(57)【要約】  本開示は、落射蛍光集光のためのシステムおよび方法に関する。例示的なシステムは、光学素子と、１つまたは複数の光源と、画像センサとを含む。光学素子は、少なくとも１つの高反射率（ＨＲ）コーティング部分と、少なくとも１つの反射防止（ＡＲ）コーティング部分とを含む。光源（単数または複数）は、第１の光軸に沿って光学素子に光学的に結合される。１つまたは複数の光源は、光学素子を介して試料と相互作用する励起光を放出する。試料は、励起光に反応して放出光を放出する蛍光色素分子を含む。画像センサは、第２の光軸に沿って光学素子に光学的に結合される。画像センサは、光学素子を介して放出光を検出する。【選択図】図３
2020515828.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの高反射率（ＨＲ）コーティング部分と少なくとも１つの反射防止（ＡＲ）コーティング部分とを備える光学素子と、
第１の光軸に沿って前記光学素子に光学的に結合された１つまたは複数の光源であって、前記１つまたは複数の光源は励起光を放出し、前記励起光は前記光学素子を介して試料を相互作用し、前記試料は記励起光に反応して放出光を放出する蛍光色素分子を備える、１つまたは複数の光源と、
第２の光軸に沿って前記光学素子に光学的に結合された画像センサであって、前記光学素子を介して前記放出光を検出する画像センサと
を備えるシステム。
【請求項２】
前記ＨＲコーティング部分は、前記試料と相互作用するように前記励起光を反射するように構成され、前記ＡＲコーティング部分は、前記放出光を実質的に透過する、請求項１に記載のシステム。
【請求項３】
前記ＨＲコーティング部分は、前記画像センサに向けて前記放出光を方向付けるために前記放出光を反射するように構成され、前記ＡＲコーティング部分は、前記励起光を実質的に透過する、請求項１に記載のシステム。
【請求項４】
前記ＨＲコーティング部分は、前記光学素子上に複数のＨＲコーティング領域を備える、請求項１に記載のシステム。
【請求項５】
前記１つまたは複数の光源は、複数の光源を備え、前記複数の光源の各々の光源は、前記光学素子上の個々のＨＲコーティング領域に向けて励起光を放出する、請求項４に記載のシステム。
【請求項６】
前記複数の光源の各々の光源は、個々の励起波長で励起光を放出する、請求項５に記載のシステム。
【請求項７】
前記１つまたは複数の光源、前記光学素子、および前記画像センサは、前記試料に対して落射蛍光光学顕微鏡構成で配置される、請求項１に記載のシステム。
【請求項８】
前記ＨＲコーティング部分は、金属コーティングを備える、請求項１に記載のシステム。
【請求項９】
前記ＡＲコーティング部分は、誘電体コーティングを備える、請求項１に記載のシステム。
【請求項１０】
前記１つまたは複数の光源に光学的に結合された走査光学系であって、前記試料の表面に平行な少なくとも第１の試料軸に沿って前記試料上の励起光を走査する走査光学系をさらに備える、請求項１に記載のシステム。
【請求項１１】
前記走査光学系は、少なくとも１つのガルバノミラーを備える、請求項１０に記載のシステム。
【請求項１２】
前記試料を支持する載物台であって、前記試料の表面に平行な少なくとも第２の試料軸に沿って前記試料を移動させる載物台をさらに備える、請求項１に記載のシステム。
【請求項１３】
前記画像センサは、多画素カメラセンサを備える、請求項１に記載のシステム。
【請求項１４】
少なくとも１つのメモリと少なくとも１つのプロセッサとを有するコントローラをさらに備え、前記少なくとも１つのプロセッサは、
前記１つまたは複数の光源に前記励起光を放出させる動作、および
前記画像センサによって前記放出光を検出する動作
を含む動作を実行するように、前記少なくとも１つのメモリ内に記憶された命令を実行する、請求項１に記載のシステム。
【請求項１５】
前記１つまたは複数の光源に光学的に結合された走査光学系をさらに備え、前記動作は、
前記試料の表面に平行な少なくとも第１の試料軸に沿って励起光を使用して前記試料を走査するように前記走査光学系を調整する動作を含む、請求項１４に記載のシステム。
【請求項１６】
前記試料を支持する載物台をさらに備え、前記動作は、
前記試料の表面に平行な少なくとも第２の試料軸に沿って前記試料を移動させるように前記載物台を調整する動作を含む、請求項１４に記載の試料。
【請求項１７】
１つまたは複数の光源に励起光を放出させるステップであって、前記励起光は光学素子と相互作用し、前記光学素子は少なくとも１つの高反射率（ＨＲ）コーティング部分と少なくとも１つの反射防止（ＡＲ）コーティング部分とを備え、前記励起光は前記光学素子の前記ＨＲコーティング部分と相互作用する際に反射励起光として入射光軸から反射光軸へと反射され、前記反射励起光は試料と相互作用し、前記試料は前記反射励起光に反応して放出光を放出する蛍光色素分子を備える、励起光放出ステップと、
画像センサによって前記放出光を検出するステップであって、前記画像センサは前記反射光軸に沿って前記光学素子に結合され、前記放出光の少なくとも一部は前記光学素子を介して前記画像センサへと透過される、放出光検出ステップと
を含む方法。
【請求項１８】
前記試料の表面に平行な少なくとも第１の軸に沿って励起光を使用して前記試料を走査するように走査光学系を調整するステップであって、前記走査光学系は前記１つまたは複数の光源に光学的に結合される、走査光学系調整ステップ、または
前記試料の表面に平行な少なくとも第２の軸に沿って前記試料を移動させるように載物台を調整するステップであって、前記載物台は前記試料を支持する、載物台調整ステップ
の少なくとも一方をさらに含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
１つまたは複数の光源に励起光を放出させるステップであって、前記励起光は光学素子と相互作用し、前記光学素子は少なくとも１つの高反射率（ＨＲ）コーティング部分と少なくとも１つの反射防止（ＡＲ）コーティング部分とを備え、前記励起光は前記光学素子を介して光透過軸に沿って試料に向けて透過され、前記試料は前記励起光に反応して放出光を放出する蛍光色素分子を備え、前記放出光は前記光学素子の前記ＨＲコーティング部分によって反射光軸に沿って画像センサに向けて反射される、励起光放出ステップと、
前記画像センサによって前記放出光を検出するステップであって、前記画像センサは前記反射光軸に沿って前記光学素子に結合される、放出光検出ステップと
