(57)【要約】  本発明は、インビボでシステアミンに変換可能なジスルフィドの投与を含む、対象におけるシスチン症および他のシステアミン感受性障害の治療のための方法を特徴とする。本方法は、ジスルフィドの投与後に産生されるシステアミンの生物学的利用能を高め、血漿薬物動態プロファイルを拡張するために、対象に還元剤を別個に投与することを含むことができる。本方法は、対象における持続的なシステアミン血漿濃度を可能にする。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象においてシステアミン感受性障害を治療する方法であって、５０〜１５０ミリグラム／体重１キログラム（ｍｇ／ｋｇ）の用量の化合物１、
2020535133.tif 000020
またはその薬学的に許容される塩を、１日１回以上前記対象に投与することを含む、方法。
【請求項２】
前記用量の前記投与から２時間以内に、還元剤が前記対象に投与されない、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記用量の前記投与後２時間〜８時間の間に、還元剤が前記対象に投与される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記還元剤が、グルタチオン、グルタチオンジエチルエステル、ガンマグルタミルシステイン、ジヒドロリポ酸、Ｎ−アセチルシステイン、ホモシステイン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、ビタミンＥ、およびアスコルビン酸から選択される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記化合物１またはその薬学的に許容される塩が、即時放出用に配合される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記化合物１またはその薬学的に許容される塩が、粉末として配合され、剤形がサシェである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
ＰＰＡＲアルファアゴニスト、ＰＰＡＲガンマアゴニスト、またはＮｒｆ２誘導剤を含む群から選択されるパンテテイナーゼ誘導剤を前記対象に投与することをさらに含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記パンテテイナーゼ誘導剤が、アブラナ科野菜に存在するイソチオシアネート、スルフォラファン、Ｓ−アリルシステイン、ジアリルトリスルフィド、酸化脂肪、オメガ３脂肪酸、またはオレイルエタノールアミドである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記化合物１またはその薬学的に許容される塩の投与から３０分以内に、１０〜５０ｍｇ／ｋｇのシスタミンまたはその薬学的に許容される塩が前記対象に投与される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記シスタミンまたはその薬学的に許容される塩が、即時放出用に配合される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記シスタミンまたはその薬学的に許容される塩が、前記化合物１またはその薬学的に許容される塩の投与と同時に投与される、請求項９または１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記化合物１またはその薬学的に許容される塩の投与から３０分以内に、１０〜５０ｍｇ／ｋｇの化合物３、
2020535133.tif 000021
またはその薬学的に許容される塩が前記対象に投与される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記化合物３またはその薬学的に許容される塩が、即時放出用に配合される、請求項１２に記載の方法
【請求項１４】
前記化合物３またはその薬学的に許容される塩が、前記化合物１またはその薬学的に許容される塩の投与と同時に投与される、請求項１２または１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記システアミン感受性障害が、シスチン症；神経変性疾患；神経発達疾患；精神神経疾患；ミトコンドリア病；腎臓、肝臓、または肺の線維性疾患；寄生虫感染症；鎌状赤血球貧血症；癌；虚血性心疾患または発作を含む虚血性疾患；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；嚢胞性線維症（ＣＦ）；細菌感染症；ウイルス感染症；非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）；アルコール性脂肪性肝炎；および非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）から選択される、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
キットであって、
（ｉ）化合物１またはその薬学的に許容される塩を含む、第１の医薬組成物と、
（ｉｉ）還元剤を含む、第２の医薬組成物と、
（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、前記第１の医薬組成物が対象に投与されてから少なくとも２時間後に前記第２の医薬組成物を投与するための説明書と、を含む、キット。
【請求項１７】
キットであって、
（ｉ）化合物１またはその薬学的に許容される塩を含む、第１の医薬組成物と、
（ｉｉ）パンテテイナーゼ誘導剤を含む、第２の医薬組成物と、
（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、前記第１の医薬組成物および前記第２の医薬組成物を対象に投与するための説明書と、を含む、キット。
【請求項１８】
キットであって、
（ｉ）化合物１またはその薬学的に許容される塩を含む、第１の医薬組成物と、
（ｉｉ）シスタミンまたはその薬学的に許容される塩を含む、第２の医薬組成物と、
（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、前記第１の医薬組成物を対象に投与してから３０分以内に前記第２の医薬組成物を投与するための説明書と、を含む、キット。
【請求項１９】
キットであって、
（ｉ）化合物１またはその薬学的に許容される塩を含む、第１の医薬組成物と、
（ｉｉ）化合物３またはその薬学的に許容される塩を含む、第２の医薬組成物と、
（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、前記第１の医薬組成物を対象に投与してから３０分以内に前記第２の医薬組成物を投与するための説明書と、を含む、キット。
【請求項２０】
前記説明書が、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法を実施するためのものである、請求項１６〜１９のいずれか一項に記載のキット。
【請求項２１】
対象においてシステアミン感受性障害を治療する方法であって、５０〜１５０ミリグラム／体重１キログラム（ｍｇ／ｋｇ）の用量の化合物２、
2020535133.tif 000022
またはその薬学的に許容される塩を、１日１回以上前記対象に投与することを含む、方法。
【請求項２２】
前記用量の前記投与から２時間以内に、還元剤が前記対象に投与されない、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記用量の前記投与後２時間〜８時間の間に、還元剤が前記対象に投与される、請求項２１または２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記還元剤が、グルタチオン、グルタチオンジエチルエステル、ガンマグルタミルシステイン、ジヒドロリポ酸、Ｎ−アセチルシステイン、ホモシステイン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、ビタミンＥ、およびアスコルビン酸から選択される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記化合物２またはその薬学的に許容される塩が、即時放出用に配合される、請求項２１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記化合物１またはその薬学的に許容される塩が、粉末として配合され、剤形がサシェである、請求項２１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
ＰＰＡＲアルファアゴニスト、ＰＰＡＲガンマアゴニスト、またはＮｒｆ２誘導剤を含む群から選択されるパンテテイナーゼ誘導剤を前記対象に投与することをさらに含む、請求項２１〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記パンテテイナーゼ誘導剤が、アブラナ科野菜に存在するイソチオシアネート、スルフォラファン、Ｓ−アリルシステイン、ジアリルトリスルフィド、酸化脂肪、オメガ３脂肪酸、またはオレイルエタノールアミドである、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記化合物２またはその薬学的に許容される塩の投与から３０分以内に、１０〜５０ｍｇ／ｋｇのシスタミンまたはその薬学的に許容される塩が前記対象に投与される、請求項２１〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記シスタミンまたはその薬学的に許容される塩が、即時放出用に配合される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記シスタミンまたはその薬学的に許容される塩が、前記化合物２またはその薬学的に許容される塩の投与と同時に投与される、請求項２９または３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記化合物２またはその薬学的に許容される塩の投与から３０分以内に、１０〜５０ｍｇ／ｋｇの化合物３、
2020535133.tif 000023
またはその薬学的に許容される塩が前記対象に投与される、請求項２１〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記化合物３またはその薬学的に許容される塩が、即時放出用に配合される、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記化合物３またはその薬学的に許容される塩が、前記化合物２またはその薬学的に許容される塩の投与と同時に投与される、請求項３２または３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記システアミン感受性障害が、シスチン症；神経変性疾患；神経発達疾患；精神神経疾患；ミトコンドリア病；腎臓、肝臓、または肺の線維性疾患；寄生虫感染症；鎌状赤血球貧血症；癌；虚血性心疾患または発作を含む虚血性疾患；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；嚢胞性線維症（ＣＦ）；細菌感染症；ウイルス感染症；非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）；アルコール性脂肪性肝炎；および非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）から選択される、請求項２１〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
キットであって、
（ｉ）化合物２またはその薬学的に許容される塩を含む、第１の医薬組成物と、
（ｉｉ）還元剤を含む、第２の医薬組成物と、
（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、前記第１の医薬組成物が対象に投与されてから少なくとも２時間後に前記第２の医薬組成物を投与するための説明書と、を含む、キット。
【請求項３７】
キットであって、
（ｉ）化合物２またはその薬学的に許容される塩を含む、第１の医薬組成物と、
（ｉｉ）パンテテイナーゼ誘導剤を含む、第２の医薬組成物と、
（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、前記第１の医薬組成物および前記第２の医薬組成物を対象に投与するための説明書と、を含む、キット。
【請求項３８】
キットであって、
（ｉ）化合物２またはその薬学的に許容される塩を含む、第１の医薬組成物と、
（ｉｉ）シスタミンまたはその薬学的に許容される塩を含む、第２の医薬組成物と、
（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、前記第１の医薬組成物を対象に投与してから３０分以内に前記第２の医薬組成物を投与するための説明書と、を含む、キット。
【請求項３９】
キットであって、
（ｉ）化合物２またはその薬学的に許容される塩を含む、第１の医薬組成物と、
（ｉｉ）化合物３またはその薬学的に許容される塩を含む、第２の医薬組成物と、
（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、前記第１の医薬組成物を対象に投与してから３０分以内に前記第２の医薬組成物を投与するための説明書と、を含む、キット。
【請求項４０】
前記説明書が、請求項２１〜５５のいずれか一項に記載の方法を実施するためのものである、請求項３６〜３９のいずれか一項に記載のキット。
【請求項４１】
医薬組成物であって、化合物３、
2020535133.tif 000024
またはその薬学的に許容される塩を含む、医薬組成物。
【請求項４２】
前記化合物３またはその薬学的に許容される塩が、即時放出用に配合される、請求項４１に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
前記化合物３またはその薬学的に許容される塩が、遅延放出用に配合される、請求項４１に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
前記化合物３またはその薬学的に許容される塩が、持続放出用に配合される、請求項４１に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
前記医薬組成物が、システアミン前駆体またはその薬学的に許容される塩を含む第２の活性物質をさらに含む、請求項４１〜４４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
前記第２の活性物質が、即時放出用に配合される、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
前記第２の活性物質が、遅延放出用に配合される、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項４８】
前記第２の活性物質が、持続放出用に配合される、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項４９】
前記化合物３またはその薬学的に許容される塩が、即時放出用に配合され、前記第２の活性物質が、遅延放出用に配合される、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項５０】
対象においてシステアミン感受性障害を治療するための方法であって、治療有効量の請求項４１〜４９のいずれか一項に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む、方法。
【請求項５１】
前記システアミン感受性障害が、シスチン症；神経変性疾患；神経発達疾患；精神神経疾患；ミトコンドリア病；腎臓、肝臓、または肺の線維性疾患；寄生虫感染症；鎌状赤血球貧血症；癌；虚血性心疾患または発作を含む虚血性疾患；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；嚢胞性線維症（ＣＦ）；細菌感染症；ウイルス感染症；非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）；アルコール性脂肪性肝炎；および非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）から選択される、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
対象においてシステアミン感受性障害を治療する方法であって、５０〜１５０ミリグラム／体重１キログラム（ｍｇ／ｋｇ）の用量の化合物３、
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またはその薬学的に許容される塩を、１日１回以上前記対象に投与することを含む、方法。
【請求項５３】
前記用量の前記投与から２時間以内に、還元剤が前記対象に投与されない、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記用量の前記投与後２時間〜８時間の間に、還元剤が前記対象に投与される、請求項５２または５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記還元剤が、グルタチオン、グルタチオンジエチルエステル、ガンマグルタミルシステイン、ジヒドロリポ酸、Ｎ−アセチルシステイン、ホモシステイン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、ビタミンＥ、およびアスコルビン酸から選択される、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記化合物２またはその薬学的に許容される塩が、即時放出用に配合される、請求項５２〜５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
前記化合物１またはその薬学的に許容される塩が、粉末として配合され、剤形がサシェである、請求項５２〜５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５８】
ＰＰＡＲアルファアゴニスト、ＰＰＡＲガンマアゴニスト、またはＮｒｆ２誘導剤を含む群から選択されるパンテテイナーゼ誘導剤を前記対象に投与することをさらに含む、請求項５２〜５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５９】
前記パンテテイナーゼ誘導剤が、アブラナ科野菜に存在するイソチオシアネート、スルフォラファン、Ｓ−アリルシステイン、ジアリルトリスルフィド、酸化脂肪、オメガ３脂肪酸、またはオレイルエタノールアミドである、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記化合物２またはその薬学的に許容される塩の投与から３０分以内に、１０〜５０ｍｇ／ｋｇのシスタミンまたはその薬学的に許容される塩が前記対象に投与される、請求項５２〜５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６１】
前記シスタミンまたはその薬学的に許容される塩が、即時放出用に配合される、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記シスタミンまたはその薬学的に許容される塩が、前記化合物２またはその薬学的に許容される塩の投与と同時に投与される、請求項６０または６１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６３】
前記システアミン感受性障害が、シスチン症；神経変性疾患；神経発達疾患；精神神経疾患；ミトコンドリア病；腎臓、肝臓、または肺の線維性疾患；寄生虫感染症；鎌状赤血球貧血症；癌；虚血性心疾患または発作を含む虚血性疾患；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；嚢胞性線維症（ＣＦ）；細菌感染症；ウイルス感染症；非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）；アルコール性脂肪性肝炎；および非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）から選択される、請求項５２〜６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６４】
