(57)【要約】  本開示は、対象の中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分に神経保護ポリペプチドを送達する方法を提供する。この方法は、治療的有効量の神経保護ポリペプチドを、神経保護ポリペプチドの持続放出を提供する制御放出調製物またはデバイスを用いて、対象の全身循環血流に投与することを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物または神経保護ポリペプチドの持続放出は、神経保護ポリペプチドの速放調製物と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過によるＣＮＳの少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達を増大させる。また、本開示は、ＣＮＳ関連疾患を有する対象を処置する、またはＣＮＳ関連疾患の少なくとも１種の症状の低減を必要とする対象においてその症状を低減する方法をも開示する。
2020500163.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象の中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分に神経保護ポリペプチドを送達する方法であって、
治療的有効量の前記神経保護ポリペプチドを、前記神経保護ポリペプチドの持続放出を提供する制御放出調製物またはデバイスを用いて、前記対象の全身循環血流に投与する工程であって、前記神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドを含む、工程を含み、
前記神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、
前記制御放出神経保護調製物または前記神経保護ポリペプチドの持続放出は、前記神経保護ペプチドの速放調製物と比較して、前記対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への前記神経保護ポリペプチドの送達および／または取り込みを増大させる、方法。
【請求項２】
前記制御放出調製物は、前記神経保護ポリペプチドの持効性調製物である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記制御放出調製物は、有効量の前記神経保護ポリペプチドの生物学的利用能および持続放出を十分な時間にわたって実現するために、特定の粘度を有する生分解性ポリマーと、被覆材料とをさらに含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記制御放出神経保護調製物は、
前記神経保護ポリペプチドを含むコアと生分解性ポリマーとを含む制御放出微小球と、
前記コアを被覆する被覆層とを含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記持効性調製物は、前記神経保護ポリペプチドの持続放出のためのデポー剤調製物を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
前記持効性調製物は、前記神経保護ポリペプチドの持続放出のための組成物を含む、請求項２または３に記載の方法。
【請求項７】
中枢神経系（ＣＮＳ）関連疾患を有する対象を処置する、またはＣＮＳ関連疾患の少なくとも１種の症状の低減を必要とする対象においてその症状を低減する方法であって、
治療的有効量の神経保護ポリペプチドを、前記神経保護ポリペプチドの持続放出を提供する制御放出調製物またはデバイスを用いて、前記対象の全身循環血流に投与する工程であって、前記神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドを含む、工程を含み、
前記神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、
前記制御放出神経保護調製物または前記神経保護ポリペプチドの持続放出は、前記神経保護ポリペプチドの速放調製物と比較して、前記対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への前記神経保護ポリペプチドの送達を増大させる、方法。
【請求項８】
前記制御放出調製物は、前記神経保護ポリペプチドの持効性調製物である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記制御放出調製物は、特定の粘度を有する生分解性ポリマーと、被覆材料とをさらに含み、有効濃度における前記神経保護ポリペプチドの生物学的利用能および持続放出が、ある期間にわたって継続する、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
前記制御放出神経保護調製物は、
前記神経保護ポリペプチドを含むコアと生分解性ポリマーとを含む制御放出微小球と、
前記コアを被覆する被覆層とを含む、請求項７〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記持効性調製物は、前記神経保護ポリペプチドの持続放出のためのデポー剤調製物を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
前記持効性調製物は、前記神経保護ポリペプチドの持続放出のための組成物を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
前記生分解性ポリマーは、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリグリコリド（ＰＧＡ）、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）、ポリオルトエステル、ポリ酸無水物、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、およびポリアルキルカーボネートからなる群より選択されるか、これらのポリマーの群から選択される２種以上のポリマーの共重合体もしくは単純な混合物であるか、前記ポリマーとポリエチレングリコール（ＰＥＧ）との共重合体であるか、または、糖と前記ポリマーもしくは前記共重合体とがカップリングしてなるポリマー−糖複合体である、請求項３、４、９、または１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記制御放出神経保護調製物の投与は、前記対象への前記制御放出神経保護調製物の注射を含む、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記対象への前記制御放出調製物の注射は、皮下注射である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記制御放出調製物の投与は、先行する投与の実施から、約７〜約２１日後に（たとえば、約７、約８、約９、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４、約１５、約１６、約１７、約１８、約１９、約２０、または約２１日に１回にて）実施される、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記デバイスは、前記制御放出調製物の持続放出を提供する、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記デバイスは、ポンプ（たとえば、ポンプ、ミニポンプ、浸透圧ポンプ、浸透圧送達デバイス、輸液ポンプ、静脈内投与デバイス、蠕動ポンプ、または小型輸液ポンプなど）である、請求項１、８、または１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記神経保護ポリペプチドは、前記デバイスを用いて、約１ｐＭ／ｋｇ／分〜約３０ｐＭ／ｋｇ／分（たとえば、約３ｐＭ／ｋｇ／分〜約１７．５ｐＭ／ｋｇ／分）の速度で投与される、請求項１、８、１７、または１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
全身循環血流への前記神経保護ポリペプチドの投与は、前記対象における少なくとも１種のＣＮＳ関連状態の少なくとも１種の症状を緩和する、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記ＣＮＳ関連状態は、パーキンソン病（ＰＤ）、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、多発性硬化症、薬物嗜癖、アルコール嗜癖、神経変性状態、脳の炎症、アルツハイマー病（ＡＤ）、多系統萎縮症、ハンチントン病、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、運動ニューロン疾患（たとえば、筋萎縮性側索硬化症、脊髄損傷、脊髄小脳失調（ＳＣＡ）、脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ））、脳血管性認知症、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）、混合型認知症、前頭側頭型認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病、正常圧水頭症、またはそれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記制御放出調製物の投与により、またはデバイスを用いた前記神経保護ポリペプチドの持続放出の提供により、血漿中の前記神経保護ポリペプチドの濃度が、約５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬの範囲内で安定状態となる、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記制御放出調製物の投与により、またはデバイスを用いた前記神経保護ポリペプチドの持続放出の提供により、脳脊髄液（ＣＳＦ）、脳、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種における前記神経保護ポリペプチドの濃度が、累積的に増加する、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
ＣＳＦ中の前記神経保護ポリペプチドの濃度は、約１０〜約４００ｐｇ／ｍＬの範囲内である、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
安定状態での血漿中の前記ポリペプチドの濃度に対する、安定状態でのＣＦＳ中の前記ポリペプチドの濃度の比率は、約０．１％〜約５％の範囲内である、請求項１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
前記エキセンジン−４類似体は、化学式Ｉで表される、またはその薬学的に許容される塩である、請求項１〜２５のいずれか１項に記載の方法：
Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ａｌａ  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１  Ｘａａ２２  Ｘａａ２３  Ｘａａ２４  Ｘａａ２５  Ｘａａ２６  Ｘａａ２７  Ｘａａ２８  −Ｚ１
（化学式Ｉ）
（式中、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４−イミダゾプロピオニルであり、
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり、
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり、
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり、
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり、
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり、
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり、
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり、
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり、
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり、
Ｘａａ２０は、Ａｌａ、またはＡｒｇであり、
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ−ＮＨε−Ｒであり、ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、または炭素数１〜１０の直鎖状もしくは分枝状のアルカノイルであり、
Ｘａａ２２は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、ｔｅｒｔ−ブチルグリシン、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり、
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり、
Ｘａａ２７は、ＡｌａまたはＬｙｓであり、
Ｘａａ２８は、ＡｌａまたはＡｓｎであり、かつ
Ｚ１は、−ＯＨ、−ＮＨ２、Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８−Ｚ２、またはＧｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８  Ｘａａ３９−Ｚ２であり、
Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、およびＸａａ３８は、独立して、Ｐｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ−アルキルグリシン、Ｎ−アルキルペンチルグリシン、またはＮ−アルキルアラニンからなる群より選択され、Ｘａａ３９は、Ｓｅｒ、またはＴｙｒであり（たとえば、Ｓｅｒであり）、かつ
Ｚ２は、−ＯＨ、または−ＮＨ２であり、
ただし、
Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、およびＸａａ２８のうち、Ａｌａであるものは３つを超えず、かつ
Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｙｒである場合、Ｘａａ３、Ｘａａ４、およびＸａａ９のうち少なくとも１つはＡｌａである）。
【請求項２７】
前記エキセンジン−４類似体は、化学式ＩＩで表される、またはその薬学的に許容される塩である、請求項１〜２５のいずれか１項に記載の方法：
Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ａｌａ  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１  Ｘａａ２２  Ｘａａ２３  Ｘａａ２４  Ｘａａ２５  Ｘａａ２６  Ｘ１−Ｚ１
（化学式ＩＩ）
（式中、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４−イミダゾプロピオニルであり、
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり、
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり、
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり、
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり、
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり、
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり、
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり、
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり、
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり、
Ｘａａ２０は、ＡｌａまたはＡｒｇであり、
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ−ＮＨε−Ｒであり、ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、炭素数１〜１０の直鎖状もしくは分枝状のアルカノイル、またはシクロアレイル−アルカノイルであり、
Ｘａａ２２は、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、ｔｅｒｔ−ブチルグリシン、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり、
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり、
Ｘ１は、Ｌｙｓ  Ａｓｎ、Ａｓｎ  Ｌｙｓ、Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒ  Ａｓｎ、Ａｓｎ  Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒ、Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒ  Ａｌａ、Ａｌａ  Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒであり、ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、炭素数１〜１０の直鎖状もしくは分枝状のアルカノイル、またはシクロアルキルアルカノイルであり、
Ｚ１は、−ＯＨ、−ＮＨ２、Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８−Ｚ２、またはＧｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８  Ｘａａ３９−Ｚ２であり、
Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、およびＸａａ３８は、独立して、Ｐｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ−アルキルグリシン、Ｎ−アルキルペンチルグリシン、およびＮ−アルキルアラニンからなる群より選択され、Ｘａａ３９は、ＳｅｒまたはＴｙｒであり、かつ
Ｚ２は、−ＯＨまたは−ＮＨ２であり、
ただし、
Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、およびＸａａ２６のうち、Ａｌａであるものは３つを超えず、かつ
Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、または４−イミダゾプロピオニルである場合、Ｘａａ３、Ｘａａ４、およびＸａａ９のうち少なくとも１つはＡｌａである）。
【請求項２８】
前記神経保護ポリペプチドは、配列番号１〜５５からなる群より選択される、請求項１〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願との相互参照
本願は、２０１６年１０月２０日付で提出された米国仮出願第６２／４１０，７４８号に基づく優先権を主張するものであり、その全体を引用により本明細書に援用する。
【０００２】
政府による資金提供
本願を裏付ける研究は、米国保健福祉省長官が代表するところの米国によって実施されたものである。米国政府は、本発明について一定の権利を有する。
【０００３】
引用による援用
３７Ｃ．Ｆ．Ｒ．§１．５２（ｅ）（５）にしたがって、電子ファイル（ファイル名：１５６８３９０＿１００ＷＯ２＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿Ｌｉｓｔｉｎｇ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ、サイズ：２４．４ＫＢ、作成：２０１７年９月３日にＰＡＴＥＮＴ−Ｉｎ  ３．５およびＣｈｅｃｋｅｒ  ４．４．０の使用により）に含まれる配列情報の全体を、引用により本明細書に援用する。
【０００４】
背景
分野
本開示は、たとえばグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）、エキセンジン−４、および／またはそれらのペプチド類似体などの、神経保護治療用ポリペプチドを含有する組成物に関する。特に、本開示は、神経変性状態を処置するために、血漿中の神経保護治療用ポリペプチドレベルを安定状態で維持し、これにより、血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による脳への送達を促進する方法に関する。
【背景技術】
【０００５】
背景技術
グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）は、正常時に食物に応答して腸の神経内分泌細胞から分泌されるホルモンであるが、２型糖尿病の新たな処置としての利用が示唆されている（Ｇｕｔｎｉａｋ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２；Ｎａｕｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，，１９９３）。ＧＬＰ−１は、ベータ細胞によるインスリン放出を増加させ、この効果は、長期２型糖尿病患者においても見られる（Ｎａｕｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，，１９９３）。ＧＬＰ−１は内因性インスリン分泌を刺激し、この刺激は、血中グルコースレベルが低下すると消失することから、ＧＬＰ−１処置はインスリン療法よりも優れている（Ｎａｕｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，，１９９３；Ｅｌａｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４）。ＧＬＰ−１は、インスリンの放出および合成を増大させ、グルカゴンの放出を阻害し、かつ胃内容排出を低減することによって、正常血糖となるよう促す（Ｎａｕｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，，１９９３；Ｅｌａｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４；Ｗｉｌｌｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６；Ｎａｔｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２；Ｄｅ  Ｏｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７）。ＧＬＰ−１は、プログルカゴンの翻訳後修飾産物である。ＧＬＰ−１の配列ならびにその活性断片であるＧＬＰ−１（７−３７）およびＧＬＰ−１（７−３６）アミドの配列は、当技術分野において周知である（Ｆｅｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５）。ＧＬＰ−１は糖尿病処置における治療剤として提案されてはいるが、生物学的半減期が短く（Ｄｅ  Ｏｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７）、ボーラス皮下投与時においても生物学的半減期が短い（Ｒｉｔｚｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５）。ＧＬＰ−１（およびＧＬＰ−１（７−３６）アミド）の分解は、ひとつには、このポリペプチドを８位と９位のアミノ酸（アラニンおよびグルタミン酸）の間で切断する酵素ジペプチジルペプチダーゼ（ＤＰＰ  １Ｖ）によるものである。
【０００６】
エキセンジン−４は、ドクトカゲ（Ｇｉｌａ  ｍｏｎｓｔｅｒ  ｌｉｚａｒｄ）の唾液腺において産生されるポリペプチドである（Ｇｏｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３）。エキセンジン−４のアミノ酸配列は、当技術分野において周知である（Ｆｅｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．１９９５）。エキセンジン−４は、非哺乳類に特有の遺伝子産物であり、発現が唾液腺中に限定されるようではあるが（Ｃｈｅｎ  ａｎｄ  Ｄｒｕｃｋｅｒ，１９９７）、ＧＬＰ−１とのアミノ酸配列相同性が５２％であり、哺乳類体内においてＧＬＰ−１受容体と相互に作用する（Ｇｏｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３；Ｔｈｏｒｅｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３）。ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて、エキセンジン−４は、インスリン産生細胞によるインスリン分泌を促進することが示されており、また、インスリン産生細胞によるインスリン放出を引き起こす効力は、等モル量のＧＬＰ−１の投与よりも高い。さらに、エキセンジン−４は、齧歯類およびヒトの両方においてインスリン放出を強く刺激して血漿グルコースレベルを低下させ、かつ、ＧＬＰ−１よりも持効性が高い。しかしながら、エキセンジン−４は、哺乳類において天然に存在するわけではないため、哺乳類において、ＧＬＰ−１にはない抗原特性を、ある程度有している可能性がある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
このように糖尿病においてインスリン産生が減少することの他にも、末梢神経障害と糖尿病とは相互に関連している。全糖尿病患者の２０〜３０パーセントが最終的には末梢神経障害を発病する。さらに、アルツハイマー病患者は、心疾患、脳卒中、高血圧、および糖尿病を発病するリスクが高いという報告がある（Ｍｏｃｅｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０００；Ｏｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９）。したがって、糖尿病は、神経変性疾患にも関連する疾患である。
【０００８】
ＧＬＰ−１受容体は、齧歯類（Ｊｉｎ  ｅｔ  ａｌ．１９８８，Ｓｈｕｇｈｒｕｅ  ｅｔ  ａｌ．１９９６，Ｊｉａ  ｅｔ  ａｌ．２０１５）およびヒト（Ｗｅｉ  ａｎｄ  Ｍｏｊｓｏｖ  １９９５，Ｓａｔｏｈ  ｅｔ  ａｌ．２０００）の脳に存在する。この分布の化学的な構成は、概ね、視床下部、視床、脳幹、外側中隔、脳弓下器官、および最後野に限定されるようであり、一般的に、こうした脳室周囲領域のいずれにも多数のペプチド受容体が存在する。しかしながら、ＧＬＰ−１の特異的結合部位は、低密度ではあるが、尾状核被殻、大脳皮質、および小脳にかけても検出されている（Ｃａｍｐｏｓ  ｅｔ  ａｌ．１９９４，Ｃａｌｖｏ  ｅｔ  ａｌ．１９９５，ａｎｄ  Ｇｏｋｅ  ｅｔ  ａｌ．１９９５）。たとえば、Ｌｕら（２０１４）の報告によれば、ＧＬＰ−１受容体の発現は、Ｍｕｓｔｅｌａ  ｐｕｔｏｒｉｕｓ  ｆｕｒｏ（フェレット）の扁桃体、小脳、前頭皮質、海馬、視床下部、中脳、髄質、脳橋、線条、視床、および側頭皮質にみられる。ＧＬＰ−１受容体の脳内発現レベルは、加齢の影響を受けない。
【０００９】
さらに、ＧＬＰ−１は、認知と挙動とに関与することが示されている。（Ｄｕｒｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．２００３）。実際、多くの研究によれば、ＧＬＰ−１受容体作動薬が、パーキンソン病、アルツハイマー病、ハンチントン病、外傷性脳損傷、脳卒中、および末梢神経障害を含む神経変性疾患の新たな処置法であることが示唆されている。しかしながら、中枢神経系（ＣＮＳ）関連疾患の処置に用いるためには、血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）への薬物送達が、大きな壁となる。たとえば、ＧＬＰ−１の半減期は１〜２分間と短く、また、不活性化に対する耐性を持たせる目的で作製されたＧＬＰ−１−トランスフェリン融合タンパク質（ＧＬＰ−１−Ｔｆ）は半減期がおよそ２日とＧＬＰ−１よりも長くはなっているものの、ＢＢＢ通過は達成されていない。Ｋｉｍら（２０１０）およびＭａｒｔｉｎら（２０１２）。
【００１０】
また、エキセンジン−４によれば、ロータロッド試験の結果がＧＬＰ−１−Ｔｆよりも改善されることが示されており（Ｍａｒｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．２０１２）、エキセンジン−４は血中から脳内に入ることが知られているが、その流入速度は十分でない（Ｋａｓｔｉｎ  ＡＪ  ａｎｄ  Ａｋｅｅｒｓｔｒｏｍ  Ｖ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｂｅｓｉｔｙ（２００３）２７，３１３−３１８）。また、エキセナチドを、後処置とともに、ＭＰＴＰパーキンソン病マウスモデルに１日１回７日間投与した結果、神経保護効果が見られないことが示されている（Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．２０１５）。
【００１１】
したがって、当技術分野において、神経変性状態を処置する方法が必要とされるとともに、血漿中の神経保護ＧＬＰ−１受容体作動薬レベルを安定状態で維持し、これにより、ＢＢＢの通過による中枢神経系への薬物送達を促進かつ推進する方法が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
概要
本開示の一態様において、対象の中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分に神経保護ポリペプチドを送達する方法が提供される。この方法は、治療的有効量の神経保護ポリペプチドを、神経保護ポリペプチドの持続放出または持続送達を提供する制御放出調製物またはデバイスを用いて、対象の全身循環血流に投与する工程であって、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドを含む、工程を含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物または神経保護ポリペプチドの持続放出は、神経保護ペプチドの速放調製物と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達および／または取り込みを増大させる。
【００１３】
本開示の別の一態様において、中枢神経系（ＣＮＳ）関連疾患を有する対象を処置する、またはＣＮＳ関連疾患の少なくとも１種の症状の低減を必要とする対象においてその症状を低減する方法が提供される。この方法は、治療的有効量の神経保護ポリペプチドを、神経保護ポリペプチドの持続放出または持続送達を提供する制御放出調製物またはデバイスを用いて、対象の全身循環血流に投与する工程であって、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドを含む、工程を含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物またはデバイスは、神経保護ポリペプチドの速放調製物と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達を増大させる。
【００１４】
本開示の一態様において、対象の中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分に神経保護ポリペプチドを送達する方法が提供される。この方法は、制御放出神経保護調製物を、対象の全身循環血流に投与することを含む。一実施形態において、制御放出神経保護調製物は、ＧＬＰ−１、エキセンジン（たとえば、エキセンジン−４）、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体（たとえば、エキセンジン−４類似体）からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン（たとえば、エキセンジン−４）、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物は、神経保護ポリペプチドの速放調製物と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達を増大させる。
【００１５】
特定の実施形態において、制御放出調製物は、神経保護ポリペプチドの持効性調製物である。
【００１６】
他の実施形態において、持効性調製物は、神経保護ポリペプチドの持続放出のためのデポー剤調製物を含む。
【００１７】
具体的な実施形態において、持効性調製物は、神経保護ポリペプチドの持続放出のための組成物を含む。
【００１８】
追加的な実施形態において、制御放出調製物は、特定の粘度を有する生分解性ポリマーと、被覆材料とをさらに含み、有効濃度における神経保護ポリペプチドの生物学的利用能および持続放出が、ある期間にわたって継続する。
【００１９】
具体的な実施形態において、制御放出神経保護調製物は、神経保護ポリペプチドを含むコアと生分解性ポリマーとを含む制御放出微小球と、コアを被覆する被覆層とを含む。
【００２０】
一実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与は、対象における少なくとも１種のＣＮＳ関連状態の少なくとも１種の症状を緩和する。
【００２１】
