(57)【要約】  式(Ｉ)2020519596.tif 000056［式中、  Ｘは、ＣＲ４またはＮであり；  Ｙは、ＣＲ５またはＮであるが；ただし、ＸおよびＹの内の１つのみが、Ｎであり；  Ｒ１は、2020519596.tif 000057(式中、Ｒ１、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ１ｃ、Ｒ２およびＲ３は、本明細書に規定されている)である]の化合物、あるいはその塩またはプロドラッグを開示する。前記化合物を、ＩＲＡＫ４のモジュレーターとして用いる方法、および前記化合物を含む医薬組成物も開示される。これらの化合物は、炎症性疾患および自己免疫性疾患の治療、予防または遅延、あるいはがんの治療に有用である。
2020519596.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(Ｉ)：
【化１】
2020519596.tif 000052
[式中、
Ｘは、ＣＲ４またはＮであり；
Ｙは、ＣＲ５またはＮであるが；ただし、ＸおよびＹの１つのみが、Ｎであり；
Ｒ１は：
【化２】
2020519596.tif 000053
であり；
各々Ｒ１ａは、独立して、Ｈ、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３フルオロアルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルであるか；あるいは、２つのＲ１ａは、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員スピロシクロアルキル環を形成できる；
各々Ｒ１ｂは、独立して、Ｈ、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３フルオロアルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルであるか；あるいは、２つのＲ１ｂは、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員スピロシクロアルキル環を形成できる；
各々Ｒ１ｃは、独立して、Ｈ、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３フルオロアルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルであるか；あるいは、２つのＲ１ｃは、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員スピロシクロアルキル環を形成できる；
Ｒ１ａおよびＲ１ｂは、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員シクロアルキル環を形成でき；
Ｒ１ｂおよびＲ１ｃは、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員シクロアルキル環を形成できる；
Ｒ２は、Ｈ、ハロ、Ｃ１−３アルキルまたはＣ３−６シクロアルキルであり；
Ｒ３は、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルコキシであり；
Ｒ４は、Ｈ、ハロ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４フルオロアルキルまたはＣ３−６シクロアルキルであり；および
Ｒ５は、Ｈ、ハロ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４フルオロアルキルまたはＣ３−６シクロアルキルである]
の化合物、あるいはその塩またはプロドラッグ。
【請求項２】
各々Ｒ１ａが、独立して、Ｈ、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−２フルオロアルキル、Ｃ１−２アルコキシ、Ｃ１−２フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルであるか；あるいは、２つのＲ１ａが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員スピロシクロアルキル環を形成できる；
各々Ｒ１ｂが、独立して、Ｈ、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２フルオロアルキル、Ｃ１−２アルコキシ、Ｃ１−２フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルであるか；あるいは、２つのＲ１ｂが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員スピロシクロアルキル環を形成できる；
各々Ｒ１ｃが、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２フルオロアルキルまたはＣ３−６シクロアルキルであるか；あるいは、２つのＲ１ｃが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員スピロシクロアルキル環を形成できる；
Ｒ２が、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｃ１−２アルキルまたはＣ３−６シクロアルキルであり；
Ｒ３が、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−２フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルコキシであり；
Ｒ４が、Ｈ、ハロ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４フルオロアルキルまたはＣ３−６シクロアルキルであり；および
Ｒ５が、Ｈ、ハロ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４フルオロアルキルまたはＣ３−６シクロアルキルである、
請求項１記載の化合物、あるいはその塩またはプロドラッグ。
【請求項３】
各々Ｒ１ａが、独立して、ＨまたはＣ１−２アルキルであり；
各々Ｒ１ｂが、独立して、Ｈ、Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＨＦ２またはシクロプロピルであるか；あるいは、２つのＲ１ｂが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３員スピロシクロアルキル環を形成でき；
各々Ｒ１ｃが、Ｈであり；
Ｒ２が、Ｈまたは−ＣＨ３であり；
Ｒ３が、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ(ＣＨ３)２または−Ｏ(シクロプロピル)であり；
Ｒ４が、Ｈであり；および
Ｒ５が、Ｈである、
請求項１〜２のいずれかに記載の化合物、あるいはその塩またはプロドラッグ。
【請求項４】
Ｒ１が、
【化３】
2020519596.tif 000054
である、
請求項１〜３のいずれかに記載の化合物、あるいはその塩またはプロドラッグ。
【請求項５】
各々Ｒ１ａが、独立して、ＨまたはＣ１−２アルキルであり；および
各々Ｒ１ｂが、独立して、Ｈ、Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＨＦ２またはシクロプロピルであるか；あるいは、２つのＲ１ｂが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３員スピロシクロアルキル環を形成している、
請求項１〜２および４のいずれかに記載の化合物、あるいはその塩またはプロドラッグ。
【請求項６】
Ｒ１が、
【化４】
2020519596.tif 000055
である、
請求項１記載の化合物、あるいはその塩またはプロドラッグ。
【請求項７】
各々Ｒ１ａが、独立して、ＨまたはＣ１−２アルキルであり；
各々Ｒ１ｂが、独立して、Ｈ、Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＨＦ２またはシクロプロピルであり；および
各々Ｒ１ｃが、Ｈである、
請求項１〜６のいずれかに記載の化合物、あるいはその塩またはプロドラッグ。
【請求項８】
化合物が、
３−(((２Ｓ,３Ｓ)−３−エチル−４,４−ジフルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１)；
３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２)；
(Ｓ)−５−メトキシ−３−((５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[２,３−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(３)；
３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン−６−カルボキサミド(４)；
(Ｓ)−５−メトキシ−３−((５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(５)；
３−(((２Ｓ,３Ｒ)−３−エチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(６)；
５−メトキシ−３−((５−オキソモルホリン−３−イル)メトキシ)チエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(７)；
３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｒ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(８)；
３−(((６Ｓ,７Ｒ)−７−エチル−４−オキソ−５−アザスピロ[２.４]ヘプタン−６−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(９)；
３−(((２Ｓ,３Ｒ)−３−エチル−４,４−ジメチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１０)；
３−(((２Ｓ,４Ｒ)−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１１)；
３−(((２Ｓ,３Ｒ)−３−(ジフルオロメチル)−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１２)；
５−メトキシ−３−(((２Ｓ)−４−メチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１３−１４)；
３−(((２Ｓ)−４−エチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１５−１６)；
５−メトキシ−３−(((２Ｓ,３Ｒ)−３−メチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１７)；
３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｒ)−３−シクロプロピル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１８)；
３−(((２Ｓ,３Ｒ)−３−エチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシ−２−メチルチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１９)；
５−シクロプロポキシ−３−(((２Ｓ,３Ｒ)−３−エチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２０)；
３−(((２Ｓ,３Ｓ)−４,４−ジフルオロ−３−メチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２１)；
３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシ−２−メチルチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２２)；
３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−イソプロポキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２３)；
５−シクロプロポキシ−３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２４)；
(Ｓ)−５−メトキシ−２−メチル−３−((５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２５)；
３−(((４Ｒ,５Ｓ)−５−エチル−２−オキソオキサゾリジン−４−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２６)；
３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｒ)−４−フルオロ−３−メチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２７)；
３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−４−フルオロ−３−メチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２８)；および
３−(((２Ｓ,３Ｒ)−３−エチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン−６−カルボキサミド(２９)、
から選択される、請求項１記載の化合物またはその塩。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項記載の１または複数の化合物と、医薬的に許容される担体または希釈剤を含む、医薬組成物。
【請求項１０】
治療に用いるための請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物またはその塩、あるいは治療に用いるための請求項９記載の組成物。
【請求項１１】
炎症疾患、自己免疫疾患またはがんの治療に用いるための請求項１〜８のいずれか一項記載の化合物またはその塩、あるいは炎症疾患、自己免疫性疾患またはがんの治療に用いるための請求項９記載の組成物。
【請求項１２】
疾患が、クローン病、潰瘍性大腸炎、喘息、移植片対宿主病、同種移植の拒絶反応、慢性閉塞性肺疾患、グレーブス病、関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡、ループス腎炎、皮膚ループス、乾癬、クリオピリン関連周期性症候群、ＴＮＦ受容体関連周期性症候群、家族性地中海熱、成人発症型スチル病、全身性発症若年性突発性関節炎、多発性硬化症、神経因性疼痛、痛風、痛風性関節炎より選択される、請求項１１記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
(発明の分野)
本願は、一般に、ＩＲＡＫ−４の調整を含めた、キナーゼ阻害剤として有用であるチエノピリジンおよびベンゾチオフェン化合物に関する。チエノピリジンおよびベンゾチオフェン化合物、かかる化合物を含む組成物、およびそれらの使用方法が本明細書において提供される。本発明はさらには、キナーゼ調整と関連付けられる症状の治療に有用である少なくとも１つの本発明の化合物を含有する医薬組成物、および哺乳動物において、ＩＲＡＫ−４を含むキナーゼの活性を阻害する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
トル(Toll)／ＩＬ−１受容体ファミリーメンバーは、炎症および宿主抵抗性の重要なレギュレーターである。トル様受容体(ＴＬＲ)ファミリーは、細菌、真菌、寄生体およびウイルスを含む感染性微生物由来の分子パターンを認識する(Kawai, T.et al., Nature Immunol., 11: 373-384 (2010)を参照のこと)。受容体とのリガンド結合は、アダプター分子の二量化および受容体に保存された細胞質モチーフ(トル／ＩＬ−１受容体(ＴＩＲ)ドメインと称される)への動員を誘導する。ＴＬＲ３を例外として、全てのＴＬＲは、アダプター分子のＭｙＤ８８を動員する。ＩＬ−１受容体ファミリーもまた、細胞質ＴＩＲモチーフを含有しており、リガンド結合によりＭｙＤ８８を動員する(Sims, J.E. et al., Nature Rev. Immunol., 10: 89-102 (2010)を参照のこと)。
【０００３】
セリン／スレオニンキナーゼのＩＲＡＫファミリーのメンバーは、ＭｙＤ８８との相互作用を介して受容体に動員される。該ファミリーは、４つのメンバーからなる。数連の証拠は、ＩＲＡＫ４がＭｙＤ８８依存性のＴＬＲおよびＩＬ−１Ｒファミリーメンバーを介するシグナル伝達の開始において、重要かつ無駄が無い役割を果たすことを示唆する。構造データから、ＩＲＡＫ４がＭｙＤ８８と直接相互作用して、その後ＩＲＡＫ１またはＩＲＡＫ２のいずれかを受容体複合体に動員して、下流シグナル制御を促進することが確認されている(Lin, S. et al., Nature, 465: 885-890 (2010))。ＩＲＡＫ４は、ＩＲＡＫ１を直接リン酸化し、Ｅ３ユビキチンリガーゼＴＲＡＦ６への下流シグナル伝達を促進し、セリン／スレオニンキナーゼＴＡＫ１を活性化し、その後ＮＦκＢ経路およびＭＡＰＫカスケードの活性化をもたらす(Flannery, S. et al., BioChem. Pharmacol., 80: 1981-1991 (2010))。ＩＲＡＫ４を発現しないヒト患者サブセットが同定された(Picard, C. et al., Science, 299: 2976-2079 (2003))。これらの患者由来の細胞は、ＴＬＲ３以外の全てのＴＬＲアゴニストならびにＩＬ−１βおよびＩＬ−１８を含むＩＬ−１ファミリーのメンバーに対して応答できない(Ku, C. et al., J. Exp. Med., 204: 2407-2422 (2007))。マウスにおけるＩＲＡＫ４の欠失は、ＩＬ−１、ＩＬ−１８および全てのＴＬＲ(ＴＬＲ３を除いた)の依存的応答に対して厳密な遮断をもたらす(Suzuki, N. et al., Nature, 416:750-754 (2002))。対照的に、ＩＲＡＫ１(Thomas, J.A. et al., J. Immunol., 163: 978-984 (1999))；Swantek, J.L. et al., J. Immunol., 164: 4301-4306 (2000))またはＩＲＡＫ２(Wan, Y. et al., J. Biol. Chem., 284: 10367-10375 (2009))のいずれかの欠失は、シグナル伝達の部分的喪失をもたらす。また、ＩＲＡＫ４は、そのキナーゼ活性がシグナル伝達の阻害に必要であることが判っている唯一のＩＲＡＫファミリーメンバーである。マウスゲノムにおいて、野生型ＩＲＡＫ４をキナーゼ不活性変異体(ＫＤＫＩ)で置換することにより、ＩＬ−１、ＩＬ−１８および全てのＴＬＲ(ＴＬＲ３以外)を含めたあらゆるＭｙＤ８８依存性受容体を介したシグナル伝達が阻害された(Koziczak-Holbro, M. et al., J. Biol. Chem., 282: 13552-13560 (2007)；Kawagoe, T. et al., J. Exp. Med., 204: 1013-1024 (2007)；およびFraczek, J. et al., J. Biol. Chem., 283: 31697-31705 (2008))。
【０００４】
