(57)【要約】  本発明は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）阻害剤に関する。本発明は、そのような化合物を含む医薬組成物、そのような化合物および組成物を調製するプロセスおよびＯＧＡの阻害が有益である障害、例えばタウオパチー、特にアルツハイマー病または進行性核上性麻痺およびタウ病変を伴う神経変性疾患、特にＣ９ＯＲＦ７２の変異を原因とする筋萎縮性側索硬化症または前頭側頭葉型認知症を予防および処置するための、そのような化合物および組成物の使用も対象とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2020509004.tif 000314
（式中、
Ａ−Ｂは、１〜４個の窒素原子を有する９員二環式ヘテロアリール系を表し、
Ｘ１およびＸ３は、それぞれ独立に、ＣＲＸＡ、ＮおよびＮＲＹＡからなる群から選択され、
Ｘ２は、ＣＨであり、
Ｘ４は、ＣまたはＮであり、および
Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７およびＸ８は、それぞれ独立に、Ｃ、ＣＲＸＢおよびＮからなる群から選択され、
ただし、Ｘ１およびＸ３の少なくとも１つは、ＮまたはＮＲＹＡであり、
それぞれのＲＸＡおよびＲＸＢは、存在する場合、水素、ハロ、−ＣＮ、１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルおよび１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルオキシからなる群から独立に選択され、
それぞれのＲＹＡは、存在する場合、水素および１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルからなる群から独立に選択され、
ＬＡは、Ａ−Ｂ二環の６員Ｂ環における任意の利用可能な炭素原子に結合され、かつ結合、ＣＨＲ１、ＯおよびＮＲ１からなる群から選択され、
Ｒ１は、水素および１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルからなる群から選択され、
ＲＡは、ＬＡが結合、ＣＨＲ１、ＯまたはＮＲ１である場合、（ａ−１）基であり、またはＬＡが結合またはＣＨＲ１である場合、（ａ−２）および（ａ−３）
【化２】
2020509004.tif 000315
（式中、
ｍは、０、１または２を表し、
ｘ、ｙおよびｚは、それぞれ独立に、０、１または２を表し、
それぞれのＲ１ａおよびＲ２ａは、存在する場合、任意の利用可能な炭素原子に結合され、かつハロおよび１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルからなる群から独立に選択され、または２個のＲ１ａ置換基もしくは２個のＲ２ａ置換基は、同じ炭素原子に結合されかつ一緒にシクロプロピリデン基を形成し、
Ｚは、Ｒ３ａで置換されている場合にはＮであり、またはＮＨであり、
それぞれのＲ３ａは、存在する場合、任意の利用可能な炭素原子または窒素原子に結合され、かつ１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜３アルキルから独立に選択され、または２個のＲ３ａ置換基は、同じ炭素原子に結合されかつ一緒にシクロプロピリデン基を形成し、
ＬＢは、＞ＣＨＲ２および＞ＳＯ２からなる群から選択され、
Ｒ２は、水素および１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルからなる群から選択され、および
ＲＢは、（ｂ−１）、（ｂ−２）、（ｂ−３）、（ｂ−４）、（ｂ−５）、（ｂ−６）、（ｂ−７）、（ｂ−８）、（ｂ−９）、（ｂ−１０）、（ｂ−１１）および（ｂ−１２）
【化３】
2020509004.tif 000316
（式中、
Ｚ１は、Ｏ、ＮＲ１ｚまたはＳであり、Ｒ１ｚは、水素またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｚ２およびＺ３は、それぞれ独立に、ＣＨまたはＮを表し、
Ｒ４ｂは、Ｃ１〜４アルキルであり、
Ｒ４ａ、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立に、水素またはＣ１〜４アルキルを表す）
からなる群から選択される複素環または複素環系を表し、または
−ＬＢ−ＲＢは、式（ｂ−１３）
【化４】
2020509004.tif 000317
（式中、Ｒ８は、水素またはＣ１〜４アルキルである）
の基である）
からなる群から選択される基である）
の化合物またはその互変異性体もしくは立体異性体型あるいはその薬学的に許容される塩または溶媒和物。
【請求項２】
ＲＢは、（ｂ−１）、（ｂ−２）、（ｂ−３）および（ｂ−８）からなる群から選択される基であり、または−ＬＢ−ＲＢは、式（ｂ−１３）の基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘ１は、ＣＨ、ＮおよびＮＲＹＡからなる群から選択され、ＲＹＡは、存在する場合、水素またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｘ２は、ＣＨであり、
Ｘ３は、ＣＨまたはＮであり、
Ｘ４は、ＣまたはＮであり、
Ｘ５は、Ｃ、ＣＲＸＢまたはＮであり、ＲＸＢは、存在する場合、水素または１、２もしくは３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルであり、
Ｘ６は、Ｃ、ＣＨまたはＣ（ハロ）であり、
Ｘ７は、Ｃ、ＣＲＸＢまたはＮであり、ＲＸＢは、存在する場合、水素または１、２もしくは３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルであり、および
Ｘ８は、Ｃ、ＣＨまたはＮであり、
ただし、Ｘ１およびＸ３の少なくとも１つは、ＮまたはＮＲＹＡであり、
ＬＡは、前記Ａ−Ｂ二環の前記６員Ｂ環における任意の利用可能な炭素原子に結合され、かつ結合、ＣＨＲ１およびＮＲ１からなる群から選択され、
Ｒ１は、水素またはＣ１〜４アルキルであり、
ＲＡは、ＬＡが結合、ＣＨＲ１、ＮＲ１である場合、（ａ−１）基であり、またはＬＡが結合またはＣＨＲ１である場合、（ａ−２）および（ａ−３）
【化５】
2020509004.tif 000318
（式中、
ｍは、０または１を表し、
ｘは、０、１または２であり、
ｙおよびｚは、それぞれ独立に０を表し、
それぞれのＲ１ａは、存在する場合、任意の利用可能な炭素原子に結合され、かつ１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルであり、または２個のＲ１ａ置換基は、同じ炭素原子に結合されかつ一緒にシクロプロピリデン基を形成し、
Ｚは、ＮＨであり、
ＬＢは、＞ＣＨＲ２および＞ＳＯ２からなる群から選択され、Ｒ２は、水素またはＣ１〜４アルキルであり、および
ＲＢは、（ｂ−１）、（ｂ−２）、（ｂ−３）および（ｂ−８）
【化６】
2020509004.tif 000319
（式中、
Ｚ１は、Ｓであり、
Ｚ２は、ＣＨであり、
Ｒ４ａは、ＨまたはＣＨ３であり、
Ｒ４ｂは、Ｃ１〜４アルキルである）
からなる群から選択される基であり、または
−ＬＢ−ＲＢは、式（ｂ−１３）
（式中、Ｒ８は、水素またはＣ１〜４アルキルである）
の基である）
からなる群から選択される基である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
ＬＢは、ＣＨ２である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
ＬＡは、結合、ＣＨ２またはＮＨであり、およびＲＡは、（ａ−１）である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
ＲＡは、（ａ−１）であり、ｍは、０または１であり、ｘは、０、１または２であり、およびＲ１ａは、メチルであり、または２個のＲ１ａ置換基は、同じ炭素原子に結合されかつ一緒にシクロプロピリデン基を形成する、請求項６に記載の化合物。
【請求項７】
ＬＡは、結合またはＣＨ２である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
式（Ｉ’）
【化７】
2020509004.tif 000320
を有する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
【化８】
2020509004.tif 000321
またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物の予防有効量または治療有効量と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項１１】
医薬組成物を調製するプロセスであって、薬学的に許容される担体を請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物の予防有効量または治療有効量と混合するステップを含むプロセス。
【請求項１２】
医薬として使用するための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物または請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
タウオパチー、特にアルツハイマー病、進行性核上性麻痺、ダウン症候群、前頭側頭葉型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ピック病、大脳皮質基底核変性症および嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチーまたはタウ病変を伴う神経変性疾患、特にＣ９ＯＲＦ７２の変異を原因とする筋萎縮性側索硬化症もしくは前頭側頭葉型認知症から選択される神経変性疾患の処置または予防に使用するための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物または請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
タウオパチー、特にアルツハイマー病、進行性核上性麻痺、ダウン症候群、前頭側頭葉型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ピック病、大脳皮質基底核変性症および嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチーまたはタウ病変を伴う神経変性疾患、特にＣ９ＯＲＦ７２の変異を原因とする筋萎縮性側索硬化症もしくは前頭側頭葉型認知症から選択される神経変性疾患からなる群から選択される障害を予防または処置する方法であって、それを必要とする対象に請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物または請求項１０に記載の医薬組成物の予防有効量または治療有効量を投与するステップを含む方法。
【請求項１５】
Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素を阻害する方法であって、それを必要とする対象に請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物または請求項１０に記載の医薬組成物の予防有効量または治療有効量を投与するステップを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式（Ｉ）
【化１】
2020509004.tif 000002
（式中、各基は、本明細書に定義されているとおりである）
で示される構造を有するＯ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）阻害剤に関する。本発明は、そのような化合物を含む医薬組成物、そのような化合物および組成物を調製するプロセスおよびＯＧＡの阻害が有益である障害、例えばタウオパチー、特にアルツハイマー病または進行性核上性麻痺およびタウ病変を伴う神経変性疾患、特にＣ９ＯＲＦ７２の変異を原因とする筋萎縮性側索硬化症または前頭側頭葉型認知症を予防および処置するための、そのような化合物および組成物の使用も対象とする。
【背景技術】
【０００２】
Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化とは、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン残基がセリン残基およびスレオニン残基のヒドロキシル基に転移してＯ−ＧｌｃＮＡｃ化タンパク質を産生する、タンパク質の可逆的修飾である。１０００を超えるそのような標的タンパク質が真核生物の細胞質基質および核の両方において確認されている。この修飾は、転写、細胞骨格プロセス、細胞周期、プロテアソーム分解および受容体シグナリングを含む広範な細胞プロセスを調節すると考えられている。
【０００３】
Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ転移酵素（ＯＧＴ）およびＯ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃを標的タンパク質に付加（ＯＧＴ）または標的タンパク質から除去（ＯＧＡ）すると説明されている２つのみのタンパク質である。ＯＧＡは、１９９４年に初めて脾臓標本から精製され、１９９８年に髄膜腫により発現する抗原として同定され、ＭＧＥＡ５と命名された。これは、細胞の細胞質基質コンパートメントにおいて単量体として９１６アミノ（１０２９１５ダルトン）からなるものである。これは、タンパク質の輸送および分泌に重要であるＥＲ関連およびゴルジ体関連のグリコシル化プロセスとは区別されるべきであり、これらは、ＯＧＡと異なり、至適ｐＨが酸性であるが、ＯＧＡは、中性ｐＨで最高活性を示す。
【０００４】
２つのアスパラギン酸触媒中心を有するＯＧＡの触媒領域は、２つの柔軟な領域と隣接している酵素のＮ−末端部に存在する。Ｃ−末端部は、ストーク領域が先にあるＨＡＴ（ヒストンアセチル転移酵素領域）と推定されている領域からなる。ＨＡＴ領域が触媒作用的に活性であることは、依然としてこれから証明される必要がある。
【０００５】
Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化タンパク質ならびにＯＧＴおよびＯＧＡ自体は、特に脳および神経細胞に豊富にあり、これは、この修飾が中枢神経系において重要な役割を果たすことを示唆している。実際、研究により、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化は、神経細胞伝達、記憶形成および神経変性疾患の一因となる重要な調節機序であることが立証された。さらに、いくつかの動物モデルにおいて、ＯＧＴは、胚発生に必須であり、ｏｇｔ欠損マウスは、胚性致死性であることが示されている。ＯＧＡも哺乳類の発生に不可欠である。２つの別々の研究により、ＯＧＡホモ接合型欠損マウスが生後２４〜４８時間を過ぎると生存しないことが示されている。Ｏｇａが欠失すると、仔においてグリコーゲン動員が不足し、このため、ホモ接合型ノックアウト胎仔由来のＭＥＦにおいてゲノム不安定性に関連する細胞周期停止が生じた。ヘテロ接合型の動物は、成体になるまで生存したが、転写および代謝の両方に変化が見られた。
【０００６】
Ｏ−ＧｌｃＮＡｃの循環の撹乱は、糖尿病などの慢性の代謝性疾患およびがんに影響を及ぼすことが知られている。Ｏｇａのヘテロ接合性は、Ａｐｃ−／＋マウスがんモデルにおいて腸腫瘍発生を抑制した。また、Ｏｇａ遺伝子（ＭＧＥＡ５）は、ヒト糖尿病感受性遺伝子座であることが立証されている。
【０００７】
さらに、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ修飾は、神経変性疾患の発症および進行に関与するいくつかのタンパク質に確認されており、アルツハイマー病では、タウによる神経原線維変化（ＮＦＴ）タンパク質の形成についてＯ−ＧｌｃＮＡｃレベルの変化量間の相関性が示唆されている。加えて、パーキンソン病では、αシヌクレインのＯ−ＧｌｃＮＡｃ化が説明されている。
【０００８】
中枢神経系において、タウの６種のスプライスバリアントが報告されている。タウは、１７番染色体上にコードされ、中枢神経系に発現するその最長のアミノ酸数４４１のスプライスバリアントがその主なものである。これらのアイソフォームは、Ｎ−末端側の２つのインサート（エクソン２および３）および微小管結合領域内にあるエクソン１０によって異なるものになる。エクソン１０は、タウオパチーにおいてかなり重要である。なぜなら、以下で説明するように、それは、タウを凝集しやすくする多重変異を有するためである。タウタンパク質は、神経細胞の微小管細胞骨格に結合し、安定化させる。これは、軸索コンパートメントに沿った細胞小器官の細胞内輸送の調節に重要である。このように、タウは、軸索の形成およびその保全性の維持に重要な役割を果たす。さらに、樹状突起スパインの生理学における役割も示唆されている。
【０００９】
タウの凝集は、種々のいわゆるタウオパチー、例えばＰＳＰ（進行性核上性麻痺）、ダウン症候群（ＤＳ）、ＦＴＬＤ（前頭側頭葉型認知症）、ＦＴＤＰ−１７（１７番染色体に連鎖しパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症）、ピック病（ＰＤ）、ＣＢＤ（大脳皮質基底核変性症）、嗜銀顆粒病（ＡＧＤ）およびＡＤ（アルツハイマー病）の根底にある原因の１つである。さらに、タウ病変は、Ｃ９ＯＲＦ７２の変異を原因とする筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）またはＦＴＬＤのようなさらなる神経変性疾患に伴う。これらの疾患では、タウは、過剰なリン酸化によって翻訳後修飾され、これにより、タウは、微小管から引き離され、凝集しやすくなると考えられる。Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ残基を担持するセリン残基またはスレオニン残基は、リン酸化しにくいため、タウのＯ−ＧｌｃＮＡｃ化は、リン酸化の程度を調節する。これは、効果的にタウを微小管から離れにくくし、凝集して毒性の神経原線維変化（最終的に神経毒性および神経細胞の細胞死に至る）を起こすことを低減する。この機序は、神経細胞から放出されるタウ凝集体が脳内の相互連結した回路によって細胞から細胞へと拡散することも低減し得る。最近では、この拡散は、タウが関連する認知症において病状を促進すると言われている。実際、ＡＤ患者の脳から単離された過リン酸化タウは、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化のレベルを有意に減少させていたことが示された。
【００１０】
ＪＮＰＬ３タウトランスジェニックマウスに投与したＯＧＡ阻害剤は、ＮＦＴの形成および神経細胞脱落を低減することに成功し、明らかな有害作用はなかった。この所見は、ＦＴＤに見られる変異型タウの発現を誘導することができる別のタウオパチーの齧歯類モデル（ｔｇ４５１０）において確認された。ＯＧＡの低分子阻害剤の投与は、タウ凝集の形成の低減に有効であり、皮質萎縮および脳室拡大を減弱させた。
【００１１】
さらに、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）のＯ−ＧｌｃＮＡｃ化は、非アミロイド形成経路によるプロセシングに有利に作用し、可溶性のＡＰＰ断片を産生し、ＡＤ関連のアミロイドβ（Ａβ）を形成する切断を回避する。
【００１２】
ＯＧＡの阻害によってタウのＯ−ＧｌｃＮＡｃ化を維持することは、上記の神経変性疾患におけるタウのリン酸化およびタウ凝集を低減し、それにより神経変性タウオパチー疾患の進行を減弱または停止するための有望な手法である。
【００１３】
米国特許出願公開第２０１０／０２２５１７号明細書（Ｒｉｃｈａｒｄｓ  Ｌｏｒｉ  ｅｔ  ａｌ．）は、Ｒｈｏ関連プロテインキナーゼの少なくとも１種の阻害剤を含む眼科用製剤を開示し、Ｎ−（１−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン−６−イル）メチル）ピペリジン−３−イル）−１Ｈ−インダゾール−５−アミンを開示しており、国際公開第２０１５／１６４５０８号パンフレット（Ｄａｒｔ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  ＬＬＣ）は、ＰＤＥ２阻害剤としての置換［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−イル化合物、特に２−［（３−｛５−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル｝ピペリジン−１−イル）メチル］キノリン、１−（２Ｈ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イルメチル）−３−｛５−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル｝ピペリジンおよび１−メチル−２−［（３−｛５−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル｝ピペリジン−１−イル）メチル］−１Ｈ−１，３−ベンゾジアゾールなどの化合物を開示しており、国際公開第２０１４／１５９２３４号パンフレット（Ｍｅｒｃｋ  Ｐａｔｅｎｔ  ＧｍｂＨ）は、主として、１位でアセトアミド−チアゾリルメチルまたはアセトアミドキサゾリルメチル置換基で置換されている４−フェニルまたはベンジル−ピペリジンおよびピペラジン化合物ならびに化合物Ｎ−［５−（３−フェニル−１−ピペリジル）メチル］チアゾール−２−イル］アセトアミドを開示しており、国際公開第２０１２／０６２７５９号パンフレット（Ｊａｎｓｓｅｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ）は、ｍＧｌｕＲ２のポジティブアロステリックモジュレーターとしての１，２，４−トリアゾロ［４，３−ａ］ピリジン化合物を開示している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
有利なバランスの性質を有するＯＧＡ阻害剤、例えば効力が改善され、選択性、脳透過性がより優れ、および／または副作用プロファイルがより優れたＯＧＡ阻害剤が依然として求められている。ここで、本発明による化合物は、ＯＧＡ阻害活性および良好なバランスの性質を示すことが発見された。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明は、式（Ｉ）
【化２】
2020509004.tif 000003
（式中、
Ａ−Ｂは、１〜４個の窒素原子を有する９員二環式ヘテロアリール系を表し、
Ｘ１およびＸ３は、それぞれ独立に、ＣＲＸＡ、ＮおよびＮＲＹＡからなる群から選択され、
Ｘ２は、ＣＨであり、
Ｘ４は、ＣまたはＮであり、および
Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７およびＸ８は、それぞれ独立に、Ｃ、ＣＲＸＢおよびＮからなる群から選択され、
ただし、Ｘ１およびＸ３の少なくとも１つは、ＮまたはＮＲＹＡであり、
それぞれのＲＸＡおよびＲＸＢは、存在する場合、水素、ハロ、−ＣＮ、１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルおよび１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルオキシからなる群から独立に選択され、
それぞれのＲＹＡは、存在する場合、水素および１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルからなる群から独立に選択され、
ＬＡは、Ａ−Ｂ二環の６員Ｂ環における任意の利用可能な炭素原子に結合され、かつ結合、ＣＨＲ１、ＯおよびＮＲ１からなる群から選択され、
Ｒ１は、水素および１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルからなる群から選択され、
ＲＡは、ＬＡが結合、ＣＨＲ１、ＯまたはＮＲ１である場合、（ａ−１）基であり、またはＬＡが結合またはＣＨＲ１である場合、（ａ−２）および（ａ−３）
【化３】
2020509004.tif 000004
（式中、
ｍは、０、１または２を表し、
ｘ、ｙおよびｚは、それぞれ独立に、０、１または２を表し、
それぞれのＲ１ａおよびＲ２ａは、存在する場合、任意の利用可能な炭素原子に結合され、かつハロおよび１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルからなる群から独立に選択され、または２個のＲ１ａ置換基もしくは２個のＲ２ａ置換基は、同じ炭素原子に結合されかつ一緒にシクロプロピリデン基を形成し、
Ｚは、Ｒ３ａで置換されている場合にはＮであり、またはＮＨであり、
それぞれのＲ３ａは、存在する場合、任意の利用可能な炭素原子または窒素原子に結合され、かつ１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜３アルキルから独立に選択され、または２個のＲ３ａ置換基は、同じ炭素原子に結合されかつ一緒にシクロプロピリデン基を形成し、
ＬＢは、＞ＣＨＲ２および＞ＳＯ２からなる群から選択され、
Ｒ２は、水素および１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルからなる群から選択され、および
ＲＢは、（ｂ−１）、（ｂ−２）、（ｂ−３）、（ｂ−４）、（ｂ−５）、（ｂ−６）、（ｂ−７）、（ｂ−８）、（ｂ−９）、（ｂ−１０）、（ｂ−１１）および（ｂ−１２）
【化４】
2020509004.tif 000005
（式中、
Ｚ１は、Ｏ、ＮＲ１ｚまたはＳであり、Ｒ１ｚは、水素またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｚ２およびＺ３は、それぞれ独立に、ＣＨまたはＮを表し、
Ｒ４ｂは、Ｃ１〜４アルキルであり、
Ｒ４ａ、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立に、水素またはＣ１〜４アルキルを表す）
からなる群から選択される複素環または複素環系を表し、または
−ＬＢ−ＲＢは、式（ｂ−１３）
【化５】
2020509004.tif 000006
（式中、Ｒ８は、水素またはＣ１〜４アルキルである）
の基である）
からなる群から選択される基である）
の化合物、ならびにその互変異性体および立体異性体型、ならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物を対象とする。
【００１６】
本発明の実例となるものとして、薬学的に許容される担体および上記の化合物のいずれかを含む医薬組成物がある。本発明の例として、上記の化合物のいずれかと、薬学的に許容される担体とを混合することによって作製される医薬組成物がある。本発明を例示するものとして、医薬組成物を作製するプロセスであって、上記の化合物のいずれかと、薬学的に許容される担体とを混合するステップを含むプロセスがある。
【００１７】
本発明を例示するものとして、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）の阻害によって緩和される障害を予防または処置する方法であって、それを必要とする対象に上記の化合物または医薬組成物のいずれかの予防有効量または治療有効量を投与するステップを含む方法がある。
【００１８】
本発明をさらに例示するものとして、ＯＧＡを阻害する方法であって、それを必要とする対象に上記の化合物または医薬組成物のいずれかの予防有効量または治療有効量を投与するステップを含む方法がある。
【００１９】
本発明の一例として、タウオパチー、特にアルツハイマー病、進行性核上性麻痺、ダウン症候群、前頭側頭葉型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ピック病、大脳皮質基底核変性症および嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチーまたはタウ病変を伴う神経変性疾患、特にＣ９ＯＲＦ７２の変異を原因とする筋萎縮性側索硬化症もしくは前頭側頭葉型認知症から選択される神経変性疾患から選択される障害を予防または処置する方法であって、それを必要とする対象に上記の化合物または医薬組成物のいずれかの予防有効量または治療有効量を投与するステップを含む方法がある。
【００２０】
本発明の別の例として、タウオパチー、特にアルツハイマー病、進行性核上性麻痺、ダウン症候群、前頭側頭葉型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ピック病、大脳皮質基底核変性症および嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチーまたはタウ病変を伴う神経変性疾患、特にＣ９ＯＲＦ７２の変異を原因とする筋萎縮性側索硬化症もしくは前頭側頭葉型認知症から選択される神経変性疾患の予防または処置を、それを必要とする対象において行うのに使用するための、上記のいずれかの化合物がある。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明は、上記に定義したとおりの式（Ｉ）の化合物ならびにその薬学的に許容される付加塩および溶媒和物を対象とする。式（Ｉ）の化合物は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）の阻害剤であり、タウオパチー、特にアルツハイマー病、進行性核上性麻痺、ダウン症候群、前頭側頭葉型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ピック病、大脳皮質基底核変性症および嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチーの予防もしくは処置に有用であり得、またはタウ病変を伴う神経変性疾患、特にＣ９ＯＲＦ７２の変異を原因とする筋萎縮性側索硬化症もしくは前頭側頭葉型認知症から選択される神経変性疾患の予防もしくは処置に有用であり得る。
【００２２】
ある実施形態では、本発明は、本明細書に記載の式（Ｉ）（式中、
Ａ−Ｂは、１〜４個の窒素原子を有する９員二環式ヘテロアリール系を表し、
Ｘ１およびＸ３は、それぞれ独立に、ＣＲＸＡ、ＮおよびＮＲＹＡからなる群から選択され、
Ｘ２は、ＣＨであり、
Ｘ４は、ＣまたはＮであり、および
Ｘ５、Ｘ６、Ｘ７およびＸ８は、それぞれ独立に、Ｃ、ＣＲＸＢおよびＮからなる群から選択され、
ただし、Ｘ１およびＸ３の少なくとも１つは、ＮまたはＮＲＹＡであり、
それぞれのＲＸＡおよびＲＸＢは、存在する場合、水素、ハロ、−ＣＮ、１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルおよび１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルオキシからなる群から独立に選択され、
それぞれのＲＹＡは、存在する場合、水素および１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルからなる群から独立に選択され、
ＬＡは、Ａ−Ｂ二環の６員Ｂ環における任意の利用可能な炭素原子に結合され、かつ結合、ＣＨＲ１、ＯおよびＮＲ１からなる群から選択され、
Ｒ１は、水素および１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルからなる群から選択され、
ＲＡは、ＬＡが結合、ＣＨＲ１、ＯまたはＮＲ１である場合、（ａ−１）基であり、またはＬＡが結合またはＣＨＲ１である場合、（ａ−２）および（ａ−３）
【化６】
2020509004.tif 000007
（式中、
ｍは、０または１を表し、
ｘ、ｙおよびｚは、それぞれ独立に、０、１または２を表し、
それぞれのＲ１ａおよびＲ２ａは、存在する場合、任意の利用可能な炭素原子に結合され、かつハロおよび１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルからなる群から独立に選択され、または２個のＲ１ａ置換基もしくは２個のＲ２ａ置換基は、同じ炭素原子に結合されかつ一緒にシクロプロピリデン基を形成し、
Ｚは、Ｒ３ａで置換されている場合にはＮであり、またはＮＨであり、
それぞれのＲ３ａは、存在する場合、任意の利用可能な炭素原子または窒素原子に結合され、かつ１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜３アルキルから独立に選択され、または２個のＲ３ａ置換基は、同じ炭素原子に結合されかつ一緒にシクロプロピリデン基を形成し、
ＬＢは、＞ＣＨＲ２および＞ＳＯ２からなる群から選択され、
Ｒ２は、水素および１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルからなる群から選択され、および
ＲＢは、（ｂ−１）、（ｂ−２）、（ｂ−３）、（ｂ−４）、（ｂ−５）、（ｂ−６）、（ｂ−７）、（ｂ−８）、（ｂ−９）、（ｂ−１０）、（ｂ−１１）および（ｂ−１２）
【化７】
2020509004.tif 000008
（式中、
Ｚ１は、Ｏ、ＮＲ１ｚまたはＳであり、Ｒ１ｚは、水素またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｚ２およびＺ３は、それぞれ独立に、ＣＨまたはＮを表し、
Ｒ４ｂは、Ｃ１〜４アルキルであり、
Ｒ４ａ、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、それぞれ独立に、水素またはＣ１〜４アルキルを表す）
からなる群から選択される複素環または複素環系を表し、または
−ＬＢ−ＲＢは、式（ｂ−１３）
【化８】
2020509004.tif 000009
（式中、Ｒ８は、水素またはＣ１〜４アルキルである）
の基である）
からなる群から選択される基である）
の化合物、ならびにその互変異性体および立体異性体型、ならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物を対象とする。
【００２３】
ある実施形態では、本発明は、本明細書に記載の式（Ｉ）（式中、
Ｘ１は、ＣＨ、ＮおよびＮＲＹＡからなる群から選択され、
Ｘ２は、ＣＨであり、
Ｘ３は、ＣＨまたはＮであり、
Ｘ４は、ＣまたはＮであり、
Ｘ５は、Ｃ、ＣＲＸＢまたはＮであり、
Ｘ６は、Ｃ、ＣＨ、Ｃ（ＣＨ３）またはＣ（ハロ）であり、
Ｘ７は、Ｃ、ＣＲＸＢまたはＮであり、および
Ｘ８は、Ｃ、ＣＨまたはＮであり、
ただし、Ｘ１およびＸ３の少なくとも１つは、ＮまたはＮＲＹＡである）
の化合物、ならびにその互変異性体および立体異性体型、ならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物を対象とする。
【００２４】
ある実施形態では、本発明は、本明細書に記載の式（Ｉ）（式中、
Ｘ１は、ＣＨ、ＮおよびＮＲＹＡからなる群から選択され、
Ｘ２は、ＣＨであり、
Ｘ３は、ＣＨまたはＮであり、
Ｘ４は、ＣまたはＮであり、
Ｘ５は、Ｃ、ＣＲＸＢまたはＮであり、
Ｘ６は、Ｃ、ＣＨまたはＣ（ハロ）であり、
Ｘ７は、Ｃ、ＣＲＸＢまたはＮであり、および
Ｘ８は、Ｃ、ＣＨまたはＮであり、
ただし、Ｘ１およびＸ３の少なくとも１つは、ＮまたはＮＲＹＡである）
の化合物、ならびにその互変異性体および立体異性体型、ならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物を対象とする。
【００２５】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の式（Ｉ）（式中、
ＲＢは、（ｂ−１）、（ｂ−２）、（ｂ−３）および（ｂ−８）からなる群から選択される基であり、または
−ＬＢ−ＲＢは、本明細書で定義する式（ｂ−１３）の基である）
の化合物、ならびにその互変異性体および立体異性体型、ならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物を対象とする。
【００２６】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の式（Ｉ）（式中、
ＲＢは、（ｂ−１）、（ｂ−２）、（ｂ−３）および（ｂ−８）
【化９】
2020509004.tif 000010
（式中、
Ｚ１は、Ｓであり、
Ｚ２は、ＣＨであり、
Ｒ４ａは、ＨまたはＣＨ３であり、
Ｒ４ｂは、Ｃ１〜４アルキルである）
からなる群から選択される基であり、または
−ＬＢ−ＲＢは、式（ｂ−１３）
（式中、Ｒ８は、水素またはＣ１〜４アルキルである）
の基である）
の化合物、ならびにその互変異性体および立体異性体型、ならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物を対象とする。
【００２７】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の式（Ｉ）（式中、
Ｘ１は、ＣＨ、ＮおよびＮＲＹＡからなる群から選択され、ＲＹＡは、存在する場合、水素またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｘ２は、ＣＨであり、
Ｘ３は、ＣＨまたはＮであり、
Ｘ４は、ＣまたはＮであり、
Ｘ５は、Ｃ、ＣＲＸＢまたはＮであり、ＲＸＢは、存在する場合、水素または１、２もしくは３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルであり、
Ｘ６は、Ｃ、ＣＨ、Ｃ（ＣＨ３）またはＣ（ハロ）であり、
Ｘ７は、Ｃ、ＣＲＸＢまたはＮであり、ＲＸＢは、存在する場合、水素または１、２もしくは３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルであり、および
Ｘ８は、Ｃ、ＣＨまたはＮであり、
ただし、Ｘ１およびＸ３の少なくとも１つは、ＮまたはＮＲＹＡであり、
ＬＡは、Ａ−Ｂ二環の６員Ｂ環における任意の利用可能な炭素原子に結合され、かつ結合、ＣＨＲ１およびＮＲ１からなる群から選択され、
Ｒ１は、水素またはＣ１〜４アルキルであり、
ＲＡは、ＬＡが結合、ＣＨＲ１、ＮＲ１である場合、（ａ−１）基であり、またはＬＡが結合またはＣＨＲ１である場合、（ａ−２）および（ａ−３）
【化１０】
2020509004.tif 000011
（式中、
ｍは、０または１を表し、
ｘは、０、１または２であり、
ｙおよびｚは、それぞれ独立に０を表し、
それぞれのＲ１ａは、存在する場合、任意の利用可能な炭素原子に結合され、かつ１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルであり、または２個のＲ１ａ置換基は、同じ炭素原子に結合されかつ一緒にシクロプロピリデン基を形成し、
Ｚは、ＮＨであり、
ＬＢは、＞ＣＨＲ２および＞ＳＯ２からなる群から選択され、Ｒ２は、水素またはＣ１〜４アルキルであり、および
ＲＢは、（ｂ−１）、（ｂ−２）、（ｂ−３）および（ｂ−８）
【化１１】
2020509004.tif 000012
（式中、
Ｚ１は、Ｓであり、
Ｚ２は、ＣＨであり、
Ｒ４ａは、ＨまたはＣＨ３であり、
Ｒ４ｂは、Ｃ１〜４アルキルである）
からなる群から選択される基であり、または
−ＬＢ−ＲＢは、式（ｂ−１３）
（式中、Ｒ８は、水素またはＣ１〜４アルキルである）
の基である）
からなる群から選択される基である）
の化合物、ならびにその互変異性体および立体異性体型、ならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物を対象とする。
【００２８】
特定の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の式（Ｉ）（式中、
Ｘ１は、ＣＨ、ＮおよびＮＲＹＡからなる群から選択され、ＲＹＡは、存在する場合、水素またはＣ１〜４アルキルであり、
Ｘ２は、ＣＨであり、
Ｘ３は、ＣＨまたはＮであり、
Ｘ４は、ＣまたはＮであり、
Ｘ５は、Ｃ、ＣＲＸＢまたはＮであり、ＲＸＢは、存在する場合、水素または１、２もしくは３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルであり、
Ｘ６は、Ｃ、ＣＨまたはＣ（ハロ）であり、
Ｘ７は、Ｃ、ＣＲＸＢまたはＮであり、ＲＸＢは、存在する場合、水素または１、２もしくは３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルであり、および
Ｘ８は、Ｃ、ＣＨまたはＮであり、
ただし、Ｘ１およびＸ３の少なくとも１つは、ＮまたはＮＲＹＡであり、
ＬＡは、Ａ−Ｂ二環の６員Ｂ環における任意の利用可能な炭素原子に結合され、かつ結合、ＣＨＲ１およびＮＲ１からなる群から選択され、
Ｒ１は、水素またはＣ１〜４アルキルであり、
ＲＡは、ＬＡが結合、ＣＨＲ１、ＮＲ１である場合、（ａ−１）基であり、またはＬＡが結合またはＣＨＲ１である場合、（ａ−２）および（ａ−３）
【化１２】
2020509004.tif 000013
（式中、
ｍは、０または１を表し、
ｘは、０、１または２であり、
ｙおよびｚは、それぞれ独立に０を表し、
それぞれのＲ１ａは、存在する場合、任意の利用可能な炭素原子に結合され、かつ１、２または３個の独立に選択されるハロ置換基で任意選択により置換されているＣ１〜４アルキルであり、または２個のＲ１ａ置換基は、同じ炭素原子に結合されかつ一緒にシクロプロピリデン基を形成し、
Ｚは、ＮＨであり、
ＬＢは、＞ＣＨＲ２および＞ＳＯ２からなる群から選択され、Ｒ２は、水素またはＣ１〜４アルキルであり、および
ＲＢは、（ｂ−１）、（ｂ−２）、（ｂ−３）および（ｂ−８）
【化１３】
2020509004.tif 000014
（式中、
Ｚ１は、Ｓであり、
Ｚ２は、ＣＨであり、
Ｒ４ａは、ＨまたはＣＨ３であり、
Ｒ４ｂは、Ｃ１〜４アルキルである）
からなる群から選択される基であり、または
−ＬＢ−ＲＢは、式（ｂ−１３）
（式中、Ｒ８は、水素またはＣ１〜４アルキルである）
の基である）
からなる群から選択される基である）
の化合物、ならびにその互変異性体および立体異性体型、ならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物を対象とする。
【００２９】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の式（Ｉ）（式中、ＬＡは、結合またはＣＨ２である）の化合物、ならびにその互変異性体および立体異性体型、ならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物を対象とする。
