨ６．５で、ｃｙｎｏＶＩＳＴＡに、例えばＥＣＤのヒスチジンリッチ領域に特異的に結合すること、
−  生理的ｐＨまたは中性ｐＨで、例えばｐＨ７．４またはｐＨ７．０で、ｃｙｎｏ  ＶＩＳＴＡに対する、例えばＥＣＤのヒスチジンリッチ領域に対する有意な結合を欠如すること、
−  配列番号２を有するｈＶＩＳＴＡ  ＥＣＤと比べて、以下のアミノ酸：Ｔ３５、Ｙ３７、Ｋ３８、Ｔ３９、Ｙ４１、Ｒ５４、Ｔ６１、Ｆ６２、Ｑ６３、Ｌ６５、Ｈ６６、Ｌ６７、Ｈ６８、Ｈ６９、Ｆ９７、Ｌ１１５、Ｖ１１７、Ｉ１１９、Ｈ１２１、Ｈ１２２、Ｓ１２４、Ｅ１２５、Ｒ１２７の１つまたは複数に置換を有するｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤへの結合が低減していること、
−  ｈＶＩＳＴＡに対する結合をめぐって、Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７６１、Ｐ１−０６８７６７、および／またはＰ１−０６１０１５と交差競合すること、
−  酸性ｐＨで、例えばｐＨ６．０またはｐＨ６．５で、ヒトＴ細胞に対するｈＶＩＳＴＡの結合を阻害すること、
−  酸性ｐＨで、例えばｐＨ６．０またはｐＨ６．５で、ＰＳＧＬ−１に対するｈＶＩＳＴＡの結合を阻害すること、
−  カニクイザルで少なくとも３５０時間の平均滞留時間、
−  Ｔ細胞活性化を刺激すること、
−  ＶＩＳＴＡ媒介性の細胞間接着を阻害すること、および
−  ヒト腫瘍細胞の試料または炎症ヒト組織の試料中でｈＶＩＳＴＡに特異的に結合すること。
【０１０８】
例示的な抗体定常領域
一部の実施形態では、本明細書に記載されている抗体は、１つまたは複数のヒト定常領域を含む。一部の実施形態では、ヒト重鎖定常領域は、ＩｇＡ、ＩｇＧ、およびＩｇＤから選択されるアイソタイプのものである。一部の実施形態では、ヒト軽鎖定常領域は、κおよびλから選択されるアイソタイプのものである。一部の実施形態では、本明細書に記載されている抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４などのヒトＩｇＧ定常領域を含む。一部の実施形態では、本明細書に記載されている抗体は、ヒトＩｇＧ４重鎖定常領域を含む。一部のそのような実施形態では、本明細書に記載されている抗体は、ヒトＩｇＧ４定常領域にＳ２４１Ｐ突然変異を含む。一部の実施形態では、本明細書に記載されている抗体は、ヒトＩｇＧ４定常領域およびヒトκ軽鎖を含む。
【０１０９】
重鎖定常領域の選択は、抗体がインビボでエフェクター機能を有することになるか否かを決定する場合がある。一部の実施形態では、そのようなエフェクター機能としては、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）および／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）が挙げられ、抗体が結合した細胞の死滅をもたらすことができる。一部のがんを治療するための方法を含む、一部の治療方法では、例えば、腫瘍の維持または増殖を支持する細胞に抗体が結合した際に細胞を死滅させることが望ましい場合がある。腫瘍の維持または増殖を支持することができる例示的な細胞としては、これらに限定されないが、腫瘍細胞自体、腫瘍への脈管構造の動員を支援する細胞、および腫瘍増殖もしくは腫瘍生存を支持もしくは促進するリガンド、増殖因子、または対抗受容体を提供する細胞が挙げられる。一部の実施形態では、エフェクター機能が望ましい場合、ヒトＩｇＧ１重鎖またはヒトＩｇＧ３重鎖を含む抗体が選択される。
【０１１０】
ある特定の実施形態では、本明細書で提供されている抗体は、抗体がグリコシル化される程度を増加または減少させるように変更されている。抗体に対するグリコシル化部位の付加または欠失は、簡便には、１つまたは複数のグリコシル化部位が生成または除去されるようにアミノ酸配列を変更することにより達成することができる。
【０１１１】
抗体がＦｃ領域を含む場合、それに付着された糖（炭水化物）が変更されていてもよい。哺乳動物細胞により産生される天然抗体は、典型的には、一般にはＮ−連結によりＦｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７に付着されている分岐、二分岐オリゴ糖を含む。例えば、Wrightら、TIBTECH  １５巻：２６〜３２頁（１９９７年）を参照されたい。オリゴ糖は、種々の糖（炭水化物）、例えば、マンノース、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース、およびシアル酸、ならびに二分岐オリゴ糖構造の「基部」のＧｌｃＮＡｃに付着されているフコースを含んでいてもよい。一部の実施形態では、本発明の抗体のオリゴ糖には、ある特定の向上された特質を有する抗体を生成するために、修飾がなされていてもよい。例えば、一部の実施形態では、抗体は、例えば、通常はフコース含有グリコシル化または他の手段によりグリコシル化されているＡｓｎ２９７などの残基を突然変異させることにより、アフコシル化されていてもよい。一部の実施形態では、本明細書の抗体は、アフコシル化ヒトＩｇＧ１定常領域を含んでいてもよい。
【０１１２】
例えば、抗体のＦｃ領域に付着された二分岐オリゴ糖が、ＧｌｃＮＡｃにより二分されている二分されたオリゴ糖を有する抗体がさらに提供される。そのような抗体は、フコシル化の低減および／またはＡＤＣＣ機能の向上を示す場合がある。そのような抗体の例は、例えば、国際公開第２００３／０１１８７８号（Jean-Mairetら）、米国特許第６，６０２，６８４号（Umanaら）、および米国特許出願公開第２００５／０１２３５４６号（Umanaら）に記載されている。また、Ｆｃ領域に付着されたオリゴ糖に少なくとも１つのガラクトース残基を有する抗体が提供される。そのような抗体は、ＣＤＣ機能の向上を示す場合がある。そのような抗体は、例えば、国際公開第１９９７／３００８７号（Patelら）、国際公開第１９９８／５８９６４号（Raju, S.）、および国際公開第１９９９／２２７６４号（Raju, S.）に記載されている。
【０１１３】
また、アミノ末端リーダー伸長を有する抗体が提供される。例えば、アミノ末端リーダー配列の１つまたは複数のアミノ酸残基が、抗体の任意の１つまたは複数の重鎖または軽鎖のアミノ末端に存在する。例示的なアミノ末端リーダー伸長は、抗体の一方または両方の軽鎖に存在する３つのアミノ酸残基ＶＨＳを含むかまたはからなる。
【０１１４】
ヒトＦｃＲｎ高親和性結合ポリペプチドのインビボまたは血清半減期は、例えば、変異Ｆｃ領域を有するポリペプチドが投与されるトランスジェニックマウス、ヒト、または非ヒト霊長類で分析することができる。例えば、Petkovaら、International Immunology  １８巻（１２号）：１７５９〜１７６９頁（２００６年）も参照されたい。
【０１１５】
本発明の一部の実施形態では、アフコシル化抗体は、ヒトエフェクター細胞の存在下で、フコースを含む親抗体よりも効果的にＡＤＣＣを媒介する。一般に、ＡＤＣＣ活性は、本明細書で開示されたようなインビトロＡＤＣＣアッセイを使用して決定することができるが、例えば、動物モデルなどでＡＤＣＣ活性を決定するための他のアッセイまたは方法が企図される。
【０１１６】
ある特定の実施形態では、Ｆｃ領域は、抗体のエフェクター機能を変更するように、少なくとも１つのアミノ酸残基を異なるアミノ酸残基で置換することにより変更される。例えば、アミノ酸残基２３４、２３５、２３６、２３７、２９７、３１８、３２０、３２２、３３０、および／または３３１から選択される１つまたは複数のアミノ酸を、抗体が、エフェクターリガンドに対する親和性の変更を示すが、親抗体の抗原結合能力を保持するように、異なるアミノ酸残基と置換することができる。親和性が変更されるエフェクターリガンドは、例えば、Ｆｃ受容体またはＣ１補体成分であってもよい。この手法は、両方ともWinterらによる米国特許第５，６２４，８２１号および第５，６４８，２６０号にさらに詳細に記載されている。
【０１１７】
一部の例では、アミノ酸残基３２９、３３１、および３２２から選択される１つまたは複数のアミノ酸を、抗体が、Ｃ１ｑ結合の変更および／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）の低減もしくは消失を示すように、異なるアミノ酸残基と置換することができる。この手法は、Idusogieらによる米国特許第６，１９４，５５１号にさらに詳細に記載されている。
【０１１８】
一部の例では、アミノ酸２３１および２３９位内の１つまたは複数のアミノ酸残基を変更し、それにより抗体が補体を固定する能力を変更する。この手法は、BodmerらによるＰＣＴ公開第９４／２９３５１号にさらに記載されている。一部の例では、以下の位置の１つまたは複数のアミノ酸を修飾することにより、抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を減少させるように、および／またはＦｃγ受容体に対する親和性を減少させるように、Ｆｃ領域を修飾することができる：２３４、２３５、２３６、２３８、２３９、２４０、２４１、２４３、２４４、２４５、２４７、２４８、２４９、２５２、２５４、２５５、２５６、２５８、２６２、２６３、２６４、２６５、２６７、２６８、２６９、２７０、２７２、２７６、２７８、２８０、２８３、２８５、２８６、２８９、２９０、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９８、２９９、３０１、３０３、３０５、３０７、３０９、３１２、３１３、３１５、３２０、３２２、３２４、３２５、３２６、３２７、３２９、３３０、３３１、３３２、３３３、３３４、３３５、３３７、３３８、３４０、３６０、３７３、３７６、３７８、３８２、３８８、３８９、３９８、４１４、４１６、４１９、４３０、４３３、４３４、４３５、４３６、４３７、４３８または４３９。例示的な置換としては、２３６Ａ、２３９Ｄ、２３９Ｅ、２６８Ｄ、２６７Ｅ、２６８Ｅ、２６８Ｆ、３２４Ｔ、３３２Ｄ、および３３２Ｅが挙げられる。例示的な変異体としては、２３９Ｄ／３３２Ｅ、２３６Ａ／３３２Ｅ、２３６Ａ／２３９Ｄ／３３２Ｅ、２６８Ｆ／３２４Ｔ、２６７Ｅ／２６８Ｆ、２６７Ｅ／３２４Ｔ、および２６７Ｅ／２６８Ｆ７３２４Ｔが挙げられる。Ｆｃになすことができる他のＦｃ修飾は、ＦｃγＲおよび／または補体タンパク質に対する結合を低減または除去し、それによりＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、およびＣＤＣなどのＦｃ媒介性エフェクター機能を低減または除去するための修飾である。例示的な修飾としては、２３４、２３５、２３６、２３７、２６７、２６９、３２５、３２８、３３０、および／または３３１（例えば、３３０および３３１）位における置換、挿入、および欠失が挙げられるが、それらに限定されない。この場合、付番はＥＵインデックスによるものである。例示的な置換としては、２３４Ａ、２３５Ｅ、２３６Ｒ、２３７Ａ、２６７Ｒ、２６９Ｒ、３２５Ｌ、３２８Ｒ、３３０Ｓ、および３３１Ｓ（例えば、３３０Ｓおよび３３１Ｓ）が挙げられるが、それらに限定されない。この場合、付番はＥＵインデックスによるものである。Ｆｃ変異体は、２３６Ｒ／３２８Ｒを含んでいてもよい。ＦｃγＲおよび補体相互作用を低減するための他の修飾としては、置換２９７Ａ、２３４Ａ、２３５Ａ、２３７Ａ、３１８Ａ、２２８Ｐ、２３６Ｅ、２６８Ｑ、３０９Ｌ、３３０Ｓ、３３１Ｓ、２２０Ｓ、２２６Ｓ、２２９Ｓ、２３８Ｓ、２３３Ｐ、および２３４Ｖ、ならびに突然変異的もしくは酵素的手段により、またはタンパク質をグリコシル化しない細菌などの生物体での産生により、２９７位のグリコシル化を除去することが挙げられる。これらおよび他の修飾は、Strohl、２００９年、Current Opinion in Biotechnology  ２０巻：６８５〜６９１頁に概��がある。例えば、ヒトＩｇＧ１．３Ｆｃ定常領域は、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ｅ、およびＧ２３７Ａ置換を含む。ＩｇＧ１ｆａ．Ｐ２３８Ｋ（またはＩｇＧ１．Ｐ２３８Ｋ）は、Ｐ２３８Ｋ置換を含む。ＩｇＧ１．１ｆは、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ｅ、Ｇ２３７Ａ、Ａ３３０Ｓ、およびＰ３３１Ｓ置換を含む。
【０１１９】
また、阻害性受容体ＦｃγＲＩＩｂに対する親和性を増強するＦｃ変異体を使用することができる。そのような変異体は、Ｆｃ融合タンパク質に、例えば、Ｂ細胞および単球を含む、ＦｃγＲＩＩｂ細胞に関連する免疫調節活性を提供することができる。一実施形態では、Ｆｃ変異体は、１つまたは複数の活性化受容体と比べて、ＦｃγＲＩＩｂに対する選択的に増強された親和性を提供する。ＦｃγＲＩＩｂに対する結合を変更するための修飾としては、ＥＵインデックスによる、２３４、２３５、２３６、２３７、２３９、２６６、２６７、２６８、３２５、３２６、３２７、３２８、３３０、３３１、および３３２からなる群から選択される位置における１つまたは複数の修飾が挙げられる。ＦｃγＲｌｌｂ親和性を増強するための例示的な置換としては、これらに限定されないが、以下のものが挙げられる：２３４Ａ、２３４Ｄ、２３４Ｅ、２３４Ｆ、２３４Ｗ、２３５Ｄ、２３５Ｅ、２３５Ｆ、２３５Ｒ、２３５Ｙ、２３６Ｄ、２３６Ｎ、２３７Ａ、２３７Ｄ、２３７Ｎ、２３９Ｄ、２３９Ｅ、２６６Ｍ、２６７Ｄ、２６７Ｅ、２６８Ｄ、２６８Ｅ、３２７Ｄ、３２７Ｅ、３２８Ｆ、３２８Ｗ、３２８Ｙ、３３０Ｓ、３３１Ｓ、および３３２Ｅ。例示的な置換としては、２３５Ｙ、２３６Ｄ、２３９Ｄ、２６６Ｍ、２６７Ｅ、２６８Ｄ、２６８Ｅ、３２８Ｆ、３２８Ｗ、および３２８Ｙが挙げられる。ＦｃγＲＩＩｂに対する結合を増強するための他のＦｃ変異体としては、２３５Ｙ／２６７Ｅ、２３６Ｄ／２６７Ｅ、２３９Ｄ／２６８Ｄ、２３９Ｄ／２６７Ｅ、２６７Ｅ／２６８Ｄ、２６７Ｅ／２６８Ｅ、および２６７Ｅ／３２８Ｆが挙げられる。
【０１２０】
ＦｃγＲおよび補体相互作用を増強するための他の修飾としては、これらに限定されないが、以下のものが挙げられる：置換２９８Ａ、３３３Ａ、３３４Ａ、３２６Ａ、２４７１、３３９Ｄ、３３９Ｑ、２８０Ｈ、２９０Ｓ、２９８Ｄ、２９８Ｖ、２４３Ｌ、２９２Ｐ、３００Ｌ、３９６Ｌ、３０５１、および３９６Ｌ。これらおよび他の修飾は、Strohl、２００９年、Current Opinion in Biotechnology  ２０巻：６８５〜６９１頁に概説がある。Ｆｃγ受容体に対する結合を増加させるＦｃ修飾としては、Ｆｃ領域のアミノ酸２３８、２３９、２４８、２４９、２５２、２５４、２５５、２５６、２５８、２６５、２６７、２６８、２６９、２７０、２７２、２７９、２８０、２８３、２８５、２９８、２８９、２９０、２９２、２９３、２９４、２９５、２９６、２９８、３０１、３０３、３０５、３０７、３１２、３１５、３２４、３２７、３２９、３３０、３３５、３３７、３３８、３４０、３６０、３７３、３７６、３７９、３８２、３８８、３８９、３９８、４１４、４１６、４１９、４３０、４３４、４３５、４３７、４３８、または４３９位の任意の１つまたは複数におけるアミノ酸修飾が挙げられる。この場合、Ｆｃ領域の残基の付番は、国際公開第００／４２０７２号にあるようなＥＵインデックスの付番である。
【０１２１】
任意選択で、Ｆｃ領域は、当業者に公知の追加のおよび／または代替的な位置に天然に存在しないアミノ酸残基を含んでいてもよい（例えば、米国特許第５，６２４，８２１号、第６，２７７，３７５号、第６，７３７，０５６号、第６，１９４，５５１号、第７，３１７，０９１号、第８，１０１，７２０号、ＰＣＸ国際公開第００／４２０７２号、国際公開第０１／５８９５７号、国際公開第０２／０６９１９号、国際公開第０４／０１６７５０号、国際公開第０４／０２９２０７号、国際公開第０４／０３５７５２号、国際公開第０４／０７４４５５号、国際公開第０４／０９９２４９号、国際公開第０４／０６３３５１号、国際公開第０５／０７０９６３号、国際公開第０５／０４０２１７号、国際公開第０５／０９２９２５号、および国際公開第０６／０２０１１４号を参照）。
【０１２２】
そのリガンドに対するＦｃ領域の親和性および結合特質は、これらに限定されないが、平衡法（例えば、酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）またはラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ））または動力学法（例えば、ビアコア解析）、ならびに間接結合アッセイ、競合阻害アッセイ、蛍光共鳴エネルギー転移（ＦＲＥＴ）、ゲル電気泳動、およびクロマトグラフィー（例えば、ゲル濾過）などの他の方法を含む、当該技術分野で公知の様々なインビトロアッセイ法（生化学または免疫学ベースのアッセイ）で決定することができる。これらおよび他の方法は、調査されている成分の１つまたは複数にある標識を使用することができ、および／またはこれらに限定されないが、色素原性、蛍光性、発光性、または同位体性標識を含む様々な検出方法を使用することができる。結合親和性および動力学の詳細な説明は、Paul, W. E.編、Fundamental immunology、第４版、Lippincott-Raven, Philadelphia、フィラデルフィア（１９９９年）に見出すことができる。この文献では、抗体−免疫原相互作用に着目している。
【０１２３】
ある特定の実施形態では、抗体は、その生物学的半減期が増加するように修飾されている。種々の手法が可能である。例えば、これは、ＦｃＲｎに対するＦｃ領域の結合親和性を増加させることによりなすことができる。例えば、米国特許第６，２７７，３７５号に記載のように、以下の残基：２５２、２５４、２５６、４３３、４３５、４３６の１つまたは複数を突然変異させることができる。具体的な例示的な置換としては、以下のもの：Ｔ２５２Ｌ、Ｔ２５４Ｓ、および／またはＴ２５６Ｆの１つまたは複数が挙げられる。あるいは、生物学的半減期を増加させるために、Prestaらによる米国特許第５，８６９，０４６号および第６，１２１，０２２号に記載のように、ＩｇＧのＦｃ領域のＣＨ２ドメインの２つのループから得られるサルベージ受容体結合エピトープを含むようにＣＨ１またはＣＬ領域内で抗体を変更してもよい。ＦｃＲｎに対する結合を増加させる、および／または薬物動態学的特質を向上させる他の例示的な変異体としては、例えば、２５９１、３０８Ｆ、４２８Ｌ、４２８Ｍ、４３４Ｓ、４３４１  １．４３４Ｆ、４３４Ｙ、および４３４Ｘ１を含む、２５９、３０８、４２８、および４３４位における置換が挙げられる。ＦｃＲｎに対するＦｃ結合を増加させる他の変異体としては、以下のものが挙げられる：２５０Ｅ、２５０Ｑ、４２８Ｌ、４２８Ｆ、２５０Ｑ／４２８Ｌ（Hintonら  ２００４年、J. Biol. Chem.、２７９巻（８号）：６２１３〜６２１６頁、Hintonら  ２００６年  Journal of Immunology、１７６巻：３４６〜３５６頁）、２５６Ａ、２７２Ａ、２８６Ａ、３０５Ａ、３０７Ａ、３０７Ｑ、３１  １Ａ、３１２Ａ、３７６Ａ、３７８Ｑ、３８０Ａ、３８２Ａ、４３４Ａ（Shieldsら、Journal of Biological Chemistry、２００１年、２７６巻（９号）：６５９１〜６６０４頁）、２５２Ｆ、２５２Ｔ、２５２Ｙ、２５２Ｗ、２５４Ｔ、２５６Ｓ、２５６Ｒ、２５６Ｑ、２５６Ｅ、２５６Ｄ、２５６Ｔ、３０９Ｐ、３１  １  Ｓ、４３３Ｒ、４３３Ｓ、４３３１、４３３Ｐ、４３３Ｑ、４３４Ｈ、４３４Ｆ、４３４Ｙ、２５２Ｙ／２５４Ｔ／２５６Ｅ、４３３Ｋ／４３４Ｆ／４３６Ｈ、３０８Ｔ／３０９Ｐ／３１１Ｓ（Dall Acquaら  Journal of Immunology、２００２年、１６９巻：５１７１〜５１８０頁、Dall'Acquaら、２００６年、Journal of Biological Chemistry  ２８１巻：２３５１４〜２３５２４頁）。ＦｃＲｎ結合を調節するための他の修飾は、Yeungら、２０１０年、J Immunol、１８２巻：７６６３〜７６７１頁に記載されている。
【０１２４】
ある特定の実施形態では、特定の生物学的特性を有するハイブリッドＩｇＧアイソタイプを使用してもよい。例えば、ＩｇＧ１／ＩｇＧ３ハイブリッド変異体は、２つのアイソタイプが異なる位置において、ＣＨ２および／またはＣＨ３領域のＩｇＧ１位置を、ＩｇＧ３に由来するアミノ酸と置換するにより構築することができる。したがって、１つまたは複数の置換、例えば、２７４Ｑ、２７６Ｋ、３００Ｆ、３３９Ｔ、３５６Ｅ、３５８Ｍ、３８４Ｓ、３９２Ｎ、３９７Ｍ、４２２１、４３５Ｒ、および４３６Ｆを含むハイブリッド変異体ＩｇＧ抗体を構築してもよい。本明細書に記載の一部の実施形態では、ＩｇＧ１／ＩｇＧ２ハイブリッド変異体は、２つのアイソタイプが異なる位置において、ＣＨ２および／またはＣＨ３領域のＩｇＧ２位置を、ＩｇＧ１に由来するアミノ酸と置換するにより構築することができる。したがって、１つまたは複数の置換、例えば、以下のアミノ酸置換：２３３Ｅ、２３４Ｌ、２３５Ｌ、−２３６Ｇ（２３６位におけるグリシンの挿入を指す）、および３２７Ａの１つまたは複数を含むハイブリッド変異体ＩｇＧ抗体を構築することができる。
【０１２５】
さらに、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、ＦｃγＲＩＩＩ、およびＦｃＲｎに対するヒトＩｇＧ１の結合部位がマッピングされており、結合の向上を示す変異体が報告されている（Shields, R.L.ら（２００１年）J. Biol. Chem.  ２７６巻：６５９１〜６６０４を参照）。２５６、２９０、２９８、３３３、３３４、および３３９位における特定の突然変異が、ＦｃγＲＩＩＩに対する結合を向上させることが示された。加えて、以下の組合せ突然変異体：Ｔ２５６Ａ／Ｓ２９８Ａ、Ｓ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ、Ｓ２９８Ａ／Ｋ２２４Ａ、およびＳ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ／Ｋ３３４Ａは、ＦｃγＲＩＩＩ結合を向上させることが示され、これらは、ＦｃγＲＩＩＩａ結合およびＡＤＣＣ活性の増強を呈することが示されている（Shieldsら、２００１年）。カニクイザルにおいてＦｃγＲＩＩＩａに対する親和性の最も大きな増加、ＦｃγＲＩＩｂ結合の減少、および強力な細胞傷害活性を示したＳ２３９Ｄ／Ｉ３３２ＥおよびＳ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ／Ａ３３０Ｌ突然変異を有する変異体を含む、ＦｃγＲＩＩＩａに対する結合が強力に増強された他のＩｇＧ１変異体が特定されている（Lazarら、２００６年）。アレムツズマブ（ＣＤ５２特異的）、トラスツズマブ（ＨＥＲ２／ｎｅｕ特異的）、リツキシマブ（ＣＤ２０特異的）、およびセツキシマブ（ＥＧＦＲ特異的）などの抗体への三重突然変異の導入は、インビトロでは非常に増強されたＡＤＣＣ活性に翻訳され、Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ変異体は、サルにおいてＢ細胞を枯渇させる能力の増強を示した（Lazarら、２００６年）。加えて、Ｂ細胞悪性腫瘍および乳がんのモデルでヒトＦｃγＲＩＩＩａを発現するトランスジェニックマウスにおいてＦｃγＲＩＩＩａに対する結合の増強および同時にＡＤＣＣ活性の増強を示したＬ２３５Ｖ、Ｆ２４３Ｌ、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、およびＰ３９６Ｌ突然変異を含むＩｇＧ１突然変異体が特定されている（Stavenhagenら、２００７年；Nordstromら、２０１１年）。使用することができる他のＦｃ突然変異体としては、以下のものが挙げられる：Ｓ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ／Ｌ３３４Ａ、Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ、Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ／Ａ３３０Ｌ、Ｌ２３５Ｖ／Ｆ２４３Ｌ／Ｒ２９２Ｐ／Ｙ３００Ｌ／Ｐ３９６Ｌ、およびＭ４２８Ｌ／Ｎ４３４Ｓ。
【０１２６】
ある特定の実施形態では、ＦｃγＲに対する結合が低減されたＦｃが選択される。ＦｃγＲ結合が低減された例示的なＦｃ、例えば、ＩｇＧ１  Ｆｃは、以下の３つのアミノ酸置換：Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ｅ、およびＧ２３７Ａを含む。
【０１２７】
ある特定の実施形態では、補体結合が低減されたＦｃが選択される。補体結合が低減された例示的なＦｃ、例えば、ＩｇＧ１  Ｆｃは、以下の２つのアミノ酸置換：Ａ３３０ＳおよびＰ３３１Ｓを有する。
【０１２８】
ある特定の実施形態では、エフェクター機能を本質的に有していしないＦｃが選択される。つまり、それは、ＦｃγＲに対する結合が低減されており、補体結合が低減されている。エフェクターレスである例示的なＦｃ、例えば、ＩｇＧ１  Ｆｃは、以下の５つの突然変異：Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ｅ、Ｇ２３７Ａ、Ａ３３０Ｓ、およびＰ３３１Ｓを含む。
【０１２９】
ＩｇＧ４定常ドメインを使用する場合、ＩｇＧ１のヒンジ配列を模倣し、それによりＩｇＧ４分子を安定させる置換Ｓ２２８Ｐを含んでいてもよい。
【０１３０】
また、国際公開第２０１７／０８７６７８号または国際公開第２０１６０８１７４６号に記載されているＦｃ修飾を使用してもよい。
【０１３１】
ある特定の実施形態では、抗体のグリコシル化が、修飾される。例えば、非グリコシル化抗体を作製してもよい（つまり、抗体はグリコシル化を欠如する）。グリコシル化は、例えば、抗原に対する抗体の親和性を増加させるように変更することができる。そのような糖（炭水化物）修飾は、例えば、抗体配列内のグリコシル化の１つまたは複数の部位を変更することにより達成することができる。例えば、１つまたは複数の可変領域フレームワークグリコシル化部位の排除をもたらし、それによりその部位でのグリコシル化を排除する１つまたは複数のアミノ酸置換をなすことができる。そのような非グリコシル化は、抗原に対する抗体の親和性を増加させる場合がある。そのような手法は、Ｃｏらによる米国特許第５，７１４，３５０号および第６，３５０，８６１号にさらに詳細に記載されている。
【０１３２】
定常領域のＮ２９７におけるグリコシル化は、Ｎ２９７残基を、別の残基、例えばＮ２９７Ａに突然変異させることにより、および／または隣接アミノ酸、例えば２９８を突然変異させ、それによりN２９７でのグリコシル化を低減させることにより防止することができる。
【０１３３】
それに加えてまたはその代わりに、フコシル残基の量が低減されている低フコシル化抗体またはバイセクトＧｌｃＮａｃ構造が増加されている抗体など、変更されたタイプのグリコシル化を有する抗体を作製してもよい。そのような変更されたグリコシル化パターンは、抗体のＡＤＣＣ能力を増加させることが実証されている。そのような糖（炭水化物）修飾は、例えば、変更されたグリコシル化機構を有する宿主細胞で抗体を発現することにより達成することができる。変更されたグリコシル化機構を有する細胞は、当該技術分野に記載されており、本明細書に記載されている組換え抗体を発現させ、それによりグリコシル化が変更された抗体を産生するための宿主細胞として使用することができる。例えば、Hanaiらによる欧州特許第１，１７６，１９５号には、フコシルトランスフェラーゼをコードする機能的に分断されたＦＵＴ８遺伝子を有し、そのためそのような細胞株で発現された抗体が低フコシル化を示す細胞株が記載されている。PrestaによるＰＣＴ公開第０３／０３５８３５号には、Ａｓｎ（２９７）に連結されている糖（炭水化物）にフコースを付着させる能力が低減されており、また、その宿主細胞で発現される抗体の低フコシル化をもたらす変異体ＣＨＯ細胞株Ｌｅｄ３細胞が記載されている（Shields, R.L.ら（２００２年）J. Biol. Chem.  ２７７巻：２６７３３〜２６７４０頁も参照）。UmanaらのＰＣＴ公開第９９／５４３４２号には、糖タンパク質修飾グリコシルトランスフェラーゼ｛例えば、ベータ（ｌ，４）−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩＩＩ（ＧｎＴＩＩＩ））を発現するように操作されており、そのため、操作された細胞株で発現される抗体が、バイセクトＧｌｃＮａｃ構造の増加を示し、それにより抗体のＡＤＣＣ活性の増加がもたらされる細胞株が記載されている（Umanaら（１９９９年）Nat. Biotech.  １７巻：１７６〜１８０頁も参照）。
