(57)【要約】  本発明は、４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オン及びクロルフェネシンを含有する抗菌性混合物、並びにさらにこのような混合物を含有する化粧用組成物に関する。ケラチン物質のケア、メイクアップ及びクレンジングにおける使用。【特許請求の範囲】
【請求項１】
４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オン及びクロルフェネシンを含む抗菌性混合物。
【請求項２】
４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オン／クロルフェネシン質量比が、０．１〜０．９の範囲であり、好ましくは、０．１〜０．７の範囲であり、優先的に、０．１５〜０．６の範囲であるような量で前記４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オン及びクロルフェネシンを含むことを特徴とする、請求項１に記載の抗菌性混合物。
【請求項３】
かび、特にアスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）に対する抗菌活性を有することを特徴とする、請求項１又は２に記載の抗菌性混合物。
【請求項４】
生理学的に許容可能な媒体中に、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗菌性混合物を含む組成物。
【請求項５】
水、油、２〜１０個の炭素原子を含有するポリオール、ゲル化剤、界面活性剤、塗膜形成ポリマー、染料、香料、充填剤、紫外線遮断剤、植物抽出物、化粧用及び皮膚用活性薬剤、及び塩から選択される少なくとも１つのさらなる成分を含むことを特徴とする、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
前記４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オンが、前記組成物の総質量に対して０．０１質量％〜５質量％の範囲、好ましくは、０．０１質量％〜３質量％の範囲、優先的に、０．０１質量％〜２．５質量％の範囲の含量で存在することを特徴とする、請求項４又は５に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オン及びクロルフェネシンを含有する抗菌性混合物、並びにさらにこのような混合物を含有する化粧用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オン（ケトン化合物）は、特許出願（特許文献１）に記載されるように、微生物汚染から組成物を保護するための、化粧用組成物用の保存剤として有用な物質である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】国際公開第２０１１／０３９４４５号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、良好な抗菌保護性能を維持しながら、組成物、特に、化粧用又は皮膚用組成物中に低濃度の前記ケトン化合物を組み込むことができることが望ましい。したがって、ケトン化合物と、抗菌効果を有する他の化合物との組合せが、この目的のために探し求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、予想外にも、４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オンと、クロルフェネシンとの組合せが、特にかび、特にアスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）に対する相乗的抗菌活性を有する抗菌性混合物を得ることを可能にすることを発見した。後述される実施例１の結果は、いくつかの混合物で取られた最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）測定で得られた相乗的抗菌活性を示す。抗菌活性は、抗菌性混合物が、２５％以下、或いは２０％以下の菌株増殖のパーセンテージを得ることを可能にする場合に相乗的であると見なされる。
【０００６】
より正確には、本発明の主題は、４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オン及びクロルフェネシンを含むか、又はそれらによって構成される（又はそれらからなる）抗菌性混合物である。
【０００７】
本発明の主題はまた、生理学的に許容可能な媒体中の、上述される前記混合物を含む組成物、特に、化粧用又は皮膚用組成物である。
【０００８】
本発明のさらなる主題は、上述される組成物のケラチン物質への適用を含む、ケラチン物質の非治療的美容的処置のための方法である。この方法は、ケラチン物質をケア又はメイクアップ又はクレンジングするための美容的方法であり得る。
【０００９】
４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オンは、式：
【化１】
2020525482.tif 000002