さらなる実施形態において、ＣＮＳ関連状態は、パーキンソン病（ＰＤ）、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、多発性硬化症、薬物嗜癖、アルコール嗜癖、神経変性状態、脳の炎症、アルツハイマー病（ＡＤ）、多系統萎縮症、ハンチントン病、慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）、運動ニューロン疾患（たとえば、筋萎縮性側索硬化症、脊髄損傷、脊髄小脳失調（ＳＣＡ）、脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ））、脳血管性認知症、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）、混合型認知症、前頭側頭型認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病、正常圧水頭症、またはそれらの組み合わせからなる群より選択される。
【００２２】
特定の一実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与は、制御放出神経保護調製物の注射を含む。
【００２３】
追加的な実施形態において、制御放出神経保護調製物の注射は、皮下注射である。たとえば、制御放出神経保護調製物の投与は、制御放出神経保護調製物の皮下注射を含んでよい。
【００２４】
別の一実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与により、血漿中の神経保護ポリペプチドの濃度が、約５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬの範囲内で安定状態となる。
【００２５】
他の実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与により、対象の脳脊髄液（ＣＳＦ）、脳、またはそれらの組み合わせにおける神経保護ポリペプチドの濃度が、累積的に増加する。
【００２６】
具体的な実施形態において、ＣＳＦ中の神経保護ポリペプチドの濃度は、約５〜約４００ｐｇ／ｍＬ（たとえば、約１０〜約４００ｐｇ／ｍＬ）の範囲内である。
【００２７】
追加的な一態様において、ＣＮＳ関連疾患を有する対象を処置する、またはＣＮＳ関連疾患の少なくとも１種の症状の低減を必要とする対象においてその症状を低減する方法が提供される。この方法は、対象に、治療的有効量の制御放出神経保護調製物を、対象の全身循環血流に投与することを含む。制御放出神経保護調製物は、ＧＬＰ−１、エキセンジン（エキセンジン−４など）、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン（エキセンジン−４など）類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン（たとえば、エキセンジン−４）、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物は、神経保護ポリペプチドの速放調製物と比較して、対象のＢＢＢの通過によるＣＮＳの少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達を増大させる。
【００２８】
特定の実施形態において、制御放出調製物は、神経保護ポリペプチドの持効性調製物である。
【００２９】
他の実施形態において、持効性調製物は、神経保護ポリペプチドの持続放出のためのデポー剤調製物を含む。
【００３０】
追加的な実施形態において、持効性調製物は、神経保護ポリペプチドの持続放出のための組成物を含む。
【００３１】
追加的な実施形態において、制御放出調製物は、特定の粘度を有する生分解性ポリマーと、被覆材料とをさらに含み、有効濃度における神経保護ポリペプチドの生物学的利用能および持続放出が、ある期間にわたって継続する。
【００３２】
具体的な実施形態において、制御放出神経保護調製物は、神経保護ポリペプチドを含むコアと生分解性ポリマーとを含む制御放出微小球と、コアを被覆する被覆層とを含む。
【００３３】
具体的な一実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与は、対象における少なくとも１種のＣＮＳ関連状態の少なくとも１種の症状を緩和する。
【００３４】
一実施形態において、このＣＮＳ状態は、パーキンソン病（ＰＤ）、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、多発性硬化症、薬物嗜癖、アルコール嗜癖、神経変性状態、脳の炎症、アルツハイマー病（ＡＤ）、多系統萎縮症、ハンチントン病、慢性外傷性脳症、運動ニューロン疾患（たとえば、筋萎縮性側索硬化症、脊髄損傷、脊髄小脳失調（ＳＣＡ）、脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ））、脳血管性認知症、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）、混合型認知症、前頭側頭型認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病、正常圧水頭症、またはそれらの組み合わせからなる群より選択される。
【００３５】
さらなる実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与は、対象への制御放出神経保護調製物の注射を含む。
【００３６】
特定の実施形態において、対象への制御放出神経保護調製物の注射は、皮下注射である。
【００３７】
追加的な実施形態において、制御放出調製物の投与により、血漿中の神経保護ポリペプチドの濃度が、約５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬの範囲内で安定状態となる。
【００３８】
いくつかの実施形態において、制御放出調製物の投与により、脳脊髄液（ＣＳＦ）、脳、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種における神経保護ポリペプチドの濃度が、累積的に増加する。
【００３９】
さらなる一態様において、対象の中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分に神経保護ポリペプチドを送達する方法が提供される。この方法は、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドの持続送達を、対象の全身循環血流に対して提供することを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物は、神経保護ペプチドの速放調製物と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達および／または取り込みを増大させる。
【００４０】
さらに別の一態様において、中枢神経系（ＣＮＳ）関連疾患を有する対象を処置する、またはＣＮＳ関連疾患の少なくとも１種の症状の低減を必要とする対象においてその症状を低減する方法が提供される。この方法は、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドの持続送達を、対象の全身循環血流に対して提供することを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物は、神経保護ポリペプチドの速放調製物と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達を増大させる。
【００４１】
一実施形態において、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドの持続放出の提供は、（１種または２種以上の）ポリペプチドの、デバイス（たとえば、ポンプ、ミニポンプ、浸透圧ポンプ、浸透圧送達デバイス、輸液ポンプ、静脈内投与デバイス、蠕動ポンプ、または小型輸液ポンプなど）による投与を含む。
【００４２】
特定の実施形態において、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドは、約１ｐＭ／ｋｇ／分〜約３０ｐＭ／ｋｇ／分（たとえば、約３ｐＭ／ｋｇ／分〜約１７．５ｐＭ／ｋｇ／分）の速度で投与される。
【００４３】
他の実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与または神経保護ポリペプチドの持続送達の提供は、対象における少なくとも１種のＣＮＳ関連状態の少なくとも１種の症状を緩和する。
【００４４】
具体的な実施形態において、ＣＮＳ関連状態は、パーキンソン病（ＰＤ）、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、多発性硬化症、薬物嗜癖、アルコール嗜癖、神経変性状態、脳の炎症、アルツハイマー病（ＡＤ）、多系統萎縮症、ハンチントン病、慢性外傷性脳症、運動ニューロン疾患（たとえば、筋萎縮性側索硬化症、脊髄損傷、脊髄小脳失調（ＳＣＡ）、脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ））、脳血管性認知症、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）、混合型認知症、前頭側頭型認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病、正常圧水頭症、またはそれらの組み合わせからなる群より選択される。
【００４５】
一実施形態において、制御放出調製物の投与または神経保護ポリペプチドの持続放出の提供により、血漿中の神経保護ポリペプチドの濃度が、約５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬの範囲内で安定状態となる。
【００４６】
特定の実施形態において、制御放出調製物の投与または神経保護ポリペプチドの持続放出の提供により、脳脊髄液（ＣＳＦ）、脳、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種における神経保護ポリペプチドの濃度が、累積的に増加する。
【００４７】
さらに別の一実施形態において、ＣＳＦ中の神経保護ポリペプチドの濃度は、約５〜約４００ｐｇ／ｍＬの範囲内である。
【００４８】
いくつかの実施形態において、安定状態での血漿中のポリペプチドの濃度に対する、安定状態でのＣＦＳ中のポリペプチドの濃度の比率は、約０．１％〜約５％の範囲内である。
【００４９】
さらなる実施形態において、神経保護ポリペプチドは、配列番号１〜５５からなる群より選択される。たとえば、神経保護ポリペプチドは、配列番号１〜５５から選択されるアミノ酸配列を含んでよい。
【００５０】
他の実施形態において、エキセンジン−４類似体は、化学式Ｉで表される、またはその薬学的に許容される塩である：
Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ａｌａ  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１  Ｘａａ２２  Ｘａａ２３  Ｘａａ２４  Ｘａａ２５  Ｘａａ２６  Ｘａａ２７  Ｘａａ２８  −Ｚ１
（化学式Ｉ）
（式中、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４−イミダゾプロピオニルであり、
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり、
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり、
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり、
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり、
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり、
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり、
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり、
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり、
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり、
Ｘａａ２０は、Ａｌａ、またはＡｒｇであり、
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ−ＮＨε−Ｒであり、ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、または炭素数１〜１０の直鎖状もしくは分枝状のアルカノイルであり、
Ｘａａ２２は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、ｔｅｒｔ−ブチルグリシン、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり、
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり、
Ｘａａ２７は、ＡｌａまたはＬｙｓであり、
Ｘａａ２８は、ＡｌａまたはＡｓｎであり、かつ
Ｚ１は、−ＯＨ、−ＮＨ２、Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８−Ｚ２、またはＧｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８  Ｘａａ３９−Ｚ２であり、
Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、およびＸａａ３８は、独立して、Ｐｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ−アルキルグリシン、Ｎ−アルキルペンチルグリシン、またはＮ−アルキルアラニンからなる群より選択され、Ｘａａ３９は、Ｓｅｒ、またはＴｙｒであり（たとえば、Ｓｅｒであり）、かつ
Ｚ２は、−ＯＨ、または−ＮＨ２であり、
ただし、
Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、およびＸａａ２８のうち、Ａｌａであるものは３つを超えず、かつ
Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｙｒである場合、Ｘａａ３、Ｘａａ４、およびＸａａ９のうち少なくとも１つはＡｌａである）。
【００５１】
他の実施形態において、エキセンジン−４類似体は、化学式ＩＩで表される、またはその薬学的に許容される塩である：
Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ａｌａ  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１  Ｘａａ２２  Ｘａａ２３  Ｘａａ２４  Ｘａａ２５  Ｘａａ２６  Ｘ１−Ｚ１
（化学式ＩＩ）
（式中、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４−イミダゾプロピオニルであり、
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり、
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり、
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり、
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり、
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり、
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり、
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり、
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり、
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり、
Ｘａａ２０は、ＡｌａまたはＡｒｇであり、
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ−ＮＨε−Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、炭素数１〜１０の直鎖状もしくは分枝状のアルカノイル、またはシクロアレイル−アルカノイルであり）、
Ｘａａ２２は、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、ｔｅｒｔ−ブチルグリシン、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり、
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり、
Ｘ１は、Ｌｙｓ  Ａｓｎ、Ａｓｎ  Ｌｙｓ、Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒ  Ａｓｎ、Ａｓｎ  Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒ、Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒ  Ａｌａ、Ａｌａ  Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒであり、ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、炭素数１〜１０の直鎖状もしくは分枝状のアルカノイル、またはシクロアルキルアルカノイルであり、
Ｚ１は、−ＯＨ、−ＮＨ２、Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８−Ｚ２、またはＧｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８  Ｘａａ３９−Ｚ２であり、
Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、およびＸａａ３８は、独立して、Ｐｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ−アルキルグリシン、Ｎ−アルキルペンチルグリシン、およびＮ−アルキルアラニンからなる群より選択され、Ｘａａ３９は、ＳｅｒまたはＴｙｒであり、かつ
Ｚ２は、−ＯＨまたは−ＮＨ２である）、
ただし、
Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、およびＸａａ２６のうち、Ａｌａであるものは３つを超えず、かつ
Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、または４−イミダゾプロピオニルである場合、Ｘａａ３、Ｘａａ４、およびＸａａ９のうち少なくとも１つはＡｌａである）。
【００５２】
添付の図面は、本明細書に組み込まれており、かつ本明細書の一部を構成しているが、これらの図面は、本開示の１つまたはいくつかの実施形態を例示するものであり、本開示の記載と合わせて、本開示の原理を説明する役目を果たす。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
【図１Ａ】成体（９週齢）雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２）を２ｍｇ／ｋｇで単回皮下投与した際の時間依存性のエキセナチド（エキセンジン−４）の血漿レベルを示すグラフである。
【図１Ｂ】成体（９週齢）雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２）を２．４ｍｇ／ｋｇ、４．８ｍｇ／ｋｇ、または９．６ｍｇ／ｋｇで単回皮下投与した際の時間依存性のエキセナチド（エキセンジン−４）の血漿レベルを示すグラフである。
【図２】成体（９週齢）雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに持続放出エキセナチド（ＰＴ３０４）を４．０ｍｇ／ｋｇの量で単回皮下注射した際の時間依存性のエキセンジン−４血漿レベルを示すグラフである。
【図３】ＰＴ３０２またはＰＴ３０４のいずれかを、記載された量および回数で投与した雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットにおける、１０週間にわたる、時間依存性のエキセンジン−４血漿レベルを示すグラフである。
【図４Ａ】実施例２の実験設計の概要を示す。Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに、６−ＯＨＤＡにより内側前脳束に一側性傷害を与える前に、ＰＴ３０２を投与した。
【図４Ｂ】ＰＴ３０２で前処置した６−ＯＨＤＡラットのメタンフェタミン誘発性（ｍｅｔｈ誘発性）旋回挙動を示すグラフである。
【図４Ｃ】ＰＴ３０２で前処置した６−ＯＨＤＡラットにおけるエキセンジン−４の血漿レベルを示すグラフである。
【図５Ａ】実施例３の実験設計の概要を示す。Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに、６−ＯＨＤＡにより内側前脳束に一側性傷害を与えた後、ＰＴ３０２を投与した。
【図５Ｂ】ＰＴ３０２で後処置した６−ＯＨＤＡラットのｍｅｔｈ誘発性旋回挙動を示すグラフである。
【図５Ｃ】６−ＯＨＤＡにより内側前脳束に一側性傷害を与えたラットに、ビヒクル（コントロール）（ラット＃８６６、＃８８３、および＃８８６）およびＰＴ３０２（ラット＃８８１、＃８７５、＃８８２）を投与し、線条のチロシンヒドロキシラーゼ（ＴＨ）免疫組織化学的検査を実施した際の、代表的な顕微鏡画像である。各動物のエキセンジン−４血漿濃度（ｎｇ／ｍｌ）を示す。
【図５Ｄ】図５Ｃ中に記載および図５Ｃに関連する免疫組織化学的検査において観察されたＴＨ免疫反応性の定量結果を示すグラフである。
【図５Ｅ】６−ＯＨＤＡにより内側前脳束に一側性傷害を与えたラットに、ビヒクル（コントロール）（ラット＃８６６、＃８８３、および＃８８６）およびＰＴ３０２（ラット＃８８１、＃８７５、および＃８８２）を投与し、黒質のＴＨ免疫組織化学的検査を実施した際の、代表的な顕微鏡画像である。各動物のエキセンジン−４血漿濃度（ｎｇ／ｍｌ）を示す。
【図５Ｆ】図５Ｅ中に記載および図５Ｅに関連する免疫組織化学的検査において観察されたＴＨ免疫反応性の定量結果を示すグラフである。
【図５Ｇ】ラットの脳の非傷害側において観察されたＴＨ＋ニューロンの代表的な顕微鏡画像である。
【図５Ｈ】ラットの脳の非傷害側において観察されたＴＨ＋ニューロンの代表的な顕微鏡画像である。
【図５Ｉ】６−ＯＨＤＡにより内側前脳束に一側性傷害を与えたラットの脳の傷害側の黒質中にＴＨ＋ニューロンが存在しないことを示す、代表的な顕微鏡の画像である。
【図５Ｊ】ＰＴ３０２で処置した６−ＯＨＤＡラットの脳の代表的な画像である。
【図５Ｋ】ＰＴ３０２で処置した６−ＯＨＤＡラットの脳の代表的な画像である。
【図５Ｌ】ＰＴ３０２で処置した６−ＯＨＤＡラットの脳の代表的な画像である。
【図５Ｍ】標準化ＴＨ免疫反応性とエキセンジン−４血漿レベル（線条における）との間に観察された有意な相関関係を示すグラフである。
【図５Ｎ】エキセンジン−４血漿レベルと黒質におけるＴＨ免疫反応性との間に観察された有意な相関関係を示すグラフである。
【図６Ａ】実施例４の実験設計の概要を示す。
【図６Ｂ】６−ＯＨＤＡにより内側前脳束に一側性傷害を与えたラットの旋回行動が、エキセンジン−４およびＰＴ３０２処置により低減される。
【図６Ｃ】コントロール（偽）ラット、６−ＯＨＤＡラット、エキセンジン−４処置６−ＯＨＤＡラット、およびＰＴ３０２処置６−ＯＨＤＡラットの黒質の代表的な顕微鏡画像である。
【図６Ｄ】図６Ｃを定量化したデータを示すグラフである。
【図７Ａ】実施例５の実験設計の概要を示す。
【図７Ｂ】一側性６−ＯＨＤＡ傷害ラットの旋回挙動が、ＰＴ３０２により有意に低減されたが、エキセンジン−４では、一側性６−ＯＨＤＡ傷害ラットの旋回挙動は低減されなかった。
【図８Ａ】実施例６の実験設計の概要を示す。
【図８Ｂ】ＭＰＴＰ処置マウスがワイヤから落下するまでの時間が、ＰＴ３０２により有意に増加するが、エキセンジン−４では、ワイヤから落下するまでの時間が増加しなかったことを示すグラフである。
【図９Ａ】実施例８の実験設計の概要を示す。
【図９Ｂ】軽度外傷性脳損傷（ｍＴＢＩ）を与えたマウスにおける新規物体認識が、持続放出エキセナチドにより有意に増加したことを示すグラフである。
【図１０Ａ】エキセンジン−４血漿レベルがＰＴ３０２投与後７日間持続し、さらに用量依存的であることを示すグラフである。
【図１０Ｂ】正常／コントロールマウスとｍＴＢＩ投与マウスとの間に、ＰＴ３０２投与に由来するエキセンジン−４血漿レベルの有意差が観察されなかったことを示すグラフである。
【図１０Ｃ】持続放出エキセナチドの３つの異なる用量（ＰＴ３０２、０．０２４、０．１２、および０．６ｍｇ／ｋｇ）が、血漿中において蓄積され得たこと、および、血漿中において時間依存的に維持され得たことを示すグラフである。
【図１１Ａ】持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２、０．０２４、０．１２、および０．６ｍｇ／ｋｇ）により、ｍＴＢＩ投与マウスでは、新しい物体に対する選好性が高くなったが、これと比較して、未処置ｍＴＢＩ投与マウスでは、視覚記憶の欠損を呈し、かつ、新規物体近傍にいる時間が短くなったことを示すグラフである。評価は、ｍＴＢＩの７日後に、新規物体認識パラダイムによって実施した。
【図１１Ｂ】未処置ｍＴＢＩ投与マウスにおいて観察されるｍＴＢＩ空間記憶欠損が、持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２、０．０２４、０．１２、および０．６ｍｇ／ｋｇ）により寛解したことを示すグラフである。評価は、ｍＴＢＩの７日後に、Ｙ字迷路によって実施した。
【図１１Ｃ】図１１Ａおよび図１１Ｂの結果が不安様挙動の結果ではなかったことを示すグラフである。
【図１２Ａ】持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２、０．１２および０．６ｍｇ／ｋｇ）により、ｍＴＢＩ誘発性マウスでは、新しい物体に対する選好性が高くなったが、これと比較して、未処置ｍＴＢＩ誘発性マウスでは、視覚記憶の欠損を呈し、かつ、新規物体近傍にいる時間が短くなったことを示すグラフである。評価は、ｍＴＢＩの３０日後に、新規物体認識パラダイムによって実施した。
【図１２Ｂ】未処置ｍＴＢＩ誘発性マウスにおいて観察されるｍＴＢＩ空間記憶欠損が、持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２、０．１２および０．６ｍｇ／ｋｇ）により寛解したことを示すグラフである。評価は、ｍＴＢＩの３０日後に、Ｙ字迷路によって実施した。
【図１２Ｃ】図１２Ａおよび図１２Ｂの結果が不安様挙動の結果ではなかったことを示すグラフである。
【図１３Ａ】ｍＴＢＩ誘発性マウスの皮質、ＣＡ３、および歯状回において観察されるニューロンの減少を、持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２、０．６ｍｇ／ｋｇ）により防止できたことを示す代表的な画像である。
【図１３Ｂ】図１３Ａの代表的な画像に関連する大脳皮質のデータを定量化して示すグラフである。グラフは、ｍＴＢＩ誘発性マウスの大脳皮質において観察されるニューロンの減少を、持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２、０．６ｍｇ／ｋｇ）により防止できたことを示す。
【図１３Ｃ】図１３Ａの代表的な画像に関連するＣＡ３のデータを定量化して示すグラフである。グラフは、ｍＴＢＩ誘発性マウスの海馬のＣＡ３領域において観察されるニューロンの減少を、持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２、０．６ｍｇ／ｋｇ）により防止できたことを示す。
【図１３Ｄ】図１３Ａの代表的な画像に関連する歯状回のデータを定量化して示すグラフである。グラフは、ｍＴＢＩ誘発性マウスの海馬の歯状回領域において観察されるニューロンの減少を、持続放出エキセナチドにより防止できたことを示す。
【図１４Ａ】ビヒクルまたは持続放出エキセナチド（０．６ｍｇ／ｋｇまたは０．１２ｍｇ／ｋｇ（ＰＴ３０２））を与えたコントロール（ＣＴＲＬ）およびｍＴＢＩ投与マウスにおける、脳傷害に起因するニューロンの減少のマーカーであるＦｌｕｏｒｏ−Ｊａｄｅ（登録商標）Ｃ染色の、代表的な画像を示す。
【図１４Ｂ】図１４Ａの代表的な画像に関連する海馬ＣＡ１領域のデータを定量化して示すグラフである。未処置ｍＴＢＩ誘発性マウスのＣＡ１における、外傷性脳損傷に起因するニューロンの減少の大幅な増加が、持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２）の０．６ｍｇ／ｋｇでの投与により有意に低減されたことを示す。
【図１４Ｃ】図１４Ａの代表的な画像に関連する海馬ＣＡ３領域のデータを定量化して示すグラフである。未処置ｍＴＢＩ誘発性マウスのＣＡ３における、外傷性脳損傷に起因するニューロンの減少の大幅な増加が、持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２）の０．６ｍｇ／ｋｇまたは０．１２ｍｇ／ｋｇでの投与により有意に低減されたことを示す。
【図１４Ｄ】図１４Ａの代表的な画像に関連する歯状回のデータを定量化して示すグラフである。未処置ｍＴＢＩ誘発性マウスの歯状回における、外傷性脳損傷に起因するニューロンの減少の大幅な増加が、持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２）の０．６ｍｇ／ｋｇまたは０．１２ｍｇ／ｋｇでの投与により有意に低減されたことを示す。
【図１４Ｅ】図１４Ａの代表的な画像に関連する大脳皮質のデータを定量化して示すグラフである。未処置ｍＴＢＩ誘発性マウスの皮質における、外傷性脳損傷に起因するニューロンの減少の大幅な増加が、持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２）の０．６ｍｇ／ｋｇでの投与により有意に低減されたことを示す。
【図１５Ａ】ビヒクルまたは持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２）（０．６ｍｇ／ｋｇまたは０．１２ｍｇ／ｋｇ）を与えたコントロールおよびｍＴＢＩ誘発性マウスにおける、ミクログリア活性化および神経炎症（外傷性脳損傷に起因）のマーカーであるイオン化カルシウム結合アダプター分子１（ＩＢＡ１）染色の、代表的な画像を示す。
【図１５Ｂ】図１５Ａの代表的な画像に関連するＣＡ１のデータを定量化して示すグラフである。未処置ｍＴＢＩ誘発性マウスのＣＡ１中のＩＢＡ１＋細胞において炎症誘発性サイトカインＴＮＦ−αが有意に増加したが、これが、持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２）の０．６ｍｇ／ｋｇまたは０．１２ｍｇ／ｋｇでの投与によって有意に低減されたことを示す。
【図１５Ｃ】図１５Ａの代表的な画像に関連するＣＡ３のデータを定量化して示すグラフである。未処置ｍＴＢＩ誘発性マウスのＣＡ３中のＩＢＡ１＋細胞において炎症誘発性サイトカインＴＮＦ−αが有意に増加したが、これが、持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２）の０．６ｍｇ／ｋｇまたは０．１２ｍｇ／ｋｇでの投与によって有意に低減されたことを示す。
【図１５Ｄ】図１５Ａの代表的な画像に関連する歯状回のデータを定量化して示すグラフである。未処置ｍＴＢＩ誘発性マウスの歯状回中のＩＢＡ１＋細胞において炎症誘発性サイトカインＴＮＦ−αが有意に増加したが、これが、持続放出エキセナチド（ＰＴ３０２）の０．６ｍｇ／ｋｇまたは０．１２ｍｇ／ｋｇでの投与によって有意に低減されたことを示す。
【図１５Ｅ】図１５Ａの代表的な画像に関連する大脳皮質のデータを定量化して示すグラフである。未処置ｍＴＢＩ誘発性マウスの皮質中のＩＢＡ１＋細胞において炎症誘発性サイトカインＴＮＦ−αが有意に増加したが、これが、持続放出エキセナチドの０．６ｍｇ／ｋｇまたは０．１２ｍｇ／ｋｇでの投与によって有意に低減されたことを示す。
【発明を実施するための形態】
【００５４】
詳細な説明
本開示は、本明細書中に記載される有効成分（たとえば、ＧＬＰ−１、エキセンジン、ならびに、ＧＬＰ−１およびエキセンジンの生理活性類似体または誘導体）の送達が驚くべきことに予期せずに増大したことに基づくものである。以下に記載される、本開示の好ましい実施形態の詳細な説明と本明細書中に含まれる実施例とを参照し、かつ、図面および図面前後の記載内容を参照すれば、本明細書に記載される内容について、より容易に理解できるであろう。
【００５５】
本発明の化合物、組成物、物品、デバイス、および／または方法についての開示および記載に先立ち、本開示が、特定の合成方法、特定の処置計画、または具体的な精製手順に限定されず、したがって、言うまでもなく、多様であってよいということが理解される。また、本明細書中において専門用語を使用する目的は、具体的な実施形態を説明するためのみであって、限定を意図したものではないということも理解される。
【００５６】
本明細書中において言及するすべての出版物、特許出願、特許、および他の先行技術文献の全体を、引用により本明細書に援用する。たとえば、米国特許第８，８５３，１６０号、米国特許第８，２７８，２７２号、米国特許第７，５７６，０５０号、米国特許第９，１５５，７０２号、国際特許公報第ＷＯ／２００３／０１１８９２号、およびＧｕらの文献（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．３６（１）：１０１−１１４（２０１４））の各々の全体を、あらゆる目的において、引用により本明細書に援用する。
【００５７】
本明細書および付属の請求項において使用する単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、特に記載がない限り、複数の意味も含む。したがって、たとえば、「ポリペプチド」という記載は複数種類のポリペプチドの混合物を含み、「医薬担体」という記載は２種以上の医薬担体の混合物を含む。
【００５８】
