(57)【要約】本発明は、活性作用物質としての乳酸カルシウムと、多糖、ポリマー、脂質またはそれらの組み合わせとを含む、薬学的組成物に関する。本薬学的組成物は、がんを処置する際に有用である。本発明はまた、乳酸カルシウムを含む食品および栄養組成物に関する。2020500870.tif 000034
2020500870.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
がんを処置するための活性作用物質としての治療有効量の乳酸カルシウムと、薬学的に許容される多糖、ポリマー、脂質またはそれらの組み合わせとを含む、薬学的組成物。
【請求項２】
乳酸カルシウムと多糖とを含む、請求項1記載の組成物。
【請求項３】
乳酸カルシウムと多糖との重量比が、1:<0.2〜1:5である、請求項2記載の組成物。
【請求項４】
乳酸カルシウムと多糖との重量比が、1:<0.2である、請求項2記載の組成物。
【請求項５】
乳酸カルシウムと多糖との重量比が、1:0.2〜1:5である、請求項2記載の組成物。
【請求項６】
ポリマーおよび/または脂質をさらに含む、請求項1〜5のいずれか一項記載の組成物。
【請求項７】
ポリマーおよび脂質をさらに含み、ポリマーと脂質との重量比が1:0.1〜1:50である、請求項6記載の組成物。
【請求項８】
乳酸カルシウムとポリマーおよび/または脂質との重量比が、少なくとも1:5である、請求項6〜7のいずれか一項記載の組成物。
【請求項９】
乳酸カルシウムとポリマーおよび/または脂質との重量比が、1:5〜1:30である、請求項8記載の組成物。
【請求項１０】
乳酸カルシウムとポリマーおよび/または脂質とを含む、請求項1記載の組成物。
【請求項１１】
ポリマーおよび脂質を含み、ポリマーと脂質との重量比が1:0.1〜1:50である、請求項10記載の組成物。
【請求項１２】
乳酸カルシウムとポリマーおよび/または脂質との重量比が、少なくとも1:5である、請求項10〜11のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１３】
乳酸カルシウムとポリマーおよび/または脂質との重量比が、1:5〜1:30である、請求項10〜12のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１４】
短時間作用型である、請求項1〜13のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１５】
長時間作用型である、請求項1〜13のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１６】
注射可能組成物である、請求項1〜15のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１７】
セルロース誘導体、ペクチン、ヒアルロン酸、デンプン、グアーガム、キトサン、ゼラチン、コラーゲン、アルギン酸塩、アルギン酸またはそれらの組み合わせである多糖を含む、請求項1〜16のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１８】
ポロキサマー系列、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール（PEG）、ポリグリコール酸・乳酸（polyglycolic lactic acid）（PLGA）系列、またはそれらの組み合わせであるポリマーを含む、請求項1〜17のいずれか一項記載の組成物。
【請求項１９】
モノもしくはトリ脂肪酸グリセリンエステルまたはそのポリエチレングリコール複合体、植物油のポリエチレングリコールエステル、脂肪酸プロピレングリコールエステル、ゴマ油、大豆油、ヒマシ油、コーン油、パーム油、落花生油、カカオ脂、綿実油、ヒマワリ種子油、サフラワー油、アーモンド油、オリーブ油、硬化油、オレイン酸、リノレン酸、リノール酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、アラキドン酸、ミリスチン酸、カプリン酸、カプリル酸、ラウリン酸、ステアリン酸、オレイン酸エチル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸セチル、ラウリルアルコール、オレイルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、またはそれらの組み合わせである脂質を含む、請求項1〜18のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２０】
45μmの孔径を有するナイロンフィルターを使用した37℃でpH 6.8を有する200ml中300rpmでの溶出試験法を含むインビトロ溶解試験に前記組成物を配置すると、6時間後に活性作用物質の少なくとも約40％が放出される、請求項1〜14および16〜19のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２１】
45μmの孔径を有するナイロンフィルターを使用した37℃でpH 6.8を有する200ml中300rpmでの溶出試験法を含むインビトロ溶解試験に前記組成物を配置すると、12時間後に活性作用物質の少なくとも約60％が放出される、請求項1〜14および16〜20のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２２】
45μmの孔径を有するナイロンフィルターを使用した37℃でpH 6.8を有する200ml中300rpmでの溶出試験法を含むインビトロ溶解試験に前記組成物を配置すると、24時間後に活性作用物質の少なくとも約80％が放出される、請求項1〜14および16〜21のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２３】
45μmの孔径を有するナイロンフィルターを使用した37℃でpH 6.8を有する200ml中300rpmでの溶出試験法を含むインビトロ溶解試験に前記組成物を配置すると、48時間後に活性作用物質の少なくとも約90％が放出される、請求項1〜14および16〜22のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２４】
45μmの孔径を有するナイロンフィルターを使用した37℃でpH 6.8を有する200ml中300rpmでの溶出試験法を含むインビトロ溶解試験に前記組成物を配置すると、24時間後に活性作用物質の約40％未満が放出される、請求項1〜3、5〜13および15〜19のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２５】
45μmの孔径を有するナイロンフィルターを使用した37℃でpH 6.8を有する200ml中300rpmでの溶出試験法を含むインビトロ溶解試験に前記組成物を配置すると、48時間後に活性作用物質の約60％未満が放出される、請求項1〜3、5〜13、15〜19、および24のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２６】
45μmの孔径を有するナイロンフィルターを使用した37℃でpH 6.8を有する200ml中300rpmでの溶出試験法を含むインビトロ溶解試験に前記組成物を配置すると、72時間後に活性作用物質の約80％未満が放出される、請求項1〜3、5〜13、15〜19、および24〜25のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２７】
45μmの孔径を有するナイロンフィルターを使用した37℃でpH 6.8を有する200ml中300rpmでの溶出試験法を含むインビトロ溶解試験に前記組成物を配置すると、144時間後に活性作用物質の約90％未満が放出される、請求項1〜3、5〜13、15〜19、および24〜26のいずれか一項記載の組成物。
【請求項２８】
請求項1〜27のいずれか一項記載の組成物を含む、減菌ガラスまたはポリオレフィン容器。
【請求項２９】
がんを処置するための活性作用物質としての治療有効量の乳酸カルシウムを含む薬学的組成物であって、薬学的に許容される腸溶性コーティングで乳酸カルシウムがコーティングされている、薬学的組成物。
【請求項３０】
腸溶性コーティングが、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（HPMCP）、セルロースアセテートフタレート（CAP）、ポリビニルアセテートフタレート（PVAP）、セラック、メタクリル酸およびそのエステルのポリマー、またはそれらの組み合わせを含む、請求項29記載の組成物。
【請求項３１】
乳酸カルシウムと腸溶性コーティングとの重量比が、10:0.5〜1:1.5である、請求項29〜30のいずれか一項記載の組成物。
【請求項３２】
37℃でパドル速度50rpmでのUSP Paddle法を含むインビトロ溶解試験において、前記組成物を0.1 HCl中に120分間置き、続いて、リン酸緩衝液でpH 6.8に60分間調整したとき、30分後に活性作用物質の約20％未満が放出される、請求項29〜31のいずれか一項記載の組成物。
【請求項３３】
37℃でパドル速度50rpmでのUSP Paddle法を含むインビトロ溶解試験において、前記組成物を0.1N HCl中に120分間置き、続いて、リン酸緩衝液でpH 6.8に60分間調整したとき、60分後に活性作用物質の30％未満が放出される、請求項29〜32のいずれか一項記載の組成物。
【請求項３４】
37℃でパドル速度50rpmでのUSP Paddle法を含むインビトロ溶解試験において、前記組成物を0.1N HCl中に120分間置き、続いて、リン酸緩衝液でpH 6.8に60分間調整したとき、120分後に活性作用物質の50％未満が放出される、請求項29〜33のいずれか一項記載の組成物。
【請求項３５】
37℃でパドル速度50rpmでのUSP Paddle法を含むインビトロ溶解試験において、前記組成物を0.1N HCl中に120分間置き、続いて、リン酸緩衝液でpH 6.8に60分間調整したとき、120分後に活性作用物質の10％未満が放出される、請求項29〜33のいずれか一項記載の組成物。
【請求項３６】
その必要のある対象におけるがんを処置する方法であって、請求項1〜35のいずれか一項記載の組成物を投与することを含む、方法。
【請求項３７】
がんが、肺がん、乳がん、結腸直腸がん、胃がん、脳がん、膵臓がん、甲状腺がん、皮膚がん、骨がん、リンパ腫、子宮がん、子宮頸がん、腎臓がん、または黒色腫である、請求項36記載の方法。
【請求項３８】
第二の抗がん剤を投与することをさらに含む、請求項36〜37のいずれか一項記載の方法。
【請求項３９】
第二の抗がん剤が、イマチニブ、5-FU（5-フルオロウラシル）、イリノテカン、スニチニブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、ラパチニブ、トラスツズマブ（ハーセプチン）、ゲフィチニブ、エルロチニブ、メトトレキサート、カルボプラチン、ドセタキセル、エベロリムス、ソラフェニブ、炭酸脱水酵素阻害剤、およびモノカルボン酸トランスポーター阻害剤である、請求項37記載の方法。
【請求項４０】
乳酸カルシウムおよび第二の抗がん剤が同時に投与される、請求項38〜39のいずれか一項記載の方法。
【請求項４１】
乳酸カルシウムおよび第二の抗がん剤が逐次的に投与される、請求項38〜39のいずれか一項記載の方法。
【請求項４２】
放射線を投与することをさらに含む、請求項36〜41のいずれか一項記載の方法。
【請求項４３】
放射線が、1日当たり2Gy〜10Gyの量で対象に提供される、請求項42記載の方法。
【請求項４４】
がんのリスクを低減するための有効量の乳酸カルシウムを含む、食品または栄養組成物。
【請求項４５】
注射可能栄養補給剤である、請求項44記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、2016年11月30日に出願されたKR 10-2016-0161931に対する優先権を主張するものであり、参照によってその全体が本明細書に組み入れられる。
【０００２】
発明の分野
本発明は、乳酸カルシウムを含む薬学的組成物、およびがんを処置するまたは転移を抑制するための使用法に関する。薬学的組成物は、例えば、多糖類、ポリマー類、脂質類、および/またはそれらの組み合わせを含むことができる。本発明はまた、乳酸カルシウムを含む食品および栄養組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