野生型動物と比べて、ＩＲＡＫ４ ＫＤＫＩマウスは、多発性硬化症(Staschke, K.A. et al., J. Immunol., 183: 568-577 (2009))、関節リウマチ(Koziczak-Holbro, M. et al., Arthritis Rheum., 60: 1661-1671 (2009))、アテローム性動脈硬化症(Kim, T.W. et al., J. Immunol., 186: 2871-2880 (2011) and Rekhter, M. et al., Biochem. Biophys. Res. Comm., 367: 642-648 (2008))および心筋梗塞(Maekawa, Y. et al., Circulation, 120: 1401-1414 (2009))のマウスモデルにおいて、疾患の重篤度が大幅に減少することがわかった。記載された通り、ＩＲＡＫ４阻害剤は、全てのＭｙＤ８８依存性のシグナル伝達を遮断する。ＭｙＤ８８依存性ＴＬＲは、多発性硬化症、関節リウマチ、代謝性症候群、乾癬、全身性紅斑性狼瘡、クローン病および潰瘍性大腸炎を含む炎症性腸疾患、自己免疫性ブドウ膜炎、喘息、アレルギー、Ｉ型糖尿病および同種移植の拒絶反応の発症に関与することが示された(Keogh, B. et al., Trends Pharmacol. Sci., 32: 435-442 (2011)；Mann, D.L., Circ. Res., 108: 1133-1145 (2011)；Horton, C.G. et al., Mediators Inflamm., Article ID 498980 (2010), doi: 10.1155/2010/498980；Goldstein, D.R. et al., J. Heart Lung Transplant., 24: 1721-1729 (2005)；およびCario, E., Inflamm. Bowel Dis., 16: 1583-1597 (2010))。びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫において発がん活性を有しており、ＩＲＡＫ４阻害に対して感受性である、ＭｙＤ８８変異が同定されている(Ngo, V.N. et al., Nature, 470: 115-121 (2011))。全ゲノム配列決定により、慢性リンパ性白血病に関連するＭｙＤ８８の変異が同定されており、ＩＲＡＫ４阻害剤が白血病の治療における有用性も有する可能性を示唆した(Puente, X.S. et al., Nature, 475: 101-105 (2011))。
【０００５】
ＴＬＲシグナル伝達を遮断することに加えて、ＩＲＡＫ４阻害剤は、ＩＬ−１Ｒファミリーのメンバーによるシグナル伝達も遮断するであろう。ＩＬ−１の中和が、痛風；痛風性関節炎；ＩＩ型糖尿病；クリオピリン関連周期性症候群(ＣＡＰＳ)、ＴＮＦ受容体関連周期性症候群(ＴＲＡＰＳ)、家族性地中海熱(ＦＭＦ)、成人発症型スチル病を含む自己炎症性疾患；全身性発症若年性突発性関節炎；卒中；移植片対宿主病(ＧＶＨＤ)；くすぶり型多発性骨髄腫；再発性心膜炎；骨関節炎；気腫を含む、複数の疾患に効果的であることが示唆された(Dinarello, C.A., Eur. J. Immunol., 41:1203-1217 (2011) and Couillin, I. et al., J. Immunol., 183: 8195-8202 (2009))。アルツハイマー病のマウスの実験において、ＩＬ−１受容体の遮断により、認知障害が改善され、タウ病変が弱められ、アミロイド−βのオリゴマー形成が低下した(Kitazawa, M. et al., J. Immunol., 187: 6539-6549 (2011))。ＩＬ−１は、適応免疫に重要な関連性があり、ＴＨ１７エフェクターＴ細胞サブセットの分化を作動させることも示されている(Chung, Y. et al., Immunity, 30: 576-587 (2009))。従って、ＩＲＡＫ４阻害剤は、多発性硬化症、乾癬、炎症性腸疾患、自己免疫性ブドウ膜炎および関節リウマチを含む、ＴＨ１７関連疾患において効果を示すことが予測される(Wilke, C.M. et al., Trends Immunol., 32: 603-661 (2011))。
【０００６】
ＷＯ ２０１３／１０６６１２、ＷＯ ２０１３／１０６６１４、ＷＯ ２０１３／１０６６４１、ＷＯ２０１４／０７４６５７、およびＷＯ ２０１４／０７４６７５は、ＩＲＡＫ４の調整を含む、キナーゼ阻害剤として有用な置換ピリジル化合物を開示する。
【０００７】
タンパク質キナーゼ調整に関与する治療により利益を受け得る症状を考慮すると、ＩＲＡＫ４などのタンパク質キナーゼの調整能を有する新規な化合物、ならびにこれらの化合物を用いる方法が、多種多様な患者に対して相当な治療的有用性を提供し得ることはすぐに分かるであろう。
【０００８】
本発明は、ＩＲＡＫ４を含めたタンパク質キナーゼの効果的な阻害剤であることが見出された新規な一連のチエノピリジンおよびベンゾチオフェン置換化合物に関する。薬剤適性(drugability)に重要である、望ましい安定性、生物学的利用能、治療指数および毒性値を有する医薬品として有用である、これらの化合物を提供する。
【発明の概要】
【０００９】
本発明は、ＩＲＡＫ４の阻害剤として有用であり、かつ増殖性疾患、アレルギー性疾患、自己免疫性疾患および炎症性疾患の治療に有用である、式(Ｉ)の化合物、あるいはその立体異性体、互変異性体、医薬的に許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグを提供する。
【００１０】
本発明は、医薬的に許容される担体と、少なくとも１つの本発明の化合物あるいはその立体異性体、互変異性体、医薬的に許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグを含む、医薬組成物も提供する。
【００１１】
本発明は、ＩＲＡＫ４の阻害を必要とする宿主に、治療的に効果的な量の少なくとも１つの本発明の化合物あるいはその立体異性体、互変異性体、医薬的に許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグを投与することを含む、ＩＲＡＫ４の阻害方法も提供する。
【００１２】
本発明は、増殖性、アレルギー性、自己免疫性および炎症性疾患の治療方法であって、そのような治療を必要とする宿主に、治療的に効果的な量の少なくとも１つの本発明の化合物あるいはその立体異性体、互変異性体、医薬的に許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグを投与することを含む、方法を提供する。
【００１３】
一実施態様は、炎症性および自己免疫性疾患の治療方法を提供するものであって、ここで該炎症性疾患の治療がさらにより好ましい。特に、炎症性および自己免疫性疾患は、以下に限定されないが、クローン病、潰瘍性大腸炎、喘息、移植片対宿主病、同種移植の拒絶反応、慢性閉塞性肺疾患、グレーブス病、関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡、ループス腎炎、皮膚ループス、乾癬、クリオピリン関連周期性症候群(ＣＡＰＳ)、ＴＮＦ受容体関連周期性症候群(ＴＲＡＰＳ)、家族性地中海熱(ＦＭＦ)、成人発症型スチル病、全身性発症若年性突発性関節炎、多発性硬化症、神経因性疼痛、痛風および痛風性関節炎を包含する。
【００１４】
一実施態様は、痛風および痛風性関節炎の治療方法を提供する。
【００１５】
別の好ましい実施態様は、ＩＩ型糖尿病およびアテローム性動脈硬化症を含む、代謝性疾患の治療方法である。
【００１６】
一実施態様は、がんの治療方法であって、そのような治療を必要とする宿主に、治療的に効果的な量の少なくとも１つの本発明の化合物あるいはその立体異性体、互変異性体、医薬的に許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグを投与することを含む、方法を提供する。
【００１７】
本発明は、療法に用いるための、本発明の化合物あるいはその立体異性体、互変異性体、医薬的に許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグも提供する。
【００１８】
本発明は、がん治療用の医薬を製造するための、本発明の化合物あるいはその立体異性体、互変異性体、医薬的に許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグの使用も提供する。
【００１９】
本発明は、式(Ｉ)の化合物または医薬組成物であって、該化合物または組成物を使用するための取扱説明書と一緒にキットに入れた化合物または組成物も提供する。
【００２０】
本発明は、本発明の化合物あるいはその立体異性体、互変異性体、医薬的に許容される塩、溶媒和物またはプロドラッグを製造するための方法および中間体も提供する。
【００２１】
本発明のこれらの、および他の特徴は、開示が進むにつれて、拡充された形態にて述べられるであろう。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本発明の第一態様は、式(Ｉ)：
【化１】
2020519596.tif 000003
[式中、
Ｘは、ＣＲ４またはＮであり；
Ｙは、ＣＲ５またはＮであるが；ただし、ＸおよびＹの内の１つのみが、Ｎであり；
Ｒ１は、
【化２】
2020519596.tif 000004
であり；
各々Ｒ１ａは、独立して、Ｈ、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３フルオロアルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルであるか；あるいは、２つのＲ１ａは、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員スピロシクロアルキル環を形成できる；
各々Ｒ１ｂは、独立して、Ｈ、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３フルオロアルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルであるか；あるいは、２つのＲ１ｂは、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員スピロシクロアルキル環を形成できる；
各々Ｒ１ｃは、独立して、Ｈ、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３フルオロアルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルであるか；あるいは、２つのＲ１ｃは、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員スピロシクロアルキル環を形成できる；
Ｒ１ａおよびＲ１ｂは、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員シクロアルキル環を形成できる；
Ｒ１ｂおよびＲ１ｃは、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員シクロアルキル環を形成できる；
Ｒ２は、Ｈ、ハロ、Ｃ１−３アルキルまたはＣ３−６シクロアルキルであり；
Ｒ３は、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルコキシであり；
Ｒ４は、Ｈ、ハロ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４フルオロアルキルまたはＣ３−６シクロアルキルであり；および
Ｒ５は、Ｈ、ハロ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４フルオロアルキルまたはＣ３−６シクロアルキルである]
の少なくとも一つの化合物、あるいはその塩またはプロドラッグを提供する。
【００２３】
一実施形態において、ＸがＣＲ４であり；ＹがＣＲ５であり；ならびに、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５が、第一態様において規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態の化合物は、式(ＩＩ)：
【化３】
2020519596.tif 000005
の構造を有する。
【００２４】
一実施形態において、ＸがＮであり；ＹがＣＲ５であり；ならびに、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ５が、第一態様において規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態の化合物は、式(ＩＩＩ)：
【化４】
2020519596.tif 000006
の構造を有する。
【００２５】
一実施形態において、ＸがＣＲ４であり；ＹがＮであり；ならびに、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が、第一態様において規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態の化合物は、式(ＩＶ)：
【化５】
2020519596.tif 000007
の構造を有する。
【００２６】
一実施形態において、Ｒ１が、
【化６】
2020519596.tif 000008
であり；ならびに、Ｘ、Ｙ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ１ａおよびＲ１ｂが、第一態様において規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態において、Ｒ１が、
【化７】
2020519596.tif 000009
である化合物が包含される。また、この実施形態において、Ｒ１が、
【化８】
2020519596.tif 000010
である化合物も包含される。
【００２７】
一実施形態において、Ｒ１が、
【化９】
2020519596.tif 000011
であり；ならびに、Ｘ、Ｙ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂおよびＲ１ｃが、第一態様において規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが包含される。この実施形態に含まれるものは、Ｒ１が、
【化１０】
2020519596.tif 000012
である化合物である。
【００２８】
一実施形態において、Ｒ１が、
【化１１】
2020519596.tif 000013
であり；ならびに、Ｘ、Ｙ、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ１ｃ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５が、第一態様において規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態において、各々Ｒ１ａが、独立して、ＨまたはＣ１−２アルキルであり；各々Ｒ１ｂが、独立して、Ｈ、Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＨＦ２またはシクロプロピルであり；および、各々Ｒ１ｃがＨである、化合物が包含される。
【００２９】
一実施形態において、各々Ｒ１ａが、独立して、Ｈ、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３フルオロアルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルであり；ならびに、Ｘ、Ｙ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３が、第一態様において規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態において、各々Ｒ１ａが、独立して、Ｈ、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−２フルオロアルキル、Ｃ１−２アルコキシ、Ｃ１−２フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルである、化合物が包含される。また、この実施形態において、各々Ｒ１ａが、独立して、ＨまたはＣ１−２アルキルである化合物；ならびに、１つのＲ１ａがＨであり、もう一方のＲ１ａが、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３フルオロアルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルである、化合物である。
【００３０】
一実施形態において、２つのＲ１ａが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員スピロシクロアルキル環を形成しており；ならびに、Ｘ、Ｙ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３が、第一態様において規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態において、２つのＲ１ａは、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３員スピロシクロアルキル環を形成している化合物が包含される。また、この実施形態において、２つのＲ１ａは、それらに結合している炭素原子と一緒になって、４員スピロシクロアルキル環を形成している化合物が包含される。
【００３１】
一実施形態において、各々Ｒ１ｂが、独立して、Ｈ、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３フルオロアルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルであり；ならびに、Ｘ、Ｙ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３が、第一態様に規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態において、各々Ｒ１ｂが、独立して、Ｈ、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−２フルオロアルキル、Ｃ１−２アルコキシ、Ｃ１−２フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルである、化合物が包含される。また、この実施形態において、各々Ｒ１ｂが、独立して、Ｈ、Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＨＦ２またはシクロプロピルである化合物；および、１つのＲ１ｂがＨであり、もう一方のＲ１ｂが、Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＨＦ２またはシクロプロピルである、化合物が包含される。さらに、この実施形態において、各々Ｒ１ｂがＨであり；各々Ｒ１ｂがＦである化合物；および、各々Ｒ１ｂが−ＣＨ３である、化合物が包含される。
【００３２】
一実施形態において、２つのＲ１ｂが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員スピロシクロアルキル環を形成しており；ならびに、Ｘ、Ｙ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３が、第一態様に規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態において、２つのＲ１ｂが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３員スピロシクロアルキル環を形成している化合物を包含する。また、この実施形態において、２つのＲ１ｂが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、４員スピロシクロアルキル環を形成している化合物が包含される。
