(57)【要約】  哺乳類、好ましくは、ヒトにおいて、心房細動又は前心房細動状態を治療する方法であって、該方法は、有機又は無機の硫化物、有機又は無機の亜硝酸塩の一方、有機又は無機の硫化物及び有機又は無機の亜硝酸塩の両方、又はその薬学上許容される塩、溶媒和物、エステル、アミド、クラスレート、立体異性体、鏡像異性体、プロドラッグ、又は類似体、又はその組み合わせを、治療上有効量で投与することを含んでなる。【選択図】    図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳類における心房細動又は前心房細動状態を治療する方法であって、
有機又は無機の硫化物、その薬学上許容される塩、溶媒和物、エステル、アミド、クラスレート、立体異性体、鏡像異性体、プロドラッグ、又は類似体、又はその組み合わせを含む硫化物、及び
有機又は無機の亜硝酸塩、その薬学上許容される塩、溶媒和物、エステル、アミド、クラスレート、立体異性体、鏡像異性体、プロドラッグ、又は類似体、又はその組み合わせを含む亜硝酸塩
の一方、又は
硫化物及び亜硝酸塩の両方
を、治療上有効量で含有する医薬組成物を投与することを含んでなる方法。
【請求項２】
医薬組成物が硫化物を含有するものである請求項１に記載の方法。
【請求項３】
硫化物がプロドラッグである請求項２に記載の方法。
【請求項４】
プロドラッグが、ニンニク、ニンニクエキス、アブラナ科野菜、アブラナ科野菜エキス、及びその組み合わせの１つである請求項３に記載の方法。
【請求項５】
硫化物がジアリルトリスルフィッド（ＤＡＴＳ）である請求項２に記載の方法。
【請求項６】
哺乳類が男性である請求項２に記載の方法。
【請求項７】
医薬組成物が亜硝酸塩を含有するものである請求項１に記載の方法。
【請求項８】
亜硝酸塩がプロドラッグである請求項７に記載の方法。
【請求項９】
プロドラッグが、ビートルート、ホウレンソウ、レタス、アルギュラ、チンゲン菜、セロリ、チャービル、コラードの葉、クレス、大根、レッドビートルート、ルバーブ、スイス・チャード、バジル、根セロリ、白菜、トウチシャ、コリアンダー、エンダイブ、フェンネル、コールラビ、リーキ、からし菜、及びパセリ、そのエキス、及びその組み合わせの１つである請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
プロドラッグが硝酸塩の形を含む請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
亜硝酸塩が無機亜硝酸塩である請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
亜硝酸塩が亜硝酸ナトリウムである請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
哺乳類が女性である請求項７に記載の方法。
【請求項１４】
哺乳類がヒトである請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
医薬組成物が、硫化物及び亜硝酸塩の両方を含有するものである請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
さらに、哺乳類が男性あるか又は女性であるかに基づいて、医薬組成物における硫化物及び亜硝酸塩の相対レベルを公式化する工程を含んでなる請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
医薬組成物が、哺乳類が男性である場合に、より高い硫化物／亜硝酸塩レベルを有し、哺乳類が女性である場合に、より低い硫化物／亜硝酸塩レベルを有する請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
治療上有効量の、有機又は無機の硫化物、その薬学上許容される塩、溶媒和物、エステル、アミド、クラスレート、立体異性体、鏡像異性体、プロドラッグ、又は類似体、又はその組み合わせを含む硫化物、及び
治療上有効量の、有機又は無機の亜硝酸塩、その薬学上許容される塩、溶媒和物、エステル、アミド、クラスレート、立体異性体、鏡像異性体、プロドラッグ、又は類似体、又はその組み合わせを含む亜硝酸塩
を含んでなる医薬組成物。
【請求項１９】
硫化物がジアリルトリスルフィッドである請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
亜硝酸塩が亜硝酸ナトリウムである請求項１８に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、２０１７年２月２０日出願の米国仮特許出願第６２／４６１０２８号（参照して、ここに完全に再び述べるかの如く、本明細書に組み込む）の優先権を主張する。組み込まれたものと、本明細書の具体的な教示との間のいかなる矛盾も、後者を優先して解決される。同様に、語句の当分野で理解される定義と、本明細書において具体的に教示された語句の定義との間のいかなる矛盾も、後者を優先して解決される。
【０００２】
本発明は、心房細動の治療及び予防における硫化水素及び／又は亜硝酸塩に関する。
【背景技術】
【０００３】
心房細動（ＡＦ）は、心臓の心房（上方の室）における急速且つ無秩序な電気活動が、心不全及び脳卒中につながる不規則且つ急速な心室（下方の室）活動を引き起こす心臓のリズム障害である。米国では２２０万人及び欧州連合では４５０万人がＡＦに罹っていると推測され、有病率は、続く５０年以内に、少なくとも２倍になると予測される。ＡＦは、最も一般的な持続性の不整脈である。現在、米国の人口の約１％が発症している。米国では、２０５０年までに、１２００〜１６００万人が発症するであろう。増加する肥満及び加齢は、発生におけるリスクを説明する助けとなる危険因子である。ＡＦを発症する生涯リスクは、４０歳以上の男性及び女性については４人に１人であると予測される。
【０００４】
米国では、１時間当たり約８件の心房細胞による虚血性脳卒中が発生している。米国では、毎年、約７９５０００件の新たな及び再発の脳卒中が発生する。これらの内の８７％は本質的に虚血性であり、残りの１３％は出血性である。虚血性脳卒中の１／５は、心原性脳塞栓症による。これらの内、非弁膜性の心房細動は、約半分を占める。ＡＦに関連する虚血性脳卒中は、非ＡＦ関連虚血性脳卒中よりも、患者を、寝たきり及び重症化又は致命的なものとする傾向が強い。ＡＦが、人口のかなりの且つ増大する部分に対して、疾病及び死亡の原因となり、米国医療制度に対して、かなりの且つ増大する財政負担の原因となるものを含む治療の巨大な要求にもかかわらず、従来技術では、ＡＦに対する十分な治療は存在しない。上述の理由から、ＡＦ及び前ＡＦ状態についての治療の開発について、差し迫っているが、一見したところ、解決できない要求が存在する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
それ故、本発明の目的は、現在の治療法に関連する上述の欠陥及び欠点を克服することにある。本発明は、上述の欠陥及び欠点を満足する心房細動又は前ＡＦ状態の治療法及び治療用組成物を対象とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、哺乳類、好ましくは、ヒトにおける心房細動及び前心房細動状態を治療する処置、治療学、キット、及び方法に関し、有機又は無機の硫化物、有機又は無機の亜硝酸塩の一方、有機又は無機の硫化物及び有機又は無機の亜硝酸塩の両方、又はその薬学上許容される塩、溶媒和物、エステル、アミド、クラスレート、立体異性体、鏡像異性体、プロドラッグ、又は類似体、又はその組み合わせを、治療上有効量で投与することを含んでなる。
【０００７】
本発明は、治療薬（有機及び／又は無機の硫化物、有機及び／又は無機の亜硝酸塩、又は有機及び／又は無機の硫化物及び有機及び／又は無機の亜硝酸塩の両方、又はその薬学上許容される塩、溶媒和物、エステル、アミド、クラスレート、立体異性体、鏡像異性体、プロドラッグ、又は類似体、又はその組み合わせ）を含んでなる医薬組成物、及びＡＦ又は前ＡＦ状態の治療のための、これら組成物の使用に関する。
【０００８】
いくつかの具体例では、治療薬、又はその薬学上許容される塩、溶媒和物、エステル、アミド、クラスレート、立体異性体、鏡像異性体、プロドラッグ、又は類似体、又はその組み合わせを、さらに、薬学上許容される添加剤を含む医薬組成物として投与する。
【０００９】
いくつかの具体例では、ヒトへの医薬組成物の投与では、０．０５〜１０μＭ（例えば、０．０５〜５μＭ）の治療薬のピーク血漿濃度を生ずる。
【００１０】
いくつかの具体例では、治療薬のピーク血漿濃度は１４時間まで持続される。他の具体例では、治療薬のピーク血漿濃度は１時間まで持続される。
【００１１】
いくつかの具体例では、疾患はＡＦ又は前ＡＦ状態である。
【００１２】
特定の具体例では、ＡＦ又は前ＡＦ状態は、軽症から中等度のＡＦ又は前ＡＦ状態である。
【００１３】
更なる具体例では、ＡＦ又は前ＡＦ状態は、中等度から重篤なＡＦ又は前ＡＦ状態である。
【００１４】
他の具体例では、治療薬は０．０５〜５ｍｇ／ｋｇ（ヒトの体重）の用量で投与される。
【００１５】
特定の具体例では、医薬組成物は経口投与用として処方される。
【００１６】
他の具体例では、医薬組成物は持続放出性として処方される。
【００１７】
さらに他の具体例では、医薬組成物は即時放出性として処方される。
【００１８】
いくつかの具体例では、医薬組成物は、ＡＦ又は前ＡＦ状態の治療又は予防のため、１以上の追加の治療薬と同時に投与される。
【００１９】
