(57)【要約】  本明細書は、オリゴ糖、特に人乳オリゴ糖、より詳細には２’−フコシルラクトース（「２’−ＦＬ」）を結晶化するためのプロセスに関する。本明細書は又、このようなプロセスを使用して製造される組成物（例えば、結晶性生成物）に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
２’−フコシルラクトース及び少なくとも１つの他の炭水化物を含む水性出発溶液から結晶性２’−フコシルラクトースを製造するためのプロセスであって、
前記出発溶液を２’−フコシルラクトースについて過飽和状態まで濃縮することと、
前記過飽和溶液を６０℃超の温度にさらしている間に、前記過飽和溶液から２’−フコシルラクトース結晶を析出させること、を含み、
前記過飽和溶液が、前記２’−フコシルラクトース結晶の前記析出の際、１（重量）％以下の有機溶媒を含む、プロセス。
【請求項２】
前記過飽和溶液が、前記２’−フコシルラクトース結晶の析出の際、０．１（重量）％未満の有機溶媒を含む、請求項１に記載のプロセス。
【請求項３】
前記過飽和溶液が、前記２’−フコシルラクトース結晶の析出の際、本質的に有機溶媒を含まない、請求項１に記載のプロセス。
【請求項４】
前記出発溶液が、９８％未満（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）の２’−フコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項５】
前記出発溶液が、６０〜９５％（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）の２’−フコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する、請求項１〜４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６】
前記出発溶液が、７０〜９５％（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）の２’−フコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７】
前記出発溶液が、９１％未満（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）の２’−フコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する、請求項１〜６のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項８】
前記少なくとも１つの他の炭水化物が、ジフコシルラクトースを含み、
前記出発溶液が、少なくとも１％（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）のジフコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する、
請求項１〜７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項９】
前記出発溶液が、少なくとも５％（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）のジフコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する、請求項８に記載のプロセス。
【請求項１０】
前記少なくとも１つの他の炭水化物が、ラクトースを含み、
前記出発溶液が、少なくとも０．１％（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）のラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する、
請求項１〜９のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１１】
前記出発溶液が、少なくとも５％（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）のラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する、
請求項１０に記載のプロセス。
【請求項１２】
前記過飽和溶液を６０℃超の温度にさらしている間に、前記過飽和溶液に有機溶媒が添加されない、請求項１〜１１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１３】
前記過飽和溶液からの２’−フコシルラクトース結晶の前記析出が、前記過飽和溶液に種結晶を添加することを含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１４】
前記出発溶液が、発酵から誘導される、請求項１〜１３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１５】
前記出発溶液が、発酵産物からの微生物の分離を含むプロセスにより生成される、請求項１〜１４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１６】
前記出発溶液が、０．１（重量）％未満の有機溶媒を含む、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１７】
前記出発溶液が、本質的に有機溶媒を含まない、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１８】
前記出発溶液を過飽和状態まで濃縮する前に、前記出発溶液に有機溶媒を添加しない、請求項１〜１７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項１９】
前記出発溶液を過飽和状態まで濃縮する間に、前記出発溶液に有機溶媒を添加しない、請求項１〜１８のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項２０】
２’−フコシルラクトース及び少なくとも１つの他の炭水化物を含む水性出発溶液から結晶性２’−フコシルラクトースを製造するためのプロセスであって、
前記出発溶液を２’−フコシルラクトースについて過飽和状態まで濃縮することと、
前記過飽和溶液を少なくとも４０℃の温度にさらしている間に、前記過飽和溶液から２’−フコシルラクトース結晶を析出させること、を含み、
前記出発溶液が、７０〜９５％（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）の２’−フコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有し、
前記過飽和溶液が、前記２’−フコシルラクトース結晶の前記析出の際、１（重量）％以下の有機溶媒を含む、プロセス。
【請求項２１】
２’−フコシルラクトース及び少なくとも１つの他の炭水化物を含む水性出発溶液から結晶性２’−フコシルラクトースを製造するためのプロセスであって、
前記出発溶液を２’−フコシルラクトースについて過飽和状態まで濃縮することと、
前記過飽和溶液を少なくとも４０℃の温度にさらしている間に、前記過飽和溶液から２’−フコシルラクトース結晶を析出させること、を含み、
前記出発溶液が、９８％未満（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）の２’−フコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有し、
前記過飽和溶液が、前記２’−フコシルラクトース結晶の前記析出の際、１（重量）％以下の有機溶媒を含む、プロセス。
【請求項２２】
前記出発溶液が、９５％未満（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）の２’−フコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する、請求項２１に記載のプロセス。
【請求項２３】
前記出発溶液が、９１％未満（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）の２’−フコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する、請求項２０〜２２のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項２４】
前記少なくとも１つの他の炭水化物が、ジフコシルラクトースを含み、
前記出発溶液が、少なくとも１％（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）のジフコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する、請求項２０〜２３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項２５】
前記出発溶液が、少なくとも５％（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）のジフコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する、請求項２４に記載のプロセス。
【請求項２６】
前記少なくとも１つの他の炭水化物が、ラクトースを含み、
前記出発溶液が、少なくとも０．１％（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）のラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する、
請求項２０〜２５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項２７】
前記出発溶液が、少なくとも５％（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）のラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する、請求項２６に記載のプロセス。
【請求項２８】
前記結晶性２’−フコシルラクトースが、（欧州薬局方キャピラリー融点法を使用して１℃／分の加熱速度で測定した際に）約２３０〜約２３９℃の融点を有する、請求項１〜２７のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項２９】
２’−フコシルラクトース及び少なくとも１つの他の炭水化物を含む水性出発溶液から結晶性２’−フコシルラクトースを製造するためのプロセスであって、
前記出発溶液を２’−フコシルラクトースについて過飽和状態まで濃縮することと、
前記過飽和溶液を少なくとも４０℃の温度にさらしている間に、前記過飽和溶液から２’−フコシルラクトース結晶を析出させること、を含み、
前記過飽和溶液が、前記２’−フコシルラクトース結晶の前記析出の際、１（重量）％以下の有機溶媒を含み、
前記結晶性２’−フコシルラクトースが、（欧州薬局方キャピラリー融点法を使用して１℃／分の加熱速度で測定した際に）約２３０〜約２３９℃の融点を有する、プロセス。
【請求項３０】
前記結晶性２’−フコシルラクトースが、（欧州薬局方キャピラリー融点法を使用して１℃／分の加熱速度で測定した際に）約２３２〜約２３９℃の融点を有する、請求項１〜２９のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項３１】
前記結晶性２’−フコシルラクトースが、（欧州薬局方キャピラリー融点法を使用して１℃／分の加熱速度で測定した際に）約２３３〜約２３８℃の融点を有する、請求項１〜３０のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項３２】
前記結晶性２’−フコシルラクトースが、ＣｕＫａ線を使用した測定に基づいて、１６．９８±０．２０、１３．６５±０．２０、及び１８．３２±０．２０  ２Θ角でＸ線粉末回折反射を示す、請求項１〜３１のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項３３】
２’−フコシルラクトース及び少なくとも１つの他の炭水化物を含む水性出発溶液から結晶性２’−フコシルラクトースを製造するためのプロセスであって、
前記出発溶液を２’−フコシルラクトースについて過飽和状態まで濃縮することと、
前記過飽和溶液を少なくとも４０℃の温度にさらしている間に、前記過飽和溶液から２’−フコシルラクトース結晶を析出させること、を含み、
前記過飽和溶液が、前記２’−フコシルラクトース結晶の前記析出の際、１（重量）％以下の有機溶媒を含み、
前記結晶性２’−フコシルラクトースが、ＣｕＫａ線を使用した測定に基づいて、１６．９８±０．２０、１３．６５±０．２０、及び１８．３２±０．２０  ２Θ角でＸ線粉末回折反射を示す、プロセス。
【請求項３４】
非晶質２’−フコシルラクトースを製造するためのプロセスであって、
請求項１〜３３のいずれか一項に記載のプロセスに従って結晶性２’−フコシルラクトースを製造することと、
前記結晶性２’−フコシルラクトースを溶媒中に溶解させて、精製した２’−フコシルラクトース溶液を形成することと、
前記精製した２’−フコシルラクトース溶液から非晶質２’−フコシルラクトースを析出させることと、を含む、プロセス。
【請求項３５】
前記精製した２’−フコシルラクトース溶液からの非晶質２’−フコシルラクトースの前記析出が、噴霧乾燥を含む、請求項３４に記載のプロセス。
【請求項３６】
食品、栄養補助食品又は薬を製造するためのプロセスであって、
請求項１〜３３のいずれか一項に記載のプロセスに従って結晶性２’−フコシルラクトースを製造することと、
前記結晶性２’−フコシルラクトースを前記食品、栄養補助食品又は薬に好適な１つ以上の成分と混合することと、を含むプロセス。
【請求項３７】
食品、栄養補助食品又は薬を製造するためのプロセスであって、
請求項１〜３３のいずれか一項に記載のプロセスに従って結晶性２’−フコシルラクトースを製造することと、
前記結晶性２’−フコシルラクトースを溶媒中に溶解させることと、
前記溶解した２’−フコシルラクトースを前記食品、栄養補助食品又は薬に好適な１つ以上の成分と混合することと、を含むプロセス。
【請求項３８】
食品、栄養補助食品又は薬を製造するためのプロセスであって、
請求項３４又は３５に記載のプロセスに従って非晶質２’−フコシルラクトースを製造することと、
前記非晶質２’−フコシルラクトースを前記食品、栄養補助食品又は薬に好適な１つ以上の成分と混合することと、を含むプロセス。
【請求項３９】
食品、栄養補助食品又は薬を製造するためのプロセスであって、
請求項３４又は３５に記載のプロセスに従って非晶質２’−フコシルラクトースを製造することと、
前記非晶質２’−フコシルラクトースを溶媒中に溶解させることと、
前記溶解した２’−フコシルラクトースを前記食品、栄養補助食品又は薬に好適な１つ以上の成分と混合することと、を含むプロセス。
【請求項４０】
乳児用調製乳を製造するためのプロセスであって、
請求項１〜３３のいずれか一項に記載のプロセスに従って結晶性２’−フコシルラクトースを製造することと、
前記結晶性２’−フコシルラクトースを１つ以上の乳児用調製乳成分と混合することと、を含む、プロセス。
【請求項４１】
乳児用調製乳を製造するためのプロセスであって、
請求項１〜３３のいずれか一項に記載のプロセスに従って結晶性２’−フコシルラクトースを製造することと、
前記結晶性２’−フコシルラクトースを溶媒中に溶解させることと、
前記溶解した２’−フコシルラクトースを１つ以上の乳児用調製乳成分と混合することと、を含む、プロセス。
【請求項４２】
乳児用調製乳を製造するためのプロセスであって、
請求項３４又は３５に記載のプロセスに従って非晶質２’−フコシルラクトースを製造することと、
前記非晶質２’−フコシルラクトースを１つ以上の乳児用調製乳成分と混合することと、を含む、プロセス。
【請求項４３】
乳児用調製乳を製造するためのプロセスであって、
請求項３４又は３５に記載のプロセスに従って非晶質２’−フコシルラクトースを製造することと、
前記非晶質２’−フコシルラクトースを溶媒中に溶解させることと、
前記溶解した２’−フコシルラクトースを１つ以上の乳児用調製乳成分と混合することと、を含む、プロセス。