乳酸カルシウムは、優れたバイオアベイラビリティおよび体内吸収を有し、かつ、副作用を有することは知られておらず、したがって、カルシウム強化剤または食品のpH調節剤として主に使用されている。しかしながら、乳酸カルシウムは、がんを処置するおよび転移を抑制するための活性作用物質として有用であることが発見された。WO2016/108446（特許文献1）（参照によってその全体が本明細書に組み入れられる）を参照のこと。がん細胞への乳酸カルシウムの投与は、乳酸、乳酸の代謝に影響を及ぼすLDH-B（乳酸脱水素酵素B）、ピルビン酸、ピルビン酸の代謝に影響を及ぼすPDH（ピルビン酸脱水素酵素）、およびα-KG（α-ケトグルタル酸）の細胞内レベルが増加すること;がん増殖因子としてのβ-カテニン、細胞内DNA損傷を抑制するPARP、HIF-1α（低酸素誘導因子1α）、ならびにがん細胞の転移、浸潤、および血管新生に影響を及ぼすVEGF（血管内皮増殖因子）の細胞内レベルが減少すること;ならびにがん細胞の成長、転移（遊走）、および管形成のレベルが減少することを示した。WO2016/108446（特許文献1）を参照のこと。
【０００４】
さらに、乳酸カルシウムの抗がん活性が動物モデルを使用して測定されたが、そこでは、乳酸カルシウムの投与が動物モデルにおいてがん細胞の成長を抑制したことが示された。WO2016/108446（特許文献1）を参照のこと。
【０００５】
従来の放射線と組み合わせた乳酸カルシウムの投与は、従来の放射線量と比較して減少した放射線量で、同等の抗がん効果を得ることができることを示した。WO2016/108446（特許文献1）を参照のこと。また、様々な種類の周知の抗がん薬と組み合わせた乳酸カルシウムの当該がん細胞株への投与は、周知の抗がん薬単独の投与と比較して減少した抗がん薬濃度でより高い抗がん効果を得ることができることを示した。WO2016/108446（特許文献1）を参照のこと。
【０００６】
乳酸カルシウムを含有する新規の薬学的組成物ならびに栄養組成物および食品が、がんの処置のためにまたはがんのリスクを低減するために必要とされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】WO2016/108446
【発明の概要】
【０００８】
本発明は、がんを処置するための活性作用物質としての治療有効量の乳酸カルシウムと、薬学的に許容される多糖、ポリマー、脂質またはそれらの組み合わせとを含む、薬学的組成物を対象とする。いくつかの態様において、組成物は、乳酸カルシウムと多糖とを含む。いくつかの態様において、乳酸カルシウムと多糖との重量比は、1:<0.2〜1:5、1:<0.2、または1:0.2〜1:5である。
【０００９】
いくつかの態様において、組成物は、ポリマーおよび/または脂質をさらに含む。いくつかの態様において、ポリマーと脂質との重量比は、1:0.1〜1:50、少なくとも1:5、または1:5〜1:30である。
【００１０】
いくつかの態様において、組成物は、乳酸カルシウムとポリマーおよび/または脂質とを含む。いくつかの態様において、ポリマーと脂質との重量比は、1:0.1〜1:50、少なくとも1:5、または1:5〜1:30である。
【００１１】
いくつかの態様において、組成物は、短時間作用型または長時間作用型である。組成物は、例えば、注射可能組成物であることができる。
【００１２】
いくつかの態様において、多糖は、セルロース誘導体、ペクチン、ヒアルロン酸、デンプン、グアーガム、キトサン、ゼラチン、コラーゲン、アルギン酸塩、アルギン酸またはそれらの組み合わせであることができる。いくつかの態様において、ポリマーは、ポロキサマー系列、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール（PEG）、ポリグリコール酸・乳酸（polyglycolic lactic acid）（PLGA）系列、またはそれらの組み合わせであることができる。いくつかの態様において、脂質は、モノもしくはトリ脂肪酸グリセリンエステルまたはそのポリエチレングリコール複合体、植物油のポリエチレングリコールエステル、脂肪酸プロピレングリコールエステル、ゴマ油、大豆油、ヒマシ油、コーン油、パーム油、落花生油、カカオ脂、綿実油、ヒマワリ種子油、サフラワー油、アーモンド油、オリーブ油、硬化油、オレイン酸、リノレン酸、リノール酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、アラキドン酸（arachadonic acid）、ミリスチン酸、カプリン酸、カプリル酸、ラウリン酸、ステアリン酸、オレイン酸エチル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸セチル、ラウリルアルコール、オレイルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、またはそれらの組み合わせであることができる。
【００１３】
いくつかの態様において、45μmの孔径を有するナイロンフィルターを使用した37℃でpH 6.8を有する200ml中300rpmでの溶出試験法を含むインビトロ溶解試験に組成物を配置すると、6時間後に活性作用物質の少なくとも約40％が放出され、12時間後に活性作用物質の少なくとも約60％が放出され、24時間後に活性作用物質の少なくとも約80％が放出され、かつ/または、48時間後に活性作用物質の少なくとも約90％が放出される。
【００１４】
いくつかの態様において、45μmの孔径を有するナイロンフィルターを使用した37℃でpH 6.8を有する200ml中300rpmでの溶出試験法を含むインビトロ溶解試験に組成物を配置すると、24時間後に活性作用物質の約40％未満が放出され、48時間後に活性作用物質の約60％未満が放出され、72時間後に活性作用物質の約80％未満が放出され、かつ/または、144時間後に活性作用物質の約90％未満が放出される。
【００１５】
本発明はまた、本明細書に記載の組成物を含む減菌ガラスまたはポリオレフィン容器を対象とする。
【００１６】
本発明はまた、がんを処置するための活性作用物質としての治療有効量の乳酸カルシウムを含む薬学的組成物であって、乳酸カルシウムが薬学的に許容される腸溶性コーティングでコーティングされている薬学的組成物を対象とする。
【００１７】
いくつかの態様において、腸溶性コーティングは、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（HPMCP）、セルロースアセテートフタレート（CAP）、ポリビニルアセテートフタレート（PVAP）、セラック、メタクリル酸およびそのエステルのポリマー、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの態様において、乳酸カルシウムと腸溶性コーティングとの重量比は、10:0.5〜1:1.5である。
【００１８】
いくつかの態様において、37℃でパドル速度50rpmでのUSP Paddle法を含むインビトロ溶解試験において、本明細書に記載の組成物を0.1N HCl中に120分間置き、続いて、リン酸緩衝液でpH 6.8に60分間調整したとき、30分後に活性作用物質の約20％未満が放出され、60分後に活性作用物質の30％未満が放出され、120分後に活性作用物質の50％未満が放出され、かつ/または、120分後に活性作用物質の10％未満が放出される。
【００１９】
本発明はまた、その必要のある対象におけるがんを処置する方法であって、本明細書に記載の組成物を投与することを含む方法を対象とする。いくつかの態様において、がんは、肺がん、乳がん、結腸直腸がん、胃がん、脳がん、膵臓がん、甲状腺がん、皮膚がん、骨がん、リンパ腫、子宮がん、子宮頸がん、腎臓がん、または黒色腫である。いくつかの態様において、第二の抗がん剤を投与することができる。いくつかの態様において、第二の抗がん剤は、イマチニブ、5-FU（5-フルオロウラシル）、イリノテカン、スニチニブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、ラパチニブ、トラスツズマブ（ハーセプチン）、ゲフィチニブ、エルロチニブ、メトトレキサート、カルボプラチン、ドセタキセル、エベロリムス、ソラフェニブ、炭酸脱水酵素阻害剤、およびモノカルボン酸トランスポーター阻害剤である。いくつかの態様において、乳酸カルシウムおよび第二の抗がん剤は、同時にまたは逐次的に投与される。
【００２０】
いくつかの態様において、該方法は、放射線を投与することをさらに含む。放射線は、例えば、1日当たり2Gy〜10Gyの量で対象に提供される。
【００２１】
本発明はまた、がんのリスクを低減するための有効量の乳酸カルシウムを含む食品または栄養組成物、例えば、注射可能栄養補給剤などを対象とする。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】本発明のいくつかの例示的な製剤の、薬物放出結果。
【図２】本発明のいくつかの例示的な製剤の、薬物放出結果。
【図３】乳酸カルシウムを含有する腸溶性コーティング錠からの薬物放出プロファイル（平均±SD、n=3）。
【図４】乳酸カルシウムを含有する腸溶性コーティングペレットからの薬物放出プロファイル（平均±SD、n=3）。
【図５】異なる量の腸溶性コーティング材料を含む乳酸カルシウムの腸溶性コーティング錠を40℃で4週間保存した後の薬物放出プロファイル（平均±SD、n=3）（A;10.9％、B;8.3％、C;5.7％、D;2.1％）。
【図６】異なる量の腸溶性コーティング材料を含む乳酸カルシウムの腸溶性コーティングペレットを40℃で4週間保存した後の薬物放出プロファイル（平均±SD、n=3）（A;100％、B;60％、C;45％、D;コーティングなし）。
【図７】長時間作用型製剤の投与後の腫瘍体積の測定。
【図８】乳酸カルシウムおよび長時間作用型（200mg/kgおよび400mg/kg）で処置したマウスの腫瘍サイズ。
【図９】長時間作用型製剤の投与後の腫瘍重量の比較。
【図１０】長時間作用型製剤の抗がん効果についての組織学的分析。
【図１１】乳酸カルシウム投与後の肝臓転移に対する抗腫瘍効果の比較。
【図１２】腸溶性コーティング製剤の投与後の腫瘍体積の測定。
【図１３】腸溶性コーティング製剤の投与後の腫瘍成長の比較。
【図１４】腸溶性コーティング製剤の投与後の腫瘍重量の比較。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
発明の詳細な説明
薬学的組成物
用語「乳酸カルシウム」は、C6H10O6Ca・5H2Oによって表される、例えば水和物として存在することができる、乳酸金属塩の一種を指し、ここで、カルシウムイオンは乳酸に結合している。乳酸カルシウムは、室温で白色の粉末または顆粒、120℃の加熱条件で無水物の形態であることができ、5％（w/v）の溶解度を有する。
【００２４】
乳酸カルシウムを、がんを処置するための薬学的組成物へと製剤化することができる。乳酸に結合したカルシウムは、正常細胞よりもがん細胞へより吸収性であるため、乳酸カルシウムは、がん細胞への乳酸送達効率が他の種類の乳酸金属塩よりも比較的高いという利点を有する。
【００２５】
様々な態様において、本発明は、がんを処置するための活性作用物質としての治療有効量の乳酸カルシウムと、薬学的に許容される多糖、ポリマー、脂質またはそれらの組み合わせとを含む、薬学的組成物を提供する。いくつかの態様において、薬学的組成物は、乳酸カルシウムと多糖とを含む。
【００２６】
いくつかの態様において、本発明は、活性作用物質が胃の酸性環境から保護され、かつ、活性作用物質が経口投与されたときに大腸に到達する前に小腸で吸収されるような、乳酸カルシウムの腸溶性コーティングを提供する。
【００２７】
本発明はまた、乳酸カルシウムを含む短時間作用型および長時間作用型薬学的組成物を提供する。いくつかの態様において、長時間作用型組成物は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（HPMCP）、セルロースアセテートフタレート（CAP）、ポリビニルアセテートフタレート（PVAP）、セラックならびにメタクリル酸およびそのエステルのポリマーなどの少なくとも1種の腸溶性コーティング材料でコーティングされた乳酸カルシウムを含む。
【００２８】
本発明の薬学的組成物を、経口投与用の薬学的調製物へと製剤化することができる。調製物の例は、粉剤、錠剤、カプセル剤、顆粒剤またはシロップ剤、錠剤およびカプセル剤を含むが、それらに限定されない。
【００２９】
本発明者等は、インビトロで溶液またはナノ粒子の形態で留まることができ、かつ、体内に注射されたときにゲルを形成して、乳酸カルシウムの持続放出を可能にする、ヒドロゲル、具体的にはメチルセルロース、ポロキサマー、ペクチン、およびアルギン酸ヒドロゲルの製剤を開発した。ヒドロゲルの欠点である比較的短い薬物放出時間は、薬物とヒドロゲルとの間の相互作用を増加させることによるかまたはヒドロゲル中の薬物の拡散を遅延させることによって改善された。
【００３０】
乳酸カルシウムと多糖との重量比は、例えば、1:<0.2〜1:5、1:0.01〜1:5、1:0.05〜1:5、または1:0.1〜1:5であることができる。乳酸カルシウムと多糖との重量比は、1:<0.2であることができる。乳酸カルシウムと多糖との重量比は、1:0.2〜1:5であることができる。
【００３１】
いくつかの態様において、薬学的組成物は、ポリマーまたは脂質をさらに含む。乳酸カルシウムとポリマーまたは脂質との重量比は、少なくとも1:5であることができる。乳酸カルシウムとポリマーまたは脂質との重量比は、1:5〜1:30、例えば、1:5〜1:30、1:5〜1:20、1:5〜1:10、1:10〜1:30、1:10〜1:20、または1:20〜1:30であることができる。