いくつかの具体例では、治療薬、又はその薬学上許容される塩、溶媒和物、エステル、アミド、クラスレート、立体異性体、鏡像異性体、プロドラッグ、又は類似体は、さらに、薬学上許容される添加物を含む医薬組成物として投与される。
【００２０】
いくつかの具体例では、医薬組成物のヒトへの投与は、０．０５〜１０μＭ（例えば、０．０５〜５μＭ）の治療薬のピーク血漿濃度を生ずる。
【００２１】
いくつかの具体例では、治療薬のピーク血漿濃度は、１４時間まで持続する。他の具体例では、治療薬のピーク血漿濃度は、１時間まで持続する。
【００２２】
他の具体例では、治療薬は０．０５〜５ｍｇ／ｋｇ（ヒトの体重）の用量で投与される。
【００２３】
特定の具体例では、医薬組成物は経口投与用に処方される。
【００２４】
他の具体例では、医薬組成物は持続放出性として処方される。
【００２５】
さらに他の具体例では、医薬組成物は即時放出性として処方される。
【００２６】
ここで使用するように、用語「遅延放出性」は、実質的にそのままで胃を通過し、小腸及び／又は大腸（例えば、結腸）で溶解する医薬製剤、例えば、経口投与製剤を含む。いくつかの具体例では、活性剤（例えば、ここに記載するような治療薬）の遅延放出は、経口薬（経口剤形）の全体コーティングの使用から生ずる。
【００２７】
活性剤の用語「有効量」とは、ここで使用するように、有益な又は所望の結果、例えば、臨床結果をもたらすに十分な量であり、「有効量」自体は、適用される状況に左右される。
【００２８】
用語「持続放出性」又は「徐放性」は、交換可能に、同じ薬剤の即時放出性製剤と比べて、延長された期間、例えば、６〜１２時間以上の間での薬剤の除放出を提供する薬剤製剤を含む。好ましくは、必ずしもというわけではないが、治療レベル内にあり、延長された期間にわたって、例えば、０．０５〜１０μＭ、０．１〜１０μＭ、０．１〜０．５μＭ、又は０．１〜１μＭのピーク血漿濃度範囲に入る薬剤の実質的に一定の血中レベルを生ずる。
【００２９】
ここで使用するように、用語「腸溶放出製剤」及び「腸溶製剤」は、胃の強酸性（低ｐＨ）環境において、溶解からの保護を提供できる経口投与のための医薬組成物、例えば、経口剤を含む。腸溶製剤は、例えば、医薬組成物に、胃液中での溶解に抵抗性のポリマーを配合することによって得られる。いくつかの具体例では、ポリマーは、約５．０〜７．０の範囲に溶解最適ｐＨを有する（「ｐＨ感受性ポリマー」）。例となるポリマーとしては、商標名Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）（例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）Ｌ１００、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）Ｓ１００、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）Ｌ−３０Ｄ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）ＦＳ  ３０Ｄ、及びＥｕｄｒａｇｉｔ（登録商標）Ｌ１００−５５）によって知られているメタクリル酸共重合体、フタル酸酢酸セルロース、トリメリト酸酢酸セルロース、ポリ酢酸ビニルフタレート（例えば、Ｃｏａｔｅｉｃ（登録商標））、ヒドロキシエチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、又はシェラック、その水性分散液が含まれる。これらポリマーの水性分散液としては、セルロースアセテートフタレート（Ａｑｕａｔｅｒｉｃ（登録商標））又はシェラック（例えば、ＭａｒＣｏａｔ１２５及び１２５Ｎ）の分散液が含まれる。腸溶製剤は、即時放出製剤と比較して、胃に放出される投与された用量の割合を、少なくとも、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は９８％まで低減する。このようなポリマーが錠剤又はカプセルを被覆する場合、このコーティングは、「腸溶コーティング」とも称される。
【００３０】
用語「即時放出性」とは、薬剤（例えば、治療薬）が、単位剤形として処方されるように、インビトロ条件下、例えば、ヒトへの投与後２時間以内に、薬剤の少なくとも５５％、６５％、７５％、８５％、又は９５％が放出される溶解放出プロフィールを有する場合を含む。望ましくは、単位剤形として処方された薬剤は、インビトロ条件下、投与の少なくとも３０分、４５分、又は６０分以内で、薬剤の少なくとも５０％、６５％、７５％、８５％、９０％、又は９５％が放出される溶解放出プロフィールを有する。
【００３１】
用語「医薬組成物」は、ここで使用するように、薬学上許容される添加剤とともに処方された、哺乳類の疾患の治療レジメンの一部としての政府機関の許可とともに、製造及び販売される、ここに記載の化合物（例えば、有機及び／又は無機の硫化物、有機及び／又は無機の亜硝酸塩、又は有機及び／又は無機の硫化物及び有機及び／又は無機の亜硝酸塩の両方、又はその薬学上許容される塩、溶媒和物、エステル、アミド、クラスレート、立体異性体、鏡像異性体、プロドラッグ、又は類似体、又はその組み合わせ）を含有する組成物を含む。
【００３２】
医薬組成物は、例えば、単位用量剤型の経口投与（例えば、錠剤、カプセル、カプレット、ジェルキャップ、又はシロップ）、局所投与（例えば、クリーム、ジェル、ローション、又は軟膏）、静脈内投与（例えば、微粒子状栓子フリー及び静脈内使用に好適な溶媒システムにおける無菌液）、又はここに記載の各種の他の剤形として処方される。
【００３３】
「薬学上許容される添加剤」としては、ここで使用されるように、ここに記載の化合物（例えば、活性化合物を懸濁化又は溶解することができるビヒクル）以外で、患者において非毒性及び非炎症性であるとの特性を有する各種の成分を含む。添加剤としては、例えば、粘着防止剤、抗酸化剤、結合剤、コーティング剤、圧縮補助剤、崩壊剤、染料（色素）、皮膚軟化剤、乳化剤、賦形剤（希釈剤）、膜形成剤又は塗膜剤、香味料、香料、滑剤（フローエンハンサー）、滑沢剤、保存料、印刷インク、吸着剤、懸濁又は分散剤、甘味料、又は水和の水が含まれる。例としての添加剤としては、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム（二塩基性）、ステアリン酸カルシウム、クロスカルメロース、架橋ポリビニルピロリドン、クエン酸、クロスポビドン、システイン、エチルセルロース、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、マルチトール、マルトース、マンニトール、メチオニン、メチルセルロース、メチルパラベン、微結晶性セルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ポビドン、アルファ化デンプン、プロピルパラベン、パルミチン酸レチニル、シェラック、二酸化ケイ素、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、クエン酸ナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、ソルビトール、デンプン（コーン）、ステアリン酸、ショ糖、タルク、二酸化チタン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＣ、及びキシリトールが含まれるが、これらに限定されない。
【００３４】
用語「薬学上許容されるプロドラッグ」は、ここで使用するように、可能であれば、双性イオン型の本発明の化合物と同様に、正しい医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激作用、アレルギー反応等を有するヒト及び動物の組織と接触しての使用に適し、ベネフィット／リスク比に見合っており、及びそれらの意図する用途について有効である本発明の化合物のプロドラッグを含む。
【００３５】
用語「薬学上許容される塩」は、ここで使用するように、正しい医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激作用、アレルギー反応等を有していないヒト及び動物の組織と接触しての使用に適し、ベネフィット／リスク比に見合っている塩を含む。薬学上許容される塩は、当分野においてよく知られている。例えば、薬学上許容される塩は、Ｂｅｒｇｅら，Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，６６：１−１９，１９７７、及びＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：特性、選択、及び使用，（編者Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ及びＣ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ），Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００８に記載されている。塩は、本発明の化合物の最終の単離及び精製の間にその場で、又は別に、遊離塩基基を好適な有機酸又は無機酸と反応させることによって調製される。代表的な酸付加塩としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロオピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプトン酸塩、ヘキサン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロオピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩、等が含まれる。無毒アンモニウム、４級アンモニウム、及びアミンカチオン（アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミン、等を含むが、これらに限定されない）と同様に、代表的なアルカリ金属又はアルカリ土類金属塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、等が含まれる。
