(57)【要約】  試料濾過装置が提供される。本装置は、入力基板と出力基板との間に配置され、粘着層を使用して接合されたフィルタ膜を含んでよい。フィルタアセンブリは、フレキシブル容器、バルブピペット、マイクロピペット等のような、様々な、試料を採取且つ定量供給する装置とともに使用されてよい。（例えば、フレキシブル容器、バルブピペット、又はマイクロピペットを使用して）フィルタアセンブリに圧力をかけることにより、流体をフィルタ膜に押し通して、検査ストリップ又は検査カートリッジの上に押し出すことが可能である。
2020525802.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料を処理する試料濾過装置であって、
フレキシブル容器と、
前記フレキシブル容器を封止するように構成されたキャップであって、
前記フレキシブル容器と流体連通している１つ以上の入口穴と、
前記１つ以上の入口穴と流体連通していて、前記試料を濾過して濾液にするように構成された非対称フィルタと、
前記非対称フィルタからの前記濾液と流体連通する１つ以上のチャネルを含む支持構成要素と、
前記フィルタを前記キャップ又は前記支持構成要素に接合するように構成された粘着層と、
前記１つ以上のチャネルと流体連通している出口と、
を含む前記キャップと、
を含む試料濾過装置。
【請求項２】
前記粘着層は両面粘着層である、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項３】
前記キャップは、ねじ式接続により前記フレキシブル容器を封止する、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項４】
前記試料流体は全血を含む、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項５】
前記粘着層は、前記粘着層が前記非対称フィルタに粘着されたときに前記非対称フィルタを露出させるように構成された切り抜き部を含む、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項６】
前記非対称フィルタのサイズが、前記粘着層のサイズより小さい、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項７】
前記１つ以上のチャネルは、曲がりくねったチャネル、又は複数のチャネルを含む、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項８】
前記出口はスパウトを含む、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項９】
前記キャップは、ポリプロピレン、ポリカーボネート、アルミニウム、及び鋼のうちの少なくとも１つを含む、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項１０】
前記粘着層と接合する前記キャップの表面がほぼフラットである、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項１１】
前記粘着層と接合する前記キャップの表面が突起形状物を含む、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項１２】
前記粘着層と接合する前記支持構成要素の表面がほぼフラットである、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項１３】
前記粘着層と接合する前記支持構成要素の表面が突起形状物を含む、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項１４】
前記粘着層は、シリコーン系又はアクリル系の粘着剤を含む、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項１５】
前記フィルタ膜の幅が約１５ｍｍである、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項１６】
前記フィルタ膜の長さが約１５ｍｍである、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項１７】
前記非対称フィルタの細孔径が約０．８μｍである、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項１８】
前記フィルタ膜は、ポリカーボネート、ポリスルホン、ポリエステル、ポリエチレン、及びポリプロピレンのうちの少なくとも１つを含む、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項１９】
前記キャップは、その外周部の周囲にリッジを含む、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項２０】
前記支持構成要素は、前記キャップの前記リッジの内側にぴったり収まるサイズになっている、請求項１９に記載の試料濾過装置。
【請求項２１】
前記支持構成要素は、その外周部の周囲にリッジを含む、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項２２】
前記キャップは、前記支持構成要素の前記リッジの内側にぴったり収まるサイズになっている、請求項２１に記載の試料濾過装置。
【請求項２３】
前記１つ以上のチャネルは、前記フィルタ膜の領域全体にわたって延びる、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項２４】
前記１つ以上のチャネルは、チャネル間の間隔が約１．５ｍｍである、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項２５】
前記チャネルの構成の選択が、前記支持構成要素の表面の材質及び粗度に基づいて行われる、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項２６】
前記容器の開口部のサイズより大きいフィルタサイズに対応する為に、前記キャップの封止部分が前記キャップの外周より小さい、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項２７】
前記キャップに接続されて前記フレキシブル容器の長さ全体にわたって延びるスワブを更に含む、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項２８】
前記スワブの端部が、前記キャップの切り抜き部と結合するように構成されたアンダカットを含む、請求項２７に記載の試料濾過装置。
【請求項２９】
前記キャップが前記スワブに取り付けられた場合に前記スワブの周囲の前記切り抜き部を通り抜ける流体経路を更に含む、請求項２８に記載の試料濾過装置。
【請求項３０】
前記粘着層は、前記フィルタを前記キャップに接合するように構成されている、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項３１】
前記粘着層は、前記フィルタを前記支持構成要素に接合するように構成されている、請求項１に記載の試料濾過装置。
【請求項３２】
試料を濾過する方法であって、
フレキシブル容器と、前記フレキシブル容器を封止するように構成されたキャップと、を含む試料濾過装置を用意するステップと、
前記フレキシブル容器に試料流体を入れるステップと、
前記フレキシブル容器を圧搾することによって、前記試料流体を前記キャップの１つ以上の入口穴に押し通し、非対称フィルタに押し通して濾液を生成し、前記濾液を１つ以上のチャネルに押し通して出口まで押し出すステップと、
を含む方法。
【請求項３３】
前記フレキシブル容器を圧搾するステップを更に含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記試料流体は全血を含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項３５】
前記フレキシブル容器に緩衝液を追加するステップを更に含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項３６】
前記フレキシブル容器を圧搾する前記ステップの前に前記試料流体を混合するステップを更に含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項３７】
前記フレキシブル容器を圧搾する前記ステップの前に前記フレキシブル容器を逆さまにするステップを更に含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項３８】
前記容器を圧搾する前記ステップは、０．２５〜５ｐｓｉの圧力を発生させる、請求項３２に記載の方法。
【請求項３９】
検査装置又は診断装置において前記濾液を使用するステップを更に含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項４０】
ラテラルフローイムノアッセイ（ＬＦＩＡ）検査において前記濾液を使用するステップを更に含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項４１】
前記濾液を使用して、血中アルコール濃度、カンナビノイド検出、又はビタミン不足の検査を行うステップを更に含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項４２】
前記濾液を使用して、血流中を循環する無細胞ＤＮＡを隔離するステップを更に含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項４３】
ラテラルフローイムノアッセイ検査ストリップ上で前記濾液を使用するステップを更に含む、請求項３２に記載の方法。
【請求項４４】
試料濾過装置の製造方法であって、
入口穴を含む第１の基板を用意するステップと、
前記入口穴と流体連通していて、前記試料を濾過して濾液にするように構成された非対称フィルタを用意するステップと、
前記フィルタからの前記濾液と流体連通し、出口穴と流体連通している１つ以上のチャネルを含む第２の基板を用意するステップと、
前記非対称フィルタのサイズより小さい中央切り抜き部を含む粘着層であって、前記非対称フィルタを前記第１の基板又は前記第２の基板に接合するように構成された前記粘着層を用意するステップと、
を含む方法。
【請求項４５】
前記フィルタアセンブリをまとめて圧縮して、前記粘着層が、隣接する面に結合し、前記フィルタ膜の外周部を封止するようにするステップを更に含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記第１の基板がキャップである、請求項４４に記載の方法。
【請求項４７】
フレキシブルコネクタを前記第１の基板又は前記第２の基板に取り付けるステップを更に含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項４８】
前記フレキシブルコネクタを取り付ける前記ステップは、前記フレキシブルコネクタを前記第１の基板上にオーバモールドするステップを含む、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記フレキシブルコネクタを取り付ける前記ステップは、機械式インタロックを使用して前記フレキシブルコネクタを前記第１の基板に取り付けるステップを含む、請求項４７に記載の方法。
【請求項５０】
前記フレキシブルコネクタは、管部分につながる漏斗状入口を含み、前記管部分は、前記管部分の径より小さい径を有する収縮穴と流体連通しており、前記収縮穴は、前記第１の基板の前記入口穴と流体連通している、請求項４７に記載の方法。
【請求項５１】
前記入口穴の近くのキャビティ内にボール弁を設けるステップを更に含み、前記ボール弁は前記入口穴を可逆的に封止するように構成されている、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記粘着層を使用して前記非対称フィルタを前記第１の基板に粘着させるステップを更に含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項５３】
前記粘着層を使用して前記非対称フィルタを前記第２の基板に粘着させるステップを更に含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項５４】
前記第２の基板の少なくとも一部分の周囲にリッジを形成するステップを更に含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項５５】
前記第１の基板は、前記リッジ内にぴったり収まる形状になっている、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記第１の基板の少なくとも一部分の周囲にリッジを形成するステップを更に含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項５７】
前記第２の基板は、前記リッジ内にぴったり収まる形状になっている、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
管部分につながる漏斗状開口部を含むフレキシブルコネクタと、
前記管部分と流体連通している入口収縮穴を含む入力基板と、
前記入口収縮穴と流体連通していて、前記試料を濾過して濾液にするように構成された非対称フィルタ膜と、
前記非対称フィルタ膜に接合するように構成された粘着層であって、前記フィルタ膜の中央部分を露出させるように構成された中央切り抜き部を含む前記粘着層と、
前記非対称フィルタからの前記濾液と流体連通する１つ以上のチャネルを含む出力基板であって、前記１つ以上のチャネルは前記出力基板の出口と流体連通している、前記出力基板と、
を含む試料濾過装置。
【請求項５９】
前記入口収縮穴を可逆的に封止するように構成されたボール弁を更に含む、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項６０】
前記ボールは、前記入口収縮穴と前記フィルタ膜との間の前記キャビティ内に配置されている、請求項５９に記載の試料濾過装置。
【請求項６１】
前記ボール弁は、活性化動作の解除によって引き起こされる逆流を阻止するように構成されている、請求項５９に記載の試料濾過装置。
【請求項６２】
前記ボールは、ゴム、プラスチック、セラミック、及び金属のうちの少なくとも１つを含む、請求項５９に記載の試料濾過装置。
【請求項６３】
前記ボールの材料は、前記フィルタアセンブリの意図された使用方向に基づいて選択される、請求項５９に記載の試料濾過装置。
【請求項６４】
直立させる場合には低密度材料が選択される、請求項６３に記載の試料濾過装置。
【請求項６５】
逆さまにする場合には高密度材料が選択される、請求項６３に記載の試料濾過装置。
【請求項６６】
前記フレキシブルコネクタの開口部及び管部分は、マイクロピペットチップを受ける形状になっている、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項６７】
前記フレキシブルコネクタの外側表面が、スクイーズボトルの開口部の内側表面と結合して前記内側表面を封止する形状になっている、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項６８】
前記漏斗状開口部は長さが約１ｍｍである、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項６９】
前記漏斗状開口部は角度が約４５°である、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項７０】
前記管部分は長さが約７ｍｍである、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項７１】
前記管部分は最小内径が約１．５ｍｍである、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項７２】
前記収縮穴は径が約０．７５ｍｍである、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項７３】
