(57)【要約】  本発明は、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドと、少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤と、を含む組成物に関し、前記組成物は無菌であり、前記組成物は、チオール基を含む少なくとも１種の作用物質および少なくとも１種のホスフェート化合物を含み、好ましくは、前記組成物は、眼用組成物である。本発明はまた、当該組成物を得るための方法、およびその治療上の使用にも関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドと、少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤と、を含む組成物であって、
前記組成物は無菌であり、前記組成物は、少なくとも１種のホスフェート化合物と、チオール基を含む少なくとも１種の作用物質と、をさらに含み、好ましくは、前記組成物は眼用組成物である、
組成物。
【請求項２】
前記組成物がエマルジョンであり、好ましくは水中油型エマルジョンまたは水中油中水型エマルジョンである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
チオール基を含む前記作用物質が、Ｎ−アセチルシステイン、リポ酸、ＤＬ−システイン、クレアチニン、グルタチオン、２−メルカプト−５−ベンズイミダゾール塩、２−メルカプトエタンスルホン酸塩、エデト酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウムおよび亜硫酸ナトリウムを含む群から選択され、好ましくは、チオール基を含む前記作用物質が、リポ酸、ＤＬ−システインまたはＮ−アセチルシステインである、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記ホスフェート化合物が、Ｎａ２ＨＰＯ４、ＮａＨ２ＰＯ４、Ｎａ３ＰＯ４、Ｋ２ＨＰＯ４、Ｋ３ＰＯ４、ＫＨ２ＰＯ４、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４、（ＮＨ４）３ＰＯ４、Ｍｇ（Ｈ２ＰＯ４）２、Ｍｇ３（ＰＯ４）２、ＭｇＨＰＯ４、ＭｇＮＨ４ＰＯ４、Ｃａ（Ｈ２ＰＯ４）２、ＣａＨＰＯ４、Ｃａ３（ＰＯ４）２、Ｃａ８（ＨＰＯ４）２（ＰＯ４）４、Ｈ３ＰＯ４、ならびにＮａＨ２ＰＯ４／Ｎａ２ＨＰＯ４、ＫＨ２ＰＯ４／Ｋ２ＨＰＯ４、Ｎａ２ＨＰＯ４／Ｎａ３ＰＯ４およびＫ２ＨＰＯ４／Ｋ３ＰＯ４を含む群から選択されるホスフェートの共役酸塩基対、を含む群から選択される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
前記ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドが、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、リボザイム、アプタマー、分子のデコイ、およびＲＮＡ−ＤＮＡハイブリッド分子を含む群から選択され、好ましくは前記ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチドである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
前記ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドが、ＩＲＳ−１（インスリン受容体基質−１）に対して特異的なアンチセンスオリゴヌクレオチドであり、好ましくは、ＩＲＳ−１アンチセンスホスホロチオエートオリゴヌクレオチドが、配列番号１のうち少なくとも１２個の連続したヌクレオチドの配列を含み、より好ましくは、ＩＲＳ−１アンチセンスホスホロチオエートオリゴヌクレオチドが、配列番号２またはその機能が保存された誘導体である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
配列番号２の機能が保存された誘導体が、９〜５０ヌクレオチドを含み、配列番号２と比較して少なくとも約７５％の同一性を有し、配列番号２としてのＩＲＳ−１発現を阻害する能力を保存しており、好ましくは、前記配列番号２の機能が保存された誘導体は、配列番号３〜配列番号２８から選択される、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
前記ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドが、２５℃で少なくとも１日間安定である、および／または前記ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドが、４０℃で少なくとも１日間安定である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の組成物と、少なくとも１種の薬学的に許容される賦形剤と、を含む医薬組成物。
【請求項１０】
オートクレーブに供され、少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤を含む組成物中のホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの分解を防止および／または阻止するための方法であって、前記方法が、前記組成物の中に少なくとも１種のホスフェート化合物、および／またはチオール基を含む少なくとも１種の作用物質、を添加するステップを含む、方法。
【請求項１１】
ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドと、少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤と、を含む無菌組成物を得るための方法であって、前記ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドが、前記無菌組成物の中で安定しており、前記方法が、前記組成物の中に少なくとも１種のホスフェート化合物、および／またはチオール基を含む少なくとも１種の作用物質、を添加するステップを含む、方法。
【請求項１２】
前記方法が、
少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤を含む、バルクのエマルジョンを調製するステップと、
前記バルクのエマルジョンをオートクレーブにより滅菌するステップと、
前記滅菌したバルクのエマルジョンの中に、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、少なくとも１種のホスフェート化合物、および／またはチオール基を含む少なくとも１種の作用物質、を添加するステップと、
を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記バルクのエマルジョンのパーセンテージが、前記無菌組成物の総重量に対して重量で約６０％〜約９９％の範囲であり、
油、乳化剤、増粘剤および／または浸透圧調整剤を含む、油相と、
粘度調整剤、ｐＨ緩衝剤および／または尿素を含む、水相と、
を含み、
ホスホロチオエート溶液のパーセンテージが、前記無菌組成物の総重量に対して重量で約１％〜約４０％の範囲にあり、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、少なくとも１種のホスフェート化合物、および／またはチオール基を含む少なくとも１種の作用物質、を含む、
請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドがＩＲＳ−１アンチセンスである、血管新生障害を治療するための請求項１〜８のいずれか１項に記載の組成物または請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤を含む、バルクのエマルジョンと、
少なくとも１種のホスフェート化合物、および／またはチオール基を含む少なくとも１種の作用物質、を含む、ホスホロチオエート溶液と、
任意選択で、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドと、
を含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、オリゴヌクレオチドの治療上の使用に関し、組成物（特に少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤を含む組成物）における上記オリゴヌクレオチドの安定性の問題を解決することを目的とする。より具体的には、本発明は、少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤と、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドと、チオール基を含む少なくとも１種の作用物質と、少なくとも１種のホスフェート化合物と、を含む無菌組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
オリゴヌクレオチドは、一般に研究用のツールとして使用されており、次第に、治療薬として使用されている。オリゴヌクレオチドは、たとえばワトソン−クリックの塩基対形成の性質による配列相補性を介して、特定の標的を認識および結合することができる特異性を特徴とする。アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、およびｓｈＲＮＡは、治療上の目的を有する最も一般的なオリゴヌクレオチドであり、よって、標的の遺伝子の発現を調節することができる。特に、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、特定のｍＲＮＡの標的に結合し、ＲＮＡ／ＤＮＡハイブリッドのＲＮＡ鎖を加水分解する、広範囲に存在する酵素であるＲＮａｓｅ  Ｈの動員を介して、その分解を誘導する。あるいは、一部のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、そのＲＮＡ標的に対する細胞機構のアクセスを阻害するため、「立体遮断剤（ｓｔｅｒｉｃ  ｂｌｏｃｋｅｒ）」として作用し得る。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、癌、代謝性疾患、炎症性疾患、および血管新生関連障害を含む多くの障害の治療に有用である。
【０００３】
ヒトの対象へのオリゴヌクレオチドの投与を含む治療は、このオリゴヌクレオチドが安定している組成物を必要とする。修飾されていないオリゴヌクレオチドは、細胞内および細胞外の両方のヌクレアーゼによる分解の影響を受けやすい。よって、天然のホスホジエステル骨格の化学的な修飾が、開発されており、現在、修飾したオリゴヌクレオチドの安定性を高めるために一般的に使用されている。特に、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、ヌクレアーゼによる分解に対して耐性が強いことが知られている。ホスホロチオエートアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＲＮａｓｅ  Ｈの活性を活性化することができ、よって、それらの標的のｍＲＮＡの分解を誘導することができる。
【０００４】
治療される疾患に応じて、異なる投与方法と、対応して異なる種類の組成物とが、使用される。ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、水溶液において非常に安定している。しかしながら、オリゴヌクレオチドの投与はまた、活性オリゴヌクレオチドに対する標的組織の十分な曝露を確保するために、特には局所投与のための、エマルジョン、クリーム、または何らかの二相もしくは多相の製剤の形態で、想定されている。たとえば、エマルジョンの局所的な適用は、一部の眼の疾患の治療に必要とされ得る。水溶液ではなくエマルジョンで適用されることにより、実際に、親水性オリゴヌクレオチドが硝子体液に容易に吸収されないようにすることが可能である。
【０００５】
しかしながら、エマルジョンにホスホロチオエートヌクレオチドを用いる場合には、安定性の問題が生じる。実際に、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、組成物に存在する賦形剤からもたらされる過酸化物ラジカルの作用を介した脱硫の影響を受けやすい。国際公開第０３００５８２２号は、二相または多相の局所製剤の水相に区分化する抗酸化剤の添加が、どのように、ホスホロチオエートヌクレオシド間の結合の脱硫を防止するかを提示している。
【０００６】
しかしながら、国際公開第０３００５８２２号に記載されるホスホロチオエートオリゴヌクレオチドおよび抗酸化剤を含む二相または多相の組成物は、４０℃より高い温度に対しては提示されていないことに留意すべきである。しかしながら、眼への適用などの一部の治療は、オートクレーブにより得られる滅菌性のエマルジョン、すなわち、圧力下での飽和蒸気による滅菌（１００℃超）により得られる滅菌性のエマルジョンの投与を必要とする。本出願人らは、オートクレーブを行うと、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドが、図１および図２に示す通り、一連の末端の酸化（sequential peripheral oxidation）に続き、β−脱離に供される可能性があることを示した。理論に拘束されるものではないが、本出願人らは、エマルジョンの脂肪酸および／または乳化剤が高温に曝露されると、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの分解をもたらし得る活性の高い化学的な実体および／またはフリーラジカルがもたらされることを提言している。
【０００７】
よって、依然として、少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤を含む無菌組成物であって、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドが安定している、組成物が必要とされている。
【発明の概要】
【０００８】
本発明は、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドと、少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤と、を含む組成物であって、無菌であり、上記組成物がさらに、少なくとも１種のホスフェート化合物と、チオール基を含む少なくとも１種の作用物質と、を含み、好ましくは、上記組成物は、眼用組成物である、組成物に関する。
【０００９】
一実施形態では、本組成物は、エマルジョン、好ましくは水中油型エマルジョンまたは水中油中水型エマルジョンである。
【００１０】
一実施形態では、チオール基を含む作用物質は、Ｎ−アセチルシステイン、リポ酸、ＤＬ−システイン、クレアチニン、グルタチオン、２−メルカプト−５−ベンズイミダゾール塩、２−メルカプトエタンスルホン酸塩、エデト酸ナトリウム（Na-edetate）、亜硫酸水素ナトリウム（Na-bisulfite）、および亜硫酸ナトリウム（Na-sulfite）を含む群から選択され、好ましくは、チオール基を含む作用物質は、リポ酸、ＤＬ−システイン、またはＮ−アセチルシステインである。
【００１１】
一実施形態では、チオール基を含む作用物質は、Ｎ−アセチルシステイン、リポ酸、ＤＬ−システイン、クレアチニン、グルタチオン、２−メルカプト−５−ベンズイミダゾール塩、および２−メルカプトエタンスルホン酸塩を含む群から選択され、好ましくは、チオール基を含む作用物質は、リポ酸、ＤＬ−システイン、またはＮ−アセチルシステインである。
【００１２】
一実施形態では、ホスフェート化合物は、Ｎａ２ＨＰＯ４、ＮａＨ２ＰＯ４、Ｎａ３ＰＯ４、Ｋ２ＨＰＯ４、Ｋ３ＰＯ４、ＫＨ２ＰＯ４、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４、（ＮＨ４）３ＰＯ４、Ｍｇ（Ｈ２ＰＯ４）２、Ｍｇ３（ＰＯ４）２、ＭｇＨＰＯ４、ＭｇＮＨ４ＰＯ４、Ｃａ（Ｈ２ＰＯ４）２、ＣａＨＰＯ４、Ｃａ３（ＰＯ４）２、Ｃａ８（ＨＰＯ４）２（ＰＯ４）４、Ｈ３ＰＯ４、ならびにＮａＨ２ＰＯ４／Ｎａ２ＨＰＯ４、ＫＨ２ＰＯ４／Ｋ２ＨＰＯ４、Ｎａ２ＨＰＯ４／Ｎａ３ＰＯ４およびＫ２ＨＰＯ４／Ｋ３ＰＯ４を含む群から選択されるホスフェートの共役酸塩基対（a phosphate acid/base conjugate pair）、を含む群から選択される。
【００１３】
一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、リボザイム、アプタマー、分子のデコイ（molecular decoys）、およびＲＮＡ−ＤＮＡハイブリッド分子を含む群から選択され、好ましくは、上記ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、アンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【００１４】
一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、ＩＲＳ−１（インスリン受容体基質−１）に対して特異的なアンチセンスオリゴヌクレオチドであり、好ましくは、ＩＲＳ−１アンチセンスホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、配列番号１のうち少なくとも１２個の連続したヌクレオチドの配列を含み、より好ましくは、ＩＲＳ−１アンチセンスホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、配列番号２またはその機能が保存された誘導体である。
【００１５】
一実施形態では、配列番号２の機能が保存された誘導体は、９〜５０ヌクレオチドを含み、配列番号２と比較して少なくとも約７５％の同一性を有し、配列番号２としてのＩＲＳ−１発現を阻害する能力を保存しており、好ましくは、上記配列番号２の機能が保存された誘導体は、配列番号３〜配列番号２８から選択される。
【００１６】
一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、少なくとも１日間２５℃で安定であり、かつ／またはホスホロチオエートオリゴヌクレオチドが、少なくとも１日間４０℃で安定である。
【００１７】
さらに本発明は、本発明の組成物と少なくとも１種の薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物に関する。
【００１８】
さらに本発明は、本発明の組成物を含む医薬に関する。
【００１９】
さらに本発明は、オートクレーブに供され、少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤を含む組成物中のホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの分解を防止および／または阻止するための方法であって、上記組成物の中に、少なくとも１種のホスフェート化合物、および／またはチオール基を含む少なくとも１種の作用物質、を添加するステップを含む、方法に関する。
【００２０】
さらに本発明は、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドと、少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤と、を含む無菌組成物を得るための方法であって、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドが、上記無菌組成物の中で安定しており、上記方法が、上記組成物の中に、少なくとも１種のホスフェート化合物、および／またはチオール基を含む少なくとも１種の作用物質、を添加するステップを含む、方法に関する。
【００２１】
一実施形態では、本方法は、
少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤を含む、バルクのエマルジョンを調製するステップと、
バルクのエマルジョンをオートクレーブにより滅菌するステップと、
滅菌したバルクのエマルジョンの中に、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、少なくとも１種のホスフェート化合物、および／またはチオール基を含む少なくとも１種の作用物質、を添加するステップと、
を含む。
【００２２】
一実施形態では、バルクのエマルジョンのパーセンテージは、無菌組成物の総重量に対して重量で約６０％〜約９９％の範囲にあり、
油、乳化剤、増粘剤および／または浸透圧調整剤を含む、油相と、
粘度調整剤、ｐＨ緩衝剤および／または尿素を含む、水相と
を含み、
ホスホロチオエート溶液のパーセンテージは、無菌組成物の総重量に対して重量で約１％〜約４０％の範囲にあり、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、少なくとも１種のホスフェート化合物、および／またはチオール基を含む少なくとも１種の作用物質、を含む。
【００２３】
さらに本発明は、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドがＩＲＳ−１アンチセンスである、血管新生障害を治療するための上述の組成物、医薬組成物または医薬に関する。
【００２４】
さらに本発明は、
少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤を含む、バルクのエマルジョンと、
少なくとも１種のホスフェート化合物、および／またはチオール基を含む少なくとも１種の作用物質、を含む、ホスホロチオエート溶液と、
任意選択で、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドと、
を含む、キットに関する。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
定義
本発明では、以下の用語は、以下の意味を有する。
【００２６】
「眼用組成物」は、眼球および／もしくは結膜への投与、または結膜嚢への挿入、または後眼部への投与を目的とした、滅菌性の液体、半固体、または固体の製剤を表す。本明細書中使用される場合、用語「後眼部」は、前部硝子体膜およびその後ろの構造（硝子体液、網膜、脈絡膜、視神経）を含む、眼の後ろ２／３を表す。特に、眼用組成物は、たとえば硝子体内注射により、硝子体液へと局所投与または投与され得る。眼用組成物の例として、限定するものではないが、点眼薬、洗眼液、点眼薬用の散剤および洗眼液用の散剤、ならびに、結膜嚢または硝子体液に注射される組成物が挙げられる。