【００３２】
いくつかの態様において、薬学的組成物は、ポリマーおよび脂質をさらに含む。乳酸カルシウムとポリマーおよび脂質との重量比は、少なくとも1:5であることができる。乳酸カルシウムとポリマーおよび脂質との重量比は、1:5〜1:30、例えば、1:5〜1:30、1:5〜1:20、1:5〜1:10、1:10〜1:30、1:10〜1:20、または1:20〜1:30であることができる。
【００３３】
いくつかの態様において、薬学的組成物は、乳酸カルシウムとポリマーまたは脂質とを含む。乳酸カルシウムとポリマーまたは脂質との重量比は、少なくとも1:5であることができる。乳酸カルシウムとポリマーまたは脂質との重量比は、1:5〜1:30であることができる。乳酸カルシウムとポリマーまたは脂質との重量比は、1:5〜1:30、例えば、1:5〜1:30、1:5〜1:20、1:5〜1:10、1:10〜1:30、1:10〜1:20、または1:20〜1:30であることができる。
【００３４】
いくつかの態様において、薬学的組成物は、乳酸カルシウムとポリマーおよび脂質とを含む。乳酸カルシウムとポリマーおよび脂質との重量比は、少なくとも1:5であることができる。乳酸カルシウムとポリマーおよび脂質との重量比は、1:5〜1:30であることができる。乳酸カルシウムとポリマーおよび脂質との重量比は、1:5〜1:30、例えば、1:5〜1:30、1:5〜1:20、1:5〜1:10、1:10〜1:30、1:10〜1:20、または1:20〜1:30であることができる。
【００３５】
いくつかの態様において、ポリマーと脂質との重量比は、1:0.1〜1:50、1:0.1〜1:20、1:0.1〜1:10、1:0.1〜1:5、1:0.1〜1:2、1:0.1〜1:1、1:0.1〜0.5、または1:0.1〜1:0.2であることができる。
【００３６】
組成物中での使用に適した多糖類は、セルロース誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロース（CMC）、エチルセルロース（EC）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（HPMC）、メチルセルロース（MC））、ペクチン、ヒアルロン酸、デンプン、グアーガム、キトサン、ゼラチン、コラーゲン、アルギン酸塩、アルギン酸、またはそれらの組み合わせであることができる。
【００３７】
組成物中での使用に適したポリマー類は、ポロキサマー系列、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール（PEG）、ポリグリコール酸・乳酸（PLGA）系列、またはそれらの組み合わせであることができる。
【００３８】
組成物中での使用に適した脂質類は、モノもしくはトリ脂肪酸グリセリンエステルまたはそのポリエチレングリコール複合体、植物油のポリエチレングリコールエステル、脂肪酸プロピレングリコールエステル、ゴマ油、大豆油、ヒマシ油、コーン油、パーム油、落花生油、カカオ脂、綿実油、ヒマワリ種子油、サフラワー油、アーモンド油、オリーブ油、硬化油、オレイン酸、リノレン酸、リノール酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、アラキドン酸、ミリスチン酸、カプリン酸、カプリル酸、ラウリン酸、ステアリン酸、オレイン酸エチル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸セチル、ラウリルアルコール、オレイルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、またはそれらの組み合わせであることができる。
【００３９】
本発明は、がんを処置するための活性作用物質としての治療有効量の乳酸カルシウムを含む薬学的組成物であって、乳酸カルシウムが薬学的に許容される腸溶性コーティングでコーティングされている、薬学的組成物をさらに対象とする。いくつかの態様において、腸溶性コーティングは、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（HPMCP）、セルロースアセテートフタレート（CAP）、ポリビニルアセテートフタレート（PVAP）、セラック、メタクリル酸およびそのエステルのポリマー、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの態様において、乳酸カルシウムと腸溶性コーティングとの重量比は、10:0.5〜10:15、10:0.5〜1:1、10:0.5〜10:5、10:0.5〜10:3、10:0.5〜10:2、10:0.5〜10:1、10:0.5〜1:0.8である。
【００４０】
「薬学的に許容される」とは、本明細書において使用される場合、化合物の生物学的活性または特性を無効にすることなく、かつ、比較的非毒性である、担体または希釈剤などの材料を指すものであり、すなわち、該材料は、望ましくない生物学的効果を引き起こすことなしにまたはその材料が含有される組成物の成分のいずれかと有害な様式で相互作用することなしに、個体に投与することができる。
【００４１】
薬学的組成物は、本明細書において使用される場合、乳酸カルシウムと、限定されないが担体、安定剤、希釈剤、崩壊剤、懸濁化剤、増粘剤、結合剤、抗菌剤、抗菌防腐剤、酸化防止剤、および/または緩衝剤などの薬学的に許容される他の化学成分との混合物を指す。薬学的組成物は、対象への乳酸カルシウムの投与を容易にする。
【００４２】
用語「担体」は、本明細書において使用される場合、細胞または組織への化合物の取り込みを容易にする、比較的非毒性の化合物または作用物質を指す。用語「希釈剤」は、送達に先立ち関心対象の化合物を希釈するために使用される化合物を指す。また、希釈剤は、より安定な環境を提供することができるので、これらを使用して化合物を安定化させることもできる。薬学的に許容される添加物は、当技術分野において周知の希釈剤、結合剤、可溶化剤、溶解度増強剤、細孔形成剤、浸透物質、ガス形成剤、滑剤および流動化剤を含むが、それらに限定されない。
【００４３】
希釈剤は、乳糖、フルクトース、デキストロース、スクロース、マルトース、微晶質セルロース、デンプン、リン酸水素カルシウム、マンニトールまたはそれらの混合物を含むことができるが、それらに限定されない。それらの希釈剤は、微晶質セルロース、乳糖、マンニトール、リン酸カルシウムなどを含む。
【００４４】
結合剤の例は、ポビドン、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルアルコール、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチル-セルロースナトリウムおよびそれらを含むことができる。
【００４５】
可溶化剤は、界面活性剤、シクロデキストリンおよびその誘導体、親油性物質またはそれらの混合物を含むが、それらに限定されない。
【００４６】
界面活性剤は、水溶性または水分散性の非イオン性、無極性非イオン性、陰イオン性、陽イオン性、両性またはイオン性の表面活性剤またはそれらの混合物を含むが、それらに限定されない。
【００４７】
崩壊剤の例は、クロスポビドン、クロスカルメロースナトリウム、グリコール酸デンプンナトリウムを含み、滑剤の例は、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、フマル酸ステアリルナトリウムおよびそれらを含む。
【００４８】
本発明の薬学的組成物は、ベンジルアルコール、クロロブタノール、フェニルエチルアルコール、フェニル-酢酸水銀、ソルビン酸カリウム、およびソルビン酸などの抗菌剤をさらに含むことができる。抗真菌剤は、安息香酸、ブチルパラベン、エチルパラベン、メチルパラベン、プロピルパラベン、および安息香酸ナトリウムなどの化合物を含む。
【００４９】
通常は水相に侵入するが場合によっては組成物の油相で成長することもできる潜在的に有害な微生物の成長から本発明の薬学的組成物を保護するために、本発明の薬学的組成物に抗菌防腐剤を加えることができる。したがって、水溶解性と脂質溶解性の両方を有する防腐剤が望ましい。好適な抗菌防腐剤は、例えば、p-ヒドロキシ安息香酸のアルキルエステル、プロピオン酸塩、フェノキシエタノール、メチルパラベンナトリウム、プロピルパラベンナトリウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ベンジルアルコール、ヒダントイン誘導体、第四級アンモニウム化合物および陽イオン性ポリマー類、イミダゾリジニル尿素、ジアゾリジニル尿素、ならびにエチレンジアミン四酢酸三ナトリウム（EDTA）を含む。
【００５０】
組成物それ自体にまたはその使用環境中に存在する酸化剤による損傷または分解から薬学的組成物の成分の全てを保護するために、酸化防止剤、例えば、アノキソマー、パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、次亜リン酸、メタ重亜硫酸カリウム、没食子酸プロピルオクチルおよびドデシル、メタ重亜硫酸ナトリウム、二酸化硫黄、ならびにトコフェロール類を加えることができる。
【００５１】
緩衝剤を使用して、外部の作用物質の作用および組成物の成分の平衡のシフトに対して、一旦確立された薬学的組成物の所望のpHを保持することができる。
【００５２】
当技術分野において公知の技術、例えば、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Nineteenth Ed (Easton, Pa.: Mack Publishing Company, 1995); Hoover, John E., Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pa. 1975; Liberman, H. A. and Lachman, L., Eds., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, New York, N.Y., 1980; and Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Seventh Ed. (Lippincott Williams & Wilkins 1999)（参照によってその全体が本明細書に組み入れられる）に従って、本明細書に記載の薬学的組成物を調製することができる。
【００５３】
いくつかの態様において、本発明の薬学的組成物は、短時間作用型である。用語「短時間作用型」は、本明細書に記載のインビトロ溶解試験で試験したときに、48時間以内に、例えば、送達時（すなわち、0時間）から、約1時間〜約48時間まで、約3時間〜約24時間まで、約6時間〜約24時間まで、または約12時間〜約24時間まで、活性作用物質の実質的に全てを放出する組成物を指す。
【００５４】
例えば、45μmの孔径を有するナイロンフィルターを使用した37℃でpH 6.8を有する200ml中300rpmでの溶出試験法（例えば、Labfine Co., Mumbai, India提供）を含むインビトロ溶解試験に組成物を配置すると、6時間後に活性作用物質の少なくとも約40％が放出され、12時間後に活性作用物質の少なくとも約60％が放出され、24時間後に活性作用物質の少なくとも約80％が放出され、かつ/または、48時間後に活性作用物質の少なくとも約90％が放出される。いくつかの態様において、45μmの孔径を有するナイロンフィルターを使用した37℃でpH 6.8を有する200ml中300rpmでの溶出試験法（例えば、Labfine Co., Mumbai, India提供）を含むインビトロ溶解試験に組成物を配置すると、6時間後に活性作用物質の少なくとも約40％〜約60％が放出され、12時間後に活性作用物質の少なくとも約60％〜約80％が放出され、24時間後に活性作用物質の少なくとも約80％〜約90％が放出され、かつ/または、48時間後に活性作用物質の少なくとも約90％〜約100％が放出される。
【００５５】
いくつかの態様において、本発明の薬学的組成物は、長時間作用型である。用語「長時間作用型」は、初期投与後、例えば、送達時（すなわち、0時間）から、約48時間〜約192時間まで、約72時間〜約192時間まで、約96時間〜約192時間まで、約120時間〜約192時間まで、または約144時間〜約192時間まで、活性作用物質をゆっくり放出する組成物を意味することを意図する。
【００５６】