前記フィルタ膜は前記入力基板に粘着される、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項７４】
前記フィルタ膜は前記出力基板に粘着される、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項７５】
前記フレキシブルコネクタは、ＴＰＥ、シリコーン、ゴム、ポリウレタン、ＬＤＰＥ、ＨＤＰＥ、ＰＰ、及び可塑化ＰＶＣのうちの少なくとも１つを含む、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項７６】
前記フレキシブルコネクタの壁厚が約２ｍｍである、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項７７】
前記粘着層は両面粘着層である、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項７８】
前記試料流体は全血を含む、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項７９】
前記非対称フィルタのサイズが、前記粘着層の外周部のサイズより小さい、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項８０】
前記１つ以上のチャネルは、曲がりくねったチャネル、又は複数のチャネルを含む、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項８１】
前記出口はスパウトを含む、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項８２】
前記フィルタ膜に隣接する前記入力基板及び前記出力基板の少なくとも一方の基板の表面がフラットである、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項８３】
前記フィルタ膜に隣接する前記入力基板及び前記出力基板の少なくとも一方の基板の表面が突起形状物を含む、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項８４】
前記粘着層は、シリコーン系又はアクリル系の粘着剤を含む、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項８５】
前記フィルタ膜の幅が約１５ｍｍである、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項８６】
前記フィルタ膜の長さが約１５ｍｍである、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項８７】
前記非対称フィルタの細孔径が約０．８μｍである、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項８８】
前記フィルタ膜は、ポリカーボネート、ポリスルホン、ポリエステル、ポリエチレン、及びポリプロピレンのうちの少なくとも１つを含む、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項８９】
前記出力基板は、その外周部の周囲にリッジを含む、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項９０】
前記入力基板は、前記出力基板の前記リッジの内側にぴったり収まるサイズになっている、請求項８９に記載の試料濾過装置。
【請求項９１】
前記入力基板は、その外周部の周囲にリッジを含む、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項９２】
前記出力基板は、前記入力基板のリッジの内側にぴったり収まるサイズになっている、請求項９１に記載の試料濾過装置。
【請求項９３】
前記１つ以上のチャネルは、前記フィルタ膜の領域全体にわたって延びる、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項９４】
前記１つ以上のチャネルは、チャネル間の間隔が約１．５ｍｍである、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項９５】
前記チャネルの構成の選択が、前記支持構成要素の表面の材質及び粗度に基づいて行われる、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項９６】
前記入口収縮穴の径が、前記管部分の径より小さい、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項９７】
前記フレキシブルコネクタは、機械式インタロックを使用して前記入力基板に接続される、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項９８】
請求項５８に記載の試料濾過装置と、試料入力領域を含む検査カートリッジであって、前記試料濾過装置の出口を前記試料入力領域と位置合わせするように構成された位置合わせ形状物を含む前記検査カートリッジと、を含む診断システム。
【請求項９９】
前記試料濾過装置を前記検査カートリッジに固定するように構成されたラッチを更に含む、請求項９８に記載の診断システム。
【請求項１００】
前記位置合わせ形状物は前記ラッチである、請求項９９に記載の診断システム。
【請求項１０１】
前記出力基板は、前記試料濾過装置を検査カートリッジに粘着させるように構成された粘着剤を含む、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項１０２】
前記出力基板は、前記試料濾過装置を検査カートリッジに粘着させるように構成された接着剤を含む、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項１０３】
前記管部分の上部が、バーブと結合するように構成されたアンダカットを含む、請求項５８に記載の試料濾過装置。
【請求項１０４】
請求項５８に記載の試料濾過装置を複数含むアレイ。
【請求項１０５】
２個、３個、４個、６個、８個、又は１２個の試料濾過装置を含む、請求項１０４に記載のアレイ。
【請求項１０６】
試料を濾過する方法であって、
管部分につながる漏斗状開口部を含むフレキシブルコネクタであって、前記管部分は入力基板の入口と流体連通しており、前記入口は非対称フィルタ膜と流体連通しており、前記非対称フィルタ膜は粘着層に接続されている、前記フレキシブルコネクタと、前記フィルタ膜から濾液を受けるように構成された１つ以上のチャネルを含み、出口を含む出力基板と、を含む試料濾過装置を用意するステップと、
試料を採取又は定量供給する装置を前記フレキシブルコネクタに取り付けるステップと、
試料を採取又は定量供給する前記装置に圧力をかけることによって、前記試料流体を前記非対称フィルタに押し通して濾液を生成し、前記濾液を１つ以上のチャネルに押し通して前記出口まで押し出すステップと、
を含む方法。
【請求項１０７】
試料を採取又は定量供給する前記装置を取り付けるステップは、前記漏斗状開口部にマイクロピペットチップを挿入するステップを含む、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１０８】
試料を採取又は定量供給する前記装置を取り付けるステップは、フレキシブル容器の開口部に前記フレキシブルコネクタを挿入するステップを含む、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１０９】
前記フレキシブル容器に緩衝液を追加するステップを更に含む、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１０】
前記フレキシブル容器を圧搾して、前記濾液を検査ストリップ又は検査カートリッジの上に定量供給するステップを更に含む、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１１】
前記フレキシブル容器を逆さまにしてから圧搾するステップを更に含む、請求項１１０に記載の方法。
【請求項１１２】
前記容器を圧搾する前記ステップは、０．２５〜５ｐｓｉの圧力を発生させる、請求項１１０に記載の方法。
【請求項１１３】
試料を採取又は定量供給する前記装置を取り付けるステップは、前記漏斗状開口部にバーブを挿入するステップを含む、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１１４】
試料を採取又は定量供給する前記装置を取り付けるステップは、前記漏斗状開口部にオスコネクタを挿入するステップを含む、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１１５】
前記濾液を検査ストリップ上に定量供給するステップを更に含む、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１１６】
前記試料流体は全血を含む、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１１７】
前記試料流体は希釈血液を含む、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１１８】
試料を採取又は定量供給する前記装置に緩衝液を追加するステップを更に含む、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１１９】
前記試料流体と前記緩衝液とを混合するステップを更に含む、請求項１１８に記載の方法。
【請求項１２０】
検査装置又は診断装置において前記濾液を使用するステップを更に含む、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１２１】
ラテラルフローイムノアッセイ（ＬＦＩＡ）検査において前記濾液を使用するステップを更に含む、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１２２】
前記濾液を使用して、血中アルコール濃度、ビタミン不足、又はカンナビノイド検出の検査を行うステップを更に含む、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１２３】
前記濾液を使用して、血流中を循環する無細胞ＤＮＡを隔離するステップを更に含む、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１２４】
ラテラルフローイムノアッセイ検査ストリップ上で前記濾液を使用するステップを更に含む、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１２５】
前記試料濾過装置を検査カートリッジ上に配置するステップを更に含む、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１２６】
前記試料濾過装置を前記検査カートリッジ上に配置する前記ステップは、前記試料濾過装置を前記検査カートリッジにラッチするステップを含む、請求項１２５に記載の方法。
【請求項１２７】
前記試料濾過装置を前記検査カートリッジ上に配置する前記ステップは、前記試料濾過装置を前記検査カートリッジに粘着させるステップを含む、請求項１２５に記載の方法。
【請求項１２８】
前記試料濾過装置を前記検査カートリッジ上に配置する前記ステップは、前記試料濾過装置を前記検査カートリッジに接着するステップを含む、請求項１２５に記載の方法。
【請求項１２９】
入口穴を含む入力基板と、
前記入口穴と流体連通していて、前記試料を濾過して濾液にするように構成された非対称フィルタ膜と、
前記非対称フィルタ膜に接合するように構成された粘着層であって、前記フィルタ膜の中央部分を露出させるように構成された中央切り抜き部を含む前記粘着層と、
前記非対称フィルタからの前記濾液と流体連通する１つ以上のチャネルを含む出力基板であって、前記１つ以上のチャネルは前記出力基板の出口と流体連通している、前記出力基板と、
を含む試料濾過装置。
【請求項１３０】
前記入口穴に取り付けられたフレキシブルコネクタであって、前記フレキシブルコネクタは、管状部分と流体連通している漏斗状開口部を含み、前記管状部分は前記入口穴と流体連通している、前記フレキシブルコネクタを更に含む、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１３１】
前記フレキシブルコネクタは、フレキシブル容器、バルブピペット、マイクロピペット、及びバーブと結合する形状になっている、請求項１３０に記載の試料濾過装置。
【請求項１３２】
前記入力基板又は前記出力基板の少なくとも一方が、フレキシブル容器のキャップの一部分を含む、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１３３】
前記入口穴を可逆的に封止するように構成されたボール弁を更に含む、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１３４】
前記ボールは、前記入口穴と前記フィルタ膜との間の前記キャビティ内に配置されている、請求項１３３に記載の試料濾過装置。
【請求項１３５】
前記ボール弁は、活性化動作の解除によって引き起こされる逆流を阻止するように構成されている、請求項１３３に記載の試料濾過装置。
【請求項１３６】
前記ボールは、ゴム、プラスチック、セラミック、及び金属のうちの少なくとも１つを含む、請求項１３３に記載の試料濾過装置。
【請求項１３７】
前記ボールの材料は、前記フィルタアセンブリの意図された使用方向に基づいて選択される、請求項１３３に記載の試料濾過装置。
【請求項１３８】
直立させる場合には低密度材料が選択される、請求項１３７に記載の試料濾過装置。
【請求項１３９】
逆さまにする場合には高密度材料が選択される、請求項１３７に記載の試料濾過装置。
【請求項１４０】
前記フィルタ膜は前記入力基板に粘着される、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１４１】
前記フィルタ膜は前記出力基板に粘着される、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１４２】
前記粘着層は両面粘着層である、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１４３】
前記試料流体は全血を含む、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１４４】
前記非対称フィルタのサイズが、前記粘着層の外周部のサイズより小さい、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１４５】
前記１つ以上のチャネルは、曲がりくねったチャネル、又は複数のチャネルを含む、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１４６】
前記出口はスパウトを含む、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１４７】
前記フィルタ膜に隣接する前記入力基板及び前記出力基板の少なくとも一方の基板の表面がフラットである、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１４８】
前記フィルタ膜に隣接する前記入力基板及び前記出力基板の少なくとも一方の基板の表面が突起形状物を含む、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１４９】
前記粘着層は、シリコーン系又はアクリル系の粘着剤を含む、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１５０】
前記フィルタ膜の幅が約１５〜１７ｍｍである、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１５１】
前記フィルタ膜の長さが約１５〜１７ｍｍである、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１５２】