【００２７】
「点眼薬」は、眼への滴下を目的とした、１つ以上の有効物質の滅菌性の、水性または油性の液剤、乳剤、または懸濁剤を表す。本発明では、１つ以上の有効物質は、少なくとも１つのホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを含む。
【００２８】
「洗眼液」は、眼をすすぐかもしくは浸す際に使用すること、または眼用のドレッシング材（ｅｙｅ  ｄｒｅｓｓｉｎｇ）を含浸させることを目的とした、滅菌性の水性または油性の液剤を表す。
【００２９】
「オリゴヌクレオチド」は、一本鎖または二本鎖の、核酸分子、すなわち、リボ核酸および／またはデオキシリボ核酸のポリマーを表す（よって、核酸分子はＤＮＡ分子および／またはＲＮＡ分子であり得る）。一実施形態では、オリゴヌクレオチドの長さは、約５〜約２００ヌクレオチド、好ましくは約７〜１００ヌクレオチド、より好ましくは１０〜７０ヌクレオチド、さらにより好ましくは１２〜３０ヌクレオチドの範囲にある。
【００３０】
「ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド」は、ヌクレオチドのリン酸骨格上にある少なくとも１つの架橋していない酸素が、（天然のホスホジエステルヌクレオシド間結合の代わりに）ホスホロチオエートヌクレオシド間結合を形成するように、硫黄原子に置き換えられているオリゴヌクレオチドを表す。このような化学的な修飾は、オリゴヌクレオチドを、細胞内および細胞外の両方のヌクレアーゼによる分解から保護する。またホスホロチオエート結合は、オリゴヌクレオチドの細胞への取り込みを増大させることが報告されている。またこれらは、血清タンパク質に結合することにより、腎臓による排泄を遅らせることができる。
【００３１】
「脂肪酸」は、飽和型または不飽和型のいずれかであり、たとえば４〜３６個の炭素原子などの長い脂肪性の尾（鎖）を伴うカルボン酸を表す。
【００３２】
「チオール」は、−ＳＨ基を表す。
【００３３】
「ホスフェート化合物」は、少なくとも１つの−ＰＯ４部分を有する化学化合物を表す。
【００３４】
「薬学的に許容される賦形剤」は、動物、好ましくはヒトに投与される場合に、有害な反応、アレルギー反応、または他の望ましくない反応をもたらさない賦形剤を表す。これは、あらゆる溶媒、分散媒体、コーティング剤、抗細菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などを含む。ヒトへの投与では、製剤は、たとえばＦＤＡ局またはＥＭＡなどの規制局が要求する、滅菌性、発熱性、一般的な安全性、および純度の基準を満たすべきである。
【００３５】
数字に先行する「約」は、上記数字の値の±１０％を意味する。
【００３６】
「治療有効量」は、標的に有意な負の作用または有害な副作用を引き起こすことなく、（１）標的の疾患、障害、もしくは病態を遅延もしくは予防すること；（２）標的の疾患、障害、もしくは病態の１つ以上の症状の進行、憎悪、もしくは悪化を遅延もしくは停止させること；（３）標的の疾患、障害、もしくは病態の症状の回復をもたらすこと；（４）標的の疾患、障害、もしくは病態の重症度もしくは発生率を低減させること；または（５）標的の疾患、障害、もしくは病態を治癒することを目的とする、作用物質のレベルまたは量を意味する。治療有効量は、防止的または予防的な行為のため、標的の疾患、障害、または病態の発症より前に投与され得る。あるいはまたはさらに、治療有効量は、治療的な行為のため、標的の疾患、障害、または病態の発症より後に投与され得る。
【００３７】
「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、治療的な処置、および、防止的または予防的な手段の両方を表し、この目的は、標的の疾患、障害、または病態を予防または遅延（減弱）することである。治療が必要なものは、障害をすでに有するもの、および障害を有する傾向のあるもの、または障害を予防すべきものを含む。本発明に係る組成物の治療量を投与した後に、哺乳類の対象が、以下のうちの１つ以上の観察可能かつ／または測定可能な改善を示す場合、当該対象または哺乳類の疾患または病態の「治療」は成功している：病原性細胞の数の減少；病原性である総細胞数のパーセントの減少；ならびに／または、特定の疾患もしくは病態に関連する１つ以上の症状の、ある度合いまでの軽減；罹患率および死亡率の減少；ならびに／またはクオリティオブライフの問題の改善。成功した治療および疾患の改善を評価するための上記のパラメータは、医師によく知られた通例の手段により容易に測定可能である。
【００３８】
「対象」は、哺乳類、好ましくはヒトを表す。一実施形態では、対象は、「患者」、すなわち、医療の受診を待機しているか、または医療を受診しているか、または過去／現在／将来に医療の対象であった／ある／あり得るか、または疾患の発達に関してモニタリングされている、温血動物、より好ましくはヒトであってよい。
【００３９】
詳細な説明
本発明の目的の１つは、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドと、少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤と、を含む組成物であって、無菌であり、チオール基を含む少なくとも１種の作用物質および少なくとも１種のホスフェート化合物を含む、組成物である。
【００４０】
一実施形態では、本発明の組成物は、眼用組成物である。
【００４１】
本発明によると、本発明の組成物は、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドに対して安定性を提供する。いずれの理論に対しても拘束されるものではないが、本出願人らは、チオール基を含む作用物質の存在が、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの分解を防止し、ホスフェート化合物の存在が、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの構造上の立体構造を安定化することを提言している。特に、チオール基を含む作用物質の存在は、オリゴヌクレオチドを、オートクレーブのステップの間に脂肪酸および／または乳化剤から遊離した化学塩基により攻撃させないようにすることが可能である。
【００４２】
少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤を含む組成物の例としては、限定されるものではないが、ゲル、軟膏、ミセル、およびエマルジョンが挙げられる。
【００４３】
本発明の一実施形態では、少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤を含む組成物は、油中水型エマルジョン、水中油型エマルジョン、水中油中水型エマルジョン、またはいずれかの複数の相のエマルジョンなどの、エマルジョンである。好ましくは、少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤を含む組成物は、水中油中水型エマルジョン、すなわち、水相に分散された油滴の中にさらに水相を含む水中油型エマルジョンである。
【００４４】
一実施形態では、エマルジョンは、陽イオン性である。別の実施形態では、エマルジョンは陰イオン性である。
【００４５】
一実施形態では、本発明のエマルジョンは、水相と、水相中に分散した油相と、を含み、
水相のパーセンテージは、エマルジョンの総重量に対して重量で約７０〜約９９％、好ましくは約７５〜約８５重量％の範囲にあり、より好ましくは約８１．５重量％であり、
油相のパーセンテージは、エマルジョンの総重量に対して重量で約１〜約３０％、好ましくは約１０〜約２０重量％、または約１５〜約２５重量％の範囲にあり、より好ましくは約１８．５重量％である。
【００４６】
一実施形態では、本発明のエマルジョンは、水相と、水相中に分散した油相と、を含み、
水相のパーセンテージは、エマルジョンの総重量に対して重量で約７０〜約９９％、好ましくは約８０〜約９０重量％の範囲にあり、より好ましくは約８６．５重量％であり、
油相のパーセンテージは、エマルジョンの総重量に対して重量で約１〜約３０％、好ましくは約１０〜約２０重量％の範囲にあり、より好ましくは約１３．５重量％である。
【００４７】
本発明の一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、エマルジョンの水相に存在している。一実施形態では、エマルジョンは、水中油中水型エマルジョンであり、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、油滴を囲む水相と油滴の中の水相との両方に存在する。
【００４８】
本発明の一実施形態では、チオール基を含む少なくとも１種の作用物質は、エマルジョンの水相に存在している。一実施形態では、エマルジョンは、水中油中水型エマルジョンであり、チオール基を含む少なくとも１種の作用物質は、油滴を囲む水相と油滴の中の水相との両方に存在する。
【００４９】
本発明の一実施形態では、少なくとも１種のホスフェート化合物は、エマルジョンの水相に存在している。一実施形態では、エマルジョンは、水中油中水型エマルジョンであり、少なくとも１種のホスフェート化合物は、油滴を囲む水相と油滴の中の水相との両方に存在する。
【００５０】
一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、治療上の目的のために使用され得る、活性のあるオリゴヌクレオチドである。
【００５１】
一実施形態では、少なくとも１つ（たとえば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個、またはそれ以上）の、本発明のオリゴヌクレオチドのホスホジエステル結合は、ホスホロチオエート結合に置き換えられている。別の実施形態では、本発明のオリゴヌクレオチドの５’の第１のホスホジエステル結合および３’の第１のホスホジエステル結合が、ホスホロチオエート結合に置き換えられている。好ましくは、本発明のオリゴヌクレオチドの全てのホスホジエステル結合が、ホスホロチオエート結合に置き換えられている。
【００５２】
ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの例としては、限定されるものではないが、アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、ｓｈＲＮＡ（ｓｍａｌｌ  ｈａｉｒｐｉｎ  ＲＮＡ：小ヘアピンＲＮＡ）、リボザイム、アプタマー、分子のデコイ、およびＲＮＡ−ＤＮＡハイブリッド分子が挙げられる。
【００５３】
アンチセンスオリゴヌクレオチドは、一般に、ワトソン−クリックの塩基対形成の性質により特定のＲＮＡ標的に対する自身のハイブリダイゼーションを介して遺伝子発現を調節するために、使用される。特に、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、特定のｍＲＮＡ標的に結合し、ＲＮＡ／ＤＮＡハイブリッドのＲＮＡ鎖を加水分解する、広範囲に存在する酵素であるＲＮａｓｅ  Ｈの動員を介して、その分解を誘導し得る。あるいは、一部のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、そのＲＮＡ標的に対する細胞機構のアクセスを阻害するため、「立体遮断剤（ｓｔｅｒｉｃ  ｂｌｏｃｋｅｒ）」として作用する。
【００５４】
ｓｉＲＮＡおよびｓｈＲＮＡの両方は、ＲＮＡ干渉として知られている遺伝子サイレンシング機構を介して遺伝子発現を調節することができ、ここで、ｓｍａｌｌ  ＲＮＡの二本鎖は、ＲＮＡ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ  ｃｏｍｐｌｅｘ（ＲＩＳＣ）と結合して、特定の標的のｍＲＮＡに対するＲＩＳＣを導く。ｓｉＲＮＡは、細胞に直接送達される小さな二本鎖のＲＮＡ分子であり、ｓｈＲＮＡは、通常、プラスミドまたはベクターを介して細胞に送達され、細胞の中でさらに処置される、タイトなヘアピンターンを有する人工的なＲＮＡ分子である。
【００５５】
リボザイムは、特定の生化学反応を触媒できるＲＮＡ分子である。人工的なリボザイムが、たとえば特定のウイルスのＲＮＡを標的とするように、設計されてきた。
【００５６】
アプタマーは、ワトソン−クリックの塩基対形成以外の機構を介した、小分子、タンパク質、核酸、さらには細胞および組織などの様々な分子標的に特異的に結合する、短い一本鎖の合成オリゴヌクレオチドである。これらは、基本的に、抗体の化学的等価物である。
【００５７】
分子のデコイは、天然の核酸と競合して調節タンパク質の作用を減弱するために使用できる、転写因子などの調節タンパク質に対して高い親和性のある、短い二本鎖の合成ポリヌクレオチドである。
【００５８】
ＲＮＡ−ＤＮＡハイブリッド分子は、キメラのオリゴヌクレオチド（キメラ）としても知られており、植物および動物のゲノムにおける単一の塩基を変更または修復することが示されている。
【００５９】
本発明の一実施形態では、生理活性のあるホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、ホスホロチオエートアンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【００６０】
本発明の一実施形態では、ホスホロチオエートアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＩＲＳ−１（インスリン受容体基質−１）の発現を阻害する。
【００６１】
本発明の一実施形態では、ＩＲＳ−１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、少なくとも１２ヌクレオチドの配列、好ましくは、配列番号１：
５’−ＴＡＧＴＡＣＴＣＧＡＧＧＣＧＣＧＣＣＧＧＧＣＣＣＣＣＡＧＣＣＴＣＧＣＴＧＧＣＣＧＣＧＣＧＣＡＧＴＡＣＧＡＡＧＡＡＧＣＧＴＴＴＧＴＧＣＡＴＧＣＴＣＴＴＧＧＧＴＴＴＧＣＧＣＡＧＧＴＡＧＣＣＣＡＣＣＴＴＧＣＧＣＡＣＧＴＣＣＧＡＧＡＡＧＣＣＡＴＣＧＣＴＣＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＣＡＣＣＧ−３’
のうちの少なくとも１２個の連続したオリゴヌクレオチドである。
【００６２】
本発明の一実施形態では、ＩＲＳ−１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、配列番号１のうちの少なくとも１２個の連続したヌクレオチド、好ましくは配列番号１のうちの少なくとも１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０個の連続したヌクレオチドを含むまたはからなる配列である。
【００６３】
本発明の一実施形態では、ＩＲＳ−１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、配列番号１のうちの少なくとも１２個の連続したヌクレオチド、好ましくは配列番号１のうちの少なくとも１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０個の連続したヌクレオチドと、３’および／または５’における１、２、３、４、または５個の追加的なヌクレオチドとを含むまたはからなる配列である。
【００６４】
本発明の一実施形態では、ＩＲＳ−１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＧＳ−１０１である。本発明では、ＧＳ−１０１は、配列番号２の配列（５’−ＴＣＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’）を有するアンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【００６５】
一実施形態では、ＩＲＳ−１アンチセンスオリゴヌクレオチドは、配列番号２の機能を保存した配列であって、上記機能を保存した配列は、配列番号２と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または約９５％超、９６％超、９７％超、９８％超、９９％超の同一性を有し、配列番号２としてのＩＲＳ−１の発現を阻害する性質を保存する、９〜５０ヌクレオチド、１２〜４５ヌクレオチド、１５〜４０ヌクレオチド、２０〜３５ヌクレオチド、または２５〜３０ヌクレオチドを含む。
【００６６】
一実施形態では、配列番号２の機能を保存した配列は、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０ヌクレオチドを含む。
【００６７】
用語「同一性」または「同一な」は、２つ以上のヌクレオチド配列の間の関係に使用される場合、２つ以上の塩基の文字列（ｓｔｒｉｎｇ）の間の一致数により決定される、ヌクレオチド配列間の配列の関係性の度合いを表す。「同一性」は、特定の数学モデルまたはコンピュータプログラム（すなわち「アルゴリズム」）により提示されるギャップアライメントを伴う（存在する場合）、２つ以上の配列のうちの小さな方に合わせた配列間の同一である一致のパーセントを測定する。関連するヌクレオチド配列の同一性は、既知の方法により容易に計算することができる。このような方法として、限定するものではないが、Ａｒｔｈｕｒ  Ｍ．  Ｌｅｓｋ，  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：  Ｓｏｕｒｃｅｓ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  （Ｎｅｗ−Ｙｏｒｋ：  Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，  １９８８）；Ｄｏｕｇｌａｓ  Ｗ．  Ｓｍｉｔｈ，  Ｂｉｏｃｏｍｐｕｔｉｎｇ：  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｐｒｏｊｅｃｔｓ  （Ｎｅｗ−Ｙｏｒｋ：  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，  １９９３）；Ｈｕｇｈ  Ｇ．  Ｇｒｉｆｆｉｎ  ａｎｄ  Ａｎｎｅｔｔｅ  Ｍ．  Ｇｒｉｆｆｉｎ，  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｄａｔａ，  Ｐａｒｔ  １  （Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ：  Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，  １９９４）；Ｇｕｎｎａｒ  ｖｏｎ  Ｈｅｉｎｊｅ，  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ：  Ｔｒｅａｓｕｒｅ  Ｔｒｏｖｅ  ｏｒ  Ｔｒｉｖｉａｌ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  （Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，  １９８７）；Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｇｒｉｂｓｋｏｖ  ａｎｄ  Ｊｏｈｎ  Ｄｅｖｅｒｅｕｘ，  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｐｒｉｍｅｒ  （Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：  Ｍ．  Ｓｔｏｃｋｔｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，  １９９１）；およびＣａｒｉｌｌｏ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８８．  ＳＩＡＭ  Ｊ．  Ａｐｐｌ．  Ｍａｔｈ．  ４８（５）：１０７３−１０８２に記載されるものが挙げられる。同一性を決定するための好ましい方法は、試験される配列間で最も多くの一致を提供するように設計される。同一性を決定するための方法は、公的に入手可能なコンピュータプログラムで記載されている。２つの配列間の同一性を決定するための好ましいコンピュータプログラム方法として、ＧＡＰ（Ｄｅｖｅｒｅｕｘ  ｅｔ  ａｌ．，  １９８４．  Ｎｕｃｌ．  Ａｃｉｄ．  Ｒｅｓ．  １２（１  Ｐｔ  １）：３８７−３９５；Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｅｎｔｅｒ，  Ｍａｄｉｓｏｎ，  ＷＩ）、ＢＬＡＳＴＰ、ＢＬＡＳＴＮ、ＴＢＬＡＳＴＮ、およびＦＡＳＴＡ（Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９０．  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２１５（３）：４０３−４１０）を含む、ＧＣＧプログラムパッケージが挙げられる。ＢＬＡＳＴＸプログラムは、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）および他の供給源（ＢＬＡＳＴ  Ｍａｎｕａｌ，  Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．  ＮＣＢ／ＮＬＭ／ＮＩＨ  Ｂｅｔｈｅｓｄａ，  Ｍｄ．  ２０８９４；Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９０．  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２１５（３）：４０３−４１０）から公的に入手可能である。よく知られているＳｍｉｔｈ  Ｗａｔｅｒｍａｎアルゴリズムも、同一性を決定するために使用され得る。
【００６８】
配列番号２の機能を保存した配列の例として、配列番号３（５’−ＴＡＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’）がある。
【００６９】
配列番号２の機能を保存した配列の他の例として、限定するものではないが、以下の配列：