【０１３４】
本明細書に記載されている抗体の別の修飾はペグ化である。抗体をペグ化して、例えば、抗体の生物学的（例えば、血清）半減期を増加させることができる。抗体のペグ化には、典型的には、抗体またはその断片を、１つまたは複数のＰＥＧ基が抗体または抗体断片に付着されることになる条件下で、ＰＥＧの反応性エステルまたはアルデヒド誘導体などの、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と反応させる。一部の実施形態では、ペグ化は、反応性ＰＥＧ分子（または類似の反応性水溶性ポリマー）とのアシル化反応またはアルキル化反応により実施される。本明細書で使用される場合、用語「ポリエチレングリコール」は、モノ（ＣＩ−ＣＩＯ）アルコキシ−もしくはアリールオキシ−ポリエチレングリコールまたはポリエチレングリコール−マレイミドなどの他のタンパク質を誘導体化するために使用されているＰＥＧの形態をいずれも包含することが意図されている。ある特定の実施形態では、ペグ化される抗体は、非グリコシル化抗体である。タンパク質をペグ化するための方法は、当該技術分野で公知であり、本明細書に記載されている抗体に適用することができる。例えば、Nishimuraらによる欧州特許第０１５４３１６号およびIshikawaらによる欧州特許第０４０１３８４号を参照されたい。
【０１３５】
核酸および宿主細胞
また、抗体またはその重鎖もしくは軽鎖またはその部分をコードする核酸が提供される。例示的な核酸は、配列表に提供されている。配列表の核酸に対して、少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９８％、または９９％である任意の核酸が、本明細書に包含される。本明細書で提供されている抗体をコードする核酸を含む組成物も包含され、それらを含む細胞、ならびに抗ＶＩＳＴＡ抗体をコードする核酸で形質転換された細胞を培養すること、および抗体を培地または細胞から単離することを含む、抗体を調製するための方法も包含される。
【０１３６】
ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ結合Ａｂおよび関連する薬学的組成物を使用する治療方法
ある特定の実施形態では、低ｐＨではＶＩＳＴＡに結合し、例えば中性または生理的ｐＨでは有意な結合を欠如する抗ＶＩＳＴＡ抗体は、ＶＩＳＴＡアンタゴニスト抗体、つまりＶＩＳＴＡの作用を阻害し、そのため免疫応答が刺激される抗体であってもよい。そのような抗体は、増殖性疾患（良性または悪性）、がん、および感染性疾患（例えば、ウイルス感染症）などの、免疫系または免疫応答の刺激が望ましい疾患を治療するために使用することができる。
【０１３７】
ある特定の実施形態では、低ｐＨではＶＩＳＴＡに結合し、例えば中性または生理的ｐＨでは有意な結合を欠如する抗ＶＩＳＴＡ抗体は、ＶＩＳＴＡアゴニスト抗体、つまりＶＩＳＴＡの作用を増加させ、そのため免疫応答が阻害される抗体であってもよい。そのような抗体は、関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡、セリアック病、シェーグレン症候群（Sjoigren’s syndrome）、グレーヴス病、炎症性腸疾患、乾癬、強直性脊椎炎、移植片対宿主病、アレルギー、および喘息などの自己免疫疾患および炎症状態などの、免疫系または免疫応答の阻害が望ましい疾患を治療するために使用することができる。
【０１３８】
本明細書に記載されている抗体は、例えば、がんの治療に使用することができる。一部の実施形態では、がんを治療するための方法であって、本明細書に記載されている有効量の抗体を患者に投与することを含む方法が提供される。一部の実施形態では、Ａｂは、抗原特異的免疫応答など、患者の免疫応答を始動または増強することができる。一部の実施形態では、Ａｂは、Ｔ細胞活性を刺激することができる。一部の実施形態では、Ａｂは、患者の少なくとも１つの腫瘍の増殖を阻害することができる。
【０１３９】
本明細書には、がんを有する対象を治療する方法であって、対象に、本明細書に記載されている治療的有効量の抗ＶＩＳＴＡ抗体を、対象が治療されるように投与することを含む方法が提供される。抗ＶＩＳＴＡ抗体は、単独で使用してもよい。あるいは、抗ＶＩＳＴＡ抗体は、下記にさらに記載されているように、別の作用剤と併せて使用してもよい。
【０１４０】
本明細書に記載のような酸性条件下でＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合するＡｂで治療することができるがんの例としては、これらに限定されないが、癌、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、および白血病が挙げられる。また、本明細書に記載されているＡｂで治療することができるがんとしては、典型的には免疫療法に応答性であるがん、および典型的には免疫療法に応答性ではないものが挙げられる。また、治療することができるがんとしては、ＶＩＳＴＡ陽性がん、例えば、ＶＩＳＴＡ陽性腫瘍浸潤細胞を有するがん、例えば、リンパ球、骨髄、または単球細胞を挙げることができる。がんは、固形腫瘍を有するがんであってもよく、または血液悪性腫瘍（液性腫瘍）であってもよい。
【０１４１】
治療するがんの非限定的な例としては、以下のものが挙げられる：扁平上皮癌、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、扁平上皮非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、非扁平上皮ＮＳＣＬＣ、神経膠腫、胃腸がん、腎がん（例えば、明細胞癌）、卵巣がん、肝臓がん、結腸直腸がん、子宮内膜がん、腎臓がん、（例えば、腎細胞癌（ＲＣＣ））、前立腺がん（例えば、ホルモン不応性前立腺腺癌）、甲状腺がん、神経芽細胞腫、膵臓がん、膠芽細胞腫（多形神経膠芽腫）、子宮頸がん、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）がん、膀胱がん、肝がん、乳がん、結腸癌、および頭頸部がん（または癌）、胃（ｇａｓｔｒｉｃ）がん、胚細胞腫瘍、小児肉腫、副鼻腔ナチュラルキラー、メラノーマ、（例えば、皮膚または眼内悪性腫瘍メラノーマなどの、転移性悪性腫瘍メラノーマ）、骨がん、皮膚がん、子宮がん、肛門部がん、睾丸がん、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膣癌、外陰癌、食道がん、小腸がん、内分泌系のがん、副甲状腺がん、副腎がん、軟組織肉腫、尿道がん、陰茎がん、小児期固形腫瘍、尿管がん、腎盂癌、中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物、原発性ＣＮＳリンパ腫、腫瘍血管新生、脊椎腫瘍、脳がん、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、カポジ肉腫、類表皮がん、扁平上皮がん、Ｔ細胞リンパ腫、石綿により誘導されるものを含む環境誘導性がん、ウイルス関連がんまたはウイルス由来のがん（例えば、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ関連またはＨＰＶ由来腫瘍）)、ならびに２つの主な血液細胞系統のいずれかに由来する血液悪性腫瘍、つまり、すべてのタイプの白血病、リンパ腫、および骨髄腫、例えば、急性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、および慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、未分化ＡＭＬ（ＭＯ）、骨髄芽球性白血病（Ｍｌ）、骨髄芽球性白血病（Ｍ２；細胞成熟を伴う）、前骨髄球性白血病（Ｍ３またはＭ３変異体［Ｍ３Ｖ］）、骨髄単球性白血病（好酸球増加症［Ｍ４Ｅ］を伴うＭ４またはＭ４変異体）、単球性白血病（Ｍ５）、赤白血病（Ｍ６）、巨核芽球性白血病（Ｍ７）、単離された顆粒球性肉腫、および緑色腫などの、急性、慢性、リンパ球性、および／または骨髄性白血病などの、骨髄細胞株（顆粒球、赤血球、血小板、マクロファージ、およびマスト細胞を産生する）またはリンパ系細胞株（Ｂ、Ｔ、ＮＫ、および形質細胞を産生する）；ホジキンリンパ腫（ＨＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、Ｂ細胞血液悪性腫瘍、例えば、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、リンパ形質細胞様リンパ腫、単球様Ｂ細胞リンパ腫、粘膜関連リンパ系組織（ＭＡＬＴ）リンパ腫、未分化（例えば、Ｋｉ  １＋）大型細胞リンパ腫、成人Ｔ細胞リンパ腫／白血病、マントル細胞リンパ腫、血管免疫芽細胞性Ｔ細胞リンパ腫、血管中心性リンパ腫、腸管Ｔ細胞リンパ腫、縦隔原発Ｂ細胞性リンパ腫、前駆Ｔ−リンパ芽球性リンパ腫、Ｔ−リンパ芽球性リンパ腫などのリンパ腫；ならびにリンパ腫／白血病（Ｔ−Ｌｂｌｙ／Ｔ−ＡＬＬ）、末梢Ｔ−細胞リンパ腫、リンパ芽球性リンパ腫、移植後リンパ増殖性疾患、真性組織球性リンパ腫、中枢神経系原発リンパ腫、原発性体液性リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、リンパ芽球性リンパ腫（ＬＢＬ）、リンパ系系統の造血器腫瘍、急性リンパ芽球性白血病、びまん性大型Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、濾胞性リンパ腫、びまん性組織球性リンパ腫（ＤＨＬ）、免疫芽細胞性大細胞型リンパ腫、前駆Ｂ−リンパ芽球性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫（ＣＴＬＣ）（菌状息肉症またはセザリー症候群とも呼ばれる）、およびワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症を伴うリンパ形質細胞性リンパ腫（ＬＰＬ）；ＩｇＧ骨髄腫、軽鎖骨髄腫、非分泌性骨髄腫、くすぶり型骨髄腫（インドレント骨髄腫とも呼ばれる）、孤在性形質細胞腫、および多発性骨髄腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、毛様細胞リンパ腫などの骨髄腫；線維肉腫および横紋筋肉腫（rhabdomyoscarcoma）を含む、骨髄系統の造血器腫瘍、間葉系由来の腫瘍；星状細胞腫、シュワン腫を含む、精上皮腫、奇形癌、中枢神経および末梢神経の腫瘍；線維肉腫、横紋筋肉腫、および骨肉腫を含む間葉系由来の腫瘍；ならびに、メラノーマ、色素性乾皮症、ケラトアカントーマ、精上皮腫、甲状腺濾胞性がん、および奇形癌、リンパ系系統の造血器腫瘍、例えば、これらに限定されないが、小細胞および大脳様細胞タイプのものを含むＴ−前リンパ球性白血病（Ｔ−ＰＬＬ）などのＴ細胞障害を含むＴ細胞およびＢ細胞腫瘍を含む他の腫瘍；Ｔ細胞タイプの大型顆粒リンパ球白血病（ＬＧＬ）；ａ／ｄ  Ｔ−ＮＨＬ  肝脾リンパ腫；末梢／胸腺後Ｔ細胞リンパ腫（多形性および免疫芽細胞性サブタイプ）；血管中心性（鼻腔）Ｔ細胞リンパ腫；頭頸部のがん、腎がん、直腸がん、甲状腺がん；急性骨髄リンパ腫、ならびに上記がんの任意の組合せ。また、本明細書に記載されている方法は、転移性がん、切除不能不応性がん（例えば、以前の免疫療法、例えばブロッキングＣＴＬＡ−４またはＰＤ−１抗体に不応性のがん）および／または再発性がんの治療に使用することができる。
【０１４２】
一部の実施形態では、がんを治療するための方法であって、本明細書に記載されているような、酸性条件でｈｕＶＩＳＴＡに特異的に結合する単離された抗体を、がんを有する対象に投与することを含む方法が提供される。一部の実施形態では、がんを治療するための本明細書に記載されている抗体の使用が提供される。
【０１４３】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載されている抗体は、以前の治療、例えば、免疫腫瘍学的もしくは免疫療法薬による以前の治療に対して不適切な応答を示すかまたは進行するがんを有する患者に投与される。一部の実施形態では、がんは、以前の治療に不応性または抵抗性である。本来的に不応性もしくは抵抗性（例えば、ＰＤ−１経路アンタゴニストに不応性）であっても、または抵抗性もしくは不応性状態は獲得性であってもよい。例えば、本明細書に記載されている抗体は、第１療法に非応答性であるかもしくは十分に応答性でない対象、または治療、例えば抗ＰＤ−１経路アンタゴニスト治療後に疾患進行を示す対象に、単独でまたは別の療法（例えば、抗ＰＤ−１経路アンタゴニスト療法）と組み合わせてのいずれかで投与してもよい。他の実施形態では、本明細書に記載されている抗体は、以前に免疫腫瘍学的作用剤、例えばＰＤ−１経路アンタゴニストを受容していない（つまり、治療されていない）患者に投与される。
【０１４４】
ある特定の実施形態では、対象のがんを治療するための方法は、まず、対象の腫瘍の腫瘍突然変異負荷（ＴＭＢ、tumor mutational burden）を決定すること、およびその結果に基づいて、例えば、高ＴＭＢを有することが見出された対象に抗ＶＩＳＴＡ抗体を投与することを含む。
【０１４５】
免疫刺激剤との組合せ
一部の実施形態では、本明細書に記載のような抗体、例えば本明細書に記載されているアンタゴニストＶＩＳＴＡ抗体は、少なくとも１つの免疫刺激剤と組み合わせて投与される。例えば、治療剤は、一緒に注入してもよく、またはほぼ同時に注射してもよい。一部の実施形態では、抗体および少なくとも１つの免疫刺激剤は、順次的に投与される。例えば、一部の実施形態では、抗体は、少なくとも１つの免疫刺激剤の前にまたは後で、２つの治療剤が、３０分、６０分、９０分、１２０分、３時間、６時間、１２時間、２４時間、３６時間、４８時間、３日間、５日間、７日間、または２週間の時間を置いて投与されるように順次的に投与される。
【０１４６】
一部の実施形態では、抗体の少なくとも１用量、少なくとも２用量、少なくとも３用量、少なくとも５用量、または少なくとも１０用量が、少なくとも１つの免疫刺激剤を投与する前に投与される。一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤の少なくとも１用量、少なくとも２用量、少なくとも３用量、少なくとも５用量、または少なくとも１０用量が、抗体の投与前に投与される。一部の実施形態では、免疫刺激剤の最後の用量は、抗体の最初の用量の少なくとも１、２、３、５日、もしくは１０日、または１、２、３、５、１２、もしくは２４週間前に投与される。一部の実施形態では、抗体の最後の用量は、少なくとも１つの免疫刺激剤の最初の用量の少なくとも１、２、３、５日、もしくは１０日、または１、２、３、５、１２、もしくは２４週間前に投与される。一部の実施形態では、対象は、少なくとも１つの免疫刺激剤による治療を受けたことがあるかまたは受けている最中であり、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ結合性抗体が、治療レジメンに追加される。
【０１４７】
一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、Ｔ細胞の活性化の阻害剤のアンタゴニストを含むが、一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、Ｔ細胞の活性化の刺激因子のアゴニストを含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、ＣＴＬＡ４、ＬＡＧ−３、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ガレクチン１、ガレクチン９、ＣＥＡＣＡＭ−１、ＢＴＬＡ、ＣＤ２５、ＣＤ６９、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ１１３、ＧＰＲ５６、ＶＩＳＴＡ、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、２Ｂ４、ＣＤ４８、ＧＡＲＰ、ＰＤ１Ｈ、ＬＡＩＲ１、ＴＩＭ１、ＴＩＭ３、ＴＩＭ４、ＩＬＴ４、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＴＧＦβ、ＶＥＧＦ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、アデノシンＡ２Ａ受容体、ＰＩ３Ｋデルタ、またはＩＤＯのアンタゴニストを含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、Ｂ７−１、Ｂ７−２、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、４−１ＢＢＬ、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳ−Ｌ、ＯＸ４０、ＯＸ４０Ｌ、ＧＩＴＲ、ＧＩＴＲＬ、ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＤＲ３、ＣＤ２８Ｈ、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＩＦＮα、ＳＴＩＮＧのアゴニスト、またはＴＬＲ２／４アゴニストなどのトール様受容体アゴニストを含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、Ｂ７−１、Ｂ７−２、Ｂ７−Ｈ２（ＩＣＯＳ−Ｌ）、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、およびＢ７−Ｈ６などのＢ７ファミリーの膜結合タンパク質の別のメンバーに結合する作用剤を含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、ＣＤ４０、ＣＤ４０Ｌ、ＯＸ４０、ＯＸ４０Ｌ、ＧＩＴＲ、ＧＩＴＲＬ、ＣＤ７０、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ３０、ＣＤ３０Ｌ、４−１ＢＢＬ、ＣＤ１３７  （４−１ＢＢ）、ＴＲＡＩＬ／Ａｐｏ２−Ｌ、ＴＲＡＩＬＲ１／ＤＲ４、ＴＲＡＩＬＲ２／ＤＲ５、ＴＲＡＩＬＲ３、ＴＲＡＩＬＲ４、ＯＰＧ、ＲＡＮＫ、ＲＡＮＫＬ、ＴＷＥＡＫＲ／Ｆｎ１４、ＴＷＥＡＫ、ＢＡＦＦＲ、ＥＤＡＲ、ＸＥＤＡＲ、ＥＤＡ１、ＥＤＡ２、ＴＡＣＩ、ＡＰＲＩＬ、ＢＣＭＡ、ＬＴβＲ、ＬＩＧＨＴ、ＤｅＲ３、ＨＶＥＭ、ＶＥＧＬ／ＴＬ１Ａ、ＴＲＡＭＰ／ＤＲ３、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦβ、ＴＮＦＲ２、ＴＮＦα、１β２、ＦＡＳ、ＦＡＳＬ、ＲＥＬＴ、ＤＲ６、ＴＲＯＹ、またはＮＧＦβなどのＴＮＦ受容体ファミリーのメンバーまたはＴＮＦ受容体ファミリーのメンバーに結合する共刺激性もしくは共阻害性分子に結合する作用剤を含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＴＧＦβ、ＶＥＧＦなどのＴ細胞活性化を阻害するサイトカインをアンタゴナイズまたは阻害する作用剤を含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、およびＩＦＮαなどのＴ細胞活性化を刺激するサイトカインのアゴニストを含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ４、ＣＣＲ２、またはＣＣＲ４などのケモカインのアンタゴニストを含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、抗体を含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの免疫刺激剤は、メソテリン標的ワクチンまたはＣＲＳ−２０７などの弱毒化リステリアが���ワクチンなどのワクチンを含んでいてもよい。
【０１４８】
例えば、本明細書に記載されている抗ＶＩＳＴＡ抗体は、以下の作用剤の１つまたは複数と共に投与することができる。
【０１４９】
（１）ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、およびＬＡＧ−３、ガレクチン９、ＣＥＡＣＡＭ−１、ＢＴＬＡ、ＣＤ６９、ガレクチン−１、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ１１３、ＧＰＲ５６、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、２Ｂ４、ＣＤ４８、ＧＡＲＰ、ＰＤ１Ｈ、ＬＡＩＲ１、ＴＩＭ−１、ＴＩＭ−３、およびＴＩＭ−４などのＴ細胞活性化を阻害するタンパク質（例えば、免疫チェックポイント阻害剤）のアンタゴニスト（阻害剤またはブロッキング剤）、ならびに／または（２）Ｂ７−１、Ｂ７−２、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、４−１ＢＢＬ、ＧＩＴＲ、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳ−Ｌ、ＯＸ４０、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＤＲ３、およびＣＤ２８ＨなどのＴ細胞活性化を刺激するタンパク質のアゴニスト。
【０１５０】
がんを治療するために本明細書に記載されている抗ＶＩＳＴＡ抗体と組み合わせることができる例示的な作用剤としては、以下のものが挙げられる：ＹＥＲＶＯＹ（登録商標）（イピリムマブ）またはトレメリムマブ（ＣＴＬＡ−４に対する）、ガリキシマブ（Ｂ７．１に対する）、ＢＭＳ−９３６５５８（ＰＤ−１に対する）、ＭＫ−３４７５（ＰＤ−１に対する）、アテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ（登録商標））、アベルマブ、デュルバルマブ、ＡＭＰ２２４（Ｂ７ＤＣに対する）、ＢＭＳ−９３６５５９（Ｂ７−Ｈ１に対する）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（Ｂ７−Ｈ１に対する）、ＭＥＤＩ−５７０（ＩＣＯＳに対する）、ＡＭＧ５５７（Ｂ７Ｈ２に対する）ＭＧＡ２７１（Ｂ７Ｈ３に対する）、ＩＭＰ３２１（ＬＡＧ−３に対する）、ＢＭＳ−６６３５１３（ＣＤ１３７に対する）、ＰＦ−０５０８２５６６（ＣＤ１３７に対する）、ＣＤＸ−１１２７（ＣＤ２７に対する）、抗ＯＸ４０（Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｅ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ）、ｈｕＭＡｂＯＸ４０Ｌ（ＯＸ４０Ｌに対する）、アタシセプト（ＴＡＣＩに対する）、ＣＰ−８７０８９３（ＣＤ４０に対する）、ルカツムマブ（ＣＤ４０に対する）、ダセツズマブ（ＣＤ４０に対する）、ムロモナブ−ＣＤ３（ＣＤ３に対する）；抗ＧＩＴＲ抗体ＭＫ４１６６、ＴＲＸ５１８、Ｍｅｄｉ１８７３、ＩＮＢＲＸ−１１０、ＬＫ２−１４５、ＧＷＮ−３２３、ＧＩＴＲＬ−Ｆｃ、またはそれらの任意の組合せ。
【０１５１】
がんを治療するために抗ＶＩＳＴＡ抗体と組み合わせることができる他の分子としては、ＮＫ細胞の阻害性受容体のアンタゴニスト、またはＮＫ細胞の活性化受容体のアゴニスト、例えばＫＩＲのアンタゴニスト（例えば、リリルマブ）が挙げられる。
【０１５２】
Ｔ細胞活性化は、可溶型サイトカインによっても調節することができる。一部の実施形態では、抗ＶＩＳＴＡ抗体は、Ｔ細胞活性化を阻害することを企図したサイトカインのアンタゴニスト、またはＴ細胞活性化を刺激するサイトカインアゴニストと組み合わせて投与することができる。例えば、抗ＶＩＳＴＡ抗体は、（ｉ）Ｔ細胞活性化を阻害するＩｇＳＦファミリーもしくはＢ７ファミリーもしくはＴＮＦファミリーのタンパク質のアンタゴニスト（または阻害剤もしくはブロッキング剤）、またはＴ細胞活性化を阻害するサイトカイン（例えば、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＴＧＦ−β、ＶＥＧＦ；「免疫抑制性サイトカイン」）のアンタゴニスト、および／あるいは（ｉｉ）ＩｇＳＦファミリー、Ｂ７ファミリー、もしくはＴＮＦファミリーの刺激性受容体の、またはＴ細胞活性化を刺激するサイトカインのアゴニストと組み合わせて使用することができる。
【０１５３】
併用療法のためのさらに他の作用剤としては、ＲＧ７１５５（国際公開第１１／７００２４号、国際公開第１１／１０７５５３号、国際公開第１１／１３１４０７号、国際公開第１３／８７６９９号、国際公開第１３／１１９７１６号、国際公開第１３／１３２０４４号）またはＦＰＡ−００８（国際公開第１１／１４０２４９号、国際公開第１３１６９２６４号、国際公開第１４／０３６３５７号）を含むＣＳＦ−１Ｒアンタゴニスト抗体などのＣＳＦ−１Ｒアンタゴニストを含むが、それらに限定されない、マクロファージまたは単球を阻害または枯渇させる作用剤が挙げられる。
【０１５４】
また、抗ＶＩＳＴＡ抗体は、ＴＧＦ−βシグナル伝達を阻害する作用剤と共に投与することができる。
【０１５５】
抗ＶＩＳＴＡ抗体と組み合わせることができる追加の作用剤としては、腫瘍抗原提示を増強する作用剤、例えば、樹状細胞ワクチン、ＧＭ−ＣＳＦ分泌細胞ワクチン、ＣｐＧオリゴヌクレオチド、およびイミキモド、または腫瘍細胞の免疫原性を増強する治療剤（例えば、アントラサイクリン類）が挙げられる。
【０１５６】
抗ＶＩＳＴＡ抗体と組み合わせることができるさらに他の治療剤としては、Ｔｒｅｇ細胞を枯渇またはブロックする治療剤、例えば、ＣＤ２５に特異的に結合する作用剤が挙げられる。
【０１５７】
抗ＶＩＳＴＡ抗体と組み合わせることができる別の治療剤は、インドールアミンジオキシゲナーゼ（dioxigenase）（ＩＤＯ）、ジオキシゲナーゼ、アルギナーゼ、または一酸化窒素合成酵素などの代謝酵素を阻害する治療剤である。
【０１５８】
抗ＶＩＳＴＡ抗体と共に使用することができる別のクラスの作用剤としては、アデノシンの形成を阻害する作用剤、例えばＣＤ７３阻害剤、またはアデノシンＡ２Ａ受容体を阻害する作用剤が挙げられる。
【０１５９】
がんを治療するために抗ＶＩＳＴＡ抗体と組み合わせることができる他の治療剤としては、Ｔ細胞アネルギーまたは疲弊を逆行／予防する治療剤、ならびに腫瘍部位での自然免疫活性化および／または炎症を始動させる治療剤が挙げられる。
【０１６０】
がんを治療するために抗ＶＩＳＴＡ抗体と組み合わせることができる他の治療剤としては、例えば、ＨｕＭａｘ（登録商標）−ＩＬ８による、ＩＬ−８をブロックする治療剤が挙げられる。
【０１６１】
抗ＶＩＳＴＡ抗体は、１つよりも多くの免疫腫瘍学的作用剤と組み合わせることができ、例えば、以下のものの１つまたは複数など、免疫経路の複数の要素を標的とするためのコンビナトリアル手法と組み合わせることができる：腫瘍抗原提示を増強する治療剤（例えば、樹状細胞ワクチン、ＧＭ−ＣＳＦ分泌細胞ワクチン、ＣｐＧオリゴヌクレオチド、イミキモド）；例えば、ＣＴＬＡ−４および／またはＰＤ１／ＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−Ｌ２経路を阻害することにより、および／またはＴｒｅｇもしくは他の免疫抑制性細胞を枯渇もしくはブロックすることにより負の免疫調節を阻害する治療剤；ＣＤ−１３７、ＯＸ−４０、および／もしくはＣＤ４０もしくはＧＩＴＲ経路、ならびに／またはＴ細胞エフェクター機能を刺激するアゴニストによる、正の免疫調節を刺激する治療剤；抗腫瘍Ｔ細胞の頻度を全身的に増加させる治療剤；例えば、ＣＤ２５のアンタゴニスト（例えば、ダクリズマブ）を使用して、またはエクスビボでの抗ＣＤ２５ビーズ枯渇により、腫瘍中のＴｒｅｇなどのＴｒｅｇを枯渇または阻害する治療剤；腫瘍におけるサプレッサー骨髄細胞の機能に影響を及ぼす治療剤；腫瘍細胞の免疫原性を増強する治療剤（例えば、アントラサイクリン類）；遺伝子改変細胞、例えばキメラ抗原受容体により修飾された細胞を含む養子Ｔ細胞またはＮＫ細胞移入（ＣＡＲ−Ｔ療法）；インドールアミンジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）、ジオキシゲナーゼ、アルギナーゼ、または一酸化窒素合成酵素などの代謝酵素を阻害する治療剤；Ｔ細胞アネルギーまたは疲弊を逆行／予防する治療剤；腫瘍部位において自然免疫活性化および／または炎症を始動させる治療剤；免疫刺激性サイトカインの投与；または免疫抑制性サイトカインのブロッキング。
