(57)【要約】  本発明は、癌の治療に使用するための（ａ）ＭＤＭ２阻害剤及び（ｂ）ＥＲＫ阻害剤を含む医薬組合せに関する。本発明は、癌の治療のための医薬品の調製のためのそのような組合せの使用；癌治療を必要とする対象の癌を治療する方法であって、前記対象に共同で治療上有効な量の前記組合せを投与することを含む方法；そのような組合せを含む医薬組成物；並びにそのような組合せを含むキット及び／又は包装に関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容できる塩であるＭＤＭ２阻害剤、
並びに
（ｂ）４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド；４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−２−フルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−フルオロ−５−ヨードフェニル）−２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド；及び（Ｓ）−４−（５−クロロ−２−（イソプロピルアミノ）ピリジン−４−イル）−Ｎ−（１−（３−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド（ＢＶＤ−５）又はこれらの化合物の１つの薬学的に許容できる塩から選択されるＥＲＫ阻害剤
を含む医薬組合せ。
【請求項２】
前記ＥＲＫ阻害剤が、４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド又はその薬学的に許容できる塩である、請求項１に記載の医薬組合せ。
【請求項３】
前記ＥＲＫ阻害剤が、４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−２−フルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−フルオロ−５−ヨードフェニル）−２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド又はその薬学的に許容できる塩である、請求項１に記載の医薬組合せ。
【請求項４】
前記ＥＲＫ阻害剤が、（Ｓ）−４−（５−クロロ−２−（イソプロピルアミノ）ピリジン−４−イル）−Ｎ−（１−（３−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド又はその薬学的に許容できる塩である、請求項１に記載の医薬組合せ。
【請求項５】
（ａ）（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容できる塩であるＭＤＭ２阻害剤、及び
（ｂ）４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド又はその薬学的に許容できる塩であるＥＲＫ阻害剤
を含む医薬組合せ。
【請求項６】
共同で治療上有効である量の前記ＭＤＭ２阻害剤及び前記ＥＲＫ阻害剤を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項７】
前記量の前記ＭＤＭ２阻害剤及び前記ＥＲＫ阻害剤が、ＢＲＡＦ変異を発現する癌の治療に共同で治療上有効である、請求項６に記載の医薬組合せ。
【請求項８】
前記量の前記ＭＤＭ２阻害剤及び前記ＥＲＫ阻害剤が、ＢＲＡＦ変異を発現するメラノーマの治療に共同で治療上有効である、請求項７に記載の医薬組合せ。
【請求項９】
同時又は連続的な使用のための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項１０】
固定された組合せの形態である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項１１】
固定されていない組合せの形態である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の医薬組合せ。
【請求項１２】
癌を治療する方法であって、それを必要とする対象に、治療上有効な量の（ａ）（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容できる塩であるＭＤＭ２阻害剤、並びに
（ｂ）治療上有効な量の、４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド；４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−２−フルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−フルオロ−５−ヨードフェニル）−２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド；及び（Ｓ）−４−（５−クロロ−２−（イソプロピルアミノ）ピリジン−４−イル）−Ｎ−（１−（３−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド又はこれらの化合物の１つの薬学的に許容できる塩から選択されるＥＲＫ阻害剤
を投与することを含む方法。
【請求項１３】
前記治療上有効な量の前記ＭＤＭ２阻害剤と前記治療上有効な量の前記ＥＲＫ阻害剤が、野生型ｐ５３を発現している癌の治療に共同で有効である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記治療上有効な量の前記ＭＤＭ２阻害剤と前記治療上有効な量の前記ＥＲＫ阻害剤が、前記ＭＤＭ２阻害剤及び前記ＥＲＫ阻害剤による相乗的な有効性により共同で有効である、請求項１２又は１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記癌がＢＲＡＦ変異を発現している、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記癌がメラノーマである、請求項１２〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
（ａ）（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容できる塩であるＭＤＭ２阻害剤、
（ｂ）４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド；４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−２−フルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−フルオロ−５−ヨードフェニル）−２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド；及び（Ｓ）−４−（５−クロロ−２−（イソプロピルアミノ）ピリジン−４−イル）−Ｎ−（１−（３−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド又はこれらの化合物の１つの薬学的に許容できる塩から選択されるＥＲＫ阻害剤；並びに
（ｃ）少なくとも１種の薬学的に許容できる担体又は賦形剤
を含む医薬組成物。
【請求項１８】
共同で治療上有効である量の前記ＭＤＭ２阻害剤及び前記ＥＲＫ阻害剤を含む、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド；４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−２−フルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−フルオロ−５−ヨードフェニル）−２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド；及び（Ｓ）−４−（５−クロロ−２−（イソプロピルアミノ）ピリジン−４−イル）−Ｎ−（１−（３−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド又はこれらの化合物の１つの薬学的に許容できる塩から選択されるＥＲＫの阻害剤と組み合わせる、（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容できる塩であるＭＤＭ２の阻害剤の療法における使用。
【請求項２０】
癌の治療のための、請求項１９に記載のＥＲＫの阻害剤と組み合わせたＭＤＭ２の阻害剤の使用。
【請求項２１】
ＢＲＡＦ変異を発現している癌、且つ任意選択で野生型ｐ５３を発現している癌の治療のための、請求項２０に記載のＥＲＫの阻害剤と組み合わせたＭＤＭ２の阻害剤の使用。
【請求項２２】
メラノーマの治療のための、請求項１９〜２１のいずれか一項に記載のＥＲＫの阻害剤と組み合わせたＭＤＭ２の阻害剤の使用。
【請求項２３】
４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド；４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−２−フルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−フルオロ−５−ヨードフェニル）−２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド；及び（Ｓ）−４−（５−クロロ−２−（イソプロピルアミノ）ピリジン−４−イル）−Ｎ−（１−（３−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド又はこれらの化合物の１つの薬学的に許容できる塩から選択されるＥＲＫ阻害剤と組み合わせて癌を治療することに使用するための、（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容できる塩であるＭＤＭ２阻害剤。