５’−ＴＣＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣ−３’（配列番号４）；
５’−ＴＣＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧ−３’（配列番号５）；
５’−ＴＣＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴ−３’（配列番号６）；
５’−ＴＣＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣ−３’（配列番号７）；
５’−ＴＣＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧ−３’（配列番号８）；
５’−ＴＣＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴ−３’（配列番号９）；
５’−ＣＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’（配列番号１０）；
５’−ＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’（配列番号１１）；
５’−ＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’（配列番号１２）；
５’−ＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’（配列番号１３）；
５’−ＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’（配列番号１４）；
５’−ＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’（配列番号１５）；
５’−ＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’（配列番号１６）；
５’−ＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’（配列番号１７）；
５’−ＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’（配列番号１８）；
５’−ＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’（配列番号１９）；
５’−ＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’（配列番号２０）；
５’−ＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’（配列番号２１）；
５’−ＴＡＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣ−３’（配列番号２２）；
５’−ＴＡＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧ−３’（配列番号２３）；
５’−ＴＡＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴ−３’（配列番号２４）；
５’−ＴＡＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣ−３’（配列番号２５）；
５’−ＴＡＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧ−３’（配列番号２６）；
５’−ＴＡＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴ−３’（配列番号２７）；
５’−ＡＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’（配列番号２８）
が、挙げられる。
【００７０】
本発明の一実施形態では、２５、３０、３５、４０、４５、または５０ヌクレオチドである、上記配列番号２の機能を保存した配列は、Ｃ末端およびＮ末端の他の配列の間に配列番号２または配列番号３を含む配列であり得る。上記機能を保存した配列はまた、配列番号２または配列番号３のうちの９〜１２個の連続したヌクレオチドフラグメントであり得る。
【００７１】
本発明の一実施形態では、上記配列番号２の機能を保存した配列は、配列番号２１を含む核酸配列である。一実施形態では、上記配列番号２の機能を保存した配列は、配列番号２１を含む、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、３０、３５、４０、４５、または５０ヌクレオチドの核酸配列である。
【００７２】
本発明のホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、たとえば本明細書中上述したＩＲＳ−１の阻害剤は、当業者によく知られている全ての方法、たとえば化学合成により、合成され得る。
【００７３】
一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、コンジュゲートされていない。好ましくは、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、脂質（たとえば脂肪酸など）、炭水化物、別の核酸、ペプチドにコンジュゲートされていない。一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、たとえば層状化された無機水酸化物のナノハイブリッドなどの、ナノマテリアルの一部ではない。
【００７４】
一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、たとえば、本明細書中上述したアンチセンスオリゴヌクレオチドは、少なくとも１つの脂肪酸にコンジュゲートされていない。
【００７５】
一実施形態では、本発明のホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、たとえばろ過、好ましくは約０．２〜約０．８μｍ、好ましくは約０．４〜約０．５μｍの範囲の大きさを有するフィルタを使用するろ過、より好ましくは０．４５μｍのフィルタを介したろ過などにより、滅菌され得る。
【００７６】
一実施形態では、本発明の組成物は、本組成物の総重量に対して重量で約０．０１％〜約３％、好ましくは０．０４〜約２重量％の範囲であり、より好ましくは約１．７２重量％である量の、少なくとも１つのホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを含む。
【００７７】
一実施形態では、本発明の組成物は、本組成物の総重量に対して重量で約０．０１％〜約３％、好ましくは約０．０４〜約２重量％の範囲にあり、より好ましくは約０．０８６重量％である量の、少なくとも１つのホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを含む。
【００７８】
別の実施形態では、本発明の組成物は、エマルジョンであり、エマルジョンの水相の総重量に対して重量で約０．０１％〜約３％、好ましくは約０．０４〜約２．５重量％の範囲であり、より好ましくは約２．１１重量％である量の、少なくとも１つのホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを含む。
【００７９】
一実施形態では、本発明の組成物は、約０．４０ｍｇ／ｍＬ〜約１．７５、好ましくは約０．５０ｍｇ／ｍＬ〜約１．７５ｍｇ／ｍＬ、より好ましくは約０．６０ｍｇ／ｍＬ〜約１．５ｍｇ／ｍＬのホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、好ましくは本明細書中上述したＩＲＳ−１アンチセンスを含む。
【００８０】
別の実施形態では、本発明の組成物は、約０．７０ｍｇ／ｍＬ〜約１．２５ｍｇ／ｍＬのホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、好ましくは本明細書中上述したＩＲＳ−１アンチセンスを含む。
【００８１】
別の実施形態では、本発明の組成物は、約０．８０ｍｇ／ｍＬ〜約１ｍｇ／ｍＬ、好ましくは約０．８０ｍｇ／ｍＬ〜約０．９０ｍｇ／ｍＬのホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、好ましくは本明細書中上述したＩＲＳ−１アンチセンスを含む。
【００８２】
一実施形態では、本発明の組成物は、約０．４０ｍｇ／ｍＬ〜約０．５０ｍｇ／ｍＬ、好ましくは約０．４３ｍｇ／ｍＬのホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、好ましくは本明細書中上述したＩＲＳ−１アンチセンスを含む。
【００８３】
別の実施形態では、本発明の組成物は、約０．８０ｍｇ／ｍＬ〜約０．９０ｍｇ／ｍＬ、好ましくは約０．８６ｍｇ／ｍＬのホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、好ましくは本明細書中上述したＩＲＳ−１アンチセンスを含む。
【００８４】
別の実施形態では、本発明の組成物は、約１．６０ｍｇ／ｍＬ〜約１．８０ｍｇ／ｍＬ、好ましくは約１．７０ｍｇ／ｍＬのホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、好ましくは本明細書中上述したＩＲＳ−１アンチセンスを含む。
【００８５】
本発明の一実施形態では、本発明の組成物は、少なくとも１種の脂肪酸を含む。
【００８６】
脂肪酸の例としては、限定されるものではないが、
（１）飽和脂肪酸：Ｃ＝Ｃ部分を有さず、限定するものではないが、以下を含む：ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ベヘン酸、リグノセリン酸；ならびに
（２）不飽和脂肪酸：限定するものではないが、以下を含む：１つのＣ＝Ｃ基を有するモノ不飽和脂肪酸、たとえばパルミトレイン酸、オレイン酸、およびネルボン酸；２つのＣ＝Ｃ基を有するジ不飽和脂肪酸、たとえばリノール酸；３つのＣ＝Ｃ基を有するトリ不飽和脂肪酸、たとえば［α］−リノレン酸および［γ］−リノレン酸；４つのＣ＝Ｃ基を有するテトラ不飽和脂肪酸、たとえばアラキドン酸；および５つのＣ＝Ｃ基を有するペンタ不飽和脂肪酸、たとえばエイコサペンタエン酸
が、挙げられる。
【００８７】
使用され得る脂肪酸の他の例として、限定するものではないが、ラウリン酸；１４個の炭素の脂肪酸、たとえばミリスチン酸；１６個の炭素の脂肪酸、たとえばパルミチン酸およびパルミトレイン酸；１８個の炭素の脂肪酸、たとえばステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、［α］−リノレン酸、および［γ］−リノレン酸；２０個の炭素の脂肪酸、たとえばエイコサペンタエン酸；２２個の炭素の脂肪酸、たとえばアラキジン酸；および２４個の炭素の脂肪酸、たとえばリグノセリン酸およびネルボン酸が、挙げられる。
【００８８】
一実施形態では、本発明の組成物はエマルジョンであり、少なくとも１種の脂肪酸が、エマルジョンの油相に含まれている。
【００８９】
一実施形態では、本発明の組成物は、植物油、たとえばヒマシ油、オリーブ油、ダイズ油、ゴマ油、綿実油、スイートアーモンド油、落花生油（ａｒａｃｈｉｓ  ｏｉｌ）；トリグリセリド、たとえば半合成油（中鎖脂肪酸トリグリセリド（ＭＣＴ）または長鎖脂肪酸トリグリセリド（ＬＣＴ））など；モノグリセリド；ジグリセリド；油状の脂肪酸；ミリスチン酸イソプロピル；油状の脂肪アルコール；ソルビトールおよび脂肪酸のエステル、油状のスクロースエステル、または鉱油、たとえば流動パラフィンまたはワセリン；ならびに、一般に生理的に忍容されているいずれかの油状の物質およびそれらの混合物であり得る、少なくとも１種の油を含む。
【００９０】
一実施形態では、本発明の組成物はエマルジョンであり、このエマルジョンの油相は、ＭＣＴ、すなわち、炭水化物鎖が約８〜１２個の炭素原子を有するトリグリセリド油を含む。本発明のエマルジョンに使用され得るＭＣＴ油の例として、Ｍｉｇｌｙｏｌ  ８１２（商標）（たとえばＤｙｎａｍｉｔ  Ｎｏｖｅｌ（スウェーデン）により供給）がある。Ｍｉｇｌｙｏｌ  ８１２（商標）は、約２重量％以下のカプロン酸（Ｃ６：０）、約５０〜約６５重量％のカプリル酸（Ｃ８：０）、約３０〜約４５重量％のカプリン酸（Ｃ１０：０）、約２重量％以下のラウリン酸（Ｃ１２：０）、および約１重量％以下のミリスチン酸を含む、分取したＣ８およびＣ１０の植物性脂肪酸のトリグリセリドの混合物である。
【００９１】
本発明の一実施形態では、本組成物、好ましくはエマルジョンにおける油の量は、本組成物の総重量に対して重量で約１〜約２０％、好ましくは約５〜約１０重量％の範囲にあり、より好ましくは、約８重量％である。
【００９２】
本発明の一実施形態では、エマルジョンにおける油の量は、エマルジョンの油相の総重量に対して重量で約２５〜約７５％、好ましくは約３５〜約５０重量％の範囲にあり、より好ましくは約４３．２重量％である。
【００９３】
本発明の一実施形態では、本発明の組成物は、少なくとも１種の乳化剤を含む。
【００９４】
好ましくは、本発明の組成物が少なくとも１種の乳化剤を含む場合、本組成物はエマルジョンである。本明細書中使用される場合、用語「乳化剤」は、界面活性剤と互換可能に使用され得る。
【００９５】
一実施形態では、乳化剤は、水相および／または油相にある。
【００９６】
界面活性剤は、賦形剤もしくは有効な作用物質の溶解、組成物への固体もしくは液体の分散、湿潤の亢進、液滴の大きさの修正、または多くの他の目的を支援するために使用され得る。
【００９７】
有用な界面活性剤の例として、限定するものではないが、以下のクラスの界面活性剤：アルコール；酸化アミン；ブロックポリマー；カルボキシル化アルコールまたはアルキルフェノールエトキシレート；カルボン酸／脂肪酸；エトキシル化アルコール；エトキシル化アルキルフェノール；エトキシル化アリールフェノール；エトキシル化脂肪酸；エトキシル化脂肪酸エステルまたは油（動物由来および植物由来）；脂肪酸エステル；脂肪酸メチルエステルエトキシレート；グリセロールエステル；グリコールエステル；ラノリンベースの誘導体；レシチンおよびレシチン誘導体；リグニンおよびリグニン誘導体；メチルエステル；モノグリセリドおよび誘導体；ポリエチレングリコール；ポリマー状の界面活性剤；プロポキシル化およびエトキシル化の脂肪酸、アルコール、またはアルキルフェノール；タンパク質ベースの界面活性剤；サルコシン誘導体；ソルビタン誘導体；スクロースエステルおよびグルコースエステル、および誘導体が、挙げられる。
【００９８】
一実施形態では、界面活性剤は、エトキシレートの界面活性剤である。エトキシレートの界面活性剤は、部分−Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−ＯＨ（式中ｎは少なくとも約１である）を含む界面活性剤である。
【００９９】
一実施形態では、ｎは、約１〜約１０，０００、好ましくは１〜約１０００、より好ましくは約１〜約５００の範囲にある。
【０１００】
一部のエトキシレートは、１つのエトキシレート部分を含む。言い換えると、各分子に１つのエトキシレート鎖が存在する。１つのエトキシレート部分を含む界面活性剤の例として、限定するものではないが、アルコールが単一のヒドロキシル単位を有するエトキシル化アルコール；アルキルフェノールエトキシレート；エトキシル化脂肪酸；脂肪酸メチルエステルエトキシレート；ポリエチレングリコールなどが、挙げられる。
【０１０１】
エトキシル化アルコールの例として、限定するものではないが、以下が挙げられる：
約６〜約２０個の炭素原子、好ましくは約１０〜約１６個の炭素原子を有する直鎖状アルコールのエトキシレート。別の実施形態では、ｎは、約１〜約１００、好ましくは約１〜約５０の範囲にあり、たとえば、約５〜約５０個のエチレンオキシドの単位、または約１〜約２０個のエチレンオキシドの単位、または約３０〜約５０個のエチレンオキシドの単位の範囲にある；
エトキシル化、すなわち、フェノール性ＯＨが、エトキシレート部分で置き換えられているアルキルフェノールである、エトキシル化アルキルフェノール。これらは、限定するものではないが、オクチルフェノールエトキシレート、すなわちＣ８Ｈ１７Ｐｈ（ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＨ；ノニルフェノールエトキシレート、すなわちＣ９Ｈ１９Ｐｈ（ＯＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＨ；上記の式（式中ｎが約１〜約１００である）アルキルフェノールを含む；
エトキシル化脂肪酸、限定するものではないが、以下を含む：モノエステル、すなわちＲＣＯ２（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＯＨ（式中ＲＣＯ２Ｈが脂肪酸である）またはジエステル、すなわちＲＣＯ２（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＣ（＝Ｏ）Ｒのいずれかを形成するようにエステル化されたエトキシレート。
【０１０２】
エトキシレートは、２つ以上のエトキシレート部分を含み得る。言い換えると、分子のいくつかの異なる部分に結合したエトキシレート部分が存在し得る。例として、限定するものではないが、ブロックポリマー；エトキシル化油；ソルビタン誘導体；スクロースエトキシレートおよびグルコースエトキシレートなどが挙げられる。
【０１０３】
ブロックポリマーは、構造Ａ−Ｂ−Ａ’（式中ＡおよびＡ’は、１つ以上のエチレン単位のポリエチレン鎖であり、Ｂは、１つ以上のプロピレン単位のポリプロピレン鎖である）を有するポリマーである。一般的に、必ずしも必要ではないが、ＡおよびＡ’は、ほぼ同じ長さである。
【０１０４】
一実施形態では、ＡおよびＡ’は、約２〜約２００個のエチレンの単位、好ましくは約５〜約１００個のエチレンの単位、好ましくは約７〜約１５個のエチレンの単位、より好ましくは、約７、約８、または約１２個のエチレンの単位を含む。別の実施形態では、Ｂは、約２５〜約１００個のプロピレンの単位、好ましくは約３０〜約５５個のプロピレンの単位、より好ましくは約３０、約３４、または約５４個のプロピレンの単位を含む。別の実施形態では、ブロックポリマーの分子量は、約１０００ｇ／ｍｏｌ〜約２００００ｇ／ｍｏｌ、好ましくは約２０００ｇ／ｍｏｌ〜約１００００ｇ／ｍｏｌ、好ましくは約２５００ｇ／ｍｏｌ、約３０００ｇ／ｍｏｌ、約３８００ｇ／ｍｏｌ、または約８４００ｇ／ｍｏｌである。
【０１０５】
ブロックポリマーの例として、限定するものではないが、以下が挙げられる：
ポロキサレン：Ａが、約１２個のエチレンオキシドの単位を有し、Ｂが、約３４個のプロピレンオキシドの単位を有し、Ａ’が、約１２個のエチレンオキシドの単位を有し、平均分子量が、約３０００ｇ／ｍｏｌである；
ポロクサマー１８２：Ａが、約８個のエチレンオキシドの単位を有し、Ｂが、約３０個のプロピレンオキシドの単位を有し、Ａ’が、約８個のエチレンオキシドの単位を有し、平均分子量が、約２５００ｇ／ｍｏｌである；
ポロクサマー１８８：Ａが、約７５個のエチレンオキシドの単位を有し、Ｂが、約３０個のプロピレンオキシドの単位を有し、Ａ’が、約７５個のエチレンオキシドの単位を有し、平均分子量が、約８４００ｇ／ｍｏｌである；
ポロクサマー３３１：Ａが、約７個のエチレンオキシドの単位を有し、Ｂが、約５４個のプロピレンオキシドの単位を有し、Ａ’が、約７個のエチレンオキシドの単位を有し、平均分子量が、約３８００ｇ／ｍｏｌである。
【０１０６】
エトキシル化した脂肪酸エステルまたは油（動物由来および植物由来）は、脂肪酸エステルまたは油とエチレンオキシドを反応させることからもたらされる生成物である。脂肪油を使用する場合、生成物は、油に存在する脂肪酸のエトキシレート、グリセリンのエトキシレート、モノグリセリドおよびジグリセリドのエトキシレートなどの混合物である。具体的な例として、限定するものではないが、以下の油：アニス油、ヒマシ油、チョウジ油、カシア油、シナモン油、アーモンド油、トウモロコシ油、落花生油、綿実油、ベニバナ油、コーン油、アマニ油、ナタネ油、ダイズ油、オリーブ油、カラウエイ油、ローズマリー油、ピーナッツ油、ペパーミント油、ヒマワリ油、ユーカリ油、およびゴマ油、コリアンダー油、ラベンダー油、シトロネラ油、ジュニパー油、レモン油、オレンジ油、クラリセージ油、ナツメグ油、ティーツリー油、ココナッツ油、獣脂油、ならびにラードのエトキシレートが挙げられる。一実施形態では、油のトリグリセリド１モルあたり、１〜約５０モルのエチレンオキシドが、使用される。別の実施形態では、油のトリグリセリド１モルあたり約３０〜約４０モルのエチレンオキシドが使用される。
【０１０７】
またエチレンオキシドは、式ＲＣＯ２Ｒ’を有する脂肪酸エステルと反応してＲＣＯ２（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＲ’を形成し得る。よって、式ＲＣＯ２（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＲ’（式中ＲＣＯ２Ｈは脂肪酸であり、Ｒ’は１〜６個の炭素を有するアルキルである）を有する界面活性剤が、企図されている。
【０１０８】
一実施形態では、界面活性剤は、脂肪酸メチルエステルエトキシレート（式中Ｒ’はメチルである）である。
【０１０９】
ＲＣＯ２Ｈの他の例として、限定するものではないが、ラウリン酸；１４個の炭素の脂肪酸、たとえばミリスチン酸；１６個の炭素の脂肪酸、たとえばパルミチン酸およびパルミトレイン酸；１８個の炭素の脂肪酸、たとえばステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、［α］−リノレン酸および［γ］−リノレン酸；２０個の炭素の脂肪酸、たとえばエイコサペンタエン酸；２２個の炭素の脂肪酸、たとえばアラキジン酸；または２４個の炭素の脂肪酸、たとえばリグノセリン酸およびネルボン酸が挙げられる。
【０１１０】
一実施形態では、界面活性剤は、ポリエチレングリコールである。ポリエチレングリコールは、不飽和型であるか、または両方の末端が酸素で終結しているエトキシレート、すなわちＨＯ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＨである。
【０１１１】