【００３６】
用語「薬学上許容される溶媒和物」又は「溶媒和物」は、ここで使用するように、好適な溶媒の分子が結晶格子内に組み込まれた本発明の化合物を含む。好適な溶媒は、投与量において、生理的に容認可能である。例えば、溶媒和物は、有機溶媒、水、又はその混合物を含む溶液から、結晶化、再結晶、又は析出によって調製される。好適な溶媒の例としては、エタノール、水（例えば、１、２、及び３水和物）、Ｎ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ´−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、Ｎ，Ｎ´−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノン（ＤＭＥＵ）、１，３−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２−（１Ｈ）−ピリミジノン（ＤＭＰＵ）、アセトニトリル（ＡＣＮ）、プロピレングリコール、酢酸エチル、ベンジルアルコール、２−ピロリドン、安息香酸ベンジルエステル、等が含まれる。水が溶媒である場合、溶媒和物は、「水和物」と呼ばれる。
【００３７】
用語「防止する」は、ここで使用するように、ここに記載する疾患、障害、又は症状（例えば、ＡＦ又は前ＡＦ状態）の１以上の兆候又は症状を防止する予防措置又は処置を含む。処置は、例えば、疾患、障害、又は兆候の開始に先んずる事象の前に（暴露前予防）又は後に（暴露後予防）開始される。本発明の化合物、又はその医薬組成物の投与を含む処置は、急性、短期、又は慢性である。投与量は、予防処置の過程において変動される。
【００３８】
用語「プロドラッグ」は、ここで使用するように、インビボで、上記化学式の親化合物に迅速に変換される化合物を含む。プロドラッグは、ヒトに投与される際に、治療薬のインビボ形成をもたらす生物学的同等性の化合物も包含する。徹底した検討は、Ｔ．Ｈｉｇｕｃｈｉ及びＶ．Ｓｔｅｌｌａ，新規の送達システムとしてプロドラッグ，Ａ．Ｃ．Ｓ．  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓの１４巻、及びＥｄｗａｒｄ  Ｂ．  Ｒｏｃｈｅ編，Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，１９８７に提供されており、それぞれを、参照して、ここに組み込む。プロドラッグは、下記に列挙するように、食品を含むこともできる。好ましくは、本発明の化合物のプロドラッグは薬学上許容される。
【００３９】
ここで使用するように、及び当分野で良く理解されているように、「治療」は、有益な又は所望の結果、例えば、臨床結果を得るためのアプローチを含む。有益な又は所望の結果としては、１以上の兆候又は症状の軽減又は改善；疾患、障害、又は症状の程度の縮減；疾患、障害、又は症状の安定化（すなわち、非悪化）状態；疾患、障害、又は状態の展開の防止；疾患、障害、又は症状の進行の遅延又は緩慢化；疾患、障害、又は症状の改善又は寛解；及び検出可能又は検出不可の緩和（部分的又は完全）が含まれる。「治療」は、治療を行わない場合に期待される生存と比較して、生存が延長されることを意味する。ここで使用するように、用語「治療する」及び「治療」は、治療が適用された疾患又は症状又はこのような疾患又は症状の１以上の兆候、開始を遅延させること、進行を妨害又は逆進させること、又は軽減することも含む。
【００４０】
用語「単位剤形」は、ヒト患者及び他の哺乳類のための単位用量として、物理的に別々のユニットを含み、各ユニットは、好適な薬学上許容される添加剤を伴って、所望の治療効果を生じるように算定された所定量の活性物質を含有する。
【００４１】
ここで使用するように、用語「血漿濃度」は、治療患者の血漿中に存在する治療薬の量を含む（例えば、下記のアッセイを使用するウサギにおいて又はヒトにおいて測定されるように）。
【００４２】
本発明の各種の目的、特徴、態様、及び利点は、添付図面（数字は同様の成分を表す）とともに、下記の本発明の好適な具体例の詳細な記載から、より明らかになるであろう。本発明は、上述の現在の技術の課題及び欠陥の１以上を処理できる。しかし、本発明は、かなりの技術領域における他の課題及び欠陥を処理することにおいて有用であることが明らかであると予期される。それ故、特許請求の範囲に記載の発明は、ここに開示された特別な課題又は欠陥のいずれかを処理することに限定されるものであると理解されてはならない。
【００４３】
添付図面（明細書の一部に組み込まれ、及び構成する）は、本発明の各種の具体例を説明し、上記の発明の一般的な記載及び下記の図面の詳細な記載とともに、発明の原理を説明するように機能する。図面は、発明の原理を説明する際、むしろ強調がなされているため、必ずしも原寸に比例していないと理解されるべきである。次に、添付図面を参照して、例として、本発明を記載する。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】図１は、本発明の洞調律（ＳＲ）（左の像）又は心房細動（ＡＦ）（右の像）の患者からの右心房組織の所定領域における、ｏｘ−ＣａＭＫＩＩに対する抗血清を使用する２つ免疫蛍光像である。
【図２】図２Ａ及び２Ｂは、図１からのＳＲ及びＡＦ像についてのｏｘ−ＣａＭＫＩＩ密度／面積を示す棒グラフ（２Ａ）、及びマウスの４つのサブグループのＡＦのマウスの割合を示す棒グラフ（２Ｂ）である。
【図３】図３Ａ及び３Ｂは、カルシウムシグナリングタンパク質及びＡＦ−ＲｙＲの酸化を示す。図３Ａは、ＡＦの患者及び正常な心室機能を有するヒト又はコントロールの右心房（ＲＡ）組織におけるＡＦ−ＲｙＲ２複合体の翻訳後修飾を示す。心臓手術時、慢性のＡＦ患者（＞６か月；ｎ＝１０）、及び洞調律の患者（ｎ＝１０）から、ＲＡ心耳組織を得た。ＲｙＲ２のチャネル酸化を測定するため、免疫沈降されたＲｙＲ２のタンパク質側鎖におけるカルボニル基を、２，４−ジニトロフェニルヒドラジンとの反応によって、（ＤＮＰ）に誘導体化した。ＲｙＲ２と関連するＤＮＰ（２，４−ジニトロフェニルヒドラゾン）シグナルを、抗−ＤＮＰ抗体によって測定した。図３Ｂは、ヒトＣＰＶＴ（ＲｙＲ２−Ｒ２４７４Ｓ＋／−）と関連するＲｙＲ２変異を内包するＤＮＰマウス、及び恒常的に漏出し易いチャネルにつながる位置２８０８（ＲｙＲ２−Ｓ２８０８Ｄ＋／−）においてリン酸化模倣を発現するマウスの数量化を示す。
【図４】図４Ａ及び４Ｂは、図３Ａ及び３Ｂにおけるマウスの年齢による（４Ａ）及びサブグループによる（４Ｂ）ＡＦの％割合を示す
【図５】図５Ａ及び５Ｂは、心不全患者における硫化水素レベルを示す折れ線グラフ及び棒グラフである。
【図６】図６は、Ｈ２Ｓの各種の心保護機構の概略的描写である。
【図７】図７は、内在性Ｈ２Ｓの生合成経路の概略的描写である。
【図８】図８Ａ及び８Ｂは、野生型マウス及びＣＳＥ  ＫＯ（ノックアウト）マウスに関する血液Ｈ２Ｓを示す（８Ａ）及び心臓Ｈ２Ｓを示す（８Ｂ）棒グラフである。
【図９】図９Ａ及び９Ｂは、ＣＳＥ  ＫＯマウスについての酸化ストレスを示す写真（９Ａ）及び棒グラフ（９Ｂ）である。
【図１０】図１０Ａ〜１０Ｄは、心房（１０Ａ）、心室（１０Ｂ）、筋肉（１０Ｃ）、及び血漿（１０Ｄ）についての、ＷＴ及びＣＳＥ  ＫＯマウスにおけるスーパーオキシドレベルを示す棒グラフである。
【図１１】図１１は、マウスの電気生理学及びマウスにおけるＡＦ誘導の概略的描写である。
【図１２】図１２Ａ及び１２Ｂは、持続性ＡＦの（１２Ａ）及び非持続性ＡＦの（１２Ｂ）心電リズムである。
【図１３】図１３は、ＷＴ及びＣＳＥ  ＫＯマウスの心電リズムを示す。
【図１４】図１４Ａ及び１４Ｂは、ＷＴ及びＣＳＥ  ＫＯマウスにおける持続性ＡＦを示す（１４Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（１４Ｂ）棒グラフである。
【図１５】図１５は、ＷＴ及びＣＳＥ  ＫＯマウスにおける心房の活動電位持続時間を示す棒グラフ及び心臓波である。
【図１６】図１６Ａ及び１６Ｂは、ＷＴ雄マウス及びＣＳＥ  ＫＯ雄マウスにおける持続性ＡＦを示す（１６Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（１６Ｂ）棒グラフである。
【図１７】図１７Ａ及び１７Ｂは、ＷＴ雌マウス及びＣＳＥ  ＫＯ雌マウスにおける持続性ＡＦを示す（１７Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（１７Ｂ）棒グラフである。
【図１８】図１８Ａ及び１８Ｂは、ＷＴマウス、ＣＳＥ  ＫＯマウス、及びＣＳＥ  ＫＯ  ＤＡＴＳ処置マウスにおける持続性ＡＦを示す（１８Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（１８Ｂ）棒グラフである。
【図１９】図１９Ａ及び１９Ｂは、ＷＴ雄マウス、ＣＳＥ  ＫＯ雄マウス、及びＣＳＥ  ＫＯ  ＤＡＴＳ処置雄マウスにおける持続性ＡＦを示す（１８Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（１８Ｂ）棒グラフである。