【０１６２】
本明細書に記載されている抗ＶＩＳＴＡ抗体は、正の共刺激受容体にライゲートするアゴニスト作用剤、阻害性受容体、アンタゴニストによりシグナル伝達を減弱させるブロッキング剤、および抗腫瘍Ｔ細胞の頻度を全身的に増加させる１つまたは複数の作用剤、腫瘍微小環境内の異なる免疫抑制経路を克服する（例えば、阻害性受容体エンゲージメント（例えば、ＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−１相互作用）をブロックするか、またはＴｒｅｇを枯渇もしくは阻害するか（例えば、抗ＣＤ２５モノクローナル抗体（例えば、ダクリズマブ）を使用して、またはエクスビボでの抗ＣＤ２５ビーズ枯渇により）、ＩＤＯなどの代謝酵素を阻害するか、またはＴ細胞アネルギーもしくは疲弊を逆行／予防する）作用剤、ならびに腫瘍部位において自然免疫活性化および／または炎症を始動させる作用剤の１つまたは複数と共に使用することができる。
【０１６３】
ある特定の実施形態では、抗ＶＩＳＴＡ抗体は、対象がＢＲＡＦ  Ｖ６００突然変異陽性である場合、ＢＲＡＦ阻害剤と共に対象に投与される。
【０１６４】
本明細書に記載されている併用療法に使用するための好適なＰＤ−１アンタゴニストとしては、限定ではないが、リガンド、抗体（例えば、モノクローナル抗体および二重特異性抗体）、および多価作用剤が挙げられる。一実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、融合タンパク質、例えばＡＭＰ−２４４などのＦｃ融合タンパク質である。一実施形態では、ＰＤ−１アンタゴニストは、抗ＰＤ−１または抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。
【０１６５】
例示的な抗ＰＤ−１抗体は、ニボルマブ（ＢＭＳ−９３６５５８）、または国際公開第２００６／１２１１６８号に記載されている抗体１７Ｄ８、２Ｄ３、４Ｈ１、５Ｃ４、７Ｄ３、５Ｆ４、および４Ａ１１の１つのＣＤＲまたは可変領域を含む抗体である。ある特定の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、国際公開第２０１２／１４５４９３号に記載されているＭＫ−３４７５（ランブロリズマブ）、国際公開第２０１２／１４５４９３号に記載されているＡＭＰ−５１４、またはＰＤＲ００１である。さらなる公知のＰＤ−１抗体および他のＰＤ−１阻害剤としては、国際公開第２００９／０１４７０８号、国際公開第０３／０９９１９６、国際公開第２００９／１１４３３５号、国際公開第２０１１／０６６３８９号、国際公開第２０１１／１６１６９９号、国際公開第２０１２／１４５４９３号、米国特許第７，６３５，７５７号および第８，２１７，１４９号、ならびに米国特許出願公開第２００９／０３１７３６８号に記載されているものが挙げられる。また、国際公開第２０１３／１７３２２３号に開示されている抗ＰＤ−１抗体をいずれも使用することができる。こうした抗体の１つと同じＰＤ−１のエピトープとの結合をめぐって競合する、および／または同じＰＤ−１のエピトープに結合する抗ＰＤ−１抗体も、併用治療に使用することができる。
【０１６６】
一部の実施形態では、併用療法に有用な抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＢＭＳ−９３６５５９（国際公開第２００７／００５８７４号および米国特許第７，９４３，７４３号では１２Ａ４と呼ばれている）、またはＰＣＴ公開第０７／００５８７４号および米国特許第７，９４３，７４３号に記載されている３Ｇ１０、１２Ａ４、１０Ａ５、５Ｆ８、１０Ｈ１０、１Ｂ１２、７Ｈ１、１１Ｅ６、１２Ｂ７、および１３Ｇ４のＣＤＲまたは可変領域を含む抗体である。ある特定の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブおよび抗Ｂ７−Ｈ１としても知られている）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブおよびＲＧ７４４６としても知られている）、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブとしても知られている；国際公開第２０１３／７９１７４号）、またはｒＨｉｇＭ１２Ｂ７である。また、国際公開第２０１３／１７３２２３号、国際公開第２０１１／０６６３８９号、国際公開第２０１２／１４５４９３号、米国特許第７，６３５，７５７号および第８，２１７，１４９号、ならびに米国特許出願公開第２００９／１４５４９３号に開示されていている抗ＰＤ−Ｌ１抗体をいずれも使用することができる。こうした抗体のいずれかのエピトープと同じエピトープをめぐって競合および／または結合する抗ＰＤ−１抗体も、併用治療に使用することができる。
【０１６７】
ある特定の実施形態では、本開示の抗ＶＩＳＴＡ抗体は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニスト、例えば、抗ＣＴＬＡ−４抗体と共に使用することができる。一実施形態では、抗ＣＴＬＡ−４抗体は、以下の群から選択される抗体である：ＹＥＲＶＯＹ（登録商標）（ＰＣＴ公開第０１／１４４２４号に記載されているイピリムマブまたは抗体１０Ｄ１）、トレメリムマブ（以前はチシリムマブ、ＣＰ−６７５，２０６）、以下の刊行物のいずれかに記載されているモノクローナルまたは抗ＣＴＬＡ−４抗体：国際公開第９８／４２７５２号；国際公開第００／３７５０４号；米国特許第６，２０７，１５６号；Hurwitzら（１９９８年）Pro. Natl. Acad. Sci. USA  ９５巻（１７号）：１００６７〜１００７１頁；Camachoら（２００４年）J. Clin. Oncology  ２２巻（１４５号）：抄録番号２５０５号（抗体ＣＰ−６７５２０６）；およびMokyrら（１９９８年）Cancer Res.  ５８巻：５３０１〜５３０４頁。国際公開第２０１３／１７３２２３号に開示されている抗ＣＴＬＡ−４抗体をいずれも使用することができる。
【０１６８】
一部の実施形態では、本開示の抗ＶＩＳＴＡ抗体は、ＬＡＧ３アンタゴニストと組み合わせて使用される。抗ＬＡＧ３抗体の例としては、米国特許出願公開第２０１１／０１５０８９２号、国際公開第１０／１９５７０号、および国際公開第２０１４／００８２１８号に記載されている抗体２５Ｆ７、２６Ｈ１０、２５Ｅ３、８Ｂ７、１１Ｆ２、または１７Ｅ５のＣＤＲまたは可変領域を含む抗体が挙げられる。一実施形態では、抗ＬＡＧ−３抗体は、ＢＭＳ−９８６０１６である。使用することができる当該技術分野で認識されている他の抗ＬＡＧ−３抗体としては、米国特許出願第２０１１／００７０２３号、国際公開第０８／１３２６０１号、および国際公開第０９／４４２７３号に記載されているＩＭＰ７３１およびＩＭＰ−３２１が挙げられる。こうした抗体のいずれかのものと同じエピトープをめぐって競合および／または結合する抗ＬＡＧ−３抗体も、併用治療に使用することができる。
【０１６９】
一部の実施形態では、本開示の抗ＶＩＳＴＡ抗体は、アゴニスト性ＣＤ１３７抗体など、ＣＤ１３７（４−１ＢＢ）アゴニストと組み合わせて投与することができる。好適なＣＤ１３７抗体としては、例えば、ウレルマブまたはＰＦ−０５０８２５６６（国際公開第１２／３２４３３号）が挙げられる。
【０１７０】
一部の実施形態では、抗ＶＩＳＴＡ抗体は、アゴニスト性ＯＸ４０抗体など、ＯＸ４０アゴニストと組み合わせて投与することができる。好適なＯＸ４０抗体としては、例えば、ＭＥＤＩ−６３８３、ＭＥＤＩ−６４６９、またはＭＯＸＲ０９１６（ＲＧ７８８８、国際公開第０６／０２９８７９号）が挙げられる。
【０１７１】
一部の実施形態では、抗ＶＩＳＴＡ抗体は、アゴニスト性ＣＤ４０抗体など、ＣＤ４０アゴニストと組み合わせて投与される。ある特定の実施形態では、免疫腫瘍学的作用剤は、アンタゴニスト性ＣＤ４０抗体など、ＣＤ４０アンタゴニストである。好適なＣＤ４０抗体としては、例えば、ルカツムマブ（ＨＣＤ１２２）、ダセツズマブ（ＳＧＮ−４０）、ＣＰ−８７０，８９３、またはＣｈｉ  Ｌｏｂ７／４が挙げられる。
【０１７２】
一部の実施形態では、抗ＶＩＳＴＡ抗体は、アゴニスト性ＣＤ２７抗体など、ＣＤ２７アゴニストと組み合わせて投与される。好適なＣＤ２７抗体としては、例えば、バルリルマブ（varlilumab）（ＣＤＸ−１１２７）が挙げられる。
【０１７３】
ある特定の実施形態では、抗ＶＩＳＴＡ抗体は、抗ＧＩＴＲ抗体、例えば、国際公開第２００６／１０５０２１号に記載されている、例えば、６Ｃ８のＣＤＲ配列を有する抗体、例えば、６Ｃ８のＣＤＲを有するヒト化抗体；国際公開第２０１１／０２８６８３号に記載されている抗ＧＩＴＲ抗体のＣＤＲを含む抗体；日本特許第２００８２７８８１４号に記載されている抗ＧＩＴＲ抗体のＣＤＲを含む抗体；国際公開第２０１５／０３１６６７号、国際公開第２０１５／１８７８３５号、国際公開第２０１５／１８４０９９号、国際公開第２０１６／０５４６３８号、国際公開第２０１６／０５７８４１号、もしくは国際公開第２０１６／０５７８４６号に記載されている抗ＧＩＴＲ抗体、または本明細書に記載もしくは参照されている他の抗ＧＩＴＲ抗体のＣＤＲを含む抗体と共に投与される。
【０１７４】
一部の実施形態では、抗ＶＩＳＴＡ抗体は、ＭＧＡ２７１（Ｂ７Ｈ３に対する）（国際公開第１１／１０９４００号）と組み合わせて投与される。
【０１７５】
一部の実施形態では、抗ＶＩＳＴＡ抗体は、リリルマブなどのＫＩＲアンタゴニストと組み合わせて投与される。
【０１７６】
一部の実施形態では、抗ＶＩＳＴＡ抗体は、ＩＤＯアンタゴニストと組み合わせて投与される。好適なＩＤＯアンタゴニストとしては、例えば、ＩＮＣＢ−０２４３６０（国際公開第２００６／１２２１５０号、国際公開第０７／７５５９８号、国際公開第０８／３６６５３号、国際公開第０８／３６６４２号）、インドキシモド、ＮＬＧ−９１９（国際公開第０９／７３６２０号、国際公開第０９／１１５６６５２号、国際公開第１１／５６６５２号、国際公開第１２／１４２２３７号）、またはＦ００１２８７が挙げられる。
【０１７７】
一部の実施形態では、抗ＶＩＳＴＡ抗体は、トール様受容体アゴニスト、例えば、ＴＬＲ２／４アゴニスト（例えば、カルメット・ゲラン菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  Ｃａｌｍｅｔｔｅ−Ｇｕｅｒｉｎ）；ＴＬＲ７アゴニスト（例えば、Ｈｉｌｔｏｎｏｌまたはイミキモド）；ＴＬＲ７／８アゴニスト（例えば、レシキモド）；またはＴＬＲ９アゴニスト（例えば、ＣｐＧ７９０９）と組み合わせて投与される。
【０１７８】
一実施形態では、抗ＶＩＳＴＡは、ＴＧＦ−β阻害剤、例えば、ＧＣ１００８、ＬＹ２１５７２９９、ＴＥＷ７１９７、またはＩＭＣ−ＴＲ１と組み合わせて投与される。
【０１７９】
追加の併用療法
また、本明細書のＡｂは、他の治療モード、例えば外科手術、化学療法、放射線療法、または別の治療抗体などの生物製剤の投与の前、投与と実質的に同時に、または投与の後で提供してもよい。一部の実施形態では、がんは、外科手術、化学療法、および放射線療法、またはそれらの組合せから選択される療法後に、再発または進行している。例えば、微小転移が存在し得るリスクがある場合、および／または再発のリスクを低減するために、本明細書に記載されている抗ＶＩＳＴＡ抗体を補助療法として投与することができる。
【０１８０】
がん治療の場合、上記組合せを、化学療法剤、増殖阻害剤、遺伝子治療ワクチンなどの抗がんワクチン、抗血管新生剤、および／または抗腫瘍性組成物などの、１つまたは複数の追加の抗がん剤と共に投与してもよい。本発明の抗体と組み合わせて使用することができる化学療法剤、増殖阻害剤、抗がんワクチン、抗血管新生剤、および抗腫瘍性組成物の非限定的な例は、本明細書の「定義」に提供されている。
【０１８１】
一部の実施形態では、ステロイドまたは非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）などの抗炎症薬を、上記組合せと共に投与してもよい。また、本明細書に記載されている抗ＶＩＳＴＡ抗体による治療と同時にまたは治療の前に異常増殖細胞を静止させることが望ましい場合、１７ａ−エチニルエストラジオール、ジエチルスチルベストロール、テストステロン、プレドニゾン、フルオキシメステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、テストラクトン、酢酸メゲストロール、メチルプレドニゾロン、メチルテストステロン、プレドニゾロン、トリアムシノロン、クロロトリアニセン、ヒドロキシプロゲステロン、アミノグルテチミド、エストラムスチン、酢酸メドロキシプロゲステロン、ロイプロリド、フルタミド、トレミフェン、Ｚｏｌａｄｅｘ（登録商標）などのホルモンおよびステロイド（合成アナログを含む）を、患者に投与してもよい。また、本明細書に記載されている方法または組成物を使用する場合、必要に応じて、アンチミメティックス（antimimetics）など、腫瘍増殖または転移の調節に臨床設定で使用される他の作用剤を投与してもよい。
【０１８２】
また、本明細書に記載されている抗体は、がん性細胞、精製腫瘍抗原（組換えタンパク質、ペプチド、および糖（炭水化物）分子を含む）、細胞、および免疫刺激性サイトカインをコードする遺伝子をトランスフェクトされた細胞などの免疫原性剤と組み合わせることができる（Heら、（２００４年）J. Immunol.１７３巻：４９１９〜２８頁）。使用することができる腫瘍ワクチンの非限定的な例としては、ｇｐ１００のペプチドなどメラノーマ抗原、ＭＡＧＥ抗原、Ｔｒｐ−２、ＭＡＲＴ１、および／またはチロシナーゼのペプチド、またはサイトカインＧＭ−ＣＳＦを発現するようにトランスフェクトされた腫瘍細胞（下記でさらに考察されている）が挙げられる。
【０１８３】
ヒトでは、メラノーマなどの一部の腫瘍は、免疫原性であることが示されている。ＶＩＳＴＡ阻害によりＴ細胞活性化の閾値を低下させることにより、宿主における腫瘍応答を活性化することができ、非免疫原性腫瘍または免疫原性が限定的な腫瘍を治療することが可能になる。
【０１８４】
また、本明細書に記載されている抗ＶＩＳＴＡ抗体は、ワクチン接種プロトコールと組み合わせることができる。腫瘍に対してワクチン接種するための多くの実験的戦略が考案されている（Rosenberg, S.、２０００年、Development of Cancer Vaccines，ASCO Educational Book Spring：６０〜６２頁；Logothetis, C、２０００年、ASCO Educational Book Spring：３００〜３０２；Khayat, D.２０００年、ASCO Educational Book Spring：４１４〜４２８頁；Foon, K.  ２０００年、ASCO Educational Book Spring：７３０〜７３８頁を参照；また、DeVitaら（編）、１９９７年、Cancer: Principles and Practice of Oncology、第５版の、Restifo, N.およびSznol, M.、Cancer Vaccines、第６１章、３０２３〜３０４３頁を参照）。こうした戦略の１つでは、ワクチンは、自己または同種異系腫瘍細胞を使用して調製される。こうした細胞ワクチンは、腫瘍細胞がＧＭ−ＣＳＦを発現するように形質導入されている場合に最も効果的であることが示されている。ＧＭ−ＣＳＦは、腫瘍ワクチン接種のための抗原提示の強力な活性化因子であることが示されている（Dranoffら（１９９３年）Proc. Natl. Acad. Sci U.S.A.  ９０巻：３５３９〜４３頁）。
【０１８５】
種々の腫瘍での遺伝子発現および大規模遺伝子発現パターンに関する研究により、いわゆる腫瘍特異的抗原が定義されるに至っている（Rosenberg, S A（１９９９年）Immunity  １０巻：２８１〜７頁）。多くの場合、こうした腫瘍特異的抗原は、腫瘍においておよび腫瘍が生じた細胞において発現される分化抗原、例えば、メラノサイト抗原ｇｐ１００、ＭＡＧＥ抗原、およびＴｒｐ−２である。より重要なことには、こうした抗原の多くは、宿主に見出される腫瘍特異的Ｔ細胞の標的であることが示されている場合がある。ＶＩＳＴＡ阻害は、腫瘍で発現される組換えタンパク質および／またはペプチドのコレクションと共に、こうしたタンパク質に対する免疫応答を生成するために使用することができる。こうしたタンパク質は、通常は、免疫系により自己抗原として認識されるため、それらに対して寛容性である。腫瘍抗原としては、染色体のテロメアの合成に必要であり、ヒトがんの８５％よりも多くで発現されるが、限定的な数の体細胞組織でしか発現されないタンパク質テロメラーゼを挙げることができる（Kimら（１９９４年）Science  ２６６巻：２０１１〜２０１３頁）。また、腫瘍抗原は、タンパク質配列を変更するか、または２つの無関連配列間の融合タンパク質（つまり、フィラデルフィア染色体のｂｃｒ−ａｂｌ）を生成する体細胞突然変異のため、がん細胞で発現される「ネオ抗原」であってもよく、またはＢ細胞腫瘍に由来するイディオタイプであってもよい。
【０１８６】
他の腫瘍ワクチンとしては、ヒトパピローマ（ＨＰＶ）、肝炎ウイルス（ＨＢＶおよびＨＣＶ）、およびカボジヘルペス肉腫ウイルス（ＫＨＳＶ、Kaposi's Herpes sarcoma virus）などの、ヒトがんへの関与が示唆されているウイルス由来のタンパク質を挙げることができる。ＶＩＳＴＡ阻害と共に使用することができる腫瘍特異的抗原の別の形態は、腫瘍組織それ自体から単離された精製ヒートショックタンパク質（ＨＳＰ）である。こうしたヒートショックタンパク質は、腫瘍細胞に由来するタンパク質の断片を含み、こうしたＨＳＰは、腫瘍免疫性を誘発するための抗原提示細胞への送達が高度に効率的である（Suot & Srivastava（１９９５年）Science  ２６９巻：１５８５〜１５８８頁；Tamuraら（１９９７年）Science  ２７８巻：１１７〜１２０頁）。
【０１８７】
樹状細胞（ＤＣ）は、抗原特異的応答を刺激するために使用することができる強力な抗原提示細胞である。ＤＣは、エクスビボで産生することができ、種々のタンパク質およびペプチド抗原ならびに腫瘍細胞抽出物をＤＣに負荷することができる（Nestleら（１９９８年）Nature Medicine  ４巻：３２８〜３３２頁）。また、ＤＣは、こうした腫瘍抗原を発現するように、遺伝子手段で同様に形質導入することができる。また、ＤＣは、免疫化の目的で腫瘍細胞に直接的に融合されている（Kuglerら（２０００年）Nature Medicine  ６巻：３３２〜３３６頁）。ワクチン接種の方法として、ＤＣ免疫化をＶＩＳＴＡ阻害と組み合わせて、より強力な抗腫瘍応答を効率的に活性化することができる。
【０１８８】
感染性疾患治療
また、本明細書に記載されている方法は、特定の毒素または病原体に曝された患者を治療するために使用することができる。したがって、本開示では、対象の感染性疾患を治療するための方法であって、対象に、本明細書に記載のような抗体、例えばアンタゴニストＶＩＳＴＡ抗体を、対象の感染性疾患が治療されるように投与することを含む方法が企図される。上記で考察されているような腫瘍に対する適用と同様に、抗体媒介性ＶＩＳＴＡ阻害は、単独で、またはワクチンと組み合わせてアジュバントとして使用して、病原体、毒素、および自己抗原に対する免疫応答を刺激することができる。この治療手法が特に有用であり得る病原体の例としては、有効なワクチンが現在、存在しない病原体、または従来のワクチンが完全に有効であるとは言い難い病原体が挙げられる。そうしたものとしては、これらに限定されないが、ＨＩＶ、肝炎（Ａ、Ｂ、およびＣ）、インフルエンザ、ヘルペス、ジアルジア（Ｇｉａｒｄｉａ）、マラリア、リーシュマニア（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ）、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）が挙げられる。ＶＩＳＴＡ阻害は、感染の経過にわたって変更された抗原を提示するＨＩＶなどの因子により確立された感染に対して有用であり得る。
【０１８９】
本明細書に記載されている方法により治療可能であり得る感染症を引き起こす病原性ウイルスの一部の例としては、以下のものが挙げられる：ＨＩＶ、肝炎（Ａ、Ｂ、またはＣ）、ヘルペスウイルス（例えば、ＶＺＶ、ＨＳＶ−１、ＨＡＶ−６、ＨＳＶ−ＩＩ、およびＣＭＶ、エプスタイン−バーウイルス）、アデノウイルス、インフルエンザウイルス、フラビウイルス、エコーウイルス、ライノウイルス、コクサッキーウイルス、コロナウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、おたふくかぜウイルス、ロタウイルス、麻疹ウイルス、風疹ウイルス、パルボウイルス、ワクシニアウイルス、ＨＴＬＶウイルス、デング熱ウイルス、パピローマウイルス、軟属腫ウイルス、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、ＪＣウイルス、およびアルボウイルス脳炎ウイルス。
【０１９０】
本明細書に記載されている方法により治療可能であり得る感染症を引き起こす病原性細菌の一部の例としては、クラミジア、リケッチア細菌、ミコバクテリア、ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）、連鎖球菌（ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ）、ニューモノコッカス（pneumonococci）、髄膜炎菌（ｍｅｎｉｎｇｏｃｏｃｃｉ）および淋菌（ｇｏｎｏｃｏｃｃｉ）、クレブシエラ属（ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ）、プロテウス属（ｐｒｏｔｅｕｓ）、セラチア属（ｓｅｒｒａｔｉａ）、シュードモナス属（ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、レジオネラ（ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ）、ジフテリア（ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａ）、サルモネラ属（ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、桿菌（ｂａｃｉｌｌｉ）、コレラ、破傷風、ボツリヌス（ｂｏｔｕｌｉｓｍ）、炭疽菌、ペスト、レプトスピラ症、およびライム病細菌が挙げられる。
【０１９１】
本明細書に記載されている方法により治療可能であり得る感染症を引き起こす病原性真菌の一部の例としては、以下のものが挙げられる：カンジダ属（Ｃａｎｄｉｄａ）（アルビカンス（ａｌｂｉｃａｎｓ）、クルセイ（ｋｒｕｓｅｉ）、グラブラタ（ｇｌａｂｒａｔａ）、トロピカリス（ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓ）など）、クリプトコッカス・ネオフォルマンス（ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）（フミガーツス（ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）、ニガー（ｎｉｇｅｒ）など）、ムコラーレス（Ｍｕｃｏｒａｌｅｓ）属（ムコール（ｍｕｃｏｒ）、アブシディア（ａｂｓｉｄｉａ）、リゾープス（ｒｈｉｚｏｐｕｓ））、スポロトリックス・シェンキイ（Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ  ｓｃｈｅｎｋｉｉ）、ブラストミセス・デルマティティディス（Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ）、パラコクシジオイデス・ブラジリエンシス（Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ  ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）、コクシジオイデス・イミチス（Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ  ｉｍｍｉｔｉｓ）、およびヒストプラズマ・カプスラーツム（Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ  ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ）。
【０１９２】
本明細書に記載されている方法により治療可能であり得る感染症を引き起こす病原性寄生動物の一部の例としては、以下のものが挙げられる：エントアメーバ・ヒストリティカ（Ｅｎｔａｍｏｅｂａ  ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ）、大腸バランチジウム（Ｂａｌａｎｔｉｄｉｕｍ  ｃｏｌｉ）、ネグレリア・フォーレリ（Ｎａｅｇｌｅｒｉａｆｏｗｌｅｒｉ）、アカントアメーバ種（Ａｃａｎｔｈａｍｏｅｂａ  ｓｐ．）、ジアルジア・ランビア（Giardia lambia）、クリプトスポリジウム種（ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ  ｓｐ）、ニューモシスチス・カリニ（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｒｉｎｉｉ）、プラスモディウム・ビバックス（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｖｉｖａｘ）、バベシア・ミクロチ（Ｂａｂｅｓｉａ  ｍｉｃｒｏｔｉ）、トリパノソーマ・ブルーセイ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｂｒｕｃｅｉ）、トリパノソーマ・クルージ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）、リーシュマニアドノバニ（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ  ｄｏｎｏｖａｎｉ）、トキソプラズマ・ゴンディ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｇｏｎｄｉｉ）、およびニッポストロンジラス・ブラジリエンシス（Ｎｉｐｐｏｓｔｒｏｎｇｙｌｕｓ  ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）。
【０１９３】
上記の方法のすべてで、ＶＩＳＴＡ阻害は、他の形態の免疫療法、例えば、サイトカイン治療（例えば、インターフェロン、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＩＬ−２）または腫瘍抗原の提示の増強を提供することができる二重特異性抗体療法などの本明細書に記載されているものと組み合わせることができる（例えば、Holliger（１９９３年）Proc. Natl. Acad. Sci. USA  ９０巻：６４４４〜６４４８頁；Poljak（１９９４年）Structure  ２巻：１１２１〜１１２３頁を参照）。
【０１９４】
投与経路および担体
種々の実施形態では、抗体は、これらに限定されないが、経口、動脈内、非経口、鼻腔内、筋肉内、心内、脳室内、気管内、頬側、直腸、腹腔内、皮内、局所、経皮、および髄腔内を含む、種々の経路により、またはそうでなければ移植もしくは吸入により、インビボで投与することができる。対象組成物は、これらに限定されないが、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、軟膏、液剤、坐剤、浣腸剤、注射剤、吸入剤、およびエアゾール剤を含む、固形物、半固形物、液体、またはガス形態の調製物に製剤化することができる。抗体をコードする核酸分子を、文献に記載されているように（例えば、Tangら、Nature  ３５６巻：１５２〜１５４頁（１９９２年）を参照）、金微小粒子にコーティングし、粒子衝撃デバイスまたは「遺伝子銃」により皮内送達してもよい。適切な製剤および投与経路は、目的の応用に応じて選択することができる。