一実施形態では、界面活性剤は、ソルビタン誘導体である。ソルビタン誘導体は、エトキシル化鎖のうちの１つ以上をキャッピングした脂肪酸を有するエトキシル化ソルベートである。これらは、限定するものではないが、（Ａ）エチレンオキシドの単位の総数が３〜３０であるソルビタン誘導体；（Ｂ）エチレンオキシドの単位の総数が４、５、または２０であるソルビタン誘導体；（Ｃ）キャッピングした酸部分が、ラウラート、パルミタート、ステアラート、またはオレアートである、ソルビタン誘導体を含む。
【０１１２】
ソルビタン誘導体は、ポリオキシエチレン（ＰＯＥ）ソルビタンモノラウラート、ＰＯＥソルビタンジラウラート、ＰＯＥソルビタントリラウラート、ＰＯＥソルビタンモノパルミタート、ＰＯＥソルビタンジパルミタート、ＰＯＥソルビタントリパルミタート、ＰＯＥソルビタンモノステアラート、ＰＯＥソルビタンジステアラート、ＰＯＥソルビタントリステアラート、ＰＯＥソルビタンモノオレアート、ＰＯＥソルビタンジオレアート、および／またはＰＯＥソルビタントリオレアートであり得る。
【０１１３】
特定の例として、限定するものではないが、ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノラウラート、ＰＯＥ（４）ソルビタンモノラウラート、ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノパルミタート、ＰＯＥ（２０）モノステアラート、ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノステアラート、ＰＯＥ（４）ソルビタンモノステアラート、ＰＯＥ（２０）ソルビタントリステアラート、ＰＯＥ（２０）ソルビタンモノオレアート、ＰＯＥ（２０）ソルビタン１５モノオレアート、ＰＯＥ（５）ソルビタン１０モノオレアート、および／またはＰＯＥ（２０）ソルビタントリオレアートが挙げられる。
【０１１４】
一実施形態では、界面活性剤は、スクロースもしくはグルコースのエステル、またはそれらの誘導体である。スクロースエステルおよびグルコースエステルならびに誘導体として、限定するものではないが、ポリビニルアルコール、ポビドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポロクサマー、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、およびアクリラート（たとえば、Ｐｅｍｕｌｅｎ（Ｒ））が挙げられる。
【０１１５】
適切な乳化剤の他の例として、限定するものではないが、天然に存在するガム、たとえばアカシアガムまたはトラガントガム；天然に存在するホスファチド、たとえばダイズレシチン、ならびに脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来するエステルまたは部分的なエステル、たとえばソルビタンモノオレアート、および上記エチレンオキシドと部分的なエステルの縮合生成物、たとえばポリオキシエチレンソルビタンモノオレアート；ソルビタンエステル、たとえばソルビタンステアラート、ソルビタンモノラウラート、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレアート、およびソルビタンモノパルミタート；ベントナイト；グリセリンモノステアラート；グリセリルモノオレアート、およびプロピレングリコールモノラウラートまたはそれらの混合物；グリセリルステアラート；ポロクサマー１８８；ポロクサマー２８２；ポロクサマー４０７；チロキサポール；ビタミンＥ  Ｄ−ポリエチレングリコールスクシナート；ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）（たとえばＰＥＧ  ７５など）；セトステアリルアルコール；コレステロール；エチレングリコールパルミトステアラート；ラウリン酸；ミリスチン酸；ミリスチルアルコール；リノール酸；オレイン酸；パルミチン酸；ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ  ２０）、ソルビタントリオレアート（Ｓｐａｎ  ８５）、リン脂質、たとえばタマゴのレシチン  ステアリン酸オレイルアルコール；ならびにそれらの混合物が、挙げられる。
【０１１６】
一実施形態では、本発明の組成物は、エマルジョンであり、乳化剤が、油相に含まれている。一実施形態では、本発明のエマルジョンは、乳化剤としてのグリセリルステアラートおよびＰＥＧ７５を含む。グリセリルステアラートおよびＰＥＧ７５の混合物は、Ｇｅｌｏｔ  ６４（登録商標）として、市販されている。
【０１１７】
一実施形態では、エマルジョンにおける乳化剤の量は、エマルジョンの総重量に対して重量で約１％〜約１０％、好ましくは約２．５〜約５重量％の範囲にあり、より好ましくは約３．５重量％である。
【０１１８】
一実施形態では、エマルジョンにおける乳化剤の量は、エマルジョンの油相の総重量に対して重量で約５％〜約４０％、好ましくは約１０〜約３０重量％の範囲にあり、より好ましくは１８．９重量％である。
【０１１９】
一実施形態では、本発明の組成物は、さらに増粘剤を含む。
【０１２０】
適切な増粘剤の例として、限定するものではないが、ミツロウ、固形パラフィンおよびセチルアルコールが挙げられる。好適には、上記増粘剤は、セチルアルコールである。
【０１２１】
一実施形態では、本発明の組成物はエマルジョンであり、増粘剤が、エマルジョンの油相に含まれている。
【０１２２】
一実施形態では、本組成物、好ましくはエマルジョンにおける増粘剤の量は、本組成物の総重量に対して重量で約０．１％〜約１０％、好ましくは約０．５〜約５重量％の範囲にあり、より好ましくは約２重量％である。
【０１２３】
一実施形態では、エマルジョンにおける増粘剤の量は、エマルジョンの油相の総重量に対して重量で約１％〜約３０％、好ましくは約５〜約２０重量％の範囲にあり、より好ましくは約１０．８重量％である。
【０１２４】
一実施形態では、本発明の組成物は、さらに浸透圧調整剤を含む。
【０１２５】
適切な浸透圧調整剤の例として、限定するものではないが、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＣａＣｌ２、グリセロール、マンニトール、α−トレハロース、およびプロピレングリコールが挙げられる。
【０１２６】
一実施形態では、本発明の組成物はエマルジョンであり、浸透圧調整剤は、好適にはエマルジョンの油相に含まれている。エマルジョンの油相に存在する適切な浸透圧調整剤の例として、グリセロールがある。
【０１２７】
本発明の一実施形態では、本組成物、好ましくはエマルジョンにおける浸透圧調整剤の量は、本組成物の総重量に対して重量で約０．５％〜約２５％、好ましくは約１〜約１０重量％の範囲にあり、より好ましくは約５重量％である。
【０１２８】
本発明の一実施形態では、エマルジョンにおける浸透圧調整剤の量は、エマルジョンの油相の総重量に対して重量で約１０％〜約４５％、好ましくは約２０〜約３５重量％の範囲にあり、より好ましくは約２７重量％である。
【０１２９】
本発明の組成物は、さらにチオール基を含む少なくとも１種の作用物質を含む。
【０１３０】
一実施形態では、チオール基を含む少なくとも１種の作用物質は、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドではない。
【０１３１】
チオール基を含む作用物質の例として、限定するものではないが、リポ酸、ＤＬ−システイン、Ｎ−アセチルシステイン、クレアチニン、グルタチオン、２−メルカプト−５−ベンズイミダゾール塩、２−メルカプトエタンスルホン酸塩、エデト酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、および亜硫酸ナトリウムが挙げられる。好ましくは、チオール基を含む少なくとも１つの作用物質は、ＤＬ−システイン、Ｎ−アセチルシステイン、およびリポ酸を含む群から選択される。
【０１３２】
一実施形態では、チオール基を含む作用物質は、リポ酸、ＤＬ−システイン、Ｎ−アセチルシステイン、クレアチニン、グルタチオン、２−メルカプト−５−ベンズイミダゾール塩、２−メルカプトエタンスルホン酸塩から選択される。好ましくは、チオール基を含む少なくとも１つの作用物質は、ＤＬ−システイン、Ｎ−アセチルシステイン、およびリポ酸を含む群から選択される。
【０１３３】
好ましくは、本発明の組成物はエマルジョンであり、チオール基を含む少なくとも１種の作用物質は、エマルジョンの水相に含まれている。
【０１３４】
一実施形態では、本組成物（好ましくはエマルジョン）におけるチオール基を含む少なくとも１種の作用物質の量は、本組成物の総重量に対して重量で約０．５％〜約５％、好ましくは約１〜約３重量％の範囲にあり、より好ましくは約２重量％である。
【０１３５】
一実施形態では、本組成物（好ましくはエマルジョン）におけるチオール基を含む少なくとも１種の作用物質の量は、本組成物の総重量に対して重量で約０．０１％〜約２％、好ましくは約０．０５〜約０．５重量％の範囲にあり、より好ましくは約０．１重量％である。
【０１３６】
一実施形態では、本組成物（好ましくはエマルジョン）におけるチオール基を含む少なくとも１種の作用物質の量は、本組成物の総重量に対して重量で約０．０５％〜約２％、好ましくは約０．１〜約１重量％の範囲にあり、より好ましくは約０．２５重量％である。
【０１３７】
一実施形態では、本発明のエマルジョンにおけるチオール基を含む少なくとも１種の作用物質の量は、水相の総重量に対して重量で約０．５％〜約５％、好ましくは約１〜約３重量％の範囲にあり、より好ましくは約２．４５重量％である。
【０１３８】
本発明の組成物は、さらに少なくとも１種のホスフェート化合物を含む。
【０１３９】
一実施形態では、ホスフェート化合物は、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドではない。
【０１４０】
ホスフェート化合物の例として、限定するものではないが、Ｎａ２ＨＰＯ４（リン酸水素ナトリウム）、ＮａＨ２ＰＯ４（リン酸二水素ナトリウム）、Ｎａ３ＰＯ４（リン酸ナトリウム）、Ｋ２ＨＰＯ４（リン酸水素カリウム）、Ｋ３ＰＯ４（リン酸カリウム）、ＫＨ２ＰＯ４（リン酸一カリウム）、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４（リン酸水素アンモニウム）、（ＮＨ４）３ＰＯ４（リン酸アンモニウム）、Ｍｇ（Ｈ２ＰＯ４）２（リン酸二水素マグネシウム）、Ｍｇ３（ＰＯ４）２（リン酸マグネシウム）、ＭｇＨＰＯ４（リン酸水素マグネシウム）、ＭｇＮＨ４ＰＯ４（リン酸マグネシウムアンモニウム）、Ｃａ（Ｈ２ＰＯ４）２（リン酸二水素カルシウム）、ＣａＨＰＯ４（リン酸二カルシウム）、Ｃａ３（ＰＯ４）２（リン酸三カルシウム）、Ｃａ８（ＨＰＯ４）２（ＰＯ４）４（リン酸オクタカルシウム）、Ｈ２ＰＯ４（リン酸二水素）、Ｈ３ＰＯ４（リン酸）、Ｂａ３（ＰＯ４）２（リン酸バリウム）、Ｃｏ３（ＰＯ４）２（リン酸コバルト（ＩＩ））、ＣｏＰＯ４（リン酸コバルト（ＩＩＩ））、Ｃｒ３（ＰＯ４）２（リン酸クロム（ＩＩ））、Ｃｕ３（ＰＯ４）２（リン酸銅（ＩＩ））、Ｆｅ３（ＰＯ４）２（リン酸鉄（ＩＩ））、ＦｅＰＯ４（リン酸鉄（ＩＩＩ））、Ｌｉ３ＰＯ４（リン酸リチウム）、Ｎｉ３（ＰＯ４）２（リン酸ニッケル（ＩＩ））、Ｐｂ３（ＰＯ４）２（リン酸鉛（ＩＩ））、Ｐｂ３（ＳＯ４）４（リン酸鉛（ＩＶ）、Ｓｎ３（ＰＯ４）２（リン酸スズ（ＩＩ））、Ｓｒ３（ＰＯ４）２（リン酸ストロンチウム）、Ｖ３（ＰＯ４）５（リン酸バナジウム（Ｖ））、およびＺｎ３（ＰＯ４）２（リン酸亜鉛（ＩＩ））が挙げられる。好ましくは、少なくとも１種のホスフェート化合物は、Ｎａ２ＨＰＯ４、ＮａＨ２ＰＯ４、Ｎａ３ＰＯ４、Ｋ２ＨＰＯ４、Ｋ３ＰＯ４、ＫＨ２ＰＯ４、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４、（ＮＨ４）３ＰＯ４、Ｍｇ（Ｈ２ＰＯ４）２、Ｍｇ３（ＰＯ４）２、ＭｇＨＰＯ４、ＭｇＮＨ４ＰＯ４、Ｃａ（Ｈ２ＰＯ４）２、ＣａＨＰＯ４、Ｃａ３（ＰＯ４）２、Ｃａ８（ＨＰＯ４）２（ＰＯ４）４、Ｈ２ＰＯ４、およびＨ３ＰＯ４を含む群から選択される。より好ましくは、少なくとも１つのホスフェート化合物は、Ｎａ２ＨＰＯ４、ＮａＨ２ＰＯ４、Ｋ２ＨＰＯ４、およびＫＨ２ＰＯ４を含む群から選択される。
【０１４１】
一実施形態では、ホスフェート化合物は、Ｎａ２ＨＰＯ４、ＮａＨ２ＰＯ４、Ｎａ３ＰＯ４、Ｋ２ＨＰＯ４、Ｋ３ＰＯ４、およびＫＨ２ＰＯ４から選択される。好ましくは、少なくとも１つのホスフェート化合物は、Ｎａ２ＨＰＯ４、ＮａＨ２ＰＯ４、およびＮａ３ＰＯ４を含む群から選択される。
【０１４２】
好ましくは、本発明の組成物はエマルジョンであり、少なくとも１種のホスフェート化合物は、エマルジョンの水相に含まれている。
【０１４３】
一実施形態では、本組成物、好ましくはエマルジョンにおける少なくとも１種のホスフェート化合物の量は、本組成物の総重量に対して重量で約０．０５％〜約２％、好ましくは約０．１重量％〜約１重量％、より好ましくは約０．３重量％〜約０．７重量％の範囲にあり、さらにより好ましくは約０．４〜０．６重量％である。
【０１４４】
一実施形態では、本発明のエマルジョンにおける少なくとも１種のホスフェート化合物の量は、水相の総重量に対して重量で約０．０１％〜約２％、好ましくは約０．１重量％〜約１重量％、の範囲にあり、より好ましくは約０．５重量％である。
【０１４５】
一実施形態では、本発明の組成物における少なくとも１種のホスフェート化合物の量は、組成物全体で最終的に約０．１ｍＭ〜約１００ｍＭ、好ましくは約１ｍＭ〜約５０ｍＭの範囲にあり、より好ましくは約１５ｍＭである。
【０１４６】
一実施形態では、少なくとも１種のホスフェート化合物は、ホスフェートの共役酸塩基対（a phosphate acid/base conjugate pair）として存在する。ホスフェートの共役酸塩基対の例としては、限定されるものではないが、ＮａＨ２ＰＯ４／Ｎａ２ＨＰＯ４、ＫＨ２ＰＯ４／Ｋ２ＨＰＯ４、Ｎａ２ＨＰＯ４／Ｎａ３ＰＯ４、およびＫ２ＨＰＯ４／Ｋ３ＰＯ４が挙げられる（ここで、上記の対の１番目のメンバーは酸であり、上記の対の２番目のメンバーは共役塩基である）。
【０１４７】
一実施形態では、当該共役酸塩基対におけるホスフェートの酸対ホスフェートの塩基の比は、約１：２〜約１：２０、好ましくは約１：２〜約１：１２である。
【０１４８】
一実施形態では、ホスフェートの酸の量は、ホスフェートの共役酸塩基対の総重量に対して重量で約５％〜約３０％、好ましくは約７．５重量％〜約２５重量％の範囲にある。一実施形態では、ホスフェートの塩基の量は、ホスフェートの共役酸塩基対の総重量に対して重量で約７０％〜約９５％、好ましくは約７５重量％〜約９２．５重量％の範囲にある。
【０１４９】
一実施形態では、本発明の組成物は、さらに、粘度調整剤などの別の乳化剤を含み得る。
【０１５０】
一実施形態では、本組成物は、１５ｍＭの、好ましくはＮａ２ＨＰＯ４、ＮａＨ２ＰＯ４、Ｎａ３ＰＯ４、Ｋ２ＨＰＯ４、Ｋ３ＰＯ４、ＫＨ２ＰＯ４およびそれらの混合物から選択される、少なくとも１種のホスフェート化合物と、０．２５％のＮ−アセチルシステインと、を含む。
【０１５１】
粘度調整剤の例として、限定するものではないが、ヒアルロン酸ナトリウムのハイドロゲル、アクリル酸のポリマー、たとえばポリアルケニルエーテルまたはジビニルグリコールと架橋したアクリル酸のポリマー、たとえばＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）ゲル（カルボマーとしても知られている）、ヒドロキシエチルセルロース、デキストラン、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、およびコラーゲンが、挙げられる。
【０１５２】
一実施形態では、本発明の組成物はエマルジョンであり、粘度調整剤が、この水相に含まれている。本発明の一実施形態では、粘度調整剤は、たとえばＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）９８０  ＮＦなどのＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）である。Ｃａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）は、ペンタエリスリトールのアリルエーテル、スクロースのアリルエーテル、またはプロピレンのアリルエーテルと架橋した、アクリル酸のホモポリマーである。上記実施形態では、粘度調整剤は、エマルジョンの水相にある。
【０１５３】
本発明の一実施形態では、本組成物、好ましくはエマルジョンにおける粘度調整剤の量は、本組成物の総重量に対して重量で約０．０１％〜約０．１％、好ましくは約０．０３重量％〜約０．０８重量％の範囲にあり、より好ましくは約０．０５重量％である。
【０１５４】
本発明の一実施形態では、本組成物（好ましくはエマルジョン）における粘度調整剤の量は、本組成物の総重量に対して重量で約０．０１％〜約０．３％、好ましくは約０．０５重量％〜約０．２重量％の範囲にあり、より好ましくは約０．１重量％である。
【０１５５】
本発明の一実施形態では、エマルジョンにおける粘度調整剤の量は、エマルジョンの水相の総重量に対して重量で約０．０１％〜約０．２％、好ましくは約０．０３重量％〜約０．１重量％の範囲にあり、より好ましくは約０．０６１重量％である。
【０１５６】
本発明の一実施形態では、エマルジョンにおける粘度調整剤の量は、エマルジョンの水相の総重量に対して重量で約０．０１％〜約０．３％、好ましくは約０．０７重量％〜約０．２重量％の範囲にあり、より好ましくは約０．１２３重量％である。
【０１５７】
一実施形態では、本発明の組成物は、さらにｐＨ緩衝剤を含む。
【０１５８】
実際に、好ましくは、エマルジョンの組成物のｐＨは、一定であり、約６〜約８、好ましくは約６．８〜約７．２の範囲にあり、より好ましくは約７である。
【０１５９】
ｐＨ緩衝剤の適切な例として、限定するものではないが、ＮａＯＨ、リン酸バッファー、クエン酸バッファー、トリスバッファー、ヒスチジンバッファー、および酢酸バッファーが挙げられる。一実施形態では、ｐＨ緩衝剤はＮａＯＨである。
【０１６０】
一実施形態では、本発明の組成物はエマルジョンであり、ｐＨ緩衝剤は、好適には、エマルジョンの水相に存在する。
【０１６１】
本発明の一実施形態では、本組成物、好ましくはエマルジョンにおけるｐＨ緩衝剤の量は、本組成物を望ましいｐＨに緩衝するために十分な量である。
【０１６２】
一実施形態では、本組成物（好ましくはエマルジョン）におけるｐＨ緩衝剤の量は、本組成物（好ましくはエマルジョン）の総重量に対して重量で約０．１％〜約０．５％、好ましくは約０．２重量％〜約０．４重量％の範囲にあり、より好ましくは約０．２９重量％である。
【０１６３】
本発明の一実施形態では、本組成物はエマルジョンであり、エマルジョンにおけるｐＨ緩衝剤の量は、エマルジョンの水相の総重量に対して重量で約０．２％〜約０．５％、好ましくは約０．３重量％〜約０．４重量％の範囲にあり、より好ましくは約０．３５重量％である。
【０１６４】
本発明の一実施形態では、本発明の組成物は、さらに尿素を含む。尿素は、本発明の組成物中に存在する、活性のあるホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの二次構造を変性させるのに役立つ可能性がある。
【０１６５】
一実施形態では、本発明の組成物はエマルジョンであり、尿素は、好ましくは、エマルジョンの水相に含まれている。
【０１６６】
一実施形態では、本組成物（好ましくはエマルジョン）における尿素の量は、本組成物の総重量に対して重量で約０．５％〜約２０％、好ましくは約１重量％〜約１０重量％の範囲にあり、より好ましくは約４重量％である。
【０１６７】
一実施形態では、本発明のエマルジョンにおける尿素の量は、本発明のエマルジョンの水相の総重量に対して重量で約０．５％〜約２０％、好ましくは約１重量％〜約１０重量％の範囲にあり、より好ましくは約４．９重量％である。
【０１６８】
一実施形態では、本発明の組成物は、水中油型エマルジョンまたは水中油中水型エマルジョン、好ましくは水中油中水型エマルジョンであり、上記エマルジョンは、
エマルジョンにおける水相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量で約７０〜９９％の範囲にあり、好ましくは約８１．５重量％である、水相と、
エマルジョンにおける油相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量で約１〜約３０％の範囲にあり、好ましくは約１８．５重量％である、油相と
を含む。
【０１６９】
一実施形態では、本発明の組成物は、水中油型エマルジョンまたは水中油中水型エマルジョン、好ましくは水中油中水型エマルジョンであり、上記エマルジョンは、
エマルジョンにおける水相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量で約７０〜９９％の範囲にあり、好ましくは約８６．５重量％である、水相と、
エマルジョンにおける油相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量で約１〜約３０％の範囲にあり、好ましくは約１３．５重量％である、油相と
を含む。
【０１７０】
一実施形態では、エマルジョンにおける水相は、
ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド；
チオール基を含む少なくとも１種の作用物質；
少なくとも１種のホスフェート化合物；
任意選択で粘度調整剤；
任意選択でｐＨ緩衝剤；および
任意選択で尿素
を含む。
【０１７１】
一実施形態では、エマルジョンにおける水相は、
ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド；
チオール基を含む少なくとも１種の作用物質；
少なくとも１種のホスフェート化合物；
任意選択で粘度調整剤；および
任意選択で尿素
を含む。
【０１７２】
一実施形態では、エマルジョンにおける油相は、
油；
任意選択で少なくとも１種の乳化剤；
任意選択で増粘剤；および
任意選択で浸透圧調整剤
を含む。
【０１７３】
一実施形態では、本発明の組成物は、水中油型エマルジョンまたは水中油中水型エマルジョン、好ましくは水中油中水型エマルジョンであり、上記エマルジョンは、
エマルジョンにおける水相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量で約７０〜９９％の範囲にあり、好ましくは約８１．５重量％である、水相と、
エマルジョンにおける油相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量で約１〜約３０％の範囲にあり、好ましくは約１８．５重量％である、油相と
を含み、