を含む方法。
【請求項２０】
前記試料の表面に平行な少なくとも第１の軸に沿って励起光を使用して前記試料を走査するように走査光学系を調整するステップであって、前記走査光学系は前記１つまたは複数の光源に光学的に結合される、走査光学系調整ステップ、または
前記試料の表面に平行な少なくとも第２の軸に沿って前記試料を移動させるように載物台を調整するステップであって、前記載物台は前記試料を支持する、載物台調整ステップ
の少なくとも一方をさらに含む、請求項１９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の相互参照】
【０００１】
［0001］  本願は、２０１７年４月７日に出願された米国特許出願第６２／４８２，７４４号の利益を主張するものであり、この開示内容を参照によって本願明細書に引用したものとする。
【背景技術】
【０００２】
［0002］  蛍光の光検出は、様々な医用診断装置で使用されている。このような装置は、臨床診断装置、ウェアラブルデバイス、および科学機器を含み得るが、これらに限定されない。厚みのあるまたは高散乱性の試料では、蛍光は、入射励起光と同じ側から集光されることが多い。このような蛍光の集光方法は、落射蛍光集光技術と呼ばれる。
【発明の概要】
【０００３】
［0003］  本開示は、落射蛍光集光のためのシステムおよび方法に関する。すなわち、本明細書に記載されている実施形態は、（１）対象となる蛍光範囲全体を覆う広帯域反射防止（ＡＲ）コーティング、および（２）励起光波長を反射するように動作可能な高反射率（ＨＲ）コーティングの様々な部分を有する光学素子を含むシステムを含む。いくつかの実施形態では、ＨＲコーティングは、光学素子の面積のごく一部を覆い得る。さらに、いくつかの例示的な実施形態は、光学素子上に複数のＨＲコーティング領域を含み得る。このようなシナリオにおいては、各々のＨＲコーティング領域は、異なるレーザスポット（スポットは、同じ波長または異なる波長のスポットであり得る）によって照明され得る。
【０００４】
［0004］  第１の態様では、１つのシステムが提供される。該システムは、光学素子を含む。光学素子は、少なくとも１つの高反射率（ＨＲ）コーティング部分と、少なくとも１つの反射防止（ＡＲ）コーティング部分とを含む。該システムはさらに、第１の光軸に沿って光学素子に光学的に結合された１つまたは複数の光源を含む。１つまたは複数の光源は、励起光を放出する。励起光は、光学素子を介して、試料と相互作用する。試料は、励起光に反応して放出光を放出する蛍光色素分子を含む。該システムは、第２の光軸に沿って光学素子に光学的に結合された画像センサを含み、画像センサは、光学素子を介して放出光を検出する。
【０００５】
［0005］  第２の態様では、１つの方法が提供される。該方法は、１つまたは複数の光源に励起光を放出させるステップを含む。励起光は、光学素子と相互作用する。光学素子は、少なくとも１つの高反射率（ＨＲ）コーティング部分と、少なくとも１つの反射防止（ＡＲ）コーティング部分とを含む。励起光は、光学素子のＨＲコーティング部分と相互作用する際に、反射励起光として、入射光軸から反射光軸へと反射される。反射励起光は、試料と相互作用する。試料は、反射励起光に反応して放出光を放出する蛍光色素分子を含む。該方法は、画像センサによって放出光を検出するステップを含む。画像センサは、反射光軸に沿って光学素子に結合される。放出光の少なくとも一部は、光学素子を介して画像センサへと透過される。
【０００６】
［0006］  第３の態様では、１つの方法が提供される。該方法は、１つまたは複数の光源に励起光を放出させるステップを含む。励起光は、光学素子と相互作用する。光学素子は、少なくとも１つの高反射率（ＨＲ）コーティング部分と、少なくとも１つの反射防止（ＡＲ）コーティング部分とを含む。励起光は、光透過軸に沿って光学素子を介して試料に向けて透過される。試料は、励起光に反応して放出光を放出する蛍光色素分子を含む。放出光は、光学素子のＨＲコーティング部分によって、光反射軸に沿って画像センサに向けて反射される。該方法は、画像センサによって放出光を検出するステップを含む。画像センサは、光反射軸に沿って光学素子に結合される。
【０００７】
［0007］  他の態様、実施形態、および実施例は、必要に応じて添付図面を参照しながら以下の詳細な説明を読めば、当業者に明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】［0008］例示的な一実施形態に係るシステムを示す図である。
【図２Ａ】［0009］例示的な一実施形態に係るシステムを示す図である。
【図２Ｂ】［0010］例示的な一実施形態に係るシステムを示す図である。
【図２Ｃ】［0011］例示的な一実施形態に係るシステムを示す図である。
【図３】［0012］例示的な一実施形態に係る様々な光学素子を示す図である。
【図４】［0013］例示的な一実施形態に係る方法を示す図である。
【図５】［0014］例示的な一実施形態に係る方法を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
［0015］  本明細書において、例示的な方法、装置、およびシステムを説明する。用語「実施例」および「例示的な」は、本明細書では「１つの例、実例、例示としての役割を果たす」という意味を示すのに使用される。「実施例」または「例示的」なものであるとして本明細書に記載されている実施形態または特徴のいずれも、必ずしも他の実施形態または特徴よりも好適である、または有利であると解釈されるものとは限らない。本明細書に示されている対象の範囲から逸脱せずに、他の実施形態が使用されてよく、他の変更がなされてよい。
【００１０】
［0016］  したがって、本明細書に記載されている例示的な実施形態は、限定的なものではない。全般的に本明細書に記載され、図面に示されている本開示の態様は、多種多様な異なる構成で配置され、置換され、組み合わされ、分離され、設計され得る。本明細書内では、これら全てが想定されている。
【００１１】
［0017］  さらに、文脈上別の意味を示していない限り、図面の各々に示されている特徴は、互いに組み合わせて使用されてよい。したがって、全ての図示されている特徴が各々の実施形態に必要であるとは限らないことを理解した上で、全般的に、図面は１つまたは複数の実施形態全体のコンポーネントの態様と見なすべきである。
Ｉ．概要
【００１２】