いくつかの態様において、45μmの孔径を有するナイロンフィルターを使用した37℃でpH 6.8を有する200ml中300rpmでの溶出試験法（例えば、Labfine Co., Mumbai, India提供）を含むインビトロ溶解試験に組成物を配置すると、24時間後に活性作用物質の約40％未満が放出され、48時間後に活性作用物質の約60％未満が放出され、72時間後に活性作用物質の約80％未満が放出され、144時間後に活性作用物質の約90％未満が放出される。いくつかの態様において、45μmの孔径を有するナイロンフィルターを使用した37℃でpH 6.8を有する200ml中300rpmでの溶出試験法（例えば、Labfine Co., Mumbai, India提供）を含むインビトロ溶解試験に組成物を配置すると、24時間後に活性作用物質の約20％〜約50％が放出され、24時間後に活性作用物質の約20％〜約40％が放出され、48時間後に活性作用物質の約40％〜約70％が放出され、48時間後に活性作用物質の約40％〜約60％が放出され、72時間後に活性作用物質の約40％〜約80％が放出され、72時間後に活性作用物質の約50％〜約80％が放出され、144時間後に活性作用物質の約60％〜約90％が放出され、または144時間後に活性作用物質の約70％〜約90％が放出される。
【００５７】
いくつかの態様において、37℃でパドル速度50rpmでのUSP Paddle法を含むインビトロ溶解試験に組成物を配置すると、組成物を0.1N HCl中に120分間置き、続いて、リン酸緩衝液でpH 6.8に60分間調整したとき、30分後に活性作用物質の約20％未満が放出され、60分後に活性作用物質の30％未満が放出され、120分後に活性作用物質の50％未満が放出され、かつ/または、120分後に活性作用物質の10％未満が放出される。
【００５８】
いくつかの態様において、本発明の薬学的組成物は、注射可能剤形である。非経口注射のために、適切な製剤は、好ましくは生理学的に適合可能な担体を有する、水性または非水性液剤を含むことができる。
【００５９】
非経口投与用の薬学的製剤は、水溶性形態の活性化合物の水性液剤を含む。加えて、適切な油性注射懸濁剤として、活性作用物質の懸濁剤を調製することもできる。好適な脂質類または親油性担体は、ゴマ油などの脂肪油、またはオレイン酸エチルもしくはトリグリセリドなどの合成脂肪酸エステル、またはリポソームを含む。脂質は、モノもしくはトリ脂肪酸グリセリンエステルまたはそのポリエチレングリコール複合体、植物油のポリエチレングリコールエステル、脂肪酸プロピレングリコールエステル、ゴマ油、大豆油、ヒマシ油、コーン油、パーム油、落花生油、カカオ脂、綿実油、ヒマワリ種子油、サフラワー油、アーモンド油、オリーブ油、硬化油、オレイン酸、リノレン酸、リノール酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、アラキドン酸、ミリスチン酸、カプリン酸、カプリル酸、ラウリン酸、ステアリン酸、オレイン酸エチル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸セチル、ラウリルアルコール、オレイルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、またはそれらの組み合わせであることができる。
【００６０】
ヒドロゲルが医学に応用されて以来、医学、薬学、および化粧品業界を含めた多くの分野で多数のヒドロゲルが開発および研究されてきた。ヒドロゲルは、一般に生体適合性であるが、薬物の送達を制限する様々な問題を有しており、こうした問題を解決するために様々な努力が成されている。ヒドロゲルは、親水性ポリマー類の網目構造から構成される三次元構造体である。その成分の90％超は、水から構成されている。ヒドロゲルは、高い含水率、多孔質構造、比較的軟質な特性、および生体適合性など生体組織と似ていることから、生体医学の分野において積極的に研究されてきた。ヒドロゲルは、主鎖として使用されるポリマーの種類または採用される架橋法に応じて様々な特性を示すことができる。ポリアクリル酸系列ポリマーのポリマーまたはポリビニルアルコールなどの合成化合物が使用されたとき、生体適合性は低いが、その化学修飾は容易であり、よって工学応用が非常に容易である。その一方で、天然化合物、とりわけペクチン、アルギン酸、コラーゲン、フィブリンおよびヒアルロン酸が主鎖として使用されたとき、化学修飾は困難である。それにもかかわらず、臨床応用に適することおよび移植時に免疫炎症反応などの副作用がほとんどないことから、生物由来の成分であるこれらの材料を使用する利点がある。
【００６１】
使用するポリマーの種類のみならずヒドロゲルの特性にも影響を及ぼすのが架橋法である。同じポリマーが主鎖として使用されたとしても、架橋法が異なれば完全に異なる特徴を有するヒドロゲルを得ることができる。ヒドロゲルを架橋する方法は、物理的方法と化学的方法とに大別することができる。物理的架橋法は、イオン相互作用、疎水性相互作用、水素結合、および構造上のもつれによる可逆的架橋を含む。これらの架橋法は、別個の化学添加物または複雑なプロセスを必要とすることなく、三次元網目構造の形成を容易に引き起こすことができる。その一方で、化学的架橋法は、典型的には、不可逆的でありかつ物理的架橋法と比較して安定な網目構造をもたらす、共有結合を形成する。優れた生体適合性および様々な物理化学的特性を有するヒドロゲルが薬物送達および組織工学などの生体医学の分野において広く研究されている。ほとんどのヒドロゲルは、それらの高い含水率に起因して他の薬物送達系よりも短い薬物放出時間を示し、より長い薬物放出時間を有する系を開発する必要がある。
【００６２】
いくつかの態様において、本発明の薬学的組成物は、経口剤形である。経口投与のために、活性作用物質と当技術分野において周知の薬学的に許容される担体または賦形剤とを組み合わせることによって、本明細書に記載の化合物を容易に製剤化することができる。そのような担体によって、処置されるべき患者による経口摂取のため、錠剤、粉剤、丸剤、糖衣錠、カプセル剤、液剤、ゲル剤、シロップ剤、エリキシル剤、スラリー剤、懸濁剤などとして、本明細書に記載の活性作用物質を製剤化することが可能になる。
【００６３】
1つまたは複数の固体担体と本明細書に記載の化合物とを混合し、得られた混合物を任意で粉砕し、所望により好適な補助剤を加えた後に、顆粒の混合物を加工することによって、錠剤または糖衣錠コアを得ることで、経口使用のための薬学的調製物を得ることができる。好適な賦形剤は、増量剤、例えば、乳糖、スクロース、マンニトール、またはソルビトールを含む糖;セルロース調製物:例えば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガントガム、メチルセルロース、微晶質セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロースなど;またはその他のもの：ポリビニルピロリドン（PVPまたはポビドン）またはリン酸カルシウムなどを含むが、それらに限定されない。所望により、架橋クロスカルメロースナトリウム、ポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸もしくはその塩（例えば、アルギン酸ナトリウム）などの崩壊剤を加えることができる。
【００６４】
糖衣錠コアには、好適なコーティングが施される。このために、濃縮糖溶液を使用することができ、これは、任意で、アラビアガム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコール、および/または二酸化チタン、ラッカー溶液、ならびに好適な有機溶媒または溶媒混合物を含有することができる。識別のためまたは活性化合物用量の様々な組み合わせを特徴付けるために、錠剤または糖衣錠コーティングに染料または顔料を加えることができる。
【００６５】
活性作用物質を薬学的に使用できる調製物へ加工するのを容易にする賦形剤および補助剤を含む1つまたは複数の薬学的に許容される担体を使用して、薬学的組成物を従来の様式で製剤化することができる。適切な製剤は、選択される投与経路に依存する。周知の技術のいずれかを、当技術分野において適する通りかつ理解されている通り使用することができる。本明細書に記載の薬学的組成物は、従来の様式で、例えば、ほんの一例として、従来の混合、溶解、造粒、糖衣錠製造（dragee-making）、研和（levigating）、乳化、カプセル化、封入または圧縮プロセスを介して製造することができる。
【００６６】
水性懸濁剤はまた、懸濁化剤として1つまたは複数のポリマー類を含有することができる。ポリマーは、ポロキサマー系列、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール（PEG）、ポリグリコール酸・乳酸（PLGA）系列、またはそれらの組み合わせであることができる。他の有用なポリマー類は、セルロース系ポリマー類、例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなどの水溶性ポリマー類、および架橋カルボキシル含有ポリマー類などの水不溶性ポリマー類を含む。有用な組成物はまた、例えば、カルボキシメチルセルロース、カルボマー（アクリル酸ポリマー）、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリアクリルアミド、ポリカルボフィル、アクリル酸/ブチルアクリレートコポリマー、アルギン酸ナトリウム、およびデキストランから選択される粘膜付着性ポリマーを含むことができる。
【００６７】
いくつかの態様において、乳酸カルシウムと、活性作用物質の放出を制御するための薬学的に許容される腸溶性コーティングとを含む、薬学的剤形が提供される。いくつかの態様において、コーティングは、フィルムであり、別の態様においては、膜である。腸溶性コーティング、例えば、フィルムまたは膜は、胃の後まで放出を遅延させるために、かつ、胃液から活性作用物質を保護するために役立つことができる。腸溶性コーティングは、任意で、他の賦形剤、例えば可塑剤などを含む、1つまたは複数の好ましくは重合性の物質（例えば、メタクリレートなど;多糖類など、以下に詳細に記載する通り）または2以上のそのような物質の組み合わせを含むことができる。いくつかの態様において、腸溶性コーティングは、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（HPMCP）、セルロースアセテートフタレート（CAP）、ポリビニルアセテートフタレート（PVAP）、セラック、メタクリル酸およびそのエステルのポリマー、またはそれらの組み合わせを含む。本発明のいくつかの態様において、組成物は、ヒドロゲル形成ポリマーと、活性作用物質の放出において所望の遅延（または他の変化）を達成することが可能なさらなるポリマー類を含む。
【００６８】
経口使用のための錠剤の場合、一般的に使用される担体は、乳糖およびコーンスターチを含む。典型的には、ステアリン酸マグネシウムなどの滑剤も加えられる。カプセル形態での経口投与のために、有用な希釈剤は、乳糖および乾燥コーンスターチを含む。
【００６９】
減菌注射可能調製物はまた、脂質類などの非毒性の非経口的に許容される担体中の減菌注射可能懸濁剤であることもできる。
【００７０】
薬学的組成物中に含まれる乳酸カルシウムの量は、最終組成物の総重量に基づいて1wt％〜50wt％、1wt％〜40wt％、1wt％〜35wt％、1wt％〜30wt％、1wt％〜20wt％、1wt％〜15wt％、または1wt％〜10wt％であることができるが、それらに限定されない。薬学的組成物の単回用量に含まれる乳酸カルシウムの濃度は、2.5mM〜100mM、2.5mM〜50mM、2.5mM〜25mM、5mM〜100mM、5mM〜50mM、5mM〜25mM、10mM〜100mM、10mM〜50mM、または10mM〜25mMであることができるが、それらに限定されない。
【００７１】
限定されないが乾式造粒、直接圧縮、湿式造粒、押出球状化、溶融造粒または圧縮コーティングなどの従来の技術によって、固体の経口薬学的組成物を調製することができる。コーティングは、以下に記載の通り適用することができ、厚さおよび密度において変動可能である。コーティングの量は、本発明の乾燥組成物（例えば、乳酸カルシウムを含有するビーズまたはコア）に加えられる（それによって得られる）追加重量によって規定される。重量増加は、0.1％〜50％、1％〜20％、1％〜15％、3％〜10％、5％〜12％、または8％〜12％の範囲であることができる。
【００７２】
コーティングプロセスは、任意の好適な手段、例えば、ポリマーコートの溶液（特に上記の通り）を組成物に適用するコーティング機器の使用などによって行うことができる。コーティング用のポリマー類は、製造業者によって直接使用のための既製溶液で提供されているか、製造業者の説明書に従って使用前に構成できるかのいずれかである。
【００７３】
単位投与量およびキット
用語「単位剤形」は、各単位が所定量の活性成分を好適な薬学的賦形剤と組み合わせて含有する単回投与量として適した物理的に分離した単位であって、1つまたは複数が投薬計画を通して使用されて所望の治療効果をもたらす、例えば、がんを処置するおよび/またはがんの転移を抑制する、単位を指す。
【００７４】