【請求項２４】
（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容できる塩であるＭＤＭ２阻害剤と組み合わせて癌を治療することに使用するための、４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド；４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−２−フルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−フルオロ−５−ヨードフェニル）−２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド；及び（Ｓ）−４−（５−クロロ−２−（イソプロピルアミノ）ピリジン−４−イル）−Ｎ−（１−（３−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド又はこれらの化合物の１つの薬学的に許容できる塩から選択されるＥＲＫ阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、癌、特にＫＲＡＳ経路に変異を有する癌の治療に使用するためのＭＤＭ２阻害剤及びＥＲＫ阻害剤を含む医薬組合せ（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）に関する。本発明は、そのような癌の治療のため、及び癌の治療のための医薬品の調製のための、組み合わせたこれらの化合物の使用；癌治療を必要とする対象に、共同で治療上有効な（ｊｏｉｎｔｌｙ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌｌｙ  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ）量の前記組合せを投与することを含む、前記対象の癌を治療する方法；そのような組合せを含む医薬組成物；並びにそのような組合せを含む商品包装（ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ  ｐａｃｋａｇｅｓ）にも関する。
【背景技術】
【０００２】
癌の標的療法の出現は、種々の悪性腫瘍に関して患者の寿命を延ばし、薬剤耐性機構の研究により腫瘍の複雑さを理解することを助けてきた。標的薬に対する臨床反応が一般的に不完全であり、且つ／又は一過性であるという事実は、広く２つの種類に分けられる多数の因子から生じる：薬物の最適な投薬を妨げ、その結果ターゲットエンゲージメントを限定する毒性（Ｂｒａｎａ  ａｎｄ  Ｓｉｕ  ２０１２，Ｃｈａｐｍａｎ，Ｓｏｌｉｔ  ｅｔ  ａｌ．２０１４）、及び癌が適応し混乱に対してその増殖能を維持する能力（Ｄｒｕｋｅｒ  ２００８、Ｃｈａｎｄａｒｌａｐａｔｙ  ２０１２、Ｄｏｅｂｅｌｅ，Ｐｉｌｌｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．２０１２、Ｄｕｎｃａｎ，Ｗｈｉｔｔｌｅ  ｅｔ  ａｌ．２０１２、Ｋａｔａｙａｍａ，Ｓｈａｗ  ｅｔ  ａｌ．２０１２、Ｌｉｔｏ，Ｒｏｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．２０１３、Ｓｕｌｌｉｖａｎ  ａｎｄ  Ｆｌａｈｅｒｔｙ  ２０１３、Ｓｏｌｉｔ  ａｎｄ  Ｒｏｓｅｎ  ２０１４）。薬物の組合せは、全体的有効性を改善し、同時に腫瘍の頑強性及び複雑さを標的化して耐性に反撃することにより、これらの因子の両方に対処できる（Ｒｏｂｅｒｔ，Ｋａｒａｓｚｅｗｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．２０１５、Ｔｕｒｎｅｒ，Ｒｏ  ｅｔ  ａｌ．２０１５）。しかし、癌を克服するには何種類の薬物が必要であるか、及びどのプロセス又はどの経路の組合せを組み合わせて標的化する必要があるかは未だ明らかでない。しかし、特定の場合に、２種以上の薬物の組合せ（Ｂｏｚｉｃ，Ｒｅｉｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．２０１３）が癌をより効果的に治療でき、単剤への曝露後に変異して適応し、効果的に１種の治療剤に対する耐性を発生させる癌と戦うことができることが分かった。
【０００３】
特定の種類の癌を有する患者のための多くの治療選択肢にもかかわらず、癌の有効な長期治療のために、及び単剤療法に対する耐性を有するか、又は発生させる傾向がある癌の治療のために投与できる、有効で安全な併用療法が依然として必要とされている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の一目的は、癌の治療を改善し、とりわけ細胞成長（増殖）の阻害及びアポトーシスの誘導により癌の治療を改善する医薬品を提供することである。本発明の一目的は、相乗的に働いて、より効果的に腫瘍細胞の増殖を減少させ、且つ／又はアポトーシスを誘導する新規併用療法を提供し、且つ腫瘍成長阻害を含むより大きな抗癌作用を提供することである。
【０００５】
マウス二重微小染色体２ホモログ（ＭＤＭ２）は、Ｅ３ユビキチンタンパク質リガーゼＭｄｍ２としても知られ、腫瘍タンパク質ｐ３（ｐ５３）の負の調節因子である。ＭＤＭ２のｐ５３への結合は、ｐ５３の分解を促進するが、それは、健康でストレスを受けていない細胞中でｐ５３のレベルを低く保つ主要な調節機構である。タンパク質ｐ５３は、細胞中で、腫瘍抑制因子の機能を含む多くの機能を有する。正常なストレスを受けていない細胞において、ｐ５３のレベルは低いが、ｐ５３のレベルが増加すると、それは活性化されていくつかの細胞変化を起こし得る。ストレスを受けているか、又は損傷のある細胞において、ｐ５３は増加し、リン酸化により活性化される：活性化されたｐ５３は、ＤＮＡ修復を引き起こすことによるなど、細胞に対する損傷を限定することができ、又はそれは、アポトーシスを誘導して、損傷を受けた細胞の除去を起こすことができる。ＭＤＭ２（又はＭｄｍ２）の阻害剤は、ＭＤＭ２のｐ５３との結合を妨げる化合物である。ＭＤＭ２とｐ５３との相互作用の崩壊がｐ５３の増加につながり、高レベルのｐ５３が、細胞死を含む種々の作用を起こし得るので、ＭＤＭ２の阻害剤は潜在的に腫瘍成長を停止させ、腫瘍細胞を殺傷することすらできる。実際に、少なくとも７種のＭＤＭ２の阻害剤が、２０１５年までに種々の癌を治療するための臨床試験に入った。Ｚｈａｏ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．５８（３），１０３８−５２（２０１５）。これらの化合物は、ＭＤＭ２を過剰発現する腫瘍、例えば、数種の脂肪肉腫、神経膠芽腫、及び白血病、並びに野生型ｐ５３を有する腫瘍を治療するのに特に有用であることが期待される。ｐ５３に変異を有する腫瘍は、変異したｐ５３へのＭＤＭ２の結合を崩壊させるＭＤＭ２阻害剤の能力が変異のために減少している場合、ＭＤＭ２阻害剤に対する感受性が低い可能性がある。
【０００６】
ＭＤＭ２阻害剤及びＥＲＫ阻害剤は、別々な単独療法として有用な抗癌活性を示す。驚くべきことに、ＭＤＭ２阻害剤をＥＲＫ阻害剤と組み合わせて使用すると、異種移植片モデルにおいて示される通り、相乗的な抗癌活性を与え得ることがいまや見出された。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
そのため一態様において、本発明は、
（ａ）国際公開第２０１３／１１１１０５号パンフレットに開示されている（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン（「化合物Ａ（Ｃｏｍｐｏｕｎｄ  Ａ）」又は「化合物Ａ（ＣＯＭＰＯＵＮＤ  Ａ）」）、
【化１】
2020536890.tif 000003
又はその薬学的に許容できる塩であるＭＤＭ２阻害剤；並びに
（ｂ）４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド（「化合物Ｂ（Ｃｏｍｐｏｕｎｄ  Ｂ）」又は「化合物Ｂ（ＣＯＭＰＯＵＮＤ  Ｂ）」）；４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−２−フルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−フルオロ−５−ヨードフェニル）−２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド；及び（Ｓ）−４−（５−クロロ−２−（イソプロピルアミノ）ピリジン−４−イル）−Ｎ−（１−（３−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド（ＢＶＤ−５２３）；及びこれらの化合物の薬学的に許容できる塩から選択されるＥＲＫ阻害剤
を含む医薬組合せを提供する。
【０００８】
化合物Ａ（本明細書で「化合物Ａ」とも称される）は、別名（Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−３−イル）−６−（４−クロロ−フェニル）−２−（２，４−ジメトキシ−ピリミジン−５−イル）−１−イソプロピル−５，６−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−オンによっても知られている。