［0018］  落射蛍光集光技術（例えば、試料の同じ側に励起光を供給して、試料の同じ側から蛍光を集光する方法）は、励起経路と集光経路との位置合わせが容易であること、および光学素子の数が少ないことから、利用される場合が多い。落射蛍光技術はさらに、対象試料の下で散乱基板または不透明基板を使用することができる。落射蛍光集光を利用するいくつかの装置では、照明（特に、レーザ照明が使用される場合）に使用される開口数（ＮＡ）と集光に使用されるＮＡとの間に大きな差があることが多い。すなわち、入射レーザ光は、通常、狭い角度範囲にわたって光学システムおよび試料と相互作用する。一方、蛍光は、比較的広い角度範囲にわたって放出される。レーザ光源を使用する照明では、非常に高い空間分解能が望まれる場合には、高いＮＡのみが必要である。一方、集光の際に、典型的には立体角で実質的に均一に放射された蛍光光子の収集を最大化するには、ほとんどの場合、高いＮＡが望ましい。
【００１３】
［0019］  従来の落射蛍光装置は、ダイクロイックフィルタを使用して励起光を蛍光から分離するものである。しかしながら、このようなダイクロイックフィルタを使用する装置には、いくつかの欠点がある。第一に、ダイクロイックフィルタの透過スペクトルは光の入射角に依存するので、集光効率は所与の視野の様々な点において同一でない。第二に、複数の異なる励起波長を使用して試料を検査することが望ましい場合が多い。可能性のある結果として、蛍光は、最も長い励起波長未満の波長で集光されない場合があり、励起源、蛍光色素分子、および光学素子に関する選択肢を制限し得る。マルチバンド・ダイクロイック・フィルタが使用される場合、集光されたスペクトルにギャップが生じ得、このことが、集光される蛍光量を実質的に低減し得る。さらに、高品質のマルチバンド・ダイクロイック・フィルタは、一般的に、多数の誘電体層を利用しており、このことが処理コストおよび材料コストによりフィルタのコストを高くしている。
【００１４】
［0020］  別の従来の代替形態として、複数の励起レーザに適応させるためにダイクロイック・フィルタ・ホイールが使用され得る。このような場合、ホイールは、できる限り（赤色の側で）励起源のスペクトルに近い遷移波長を有するダイクロイックフィルタを選択する。このアプローチは、機械的フィルタホイールおよびそのアクチュエータ／モータの存在により、システムのサイズを増大させ得る。また、このようなアプローチは、典型的には、回転載物台（電動式である場合が多い）を使用し、このことがシステムのコストを増大させ得る。さらに、このような装置は、異なる波長で複数の光源を使用した試料の同時励起に適応していない。それに加えて、このようなアプローチは、ダイクロイックフィルタの角度依存透過スペクトルを補正するものではない。
【００１５】
［0021］  本明細書に記載されている実施形態は、多くの落射蛍光集光シナリオに存在する励起ＶＡと集光ＮＡとの間の大きな差を利用したシステムを含む。例示的な一実施形態では、システムは、対象の蛍光範囲全体を覆う広帯域反射防止（ＡＲ）コーティングを有する光学素子を含む。光学素子の一部は、塗布された高反射率（ＨＲ）コーティングを有する。このＨＲコーティングは、金属コーティングであり得る。ＨＲコーティングは、安価な金属コーティング（例えば、スパッタリングされたアルミニウムおよび／または金コーティング）を含み得る。例えば、ＨＲコーティングは、入射角に概ね依存しない反射特性を有し得る。いくつかの実施形態では、ＨＲコーティングは、光学素子の面積のごく一部（例えば、数パーセント）を覆い得る。ＨＲコーティングの面積は、入射する励起レーザスポットのサイズに基づき得る。
【００１６】
［0022］  いくつかの例示的な実施形態は、光学素子上に複数のＨＲコーティング領域を含み得る。このようなシナリオにおいては、各々のＨＲコーティング領域は、異なるレーザスポット（スポットは、同じ波長または異なる波長のスポットであり得る）によって照明され得る。
【００１７】
［0023］  光学素子上の複数の離散的ＨＲコーティング領域の代替形態として、または光学素子上の複数の離散的ＨＲコーティング領域に追加して、光学素子上に線形ＨＲコーティング領域が存在し得る。例示的な一実施形態では、レーザスポットは、線形ＨＲコーティング領域に沿って走査されて、試料の１Ｄ走査を行い得る。いくつかの実施形態では、複数の波長で試料を同時に励起させるために、異なるレーザからの複数のレーザスポットが、このラインに沿って走査され得る。このことにより、一次元（進相軸）に対して励起ビーム経路内で高速ガルバノミラーを使用して蛍光データを非常に迅速に収集することができ、載物台は、遅相軸に対して他の次元で試料を移動させることができる。集光アームにおいて、集光された蛍光はデスキャンされ得る、または多画素画像センサが使用され得る。
【００１８】
［0024］  代替の実施形態では、光学素子は、その９９％がＨＲであり、ほんのわずかなＡＲスポットを有するように作製され得る。このような場合、励起は光学素子を介して透過され、蛍光は集光検出器に反射される。
【００１９】
［0025］  本明細書に記載されている実施形態は、複数の励起レーザ（異なる位置に存在し得る）による試料の同時検査を可能にし得る。いくつかの実施形態は、完全二次元蛍光マップを構築するステップを含み得る。このような場合、試料は、光軸に垂直な両方の軸方向に走査され得る。
【００２０】
［0026］  記載されているシステムおよび方法は、複数の励起レーザを使用し、任意で異なる波長のレーザを有するコスト効率の良い診断装置を提供し得る。本開示は、数十個の誘電体層を含むマルチバンド・ダイクロイック・フィルタよりも単純で安価であり得る金属層を有する光学素子を含む。
【００２１】
［0027］  本明細書に記載されているシステムおよび方法は、フロー・サイトメトリ・システム、および他の蛍光ベースの診断技術に関連し得る。一例として、本開示は、ウェアラブルデバイス、臨床用装置、および／または外科用装置に関連し得る。追加的にまたは代替的に、システムおよび方法はさらに、光退色過程が生じる前にできる限り多くの光子を捕捉するために高い集光効率が望ましいデジタルパソロジー用途で使用され得る。
【００２２】