の化合物である。
【００１０】
クロルフェネシンは、式：
【化２】
2020525482.tif 000003
の化合物３−（４−クロロフェノキシ）−１，２−プロパンジオール（ＣＡＳ番号１０４−２９−０）に相当する。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
有利には、４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オン及びクロルフェネシンは、４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オン／クロルフェネシン質量比が、０．１〜０．９、好ましくは、０．１〜０．７、優先的に、０．１５〜０．６の範囲であるような含量で前記混合物中に存在する。
【００１２】
化合物４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オンは、組成物の総質量に対して０．０１質量％〜５質量％の範囲、好ましくは、０．０１質量％〜３質量％の範囲、優先的に、０．０１質量％〜２．５質量％の範囲、より優先的に、０．０１質量％〜２質量％の範囲の量で本発明に係る組成物中に存在し得る。
【００１３】
本発明の主題はまた、生理学的に許容可能な媒体中に、上述される抗菌性混合物を含む組成物である。
【００１４】
「生理学的に許容可能な媒体」という用語は、皮膚、頭皮、毛髪及び爪などのヒトケラチン物質と適合する媒体を意味する。前記媒体は、ケトン化合物及び上述されるクロルフェネシン以外の１つ以上のさらなる成分を含み得る。
【００１５】
本組成物は、水、油、２〜１０個の炭素原子を含有するポリオール、ゲル化剤、界面活性剤、塗膜形成ポリマー、染料、香料、充填剤、紫外線遮断剤、植物抽出物、化粧用及び皮膚用活性薬剤、及び塩から選択される少なくとも１つのさらなる成分を含み得る。
【００１６】
本発明に係る組成物は、水性相を含み得る。
【００１７】
本組成物は、組成物の総質量に対して５質量％〜９０質量％の範囲、好ましくは、３５質量％〜７５質量％の範囲の量で存在し得る水を含み得る。
【００１８】
本組成物は、特に、グリセロール、プロピレングリコール、１，３−プロパンジオール、ブチレングリコール、ペンチレングリコール、ヘキシレングリコール、ジプロピレングリコール、ジエチレングリコール又はジグリセロールなどの、特に２〜１０個の炭素原子を含有する、好ましくは、２〜６個の炭素原子を含有するポリオールから選択される、室温（２５℃）で水混和性のポリオールも含み得る。有利には、本発明に係る組成物は、特に、組成物の総質量に対して、０．１質量％〜２０質量％の範囲、好ましくは、０．１質量％〜１０質量％の範囲、優先的に、０．５質量％〜５質量％の範囲の含量で１，３−プロパンジオールを含む。
【００１９】
本発明に係る組成物は、水中油型（Ｏ／Ｗ）エマルション、油中水型（Ｗ／Ｏ）エマルション又は多重エマルション（トリプル：Ｗ／Ｏ／Ｗ又はＯ／Ｗ／Ｏ）、油性溶液、油性ゲル、水溶液、水性ゲル、固体組成物の形態であり得る。これらの組成物は、通常の方法にしたがって調製される。
【００２０】
本発明に係る組成物は、程度の差はあるが流体であり得、白色若しくは有色のクリーム、軟膏、乳液、ローション、セラム、ペースト又はフォームの外観を有し得る。それらは、任意選択的に、エアロゾル形態で皮膚に適用され得る。それらはまた、固体形態、例えば、スティック又はコンパクトパウダーの形態であり得る。
【００２１】
本発明に係る組成物は、特に以下の形態であり得る：
−特に、顔、身体の皮膚、又は唇若しくはまつげをメイクアップするためのメイクアップ製品；
−アフターシェーブジェル又はローション；シェービング製品；
−デオドラント（スティック、ロールオン又はエアロゾル）；
−脱毛クリーム；
−シャワージェル又はシャンプーなどの身体衛生組成物；
−医薬組成物；
−石鹸又はクレンジングバーなどの固体組成物；
−加圧噴射剤も含むエアロゾル組成物；
−ヘアセット用ローション、ヘアスタイリング用クリーム若しくはジェル、染料組成物、パーマネントウェーブ用組成物、抜け毛を防ぐためのローション若しくはジェル、又はヘアコンディショナー；
−皮膚をケア又はクレンジングするための組成物。
【００２２】
本発明の主題はまた、組成物、特に、化粧用又は皮膚用組成物を調製するための方法であって、４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オン、クロルフェネシン、及び１つ以上のさらなる成分、特に、上述されるものなどの化粧用又は皮膚用成分を混合する工程を含む方法である。
【００２３】
本発明は、以下に続く実施例においてより詳細に例示される。成分の量は、質量パーセンテージとして表される。
【実施例】
【００２４】
実施例１：微生物菌株アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）のＭＩＣにおける相乗的抗菌活性の決定
４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オン（物質Ａと呼ばれる）とクロルフェネシン（物質Ｂと呼ばれる）との混合物による相乗的抗菌活性効果の実証が、下式にしたがって相乗効果指数（又はＦＩＣ指数）を計算することによって行われる：