【００３３】
一実施形態において、Ｒ１が、
【化１２】
2020519596.tif 000014
であり；各々Ｒ１ｃが、独立して、Ｈ、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３フルオロアルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルであり；ならびに、Ｘ、Ｙ、Ｒ２およびＲ３が、第一態様に規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態において、各々Ｒ１ｃが、独立して、Ｈ、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−２フルオロアルキル、Ｃ１−２アルコキシ、Ｃ１−２フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルである、化合物が包含される。また、この実施形態において、各々Ｒ１ｃが、独立して、ＨまたはＣ１−２アルキルである化合物；および、各々Ｒ１ｃがＨである、化合物が包含される。
【００３４】
一実施形態において、Ｒ１が、
【化１３】
2020519596.tif 000015
であり；２つのＲ１ｃが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員スピロシクロアルキル環を形成しており；ならびに、Ｘ、Ｙ、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ２およびＲ３が、第一態様に規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態において、２つのＲ１ｃが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３員スピロシクロアルキル環を形成している化合物が包含される。また、この実施形態において、２つのＲ１ｃが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、４員スピロシクロアルキル環を形成している化合物が包含される。
【００３５】
一実施形態において、Ｒ１ａおよびＲ１ｂが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員シクロアルキル環を形成しており；各々Ｒ１ｂが、独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３フルオロアルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルであり；ならびに、Ｘ、Ｙ、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３が、第一態様に規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態において、Ｒ１ａおよびＲ１ｂが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３員シクロアルキル環を形成している化合物が包含される。また、この実施形態において、Ｒ１ａおよびＲ１ｂが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、４員シクロアルキル環を形成している化合物が包含される。
【００３６】
一実施形態において、Ｒ１が、
【化１４】
2020519596.tif 000016
であり；各々Ｒ１ａが、独立して、Ｈ、ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−３フルオロアルキル、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−３フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルであり；Ｒ１ｃおよびＲ１ｃが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員シクロアルキル環を形成しており；ならびに、Ｘ、Ｙ、Ｒ２およびＲ３が、第一態様に規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。また、この実施形態において、Ｒ１ｂおよびＲ１ｃが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３員シクロアルキル環を形成している化合物が包含される。また、この実施形態において、Ｒ１ｂおよびＲ１ｃが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、４員シクロアルキル環を形成している化合物が包含される。
【００３７】
一実施形態において、Ｒ３が、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−２フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルコキシであり；ならびに、Ｘ、Ｙ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５が、第一態様に規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態において、Ｒ３が、Ｃ１−３アルコキシおよびＣ３−６シクロアルコキシである、化合物が包含される。また、この実施形態において、Ｒ３が、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ(ＣＨ３)２または−Ｏ(シクロプロピル)である、化合物が包含される。
【００３８】
一実施形態において、ＸがＣＲ４であり；Ｒ４が、Ｈ、ハロ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４フルオロアルキルまたはＣ３−６シクロアルキルであり；ならびに、Ｙ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ５が、第一態様に規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態において、Ｒ４が、Ｈ、Ｆ、Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２フルオロアルキルまたはＣ３−６シクロアルキルである、化合物が包含される。また、この実施形態において、Ｒ４が、Ｈ、Ｆ、−ＣＨ３または−ＣＦ３である化合物；および、Ｒ４がＨである、化合物が包含される。
【００３９】
一実施形態において、ＹがＣＲ５であり；Ｒ５が、Ｈ、ハロ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４フルオロアルキルまたはＣ３−６シクロアルキルであり；ならびに、Ｙ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４が、第一態様に規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態において、Ｒ５が、Ｈ、Ｆ、Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２フルオロアルキルまたはＣ３−６シクロアルキルである、化合物が包含される。また、この実施形態において、Ｒ５が、Ｈ、Ｆ、−ＣＨ３または−ＣＦ３である、化合物；および、Ｒ５がＨである化合物が包含される。
【００４０】
一実施形態において、各々Ｒ１ａが、独立して、Ｈ、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−３アルキル、Ｃ１−２フルオロアルキル、Ｃ１−２アルコキシ、Ｃ１−２フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルであるか；あるいは、２つのＲ１ａが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員スピロシクロアルキル環を形成できる；各々Ｒ１ｂは、独立して、Ｈ、−ＯＨ、Ｆ、Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２フルオロアルキル、Ｃ１−２アルコキシ、Ｃ１−２フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルキルであるか；あるいは、２つのＲ１ｂが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員スピロシクロアルキル環を形成できる；各々Ｒ１ｃは、独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２フルオロアルキルまたはＣ３−６シクロアルキルであるか；あるいは、２つのＲ１ｃが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３〜４員スピロシクロアルキル環を形成できる；Ｒ２が、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｃ１−２アルキルまたはＣ３−６シクロアルキルであり；Ｒ３が、Ｃ１−３アルコキシ、Ｃ１−２フルオロアルコキシまたはＣ３−６シクロアルコキシであり；Ｒ４が、Ｈ、ハロ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４フルオロアルキルまたはＣ３−６シクロアルキルであり；Ｒ５が、Ｈ、ハロ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４フルオロアルキルまたはＣ３−６シクロアルキルであり；ならびに、Ｘ、ＹおよびＲ１が、第一態様に規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態において、ＸがＣＨである化合物が包含される。また、この実施形態において、ＸがＣＨであり；および、ＹがＮである化合物が包含される。
【００４１】
一実施形態において、各々Ｒ１ａが、独立して、ＨまたはＣ１−２アルキルであり；各々Ｒ１ｂが、独立して、Ｈ、Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＨＦ２またはシクロプロピルであるか；あるいは、２つのＲ１ｂが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３員スピロシクロアルキル環を形成できる；各々Ｒ１ｃが、Ｈであり；Ｒ２が、Ｈまたは−ＣＨ３であり；Ｒ３が、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ(ＣＨ３)２または−Ｏ(シクロプロピル)であり；Ｒ４がＨであり；Ｒ５がＨであり；ならびに、Ｘ、ＹおよびＲ１が、第一態様において規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態において、ＸがＣＨである化合物が包含される。また、この実施形態において、ＸがＣＨであり；および、ＹがＮである化合物が包含される。
【００４２】
一実施形態において、各々Ｒ１ａが、独立して、ＨまたはＣ１−２アルキルであり；各々Ｒ１ｂが、独立して、Ｈ、Ｆ、−ＣＨ３、−ＣＨＦ２またはシクロプロピルであるか；あるいは、２つのＲ１ｂが、それらに結合している炭素原子と一緒になって、３員スピロシクロアルキル環を形成しており；ならびに、Ｘ、Ｙ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５が、第一態様において規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態において、ＸがＣＨである化合物が包含される。また、この実施形態において、ＸがＣＨであり；および、ＹがＮである化合物が包含される。
【００４３】
一実施形態において、ＸがＣＨであり；ＹがＮであり；Ｒ１が、
【化１５】
2020519596.tif 000017
であり；ならびに、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５が、第一態様に規定されている、式(Ｉ)の化合物あるいはその塩またはプロドラッグが提供される。この実施形態において、Ｒ４がＨであり；および、Ｒ５がＨである化合物が包含される。本発明には、１つのＲ１ａがＨであり、もう一方のＲ１ａがＨまたはＣ１−２アルキルである化合物が含まれる。
【００４４】
一実施形態は、下記：３−(((２Ｓ,３Ｓ)−３−エチル−４,４−ジフルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１)；３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２)；(Ｓ)−５−メトキシ−３−((５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[２,３−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(３)；３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン−６−カルボキサミド(４)；(Ｓ)−５−メトキシ−３−((５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(５)；３−(((２Ｓ,３Ｒ)−３−エチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(６)；５−メトキシ−３−((５−オキソモルホリン−３−イル)メトキシ)チエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(７)；３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｒ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(８)；３−(((６Ｓ,７Ｒ)−７−エチル−４−オキソ−５−アザスピロ[２.４]ヘプタン−６−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(９)；３−(((２Ｓ,３Ｒ)−３−エチル−４,４−ジメチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１０)；３−(((２Ｓ,４Ｒ)−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１１)；３−(((２Ｓ,３Ｒ)−３−(ジフルオロメチル)−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１２)；５−メトキシ−３−(((２Ｓ)−４−メチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１３−１４)；３−(((２Ｓ)−４−エチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１５−１６)；５−メトキシ−３−(((２Ｓ,３Ｒ)−３−メチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１７)；３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｒ)−３−シクロプロピル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１８)；３−(((２Ｓ,３Ｒ)−３−エチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシ−２−メチルチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１９)；５−シクロプロポキシ−３−(((２Ｓ,３Ｒ)−３−エチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２０)；３−(((２Ｓ,３Ｓ)−４,４−ジフルオロ−３−メチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２１)；３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オ��ソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシ−２−メチルチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２２)；３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−イソプロポキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２３)；５−シクロプロポキシ−３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２４)；(Ｓ)−５−メトキシ−２−メチル−３−((５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２５)；３−(((４Ｒ,５Ｓ)−５−エチル−２−オキソオキサゾリジン−４−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２６)；３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｒ)−４−フルオロ−３−メチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２７)；３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−４−フルオロ−３−メチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２８)；および３−(((２Ｓ,３Ｒ)−３−エチル−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン−６−カルボキサミド(２９)、
の化合物から選択される、式(Ｉ)の化合物またはその塩を提供する。
【００４５】
一実施態様は、ＩＲＡＫ４  ＩＣ５０値が＜０.６μＭである化合物を提供する。
【００４６】
一実施態様は、ＩＲＡＫ４  ＩＣ５０値が＜０.１μＭである化合物を提供する。
【００４７】
一実施態様は、ＩＲＡＫ４  ＩＣ５０値が＜０.０５μＭである化合物を提供する。
【００４８】
一実施態様は、ＩＲＡＫ４  ＩＣ５０値が＜０.０２５μＭである化合物を提供する。
【００４９】
一実施態様は、ＩＲＡＫ４  ＩＣ５０値が＜０.０１５μＭである化合物を提供する。
【００５０】
一実施態様は、ＩＲＡＫ４  ＩＣ５０値が＜０.０１μＭである化合物を提供する。
【００５１】
定義
本発明の特徴および利点は、以下の詳細な記載を読むことで、当業者にはさらに容易に理解されるであろう。明瞭化のために、個々の実施態様に関連して前後に記載された本発明の特定の特徴を組み合わせて、一実施態様を形成してもよいことが分かるであろう。反対に、簡潔化のために、単一の実施態様に関連して記載される本発明の様々な特徴をそのサブコンビネーションを形成するために組み合わせてもよい。ここで同定される実施態様は、例示を意図したものであり、制限を目的とするものではない。
【００５２】