［0028］  例示的な一実施形態では、光学素子は、マイクロメートルサイズのスケールに至るまで、半導体リソグラフィ技術を使用してパターン形成され得る。例えば、リソグラフィでパターン形成されたＨＲコーティング領域は、１００×１００μの正方形または円を含み得る。追加的にまたは代替的に、線形ＨＲコーティング領域は、１ｍｍ×１００μのラインを含み得る。それより大きい、小さい、および異なる形状のＨＲコーティング領域も考えられる。本明細書内の他の場所で記載されているように、複数のＨＲコーティング領域が可能である。また、小さいＨＲコーティング領域およびそれらの個々の形状が本明細書に記載されているが、光学素子の大部分がＨＲコーティング領域を含み、小さいＡＲコーティング領域を有するように、反射防止部分と高反射率部分が「逆にされ」得ることが理解されよう。
【００２３】
［0029］  いくつかの実施形態では、システムは、異なるパターンが形成された光学素子を受容するように構成され得る。例えば、例示的な一実施形態は、各々が異なるＨＲ／ＡＲパターンを有する複数の光学素子を有するフィルタホイールを含み得る。このような異なるフィルタは、例えば、様々な試料励起パターンおよび様々な数の励起源に適応させるために使用され得る。
ＩＩ．例示的なシステム
【００２４】
［0030］  図１は、例示的な一実施形態に係るシステム１００を示す図である。システム１００、例えば、ウェアラブルデバイス、臨床用装置または外科用装置を含み得る。例えば、システム１００は、フロー・サイトメトリ・システム、蛍光顕微鏡、または任意のタイプの光学的特性評価システムであり得る。
【００２５】
［0031］  システム１００は、１つまたは複数の光源１１０を含む。１つまたは複数の光源１１０は、レーザ光源を含み得る。さらに、光源１１０は、励起光を放出するように構成される。例示的な一実施形態では、光源１１０は、ガウスビームプロファイルおよび比較的小さいビーム広がり（例えば、１００μ）を有するレーザ光を供給し得る。すなわち、光源１１０によって放出された励起光は、比較的狭い角度範囲にわたってシステム１００の他の要素と相互作用し得る。
【００２６】
［0032］  システム１００はさらに、光学素子１２０を含む。光学素子１２０は、少なくとも１つの高反射率（ＨＲ）コーティング部分１２２と、少なくとも１つの反射防止（ＡＲ）コーティング部分１２４とを含む。例示的な一実施形態では、ＨＲコーティング部分１２２は、金属コーティング（例えば、アルミニウム、銀、および／または金）を含み得る。追加的にまたは代替的に、ＨＲコーティング部分１２２は、誘電体層（ＴｉＯ２、ＴａＯ２など）を含み得る。例えば、ＨＲコーティング部分１２２は、広い光波長範囲にわたって高反射面を形成し得る。
【００２７】
［0033］  いくつかの実施形態では、ＡＲコーティング部分１２４は、誘電体コーティングを含み得る。例えば、単層のＭｇＦ２が使用され得る。いくつかの実施形態では、ＡＲコーティング部分１２４は、特定の波長の光に関しては実質的に透過性であり、他の波長を吸収する、または他の波長に関しては反射性である（例えば、帯域通過もしくは帯域消去フィルタ）ように構成され得る。追加的にまたは代替的に、ＡＲコーティング部分１２４は、広い光波長範囲に対して実質的に透過性であるように構成され得る。
【００２８】
［0034］  材料およびコーティング層の厚さ（単数または複数）の選択は、反射ピーク（ＨＲ）または透過ピーク（ＡＲ）の幅および深さに基づき得る。ＡＲコーティングは、数百ナノメートルの幅の帯域通過波長「窓」を有し得る。
【００２９】
［0035］  本開示は、特定の材料を含むものとしてＨＲコーティングおよびＡＲコーティングを記載しているが、実質的に反射特性または透過特性を有する光学素子を形成するのに他の材料および製造方法も可能であることは理解されよう。本明細書で使用される場合、「高反射率コーティング」は、光の所与の波長で９０％より大きい反射率を有する材料およびコーティングを含み得る。さらに、本明細書で使用される場合、「反射防止コーティング」は、光の所与の波長でコーティングされていない基板より小さい反射率（例えば、コーティングされていないガラスでは、およそ４〜５％）を示す材料およびコーティングを含み得る。例えば、本明細書に記載されているＡＲコーティングは、３５０〜７００ナノメートルの波長範囲にわたって１％未満の反射率を示し得るが、４％未満の他の反射率の値および他の波長範囲も可能であり、本明細書では想定されている。
【００３０】
［0036］  １つまたは複数の光源１１０は、第１の光軸に沿って光学素子１２０に光学的に結合される。
【００３１】
［0037］  例示的な実施形態では、システム１００は、試料と相互作用する。すなわち、システム１００は、１つまたは複数の光源１１０によって放出された励起光で試料を照明し得る。励起光は、試料と相互作用する前に、光学素子１２０と相互作用する。試料は、励起光に反応して放出光を放出する蛍光色素分子を含む。例示的な実施形態では、試料は、人もしくは動物の組織または蛍光特性評価に適した別のタイプの物体を含むが、これらに限定されない。
【００３２】
［0038］  システム１００はさらに、第２の光軸に沿って光学素子１２０に光学的に結合された画像センサ１４０を含む。すなわち、例示的な実施形態では、（試料内に存在する蛍光色素分子から生成された）放出光は、反射および／または透過相互作用によって光学素子１２０と相互作用する。画像センサ１４０は、光学素子１２０を介して放出光を検出するように構成される。例示的な一実施形態では、画像センサ１４０は、多画素カメラセンサを含み得るが、個々の構成またはアレイ構成の他のタイプの光検出装置も可能である。
【００３３】
［0039］  例示的な一実施形態では、ＨＲコーティング部分１２２は、試料と相互作用するように、励起光を反射するように構成され得る。このような場合、ＡＲコーティング部分１２４は、放出光に対して実質的に透過性であるように構成される。
【００３４】
［0040］  あるいは、ＨＲコーティング部分１２２は、放出光を画像センサ１４０に向けて方向付けるために、放出光を反射するように構成され得る。このような場合、ＡＲコーティング部分１２４は、励起光に対して実質的に透過性であるように構成される。
【００３５】
［0041］  いくつかの実施形態では、ＨＲコーティング部分１２２は、光学素子１２０上に複数のＨＲコーティング領域を含み得る。例えば、複数のＨＲコーティング領域は、光学素子１２０の第１の表面に沿って配置され得る。このような場合、複数のＨＲコーティング領域は、２〜２０個のＨＲコーティング領域１２２、またはそれ以上のＨＲコーティング領域を含み得る。
【００３６】