【００３０】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の式（Ｉ）（式中、ＬＡは、結合、ＣＨ２またはＮＨであり、およびＲＡは、（ａ−１）である）の化合物、ならびにその互変異性体および立体異性体型、ならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物を対象とする。
【００３１】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の式（Ｉ）（式中、ＲＡは、（ａ−１）であり、ｍは、０または１であり、ｘは、０、１または２であり、およびＲ１ａは、メチルであり、または２個のＲ１ａ置換基は、同じ炭素原子に結合されかつ一緒にシクロプロピリデン基を形成する）の化合物、ならびにその互変異性体および立体異性体型、ならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物を対象とする。
【００３２】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の式（Ｉ）（式中、ＲＡは、（ａ−１）であり、ｍは、０または１であり、およびｘは、０である）の化合物、ならびにその互変異性体および立体異性体型、ならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物を対象とする。
【００３３】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の式（Ｉ）（式中、ＬＢは、ＣＨ２である）の化合物、ならびにその互変異性体および立体異性体型、ならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物を対象とする。
【００３４】
さらなる実施形態では、本発明は、本明細書に記載の式（Ｉ）（式中、ＲＢは、（ｂ−１）である）の化合物、ならびにその互変異性体および立体異性体型、ならびにその薬学的に許容される塩および溶媒和物を対象とする。
【００３５】
さらなる実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、特に、式（Ｉ−Ａ）、（Ｉ−Ｂ）、（Ｉ−Ｃ）または（Ｉ−Ｄ）
【化１４】
2020509004.tif 000015
の化合物であり、より特定すると、式（Ｉ−Ａ）、（Ｉ−Ｂ）または（Ｉ−Ｃ）の化合物であり、変数は、すべて本明細書で式（Ｉ）に記載しているとおりである。
【００３６】
さらなる実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、特に、式（Ｉ’）
【化１５】
2020509004.tif 000016
の化合物であり、変数は、すべて本明細書で式（Ｉ）に記載しているとおりである。
【００３７】
別の実施形態では、本発明の化合物は、特に、式（ＩＡ）（式中、
Ｘ１は、Ｎ、ＮＨまたはＮ（ＣＨ３）であり、
Ｘ２は、ＣＨであり、
Ｘ３は、ＣＨまたはＮであり、
Ｘ４は、ＣまたはＮであり、
Ｘ６は、ＣＨまたはＣＦであり、
Ｘ７は、Ｃ、ＣＨ、Ｃ（ＣＨ３）またはＣ（ＣＨＦ２）であり、
Ｘ８は、ＣＨまたはＮである）
の化合物であり、他の変数は、すべて本明細書で式（Ｉ）に記載しているとおりである。
【００３８】
別の実施形態では、本発明の化合物は、特に、式（ＩＡ）（式中、
Ｘ１は、Ｎ、ＮＨまたはＮ（ＣＨ３）であり、
Ｘ２は、ＣＨであり、
Ｘ３は、ＣＨまたはＮであり、
Ｘ４は、ＣまたはＮであり、
Ｘ６は、ＣＨであり、
Ｘ７は、Ｃ、ＣＨ、Ｃ（ＣＨ３）またはＣ（ＣＨＦ２）であり、
Ｘ８は、ＣＨまたはＮである）
の化合物であり、他の変数は、すべて本明細書で式（Ｉ）に記載しているとおりである。
【００３９】
別の実施形態では、本発明の化合物は、特に、式（ＩＡ）（式中、
Ｘ１は、Ｎであり、
Ｘ２は、ＣＨであり、
Ｘ３は、ＣＨまたはＮであり、
Ｘ４は、Ｎであり、
Ｘ６は、ＣＨであり、
Ｘ７は、ＣＨ、Ｃ（ＣＨ３）またはＮであり、
Ｘ８は、ＣＨまたはＮである）
の化合物であり、他の変数は、すべて本明細書で式（Ｉ）に記載しているとおりである。
【００４０】
別の実施形態では、本発、明の化合物は、特に、式（ＩＡ）（式中、
Ｘ１、Ｘ２およびＸ６は、それぞれＣＨであり、
Ｘ３は、ＮＨまたはＮ（ＣＨ３）であり、
Ｘ４は、Ｃであり、
Ｘ７は、Ｃ（ＣＨ３）であり、
Ｘ８は、Ｎである）
の化合物であり、他の変数は、すべて本明細書で式（Ｉ）に記載しているとおりである。
【００４１】
別の実施形態では、本発明の化合物は、特に、式（ＩＡ）（式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ６およびＸ８は、ＣＨであり、
Ｘ３およびＸ４は、Ｎであり、
Ｘ７は、Ｃ、ＣＨ、Ｃ（ＣＨ３）またはＣ（ＣＨＦ２）である）
の化合物であり、他の変数は、すべて本明細書で式（Ｉ）に記載しているとおりである。
【００４２】
さらなる実施形態では、本発明の化合物は、特に、式（ＩＡ’）
【化１６】
2020509004.tif 000017
の化合物であり、変数は、すべて本明細書で式（ＩＡ）に記載しているとおりである。
【００４３】
別の実施形態では、本発明の化合物は、特に、式（ＩＢ）（式中、
Ｘ１は、Ｎ、ＮＨまたはＮ（ＣＨ３）であり、
Ｘ２は、ＣＨであり、
Ｘ３は、ＣＨまたはＮであり、
Ｘ４は、ＣまたはＮであり、
Ｘ５は、Ｃ、ＣＨ、Ｃ（ＣＨＦ２）またはＮであり、
Ｘ７は、Ｃ、ＣＨ、Ｃ（ＣＨ３）またはＣ（ＣＨＦ２）であり、
Ｘ８は、ＣＨまたはＮである）
の化合物であり、他の変数は、すべて本明細書で式（Ｉ）に記載しているとおりである。
【００４４】
別の実施形態では、本発明の化合物は、特に、式（ＩＢ）（式中、
Ｘ１は、ＣＨまたはＣ（ＣＨ３）であり、
Ｘ２は、ＣＨであり、
Ｘ３は、ＣＨであり、
Ｘ４は、Ｃであり、
Ｘ５は、ＣＨであり、
Ｘ７は、Ｃ（ＣＨ３）であり、
Ｘ８は、Ｎである）
の化合物であり、他の変数は、すべて本明細書で式（Ｉ）に記載しているとおりである。
【００４５】
別の実施形態では、本発明の化合物は、特に、式（ＩＢ）（式中、
Ｘ１、Ｘ２およびＸ８は、ＣＨであり、
Ｘ３およびＸ４は、Ｎであり、
Ｘ５は、Ｃ、ＣＨおよびＣ（ＣＨＦ２）であり、
Ｘ７は、Ｃ、ＣＨ、Ｃ（ＣＨ３）またはＣ（ＣＨＦ２）である）
の化合物であり、他の変数は、すべて本明細書で式（Ｉ）に記載しているとおりである。
【００４６】
別の実施形態では、本発明の化合物は、特に、式（ＩＢ）（式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ５およびＸ７は、ＣＨであり、
Ｘ３およびＸ４は、Ｎである）
の化合物であり、他の変数は、すべて本明細書で式（Ｉ）に記載しているとおりである。
【００４７】
さらなる実施形態では、本発明の化合物は、特に、式（ＩＢ’）
【化１７】
2020509004.tif 000018
の化合物であり、変数は、すべて本明細書で式（ＩＢ）に記載しているとおりである。
【００４８】
別の実施形態では、本発明の化合物は、特に、式（ＩＣ）（式中、
Ｘ１は、Ｎ、ＮＨまたはＮ（ＣＨ３）であり、
Ｘ２は、ＣＨであり、
Ｘ３は、ＣＨまたはＮであり、
Ｘ４は、ＣまたはＮであり、
Ｘ５は、Ｃ、ＣＨ、Ｃ（ＣＨＦ２）またはＮであり、
Ｘ６は、ＣまたはＣＨであり、
Ｘ８は、ＣＨまたはＮである）
の化合物であり、他の変数は、すべて本明細書で式（Ｉ）に記載しているとおりである。
【００４９】
別の実施形態では、本発明の化合物は、特に、式（ＩＣ）（式中、
Ｘ１は、ＮＨまたはＮ（ＣＨ３）であり、
Ｘ２、Ｘ３、Ｘ６およびＸ８は、それぞれＣＨであり、
Ｘ４は、Ｃであり、
Ｘ５は、Ｎである）
の化合物であり、他の変数は、すべて本明細書で式（Ｉ）に記載しているとおりである。
【００５０】
別の実施形態では、本発明の化合物は、特に、式（ＩＣ）（式中、
Ｘ１、Ｘ２およびＸ８は、ＣＨであり、
Ｘ３およびＸ４は、Ｎであり、
Ｘ５は、Ｃ、ＣＨまたはＣ（ＣＨＦ２）であり、
Ｘ６は、ＣまたはＣＨである）
の化合物であり、他の変数は、すべて本明細書で式（Ｉ）に記載しているとおりである。
【００５１】
別の実施形態では、本発明の化合物は、特に、式（ＩＤ）（式中、
Ｘ１は、ＮＨであり、
Ｘ２は、ＣＨであり、
Ｘ３は、ＣＨであり、
Ｘ４は、Ｃであり、
Ｘ５は、ＣＨまたはＮであり、
Ｘ６は、ＣＨまたはＣ（ＣＨ３）であり、
Ｘ７は、ＣＨまたはＮである）
の化合物であり、他の変数は、すべて本明細書で式（Ｉ）に記載しているとおりである。
【００５２】
さらなる実施形態では、本発明の化合物は、特に、式（ＩＣ’）
【化１８】
2020509004.tif 000019
の化合物であり、変数は、すべて本明細書で式（ＩＣ）に記載しているとおりである。
【００５３】
さらなる実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、特に、式（ＩＤ’）
【化１９】
2020509004.tif 000020
の化合物であり、変数は、すべて本明細書で式（ＩＤ）に記載しているとおりである。
【００５４】
さらに別の実施形態では、二環Ａ−Ｂは、
【化２０】
2020509004.tif 000021
であり、ＲＸＡは、ＨまたはＣＨ３であり、およびＲＸＢは、Ｈ、ＣＨ３またはＣＨＦ２である。
【００５５】
さらに別の実施形態では、二環Ａ−Ｂは、
【化２１】
2020509004.tif 000022
である。
【００５６】
別の実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、
【化２２】
2020509004.tif 000023
またはこれらの薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である。
【００５７】
定義
「ハロ」は、フルオロ、クロロおよびブロモを指すものとし、「Ｃ１〜４アルキル」は、１、２、３または４個の炭素原子を有する直鎖または分枝鎖の飽和アルキル基、例えばそれぞれメチル、エチル、１−プロピル、２−プロピル、ブチル、１−メチル−プロピル、２−メチル−１−プロピルおよび１，１−ジメチルエチルなどを指すものとし、「Ｃ１〜４アルキルオキシ」は、Ｃ１〜４アルキルが上に定義されているとおりであるエーテル基を指すものとする。
【００５８】
本明細書で使用する「対象」という用語は、処置、観察または実験の目的物となるかまたは目的物となった動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを指す。したがって、本明細書で使用する場合、「対象」という用語は、患者および本明細書で定義する疾患または病態を発症するリスクのある無症候性または症状が出る前の個体を包含する。
【００５９】
「治療有効量」という用語は、本明細書で使用する場合、研究者、獣医師、医師または他の臨床医によって求められている、組織系、動物またはヒトにおける生物学的または医学的反応（処置されている疾患または障害の症状の軽減を含む）を誘発する活性化合物または医薬剤の量を意味する。「予防有効量」という用語は、本明細書で使用する場合、予防されている疾患または障害の発症の可能性を実質的に低減する活性化合物または医薬剤の量を意味する。
【００６０】
本明細書で使用する場合、「組成物」という用語は、特定の成分を特定の量で含む生成物および特定の成分の特定の量での組合せから直接的または間接的に得られる任意の生成物を包含するものとする。
【００６１】
上記および下記では、「式（Ｉ）の化合物」という用語は、その付加塩、溶媒和物および立体異性体を含むものとする。
【００６２】
上記および下記では、「立体異性体」または「立体化学的異性体型」という用語は、互換的に使用される。
【００６３】
本発明は、純粋な立体異性体としてまたは２種以上の立体異性体の混合物として式（Ｉ）の化合物のすべての立体異性体を含む。
【００６４】
エナンチオマーは、重ね合わせることができない互いの鏡像となっている立体異性体である。エナンチオマーの対の１：１混合物は、ラセミ体またはラセミ混合物である。ジアステレオマー（またはジアステレオ異性体）は、エナンチオマーではない立体異性体であり、すなわち鏡像の関係にない。化合物が二重結合を含有する場合、置換基は、Ｅ配置またはＺ配置であり得る。化合物が二置換シクロアルキル基を含有する場合、置換基は、ｃｉｓ配置またはｔｒａｎｓ配置であり得る。したがって、本発明は、エナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ体、Ｅ異性体、Ｚ異性体、ｃｉｓ異性体、ｔｒａｎｓ異性体およびこれらの混合物を含む。
【００６５】
絶対配置は、カーン・インゴルド・プレローグ表示法に従って特定される。不斉原子における配置は、ＲまたはＳで指定される。絶対配置が不明である分割化合物は、平面偏光を回転させる方向に応じて（＋）または（−）で示すことができる。
【００６６】
特定の立体異性体が同定される場合、これは、前記立体異性体が他の異性体を実質的に含まない、すなわち他の異性体を５０％未満、好ましくは２０％未満、より好ましくは１０％未満、より一層好ましくは５％未満、特に２％未満、最も好ましくは１％未満のみ伴うことを意味する。したがって、式（Ｉ）の化合物が例えば（Ｒ）と特定される場合、これは、この化合物が（Ｓ）異性体を実質的に含まないことを意味し、式（Ｉ）の化合物が例えばＥと特定される場合、これは、この化合物がＺ異性体を実質的に含まないことを意味し、式（Ｉ）の化合物が例えばｃｉｓと特定される場合、これは、この化合物がｔｒａｎｓ異性体を実質的に含まないことを意味する。
【００６７】
医療で使用される場合、本発明の化合物の付加塩は、毒性のない「薬学的に許容される付加塩」を指す。しかしながら、他の塩は、本発明による化合物またはその薬学的に許容される付加塩の調製に有用であり得る。本化合物の薬学的に許容される好適な付加塩としては、例えば、本化合物の溶液を塩酸、硫酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酢酸、安息香酸、クエン酸、酒石酸、炭酸またはリン酸などの薬学的に許容される酸の溶液と混合することによって形成され得る酸付加塩が挙げられる。さらに、本発明の化合物が酸部分を有する場合、その薬学的に許容される好適な付加塩としては、アルカリ金属塩、例えばナトリウム塩またはカリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えばカルシウム塩またはマグネシウム塩；および好適な有機配位子と形成される塩、例えば第四級アンモニウム塩を挙げることができる。
【００６８】
薬学的に許容される付加塩の調製に使用することができる代表的な酸としては、以下に限定されるものではないが、酢酸、２，２−ジクロロ酢酸、アシル化アミノ酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、Ｌ−アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、４−アセトアミド安息香酸、（＋）−樟脳酸、樟脳スルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、ケイ皮酸、クエン酸、シクラミン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチジン酸、グルコヘプトン酸、Ｄ−グルコン酸、Ｄ−グルクロン酸、Ｌ−グルタミン酸、β−オキソ−グルタル酸、グリコール酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、（＋）−Ｌ−乳酸、（±）−ＤＬ−乳酸、ラクトビオン酸、マレイン酸、（−）−Ｌ−リンゴ酸、マロン酸、（±）−ＤＬ−マンデル酸、メタンスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、ニコチン酸、硝酸、オレイン酸、オロト酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、リン酸、Ｌ−ピログルタミン酸、サリチル酸、４−アミノ−サリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、タンニン酸、（＋）−Ｌ−酒石酸、チオシアン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロメチルスルホン酸およびウンデシレン酸が挙げられる。薬学的に許容される付加塩の調製に使用することができる代表的な塩基としては、以下に限定されるものではないが、アンモニア、Ｌ−アルギニン、ベネタミン、ベンザチン、水酸化カルシウム、コリン、ジメチルエタノール−アミン、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、２−（ジエチルアミノ）−エタノール、エタノールアミン、エチレン−ジアミン、Ｎ−メチル−グルカミン、ヒドラバミン、１Ｈ−イミダゾール、Ｌ−リシン、水酸化マグネシウム、４−（２−ヒドロキシエチル）−モルホリン、ピペラジン、水酸化カリウム、１−（２−ヒドロキシエチル）−ピロリジン、第二級アミン、水酸化ナトリウム、トリエタノールアミン、トロメタミンおよび水酸化亜鉛が挙げられる。
【００６９】
化合物の名称は、Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｂｓｔｒａｃｔｓ  Ｓｅｒｖｉｃｅ（ＣＡＳ）によって取り決められた命名規則または国際純正・応用化学連合（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｕｎｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｕｒｅ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：ＩＵＰＡＣ）によって取り決められた命名規則に従って生成された。
【００７０】
最終化合物の調製
本発明による化合物は、一般に、それぞれが当業者に公知の一連の工程により調製することができる。具体的には、本化合物は、以下の合成方法に従って調製することができる。
【００７１】
式（Ｉ）の化合物は、当技術分野で公知の分割法に従って互いに分離することができるエナンチオマーのラセミ混合物の形態で合成することができる。式（Ｉ）のラセミ化合物は、好適なキラル酸との反応により、対応するジアステレオマー塩形態に変換することができる。その後、前記ジアステレオマー塩形態は、例えば、選択的または分別結晶化により分離され、エナンチオマーはアルカリでそれから遊離される。式（Ｉ）の化合物のエナンチオマー形態を分離する代替方法には、キラル固定相を使用する液体クロマトグラフィーが含まれる。前記純粋な立体化学的異性体型は、反応が立体特異的に起こる場合、適切な出発物質の対応する純粋な立体化学的異性体型から誘導することもできる。
【００７２】
化合物の調製
実験手順１
式（Ｉ）による最終化合物（式中、ＲＢは、（ｂ−１）である）は、本明細書では式（Ｉ−ａ）の化合物と称し、反応スキーム（１）に従い、式（ＩＩ−ａ）の中間化合物を式（ＸＩＸ）の化合物と反応させることによって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、ジクロロメタンなど）中、好適な塩基（例えばトリエチルアミンなど）の存在下、０℃または室温の温度条件下で例えば１時間行われる。反応スキーム（１）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、
【化２３】
2020509004.tif 000024
は、ＲＡの位置の任意選択により置換されているヘテロ環部分（すなわち本明細書で定義しているとおりの（ａ−１）のピロリジニル、ピペリジニルもしくはアゼパニル、（ａ−２）のモルホリニルまたは（ａ−３）のピペラジニル）を表す。
【化２４】
2020509004.tif 000025
【００７３】
実験手順２
さらに、式（Ｉ）の最終化合物（式中、ＬＢは、ＣＨＲ２である）は、本明細書では式（Ｉ−ｂ）の化合物と称し、反応スキーム（２）に従い、式（ＩＩ−ａ）の中間化合物を式（ＸＸ）の化合物と反応させることによって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、ジクロロメタンなど）、金属水素化物（例えば、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウムまたは水素化ホウ素ナトリウムなど）中で行われ、好適な塩基（例えばトリエチルアミンなど）および／またはルイス酸（例えば、チタンテトライソプロポキシドまたは四塩化チタンなど）の存在を０℃、または室温、または１４０℃などの温度条件下で例えば１時間または２４時間にわたって必要とし得る。反応スキーム（２）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、
【化２５】
2020509004.tif 000026
は、ＲＡの位置の任意選択により置換されているヘテロ環部分（すなわち本明細書で定義しているとおりの（ａ−１）のピロリジニル、ピペリジニルもしくはアゼパニル、（ａ−２）のモルホリニルまたは（ａ−３）のピペラジニル）を表す。
【化２６】
2020509004.tif 000027
【００７４】
実験手順３
代替として、式（Ｉ−ｂ）の最終化合物は、反応スキーム（３）に従い、式（ＩＩ−ａ）の中間化合物を式（ＸＸＩ）の化合物と反応させることによって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、アセトニトリルなど）、好適な塩基（例えば、トリメチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミンなど）中、０℃または室温または７５℃などの温度条件下で例えば１時間または２４時間行われる。反応スキーム（３）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、ハロは、クロロ、ブロモまたはヨードであり、
【化２７】
2020509004.tif 000028
は、ＲＡの位置の任意選択により置換されているヘテロ環部分（すなわち本明細書で定義しているとおりの（ａ−１）のピロリジニル、ピペリジニルもしくはアゼパニル、（ａ−２）のモルホリニルまたは（ａ−３）のピペラジニル）を表す。
【化２８】
2020509004.tif 000029
【００７５】
実験手順４
さらに、式（Ｉ）の最終化合物（式中、ＬＡは、ＮＨである）は、本明細書では（Ｉ−ｃ）と称し、反応スキーム（４）に従い、式（ＩＩＩ−ａ）の中間化合物を式（ＩＶ）の化合物と反応させることによって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、アセトニトリルなど）、好適な塩基（例えば、トリメチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミンなど）中、例えば１００℃などの温度条件下で例えば１時間または２４時間行われる。反応スキーム（４）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、ＬＡは、ＮＨであり、ハロは、クロロ、ブロモまたはヨードである。
【化２９】
2020509004.tif 000030
【００７６】
実験手順５
さらに、式（Ｉ−ｄ）の最終化合物は、反応スキーム（５）に従い、式（Ｖ）の中間化合物の保護基を切断して調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、ジクロロメタンなど）、好適な酸（例えばトリフルオロ酢酸など）中、例えば室温などの温度条件下で例えば１時間または２４時間行われる。反応スキーム（５）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、Ｘ３は、ＮＨである。ＰＧ１は、窒素官能基の好適な保護基、例えば２−（トリメチルシリル）エトキシメチル（ＳＥＭ）などである。
【化３０】
2020509004.tif 000031
【００７７】
実験手順６
式（ＩＩ−ａ）の中間化合物は、反応スキーム（６）に従い、式（ＶＩ）の中間化合物の保護基を切断して調製することができる。反応スキーム（６）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、
【化３１】
2020509004.tif 000032
は、ＲＡの位置の任意選択により置換されているヘテロ環部分（すなわち本明細書で定義しているとおりの（ａ−１）のピロリジニル、ピペリジニルもしくはアゼパニル、（ａ−２）のモルホリニルまたは（ａ−３）のピペラジニル）を表し、ＰＧ２は、窒素官能基の好適な保護基、例えばｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、エトキシカルボニル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）などである。このような保護基を除去する好適な方法は、当業者に広く知られており、以下に限定されるものではないが、
−  Ｂｏｃ脱保護：反応不活性溶媒（例えば、ジクロロメタンなど）中、プロトン酸（例えば、トリフルオロ酢酸など）での処理、
−  エトキシカルボニル脱保護：反応不活性溶媒（例えば、含水テトラヒドロフランなど）中、強塩基（例えば、水酸化ナトリウムなど）での処理、
−  ベンジル脱保護：反応不活性溶媒（例えば、エタノールなど）中、好適な触媒（例えば、パラジウム担持炭素など）の存在下での接触水素化、
−  ベンジルオキシカルボニル脱保護：反応不活性溶媒（例えば、エタノールなど）中、好適な触媒（例えば、パラジウム担持炭素など）の存在下での接触水素化
を含む。
【化３２】
2020509004.tif 000033
【００７８】
実験手順７
式（ＶＩ−ａ）の中間化合物は、反応スキーム（７）に従い、式（ＶＩＩ）の中間化合物を式（ＸＸＩＩ）の化合物と反応させることによって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、酢酸など）中、例えば１２０℃などの温度条件下で例えば３０分間または１時間行われる。反応スキーム（７）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、Ｘ１、Ｘ４およびＸ８は、Ｎであり、Ｘ５およびＸ６は、ＣＨであり、Ｘ７は、ＣＲＸＢであり、ＬＡは、結合であり、
【化３３】
2020509004.tif 000034
は、ＲＡの位置の任意選択により置換されているヘテロ環部分（すなわち本明細書で定義しているとおりの（ａ−１）のピロリジニル、ピペリジニルもしくはアゼパニル、（ａ−２）のモルホリニルまたは（ａ−３）のピペラジニル）を表す。ＰＧ２は、式（ＶＩ）と同様に定義されている。
【化３４】
2020509004.tif 000035
【００７９】
実験手順８
さらに、式（ＶＩ−ａ）および（ＶＩ−ｂ）の中間化合物は、反応スキーム（８）に従い、式（ＶＩＩＩ）の中間化合物を式（ＸＸＩＩ）の化合物と反応させることによって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、酢酸またはＤＭＦなど）中、例えば６０℃などの温度条件下で例えば３日間行われる。反応スキーム（８）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、Ｘ１、Ｘ４およびＸ８は、Ｎであり、Ｘ５は、化合物（ＶＩ−ａ）ではＣであり、化合物（ＶＩ−ｂ）ではＣＲＸＢであり、Ｘ６は、ＣＨであり、Ｘ７は、化合物（ＶＩ−ａ）ではＣＲＸＢであり、化合物（ＶＩ−ｂ）ではＣであり、ＬＡは、結合であり、
【化３５】
2020509004.tif 000036
は、ＲＡの位置の任意選択により置換されているヘテロ環部分（すなわち本明細書で定義しているとおりの（ａ−１）のピロリジニル、ピペリジニルもしくはアゼパニル、（ａ−２）のモルホリニルまたは（ａ−３）のピペラジニル）を表す。ＰＧ２は、式（ＶＩ）と同様に定義されている。
【化３６】
2020509004.tif 000037
【００８０】
実験手順９
式（ＶＩＩ）の中間化合物は、反応スキーム（９）に従い、式（ＩＸ）の中間化合物を式（ＸＸＩＩＩ）の化合物と反応させることによって調製することができる。反応は、例えば、１００℃などの温度条件下で例えば３時間行われる。反応スキーム（９）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、
【化３７】
2020509004.tif 000038
は、ＲＡの位置の任意選択により置換されているヘテロ環部分（すなわち本明細書で定義しているとおりの（ａ−１）のピロリジニル、ピペリジニルもしくはアゼパニル、（ａ−２）のモルホリニルまたは（ａ−３）のピペラジニル）を表す。ＰＧ２は、式（ＶＩ）と同様に定義されている。
【化３８】
2020509004.tif 000039
【００８１】
実験手順１０
式（ＶＩＩＩ）の中間化合物は、反応スキーム（１０）に従い、式（ＩＸ）の中間化合物を式（ＸＸＩＶ）の化合物と反応させることによって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、トルエンなど）、好適な塩基（例えばカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなど）中、例えば−５℃または０℃または室温などの温度条件下で例えば２時間または３時間行われる。反応スキーム（１０）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、
【化３９】
2020509004.tif 000040
は、ＲＡの位置の任意選択により置換されているヘテロ環部分（すなわち本明細書で定義しているとおりの（ａ−１）のピロリジニル、ピペリジニルもしくはアゼパニル、（ａ−２）のモルホリニルまたは（ａ−３）のピペラジニル）を表す。ＰＧ２は、式（ＶＩ）と同様に定義されている。
【化４０】
2020509004.tif 000041
【００８２】
実験手順１１
式（ＩＸ）の中間化合物は、反応スキーム（１１）に従い、式（Ｘ）の中間化合物をメチルマグネシウムブロミドと反応させることによって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、テトラヒドロフランなど）中、例えば０℃または室温などの温度条件下で例えば１時間行われる。反応スキーム（１１）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、
【化４１】
2020509004.tif 000042
は、ＲＡの位置の任意選択により置換されているヘテロ環部分（すなわち本明細書で定義しているとおりの（ａ−１）のピロリジニル、ピペリジニルもしくはアゼパニル、（ａ−２）のモルホリニルまたは（ａ−３）のピペラジニル）を表す。ＰＧ２は、式（ＶＩ）と同様に定義されている。
【化４２】
2020509004.tif 000043
【００８３】
実験手順１２
式（Ｘ）の中間化合物は、反応スキーム（１２）に従い、式（ＸＩ）の中間化合物をＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩と反応させることによって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、テトラヒドロフランまたはアセトニトリルなど）、ワインレブアミドの調製に好適な試薬（例えばカルボニルジイミダゾールなど）、好適な塩基（例えばトリエチルアミンなど）中、例えば室温などの温度条件下で例えば３時間行われる。反応スキーム（１２）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、
【化４３】
2020509004.tif 000044
は、ＲＡの位置の任意選択により置換されているヘテロ環部分（すなわち本明細書で定義しているとおりの（ａ−１）のピロリジニル、ピペリジニルもしくはアゼパニル、（ａ−２）のモルホリニルまたは（ａ−３）のピペラジニル）を表す。ＰＧ２は、式（ＶＩ）と同様に定義されている。
【化４４】
2020509004.tif 000045
【００８４】
実験手順１３
さらに、式（ＶＩ−ａ）の中間化合物は、反応スキーム（１３）に従い、式（ＸＩＩ）の中間化合物の脱炭酸反応によって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、ＭｅＯＨまたはＥｔＯＨおよびＨ２Ｏなど）の混合液、好適な塩基（例えば、水酸化リチウムなど）中、例えば４０℃などの温度条件下で例えば２４時間行われる。反応スキーム（１３）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、Ｘ１、Ｘ４およびＸ８は、Ｎであり、Ｘ５およびＸ６は、Ｃ（Ｈ）であり、Ｘ７は、ＣＲＸＢであり、ＬＡは、結合であり、
【化４５】
2020509004.tif 000046
は、ＲＡの位置の任意選択により置換されているヘテロ環部分（すなわち本明細書で定義しているとおりの（ａ−１）のピロリジニル、ピペリジニルもしくはアゼパニル、（ａ−２）のモルホリニルまたは（ａ−３）のピペラジニル）を表す。ＰＧ２は、式（ＶＩ）と同様に定義されている。
【化４６】
2020509004.tif 000047
【００８５】
実験手順１４
式（ＸＩＩ）の中間化合物は、反応スキーム（１４）に従い、式（ＩＩＩ−ｂ）の中間化合物を式（ＸＸＶ）の化合物と反応させることによって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、テトラヒドロフランなど）、好適な塩基（例えば、リチウムジイソプロピルアミドなど）中、例えば−７８℃または−６０℃などの温度条件下で例えば１時間または２時間行われる。反応スキーム（１４）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、Ｘ１、Ｘ４およびＸ８は、Ｎであり、Ｘ５およびＸ６は、Ｃ（Ｈ）であり、Ｘ７は、ＣＲＸＢであり、ＬＡは、結合であり、
【化４７】
2020509004.tif 000048
は、ＲＡの位置の任意選択により置換されているヘテロ環部分（すなわち本明細書で定義しているとおりの（ａ−１）のピロリジニル、ピペリジニルもしくはアゼパニル、（ａ−２）のモルホリニルまたは（ａ−３）のピペラジニル）を表し、ハロはクロロである。ＰＧ２は、式（ＶＩ）と同様に定義されている。
【化４８】
2020509004.tif 000049
【００８６】
実験手順１５
式（ＶＩ−ｃ）の中間化合物は、反応スキーム（１５）に従い、式（ＩＩＩ−ａ）のハロ化合物と式（ＸＩＩＩ）の有機亜鉛化合物との「根岸カップリング」反応によって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、テトラヒドロフランなど）および好適な触媒（例えば、Ｐｄ（ＯＡｃ）２など）、遷移金属の好適な配位子（例えば、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジイソプロポキシビフェニル［ＣＡＳ：７８７６１８−２２−８］など）中、例えば室温などの温度条件下で例えば１時間行われる。反応スキーム（１５）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、ハロは、好ましくは、ヨードである。ＰＧ２は、式（ＶＩ）と同様に定義されている。
【化４９】
2020509004.tif 000050
【００８７】
実験手順１６
式（ＸＩＩＩ）の中間化合物は、反応スキーム（１６）に従い、式（ＸＩＶ）のハロ化合物と亜鉛との反応によって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、テトラヒドロフランなど）および好適な塩（例えば、塩化リチウムなど）中、例えば４０℃などの温度条件下で例えば連続流通反応器内において行われる。反応スキーム（１６）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、ハロは、好ましくは、ヨードである。ＰＧ２は、式（ＶＩ）と同様に定義されている。
【化５０】
2020509004.tif 000051
【００８８】
実験手順１７
式（ＶＩ−ｄ）の中間化合物は、反応スキーム（１７）に従い、式（ＸＶ）の化合物の還元条件下で調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、エタノールなど）および好適な触媒（例えば、パラジウム担持活性炭など）中、例えば室温で１水素圧などの温度条件下において例えば１８時間行われる。反応スキーム（１７）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、ＬＡは、結合である。ＰＧ２は、式（ＶＩ）と同様に定義されている。
【化５１】
2020509004.tif 000052
【００８９】
実験手順１８
式（ＸＶ）の中間化合物は、反応スキーム（１８）に従い、式（ＩＩＩ−ａ）のハロ化合物と式（ＸＶＩ）のボロン酸エステル化合物との「鈴木カップリング」反応によって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、ジオキサンなど）および好適なＰｄ−錯体触媒（例えば、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４など）、好適な塩基（例えば、炭酸ナトリウム水溶液など）中、例えばマイクロ波照射下で１３０℃などの温度条件下において例えば３０分間行われる。反応スキーム（１８）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、ＬＡは、結合であり、ハロは、クロロ、ブロモまたはヨードである。ＰＧ２は、式（ＶＩ）と同様に定義されている。
【化５２】
2020509004.tif 000053
【００９０】
実験手順１９
式（ＩＶ）の中間化合物は、反応スキーム（１９）に従い、式（ＸＶＩＩ）の中間化合物の保護基を切断することによって調製することができる。反応スキーム（１９）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義される。ＰＧ２は、窒素官能基の好適な保護基、例えばｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、エトキシカルボニル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）などである。このような保護基を除去する好適な方法は、実験手順６に記載されている。
【化５３】
2020509004.tif 000054
【００９１】
実験手順２０
式（ＸＶＩＩ）の中間化合物は、反応スキーム（２０）に従い、式（ＸＶＩＩＩ）の化合物を式（ＸＸ）の化合物と反応させることによって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、ジクロロメタンなど）、金属水素化物（例えば、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウムまたは水素化ホウ素ナトリウムなど）中で行われ、好適な塩基（例えば、トリメチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミンなど）の存在を０℃または室温または１４０℃などの温度条件下で例えば１時間または２４時間にわたって必要とし得る。反応スキーム（２０）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義される。ＰＧ２は、式（ＶＩ）と同様に定義されている。
【化５４】
2020509004.tif 000055
【００９２】
実験手順２１
式（Ｖ）の中間化合物は、反応スキーム（２１）に従い、式（ＩＩ−ｂ）の化合物を式（ＸＸ）の化合物と反応させることによって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、ジクロロメタンまたはＭｅＯＨなど）、金属水素化物（例えば、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウムまたは水素化ホウ素ナトリウムなど）中で行われ、好適な塩基（例えば、トリメチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミンなど）の存在を例えば０℃または室温または１４０℃などの温度条件下で例えば１時間または２４時間にわたって必要とし得る。反応スキーム（２１）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、Ｘ３は、Ｎである。ＰＧ１は、式（Ｖ）と同様に定義されている。
【化５５】
2020509004.tif 000056
【００９３】
実験手順２２
式（ＩＩ−ｂ）の中間化合物は、反応スキーム（２２）に従い、式（ＶＩ−ｅ）の中間化合物の保護基ＰＧ２を切断することによって調製することができる。反応スキーム（２２）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、Ｘ３は、Ｎである。ＰＧ１は、式（Ｖ）と同様に定義されている。ＰＧ２は、窒素官能基の好適な保護基、例えばｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、エトキシカルボニル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）などである。このような保護基を除去する好適な方法は、実験手順６に記載されている。
【化５６】
2020509004.tif 000057
【００９４】
実験手順２３
式（ＶＩ−ｅ）の中間化合物は、反応スキーム（２３）に従い、式（ＩＩＩ−ｃ）のハロ化合物と式（ＸＩＩＩ）の有機亜鉛化合物との「根岸カップリング」反応によって調製することができる。反応は、好適な反応不活性溶媒（例えば、テトラヒドロフランなど）および好適な触媒（例えば、Ｐｄ（ＯＡｃ）２など）、遷移金属の好適な配位子（例えば、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジイソプロポキシビフェニル［ＣＡＳ：７８７６１８−２２−８］など）中、例えば室温などの温度条件下で例えば１時間行われる。反応スキーム（２３）において、変数は、すべて式（Ｉ）と同様に定義され、Ｘ３は、Ｎであり、ハロは、好ましくは、ヨードである。ＰＧ１は、式（Ｖ）と同様に定義されている。ＰＧ２は、式（ＶＩ）と同様に定義されている。
【化５７】
2020509004.tif 000058
【００９５】