前記非対称フィルタの細孔径が約０．８μｍである、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１５３】
前記フィルタ膜は、ポリカーボネート、ポリスルホン、ポリエステル、ポリエチレン、及びポリプロピレンのうちの少なくとも１つを含む、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１５４】
前記出力基板は、その外周部の周囲にリッジを含む、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１５５】
前記入力基板は、前記出力基板の前記リッジの内側にぴったり収まるサイズになっている、請求項１５４に記載の試料濾過装置。
【請求項１５６】
前記入力基板は、その外周部の周囲にリッジを含む、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１５７】
前記出力基板は、前記入力基板のリッジの内側にぴったり収まるサイズになっている、請求項１５６に記載の試料濾過装置。
【請求項１５８】
前記１つ以上のチャネルは、前記フィルタ膜の領域全体にわたって延びる、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１５９】
前記１つ以上のチャネルは、チャネル間の間隔が約１．５ｍｍである、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１６０】
前記チャネルの構成の選択が、前記支持構成要素の表面の材質及び粗度に基づいて行われる、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１６１】
前記入力基板及び前記出力基板の少なくとも一方が剛体材料を含む、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１６２】
前記装置を、試料を採取且つ定量供給する装置に取り付けるように構成されたコネクタを更に含む、請求項１２９に記載の試料濾過装置。
【請求項１６３】
試料を濾過する方法であって、
入口穴を含む入力基板と、前記入口穴と流体連通していて、前記試料を濾過して濾液にするように構成された非対称フィルタ膜と、前記非対称フィルタ膜に接合するように構成された粘着層であって、前記フィルタ膜の中央部分を露出させるように構成された中央切り抜き部を含む前記粘着層と、前記非対称フィルタからの前記濾液と流体連通する１つ以上のチャネルを含む出力基板であって、前記１つ以上のチャネルは前記出力基板の出口と流体連通している、前記出力基板と、を含む試料濾過装置を用意するステップと、
試料を採取又は定量供給する装置を前記入口穴に接続するステップと、
前記試料を駆動して前記フィルタ膜に通すように、試料を採取又は定量供給する前記装置を活性化するステップと、
を含む方法。
【請求項１６４】
前記入口穴と流体連通するフレキシブルコネクタを前記濾過装置に接続するステップを更に含む、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１６５】
試料を採取又は定量供給する前記装置を接続する前記ステップは、マイクロピペットチップを前記入口穴に流体接続するステップを含む、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１６６】
試料を採取又は定量供給する前記装置を接続する前記ステップは、フレキシブルコネクタを前記入口穴に流体接続するステップを含む、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１６７】
前記試料を駆動して前記フィルタ膜に通すように、試料を採取又は定量供給する前記装置を活性化するステップを更に含む、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１６８】
前記濾液を検査ストリップ上に定量供給するステップを更に含む、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１６９】
前記試料流体は全血を含む、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１７０】
前記試料流体は希釈血液を含む、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１７１】
試料を採取又は定量供給する前記装置に緩衝液を追加するステップを更に含む、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１７２】
前記試料流体と前記緩衝液とを混合するステップを更に含む、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１７３】
検査装置又は診断装置において前記濾液を使用するステップを更に含む、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１７４】
ラテラルフローイムノアッセイ（ＬＦＩＡ）検査において前記濾液を使用するステップを更に含む、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１７５】
前記濾液を使用して、血中アルコール濃度、ビタミン不足、又はカンナビノイド検出の検査を行うステップを更に含む、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１７６】
前記濾液を使用して、血流中を循環する無細胞ＤＮＡを隔離するステップを更に含む、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１７７】
ラテラルフローイムノアッセイ検査ストリップ上で前記濾液を使用するステップを更に含む、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１７８】
前記試料濾過装置を検査カートリッジ上に配置するステップを更に含む、請求項１６３に記載の方法。
【請求項１７９】
前記試料濾過装置を前記検査カートリッジ上に配置する前記ステップは、前記試料濾過装置を前記検査カートリッジにラッチするステップを含む、請求項１７５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、本明細書での参照によって開示の全体が本明細書に組み込まれている、２０１７年６月２６日に出願された米国特許仮出願第６２／５２５，０３９号の利益を主張するものである。
文献の引用
【０００２】
本明細書中において言及される全ての公表文献及び特許出願は、それぞれ個々の公表文献又は特許出願が参照により具体的且つ個別に示されて組み込まれるのと同程度に、参照により完全な形で本明細書に組み込まれる。
【０００３】
本出願は、試料処理用フィルタの分野に関する。
【背景技術】
【０００４】
試料処理は複雑な処理である。これは、典型的には、訓練を積んだ専門家が特殊な装置を使用して、試料の調製に必要なステップの全てを実施することによって行われる為である。一般に、ラテラルフローイムノアッセイの為の試料処理は、特定量の血液を収集するステップと、この量の血液とランニング緩衝液とを混合するステップと、血球を緩衝液及び血漿と分離するステップと、特定量の希釈血漿を検査ストリップ又は検査装置に送り出すステップと、を含む。これらのタスクを達成する為の典型的なプロトコルは、静脈穿刺を経たバキュテイナ管から血液試料を精密ピペットで収集するステップと、その試料を遠心分離管に入れるステップと、を含む。次に、その血液試料が入った遠心分離管に特定量の緩衝液がピペットで入れられる。次にその混合物が、均一になるまで数回、ピペットに吸い込まれる。次にその混合物が、指定された時間の間、高回転速度で遠心分離される。例えば、エッペンドルフ卓上遠心機は、毎分８０００回転で６０秒回転して、５００μＬの全血を分離することが可能である。その後、特定量の上澄み液がピペットで検査ストリップ上に移される。
【０００５】
上述の手順から明らかなように、試料処理は、現時点では、時間のかかる処理であり、試料を用意する為に、訓練を積んだ専門家と高価な機器とを必要とする。専門家ではない一般人が家庭や現場で試料処理を実施することを可能にする、よりシンプルな処理が必要とされている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、上記従来技術における課題を解決するためになされたものである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
一態様では、試料を処理する試料濾過装置の実施形態が提供される。本装置は、フレキシブル容器と、フレキシブル容器を封止するように構成されたキャップとを含み、キャップは、フレキシブル容器と流体連通している１つ以上の入口穴と、その１つ以上の入口穴と流体連通していて、試料を濾過して濾液にするように構成された非対称フィルタと、非対称フィルタからの濾液と流体連通する１つ以上のチャネルを含む支持構成要素と、フィルタをキャップ又は支持構成要素に接合するように構成された粘着層と、１つ以上のチャネルと流体連通している出口と、を含む。
【０００８】
幾つかの実施形態では、粘着層は両面粘着層である。キャップは、ねじ式接続によりフレキシブル容器を封止してよい。幾つかの実施形態では、試料流体は全血を含む。粘着層は、粘着層が非対称フィルタに粘着されたときに非対称フィルタを露出させるように構成された切り抜き部を含んでよい。幾つかの実施形態では、１つ以上のチャネルは、曲がりくねったチャネル、又は複数のチャネルを含む。出口はスパウトを含んでよい。幾つかの実施形態では、キャップは、ポリプロピレン、ポリカーボネート、アルミニウム、及び鋼のうちの少なくとも１つを含む。粘着層と接合するキャップの表面がほぼフラットであってよい。幾つかの実施形態では、粘着層と接合するキャップの表面が突起形状物を含む。粘着層と接合する支持構成要素の表面がほぼフラットであってよい。幾つかの実施形態では、粘着層と接合する支持構成要素の表面が突起形状物を含む。粘着層は、シリコーン系又はアクリル系の粘着剤を含んでよい。幾つかの実施形態では、フィルタ膜の幅が約１５ｍｍである。フィルタ膜の長さは約１５ｍｍであってよい。幾つかの実施形態では、非対称フィルタの細孔径が約０．８μｍである。フィルタ膜は、ポリカーボネート、ポリスルホン、ポリエステル、ポリエチレン、及びポリプロピレンのうちの少なくとも１つを含んでよい。幾つかの実施形態では、キャップは、その外周部の周囲にリッジを含む。支持構成要素は、キャップのリッジの内側にぴったり収まるサイズであってよい。幾つかの実施形態では、支持構成要素は、その外周部の周囲にリッジを含む。キャップは、支持構成要素のリッジの内側にぴったり収まるサイズであってよい。幾つかの実施形態では、１つ以上のチャネルは、フィルタ膜の領域全体にわたって延びる。１つ以上のチャネルは、チャネル間の間隔が約１．５ｍｍであってよい。幾つかの実施形態では、チャネルの構成の選択が、支持構成要素の表面の材質及び粗度に基づいて行われる。容器の開口部のサイズより大きいフィルタサイズに対応する為に、キャップの封止部分はキャップの外周より小さくてよい。幾つかの実施形態では、本装置は、キャップに接続されてフレキシブル容器の長さ全体にわたって延びるスワブを含む。スワブの端部が、キャップの切り抜き部と結合するように構成されたアンダカットを含んでよい。幾つかの実施形態では、本装置は、キャップがスワブに取り付けられた場合にスワブの周囲の切り抜き部を通り抜ける流体経路を含む。粘着層は、フィルタをキャップに接合するように構成されてよい。粘着層は、フィルタを支持構成要素に接合するように構成されてよい。
【０００９】
別の態様では、試料を濾過する方法の実施形態が提供される。本方法は、フレキシブル容器と、フレキシブル容器を封止するように構成されたキャップと、を含む試料濾過装置を用意するステップと、フレキシブル容器に試料流体を入れるステップと、フレキシブル容器を圧搾することによって、試料流体をキャップの１つ以上の入口穴に押し通し、非対称フィルタに押し通して濾液を生成し、濾液を１つ以上のチャネルに押し通して出口まで押し出すステップと、を含む。
【００１０】
幾つかの実施形態では、本方法は、フレキシブル容器を圧搾するステップを含む。試料流体は全血を含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、フレキシブル容器に緩衝液を追加するステップを含む。本方法は、フレキシブル容器を圧搾するステップの前に試料流体を混合するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、フレキシブル容器を圧搾するステップの前にフレキシブル容器を逆さまにするステップを含む。容器を圧搾するステップは、約０．２５〜５ｐｓｉの圧力を発生させうる。幾つかの実施形態では、本方法は、検査装置又は診断装置において濾液を使用するステップを含む。本方法は、ラテラルフローイムノアッセイ（ＬＦＩＡ）検査において濾液を使用するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、濾液を使用して、血中アルコール濃度、カンナビノイド検出、又はビタミン不足の検査を行うステップを含む。本方法は、濾液を使用して、血流中を循環する無細胞ＤＮＡを隔離するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、ラテラルフローイムノアッセイ検査ストリップ上で濾液を使用するステップを含む。
【００１１】
別の態様では、試料濾過装置の製造方法の実施形態が提供される。本方法は、入口穴を含む第１の基板を用意するステップと、入口穴と流体連通していて、試料を濾過して濾液にするように構成された非対称フィルタを用意するステップと、フィルタからの濾液と流体連通し、出口穴と流体連通している１つ以上のチャネルを含む第２の基板を用意するステップと、非対称フィルタのサイズより小さい中央切り抜き部を含む粘着層であって、非対称フィルタを第１の基板又は第２の基板に接合するように構成された粘着層を用意するステップと、を含む。
【００１２】
幾つかの実施形態では、本方法は、フィルタアセンブリをまとめて圧縮して、粘着層が、隣接する面に結合し、フィルタ膜の外周部を封止するようにするステップを含む。第１の基板はキャップであってよい。幾つかの実施形態では、本方法は、フレキシブルコネクタを第１の基板又は第２の基板に取り付けるステップを含む。フレキシブルコネクタを取り付けるステップは、フレキシブルコネクタを第１の基板上にオーバモールドするステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、フレキシブルコネクタを取り付けるステップを含み、このステップは、機械式インタロックを使用してフレキシブルコネクタを第１の基板に取り付けるステップを含む。フレキシブルコネクタは、管部分につながる漏斗状入口を含んでよく、管部分は、管部分の径より小さい径を有する収縮穴と流体連通しており、収縮穴は、第１の基板の入口穴と流体連通している。幾つかの実施形態では、本方法は、入口穴の近くのキャビティ内にボール弁を設けるステップを含み、ボール弁は入口穴を可逆的に封止するように構成されている。本方法は、粘着層を使用して非対称フィルタを第１の基板に粘着させるステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、粘着層を使用して非対称フィルタを第２の基板に粘着させるステップを含む。本方法は、第２の基板の少なくとも一部分の周囲にリッジを形成するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、第１の基板は、リッジ内にぴったり収まる形状になっている。本方法は、第１の基板の少なくとも一部分の周囲にリッジを形成するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、第２の基板は、リッジ内にぴったり収まる形状になっている。
【００１３】