［0042］  このような実施形態では、１つまたは複数の光源１１０は、複数の光源を含み得る。具体的には、複数の光源の各々の光源１１０は、光学素子上の個々のＨＲコーティング領域１２２に向けて励起光を放出する。このような場合、複数の光源の各々の光源１１０は、個々の励起波長で励起光を放出するように動作可能であり得る。すなわち、各々の光源１１０は、異なる励起波長で励起光を放出し得る。
【００３７】
［0043］  例示的な一実施形態では、１つまたは複数の光源１１０、光学素子１２０、および画像センサ１４０は、試料に対して落射蛍光光学顕微鏡構成で配置される。すなわち、システム１００は、試料の第１の表面上に入射する光源１１０からの励起光を供給し得る。このような場合、試料内の蛍光色素分子は、広い角度範囲（例えば、試料の第１の表面によって画定された半球の範囲内）で環境へ放出光を放出し得る。画像センサ１４０は、試料の第１の表面からの放出光の少なくとも一部を集光し得る。すなわち、試料の励起および蛍光集光は、試料の同じ側で生じ得る。
【００３８】
［0044］  いくつかの実施形態では、システム１００は、走査光学系１３２、集束光学系１３４、および／または集光光学系１３６のような他の光学系１３０を含み得る。例えば、走査光学系１３２は、１つまたは複数の光源１１０に光学的に結合され得る。このような場合、走査光学系１３２は、試料の表面に平行な少なくとも第１の試料軸に沿って（ｘ軸に沿って）試料上に励起光を走査するように構成され得る。走査光学系１３２は、少なくとも１つのガルバノミラーを含み得る。
【００３９】
［0045］  いくつかの例示的な実施形態は、試料を支持し得る載物台１６０を含む。一実施例では、載物台１６０は、試料を少なくとも１つの軸に沿って移動させることができるように電動式であり得る。このような場合、載物台１６０は、試料の表面に平行な少なくとも第２の試料軸に沿って（例えば、ｙ軸に沿って）試料を移動させるように構成され得る。他の実施形態では、載物台１６０は、試料の表面に平行な平面（例えば、ｘ方向およびｙ方向）に沿って、および／または第１の光軸もしくは第２の光軸に垂直な平面に沿って試料を移動させるように構成され得る。さらに別の実施形態では、載物台１６０は、３つの空間次元全て（ｘ方向、ｙ方向、およびｚ方向）に試料を移動させるように構成され得る。いくつかの実施形態では、載物台１６０の位置は、手動で調整可能であり得る。
【００４０】
［0046］  いくつかの実施形態では、システム１００は、少なくとも１つのプロセッサ１５２およびメモリ１５４を有するコントローラ１５０を含み得る。１つまたは複数のプロセッサ１５２は、汎用プロセッサまたは専用プロセッサ（例えば、デジタル・シグナル・プロセッサ、特定用途向け集積回路など）を含み得る。１つまたは複数のプロセッサ１５２は、メモリ１５４内に記憶されているコンピュータ可読プログラム命令を実行するように構成され得る。このように、１つまたは複数のプロセッサ１５２は、本明細書に記載されている機能および動作の少なくともいくつかを提供するためにプログラム命令を実行し得る。
【００４１】
［0047］  メモリ１５４は、１つまたは複数のプロセッサ１５２によって読み取られ得る、またはアクセスされ得る１つまたは複数の非一時的なコンピュータ可読記憶媒体を含み得る、または１つまたは複数の非一時的なコンピュータ可読記憶媒体の形態を取り得る。１つまたは複数のコンピュータ可読記憶媒体は、全体または一部が１つまたは複数のプロセッサ１５２の少なくとも１つと一体化され得る光学メモリ、磁気メモリ、有機メモリもしくは他のメモリ、またはディスクストレージのような揮発性および／または不揮発性の記憶コンポーネントを含み得る。いくつかの実施形態では、メモリ１５４は、１つの物理的装置（例えば、１つの光学メモリ、磁気メモリ、有機メモリもしくは他のメモリ、またはディスクストレージユニット）を使用して実装され得るが、他の実施形態では、メモリ１５４は、２つ以上の物理的装置を使用して実装され得る。
【００４２】
［0048］  上述したように、メモリ１５４は、コンピュータ可読プログラム命令と、システム１００の要素および／または試料に関する情報のような追加データとを含み得る。このように、メモリ１５４は、本明細書に記載されている動作および機能のいくつかまたは全てを実行する、または容易にするためのプログラム命令を含み得る。
【００４３】
［0049］  例示的な一実施形態では、動作は、１つまたは複数の光源１１０に励起光を放出させる動作、および画像センサ１４０によって放出光を検出する動作を含み得る。
【００４４】
［0050］  さらに、走査光学系１３２を伴う場合には、動作は、試料の表面に平行な少なくとも第１の試料軸に沿って励起光を使用して試料を走査するように走査光学系１３２を調整する動作をさらに含み得る。
【００４５】
［0051］  載物台１６０を含む例示的な実施形態では、動作は、試料の表面に平行な少なくとも第２の試料軸に沿って試料を移動させるように載物台１６０を調整する動作を含み得る。
【００４６】
［0052］  図２Ａは、例示的な一実施形態に係るシステム２００を示す図である。システム２００は、図１に図示され、図１に関して説明されているシステム１００と同様または同一であり得る。例えば、システム２００は、第１の光軸２４４に沿って励起光２１２を放出する光源２１０を含み得る。放出された励起光２１２は、光学素子２２０と相互作用し得る。特に、励起光２１２は、光学素子２２０の表面に沿って配置されたＨＲコーティング部分２２２によって実質的に反射され得る。励起光２１２は、第２の光軸２４２に沿った、または第２の光軸２４２に平行な軸方向に試料２１４に向けて反射され得る。
【００４７】
［0053］  反射された励起光２１３は、集束レンズおよび／または集光光学系であり得る対物光学系２３６によって集束され得る。集束された励起光２１３は、試料２１４と相互作用し得る。例えば、反射された励起光２１３は、試料２１４内に配置された蛍光色素分子と相互作用し得る。蛍光色素分子は、反射された励起光２１３との相互作用に反応して、放出光２１６を放出し得る。例示的な実施形態は、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ社製色素またはＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ社製色素のＢｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｖｉｏｌｅｔ（ＢＶ）またはＢｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｖｉｏｌｅｔ  ＵＶ（ＢＵＶ）色素のような蛍光色素分子を含み得る。本明細書に記載されているシステムおよび方法と共に、他のタイプの蛍光色素分子が使用され得ることは理解されよう。いくつかの実施形態では、このような蛍光色素分子の励起波長は、３５５ナノメートル〜４０５ナノメートルであり得るが、他の励起波長も考えられる。いくつかの実施形態では、放出光２１６は、励起波長より長い波長の放出波長を有し得る。