本明細書中において、範囲は、「約」特定値〜「約」別の特定値と表記され得る。このように範囲が表記されている場合、別の一実施形態において、上記特定値〜上記別の特定値という範囲が含まれる。同様に、値の前に「約」がついた形で近似値として表記される場合、その特定値が別の実施形態を構成することが理解される。さらに、個々の範囲について、一方の端値は、もう一方の端値との関係においての意味を有し、かつ、もう一方の端値とは独立した形においても意味を有する、ということが理解される。本明細書中において使用する「約」は、所与の値±１０％を指す。
【００５９】
本明細書中およびその後に記載される請求項中において言及され得る多くの用語は、以下の意味を有するものと定義する。
【００６０】
「任意の」または「任意に」は、その後に記載される事象または状況が生じてもよく生じなくてもよいということを意味する。この記載には、こうした事象または状況が生じる場合と生じない場合とが含まれる。
【００６１】
本明細書全体において、「対象」は、個体を意味する、特定の実施形態において、対象は、霊長類などの哺乳類である。具体的な一実施形態において、対象はヒトである。したがって、「対象」は、ネコおよびイヌなどの飼い慣らされた動物、家畜（たとえば、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギなど）、ならびに実験動物（たとえば、マウス、ウサギ、ラット、モルモットなど）を含んでよい。
【００６２】
「ポリペプチド」および「ペプチド」という用語は、特に記載されない限り、概ね、交換可能に使用する。特に記載がなければ、「ポリペプチド」および「ペプチド」はいずれも、ペプチド結合によって結合した天然または非天然のアミノ酸を指し得る。
【００６３】
「安定状態」という用語は、薬物動態学における通常の意味で使用する。簡潔には、たとえば血漿または脳脊髄液（ＣＳＦ）中の、安定状態での濃度とは、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドが投与される速度が、当該（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドが対象の体内から排出される速度に等しい場合の、血漿およびＣＳＦ中の濃度である。本開示に係る（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドの安定状態での濃度を求めることは、当技術分野の当業者であれば、常套的に実施できる。
【００６４】
「単離ポリペプチド」または「精製ポリペプチド」は、あるポリペプチドについて、そのポリペプチドが天然または培養下で通常結合している物質を、実質的に含まないことを意味する。本開示に係るポリペプチドは、たとえば、天然物（たとえば、哺乳類細胞）が入手できればその天然物からの抽出によって、または、当該ポリペプチドをコードする組換核酸からの（たとえば、細胞における、または無細胞翻訳系における）発現によって、または、当該ポリペプチドの化学合成によって得られてよい。また、ポリペプチドは、全長ポリペプチドの切断によっても得ることができる。ポリペプチドが大きな天然ポリペプチドの断片である場合、単離ポリペプチドは、断片化前の全長の天然ポリペプチドよりも短く、かつ、当該単離ポリペプチドには、断片化前の全長の天然ポリペプチドは含まれない。
【００６５】
本開示は、対象の中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分に神経保護ポリペプチドを送達する方法に関する。この方法は、制御放出神経保護調製物を、対象の全身循環血流に投与することを含み、制御放出神経保護調製物は、ＧＬＰ−１、エキセンジン（たとえば、エキセンジン−４）、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体（たとえば、エキセンジン−４類似体）からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン（たとえば、エキセンジン−４）、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物は、神経保護ポリペプチドの速放調製物と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達を増大させる。
【００６６】
図１Ａ、図１Ｂ、図２、および図３中に示すように、制御放出神経保護調製物により、動物モデルにおけるエキセナチドの血漿レベルが、より良好に維持される。さらに、図７Ｂおよび図８Ｂから、エキセナチドの制御放出調製物が、エキセナチド単独と比較して、神経保護効果および神経再生効果が高められた調製物および／または治療であることが示される。
【００６７】
本開示は、対象の中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分に神経保護ポリペプチドを送達するための方法に関する。この方法は、治療的有効量の神経保護ポリペプチドを、神経保護ポリペプチドの持続放出または持続送達を提供する制御放出調製物またはデバイスを用いて、対象の全身循環血流に投与することを含んでよく、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物、または神経保護ポリペプチドの持続放出は、神経保護ペプチドの速放調製物と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達および／または取り込みを増大させる。
【００６８】
また、本開示は、中枢神経系（ＣＮＳ）関連疾患を有する対象を処置する、またはＣＮＳ関連疾患の少なくとも１種の症状の低減を必要とする対象においてその症状を低減する方法にも関する。この方法は、神経保護ポリペプチドの持続放出または持続送達を提供する制御放出調製物またはデバイスを用いて、治療的有効量の神経保護ポリペプチドを対象の全身循環血流に投与することを含んでよく、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物またはデバイスは、神経保護ポリペプチドの速放調製物と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達を増大させる。
【００６９】
特定の実施形態において、制御放出調製物は、神経保護ポリペプチドの持効性調製物である。持効性調製物は、神経保護ポリペプチドの持続放出のためのデポー剤調製物を含んでよい。たとえば、持効性調製物は、神経保護ポリペプチドの持続放出のための組成物を含んでよい（詳細は下記に記載される）。追加的な実施形態において、制御放出調製物は、特定の粘度を有する生分解性ポリマーと、被覆材料とをさらに含み、有効濃度における神経保護ポリペプチドの生物学的利用能および持続放出が、ある期間にわたって継続する。追加的な実施形態において、制御放出調製物は、特定の粘度を有する生分解性ポリマーと、被覆材料とをさらに含み、有効濃度における神経保護ポリペプチドの生物学的利用能および持続放出が、有効成分の初期バーストを起こさずに（たとえば、有効成分の、有害な初期バーストなどの初期バーストを起こさずに）、ある期間にわたって継続する。具体的な実施形態において、制御放出神経保護調製物は、神経保護ポリペプチドを含むコアと生分解性ポリマーとを含む制御放出微小球と、コアを被覆する被覆層とを含む。
【００７０】
一実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与は、対象における少なくとも１種のＣＮＳ関連状態の少なくとも１種の症状を緩和する。たとえば、ＣＮＳ関連状態は、パーキンソン病（ＰＤ）、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、多発性硬化症、薬物嗜癖、アルコール嗜癖、神経変性状態、脳の炎症、アルツハイマー病（ＡＤ）、多系統萎縮症、ハンチントン病、慢性外傷性脳症、運動ニューロン疾患（たとえば、筋萎縮性側索硬化症、脊髄損傷、脊髄小脳失調（ＳＣＡ）、脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ））、脳血管性認知症、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）、混合型認知症、前頭側頭型認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病、正常圧水頭症、またはそれらの組み合わせからなる群より選択されてよい。
【００７１】
制御放出神経保護調製物の投与は、制御放出神経保護調製物の注射を含んでよい。たとえば、制御放出神経保護調製物は、皮下注射されてよい。
【００７２】
別の一実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与により、血漿中の神経保護ポリペプチドの濃度が、約５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬの範囲内で安定状態となる。たとえば、この、安定状態での血漿中の神経保護ポリペプチドの濃度は、約５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約４２５０ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約４０００ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約３７５０ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約３５００ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約３２５０ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約３０００ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約２７５０ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約２５００ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約２２５０ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約２０００ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約１７５０ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約１５００ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約１２５０ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約１０００ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約７５０ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約５００ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約２５０ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約４２５０ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約４０００ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約３７５０ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約３５００ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約３２５０ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約３０００ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約２７５０ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約２５００ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約２２５０ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約２０００ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約１７５０ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約１５００ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約１２５０ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約１０００ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約７５０ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約５００ｐｇ／ｍＬ、約５００〜約４５００ｐｇ／ｍＬ、約５００〜約４２５０ｐｇ／ｍＬ、約５００〜約４０００ｐｇ／ｍＬ、約５００〜約３７５０ｐｇ／ｍＬ、約５００〜約３５００ｐｇ／ｍＬ、約５００〜約３２５０ｐｇ／ｍＬ、約５００〜約３０００ｐｇ／ｍＬ、約５００〜約２７５０ｐｇ／ｍＬ、約５００〜約２５００ｐｇ／ｍＬ、約５００〜約２２５０ｐｇ／ｍＬ、約５００〜約２０００ｐｇ／ｍＬ、約５００〜約１７５０ｐｇ／ｍＬ、約５００〜約１５００ｐｇ／ｍＬ、約５００〜約１２５０ｐｇ／ｍＬ、約５００〜約１０００ｐｇ／ｍＬ、約５００〜約７５０ｐｇ／ｍＬ、約７５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬ、約７５０〜約４２５０ｐｇ／ｍＬ、約７５０〜約４０００ｐｇ／ｍＬ、約７５０〜約３７５０ｐｇ／ｍＬ、約７５０〜約３５００ｐｇ／ｍＬ、約７５０〜約３２５０ｐｇ／ｍＬ、約７５０〜約３０００ｐｇ／ｍＬ、約７５０〜約２７５０ｐｇ／ｍＬ、約７５０〜約２５００ｐｇ／ｍＬ、約７５０〜約２２５０ｐｇ／ｍＬ、約７５０〜約２０００ｐｇ／ｍＬ、約７５０〜約１７５０ｐｇ／ｍＬ、約７５０〜約１５００ｐｇ／ｍＬ、約７５０〜約１２５０ｐｇ／ｍＬ、約７５０〜約１０００ｐｇ／ｍＬ、約１０００〜約４５００ｐｇ／ｍＬ、約１０００〜約４２５０ｐｇ／ｍＬ、約１０００〜約４０００ｐｇ／ｍＬ、約１０００〜約３７５０ｐｇ／ｍＬ、約１０００〜約３５００ｐｇ／ｍＬ、約１０００〜約３２５０ｐｇ／ｍＬ、約１０００〜約３０００ｐｇ／ｍＬ、約１０００〜約２７５０ｐｇ／ｍＬ、約１０００〜約２５００ｐｇ／ｍＬ、約１０００〜約２２５０ｐｇ／ｍＬ、約１０００〜約２０００ｐｇ／ｍＬ、約１０００〜約１７５０ｐｇ／ｍＬ、約１０００〜約１５００ｐｇ／ｍＬ、約１０００〜約１２５０ｐｇ／ｍＬ、約１２５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬ、約１２５０〜約４２５０ｐｇ／ｍＬ、約１２５０〜約４０００ｐｇ／ｍＬ、約１２５０〜約３７５０ｐｇ／ｍＬ、約１２５０〜約３５００ｐｇ／ｍＬ、約１２５０〜約３２５０ｐｇ／ｍＬ、約１２５０〜約３０００ｐｇ／ｍＬ、約１２５０〜約２７５０ｐｇ／ｍＬ、約１２５０〜約２５００ｐｇ／ｍＬ、約１２５０〜約２２５０ｐｇ／ｍＬ、約１２５０〜約２０００ｐｇ／ｍＬ、約１２５０〜約１７５０ｐｇ／ｍＬ、約１２５０〜約１５００ｐｇ／ｍＬ、約１５００〜約４５００ｐｇ／ｍＬ、約１５００〜約４２５０ｐｇ／ｍＬ、約１５００〜約４０００ｐｇ／ｍＬ、約１５００〜約３７５０ｐｇ／ｍＬ、約１５００〜約３５００ｐｇ／ｍＬ、約１５００〜約３２５０ｐｇ／ｍＬ、約１５００〜約３０００ｐｇ／ｍＬ、約１５００〜約２７５０ｐｇ／ｍＬ、約１５００〜約２５００ｐｇ／ｍＬ、約１５００〜約２２５０ｐｇ／ｍＬ、約１５００〜約２０００ｐｇ／ｍＬ、約１５００〜約１７５０ｐｇ／ｍＬ、約１７５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬ、約１７５０〜約４２５０ｐｇ／ｍＬ、約１７５０〜約４０００ｐｇ／ｍＬ、約１７５０〜約３７５０ｐｇ／ｍＬ、約１７５０〜約３５００ｐｇ／ｍＬ、約１７５０〜約３２５０ｐｇ／ｍＬ、約１７５０〜約３０００ｐｇ／ｍＬ、約１７５０〜約２７５０ｐｇ／ｍＬ、約１７５０〜約２５００ｐｇ／ｍＬ、約１７５０〜約２２５０ｐｇ／ｍＬ、約１７５０〜約２０００ｐｇ／ｍＬ、約２０００〜約４５００ｐｇ／ｍＬ、約２０００〜約４２５０ｐｇ／ｍＬ、約２０００〜約４０００ｐｇ／ｍＬ、約２０００〜約３７５０ｐｇ／ｍＬ、約２０００〜約３５００ｐｇ／ｍＬ、約２０００〜約３２５０ｐｇ／ｍＬ、約２０００〜約３０００ｐｇ／ｍＬ、約２０００〜約２７５０ｐｇ／ｍＬ、約２０００〜約２５００ｐｇ／ｍＬ、約２０００〜約２２５０ｐｇ／ｍＬ、約２２５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬ、約２２５０〜約４２５０ｐｇ／ｍＬ、約２２５０〜約４０００ｐｇ／ｍＬ、約２２５０〜約３７５０ｐｇ／ｍＬ、約２２５０〜約３５００ｐｇ／ｍＬ、約２２５０〜約３２５０ｐｇ／ｍＬ、約２２５０〜約３０００ｐｇ／ｍＬ、約２２５０〜約２７５０ｐｇ／ｍＬ、約２２５０〜約２５００ｐｇ／ｍＬ、約２５００〜約４５００ｐｇ／ｍＬ、約２５００〜約４２５０ｐｇ／ｍＬ、約２５００〜約４０００ｐｇ／ｍＬ、約２５００〜約３７５０ｐｇ／ｍＬ、約２５００〜約３５００ｐｇ／ｍＬ、約２５００〜約３２５０ｐｇ／ｍＬ、約２５００〜約３０００ｐｇ／ｍＬ、約２５００〜約２７５０ｐｇ／ｍＬ、約２７５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬ、約２７５０〜約４２５０ｐｇ／ｍＬ、約２７５０〜約４０００ｐｇ／ｍＬ、約２７５０〜約３７５０ｐｇ／ｍＬ、約２７５０〜約３５００ｐｇ／ｍＬ、約２７５０〜約３２５０ｐｇ／ｍＬ、約２７５０〜約３０００ｐｇ／ｍＬ、約３０００〜約４５００ｐｇ／ｍＬ、約３０００〜約４２５０ｐｇ／ｍＬ、約３０００〜約４０００ｐｇ／ｍＬ、約３０００〜約３７５０ｐｇ／ｍＬ、約３０００〜約３５００ｐｇ／ｍＬ、約３０００〜約３２５０ｐｇ／ｍＬ、約３２５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬ、約３２５０〜約４２５０ｐｇ／ｍＬ、約３２５０〜約４０００ｐｇ／ｍＬ、約３２５０〜約３７５０ｐｇ／ｍＬ、約３２５０〜約３５００ｐｇ／ｍＬ、約３５００〜約４５００ｐｇ／ｍＬ、約３５００〜約４２５０ｐｇ／ｍＬ、約３５００〜約４０００ｐｇ／ｍＬ、または約３５００〜約３７５０ｐｇ／ｍＬの範囲であってよい。
【００７３】
上述されるように、血漿中の神経保護ポリペプチドの濃度が安定状態で持続されることにより、対象の脳脊髄液（ＣＳＦ）、脳、またはそれらの組み合わせにおける神経保護ポリペプチドの濃度が、累積的に増加する。たとえば、ＣＳＦ中の神経保護ポリペプチドの濃度は、約５〜約４００ｐｇ／ｍＬまたは約１０〜約４００ｐｇ／ｍＬの範囲内であってよい。すなわち、ＣＳＦ中の神経保護ポリペプチドの濃度は、約１０〜約３５０ｐｇ／ｍＬ、約１０〜約３００ｐｇ／ｍＬ、約１０〜約２５０ｐｇ／ｍＬ、約１０〜約２００ｐｇ／ｍＬ、約１０〜約１５０ｐｇ／ｍＬ、約１０〜約１００ｐｇ／ｍＬ、約１０〜約５０ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約４００ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約３５０ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約３００ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約２５０ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約２００ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約１５０ｐｇ／ｍＬ、約５０〜約１００ｐｇ／ｍＬ、約１００〜約４００ｐｇ／ｍＬ、約１００〜約３５０ｐｇ／ｍＬ、約１００〜約３００ｐｇ／ｍＬ、約１００〜約２５０ｐｇ／ｍＬ、約１００〜約２００ｐｇ／ｍＬ、約１００〜約１５０ｐｇ／ｍＬ、約１５０〜約４００ｐｇ／ｍＬ、約１５０〜約３５０ｐｇ／ｍＬ、約１５０〜約３００ｐｇ／ｍＬ、約１５０〜約２５０ｐｇ／ｍＬ、約１５０〜約２００ｐｇ／ｍＬ、約２００〜約４００ｐｇ／ｍＬ、約２００〜約３５０ｐｇ／ｍＬ、約２００〜約３００ｐｇ／ｍＬ、約２００〜約２５０ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約４００ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約３５０ｐｇ／ｍＬ、約２５０〜約３００ｐｇ／ｍＬ、約３００〜約４００ｐｇ／ｍＬ、約３００〜約３５０ｐｇ／ｍＬ、または約３５０〜約４００ｐｇ／ｍＬの範囲内であってよい。
【００７４】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、安定状態での血漿中のポリペプチドの濃度に対する、安定状態でのＣＦＳ中のポリペプチドの濃度の比率は、約０．１％〜約５％の範囲内であってよい。たとえば、安定状態での血漿中のポリペプチドの濃度に対する、安定状態でのＣＳＦ中の濃度の比率は、本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、少なくとも約０．１％、少なくとも約０．３％、少なくとも約０．５％、少なくとも約０．７％、少なくとも約０．９％、少なくとも約１％、少なくとも約１．１％、少なくとも約１．２％、少なくとも約１．５％、少なくとも約２．０％、約０．１％〜約５％、約０．１％〜約４％、約０．１％〜約３％、約０．１％〜約２％、約０．５％〜約５％、約０．５％〜約４％、約０．５％〜約３％、約０．５％〜約２％、約１％〜約５％、約１％〜約４％、約１％〜約３％、約１％〜約２％、約２％〜約５％、約２％〜約４％、約２％〜約３％、約３％〜約５％、約３％〜約４％、または約４％〜約５％であってよい。
【００７５】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、安定状態での血漿中の神経保護ポリペプチドの濃度レベルにおけるパーセント変化（すなわち、安定状態到達後のパーセント変化）は、約８０％以下（たとえば、約５０％以下）であってよい。たとえば、安定状態での血漿レベルおよび／または濃度に到達した後に再投与が実施された場合、血漿中の神経保護ポリペプチドの濃度におけるパーセント変化は、約８０％以下（たとえば、約５０％以下）であってよい（たとえば、血漿中の神経保護ポリペプチドの濃度は、１回目の投与の約２、約３、約４、約５、または約６週間後に、安定状態になってよい）。たとえば、安定状態到達後における安定状態での血漿中の神経保護ポリペプチドの濃度におけるパーセント変化は、たとえば、神経保護ポリペプチドが、先行する神経保護ポリペプチド投与から約２８日以内（たとえば、約７、１４、または約２１日以内）に再投与された場合（たとえば、先行する（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドの投与の約１、約２、約３、約４、約５、約６、約７、約８、約９、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４、約１５、約１６、約１７、約１８、約１９、約２０、約２１、約２２、約２３、約２４、約２５、約２６、約２７、または約２８日後に投与された場合）、約８０％以下、約７９％以下、約７８％以下、約７７％以下、約７６％以下、約７５％以下、約７４％以下、約７３％以下、約７２％以下、約７１％以下、約７０％以下、約６９％以下、約６８％以下、約６７％以下、約６６％以下、約６５％以下、約６４％以下、約６３％以下、約６２％以下、約６１％以下、約６０％以下、約５９％以下、約５８％以下、約５７％以下、約５６％以下、約５５％以下、約５４％以下、約５３％以下、約５２％以下、約５１％以下、約５０％以下、約４９％以下、約４８％以下、約４７％以下、約４６％以下、約４５％以下、約４４％以下、約４３％以下、約４２％以下、約４１％以下、約４０％以下、約３９％以下、約３９％以下、約３７％以下、約３６％以下、約３５％以下、約３４％以下、約３３％以下、約３２％以下、約３１％以下、約３０％以下、約２９％以下、約２８％以下、約２７％以下、約２６％以下、約２５％以下、約２４％以下、約２３％以下、約２２％以下、約２１％以下、約２０％以下、約１９％以下、約１８％以下、約１７％以下、約１６％以下、約１５％以下、約１４％以下、約１３％以下、約１２％以下、約１１％以下、約１０％以下、約９％以下、約８％以下、約７％以下、約６％以下、または約５％以下である。
【００７６】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、調製物は、約７〜約２８日（たとえば、約７〜約２１日または約７日〜約１４日）に１回投与される。たとえば、調製物は複数回投与されてよく、この場合の投与間隔は、約７〜約２８日である（たとえば、約７、約８、約９、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４、約１５、約１６、約１７、約１８、約１９、約２０、約２１、約２２、約２３、約２４、約２５、約２６、約２７、または約２８日に１回である）（たとえば、先行する投与の約７〜約２８日後に、次の投与が実施される）。調製物は、本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、複数回投与されてよく、この場合の調製物の投与間隔は、約７〜約２８日（たとえば、約７、約８、約９、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４、約１５、約１６、約１７、約１８、約１９、約２０、または約２１日間隔（すなわち、約７、約８、約９、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４、約１５、約１６、約１７、約１８、約１９、約２０、約２１、約２２、約２３、約２４、約２６、約２７、または約２８日に１回という間隔）である。
【００７７】
追加的な一態様において、中枢神経系（ＣＮＳ）関連疾患を有する対象を処置する、またはＣＮＳ関連疾患の少なくとも１種の症状の低減を必要とする対象においてその症状を低減する方法が提供される。この方法は、対象に、治療的有効量の制御放出神経保護調製物を、対象の全身循環血流に投与することを含み、制御放出神経保護調製物は、ＧＬＰ−１、エキセンジン（たとえば、エキセンジン−４）、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン（たとえば、エキセンジン−４）類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン（たとえば、エキセンジン−４）、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物は、神経保護ポリペプチド単独と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達を増大させる。
【００７８】
具体的な一実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与は、対象における少なくとも１種のＣＮＳ関連状態の少なくとも１種の症状を緩和する。たとえば、このＣＮＳ状態は、パーキンソン病（ＰＤ）、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、多発性硬化症、薬物嗜癖、アルコール嗜癖、神経変性状態、脳の炎症、アルツハイマー病（ＡＤ）、多系統萎縮症、ハンチントン病、慢性外傷性脳症、運動ニューロン疾患（たとえば、筋萎縮性側索硬化症、脊髄損傷、脊髄小脳失調（ＳＣＡ）、脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ））、脳血管性認知症、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）、混合型認知症、前頭側頭型認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病、正常圧水頭症、またはそれらの組み合わせからなる群より選択される。
【００７９】
さらなる実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与は、対象への制御放出神経保護調製物の注射を含む。たとえば、制御放出神経保護調製物の投与は、対象への制御放出神経保護調製物の皮下注射を含む。追加的な実施形態において、制御放出調製物は、特定の粘度を有する生分解性ポリマーと、被覆材料とをさらに含み、有効濃度における神経保護ポリペプチドの生物学的利用能および持続放出が、ある期間にわたって継続する。本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出調製物は、有効濃度における神経保護ポリペプチドの生物学的利用能および持続放出が、有効成分の初期バースト（たとえば、有害な初期バースト）を起こさずに、ある期間にわたって継続する。具体的な実施形態において、制御放出神経保護調製物は、神経保護ポリペプチドを含むコアと生分解性ポリマーとを含む制御放出微小球と、コアを被覆する被覆層とを含む。
【００８０】
追加的な実施形態において、制御放出調製物の投与により、血漿中の神経保護ポリペプチドの濃度が、上述される範囲内、たとえば約５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬの範囲内で、安定状態となる。
【００８１】
いくつかの実施形態において、制御放出調製物の投与により、脳脊髄液（ＣＳＦ）、脳、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種における神経保護ポリペプチドの濃度が、累積的に増加する。
【００８２】
さらなる一態様において、本開示は、対象の中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分に神経保護ポリペプチドを送達する方法を提供する。この方法は、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドの持続送達を、対象の全身循環血流に対して提供することを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物は、神経保護ペプチドの速放調製物と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過によるＣＮＳの少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達および／または取り込みを増大させる。
【００８３】
さらに別の一態様において、本開示は、ＣＮＳ関連疾患を有する対象を処置する、またはＣＮＳ関連疾患の少なくとも１種の症状の低減を必要とする対象においてその症状を低減する方法を提供する。この方法は、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドの持続送達を、対象の全身循環血流に対して提供することを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物は、神経保護ポリペプチドの速放調製物と比較して、対象のＢＢＢの通過によるＣＮＳの少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達を増大させる。本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドの持続放出の提供は、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドを、デバイス（たとえば、ポンプ、ミニポンプ、浸透圧ポンプ、浸透圧送達デバイス、輸液ポンプ、静脈内投与デバイス、蠕動ポンプ、または小型輸液ポンプなど）を用いて投与することを含む。
【００８４】