ＦＩＣ指数＝（Ｂと合わせたＭＩＣａ／ＭＩＣａ）＋（Ａと合わせたＭＩＣｂ／ＭＩＣｂ）
ここで：
−Ｂと合わせたＭＩＣａ：阻害効果を得ることを可能にする組合せＡ＋Ｂにおける生成物Ａの最小濃度
−Ａと合わせたＭＩＣｂ：阻害効果を得ることを可能にする組合せＡ＋Ｂにおける生成物Ｂの最小濃度。
−ＭＩＣａ：生成物Ａ単独の最小発育阻止濃度。
−ＭＩＣｂ：生成物Ｂ単独の最小発育阻止濃度。
【００２５】
この式は、Ｆ．Ｃ．Ｋｕｌｌ、Ｐ．Ｃ．Ｅｉｓｍａｎ、Ｈ．Ｄ．Ｓｙｌｗｅｓｔｒｏｗｋａ、及びＲ．Ｌ．Ｍａｙｅｒによる論文、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ９：５３８−５４１，１９６１において初めて記載された。
【００２６】
試験される各化合物単独では、ＭＩＣは、２５％以下の微生物増殖パーセンテージを得ることを可能にする最初の濃度と見なされる。
【００２７】
試験される組合せに関しては、ｂと合わせたＭＩＣａ及びａと合わせたＭＩＣｂは、２５％以下の微生物増殖パーセンテージを得ることを可能にする組合せにおけるＡ及びＢのそれぞれの濃度である。
【００２８】
ＦＩＣ指数の解釈：
ＦＩＣ指数値が、１以下である場合、試験化合物の組合せが相乗効果を有するものと見なされる。
【００２９】
得られた結果が、以下の表にまとめられている。
【００３０】
微生物菌株アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）ＡＴＣＣ  ６２７５、並びにポリオキシエチレン化（２０  ＯＥ）ソルビタンモノパルミテート（Ｃｒｏｄａ製のＴｗｅｅｎ  ４０）及びＰｈｙｔａｇｅｌ（著作権）ＢｉｏＲｅａｇｅｎｔを補充した２倍濃度サブローブロス液体培養培地を使用した（すなわち、５ｇのＰｈｙｔａｇｅｌ＋０．６ｇのＴｗｅｅｎ  ４０＋６０ｇのサブローブロスの混合物）。
【００３１】
３２．５℃のインキュベーション温度で９６ウェルマイクロプレートを使用する。
【００３２】
マイクロプレートのインキュベーション時間は、好気的に２４〜４８時間である。
【００３３】
試験
各化合物について：
Ａ＝４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オン化合物
Ｂ＝クロルフェネシン
１０％（質量／体積）のストック溶液を、１ｇの化合物を９ｍｌの水性１％ｏ寒天溶液中で混合することによって調製した。連続希釈を、１％ｏ寒天溶液を用いて行った。
【００３４】
・化合物Ａ及びＢ単独の試験
化合物Ａ又はＢを含有する得られた娘溶液のそれぞれ５０μｌを、マイクロプレートウェルに加える。菌株アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）を接種した１００μｌのサブロー液体栄養ブロス及び５０μｌの水性１％ｏ寒天溶液もそれに加える。
【００３５】
・混合物としての化合物Ａ及びＢの試験
化合物Ａを含有する得られた娘溶液のそれぞれ５０μｌ及び化合物Ｂを含有する得られた娘溶液のそれぞれ５０μｌを、マイクロプレートウェルに加える。菌株アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）を２倍濃度で接種した１００μｌのサブロー液体栄養ブロスもそれに加える。
【００３６】
微生物増殖対照
陽性微生物増殖対照も調製した。陽性微生物増殖対照は、化合物Ａ及びＢの非存在下での、１００μｌの水性１％ｏ寒天溶液と、菌株アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）を２倍濃度で播種した１００μｌのサブロー液体栄養ブロスとの混合物に相当する。
【００３７】
化合物Ａ及びＢ単独の吸光度対照
並行して、吸光度対照を、化合物Ａ及びＢ単独について行った。この対照は、１００μｌの２倍濃度滅菌サブロー液体栄養ブロス＋１００μｌの２倍濃度化合物Ａ又はＢに相当する。
【００３８】
３つの場合（吸光度対照、増殖対照及び試験）において、マイクロプレートウェルのそれぞれに存在する最終体積は、２００μｌである。
【００３９】
２つの場合（試験及び対照）において、接種材料は、ウェルの最終体積（２００μｌ）で存在する菌株アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）の濃度を示し、２〜６×１０５ｃｆｕ／ｍｌのアスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）である。
【００４０】
各化合物Ａ及びＢ単独並びに組合せの最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を、６２０ｎｍの波長での光学密度測定によって、公知の方法で決定した。
【００４１】
以下の結果が得られた：
【００４２】
【表１】
2020525482.tif 000004
【００４３】
得られた結果は、混合物について相乗的阻害活性を示す：
ｉ）０．０６２５％のＡ及び０．２５％のＢ、すなわち、比率Ａ／Ｂ＝０．２５