キットであって、
（ｉ）化合物３またはその薬学的に許容される塩を含む、第１の医薬組成物と、
（ｉｉ）還元剤を含む、第２の医薬組成物と、
（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、前記第１の医薬組成物が対象に投与されてから少なくとも２時間後に前記第２の医薬組成物を投与するための説明書と、を含む、キット。
【請求項６５】
キットであって、
（ｉ）化合物３またはその薬学的に許容される塩を含む、第１の医薬組成物と、
（ｉｉ）パンテテイナーゼ誘導剤を含む、第２の医薬組成物と、
（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、前記第１の医薬組成物および前記第２の医薬組成物を対象に投与するための説明書と、を含む、キット。
【請求項６６】
キットであって、
（ｉ）化合物３またはその薬学的に許容される塩を含む、第１の医薬組成物と、
（ｉｉ）シスタミンまたはその薬学的に許容される塩を含む、第２の医薬組成物と、
（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、前記第１の医薬組成物を対象に投与してから３０分以内に前記第２の医薬組成物を投与するための説明書と、を含む、キット。
【請求項６７】
前記説明書が、請求項５２〜６３のいずれか一項に記載の方法を実施するためのものである、請求項６４〜６６のいずれか一項に記載のキット。
【請求項６８】
化合物１の酸付加塩であって、前記酸が、塩酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、または酒石酸である、酸付加塩。
【請求項６９】
前記酸が酢酸または酒石酸である、請求項６８に記載の酸付加塩。
【請求項７０】
前記酸が酢酸である、請求項６９に記載の酸付加塩。
【請求項７１】
前記酸付加塩が以下の式を有する、請求項７０に記載の酸付加塩。
2020535133.tif 000026
【請求項７２】
前記酸付加塩が以下の式を有する、請求項７０に記載の酸付加塩。
2020535133.tif 000027
【請求項７３】
前記酸が酒石酸である、請求項６９に記載の酸付加塩。
【請求項７４】
前記酸付加塩が以下の式を有する、請求項７３に記載の酸付加塩。
2020535133.tif 000028
【請求項７５】
前記酸付加塩が以下の式を有する、請求項７３に記載の酸付加塩。
2020535133.tif 000029
【請求項７６】
前記酸付加塩が以下の式を有する、請求項７３に記載の酸付加塩。
2020535133.tif 000030
【請求項７７】
対象におけるシステアミン感受性障害を治療する方法であって、請求項６８〜７６のいずれか一項に記載の有効量の前記酸付加塩を前記対象に投与することを含む、方法。
【請求項７８】
前記用量の前記投与から２時間以内に、還元剤が前記対象に投与されない、請求項７７に記載の方法。
【請求項７９】
前記用量の前記投与後２時間〜８時間の間に、還元剤が前記対象に投与される、請求項７７または７８に記載の方法。
【請求項８０】
前記還元剤が、グルタチオン、グルタチオンジエチルエステル、ガンマグルタミルシステイン、ジヒドロリポ酸、Ｎ−アセチルシステイン、ホモシステイン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、ビタミンＥ、およびアスコルビン酸から選択される、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
前記酸付加塩が、即時放出用に配合される、請求項７７〜８０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８２】
前記酸付加塩が粉末として配合され、剤形がサシェであるか、または前記酸付加塩が飲用に適した水溶液中で再懸濁するためにボトルの中に配合される、請求項７７〜８１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８３】
ＰＰＡＲアルファアゴニスト、ＰＰＡＲガンマアゴニスト、またはＮｒｆ２誘導剤を含む群から選択されるパンテテイナーゼ誘導剤を前記対象に投与することをさらに含む、請求項７７〜８２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８４】
前記パンテテイナーゼ誘導剤が、アブラナ科野菜に存在するイソチオシアネート、スルフォラファン、Ｓ−アリルシステイン、ジアリルトリスルフィド、酸化脂肪、オメガ３脂肪酸、またはオレイルエタノールアミドである、請求項８３に記載の方法。
【請求項８５】
前記酸付加塩の前記投与から３０分以内に、１０〜５０ｍｇ／ｋｇのシスタミンまたはその薬学的に許容される塩が前記対象に投与される、請求項７７〜８４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８６】
前記シスタミンまたはその薬学的に許容される塩が、即時放出用に配合される、請求項８５に記載の方法。
【請求項８７】
前記シスタミンまたはその薬学的に許容される塩が、前記酸付加塩の前記投与と同時に投与される、請求項８５または８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８８】
前記酸付加塩の前記投与から３０分以内に、１０〜５０ｍｇ／ｋｇの化合物３、
2020535133.tif 000031
またはその薬学的に許容される塩が前記対象に投与される、請求項７７〜８４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８９】
前記化合物３またはその薬学的に許容される塩が、即時放出用に配合される、請求項８８に記載の方法。
【請求項９０】
前記化合物３またはその薬学的に許容される塩が、前記酸付加塩の前記投与と同時に投与される、請求項８８または８９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９１】
前記システアミン感受性障害が、シスチン症；神経変性疾患；神経発達疾患；精神神経疾患；ミトコンドリア病；腎臓、肝臓、または肺の線維性疾患；寄生虫感染症；鎌状赤血球貧血症；癌；虚血性心疾患または発作を含む虚血性疾患；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；嚢胞性線維症（ＣＦ）；細菌感染症；ウイルス感染症；非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）；アルコール性脂肪性肝炎；および非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）から選択される、請求項７７〜９０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９２】
非対称ジスルフィドを合成する方法であって、前記方法が、
（ａ）１モル当量の有機カルボン酸またはその塩、
（ｂ）２〜４モル当量のシスタミンまたはその塩、および
（ｃ）アミドカップリング試薬を組み合わせて、
前記有機カルボン酸またはその塩の９０％超が、式（Ａ）の前記非対称ジスルフィドに変換され、前記有機カルボン酸の１０％未満が、未反応のままか、または式（Ｂ）の対称ジスルフィドに変換されることを含む、混合物を形成することを含み、
2020535133.tif 000032
式中、Ｒが有機ラジカルである、方法。
【請求項９３】
前記有機カルボン酸またはその塩が、パントテン酸、４−ホスホパントテン酸、酢酸、またはそれらの塩から選択される、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
前記有機カルボン酸またはその塩が、パントテン酸またはその塩である、請求項９２に記載の方法。
【請求項９５】
前記アミドカップリング試薬がヒドロキシベンゾトリアゾールである、請求項９２〜９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９６】
前記アミドカップリング試薬がＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドである、請求項９２〜９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９７】
前記組み合わせることが、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、アセトニトリルジメチルホルムアミド、水、およびそれらの組み合わせから選択される１つ以上の溶媒中である、請求項９２〜９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９８】
非対称ジスルフィドを合成する方法であって、
（ａ）システアミン、Ｎ−アセチルシステアミン、システイン、Ｎ−アセチルシステイン、Ｎ−アセチルシステインアミド、またはそれらの塩から選択される２〜４モル当量のチオール、および
（ｂ）シスタミン、パンテチン、またはそれらの塩から選択される１モル当量のジスルフィドを、有機溶媒中で組み合わせることを含む、方法。
【請求項９９】
前記チオール対前記ジスルフィドのモル比が約２：１〜約４：１である、請求項９８に記載の方法。
【請求項１００】
前記チオール対前記ジスルフィドのモル比が約２．５：１〜約３．５：１である、請求項９８に記載の方法。
【請求項１０１】
前記チオール対前記ジスルフィドのモル比が約２．７：１〜約３．３：１である、請求項９８に記載の方法。
【請求項１０２】
前記チオールがＮ−アセチルシステアミンまたはその塩である、請求項９８〜１０１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０３】
前記ジスルフィドがシスタミンまたはその塩である、請求項９８〜１０２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０４】
前記有機溶媒がメタノールまたはエタノールである、請求項９８〜１０３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０５】
前記有機溶媒がメタノールである、請求項１０４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、システアミン感受性症状、症候群、および疾患を治療するための組成物および方法を特徴とする。
【背景技術】
【０００２】
システアミンは、天然に存在するアミノチオールであり、パンテテインの異化を介してインビボで生成される。前臨床および早期臨床研究は、システアミンが、様々な疾患において治療的に活性であり得ることを示唆しているが、広範な臨床開発は、便利な投与レジメンの欠如および不十分な毒性学によって妨げられている。
【０００３】
システアミンは、いくつかの作用機序を有し、それらのほとんどは、そのチオール部分の還元能力に関連する。システアミンは、放射線治療を受けている癌患者の放射線防護剤として、および放射線中毒の治療薬として１９５０年代に最初に臨床的に研究された。システアミンのチオール基は、フリーラジカルおよび細胞に有害であり得る他の酸化化合物を低減することができ、それによって酸化還元ホメオスタシスに寄与する。システアミンはまた、グルタチオンおよびシステインなどの他の抗酸化チオールのレベルを増加させることによって、有害な酸化体を間接的に中和することができる。例えば、システアミンは、シスチン（システインの二量体酸化形態）とのチオール−ジスルフィド交換に関与して、システアミン−システインジスルフィドおよび遊離システインを形成することができる。システアミンはまた、タンパク質のシステイン残基を有するジスルフィドを形成することができ、それによってタンパク質の構造および機能に影響を及ぼす。システアミンは、トランスグルタミナーゼ、カスパーゼ、マトリックスメタロプロテイナーゼ、およびグルタミニルシクラーゼを含む酵素を阻害することができる。システアミンは、キレート剤であり、銅に対して特に親和性がある。システアミンはまた、ソマトスタチンを含む、ある特定のペプチドホルモンの分泌を遮断する。
【０００４】
システアミン治療効果についての前臨床的または臨床的証拠がある疾患としては、アルツハイマー病、ハンチントン病、およびパーキンソン病を含む神経変性疾患；腎臓、肝臓、および肺の炎症性および線維性疾患；糖尿病、代謝症候群、および脂肪肝疾患のスペクトルを含む代謝疾患；ウイルス、細菌、および寄生虫感染症を含む感染性疾患；高コレステロール血症；虚血性心疾患または発作を含む虚血性疾患；鎌状赤血球貧血症；遺伝的ミトコンドリア障害；アルギニンのシステインへの突然変異によって引き起こされる遺伝性疾患；ならびに癌が挙げられる。
【０００５】
残念なことに、システアミンは、非常に不快な感覚特性（悪臭および苦味）を有し、治療的に有効な量（青年および成人では１日あたり１グラム以上）で摂取される場合、体臭および口臭を生じ得る。ほとんどの患者はまた、食欲不振、悪心、嘔吐、および／または胃痛を含む胃腸の副作用を経験する。口臭、体臭、および胃腸の副作用は、全て、高いピークシステアミン血中レベル（健康な対象では内在性システアミンレベルよりも５０倍以上高いことが多い）と関連している。さらに、システアミンの排出半減期はわずか約２５分であり、これは頻繁な投与を必要とする。要約すると、システアミンの既存の経口製剤の感覚刺激特性（苦味、悪臭）、薬理学（用量間隔の大部分の治療血中濃度以下）、毒物学（胃腸およびその他の副作用）、および安定性（酸化に起因する短い半減期）に問題がある。これらの問題の多くは、揮発性チオール化合物である薬物に内在するものである。結果として、多くのシスチン症患者は、システアミン療法に完全に準拠しておらず、結果として、疾患の進行に苦しんでいる。
【０００６】
許容可能な毒性学を有する、持続的な期間にわたって治療レベルの薬物を送達するシステアミン製剤の不可能性によって臨床開発が妨げられている。したがって、持続的な上昇した血中レベルのシステアミンを産生しながらピーク濃度を低下させ、改善された有効性を提供するようにトラフ濃度を上昇させながら副作用を最小限に抑えることができる、改善されたシステアミン産生化合物、改善された製剤、および改善された投与レジメンを含む、改善された治療レジメンが必要である。さらに、システアミン薬物動態の既知の患者間変動を考慮して、有効性を改善し、毒性を低下させるためには、投与レジメンの個別化を可能にする組成物が必要である。
【発明の概要】
【０００７】
第１の態様では、本発明は、５０〜１５０ミリグラム／体重１キログラム（ｍｇ／ｋｇ）（例えば、６０±１０、７０±１０、８０±１０、９０±１０、１００±２５、１１０±２０、１２０±１０、１３０±１０、または１４０±１０ｍｇ／ｋｇ）の用量の化合物１、
2020535133.tif 000002
またはその薬学的に許容される塩を、１日１回以上（例えば、１日１回、２回、または３回）対象に投与することを含む、対象においてシステアミン感受性障害を治療するための方法を特徴とする。特定の実施形態では、用量の投与から２時間以内（例えば、３０分、１時間、９０分、または２時間以内）は、還元剤は対象に投与されない。特定の実施形態では、用量の投与後２時間〜８時間の間に、還元剤が対象に投与される。特定の実施形態では、還元剤は、化合物１またはその薬学的に許容される塩の用量の投与後、３±１時間、４±１時間、５±１時間、６±１時間、７±１時間、または４±２時間に投与される。一実施形態では、還元剤は、グルタチオン、グルタチオンジエチルエステル、ガンマグルタミルシステイン、ジヒドロリポ酸、Ｎ−アセチルシステイン、ホモシステイン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、ビタミンＥ、およびアスコルビン酸から選択される。特定の実施形態では、化合物１またはその薬学的に許容される塩は、即時放出用に配合される。特定の実施形態では、化合物１またはその薬学的に許容される塩は、粉末として配合され、剤形はサシェである。特定の実施形態では、ＰＰＡＲアルファアゴニスト、ＰＰＡＲガンマアゴニスト、またはＮｒｆ２誘導剤を含む群から選択されるパンテテイナーゼ誘導剤が対象に投与される。一実施形態では、パンテテイナーゼ誘導剤は、アブラナ科野菜に存在するイソチオシアネート、スルフォラファン、Ｓ−アリルシステイン、ジアリルトリスルフィド、酸化脂肪、オメガ３脂肪酸、またはオレイルエタノールアミドである。特定の実施形態では、化合物１またはその薬学的に許容される塩の投与から３０分以内（例えば、５分、１０分、１５分、２０分、２５分、または３０分）に、１０〜５０ｍｇ／ｋｇ（例えば、１５±５、２０±５、２５±５、３０±５、３５±５、４０±５、または４５±５ｍｇ／ｋｇ）のシスタミンまたはその薬学的に許容される塩が対象に投与される。一実施形態では、シスタミンまたはその薬学的に許容される塩は、即時放出用に配合される。特定の実施形態では、シスタミンまたはその薬学的に許容される塩は、化合物１またはその薬学的に許容される塩の投与と同時に投与される。
【０００８】
特定の実施形態では、化合物１またはその薬学的に許容される塩の投与から３０分以内（例えば、５分、１０分、１５分、２０分、２０分、または２５分）に、１０〜５０ｍｇ／ｋｇ（例えば、１５±５、２０±５、２５±５、３０±５、３５±５、４０±５、または４５±５ｍｇ／ｋｇ）の用量の化合物３、
2020535133.tif 000003
またはその薬学的に許容される塩が、対象に投与される。任意で、化合物３またはその薬学的に許容される塩は、即時放出用に配合される。特定の実施形態では、化合物３またはその薬学的に許容される塩は、化合物１またはその薬学的に許容される塩の投与と同時に投与される。
【０００９】
上記の方法のいずれかにおいて、システアミン感受性障害は、シスチン症；神経変性疾患；神経発達疾患；精神神経疾患；ミトコンドリア病；腎臓、肝臓、または肺の線維性疾患；寄生虫感染症；鎌状赤血球貧血症；癌；虚血性心疾患または発作を含む虚血性疾患；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；嚢胞性線維症（ＣＦ）；細菌感染症；ウイルス感染症；非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）；アルコール性脂肪性肝炎；および非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、または本明細書に説明される任意の他のシステアミン感受性障害から選択され得る。
【００１０】
関連する態様では、本発明は、以下を含むキットを特徴とする：（ｉ）化合物１またはその薬学的に許容される塩を含む第１の医薬組成物、（ｉｉ）還元剤を含む第２の医薬組成物、および（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、第１の医薬組成物が対象に投与されてから少なくとも２時間後に第２の医薬組成物を投与するための説明書。
【００１１】
別の態様では、本発明は、以下を含むキットを特徴とする：（ｉ）化合物１またはその薬学的に許容される塩を含む第１の医薬組成物、（ｉｉ）パンテテイナーゼ誘導剤を含む第２の医薬組成物、および（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、第１の医薬組成物および第２の医薬組成物を対象に投与するための説明書。
【００１２】
別の関連する態様では、本発明は、以下を含むキットを特徴とする：（ｉ）化合物１またはその薬学的に許容される塩を含む第１の医薬組成物、（ｉｉ）シスタミンまたはその薬学的に許容される塩を含む第２の医薬組成物、および（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、第１の医薬組成物を対象に投与してから３０分以内に第２の医薬組成物を投与するための説明書。
【００１３】