【０１９５】
種々の実施形態では、抗体を含む組成物は、幅広く様々な薬学的に許容される担体を有する製剤で提供される（例えば、Gennaro, Remington：The Science and Practice of Pharmacy with Facts and Comparisons: Drugfacts Plus、第２０版（２００３年）；Anselら、Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Sysmtems、第７版、Lippencott WilliamsおよびWilkins（２００４年）；Kibbeら、Handbook of Pharmaceutical Excipients、第３版、Pharmaceutical Press（２０００年）を参照）。ビヒクル、アジュバント、および希釈剤を含む、種々の薬学的に許容される担体が使用可能である。さらに、ｐＨ調整および緩衝剤、等張性調整剤、安定剤、および湿潤剤などの種々の薬学的に許容される補助物質も使用可能である。非限定的で例示的な担体としては、生理食塩水、緩衝生理食塩水、デキストロース、水、グリセロール、エタノール、およびそれらの組合せが挙げられる。
【０１９６】
種々の実施形態では、抗体を含む組成物は、それらを、植物油もしくは他の油、合成脂肪酸グリセリド、高級脂肪族酸のエステル、またはプロピレングリコールなどの水性または非水性溶媒に、必要に応じて可溶化剤、等張剤、懸濁化剤、乳化剤、安定剤、および防腐剤などの従来の添加剤と共に溶解、懸濁、または乳化させることにより、皮下投与を含む注射用に製剤化することができる。種々の実施形態では、組成物は、例えば、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、および窒素などの加圧されている許容可能な噴射剤を使用して製剤化することができる。また、種々の実施形態では、組成物は、生分解性または非生分解性ポリマーなどを用いて、持続放出マイクロカプセルへと製剤化することができる。非限定的で例示的な生分解性製剤は、ポリ乳酸−グリコール酸ポリマーを含む。非限定的で例示的な非生分解性製剤は、ポリグリセリン脂肪酸エステルを含む。そのような製剤を作製するためのある特定の方法は、例えば、欧州特許第１１２５５８４Ａ１に記載されている。
【０１９７】
各々が１つまたは複数の用量の抗体または抗体の組合せを含む、１つまたは複数の容器を含む医薬品パックおよびキットも提供される。一部の実施形態では、単位用量が提供され、単位用量は、１つまたは複数の追加の作用剤を有するまたは有していない、抗体または抗体の組合せを含む所定量の組成物を含む。一部の実施形態では、そのような単位用量は、注射用の単回使用充填済み注射器で供給される。種々の実施形態では、単位用量に含まれる組成物は、生理食塩水、スクロースなど；リン酸塩などのバッファーなどを含んでいてもよく、および／または安定で有効なＰｈ範囲内に製剤化されていてもよい。あるいは、一部の実施形態では、組成物は、適切な液体、例えば滅菌水を添加すると再構成することができる凍結乾燥粉末として提供することができる。一部の実施形態では、組成物は、これらに限定されないが、スクロースおよびアルギニンを含む、タンパク質凝集を阻害する１つまたは複数の物質を含む。一部の実施形態では、本発明の組成物は、ヘパリンおよび／またはプロテオグリカンを含む。
【０１９８】
薬学的組成物は、特定の適応症の治療または予防に有効な量で投与される。治療的有効量は、典型的には、治療されている対象の体重、彼または彼女の身体状態または健康状態、治療しようとする状態の程度、または治療されている対象の年齢に依存する。一般に、抗体は、１用量当たり、約１０μｇ／ｋｇ体重〜約１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。一部の実施形態では、抗体は、１用量当たり、約５０μｇ／ｋｇ体重〜約５ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。一部の実施形態では、抗体は、１用量当たり、約１００μｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。一部の実施形態では、抗体は、１用量当たり、約１００μｇ／ｋｇ体重〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。一部の実施形態では、抗体は、１用量当たり、約０．５ｍｇ／ｋｇ体重〜約２０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲の量で投与することができる。
【０１９９】
抗体組成物は、必要に応じて対象に投与することができる。投与頻度の決定は、主治医などの当業者であれば、治療されている状態、治療されている対象の年齢、治療されている状態の重症度、および治療されている対象の一般健康状態などの考慮に基づき行うことができる。一部の実施形態では、有効用量の抗体は、１回または複数回、対象に投与される。種々の実施形態では、有効用量の抗体は、月１回、例えば、２か月毎または３か月毎などの月１回未満で対象に投与される。他の実施形態では、有効用量の抗体は、例えば、３週間毎、２週間毎、または毎週など、月１回よりも頻繁に投与される。一部の実施形態では、有効用量の抗体は、１、２、３、４、または５週に１回投与される。一部の実施形態では、有効用量の抗体は、週２回または週３回投与される。有効用量の抗体は、少なくとも１回対象に投与される。一部の実施形態では、有効用量の抗体は、少なくとも１か月間、少なくとも６か月間、または少なくとも１年間を含む期間にわたって、複数回投与してもよい。
【０２００】
ある特定の実施形態では、抗ＶＩＳＴＡ抗体および本明細書で考察されている第２の作用剤の組合せは、薬学的に許容される担体中の単一組成物として同時に、または薬学的に許容される担体中に抗ＶＩＳＴＡ抗体および第２の作用剤を有する別々の組成物として同時に投与することができる。一実施形態では、抗ＶＩＳＴＡ抗体および第２の作用剤の組合せは、順次的に投与することができる。２つの作用剤の投与は、例えば、３０分間、６０分間、９０分間、１２０分間、３時間、６時間、１２時間、２４時間、３６時間、４８時間、３日間、５日間、７日間、または１週間もしくは複数週間だけ離間させた時間で開始してもよく、または第２の作用剤の投与は、第１の作用剤が投与された、例えば、３０分間、６０分間、９０分間、１２０分間、３時間、６時間、１２時間、２４時間、３６時間、４８時間、３日間、５日間、７日間、または１週間もしくは複数週間後に開始してもよい。
【０２０１】
低ｐＨ結合性ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ  Ａｂを特定するための方法
また、本明細書では、酸性（または低ｐＨ）条件でＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合するＡｂを特定するため方法が提供される。ある特定の実施形態では、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合するＡｂを特定するための方法は、試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質と接触させること、および試験Ａｂが１０−７Ｍ、１０−８Ｍ、１０−９Ｍ、またはそれよりも小さなＫＤでＶＩＳＴＡタンパク質のＥＣＤに結合する場合、それを選択することを含む。一部の実施形態では、方法は、ｐＨ６．５で実施されるが、他の実施形態では、ｐＨ６．０で、またはｐＨ５．５で、またはｐＨ５．０で実施される。一部の実施形態では、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質は、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質であるか、あるいはｈＶＩＳＴＡ  ＩｇＶドメインを含むか、あるいは配列番号２のアミノ酸２０〜９５または配列番号２のアミノ酸２０〜７０、３５〜９５、もしくは３５〜７０を含むポリペプチドである。また、一部の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸９５〜１０５を含む。一部の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸３５〜１２７または３７〜１２５を含む。
【０２０２】
一部の実施形態では、方法は、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４などの、中性、生理的、またはアルカリ性ｐＨで、試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂの結合を試験することをさらに含む。一部の実施形態では、方法は、抗体が、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−７Ｍ、１０−８Ｍ、１０−９Ｍ、またはそれよりも小さなＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合する場合だけでなく、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４でもポリペプチドに特異的に結合する場合、それを選択することをさらに含む。一部の実施形態では、試験Ａｂが、酸性状態にて、例えばｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、中性および／またはアルカリ性ｐＨでも同様の親和性で、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する（つまり、それらは「汎結合体」である）場合、それらを選択する。例えば、一部のそのようなＡｂは、ｐＨ６．５およびｐＨ７．０の両方またはｐＨ７．４にて（例えば、２５℃または３７℃の一定温度にて）、１０−７Ｍ、１０−８Ｍ、１０−９Ｍ、またはそれよりも小さなＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができ、その場合、ｐＨ６．５におけるＫＤは、ｐＨ７．０におけるＫＤの１．５倍以内である。
【０２０３】
ある特定のＡｂが、酸性条件にて、例えばｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、中性またはアルカリ性ｐＨにおける場合よりも高い親和性でＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する場合（「ｐＨ感受性結合体」または「ｐＨ感受性Ａｂ」）、それらを選択してもよい。例えば、一部の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ６．５では１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４では１０−８Ｍまたはそれよりも大きなＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。一部のそのような実施形態では、Ａｂは、ｐＨ６．５では１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４ではｐＨ６．５でのＫＤより１．５倍よりも大きなＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。ある特定の実施形態では、ｐＨ感受性Ａｂが、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４における場合の１．５倍、２倍、５分の１、１０分の１、２０分の１、５０分の１、１００分の１、３００分の１、５００分の１、１０００分の１、または５０００分の１以下のＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する（例えば２５℃または３７℃の一定温度で）場合、それを選択する。例えば、一部の場合では、Ａｂが、ｐＨ６．０では、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４またはそれよりも高いｐＨと比べて、１．５倍、２分の１、５分の１、１０分の１、２０分の１、５０分の１、１００分の１、３００分の１、５００分の１、１０００分の１、または５０００分の１のＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する（例えば２５℃または３７℃の一定温度で）場合、それを選択する。
【０２０４】
ある特定の実施形態では、Ａｂが、酸性条件では、中性、生理的、またはアルカリ性条件でのｋｏｆｆと比べてより低いｋｏｆｆでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する場合、それを選択する。ある特定の実施形態では、Ａｂが、例えば２５℃または３７℃で測定して、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４でのＫｏｆｆの１．５分の１、２分の１、５分の１、１０分の１、２０分の１、５０分の１、または１００分の１以下のＫｏｆｆで、酸性条件にてＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合する場合、それを選択する。例えば、一部の実施形態では、Ａｂが、例えば２５℃または３７℃で測定して、ｐＨ６．０では、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４と比べて、１．５分の１、２分の１、５分の１、１０分の１、２０分の１、５０分の１、または１００分の１以下のＫｏｆｆ速度で、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する場合、それを選択する。
【０２０５】
ある特定の実施形態では、Ａｂが、酸性条件では、中性またはアルカリ性条件と比べてより高いｋｏｎでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する場合、それを選択する。ある特定の実施形態では、Ａｂが、例えば２５℃または３７℃で測定して、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４でのＫｏｎよりも少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、または１００倍高いＫｏｎで、酸性条件にてＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合する場合、それを選択する。例えば、一部の実施形態では、Ａｂが、例えば２５℃または３７℃で測定して、ｐＨ６．０では、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４における場合よりも少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、または１００倍高いＫｏｎで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合する場合、それを選択する。
【０２０６】
ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ結合性ＡｂのｐＨ感受性を改変するための方法
ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合するが、ｐＨ６．５もしくはそれよりも低いｐＨでは結合しないか、またはｐＨ６．５もしくはそれよりも低いｐＨでは高親和性で結合しないＡｂを操作して、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨでのその結合親和性を増加させることができる。例えば、Ａｂのパラトープを、例えば、１つまたは複数のアミノ酸残基を置換することにより突然変異させることができる。例えば、一部の実施形態では、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤとの接触残基である、Ａｂの重鎖または軽鎖の１〜８つ、例えば、１〜６つ、１〜４つ、１〜３つ、１〜２つ、または１つのアミノ酸残基（例えば、ＣＤＲの１つまたは複数の残基）を、異なるアミノ酸残基と置換してもよい。その後、突然変異させたＡｂを、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨでのＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に対する結合について試験し、親抗体よりも高い親和性で結合するＡｂ種を選択してもよい。所望の場合、上記の工程を繰り返して、２ラウンドまたはそれよりも多くのラウンドの突然変異誘発および選択を抗体に対して実施し、酸性条件で最も高い親和性結合体を選択してもよい。一部の実施形態では、そのような選択により、得られた抗体の抗腫瘍効能を、その親よりも向上させることができる。
【０２０７】
また、上記の選択方法は、抗体に特異的に結合するＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質の以前に記載されている一般的な選択後に行うように設計してもよい。すなわち、ある特定の実施形態では、向上されたＡｂが、ｐＨ６．５にて１０−８Ｍまたはそれよりも低いＫＤでＭＶＩＳＴＡタンパク質のＥＣＤに結合する場合、それを選択する。一部の実施形態では、選択は、ｐＨ６．５ではなく、ｐＨ６．０、ｐＨ５．５、またはｐＨ５．０で実施される。一部の実施形態では、選択法に使用されるＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質は、完全なｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質であるか、あるいはｈＶＩＳＴＡ  ＩｇＶドメインを含むか、あるいは配列番号２のアミノ酸２０〜９５または配列番号２のアミノ酸２０〜７０、３５〜９５、もしくは３５〜７０を含むポリペプチドである。また、一部の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号２のアミノ酸９５〜１０５を含む。一部の実施形態では、配列番号２のアミノ酸残基３５〜１２７を含むポリペプチドが使用される。
【０２０８】
一部の実施形態では、酸性ｐＨでのＶＩＳＴＡ  ＥＣＤに対するＶＩＳＴＡ抗体の結合を向上させるための方法は、１つまたは複数のＶＨ  ＣＤＲ、例えば、ＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のグルタミン酸、アスパラギン酸、およびヒスチジン残基の数を増加させることを含む。
【０２０９】
一部の実施形態では、方法は、選択されたＡｂの結合を、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４などの、中性、アルカリ性、または生理的ｐＨで試験することをさらに含む。一部の実施形態では、方法は、抗体が、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合する場合だけでなく、ｐＨ７．０または７．４でもポリペプチドに特異的に結合する場合、それを選択することをさらに含む。一部の実施形態では、Ａｂが、酸性状態にて、例えばｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合し、中性および／またはアルカリ性または生理的ｐＨでも同様の親和性で、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する（つまり、それらが「汎結合体」である）場合、それらを選択する。例えば、一部のそのようなＡｂは、ｐＨ６．５およびｐＨ７．０の両方にて（例えば２５℃または３７℃の一定温度にて）１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができ、その場合、ｐＨ６．５におけるＫＤは、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４におけるＫＤの１．５倍以内である。
【０２１０】
ある特定のＡｂが、酸性条件にて、例えばｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、中性、生理的、またはアルカリ性ｐＨよりも高い親和性でＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する場合（「ｐＨ感受性結合体」または「ｐＨ感受性Ａｂ」）、それらを選択してもよい。例えば、一部の実施形態では、Ａｂは、ｐＨ６．５では１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ｐＨ７．０では１０−８Ｍまたはそれよりも大きなＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。一部のそのような実施形態では、Ａｂは、ｐＨ６．５では１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、ｐＨ７．０ではｐＨ６．５のＫＤより１．５倍よりも高いＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合することができる。ある特定の実施形態では、ｐＨ感受性Ａｂが、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４における場合の１．５分の１、２分の１、５分の１、１０分の１、２０分の１、５０分の１、１００分の１、３００分の１、５００分の１、１０００分の１、または５０００分の１以下のＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する（例えば２５℃または３７℃の一定温度で）場合、それを選択する。例えば、一部の場合では、Ａｂが、ｐＨ６．０では、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４またはそれよりも高いｐＨと比べて、１．５分の１、２分の１、５分の１、１０分の１、２０分の１、５０分の１、１００分の１、３００分の１、５００分の１、１０００分の１、または５０００分の１のＫＤでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する（例えば２５℃または３７℃の一定温度で）場合、それを選択する。
【０２１１】
ある特定の実施形態では、方法は、２つのｐＨ値にてｋｏｆｆを決定することをさらに含む。一部のそのような実施形態では、Ａｂが、酸性条件では、中性、生理的、またはアルカリ性条件でのｋｏｆｆと比べてより低いｋｏｆｆでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に特異的に結合する場合、それを選択する。ある特定の実施形態では、Ａｂが、例えば２５℃または３７℃で測定して、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４でのＫｏｆｆの１．５分の１、２分の１、５分の１、１０分の１、２０分の１、５０分の１、または１００分の１以下のＫｏｆｆで、酸性条件にてＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合する場合、それを選択する。例えば、一部の実施形態では、Ａｂが、例えば２５℃または３７℃で測定して、ｐＨ６．０では、ｐＨ７．０と比べて、１．５分の１、２分の１、５分の１、１０分の１、２０分の１、５０分の１、または１００分の１以下のＫｏｆｆ速度で、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合する場合、それを選択する。
【０２１２】
ある特定の実施形態では、方法は、２つのｐＨ値にてｋｏｎを決定することをさらに含む。一部のそのような実施形態では、Ａｂが、酸性条件では、中性、生理的、またはアルカリ性条件と比べてより高いｋｏｎでＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合する場合、それを選択する。ある特定の実施形態では、Ａｂが、例えば２５℃または３７℃で測定して、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４でのＫｏｎよりも少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、または１００倍高いＫｏｎで、酸性条件にてＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合する場合、それを選択する。例えば、一部の実施形態では、Ａｂが、例えば２５℃または３７℃で測定して、ｐＨ６．０では、ｐＨ７．０またはｐＨ７．４における場合よりも少なくとも２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、または１００倍高いＫｏｎで、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に結合する場合、それを選択する。
【０２１３】
中性または生理的ｐＨよりも酸性ｐＨでｈｕＶＩＳＴＡに優先的に結合する抗体は、ＶＩＳＴＡ抗体またはＦａｂまたはｓｃＦｖのライブラリーを、酸性ｐＨ、例えばｐＨ６．０または６．５での結合についてポジティブスクリーニングし、ライブラリーを、中性ｐＨ、例えばｐＨ７．０または生理的ｐＨ、例えばｐＨ７．４での結合欠如についてネガティブスクリーニングすることにより、特定することができる。ライブラリーは、酸性ｐＨで正に荷電され、ＶＩＳＴＡに結合する可能性がより高い結合ドメインを選択するなどために、グルタミン酸、アスパラギン酸、およびヒスチジン残基が多く含まれていてもよい。スクリーニングは、酸性ｐＨでのポジティブ選択および中性または生理的ｐＨでのネガティブ選択を含んでいてもよい。ポジティブおよびネガティブ選択を交互に行ってもよい。
【０２１４】
あるいは、ＶＩＳＴＡに中性ｐＨで結合しおよび／または酸性ｐＨで結合を欠如する抗体を、中性ｐＨで結合を欠如し、酸性ｐＨで結合するように操作してもよい。
【０２１５】
具体的な実施形態
本開示の追加の実施形態としては、以下のものが挙げられる：
１．  Ｔ細胞活性化のヒトＶドメイン免疫グロブリン含有サプレッサー（ｈＶＩＳＴＡ）細胞外ドメイン（ＥＣＤ）に特異的に結合する単離された抗体（Ａｂ）であって、
ａ．  Ａｂは、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−７Ｍまたはそれよりも小さな親和性定数（ＫＤ）でｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するか、
ｂ．  ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−３ｓｅｃ−１またはそれよりも小さな解離速度定数（ｋｏｆｆ）でｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するか、または
ｃ．  ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび１０−３ｓｅｃ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、単離された抗体。
２．  Ａｂは、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、実施形態１に記載の単離されたＡｂ。
３．  Ａｂは、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−９Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、実施形態２に記載の単離されたＡｂ。
４．  Ａｂは、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−４ｓｅｃ−１またはそれよりも小さなＫｏｆｆでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、実施形態１〜３のいずれか一項に記載の単離されたＡｂ。
５．  Ａｂは、ｐＨ７．０またはそれよりも高いｐＨにて、