【０００９】
本発明の組合せは、種々のＥＲＫ阻害剤と共に実施できる。本発明の組合せ及び方法での使用に好ましいＥＲＫ阻害剤は、４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド：
【化２】
2020536890.tif 000004
である化合物Ｂ（本明細書で「化合物Ｂ」とも称される）である。
【００１０】
この化合物は、ＥＲＫ１及びＥＲＫ２の阻害剤である。化合物は、公開されているＰＣＴ特許出願国際公開第２０１５／０６６１８８号パンフレットに開示されており、その調製は記載されている。いくつかの実施形態において、この化合物はその塩酸塩として使用されている。
【００１１】
本発明の方法及び組成物に使用するための別の好ましいＥＲＫ阻害剤は、４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−２−フルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−フルオロ−５−ヨードフェニル）−２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド：
【化３】
2020536890.tif 000005
である。
【００１２】
この化合物は、ＥＲＫ１及びＥＲＫ２の阻害剤である。化合物は、公開されているＰＣＴ特許出願国際公開第２０１５／０６６１８８号パンフレットに開示されており、その調製は記載されている。
【００１３】
本発明の方法に使用できる別のＥＲＫ阻害剤は、（Ｓ）−４−（５−クロロ−２−（イソプロピルアミノ）ピリジン−４−イル）−Ｎ−（１−（３−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド：
【化４】
2020536890.tif 000006
であるＢＶＤ−５２３、別名ウリキセルチニブである。
【００１４】
好ましい実施形態において、
（ａ）（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容できる塩であるＭＤＭ２阻害剤、及び
（ｂ）４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド又はその薬学的に許容できる塩であるＥＲＫ阻害剤
を含む医薬組合せも提供される。
【００１５】
また、下記も提供される
・４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド；４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−２−フルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−フルオロ−５−ヨードフェニル）−２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド；及び（Ｓ）−４−（５−クロロ−２−（イソプロピルアミノ）ピリジン−４−イル）−Ｎ−（１−（３−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド又はこれらの化合物の１つの薬学的に許容できる塩から選択されるＥＲＫ阻害剤と組み合わせて癌を治療することに使用するための、（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容できる塩であるＭＤＭ２阻害剤；
【００１６】
・（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容できる塩であるＭＤＭ２阻害剤と組み合わせて癌を治療することに使用するための、４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド；４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−２−フルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−フルオロ−５−ヨードフェニル）−２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド；及び（Ｓ）−４−（５−クロロ−２−（イソプロピルアミノ）ピリジン−４−イル）−Ｎ−（１−（３−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド又はこれらの化合物の１つの薬学的に許容できる塩から選択されるＥＲＫ阻害剤；
【００１７】
・４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド；４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−２−フルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−フルオロ−５−ヨードフェニル）−２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド；及び（Ｓ）−４−（５−クロロ−２−（イソプロピルアミノ）ピリジン−４−イル）−Ｎ−（１−（３−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド又はこれらの化合物の１つの薬学的に許容できる塩から選択されるＥＲＫ阻害剤との共投与により癌を治療することに使用するための、（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容できる塩であるＭＤＭ２阻害剤；並びに
【００１８】
・（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容できる塩であるＭＤＭ２阻害剤との共投与により癌を治療することに使用するための、４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド；４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−２−フルオロ−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−フルオロ−５−ヨードフェニル）−２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド；及び（Ｓ）−４−（５−クロロ−２−（イソプロピルアミノ）ピリジン−４−イル）−Ｎ−（１−（３−クロロフェニル）−２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−ピロール−２−カルボキサミド又はこれらの化合物の１つの薬学的に許容できる塩から選択されるＥＲＫ阻害剤。
【００１９】
別の態様において、本発明は、本発明の医薬組合せ及び少なくとも１種の薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物に関する。
【００２０】
一態様において、本発明は、医薬として使用するための本発明の医薬組合せ又は医薬組成物に関する。
【００２１】
別の態様において、本発明は、癌の治療に使用するための本発明の医薬組合せ又は医薬組成物に関する。
【００２２】
別の態様において、本発明は、癌の治療のための医薬品の調製のための本発明の医薬組合せの使用を提供する。
【００２３】
さらに別な態様において、本発明は、癌治療を必要とする対象の癌を治療する方法であって、対象に、治療上有効な量の本発明の医薬組合せ又は本発明の医薬組成物を投与することを含む方法に関する。
【００２４】
具体的には、本発明は、以下の請求項に列記される通り、それぞれ単独又は組合せた以下の態様及び具体的な実施形態を提供する。
【００２５】
本発明の組合せにより治療すべき癌は、以下に列記されている。本発明の組合せは、少なくとも１つのＫＲＡＳ変異及び／又は少なくとも１つのＢＲＡＦ変異を含む癌、例えば、メラノーマを有する対象の治療に特に有用である。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】図１は（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン（化合物Ａ）と４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド（化合物Ｂ）との組合せの細胞成長阻害活性を示すインビトロ結果である。
【図２−１】図２：図２Ａは追加の活性化ＭＥＫ変異、ＴＰ５３  ＷＴ、及びｐ５３再活性化に対する感受性を示すバイオマーカーシグナチャーを有する、ベムラフェニブ服用中に再発した（無増悪生存期間（ＰＦＳ）４６週、最良効果安定）ＢＲＡＦ−Ｖ６００Ｅ患者からの患者由来異種移植片（ＰＤＸ）モデルである。マウス（ｎ＝１０／群）内のＰＤＸ腫瘍異種移植片を、ＥＲＫ阻害剤ＢＶＤ−５２３  ５０ｍｇ／ｋｇ  １日２回強制経口投与、ＭＤＭ２阻害剤ＣＧＭ０９７  １００ｍｇ／ｋｇ  １日１回強制経口投与、又は両者の組合せにより処置した。ＣＧＭ０９７は、（Ｓ）−１−（４−クロロ−フェニル）−７−イソプロポキシ−６−メトキシ−２−（４−｛メチル−［４−（４−メチル−３−オキソ−ピペラジン−１−イル）−トランス−シクロヘキシルメチル］−アミノ｝−フェニル）−１，４−ジヒドロ−２Ｈ−イソキノリン−３−オンである。図２ＢはＰＤＸモデルにおける反応の不均一性を強調するＢＶＤ−５２３＋ＣＧＭ０９７処置群の単一のマウス成長曲線である。腫瘍の大多数は安定を示したが、２匹のマウスは早期の再発を有し、２匹のマウスは完全奏功（ＣＲ）を有した。投薬は、群全体で３８日目に停止され、２匹のＣＲマウスは残存疾患の再成長を示した。