【００４８】
［0054］  放出光２１６は、対物光学系２３６または別のタイプの光学集光素子（例えば、集光光学系１３６）を使用して集光され得る。いくつかの実施形態では、対物光学系２３６は、放出光２１６を実質的にコリメートし得る。
【００４９】
［0055］  放出光２１６は、光学素子２２０に衝突して、光学素子２２０と相互作用し得る。例えば、放出光２１６の第１の部分は、ＨＲコーティング部分２２２と相互作用し得、放出光２１６の第２の部分は、ＡＲコーティング部分２２４と相互作用し得る。ＨＲコーティング部分２２２と相互作用する放出光２１６の第１の部分は、反射され得る、または別の方法で遮断もしくは吸収され得る。ＡＲコーティング部分２２４と相互作用する放出光２１６の第２の部分は、光学素子２２０を介して、透過放出光２１８として実質的に透過され得る。すなわち、放出光の一部は、光学素子２２０との相互作用によって、光学素子２２０によって遮断され得る、または反射され得る。このことにより、光学素子２２０を介して透過された放出光に減衰領域２１９が生じ得る。減衰領域２１９では、放出光は存在し得ない、または透過放出光２１８の強度よりも実質的に低い強度で存在し得る。
【００５０】
［0056］  図２Ａに示されているように、放出光２１８は、集束光学系２３４と相互作用し得る。いくつかの実施形態では、集束光学系２３４は、画像センサ２４０上に画像を生成するように構成され得る。（例えば、低い蛍光出力および／または単一の光子計数を伴う）他の実施形態では、集束光学系２３４は、光電子倍増管またはアバランシェフォトダイオードのような高感度単画素検出器を含み得る光検出装置上に放出光２１８を集束するように構成され得る。
【００５１】
［0057］  図２Ｂは、例示的な一実施形態に係るシステム２５０を示す図である。システム２５０は、複数の光源を有することを除いては図１および図２Ａに図示され、図１および図２Ａに関して説明されているシステム１００および／またはシステム２００と同様または同一であり得る。
【００５２】
［0058］  図２Ｂに示されているように、システム２５０は、複数のＨＲコーティング部分２２２ａ、２２２ｂ、２２２ｃを有する光学素子２２０を含み得る。システム２５０はさらに、複数の光源２１０ａ、２１０ｂ、２１０ｃを含み得る。例示的な実施形態では、光源２１０ａは、第１の励起波長を有する励起光２１２ａを放出するように構成され得る。同様に、光源２１０ｂ、２１０ｃは、それぞれ第２の励起波長および第３の励起波長を有する励起光２１２ｂ、２１２ｃを放出するように構成され得る。
【００５３】
［0059］  個々の励起光２１２ａ、２１２ｂ、２１２ｃは、光学素子２２０の表面に沿って異なる位置に衝突し得る。例えば、励起光２１２ａは、ＨＲコーティング部分２２２ａと相互作用し得、励起光２１２ｂは、ＨＲコーティング部分２２２ｂと相互作用し得、励起光２１２ｃは、ＨＲコーティング部分２２２ｃと相互作用し得る。
【００５４】
［0060］  励起光と個々のＨＲコーティング部分との相互作用は、試料２１４に向けて方向付けられ得る反射励起光２１３ａ、２１３ｂ、２１３ｃを生成し得る。例えば、光学素子２３６は、試料２１４上の特定の位置に個々の励起光ビーム２１３ａ、２１３ｂ、２１３ｃを集束し得る。このような場合、複数の励起波長によって所与の試料位置が同時に照明され得る。
【００５５】
［0061］  例示的な一実施形態では、システム２５０は、複数の異なる蛍光色素分子を含む試料を特性評価するように動作可能であり得る。例えば、試料２１４は、光源２１０ａ、２１０ｂ、２１０ｃによって生成された３つの異なる励起波長に対応する３つの異なる蛍光色素分子を含み得る。
【００５６】
［0062］  いくつかの実施形態では、光源２１０ａ、２１０ｂ、２１０ｃは、逐次または並行して操作され得る。すなわち、光源２１０ａ、２１０ｂ、２１０ｃは、異なる時間にまたは同時に、個々の励起光２１２ａ、２１２ｂ、２１２ｃを供給し得る。
【００５７】
［0063］  図２Ｂには３つのＨＲコーティング部分および３つの光源が示されているが、それより多いまたは少ない数のＨＲコーティング部分および光源が使用され得、本明細書内で想定されている。さらに、光源２１０ａ、２１０ｂ、２１０ｃは特定の空間構成で配置されるものとして示されているが、光源２１０ａ〜２１０ｃは、異なる位置に配置されてもよく、光学素子２２０および個々のＨＲコーティング部分２２２ａ〜２２２ｃに対して平行な入射角度を有する必要はないことが理解されよう。例えば、空間制約および／またはフォームファクタにより、光源２１０ａ〜２１０ｃは、空間的にずらされ得、励起光２１２ａ〜２１２ｃは、異なる入射角で個々のＨＲコーティング部分２２２ａ〜２２２ｃと相互作用し得る。例えば、いくつかの実施形態では、複数の光源（例えば、４つのレーザダイオード）が、光学素子２２０上の１つのＨＲコーティング部分（例えば、ＨＲコーティング部分２２２ｂ）に衝突するように、異なる入射角に沿って光を放出し得る。
【００５８】
［0064］  図２Ｃは、例示的な一実施形態に係るシステム２７０を示す図である。システム２７０は、図１、図２Ａ、または図２Ｂに図示され、図１、図２Ａ、または図２Ｂに関して説明されているシステム１００、システム２００および／またはシステム２５０と同様または同一であり得る。一実施例では、システム２７０は、システム２００またはシステム２５０の代替構成を表し得る。
【００５９】
［0065］  システム２７０は、第１の光軸２７１に沿って励起光２１２を放出する光源２１０を含み得る。放出された励起光２１２は、光学素子２２０と相互作用し得る。特に、励起光２１２は、光学素子２２０の表面に沿って配置されたＡＲコーティング領域２２４によって実質的に透過され得る。励起光２１２は、第１の光軸２７１に沿った、または第１の光軸２７１に平行な軸方向に試料２１４に向けて透過され得る。
【００６０】