本願明細書において特記されない限り、単数は複数をも包含して言及するものである。例えば、「ａ」および「ａｎ」は、一または一以上のいずれをもいう。
【００５３】
本明細書で用いるように、「化合物」なる語は、少なくとも１つの化合物をいう。例えば、式(Ｉ)の化合物は、式(Ｉ)の化合物および式(Ｉ)の２個以上の化合物を包含する。
【００５４】
特に断りがなければ、原子価が満たされていないヘテロ原子はいずれも、原子価を満たすのに十分な水素原子を有するものとされる。
【００５５】
ここに記載の定義は、出典明示により本願明細書の一部とされる、特許、特許出願および／または特許出願公報のいずれに記載の定義にも優先する。
【００５６】
本発明を記載するのに使用される種々の用語の定義が以下に列挙される。これらの定義は、(特定の場合で限定されない限り)個々に、またはより大きな基の一部として、明細書を通して使用される用語に適用される。
【００５７】
本願明細書を通して、その基および置換基は、安定した部分および化合物を提供するように当業者により選択され得る。
【００５８】
当該分野にて使用される慣習に従って、
【化１６】
2020519596.tif 000018
は、部分または置換基のコアまたは骨格構造への結合点である結合を表すのに、本願明細書の構造式にて使用される。
【００５９】
本明細書で使用される「ハロ」および「ハロゲン」なる語は、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩをいう。
【００６０】
「シアノ」なる語は基−ＣＮをいう。
【００６１】
「アミノ」なる語は基−ＮＨ２をいう。
【００６２】
「オキソ」なる語は＝Ｏをいう。
【００６３】
本明細書で使用される「アルキル」なる語は、例えば、１〜１２個の炭素原子、１〜６個の炭素原子および１〜４個の炭素原子を含有する、分枝鎖および直鎖の両方の飽和脂肪族炭化水素基をいう。アルキル基の例は、以下に限定されないが、メチル(Ｍｅ)、エチル(Ｅｔ)、プロピル(例えば、ｎ−プロピルおよびｉ−プロピル)、ブチル(例えば、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔ−ブチル)およびペンチル(例えば、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル)、ｎ−ヘキシル、２−メチルペンチル、２−エチルブチル、３−メチルペンチルおよび４−メチルペンチルを包含する。記号「Ｃ」の後に数字が下付きで示される場合、その下付き文字は特定の基が含有しうる炭素原子の数をより具体的に限定する。例えば、「Ｃ１−６アルキル」は、１〜６個の炭素原子を有する直鎖および分岐鎖のアルキル基を意味する。
【００６４】
本明細書で使用される場合に「フルオロアルキル」なる語は、１または複数のフッ素原子で置換されている、分岐鎖および直鎖の両方の飽和脂肪族炭化水素基を包含するものとする。例えば、「Ｃ１−４フルオロアルキル」は、１または複数のフッ素原子で置換された、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３およびＣ４アルキル基を包含するものとする。フルオロアルキル基の代表例は、これに限定されないが、−ＣＦ３および−ＣＨ２ＣＦ３を包含する。
【００６５】
本明細書で使用される場合の「シクロアルキル」なる語は、飽和環炭素原子より１個の水素原子を取り除くことにより、非芳香族単環式または多環式炭化水素分子から得られる基をいう。シクロアルキル基の代表例は、これに限定されないが、シクロプロピル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルを包含する。記号「Ｃ」の後に数字が下付きで示される場合、その下付き文字は特定のシクロアルキル基が含有しうる炭素原子の数をより具体的に限定する。例えば、「Ｃ３−６シクロアルキル」は、３〜６個の炭素原子を有するシクロアルキル基を意味する。
【００６６】
本明細書において使用される用語「アルコキシ」は、酸素原子を介して親分子部分に結合したアルキル基、例えば、メトキシ基(−ＯＣＨ３)をいう。例えば、「Ｃ１−３アルコキシ」は、１〜３個の炭素原子を含むアルコキシ基を表す。
【００６７】
用語「フルオロアルコキシ」および「−Ｏ(フルオロアルキル)」は、酸素結合(−Ｏ−)を介して結合された上記に定義されたフルオロアルキルをいう。例えば、「Ｃ１−４フルオロアルコキシ」は、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３およびＣ４フルオロアルコキシ基を包含することを意図される。
【００６８】
用語「スピロシクロアルキル」は、分子部分と共有されたシクロアルキル環中の炭素原子により分子部分に結合したカルボサイクリル環をいう。
【００６９】
「医薬的に許容される」なる語は、本願明細書において、適切な医学的判断の範囲内で、妥当な利益/リスク比に見合って、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症を伴わずにヒトおよび動物の組織と接触して用いるのに適した、化合物、物質、組成物、および/または剤形を意味するように用いられる。
【００７０】
式(Ｉ)の化合物は、非晶質固体または結晶固体として提供され得る。凍結乾燥を利用して式(Ｉ)の化合物を、非晶質固体として提供することができる。
【００７１】
さらには、式(Ｉ)の化合物の溶媒和物(例、水和物)も本発明の範囲内にあると認識されるべきである。「溶媒和物」なる語は、式(Ｉ)の化合物と、１または複数の溶媒分子(有機または無機のいずれか)との物理的結合を意味する。この物理的結合は水素結合を包含する。場合によっては、例えば１または複数の溶媒分子が、結晶性固体の結晶格子に組み込まれている場合に、溶媒和物は単離が可能である。「溶媒和物」は、溶液相と単離可能な溶媒和物の両者を含む。溶媒和物の例示としては、水和物、エタノール溶媒和物、メタノール溶媒和物、イソプロパノール溶媒和物、アセトニトリル溶媒和物および酢酸エチル溶媒和物が挙げられる。溶媒和の方法は、当該分野にて公知である。
【００７２】
様々な形態のプロドラッグが当分野において周知であり、以下：
ａ)The Practice of Medicinal Chemistry, Camille G. Wermuth et al., Ch 31, (Academic Press, 1996)；
ｂ)Design of Prodrugs, edited by H. Bundgaard,(Elsevier, 1985)；
ｃ)A Textbook of Drug Design and Development, P. Krogsgaard-Larson and H. Bundgaard eds, Ch 5, pgs113-191(Harwood Academic Publishers, 1991)；および
ｄ)Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism, Bernard Testa and Joachim M. Mayer, (Wiley-VCH, 2003)
に記載されている。
【００７３】
加えて、式(Ｉ)の化合物は、製造後に単離および精製して、重量で９９％以上の式(Ｉ)の化合物(「実質的に純粋な」)を含む組成物を得て、次いでそれを本明細書に記載のとおり用いられるか、または製剤化され得る。かかる「実質的に純粋な」式(Ｉ)の化合物も、ここで本発明の一部として本明細書に含まれると考えられる。
【００７４】
「安定な化合物」および「安定な構造」は、反応混合物から有用な純度にまで単離し、有効な治療薬への製剤化に耐えるのに十分強い化合物を示すことを意図する。本発明は、安定な化合物を具現化するものと意図される。
【００７５】
「治療的に効果的な量」は、ＩＲＡＫ４に対する阻害剤として作用するのに効果的な、または多発性硬化症および関節リウマチなどの自己免疫性および／または炎症性病態を治療または予防するのに効果的な、あるいはがんを治療するのに効果的な量の、本発明の化合物を単独で、または当該量の特許請求の範囲の化合物を組み合わせて、あるいは当該量の本発明の化合物を他の活性成分と組み合わせて含むものとする。
【００７６】
本明細書で用いるように、「治療する」または「治療」は、哺乳類、特にヒトにおける病態の治療に及び、(ａ)特に、哺乳類が病態に罹りやすいが、まだ罹患していると診断されていない場合に、該哺乳類が病態に罹患することを妨げること；(ｂ)病態を阻害すること、すなわち、病態の進行を阻むこと；および／または(ｃ)病態を緩和すること、すなわち、病態の退行を生じさせることを包含する。
【００７７】
本発明の化合物は、本発明の化合物中に存在する原子のすべての同位体を包含するものとする。同位体は、原子番号が同一であるが質量数が異なる原子が含まれる。一般的な例として、限定されることなく、水素の同位体にはジュウテリウム(Ｄ)およびトリチウム(Ｔ)が含まれる。炭素の同位体としては１３Ｃおよび１４Ｃが挙げられる。同位体で標識された本発明の化合物は、一般に、当業者に公知の通常の技法によるか、または本明細書に記載されたものと類似した方法により、他で用いられる非標識試薬の代わりに適切な同位体-標識試薬を用いて、製造することができる。例えば、メチル(−ＣＨ３)は、−ＣＤ３などの重水素化メチル基も包含する。
【００７８】
有用性
本発明の化合物は、ＩＲＡＫ４の調整を含め、キナーゼ活性を調整する。本発明の化合物により調整され得るキナーゼ活性の他の型は、限定されるものではないが、Ｐｅｌｌｅ／ＩＲＡＫファミリーおよびその変異体を包含する。
【００７９】
従って、式(Ｉ)の化合物は、キナーゼ活性の調整、特にＩＲＡＫ４活性の選択的阻害、あるいはＩＲＡＫおよび他のＰｅｌｌｅファミリーキナーゼの阻害に付随する症状の治療において有用性がある。かかる症状は、サイトカインレベルが細胞内シグナル伝達の結果として調整される、ＴＬＲ／ＩＬ−１ファミリー受容体関連疾患を包含する。その上、式(Ｉ)の化合物は、ＩＲＡＫ４活性について有利な選択性、好ましくは少なくとも２０倍ないし１０００倍以上の選択性を有する。
【００８０】
本明細書で使用されるように、「治療する」または「治療」なる語には、哺乳動物、特にヒトにおける疾患状態の処置が含まれ、(ａ)特に、哺乳類が病態に罹りやすいが、まだ罹患していると診断されていない場合に、該哺乳類が病態に罹患することを妨げるか、または遅らせること；(ｂ)病態を阻害すること、すなわち、病態の進行を阻むこと；および／または(ｃ)症候または病態を完全にまたは部分的に軽減すること、および／または疾患または障害および／またはその症候を緩和、改善、軽減または治癒することを包含する。
【００８１】
ＩＲＡＫ４の選択的阻害剤としてのその活性を考慮して、式(Ｉ)の化合物は、以下の：クローン病、潰瘍性大腸炎、喘息、移植片対宿主病、同種移植の拒絶反応、慢性閉塞性肺疾患などの炎症性疾患；グレーブス病、関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡、乾癬などの自己免疫性疾患；ＣＡＰＳ、ＴＲＡＰＳ、ＦＭＦ、成人発症型スチル病、全身性発症若年性突発性関節炎、痛風、痛風性関節炎を含む自己炎症性疾患；ＩＩ型糖尿病、アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞を含む代謝性疾患；骨吸収疾患、骨関節炎、骨粗鬆症、多発性骨髄腫関連骨障害などの破壊性骨障害；急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病などの増殖性障害；充実性腫瘍、眼内新血管形成、および小児血管腫を含む血管形成障害などの血管新生障害；敗血症、敗血症性ショック、および細菌性赤痢などの感染性疾患；神経変性疾患、例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、外傷により惹起される脳虚血または神経変性疾患、転移性黒色腫、カポジ肉腫、多発性骨髄腫、およびＨＩＶ乾癬およびＣＭＶ網膜炎、ＡＩＤＳなどの腫瘍性またはウイルス性疾患の各々に限定されないが、ＴＬＲ／ＩＬ−１ファミリー受容体関連疾患を治療するのに有用である。
【００８２】
より具体的には、本発明の化合物で治療され得る特定の症状または疾患は、限定されないが、膵炎(急性または慢性)、喘息、アレルギー、成人呼吸窮迫症候群、慢性閉塞性肺疾患、糸球体腎炎、関節リウマチ、全身性紅斑性狼瘡、強皮症、慢性甲状腺炎、グレーブス病、自己免疫性胃炎、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性好中球減少症、血小板減少症、アトピー性皮膚炎、慢性活動性肝炎、重症筋無力症、多発性硬化症、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、乾癬、宿主対移植片疾患、内毒素により誘発される炎症性反応、結核、アテローム性動脈硬化症、筋肉変性、悪液質、乾癬性関節炎、ライター症候群、痛風、外傷性関節炎、風疹性関節炎、急性滑膜炎、膵臓β細胞疾患；大量の好中球浸潤により特徴付けられる疾患；リウマチ様脊椎炎、痛風性関節炎および他の関節炎状態、脳マラリア、慢性炎症性肺疾患、珪肺症、肺サルコイドーシス、骨吸収疾患、同種移植の拒絶反応、感染による発熱および筋肉痛、感染に対して二次的な悪液質、ケロイド形成、瘢痕組織形成、潰瘍性大腸炎、発熱、インフルエンザ、骨粗鬆症、骨関節炎、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、転移性黒色腫、カポジ肉腫、多発性骨髄腫、敗血症、敗血症性ショック、および細菌性赤痢；アルツハイマー病、パーキンソン病、外傷性損傷により惹起される脳虚血または神経変性疾患；充実性腫瘍、眼内新血管形成、および小児血管腫を含む血管形成障害；急性肝炎感染を含むウイルス性疾患(Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎およびＣ型肝炎を含む)、ＨＩＶ感染およびＣＭＶ網膜炎、ＡＩＤＳ、ＡＲＣまたは悪性腫瘍、およびヘルペス；卒中、心筋虚血、卒中性心臓発作における虚血、臓器低酸素症、血管過形成、心臓および腎臓の再灌流損傷、血栓症、心臓肥大、トロンビン誘発性血小板凝集、内毒素血症および／または毒素性ショック症候群、プロスタグランジンエンドペルオキシダーゼ・シンターゼ−２に関連する症状、および尋常性天疱瘡を包含する。好ましい治療方法は、該症状がクローン病、潰瘍性大腸炎、同種移植の拒絶反応、関節リウマチ、乾癬、強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、および尋常性天疱瘡より選択されるところの方法である。別の好ましい治療方法は、その症状が虚血再灌流損傷(卒中より惹起される脳虚血再灌流損傷、および心筋梗塞より惹起される心臓虚血再灌流損傷を含む)より選択されるところの方法である。もう一つ別の好ましい選択方法は、その症状が多発性骨髄腫であるところの方法である。
【００８３】
一実施態様において、式(Ｉ)の化合物は、ヴァルデンストレーム・マクログロブリン血症(ＷＭ)、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫(ＤＬＢＣＬ)、慢性リンパ球性白血病(ＣＬＬ)、皮膚びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫および原発性ＣＮＳリンパ腫を含む、がんの治療において有用である。
【００８４】
加えて、本発明のキナーゼ阻害剤は、プロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２(ＰＧＨＳ−２)(また、シクロオキシゲナーゼ−２(ＣＯＸ−２)とも称される)、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＩＬ−１８、ケモカインなどの誘発性プロ炎症性タンパク質の発現を阻害する。従って、ＩＲＡＫ４関連症状はさらに、浮腫、無痛覚症、発熱と痛み、例えば、神経筋痛、頭痛、がんにより惹起される痛み、歯痛および関節痛を包含する。本発明の化合物はまた、限定されないが、ウマ感染性貧血ウイルスを含むレンチウイルス感染症；またはネコ免疫不全ウイルス、ウシ免疫不全ウイルス、およびイヌ免疫不全ウイルスを含むレトロウイルス感染症などの家畜ウイルス感染症を治療するのに用いられてもよい。
【００８５】
「ＩＲＡＫ４関連症状」または「ＩＲＡＫ４関連疾患または障害」なる語が、本明細書中で使用される場合、その各々は、詳細に繰り返されるかのように上記にて同定されるすべての症状、ならびにＩＲＡＫ４キナーゼ活性により影響を受けるあらゆる他の症状を包含するものとする。
【００８６】
本発明は、かくして、そのような症状の治療方法であって、かかる治療を必要とする対象に治療的に効果的な量の少なくとも一つの式(Ｉ)の化合物またはその塩を投与することを含む、方法を提供する。「治療的に効果的な量」は、本発明の化合物が、ＩＲＡＫ４を阻害するのに、および／または疾患を治療するのに、単独で、または組み合わせて投与される場合に、効果的である量を包含するものとする。
【００８７】
ＩＲＡＫ４キナーゼ関連症状の治療方法は、式(Ｉ)の化合物を、単独で、あるいは相互に、および／またはかかる症状を治療するのに有用である他の適切な治療剤と組み合わせて投与することを含んでもよい。従って、「治療的に効果的な量」は、ＩＲＡＫ４を阻害するのに、および／またはＩＲＡＫ４と関連付けられる疾患を治療するのに効果的である、特許請求の範囲に係る化合物の組み合わせの量を包含するものとする。
【００８８】
かかる他の治療剤の例として、コルチコステロイド、ロリプラム、カルホスチン、サイトカイン抑制性抗炎症薬(ＣＳＡＩＤ)、インターロイキン−１０、グルココルチコイド、サリチラート、酸化窒素、および他の免疫抑制剤；デオキシスペルグアリン(ＤＳＧ)などの核転座阻害剤；イブプロフェン、セレコキシブおよびロフェコキシブなどの非ステロイド系抗炎症剤(ＮＳＡＩＤ)；プレドニゾンまたはデキサメタゾンなどのステロイド；アバカビルなどの抗ウイルス剤；メトトレキサート、レフルノミド、ＦＫ５０６(タクロリムス、ＰＲＯＧＲＡＦ(登録商標))などの抗増殖剤；ヒドロキシクロロキンなどの抗マラリア剤；アザチプリンおよびシクロホスファミドなどの細胞傷害性薬；ＴＮＦ−α阻害剤、例えば、テニダップ、抗ＴＮＦ抗体または可溶性ＴＮＦ受容体、およびラパマイシン(シロリムスまたはＲＡＰＡＭＵＮＥ(登録商標))またはその誘導体が挙げられる。
【００８９】
本発明の化合物と組み合わせて利用される場合に、上記される他の治療剤は、例えば、the Physicians’Desk Reference(PDR)に示されるそれらの量で使用されてもよく、あるいは当業者により決定されてもよい。本発明の方法において、そのような他の治療剤は、本発明の化合物を投与する前に、同時に、または後に投与されてもよい。本発明は、上記されるように、ＴＬＲおよびＩＬ−１ファミリー受容体関連疾患を含む、ＩＲＡＫ４キナーゼ関連症状の治療能を有する医薬組成物も提供する。
【００９０】
本発明の組成物は、上記されるような他の治療剤を含有してもよく、例えば、製剤処方の分野にて周知の方法などの技法に従って、慣用的な固体または液体ベヒクルまたは希釈剤、ならびに望ましい投与様式に適する型の医薬添加剤(例えば、賦形剤、結合剤、保存剤、安定化剤、フレーバー等)を利用することにより処方されてもよい。
【００９１】
従って、本発明は、１または複数の式(Ｉ)の化合物と、医薬的に許容される担体とを含む組成物を提供する。
【００９２】