本明細書に記載の薬学的組成物は、正確な投与量の単回投与に適した単位剤形であることができる。単位剤形では、製剤は、1つまたは複数の活性作用物質を適量含有する単位用量に分割される。単位投与量は、製剤を個別の量で含有する包装形態であることができる。非限定例は、包装された錠剤またはカプセル剤、およびバイアルまたはアンプル中の粉剤である。水性懸濁組成物を、単一用量の再密閉不可能な容器に包装することができる。あるいは、複数用量の再密閉可能な容器を使用することもでき、その場合、組成物中に防腐剤を含めることが典型である。ほんの一例として、非経口注射用の製剤は、単位剤形（アンプルを含むがこれに限定されない）でまたは複数用量容器で提示することができる。
【００７５】
乳酸カルシウムに適した日投与量は、約1mg/kg〜約1000mg/kg、約10mg/kg〜約750mg/kg、約10mg/kg〜約500mg/kg、または約100mg/kg〜500mg/kg（体重）であることができる。大型哺乳動物（ヒトを含むがこれに限定されない）において示される日投与量は、約5mg〜約100,000mgの範囲であるが、分割用量（1日最大4回を含むがこれに限定されない）でまたは長時間作用形態で都合よく投与される。投与に好適な単位剤形は、約10mg〜約1000mg、約100mg〜約1000mg、約500mg〜約750mg、約25mg〜約250mg、約50mg〜約100mg、約10mg〜約200mg、または約10mg〜約250mgの活性作用物質を含む。本開示の組成物の投与頻度は、1日1回、2回、3回、4回などの分割用量であることができるが、それらに特に限定されない。任意の個別の事例における適切な「有効」量は、用量漸増試験などの技術を使用して決定することができる。
【００７６】
前述の範囲は、個々の処置計画に関する変数の数が大きいため、単なる示唆にすぎず、これらの推奨値からの大幅な逸脱は、珍しいことではない。そのような投与量は、限定されないが、使用される化合物の活性、処置されるべき疾患または病態、投与様式、個々の対象の要件、処置されている疾患または病態の重症度、および実践者の判断といった多数の変数に応じて変更することができる。
【００７７】
そのような治療計画の毒性および治療効果は、限定されないがLD50（母集団の50％に致死的な用量）およびED50（母集団の50％において治療的に有効な用量）の決定を含む、細胞培養または実験動物における標準的な薬学手順によって決定できる。毒性と治療効果との間の用量比は治療指数であり、LD50とED50との間の比率として表すことができる。高い治療指数を示す化合物が好ましい。細胞培養アッセイおよび動物研究から得られたデータを、ヒトに使用するための投与量の範囲を定める際に使用することができる。活性作用物質の投与量は、毒性が最小限であるED50を含む循環濃度の範囲内にあるのが好ましい。投与量は、用いられる剤形および利用される投与経路に応じてこの範囲内で変動可能である。
【００７８】
本発明によれば、薬学的組成物は、減菌注射可能調製物、例えば減菌注射可能な水性または油性懸濁液の形態であることができる。本発明の薬学的組成物は、限定されないがカプセル剤、錠剤、水性懸濁剤または液剤を含む、経口的に許容される任意の剤形で、経口投与することができる。
【００７９】
本発明はまた、本明細書に開示の薬学的組成物を含む減菌ガラスまたはポリオレフィン容器を対象とする。いくつかの態様において、容器は、非DEHP（ビス(2-エチルヘキシル) フタレート (ジ-2-エチルヘキシルフタレート、ジエチルヘキシルフタレート、DEHP；ジオクチルフタレート、DOP）または非PVP（ポリビニルピロリドン）である。
【００８０】
キットは、ボックス、個々のボトル、バッグまたはアンプルなどの好適な容器を含む。懸濁組成物は、単一用量の再密閉不可能な容器または複数用量の再密閉可能な容器内に包装することができる。
【００８１】
処置方法およびがん
本発明はまた、その必要のある対象におけるがんを処置する方法であって、がんを処置するための活性作用物質としての治療有効量の乳酸カルシウムを含む本明細書に記載の薬学的組成物を投与することを含む、方法に向けられる。
【００８２】
用語「がん」は、本明細書において使用される場合、制御されない様式で増殖し、場合によっては、転移（伝播）する傾向のある、細胞の異常な成長を指す。本明細書に記載の方法による処置に適したがんの種類は、肺がん、乳がん、結腸直腸がん、胃がん、脳がん、膵臓がん、甲状腺がん、皮膚がん、骨がん、リンパ腫、子宮がん、子宮頸がん、腎臓がん、および黒色腫を含むが、それらに限定されない。いくつかの態様において、がんは、限定されないが、肺がん、乳がん、結腸直腸がん、胃がん、脳がん、膵臓がん、甲状腺がん、皮膚がん、骨がん、リンパ腫、子宮がん、子宮頸がん、腎臓がん、および黒色腫などの転移性がんである。本開示において提供される薬学的組成物で処置できるがんは、その成長、浸潤、および転移を、例えば、その代謝を妨害することによって抑制または減少できるかぎり、特に限定されない。
【００８３】
用語「対象」または「患者」は、哺乳動物および非哺乳動物を包含する。哺乳動物の例は、哺乳動物クラスの任意のメンバー:ヒト、チンパンジーなどの非ヒト霊長類、ならびに他の類人猿およびサル種;ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ブタなどの家畜;ウサギ、イヌ、およびネコなどの家庭内動物;ラット、マウスおよびモルモットなどの齧歯動物を含む実験動物などを含むが、それらに限定されない。非哺乳動物の例は、鳥類、魚類などを含むが、それらに限定されない。本明細書に提供される方法および組成物のいくつかの態様において、哺乳動物は、ヒトまたは非ヒトである。
【００８４】
本明細書において使用される場合、薬学的組成物の投与によってがんを「処置する（treat）」、「処置すること（treating）」、またはその「処置（treatment）」は、組成物の投与に起因または関連し得る、恒久的であるか一時的であるか、持続的か一過性かにかかわることのない、がんまたはがんの転移の重症度の軽減、発症の遅延、進行の減速、または持続期間の短縮のいずれかを指す。
【００８５】
いくつかの態様において、方法は、第二の抗がん剤を投与することをさらに含む。第二の抗がん剤は、イマチニブ、5-FU（5-フルオロウラシル）、イリノテカン、スニチニブ、オキサリプラチン、パクリタキセル、ラパチニブ、トラスツズマブ（ハーセプチン）、ゲフィチニブ、エルロチニブ、メトトレキサート、カルボプラチン、ドセタキセル、エベロリムス、ソラフェニブ、炭酸脱水酵素阻害剤、およびモノカルボン酸トランスポーター阻害剤を含むことができる。
【００８６】
いくつかの態様において、乳酸カルシウムおよび第二の抗がん剤は、同時に投与される。いくつかの態様において、乳酸カルシウムおよび第二の抗がん剤は、逐次的に投与される。
【００８７】
乳酸カルシウムは、公知の抗がん薬と組み合わせて投与した場合に、改善された抗がん活性を示す。これは、公知の抗がん薬ががん細胞の解糖に関与する機序を有し得ないからである。それ故、活性作用物質である乳酸カルシウムと公知の抗がん薬との共投与は、がんの処置においてより効果的に使用することができる。しかしながら、いくつかの態様において、乳酸カルシウムは、本明細書に記載の方法または組成物において使用される唯一の活性作用物質である。
【００８８】
活性作用物質である乳酸カルシウムは、がん細胞の転移、浸潤、血管新生、管形成、細胞遊走、コロニー形成能などのがん細胞の転移を引き起こすことができる様々な特徴を抑制することができ、したがって、これを、がん転移を抑制するための薬学的組成物の活性成分として使用することができる。
【００８９】
転移が抑制される標的がんは、上で定義したものと同じである。例えば、がん転移を抑制するための薬学的組成物を、転移性の肺がん、乳がん、結腸直腸がん、胃がん、脳がん、膵臓がん、甲状腺がん、皮膚がん、骨がん、リンパ腫、子宮がん、子宮頸がん、腎臓がん、および黒色腫などの1つまたは複数の転移性がんの発生を抑制するために使用することができる。
【００９０】
本発明の方法は、放射線を投与することをさらに含むことができる。放射線は、1日当たり2Gy〜10Gyの量で対象に提供することができる。したがって、組成物を放射線と組み合わせて投与する場合、乳酸金属塩は、放射線の抗がん活性を改善する。それ故、従来の場合と比較して減少した放射線量で同等の抗がん作用を得ることが可能である。この場合、放射線の量は、特に限定されることはなく、1日当たり2〜10Gyであることができる。放射線は、1日1回照射しても、放射線量を分割することによって数日間かけて照射してもよい。
【００９１】
用語「共投与」または類語は、本明細書において使用される場合、選択された2以上の活性作用物質の単一患者への投与を包含することを意味し、それらの作用物質が同じもしくは異なる投与経路によってまたは同じもしくは異なる時点に投与される処置計画を含むことを意図する。
【００９２】
本開示の薬学的組成物は、治療有効量で投与することができ、本明細書において使用される場合、用語「有効量」または「治療有効量」は、任意の医学的治療または予防に適用可能な妥当なベネフィット/リスク比で疾患を治療または予防するのに十分な量を指す。有効投与量レベルは、疾患の重症度、薬物の活性、患者の年齢、体重、健康および性別、薬物への感受性、投与時間、投与経路、ならびに本開示の組成物の排出速度、処置の継続時間、本開示の組成物と同時にまたは組み合わせて使用される薬物、ならびに医学分野において公知の他の要因に応じて決定することができる。本開示の薬学的組成物を、単独で、または、他の公知の抗がん薬もしくは抗がん活性を有するとして公知の成分と組み合わせて投与することができる。上の要因の全てを考慮した上で、副作用を引き起こすことなく最大効果を示すことができる最少量で、組成物を投与することが重要である。
【００９３】
本開示の薬学的組成物を、1日当たりの投与量が、例えば、約10mg/kg〜約1,000mg/kg、約10mg/kg〜約500mg/kg、約10mg/kg〜約250mg/kg、約10mg/kg〜約200mg/kg、約10mg/kg〜約100mg/kg、約1mg/kg〜約100mg/kg、約1mg/kg〜約75mg/kg、約1mg/kg〜約50mg/kg、約1mg/kg〜約25mg/kg、または約1mg/kg〜約10mg/kgになるように投与することができる。組成物の投与頻度は、1日1回、2回、3回、4回などの分割用量であることができるが、それらに特に限定されない。
【００９４】
本明細書に記載の化合物を含有する組成物を、予防的処置および/または治療的処置のために投与することができる。治療的適用では、組成物は、すでに疾患または病態を患っている患者に、疾患または病態の症状を治癒するかまたは少なくとも部分的に阻止するのに十分な量で投与される。この使用に有効な量は、疾患または病態の重症度および経過、治療歴、患者の健康状態、体重、および薬物への応答、ならびに主治医の判断に依存する。ルーチン実験（限定されないが用量漸増臨床試験を含む）によってそのような治療有効量を決定することは、十分に当業者の技能範囲内であると考えられる。
【００９５】
予防的適用では、本明細書に記載の活性作用物質を含有する組成物は、がんの影響を受けやすいかまたはそうでなければそのリスクのある患者に投与される。そのような量は、「予防的に有効な量または用量」であると定義される。この使用において、正確な量はまた、患者の健康状態、体重などに依存する。ルーチン実験（例えば、用量漸増臨床試験）によってそのような予防的に有効な量を決定することは、十分に当業者の技能範囲内であると考えられる。患者に使用されるとき、この使用のための有効量は、疾患、障害または病態の重症度および経過、治療歴、患者の健康状態および薬物への応答、ならびに主治医の判断に依存する。
【００９６】
患者の病態が改善しない場合には、医師の裁量によって、患者の疾患または病態の症状を改善するかまたはそうでなければ制御もしくは制限するために、本明細書に記載の活性作用物質の投与を、患者の人生の期間全体を含め、慢性的に、すなわち、長期間投与することができる。
【００９７】
そのような量に相当する所与の作用物質の量は、特定の化合物、疾患状態およびその重症度、処置を必要とする対象または宿主の固有性（例えば、年齢、体重、性など）などの要因に応じて変動するが、それとは関係なく、例えば投与されている具体的な作用物質、投与経路、処置されている病態、および処置されている対象または宿主を含めたその事例を取り巻く特定の状況に従って、当技術分野において公知の様式で、これをルーチンに決定することができる。
【００９８】
いくつかの態様において、該方法は、細胞毒性剤、例えば、5-FU、メトトレキサート、イリノテカン、ドセタキセル、パクリタキセル、カルボプラチン、オキサリプラチン、標的薬剤、例えば、スニチニブ、ソラフェニブ、ラパチニブ、イマチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、トラスツズマブ（ハーセプチン）、エベロリムス、炭酸脱水酵素阻害剤（CAi）、モノカルボン酸トランスポーター阻害剤（MCTi）、ホルモン薬、および細胞療法薬などの第二の活性作用物質を投与することをさらに含む。
【００９９】
いくつかの態様において、該方法は、以下を含むがこれらに限定されないがん処置のための当技術分野において公知のUSFDA承認薬などの第二の抗がん剤を投与することを含む。
2020500870.tif 000003