式、（ＩＩＩ−ａ）、（ＩＩＩ−ｂ）、（ＩＩＩ−ｃ）、（ＸＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、（ＸＩＸ）、（ＸＸ）、（ＸＸＩ）、（ＸＸＩＩ）、（ＸＸＩＩＩ）、（ＸＸＩＶ）および（ＸＸＶ）の各中間体は、市販されているか、または当業者に公知の手順によって調製することができる。
【００９６】
薬理学
本発明の化合物およびその薬学的に許容される組成物は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）を阻害し、したがってタウ病変が関わる疾患、別名タウオパチーおよびタウ封入体を伴う疾患の処置または予防に有用であり得る。このような疾患としては、以下に限定されるものではないが、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン認知症複合、嗜銀顆粒病、慢性外傷性脳症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、ダウン症候群、家族性イギリス型認知症、家族性デンマーク型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症（ＭＡＰＴの変異を原因とする）、前頭側頭葉変性症（Ｃ９ＯＲＦ７２の変異を原因とする場合がある）、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、グアドループ型パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、脳内鉄沈着を伴う神経変性症、ニーマン・ピック病Ｃ型、非グアム型神経原線維変化を伴う運動ニューロン疾患、ピック病、脳炎後パーキンソニズム、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、ＳＬＣ９Ａ６関連精神遅滞、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化のみの認知症およびグリア細胞球状封入体を伴う白質タウオパチーが挙げられる。
【００９７】
本明細書で使用する場合、「処置」という用語は、疾患の進行の遅延、中断、阻止もしくは停止または症状の軽減があり得るすべてのプロセスを指すものとするが、必ずしも全症状の完全な排除を示すものではない。本明細書で使用する場合、「予防」という用語は、疾患の発症の遅延、中断、阻止または停止があり得るすべてのプロセスを指すものとする。
【００９８】
本発明は、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン認知症複合、嗜銀顆粒病、慢性外傷性脳症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、ダウン症候群、家族性イギリス型認知症、家族性デンマーク型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症（ＭＡＰＴの変異を原因とする）、前頭側頭葉変性症（Ｃ９ＯＲＦ７２の変異を原因とする場合がある）、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、グアドループ型パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、脳内鉄沈着を伴う神経変性症、ニーマン・ピック病Ｃ型、非グアム型神経原線維変化を伴う運動ニューロン疾患、ピック病、脳炎後パーキンソニズム、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、ＳＬＣ９Ａ６関連精神遅滞、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化のみの認知症およびグリア細胞球状封入体を伴う白質タウオパチーからなる群から選択される疾患または病態の処置または予防に使用するための、一般式（Ｉ）による化合物、その立体異性体型またはその薬学的に許容される酸付加塩もしくは塩基付加塩にも関する。
【００９９】
本発明は、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症／パーキンソン認知症複合、嗜銀顆粒病、慢性外傷性脳症、大脳皮質基底核変性症、石灰化を伴うびまん性神経原線維変化病、ダウン症候群、家族性イギリス型認知症、家族性デンマーク型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症（ＭＡＰＴの変異を原因とする）、前頭側頭葉変性症（Ｃ９ＯＲＦ７２の変異を原因とする場合がある）、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、グアドループ型パーキンソニズム、筋緊張性ジストロフィー、脳内鉄沈着を伴う神経変性症、ニーマン・ピック病Ｃ型、非グアム型神経原線維変化を伴う運動ニューロン疾患、ピック病、脳炎後パーキンソニズム、プリオンタンパク質脳アミロイド血管症、進行性皮質下グリオーシス、進行性核上性麻痺、ＳＬＣ９Ａ６関連精神遅滞、亜急性硬化性全脳炎、神経原線維変化のみの認知症およびグリア細胞球状封入体を伴う白質タウオパチーからなる群から選択される疾患または病態のリスクの処置、予防、改善、制御または低減に使用するための、一般式（Ｉ）による化合物、その立体異性体型またはその薬学的に許容される酸付加塩もしくは塩基付加塩にも関する。
【０１００】
特に、疾患もしくは病態は、特にタウオパチーから選択することができ、より特定すると、アルツハイマー病、進行性核上性麻痺、ダウン症候群、前頭側頭葉型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ピック病、大脳皮質基底核変性症および嗜銀顆粒病からなる群から選択されるタウオパチーから選択することができ、または疾患もしくは病態は、特に、タウ病変を伴う神経変性疾患、より特定すると、Ｃ９ＯＲＦ７２の変異を原因とする筋萎縮性側索硬化症もしくは前頭側頭葉型認知症から選択される神経変性疾患であり得る。
【０１０１】
アルツハイマー病およびタウオパチー疾患における発症前状態：
近年、米国（ＵＳ）国立老化研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  Ａｇｉｎｇ）および国際ワーキンググループ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ）は、発症前（無症候性）段階のＡＤをより明確に定義するためのガイドラインを提案した（Ｄｕｂｏｉｓ  Ｂ，ｅｔ  ａｌ．Ｌａｎｃｅｔ  Ｎｅｕｒｏｌ．２０１４；１３：６１４−６２９；Ｓｐｅｒｌｉｎｇ，ＲＡ，ｅｔ  ａｌ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ  Ｄｅｍｅｎｔ．２０１１；７：２８０−２９２）。仮説モデルは、Ａβの蓄積およびタウ凝集が、明白な臨床的障害が発現する何年も前に始まることを前提とする。アミロイド蓄積、タウ凝集の上昇およびＡＤの発症の重要な危険因子は、年齢（すなわち６５歳以上）、ＡＰＯＥ遺伝子型および家族歴である。臨床的に正常な７５歳より高齢の個体のおよそ３分の１は、アミロイドおよびタウのＰＥＴ画像診断（タウについて現在あまり進んでいない）でＡβまたはタウの蓄積のエビデンスを示す。さらに、ＣＳＦ測定値においてＡβレベルの減少が観察される一方、修飾を受けていないタウおよびリン酸化したタウのレベルは、ＣＳＦにおいて上昇している。類似の所見が大規模な剖検調査に見られ、早くも２０歳以下で脳内にタウ凝集体が検出されていることが示されている。アミロイド陽性（Ａβ＋）の臨床的に正常な個体は、一貫して他のバイオマーカーで「ＡＤ様中間形質」のエビデンスを示し、これには、機能的磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）と安静時機能的結合との両方における機能的ネットワーク活動の崩壊、フルオロデオキシグルコース１８Ｆ（ＦＤＧ）の代謝低下、皮質薄化および萎縮の加速が含まれる。時系列データを積み上げると、やはり、Ａβ＋の臨床的に正常な個体は、認知機能低下ならびに軽度認知障害（ＭＣＩ）およびＡＤ認知症への進行のリスクが増大していることが強く示されている。アルツハイマー病の科学界には、これらのＡβ＋の臨床的に正常な個体がＡＤ病理の連続体の初期段階を呈しているという意見の一致がある。したがって、Ａβの産生またはタウの凝集を減少させる治療剤の介入は、広範な神経変性が起こる前の病期で開始すると、より有効になりそうであると主張されてきた。複数の製薬会社が、現在、前駆性ＡＤにおけるＢＡＣＥの阻害を試験中である。
【０１０２】
バイオマーカー研究の発展により、現在、最初の症状が発生する前の発症前段階でのアルツハイマー病を特定することが可能である。発症前アルツハイマー病に関する様々な問題、例えば定義および用語、範囲、自然経過、進行のマーカーならびに無症候性段階での疾患の検出の倫理的重大性などは、すべてＡｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ＆Ｄｅｍｅｎｔｉａ  １２（２０１６）２９２−３２３でレビューされている。
【０１０３】
発症前アルツハイマー病またはタウオパチーにおいて、個体は、２つのカテゴリーで識別され得る。ＰＥＴスキャンでアミロイドβまたはタウ凝集のエビデンスがあるか、またはＣＳＦ  Ａβ、タウおよびリン酸タウに変化がある、認知が正常な個体は、「アルツハイマー病のリスク状態にある無症候性（ＡＲ−ＡＤ）」または「タウオパチーの無症候性状態」にあると定義される。家族性アルツハイマー病の完全浸透性優性常染色体の変異を有する個体は、「症状が出る前のアルツハイマー病」を有すると言われる。タウタンパク質内の優性常染色体の変異は、同様に、多様な形態のタウオパチーについて説明されている。
【０１０４】
したがって、ある実施形態では、本発明は、発症前アルツハイマー病、前駆性アルツハイマー病またはタウオパチーの様々な形態に見られるタウ関連の神経変性のリスクの制御または低減に使用するための、一般式（Ｉ）による化合物、その立体異性体型またはその薬学的に許容される酸付加塩もしくは塩基付加塩にも関する。
【０１０５】
上で既に述べたように、「処置」という用語は、必ずしも全症状の完全な排除を示すものではないが、上記の障害のいずれかの対症処置を指す場合もある。式（Ｉ）の化合物の有効性に鑑みて、上記の疾患のいずれか１つに罹患しているヒトを含む温血動物などの対象を処置する方法または上記の疾患のいずれか１つに罹患しているヒトを含む温血動物などの対象を予防する方法が提供される。
【０１０６】
前記方法は、式（Ｉ）の化合物、その立体異性体型、その薬学的に許容される付加塩または溶媒和物の予防有効量または治療有効量の、ヒトを含む温血動物などの対象への投与、すなわち全身投与または局所投与、好ましくは経口投与を含む。
【０１０７】
したがって、本発明は、上記の疾患のいずれかを予防および／または処置する方法であって、それを必要とする対象に本発明による化合物の予防有効量または治療有効量を投与するステップを含む方法にも関する。
【０１０８】
本発明は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）の活性を調節する方法であって、それを必要とする対象に本発明によるおよび特許請求の範囲で定義される化合物または本発明によるおよび特許請求の範囲で定義される医薬組成物の予防有効量または治療有効量を投与するステップを含む方法にも関する。
【０１０９】
処置方法は、１日に１〜４回摂取する投薬計画で活性成分を投与するステップも含み得る。これらの処置方法では、本発明による化合物は、投与前に製剤化されることが好ましい。本明細書で下記に記載するように、好適な医薬製剤は、容易に入手可能な周知の成分を使用して既知の手順で調製される。
【０１１０】
上記の障害のいずれかまたはそれらの症状を処置または予防するのに好適であり得る本発明の化合物は、単独で投与されるか、または１種もしくは複数種の追加の治療剤と併用投与され得る。併用治療には、式（Ｉ）の化合物および１種または複数種の追加の治療剤を含有する単一医薬投与製剤の投与、ならびに式（Ｉ）の化合物および各追加の治療剤（それ自体個別の医薬投与製剤中）の投与が含まれる。例えば、式（Ｉ）の化合物および治療剤は、患者に錠剤もしくはカプセル剤などの単一経口投与組成物で一緒に投与され得るか、または各薬剤が個別の経口投与製剤で投与され得る。
【０１１１】
当業者は、本明細書に記載の疾患または病態の別の命名法、疾病分類および分類体系に精通しているであろう。例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ  ＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎのＤｉａｇｎｏｓｔｉｃ＆Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｍｅｎｔａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓの第５版（ＤＳＭ−５（商標））は、神経認知障害群（ＮＣＤ）（重度と軽度の両方）、特にアルツハイマー病による神経認知障害などの用語を使用している。このような用語は、本明細書に記載する疾患または病態の一部の別の名称として当業者が使用する場合がある。
【０１１２】
医薬組成物
本発明は、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ加水分解酵素（ＯＧＡ）の阻害が有益である疾患、例えばアルツハイマー病、進行性核上性麻痺、ダウン症候群、前頭側頭葉型認知症、１７番染色体に連鎖しパーキンソニズムを伴う前頭側頭型認知症、ピック病、大脳皮質基底核変性症、嗜銀顆粒病、Ｃ９ＯＲＦ７２の変異を原因とする筋萎縮性側索硬化症または前頭側頭葉型認知症などを予防または処置するための組成物も提供し、前記組成物は、治療有効量の式（Ｉ）による化合物と、薬学的に許容される担体または希釈剤とを含む。
【０１１３】
活性成分を単独で投与することが可能であるが、それを医薬組成物として提供することが好ましい。したがって、本発明は、本発明による化合物を薬学的に許容される担体または希釈剤とともに含む医薬組成物をさらに提供する。担体または希釈剤は、組成物の他の成分と適合し、そのレシピエントに有害でないという意味で「許容される」ものでなければならない。
【０１１４】
本発明の医薬組成物は、薬学の技術分野において周知の任意の方法によって調製することができる。治療有効量の特定の化合物は、活性成分として、塩基形態または付加塩形態において、薬学的に許容される担体と組み合わされて均質な混合物にされるが、これは、投与に所望される製剤の形態に応じて多様な形態をとり得る。これらの医薬組成物は、好ましくは、経口、経皮または非経口投与などの全身投与；あるいは吸入、鼻腔スプレー、点眼剤によるかまたはクリーム、ゲルもしくはシャンプーなどによる局所投与に好適な単位剤形であることが望ましい。例えば、組成物を経口剤形に調製する際、例えば懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤および液剤などの経口液体製剤の場合、水、グリコール類、油およびアルコールなど；または散剤、丸剤、カプセル剤および錠剤の場合、デンプン、糖、カオリン、滑沢剤、結合剤および崩壊剤などの固体担体など、通常の医薬媒体のいずれかを使用することができる。錠剤およびカプセル剤は、その投与が容易であるため、最も有利な経口単位剤形であり、その場合、固体医薬担体が当然使用される。非経口組成物の場合、担体は、通常、滅菌水を少なくとも大部分含むことになるが、例えば溶解性を促進する他の成分が含まれ得る。例えば、担体が生理食塩水、グルコース溶液または生理食塩水とグルコース溶液との混合物を含む注射用溶液を調製することができる。注射用懸濁剤も調製することができ、その場合、適切な液体担体および懸濁化剤などを使用し得る。経皮投与に好適な組成物では、担体は、皮膚に大きい有害作用を引き起こさない任意の性質の少量の好適な添加剤と任意選択により組み合わせて、浸透促進剤および／または好適な湿潤剤を任意選択により含む。前記添加剤は、皮膚への投与を容易にすることができ、かつ／または所望の組成物の調製に役立ち得る。これらの組成物は、様々な方法で、例えば経皮貼付剤、スポットオン製剤または軟膏剤として投与することができる。
【０１１５】
投与を容易にし、投与量を均一にするために、前述の医薬組成物を単位剤形に製剤化することが特に有利である。本明細書および特許請求の範囲で使用される単位剤形とは、単位投与量として好適な物理的に個別の単位を指し、各単位は、必要な医薬担体と共同して所望の治療効果を生じるように計算された所定量の活性成分を含有する。そのような単位剤形の例は、錠剤（分割錠剤またはコーティング錠剤を含む）、カプセル剤、丸剤、粉末パケット、ウエハー、注射用溶液または注射用懸濁剤、小さじ１杯分、大さじ１杯分など、およびそれらの分離複合剤である。
【０１１６】
正確な投与量および投与頻度は、当業者に周知のとおり、使用される式（Ｉ）の特定の化合物、処置される特定の病態、処置される病態の重症度、特定の患者の年齢、体重、性別、障害の程度および全身の健康状態ならびにその個体が摂取している場合がある他の薬剤に依存する。さらに、前記有効１日量は、処置された対象の応答に応じて、および／または本発明の化合物を処方する医師の評価に応じて減少または増加し得ることが明らかである。
【０１１７】
投与方式に応じて、医薬組成物は、活性成分を０．０５〜９９重量％、好ましくは０．１〜７０重量％、より好ましくは０．１〜５０重量％および薬学的に許容される担体を１〜９９．９５重量％、好ましくは３０〜９９．９重量％、より好ましくは５０〜９９．９重量％含むことになり、パーセンテージは、すべて組成物の総重量に基づく。
【０１１８】
本化合物は、経口、経皮もしくは非経口投与などの全身投与；あるいは吸入、鼻腔スプレー、点眼剤によるかまたはクリーム、ゲルもしくはシャンプーなどによる局所投与に使用することができる。本化合物は、経口投与されるのが好ましい。正確な投与量および投与頻度は、当業者に周知のとおり、使用される式（Ｉ）による特定の化合物、処置される特定の病態、処置される病態の重症度、特定の患者の年齢、体重、性別、障害の程度および全身の健康状態ならびにその個体が摂取している場合がある他の薬剤に依存する。さらに、前記有効１日量は、処置された対象の応答に応じて、および／または本発明の化合物を処方する医師の評価に応じて減少または増加し得ることが明らかである。
【０１１９】
単回剤形を製造するために担体材料と組み合わせることができる式（Ｉ）の化合物の量は、処置される疾患、哺乳動物種および特定の投与方式に応じて変動するであろう。しかし、一般的な指針として、本発明の化合物についての好適な単位用量は、例えば、好ましくは０．１ｍｇ〜約１０００ｍｇの活性化合物を含有し得る。好ましい単位用量は、１ｍｇ〜約５００ｍｇである。より好ましい単位用量は、１ｍｇ〜約３００ｍｇである。より一層好ましい単位用量は、１ｍｇ〜約１００ｍｇである。このような単位用量は、１日２回以上、例えば１日に２、３、４、５または６回、しかし好ましくは１日に１回または２回、７０ｋｇの成人に対する総投与量が１回の投与につき対象の体重１ｋｇ当たり０．００１〜約１５ｍｇの範囲となるように投与することができる。好ましい投与量は、１回の投与につき対象の体重１ｋｇ当たり０．０１〜約１．５ｍｇであり、このような治療は、数週間または数カ月間、場合により数年間にわたり得る。しかし、当然のことながら、当業者によく理解されているように、任意の特定の患者に対する特定の用量レベルは、使用する特定の化合物の活性；処置される個体の年齢、体重、全身の健康状態、性別および食事；投与時間および投与経路；排泄率；以前投与された他の薬物；ならびに治療を受ける特定の疾患の重症度を含む様々な要因に依存することになる。
【０１２０】
典型的な投与量は、１ｍｇ〜約１００ｍｇの錠剤もしくは１ｍｇ〜約３００ｍｇの錠剤を１錠、１日１回もしくは１日数回服用または活性成分の含量を比較的多く含有する徐放カプセル剤もしくは錠剤を１つ、１日１回服用とすることができる。徐放効果は、異なるｐＨ値で溶解するカプセル材料により、浸透圧で徐々に放出するカプセルにより、または他の既知の任意の放出制御手段により得ることができる。
【０１２１】
当業者に明らかであろうように、これらの範囲外の投与量を使用することが必要となる場合があり得る。さらに、臨床医または処置医は、個々の患者の応答に応じて治療を開始、中断、調整または終了する方法および時点を知っているであろうことにも留意されたい。
【０１２２】
本発明は、本発明による化合物、「リーフレット」とも呼ばれる処方情報、ブリスターパッケージまたはボトルおよび容器を含むキットも提供する。さらに、本発明は、本発明による医薬組成物、「リーフレット」とも呼ばれる処方情報、ブリスターパッケージまたはボトルおよび容器を含むキットを提供する。処方情報には、本発明による化合物または医薬組成物の投与に関して患者への注意または説明を含めることが好ましい。特に、処方情報には、タウオパチーの予防および／または処置のために、それを必要とする対象において本発明による化合物または医薬組成物がどのように使用されるべきかについて、前記本発明による化合物または医薬組成物の投与に関して患者への注意または説明が含められる。したがって、ある実施形態では、本発明は、式（Ｉ）の化合物、またはその立体異性体型、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、または前記化合物を含む医薬組成物およびタウオパチーを予防または処置するための説明書を含むキットオブパーツを提供する。本明細書に記載するキットは、特に、市販用に好適な医薬パッケージであり得る。
【０１２３】
上記の組成物、方法およびキットについて、当業者は、それぞれに使用するのに好ましい化合物が上記で好ましいと記載されている化合物であることを理解するであろう。組成物、方法およびキットについてさらに一層好ましい化合物は、下記の非限定的な実施例で提供される化合物である。
【実施例】
【０１２４】
実験の部
以下では、「ｍ．ｐ．」という用語は、融点を意味し、「ｍｉｎ」は、分を意味し、「ＡｃＯＨ」は、酢酸を意味し、「ＡＣＮ」は、アセトニトリルを意味し、「ａｑ．」は、水性を意味し、「ＤＭＡＰ」は、４−ジメチルアミノピリジンを意味し、「ＤＩＰＥ」は、ジイソプロピルエーテルを意味し、「ＤＭＦ」は、ジメチルホルムアミドを意味し、「ｒ．ｔ．」または「ＲＴ」は、室温を意味し、「ｒａｃ」または「ＲＳ」は、ラセミを意味し、「ｓａｔ．」は、飽和を意味し、「ＳＦＣ」は、超臨界流体クロマトグラフィーを意味し、「ＳＦＣ−ＭＳ」は、超臨界流体クロマトグラフィー／質量分析を意味し、「ＬＣ−ＭＳ」は、液体クロマトグラフィー／質量分析を意味し、「ＨＰＬＣ」は、高速液体クロマトグラフィーを意味し、「ｉＰｒＯＨ」は、イソプロピルアルコールを意味し、「ＲＰ」は、逆相を意味し、「Ｒｔ」は、保持時間（単位は分）を意味し、「［Ｍ＋Ｈ］＋」は、化合物の遊離塩基のプロトン化質量を意味し、「ｗｔ」は、重量を意味し、「ＴＥＭＰＯ」は、２，２，６，６−テトラメチルピペリジン１−オキシルを意味し、「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフランを意味し、「Ｅｔ２Ｏ」は、ジエチルエーテルを意味し、「ＥｔＯＡｃ」は、酢酸エチルを意味し、「ＤＣＭ」は、ジクロロメタンを意味し、「ＭｅＯＨ」は、メタノールを意味し、「ｓａｔ」は、飽和を意味し、「ｓｏｌｔｎ」または「ｓｏｌ．」は、溶液を意味し、「ＨＡＴＵ」は、１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェートを意味し、「ＭＴＢＥ」は、メチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテルを意味し、「ＥｔＯＨ」は、エタノールを意味し、「ＶＣＤ」は、振動円二色性を意味し、「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフランを意味する。
【０１２５】
「ＲＳ」という表記が本明細書で示されている場合には常に、別途指示しない限り、その化合物は、示された中心でのラセミ混合物であることを意味する。一部の化合物では、中心の立体化学的配置は、混合物が分離された場合に「Ｒ」または「Ｓ」と指定されており、一部の化合物では、化合物自体は、単一の立体異性体として単離され、鏡像異性的に／ジアステレオ異性的に純粋であるが、絶対立体化学が未確定の場合、示された中心での立体化学的配置は、「＊Ｒ」または「＊Ｓ」と指定されている。本明細書で報告している化合物の鏡像体過剰率は、例えば、超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）によるラセミ混合物の分析と、その後の分離されたエナンチオマーのＳＦＣ比較とにより決定した。
【０１２６】
結合が太いくさび形または平行線のくさび形で示され、立体中心がＲＳで指定されている中間体／化合物において、その表示は、その試料が立体異性体の混合物であることを示し、１つの立体異性体は、表示された図の平面の上側または下側に突出した、示された置換基または基を有し、１つの立体異性体は、図の平面の、それとは反対側の下側または上側に突出した置換基または基を有し、例えば、
【化５８】
2020509004.tif 000059
は、
【化５９】
2020509004.tif 000060
との５０：５０混合物を表す。
【０１２７】
キラル中心の絶対配置（Ｒおよび／またはＳで示される）は、中間体／化合物におけるＶＣＤによって決定したか、または理論的に説明することができる。最終化合物の合成は、文献による前例に一致する既知の絶対配置の中間体または適切な合成手順により得られた中間体から出発させた。そうすると、追加の立体中心の絶対配置の割り当ては、標準的なＮＭＲ法により割り当てることができるであろう。
【０１２８】
マイクロ波補助反応は、シングルモード式反応器：Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ（商標）Ｓｉｘｔｙ  ＥＸＰマイクロ波反応器（Ｂｉｏｔａｇｅ  ＡＢ）またはマルチモード式反応器：ＭｉｃｒｏＳＹＮＴＨ  Ｌａｂｓｔａｔｉｏｎ（Ｍｉｌｅｓｔｏｎｅ，Ｉｎｃ．）で行った。
【０１２９】
薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、試薬級溶媒を使用して、シリカゲル６０  Ｆ２５４プレート（Ｍｅｒｃｋ）で行った。オープンカラムクロマトグラフィーは、標準技術を使用して、シリカゲル、粒径６０Å、メッシュ＝２３０〜４００（Ｍｅｒｃｋ）で行った。
【０１３０】
自動フラッシュカラムクロマトグラフィーは、そのまま接続できるカートリッジを使用して、粒径１５〜４０μｍの不定形シリカゲル（順相使い捨てフラッシュカラム）において、様々なフラッシュシステム：Ａｒｍｅｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ製ＳＰＯＴシステムもしくはＬＡＦＬＡＳＨシステム、またはＩｎｔｅｒｃｈｉｍ製ＰｕｒｉＦｌａｓｈ（登録商標）４３０ｅｖｏシステム、またはＡｇｉｌｅｎｔ製９７１−ＦＰシステム、またはＢｉｏｔａｇｅ製Ｉｓｏｌｅｒａ  １ＳＶシステムにおいて行った。
【０１３１】
一部の化合物の絶対立体化学的配置は、振動円二色性（ＶＣＤ）を使用して決定した。それらは、ＣＤ２Ｃｌ２を溶媒として使用し、ＫＢｒ液体セルに入れて、ＰＭＡ  ３７を備えるＢｒｕｋｅｒ  Ｅｑｕｉｎｏｘ  ５５で測定した（ＰＥＭ：１３５０ｃｍ−１、ＬＩＡ：１ｍＶ、分解能：４ｃｍ−１）。絶対配置を決定するためのＶＣＤの使用に関する説明は、Ｄｙａｔｋｉｎ  Ａ．Ｂ．ｅｔ．ａｌ，Ｃｈｉｒａｌｉｔｙ，１４：２１５−２１９（２００２）に見出すことができる。第一原理計算：徹底的な配座探索を、混合ねじれ／低モードサンプリングをＯＰＬＳ−２００５力場で行うＭａｃｒｏｍｏｄｅｌを使用して分子力学レベルで行う。突き止めた最小値は、ＪａｇｕａｒをＢ３ＬＹＰ／６−３１Ｇ＊＊レベルで使用し、ジクロロメタン溶媒を模倣するポアソン−ボルツマン連続溶媒和モデルを用いて最適化した。１０ｋＪ／ｍｏｌ区間以内のすべての配座を使用して、ＶＣＤおよびＩＲスペクトルをシミュレートした。双極子強度および旋光強度を同じＢ３ＬＹＰ／６−３１Ｇ＊＊レベルでＪａｇｕａｒを使用して計算した。計算されたＶＣＤスペクトルは、周波数を０．９７倍スケーリングし、ローレンツ型バンドに変換し、ボルツマンアンサンブルを想定する各配座異性体の寄与を合計した後に生成され、これを、正確な立体化学を割り当てるために実験スペクトルと目視比較した。
【０１３２】
Ａ．中間体の調製
中間体１の調製
【化６０】
2020509004.tif 000061
１，１’−カルボニルジイミダゾール（ＣＡＳ：５３０−６２−１、４８ｇ、０．３０ｍｏｌ）を１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ピペリジンカルボン酸（ＣＡＳ：８４３５８−１２−３、５０ｇ、０．２２ｍｏｌ）のＴＨＦ（２５０ｍＬ）溶液に添加し、この混合物を室温で１時間撹拌した。別のフラスコ中でトリエチルアミン（３１．７８ｇ、０．３１ｍｏｌ）をＮ−メトキシメタンアミン塩酸塩（１：１）（２９．２７ｇ、０．３０ｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（２００ｍＬ）中懸濁液に添加し、この混合物を室温で１時間撹拌した。両方の混合物をまとめ、室温で１６時間撹拌した。次いで、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をＤＣＭに溶解し、水、酢酸（２０％溶液）および最後にＮａ２ＣＯ３（飽和水溶液）で洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させ、真空中でトルエンと共蒸発させて、中間体１（５９ｇ、９９％）を得た。
【０１３３】
中間体２の調製
【化６１】
2020509004.tif 000062
メチルマグネシウムブロミド（トルエン／ＴＨＦ（７５／２５）中１．４Ｍ、２６８ｍＬ）を０℃の中間体１（５９ｇ、０．２２ｍｏｌ）のＴＨＦ（２５０ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下において、温度が１５℃を超えないように滴加した。添加後、反応混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、混合物を１００ｍＬのＡｃＯＨとともに氷上に注いだ。生成物をＥｔ２Ｏで抽出し、有機層を５％ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させて、中間体２（５０ｇ、定量的）を得た。
【０１３４】
中間体３の調製
【化６２】
2020509004.tif 000063
中間体２（５０ｇ、０．２２ｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（１１０ｍＬ）に添加し、この混合物を４日間還流した。反応混合物を蒸発させ、追加のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタールを添加し、この混合物をさらに４時間還流した。溶媒を蒸発させ、生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＤＣＭ中１％ＭｅＯＨ、２％）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体３（６０ｇ、９７％）を得た。
【０１３５】
中間体４、５および６の調製
【化６３】
2020509004.tif 000064
３−アミノ−１，２，４−トリアゾール（ＣＡＳ：６１−８２−５、１２．２８ｇ、０．１５ｍｏｌ）を中間体３（３３ｇ、０．１２ｍｏｌ）のＡｃＯＨ（７５ｍＬ）溶液に添加した。反応混合物を１３０℃で１時間撹拌した。次いで、混合物を氷浴で冷却し、室温で終夜撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、トルエンと共蒸発させ、Ｅｔ２Ｏ（０．７Ｌ）で希釈し、氷上に注いだ（０．５Ｌ）。層を分離し、水性層をＥｔ２Ｏ（３×０．３Ｌ）で再度抽出した。まとめた有機層をブラインで処理し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させて、中間体４を褐色油状物として得た（２５ｇ、７０％）。
【０１３６】
次いで、中間体４（２５ｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  Ｄｉａｃｅｌ  ＯＪ  ２０×２５０ｍｍ、移動相：ＣＯ２、ＭｅＯＨ）によってエナンチオマーに分離し、中間体５（１０ｇ）および中間体６（１０ｇ）を得た。
【０１３７】
中間体７の調製
【化６４】
2020509004.tif 000065
中間体５（３．８ｇ、１２．５３ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１００ｍＬ）に溶解し、室温においてＨＣｌ（１００ｍＬ；２−プロパノール中６Ｎ）で処理し、この混合物をさらに室温で１６時間撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させ、固体をＤＩＰＥ／ｉＰｒＯＨ（５／１、１００ｍＬ）でトリチュレートし、乾燥（真空オーブン、６０℃、１６時間）した後、中間体７のビス塩酸塩（３．１７ｇ、９２％）を得た。
【０１３８】
中間体８の調製
【化６５】
2020509004.tif 000066
２−アミノイミダゾール硫酸塩（ＣＡＳ：１４５０−９３−７、６．０８３ｇ、２３．０２ｍｍｏｌ）を中間体３（１３ｇ、４６．０４ｍｍｏｌ）のＡｃＯＨ（１００ｍＬ）溶液に還流しながら添加した。反応混合物を還流しながら６時間撹拌した。次いで、溶媒を真空中で蒸発させ、Ｎａ２ＣＯ３（飽和水溶液）を添加し、生成物をＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させた。残渣をＨＣｌ（２−プロパノール中６Ｎ）で処理した。生成物を結晶化させ、結晶を濾別し、乾燥して、中間体８の二塩酸塩（２．０８ｇ、１６％）を得た。
【０１３９】
中間体９の調製
【化６６】
2020509004.tif 000067
中間体２（２ｇ、８．８０ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドジメチルアセタール（３．５２ｇ、２６．４０ｍｍｏｌ）との混合物を還流しながら３時間撹拌した。反応混合物を真空中で蒸発させ、次の反応工程にそのまま使用した（生成物は、シリカ上で分解する）。
【０１４０】
中間体１０の調製
【化６７】
2020509004.tif 000068
ＡｃＯＨ（５０ｍＬ）中、３−アミノ−１，２，４−トリアゾール（ＣＡＳ：６１−８２−５、０．７１ｇ、８．４３ｍｍｏｌ）および中間体９（２．５ｇ、８．４３ｍｍｏｌ）を１２０℃で３０分間撹拌した。次いで、溶媒を真空中で蒸発させ、Ｎａ２ＣＯ３（飽和水溶液）を添加し、生成物をＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させた。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＤＣＭ中１％ＭｅＯＨ、２％）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体１０（２．１４ｇ、８０％）を得た。
【０１４１】
中間体１１の調製
【化６８】
2020509004.tif 000069
ＨＣｌ（５０ｍＬ；２−プロパノール中４Ｎ）を中間体１０（２．１４ｇ、６．７４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中混合物に添加し、この混合物をさらに室温で１時間撹拌した。生成物は、反応混合物から結晶化し、これを濾別し、乾燥して、中間体１１のビス塩酸塩（１．０７ｇ、５５％）を得た。
【０１４２】
中間体１２の調製
【化６９】
2020509004.tif 000070
中間体６（３．９ｇ、１２．８６ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（１００ｍＬ）に溶解し、室温においてＨＣｌ（１００ｍＬ；２−プロパノール中６Ｎ）で処理し、この混合物をさらに室温で１６時間撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させ、固体をＤＩＰＥ／ｉＰｒＯＨ（２５０ｍＬ／５０ｍＬ）でトリチュレートし、乾燥（真空オーブン、６０℃、１６時間）した後、中間体１２のビス塩酸塩（３．１８ｇ、９０％）を得た。
【０１４３】
中間体１３の調製
【化７０】
2020509004.tif 000071
中間体２（２０ｇ、０．０８８ｍｏｌ）のベンゼン（２００ｍＬ）中混合物を０℃、窒素雰囲気下で撹拌した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１２ｇ）、次いでジフルオロ酢酸エチル（１３．１４ｇ、０．１０６ｍｏｌ）を０〜５℃で添加した。反応混合物を室温で５時間撹拌した。次いで冷却により温度を１５〜２０℃に維持しながら、１０％Ｈ２ＳＯ４（１０ｍＬ）をｐＨ＝７になるまで滴加した。この混合物をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、ブライン（２×２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させて、中間体１３（２６ｇ、９７％）を得た。
【０１４４】
中間体１４および１５の調製
【化７１】
2020509004.tif 000072
２−アミノイミダゾール硫酸塩（ＣＡＳ：１４５０−９３−７、２２．５ｇ、０．０８５ｍｏｌ）を中間体１３（２６ｇ、０．０８５ｍｏｌ）のＡｃＯＨ（６００ｍＬ）溶液に還流しながら添加した。反応混合物を還流しながら６時間撹拌した。次いで、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（Ｖｙｄａｃ  Ｄｅｎａｌｉ  Ｃ１８−１０μｍ、２５０ｇ、５ｃｍ）により精製した。移動相（０．０５％ＴＦＡ水溶液＋５％ＣＨ３ＣＮ、ＭｅＯＨ）。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して２つの画分を得、これらをＤＣＭ＋５％ＭｅＯＨ−ＮＨ３を用いてシリカで濾過し、中間体１４（６．５ｇ、３０％）および中間体１５（７．９ｇ、３７％）を遊離塩基として得た。
【０１４５】
遊離塩基としての中間体１５（５ｇ）をｉＰｒＯＨに溶解し、ＨＣｌ（２−プロパノール中６Ｎ）で酸性化し、室温で２０時間撹拌した。固体が沈殿し、これを濾別し、乾燥（真空オーブン、７０℃）して、中間体１５のビス塩酸塩（４．９ｇ）を得た。
【０１４６】
中間体１６の調製
【化７２】
2020509004.tif 000073
ＨＣｌ（５００ｍＬ；２−プロパノール中６Ｎ）およびＨＣｌ（５００ｍＬ、１Ｍ水溶液）を３−アミノ−１，２，４−トリアゾール（ＣＡＳ：６１−８２−５、５０ｇ、０．５９ｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５００ｍＬ）中混合物に添加した。反応混合物を室温で３０分間撹拌した。次いで、溶媒を真空中で蒸発させた。生成物を乾燥（真空オーブン、６０℃、２時間）して、中間体１６の塩酸塩（６９．６ｇ、９７％）を得た。
【０１４７】
中間体１７および１８および１９の調製
【化７３】
2020509004.tif 000074
手順ａ：中間体１６（５５．４４ｇ、０．４６ｍｏｌ）を中間体１３（７０．２１ｇ、０．２３ｍｏｌ）のＤＭＦ（８００ｍＬ）溶液に添加した。反応混合物を６０℃で２０時間撹拌した。反応混合物を氷浴で冷却した。次いで、ＤＭＦ（３００ｍＬ）を添加し、次にトリエチルアミン（１６０．３１ｍＬ、１．１５ｍｏｌ）を添加した。次いで、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５１．１７ｇ、０．２３ｍｏｌ）のＤＭＦ（３００ｍＬ）溶液を滴加し、反応混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をＤＣＭ（７３０ｍＬ）および２０％ＮＨ４ＯＨ（３００ｍＬ）中で３０分間撹拌した。有機層を分離し、水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ３０／７０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。残渣をＤＩＰＥに入れ、室温で終夜撹拌した。沈殿した固体を濾過して、中間体１７（４５．１１ｇ、５５．５％）を得た。濾液を真空中で蒸発させて、中間体１８（２５ｇ、化合物１７と１８との混合物として）を得た。
【０１４８】
手順ｂ：中間体１６（１５．４２ｇ、１８３．４１ｍｍｏｌ）を中間体１３（５６ｇ、１８３．４１ｍｍｏｌ）のＡｃＯＨ（３００ｍＬ）中混合物に添加した。この混合物を２時間還流した。次いで、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をＤＣＭに溶解し、Ｎａ２ＣＯ３の１０％水溶液で、中性ｐＨになるまで洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：ＤＣＭ、２％ＭｅＯＨ−ＮＨ３）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体１８（４５ｇ、収率６９％）を得た。水性層を真空中で蒸発させた。残渣をＤＣＭ中で撹拌し、濾過した。濾液をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：ＤＣＭ、１０％ＭｅＯＨ−ＮＨ３）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体１９（１１ｇ、収率２４％）を得た。
【０１４９】
代替として、中間体１９は、中間体２０の合成について説明するものと類似の手順により、中間体１８から出発して調製することができる。
【０１５０】
中間体２０の調製
【化７４】
2020509004.tif 000075
ＨＣｌ／ｉ−ＰｒＯＨ（２００ｍＬ）を中間体１７（１５ｇ、４２．４５ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４００ｍＬ）中混合物に添加した。反応混合物を室温で２０時間撹拌した。次いで、混合物を真空中で蒸発させた。残渣をＤＩＰＥとともに撹拌した。沈殿した固体を濾別し、乾燥（真空オーブン、７０℃）した後、中間体２０のビス塩酸塩（１４ｇ、定量的）を得た。