【図２−２】（上記の通り。）
【発明を実施するための形態】
【００２７】
一態様において、本発明は、ＥＲＫ阻害剤と組み合わせて使用されるＭＤＭ２阻害剤を含む医薬組合せであって、２種の化合物が、別々にも、連続的にも、単一の医薬組成物としてなど一緒にも投与できる医薬組合せに関する。それは、ＥＲＫ阻害剤と組み合わせてＭＤＭ２阻害剤を使用して癌を治療する方法を提供し、これらの組合せ及び方法で使用するための具体的なＭＤＭ２及びＥＲＫ阻害剤を提供する。
【００２８】
本発明の組合せを使用して効率的に癌を治療できることが見出された。とりわけ、ＭＤＭ２阻害剤とＥＲＫ阻害剤との組合せでの使用から生じる細胞増殖の阻害及び／又はアポトーシスの誘導における相乗効果により、組合せを使用して癌を治療できることが確認された。そのため、本発明は、本発明の組合せにより治療される対象に投与される、より低い用量の一方若しくは両方の化合物の使用を可能にし、又はそれは、別々な化合物の有効性に基づいて期待されただろうより高い治療効果をもたらす。
【００２９】
本発明を説明する文脈での（特に以下の請求項の文脈での）用語「１つの（ａ）」及び「１つの（ａｎ）」及び「前記（ｔｈｅ）」及び類似の言及は、本明細書で特記されない限り又は文脈により明らかに矛盾しない限り、単数と複数の両方を含むと解釈されるものとする。複数形が、化合物、患者、癌などに使用される場合、単一の化合物、患者なども意味するものとする。
【００３０】
本明細書での用語「相乗効果」は、例えば、少なくとも１種の本発明のＭＤＭ２阻害剤化合物及び少なくとも１種の本発明のＥＲＫ阻害剤化合物などの２種の治療剤の作用であって、効果、例えば、増殖性疾患、特に癌又はその症状の進行の緩徐化を生み出す、それ自体で投与される各薬物の効果の単純な付加よりも大きい作用を指す。相乗効果は、例えば、シグモイド−Ｅｍａｘ式（Ｓｉｇｍｏｉｄ−Ｅｍａｘ  ｅｑｕａｔｉｏｎ）（Ｈｏｌｆｏｒｄ，Ｎ．Ｈ．Ｇ．ａｎｄ  Ｓｃｈｅｉｎｅｒ，Ｌ．Ｂ．，Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．６：４２９−４５３（１９８１））、Ｌｏｅｗｅの相加性の式（Ｌｏｅｗｅ，Ｓ．ａｎｄ  Ｍｕｉｓｃｈｎｅｋ，Ｈ．，Ａｒｃｈ．Ｅｘｐ．Ｐａｔｈｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１１４：３１３−３２６（１９２６））、及び中央値効果の式（ｍｅｄｉａｎ−ｅｆｆｅｃｔ  ｅｑｕａｔｉｏｎ）（Ｃｈｏｕ，Ｔ．Ｃ．ａｎｄ  Ｔａｌａｌａｙ，Ｐ．，Ａｄｖ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｒｅｇｕｌ．２２：２７−５５（１９８４））などの好適な方法を利用して計算できる。上記で言及された各式を実験データに適用して、対応するグラフを生成させ、薬物組合せの効果の評価を支援することができる。上記で言及された式と関連する対応するグラフは、それぞれ、濃度効果曲線、アイソボログラム曲線、及び併用指数曲線である。
【００３１】
とりわけ、ＴＰ５３野生型メラノーマ細胞株におけるＭＤＭ２とＥＲＫの組み合わせた阻害が、別々な単剤治療薬として使用される場合の阻害剤の足された活性から予測されるものより優れた相乗的な活性を与えることが示された。そのため、本発明の組合せは、単剤のそれぞれと比べて反応を改善することが可能である効果的な療法選択肢を与え、単剤活性に基づいて予測されただろうよりも、より永続性のある反応を臨床においてもたらし得る。
【００３２】
本明細書での用語「ＭＤＭ２阻害剤」又は「ＨＤＭ２阻害剤」又は「Ｍｄｍ２阻害剤」は、ＨＤＭ２／ｐ５３（Ｍｄｍ２／ｐ５３）相互作用会合（ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）を阻害するあらゆる化合物を指す。ＨＤＭ２（マウス二重微小染色体２のヒトホモログ）は、ｐ５３の負の調節因子である。Ｍｄｍ２阻害剤は、Ｍｄｍ２／ｐ５３会合の阻害が適応とされる場合、例えば、腫瘍及び／又は癌細胞成長の治療において、ヒト又は獣医学的使用のための医薬組成物において有用である。とりわけ、Ｍｄｍ２阻害剤はヒト癌の治療に有用であるが、その理由は、これらの癌の進行が、ｐ５３の「ゲートキーパー」機能の無効化、例えばＭｄｍ２の過剰発現に、少なくとも部分的に依存し得るからである。
【００３３】
本発明によると、Ｍｄｍ２阻害剤は、化合物
（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン又はその薬学的に許容できる塩である。
【００３４】
ＭＤＭ２阻害剤は、本明細書で化合物Ａとも称される。このＭｄｍ２阻害剤は、新規なクラスのイミダゾピロリジノン化合物に属し、ＭＤＭ２／ｐ５３相互作用（この用語は特にＨｄｍ２／ｐ５３相互作用を含む）の強力な阻害を示す。とりわけ、この化合物は、ＭＤＭ２に結合することにより、ｐ５３とのＭＤＭ２相互作用の阻害剤として作用する。ＭＤＭ２阻害剤（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン、
【化５】
2020536890.tif 000007
は、参照により本明細書に全体として組み込まれる国際公開第２０１３／１１１１０５号パンフレットの実施例１０２に記載されている。
【００３５】
（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オンの結晶形は、国際公開第２０１３／１１１１０５号パンフレットで実施例６、実施例７、及び実施例８として記載されている。本発明は、（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン化合物のコハク酸共結晶を包含する。化合物は、エタノール溶媒和物の形態でもあり得る。
【００３６】
ＣＧＭ０９７はＭＤＭ２阻害剤であり、（Ｓ）−１−（４−クロロ−フェニル）−７−イソプロポキシ−６−メトキシ−２−（４−｛メチル−［４−（４−メチル−３−オキソ−ピペラジン−１−イル）−トランス−シクロヘキシルメチル］−アミノ｝−フェニル）−１，４−ジヒドロ−２Ｈ−イソキノリン−３−オンであり、国際公開第２０１１／０７６７８６号パンフレットの実施例１０６に記載されている。
【化６】
2020536890.tif 000008
【００３７】
国際公開第２０１２／０６６０９５号パンフレットは、そのビスファート塩（ｂｉｓｕｐｈａｔｅ  ｓａｌｔ）及び結晶形を記載している。
【００３８】
一実施形態において、本発明の組成物及び方法に使用するためのＥＲＫ阻害剤は、経口送達による投与用に調製され、その塩酸塩として使用できる。いくつかの実施形態において、化合物又はそのＨＣｌ塩は、経口投与用のハード又はソフトジェルキャップなどの薬学的に許容できる容器に単純に封入される。ジェルキャップは、柔軟な投与のために種々の用量で製造できる；例えば、約５ｍｇ、約２０ｍｇ、約５０ｍｇ、又は約１００ｍｇの化合物Ｂ又はそのＨＣｌ塩を含むジェルキャップを調製できる。
【００３９】
用語「薬学的に許容できる塩」は、化合物の生物学的な有効性及び性質を保持し、典型的には生物学的にも他の面でも望ましくないことがない塩を指す。化合物は、アミノ基の存在により酸付加塩を形成することが可能であり得る。
【００４０】
特記されない限り、又は本文により明らかに示されていない限り、本発明の医薬組合せにおいて有用な治療剤への言及は、化合物の遊離塩基と化合物の全ての薬学的に許容できる塩の両方を含む。
【００４１】
用語「組合せ」又は「医薬組合せ」は、１用量単位形態の固定された組合せ（ｆｉｘｅｄ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）、治療剤が、一緒に、同じ時間で独立に、若しくは時間間隔内で別々に投与され得る固定されていない組合せ（ｎｏｎ−ｆｉｘｅｄ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）、又は組合せ投与のための要素のキットのいずれかを指すように本明細書で定義され、それは、好ましくは、組合せパートナーが、協調的な効果、例えば、相乗効果を示すことを可能にする。そのため、本発明の医薬組合せの単一の化合物は、同時にも、連続的にも投与され得る。
【００４２】
さらに、本発明の医薬組合せは、固定された組合せの形態でも、固定されていない組合せの形態でもあり得る。
【００４３】
用語「固定された組合せ」は、治療剤、例えば、組合せの単一の化合物が単一の実体又は剤形の形態であることを意味する。
【００４４】
用語「固定されていない組合せ」は、治療剤、例えば、組合せの単一の化合物が、別々な実体又は剤形として、同時に、又は具体的な時間の制限なしに連続的に患者に投与されることを意味するが、好ましくはそのような投与は、対象、例えば、それを必要とする哺乳動物又はヒトの体内に治療上有効なレベルの２種の治療剤を与える。
【００４５】
医薬組合せは、少なくとも１種の薬学的に許容できる担体をさらに含み得る。そのため、本発明は、本発明の医薬組合せ及び少なくとも１種の薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物に関する。
【００４６】
本明細書では、用語「担体」又は「薬学的に許容できる担体」は、当業者には公知である通り、ありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング、界面活性剤、酸化防止剤、保存剤（例えば、抗菌剤、抗真菌剤）、等張剤、吸収遅延剤、塩、保存剤、薬物安定剤、結合剤、賦形剤、崩壊剤、潤滑剤、甘味剤、着香剤、染料など、及びこれらの組合せを含む（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄ．Ｍａｃｋ  Ｐｒｉｎｔｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０，ｐｐ．１２８９−１３２９参照）。従来の担体が有効成分と不適合性でない限り、治療剤又は医薬組成物におけるその使用が企図される。