上記水相は、
ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド；
チオール基を含む少なくとも１種の作用物質；
少なくとも１種のホスフェート化合物；
任意選択で粘度調整剤；
任意選択でｐＨ緩衝剤；および
任意選択で尿素
を含み、
上記油相は、
油；
任意選択で少なくとも１種の乳化剤；
任意選択で増粘剤；および
任意選択で浸透圧調整剤
を含む。
【０１７４】
一実施形態では、本発明の組成物は、水中油型エマルジョンまたは水中油中水型エマルジョン、好ましくは水中油中水型エマルジョンであり、上記エマルジョンは、
エマルジョンにおける水相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量で約７０〜９９％の範囲にあり、好ましくは約８６．５重量％である、水相と、
エマルジョンにおける油相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量で約１〜約３０％の範囲にあり、好ましくは約１３．５重量％である、油相と
を含み、
上記水相は、
ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド；
チオール基を含む少なくとも１種の作用物質；
少なくとも１種のホスフェート化合物；
任意選択で粘度調整剤；
任意選択でｐＨ緩衝剤；および
任意選択で尿素
を含み、
上記油相は、
油；
任意選択で少なくとも１種の乳化剤；
任意選択で増粘剤；および
任意選択で浸透圧調整剤
を含む。
【０１７５】
一実施形態では、本発明の組成物は、水中油型エマルジョンまたは水中油中水型エマルジョン、好ましくは水中油中水型エマルジョンであり、上記エマルジョンは、
エマルジョンにおける水相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量で約７０〜９９％の範囲にあり、好ましくは約８１．５重量％または８６．５重量％である、水相と、
エマルジョンにおける油相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量で約１〜約３０％の範囲にあり、好ましくは約１８．５重量％または１３．５重量％である、油相と
を含み、
上記水相は、
ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド；
チオール基を含む少なくとも１種の作用物質；
少なくとも１種のホスフェート化合物；
任意選択で粘度調整剤；および
任意選択で尿素
を含み、
上記油相は、
油；
任意選択で少なくとも１種の乳化剤；
任意選択で増粘剤；および
任意選択で浸透圧調整剤
を含む。
【０１７６】
一実施形態では、本発明の組成物は、水中油型エマルジョンまたは水中油中水型エマルジョン、好ましくは水中油中水型エマルジョンであり、上記エマルジョンは、
エマルジョンにおける水相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量で約７０〜９９％の範囲にあり、好ましくは約８１．５重量％または８６．５重量％である、水相と、
エマルジョンにおける油相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量で約１〜約３０％の範囲にあり、好ましくは約１８．５重量％または１３．５重量％である、油相と
を含み、
上記水相は、
ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド；
ＤＬ−システイン、Ｎ−アセチルシステイン、およびリポ酸からなる群から選択されるチオール基を含む少なくとも１種の作用物質；
Ｎａ２ＨＰＯ４、ＮａＨ２ＰＯ４、Ｋ２ＨＰＯ４、およびＫＨ２ＰＯ４からなる群から選択される少なくとも１種のホスフェート化合物、好ましくはＮａＨ２ＰＯ４／Ｎａ２ＨＰＯ４またはＫＨ２ＰＯ４／Ｋ２ＨＰＯ４の共役対（conjugate pair）；
任意選択で、ヒアルロン酸ナトリウムのハイドロゲル、アクリル酸のポリマー、ヒドロキシエチルセルロース、デキストラン、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、およびコラーゲンからなる群から選択される、粘度調整剤、好ましくはＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）ゲル、より好ましくはＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）９８０  ＮＦ；および
任意選択で、ＮａＯＨ、リン酸バッファー、クエン酸バッファー、トリスバッファー、ヒスチジンバッファー、および酢酸バッファーからなる群から選択されるｐＨ緩衝剤、好ましくはＮａＯＨ；および
任意選択で尿素
を含み、
上記油相は、
植物油、トリグリセリド、モノグリセリド、ジグリセリド、油状脂肪酸、ミリスチン酸イソプロピル、油状脂肪アルコール、ソルビトールおよび脂肪酸のエステル、油状スクロースエステル、および鉱油からなる群から選択される油、好ましくはＭＣＴ、より好ましくはＭｉｇｌｙｏｌ  ８１２（商標）；
任意選択で、エトキシレート界面活性剤、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ソルビタン誘導体、スクロースまたはグルコースのエステル、天然に存在するガム、天然に存在するホスファチド、脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来するエステルまたは部分エステル、エチレンオキシドと上記部分エステルの縮合生成物、ベントナイト、グリセリンモノステアラート、グリセリルモノオレアート、プロピレングリコールモノラウラート、グリセリルステアラート、ポロクサマー、チロキサポール、ビタミンＥ、Ｄ−ポリエチレングリコールスクシナート、セトステアリルアルコール、コレステロール、エチレングリコールパルミトステアラート、ラウリン酸、ミリスチン酸、ミリスチルアルコール、リノール酸、オレイン酸、パルミチン酸、ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ  ２０）、ソルビタントリオレアート（Ｓｐａｎ  ８５）、リン脂質、およびそれらの混合物からなる群から選択される、少なくとも１つの乳化剤、好ましくはグリセリルステアラートおよびＰＥＧの混合物、好ましくはグリセリルステアラートおよびＰＥＧ７５の混合物、好ましくはＧｅｌｏｔ  ６４（登録商標）；
任意選択で、ミツロウ、固形パラフィンおよびセチルアルコールからなる群から選択される、増粘剤、好ましくはセチルアルコール；および
任意選択で、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＣａＣｌ２、グリセロール、マンニトール、α−トレハロース、およびプロピレングリコールからなる群から選択される浸透圧調整剤、好ましくはグリセロール
を含む。
【０１７７】
一実施形態では、本発明の組成物は、水中油型エマルジョンまたは水中油中水型エマルジョン、好ましくは水中油中水型エマルジョンであり、上記エマルジョンは、
エマルジョンにおける水相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量で約７０〜９９％の範囲にあり、好ましくは約８１．５重量％または８６．５重量％である、水相と、
エマルジョンにおける油相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量で約１〜約３０％の範囲にあり、好ましくは約１８．５重量％または１３．５重量％である、油相と
を含み、
上記水相は、
ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド；
ＤＬ−システイン、Ｎ−アセチルシステイン、およびリポ酸からなる群から選択されるチオール基を含む少なくとも１種の作用物質；
Ｎａ２ＨＰＯ４、ＮａＨ２ＰＯ４、Ｋ２ＨＰＯ４、およびＫＨ２ＰＯ４からなる群から選択される少なくとも１つのホスフェート化合物、好ましくはＮａＨ２ＰＯ４／Ｎａ２ＨＰＯ４またはＫＨ２ＰＯ４／Ｋ２ＨＰＯ４の共役対；
任意選択で、ヒアルロン酸ナトリウムのハイドロゲル、アクリル酸のポリマー、ヒドロキシエチルセルロース、デキストラン、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、およびコラーゲンからなる群から選択される粘度調整剤、好ましくはＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）ゲル、より好ましくはＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）９８０  ＮＦ；ならびに
任意選択で尿素
を含み、
上記油相は、
植物油、トリグリセリド、モノグリセリド、ジグリセリド、油状脂肪酸、ミリスチン酸イソプロピル、油状脂肪アルコール、ソルビトールおよび脂肪酸のエステル、油状スクロースエステル、および鉱油からなる群から選択される油、好ましくはＭＣＴ、より好ましくはＭｉｇｌｙｏｌ  ８１２（商標）；
任意選択で、エトキシレート界面活性剤、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ソルビタン誘導体、スクロースまたはグルコースのエステル、天然に存在するガム、天然に存在するホスファチド、脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来するエステルまたは部分エステル、エチレンオキシドと上記部分エステルの縮合生成物、ベントナイト、グリセリンモノステアラート、グリセリルモノオレアート、プロピレングリコールモノラウラート、グリセリルステアラート、ポロクサマー、チロキサポール、ビタミンＥ、Ｄ−ポリエチレングリコールスクシナート、セトステアリルアルコール、コレステロール、エチレングリコールパルミトステアラート、ラウリン酸、ミリスチン酸、ミリスチルアルコール、リノール酸、オレイン酸、パルミチン酸、ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ  ２０）、ソルビタントリオレアート（Ｓｐａｎ  ８５）、リン脂質、およびそれらの混合物からなる群から選択される少なくとも１つの乳化剤、好ましくはグリセリルステアラートおよびＰＥＧの混合物、好ましくはグリセリルステアラートおよびＰＥＧ７５の混合物、好ましくはＧｅｌｏｔ  ６４（登録商標）；
任意選択で、ミツロウ、固形パラフィン、およびセチルアルコールからなる群から選択される増粘剤、好ましくはセチルアルコール；ならびに
任意選択で、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、ＣａＣｌ２、グリセロール、マンニトール、α−トレハロース、およびプロピレングリコールからなる群から選択される浸透圧調整剤、好ましくはグリセロール
を含む。
【０１７８】
一実施形態では、本発明の組成物は、水中油型エマルジョンまたは水中油中水型エマルジョン、好ましくは水中油中水型エマルジョンであり、上記エマルジョンは、
エマルジョンにおける水相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量で約７０〜９９％の範囲にあり、好ましくは約８１．５重量％または８６．５重量％である、水相と、
エマルジョンにおける油相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量で約１〜約３０％の範囲にあり、好ましくは約１８．５重量％または１３．５重量％である、油相と
を含み、
上記水相は、
好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量で約０．０１〜約３％、好ましくは約０．０４重量％〜約２重量％の範囲、より好ましくは約１．７２重量％％または約０．０８６重量％の量、またはエマルジョンの水相の総重量に対して重量で約０．０１〜約３％、好ましくは約０．０４重量％〜約２．５重量％の範囲、より好ましくは約２．１１重量％の量である、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド；および
好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量で約０．５〜約５％、好ましくは約１〜約３重量％の範囲、より好ましくは約２重量％の量、または本発明のエマルジョンの水相の総重量に対して重量で約０．５〜約５％、好ましくは約１〜約３重量％の範囲、より好ましくは約２．４５重量％の量である、チオール基を含む少なくとも１種の作用物質；および
好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量で約０．０５〜約２％、好ましくは約０．１〜約１重量％の範囲、より好ましくは約０．３〜約０．７重量％の範囲、さらにより好ましくは約０．４〜０．６重量％の量、または本発明のエマルジョンの水相の総重量に対して重量で約０．０１〜約２％、好ましくは約０．１〜約１重量％の範囲、より好ましくは約０．５重量％の量である、少なくとも１種のホスフェート化合物；および
任意選択で、好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量で約０．０１〜約０．１％の範囲、より好ましくは約０．０５重量％の量、または水相の重量に対して重量で約０．０１〜約０．２％の範囲、好ましくは約０．０６１重量％の量である、粘度調整剤；および
任意選択で、好ましくは、約６〜約８、好ましくは約６．８〜約７．２の範囲、より好ましくは約７のｐＨを提供するために十分な量であり、たとえば、エマルジョンの総重量に対して重量で約０．１〜約０．５％の範囲、好ましくは約０．２９重量％の量、または水相の重量に対して重量で約０．２〜約０．５％の範囲、好ましくは約０．３５重量％の量である、ｐＨ緩衝剤；および
任意選択で、エマルジョンの総重量に対して重量で約０．５〜約２０％の範囲、好ましくは約４重量％の量、または水相の重量に対して重量で約０．５〜約２０％の範囲、好ましくは約４．９重量％の量である、尿素；
を含み、
上記油相は、
好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量で約１〜約２０％の範囲、好ましくは約８重量％の量、または油相の総重量に対して重量で約２５〜約７５％の範囲、好ましくは約４３．２重量％の量である、油；および
任意選択で、好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量で約１〜約１０％の範囲、好ましくは約３．５重量％の量、または油相の総重量に対して重量で約５〜約４０％の範囲、好ましくは約１８．９重量％の量である、少なくとも１つの乳化剤；および
任意選択で、好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量で約０．１〜約１０％の範囲、好ましくは約２重量％の量、または油相の総重量に対して重量で約１〜約３０％の範囲、好ましくは約１０．８重量％の量である、増粘剤；および
任意選択で、好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量で約０．５〜約２５％の範囲、好ましくは約５重量％の量、または油相の総重量に対して重量で約１０〜約４５％の範囲、好ましくは約２７重量％の量である、浸透圧調整剤；
を含む。
【０１７９】
一実施形態では、本発明の組成物は、水中油型エマルジョンまたは水中油中水型エマルジョン、好ましくは水中油中水型エマルジョンであり、上記エマルジョンは、
エマルジョンにおける水相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量において約７０〜９９％の範囲にあり、好ましくは約８１．５（ｗ／ｗ）％または約８６．５（ｗ／ｗ）％である、水相と、
エマルジョンにおける油相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量において約１〜約３０％の範囲にあり、好ましくは約１８．５（ｗ／ｗ）％または約１３．５（ｗ／ｗ）％である、油相と
を含み、
上記水相は、
好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．０１〜約３％、好ましくは約０．０４〜約２（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約１．７２（ｗ／ｗ）％もしくは約０．０８６（ｗ／ｗ）％の量、またはエマルジョンの水相の総重量に対して重量において約０．０１〜約３％、好ましくは約０．０４〜約２．５（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約２．１１（ｗ／ｗ）％の量である、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド；
好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．５〜約５％、好ましくは約１〜約３（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約２（ｗ／ｗ）％の量、または本発明のエマルジョンの水相の総重量に対して重量において約０．５〜約５％、好ましくは約１〜約３（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約２．４５（ｗ／ｗ）％の量である、チオール基を含む少なくとも１種の作用物質；および
好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．０５〜約２％、好ましくは約０．１〜約１（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約０．３〜約０．７（ｗ／ｗ）％の範囲、さらにより好ましくは約０．４〜０．６（ｗ／ｗ）％の量、または本発明のエマルジョンの水相の総重量に対して重量において約０．０１〜約２％、好ましくは約０．１〜約１（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約０．５（ｗ／ｗ）％の量である、少なくとも１種のホスフェート化合物；および
任意選択で、好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．０１〜約０．１％の範囲、より好ましくは約０．０５（ｗ／ｗ）％の量、または水相の重量に対して重量において約０．０１〜約０．２％の範囲、好ましくは約０．０６１（ｗ／ｗ）％の量である、粘度調整剤；および
任意選択で、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．５〜約２０％の範囲、好ましくは約４（ｗ／ｗ）％の量、または水相の重量に対して重量において約０．５〜約２０％の範囲、好ましくは約４．９（ｗ／ｗ）％の量である、尿素；
を含み、
上記油相は、
好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約１〜約２０％の範囲、好ましくは約８（ｗ／ｗ）％の量、または油相の総重量に対して重量において約２５〜約７５％の範囲、好ましくは約４３．２（ｗ／ｗ）％の量である、油；および
任意選択で、好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約１〜約１０％の範囲、好ましくは約３．５（ｗ／ｗ）％の量、または油相の総重量に対して重量において約５〜約４０％の範囲、好ましくは約１８．９（ｗ／ｗ）％の量である、少なくとも１種の乳化剤；および
任意選択で、好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．１〜約１０％の範囲、好ましくは約２（ｗ／ｗ）％の量、または油相の総重量に対して重量において約１〜約３０％の範囲、好ましくは約１０．８（ｗ／ｗ）％の量である、増粘剤；および
任意選択で、好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．５〜約２５％の範囲、好ましくは約５（ｗ／ｗ）％の量、または油相の総重量に対して重量において約１０〜約４５％の範囲、好ましくは約２７（ｗ／ｗ）％の量である、浸透圧調整剤；
を含む。
【０１８０】
一実施形態では、本発明の組成物は、水中油型エマルジョンまたは水中油中水型エマルジョン、好ましくは水中油中水型エマルジョンであり、上記エマルジョンは、
エマルジョンにおける水相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量において約７０〜９９％の範囲にあり、好ましくは約８１．５（ｗ／ｗ）％または約８６．５（ｗ／ｗ）％である、水相と、
エマルジョンにおける油相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量において約１〜約３０％の範囲にあり、好ましくは約１８．５（ｗ／ｗ）％または約１３．５（ｗ／ｗ）％である、油相と
を含み、
上記水相は、
好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．０１〜約３％、好ましくは約０．０４〜約２（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約１．７２（ｗ／ｗ）％または約０．０８６（ｗ／ｗ）％の量、またはエマルジョンの水相の総重量に対して重量において約０．０１〜約３％、好ましくは約０．０４〜約２．５（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約２．１１（ｗ／ｗ）％の量である、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド；および
好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．５〜約５％、好ましくは約１〜約３（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約２（ｗ／ｗ）％の量、または本発明のエマルジョンの水相の総重量に対して重量において約０．５〜約５％、好ましくは約１〜約３（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約２．４５（ｗ／ｗ）％の量である、チオール基を含む少なくとも１種の作用物質；および