【０１５１】
中間体２１の調製
【化７５】
2020509004.tif 000076
手順ａ：４−メチル−３−ピリジンカルボン酸塩酸塩（１：１）（４０ｇ、２３０．４ｍｍｏｌ）を硫酸（２０ｍＬ）とＭｅＯＨ（４００ｍＬ）との還流混合物に添加した。この混合物を終夜還流し、次いでこれを蒸発させ、得られたスラリーをＮａＨＣＯ３（６４ｇ）の冷水（３６０ｍＬ）溶液に添加した。生成物をＤＣＭで抽出し、有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させて、中間体２１（２８．７０ｇ、８３％）を得た。
【０１５２】
手順ｂ：金属反応器に３−ブロモ−４−メチル−ピリジン（２００ｇ、０．１１６ｍｏｌ）およびＤＭＦ／ＭｅＯＨ（１Ｌ／１Ｌ）の混合物を入れた。これにＥｔ３Ｎ（４００ｇ、０．３９５ｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（８ｇ、０．０３６ｍｏｌ）および１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（１６ｇ、０．０２９ｍｏｌ）を添加した。反応器を密閉し、ＣＯガス（３ＭＰａ）で加圧し、反応混合物を終夜１４０℃で撹拌し、加熱した。反応混合物を冷却し、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィー（勾配溶離液：ＥｔＯＡｃ／石油エーテル  １／１〜１／０）により精製した。生成物画分を回収し、溶媒を蒸発させて、所望の中間体２１（９０ｇ、５１％）を得た。
【０１５３】
中間体２２の調製
【化７６】
2020509004.tif 000077
手順ａ：水素化フラスコにＡｃＯＨ（５００ｍＬ）を入れ、次いでＰｔＯ２（１５．０２ｇ、６６．２ｍｍｏｌ）を添加した。中間体２１（５０ｇ、３３０．８ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を５０℃で７日間水素化した。反応混合物をｄｉｃａｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、濾液を蒸発させて中間体２２（５２ｇ）を得、これをそれ以上精製せずに次の工程に使用した。
【０１５４】
手順ｂ：酸化白金（５ｇ、０．０２２ｍｏｌ）を中間体２１（９０ｇ、０．５９５ｍｏｌ）とＡｃＯＨ（１Ｌ）との溶液に添加した。反応混合物を撹拌し、３．５ｋＰａの加圧下において５０℃で５日間水素化した。冷却した反応混合物を真空中で濃縮して、中間体２２を酢酸塩（１４０ｇ、９７％、１Ｈ−ＮＭＲにより決定した純度９０％）として得た。
【０１５５】
中間体２３の調製
【化７７】
2020509004.tif 000078
手順ａ：中間体２２（５２ｇ、３３０．８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（８６９ｍＬ）溶液にＤＩＰＥＡ（８５．５ｇ、６６１．５ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（４．０４ｇ、３３．０８ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（７２．１９ｇ、３３０．８ｍｍｏｌ）をこの溶液に少量ずつ添加し、反応生成物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を水およびブラインで洗浄し、有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。生成物をフラッシュクロマトグラフ（シリカゲル、溶離液：ＤＣＭ、ＤＣＭ中１％ＭｅＯＨ、２％、４％）により精製した。所望の画分を蒸発させて、中間体２３（６４．１ｇ、７５％）を得た。
【０１５６】
手順ｂ：撹拌し、冷却（０℃）した中間体２２（１４０ｇ、０．５９５ｍｏｌ）のＤＣＭ（１．５Ｌ）溶液に二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１３０ｇ、０．５９６ｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（２２５ｇ、１．７４ｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１０ｇ、０．０８２ｍｏｌ）を順次添加し、撹拌を室温で２時間継続した。反応混合物をＨ２Ｏ（５００ｍＬ）に注ぎ、ＤＣＭ（２×１００ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、溶媒を蒸発させて、粗製中間体２３（１５０ｇ、９０％、１Ｈ−ＮＭＲにより決定した純度９０％）を得、これを次の工程にそのまま使用した。
【０１５７】
中間体２４の調製
【化７８】
2020509004.tif 000079
手順ａ：中間体２３（６４．１ｇ、２４９．１ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（５００ｍＬ）に入れ、室温で撹拌した。ＮａＯＨ（２Ｍ、７４７．３ｍＬ）を添加し、この混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を１Ｎ  ＨＣｌで酸性化し、生成物をＥｔ２Ｏで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させて、中間体２４（５９．７０ｇ）を白色固体として得た。
【０１５８】
手順ｂ：中間体２３（１５０ｇ、純度９０％、０．５２４ｍｏｌ）のＭｅＯＨ（０．９Ｌ）中撹拌溶液に２Ｍ  ＮａＯＨ溶液（１．８ｍｏｌ）の溶液を添加した。室温で１４時間後、反応混合物をＭＴＢＥ（２×０．８Ｌ）で抽出した。水性層を１０％クエン酸で酸性化し、次いでＥｔＯＡｃ（４×１Ｌ）で抽出した。まとめた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮して、粗製中間体２４（１４２ｇ、１Ｈ−ＮＭＲにより決定した純度９０％、１００％）を得、これを次の工程にそのまま使用した。
【０１５９】
中間体２５の調製
【化７９】
2020509004.tif 000080
手順ａ：中間体２４（５９．７ｇ、０．２５ｍｏｌ）のＴＨＦ（８００ｍＬ）溶液にジ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル−メタノン（５４ｇ、０．３３ｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で１時間撹拌した。別のフラスコ中でＮ−メトキシ−メタンアミン塩酸塩（１：１）（３２．９３ｇ、０．３４ｍｏｌ）のＡＣＮ（５００ｍＬ）中懸濁液にトリメチルアミン（３５．７５ｇ、０．３５ｍｏｌ）を添加した。両方の混合物をまとめ、モニターしながら５０℃で撹拌した。中間生成物が反応混合物から結晶化し、Ｎ−メトキシ−メタンアミンと反応させずに所望の生成物が形成した。中間体が溶解するまでＤＣＭを添加した。反応生成物を８０℃で１週間撹拌した。溶媒を蒸発させた。残渣をＤＣＭに溶解し、水、２０％ＡｃＯＨ溶液および最後にＮａＨＣＯ３飽和溶液で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：ＤＣＭ中２％ＭｅＯＨ、４％）により精製した。純粋な画分を蒸発させて、中間体２５（７０ｇ、定量的）を得た。
【０１６０】
手順ｂ：撹拌し、氷冷した中間体２４（１４０ｇ、０．５１８ｍｏｌ）のＤＣＭ（２Ｌ）溶液にＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン（１１３ｇ、１．１６ｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（１１３ｇ、１．７９ｍｏｌ）を添加した。次いで、ＨＡＴＵ（２３５ｇ、０．６１８ｍｏｌ）を添加し、撹拌を１４時間継続した。溶媒を蒸発させ、ＮａＨＣＯ３溶液（０．５Ｌ）を添加し、次いでＤＣＭ（３×１Ｌ）で抽出した。まとめた有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーにより石油エーテル中１〜１０％ＥｔＯＡｃで溶離して精製し、中間体２５（１５２ｇ、１００％）を得た。
【０１６１】
中間体２６の調製
【化８０】
2020509004.tif 000081
手順ａ：ＴＨＦ（２５０ｍＬ）に入れた中間体２５（７０ｇ、２４４．４ｍｍｏｌ）をＮ２下でフラスコに入れ、−１５℃まで冷却した。メチルマグネシウムブロミド（トルエン／ＴＨＦ（７５／２５）中１．４Ｍ、２０６ｍＬ）を、温度が０℃を超えないように滴加した。添加後、反応混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、反応混合物を２０ｍＬのＡｃＯＨとともに氷上に注いだ。生成物をＥｔ２Ｏで抽出し、有機層を５％ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させて、中間体２６（５３．３５ｇ、９０％）を得た。
【０１６２】
手順ｂ：撹拌し、冷却した中間体２５（１５０ｇ、０．５２４ｍｏｌ）のＴＨＦ（２Ｌ）溶液（０℃）にメチルマグネシウムブロミドの３Ｍ  ＴＨＦ（０．７５Ｌ、２．２５ｍｏｌ）溶液を滴加し、撹拌を室温で２時間継続した。反応混合物をＮＨ４Ｃｌ水溶液に注ぎ、ＤＣＭで抽出した。まとめた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより石油エーテル中１〜５％ＥｔＯＡｃで溶離して精製し、中間体２６（１２０ｇ、９５％）を得た。
【０１６３】
中間体２７の調製
【化８１】
2020509004.tif 000082
中間体２６（５３．３５ｇ、０．２２ｍｏｌ）を０℃のトルエン（１５００ｍＬ）に入れ、Ｎ２下で撹拌した。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（３４．１４ｇ）を０〜５℃で添加し、２，２−ジフルオロ−酢酸エチルエステル（３３．０１ｇ、０．２７ｍｏｌ）を０〜５℃で滴加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いでＨ２ＳＯ４の１０％水溶液で洗浄し、有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させて、中間体２７（７０．５０ｇ、定量的）を得た。
【０１６４】
中間体２８の調製
【化８２】
2020509004.tif 000083
中間体２７（７０．５ｇ、２２０．８ｍｍｏｌ）、１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−アミン塩酸塩（１：１）（５３．２２ｇ、４４１．５２ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（１５００ｍＬ）を８０℃で２４時間撹拌した。Ｅｔ３Ｎ（２０ｇ）および二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２０ｇ）を添加した。この混合物を３０分間撹拌し、蒸発させ、次いでＥｔＯＡｃに溶解し、水およびブラインで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。４種の異性体が観察された。第１の画分は、Ｅｔ２Ｏから結晶化した。この結晶を濾別し、乾燥して、中間体２８（２４．６０ｇ、３０％）を得た。母液から化合物の第２の画分が得られた。この結晶を濾別し、乾燥して、中間体２８（２．５３ｇ、３％）を得た。
【０１６５】
中間体２９、３０および３１の調製
【化８３】
2020509004.tif 000084
中間体２８（２４．６ｇ、６７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３５０ｍＬ）溶液にＨＣｌ−ｉＰｒＯＨ（３５０ｍＬ）を添加し、反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を蒸発させ、生成物をＥｔＯＨから結晶化させた。結晶を濾別し、乾燥して、２０．３３ｇの粗製物を得、これに水、Ｎａ２ＣＯ３およびＤＣＭを添加した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させて、１２．８０ｇの中間体２９を得た。この遊離塩基を分取ＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  Ｄｉａｃｅｌ  ＡＤ  ３０×２５０ｍｍ；移動相：ＣＯ２、（（ＭｅＯＨ−ｉＰｒＯＨ５０／５０）に０．４％ｉＰｒＮＨ２を添加）による精製によってエナンチオマーに分離し、中間体３０（５ｇ、１９％、Ｒｔ＝７．５７分）および中間体３１（５．１３ｇ、１９％、Ｒｔ＝９．３６分）を得た。
【０１６６】
中間体３０および３１を遊離塩基として単離した。または代替として、これらをＭｅＯＨに溶解し、次にＨＣｌ／ｉ−ＰｒＯＨを添加し、混合物を蒸発させた。これらの塩酸塩（いずれの場合も．ＨＣｌ）をＡＣＮから結晶化させ、濾別し、乾燥した。
【０１６７】
中間体３２の調製
【化８４】
2020509004.tif 000085
ヨウ素（７．４５ｇ、２９．３７ｍｍｏｌ）を（Ｒ）−（−）−Ｎ−Ｂｏｃ−３−ピロリジノール（ＣＡＳ：１０３０５７−４４−９；５ｇ、２６．７０ｍｍｏｌ）と、イミダゾール（２．７３ｇ、４０．０６ｍｍｏｌ）と、トリフェニルホスフィン（７．７０ｇ、２９．３７ｍｍｏｌ）とのＴＨＦ（５０ｍＬ）溶液に０℃（氷浴）で少しずつ添加した。この混合物を室温で３時間撹拌した。過剰なヨウ素をＮａ２Ｓ２Ｏ３（１０％水溶液）で反応停止した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ  ０／１００〜２０／８０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体３２を無色油状物（７．２１ｇ、９１％）として得た。
【０１６８】
中間体３３の調製
【化８５】
2020509004.tif 000086
中間体３２（１．１２ｇ、３．７７ｍｍｏｌ）と塩化リチウム（７．５３ｍＬ、３．７７ｍｍｏｌ）とのＴＨＦ（１ｍｌ）溶液を、活性Ｚｎ（１５．２４ｇ、２３３．０６ｍｍｏｌ）を含有するカラムに４０℃、流速０．５ｍＬ／分においてポンプで通過させた。生成物を７−クロロ−５−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（ＣＡＳ：２４４１５−６６−５；２５４ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ）と、ビス（トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（０）（ＣＡＳ：５３１９９−３１−８；３８．５ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）とのＴＨＦ（１．５ｍＬ）中撹拌溶液に室温、窒素雰囲気下で回収した。この混合物を室温で終夜撹拌した。粗製物をＮＨ３（１０％水溶液）で反応停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ  ０／１００〜１００／０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体３３を褐色油状物（２０３ｍｇ、４３％）として得た。
【０１６９】
上記の反応のためにＺｎを以下のように活性化した：ＴＭＳＣｌ（２Ｍ）と１−ブロモ−２−クロロエタン（０．３Ｍ）とのＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を、Ｚｎを含有するカラムに４０℃、流速１ｍＬ／分で通過させた。
【０１７０】
中間体３４の調製
【化８６】
2020509004.tif 000087
ＨＣｌ（０．４１ｍＬ；ジオキサン中４Ｍ）を中間体３３（７０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に室温で添加し、この混合物をさらに室温で１５０分間撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させて、中間体３４の塩酸塩（４７ｍｇ、定量的）を得た。
【０１７１】
中間体３５の調製
【化８７】
2020509004.tif 000088
中間体３２（６００ｍｇ、２．０２ｍｍｏｌ）と塩化リチウム（ＴＨＦ中０．５Ｍ；４ｍＬ、２ｍｍｏｌ）とのＴＨＦ（１．２ｍＬ）溶液を、活性Ｚｎ（１５ｇ、２２９．３９ｍｍｏｌ）を含有するカラムに４０℃、流速０．５ｍＬ／分においてポンプで通過させた。有機亜鉛試薬は、ＴＨＦ（１．２ｍＬ）中塩化リチウム（ＴＨＦ中０．５Ｍ；４ｍＬ、２ｍｍｏｌ）を４０℃、流速０．５ｍＬ／分でポンプ給送して回収した。生成した溶液をＮ２雰囲気下で回収して中間体３５（Ｉ２での滴定後０．２Ｍ）を得、これをそれ以上処理せずに使用した。
【０１７２】
上記の反応のためにＺｎを以下のように活性化した：ＴＭＳＣｌ（２Ｍ）と１−ブロモ−２−クロロエタン（０．３Ｍ）とのＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を、Ｚｎを含有するカラムに４０℃、流速１ｍＬ／分で通過させた。
【０１７３】
中間体３６の調製
【化８８】
2020509004.tif 000089
中間体３５（３．３ｍＬ；ＴＨＦ中０．１６Ｍ）を７−クロロ−６−フルオロ−５−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（ＰＣＴ国際出願国際公開第２０１００１８８６８号パンフレットに記載の手順により調製；３９ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）と、ビス（トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（０）（ＣＡＳ：５３１９９−３１−８；５．４ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）とのＴＨＦ（０．２ｍＬ）溶液に室温、窒素雰囲気下で添加した。この混合物を室温で終夜撹拌した。粗製物を水で反応停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１００／０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体３６を黄色油状物として得た（２４ｍｇ、３５％）。
【０１７４】
中間体３７の調製
【化８９】
2020509004.tif 000090
ＨＣｌ（０．１９８ｍＬ；ジオキサン中４Ｍ）を中間体３６（３５．６ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（０．２５ｍＬ）中撹拌溶液に室温で添加し、この混合物をさらに室温で３時間撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させて、中間体３７の塩酸塩（２８．５ｍｇ、９９％）を得た。
【０１７５】
中間体３８の調製
【化９０】
2020509004.tif 000091
塩化アセチル（６ｍＬ、８４．３８ｍｍｏｌ）を２−アミノ−５−ホルミルチアゾール（１０ｇ、７８ｍｍｏｌ）とジイソプロピルアミン（４５ｍＬ、２６１．１ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（１００ｍＬ）溶液に０℃で添加した。得られた混合物を室温まで昇温させ、さらに室温で１７時間撹拌した。ＮＨ４Ｃｌ（飽和水溶液）を添加し、この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮した。このようにして得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；乾式充填、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ  ０／１００〜５０／５０）により精製し、所望の画分を真空中で濃縮して、中間体３８を黄色固体（８．６ｇ、収率６５％）として得た。
【０１７６】
中間体３９の調製
【化９１】
2020509004.tif 000092
ｔｅｒｔ−ブチル３−ヨードピペリジン−１−カルボキシレート（３１３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）溶液を、活性Ｚｎを含有するカラムに４０℃、流速０．５ｍＬ／分においてポンプで通過させた。生成した溶液をＮ２雰囲気下で回収して中間体３９を得、これをそれ以上処理せずに使用した。
【０１７７】
上記の反応のためにＺｎを以下のように活性化した：ＴＭＳＣｌ（２Ｍ）と１−ブロモ−２−クロロエタン（０．３Ｍ）とのＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を、Ｚｎを含有するカラムに４０℃、流速１ｍＬ／分で通過させた。
【０１７８】
中間体４０の調製
【化９２】
2020509004.tif 000093
中間体３９（２４９．６５ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を５−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（ＣＡＳ：６９２１４−０９−１；１００ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）と、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジイソプロポキシ−１，１’−ビフェニル（ＣＡＳ：７８７６１８−２２−８；１２ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）と、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（１１ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）との混合物に窒素雰囲気下で添加した。この混合物を室温で１７時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）を添加し、この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１００／０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体４０を黄色油状物として得た（２４ｍｇ、１６％）。
【０１７９】
中間体４１の調製
【化９３】
2020509004.tif 000094
ＨＣｌ（０．３ｍＬ；ジオキサン中４Ｍ）を中間体４０（４０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１ｍＬ）中撹拌溶液に室温で添加し、この混合物をさらに室温で２４時間撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させて、中間体４１の塩酸塩（４３ｍｇ、７２％）を得た。
【０１８０】
中間体４２の調製
【化９４】
2020509004.tif 000095
７−クロロ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｂ］ピリジン（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２０１４，５７（１３），５７２８−５７３７に記載の手順により調製；５０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）と、ｔｅｒｔ−ブチル５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピリジン−１−カルボキシレート（ＣＡＳ：１２５１５３７−３４−４；１１１．５ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）と、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（ＣＡＳ：１４２２１−０１−３；３８ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）との１，４−ジオキサン（１．２９ｍＬ）およびＮａ２ＣＯ３（０．７５ｍＬ；飽和水溶液）中混合物を封管中、窒素雰囲気下でマイクロ波照射下において１５０℃で３０分間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ  ０／１００〜１００／０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体４２を淡黄色固体として得た（８２ｍｇ、収率８４％）。
【０１８１】
中間体４３の調製
【化９５】
2020509004.tif 000096
中間体４２（１２５ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍＬ）溶液に１０％パラジウム担持活性炭素（１２５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で添加した。次いで、この混合物からガス抜きし、これに水素を３回埋め戻した。この混合物を水素雰囲気下で１８時間撹拌した。反応混合物をｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドで濾過し、ＥｔＯＨですすいだ。濾液を真空中で濃縮して中間体４３（１００ｍｇ、収率７９％）を得、これをそれ以上処理せずに使用した。
【０１８２】
中間体４４の調製
【化９６】
2020509004.tif 000097
ＨＣｌ（０．８３ｍＬ；ジオキサン中４Ｍ）を中間体４３（１００ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（０．８４ｍＬ）中撹拌溶液に室温で添加し、この混合物をさらに室温で１時間撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させた。残渣をイオン交換クロマトグラフィー（ｉｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＳＣＸ２、最初にＭｅＯＨで、次にＭｅＯＨ中７Ｎ  ＮＨ３で溶離）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物４４を白色固体として得た（６５ｍｇ、収率９７％）。
【０１８３】
中間体４５の調製
【化９７】
2020509004.tif 000098
５−クロロ−７−メチル−イミダゾ［１，２−ａ］ピリミジン（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２０１２，５５（１７），７４２５−７４３６に記載の手順により調製；５４３ｍｇ、３．２４ｍｍｏｌ）と、ｔｅｒｔ−ブチル５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピリジン−１−カルボキシレート（ＣＡＳ：１２５１５３７−３４−４；１００１．８ｍｇ、３．２４ｍｍｏｌ）と、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（ＣＡＳ：１４２２１−０１−３；３７４ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）との１，４−ジオキサン（９．７ｍＬ）およびＮａＨＣＯ３（８．１ｍＬ；１．２Ｍ）中混合物を封管中、窒素雰囲気下でマイクロ波照射下において１５０℃で１５分間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体４５を無色油状物として得た（２５６ｍｇ、収率４４％）。
【０１８４】
中間体４６の調製
【化９８】
2020509004.tif 000099
中間体４５（２５６ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）と１０％パラジウム担持活性炭素（１７３ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）とのＭｅＯＨ（６．６ｍＬ）中懸濁液に水素をバブリングした。次いで、この混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物をｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドで濾過し、濾液を真空中で濃縮して、中間体４６を無色油状物として得た（２６３ｍｇ、定量的）。
【０１８５】
中間体４７の調製
【化９９】
2020509004.tif 000100
ＨＣｌ（２．７７ｍＬ；ｉＰｒＯＨ中４Ｍ）を中間体４６（２６３ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５ｍＬ）中撹拌溶液に室温で添加し、この混合物をさらに室温で１６時間撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させた。残渣をイオン交換クロマトグラフィー（ｉｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＳＣＸ２、最初にＭｅＯＨで、次にＭｅＯＨ中７Ｎ  ＮＨ３で溶離）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物４７を淡黄色油状物として得た（１３２ｍｇ、収率７３％）。
【０１８６】
中間体４８の調製
【化１００】
2020509004.tif 000101
ＰＯＢｒ３（１．５４ｇ、５．３９ｍｍｏｌ）を５−（トリフルオロメチル）−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−オール（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２０１１，５４（１１），３９３５−３９４９に記載の手順により調製；４４０ｍｇ、２．１６ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（８ｍＬ）中懸濁液に添加した。この混合物をマイクロ波照射下において１５０℃で５分間撹拌した。過剰なＰＯＢｒ３を氷水で反応停止し、混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ  ０／１００〜２５／７５）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体４８をオフホワイト色の固体として得た（３５７ｍｇ、収率６２％）。
【０１８７】
中間体４９の調製
【化１０１】
2020509004.tif 000102
中間体３５（１．８７ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中０．３Ｍ）を中間体４８（２００ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）と、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（１９．１４ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）と、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジ−ｉ−プロポキシ−１，１’−ビフェニル（別名ＲｕＰｈｏｓ）（ＣＡＳ：７８７６１８−２２−８；３４．９５ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）とのＴＨＦ（０．５ｍＬ）中混合物に添加した。得られた混合物を室温で終夜撹拌した。粗製物を水で反応停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮した。このようにして得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ  ０／１００〜４０／６０）により精製し、所望の画分を真空中で濃縮した。得られた残渣を再度フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１００／０）により精製した。所望の画分を真空中で濃縮して、中間体４９を無色油状物として得た（１１０ｍｇ、収率３９％）。
【０１８８】
中間体５０の調製
【化１０２】
2020509004.tif 000103
ＴＦＡ（０．７ｍＬ）を中間体４９（１２３ｍｇ、０．３４５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を２時間撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させて中間体５０のトリフルオロ酢酸塩（８９ｍｇ、収率９９％）を得、これをそれ以上処理せずに使用した。
【０１８９】
中間体５１の調製
【化１０３】
2020509004.tif 000104
中間体３５（１．３５ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中０．３Ｍ）を７−クロロ−５−メチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（ＣＡＳ：１６０８２−２７−２；９０．５ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）と、Ｐｄ（ＯＡｃ）２（１３．８ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）と、２−ジシクロヘキシルホスフィノ−２’，６’−ジ−ｉ−プロポキシ−１，１’−ビフェニル（別名ＲｕＰｈｏｓ）（ＣＡＳ：７８７６１８−２２−８；２５．２ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）とのＴＨＦ（０．３６ｍＬ）中混合物に添加した。得られた混合物を室温で終夜撹拌した。粗製物を水で反応停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮した。このようにして得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜６０／４０）により精製した。所望の画分を真空中で濃縮した。残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５ｕｍ）、移動相：０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が７４％と、ＣＨ３ＣＮが２６％から、０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が５８％と、ＣＨ３ＣＮが４２％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体５１を無色油状物として得た（３８ｍｇ、収率２１％）。
【０１９０】
中間体５２の調製
【化１０４】
2020509004.tif 000105
ＴＦＡ（０．１９ｍＬ）を中間体５１（３８ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（０．３５ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を２時間撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させて中間体５２のトリフルオロ酢酸塩（２５ｍｇ、収率９９％）を得、これをそれ以上処理せずに使用した。
【０１９１】
中間体５３および５４の調製
【化１０５】
2020509004.tif 000106
中間体１８（４５ｇ、１２７．３４ｍｍｏｌ）を分取ＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  Ｄｉａｃｅｌ  ＡＤ  ３０×２５０ｍｍ；移動相：ＣＯ２、（０．２％  ｉＰｒＮＨ２を伴うＭｅＯＨ）による精製によってエナンチオマーに分離して、中間体５３（２１ｇ、４７％）および中間体５４（２０ｇ、４４％）を得た。
【０１９２】
中間体５５の調製
【化１０６】
2020509004.tif 000107
ＨＣｌ−ｉＰｒＯＨ（２００ｍＬ）を中間体５３（２１ｇ、５９．４３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５００ｍＬ）中混合物に添加した。この混合物を還流しながら３０分間撹拌した。溶媒を体積が半分になるまで真空中で蒸発させた。このようにして得られた沈殿物を濾別し、７０℃で真空乾燥して、中間体５５のビス塩酸塩（１７．５ｇ、収率９０％）を得た。
【０１９３】
中間体５６の調製
【化１０７】
2020509004.tif 000108
６−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｂ］ピリジン（ＣＡＳ：９４４９３７−５３−５；７５ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）と、ｔｅｒｔ−ブチル５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピリジン−１−カルボキシレート（ＣＡＳ：１２５１５３７−３４−４；１２９．５ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）と、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（ＣＡＳ：１４２２１−０１−３；４４ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）との１，４−ジオキサン（１．５ｍＬ）およびＮａ２ＣＯ３（０．７５ｍＬ；飽和水溶液）中混合物を封管中、窒素雰囲気下でマイクロ波照射下において１５０℃で３０分間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ＤＣＭ  ０／１００〜１００／０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体５６を淡黄色固体として得た（１００ｍｇ、収率８８％）。
【０１９４】
中間体５７の調製
【化１０８】
2020509004.tif 000109
中間体５６（１００ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍＬ）溶液に１０％パラジウム担持活性炭素（１００ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で添加した。次いで、この混合物からガス抜きし、これに水素を３回埋め戻した。この混合物を水素雰囲気下で１８時間撹拌した。反応混合物をｃｅｌｉｔｅ（登録商標）のパッドで濾過し、ＥｔＯＨですすいだ。濾液を真空中で濃縮して中間体５７（５０ｍｇ、収率５０％）を得、これをそれ以上処理せずに使用した。
【０１９５】
中間体５８の調製
【化１０９】
2020509004.tif 000110
ＨＣｌ（０．４１ｍＬ；ジオキサン中４Ｍ）を中間体５７（５０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（０．４２ｍＬ）中撹拌溶液に室温で添加し、この混合物をさらに室温で１時間撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させた。残渣をイオン交換クロマトグラフィー（ｉｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＳＣＸ２、最初にＭｅＯＨで、次にＭｅＯＨ中７Ｎ  ＮＨ３で溶離）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物５８を白色固体として得た（３３ｍｇ、収率９９％）。
【０１９６】
中間体５９の調製
【化１１０】
2020509004.tif 000111
１，１’−カルボニルジイミダゾール（ＣＡＳ：５３０−６２−１、３２．２６ｇ、０．２０ｍｏｌ）のＴＨＦ（３５０ｍＬ）溶液を４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルモルホリン−２−カルボン酸（ＣＡＳ：１８９３２１−６６−２；４０ｇ、０．１７ｍｏｌ）のＴＨＦ（３５０ｍＬ）溶液に０℃で添加した。この混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、混合物を０℃まで冷却し、トリエチルアミン（３６．０６ｍＬ、０．２６ｍｏｌ）とＮ−メトキシメタンアミン塩酸塩（１：１）（１９．４０ｇ、０．２０ｍｏｌ）とのＣＨ３ＣＮ（４５２ｍＬ）中懸濁液を０℃で滴加し、この混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をＤＣＭに溶解し、水（３×５００ｍＬ）、酢酸（２０％溶液）および最後にＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）で洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させて、中間体５９（４６．４ｇ、収率９８％）を得た。
【０１９７】
中間体６０の調製
【化１１１】
2020509004.tif 000112
メチルマグネシウムブロミド（トルエン／ＴＨＦ（７５／２５）中１．４Ｍ、１８１ｍＬ）を中間体５９（４６．４ｇ、０．１７ｍｏｌ）のＴＨＦ（５００ｍＬ）溶液に０℃で窒素雰囲気下において、温度が１０℃を超えないように滴加した。添加後、反応混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、混合物をＮＨ４Ｃｌ飽和溶液で反応停止した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層をＮＨ４Ｃｌ飽和溶液で洗浄した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させて、中間体６０を橙色油状物として得た（４１ｇ、定量的）。
【０１９８】
中間体６１の調製
【化１１２】
2020509004.tif 000113
カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（ＣＡＳ：８６５−４７−４；４．８９ｇ、４３．６２ｍｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸エチル（ＣＡＳ；３８３−６３−１；５．１９ｍＬ、４３．６２ｍｍｏｌ）を中間体６０（４ｇ、１７．４５ｍｍｏｌ）のトルエン（６４ｍＬ）中混合物に０℃、窒素雰囲気下で添加した。次いで、この混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、ＮＨ４Ｃｌ飽和溶液を添加した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させて、中間体６１を黄色油状物として得（５．２ｇ、収率９２％）、これをそれ以上処理せずに使用した。