【図２０】図２０Ａ及び２０Ｂは、ＷＴ雌マウス、ＣＳＥ  ＫＯ雌マウス、及びＣＳＥ  ＫＯ  ＤＡＴＳ処置雌マウスにおける持続性ＡＦを示す（１８Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（１８Ｂ）棒グラフである。
【図２１】図２１及び２１Ｂは、マウスの各種のグループについての、高ホモシステイン血症の概略的描写（２１Ａ）及び総血漿システインの棒グラフ（２１Ｂ）である。
【図２２】図２２は、ホモシステイン惹起ＲＯＳが生体利用可能なＮＯのレベルを低下させる機構の概略的描写である。
【図２３】図２３は、ＷＴマウス及びＣＳＥ  ＫＯマウスにおける心房のＮＯレベルを示す棒グラフである。
【図２４】図２４Ａ及び２４Ｂは、ＷＴ及びＣＳＥ  ＫＯ雄マウスにおける（２４Ａ）及び雌マウスにおける（２４Ｂ）心房でのＮＯレベルを示す棒グラフである。
【図２５】図２５Ａ及び２５Ｂは、ＰＢＳで処置した（２５Ａ）及び亜硝酸塩で処置した（２５Ｂ）ＣＳＥ  ＫＯ雌マウスの心電リズムである。
【図２６】図２６Ａ及び２６Ｂは、ＷＴ雌マウス、ＣＳＥ  ＫＯ雌マウス、及び亜硝酸塩処置したＣＳＥ  ＫＯ雌マウスにおける持続性ＡＦを示す（２６Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（２６Ｂ）棒グラフである。
【図２７】図２７Ａ及び２７Ｂは、ＷＴマウス及びＣＳＥ  ＫＯマウスにおける持続性ＡＦを示す（２７Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（２７Ｂ）棒グラフである。
【図２８】図２８Ａ及び２８Ｂは、ＷＴ雄マウス及びＣＳＥ  ＫＯ雄マウスにおける持続性ＡＦを示す（２８Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（２８Ｂ）棒グラフである。
【図２９】図２９Ａ及び２９Ｂは、ＷＴ雌マウス及びＣＳＥ  ＫＯ雌マウスにおける持続性ＡＦを示す（２９Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（２９Ｂ）棒グラフである。
【図３０】図３０Ａ及び３０Ｂは、ＷＴマウス、ＤＡＴＳで処置したＷＴマウス、ＣＳＥ  ＫＯマウス、及びＤＡＴＳで処置したＣＳＥ  ＫＯマウスにおける持続性ＡＦを示す（３０Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（３０Ｂ）棒グラフである。
【図３１】図３１Ａ及び３１Ｂは、ＷＴ雄マウス、ＤＡＴＳで処置したＷＴ雄マウス、ＣＳＥ  ＫＯ雄マウス、及びＤＡＴＳで処置したＣＳＥ  ＫＯ雄マウスにおける持続性ＡＦを示す（３１Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（３１Ｂ）棒グラフである。
【図３２】図３２Ａ及び３２Ｂは、ＷＴ雌マウス、ＣＳＥ  ＫＯ雌マウス、及びＤＡＴＳで処置したＣＳＥ  ＫＯ雌マウスにおける持続性ＡＦを示す（３２Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（３２Ｂ）棒グラフである。
【図３３】図３３Ａ及び３３Ｂは、ＷＴマウス、ＣＳＥ  ＫＯマウス、及び亜硝酸塩で処置したＣＳＥ  ＫＯマウスにおける持続性ＡＦを示す（３３Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（３３Ｂ）棒グラフである。
【図３４】図３４Ａ及び３４Ｂは、ＷＴ雄マウス、ＣＳＥ  ＫＯ雄マウス、及び亜硝酸塩で処置したＣＳＥ  ＫＯ雄マウスにおける持続性ＡＦを示す（３４Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（３４Ｂ）棒グラフである。
【図３５】図３５Ａ及び３５Ｂは、ＷＴ雌マウス、ＣＳＥ  ＫＯ雌マウス、及び亜硝酸塩で処置したＣＳＥ  ＫＯ雌マウスにおける持続性ＡＦを示す（３４Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（３４Ｂ）棒グラフである。
【図３６】図３６Ａ及び３６Ｂは、ＷＴマウス及びｅＮＯＳ  ＫＯマウスにおける持続性ＡＦを示す（３６Ａ）及び全てのＡＦの期間を示す（３６Ｂ）棒グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００４５】
本発明は、下記の詳細な説明（添付図面と合わせて読まれるべきである）を参照することによって理解されるであろう。各種の具体例の下記の詳細な説明は、例としてのみ述べたものであり、いかなる意味でも、本発明の範囲を限定するものではないことが理解されなければならない。上述の記載、下記の詳細な説明、特許請求の範囲、及び添付図面において、本発明の特徴（方法の工程を含む）を参照する。明細書における発明の開示は、明白に記載されたものだけでなく、このような特徴の全ての可能な組み合わせを含むことが理解されなければならない。例えば、特徴が、本発明の特別な態様又は具体例又は特別な特許請求の範囲という文脈において開示されている場合、このような特徴は、可能な範囲内で、組み合わせて及び／又は本発明の他の特徴及び具体例という文脈において、及び本発明において一般的にも使用される。用語「含んでなる」及びその文法上等価物は、ここでは、他の部材、成分、工程等が任意に存在することを意味するために使用する。例えば、部材Ａ、Ｂ、及びＣを含んでなる物品は、部材Ａ、Ｂ、及びＣからなる（のみを含有する）か、又は部材Ａ、Ｂ、及びＣだけでなく、１以上の他の部材を含有できる。ここで、２以上の限定された工程を含んでなる方法を参照する場合、限定された工程は、いずれかの順番で又は同時に行われ、方法は、限定された工程のいずれかの前、限定された２つの工程の間、又は全ての限定された工程の後に行われる１以上の他の工程（文脈がその可能性を除外する場合を除く）を含むことができる。
【００４６】
数字の前の用語「少なくとも」は、ここでは、その数字で始まる範囲（定義される変数に応じて、上限を有する又は上限のない範囲でもよい）の開始点を表示するために使用される。例えば、「少なくとも１」は、ここでは、１以上を示すように使用される。数字の前の用語「多くとも」は、その数字で終わる範囲（定義される変数に応じて、その下限として１又は０を有する範囲、又は下限を持たない範囲でもよい）の終末点を表示するために使用される。例えば、「多くとも４」は４以下を意味し、「多くとも４０％」は４０％以下を意味する。この明細書において、範囲が、「（第１の数）から（第２の数）」又は「（第１の数）〜（第２の数）」として示される場合、これは、その下限が第１の数であり、その上限が第２の数である範囲を意味する。例えば、２５から１００ｍｍは、その下限が２５ｍｍであり、上限が１００ｍｍである範囲を意味する。下記に示す具体例は、当業者が本発明を実施することを可能にする必要な情報を提示するものであり、本発明の実施の最良のモードを説明するものである。さらに、本発明は、全ての有利な特徴及び全ての利点が、本発明の各具体例に組み込まれることが必要であることを要求しない。
【００４７】
次に、図１Ａ〜３Ｂを見て、本発明の各種の要素に関する概要を簡単に検討する。
【００４８】
酸化ストレスはＡＦに関連するが、正確な機構及び下流シグナル制御は、不明のままである。硫化水素及び一酸化窒素は、人体における２つのガス状伝達物質である。これら２つのガス状伝達物質は、心臓病、特に、粥状動脈硬化症及び心不全の発病において役割を果たすが、不整脈、特に、ＡＦにおけるその役割は、発明者らによって、未だ探求されていない。硫化水素及び一酸化窒素は、心血管系の酸化還元状態を変更する。遺伝子組み換えされたマウス（硫化水素を発生する酵素シスタチオニンγ−リアーゼ（ＣＳＥ）に関する遺伝子がノックアウトされている）における低減された硫化水素レベルは、心室における活性酸素種の低減と関連する。発明者らの実験室での実験では、初めて、スーパーオキシドレベルが、野生型マウスと比較して、これらＣＳＥノックアウトマウスの心房において有意に上昇し、その差は、心室におけるよりも、はるかに卓越していることが示された。
【００４９】
発明者らは、ＣＳＥノックアウトマウスが、誘導後９０秒以上持続するＡＦとして定義される誘導性持続性ＡＦの有意により高い発生率を有するとの知見を得た。心房筋細胞単一細胞パッチクランプ試験は、ＣＳＥノックアウトマウスからの心房筋細胞の活動電位持続時間が、野生型の心房筋細胞と比べて、有意に延長されることを示しており、これは、これらマウスにおけるＡＦへの増大された感受性に関する機構を証明する。発明者らは、雌ＣＳＥノックアウトマウスが、雄ＣＳＥノックアウトマウスと比べて、誘導性持続性ＡＦに関して、それらの野生型のものとの差異を誇張することを観察した。発明者らが、ＣＳＥノックアウト雄マウスに、ジアリルトリスルフィッド（ＤＡＴＳ；２００μｇ／ｋｇ）を、毎日、後眼窩的に（すなわち、Ｉ．Ｖ．）、３日間投与する場合、誘導性持続性ＡＦのリスクが、野生型レベルの近くまで減少するが、雌ＣＳＥノックアウトマウスでは、誘導性持続性ＡＦの顕著なリスクの減少はなかった。
【００５０】