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【０１００】
本発明はまた、以下を含む：
A. 薬学的に活性な成分として抗がん剤を含む持続放出薬学的組成物であって、ポリマー類、多糖類、および脂質類からなる群より選択される少なくとも1つの物質を含む、持続放出薬学的組成物。
B. 抗がん剤が乳酸カルシウムである、Aの組成物。
C. ポリマーが、ポロキサマー系列、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール（PEG）、またはポリグリコール酸・乳酸（PLGA）である、Aの組成物。
D. 多糖が、セルロース誘導体、ペクチン、ヒアルロン酸、デンプン、グアーガム、キトサン、ゼラチン、コラーゲンおよびアルギン酸からなる群より選択される少なくとも1つの多糖である、Aの組成物。
E. 脂質が、モノもしくはトリ脂肪酸グリセリンエステルおよびそのポリエチレングリコール複合体、植物油のポリエチレングリコールエステル、および脂肪酸プロピレングリコールエステル;ゴマ油、大豆油、ヒマシ油、コーン油、パーム油、落花生油、カカオ脂、綿実油、ヒマワリ種子油、サフラワー油、アーモンド油、オリーブ油およびその硬化油;限定されないが、オレイン酸、リノレン酸、リノール酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、アラキドン酸、ミリスチン酸、カプリン酸、カプリル酸、ラウリン酸、ステアリン酸、オレイン酸エチル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシルおよびパルミチン酸セチル; ならびにラウリルアルコール、オレイルアルコール、セチルアルコールおよびステアリルアルコールからなる群より選択される少なくとも1つの成分からなる群より選択される、Aの組成物。
F. 組成物の抗がん剤とポリマーとの重量比が、1:2〜1:10の範囲である、Aの組成物。
G. 組成物の抗がん剤：多糖の重量比が、1:0.5〜1:10の範囲である、Aの組成物。
H. 組成物の抗がん剤：多糖：ポリマーの重量比が、1:0.5:2〜1:10:10の範囲である、Aの組成物。
I. 組成物の抗がん剤：多糖：脂質：ポリマーの重量比が、1:0.5:1:2〜1:10:100:10の範囲である、Aの組成物。
J. 注射または口腔粘膜による投与用である、A〜Iのいずれか1つの組成物。
K. 薬学的に活性な成分として抗がん剤を含む持続放出薬学的組成物であって、抗がん剤が、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（HPMCP）、セルロースアセテートフタレート（CAP）、ポリビニルアセテートフタレート（PVAP）、セラック、およびメタクリル酸およびそのエステルのポリマーからなる群より選択される少なくとも1つのメンバーでコーティングされている、持続放出薬学的組成物。
L. 抗がん剤が乳酸カルシウムである、Kの組成物。
【実施例】
【０１０１】
乳酸カルシウムはまた、本実施例において、OMT-110またはOMT110とも称される。
【０１０２】
実施例1
乳酸カルシウムを水に溶解し、その溶液を4℃で15分間保持し、ポロキサマー 407（Sigma-Aldrich, Germany）をその溶液に加えた。混合物を、清澄な溶液が得られるまで保存した（組成物：乳酸カルシウム：400mg、ポロキサマー407：2.5g、水：10g）。
【０１０３】
実施例2
乳酸カルシウムを水に溶解した。メチルセルロース（MC）（DAEJUNG, South Korea）をその溶液に加え、混合物を撹拌して、メチルセルロースが完全に溶解するまで室温で保持し、次いで、4℃で15分間維持した（組成物：乳酸カルシウム：400mg、MC：2.5g、水：10g）。
【０１０４】
実施例3
乳酸カルシウムを水に溶解し、MCをその溶液に加え、混合物を攪拌して、MCが完全に溶解するまで室温で保持し、次いで、4℃で15分間維持して、ポロキサマー407をその溶液に加える。混合物を、清澄な溶液が得られるまで保存した（組成物：乳酸カルシウム：400mg、MC：200mg、ポロキサマー407：2.5g、水：10g）。
【０１０５】
実施例4
乳酸カルシウムを水に溶解し、MCおよびコーン油（DAEJUNG, South Korea）をその溶液に加えた。混合物を撹拌し、MCが完全に溶解するまで室温で保持し、4℃で15分間維持し、ポロキサマー407をその溶液に加え、混合物を、清澄な溶液が得られるまで保存した（組成物：乳酸カルシウム：400mg、MC：200mg、コーン油：400mg、ポロキサマー407：2.5g、水：10g）。
【０１０６】
実施例5
ペクチン（Sigma-Aldrich, Germany）を水に溶解し、混合物を撹拌して、ペクチンが完全に膨張するまで室温で維持した。CaCl2を加え、撹拌することによって溶解し、乳酸カルシウムを加え、均質化された混合物が得られるまで撹拌した（組成物：乳酸カルシウム：400mg、CaCl2：150mg、ペクチン：200mg、水：10g）。
【０１０７】
実施例6
アルギン酸（Sigma-Aldrich, Germany）を水に溶解し、混合物を撹拌して、完全な膨張が生じるまで室温で保持した。CaCl2をその溶液に加え、撹拌することによって溶解し、均質化された混合物が得られるまで乳酸カルシウムを加えた（組成物：乳酸カルシウム：400mg、CaCl2：150mg、アルギン酸塩：200mg、水：10g）。
【０１０８】
実施例7
ペクチンを水に溶解し、混合物を撹拌して、ペクチンが完全に膨張するまで室温で維持し、次いで、乳酸カルシウムを加え、撹拌して、均質化された混合物を得た（組成物：乳酸カルシウム：400mg、ペクチン：200mg、水：10g）。
【０１０９】
実施例8
アルギン酸を水に溶解し、混合物を撹拌して、完全な膨張まで室温で維持し、乳酸カルシウムを加え、撹拌して、均質化された混合物を得た（組成物：乳酸カルシウム：400mg、アルギン酸塩：200mg、水：10g）。
【０１１０】
実施例9：薬物放出実験
溶解試験器法：溶出試験器（Labfine Co., Mumbai, India）；温度：37℃；撹拌：300rpm；膜：Whatman 0.45μm、ナイロン。
放出研究：上の実施例1〜8の製剤2gを量り、ドナー成分に加えた。レセプター成分を蒸留水で満たし、セルを総量200ml、pH 6.8でシステムにセットした。サンプリング時間毎に、放出媒体0.5mlを取り出し、蒸留水と交換した。全ての実験を3回繰り返した。薬物放出の結果は以下である。
【０１１１】
図1に示す通り、本発明に従って調製した実施例1および2の製剤において、薬物が6〜24時間以内に完全に放出されることが確認される。比較して、実施例3および4の製剤では、薬物が144時間まで継続的に放出されることが分かる。このことは、メチルセルロースおよび脂質（コーン油）がポロキサマー407と適正に混合されて、ヒドロゲル中での薬物の拡散を遅らせ、それによって持続放出が達成されることを示唆している。
【０１１２】
図2に示す通り、薬物は、本発明に従って調製した実施例5および6のヒドロゲル中に6〜24時間以内に完全に放出される。比較して、実施例7および8のヒドロゲルでは、薬物が144時間まで継続的に放出されたことが確認された。いかなる理論にも束縛されるものではないが、乳酸カルシウムがペクチンおよびアルギン酸塩に組み込まれて、Caイオン塩であるがCaイオンではない乳酸カルシウムを使用してゲル化を形成することによって持続放出薬物送達系を形成することが考えられる。
【０１１３】
実施例10：乳酸カルシウムの新しい腸溶性コーティング製剤の設計および評価
乳酸カルシウムは、インビトロで強い抗がん効果を示すことが見いだされた。しかしながら、その薬物は、水中、とりわけ酸性条件下で非常に不安定であり、急速に分解される。それ故、この薬物は、経口投与時に胃の酸性環境中で急速に分解するので、一般的な経口製剤で薬学的効果を示すことは困難である。乳酸カルシウムはまた、大腸に存在する酵素によって破壊されるので、大腸に到達しても吸収されない。
【０１１４】
この研究の目的は、胃内で薬物を保護することおよび大腸に到達する前に小腸で吸収されることを目的として、腸溶性コーティングされた乳酸カルシウム調製物を製剤化することであった。
【０１１５】
腸溶性コーティングされた乳酸カルシウムを得るために2つの別個の調製物を開発して、その生成物を溶解試験によって評価した。第一の調製物では、流動床コーターを使用して乳酸カルシウムを含有するペレットを調製し、腸溶性コーティングし、カプセルに充填した。第二の調製物では、乳酸カルシウム100mgの速溶錠を調製し、腸溶性コーティングした。腸溶性コーティング層が厚くなるにつれて、耐酸性は良好となるが、調製物の崩壊が遅延されるので小腸において吸収は不完全である。それ故、最適な腸溶性コーティング層を得るために、腸溶性コーティング溶液の内容物を変えながら耐酸性および崩壊率に関して製剤を評価する。
【０１１６】
A）試薬および材料
（1）試薬
以下の試薬を購入し、さらに精製することなしに使用した。
乳酸カルシウム（Metimedi Pharmaceuticals Co. Ltd.によって提供される）
HPMCP（pH 5.0, 5cps, Shinetsu, Japan）
HPMCP（pH 5.5, 5cps, Shinetsu, Japan）
ポリビニルアセテートフタレート（Opadry enteric 91 series, Colorcon, USA）
微晶質セルロース（Vivapur 12, JRS Pharma, Germany）
水は、実験室で逆浸透によって濾過した後に使用し、全ての他の試薬は、試薬等級であった。
【０１１７】
（2） 装置
以下の装置を使用した。
HPLCシステム（Agilent, Model 1260 Infinity）
天秤（Mettler Toledo, Model ML802）
天秤（Sartorius, Model Quintix224-1SKR）
pHメーター（Mettler Toledo, Model FiveEasy Plus）
等温水浴（Daihan, Model Maxturdy-30）
超音波発生装置（Branson, Model 2510）
崩壊試験器（Erweka, Model ZT 222）
流動床コーター（Enger, China, Model Labcoat II）
打錠機（Erweka, Germany, Model EP-1）
コーター（Freund Industrial, Japan, Model HOT-MINI）
溶解試験器（Labfine, Model DST-810）
【０１１８】
B）乳酸カルシウムの分析
この実験室で開発されたHPLC法によって、試料中の乳酸カルシウムの量を分析した。線形性、日内および日間の精度および正確性について、Q2 （R1）のICHガイドラインに従ってこのHPLC法を検証した。
【０１１９】
（1）HPLCシステム（Agilent, Model 1260 Infinity） 
4成分ポンプ（Agilent, Model G1311C）
オートサンプラー（Agilent, Model G1329B）
UV検出器（Agilent, Model G1314F）
OpenLABクロマトグラフィーデータシステム（Agilent, Model CDS）
【０１２０】
（2）HPLC分析条件
移動相：H2SO4 7.5mM 
流速：0.6ml/min
カラム：Rezex RHM-Monosaccharide-H＋カラム（5μm, 7.8mm×300mm, Phenomenex, USA）
カラム温度：40℃
検出波長：210nm
注入量：10μl
保持時間：約14分
【０１２１】
C）様々な溶媒中での乳酸カルシウムの溶解度
様々な溶媒中での乳酸カルシウムの溶解度を、Higuchi and Connors法を使用して測定した。過剰量の乳酸カルシウム（五水和物形態および乾燥形態）を、精製水または有機溶媒を含有する小さいバイアル中に入れた。次いで、バイアルを密閉し、恒温水浴中に取り付け、50rpm、30℃で72時間振盪した。72時間の振盪は、予備実験としての溶解度測定にとって十分であることが見いだされた。振盪後、0.45μm膜フィルター（Whatman、ナイロンフィルター）で試料を濾過し、精製水で適切に希釈し、HPLC法を使用して分析した。この実験を3回繰り返した。
【０１２２】
乳酸カルシウム五水和物形態30.81gをオーブン中100℃で乾燥することによって乾燥形態の乳酸カルシウムを得た。予備実験として、乾燥の8、24、48、および72時間後に乳酸カルシウムの重量を測定し、24時間後に最終重量に達したことが見いだされた。乾燥形態の乳酸カルシウムの含水率は、4.05％（w/w）であった。
【０１２３】
D）乳酸カルシウムの腸溶性コーティングペレットの調製
乳酸カルシウムが可能な限り迅速かつ容易に吸収されるようにするために、薬物は、胃の酸性環境から完全に保護されるべきであり、調製物は、小腸に到達次第ただちに崩壊し、吸収のために薬物を放出すべきである。
【０１２４】
Natural Way Co.の工場で流動床コーターを使用して腸溶性コーティングペレットを調製した。乳酸カルシウムの腸溶性コーティングペレットの調製プロセスは以下の通りであった。