「医薬的に許容される担体」は、生物学的活性剤を動物に、特に哺乳類に送達するのにその分野において一般に許容される媒体をいう。医薬的に許容される担体は、当業者の管理する権限内にある多くの要因に依って処方される。これらの要因は、限定されるものではないが、処方される活性剤の型および特性；活性剤を含有する組成物が投与される予定の対象；その組成物の意図する投与経路；および標的とされる治療指標を包含する。医薬的に許容される担体は、水性および非水性の両方の液体媒体を、ならびに種々の固体および半固体の剤形を包含する。そのような担体は、活性剤の他に多くの異なる成分および添加剤を含むことができ、かかる付加的な成分は、種々の理由で、例えば、当業者に周知の活性剤の安定化、結合剤等の理由で製剤中に含まれる。適切な医薬的に許容される担体、およびそれを選択する際の要因は、例えば、その出典明示により本明細書の一部とされる、Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th Edition(1985)などの容易に入手できる様々な供給源に記載されており、それで理解される。
【００９３】
式(Ｉ)で示される化合物は、治療されるべき症状に適するいずれかの手段により投与することができ、それは部位特異的治療の必要性または送達されるべき式(Ｉ)の化合物の量に依存しうる。
【００９４】
式(Ｉ)の化合物と、１または複数の毒性のない医薬的に許容される担体および／または希釈剤および／またはアジュバント(本明細書において包括的に「担体」材料と称される)、また必要であれば、他の活性成分を含む、一連の医薬組成物も本発明に含まれる。式(Ｉ)の化合物は、いずれか適切な経路により、好ましくはそのような経路に適応する医薬組成物の形態で、そして意図する治療に効果的な用量にて投与されてもよい。本発明の化合物および組成物は、例えば、経口的、経粘膜的、あるいは動脈内的、静脈内的、腹腔内的、皮下的、筋肉内的、および胸骨内的を含む非経口的に、医薬的に許容される慣用的な担体、アジュバント、およびビヒクルを含有する投与単位製剤にて投与されてもよい。例えば、医薬組成物は、マンニトールまたはラクトースと、微結晶性セルロースとの混合物を含有してもよい。該混合物は、滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、およびクロスポビドン等の崩壊剤などの添加成分を含有してもよい。担体混合物は、ゼラチンカプセルに充填されてもよく、あるいは錠剤として圧縮されてもよい。医薬組成物は、例えば、経口剤形として、または点滴として投与されてもよい。
【００９５】
経口投与の場合、医薬組成物は、例えば、錠剤、カプセル、液体カプセル、懸濁液または液体の形態であってもよい。医薬組成物は、好ましくは、活性成分を特定量で含有する投与単位の形態にて製造される。例えば、活性成分を、約０.１ないし１０００ｍｇ、好ましくは約０.２５ないし２５０ｍｇ、より好ましくは約０.５ないし１００ｍｇの範囲にある量で含む錠剤またはカプセルとして提供されてもよい。ヒトまたは他の哺乳類に適する一日用量は、患者の条件および他の要因に応じて大きく変化してもよいが、慣用的方法を用いて決定され得る。
【００９６】
例えば、本明細書で検討される医薬組成物はいずれも、許容し得る、かつ適切ないずれかの経口製剤を介して経口的に送達され得る。経口製剤の例として、限定されないが、例えば、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性および油性懸濁液、分散性粉末または顆粒、エマルジョン、ハードおよびソフトカプセル、液体カプセル、シロップ、およびエリキシルが挙げられる。経口投与用の医薬組成物は、経口投与を意図とする医薬組成物の製造のための分野にて公知のいずれかの方法に従って調製され得る。薬学的に受け入れられる製剤を提供するために、本発明に係る医薬組成物は、甘味剤、フレーバー剤、着色剤、鎮痛剤、酸化防止剤、および保存剤より選択される、少なくとも１つの試薬を含有し得る。
【００９７】
錠剤は、例えば、式(Ｉ)で示される少なくとも１つの化合物を、錠剤の製造に適する少なくとも１つの非毒性の医薬的に許容される賦形剤と混合することにより製造され得る。賦形剤の例として、以下に限定されないが、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムおよびリン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤；例えば、微結晶セルロース、ナトリウムクロスカルメロース、トウモロコシ澱粉およびアルギン酸などの整粒および崩壊剤；例えば、澱粉、ゼラチン、ポリビニルピロリドンおよびアカシアなどの結合剤；ならびに、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸およびタルクなどの滑沢剤が挙げられる。加えて、錠剤は、被覆されていなくてもよく、あるいは不快な味の薬物の嫌な味をマスキングするために、または消化管での活性成分の崩壊および吸収を遅らせて、活性成分の作用を長期間にわたって持続させるために既知の技法により被覆されてもよい。水可溶性味マスキング材料の例として、以下に限定されないが、ヒドロキシプロピル−メチルセルロースおよびヒドロキシプロピル−セルロースが挙げられる。時間遅延材料の例として、限定されないが、エチルセルロースおよび酢酸酪酸セルロースが挙げられる。
【００９８】
ハードゼラチンカプセルは、例えば、式(Ｉ)の少なくとも１つの化合物を、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、およびカオリンなどの少なくとも１つの不活性固形希釈剤と混合することにより製造され得る。
【００９９】
ソフトゼラチンカプセルは、例えば、式(Ｉ)の少なくとも１つの化合物を、例えば、ポリエチレングリコールなどの少なくとも１つの水可溶性担体；および、例えば、落花生油、流動パラフィンおよびオリーブ油などの少なくとも１つの油性媒体と混合することにより製造され得る。
【０１００】
水性懸濁液は、例えば、式(Ｉ)の少なくとも１つの化合物を、少なくとも１つの水性懸濁液の製造に適する少なくとも１つの賦形剤と混合することにより製造され得る。水性懸濁液の製造に適する賦形剤の例として、以下に限定されないが、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、ポリビニルピロリドン、トラガカントガムおよびアカシアガムなどの沈殿防止剤；例えば、天然に存在するホスファチド、例えば、レシチンなどの分散剤または湿潤剤；例えば、ポリオキシエチレンステアラートなどの酸化アルキレンと脂肪酸との縮合生成物；例えば、ヘプタデカエチレン−オキシセタノールなどの酸化エチレンと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物；例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレアートなどの酸化エチレンと、脂肪酸とヘキシトールとから得られる部分エステルとの縮合生成物；および、例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレアートなどの、酸化エチレンと、脂肪酸とヘキシトール無水物とから得られる部分エステルとの縮合生成物が挙げられる。水性懸濁液はまた、少なくとも１つの保存剤、例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルおよびｎ−プロピル；少なくとも１つの着色剤；少なくとも１つのフレーバー剤；および／または少なくとも１つの甘味剤(これに限定されないが、例えば、シュークロース、サッカリンおよびアスパルタームを含む)を含有しうる。
【０１０１】
油性懸濁液は、例えば、式(Ｉ)の少なくとも１つの化合物を、例えば、落花生油、オリーブ油、ゴマ油およびヤシ油などの植物油か、あるいは、例えば、流動パラフィンなどの鉱油のいずれかに懸濁させることにより調製され得る。油性懸濁液は、例えば、蜜ロウ、硬質パラフィンおよびセチルアルコールなどの少なくとも１つの増粘剤も含有し得る。口当たりのよい油性懸濁液を得るために、上記の甘味剤の少なくとも１つ、および／または少なくとも１つのフレーバー剤を油性懸濁液に添加することができる。油性懸濁液は、以下に限定されないが、例えば、ブチル化ヒドロキシアニソールおよびアルファ−トコフェロールなどの酸化防止剤を包含する、少なくとも１つの保存剤をさらに含有し得る。
【０１０２】
分散性粉末および顆粒は、例えば、式(Ｉ)の少なくとも１つの化合物を、少なくとも１つの分散剤および／または湿潤剤；少なくとも１つの沈殿防止剤；および／または少なくとも１つの保存剤と混合することにより製造され得る。適切な分散剤、湿潤剤および沈殿防止剤は、上記されるとおりである。典型的な保存剤は、以下に限定されないが、例えば、酸化防止剤、例えば、アスコルビン酸を包含する。加えて、分散性粉末および顆粒はまた、以下に限定されないが、例えば、甘味剤、フレーバー剤および着色剤を含む、少なくとも１つの賦形剤を含有し得る。
【０１０３】
式(Ｉ)のその少なくとも１つの化合物のエマルジョンは、例えば、水中油型エマルジョンとして調製され得る。式(Ｉ)の化合物を含むエマルジョンの油相は、既知の方式にて既知の成分より構成されてもよい。油相は、以下に限定されないが、例えば、オリーブ油および落花生油などの植物油；例えば、流動パラフィンなどの鉱油；およびその混合物によって提供され得る。相は乳化剤だけを含むものであってもよいが、少なくとも１つの乳化剤と脂肪または油との混合物、あるいは脂肪と油の両方の混合物を含んでもよい。適切な乳化剤は、以下に限定されないが、例えば、天然に存在するリン脂質、例えば、大豆レシチン；例えば、ソルビタンモノオレアートなどの、脂肪酸とヘキシトール無水物とから誘導されるエステルまたは部分エステル；および、例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレアートなどの酸化エチレンとの部分エステルの縮合生成物を包含する。好ましくは、親水性乳化剤が安定化剤として作用する親油性乳化剤と一緒に含まれる。油および脂肪の両方を含むことも好ましい。全体として、乳化剤を、安定化剤と共に、または安定化剤無しで、いわゆる乳化ワックスを混合して作り、該ワックスを油および脂肪と共にクリーム製剤の油性分散相を形成させて、いわゆる乳化軟膏基剤を作る。エマルジョンは、乳化剤、フレーバー剤、保存剤および／または酸化防止剤も含有し得る。本発明の製剤に用いるのに適する乳化剤およびエマルジョン安定化剤は、ツィーン(Tween)６０、スパン(Span)８０、セトステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、グリセリルモノステアラート、ラウリル硫酸ナトリウム、グリセリルジステアラートを、単独で、またはワックスと、あるいは当該分野で周知の他の材料と一緒に含むものを包含する。
【０１０４】
式(Ｉ)の化合物は、例えば、いずれかの医薬的に許容され、かつ適切な注射可能な形態を介して、静脈内に、皮下内に、および／または筋肉内に送達され得る。注射可能な形態の例として、以下に限定されないが、例えば、水、リンガー溶液、および塩化ナトリウム等張液などの許容されるビヒクルおよび溶媒を含む滅菌性水溶液；滅菌性水中油型マイクロエマルジョン；および水性または油性懸濁液が挙げられる。
【０１０５】
非経口投与用の製剤は、水性または非水性等張滅菌注射溶液または懸濁液の形態であってもよい。これらの溶液および懸濁液は、経口投与用の製剤における使用について記載される１または複数の担体または希釈剤を用いて、あるいは他の適切な分散剤または湿潤剤および沈殿防止剤を用いることにより、滅菌粉末または顆粒から製造され得る。該化合物は、水、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、エタノール、トウモロコシ油、綿実油、落花生油、ゴマ油、ベンジルアルコール、塩化ナトリウム、トラガカントガムおよび／または種々の緩衝剤に溶解させてもよい。他のアジュバントおよび投与方法は、製薬分野において周知であり、広く知られている。活性成分は、適切な担体(例えば、生理食塩水、デキストロースまたは水)あるいはシクロデキストリン(すなわち、カプチソール)、可溶化共溶媒(すなわち、プロピレングリコール)または可溶化ミセル(すなわち、ツィーン８０)との組成物として注射により投与されてもよい。
【０１０６】
滅菌注射可能な製剤は、例えば、１,３−ブタンジオール中の溶液として、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の滅菌注射可能な溶液または懸濁液であってもよい。許容され得るビヒクルおよび溶媒の内で、利用されてもよいビヒクルおよび溶媒は、水、リンガー溶液、および塩化ナトリウム等張溶液である。加えて、滅菌された固定油は、溶媒または懸濁化媒体として利用されるのが慣例である。このために、合成モノ−またはジグリセリドを含む、いずれの無菌性の固定油が利用されてもよい。加えて、オレイン酸などの脂肪酸が、注射可能な製剤において有用であることが分かる。
【０１０７】
滅菌された注射可能な水中油型マイクロエマルジョンは、例えば、１)式(Ｉ)の少なくとも１つの化合物を、例えば、大豆油とレシチンの混合物などの油相に溶かし；２)式(Ｉ)の化合物を含有する油相を水およびグリセロールの混合物と組み合わせ；および３)その組み合わせを処理してマイクロエマルジョンを形成する、ことにより製造され得る。
【０１０８】
滅菌された水性または油性懸濁液は、当分野にて公知の方法に従って製造され得る。例えば、滅菌された水溶液または懸濁液は、例えば、１,３−ブタンジオールなどの毒性がない非経口的に許容される希釈体または溶媒を用いて製造され得る；ならびに、滅菌された油性懸濁液は、例えば、滅菌された固定油、例えば合成モノ−またはジグリセリドなどの滅菌された毒性がない許容される溶媒または懸濁化媒体；および、例えば、オレイン酸などの脂肪酸を用いて製造され得る。
【０１０９】
本発明の医薬組成物に使用されてもよい、医薬的に許容される担体、アジュバントおよびビヒクルは、以下に限定されないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ｄ−アルファ−トコフェロールポリエチレングリコール１０００スクシナートなどの自己乳化ドラッグデリバリーシステム(ＳＥＤＤＳ)、ツィーンなどの医薬剤形に使用される界面活性剤、CREMOPHOR界面活性剤(ＢＡＳＦ)などのポリエトキシル化ヒマシ油、または他の類似するポリマーデリバリーマトリックス、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質、バッファー物質、例えば、ホスファート、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、植物性飽和脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質、例えば硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリラート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂を包含する。アルファ−、ベータ−、およびガンマ−シクロデキストリンなどのシクロデキストリン、あるいは２−または３−ヒドロキシプロピル−シクロデキストリンを含む、ヒドロキシアルキルシクロデキストリン、または他の可溶化誘導体などの化学的に修飾された誘導体もまた、本明細書に記載の式で示される化合物の送達を強化するのに有利に使用されるかもしれない。
【０１１０】
本発明の医薬的に活性な化合物は、薬剤学における慣用的方法に従って、処方され、ヒトおよび他の哺乳類を含む患者に投与される薬剤を生成することができる。その医薬組成物は滅菌処理などの慣用的な製薬操作に供されてもよく、および／または保存剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、緩衝剤等などの慣用的なアジュバントを含有してもよい。錠剤およびピルは付加的に腸溶性被覆剤を用いて調製され得る。そのような組成物は、湿潤剤、甘味剤、フレーバー剤および芳香剤などのアジュバントを含んでもよい。
【０１１１】
本発明の化合物および／または組成物で病態を治療するために投与される化合物の量、および投薬計画は、対象の年齢、体重、性別、および病状、疾患の型、疾患の重篤度、投与経路および投与頻度、利用される個々の化合物を含む、種々の因子に依存する。従って、投薬計画は大きく変化してもよいが、標準的方法を用いて日常的に決定され得る。約０.００１ないし１００ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは約０.００２５〜約５０ｍｇ／体重ｋｇ、最も好ましくは約０.００５〜１０ｍｇ／体重ｋｇの一日用量が適切であるかもしれない。その一日用量は、一日に１ないし４回の投与で投与され得る。他の投薬計画として、１週に付き１回の投与、２日毎に１回の投与が挙げられる。
【０１１２】
治療を目的とする場合、本発明の活性な化合物は、示唆される投与経路に適する１または複数のアジュバントと組み合わせるのが一般的である。経口投与される場合、該化合物は、ラクトース、シュークロース、澱粉粉末、アルカン酸のセルロースエステル、セルロースアルキルエステル、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リン酸および硫酸のナトリウムおよびカルシウム塩、ゼラチン、アカシアガム、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドンおよび／またはポリビニルアルコールと混合され、次に都合のよい投与用に錠剤化またはカプセル化されてもよい。かかるカプセルまたは錠剤は、放出制御製剤として提供されてもよく、活性な化合物をヒドロキシプロピルメチルセルロースに分散させて含んでもよい。
【０１１３】
本発明の医薬組成物は、式(Ｉ)の少なくとも１つの化合物を含み、所望により、医薬的に許容される担体、アジュバントおよびビヒクルから選択される添加剤を含んでもよい。本発明の別の組成物は、本明細書に記載の式(Ｉ)の化合物、またはそのプロドラッグ、および医薬的に許容される担体、アジュバントまたはビヒクルを含む。
【０１１４】
本発明は製造品も包含する。本明細書中で使用される場合、製造品とは、例えば、限定されないが、キットおよびパッケージを包含するものとする。本発明の製造品は、(ａ)第１の容器；(ｂ)第１の容器内に入れられた医薬組成物(ここで、該組成物は、本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩の形態を含む第１の治療薬を含む)；および(ｃ)該医薬組成物が心血管障害、利尿、および／またはナトリウム利尿の治療に用いることができる旨を記載したパッケージインサートを含む。もう一つ別の実施態様において、該パッケージインサートには、該医薬組成物が第２の治療薬と組み合わせて(上記されるとおり)、心血管障害、利尿、および／またはナトリウム利尿の治療に用いることができる旨が記載される。該製造品はさらに、(ｄ)第２の容器(ここで、構成要素(ａ)および(ｂ)は第２の容器内に位置し、構成要素(ｃ)は第２の容器内または容器外に位置する)を含み得る。第１および第２の容器内に位置するとは、各容器が該アイテムをその領域内に保持することを意味する。
【０１１５】
第１の容器は、医薬組成物を保持するのに用いられる容器である。この第１の容器は、製造、貯蔵、運搬、および／または個別／大量販売するためのものである。第１の容器は、ボトル、ジャー、バイアル、フラスコ、シリンジ、チューブ(例えば、クリーム製剤用のもの)、または医薬製剤の製造、保持、貯蔵、または流通に用いられる任意の別の容器に及ぶものとする。
【０１１６】
第２の容器は、第１の容器を、そして所望によりパッケージインサートを保持するために用いられるものである。第２の容器の例は、例えば、限定されないが、箱(例えば、ダンボールまたはプラスチック)、木箱、紙箱(carton)、袋(例えば、紙またはプラスチックの袋)、ポーチ、および布袋(sack)である。パッケージインサートは、テープ、接着剤、ホッチキスまたはその他の取り付ける方法により第１の容器の外側に物理的に取り付けるか、あるいは、第１の容器と物理的に取り付ける手段を用いることなく第２の容器の内側に配置することもできる。あるいは、パッケージインサートは、第２の容器の外に配置される。第２の容器の外に配置される場合、パッケージインサートは、テープ、接着剤、ホッチキスまたは他の付着方法により物理的に取り付けることが好ましい。あるいはまた、物理的に取り付けることなく第２の容器に近接させることも、またはその外側に隣接させることもできる。