（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチド（たとえば、制御放出神経保護調製物に含まれた形態のもの）は、約０．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３５ｐＭ／ｋｇ／分（たとえば、約３ｐＭ／ｋｇ／分〜約１７．５ｐＭ／ｋｇ／分）の速度で投与されてよい。たとえば、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドは、約０．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３５ｐＭ／ｋｇ／分、約０．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３５ｐＭ／ｋｇ／分、約０．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３２．５ｐＭ／ｋｇ／分、約０．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３０ｐＭ／ｋｇ／分、約０．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２７．５ｐＭ／ｋｇ／分、約０．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２５ｐＭ／ｋｇ／分、約０．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２２．５ｐＭ／ｋｇ／分、約０．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２０ｐＭ／ｋｇ／分、約０．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約１７．５ｐＭ／ｋｇ／分、約０．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約１５ｐＭ／ｋｇ／分、約０．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約１２．５ｐＭ／ｋｇ／分、約０．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約１０ｐＭ／ｋｇ／分、約１．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３５ｐＭ／ｋｇ／分、約１．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３５ｐＭ／ｋｇ／分、約１．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３２．５ｐＭ／ｋｇ／分、約１．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３０ｐＭ／ｋｇ／分、約１．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２７．５ｐＭ／ｋｇ／分、約１．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２５ｐＭ／ｋｇ／分、約１．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２２．５ｐＭ／ｋｇ／分、約１．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２０ｐＭ／ｋｇ／分、約１．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約１７．５ｐＭ／ｋｇ／分、約１．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約１５ｐＭ／ｋｇ／分、約１．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約１２．５ｐＭ／ｋｇ／分、約１．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約１０ｐＭ／ｋｇ／分、約２．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３５ｐＭ／ｋｇ／分、約２．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３５ｐＭ／ｋｇ／分、約２．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３２．５ｐＭ／ｋｇ／分、約２．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３０ｐＭ／ｋｇ／分、約２．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２７．５ｐＭ／ｋｇ／分、約２．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２５ｐＭ／ｋｇ／分、約２．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２２．５ｐＭ／ｋｇ／分、約２．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２０ｐＭ／ｋｇ／分、約２．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約１７．５ｐＭ／ｋｇ／分、約２．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約１５ｐＭ／ｋｇ／分、約２．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約１２．５ｐＭ／ｋｇ／分、約２．５ｐＭ／ｋｇ／分〜約１０ｐＭ／ｋｇ／分、約５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３５ｐＭ／ｋｇ／分、約５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３５ｐＭ／ｋｇ／分、約５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３２．５ｐＭ／ｋｇ／分、約５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３０ｐＭ／ｋｇ／分、約５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２７．５ｐＭ／ｋｇ／分、約５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２５ｐＭ／ｋｇ／分、約５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２２．５ｐＭ／ｋｇ／分、約５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２０ｐＭ／ｋｇ／分、約５ｐＭ／ｋｇ／分〜約１７．５ｐＭ／ｋｇ／分、約５ｐＭ／ｋｇ／分〜約１５ｐＭ／ｋｇ／分、約５ｐＭ／ｋｇ／分〜約１２．５ｐＭ／ｋｇ／分、約５ｐＭ／ｋｇ／分〜約１０ｐＭ／ｋｇ／分、約１０ｐＭ／ｋｇ／分〜約３５ｐＭ／ｋｇ／分、約１０ｐＭ／ｋｇ／分〜約３５ｐＭ／ｋｇ／分、約１０ｐＭ／ｋｇ／分〜約３２．５ｐＭ／ｋｇ／分、約１０ｐＭ／ｋｇ／分〜約３０ｐＭ／ｋｇ／分、約１０ｐＭ／ｋｇ／分〜約２７．５ｐＭ／ｋｇ／分、約１０ｐＭ／ｋｇ／分〜約２５ｐＭ／ｋｇ／分、約１０ｐＭ／ｋｇ／分〜約２２．５ｐＭ／ｋｇ／分、約１０ｐＭ／ｋｇ／分〜約２０ｐＭ／ｋｇ／分、約１０ｐＭ／ｋｇ／分〜約１７．５ｐＭ／ｋｇ／分、約１５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３５ｐＭ／ｋｇ／分、約１５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３５ｐＭ／ｋｇ／分、約１５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３２．５ｐＭ／ｋｇ／分、約１５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３０ｐＭ／ｋｇ／分、約１５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２７．５ｐＭ／ｋｇ／分、約１５ｐＭ／ｋｇ／分〜約２５ｐＭ／ｋｇ／分、約２０ｐＭ／ｋｇ／分〜約３５ｐＭ／ｋｇ／分、約２０ｐＭ／ｋｇ／分〜約３５ｐＭ／ｋｇ／分、約２０ｐＭ／ｋｇ／分〜約３２．５ｐＭ／ｋｇ／分、約２０ｐＭ／ｋｇ／分〜約３０ｐＭ／ｋｇ／分、または約２５ｐＭ／ｋｇ／分〜約３５ｐＭ／ｋｇ／分の速度で投与されてよい。
【００８５】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出調製物または（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドは、デバイスによって投与されてよい。たとえば、デバイスは、制御放出調製物または（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドを収容し且つこれを送達する埋め込み型デバイスであってよい。デバイスは、ポンプ、ミニポンプ、浸透圧ポンプ、浸透圧送達デバイス、輸液ポンプ、静脈内投与デバイス、蠕動ポンプ、または小型輸液ポンプなどであってよい。本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、デバイスは埋め込み型デバイスであってよく、この埋め込み型デバイスは、制御放出調製物または（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドを、一定の流量、調整可能な流量、またはプログラム可能な流量において提供できるものであってよい。たとえば、米国特許第８，２９８，５６１  Ｂ２号または米国特許第８，９４０，３１６  Ｂ２号中に記載されるもののような浸透圧送達デバイスがあり、両特許の全体を引用により本明細書に援用する。
【００８６】
本明細書中において使用する「浸透圧送達デバイス」という用語は、対象への１種以上の有益な剤（たとえば、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物）の送達に使用するデバイスを指し、このデバイスは、たとえば、内部空洞に（たとえば、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物を含有する）懸濁調製物が入っている容器（たとえば、チタン合金製）と、浸透圧剤調製物とを有する。内部空洞内に配置されたピストンアセンブリが、浸透圧剤調製物と懸濁調製物とを分けている。容器の第１の遠位端には、浸透圧剤調製物に隣り合うようにして、半透過膜が配置され、さらに、容器の第２の遠位端には、懸濁調製物に隣り合うようにして、流量調節器が配置されている（この流量調節器によって送達孔が画定されており、この送達孔を通って、デバイスから懸濁調製物が放出される）。浸透圧送達デバイスまたは浸透圧ポンプは、対象の体内の、たとえば皮下に、（たとえば、上腕の内側、外側、もしくは後ろ側、または腹部の領域に）埋め込まれてよい。
【００８７】
本明細書中に記載される（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物は、デバイスによって投与されることにより、数週間、数か月間、または最長で約１年間といったように、長期間にわたって、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物の持続送達を提供してよい。このデバイスは、埋め込み型デバイスであってもよく、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物を、所望の流速において、所望の期間にわたって送達できる。（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物の、この埋め込み型の薬物送達デバイス内への導入は、従来の技術によって実施されてよい。
【００８８】
（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物は、たとえば、浸透圧的、機械的、電気機械的、または化学的に駆動されるデバイスを使用して、送達されてよい。本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物は、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドによる処置を必要とする対象にとって治療的に有効である流速において、送達される。
【００８９】
（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物は、約１週間超〜約１年間以上（たとえば、約１か月間〜約１年間以上、または約３か月間〜約１年間以上）の範囲の期間にわたって送達されてよい。デバイスは、少なくとも１つの孔を有する容器を有していてよく、この孔を通って、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物が送達される。（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物は、容器の中に保管されてよい。本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、デバイスは、埋め込み型デバイスであってもよい浸透圧送達デバイスであり、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物の送達は、浸透圧によって推進される。いくつかの浸透圧送達デバイスまたは浸透圧ポンプおよびその部品が記載されている。たとえば、ＤＵＲＯＳ（登録商標）送達デバイスまたはこれに類似するデバイスが挙げられる（たとえば、米国特許第５，６０９，８８５号、第５，７２８，３９６号、第５，９８５，３０５号、第５，９９７，５２７号、第６，１１３，９３８号、第６，１３２，４２０号、第６，１５６，３３１号、第６，２１７，９０６号、第６，２６１，５８４号、第６，２７０，７８７号、第６，２８７，２９５号、第６，３７５，９７８号、第６，３９５，２９２号、第６，５０８，８０８号、第６，５４４，２５２号、第６，６３５，２６８号、第６，６８２，５２２号、第６，９２３，８００号、第６，９３９，５５６号、第６，９７６，９８１号、第６，９９７，９２２号、第７，０１４，６３６号、第７，２０７，９８２号、第７，１１２，３３５号、および第７，１６３，６８８号、ならびに米国特許出願第２００５−０１７５７０１号、第２００７−０２８１０２４号、および第２００８−００９１１７６を参照、これらの全体を引用により本明細書に援用する）。
【００９０】
ＤＵＲＯＳ（登録商標）送達デバイスは、典型的には、浸透圧機関と、ピストンと、薬剤調製物とを収容する円筒形容器からなる。この容器は、一端が速度制御透水膜で封じられ、他端が拡散調節部で封じられており、この拡散調節部を通って、薬剤調製物が薬剤容器から放出される。ピストンは、薬剤調製物と浸透圧機関とを隔てている。ピストンは、浸透圧機関区画内の水が薬剤容器中に流入するのを防ぐために、封止材を含んでいる。拡散調節部は、体液が、薬剤調製物（たとえば、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物）と共に、孔から薬剤容器中に流入するのを防止するよう設計されている。
【００９１】
ＤＵＲＯＳ（登録商標）デバイスは、浸透の原理に基づいて、所定の速度で治療剤を放出する。細胞外液が、半透過膜を通ってＤＵＲＯＳ（登録商標）デバイス内の塩型機関（ｓａｌｔ  ｅｎｇｉｎｅ）中に直接流入すると、塩型機関が拡張して、ピストンを、ゆっくりした一定の送達速度で推進する。ピストンの動きによって、薬剤調製物（たとえば、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物）が、孔または出口穴を通って、所定の剪断速度で放出される。本発明の任意の態様または実施形態において、ＤＵＲＯＳ（登録商標）デバイスの容器中に、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物が導入されており、このデバイスは、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物を、対象に対し、長期間（たとえば、約１、約２、約３、約４、約５、約６、約７、約８、約９、約１０、約１１、または約１２か月間）にわたって、所定の、治療的有効な送達速度において、送達できる。
【００９２】
任意の埋め込み型デバイスを、本開示の実施において使用してよく、この任意の埋め込み型デバイスは、一定の流量、調整可能な流量、またはプログラム可能な流量において化合物を提供できるレギュレータ式埋め込み型ポンプを含んでいてよい。
【００９３】
本開示に係る送達デバイスにおいて使用する（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物の量は、所望の治療成果の達成のために治療的有効量の剤を送達するのに必要とされる量である。実際には、この量は、たとえば、剤の種類、送達部位、状態の重症度、および所望の治療効果などの可変要因に依存して、変動してもよい。典型的には、浸透圧送達デバイスが有する、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドまたは制御放出調製物を収容するための有益剤用チャンバの容積は、約１００μｌ〜約１０００μｌ（たとえば、約１２０μｌおよび約５００μｌまたは約１５０μｌおよび約２００μｌ）である。
【００９４】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、浸透圧送達デバイスは、対象の体内の、たとえば皮下に、埋め込まれる。このデバイスは、片腕または両腕（たとえば、上腕の内側、外側、または後ろ側）に、または腹部に挿入されてよい。たとえば、このデバイスは、腹部の、肋骨より下でベルトラインより上の領域の皮膚の下に埋め込まれてよい。１つ以上の浸透圧送達デバイスを腹部に挿入できるよう、複数の位置を提供する目的で、腹部の壁を以下のように四半分４つに分けてよく、その４つとは、右肋骨より下に５〜８センチメートルかつ正中線より右に約５〜８センチメートルにわたって延在する右上の四半分と、ベルトラインより上に５〜８センチメートルかつ正中線より右に５〜８センチメートルにわたって延在する右下の四半分と、左肋骨より下に５〜８センチメートルかつ正中線より左に約５〜８センチメートルにわたって延在する左上の四半分と、ベルトラインより上に５〜８センチメートルかつ正中線より左に５〜８センチメートルにわたって延在する左下の四半分とである。こうすることによって、１つ以上のデバイスを１つ以上の場合に埋め込むために使用できる複数の位置が提供される。
【００９５】
他の実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与または神経保護ポリペプチドの持続送達の提供は、対象における、パーキンソン病（ＰＤ）、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、多発性硬化症、薬物嗜癖、アルコール嗜癖、神経変性状態、脳の炎症、アルツハイマー病（ＡＤ）、多系統萎縮症、ハンチントン病、慢性外傷性脳症、運動ニューロン疾患（たとえば、筋萎縮性側索硬化症、脊髄損傷、脊髄小脳失調（ＳＣＡ）、脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ））、脳血管性認知症、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）、混合型認知症、前頭側頭型認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病、正常圧水頭症、またはそれらの組み合わせからなる群より選択される少なくとも１種のＣＮＳ関連状態の少なくとも１種の症状を緩和する。
【００９６】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出調製物の投与または神経保護ポリペプチドの持続放出の提供により、血漿中の神経保護ポリペプチドの濃度が、約５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬの範囲内で安定状態となる。
【００９７】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出調製物の投与または神経保護ポリペプチドの持続放出の提供により、脳脊髄液（ＣＳＦ）、脳、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種における神経保護ポリペプチドの濃度が、累積的に増加する。
【００９８】
神経保護ポリペプチド
神経保護ポリペプチドは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４８、配列番号４９、配列番号５０、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、または配列番号５５からなる群より選択されるアミノ酸を有してよい。神経保護ポリペプチドは、配列番号１〜５５から選択されるアミノ酸配列を含んでよい。さらに、神経保護ポリペプチドは、配列番号１〜５５から選択されるアミノ酸配列からなっていてよい。
【００９９】
「ＧＬＰ−１または（もしくは）エキセンジン−４の類似体」は、作動薬特性を示す（すなわち、ＧＬＰ−１またはエキセンジン−４の１種以上の生物学的活性を示す）、改変されたＧＬＰ−１および／またはエキセンジンアミノ酸配列を意味する。このような改変には、ＧＬＰ−１中に存在する１つ以上のアミノ酸残基とエキセンジン−４中に存在する１つ以上のアミノ酸残基とを含むキメラポリペプチドが含まれる。また、上記の改変には、ＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４のいずれか一方またはそのキメラポリペプチドのトランケーションも含まれる。たとえば、トランケーション型キメラポリペプチドとして、エキセンジン−４  ７−３６において３６位のＧがＧＬＰ−１の３６位のＲで置き換えられたものが挙げられる。本開示に係るポリペプチドは、ＧＬＰ−１またはエキセンジン−４と比較して機能活性が顕著に低下しない程度の、ＧＬＰ−１またはエキセンジン−４のアミノ酸配列における、１つ以上のアミノ酸の追加（すなわち、挿入または付加）、アミノ酸の欠失、または置換を含む。たとえば、欠失とは、本発明において定義される分化誘導活性を与えるのに必須ではないアミノ酸の欠失であってよく、置換とは、保存的（すなわち、塩基性、親水性、または疎水性のアミノ酸を、こうした性質が同じであるアミノ酸で置換すること）であってもよく、または非保存的であってもよい。保存的置換とは、置換されたアミノ酸の構造的特性または化学的特性が、参照配列中の対応するアミノ酸の構造的特性または化学的特性と類似する置換である。例として、保存的アミノ酸置換は、アラニン、バリン、ロイシン、およびイソロイシンなどの脂肪族または疎水性アミノ酸１つを別の脂肪族または疎水性アミノ酸１つで置換すること、セリンおよびトレオニンなどのヒドロキシ含有アミノ酸１つを別のヒドロキシ含有アミノ酸１つで置換すること、グルタミン酸またはアスパラギン酸などの酸性残基１つを別の酸性残基１つで置換すること、アスパラギンおよびグルタミンなどのアミド含有残基１つを別のアミド含有残基１つで置き換えること、フェニルアラニンおよびチロシンなどの芳香族残基１つを別の芳香族残基１つで置き換えること、リシン、アルギニン、およびヒスチジンなどの塩基性残基１つを別の塩基性残基１つで置き換えること、ならびに、アラニン、セリン、トレオニン、メチオニン、およびグリシンなどの小アミノ酸１つを別の小アミノ酸１つで置き換えることに関与する。したがって、ＧＬＰ−１およびエキセンジン−４のアミノ酸配列を改変および変更することが望ましい場合には、改変および変更してよく、その場合にも、類似する特徴を有するタンパク質が得られるということが理解される。ＧＬＰ−１のアミノ酸配列またはエキセンジン−４アミノ酸配列（またはその元となる核酸配列）には、生物学的有用性または活性を顕著に低下させない程度に、かつ、できればこうした有用性または活性を増大させるように、種々の変更がなされてよい。
【０１００】
本明細書中において、ＧＬＰ−１、またはエキセンジン−４、またはこれらと実質的に相同するアミノ酸配列を有するポリペプチドに関して用いられる「断片」または「トランケーション」という用語は、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはこれらと実質的に相同するアミノ酸配列を有するポリペプチドのいずれかが有する、少なくとも５つの連続するアミノ酸からなるポリペプチド配列を意味し、このポリペプチド配列は、インスリン分泌機能を有する。
【０１０１】
上記以外の改変には、Ｄ−エナンチオマーが含まれる。アミノ酸残基の、天然に存在する少なくとも１つのＬ型立体配置が、そのアミノ酸残基のＤ型立体配置で置き換えられたものである。
【０１０２】
本開示は、横方向スペーサなどのスペーサの使用を意図している。「横方向スペーサ」という用語は、化学結合によってアミノ酸配列中に組み込まれる化合物と定義される。この化合物は、２つ以上のアミノ酸残基の間の距離を長くすることによって、この化合物が組み込まれた位置またはその近傍において当該アミノ酸配列が切断（たとえば、ＤＰＰ  １Ｖにより切断）されにくくする、または切断されないようにするものである。たとえば、アミノ酸残基ＡおよびＢと横方向スペーサＸとを有する配列Ａ−Ｘ−Ｂは、横方向スペーサを有さない配列（Ａ−Ｂ）と比較して、酵素によって配列が切断されにくい、または切断されない。たとえば、横方向スペーサとして、１〜４つの化合物がアミノ酸配列中に組み込まれてよい。したがって、種々の実施形態において、１、２、３、または４つの化合物が挿入される。
【０１０３】
一般的に、横方向スペーサは、アミノ酸とペプチド結合を形成できる任意の化合物である。すなわち、少なくとも１つのアミノ基と少なくとも１つのカルボキシ基（ＣＯ２）とを含有し、このカルボキシ基は、カルボン酸またはそのエステルもしくは塩であってよい。一実施形態において、横方向スペーサは、式Ｈ２Ｎ−Ｒ１−ＣＯ２Ｈ（Ｉ）を有し、式中、Ｒ１は、置換もしくは未置換の、分枝状もしくは直鎖状の、炭素数１〜２０の、アルキル基、アルケニル基、もしくはアルキニル基、または置換もしくは未置換の炭素数３〜８のシクロアルキル基、または置換もしくは未置換の炭素数６〜２０のアリール基、または置換もしくは未置換の炭素数４〜２０のヘテロアリール基を含む。別の一実施形態において、Ｒ１は、式（ＣＨ２）ｎで表されてよく、式中、ｎは１〜１０である。一実施形態において、Ｒ１は、（ＣＨ２）３（３−アミノプロピオン酸）または（ＣＨ２）５（６−アミノヘキサン酸）である。
【０１０４】
本開示は、少なくとも１種の神経保護ポリペプチドを含む制御放出調製物の投与を含む方法を提供する。ポリペプチドは、改変されたＧＬＰ−１またはエキセンジン（たとえば、エキセンジン−４）の配列、またはその類似体もしくは誘導体であって、ＧＬＰ−１の７番目および８番目の残基に相当するアミノ酸残基の間にスペーサが配置されたもの（たとえば、Ａｈａスペーサを有するＧＬＰ−１の場合、「ＧＬＰ−１  Ａｈａ８」と称される）、または、ＧＬＰ−１の８番目および９番目の残基に相当するアミノ酸残基の間にスペーサが配置されたもの（たとえば、Ａｈａスペーサを有するＧＬＰ−１の場合、「ＧＬＰ−１Ａｈａ９」と称される）を含んでよい。横方向スペーサは、一実施形態において、１つ以上のアミノプロプリオニック酸残基である。一実施形態において、スペーサは、６−アミノヘキサン酸スペーサであり、この６−アミノヘキサン酸スペーサは、６−アミノヘキサン酸残基を４つ未満含む。ポリペプチドは、たとえば、ＧＬＰ−１  ７−３６の７番目の残基と８番目の残基との間に１つ以上の６−アミノヘキサン酸残基が含まれたもの（すなわち、ＧＬＰ−１  Ａｈａ８）を含んでよい、または、ＧＬＰ−１  ７−３６の８番目の残基と９番目の残基との間に１つ以上の６−アミノヘキサン酸残基が含まれたものを含んでよい。ポリペプチドは、ＧＬＰ−１  ７−３６の７番目の残基と８番目の残基との間に２つ以上の６−アミノヘキサン酸残基が含まれたもの（すなわち、ＧＬＰ−１  Ａｈａ８）を含んでよい、または、ＧＬＰ−１  ７−３６の８番目の残基と９番目の残基との間に２つ以上の６−アミノヘキサン酸残基が含まれたものを含んでよい。ポリペプチドは、たとえば、ＧＬＰ−１  ７−３６の７番目の残基と８番目の残基との間に３つ以上の６−アミノヘキサン酸残基が含まれたもの（すなわち、ＧＬＰ−１  Ａｈａ８）を含んでよい、または、ＧＬＰ−１  ７−３６の８番目の残基と９番目の残基との間に３つ以上の６−アミノヘキサン酸残基が含まれたものを含んでよい。
【０１０５】
他の実施形態において、本開示に係るポリペプチドは、ＧＬＰ−１の等モル量と同等のインスリン分泌効果を有する、または、一実施形態において、エキセンジン−４の等モル量と同等のインスリン分泌効果を有する。「同等の効果」とは、ＧＬＰ−１またはエキセンジン−４の効果の約１０〜１５％の効果を意味する。別の一実施形態において、ポリペプチドは、ＧＬＰ−１またはエキセンジン−４のいずれかのインスリン分泌効果を超えるインスリン分泌効果を有する。ＧＬＰ−１またはエキセンジン−４が有する「効果を超える」とは、ＧＬＰ−１またはエキセンジン−４と比較してインスリン分泌効果が増大していること、たとえば、その増大の幅がＧＬＰ−１またはエキセンジン−４の効果の約１０％よりも大きいこと、を意味する。したがって、一実施形態において、本開示に係るポリペプチドは、ＧＬＰ−１またはエキセンジン−４と同程度の効力を有し、別の一実施形態において、本開示に係るポリペプチドは、ＧＬＰ−１よりも高い効力を有し、かつ、任意に、エキセンジン−４よりも高い効力を有する。他の実施形態において、本開示に係るポリペプチドは、ＧＬＰ−１よりも持効性が高い。さらなる一実施形態において、ポリペプチドは、少なくともエキセンジン−４と同程度の持効性を有する。他の実施形態において、ポリペプチドは、エキセンジン−４よりも持効性が高い。「〜よりも持効性が高い」とは、ポリペプチドが、ＧＬＰ−１またはエキセンジン−４よりも、少なくとも１種の分解酵素に対する耐性が高いことを意味する。たとえば、本開示に係るポリペプチドは、ＧＬＰ−１よりも、かつ、任意に、エキセンジン−４よりも、酵素ジペプチジルペプチダーゼ−４（ＤＰＰＩＶ）による分解に対する耐性が高い。１つ以上の分解酵素に対するこうした耐性は、分解産物の量（たとえば、Ｎ−末端分解産物の量）または切断されていないポリペプチドの量を検出することによって、直接調べることができる。代替的には、１つ以上の分解酵素に対するこうした耐性は、本開示に係るポリペプチドの投与後における、インスリン分泌効果の経時的減少を調べることによって、間接的に検出されてよい。たとえば、本開示に係るポリペプチドを分解酵素が切断するにつれて、単回投与後に、血漿インスリンレベルが低下するであろう。追加的な実施形態において、この低下の速度は、ＧＬＰ−１の場合よりも遅いと考えられ、かつ／または、おそらくはエキセンジン−４の場合よりもさらに遅いと考えられる。
【０１０６】
本開示に係るポリペプチドは、当技術分野において通常の知識を有する者に広く周知される、溶液法および固相法などの複数の化学的ポリペプチド合成技術のうち、任意の技術によって調製してよい。固相合成とは、ポリペプチド配列のＣ−末端アミノ酸を不溶性担持体に付着させ、続いて、当該配列の残りのアミノ酸を連続的に付加するものであり、この方法は、ポリペプチドの調製を目的とした合成方法の１つである。固相合成技術は、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８５：２１４９−２１５６（１９６３）によって記載されている。固相ペプチド合成を実施するための多くの自動システムが市販される。
【０１０７】
固相合成は、ポリペプチドのカルボキシ末端（すなわち、Ｃ−末端）から開始し、保護されたアミノ酸を、そのカルボキシ基を介して、適切な固体担持体にカップリングさせることによって実施する。使用する固体担持体は、当該カルボキシ基に結合できるものであって、かつ、ペプチド合成手順で使用する試薬に対して実質的に不活性であるものであれば、特徴として重要ではない。たとえば、アミノ基が保護されたアミノ酸を、ベンジルエステル結合を介してクロロメチル化樹脂もしくはヒドロキシメチル樹脂に付着させることによって、または、アミド結合を介してベンズヒドリルアミン（ＢＨＡ）樹脂もしくはｐ−メチルベンズヒドリルアミン（ＭＢＨＡ）樹脂に付着させることによって、出発原料を調製してよい。固体担持体として使用するのに適切な材料は、当技術分野における知識を有する者に広く周知されており、そうした材料には、クロロメチル樹脂またはブロモメチル樹脂などのハロメチル樹脂、ヒドロキシメチル樹脂、４−（ａ−［２，４−ジメトキシフェニル］−Ｆｍｏｃ−アミノメチル）フェノキシ樹脂などのフェノール樹脂、およびｔｅｒｔ−アルキルオキシカルボニルヒドラジド化樹脂などが含まれるが、これらに限定されない。このような樹脂は、市販されており、その調製方法は、当技術分野において通常の知識を有する者に周知である。
【０１０８】
ペプチドの酸型は、固体担持体としてベンジルエステル樹脂を使用する固相ペプチド合成手順によって調製してよい。対応するアミドは、固体担持体としてベンズヒドリルアミンまたはメチルベンズヒドリルアミン樹脂を使用することによって、生成してよい。当業者であれば、ＢＨＡまたはＭＢＨＡ樹脂を使用する場合には、この固体担持体からの当該ペプチドの切り離しを無水フッ化水素酸処理によって実施すると、末端アミド基を有するペプチドが生成されることを、認識できるであろう。
【０１０９】
合成に使用する各アミノ酸のα−アミノ基は、カップリング反応の実施中、反応性α−アミノ官能基を巻き込んだ副反応が生じるのを防ぐために、保護されているべきである。反応性の側鎖官能基（たとえば、スルフヒドリル、アミノ、カルボキシ、ヒドロキシなど）をさらに含有するアミノ酸については、当該部位における化学反応がペプチド合成中に生じるのを防ぐために、適切な保護基で保護されていなければならない。保護基は、当技術分野における知識を有する者に広く周知される。たとえば、Ｔｈｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．３：Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｇｒｏｓｓ  ａｎｄ  Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ（ｅｄｓ．），Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．（１９８１））を参照のこと。
【０１１０】
適切に選択したα−アミノ保護基であれば、カップリング反応中にα−アミノ官能基を不活性化でき、カップリング後は、側鎖保護基の除去が生じない条件の下で容易に除去でき、ペプチド断片の構造を変化させず保持でき、かつ、カップリング直前の活性化によるラセミ化を防止できる。同様に、側鎖保護基は、合成中に側鎖官能基を不活性化できるものを選択しなければならず、α−アミノ保護基を除去する際の条件下で安定でなければならず、かつ、ペプチド合成終了後には、ペプチドの構造を変化させない条件の下で除去できなければならない。
【０１１１】
アミノ酸のカップリングは、当技術分野における知識を有する者に周知の様々な技術によって、実施してよい。典型的な方法では、アミノ酸を誘導体に変換することにより、そのカルボキシ基と、ペプチド断片の遊離Ｎ−末端アミノ基との反応を生じやすくするか、または、たとえばＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）またはＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＰＣＤＩ）などの、好適なカップリング剤を使用する。多くの場合、こうしたカップリング反応の触媒として、ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）を使用する。
【０１１２】
一般的に、ペプチドの合成は、まず、フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）などの保護基でＮ−アミノ位が保護されたＣ−末端アミノ酸を、固体担持体にカップリングさせることによって、開始する。Ｆｍｏｃ−Ａｓｎをカップリングさせる前に、Ｆｍｏｃ残基をポリマーから切り離す必要がある。たとえば、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎは、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）およびヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）を用い、約２５℃で、約２時間かけて、撹拌しながら、４−（ａ−［２，４−ジメトキシフェニル］−Ｆｍｏｃ−アミノ−メチル）フェノキシ樹脂にカップリングさせることができる。Ｆｍｏｃ保護アミノ酸を樹脂担持体にカップリングさせた後、２０％ピペリジン含有ＤＭＦを用いて、室温において、α−アミノ保護基を除去する。