雌ＣＳＥノックアウトマウスは、雄ＣＳＥノックアウトマウスと比べて、３〜４倍増大したホモシステイン（システインのα−アミノ酸類似体）レベルを有する。ホモシステイン誘発活性酸素種は、酸化窒素（ＮＯ）の発生において適切に機能するｅＮＯＳの可能性を低減させる。発明者らが、雄及び雌ＣＳＥノックアウトマウスの間で、ＤＡＴＳに対するそれらの応答において観察し、差異を説明するために、発明者らは、雄及び雌ＣＳＥノックアウトマウスの心房におけるＮＯレベルを測定し、測定したレベルを、それらの野生型のものと比較した。雄ＣＳＥノックアウトマウスにおけるＮＯレベルは、雄野生型マウスに匹敵するが、雌ＣＳＥノックアウトマウスでは、雌野生型マウスと比べて、レベルは著しく減少した。この観察に基づき、発明者らは、雌ＣＳＥノックアウトマウスへのＮＯ生物学的利用能の増大は、雌ＣＳＥノックアウトマウスの誘導性持続性ＡＦの感受性を覆すかどうかをテストした。発明者らは、亜硝酸ナトリウム（１６５μｇ／ｋｇ）の３日間の腹腔内投与が、事実、誘導性持続性ＡＦの発生率を低下させたとの知見を得た。
【００５１】
硫化水素及び亜硝酸塩治療が誘導性ＡＦの発生率を低減できるとの発明者らの発見は、有意の効果を有する。ＡＦに関する最強の危険因子、すなわち、高血圧症、糖尿病、加齢、及び心不全は、全て、ＣＳＥノックアウトマウスと同様に、硫化水素の低減されたレベルと関連する。さらに、これらの症状は、低減されたＮＯレベルにも関連する。これらの患者におけるＡＦの発現は、交感神経系の緊張、炎症、及び増大した心拍に対する反射要求を増大させる因子によって惹起／誘発される。術後状態、敗血症／敗血症性ショック、血液量減少、及び痛みは、公知のトリガーのいくつかである。特に、術後ＡＦは、ＡＦに関する危険因子を有する患者においては、罹患率、死亡率、入院期間、及びコストを増大させる。既に、この患者群では、ＡＦを防止するために、多数の介入が試みられているが、せいぜい、雑多な結果が得られているに過ぎない。
【００５２】
発明者らの実験結果は、有機型又は無機型の硫化水素又は亜硝酸塩の、ＡＦの危険因子を有する患者への経口、非経口、又は局所的投与がＡＦの発症を防止でき、続いて、さらに、ＡＦの将来の発症を増大させる心房のリモデリングを防止できることを証明する。さらに、有機型又は無機型の硫化水素又は亜硝酸塩の、ＡＦの患者への経口、非経口、又は局所的投与は、酸化ストレスを低減することによる治療となる。
【００５３】
発明者らは、哺乳類、特にヒトにおけるＡＦ又は前ＡＦ状態の治療法であって、有機又は無機の硫化物及び有機又は無機の亜硝酸塩の１つ、有機又は無機の硫化物及び有機又は無機の亜硝酸塩の両方、又はその薬学上許容される塩、溶媒和物、エステル、アミド、クラスレート、立体異性体、対掌体、プロドラッグ、又は類似体の少なくとも１つ、又はその組み合わせを、治療上有効量で投与することを含んでなる治療法を発明した。
【００５４】
発明者らは、亜硝酸塩レベル及び硫化物レベルが、哺乳類における亜硝酸塩及び／又は硫化物レベルの増大の原因となるプロドラッグ（例えば、食物又は化合物）の投与を介して、哺乳類において、治療上増大され、ＡＦ又は前ＡＦ状態を治療できることを知っている。本発明のこれらの他の具体例は、哺乳類における亜硝酸塩レベルを増大させるために、ビートルートのジュース（又はエキス）、ホウレンソウ、レタス、アルギュラ（ロケット又はルッコラ）、チンゲン菜、セロリ、チャービル、コラードの葉、クレス、大根、レッドビートルート、ルバーブ、スイス・チャード、バジル、根セロリ、白菜、トウチシャ、コリアンダー、エンダイブ、フェンネル、コールラビ、リーキ、からし菜、パセリ、又は任意の植物製品を投与すること、及び哺乳類における硫化物レベルを増大させるために、ニンニク又はニンニクエキス、又はアブラナ科の野菜を投与することを含む。他のプロドラッグの例として、発明者らは、体内では、硝酸塩は亜硝酸塩に転化されることを知っている。それ故、本発明のさらに他の具体例では、ＡＦ又は前ＡＦ状態の治療のために、哺乳類に効果的に硝酸塩を投与するために、無機及び／又は有機の硝酸塩を、亜硝酸塩に加えて又は亜硝酸塩の代わりに投与できる。
【００５５】
亜硝酸塩は、化学式ＮＯ２−を有し、水中ではイオンとして存在する。亜硝酸ナトリウムは、化学式ＮａＮＯ２を有し、一般的には、水に溶解して、ナトリウムイオンＮａ＋及び亜硝酸イオンＮＯ２−を形成する。さらに、本発明は、亜硝酸化合物の全ての溶媒和型（例えば、水和物）を包含することが理解される。亜硝酸ナトリウムに加えて、代表的な無機の亜硝酸化合物としては、亜硝酸アンモニウム（ＮＨ４ＮＯ２）、亜硝酸バリウム（Ｂａ（ＮＯ２）２；例えば、無水の亜硝酸バリウム又は亜硝酸バリウム・１水和物）、亜硝酸カルシウム（Ｃａ（ＮＯ２）２；例えば、無水の亜硝酸カルシウム又は亜硝酸カルシウム・１水和物）、亜硝酸セシウム（ＣｓＮＯ２）、亜硝酸コバルト（ＩＩ）（Ｃｏ（ＮＯ２）２）、亜硝酸コバルト（ＩＩＩ）カリウム（ＣｏＫ３（ＮＯ２）６；例えば、亜硝酸コバルト（ＩＩＩ）カリウム・セスキ水和物）、亜硝酸リチウム（ＬｉＮＯ２；例えば、無水の亜硝酸リチウム又は亜硝酸リチウム・１水和物）、亜硝酸マグネシウム（ＭｇＮＯ２；例えば、亜硝酸マグネシウム・３水和物）、亜硝酸カリウム（ＫＮＯ２）、亜硝酸ルビジウム（ＲｂＮＯ２）、亜硝酸銀（Ｉ）（ＡｇＮＯ２）、亜硝酸ストロンチウム（Ｓｒ（ＮＯ２）２）、及び亜硝酸亜鉛（Ｚｎ（ＮＯ２）２）が含まれる。
【００５６】
酸化窒素（ＮＯ）及び硫化水素（Ｈ２Ｓ）は、いずれも、酵素を介して、内生的に生成される。ＮＯは、ニューロンＮＯシンターゼ（ｎＮＯＳ）、誘導ＮＯシンターゼ（ｉＮＯＳ）、及び内皮ＮＯシンターゼ（ｅＮＯＳ）によって合成される。Ｈ２Ｓは、シスタチオニンβ−シンターゼ（ＣＢＳ）、シスタチオニンγ−リアーゼ（ＣＳＥ又はＣＧＬ）、及び３−メルカプトピルビン酸イオウ転移酵素（３−ＭＳＴ）の作用を介して合成される。これらのガス状分子は、低ｎモル／Ｌ〜低μモル／Ｌの範囲の低濃度で生成され、不安定である。
【００５７】
次に、図１〜２Ｂを見ると、酸化Ｃａ２＋／カルモジュリン依存性タンパク質キナーゼＩＩ（ｏｘ−ＣａＭＫＩＩ）は、心房細動（ＡＦ）の患者では、心房において増大されることが示されている。ｏｘ−ＣａＭＫＩＩに対する抗血清を使用して、洞調律（ＳＲ）又はＡＦの患者からの右心房組織の所定部位における典型的な免疫蛍光像を作成した。画像定量化は、ＳＲの患者と比べて、ＡＦの患者において、有意により高いｏｘ−ＣａＭＫＩＩを示した（＊Ｐ＜０．０５、スチューデントｔテスト）。ｏｘ−ＣａＭＫＩＩ抗血清を使用して、ＳＲ又はＡＦの患者からの右心房細胞組織ホモジネートにおける典型的な免疫ブロットを作成した。免疫ブロットの定量化は、ＳＲ患者と比べて、ＡＦ患者において、有意により高いｏｘ−ＣａＭＫＩＩ発現を示した（＊Ｐ＜０．０５、スチューデントｔテスト）。百分率は、ＳＲグループにおける、正規化した平均ｏｘ−ＣａＭＫＩＩ／ＧＡＰＤＨ比のように、平均ｏｘ−ＣａＭＫＩＩ／ＧＡＰＤＨ比を示す。ＳＲ又はＡＦの患者からの右心房組織ホモジネートにおける全ＣａＭＫＩＩ抗血清による典型的な免疫ブロットを作成した。免疫ブロットの定量化は、ＡＦ及びＳＲの患者において、同様の全ＣａＭＫＩＩ発現を示し（Ｐ＝０．３、スチューデントｔテスト）、百分率値は、ＳＲグループにおける正規化した平均ＣａＭＫＩＩ／ＧＡＰＤＨのような平均ＣａＭＫＩＩ／ＧＡＰＤＨを示す。図におけるグラフのバー内の数値は、各グループにおける症例数を示す。
【００５８】
図３Ａ〜４Ｂでは、発明者らは、酸化ストレスが、ＡＦの発病に役割を果たすとの仮説を立てた。実際、ＡＦの有病率は、酸化ストレスとなる加齢によって増大する。しかし、レドックス状態をＡＦにリンクさせる機構は、良好には理解されていない。この研究では、発明者らは、酸化ストレスと、ＡＦを促進するタイプ２リアノジンレセプター（ＲｙＲ２）による異常な細胞間Ｃａ２＋放出との間のリンクを確認した。発明者らは、ＲｙＲ２が、洞調律のヒトと比較して、慢性のＡＦ患者の心房において酸化されることを示した。ＲｙＲ２をＡＦにリンクさせる分子機構を詳細に調査するために、発明者らは、細胞間Ｃａ２＋漏出の原因となるＲｙＲ２の突然変異を有する２つのマウスモデルを使用した。細胞間Ｃａ２＋漏出を有するマウスは、増大した心房ＲｙＲ２酸化、ミトコンドリアの機能障害、反応性酸素種（ＲＯＳ）の生成及びＡＦ感受性を発揮した。ミトコンドリアのＲＯＳ生成の遺伝子的阻害及ＲｙＲ２漏出の薬理学的処置の両方がＡＦを防止した。まとめると、発明者らの結果は、ＲｙＲ２及びミトコンドリアのＲＯＳ発生の変更が、ＡＦの発生における悪循環を形成することを示す。実験結果は、このこれまで認識されていなかった機構をターゲットすることがＡＦを防止及び治療することを証明する。図３Ａ〜４Ｂにおける結果が示すように、ＡＦ患者及びＲｙＲ２−Ｓ２８０８Ｄ＋／＋マウスにおいて、心房ＲｙＲ２複合体の酸化が増大した。
【００５９】
図５Ａ及び５Ｂを見ると、Ｈ２Ｓは、心不全の患者では減少することが認めらえる。心不全の患者では、硫化水素レベルの循環は減少された。発明者らは、同年齢のコントロール対象（ｎ＝２０）と比較して、心不全患者（ｎ＝２４）におけるＨ２Ｓレベルを評価した。血清フリーのＨ２Ｓ（μＭ）レベルは、心不全患者において、有意に減少した（Ｐ<０．０５）。血清サンプルを、Ａｔｌａｎｔａ  Ｃａｒｄｉｏｍｙｏｐａｔｈｙ  Ｃｏｎｓｏｒｔｉｕｍ（ＡＴＣＣ）に登録された患者から得た。この前向きコホート研究は、エモリー大学付属教育病院、エモリー大学病院及びエモリー大学病院ミッドタウン、及びアトランタのグラディーメモリアル病院からの患者を登録する。すべての患者について、詳細な病歴調査、心電図、標準的なアンケート、ベースライン時の血液及び尿サンプルの採取を行った。全ての患者が、登録前に、同意書を提出した。エモリー大学施設内治験審査委員会は、この研究を承認した。既に記載された方法に従って、血液中のＨ２Ｓレベルを測定した。
【００６０】