別の態様では、本発明は、以下を含むキットを特徴とする：（ｉ）化合物１またはその薬学的に許容される塩を含む第１の医薬組成物、（ｉｉ）化合物３またはその薬学的に許容される塩を含む第２の医薬組成物、および（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、第１の医薬組成物を対象に投与してから３０分以内に第２の医薬組成物を投与するための説明書。
【００１４】
上記のキットのいずれにおいても、説明書は、上記の化合物１を投与する方法を実施するための説明書を含むことができる。
【００１５】
別の態様では、本発明は、５０〜１５０ミリグラム／体重１キログラム（ｍｇ／ｋｇ）（例えば、６０±１０、７０±１０、８０±１０、９０±１０、１００±２５、１１０±２０、１２０±１０、１３０±１０、または１４０±１０ｍｇ／ｋｇ）の用量の化合物２、
2020535133.tif 000004
またはその薬学的に許容される塩を、１日１回以上（例えば、１日１回、２回、または３回）対象に投与することを含む、対象においてシステアミン感受性障害を治療するための方法を特徴とする。特定の実施形態では、用量の投与から２時間以内（例えば、３０分、１時間、９０分、または２時間以内）は、還元剤は対象に投与されない。特定の実施形態では、用量の投与後２時間〜８時間の間に、還元剤が対象に投与される。特定の実施形態では、還元剤は、化合物２またはその薬学的に許容される塩の用量の投与後、３±１時間、４±１時間、５±１時間、６±１時間、７±１時間、または４±２時間に投与される。一実施形態では、還元剤は、グルタチオン、グルタチオンジエチルエステル、ガンマグルタミルシステイン、ジヒドロリポ酸、Ｎ−アセチルシステイン、ホモシステイン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、ビタミンＥ、およびアスコルビン酸から選択される。特定の実施形態では、化合物２またはその薬学的に許容される塩は、即時放出用に配合される。特定の実施形態では、化合物２またはその薬学的に許容される塩は、粉末として配合され、剤形はサシェである。特定の実施形態では、ＰＰＡＲアルファアゴニスト、ＰＰＡＲガンマアゴニスト、またはＮｒｆ２誘導剤を含む群から選択されるパンテテイナーゼ誘導剤が対象に投与される。一実施形態では、パンテテイナーゼ誘導剤は、アブラナ科野菜に存在するイソチオシアネート、スルフォラファン、Ｓ−アリルシステイン、ジアリルトリスルフィド、酸化脂肪、オメガ３脂肪酸、またはオレイルエタノールアミドである。特定の実施形態では、化合物２またはその薬学的に許容される塩の投与から３０分以内（例えば、５分、１０分、１５分、２０分、２５分、または３０分）に、１０〜５０ｍｇ／ｋｇ（例えば、１５±５、２０±５、２５±５、３０±５、３５±５、４０±５、または４５±５ｍｇ／ｋｇ）のシスタミンまたはその薬学的に許容される塩が対象に投与される。一実施形態では、シスタミンまたはその薬学的に許容される塩は、即時放出用に配合される。特定の実施形態では、シスタミンまたはその薬学的に許容される塩は、化合物２またはその薬学的に許容される塩の投与と同時に投与される。
【００１６】
特定の実施形態では、化合物２またはその薬学的に許容される塩の投与から３０分以内（例えば、５分、１０分、１５分、２０分、２０分、または２５分）に、１０〜５０ｍｇ／ｋｇ（例えば、１５±５、２０±５、２５±５、３０±５、３５±５、４０±５、または４５±５ｍｇ／ｋｇ）の用量の化合物３、
2020535133.tif 000005
またはその薬学的に許容される塩が、対象に投与される。任意で、化合物３またはその薬学的に許容される塩は、即時放出用に配合される。特定の実施形態では、化合物３またはその薬学的に許容される塩は、化合物２またはその薬学的に許容される塩の投与と同時に投与される。
【００１７】
上記の方法のいずれかにおいて、システアミン感受性障害は、シスチン症；神経変性疾患；神経発達疾患；精神神経疾患；ミトコンドリア病；腎臓、肝臓、または肺の線維性疾患；寄生虫感染症；鎌状赤血球貧血症；癌；虚血性心疾患または発作を含む虚血性疾患；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；嚢胞性線維症（ＣＦ）；細菌感染症；ウイルス感染症；非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）；アルコール性脂肪性肝炎；および非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、または本明細書に説明される任意の他のシステアミン感受性障害から選択され得る。
【００１８】
関連する態様では、本発明は、以下を含むキットを特徴とする：（ｉ）化合物２またはその薬学的に許容される塩を含む第１の医薬組成物、（ｉｉ）還元剤を含む第２の医薬組成物、および（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、第１の医薬組成物が対象に投与されてから少なくとも２時間後に第２の医薬組成物を投与するための説明書。
【００１９】
別の態様では、本発明は、以下を含むキットを特徴とする：（ｉ）化合物２またはその薬学的に許容される塩を含む第１の医薬組成物、（ｉｉ）パンテテイナーゼ誘導剤を含む第２の医薬組成物、および（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、第１の医薬組成物および第２の医薬組成物を対象に投与するための説明書。
【００２０】
さらに別の態様では、本発明は、以下を含むキットを特徴とする：（ｉ）化合物２またはその薬学的に許容される塩を含む第１の医薬組成物、（ｉｉ）シスタミンまたはその薬学的に許容される塩を含む第２の医薬組成物、および（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、第１の医薬組成物を対象に投与してから３０分以内に第２の医薬組成物を投与するための説明書。
【００２１】
さらに別の態様では、本発明は、以下を含むキットを特徴とする：（ｉ）化合物２またはその薬学的に許容される塩を含む第１の医薬組成物、（ｉｉ）化合物３またはその薬学的に許容される塩を含む第２の医薬組成物、および（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、第１の医薬組成物を対象に投与してから３０分以内に第２の医薬組成物を投与するための説明書。
【００２２】
上記のキットのいずれにおいても、説明書は、上記の化合物２を投与する方法を実施するための説明書を含むことができる。
【００２３】
本発明は、化合物３、
2020535133.tif 000006
またはその薬学的に許容される塩を含む、医薬組成物を特徴とする。医薬組成物は、即時放出用に配合された、遅延放出用に配合された、または持続放出用に配合された、化合物３またはその薬学的に許容される塩を含むことができる。特定の実施形態では、医薬組成物は、システアミン前駆体またはその薬学的に許容される塩を含む、第２の活性物質をさらに含む。任意で、第２の活性物質は、即時放出用に配合される。特定の実施形態では、第２の活性物質は、遅延放出用に配合されるか、または持続放出用に配合される。１つの特定の実施形態では、化合物３またはその薬学的に許容される塩は、即時放出用に配合され、第２の活性物質は、遅延放出用に配合される。
【００２４】
関連する態様では、本発明は、治療有効量の化合物３またはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるシステアミン感受性障害を治療するための方法を特徴とする。システアミン感受性障害は、シスチン症；神経変性疾患；神経発達疾患；精神神経疾患；ミトコンドリア病；腎臓、肝臓、または肺の線維性疾患；寄生虫感染症；鎌状赤血球貧血症；癌；虚血性心疾患または発作を含む虚血性疾患；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；嚢胞性線維症（ＣＦ）；細菌感染症；ウイルス感染症；非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）；アルコール性脂肪性肝炎；および非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、または本明細書に説明される任意の他のシステアミン感受性障害から選択され得る。
【００２５】
別の態様では、本発明は、５０〜１５０ミリグラム／体重１キログラム（ｍｇ／ｋｇ）（例えば、６０±１０、７０±１０、８０±１０、９０±１０、１００±２５、１１０±２０、１２０±１０、１３０±１０、または１４０±１０ｍｇ／ｋｇ）の用量の化合物３、
2020535133.tif 000007
またはその薬学的に許容される塩を、１日１回以上（例えば、１日１回、２回、または３回）対象に投与することを含む、対象においてシステアミン感受性障害を治療するための方法を特徴とする。特定の実施形態では、用量の投与から２時間以内（例えば、３０分、１時間、９０分、または２時間以内）は、還元剤は対象に投与されない。特定の実施形態では、用量の投与後２時間〜８時間の間に、還元剤が対象に投与される。特定の実施形態では、還元剤は、化合物３またはその薬学的に許容される塩の用量の投与後、３±１時間、４±１時間、５±１時間、６±１時間、７±１時間、または４±２時間に投与される。一実施形態では、還元剤は、グルタチオン、グルタチオンジエチルエステル、ガンマグルタミルシステイン、ジヒドロリポ酸、Ｎ−アセチルシステイン、ホモシステイン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、ビタミンＥ、およびアスコルビン酸から選択される。特定の実施形態では、化合物３またはその薬学的に許容される塩は、即時放出用に配合される。特定の実施形態では、化合物３またはその薬学的に許容される塩は、粉末として配合され、剤形はサシェである。特定の実施形態では、ＰＰＡＲアルファアゴニスト、ＰＰＡＲガンマアゴニスト、またはＮｒｆ２誘導剤を含む群から選択されるパンテテイナーゼ誘導剤が対象に投与される。一実施形態では、パンテテイナーゼ誘導剤は、アブラナ科野菜に存在するイソチオシアネート、スルフォラファン、Ｓ−アリルシステイン、ジアリルトリスルフィド、酸化脂肪、オメガ３脂肪酸、またはオレイルエタノールアミドである。特定の実施形態では、化合物３またはその薬学的に許容される塩の投与から３０分以内（例えば、５分、１０分、１５分、２０分、２５分、または３０分）に、１０〜５０ｍｇ／ｋｇ（例えば、１５±５、２０±５、２５±５、３０±５、３５±５、４０±５、または４５±５ｍｇ／ｋｇ）のシスタミンまたはその薬学的に許容される塩が対象に投与される。一実施形態では、シスタミンまたはその薬学的に許容される塩は、即時放出用に配合される。特定の実施形態では、シスタミンまたはその薬学的に許容される塩は、化合物３またはその薬学的に許容される塩の投与と同時に投与される。
【００２６】
上記の方法のいずれかにおいて、システアミン感受性障害は、シスチン症；神経変性疾患；神経発達疾患；精神神経疾患；ミトコンドリア病；腎臓、肝臓、または肺の線維性疾患；寄生虫感染症；鎌状赤血球貧血症；癌；虚血性心疾患または発作を含む虚血性疾患；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；嚢胞性線維症（ＣＦ）；細菌感染症；ウイルス感染症；非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）；アルコール性脂肪性肝炎；および非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、または本明細書に説明される任意の他のシステアミン感受性障害から選択され得る。
【００２７】
関連する態様では、本発明は、以下を含むキットを特徴とする：（ｉ）化合物３またはその薬学的に許容される塩を含む第１の医薬組成物、（ｉｉ）還元剤を含む第２の医薬組成物、および（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、第１の医薬組成物が対象に投与されてから少なくとも２時間後に第２の医薬組成物を投与するための説明書。
【００２８】
別の態様では、本発明は、以下を含むキットを特徴とする：（ｉ）化合物３またはその薬学的に許容される塩を含む第１の医薬組成物、（ｉｉ）パンテテイナーゼ誘導剤を含む第２の医薬組成物、および（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、第１の医薬組成物および第２の医薬組成物を対象に投与するための説明書。
【００２９】
さらに別の態様では、本発明は、以下を含むキットを特徴とする：（ｉ）化合物３またはその薬学的に許容される塩を含む第１の医薬組成物、（ｉｉ）シスタミンまたはその薬学的に許容される塩を含む第２の医薬組成物、および（ｉｉｉ）システアミン感受性障害の治療のために、第１の医薬組成物を対象に投与してから３０分以内に第２の医薬組成物を投与するための説明書。
【００３０】
上記のキットのいずれにおいても、説明書は、上記の化合物３を投与する方法を実施するための説明書を含むことができる。
【００３１】
別の態様では、本発明は、酸が塩酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、または酒石酸である、化合物１の酸付加塩を特徴とする。特定の実施形態では、酸は酢酸または酒石酸である。特定の実施形態では、酸は酢酸である。
【００３２】
一実施形態では、酸付加塩は、以下の式を有する。
2020535133.tif 000008
いくつかの実施形態では、酸付加塩は、以下の式を有する。
2020535133.tif 000009
【００３３】
特定の実施形態では、酸は酒石酸である。
【００３４】
一実施形態では、酸付加塩は、以下の式を有する。
2020535133.tif 000010
一実施形態では、酸付加塩は、以下の式を有する。
2020535133.tif 000011
一実施形態では、酸付加塩は、以下の式を有する。
2020535133.tif 000012
【００３５】
別の態様では、本発明は、有効量の前述の酸付加塩のいずれかを対象に投与することを含む、対象においてシステアミン感受性障害を治療するための方法を特徴とする。
【００３６】
特定の実施形態では、用量の投与から２時間以内（例えば、３０分、１時間、９０分、または２時間以内）は、還元剤は対象に投与されない。特定の実施形態では、用量の投与後２時間〜８時間の間に、還元剤が対象に投与される。特定の実施形態では、還元剤は、化合物１またはその薬学的に許容される塩の用量の投与後、３±１時間、４±１時間、５±１時間、６±１時間、７±１時間、または４±２時間に投与される。一実施形態では、還元剤は、グルタチオン、グルタチオンジエチルエステル、ガンマグルタミルシステイン、ジヒドロリポ酸、Ｎ−アセチルシステイン、ホモシステイン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、ビタミンＥ、およびアスコルビン酸から選択される。
【００３７】
特定の実施形態では、前述の酸付加塩のいずれかは、即時放出用に配合される。特定の実施形態では、前述の酸付加塩はいずれも粉末として配合され、剤形はサシェであるか、または飲用に適した水溶液中で再懸濁するためにボトルの中に配合される。特定の実施形態では、ＰＰＡＲアルファアゴニスト、ＰＰＡＲガンマアゴニスト、またはＮｒｆ２誘導剤を含む群から選択されるパンテテイナーゼ誘導剤が対象に投与される。一実施形態では、パンテテイナーゼ誘導剤は、アブラナ科野菜に存在するイソチオシアネート、スルフォラファン、Ｓ−アリルシステイン、ジアリルトリスルフィド、酸化脂肪、オメガ３脂肪酸、またはオレイルエタノールアミドである。特定の実施形態では、前述の酸付加塩のいずれかの投与から３０分以内（例えば、５分、１０分、１５分、２０分、２５分、または３０分）に、１０〜５０ｍｇ／ｋｇ（例えば、１５±５、２０±５、２５±５、３０±５、３５±５、４０±５、または４５±５ｍｇ／ｋｇ）のシスタミンまたはその薬学的に許容される塩が対象に投与される。一実施形態では、シスタミンまたはその薬学的に許容される塩は、即時放出用に配合される。特定の実施形態では、シスタミンまたはその薬学的に許容される塩は、前述の酸付加塩のいずれかの投与と同時に投与される。
【００３８】
特定の実施形態では、化合物１またはその薬学的に許容される塩の投与から３０分以内（例えば、５分、１０分、１５分、２０分、２０分、または２５分）に、１０〜５０ｍｇ／ｋｇ（例えば、１５±５、２０±５、２５±５、３０±５、３５±５、４０±５、または４５±５ｍｇ／ｋｇ）の用量の化合物３、
2020535133.tif 000013
またはその薬学的に許容される塩が、対象に投与される。任意で、化合物３またはその薬学的に許容される塩は、即時放出用に配合される。特定の実施形態では、化合物３またはその薬学的に許容される塩は、化合物１またはその薬学的に許容される塩の投与と同時に投与される。
【００３９】
上記の方法のいずれかにおいて、システアミン感受性障害は、シスチン症；神経変性疾患；神経発達疾患；精神神経疾患；ミトコンドリア病；腎臓、肝臓、または肺の線維性疾患；寄生虫感染症；鎌状赤血球貧血症；癌；虚血性心疾患または発作を含む虚血性疾患；慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；嚢胞性線維症（ＣＦ）；細菌感染症；ウイルス感染症；非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）；アルコール性脂肪性肝炎；および非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、または本明細書に説明される任意の他のシステアミン感受性障害から選択され得る。
【００４０】
さらに別の態様では、本開示は、非対称ジスルフィドを合成する方法を特徴とし、当該方法は、（ａ）１モル当量の有機カルボン酸またはその塩と、（ｂ）２〜４モル当量（例えば、２、２．５、３、３．５、または４モル当量）のシスタミンまたはその塩と、（ｃ）アミドカップリング試薬と、を組み合わせることを含み、有機カルボン酸またはその塩の９０％超（例えば、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または９９．５％）が式（Ａ）の非対称ジスルフィドに変換され、有機カルボン酸の１０％未満（例えば、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、または０．５％）が未反応のままか、または式（Ｂ）の対称ジスルフィドに変換されることを含む、混合物を形成し、
2020535133.tif 000014
式中、Ｒは有機ラジカルである。特定の実施形態では、基Ｒ−Ｃ（Ｏ）−は、１，０００ダルトン、７００ダルトン、４００ダルトン、または２００ダルトン未満の部分である。いくつかの実施形態では、Ｒ−Ｃ（Ｏ）−は、天然または合成アミノ酸、またはそれらのエステルもしくはアミドである。
【００４１】
いくつかの実施形態では、有機カルボン酸またはその塩は、パントテン酸、４−ホスホパントテン酸、酢酸、またはそれらの塩から選択される。特定の実施形態では、有機カルボン酸またはその塩は、パントテン酸またはその塩である。いくつかの実施形態では、アミドカップリング試薬は、ヒドロキシベンゾトリアゾールである。いくつかの実施形態では、アミドカップリング試薬は、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドである。いくつかの実施形態では、組み合わせることは、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、アセトニトリルジメチルホルムアミド、水、およびそれらの組み合わせから選択される１つ以上の溶媒中である。
【００４２】
別の態様では、本開示は非対称ジスルフィドを合成する方法を特徴とし、当該方法は、有機溶媒：
（ａ）システアミン、Ｎ−アセチルシステアミン、システイン、Ｎ−アセチルシステイン、Ｎ−アセチルシステインアミド、またはそれらの塩から選択される２〜４モル当量（例えば、２〜２．３、２．２〜３、２．７〜３．３、または３．１〜４モル当量）のチオール、および
（ｂ）シスタミン、パンテチン、またはそれらの塩から選択される１モル当量のジスルフィド中で組み合わせることを含む。