ａ．  １０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで、
ｂ．  １０−３ｓｅｃ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆで、または
ｃ．  １０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤおよび１０−３ｓｅｃ−１またはそれよりも小さなｋｏｆｆで、
ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、実施形態１〜４のいずれか一項に記載の単離されたＡｂ。
６．  Ａｂは、ｐＨ７．０またはそれよりも高いｐＨにて、１０−８Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、実施形態５に記載の単離されたＡｂ。
７．  Ａｂは、ｐＨ７．０またはそれよりも高いｐＨにて、１０−９Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、実施形態６に記載の単離されたＡｂ。
８．  Ａｂは、ｐＨ７．０またはそれよりも高いｐＨにて、１０−４ｓｅｃ−１またはそれよりも小さなＫｏｆｆでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、実施形態５〜７のいずれか一項に記載の単離されたＡｂ。
９．  Ａｂは、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０における場合と同様の親和性でｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、実施形態５〜８のいずれか一項に記載の単離されたＡｂ。
１０．  Ａｂは、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０における場合よりも高い親和性でｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、実施形態９に記載の単離されたＡｂ。
１１．  Ａｂは、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０でのＫＤの１．５分の１以下のＫＤでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、実施形態１０に記載の単離されたＡｂ。
１２．  Ａｂは、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０でのＫＤの２分の１以下のＫＤでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、実施形態１１に記載の単離されたＡｂ。
１３．  Ａｂは、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０でのＫＤの５分の１以下のＫＤでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、実施形態１１に記載の単離されたＡｂ。
１４．  Ａｂは、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０でのｋｏｆｆよりも低いｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、実施形態１０〜１３のいずれか一項に記載の単離されたＡｂ。
１５．  Ａｂは、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０でのｋｏｆｆの１．５分の１以下のｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、実施形態１４に記載の単離されたＡｂ。
１６．  Ａｂは、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０でのｋｏｆｆの２分の１以下のｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、実施形態１５に記載の単離されたＡｂ。
１７．  Ａｂは、ｐＨ６．５では、ｐＨ７．０でのｋｏｆｆの５分の１以下のｋｏｆｆでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、実施形態１６に記載の単離されたＡｂ。
１８．  Ａｂは、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤの少なくとも１つのヒスチジン残基がプロトン化される条件下でｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに特異的に結合する、実施形態１〜１７のいずれか一項に記載の単離されたＡｂ。
１９．  Ａｂは、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤのＩｇＶドメインに結合する、実施形態１８に記載の単離されたＡｂ。
２０．  Ａｂは、配列番号２のアミノ酸２０および９５内に位置する領域に結合する、実施形態１９に記載の単離されたＡｂ。
２１．  Ａｂは、配列番号２のアミノ酸２０および７０内に位置する領域に結合する、実施形態２０に記載の単離されたＡｂ。
２２．  Ａｂは、配列番号２のアミノ酸３５および７０内に位置する領域に結合する、実施形態２１に記載の単離されたＡｂ。
２３．  Ａｂは、ｈＶＩＳＴＡのＥＣＤの別の領域にさらに結合する、実施形態２０〜２２のいずれか一項に記載の単離されたＡｂ。
２４．  別の領域は、配列番号２のアミノ酸９５および１０５内に位置する、実施形態２３に記載の単離されたＡｂ。
２５．  結合は、水素−重水素交換質量分析（ＨＤＸ−ＭＳ）により決定される、実施形態１８〜２４のいずれか一項に記載の単離されたＡｂ。
２６．  Ａｂは、そうでなければｈＶＩＳＴＡが結合することになる細胞に対するｈＶＩＳＴＡの結合を阻害する、実施形態１〜２５のいずれか一項に記載の単離されたＡｂ。
２７．  Ａｂは、腫瘍モデルで免疫応答を始動または増強する、実施形態１〜２６のいずれか一項に記載の単離されたＡｂ。
２８．  Ａｂは、腫瘍モデルでＴ細胞活性を始動または増強する、実施形態２７に記載の単離されたＡｂ。
２９．  Ａｂは、腫瘍モデルで腫瘍増殖を阻害する、実施形態１〜２８のいずれか一項に記載の単離されたＡｂ。
３０．  Ａｂは、Ｔ細胞に対するｈＶＩＳＴＡの結合を阻害する、実施形態１〜２９のいずれか一項に記載の単離されたＡｂ。
３１．  Ａｂは、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、ｐＨ７．０またはそれよりも高いｐＨよりも、Ｔ細胞に対するｈＶＩＳＴＡの結合をより強力に阻害し、抗体は、ｐＨ７．０よりもｐＨ６．５で、Ｔ細胞に対するｈＶＩＳＴＡの結合をより強力に阻害する、実施形態３０に記載のＡｂ。
３２．  実施形態１〜３１のいずれか一項に記載の単離されたＡｂおよび薬学的に許容される担体を含む組成物。
３３．  がんを有する対象を治療するための方法であって、実施形態３２に記載の組成物を対象に投与することを含む方法。
３４．  ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するＡｂを特定するための方法であって、試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ、あるいはｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤのＩｇＶドメインを含むかまたは配列番号２のアミノ酸２０〜９５、２０〜７０、もしくは３５〜７０を含むその断片を含むポリペプチドと、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨで接触させること、およびポリペプチドに１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤで結合する試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを選択することを含む方法。
３５．ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて１０−３ｓｅｃ−１またはそれよりも小さなＫｏｆｆでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するＡｂを特定するための方法であって、試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ、あるいはｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤのＩｇＶドメインを含むかまたは配列番号２のアミノ酸２０〜９５、２０〜７０、もしくは３５〜７０を含むその断片を含むポリペプチドと、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨで接触させること、およびポリペプチドに１０−３ｓｅｃ−１またはそれよりも小さなＫｏｆｆで結合する試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを選択することを含む方法。
３６．ｐＨ６．５にて、ｐＨ７．０と同様の親和性でｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに特異的に結合するＡｂを特定するための方法であって、
ａ．  試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ、あるいはｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤのＩｇＶドメインを含むかまたは配列番号２のアミノ酸２０〜９５、２０〜７０、もしくは３５〜７０を含むその断片を含むポリペプチドと、ｐＨ６．５で接触させること、
ｂ．  試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを、（ａ）のポリペプチドとｐＨ７．０で接触させること、および
ｃ．  ｐＨ６．５およびｐＨ７．０にて、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでポリペプチドに結合する場合、試験Ａｂを選択すること
を含む方法。
３７．ｐＨ６．５にて、ｐＨ７．０における場合より高い親和性でｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するＡｂを特定するための方法であって、
ａ．  試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ、あるいはｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤのＩｇＶドメインを含むかまたは配列番号２のアミノ酸２０〜９５、２０〜７０、もしくは３５〜７０を含むその断片を含むポリペプチドと、ｐＨ６．５で接触させること、
ｂ．  試験Ａｂまたは複数の試験Ａｂを、（ａ）のポリペプチドとｐＨ７．０で接触させること、および
ｃ．  ｐＨ６．５にて、ｐＨ７．０における場合の２分の１以下のＫＤで、ポリペプチドに結合する場合、試験Ａｂを選択すること
を含む方法。
３８．がんの処置に使用するための、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに特異的に結合するＡｂを特定するための方法であって、
ａ．  ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに特異的に結合するＡｂを、実施形態３２〜３５に記載の方法などにより特定すること、および
ｂ．  ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨで、腫瘍モデルの免疫応答を始動もしくは増強するかまたは腫瘍増殖を阻害する（ａ）のＡｂを選択すること
を含む方法。
３９．工程（ｂ）は、Ｔ細胞活性を測定することを含む、実施形態３８に記載の方法。
４０．Ａｂの抗腫瘍効果を測定することをさらに含む、実施形態３８または３９に記載の方法。
４１．  ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するＡｂの抗腫瘍効能を向上させるための方法であって、
ａ．  ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、所望の値未満の親和性でｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するＡｂを準備する工程、
ｂ．  Ａｂの重鎖または軽鎖の１〜５つのアミノ酸残基を、異なるアミノ酸残基で置換し、１〜５つのアミノ酸残基は、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤとの接触残基である工程、
ｃ．  （ｂ）で得られたＡｂが、（ａ）のＡｂと比べて、ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに対してより高い親和性を有するか否かを決定する工程、および
ｄ．ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するＡｂを得るのに十分なラウンドの回数だけ、工程（ａ）〜（ｃ）を繰り返す工程
を含む方法。
４２．ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するＡｂの抗腫瘍効能を向上させるための方法であって、
ａ．  ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、所望の値未満の親和性でｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合するＡｂを準備すること、
ｂ．  （ａ）のＡｂの変異体のライブラリーであって、各変異体は、Ａｂの重鎖または軽鎖における１〜５つのアミノ酸残基の、異なるアミノ酸残基による置換を含み、１〜５つのアミノ酸残基は、ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤとの接触残基であるライブラリーを調製すること、
ｃ．  ｐＨ６．５またはそれよりも低いｐＨにて、１０−７Ｍまたはそれよりも小さなＫＤでｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに結合する、（ｂ）の変異体のライブラリーのＡｂを選択すること、および
ｄ．  （ｃ）のＡｂの抗腫瘍効能を腫瘍モデルにて試験すること
を含む方法。
４３．ヒトＶＩＳＴＡ  ＥＣＤに結合する抗体の薬物動態を向上させるための方法であって、例えばｐＨ６．５と等しいかまたはそれよりも低い酸性条件でヒトＶＩＳＴＡに結合する抗体の能力を増強することを含む方法。
４４．ヒトＶＩＳＴＡに結合し、より長い半減期（良好な薬物動態学的特質）を有する抗体を選択するための方法であって、例えばｐＨ６．５と等しいかまたはそれよりも低い酸性条件でヒトＶＩＳＴＡに結合する抗体を選択することを含む方法。
【実施例】
【０２１６】
下記で考察されている実施例は、本発明の純粋な例示であることが意図されており、いかなる点でも本発明を限定するとみなされるべきではない。実施例は、下記の実験がすべて実施されることを示すためのものではなく、そうした実験のみが実施されたことを示すためのものでもない。使用されている数値（例えば、量、温度など）に関しては、正確性を担保するための努力がなされているものの、ある程度の実験誤差および偏差が考慮されるべきである。別様の指示がない限り、部は重量部であり、分子量は平均分子量であり、温度は摂氏度であり、圧力は大気圧であるかまたは大気圧付近である。
【０２１７】
実施例１：ＶＩＳＴＡの細胞外ドメインは、極めてヒスチジンリッチである。
この実施例は、ＶＩＳＴＡの細胞外ドメインがヒスチジン残基において極めてヒスチジンリッチであり、そうしたヒスチジン残基が、進化的に保存されており、ＶＩＳＴＡを含む受容体−リガンド相互作用に寄与することができることを示す。
【０２１８】
免疫グロブリンドメイン含有タンパク質の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）のアミノ酸配列を、ｕｎｉｐｒｏｔおよびｓｗｉｓｓ−ｐｒｏｔデータベースから抽出し、ヒスチジン含有量を分析した。図１Ａには、この分析の結果がグラフとして示されている。各タンパク質について、ヒスチジン残基の頻度が、全細胞外ドメインアミノ酸残基のパーセンテージとしてＹ軸にプロットされており、細胞外ドメインアミノ酸残基の総数が、Ｘ軸にプロットされている。各データポイントの直径は、各タンパク質の細胞外ドメインのヒスチジン残基の総数に対応する。ＶＩＳＴＡ（表記されている）は、極めて高頻度のヒスチジン残基をその細胞外ドメインに含む。
【０２１９】
その後、ＶＩＳＴＡのヒスチジン残基の進化的保存を評価した。図１Ｂには、シグナルペプチド（「Ｓｉｇ」）、膜貫通ドメイン（「ＴＭＤ」）、および細胞内ドメインを除き、ヒト、カニクイザル、およびマウスＶＩＳＴＡのアミノ酸参照配列をアラインしたことが示されている。３つの種すべてにわたって保存されているヒスチジン残基は太字および下線で示されている。ヒトおよびｃｙｎｏＶＩＳＴＡにわたって保存されているヒスチジン残基は太字で示されているが、下線は引かれていない。ＶＩＳＴＡの細胞外ドメインヒスチジン残基の多くは、進化的に保存されており、ＶＩＳＴＡの高ヒスチジン含有量には重要な生物学的役割があることが示唆される。
【０２２０】
ｈＶＩＳＴＡ  ＩｇＶドメインの三次元モデルを、ＰＤＢデータベースで入手可能な解かれた構造に対する配列相同性分析に基づいて作成した。図１Ｃに示されているモデルは、ＶＩＳＴＡのＥＣＤにある多数のヒスチジンが、分子の表面に露出しており、それらが、リガンド結合ならびに抗体認識に役割を果たしている可能性があることを示す。ヒスチジン残基は、球棒型で示されている。
【０２２１】
実施例２：ヒスチジンプロトン化は、腫瘍および他の酸性微小環境でのＶＩＳＴＡ受容体−リガンドエンゲージメントおよび免疫抑制活性を調節することができる。
この実施例には、生理的に意義のある酸性ｐＨに応答したヒスチジンプロトン化、ならびにＶＩＳＴＡ細胞外ドメインヒスチジンが、生理的ｐＨではなく酸性ｐＨにて、対抗受容体またはリガンド選択性を付与するモデルが記載されている。
【０２２２】
図２Ａは、ヒスチジン残基のピロールアンモニウム基（ＮＨ）のプロトン化の欠如と存在とが平衡状態にあることを示す。溶液中でのヒスチジンのｐＫａは、６．５である。これは、ｐＨ６．５およびそれよりも低いｐＨでは、それよりも高いｐＨにおける場合よりも、ヒスチジン残基がプロトン化されている可能性がより高く、したがって正に荷電されている可能性がより高いことを示す。プロトン化の結果としてのＶＩＳＴＡ  ＥＣＤの表面での正電荷の増加は、受容体またはリガンド結合ならびにＶＩＳＴＡ構造および／または機能に影響を及ぼす場合がある。したがって、ｐＨの変化も、抗体結合エピトープを修飾する場合があり、および／または抗体親和性の変化をもたらす場合がある。
【０２２３】
図２Ｂは、ＶＩＳＴＡが、酸性ｐＨにて、ＰＳＧＬ−１または他の対抗受容体およびリガンド（「ＶＩＳＴＡ−Ｒ」）に選択的にエンゲージするモデルを示す。血液中などの生理的ｐＨでは、ＶＩＳＴＡのＥＣＤにあるヒスチジン残基は、プロトン化されていないと予想される。その結果、ＰＳＧＬ−１または他の対抗受容体およびリガンドに対するＶＩＳＴＡ結合は、生理的ｐＨでは無視できる程度（neglible）である。対照的に、腫瘍微小環境または炎症部位などの、酸性細胞外ｐＨを有する傾向がある位置では、酸性ｐＨは、ＶＩＳＴＡ  ＥＣＤヒスチジンプロトン化を部分的にまたは完全に駆動する場合があり、したがってＰＳＧＬ−１または他の対抗受容体およびリガンドとのＶＩＳＴＡエンゲージメントを可能にする。したがって、酸性ｐＨ範囲にてＶＩＳＴＡ−ＥＣＤタンパク質に強力に結合する抗体は、腫瘍中でのＶＩＳＴＡ活性の阻害により効果的であり得る。
【０２２４】
実施例３：ＶＩＳＴＡは、腫瘍の骨髄単球性細胞により発現される
この実施例は、ＶＩＳＴＡが、マクロファージ、樹状細胞、および顆粒球を含む、腫瘍中の骨髄単球性細胞により頻繁に発現されることを示す。
【０２２５】
外科的に切除された非小細胞肺癌（non-small cell lung carcincoma）、腎明細胞癌、メラノーマ、結腸直腸癌、および他の腫瘍試料を、氷冷ＰＢＳで洗浄し、およそ１５ｍｍ３サイズの小片に切断し、２％熱不活化ＦＢＳおよび２ｍＭ  ＥＤＴＡ（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  １５５７５０２０）で補完された氷冷ＲＰＭＩ−１６４０培地（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ番号１１８７５０９３）に懸濁した。各試料を、大型クリアランスガラスダンス（テンブロック型組織粉砕器）に移し、組織小片が視覚的にばらばらになるまで粉砕した。懸濁物を７０μＭナイロンメッシュで濾過し、遠心分離した。上清を廃棄し、細胞ペレットを、０．１％ウシ血清アルブミンおよび２５０ｍｇ／ｍＬ滅菌濾過ＤＮａｓｅ１（グレードＩＩ、ウシ膵臓由来、Ｒｏｃｈｅカタログ番号１０１０４１５９００１）で補完された室温ＰＢＳに、室温で３分間再懸濁した。その後、細胞を、氷冷補完ＲＰＭＩで洗浄し、氷冷ＰＢＳに再懸濁した。細胞生存能力色素（cell viability dye）を添加し、細胞を暗所氷上でインキュベートした。２０分後、非特異的抗体染色を、４％正常ラット血清、４％正常マウス血清、ＡＢ血漿由来の２０％ヒト血清、および１：１２５希釈ヒトＴｒｕＳｔａｉｎ  ＦｃＸ（商標）（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄカタログ番号４２２３０２）を添加することによりブロックした。ブリリアント染色バッファー（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓカタログ番号５６２７９４）に懸濁したＨＬＡ−ＤＲ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓカタログ番号５６４０４０）、ＣＤ８（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ番号４６−００８７−４２）、ＣＤ１４（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄカタログ番号３２５６２０）、ＣＤ４５（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄカタログ番号３０４０１７）、ＣＤ４（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓカタログ番号５６３８７５）、ＣＤ１１ｃ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓカタログ番号７４４４３９）、ＣＤ１５（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓカタログ番号５６３１４２）、ＰＤ−１（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社カタログ番号５６５２９９）、ＣＤ３（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓカタログ番号５６５５１５）、ＣＤ５６（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ番号６１−０５６７−４２）、ＣＤ１９（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓカタログ番号５６４９７７）、およびＶＩＳＴＡ（ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ（商標）６４７、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ番号Ａ２０１８６にコンジュゲートされたＶＩＳＴＡ抗体３）に対するフルオロフォア−コンジュゲート抗体と共に、細胞を暗所氷上にて３０分間染色した。染色した細胞を、氷冷ＰＢＳで洗浄し、固定し（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ番号００−５５２３−００）、フローサイトメーターで取得した。データは、ＦｌｏｗＪｏ（商標）ソフトウェア（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して分析した。図３に示されているように、ＶＩＳＴＡ細胞表面発現は、マクロファージおよび顆粒球上で最も高く、樹状細胞上では中程度であり、Ｔ細胞、ナチュラルキラー細胞、およびＢ細胞では低かった。
【０２２６】
実施例４：ＶＩＳＴＡ細胞結合は酸性ｐＨ選択性を示す
この実施例は、多量体化ヒトＶＩＳＴＡ  ＥＣＤが、刺激されたヒトＣＤ４＋Ｔ細胞およびヒト末梢血単核細胞に、中性または生理的ｐＨよりも酸性ｐＨでより効率的に結合し、この結合は、抗ヒトＶＩＳＴＡロックキング抗体（anti-human VISTA locking antibody）によりブロックすることができることが示されている。マウス脾細胞に結合する酸性ｐＨ選択的二量体化マウスＶＩＳＴＡ  ＥＣＤも示されている。
【０２２７】
ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞を、ＲｏｓｅｔｔｅＳｅｐ（商標）（Ｓｔｅｍｃｅｌｌカタログ番号１５０６２）により健康ドナー血液から濃縮し、１０％熱不活化ＦＢＳ、Ｇｌｕｔａｍａｘ（商標）（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ番号３５０５００６１）、非必須アミノ酸（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ１１１４００５０）、ピルビン酸ナトリウム（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ番号１１３６００７０）、および２−メルカプトエタノール（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ２１９８５０２３）で補完されたＲＰＭＩ−１６４０中で、ヒトＴ活性化因子ＣＤ３／ＣＤ２８  Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（商標）（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ番号１１１．３２Ｄ）および組換えヒトＩＬ−２（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈカタログ番号２００−０２）でおよそ４日間インビトロで刺激した。活性化ＣＤ４＋Ｔ細胞を、ｍＭ  ＭＥＳ（Ｓｉｇｍａ、１３１７−１００ＭＬ）で種々のｐＨに酸性化されたハンクス緩衝食塩水（ＨＢＳＳ、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ番号１４０２５１３４）で希釈された、フィコエリトリン（ＰＥ）コンジュゲートストレプトアビジンデキストラマー（カタログ番号ＤＸ０１−ＰＥ）に２８：１モル比で担持されたモノビオチン化ｈＶＩＳＴＡ  ＥＣＤ分子（Ｐｈｅ３３〜Ａｌａ１９４（受入番号ＡＡＨ２０５６８）−ポリヒスチジン；ＡｃｒｏＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．Ｂ７５−Ｈ８２Ｆ３）で３０分間室温で染色した。コントロールとして、活性化ＣＤ４＋Ｔ細胞を、ｈＶＩＳＴＡを担持しなかったＰＥコンジュゲートストレプトアビジンデキストラマーで染色した。染色細胞を、ＨＢＳＳ＋ＭＥＳで洗浄し、フローサイトメーターで取得した。データは、ＦｌｏｗＪｏ（商標）ソフトウェア（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して分析した。結果は、図４Ａに示されており、ｈＶＩＳＴＡが、ｐＨ＞６．５では、コントロールよりも良好にはＣＤ４＋Ｔ細胞に結合しなかったことを示す。対照的に、ｈＶＩＳＴＡは、ｐＨ＜６．５では、ＣＤ４＋Ｔ細胞に対して漸進的により強力な結合を示した。左側には、塗潰しヒストグラムは、より濃い灰色からより薄い灰色に向かって、ｐＨ７．０、６．５、６．４、６．３、６．１、および６．０での結合を示す。一部のヒストグラムには、それらの対応するｐＨが表記されている。ｐＨ６．０で結合する非ＶＩＳＴＡコントロール多量体は、塗潰無しヒストグラムとして示される。右側には、種々のｐＨにてｈＶＩＳＴＡ担持デキストラマーで（青色円形）または非担持デキストラマー（三角形）で染色されたＣＤ４＋Ｔ細胞のＰＥ平均蛍光発光強度（ＭＦＩ）がグラフ化されている。