図６を見ると、心臓保護作用を示すＨ２Ｓによって活性化される各種のシグナル経路が示されている。Ｈ２Ｓは、各種の機構を介して、疾患に対して心臓を保護できる：Ｈ２Ｓは、炎症性サイトカインによって仲介される炎症反応を防止する。Ｈ２Ｓは、ＶＥＧＦの発現を増大させること及びホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）及びＡｋｔを活性化することによって血管形成を刺激する。Ｈ２Ｓは、内皮一酸化窒素シンターゼ（ｅＮＯＳ）を活性化し、及びＮＯの生物学的利用能を増加させる。Ｈ２Ｓは、カスパーゼ−３の活性化を抑制すること及びグリコーゲンシンターゼキナーゼ−３（ＧＳＫ−３β）の発現を増加させることによって、心筋細胞のアポトーシスから有意に守る。Ｈ２Ｓは、ｍｉＲＮＡの発現を調節することによって、その役割を果たす。Ｈ２Ｓは、また、ミトコンドリア呼吸の阻害を介してミトコンドリア機能を保護する。Ｈ２Ｓは、ＮＦ−Ｅ２関連因子２（Ｎｒｆ２）依存経路を活性化すること及びＲＯＳの除去によって、抗酸化作用を発揮する。Ｈ２Ｓは、ＫＡＴＰチャンネルを開き、Ｎａ＋チャンネル（Ｎａｖ）電流を増大させ、及びＬタイプＣａ２＋チャンネル及び塩素イオンチャンネルを阻害して、心保護的作用を生ずる。
【００６１】
図７を見ると、内在性Ｈ２Ｓの生合成経路が示されている。シスタチオニン−β−シンターゼ（ＣＢＳ）及びシスタチオニン−γ−リアーゼ（ＣＳＥ）は、基質として、Ｌ−システインを使用して、Ｈ２Ｓを生成する。しかし、３−メルカプトピルビン酸イオウトランスフェラーゼ（３−ＭＳＴ）は、基質として、３−メルカプトピルビン酸（３−ＭＰ）を使用して、Ｈ２Ｓを形成する。３−ＭＰは、α−ケトグルタル酸（α−ＫＧ）の存在下、システインアミノトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）によって、Ｌ−システインから生成され、一方、Ｄ−アミノ酸オキシダーゼ（ＤＡＯ）によって、Ｄ−システインからも生成される。
【００６２】
図８Ａ〜９Ｂは、ＣＳＥノックアウトが、Ｈ２Ｓの低減を引き起こし、酸化的ストレスを引き起こすことを示している。
【００６３】
図１０Ａ〜１０Ｄを見ると、ＣＳＥノックアウトが心房スーパーオキシドにおける増大を引き起こすことが認められた。
【００６４】
図１１〜１２Ｂは、マウス電気生理学及びマウスにおけるＡＦ誘導及び持続性ＡＦ及び連発又は非持続性ＡＦを示す。
【００６５】
図１３を見ると、ＣＳＥノックアウトマウスにおけるＡＦが、野生型マウスの心臓リズムと比較して示されている。
【００６６】
図１４Ａ及び１４Ｂは、ＷＴマウスと比べて、ＣＳＥノックアウトマウスにおいて、ＡＦの発生及び期間が増大することを示している。
【００６７】
図１５は、ＣＳＥノックアウトマウスが、増大した心房活動電位持続時間を有することを示している。
【００６８】
図１６Ａ〜１７Ｂは、持続性ＡＦにおけるＡＦ及び全てのＡＦの期間に関する、ＣＳＥノックアウトマウスにおける性別の差異を示している。
【００６９】
図１８Ａ及び１８Ｂを見ると、ＤＡＴＳ治療及びＡＦの負担が示されている。図１９Ａから２０Ｂは、ＣＳＥノックアウトマウス及びＡＦに関するＤＡＴＳに対する応答における性別の差異を示している。
【００７０】
図２１Ａ及び２１Ｂを見ると、雌ＣＳＥノックアウトマウスは、重篤な高ホモシステイン血症を有することが示されている。システインの内因性合成における役割に加えて、シスタチオニンγ−リアーゼ（ＣＧＬ）は、血管弛緩性硫化水素の主要な生理学上の源である。Ｃｇｌヌルマウスは、血管緊張及び内皮機能に対するこの化合物の影響を調査するために潜在的に有用である。ここに、発明者らは、雌Ｃｇｌヌルマウスが、野生型のコントロールと比べて、約４５倍の血漿総ホモシステインの増加を示すことを表示する。このホモシステインレベルは、雄Ｃｇｌヌルマウスにおいて観察されるレベルよりも約３．５倍高く、シスタチオニンβ−シンテターゼ欠損ホモシスチン尿症のマウスモデルにおいて観察されるレベルと本質的に同等である。両性別のＣｇｌヌルマウスは、ＷＴコントロールと比べて、メチレンテトラヒドロ葉酸リダクターゼ及びシステインスルフィン酸デカルボキシラーゼの発現の減少を示した。雌Ｃｇｌヌルマウスは、ベタイン・ホモシステイン・Ｓ−メチルトランスフェラーゼ及びメチオニンアデノシルトランスフェラーゼ１αの性特異的誘導、及び有意の血漿メチオニンの減少を伴うメチオニンシンターゼ発現の７０％の減少を示した。雌Ｃｇｌヌルマウスにおける血漿システインレベルの減少は、システインジオキシゲナーゼの発現の性特異的調節不全に関連する。シスタチオニンβ−シンテターゼと、Ｃｇｌヌルマウスとの間の比較組織学的アセスメントは、肝損傷に対するシスタチオニンの治療可能性が、更なる可能な調査に値することを示した。まとめると、発明者らのデータは、代謝の先天異常のマウスモデルを調査する際、性別を考慮する重要性を証明しており、雌Ｃｇｌヌルマウスが、硫化水素の生理学的役割を研究するために使用するには疑わしいものであるが、メチオニンシンターゼ欠損の結果及びメチル葉酸トラップを研究するための有用なモデルとしては機能することを示している。
【００７１】
図２２を見ると、ホモシステイン誘導活性酸素種形成が、重要なＮＯＳ補助因子、例えば、テトラヒドロビオプテリン（ＢＨ４）の利用能を低減させることによって、又はＮＯ−のペルオキシニトライト（ＯＮＯＯ−）への転化を誘導することによって、生物学的利用可能なＮＯ−のレベルを低下させることを示している。ＳＯＤ＝スーパーオキシドジスムターゼ；ｅＮＯＳ＝内皮型一酸化窒素シンターゼ。
【００７２】
図２３は、ＣＳＥノックアウトマウスにおけるＮＯレベルが、ＷＴマウスよりも低いことを示す。図２４Ａ及び２４Ｂは、ＣＳＥノックアウトマウスにおけるＮＯレベルの性別変化を示す。
【００７３】
図２５Ａ及び２５Ｂは、亜硝酸塩治療が、雌ＣＳＥノックアウトマウスにおいて、ＡＦを低減することを示す。
【００７４】
図２６Ａ及び２６Ｂは、ＮＯが、雌のマウスにおいて、持続性ＡＦを低減することを示す。
【００７５】
図２７Ａ及び２７Ｂは、ＣＳＥノックアウトマウスでは、心房細動の発生及び期間が増大されることを示す。
【００７６】
図２８Ａ〜２９Ｂは、ＣＳＥノックアウトマウスにおけるＡＦの性別の差異を示す。
【００７７】
図３０Ａ及び３０Ｂは、ＤＡＴＳ治療及びＡＦの負担を示す。図３１Ａ〜３２Ｂは、ＣＳＥノックアウトマウスＡＦによるＤＡＴＳへの応答における性別の差異を示す。
【００７８】
図３３Ａ及び３３Ｂは、亜硝酸塩治療及びＡＦの負担を示す。図３４Ａ〜３５Ｂは、ＣＳＥノックアウトマウスＡＦによる亜硝酸塩への応答における性別変化を示す。亜硝酸塩は、雌ノックアウトマウスにおいて、持続性ＡＦを劇的に低減する。
【００７９】
図３６Ａ及び３６Ｂは、ｅＮＯＳノックアウトマウスにおけるによるＡＦの発生を示す。
【００８０】
医薬組成物
ここに記載する方法は、治療薬、又はその薬学上許容される塩、溶媒和物、エステル、アミン、クラスレート、立体異性体、鏡像異性体、プロドラッグ、又は類似体、又はその組み合わせを含む薬学上許容される組成物の投与を含むことができる。医薬品として使用される場合、いずれかの本発明の化合物が、医薬組成物の形で投与される。これらの組成物は、薬学の分野において良く知られている様式で調製され、局所的治療又は全身治療のいずれが望まれるかに応じて、及び治療されるべき領域に応じて、各種ルートによって投与される。投与は、局所、非経口、静脈内、動脈内、皮下、筋肉内、脳内、眼窩内、眼内、脳室内、関節内、脊髄内、槽内、腹腔内、鼻腔内、エーロゾルによる、坐剤による、又は経口投与である。
【００８１】
本発明は、１以上の薬学上許容されるキャリヤーを含有できる医薬組成物も含む。本発明の医薬組成物の製造では、代表的には、活性剤を添加剤と混合し、添加剤によって希釈し、又は例えば、カプセル、小袋、ペーパー、又は他の容器の形の容器内に封入される。添加剤が希釈剤として働く場合、添加剤は、固体、半固体、又は液体物質（例えば、生理食塩水）であり、活性成分用のビヒクル、キャリヤー、又は媒質である。このように、組成物は、錠剤、粉末、トローチ、小袋、カシェ剤、エリキシル剤、懸濁液、エマルジョン、溶液、シロップ及びハードゼラチンカプセル剤の形である。当分野において知られているように、希釈剤のタイプは、意図する投与ルートに応じて変動できる。得られる組成物は、追加の剤、例えば、保存料を含むことができる。
【００８２】
本発明の治療薬は、単独で、又は薬学上許容される添加剤又はキャリヤーの存在下、混合物として投与される。添加剤又はキャリヤーは、投与の様式又はルートに基づいて選択される。医薬処方における使用のために薬学上の必需品とともに、好適な医薬キャリヤーは、この分野において公知の文献であるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２版，Ｇｅｎｎａｒｏ編，Ｌｉｐｐｅｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  （２０１２）、及びＵＳＰ／ＮＦ（米国薬局方，Ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ発行所）に記載されており、それぞれを、参照して、ここに組み込む。製剤では、他の成分と組み合わせる前に、活性化合物を粉砕して、好適な粒径とする。活性化合物が実質的に不溶性であれば、活性化合物を２００メッシュ未満の粒径に粉砕できる。活性化合物が実質的に水溶性であれば、剤形内で実質的に均一に分散するように、粉砕によって粒径を調節する（例えば、約４０メッシュ）。
【００８３】