【０１９９】
中間体６２の調製
【化１１３】
2020509004.tif 000114
中間体１６（７７４．５ｍｇ、６．４２ｍｍｏｌ）を中間体６１（１．９ｇ、５．８４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）中混合物に添加した。この混合物を６０℃で７２時間撹拌した。次いで、ＮａＣｌ飽和溶液を添加した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させて、中間体６２を黄色油状物として得た（２．２ｇ、定量的）。
【０２００】
中間体６３の調製
【化１１４】
2020509004.tif 000115
中間体６２（２．２ｇ、５．８９ｍｍｏｌ）をｉＰｒＯＨ（４５ｍＬ）に溶解し、ＨＣｌ（２．９５ｍＬ；２−プロパノール中６Ｍ）で室温において処理し、この混合物をさらに１００℃で１時間撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、アンモニアの７Ｍ  ＭｅＯＨ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜４／９６）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体６３（０．５８ｇ、３６％）を得た。
【０２０１】
中間体６４の調製
【化１１５】
2020509004.tif 000116
中間体６０（２５ｇ、１０９．０４ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（５８ｍＬ）中混合物を還流しながら終夜撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させて、中間体６４（３０ｇ、収率９７％）を得た。
【０２０２】
中間体６５、６６および６７の調製
【化１１６】
2020509004.tif 000117
中間体６４（３０ｇ、１０５．５０ｍｍｏｌ）と中間体１６（１１．０９ｇ、１３１．８８ｍｍｏｌ）とのＡｃＯＨ（５２ｍＬ）溶液を還流しながら１時間撹拌した。次いで、水を添加し、この混合物をＥｔ２Ｏで抽出した。有機層をＮａ２ＣＯ３（飽和水溶液）、次にブラインで洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、溶離液：ＤＣＭ、ＤＣＭ中１％ＭｅＯＨ、２％、４％）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体６５（１９ｇ、収率５９％）を得た。
【０２０３】
中間体６５（２．８３ｇ）を分取ＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  Ｄｉａｃｅｌ  ＯＪ−Ｈ  ２０×２５０ｍｍ；移動相：ＣＯ２、（ＭｅＯＨ））による精製によってエナンチオマーに分離し、対応するエナンチオマー６６および６７を得た。部分ラセミ化が観察され、両方の画分を再度分取ＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  Ｄｉａｃｅｌ  ＯＪ−Ｈ  ２０×２５０ｍｍ；移動相：（ＣＯ２、ＭｅＯＨ）により精製して、中間体６６（１ｇ）および中間体６７（１ｇ）を得た。
【０２０４】
中間体６８の調製
【化１１７】
2020509004.tif 000118
ＨＣｌ（３０ｍＬ；Ｅｔ２Ｏ中１Ｍ）を中間体６６（１ｇ、３．２７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２００ｍＬ）中撹拌溶液に室温で添加し、この混合物をさらに室温で終夜撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させて、中間体６８のビス塩酸塩（０．８ｇ、収率８８％）を得た。
【０２０５】
中間体６９の調製
【化１１８】
2020509004.tif 000119
ＨＣｌ（３０ｍＬ；Ｅｔ２Ｏ中１Ｍ）を中間体６７（１ｇ、３．２７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２００ｍＬ）中撹拌溶液に室温で添加し、この混合物をさらに室温で終夜撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させた。このようにして得られた生成物は、部分ラセミ化し、ＨＣｌ塩には溶解性の問題があるため、遊離塩基を作製してから、分取ＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  Ｄｉａｃｅｌ  ＯＪ  ２０×２５０ｍｍ；移動相：（ＣＯ２、ＭｅＯＨ）により精製して中間体６９を得、これをＨＣｌのＥｔ２Ｏ溶液で処理し、３５℃で蒸発させて、中間体６９のビス塩酸塩（０．５ｇ）を得た。
【０２０６】
中間体７０の調製
【化１１９】
2020509004.tif 000120
ＨＣｌ（ｉＰｒＯＨ中６Ｍ；４１ｍＬ）を中間体６５（６．７ｇ、２１．９４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３２ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させて、中間体７０のビス塩酸塩（５．８ｇ、収率９５％）を得た。
【０２０７】
中間体７１の調製
【化１２０】
2020509004.tif 000121
３−ヨードメチルピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ＣＡＳ：２５３１７７−０３−６；３．５８ｇ、１１ｍｍｏｌ）と、ＬｉＣｌ（２６ｍＬ、１３ｍｍｏｌ、０．５Ｍ  ＴＨＦ溶液）との溶液を、活性Ｚｎ（１２ｇ、１８３．５ｍｍｏｌ）を含有するカラムに４０℃、流速０．５ｍＬ／分においてポンプで通過させた。生成した溶液をＮ２雰囲気下で回収して中間体７１（Ｉ２での滴定後０．３３Ｍ）を透明溶液として得、これをそれ以上処理せずに使用した。
【０２０８】
上記の反応のためにＺｎを以下のように活性化した：ＴＭＳＣｌ（２Ｍ）と１−ブロモ−２−クロロエタン（０．３Ｍ）とのＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を、Ｚｎを含有するカラムに４０℃、流速１ｍＬ／分で通過させた。
【０２０９】
中間体７２の調製
【化１２１】
2020509004.tif 000122
中間体７１（５．３６ｍＬ；ＴＨＦ中０．３３Ｍ）を７−クロロ−５−メチル−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（ＣＡＳ  １６０８２−２７−２；１１８．７ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）と、ビス（トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン）パラジウム（０）（ＣＡＳ：５３１９９−３１−８；１８．１ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ）とのＴＨＦ（０．５ｍＬ）溶液に室温、窒素雰囲気下で添加した。この混合物を室温で終夜撹拌した。粗製物を水で反応停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜７０／３０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体７２を橙色油状物として得た（４９ｍｇ、２０％）。
【０２１０】
中間体７３の調製
【化１２２】
2020509004.tif 000123
ＴＦＡ（０．１３ｍＬ）を中間体７２（４９ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（０．２ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を３時間撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させて中間体７３のトリフルオロ酢酸塩（２５ｍｇ、収率９６％）を得、これをそれ以上処理せずに使用した。
【０２１１】
中間体７４の調製
【化１２３】
2020509004.tif 000124
この化合物は、中間体７２の合成について説明したものと類似の手順により、５−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピラジン（Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．，２０１５，１７（１２），２８８６−２８８９に記載の手順により調製）を出発材料として使用して調製した。
【０２１２】
中間体７５の調製
【化１２４】
2020509004.tif 000125
ＨＣｌ（０．１９ｍＬ；ジオキサン中４Ｍ）を中間体７４（２５ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（０．６２５ｍＬ）中撹拌溶液に室温で添加し、この混合物をさらに室温で２４時間撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させて、中間体７５の塩酸塩を褐色固体として得た（２０ｍｇ、定量的）。
【０２１３】
中間体７６の調製
【化１２５】
2020509004.tif 000126
この化合物は、中間体７２の合成について説明したものと類似の手順により、７−クロロ−５−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジンを出発材料として使用して調製した。
【０２１４】
中間体７７の調製
【化１２６】
2020509004.tif 000127
この化合物は、中間体７３の合成について説明したものと類似の手順により、中間体７６を出発材料として使用して調製した。
【０２１５】
中間体７８の調製
【化１２７】
2020509004.tif 000128
この化合物は、中間体７２の合成について説明したものと類似の手順により、７−クロロ−６−フルオロ−５−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（ＰＣＴ国際出願国際公開第２０１００１８８６８号パンフレットに記載の手順により調製）を出発材料として使用して調製した。
【０２１６】
中間体７９の調製
【化１２８】
2020509004.tif 000129
この化合物は、中間体７３の合成について説明したものと類似の手順により、中間体７８を出発材料として使用して調製した。
【０２１７】
中間体８０の調製
【化１２９】
2020509004.tif 000130
３−ヨードメチルピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ＣＡＳ：４７９６２２−３６−１；４ｇ、１２．８５ｍｍｏｌ）と、ＬｉＣｌ（２５ｍＬ、１２．５ｍｍｏｌ、０．５Ｍ  ＴＨＦ溶液）とのＴＨＦ（４ｍＬ）溶液を、活性Ｚｎ（１２ｇ、１８３．５ｍｍｏｌ）を含有するカラムに４０℃、流速０．５ｍＬ／分においてポンプで通過させた。試薬は、カラムにＴＨＦ（５ｍＬ）を４０℃、流速０．５ｍＬ／分においてポンプで通過させて回収した。生成した溶液をＮ２雰囲気下で回収して中間体８０（Ｉ２での滴定後に０．３Ｍ）を得、これをそれ以上処理せずに使用した。
【０２１８】
上記の反応のためにＺｎを以下のように活性化した：ＴＭＳＣｌ（２Ｍ）と１−ブロモ−２−クロロエタン（０．３Ｍ）とのＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を、Ｚｎを含有するカラムに４０℃、流速１ｍＬ／分で通過させた。
【０２１９】
中間体（３Ｓ）−Ｉ−８０を、Ｉ−８０と同様の反応手順に従ったが、３Ｓ−ヨードメチルピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ＣＡＳ：２２４１６８−６８−７）から出発して調製した。
【０２２０】
中間体８１の調製
【化１３０】
2020509004.tif 000131
この化合物は、中間体７２の合成について説明したものと類似の手順により、７−クロロ−５−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジンおよび中間体８０を出発材料として使用して調製した。
【０２２１】
中間体８２の調製
【化１３１】
2020509004.tif 000132
この化合物は、中間体７３の合成について説明したものと類似の手順により、中間体８１を出発材料として使用して調製した。
【０２２２】
中間体８３の調製
【化１３２】
2020509004.tif 000133
この化合物は、中間体７２の合成について説明したものと類似の手順により、中間体８０および７−クロロ−６−フルオロ−５−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（ＰＣＴ国際出願国際公開第２０１００１８８６８号パンフレットに記載の手順により調製）を出発材料として使用して調製した。
【０２２３】
中間体８４の調製
【化１３３】
2020509004.tif 000134
この化合物は、中間体７３の合成について説明したものと類似の手順により、中間体８３を出発材料として使用して調製した。
【０２２４】
中間体８５の調製
【化１３４】
2020509004.tif 000135
この化合物は、中間体７２の合成について説明したものと類似の手順により、中間体８０および５−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（ＣＡＳ：６９２１４−０９−１）を出発材料として使用して調製した。
【０２２５】
中間体８６の調製
【化１３５】
2020509004.tif 000136
この化合物は、中間体７５の合成について説明したものと類似の手順により、中間体８５を出発材料として使用して調製した。
【０２２６】
中間体８７の調製
【化１３６】
2020509004.tif 000137
ジイソプロピルエチルアミン（０．５２ｍＬ、３ｍｍｏｌ）をｔｅｒｔ−ブチルＮ−（３−ピペリジル）カルバメート（２００ｍｇ、１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）中混合物に添加し、この混合物を室温で１０分間撹拌した。次いで、中間体３８（２０３．９４ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）を添加し、得られた懸濁液を２時間撹拌した。次いで、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（４２３．２９ｍｇ、２ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で６４時間撹拌した。次いで水を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜１５／８５）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体８７を淡黄色油状物として得た（３２７ｍｇ、収率９２％）。
【０２２７】
中間体８８の調製
【化１３７】
2020509004.tif 000138
ＨＣｌ（４．６１ｍＬ；ジオキサン中４Ｍ）を中間体８７（３２７ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（２５ｍＬ）中撹拌溶液に室温で添加し、この混合物をさらに室温で１８時間撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させ、このようにして得られた残渣をＥｔＯＡｃで処理して淡褐色ガム状物を得、これを有機相から分離し、オーブン中で乾燥して、中間体８８のビス塩酸塩（３５０ｍｇ、定量的）を得た。
【０２２８】
中間体８９の調製
【化１３８】
2020509004.tif 000139
Ｋ２ＣＯ３（８．８３ｇ、６３．８８ｍｍｏｌ）、次にＢｎＢｒ（６ｇ、３５．１３ｍｍｏｌ）を６−アザスピロ［２．５］オクタン−５，７−ジオン（ＰＣＴ国際出願国際公開第２０１００２６９８９号パンフレットに記載の手順により調製；４．４４ｇ、３１．９１ｍｍｏｌ）のアセトン（１１３ｍＬ）溶液に添加した。この混合物を５０℃で４時間撹拌した。次いで、混合物を室温まで冷却し、室温で終夜撹拌した。白色沈殿物を濾過し、濾液を真空中で濃縮した。得られた残渣をヘプタンから結晶化させた。結晶を濾別し、乾燥して、中間体８９（６．０６ｇ、収率８３％）を得た。
【０２２９】
中間体９０の調製
【化１３９】
2020509004.tif 000140
水素化ジイソブチルアルミニウム（ＤＣＭ中１Ｍ；９９．４４ｍＬ、９９．４４ｍｍｏｌ）を中間体８９（１１．４ｇ、４９．７２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２５２ｍＬ）中撹拌溶液に−７８℃で添加した。この混合物を−７８℃で２時間撹拌した。次いで、混合物を−７８℃においてロシェル塩（３Ｍ、２ｍＬ）で反応停止し、次いでこれを室温まで昇温させた。混合物を水で希釈した。得られた白色塩をｃｅｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、ＤＣＭで洗浄した。濾液を真空中で蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃおよび水に入れた。水性層を分離し、さらにＥｔＯＡｃ（×２）で抽出した。まとめた有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜３／９７）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体９０（９ｇ、収率７８％）を得た。
【０２３０】
中間体９１の調製
【化１４０】
2020509004.tif 000141
ＴＦＡ（１９．９５ｍＬ）、次にトリエチルシラン（１９．８９ｍＬ、１２４．５２ｍｍｏｌ）を中間体９０（９ｇ、３８．９１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（９１ｍＬ）中混合物に０℃で添加した。次いで、混合物を室温まで昇温させ、さらに１時間撹拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）で洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜２／９８）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体９１（６．６９ｇ、収率８０％）を得た。
【０２３１】
中間体９２の調製
【化１４１】
2020509004.tif 000142
ＢｕＬｉ（ヘキサン中２．５Ｍ；１８．５７ｍＬ、４６．４２ｍｍｏｌ）をジイソプロピルアミン（４．９ｇ、４８．４４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３００ｍＬ）中混合物に−７８℃で添加した。この混合物を−３０℃で１０分間撹拌し、次いで−７８℃まで冷却した。次いで、中間体９１（８．６９ｇ、４０．３６ｍｍｏｌ）をいくらかのＴＨＦに入れて添加し、この混合物をさらに３０分間撹拌した。次いで、クロロギ酸メチル（５．３９ｇ、５６．５１ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温まで昇温させた。次いで、ＮＨ４Ｃｌ（飽和水溶液）を添加し、生成物をＥｔ２Ｏで抽出した。有機層を分離し、ブラインで洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮して、中間体９２（１１ｇ、収率９９．７％）を得、これをそれ以上処理せずに使用した。
【０２３２】
中間体９３の調製
【化１４２】
2020509004.tif 000143
トリメチルオキソニウムテトラフルオロボレート（ＣＡＳ：４２０−３７−１；１７．８６ｇ、１２０．７３ｍｍｏｌ）を中間体９２（１１ｇ、４０．２４ｍｍｏｌ）と、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルピリジン（ＣＡＳ：５８５−４８−８；２５．４１ｇ、１３２．８１ｍｍｏｌ）との無水ＤＣＭ（９３８ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下で添加した。この混合物を室温で終夜撹拌した。次いで、この溶液を０℃まで冷却し、無水ＭｅＯＨ（６２６ｍＬ）、次に水素化ホウ素ナトリウム（１５．２２ｇ、４０２．４４ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を０℃で３０分間撹拌した。次いで、混合物をＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）の添加により反応停止し、生成物をＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜３／９７）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体９３（６．６２ｇ、収率６３％）を得た。
【０２３３】
中間体９４の調製
【化１４３】
2020509004.tif 000144
水素化フラスコに１０％パラジウム担持炭素（４．０７ｇ、３．８３ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で入れた。次いで、ＭｅＯＨ（８９２ｍＬ）を添加した。中間体９３（６．６２ｇ、２５．５３ｍｍｏｌ）、次いで二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（６．８９ｇ，３０．６３ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（４．４３ｍＬ、３１．９１ｍｍｏｌ）を順次添加した。反応混合物を水素下に置き、室温で撹拌した。反応混合物を濾別し、真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜２／９８）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体９４（６．０６ｇ、収率８８％）を得た。
【０２３４】
中間体９５の調製
【化１４４】
2020509004.tif 000145
１Ｍ  ＮａＯＨ（１２９ｍＬ）を中間体９４（５．８ｇ、２１．５３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５１ｍＬ）中混合物に添加し、この混合物を室温で終夜撹拌した。次いで、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣を１Ｎ  ＨＣｌ（１２９ｍＬ）で酸性化し、生成物をＣＨＣｌ３で抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。生成物をＤＩＰＥから結晶化させた。結晶を濾別し、乾燥して、中間体９５（５．２９ｇ、収率９６％）を得た。
【０２３５】
中間体９６の調製
【化１４５】
2020509004.tif 000146
この化合物は、中間体７２の合成について説明したものと類似の手順により、５−ブロモイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（ＣＡＳ：６９２１４−０９−１）を出発材料として使用して調製した。
【０２３６】
中間体９７の調製
【化１４６】
2020509004.tif 000147
この化合物は、中間体７５の合成について説明したものと類似の手順により、中間体９６を出発材料として使用して調製した。
【０２３７】
中間体９８の調製
【化１４７】
2020509004.tif 000148
この化合物は、中間体５１の合成について説明したものと類似の手順により、中間体８０および２−［（６−ブロモ−３ａ，７ａ−ジヒドロピロロ［３，２−ｂ］ピリジン−１−イル）メトキシ］エチル−トリメチル−シラン（ＰＣＴ国際出願国際公開第２０１２０３７２９８号パンフレットに記載の手順により調製）を出発材料として使用して調製した。
【０２３８】
中間体９９の調製
【化１４８】
2020509004.tif 000149
この化合物は、中間体４７の合成について説明したものと類似の手順により、中間体９８を出発材料として使用して調製した。
【０２３９】
中間体１００の調製
【化１４９】
2020509004.tif 000150
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１１６．９９ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を中間体９９（１２２ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）、中間体３８（７５．１５ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）の、ＭｅＯＨ（０．６２ｍＬ）とＤＣＭ（０．６２ｍＬ）との溶液に添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、混合物を真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、アンモニアの７Ｍ  ＭｅＯＨ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜３／９７）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体１００を黄色油状物として得た（８０ｍｇ、収率４５％）。
【０２４０】
中間体１０１の調製
【化１５０】
2020509004.tif 000151
この化合物は、中間体５１の合成について説明したものと類似の手順により、中間体８０および６−ブロモ−１−メチル−３ａ，７ａ−ジヒドロピロロ［３，２−ｂ］ピリジン（ＰＣＴ国際出願国際公開第２０１５１２８３３３号パンプレットに記載の手順により調製）を出発材料として使用して調製した。
【０２４１】
中間体１０２の調製
【化１５１】
2020509004.tif 000152
ＴＦＡ（０．９ｍＬ）を中間体１０１（１４９ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（０．９ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を１６時間撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。次いで、ＥｔＯＡｃを添加し、この混合物をＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）で洗浄した。生成物を水性層中に単離し、これをイオン交換クロマトグラフィー（ｉｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＳＣＸ２、最初にＭｅＯＨで、次にＭｅＯＨ中７Ｎ  ＮＨ３で溶離）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体１０２（３６ｍｇ、収率３５％）を得た。
【０２４２】
中間体１０３の調製
【化１５２】
2020509004.tif 000153
ＮａＨ（２１．９ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ、鉱油中６０％分散体）を中間体４３（１５０ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で添加した。この混合物を０℃で３０分間撹拌した。次いで、混合物を０℃まで冷却し、ヨウ化メチル（０．０３４ｍＬ、０．５５ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を０℃で３０分間および室温で１時間撹拌した。混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、ＮａＣｌ（飽和水溶液）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体１０３（５４ｍｇ、収率３４％）を得た。
【０２４３】
中間体１０４の調製
【化１５３】
2020509004.tif 000154
この化合物は、中間体３４の合成について説明したものと類似の手順により、中間体１０３を出発材料として使用して調製した。
【０２４４】
中間体１０５の調製
【化１５４】
2020509004.tif 000155
この化合物は、中間体５６の合成について説明したものと類似の手順により、６−クロロ−１−メチル−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，５８（２３），９３８２−９３９４，２０１５に記載の手順により調製）を出発材料として使用して調製した。
【０２４５】
中間体１０６の調製
【化１５５】
2020509004.tif 000156
中間体１０５（２８０ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２０ｍＬ）溶液をＨ−ｃｕｂｅ（登録商標）反応器（１．３ｍＬ／分、７０ｍｍ  Ｐｄ／Ｃ  １０％カートリッジ、フルＨ２モード、５０℃、１サイクル）中で水素化した。溶媒を真空中で蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜５０／５０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体１０６を無色油状物として得た（１１３ｍｇ、収率４０％）。
【０２４６】
中間体１０７の調製
【化１５６】
2020509004.tif 000157
ＴＦＡ（０．２５ｍＬ）を中間体１０６（１０４ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を４時間撹拌した。溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をイオン交換クロマトグラフィー（ｉｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＳＣＸ２、最初にＭｅＯＨで、次にＭｅＯＨ中７Ｎ  ＮＨ３で溶離）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体１０７を淡黄色油状物として得た（６８．７ｍｇ、収率９７％）。
【０２４７】
中間体１０８の調製
【化１５７】
2020509004.tif 000158
この化合物は、中間体５６の合成について説明したものと類似の手順により、５−ブロモ−６−メチル−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン（ＰＣＴ国際出願国際公開第２００７１３５３９８号パンフレットに記載された手順により調製）を出発材料として使用して調製した。
【０２４８】
中間体１０９の調製
【化１５８】
2020509004.tif 000159
この化合物は、中間体５７の合成について説明したものと類似の手順により、中間体１０８を出発材料として使用して調製した。
【０２４９】
中間体１１０の調製
【化１５９】
2020509004.tif 000160
この化合物は、中間体５０の合成について説明したものと類似の手順により、中間体１０９を出発材料として使用して調製した。
【０２５０】
中間体１１１の調製
【化１６０】
2020509004.tif 000161
この化合物は、中間体１０３の合成について説明したものと類似の手順により、中間体５７を出発材料として使用して調製した。
【０２５１】
中間体１１２の調製
【化１６１】
2020509004.tif 000162
この化合物は、中間体３４の合成について説明したものと類似の手順により、中間体１１１を出発材料として使用して調製した。
【０２５２】
中間体１１３の調製
【化１６２】
2020509004.tif 000163
オートクレーブに３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ピリジン（ＣＡＳ：４３６７９９−３３−６；２４ｇ、１０６．２ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（１．２５ｇ、５．５７ｍｍｏｌ）、１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパン（ＣＡＳ：６７３７−４２−４；１．１９ｇ、２．７９ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（１５．３８ｍＬ、１１１ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ（９６ｍＬ）を入れた。次いで、これにＣＯを３回流し、次いで３ＭＰａ（３０ｂａｒ）ＣＯ（３．１３ｇ、１１１．８ｍｍｏｌ）で加圧した。反応混合物を１２０℃に１６時間加熱した。冷却後、混合物をフラスコに移し、真空中で濃縮した。残渣をＤＣＭで希釈し、水で洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜２／９８）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体１１３（１８．８１ｇ、収率８６％）を得た。
【０２５３】
中間体１１４の調製
【化１６３】
2020509004.tif 000164
水素化フラスコにＡｃＯＨ（５００ｍＬ）を入れ、次いで１０％パラジウム担持活性炭素（１９．５２ｇ、１８．３４ｍｍｏｌ）を添加した。中間体１１３（１８．８１ｇ、９１．６９ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を５０℃で終夜水素化した。混合物をｄｉｃａｌｉｔｅ（登録商標）で濾過し、濾液を蒸発させて中間体１１４（１９．３ｇ、収率９９．７％）を得、これをそれ以上精製せずに次の工程に使用した。
【０２５４】
中間体１１５の調製
【化１６４】
2020509004.tif 000165
中間体１１４（１９．３ｇ、９１．３９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２４０ｍＬ）溶液にＤＩＰＥＡ（２３．６２ｇ、１８２．７８ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１．１２ｇ、９．１４ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（１９．９５ｇ、９１．３９ｍｍｏｌ）をこの溶液に少量ずつ添加し、反応生成物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を水およびブラインで洗浄し、有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させた。生成物をフラッシュクロマトグラフ（シリカゲル、溶離液：ＤＣＭ、ＤＣＭ中１％  ＭｅＯＨ）により精製した。所望の画分を蒸発させて、中間体１１５（２０．１ｇ、７１％）を得た。
【０２５５】
中間体１１６の調製
【化１６５】
2020509004.tif 000166
ＬＤＡ（シクロヘキサン／エチルベンゼン／ＴＨＦ中２Ｍ；３２．０４ｍＬ、６４．０９ｍｍｏｌ）を中間体１１５（１９ｇ、６１．０３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２４４ｍＬ）中撹拌溶液に−７８℃〜−６０℃で窒素雰囲気下において滴加した。この混合物を−６０℃で４０分間撹拌した。次いで、最小量のＴＨＦに溶解した７−クロロ−５−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（ＣＡＳ：２４４１５−６６−５；１０．２９ｇ、６１．０３ｍｍｏｌ）を滴加し、この混合物を−６０℃〜−７０℃で１時間撹拌した。混合物をＮＨ４Ｃｌ（飽和水溶液）で反応停止し、真空中で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃと水とに分配した。層を分離し、水性層をＥｔＯＡｃ（×２）で抽出した。まとめた有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮して、中間体１１６（２７ｇ、収率９９．７％）を得、次の反応工程にそのまま使用した。
【０２５６】
中間体１１７の調製
【化１６６】
2020509004.tif 000167
ＬｉＯＨ（２１ｇ、８７７．０４ｍｍｏｌ）を中間体１１６（２７ｇ、６０．８９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２７１ｍＬ）とＨ２Ｏ（２７１ｍＬ）との溶液に添加した。この混合物を４０℃で終夜撹拌した。混合物を真空中で濃縮し、得られた水性残渣をＥｔＯＡｃ（×３）で抽出した。まとめた有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。生成物をフラッシュクロマトグラフ（シリカゲル、溶離液：ＤＣＭ、ＤＣＭ中２％ＭｅＯＨ）により精製した。所望の画分を蒸発させ、Ｅｔ２Ｏから結晶化させた。結晶を濾別し、乾燥して、中間体１１７（１４．９１ｇ、収率６３％）を得た。
【０２５７】
中間体１１８の調製
【化１６７】
2020509004.tif 000168
中間体１１７（１４．９１ｇ、３８．６９ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（４０８ｍＬ）に溶解し、ＨＣｌ（４０８ｍＬ；２−プロパノール中６Ｎ）で室温において処理し、この混合物をさらに室温で終夜撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させ、固体をＥｔ２Ｏから結晶化させた。結晶を濾別し、乾燥して、中間体１１８のビス塩酸塩（１５．０１ｇ、定量的）を得た。
【０２５８】
中間体１１９〜１３０の調製
次の各化合物は、中間体７の調製について説明したもののような脱保護手順に従い、対応するＢｏｃで保護したアミン中間体から出発し、塩酸またはトリフルオロ酢酸を使用し、当業者に公知の標準的な反応条件下で調製した。
【０２５９】
【表１】
2020509004.tif 000169
【０２６０】
【表２】
2020509004.tif 000170
【０２６１】
【表３】
2020509004.tif 000171
【０２６２】
中間体１３１、１３２、１３６、１３７および１３９の調製
次の各化合物は、中間体１０３の調製について説明したもののような脱保護手順に従い、対応するＮＨ−アザインドール中間体から出発し、ヨウ化メチルを使用し、当業者に公知の標準的な反応条件下で調製した。
【０２６３】
【表４】
2020509004.tif 000172
【０２６４】
中間体１３３、１３４、１４０および１４３の調製
次の各化合物は、中間体１０６の調製について説明したもののような脱保護手順に従い、対応するアルケンから出発し、当業者に公知の標準的な水素化反応条件下で調製した。
【０２６５】
【表５】
2020509004.tif 000173
【０２６６】
中間体１４４〜１４７の調製
次の各化合物は、中間体４２の調製について説明したもののような脱保護手順に従い、対応するハロ−アザインドール（ハロ：ＣｌまたはＢｒ）中間体およびＣＡＳ  １２５１５３７−３４−４から出発し、当業者に公知の標準的なパラジウム触媒クロスカップリング反応条件下で調製した。
【０２６７】
【表６】
2020509004.tif 000174
【０２６８】
中間体１４８の調製
【化１６８】
2020509004.tif 000175
中間体１４９（４３０ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ）を酢酸（７．１６ｍＬ）に溶解し、この混合物を１１０℃に４時間加熱した。揮発分を真空中で蒸発させ、このようにして得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＤＣＭ中ＭｅＯＨ、０／１００〜２／９８）により精製した。所望の画分をバシオ（ｖａｃｉｏ）中で蒸発させて、中間体１４８（３３０ｍｇ、９３％）を橙色固体として得た。
【０２６９】
中間体１４９の調製
【化１６９】
2020509004.tif 000176
中間体１５０（６００ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）とｔｒａｎｓ−２−エトキシビニルボロン酸ピナコールエステル（４９３．７ｍｇ、２．４９ｍｍｏｌ）とのＤＭＦ（５ｍＬ）中混合物に室温、Ｎ２雰囲気下で水酸化リチウム（１３７．７ｍｇ、５．７５ｍｍｏｌ）と、［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）のジクロロメタン（ＣＡＳ：９５４６４−０５−４；３１．６６ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）錯体とを添加した。この混合物を７０℃に１８時間加熱した。室温まで冷却してから、水およびＥｔＯＡｃを添加した。有機層を分離し、揮発分を真空中で蒸発させた。このようにして得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ヘプタン中ＥｔＯＡｃ、０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分をバシオ（ｖａｃｉｏ）中で蒸発させて、中間体１４９（４３０ｍｇ、８７％）を油状物として得た。
【０２７０】
中間体１５０の調製
【化１７０】
2020509004.tif 000177
Ｉ２（５７０ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）およびＡｇ２ＳＯ４（７３３ｍｇ、２．３５ｍｍｏｌ）を５−ブロモ−６−メチルピリジン−３−アミン（４００ｍｇ、２．１３ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中混合物に室温で添加した。この混合物を室温で１８時間撹拌した。次いで、固体を濾別し、濾液を真空中で蒸発させた。このようにして得られた残渣をＤＣＭおよびＮａＯＨ（１Ｎ水溶液）に溶かした。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、揮発分を真空中で蒸発させて、中間体１５０（６００ｍｇ、９０％）を固体として得た。