【０２２８】
末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を、フィコール勾配遠心分離（Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ  Ｐｌｕｓ、ＧＥ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓカタログ番号１７１４４００３）により健康ドナー血液から濃縮し、上記に記載されているように、ＨＢＳＳ＋ＭＥＳバッファーで希釈されたｈＶＩＳＴＡ担持デキストラマー（多量体とも呼ばれる）およびフルオロフォアコンジュゲートで染色した。図４Ｂは、より濃い灰色からより薄い灰色に向かって、ＣＤ１９＋Ｂ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ５６＋ＮＫ細胞、およびＣＤ１４＋単球に対する、ｐＨ６．０での結合を示す塗潰しヒストグラムを示す。塗潰無しの実線境界線および点線境界線ヒストグラムは、それぞれ全ＰＢＭＣリンパ球および単球に対する、ｐＨ７．４での結合を示す。結果は、ｈＶＩＳＴＡが、酸性ｐＨでは多数の白血球に結合することができるが、生理的ｐＨでは有意には結合できないことを示す。
【０２２９】
活性化ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞を、滴定された抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体またはアイソタイプ一致非ＶＩＳＴＡ特異的抗体の存在下でｐＨ６にてｈＶＩＳＴＡ多量体で染色した。結果は、図４Ｃにグラフ化されており、抗体濃度に対するＶＩＳＴＡ多量体ＭＦＩを示す。抗ｈＶＩＳＴＡ抗体（ＶＩＳＴＡ抗体３；正方形）は、濃度に依存して、活性化ＣＤ４＋Ｔ細胞に対するｈＶＩＳＴＡ結合をブロックしたが、非ＶＩＳＴＡ特異的コントロール抗体（円形）はブロックしなかった。コントロール（単一の三角形）として、ｈＶＩＳＴＡ担持多量体で染色されなかったＣＤ４＋Ｔ細胞のＰＥ  ＭＦＩが含まれている。
【０２３０】
図４Ｄは、全長ヒトＰＳＧＬ−１（配列番号３；核酸ＮＭ＿００３００６．４）を発現するようにトランスフェクトされたヘパラン硫酸突然変異チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞（系統ｐＧＳＤ−６７７、アメリカンタイプカルチャーコレクション）に対する、ｐＨ６．０でのＶＩＳＴＡ多量体染色の代表的な二次元フローサイトメトリープロットを示す。染色は、滴定された抗ＶＩＳＴＡブロックキング抗体（ｍＡｂ３）の存在下または非存在下で実施した。ＶＩＳＴＡ多量体で染色されないままの細胞が、コントロールとして示されている。ＰＳＧＬ−１抗体（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓカタログ番号５６２７５８）染色がＹ軸にプロットされており、ＶＩＳＴＡ多量体染色がＸ軸にプロットされている。
【０２３１】
脾細胞を、Ｃ５７ＢＬ６／Ｊマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙカタログ番号０００６６４）から収集し、ｐＨ６．０または７．４にて、ｍＶＩＳＴＡ  ＥＣＤ／ヒトＩｇＧ  Ｆｃ（断片、結晶性）キメラ融合タンパク質で、その後フルオロフォアコンジュゲート抗ヒトＩｇＧ  Ｆｃ二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈカタログ番号１０９−０６５−０９８）で染色した。結果は、図４のヒストグラムにより示されており、ｍＶＩＳＴＡが、ｐＨ６．０では、生理的ｐＨ（およそｐＨ７．４）よりも効率的にマウス脾細胞に結合することを示す。塗潰しヒストグラムは、より濃い灰色からより薄い灰色に向かって、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ１１ｂ＋骨髄細胞、およびＣＤ４＋Ｔ細胞に対する、ｐＨ６．０での結合を示す。塗潰無しヒストグラムは、全脾細胞に対するｐＨ７．４での結合を示す。
【０２３２】
実施例５：ＶＩＳＴＡは、酸性ｐＨにて細胞間接着および免疫抑制を選択的に媒介する
この実施例は、ＶＩＳＴＡが、中性または生理的ｐＨよりも酸性ｐＨにてより強力に細胞間接着を媒介し、Ｔ細胞活性化を抑制することを示す。
【０２３３】
酸性ｐＨ適合性フローサイトメトリーベースの細胞／細胞コンジュゲートアッセイを確立した。全長ヒトＶＩＳＴＡまたはベクターを異所的に発現する２９３Ｔ細胞（不死化ヒト胚腎臓細胞株、ＡＴＣＣカタログ番号ＣＲＬ−３２１６）を、ＣＦＳＥ（カルボキシフルオレセインスクシンイミジルエステル；Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社カタログ番号Ｃ３４５５４）で標識した。ＣＨＯ細胞を、ＣｅｌｌＴｒａｃｅ（商標）Ｆａｒ  Ｒｅｄ（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ番号Ｃ３４５６４）で標識した。その後、ベクターまたはＶＩＳＴＡ  ２９３Ｔ細胞を、ｐＨ７．０またはｐＨ６．０のバッファーでＣＨＯ細胞と１：１比で混合し、室温で１時間インキュベートした。ＣＨＯおよび２９３Ｔ細胞／細胞コンジュゲートの形成をフローサイトメトリーで評価した。図５Ａ〜Ｂに示されている結果は、ＶＩＳＴＡ発現２９３Ｔ細胞が、酸性ｐＨにてＣＨＯ細胞に優先的に接着すること、および抗ＶＩＳＴＡブロックキング抗体（ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂ３；赤色バー）の介在が、ＶＩＳＴＡ媒介性細胞／細胞接着を阻害することを示す。
【０２３４】
酸性ｐＨ適合性Ｔ細胞抑制アッセイを確立した。ＮＦｋＢプロモーター駆動性ルシフェラーゼレポーターを発現するジャーカット細胞（不死化ヒトＴ細胞株、ＡＴＣＣカタログ番号ＴＩＢ−１５２）を、１０：１ジャーカット：２９３Ｔ細胞比で、全長ヒトＶＩＳＴＡおよび抗ヒトＴ細胞受容体アゴニスト抗体クローンＯＫＴ３の単鎖可変断片を異所的に発現する２９３Ｔ細胞（不死化ヒト胚腎臓細胞株、ＡＴＣＣカタログ番号ＣＲＬ−３２１６）と共に、種々のｐＨのＨＢＳＳ＋ＭＥＳバッファーで共培養した。１０μｇ／ｍＬの抗ＶＩＳＴＡブロックキング抗体（ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂ３）またはアイソタイプ一致非ＶＩＳＴＡ特異的コントロール抗体を共培養物に添加した。インキュベーション後、ジャーカットＴ細胞活性化を、ルシフェラーゼ活性を測定することにより定量化した（１秒間隔、Ｐｒｏｍｅｇａカタログ番号Ｇ７９４０）。結果は、図５Ｃ〜Ｄに示されている。図５Ｃは、異なるｐＨにおいて抗ＶＩＳＴＡ（赤色正方形）またはコントロール抗体（青色円形）で処理したジャーカットのルシフェラーゼ単位のプロットを示す。図５Ｄは、試験した各ｐＨにおける、コントロール抗体処理共培養でのルシフェラーゼシグナルで除算した抗ＶＩＳＴＡ抗体処理共培養でのルシフェラーゼシグナルのプロットを示す。結果は、ＶＩＳＴＡ媒介性Ｔ細胞抑制が、酸性ｐＨで最も強力であることを示す。
【０２３５】
実施例６：細胞内再循環エンドソームによるＶＩＳＴＡ輸送
この実施例は、ＶＩＳＴＡを、細胞内エンドソーム、特にＲａｂ１１＋再循環エンドソームに見出すことができ、エンドソーム輸送により細胞表面へとおよび細胞表面から再循環することができることを示す。抗ＶＩＳＴＡ抗体が酸性ｐＨでＶＩＳＴＡに結合する強度は、エンドソーム輸送中のそのＶＩＳＴＡ結合維持能力に影響を及ぼす。
【０２３６】
単球を、磁気活性化細胞選別によりＰＢＭＣから単離した。その後、単球および２９３Ｔ細胞を両方とも、４％パラホルムアルデヒドで固定し、Ｒａｂ５、Ｒａｂ７、またはＲａｂ１１を、抗ＶＩＳＴＡまたはコントロール抗体で細胞内染色した。抗ＶＩＳＴＡ抗体と同じアイソタイプの非ＶＩＳＴＡ結合抗体であるコントロール抗体（「ｃＡｂ」）は、ヒトＶＩＳＴＡを発現する単球または２９３Ｔ細胞に対する結合が検出可能ではない。抗ＶＩＳＴＡおよびコントロール抗体をＡｌｅｘａ４８８で直接的に標識した。Ｒａｂ抗体を、Ａｌｅｘａ５９４抗ウサギＩｇ二次抗体を使用して検出した。Ｈｏｅｓｃｈｔ３３３４２染色を実施して、細胞核を特定した。スピニングディスク共焦点顕微鏡を使用して画像を記録した。図６Ａは、ヒトＶＩＳＴＡを発現する２９３Ｔ細胞内における、ＶＩＳＴＡ、Ｒａｂ５（初期エンドソームマーカー）、Ｒａｂ７（後期エンドソームマーカー）、およびＲａｂ１１（再循環エンドソームマーカー）の共局在化を示す。図６Ｂは、ヒト単球内でのＶＩＳＴＡおよびＲａｂ１１の共局在化を示す。細胞内ＶＩＳＴＡは、Ｒａｂ１１＋再循環エンドソームと共局在化される。
【０２３７】
エンドソームによるＶＩＳＴＡの再循環能力を評価するため、エンドリソソーム依存性抗体薬物コンジュゲート死滅アッセイを、生理的および酸性ｐＨにて、異なるＶＩＳＴＡ結合特質を有する３つの抗ｈＶＩＳＴＡ抗体（ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂ１、２、および３）で実施した。まず、ＳＰＲアッセイを実施して、ｐＨ７．４、６．７、および６．０での３つのＶＩＳＴＡ抗体すべてのｈＶＩＳＴＡ結合プロファイルを比較した。ＶＩＳＴＡ抗体を、固定化されているプロテインＡを含むＢｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ１００（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）ＣＭ５バイオセンサーで捕捉し、その後、表示されているｐＨのＰＢＳＴランニングバッファー中の１００ｎＭ  ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ（７×Ｈｉｓ尾部を有する配列番号１のアミノ酸３２〜１９３、つまり、ＡＦＫＶＡＴＰＹＳＬ  ＹＶＣＰＥＧＱＮＶＴ  ＬＴＣＲＬＬＧＰＶＤ  ＫＧＨＤＶＴＦＹＫＴ  ＷＹＲＳＳＲＧＥＶＱ  ＴＣＳＥＲＲＰＩＲＮ  ＬＴＦＱＤＬＨＬＨＨ  ＧＧＨＱＡＡＮＴＳＨ  ＤＬＡＱＲＨＧＬＥＳ  ＡＳＤＨＨＧＮＦＳＩ  ＴＭＲＮＬＴＬＬＤＳ  ＧＬＹＣＣＬＶＶＥＩ  ＲＨＨＨＳＥＨＲＶＨ  ＧＡＭＥＬＱＶＱＴＧ  ＫＤＡＰＳＮＣＶＶＹ  ＰＳＳＳＱＥＳＥＮＩ  ＴＡＨＨＨＨＨＨＨ；配列番号３２５）を３７℃で流した。参照シグナルを減算したセンサグラムを「結合」レポートポイントに対して正規化し、プロットした。ＶＩＳＴＡ抗体３「ｍＡｂ３」（図６Ｃ、上段）は、酸性ｐＨにて最も大きな度合いのＶＩＳＴＡ結合障害を示し、その次が、わずかに障害を示したに過ぎないＶＩＳＴＡ抗体２、「ｍＡｂ２」（図６Ｃ、中段）であった。ＶＩＳＴＡ抗体１「ｍＡｂ１」は、酸性および生理的ｐＨ条件で強力なＶＩＳＴＡ結合を維持した（図６Ｃ、下段）。
【０２３８】
エンドリソソーム依存性抗体薬物コンジュゲート死滅アッセイを、以下のように実施した。ヒトＶＩＳＴＡを内因的に発現するＡＭＬ３細胞（不死化ヒト単球細胞株、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−９５８９）を、滴定した抗ＶＩＳＴＡ抗体または非ＶＩＳＴＡ特異的コントロール抗体、およびカテプシンＢ感受性リンカーおよび細胞傷害性チューブリシンペイロードにコンジュゲートされた抗ヒトＩｇＧ二次抗体と共に培養した。カテプシンＢは、主に、後期エンドソームおよびリソソームにおいて活性であるため、初期エンドソームおよび再循環エンドソームによりＶＩＳＴＡと共に再循環する抗ＶＩＳＴＡ抗体は、低レベルのリンカー切断、およびその結果として低レベルの細胞傷害性ペイロード放出および細胞死を経験することになる。酸性エンドソーム中でＶＩＳＴＡから解離し、後期エンドソームおよびリソソーム内へと選別される抗ＶＩＳＴＡ抗体は、高レベルのリンカー切断を経験することになる。細胞生存能力を、Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏ（登録商標）（Ｐｒｏｍｅｇａカタログ番号Ｇ７５７３）により培養の５日後に測定した。図６Ｄは、このアッセイの結果を示し、Ｙ軸にはＡＭＬ３生存能力（Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏ）がプロットされており、Ｘ軸には一次抗体濃度がプロットされている。一次抗体に対するＥＣ５０計算値は、ＶＩＳＴＡ抗体１、逆三角形、０．４８５μｇ／ｍＬ；ＶＩＳＴＡ抗体２、円形、０．０９２μｇ／ｍＬ；ＶＩＳＴＡ抗体３、正方形、０．００６μｇ／ｍＬ；コントロール、三角形、１．０８５μｇ／ｍＬである。抗体力価は、酸性ｐＨでは抗ＶＩＳＴＡ抗体結合に逆相関した。
【０２３９】
酸性ｐＨでの結合が力価の差異の原因であったことを確認するため、ＶＩＳＴＡ抗体３を、酸性ｐＨでＶＩＳＴＡに結合するその能力が向上されるように親和性を最適化した。図６Ｅは、図６Ｃについて記載されているアッセイ条件を使用して、ＶＩＳＴＡ抗体３のｈＶＩＳＴＡ抗体結合プロファイルを、この変異体、ＶＩＳＴＡ抗体３ｃと比較したＳＰＲアッセイを示す。ＶＩＳＴＡ抗体３は、この場合も、酸性ｐＨでＶＩＳＴＡ結合障害を示したが、変異体ＶＩＳＴＡ抗体３ｃは、酸性および生理的ｐＨで同等のＶＩＳＴＡ結合を示した。図６Ｆは、図６Ｄについて記載されている死滅アッセイでの、ＶＩＳＴＡ抗体３ｃ（菱形）の活性を示す。ＶＩＳＴＡ抗体３の酸性ｐＨ最適化変異体は、元の抗体の力価の３１分の１の力価を示した。これは、酸性ｐＨでは抗ＶＩＳＴＡ抗体結合が障害を受け、ＶＩＳＴＡ再循環中に抗体結合の喪失がもたらされたことを示す。
【０２４０】
こうした知見に基づくと、ＶＩＳＴＡが初期エンドソームおよび再循環エンドソームにより細胞表面へとおよび細胞表面から再循環するという再循環モデルが提案される。このモデルは、図６Ｇに示されている。抗ＶＩＳＴＡ抗体は、こうしたエンドソームによりＶＩＳＴＡと共に再循環することができ、標的エンゲージメントを維持することができる。しかしながら、酸性ｐＨでＶＩＳＴＡ結合障害を示すＶＩＳＴＡ抗体、特に酸性ｐＨで迅速な解離速度を有するものは、再循環中にＶＩＳＴＡから解離し、細胞内で捕捉または分解され、不良な標的エンゲージメントおよび循環抗体の連続消費をもたらす場合がある。対照的に、酸性ｐＨでＶＩＳＴＡに結合し、結合を維持する抗体は、特に、腫瘍などの酸性微小環境中で高レベルの標的エンゲージメントを維持することができ、インビボでより長い平均滞留時間を示すことができる。
【０２４１】
実施例７：生理的ｐＨにて結合を欠如するＶＩＳＴＡ抗体の優位性
本発明者らは、ＶＩＳＴＡが、酸性ｐＨ選択的免疫受容体であることを示した。これにより、酸性ｐＨで十分に結合する抗体によりＶＩＳＴＡを標的とすることの重要性および有用性が示された。加えて、生理的ｐＨではＶＩＳＴＡに結合しないか、結合が無視できる程度である抗体が、幾つかの理由で有利である。第１に、循環中の骨髄単球性細胞、特に単球および好中球上でのＶＩＳＴＡ発現が比較的豊富であるため、生理的ｐＨでＶＩＳＴＡに結合する抗体は、血液中で高レベルの標的媒介性薬物動態（ＴＭＤＤ）の影響を受ける。この効果は、細胞内エンドソームを介して再循環するＶＩＳＴＡの傾向により深刻になり、抗ＶＩＳＴＡ抗体内部移行および分解に結び付く。この二次効果は、ＶＩＳＴＡのヒスチジンリッチリガンド接触面に結合する抗体について観察することができるように、酸性ｐＨで結合障害を示す抗体の場合に特に問題である。両効果は、循環中の抗ＶＩＳＴＡ抗体の量を低減し、腫瘍に到達することになる抗体の量を低減し、したがって抗体の目的生物学活性を低減することになるだろう。第２に、生理的ｐＨでＶＩＳＴＡに結合し、抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）、または免疫調節性ペイロード送達の誘導などのエフェクター機能を有する抗体は、骨髄単球性細胞をそうしたエフェクター機能の影響下におき、循環好中球枯渇または活性化などの望ましくない効果をもたらす可能性が高いだろう。したがって、本発明者らは、酸性ｐＨではｈｕＶＩＳＴＡに結合するが、生理的ｐＨでは結合が無視できる程度である抗体は、ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、または免疫調節性ペイロード送達などのエフェクター機能を有する抗体の場合、（１）腫瘍などの関連部位でのより良好な曝露および（２）毒性低減という二重の利点を有することを発見した。加えて、ＶＩＳＴＡは、それ自体が酸性ｐＨ選択的免疫受容体であるため、生理的ｐＨにおけるＶＩＳＴＡのリガンド接触面の遮断は、ＶＩＳＴＡ受容体−リガンド活性の調節に不必要である可能性が高い。したがって、酸性ｐＨではｈｕＶＩＳＴＡに結合するが、生理的ｐＨでは有意には結合しない抗体を、下記に記載されているように生成した。
【０２４２】
実施例８：生理的ｐＨよりも酸性ｐＨにてヒトＶＩＳＴＡに優先的に結合する抗ＶＩＳＴＡ抗体の単離
この実施例では、中性または生理的ｐＨと比べて、低（酸性）ｐＨにてヒトＶＩＳＴＡに優先的に結合する抗体の生成が記載されている。
【０２４３】
抗体の抗ＶＩＳＴＡ抗原結合断片のライブラリーを、以下のように構築およびスクリーニングした。全長ヒトＶＩＳＴＡ（ｈＶＩＳＴＡ）で免疫されたＨｕＭａｂマウスから単離された遺伝物質を使用して、抗体ライブラリーを生成した。こうした抗体は、ｓｃＦｖとしてフォーマットされ、ｍＲＮＡディスプレイによりｐＨ低下（ｐＨ６．０）で結合する全長ｈＶＩＳＴＡに対して選択された（Xu Lら（２００２年）Chemistry & Biology  ９巻：９３３頁；Roberts RWおよびJW Szostak（１９９７年）Proc. Natl. Acad. Sci. USA  ９４巻：１２２９７頁；Kurzら（２０００年）Nucleic acids Res.  ２８巻（１８号）：Ｅ８３頁）。選択出力を次世代配列決定（ＮＧＳ）で分析し、低ｐＨでのＶＩＳＴＡ結合に対して濃縮を示したライブラリメンバーを特定し、ＩｇＧ１．３（アミノ酸突然変異Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ｅ、およびＧ２３７Ａを有するＩｇＧ１ＦｃからなるエフェクターレスＩｇＧ１定常領域）として再フォーマットし、ＳＰＲによりＶＩＳＴＡに対する結合についてスクリーニングした。
【０２４４】
Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ２００機器（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用して表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析を実施し、酸性および生理的ｐＨにおけるＶＩＳＴＡ  Ａｂの会合速度（ｋａまたはｋｏｎと規定、単位は１／Ｍｓ）、解離速度（ｋｄまたはｋｏｆｆと規定、単位はｓ−１）、および親和性定数（ＫＤと規定、単位はＭ）を測定した。プロテインＡ（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ＃２１１８１）を、１０ｍＭ酢酸ナトリウムｐＨ４．５で２０ｕｇ／ｍｌに希釈し、製造業者のアミンカップリングプロトコール（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に従ってＣＭ５バイオセンサーのフローセルに固定化し、１フローセル当たり６，０００ＲＵ固定化密度のプロテインＡを目標とした。ＳＰＲ実験は、ｐＨ７．４および６．０のＰＢＳＴ（１３７ｍＭ塩化ナトリウム、２．７ｍＭ塩化カリウム、１０ｍＭリン酸バッファー、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０）ランニングバッファーを使用して３７℃で実施した。抗体を、ＰＢＳＴ  ｐＨ７．４で２０ｎＭに希釈し、５ｕｌ／分で５０秒間、活性バイオセンサーフローセルに捕捉した。５０〜０．２ｎＭの濃度系列の一価ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ（配列番号３２５）をｐＨ７．４および６．０ランニングバッファーで調製し、捕捉した抗体に４０ｕｌ／分で注入して、会合および解離を測定した。アッセイサイクル間に１０ｍＭグリシンｐＨ１．５を１５秒間にわたって２回注入することにより、プロテインＡ捕捉表面を再生した。速度定数ｋａ（ｋｏｎ）およびｋｄ（ｋｏｆｆ）を、参照フローセルおよび０ｎＭブランク減算センサグラムから導きだし、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ２００評価ソフトウェアｖ．２．０で、１：１結合モデルにフィティングした。各ＶＩＳＴＡ抗体毎に、ｐＨ６でのｋｏｆｆ／ｐＨ７．４でのｋｏｆｆの比を算出して、酸性ｐＨで解離速度が遅く、生理的ｐＨで解離速度が速い抗体を特定した。
【０２４５】
ＩｇＧ１．３抗体として再フォーマットされた６つの抗体は、ｐＨ６およびｐＨ７．４の両方でほぼ等価な親和性を示した。特に、２つの抗体が、ｐＨ７．４よりもｐＨ６．０にてより遅い解離速度を示した（つまり、ｋｏｆｆは、ｐＨ６．０よりもｐＨ７．４でより速い）。こうした２つのｈｕＶＩＳＴＡ抗体の可変領域を、Ｐ１−０６１０１５およびＰ１−０６１０２９と呼び、こうした可変領域を含み、ＩｇＧ１．３抗体としてフォーマットされた抗体を、それぞれＰ１−０６１０１５．ＩｇＧ１．３およびＰ１−０６１０２９．ＩｇＧ１．３と呼ぶ。Ｐ１−０６１０１５．ＩｇＧ１．３およびＰ１−０６１０２９．ＩｇＧ１．３のｋｏｆｆ速度は、表１に提供されている。
2020509756.tif 000003
【０２４６】
Ｐ１−０６１０１５およびＰ１−０６１０２９の重鎖および軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３の配列は、下記の表２に提供されており、本開示の実施例セクションの後の配列表にも示されている。
2020509756.tif 000004
【０２４７】
実施例９：酸性ｐＨ選択的抗体を開発するための、Ｐ１−０６１０１５およびＰ１−０６１０２９抗ＶＩＳＴＡ  Ａｂのさらなる操作
この実施例では、ｐＨ７．４と比べてｐＨ６．０における結合間のより高いｋｏｆｆ比を有する抗ｈｕＶＩＳＴＡ可変領域を得るための、実施例２で特定された可変領域Ｐ１−０６１０１５およびＰ１−０６１０２９のさらなる操作が記載されている。
【０２４８】
それぞれ、Ｐ１−０６１０１５およびＰ１−０６１０２９のＶＨ  ＣＤＲに特定の突然変異を導入することにより、２つのライブラリーを構築した。ライブラリーでは、低ｐＨでの結合を向上させる可能性が最も高いアミノ酸置換、つまりアスパラギン酸、グルタミン酸、およびヒスチジンのみを可能にした。また、ライブラリーでは、各ＣＤＲの単一および二重アミノ酸置換、およびＣＤＲにわたる組換え（１鎖当たり最大で６つのアミノ酸置換）を可能にした。図７Ａは、Ｐ１−０６１０２９ライブラリーを形成するために、Ｐ１−０６１０２９の重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列に導入された突然変異を示す。図には、特定の配列が、不安定性の導入を回避するために除外されたことが示されている（例えば、ＤＧ）。
【０２４９】
酵母表面ディスプレイによりｐＨ６．０での全長ｈＶＩＳＴＡに対する結合を数ラウンド繰り返すことにより、’０２９および‘０１５ライブラリーをスクリーニングした。ポジティブ選択（ｐＨ６．０でｈｕＶＩＳＴＡに結合）と、ネガティブ選択（ｐＨ７．４でｈｕＶＩＳＴＡに結合）（図７Ｂに示されている）とを切り替えることにより、さらなる選択ラウンドを実施し、ｐＨ７．４でＶＩＳＴＡに結合しなかったライブラリメンバーを、ネガティブ選択ラウンドで収集した。選択出力をＮＧＳにより分析した。選択のラウンド９後にｐＨ６．０でｈｕＶＩＳＴＡに結合した’０２９ライブラリメンバーを、ｐＨ６．０およびｐＨ７．４でのヒトＶＩＳＴＡに対する結合について、フローサイトメトリーにより分析した。図７Ｃには、９ラウンドの選択後の変異体プールを示す代表的な二次元フローサイトメトリープロットが示されている。ＶＩＳＴＡ結合がＹ軸にプロットされており、変異体抗体発現がＸ軸にプロットされている。種々の抗体濃度およびｐＨでの結合データが示されている。結果は、特に２０ｎＭにて、ヒトＶＩＳＴＡに対する非常に強力なｐＨ６選択的結合を示した。
【０２５０】
‘０２９の追加の子孫クローンを、異なる方法を使用して‘０２９ライブラリーから単離した。一部のクローンは、第１の方法により特定されたものと同じであった。９つの追加のクローンを単離した。
【０２５１】
さらなる分析のために選択された‘０２９ライブラリーから単離された１９個のクローンを、ＩｇＧ１．３抗体として再フォーマットした。‘０２９ＶＨ  ＣＤＲのアミノ酸に対する、こうしたクローンの重鎖ＣＤＲのアミノ酸の差異は、表５に示されている。
2020509756.tif 000005
【０２５２】
ＩｇＧ１．３抗体としてフォーマットされた‘０２９子孫クローンおよび親‘０２９抗体の各々の幾つかの調製物の、ｐＨ６．０および７．４におけるヒトＶＩＳＴＡに対する結合を、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）により測定した。Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ１００機器（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用してＳＰＲ分析を実施し、酸性および中性ｐＨでのＶＩＳＴＡ  ＡｂのｋｏｆｆおよびＫＤ結合親和性測定値を測定した。プロテインＡ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ＃２１１８１）を、１０ｍＭ酢酸ナトリウムｐＨ４．５で２０ｕｇ／ｍｌに希釈し、製造業者のアミンカップリングプロトコール（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に従ってＣＭ５バイオセンサーのフローセルに固定化し、１フローセル当たり２，０００ＲＵ固定化密度のプロテインＡを目標とした。ＳＰＲ実験は、ｐＨ７．４および６．０のＰＢＳＴ（１３７ｍＭ塩化ナトリウム、２．７ｍＭ塩化カリウム、１０ｍＭリン酸バッファー、０．０５％Ｔｗｅｅｎ（商標登録）２０）ランニングバッファーを使用して３７℃で実施した。抗体を、ＰＢＳＴ  ｐＨ７．４で２５ｎＭに希釈し、５ｕｌ／分で６０秒間、活性バイオセンサーフローセルに捕捉した。５０〜５ｎＭの濃度系列の一価ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ（配列番号３２５）をｐＨ７．４および６．０ランニングバッファーで調製し、捕捉した抗体に４０ｕｌ／分で注入して、会合および解離を測定した。アッセイサイクル間に１０ｍＭグリシンｐＨ１．５を１５秒間にわたって２回注入することにより、プロテインＡ捕捉表面を再生した。速度定数ｋａ（ｋｏｎ）およびｋｄ（ｋｏｆｆ）を、参照フローセルおよび０ｎＭブランク減算センサグラムから導きだし、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ２００評価ソフトウェアｖ．２．０で、１：１結合モデルにフィティングした。親和性定数ＫＤを、各ＶＩＳＴＡ抗体の速度定数ｋｏｆｆ／ｋｏｎの比として算出した。
【０２５３】
ヒトＶＩＳＴＡ結合応答の最大値（または強度）を、各抗体の５０ｎＭ  ＶＩＳＴＡ注入の終了時の参照減算「結合」レポートポイント応答と規定し、応答単位（ＲＵ）で報告する。各抗体に対する最大ヒトＶＩＳＴＡ結合応答（ＲＵ）は、図７Ｄにプロットされている。平均の平均結合応答（２〜４つの重複抗体間）がプロットされており、エラーバーは、標準偏差を表す。結果は、‘０２９の選択された子孫クローンは、ｐＨ６．０でｈＶＩＳＴＡに結合するが、ｐＨ７．４では結合しない（ｐＨ７．４での結合を表す白抜き円形はすべて、親‘０２９クローンを除いてグラフの底部に位置する）ことを示す。