好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．０５〜約２％、好ましくは約０．１〜約１（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約０．３〜約０．７（ｗ／ｗ）％の範囲、さらにより好ましくは約０．４〜０．６（ｗ／ｗ）％の量、または本発明のエマルジョンの水相の総重量に対して重量において約０．０１〜約２％、好ましくは約０．１〜約１（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約０．５（ｗ／ｗ）％の量である、少なくとも１種のホスフェート化合物；および
任意選択で、好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．０１〜約０．１％の範囲、より好ましくは約０．０５（ｗ／ｗ）％の量、または水相の重量に対して重量において約０．０１〜約０．２％の範囲、好ましくは約０．０６１（ｗ／ｗ）％の量である、粘度調整剤、好ましくはＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）９８０  ＮＦ；および
任意選択で、約６〜約８、好ましくは約６．８〜約７．２の範囲、より好ましくは約７のｐＨを提供するために十分な量であり、たとえば、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．１〜約０．５％の範囲、好ましくは約０．２９（ｗ／ｗ）％の量、または水相の重量に対して重量において約０．２〜約０．５％の範囲、好ましくは約０．３５（ｗ／ｗ）％の量である、ｐＨ緩衝剤、好ましくはＮａＯＨ；および
任意選択で、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．５〜約２０％の範囲、好ましくは約４（ｗ／ｗ）％の量、または水相の重量に対して重量において約０．５〜約２０％の範囲、好ましくは約４．９（ｗ／ｗ）％の量である、尿素；
を含み、
上記油相は、
好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約１〜約２０％の範囲、好ましくは約８（ｗ／ｗ）％の量、または油相の総重量に対して重量において約２５〜約７５％の範囲、好ましくは約４３．２（ｗ／ｗ）％の量である、油、好ましくはＭＣＴ、より好ましくはＭｉｇｌｙｏｌ  ８１２（商標）；および
任意選択で、好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約１〜約１０％の範囲、好ましくは約３．５（ｗ／ｗ）％の量、または油相の総重量に対して重量において約５〜約４０％の範囲、好ましくは約１８．９（ｗ／ｗ）％の量である、少なくとも１つの乳化剤、好ましくはグリセリルステアラートおよびＰＥＧ−７５の混合物；および
任意選択で、好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．１〜約１０％の範囲、好ましくは約２（ｗ／ｗ）％の量、または油相の総重量に対して重量において約１〜約３０％の範囲、好ましくは約１０．８（ｗ／ｗ）％の量である、増粘剤、好ましくはセチルアルコール；および
任意選択で、好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．５〜約２５％の範囲、好ましくは５（ｗ／ｗ）％の量、または油相の総重量に対して重量において約１０〜約４５％の範囲、好ましくは約２７（ｗ／ｗ）％の量である、浸透圧調整剤、好ましくはグリセロール；
を含む。
【０１８１】
一実施形態では、本発明の組成物は、水中油型エマルジョンまたは水中油中水型エマルジョン、好ましくは水中油中水型エマルジョンであり、上記エマルジョンは、
エマルジョンにおける水相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量において約７０〜９９％の範囲にあり、好ましくは約８１．５（ｗ／ｗ）％または約８６．５（ｗ／ｗ）％である、水相と、
エマルジョンにおける油相の量が、エマルジョンの総重量に対して重量において約１〜約３０％の範囲にあり、好ましくは約１８．５（ｗ／ｗ）％または約１３．５（ｗ／ｗ）％である、油相と
を含み、
上記水相は、
好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．０１〜約３％、好ましくは約０．０４〜約２（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約１．７２（ｗ／ｗ）％もしくは約０．０８６（ｗ／ｗ）％の量、またはエマルジョンの水相の総重量に対して重量において約０．０１〜約３％、好ましくは約０．０４〜約２．５（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約２．１１（ｗ／ｗ）％の量である、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド；および
好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．５〜約５％、好ましくは約１〜約３（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約２（ｗ／ｗ）％の量、または本発明のエマルジョンの水相の総重量に対して重量において約０．５〜約５％、好ましくは約１〜約３（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約２．４５（ｗ／ｗ）％の量である、チオール基を含む少なくとも１種の作用物質；および
好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．０５〜約２％、好ましくは約０．１〜約１（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約０．３〜約０．７（ｗ／ｗ）％の範囲、さらにより好ましくは約０．４〜０．６（ｗ／ｗ）％の量、または本発明のエマルジョンの水相の総重量に対して重量において約０．０１〜約２％、好ましくは約０．１〜約１（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約０．５（ｗ／ｗ）％の量である、少なくとも１種のホスフェート化合物；および
任意選択で、好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．０１〜約０．１％の範囲、より好ましくは約０．０５（ｗ／ｗ）％の量、または水相の重量に対して重量において約０．０１〜約０．２％の範囲、好ましくは約０．０６１（ｗ／ｗ）％の量である、粘度調整剤、好ましくはＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）９８０  ＮＦ；および
任意選択で、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．５〜約２０％の範囲、好ましくは約４（ｗ／ｗ）％の量、または水相の重量に対して重量において約０．５〜約２０％の範囲、好ましくは約４．９（ｗ／ｗ）％の量である、尿素；
を含み、
上記油相は、
好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約１〜約２０％の範囲、好ましくは約８（ｗ／ｗ）％の量、または油相の総重量に対して重量において約２５〜約７５％の範囲、好ましくは約４３．２（ｗ／ｗ）％の量である、油、好ましくはＭＣＴ、より好ましくはＭｉｇｌｙｏｌ  ８１２（商標）；および
任意選択で、好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約１〜約１０％の範囲、好ましくは約３．５（ｗ／ｗ）％の量、または油相の総重量に対して重量において約５〜約４０％の範囲、好ましくは約１８．９（ｗ／ｗ）％の量である、少なくとも１つの乳化剤、好ましくはグリセリルステアラートおよびＰＥＧ−７５の混合物；および
任意選択で、好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．１〜約１０％の範囲、好ましくは約２（ｗ／ｗ）％の量、または油相の総重量に対して重量において約１〜約３０％の範囲、好ましくは約１０．８（ｗ／ｗ）％の量である、増粘剤、好ましくはセチルアルコール；および
任意選択で、好ましくは、エマルジョンの総重量に対して重量において約０．５〜約２５％の範囲、好ましくは約５（ｗ／ｗ）％の量、または油相の総重量に対して重量において約１０〜約４５％の範囲、好ましくは約２７（ｗ／ｗ）％の量である、浸透圧調整剤、好ましくはグリセロール；
を含む。
【０１８２】
また、眼への投与後に粘度が増大する保存型化合物（ｐｒｅｓｅｒｖｅｄ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ）も、本発明の範囲内にある。このような化合物の例として、全体が本明細書中参照として組み込まれる米国特許第５，２１２，１６２号に開示される「ゲル化多糖類（ｇｅｌｌｉｎｇ  ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ）」が挙げられる。またこの特許では、眼への滴下後にゲル化する、部分的にゲル化する液体として投与される、カラゲナンおよびフルセラランを含む眼用製剤が開示されている。さらに、米国特許第４，１３６，１７３号、同４，１３６，１７７号、および同４，１３６，１７８号は、眼に液体の形態で送達され、滴下後にゲル化する、キサンタンガムおよびローカストビーンガムを含む治療用組成物の使用を開示している。米国特許第４，８６１，７６０号は、非ゲル化液体として眼に投与され、滴下後にゲル化する、ゲランガムを含む眼用組成物を開示している。これら４つの特許は、それぞれ、全体が参照として本明細書中に組み込まれている。また、保存型の油、軟膏、ゲルなどもまた、本発明の範囲内にある。
【０１８３】
また本発明は、少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤を含み、蒸気による滅菌（好ましくはオートクレーブ）に供された組成物中のホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの分解を防止および／または阻止するための方法であって、上記組成物の中に、少なくとも１種のホスフェート化合物および／またはチオール基を含む少なくとも１種の作用物質を添加するステップを含む、方法に関する。
【０１８４】
また本発明は、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドと、少なくとも１種の脂肪酸および／または少なくとも１種の乳化剤とを含む無菌組成物、好ましくは無菌眼用組成物を得るための方法であって、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドが、上記無菌組成物の中で安定であり、上記方法が、上記組成物の中に少なくとも１種のホスフェート化合物および／またはチオール基を含む少なくとも１種の作用物質を添加するステップを含む、方法に関する。
【０１８５】
一実施形態では、本発明に係る方法は、バルクのエマルジョンおよびホスホロチオエート溶液を混合するステップを含む、またはからなる。
【０１８６】
一実施形態では、本発明に係る方法は、バルクのエマルジョンおよびホスホロチオエート溶液を混合するステップを含む、またはからなり、ここで
バルクのエマルジョンのパーセンテージは、本組成物の総重量に対して重量において約６０％〜約９９％、好ましくは約７５〜約８５（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約８０（ｗ／ｗ）％であり、
ホスホロチオエート溶液のパーセンテージは、本組成物の総重量に対して重量において約１％〜約４０％、好ましくは約１５〜約２５（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約２０（ｗ／ｗ）％である。
【０１８７】
一実施形態では、バルクのエマルジョンは、油中水型のバルクのエマルジョン、水中油型のバルクのエマルジョン、水中油中水型のバルクのエマルジョン、またはいずれかの多相のバルクのエマルジョンなどの、エマルジョンである。好ましくは、バルクのエマルジョンは、水中油中水型のバルクのエマルジョンである。
【０１８８】
一実施形態では、バルクのエマルジョンは陽イオン性である。別の実施形態では、バルクのエマルジョンは陰イオン性である。
【０１８９】
一実施形態では、本発明に係るバルクのエマルジョンは、水相と、水相に分散した油相とを含み、ここで
水相のパーセンテージは、バルクのエマルジョンの総重量に対して重量において約７０％〜約９９％、好ましくは約７５〜約９０（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約８３．１２５（ｗ／ｗ）％であり、
油相のパーセンテージは、バルクのエマルジョンの総重量に対して重量において約１％〜約３５％、好ましくは約７．５〜約２７．５（ｗ／ｗ）％、または約１２．５〜約２２．５（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約１６．８７５（ｗ／ｗ）％である。
【０１９０】
一実施形態では、バルクのエマルジョンの油相は、本明細書中上述した、油、乳化剤、増粘剤、および／または浸透圧調整剤を含み得る。
【０１９１】
一実施形態では、バルクのエマルジョンの水相は、本明細書中上述した、粘度調整剤、ｐＨ緩衝剤、および／または尿素を含み得る。
【０１９２】
本発明の一実施形態では、バルクのエマルジョンにおける油の量は、存在する場合、バルクのエマルジョンの総重量に対して重量において約１〜約２０％、好ましくは約５〜約１０（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約１０（ｗ／ｗ）％である。
【０１９３】
本発明の一実施形態では、バルクのエマルジョンにおける乳化剤の量は、存在する場合、バルクのエマルジョンの総重量に対して重量において約１〜約１０％、好ましくは約２．５〜約６．５（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約４．３７５（ｗ／ｗ）％である。
【０１９４】
本発明の一実施形態では、バルクのエマルジョンにおける増粘剤の量は、存在する場合、バルクのエマルジョンの総重量に対して重量において約０．１〜約１０％、好ましくは約１〜約５（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約２．５（ｗ／ｗ）％である。
【０１９５】
本発明の一実施形態では、バルクのエマルジョンにおける浸透圧調整剤の量は、存在する場合、バルクのエマルジョンの総重量に対して重量において約０．５〜約２０％、好ましくは約２〜約１０（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約６．２５（ｗ／ｗ）％である。
【０１９６】
本発明の一実施形態では、エマルジョンにおける粘度調整剤の量は、存在する場合、バルクのエマルジョンの総重量に対して重量において約０．０１〜約０．２５％、好ましくは約０．０２５〜約０．１（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約０．０６２５（ｗ／ｗ）％である。
【０１９７】
本発明の一実施形態では、エマルジョンにおける粘度調整剤の量は、存在する場合、バルクのエマルジョンの総重量に対して重量において約０．０１〜約０．２５％、好ましくは約０．０７５〜約０．１７５（ｗ／ｗ）％の範囲、より好ましくは約０．１２５（ｗ／ｗ）％である。
【０１９８】
一実施形態では、本明細書中上述した水中油型のバルクのエマルジョンは、水相に分散した油滴の中にさらに水相を含み、よって、水中油中水型のバルクのエマルジョンである。
【０１９９】
一実施形態では、ホスホロチオエート溶液は、少なくとも１種のホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、および／またはチオール基を含む少なくとも１種の作用物質、および／または少なくとも１種のホスフェート化合物を含む。
【０２００】
一実施形態では、本発明の方法は、（ｉ）チオール基を含む少なくとも１種の作用物質、少なくとも１種のホスフェート化合物および／またはホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを除き、水相の成分を混合するステップと、（ｉｉ）油相の成分を混合するステップと、（ｉｉｉ）油相および水相を混合してバルクのエマルジョンを得るステップとを含む、またはからなる。
【０２０１】
一実施形態では、本発明の方法は、（ｉ）油相の成分を混合するステップと、（ｉｉ）チオール基を含む少なくとも１種の作用物質、少なくとも１種のホスフェート化合物および／またはホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを除き、水相の成分を混合するステップと、（ｉｉｉ）油相および水相を混合してバルクのエマルジョンを入手するステップとを含む。
【０２０２】
一実施形態では、本発明の方法の混合ステップ（複数可）は、磁気式攪拌により行われる。一実施形態では、本発明の方法の混合ステップ（複数可）は、加熱、好ましくは約４０℃〜１００℃の範囲、好ましくは約７０℃の温度に加熱することにより行われる。一実施形態では、本発明の方法の混合ステップ（複数可）は、磁気式の設置（magnetic sitting）および加熱により行われる。
【０２０３】
一実施形態では、バルクのエマルジョンのｐＨは、一定であり、約６〜約８、好ましくは約６．８〜約７．２の範囲にあり、より好ましくは約７である。
【０２０４】
一実施形態では、ホスホロチオエート溶液のｐＨは一定であり、約６．５〜約８．５、好ましくは約７〜約８の範囲にあり、より好ましくは約７．５である。
【０２０５】
一実施形態では、本発明に係る無菌組成物、好ましくはエマルジョンのｐＨは一定であり、約６〜約８、好ましくは約６．８〜約７．２の範囲にあり、より好ましくは約７である。一実施形態では、上記無菌組成物のｐＨは、経時的、たとえば１週間、２週間、１ケ月、２ケ月、３ケ月、６ケ月、またはそれ以上の間、約５〜約４０℃の範囲の温度、より好ましくは約５℃または約１７〜２５℃の温度で、滅菌性である。
【０２０６】
一実施形態では、本発明の方法はさらに、バルクのエマルジョンの滅菌のステップを含む。一実施形態では、バルクのエマルジョンの滅菌は、蒸気による加熱、たとえばオートクレーブにより行われる。
【０２０７】
一実施形態では、滅菌ステップ、好ましくはオートクレーブのステップは、約１００℃〜約１３０℃の範囲の温度、好ましくは約１１６℃〜約１２５℃の範囲の温度、より好ましくは約１２１℃で、約１０〜約３０分間、好ましくは約１５〜約２５分間の範囲の期間、より好ましくは約２０分間、バルクのエマルジョンを加熱するステップを含む。好ましくは、オートクレーブのステップは、本組成物、好ましくはエマルジョンを、約１２１℃で約２０分間加熱するステップを含む。一実施形態では、オートクレーブのステップは、約０．５ｂａｒ〜約１．５ｂａｒ、好ましくは約０．８ｂａｒ〜約１．２ｂａｒの範囲の圧力下、より好ましくは約１ｂａｒの圧力下で行われる。
【０２０８】
一実施形態では、本発明の方法は、さらに、少なくとも１種のホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、および／またはチオール基を含む少なくとも１種の作用物質、および／または少なくとも１種のホスフェート化合物を混合することにより、ホスホロチオエート溶液を調製するステップを含む。
【０２０９】
一実施形態では、本発明の方法は、さらに、ホスホロチオエート溶液を滅菌するステップを含む。
【０２１０】
一実施形態では、ホスホロチオエート溶液を滅菌するステップは、好ましくは、約０．２μｍ〜約０．８μｍ、好ましくは約０．４μｍ〜約０．５μｍの範囲の大きさを有するフィルタを使用して、より好ましくは０．４５μｍのフィルタを介して、溶液をろ過するステップを含む。
【０２１１】
一実施形態では、本発明の方法はさらに、好ましくは滅菌条件下で、滅菌性のバルクのエマルジョンおよび滅菌性のホスホロチオエート溶液を混合するステップを含む。
【０２１２】
一実施形態では、本発明に係る方法は、以下のステップ：
チオール基を含む少なくとも１つの作用物質、少なくとも１つのホスフェート化合物および／またはホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを除き、少なくとも１つの脂肪酸および／または少なくとも１つの乳化剤を含み、本明細書中上述する通り油相および水相を調製および／または混合して、バルクのエマルジョンを得るステップと、
前のステップから得られたバルクのエマルジョンを、好ましくはオートクレーブなどの蒸気による滅菌により、滅菌するステップと、
ホスホロチオエート溶液、好ましくは滅菌性ホスホロチオエート溶液を、滅菌性のバルクのエマルジョンに、好ましくは滅菌条件下で添加するステップであって、上記ホスホロチオエート溶液が、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、少なくとも１つのホスフェート化合物、および／またはチオール基を含む少なくとも１つの作用物質を含む、ステップと
を含む、またはからなり得る。
【０２１３】
よって、一実施形態では、本発明の方法は、
チオール基を含む少なくとも１つの作用物質、少なくとも１つのホスフェート化合物および／またはホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを除き、バルクのエマルジョンの水相の成分を混合するステップと、
バルクのエマルジョンの油相の成分を混合するステップと、
前のステップからもたらされる油相および水相を混合して、バルクのエマルジョンを得るステップと、
バルクのエマルジョンを滅菌するステップと、
少なくとも１つのホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、および／またはチオール基を含む少なくとも１つの作用物質、および／または少なくとも１つのホスフェート化合物を混合することにより、ホスホロチオエート溶液を調製するステップと、
ホスホロチオエート溶液を滅菌するステップと、
好ましくは滅菌条件下で、滅菌性のバルクのエマルジョンおよび滅菌性のホスホロチオエート溶液を混合するステップと
を含む、またはからなる。
【０２１４】
代替的な一実施形態では、本発明の方法は、