【０２７１】
中間体１３８、１４１および１４２の調製
次の各化合物は、中間体７２の調製について説明したもののような脱保護手順に従い、対応するハロ−複素環（ハロ：ＣｌまたはＢｒ）および有機亜鉛中間体（３Ｓ）−８０から出発し、当業者に公知の標準的なパラジウム触媒クロスカップリング反応条件下で調製した。
【０２７２】
【表７】
2020509004.tif 000178
【０２７３】
中間体１３５の調製
【化１７１】
2020509004.tif 000179
３−ヨードメチルピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ＣＡＳ：２５３１７７−０３−６；０．４ｇ、１．２３ｍｍｏｌ）のＬｉＣｌ（１．６ｍＬ、ＴＨＦ中０．５Ｍ）溶液を、活性亜鉛を含有するカラムに４０℃、０．５ｍＬ／分においてポンプで通過させた。生成した溶液をＮ２雰囲気で回収して、有機亜鉛中間体７１（４ｍＬのＴＨＦ／ＬｉＣｌ中）を得た。次いで、ｔｅｒｔ−ブチル６−ブロモ−１Ｈ−ピロロ［３，２−ｂ］ピリジン−１−カルボキシレート（ＣＡＳ：１８２０７１１−８２−７；２４３．６ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）のＬｉＣｌ（４ｍＬ、ＴＨＦ中０．５Ｍ）溶液および有機亜鉛中間体７１を含有する溶液を、ｓｉｌｉａｃａｔ  ＤＰＰ−Ｐｄ（１ｇ、０．２〜０．３ｍｍｏｌ／ｇを充填）を含有するカラムに７０℃、０．２ｍＬ／分（各々）においてポンプで通過させた。カラムを２０ｍＬのＴＨＦで洗浄した。生成物をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮＨ４ＣｌとＮＨ４ＯＨとの飽和混合液（４：１）で洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濾液を真空中で濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＥｔＯＡｃ／ヘプタン：０／１００〜８０／２０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、中間体１３５（２０５ｍｇ、６０％）を淡黄色油状物として得た。
【０２７４】
中間体１５３の調製
【化１７２】
2020509004.tif 000180
１，１−ジメトキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−メタンアミン（［４６３７−２４−５］、１０ｍＬ）を３−アセチルヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピン−１−カルボン酸１，１−ジメチルエチルエステル（［１７８２６２９−２９−１］、４．２１ｇ）に添加し、この混合物を終夜還流した。溶媒を蒸発させて中間体１５３（５ｇ）を得、これをそれ以上精製せずに使用した。
【０２７５】
中間体１５１の調製
【化１７３】
2020509004.tif 000181
中間体１５３（５ｇ、１８．８７ｍｍｏｌ）と、１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−アミン（１．７７ｇ、２１．０９ｍｍｏｌ）とのＡｃＯＨ（１０ｍＬ）溶液を還流しながら１時間撹拌した。水を添加し、生成物をエーテルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。生成物をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル；溶離液：ＤＣＭ、１％、ＤＣＭ中２％ＭｅＯＨ）により精製した。所望の画分を蒸発させて、中間体１５１（１．６９ｇ、３２％）を得た。
【０２７６】
Ｂ．最終化合物の調製
生成物１の調製
【化１７４】
2020509004.tif 000182
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を中間体７（６１ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）とジイソプロピルエチルアミン（０．１１ｍＬ、０．６４ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（７．８１ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で少しずつ添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物１を白色固体として得た（８１ｍｇ、収率９６％）。
【０２７７】
生成物２の調製
【化１７５】
2020509004.tif 000183
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、４４ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を中間体８（５０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）とジイソプロピルエチルアミン（０．１０ｍＬ、０．５８ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．５１ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で少しずつ添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をＥｔ２Ｏで洗浄し、真空オーブン中で乾燥して、生成物２を白色固体として得た（５２ｍｇ、収率７０％）。
【０２７８】
生成物３の調製
【化１７６】
2020509004.tif 000184
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、４１．５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を中間体１１（５０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）とジイソプロピルエチルアミン（０．０９５ｍＬ、０．５５ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．４８ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で少しずつ添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をＥｔ２Ｏで洗浄し、真空オーブン中で乾燥して、生成物３を白色固体として得た（４２ｍｇ、収率５８％）。
【０２７９】
生成物４の調製
【化１７７】
2020509004.tif 000185
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を中間体１２（６５ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）とジイソプロピルエチルアミン（０．１１ｍＬ、０．６４ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で少しずつ添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物４を白色固体として得た（７３ｍｇ、収率８６％）。
【０２８０】
生成物５の調製
【化１７８】
2020509004.tif 000186
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、５２．５ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を中間体１４（５０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）とジイソプロピルエチルアミン（０．１０ｍＬ、０．５９ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で少しずつ添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をＥｔ２Ｏでトリチュレートし、濾過し、真空オーブン中で乾燥して、生成物５を白色固体として得た（５７ｍｇ、収率６３％）。
【０２８１】
生成物６の調製
【化１７９】
2020509004.tif 000187
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、５２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を中間体２０（５０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）とジイソプロピルエチルアミン（０．１０ｍＬ、０．５９ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で少しずつ添加し、この混合物をさらに０℃で２時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５ｕｍ）、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物６を白色固体として得た（１２ｍｇ、収率１３％）。
【０２８２】
生成物７の調製
【化１８０】
2020509004.tif 000188
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を中間体３０（７１ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）とジイソプロピルエチルアミン（０．１１ｍＬ、０．６４ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で少しずつ添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が４７％と、ＭｅＯＨが５３％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が２４％と、ＭｅＯＨが７６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物７を黄色固体として得た（１２ｍｇ、収率１２％）。
【０２８３】
生成物８の調製
【化１８１】
2020509004.tif 000189
ジイソプロピルエチルアミン（０．２０ｍＬ、１．１４ｍｍｏｌ）を中間体３４（５８ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）と２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、６９ｍｇ、０．２８５ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．５ｍＬ）溶液に添加し、この混合物をさらに室温で２時間撹拌した。次いで、飽和ＮＨ４Ｃｌで反応を停止し、ＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が８１％と、ＭｅＯＨが１９％から、０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が６４％と、ＭｅＯＨが３６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物８を得た（１３．５ｍｇ、収率１０％）。
【０２８４】
生成物９の調製
【化１８２】
2020509004.tif 000190
トリエチルアミン（１．０１ｍＬ、７．２６ｍｍｏｌ）を中間体１２（０．５０ｇ、１．８２ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中撹拌懸濁液に封管中で添加した。この混合物を室温で２分間撹拌した。次いで、中間体３８（０．３８ｇ、２．２４ｍｍｏｌ）、次にトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．５３ｇ、２．５３ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で２２時間撹拌した。次いで、追加のトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．２３ｇ、１．０９ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で９６時間撹拌した。次いで、混合物をＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）で希釈し、ＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、アンモニアの７Ｍ  ＭｅＯＨ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物９を黄色固体として得た（２２７．６ｍｇ、収率３５％）。
【０２８５】
生成物１０の調製
【化１８３】
2020509004.tif 000191
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（４７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を中間体８（４９ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）と、中間体３８（４０ｍｇ、０．２３５ｍｍｏｌ）と、トリエチルアミン（０．０８ｍＬ、０．５８ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下で添加した。この混合物を室温で２日間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が４７％と、ＣＨ３ＣＮが５３％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が３０％と、ＣＨ３ＣＮが７０％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物１０を黄色油状物として得た（２６ｍｇ、収率４１％）。
【０２８６】
生成物１１の調製
【化１８４】
2020509004.tif 000192
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（４０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を中間体１１（５２ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）と、中間体３８（３７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）と、トリエチルアミン（０．０７ｍＬ、０．５２ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下で添加した。この混合物を室温で２日間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜８０／２０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物１１を白色固体として得た（３１ｍｇ、収率４７％）。
【０２８７】
生成物１２の調製
【化１８５】
2020509004.tif 000193
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（４６ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を中間体４１（４３ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ、塩酸塩）と、中間体３８（３７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）と、トリエチルアミン（０．０７５ｍＬ、０．５４ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（１．１ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下で添加した。この混合物を室温で４日間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１５０ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物１２を淡橙色固体として得た（６ｍｇ、収率９％）。
【０２８８】
生成物１３の調製
【化１８６】
2020509004.tif 000194
中間体２０（５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）をＮ−［５−（クロロメチル）チアゾール−２−イル］アセトアミド（国際公開第２０１４／１５９２３４Ａ１号パンフレットに記載の手順により調製；３５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、塩酸塩）と、トリエチルアミン（０．１１ｍＬ、０．７７ｍｍｏｌ）とのＣＨ３ＣＮ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、混合物を濾過し、濾液をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ２Ｏで洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させて、生成物１３を橙色固体として得た（４０ｍｇ、収率６４％）。
【０２８９】
生成物１４の調製
【化１８７】
2020509004.tif 000195
中間体１４（５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）をＮ−［５−（クロロメチル）チアゾール−２−イル］アセトアミド（国際公開第２０１４／１５９２３４Ａ１号パンフレットに記載の手順により調製；３５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、塩酸塩）と、トリエチルアミン（０．０６ｍＬ、０．４６ｍｍｏｌ）とのＣＨ３ＣＮ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、混合物を濾過し、濾液をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ２Ｏで洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、アンモニアの７Ｍ  ＭｅＯＨ溶液／ＥｔＯＡｃ  ０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物１４を白色固体として得た（１５ｍｇ、収率２４％）。
【０２９０】
生成物１５の調製
【化１８８】
2020509004.tif 000196
中間体３８（６０．５ｍｇ、０．３５５ｍｍｏｌ）およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（２０５ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）を中間体４４（６５ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５ｍＬ）溶液に添加した。この混合物を室温で１８時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が８０％と、ＣＨ３ＣＮが２０％から、０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が０％と、ＣＨ３ＣＮが１００％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。生成物をさらにフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。生成物を５０℃で７２時間真空乾燥して、生成物１５を薄黄色固体として得た（３５ｍｇ、収率３０．５％）。
【０２９１】
生成物１６の調製
【化１８９】
2020509004.tif 000197
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（４６ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を中間体３０（３２ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）と、中間体３８（３０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）と、トリエチルアミン（０．０６ｍＬ、０．４３ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下で添加した。この混合物を室温で１７時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６０％と、ＭｅＯＨが４０％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が３７％と、ＭｅＯＨが６３％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物１６を黄色油状物として得た（８ｍｇ、収率１６％）。
【０２９２】
生成物１７の調製
【化１９０】
2020509004.tif 000198
中間体４７（４５ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）、中間体３８（４６ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（０．８ｍＬ）中懸濁液を室温で２０分間撹拌した。次いで、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（３９ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）およびＭｅＯＨ（０．０２ｍＬ）を添加し、この混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、ＭｅＯＨを添加し、この混合物を５分間撹拌した。混合物を真空中で蒸発させ、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜９０／１０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。残渣をイオン交換クロマトグラフィー（ｉｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＳＣＸ２、最初にＭｅＯＨで、次にＭｅＯＨ中７Ｎ  ＮＨ３で溶離）により再度精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物１７を白色固体として得た（２１ｍｇ、収率２７％）。
【０２９３】
生成物１８の調製
【化１９１】
2020509004.tif 000199
中間体３８（１１９ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）を中間体３４（７１ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２ｍＬ）溶液に添加し、この混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、混合物を０℃まで冷却し、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（２９６ｍｇ、１．４０ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温まで昇温させ、終夜撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）でｐＨ＝７〜８までで反応を停止し、ＤＣＭ（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１００／０および次にＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮し、残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が８８％と、ＣＨ３ＣＮが１２％から、０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が７２％と、ＣＨ３ＣＮが２９％への勾配）により再度精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物１８を白色固体として得た（５ｍｇ、収率４％）。
【０２９４】
生成物１９の調製
【化１９２】
2020509004.tif 000200
中間体３８（２２ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を中間体３７（１４．４５ｍｇ、０．０６５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（０．５ｍＬ）溶液に添加し、この混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、混合物を０℃まで冷却し、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（２８ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温まで昇温させ、３時間撹拌した。次いで、追加のトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（２８ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を添加し、反応生成物をさらに２時間撹拌した。ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）でｐＨ＝７〜８までで反応を停止し、ＤＣＭ（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１００／０および次にＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物１９を黄色固体として得た（９．６ｍｇ、収率３９％）。
【０２９５】
生成物２０の調製
【化１９３】
2020509004.tif 000201
中間体３８（１１６ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）を中間体５０（８８ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２ｍＬ）溶液に添加し、この混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、混合物を０℃まで冷却し、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（２９０ｍｇ、１．３７ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温まで昇温させ、終夜撹拌した。ＮＨ３／Ｈ２Ｏで反応を停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１００／０および次にＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮し、残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により再度精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物２０を白色固体として得た（４９．７ｍｇ、収率３５％）。
【０２９６】
生成物２１の調製
【化１９４】
2020509004.tif 000202
中間体３８（４３ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を中間体５２（２５ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（０．７ｍＬ）溶液に添加し、この混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１０６ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物をさらに４時間撹拌した。次いで、追加のトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（５３ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を添加し、反応生成物をさらに終夜撹拌した。ＮＨ３／Ｈ２Ｏで反応を停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１００／０および次にＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮し、残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により再度精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物２１を白色固体として得た（２ｍｇ、収率４．５％）。
【０２９７】
生成物２２の調製
【化１９５】
2020509004.tif 000203
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、５２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を中間体５５（５０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）とジイソプロピルエチルアミン（０．１４ｍＬ、０．７９ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で少しずつ添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。得られた固体をＥｔ２Ｏでトリチュレートし、濾過して、生成物２２を白色固体として得た（２７ｍｇ、収率３０％）。
【０２９８】
生成物２３の調製
【化１９６】
2020509004.tif 000204
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、５２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を中間体１５（５０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）とジイソプロピルエチルアミン（０．１０ｍＬ、０．５９ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で少しずつ添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。得られた固体をＣＨ３ＣＮでトリチュレートし、濾過して、生成物２３を白色固体として得た（２２ｍｇ、収率２４％）。
【０２９９】
生成物２４の調製
【化１９７】
2020509004.tif 000205
中間体１５（５０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）をＮ−［５−（クロロメチル）チアゾール−２−イル］アセトアミド（国際公開第２０１４／１５９２３４Ａ１号パンフレットに記載の手順により調製；４５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、塩酸塩）と、トリエチルアミン（０．０８ｍＬ、０．５９ｍｍｏｌ）とのＣＨ３ＣＮ（０．６ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を室温で２時間、次いで４０℃で２時間撹拌した。次いで、混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ２Ｏで洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。得られた固体をＭｅＯＨでトリチュレートして、生成物２４をクリーム色固体として得た（３８ｍｇ、収率４７％）。
【０３００】
生成物２５の調製
【化１９８】
2020509004.tif 000206
中間体５５（５０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）をＮ−［５−（クロロメチル）チアゾール−２−イル］アセトアミド（国際公開第２０１４／１５９２３４Ａ１号パンフレットに記載の手順により調製；４５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、塩酸塩）と、トリエチルアミン（０．１１ｍＬ、０．７９ｍｍｏｌ）とのＣＨ３ＣＮ（０．６ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ２Ｏで洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、アンモニアの７Ｍ  ＭｅＯＨ溶液／ＥｔＯＡｃ  ０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物２５を白色固体として得た（３５ｍｇ、収率４４％）。
【０３０１】
生成物２６の調製
【化１９９】
2020509004.tif 000207
中間体３８（３１ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１０４ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を中間体５８（３３ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２．２ｍＬ）溶液に添加した。この混合物を室温で１８時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が８０％と、ＣＨ３ＣＮが２０％から、０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が０％と、ＣＨ３ＣＮが１００％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。生成物をさらにフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。生成物を５０℃で７２時間真空乾燥して、生成物２６を白色固体として得た（５３ｍｇ、収率９１％）。
【０３０２】
生成物２７の調製
【化２００】
2020509004.tif 000208
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を中間体６３（７４ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）とジイソプロピルエチルアミン（０．１２ｍＬ、０．７０ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜８０／２０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物２７を白色固体として得た（５５ｍｇ、収率５５％）。
【０３０３】
生成物２８、２９および３０の調製
【化２０１】
2020509004.tif 000209
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、５２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を２−（５−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル）モルホリン（国際公開第２０１５／１６４５０８号パンフレットに記載の手順により調製；５０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）と、ジイソプロピルエチルアミン（０．１３ｍＬ、０．７８ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。得られた固体をＥｔ２Ｏでトリチュレートし、濾過して、生成物２８を得た（６３ｍｇ、収率７６％）。
【０３０４】
次いで、生成物２８（４２．５ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  Ｄｉａｃｅｌ  ＯＪ  ２０×２５０ｍｍ、移動相：ＣＯ２、ＥｔＯＨ＋０．４  ｉＰｒＮＨ２）によってエナンチオマーに分離し、生成物２９（１０ｍｇ）および生成物３０（１０ｍｇ）を得た。
【０３０５】
生成物３１の調製
【化２０２】
2020509004.tif 000210
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、４８ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を中間体６８（５６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）とジイソプロピルエチルアミン（０．１２ｍＬ、０．７０ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で少しずつ添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物３１を白色固体として得た（２３ｍｇ、収率２８％）。
【０３０６】
生成物３２の調製
【化２０３】
2020509004.tif 000211
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、４８ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を中間体６９（５５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）と、ジイソプロピルエチルアミン（０．１２ｍＬ、０．７０ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。生成物をＤＣＭ／ヘプタン（１：９）でトリチュレートし、固体をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜８０／２０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物３２を白色固体として得た（６４ｍｇ、収率７８％）。
【０３０７】
生成物３３の調製
【化２０４】
2020509004.tif 000212
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、５２ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を２−［５−（ジフルオロメチル）−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル］モルホリン（５０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、塩酸塩、中間体２０の合成について説明したものと類似の合成経路により、出発材料として４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）モルホリン−２−カルボン酸［ＣＡＳ；１８９３２１−６６−２］から出発して調製）と、ジイソプロピルエチルアミン（０．１０ｍＬ、０．５９ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。得られた固体をＥｔ２Ｏでトリチュレートし、濾過して、生成物３３を得た（８１ｍｇ、収率９０％）。
【０３０８】
生成物３４の調製
【化２０５】
2020509004.tif 000213
２−［５−（ジフルオロメチル）−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル］モルホリン（５０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ、塩酸塩、中間体２０の合成について説明したものと類似の合成経路により、出発材料として４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）モルホリン−２−カルボン酸［ＣＡＳ；１８９３２１−６６−２］から出発して調製）をＮ−［５−（クロロメチル）チアゾール−２−イル］アセトアミド（国際公開第２０１４／１５９２３４Ａ１号パンフレットに記載の手順により調製；３９ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ、塩酸塩）と、トリエチルアミン（０．０９５ｍＬ、０．６９ｍｍｏｌ）とのＣＨ３ＣＮ（０．６ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を室温で６時間撹拌した。次いで、追加のＮ−［５−（クロロメチル）チアゾール−２−イル］アセトアミド（１１．８ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ、塩酸塩）を添加し、この混合物を４０℃で２時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ２Ｏで洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。得られた固体をＭｅＯＨでトリチュレートし、濾過して、生成物３４をクリーム色固体として得た（３７ｍｇ、収率５３％）。
【０３０９】
生成物３５の調製
【化２０６】
2020509004.tif 000214