【０１１７】
パッケージインサートは、第１の容器内に配置される医薬組成物に関連する情報が記載されたラベル、タグ、マーカー等である。該情報は、通常、該製造品が販売される地域を管理する規制当局(例えば、アメリカ食品医薬品局)により決定されるであろう。好ましくは、パッケージインサートは該医薬組成物が認可されたことについてその表示を具体的に記載したものである。パッケージインサートは、その中またはその上に含まれる情報を人々が読み取ることができるいずれの材料で作られてもよい。好ましくは、パッケージインサートは、その上に望ましい情報が形成される(例えば、印刷または貼り付ける)印刷可能な材料(例えば、紙、プラスチック、ダンボール、ホイール、接着剤付きの紙またはプラスチック)である。
【０１１８】
製造方法
本発明の化合物は、有機合成の分野の当業者に周知の多くの方法にて調製され得る。本発明の化合物は、下記の方法を、合成有機化学の分野において公知の合成方法と一緒に用いて、あるいは当業者がそれに適宜変更を加えることにより合成され得る。好ましい方法は、それに限定されるものではないが、下記の方法を包含する。
【０１１９】
このセクションに記載される反応および技法は、利用される試剤および材料に適し、変換がなされるのに適切な溶媒または混合溶媒中で行われる。また、下記の合成方法の記載において、溶媒、反応環境、反応温度、実験の期間および後処理操作の選択を含め、提案されるすべての反応条件は、当業者であれば容易に理解し得る、その反応に標準的な条件であるように選択されると認識すべきである。有機合成の分野の当業者であれば分子の種々の部分に存在する官能基が提案される試薬および反応と整合性がなければならないことを理解する。反応条件と適合しうる置換基に対するそのような制限は、当業者にとって自明であり、制限される場合には別の方法を用いなければならない。これにより、本発明の所望とする化合物を得るために、合成工程の順序を修飾する判断、あるいは一の特定のプロセススキームを他のスキームに優先して選択する判断が時に必要とされるであろう。この分野における合成経路を計画する際にもう一つ別の大きな要因が、本発明に記載の化合物に存在する反応性官能基を保護するのに使用される保護基の賢明な選別にあることも理解されよう。熟練した当業者に多くの選択肢を記載する信頼すべき説明書は、Greenee etal.(Protective Groups in Organic Synthesis, Third Edition, Wiley and Sons (1999))である。
【０１２０】
式(Ｉ)の化合物を、以下のスキームに概説した方法に従って製造できる。スキーム１において、チエノピリジン中間体１.２を、ＵＳ２０１０／２９８３３４に記述した通りに、オキシム１.１から製造できる。メタノールなどの溶媒中において様々なアルコキシド(例えば、ナトリウムメトキシド)を用いて、中間体１.２を処理することにより、対応するアルコキシ中間体１.３(例えば、Ｒ３＝ＯＣＨ３)を得ることができる。１.３の３位にハロ基(例えば、ブロモ)を導入することにより、１.４を得る(これは、Ｎ−ブロモスクシンイミド／溶媒(例えば、ＤＭＦ)を用いる処理により達成され得る)。ジオキサンなどの溶媒中でＲｏｃｋ Ｐｈｏｓ ＰＤ Ｇ３および炭酸セシウムの存在下において、水を用いる１.４の直接的な処理により、１.４のブロモ基をヒドロキシル基で置き換えて、１.５を得ることができる。あるいは、対応するボロン酸１.６を介して、１.４から２工程で１.５を製造できる。ジオキサンなどの溶媒中でＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)−ＣＨ２Ｃｌ２付加物および酢酸カリウムの存在下において、１.４を、ビス−ピナコレートジボロンにより処理することにより１.６を得て、これを塩基(例えば、ナトリウム)または炭酸カリウム/溶媒(例えば、ＴＨＦおよび水)の存在下において過酸化水素による処理を経て１.５に変換できる。
【０１２１】
ヒドロキシ化合物１.５と、式Ｉの化合物のＲ基を含む中間体とのカップリングは、ＲＸ[式中、Ｘは、トシレート、メシレートまたはハライド(例えば、クロリドまたはブロミド)である]での求核置換反応により実施され得る。あるいは、１.５を、ミツノブ反応により、アルコール(ＲＯＨ)を用いて直接カップリングして、１.７を得ることができる。１.７を、溶媒中(例えば、ＤＭＳＯ)において炭酸カリウムおよび過酸化水素で処理して、式Ｉの化合物を得る。
【０１２２】
スキーム１
【化１７】
2020519596.tif 000019
式Ｉのある特定の化合物を、スキーム２に概説した通りに製造できる。化合物２.１の２位のクロロ基を、塩基(例えば、ＬｉＨＭＤＳ)/溶媒(例えばＴＨＦ)の存在下において、メルカプト酢酸のエステルで置換して、中間体２.２を得る。２.２から２.３への変換は、塩基(例えば、ＤＢＵ)/トルエンを用いる処理により達成され得る。第一級アミド２.４を得るためにニトリル２.３の加水分解を、酸(例えば、濃硫酸)で処理することにより達成することができる。化合物２.４を、カリウム t-ブトキシド/ＤＭＳＯを用いて約８０℃で処理することにより、２.５に変換し得る。スキーム１に記述したように、２.５を、Ｒ１ＯＨまたはＲ１Ｘとカップリングすることにより、式２.６の化合物を提供できる。化合物２.６を、クロロ基の求核置換により２.７に変換して、一般式Ｉの化合物を得ることができる。
【０１２３】
スキーム２
【化１８】
2020519596.tif 000020
式Ｉのある特定の化合物を、スキーム３に概説した通りに製造できる。塩基(例えば、炭酸カリウム)/溶媒(例えば、ＤＭＦ)の存在下において、チオール３.１を、ブロモアセトアルデヒドジエチルアセタールを用いたアルキル化により３.２を得て、これを、クロロベンゼンなどの溶媒中で、ポリリン酸の存在下において加熱することにより、ベンゾチオフェン３.３に変換できる。この反応により、３.３および対応する位置異性体生成物の混合物が生成され得る。３.４を生成するために３.３のブロモ基のシアノへの変換は、溶媒(例えば、ＤＭＦ)中で、パラジウムテトラキスの存在下において、シアン化亜鉛を用いる処理により達成され得る。ニトリル３.４を、スキームＩについて記述した手順を介して式Ｉの対応する化合物に変換できる。
【０１２４】
スキーム３
【化１９】
2020519596.tif 000021
【実施例】
【０１２５】
実施例
本発明の化合物、本発明の化合物の調製に用いられる中間体は、以下の実施例に示される操作および関連する操作を用いて調製され得る。これらの実施例に用いられる方法および条件、ならびにこれらの実施例において調製される実際の化合物は、限定的であることを意図とするものではなく、本発明の化合物がいかにして調製され得るかを説明することを意図するものである。これらの実施例において使用される出発材料および試薬は、本明細書に記載の操作により調製しない場合、一般的には、商業的に入手可能であるか、または化学文献に報告されているかのいずれかであり、あるいは化学文献に記載の操作を用いることにより調製されてもよい。発明は、以下の実施例にてさらに具体的に定められる。実施例は単に例示として付与されると理解すべきである。上記の検討および実施例の記載から、当業者は、発明の精神および範囲を逸脱することなく、その本質的特性を解明することができ、発明が様々な使用および条件に適応するように種々の変化および修飾を行うことができる。結果として、本発明は、本明細書にて下記に示される例示としての実施例により限定されるものではなく、むしろ添付される特許請求の範囲により規定されるものとする。
【０１２６】
所定の実施例において、「乾燥させて、濃縮した」なる語は、一般に、有機溶媒の溶液を、硫酸ナトリウムまたは硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過を行い、(一般に、材料の安定性に適する減圧下および温度で)濾液から溶媒を除去することをいう。カラムクロマトグラフィーは、予め充填されたシリカゲルカートリッジで、イスコ(Isco)中圧クロマトグラフィー装置(Teledyne Corporation)を用い、表示の溶媒または溶媒混合液により溶出して行われた。分取高速液体クロマトグラフィー(ＨＰＬＣ)は、分離される材料の量に適切な大きさの逆相カラム(Waters Sunfire C18、Waters Xbridge C18、PHENOMENEX (登録商標) Axia C18、YMC S5 ODS等)を用いて、一般には、水中(さらに０.０５％または０.１％トリフルオロ酢酸あるいは１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む)のメタノールまたはアセトニトリル濃度が増加するグラジエントにて、カラム容量およびカラム分離を成し遂げるのに適した溶出速度で溶出して行われた。化合物名は、ChemDraw Ultra バージョン９.０.５(CambridgeSoft)を用いて決定された。以下の略語を用いる：
2020519596.tif 000022
【０１２７】
ＨＰＬＣおよびＬＣ／ＭＳ方法：
方法Ａ：Waters Acquity UPLC BEH C18 column(２.１ｘ５０ｍｍ)、１分かけて０.８ｍＬ／ｍｉｎにて、５：９５ＭｅＣＮ−水(各々１０ｍＭ 酢酸アンモニウムを含む)〜９５：５ＭｅＣＮ−水(各々１０ｍＭ 酢酸アンモニウムを含む)のグラジエント、次いで０.５分で保持；５０℃のカラム温度。
方法Ｂ：Waters Acquity UPLC BEH C18 column(２.１ｘ５０ｍｍ)、１分かけて０.８ｍＬ／ｍｉｎにて、２：９８：０.１ＭｅＣＮ−水−ＴＦＡ〜９８：２：０.１ＭｅＣＮ−水−ＴＦＡのグラジエント、次いで０.５分で保持；５０℃のカラム温度。
方法Ｃ：Waters Acquity UPLC BEH C18 column(２.１ｘ５０ｍｍ)、３分間かけて１ｍＬ／ｍｉｎにて、５：９５：０.１ＭｅＣＮ−水−ＴＦＡ〜９５：５：０.１ＭｅＣＮ−水−ＴＦＡのグラジエント、次いで０.７５分保持；５０℃のカラム温度。
【０１２８】
実施例１
３−(((２Ｓ,３Ｓ)−３−エチル−４,４−ジフルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド
【化２０】
2020519596.tif 000023
中間体１Ａ：５−クロロチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル
【化２１】
2020519596.tif 000024
１−(チオフェン−３−イル)エタノン(２５ｇ，１９８ｍｍｏｌ)／エタノール(４５０ｍＬ)および水(１５０ｍＬ)の溶液に、ヒドロキシルアミン塩酸塩(２７.５ｇ，３９６ｍｍｏｌ)を加えて、次いで酢酸ナトリウム(３２.５ｇ，３９６ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を、穏やかに４時還流して、室温まで昇温させた。次いで、氷冷水(２００ｍＬ)を加えて、混合物を４℃で終夜貯蔵した。沈殿物を、濾取して、(Ｚ)−１−(チオフェン−３−イル)エタノンオキシム(２６.５ｇ，９５％収率)を白色固体として得た。
【０１２９】
ＰＯＣｌ３(４６.５ｍＬ，０.４９９ｍｏｌ)を、(Ｚ)−１−(チオフェン−３−イル)エタノンオキシム(７.０６ｇ，０.０５ｍｏｌ)／エーテル(０.３Ｌ)の攪拌溶液に、７〜１０℃で滴加した(PCT Int. Appl. 2010 13565)。混合物を、７〜１０℃で２時間攪拌して、次いでＤＭＦ(１２ｍＬ，０.１５５ｍｏｌ)を滴加した。反応混合物を、加熱して、大部分のエーテルを留去して、内部温度を１１０℃まで徐々に上げた。混合物を、１１０℃で更に１時間加熱した。ヒドロキシルアミン塩酸塩(６.９５ｇ，０.１００ｍｏｌ)を、次いで約１１０℃で少量ずつ慎重に加えて、混合物を、１１０℃で更に２０分間攪拌した。混合物を、室温まで冷却した。
【０１３０】
混合物を、氷および水の攪拌混合物中にゆっくりと注ぎ入れた。沈殿した褐色固体を、濾過により単離した。反応を繰り返して、(Ｚ)−１−(チオフェン−３−イル)エタノンオキシム(２７ｇ)の全量を使い、５−クロロチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル(１３.５ｇ)を得た。
【０１３１】
中間体１Ｂ：５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル
【化２２】
2020519596.tif 000025
ＭｅＯＨ(３５ｍＬ)中で５−クロロチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル(１.７１ｇ，８.７９ｍｍｏｌ)およびナトリウムメトキシド(ＭｅＯＨ中で２５％)(２.１３０ｍＬ，９.３１ｍｍｏｌ)の懸濁液を、５５℃で５.５時間攪拌した。混合物を、濃縮して、ＥｔＯＡｃで希釈して、水(２Ｘ)で洗い、乾燥させて(ＭｇＳＯ４)、濃縮した。粗生成物を、ヘキサンを用いてトリチュレートして、５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル(１.５６ｇ，９３％収率)を褐色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ) δ ８.３５(ｄ，Ｊ＝０.６Ｈｚ，１Ｈ)，７.９６(ｄ，Ｊ＝５.５Ｈｚ，１Ｈ)，７.４４(ｄｄ，Ｊ＝５.５，０.６Ｈｚ，１Ｈ)，４.１３(ｓ，３Ｈ).
【０１３２】
中間体１Ｃ：３−ブロモ−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル
【化２３】
2020519596.tif 000026
ＤＭＦ(１００ｍＬ)中の５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル(３.１５ｇ，１６.５６ｍｍｏｌ)およびＮＢＳ(３.５４ｇ，１９.８７ｍｍｏｌ)の溶液を、６０℃で４時間攪拌した。混合物を、室温に冷却して、次いで水(２０ｍＬ)で冷却した。固体の沈殿した生成物を濾取して、水で洗い、ＭｅＯＨを用いてトリチュレートして、３−ブロモ−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル(３.１４ｇ，７１％収率)を白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ) δ ８.３５(ｓ，１Ｈ)，７.９５(ｓ，１Ｈ)，４.２１(ｓ，３Ｈ).
【０１３３】
中間体１Ｄ：(６−シアノ−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−３−イル)ボロン酸
【化２４】
2020519596.tif 000027
ＴＨＦ(７００ｍＬ)中の４,４,４',４',５,５,５',５'−オクタメチル−２,２'−ビ(１,３,２−ジオキサボロラン)(４９.３ｇ，１９４ｍｍｏｌ)、３−ブロモ−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル(４７.５ｇ，１７７ｍｍｏｌ)、酢酸カリウム(３４.６ｇ，３５３ｍｍｏｌ)およびＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)−ＣＨ２Ｃｌ２付加物(１１.５３ｇ，１４.１２ｍｍｏｌ)の混合物を、窒素で約１０分間パージして、６０℃で終夜攪拌した。ＬＣ／ＭＳ分析により、反応が不完全であった(約２０％出発物質が残っている)ことが判った。追加のパラジウム触媒(２ｇ)を加えて、反応混合物を７０℃で(浴温度)５時間攪拌した。
【０１３４】
混合物を、１５℃に冷却して、Ｎ−アセチル−Ｌ−システイン(約３００ｍＬ)水溶液(おおよそ１０％)を加えた。混合物を、室温で１時間攪拌した。この時点で沈殿した褐色固体を、濾過により単離して、粗製(６−シアノ−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−３−イル)ボロン酸(４０ｇ，９７％粗製収率)(褐色固体)を得た。ＬＣ／ＭＳ(方法Ａ) ｔＲ ０.７分、ｍ／ｚ ２３５[Ｍ＋Ｈ]＋.
【０１３５】
中間体１Ｅ：３−ヒドロキシ−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル
【化２５】
2020519596.tif 000028
炭酸ナトリウム(３.１２ｇ，２９.５ｍｍｏｌ)／水(２００ｍＬ)の溶液に、(６−シアノ−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−３−イル)ボロン酸(２.３ｇ，９.８３ｍｍｏｌ)／ＴＨＦ(５００ｍＬ)溶液に加えた。得られる透明な反応混合物に、３５％ 過酸化水素(２.８７ｇ，２９.５ｍｍｏｌ)を、室温で攪拌しながら加えた。反応混合物を、分子イオンを用いるＬＣ／ＭＳにより、出発物質および目的の生成物をモニターした(出発物質および目的の生成物は、２つの別々のＬＣ／ＭＳシステムにおいて同じ保持時間を示した)。
【０１３６】
室温でおよそ１時間攪拌した後に、反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈した。有機層を、半飽和ナトリウムチオ硫酸(２Ｘ)およびブライン(１Ｘ)で順に洗った。全ての水層を、ＥｔＯＡｃで逆抽出した。有機相を合わせて、乾燥させて(ＭｇＳＯ４)、濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル／ＤＣＭ：ＭｅＯＨ １００：０〜９０：１０のグラジエント)にかけて、３−ヒドロキシ−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル(１.５５ｇ，７６％収率)を得た。ＬＣ／ＭＳ(方法Ａ) ｔＲ ０.７分，ｍ／ｚ ２０７[Ｍ＋Ｈ]＋.
【０１３７】
中間体１Ｆ：((２Ｓ,３Ｓ)−３−エチル−４,４−ジフルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メチル メタンスルホネート
【化２６】
2020519596.tif 000029
塩化メタンスルホニル(５２.６μＬ，０.６７５ｍｍｏｌ)およびＴＥＡ(１１１μＬ，０.７９８ｍｍｏｌ)を、−１０℃で、順に、ＴＨＦ(０.１ｍＬ)およびＤＣＭ(０.３ｍＬ)中の(４Ｓ,５Ｓ)−４−エチル−３,３−ジフルオロ−５−(ヒドロキシメチル)ピロリジン−２−オン(１１０ｍｇ，０.６１４ｍｍｏｌ)(参照；ＷＯ ２０１５／１５０９９５)の攪拌した溶液に加えて、５分間攪拌して、０℃に温めた。反応混合物を、塩化メチレンで希釈して、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で洗った。有機相を、乾燥させて(ＭｇＳＯ４)、濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル／ＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨ１００：０〜９０：１０のグラジエント，すぐに溶出する)にかけて、((２Ｓ,３Ｓ)−３−エチル−４,４−ジフルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メチルメタンスルホネート(１５０ｍｇ，９５％収率)を無色のガムとして得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ) δ ７.０８(ｂｒ  ｓ，１Ｈ)，４.４９−４.３５(ｍ，１Ｈ)，４.１７−３.９２(ｍ，２Ｈ)，３.０９(ｓ，３Ｈ)，２.８５−２.５５(ｍ，１Ｈ)，１.９０−１.７４(ｍ，１Ｈ)，１.６３−１.５１(ｍ，１Ｈ)，１.１３(ｔ，Ｊ＝７.４Ｈｚ，３Ｈ).