別の態様では、試料濾過装置が提供される。本装置は、管部分につながる漏斗状開口部を含むフレキシブルコネクタと、管部分と流体連通している入口収縮穴を含む入力基板と、入口収縮穴と流体連通していて、試料を濾過して濾液にするように構成された非対称フィルタ膜と、非対称フィルタ膜に接合するように構成された粘着層であって、フィルタ膜の中央部分を露出させるように構成された中央切り抜き部を含む粘着層と、非対称フィルタからの濾液と流体連通する１つ以上のチャネルを含む出力基板であって、１つ以上のチャネルは出力基板の出口と流体連通している、出力基板と、を含む。
【００１４】
幾つかの実施形態では、試料濾過装置は、入口収縮穴を可逆的に封止するように構成されたボール弁を含む。ボールは、入口収縮穴とフィルタ膜との間のキャビティ内に配置されてよい。幾つかの実施形態では、ボール弁は、活性化動作の解除によって引き起こされる逆流を阻止するように構成されている。ボールは、ゴム、プラスチック、セラミック、及び金属のうちの少なくとも１つを含んでよい。幾つかの実施形態では、ボールの材料は、フィルタアセンブリの意図された使用方向に基づいて選択される。直立させる場合には低密度材料が選択されてよい。逆さまにする場合には高密度材料が選択されてよい。幾つかの実施形態では、フレキシブルコネクタの開口部及び管部分は、マイクロピペットチップを受ける形状になっている。フレキシブルコネクタの外側表面が、スクイーズボトルの開口部の内側表面と結合してその内側表面を封止する形状であってよい。幾つかの実施形態では、漏斗状開口部は長さが約１ｍｍである。漏斗状開口部は角度が約４５°であってよい。幾つかの実施形態では、管部分は長さが約７ｍｍである。管部分は最小内径が約１．５ｍｍであってよい。幾つかの実施形態では、収縮穴は径が約０．７５ｍｍである。フィルタ膜は入力基板に粘着されてよい。幾つかの実施形態では、フィルタ膜は出力基板に粘着される。フレキシブルコネクタは、ＴＰＥ、シリコーン、ゴム、ポリウレタン、ＬＤＰＥ、ＨＤＰＥ、ＰＰ、及び可塑化ＰＶＣのうちの少なくとも１つを含んでよい。幾つかの実施形態では、フレキシブルコネクタの壁厚が約２ｍｍである。粘着層は両面粘着層であってよい。幾つかの実施形態では、試料流体は全血を含む。非対称フィルタのサイズが、粘着層の外周部のサイズより小さくてよい。幾つかの実施形態では、１つ以上のチャネルは、曲がりくねったチャネル、又は複数のチャネルを含む。出口はスパウトを含んでよい。幾つかの実施形態では、フィルタ膜に隣接する入力基板及び出力基板の少なくとも一方の基板の表面がフラットである。フィルタ膜に隣接する入力基板及び出力基板の少なくとも一方の基板の表面が突起形状物を含んでよい。幾つかの実施形態では、粘着層は、シリコーン系又はアクリル系の粘着剤を含む。フィルタ膜の幅が約１５ｍｍであってよい。幾つかの実施形態では、フィルタ膜の長さが約１５ｍｍである。非対称フィルタの細孔径が約０．８μｍであってよい。幾つかの実施形態では、フィルタ膜は、ポリカーボネート、ポリスルホン、ポリエステル、ポリエチレン、及びポリプロピレンのうちの少なくとも１つを含む。出力基板は、その外周部の周囲にリッジを含んでよい。幾つかの実施形態では、入力基板は、出力基板のリッジの内側にぴったり収まるサイズになっている。入力基板は、その外周部の周囲にリッジを含んでよい。幾つかの実施形態では、出力基板は、入力基板のリッジの内側にぴったり収まるサイズになっている。１つ以上のチャネルは、フィルタ膜の領域全体にわたって延びる。幾つかの実施形態では、１つ以上のチャネルは、チャネル間の間隔が約１．５ｍｍである。チャネルの構成の選択が、支持構成要素の表面の材質及び粗度に基づいて行われてよい。幾つかの実施形態では、入口収縮穴の径が、管部分の径より��さい。フレキシブルコネクタは、機械式インタロックを使用して入力基板に接続されてよい。幾つかの実施形態では、試料濾過装置及び検査カートリッジを含む診断システムが提供される。検査カートリッジは、試料濾過装置の出口を検査カートリッジの試料入力領域と位置合わせするように構成された位置合わせ形状物を含む。カートリッジは、試料濾過装置を検査カートリッジに固定するように構成されたラッチを含んでよい。幾つかの実施形態では、位置合わせ形状物はラッチである。出力基板は、試料濾過装置を検査カートリッジに粘着させるように構成された粘着剤を含んでよい。幾つかの実施形態では、出力基板は、試料濾過装置を検査カートリッジに粘着させるように構成された接着剤を含む。管部分の上部が、バーブと結合するように構成されたアンダカットを含んでよい。幾つかの実施形態では、複数の試料濾過装置を含むアレイが提供される。アレイは、２個、３個、４個、６個、８個、又は１２個の試料濾過装置を含んでよい。
【００１５】
更に別の態様では、試料を濾過する方法が提供される。本方法は、管部分につながる漏斗状開口部を含むフレキシブルコネクタであって、管部分は入力基板の入口と流体連通しており、入口は非対称フィルタ膜と流体連通しており、非対称フィルタ膜は粘着層に接続されている、フレキシブルコネクタと、フィルタ膜から濾液を受けるように構成された１つ以上のチャネルを含み、出口を含む出力基板と、を含む試料濾過装置を用意するステップと、試料を採取又は定量供給する装置をフレキシブルコネクタに取り付けるステップと、試料を採取又は定量供給する装置に圧力をかけることによって、試料流体を非対称フィルタに押し通して濾液を生成し、濾液を１つ以上のチャネルに押し通して出口まで押し出すステップと、を含む。
【００１６】
幾つかの実施形態では、試料を採取又は定量供給する装置を取り付けるステップは、漏斗状開口部にマイクロピペットチップを挿入するステップを含む。試料を採取又は定量供給する装置を取り付けるステップは、フレキシブル容器の開口部にフレキシブルコネクタを挿入するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、フレキシブル容器に緩衝液を追加するステップを含む。本方法は、フレキシブル容器を圧搾して、濾液を検査ストリップ又は検査カートリッジの上に定量供給するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、フレキシブル容器を逆さまにしてから圧搾するステップを含んでよい。容器を圧搾するステップは、０．２５〜５ｐｓｉの圧力を発生させてよい。幾つかの実施形態では、試料を採取又は定量供給する装置を取り付けるステップは、漏斗状開口部にバーブを挿入するステップを含む。試料を採取又は定量供給する装置を取り付けるステップは、漏斗状開口部にオスコネクタを挿入するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、濾液を検査ストリップ上に定量供給するステップを含む。試料流体は全血を含んでよい。幾つかの実施形態では、試料流体は希釈血液を含む。本方法は、試料を採取又は定量供給する装置に緩衝液を追加するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、試料流体と緩衝液とを混合するステップを含む。本方法は、検査装置又は診断装置において濾液を使用するステップを含んでよい。本方法は、ラテラルフローイムノアッセイ（ＬＦＩＡ）検査において濾液を使用するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、濾液を使用して、血中アルコール濃度、ビタミン不足、又はカンナビノイド検出の検査を行うステップを含む。本方法は、濾液を使用して、血流中を循環する無細胞ＤＮＡを隔離するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、ラテラルフローイムノアッセイ検査ストリップ上で濾液を使用するステップを含む。本方法は、試料濾過装置を検査カートリッジ上に配置するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、試料濾過装置を検査カートリッジ上に配置するステップは、試料濾過装置を検査カートリッジにラッチするステップを含む。試料濾過装置を検査カートリッジ上に配置するステップは、試料濾過装置を検査カートリッジに粘着させるステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、試料濾過装置を検査カートリッジ上に配置するステップは、試料濾過装置を検査カートリッジに接着するステップを含む。
【００１７】
別の態様では、試料濾過装置が提供される。本装置は、入口穴を含む入力基板と、入口穴と流体連通していて、試料を濾過して濾液にするように構成された非対称フィルタ膜と、非対称フィルタ膜に接合するように構成された粘着層であって、フィルタ膜の中央部分を露出させるように構成された中央切り抜き部を含む粘着層と、非対称フィルタからの濾液と流体連通する１つ以上のチャネルを含む出力基板であって、１つ以上のチャネルは出力基板の出口と流体連通している、出力基板と、を含む。
【００１８】
幾つかの実施形態では、本装置は、入口穴に取り付けられたフレキシブルコネクタであって、フレキシブルコネクタは、管状部分と流体連通している漏斗状開口部を含み、管状部分は入口穴と流体連通している、フレキシブルコネクタを含む。フレキシブルコネクタは、フレキシブル容器、バルブピペット、マイクロピペット、及びバーブと結合する形状であってよい。幾つかの実施形態では、入力基板又は出力基板の少なくとも一方が、フレキシブル容器のキャップの一部分を含む。本装置は、入口穴を可逆的に封止するように構成されたボール弁を含んでよい。幾つかの実施形態では、ボールは、入口穴とフィルタ膜との間のキャビティ内に配置されている。ボール弁は、活性化動作の解除によって引き起こされる逆流を阻止するように構成されてよい。幾つかの実施形態では、ボールは、ゴム、プラスチック、セラミック、及び金属のうちの少なくとも１つを含む。ボールの材料は、フィルタアセンブリの意図された使用方向に基づいて選択されてよい。幾つかの実施形態では、直立させる場合には低密度材料が選択される。幾つかの実施形態では、逆さまにする場合には高密度材料が選択される。フィルタ膜は入力基板に粘着されてよい。幾つかの実施形態では、フィルタ膜は出力基板に粘着される。粘着層は両面粘着層であってよい。幾つかの実施形態では、試料流体は全血を含む。幾つかの実施形態では、非対称フィルタのサイズが、粘着層の外周部のサイズより小さい。１つ以上のチャネルは、曲がりくねったチャネル、又は複数のチャネルを含んでよい。幾つかの実施形態では、出口はスパウトを含む。フィルタ膜に隣接する入力基板及び出力基板の少なくとも一方の基板の表面がほぼフラットであってよい。幾つかの実施形態では、フィルタ膜に隣接する入力基板及び出力基板の少なくとも一方の基板の表面が突起形状物を含む。粘着層は、シリコーン系又はアクリル系の粘着剤を含んでよい。フィルタ膜の幅及び／又は長さが約１５〜１７ｍｍであってよい。幾つかの実施形態では、非対称フィルタの細孔径が約０．８μｍである。フィルタ膜は、ポリカーボネート、ポリスルホン、ポリエステル、ポリエチレン、及びポリプロピレンのうちの少なくとも１つを含んでよい。幾つかの実施形態では、出力基板は、その外周部の周囲にリッジを含む。入力基板は、出力基板のリッジの内側にぴったり収まるサイズであってよい。幾つかの実施形態では、入力基板は、その外周部の周囲にリッジを含む。出力基板は、入力基板のリッジの内側にぴったり収まるサイズであってよい。幾つかの実施形態では、１つ以上のチャネルは、フィルタ膜の領域全体にわたって延びる。１つ以上のチャネルは、チャネル間の間隔が約１．５ｍｍであってよい。幾つかの実施形態では、チャネルの構成の選択が、支持構成要素の表面の材質及び粗度に基づいて行われる。入力基板及び出力基板の少なくとも一方が剛体材料を含む。本装置は、本装置を、試料を採取且つ定量供給する装置に取り付けるように構成されたコネクタを含んでよい。
【００１９】
別の態様では、試料を濾過する方法が提供される。本方法は、入口穴を含む入力基板と、入口穴と流体連通していて、試料を濾過して濾液にするように構成された非対称フィルタ膜と、非対称フィルタ膜に接合するように構成された粘着層であって、フィルタ膜の中央部分を露出させるように構成された中央切り抜き部を含む粘着層と、非対称フィルタからの濾液と流体連通する１つ以上のチャネルを含む出力基板であって、１つ以上のチャネルは出力基板の出口と流体連通している、出力基板と、を含む試料濾過装置を用意するステップと、試料を採取又は定量供給する装置を入口穴に接続するステップと、試料を駆動してフィルタ膜に通すように、試料を採取又は定量供給する装置を活性化するステップと、を含む。
【００２０】
幾つかの実施形態では、本方法は、入口穴と流体連通するフレキシブルコネクタを濾過装置に接続するステップを含む。試料を採取又は定量供給する装置を接続するステップは、マイクロピペットチップを入口穴に流体接続するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、試料を採取又は定量供給する装置を接続するステップは、フレキシブルコネクタを入口穴に流体接続するステップを含む。本方法は、試料を駆動してフィルタ膜に通すように、試料を採取又は定量供給する装置を活性化するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、濾液を検査ストリップ上に定量供給するステップを含む。試料流体は全血又は希釈血液を含んでよい。本方法は、試料を採取又は定量供給する装置に緩衝液を追加するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、試料流体と緩衝液とを混合するステップを更に含む。本方法は、検査装置又は診断装置において濾液を使用するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、ラテラルフローイムノアッセイ（ＬＦＩＡ）検査において濾液を使用するステップを含む。本方法は、濾液を使用して、血中アルコール濃度、ビタミン不足、又はカンナビノイド検出の検査を行うステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、濾液を使用して、血流中を循環する無細胞ＤＮＡを隔離するステップを含む。本方法は、ラテラルフローイムノアッセイ検査ストリップ上で濾液を使用するステップを含んでよい。幾つかの実施形態では、本方法は、試料濾過装置を検査カートリッジ上に配置するステップを含む。本方法は、試料濾過装置を検査カートリッジ上に配置するステップを含んでよく、このステップは、試料濾過装置を検査カートリッジにラッチするステップを含む。
【００２１】
後述の特許請求の範囲において、本発明の新規な特徴を具体的に説明する。本発明の原理が利用される例示的実施形態を説明する後述の詳細説明と、以下の添付図面とを参照することにより、本発明の特徴及び利点がよりよく理解されよう。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１Ａ】乃至
【図１Ｂ】試料濾過装置の一実施形態を様々な方向から見た図である。
【図２Ａ】乃至
【図２Ｃ】試料濾過装置の一実施形態の一部分の側面図である。
【図３】試料濾過装置のキャップの一実施形態を示す図である。
【図４】試料濾過装置のキャップの別の実施形態を示す図である。
【図５】乃至
【図６】フィルタ膜の一実施形態を示す図である。
【図７Ａ】乃至
【図７Ｂ】試料濾過装置の製造工程の一実施形態を示す図である。
【図８Ａ】乃至
【図８Ｅ】別の試料濾過装置の一実施形態を示す図である。
【図９Ａ】乃至
【図９Ｂ】試料濾過装置の一実施形態を示す図である。
【図１０Ａ】乃至
【図１０Ｂ】フレキシブル容器に接続される試料濾過装置の一実施形態を示す図である。
【図１１Ａ】乃至
【図１１Ｂ】マイクロピペットが試料濾過装置に挿入される一実施形態を示す図である。
【図１２Ａ】乃至
【図１２Ｇ】マイクロピペットが試料濾過装置に挿入され、試料を試料濾過装置に押し通す為に使用される一実施形態を示す図である。
【図１３Ａ】乃至
【図１３Ｆ】検査カートリッジとともに使用される試料濾過装置の一実施形態を示す図である。
【図１４Ａ】乃至
【図１４Ｂ】本明細書に開示の試料濾過装置とともに使用されてよい検査カートリッジの一実施形態を示す図である。
【図１５】本明細書に開示の試料濾過装置を含むアレイの一実施形態を示す図である。
【図１６Ａ】乃至
【図１６Ｃ】フレキシブル容器及びスワブを含む試料濾過装置の一実施形態を示す図である。
【図１７】粘着層を使用してフィルタ膜のサイズを調節する一実施形態を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