【請求項４４】
前記１つ以上の乳児用調製乳成分が、脱脂乳、炭水化物源、タンパク質源、脂肪源、ビタミン、及び／又はミネラルを含む、請求項４０〜４３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項４５】
前記１つ以上の乳児用調製乳成分が、ラクトース、乳清タンパク質濃縮物、及び／又は高オレイン酸ヒマワリ油を含む、請求項４０〜４３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項４６】
請求項１〜３３のいずれか一項に記載のプロセスから得られる、結晶性２’−フコシルラクトース生成物。
【請求項４７】
前記結晶性２’−フコシルラクトース生成物が、少なくとも９３％（前記パーセンテージはＨＰＬＣ分析を使用して、２’−フコシルラクトースに対応するピーク面積のピーク総面積に対する前記パーセントである）の２’−フコシルラクトース純度を有する、請求項４６に記載の結晶性２’−フコシルラクトース生成物。
【請求項４８】
前記結晶性２’−フコシルラクトース生成物が、少なくとも９８％（前記パーセンテージはＨＰＬＣ分析を使用して、２’−フコシルラクトースに対応するピーク面積のピーク総面積に対する前記パーセントである）の２’−フコシルラクトース純度を有する、請求項４６に記載の結晶性２’−フコシルラクトース生成物。
【請求項４９】
請求項３４又は３５に記載のプロセスから得られる非晶質２’−フコシルラクトース。
【請求項５０】
請求項３６〜３９のいずれか一項に記載のプロセスから得られる食品、栄養補助食品又は薬。
【請求項５１】
請求項４０〜４５のいずれか一項に記載のプロセスから得られる乳児用調製乳。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本明細書は、２０１７年３月６日に出願された米国仮特許出願第６２／４６７，５７１号、２０１７年４月２１日に出願された欧州特許出願第１７１６７５６４．８号、及び２０１８年２月１９日に出願された米国仮特許出願第６２／６３２，１８０号に対する優先権を主張する。上記に参照した特許出願の各々の全本文は、本明細書に参照により組み込まれる。
【０００２】
本明細書は、オリゴ糖、特に人乳オリゴ糖、より詳細には２’−フコシルラクトース（「２’−ＦＬ」）を結晶化するためのプロセスに関する。本明細書は又、このようなプロセスを使用して製造される組成物（例えば、結晶性生成物）に関する。
【背景技術】
【０００３】
人乳オリゴ糖は、栄養及び治療のために重要である。最も重要な人乳オリゴ糖のうちの１つは、２’−フコシルラクトース（２’−Ｏ−フコシルラクトース又は「２’−ＦＬ」としても知られている）である。このオリゴ糖は、ヒト母乳で見られる最も大量のオリゴ糖であり、プレバイオティクス、抗菌、抗ウイルス、免疫系強化及び脳発達強化効果を含むいくつかの有益な生物学的役割があると考えられている。このような利点は、２’−ＦＬを食品、栄養補助食品及び薬、特に乳児用調製乳に含まれる潜在的に魅力的な成分にする。しかし、２’−ＦＬの大規模製造のための経済的に実現可能なプロセスの開発は引き続き課題となっている。
【０００４】
２’−ＦＬの合成のための多くの最近のプロセスは、ラクトースから２’−ＦＬを産生する微生物の発酵プロセスを伴う。このアプローチに対して成功があった一方で、このようなプロセスは、一般的に、複合生成物の混合物を製造し、これは、多くの場合、ラクトース、所望の２’−ＦＬ以外のオリゴ糖（例えば、ジフコシルラクトース（「ＤｉＦＬ」））、単糖、アミノ酸、ポリペプチド、タンパク質、一価及び二価の塩、有機酸、核酸などのその他の成分を含む。そのため、使用に適した２’−ＦＬ生成物を提供する効果的で信頼性が高く、経済的に実行可能な下流の精製プロセスに対する必要性が引き続き存在する。
【０００５】
２’−ＦＬを精製するための１つの技術は、結晶化である。しかし、通常用いられる冷却結晶化技術は、一般に、その独特な結晶化特性ゆえに、２’−ＦＬで機能しない。２’−ＦＬの飽和水濃縮糖液は、低温で低粘度を示す（通常、結晶化は単純明快であることが提案される）一方で、高度に過飽和の水性２’−ＦＬ濃縮糖液でさえ、一般に低温で安定している。
【０００６】
この問題を克服するために、当該技術分野における一部が、有機溶媒を添加して結晶化を強いることを含む技術を報告している。例えば、Ｋｕｈｎ，Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍｉｓｃｈｅ  Ｂｅｒｉｃｈｔｅ，ｖｏｌ．８８（８），ｐｐ．１１３５−１１４６（１９５５）；Ｋｕｈｎ，Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍｉｓｃｈｅ  Ｂｅｒｉｃｈｔｅ，ｖｏｌ．８９（１１），ｐ．２５１３（１９５６）；国際公開第２０１１／１５０９３９号パンフレット；同第２０１５／１８８８３４号パンフレット；及び同第２０１６９５９２４号パンフレットを参照のこと。しかし、２’−ＦＬを結晶化するために有機溶媒を使用することには、多くの潜在的な欠点がある。これらとしては、例えば、有機溶媒それ自体のコストが挙げられる。有機溶媒は又、有害な排出物、廃棄物、及び／又は汚染をつくりだす可能性がある。結晶化後に溶媒を回収するには、特別な装置が必要になることが多い。場合によっては、このような溶媒回収に付随する溶媒損失が存在する。一部の溶媒ついては、爆発やその他の安全上の理由から、特別な機器も必要である。そして、結晶性生成物中に残留溶媒が残っている場合に、溶媒の使用も又問題となり得る。一部の有機溶媒では微量でさえも、味、臭い、色、及び／又は食品の安全性に悪影響を与える場合がある。
【０００７】
したがって、２’−ＦＬを精製するための効果的で信頼性が高く、且つ経済的に実行可能な下流プロセス、特に有機溶媒の必要性を回避する水性結晶化の必要性が引き続き存在している。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
簡潔には、本明細書は、一般に、２’−ＦＬを結晶化するためのプロセス、並びにこのようなプロセスを使用して製造される組成物について開示している。
【０００９】
特に、本明細書は、部分的に、２’−ＦＬ及び少なくとも１つの他の炭水化物を含む水性出発溶液から結晶性２’−ＦＬを製造するためのプロセスについて開示している。
【００１０】
いくつかの実施形態では、プロセスは、出発溶液を２’−ＦＬについて過飽和状態まで濃縮することと、次いで過飽和溶液を６０℃超の温度にさらす間に、過飽和溶液から２’−ＦＬ結晶を析出させること、を含む。本プロセスにおいては、過飽和溶液は、２’−ＦＬ結晶の析出の際、１（重量）％以下の有機溶媒を含む。
【００１１】
いくつかの実施形態では、プロセスは、出発溶液を２’−フコシルラクトースについて過飽和状態まで濃縮することと、次いで過飽和溶液を少なくとも４０℃の温度にさらす間に、過飽和溶液から２’−フコシルラクトース結晶を析出させること、を含む。本プロセスにおいては、出発溶液は、７０〜９５％（ここで、パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）の２’−フコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する。加えて、過飽和溶液は、２’−フコシルラクトース結晶の析出の際、１（重量）％以下の有機溶媒を含む。
【００１２】
いくつかの実施形態では、プロセスは、出発溶液を２’−フコシルラクトースについて過飽和状態まで濃縮することと、次いで過飽和溶液を少なくとも４０℃の温度にさらす間に、過飽和溶液から２’−フコシルラクトース結晶を析出させること、を含む。本プロセスにおいては、出発溶液は、約９８％未満（ここで、パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）の２’−フコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する。加えて、過飽和溶液は、２’−フコシルラクトース結晶の析出の際、１（重量）％以下の有機溶媒を含む。
【００１３】
いくつかの実施形態では、プロセスは、出発溶液を２’−フコシルラクトースについて過飽和状態まで濃縮することと、次いで過飽和溶液を少なくとも４０℃の温度にさらす間に、過飽和溶液から２’−フコシルラクトース結晶を析出させること、を含む。本プロセスにおいては、出発溶液は、約９５％未満（ここで、パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）の２’−フコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する。加えて、過飽和溶液は、２’−フコシルラクトース結晶の析出の際、１（重量）％以下の有機溶媒を含む。
【００１４】
いくつかの実施形態では、プロセスは、出発溶液を２’−フコシルラクトースについて過飽和状態まで濃縮することと、次いで過飽和溶液を少なくとも４０℃の温度にさらす間に、過飽和溶液から２’−フコシルラクトース結晶を析出させること、を含む。本プロセスにおいては、過飽和溶液は、２’−フコシルラクトース結晶の析出の際、１（重量）％以下の有機溶媒を含む。加えて、結晶性２’−フコシルラクトース生成物は、（欧州薬局方キャピラリー融点法を使用して１℃／分の加熱速度で測定した際に）約２３０〜約２３９℃の融点を有する。
【００１５】
いくつかの実施形態では、プロセスは、出発溶液を２’−フコシルラクトースについて過飽和状態まで濃縮することと、次いで過飽和溶液を少なくとも４０℃の温度にさらす間に、過飽和溶液から２’−フコシルラクトース結晶を析出させること、を含む。本プロセスにおいては、過飽和溶液は、２’−フコシルラクトース結晶の析出の際、１（重量）％以下の有機溶媒を含む。加えて、結晶性２’−フコシルラクトース生成物は、ＣｕＫａ線を使用した測定に基づいて、１６．９８±０．２０、１３．６５±０．２０、及び１８．３２±０．２０  ２Θ角でＸ線粉末回折反射を示す。
【００１６】
本明細書は又、部分的には、非晶質２’−ＦＬを製造するためのプロセスについて開示している。プロセスは、上記の（又は本明細書の他の箇所に記載の）結晶化プロセスに従って結晶性２’−ＦＬを製造することと、結晶性２’−ＦＬを溶媒（例えば水）中に溶解させて、精製した２’−ＦＬ溶液を形成することと、精製した２’−ＦＬ溶液から非晶質２’−ＦＬを析出させることと、を含む。
【００１７】
本明細書は又、部分的には、食品、栄養補助食品又は薬を製造するためのプロセスについて開示している。
【００１８】
いくつかの実施形態では、食品、栄養補助食品又は薬を製造するためのプロセスは、上記の（又は本明細書の他の箇所に記載の）結晶化プロセスに従って結晶性２’−ＦＬを製造することと、次いで結晶性２’−ＦＬを食品、栄養補助食品又は薬に好適な１つ以上の成分と混合することと、を含む。
【００１９】
いくつかの実施形態では、食品、栄養補助食品又は薬を製造するためのプロセスは、上記の（又は本明細書の他の箇所に記載の）結晶化プロセスに従って結晶性２’−ＦＬを製造することと、結晶性２’−ＦＬを溶媒（例えば水）中に溶解させることと、溶解した２’−ＦＬを食品、栄養補助食品又は薬に好適な１つ以上の成分と混合することと、を含む。
【００２０】
いくつかの実施形態では、食品、栄養補助食品又は薬を製造するためのプロセスは、上記の（又は本明細書の他の箇所に記載の）のように非晶質２’−ＦＬを製造することと、次いで非晶質２’−ＦＬを食品、栄養補助食品又は薬に好適な１つ以上の成分と混合することと、を含む。
【００２１】
いくつかの実施形態では、食品、栄養補助食品又は薬を製造するためのプロセスは、上記の（又は本明細書の他の箇所に記載の）のように非晶質２’−ＦＬを製造することと、非晶質２’−ＦＬを溶媒（例えば水）中に溶解させることと、溶解した２’−ＦＬを食品、栄養補助食品又は薬に好適な１つ以上の成分と混合することと、を含む。
【００２２】
本明細書は又、部分的には、乳児用調製乳を製造するためのプロセスについて開示している。
【００２３】
いくつかの実施形態では、乳児用調製乳を製造するためのプロセスは、上記の（又は本明細書の他の箇所に記載の）結晶化プロセスに従って結晶性２’−ＦＬを製造することと、次いで結晶性２’−ＦＬを１つ以上の乳児用調製乳成分と混合することと、を含む。
【００２４】
いくつかの実施形態では、乳児用調製乳を製造するためのプロセスは、上記の（又は本明細書の他の箇所に記載の）結晶化プロセスに従って結晶性２’−ＦＬを製造することと、結晶性２’−ＦＬを溶媒（例えば、水）中に溶解させることと、溶解した２’−ＦＬを１つ以上の乳児用調製乳成分と混合することと、を含む。
【００２５】
いくつかの実施形態では、乳児用調製乳を製造するためのプロセスは、上記の（又は本明細書の他の箇所に記載の）ように非晶質２’−ＦＬを製造することと、次いで非晶質２’−ＦＬを１つ以上の乳児用調製乳成分と混合することと、を含む。
【００２６】
いくつかの実施形態では、乳児用調製乳を製造するためのプロセスは、上記の（又は本明細書の他の箇所に記載の）ように非晶質２’−ＦＬを製造することと、非晶質２’−ＦＬを溶媒（例えば、水）中に溶解させることと、溶解した２’−ＦＬを１つ以上の乳児用調製乳成分と混合することと、を含む。
【００２７】
本明細書は又、部分的には、上記の（又は本明細書の他の箇所に記載の）結晶化プロセスから得られる結晶性２’−ＦＬ生成物について開示している。
【００２８】
本明細書は又、部分的には、非晶質２’−ＦＬを製造するための上記の（又は本明細書の他の箇所に記載の）プロセスから得られる非晶質２’−ＦＬについて開示している。
【００２９】
本明細書は又、部分的には、上記の（又は本明細書の他の箇所に記載の）食品、栄養補助食品、又は薬を製造するためのプロセスによって調製される食品、栄養補助食品、又は薬について開示している。
【００３０】
本明細書は又、部分的には、上記の（又は本明細書の他の箇所に記載の）乳児用調製乳を製造するためのプロセスから得られる乳児用調製乳について開示している。
【００３１】
本明細書の教示の更なる利点は、本明細書を読むことにより、当業者には明らかであろう。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
この発明を実施するための形態は、出願人の発明、その原理、及びその実際の用途を他の当業者に知らせることのみを意図しており、当業者は、本発明をその多くの形態に適合させ、特定の用途の要件に最適化することができる。この発明を実施するための形態、及び具体例は、特定の実施形態を示しているが、例示のみを目的としている。そのため、本明細書は、記載された実施形態に限定されず、様々に変更されてもよい。
【００３３】
本明細書は、２’−ＦＬ含有溶液から２’−ＦＬを結晶化するためのプロセスに関する。一般的に、本プロセスは、２’−ＦＬ溶液を２’−ＦＬについて過飽和状態にすることと、次いで２’−ＦＬについて少なくとも約１％の結晶収率を有する結晶塊（ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ  ｍａｓｓ）が得られるまで蒸発により溶液から２’−ＦＬを結晶化することと、を含む。
【００３４】
いくつかの実施形態では、２’−ＦＬが結晶化する溶液は、例えば、動物乳（例えば、人乳）又は動物乳から誘導される組成物などの天然の２’−ＦＬ源を含む。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬが結晶化する溶液は、化学合成によって製造される。更に他の実施形態では、２’−ＦＬ含有溶液は、微生物発酵プロセスから得られる。例えば、２’−ＦＬ源は、組み換え微生物、例えばバクテリア又は酵母菌を用いた微生物発酵による得られる発酵ブロスであってもよい。いくつかのこのような実施形態では、微生物は、酵母菌である。他の実施形態では、微生物は、バクテリアである。いくつかの実施形態では、微生物は、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）である。いくつかの実施形態では、発酵は、合成培地中で起こる。
【００３５】