好適な添加剤の例は、乳糖、ブドウ糖、ショ糖、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アラビアゴム、リン酸カルシウム、アルギニン酸塩、トラガント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、シロップ、及びメチルセルロースである。剤は、さらに、滑沢剤、例えば、タルク、ステアリン酸マグネシウム、及び鉱油；湿潤剤；乳化及び懸濁化剤；保存料、例えば、メチル−及びプロピルヒドロキシ安息香酸；甘味料；及び香料を含むことができる。他の代表的な添加剤は、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，８版，Ｓｈｅｓｋｅｙら編，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ  （２０１７）に記載されており、参照して、ここに組み込む。
【００８４】
ここに記載の方法は、治療薬、又はそのプロドラッグ又は医薬組成物、又は他の治療薬の投与を含むことができる。代表的な治療薬としては、心房におけるＮＯレベルを上昇させ、及び心房におけるＨ２Ｓレベルを上昇させるものが含まれる。
【００８５】
医薬組成物は、当分野において知られた方法を使用する患者への投与の後、活性成分の即時放出、持続放出、又は遅延放出を提供するように製剤される。
【００８６】
組成物は、単位剤形として製剤され、各用量は、例えば、活性成分０．１〜５００ｍｇを含有する。例えば、用量は、約０．１〜約５０ｍｇ、約０．１〜約４０ｍｇ、約０．１〜約２０ｍｇ、約０．１〜約１０ｍｇ、約０．２〜約２０ｍｇ、約０．３〜約１５ｍｇ、約０．４〜約１０ｍｇ、約０．５〜約１ｍｇ、約０．５〜約１００ｍｇ、約０．５〜約５０ｍｇ、約０．５〜約３０ｍｇ、約０．５〜約２０ｍｇ、約０．５〜約１０ｍｇ、約０．５〜約５ｍｇ、約１〜約５０ｍｇ、約１〜約３０ｍｇ、約１〜約２０ｍｇ、約１〜約１０ｍｇ、約１〜約５ｍｇ、約５〜約５０ｍｇ、約５〜約２０ｍｇ、約５〜約１０ｍｇ、約１０〜約１００ｍｇ、約２０〜約２００ｍｇ、約３０〜約１５０ｍｇ、約４０〜約１００ｍｇ、約５０〜約１００ｍｇ、約５０〜約３００ｍｇ、約５０〜約２５０ｍｇ、約１００〜約３００ｍｇ、又は約１００〜約２５０ｍｇを含有できる。固体組成物、例えば、錠剤の調製については、主たる活性成分を、１以上の医薬添加剤と混合して、本発明の化合物の均質な混合物を含有する固体のバルク処方組成物を形成する。これらのバルク処方組成物が均質である場合、活性成分は、一般的には、組成物を通して均一に分散しており、従って、組成物は、等しく効果的な単位剤形、例えば、錠剤及びカプセル剤に、容易に、細分される。この固体バルク処方は、ついで、例えば、本発明の活性成分０．１〜約５００ｍｇを含有する、上記対応の単位剤形に細分される。
【００８７】
経口投与のための組成物
本発明によって考慮された医薬組成物には、経口投与用として処方されたもの（経口投与剤形）が含まれる。経口投与剤形は、例えば、錠剤、カプセル剤、液体溶液又は懸濁液、粉末、又は、液体又は固体結晶の形であり、非毒性の薬学上許容される添加剤との混合物中に活性成分を含有する。これらの添加剤は、例えば、不活性の希釈剤又はフィラー（例えば、ショ糖、ソルビトール、糖、マンニトール、微結晶セルロース、デンプン（ジャガイモデンプンを含む）、炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、乳糖、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、又はリン酸ナトリウム）；結合剤（例えば、ショ糖、グルコース、ソルビトール、アラビアゴム、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、デンプン、アルファ化デンプン、微結晶セルロース、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、ポリビニルピロリドン、又はポリエチレングリコール）；及び滑沢剤、流動促進剤、及び粘着防止剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸、シリカ、水素化植物油、又はタルク）である。他の薬学上許容される添加剤は、着色料、香味料、可塑化剤、湿潤剤、緩衝剤、等である。
【００８８】
経口投与剤形は、チュアブル錠として、硬ゼラチンカプセル剤（活性成分が、不活性の固体希釈剤（例えば、ジャガイモデンプン、乳糖、微結晶セルロース、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はカオリン）と混合されている）として、又は軟ゼラチンカプセル剤（活性成分が、水、又はオイル媒質（例えば、ピーナッツ油、液体パラフィン、又はオリーブ油と混合されている）としても提供される。錠剤及びカプセルのもとでは、粉末、顆粒、及びペレットは、上記成分を、例えば、ミキサー、流動床装置、又はスプレー乾燥器具を使用する一般的な様式で使用して調製される。
【００８９】
経口用途の制御された放出性の組成物は、活性薬剤物質の分解及び／又は拡散を制御することによって活性薬剤を放出するように構成される。制御された放出性及び目標とされた血漿濃度ｖｓ時間プロフィールを得るために、多くの戦略のいずれかが追及される。１例では、制御された放出性は、例えば、各種のタイプの制御された放出性の組成物及びコーティングを含む各種の処方パラメーター及び成分の好適な選択によって得られる。このように、薬剤は、好適な添加剤と一緒に、投与の際、制御された様式で薬剤を放出する医薬組成物に製剤される。例としては、単一又は多重の単位錠剤又はカプセル組成物、オイル溶液、懸濁液、エマルジョン、マイクロカプセル、微球状、ナノ粒子、パッチ、及びリポソームが含まれる。いくらかの具体例では、組成物は、生分解性、ｐＨ及び／又は温度感受性のポリマーコーティングを含む。
【００９０】
分解又は拡散による制御された放出性は、化合物の錠剤、カプセル、ペレット、又は顆粒の好適なコーティングによって、又は化合物を好適なマトリックスへ組み入れることによって達成される。制御された放出性のコーティングは、上記コーティング物質、例えば、シェラック、ミツロウ、グリコワックス、カスターワックス、カルナウバワックス、ステアリルアルコール、モノステアリン酸グリセリン、ジステアリン酸グリセリン、パルミチン酸ステアリン酸グリセリン、エチルセルロース、アクリル樹脂、ｄｌ−ポリ乳酸、酢酸酪酸セルロース、ポリ塩化ビニル、ポリ酢酸ビニル、ビニルピロリドン、ポリエチレン、ポリメタクリレート、メチルメタクリレート、２−ヒドロキシメタクリレート、メタクリレートヒドロゲル、１，３−ブチレングリコール、エチレングリコールメタクリレート、及び／又はポリエチレングリコールの１以上を含むことができる。制御された放出性のマトリックスの処方では、マトリックス材料としては、例えば、水和メチルセルロース、カルナウバワックス及びステアリルアルコール、Ｃａｒｂｏｐｏｌ  ９３４、シリコーン、トリステアリン酸グリセリン、メチルアクリレート−メチルメタクリレート、ポリ塩化ビニル、ポリエチレン、及び／又はハロゲン化フルオロカーボンが含まれる。
【００９１】
本発明の化合物又は組成物が、経口投与用に組み入れられる液体剤形としては、エリキシル及び同様の薬用ビヒクルと同様に、水溶液、好適に風味付けされたシロップ、水性又はオイル懸濁液、及び食用油（例えば、綿実油、ゴマ油、ココナツ油、又はピーナツ油）を含有する風味付けされたエマルジョンが含まれる。
【００９２】
口腔粘膜投与（例えば、口内投与又は舌下投与）に適する組成物としては、錠剤、トローチ剤が含まれ、活性成分は、キャリヤー（例えば、糖、アラビアゴム、トラガント、又はゼラチン及びグリセリン）と一緒に処方される。
【００９３】
コーティング
経口送達用に処方された医薬組成物、例えば、本発明の錠剤又はカプセル剤は、コーティングされるか、或いは、混ぜ合わされて、遅延放出又は持続放出の利点を与える剤形を提供する。コーティングは、所定のパターンで活性薬剤物質を放出するように適合される（例えば、制御された放出性の処方を達成するため）か、又は例えば、腸溶性コーティング（例えば、ｐＨ感応性のポリマー（「ｐＨ制御放出性」）、ゆっくりとした又はｐＨに依存する膨潤、分解又は崩壊率を有するポリマー（「時間制御放出」）、酵素によって分解されるポリマー（「酵素制御放出」又は「生分解性放出」））、及び圧力の増大によって分解されるフィルム層を形成するポリマー（「圧力制御放出」）の使用によって、胃の通過後まで、活性薬剤物質が放出されないように適合される。ここに記載の医薬組成物において使用される腸溶性コーティングの例としては、糖コーティング、フィルムコーティング（例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルヒドキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、アクリレートコポリマー、ポリエチレングリコール及び／又はポリビニルピロリドン系）、又はメタクリル酸コポリマー、酢酸フタル酸セルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、酢酸コハク酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、酢酸フタル酸ポリビニル、シェラック、及び／又はエチルセルロース、等のコーティングが含まれる。さらに、時間遅延物質、例えば、モノステアリン酸グリセリン又はジステアリン酸グリセリンが使用される。
【００９４】
例えば、錠剤又はカプセル剤は、内部投薬成分及び外部投薬成分を含んでなる（後者は前者の上の外被の形である）。２つの成分は、胃での消化に抵抗し、内部投薬成分が、そのままで十二指腸に通過すること又は放出を遅らせることを許容するように働く腸溶性の層によって分離され得る。