本明細書では試料濾過装置の実施形態を示す。本装置は、フィルタ膜が２つの基板の間に配置され、隣接する面に貼り付けられて、粘着層（例えば、両面粘着層）で封止された、シンプルな構造を含む。フィルタ膜を取り囲む基板は、様々な構成要素を含んでよい。例えば、本明細書に開示の幾つかの実施形態では、基板は、フレキシブル容器とともに使用可能な蓋の一部を含む。別の実施形態では、基板は、フレキシブルなコネクタに接続可能な基板を含む。いずれの実施形態においても、本装置の濾過部分では、フィルタ膜が、フィルタ膜を露出させるように切り抜かれた部分を有する粘着層により、支持基板に接合されている。フィルタ膜に対して支持基板の反対側にある出力基板が、フィルタ膜によって得られた濾液を受けるように構成された単一又は複数のチャネルを含んでよい。濾過装置は、濾液を排出するように構成された出口を含んでよい。
【００２４】
本濾過装置のシンプルな構造は、容易な製造を可能にしうる。これは、粘着層による粘着が、従来の試料濾過装置の製造で用いられる典型的な接着処理（例えば、液状接着剤、超音波溶接等）の代わりになりうる為である。製造が容易であれば、濾過製品の消費者コストを減らすことが可能である。本濾過装置は更に、試料処理手順を非常にシンプルにする。処理がシンプルであれば、結果を得るのに通常は数日から数週間かかるタスクである、試料（例えば、全血）の採取及び処理をほぼ即座に行うことが可能になりうる。製品がシンプルであれば更に、通常は検査室で行われる処理を現場や家庭で実施することが可能になる。本装置は、検査装置や診断装置（例えば、ＨＩＶ検査、妊娠検査等）と組み合わせて使用されてよく、これにより、試料採取、検査、及び診断を家庭や現場で迅速に行うことが可能になる。
【００２５】
図１Ａ及び１Ｂは、試料濾過装置の一実施形態１００の上面斜視図及び底面斜視図を示す。装置１００は、フレキシブル容器１０２とキャップ１０４とを含む。フレキシブル容器１０２は、ねじ山１０６により、キャップ１０４と接続されるように構成されている。他の接続機構も可能である（例えば、スナップフィット等）。フレキシブル容器１０２は、円筒形であってよいが、他の形状も可能である（例えば、卵形、球形、正方形等）。
【００２６】
キャップ１０４はキャップハウジング１０８を含む。フィルタ機構は、キャップ１０４の上部に配置される。入口穴１１０により、試料流体がフレキシブル容器からフィルタ機構に入ることが可能である。フレキシブル容器を圧搾することにより、試料流体を入口穴１１０から押し出す圧力勾配を生成することが可能である。フィルタ膜１１２が、入口穴１１０の上方に配置される。フィルタ膜１１２は形状が正方形であるように示されているが、他の形状も、キャップハウジング１０８のリッジ１１４のフットプリントに収まるのであれば可能である。フィルタ膜１１２の上方に、両面粘着層１１６が配置される。粘着層１１６は切り抜き部１１８を含み、切り抜き部１１８は、フィルタ膜１１２を露出させ、支持構成要素１２０へのアクセスを可能にするように構成されており、支持構成要素１２０は、ミニチャネル１２２及び出口１２４を含み、粘着層１１６の上方に配置される。ミニチャネル１２２は、支持構成要素１２０の底面に配置され、フィルタ膜１１２に最も近接する。チャネル内の出口穴１２６が出口１２４につながっている。図１Ａに示されるように、出口１２４はスパウト機構を含んでよい。
【００２７】
ねじ山（又は他の結合機構）が係合されると、キャップ１０４とフレキシブル容器１０２は流体封止を形成する。この封止は、フレキシブル容器の開口部を形成する外周部１３０とキャップハウジングのフラット面１３２との締まり嵌めにおいて形成される。封止が行われた後、キャップは、流体だけが、キャップハウジング１０８上にある入口穴１１０からフィルタアセンブリに流入することを可能にする。幾つかの実施形態では、キャップは、適切に機能する為には開口部が１つあればよいが、本装置内での固形物による閉塞の発生を防ぐ為に、複数の穴によって冗長性が与えられている。このような固形物として、クロット、微粒子、ユーザがフレキシブル容器１０２内に残したものなどが考えられる。ハウジング１０８は更に、組み立て及び自己センタリングを容易にする為のリッジ１１４を含む。更に、このリッジは、組み立て後の粘着剤へのアクセスを阻止することによって、ユーザが本装置を細工するのを防ぐ。
【００２８】
キャップ１０４は、十分な剛性を備える材料を含んでよく、そのような材料として、ポリプロピレンやポリカーボネートのような熱可塑性プラスチック、或いは、アルミニウムや鋼のような金属があり、これらに限定されない。
【００２９】
フィルタ積層物との接触面はほぼフラットである。即ち、これらの面の間には、隙間（即ち間隔）又は形状物が存在しないことが好ましい。フラットな構造であれば製造を容易にすることが可能である。幾つかの実施形態では、これらの面の間に隙間（即ち間隔）又は突起形状物が配置される。そのような形状物は流れの促進に役立ちうる。そのような実施形態では、その間隔又は形状物が、血液と緩衝液の混合物のラテラルフローを著しく制限することがないように注意を払う必要がある。流れが制限されるのは、フィルタが加圧された後に、フィルタ膜全体にわたる圧力差の結果として薄いポケットが形成される為である。
【００３０】
図２Ａ〜２Ｃは、フィルタ膜２０２、支持構成要素２０４、及び両面粘着剤２０６の詳細図を示す。図２Ａに示されるように、フィルタ膜２０２は底部に配置される。両面粘着剤２０６は、フィルタ膜２０２の上方に配置され、その中央に開口部又は切り抜き部２０８を有する。両面粘着剤２０６で封止される前のこのアセンブリには、図２Ａに示されるように、両面粘着剤２０６とキャップハウジング２１４との間に隙間２１０があり、隙間２１０はフィルタ膜２０２を取り囲む。封止後は、図２Ｂに示されるように、粘着剤２０６がフィルタ膜２０２及びキャップハウジング２１４を封止して、隙間２１０を無くすか最小化する。加圧後（例えば、フレキシブル容器の圧搾後）は、図２Ｃに示されるように、フィルタ膜２０２とキャップハウジング２１４との間に薄いポケット２１６が形成されうる。
【００３１】
両面粘着剤は感圧粘着剤であり、組み立て時に複数の面に粘着することを意図されている。両面粘着剤は、一方の面では支持構成要素とだけ結合される。他方の面では、両面粘着剤は、フィルタ膜及びキャップハウジングの両方と結合される。用途によっては、フィルタ及び両面粘着剤の積層順序を逆にすることによって、加圧時のフィルタ膜のたわみ（ポケットの形成）を防ぐことが必要とされる場合がある。この逆構成では、一方の面では、両面粘着剤は、フィルタ膜及び剛体支持構成要素の両方と結合され、他方の面では、両面粘着剤は、キャップハウジングとだけ結合される。この面は複数の面と結合される為、支持構造に過剰な残留応力がかかって両面粘着剤が剥がれるのを防ぐ為には、両面粘着剤の厚さを、フィルタ膜の圧縮された厚さより厚くしなければならない。
【００３２】
両面粘着剤は内側に切り抜き部があり、この切り抜き部の外周はフィルタ膜の外周より小さい。両面粘着剤の外周のサイズは、支持構成要素の外周より小さいことが好ましいが、両面粘着剤の外周は、支持構成要素以上の大きさであってよく、それでも適切に機能する。両面粘着剤は、流体がフィルタ膜の外周の外側から膜を迂回することによって膜を通り抜けるのを防ぎ、これによって、適切な濾過動作が確実に達成される。粘着強度は、ユーザが本装置を加圧して動作させたときに、両面粘着剤が、粘着しているどの面からも剥がれないような十分な大きさであってよい。両面粘着剤の厚さは、フィルタ膜が、加圧時に未濾過試料混合物のラテラルフローを可能にする為の十分な隙間があるように選択しなければならない。このラテラルフローによって、フィルタ領域全体が濾過に利用されることが可能になる。厚すぎる感圧粘着剤の使用を避ける為に、各面に両面粘着剤を有する基材ポリマーフィルムが使用することにより、本装置が機能するのに必要な厚さを考慮することが可能である。必要な厚さを考慮する別の一手法は、適切に機能する為に必要な厚さを考慮した隆起面を支持構成要素上に含むことである。
【００３３】
粘着剤としては、シリコーン系又はアクリル系の粘着剤があってよく、これらに限定されない。両面粘着剤が全ての必要な面に適切に結合することが確実に行われるように、アセンブリはまとめて圧縮されてよい。更に、フィルタ膜のエッジが粘着剤によって圧縮されて、締め付けられて、封止されてよい。フィルタ膜の外周部を封止する別の方法として、超音波溶接による圧縮がある。フィルタ材料がキャップハウジング又は支持構成要素と適合する場合は、フィルタ膜をハウジング又は支持構成要素の表面に直接超音波溶接することが可能である。別の手法として、支持構成要素とキャップハウジングとの間で超音波ボンディングを行ってよい。このボンディングによって連続的な締め付け応力がかかって、フィルタ膜の外周部が封止されることが可能である。超音波ボンディングに加えて、液状粘着剤を使用する同じタイプのボンディングが実施されてよい。
【００３４】
フィルタ膜は、アセンブリの中央に配置される薄い構成要素である。フィルタ膜には化学物質又はドライ試薬がコーティングされてよい。フィルタ膜は、ほぼ任意のサイズ及び形状にカットされてよい。フィルタ膜は、封止が適切に行われるように、フィルタ膜の外周部が両面粘着剤の内側の切り抜き部の外周部の外側にあるように位置合わせされる。更に、フィルタ膜の外周部は、両面粘着剤が支持構成要素に適切に粘着することを可能にする為に、（図２Ａに最もよく示されるように）両面粘着剤の外周部より内側になければならない。
【００３５】
幾つかの実施形態では、フィルタは約１５ｍｍ×約１５ｍｍであってよい。他の寸法も可能である。例えば、フィルタは、長さが約１２〜１８ｍｍ、幅が約１２〜１８ｍｍであってよい。幾つかの実施形態では、フィルタの細孔径は約０．８μｍである。他の細孔径も可能である（例えば、０．２μｍ、０．４５μｍ、１．０μｍ、０．５μｍ等）。幾つかの実施形態では、細孔径が０．８μｍである１５×１５ｍｍの非対称フィルタを使用することにより、１０倍希釈血液でラテラルフローイムノアッセイ検査を実施するのに十分な試料を生成することが可能である。この濃度であれば、約１００μＬ又は２〜３滴の処理済み試料を生成してアッセイを実施することが可能である。典型的なラテラルフローイムノアッセイ検査ストリップであれば、約５０μＬ以上の処理済み試料で実施可能である。
【００３６】
フィルタの濾過能力は、膜の露出面積と、生物学的試料混合物の濃度とに直接関係する。従って、様々な用途に対応する為に様々な形状及びサイズが用いられてよい。フィルタ膜が非対称フィルタである場合は、その向きが正しいように注意を払う必要がある。即ち、非対称フィルタの細孔径がより大きい側が、未濾過試料と最初に向き合わなければならない。液体がフィルタを通り抜けて、細孔径が小さく、生物学的粒子を非対称フィルタのマトリックスで捕捉する側から出る為には、この向きが重要である。これらのフィルタ膜は、細孔径が用途に応じて様々であってよい。幾つかの実施形態では、他の向きが可能である。様々な材料及びスタイルの様々なフィルタ膜も同様に使用されてよい。このような材料として、ポリカーボネート、ポリスルホン、ポリエステル、ポリエチレン、及びポリプロピレンがあってよく、これらに限定されない。
【００３７】
複合フィルタも使用されてよい。複合フィルタは第２のフィルタを含んでよく、第２のフィルタは、外周が前述のフィルタより若干小さいが、それでも両面粘着剤の切り抜き部の外周よりは大きい。小さいほうのフィルタは、大きいほうのフィルタと両面粘着剤との間に配置される。このようにして、粘着剤は、各フィルタ膜の外周部に結合し、それぞれを封止することによって、流体が確実に、各フィルタの外周部の周囲ではなく中央を通り抜けるようにする。この複合フィルタの積層設計手順は、積層物が厚くなりすぎない範囲で、又は、粘着剤膜がその意図された面を全て封止することができなくなるまでは、フィルタを無限に増やして実施することが可能である。複合フィルタを作成する別の一方法は、フィルタ膜及び両面粘着剤の両方からなるアレイを直列に追加してフィルタを直列に積層する方法である。この追加アレイは、第１のフィルタ膜の出力と剛体支持構成要素との間に配置されることになる。これにより、無限の数のフィルタを直列に有するフィルタの作成が可能になる。この、フィルタを直列に積層する工程は、潜在的には、前述の、わずかに小さいフィルタを使用して両面粘着剤の使用量を減らす方法との組み合わせで行われることが可能である。
【００３８】
支持構成要素は、粘着剤及びフィルタ膜と結合される薄肉片を含む。その外周部は、キャップハウジング上にあるリッジの内側にぴったり収まって適切な位置合わせが達成されるように成形される。支持構成要素は、フィルタ材料の領域全体にわたって延びるミニチャネルを含む。ミニチャネルの数及びサイズを最小限に抑えることにより、濾過生成物のデッドボリュームの量を減らすことが可能である。ミニチャネルは、ミニチャネルにつながる出口穴まで濾液が移動する為の低抵抗経路を提供する。膜の露出領域の全体が出口穴までの低抵抗経路にアクセスできるように、十分なミニチャネルを組み込むことが可能である。複数のミニチャネルを使用することが最も一般的であるが、単一の曲がりくねったチャネルで、複数のチャネルと同じ領域をカバーすることも可能である。幾つかの実施形態では、チャネル間隔は約１．５ｍｍである。他の間隔も可能である(例えば、１〜２ｍｍ、１〜３ｍｍ、１〜４ｍｍ、１ｍｍ、２ｍｍ、３ｍｍ等)。フィルタ材料が異なれば、生成物が最も近いチャネルまで移動する際の抵抗のレベルが異なる為、チャネルの構成は、フィルタの材料、及び支持構成要素の表面の粗さに基づいて選択されてよい。濾過生成物がチャネルに移動する為の経路の抵抗が低い、細孔径の大きいフィルタに比べると、細孔径の小さいフィルタはチャネル間隔が狭くてよい。
【００３９】
出口穴は、ミニチャネルにつながる任意の場所にあってよい。出口穴はスパウト機構を含んでもよい。スパウト機構は、流体の堆積及び採取を制御するように設計される。このスパウトにより、流体を様々な受け側装置に厳密に定量供給することが可能である。スパウト機構の形状は、バーブ、毛細管、先細ノズル、又はシンプルな管形状であってよい。本装置が加圧されたときにあまり曲がらないようにする為に、支持構成要素の壁厚は、その曲がりにくさを考慮に入れなければならない。これは、材料の選択、又は適切な厚さの構成要素の設計によって達成可能である。この構成要素の材料は、熱可塑性プラスチック、金属、及びセラミックであってよく、これらに限定されない。支持構成要素は更に、採取装置との接合部分の管理を支援する保護シースを含んでよい。これは特に、ポイントオブケア装置内に試料を堆積させる場合に有用である。ユーザが試料入力領域を狙い損ねるのを防いで、試料が時折不必要に試料入力領域に注がれて完全な滴下が形成されなくなることなく、完全な滴下が形成されるようにする為に、出口３０２の周囲に、図３に示される透明シース３０４が組み込まれてよい。
【００４０】
フレキシブル容器は、フィルタアセンブリを通り抜ける前の流体を収容するように構成されている。フレキシブル容器は更に、操作者が圧搾したときに、流体を駆動してフィルタアセンブリに通す圧力を提供する。流体を駆動して本装置に通すのに必要な圧力は、わずか０．２５ｐｓｉであってよく、最大５ｐｓｉの圧力に達してよい。幾つかの実施形態では、細胞溶解が不要の場合、５ｐｓｉを超える過大な圧力は血液試料には使用されない。駆動圧力が大きすぎると、細胞を破裂させて細胞内容物を放出させる可能性があり、これはアッセイの結果に影響を及ぼす可能性がある。フレキシブル容器の構造は、キャップと結合される為のねじ山を最上部に有する一般的なスクイーズボトルに非常によく似ている。スクイーズボトルを作る材料として、高密度ポリエチレン、低密度ポリエチレン、ポリプロピレン、及びポリエステルがあってよく、これらに限定されない。
【００４１】