結晶化前に、２’−ＦＬ源（例えば、発酵ブロス）を、１つ以上の精製プロセスに供してもよい。いくつかの実施形態では、例えば、２’−ＦＬ源（例えば、発酵ブロス）を、遠心分離、沈殿、又は１つ以上の他のプロセスに供して、細胞バイオマスを除去する。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ源（例えば、発酵ブロス）を、限外濾過にかける。これは、例えば、細胞並びに大きな生体分子、例えばタンパク質、核酸及びリポ多糖などを除去するのに役立ち得る。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ源（例えば、発酵ブロス）を、ナノ濾過にかける。これは、例えば、鉱物及びさまざまな小さな生体分子を除去しながら水分を減らすことで２’−ＦＬを濃縮するのに役立ち得る。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ源（例えば、発酵ブロス）を、クロマト分離、例えばゲル濾過クロマトグラフィーにかける。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ源（例えば、発酵ブロス）を、マイクロ濾過にかける。これは、例えば、微生物の汚染を除去するのに役立ち得る。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ源（例えば、発酵ブロス）を、カチオン交換、アニオン交換、イオン交換樹脂、混床イオン交換、及び／又は電気透析にかける。これは、例えば、小さな荷電した分子、塩及び微量金属を除去するのに役立ち得る。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ源（例えば、発酵ブロス）を、例えば、粉末活性炭又は炭濾過と接触させることにより、脱色させる。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ源（例えば、発酵ブロス）を、蒸発させる。これは、例えば、水を除去することによって２’−ＦＬを濃縮するのに役立ち得る。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ源（例えば、発酵ブロス）を、結晶化前に上記精製工程のうちの２つ以上の組み合わせに供する。このような実施形態は、プロセスの異なるポイントで様々な工程を繰り返すのと同様に、様々な順序での工程の使用を含み得る。
【００３６】
いくつかの実施形態では、例えば、２’−ＦＬ源は、発酵ブロスであり、これは、限外濾過、カチオン交換、アニオン交換、混床イオン交換、及び粉末活性炭にさらされた後、溶液は結晶化のために過飽和状態になる。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ源は、発酵ブロスであり、これは、遠心分離、限外濾過、カチオン交換、アニオン交換、混床イオン交換、及び粉末活性炭にさらされた後、溶液は結晶化のために過飽和状態になる。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ源は、発酵ブロスであり、これは、限外濾過、ナノ濾過、カチオン交換、アニオン交換、混床イオン交換、及び粉末活性炭にさらされた後、溶液は結晶化のために過飽和状態になる。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ源は、発酵ブロスであり、これは、遠心分離、限外濾過、ナノ濾過、カチオン交換、アニオン交換、混床イオン交換、及び粉末活性炭にさらされた後、溶液は結晶化のために過飽和状態になる。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ源は、発酵ブロスであり、これは、限外濾過、ナノ濾過、任意選択的なマイクロ濾過、任意選択的なイオン除去（例えば、イオン交換樹脂及び／又は電気透析）、任意選択的な予備濃縮（例えば、蒸発又はナノ濾過）、脱色（例えば、炭濾過）、マイクロ濾過、及び任意選択的なナノ濾過にさらされた後、溶液は結晶化のために過飽和状態になる。
【００３７】
いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度（又は「純度」）は、９９％未満である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、９８％未満である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約９５％未満である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約９１％未満である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約９０％未満である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約８５％未満である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約８０％未満である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約７５％未満である。
【００３８】
いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、少なくとも約５０％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、少なくとも約５５％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、少なくとも約６０％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、少なくとも約６５％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、少なくとも約７０％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程からの予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、少なくとも約７５％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、少なくとも約８０％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、少なくとも約８５％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、少なくとも約９０％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、少なくとも約９５％である。
【００３９】
いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約６０〜約９５％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約６０〜約９０％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約６５〜約９５％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約６５〜約９０％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約７０〜約９５％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約７０〜約９０％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約７０〜約８５％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約７０〜約８０％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約７０〜約７５％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約７５〜約９５％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約８０〜約９５％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約８５〜約９５％である。いくつかの実施形態では、予備結晶化精製工程から得られる濃縮糖液の乾燥固形分含有量における２’−ＦＬ濃度は、約９０〜約９５％である。
【００４０】
上記２’−ＦＬ濃度パーセンテージは、高速液体クロマトグラフィー（「ＨＰＬＣ」）を使用して得られる正規化されたピーク面積濃度（又は「純度」）に対応する。
【００４１】
いくつかの実施形態では、２’−ＦＬは、２’−ＦＬ及び少なくとも１つの他の炭水化物を含む溶液から結晶化される。例えば、２’−ＦＬ溶液が、酵素的方法又は発酵アプローチに由来する場合、溶液は、例えば、２’−ＦＬ（例えば、ジフコシルラクトース（「ＤｉＦＬ」））、単糖、アミノ酸、ポリペプチド、タンパク質、一価及び二価の塩、有機酸、核酸などに加えて、ラクトース、オリゴ糖の複合混合物を含有し得る。いくつかの実施形態では、溶液中の２’−ＦＬ以外の炭水化物の総濃度は、少なくとも約１％である。いくつかの実施形態では、溶液中の２’−ＦＬ以外の炭水化物の総濃度は、少なくとも約２％である。いくつかの実施形態では、例えば、溶液中の２’−ＦＬ以外の炭水化物の総濃度は、少なくとも約５％である。いくつかの実施形態では、溶液中のＤｉＦＬの濃度は、少なくとも約１％である。いくつかの実施形態では、溶液中のＤｉＦＬの濃度は、少なくとも約２％である。いくつかの実施形態では、溶液中のＤｉＦＬの濃度は、少なくとも約５％である。いくつかの実施形態では、溶液中のＤｉＦＬの濃度は、少なくとも約７％である。いくつかの実施形態では、溶液中のＤｉＦＬの濃度は、約１〜約２０％である。いくつかの実施形態では、溶液中のＤｉＦＬの濃度は、約２〜約２０％である。いくつかの実施形態では、溶液中のＤｉＦＬの濃度は、約２〜約１８％である。いくつかの実施形態では、溶液中のＤｉＦＬの濃度は、約５〜約１８％である。いくつかの実施形態では、溶液中のＤｉＦＬの濃度は、約２〜約１０％である。いくつかの実施形態では、溶液中のＤｉＦＬの濃度は、約５〜約１０％である。いくつかの実施形態では、溶液中のＤｉＦＬの濃度は、約１０〜約１８％である。いくつかの実施形態では、溶液中のラクトースの濃度は、約０．１％以下である。いくつかの実施形態では、溶液中のラクトースの濃度は、少なくとも約０．１％である。いくつかの実施形態では、溶液中のラクトースの濃度は、少なくとも約２％である。いくつかの実施形態では、溶液中のラクトースの濃度は、少なくとも約５％である。いくつかの実施形態では、溶液中のラクトースの濃度は、約０．１〜約１５％である。いくつかの実施形態では、溶液中のラクトースの濃度は、約０．１〜約０．５％である。いくつかの実施形態では、溶液中のラクトースの濃度は、約１〜約１２％である。いくつかの実施形態では、溶液中のラクトースの濃度は、約２〜約１２％である。いくつかの実施形態では、溶液中のラクトースの濃度は、約５〜約１２％である。いくつかの実施形態では、溶液中のラクトースの濃度は、約２〜約１５％である。いくつかの実施形態では、溶液中のラクトースの濃度は、約５〜約１５％である。これらのパーセンテージは、ＨＰＬＣを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度（又は「純度」）に対応する。
【００４２】
一般的に、結晶化前に、溶液は過飽和状態になる。いくつかの実施形態では、溶液は約１．０超の２’−ＦＬ過飽和になる。いくつかの実施形態では、溶液は約１．０５〜約１．８の２’−ＦＬ過飽和になる。いくつかの実施形態では、溶液は約１．１〜約１．７の２’−ＦＬ過飽和になる。いくつかの実施形態では、溶液は約１．１〜約１．５の２’−ＦＬ過飽和になる。いくつかの実施形態では、溶液は約１．２〜約１．７の２’−ＦＬ過飽和になる。いくつかの実施形態では、溶液は約１．３〜約１．７の２’−ＦＬ過飽和になる。いくつかの実施形態では、溶液は約１．３〜約１．５の２’−ＦＬ過飽和になる。本明細書では、特に指示しない限り、用語「過飽和」及び「過飽和した」は、測定された２’−ＦＬ含有量の２’−ＦＬの溶解度に対する無次元比に相当し、その比は次の式；
【数１】
2020509073.tif 000002
から計算される。ここで、ｓは過飽和であり、２’−ＦＬ含有量及び２’−ＦＬ溶解度の測定単位は、ｇ／水１００ｇである。異なる温度での２’−ＦＬの溶解度を、実施例１５にて提供する。
【００４３】
いくつかの実施形態では、少なくとも約５０（重量）％まで乾燥固形分含有量を増大させることにより、溶液は過飽和状態になる。いくつかのこのような実施形態では、乾燥固形分含有量を、少なくとも約５５（重量）％まで増大させる。いくつかのこのような実施形態では、乾燥固形分含有量を、少なくとも約６０（重量）％まで増大させる。いくつかのこのような実施形態では、乾燥固形分含有量を、少なくとも約６５（重量）％まで増大させる。いくつかのこのような実施形態では、乾燥固形分含有量を、約８０（重量）％以下まで増大させる。いくつかのこのような実施形態では、乾燥固形分含有量を、約７８（重量）％以下まで増大させる。いくつかのこのような実施形態では、乾燥固形分含有量を、約７５（重量）％以下まで増大させる。いくつかのこのような実施形態では、乾燥固形分含有量を、約５０〜約８０（重量）％まで増大させる。いくつかの実施形態では、乾燥固形分含有量を、約５５〜約７８（重量）％まで増大させる。いくつかの実施形態では、乾燥固形分含有量を、約６０〜約７５（重量）％まで増大させる。いくつかの実施形態では、乾燥固形分含有量を、約６５〜約７５（重量）％まで増大させる。いくつかのこのような実施形態では、乾燥固形分含有量を、約６０（重量）％まで増大させる。
【００４４】
いくつかの実施形態では、蒸発により、溶液は２’−ＦＬについて過飽和状態になる。いくつかのこのような実施形態では、蒸発（又は少なくともその一部）は、大気圧で実施される。いくつかの実施形態では、蒸発（又は少なくともその一部）は、より低い圧力で実施される。いくつかの実施形態では、蒸発（又は少なくともその一部）は、約２５０ｍｂａｒ以下の圧力で実施される。いくつかの実施形態では、蒸発（又は少なくともその一部）は、約１２０〜約２５０ｍｂａｒの圧力で実施される。いくつかの実施形態では、蒸発（又は少なくともその一部）は、約１３０〜約２２０ｍｂａｒの圧力で実施される。いくつかの実施形態では、蒸発（又は少なくともその一部）は、約１５０〜約２１０ｍｂａｒの圧力で実施される。
【００４５】