【０１１３】
α−アミノ保護基の除去後、残ったＦｍｏｃ保護アミノ酸を、段階的に、望ましい順序で、カップリングさせる。適切に保護されたアミノ酸が、複数の供給元から市販される（たとえば、Ｎｏｖａｒｔｉｓ（スイス）またはＢａｃｈｅｍ（Ｔｏｒｒａｎｃｅ、ＣＡ））。アミノ酸を１つ１つ段階的に付加する代わりに、１つより多いアミノ酸からなる、適切に保護されたペプチド断片を、「伸長中の」ペプチドにカップリングさせてもよい。適切なカップリング試薬の選択は、上述されるように、当技術分野における知識を有する者に広く周知される。
【０１１４】
保護されたアミノ酸またはアミノ酸配列の各々を、過剰量で、固相反応器中に導入し、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、塩化メチレン（ＣＨ２Ｃｌ２）、またはそれらの混合物を媒体として、カップリングを実施する。カップリングが不完全である場合には、Ｎ−アミノ基の脱保護および次のアミノ酸の付加まで、カップリング反応を繰り返してよい。カップリング効率の監視を、当技術分野における知識を有する者に広く周知される複数の手段によって、実施してよい。カップリング効率を監視する方法は、ニンヒドリン反応であってよい。ペプチド合成反応は、Ｂｉｏｓｅａｒｃｈ  ９５００（商標）合成装置（Ｂｉｏｓｅａｒｃｈ、Ｓａｎ  Ｒａｐｈａｅｌ、ＣＡ）などの、市販される複数のペプチド合成装置を用いて、自動的に実施してよい。
【０１１５】
ペプチドを切断してよく、保護基の除去は、無水液状フッ化水素（ＨＦ）中、アニソールおよび硫化ジメチルの存在下、約０℃において、約２０〜約９０分間、たとえば６０分間、不溶性の担体もしくは固体担持体を撹拌することによって実施してもよいし、または、選択した保護基に応じて、樹脂１ｍｇ／１０ｍＬをトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）中に懸濁した懸濁液に、臭化水素（ＨＢｒ）を連続して６０〜３６０分間、ほぼ室温で通気することによって実施してもよいし、または、固相合成に使用した反応カラム中で、固体担持体を、９０％トリフルオロ酢酸と５％水と５％トリエチルシランとを使用して、約３０〜約６０分間インキュベートすることによって実施してもよい。また、当技術分野における知識を有する者に広く周知される他の脱保護方法を使用してもよい。
【０１１６】
ペプチドを、当技術分野における知識を有する者に広く周知されるペプチド精製手段によって、反応混合物から単離および精製してよい。たとえば、ペプチドを、逆相ＨＰＬＣ、ゲル浸透、イオン交換、サイズ排除、アフィニティ、分配、または向流分配などの、周知のクロマトグラフィー法によって、精製してよい。
【０１１７】
また、神経保護ポリペプチドの調製を、たとえば組換え技術などの、他の手段によって実施してもよい。適切なクローニングおよびシーケンシング技術の例と、当業者が多くのクローニング実習を実施するのに十分な説明とについては、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．（１９８９）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ−Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（２ｎｄ  ｅｄ．）Ｖｏｌ．１−３，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ，（Ｓａｍｂｒｏｏｋ）を参照のこと。
【０１１８】
たとえば、制御放出調製物中において使用する（１種または２種以上の）エキセンジン誘導体は、化学式Ｉで表される化合物、またはその薬学的に許容される塩であってよい：
Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ａｌａ  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１  Ｘａａ２２  Ｘａａ２３  Ｘａａ２４  Ｘａａ２５  Ｘａａ２６  Ｘａａ２７  Ｘａａ２８  −Ｚ１
（化学式Ｉ）
（式中、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４−イミダゾプロピオニルであり、
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり、
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり、
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり、
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり、
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり、
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり、
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり、
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり、
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり、
Ｘａａ２０は、Ａｌａ、またはＡｒｇであり、
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ−ＮＨε−Ｒであり、ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、または炭素数１〜１０の直鎖状もしくは分枝状のアルカノイルであり、
Ｘａａ２２は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、ｔｅｒｔ−ブチルグリシン、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり、
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり、
Ｘａａ２７は、ＡｌａまたはＬｙｓであり、
Ｘａａ２８は、ＡｌａまたはＡｓｎであり、かつ
Ｚ１は、−ＯＨ、−ＮＨ２、Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８−Ｚ２、またはＧｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８  Ｘａａ３９−Ｚ２であり、
Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、およびＸａａ３８は、独立して、Ｐｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ−アルキルグリシン、Ｎ−アルキルペンチルグリシン、またはＮ−アルキルアラニンからなる群より選択され、Ｘａａ３９は、Ｓｅｒ、またはＴｙｒであり（たとえば、Ｓｅｒであり）、かつ
Ｚ２は、−ＯＨ、または−ＮＨ２であり、
ただし、
Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、およびＸａａ２８のうち、Ａｌａであるものは３つを超えず、かつ
Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｙｒである場合、Ｘａａ３、Ｘａａ４、およびＸａａ９のうち少なくとも１つはＡｌａである）。
【０１１９】
いくつかの実施形態において、Ｎ−アルキルグリシン、Ｎ−アルキルペンチルグリシン、およびＮ−アルキルアラニンのＮ−アルキル基は、たとえば炭素原子１〜約６個または炭素原子１〜４個を有する、低級アルキル基を含んでよい。化学式Ｉで表される化合物は、１９９８年１１月１３日付提出のＰＣＴ出願番号第ＰＣＴ／ＵＳ９８／２４２７３号（発明の名称「新規エキセンジン作動薬化合物」、その全体を、あらゆる目的において、引用により本明細書に援用する）の実施例１〜８９中に示される化合物（それぞれ化合物１〜８９）、ならびに、これらに対応する、同実施例１０４および１０５中に示される化合物を含んでよい。
【０１２０】
具体的な一実施形態において、化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、化学式ＩのＸａａ１がＨｉｓ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、または４−イミダゾプロピオニルであるものを含んでよい。別の一実施形態において、化学式ＩのＸａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｌａ、または４−イミダゾプロピオニルである。追加的な一実施形態において、化学式ＩのＸａａ１は、Ｈｉｓまたは４−イミダゾプロピオニルである。
【０１２１】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２がＧｌｙであるものであってよい。
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ３がＡｌａであるものであってよい。
【０１２２】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ４がＡｌａであるものであってよい。
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ９がＡｌａであるものであってよい。
【０１２３】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ１４がＬｅｕ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであるものであってよい。
【０１２４】
化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２１がＬｙｓ−ＮＨε−Ｒであるものであってよく、ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、または炭素数１〜１０の直鎖状もしくは分枝状のアルカノイルである。
【０１２５】
一実施形態において、化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２５がＴｒｐまたはＰｈｅであるものであってよい。
【０１２６】
別の一実施形態において、化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ６がＡｌａ、Ｐｈｅ、またはナフチルアラニンであり、Ｘａａ２２がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり、かつＸａａ２３がＩｌｅまたはＶａｌであるものであってよい。さらに、化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、およびＸａａ３８が、独立して、Ｐｒｏ、ホモプロリン、チオプロリン、およびＮ−アルキルアラニンからなる群より選択され、Ｚ１が−ＮＨ２であってよく、かつＺ２が−ＮＨ２であってよいものであってよい。
【０１２７】
他の実施形態において、化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ１がＡｌａ、Ｈｉｓ、またはＴｙｒであり（たとえば、ＡｌａまたはＨｉｓであり）、Ｘａａ２がＡｌａまたはＧｌｙであり、Ｘａａ６がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり、Ｘａａ１４がＡｌａ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり、Ｘａａ２２がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり、Ｘａａ２３がＩｌｅまたはＶａｌであり、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、およびＸａａ３８が、独立して、Ｐｒｏ、ホモプロリン、チオプロリン、およびＮ−アルキルアラニンからなる群より選択され、Ｘａａ３９がＳｅｒまたはＴｙｒであり（たとえば、Ｓｅｒであり）、かつＺ１が−ＮＨ２であってよいものであってよい。
【０１２８】
一実施形態によれば、化学式Ｉのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ１がＨｉｓまたはＡｌａであり、Ｘａａ２がＧｌｙまたはＡｌａであり、Ｘａａ３がＡｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、Ｘａａ４がＡｌａまたはＧｌｙであり、Ｘａａ５がＡｌａまたはＴｈｒであり、Ｘａａ６がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり、Ｘａａ７がＴｈｒまたはＳｅｒであり、Ｘａａ８がＡｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり、Ｘａａ９がＡｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、Ｘａａ１０がＡｌａ、Ｌｅｕ、またはペンチルグリシンであり、Ｘａａ１１がＡｌａまたはＳｅｒであり、Ｘａａ１２がＡｌａまたはＬｙｓであり、Ｘａａ１３がＡｌａまたはＧｌｎであり、Ｘａａ１４がＡｌａ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、またはペンチルグリシンであり、Ｘａａ１５がＡｌａまたはＧｌｕであり、Ｘａａ１６がＡｌａまたはＧｌｕであり、Ｘａａ１７がＡｌａまたはＧｌｕであり、Ｘａａ１９がＡｌａまたはＶａｌであり、Ｘａａ２０がＡｌａまたはＡｒｇであり、Ｘａａ２１がＡｌａまたはＬｅｕであり、Ｘａａ２２がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり、Ｘａａ２３がＩｌｅ、Ｖａｌ、またはｔｅｒｔ−ブチルグリシンであり、Ｘａａ２４がＡｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり、Ｘａａ２５がＡｌａ、Ｔｒｐ、またはＰｈｅであり、Ｘａａ２６がＡｌａまたはＬｅｕであり、Ｘａａ２７がＡｌａまたはＬｙｓであり、Ｘａａ２８がＡｌａまたはＡｓｎであり、Ｚ１が、−ＯＨ、−ＮＨ２、Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８−Ｚ２、またはＧｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８  Ｘａａ３９−Ｚ２であり、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、およびＸａａ３８が、独立して、Ｐｒｏ、ホモプロリン、チオプロリン、またはＮ−メチルアラニンであり、Ｘａａ３９がＳｅｒまたはＴｙｒであり（たとえば、Ｓｅｒであり）、かつＺ２が−ＯＨまたは−ＮＨ２であり、ただし、Ｘａａ３、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、およびＸａａ２８のうち、Ａｌａであるものは３つを超えず、かつＸａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｙｒである場合、Ｘａａ３、Ｘａａ４、およびＸａａ９のうち少なくとも１つがＡｌａであってよいものであってよい。
【０１２９】
さらなる実施形態において、化学式Ｉの化合物は、ＰＣＴ出願番号第ＰＣＴ／ＵＳ９８／２５７２８号中に記載される配列番号５〜９３のアミノ酸配列を有するもの、または米国仮出願第６０／０６６，０２９号中に記載されるものを含んでよい（これらを引用により本明細書に援用する）。
【０１３０】
一実施形態によれば、Ｘａａ１４がＬｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、またはペンチルグリシンであり（たとえば、Ｌｅｕまたはペンチルグリシンであり）、かつＸａａ２５がＡｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンである（たとえば、Ｐｈｅまたはナフチルアラニンである）化合物が提供される。これらの化合物は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏの両方において、かつ当該化合物の合成中において、酸化分解しにくいであろう。
【０１３１】
別の一態様において、エキセンジン誘導体は、化学式ＩＩで表される化合物、またはその薬学的に許容される塩を含んでよい：
Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ａｌａ  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１  Ｘａａ２２  Ｘａａ２３  Ｘａａ２４  Ｘａａ２５  Ｘａａ２６  Ｘ１−Ｚ１
（化学式ＩＩ）
（式中、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４−イミダゾプロピオニルであり、
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり、
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり、
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり、
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり、
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり、
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり、
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり、
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり、
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり、
Ｘａａ２０は、ＡｌａまたはＡｒｇであり、
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ−ＮＨε−Ｒであり（ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、炭素数１〜１０の直鎖状もしくは分枝状のアルカノイル、またはシクロアレイル−アルカノイルであり）、
Ｘａａ２２は、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、ｔｅｒｔ−ブチルグリシン、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり、
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり、
Ｘ１は、Ｌｙｓ  Ａｓｎ、Ａｓｎ  Ｌｙｓ、Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒ  Ａｓｎ、Ａｓｎ  Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒ、Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒ  Ａｌａ、Ａｌａ  Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒであり、ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、炭素数１〜１０の直鎖状もしくは分枝状のアルカノイル、またはシクロアルキルアルカノイルであり、
Ｚ１は、−ＯＨ、−ＮＨ２、Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８−Ｚ２、またはＧｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８  Ｘａａ３９−Ｚ２であり、
Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、およびＸａａ３８は、独立して、Ｐｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ−アルキルグリシン、Ｎ−アルキルペンチルグリシン、およびＮ−アルキルアラニンからなる群より選択され、Ｘａａ３９は、ＳｅｒまたはＴｙｒであり、かつ
Ｚ２は、−ＯＨまたは−ＮＨ２である）、
ただし、
Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、およびＸａａ２６のうち、Ａｌａであるものは３つを超えず、かつ
Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、または４−イミダゾプロピオニルである場合、Ｘａａ３、Ｘａａ４、およびＸａａ９のうち少なくとも１つはＡｌａである）。
【０１３２】
特定の実施形態において、化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、または４−イミダゾプロピオニルであるもの（たとえば、Ｘａａ１がＨｉｓ、４−イミダゾプロピオニル、もしくはＡｌａを含むもの、またはＸａａ１がＨｉｓ、もしくは４−イミダゾプロピオニルを含むもの）を含んでよい。
【０１３３】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２がＧｌｙであるものであってよい。
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ４がＡｌａであるものであってよい。
【０１３４】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ９がＡｌａであるものであってよい。
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ１４がＬｅｕ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであるものであってよい。
【０１３５】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２５がＴｒｐまたはＰｈｅであるものであってよい。
【０１３６】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ６がＡｌａ、Ｐｈｅ、またはナフチルアラニンであり、Ｘａａ２２がＰｈｅまたはナフチルアラニンであり、かつＸａａ２３がＩｌｅまたはＶａｌであるものであってよい。
【０１３７】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｚ１が−ＮＨ２であるものであってよい。
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、およびＸａａ３８が、独立して、Ｐｒｏ、ホモプロリン、チオプロリン、およびＮ−アルキルアラニンからなる群より選択されるものであってよい。
【０１３８】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ３９がＳｅｒまたはＴｙｒである（たとえば、Ｓｅｒである）ものであってよい。化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｚ２が−ＮＨ２であるものであってよい。
【０１３９】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｚ１が−ＮＨ２であるものであってよい。
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘａａ２１がＬｙｓ−ＮＨε−Ｒであるものであってよく、ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、または炭素数１〜１０の直鎖状または分枝状のアルカノイルである。
【０１４０】
化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、Ｘ１が、Ｌｙｓ  Ａｓｎ、Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒ  Ａｓｎ、またはＬｙｓ−ＮＨε−Ｒ  Ａｌａであるものであってよく、ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、または炭素数１〜１０の直鎖状もしくは分枝状のアルカノイルである。
【０１４１】
さらなる実施形態において、化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、ＷＯ９９／０２５７２８中に記載される配列番号９５〜１１０で示されるアミノ酸配列を有する化合物を含んでよい。化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、１９９８年１１月１３日付提出のＰＣＴ出願ＰＣＴ／ＵＳ９８／２４２１０（発明の名称「新規エキセンジン作動薬化合物」）中に記載される配列番号５〜９３で示されるアミノ酸配列を有する化合物を含んでよい。別の一態様において、化学式ＩＩのエキセンジン誘導体は、ＷＯ９９／００７４０４中に記載される配列番号３７〜４０で示されるアミノ酸配列を有する化合物を含んでよい。上記文献を、引用により本明細書に援用する。
【０１４２】
化学式ＩおよびＩＩ中に使用する省略形は、以下のとおりの意味である。
「ＡＣＮ」および「ＣＨ３ＣＮ」は、アセトニトリルを指す。
【０１４３】
「Ｂｏｃ」、「ｔＢｏｃ」、および「Ｔｂｏｃ」は、ｔ−ブトキシカルボニルを指す。
「ＤＣＣ」は、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドを指す。
【０１４４】
「Ｆｍｏｃ」は、フルオレニルメトキシカルボニルを指す。
「ＨＢＴＵ」は、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３，−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェートを指す。
【０１４５】
「ＨＯＢｔ」は、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物を指す。
「ｈｏｍｏＰ」および「ｈＰｒｏ」は、ホモプロリンを指す。
【０１４６】
「ＭｅＡｌａ」および「Ｎｍｅ」は、Ｎ−メチルアラニンを指す。
「ｎａｐｈ」は、ナフチルアラニンを指す。
【０１４７】
「ｐＧ」および「ｐＧｌｙ」は、ペンチルグリシンを指す。
「ｔＢｕＧ」は、ｔｅｒｔ−ブチルグリシンを指す。
【０１４８】
「ＴｈｉｏＰ」および「ｔＰｒｏ」は、チオプロリンを指す。
「３Ｈｙｐ」は、３−ヒドロキシプロリンを指す。
【０１４９】
「４Ｈｙｐ」は、４−ヒドロキシプロリンを指す。
「ＮＡＧ」は、Ｎ−アルキルグリシンを指す。
【０１５０】
「ＮＡＰＧ」は、Ｎ−アルキルペンチルグリシンを指す。
「Ｎｏｒｖａｌ」は、ノルバリンを指す。
【０１５１】
一実施形態において、エキセンジン断片または誘導体は、Ｃ−末端がアミド基で置換されていても置換されていなくてもよく、エキセンジン−４（１−２８）（配列番号１５）、エキセンジン−４（１−２８）アミド、エキセンジン−４（１−３０）（配列番号７）、エキセンジン−４（１−３０）アミド、エキセンジン−４（１−３１）（配列番号５４）、エキセンジン−４（１−３１）アミド、１４Ｌｅｕ２５Ｐｈｅエキセンジン−４（配列番号５５）、１４Ｌｅｕ２５Ｐｈｅエキセンジン−４アミド、およびこれらの薬学的に許容される塩からなる群より選択されてよい。
【０１５２】
制御放出調製物
他の実施形態によれば、制御放出組成物または微小球は、有効成分として、エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体を、エキセンジン（エキセンジン−４など）、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体（たとえば、エキセンジン−４類似体）と、生分解性ポリマーと、被覆材料とを含む、組成物または微小球１００重量部に基づいて、約０．１〜約１０重量部（たとえば、約０．８〜約６重量部）の量で含んでよい。たとえば、制御放出組成物または微小球は、エキセンジンもしくはその治療的に有効である類似体および／またはＧＬＰ−１もしくはその治療的に有効である類似体を、エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体と、生分解性ポリマーと、被覆材料とを含む、組成物または微小球１００重量部に基づいて、約０．１〜約１０重量部、約０．１〜約９重量部、約０．１〜約８重量部、約０．１〜約７重量部、約０．１〜約６重量部、約０．１〜約６重量部、約０．１〜約５重量部、約０．１〜約４重量部、約０．１〜約３重量部、約０．５〜約１０重量部、約０．５〜約９重量部、約０．５〜約８重量部、約０．５〜約７重量部、約０．５〜約６重量部、約０．５〜約６重量部、約０．５〜約５重量部、約０．５〜約４重量部、約０．５〜約３重量部、約１〜約１０重量部、約１〜約９重量部、約１〜約８重量部、約１〜約７重量部、約１〜約６重量部、約１〜約６重量部、約１〜約５重量部、約１〜約４重量部、約１〜約３重量部、約２〜約１０重量部、約２〜約９重量部、約２〜約８重量部、約２〜約７重量部、約２〜約６重量部、約２〜約６重量部、約２〜約５重量部、約２〜約４重量部、約３〜約１０重量部、約３〜約９重量部、約３〜約８重量部、約３〜約７重量部、約３〜約６重量部、約４〜約１０重量部、約４〜約９重量部、約４〜約８重量部、約４〜約７重量部、約５〜約１０重量部、約５〜約９重量部、約５〜約８重量部、約６〜約１０重量部、約６〜約９重量部、または約７〜約１０重量部含んでよい。本開示に係る組成物または微小球に含まれるエキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体の量が、上記範囲より少ない場合には、エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体の高い効果を得ることができない。また、エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体の量が、上記範囲より多い場合には、エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体の初期バーストが増大し、これにより、初期バーストに起因する副作用が生じる。したがって、エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体の量は、上記範囲内であることが好ましい。
【０１５３】
生分解性ポリマーは、人間にとって有害でないすべてのポリマーを指す。というのは、生分解性ポリマーは、体内に投与されると、ゆっくりと分解および排出され得るためである。生分解性ポリマーは、ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリグリコリド（ＰＧＡ）、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）、ポリオルトエステル、ポリ酸無水物、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、およびポリアルキルカーボネート、ならびに、１種以上のポリマーとポリエチレングリコール（ＰＥＧ）との共重合体からなる群より選択される１種以上（たとえば、１、２、３、４、５、６種、またはそれ以上）を含んでよい。上記１種以上のポリマーは、共重合体または単純な混合物の形態であってよい。
【０１５４】
たとえば、生分解性ポリマーは、ラクチド：グリコリド比が１：１である、ＲＧ５０２Ｈ（ＩＶ＝０．１６〜０．２４ｄＬ／ｇ）、ＲＧ５０３Ｈ（ＩＶ＝０．３２〜０．４４ｄＬ／ｇ）、およびＲＧ５０４Ｈ（ＩＶ＝０．４５〜０．６０ｄＬ／ｇ）、ラクチド：グリコリド比が７５：２５であるＲＧ７５２Ｈ（ＩＶ＝０．１４〜０．２２ｄＬ／ｇ）といった、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）、Ｒ２０２Ｈ（ＩＶ＝０．１６〜０．２４ｄＬ／ｇ）およびＲ２０３Ｈ（ＩＶ＝０．２５〜０．３５ｄＬ／ｇ）といったポリラクチド（ＰＬＡ）（いずれも、提供元はＥｖｎｉｋ、ドイツ）、ラクチド：グリコリド比が１：１である、５０５０ＤＬ  ２Ａ（ＩＶ＝０．１５〜０．２５ｄＬ／ｇ）、５０５０ＤＬ  ３Ａ（ＩＶ＝０．２５〜０．４３ｄＬ／ｇ）、および５０５０ＤＬ  ４Ａ（ＩＶ＝０．３８〜０．４８ｄＬ／ｇ）といったポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（Ｅｖｏｎｉｋ（Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ、ＮＪ、米国）提供の共重合体）などからなる群より選択される１種以上であってよいが、同等のポリマーが、任意の適切な供給元から提供、入手されてもよい。
【０１５５】
さらなる実施形態において、生分解性ポリマーは、ポリマー−糖複合体であってよい。このポリマー−糖複合体は、糖と、（１）ポリラクチド（ＰＬＡ）、ポリグリコリド（ＰＧＡ）、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）、ポリオルトエステル、ポリ酸無水物、ポリヒドロキシ酪酸、ポリカプロラクトン、およびポリアルキルカーボネートからなる群より選択されるポリマー、（２）上記ポリマー群の中の少なくとも２種からなる共重合体、または（３）ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と上記ポリマー群の中の１種との共重合体とが、カップリングしたものである。
【０１５６】
本開示の他の実施形態において、ポリマー−糖複合体は、糖の水酸基がポリマーで置換された複合体を指してよい。糖は、単位糖１〜８個を有する単糖および多糖（各単位糖は水酸基３〜６個を有する）と、水酸基３〜６個を有し分子量が２０，０００以下である直鎖の糖アルコールとを含んでよい。この糖アルコールは、マンニトール、ペンタエリスリトール、ソルビトール、リビトール、およびキシリトールを含んでよい。ポリマーと糖とは、糖の３つ以上の水酸基においてカップリングしている。