２−（５−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル）モルホリン（国際公開第２０１５／１６４５０８号パンフレットに記載の手順により調製；４０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）をＮ−［５−（クロロメチル）チアゾール−２−イル］アセトアミド（国際公開第２０１４／１５９２３４Ａ１号パンフレットに記載の手順により調製；３１ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ、塩酸塩）と、トリエチルアミン（０．０７６ｍＬ、０．５５ｍｍｏｌ）とのＣＨ３ＣＮ（０．４５ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を室温で６時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ２Ｏで洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。得られた固体をＭｅＯＨでトリチュレートし、濾過して、生成物３５をクリーム色固体として得た（２０ｍｇ、収率３９％）。
【０３１０】
生成物３６の調製
【化２０７】
2020509004.tif 000215
シアノ水素化ホウ素ナトリウム（８３ｍｇ、１．３２ｍｍｏｌ）を中間体７０（９０ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）と、中間体３８（９７ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）と、トリエチルアミン（０．２４ｍＬ、１．７５ｍｍｏｌ）とのＥｔＯＨ（１．５ｍＬ）中撹拌懸濁液に添加した。この混合物を８０℃で１６時間撹拌した。混合物をＨ２Ｏで反応停止し、真空中で濃縮し、ＣＨ３ＣＮで希釈した。このようにして得られた懸濁液を超音波処理し、濾過して、生成物３６を得た（２９ｍｇ、収率１８％）。
【０３１１】
生成物３７の調製
【化２０８】
2020509004.tif 000216
トリエチルアミン（０．１２ｍＬ、０．８７ｍｍｏｌ）を中間体６３（１１９ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）と、Ｎ−［５−（クロロメチル）チアゾール−２−イル］アセトアミド（国際公開第２０１４／１５９２３４Ａ１号パンフレットに記載の手順により調製；８３ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）とのＣＨ３ＣＮ（２ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を室温で４時間撹拌した。次いで、反応粗製物を濾過し、得られた固体をＭｅＯＨでトリチュレートし、濾過して、生成物３７を白色固体として得た（５０ｍｇ、収率２７％）。
【０３１２】
生成物３８の調製
【化２０９】
2020509004.tif 000217
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、４０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を２−［７−（ジフルオロメチル）−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル］モルホリン（５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、中間体１９の合成について説明したものと類似の合成経路により、出発材料として４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）モルホリン−２−カルボン酸［ＣＡＳ；１８９３２１−６６−２］から出発して調製）と、ジイソプロピルエチルアミン（０．０７９ｍＬ、０．４６ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．４ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。得られた固体をＥｔ２Ｏでトリチュレートし、濾過して、生成物３８を白色固体として得た（７０ｍｇ、収率９９％）。
【０３１３】
生成物３９の調製
【化２１０】
2020509004.tif 000218
２−［７−（ジフルオロメチル）−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル］モルホリン（５０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、中間体１９の合成について説明したものと類似の合成経路により、出発材料として４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）モルホリン−２−カルボン酸［ＣＡＳ；１８９３２１−６６−２］から出発して調製）をＮ−［５−（クロロメチル）チアゾール−２−イル］アセトアミド（国際公開第２０１４／１５９２３４Ａ１号パンフレットに記載の手順により調製；３７ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、塩酸塩）と、トリエチルアミン（０．０５４ｍＬ、０．３９ｍｍｏｌ）とのＣＨ３ＣＮ（０．６ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を室温で６時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ２Ｏで洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。得られた固体をＭｅＯＨでトリチュレートし、濾過して、生成物３９をクリーム色固体として得た（５０ｍｇ、収率６２％）。
【０３１４】
生成物４０の調製
【化２１１】
2020509004.tif 000219
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、４０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を５−メチル−７−ピペラジン−２−イル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（５２ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ、トリス塩酸塩、中間体１１の合成について説明したものと類似の合成経路により、出発材料として１，４−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−２−カルボン酸［ＣＡＳ；１７３７７４−４８−６］から出発して調製）と、ジイソプロピルエチルアミン（０．１ｍＬ、０．５８ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．４ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜８０／２０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物４０を黄色固体として得た（２７ｍｇ、収率４０％）。
【０３１５】
生成物４１の調製
【化２１２】
2020509004.tif 000220
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、３３ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を５−（ジフルオロメチル）−７−ピペラジン−２−イル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（５０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ、トリス塩酸塩、中間体２０の合成について説明したものと類似の合成経路により、出発材料として１，４−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−２−カルボン酸［ＣＡＳ；１７３７７４−４８−６］から出発して調製）と、ジイソプロピルエチルアミン（０．０７１ｍＬ、０．４１ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．３５ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。得られた固体をＥｔ２Ｏでトリチュレートし、濾過した。固体をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物４１を得た（３５ｍｇ、収率５５％）。
【０３１６】
生成物４２の調製
【化２１３】
2020509004.tif 000221
トリエチルアミン（０．２４ｍＬ、１．７４ｍｍｏｌ）を５−メチル−７−ピペラジン−２−イル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（１４３ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ、トリス塩酸塩、中間体１１の合成について説明したものと類似の合成経路により、出発材料として１，４−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−２−カルボン酸［ＣＡＳ；１７３７７４−４８−６］から出発して調製）、Ｎ−［５−（クロロメチル）チアゾール−２−イル］アセトアミド（国際公開第２０１４／１５９２３４Ａ１号パンフレットに記載の手順により調製；８３ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）のＣＨ３ＣＮ（１．５ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、反応粗製物を濾過し、得られた固体をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、アンモニアの７Ｍ  ＭｅＯＨ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。得られた油状物をＭｅＯＨでトリチュレートし、濾過して、生成物４２を白色固体として得た（４０ｍｇ、収率２５％）。
【０３１７】
生成物４３の調製
【化２１４】
2020509004.tif 000222
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、３３ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を７−（ジフルオロメチル）−５−ピペラジン−２−イル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（５０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ、トリス塩酸塩、中間体１９の合成について説明したものと類似の合成経路により、出発材料として１，４−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−２−カルボン酸［ＣＡＳ；１７３７７４−４８−６］から出発して調製）と、ジイソプロピルエチルアミン（０．０９５ｍＬ、０．５５ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．３５ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。得られた固体をＥｔ２Ｏでトリチュレートし、濾過して、生成物４３を白色固体として得た（２０ｍｇ、収率３２％）。
【０３１８】
生成物４４の調製
【化２１５】
2020509004.tif 000223
中間体３８（３７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を中間体７３（２５ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（０．６ｍＬ）溶液に添加し、この混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（９２ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で終夜撹拌した。追加のトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（４６ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を添加し、反応生成物をさらに室温で３時間撹拌した。ＮＨ３／Ｈ２Ｏで反応を停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１００／０および次にＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮し、残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により再度精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物４４を粘着性の白色固体として得た（５．５ｍｇ、収率１３％）。
【０３１９】
生成物４５の調製
【化２１６】
2020509004.tif 000224
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（２０ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）を中間体７５（２０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ、塩酸塩）と、中間体３８（１６ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）と、トリエチルアミン（０．０３ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．５ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下で添加した。この混合物を室温で３日間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ２０／８０〜１００／０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により再度精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物４５を黄色油状物として得た（２ｍｇ、収率６．８％）。
【０３２０】
生成物４６の調製
【化２１７】
2020509004.tif 000225
中間体３８（１３１ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）を中間体７７（８９ｍｇ、０．３８５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２ｍＬ）溶液に添加し、この混合物を室温で３０分間撹拌した。次いで、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（３２６ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で２時間撹拌した。追加のトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１６３ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）を添加し、反応生成物をさらに室温で終夜撹拌した。ＮＨ３／Ｈ２Ｏで反応を停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１００／０および次にＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、アンモニアの７Ｍ  ＭｅＯＨ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜１０／９０）により再度精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物４６を白色固体として得た（１０ｍｇ、収率６．６％）。
【０３２１】
生成物４７の調製
【化２１８】
2020509004.tif 000226
中間体３８（４８ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を中間体７９（３５ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（０．８ｍＬ）溶液に添加し、この混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１１９ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で終夜撹拌した。ＮＨ３／Ｈ２Ｏで反応を停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１００／０および次にＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮し、残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により再度精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物４７を白色固体として得た（１２．３ｍｇ、収率２１％）。
【０３２２】
生成物４８の調製
【化２１９】
2020509004.tif 000227
中間体３８（１３０．５ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）を中間体８２（１２７ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ、トリフルオロ酢酸塩）のＤＣＭ（２ｍＬ）溶液に添加し、この混合物を室温で３０分間撹拌した。トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（３２５ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で終夜撹拌した。次いで、ＡｃＯＨ（０．０５ｍＬ、０．０９ｍｍｏｌ）および追加のトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１６３ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）を添加し、反応生成物をさらに室温で３時間撹拌した。ＮＨ３／Ｈ２Ｏで反応を停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１００／０および次にＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮し、残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が８８％と、ＣＨ３ＣＮが１２％から、０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が７２％と、ＣＨ３ＣＮが２９％への勾配）により再度精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物４８を白色固体として得た（３９ｍｇ、収率２６％）。
【０３２３】
生成物４９の調製
【化２２０】
2020509004.tif 000228
中間体３８（８６ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）を中間体８４（８８ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ、トリフルオロ酢酸塩）のＤＣＭ（１．３ｍＬ）溶液に添加し、この混合物を室温で５分間撹拌した。次いで、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（２１４ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で終夜撹拌した。ＮＨ３／Ｈ２Ｏで反応を停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１００／０および次にＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮し、残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により再度精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物４９を白色固体として得た（１９ｍｇ、収率１８％）。
【０３２４】
生成物５０の調製
【化２２１】
2020509004.tif 000229
ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）を中間体８６（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ、塩酸塩）のＤＣＭ（１．１ｍＬ）中懸濁液に添加し、この混合物を室温で５分間撹拌した。次いで、中間体３８（４３ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（８９ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で１７時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物５０を黄色油状物として得た（２０ｍｇ、収率２７％）。
【０３２５】
生成物５１の調製
【化２２２】
2020509004.tif 000230
ジイソプロピルエチルアミン（０．４７ｍＬ、２．７５ｍｍｏｌ）を中間体８８（１８０ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）のＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）中懸濁液に封管中で添加した。この混合物を室温で１５分間撹拌した。次いで、７−クロロ−５−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（ＣＡＳ：２４４１５−６６−５；１０２ｍｇ、０．６０５ｍｍｏｌ）を添加し、得られた溶液を１００℃で１６時間撹拌した。反応生成物を室温まで冷却し、揮発分を真空中で蒸発させた。このようにして得られた残渣をＥｔＯＡｃに溶かし、水を添加した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。このようにして得られた残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ５０×１５０ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８０％と、ＣＨ３ＣＮが２０％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が０％と、ＣＨ３ＣＮが１００％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物５１を淡褐色固体として得た（３５ｍｇ、収率１６％）。
【０３２６】
生成物５２の調製
【化２２３】
2020509004.tif 000231
チタン（ＩＶ）イソプロポキシド（０．２２ｍＬ、０．７４ｍｍｏｌ）を中間体４７（８０ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）と、３’，４’−（メチレンジオキシ）アセトフェノン（ＣＡＳ：３１６２−２９−６；７３ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）とのＴＨＦ（１ｍＬ）およびＥｔＯＨ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に封管中、室温で添加した。反応混合物を７０℃で２時間撹拌し、次いでシアノ水素化ホウ素ナトリウム（７０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を７０℃で１６時間撹拌した。次いで、混合物を真空中で濃縮し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮し、残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が７４％と、ＣＨ３ＣＮが２６％から、０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が５８％と、ＣＨ３ＣＮが４２％への勾配）により再度精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、アセトン１００％）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。残渣をイオン交換クロマトグラフィー（ｉｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＳＣＸ２、最初にＭｅＯＨで、次にＭｅＯＨ中７Ｎ  ＮＨ３で溶離）により再度精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物５２を淡黄色固体として得た（２１ｍｇ、収率２７％）。
【０３２７】
生成物５３の調製
【化２２４】
2020509004.tif 000232
２−（５−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル）モルホリン（国際公開第２０１５／１６４５０８号パンフレットに記載の手順により調製；１３８．５ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ、塩酸塩）と、５−（１−クロロエチル）−１，３−ベンゾジオキソール（ＰＣＴ国際出願国際公開第２０１６０３０４４３号パンフレットに記載の手順により調製；１００ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）と、トリエチルアミン（０．１５ｍＬ、１．０８ｍｍｏｌ）とのＤＣＥ（３ｍＬ）中混合物を室温で１２０時間撹拌した。次いで、混合物を真空中で濃縮し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、アンモニアの７Ｍ  ＭｅＯＨ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜３／９７）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮し、残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が７４％と、ＣＨ３ＣＮが２６％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が５８％と、ＣＨ３ＣＮが４２％への勾配）により再度精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物５３を白色固体として得た（３１ｍｇ、収率１６％）。
【０３２８】
生成物５４の調製
【化２２５】
2020509004.tif 000233
トリエチルアミン（０．０６ｍＬ、０．４４ｍｍｏｌ）を中間体６３（６０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）と、５−（１−クロロエチル）−１，３−ベンゾジオキソール（ＰＣＴ国際出願国際公開第２０１６０３０４４３号パンフレットに記載の手順により調製；４０．５ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）とのＣＨ３ＣＮ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、追加の５−（１−クロロエチル）−１，３−ベンゾジオキソール（４０．５ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物をさらに室温で７２時間撹拌した。混合物を真空中で濃縮し、残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物５４を黄色固体として得た（２０ｍｇ、収率２２％）。
【０３２９】
生成物５５の調製
【化２２６】
2020509004.tif 000234
５−（１−クロロエチル）−１，３−ベンゾジオキソール（ＰＣＴ国際出願国際公開第２０１６０３０４４３号パンフレットに記載の手順により調製；１９９ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）を中間体７０（３００ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）とトリエチルアミン（０．７５ｍＬ、５．３９ｍｍｏｌ）とのＣＨ３ＣＮ（２．３ｍＬ）中撹拌懸濁液に添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌した。混合物を真空中で濃縮し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、アンモニアの７Ｍ  ＭｅＯＨ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜１００／０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜１００／０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮し、残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が７４％と、ＣＨ３ＣＮが２６％から、０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が５８％と、ＣＨ３ＣＮが４２％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物５５を白色固体として得た（８０ｍｇ、収率３１％）。
【０３３０】
生成物５６および５７の調製
【化２２７】
2020509004.tif 000235
トリエチルアミン（０．５１ｍＬ、３．６６ｍｍｏｌ）を５−メチル−７−ピペラジン−２−イル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（３００ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ、トリス塩酸塩、中間体１１の合成について説明したものと類似の合成経路により、出発材料として１，４−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−２−カルボン酸［ＣＡＳ；１７３７７４−４８−６］から出発して調製）と、５−（１−クロロエチル）−１，３−ベンゾジオキソール（ＰＣＴ国際出願国際公開第２０１６０３０４４３号パンフレットに記載の手順により調製；１６９ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）とのＣＨ３ＣＮ（３ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を室温で４時間撹拌した。次いで、反応粗製物を濾過した。濾液を真空中で濃縮し、残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物５６を白色固体として（２７ｍｇ、収率８％）および生成物５７を黄色固体として（１４ｍｇ、４％）得た。
【０３３１】
生成物５８の調製
【化２２８】
2020509004.tif 000236
ジイソプロピルエチルアミン（０．１８ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）を中間体８６（５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ、塩酸塩）のＤＣＭ（１．１ｍＬ）中懸濁液に添加し、この混合物を室温で５分間撹拌した。次いで、キノキサリン−６−カルボアルデヒド（ＣＡＳ：１３０３４５−５０−５；４０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（８９ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で１７時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物５８を黄色油状物として得た（１８ｍｇ、収率２５％）。
【０３３２】
生成物５９の調製
【化２２９】
2020509004.tif 000237
２−クロロ−１−ピロリジン−１−イル−エタノン（ＣＡＳ：２０２６６−００−６；１００ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）を２−（５−メチル−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル）モルホリン（国際公開第２０１５／１６４５０８号パンフレットに記載の手順により調製；１２４ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（０．２５ｍＬ、１．８１ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（３．３ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を室温で２４時間撹拌した。混合物を真空中で濃縮し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、アンモニアの７Ｍ  ＭｅＯＨ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜３／９７）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮し、残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物５９を得た（５２ｍｇ、収率２８％）。
【０３３３】
生成物６０の調製
【化２３０】
2020509004.tif 000238
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を５−（ジフルオロメチル）−７−（３−メチル−３−ピペリジル）−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（６５ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ、塩酸塩、中間体２０の合成について説明したものと類似の合成経路により、出発材料として１−（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−メチル−ピペリジン−３−カルボン酸から出発して調製）と、ジイソプロピルエチルアミン（０．１２ｍＬ、０．７０ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で少しずつ添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をＤＣＭ／ヘプタン（１：９）の混合物でトリチュレートした。固体を濾過し、フラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜８０／２０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物６０を白色固体として得た（８４ｍｇ、収率８６％）。１−（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−メチル−ピペリジン−３−カルボン酸は、ＰＣＴ国際出願国際公開第２０１５０８３０２８号パンフレットに記載の手順により調製した。
【０３３４】
生成物６１の調製
【化２３１】
2020509004.tif 000239
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１０４ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を５−（ジフルオロメチル）−７−（３−メチル−３−ピペリジル）−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（８９ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ、中間体２０の合成について説明したものと類似の合成経路により、出発材料として１−（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−メチル−ピペリジン−３−カルボン酸から出発して調製）と、中間体３８（７０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）と、トリエチルアミン（０．１４ｍＬ、１．０１ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（２ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下で添加した。この混合物を室温で２日間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１５０ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物６１を無色フィルム状物として得た（１２ｍｇ、収率９％）。１−（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−メチル−ピペリジン−３−カルボン酸は、ＰＣＴ国際出願国際公開第２０１５０８３０２８号パンフレットに記載の手順により調製した。
【０３３５】
生成物６２の調製
【化２３２】
2020509004.tif 000240
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（４８ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を７−（ジフルオロメチル）−５−（３−メチル−３−ピペリジル）−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（６０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、塩酸塩、中間体１９の合成について説明したものと類似の合成経路により、出発材料として１−（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−メチル−ピペリジン−３−カルボン酸から出発して調製）と、中間体３８（４０ｍｇ、０．２３５ｍｍｏｌ）と、トリエチルアミン（０．０８ｍＬ、０．５８ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（２ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下で添加した。この混合物を室温で１７時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物６２を白色固体として得た（３４ｍｇ、収率４１％）。１−（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−メチル−ピペリジン−３−カルボン酸は、ＰＣＴ国際出願国際公開第２０１５０８３０２８号パンフレットに記載の手順により調製した。
【０３３６】
生成物６３の調製
【化２３３】
2020509004.tif 000241
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（ＣＡＳ：６５４０７２−７１−６、５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を７−（６−アザスピロ［２．５］オクタン−８−イル）−５−（ジフルオロメチル）−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（７２ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、塩酸塩、中間体２０の合成について説明したものと類似の合成経路により、中間体９５から出発して調製）と、ジイソプロピルエチルアミン（０．１１ｍＬ、０．６４ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．５ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で少しずつ添加し、この混合物をさらに０℃で１時間撹拌した。次いで、Ｈ２Ｏを添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜８０／２０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物６３を白色固体として得た（６３ｍｇ、収率６３％）。
【０３３７】
生成物６４の調製
【化２３４】
2020509004.tif 000242
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（４６ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を７−（６−アザスピロ［２．５］オクタン−８−イル）−５−（ジフルオロメチル）−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（５１ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ、塩酸塩、中間体２０の合成について説明したものと類似の合成経路により、中間体９５から出発して調製）と、中間体３８（３７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）と、トリエチルアミン（０．０７ｍＬ、０．５０ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下で添加した。この混合物を室温で１７時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン  ０／１００〜８０／２０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物６４を黄色油状物として得た（１２ｍｇ、収率１７％）。