本装置を動作させる為に、未濾過流体がフレキシブル容器に挿入される。容器は、事前充填量の流体を貯蔵中に内部に収容する為に、その開口部に着脱可能シールを有してよい。事前充填流体が不要な用途の場合は、操作者は未濾過流体を追加してよい。混合が必要であれば、操作者は、流体内で相対運動を引き起こすことによって混合を行う必要がある。これは、流体をかき混ぜるか、回転させるか、振ることによって行われてよい。かき混ぜ棒、スワブ、又は採取装置のように汚染される器具が使用される場合、これらは、廃棄物の散乱を防ぐ為にフレキシブル容器内に廃棄されてよい。試料が準備されたら、操作者は、キャップが封止されていることを確認し、アセンブリを逆さまにして、スパウト機構を所望の場所の中に向ける。操作者がフレキシブル容器を圧搾して圧力をかけると、濾液は、所望の量が採取されるまでアセンブリから出る。圧搾操作によって流体が駆動されてキャップハウジングの穴を通り抜け、横方向に動いてフィルタ膜の露出領域全体に達する。駆動圧力によって、膜が下方に押されるが、剛体支持構成要素に押しつけられてフィルタ膜とキャップハウジングとの間にポケットが形成されることにより、フィルタ膜が伸びすぎて裂ける事態が避けられる。非対称フィルタが使用される場合、流体は大きな細孔から膜に入り、濾液は小さい細孔から出る。非対称フィルタが使用されない場合、流体は、対称フィルタ膜の細孔を通り抜ける。捕捉された粒子は全て、フィルタ膜によって捕捉されたままとなる。複合フィルタが使用される場合、濾過された試料は、次のフィルタ膜を通って再度濾過される。その後、濾液は膜の出口からミニチャネルに移動する。濾液は、ミニチャネルに沿って、支持構成要素上にある出口穴まで流れる。最後に、濾液は、スパウト機構を通ってアセンブリ内から出て、所望の用途に従って採取される。
【００４２】
図４に示されるように、幾つかの実施形態では、フィルタのサイズは、フレキシブル容器の開口部より著しく大きいことが必要とされるであろう。大きなフィルタ４０２を小さなフレキシブル容器に対応させる為に、相補的ねじ山４０４のサイズを、キャップハウジングの外周全体のサイズより著しく小さくなるように変更してよい。そうすることにより、設計者は、キャップハウジングとフレキシブル容器の相補的ねじ山同士が適合する限り、任意のサイズ及び形状のフィルタを、任意のサイズ及び形状の任意のフレキシブル容器とぴったり合うようにすることが可能である。
【００４３】
幾つかの実施形態では、フレキシブル容器を使用せずに済ませなければならない場合がある。理論的には、このアセンブリは任意の圧力発生装置とともに使用されてよい。他の圧力発生装置として、シリンジ、ポンプ、重力送り管、又は、ガスシリンダによく似た加圧式アキュムレータがある。従って、取り付けにはねじ山は不要である。例えば、アセンブリは、管と結合される入力バーブを有するように設計されてよい。バーブが二重に付けられたアセンブリであれば、別のタイプの用途で使用可能なインラインフィルタを生成する。別の用途では、アセンブリは、濾過対象の試料が装填されたシリンジに取り付けられる為のルアーテーパ接続が組み込まれてよい。別の用途では、フィルタは、感圧粘着剤につながるフラット面を含んでよい。この構造はフレキシブル容器との使用に限定されないが、フレキシブル容器を使用することにより、使いやすい装置としてのフィルタの可能性が示される。更に、フレキシブル容器を使用することにより、加圧過剰の結果としての細胞溶解（これはシリンジの場合に特に発生しやすい可能性がある）のリスクを減らす為の、駆動圧力の厳密な制御が可能になる。
【００４４】
幾つかの実施形態では、濾過の前に緩衝液が未濾過流体と混合される。緩衝液として、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）が使用されてよい。水も使用可能であるが、水を使用すると、浸透圧によって過剰な流体が細胞内へと駆動されて、細胞膜の破裂と細胞内容物の放出とが引き起こされる。これには、細胞内に捕捉されたヘモグロビン及び他の細胞内成分が含まれ、これらは、混合物を不可逆的に赤色に染め、過剰なタンパク質を試料混合物内に放出する。場合によっては溶解が必要であり、それは、例えば、細胞からのＤＮＡ抽出が必要な場合であり、或いは、細胞内バイオマーカを検出する場合である。溶解が行われる場合には、フィルタは、アッセイにおいて流れの問題を引き起こしかねない細胞デブりを濾液から排除することが可能である。従来のラテラルフローイムノアッセイ検査では、ストリップ上の流れ落ちを改善する為に、緩衝液は、ＰＢＳに混合された界面活性剤を含む場合がある。よく使用される界面活性剤はＴｗｅｅｎ−２０及びＴｒｉｔｏｎ−Ｘ１００であるが、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００は細胞溶解を引き起こす可能性がある。幾つかの実施形態では、これらの界面活性剤はストリップ自体の表面にある為、緩衝液は界面活性剤を含まなくてよい。更に、幾つかの実施形態では、緩衝液は動物性タンパク質を含んでよく、これは、関心対象の検体を、それらの領域において競合させて、バックグラウンドに結合するのを防ぐ為である。緩衝液は、混合物中に血液クロットが形成されるのを防ぐ為に、ＥＤＴＡのような抗凝血剤を含んでもよい。
【００４５】
本明細書に記載の装置で生成される試料は、任意の数の検査装置及び診断装置とともに使用されてよく、これは、ヒトを含む、血液を産生する全ての動物種において同じ原理が適用されてよい為である。上述のように、タンパク質の検出にラテラルフローイムノアッセイ（ＬＦＩＡ）検査を用いることが考えられる。幾つかの実施形態では、本装置は、タンパク質ベースではない検査に使用されてよい。例えば、本装置は、血中アルコール濃度検査、大麻消費に起因する血中カンナビノイドの検出、ビタミン不足の測定、又は血流中を循環する無細胞ＤＮＡの隔離を実施することに使用されてよい。本質的には、本装置で血液を処理することにより、細胞間又は細胞内にあって血流中を循環する任意の検体を検査することが可能である。
【００４６】
本明細書に記載の装置及び方法を用いて全血試料を濾過することにより、ラテラルフローイムノアッセイ検査ストリップを使用して家庭や現場で信頼できる検査を行うことが可能になりうる。現時点では、この要求を満たす為に、全血を検査ストリップに直接付けている。全血を検査ストリップに直接付けることの問題は、多くのラテラルフローイムノアッセイ診断検査で使用されるコロイド金又は蛍光検査ラインの検出を妨げるバックグラウンドノイズが血液試料の赤色によって発生することである。血漿を濾過して細胞を取り除くことにより、検査ストリップはバックグラウンドノイズがない状態が保たれ、検査ラインの容易な検出が可能になる。信頼できる血液検査が家庭で行われれば、特定の場所ではいまだに後ろ指を差されることがある、ＨＩＶのような病気の検査に役立ちうる。
【００４７】
測定の対象に応じて、様々なタイプのフィルタが使用されてよい。例えば、血流中を循環する、血漿内の検体を測定する為に、単一の非対称フィルタが使用されてよい。別の実施形態では、特定の細胞集団を選択的に溶解する為に、複合フィルタが使用されてよい。別の実施形態では、バクテリアの細胞内容物を検出することにより、敗血症を引き起こすバクテリアを識別する迅速検査が動作可能になる。そのような実施形態では、２ステージ複合フィルタが使用されてよい。第１のフィルタは、大きな赤血球及び白血球を溶解させずに全て捕捉するように設計された非対称膜フィルタ（Ｐａｌｌ  ＭＭＭシリーズ、又はＶｉｖｉｄシリーズ、又はＢＴＳシリーズ、図５を参照）であってよい。バクテリアは、通常、血球より小さい為、細孔がバクテリアより大きいことになるこのフィルタを通り抜けるであろう。その後、第１のフィルタ膜を通り抜けたところで、細孔が非常に小さい膜フィルタを使用してよい。そのフィルタは、バクテリア細胞を止めるだけでなく溶解させるように設計されてよい。第２のフィルタは、流体がその周囲を流れることを可能にする為に、第１のフィルタのような非対称ではない。その代わりに、第２のフィルタは、貫通穴を有する膜（ホワットマンヌクレポア（Ｗｈａｔｍａｎ  Ｎｕｃｌｅｐｏｒｅ）トラックエッチ膜、図６を参照）として構成されてよく、駆動圧力は細胞を破裂させることになる。このタイプのフィルタ構造は、サイズに応じて、ある細胞集団を選択的に溶解させる一方、他の集団はそのまま残すようになっている。そのようなフィルタの別の用途として、他の、血液によって感染する寄生虫（マラリア等）の検出がある。本方法によれば、アセンブリは、小さい未成熟マラリア細胞を選択的に溶解させることによって、その細胞内容物を潜在的に検出することが可能である。
【００４８】
様々な症状に関して検出すべきバイオマーカを見つける研究は、急激に変容しており、急速に進歩している。本装置は、既知量の血液及び緩衝液が本装置に挿入された場合に、定性検査及び定量検査の両方に向けて試料を処理する能力を備えている。
【００４９】
定性検査では、陽性／陰性の２値の結果が提示される。本明細書に記載の装置を使用して行われてよい定性検査の例として、妊娠に関連するｈＣＧホルモンの検出、ＨＩＶ感染に関連するＨＩＶの抗体及び／又は表面抗原の検出、Ａ、Ｂ、Ｃ型肝炎の感染又はワクチン接種に関連する肝炎の抗体及び／又は表面抗原の検出、ヘルペス感染に関連するヘルペス抗体の検出、ウマにおけるウマ感染性貧血に関連するＥＩＡＶ抗体の検出、イヌ糸状虫病の検出の為の、イヌやネコにおける犬糸状虫抗体の検出、及び血流中の合法又は違法の薬物の存在の検出がある。ＨＩＶ抗体を検出する検査の場合など、幾つかの実施形態では、本明細書に記載の濾過装置は、現行の唾液による検査より早く、ＨＩＶ抗体の血液検査を家庭や現場でシンプルに行うことを可能にしうる。幾つかの実施形態では、本明細書に記載の濾過装置は、現在利用可能な、家庭で採取した尿による検査より早く、ｈＣＧの血液検査を家庭や現場でシンプルに行うことを可能にしうる。
【００５０】
定性検査では、血中の検体の濃度に関する数値が提示される。このタイプの検査は、実質的に実施がより困難である。それは、量を適切に採取及び処理するようにすることが非常に重要だからである。本明細書に記載の装置及び方法を使用して行われてよい定量検査の例を幾つか挙げると、排卵追跡の為の黄体形成ホルモンの急なスパイクの測定、潰瘍診断の為の高濃度のピロリ菌抗体の測定、前立腺癌のスクリーニングの為のＰＳＡ濃度の測定、副甲状腺腺腫の検出の為の副甲状腺ホルモン濃度の測定、コレステロールの監視の為のＨＤＬ／ＬＤＬ濃度の測定、及び腎臓機能の監視の為のクレアチニン濃度の測定がある。
【００５１】
幾つかの実施形態では、検査ラインと対照ラインとを比較する定量検査は、それらのラインの強度を比較するように構成されたスマートフォンアプリケーションを使用して強化されてよい。幾つかの実施形態では、定量検査において、約２０〜３０μＬを保持するように構成されたスワブを使用する。緩衝液を使用して、定量検査に十分な量を確保する為の１０倍希釈を行うことが可能である。
【００５２】
図７Ａ及び７Ｂは、本明細書に記載の装置の構成要素の製造工程の一例を示す。図７Ａは、出力６０４又はスパウトを含む出力基板６０２、両面粘着剤６０６、フィルタ６０８、及び入力基板６１０の分解側面図を示す。製造工程は、粘着剤６０６の上面を出力基板６０２の底面に粘着させるステップを含む。粘着剤６０６の底面が、フィルタ６０８の上面と、入力基板６１０の内側部分の上面とに粘着される。従来は、ほとんどのフィルタが超音波溶接を使用しており、従って、製造工程の時間はプラスチックの溶融時間等に依存する。本装置の場合、フィルタは粘着剤を使用して製造される為、製造工程の時間を格段に短縮することが可能である。
【００５３】
これまでの図は、フレキシブル容器の蓋の上で組み立てられるフィルタアセンブリを示していたが、ここからの図は、フレキシブルコネクタと一緒に組み立てられるフィルタアセンブリを示す。試料濾過装置の以下の実施形態（例えば、図８Ａ〜１７に関して説明される実施形態）は、図１Ａ〜７Ｂに関して説明されたフィルタの特徴を含んでよい。フレキシブルコネクタは、試料の採取及び定量供給を行う様々な装置（スクイーズボトルを含む）にフィルタを接続する為に使用されてよい。フレキシブルコネクタは、試料濾過装置が、全血濾過を含む多様なタイプの用途で使用されることを可能にしうる。フレキシブルコネクタの材料の可撓性は、フレキシブルコネクタが様々なタイプの取付機構に適合して、フレキシブルコネクタを多様な用途に適応可能にすることを可能にしうる。上述のように、記載のフレキシブルコネクタは、試料の採取及び定量供給を行う従来式の装置をフレキシブルコネクタに接続して使用することを可能にする。そのような装置として、バルブピペット、マイクロピペットチップ、毛細管、シリンジ針、バーブ、スクイーズボトル、チューブ、又は他の、管状又はテーパ状の接続形状を有する装置があり、これらに限定されない。更に、フレキシブルコネクタは、分割線や鋳バリのような製造アーチファクトを含む非円形の形状及び構成要素（例えば、後述のバルブピペット）とも接続可能である。
【００５４】
図８Ａ〜８Ｃは、フィルタ（例えば、本明細書に記載のフィルタ）とともに使用されてよいフレキシブルコネクタ８００を含むフィルタアセンブリの一実施形態８００の様々な図を示す。図８Ａは、フィルタアセンブリの入力基板８３０に取り付けられたフィルタアセンブリフレキシブルコネクタ８０２の斜視図を示す。入力基板８３０の下方に出力基板８３２がある。図８Ｂの正面断面図に示されるように、入力基板８３０と出力基板８３２との間にフィルタ膜８３８及び粘着層（例えば、両面粘着層）８３６が配置される。幾つかの実施形態では、粘着層８３６とフィルタ膜８３８の順序が逆である。例えば、フィルタ膜８３８は、フィルタ膜の正しい向きが保持されることを保証しながら、粘着層８３６の上又は下に横たわる。
【００５５】
幾つかの実施形態では、フィルタ膜は、長さが約１７ｍｍであり、幅が約１７ｍｍである。他の寸法も可能である（例えば、幅及び／又は長さは約１５ｍｍ、１６ｍｍ、１７ｍｍ、１５〜２０ｍｍ、１０〜１５ｍｍ、２０ｍｍ超等）。幾つかの実施形態では、粘着層は、両面感圧粘着層を含む。粘着層は、基板（例えば、ＰＥＴ基板）のいずれかの面上に配置された感圧粘着層を含んでよい。各粘着層は、厚さが約０．００５”であってよい。他の寸法も可能である（例えば、約０．００４〜０．００６”、約０．００３〜０．００７”、約０．００２〜０．００８”、約０．００４”、約０．００６”等）。基板は、厚さが約０．００５”であってよい。他の寸法も可能である（例えば、約０．００４〜０．００６”、約０．００３〜０．００７”、約０．００２〜０．００８”、約０．００４”、約０．００６”等）。０．００５”の基板のいずれかの面上に０．００５”の粘着層が配置された粘着層であれば、合計厚さが約０．０１５”である。
【００５６】
この厚さにより、寸法が１７ｍｍ×１７ｍｍであるフィルタ膜との隙間が非常に薄い０．００２”のままになり、これによって、流体が横方向に流れてフィルタ全体を湿らせることが可能になる。試料を駆動してフィルタに通すのに十分な圧力がアセンブリ内で発生するように、しかしそれでも流体が横方向に流れてフィルタ膜の露出部分全体に行き渡ることが十分可能であるように、この隙間を最小化することが重要であろう。隙間が大きすぎると、空間が空いて駆動圧力が不十分になることにより、試料の濾過が不完全になる可能性がある。隙間が不十分な場合には、試料は、フィルタ膜の露出部分全体に行き渡る為の流路が制限される可能性がある。この隙間が適切に設計されれば、加圧装置によって定量供給される空気の体積が小さくなって、液体試料の完全濾過が確実に行われることが可能になる。例えば、１００〜１０００μＬのマイクロピペットは、典型的には、液量を定量供給した後にプランジャの第２のストップに達すると、約２５０μＬの空気だけを定量供給することが可能である。この隙間を最小化すると、マイクロピペットのような、少量の空気を定量供給する装置を圧力源として使用して、試料を適切に駆動してフィルタアセンブリに完全に通すことが可能になる。他の隙間寸法も可能である（例えば、約１〜３ｍｍ、約１ｍｍ、約３ｍｍ等）．
【００５７】
粘着層は、長さと幅が約２２ｍｍであってよい。他の長さ及び幅も可能である（例えば、約２１ｍｍ、約２３ｍｍ、約２１〜２３ｍｍ、約２０〜２４ｍｍ、約１９〜２５ｍｍ、約１５〜２５ｍｍ、２５ｍｍ超等）。粘着層の切り抜き部は、長さと幅が約１４ｍｍであってよい。他の長さ及び幅も可能である（例えば、約１３ｍｍ、約１５ｍｍ、約１３〜１５ｍｍ、約１１〜１７ｍｍ、約１０〜２０ｍｍ等）。
【００５８】