【０１５７】
上記実施形態に係るポリマー−糖複合体は、糖とカップリングしている当該ポリマーのｉｎ  ｖｉｖｏ特性と類似するｉｎ  ｖｉｖｏ特性を有し、かつ、使用するポリマーの種類に応じて種々の分解速度を有し、かつ、体内で無害なポリマーおよび糖に分解されるため、生分解性ポリマーとして適切であってよい。一実施形態において、ポリマー−糖複合体は、ＰＬＡ−グルコース複合体、ＰＧＡ−グルコース複合体、またはＰＬＧＡ−グルコース複合体であってよく、このＰＬＧＡ−グルコース複合体は、以下の構造を有するものであってよい。
【０１５８】
【化１】
2020500163.tif 000003
【０１５９】
本開示に係る制御放出微小球において、その表面に形成される被覆層は、エキセンジンまたはＧＬＰ−１または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体の初期バーストを効果的に制御できるため、過度の初期バーストに起因する副作用を防止する。生分解性ポリマーは、粘度制限なしに使用してよい。
【０１６０】
本開示に係る制御放出組成物／調製物において、生分解性ポリマーは、有効成分（エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体）を保護するマトリックスとしての役割を果たす。そのため、ポリマーの粘度が十分に低くないと、有効成分を効果的に保護できず、その結果、初期バーストが増大する。ポリマーの粘度が高過ぎると、放出される有効成分の総量が減少し、その結果、その生物学的利用能が減少する。本開示においては、生分解性ポリマーだけでなく、組成物中に含まれる被覆材料もまた、薬剤放出を制御する役割を果たしており、そのため、比較的低粘度の生分解性ポリマーを使用できる。したがって、薬剤の初期バーストを効果的に制御し、かつ、生物学的利用能を改善するために、生分解性ポリマーの固有粘度（ＩＶ）は、約０．１〜約０．６ｄＬ／ｇ（たとえば、約０．１５〜約０．３１ｄＬ／ｇまたは約０．１６〜約０．２４ｄＬ／ｇ）であってよい。この固有粘度の測定は、生分解性ポリマーを濃度１％（Ｗ／Ｖ）でクロロホルム中に溶解したものについて、ウベローデ粘度計を用い、２５℃±０．１℃において実施する。
【０１６１】
本開示に係る組成物、調製物、または微小球において、生分解性ポリマーは、放出中における有効成分の保護と放出速度の制御とを行なうマトリックスとしての役割を果たし、組成物または微小球中におけるその含有量は、有効成分（エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体）と、生分解性ポリマーと、被覆材料とを含む、組成物／調製物または微小球１００重量部に基づいて、約８５〜約９９．８９重量部（たとえば、約９１〜約９９重量部）であってよい。
【０１６２】
被覆材料は、過度の初期バーストを防止して、有効成分の生物学的利用能を増大させるために使用し、本開示に係る微小球において、被覆材料は、微小球の表面上に形成された被覆層の形態であってよい。被覆材料は、塩基性アミノ酸、ポリペプチド、および有機窒素化合物から選択される１種以上（たとえば、１、２、または３種）であってよい。この塩基性アミノ酸は、アルギニン、リシン、ヒスチジン、およびこれらの誘導体を含んでよい。ポリペプチドは、アルギニン、リシン、およびヒスチジンから選択される１種以上（たとえば、１、２、または３種）を含むアミノ酸を２〜１０個（たとえば、アミノ酸を２〜５個）を含んでよい。ポリペプチドは、酸性アミノ酸よりも塩基性アミノ酸を多く含んでよく、したがって、塩基性を呈してよい。たとえば、ポリペプチドは、Ｌ−Ａｌａ−Ｌ−Ｈｉｓ−Ｌ−Ｌｙｓ、Ｌ−Ａｒｇ−Ｌ−Ｐｈｅ、Ｇｌｙ−Ｌ−Ｈｉｓ、Ｇｌｙ−Ｌ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｌ−Ｈｉｓ−Ｌ−Ｌｙｓ、Ｌ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ、Ｌ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ、Ｌ−Ｌｙｓ−Ｌ−Ｔｙｒ−Ｌ−Ｌｙｓ、Ｌ−Ｈｉｓ−Ｌ−Ｖａｌ、Ｌ−Ｌｙｓ−Ｌ−Ｌｙｓ、Ｌ−Ｌｙｓ−Ｌ−Ｌｙｓ−Ｌ−Ｌｙｓ、およびＬ−Ｌｙｓ−Ｌ−Ｔｈｒ−Ｌ−Ｔｈｒ−Ｌ−Ｌｙｓ−Ｌ−Ｓｅｒなどであってよい。さらに、上記有機窒素化合物は、クレアチン、クレアチニン、および尿素などであってよい。
【０１６３】
本開示に係る組成物中に含まれる、または微小球を被覆する、被覆材料の含有量は、エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体と、生分解性ポリマーと、被覆材料とを含む、組成物または微小球１００重量部に基づいて、約０．０１〜約５重量部（たとえば、約０．０１５〜約３重量部、約０．０１〜約４、約０．０１〜約３、約０．０１〜約２、約０．０１〜約４、約０．０１〜約２、約０．０１５〜約５、約０．０１５〜約４、約０．０１５〜約２、約０．０５〜約５、約０．０５〜約４、約０．０５〜約３、約０．０５〜約２、約０．１〜約５、約０．１〜約４、約０．１〜約３、約０．１〜約２、約０．５〜約５、約０．０５〜約４、約０．０５〜約３、約０．０５〜約２、約１〜約５、約１〜約４、約１〜約３、約１．５〜約５、約１．５〜約４、約１．５〜約３、約２〜約５、約２〜約４、約３〜約５約３〜約４、または約４〜約５）であってよい。被覆材料の含有量が上記範囲より少ない場合には、薬剤放出を効果的に制御できず、また、被覆材料の含有量が上記範囲を超えて多い場合には、初期バースト制御効果のさらなる増大は得られない。
【０１６４】
本開示に係る制御放出微小球は、各々、被覆材料で被覆された滑らかな表面を有してよく、かつ、平均サイズが約１〜約５０μｍ（たとえば、約５〜約３０μｍ、約１〜約４０μｍ、約１〜約３０μｍ、約１〜約２０μｍ、約１〜約１０μｍ、約５〜約５０μｍ、約５〜約４０μｍ、約５〜約３０μｍ、約５〜約２０μｍ、約５〜約１０μｍ、約１０〜約５０μｍ、約１０〜約４０μｍ、約１０〜約３０μｍ、約１０〜約２０μｍ、約２０〜約５０μｍ、約２０〜約４０μｍ、約２０〜約３０μｍ、約３０〜約５０μｍ、約３０〜約４０μｍ、または約４０〜約５０μｍ）であってよい。微小球が滑らかな表面を有することによって、初期バーストが効果的に制御され、優れた生物学的利用能が得られる。
【０１６５】
従来の形態とは異なり、制御放出微小球、または本開示に係る組成物／調製物から調製される微小球は、被覆材料で被覆されており、これにより、従来の、エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体を含有する微小球では達成不可能な、過度の／有害な初期バーストの防止と生物学的利用能の増大とが達成される。特に、エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体の過度の／有害な初期バーストは、嘔吐、吐き気、および頭痛など種々の副作用を引き起こすため、初期バースト量を５％以下に低下させることは非常に重要である。制御放出微小球、または本開示に係る組成物（または調製物）から調製される微小球により、最初の２４時間の放出量が、５％以下に低下する。エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体を含む制御放出微小球の投与に起因する副作用を低減するために、最初の１時間の初期バースト量は、約５％以下（たとえば、約４％以下、約３％以下、約２％以下、または約１％以下）であってよい。本開示に係る微小球は、その表面上に被覆材料の被覆層を含むため、初期バーストが効果的に制御されることにより過度の／有害な初期バーストに起因する副作用が起こらず、薬剤が持続的かつ十分に放出されることにより優れた生物学的利用能が得られる。
【０１６６】
本開示の一実施形態において、調製物または微小球は、さらに、保護コロイドおよび／または安定剤などの賦形剤を含んでよい。
【０１６７】
組成物または微小球は、さらに、ポリビニルアルコール、アルブミン、ポリビニルピロリドン、およびゼラチンなどから選択される１種以上の保護コロイドを含んでよい。保護コロイドには、微小球に含まれる有効成分の過度の／有害な初期バーストを防止する特別な効果はないが、微小球同士の凝集を防止して分散性を改善する役割を果たす。このような役割を考慮すると、保護コロイドの含有量は、エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体と、生分解性ポリマーと、および被覆材料とを含む、組成物、調製物、または微小球の重量に基づいて、約０．０２％（Ｗ／Ｗ）〜約１．０％（Ｗ／Ｗ）（たとえば、約０．０２％〜約０．８％、約０．０２％〜約０．６％、約０．０２％〜約０．４％、約０．０５％〜約１．０％、約０．０４％〜約０．８％、約０．０５％〜約０．５％、約０．０５％〜約０．４％、約０．０５％〜約０．３％、約０．０５％〜約０．２％、約０．１％〜約１．０％、約０．１％〜約０．８％、約０．１％〜約０．６％、約０．１％〜約０．４％、約０．１％〜約０．３％、約０．１％〜約０．２％、約０．２％〜約１．０％、約０．２％〜約０．８％、約０．２％〜約０．６％、約０．２％〜約０．４％、約０．４％〜約１．０％、約０．４％〜約０．８％、約０．４％〜約０．６％、約０．６％〜約１．０％、約０．６％〜約０．８％、または約０．８％〜約１．０％）であってよい。
【０１６８】
また、凍結乾燥中の微小球の安定性を改善するために、本開示に係る組成物／調製物または微小球は、さらに、マンニトール、トレハロース、スクロース、およびカルボキシメチルセルロースナトリウムなどから選択される賦形剤を、エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体と、生分解性ポリマーと、被覆材料と含む、組成物または微小球の重量に基づいて、約５％（Ｗ／Ｗ）〜約３０％（Ｗ／Ｗ）の量、たとえば、約１０％（Ｗ／Ｗ）〜約２０％（Ｗ／Ｗ）の量にて含んでよい。
【０１６９】
さらに、本開示に係る組成物、調製物、または微小球は、さらに、薬剤調製物中に従来使用される任意の添加剤および賦形剤を含んでよく、その種類および含有量は、関連技術における当業者であれば、容易に決定できる。
【０１７０】
本開示に係る方法において使用する、エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体を含む制御放出微小球は、たとえば、微小球の調製中または調製後に微小球を被覆材料溶液中に懸濁して微小球の表面を被覆する方法などの、種々の制御放出微小球調製方法によって、調製してよい。微小球を調製する方法は、ダブルエマルション法（Ｗ／Ｏ／Ｗ法）、シングルエマルション法（Ｏ／Ｗ法）、相分離法、および噴霧乾燥法などにより実施してよい。
【０１７１】
具体的には、エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン類似体を含む制御放出微小球を調製する方法は、有効剤および生分解性ポリマーを混合してＷ／Ｏ型エマルションまたは均質混合物を調製する工程と、このエマルションまたは均質混合物を被覆材料の水溶液中に添加することによって乳化させて、被覆層を形成する工程と、を含んでよい。
【０１７２】
より具体的に、ダブルエマルション法を用いる場合、この方法は、有効成分の水溶液と、生分解性ポリマーを有機溶媒中に溶解させたものと、を混合して乳化させて、一次エマルション（Ｗ／Ｏ型）を形成する工程と、このエマルションを被覆材料の水溶液中に懸濁してＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションを形成する工程と、このＷ／Ｏ／Ｗ型エマルションを加熱することによって、溶媒を除去し、かつ、得られた微小球を硬化させる工程と、硬化させた微小球を回収して洗浄する工程と、得られた微小球を凍結乾燥させる工程とを含んでよい。有機溶媒は、生分解性ポリマーを溶解した後で水溶液と混合されることでエマルションを形成できる任意の有機溶媒であってよく、たとえば、クロロホルム、酢酸エチル、塩化メチレン、およびメチルエチルケトンからなる群より選択される１種以上（たとえば、塩化メチレン）であってよい。この場合、被覆材料は、第２の水相（Ｗ／Ｏ／Ｗエマルションの外側の水相）中に含まれ、そのため、有機溶媒の除去後に、少なくとも１種の有効成分（たとえば、エキセンジン、ＧＬＰ−１、または治療的に有効であるＧＬＰ−１類似体もしくはエキセンジン−４類似体、またはそれらの組み合わせ）と生分解性ポリマーとを含む微小球の外側に、被覆層が形成される。
【０１７３】
代替的に、シングルエマルション法を用いる場合、この方法は、有効成分と生分解性ポリマーとを有機溶媒中に溶解して均質混合物を形成する工程と、得られた混合物に、被覆材料を含有する水溶液を添加して、エマルションを形成する工程と、エマルションを加熱することによって、溶媒を除去し、かつ、得られた微小球を硬化させる工程と、硬化させた微小球を回収して洗浄する工程と、得られた微小球を凍結乾燥させる工程とを含んでよい。有機溶媒は、有効成分と生分解性ポリマーとを完全に混合して均質混合物を形成でき、かつ、水溶液と混合してエマルションを形成できる、任意の有機溶媒であってよい。たとえば、有機溶媒は、炭素原子１〜５個を有するアルコール、氷酢酸、ギ酸、ジメチルスルホキシド、およびｎ−メチルピロリドンからなる群より選択される１種以上と、クロロホルム、酢酸エチル、メチルエチルケトン、および塩化メチレンからなる群より選択される１種以上とを混合した混合溶媒、ならびに、たとえば、メタノールと塩化メチレンとを混合した混合溶媒であってよい。この場合、生分解性ポリマーと有効成分との均質混合物を乳化し、被覆材料を水溶液中に添加して有機溶媒を除去することにより、最終的に得られる微小球の表面に被覆層が形成される。
【０１７４】
制御放出微小球を調製する方法は、有効成分と生分解性ポリマーとを混合してエマルションまたは均質混合物を形成する工程と、得られたエマルションまたは均質混合物を固化して一次微小球を調製する工程と、得られた一次微小球を被覆材料の水溶液中に懸濁して、各微小球上に被覆層を形成する工程とを含んでよい。
【０１７５】
固化方法は限定されず、たとえば相分離法または噴霧乾燥法などの、関連技術において従来使用される任意の固化方法であってよい。より具体的には、固化工程において相分離法を用いる場合、この方法は、有効成分の水溶液と生分解性ポリマーを有機溶媒中に溶解させたものとを混合してエマルションを形成する、または有効成分と生分解性ポリマーとを混合溶媒中に混合して均質混合物溶液を形成する工程と、得られたエマルションまたは溶液にシリコン油などの油を添加して一次微小球を調製する工程と、たとえばエタノールとヘプタンとの混合溶媒などの、炭素原子１〜５個を有するアルコールと炭素原子１〜１２個を有するアルカンとの混合溶媒のような、生分解性ポリマーにとっての非溶媒を添加することによって、微小球から有機溶媒を除去し、かつ、微小球を硬化させる工程と、得られた微小球を被覆材料の水溶液中に懸濁して、各微小球上に被覆層を形成する工程と、被覆層が形成された微小球を、回収、洗浄、および凍結乾燥させる工程とを含んでよい。
【０１７６】
有機溶媒は、クロロホルム、酢酸エチル、塩化メチレン、およびメチルエチルケトンからなる群より選択される１種以上（たとえば、１、２、３、または４種）（たとえば、塩化メチレン）であってよい。混合溶媒は、炭素原子１〜５個を有する少なくとも１種のアルコール、氷酢酸、ギ酸、ジメチルスルホキシド、およびｎ−メチルピロリドンからなる群より選択される１種以上（たとえば、１、２、３、４、５種、またはそれ以上）と、クロロホルム、酢酸エチル、メチルエチルケトン、および塩化メチレンからなる群より選択される１種以上（たとえば、１、２、３、または４種）とを混合したもの（たとえば、メタノールと塩化メチレンとの混合溶媒）であってよい。
【０１７７】
代替的に、噴霧乾燥法を用いる場合、この方法は、有効成分の水溶液と生分解性ポリマーを有機溶媒中に溶解したものとを混合してエマルションを形成する、または有効成分と生分解性ポリマーとを単独溶媒もしくは混合溶媒中に混合して均質混合物溶液を形成する工程と、得られたエマルションまたは溶液を噴霧乾燥させて一次微小球を調製する工程と、得られた一次微小球を被覆材料の水溶液中に懸濁して、各微小球上に被覆層を形成する工程と、被覆層が形成された微小球を洗浄および凍結乾燥させる工程とを含んでよい。
【０１７８】
有機溶媒は、クロロホルム、酢酸エチル、塩化メチレン、およびメチルエチルケトンからなる群より選択される１種以上（たとえば、１、２、３、または４種）（たとえば、塩化メチレン）であってよい。単独溶媒は、氷酢酸およびギ酸からなる群より選択される１種以上（たとえば、１、２、３、４、または５種）であってよく、混合溶媒は、炭素原子１〜５個を有する少なくとも１種のアルコール、氷酢酸、ギ酸、ジメチルスルホキシド、およびｎ−メチルピロリドンからなる群より選択される１種以上（たとえば、１、２、３、４種、またはそれ以上）と、クロロホルム、酢酸エチル、メチルエチルケトン、および塩化メチレンからなる群より選択される１種以上とを混合したもの（たとえば、メタノールと塩化メチレンとの混合溶媒）であってよい。
【０１７９】
上記方法は、さらに、従来の任意の方法によって保護コロイド材料を添加する工程を含んでよく、たとえば、微小球を被覆材料で被覆する工程において保護コロイド材料を添加してよい。
【０１８０】
水相または水溶液中に溶解させる被覆材料の濃度は、約０．０１Ｍ〜約１Ｍ（たとえば、約０．１Ｍ〜約０．５Ｍ、約０．０１Ｍ〜約０．８Ｍ、約、約０．０１Ｍ〜約０．６Ｍ、約０．０１Ｍ〜約０．４Ｍ、約０．１〜約１Ｍ、約０．１Ｍ〜約０．８Ｍ、約、約０．１Ｍ〜約０．６Ｍ、約０．１Ｍ〜約０．４Ｍ、約０．２〜約１Ｍ、約０．２Ｍ〜約０．８Ｍ、約、約０．２Ｍ〜約０．６Ｍ、約０．２Ｍ〜約０．４Ｍ、約０．４〜約１Ｍ、約０．４Ｍ〜約０．８Ｍ、約、約０．４Ｍ〜約０．６Ｍ、約０．６〜約１Ｍ、約０．６Ｍ〜約０．８Ｍ約、または約０．８Ｍ〜約１Ｍ）であってよい。被覆材料の濃度が上記範囲より低いと、微小球の表面を被覆材料で完全に被覆することができず、被覆材料の濃度が上記範囲より高いと、被覆材料溶液が過飽和となるため、初期バーストを制御する効果を改善することができない。そのため、被覆材料の濃度は、上記範囲内であってよい。
【０１８１】
投与
本開示に係る制御放出組成物は、静脈内経路、皮下経路、筋肉内経路、および腹腔内経路などの、経口または非経口経路（たとえば、非経口経路）によって投与されてよい。したがって、本開示の一実施形態において、制御放出組成物または調製物は、分散溶液の形態で、注射溶液として投与されてよい。組成物の有効量は、対象の年齢、疾患の種類および重篤度、ならびに対象の状態に応じて適切に調整されてよく、組成物中の有効成分の量は、約０．０１〜約１００μｇ／ｋｇ／日（たとえば、約０．１〜約１０μｇ／ｋｇ／日）であってよく、この量が、１回で、または複数回に分けて、投与されてよい。厳密な必要量は、ポリペプチドの種類に応じて、かつ、個々の対象に応じて、変動してよく、対象の種、年齢、全身状態、処置する疾患の重症度、使用する特定のポリペプチド、およびその投与様式などに依存して変動してよい。したがって、厳密な「インスリン分泌量」、または神経疾患もしくは損傷の処置に有用な量を特定することは不可能である。しかしながら、適切な量が、当技術分野の当業者により、常套的な実験法のみを用いることによって決定されてよい。
【０１８２】
当業者であれば、処置の有効性をどのように監視するか、および、その結果に応じて処置をどのように調整するかを認識できるであろう。たとえば、血中グルコースレベルを監視し、正常血糖であれば、処置の効果が最適に発揮されていると考えることができる。血中グルコースレベルが好ましいレベルよりも高い場合には、次いで、ポリペプチドの投与量を増やすべきであり、血中グルコースレベルが好ましいレベルよりも低い場合には、次いで、ポリペプチドの投与量を減らすべきである。
【０１８３】
化合物は、経口的、静脈内、筋肉内、腹腔内、局部的、経皮的、局所的、全身的、室内、脳内、硬膜下、またはくも膜下腔内に投与されてよい。当業者には、投与様式、薬理学的担体、または他のパラメータを変更してインスリン分泌効果を最適化するということが周知であろう。投与される有効化合物の量は、言うまでもなく、処置対象、対象の体重、投与の手法、および処方担当医師の判断に依存するであろう。
【０１８４】
意図される投与様式に応じて、医薬組成物の剤形は、たとえば、錠剤、坐剤、丸剤、カプセル剤、散剤、液剤、懸濁剤、ローション剤、クリーム剤、またはゲル剤などの、固体、半固体、または液体であってよく、たとえば、正確な用量を単回投与するのに好適な単位剤形であってよい。上述されるように、組成物は、選択した薬剤の有効量と、薬学的に許容される担体との組み合わせを含み、さらに、組成物は、他の薬効剤、医薬剤、担体、佐剤、希釈剤などを含んでよい。たとえば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ｌａｔｅｓｔ  ｅｄｉｔｉｏｎ，ｂｙ  Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ．Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡを参照のこと。この文献には、ポリペプチドの調製物の調製と併せて用いてよい、典型的な担体と、従来の医薬組成物調製法とが開示されており、引用により本明細書に援用する。固体の組成物に関して、従来の非毒性の固形担体には、たとえば、医薬品グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルク、セルロース、グルコース、スクロース、および炭酸マグネシウムなどが含まれる。液状の薬学的に投与可能な組成物は、たとえば、本明細書中に記載されるような有効化合物と任意の医薬佐剤とを、たとえば、水、生理食塩水水性デキストロース、グリセリン、およびエタノールなどの、賦形剤中に、溶解、分散などして、溶液または懸濁液を得ることによって、調製できる。投与する医薬組成物が、さらに、たとえば、酢酸ナトリウム、モノラウリン酸ソルビタン、トリエタノールアミン酢酸ナトリウム（ｔｒｉｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ  ｓｏｄｉｕｍ  ａｃｅｔａｔｅ）、オレイン酸トリエタノールアミンなどの、湿潤剤または乳化剤およびｐＨ緩衝剤といった非毒性の補助物質を、微量に含むことが望ましい場合には、これを含んでもよい。このような剤形を実際に調製する方法は、当業者にとっては、周知または明らかであろう。たとえば、上に参照した、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓを参照のこと。
【０１８５】
経口投与用としては、微細な散剤または顆粒剤に希釈剤、分散剤、および／または界面活性剤を含有させてもよく、微細な散剤または顆粒剤を、水もしくはシロップ中に存在させた形態で、または、乾燥させたものをカプセル剤もしくはサッシェ剤とした形態で、または、非水性溶液の形態で、または、懸濁剤を含有してよい非水性懸濁液の形態で、または、バインダおよび滑剤を含有してよい錠剤の形態で、または、水もしくはシロップ中に懸濁した懸濁液の形態であってよい。着香剤、保護剤、懸濁剤、増粘剤、もしくは乳化剤を含有することが望ましい場合、またはそれを含有する必要がある場合には、これらを含有してよい。特定の実施形態において、経口投与形態は、被覆されていてよい、錠剤または顆粒剤である。親の投与を実施する場合には、一般的に、注射を特徴とする投与を実施する。
【０１８６】
注射剤は、溶液もしくは懸濁液として、または、注射実施前に液体中に溶解もしくは懸濁するのに好適な固体形態として、またはエマルションとして、従来の形態で調製してよい。近年改変された、親の投与のための方法では、遅放または持続放出系を用いることにより、用量が一定レベルに維持される。たとえば、米国特許第３，７１０，７９５号を参照のこと（この特許を引用により本明細書に援用する）。
【０１８７】
局部投与用としては、皮膚表面に有効化合物を送達できるものであれば、液剤、懸濁剤、ローション剤、クリーム剤、またはゲル剤などを使用してよい。
【０１８８】
実施例
以下の実施例は、本明細書中で主張する化合物、組成物、物品、デバイス、および／または方法をどのように形成および評価するかを、当技術分野において通常の知識を有する者に対して、完全な形で開示し、説明する目的で提示するものであり、本開示の例を示すことを純粋に意図したものであって、本発明者らが認識する開示範囲の制限を意図したものではない。数値（たとえば、量、温度など）の正確さを期すことに努力を費やしたが、いくらかの誤差やずれが考慮されるべきである。
【０１８９】
統計：各値は、±Ｓ．Ｅ．Ｍを意味するものとして表す。コルモゴロフ・スミルノフ検定により、分布の正規性を求めた。結果部分に示すような統計的分析を、スチューデントｔ検定、マン・ホイットニー検定、フィッシャーの正確確率検定、または一方向および二方向ＡＮＯＶＡによって実施した。正規性の仮定から外れた場合には、順位に基づくＡＮＯＶＡを実施した。多重対比較はいずれも、事後的ニューマン・クールズ検定またはＤｕｎｎ検定によって実施した、統計的有意差は、ｐ＜０．０５と定義した。
【０１９０】
実施例１．  エキセンジン−４の薬物動態学および血漿中への持続放出。ＰＴ３０２は、エキセンジン−４の持続放出調製物であり、ポリマー（９８％）とエキセンジン−４（２％）との混合物を含有する。エキセンジン−４の持続放出調製物（ＰＴ３０２）の注射後に、エキセナチドの血漿レベルを分析した。特に、ＰＴ３０２単回投与の薬物動態学について、成体（９週齢）雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット６匹を用いて調べた。ＰＴ３０２を新たに希釈剤中に溶解し、２ｍｇ／ｋｇを皮下投与した。注射の０時間、０．５時間、および１時間後、ならびに、注射後１、３、５、７、９、１１、１４、１８、２１、および２６日目に、採血を行なった。エキセンジン−４の血漿レベルを、Ｐｅｐｔｒｏｎ  Ｅｘｅｎａｔｉｄｅ  ＥＩＡ  Ｋｉｔ（Ｐｅｐｔｒｏｎ、Ｄａｅｊｅｏｎ、韓国）を用いて定量した。そのデータを図１Ａ中に示す。図中、Ｃｍａｘは１．８５ｎｇ／ｍｌ、Ｔｍａｘは１２．５日、ＡＵＣは１８．５５ｎｇ＊ｄ／ｍｌである（値は、動物全６匹の個々のデータから計算した）。図１Ａ中に示すように、持続放出調製物ＰＴ３０２を単回皮下注射することによって、１〜２週間の投与計画にて許容され得る長期的なエキセンジン−４血漿レベルが達成される。
【０１９１】
種々の用量（２．４ｍｇ／ｋｇ、４．８ｍｇ／ｋｇ、および９．６ｍｇ／ｋｇ）におけるＰＴ３０２の単回投与の薬物動態学を、各群につき成体（９週齢）雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット６匹を用いて調べた。ＰＴ３０２を新たに希釈剤中に溶解し、上述するとおりに皮下投与した。注射の０時間、０．５時間、および１時間後、ならびに、注射後１、３、７、１０、１４、１７、２１、２４、２８、および３１日目に、採血を行なった。エキセンジン−４の血漿レベルを、上述するとおりに定量した。そのデータを図１Ｂ中に示す。図中、２．４ｍｇ／ｋｇ投与でのＣｍａｘは２．２３ｎｇ／ｍｌ、Ｔｍａｘは１４．８３日、ＡＵＣは２１．１３ｎｇ＊ｄ／ｍｌであり、４．８ｍｇ／ｋｇ投与でのＣｍａｘは５．２１ｎｇ／ｍｌ、Ｔｍａｘは１６．１７日、ＡＵＣは４９．４６ｎｇ＊ｄ／ｍｌであり、９．６ｍｇ／ｋｇ投与でのＣｍａｘは９．４２ｎｇ／ｍｌ、Ｔｍａｘは１７．１７日、ＡＵＣは８７．１４ｎｇ＊ｄ／ｍｌである。図１Ｂ中に示すように、持続放出調製物ＰＴ３０２を単回皮下注射することによって、投与したＰＴ３０２の用量レベルに直接関連して、長期的なエキセンジン−４血漿レベルが達成される。
【０１９２】
ＰＴ３０４は、エキセンジン−４の持続放出調製物であり、ポリマー（９６％）とエキセンジン−４（４％）との混合物を含有する。成体（９週齢）雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット６匹に、エキセンジン−４の持続放出調製物（ＰＴ３０４）を注射した後、エキセナチドの血漿レベルを分析した。ＰＴ３０４を新たに希釈剤中に溶解し、４ｍｇ／ｋｇを皮下投与した。注射の１時間および３時間後、ならびに、注射後１、４、７、１１、１４、１８、２１、２５、２８、３２、３５、３９、および４２日目に、採血を行なった。エキセンジン−４の血漿レベルを、Ｐｅｐｔｒｏｎ  Ｅｘｅｎａｔｉｄｅ  ＥＩＡ  Ｋｉｔを用いて定量した。そのデータを図２中に示す。図中、Ｃｍａｘは３．８２ｎｇ／ｍｌ、Ｔｍａｘは１４．１７日、ＡＵＣは４８．３４ｎｇ＊ｄ／ｍｌである（値は、動物全６匹の個々のデータから計算した）。図２中に示すように、持続放出調製物ＰＴ３０４を単回皮下注射することによって、２〜４週間の投与計画にて許容され得る長期的なエキセンジン−４血漿レベルが達成される。
【０１９３】
ＰＴ３０２の薬物動態学を、１０週間にわたって、各群につき成体（９週齢）Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット１０匹を用いて調べた。ＰＴ３０２を週１回２ｍｇ／ｋｇずつ、またはＰＴ３０４を隔週で４ｍｇ／ｋｇずつの用量で、ラットに皮下注射した。ＰＴ３０２およびＰＴ３０４は上述するとおりに調製し、１回目の注射の１時間および３時間後、ならびに、１回目の注射後１、３、５、７、１０、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６、６３、７０、７７、８４、および９１日目に、採血を行なった。エキセンジン−４の血清レベルを、上述するとおりに定量し、図３中に示す。週１回注射したラットは、Ｃｍａｘが５．２７ｎｇ／ｍｌ、Ｔｍａｘが５１．６０日、ＡＵＣが２３６．４２ｎｇ＊ｄ／ｍＬであり、隔週で注射したラットは、Ｃｍａｘが５．０８ｎｇ／ｍｌ、Ｔｍａｘが４７．８９日、ＡＵＣが２１１．５１ｎｇ＊ｄ／ｍＬであった。
【０１９４】
実施例２．  ６−ＯＨＤＡパーキンソン病ラットモデルにおける、Ｍｅｔｈ介在性旋回行動が、ＰＴ３０２での前処置により低減される。
【０１９５】
動物の処置を、ビヒクル（ラット９匹）、ＰＴ３０２を０．４ｍｇ／ｋｇ（低用量、ラット９匹）、またはＰＴ３０２を２ｍｇ／ｋｇ（高用量、ラット１０匹）にて、図４Ａ中に記載される日（すなわち、６−ＯＨＤＡにより内側前脳束に一側性傷害を与える１６日前および２日前、ならびに、傷害後１２、２６、および４０日目）に実施した。図４Ａおよび図４Ｂ中に示すように、傷害後２０、３０、および４５日目に、ラットのｍｅｔｈ介在性旋回行動を調べ、４７日目に安楽死させた。傷害は以下のように与えた。ラットを抱水クロラール（４００ｍｇ／ｋｇ、腹腔内）により麻酔し、脳定位固定装置内に載置した。脳定位固定アームに保持したハミルトンマイクロシリンジを用いて、６−ＯＨＤＡ（２．７６μｇ／μｌ×５μｌ、０．２ｍｇ／ｍｌアスコルビン酸含有０．９％ＮａＣｌ中）を、内側前脳束内（−４．４ｍｍ  ＡＰ、ブレグマより１．２ｍｍ  ＭＬ、頭蓋下に８．４ｍｍ）に、４分間かけて、片側注射した。脳定位固定装置に取り付けたマイクロマニピュレータを用いて、マイクロシリンジの位置を下げ、脳内において望ましい標的部位にくるようにした。注射速度（０．５μｌ／分）の制御には、シリンジポンプ（Ｍｉｃｒｏ  ４、ＷＰＩ、Ｓａｒａｓｏｔａ、ＦＬ）を用いた。注射５分後に、注射針を抜いた。体液漏れを防ぐため、頭蓋穿孔にボーンワックス片を塗布した。傷を、縫合、またはクリップで留めた。サーミスタープローブにより体温を監視し、ヒーティングパッドを用いて、麻酔中の体温を３７℃に維持した。麻酔から回復後、温度制御インキュベータを用いて、体温を３７℃にてさらに３時間維持した。
【０１９６】
ｍｅｔｈ誘発性旋回挙動［Ｌｉｕ  ＤＭ，Ｌｉｎ  ＳＺ，Ｗａｎｇ  ＳＤ，Ｗｕ  ＭＩ，Ｗａｎｇ  Ｙ．Ｘｅｎｏｇｒａｆｔｉｎｇ  ｈｕｍａｎ  Ｔ２  ｓｙｍｐａｔｈｅｔｉｃ  ｇａｎｇｌｉｏｎ  ｆｒｏｍ  ｈｙｐｅｒｈｉｄｒｏｔｉｃ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｐａｒｔｉａｌｌｙ  ｒｅｓｔｏｒｅｓ  ｃａｔｅｃｈｏｌａｍｉｎｅｒｇｉｃ  ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｈｅｍｉ−Ｐａｒｋｉｎｓｏｎｉａｎ  ａｔｈｙｍｉｃ  ｒａｔｓ．Ｃｅｌｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  １９９９；８：５６３−９１；ａｎｄ  Ｌｕｏ  Ｙ，Ｈｏｆｆｅｒ  ＢＪ，Ｗａｎｇ  Ｙ．Ｒｏｔａｔｉｏｎ，Ｄｒｕｇ−ｉｎｄｕｃｅｄ．Ｉｎ：Ｋｏｍｐｏｌｉｔｉ  Ｋ，Ｖｅｒｈａｇｅｎ  Ｍｅｔｍａｎ  Ｌ，ｅｄｉｔｏｒｓ．Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｍｏｖｅｍｅｎｔ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ．Ｏｘｆｏｒｄ：Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，２０１０．ｐ  ４９−５１］を、８−チャネルロトメータシステム（ＲｏｔｏＭａｘ、ＡｃｃｕＳｃａｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社）を用いて評価した。以前に記載されたとおりに［Ｙｉｎ  ＬＨ，Ｓｈｅｎ  Ｈ，Ｄｉａｚ−Ｒｕｉｚ  Ｏ，Ｂａｃｋｍａｎ  ＣＭ，Ｂａｅ  Ｅ，Ｙｕ  ＳＪ，Ｗａｎｇ  Ｙ．Ｅａｒｌｙ  ｐｏｓｔ−ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｗｉｔｈ  ９−ｃｉｓ  ｒｅｔｉｎｏｉｃ  ａｃｉｄ  ｒｅｄｕｃｅｓ  ｎｅｕｒｏｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｏｐａｍｉｎｅｒｇｉｃ  ｎｅｕｒｏｎｓ  ｉｎ  ａ  ｒａｔ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ．ＢＭＣ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  ２０１２；１３：１２０］、動物に、メタンフェタミン（２．５ｍｇ／ｋｇ）を、６−ＯＨＤＡ傷害の６日後に投与した。メタンフェタミンは、脳内におけるドーパミン放出を誘発する間接型作動薬である。黒質線条体ドーパミン作動系に６−ＯＨＤＡを片側注射したラットを、ＰＤモデルとして使用する。間接型ドーパミン作動薬（たとえば、メタンフェタミン）を投与した動物は投与後に同側旋回行動を示し、直接型ドーパミン作動薬（たとえば、アポモルフィン）を投与した動物は投与後に対側旋回行動を示す。こうした挙動は、線条体においてドーパミン作動性マーカーの発現が片側変化することに関連している。