【０１２５】
最初に、乳酸カルシウムを60メッシュの篩で選別した。乳酸カルシウムのおよそ15％を篩に通し、残りの85％を調製のために使用した。これらの細粒を流動床コーターに入れ、以下の操作およびコーティング条件下で細粒の重量に対して45％、60％、および100％の重量増加に達するまで腸溶性コーティングした。
【０１２６】
（1）腸溶性コーティング溶液の調製
腸溶性コーティング溶液の内容物（5％固形分）
HPMCP 95
グリセリン 5
エタノール 95
水 5
【０１２７】
HPMCP（pH 5.5）95gおよびグリセリン5gを、エタノール：水の溶液（95：5混合物）に撹拌しながら加え、溶解して、腸溶性コーティング溶液を調製した。
【０１２８】
流動床コーターの操作条件
-スプレーの種類：ボトムスプレー
-バッチサイズ：300g
-ノズルタイプ：円形
-ノズル数：1
-ノズル径：0.8mm
-エアキャップ：標準
-ポンプタイプ：蠕動
-カラム径：12cm
-カラム高：2.5cm
-カラム数：1
【０１２９】
流動床コーターのコーティング条件
-入口予熱温度：32℃
-予熱時間：3分間
【０１３０】
詳細なコーティング条件を表1に示す。
【０１３１】
（表１）流動床コーターに使用される腸溶性コーティングの条件
2020500870.tif 000021
2020500870.tif 000022
* コーティング番号:コアに対する腸溶性コーティング顆粒の重量％、CN1：45％、CN2：60％、CN3：100％
** 吹付け空気圧
【０１３２】
E）乳酸カルシウムの腸溶性コーティング錠の調製
通常、錠剤は比較的長い崩壊時間を有する。しかしながら、錠剤が胃の酸性条件下から保護され、小腸における迅速な吸収のために小腸に到達後に直ちに崩壊される場合には、ペレットと同じ目標を達成することができる。この事実に基づき、乳酸カルシウムの速溶錠を調製し、腸溶性コーティングした。乳酸カルシウム腸溶性コーティング錠の調製プロセスは以下の通りであった。
【０１３３】
打錠機（Erweka, Model: EP-1）および8mmの凹面パンチを使用して直接圧縮法によって乳酸カルシウム錠剤を調製した。調製バッチサイズは、250錠であった。乳酸カルシウム製剤の詳細を表2に示す。
【０１３４】
（表２）乳酸カルシウム錠剤の配合
2020500870.tif 000023
【０１３５】
最初に、天秤（Mettler Toledo, Model: ML802）を使用して乳酸カルシウム25gおよびVivapur 12 12.312gを量り、十分に混合した。次に、天秤（Sartorius, Model: Quintix 224-1SKR）を使用してステアリン酸マグネシウム0.187gを量り、混合物に加えた。この最終混合物を、8mmの凹面パンチを使用して以下の条件下で圧縮した。硬度を80〜100Nに調整した。
【０１３６】
F）調製した錠剤の物性の測定
10個の錠剤を使用して、硬度試験器（Erweka, Model: TBH 125）で硬度を測定した。10個の錠剤を使用して、天秤（Sartorius, Model: Quintix 224-1SKR）で錠剤の重量を測定した。調製した腸溶性コーティング錠の崩壊試験を、崩壊試験器を使用して薬局方の方法に従って行った。このようにして測定された乳酸カルシウム錠剤の詳細を表3に示す。
【０１３７】
（表３）乳酸カルシウム錠剤の詳細
2020500870.tif 000024
【０１３８】
G）錠剤の腸溶性コーティング
ポンプ（Eyela, Model: SMP-4）を備えたコーター（Freund Industrial Co., Model: HOT-MINI）を使用して、表4に示す腸溶性コーティング溶液で錠剤をコーティングした。ポリビニルアセテートフタレート（Opadry enteric 91 series）を腸溶性コーティング剤として使用した。
【０１３９】
（表４）腸溶性コーティング基剤の配合
2020500870.tif 000025
【０１４０】
（1）1リットルのビーカー中、イソプロパノール300mlおよび塩化メチレン200mlを入れ、マグネチックスターラーを使用して約10分間混合した。
（2）（1）で調製した溶媒中に、ポリビニルアセテートフタレート30gを加え、約1時間撹拌した。
（3）溶液を100メッシュの篩に通した後、通過させた材料を撹拌した。
【０１４１】
次に、以下の条件下で、この腸溶性コーティング溶液を用いてコーティングを行った。
-入口温度：65〜70℃
-出口温度：30〜33℃
-生成物温度：30〜32℃
-注入速度：1.7ml/min
-大気：0.1MPa
-RPM：12〜16
【０１４２】
コーティング中、錠剤重量が約2％、5％、8％、および10％に増加したときに、コーティング錠の試料を採取した。
【０１４３】
G）腸溶性コーティングされた乳酸カルシウムの溶解試験
US薬局方のパドル法を使用して、以下の条件を使用して乳酸カルシウムの腸溶性ペレットおよび錠剤の溶解試験を行った。
-パドル速度:50rpm
-媒体:0.1N HCl（0〜120分）、リン酸緩衝液 pH 6.8（120〜180分）
-温度:37℃
-分析法:HPLC
【０１４４】
H）結果
（1）様々な溶媒中での乳酸カルシウムの溶解度
イソプロパノール、エタノール、メタノールおよび水中での乳酸カルシウムの溶解度を表5に示す。この表から分かるように、五水和物形態および乾燥形態の溶解度は、互いに異なる。五水和物形態の乳酸カルシウムは、水中では予想どおり99.48mg/mLの高い溶解度を示したが、イソプロパノール中では0.024g/mL、エタノール中では1.464mg/mL、メタノール中では507.17mg/mLを示した（乳酸カルシウムの溶解度はメタノール中で非常に高いが、Gincomin錠の事件以来、韓国ではメタノールをコーティング溶媒として使用することができない）。メタノール中の乾燥乳酸カルシウムの溶液は、五水和物形態の場合よりもはるかにより高い。しかし、該溶液は、メタノール中750mg/mLの乾燥乳酸カルシウム濃度で高度に粘性（ゲルに似た）になったので、本発明者等は、溶解度を決定するためにこれ以上薬物を加えることができなかった。
【０１４５】
（表５）30℃での様々な溶媒中での乳酸カルシウム（五水和物および乾燥形態）の溶解度（平均±SD、n=3）
2020500870.tif 000026
* 該溶液は、メタノール中750mg/mLの乾燥乳酸カルシウム濃度で高度に粘性（ゲルに似た）になったので、本発明者等は、溶解度を決定するためにこれ以上薬物を加えることができなかった。
【０１４６】
（2）乳酸カルシウムの腸溶性コーティング錠からの、薬物の溶解
ポリビニルアセテートフタレートを腸溶性コーティング剤として使用して0％、2.1％、5.7％、8.3％、および10.9％のレベルで、錠剤を腸溶性コーティングした。錠剤の溶解試験をpH 6.8の0.1N HCL中120分間、続いて、もう1つの試験をリン酸緩衝液でpH 6.8に調整した後に1時間行った。結果を表に6および図3示す。
【０１４７】
（表６）乳酸カルシウムを含有する腸溶性コーティング錠からの、薬物放出（平均±SD、n=3）
2020500870.tif 000027
【０１４８】
コーティングのない錠剤を用いた0.1N HCl溶液中120分間の溶解試験は、15分で薬物が完全に溶解したことを示した。2.1％腸溶性コーティング錠の場合、薬物の溶解は、0.1N HCl溶液中60分で開始し、薬物の約41％が120分で溶解した。その後、薬物は、pH 6.8 リン酸緩衝液中10分で完全に溶解した。上記の通り溶解が酸性溶液中で開始したので、腸溶性コーティングは十分でないと考えられる。
【０１４９】
その一方で、5.7％以上でコーティングされた錠剤の場合、薬物は、120分まで0.1N HCl溶液から溶解しなかった。その後、pH 6.8で、薬物は、5.7％腸溶性コーティング錠から20分で、8.3％腸溶性コーティング錠から30分で、10.9％腸溶性コーティング錠から45分で完全に溶解した。
【０１５０】
この結果に基づき、図3に示す通り、錠剤の約5％の腸溶性コーティングが胃で十分な耐酸性を示し、短時間で完全に溶解できることが見いだされた。
【０１５１】
（3）乳酸カルシウムの腸溶性ペレットからの、薬物の溶解
HPMCPを腸溶性コーティング剤として使用して0％、45％、60％、および100％のレベルで、ペレットを腸溶性コーティングした。ペレットの溶解試験を、0.1N HCL中で120分間、続いて、もう1つの試験をリン酸緩衝液でpH 6.8に調整した後に1時間行った。結果を表7および図4に示す。これらのデータから分かるように、薬物は、コーティングのない錠剤の場合と同じく試験の15分後に十分に溶解した。
【０１５２】
（表７）乳酸カルシウムを含有する腸溶性コーティングペレットからの、薬物放出（平均±SD、n=3）
2020500870.tif 000028
【０１５３】
45％腸溶性コーティングペレットについて、薬物は、0.1N HCl中15分で溶解し始め、薬物の約40％が120分で溶解した。
【０１５４】
この結果は、より高いレベルの腸溶性コーティングペレットで類似していた。60％腸溶性コーティングペレットでは、約22％の薬物が溶解し、100％腸溶性コーティングペレットでは、約15％の薬物が溶解した。それは、腸溶性コーティングが不完全であったことを示している。その後、45％および60％の腸溶性コーティングペレットについて140分（腸液中で20分）、100％腸溶性コーティングペレットについて150分（腸液中で30分）で、薬物は完全に溶解した。この結果の理由は、生産に使用された乳酸カルシウムの原料の一貫性のないサイズに起因し得るので、一部の細粒をコーティングしないかまたは他の細粒より薄くコーティングした。この溶解の程度は、無視できないが、それは、実際の生産では150％の腸溶性コーティングで制御することができ、パイロット試験での生産では多いとは言えない。
【０１５５】
（4）腸溶性コーティングされた乳酸カルシウムの安定性試験
2.1％、5.7％、8.3％および10.9％のレベルのポリビニルアセテートフタレートでの腸溶性コーティング錠で、ならびに45％、60％、および100％のレベルのHPMCでコーティングされたペレットで、乳酸カルシウム調製物の安定性を観察した。40℃で1、2および4週間保存した後の溶解プロファイルに関して、腸溶性コーティング錠およびペレットの安定性を評価した。結果を表8および9に示し、また、各腸溶性コーティングレベルでの乳酸カルシウムの安定性もそれぞれ図5および6に提示する。
【０１５６】
表8および図5に示す通り、2.1％腸溶性コーティング錠の場合を除き、時間0と40℃で4週間保存後との間で腸溶性コーティング錠の溶解プロファイルに差はなかった。しかしながら、この差は、保存温度の効果よりも少量のコーティングの不均一コーティングに起因すると考えられる。1、2、および4週間保存した試料の中で溶解プロファイルに差はなかった。概して、4週間保存したとき、主成分として乳酸カルシウムを含有する腸溶性コーティング錠の溶解プロファイルに変化はない。
【０１５７】
また、表9および図6に示す通り、時間0と40℃で4週間保存後との間で腸溶性コーティングペレットの溶解プロファイルに差はなかった。概して、腸溶性コーティングされた乳酸カルシウム調製物は安定であり、それらの溶解プロファイルは、高い温度で保存したときであっても変化しなかった。
【０１５８】
（I）結論
胃酸および腸内酵素に感受性である乳酸カルシウムを胃から保護するために、かつ、大腸に到達する前に小腸でのその吸収を改善するために、乳酸カルシウムを腸溶性コーティング錠およびカプセル剤へと製剤化した。両調製物は、薬学的評価に基づく研究目標に到達した。乳酸カルシウムのヒトの身体への投与量が数十mgであることを前提として製造の容易性を考慮したときに、錠剤形態が好ましいとの結論に至った。
【０１５９】
加えて、1、2および4週間での安定性を40℃の加速条件で測定し、試験の直前に測定した安定性の間で差は観察されなかった。
【０１６０】
しかしながら、2.1％の含量でコーティングされた錠剤の場合、時間0において測定されたプロファイル間で溶解プロファイルにわずかな差があったが、試料間で安定性にほとんど差はなかった。
【０１６１】
（表８）40℃で1、2および4週間保存された、乳酸カルシウムを含有する腸溶性コーティング錠からの薬物放出（平均±SD、n=3）
2020500870.tif 000029
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【０１６２】
（表９）40℃で1、2および4週間保存された、乳酸カルシウムを含有する腸溶性コーティングペレットからの薬物放出（平均±SD、n=3）
2020500870.tif 000031
2020500870.tif 000032
【０１６３】
実施例11：カプセル剤の調製
1. 流動床造粒機を使用して、乳酸カルシウム溶液を一定サイズのシード上にスプレーして薬物層を形成し、形成された球状顆粒を腸溶性コーティングする。
2. 乳酸カルシウムを篩にかけ、ある特定のサイズのみを選択し、流動床造粒機を使用してそれを腸溶性コーティングする。