幾つかの実施形態では、入力基板及び出力基板の一方又は両方がポリカーボネートを含む。他の材料も可能である（例えば、ポリプロピレン、ポリエチレン、及びポリスチレン）。ポリカーボネートは、有利なことに、デュロメータ硬度がショア５０Ａである熱可塑性エラストマ（ＴＰＥ）でオーバモールドされているフレキシブルコネクタ材料と化学的に適合する。この適合性により、フレキシブルコネクタ材料が基板上に適切に固定されたままとなり、漏れ経路が発生しないことが保証されうる。入力基板は、厚さが約３ｍｍであってよい。他の寸法も可能である（例えば、約２ｍｍ、約４ｍｍ、約２〜４ｍｍ、約１〜５ｍｍ等）。入力基板は、幅と長さが約２２ｍｍであってよい。他の長さ及び幅も可能である（例えば、約２１ｍｍ、約２３ｍｍ、約２１〜２３ｍｍ、約２０〜２４ｍｍ、約１９〜２５ｍｍ、約１５〜２５ｍｍ、２５ｍｍ超等）。幾つかの実施形態では、入力基板の表面が、両面粘着剤への粘着の為にフラットである。幾つかの実施形態では、入力基板の表面は、突起形状物又はテクスチャ形状物を含む。幾つかの実施形態では、出力基板は、厚さが約２ｍｍである。この厚さは、加圧中の曲がりを防ぐのに十分でありうる。他の厚さも可能である（例えば、約１ｍｍ、約３ｍｍ、約１〜３ｍｍ、約１〜５ｍｍ等）。出力基板は、長さと幅が約２２．２５ｍｍであってよい。この寸法は、２２ｍｍ×２２ｍｍの入力基板が、入力基板と出力基板の間に粘着層及びフィルタ膜を挟んで出力基板の領域にぴったり収まることを可能にしうる。他の長さ及び幅も可能である（例えば、約２１ｍｍ、約２３ｍｍ、約２１〜２３ｍｍ、約２０〜２４ｍｍ、約１９〜２５ｍｍ、約１５〜２５ｍｍ、２５ｍｍ超等）。
【００５９】
フレキシブルコネクタ８０２の上部に、コネクタへの容易な取り付けを可能にする漏斗８０４が含まれてよい。漏斗８０４は、取付機構を穴８０６内に導く（図８Ｃに最もよく示されている）。幾つかの実施形態では、漏斗は、大径が約３．６ｍｍ、小径が約１．６ｍｍ、面取り角度が４５°、長さが約１ｍｍである。他の寸法も可能である。例えば、大径は、約３〜４ｍｍ、約３ｍｍ、約４ｍｍ、約２〜６ｍｍ等であってよい。小径は、約１〜２ｍｍ、約１ｍｍ、約２ｍｍ、約０〜３ｍｍ等であってよい。面取り角度は、約４０〜５０°、約３５〜５５°、約３０〜６０°等であってよい。漏斗の長さは、約０．７５〜１．２５ｍｍ、約０．５〜１．５ｍｍ、約０．７５ｍｍ、約１．２５ｍｍ等であってよい。漏斗８０４の面取り箇所の後方に、狭い管又はパイプ８０８がある。このパイプは、取付機構（例えば、ピペットチップの端部）を把持及び封止できるように十分な長さであってよい。パイプの高さは約７ｍｍであってよい。他の長さも可能である（例えば、約５〜７ｍｍ、約５ｍｍ、約６ｍｍ、約６〜８ｍｍ、約５〜９ｍｍ、約７〜８ｍｍ、約７〜９ｍｍ等）。パイプは、最小内径が約１．５ｍｍであってよい。他の形状寸法も可能である（例えば、約１ｍｍ、約１〜２ｍｍ、約２ｍｍ等）。長さが約７ｍｍであって最小内径が約１．５ｍｍであるパイプが、市販の１０００μＬピペットチップ並びに他の多くの挿入された接続機構を把持且つ封止するように構成されてよい。
【００６０】
パイプ８０８の後方に、アセンブリ内へのそれ以上の挿入を阻止する収縮穴８１０がある。この収縮穴８１０は、フレキシブルコネクタへのオス接続機構の過挿入に起因するフィルタ膜の損傷を防ぐ。幾つかの実施形態では、収縮穴の径は約０．７５ｍｍである。他の径も可能である（例えば、約０．７ｍｍ、約０．８ｍｍ、約０．６〜０．９ｍｍ、約０．５〜１ｍｍ等）。収縮穴８０８のサイズは接続機構（例えば、ピペット）の先端より小さくなっており、これは、接続機構の先端が、収縮穴８０８に当たったときに急停止して、フィルタ膜に届かないようにする為である。
【００６１】
フレキシブルコネクタに含まれてよい可撓材料として、ＴＰＥ、シリコーン、ゴム、ポリウレタン、及び軟質熱可塑性プラスチック（ＬＤＰＥ、ＨＤＰＥ、ＰＰ、可塑化ＰＶＣ等）があり、これらに限定されない。フレキシブルコネクタの壁厚は、接続装置がフレキシブルコネクタに取り付けられる際に十分な剛性の支持が得られるようになっており、それによって、わずかな位置合わせずれを許容しながらも位置合わせが保持される。フレキシブルコネクタのサイズは更に、スクイーズボトルのネックにあるようなボアに挿入される際に剛性を備えうるサイズである。幾つかの実施形態では、壁厚は２ｍｍである。他の厚さも可能である（例えば、１．５〜２．５ｍｍ、約１．７５〜２．２５ｍｍ、約１〜３ｍｍ、約１〜４ｍｍ等）。
【００６２】
フレキシブルコネクタの反対側の端部に、流体を所望の場所に入るように方向付ける出力機構８１２がある。この機構は、ほんのわずかに突出するようなサイズになっている（例えば、約２ｍｍ、約１〜３ｍｍ、約１ｍｍ、約３ｍｍ、３ｍｍ超等）。これにより、市販の検査カートリッジへの容易な位置合わせ及び取り付けが可能であり、このことは、他の利用可能なフィルタ構造では困難である可能性がある。出力側のフラット面がフラットな検査カートリッジの表面に取り付けられ、これにより、流体は常に、カートリッジ内に向かって垂直に方向付けられる。出力機構の小突起の長さと径は、小突起が検査カートリッジの試料入力機構内にあるときに空間に余裕があるようになっている。出力機構の外径は、約１．２５ｍｍであってよい。他の径も可能である（例えば、約１ｍｍ、約１．５ｍｍ、約１〜１．５ｍｍ、約０．５〜１．５ｍｍ、約０．５〜２ｍｍ、約１〜２ｍｍ、約１〜３ｍｍ等）。この機構は更に、流体がフィルタアセンブリの壁に付着せず、主に検査カートリッジ内へと方向付けられることを保証しうる。
【００６３】
図８Ｃは、入力基板８３０に接続されたフレキシブルコネクタの一実施形態８０２を示す。このフレキシブルコネクタは、漏斗部８０４、開口部８０６、パイプ８０８、及び収縮穴８１０を含む。図８Ｃの実施形態が図８Ｂに示された実施形態と異なるのは、収縮穴の先に、より大きなキャビティ８１１がある為であり、キャビティ８１１は、後で詳述するように、ボール弁を収容する為に使用されてよい。図８Ｄは、図８Ｃに示されたアセンブリとよく似ている、フィルタアセンブリの一実施形態８５０を示しているが、図８Ｄのフレキシブルコネクタ８５２は、パイプ８５６の上部にアンダカット８５４を含む。このアンダカット８５４は、バーブがフレキシブルコネクタに接続されたときに可聴スナップ音を鳴らすことが可能である。アンダカット８５４は更に、フィルタアセンブリに接続されたバーブを定位置で保持することが可能である。
【００６４】
図８Ｅは、入力基板８６４に接続されたフレキシブルコネクタの別の実施形態８６２を示す。コネクタ８６２と基板８６４は機械式インタロック８６４で接続されており、機械式インタロック８６４は、フレキシブルコネクタが入力基板から離れない（例えば、剥がれない）ようにすることに役立ちうる。
【００６５】
幾つかの実施形態では、フィルタアセンブリは、１ピースとして形成され、或いは、互いにつながっている複数の個別ピースとして形成されてよい。幾つかの実施形態では、ポリカーボネート基板が射出成形され、その後、物理的に別のモールドの上に置かれてよい。その後、フレキシブルコネクタ材料（例えば、弾性ＴＰＥ）が基板上にオーバモールドされて、フレキシブルコネクタが作成されてよい。
【００６６】
図９Ａ及び９Ｂに示されるように、幾つかの実施形態では、フィルタアセンブリ９００はボール弁を含む。弁機構は、操作者が活性化動作を解除したとき（例えば、スクイーズボトルを放したとき、或いはマイクロピペットのプランジャを放したとき）に引き起こされる逆流に対処することが可能である。既に示された実施形態と同様に、フィルタアセンブリは、フレキシブルコネクタ９０２。漏斗９０４、開口部９０６、パイプ９０８、及び収縮穴９１０を含む。ボール９１４は、空間に余裕があるキャビティ９１６内で休止しており、収縮穴の直後に配置される。キャビティの壁のうちの１つの壁がフィルタ膜９３８で形成され、ボールは使用時以外はフィルタ上で休止する。加圧動作が活性化されると、ボールはキャビティを塞がないが、活性化動作が解除されると、流体が逆方向に流れる。これは、スクイーズボトルを放すような動作によってスクイーズボトルが元の形状に戻ろうとするときに負の相対圧力が発生し、これによって流体が逆吸引される為である。そこで、フィルタの構造にボールを含めると、ボールがキャビティ内で封止を形成して収縮穴９１０を塞ぐ為に逆流が阻止される。図９Ａは封止されていない構成の弁を示しており、パイプ９０８からフィルタ膜９３８への流体経路がボール９１４の周囲にあり、一方、図９Ｂは封止された構成の弁を示しており、フィルタ膜９３８とパイプ９０８との間の流体経路がボール９１４によって封止されている。ボールは様々な材料を含んでよく、そのような材料としてゴム、プラスチック、セラミック、及び金属があり、これらに限定されない。更に、ユーザは、アセンブリが保持される向きに応じてボールが浮いたり沈んだりするような密度の材料を選択することが可能である。例えば、（密度が最大０．９ｇ／ｃｍ３である）ポリプロピレン材料であれば、水に浮くことによって、垂直方向の封止がより容易になる。これに対し、（密度が最大１．３ｇ／ｃｍ３である）ニトリルゴムボールであれば、フィルタが逆さまに保持された場合に沈むことによって、その向きにおけるよりよい封止材料となる。そして、加圧装置によって発生する負の相対圧力は、ボールの両側に圧力差を発生させることによって封止を保持し、ボールは入力である穴を封止して逆流を阻止する。
【００６７】
図１０Ａ〜１０Ｂは、フィルタアセンブリ１０００をスクイーズボトル１００６に取り付ける為のフレキシブルコネクタの使用方法を示す。フレキシブルコネクタ１００２は、ボトルの内径の内側１００４に挿入されて、これを封止してよい。ボトルの内径１００４は、コネクタが挿入されるとコネクタと干渉して、本装置が（例えば、図１Ａ〜１Ｂにおいて）上述されたように動作することを可能にする。
【００６８】
フレキシブルコネクタの漏斗機構は、マイクロピペットチップをフレキシブルコネクタに取り付ける場合に特に有用でありうる。マイクロピペットはピペットチップの先端から遠く離れて保持される為、チップの狙いをフレキシブルコネクタ内に定めることが、図示されたような漏斗機構をしないと、より著しく困難になる。上述のように、高さが約７ｍｍであって最小内径が約１．５ｍｍであるパイプを有するフィルタアセンブリであれば、フレキシブルコネクタが市販の１０００μＬピペットチップ並びに他の多くの挿入された接続機構を把持且つ封止することを可能にしうる。
【００６９】
図１１Ａ〜１１Ｂは、フィルタアセンブリ１１００とともに使用されているマイクロピペットの一例を示す。１００〜１０００μＬのマイクロピペット１１２０が全血の試料（例えば、１００μＬ）を採取する。そして、チップ１１２２がフレキシブルコネクタ１１０２の漏斗１１０４に挿入される。挿入後、フレキシブルコネクタは、図１１Ｂに示されるように、チップ上に流体封止を形成する。コネクタとマイクロピペットとを接続することにより、アセンブリ全体が持ち上げられて、適切な使用場所まで輸送されることも可能になる。
【００７０】
図１２Ａ〜１２Ｃは、フィルタアセンブリ１２００に挿入されたマイクロピペットを示しており、マイクロピペットのプランジャが様々な位置まで押下されている様子を示している。図１２Ａでは、マイクロピペット１２１０がフレキシブルコネクタ１２０２に挿入されていて、プランジャ１２１４はまだ押されていない。一般的な検査用マイクロピペットのプランジャはストッパが２つある。図１２Ｂに示されるように、プランジャを第１のストッパまで押下すると、ピペットチップの内容物が定量供給される。図１２Ｃに示されるように、プランジャを第２のストッパまで押下すると、空気を追い出すことによって残りの液体が全て吐出される。図１２Ｃでは、マイクロピペットが第２のストッパまで押下され、追い出された空気が、血液に印加される圧力のソースとして使用されて、血液がフィルタを通り抜けるように駆動される。適切な量の血漿が定量供給された後、ユーザはプランジャを放して、アセンブリに対する圧力を解放することが可能である。幾つかの実施形態では、プランジャは１分間保持されるが、用途に応じて、より長く、又はより短く保持されてよい。別の用途では、同じ動作モードを使用して、希釈血液も同様に濾過することが可能である。一般に、希釈血液は、フィルタを詰まらせる細胞が少ない為に短時間で濾過することが可能である。幾つかの実施形態では、希釈血液は、プランジャを約５秒間保持することにより濾過可能である。別の実施形態では、希釈血液を濾過する際に、プランジャをより短時間又はより長時間押下してよい。図１２Ａ〜１２Ｃに関して説明されたように、一般的な検査用マイクロピペット１２１０は、全血だけでなく希釈血液を濾過するように容易に適合可能であり、その場合、本出願のフィルタアセンブリを使用する遠心分離は不要である。マイクロピペットの、追い出される空気及び液体の体積は厳密な量であり、これを用いて、信頼できる圧力を血液にかけて内容物を濾過することが可能である。
【００７１】
更に、図１２Ｄ〜１２Ｇに示されるように、バルブピペット１２４０がフレキシブルコネクタ１２４２に挿入されてよい。フレキシブルコネクタの構造は、他の材料を封止する際にバルブピペットの分割線や鋳バリによって漏れ経路が発生することで提起される難題に対処することが可能である。バルブピペットをフレキシブルコネクタとともに使用することにより、分割線が試料漏れの問題を提起することはなくなる。これは、フレキシブルコネクタの可撓性により、理想的でない表面を封止することが可能になる為である。分割線や鋳バリのような成形欠陥は、理想的でない封止面を発生させ、これは、剛体又は半剛体の材料を封止することに関して、微細な漏れ経路を発生させる問題を提起する。フレキシブルコネクタの可撓材料は、不規則であって理想的でない表面及び成形欠陥に順応することによって、それらを封止し、望ましくない漏れの可能性を減らすことが可能である。
【００７２】
以下の図に示されるように、フィルタアセンブリは、ラッチ又は粘着剤又はボンディングの機構を含むカートリッジ上に直接配置されてよく、これは、カートリッジが検査カートリッジ製造者によって梱包される間、アセンブリが定位置で固定されるようにする為である。ユーザは、自身にとって好ましい試料処理装置（マイクロピペットチップ、バルブピペット、適切なオスコネクタを有するスクイーズボトル）をカートリッジに対して直接適用することが可能になる。この動作モードでは、処理装置が定位置に固定された後に流体がアセンブリに直接送達される為、位置合わせが不要になる。更に、アセンブリの構造が本質的にフラットであることにより、容易な組み立て及び梱包が可能である。典型的には、市販のフィルタアセンブリは長い突起形状物を含んでおり、これによってカートリッジへの適合が困難になっている。本出願の構造では、様々な用途とのシンプルな統合が可能なように、本装置の表面はフラットであり、突起形状物はインパクトが最小限に抑えられている。図１３Ａ〜１３Ｂは、カートリッジ１３０２に取り付けられるフィルタアセンブリの一実施形態１３００の斜視図を示す。図１３Ａは、フィルタアセンブリ１３００がカートリッジ１３０２上に配置される前のフィルタアセンブリ１３００及びカートリッジ１３０２を示している。カートリッジ１３０２はラッチ機構１３０４を含む。フィルタアセンブリは、適切に、アライナ１３０５及びラッチ機構１３０６によりカートリッジ上に配置され、フィルタアセンブリを定位置に固定するラッチ機構１３０４の突起物１３０６によってカートリッジ上にスナップ接続されてよい。アライナ１３０６及びラッチ機構は、図１３Ｂに示されるように、フィルタアセンブリの出力を、カートリッジ１３０２の試料入力領域１３０８と適切に位置合わせする。図１３Ｃ及び１３Ｄは、フィルタアセンブリ１３００及びカートリッジ１３０２の側面断面図である。フィルタアセンブリの出力機構１３１２は、図１３Ｃ及び１３Ｄの側面図において見られる。図１３Ｃは、フィルタアセンブリ１３００がカートリッジ１３０２上に配置される前のフィルタアセンブリ１３００及びカートリッジ１３０２を示している。図１３Ｄは、アライナ１３０５（図１３Ｄには示されず）及びラッチ１３０４を使用してカートリッジ１３１０上に配置されたフィルタアセンブリ１３００を示している。図１３Ａ〜１３Ｄは、ラッチがフィルタアセンブリの出力基板にスナップ接続される様子を示しているが、幾つかの実施形態では、ラッチはフィルタアセンブリの入力基板にスナップ接続されてよい。他の取付機構も可能である（例えば、感圧粘着剤、液状粘着剤、超音波溶接、クラッシュリブ、クラッシュピン、及び圧入）。
【００７３】