【００４７】
句「薬学的に許容できる」は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、又は他の問題若しくは合併症なしにヒト及び動物の組織と接触する使用に好適であり、妥当なベネフィット／リスク比に釣り合う化合物、材料、組成物、及び／又は剤形を指すように本明細書で利用される。
【００４８】
一般に、用語「医薬組成物」は、対象、例えば、哺乳動物又はヒトに投与すべき少なくとも１種の治療剤を含む混合物又は溶液を指すと本明細書で定義される。本医薬組合せは、腸内又は非経口投与用の好適な医薬組成物、例えば、糖衣錠、錠剤、カプセル剤、若しくは坐剤、又はアンプルなどの単位剤形で製剤できる。特記されない限り、それらは自体公知の方法で、例えば、種々の従来の混合、粉砕、直接打錠、造粒、糖衣、溶解、凍結乾燥プロセス、又は当業者に明らかである作製技法により調製される。複数の用量単位の投与により必要な有効量に達し得るので、各剤形の個別の投与量に含まれる組合せパートナーの単位含量がそれ自体で有効量を構成する必要がないことが認識されるだろう。医薬組成物は、約０．１％〜約９９．９％、好ましくは約１％〜約６０％の治療剤を含み得る。当業者は、定型的な実験により、過度の負担なく、剤形の特定の所望の性質に関して上述の担体の１種以上を選択できる。使用される各担体の量は、当技術分野の従来の範囲内で変動し得る。以下の参照文献は、経口剤形を製剤するのに利用される技法及び賦形剤を開示する。Ｔｈｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，４ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｒｏｗｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｄｓ．，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ（２００３）；及びＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００３）を参照されたい。これらの任意選択の追加の従来の担体は、造粒の前若しくはその間に１種以上の従来の担体を初期の混合物に組み込むか、又は１種以上の従来の担体を、経口剤形中の薬剤の組合せ若しくは薬剤の組合せの個別の薬剤を含む顆粒と合わせることにより、経口剤形に組み込むことができる。後者の実施形態において、合わされた混合物を、例えばＶブレンダーによりさらにブレンドして、その後に圧縮又は型に入れて、錠剤、例えば一体型錠剤（ｍｏｎｏｌｉｔｈｉｃ  ｔａｂｌｅｔ）にすることも、カプセルにより封入することも、分包に充填することもできる。明らかに、本発明の医薬組合せを利用して医薬品を製造できる。
【００４９】
本発明は、医薬品として特に有用であるそのような医薬組合せ又は医薬組成物に関する。
【００５０】
具体的に、本発明の組合せ又は組成物は、癌の治療に適用できる。
【００５１】
本発明は、本発明の医薬組合せ又は医薬組成物の、癌の治療のための医薬品の調製のための使用、及び癌治療を必要とする対象の癌を治療する方法であって、対象に、治療上有効な量の本発明による医薬組合せ又は本発明による医薬組成物を投与することを含む方法にも関する。
【００５２】
本明細書での用語「治療」は、対象の少なくとも１つの症状を軽減し、減少させ、若しくは緩和し、無増悪生存期間、全生存期間を増加させ、奏功期間を延ばし、又は疾患の進行を遅延させる治療を含む。例えば、治療は、疾患の１つ若しくはいくつかの症状の減弱でも、癌などの疾患の完全な根絶でもあり得る。本発明の意味の中で、用語「治療」は、発症を停止し、遅延させること（すなわち疾患の臨床徴候の前の期間）、且つ／又は、患者、例えば、哺乳動物の疾患の発生若しくは悪化のリスクを減少させることを指し、特に患者はヒトである。本明細書での用語「治療」は、原発腫瘍成長の直接阻害及び／又は転移性癌細胞の全身性阻害を組み込む腫瘍の成長の阻害を含む。
【００５３】
「対象」、「個人」、又は「患者」は本明細書において互換的に使用され、脊椎動物、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトを指す。哺乳動物には、マウス、サル、ヒト、家畜、スポーツ動物（ｓｐｏｒｔ  ａｎｉｍａｌｓ）、及びペットがあるが、これらに限定されない。
【００５４】
本発明の化合物（例えば、化学成分又は生物製剤）の「治療上有効な量」という用語は、対象の生物学的若しくは医学的反応、例えば酵素若しくはタンパク質活性の減少若しくは阻害を引き出し、又は症状を改善し、病態を緩和し、疾患進行を緩徐化若しくは遅延させ、又は疾患を予防する、本発明の化合物の量を指す。一実施形態において、インビボでの治療上有効な量は、投与経路によって、約０．１〜５００ｍｇ／ｋｇ、又は約１〜１００ｍｇ／ｋｇになり得る。
【００５５】
癌の治療のための各組合せパートナーの最適な用量は、公知の方法を利用して、各個人に対して経験的に決定でき、疾患の進行の程度；個人の年齢、体重、全般的な健康、性別、及び食事；投与の時間及び経路；並びに個人が服用している他の医薬品を含むがこれらに限定されない種々の因子に依存するだろう。最適な用量は、当技術分野に周知である定型的な試験及び手順を利用して確立できる。担体材料と合わされて単一の剤形を生み出し得る各組合せパートナーの量は、治療される個人及び特定の投与様式によって様々だろう。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の薬剤の組合せを含む単位剤形は、薬剤が単独で投与される場合に典型的に投与される、組合せの各薬剤の量を含むだろう。
【００５６】
用量の頻度は、使用される化合物及び治療又は予防すべき特定の病態により様々になり得る。一般に、有効な療法を与えるのに充分な最低用量の使用が好ましい。患者は、一般に、当業者に知られている、治療又は予防されている病態に好適なアッセイを利用して、治療の有効性に関してモニターされ得る。
【００５７】
（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オンの治療量又は投与量は、経口投与される場合、３週ごとに１００〜１５００ｍｇの範囲、特に３週ごとに１００〜８００ｍｇの範囲、又は毎日５０〜６００ｍｇの範囲であり得る。（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オンの治療量又は投与量は、２８日サイクルの最初の２１日の毎日投与で、４００ｍｇであり得て、より好ましくは３００ｍｇである。或いは、（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オンの総治療量又は総投与量は、サイクルあたり５６０ｍｇである（４０ｍｇ  １日１回２週間服用／２週間休薬、又は８０ｍｇ  １日１回１週間服用／３週間休薬）。さらに、本発明の組合せにおける使用の用量は、典型的には、この化合物の単剤としての使用に適切である上述のものより低いだろう。したがって、３週ごとに１００〜５００ｍｇの用量が好適であり得て、又は毎日５０〜４００ｍｇの用量が経口投与に好適になり得て、２８日サイクルの最初の２１日間毎日２００ｍｇ又は３００ｍｇなどのより低い用量が利用され得る。静脈内投与量であれば、それに応じて減らす必要があるだろう。
【００５８】
各治療剤が、簡便には、例えば、１つの個別の用量単位で投与されても、複数の用量単位に分割されてもよいことが理解される。その各治療剤が、簡便には１日１回の投与量でも、１日当たり４回までの投与量でも投与できることがさらに理解される。
【００５９】
用語「癌」は、広範囲の腫瘍、とりわけ固形腫瘍を意味するように本明細書で使用される。そのような腫瘍の例には、肺（小細胞肺癌及び非小細胞肺癌を含む）、気管支、前立腺、乳房（散発性乳癌及びカウデン病の患者を含む）、膵臓、消化管、結腸、直腸、結腸癌腫、大腸癌、甲状腺、肝臓、胆道、肝内胆管、肝細胞、副腎、胃（ｓｔｏｍａｃｈ）、胃（ｇａｓｔｒｉｃ）、グリオーマ、膠芽腫、子宮内膜、腎臓、腎盂、膀胱、子宮、子宮頸部、膣、卵巣、多発性骨髄腫、食道、頭頚部、脳、口腔及び咽頭、喉頭、小腸の良性又は悪性腫瘍、メラノーマ、繊毛結腸腺腫、肉腫、新生物、上皮形質（ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｃｈａｒａｃｔｅｒ）の新生物、乳癌、基底細胞癌、扁平上皮癌、日光角化症、真性多血病、本態性血小板症、白血病（急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、リンパ球性白血病、及び骨髄性白血病を含む）、リンパ腫（非ホジキンリンパ腫及びホジキンリンパ腫を含む）、骨髄化生を伴う骨髄線維症、ワルデンシュトレーム病、及びバレット腺癌があるが、これらに限定されない。
【００６０】
好ましくは、癌は、メラノーマ、脂肪肉腫、膠芽腫、神経芽細胞腫、大腸癌、リンパ腫、又は白血病である。好ましい実施形態において、癌はメラノーマである。一実施形態において、本発明は、ＢＲＡＦのＶ６００Ｅ変異など、ＲＡＦ阻害剤に対する耐性を付与する変異を有するメラノーマに関する。そのようないくつかの実施形態において、メラノーマは、野生型ｐ５３をさらに特徴とする。
【００６１】