【００４３】
いくつかの実施形態では、チオール対ジスルフィドのモル比は、約２：１〜約４：１（例えば、約２：１〜約２．５：１、約２．５：１〜３．５：１、約２．７：１〜約３．３：１、約２．５：１〜約３：１、約３：１〜約３．５、または約３：１〜約３．５、〜約４：１、約３．５：１〜約４：１）である。特定の実施形態では、チオール対ジスルフィドのモル比は、約２．５：１〜約３．５：１（例えば、約２．５：１〜２．７：１、約２．７：１〜約３．３：１、または約３．３：１〜約３．５：１）である。他の実施形態では、チオール対ジスルフィドのモル比は、約２．７：１〜約３．３：１（例えば、約２．７：１〜約３．１：１、または約３．１〜約３．３）である。
【００４４】
いくつかの実施形態では、チオールは、Ｎ−アセチルシステアミンまたはその塩である。
【００４５】
いくつかの実施形態では、ジスルフィドは、シスタミンまたはその塩である。
【００４６】
いくつかの実施形態では、有機溶媒は、メタノールまたはエタノールである。特定の実施形態では、有機溶媒はメタノールである。
【００４７】
定義
「即時放出」とは、人工胃液中で溶解放出プロファイルを有する単位剤形で配合された活性剤（例えば、システアミン前駆体、またはその薬学的に許容される塩）を放出する態様を意味し、薬剤の少なくとも５５％、６５％、７５％、８５％、または９５％が、ＵＳＰ適合機器を使用して試験の最初の２時間以内に放出される。
【００４８】
「制御放出」とは、解剖学的放出部位もしくは放出の速度のいずれか、または両方の制御を可能にする様式で、活性剤（例えば、システアミン前駆体、またはその薬学的に許容される塩）をその製剤から放出する態様を意味する。一般に、制御放出製剤の目的は、治療薬物レベルが体内に存在する期間（例えば、即時放出製剤に対する）を延長すること、および／またはシステアミン吸収部位への薬物送達を最適化することであり、それによって２４時間で投与されなければならない用量の数を減少させる。胃内滞留性、遅延放出、持続放出、および結腸標的製剤は、全て制御放出製剤の例である。制御放出製剤はまた、同じ用量レベルで投与される即時放出製剤（すなわち、本発明のシステアミン前駆体の場合には低下したシステアミンＣｍａｘ）に対して観察されるものに対して、薬剤（Ｃｍａｘ）のピーク濃度の低減を可能にし得る。活性剤の制御放出製剤は、例えば、活性剤を、本体の溶解または浸食が遅いマトリックス物質に包埋することによって達成することができ、それにより有効成分は、マトリックスからの拡散もしくマトリックスの表面の浸食のいずれかまたは両方によって、あるいは薬物が半透過性層をゆっくりと出る、半透過性表面を有するゲルの形成によって、コーティングからゆっくりかつ規則的に浸出する。
【００４９】
「遅延放出」とは、薬学的調製物、例えば、胃の酸性環境を実質的に無傷で通過し、小腸のより塩基性の環境で溶解し、それにより単位剤形で配合された活性剤（例えば、システアミン前駆体またはその薬学的に許容される塩）が、薬剤の２５％、２０％、１５％、１０％、または５％未満が、試験の最初の１時間以内に放出される、人工胃液中の溶解放出プロファイルを有し、追加として、薬剤の少なくとも５５％、６５％、７５％、８５％、または９５％が、試験の最初の２時間以内に放出される、ｐＨ６．０または６．３または６．５の人工腸液中の溶解放出プロファイルを有する、経口投与製剤を意味する。いくつかの実施形態では、活性剤（例えば、システアミン前駆体、またはその薬学的に許容される塩）の遅延放出は、経口剤形のｐＨ感受性腸溶性コーティングの使用から生じる。腸溶性コーティングは、薬物が放出される期間を延長するように、例えば、急速または遅い（持続した）放出製剤、またはその２つの組み合わせと組み合わせることができる。
【００５０】
「持続放出」という用語（文献では「延長放出」とも呼ばれる）は、同じ薬物の即時放出製剤と比較して、長期間、例えば６〜１２時間以上にわたって薬物の徐放を提供し、それにより単位剤形で配合された活性剤（例えば、システアミン前駆体、またはその薬学的に許容される塩）が、薬剤の少なくとも１０〜４５％（すなわち、１５〜４５％、２０〜４５％、２５〜４５％、３５〜４５％、３０〜４５％、または４０〜４５％）が、試験の最初の３時間以内に放出され、人工小腸液中にあるとき、薬剤の６５％、７５％、８５％、９０％、９３％、９５％、または９７％以上が、８時間以内に放出される、人工胃液または腸液中の溶解放出プロファイルを有する、薬物製剤を指す。好ましくは、必ずしも必要ではないが、持続放出は、長期間にわたって、治療される疾患の治療範囲内にある薬物の実質的に一定の血中レベルをもたらす。好ましくは、システアミン前駆体の持続放出製剤は、例えば５〜５０μＭ、５〜４０μＭ、５〜３５μＭ、５〜３０μＭ、５〜２５μＭ、５〜２０μＭ、または１０〜５０μＭ、１０〜４５μＭ、１０〜４０μＭ、１０〜３５μＭ、１０〜３０μＭ、１０〜２５μＭ、または１０〜２０μＭの間の濃度範囲内に入る、血漿システアミンレベルを生じる。
【００５１】
「結腸標的」という用語は、結腸（小腸よりも腸内細菌叢の密度がはるかに高い）および任意に遠位回腸（胃腸管の最もアルカリ性の領域である傾向がある）においても薬物放出を提供する製剤または組成物を指す。遠位回腸および結腸への薬物放出を標的とするための１つの方法は、回腸における典型的なｐＨであるｐＨ７（例えば、ｐＨ６．８、ｐＨ６．９、ｐＨ７．０）付近で溶解するｐＨ感受性コーティングを使用することである。回腸におけるｐＨ依存性薬物放出のために設計された製剤は、結腸内でも薬物を放出する可能性が非常に高い（特に、薬物が持続放出マトリックスに包埋されている場合）、および／または回腸で放出されるシステアミン前駆体の一部が、依然として前駆体（すなわち、まだシステアミンに変換されていない）形態で結腸に移ることができる。別の種類の結腸標的製剤は、腸内細菌によって作製された酵素に依存して、唾液、胃、または膵臓酵素によって分解することができない薬物封入ポリマーを分解し、それによって結腸での薬物送達をもたらす。腸内細菌叢の密度は、遠位回腸においても高く、そのため、腸内細菌叢は、ポリマーを消化し始め、したがって遠位回腸において薬物を放出することができる。回腸および結腸標的製剤は、本明細書では結腸標的製剤と総称される。
【００５２】
「単位剤形」という用語は、各単位が所定量のシステアミン前駆体、またはその薬学的に許容される塩を含有する丸剤、錠剤、カプレット、硬質カプセル、または軟質カプセルなどの一体型剤形として適切な物理的に別個の単位を指す。「硬質カプセル」とは、薬物および賦形剤の固体または液体ペイロードを担持することができる２部分のカプセル形状の容器を形成する膜を含むカプセルを意味する。「軟質カプセル」とは、薬物および賦形剤の液体または半固体または固体ペイロードを担持する単一の容器に成形されたカプセルを意味する。顆粒、粉末、および液体は、適切な包装を使用することによって、「単位剤形」で提供することもできる。例えば、顆粒または粉末は、サシェで、およびアンプル、バイアル、またはプラスチック容器中の液体で投与することができる。
【００５３】
「微粒子」という用語は、本明細書で使用される場合、薬物製剤に使用されるマイクロビーズ、マイクロスフェア、マイクロペレット、ナノ粒子、ナノビーズ、ナノスフェア、または他の微細粒子を指し、各微粒子が、平均直径で０．０５〜９９９マイクロメートルの間にある。そのような微粒子の数十、数百、または数千を単一の単位剤形で使用することができ、例えば、それらをカプセルの中に充填するか、または粉末として配合するか、または液体中に懸濁させることができる。
【００５４】
薬剤の「有効量」という用語は、本明細書で使用される場合、疾患寛解などの患者において有益なまたは所望の結果をもたらすために十分な量であり、そのような「有効量」は、患者の年齢および体重、疾患の影響を受ける臓器（複数可）を含む疾患の性質、疾患の状態または活性のレベル、患者のシステアミンに対する感受性、および他の要因を含む、それが適用されている文脈に依存する。
【００５５】
本明細書で使用される場合、「パンテテイン」、「４−ホスホパンテテイン」、「デホスホ補酵素Ａ」、および「補酵素Ａ」、ならびに胃腸管におけるこれらの化合物のうちの１つに変換可能な任意の類縁体または誘導体は、全てＤ鏡像異性体を指す（最近の命名法を用いて、Ｒ鏡像異性体とも呼ばれることもある）。これらの化合物の各々は、それぞれ（Ｒ）または（Ｓ）形態とも呼ばれるＤ（デキストロ）形態またはＬ（レボ）形態のいずれかで存在し得る、パントテノイル部分にキラル炭素を含有する。Ｄ−パンテテイン鏡像異性体のみが、パンテテイナーゼの基質であり、したがってシステアミン前駆体である唯一のパンテテイン鏡像異性体である。同様に、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、および補酵素Ａなどのパンテテインに変換可能な化合物のＤ−鏡像異性体のみが、本発明の組成物および方法において有用である。
【００５６】
本明細書で使用される場合、「ジスルフィド化合物」は、Ｒ１−Ｓ−Ｓ−Ｒ２（式中、Ｒ１およびＲ２が有機化合物である）の形態の第２の硫黄原子に化学的に結合した硫黄原子を含有する化合物である。Ｒ１およびＲ２は、同一でも異なっていてもよい。ジスルフィド化合物は、一般に、２つのチオールの酸化によって形成され（すなわち、Ｒ１−Ｓ−Ｈ＋Ｒ２−Ｓ−Ｈが、Ｒ１−Ｓ−Ｓ−Ｒ２＋２Ｈ＋を生じる）、還元によって２つのチオールに可逆的に変換され得る（すなわち、Ｒ１−Ｓ−Ｓ−Ｒ２＋２Ｈ＋が、Ｒ１−Ｓ−Ｈ＋Ｒ２−Ｓ−Ｈを生じる）。ジスルフィド化合物はまた、１つまたは２つのチオールを、ジチオールと反応させることによって形成され得る（例えば、Ｒ１−Ｓ−Ｈ＋Ｒ２−Ｓ−Ｈ＋Ｈ−Ｓ−Ｒ３−Ｓ−Ｈが、Ｒ１−Ｓ−Ｓ−Ｒ３−Ｓ−Ｓ−Ｒ２＋４Ｈ＋を生じ、式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、有機化合物であり、Ｈ＋は、水素イオンである）。本発明のジスルフィド化合物は、１）式Ｃ２Ｈ６ＮＳ−Ｓ−Ｒ１（式中、Ｒ１は有機部分である）のシステアミン混合ジスルフィド化合物、２）式Ｃ１１Ｈ２１Ｎ２Ｏ４Ｓ−Ｓ−Ｒ１，（式中、Ｒ１は有機部分である）のパンテテインジスルフィド化合物、３）式Ｃ１１Ｈ２２Ｎ２Ｏ７ＰＳ−Ｓ−Ｒ１（式中、Ｒ１は有機部分である）の４−ホスホパンテテインジスルフィド化合物、４）式Ｃ２１Ｈ３４Ｎ７Ｏ１３Ｐ２Ｓ−Ｓ−Ｒ１（式中、Ｒ１は有機部分である）のデホスホ補酵素Ａジスルフィド化合物、５）式Ｃ２１Ｈ３５Ｎ７Ｏ１６Ｐ３Ｓ−Ｓ−Ｒ１（式中、Ｒ１は有機部分である）の補酵素Ａジスルフィド化合物、または６）式Ｃ４Ｈ８ＮＯＳ−Ｓ−Ｒ１（式中、Ｒ１は有機部分である）のＮ−アセチルシステアミン化合物を包含する、生物活性硫黄含有化合物である。追加のジスルフィドは、２つのジスルフィド結合を形成し得る化合物である、ジチオールを使用して形成することができる。少なくとも１つの、および任意に両方のジスルフィド結合は、システアミンまたは胃腸管でシステアミンに分解可能な化合物とのものである。あるいは、ジチオールは、たった１つのそのような化合物にジスルフィド結合しており、ジチオールの第２のチオールは、チオール形態で残っているか、または第２のチオールは、例えば図１７に列挙されている任意のチオールを含む任意のチオールにジスルフィド結合することができる。胃腸管でシステアミンに分解可能な化合物としては、パンテテインに加えて、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、もしくはＮ−アセチルシステアミン、または胃腸管において（例えば、化学的もしくは酵素的プロセスによって）これら５つの化合物のうちの１つに変換可能な任意の類似体もしくは誘導体が挙げられる。本明細書において「適切な類似体または誘導体」と呼ばれる任意のそのような類似体または誘導体は、本発明のチオールであり、これらの５つの化合物のうちの１つの代わりになり得る。「混合ジスルフィド」は、２つの異なるチオールから形成されるジスルフィドである。「システアミン混合ジスルフィド」とは、システアミンを別の（システアミンでない）チオールと接続するジスルフィドを意味する。「パンテテイン混合ジスルフィド」とは、パンテテインを別の（パンテテインでない）チオールと接続するジスルフィドを意味し、以下同様である。一般に、混合ジスルフィドは、２つの構成体チオールのより単純なものによって分類される（例えば、システアミン−パンテテインは、システアミン混合ジスルフィドと呼ばれる）。ジスルフィドシステアミン前駆体を形成するために有用なチオールとしては、例えば、Ｌ−システイン、Ｎ−アセチルシステイン、グルタチオン、図１７に列挙される任意のチオール、および本明細書に説明される他のチオールが挙げられる。いくつかの例示的な混合ジスルフィドは、図２〜図１０に示されている。図１８〜図２１の表は、ジスルフィドを形成するために、図１７のチオールをどのようにして有用に組み合わせることができるかを示している。簡潔かつ明瞭にするために、ジスルフィド結合を介して接続される２つのチオールの名称は、本明細書では、正式な化学名（例えばＩＵＰＡＣ命名法を用いる）ではなく、ジスルフィド名を示すために使用される。したがって、システアミン−パンテテインは、これら２つの化合物から形成されるジスルフィドを指す。そのルールに対する３つの重要な例外は、次のとおりである。２つのパンテテインを反応させることによって形成されるジスルフィドは、一般にパンテチンと呼ばれ、２つのシステインを反応させることによって形成されるジスルフィドは、一般にシスチンと呼ばれ、２つのシステアミンを反応させることによって形成されるジスルフィドは、一般にシステアミンと呼ばれる。
【００５７】
本明細書で使用される場合、「…を反応させることによって形成されるジスルフィド」または「…を反応させることによって形成される化合物」という用語は、特に２つの指定されたチオールの間に形成されるジスルフィドを指す。例えば、システアミンをパンテテインと反応させることによって形成されるジスルフィド（システアミン−パンテテインと呼ばれる）は、システアミン分子とパンテテイン分子との間に形成されるヘテロ二量体を意味する。この定義は、２つの指定されたチオールが反応したときに、何が実際に起こり得るかを反映していない。すなわち、システアミンを酸化条件下でパンテテインと反応させると、次の化学的条件に依存して３つのジスルフィドが様々な割合で形成され得る：システアミン−システアミン（すなわち、シスタミン）、システアミン−パンテテイン（また、本発明の目的のために同一であるパンテテイン−システアミン）、およびパンテテイン−パンテテイン（すなわち、パンテチン）。実際の反応産物（すなわち、３つのジスルフィドの混合物）を意味するとき、そのテキストは明らかにそれを述べている。
【００５８】
「システアミン前駆体」とは、生理学的条件下で少なくとも１つのシステアミンに変換され得る化合物を意味する。変換の手段としては、システアミン含有ジスルフィド（すなわち、システアミン混合ジスルフィド）の場合の還元、パンテテイナーゼ基質（パンテテインならびに胃腸管内でパンテテインに代謝的に変換可能な化合物、例えば４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、および補酵素Ａ、ならびにその適切な類似体もしくは誘導体）の場合の酵素加水分解、または還元および酵素的切断の両方が挙げられる。前駆体の例としては、システアミン混合ジスルフィド、パンテテインジスルフィド、４−ホスホパンテテインジスルフィド、デホスホ補酵素Ａジスルフィド、補酵素Ａジスルフィド、およびＮ−アセチルシステアミンジスルフィド、ならびにパンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、およびＮ−アセチルシステアミンが挙げられるが、これらに限定されない。システアミン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、および補酵素Ａ（後者の４つの化合物は、システアミン前駆体である）の間の化学的関係を以下に示す。構成体チオールが全てシステアミン前駆体であるため、２つのパンテテイン分子（すなわち、パンテチン）、または２つの４−ホスホパンテテイン分子、または２つのデホスホ補酵素Ａ分子、または２つの補酵素Ａ分子、または２つのＮ−アセチルシステアミン分子のホモ二量体もまた、各々ジスルフィドシステアミン前駆体化合物である。
【００５９】
「適切な類似体または誘導体」とは、システアミン前駆体であるパンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、もしくはＮ−アセチルシステアミン、またはそれらのうちのいずれかを含有するジスルフィドに関して、化学的プロセスによるかまたは酵素的プロセスによるかにかかわらず、胃腸管でパンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、またはＮ−アセチルシステアミンに変換可能な化合物を意味する。
【００６０】
「パンテテインに変換可能な化合物」とは、胃腸管でパンテテインに分解され得る、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、および補酵素Ａなどの化合物、ならびに胃腸管で親化合物に変換され得る化合物の類似体または誘導体を意味する。
【００６１】
ジスルフィドに関して使用される「構成体チオール」とは、反応してジスルフィドを形成するチオール（および任意にジチオール）化合物を意味する。
【００６２】
「システアミン含有量」とは、化学的および／または酵素的分解の際にインビボでシステアミンに変換可能なシステアミン前駆体の重量分率を意味する。
【００６３】
「薬学的に許容される塩」という用語は、本明細書で使用される場合、適切な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応等を伴わずにヒトおよび動物の組織と接触させて使用するのに適し、合理的な便益／リスク比に見合うような塩を表す。薬学的に許容される塩は、当該分野において周知である。例えば、薬学的に許容される塩は、Ｂｅｒｇｅら、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ６６：１−１９，１９７７、およびＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｕｓｅ（Ｐ．Ｈ．ＳｔａｈｌおよびＣ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ編），Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００８に説明されている。この塩は、本発明の化合物の最終的な単離および精製の間に原位置で、または遊離塩基基を適切な有機酸もしくは無機酸と反応させることによって別々に調製することができる。代表的な酸付加塩としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、重酒石酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリル酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩等が挙げられる。代表的なアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム等、ならびに非毒性アンモニウム、第四級アンモニウム、およびアミンカチオンが挙げられ、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミン等を含むが、これらに限定されない。
【００６４】
「胃内滞留性」、「胃滞留性」等とは、哺乳動物、好ましくはヒトの胃内に長期間にわたって、好ましくは食物のそれと同じ長さ、より好ましくは食物のそれより長い時間にわたって滞留可能な医薬組成物を意味する。したがって、「胃滞留」は、遊離形態で、例えば、胃内滞留性であると見なされない経口送達ビヒクル内で送達されたときに胃内で滞留する時間よりも長い期間にわたる、胃の中の薬物組成物の維持である。胃内滞留性製剤は、胃からの通常の排出時間よりも長い期間、すなわち約２時間より長い、特に約３時間より長い、通常は約４、６、８、または１０時間より長い期間にわたる胃内滞留を特徴とし得る。胃内滞留性製剤は、典型的には、食事を摂取した後約３、４、６、８、１０時間、または時には１８時間以上にわたって胃内に滞留する。しかしながら、本発明によれば、制御放出胃内滞留性薬物送達系の滞留は、非空腹時に投与して４８時間以上後、好ましくは２４時間後には観察されないことに留意されたい。胃内滞留性製剤としては、浮遊性もしくは浮揚性製剤、膨潤性もしくは膨張製剤、生体付着性もしくは粘膜付着性製剤、展開製剤および磁性製剤、またはそれらの任意の組み合わせが挙げられる。たった１つの胃内滞留機序で胃内滞留を維持することが困難であることが判明しているため、２種以上の胃内滞留性製剤の組み合わせが一般的である。胃内滞留性製剤は、好ましくは食事とともに投与される。