一般に、蒸発が実施される温度は、例えば圧力に依存する。いくつかの実施形態では、蒸発の温度は、圧力で溶液の沸点温度である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、少なくとも約４０℃である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、少なくとも約４５℃である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、少なくとも約５０℃である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、少なくとも約５５℃である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、少なくとも約６０℃である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、６０℃超である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、約１００℃以下である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、約９０℃以下である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、約８０℃以下である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、約７５℃以下である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、約７０℃以下である（約７０℃超の温度は蒸発に有利であり得るが、そのような温度を使用すると、望ましくない生成物の劣化及び／又は発色を引き起こし得る）。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、約４５℃〜約８０℃である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、約５０℃〜約８０℃である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、約５５℃〜約８０℃である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、約６０℃〜約８０℃である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、６０℃超〜約８０℃以下である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、約６０℃〜約７５℃である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、６０℃超〜約７５℃以下である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、約６５〜約７５℃である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、約４０〜約７０℃である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、約４５〜約７０℃である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、約５０〜約７０℃である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、約５５〜約７０℃である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、約６０〜約７０℃である。いくつかの実施形態では、蒸発温度は、６０℃超〜約７０℃以下である。
【００４６】
いくつかの実施形態では、シーディングを用いて過飽和溶液から２’−ＦＬ結晶の形成を開始させる。いくつかのこのような実施形態では、シーディングは、過飽和溶液に種結晶を添加することによって生じる。いくつかのこのような実施形態では、種結晶は、粒子状の２’−ＦＬ粉末を含む。いくつかの実施形態では、種結晶は、無水の２’−ＦＬ種結晶を含む。
【００４７】
種結晶は、例えば、本明細書にて議論されているプロセスを含む、様々なプロセスによって製造できる。いくつかの実施形態では、乾燥種結晶をミル加工して、より小さい粒子サイズを得る。種結晶は、懸濁液形態でも又使用できる。
【００４８】
所望量の種結晶は、例えば、種結晶のサイズに依存し得る。
【００４９】
いくつかの実施形態では、使用される乾燥種結晶の量は、結晶塊の２’−ＦＬに基づいて、約０．００１〜約１（重量）％の粒子状２’−ＦＬである。
【００５０】
いくつかの実施形態では、使用される種結晶の懸濁液、及び種結晶の懸濁液の量は、結晶塊の２’−ＦＬに基づいて、約１〜約３０（重量）％の粒子状２’−ＦＬである。
【００５１】
いくつかの実施形態では、結晶化は、過飽和溶液に２’−ＦＬ種結晶を添加することなく開始される。いくつかのこのような実施形態では、例えば、シーディングは、自発的シーディング又は超音波シーディングを使用して生じる。
【００５２】
一般に、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、好適な過飽和が達成された場合に実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、２’−ＦＬ過飽和が約１．０超である場合に実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、２’−ＦＬ過飽和が約１．０５〜約１．８である場合に実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、２’−ＦＬ過飽和が約１．１〜約１．７である場合に実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、２’−ＦＬ過飽和が約１．１〜約１．５である場合に実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、２’−ＦＬ過飽和が約１．２〜約１．７である場合に実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、２’−ＦＬ過飽和が約１．３〜約１．７である場合に実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、２’−ＦＬ過飽和が約１．３〜約１．５である場合に実施される。
【００５３】
いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、濃縮糖液の乾燥固形分含有量が少なくとも約６０（重量）％である場合に実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、濃縮糖液の乾燥固形分含有量が少なくとも約６５（重量）％である場合に実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、濃縮糖液の乾燥固形分含有量が約８０（重量）％以下である場合に実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、濃縮糖液の乾燥固形分含有量が約７５（重量）％以下である場合に実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、濃縮糖液の乾燥固形分含有量が約６０〜約８０（重量）％である場合に実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、濃縮糖液の乾燥固形分含有量が約６５〜約８０（重量）％である場合に実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、濃縮糖液の乾燥固形分含有量が約６５〜約７７（重量）％である場合に実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、濃縮糖液の乾燥固形分含有量が約６５〜約７５（重量）％である場合に実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、濃縮糖液の乾燥固形分含有量が約６５〜約７０（重量）％である場合に実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の開始（例えば、種結晶の添加）は、濃縮糖液の乾燥固形分含有量が約７０〜約７６（重量）％である場合に実施される。
【００５４】
結晶化が始まると、結晶化は、一般に、溶液の沸点で実施され得る。
【００５５】
いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部（又は全て）は、大気圧で実施される。
【００５６】
いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、大気圧未満の圧力で実施される。いくつかのこのような実施形態では、結晶化（又は少なくともその一部）は、約２５０ｍｂａｒ以下の圧力で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化（又は少なくともその一部）は、約５０〜約２５０ｍｂａｒの圧力で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化（又は少なくともその一部）は、約５０〜約１２０ｍｂａｒの圧力で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化（又は少なくともその一部）は、約１２０〜約２５０ｍｂａｒの圧力で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化（又は少なくともその一部）は、約１３０〜約２２０ｍｂａｒの圧力で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化（又は少なくともその一部）は、約１５０〜約２１０ｍｂａｒの圧力で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化（又は少なくともその一部）は、約１７０〜約２０５ｍｂａｒの圧力で実施される。
【００５７】
いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも約５０％は、上述した低大気圧範囲で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも約７５％は、上述した低大気圧範囲で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも約９０％は、上述した低大気圧範囲で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも約９５％は、上述した低大気圧範囲で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも約９８％は、上述した低大気圧範囲で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも約９９％は、上述した低大気圧範囲で実施される。いくつかの実施形態では、全結晶化は、上述した低大気圧範囲で実施される。
【００５８】
いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、圧力で溶液の沸点温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の間の温度は、約２０℃未満まで低下しない。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、少なくとも約４０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、少なくとも約４５℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、少なくとも約５０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、少なくとも約５５℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、少なくとも約６０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約６０℃超の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約１００℃以下の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約９０℃以下の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約８０℃以下の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約７５℃以下の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約７０℃以下の温度で実施される（約７０℃超の温度は結晶化に有利であり得るが、そのような温度を使用すると、望ましくない生成物の劣化及び／又は発色を引き起こし得る）。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約４５〜約８０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約５０〜約８０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約５５〜約８０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約６０〜約８０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、６０℃超〜約８０℃以下の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約６０〜約７５℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、６０℃超〜約７５℃以下の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約６５〜約７５℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約４０〜約７０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約４５〜約７０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約５０〜約７０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約５５〜約７０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、約６０〜約７０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部は、６０℃超〜約７０℃以下の温度で実施される。
【００５９】
いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも約５０％は、上述した温度範囲で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも約７５％は、上述した温度範囲で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも約９０％は、上述した温度範囲で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも約９５％は、上述した温度範囲で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも約９８％は、上述した温度範囲で実施される。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも約９９％は、上述した温度範囲で実施される。いくつかの実施形態では、全結晶化は、上述した温度範囲で実施される。
【００６０】
いくつかの実施形態では、結晶化のｐＨは、約４〜約１１である。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部の間のｐＨは、約４〜約８である。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部の間のｐＨは、約５〜約７である。いくつかの実施形態では、結晶化の少なくとも一部の間のｐＨは、約５〜約６である。いくつかの実施形態では、全結晶化の間のｐＨは、約７以下である。いくつかの実施形態では、全結晶化の間のｐＨは、約５〜約７である。いくつかの実施形態では、全結晶化の間のｐＨは、約５〜約６である。
【００６１】
結晶化の間、結晶塊は、典型的には、機械的に混合される。いくつかの実施形態では、混合は、結晶塊の全容積にわたって均一性を最大化するように最適に配置される。これは、一般に、全結晶化容積にわたって望ましい熱並びに物質移動及び小さな過飽和勾配を提供する。いくつかの実施形態では、これは、従来の回転ミキサーブレードを使用して達成される。一般的に、混合の強度は、過剰な微粉形成を防止するように調節される。
【００６２】
結晶化の間、十分な程度の結晶化（収率、母液の２’−ＦＬ純度及び／又は結晶サイズの低下）が達成されるまで、結晶懸濁液は、一般に、沸騰及び蒸発にさらされる。いくつかの実施形態では、蒸発による結晶化は、約１〜約５０時間継続する。いくつかの実施形態では、蒸発による結晶化は、約２〜約４０時間継続する。いくつかの実施形態では、蒸発による結晶化は、約２〜約３０時間継続する。いくつかの実施形態では、蒸発による結晶化は、約２〜約２０時間継続する。いくつかの実施形態では、蒸発による結晶化は、約２〜約１５時間継続する。いくつかの実施形態では、蒸発による結晶化は、約２〜約５時間継続する。