チオール基を含む少なくとも１つの作用物質、少なくとも１つのホスフェート化合物および／またはホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを除き、バルクのエマルジョンの水相の成分を混合するステップと、
バルクのエマルジョンの油相の成分を混合するステップと、
前のステップからもたらされる油相および水相を混合して、バルクのエマルジョンを得るステップと、
バルクのエマルジョンを滅菌するステップと、
少なくとも１つのホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを除き、チオール基を含む少なくとも１つの作用物質および／または少なくとも１つのホスフェート化合物を混合することにより、ホスホロチオエート溶液を調製するステップと、
ホスホロチオエート溶液を滅菌するステップと、
好ましくは滅菌条件下で、少なくとも１つのホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを、ホスホロチオエート溶液に添加するステップと、
好ましくは滅菌条件下で、滅菌性のバルクのエマルジョンおよび滅菌性のホスホロチオエート溶液を混合するステップと
を含む、またはからなる。
【０２１５】
一実施形態では、上述の本発明の方法のステップは、任意の順序で行うことができる。
【０２１６】
一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、本発明の組成物中で安定している。言い換えると、一実施形態では、本発明の組成物は、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの分解を防止する。
【０２１７】
本明細書中使用される場合、用語「安定な」は、記載の時間の間、記載の温度でインキュベートされる際に元の量の約２０重量％以下の範囲内、好ましくは約１５（ｗ／ｗ）％、約１０（ｗ／ｗ）％、約９（ｗ／ｗ）％、約８（ｗ／ｗ）％、約７（ｗ／ｗ）％、約６（ｗ／ｗ）％、約５（ｗ／ｗ）％、約４（ｗ／ｗ）％、約３（ｗ／ｗ）％、約２（ｗ／ｗ）％、約１（ｗ／ｗ）％、またはそれ以下の範囲内が以前のままである（ｒｅｍａｉｎ）ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを表す。
【０２１８】
一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの分解は、図１および図２に示されるように、少なくとも１つの脂肪酸および／または少なくとも１つの乳化剤から高温の蒸気による滅菌のために遊離した高反応性の実体の攻撃により誘発される、一連の酸化およびそれに続くβ−脱離を含む。
【０２１９】
ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの安定性は、本組成物からのオリゴヌクレオチドの抽出後に、ＵＶ検出と連携したイオン交換クロマトグラフィー（ＩＥＸ−ＨＰＬＣ）により、評価することができる。使用され得るクロマトグラフィー条件の例として、限定するものではないが、以下の条件が挙げられる：
プレカラムおよびカラム：ＤＩＯＮＥＸ  ＤＮＡＳ  Ｐａｃｋ  ｐａ−１００；
移動相：
Ａ：１０ｍＭのＮａＯＨ水溶液
Ｂ：１０ｍＭのＮａＯＨおよび０．３７５ＭのＮａＣｌＯ４。
【０２２０】
ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの安定性はまた、ＵＶ検出と連携した逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）により評価することができる。使用され得るクロマトグラフィー条件の例として、限定するものではないが、以下の条件が挙げられる：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＯＳＴ  ＢＥＨ  Ｃ１８  ２．１×５０ｍｍ、ビーズの大きさ：１．７μｍ；
移動相：
Ａ：水
Ｂ：１７．２ｍＭのトリエタノールアミンおよび２００ｍＭのヘキサフルオロイソプロパノールの水溶液
Ｃ：ＭｅＯＨ。
【０２２１】
一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの安定性は、パーセンテージアッセイ（ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ  ａｓｓａｙ）の値により表される。パーセンテージアッセイの技術は、当業者によく知られている。
【０２２２】
一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、パーセンテージアッセイの値が、記載の温度、記載の時間でインキュベートした際に、元のパーセンテージアッセイの値の約２０％以下の範囲内、好ましくは約１５％、約１０％、約９％、約８％、約７％、約６％、約５％、約４％、約３％、約２％、約１％、またはそれ以下の範囲内に留まる場合に、安定しているとみなされる。
【０２２３】
本発明の一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、少なくとも約１日、好ましくは少なくとも約１週間、より好ましくは少なくとも約１ケ月以上、たとえば２ケ月、３ケ月、４ケ月、５ケ月、６ケ月、１２ケ月、２４ケ月、またはそれ以上の間、室温（すなわち約１５〜約２５℃の範囲の温度、好ましくは約２０℃の温度）で、本発明の組成物において安定している。
【０２２４】
本発明の別の実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、少なくとも約１０分間、好ましくは少なくとも約１時間、より好ましくは少なくとも約５、６、７、８、９、１０、１２、２４、４８時間、またはそれ以上の間、少なくとも約４０℃、好ましくは少なくとも約５０℃、より好ましくは約６０℃の温度で、安定している。
【０２２５】
本発明の別の実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、１０、１４、２１、２８日間、１ケ月、２ケ月、３ケ月、４ケ月、５ケ月、６ケ月、またはそれ以上の間、少なくとも約４０℃の温度で安定している。
【０２２６】
一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの最初の量の約１０％未満、好ましくは約５％未満、好ましくは約４％、３％、２％、１％未満が、１ケ月間の５℃でのインキュベーション後に分解する。一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの最初の量の約１０％未満、好ましくは約５％未満、好ましくは約４％、３％、２％、１％未満が、２ケ月間の５℃でのインキュベーション後に分解する。一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの最初の量の約１０％未満、好ましくは約５％未満、好ましくは約４％、３％、２％、１％未満が、３ケ月間の５℃でのインキュベーション後に分解する。一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの最初の量の約１０％未満、好ましくは約５％未満、好ましくは約４％、３％、２％、１％未満が、６ケ月間の５℃でのインキュベーション後に分解する。
【０２２７】
一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの最初の量の約１０％未満、好ましくは約５％未満、好ましくは約４％、３％、２％、１％未満が、２週間の２５℃でのインキュベーション後に分解する。一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの最初の量の約１０％未満、好ましくは約５％未満、好ましくは約４％、３％、２％、１％未満が、１ケ月間の２５℃でのインキュベーション後に分解する。一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの最初の量の約１０％未満、好ましくは約５％未満、好ましくは約４％、３％、２％、１％未満が、２ケ月間の２５℃でのインキュベーション後に分解する。一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの最初の量の約１０％未満、好ましくは約５％未満、好ましくは約４％、３％、２％、１％未満が、３ケ月間の２５℃でのインキュベーション後に分解する。一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの最初の量の約２０％未満、好ましくは約１５％未満、好ましくは約１０％未満が、６ケ月間の２５℃でのインキュベーション後に分解する。
【０２２８】
一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの最初の量の約１０％未満、好ましくは約５％未満、好ましくは約４％、３％、２％、１％未満が、２週間の４０℃でのインキュベーション後に分解する。一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの最初の量の約１０％未満、好ましくは約９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％未満が、１ケ月間の４０℃でのインキュベーション後に分解する。一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの最初の量の約１５％未満、好ましくは約１０％未満、好ましくは約９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％未満が、２ケ月間の４０℃でのインキュベーション後に分解する。一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの最初の量の約２５％未満、好ましくは約２０％未満、好ましくは約１９％、１８％、１７％、１６％、１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％未満が、３ケ月間の４０℃でのインキュベーション後に分解する。
【０２２９】
さらに本発明は、本発明の方法により得られるかまたは本発明の方法により得ることができる組成物に関する。
【０２３０】
一実施形態では、本発明の方法により得られるかまたは本発明の方法により得ることができる組成物に含まれるホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、安定している。言い換えると、一実施形態では、本発明の方法により得られるかまたは本発明の方法により得ることができる組成物は、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの分解を防止する。
【０２３１】
本発明の方法により得られるかまたは本発明の方法により得ることができる組成物に含まれるホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの安定性は、エマルジョンからのオリゴヌクレオチドの抽出後に、本明細書中上述した、ＵＶ検出と連携したイオン交換クロマトグラフィー（ＩＥＸ−ＨＰＬＣ）またはＵＶ検出と連携した逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）により、評価することができる。
【０２３２】
一実施形態では、本発明の方法により得られるかまたは本発明の方法により得ることができる組成物に含まれるホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、少なくとも約１日、好ましくは少なくとも約１週間、より好ましくは少なくとも約１ケ月以上、たとえば２ケ月、３ケ月、４ケ月、５ケ月、６ケ月、１２ケ月、２４ケ月、またはそれ以上の間、室温（すなわち約１５〜約２５℃の範囲の温度、好ましくは約２０℃の温度）で、本発明の組成物の中で安定している。
【０２３３】
一実施形態では、本発明の方法により得られるかまたは本発明の方法により得ることができる組成物に含まれるホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、少なくとも約１０分間、好ましくは少なくとも約１時間、より好ましくは少なくとも約５、６、７、８、９、１０、１２、２４、４８時間、またはそれ以上の間、少なくとも約４０℃、好ましくは少なくとも約５０℃、より好ましくは約６０℃の温度で、安定している。
【０２３４】
一実施形態では、本発明の方法により得られるかまたは本発明の方法により得ることができる組成物に含まれるホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、１０、１４、２１、２８日間、１ケ月、２ケ月、３ケ月、４ケ月、５ケ月、６ケ月、またはそれ以上の間、少なくとも約４０℃の温度で安定している。
【０２３５】
一実施形態では、本発明の組成物、または本発明の方法により得られるかもしくは本発明の方法により得ることができる組成物は、医薬組成物であり、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を含む。
【０２３６】
さらに本発明は、本発明の組成物、または本発明の方法により得られるかもしくは本発明の方法により得ることができる組成物と、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物に関する。
【０２３７】
薬学的に許容される賦形剤の例として、限定するものではないが、水、生理食塩水、リンゲル溶液、デキストロース溶液、および、エタノール、グルコース、スクロース、デキストラン、マンノース、マンニトール、ソルビトール、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ホスフェート、アセテート、ゼラチン、コラーゲン、カーボポール（登録商標）、植物油の溶液などが挙げられる。さらに、適切な保存剤、安定剤、抗酸化剤、抗菌剤、および緩衝剤、たとえばＢＨＡ、ＢＨＴ、クエン酸、アスコルビン酸、テトラサイクリンなどを含み得る。
【０２３８】
本発明の組成物で使用され得る薬学的に許容される賦形剤の他の例として、限定するものではないが、イオン交換剤、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質、たとえばヒト血清アルブミン、緩衝物質、たとえばホスフェート、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和型植物性脂肪酸の部分的なグリセリド混合物、水、塩、または電解質、たとえば硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリラート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレンブロックポリマー、ポリエチレングリコール、および羊毛脂が挙げられる。
【０２３９】
さらに、薬学的に許容される賦形剤は、いくつかの賦形剤、たとえば界面活性剤（たとえばヒドロキシプロピルセルロース）；適切なキャリア、たとえば水、エタノール、ポリオール（たとえばグリセロール、プロピレングリコール、および液体のポリエチレングリコールなど）、それらの適切な混合物、ならびにたとえばピーナッツ油およびゴマ油などの植物油などを含む、溶媒および分散媒体；等張剤、たとえば糖または塩化ナトリウムなど；コーティング剤、たとえばレシチンなど；作用物質吸収遅延剤、たとえばモノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなど；保存剤、たとえば塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、クロロブタノール、チメロサールなど；緩衝剤、たとえばホウ酸、炭酸水素ナトリウムおよび炭酸水素カリウム、ホウ酸ナトリウムおよびホウ酸カリウム、炭酸ナトリウムおよび炭酸カリウム、酢酸ナトリウム、リン酸二水素ナトリウムなど；等張化剤、たとえばデキストロース、塩化カリウム、プロピレングリコール、塩化ナトリウムなど；抗酸化剤および安定剤、たとえば亜硫酸水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ亜硫酸ナトリウム、チオ尿素など；非イオン性湿潤剤または清澄剤、たとえばポリソルベート８０、ポリソルベート２０、ポロクサマー２８２、およびチロキサポールなど；粘度調整剤、たとえばデキストラン４０、デキストラン７０、ゼラチン、グリセリン、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシメチルプロピルセルロース、ラノリン、メチルセルロース、ワセリン、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースなどを、含み得る。
【０２４０】
さらに本発明は、本発明の組成物、または本発明の方法により得られるかもしくは本発明の方法により得ることができる組成物を含む医薬に関する。
【０２４１】
本発明の組成物、医薬組成物、および／または医薬は、様々な、局所投与可能な組成物または注射により投与可能な組成物へと製剤化され得る。このような製剤の例として、限定するものではないが、エマルジョン、ゲル、軟膏、ミセル、または点眼薬が挙げられる。
【０２４２】
一実施形態では、本組成物は、ヒトへの局所投与（特に目への局所投与）、またはヒトへの注射（特に、硝子体内注射、結膜下（ｓｕｂｃｏｎｊｕｃｔｉｖａｌ）注射、結膜嚢への注射、テノン嚢下注射、眼球後注射、上脈絡膜注射、または前房内注射）に適合した組成物、医薬組成物、または医薬として、通常の手順に従い製剤化されている。
【０２４３】
本発明の一実施形態では、本発明の上記組成物、医薬組成物、または医薬は、ユニットドーズの形態でパッケージングされている。使用され得るユニットドーズの例として、限定するものではないが、一般的な手動のバルブにより操作される（ｂｕｌｂ−ｏｐｅｒａｔｅｄ）ピペットまたはドロッパーチップを備えた小さなスクイズボトルなどの点眼薬を分注できる容器；点眼薬の留置のための装置が適用され得る容器；液滴（ｄｒｏｐｓ  ｏｒ  ｄｒｏｐｌｅｔ）を霧化できる容器、および使い捨てのシリンジが、挙げられる。
【０２４４】
本発明の組成物、医薬組成物、および医薬の一日の総使用量は、通常の医療の判断の範囲内で担当医により決定されることが理解されるであろう。いずれかの特定の患者に特有の治療有効量は、治療される障害および障害の重症度；使用される特定のホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの活性；使用される特定の組成物、対象の年齢、体重、一般的な健康状態、性別、および食事；使用される特定のホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの投与時間、投与経路、および排出速度；治療の持続期間；使用される特定のホスホロチオエートオリゴヌクレオチドと併用または同時に使用される医薬；ならびに医療の分野でよく知られている同様の要因を含む様々な要因に応じて変化する。たとえば、所望の治療効果を達成するために必要とされるものよりも低いレベルで治療化合物の投与を開始すること、および所望の効果が達成されるまで用量を徐々に増加させることは、明らかに当業者の範囲内にある。
【０２４５】
さらに本発明は、その必要がある対象の血管新生障害を治療するためまたは血管新生障害の治療に使用するための、本発明の組成物、医薬組成物、または医薬に関し、上記組成物、医薬組成物、または医薬は、好ましくは、本明細書中上述されるＩＲＳ−１阻害剤を含む。
【０２４６】
血管新生は、新規の血管が形成される手段による根本的なプロセスである。血管新生は、複製、発達、さらには創傷治癒などの複数の正常な生理現象に必須である。血管新生障害は、多くの疾患で起こる病的な血管新生を表し、ここで病的な血管新生は、新生血管による組織および臓器の浸潤に関連している。血管新生障害の例として、限定するものではないが、眼の新生血管疾患（たとえば虚血性網膜症、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、網膜静脈閉塞症、加齢黄斑変性、角膜血管新生、血管新生緑内障など）、アテローム性動脈硬化、関節炎、乾癬、肥満、癌、およびアルツハイマー病が、挙げられる。本発明の一実施形態では、血管新生障害は、眼の血管新生疾患である。
【０２４７】
一実施形態では、眼の血管新生疾患は、網膜、周辺部網膜、および／または脈絡膜の血管新生に関連している。このような血管新生疾患の例として、限定するものではないが、ぶどう膜炎、脈絡膜炎、脈絡膜の脈管障害、高血圧性網膜症（hypersensitive retinopathy）、脈絡網膜炎（retinochoroiditis）、脈絡網膜炎（chorioretinitis）、網膜血管腫、網膜変性、黄斑変性、ＡＭＤ、網膜剥離、網膜血管新生、増殖性硝子体網膜症、未熟児網膜症（ＲＯＰ）、中心性漿液性脈絡網膜症、糖尿病性網膜症、後眼部外傷、網膜血管の病態、網膜毛細血管拡張症、眼内炎、黄斑浮腫、放射線誘発性網膜症、嚢胞様黄斑浮腫、糖尿病性網膜症、網膜の炎症性病態、鎌状赤血球貧血、鎌状赤血球網膜症、サルコイド、梅毒症、弾性線維性仮性黄色腫、ページェット病、静脈閉塞、動脈閉塞、頸動脈閉塞性疾患、慢性ぶどう膜炎／硝子体炎、マイコバクテリア感染症、ライム病、全身性エリテマトーデス、網膜に影響する全身性の病態、イールズ病、ベーチェット病、網膜炎または脈絡膜炎を引き起こす感染症、推定眼ヒストプラスマ症、ベスト病、近視、視窩、シュタルガルト病、扁平部炎、慢性網膜剥離、過粘稠度症候群（hyperviscosity syndromes）、トキソプラズマ症、外傷、およびレーザー後の合併症が挙げられる。
【０２４８】
一実施形態では、眼の血管新生疾患は、角膜の血管新生に関連している。このような血管新生疾患の例として、限定するものではないが、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、角膜の移植片拒絶、血管新生緑内障および後水晶体線維増殖症、流行性角結膜炎、ビタミンＡ欠乏症、コンタクトレンズの過剰装着、アトピー性角膜炎、上輪部角膜炎（ｓｕｐｅｒｉｏｒ  ｌｉｍｂｉｃ  ｋｅｒａｔｉｔｉｓ）、翼状片乾性角膜炎（ｐｔｅｒｙｇｉｕｍ  ｋｅｒａｔｉｔｉｓ  ｓｉｃｃａ）、シェーグレン症候群、しゅさ性ざ瘡、フリクテン症（ｐｈｌｙｃｔｅｎｕｌｏｓｉｓ）、梅毒症、マイコバクテリア感染症、脂質変性、化学物質による火傷（ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｂｕｍｓ）、細菌性潰瘍、真菌性潰瘍、単純性ヘルペス感染症、帯状疱疹感染症、原生動物感染症、カポジ肉腫、モーレン潰瘍、テリエン周辺角膜変性（Ｔｅｒｒｉｅｎ’ｓ  ｍａｒｇｉｎａｌ  ｄｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ）、周辺部角質溶解（ｍａｒｉｇｉｎａｌ  ｋｅｒａｔｏｌｙｓｉｓ）、外傷、関節リウマチ、全身性ループス、多発動脈炎、Ｗｅｇｅｎｅｒｓサルコイドーシス、強膜炎、スティーブンズジョンソン疾患、および類天疱瘡、放射状角膜切開が挙げられる。