【００６５】
互換的に使用される「浮遊性」、「浮遊」、および「浮揚性」とは、本発明の組成物を、摂食状態での粥状液である（絶食状態または胃排出後の胃液）、胃内容物の表面上またはその近傍に位置づける能力を有する製剤の種類を意味する。胃内容物上に浮遊することにより、製剤は、胃の筋肉の収縮中に、幽門を通って十二指腸内に推進される機会が少なくなり、幽門は、着座または起立した状態で胃の底部に位置する。浮遊製剤は、小さい（例えば、ミクロンスケール）、中程度（例えば、ミリスケール）、または大きい（例えば、センチメートルスケール）の粒子からなる場合がある。大きな組成物は、本明細書で説明するように、膨潤性／膨張性機序を介して同時に作用し得る。任意のサイズの製剤は、粘膜付着性機序を介して同時に作用することができる。
【００６６】
互換的に使用される「膨潤性」および「膨張性」とは、組成物が、胃液または粥状液などの流体含有媒体との接触時にその寸法を増大させる能力を意味する。好ましくは、「膨潤性」は、最初の錠剤の寸法を、胃から容易に除去されないであろうサイズに増加させることを特徴とする。胃からの排出は、幽門の通過を伴う。ヒトにおける幽門の平均静止直径は、摂食状態および絶食状態で変化する。摂食状態では約１センチメートル以下、絶食状態では約１．２８センチメートル±７ミリメートルである。好ましくは、「膨潤性」は、組成物の寸法を、少なくとも２つの寸法で１４ｍｍ以上、１６ｍｍ以上、１８ｍｍ以上、２０ｍｍ以上、または２２ｍｍ以上であるが、代替として１つの寸法のみがそうある場合、２つ目および３つ目の両方の寸法が１２ｍｍ、１４ｍｍ、または１６ｍｍより大きくなるまで増加させることを必要とする。
【００６７】
「粘膜付着」とは、組成物が胃腸管内を覆う粘液の層に付着する能力を意味する。胃内滞留性製剤の場合、「粘膜付着」は、胃内を覆う粘液層への付着を指す。粘膜付着は、胃内滞留時間を延長するためのいくつかの技術のうちの１つであるが、胃の粘膜層は、ゆっくりでも継続的に代謝回転し、粘膜付着の持続時間を制限する。したがって、粘膜付着は、通常、長期の胃内滞留時間をもたらすために他の胃内滞留法と組み合わせられる。「生体付着」とは、組成物が、腸細胞の表面上の分子を含む胃腸管内を覆う他の分子に付着する能力を意味する。
【００６８】
互換的に使用される「展開」または「形状変化」とは、組成物が、胃の中で展開し、伸び、巻き戻り、緩むか、または他の方法で開いて、容易に幽門を通過せず、したがって長期間にわたって胃内に滞留するサイズおよび／または幾何形状の組成物に変容する能力を意味する。「展開」または形状変化製剤を、カプセル内で配合することができる。必須ではないが理想的に、展開または無包装状態の展開製剤の寸法は、少なくとも２つの寸法で１６ｍｍ、１８ｍｍ、２０ｍｍ、または２２ｍｍより大きいが、代替として１つの寸法のみがそうある場合、２つ目および３つ目の寸法が１２ｍｍ、１４ｍｍ、または１６ｍｍ以上である。
【００６９】
「磁性製剤」とは、長期間にわたって胃または小腸での組成物の滞留をもたらすために、体外に配置された磁石（複数可）によって形成された外部印加された磁場と相互作用することができる磁石または播種性磁化材料を含有する組成物を意味する。胃を標的とした組成物は、好ましくは、少なくとも食物が胃に滞留する限り、より好ましくは食物が滞留するより長く滞留する。小腸を標的とした組成物は、好ましくは、実質的に完全な薬物溶解まで、または組成物を適所に保持するために適正な磁気強度が失われるまでのいずれか早い方まで滞留する。使用される磁石または磁性材料は、ヒトの摂取に対して安全でなければならない。外部磁石を使用して、結腸などの胃腸管の他の領域に磁石を含有する医薬組成物を配置することもできるが、ほとんどの場合、磁性製剤は、胃内滞留性製剤または小腸標的製剤の一種である。
【００７０】
本明細書で使用される場合、「治療有効量」は、疾患を改善するため、または疾患活動の代理となるバイオマーカーを調節するために、患者（ヒトまたは非ヒト哺乳動物）に投与されなければならない量を指す。神経変性、代謝性、線維性、虚血性、感染性、腫瘍性、および遺伝性疾患を含む様々な疾患の臨床的エンドポイントは広く変化するが、一般に当該分野で周知である。特定のバイオマーカーとしては、例えば、（ｉ）シスチン症患者における疾患制御の代理となる白血球（ＷＢＣ）シスチンレベル；（ｉｉ）臨床的全体評価（ＣＧＩ）スコア、臨床医インタビューに基づく変化および介護者インプットに関する評価（ＣＩＢＩＣ−Ｐｌｕｓ）、アルツハイマー病共同研究−臨床医による変化に関する全体評価（ＡＤＣＳ−ＣＣＧＩＣ）スコア、アルツハイマー病評価スケール−認知的サブスケール（ＡＤＡＳ−Ｃｏｇ）スコア、アルツハイマー病共同研究−重度認知症に関して修正された日常生活動作インベントリー（ＡＤＣｓ−ＡＤＬｓｅｖ）スコア、ミニメンタルステート検査（ＭＭＳＥ）、精神神経インベントリー（ＮＰＩ）スコア、統一ハンチントン病評価スケール（ＵＤＨＲＳ）、ＭＡＴＴＩＳテスト、ホプキンストレイルメーキングテスト、カテゴリー流暢性課題、統一パーキンソン病評価スケール（ＵＰＤＲＳ）スコア、またはパーキンソン病睡眠スケール（ＰＤＳＳ−２）合計スコアのような手段を含む、認知的、運動的または感情的状態の指標を用いて、神経変性疾患患者の治療応答を測定することができる。（ｉｉｉ）神経変性疾患活動の生化学的尺度としては、ＡＤバイオマーカー（例えば、血漿ベータ−アミロイドタンパク質）または脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）レベルが挙げられる。（ｉｖ）代謝性および線維性肝疾患の指標としては、（ＮＡＦＬＤ）活動スコア（ＮＡｓ）および肝線維スコアなどの肝生検に基づく肝線維症の測定などの解剖学的検査が挙げられる。（ｖ）ＨＯＭＡ−ＩＲおよびアジポ−ＩＲ指標によってそれぞれ測定される、肝臓および脂肪組織インスリン感受性を含む肝臓健康の生化学的指標、血清アミノトランスフェラーゼおよびガンマ−グルタミルトランスペプチダーゼ（ＧＧＴ）レベル、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、ＡＳＨ、または遺伝性肝疾患に関する血中のＣＫ−１８由来断片。（ｖｉ）ミトコンドリア病に関する疾患状態の指標としては、臨床エンドポイントとしてのニューキャッスル小児ミトコンドリア病スケール（ＮＰＭＤＳ）スコアが挙げられる。ならびに（ｖｉｉ）グルタチオン、総血清チオール、アセトアセテート、ベータ−ヒドロキシブチレート、乳酸塩、またはマロンジアルデヒド（酸化ストレスのマーカー）のレベルを含むバイオマーカーを挙げることができる。他の代理疾患マーカーとしては、免疫応答の調節、遺伝子もしくはタンパク質発現の調節、または確認された放射線学的疾患尺度（例えば、Ｘ線、ＣＴスキャン、ＭＲＩスキャン、もしくはＰＥＴスキャンによって評価される）の調節が挙げられる。システアミン前駆体の治療有効量を決定する方法は、高度に疾患特異的であり、上記疾患の各々を専門とする臨床医には周知である。
【００７１】
本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される賦形剤」は、過度の有害な副作用（毒性、刺激、またはアレルギー反応など）を伴わずにヒトおよび／または非ヒト哺乳動物での使用に適した組成物の製剤中に（活性成分と一緒に）含まれる天然または合成物質である。賦形剤としては、例えば、抗付着剤、抗酸化剤、結合剤、コーティング剤、圧縮助剤、崩壊剤、染料（色）、皮膚軟化剤、乳化剤、充填剤（希釈剤）、フィルム形成剤またはコーティング剤、香味料、香料、滑剤（流動促進剤）、潤沢剤、保存剤（酸化防止剤を含む）、印刷インク、吸着剤、懸濁剤または分散剤、溶媒、コロイド安定剤、甘味料、および水を挙げることができる。ＵＳ  ＦＤＡは、薬物を配合する際に一般に使用される数千種の物質に関する情報を含む、「不活性成分」のデータベースを維持している。このデータベースは、制御放出、遅延放出、持続放出、または延長放出製剤において一般的に使用される賦形剤を検索することができる。賦形剤としては、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム（二塩基性）、ステアリン酸カルシウム、カルボマー、クロスカルメロース、架橋ポリビニルピロリドン、クエン酸、クロスポビドン、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、またはヒプロメロースを含むセルロース誘導体、ドクサートナトリウム、ゼラチン、ゲルシール（ｇｅｌｕｃｉｒｅ）４３／０１、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、マルチトール、マンニトール、メチルセルロース、メチルパラベン、微結晶セルロース、ポリエチレングリコール、ポリ（エチレンオキシド）、ポリビニルピロリドン、ポビドン、アルファ化デンプン、プロピルパラベン、シェラック、二酸化ケイ素、カルボキシメチルセルロースナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、ソルビトール、デンプン（トウモロコシ）、ステアリン酸、スクロース、タルク、二酸化チタン、植物油、白色、黄色、または蜜蝋を含む蝋、およびキシリトールが挙げられるが、これらに限定されない。賦形剤としてはまた、希釈剤（例えば、生理食塩水および水性緩衝液）、水性担体、および非水性担体、例えば水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）、およびそれらの適切な混合物、オリーブ油などの植物油、およびオレイン酸エチルなどの注入可能な有機エステルが挙げられる。特定の特性を有する組成物を配合するために有用な賦形剤は、発明の詳細な説明により具体的に説明されている。
【００７２】
「腸溶性コーティング」とは、本明細書に説明される活性成分（複数可）（例えば、システアミン前駆体、ならびにシステアミン前駆体の分解および吸収の促進剤）が胃を通過するときに、それらを保護する、本明細書に説明される製剤に添加される薬剤または化合物を意味する。腸溶性コーティングはまた、刺激性の薬学的成分（例えば、システアミン）から胃を保護する。市販の腸溶性コーティング技術の例としては、ＡｃｒｙｌＥＺＥ、Ｏｐａｄｒｙ、ＮｕｔｒａｔｅｒｉｃおよびＳｕｒｅｔｅｒｉｃ製品（Ｃｏｌｏｒｃｏｎ，Ｗｅｓｔ  Ｐｏｉｎｔ  ＰＡ）、Ａｄｖａｎｔｉａ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｃｏａｔｉｎｇｓ（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｗａｙｎｅ  ＮＪ）、Ｋｏｌｌｉｃｏａｔ製品ライン（ＢＡＳＦ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｌｕｄｗｉｇｓｈａｆｅｎ  Ｇｅｒｍａｎｙ）、Ａｑｕａｃｏａｔ製品（ＦＭＣ  ＢｉｏＰｏｌｙｍｅｒ）、Ｅａｓｔｍａｎ  Ｃ−Ａ−Ｐ（Ｅａｓｔｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．Ｋｉｎｇｓｍａｎ  ＴＮ）、Ｅｕｄｒａｇｉｔ製品ライン（Ｅｖｏｎｉｋ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ）、ならびにＡＱＯＡＴ、ＨＰ−５０、およびＨＰ−５５製品ライン（Ｓｈｉｎ  Ｅｔｓｕ  Ｐｈａｒｍａ）が挙げられるが、これらに限定されない。Ａｓｈｌａｎｄ  Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ、Ｅｎｃａｐ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ、およびＳａｎｙｏ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｌｔｄ．もまた、腸溶性コーティング系を販売している。腸溶性コーティング製剤に一般に使用されるｐＨ感受性フィルム形成ポリマーの例としては、（ｉ）セルロースアセテートフタレートなどのセルロース系ポリマー（例えば、Ａｑｕａｃｏａｔ  ＣＰＤ、ＦＭＣ；Ｃ−Ａ−Ｐ、Ｅａｓｔｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．）、セルロースアセテートスクシネート、セルロースアセテートトリメリテート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート（例えば、ＡｑｕａＳｏｌｖｅ，Ａｓｈｌａｎｄ  Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ，Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ  ＤＥ）、（ｉｉ）１：１および１：２の比のポリ（メタクリル酸−エチルアクリレート）などのポリメタクリレート（例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ３０Ｄ−５５およびＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ１００−５５（Ｅｖｏｎｉｋ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ）、ＡｃｒｙｌＥＺＥ（Ｃｏｌｏｒｃｏｎ）、Ｋｏｌｌｉｃｏａｔ  ＭＡＥ  ３０  ＤＰおよびＫｏｌｌｉｃｏａｔ  ＭＡＥ  １００Ｐ（ＢＡＳＦ  Ｐｈａｒｍａ  Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ）、Ｐｏｌｙｑｕｉｄ  ＰＡ−３０（Ｓａｎｙｏ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ）、およびポリ（メタクリル酸−メチルメタクリレート）、（ｉｉｉ）ポリ（ビニルアセテート）フタレートなどのポリビニル誘導体（例えば、Ｓｕｒｅｔｅｒｉｃ、Ｃｏｌｏｒｃｏｎ）、ならびに（ｉｖ）スチレンおよびマレイン酸のコポリマーの半エステル、ビニルエーテルおよびマレイン酸のコポリマーの半エステル、ならびにビニルアセテートおよびクロトン酸のコポリマーのなどの他のコポリマーが挙げられる。腸溶性コーティングはまた、シェラック（例えば、ＰＲＯＴＥＣＴ、Ｓｅｎｓｉｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏａｔｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）またはアルギン酸ナトリウムおよびゼイン（Ｅｎｃａｐ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ）を使用して作製される。ヒドロキシプロピルメチルセルロースはまた、ヒプロメロースまたはＨＰＭＣとも呼ばれる。腸溶性コーティング製剤に一般に使用される他の賦形剤の例としては、湿潤微晶質セルロース、湿潤粉末セルロース、ゲランガム、およびステアリン酸が挙げられる。腸溶性コーティングは、錠剤、カプセル、および微粒子を含む様々な製剤に適用することができる。
【００７３】
本明細書で使用される場合、「併用療法」は、本発明による治療を必要とする患者（または非ヒト哺乳動物）が、本明細書に開示されるものに加えて、本明細書に完全に説明されていないか、または場合によっては企図されていない薬物療法を受けることを意味する。併用療法は、本発明のシステアミン前駆体療法と連続して（前もしくは後に）または同時に行うことができる。
【００７４】
「治療する」とは、疾患または障害を治療し、疾患徴候もしくは症状の改善、または疾患活動もしくは疾患状態の生化学的、放射線学的、行動的、もしくは身体的なマーカーの改善などの、有益なまたは望ましい結果を得る目的で、患者を管理レジメンに供することを意味する。有益なまたは望ましい結果の例としては、炎症の解消、生化学的不均衡の解消、生活の質の改善、認知および行動状態の改善、運動機能の改善、感情および気分状態の改善、睡眠改善、またはより一般的には、１つ以上の症状もしくは状態の緩和または改善、疾患の程度の減少、疾患の状態の安定化、病気の伝播の予防、疾患の進行の遅延または減速、疾患、障害、または病態の改善または緩和、および重大な疾患発現の部分的または完全な寛解を挙げることができるが、これらに限定されない。
【００７５】
「哺乳動物」という用語は、ヒトおよび非ヒト哺乳類の両方を意味することが意図される。
【００７６】
「送達する」とは、本明細書に説明される活性成分（複数可）を、活性成分（複数可）および（任意に）１種以上の担体および／または希釈剤および／または補助剤または他の賦形剤を含有する、錠剤、カプセル、液体、粉末、顆粒、微粒子、サシェ、坐剤、等（「医薬組成物」または単に「組成物」と総称される）の経口投与によって提供および／または投与することを意味する。組成物は、該組成物の表面または包装上の任意の色分けまたは英数字のテキストの説明、ならびに組成物が特定の時間帯に、または食品（例えば、（特定の種類または量の食品）、液体、食事（食事の種類に関する詳細を含む）、または他の薬物療法とともに摂取されるべきかどうか、および薬物投与後のある期間にわたって、患者が直立したままであるか、または座っているべきかどうかに関する指示を含む、送達のための指示とともに提供され得る。
【００７７】
いくつかの疾患の頭字語、遺伝子名、および他の医学用語は、略語によって表される。疾患の頭字語としては、ＭＥＬＡＳ（ミトコンドリア脳心筋症、乳酸アシドーシス、および脳卒中様エピソード）ならびにＭＥＲＦＦ（赤色ぼろ線維を伴うミオクローヌス癲癇）が挙げられる。遺伝子名としては、ＰＯＬＧ（ＤＮＡポリメラーゼガンマ、ミトコンドリアＤＮＡポリメラーゼの触媒サブユニットをコードする）；ＯＣＴ１、ＯＣＴ２、およびＯＣＴ３（有機カチオン輸送体１、２、および３をコードする）（それぞれＳＬＣ２２Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ２、およびＳＬＣ２２Ａ３としても知られる）；ＰＡＮＫ２（パントテネートキナーゼ２をコードする）；ＶＮＮ１（バニン１をコードする、パンテテイナーゼとしても知られる）；ＶＮＮ２（バニン２をコードする、ＧＰＩ−８０およびパンテテイナーゼとしても知られる）が挙げられる。
【００７８】
本明細書で使用される場合、「システアミン感受性疾患」は、システアミンが有効な治療であり得るという証拠がある疾患を意味する。証拠は、哺乳動物（例えば、ヒト、イヌ、マウス、ラット、サル、ウサギ）における疾患の臨床的もしくは前臨床的研究のいずれか、または疾患機序のインビトロ研究から導かれ得る。システアミン感受性疾患は、広く変化する徴候および病因を有する広範な異種の疾患群を構成する。システアミン有効性の証拠がある疾患および障害は、システアミン有効性の機序が必ずしも明確ではなく、未知の作用機序があり得るという重要な注意点とともに、病因によって分類され得る。システアミン感受性疾患の重要なカテゴリーとしては、（ｉ）シスチン輸送の障害（中でもシスチン症が最もよく知られている）、（ｉｉ）神経変性および肝臓疾患を含む酸化的損傷に関連する障害、（ｉｉｉ）神経変性疾患、遺伝性ミトコンドリア疾患、突然変異体ＭＥＣＰ２およびＰＯＬＧに関連する疾患を含む、病理学的酵素活性に関連する障害、（ｉｖ）腎臓、肝臓、または肺の線維症を含む線維性障害、（ｖ）代謝症候群Ｘ、糖尿病、および非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）に至る非アルコール性脂肪肝疾患のスペクトルを含む代謝障害、（ｖｉ）ある特定のウイルス感染症（例えば、インフルエンザ）、細菌感染症（例えば、ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓ）、および寄生虫感染症（例えば、マラリア）を含む感染性疾患、（ｖｉｉ）心臓および他の臓器の虚血再灌流傷害を含む虚血性疾患、（ｖｉｉｉ）異常なアディポネクチン代謝に関連する疾患、および（ｉｘ）癌ならびに癌治療の有害作用の改善が挙げられる。