［0066］  透過された励起光２７２は、集束レンズおよび／または集光光学系であり得る対物光学系２３６によって集束され得る。集束された励起光２７３は、試料２１４と相互作用し得る。例えば、集束された励起光２７３は、試料２１４内に配置された蛍光色素分子と相互作用し得る。蛍光色素分子は、集束された励起光２７３との相互作用に反応して、放出光２１６を放出し得る。いくつかの実施形態では、放出光２１６は、励起波長とは異なる放出波長を有し得る。
【００６１】
［0067］  放出光２１６は、対物光学系２３６または別のタイプの光学集光素子（例えば、集光光学系１３６）を使用して集光され得る。いくつかの実施形態では、対物光学系２３６は、放出光２１６を実質的にコリメートし得る。
【００６２】
［0068］  放出光２１６は、光学素子２２０に衝突して、光学素子２２０と相互作用し得る。例えば、放出光２１６の第１の部分は、ＨＲコーティング部分２２２と相互作用し得、放出光２１６の第２の部分は、ＡＲコーティング部分２２４と相互作用し得る。ＨＲコーティング部分２２２と相互作用する放出光２１６の第１の部分は、画像センサ２４０に向けて反射され得る。ＡＲコーティング部分２２４と相互作用する放出光２１６の第２の部分は、光学素子２２０を介して実質的に透過され得る。
【００６３】
［0069］  図２Ｃに示されているように、反射された放出光２１９は、集束光学系２３４と相互作用し得る。いくつかの実施形態では、集束光学系２３４は、画像センサ２４０上に画像を生成するように構成され得る。（例えば、低い蛍光出力および／または単一の光子計数を伴う）他の実施形態では、集束光学系２３４は、光検出装置上で放出光２１９を集束するように構成され得る。
【００６４】
［0070］  図３は、例示的な一実施形態に係る様々な光学素子３００を示す図である。様々な光学素子３００は、図１、図２Ａ、図２Ｂ、および図２Ｃに図示され、図１、図２Ａ、図２Ｂ、および図２Ｃに関して説明されている光学素子１２０または光学素子２２０の実施例を表し得る。光学素子３１０は、中央に位置する１つのＨＲコーティング部分３１４を含む。光学素子３１０の残りの面積は、ＡＲコーティング部分３１２を含む。光学素子３２０は、光学素子３１０の逆の色調の実施形態を含む。すなわち、光学素子３２０は、中央に位置する１つのＡＲコーティング部分３２４を含む。光学素子３２０の残りの面積は、ＨＲコーティング部分３２２を含む。
【００６５】
［0071］  例示的な一実施形態では、ＨＲコーティング部分３１４は、５０μ〜１ｍｍの直径を有する円形形状を有し得る。しかしながら、ＨＲコーティング部分３１４の他のサイズおよび形状も可能である。同様に、ＡＲコーティング部分３２４は、５０μ〜１ｍｍの直径を有する円形形状を有し得る。しかしながら、ＡＲコーティング部分３２４の他のサイズおよび形状も可能である。
【００６６】
［0072］  光学素子３３０は、複数のＨＲコーティング部分３３４を含む。光学素子３３０の残りの面積は、ＡＲコーティング部分３３２を含む。光学素子３４０は、光学素子３３０の逆の色調の実施形態を含む。すなわち、光学素子３４０は、複数のＡＲコーティング部分３４４を含む。光学素子３４０の残りの面積は、ＨＲコーティング部分３４２を含む。
【００６７】
［0073］  光学素子３５０は、細長形状を有するＨＲコーティング部分３５４を含む。例えば、ＨＲコーティング部分３５４は、線形セグメントを含み得る。このような場合、レーザスポットは、試料の一次元走査を行うようにＨＲコーティング部分３５４にわたって走査され得る。いくつかの実施形態では、複数の波長で試料を同時に励起させるために、異なるレーザからの複数のレーザスポットが、このラインに沿って走査され得る。光学素子３５０の残りの面積は、ＡＲコーティング部分３５２を含む。光学素子３６０は、光学素子３５０の逆の色調の実施形態を含む。すなわち、光学素子３６０は、細長形状を有するＡＲコーティング部分３６４を含む。光学素子３６０の残りの面積は、ＨＲコーティング部分３６２を含む。
【００６８】
［0074］  図３は、個々の光学素子上のＡＲコーティング部分およびＨＲコーティング部分の特定の配置を有する様々な光学素子３００を示しているが、ＡＲコーティング部分とＨＲコーティング部分の他の組み合わせおよび配置も考えられ、可能であることは理解されよう。
【００６９】
［0075］  様々な光学素子３００は、光学電子ビームリソグラフィのような半導体製造技術を使用して作製され得る。一実施例として、ＨＲコーティング領域は、１００μ以下の限界寸法を有する正方形、円形、および／または長方形を含み得る。
【００７０】
［0076］  いくつかの実施形態では、各々が異なるＨＲ／ＡＲパターンを有する複数の異なる光学素子（例えば、光学素子３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０）は、フィルタホイール上に含まれ得る。このような場合、フィルタホイールは、光軸に沿って所望のＨＲ／ＡＲパターンを形成するように手動でまたは自動的に作動され得る。例示的な一実施形態では、コントローラ１５０は、フィルタホイール上の複数のＨＲ／ＡＲパターンからＨＲ／ＡＲパターンを自動的に選択し得る。このような場合、ＨＲ／ＡＲパターンの選択は、光源の数、試料内の異なる蛍光色素分子のタイプおよび数、および画像センサの検出能力に基づき得る。他の検討事項も可能であり、想定されている。
ＩＩＩ．例示的な方法
【００７１】
［0077］  図４は、例示的な一実施形態に係る方法４００を示す図である。方法４００は、様々なブロックまたはステップを含み得る。ブロックまたはステップは、個々にまたは組み合わせて実行され得る。ブロックまたはステップは、任意の順序でおよび／または順次もしくは並行して実行され得る。さらに、ブロックまたはステップは、省略され得る、または方法４００に追加され得る。
【００７２】
［0078］  方法４００のブロックは、図１、図２Ａ、図２Ｂ、図２Ｃ、および図３に図示され、図１、図２Ａ、図２Ｂ、図２Ｃ、および図３に関して説明されているシステム１００、システム２００、システム２５０、もしくはシステム２７０、または様々な光学素子３００の要素を制御し得る、含み得る、および／または伴い得る。いくつかの実施形態では、方法４００のいくつかまたは全てのブロックは、コントローラ１５０によって実行され得る。
【００７３】