【０１９７】
図４Ｂ中に示すように、ＰＴ３０２処置により、高用量および低用量の両方で、ＰＴ３０２処置群の旋回行動が、ビヒクル比較で有意に低減された（ｐ＝０．０１８、Ｆ２，８７＝４．３０９、低用量群についての二方向ＡＮＯＶＡ）。事後的ニューマン・クールズ検定より、高用量のＰＴ３０２がｍｅｔｈ介在性旋回行動を有意に減弱したことが示された（ｐ＝０．０３７）。したがって、ラット（特徴付けが十分になされたＰＤ動物モデル）の内側前脳束の一側性６−ＯＨＤＡ傷害が挙動に及ぼす影響が、エキセンジン−４をＰＴ３０２として持続的かつ安定状態で投与することによって、有意に抑制されており、神経保護活性が得られた。
【０１９８】
エキセンジン−４の血漿レベルを、上述するとおりに定量した。図４Ｃ中に示すように、エキセンジン−４血漿レベルの平均は、高用量ラットにおいて３０．８４５ｐｇ／ｍｌ（ｎ＝１０）、低用量ラットにおいて８，９９０ｐｇ／ｍｌ（ｎ＝９）であった。しかしながら、外れ値のラットおよび測定値（ラット１、１０、および１２）を除外すると、エキセンジン−４血漿レベルの平均値は、高用量ラットにおいて５，５９６ｐｇ／ｍｌ（ｎ＝８）、低用量ラットにおいて５７４ｐｇ／ｍｌ（ｎ＝８）であった。
【０１９９】
実施例３．  ６−ＯＨＤＡ傷害ラットにおいて、ｍｅｔｈ誘発性旋回挙動が、ＰＴ３０２での後処置により低減された。実施例２中に記載の、６−ＯＨＤＡによるＰＤ齧歯類モデルの内側前脳束一側性傷害と、高効力の薬剤による後処置とを、図５Ａのスキームに示すとおりに、組み合わせることができる。この場合には、齧歯類に、６−ＯＨＤＡにより一側性傷害を与え（０日目）、その６日後に処置を開始する。このＰＤ齧歯類モデルは、処置前に既にドーパミン作動性細胞死が開始かつ進行しているため、処置がより困難である。ラット１９匹に対し、上述するとおりに傷害を与えた。上述するとおりに、ｍｅｔｈ誘発性旋回行動について調べ、旋回回数が３００回／時間を超えた動物を２群に分けることによって、処置開始前のビヒクル群とＰＴ３０２群との旋回挙動数が同数となるようにした。図５Ａ中に概要を示すように、ｍｅｔｈ誘発性旋回行動について、傷害の６、２０、３０、および４５日後に調べた。動物（成体雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット、入手時月齢２か月）を、６−ＯＨＤＡ傷害後６、２０、および３４日目に、ビヒクル（皮下、ｎ＝１１）またはＰＴ３０２（１００ｍｇ／ｋｇ、エキセンジン−４を２．０ｍｇ／ｋｇ含有、皮下、ｎ＝８）により処置した。ＰＴ３０２の調製は、上述するとおりに実施した。傷害後４７日目に、動物を安楽死させた。血液および脳の試料を採取し、血漿を分離して保存した（−８０℃）。採取血漿中のエキセンジン−４を測定した。
【０２００】
図５Ｂ中に示すように、一側性６−ＯＨＤＡ傷害ラットのｍｅｔｈ誘発性旋回挙動が、ＰＴ３０２により、ビヒクルコントロールと比較して、有意に低減された（ｐ＝０．０３２、二方向ＡＮＯＶＡ）。
【０２０１】
免疫組織化学的検査により、ＴＨを調べた。具体的には、脳全体から、厚さ２５μｍの連続するクライオスタット切片をカットした。切片６個中１個の割合で、ＴＨ検査用に染色した。染色のばらつきを制御する目的で、各バッチに、すべての実験群の検体を含め、１つのネットウェルトレイ中で、同じ条件下において一緒に反応させた。切片を０．１Ｍリン酸緩衝液（ＰＢ）中ですすぎ、４％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）および０．３％  Ｔｒｉｔｏｎ  ｘ−１００の０．１Ｍ  ＰＢ溶液を用いてブロッキングした。次いで、一次抗体（マウス抗ＴＨモノクローナル抗体、４％ＢＳＡおよび０．３％Ｔｒｉｔｏｎ  ｘ−１００の０．１Ｍ  ＰＢ溶液中に希釈、濃度１：１００；Ｃｈｅｍｉｃｏｎ、Ｔｅｍｅｃｕｌａ、ＣＡ）中において、１７〜１９時間、４℃において、切片をインキュベートした。次いで、切片を０．１Ｍ  ＰＢ中ですすぎ、二次抗体中において１時間インキュベートし、続いて、アビジン−ビオチン−西洋ワサビペルオキシダーゼ複合体と共に１時間インキュベートした。切片をスライドガラス上に載せ、カバースリップをかぶせた。コントロールの切片は、一次抗体なしでインキュベートした。
【０２０２】
線条におけるＴＨ免疫反応性をＩｍａｇｅＪによって測定し、前交連の見える脳切片を３つ選択して、それらの平均値を求めた。中脳全体にわたって（ブレグマから−４．２ｍｍ〜−６．０ｍｍ）、３６０μｍ毎に、黒質におけるＴＨ免疫反応性を測定した。動物１匹につき、脳切片合わせて５つを使用した。黒質の体積を、カヴァリエリの方法（Ｃａｖａｌｉｅｒｉ’ｓ  ｍｅｔｈｏｄ）によって分析した。
【０２０３】
線条における６−ＯＨＤＡ介在性ドーパミン作動性神経変性が、ＰＴ３０２により低減された。ビヒクル投与ラット３匹（＃８６６、８８３、８８６）およびＰＴ３０２投与ラット３匹（＃８８１、８７５、８８２）について、代表的な線条体ＴＨ免疫染色結果と血漿エキセンジン−４レベルとを、図５Ｃ中に示す（同じ動物のエキセンジン−４の血漿濃度を定量したものを、図５Ｃ中に記載する）。図５Ｄ中に示すように、ビヒクル投与動物における線条体のＴＨ免疫反応性が、６−ＯＨＤＡ注射によって有意に低減され、一方、傷害線条におけるＴＨ免疫反応性が、ＰＴ３０２によって有意に増加した（＊ｐ＜０．００１、二方向ＡＮＯＶＡ）。Ｌ＝傷害側、ｎｏｎ−Ｌ−非傷害側、ｖｅｈ＝ビヒクル投与動物、ＰＴ＝ＰＴ３０２。
【０２０４】
黒質におけるＴＨ免疫反応性をＩｍａｇｅＪによって測定し、前交連の見える脳切片を３つ選択して、それらの平均値を求めた。ビヒクル投与動物（ラット＃８６６、＃８８３、＃８８６）またはＰＴ３０２投与動物（ラット＃８８１、＃８７５、＃８８２）について、代表的なＴＨ免疫染色結果を図５Ｅ中に示す（同じ動物のエキセンジン−４の血漿レベルも記載する）。ブレグマから−４．２ｍｍ〜−６ｍｍについて、３６０ｕｍ毎に、黒質におけるＴＨ免疫反応性を定量したものを、図５Ｆ中に示す。ビヒクル投与動物における黒質のＴＨ免疫反応性が、６−ＯＨＤＡ注射によって有意に低減され、一方、傷害黒質におけるＴＨ免疫反応性の喪失が、ＰＴ３０２によって有意に抑制された（＊ｐ＜０．００１、二方向ＡＮＯＶＡ）。Ｌ＝傷害側、ｎｏｎ−Ｌ−非傷害側、ｖｅｈ＝ビヒクル投与動物、ＰＴ＝ＰＴ３０２
ＰＴ３０２後処置により、傷害黒質のＴＨ＋ニューロンが保護される。脳の切片を作製し、上述するとおりに免疫組織化学的検査を実施した。脳の非傷害側に、ＴＨ＋ニューロンが見られた（図５Ｇおよび図５Ｈ）。脳の傷害側の黒質には、ＴＨ＋ニューロンも繊維もほとんど見られなかった（ラット＃８８６、図５Ｉ）。ＰＴ３０２処置により、ＴＨ＋ニューロンの一部が保護された（図５Ｊ、図５Ｋ、および図５Ｌ）。
【０２０５】
ＴＨニューロンにおけるエキセンジン−４介在性保護と、血漿エキセンジン４レベルとが関連する。図５Ｍは、同じ動物における標準化線条体ＴＨ（すなわち、傷害側／非傷害側）免疫反応性と血漿エキセンジン４レベルとの間に見られた有意な相関関係を示す（ｐ＝０．００２、Ｒ＝０．６６３）。図５Ｌは、血漿エキセンジン４レベルと、傷害側の黒質におけるＴＨ免疫反応性との間に観察された有意な相関関係を示す（ｐ＜０．００１、Ｒ＝０．８４２）。
【０２０６】
実施例４．  ６−ＯＨＤＡ  ＰＤラットモデルにおける、Ｍｅｔｈ介在性旋回行動が、ＰＴ３０２での前処置により低減される。図６Ａ中に示すように、上述するとおり、６−ＯＨＤＡ傷害の７日前および７日後に、Ｅｘ−４（５μｇ／ｋｇ、ＢＩＤ）またはＰＴ３０２（０．４ｍｇ／ｋｇ）により、動物の皮下に処置を実施した。この実験において使用したエキセンジン−４用量である５μｇ／ｋｇ  ＢＩＤは、人間に対して使用できる用量よりも高く（下記表１を参照）、この用量よりも低い約１μｇ／ｋｇ  ＢＩＤは、人間に対する用量と、この実験で使用したＰＴ３０２用量とのいずれとも同等である。Ｅｘ−４（５μｇ／ｋｇ、ＢＩＤ）処置およびＰＴ３０２（０．４ｍｇ／ｋｇ）処置のいずれによっても、６−ＯＨＤＡ傷害ラットにおける旋回行動が有意に低減された（Ｅｘ−４群についてｐ＝０．００５、ＰＴ３０２群についてｐ＝０．００２）（図６Ｂ）。
【０２０７】
エキセンジン−４またはＰＴ３０２のいずれかでの前処置により、黒質における６−ＯＨＤＡ介在性ドーパミン作動性神経変性に対する保護が得られた。ビヒクル、Ｅｘ−４（５μｇ／ｋｇ、ＢＩＤ）、またはＰＴ３０２（０．４ｍｇ／ｋｇ）を投与した、偽動物および６−ＯＨＤＡ傷害動物についての、代表的なＴＨ免疫反応性結果を、図６Ｃ中に示す。傷害側のＴＨ免疫反応性が、６−ＯＨＤＡ注射によって有意に低減された（図６Ｃ中、ｉｐｓｉで示す）。黒質における代表的なＴＨ免疫反応性を定量したものを、図６Ｄ中に示す。６−ＯＨＤＡ傷害側のＴＨ免疫反応性の喪失が、ＰＴ３０２およびＥｘ−４での処置によって有意に低減された（評価は、ＴＨ免疫反応性を、コントロール非傷害側（ｃｏｎｔｒａ）の免疫反応性に対する、同じ動物の傷害側（ｉｐｓｉ）の免疫反応性のパーセント比率で表すことによって実施した）。
【０２０８】
実施例５．  ６−ＯＨＤＡパーキンソン病ラットモデルにおける、Ｍｅｔｈ介在性旋回行動が、ＰＴ３０２での後処置により低減される。上述するとおり、６−ＯＨＤＡ傷害後に、Ｅｘ−４（１μｇ／ｋｇ、２日目からＢＩＤ）またはＰＴ３０２（０．４ｍｇ／ｋｇ、２日目に１回）により動物を処置し、傷害後９日目に、ｍｅｔｈ介在性旋回挙動について調べた（図７Ａ）。図７Ｂ中に示すように、一側性６−ＯＨＤＡ傷害ラットにおける旋回挙動が、ＰＴ３０２によって有意に低減された（ｐ＝０．００７５）。これとは対照的に、エキセンジン−４では、一側性６−ＯＨＤＡ傷害ラットにおける旋回挙動が低減されなかった。したがって、６−ＯＨＤＡラットＰＤモデルにおいて、エキセンジン−４を、人間に対する用量と同等（ラットに対して１μｇ／ｋｇ、ＢＩＤ）で使用しても、ｍｅｔｈ誘発性旋回行動の抑制効果はないが、ＰＴ３０２を、人間に対する用量に相当する用量で使用すると、効果があることが立証された。エキセンジン−４の用量を、人間に使用可能な用量より高い用量（５μｇ／ｋｇ、ＢＩＤ、実施例４に示す）と同等にまで増やすと、エキセンジン−４でも、６−ＯＨＤＡ誘発性の異常を抑制できた。これに対し、ＰＴ３０２の、臨床用量相当用量と同等の用量は、実施例４および５の両方において、有利な作用を呈している。
【０２０９】
実施例６．  ＭＰＴＰ  ＰＤマウスモデルにおける、毒素誘発性挙動欠陥が、ＰＴ３０２での後処置により改善された。上述するとおり、ＭＰＴＰによるパーキンソン症候群の誘発後に、Ｅｘ−４（１６．７ｕｇ／ｋｇ、６日目からＢＩＤ）またはＰＴ３０２（０．６ｍｇ／ｋｇ；６、２０、および３４日目）により、動物を処置した（図８Ａ）。具体的には、ＭＰＴＰを１日１回３０ｍｇ／ｋｇ、５日間、全身投与することにより、パーキンソン症候群を誘発した。たとえば、Ｆｉｌｉｃｈｉａ  Ｅ，Ｈｏｆｆｅｒ  Ｂ，Ｑｉ  Ｘ，Ｌｕｏ  Ｙ．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｄｒｐ１  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ  ｐｒｏｖｉｄｅｓ  ｎｅｕｒａｌ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｄｏｐａｍｉｎｅｒｇｉｃ  ｓｙｓｔｅｍ  ｉｎ  ａ  Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｍｏｄｅｌ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ＭＰＴＰ．Ｓｃｉ  Ｒｅｐ．２０１６；６：３２６５６を参照のこと。１回目のＭＰＴＰ投与の１日後に、Ｅｘ−４またはＰＴ３０２のいずれかによる処置を開始し、これを１８日間継続した。選択した用量である、Ｅｘ−４（１６．７ｕｇ／ｋｇ、ＢＩＤ、皮下）およびＰＴ３０２（０．４ｍｇ／ｋｇ、単回皮下投与）は、処置１８日間に送達かつ提供されるＥｘ−４量がそれぞれ６０１．２ｕｇ／ｋｇと６００ｕｇ／ｋｇ未満とであるという点で、同等であった。１８日目に、ワイヤグリップ試験によって、全群の動物の運動協調を評価した。ワイヤグリップ試験（四肢グリップ持久力（ｐａｗ  ｇｒｉｐ  ｅｎｄｕｒａｎｃｅ；ＰａＧＥ）法およびグリップ力記録（ｇｒｉｐ  ｆｏｒｃｅ−ｒｅｃｏｒｄｉｎｇ）試験としても知られる）は、運動力の指標として用いられることが多い。ＰａＧＥは、マウスのグリップ強度を評価するために設計されたものであり、グリップ強度により、運動能力の低下が示され得る。本明細書中において、ＰａＧＥは、Ｊｅｓｓｉｃａ  ＡＬらによる記載にしたがって実施した（Ｊｅｓｓｉｃａ  Ａ．Ｌ．Ｈｕｔｔｅｒ−Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｈｏｗａｒｄ  Ｅ．Ｇｅｎｄｅｌｍａｎ，Ｒ．Ｌｅｅ  Ｍｏｓｌｅｙ．Ｍｕｒｉｎｅ  Ｍｏｔｏｒ  ａｎｄ  Ｂｅｈａｖｉｏｒ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  Ａｃｕｔｅ  １−Ｍｅｔｈｙｌ−４−Ｐｈｅｎｙｌ−１，２，３，６−Ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｙｒｉｄｉｎｅ（ＭＰＴＰ）Ｉｎｔｏｘｉｃａｔｉｏｎ．Ｊ  Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０１２；７（１）：２７９−２８８）。簡潔には、各マウスを、従来の齧歯類収容用ケージから出して、ワイヤリッドの上に載せ、リッドを穏やかに振とうすることによってマウスが掴むようにし、リッドを裏返す（１８０度）。マウスの両後肢が離れるまでの待ち時間を、秒単位で測定した。各マウスにつき試験を３回、任意に最長２４０秒まで実施し、落下するまで、または両後肢が離れるまでの最長の待ち時間を記録した（Ｊｅｓｓｉｃａ，ｅｔ  ａｌ．２０１２）。
【０２１０】
図８Ｂ中に示すように、ドーパミン作動性細胞毒素ＭＰＴＰを投与した結果、グリップ試験における待ち時間が有意に短くなった（ＭＰＴＰの９４．５秒に対し、ＭＰＴＰなしコントロール群の集約は１４８．３秒、ｐ＝０．０２）。ＭＰＴＰ処置マウスがワイヤから落下するまでの時間が、ＰＴ３０２によって有意に長くなったが（１１８．３秒、コントロール群の集約値との統計的差異はない）、エキセンジン−４（１日２回投与、人間によるバイエッタ（Ｂｙｅｔｔａ、すなわち即時放出Ｅｘ−４）服用に類似する手法にて）では、ＭＰＴＰ処置マウスの毒素誘発性挙動欠陥は抑制されなかった（７２．９秒、コントロール群の集約値に対してｐ＋０．０１）（図８Ｂ：全群につき、マウス数は７〜１０匹）。
【０２１１】
実施例７．  持続放出エキセンジン−４を使用した中枢神経系へのＥｘ−４送達は、脳脊髄液中におけるエキセンジン−４治療有効量の達成に有効である。エキセンジン−４（注射およびミニポンプ）およびエキセンジン−４持続放出調製物（ＰＴ３０２）を、本実験に用いた成体雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（９週齢）に対して、表１中に記載するとおりに投与した。１回目のエキセンジン−４注射投与後１４日目に、エキセンジン−４レベル測定のために、血液および脳脊髄液（ＣＳＦ）を採取した。エキセンジン−４の血漿レベルおよびＣＳＦレベルの定量を、上述するとおりに実施した。表２中に示すとおり、持続放出調製物群およびミニポンプ投与エキセンジン−４群では、血漿およびＣＳＦ中にエキセンジン−４が検出されたが、１日２回（ＢＩＤ、即時放出）エキセンジン−４群では、ＣＳＦ中のエキセンジン−４は検出限界未満であった。この結果とは対照的に、同じエキセンジン−４群の血漿中には、エキセンジン−４が高レベルで検出された。用量３．５〜１５ｐＭ／ｋｇ／分のポンプ投与エキセンジン−４群で、ＣＳＦレベル／血漿レベルの比率が０．００８１（または０．８１％）〜約０．０４１２（または４．１２％）、平均が０．０１８（または１．８％）であることが観察された。同様に、ＰＴ３０２を０．４６〜２．０ｍｇ／ｋｇ／１４日で投与した動物において、ＣＳＦ／血漿レベル比率が０．０１１７（または１．１７％）〜約０．０１６（または１．６％）であった。このデータから、エキセンジン−４の持続放出によって、さらに高レベルのエキセンジン−４がＣＮＳ中に提供されることが示される。
【０２１２】
【表１】
2020500163.tif 000004
【０２１３】
【表２】
2020500163.tif 000005
【０２１４】
実施例８．  軽度外傷性脳損傷（ｍＴＢＩ）マウスを持続放出エキセナチドで処置することにより、新規物体認識が改善される。以前に記載されたとおり（Ｔｗｅｅｄｉｅ  ｅｔ  ａｌ．２００７）、落錘式衝撃装置を使用して、頭部に損傷を与えた。当該装置は、金属チューブ（長さ９０ｃｍ、内径１．３ｃｍ）と、このチューブの下に配置された、マウス頭部を支えるためのスポンジとからなる。マウスを、イソフルラン吸入により軽く麻酔して、装置の下に置いた。金属製の錘（３０グラム）をチューブ頂部から落下させて、マウス頭部の側頭側の、眼の端と耳との間に打ち当てた。損傷直後に、マウスを元のケージに戻して、回復させた。マウスは、この頭部損傷処置に十分耐えることができ、この処置により、損傷側の海馬および大脳皮質にニューロンの減少が広がり、これに伴って、視覚および空間記憶試験において認知障害が生じる（Ｄｅｓｅｌｍｓ  Ｈ，Ｍａｇｇｉｏ  Ｎ，Ｒｕｂｏｖｉｔｃｈ  Ｖ，Ｃｈａｐｍａｎ  Ｊ，Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ  Ｓ，Ｔｗｅｅｄｉｅ  Ｄ，Ｋｉｍ  ＤＳ，Ｇｒｅｉｇ  ＮＨ，Ｐｉｃｋ  ＣＧ．Ｎｏｖｅｌ  ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｍｉｎｉｍａｌ  ｔｒａｕｍａｔｉｃ  ｂｒａｉｎ  ｉｎｊｕｒｙ  ａｎｄ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｉｍａｌ  ｍｏｄｅｌｓ  ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｉｅｓ  ｓｕｐｐｏｒｔｉｎｇ  ｔｈｅｉｒ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０１６；２７２：６９−７６）。
【０２１５】
頭部損傷の１時間後に、上述するとおり、持続放出ＰＴ３０２を投与した（０．６ｍｇ／ｋｇ、皮下）（図９Ａ）。損傷後７日目に、マウスを新規物体認識パラダイム試験に供した。この試験は、齧歯類における再認記憶の評価に慣例的に使用される試験である。負傷させていない齧歯類は、先天的に、新規物体が近傍にあればそれを探索するという傾向を示す。マウスがこの挙動特性を有しているために、視覚再認記憶機能の評価が可能となっている。おそらく、より重要なことには、この挙動特性を有しているために、この先天的行動に対して種々の刺激が及ぼす影響の評価が可能となっている。この試験では、２つの実験を実施する。第１の実験では、動物に、規定時間（５分間）にわたり、２つの物体を調べさせる。第１の実験の２４時間後に実施する第２の実験では、動物に、第１の実験で与えたものと同じ物体と、動物にとって新しい物体との、２つの物体を与える。第２の実験において、マウスに、この２つの物体を５分間探索させる。識別選好指数を計算し、これを用いて、動物の再認記憶を評価する。この指数の計算は、以下のとおり実施する。動物が新規物体近傍にいる時間から、動物が既知物体近傍にいる時間を差し引き、これを、動物が新規物体近傍にいる時間と、既知物体近傍にいる時間との合計で割る（Ｄｉｘ  ＳＬ，Ａｇｇｌｅｔｏｎ  ＪＰ．Ｅｘｔｅｎｄｉｎｇ  ｔｈｅ  ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ  ｐｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ｔｅｓｔ  ｏｆ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ：ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  ｏｂｊｅｃｔ−ｌｏｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｏｂｊｅｃｔ−ｃｏｎｔｅｘｔ  ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ．Ｂｅｈａｖ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．１９９９；９９：１９１−２００）。図９Ｂ中に示すように、エキセナチド投与により、ｍＴＢＩマウス（ｎ＝５）における新規物体認識が、未処置ｍＴＢＩマウス（ｎ＝７）と比較して、有意に増加し、これにより、ＰＴ３０２処置マウスではｍＴＢＩ誘発性の視覚認識異常が抑制されたことが示される。
【０２１６】
実施例９．  正常ＩＣＲマウスにおける血漿エキセンジン−４レベルの検査。正常ＩＣＲマウスにおいて、ＰＴ３０２（０．１、０．３、０．６、１．０、および２．０ｍｇ／ｋｇ）皮下投与の７日後に、エキセンジン−４血漿濃度を測定した。エキセンジン−４の血漿レベルを、上述するとおりに定量した。注射の７日後まで、血漿エキセンジン−４レベルが持続し、用量依存的に累積して約４０００ｐｇ／ｍｌとなる（図１０Ａ）。
【０２１７】
実施例１０．  正常マウスおよび外傷性脳損傷マウスにおける血漿エキセンジン−４レベルの検査。正常マウスおよびＴＢＩモデルマウスにおいて、ＰＴ３０２（０．６ｍｇ／ｋｇ）皮下投与の７日後に、エキセンジン−４血漿レベルを測定した。エキセンジン−４の血漿レベルを、上述するとおりに定量した。正常マウスとＴＢＩ誘発性マウスとの間に、エキセンジン−４血漿レベルの差異は観察されなかった（図１０Ｂ）。
【０２１８】
実施例１１．  持続放出エキセナチドにより、エキセンジン−４血漿レベルが長期間維持される。正常ＩＣＲマウスに、ＰＴ３０２の単回皮下注射を、３種の異なる用量で実施した（０．０２４ｍｇ／ｋｇ、０．１２ｍｇ／ｋｇ、および０．６ｍｇ／ｋｇ）。１回目の注射の０時間、０．５時間、および１時間後、ならびに、１、３、７、１４、および２１日目に、血漿測定用の採血を行なった。エキセンジン−４の血漿濃度を、上述するとおりに定量した。図１０Ｃ中に示すように、ＰＴ３０２単回投与により、エキセンジン−４血漿レベルが、２０日より長く維持された。
【０２１９】
実施例１２．  外傷性脳損傷の７日後における、新規物体と、迷路の新しいアームとに対する認識が、持続放出エキセナチドによって有意に増大する。上述するとおりに頭部に損傷を与え、速やかにマウスを元のケージに戻して、回復させた。ＴＢＩ誘発の１時間後に、単回注射により、ＰＴ３０２（０．０２４ｍｇ／ｋｇ、０．１２ｍｇ／ｋｇ、および０．６ｍｇ／ｋｇ）をマウス皮下に投与した。ｍＴＢＩの７日後に、挙動を評価した（新規物体認識およびＹ字迷路試験）。Ｙ字迷路パラダイムは、新規環境に対する自発性探索および応答と、空間的作動記憶機能とを評価する目的で、一般的に使用される（Ｄｅｓｅｌｍｓ，ｅｔ  ａｌ．，２０１６）。試験装置は、複数の同一の黒色プレキシガラス製アーム（８×３０×１５ｃｍ）でできており、これらアームが、中心から１２０度の角度で、中心点から延在している。マウスに視覚記憶アンカー（ｖｉｓｕａｌ  ｍｅｍｏｒｙ  ａｎｃｈｏｒ）を与える目的で、各アームの内部には、アーム毎に異なる空間的手がかりが備えられている。典型的には、２つの実験を２〜３分間隔で実施するが、ここでは、これらの実験を５分間隔で実施した。第１の実験では、実施の度に、どのアームから出発するかを無作為に選択する。動物１匹をＹ字迷路環境の中心点に載せ、第１の実験を実施する５分間の間に、残りの２つのアームのうち１つを無作為に閉鎖し、第２の実験を実施する２分間の間に、３つのアーム全てを開放して、探索させる。第２の実験中にマウスが各アームの中で探索した時間の合計を、記録する。混乱することのないよう、実験と実験の間に、Ｔ字迷路を入念に清掃する。以前に探索した既知のアームの中にいた時間に対する、以前に探索していない新規のアームの中にいた時間、すなわち、（（新しいアームの中にいた時間）−（既知のアームの中にいた時間））／（（新しいアームの中にいた時間）＋（既知のアームの中にいた時間））を用いて、動物処置群同士の間に挙動の差異があるかどうかを評価する。
【０２２０】
ビヒクル処置ｍＴＢＩマウスは視覚記憶の欠損を呈し、コントロールマウスと比較して、新規物体近傍にいる時間が短かった（ｐ＜０．００１）（図１１Ａ）。ｍＴＢＩ誘発の１時間後に、ＰＴ３０２単回皮下注射により、用量０．１２ｍｇ／ｋｇ（ｐ＜０．０５）および０．６ｍｇ／ｋｇ（ｐ＜０．０１）で処置したマウスは、未処置ｍＴＢＩマウスと比較して、新しい物体に対する選好性が高いことが観察された（図１１Ａ）。
【０２２１】
ｍＴＢＩ投与マウスは著しい空間記憶異常を呈し、偽（コントロール）動物と比較して、Ｙ字迷路の新しいアームの中にいる時間が短かった（ｐ＜０．００１）（図１１Ｂ）。ｍＴＢＩ誘発の１時間後に、ＰＴ３０２単回皮下注射を、用量０．１２ｍｇ／ｋｇおよび０．６ｍｇ／ｋｇで実施することにより、未処置ｍＴＢＩマウスと比較して、ｍＴＢＩ空間記憶欠損が寛解された（ｐ＜０．０１）（図１１Ｂ）。［Ｆ（４，５０）＝４．８３、ｐ＝０．００２、フィッシャーの最小有意差法、事後的］。
【０２２２】
全ての群について、高架式十字迷路の開放アームの中にいた時間はほぼ等しく、不安様挙動の点で各群を区別することは不可能であった（図１１Ｃ）。重要なことには、これにより、不安様挙動が、先に実施した新規物体認識およびＹ字迷路パラダイムにおける交絡因子ではなかったということが示された（ｐ＞０．０５）［Ｆ（４，３６）＝０．２８、ｐ＝０．８９］。
【０２２３】
実施例１３．  外傷性脳損傷の３０日後における、新規物体と、迷路の新しいアームとに対する認識が、持続放出エキセナチドによって有意に増大する。上述するとおりに頭部に損傷を与え、速やかにマウスを元のケージに戻して、回復させた。ＴＢＩ誘発の１時間後に、単回注射により、ＰＴ３０２（０．６ｍｇ／ｋｇ）をマウス皮下に投与した。ｍＴＢＩの３０日後に、挙動を評価した（新規物体認識およびＹ字迷路試験）。
【０２２４】
ビヒクル処置ｍＴＢＩマウスは視覚記憶の欠損を呈し、コントロールマウスと比較して、新規物体近傍にいる時間が短かった（ｐ＜０．００１、図１２Ａ）。ｍＴＢＩ誘発の１時間後に、ＰＴ３０２の単回皮下注射により、用量０．１２ｍｇ／ｋｇまたは０．６ｍｇ／ｋｇで処置したマウスは、ｍＴＢＩマウスと比較して、新しい物体に対する選好性が高いことが観察された（それぞれｐ＜０．０１およびｐ＜０．００１、図１２Ａ）。
【０２２５】
ｍＴＢＩ投与マウスは著しい空間記憶異常を呈し、偽／コントロール動物と比較して、迷路の新しいアームの中にいる時間が短かった（ｐ＜０．００１、図１２Ｂ）。ｍＴＢＩ誘発の１時間後に、ＰＴ３０２単回皮下注射を、用量０．６ｍｇ／ｋｇで実施することにより、ｍＴＢＩ単独と比較して、ｍＴＢＩ空間記憶欠損が寛解された（ｐ＜０．０１、図１２Ｂ）。
【０２２６】
全ての群について、迷路の開放アームの中にいた時間はほぼ等しく、不安様挙動の点で各群を区別することは不可能であった（図１２Ｃ）。このことから、不安様挙動が、先に実施した新規物体認識およびＹ字迷路パラダイムにおける因子ではなかったということが示された（ｐ＞０．０５）。
【０２２７】
実施例１４．  マウスの側頭皮質領域および海馬領域における、外傷性脳損傷後のＮｅｕＮ免疫反応性の低下が、ＰＴ３０２投与により防止された。ＮｅｕＮは、成熟ニューロンマーカーであり、外傷性脳損傷に起因するニューロンの減少を調べる目的で使用できる。規定された脳領域におけるＮｅｕＮ細胞を評価するために、マウスを過剰量のケタミン＋キシラジン投与により麻酔し、速やかに、生理的緩衝生理食塩水、続いて４％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ、０．１Ｍリン酸緩衝液中、ｐＨ７．４）により、経心腔的灌流した。脳を取り出して、一晩固定し（０．１Ｍリン酸緩衝液中４％ＰＦＡ、ｐＨ７．４）、次いで、３０％スクロース中に４８時間置いた。クライオスタットにより冠状断（３０μｍ）を作製して、凍結保護物質中に置き、使用時まで−２０℃において保存した。その後、皮質切片５つおよび海馬切片５つを、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳＴ）中の０．１％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００と１０％正常ウマ血清と共に、２５℃において１時間インキュベートすることにより、ブロッキングした。次いで、一次抗体であるマウス抗ニューロン核抗体（ＮｅｕＮ；１：５０、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、Ｄａｎｖｅｒｓ、ＭＡ、米国、Ｃａｔ＃ＭＡＢ３３７７）を、ＰＢＳＴおよび２％正常ウマ血清中に溶解し、切片と共に４℃において４８時間インキュベートした。ＰＢＳＴ中ですすいだ後、ＤｙＬｉｇｈｔ（商標）５９４標識ＡｆｆｉｎｉｔｙＰｕｒｅロバ抗ウサギＩｇＧ抗体およびＤｙＬｉｇｈｔ（商標）４８８標識ＡｆｆｉｎｉｔｙＰｕｒｅロバ抗マウスＩｇＧ抗体（１：３００；Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ、ＭＥ、米国）と共に、２５℃において１時間、切片をインキュベートした。ＰＢＳＴ中ですすいだ後、切片を乾燥ゼラチン被覆スライドガラス上に載せ、×２０および×６３のレンズを備えたＺｅｉｓｓ  ＬＳＭ  ５１０共焦点顕微鏡（Ｃａｒｌ  Ｚｅｉｓｓ、Ｊｅｎａ、ドイツ）により、蛍光を評価した。１つの脳について切片３〜５つを使い、海馬および側頭皮質中の、規定された視野１４０２または４４０２μＭにおける平均細胞数を計算した。免疫組織化学用スライドガラスの免疫蛍光は盲検法により評価し、ネガティブコントロール切片の作製の際には、慣例的に、一次抗体を除去した。色の定量化の分析は、Ｉｍａｒｉｓプログラムにより実施した（Ｂｉｔｐｌａｎｅ  ＡＧ、Ｚｕｒｉｃｈ、スイス）。
【０２２８】
図１３Ａは、ｍＴＢＩの３０日後の、コントロールマウス、未処置ｍＴＢＩマウス、およびＰＴ３０２処置ｍＴＢＩマウス（ｍＴＢＩの１時間後に０．６ｍｇ／ｋｇ）の、皮質、ＣＡ３、および歯状回における、ＮｅｕＮ（赤、色評価時）陽性ニューロンの代表的な画像を示す。図１３Ｂ、図１３Ｃ、および図１３Ｄの棒グラフは、皮質、ＣＡ３、および歯状回のそれぞれにおいて生存ニューロンを定量したものを示す。定量化は、偽コントロール群、ｍＴＢＩ群、およびｍＴＢＩ＋ＰＴ３０２  ０．６ｍｇ／ｋｇ群において抗ＮｅｕＮ陽性染色されたニューロンの数を用いて実施した（＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００１）。値は、平均±ＳＥＭである。エキセンジン−４をＰＴ３０２として持続放出により投与すると、外傷性脳損傷に起因して観察されるニューロンの減少が防止された。
【０２２９】
実施例１５．  ｍＴＢＩマウスにおける変性ニューロンの数が、ＰＴ３０２投与により減少した。Ｆｌｕｏｒｏ−Ｊａｄｅ（登録商標）Ｃは、損傷した変性脳ニューロンを標識する蛍光染色であり、外傷性脳損傷に起因するニューロンの減少を調べる目的で使用できる。イオン化カルシウム結合アダプター分子１（ＩＢＡ１）は、ミクログリアにおいて特異的に発現しており、活性化ミクログリアにおいて上方調節されている。これを、神経炎症のマーカーとして使用できる。マウスを安楽死させ、その脳を、上述するとおり、免疫組織化学的分析の実施用に調製した。海馬および頭頂皮質の冠状断（４０μｍ）をクライオスタットにより作製し、凍結保護物質溶液中に回収した。頭頂皮質に加えて、海馬由来のＣＡ１、ＣＡ３、および歯状回についても分析を実施した。
【０２３０】
ＦｌｕｏｒｏＪａｄｅ  Ｃ染色を実施するために、脳切片を、まず、１％ＮａＯＨ含有の８０％エタノール溶液中に５分間浸漬した。７０％エタノール中において２分間すすいだ後、蒸留水中において洗浄し、次いで０．０６％過マンガン酸カリウム溶液中において１０分間インキュベートした。水洗後、スライドガラスをＦＪＣ染色溶液（蒸留水中のＦＪＣ０．０１％保存液４ｍｌを０．１％酢酸９６ｍｌに添加して得られる）中においてインキュベートし、１０分間染色した。蒸留水で３回洗浄した後、スライドガラスをスライドガラスウォーマーで十分に風乾し、キシレン中で透徹し、ＤＰＸを用いてカバースリップをかぶせた。ＦＶ  １０００ＭＰＥ  Ｏｌｙｍｐｕｓ共焦点顕微鏡を用いて、両半球の各領域において、Ｆｌｕｏｒｏｊａｄｅ  Ｃ陽性細胞を計数した。
【０２３１】
ＩＢＡ１／ＴＮＦ−αの二重標識を実施するために、切片を、ＩＢＡ１抗体（ヤギ抗ＩＢＡ１ポリクローナル抗体  １：２００、Ａｂｃａｍ、米国）およびＴＮＦ−α抗体（ＴＮＦ−αウサギ抗ＴＮＦ−αポリクローナル抗体  １：８００、Ａｂｂｉｏｔｅｃ、米国）と共に、４８時間インキュベートした。ＰＢＳ洗浄後、切片を、ＩＢＡ１の二次抗体と共にインキュベートし、ＴＮＦ−αシグナルを増大させるために、ビオチン標識ＩｇＧ（ＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）ビオチン−ヤギ抗ウサギ  １：５００、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、米国）およびストレプトアビジン−フルオレセイン（１：２００、Ｖｅｃｔｏｒ、ＵＫ）を用いた３段階検出を実施した。
【０２３２】
ＩＢＡ１およびＴＮＦαの定性および定量分析を、Ｏｌｙｍｐｕｓ共焦点レーザ走査顕微鏡ＦＶ  １０００ＭＰＥを用いて実施した。Ｚ系列画像をＩｍａｇｅＪ  １．４７ｖで処理し、共局在因子の体積を、Ｉｍａｒｉｓ  ７．４．２で以下のように測定した。各データセットについて、ソフトウェアにより、共局在化チャネル（ｃｏｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｃｈａｎｎｅｌ）を自動的に構成した。最終層において、各動物の各半球における各脳領域（ＣＡ１、ＣＡ３、ＤＧ、および皮質）の標的領域を選択し、標的要素の体積を計算し、合計して、体積／μｍ３で表した。
【０２３３】
図１４Ａ中に示すように、ｍＴＢＩ損傷後、すべての調査対象領域（海馬についてＣＡ１、ＣＡ３、ＤＧ、および外側皮質）において、コントロールと比較して、Ｆｌｕｏｒｏ−Ｊａｄｅ陽性ニューロン数の大幅な増加が観察された（ＣＡ１についてｐ＜０．０５；ＣＡ３、ＤＧ、およびＣＴＸについてｐ＜０．００１；それぞれ、図１４Ａ、および図１４Ｂ、図１４Ｃ、および図１４Ｄ、ならびに図１４Ｅ）。用量０．６ｍｇ／ｋｇでのＰＴ３０２処置により、すべての調査対象領域において、ｍＴＢＩ誘発性神経変性の影響が打ち消され（ＣＡ３およびＤＧについてｐ＜０．０１、図１４Ｃおよび図１４Ｄ；ＣＴＸおよびＣＡ１についてｐ＜０．０５、図１４Ｅおよび図１４Ｂ）、ＰＴ３０２用量０．１２ｍｇ／ｋｇにより、ＣＡ３領域において著しい効果が見られた（ｐ＜０．０５）。