【０２５４】
ｐＨ６．０での‘０２９およびその子孫のｋｏｆｆ速度を、上記に記載されている方法を使用してＳＰＲにより決定し、結果は、図７Ｅに表されている。図中の点線は、‘０２９のｋｏｆｆ速度を表し、点線の左側のクローンは、ｐＨ６．０にて、親‘０２９の抗体のｋｏｆｆ速度に比べてより遅いｋｏｆｆ速度を示し、右側のクローンは、ｐＨ６．０にて、親‘０２９抗体のｋｏｆｆ速度と比べてより速いｋｏｆｆ速度を示す。
【０２５５】
中性および酸性ｐＨでの‘０２９、‘７６１、および‘７６７抗体に対する代表的なｈＶＩＳＴＡ  ＳＰＲ結合センサグラムが、図７Ｆに示されている。参照減算５０ｎＭおよび５ｎＭ  ｈｕＶＩＳＴＡセンサグラムがプロットされている。中性ｐＨでは、‘７６１および‘７６７で観察されたＶＩＳＴＡ結合シグナルが＜１０ＲＵであったため、‘７６１および‘７６７のｋｏｆｆおよびＫＤを適切に測定して、‘０２９と比較するためには、μＭのＶＩＳＴＡ濃度を生理的ｐＨで使用するＳＰＲ動力学アッセイが必要であった。
【０２５６】
このアッセイでは、‘０２９、‘７６１、および‘７６７を、ｈＩｇＧ１ｆアイソタイプとして再フォーマットし、標準ｈＩｇＧ１ｆおよびｈＩｇＧ１ｆアフコシル化フォーマットの両方として発現させて、ｈＩｇＧ１．３ｆ  Ｆｃと比較した。Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ１００機器（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用してＳＰＲ動力学アッセイを実施し、酸性および中性ｐＨでのＶＩＳＴＡ  ＡｂのｋｏｆｆおよびＫＤ結合親和性測定値を測定した。プロテインＡ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ＃２１１８１）を、１０ｍＭ酢酸ナトリウムｐＨ４．５で２０μｇ／ｍｌに希釈し、製造業者のアミンカップリングプロトコール（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に従ってＣＭ５バイオセンサーのフローセルに固定化し、１フローセル当たり２，０００ＲＵ固定化密度のプロテインＡを目標とした。ＳＰＲ実験は、ｐＨ７．４および６．０のＰＢＳＴ（１３７ｍＭ塩化ナトリウム、２．７ｍＭ塩化カリウム、１０ｍＭリン酸バッファー、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０）ランニングバッファーを使用して３７℃で実施した。抗体を、ＰＢＳＴ  ｐＨ７．４で２５ｎＭに希釈し、５ｕｌ／分で４５秒間、活性バイオセンサーフローセルに捕捉した。１６００〜０．７８ｎＭ（ｐＨ７．４）および１００〜０．７８ｎＭ（ｐＨ６．０）の濃度系列の一価ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ（配列番号３２５）をランニングバッファーで調製し、捕捉した抗体に４０ｕｌ／分で注入して、会合および解離を測定した。アッセイサイクル間に１０ｍＭグリシンｐＨ１．５を１５秒間にわたって２回注入することにより、プロテインＡ捕捉表面を再生した。速度定数ｋａ（ｋｏｎ）およびｋｄ（ｋｏｆｆ）を、参照フローセルおよび０ｎＭブランク減算センサグラムから導きだし、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ２００評価ソフトウェアｖ．２．０で、１：１結合モデルにフィティングした。親和性定数ＫＤを、各ＶＩＳＴＡ抗体の速度定数ｋｏｆｆ／ｋｏｎの比として算出した。ｐＨ７．４／ｐＨ６．０でのｋｏｆｆおよびＫＤの比を算出し、生理的ｐＨと比べて、酸性ｐＨでの解離速度および親和性の向上を比較した。以前は５０ｎＭ  ｈＶＩＳＴＡを使用しても、‘７６１および‘７６７の中性ｐＨ結合速度定数を決定することができなかったが（図７Ｄおよび７Ｆ）、中性ｐＨ  ＶＩＳＴＡの濃度範囲を１．６μＭまで増加させることにより、こうしたクローンの結合応答（＞１０ＲＵ）がもたらされ、それを１：１結合モデルにフィティングした。こうした酸性選択的ＶＩＳＴＡ抗体の動力学的データは表６に示されている。‘０２９親は、両ｐＨで等価なｋｏｆｆを示すが、‘７６１および‘７６７は、ｋｏｆｆが、ｐＨ６．０ではｐＨ７．４と比べて１０倍よりも高い選択性を示し、ＫＤが、ｐＨ６ではｐＨ７．４と比べて２０００倍よりも高い選択性を示す。ヒトＶＩＳＴＡ結合速度定数は、ｈＩｇＧ１．３ｆ、ｈＩｇＧ１ｆ、およびアフコシル化ｈＩｇＧ１ｆアイソタイプ変異体にわたって保存されている。
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【０２５７】
‘０２９、‘７６１、および‘７６７（ＩｇＧ１．３抗体として）のヒトＶＩＳＴＡ結合動力学を、ｐＨ７．４とｐＨ６．０との間のｐＨ値、つまりｐＨ６．９およびｐＨ６．４５で、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ１００機器（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用して測定した。プロテインＡ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ＃２１１８１）を、１０ｍＭ酢酸ナトリウムｐＨ４．５で２０ｕｇ／ｍｌに希釈し、製造業者のアミンカップリングプロトコール（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に従ってＣＭ５バイオセンサーのフローセルに固定化し、１フローセル当たり２，０００ＲＵ固定化密度のプロテインＡを目標とした。アッセイは、ｐＨ７．４、６．９、６．４５、および６．０のＰＢＳＴ（１３７ｍＭ塩化ナトリウム、２．７ｍＭ塩化カリウム、１０ｍＭリン酸バッファー、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０）ランニングバッファーを使用して３７℃で実施した。抗体を、ＰＢＳＴ  ｐＨ７．４で２５ｎＭに希釈し、５ｕｌ／分で４５秒間、活性バイオセンサーフローセルに捕捉した。１００〜０．７８ｎＭの濃度系列の一価ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ（配列番号３２５）をｐＨ７．４、６．９、６．４５、および６．０ランニングバッファーで調製し、捕捉した抗体に４０ｕｌ／分で注入して、会合および解離を測定した。アッセイサイクル間に１０ｍＭグリシンｐＨ１．５を１５秒間にわたって２回注入することにより、プロテインＡ捕捉表面を再生した。速度定数ｋａ（ｋｏｎ）およびｋｄ（ｋｏｆｆ）を、参照フローセルおよび０ｎＭブランク減算センサグラムから導きだし、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ２００評価ソフトウェアｖ．２．０で、１：１結合モデルにフィティングした。親和性定数ＫＤを、各ＶＩＳＴＡ抗体の速度定数ｋｏｆｆ／ｋｏｎの比として算出した。ｐＨ６．０に対する各ｐＨのｋｏｆｆおよびＫＤの比を算出して、バッファーｐＨが生理的ｐＨへと移行すると共にＶＩＳＴＡ  ｋｏｆｆおよびＫＤがどのように変化するかを評価した。評価は表７に示されている。‘０２９親は、試験した各ｐＨで一貫したｋｏｆｆを示したが、‘７６１および‘７６７子孫は、ｐＨ６．９では、ｐＨ６．０と比較して少なくとも１０倍より速いＶＩＳＴＡ  ｋｏｆｆおよび１００倍より弱いＶＩＳＴＡ  ＫＤを示した。バッファーｐＨが酸性から生理的ｐＨへと移行すると共に、‘７６１および‘７６７のＶＩＳＴＡ  ｋｏｆｆおよびＫＤは両方とも弱くなった。比較のための‘７６１および‘７６７の生理的ｐＨデータを、表７から引用し、星印（＊）を表記した。
2020509756.tif 000007
【０２５８】
表７のデータは、ｈＶＩＳＴＡに対する‘７６１および‘７６７の結合親和性が、ｐＨ６．４５ではｐＨ６．０と比較して１０分の１以下であること；ｈＶＩＳＴＡに対する‘７６１および‘７６７の結合親和性が、ｐＨ６．９ではｐＨ６．０と比較して１００分の１以下であること；およびｈＶＩＳＴＡに対する‘７６１および‘７６７の結合親和性が、ｐＨ７．４ではｐＨ６．０と比較して１０００分の１以下であることを示す。
【０２５９】
‘０１５ライブラリーも、ＶＩＳＴＡに対するｐＨ６選択的結合のわずかな優先性を示した。‘０１５ＶＨ  ＣＤＲに対する子孫クローンのアミノ酸差異は、表８に示されている。‘０１５子孫クローンおよび親‘０１５（すべてＩｇＧ１．３抗体として）の各々の幾つかの調製物の、ｐＨ６．０および７．４でのヒトＶＩＳＴＡに対する結合を、上記の各‘０２９分析について記載されているものと同一の方法を使用してＳＰＲにより測定した。結果は表８に示されている。
2020509756.tif 000008
【０２６０】
ＳＰＲにより決定された、ｐＨ６．０および７．４におけるｈｕＶＩＳＴＡに対する‘０２９および‘０１５およびそれらの子孫クローンの結合の動力学の要約は、表９および１０に示されている。
2020509756.tif 000009
2020509756.tif 000010
【０２６１】
このように、‘０２９親と比較して、ｐＨ６．０におけるＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに対するｋｏｆｆを維持したかまたは向上させたかのいずれかであり、また、生理学ｐＨではＶＩＳＴＡに対するより弱いｋｏｆｆまたは結合の喪失を示した幾つかの’０２９子孫クローンが特定された。‘０１５子孫は、ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤに対する酸性ｐＨ選択的結合を示したが、中性ｐＨではＶＩＳＴＡに対する結合が検出されなかったが、アッセイした‘０１５子孫はすべて、ｐＨ６．０では‘０１５親と比較してより速いｋｏｆｆをもたらした。
【０２６２】
実施例１０：酸性ｐＨ選択的‘０２９子孫は、ＶＩＳＴＡブロッキング活性を維持しつつ、酸性ｐＨ依存性細胞結合およびエフェクター機能を示す
全長ヒトＶＩＳＴＡ（Ｄ１８７Ｅ置換を有する配列番号１）を異所的に発現するように操作されたラージ細胞に対する、クローン‘７６１および‘７６７のｐＨ依存性結合を測定した。この実験では、‘７６１および‘７６７を、ＩｇＧ１．３抗体としてフォーマットし、抗ヒトＩｇＧ二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈカタログ番号１０９−０６５−０９８）により結合を測定した。結果は、図８Ａ〜８Ｂに示されており、‘７６１（図８Ａ）および‘７６７クローン（図８Ｂ）は、ｐＨ７．２および８．１では結合が不良であるが、酸性ｐＨ、特にｐＨ６．０、６．１、６．２、および６．４ではより良好である。Ｙ軸には結合ＭＦＩがプロットされており、Ｘ軸には一次抗体濃度がｌｏｇスケールでプロットされている。非線形回帰曲線も示されている。
【０２６３】
図８Ｃは、ヒトＶＩＳＴＡを発現するラージ細胞に対する、３１２５ｎｇ／ｍＬのＰ１−０６８７６７（円形）およびアイソタイプ一致非特異的コントロール抗体（三角形）結合を異なるｐＨで測定した図８Ａ〜８Ｂに記載されている実験のデータを示す。「ｐＨ５０」は、Ｐ１−０６８７６７結合の５０％が失われたｐＨであり、およそ６．６である。Ｙ軸には結合ＭＦＩがプロットされており、Ｘ軸にはバッファーｐＨがプロットされている。非線形回帰曲線も示されている。
【０２６４】
図８Ｄは、ヒト単球に対する、アイソタイプ一致非特異的コントロール抗体（塗潰しおよび塗潰無し円形は、それぞれｐＨ７．０および６．０）、抗ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂ２（「コントロール」、図６Ｃを参照、塗潰しおよび塗潰無し正方形は、それぞれｐＨ７．０および６．０）、Ｐ１−０６８７６１（塗潰しおよび塗潰無し三角形は、それぞれｐＨ７．０および６．０）、およびＰ１−０６８７６７（塗潰しおよび塗潰無し逆三角形は、それぞれｐＨ７．０および６．０）結合のＭＦＩを示す。結合は、図８Ａ〜８Ｂに記載されているように検出した。非ｐＨ選択的ＶＩＳＴＡコントロール抗体（ｍＡｂ２）は、両ｐＨで単球に結合した。操作された酸性ｐＨ選択的抗体は両方とも、ｐＨ６．０では単球に十分に結合したが、ｐＨ７．０では非特異性アイソタイプ一致コントロールよりも良好には結合しなかった。このように、‘７６１および‘７６７は、中性ｐＨではＶＩＳＴＡに対する結合が弱いかまたは結合を示さないが、酸性ｐＨでは細胞上のＶＩＳＴＡに選択的に結合する。
【０２６５】
図８Ｅは、活性化ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞に対する組換えＶＩＳＴＡ多量体結合が、ｐＨ６．０では、‘０２９（正方形）、‘７６１（三角形）、および‘７６７（逆三角形）により同等にブロックされたが、非ＶＩＳＴＡ特異的コントロール抗体（円形）は、ＶＩＳＴＡ結合をブロックしなかったことを示す。このブロッキングアッセイは、実施例４に記載されているように実施した。こうしたデータは、操作された酸性ｐＨ選択的ＶＩＳＴＡ抗体が、酸性ｐＨでのＶＩＳＴＡ受容体−リガンド結合を依然としてブロックすることができることを示す。
【０２６６】
生理的ｐＨでの、抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）による標的細胞（図８Ａ〜８Ｂに記載されているヒトＶＩＳＴＡを発現する同じラージ細胞）のＮＫ細胞特異的溶解を、すべてアフコシル化ＩｇＧ１抗体として発現された、Ｐ１−０６１０２９．ＩｇＧ１ｆ、Ｐ１−０６８７６１．ＩｇＧ１ｆ、Ｐ１−０６８７６７．ＩｇＧ１ｆ抗体、非ＶＩＳＴＡ特異的抗体、および非ＶＩＳＴＡ特異的ネガティブコントロール抗体について測定した。ＮＫ細胞を、ネガティブビーズ選択（ＳｔｅｍＣｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓカタログ番号１９０５５）によりＰＢＭＣから濃縮し、１μＭヒドロコルチゾン（ＳｔｅｍＣｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓカタログ番号０７９０４）および５００Ｕ／ｍＬ組換えヒトＩＬ−２（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈカタログ番号２００−０２）で補完されたＭｙｅｌｏｃｕｌｔ（商標）培地（ＳｔｅｍＣｅｌｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓカタログ番号０５１５０）で一晩培養した。アッセイ当日に、ヒトＶＩＳＴＡを異所的に発現するラージ細胞（図８Ａ〜８Ｂに記載）を、Ｃａｌｃｅｉｎ  ＡＭ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓカタログ番号Ｃ３１００ＭＰ）で標識し、１０：１のＮＫ：標的細胞比の培養ＮＫ細胞と共に、ならびにＰ１−０６１０２９．ＩｇＧ１ｆ、Ｐ１−０６８７６１．ＩｇＧ１ｆ、Ｐ１−０６８７６７．ＩｇＧ１ｆ抗体、非ＶＩＳＴＡ特異的抗体、および非ＶＩＳＴＡ特異的ネガティブコントロール抗体と共に、生理的ｐＨで２時間共培養した。特異的溶解は、上清蛍光シグナル（ＥｎＶｉｓｉｏｎ（商標）プレートリーダ）から内挿した。抗体を含まない共培養物から得された自然溶解シグナル、および最大溶解シグナルは、Ｄｅｌｆｉａ（登録商標）溶解バッファー（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒカタログ番号４００５−００１０）を用いた標的細胞の溶解により決定した。抗体特異的溶解は、観察された溶解を（最大溶解シグナル−自然溶解シグナル）で除算したパーセンテージとして算出した。
【０２６７】
結果は、図８Ｆに提供されており、Ｐ１−０６８７６１．ＩｇＧ１ｆおよびＰ１−０６８７６７．ＩｇＧ１ｆが、Ｐ１−０６１０２９およびポジティブコントロールと比べて、生理的ｐＨでは、抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を媒介する力価が低減されていることを示す。
【０２６８】
実施例１１：ＶＩＳＴＡ抗体のＣｙｎｏ  ＰＫ
ヒト抗体未感作カニクイザルに、酸性および中性ｐＨで同等に結合するＶＩＳＴＡ抗体（「コントロール」；ｍＡｂ２）、酸性ｐＨで結合障害を示すＶＩＳＴＡ抗体（「酸性ｐＨ感受性」、ｍＡｂ３）、または酸性ｐＨ選択的抗体‘７６７のいずれかの単一５ｍｐｋ用量を静脈内注射して、こうした抗体のｃｙｎｏ  ＰＫを決定した。
【０２６９】
この実施例で使用した抗体のＳＰＲ結合動力学は、表１１に提供されており、以下のように決定した。酸性ｐＨ選択的およびコントロール抗ＶＩＳＴＡ抗体のＣｙｎｏ  ＶＩＳＴＡ交差反応性を、酸性および中性ｐＨで評価した。Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ１００機器（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用してＶＩＳＴＡ  Ａｂの結合親和性測定を実施した。プロテインＡ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ番号＃２１１８１）を、１０ｍＭ酢酸ナトリウムｐＨ４．５で２０ｕｇ／ｍｌに希釈し、製造業者のアミンカップリングプロトコール（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に従ってＣＭ５バイオセンサーのフローセルに固定化し、１フローセル当たり２，０００ＲＵ固定化密度のプロテインＡを目標とした。アッセイは、ｐＨ７．４および６．０のＰＢＳＴ（１３７ｍＭ塩化ナトリウム、２．７ｍＭ塩化カリウム、１０ｍＭリン酸バッファー、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０）ランニングバッファーを使用して３７℃で実施した。抗体（ＩｇＧ１．３抗体としてフォーマットされている）を、ＰＢＳＴ  ｐＨ７．４で２５ｎＭに希釈し、５ｕｌ／分で４５秒間、活性バイオセンサーフローセルに捕捉した。１６００〜０．７８ｎＭ（ｐＨ７．４）および１００〜０．７８ｎＭ（ｐＨ６．０）濃度系列の一価ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ（配列番号３２５）およびｃｙｎｏ  ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ  （ＡＦＫＶＡＴＬＹＳＬ  ＹＶＣＰＥＧＱＮＶＴ  ＬＴＣＲＶＦＧＰＶＤ  ＫＧＨＤＶＴＦＹＫＴ  ＷＹＲＳＳＲＧＥＶＱ  ＴＣＳＥＲＲＰＩＲＮ
ＬＴＦＱＤＬＨＬＨＨ  ＧＧＨＱＡＡＮＴＳＨ  ＤＬＡＱＲＨＧＬＥＳ  ＡＳＤＨＨＧＮＦＳＩ  ＴＭＲＮＬＴＬＬＤＳ  ＧＬＹＣＣＬＶＶＥＩＲＨＨＨＳＥＨＲＶＨ  ＧＡＭＥＬＱＶＱＴＧ  ＫＤＡＰＳＳＣＶＡＹ  ＰＳＳＳＱＥＳＥＮＩ  ＴＡＨＨＨＨＨＨＨ；（配列番号３２６）をランニングバッファーで調製し、捕捉した抗体に４０ｕｌ／分で注入して、会合および解離を測定した。アッセイサイクル間に１０ｍＭグリシンｐＨ１．５を１５秒間にわたって２回注入することにより、プロテインＡ捕捉表面を再生した。速度定数ｋａ（ｋｏｎ）およびｋｄ（ｋｏｆｆ）を、参照フローセルおよび０ｎＭブランク減算センサグラムから導きだし、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ２００評価ソフトウェアｖ．２．０で、１：１結合モデルにフィティングした。親和性定数ＫＤを、各ＶＩＳＴＡ抗体の速度定数ｋｏｆｆ／ｋｏｎの比として算出した。ｐＨ７．４／ｐＨ６．０でのｋｏｆｆおよびＫＤの比を算出し、中性ｐＨと比べて、酸性ｐＨでの解離速度および親和性の差異を比較した。試験した抗ＶＩＳＴＡ抗体はすべて、試験した両ｐＨで同等の（２倍以内の）ヒトおよびｃｙｎｏ  ＶＩＳＴＡ動力学的結合パラメーターを示し、ｃｙｎｏ  ＶＩＳＴＡとの交差反応性が確認された。抗ＶＩＳＴＡコントロール抗体は両方とも、酸性ｐＨと比較して、生理的ｐＨにて、向上したｋｄおよびより強力なＫＤを示し、酸性ｐＨ感受性コントロールは、酸性ｐＨにて、コントロール抗体と比較して、より速いＶＩＳＴＡ  ｋｄを示した。
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【０２７０】
ヒト抗体未感作カニクイザルに、ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂ２（「コントロール」）、ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂ３（「酸性ｐＨ感受性」）、またはＰ１−０６８７６７．ＩｇＧ１．３のいずれかの単一５ｍｐｋ用量を静脈内注射した。注射後の各抗体の血清濃度が図９に示されている。Ｐ１−０６８７６７．ＩｇＧ１．３およびコントロール抗ＶＩＳＴＡ抗体の平均滞留時間は、それぞれ７１７時間および２２時間であった。これは、酸性ｐＨ選択性がＶＩＳＴＡ抗体ＴＭＤＤを大幅に低減したことを示す。コントロール抗体（ｍＡｂ２）および酸性ｐＨ感受性抗体（ｍＡｂ３）は、生理的ｐＨではＶＩＳＴＡに同等に結合するが、酸性ｐＨ感受性抗体は、７．６時間のより低い平均滞留時間を示した。これは、実施例６および７に記載されているように、ＶＩＳＴＡ抗体再循環には酸性ｐＨ結合性が重要であること示す。こうした結果は、酸性ｐＨ選択的抗体は、優れたＰＫを有し、したがって腫瘍または他の微小環境での標的エンゲージメントをより容易に達成することになることを示す。
【０２７１】
実施例１２：ｐＨ選択的‘０２９子孫は、高ｐＩタンパク質に対して非特異的に結合しない
ＶＩＳＴＡおよび他の高ｐＩタンパク質に対する‘０２９、‘７６１、および‘７６７クローンの結合特異性を、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ１００機器（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用してＳＰＲにより、中性および酸性ｐＨで評価した。プロテインＡ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ＃２１１８１）を、１０ｍＭ酢酸ナトリウムｐＨ４．５で２０ｕｇ／ｍｌに希釈し、製造業者のアミンカップリングプロトコール（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に従ってＣＭ３バイオセンサーのフローセルに固定化し、１フローセル当たり８００ＲＵ固定化密度のプロテインＡを目標とした。ＳＰＲ実験は、ｐＨ７．４および６．０のＰＢＳＴ（１３７ｍＭ塩化ナトリウム、２．７ｍＭ塩化カリウム、１０ｍＭリン酸バッファー、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０）ランニングバッファーを使用して２５℃で実施した。抗体（ＩｇＧ１．３抗体としてフォーマットされている）を、ＰＢＳＴ  ｐＨ７．４で５０ｎＭに希釈し、５ｕｌ／分で６０秒間、活性バイオセンサーフローセルに捕捉した。１００〜１０ｎＭの濃度系列の一価ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ（配列番号３２５）、アビジン（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ＃２１１２８）、チトクロムＣ（Ｓｉｇｍａカタログ＃Ｃ２８６７）、ＢＳＡ（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍカタログ＃１２６５９３）、および一価コントロール抗原（「Ａｇ」）を、ｐＨ７．４および６．０ランニングバッファーで調製し、捕捉した抗体に５０ｕｌ／分で注入して、結合特異性を評価した。アッセイサイクル間に１０ｍＭグリシンｐＨ１．５を１５秒間にわたって２回注入することにより、プロテインＡ捕捉表面を再生した。参照フローセルおよび０ｎＭのブランク減算センサグラムを、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ２００評価ソフトウェアｖ．２．０を使用して精査した。結果は、表１２に示されている。
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【０２７２】
表１２では、特異的結合は、試料注入の終了時のＲＵ  ＳＰＲ結合応答が＞１０であることと規定し、塗潰し灰色ボックスにより示されている。「抗Ａｇ」は、ＶＩＳＴＡ結合コントロールＡｂである。‘０２９クローンは、酸性および中性ｐＨにてＶＩＳＴＡに特異的であった。‘０２９子孫クローン‘７６１および‘７６７は、酸性ｐＨにてＶＩＳＴＡに特異的であったが、コントロール抗体も抗原特異性を維持した。プロテインＡ参照表面に対するｐＩコントロールタンパク質の非特異的結合（「ＮＳＢ」）は、このアッセイでは観察されなかった。
【０２７３】
したがって、‘７６１および‘７６７のＶＨ  ＣＤＲに導入された荷電アミノ酸は、アビジンおよびチトクロムＣなどの他の高ｐＩタンパク質に対する、またはＢＳＡなどの低ｐＩタンパク質に対する、これら抗体の静電的結合を引き起こさない。
【０２７４】
実施例１３：抗体‘７６１および‘７６７によるＴ細胞活性化の阻害
この実施例には、ジャーカットＴ細胞活性化のｈＶＩＳＴＡ阻害をブロックする抗体‘７６１および‘７６７の能力を決定するために実施することができるアッセイが記載されている。
【０２７５】
実施例５に記載されているものと同じアッセイを使用する。手短に述べれば、ＮＦｋＢルシフェラーゼレポーターを発現するジャーカット（ヒトＴ細胞株）細胞を、ヒトＶＩＳＴＡおよび抗ヒトＴ細胞受容体アゴニスト抗体ＯＫＴ３の単鎖可変断片を発現する２９３Ｔ細胞と共に、種々のｐＨで共培養する。抗ＶＩＳＴＡ抗体‘７６１および‘７６７またはアイソタイプ一致非ＶＩＳＴＡ特異的コントロール抗体を共培養細胞に添加する。ジャーカット活性化は、ルシフェラーゼ単位として、およびコントロールと比べた抗ＶＩＳＴＡ処置によるルシフェラーゼシグナルの倍数増として示されている。
【０２７６】
実施例１４：突然変異分析は、ＶＩＳＴＡ抗体にｐＨ依存性結合特質を付与する重要な残基を特定した
抗体Ｐ１−０６８７６１．ＩｇＧ１．３およびＰ１−０６８７６７．ＩｇＧ１．３は、Ｐ１−０６１０２９と異なる５〜６つの突然変異を含む（表７）。ＶＩＳＴＡ抗体にｐＨ依存性結合特質を付与する重要な残基を特定するために、突然変異分析を実施した。そのため、Ｐ１−０６８７６１およびＰ１−０６８７６７のＮ−１（Ｐ１−０６１０２９への１つのアミノ酸復帰突然変異）およびＮ−２（Ｐ１−０６１０２９への２つのアミノ酸復帰突然変異）変異体を合成し、ＩｇＧ１．３として発現させ、ｐＨ６、ｐＨ６．７、およびｐＨ７．４でのｈｕＶＩＳＴＡに対するそれらの結合を分析した。
【０２７７】
Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ１００機器（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用して結合動力学を測定した。プロテインＡ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃカタログ＃２１１８１）を、１０ｍＭ酢酸ナトリウムｐＨ４．５で２０ｕｇ／ｍｌに希釈し、製造業者のアミンカップリングプロトコール（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に従ってＣＭ５バイオセンサーのフローセルに固定化し、１フローセル当たり２，０００ＲＵ固定化密度のプロテインＡを目標とした。アッセイは、ｐＨ７．４、６．７、および６．０のＰＢＳＴ（１３７ｍＭ塩化ナトリウム、２．７ｍＭ塩化カリウム、１０ｍＭリン酸バッファー、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０）ランニングバッファーを使用して３７℃で実施した。抗体を、ＰＢＳＴ  ｐＨ７．４で２５ｎＭに希釈し、５ｕｌ／分で４０秒間、活性バイオセンサーフローセルに捕捉した。１００〜１０ｎＭの濃度系列の一価ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ（配列番号３２５）をｐＨ７．４、６．７、および６．０ランニングバッファーで調製し、捕捉した抗体に４０ｕｌ／分で注入して、会合および解離を測定した。アッセイサイクル間に１０ｍＭグリシンｐＨ１．５を１５秒間にわたって２回注入することにより、プロテインＡ捕捉表面を再生した。速度定数ｋａ（ｋｏｎ）およびｋｄ（ｋｏｆｆ）を、参照フローセルおよび０ｎＭブランク減算センサグラムから導きだし、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ２００評価ソフトウェアｖ．２．０で、１：１結合モデルにフィティングした。