組合せは、機能的ｐ５３又はｐ５３野生型癌における優れた効果を得ることが期待される。ＴＰ５３遺伝子は、ヒト癌において最も頻繁に変異している遺伝子の１つである。そのため、腫瘍抑制因子ｐ５３は、ヒト癌のほぼ５０％において変異又は欠失により機能障害を受けている。残りのヒト癌において、ｐ５３は野生型状態を保持しているが、その機能は、その主要な細胞阻害因子（ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）、マウス二重微小染色体２（Ｍｄｍ２、ＭＤＭ２；ＨＤＭ２（マウス二重微小染色体２のヒトホモログ））により阻害される。Ｍｄｍ２は、ｐ５３腫瘍抑制因子の負の調節因子である。Ｍｄｍ２タンパク質は、ｐ５３のプロテアソーム分解をもたらすＥ３ユビキチンリガーゼとｐ５３転写活性化の阻害因子の両方として機能する。多くの場合、Ｍｄｍ２はｐ５３野生型腫瘍中で増幅している。Ｍｄｍ２とｐ５３の間の相互作用が、野生型ｐ５３を保持している癌内のｐ５３機能の阻害の主要な機構であるため、ＭＤＭ２阻害剤を含む本発明の組合せは、機能的ｐ５３又はｐ５３野生型癌の治療に特に有用である。
【００６２】
さらに、組合せの有効性は、ＮＲＡＳ若しくはＫＲＡＳ変異及び／又はＢＲＡＦ変異の１つ以上を特徴とする癌において増加すると期待される。
【００６３】
ＫＲＡＳ又はＢＲＡＦ変異を有するメラノーマの患者は、一般的に予後不良と関連する（Ａｒｒｉｎｇｔｏｎ，Ｈｅｉｎｒｉｃｈ  ｅｔ  ａｌ．２０１２，Ｓａｆａｅｅ  Ａｒｄｅｋａｎｉ，Ｊａｆａｒｎｅｊａｄ  ｅｔ  ａｌ．２０１２）。本発明の組合せは、少なくとも１つのＫＲＡＳ変異及び／又は少なくとも１つのＢＲＡＦ変異を含むメラノーマを有する対象の治療に特に有用である。
【００６４】
ＢＲＡＦ変異の例には、Ｖ６００Ｅ、Ｒ４６１Ｉ、Ｉ４６２Ｓ、Ｇ４６３Ｅ、Ｇ４６３Ｖ、Ｇ４６５Ａ、Ｇ４６５Ｅ、Ｇ４６５Ｖ、Ｇ４６８Ａ、Ｇ４６８Ｅ、Ｎ５８０Ｓ、Ｅ５８５Ｋ、Ｄ５９３Ｖ、Ｆ５９４Ｌ、Ｇ５９５Ｒ、Ｌ５９６Ｖ、Ｔ５９８Ｉ、Ｖ５９９Ｄ、Ｖ５９９Ｅ、Ｖ５９９Ｋ、Ｖ５９９Ｒ、Ｖ６００Ｋ、Ａ７２７Ｖがあるが、これらに限定されない。これらの変異のほとんどは、２つの領域：ＮローブのグリシンリッチＰループ並びに活性化セグメント及び隣接領域に集中している。Ｖ６００Ｅ変異は種々の癌に検出されており、ヌクレオチド１７９９でのチミンのアデニンによる置換によるものである。これにより、コドン６００で、バリン（Ｖ）がグルタミン酸（Ｅ）により置換されている（ここで、Ｖ６００Ｅと称される）。
【００６５】
とりわけ、本発明の組合せは、ＢＲＡＦ変異体メラノーマ、例えば、ＢＲＡＦ−Ｖ６００Ｅ変異メラノーマを治療するのに有用であり得る。これらのメラノーマはベムラフェニブに耐性でもあり得る。
【００６６】
以下の実施例は上述の本発明を説明するが、本発明の範囲を決して限定しないものとする。該当分野の当業者にそれ自体知られている他の試験モデルも、請求項記載の本発明の有益な効果を決定できる。
【実施例】
【００６７】
以下の実施例は、ＥＲＫ阻害剤がＭＤＭ２阻害剤と組み合わせて使用されて、ＢＲＡＦ変異を有する癌が治療される場合の相乗的な活性を表す。実施例１はインビトロでの相乗効果を表し、実施例２は、ＥＲＫ及びＭＤＭ２の阻害剤の異なる組合せを使用するインビボ異種移植片モデルにおける相乗効果を表す。
【００６８】
実施例１：メラノーマ細胞株ＷＭ−２６６−４及びＡ−３７５の増殖に対する、Ｍｄｍ２阻害剤化合物ＡをＥＲＫ阻害剤化合物Ｂと組み合わせることのインビトロの効果
この試験は、ＢＲＡＦ変異を発現するメラノーマモデルに対する、ＭＤＭ２阻害剤をＥＲＫ阻害剤と組み合わせることのインビトロの効果を研究するために設計した。ＭＤＭ２阻害剤（６Ｓ）−５−（５−クロロ−１−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）−６−（４−クロロフェニル）−２−（２，４−ジメトキシピリミジン−５−イル）−１−（プロパン−２−イル）−５，６−ジヒドロピロロ［３，４−ｄ］イミダゾール−４（１Ｈ）−オン（「化合物Ａ」）を、ある範囲の濃度でＥＲＫ阻害剤４−（３−アミノ−６−（（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）ピラジン−２−イル）−Ｎ−（（Ｓ）−１−（３−ブロモ−５−フルオロフェニル）−２−（メチルアミノ）エチル）−２−フルオロベンズアミド（「化合物Ｂ」）と組み合わせて使用した。２種のＢＲＡＦ変異メラノーマ細胞株、ＷＭ−２６６−４及びＡ−３７５を試験した。
【００６９】
化合物を１００％ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ、カタログ番号Ｄ２４３８−５０ＭＬ）に１０ｍＭのストック濃度で溶解させ、−２０℃で使用まで保存した。組合せのために、化合物を、Ｄｉｌｕｘ  ｄｉｌｕｔｉｏｎ  ｒｅｓｅｒｖｏｉｒｓ（Ｃｈｅｍｇｌａｓｓ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、カタログ番号ＣＬＳ−３７９６−００１）中で３倍の段階希釈で希釈した。化合物Ａを０．０〜４．０μＭの濃度範囲で使用した。化合物Ｂを０．０〜１０．０μＭの濃度範囲で使用した。
【００７０】
細胞株をＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから購入した。Ａ−３７５細胞をダルベッコ改変イーグル培地（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号１１９９５−０６５）で培養し、ＷＭ−２６６−４細胞を最小必須培地α（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号１２５６１−０５６）で培養した。両株に、１０％ＦＢＳ（Ｓｅｒａｄｉｇｍ、カタログ番号１５００−５００）を補った。全細胞株を、Ｉｄｅｘｘ  Ｒａｄｉｌ（Ｃｏｌｕｍｂｉａ、ＭＯ、ＵＳＡ）で実施されたＰＣＲ検出アッセイによりマイコプラズマ汚染がないと確認し、ＳＮＰ分析により本物であると証明した。細胞を凍結ストックから解凍し、１以上の継代により増殖させ、３７℃５％ＣＯ２中で成長させた。細胞をＴ−７５フラスコに増殖させ、播種の前にＢｅｃｋｍａｎ−Ｃｏｕｌｔｅｒ  ＶｉＣｅｌｌカウンターを使用して生存能力に関して評価した。細胞株を分けて増殖させるために、細胞を、０．２５％トリプシン−ＥＤＴＡ（Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｃｏｓｔａｒ、カタログ番号２５−０５３−ＣＬ）を使用してフラスコから取り除いた。
【００７１】
組合せアッセイのために、細胞を、ウェルあたり８０μＬの最終体積及びウェルあたり２５００細胞（Ａ−３７５用）又は４０００細胞（ＷＭ−２６６−４用）の密度で、９６−ウェルプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｃｏｓｔａｒ、カタログ番号３９０４）に加えた。１２〜２４時間の培養後、１０μＬの各化合物希釈系列を三連でプレートに移し、先に明示した化合物濃度範囲を生じさせた。さらに、０日のプレートを、以下に説明するＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ａｓｓａｙを使用して、この時点でアッセイした。７２時間の化合物処理の後、細胞増殖に対する化合物の効果を、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（商標）Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｇ７５７３）を使用して測定した。これは、代謝活性がある細胞の存在の信号を送る、存在するＡＴＰの定量化により培養物中の生細胞の数を測定する均質な方法である。方法は、ｔｈｅ  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ，ＴＢ２８８  Ｐｒｏｍｅｇａに詳述されている。簡単に言うと、１００μｌのＣＴＧ  Ｒｅａｇｅｎｔをプレートに加え、プレートをオービタルシェーカー上で２０〜３０分間インキュベートした。次いで、プレートをＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｖｉｃｔｏｒ（商標）Ｘ４プレートリーダーで読み取った。
【００７２】
成長阻害パーセント、過剰阻害（ｅｘｃｅｓｓ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ）、及び成長阻害を、Ｌｏｅｗｅ相乗効果モデル（Ｌｅｈａｒ  ｅｔ  ａｌ．２００９に記載）を使用しＣｏｍｂｏ  Ｍｏｄｕｌｅソフトウェアを使用して計算したが、それは、２種の薬物が用量相加的（ｄｏｓｅ  ａｄｄｉｔｉｖｅ  ｍａｎｎｅｒ）にふるまう場合に期待されるだろうよりも高い成長に対する効果を測定するものである。正の数は相乗効果増加の部分を表す。ＤＭＳＯに対する成長阻害のパーセンテージは、「阻害」と記されたパネル中に表される。期待される量を上回る阻害の量は「ＡＤＤ過剰阻害」と記されたパネルにある。０日目に対して正規化された阻害の量は、「成長阻害」と記されたパネルに表される。化合物Ａの濃度は一番下の列に沿って左から右に示され、化合物Ｂの増加する濃度は一番左の行に沿って下から上に示されている。グリッド中の残りの点全ては、２つの軸上に示される単剤濃度に対応する２種の阻害剤の組合せの結果を表す。絶対的なＡＣ５０は、計算された曲線が５０％活性マークと交わる化合物濃度を見つけることにより決定した。絶対的なＡＣ５０及び相乗効果スコアを、Ｌｅｈａｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）に記載の通りＣｏｍｂｏ  ｍｏｄｕｌｅソフトウェアで計算した。