図１３Ｅ及び１３Ｆは、カートリッジの別の実施形態１３２０とともに使用されているフィルタアセンブリ１３００の斜視図を示す。図１３Ｅは、カートリッジ１３２０上に配置される前のフィルタアセンブリ１３００を示している。この実施形態では、カートリッジ１３２０はアライナ１３２２を含むが、アライナはラッチを形成する突起を含まない。アライナは、図１３Ｆに示されるように、フィルタアセンブリをカートリッジの試料入力領域の上方に適切に配置する為に使用されてよい。フィルタアセンブリがカートリッジに対して位置合わせされ、濾液が定量供給されたら、フィルタアセンブリがカートリッジから取り外されてよく、これにより、フィルタアセンブリ及びマイクロピペットチップは、カートリッジとは別個に廃棄される。幾つかの実施形態では、図１３Ｅ及び１３Ｆに示されるように、フィルタアセンブリは、検査カートリッジに取り付けられたままでなくてよい。この動作モードにより、ユーザは、用途の必要に応じてフィルタアセンブリをカートリッジに取り付けたままにしたり、カートリッジから取り外したままにしたりすることを柔軟に行うことが可能である。例えば、カートリッジが後で分析器に挿入される場合、フィルタアセンブリは、物理的にカートリッジ挿入の邪魔になることがある。更に、フィルタアセンブリの廃棄を別個に行うことにより、分析器を汚染する可能性が減じられる。幾つかの実施形態では、アライナを感圧粘着剤又は接着剤と組み合わせて使用して、フィルタアセンブリ１３００をカートリッジ１３２０に取り付けることが可能である。
【００７４】
図１４Ａは、市販の検査カートリッジの一実施形態１４０２と、フィルタアセンブリが取り付けられる予定の場所（例えば、試料入力領域１４０４）とを示す。図１４Ｂは、カートリッジ１４０２にフィルタアセンブリ１４００が取り付けられている様子を示す。
【００７５】
図１５に示されるように、幾つかの実施形態では、フィルタ構造は、多チャネルマイクロピペット又はロボット式液体処理ステーション向けのアレイとして組み立てられてよい。この構成は、複数の試料を一度に処理しなければならない場合に検査室での時間を節約する為に特に有用でありうる。図１５は、フィルタアセンブリがどのようにしてアレイの形に適合されうるかを示しており、ここでは、４つのポート１５０２、１５０４、１５０６、１５０８が全て、互いに独立に動作することで、異なる複数の試料が相互汚染されることなく別々に濾過されることが可能になる。各ポート１５０２、１５０４、１５０６、１５０８は、上述のフレキシブルコネクタ及びフィルタアセンブリの構造を含んでよい。この構造は、アレイ内の任意の数のフィルタに拡張されてよい。標準的且つ遍在的な９６ウェルプレート形式では、検査機器全般において一般的であり、各ピペットチャネル同士の間隔が９ｍｍである。入力チャネル同士は、９ｍｍ、又は９の任意の倍数（９、１８、２７等）の間隔を空けて配置されてよい。
【００７６】
図１６Ａ〜Ｃは、（例えば、図１Ａ及び１Ｂに関して）上述された、フレキシブル容器１６０２とキャップ１６０４の構造を利用したフィルタ装置の別の実施形態を示す。フレキシブル容器を有する血液フィルタ構造の使いやすさを向上させる為に、図１６Ａの断面図に示されるように、キャップ１６０４にスワブ１６０６が含まれてよい。スワブの長さは、ユーザがキャップ１６０４をねじり始めると、スワブの先端１６０８がスクイーズボトル１６０２の内壁に突き当たるようなサイズになっている。スワブ１６０６は、理想的には、キャップ１６０４の取り付け中に力がかかって破損しないように、半剛体であって曲げられる材料及び形状で作られる。ボトルのねじ山１６１２に対してキャップのねじ山１６１０を回すねじり動作によって、流体の攪拌中もキャップは確実に定位置でロックされ、これによって、スワブ先端にある血液試料がボトルの内側で緩衝液と混合される。
【００７７】
ねじ山を時計回りに回してキャップをスワブに取り付ける際に、曲げられたときのスワブの弾性により、キャップが反時計回り方向に跳ね返ることがわかっている。この跳ね返りを抑制する為に、キャップ１６０４に跳ね返りトルクがかかってもキャップ１６０４が反対方向にあまり回らないように、キャップ１６１０のねじ山とフレキシブル容器１６１２のねじ山との間に摩擦が導入された。スワブ１６０６は、スワブにアンダカット１６１４を含むことによって、キャップ１６０４上に固定されており、これは図１６Ｂの拡大図に最もよく示されている。このことが図面において正しく参照されていることをご確認いただけますか？このアンダカット１６１４は、キャップ１６０４上の相補的結合機構１６１６により定位置にスナップ接続される。キャップは、回されている間はスワブを回転させるように、トルクをスワブに伝達できることが重要である。そこで、アンダカットは、トルクの伝達を可能にするファセット１６１８を含む。キャップは更に、キャップと結合する為の相補的なファセット１６２０を含む。
【００７８】
これが適切に機能する為の別の重要な特徴として、試料がフィルタに入ることを可能にする為には、キャップとスワブは、取り付けられたときに流体封止を形成してはならないというものがあってよい。従って、スワブ１６０６とキャップ１６０４との間には形状の不整合がある可能性がある。この例では、キャップの六角形のフラット面間の寸法１６２２（例えば、六角形の平行なファセット同士の間隔）が、六角形の外側のフラット面間の寸法１６２４を（例えば、０．００２”、０．００１〜０．００２”、０．００１〜０．１”、０．００１〜０．００５”等だけ）上回ることにより、流体が隙間を通り抜けてフィルタに流入することが可能になる。スワブは、スワブのラッチ機構１６１４をキャップの六角形１６２０の先まで押すことにより、定位置にスナップ接続される。これらのラッチ機構により、スワブは確実に定位置に保持され、容易に引き抜くことができなくなる。フィルタが検査カートリッジ自体に配置されている場合、又は用途が濾過を必要としない場合には、キャップにフィルタが不要になり、本装置が圧搾されると、流体が自由に流れ出る。上述の構成は、このアセンブリにフィルタを組み込む方法を示しているが、試料の濾過を必要としない検査であれば、フィルタは不要である。その代わりに、本明細書では、血液試料が濾過済み試料又は未濾過試料として定量供給されることが可能であるように、フィルタ構造との統合を選択肢として有する、スクリューキャップを使用して血液試料を混合する方法を示す。
【００７９】
多くの用途では、その個々の用途で機能する為の様々な量の血液及び緩衝液が必要とされる為、フィルタ面積が可変量であるフィルタを設計できることが必要とされる。図１７に示したアセンブリ１７００では、らせん状のミニチャネル１７０６が粘着剤の切り抜き部の外周１７０２の上に延びている。更に、粘着剤を出力構成要素の封止面に押しつけた後、感圧粘着剤がチャネル内に広がって、チャネルの全体又は一部を封止する。このようにして、粘着剤の切り抜き部の外周を表す線１７０２は、（白色で示された）両面粘着層によって覆われて、使用されない。これは、粘着剤がチャネルのその長さ部分をブロックした為である。従って、この設計では、使用されているフィルタの使用可能部分は、両面粘着層によって画定される。影付き部分１７０４は、フィルタ膜のうちの、血液試料の濾過に使用されている領域である。このような、粘着剤による封止により、設計者は、剛体のハウジングを設計し直すことを必要とせずに、当該用途向けの切り抜き領域を指定することが可能になる。この利点により、同じ製造済み剛体ハウジング構成要素の使用が、量及び希釈度の要件が様々である多様な用途で機能することに適合可能であることが可能になる。この機能により、フィルタを新たなサイズフットプリントに合わせて再構成する為の新規且つ高価な治工具を設計することが不要になる。そうする代わりに、粘着層が用途に適合するサイズに改造される。これは、新たな用途に合わせて新規に金型を起こすことに比べて格段にシンプル且つ廉価に実施される。
【００８０】
上述のように、典型的には、試料処理は、静脈穿刺を経たバキュテイナ管から血液試料を精密ピペットで収集するステップと、その試料を遠心分離管に入れるステップと、を含む。次に、その血液試料が入った遠心分離管に特定量の緩衝液がピペットで入れられる。次にその混合物が、均一になるまで数回、ピペットに吸い込まれる。次にその混合物が、指定された時間の間、高回転速度で遠心分離される。その後、特定量の上澄み液がピペットで検査ストリップ上に移される。本明細書に記載の装置及び方法を使用すると、その量の血液が毛細管、スワブ、又はピペットに採取されることが可能である。本装置は、血液の採取方法に依存しない。血液の混合は、混合物をかき混ぜるか、回転させることによって行われてよい。細胞は、フィルタにより、希釈された血漿から分離される。この量は、滴数を数えるか、指定量の試料を採取することにより、ストリップ内に堆積される。
【００８１】
必要とされていたリソースであって、本明細書に記載の装置によって不要になるリソースとして、精密ピペット、遠心分離器、電力、及び専門トレーニング、並びにコストがある。多くのポイントオブケア用途において、細胞分離は、ケア提供者が直面す重要な課題であるが、本出願の装置及び方法は、フィルタアセンブリを使用してこの課題を解決した。他の製品は、接線流濾過及び慣性集束を利用するが、これらは、本明細書に記載の装置ほど迅速でもシンプルでもない。研究においては、これらのステップを全て自動化できるようにする為の作業がマイクロ流体工学においてはたくさんある。しかしながら、マイクロ流体装置は、やはり、電力、圧力ポンプ、特殊な計器、コンピュータ制御、弁、専門トレーニング、及びお金を必要とする。更に、微小規模においては、混合のような処理が重要になる。これは、レイノルズ数が低い、小さなチャネルが乱流混合を促進しない為である。細胞分離は、マイクロ流体工学での実施が非常に困難な作業でもある。血漿に対する血液の割合はおおよそ５０％である。従って、細胞を血漿から分離する際にはフィルタが非常に効果的であることが必要になってくるが、高効率及び低コストであるそのようなフィルタは、これまで文献では適切に示されていない。更に、このマイクロ流体的な細胞分離の観点からの、大量生産への道筋は示されていない。
【００８２】
本明細書に記載の装置及び方法は、大量生産には十分な規模を活用する。本装置及び方法は、コストを大幅に抑える為に、射出成形された装置及び部品を有することが可能な寸法及び規模で動作する。これにより、混合作業は、かき混ぜたり、回転させたり、逆さまにしたり、ピペット操作を繰り返したりして容易に実施可能である。この規模では、本装置は、わずかに多めの試料（１〜２滴）を採取する負担で、大きなフィルタを利用することが可能である。本装置の圧力源は、フレキシブル容器を圧搾したり、マイクロピペットのプランジャを押下したりといった単純な操作から得られる。本試料処理のステップは全て直感的であって、正しく実施する為の十分なトレーニングを必要としない。
【００８３】
本出願のフィルタ構造は、現在利用可能なフィルタ構造に比べて幾つかの点で有利でありうる。現在利用可能な幾つかのフィルタ構造では、フィルタから濾液を受けるチャネルは、薄い膜、又は他の薄くて軽い材料の上に配置されることがある。更に、これらのチャネルは、レーザエッチング又は別の手段で膜から材料を取り除いて、膜を更に薄くすることによって形成されることがある。これらのチャネルを含む膜が薄くて軽い為、各チャネルは、十分な間隔を空けて配置されなければならない。これは、チャネル間隔が狭すぎる場合に、膜がたわんだり圧迫されたりしてチャネル同士が互いの障害になりうることに対処する為である。これに対し、本出願の構造のチャネルは、曲げることができなくてよい、非可撓性の、又はより高剛性の基板の上に設けられる。チャネルを含む基板が剛体であることにより、チャネルの精密な位置決めが可能になりうる。例えば、基板のたわみによってチャネル同士が互いの障害になる懸念がない為、チャネル同士を互いに非常に近接させて配置することが可能である。これが可能であることで、チャネル網をより高密度にして、フィルタの出力能力を高速化且つ強化することが可能になりうる。
【００８４】
現在利用可能なフィルタで提供可能な構造では又、緩衝液がフィルタの内部に与えられ、濾過過程の幾つかの時点で受動的に混合される。従って、試料の希釈度は、フィルタ構造の構成及び形状に依存する。これに対し、本出願の構造では、使用される全ての緩衝液が（例えば、フレキシブル容器内で）事前に混合されてから、緩衝液と試料の混合物がフィルタにかけられる。この事前混合により、ユーザは、試料の所望の希釈度を厳密に選択又は計算することが可能になる。
【００８５】
現在利用可能なフィルタは、マイクロピペット、スクイーズボトル、シリンジ、バルブピペット等のような様々な加圧装置の使用に対応するようには設計されていない。そのような現在利用可能な装置は、特定タイプの加圧装置とだけ動作可能なように設計されている。本出願の構造は、１つの構造で様々な加圧装置に適合し、これによって、より広範な用途で使用されることが可能になる。
【００８６】
更に、多くの現在利用可能なフィルタ構造には、フィルタを安定させる剛体の基板又はハウジングがない。そのような可撓構造は、検査カートリッジへの配置又は取り付け（例えば、スナップ接続）が容易ではない。これに対し、本出願のフィルタ構造は、剛体の基板又はハウジングを含む。更に、そのような可撓構造は、剛性が欠如している為に加圧されると変形し、アセンブリの不要な肥大化を引き起こすことになる。基板又はハウジングは、剛体であることにより、検査カートリッジに容易に配置又はスナップ接続され、加圧されてもその形状を維持することが可能でありうる。
【００８７】
当業者であれば、本明細書に開示の装置及び方法の変形形態及び修正形態が容易に明らかであろう。従って、当然のことながら、上述の詳細説明及び添付図面は、明確さと理解されることとを目的として作成されており、本発明の範囲を限定することは意図されておらず、本発明の範囲は、添付の特許請求項によってのみ規定される。本明細書に記載のどの一実施形態において説明されたどの特徴であっても、それ以外のどの実施形態の他のどの特徴とも、好ましいかどうかにかかわらず、組み合わされてよい。
【００８８】
当然のことながら、本明細書に記載の実施例及び実施形態は、例示のみを目的としており、それらを踏まえた様々な修正又は変更が当業者に示唆されることとなり、本出願の趣旨及び範囲、並びに添付の特許請求項の範囲に包含されることとなる。本明細書で言及される全ての発行物、特許、及び特許出願は、あらゆる目的のために参照により本明細書に含まれている。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図８Ｄ】
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【図８Ｅ】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１２Ｃ】
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【図１２Ｄ】
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【図１２Ｅ】
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【図１２Ｆ】
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【図１２Ｇ】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１３Ｃ】
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【図１３Ｄ】
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【図１３Ｅ】
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【図１３Ｆ】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１５】
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【図１６Ａ】
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【図１６Ｂ】
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【図１６Ｃ】
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【図１７】
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【国際調査報告】
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