【０２７８】
親和性定数ＫＤを、各ＶＩＳＴＡ抗体の速度定数ｋｏｆｆ／ｋｏｎの比として算出した。ｐＨが、ＶＩＳＴＡに対する抗体の結合能力にどのように影響するかを比較するために、％Ｒｍａｘを算出した。これは、最大ＶＩＳＴＡ結合応答予想値に対する最大ＶＩＳＴＡ結合応答測定値を表す。％Ｒｍａｘは、各抗体の１００ｎＭ  ＶＩＳＴＡ注入の終了時の参照減算「結合」レポートポイント応答（Ｒｍａｘ）の、ＶＩＳＴＡ結合応答予想値（Ｒｅｘｐ）に対する比と定義される。Ｒｅｘｐは、Ｒｅｘｐ＝［（ＶＩＳＴＡ−ＥＣＤ分子量／ｍＡｂ分子量）×（ｍＡｂ「捕捉」レポートポイント応答（ＲＵ）］×１ｍＡｂ当たり２結合部位として算出される
【０２７９】
Ｐ１−０６８７６１復帰突然変異体で得られたＳＰＲ結果が、図１０Ａに示されおり、ｐＨ６．０でのｋｏｆｆが最も遅いものから最も速いものの順に並んでいる。この表には、１００ｎＭ  ｈＶＩＳＴＡに対して、弱い結合応答を示すかまたは結合応答を示さない（＜１０ＲＵ）抗体を、非結合（ＮＢ）と分類した。結果は、３２位のＥ（つまり、‘７６１のＶＨ  ＣＤＲ１のアミノ酸残基７）および１００ｆ（‘７６１のＶＨ  ＣＤＲ３のアミノ酸残基１２）が両方とも、酸性ｐＨ選択性の維持に必要であることを示す。それは、Ｐ１−０６１０２９親配列のこれら復帰突然変異が、生理的ｐＨでの有意なｈＶＩＳＴＡ結合（％Ｒｍａｘ＞１０）を可能にしたためである。さらなる分析により、Ｅ５５Ａ（‘７６１のＶＨ  ＣＤＲ２のアミノ酸残基６）復帰突然変異を有する変異体は、酸性ｐＨ選択性を維持し、Ｐ１−０６８７６１の２倍以内の同等な結合動力学を示したことが明らかになった。対照的に、Ｈ１００Ｇ、Ｅ５６Ｎ、およびＥ３０Ｄ（それぞれ、‘７６１のＶＨ  ＣＤＲ３のアミノ酸残基１２、ＶＨ  ＣＤＲ２の７、およびＶＨ  ＣＤＲ１の４）復帰突然変異を有する変異体は、酸性ｐＨ選択性を維持したものの、こうしたｍＡｂは、酸性ｐＨではＰ１−０６８７６１よりも約３倍速いｋｏｆｆも示したため、こうした突然変異体の酸性ｐＨでの解離速度は、Ｐ１−０６１０２９親により近いものになった。したがって、元のＰ１−０６１０２９クローンに対するＧ１００Ｈ、Ｎ５６Ｅ、および／またはＤ３０Ｅ突然変異の付加は、酸性選択的Ｐ１−０６８７６１クローンで観察される酸性ｐＨ  ＶＩＳＴＡ親和性向上に寄与する。
【０２８０】
Ｐ１−０６８７６７復帰突然変異体で得られたＳＰＲ結果は、図１０Ｂに示されおり、ｐＨ６．０でのｋｏｆｆが最も遅いものから最も速いものの順に並んでいる。結果は、１０２位のＤ（‘７６７のＶＨ  ＣＤＲ３のアミノ酸残基１４）が、酸性ｐＨ選択性の維持に必要であったこと、およびＰ１−０６１０２９親配列へのＤ１０２Ｖ復帰突然変異が、中性ｐＨでの有意なｈＶＩＳＴＡ結合（％Ｒｍａｘ＞１０）を可能にしたことを示す。さらなる分析により、Ｅ３０Ｄ、Ｄ５２Ｎ、およびＥ５５Ａ（それぞれ、‘７６７のＶＨ  ＣＤＲ１のアミノ酸残基４、ＶＨ  ＣＤＲ２の３、およびＶＨ  ＣＤＲ３の６）復帰突然変異を有する変異体は、酸性ｐＨ選択性を維持し、Ｐ１−０６８７６７の２倍以内の同等なｐＨ６．０結合動力学を示したことが明らかになった。対照的に、Ｅ１００ｆＦ（‘７６７のＶＨ  ＣＤＲ３のアミノ酸残基１２）復帰突然変異を有する変異体は、酸性ｐＨ選択性を維持したとはいえ、酸性ｐＨではＰ１−０６８７６７と比較して＞３倍より速いｋｏｆｆを示した。顕著なことには、Ｅ１００ｆＦ復帰突然変異を有する変異体は、酸性ｐＨでは、親ｍＡｂ  Ｐ１−０６１０２９よりもさらに速いｋｏｆｆを示した。
【０２８１】
したがって、Ｐ１−０６１０２９（ｐＨ耐容性）と比べた、Ｐ１−０６８７６１およびＰ１−０６８７６７（酸性ｐＨ選択的）の復帰突然変異体の要約は、以下の表１３の通りである（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３は、下線により分離されている）。
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【０２８２】
表１３のＰ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７６１、およびＰ１−０６８７６７の上記ＶＨ  ＣＤＲ配列は、それぞれ、配列番号６７、５１、５５のアミノ酸（「ａａ  ｐｏｓ．」）２６〜３５、５０〜６６、および９９〜１１０である。酸性（acid）ｐＨ選択性に必要である重要な突然変異は太字で示されており、Ｐ１−０６８７６１およびＰ１−０６８７６７と比較してｐＨ６．０でのｋｄに３倍よりも大きな影響を及ぼす突然変異には下線が引かれている。
【０２８３】
実施例１５：ＶＩＳＴＡ抗体エピトープのマッピング
ＩｇＧ１．３抗体としてフォーマットされた‘０１５、‘０２９、‘７６１、および‘７６７のｈＶＩＳＴＡエピトープを、２つの異なる方法により決定した：ＢＬＩ（バイオレイヤー干渉法）競合および酵母表面ディスプレイ。
【０２８４】
酸性ｐＨ選択的ＶＩＳＴＡ抗体Ｐ１−０６８７６１およびＰ１−０６８７６７が、Ｐ１−０６１０２９親、Ｐ１−０６１０１５、ならびに関連ＶＩＳＴＡコントロール抗体１、２、および３と比較して、ＶＩＳＴＡ上の類似または重複エピトープを保持したか否かを評価するために、競合ＢＬＩエピトープビニングアッセイを実施した。サンドイッチおよびタンデムフォーマットビニングアッセイを、ＯｃｔｅｔＲｅｄ３８４  ＢＬＩ機器（ＰＡＬＬ／ＦｏｒｔｅＢｉｏ）で実施した。アッセイ工程はすべて、１０００ｒｐｍの振盪速度で３０℃にて実施し、使用したバッファーは、酸性（ｐＨ６．０）または中性（ｐＨ７．４）ＰＢＳＴ（１３７ｍＭ塩化ナトリウム、２．７ｍＭ塩化カリウム、１０ｍＭリン酸バッファー、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０）であった。サンドイッチフォーマットの場合、まず、ｐＨ７．４にてＶＩＳＴＡ抗体パネルを抗ヒトＩｇＧ−Ｆｃセンサー（ＡＨＣ、ＰＡＬＬ／ＦｏｒｔｅＢｉｏ）で捕捉し、その後、抗ヒト捕捉センサーを、全ヒトＩｇＧ（Ｊａｃｋｓｏｎ＃００９−０００−００２）でブロックした。次に、ｐＨ６．０でヒトＶＩＳＴＡ−ＥＣＤを捕捉し、最後にすべての考え得る抗体組合せの競合をｐＨ６．０で評価した。タンデムフォーマットアッセイでは、まず、ｐＨ７．４にてビオチン化ｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤをストレプトアビジン被覆バイオセンサー（ＳＡＸ、ＰＡＬＬ／ＦｏｒｔｅＢｉｏ）で捕捉し、その後、ｐＨ６．０にて完全ＶＩＳＴＡ抗体パネルをセンサーで捕捉して、ＶＩＳＴＡに対する各抗体の完全な結合飽和を保証してから、ｐＨ６．０にてすべての考え得る抗体組合せの競合を評価した。
【０２８５】
競合ＢＬＩエピトープビニングアッセイの結果は、競合マトリックスにより図１１Ａに要約されている。この図では、捕捉された第１の抗体は横列に列挙されており、（第２の）競合抗体の結合またはブロッキング活性は各縦列に示されている。競合マトリックスは両アッセイフォーマットで同一であった。サンドイッチアッセイの場合、競合抗体の結合（薄灰色）を、０．４〜１．２ｎｍ範囲のシグナルであると定義し、ブロックされた抗体（黒色）は、非結合シグナル＜０．１ｎｍを示した。タンデムアッセイの場合、競合抗体の結合を、０．３〜０．８ｎｍ範囲のシグナルであると定義し、ブロックされた抗体は、非結合シグナル＜０．２ｎｍを示した。「ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂ３」は、ＳＰＲにより３７℃にてｈＶＩＳＴＡ−ＥＣＤからの急速な酸性ｐＨ解離を示したが（図６Ｃ）、いずれのＢＬＩアッセイフォーマットでも急速には解離しなかった（３０℃で実施）。こうした競合アッセイにより、Ｐ１−０６１０１５、Ｐ１−０６１０２９、酸性ｐＨ選択的抗体Ｐ１−０６８７６１およびＰ１−０６８７６７、ならびにＶＩＳＴＡ抗体２および３はすべて、ＶＩＳＴＡ上の類似または重複エピトープをめぐって互いに競合することが示された。しかしながら、ＶＩＳＴＡ抗体１は、別個の異なるエピトープに結合する。したがって、酸性選択的クローンＰ１−０６８７６１およびＰ１−０６８７６７を生成するためにＰ１−０６１０２９のＶＨ  ＣＤＲに導入された荷電アミノ酸突然変異は、ＶＩＳＴＡ結合エピトープを著しくは（signigicantly）変更しなかった。
【０２８６】
また、抗体‘０２９、‘０１５、‘７６１、および‘７６７のエピトープを、Chaoら（２００４年）J. Mol. Biol.  ３４２巻：５３９〜５５０頁、Oliphantら（２００６年）J. Virol.  ８０巻：１２１４９〜１２１５９頁、およびKowalskyら（２０１５年）J. Biol. Chem.  ２９０巻：２６４５７〜２６４７０頁の方法に従って酵母表面ディスプレイおよびＮＧＳを使用してマッピングした。手短に述べれば、ＶＩＳＴＡ  ＥＣＤの単一点突然変異体の飽和突然変異誘発ライブラリーを生成し、酵母の表面に提示させた。マッピングされている抗体に対する結合性を喪失したが、非ブロックキング抗体（ｍＡｂ１）に対する結合を保持したＶＩＳＴＡ突然変異体を選別し、配列決定した。こうした突然変異体は、ｍＡｂ１に対する結合を保持していたため、正しくフォールディングされていた可能性が高く、マッピングされている抗体に対する結合の喪失が観察されたのは、エネルギー的に重要な接触残基の喪失による可能性が高かった。こうした突然変異の位置を、抗体のエピトープのエネルギー的に重要な残基として指定した。それらは表１４に示されている。
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【０２８７】
表１５には、表１４の詳細なデータが含まれており、酵母表面ディスプレイ／ＮＧＳ法で観察された残基頻度に基づき、列挙されている各抗体の結合を低減する可能性の高いｈＶＩＳＴＡのアミノ酸残基が列挙されている。
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【０２８８】
図１１Ｂおよび図１１Ｃには、表１４に列挙されているブロッキングｈＶＩＳＴＡ抗体の残基をすべて含むエピトープ（図１１Ｂ）が、非ブロッキングｈＶＩＳＴＡ抗体のエピトープ（ｍＡｂ１；図１１Ｃ）と比較して図示されている。アミノ酸残基６６（Ｈ）および１６２（Ａ）は、分子の向きを表すために示されている。ヒスチジン残基は灰色であり、エピトープ残基は黒色である。顕著なことには、ブロッキング抗ＶＩＳＴＡ  ｍＡｂはすべて同じエピトープ領域を占めており、ｏｃｔｅｔビニングデータ（それらが互いに競合したことを示す）と一致し、調査した抗体中にではわずかな残基差異がある。対照的に、非ブロッキングｈＶＩＳＴＡ抗体（ｍＡｂ１）は、ｈＶＩＳＴＡ分子上の異なるエピトープ領域を占めており、これは、ブロッキングｍＡｂがいずれもｍＡｂ１と競合しなかったことを示すｏｃｔｅｔビニングデータによりさらに支持される。
【０２８９】
実施例１６：‘７６１および‘７６７の生物物理学的特質
Ｐ１−０６８７６１およびＰ１−０６８７６７の物理的および化学的特質を、以下の分析的および生物物理学的技法により、親Ｐ１−０６１０２９（すべてＩｇＧ１．３定常領域を有する）の物理的および化学的特質と比較した。
【０２９０】
Ｓｈｏｄｅｘ（商標）ＫＷ４０３−４Ｆカラム（４．６ｍｍ  ＩＤ×３００ｍｍＬ）を使用したＡｇｉｌｅｎｔ１２６０  ＨＰＬＣ機器を使用し、１００ｍＭリン酸ナトリウム、１５０ｍＭ塩化ナトリウム、ｐＨ７．３（０．２ｕｍ濾過）を含むバッファーを流速０．３０ｍＬ／分で流して、分析的ＳＥＣデータを得た。データは、２８０ｎｍでデータ収集するように設定されたＡｇｉｌｅｎｔ１２６０  Ｉｎｆｉｎｉｔｙダイオードアレイ検出器により収集し、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｃｈｅｍｓｔａｔｉｏｎソフトウェア（Ａｇｉｌｅｎｔ、サンタクララ、カリフォルニア州）により分析した。
【０２９１】
Ａｌｃｏｔｔ７２０ＮＶオートサンプラーを備えたＰｒｏｔｅｉｎＳｉｍｐｌｅ  ｉＣＥ３機器で、イメージキャピラリー等電点電気泳動法（ｉｃＩＥＦ）データを得た。抗体試料を、０．２ｍｇ／ｍｌ抗体、０．３５％メチルセルロース、２．０Ｍ尿素、１ｖ／ｖ％ファルマライトｐＩ５〜８、および３ｖ／ｖ％ファルマライトｐＩ８〜１０．５の最終濃度を得るように分離混合物と混合した。こうした試料を、ＦＣ被覆のＰｒｏｔｅｉｎＳｉｍｐｌｅ  ｃＩＥＦカートリッジ（製品＃１０１７０１）にて、１５００Ｖで１分間の予集束時間、３０００Ｖで１０分間の集束時間を使用して分析した。データは、ｉＣＥ  ＣＦＲソフトウェアＶ４．３．１．５３５２を使用して分析した。
【０２９２】
抗体流体力学的サイズを動的光散乱（ＤＬＳ）で決定し、ＵＮｃｌｅ分子特徴づけ機器（Ｕｎｃｈａｉｎｅｄ  Ｌａｂｓ）を使用して、蛍光分光法および静的光散乱（ＳＬＳ）により、熱安定性を特徴を明らかにした。抗体Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７６１、およびＰ１−０６８７６７を、１×ＰＢＳバッファーで２ｍｇ／ｍｌの濃度に調製し、その後、１×ＰＢＳ中の４０ｍＭ  Ｔｒｉｓまたは１×ＰＢＳ中の４０ｍＭクエン酸塩のいずれかで異なるｐＨにて１：１希釈し、ｐＨ３．０、４．０、５．０、６．０、７．０、８．０、または９．０の２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ／１×ＰＢＳまたは２０ｍＭクエン酸塩／１×ＰＢＳのいずれかでの１ｍｇ／ｍｌ抗体の最終試料を得た。こうした試料を、ＵＮｉキュベットカートリッジにロードし、様々なｐＨ調合物に希釈した１時間以内に分析した。ＤＬＳデータは、２５℃で４回各々５秒間収集した。強度自己相関関数は、ＵＮｃｌｅ分析ソフトウェアバージョンＶ２．０を使用してフィッティングした。熱変性データは、試料を、２６６ｎｍおよび４７３ｎｍで励起して、２５℃から９０℃まで０．５℃／分のスキャン速度でスキャンすることにより得た。蛍光データは、２５０ｎｍ〜７２０ｎｍの範囲にわたって得た。蛍光およびＳＬＳデータは、ＵＮｃｌｅ分析ソフトウェアバージョンＶ２．０を使用して分析した。
【０２９３】
抗体Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７６１、およびＰ１−０６８７６７の見掛け粘度を、調合した抗体溶液の存在下でのポリスチレンビーズの拡散速度を測定するビーズベースＤＬＳ法を使用して、Ｕｎｃｈａｉｎｅｄ  Ｌａｂｓの推薦プロトコールの通りに、ＵＮｃｌｅ分子特徴づけ機器（Ｕｎｃｈａｉｎｅｄ  Ｌａｂｓ）で測定した。手短に述べれば、１００ｎｍポリスチレンビーズの１０％溶液（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ｃａｔ＃３１００Ａ）を、０．５％ｔｗｅｅｎ８０を含む調合バッファーで調製した。３ｕｌのこのポリスチレンビーズ混合物を、３０ｕｌの調合抗体（２０ｍＭヒスチジン、２６０ｍＭスクロース、ｐＨ６．０で種々のＡｂ濃度）に添加し、得られたタンパク質／ビーズ混合物を、ＵＮｉキュベットカートリッジの３つの別々のレーン（各レーン９ｕｌ）にロードし、３連で分析した。データは、１．３ｃＰの基準粘度を使用して、ＵＮｃｌｅ分析ソフトウェアバージョンＶ２．０で分析した。
【０２９４】
抗体Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７６１、およびＰ１−０６８７６７の物理的安定性を、２０ｍＭヒスチジン、２６０ｍＭスクロース  ｐＨ６．０で５０ｍｇ／ｍｌ抗体試料を調製し、４週間にわたって４０℃の熱ストレスに曝すことにより、加速ストレス条件下で研究した。４０℃でのインキュベーション直前（時間ゼロ＝ｔ０）ならびに熱ストレスの１週間後（１ｗ）および４週間後（４ｗ）にアリコートを取り出し、調合バッファーを使用して試料を２ｍｇ／ｍｌに希釈し、ａＳＥＣで分析した。Ｓｈｏｄｅｘ  ＫＷ４０３−４Ｆカラム（４．６ｍｍ  ＩＤ×３００ｍｍＬ）を使用したＡｇｉｌｅｎｔ１２６０  ＨＰＬＣ機器を使用し、１００ｍＭリン酸ナトリウム、１５０ｍＭ塩化ナトリウム、ｐＨ７．３（０．２ｕｍ濾過）を含むバッファーを流速０．３０ｍＬ／分で流して、ａＳＥＣデータを得た。データは、２８０ｎｍでデータ収集するように設定されたＡｇｉｌｅｎｔ１２６０  Ｉｎｆｉｎｉｔｙダイオードアレイ検出器により収集し、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｃｈｅｍｓｔａｔｉｏｎソフトウェア（Ａｇｉｌｅｎｔ、サンタクララ、カリフォルニア州）により分析した。
【０２９５】
結果（resuts）は、以下の通りである。分析的サイズ排除クロマトグラフィー（ａＳＥＣ）データは、３つの抗体すべてを高純度に精製することができ、各抗体試料は、９９．３％よりも多いモノマー（メインピーク）、０．７％未満の高分子量（ＨＭＷ）種、および検出不能レベルの低分子量（ＬＭＷ）種からなることを示した、表１６。
表16:高分子量種のパーセンテージ(%HMW)、単量体/主要種のパーセンテージ(%Main)、および低分子量種のパーセンテージ(%LMW)を示す、抗VISTA抗体の分析的SECデータ
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【０２９６】
抗体Ｐ１−０６１０２９のイメージキャピラリー等電点電気泳動法（ｉｃＩＥＦ）により決定した荷電変異体プロファイルは、８．５６の等電点（ｐＩ）を有する主要種（６９．４％）の存在および３０．６％の酸性種を示した。（図１２Ａ〜１２Ｃ。）Ｐ１−０６８７６１は、６．６９のｐＩを有する主要種（６６．４％）および３３．６％の酸性種を示した。Ｐ１−０６８７６７は、６．６３のｐＩを有する主要種（６１．４％）および３８．６％の酸性種を示した。したがって、酸性種、塩基性種、および主要種の分布は、３つの抗体で類似しているが、操作された抗体Ｐ１−０６８７６１およびＰ１−０６８７６７は、親Ｐ１−０６１０２９抗体より著しく低い等電点を有する。
【０２９７】
Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７６１、およびＰ１−０６８７６７のオリゴマー状態を、様々なｐＨのバッファーでの動的光散乱（ＤＬＳ）を使用して３〜９のｐＨ領域にわたって決定した（wasere determined）。各抗体の流体力学半径（Ｒｈ）値はすべて、単量体抗体試料に典型的な４．８〜５．７ｎＭの範囲であった、表１７。これは、こうした抗体が、１ｍｇ／ｍｌでは、３〜９のｐＨを有する調合物に希釈した最初１時間以内では検出可能なレベルの高分子量凝集種を形成しないことを示唆する。
表17:抗VISTA抗体の1mg/ml試料のDLSによりpH3〜pH9のpH領域にわたって決定された流体力学的半径。
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【０２９８】
Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７６１、およびＰ１−０６８７６７の熱安定性を、様々なｐＨのバッファー中で蛍光および静的光散乱を温度の関数としてモニターすることにより、３〜９のｐＨ領域にわたって測定した。典型的にはＩｇＧ１抗体のＣＨ２ドメインの変性を表す最初の熱変性遷移（Ｔｍ１）を、蛍光により決定した。これは表１８に示されている。典型的にはＩｇＧ１抗体のＦＡＢドメインの変性を表す凝集開始（Ｔａｇｇ）を、静的光散乱により測定した。これは、表１９に示されている。中性ｐＨ（ｐＨ７．０）のＴｒｉｓ／ＰＢＳ調合物中では、３つの抗体のＴｍ１値は、Ｐ１−０６１０２９（６７．４℃）、Ｐ１−０６８７６１（６７．０℃）、およびＰ１−０６８７６７（６５．３℃）であり、Ｔａｇｇ値は、Ｐ１−０６１０２９（６７．８℃）、Ｐ１−０６８７６１（６７．５℃）、およびＰ１−０６８７６７（６５．８℃）であった。同じ中性ｐＨ７．０またはわずかにより酸性ｐＨ６．０のクエン酸塩／ＰＢＳ調合物中の各抗体のＴｍ１は、Ｔｒｉｓ／ＰＢＳ  ｐＨ７．０値の０．７°以内であった。しかしながら、各抗体のＴｍ１値は、より塩基性のｐＨ８〜９ではわずかにより低く（０．３°〜１．１°だけより低い）、より酸性のｐＨ３〜５では著しく低かった。中性ｐＨと比較して、Ｐ１−０６１０２９のＴａｇｇは、より塩基性ｐＨ８．０〜９．０ではｐＨ７．０値の０．１°以内であり、ｐＨ５．０では１．０°だけより低く、最も酸性ｐＨ条件であるｐＨ３．０〜４．０では非常により低かった（６．１°〜１９．６°だけより低い）。また、Ｐ１−０６８７６１およびＰ１−０６８７６７のＴａｇｇは、ｐＨ３．０〜４．０では著しくより低かった。しかしながら、ｐＨ５．０では、Ｐ１−０６８７６１のＴａｇｇは、ｐＨ６．０でのＴａｇｇよりもわずか０．２°だけ低いに過ぎなかったが、Ｐ１−０６８７６７のＴａｇｇは、ｐＨ５．０では、ｐＨ６．０よりも２．２°だけより低く、各抗体のＴａｇｇはある程度の差異を示した、表１９。
表18:蛍光分光学法によりpH3〜pH9のpH領域にわたって決定されたP1-061029、P1-068761、P1-068767の熱安定性(Tm1値)
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表19:静的光散乱法によりpH3〜pH9のpH領域にわたって決定されたP1-061029、P1-068761、P1-068767の熱安定性(Tagg値)
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【０２９９】
Ｐ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７６１、およびＰ１−０６８７６７の見掛け粘度を、調合した抗体溶液の存在下でのポリスチレンビーズの拡散速度を測定するビーズベースＤＬＳ法を使用して測定した。４４ｍｇ／ｍｌの３つの抗体すべての比較は、操作された抗体は両方とも、こうした条件下では親抗体と同様の粘度を有すること示す、表２０。第２の研究では、Ｐ１−０６８７６１およびＰ１−０６８７６７の追加のタンパク質材料を、より高い濃度に濃縮して、粘度を１３６ｍｇ／ｍｌ、１００ｍｇ／ｍｌ、および５０ｍｇ／ｍｌで分析した。こうしたデータは、より高い抗体濃度での見掛け粘度の増加を示し、１３６ｍｇ／ｍｌでの最大見掛け粘度は、Ｐ１−０６８７６１では５．７±０．７であり、Ｐ１−０６８７６７では５．３±０．６であったことを示す。
表20:20mMヒスチジン、260mMスクロース  pH6.0で25℃にてビーズベースDLS法により決定された抗体の見掛け粘度(cP)。値は、3つのUNiレーンのデータの平均および標準偏差を表す。
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【０３００】
２０ｍＭヒスチジン、２６０ｍＭスクロース  ｐＨ６．０中のＰ１−０６１０２９、Ｐ１−０６８７６１、およびＰ１−０６８７６７の５０ｍｇ／ｍｌ試料の物理的安定性を、４０℃で４週間にわたって加速ストレス条件下で研究した。抗体のオリゴマー状態を、４０℃でのインキュベーション直前（時間ゼロ＝ｔ０）ならびに４０℃ストレスの１週間後（１ｗ）および４週間後（４ｗ）の試料のａＳＥＣによりモニターした。こうしたデータは、３つの抗体すべてが、４０℃で４週間後に９６％よりも多くの単量体種を保持し、ＨＭＷ種は低レベルであり（＜１．６％ＨＭＷ）、ＬＭＷ種（＜２．０％ＬＭＷ）は低レベルであったことを示す、表２１。
表21:t0、1w、および4w試料の、高分子量種のパーセンテージ(%HMW)、単量体/主要種のパーセンテージ(%Main)、および低分子量種のパーセンテージ(%LMW)を示す、抗VISTA抗体加速安定性試料のaSECデータ
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【０３０１】
配列表
下記は、本出願で参照されたある特定の配列の表である。配列番号２では、アミノ酸１８７位は、ＤまたはＥのいずれであってもよい。
【０３０２】
下記の抗体配列では、ＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列は、それぞれアミノ酸２６〜３５、５０〜６６、および９９〜１１０を含むアミノ酸位置に位置し、ＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列は、それぞれアミノ酸２４〜３５、５１〜５７、および９０〜９８を含むアミノ酸位置に位置する。ＶＨ  ＣＤＲ１は、ＡｂＭに従って付番されており（ＡＡ２６〜３５；AbhinandanおよびMartin（２００８年）Mol. Immunol.  ４５巻：３８３２〜３８３９頁；Swindellsら（２０１７年）J. Mol. Biol.  ４２９巻：３５６〜３６４頁）、他のＣＤＲはすべて（ＶＨ  ＣＤＲ２、ＶＨ  ＣＤＲ３、ＶＬ  ＣＤＲ１〜３）は、カバットに従って付番されている。特定の抗体種のＣＤＲ配列は、それらのＶＨおよびＶＬ配列が太字および下線で示されている。
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【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図４Ｄ】
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【図４Ｅ】
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【図５Ａ−５Ｂ】
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【図５Ｃ−５Ｄ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図６Ｄ】
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【図６Ｅ】
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【図６Ｆ】
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【図６Ｇ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図７Ｄ】
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【図７Ｅ】
2020509756.tif 000096
【図７Ｆ】
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【図８Ａ−８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図８Ｄ】
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【図８Ｅ】
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【図８Ｆ】
2020509756.tif 000102
【図９】
2020509756.tif 000103
【図１０Ａ】
2020509756.tif 000104
【図１０Ｂ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ−１１Ｃ】
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【図１２Ａ−１２Ｃ】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ａ−１】
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【図１３Ｂ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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