相乗効果スコア
ＳＳ約０→用量相加的
ＳＳ＞２→相乗効果
ＳＳ＞１→弱い相乗効果
【００７３】
図１は、メラノーマ細胞株における化合物Ａとの化合物Ｂ組合せの阻害、Ｌｏｅｗｅ（ＡＤＤ）過剰阻害、及び成長阻害のマトリックスを示す。
【００７４】
以下の表は、各化合物の単剤ＩＣ５０値及び相乗効果を評価するためのＬｅｈａｒ  Ｊ，Ｋｒｕｅｇｅｒ  ＡＳ，Ａｖｅｒｙ  Ｗ，ｅｔ  ａｌ．（２００９）に記載の方法を利用した化合物Ａ＋化合物Ｂの組合せの相乗効果スコア測定値を示す。相乗的な薬物組合せは、治療上適切な選択性を改善する傾向がある。Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  ２７：６５９−６６６）。２．０以上のスコアが観察された場合、相互作用を相乗的であるとみなした。データは、ＢＲＡＦ耐性変異を含む２種の異なるメラノーマ細胞株における化合物Ａと化合物Ｂの間の相乗的な活性を表す。
【００７５】
【表１】
2020536890.tif 000009
【００７６】
実施例２：ＢＲＡＦ阻害剤耐性メラノーマの異種移植片における活性
ＢＲＡＦ阻害剤であるベムラフェニブによる治療にもかかわらずメラノーマが進行した患者から誘導した異種移植片モデルを、免疫不全マウス中に確立した（Ｈｉｄａｌｇｏ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４）。異種移植片組織が、ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ変異及び野生型ｐ５３を有し、並びに追加の未特定の活性化ＭＥＫ変異も有することを確認した。バイオマーカーシグナチャーは、組織がｐ５３再活性化に対して感受性があるだろうことを示唆した。予測通り、この異種移植片を有するマウスはＢＲＡＦ阻害剤に反応しなかった。
【００７７】
この異種移植片を有するマウスを、ＣＧＭ０９７（１日あたり１００ｍｇ／ｋｇ  １回、強制経口投与による）、又はＢＶＤ−５２３（５０ｍｇ／ｋｇ  １日２回、強制経口投与による）、又は両者一緒により処置した（処置あたり１０匹の動物）。図２Ａは、各処置の平均腫瘍成長曲線を示す。単剤処置を受けている動物の腫瘍成長の速度は、対照と大きくは変わらなかった。しかし、ＣＧＭ０９７とＢＶＤ−５２３の組合せは、３８日の期間にわたり腫瘍成長を大幅に抑えた。このように、ＢＶＤ−５２３とＣＧＭ０９７との一緒の処置は相乗効果を生み出し、この期間にわたる安定をもたらした。
【００７８】
図２Ｂは、併用処置群の各個別の動物の腫瘍成長曲線を示す。２匹の動物は併用処置に充分に反応しなかったが、６匹は３８日まで安定を示し、他の２匹は著しい腫瘍縮小を示したので、１０匹のうち８匹の動物は組合せに反応した。３８日目に処置を停止すると（図２Ｂの矢印）、処置の間に腫瘍がほぼ消失していた動物のどちらにも腫瘍再成長が起こった。
【００７９】
ＲＥＦＥＲＥＮＣＥＳ  ＣＩＴＥＤ  ＨＥＲＥＩＮ
Ａｒｒｉｎｇｔｏｎ，  Ａ．  Ｋ．，  Ｅ．  Ｌ．  Ｈｅｉｎｒｉｃｈ，  Ｗ．  Ｌｅｅ，  Ｍ．  Ｄｕｌｄｕｌａｏ，  Ｓ．  Ｐａｔｅｌ，  Ｊ．  Ｓａｎｃｈｅｚ，  Ｊ．  Ｇａｒｃｉａ−Ａｇｕｉｌａｒ  ａｎｄ  Ｊ．  Ｋｉｍ  （２０１２）．  “Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ  ａｎｄ  ｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅ  ｒｏｌｅｓ  ｏｆ  ＫＲＡＳ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  ｃａｎｃｅｒ．”  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｍｏｌ  Ｓｃｉ  １３（１０）：  １２１５３−１２１６８．
Ｂｏｚｉｃ，  Ｉ．，  Ｊ．  Ｇ．  Ｒｅｉｔｅｒ，  Ｂ．  Ａｌｌｅｎ，  Ｔ．  Ａｎｔａｌ，  Ｋ．  Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ，  Ｐ．  Ｓｈａｈ，  Ｙ．  Ｓ．  Ｍｏｏｎ，  Ａ．  Ｙａｑｕｂｉｅ，  Ｎ．  Ｋｅｌｌｙ，  Ｄ．  Ｔ．  Ｌｅ，  Ｅ．  Ｊ．  Ｌｉｐｓｏｎ，  Ｐ．  Ｂ．  Ｃｈａｐｍａｎ，  Ｌ．  Ａ．  Ｄｉａｚ，  Ｊｒ．，  Ｂ．  Ｖｏｇｅｌｓｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｍ．  Ａ．  Ｎｏｗａｋ  （２０１３）．  “Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎａｒｙ  ｄｙｎａｍｉｃｓ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ  ｉｎ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｔｈｅｒａｐｙ．”  Ｅｌｉｆｅ  ２：  ｅ００７４７．
Ｂｒａｎａ，  Ｉ．  ａｎｄ  Ｌ．  Ｌ．  Ｓｉｕ  （２０１２）．  “Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ  ３−ｋｉｎａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．”  ＢＭＣ  Ｍｅｄ  １０：  １６１．
Ｃｈａｎｄａｒｌａｐａｔｙ，  Ｓ．  （２０１２）．  “Ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｆｅｅｄｂａｃｋ  ａｎｄ  ａｄａｐｔｉｖｅ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ．”  Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖ  ２（４）：  ３１１−３１９．
Ｃｈａｐｍａｎ，  Ｐ．  Ｂ．，  Ｄ．  Ｂ．  Ｓｏｌｉｔ  ａｎｄ  Ｎ．  Ｒｏｓｅｎ  （２０１４）．  “Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＲＡＦ  ａｎｄ  ＭＥＫ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ＢＲＡＦ−ｍｕｔａｔｅｄ  ｍｅｌａｎｏｍａ：  ｆｅｅｄｂａｃｋ  ｉｓ  ｎｏｔ  ｅｎｃｏｕｒａｇｅｄ．”  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  ２６（５）：  ６０３−６０４．
Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ，  Ｍ．  Ｓ．，  Ｊ．  Ｅ．  Ｐｕｒｖｉｓ，  Ｌ．  Ｆ．  Ｂｒａｓｓ  ａｎｄ  Ｓ．  Ｌ．  Ｄｉａｍｏｎｄ  （２０１０）．  “Ｐａｉｒｗｉｓｅ  ａｇｏｎｉｓｔ  ｓｃａｎｎｉｎｇ  ｐｒｅｄｉｃｔｓ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ  ｔｏ  ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  ｓｔｉｍｕｌｉ．”  Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  ２８（７）：  ７２７−７３２．
Ｃｈｏｕ，  Ｔ．  Ｃ．  ａｎｄ  Ｐ．  Ｔａｌａｌａｙ  （１９８１）．  “Ｇｅｎｅｒａｌｉｚｅｄ  ｅｑｕａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ−Ｍｅｎｔｅｎ  ａｎｄ  ｈｉｇｈｅｒ−ｏｒｄｅｒ  ｋｉｎｅｔｉｃ  ｓｙｓｔｅｍｓ  ｗｉｔｈ  ｔｗｏ  ｏｒ  ｍｏｒｅ  ｍｕｔｕａｌｌｙ  ｅｘｃｌｕｓｉｖｅ  ａｎｄ  ｎｏｎｅｘｃｌｕｓｉｖｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．”  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  １１５（１）：  ２０７−２１６．
Ｄｏｅｂｅｌｅ，  Ｒ．  Ｃ．，  Ａ．  Ｂ．  Ｐｉｌｌｉｎｇ，  Ｄ．  Ｌ．  Ａｉｓｎｅｒ，  Ｔ．  Ｇ．  Ｋｕｔａｔｅｌａｄｚｅ，  Ａ．  Ｔ．  Ｌｅ，  Ａ．  Ｊ．  Ｗｅｉｃｋｈａｒｄｔ，  Ｋ．  Ｌ．  Ｋｏｎｄｏ，  Ｄ．  Ｊ．  Ｌｉｎｄｅｒｍａｎ，  Ｌ．  Ｅ．  Ｈｅａｓｌｅｙ，  Ｗ．  Ａ．  Ｆｒａｎｋｌｉｎ，  Ｍ．  Ｖａｒｅｌｌａ−Ｇａｒｃｉａ  ａｎｄ  Ｄ．  Ｒ．  Ｃａｍｉｄｇｅ  （２０１２）．  “Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ｃｒｉｚｏｔｉｎｉｂ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ＡＬＫ  ｇｅｎｅ  ｒｅａｒｒａｎｇｅｄ  ｎｏｎ−ｓｍａｌｌ  ｃｅｌｌ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ．”  Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  １８（５）：  １４７２−１４８２．