【００７９】
本明細書で使用される場合、「約」という用語は、列挙された値の±２０％を意味する。
【図面の簡単な説明】
【００８０】
【図１】デホスホ補酵素Ａ、分子、４−ホスホパントテイン分子、パンテテイン分子、パントテン酸分子、またはシステアミン分子が、（図１１に示す）酵素触媒反応によって誘導され得る、補酵素Ａの化学構造を示す。
【図２】本発明のジスルフィドの２つの化学構造を示す。上の化学構造は、左側にシステアミン、右側に第２のチオール（Ｒ−Ｓ−で示される）を有する、混合システアミンジスルフィド分子を示す。下の化学構造は、左側にパンテテイン、右側に第２のチオール（Ｒ−Ｓ−で示す）を有する、パンテテインジスルフィドを示す。図３、４、および５は、例示的な混合システアミンジスルフィドを示す。図１８および２１に概略的に示すように、他の混合システアミンジスルフィドは、図１７に列挙したチオールで形成することができる。
【図３】システアミン混合ジスルフィドの４つの化学構造を示す。具体的には、ラベルに示されるように、パートナーチオールアリルメルカプタン、Ｌ−システイン、Ｌ−システインエチルエステル、およびＮ−アセチルシステインとの混合システアミンジスルフィドが示されている。
【図４】例示的なシステアミン混合ジスルフィドの２つの化学構造、および例示的なＮ−アセチルシステアミン混合ジスルフィドの１つの化学構造を示す。２つのシステアミン混合ジスルフィドは、システアミンとＮ−アセチルシステアミンとの間、およびシステアミンとＮ−アセチルシステインアミドとの間に形成される。また、Ｎ−アセチルシステアミンとＮ−アセチルシステインアミドとの間に形成される混合ジスルフィドも示される（ラベルに示される）。
【図５】ラベルに示されるように、システアミンとパンテテインとの間、およびシステアミンとグルタチオンとの間に形成される例示的なシステアミン混合ジスルフィドの２つの化学構造を示す。
【図６】システアミンと補酵素Ａとの間に形成される例示的なシステアミン混合ジスルフィドの化学構造を示す。
【図７】２つの化学構造を示す。上は、パンテテインとシステインとの間に形成される例示的なパンテテイン混合ジスルフィドである。下は、パンテテインと形成される例示的なＮ−アセチルシステアミン混合ジスルフィドである。
【図８】２つの例示的な混合ジスルフィドの化学構造を示し、ラベルに示されるように、一方がパンテテインとＮ−アセチルシステインとの間に形成され、もう一方がジチオールジヒドロリポ酸と２つのシステアミンとの間に形成される（１つのジスルフィドが、ジヒドロリポ酸の２つのチオールの各々に結合される）。
【図９】パンテテインとグルタチオンとの間に形成される例示的なパンテテイン混合ジスルフィドの化学構造を示す。
【図１０】４−ホスホパンテテインと補酵素Ａとの間に形成される例示的な４−ホスホパンテテイン混合ジスルフィドの化学構造を示す。
【図１１】細胞内代謝（実線）および胃腸管で生じる異化反応（点線）の両方を含む、補酵素Ａ、パンテテイン、およびシステアミン代謝経路の一部の概略図である。いくつかの反応が、両方の位置で起こる（例えば、ホスファターゼは、細胞質および胃腸管に存在する）。化合物は、通常の字体で示し、酵素はイタリック体で示す。化合物および酵素の両方は、図に示すものに対する様々な代替名称を有する。この図は、補酵素Ａ、パンテテイン、およびシステアミン代謝の完全な描写ではないが、補酵素Ａ、デホスホ補酵素Ａ、４−ホスホパンテテイン、およびパンテテインが腸内のシステアミン（およびパントテネート）に異化され得ることを伝えることが単に意図される。
【図１２】胃腸（ＧＩ）管の解剖図を概略形式で示す（上図）。以下は、本発明のシステアミン前駆体からのシステアミンのインビボ生成および取り込みに関連する、ある特定の解剖学的および生理学的パラメータをＧＩ管の各セグメントについて要約した表である。特に、この表は、システアミンの形成および取り込みが起こる解剖学的部位、ならびにシステアミン前駆体からのシステアミンのインビボ生成速度（例えば、ジスルフィド結合の還元およびパンテテイナーゼ切断を介して）、およびＧＩ管に沿ったシステアミンの吸収速度（例えば、有機カチオン輸送体１、２、および３による）に影響を及ぼす生理学的変数のレベルを示す。例えば、ｐＨは、ジスルフィド交換反応に影響を及ぼす。グルタチオン（ＧＳＨ）のレベルは、ジスルフィドシステアミン前駆体の還元を含む、酸化型および還元型のジスルフィドとチオールとの間の平衡に影響を及ぼす、酸化還元環境のプロキシである。吸収表面積および通過時間は、パンテテイン消化酵素およびシステアミン輸送体のレベルとともに、パンテテインからのシステアミン産生およびその後のシステアミン吸収の速度に影響を及ぼす。この図の他の生理学的変数は、ある特定の種類の製剤の性能に影響を及ぼす。例えば、いくつかの種類の胃内滞留性製剤は、幽門を通過することを妨げるサイズまで膨潤する。いくつかのｐＨ感受性薬学的コーティングは、十二指腸内でｐＨ５．５、ｐＨ６、またはｐＨ６．５付近で溶解するが、他のコーティングは、回腸により典型的なｐＨ７付近で溶解する。いくつかの種類の結腸標的製剤は、ヒト（または哺乳動物）酵素による消化に対して不応性であるが、腸内細菌によって産生される酵素によって分解され得るポリマーから部分的になり、それによって前述のポリマーと同時配合されたシステアミン前駆体の放出をもたらす。表に提供されている値または範囲は、文献源に由来しているが、通常のヒト変動の全範囲を包含しない場合がある。それにもかかわらず、示された変動の程度は、部分的に、臨床的に観察されるシステアミンの取り込みおよび代謝における広範な個体間の変動を説明することができる。
【図１３】システアミン前駆体の分類と、それらの顕著な薬理学的特性のいくつかを示す表である。システアミン前駆体は、（ｉ）それらがチオールまたはジスルフィドであるか、（ｉｉ）ジスルフィドである場合、それらがシステアミン含有混合ジスルフィドであるか（システアミン−パンテテインを含む）、パンテテイン含有混合ジスルフィドであるか（システアミン−パンテテインを除く）、または胃腸管でパンテテインに分解可能な他のチオールを含有するか、および（ｉｉｉ）化学的還元および／または酵素分解の際にいくつのシステアミンが生成されるか（＃記号の下）によって、表の左（下）側に分類される。「他のチオールまたはジチオール」とは、任意のジチオール、ならびにシステアミン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、またはＮ−アセチルシステアミンではない任意のチオールを意味する。（例示的なチオールおよびジチオールについては、図１７を参照）。「他のチオール」を含有するジスルフィドシステアミン前駆体の分解から生成されるシステアミンの数は１つであるが、ジチオールを含有するジスルフィドシステアミン前駆体は、１つのジチオールが、例えば、２つのシステアミンに結合することができるため、分解すると１つまたは２つのシステアミンを生じ得る（チオールおよびジチオールをどのように組み合わせることができるかに関する要約については、表２１を参照）。この表は、「システアミンを生成するステップ」の下で、システアミン前駆体の各クラスからシステアミンを生成するために、どの化学的および／または酵素的ステップが必要とされるかをさらに示す。例えば、システアミン＋別のチオール（例えば、システイン）を含有するシステアミン混合ジスルフィドは、ジスルフィド結合の還元という１つのステップのみを必要とする。同様に、チオールパンテテインは、パンテイナーゼ切断という１つのステップのみを必要とする。他のシステアミン前駆体は、２つのステップを必要とする。例えば、パンテテインホモ二量体パンテチンは、ジスルフィド結合の還元に続いてパンテテイナーゼ切断を必要とする。さらに他のシステアミン前駆体は、３つ以上のステップを必要とする。例えば、４−ホスホパンテテインホモ二量体は、ジスルフィド結合の還元、ホスファターゼ切断、およびパンテテイナーゼ切断を必要とする。デホスホ補酵素Ａおよび補酵素Ａを含有するジスルフィドは、追加のステップを必要とする。いくつかのジスルフィドシステアミン前駆体では、表に示すように、ジスルフィド結合の還元によって産生される２つのチオールの間でシステアミンへの分解ステップの数が異なる。さらに、この表は、システアミンのインビボ生成を促進するためにシステアミン前駆体と同時配合または同時投与され得る化合物のクラスを示し、システアミン前駆体の各クラスにどのクラス（複数可）の促進剤が有用であるかを示す。例えば、ジスルフィド結合の還元を促進するために、任意のジスルフィドシステアミン前駆体を、還元剤（表中でＲＡと略記する）と生産的に同時配合または同時投与することができる。パンテテインであるか、もしくはパンテテインを含むシステアミン前駆体、またはパンテテインに分解され得る任意のチオールは、酵素パンテテイナーゼ（表中でＰＩと略記する）の誘導物質と生産的に同時配合または同時投与され得る。パンテテインジスルフィドは、還元剤およびパンテイナーゼ誘導剤の両方と生産的に同時配合または同時投与することができる。そのような化合物は、全てのクラスのシステアミン前駆体と生産的に同時配合または同時投与することができるため、システアミン吸収の促進剤（例えば、有機カチオン輸送体などのシステアミン輸送体の誘導物質）、またはシステアミン異化の阻害剤は表に示されていない。右端（上）において、この表は、システアミンを生成するために必要な分解ステップの数、システアミンの収率、またはインビボシステアミン生成の促進剤の存在によって影響され得る、異なるクラスのシステアミン前駆体の顕著な薬理学的特性を数語で要約する。提供される非常に簡単な説明は完全ではなく、制限として解釈されるものではない。
【図１４】例示的な医薬組成物の図である。以下を含む例示的な組成物の顕著な特性を示す：（ｉ）剤形の種類（例えば、錠剤、カプセル、粉末、液体）、（ｉｉ）薬物放出の解剖学的局在化に関する製剤の特性（例えば、胃内滞留性製剤は、胃内で滞留する。腸溶性コーティング製剤は、小腸で薬物を放出するように設計され得る。結腸標的製剤は、回腸または結腸で薬物を放出するように設計される）、ならびに（ｉｉｉ）薬物放出の持続期間（即時放出：ＩＲ、または持続放出ＳＲ）、（ｉｖ）システアミン前駆体（複数可）の種類、（ｖ）用量（範囲として提供される）、（ｖｉ）存在する場合、インビボシステアミン生成の同時配合促進剤（複数可）の種類、（ｖｉｉ）促進剤化合物の用量（範囲として提供される）、（ｖｉｉｉ）食品（例えば、アップルソースもしくはヨーグルト）または食事（例えば、夕食）とともに組成物を投与するための推奨、または食品が任意にあるかどうか（「食品ＯＫ」）、（ｉｘ）胃腸管内のシステアミン前駆体放出の部位（複数可）、および（ｖｉｉ）システアミンが（例えば、ジスルフィド結合の還元またはパンテテイナーゼ切断によって）インビボで生成される部位。図１３の組成物は、各々が薬物放出の部位および時間に関して単一の種類の製剤に限定されている。そのような組成物（図に示されていない多くの異型を含む）は、様々な組み合わせで投与することができ、投与を個別化するための柔軟性を提供する。より活性な成分および／またはより複雑な製剤を有する他の例示的な組成物を、図１４および１５に示す。
【図１５】（ｉ）１つまたは２つの薬物放出プロファイル（例えば、組成物Ｇは、即時放出成分および持続放出成分を含む）、（ｉｉ）少なくとも２種類のシステアミン前駆体（複数可）および２つまでの促進剤を有する、例示的な医薬組成物の図である。薬物放出およびシステアミン前駆体のシステアミンへのインビボ変換の部位（複数可）と同様に、食品の有無にかかわらず投与するための推奨が提供される。例示的な組成物、および図示されていない多くの他の組成物は、様々な比で組み合わせることができる。
【図１６】２つ以上の組成物が一緒に、または短時間の間隔で連続して投与される例示的な複数回投与レジメンの図である。例示的な組成物の顕著な特性を図１４および１５に示す。システアミン前駆体分解の促進剤（例えば、還元剤）を提供するが、システアミン前駆体は提供しない組成物の例が含まれる。促進剤の別々の製剤は、インビボでのシステアミンの生成または取り込みを最適化するために、それらを様々な比でシステアミン前駆体含有組成物と同時投与することを可能にする。促進剤の別々の製剤は、インビボでのシステアミンの生成または取り込みを最適化するための促進剤放出の部位およびタイミングの制御をさらに可能にする。
【図１７】チオール型システアミン前駆体（化合物２〜６）またはジスルフィド型システアミン前駆体を作製するように組み合わせることができる、例示的なチオールおよびジチオールの一覧である。化学式、ＣＡＳ（Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｂｓｔｒａｃｔｓ  Ｓｅｒｖｉｃｅ）登録番号、各チオールまたはジチオールの式分子量が示されている。場合によっては、ＣＡＳ番号は、特定の鏡像異性体に特異的である。図１８〜２１のこれらのチオールの簡潔な参照を容易にするために、各チオールに番号を付ける（図１７の左端の欄）。
【図１８】図１７のチオールおよびジチオールをどのように組み合わせると、２つのクラスのジスルフィドシステアミン前駆体、システアミン混合ジスルフィドおよびパンテテインジスルフィドを作製することができるかを示す２つの表を含む。２つの表の各々の５つの列は、左から以下を列挙する。  （ｉ）反応してジスルフィドを形成する２つのチオールが、図１７の左端の列に数字によって示される（チオールには１〜２９、ジチオールには３０〜３５の番号が付けられている）。したがって、例えば、表記法：「１＋２８」は、チオール１（システアミン）とチオール２８（チオプロニン）とを反応させることによって形成されるジスルフィドを表す。左の表のジスルフィドは全て、システアミン（化合物１）＋第２のチオール（化合物２〜３５のうちのいずれか）を含む。右の表のジスルフィドは全て、パンテテイン（化合物２）＋第２のチオール（化合物２〜３５のうちのいずれか）を含む。  （ｉｉ）第１列に示されるジスルフィドの式分子量（ＭＷ）。例えば、ジスルフィド１＋２８のＭＷは、２３８．３５ダルトン（２つの失われたプロトンを説明するために２つの構成体チオールの質量の合計から２を引いたもの）である。チオール１３および１４（Ｌ−システインエチルエステルＨＣｌおよびＬ−システインメチルエステルＨＣｌ）の場合、塩形態の質量が使用されることに留意されたい。遊離ジスルフィドの実際の質量は、示された質量よりも３６．４６ダルトン少ない。  （ｉｉｉ）インビボでのシステアミン前駆体の分解の際に産生することができるシステアミンの数。ジスルフィドは、水平の太線の上に列挙される２つのシステアミンを生じるものと、下に列挙される１つのシステアミンを生じるものとに選別される。  （ｉｖ）インビボで遊離システアミンに変換可能なシステアミン前駆体の画分。例えば、２３８．３５ダルトンのシステアミンに変換され得るジスルフィド１＋２８の画分は、３２．４％である。１つのシステアミンを生じるジスルフィドは、システアミンに変換可能なそれらの分子量の画分によって、高いものから低いものへランク付けされる。  （ｖ）ジスルフィドシステアミン前駆体からシステアミンを得るために必要な分解ステップ（化学的または酵素的）の数。両方のチオールがシステアミンに分解可能である（または２つのチオールのうちの１つがシステアミン自体である）、水平の太線より上のジスルフィドについては、ジスルフィドの各チオール構成体のステップ数を示す２つの数字が示される。２つの数字の順序は、２つのチオールが表の第１列に列挙されている順序に対応している。チオールのうちの１つのみがシステアミンに分解可能なジスルフィドの場合（水平の太線より下）、１つの数字のみが示され、そのチオールの分解ステップの数を示す。例えば、ジスルフィド表１Ｂでは、「２＋５」で表されるジスルフィドは、補酵素Ａ（チオール５）に結合したパンテテイン（チオール２）ジスルフィドを意味する。このジスルフィドのＭＷは、１，３５２．３６である。腸内で分解すると、このジスルフィドは２つのシステアミンを生じる。２つのシステアミンを併せた重さは、１５４．３ダルトンであり、これは第４列に示すように、ジスルフィドの質量��１１．４％である。ジスルフィドから２つのシステアミンへの分解経路は、パンテテイン部分の場合に２つのステップ（ステップ１：ジスルフィド結合の還元、ステップ２：パンテテイナーゼ切断）を含み、補酵素Ａ部分の場合に４つ以上のステップ（４＋で示す）（ステップ１：ジスルフィド結合の還元、ステップ２：ヌクレオチドのエクトヌクレオチドジホスファターゼ触媒脱離（他の異化経路が可能である）、ステップ３：パンテテインへの脱リン酸化、ステップ４：パンテテイナーゼ切断）を含む。したがって、第５列の数字：２／４＋は、パンテテインおよび補酵素Ａ部分それぞれのジスルフィドからシステアミンへの分解ステップの数を示す。
【図１９】図１７のチオールおよびジチオールを組み合わせて、２つのクラスのジスルフィドシステアミン前駆体：４−ホスホパンテテインジスルフィドおよびデホスホ補酵素Ａジスルフィドを作製することができる方法を示す、２つの表を含む。２つの表の各々における５つの列は、図１８と同じ情報を提供する。ここでもまた、チオール１３および１４（Ｌ−システインエチルエステルＨＣｌおよびＬ−システインメチルエステルＨＣｌ）の場合、塩形態の質量が使用されることに留意されたい。遊離ジスルフィドの実際の質量は、示された質量よりも３６．４６ダルトン少ない。
【図２０】図１７のチオールおよびジチオールをどのように組み合わせると、２つのクラスのジスルフィドシステアミン前駆体、補酵素ＡジスルフィドおよびＮ−アセチルシステアミンジスルフィドを作製することができるかを示す、２つの表を含む。２つの表の各々における５つの列は、図１８と同じ情報を提供する。ここでもまた、チオール１３および１４（Ｌ−システインエチルエステルＨＣｌおよびＬ−システインメチルエステルＨＣｌ）の場合、塩形態の質量が使用されることに留意されたい。遊離ジスルフィドの実際の質量は、示された質量よりも３６．４６ダルトン少ない。
【図２１】ジチオールを２つのチオールに接合して、インビボ分解の際に、２つのシステアミン（上の表）または１つのシステアミン（下の表）を生じることができるジスルフィドを作製する方法を示す、２つの表を含む。チオールおよびジチオールの番号付けは、図１７のとおりである。各表の中で、種々の可能性のあるジチオール−チオール−チオールの組み合わせは、簡潔性のためにジチオール部分（化合物３０〜３５）によってグループ分けされ、各群の分子量およびシステアミン収率が、範囲として提供される。３つの例示的なジチオール−チオール−チオールの組み合わせが、各表の最下部に示されており、特定のＭＷ、システアミンに変換可能なＭＷのパーセント、およびシステアミンに対する分解ステップの数を含む（上記の図１８の説明を参照）。追加の詳細は、２つの表の下にある説明テキストに提供されている。
【図２２】混合（非対称）ジスルフィドの化学合成に使用される初期のチオール活性化ステップを示す。
【図２３】システアミン−パンテテインジスルフィド（ＴＴＩ−０１０２と呼ばれ、０１は図１７のチオール１であるシステアミンを指し、０２は図１７のチオール２であるパンテテインを指す）を作製するために使用される１つの合成スキームを示す。システアミンの一次アミンを、最初にｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）で保護し、次いでシステアミン−Ｂｏｃの−ＳＨを、ビス（５，５−ジメチル−２−チオキソ−１，３，２−ジオキサホスホリナン−２−イル）ジスルファン（略記でＰＤＴＡと称される）を用いて、ジクロロメタン（ＤＣＭ）中、２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノベンゾキノン（ＤＤＱ）の存在下で活性化する。次いで、Ｂｏｃ基を酸で除去し、活性化したシステアミンを（Ｒ）−パンテテインと反応させる。