【００６３】
典型的には、約１〜約８０％（この収率は、沸騰直後の２’−ＦＬの結晶収率である）の２’−ＦＬ結晶収率を達成することが望ましい。いくつかの実施形態では、目標収率は、効果的な結晶分離、洗浄及び乾燥を可能にする最大結晶化収率である。より具体的には、低結晶収率は、典型的には、製造能力及び効率の損失を引き起こすため、望ましくない。しかし、結晶収率の増加は、生成物懸濁液の粘度を増大させる。そして又、高粘度は、結晶の分離が困難になる（及び、場合によっては、さらに妨げる）場合がある。そのため、いくつかの実施形態では、目標収率は、費用効率の高い分離を可能にする粘度に対応する最大の収率である。
【００６４】
いくつかの実施形態では、２’−ＦＬについて約１〜約８０％の結晶収率を有する結晶塊が得られる。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬについて約３０〜約８０％の結晶収率を有する結晶塊が得られる。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬについて約５０〜約８０％の結晶収率を有する結晶塊が得られる。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬについて約５５〜約７５％の結晶収率を有する結晶塊が得られる。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬについて約６０〜約７５％の結晶収率を有する結晶塊が得られる。上記結晶収率は、沸騰直後の収率を意味する。
【００６５】
いくつかの実施形態では、主な結晶集団（ｃｒｙｓｔａｌ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ）の結晶サイズ（すなわち、結晶の最大寸法）は、少なくとも１μｍである。いくつかの実施形態では、主な結晶集団の結晶サイズは、少なくとも５μｍである。いくつかの実施形態では、主な結晶集団の結晶サイズは、少なくとも１０μｍである。いくつかの実施形態では、主な結晶集団の結晶サイズは、少なくとも２０μｍである。いくつかの実施形態では、主な結晶集団の結晶サイズは、少なくとも３０μｍである。いくつかの実施形態では、主な結晶集団の結晶サイズは、１００００μｍ以下である。いくつかの実施形態では、主な結晶集団の結晶サイズは、５０００μｍ以下である。いくつかの実施形態では、主な結晶集団の結晶サイズは、１０００μｍ以下である。いくつかの実施形態では、主な結晶集団の結晶サイズは、５００μｍ以下である。いくつかの実施形態では、主な結晶集団の結晶サイズは、３００μｍ以下である。いくつかの実施形態では、主な結晶集団の結晶サイズは、２００μｍ以下である。いくつかの実施形態では、主な結晶集団の結晶サイズは、約１〜約１００００μｍの範囲である。いくつかの実施形態では、主な結晶集団の結晶サイズは、約１０〜約５００μｍの範囲である。いくつかの実施形態では、主な結晶集団の結晶サイズは、約３０〜約２００μｍの範囲である。いくつかの実施形態では、主な結晶集団の結晶サイズは、約３０〜約１００μｍの範囲である。いくつかの実施形態では、主な結晶集団の結晶サイズは、約１００〜約２００μｍの範囲である。本明細書で使用する場合、用語「主な結晶集団」は、結晶塊からの顕微鏡画像の目視による判断である。異常に小さいか、又は異常に大きいかのいずれかである異常値の結晶は無視される。
【００６６】
いくつかの実施形態では、更なる供給液体を蒸発によって結晶化すると同時に２’−ＦＬ溶液に添加し、結晶化装置内の２’−ＦＬ溶液の濃度を上昇させる、及び／又は２’−ＦＬ溶液の乾燥物質含有量を上昇させる。いくつかの実施形態では、更なる供給液体を連続的に添加する。いくつかの実施形態では、更なる供給液体をバッチ式で添加する。
【００６７】
いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ含有溶液は、結晶化と同時に冷却される。いくつかの実施形態では、結晶化は、沸騰及び冷却の組み合わせプロセスを含む。このようなプロセスでは、温度を、例えば、シーディング時点の温度よりも約１０〜約２０℃低い温度まで低下させてもよい。いくつかのこのような実施形態では、冷却速度は、約１℃／時〜約５℃／時である。
【００６８】
いくつかの実施形態では、蒸発による結晶化を終了する際に、結晶塊を混合して、その後塊を冷却する。いくつかのこのような実施形態では、混合は、例えば、大気圧下、約４０〜約７５℃の温度で実施される。いくつかのこのような実施形態では、混合は、例えば、大気圧下、約４０〜約７０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、混合は、例えば、大気圧下、約４５〜約７０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、混合は、例えば、大気圧下、約５０〜約７０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、混合は、例えば、大気圧下、約５５〜約７０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、混合は、例えば、大気圧下、約６０〜約７０℃の温度で実施される。いくつかの実施形態では、混合は、例えば、大気圧下、６０℃超〜約７０℃以下の温度で実施される。いくつかの実施形態では、混合は、約０．５〜約３０時間継続する。
【００６９】
いくつかの実施形態では、蒸発による結晶化を終了する際に、結晶塊の温度を、室温まで低下させる。いくつかの実施形態では、蒸発による結晶化を終了する際に、結晶塊の温度を、約２０℃まで低下させる。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬの含有量が少ない場合は、より長い冷却期間が使用される。
【００７０】
いくつかの実施形態では、冷却は、最大約３日間にわたって行われる。いくつかの実施形態では、冷却は、約１〜約３日間にわたって行われる。いくつかの実施形態では、冷却は、約１〜約３０時間にわたって行われる。
【００７１】
いくつかの実施形態では、冷却速度は、約１℃／時〜約５℃／時である。
【００７２】
いくつかの実施形態では、蒸発による結晶化の間の結晶塊の見かけ粘度は、約３〜約２００Ｐａ−ｓである。いくつかの実施形態では、蒸発による結晶化の間の結晶塊の見かけ粘度は、約５〜約２００Ｐａ−ｓである。いくつかの実施形態では、蒸発による結晶化の間の結晶塊の見かけ粘度は、約５〜約１００Ｐａ−ｓである。いくつかの実施形態では、蒸発による結晶化の間の結晶塊の見かけ粘度は、約５０〜約１００Ｐａ−ｓである。いくつかの実施形態では、蒸発による結晶化の間の結晶塊の見かけ粘度は、約５〜約５０Ｐａ−ｓである。いくつかの実施形態では、蒸発による結晶化の間の結晶塊の見かけ粘度は、約５〜約３０Ｐａ−ｓである。これらの範囲の粘度は、一般に、結晶化した物質の効果的な分離に好適である。結晶塊の粘性が高くなりすぎて効果的な分離ができなくなる場合、例えば、結晶塊の過飽和を減少させることにより結晶塊の粘度を減少させてもよい。例えば、温度を上げること、及び／又は結晶塊を水若しくは２’−ＦＬ含有溶液で希釈することにより、結晶塊の過飽和を減少させてもよい。
【００７３】
例えば、遠心分離、濾過、デカンテーションなどによって結晶を分離することができる。いくつかの実施形態では、結晶の分離は遠心分離を含む。
【００７４】
分離に続いて、典型的には、例えば、熱い空気に接触させることによって結晶を乾燥させる。いくつかの実施形態では、結晶は、分離に続いて洗浄される。いくつかの実施形態では、結晶は水で洗浄され、次いで、例えば、熱い空気に接触させることによって乾燥させる。いくつかの実施形態では、得られる結晶分画の含水率は、約１（重量）％未満である。いくつかの実施形態では、得られる結晶分画の含水率は、約０．５（重量）％未満である。含水率は、乾燥時の重量損失、又はカールフィッシャー滴定により測定され得る。
【００７５】
いくつかの実施形態では、固液分離技術（「ＳＬＳ」）を結晶生成物で実施し、微量のタンパク質及びＤＮＡ、アミノ酸、炭水化物不純物、微量の元素などのマイクロ不純物を除去する。
【００７６】
いくつかの実施形態では、本プロセスから得られる結晶分画の２’−ＦＬ含有量は、少なくとも約８５％である。いくつかの実施形態では、得られる結晶分画の２’−ＦＬ含有量は、少なくとも約９０％である。いくつかの実施形態では、得られる結晶分画の２’−ＦＬ含有量は、少なくとも約９１％である。いくつかの実施形態では、得られる結晶分画の２’−ＦＬ含有量は、少なくとも約９２％である。いくつかの実施形態では、得られる結晶分画の２’−ＦＬ含有量は、少なくとも約９３％である。いくつかの実施形態では、得られる結晶分画の２’−ＦＬ含有量は、少なくとも約９４％である。いくつかの実施形態では、得られる結晶分画の２’−ＦＬ含有量は、少なくとも約９５％である。いくつかの実施形態では、得られる結晶分画の２’−ＦＬ含有量は、少なくとも約９６％である。いくつかの実施形態では、得られる結晶分画の２’−ＦＬ含有量は、少なくとも約９７％である。いくつかの実施形態では、得られる結晶分画の２’−ＦＬ含有量は、少なくとも約９８％である。いくつかの実施形態では、得られる結晶分画の２’−ＦＬ含有量は、少なくとも約９９％である。いくつかの実施形態では、得られる結晶分画の２’−ＦＬ含有量は、少なくとも約９９．５％である。いくつかの実施形態では、得られる結晶分画の２’−ＦＬ含有量は、少なくとも約９９．９％である。これらのパーセンテージは、ＨＰＬＣを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度、又は純度に対応する。
【００７７】
いくつかの実施形態では、本プロセスから得られる結晶の融点は、約２３０〜約２３９℃である。いくつかの実施形態では、本プロセスから得られる結晶の融点は、約２３０〜約２３２℃である。いくつかの実施形態では、本プロセスから得られる結晶の融点は、約２３０〜約２３１℃である。いくつかの実施形態では、本プロセスから得られる結晶の融点は、約２３２〜約２３９℃である。いくつかの実施形態では、本プロセスから得られる結晶の融点は、約２３２〜約２３８℃である。いくつかの実施形態では、本プロセスから得られる結晶の融点は、約２３３〜約２３８℃である。いくつかの実施形態では、本プロセスから得られる結晶の融点は、約２３４〜約２３７℃である。いくつかの実施形態では、本プロセスから得られる結晶の融点は、２３６℃未満である。いくつかの実施形態では、本プロセスから得られる結晶の融点は、少なくとも約２３３℃〜約２３６℃未満である。いくつかの実施形態では、本プロセスから得られる結晶の融点は、少なくとも約２３４℃〜約２３６℃未満である。いくつかの実施形態では、本プロセスから得られる結晶の融点は、約２３３℃〜２３５℃である。上記融点は、欧州薬局方キャピラリー融点法を使用して１℃／分の加熱速度で測定した融点に相当する。
【００７８】
いくつかの実施形態では、得られる結晶は、国際公開第２０１１／１５０９３９号パンフレットで「結晶性２’−Ｏ−フコシルラクトース多形体ＩＩ」として引用されている結晶形態について、国際公開第２０１１／１５０９３９号パンフレットで議論されているＸ線粉末回折スペクトルを示す。
【００７９】
いくつかの実施形態では、得られる結晶は、ＣｕＫａ線を使用した測定に基づいて、１６．９８±０．２０、１３．６５±０．２０、及び１８．３２±０．２０  ２Θ角でＸ線粉末回折反射を示す。いくつかの実施形態では、得られる結晶は、ＣｕＫａ線を使用した測定に基づいて、１６．９８±０．２０、１３．６５±０．２０、１８．３２±０．２０、及び２１．７０±０．２０  ２Θ角でＸ線粉末回折反射を示す。いくつかの実施形態では、得られる結晶は、ＣｕＫａ線を使用した測定に基づいて、１６．９８±０．２０、１３．６５±０．２０、１８．３２±０．２０、２１．７０±０．２０、及び１５．２２±０．２０  ２Θ角でＸ線粉末回折反射を示す。いくつかの実施形態では、得られる結晶は、ＣｕＫａ線を使用した測定に基づいて、１６．９８±０．２０、１３．６５±０．２０、１８．３２±０．２０、２１．７０±０．２０、１５．２２±０．２０、及び２０．６３±０．２０  ２Θ角でＸ線粉末回折反射を示す。いくつかの実施形態では、得られる結晶は、ＣｕＫａ線を使用した測定に基づいて、１６．９８±０．２０、１３．６５±０．２０、１８．３２±０．２０、２１．７０±０．２０、１５．２２±０．２０、２０．６３±０．２０、及び１１．９４±０．２０  ２Θ角でＸ線粉末回折反射を示す。
【００８０】
いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ純度を向上させるために再結晶化を１回以上実施する。再結晶化は、例えば、水（典型的には、脱イオン水）中に２’−ＦＬ結晶を溶解させることと、得られた溶液を２’−ＦＬについて（例えば、蒸発を介して）過飽和状態にすることと、上記の蒸発による結晶化方法を用いて結晶化することと、によって実施されてもよい。
【００８１】
いくつかの実施形態では、収率は、初期結晶化により製造される母液の結晶化を実施することにより上昇する。このような結晶化は、例えば、母液を２’−ＦＬについて（例えば、蒸発を介して）過飽和状態にすることと、上記の蒸発による結晶化方法を用いて結晶化することとによって実施されてもよい。
【００８２】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるプロセスの２’−ＦＬ結晶性生成物は、食品（例えば、ヒト又はペット用食品）、栄養補助食品又は薬に組み込まれる。いくつかの実施形態では、結晶性生成物は、ヒトベビーフード（例えば、乳児用調製乳）に組み込まれる。いくつかのこのような実施形態では、２’−ＦＬは、食品、栄養補助食品又は薬のその他の成分と混合される。乳児用調製乳中に組み込まれる場合、例えば、２’−ＦＬは、例えば、脱脂乳、炭水化物源（例えば、ラクトース）、タンパク質源（例えば、乳清タンパク質濃縮物）、脂肪源（例えば、高オレイン酸ヒマワリ油）、ビタミン、ミネラルなどのその他の乳児用調製乳成分と混合され得る。いくつかの実施形態では、乳児用調製乳中の２’−ＦＬ濃度は、ヒト母乳中に一般的に存在する２’−ＦＬ濃度とほぼ同じ濃度である。
【００８３】
一般に、本プロセスを使用して、無水の結晶性生成物を製造してもよい。いくつかの実施形態では、カールフィッシャー滴定法により測定される場合、乾燥した２’−ＦＬ結晶生成物の含水率は、１．０（重量）％未満である。いくつかのこのような実施形態では、乾燥した２’−ＦＬ結晶生成物の含水率は、０．９（重量）％未満である。いくつかの実施形態では、乾燥した２’−ＦＬ結晶生成物の含水率は、０．８（重量）％未満である。いくつかの実施形態では、乾燥した２’−ＦＬ結晶生成物の含水率は、０．７（重量）％未満である。いくつかの実施形態では、乾燥した２’−ＦＬ結晶生成物の含水率は、０．６（重量）％未満である。いくつかの実施形態では、乾燥した２’−ＦＬ結晶生成物の含水率は、０．５（重量）％未満である。いくつかの実施形態では、乾燥した２’−ＦＬ結晶生成物の含水率は、０．４（重量）％未満である。いくつかの実施形態では、乾燥した２’−ＦＬ結晶生成物の含水率は、０．３（重量）％未満である。いくつかの実施形態では、乾燥した２’−ＦＬ結晶生成物の含水率は、０．２（重量）％未満である。いくつかの実施形態では、乾燥した２’−ＦＬ結晶生成物の含水率は、０．１（重量）％未満である。いくつかの実施形態では、カールフィッシャー滴定法により測定される場合、乾燥した２’−ＦＬ結晶生成物に水分は検出されない。
【００８４】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるプロセスの２’−ＦＬ結晶性生成物は、目的の用途のために異なる物理形態に変換される。例えば、いくつかの実施形態では、結晶性生成物は、水又はその他の溶媒中に溶解又は懸濁されて、溶液又は懸濁液を形成し、これは、順次、食品（例えば、乳児用調製乳）、食事又は薬に組み込まれる（又はそうでなくとも、それらの製造において使用される）。その他の実施形態では、結晶性生成物は、水又はその他の溶媒中に溶解されて、溶液を形成し、続いて、これを噴霧乾燥させて、無水２’−ＦＬ組成物を形成し、これは、順次、食品（例えば、乳児用調製乳）、食事又は薬に組み込まれる（又はそうでなくとも、それらの製造において使用される）。
【００８５】
いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ組成物が、食品、栄養補助食品又は薬に組み込まれる場合、２’−ＦＬの量は、プレバイオティクス、抗菌、抗ウイルス、免疫系強化及び／又は脳発達強化効果などの利益を付与するのに効果的な量である。
【００８６】
本明細書に記載される結晶化は、溶液中に有機溶媒が存在する必要がない。
【００８７】
いくつかの実施形態では、アルコール（例えば、メタノール、エタノールなど）は、２’−ＦＬが結晶化する溶液には添加されない。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になっている間は、アルコールは添加されない。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になるまで蒸発を用いている間は、アルコールは添加されない。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ結晶化が起こっている間は、アルコールは添加されない。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になっている間に溶液中に存在する任意のアルコールの総濃度は、約１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になるまで蒸発を用いている間に溶液中に存在する任意のアルコールの総濃度は、１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ結晶化が起こっている間に溶液中に存在する任意のアルコールの総濃度は、約１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になっている間に溶液中に存在する任意のアルコールの総濃度は、約０．１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になるまで蒸発を用いている間に溶液中に存在する任意のアルコールの総濃度は、０．１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ結晶化が起こっている間に溶液中に存在する任意のアルコールの総濃度は、約０．１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になっている間は、溶液は本質的にアルコールを含まない。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になるまで蒸発を用いている間は、溶液は本質的にアルコールを含まない。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ結晶化が起こっている間は、溶液は本質的にアルコールを含まない。本明細書において、語句「本質的にアルコールを含まない」は、溶液中に存在するアルコールの量（少しでも存在する場合）が、結晶化に実質的な影響を与えるには不十分であることを意味する。
【００８８】
いくつかの実施形態では、有機酸溶媒（例えば、酢酸）は、２’−ＦＬが結晶化する溶液には添加されない。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になっている間は、有機酸溶媒は添加されない。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になるまで蒸発を用いている間は、有機酸溶媒は添加されない。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ結晶化が起こっている間は、有機酸溶媒は添加されない。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になっている間に溶液中に存在する任意の有機酸溶媒の総濃度は、約１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になるまで蒸発を用いている間に溶液中に存在する任意の有機酸溶媒の総濃度は、１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ結晶化が起こっている間に溶液中に存在する任意の有機酸溶媒の総濃度は、約１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になっている間に溶液中に存在する任意の有機酸溶媒の総濃度は、約０．１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、溶液を２’−ＦＬについて過飽和にするまで蒸発を用いている間に溶液中に存在する任意の有機酸溶媒の総濃度は、０．１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ結晶化が起こっている間に溶液中に存在する任意の有機酸溶媒の総濃度は、約０．１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になっている間は、溶液は本質的に有機酸溶媒を含まない。いくつかの実施形態では、溶液を２’−ＦＬについて過飽和にするまで蒸発を用いている間は、溶液は本質的に有機酸溶媒を含まない。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ結晶化が起こっている間は、溶液は本質的に有機酸溶媒を含まない。本明細書において、語句「本質的に有機酸溶媒を含まない」は、溶液中に存在する有機酸溶媒の量（少しでも存在する場合）が、結晶化に実質的な影響を与えるには不十分であることを意味する。
【００８９】
いくつかの実施形態では、有機溶媒は、２’−ＦＬが結晶化する溶液には添加されない。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になっている間は、有機溶媒は添加されない。いくつかの実施形態では、溶液を２’−ＦＬについて過飽和にするまで蒸発を用いている間は、有機溶媒は添加されない。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ結晶化が起こっている間は、有機溶媒は添加されない。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になっている間に溶液中に存在する任意の有機溶媒の総濃度は、約１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、溶液を２’−ＦＬについて過飽和にするまで蒸発を用いている間に溶液中に存在する任意の有機溶媒の総濃度は、１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ結晶化が起こっている間に溶液中に存在する任意の有機溶媒の総濃度は、約１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になっている間に溶液中に存在する任意の有機溶媒の総濃度は、約０．１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、溶液を２’−ＦＬについて過飽和にするまで蒸発を用いている間に溶液中に存在する任意の有機溶媒の総濃度は、０．１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ結晶化が起こっている間に溶液中に存在する任意の有機溶媒の総濃度は、約０．１（重量）％以下である。いくつかの実施形態では、溶液が２’−ＦＬについて過飽和になっている間は、溶液は本質的に有機溶媒を含まない。いくつかの実施形態では、溶液を２’−ＦＬについて過飽和にするまで蒸発を用いている間は、溶液は本質的に有機溶媒を含まない。いくつかの実施形態では、２’−ＦＬ結晶化が起こっている間は、溶液は本質的に有機溶媒を含まない。本明細書において、語句「本質的に有機溶媒を含まない」は、溶液中に存在する有機溶媒の量（少しでも存在する場合）が、結晶化に実質的な影響を与えるには不十分であることを意味する。
【実施例】
【００９０】
以下の実施例は、単なる例示であり、決して本明細書を限定するものではない。
【００９１】
以下の実施例では、次の定義が使用される。
【００９２】
「［１］」により識別される値は、ＨＰＬＣ（ＣａｒｂｏＰａｃ  ＰＡ１００，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ  ＵＳＡ））を使用して得られる正規化されたピーク面積純度又は濃度を指す。これは、ピーク面積の、ピークの総面積に対するパーセンテージである。
【００９３】
「［２］」により識別される値は、純度値から計算される２’−ＦＬ収率を指す。
【００９４】
「［３］」により識別される値は、カールフィッシャー滴定法により測定される場合、乾燥固形分含有量（「ＤＳ」）を指す。
【００９５】
「［４］」により識別される値は、カールフィッシャー滴定法により測定される初期の乾燥固形分含有量及び蒸発又は添加される水の量に基づいた物質収支から計算される乾燥固形分含有量を指す。
【００９６】
「［５］」により識別される値は、乾燥時の重量損失により測定される含水率を指す。
【００９７】
「［６］」により識別される値は、顕微鏡画像をもとにした結晶サイズの測定値（すなわち、結晶の最大寸法の測定値）を指す。異常に小さいか、又は異常に大きいかのいずれかである異常値の結晶は無視される。
【００９８】
「［７］」により識別される値は、国際砂糖分析統一委員会（「ＩＣＵＭＳＡ」）砂糖色ランク付けシステムの砂糖色を指す。
【００９９】
「［８］」により識別される値は、溶液中の２’−ＦＬ濃度（ｇ／１００ｇ水）と同じ温度における水中の２’−ＦＬの溶解度（ｇ／１００ｇ水）との比として定義される２’−ＦＬについての過飽和を指す。
【０１００】
「［９］」により識別される値は、欧州薬局方キャピラリー融点法を使用して１℃／分の加熱速度で測定した融点である。
【０１０１】
「［１０］」により識別される値は、ＨＰＬＣ（Ｘ−Ｂｒｉｄｇｅ  Ａｍｉｄｅ  ＨＩＬＩＣ  ｃｏｌｕｍｎ，Ｗａｔｅｒｓ（Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ  ＵＳＡ））を使用して得られる正規化されたピーク面積純度又は濃度を指す。これは、ピーク面積の、ピークの総面積に対するパーセンテージである。
【０１０２】
略語「ＨＰＬＣ」は、高速液体クロマトグラフィーを指す。
【０１０３】
略語「ＤｉＦＬ」は、ジフコシルラクトースを指す。
【０１０４】
実施例１：２’−ＦＬ種結晶調製の実例
２’−ＦＬ濃度９０．４％［１］、ＤｉＦＬ濃度８．９％［１］、及びラクトース濃度０．２％［１］を有する供給水溶液を、ＤＳ８４．４％［３］まで蒸発させた（Ｒｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−１５１エバポレータ）。次いで、アンカー撹拌機を用いて手で溶液を混合することによってエタノール（２７９ｇ）を濃縮糖液（４１５ｇ）に添加した。得られた溶液を６０℃で２．３時間、回転式Ｒｏｔａｖａｐｏｒボトル中に保持した。この間、水（１０ｇ）を２回（合計で２０ｇ）添加し、溶液を希釈した。最初の水の添加は、エタノール添加の１．０時間後に行われ、２回目の水の添加は、エタノール添加の１．６時間後に行われた。
【０１０５】
得られた濃縮糖液の一部（３０６ｇ）をガラス反応器に移動させた。エタノール（７１ｇ）を６０℃で添加した。結晶が形成し始めた。結晶化溶液を６０℃で１．２時間撹拌し、撹拌を続けながら、１時間以内に５５℃まで、更に１５時間以内に１５℃まで冷却した。冷却後、得られた結晶塊を１５℃で３．９時間撹拌し続けた。
【０１０６】
２２．５ｃｍのバスケットの直径を有するバッチ式遠心分離器で結晶塊を遠心分離にかけた。この遠心分離に関して、３４３ｇの結晶塊を５００ｒｐｍの回転速度で、加速段階で遠心分離機にのせた。洗浄水（７５ｍＬ）を、２０００ｒｐｍの回転速度で添加し、次いで３５００ｒｐｍの回転速度で５分間遠心分離を続けた。得られた遠心分離した結晶（８５ｇ）を、５０℃で３．４時間、加熱チャンバ内で乾燥させた。乾燥後の含水率は、０．８％［３］であった。
【０１０７】
ここで示されたプロセスに従って調製された結晶を、実施例２で使用した。用いられる前に、結晶をエタノールで洗浄し、乾燥させて、次いで磁器ミルで粉砕して結晶構造を破壊し、不規則な形状の粒子を提供して二次核形成を開始させた。洗浄した結晶は、２’−ＦＬ純度９４．０％［１］を有した。
【０１０８】
実施例２：実施例１に従って調製した種結晶を用いた
種結晶の調製
２’−ＦＬ濃度９０．７％［１］、ＤｉＦＬ濃度９．３％［１］、及びラクトース濃度０．１％未満［１］を有する供給水溶液を、ＤＳ８２．９％［３］まで蒸発させた（Ｒｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−１５１エバポレータ）。得られた濃縮糖液（６８３ｇ）をガラス反応器に移動させて、５５℃の温度にて、０．２９ｇの２’−ＦＬ乾燥種結晶（実施例１に従って調製した）をシーディングした。
【０１０９】
シーディングした濃縮糖液を、５５℃で維持しながら撹拌した。エタノールを２回に分けて添加し、一回目（６１０ｇ）は、シーディングから０．９時間後に０．３時間以内で添加し、二回目（２２１ｇ）は、シーディングから２，３時間後に添加した。次いで、結晶化溶液を撹拌しながら、１７時間以内に５５℃から１５℃まで冷却した。１５℃まで冷却した後、１５℃で０．９時間撹拌を続けた。得られた結晶塊（１４１６ｇ）を、１００ｍＬの洗浄水とともに遠心分離にかけた（バッチ式遠心分離器、バスケットの直径２２．５ｃｍ、３５００ｒｐｍ、５分）。合計５５７ｇの結晶ケーキを得た。この中の、２４１ｇを、６０℃で２．３時間、加熱チャンバ内で乾燥させた。乾燥後の含水率は、０．８％［３］であった。
【０１１０】
本プロセスに従って調製した結晶を、順次、以下の実施例３の種結晶として使用した。用いられる前に、結晶をエタノールで洗浄し、乾燥させて、次いで磁器ミルで粉砕した。洗浄した結晶は、２’−ＦＬ純度９１．６％［１］を有した。
【０１１１】
実施例３：２’−ＦＬ結晶化の実例
２’−ＦＬ濃度８９．３％［１］、ＤｉＦＬ濃度９．５％［１］、及びラクトース濃度０．１％未満［１］を有する供給水溶液を、ＤＳ６１．０％［４］まで蒸発させた（Ｒｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−１５１エバポレータ）。次いで濃縮糖液（１５４０ｇ）に、５７℃の温度にて、０．５ｇの２’−ＦＬ乾燥種結晶（実施例２に記載の調製物）をシーディングした（過飽和１．０１［８］）。これにより、ごくわずかな結晶形成が得られた。その結果として、シーディングした濃縮糖液を、６４℃の温度及び１３０〜１８０ｍｂａｒの圧力で２．８時間沸騰し続けた。次いで濃縮糖液に、６５℃の温度にてＤＳ６７．２％［４］で０．５ｇの２’−ＦＬ乾燥種結晶を２回シーディングした［４］（過飽和１．２７［８］）。２回目のシーディング後、結晶化が起こった。次いで、結晶化の沸騰を、６５℃の温度及び１７５ｍｂａｒの圧力で３．３時間続けた。
【０１１２】
ＤＳ７２．８％［３］を有する得られた結晶塊を、室温（２１．５℃）まで放冷し、次いで、回転式Ｒｏｔａｖａｐｏｒボトルに一晩（１８時間）保持した。最初のシーディングから２１．５時間後、少量の塊の試料を洗浄することなく遠心分離にかけ（Ｈｅｔｔｉｃｈ  Ｒｏｔａｎｔａ  ４６０Ｒ遠心分離機、２５００ｒｐｍ、１０分）、結晶含有量を決定した。結晶ケーキの２’−ＦＬ純度は、９６．７％［１］であり、母液の２’−ＦＬ純度は、８５．６％［１］であった。これは、２’−ＦＬ収率３６％［２］に相当する。塊の粘度は、３．２Ｐａ−ｓであった。
【０１１３】
結晶塊を６５℃まで加熱し、結晶化の沸騰を、結晶塊のＤＳが８１．５％［３］になるまで、１７０ｍｂａｒの圧力で４．４時間、真空下で続けた。少量の塊の試料を洗浄することなく遠心分離にかけた。これにより、２’−ＦＬ純度９７．２％［１］の結晶ケーキ、２’−ＦＬ純度７３．５％［１］の母液、２’−ＦＬ収率７２％［２］の遠心分離物、６７．９％ＤＳ［３］の母液が得られた。主な結晶集団の結晶サイズは、３０〜６０μｍ［６］であった。
【０１１４】