【０２４９】
一実施形態では、眼の血管新生疾患は、糖尿病に関連するかどうかに関わらず、虹彩血管新生（隅角の血管新生）に関連する疾患、および、増殖性硝子体網膜症の全ての形態を含む血管結合組織または繊維組織の異常増殖により引き起こされる疾患を含む群から選択される。
【０２５０】
さらに本発明は、その必要がある対象の血管新生障害を治療するための方法であって、本発明の組成物、医薬組成物、または医薬を上記対象に投与するステップを含み、上記組成物、医薬組成物、または医薬が、好ましくは、本明細書中上述したＩＲＳ−１阻害剤を含む、方法に関する。
【０２５１】
さらに本発明は、その必要がある対象の血管新生を阻害するための方法であって、本発明の組成物、医薬組成物、または医薬を上記対象に投与するステップを含み、上記組成物、医薬組成物、または医薬が、好ましくは、本明細書中上述したＩＲＳ−１阻害剤を含む、方法に関する。
【０２５２】
さらに本発明は、その必要がある対象のリンパ管新生もしくは血管新生または角膜の血管新生を、予防、安定化、および／または阻害するための方法であって、本発明の組成物、医薬組成物、または医薬を上記対象に投与するステップを含み、上記組成物、医薬組成物、または医薬が、好ましくは、本明細書中上述したＩＲＳ−１阻害剤を含む、方法に関する。
【０２５３】
さらに本発明は、その必要がある対象の血管新生を予防または安定化するための方法であって、本発明の組成物、医薬組成物、または医薬を上記対象に投与するステップを含み、上記組成物、医薬組成物、または医薬が、好ましくは、本明細書中上述したＩＲＳ−１阻害剤を含む、方法に関する。
【０２５４】
一実施形態では、本発明の組成物、医薬組成物、または医薬の治療有効量が、対象に投与される。
【０２５５】
本発明の一実施形態では、１日あたり単眼ごとに投与されるＩＲＳ−１のホスホロチオエートアンチセンスオリゴヌクレオチド阻害剤の量は、約８μｇ〜約４０μｇ、好ましくは約１０μｇ〜約３５μｇ、好ましくは約１２μｇ〜約３０μｇ、より好ましくは約１４μｇ〜約２５μｇ、さらにより好ましくは約１６μｇ〜約２０μｇの範囲にある。
【０２５６】
本発明の一実施形態では、本発明の組成物、医薬組成物、または医薬は、単眼ごとに約１μＬ〜約１ｍＬ、好ましくは約１０μＬ〜約１００μＬ、より好ましくは５０μＬの液滴として、投与される。医薬組成物を点眼薬の形態、すなわち５０μＬを投与する場合、約１０μＬのみが眼に留まり得ると一般に認められている。
【０２５７】
一実施形態では、単眼ごとに１日あたり１回または２回の本発明の組成物の滴下が、行われる。
【０２５８】
本発明の一実施形態では、上記医薬組成物は、１日に１回、２回、３回、またはそれ以上投与される。一実施形態では、上記医薬組成物は、１日に１回投与される。別の実施形態では、上記医薬組成物は、１日に２回、好ましくは午前および午後に投与される。
【０２５９】
本発明の一実施形態では、１日あたり単眼ごとに投与される、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、好ましくはＩＲＳ−１アンチセンスのホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの量は、約２０μｇ〜約１００μｇ、好ましくは約３０μｇ〜約９０μｇ、より好ましくは約４０μｇ〜約９０μｇ、さらにより好ましくは約５０μｇ〜約９０μｇ、さらにより好ましくは約６０μｇ〜約９０μｇ、さらにより好ましくは約７０μｇ〜約９０μｇ、さらにより好ましくは約８０μｇ〜約９０μｇの範囲にある。
【０２６０】
一実施形態では、１日あたり単眼ごとに投与される、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、好ましくはＩＲＳ−１アンチセンスのホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの量は、約４０μｇ〜約５０μｇの範囲にあり、好ましくは約４３μｇであり、これは、たとえば１日あたり単眼ごとに２回の滴下を行う場合の１回の滴下あたりの約２０μｇ〜２５μｇに対応している。
【０２６１】
別の実施形態では、１日あたり単眼ごとに投与される、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、好ましくはＩＲＳ−１アンチセンスのホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの量は、約８０μｇ〜約１００μｇの範囲にあり、好ましくは約８６μｇであり、これは、たとえば１日あたり単眼ごとに２回の滴下を行う場合の１回の滴下あたりの約４０μｇ〜５０μｇに対応している。
【０２６２】
上記実施形態では、医薬組成物は、好ましくは、１日あたり単眼ごとに、約８０μｇ〜１００μｇ、好ましくは約８６μｇの上記ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを投与するための、ユニットドーズの形態にある。
【０２６３】
たとえば、約０．８０ｍｇ／ｍＬ〜約１ｍｇ／ｍＬの上記アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む組成物５０μＬの２回の滴下が、その必要がある対象へ、単眼ごとに１度行われ得る。別の例では、約１．６０ｍｇ／ｍＬ〜約２ｍｇ／ｍＬの上記アンチセンスオリゴヌクレオチドを含む組成物５０μＬの１回の滴下が、その必要がある対象へ、単眼ごとに行われ得る。
【０２６４】
別の例では、約０．８０ｍｇ／ｍＬ〜約１ｍｇ／ｍＬの上記ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを含む組成物５０μＬの１回の滴下が、その必要がある対象へ、１日２度、単眼ごとに行われる。
【０２６５】
さらに本発明は、本発明の方法を行うためのキットに関する。
【０２６６】
本明細書中使用される場合、用語「キット」は、本発明に係る方法を行うために必要な異なる試薬を含み、それらの輸送および保存を可能にするようにパッケージングされているいずれかの製造物品（たとえばパッケージまたは少なくとも１つの容器）を表す。キットは、本発明の方法を行うためのユニットとして、奨励、分布、または販売され得る。さらに、あらゆるキットの試薬が、密閉されかつ滅菌した容器などの外部環境からこれらを保護する容器の中に、提供され得る。またキットは、当該キットおよびその使用に関する方法を説明する添付文書を含み得る。
【０２６７】
一実施形態では、本発明のキットは、
ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド、および／または
チオール基を含む少なくとも１種の作用物質、および／または
少なくとも１種のホスフェート化合物、および／または
任意選択で粘度調整剤、好ましくはＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）９８０  ＮＦ、および／または
任意選択でｐＨ緩衝剤、好ましくはＮａＯＨ、および／または
任意選択で尿素、および／または
油、好ましくはＭＣＴ、より好ましくはＭｉｇｌｙｏｌ  ８１２（商標）、および／または
任意選択で少なくとも１種の乳化剤、好ましくはグリセリルステアラートおよびＰＥＧ−７５の混合物、たとえばＧｅｌｏｔ  ６４（登録商標）、および／または
任意選択で増粘剤、好ましくはセチルアルコール、および／または
任意選択で浸透圧調整剤、好ましくはグリセロール
を含む。
【０２６８】
一実施形態では、本発明のキットは、
本明細書中上述した、バルクのエマルジョン、好ましくは滅菌性のバルクのエマルジョン、および
本明細書中上述した、ホスホロチオエート溶液、好ましくは滅菌性ホスホロチオエート溶液
を含む。
【０２６９】
一実施形態では、本発明のキットは、
本明細書中上述した、バルクのエマルジョン、好ましくは滅菌性のバルクのエマルジョン、
ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドを除く、本明細書中上述した、ホスホロチオエート溶液、好ましくは滅菌性ホスホロチオエート溶液、および
任意選択で、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド
を含む。
【０２７０】
一実施形態では、本キットに含まれるホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、ＩＲＳ−１（インスリン受容体基質−１）に特異的なアンチセンスオリゴヌクレオチド、好ましくは、配列番号１のうち少なくとも１２個の連続したヌクレオチドの配列を含むＩＲＳ−１アンチセンスホスホロチオエートオリゴヌクレオチドである。一実施形態では、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドは、核酸配列の配列番号２またはその機能が保存された誘導体、たとえば配列番号３〜配列番号２８のいずれかを、含むまたはからなる。
【図面の簡単な説明】
【０２７１】
【図１】図１は、ホスホロチオエート由来のオリゴヌクレオチドの一連の末端の酸化を示すスキームである。
【図２】図２は、ホスホロチオエート由来のオリゴヌクレオチドの一連の末端の酸化後のβ−脱離反応を示すスキームである。
【図３】図３は、パーセンテージアッセイ、すなわちパーセンテージとして表される純粋物（インタクトなＧＳ−１０１オリゴヌクレオチド）対不純物（分解されたＧＳ−１０１オリゴヌクレオチド）の比、を示すヒストグラムのセットである。解析を、０日目（Ｔ０）、２週間後（Ｔ２ｗ）、１ケ月後（Ｔ１ｍ）、２ケ月後（Ｔ２ｍ）、３ケ月後（Ｔ３ｍ）、および６ケ月後（Ｔ６ｍ）に行った。図３Ａは、５℃でインキュベートしたＧＳ−１０１の無菌エマルジョンの様々な製剤のパーセンテージアッセイの結果を記録する。図３Ｂは、２５℃でインキュベートした同じエマルジョンに関する結果を記録する。図３Ｃは、４０℃でインキュベートした同じエマルジョンに関する結果を記録する。
【実施例】
【０２７２】
実施例
さらに本発明を、以下の実施例により例示する。
【０２７３】
実施例１：ホスフェートの存在下でのＧＳ−１０１の促進された安定性の調査
ＧＳ−１０１の促進された安定性の調査を、この実施例で報告する。エマルジョン１ｇあたり０．８６ｍｇのＧＳ−１０１を含む組成物を、ホスフェート化合物および／または抗酸化剤（チオール基を含む作用物質など）を含む７種の異なる製剤において評価した。これらの製剤を、異なる保存条件下で保存し、異なる製剤におけるＧＳ−１０１の安定性を逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）により評価した。
【０２７４】
材料および方法
無菌のバルクのエマルジョンの調製
８重量％＊のＭｉｇｌｙｏｌ  ８１２（商標）、３．５重量％＊のＧｅｌｏｔ  ６４（登録商標）、および２重量％＊のセチルアルコールを、ビーカー内で混合した。次に、このビーカーを、７０℃に調節した磁性式の攪拌機−加熱器の上に載置した。得られた油相を可溶化し、７０℃で連続して１０分間攪拌（３００ｒｐｍ）して均質化を行った。
【０２７５】
並行して、０．０５重量％＊または０．１重量％＊のＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）９８０ＮＦ（以下の表１に記載の通り製剤に応じて変更）を、１００ｍＬのビーカーにおいて、超純水７０ｍＬに溶解した。この混合物を、磁性式攪拌下で少なくとも３０分間可溶化させ、１ＮのＮａＯＨ溶液を用いてｐＨを７に調節した。次に、得られた水相を７０℃に加熱した。
＊パーセンテージは、組成物全体に関してのｗ／ｗで与えられる。
【０２７６】
７０℃に維持した調製済みの油相を、７０℃に維持した調製済みの水相に、攪拌しながら室温にて徐々に添加した。
【０２７７】
室温に冷却した後、得られたバルクのエマルジョンを、１ｂａｒの圧力下で１２１℃にて２０分間オートクレーブした。無菌のバルクのエマルジョンを、室温に冷却されるまで攪拌し続けた。
【０２７８】
ＧＳ−１０１の無菌エマルジョンの調製
無菌のバルクのエマルジョン３２グラムに、ＧＳ−１０１溶液８グラムを添加した。ＧＳ−１０１溶液は、無菌のバルクのエマルジョンへの添加前に２回ろ過しなければならないため、１０グラムが調製された。この１０グラムは、以下の物質のうちの１つ以上を含み得る：
５０ｍｇ（０．１重量％＊）または１２５ｍｇ（０．２５重量％＊）のＮ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）、チオール基を含む作用物質（２ＭのＮａＯＨに溶解）；
５０ｍｇ（０．１重量％＊）または１２５ｍｇ（０．２５重量％＊）のメタ重亜硫酸ナトリウム、チオール基を含まない作用物質；
１５５ｍｇのＮａ２ＨＰＯ４．１２Ｈ２Ｏおよび４３．８ｍｇのＮａＨ２ＰＯ４．Ｈ２Ｏ（組成物全体において最終で１５ｍＭのホスフェート）；
４３ｍｇ（０．０８６重量％＊）の配列番号２の配列（５’−ＴＣＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’）を有するＧＳ−１０１。
＊パーセンテージは、組成物全体に関してのｗ／ｗで与えられる。
【０２７９】
これらの様々な組成の製剤を、以下の表１に詳述する。
【表１】
2020515525.tif 000002
【０２８０】
ＧＳ−１０１溶液の全ての成分は、上で提示される順で添加した。各成分を添加した後に、超純水を当該成分が完全に溶解するまで添加してから、次の成分の添加へと進んだ。ｐＨを確認し、必要に応じて、１０％のＮａＯＨを使用して７．０に調節した。最終的に、超純水を、総重量が１０グラムになるまで添加し、これらのＧＳ−１０１製剤を、無菌のＡｃｒｏｄｉｓｃの０．２μｍのフィルタユニットを使用して２回ろ過した。このろ過のステップは、以下のステップのように、クリーンベンチ内で行った。
【０２８１】
最終的に、表１の７種の製剤のそれぞれについて、無菌のバルクのエマルジョン３２グラムを秤量し、それぞれの無菌のＧＳ−１０１溶液８グラムを添加した。全ての混合物は、激しく振とうすることにより均質化させた。
【０２８２】
また、ＧＳ−１０１製剤＃３を、Ｎ２ガスで９０分間エアレーションし、サンプル中に存在し得る全ての酸素を除去した。この方法により、ＧＳ−１０１の安定性に対する酸素の存在の影響（すなわち空気酸化の量）を、ＧＳ−１０１製剤＃２と比較することにより調査することができた。
【０２８３】
ＧＳ−１０１の無菌エマルジョンのインキュベーション
全てのＧＳ−１０１の無菌エマルジョンを、５℃で一晩保存した。翌日、それぞれが約４グラムの各エマルジョンの６つのアリコートを、安定性の試験のために気候室に置いた。
【０２８４】
ＧＳ−１０１の無菌エマルジョンの製剤を、２５℃／６０％のＲＨ（相対湿度）または４０℃／７５％のＲＨで、異なる期間インキュベートした。０日目（Ｔ０）、１週間目（Ｔ１ｗ）、および２週間目（Ｔ２ｗ）に、後述のように解析を行った。
【０２８５】
ＲＰ−ＨＰＬＣ
パーセンテージアッセイ、すなわち、パーセンテージとして表される純粋物（インタクトなＧＳ−１０１オリゴヌクレオチド）対不純物（分解されたＧＳ−１０１オリゴヌクレオチド）の比を、以下の表２にまとめたクロマトグラフィーの条件を使用して、それぞれのＧＳ−１０１の無菌エマルジョンに関して計算した。
【表２】
2020515525.tif 000003
【０２８６】
結果
リン酸バッファーの添加は、ＧＳ−１０１の安定性を改善する。
５℃での０日目（Ｔ０）、２５℃および４０℃での１週間後（Ｔ１ｗ）および２週間後（Ｔ２ｗ）の、７種の異なる製剤のＲＰ−ＨＰＬＣのパーセンテージアッセイの結果を、以下の表３に（％で）示す。安定性の進展も、Ｔ１ｗとＴ０との間およびＴ２ｗとＴ０との間のパーセンテージアッセイの結果の差（（ΔＴ１ｗ−Ｔ０）および（ΔＴ２ｗ−Ｔ０））として記録されている。データは標準化されておらず、±５％以内に留まる値は、測定および希釈のバイアスに基づき同等の値とみなされ得るということが当業者には明らかであろう。
【表３】
2020515525.tif 000004
【０２８７】
全ての製剤のアッセイに関する値は、時間とともに減少し、４０℃／７５％のＲＨで保存したサンプルでより顕著である。
【０２８８】
しかしながら、リン酸バッファーを含まない製剤＃１は、他の製剤よりもアッセイにおいて遥かに大きな減少を示す（１週間後で−２８．９％、２週間後で−４２．０％）ことは明らかである。製剤＃６および＃７は、リン酸バッファーおよび抗酸化剤としてのメタ重亜硫酸塩で作製されたものであり、同様の減少（１週間後で−２２．８％、２週間後で−３０．１％〜−３４．１％）を示し、さらには製剤＃２および＃３はそれよりも少ない減少を示し、これらは抗酸化剤を含まない。このことは、チオール基を含まないメタ重亜硫酸塩は、この製剤にとって適切な抗酸化剤ではないことを意味している。
【０２８９】
他方で、リン酸バッファーおよび抗酸化剤としてＮＡＣを含む製剤＃４および＃５は、２週間のインキュベーションの後において、４０℃で１０％未満の減少を示す。
【０２９０】
同じことを、２５℃で保存したサンプルでも結論付けることができる（製剤＃４および＃５では、時間とともに安定性のわずかな減少を示すが有意ではない（２週間にわたり２％未満））。
【０２９１】
結論
これらの結果は、チオール基を含まない作用物質と比較した、本組成物のホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの分解に対する、抗酸化剤としてチオール基を含む作用物質の安定化作用を示している。
【０２９２】
１５ｍＭのリン酸バッファーの添加は、短期間でのＧＳ−１０１の安定性をさらに改善する。
【０２９３】
実施例２：長期間の安定性の調査
ＧＳ−１０１の長期間の安定性の調査を開始し、この実施例で報告する。エマルジョン１グラムあたり０．８６ｍｇのＧＳ−１０１を含むエマルジョンを、ホスフェートおよび／またはチオール基を含む作用物質を含む５種の異なる製剤において評価した。これらの製剤を、異なる保存条件下で保存し、異なる製剤におけるＧＳ−１０１の安定性を、実施例１で説明されるようにＲＰ−ＨＰＬＣにより評価した。
【０２９４】
材料および方法
ＧＳ−１０１の無菌エマルジョンの調製
ＧＳ−１０１の無菌エマルジョンを、実施例１のエマルジョンと同様に調製した。これらのエマルジョンは、以下の物質のうちの１つ以上を含み得る：
０．１重量％＊または０．２５重量％＊のＮ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）；
０．４３６重量％＊のＮａ２ＨＰＯ４．１２Ｈ２Ｏおよび０．０３９重量％＊のＮａＨ２ＰＯ４．Ｈ２Ｏ（組成物全体において最終的に１５ｍＭのホスフェート）；
０．０８６重量％＊の、配列番号２の配列（５’−ＴＣＴＣＣＧＧＡＧＧＧＣＴＣＧＣＣＡＴＧＣＴＧＣＴ−３’）を有するＧＳ−１０１。
＊パーセンテージは、組成物全体に関してのｗ／ｗで与えられる。
【０２９５】
この様々な組成の製剤を、以下の表４に詳述する。
【表４】
2020515525.tif 000005
【０２９６】
ＧＳ−１０１の無菌エマルジョンのインキュベーション
ＧＳ−１０１の無菌エマルジョンの製剤を、異なる期間、５℃、２５℃／６０％のＲＨ、または４０℃／７５％のＲＨでインキュベートした。０日目（Ｔ０）、２週間目（Ｔ２ｗ）、１ケ月目（Ｔ１ｍ）、２ケ月目（Ｔ２ｍ）、３ケ月目（Ｔ３ｍ）、および６ケ月目（Ｔ６ｍ）に、解析を行った。
【０２９７】
結果
チオール基を含む作用物質と共にリン酸バッファーを添加することは、ＧＳ−１０１の安定性を改善する。
５種の異なる製剤のＲＰ−ＨＰＬＣアッセイの結果を、（％で）以下の表５および図３Ａ〜Ｃに示す。
【表５】
2020515525.tif 000006
【０２９８】
これら結果は、他の製剤と比較して、５℃であっても、製剤＃１（リン酸バッファーもＮＡＣも含まない）の安定性が大きく減少したことを明らかに示す。
【０２９９】
比較すると、リン酸バッファーを含む製剤＃２は、ＧＳ−１０１の安定化を示し、ゆるやかな減少を示す。
【０３００】
リン酸バッファーおよび異なる濃度の抗酸化剤としてのＮＡＣ（最終濃度０．１重量％および０．２５重量％）を含む製剤＃３および＃４は、５℃または２５℃で保存した場合、６カ月のインキュベーションの後であっても、さらなるＧＳ−１０１の安定化を示す。
【０３０１】
短期間における２種類のＮＡＣ濃度でのＧＳ−１０１の安定化に差を示さなかった実施例１のアッセイとは異なり、長期間の調査は、より多い量の抗酸化剤（最終濃度０．２５重量％）を使用すると安定性の増大を示す傾向がある。
【０３０２】
結論
これらの結果は、中〜長期間において、ＧＳ−１０１に対する１５ｍＭのリン酸バッファーの安定化作用を裏付けている。
【０３０３】
Ｎ−アセチルシステインなどのチオール基を含む作用物質をさらに添加することは、室温または４０℃での数ケ月間のインキュベーションの後であっても、さらに大きなＧＳ−１０１の安定性を提供する。
【０３０４】
４℃では、１５ｍＭのリン酸バッファーおよび最終濃度０．２５重量％のＮ−アセチルシステインは、数ケ月後であっても、ホスホロチオエートオリゴヌクレオチドの完全性を完全に保存する。
【図１】
2020515525.tif 000007
【図２】
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【図３】
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【配列表】
2020515525000001.xml
【手続補正書】
【提出日】令和1年10月10日(2019.10.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
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【国際調査報告】
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2020515525.tif 000017
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