【図２４】システアミン−パンテテインジスルフィド（ＴＴＩ−０１０２）を作製するために使用される第２の合成スキームを示す。（Ｒ）−パンテテインは、ビス（５，５−ジメチル−２−チオキソ−１，３，２−ジオキサホスホリナン−２−イル）ジスルファン（略記でＰＤＴＡと称される）を用いて、ジクロロメタン（ＤＣＭ）中、２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノベンゾキノン（ＤＤＱ）の存在下で活性化する。次いで、活性化した（Ｒ）−パンテテインを、水素化ナトリウム（ＮａＨ）およびテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中のシステアミンと反応させる。
【図２５】Ｎ−アセチルシステアミン−パンテテインジスルフィド（ＴＴＩ−０６０２と呼ばれ、番号６および２は、図１７に番号を付して示すように、２つの組み合わせたチオールを指す）を作製するために使用される合成スキームを示す。Ｎ−アセチルシステアミンは、ビス（５，５−ジメチル−２−チオキソ−１，３，２−ジオキサホスホリナン−２−イル）ジスルファン（ＰＤＴＡ）を用いて、ジクロロメタン（ＤＣＭ）中、２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノベンゾキノン（ＤＤＱ）の存在下で活性化する。次いで、活性化したＮ−アセチルシステアミンを、ＤＣＭ中のトリエタノールアミン（ＴＥＡ）中の（Ｒ）−パンテテインと反応させる。
【図２６】Ｎ−アセチルシステイン−パンテテインジスルフィド（ＴＴＩ−１５０２と呼ばれ、番号１５および２は、図１７に番号を付して示すように、２つの組み合わせたチオールを指す）を作製するために使用される合成スキームを示す。Ｎ−アセチルシステインは、ビス（５，５−ジメチル−２−チオキソ−１，３，２−ジオキサホスホリナン−２−イル）ジスルファン（ＰＤＴＡ）を用いて、ジクロロメタン（ＤＣＭ）中、２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノベンゾキノン（ＤＤＱ）の存在下で活性化する。次いで、活性化したＮ−アセチルシステインを、水素化ナトリウム（ＮａＨ）およびテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中の（Ｒ）−パンテテインと反応させる。
【図２７】Ｖａｒｉａｎ  ＩＮＯＶＡ  ５００上で得られたＴＴＩ−０１０２の核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルを含む。ＴＴＩ−０１０２のインセット構造には、特定の結合を示すための文字ａ〜ｉが付されており、ＮＭＲスペクトル上にも強調表示されている。
【図２８】Ｖａｒｉａｎ  ＩＮＯＶＡ  ５００上で得られたＴＴＩ−０６０２の核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルを含む。ＴＴＩ−０６０２のインセット構造には、特定の結合を示すための文字ａ〜ｇが付されており、ＮＭＲスペクトル上にも強調表示されている。
【図２９】Ｖａｒｉａｎ  ＩＮＯＶＡ  ５００上で得られたＴＴＩ−１５０２の核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルを含む。ＴＴＩ−１５０２のインセット構造には、特定の結合を示すための文字ａ〜ｉが付されており、ＮＭＲスペクトル上にも強調表示されている。
【図３０Ａ】実施例１０に説明されるように、システアミン塩酸塩（３０ｍｇ／ｋｇ、図３０Ａ）または化合物２（別名ＴＴＩ−０６０２）（１２０ｍｇ／ｋｇ、図３０Ｂ）を、強制経口投与でＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに投与した後の、血漿中のシステアミンの濃度−時間曲線を含む。両方の曲線の値は、３匹のラットの平均値である。標準偏差は、エラーバーで示される。
【図３０Ｂ】実施例１０に説明されるように、システアミン塩酸塩（３０ｍｇ／ｋｇ、図３０Ａ）または化合物２（別名ＴＴＩ−０６０２）（１２０ｍｇ／ｋｇ、図３０Ｂ）を、強制経口投与でＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに投与した後の、血漿中のシステアミンの濃度−時間曲線を含む。両方の曲線の値は、３匹のラットの平均値である。標準偏差は、エラーバーで示される。
【図３１Ａ】実施例１０に説明されるように、化合物２（別名ＴＴＩ−０６０２）を、３０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、または１２０ｍｇ／ｋｇの用量で、強制経口投与でＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（１用量あたり３匹のラット）に投与した後の、血漿中システアミンの濃度−時間曲線（図３１Ａ）、および実施例１０に説明されるように、１２０ｍｇ／ｋｇの化合物２（別名ＴＴＩ−０６０２）を、強制経口投与でＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに投与した後の、血漿中システアミン、Ｎ−アセチルシステアミン、およびパントテン酸の濃度時間曲線（図３１Ｂ）を含む。
【図３１Ｂ】実施例１０に説明されるように、化合物２（別名ＴＴＩ−０６０２）を、３０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、または１２０ｍｇ／ｋｇの用量で、強制経口投与でＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（１用量あたり３匹のラット）に投与した後の、血漿中システアミンの濃度−時間曲線（図３１Ａ）、および実施例１０に説明されるように、１２０ｍｇ／ｋｇの化合物２（別名ＴＴＩ−０６０２）を、強制経口投与でＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに投与した後の、血漿中システアミン、Ｎ−アセチルシステアミン、およびパントテン酸の濃度時間曲線（図３１Ｂ）を含む。
【図３２】実施例１０に説明されるように、１２０ｍｇ／ｋｇの化合物２（別名ＴＴＩ−０６０２）を、強制経口投与でＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに投与してから１０．５時間後の、肝臓および腎臓におけるシステアミンの濃度（マイクロモル）を示すチャートを含む。
【図３３】実施例１に説明されるように、（ｉ）システアミン塩酸塩（３０ｍｇ／ｋｇ）またはシスタミン二塩酸塩（３０ｍｇ／ｋｇ）またはパンテチン（３０ｍｇ／ｋｇ）または化合物１（別名ＴＴＩ−０１０２）（１００ｍｇ／ｋｇ）のいずれかを、強制経口投与で雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに投与した後の、血漿中のシステアミンの濃度−時間曲線である。濃度は３匹のラットの平均値であり、エラーバーは標準偏差を示す。
【図３４Ａ】実施例１１〜１３に説明されるように、化合物１（別名ＴＴＩ−０１０２）を、３０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、または１００ｍｇ／ｋｇの用量で、強制経口投与で雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに投与した後の、血漿中のシステアミンの濃度−時間曲線（図３４Ａ）、および各用量に由来する薬物動態パラメータ（図３４Ｂ）を示す。略語：Ｃｍａｘ＝最大システアミン濃度；Ｔｍａｘ＝最大システアミン濃度が発生する時間；ＡＵＣ  ｌａｓｔ＝０〜６時間までの薬物濃度時間曲線下の面積；Ｔ１／２＝血漿中のシステアミンの半減期；ＭＲＴ  ｌａｓｔ＝６時間のデータに基づく平均滞留時間。
【図３４Ｂ】実施例１１〜１３に説明されるように、化合物１（別名ＴＴＩ−０１０２）を、３０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、または１００ｍｇ／ｋｇの用量で、強制経口投与で雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに投与した後の、血漿中のシステアミンの濃度−時間曲線（図３４Ａ）、および各用量に由来する薬物動態パラメータ（図３４Ｂ）を示す。略語：Ｃｍａｘ＝最大システアミン濃度；Ｔｍａｘ＝最大システアミン濃度が発生する時間；ＡＵＣ  ｌａｓｔ＝０〜６時間までの薬物濃度時間曲線下の面積；Ｔ１／２＝血漿中のシステアミンの半減期；ＭＲＴ  ｌａｓｔ＝６時間のデータに基づく平均滞留時間。
【図３５Ａ】システアミン塩酸塩（３０ｍｇ／ｋｇ）または化合物１（別名ＴＴＩ−０１０２）を、３０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、または１００ｍｇ／ｋｇの用量で、強制経口投与で雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに投与してから６時間後の、ラットの消化管におけるシステアミン（図３５Ａ）およびパンテテイン（図３５Ｂ）の濃度を示す棒グラフを示す。胃、近位小腸、遠位小腸および盲腸／結腸から得られた胃腸内容物を、実施例１１〜１３に説明されるように分析した。４つの腸セグメントからの試料は全て、ＴＣＥＰで還元した。近位および遠位の小腸内容物も、ＴＣＥＰなしで分析した。各バーの上の数字は、その試料の値を示す。同じ試料におけるシステアミンおよびパンテテインのレベルの比較を容易にするために、試料を上部および下部のパネルに配置する。
【図３５Ｂ】システアミン塩酸塩（３０ｍｇ／ｋｇ）または化合物１（別名ＴＴＩ−０１０２）を、３０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、または１００ｍｇ／ｋｇの用量で、強制経口投与で雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに投与してから６時間後の、ラットの消化管におけるシステアミン（図３５Ａ）およびパンテテイン（図３５Ｂ）の濃度を示す棒グラフを示す。胃、近位小腸、遠位小腸および盲腸／結腸から得られた胃腸内容物を、実施例１１〜１３に説明されるように分析した。４つの腸セグメントからの試料は全て、ＴＣＥＰで還元した。近位および遠位の小腸内容物も、ＴＣＥＰなしで分析した。各バーの上の数字は、その試料の値を示す。同じ試料におけるシステアミンおよびパンテテインのレベルの比較を容易にするために、試料を上部および下部のパネルに配置する。
【図３６Ａ】化合物１（システアミン−パンテテイン非対称ジスルフィド）を産生するためのシスタミンのヘミアシル化の合成スキームを示す。ＤＣＣは、カップリング試薬Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドの略語である。ＨＯＢｔは、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物の略語である。ＤＭＦは、溶媒ジメチルホルムアミドの略語である。
【図３６Ｂ】チオール−ジスルフィド交換による化合物１の合成スキームを示す。システアミン（チオール）およびパンテテイン（ジスルフィド）に関与する図解された反応は、実施例１４で考察される２つのチオール−ジスルフィド交換反応の１つである。
【図３７】シスタミンのヘミアシル化（図３６Ａに示される）によって生成されたＴＴＩ−０１０２のプロトン核磁気共鳴（１Ｈ  ＮＭＲ）スペクトルを示す。ＴＴＩ−０１０２の構造を示し、１Ｈ  ＮＭＲスペクトルのピークに合わせて小文字で注釈を付ける。この表は、全てのピークの数値とそのデルタ値（百万分率、またはｐｐｍで表される）およびピーク高を示す。
【図３８】図３７に示される１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにおけるプロトンのピーク高の予測値と観測値の関係を表形式で示し、プロトンは図３７のように（ａ、ｂ、ｃ、ｄ、ｅ、ｆ、ｇ、ｈ、ｉ）と符号付けする。
【発明を実施するための形態】
【００８１】
本発明は、前駆体化合物（システアミン前駆体）から制御された量および胃腸管の制御された位置におけるシステアミンのインビボ産生を可能にする組成物および方法、ならびにシステアミン感受性症状、症候群、および疾患を治療する方法を特徴とする。本発明の方法および組成物は、以下に示される化合物１〜３のいずれか１つ、またはその薬学的に許容される塩を含むことができる。
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化合物１〜３は、還元剤もしくはパンテテイナーゼ誘導剤などの化合物の投与に続いて、単独で、またはシステアミン前駆体である第２の活性剤と組み合わせて、またはシステアミンの放出もしくは取り込みを修正する薬剤と組み合わせて、対象に投与することができる。
【００８２】
システアミンは、細菌からヒトまで全ての生命体に存在する、小さな反応性の高いチオール分子（ＮＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＳＨ）である。システアミンのＩＵＰＡＣ名は、２−アミノエタンチオールである。他の一般的な名称としては、メルカプタミン、ベータ−メルカプトエチルアミン、２−メルカプトエチルアミン、デカルボキシシステイン、およびチオエタノールアミンが挙げられる。ヒトにおいて、システアミンは、パンテテインをシステアミンおよびパントテン酸に切断する、酵素パンテテイナーゼ（パントテネートまたはビタミンＢ５としても知られる）によって産生される。ヒトパンテテナイナーゼは、Ｖａｎｉｎ  １およびＶａｎｉｎ  ２遺伝子（省略してＶＮＮ１およびＶＮＮ２）によってコードされ、胃腸管を含めて広く発現される。したがって、多くの食品（例えば、ナッツおよび乳製品）中に存在する食餌性パンテテインは、胃腸管腔で切断されてシステアミンおよびパントテン酸を生成し、その後吸収される。特に、システアミンは、腸細胞内でシステアミンを輸送することが示されている有機カチオン輸送体１（ＯＣＴ１）、ＯＣＴ２、およびＯＣＴ３を含む輸送体のファミリーである、有機カチオン輸送体（ＯＣＴ）によって胃腸上皮を横切って輸送することができる。胃腸管でシステアミンに変換されるその能力に基づいて、パンテテインは、システアミン前駆体である。システアミン前駆体は、（ｉ）忍容性および副作用、（ｉｉ）薬物動態および投与間隔、（ｉｉｉ）製造、ならびに（ｉｖ）製品安定性に関して、システアミン塩を上回る利点を有し得る化合物のクラスを表す。より一般的には、様々な速度でインビボでシステアミンを生成することができるシステアミン前駆体を投与すること、および配合方法を使用して、選択された時間に胃腸管の選択部位にそれらの前駆体を送達することは、システアミン薬物動態のはるかに良好な制御を提供することによって治療レジメンにおいて有用であり得、現在まで、システアミンおよび他のチオールの広範な使用に対する大きな障害であった。
【００８３】
システアミン前駆体
パンテテインおよびその異化産物であるシステアミンおよびパントテネートは、植物および動物における補酵素Ａの生合成における中間化合物である（関連する代謝および異化経路の図については図１１を参照）。４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、および補酵素Ａなどの補酵素Ａ生合成経路中におけるいくつかの化合物は、ヒト胃腸管でパンテテイン、次いでシステアミンおよびパントテネートに異化することができる。したがって、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、および補酵素Ａは、腸内でシステアミンに変換可能であることから、システアミン前駆体である。Ｎ−アセチルシステアミンはまた、腸または細胞デアセチラーゼ（例えば、インビボでＮ−アセチルシステインをシステインに変換するデアセチラーゼ）によって脱アセチル化することによる、システアミン前駆体でもある。
【００８４】
パンテチンは、ジスルフィド結合によって接合された２つのパンテテイン分子の二量体である。換言すれば、パンテチンは、パンテテインの酸化形態である。パンテチンの２つのパンテテインへの相互変換は、酵素的に媒介されず、ＡＴＰを必要としない。この反応は、代わりに、腸内の酸化還元環境によって主に制御される。インビボで、特に細胞内で優勢である傾向がある還元環境では、パンテテインが優勢であるが、胃などのより酸化的な環境では、平衡はパンテチンに向かってシフトする。Ｗｉｔｔｗｅｒによる小規模臨床研究（Ｗｉｔｔｗｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．７６：４（１９８５））は、経口投与したとき、パンテチンのかなりの画分がヒトの胃腸管でパンテテインに化学的に還元され、続いてシステアミンおよびパントテネートに切断されることを示した。したがって、パンテチンは、システアミン前駆体である。本明細書におけるパンテテインは、Ｄ−鏡像異性体を指す。
【００８５】
パンテテインのパントテノイル部分は、キラル炭素を含む。したがって、伝統的にＤ−パンテテインおよびＬ−パンテテインと呼ばれる（Ｒ−パンテテインおよびＳ−パンテテインとも呼ばれる）パンテテインの２つの鏡像異性体形態が存在する。パンテテインのＤ−鏡像異性体のみが、パンテテイナーゼにより切断され得るため、Ｄ−鏡像異性体のみが、システアミン前駆体として適格である。パンテテインの２つの鏡像異性体は、４つの方法で組み合わせて（Ｄ−，Ｄ−；Ｄ−，Ｌ−；Ｌ−，Ｄ−；およびＬ−，Ｌ−パンテテイン）、ジスルフィドパンテチンを形成することができる。Ｄ−，Ｄ−パンテチンのみが化学的に２つのＤ−パンテテインに還元され、次いで切断されて２つのシステアミンが産生され得る。したがって、パンテチンのＤ−，Ｄ−形態が極めて好ましく、パンテチンという用語は、本明細書で使用される場合、Ｄ−，Ｄ−鏡像異性体を指す。パンテテイン関連化合物である４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、および補酵素Ａはまた、腸内分解の際にＤ−パンテテイン（およびしたがってシステアミン）を生じるために、Ｄ−立体異性体構成でなければならない。したがって、「４−ホスホパンテテイン」、「デホスホ補酵素Ａ」、および「補酵素Ａ」、ならびにそれらの任意の類似体または誘導体は、本明細書においてＤ−鏡像異性体を指す。パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、または補酵素Ａのいずれも腸細胞に吸収されず、むしろ各化合物は、吸収されるパントテネートおよびシステアミンに異化されなければならない（Ｓｈｉｂａｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎｕｔｒ．１１３：２１０７（１９８３）を参照）。
【００８６】
胃腸管において（例えば、天然の酵素的または化学的プロセスによって）親化合物に変換され得るパンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、または補酵素ＡのＤ−立体異性体の類似体または誘導体を使用して、チオールまたはジスルフィド型システアミン前駆体を形成することもでき、本明細書では「適切な類似体または誘導体」と呼ばれる。例えば、腸内で補酵素Ａに容易に分解される補酵素の多数の生理学的形態（例えば、アセチルＣｏＡ、スクシニルｃｏＡ、マロニルｃｏＡ、等）が存在する。任意のアセチル化、アルキル化、リン酸化、脂質化、または他の類似体を、システアミン前駆体として使用することができる。パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、または補酵素Ａの類似体、ならびにそれらを産生する方法が文献に説明されている（ｖａｎ  Ｗｙｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ  Ｃｏｍｍｕｎ  ４：３９８（２００７））。
【００８７】