結晶塊を、ＤＳ７９．５％［４］まで脱イオン水を添加することによって希釈し、次いで、２２．５ｃｍのバスケット直径を有するバッチ式遠心分離器で遠心分離にかけた。ここで、６９３ｇの結晶塊を、スタンディング遠心分離機にのせた。次いで、２０００ｒｐｍの回転速度での加速段階中に洗浄水（５０ｍＬ）を添加した。３５００ｒｐｍの回転速度で５分間、遠心分離時間を継続した。２’−ＦＬの遠心分離収率は、５４％［２］であった。母液の２’−ＦＬ純度は７９．５％［１］であり、未乾燥ケーキの含水率は５．７％［５］であった。
【０１１５】
遠心分離からの結晶ケーキ（２７４ｇ）を６０℃で２時間、加熱チャンバ内で乾燥させ、次いで、デシケータ内で冷却した。乾燥した結晶は、２’−ＦＬ純度１００．０％［１］、融点２３６．８〜２３７．５℃［９］、ＩＣＵＭＳＡ２２［７］に対応する色、及び含水率０．３％［３］を有した。
【０１１６】
遠心分離からの未乾燥ケーキ（３０ｇ）をエタノールで洗浄し、乾燥させ、次いで磁器ミルで粉砕して、実施例５、７、８、１０、１２及び１３用の種結晶を調製した。
【０１１７】
実施例４：実施例３の遠心分離母液からの２’−ＦＬ結晶化
２’−ＦＬ濃度７９．５％［１］、ＤｉＦＬ濃度１７．９％［１］、及びラクトース濃度０．１％未満［１］を有する実施例３からの遠心分離母液を、７３℃の温度及び２００ｍｂａｒの圧力で蒸発させた（Ｒｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−１５１エバポレータ）。ＤＳが７４．９％［４］である場合、自発核生成により結晶が形成した（過飽和１．５５［８］）。濃縮糖液をＤＳ７２．６％［４］まで希釈し、真空なしで７３℃にて１．２時間保持した。次いで、濃縮糖液の沸騰を、７３℃の温度及び１７５〜１８０ｍｂａｒの圧力で４．８時間続けた。ＤＳ８３．２％［３］を有する得られた結晶塊を、ガラスボトルに移動させて、６０℃の温度で６９時間、加熱チャンバ内で保持した。自発核生成の開始から７４時間後、洗浄なしで少量の塊の試料を遠心分離にかけ（Ｈｅｔｔｉｃｈ  Ｒｏｔａｎｔａ  ４６０Ｒ遠心分離器、２５００ｒｐｍ、１０分）、２’−ＦＬ純度９５．７％［１］を有する結晶ケーキ、及び２’−ＦＬ純度５１．５％［１］を有する母液が得られた。これは、２’−ＦＬ収率７６％［２］に相当する。主な結晶集団の結晶サイズは、４０〜１００μｍ［６］であった。
【０１１８】
結晶塊（１６５ｇ）を洗浄することなく、バッチ式遠心分離器（バスケットの直径２２．５ｃｍ、３５００ｒｐｍ、３分）で遠心分離にかけた。遠心分離２’−ＦＬ収率は、７６％［２］であった。遠心分離にかけて乾燥（６０℃、２．４時間）した結晶は、ＩＣＵＭＳＡ１５７［７］の色及び含水率０．５％［３］を有すると共に２’−ＦＬ純度９３．２％［１］を有した。母液の２’−ＦＬ純度は５３．９％［１］、色はＩＣＵＭＳＡ６０９［７］であった。
【０１１９】
実施例５：結晶析出と同時の新たな供給物の使用
２’−ＦＬ濃度８７．３％［１］、ＤｉＦＬ濃度１０．１％［１］、及びラクトース濃度０．２％［１］を有する水性供給濃縮糖液を、ＤＳ６７．７％［４］まで蒸発させた（Ｌｕｗａ薄膜エバポレータ  ＮＬ３−２１０／１６００／１０）。この時点で、１１４９ｇの濃縮糖液をＲｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−１５３エバポレータに移動させて、６１℃の温度にて、０．８３ｇの２’−ＦＬ乾燥種結晶（実施例３からの結晶）をシーディングした（過飽和１．３０［８］）。シーディングした濃縮糖液を、６５℃の温度及び１５０〜１６５ｍｂａｒの圧力で５．１時間沸騰させ、同時に新たな供給液体（ＤＳ５８．３％［４］、合計で１４４３ｇ）を、５〜４０分の時間間隔で少しずつ（約３０〜１２０ｇ）結晶塊に添加した。その後、結晶塊のＤＳは、８０．３％［３］であった。洗浄なしで少量の塊の試料を遠心分離にかけ（Ｈｅｔｔｉｃｈ  Ｒｏｔａｎｔａ  ４６０Ｒ遠心分離器、２５００ｒｐｍ、１０分）、２’−ＦＬ純度９６．１％［１］を有する結晶ケーキ、及び２’−ＦＬ純度７５．２％［１］の母液が得られ、これは２’−ＦＬ収率６４％［２］に相当する。主な結晶集団の結晶サイズは、３０〜６０μｍ［６］であった。
【０１２０】
結晶塊（１３３２ｇ）を、７５ｍＬの洗浄水とともに遠心分離にかけた（バッチ式遠心分離器、バスケットの直径２２．５ｃｍ、３５００ｒｐｍ、５分）。２’−ＦＬの遠心分離収率は、５３％［２］であった。遠心分離にかけて乾燥（６０℃、８〜１７時間）した結晶の２’−ＦＬ純度は、９７．８％［１］であった。色はＩＣＵＭＳＡ６７［７］であり、含水率は０．１％［３］であった。母液の２’−ＦＬ純度は７８．１％［１］、色はＩＣＵＭＳＡ９３［７］であった。
【０１２１】
実施例６：結晶析出と同時に水の添加を用いた
実施例５の遠心分離母液からの２’−ＦＬ結晶化
２’−ＦＬ濃度７８．１％［１］、ＤｉＦＬ濃度１７．６％［１］、及びラクトース濃度０．３％［１］を有する、実施例５からの遠心分離母液を、６７℃の温度及び２００ｍｂａｒの圧力で蒸発させた（Ｒｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−１５１エバポレータ）。ＤＳが７５．５％［４］である場合、自発核生成により結晶が形成した（過飽和１．６５［８］）。濃縮糖液をＤＳ７２．６％［４］まで希釈し、真空なしで６７℃にて１時間保持した。次いで、濃縮糖液の沸騰を、６５〜６７℃の温度及び２００ｍｂａｒの圧力で５．２時間続けると同時に、脱イオン水（全部で約５００ｇ）を塊に少しずつ添加した。
【０１２２】
自然核生成の開始から６．２時間後、結晶塊のＤＳは８１．８％［３］であった。洗浄なしで少量の塊の試料を遠心分離にかけ（Ｈｅｔｔｉｃｈ  Ｒｏｔａｎｔａ  ４６０Ｒ遠心分離器、２５００ｒｐｍ、１０分）、２’−ＦＬ純度９１．９％［１］を有する結晶ケーキ、及び２’−ＦＬ純度５９．０％［１］を有する母液が得られた。これは、２’−ＦＬ収率６８％［２］に相当する。主な結晶集団の結晶サイズは、３０〜８０μｍ［６］であった。
【０１２３】
結晶塊（３７１ｇ）を、３０ｍＬの洗浄水とともに遠心分離にかけた（バッチ式遠心分離器、バスケットの直径２２．５ｃｍ、３５００ｒｐｍ、５分）。２’−ＦＬの遠心分離収率は、５４％［２］であった。遠心分離にかけて乾燥（６０℃、２時間）した結晶の２’−ＦＬ純度は、９３．４％［１］であった。色はＩＣＵＭＳＡ１００［７］であり、含水率は０．９％［３］であった。母液の２’−ＦＬ純度は６５．４％［１］、色はＩＣＵＭＳＡ２８７［７］であった。
【０１２４】
実施例７：２’−ＦＬ結晶化の実例
２’−ＦＬ濃度８９．９％［１］、ＤｉＦＬ濃度８．５％［１］、及びラクトース濃度０．１％未満［１］を有する水性供給濃縮糖液を、ＤＳ６５．６％［３］まで蒸発させた（Ｌｕｗａ薄膜エバポレータ  ＮＬ３−２１０／１６００／１０）。得られた濃縮糖液（８１４１ｇ）をＲｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−１５３エバポレータに移動させて、６８℃の温度にて、２．７ｇの２’−ＦＬ乾燥種結晶（実施例３からの結晶）をシーディングした（過飽和１．１７［８］）。この温度で１．２時間混合を続けた。その後、シーディングした濃縮糖液を、各々の工程において、濃縮糖液をまずは真空下で０．９〜１．２時間（６７〜７２℃及び１９０〜２００ｍｂａｒ）沸騰させ、続いて大気圧で０．６〜０．９時間（６７〜７２℃）混合するように、３つの工程で５．３時間以内にＤＳ８０．４％［３］まで蒸発させた。得られた結晶塊を６Ｌの混合タンクに移動させて、６９℃で一晩（１９時間）保持した。洗浄なしで少量の塊の試料を遠心分離にかける（Ｈｅｔｔｉｃｈ  Ｒｏｔａｎｔａ  ４６０Ｒ遠心分離器、２５００ｒｐｍ、１０分）ことにより結晶化の進行を監視した。結果を表１にまとめる。
【０１２５】
得られた結晶塊は、６２〜８２ｍＬ／ｋｇの塊のＤＳに等しい量の洗浄水とともに、３つのバッチで遠心分離にかけた（バッチ式遠心分離器、バスケット直径２２．５ｃｍ、３５００ｒｐｍ、５分）。合わせた未乾燥のケーキの含水率は、４．４％［５］であった。遠心分離にかけて乾燥（６０℃、２時間）した結晶の２’−ＦＬ純度は、１００．０％［１］であった。色はＩＣＵＭＳＡ４６２［７］であり、含水率は０．９％［３］であった。主な結晶集団の結晶サイズは、３０〜１００μｍ［６］であった。
【表１】
2020509073.tif 000003
【０１２６】
実施例８：実施例７の母液及び機器洗浄液からの
２’−ＦＬ結晶化の実例
２’−ＦＬ濃度８７．４％［１］、ＤｉＦＬ濃度１１．１％［１］、及びラクトースの濃度０．１％未満［１］を有する、実施例７の機器洗浄液から回収された希釈した結晶塊と合わせた遠心分離母液を、ＤＳ６５．１％［４］まで蒸発させた（Ｒｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−１５３エバポレータ）。濃縮糖液（４８１２ｇ）に、６５℃の温度にて、１．７５ｇの２’−ＦＬ乾燥種結晶（実施例３からの結晶）をシーディングした（過飽和１．１３［８］）。次いで、シーディングした濃縮糖液を、６８〜７０℃の温度及び１９０〜１９５ｍｂａｒの圧力で６．１時間沸騰させた。得られた結晶塊のＤＳは、８０．８％［３］であった。洗浄なしで少量の塊の試料を遠心分離にかけ（Ｈｅｔｔｉｃｈ  Ｒｏｔａｎｔａ  ４６０Ｒ遠心分離器、２５００ｒｐｍ、１０分）、純度９６．５％［１］を有する２’−ＦＬの結晶ケーキ、及び純度７６．７％［１］を有する２’−ＦＬの母液が得られた。これは、２’−ＦＬ収率６０％［２］に相当する。
【０１２７】
結晶塊を６８℃の温度で一晩（１８時間）、回転式Ｒｏｔａｖａｐｏｒボトル中に保持した。シーディングから２３時間後、洗浄なしで少量の塊の試料を遠心分離にかけ（Ｈｅｔｔｉｃｈ  Ｒｏｔａｎｔａ  ４６０Ｒ遠心分離器、２５００ｒｐｍ、１０分）、２’−ＦＬ純度９７．３％［１］を有する結晶ケーキ、及び２’−ＦＬ純度６９．７％［１］の母液が得られた。これは、２’−ＦＬ収率７１％［２］に相当する。主な結晶集団の結晶サイズは、３０〜８０μｍ［６］であった。
【０１２８】
得られた結晶塊は、６１〜７５ｍＬ／ｋｇの塊のＤＳに等しい量の洗浄水とともに、２つのバッチで遠心分離にかけた（バッチ式遠心分離器、バスケット直径２２．５ｃｍ、３５００ｒｐｍ、５分）。合わせた未乾燥のケーキの含水率は、３．７％［５］であった。遠心分離にかけて乾燥（６０℃、２．２時間）した結晶の２’−ＦＬ純度は、９７．１％［１］であった。色はＩＣＵＭＳＡ３８９［７］であり、含水率は０．５％［３］であった。
【０１２９】
実施例９：結晶塊でシーディングすることを用いた
２’−ＦＬ結晶化の実例
２’−ＦＬ濃度８２．５％［１］、ＤｉＦＬ濃度１５．９％［１］、及びラクトースの濃度０．１％未満［１］を有する、実施例８の機器洗浄液から回収された希釈した結晶塊と合わせた遠心分離母液を、ＤＳ７４．７％［４］まで蒸発させた（Ｒｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−１５３エバポレータ）。濃縮糖液（２４５５ｇ）に、８３ｇの実施例８からの母液（これは、小さな結晶を含有する）を、６７℃の温度でシーディングした（過飽和１．６７［８］）。シーディングした濃縮糖液を、６６〜６８℃の温度及び１９０〜２００ｍｂａｒの圧力で４．１時間沸騰させた。得られた結晶塊のＤＳは、８５．５％［３］であった。洗浄なしで少量の塊の試料を遠心分離にかけ（Ｈｅｔｔｉｃｈ  Ｒｏｔａｎｔａ  ４６０Ｒ遠心分離器、２５００ｒｐｍ、１０分）、２’−ＦＬ純度９５．７％［１］を有する結晶ケーキ、及び２’−ＦＬ純度６１．８％［１］の母液が得られた。これは、２’−ＦＬ収率７１％［２］に相当する。
【０１３０】
得られた結晶塊を６６℃の温度で一晩（１７時間）、回転式Ｒｏｔａｖａｐｏｒボトル中に保持した。シーディングから２１時間後、洗浄なしで少量の塊の試料を遠心分離にかけ（Ｈｅｔｔｉｃｈ  Ｒｏｔａｎｔａ  ４６０Ｒ遠心分離器、２５００ｒｐｍ、１０分）、２’−ＦＬ純度９４．０％［１］を有する結晶ケーキ、及び２’−ＦＬ純度５４．０％［１］の母液が得られた。これは、２’−ＦＬ収率８１％［２］に相当する。主な結晶集団の結晶サイズは、８０〜２００μｍ［６］であった。
【０１３１】
得られた結晶塊は、７１ｍＬ／ｋｇの塊のＤＳに等しい量の洗浄水とともに、遠心分離にかけた（バッチ式遠心分離器、バスケット直径２２．５ｃｍ、３５００ｒｐｍ、５分）。合わせた未乾燥のケーキの含水率は、３．４％［５］であった。遠心分離にかけて乾燥（６０℃、２時間）した結晶の２’−ＦＬ純度は、１００．０％［１］であった。色はＩＣＵＭＳＡ３５［７］であり、含水率は０．２％［３］であった。
【０１３２】
実施例１０  高ラクトース溶液からの、及び結晶塊でシーディングすることを用いた２’−ＦＬ結晶化の実例
２’−ＦＬ濃度８４．５％［１］、ＤｉＦＬ濃度７．９％［１］、及びラクトース濃度６．０％［１］を有する供給水溶液を、ＤＳ６９．６％［３］まで蒸発させた（Ｒｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−１５３エバポレータ）。溶液を２つの部分に分け、１つ（１３９４ｇ）はシーディング塊の作製に使用し、もう一方は実際の供給溶液（１０６４０ｇ）として使用した。
【０１３３】
塊をシーディングするための濃縮糖液に、６８℃の温度にて、０．５ｇの２’−ＦＬ乾燥種結晶（実施例３からの結晶）をシーディングした（過飽和１．３２［８］）。シーディングした濃縮糖液を、６５〜６８℃の温度及び１９０ｍｂａｒの圧力で５時間沸騰させた。得られた、ＤＳ８４．５％［３］を有するシーディング塊を５５℃の温度で一晩（１９時間）、回転式Ｒｏｔａｖａｐｏｒボトル中に保持した。
【０１３４】
シーディング塊のシーディングから２４時間後、実際の供給溶液を６５℃でシーディング塊と混合した（過飽和１．３２［８］）。濃縮糖液を、６８℃の温度及び１９０〜２００ｍｂａｒの圧力で９．６時間沸騰させた。得られた、ＤＳ８０．７％［３］を有するシーディング塊を６８℃で一晩（１６時間）、回転式Ｒｏｔａｖａｐｏｒボトル中に保持した。
【０１３５】
実際の供給溶液のシーディングから２４時間後、洗浄なしで少量の塊の試料を遠心分離にかけ（Ｈｅｔｔｉｃｈ  Ｒｏｔａｎｔａ  ４６０Ｒ遠心分離器、２５００ｒｐｍ、１０分）、２’−ＦＬ純度９７．５％［１］を有する結晶ケーキ、及び２’−ＦＬ純度６５．３％［１］を有する母液が得られた。これは、２’−ＦＬ収率６９％［２］に相当する。主な結晶集団の結晶サイズは、１００〜２００μｍ［６］であった。
【０１３６】
結晶塊は、６８〜８３ｍＬ／ｋｇの塊のＤＳに等しい量の洗浄水とともに、６つのバッチで遠心分離にかけた（バッチ式遠心分離器、バスケット直径２２．５ｃｍ、３５００ｒｐｍ、５分）。６バッチにわたる２’−ＦＬ遠心分離収率の平均は５６％［２］であった。遠心分離にかけて乾燥（４０℃で１８時間及び６０℃で１時間）した結晶の２’−ＦＬ純度の平均は９９．０％［１］であり、融点は２３４．４〜２３５．９℃［９］であり、色平均はＩＣＵＭＳＡ６３［７］であり、含水率は０．６％［３］であった。母液の２’−ＦＬ純度は７１．０％［１］、色はＩＣＵＭＳＡ８５０［７］であった。
【０１３７】
実施例１１：実施例１０の母液及び機器洗浄液からの
２’−ＦＬ結晶化の実例
２’−ＦＬ濃度７２．４％［１］、ＤｉＦＬ濃度１４．０％［１］、及びラクトースの濃度１０．６％［１］を有する、実施例１０の機器洗浄液から回収された希釈した結晶塊と合わせた遠心分離母液を、ＤＳ７０．３％［３］まで蒸発させた（Ｒｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−１５３エバポレータ）。濃縮糖液（６１１９ｇ）に、６５℃の温度にて、１７６７ｇの実施例１０からの結晶塊をシーディングした（過飽和１．１９［８］）。シーディングした濃縮糖液を、６７〜７１℃の温度及び１８０〜１９０ｍｂａｒの圧力で５．４時間沸騰させた。得られた結晶塊のＤＳは、８５．１％［３］であった。
【０１３８】
得られた結晶塊を６８℃の温度で一晩（１８時間）、回転式Ｒｏｔａｖａｐｏｒボトル中に保持した。シーディングから２４時間後、洗浄なしで少量の塊の試料を遠心分離にかけ（Ｈｅｔｔｉｃｈ  Ｒｏｔａｎｔａ  ４６０Ｒ遠心分離器、２５００ｒｐｍ、１０分）、２’−ＦＬ純度９４．１％［１］を有する結晶ケーキ、及び２’−ＦＬ純度４６．５％［１］の母液が得られた。これは、２’−ＦＬ収率７６％［２］に相当する。主な結晶集団の結晶サイズは、１００〜２００μｍ［６］であった。
【０１３９】