【００９５】
腸溶性コーティングを使用する場合、実質的な量の薬剤が、下部消化管において放出される。
【００９６】
遅延又は持続放出を生ずるコーティングに加えて、固体錠剤組成物は、組成物を、不必要な化学変化（例えば、活性薬剤物質の放出前の化学分解）から保護するように適合するコーティングを含むことができる。コーティングは、Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，５及び６巻，Ｓｗａｒｂｒｉｃｋ及びＢｏｙｌａｎｄ編，２０００における記載と同様の様式で固体剤形の上に適用される。
【００９７】
非経口投与
生分解性ポリマーからの非経口デポーシステムも、本発明の範囲内にある。これらのシステムは、筋肉又は皮下組織内に注入又は移植され、数日から数か月の範囲の延長された期間で、配合された薬剤を放出する。ポリマーの特性及び器具の構造の両方により、連続型又はパルス型で放出速度を制御される。ポリマー系非経口デポーシステムは、インプラント又は微粒子として分類される。前者は、皮下組織内に注入される円筒型器具であり、一方、後者は、１０〜１００μｍの範囲の球状粒子として定義される。インプラントの製造には、押出成形、圧縮成形又は射出成型が使用され、一方、微粒子については、相分離法、スプレー乾燥法、Ｗ／Ｏ／Ｗエマルジョン技術がしばしば使用される。微粒子を形成するために最も一般的に使用される生分解性ポリマーは、乳酸及び／又はグリコール酸からのポリエステル、例えば、ポリ（グリコール酸）及びポリ（Ｌ−乳酸）（ＰＬＧ／ＰＬＡミクロスフェア）である。「その場で」形成されるシステム、例えば、熱可塑性ペースト及び凝固によって、冷却によって、又はゾル−ゲル転移によって形成されるゲル化システム、架橋システム、及び両親媒性脂質によって形成されるオルガノゲルが特に興味深い。上述のシステムにおいて使用される感熱性ポリマーの例としては、Ｎ−イソプロピルアクリルアミド、ポロキサマー（酸化エチレン及び酸化プロピレンブロック共重合体、例えば、ポロキサマー１８８及び４０７）、ポリ（Ｎ−ビニルカプロラクタム）、ポリ（シロエチレングリコール）、ポリホスファゼン誘導体及びＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＰＬＧＡが含まれる。
【００９８】
粘膜薬剤送達
ここに記載の方法では、粘膜薬剤送達（例えば、鼻、直腸、膣、眼球、又は口腔の粘膜内層を経由する薬剤送達）も使用できる。口腔粘膜薬剤送達法としては、舌下投与（口腔底を覆う粘膜を経由する）、頬側投与（頬を覆う粘膜を経由する）、及び局所送達（Ｈａｒｒｉｓら，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，８１（１）：１−１０，１９９２）が含まれる。
【００９９】
口腔粘膜吸収は、粘膜への豊富な血管供給のため、一般に迅速であり、治療薬の血中濃度の迅速な上昇を許容する。
【０１００】
舌下投与について、組成物は、一般的な様式で製剤された、例えば、錠剤、トローチ等の剤形をとることができる。舌下薬剤送達では、透過促進剤も使用できる。模範的な促進剤としては、２３−ラウリルエーテル、アプロチニン、アゾン、塩化ベンザルコニウム、塩化セチルピリジニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、シクロデキストリン、デキストラン硫酸、ラウリン酸、リゾホスファチジルコリン、メタノール、メトキシサリチル酸エステル、オレイン酸メチル、オレイン酸、ホスファチジルコリン、ポリオキシエチレン、ポリソルベート８０、ＥＤＴＡナトリウム、グリコール酸ナトリウム、グリコデオキシコール酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、サリチル酸ナトリウム、タウロコール酸ナトリウム、スルホキシド、及びアルキルグリコシドが含まれる。頬側薬剤送達システムでは、生体付着性ポリマーが広く使用されてきており、生体付着性ポリマーとしては、ヒアルロン酸及びキトサンと同様に、シアノアクリレート、ポリアクリル酸、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、及びポリメタクリレートポリマーが含まれる。
【０１０１】
液体剤形（例えば、中和剤及び液体スプレー器具及び電気流体力学（ＥＨＤ）エーロゾル器具との使用に適する）も使用できる。エーロゾル器具での使用に適する液体薬剤溶液又は懸濁液を製剤する他の方法は、当業者にはよく知られている（例えば、米国特許第５１１２５９８号（Ｂｉｅｓａｌｓｋｉ）及び米国特許第５５５６６１１号（Ｂｉｅｓａｌｓｋｉ）参照）。
【０１０２】
粉末及びエーロゾル製剤を含め、舌下用剤形も使用できる。模範的な剤形としては、速崩壊性錠剤及び液体充填軟ゼラチンカプセル剤が含まれる。
【０１０３】
投与計画
ＡＦ又は前ＡＦ状態を治療する本発明の方法は、心房における増大されたＨ２Ｓレベル及び／又は増大されたＮＯレベルを生ずるに十分な時間及び量で治療薬を投与することによって実施される。
【０１０４】
組成物の投与の量及び頻度は、例えば、投与される物、患者の状態、及び投与様式に応じて変動される。治療への応用では、組成物は、ＡＦ又は前ＡＦ状態及びその合併症を軽減する又は少なくとも部分的に軽減するに十分な量で、ＡＦ又は前ＡＦ状態の患者に投与される。用量は、恐らく、ＡＦ又は前ＡＦ状態のタイプ及び進行の程度、ＡＦ又は前ＡＦ状態の重篤度、特定の患者の年齢、体重及び全身状態、選択された組成物、添加剤処方の生物学的効率、投与ルート、及び担当医の判断のような変数に依存する。有効な用量は、インビトロ又は動物モデルテストシステムに由来の用量−応答曲線から外挿される。有効な用量は、例えば、ＡＦ又は前ＡＦ状態の徴候又は兆候を改善することによって、又はその進行を遅延させることによって、所望の臨床成績を生ずる用量である。
【０１０５】
服用量当たりの治療薬の量は変動できる。例えば、患者は約０．１〜１００００μｇ／ｋｇを服用できる。一般に、治療薬は、ピーク血漿濃度が１５０ｎＭ〜２５０μＭとなる量で投与される。
【０１０６】
模範的な用量は、０．１〜５０００μｇ／ｋｇ、１００〜１５００μｇ／ｋｇ、１００〜３５０μｇ／ｋｇ、３４０〜７５０μｇ／ｋｇ、又は７５０〜１０００μｇ／ｋｇの範囲内である。模範的な用量は、０．２５、０．５、０．７５、１、又は２ｍｇ／ｋｇである。他の具体例では、投与される用量は、治療薬０．０５〜５ｍモル（例えば、０．０８９〜３．９ｍモル）又は治療薬０．１〜５０μモル（例えば、０．１〜２５μモル又は０．４〜２０μモル）の範囲である。
【０１０７】
治療薬の血漿濃度は、当分野において知られている方法に従って測定される。治療薬の模範的なピーク血漿濃度は、０．０５〜１０μＭ、０．１〜１０μＭ、０．１〜５．０μＭ、又は０．１〜１μＭの範囲である。或いは、治療薬の平均血漿レベルは、４００〜１２００μＭ（例えば、５００〜１０００μＭ）又は５０〜２５０μＭ（例えば、４０〜２００μＭ）の範囲である。薬剤の除放出が望ましいいくつかの具体例では、ピーク血漿濃度（例えば、治療薬の）は、６〜１４時間、例えば、６〜１２又は６〜１０時間持続される。薬剤の即時放出が望ましい他の具体例では、ピーク血漿濃度（例えば、治療薬の）は、例えば、３０分間維持される。
【０１０８】
治療頻度も変動する。患者は、１日当たり１以上の回数（例えば、１、２、３、４又はそれ以上の回数）で、又はある一定の時間毎（例えば、約２、４、６、８、１２、又は２４時間毎）に、治療薬にて治療される。好ましくは、医薬組成物は、２４時間当たり１又は２回投与される。治療の時間経過は、例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、それ以上の日数の変動する期間である。例えば、治療は、３日間で日に２回、７日間で日に２回、１０日間で日に２回である。治療サイクルは、例えば、１週間、２か月、１か月の間隔で繰り返される（治療しない期間を挟んで）。治療は、単回治療でもよいし、患者の寿命の限り（例えば、多年）継続してもよい。
【０１０９】
キット
ここに記載する本発明の医薬組成物のいずれかが、１組の指示と一緒に、すなわち、キットを形成して使用される。キットは、ここに記載するように、療法としての医薬組成物の使用についての指示を含むことができる。例えば、指示は、ＡＦ又は前ＡＦ状態の兆候及び／又は根本原因を消滅させるために、本発明の化合物の使用についての用量及び治療計画を提供できる。
【０１１０】
ここに、実例として、好適に開示する発明は、ここには具体的には開示していない各種の要素の不存在下でも明白に実施される。本発明の各種の具体例を詳細に記載しているが、これらの具体例の各種の変更及び変形が可能であり、当業者には明白であろう。しかし、このような変更及び変形は、特許請求の範囲に記載するように、本発明の範囲及び精神の範囲内にあることは明確に理解されなければならない。さらに、ここに記載する発明は、他の具体例も可能であり、各種の他の関連する方法で実行又は実施される。加えて、ここで使用する語法及び用語は、記載を目的とするものであり、限定とみなされてならないことは理解されなければならない。「含む」、「含んでなる」、又は「有する」及びそのバリエーションの使用は、追加の項目と同様に、その後にリストした項目及びその均等物を包含することを意味し、用語「からなる」及び「のみからなる」のみが、限定的な意味で解釈されるべきである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【国際調査報告】
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