［0079］  ブロック４０２は、１つまたは複数の光源に励起光を放出させるステップを含む。励起光は、少なくとも１つの高反射率（ＨＲ）コーティング部分と少なくとも１つの反射防止（ＡＲ）コーティング部分とを含む光学素子と相互作用する。
【００７４】
［0080］  励起光は、光学素子のＨＲコーティング部分と相互作用する際に、反射励起光として、入射光軸から反射光軸へと反射される。反射励起光は、反射励起光に反応して放出光を放出する蛍光色素分子を含む試料と相互作用する。
【００７５】
［0081］  ブロック４０４は、画像センサを使用して放出光を検出するステップを含む。画像センサは、反射光軸に沿って光学素子に結合される。放出光の少なくとも一部は、光学素子を介して画像センサへと透過される。
【００７６】
［0082］  任意で、方法４００は、試料の表面に平行な少なくとも第１の軸に沿って励起光を使用して試料を走査するように走査光学系を調整するステップを含み得る。このような場合、走査光学系は、１つまたは複数の光源に光学的に結合され得る。
【００７７】
［0083］  追加的にまたは代替的に、方法４００は、試料の表面に平行な少なくとも第２の軸に沿って試料を移動させるように試料を支持する載物台を調整するステップを含み得る。このような場合、試料は、光軸に垂直な両方の軸方向に（例えば、ｘ−ｙ平面に沿って）走査され得る。このような実施形態は、試料の完全二次元蛍光マップを構築する方法を提供し得る。
【００７８】
［0084］  図５は、例示的な一実施形態に係る方法５００を示す図である。方法５００は、様々なブロックまたはステップを含み得る。ブロックまたはステップは、個々にまたは組み合わせて実行され得る。ブロックまたはステップは、任意の順序でおよび／または順次もしくは並行して実行され得る。さらに、ブロックまたはステップは、省略され得る、または方法５００に追加され得る。
【００７９】
［0085］  方法５００のブロックは、図１、図２Ａ、図２Ｂ、図２Ｃ、および図３に図示され、図１、図２Ａ、図２Ｂ、図２Ｃ、および図３に関して説明されているシステム１００、システム２００、システム２５０、もしくはシステム２７０、または様々な光学素子３００の要素を制御し得る、含み得る、および／または伴い得る。いくつかの実施形態では、方法５００のいくつかまたは全てのブロックは、コントローラ１５０によって実行され得る。
【００８０】
［0086］  ブロック５０２は、１つまたは複数の光源に励起光を放出させるステップを含む。励起光は、少なくとも１つの高反射率（ＨＲ）コーティング部分と少なくとも１つの反射防止（ＡＲ）コーティング部分とを含む光学素子と相互作用する。励起光は、光透過軸に沿って光学素子を介して試料に向けて透過され、試料は、励起光に反応して放出光を放出する蛍光色素分子を含む。放出光は、光学素子のＨＲコーティング部分によって、光反射軸に沿って画像センサに向けて反射される。
【００８１】
［0087］  ブロック５０４は、画像センサによって放出光を検出するステップを含む。画像センサは、反射光軸に沿って光学素子に結合される。
【００８２】
［0088］  方法５００は、任意で、試料の表面に平行な少なくとも第１の軸に沿って励起光を使用して試料を走査するように１つまたは複数の光源に光学的に結合された走査光学系を調整するステップを含む。追加的にまたは代替的に、方法５００は、試料の表面に平行な少なくとも第２の軸に沿って試料を移動させるように試料を支持する載物台を調整するステップを含み得る。本明細書の他の場所で説明されているように、試料は、光軸に垂直な両方の軸方向に（例えば、ｘ−ｙ平面に沿って）走査され得る。このような実施形態は、試料の完全二次元蛍光マップを構築する方法を提供し得る。
【００８３】
［0089］  図面に示されている特定の配置は、限定的なものであると見なすべきではない。他の実施形態は、所与の図面に示されている各々の要素をそれより多いまたは少ない数で含み得ることは理解されたい。また、図示されている要素のいくつかは、組み合わせられ得る、または省略され得る。さらに、例示的な一実施形態は、図面に示されていない要素を含み得る。
【００８４】
［0090］  情報の処理を表すステップまたはブロックは、本明細書に示されている方法または技術の特定の論理機能を実行するように構成され得る回路に対応し得る。代替的にまたは追加的に、情報の処理を表すステップまたはブロックは、モジュール、セグメント、またはプログラムコードの一部（関連データを含む）に対応し得る。プログラムコードは、方法または技術における特定の論理機能または動作を実装するためにプロセッサによって実行可能な１つまたは複数の命令を含み得る。プログラムコードおよび／または関連データは、ディスク、ハードドライブ、または他の記憶媒体を含む記憶装置のような任意のタイプのコンピュータ可読媒体に記憶され得る。
【００８５】
［0091］  コンピュータ可読媒体はさらに、レジスタメモリ、プロセッサキャッシュ、およびランダム・アクセス・メモリ（ＲＡＭ）のようにデータを短期間記憶するコンピュータ可読媒体のような非一時的なコンピュータ可読媒体を含み得る。コンピュータ可読媒体はさらに、プログラムコードおよび／またはデータを長期間記憶する非一時的なコンピュータ可読媒体を含み得る。したがって、コンピュータ可読媒体はさらに、例えば、読み取り専用メモリ（ＲＯＭ）、光ディスクもしくは磁気ディスク、コンパクトディスク読み取り専用メモリ（ＣＤ−ＲＯＭ）のような二次もしくは永続的長期記憶装置を含み得る。コンピュータ可読媒体はさらに、任意の他の揮発性もしくは不揮発性の記憶システムであり得る。コンピュータ可読媒体は、例えば、コンピュータ可読記憶媒体、または有形記憶装置と考えられ得る。
【００８６】
［0092］  様々な実施例および実施形態を開示したが、他の実施例および実施形態は当業者には明らかであろう。本明細書に開示されている様々な実施例および実施形態は、例示目的で示されたものであって、限定するものではなく、真の範囲は以下の請求項によって示されるものとする。
【図１】
2020515828.tif 000003
【図２Ａ】
2020515828.tif 000004
【図２Ｂ】
2020515828.tif 000005
【図２Ｃ】
2020515828.tif 000006
【図３】
2020515828.tif 000007
【図４】
2020515828.tif 000008
【図５】
2020515828.tif 000009
【国際調査報告】
2020515828.tif 000010
2020515828.tif 000011