【０３３８】
生成物６５の調製
【化２３５】
2020509004.tif 000243
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（７６．７４ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を中間体７（４０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ、ビス塩酸塩）と、中間体３８（３７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）と、トリエチルアミン（０．０７５ｍＬ、０．５４ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（１ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下で添加した。この混合物を室温で３日間撹拌した。次いで、混合物を水で反応停止し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１５０ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物６５を淡黄色固体として得た（１７ｍｇ、収率３３％）。
【０３３９】
生成物６６の調製
【化２３６】
2020509004.tif 000244
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（５０．５１ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を中間体９７（５０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、塩酸塩）と、中間体３８（４０．５６ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）と、トリエチルアミン（０．０８ｍＬ、０．６０ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（１．２ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下で添加した。この混合物を室温で３日間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）を添加し、この混合物をＤＣＭで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１５０ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が８１％と、ＣＨ３ＣＮが１９％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６４％と、ＣＨ３ＣＮが３６％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物６６を淡黄色フィルム状物として得た（５ｍｇ、収率７％）。
【０３４０】
生成物６７の調製
【化２３７】
2020509004.tif 000245
チタン（ＩＶ）イソプロポキシド（０．２７ｍＬ、０．９２ｍｍｏｌ）を中間体８６（９０ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）と、３’，４’−（メチレンジオキシ）アセトフェノン（ＣＡＳ：３１６２−２９−６；８３ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）と、ＤＩＰＥＡ（０．２ｍＬ、１．１６ｍｍｏｌ）とのＴＨＦ（２．１ｍＬ）中撹拌溶液に封管中、室温で添加した。反応混合物を８５℃で５時間撹拌し、次いでシアノ水素化ホウ素ナトリウム（３０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を５０℃で４８時間撹拌した。次いで、混合物をＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）で処理し、１時間撹拌した。混合物をＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が６７％と、ＣＨ３ＣＮが３３％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が５０％と、ＣＨ３ＣＮが５０％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物６７を淡黄色油状物として得た（２０ｍｇ、収率１３％）。
【０３４１】
生成物６８の調製
【化２３８】
2020509004.tif 000246
ＴＦＡ（０．３ｍＬ）を中間体１００（７８ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（０．３ｍＬ）中撹拌溶液に添加した。この混合物を１６時間撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させた。次いで、ＴＦＡ（０．３ｍＬ）を添加し、この混合物を５０℃で１６時間撹拌した。揮発分を真空中で蒸発させた。残渣をイオン交換クロマトグラフィー（ｉｓｏｌｕｔｅ（登録商標）ＳＣＸ２、最初にＭｅＯＨで、次にＭｅＯＨ中７Ｎ  ＮＨ３で溶離）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。このようにして得られた固体をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、アンモニアの７Ｍ  ＭｅＯＨ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮した。得られた固体をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、アンモニアの７Ｍ  ＭｅＯＨ溶液／ＥｔＯＡｃ  ０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物６８を白色固体として得た（１１ｍｇ、収率１９％）。
【０３４２】
生成物６９の調製
【化２３９】
2020509004.tif 000247
トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（５３．１６ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を中間体１０２（３６ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）と中間体３８（３４．１５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）とのＭｅＯＨ（０．３ｍＬ）およびＤＣＭ（０．３ｍＬ）中溶液に添加した。この混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、混合物を真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、アンモニアの７Ｍ  ＭｅＯＨ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜６／９４）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物６９を黄色固体として得た（１４ｍｇ、収率２３％）。
【０３４３】
生成物７０、７１および７２の調製
【化２４０】
2020509004.tif 000248
ジイソプロピルエチルアミン（０．１５ｍＬ、０．８５ｍｍｏｌ）を中間体１０４（４２．９ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ、塩酸塩）のＤＣＭ（０．９ｍＬ）中懸濁液に添加し、この混合物を室温で５分間撹拌した。次いで、中間体３８（３４．８ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（５４．１７ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物７０を橙色油状物として得た（４１．６ｍｇ、収率６６％）。
【０３４４】
生成物７０を分取ＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０×３０ｍｍ；移動相：６０％ＣＯ２、４０％ＥｔＯＨ）による精製によってエナンチオマーに分離し、生成物７１（１５ｍｇ）および生成物７２（１７ｍｇ）を黄色固体として得た。
【０３４５】
生成物７３の調製
【化２４１】
2020509004.tif 000249
ＡｃＯＨ（０．０２ｍＬ）を中間体１０７（３８．７ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）と中間体３８（３４ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）とのＭｅＯＨ（１ｍＬ）中撹拌混合物に室温で４時間かけて封管中で添加した。次いで、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（６６．６ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で２１時間撹拌した。追加の中間体３８（１５．１ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）およびシアノ水素化ホウ素ナトリウム（４６．１ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、追加のシアノ水素化ホウ素ナトリウム（５０．２ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で１５時間撹拌した。次いで、溶媒を真空中で蒸発させた。残渣をＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）で処理し、ＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が７５％と、ＣＨ３ＣＮが２５％から、ＮＨ４ＣＯ３Ｈの１０ｍＭ水溶液ｐＨ９が５７％と、ＣＨ３ＣＮが４３％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物７３を淡黄色油状物として得た（１１．９ｍｇ、収率１８％）。
【０３４６】
生成物７４、７５および７６の調製
【化２４２】
2020509004.tif 000250
ジイソプロピルエチルアミン（０．６ｍＬ、３．４８ｍｍｏｌ）を中間体１１０（１５０ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）のＤＣＥ（１０ｍＬ）中懸濁液に添加し、この混合物を室温で１０分間撹拌した。次いで、中間体３８（１４２．２９ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）を添加し、このようにして得られた懸濁液を２時間撹拌した。次いで、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（３２４．８６ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、水およびＤＣＭを添加し、有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ、移動相：０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が７４％と、ＣＨ３ＣＮが２６％から、０．１％ＮＨ４ＣＯ３Ｈ／ＮＨ４ＯＨの水溶液ｐＨ９が５８％と、ＣＨ３ＣＮが４２％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物７４を白色固体として得た（５７ｍｇ、収率２２％）。
【０３４７】
生成物７４を分取ＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＪ−Ｈ  ５μｍ  ２５０×２０ｍｍ；移動相：８０％ＣＯ２、２０％ＭｅＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２））による精製によってエナンチオマーに分離し、生成物７５（２１ｍｇ）および生成物７６（２３ｍｇ）を得た。
【０３４８】
生成物７７、７８および７９の調製
【化２４３】
2020509004.tif 000251
ジイソプロピルエチルアミン（０．４３ｍＬ、２．４９ｍｍｏｌ）を中間体１１２（１０７．４ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２．６５ｍＬ）中懸濁液に添加し、この混合物を室温で５分間撹拌した。次いで、中間体３８（１０１．８８ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１５８．５９ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物７７を黄色油状物として得た（１１１ｍｇ、収率６０％）。
【０３４９】
生成物７７を分取ＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０×３０ｍｍ；移動相：５５％ＣＯ２、４５％ＥｔＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２））による精製によってエナンチオマーに分離し、生成物７８（４２ｍｇ）および生成物７９（４４ｍｇ）をクリーム色固体として得た。
【０３５０】
生成物２６、８０および８１の調製
【化２４４】
2020509004.tif 000252
ジイソプロピルエチルアミン（０．９１ｍＬ、５．２６ｍｍｏｌ）を中間体５８（２５０ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ、塩酸塩）のＤＣＭ（１６ｍＬ）中懸濁液に添加し、この混合物を室温で５分間撹拌した。次いで、中間体３８（１９６．８７ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（６６８．６４ｍｇ、３．１５ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物２６を黄色油状物として得た（１６４．５ｍｇ、収率４４％）。
【０３５１】
生成物２６を分取ＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０×３０ｍｍ；移動相：５５％ＣＯ２、４５％ＥｔＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２））による精製によってエナンチオマーに分離し、生成物８０（６７ｍｇ）および生成物８１（６８ｍｇ）をクリーム色固体として得た。
【０３５２】
生成物１５、８２および８３の調製
【化２４５】
2020509004.tif 000253
ジイソプロピルエチルアミン（０．７２ｍＬ、４．２１ｍｍｏｌ）を中間体４４（２００ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ、塩酸塩）のＤＣＭ（１３ｍＬ）中懸濁液に添加し、この混合物を室温で５分間撹拌した。次いで、中間体３８（１５７．５ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（５３４．９１ｍｇ、２．５２ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ  ０／１００〜１０／９０）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物１５を黄色固体として得た（１１６．５ｍｇ、収率３９％）。
【０３５３】
生成物１５を分取ＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０×３０ｍｍ；移動相：６０％ＣＯ２、４０％ｉＰｒＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２））による精製によってエナンチオマーに分離し、生成物８２（４４ｍｇ）および生成物８３（５３ｍｇ）を黄色固体として得た。
【０３５４】
生成物８４の調製
【化２４６】
2020509004.tif 000254
ＡｃＯＨ（０．０２ｍＬ）を中間体１１８（４０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）と中間体３８（３２ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）とのＭｅＯＨ（１ｍＬ）中撹拌懸濁液に室温で２．５時間かけて封管中で添加した。次いで、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（２８ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で６０時間撹拌した。残渣をＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）で処理し、ＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ、アンモニアの７Ｍ  ＭｅＯＨ溶液／ＤＣＭ  ０／１００〜５／９５）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物８４を無色油状物として得た（１２ｍｇ、収率１９％）。
【０３５５】
生成物８５、８８、９１、９４、９７、１２３、１０１、１０５、１０６、１０７および１０８の調製
次の各化合物は、生成物１７の調製について説明したもののような還元的アミノ化手順に従い、対応するアミンおよび中間体３８から出発し、還元剤を使用して調製した。還元剤、溶媒、添加剤および溶媒の交換は、下の表Ａに記載している。
【０３５６】
【表８】
2020509004.tif 000255
【０３５７】
【表９】
2020509004.tif 000256
【０３５８】
【表１０】
2020509004.tif 000257
【０３５９】
生成物８６および８７の調製
【化２４７】
2020509004.tif 000258
生成物８５（６８ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＣＥＬ  ＯＪ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊２０ｍｍ、移動相：８０％ＣＯ２、２０％ＥｔＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２））に供して、生成物８７（３２ｍｇ）および生成物８６（３４ｍｇ）を得た。
【０３６０】
生成物８９および９０の調製
【化２４８】
2020509004.tif 000259
生成物８８（９６ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０×２１．２ｍｍ、移動相：６０％ＣＯ２、４０％ＭｅＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２））に供して、生成物８９（２６ｍｇ）および生成物９０（２７ｍｇ）を得た。
【０３６１】
生成物９２および９３の調製
【化２４９】
2020509004.tif 000260
生成物９１（１００ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊３０ｍｍ、移動相：７５％ＣＯ２、２５％ＥｔＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２））に供して、生成物９２（３５ｍｇ）および生成物９３（３６ｍｇ）を得た。
【０３６２】
生成物９５および９６の調製
【化２５０】
2020509004.tif 000261
生成物９４（６６ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０×２１．２ｍｍ、移動相：７０％ＣＯ２、３０％ＥｔＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２））に供して、生成物９５（２７ｍｇ）および生成物９６（２６ｍｇ）を得た。
【０３６３】
生成物９８および９９の調製
【化２５１】
2020509004.tif 000262
生成物９７（６８ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊３０ｍｍ、移動相：５０％ＣＯ２、５０％ＭｅＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２））に供して、生成物９８（２６ｍｇ）および生成物９９（２７ｍｇ）を得た。
【０３６４】
生成物１０２および１０３の調製
【化２５２】
2020509004.tif 000263
生成物１０１（８０ｍｇ）をキラルＳＦＣ（固定相：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ  ＡＤ−Ｈ  ５μｍ  ２５０＊３０ｍｍ、移動相：５０％ＣＯ２、５０％ＭｅＯＨ（０．３％ｉＰｒＮＨ２））に供して、生成物１０２（３２ｍｇ）および生成物１０３（３５ｍｇ）を得た。
【０３６５】
生成物１０４の調製
【化２５３】
2020509004.tif 000264
トリエチルアミン（０．０６７ｍＬ、０．４９ｍｍｏｌ）を中間体１３０（３５ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１ｍＬ）中懸濁液に添加し、この混合物を室温で２分間撹拌した。次いで、中間体３８（２４．７ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（７７ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、ＮａＨＣＯ３水溶液（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。残渣をＲＰ  ＨＰＬＣ（固定相：Ｃ１８  ＸＢｒｉｄｇｅ  ３０×１００ｍｍ  ５μｍ）、移動相：ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液が９０％と、ＣＨ３ＣＮが１０％から、ＮＨ４ＨＣＯ３の０．２５％水溶液が６５％と、ＣＨ３ＣＮが３５％への勾配）により精製した。所望の画分を回収し、真空中で濃縮して、生成物１０４を黄色油状物として得た（２６．７ｍｇ、収率６０％）。
【０３６６】
生成物１０９の調製
【化２５４】
2020509004.tif 000265
２−アセチルアミノ−チアゾール−５−スルホニルクロリド（［６５４０７２−７１−６］、４１．５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を中間体１５２（５０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）とＤＩＰＥＡ（０．０９５ｍＬ、０．５５ｍｍｏｌ）とのＤＣＭ（０．４８２ｍＬ）中撹拌溶液に０℃で１時間かけて添加した。次いで、ＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）を添加し、有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗生成物をＥｔ２Ｏで洗浄し、真空オーブン中で乾燥して、生成物１０９（９ｍｇ、１２％）を淡褐色固体として得た。
【０３６７】
次の各化合物は、実験の部で例示した方法に従って調製した。塩形態が示されていない場合、その化合物は、遊離塩基として得られたものである。「Ｃｏ．Ｎｏ．」は、化合物番号を意味する。
【０３６８】
【表１１】
2020509004.tif 000266
【０３６９】
【表１２】
2020509004.tif 000267
【０３７０】
【表１３】
2020509004.tif 000268
【０３７１】
【表１４】
2020509004.tif 000269
【０３７２】
【表１５】
2020509004.tif 000270
【０３７３】
【表１６】
2020509004.tif 000271
【０３７４】
【表１７】
2020509004.tif 000272
【０３７５】
【表１８】
2020509004.tif 000273
【０３７６】
【表１９】
2020509004.tif 000274
【０３７７】
【表２０】
2020509004.tif 000275
【０３７８】
【表２１】
2020509004.tif 000276
【０３７９】
【表２２】
2020509004.tif 000277
【０３８０】
【表２３】
2020509004.tif 000278
【０３８１】
【表２４】
2020509004.tif 000279
【０３８２】
【表２５】
2020509004.tif 000280
【０３８３】
【表２６】
2020509004.tif 000281
【０３８４】
【表２７】
2020509004.tif 000282
【０３８５】
【表２８】
2020509004.tif 000283
【０３８６】
【表２９】
2020509004.tif 000284
【０３８７】
【表３０】
2020509004.tif 000285
【０３８８】
Ｃ．分析の部
融点
値は、ピーク値であり、得られる値は、この分析法に通常付随する実験的不確実性を伴っている。
【０３８９】
ＤＳＣ８２３ｅ：いくつかの化合物について、融点をＤＳＣ８２３ｅ（Ｍｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ）装置で決定した。融点を１０℃／分の温度勾配で測定した。最高温度を３００℃とした。値は、ピーク値である。
【０３９０】
ＬＣＭＳ
一般手順
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）測定は、それぞれの方法に記載したＬＣポンプ、ダイオードアレイ（ＤＡＤ）検出器またはＵＶ検出器およびカラムを使用して行った。必要に応じて追加の検出器を含めた（下の方法の表を参照されたい）。
【０３９１】
カラムからの流れを、大気圧イオン源を装備した質量分析計（ＭＳ）に導入した。化合物の公称モノアイソトピック分子量（ＭＷ）および／または精密質量モノアイソトピック分子量の特定を可能にするイオンを得るために、調整パラメータ（例えば、走査範囲、データ取込時間など）を設定することは、当業者の知識の範囲内である。データ取得は、適切なソフトウェアを用いて行った。
【０３９２】
各化合物は、それらの実測保持時間（Ｒｔ）およびイオンで表される。データの表に別の指定がなければ、報告される分子イオンは、［Ｍ＋Ｈ］＋（プロトン化分子）および／または［Ｍ−Ｈ］−（脱プロトン化分子）に対応する。化合物が直接イオン化できなかった場合、付加体の種類を特定する（すなわち［Ｍ＋ＮＨ４］＋、［Ｍ＋ＨＣＯＯ］−、［Ｍ＋ＣＨ３ＣＯＯ］−など）。複数の同位体パターンを有する分子（Ｂｒ、Ｃｌなど）について、報告される値は、最低同位体質量について得られた値である。得られたすべての結果は、使用される方法に通常付随する実験的不確実性を伴っていた。
【０３９３】
以下、「ＳＱＤ」は、シングル四重極検出器であり、「ＭＳＤ」は、質量選択検出器であり、「ＱＴＯＦ」は、四重極飛行時間であり、「ｒｔ」は、室温であり、「ＢＥＨ」は、架橋エチルシロキサン／シリカハイブリッドであり、ＨＳＳ」は、高強度シリカであり、「ＣＳＨ」は、表面チャージハイブリッドであり、「ＵＰＬＣ」は、超高速液体クロマトグラフィーであり、「ＤＡＤ」は、ダイオードアレイ検出器である。
【０３９４】
【表３１】
2020509004.tif 000286
【０３９５】
【表３２】
2020509004.tif 000287
【０３９６】
【表３３】
2020509004.tif 000288
【０３９７】
【表３４】
2020509004.tif 000289
【０３９８】
【表３５】
2020509004.tif 000290
【０３９９】
【表３６】
2020509004.tif 000291
【０４００】
【表３７】
2020509004.tif 000292
【０４０１】
旋光度
旋光度は、ナトリウムランプを備えたＰｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  ３４１旋光計で測定し、次のように報告した：［α］°（λ、ｃ  ｇ／１００ｍｌ、溶媒、Ｔ℃）。
【０４０２】
［α］λＴ＝（１００α）／（ｌ×ｃ）：式中、ｌは、経路長（単位：ｄｍ）であり、ｃは、温度Ｔ（℃）および波長λ（単位：ｎｍ）における試料の濃度（単位：ｇ／１００ｍｌ）である。使用した光の波長が５８９ｎｍ（ナトリウムＤ線）である場合、代わりに記号Ｄが使用され得る。旋光度の符号（＋または−）は、常に記載されるべきである。この式を使用する場合、濃度および溶媒を旋光度の後の括弧内に常に記載する。旋光度は、度を使用して報告し、濃度の単位は、記載されない（ｇ／１００ｍＬであると想定する）。
【０４０３】
【表３８】
2020509004.tif 000293
【０４０４】
【表３９】
2020509004.tif 000294
【０４０５】
ＳＦＣＭＳ法
ＳＦＣ−ＭＳ法の一般手順
ＳＦＣ測定は、二酸化炭素（ＣＯ２）およびモディファイヤを供給するバイナリポンプ、オートサンプラー、室温から８０℃までカラムを加熱するための切替弁を備えたカラムオーブン、４００ｂａｒまで耐用する高圧フローセルを備えたダイオードアレイ検出器で構成される分析用超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）システムを使用して行った。カラムからの流れを、大気圧イオン源を装備した質量分析計（ＭＳ）に導入した。化合物の公称モノアイソトピック分子量（ＭＷ）の特定を可能にするイオンを得るために、調整パラメータ（例えば、走査範囲、データ取込時間など）を設定することは、当業者の知識の範囲内である。データ取得は、適切なソフトウェアを用いて行った。
【０４０６】
【表４０】
2020509004.tif 000295
【０４０７】
【表４１】
2020509004.tif 000296
【０４０８】
ＮＭＲ
いくつかの化合物について、１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、３００ＭＨｚ  Ｕｌｔｒａｓｈｉｅｌｄ磁石を備えるＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＩＩＩ、４００ＭＨｚで動作するＢｒｕｋｅｒ  ＤＰＸ−４００分光器、５００ＭＨｚで動作するＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  Ｉ、３６０ＭＨｚで動作するＢｒｕｋｅｒ  ＤＰＸ−３６０または６００ＭＨｚで動作するＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ６００分光器において、溶媒としてクロロホルム−ｄ（重水素化クロロホルム、ＣＤＣｌ３）またはＤＭＳＯ−ｄ６（重水素化ＤＭＳＯ、ジメチル−ｄ６スルホキシド）を使用して記録した。化学シフト（δ）は、内部標準として使用したテトラメチルシラン（ＴＭＳ）に対する百万分率（ｐｐｍ）で報告する。
【０４０９】
【表４２】
2020509004.tif 000297
【０４１０】
【表４３】
2020509004.tif 000298
【０４１１】
【表４４】
2020509004.tif 000299
【０４１２】
【表４５】
2020509004.tif 000300
【０４１３】
【表４６】
2020509004.tif 000301
【０４１４】
【表４７】
2020509004.tif 000302
【０４１５】
【表４８】
2020509004.tif 000303
【０４１６】
【表４９】
2020509004.tif 000304
【０４１７】
【表５０】
2020509004.tif 000305
【０４１８】
【表５１】
2020509004.tif 000306
【０４１９】
【表５２】
2020509004.tif 000307
【０４２０】
【表５３】
2020509004.tif 000308
【０４２１】
【表５４】
2020509004.tif 000309
【０４２２】
【表５５】
2020509004.tif 000310
【０４２３】
Ｄ．薬理学的実施例
１）ＯＧＡ−生物学的アッセイ
このアッセイは、フルオレセインモノ−β−Ｄ−Ｎ−アセチル−グルコサミン（ＦＭ−ＧｌｃＮＡｃ）の、組換えヒト髄膜腫発現抗原５（ＭＧＥＡ５）（Ｏ−ＧｌｃＮＡｃアーゼ（ＯＧＡ）とも呼ばれる）による加水分解を阻害すること（Ｍａｒｉａｐｐａ  ｅｔ  ａｌ．２０１５，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ  ４７０：２５５）に基づくものである。ＦＭ−ＧｌｃＮＡｃが加水分解されると（マーカー遺伝子技術、ｃａｔ＃  Ｍ１４８５）、β−Ｄ−Ｎ−グルコサミンアセテートおよびフルオレセインが形成される。フルオレセインの蛍光は、励起波長４８５ｎｍおよび発光波長５３８ｎｍで測定することができる。酵素活性が増加すると、蛍光シグナルが増加する。全長ＯＧＡ酵素は、ＯｒｉＧｅｎｅから購入した（ｃａｔ＃  ＴＰ３２２４１１）。この酵素を２５ｍＭトリス．ＨＣｌ、ｐＨ７．３、１００ｍＭグリシン、１０％グリセリンに入れ、−２０℃で保管した。Ｔｈｉａｍｅｔ  ＧおよびＧｌｃＮＡｃＳｔａｔｉｎを参照化合物として試験した（Ｙｕｚｗａ  ｅｔ  ａｌ．２００８  Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ４：４８３；Ｙｕｚｗａ  ｅｔ  ａｌ．２０１２  Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ８：３９３）。アッセイは、０．００５％  Ｔｗｅｅｎ−２０を添加した２００ｍＭクエン酸／リン酸緩衝液中で行った。Ｎａ２ＨＰＯ４  ２Ｈ２Ｏ（Ｓｉｇｍａ、＃Ｃ０７５９）３５．６ｇを水１Ｌに溶解して２００ｍＭ溶液を得た。クエン酸（Ｍｅｒｃｋ、＃１．０６５８０）１９．２ｇを水１Ｌに溶解して１００ｍＭ溶液を得た。リン酸ナトリウム溶液のｐＨをクエン酸溶液で７．２に調整した。反応を停止するための緩衝液は、５００ｍＭ炭酸緩衝液ｐＨ１１．０からなるものである。ＦＭ−ＧｌｃＮＡｃ  ７３４ｍｇをＤＭＳＯ  ５．４８ｍＬに溶解して２５０ｍＭ溶液を得、−２０℃で保管した。ＯＧＡは、濃度１０ｎＭ（プロトコルＡ）または２ｎＭ（プロトコルＢ）で使用し、ＦＭ−ＧｌｃＮＡｃは、最終濃度１００ｕＭで使用した。希釈物は、アッセイ緩衝液に入れて調製した。
【０４２４】
化合物５０ｎｌをＤＭＳＯに溶解して、Ｂｌａｃｋ  Ｐｒｏｘｉｐｌａｔｅ（商標）３８４  Ｐｌｕｓアッセイプレート（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ、＃６００８２６９）に分注し、次にｆｌ−ＯＧＡ酵素混合物３μｌを添加した。プレートを室温で６０分間プレインキュベートし、次いでＦＭ−ＧｌｃＮＡｃ基質混合物２μｌを添加した。最終ＤＭＳＯ濃度は、１％を超さなかった。プレートを１０００ｒｐｍで１分間手短に遠心分離し、室温で１時間（１０ｎＭ  ＯＧＡ、プロトコルＡ）または６時間（２ｎＭ  ＯＧＡ、プロトコルＢ）インキュベートした。反応を停止するために、停止緩衝液５μｌを添加し、プレートを再度１０００ｒｐｍで１分間遠心分離した。Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｆｌｕｏｒｏｓｋａｎ  ＡｓｃｅｎｔまたはＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  ＥｎＶｉｓｉｏｎ中で励起波長４８５ｎｍおよび発光波長５３８ｎｍで蛍光を測定した。
【０４２５】
分析のため、最小二乗和法により、最良適合曲線をフィットさせる。これによりＩＣ５０値およびヒル係数が得られた。高対照（阻害剤なし）および低対照（標準阻害剤の飽和濃度）を使用して、最小値および最大値を決定した。
【０４２６】
２）ＯＧＡ−細胞アッセイ
Ｐ３０１Ｌ変異型ヒトタウ（アイソフォーム２Ｎ４Ｒ）へ誘導可能なＨＥＫ２９３細胞は、Ｊａｎｓｓｅｎで樹立した。Ｔｈｉａｍｅｔ−Ｇを、プレートバリデーション（高対照）のため、および参照化合物（参照ＥＣ５０アッセイバリデーション）としての両方に使用した。ＯＧＡの阻害は、以前に記述されているように（Ｄｏｒｆｍｕｅｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．２０１０  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ＆ｂｉｏｌｏｇｙ，１７：１２５０）、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化残基を検出するモノクローナル抗体（ＣＴＤ１１０．６；Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ、＃９８７５）を使用して、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化タンパク質を免疫細胞化学的（ＩＣＣ）に検出することによって評価する。ＯＧＡを阻害すると、Ｏ−ＧｌｃＮＡｃ化タンパク質レベルが増加することになり、その結果、実験ではシグナルが増加する。細胞核をＨｏｅｃｈｓｔで染色して、細胞培養の品質管理を行い、即時の化合物毒性があれば、そのおよその推定を行う。ＩＣＣ写真は、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｏｐｅｒａ  Ｐｈｅｎｉｘプレート顕微鏡で画像化し、付属のソフトウェアＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｈａｒｍｏｎｙ  ４．１で定量化する。
【０４２７】
細胞は、標準手順に従って高グルコースＤＭＥＭ（Ｓｉｇｍａ、＃Ｄ５７９６）中で増殖させた。細胞アッセイの２日前に細胞を分離し、計数し、アッセイ培地（ＧｌｃＮＡｃ化の基底レベルを低減するために低グルコース培地を使用する）１００μｌ中、細胞密度１２，０００細胞／ｃｍ２（４，０００細胞／ウェル）で、ポリ−Ｄ−リシン（ＰＤＬ）をコートした９６ウェル（Ｇｒｅｉｎｅｒ、＃６５５９４６）プレートに播種する（Ｐａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．２０１４  Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２８９：１３５１９）。化合物の試験日にアッセイプレートから培地を除去し、新鮮アッセイ培地９０μｌを補充した。化合物１０μｌを最終濃度１０倍でウェルに添加した。プレートを遠心分離し、直後に細胞インキュベーターに入れて６時間インキュベートした。ＤＭＳＯ濃度を０．２％に設定した。培地は、吸引を適用して廃棄する。細胞を染色するために、培地を除去し、細胞をＤ−ＰＢＳ（Ｓｉｇｍａ、＃Ｄ８５３７）１００μｌで１回洗浄した。次の工程から先では、特に言及しない限り、アッセイ体積は、常に５０μｌとし、インキュベーションは、撹拌せずに室温で行った。細胞を４％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ、Ａｌｐｈａ  ａｅｓａｒ、＃０４３３６８）ＰＢＳ溶液５０μｌ中に室温で１５分間固定した。次いで、ＰＦＡ  ＰＢＳ溶液を廃棄し、細胞を１０ｍＭトリス緩衝液（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、＃１５５６７−０２７）、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、＃２４７４０−０１１０、０．１％  Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ（Ａｌｐｈａ  ａｅｓａｒ、＃Ａ１６０４６）、ｐＨ７．５（ＩＣＣ緩衝液）中で１回洗浄してから、同じ緩衝液中で１０分間透過化処理した。次に、５％ヤギ血清（Ｓｉｇｍａ、＃Ｇ９０２３）を含有するＩＣＣに試料を入れ、室温で４５〜６０分間ブロックする。次いで、試料を、一次抗体（市販品供給元からの１／１０００、上記参照）を用いて４℃で終夜インキュベートし、次にＩＣＣ緩衝液に入れて５分間３回洗浄した。試料を、二次蛍光抗体（１／５００希釈、Ｌｉｆｅｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、＃Ａ−２１０４２）を用いて、および核をＨｏｅｃｈｓｔ  ３３３４２で染色して、ＩＣＣ（Ｌｉｆｅｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、＃Ｈ３５７０）中１μｇ／ｍｌの最終濃度で１時間インキュベートした。分析前に試料をＩＣＣ系緩衝液中において５分間２回手作業で洗浄した。
【０４２８】
画像化は、２０×水浸対物レンズを使用し、１ウェル当たり９視野を記録するＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｐｈｅｎｉｘ  Ｏｐｅｒａを使用して実施する。４８８ｎｍでの強度読み取り値をウェル中の総タンパク質のＯ−ＧｌｃＮＡｃ化レベルの測定値として使用する。化合物の潜在的毒性を査定するためにＨｏｅｃｈｓｔ染色を使用して核を計数した。ＩＣ５０値は、パラメトリックな非線形回帰モデルフィッティングを使用して計算する。最大阻害として、２００ｕＭ濃度のＴｈｉａｍｅｔ  Ｇが各プレートに存在する。さらに、Ｔｈｉａｍｅｔ  Ｇの濃度反応を各プレートで計算する。
【０４２９】
【表５６】
2020509004.tif 000311
【０４３０】
【表５７】
2020509004.tif 000312
【０４３１】
【表５８】
2020509004.tif 000313
【国際調査報告】
2020509004.tif 000322
2020509004.tif 000323
2020509004.tif 000324