【０１３８】
中間体１Ｇ：３−(((２Ｓ,３Ｓ)−３−エチル−４,４−ジフルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル(１Ｇ)
【化２７】
2020519596.tif 000030
((２Ｓ,３Ｓ)−３−エチル−４,４−ジフルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メチル メタンスルホネート(１５０ｍｇ，０.５８３ｍｍｏｌ)、３−ヒドロキシ−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル(１１０ｍｇ，０.５３３ｍｍｏｌ)の混合物を、ＴＨＦ(３ｍＬ)に移して、濃縮乾固させた。残留物および無水炭酸セシウム(３４８ｍｇ，１.０６７ｍｍｏｌ)を、ＤＭＦ(３ｍＬ)に移して、９０℃で１０分間加熱した。反応混合物を、ＥｔＯＡｃで希釈して、飽和炭酸水素ナトリウムで洗い、乾燥させて(ＭｇＳＯ４)、濃縮した。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル／ヘキサン−ＥｔＯＡｃ １００：０〜０：１００ グラジエント)にかけて、３−(((２Ｓ,３Ｓ)−３−エチル−４,４−ジフルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル(１７０ｍｇ，８７％収率)を白色固体として得た。ＬＣ／ＭＳ(方法Ａ) ｔＲ ０.８８分、ｍ／ｚ ３６８[Ｍ＋Ｈ]＋.
【０１３９】
実施例１：
過酸化水素(３５％，１３５ｍｇ，１.３８８ｍｍｏｌ)を、ＤＭＳＯ(３ｍＬ)中の３−(((２Ｓ,３Ｓ)−３−エチル−４,４−ジフルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル(１７０ｍｇ，０.４６３ｍｍｏｌ)および炭酸カリウム(１９２ｍｇ，１.３８８ｍｍｏｌ)の攪拌した混合物に加えて、室温で１時間攪拌した。反応混合物を、ＥｔＯＡｃで希釈して、飽和炭酸水素ナトリウムで洗い、乾燥させて(ＭｇＳＯ４)、濃縮した。粗生成物を、分取ＨＰＬＣ(ＯＤＳ ｃｏｌｕｍｎ／水−ＭｅＯＨ−ＴＦＡ９０：１０：０.０５〜１０：９０：０.０５のグラジエント)にかけて、白色固体として得た。固体物質を、ＤＣＭに溶解して、ＭｅＯＨを数滴加えて、飽和ＮａＨＣＯ３で洗った。有機層を乾燥させて(ＭｇＳＯ４)、濃縮して、生成物を得て、これをＭｅＯＨから再結晶化して、３−(((２Ｓ,３Ｓ)−３−エチル−４,４−ジフルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(８２ｍｇ，４６％収率)を、白色固体として得た(母液の濃縮により、４０ｍｇの純粋では無いバッチを得た)。ＬＣ／ＭＳ(方法Ａ) ｔＲ ０.７２分、ｍ／ｚ ３８６[Ｍ＋Ｈ]＋.１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４＋ＣＤＣｌ３) δ ８.８６(ｓ，１Ｈ)，７.０１(ｓ，１Ｈ)，４.３１(ｄｄ，Ｊ＝８.８，３.５Ｈｚ，１Ｈ)，４.２２−４.０７(ｍ，５Ｈ)，２.９２−２.５６(ｍ，１Ｈ)，１.９６−１.５１(ｍ，２Ｈ)，１.１４(ｔ，Ｊ＝７.４Ｈｚ，３Ｈ).
【０１４０】
実施例２
３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド
【化２８】
2020519596.tif 000031
中間体２Ａ：３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル
【化２９】
2020519596.tif 000032
塩化メシル(１４８μＬ，１.９０４ｍｍｏｌ)およびＴＥＡ(３１４μＬ，２.２５０ｍｍｏｌ)を、−１０℃で、順に、(３Ｓ,４Ｓ,５Ｓ)−４−エチル−３−フルオロ−５−(ヒドロキシメチル)ピロリジン−２−オン(２７９ｍｇ，１.７３１ｍｍｏｌ)／ＤＣＭ(５ｍＬ)の攪拌した溶液に加えて、５分間攪拌し、次いで０℃に昇温させた。反応混合物を、ＤＣＭで希釈して、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で洗った。有機相を、乾燥させて(ＭｇＳＯ４)、濃縮して、粗生成物を得た。
【０１４１】
粗生成物および３−ヒドロキシ−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル(３２１ｍｇ，１.５５８ｍｍｏｌ)を、ＤＭＦ(５ｍＬ)に移して、次いで炭酸セシウム(１１２８ｍｇ，３.４６ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を、６０℃で２時間攪拌した。反応混合物を、ＥｔＯＡｃで希釈して、飽和炭酸水素ナトリウムで洗い、乾燥させて(ＭｇＳＯ４)、濃縮した。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル／ヘキサン−ＥｔＯＡｃ１００：０〜０：１００グラジエント)にかけて、３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル(２００ｍｇ，３３％収率)を得た。ＬＣ／ＭＳ(方法Ｂ) ｔＲ ０.８６分，ｍ／ｚ ３５０[Ｍ＋Ｈ]＋.
【０１４２】
実施例２：３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド
過酸化水素(３５％，１６７ｍｇ，１.７１７ｍｍｏｌ)を、ＤＭＳＯ(３ｍＬ)中の３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボニトリル(２００ｍｇ，０.５７２ｍｍｏｌ)および炭酸カリウム(２３７ｍｇ，１.７１７ｍｍｏｌ)の攪拌した混合物に加えて、混合物を室温で１時間攪拌した。反応混合物を、ＥｔＯＡｃで希釈して、飽和炭酸水素ナトリウムで洗い、乾燥させて(ＭｇＳＯ４)、濃縮した。粗生成物を、分取ＨＰＬＣにより精製して(ＯＤＳ ｃｏｌｕｍｎ／水−ＭｅＯＨ−ＴＦＡ ９０：１０：０.１〜１０：９０：０.１のグラジエント)、白色固体を得た。固体物質を、ＤＣＭ＋数滴のＭｅＯＨに溶解して、飽和ＮａＨＣＯ３で洗った。有機層を、乾燥させて(ＭｇＳＯ４)、濃縮して、生成物を得て、これをＭｅＯＨでトリチュレートして、３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシチエノ[３,２−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１２５ｍｇ，５８％収率)を、白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４) δ ８.７８(ｓ，１Ｈ)，８.７３−８.７１(ｍ，１Ｈ)，７.２４(ｓ，１Ｈ)，４.８４(ｄｄ，Ｊ＝５３.１，５.６Ｈｚ，１Ｈ，水のピークとオーバーラップ)，４.５４−４.２９(ｍ，１Ｈ)，４.２３−４.１５(ｍ，５Ｈ)，２.７６−２.４９(ｍ，１Ｈ)，１.８３−１.６２(ｍ，２Ｈ)，１.１２(ｔ，Ｊ＝７.３Ｈｚ，３Ｈ).１９Ｆ ＮＭＲ(３７６ＭＨｚ，メタノール−ｄ４) δ −２００.６２(ｓ，１Ｆ)．ＬＣ／ＭＳ(方法Ｂ) ｔＲ ０.７分，ｍ／ｚ ３６８[Ｍ＋Ｈ]＋.
【０１４３】
実施例３
(Ｓ)−５−メトキシ−３−((５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[２,３−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド
【化３０】
2020519596.tif 000033
中間体３Ａ：メチル ５−クロロ−６−シアノ−２−((２−メトキシ−２−オキソエチル)チオ)ニコチネート
【化３１】
2020519596.tif 000034
メチル ２,５−ジクロロ−６−シアノニコチネート(０.４９５ｇ)を、PCT Intl Appl.,2011130342に記述したように、２,５−ジクロロニコチネートから製造した。
ＬｉＨＭＤＳ(ＴＨＦ中で１Ｍ)(１.３５ｍＬ，１.３５ｍｍｏｌ)を、０℃で、メチル ２−メルカプトアセテート(０.１２ｍＬ，１.２９ｍｍｏｌ)／ＴＨＦ(１ｍＬ)の溶液に加えて、５分間攪拌した。次いで、メチル ２,５−ジクロロ−６−シアノニコチネート(０.２９７ｇ，１.２９ｍｍｏｌ)／ＴＨＦ(５ｍＬ)の溶液を加えて、０℃で３０分間攪拌した。反応混合物を、室温まで温めた。反応を、水でクエンチした。混合物を、ＥｔＯＡｃで希釈した。有機相を、飽和ＮＨ４Ｃｌで洗い、乾燥させて(ＭｇＳＯ４)、濃縮した。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル／ヘキサン／酢酸エチル １００：０〜０：１００グラジエント)を用いて精製して、メチル ５−クロロ−６−シアノ−２−((２−メトキシ−２−オキソエチル)チオ)ニコチネート(０.２５８ｇ，６６.７％収率)を黄色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ) δ ８.３６(ｓ，１Ｈ)，４.００(ｓ，３Ｈ)，３.８８(ｓ，２Ｈ)，３.８０(ｓ，３Ｈ)．
【０１４４】
中間体３Ｂ：メチル ５−クロロ−６−シアノ−３−ヒドロキシチエノ[２,３−ｂ]ピリジン−２−カルボキシレート
【化３２】
2020519596.tif 000035
トルエン(６ｍＬ)中のメチル ５−クロロ−６−シアノ−２−((２−メトキシ−２−オキソエチル)チオ)ニコチネート(０.２５８ｇ，０.８６ｍｍｏｌ)およびＤＢＵ(０.１４２ｍＬ，０.９４ｍｍｏｌ)の溶液を、室温で終夜攪拌した。ＨＣｌ(１Ｎ)を加えて、５分間攪拌した。混合物を、ＥｔＯＡｃで抽出して、乾燥させて(ＭｇＳＯ４)、濃縮した。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィーを用いて精製して(シリカゲル／ヘキサン−酢酸エチル １００：０〜０：１００のグラジエント)、メチル ５−クロロ−６−シアノ−３−ヒドロキシチエノ[２,３−ｂ]ピリジン−２−カルボキシレート(０.１８１ｇ，７９％収率)を橙色の固体として得た。ＬＣ ＭＳ(方法Ａ) ｔＲ ０.７２，ｍ／ｚ ２６７[Ｍ−Ｈ]．１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ) δ １０.０８(ｓ，１Ｈ)，８.３５(ｓ，１Ｈ)，４.０２(ｓ，３Ｈ)．
【０１４５】
中間体３Ｃ：メチル  ６−カルバモイル−５−クロロ−３−ヒドロキシチエノ[２,３−ｂ]ピリジン−２−カルボキシレート
【化３３】
2020519596.tif 000036
メチル ５−クロロ−６−シアノ−３−ヒドロキシチエノ[２,３−ｂ]ピリジン−２−カルボキシレート(０.６０２ｇ，２.２４ｍｍｏｌ)／硫酸(３ｍＬ，５６.３ｍｍｏｌ)の溶液を、６０℃で２時間攪拌して、０℃に冷却して、次いで１Ｎ ＨＣｌを加えた。得られる沈殿固体を、濾過により集めて、水で洗い、メチル ６−カルバモイル−５−クロロ−３−ヒドロキシチエノ[２,３−ｂ]ピリジン−２−カルボキシレート(０.６２５ｇ，９７％収率)を、褐色固体として得た。ＬＣ／ＭＳ(方法Ｂ) ｔＲ ０.６９，ｍ／ｚ ２８７[Ｍ−Ｈ]+.