結晶塊は、７０〜８７ｍＬ／ｋｇの塊のＤＳに等しい量の洗浄水とともに、４つのバッチで遠心分離にかけた（バッチ式遠心分離器、バスケット直径２２．５ｃｍ、３５００ｒｐｍ、１０分）。２’−ＦＬの遠心分離収率の平均は、５５％［２］であった。遠心分離にかけて乾燥（４０℃で１８時間、及び６０℃で１時間）した結晶の２’−ＦＬ純度の平均は、９７．９％［１］であった。色はＩＣＵＭＳＡ２０４［７］であり、含水率は０．８％［３］であった。母液の２’−ＦＬ純度は５９．４％［１］、色はＩＣＵＭＳＡ１４０９［７］であった。
【０１４０】
実施例１２：２’−ＦＬ再結晶化の実例
２’−ＦＬ濃度９７．９％［１］、ＤｉＦＬ濃度０．９％［１］、及びラクトース濃度１．３％［１］を有する、実施例１１からの２’−ＦＬ結晶（１８４２ｇ）を、脱イオン水中に溶解させた。得られた溶液をＤＳ６５．１％［３］まで蒸発させ（Ｒｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−１５３エバポレータ）、６０℃の温度にて、０．８８ｇの２’−ＦＬ乾燥種結晶（実施例３からの結晶）をシーディングした（過飽和１．３０［８］）。シーディングした濃縮糖液を、６４〜６５℃の温度及び１８０ｍｂａｒの圧力で４．７時間沸騰させた。得られた結晶塊のＤＳは、７７．８％［３］であった。
【０１４１】
得られた結晶塊を６４℃の温度で一晩（１９時間）、回転式Ｒｏｔａｖａｐｏｒボトル中に保持した。シーディングから２４時間後、洗浄なしで少量の塊の試料を遠心分離にかけ（Ｈｅｔｔｉｃｈ  Ｒｏｔａｎｔａ  ４６０Ｒ遠心分離器、２５００ｒｐｍ、１０分）、２’−ＦＬ純度９９．７％［１］を有する結晶ケーキ、及び２’−ＦＬ純度９５．５％［１］の母液が得られた。これは、２’−ＦＬ収率５５％［２］に相当する。主な結晶集団の結晶サイズは、３０〜１００μｍ［６］であった。
【０１４２】
結晶塊は、７１ｍＬ／ｋｇの塊のＤＳに等しい量の洗浄水とともに、遠心分離にかけた（バッチ式遠心分離器、バスケット直径２２．５ｃｍ、３５００ｒｐｍ、５分）。合わせた未乾燥のケーキの含水率は、５．８％［５］であった。遠心分離にかけて乾燥（４０℃で２１時間、及び６０℃で１時間）した結晶の２’−ＦＬ純度は、１００．０％［１］であった。色はＩＣＵＭＳＡ１４２［７］であり、含水率は０．１％［３］であった。
【０１４３】
実施例１３：２’−ＦＬ結晶化の実例
２’−ＦＬ濃度８９．６％［１］、ＤｉＦＬ濃度８．８％［１］、及びラクトース濃度０．１％未満［１］を有する水性供給濃縮糖液を、ＤＳ６７．５％［３］まで蒸発させた（Ｒｏｔａｖａｐｏｒ  Ｒ−１５３エバポレータ）。得られた濃縮糖液（１３４３ｇ）に、６１℃の温度にて、０．４４ｇの２’−ＦＬ乾燥種結晶（実施例３からの結晶）をシーディングした（過飽和１．３２［８］）。シーディングした濃縮糖液を、６４〜６５℃の温度及び１８０ｍｂａｒの圧力で５．５時間沸騰させた。得られた結晶塊のＤＳは、８１．４％［３］であった。
【０１４４】
得られた結晶塊を６６℃の温度で一晩（２３時間）、回転式Ｒｏｔａｖａｐｏｒボトル中に保持した。シーディングから２６時間後、洗浄なしで少量の塊の試料を遠心分離にかけ（Ｈｅｔｔｉｃｈ  Ｒｏｔａｎｔａ  ４６０Ｒ遠心分離器、２５００ｒｐｍ、１０分）、２’−ＦＬ純度９８．１％［１］を有する結晶ケーキ、及び２’−ＦＬ純度７６．１％［１］の母液が得られた。これは、２’−ＦＬ収率６７％［２］に相当する。主な結晶集団の結晶サイズは、３０〜１００μｍ［６］であった。
【０１４５】
結晶塊は、７５ｍＬ／ｋｇの塊のＤＳに等しい量の洗浄水とともに、遠心分離にかけた（バッチ式遠心分離器、バスケット直径２２．５ｃｍ、３５００ｒｐｍ、５分）。合わせた未乾燥のケーキの含水率は、４．６％［５］であった。遠心分離にかけて乾燥（４０℃で１９時間、及び６０℃で１時間）した結晶の２’−ＦＬ純度は、１００．０％［１］であった。融点は２３３．２〜２３４．１℃［９］であり、色はＩＣＵＭＳＡ４７［７］であり、含水率は０．１％［３］であった。
【０１４６】
実施例１４：低２’−ＦＬ溶液からの２’−ＦＬ結晶化の実例
２’−ＦＬ濃度６０．５％［１０］、ＤｉＦＬ濃度２０．７％［１０］、及びラクトース濃度１５．１％［１０］を有する供給水溶液を、ＤＳ約７５％まで蒸発させた。次いで、濃縮糖液に、約６５℃の温度で、２’−ＦＬ乾燥種結晶を約０．１８ｇ／ｋｇの濃縮糖液のＤＳと等しい量でシーディングした（過飽和約１．３［８］）。この温度で約０．５時間混合を続けた。その後、シーディングした濃縮糖液を、６５〜７０℃の温度で約２０時間以内にＤＳ約８１．５％まで蒸発させた。
【０１４７】
得られた結晶塊を、７５℃で約６時間混合し続け、次いで、約６０ｍＬ／ｋｇの塊のＤＳと等しい量の洗浄水とともに、遠心分離にかけた。２’−ＦＬ遠心分離収率の平均は１７．２％であり、遠心分離した結晶の２’−ＦＬ純度は９７．４％［１０］であった。
【０１４８】
実施例１５：水中の２’−ＦＬの溶解度
実施例９からの乾燥した２’−ＦＬ結晶及び脱イオン水を、１００ｍＬの実験室用ボトルに量り取った。サーモスタット付き水浴を用いて、容器を具体的な温度（２５、４０、５０、６０、又は７０℃）に調節した。溶解度平衡に到達するように、少なくとも１６時間、電磁攪拌器で内容物を連続的に撹拌した。平衡での結晶含有量が約１０〜２０体積％となるように、実験の間、２’−ＦＬ結晶を添加した。
【０１４９】
系が平衡に到達した後、母液を沈殿により結晶から分離した。母液の２’−ＦＬ濃度は、カールフィッシャー滴定によって決定した。結果を表２にまとめる。
【表２】
2020509073.tif 000004
【０１５０】
実施例１６：結晶性２’−ＦＬからの非晶質２’−ＦＬの調製
水中に溶解した結晶性２’−ＦＬの溶液を噴霧乾燥させて、非晶質２’−ＦＬを粉末形態で得た。２’−ＦＬ溶液は、表３に示す特性を有した。
【表３】
2020509073.tif 000005
【０１５１】
アトマイザーホイールを装着したＳＰＸ無水ＣＳＤタイプ７０（体積＝約４３ｍ３）（Ｓｏｅｂｏｒｇ，Ｄｅｎｍａｒｋ）並流噴霧乾燥器を使用して、２’−ＦＬ溶液を噴霧乾燥させた。２’−ＦＬ溶液を、７９ｋｇ／時の初期速度で噴霧乾燥器内に供給し、これを噴霧乾燥の最初の３時間にわたって１１５ｋｇ／時まで上昇させた。噴霧乾燥の設定は、表４に示すとおりであった。
【表４】
2020509073.tif 000006
乾燥プロセスを４５７分間続けた。
【０１５２】
得られた乾燥した２’−ＦＬ粉末は、表５に示す特性を有した。
【表５】
2020509073.tif 000007
【０１５３】
Ｊｏｌｔｉｎｇ  Ｓｔａｍｐｆ  Ｖｏｌｕｍｅｔｅｒ（ＳＴＡＶ  ２０３，Ｊ．Ｅｎｇｅｌｓｍａｎｎ  ＡＧ）、２５０ｍＬのメスシリンダー、及びテクニカル計量器を使用して、７０ｇの粉末の嵩密度を測定した。粉末の含水率を、カールフィッシャー滴定を使用して測定した。
【０１５４】
用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、及び「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、排他的にではなく、包含的に解釈されるべきである。この解釈は、これらの単語がこの出願の時点で米国特許法の下で与えられているという解釈と同じであることを意図する。
【０１５５】
単数形「ａ」、及び「ａｎ」は、文脈がそうでないと指示しない限り、複数の指示対象を含むことを意図する。したがって、例えば、「微生物（ａ  ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ）」の存在への言及は、文脈がそうでないと指示しない限り、複数の微生物の存在を排除しない。
【０１５６】
本明細書で引用されている参考文献はすべて、参照により本明細書に組み込まれる。
【手続補正書】
【提出日】令和1年11月7日(2019.11.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
２’−フコシルラクトース及び少なくとも１つの他の炭水化物を含む水性出発溶液から結晶性２’−フコシルラクトースを製造するためのプロセスであって、
前記出発溶液を２’−フコシルラクトースについて過飽和状態まで濃縮することと、
前記過飽和溶液を６０℃超の温度にさらしている間に、前記過飽和溶液から２’−フコシルラクトース結晶を析出させること、を含み、
前記過飽和溶液が、前記２’−フコシルラクトース結晶の前記析出の際、１（重量）％以下の有機溶媒を含む、プロセス。
【請求項２】
前記少なくとも１つの他の炭水化物が、ジフコシルラクトースを含み、
前記出発溶液が、少なくとも１％（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）のジフコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する、
請求項１に記載のプロセス。
【請求項３】
前記少なくとも１つの他の炭水化物が、ラクトースを含み、
前記出発溶液が、少なくとも０．１％（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）のラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有する、
請求項１〜２のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項４】
前記過飽和溶液を６０℃超の温度にさらしている間に、前記過飽和溶液に有機溶媒が添加されない、請求項１〜３のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項５】
前記出発溶液が、発酵から誘導される、請求項１〜４のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項６】
前記出発溶液を過飽和状態まで濃縮する前又は間に、前記出発溶液に有機溶媒を添加しない、請求項１〜５のいずれか一項に記載のプロセス。
【請求項７】
２’−フコシルラクトース及び少なくとも１つの他の炭水化物を含む水性出発溶液から結晶性２’−フコシルラクトースを製造するためのプロセスであって、
前記出発溶液を２’−フコシルラクトースについて過飽和状態まで濃縮することと、
前記過飽和溶液を少なくとも４０℃の温度にさらしている間に、前記過飽和溶液から２’−フコシルラクトース結晶を析出させること、を含み、
前記出発溶液が、７０〜９５％（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）の２’−フコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有し、
前記過飽和溶液が、前記２’−フコシルラクトース結晶の前記析出の際、１（重量）％以下の有機溶媒を含む、プロセス。
【請求項８】
２’−フコシルラクトース及び少なくとも１つの他の炭水化物を含む水性出発溶液から結晶性２’−フコシルラクトースを製造するためのプロセスであって、
前記出発溶液を２’−フコシルラクトースについて過飽和状態まで濃縮することと、
前記過飽和溶液を少なくとも４０℃の温度にさらしている間に、前記過飽和溶液から２’−フコシルラクトース結晶を析出させること、を含み、
前記出発溶液が、９８％未満（ここで、前記パーセンテージは高速液体クロマトグラフィーを使用して得られる正規化されたピーク面積濃度に対応する）の２’−フコシルラクトース濃度の乾燥固形分含有量を有し、
前記過飽和溶液が、前記２’−フコシルラクトース結晶の前記析出の際、１（重量）％以下の有機溶媒を含む、プロセス。
【請求項９】
２’−フコシルラクトース及び少なくとも１つの他の炭水化物を含む水性出発溶液から結晶性２’−フコシルラクトースを製造するためのプロセスであって、
前記出発溶液を２’−フコシルラクトースについて過飽和状態まで濃縮することと、
前記過飽和溶液を少なくとも４０℃の温度にさらしている間に、前記過飽和溶液から２’−フコシルラクトース結晶を析出させること、を含み、
前記過飽和溶液が、前記２’−フコシルラクトース結晶の前記析出の際、１（重量）％以下の有機溶媒を含み、
前記結晶性２’−フコシルラクトースが、（欧州薬局方キャピラリー融点法を使用して１℃／分の加熱速度で測定した際に）約２３０〜約２３９℃の融点を有する、プロセス。
【請求項１０】
２’−フコシルラクトース及び少なくとも１つの他の炭水化物を含む水性出発溶液から結晶性２’−フコシルラクトースを製造するためのプロセスであって、
前記出発溶液を２’−フコシルラクトースについて過飽和状態まで濃縮することと、
前記過飽和溶液を少なくとも４０℃の温度にさらしている間に、前記過飽和溶液から２’−フコシルラクトース結晶を析出させること、を含み、
前記過飽和溶液が、前記２’−フコシルラクトース結晶の前記析出の際、１（重量）％以下の有機溶媒を含み、
前記結晶性２’−フコシルラクトースが、ＣｕＫａ線を使用した測定に基づいて、１６．９８±０．２０、１３．６５±０．２０、及び１８．３２±０．２０  ２Θ角でＸ線粉末回折反射を示す、プロセス。
【請求項１１】
非晶質２’−フコシルラクトースを製造するためのプロセスであって、
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のプロセスに従って結晶性２’−フコシルラクトースを製造することと、
前記結晶性２’−フコシルラクトースを溶媒中に溶解させて、精製した２’−フコシルラクトース溶液を形成することと、
前記精製した２’−フコシルラクトース溶液から非晶質２’−フコシルラクトースを析出させることと、を含む、プロセス。
【請求項１２】
前記精製した２’−フコシルラクトース溶液からの非晶質２’−フコシルラクトースの前記析出が、噴霧乾燥を含む、請求項１１に記載のプロセス。
【請求項１３】
食品、栄養補助食品又は薬を製造するためのプロセスであって、
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のプロセスに従って結晶性２’−フコシルラクトースを製造することと、
前記結晶性２’−フコシルラクトースを前記食品、栄養補助食品又は薬に好適な１つ以上の成分と混合すること、又は、
前記結晶性２’−フコシルラクトースを溶媒中に溶解させること、及び前記溶解した２’−フコシルラクトースを前記食品、栄養補助食品又は薬に好適な１つ以上の成分と混合すること、
のいずれかと、を含む、プロセス。
【請求項１４】
食品、栄養補助食品又は薬を製造するためのプロセスであって、
請求項１１又は１２に記載のプロセスに従って非晶質２’−フコシルラクトースを製造することと、
前記非晶質２’−フコシルラクトースを前記食品、栄養補助食品又は薬に好適な１つ以上の成分と混合すること、又は、
前記非晶質２’−フコシルラクトースを溶媒中に溶解させること、及び前記溶解した２’−フコシルラクトースを前記食品、栄養補助食品又は薬に好適な１つ以上の成分と混合すること、
のいずれかと、を含む、プロセス。
【請求項１５】
乳児用調製乳を製造するためのプロセスであって、
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のプロセスに従って結晶性２’−フコシルラクトースを製造することと、
前記結晶性２’−フコシルラクトースを１つ以上の乳児用調製乳成分と混合すること、又は、
前記結晶性２’−フコシルラクトースを溶媒中に溶解させること、及び前記溶解した２’−フコシルラクトースを１つ以上の乳児用調製乳成分と混合すること、
のいずれかと、を含む、プロセス。
【請求項１６】
乳児用調製乳を製造するためのプロセスであって、
請求項１１又は１２に記載のプロセスに従って非晶質２’−フコシルラクトースを製造することと、
前記非晶質２’−フコシルラクトースを１つ以上の乳児用調製乳成分と混合すること、又は、
前記非晶質２’−フコシルラクトースを溶媒中に溶解させること、及び前記溶解した２’−フコシルラクトースを１つ以上の乳児用調製乳成分と混合すること、
のいずれかと、を含む、プロセス。
【請求項１７】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のプロセスから得られる、結晶性２’−フコシルラクトース生成物。
【請求項１８】
請求項１１又は１２に記載のプロセスから得られる非晶質２’−フコシルラクトース。
【請求項１９】
請求項１３又は１４に記載のプロセスから得られる食品、栄養補助食品又は薬。
【請求項２０】
請求項１５又は１６に記載のプロセスから得られる乳児用調製乳。
【国際調査報告】
2020509073.tif 000008
2020509073.tif 000009