Ｄｒｕｋｅｒ，  Ｂ．  Ｊ．  （２００８）．  “Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ  ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ  ｉｎｔｏ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  ＣＭＬ．”  Ｂｌｏｏｄ  １１２（１３）：  ４８０８−４８１７．
Ｄｕｎｃａｎ，  Ｊ．  Ｓ．，  Ｍ．  Ｃ．  Ｗｈｉｔｔｌｅ，  Ｋ．  Ｎａｋａｍｕｒａ，  Ａ．  Ｎ．  Ａｂｅｌｌ，  Ａ．  Ａ．  Ｍｉｄｌａｎｄ，  Ｊ．  Ｓ．  Ｚａｗｉｓｔｏｗｓｋｉ，  Ｎ．  Ｌ．  Ｊｏｈｎｓｏｎ，  Ｄ．  Ａ．  Ｇｒａｎｇｅｒ，  Ｎ．  Ｖ．  Ｊｏｒｄａｎ，  Ｄ．  Ｂ．  Ｄａｒｒ，  Ｊ．  Ｕｓａｒｙ，  Ｐ．  Ｆ．  Ｋｕａｎ，  Ｄ．  Ｍ．  Ｓｍａｌｌｅｙ，  Ｂ．  Ｍａｊｏｒ，  Ｘ．  Ｈｅ，  Ｋ．  Ａ．  Ｈｏａｄｌｅｙ，  Ｂ．  Ｚｈｏｕ，  Ｎ．  Ｅ．  Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ，  Ｃ．  Ｍ．  Ｐｅｒｏｕ，  Ｗ．  Ｙ．  Ｋｉｍ，  Ｓ．  Ｍ．  Ｇｏｍｅｚ，  Ｘ．  Ｃｈｅｎ，  Ｊ．  Ｊｉｎ，  Ｓ．  Ｖ．  Ｆｒｙｅ，  Ｈ．  Ｓ．  Ｅａｒｐ，  Ｌ．  Ｍ．  Ｇｒａｖｅｓ  ａｎｄ  Ｇ．  Ｌ．  Ｊｏｈｎｓｏｎ  （２０１２）．  “Ｄｙｎａｍｉｃ  ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｋｉｎｏｍｅ  ｉｎ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ｔａｒｇｅｔｅｄ  ＭＥＫ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｒｉｐｌｅ−ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ．”  Ｃｅｌｌ  １４９（２）：  ３０７−３２１．
Ｈｉｄａｌｇｏ，  Ｍ．  ｅｔ  ａｌ．  （２０１４），  “Ｐａｔｉｅｎｔ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｘｅｎｏｇｒａｆｔ  ｍｏｄｅｌｓ：  ａｎ  ｅｍｅｒｇｉｎｇ  ｐｌａｔｆｏｒｍ  ｆｏｒ  ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  ｃａｎｃｅｒ  ｒｅｓｅａｒｃｈ，”  Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖ．  ４，  ９９８−１０１３．
Ｋａｔａｙａｍａ，  Ｒ．，  Ａ．  Ｔ．  Ｓｈａｗ，  Ｔ．  Ｍ．  Ｋｈａｎ，  Ｍ．  Ｍｉｎｏ−Ｋｅｎｕｄｓｏｎ，  Ｂ．  Ｊ．  Ｓｏｌｏｍｏｎ，  Ｂ．  Ｈａｌｍｏｓ，  Ｎ．  Ａ．  Ｊｅｓｓｏｐ，  Ｊ．  Ｃ．  Ｗａｉｎ，  Ａ．  Ｔ．  Ｙｅｏ，  Ｃ．  Ｂｅｎｅｓ，  Ｌ．  Ｄｒｅｗ，  Ｊ．  Ｃ．  Ｓａｅｈ，  Ｋ．  Ｃｒｏｓｂｙ，  Ｌ．  Ｖ．  Ｓｅｑｕｉｓｔ，  Ａ．  Ｊ．  Ｉａｆｒａｔｅ  ａｎｄ  Ｊ．  Ａ．  Ｅｎｇｅｌｍａｎ  （２０１２）．  “Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  ａｃｑｕｉｒｅｄ  ｃｒｉｚｏｔｉｎｉｂ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｉｎ  ＡＬＫ−ｒｅａｒｒａｎｇｅｄ  ｌｕｎｇ  Ｃａｎｃｅｒｓ．”  Ｓｃｉ  Ｔｒａｎｓｌ  Ｍｅｄ  ４（１２０）：  １２０ｒａ１１７．
Ｌｅｈａｒ，  Ｊ．，  Ａ．  Ｋｒｕｅｇｅｒ，  Ｇ．  Ｚｉｍｍｅｒｍａｎｎ  ａｎｄ  Ａ．  Ｂｏｒｉｓｙ  （２００８）．  “Ｈｉｇｈ−ｏｒｄｅｒ  ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｒｏｂｕｓｔｎｅｓｓ．”  Ｍｏｌ  Ｓｙｓｔ  Ｂｉｏｌ  ４：  ２１５．
Ｌｉｔｏ，  Ｐ．，  Ｎ．  Ｒｏｓｅｎ  ａｎｄ  Ｄ．  Ｂ．  Ｓｏｌｉｔ  （２０１３）．  “Ｔｕｍｏｒ  ａｄａｐｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．”  Ｎａｔ  Ｍｅｄ  １９（１１）：  １４０１−１４０９．
Ｒｏｂｅｒｔ，  Ｃ．，  Ｂ．  Ｋａｒａｓｚｅｗｓｋａ，  Ｊ．  Ｓｃｈａｃｈｔｅｒ，  Ｐ．  Ｒｕｔｋｏｗｓｋｉ，  Ａ．  Ｍａｃｋｉｅｗｉｃｚ，  Ｄ．  Ｓｔｒｏｉａｋｏｖｓｋｉ，  Ｍ．  Ｌｉｃｈｉｎｉｔｓｅｒ，  Ｒ．  Ｄｕｍｍｅｒ，  Ｆ．  Ｇｒａｎｇｅ，  Ｌ．  Ｍｏｒｔｉｅｒ，  Ｖ．  Ｃｈｉａｒｉｏｎ−Ｓｉｌｅｎｉ，  Ｋ．  Ｄｒｕｃｉｓ，  Ｉ．  Ｋｒａｊｓｏｖａ，  Ａ．  Ｈａｕｓｃｈｉｌｄ，  Ｐ．  Ｌｏｒｉｇａｎ，  Ｐ．  Ｗｏｌｔｅｒ，  Ｇ．  Ｖ．  Ｌｏｎｇ，  Ｋ．  Ｆｌａｈｅｒｔｙ，  Ｐ．  Ｎａｔｈａｎ，  Ａ．  Ｒｉｂａｓ，  Ａ．  Ｍ．  Ｍａｒｔｉｎ，  Ｐ．  Ｓｕｎ，  Ｗ．  Ｃｒｉｓｔ，  Ｊ．  Ｌｅｇｏｓ，  Ｓ．  Ｄ．  Ｒｕｂｉｎ，  Ｓ．  Ｍ．  Ｌｉｔｔｌｅ  ａｎｄ  Ｄ．  Ｓｃｈａｄｅｎｄｏｒｆ  （２０１５）．  “Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｏｖｅｒａｌｌ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｉｎ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｗｉｔｈ  ｃｏｍｂｉｎｅｄ  ｄａｂｒａｆｅｎｉｂ  ａｎｄ  ｔｒａｍｅｔｉｎｉｂ．”  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３７２（１）：  ３０−３９．
Ｓａｆａｅｅ  Ａｒｄｅｋａｎｉ，  Ｇ．，  Ｓ．  Ｍ．  Ｊａｆａｒｎｅｊａｄ，  Ｌ．  Ｔａｎ，  Ａ．  Ｓａｅｅｄｉ  ａｎｄ  Ｇ．  Ｌｉ  （２０１２）．  “Ｔｈｅ  ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ  ｖａｌｕｅ  ｏｆ  ＢＲＡＦ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  ｍｅｌａｎｏｍａ：  ａ  ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  ｒｅｖｉｅｗ  ａｎｄ  ｍｅｔａ−ａｎａｌｙｓｉｓ．”  ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ  ７（１０）：  ｅ４７０５４．
Ｓｏｌｉｔ，  Ｄ．  Ｂ．  ａｎｄ  Ｎ．  Ｒｏｓｅｎ  （２０１４）．  “Ｔｏｗａｒｄｓ  ａ  ｕｎｉｆｉｅｄ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ＲＡＦ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．”  Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖ  ４（１）：  ２７−３０．
Ｓｕｌｌｉｖａｎ，  Ｒ．  Ｊ．  ａｎｄ  Ｋ．  Ｔ．  Ｆｌａｈｅｒｔｙ  （２０１３）．  “Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｔｏ  ＢＲＡＦ−ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  ｍｅｌａｎｏｍａ．”  Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ  ４９（６）：  １２９７−１３０４．
Ｔｕｒｎｅｒ，  Ｎ．  Ｃ．，  Ｊ．  Ｒｏ，  Ｆ．  Ａｎｄｒｅ，  Ｓ．  Ｌｏｉ，  Ｓ．  Ｖｅｒｍａ，  Ｈ．  Ｉｗａｔａ，  Ｎ．  Ｈａｒｂｅｃｋ，  Ｓ．  Ｌｏｉｂｌ，  Ｃ．  Ｈｕａｎｇ  Ｂａｒｔｌｅｔｔ，  Ｋ．  Ｚｈａｎｇ，  Ｃ．  Ｇｉｏｒｇｅｔｔｉ，  Ｓ．  Ｒａｎｄｏｌｐｈ，  Ｍ．  Ｋｏｅｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍ．  Ｃｒｉｓｔｏｆａｎｉｌｌｉ  （２０１５）．  “Ｐａｌｂｏｃｉｃｌｉｂ  ｉｎ  Ｈｏｒｍｏｎｅ−Ｒｅｃｅｐｔｏｒ−Ｐｏｓｉｔｉｖｅ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ．”  Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ．
【図１】
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【図２−１】
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【図２−２】
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【国際調査報告】
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