【０１４６】
中間体３Ｄ：５−クロロ−３−ヒドロキシチエノ[２,３−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド
【化３４】
2020519596.tif 000037
カリウム ｔｅｒｔ−ブトキシド(２.４４６ｇ，２１.８ｍｍｏｌ)／ＤＭＳＯ(１５ｍＬ)の攪拌した溶液に、メチル ６−カルバモイル−５−クロロ−３−ヒドロキシチエノ[２,３−ｂ]ピリジン−２−カルボキシレート(０.６２５ｇ，２.１８ｍｍｏｌ)を、室温で加えた。室温で３０分後、反応混合物を、８０℃で２.５時間加熱した(BMCL 22(2012) 5031-5034)。混合物を、ＥｔＯＡｃで希釈して、１Ｎ ＨＣｌ、水で洗い、乾燥させて(ＭｇＳＯ４)、濃縮した。粗生成物を、ピリジン(１０ｍＬ)に溶解して、８０℃で１５分間攪拌した。混合物を濃縮して、ＥｔＯＡｃで希釈して、１Ｎ ＨＣｌ、水で洗い、乾燥させて(ＭｇＳＯ４)、濃縮した。粗製物質を、フラッシュクロマトグラフィーを用いて精製して(シリカゲル／ヘキサン−酢酸エチル−メタノール １００：０：０〜０：９０：１０のグラジエント)、５−クロロ−３−ヒドロキシチエノ[２,３−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(０.３６９ｇ，７４％収率)を、褐色固体として得た。ＬＣ／ＭＳ(方法Ｂ) ｔＲ ０.５４，ｍ／ｚ ２２９[Ｍ＋Ｈ]＋．１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４) δ ８.１９(ｓ，１Ｈ)，６.６６(ｓ，１Ｈ)．
【０１４７】
中間体３Ｅ：(Ｓ)−５−クロロ−３−((５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[２,３−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド
【化３５】
2020519596.tif 000038
ＤＭＦ(２ｍＬ)中の５−クロロ−３−ヒドロキシチエノ[２,３−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(０.１ｇ，０.４４ｍｍｏｌ)、(Ｓ)−(５−オキソピロリジン−２−イル)メチル  ４−メチルベンゼンスルホネート(０.１１８ｇ，０.４４ｍｍｏｌ)および炭酸セシウム(０.２８５ｇ，０.８８ｍｍｏｌ)の混合物を、６５℃で１.５時間攪拌した。混合物を、室温に冷却して、濾過した。粗製物質を、分取ＨＰＬＣ[Phen. Luna Axia C18 5μ；30 X 100mm column；２２０ｎｍで検出；流速４０ｍＬ／ｍｉｎ；１０分かけて、０％Ｂ〜１００％Ｂの連続的グラジエント、２分間１００％Ｂで保持(ここで、Ａ＝１０：９０：０.１ ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ−ＴＦＡおよびＢ＝９０：１０：０.１ ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ−ＴＦＡ)]を用いて精製して、(Ｓ)−５−クロロ−３−((５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[２,３−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(２１ｍｇ，１４％収率)を、淡褐色固体として得た。ＬＣ／ＭＳ(方法Ｂ) ｔＲ ０.５８，ｍ／ｚ ３２６[Ｍ＋Ｈ]＋．１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６) δ ８.４２(ｓ，１Ｈ)，８.１２(ｂｒ．ｓ．，１Ｈ)，８.０８(ｓ，１Ｈ)，７.７８(ｂｒ．ｓ．，１Ｈ)，７.１０(ｓ，１Ｈ)，４.２２(ｄｄ，Ｊ＝９.０，３.４Ｈｚ，１Ｈ)，４.０３−３.９０(ｍ，２Ｈ)，２.３７−２.１２(ｍ，３Ｈ)，１.８７−１.７８(ｍ，１Ｈ)．
【０１４８】
実施例３
(Ｓ)−５−クロロ−３−((５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[２,３−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(１２ｍｇ，０.０４ｍｍｏｌ)、ヨウ化銅(Ｉ)(０.７０２ｍｇ，３.６８μｍｏｌ)およびナトリウムメトキシド(ＭｅＯＨ中で２５％)(０.１３ｍＬ，０.５５ｍｍｏｌ)の溶液を、６５℃で１時間攪拌して、室温に冷却して、次いで濾過した。粗生成物を、分取ＨＰＬＣ[Phen. Luna Axia C18 5μ；21.2 X 100mm column；２２０ｎｍで検出；流速＝４０ｍＬ／ｍｉｎ；１０分かけて０％Ｂ〜１００％Ｂの連続的グラジエント＋２分間１００％Ｂで保持(ここで、Ａ＝１０：９０：０.１ ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ−ＴＦＡおよびＢ＝９０：１０：０.１ ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ−ＴＦＡ)]を用いて精製して、(Ｓ)−５−メトキシ−３−((５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)チエノ[２,３−ｂ]ピリジン−６−カルボキサミド(４.１ｍｇ，３３.３％収率)を、黄色固体として得た。ＬＣ／ＭＳ(方法Ａ) ｔＲ ０.４８，ｍ／ｚ ３２２[Ｍ＋Ｈ]＋．
【０１４９】
実施例４
３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン−６−カルボキサミド
【化３６】
2020519596.tif 000039
【０１５０】
中間体４Ａ：６−ブロモ−５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン
【化３７】
2020519596.tif 000040
ＤＭＦ(１０ｍＬ)中の３−ブロモ−４−メトキシチオフェノール(１.０８ｇ，４.９３ｍｍｏｌ)、２−ブロモ−１,１−ジエトキシエタン(１.００１ｇ，５.０８ｍｍｏｌ)およびＫ２ＣＯ３(０.７８３ｇ，５.６７ｍｍｏｌ)の混合物を、１１０℃で７時間攪拌した。混合物を、室温に昇温させて、ＤＣＭで希釈して、１０％ ＬｉＣｌで洗った。次いで、有機層を、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて、濃縮して、(３−ブロモ−４−メトキシフェニル)(２,２−ジエトキシエチル)スルファン(１.６ｇ，４.７７ｍｍｏｌ，９７％収率)を得た。
【０１５１】
中間体４Ｂ：５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン−６−カルボニトリル
【化３８】
2020519596.tif 000041
(３−ブロモ−４−メトキシフェニル)(２,２−ジエトキシエチル)スルファン(１.６ｇ，４.７７ｍｍｏｌ)／クロロベンゼン(２ｍＬ)の溶液を、１２０℃で、予め加熱したクロロベンゼン(８ｍＬ)およびＰＰＡ(０.５３４ｍＬ，４.９３ｍｍｏｌ)の攪拌混合溶液に入れた。混合溶液を、１２０℃で６時間攪拌して、室温まで下げて、ＥｔＯＡｃで希釈して、水で洗った。有機層を、次いで濃縮して、粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル／ヘキサン−ＥｔＯＡｃ１００：０〜０：１００のグラジエント)にかけて、２つの位置異性体混合物(５３５ｍｇ)を得た。
【０１５２】
上記混合物、シアン化亜鉛(７００ｍｇ、５.９６ｍｍｏｌ)およびパラジウムテトラキストリフェニルホスフィン(１９７ｍｇ，０.１７０ｍｍｏｌ)を、ＤＭＦ(９ｍＬ)中に移して、窒素でパージして、１２０℃で３時間攪拌した。反応混合物を、ＥｔＯＡｃで希釈して、飽和ＮＨ４Ｃｌおよびブラインで洗い、乾燥させて(ＭｇＳＯ４)、濃縮した。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル／ヘキサン−ＥｔＯＡｃ１００：０〜３０：７０グラジエント)にかけて、より純粋な２つの位置異性体混合物を得る。この物質を、ＳＦＣ(セルロース−４, ５μｍカラム／ＣＯ２−ＭｅＯＨ８５：１５，３５℃で)にかけて、早く溶出するアイソマーとして５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン−４−カルボニトリル、および遅く溶出するアイソマーとして５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン−６−カルボニトリル(２２５ｍｇ)の生成物を得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ) δ ８.０９(ｓ，１Ｈ)，７.７１−７.７２(ｄ，１Ｈ)，７.３４(ｓ，１Ｈ)，７.３２−７.３３(ｄ，Ｊ＝５.２Ｈｚ，１Ｈ)，４.０１(ｓ，３Ｈ)．
【０１５３】
中間体４Ｃ：３−ブロモ−５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン−６−カルボニトリル
【化３９】
2020519596.tif 000042
ＤＭＦ(５ｍＬ)中の５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン−６−カルボニトリル(２２５ｍｇ，１.１８９ｍｍｏｌ)およびＮＢＳ(２７５ｍｇ，１.５４６ｍｍｏｌ)の混合物を、６０℃で３時間攪拌して、ＤＣＭで希釈して、１０％ ＬｉＣｌおよびブラインで順に洗った。次いで、有機層を、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて、濃縮して、残留物を、ＭｅＯＨでトリチュレートして、３−ブロモ−５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン−６−カルボニトリル(２４５ｍｇ，７％収率)を得た。１Ｈ ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ) δ ８.０６(ｓ，１Ｈ)，７.６９(ｓ，１Ｈ)，７.３０(ｓ，１Ｈ)，４.０９−４.０５(ｍ，４Ｈ)．
【０１５４】
中間体４Ｄ：３−ヒドロキシ−５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン−６−カルボニトリル
【化４０】
2020519596.tif 000043
３−ブロモ−５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン−６−カルボニトリル(２４２ｍｇ，０.９０３ｍｍｏｌ)／１,４−ジオキサン(８ｍＬ)の攪拌した溶液に、４,４,４',４',５,５,５',５'−オクタメチル−２,２'−ビ(１,３,２−ジオキサボロラン)(２４８ｍｇ，０.９７５ｍｍｏｌ)および酢酸カリウム(１８６ｍｇ，１.８９５ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を、Ｎ２でパージして、次いでＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)−ＣＨ２Ｃｌ２付加物(７３.７ｍｇ，０.０９０ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を、６０℃で２４時間攪拌した。混合物を、ＥｔＯＡｃで希釈して、セライトを通して濾過して、濾液を濃縮した。残留物を、メルカプトプロピル結合シリカ／ＴＨＦ(５ｍＬ)と共に、４０℃で２４時間攪拌した。混合物を、セライトを通して濾過した。次いで、濾液を、炭酸水素トリウム(３７９ｍｇ，４.５１ｍｍｏｌ)／水(３ｍＬ)および３５％ 過酸化水素(０.１３８ｍＬ)で順に洗った。反応混合物を、室温で４５分間攪拌して、ＥｔＯＡｃで希釈して、水およびブラインで洗った。有機層を、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて、濃縮して、残留物をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル／ヘキサン−ＥｔＯＡｃ１００：０〜０：１００のグラジエント)にかけて、３−ヒドロキシ−５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン−６−カルボニトリル(１０ｍｇ，０.０４９ｍｍｏｌ，５.４％収率)を得た。
【０１５５】
実施例４
ＤＭＦ(２ｍＬ)中の((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メチル ４−メチルベンゼンスルホネート(２４.４３ｍｇ，０.０７７ｍｍｏｌ)、３−ヒドロキシ−５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン−６−カルボニトリル(１５ｍｇ，０.０７３ｍｍｏｌ)およびＣｓ２ＣＯ３(５０ｍｇ，０.１５３ｍｍｏｌ)の混合物を、６０℃で５時間攪拌した。反応混合物を、ＥｔＯＡｃで希釈して、１０％ ＬｉＣｌで洗った。有機層を、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させて、次いで濃縮した。残留物を、ＤＭＳＯ(１.５ｍＬ)に溶解した。Ｋ２ＣＯ３(２５.３ｍｇ，０.１８３ｍｍｏｌ)および３５％過酸化水素(０.１１２ｍＬ，１.０９６ｍｍｏｌ)を加えた。混合物を、４８℃で１２時間攪拌した。混合物を濾過して、濾液を分取ＨＰＬＣ(Ｃ１８カラム／水−アセトニトリル(１０ｍＭ 酢酸アンモニウム９０：１０〜１０：９０のグラジエント)にかけて、３−(((２Ｓ,３Ｓ,４Ｓ)−３−エチル−４−フルオロ−５−オキソピロリジン−２−イル)メトキシ)−５−メトキシベンゾ[ｂ]チオフェン−６−カルボキサミド(４.２ｍｇ)を得た。ＬＣ／ＭＳ(方法Ｃ) ｔＲ １.１９，ｍ／ｚ ３６７[Ｍ＋Ｈ]＋．１Ｈ ＮＭＲ(５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６) δ ８.８６(ｂｒ  ｓ，１Ｈ)，８.２４(ｓ，１Ｈ)，７.７７(ｂｒ  ｓ，１Ｈ)，７.５５(ｂｒ  ｓ，１Ｈ)，７.４６(ｓ，１Ｈ)，６.９８(ｓ，１Ｈ)，４.８７(ｄｄ，Ｊ＝５３.４，５.５Ｈｚ，１Ｈ)，４.２３−４.１５(ｍ，１Ｈ)，４.０４(ｂｒ  ｓ，１Ｈ)，３.９３(ｓ，３Ｈ)，３.５２(ｂｒ  ｄ，Ｊ＝７.６Ｈｚ，１Ｈ)，１.７２−１.４８(ｍ，２Ｈ)，１.００(ｂｒ  ｔ，Ｊ＝７.６Ｈｚ，３Ｈ)．
【０１５６】
表１の実施例を、適切な出発物質を用いて実施例１〜４について概説した方法により製造した。
【０１５７】
【表１】
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【表２】
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【表３】
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【表４】
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【表５】
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【表６】
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【表７】
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【０１５８】
生物学的アッセイ
本発明の化合物の薬理学的特性は、多数の生物学的アッセイにより確認され得る。下記の典型例としての生物学的アッセイを本発明の化合物を用いて実施した。
【０１５９】
ＩＲＡＫ４阻害アッセイ
該アッセイは、Ｕ字底３８４ウェルプレートにて行われた。最終アッセイ容量は３０μＬであり、アッセイ緩衝液(２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ(ｐＨ７.２)、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、０.０１５％Ｂｒｉｊ ３５および４ｍＭ ＤＴＴ)中に１５μＬの酵素と基質(蛍光ペプチドおよびＡＴＰ)および試験化合物を添加して調製された。反応はＩＲＡＫ４と基質および試験化合物を合わせることで開始された。該反応混合物を、室温で６０分間インキュベートして、４５μＬの３５ｍＭ ＥＤＴＡを各サンプルに添加することで反応を終わらせた。その反応混合物を、キャリパー(Caliper)ＬＡＢＣＨＩＰ(登録商標)３０００(Caliper, Hopkinton, MA)にて、蛍光基質とリン酸化生成物を電気泳動の分離により分析した。阻害データは、１００％阻害としての酵素不含の対照反応と、０％阻害としてのビヒクルのみの反応を比較することにより算出された。該アッセイにおける試薬の最終濃度は、ＡＴＰ ５００μＭ；ＦＬ−ＩＰＴＳＰＩＴＴＴＹＦＦＦＫＫＫペプチド １.５μＭ；ＩＲＡＫ４ ０.６ｎＭ；およびＤＭＳＯ １.６％である。
【０１６０】
Ｃａｃｏ−２透過性アッセイ
アッセイの１３〜２７日前、Ｃａｃｏ−２細胞を、２４ウェルのトランズウェルプレートにて１.４５ｘ１０５細胞／ｃｍ２の密度で、ウェル当たり約４.８ｘ１０４細胞をコラーゲン被覆のポリカーボネートフィルター膜に播種した。細胞を、１０％ウシ胎児血清、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１％非必須アミノ酸、２ｍＭ Ｌ−グルタミン、１００Ｕ／ｍＬペニシリン−Ｇ、および１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンを補足したＤＭＥＭからなる培地にて成長させた。その培地を３日毎に取り換えて、細胞を３７℃で９５％相対湿度および５％ＣＯ２大気下で維持した。細胞を、アッセイ直前に密着結合(tight junction)の形成について評価した。試験化合物を、１００％ＤＭＳＯに１０ｍＭまで溶解させ、アッセイ緩衝液中にて３μＭに希釈した。透過性実験は、２００μＬのアッセイ緩衝液＋／−化合物を、２４ウェルのトランズウェル低結合クラスタープレートの先端トランズウェルコンパートメントに、そして６００μＬアッセイ緩衝液＋／−化合物を側底コンパートメントに添加することで開始された。先端から側底(ＡからＢ)への透過性(吸収方向性(absorptive direction))について、化合物を含有する緩衝液を先端コンパートメント(ドナーウェル)に入れ、一方で緩衝液だけを対応する側底コンパートメント(レシーバーウェル)に入れた。側底から先端(ＢからＡ)の透過性(分泌方向性(secretive direction))について、化合物を含有する緩衝液を側底コンパートメント(ドナーウェル)に入れ、その一方で緩衝液だけを対応する先端コンパートメント(レシーバーウェル)に入れた。次にトランズウェルを、緩やかに振盪しながら３７℃で９５％相対湿度および５％ＣＯ２大気下にて２時間インキュベートした。インキュベーション後に、各先端および側底コンパートメントから１００μＬを取り出し、内部標体としてウェル当たり１００μＬの２５０ｎＭのプロプラノロール、２５０ｎＭのジクロフェナク、および５００ｎＭのトルブタミドを含有するアセトニトリルで予め入れた、９６ウェルの低結合プレートに移した。サンプルを、その後ＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより分析して、化合物の濃度を測定した。
【０１６１】
ＩＲＡＫ４全血アッセイ
抗凝血性ＡＣＤ−Ａを含有するヒト全血を、３８４ウェルプレートに入れ(２５μＬ／ウェル)、化合物と共に５％ＣＯ２インキュベーター中にて３７℃で６０分間インキュベートした。５％ＣＯ２インキュベーター内で、ＴＬＲ２アゴニストである、２５μＬのＲＰＭＩ(Gibco)中において１０μｇ／ｍＬの最終濃度のリポタイコ酸(Invivogen, San Diego, CA)を用いて、その血液を５時間刺激した。インキュベーションの終了時に、プレートを２３００ｒｐｍで５分間遠心分離にかけた。上清を収集して、フローサイトメトリービーズアッセイ(BD Biosciences, San Jose, CA)によりＩＬ−６レベルを分析した。
【０１６２】
ＰＢＭＣ  ＴＬＲ２誘発性ＩＬ−６アッセイ
末梢血単核細胞(ＰＢＭＣ)を、Ficollグラジエントの遠心分離操作により、抗凝血性のＥＤＴＡ(２.５ｍＭ)含有ヒト血液から単離した。ＰＢＭＣ(２５００００細胞／ウェル)を、５％ＣＯ２インキュベーター内において、３７℃で３０分間、アッセイ培地(１０％熱不活化ＦＣＳを含むＲＰＭＩ)にて化合物と共に培養した。化合物で前処理した後、細胞を５時間、ＴＬＲ２アゴニストである１０μｇ／ｍＬのリポタイコ酸(Invivogen, San Diego, CA)で刺激した。培養の終了時に、プレートを１８００ｒｐｍで１０分間の遠心分離にかけて、細胞をペレット状にした。上清を収集して、ＥＬＩＳＡ(BD Biosciences, San Jose, CA)によりＩＬ−６レベルを分析した。
【０１６３】
下記の表に、ＩＲＡＫ４阻害アッセイ、ＩＲＡＫ４全血アッセイおよびＣａｃｏ−２透過性アッセイにて測定した、本発明の下記実施例についてのＩＲＡＫ４ ＩＣ５０値、全血ＥＣ５０値およびＣａｃｏ−２透過値を列挙する。本発明の化合物は、以下の実施例にて実証されるように、０.６μＭより低いＩＲＡＫ ＩＣ５０阻害値を示した。
【０１６４】
【表８】
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【国際調査報告】
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