【０２３４】
図１５Ａ中に示すように、ｍＴＢＩ損傷後、ビヒクルコントロールと比較して、すべての分析対象領域においてＩＢＡ１免疫反応性が増大した（ＣＡ１についてｐ＜０．０５；ＣＡ３、ＤＧ、およびＣＴＸについてｐ＜０．００１）。コントロール群においては、ミクログリア細胞の細胞体が小さくなり、突起が長く細くなって、休止形態を呈した（図１５Ａ）。ｍＴＢＩ損傷後、ミクログリアは、細胞本体が大きくなって突起が短く太くなることを特徴とする活性化形態を呈した（図１５Ａ）。ＰＴ３０２により、いずれの用量においても、ミクログリアの活性化が阻害され、ＰＴ３０２  ０．６ｍｇ／ｋｇはすべての脳領域において効果があった（ＣＴＸについてｐ＜０．００１、ＣＡ１およびＣＡ３についてｐ＜０．００１、ＤＧについてｐ＜０．０５）。
【０２３５】
炎症誘発性サイトカインＴＮＦ−αに対する免疫反応性が、ｍＴＢＩ傷害群のＩＢＡ１＋細胞のすべての分析対象領域において増加した（ＤＧについてｐ＜０．０５；ＣＡ１についてｐ＜０．０１；ＣＡ３および皮質についてｐ＜０．００１；それぞれ、図１５Ｄ、図１５Ｂ、図１５Ｃ、および図１５Ｅ）。用量０．６および０．１２ｍｇ／ｋｇでのＰＴ３０２投与により、ＩＢＡ１／ＴＮＦ−α  ＩＲ共局在化体積のレベルが、海馬および皮質の両方において低減された。
【０２３６】
具体的な実施形態
本開示の一態様は、対象の中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分に神経保護ポリペプチドを送達する方法を提供する。この方法は、治療的有効量の神経保護ポリペプチドを、神経保護ポリペプチドの持続放出または持続送達を提供する制御放出調製物またはデバイスを用いて、対象の全身循環血流に投与することを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物または神経保護ポリペプチドの持続放出は、神経保護ペプチドの速放調製物と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達および／または取り込みを増大させる。
【０２３７】
本開示の別の一態様は、中枢神経系（ＣＮＳ）関連疾患を有する対象を処置する、またはＣＮＳ関連疾患の少なくとも１種の症状の低減を必要とする対象においてその症状を低減する方法を提供する。この方法は、神経保護ポリペプチドの持続放出または持続送達を提供する制御放出調製物またはデバイスを用いて、治療的有効量の神経保護ポリペプチドを対象の全身循環血流に投与することを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物またはデバイスは、神経保護ポリペプチドの速放調製物と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達を増大させる。
【０２３８】
本開示の一態様は、対象の中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分に神経保護ポリペプチドを送達する方法を提供する。この方法は、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドを含む制御放出調製物を、対象の全身循環血流に投与することを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物は、神経保護ポリペプチドの速放調製物と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達および／または取り込みを増大させる。
【０２３９】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出調製物は、神経保護ポリペプチドの持効性調製物である。
【０２４０】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出調製物は、有効量の神経保護ポリペプチドの生物学的利用能および持続放出を十分な時間にわたって（たとえば、有効成分の、有害な初期バーストなどの初期バーストを起こさずに）実現するために、特定の粘度を有する生分解性ポリマーと、被覆材料とをさらに含む。
【０２４１】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出神経保護調製物は、神経保護ポリペプチドを含むコアと生分解性ポリマーとを含む制御放出微小球と、コアを被覆する被覆層とを含む。
【０２４２】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、持効性調製物は、神経保護ポリペプチドの持続放出のためのデポー剤調製物を含む。
【０２４３】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、持効性調製物は、神経保護ポリペプチドの持続放出のための組成物を含む。
【０２４４】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与は、対象における少なくとも１種のＣＮＳ関連状態の少なくとも１種の症状を緩和する。
【０２４５】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、ＣＮＳ関連状態は、パーキンソン病（ＰＤ）、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、多発性硬化症、薬物嗜癖、アルコール嗜癖、神経変性状態、脳の炎症、アルツハイマー病（ＡＤ）、多系統萎縮症、ハンチントン病、慢性外傷性脳症、運動ニューロン疾患（たとえば、筋萎縮性側索硬化症、脊髄損傷、脊髄小脳失調（ＳＣＡ）、脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ））、脳血管性認知症、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）、混合型認知症、前頭側頭型認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病、正常圧水頭症、またはそれらの組み合わせからなる群より選択される。
【０２４６】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与は、制御放出神経保護調製物の注射を含む。
【０２４７】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出神経保護調製物の注射は、皮下注射である。
【０２４８】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与により、血漿中の神経保護ポリペプチドの濃度が、約５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬの範囲内で安定状態となる。
【０２４９】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与により、対象の脳脊髄液（ＣＳＦ）、脳、またはそれらの組み合わせにおける神経保護ポリペプチドの濃度が、累積的に増加する。
【０２５０】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、ＣＳＦ中の神経保護ポリペプチドの濃度は、約５〜約４００ｐｇ／ｍＬの範囲内である。
【０２５１】
本開示のさらなる一態様は、中枢神経系（ＣＮＳ）関連疾患を有する対象を処置する、またはＣＮＳ関連疾患の少なくとも１種の症状の低減を必要とする対象においてその症状を低減する方法を提供する。この方法は、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドを含む治療的有効量の制御放出神経保護調製物を、対象の全身循環血流に投与することを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物は、神経保護ポリペプチドの速放調製物と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達を増大させる。
【０２５２】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出調製物は、神経保護ポリペプチドの持効性調製物である。
【０２５３】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出調製物は、特定の粘度を有する生分解性ポリマーと、被覆材料とをさらに含み、有効濃度における神経保護ポリペプチドの生物学的利用能および持続放出が、ある期間にわたって（たとえば、有効成分の、有害な初期バーストなどの初期バーストを起こさずに）継続する。
【０２５４】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出神経保護調製物は、神経保護ポリペプチドを含むコアと生分解性ポリマーとを含む制御放出微小球と、コアを被覆する被覆層とを含む。
【０２５５】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、持効性調製物は、神経保護ポリペプチドの持続放出のためのデポー剤調製物を含む。
【０２５６】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、持効性調製物は、神経保護ポリペプチドの持続放出のための組成物を含む。
【０２５７】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与は、対象における少なくとも１種のＣＮＳ関連状態の少なくとも１種の症状を緩和する。
【０２５８】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、ＣＮＳ関連状態は、パーキンソン病（ＰＤ）、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）、多発性硬化症、薬物嗜癖、アルコール嗜癖、神経変性状態、脳の炎症、アルツハイマー病（ＡＤ）、多系統萎縮症、ハンチントン病、慢性外傷性脳症、運動ニューロン疾患（たとえば、筋萎縮性側索硬化症、脊髄損傷、脊髄小脳失調（ＳＣＡ）、脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ））、脳血管性認知症、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）、混合型認知症、前頭側頭型認知症、クロイツフェルト・ヤコブ病、正常圧水頭症、またはそれらの組み合わせからなる群より選択される。
【０２５９】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与は、対象への制御放出神経保護調製物の注射を含む。
【０２６０】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、対象への制御放出神経保護調製物の注射は、皮下注射である。
【０２６１】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出調製物の投与により、血漿中の神経保護ポリペプチドの濃度が、約５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬの範囲内で安定状態となる。
【０２６２】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出調製物の投与により、脳脊髄液（ＣＳＦ）、脳、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種における神経保護ポリペプチドの濃度が、累積的に増加する。
【０２６３】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、調製物は、７〜２１日に１回（たとえば、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、または２１日に１回）投与される。
【０２６４】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、調製物の投与は、先行する投与の実施の約７〜約２１日後に、２回目の投与が実施される（たとえば、約７、約８、約９、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４、約１５、約１６、約１７、約１８、約１９、約２０、または約２１日に１回）。
【０２６５】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、調製物が、先行する調製物投与から約２８日以内（たとえば、約２１または約１４日以内）に再投与された場合、血漿中の神経保護ポリペプチドの濃度におけるパーセント変化は、約３０％以下である。
【０２６６】
本開示の追加的な一態様は、対象の中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分に神経保護ポリペプチドを送達する方法を提供する。この方法は、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドの持続送達を、対象の全身循環血流に対して提供することを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物は、神経保護ペプチドの速放調製物と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達および／または取り込みを増大させる。
【０２６７】
本開示のさらなる一態様は、中枢神経系（ＣＮＳ）関連疾患を有する対象を処置する、またはＣＮＳ関連疾患の少なくとも１種の症状の低減を必要とする対象においてその症状を低減する方法を提供する。この方法は、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、または治療的に有効であるＧＬＰ−１もしくはエキセンジン−４類似体からなる群より選択される少なくとも１種の神経保護ポリペプチドの持続送達を、対象の全身循環血流に対して提供することを含み、神経保護ポリペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種に結合する受容体に結合し、かつこれを活性化し、制御放出神経保護調製物は、神経保護ポリペプチドの速放調製物と比較して、対象の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過による中枢神経系（ＣＮＳ）の少なくとも一部分への神経保護ポリペプチドの送達を増大させる。
【０２６８】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドの持続放出の提供は、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドの、デバイス（たとえば、ポンプ、ミニポンプ、浸透圧ポンプ、浸透圧送達デバイス、輸液ポンプ、静脈内投与デバイス、蠕動ポンプ、または小型輸液ポンプなど）による投与を含む。
【０２６９】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、調製物が投与された場合（たとえば、７〜２８日に１回、または７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、もしくは２８日に１回投与された場合）、安定状態到達後における安定状態での血漿中の神経保護ポリペプチド濃度におけるパーセント変化は、約８０％以下（たとえば、約５０％以下または約４０％以下）である。
【０２７０】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドは、デバイス（たとえば、ポンプ、ミニポンプ、浸透圧ポンプ、浸透圧送達デバイス、輸液ポンプ、静脈内投与デバイス、蠕動ポンプ、または小型輸液ポンプなど）によって投与される。
【０２７１】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、（１種または２種以上の）神経保護ポリペプチドは、約１ｐＭ／ｋｇ／分〜約３０ｐＭ／ｋｇ／分（たとえば、約３ｐＭ／ｋｇ／分〜約１７．５ｐＭ／ｋｇ／分）の速度で投与される。
【０２７２】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出神経保護調製物の投与または神経保護ポリペプチドの持続送達の提供は、対象における少なくとも１種のＣＮＳ関連状態の少なくとも１種の症状を緩和する。
【０２７３】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出調製物の投与または神経保護ポリペプチドの持続放出の提供により、血漿中の神経保護ポリペプチドの濃度が、約５０〜約４５００ｐｇ／ｍＬの範囲内で安定状態となる。
【０２７４】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、制御放出調製物の投与または神経保護ポリペプチドの持続放出の提供により、脳脊髄液（ＣＳＦ）、脳、またはそれらの組み合わせのうち少なくとも１種における神経保護ポリペプチドの濃度が、累積的に増加する。
【０２７５】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、ＣＳＦ中の神経保護ポリペプチドの濃度は、約１０〜約４００ｐｇ／ｍＬの範囲内である。
【０２７６】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、安定状態での血漿中のポリペプチドの濃度に対する、安定状態でのＣＦＳ中のポリペプチドの濃度の比率は、約０．１％〜約５％の範囲内である。
【０２７７】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、エキセンジン−４類似体は、化学式Ｉで表される、またはその薬学的に許容される塩である：
Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ａｌａ  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１  Ｘａａ２２  Ｘａａ２３  Ｘａａ２４  Ｘａａ２５  Ｘａａ２６  Ｘａａ２７  Ｘａａ２８  −Ｚ１
（化学式Ｉ）
（式中、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４−イミダゾプロピオニルであり、
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり、
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり、
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり、
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり、
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり、
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり、
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり、
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり、
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり、
Ｘａａ２０は、Ａｌａ、またはＡｒｇであり、
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ−ＮＨε−Ｒであり、ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、または炭素数１〜１０の直鎖状もしくは分枝状のアルカノイルであり、
Ｘａａ２２は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、ｔｅｒｔ−ブチルグリシン、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり、
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり、
Ｘａａ２７は、ＡｌａまたはＬｙｓであり、
Ｘａａ２８は、ＡｌａまたはＡｓｎであり、かつ
Ｚ１は、−ＯＨ、−ＮＨ２、Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８−Ｚ２、またはＧｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８  Ｘａａ３９−Ｚ２であり、
Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、およびＸａａ３８は、独立して、Ｐｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ−アルキルグリシン、Ｎ−アルキルペンチルグリシン、またはＮ−アルキルアラニンからなる群より選択され、Ｘａａ３９は、Ｓｅｒ、またはＴｙｒであり（たとえば、Ｓｅｒであり）、かつ
Ｚ２は、−ＯＨ、または−ＮＨ２であり、
ただし、
Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、Ｘａａ２６、Ｘａａ２７、およびＸａａ２８のうち、Ａｌａであるものは３つを超えず、かつ
Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、またはＴｙｒである場合、Ｘａａ３、Ｘａａ４、およびＸａａ９のうち少なくとも１つはＡｌａである）。
【０２７８】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、エキセンジン−４類似体は、化学式ＩＩで表される、またはその薬学的に許容される塩である：
Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ａｌａ  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１  Ｘａａ２２  Ｘａａ２３  Ｘａａ２４  Ｘａａ２５  Ｘａａ２６  Ｘ１−Ｚ１
（化学式ＩＩ）
（式中、
Ｘａａ１は、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、または４−イミダゾプロピオニルであり、
Ｘａａ２は、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＴｈｒであり、
Ｘａａ３は、Ａｌａ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ４は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、またはＧｌｙであり、
Ｘａａ５は、ＡｌａまたはＴｈｒであり、
Ｘａａ６は、Ａｌａ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ７は、ＴｈｒまたはＳｅｒであり、
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＴｈｒであり、
Ｘａａ９は、Ａｌａ、Ｎｏｒｖａｌ、Ｖａｌ、Ｎｏｒｌｅｕ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、ペンチルグリシン、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＳｅｒであり、
Ｘａａ１２は、ＡｌａまたはＬｙｓであり、
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＧｌｎであり、
Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、ペンチルグリシン、Ｖａｌ、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ１５は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１６は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１７は、ＡｌａまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１９は、ＡｌａまたはＶａｌであり、
Ｘａａ２０は、ＡｌａまたはＡｒｇであり、
Ｘａａ２１は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＬｙｓ−ＮＨε−Ｒであり、ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、炭素数１〜１０の直鎖状もしくは分枝状のアルカノイル、またはシクロアレイル−アルカノイルであり、
Ｘａａ２２は、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ２３は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、ペンチルグリシン、ｔｅｒｔ−ブチルグリシン、またはＭｅｔであり、
Ｘａａ２４は、Ａｌａ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐであり、
Ｘａａ２５は、Ａｌａ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、またはナフチルアラニンであり、
Ｘａａ２６は、ＡｌａまたはＬｅｕであり、
Ｘ１は、Ｌｙｓ  Ａｓｎ、Ａｓｎ  Ｌｙｓ、Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒ  Ａｓｎ、Ａｓｎ  Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒ、Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒ  Ａｌａ、Ａｌａ  Ｌｙｓ−ＮＨε−Ｒであり、ここで、Ｒは、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、炭素数１〜１０の直鎖状もしくは分枝状のアルカノイル、またはシクロアルキルアルカノイルであり、
Ｚ１は、−ＯＨ、−ＮＨ２、Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７−Ｚ２、Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８−Ｚ２、またはＧｌｙ  Ｇｌｙ  Ｘａａ３１  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｘａａ３６  Ｘａａ３７  Ｘａａ３８  Ｘａａ３９−Ｚ２であり、
Ｘａａ３１、Ｘａａ３６、Ｘａａ３７、およびＸａａ３８は、独立して、Ｐｒｏ、ホモプロリン、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、チオプロリン、Ｎ−アルキルグリシン、Ｎ−アルキルペンチルグリシン、およびＮ−アルキルアラニンからなる群より選択され、Ｘａａ３９は、ＳｅｒまたはＴｙｒであり、かつ
Ｚ２は、−ＯＨまたは−ＮＨ２であり、
ただし、
Ｘａａ３、Ｘａａ４、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１２、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、Ｘａａ１５、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、Ｘａａ１９、Ｘａａ２０、Ｘａａ２１、Ｘａａ２４、Ｘａａ２５、およびＸａａ２６のうち、Ａｌａであるものは３つを超えず、かつ
Ｘａａ１がＨｉｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、または４−イミダゾプロピオニルである場合、Ｘａａ３、Ｘａａ４、およびＸａａ９のうち少なくとも１つはＡｌａである）。
【０２７９】
本明細書中に記載される任意の態様または実施形態において、神経保護ポリペプチドは、配列番号１〜５５からなる群より選択される。
【０２８０】
本明細書中において引用される各文献を、引用により本明細書に援用する。実施例中と、特に指定される箇所とを除き、本記載中において物質などの量を特定しているすべての数値は、「約」という言葉をつけて改変されるものとして理解される。本明細書中に記載される上限値、下限値、範囲限界、および比率限界は独立して組み合わせてよいということが理解される。同様に、本開示に係る各要素の範囲および量を、他の任意の要素の範囲または量と共に使用することができる。
【０２８１】
当業者であれば、本明細書中に記載される具体的な実施形態および方法に対する多くの等価物が存在することを認識できるであろう、または、こうした等価物を、常套的な実験法のみを使用して確かめることができるであろう。こうした等価物は、以下の請求項の範囲に包含されることが意図される。
【０２８２】
本明細書中に記載される詳細な実施例および実施形態は、例示のみを目的として例として記載されるということが理解され、本開示を限定するものとは考慮されない。この点において様々な改変または変更が当業者には示唆されるであろうし、こうした改変または変更は、本願の思想および範囲に含まれ、付属の請求項の範囲内であるとして考慮される。たとえば、所望の効果を最適化する目的で成分の相対量が変更されてよく、追加の成分が添加されてよく、かつ／または、記載される成分の１つ以上が類似成分で置き換えられてよい。本開示に係るシステム、方法、およびプロセスに関連するさらなる有利な特徴および機能性が、付属の請求項から明らかとなるであろう。また、当業者であれば、本明細書中に記載される本開示の具体的な実施形態に対する多くの等価物が存在することを認識できるであろう、または、こうした等価物を、常套的な実験法のみを使用して確かめることができるであろう。こうした等価物は、以下の請求項の範囲に包含されることが意図される。
【０２８３】
参照文献
【０２８４】
【表３】
2020500163.tif 000006
2020500163.tif 000007
2020500163.tif 000008
2020500163.tif 000009
2020500163.tif 000010
【図１Ａ】
2020500163.tif 000011
【図１Ｂ】
2020500163.tif 000012
【図２】
2020500163.tif 000013
【図３】
2020500163.tif 000014
【図４Ａ】
2020500163.tif 000015
【図４Ｂ】
2020500163.tif 000016
【図４Ｃ】
2020500163.tif 000017
【図５Ａ】
2020500163.tif 000018
【図５Ｂ】
2020500163.tif 000019
【図５Ｃ】
2020500163.tif 000020
【図５Ｄ】
2020500163.tif 000021
【図５Ｅ】
2020500163.tif 000022
【図５Ｆ】
2020500163.tif 000023
【図５Ｇ】
2020500163.tif 000024
【図５Ｈ】
2020500163.tif 000025
【図５Ｉ】
2020500163.tif 000026
【図５Ｊ】
2020500163.tif 000027
【図５Ｋ】
2020500163.tif 000028
【図５Ｌ】
2020500163.tif 000029
【図５Ｍ】
2020500163.tif 000030
【図５Ｎ】
2020500163.tif 000031
【図６Ａ】
2020500163.tif 000032
【図６Ｂ】
2020500163.tif 000033
【図６Ｃ】
2020500163.tif 000034
【図６Ｄ】
2020500163.tif 000035
【図７Ａ】
2020500163.tif 000036
【図７Ｂ】
2020500163.tif 000037
【図８Ａ】
2020500163.tif 000038
【図８Ｂ】
2020500163.tif 000039
【図９Ａ】
2020500163.tif 000040
【図９Ｂ】
2020500163.tif 000041
【図１０Ａ】
2020500163.tif 000042
【図１０Ｂ】
2020500163.tif 000043
【図１０Ｃ】
2020500163.tif 000044
【図１１Ａ】
2020500163.tif 000045
【図１１Ｂ】
2020500163.tif 000046
【図１１Ｃ】
2020500163.tif 000047
【図１２Ａ】
2020500163.tif 000048
【図１２Ｂ】
2020500163.tif 000049
【図１２Ｃ】
2020500163.tif 000050
【図１３Ａ】
2020500163.tif 000051
【図１３Ｂ】
2020500163.tif 000052
【図１３Ｃ】
2020500163.tif 000053
【図１３Ｄ】
2020500163.tif 000054
【図１４Ａ】
2020500163.tif 000055
【図１４Ｂ】
2020500163.tif 000056
【図１４Ｃ】
2020500163.tif 000057
【図１４Ｄ】
2020500163.tif 000058
【図１４Ｅ】
2020500163.tif 000059
【図１５Ａ】
2020500163.tif 000060
【図１５Ｂ】
2020500163.tif 000061
【図１５Ｃ】
2020500163.tif 000062
【図１５Ｄ】
2020500163.tif 000063
【図１５Ｅ】
2020500163.tif 000064
【配列表】
2020500163000001.app
【国際調査報告】
2020500163.tif 000065
2020500163.tif 000066
2020500163.tif 000067
2020500163.tif 000068
2020500163.tif 000069