ｉｉ）０．１２５％のＡ及び０．２５％のＢ、すなわち、比率Ａ／Ｂ＝０．５
【００４４】
実施例２：抗菌性混合物の抗菌活性の決定
４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オン＋クロルフェネシン抗菌性混合物（０．１６のそれぞれの質量比）の抗菌効果を、チャレンジ試験方法（Ｃｈａｌｌｅｎｇｅ  Ｔｅｓｔ  ｍｅｔｈｏｄ）によって評価した。
【００４５】
プロトコル
チャレンジ試験の方法は、コレクションからの微生物菌株（細菌、酵母及びかび）による試料の人工的汚染、及び接種の数日後の復活可能な微生物の数の評価からなる。
【００４６】
抗菌性混合物の効果を実証するために、０．０５％の４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オン及び０．３％のクロルフェネシンを含有する化粧用配合物の抗菌活性を、約１０６ｃｆｕ（コロニー形成単位）／化粧用配合物のグラムの接種後に、同じ配合物単独（対照）と比較した。
【００４７】
化粧用配合物
以下の組成を有するフェイシャルケア用水中油型エマルションを調製した（質量パーセンテージでの含量）：
ソルビタントリステアレート（Ｃｒｏｄａ製のＳｐａｎ  ６５  Ｖ）：０．９％
グリセリルモノ／ジステアレート（３６／６４）／ステアリン酸カリウム混合物
（Ｇｏｌｄｓｃｈｍｉｄｔ製のＴｅｇｉｎ  Ｐｅｌｌｅｔｓ）：３％
ステアリン酸ポリエチレングリコール（４０エチレンオキシド単位）：２％
４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オン：０．０５％
クロルフェネシン：０．３％
プロパン−１，３−ジオール：３％
鉱油、マイクロクリスタリンワックス及びパラフィンの混合物
（Ａｉｇｌｏｎ製のＶａｓｅｌｉｎｅ  Ｂｌａｎｃｈｅ  Ｃｏｄｅｘ  ２３６）：４％
シアバターの液体画分（Ｏｌｖｅａ製のＳｈｅａ  Ｏｌｅｉｎ）：１％
シクロペンタジメチルシロキサン：５％
セチルアルコール：４％
杏仁油：０．３％
水添ポリイソブテン（ＮＯＦ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ製のＰａｒｌｅａｍ）：７．２％
ミリスチン酸ミリスチル：２％
ステアリン酸：１．２％
カフェイン：０．１％
クエン酸：０．２％
グリセロール：３％
水酸化ナトリウム：０．０５％
水：１００％までの適量
【００４８】
対照配合物Ａ：０．０５％の４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オンを含有し、クロルフェネシンを含まない（０．３％を水で補った）、前のものに類似の配合物。
【００４９】
対照配合物Ｂ：０．３％のクロルフェネシンを含有し、４−（３−エトキシ−４−ヒドロキシフェニル）ブタン−２−オンを含まない（０．０５％を水で補った）、類似の配合物。
【００５０】
微生物培養物
微生物の５つの純粋培養物を使用した。
【００５１】
【表２】
2020525482.tif 000005
【００５２】
グラム陰性菌（大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）及び緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ））、グラム陽性菌（エンテロコッカス・ファエカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ））、酵母（カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ））、並びにかび（アスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ））の菌株を、細菌及び酵母については接種の前日、及びかびについては接種の５日前に、それぞれ継代培養培地中に接種する。
【００５３】
接種の当日：
−分光光度計によって、５４４ｎｍで３５％〜４５％の透過光の光学密度を有する懸濁液を得るように、細菌及び酵母についてそれぞれ、トリプトン塩希釈剤中の懸濁液を調製し；
−かびについては、６〜７ｍｌの回収用溶液で寒天を洗浄することによって、胞子を収集し、懸濁液を、滅菌管又はフラスコ中に回収する。
【００５４】
微生物懸濁液を均質化した後、０．２ｍｌの接種材料を、各薬瓶に導入し（懸濁液を純粋なまま使用する：ｍｌ当たり１×１０８〜３×１０８ｃｆｕ）、２０ｇの生成物（＝化粧用配合物）中の微生物懸濁液を、スパチュラを用いて十分に均質化する。
【００５５】
生成物中に存在する微生物の含量は、生成物のグラム当たり１０６個の微生物の濃度への均質化の後、すなわち、ｍｌ当たり１０８個の微生物を含有する１％の接種材料の接種の後に相当する。
【００５６】
２２℃±２℃及び暗所での微生物及び生成物の間の７日間の接触時間の後、１０倍の希釈を行い、生成物中に残っている復活可能な微生物の数を計数する。
【００５７】
【表３】
2020525482.tif 000006
【国際調査報告】
2020525482.tif 000007
2020525482.tif 000008