3. 乳酸カルシウムを有機溶媒に溶解した結合剤と混合して、湿塊を生産する。押出機を使用してそれを造粒し、次いで、球状化装置を使用して球状化して、球状顆粒を調製し、それを次いで腸溶性コーティングする。
【０１６４】
上記の通りの球状顆粒を調製する際に、薬学的に許容される様々な添加物を必要に応じて加えることができる。
【０１６５】
球状造粒機を使用したが、流動床造粒機に加えて類似の機能を有する他のタイプの造粒機を使用することができる。
【０１６６】
腸溶性コーティング剤の例は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート（HPMCP）、セルロースアセテートフタレート（CAP）、ポリビニルアセテートフタレート（PVAP）、セラック、メタクリル酸およびそれらのエステルのポリマー類（Eudratgit（登録商標））を含む。しかしながら、本発明は、それらに限定されず、腸溶性コーティング医薬品に使用することができる物質を含む。上記の通り、乳酸カルシウムを含有するカプセルの内容物を、従来の添加物を使用して従来の方法によって腸溶性コーティングし、適切なサイズのカプセルに投入して、カプセル剤を調製する。
【０１６７】
あるいは、乳酸カルシウムを含有するカプセル内容物を、従来の添加物を使用して従来の方法によって調製することができ、その内容物を適切なサイズのカプセルに投入して、カプセルを腸溶性コーティングする。
【０１６８】
実施例12：錠剤の調製
従来の添加物を使用して従来の方法によって乳酸カルシウムを含有する錠剤を調製し、腸溶性コーティングする。
【０１６９】
あるいは、乳酸カルシウム粉末を腸溶性コーティングし、これを使用し、従来の添加物を使用して従来の様式で錠剤を調製する。
【０１７０】
さらに、従来の添加物を使用して従来の方法によって乳酸カルシウムを含有する錠剤を調製して腸溶性コーティングし、任意で、従来の添加物を使用して従来の方法によってこれに糖衣を施すことができる。
【０１７１】
調製例12-1
乳酸カルシウム300gを、Fitzmillのハンマーを使用して回転速度500rpmで粉砕し、微粉末を生産用に60メッシュの篩に通す。この粉末を無水エタノール750gに加えて懸濁液を製造する。この溶液に、HPMC 2910 5 cps 9.5gおよびPEG 0.5gを撹拌下で加え、一晩静置する。流動床コーターを使用して、溶液を20〜25シード300gに約40℃の温度でスプレーして、薬物層を調製する。内容物の重量をコアに対して30％増加させるために、エタノール：水の混合物（95:5）に溶解した腸溶性コーティング溶液、HPMCP 95およびグリセリン5を顆粒上にスプレーする（あるいは、ポビドン（PVP K30）150gを撹拌しながら溶液に加えて、完全に溶解する）。
【０１７２】
調製例12-2
乳酸カルシウム300gを60メッシュの篩上で選別し、篩上に残っている細粒を調製に使用する。内容物の重量をコアに対して150％増加させるために、エタノール：水の混合物（95:5）に溶解した腸溶性コーティング溶液、HPMCP 95およびグリセリン5を顆粒上にスプレーする。
【０１７３】
生産例12-3
最初に、乳酸カルシウム（100mg）およびVIVAPUR 12（49.25mg、JRS Pharma, Rosenberg, Germany）を量り、十分に混合する。次いで、ステアリン酸マグネシウム（0.75mg）をこの混合物と混合する。この最終混合物を、8mmの凹面パンチを使用して1錠当たり150mgに圧縮する。硬度を80〜100Nに調整する。6％コーティング基剤を含有するようにイソプロピルアルコール：塩化メチレンの混合物（6:4）にポリビニルアセテートフタレートを溶解することによって腸溶性コーティング溶液を調製する。溶液を錠剤上にスプレーして錠剤の重量を5％増加させる。
【０１７４】
実施例13：長時間作用型製剤のインビボ効果
乳酸カルシウム：多糖（MC）：油（コーン油＋モノステアリン酸グリセリル）＝1:4:10の重量比で長時間作用型製剤を調製した。調製した組成物は、注射剤を患者に投与するのに容易である均質な溶液相を形成した。この組成物で、乳酸カルシウムは、15日まで持続的に放出される。
【０１７５】
腫瘍形成
ヒト結腸直腸がん細胞（5×106）をBalb/cヌードマウスの脇腹に移植した。乳酸カルシウム投与前、腫瘍サイズは150〜200mm3まで成長した。
【０１７６】
乳酸カルシウム投与
群1：ビヒクル投与（対照群）
群2：乳酸カルシウム（2mg/kg）を、21日間にわたり1日2回（B.I.D）皮下投与した。
群3：乳酸カルシウムを含む長時間作用型製剤（200mg/kg）を、実験の初日に1回皮下投与した。
群4：乳酸カルシウムを含む長時間作用型製剤（400mg/kg）を、実験の初日に1回皮下投与した。
【０１７７】
抗腫瘍効果
腫瘍体積を実験終了まで週3回測定し、腫瘍の最小（M）および最大（L）直線的サイズ（L×M2/2）を計算することによって記録した。実験最終日に解剖後に腫瘍重量を測定した。腫瘍塊を5μmに切片化し、次いで、組織学的分析のためにヘマトキシリンおよびエオジンで染色した。
【０１７８】
毒性
各動物の体重を実験最終日まで週3回測定した。腫瘍生検後、内臓の状態を観察した。
【０１７９】
結果
図7（腫瘍体積の測定）に示す通り、200mg/kgの長時間作用型製剤の単回投与の2週間後、腫瘍成長は、対照群と比較して約20％抑制された。腫瘍成長は、400mg/kgの長時間作用型処置群において、対照群と比較して約45％大幅に抑制された。400mg/kgの長時間作用型の投与の結果は、21日間にわたる乳酸カルシウムの連日投与と類似の抗がん効果を示した。これらの結果は、適切な濃度の乳酸カルシウムを含有する長時間作用型製剤が、1回のみの投与であっても乳酸カルシウムの3週間投薬と類似した長期にわたる抗腫瘍効果を示すことができることを示した。
【０１８０】
図8（腫瘍成長の比較）に示す通り、21日間にわたる乳酸カルシウムおよび長時間作用型（400mg/kg）処置群の腫瘍サイズは、対照群よりも明らかに小さかった。200mg/kgの長時間作用型群は、対照群と類似の腫瘍成長を示したが、乳酸カルシウムによる炎症応答が組織において明白に観察された。
【０１８１】
図9（腫瘍重量の比較）に示す通り、実験終了時の解剖された腫瘍重量の平均は、200mg/kgの長時間作用型処置群において対照群と比較して約15％減少する。腫瘍重量は、400mg/kgの長時間作用型処置群において対照群と比較して約40％大幅に減少したが、この結果は、21日間にわたる乳酸カルシウムでの連日処置群と類似していた。これらの結果は、適切な濃度の乳酸カルシウムを含有する長時間作用型製剤が、1回のみの投与であっても乳酸カルシウムの3週間投薬と類似した長期にわたる抗腫瘍効果を示すことができることを示した。
【０１８２】
図10（組織学的分析）に示す通り、長時間作用型製剤の群は、1回のみの投与であっても、21日間にわたる乳酸カルシウムでの連日投与のように組織において内部壊死を確認することができた。
【０１８３】
体重を週3回測定し、群間で体重に差はなかった。この結果は、長時間作用型製剤が実験中に毒性を与えなかったことを示した。
【０１８４】
解剖を行って内臓の機能的状態をチェックした。長時間作用型製剤であっても、肺、心臓、肝臓および腸を含む内臓に影響がないことが確認された。
【０１８５】
実施例14：長時間作用型製剤の最適な組成を決定するための論理的根拠
組成を変動させることによって長時間作用型製剤を調製し、次いで、製剤の液体状態、患者への注射可能性および薬物放出特性を調査した。
【０１８６】
（表１０）様々な組成重量比による薬物放出の特性
2020500870.tif 000033
【０１８７】
乳酸カルシウム：多糖：油（コーン油）＋ポリマー（ポロキサマー）（1:0.2:5〜1:5:30）の組成比を有する溶液は、患者へ注射可能な均質な相を示し、薬物は144時間まで絶えず放出された。
【０１８８】
乳酸カルシウムに対する多糖の組成比が0.2よりも小さかったとき、薬物は6〜24時間以内に急速に放出された。
【０１８９】
多糖組成が乳酸カルシウムの5倍よりも大きかったとき、溶液は沈殿し高度に粘性だったので、患者へ注射可能ではなかった。
【０１９０】
油（コーン油）＋ポリマー（ポロキサマー）組成が乳酸カルシウムの30倍よりも大きかったとき、溶液は注射可能であったが、その量は多過ぎて皮下注射に適さない。
【０１９１】
実施例15：インビボ転移効果
細胞培養および試薬
ヒト結腸直腸がん細胞株（HCT-116）を、American Type Culture Collection （Manassas, VA, USA）から購入した。細胞を、10％ウシ胎児血清（Welgene, Daegu, South Korea）、100IU/mlペニシリン、および100μg/mlストレプトマイシン（Welgene, Daegu, South Korea）を補充したRPMI-1640培地（Welgene, Daegu, South Korea）中、5％ CO2の加湿雰囲気中37℃で維持した。乳酸カルシウム（CaLa）をSigma-Aldrich （St Louis, MO, USA）から購入した。乳酸カルシウムを3週間にわたって1日2回皮下注射によって投与した。
【０１９２】
脾臓内注射
2％イソフルランでマウスを麻酔した。1回の注射用に、5×106個のHCT116細胞をリン酸緩衝生理食塩水100μLに懸濁した。小規模な左腹部側腹切開を行って、脾臓内注射のために脾臓を露出させた。調製した細胞を30ゲージ針で脾臓に注射した。腫瘍細胞の漏出および出血を防止するために、注射部位上を綿棒で1分間押さえた。注射した脾臓を腹部に戻し、創傷を6-0黒色絹糸で縫合した。
【０１９３】
結果
図11に示す通り、乳酸カルシウム投与によって対照と比較して転移が抑制され、腫瘍が発生した場合であっても、乳酸カルシウムの抗腫瘍効果によって炎症応答が誘導されたことが確認された。
【０１９４】
実施例16：腸溶性コーティング製剤のインビボ効果
腫瘍形成
ヒト結腸直腸がん細胞（2.5×106）をBalb/cヌードマウスの脇腹に移植した。乳酸カルシウム投与前、腫瘍サイズは150〜200mm3まで成長した。
【０１９５】
乳酸カルシウム投与
群1：ビヒクル投与（V.対照群）
群2：乳酸カルシウムを含む腸溶性コーティング製剤（100mg/kg）を、3週間にわたって週5日経口投与した。
【０１９６】
抗腫瘍効果
腫瘍体積を実験終了まで週3回測定し、腫瘍の最小（M）および最大（L）直線的サイズ（L×M2/2）を計算することによって記録した。実験最終日に解剖後に腫瘍重量を測定した。
【０１９７】
毒性
各動物の体重を実験最終日まで週3回測定した。腫瘍生検後、内臓の状態を観察した。
【０１９８】
結果
図12（腫瘍体積の測定）に示す通り、100mg/kgの腸溶性コーティング製剤の単回投与の3週間後、腫瘍成長は、対照群と比較して約36％抑制された。
【０１９９】
図13（腫瘍成長の比較）に示す通り、腸溶性コーティング（100mg/kg）処置群の腫瘍サイズは、対照群よりも明らかに小さかった。
【０２００】
図14（腫瘍重量の比較）に示す通り、実験終了時の解剖された腫瘍重量の平均は、100mg/kgの腸溶性コーティング処置群において対照群と比較して約25％減少する。
【０２０１】
体重を毎週測定し、群間で体重に差はなかった。この結果は、腸溶性コーティング製剤が実験中に毒性を与えなかったことを示した。
【０２０２】
解剖を行って内臓の機能的状態をチェックした。腸溶性コーティング製剤であっても、肺、心臓、肝臓および腸を含む内臓に影響がないことが確認された。
【０２０３】
前述の特定の態様の説明は、本発明の一般的性質を十分に明らかにしているので、当技術分野における技能の範囲内の知識を適用することによって、本発明の一般概念から逸脱することなく、そのような特定の態様を様々な適用のために容易に変更および/または適合させることができる。それ故、そのような適合および変更は、本明細書に提示される教示および指針に基づいて、開示した態様の等価物の意味および範囲内にあるものと意図される。本明細書の用語または表現が教示および指針に照らして当業者によって解釈されるべきであるように、本明細書における表現または用語は、説明を目的とするものであり、限定を目的とするものではないことを理解されるべきである。
【０２０４】
本発明の幅および範囲は、上記の例示的な態様のいずれによっても限定されるべきではないが、添付の特許請求の範囲およびその等価物に従ってのみ定義されるべきである。
【０２０５】
本明細書に記載の様々な局面、態様、および選択肢の全てを、ありとあらゆるバリエーションで組み合わせることができる。
【０２０６】
本明細書において言及される全ての刊行物、特許、および特許出願は、各々個々の刊行物、特許または特許出願が参照によって組み入れられると具体的かつ個別に示されたかのように同程度に、参照によって本明細書に組み入れられる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【国際調査報告】
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