パンテテインは、別のクラスのシステアミン前駆体を構成するパンテテイン混合ジスルフィドと呼ばれる、それ自体以外のチオールとともにジスルフィドを形成することができる。パンテテインと反応したチオールは、好ましくは天然に存在するチオール、またはヒトもしくは動物使用の履歴に基づいて、ヒトにおいて安全であることが知られている非天然チオールである。例えば、混合ジスルフィドは、パンテテインを、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、または補酵素Ａ、人体および多くの食品に存在する化合物と反応させることによって形成することができる。そのような混合ジスルフィドは、腸内での還元および分解の際に、２つのシステアミンを生じる。Ｎ−アセチルシステアミンに連結したパンテテインもまた、腸内での還元および分解の際に２つのシステアミンを生じる。ある特定の実施形態では、２つのシステアミンを生じることができるジスルフィドシステアミン前駆体が好ましい。図１８〜２１は、異なるクラスのジスルフィドシステアミン前駆体のシステアミン収率を示す。化学的または酵素的プロセス（すなわち、適切な類似体または誘導体）を介して胃腸管で親化合物に変換され得る４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、または補酵素Ａの類似体または誘導体もまた、パンテテインに連結されて、パンテテイン混合ジスルフィドシステアミン前駆体を形成することができ、または他のチオールに連結され得る。
【００８８】
パンテテイン混合ジスルフィドはまた、パンテテインを、Ｌ−システイン、ホモシステイン、Ｎ−アセチルシステイン、Ｎ−アセチルシステインアミド、Ｎ−アセチルシステインエチルエステル、Ｎ−アセチルシステアミン、Ｌ−システインエチルエステル塩酸塩、Ｌ−システインメチルエステル塩酸塩、チオシステイン、アリルメルカプタン、フルフリルメルカプタン、ベンジルメルカプタン、チオテルピネオール、３−メルカプトピルビン酸塩、システイニルグリシン、ガンマグルタミルシステイン、ガンマ−グルタミルシステインエチルエステル、グルタチオン、グルタチオンモノエチルエステル、グルタチオンジエチルエステル、メルカプトエチルグルコンアミド、チオサリチル酸、チオシステイン、チオプロニン、またはジエチルジチオカルバミン酸などの、それ自体はシステアミンに分解可能でないチオールと反応させることによって形成することもできる。パンテテインと反応してパンテテイン混合ジスルフィドを形成することができる、例示的なチオール化合物のケミカル・アブストラクツ・サービス（ＣＡＳ）登録番号、分子式、および分子量については、図１７を参照されたい。パンテテインおよびチオール６〜３５（チオールの番号付けについては、図１７を参照）のうちのいずれかによって形成されるジスルフィドは、ジスルフィド結合の還元およびパンテテイナーゼ切断の際に、１つのシステアミンを生じる。これらの第２のチオールは、腸内でシステアミンに変換可能でないが、それにもかかわらず、例えばパンテテイナーゼ活性を刺激すること、またはシステアミン含有ジスルフィドとのジスルフィド交換に関与することによって、システアミン産生を促進することができるか、または例えば、還元剤として作用することによって、もしくは他の機序によって、システアミンにより提供されるものを補完する治療的利益を提供することができる。
【００８９】
ジヒドロリポ酸（ＤＨＬＡ）、メソ−２，３−ジメルカプトコハク酸（ＤＭＳＡ）、２，３−ジメルカプトプロパンスルホン酸（ＤＭＰＳ）、２，３−ジメルカプト−１−プロパノール、ブシラミン、またはＮ，Ｎ′−ビス（２−メルカプトエチル）イソフタルアミドなどのジチオール化合物もまた、パンテテインと反応して、１つの遊離チオール基を有するパンテテイン混合ジスルフィド、または２つのパンテテイン分子をジチオールに接続する２つのジスルフィド結合を有する三部化合物のいずれかを形成することができる。前者のカテゴリーの混合パンテテインジスルフィドは、ジスルフィド結合の還元およびパンテテイナーゼ切断の際に１つのシステアミンを生じ、後者のカテゴリーは、２つのシステアミンを生じる。システアミン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、またはＮ−アセチルシステアミンを様々なジチオールと組み合わせて有用なシステアミン前駆体を産生する方法を示す表については、図２１を参照されたい。あるいは、チオールのうちの１つがシステアミン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、もしくはＮ−アセチルシステアミン、またはその適切な類似体もしくは誘導体である限り、２つの異なるチオールをジチオールに結合させてシステアミン前駆体を得ることができ、すなわち、最終的に胃腸管でシステアミンに分解され得る化合物である。図２１の表２Ａおよび２Ｂは、分子量およびシステアミン収率の範囲（すなわち、インビボでシステアミンに変換可能なシステアミン前駆体のパーセント）を含む、そのようなシステアミン前駆体の顕著な特性のうちのいくつかを示し、選択された例については、システアミン前駆体からシステアミンへのインビボ分解ステップの数を示す。
【００９０】
パンテテインと同様に、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、もしくはＮ−アセチルシステアミンのうちのいずれか、または適切な類似体もしくは誘導体は、（ｉ）それ自体と反応してホモ二量体ジスルフィドを形成することができるか、または（ｉｉ）様々な対で互いに反応して混合ジスルフィドを形成することができるか、または（ｉｉｉ）他のチオール（インビボでシステアミンに変換可能でない）と反応して、混合ジスルフィドを形成することができる。そのようなジスルフィドは全て、システアミン前駆体である。最初の２つのカテゴリーは、腸内での還元および分解の際に２つのシステアミンを生じ得るが、第３のカテゴリーは、１つのシステアミンのみを生じ得る。
【００９１】
例えば、図１７に列挙したチオールのうちのいずれかを、４−ホスホパンテテイン（図１９に示すように）、デホスホ補酵素Ａ（図１９）、補酵素Ａ（図２０）、またはＮ−アセチルシステアミン（図２０）と反応させて、混合ジスルフィドシステアミン前駆体を形成することができる。ヒトにおいて安全であることが知られている非天然チオールも同様に、他の天然に存在するキトールを使用することもできる。図１８〜２１は、反応してジスルフィドシステアミン前駆体を形成することができる、チオールおよびジチオールとの組み合わせのうちのいくつかを概略的に示す。ヒト胃腸管におけるそのような化合物のシステアミンへの変換は、（ｉ）遊離チオールを生成するためのジスルフィド結合の還元、（ｉｉ）４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａを含有するジスルフィド、またはその適切な類似体もしくは誘導体の場合、パンテテインを生成する、腸に存在する酵素（例えば、ホスファターゼ、ジホスファターゼ、ホスホジエステラーゼ）による分解、（ｉｉｉ）パンテテイナーゼによるパンテテインの切断を必要とする。ジスルフィドを含有するＮ−アセチルシステアミンは、腸、血液、または組織において還元および脱アセチル化されなければならない。
【００９２】
システアミン自体を他のチオールと反応させて、混合ジスルフィドシステアミン前駆体を形成することもできる。例えば、システアミンは、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、またはＮ−アセチルシステアミンと、胃腸管で親化合物に分解可能な５つのチオールの類似体もしくは誘導体と、または図１７に列挙される他のチオールのうちのいずれかと反応させて、図１８〜２０のジスルフィドのうちのいずれかを形成することができる。２つのシステアミンを、２つのジスルフィド結合を介してジチオールに接合して、別の種類のジスルフィドシステアミン前駆体を産生することができる（図２１）。図８は、そのようなシステアミン前駆体、すなわち２つのシステアミンに結合したジヒドロリポエートジスルフィドの化学構造を示す。ジスルフィド結合の還元に際して、強力な還元剤であるジヒドロリポ酸とともに、２つのシステアミンが放出され、ある特定の疾患設定においてシステアミンの治療特性を補完し得る。
【００９３】
要約すると、システアミン前駆体は、３つの主なカテゴリー、すなわち（ｉ）システアミンに分解可能なチオール、（ｉｉ）ジチオールで形成されたジスルフィドを含む、システアミンを含む混合ジスルフィド、（ｉｉ）パンテテインを含むジスルフィド、（ｉｉｉ）４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、もしくは補酵素Ａを含むジスルフィド、または適切な類似体もしくは誘導体に分類することができる。後者の３つのカテゴリーの各々は、第２のチオールに応じてさらに分解され得る：（ａ）パンテテイン、または適切な類似体もしくは誘導体、（ｂ）４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、もしくは補酵素Ａ、または適切な類似体もしくは誘導体、あるいは（ｃ）それ自体がシステアミン前駆体ではないチオール（例えば、Ｌ−システイン、ホモシステイン、Ｎ−アセチル−システイン、Ｎ−アセチルシステインアミド、Ｎ−アセチルシステインエチルエステル、Ｎ−アセチルシステアミン、Ｌ−システインエチルエステル塩酸塩、Ｌ−システインメチルエステル塩酸塩、チオシステイン、アリルメルカプタン、フルフリルメルカプタン、ベンジルメルカプタン、３−メルカプトピルビン酸塩、チオテルピネオール、グルタチオン、システイニルグリシン、ガンマグルタミルシステイン、ガンマ−グルタミルシステインエチルエステル、グルタチオンモノエチルエステル、グルタチオンジエチルエステル、メルカプトエチルグルコンアミド、チオサリチル酸、チオシステイン、チオプロニン、またはジエチルジチオカルバミン酸）。ジヒドロリポ酸、メソ−２，３−ジメルカプトコハク酸（ＤＭＳＡ）、２，３−ジメルカプトプロパンスルホン酸（ＤＭＰＳ）、２，３−ジメルカプト−１−プロパノール、ブシラミン、またはＮ，Ｎ′−ビス（２−メルカプトエチル）イソフタルアミドなどのジチオール化合物を、システアミン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、もしくは補酵素Ａ、または適切な類似体もしくは誘導体と組み合わせて、ジスルフィドを形成することもできる。
【００９４】
システアミン前駆体の薬理学的特性
システアミン前駆体からのインビボシステアミン生成の時間的および空間的パターンは、システアミン前駆体の種類に依存して広く変動し得る。システアミンを生成するために複数の化学的および酵素的反応を必要とするシステアミン前駆体は、平均して１つのステップのみを必要とするものよりも後にシステアミンを生成するであろう。システアミン前駆体のこの特性を使用して、インビボでのシステアミン生成の速度および持続時間が変化する複数の医薬組成物を設計することができる。さらに、医薬組成物は、所望の薬理学的終結をもたらす組み合わせおよび比で投与することができる。例えば、薬物投与直後に上昇した血漿システアミンレベルを提供するために、システアミン混合ジスルフィドを投与してもよい。システアミン混合ジスルフィドからシステアミンを産生するために必要な唯一のステップは、ジスルフィド結合の還元である。第２のチオールの同一性に依存して、第２のシステアミンが、１つ以上の分解ステップに続いて産生され得る。第２のシステアミンは、ジスルフィド結合の還元および別のステップの後にのみ生成され得るため、必然的に第１のシステアミンよりも遅く産生され、それによってシステアミンが腸内で生成され、血液中に吸収される期間を延長する。システアミン遊離塩基およびシステアミン塩（例えば、Ｃｙｓｔａｇｏｎ（登録商標）およびＰｒｏｃｙｓｂｉ（登録商標））は、非常に短い半減期を有するため、システアミン前駆体からのインビボでのシステアミン生成のこの延長は、現在の治療法を上回る著しい進歩を示す。
【００９５】
１つのアプローチでは、第２のチオールがパンテテイン（すなわち、システアミン−パンテテインジスルフィド）である場合、第２のシステアミンを生成するためにパンテテイナーゼ切断ステップが必要である。パンテテイナーゼは、一般に、腸細胞の表面上に位置するため、いつでも腸内容物の一部と接触するだけであり、それによってシステアミンが生成される期間が延長される。１つのジスルフィド分子からの早期および後期システアミン生成のこの組み合わせは、いくつかの利点を有する：（ｉ）システアミンが、ジスルフィド結合の還元に際して利用可能になり、早期の治療上の利点を提供する、（ｉｉ）経時的にパンテテインの切断が起こり（パンテテイナーゼは、胃腸管全体にわたって様々なレベルで発現される）、治療効果の持続期間を延長する、（ｉｉｉ）結合の還元およびパンテテイン切断の両方を介して時間的および空間的に延長されたシステアミンの産生は、副作用と強く関連した高いピークシステアミン濃度を低下させる一方で、（ｉｖ）ＯＣＴによる輸送などのパンテテイナーゼまたはシステアミンの取り込み機序の飽和を回避する。。つまり、長期の血中システアミンレベルの上昇は、より有効な薬物療法と、より毒性が低く、より便利な剤形の両方を患者に提供する。
【００９６】
あるいは、第２のチオールがＬ−システイン（すなわち、システアミン−Ｌ−システインジスルフィド）である場合、ジスルフィドの還元の際に１つのシステアミンのみが生成され、長期間のシステアミン生成はない。しかしながら、以下に説明されるように、システアミン−Ｌ−システインジスルフィドは、迅速なシステアミン放出が可能なシステアミン前駆体が有用であり得る、回腸または結腸を含む胃腸管の実質的に任意の部分における放出のために配合され得る。さらに、システインは、パンテテイナーゼの活性を促進し、いくつかの疾患モデルにおいて有益な効果を有することも示されている。したがって、システアミン−Ｌ−システインジスルフィドは、別のシステアミン前駆体の有用な補体であり得るか、またはシステアミンおよびシステインの両方に応答する疾患の治療に有用であり得る。
【００９７】
４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、もしくは補酵素Ａなどのシステアミンを生成するために２つ以上の異化反応を必要とするチオールを含むジスルフィド、またはその適切な類似体もしくは誘導体は、小腸においてより効率的に分解され、ここでそれらは、胃または大腸内よりも膵液に存在する消化酵素に曝露される。そのような２つのチオールを互いにまたはシステアミン以外のチオールと反応させることによって作製されるジスルフィドは、後の時点で開始し、例えばシステアミン−Ｌ−システインジスルフィドよりも長い時間にわたってシステアミンを生成する。平均して、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、もしくは補酵素Ａ、または適切な類似体は、パンテテインよりも遅くシステアミンを生成し、これらの化合物を含むジスルフィドについても同様である。
【００９８】
パンテテインなどのシステアミン前駆体および腸内のパンテテインに分解可能な化合物、ならびにそれらの化合物のうちのいずれかを含有するジスルフィドは全て、パンテテイナーゼによる切断の際にシステアミンとともにパントテネートを生じる。パントテネートまたはビタミンＢ５は、食物中に存在し、腸内細菌によって合成される、水溶性化合物である。パントテネートが大用量で投与されると、過剰量が尿中に排泄される。食事摂取基準の科学的評価に関する米国医薬常設委員会の葉酸、他のビタミンＢ、およびコリンに関するパネル（Ｐａｎｅｌ  ｏｎ  Ｆｏｌａｔｅ，  Ｏｔｈｅｒ  Ｂ  Ｖｉｔａｍｉｎｓ，ａｎｄ  Ｃｈｏｌｉｎｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＵＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  Ｓｔａｎｄｉｎｇ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｄｉｅｔａｒｙ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｉｎｔａｋｅｓ（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｉｅｓ  Ｐｒｅｓｓ（ＵＳ）、１９９８）によるパントテネートのレビューは、「ヒトまたは動物における経口パントテン酸の有害効果が認められたという報告はない」と述べている。
【００９９】
システアミン前駆体の混合物
本発明の方法および組成物は、それらの異なる薬理学的特性を利用するためのシステアミン前駆体の混合物を含むことができる。特に、システアミン血漿レベルの個別化された改善（または所与の患者のニーズに対する個人化）は、システアミン前駆体の混合物を使用することによって達成することができる。例えば、上記のシステアミン−パンテテイン混合ジスルフィドは、システアミンとパンテテインとの比を１：１に固定する。しかしながら、システアミンは身体から迅速に吸収および除去され（排出半減期：約２５分）、血中レベルの急激なピークをもたらす一方、パンテテインは、数時間にわたって（パンテテイナーゼ切断を介して）システアミンを提供する。したがって、パンテテインからのシステアミン生成が長期間にわたって広がるため、（ジスルフィド結合の還元の際に放出されるシステアミンから）早期に治療的システアミンレベルをもたらすシステアミン−パンテテイン混合ジスルフィドの用量は、後に治療的システアミンレベル以下をもたらし得る。したがって、システアミン：パンテテインの１：１の比は、特定の患者または目的には理想的ではない場合がある。より多くのパンテテインを剤形に添加することは、血中システアミンを治療濃度範囲内により長い期間維持する。パンテテインとシステアミンとの比を増加させるために、チオールパンテテインまたはジスルフィドパンテチンまたは別のパンテテイン含有ジスルフィドのいずれかを、例えば、システアミン−パンテテイン混合ジスルフィドと同時配合または同時投与して、治療範囲内の血中システアミンレベルをより長い期間達成することができる。２つのシステアミン前駆体の比を調整して、システアミン濃度−時間曲線（ＡＵＣ）下面積を最大にすること、またはシステアミンのピーク濃度（Ｃｍａｘ）を最小にすること、またはトラフ濃度（Ｃｍｉｎ）を最大にすること、または閾値を超えるシステアミン血中レベルを維持することなどの所望の薬物動態パラメータ、またはそのようなパラメータの任意の組み合わせを達成することができる。
【０１００】
４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、または補酵素Ａなどのシステアミン前駆体、およびこれらの３つの化合物から形成されるジスルフィドは、パンテテインよりもシステアミンを生じるために、より多くの異化ステップを必要とする。したがって、それらのシステアミン前駆体からのシステアミン産生の速度は、平均して、パンテテインまたはある特定のパンテテインジスルフィドよりも遅く、より長期になる。したがって、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、もしくは補酵素Ａ、またはそれらのジスルフィドとシステアミン−パンテテインの組み合わせ、および任意にパンテテインまたはパンテチンの同時投与または同時配合は、適切なシステアミン前駆体を選択することによってシステアミン薬物動態を制御する別の方法を提供する。特に、そのようなシステアミン前駆体の使用は、システアミンが胃腸管において産生される時間をさらに延長するために使用され得る。
【０１０１】
４−ホスホパンテチン、デホスホ補酵素Ａ、および補酵素Ａを含有するジスルフィド
図１１に概略的に示される補酵素Ａのための正式な生合成経路は、４つの酵素によって触媒される５つのステップを必要とする（ＣｏＡシンターゼは、最後の２つのステップを触媒する）。パントテネートキナーゼによるパントテネートのリン酸化の初期ステップは、経路を通る流動を制御する。最近まで、補酵素Ａ合成（または異化）経路における中間化合物のいずれも、胃腸管において効率的に吸収されないと考えられていた。むしろ、パンテテイン（パントテネートおよびシステアミン）の異化産物のみが、腸内で吸収される。システアミン前駆体療法のための補酵素Ａ経路に関する理解の２つの重要な結果は、（ｉ）システアミン前駆体が腸内でシステアミンに分解され、次いで吸収されて治療効果の部位（例えば、肝臓、中枢神経系）に輸送されなければならいこと、および（ｉｉ）細胞補酵素Ａ合成が、必然的に（他の代謝中間体は細胞膜を横断しないため）パントテネートから開始することである。
【０１０２】
しかしながら、４−ホスホパンテテインは、細胞膜を効率的に横断する（Ｓｒｉｎｉｖａｓａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １１：７８４（２０１５））。この観察は、様々な疾患および障害を治療するための、本明細書に説明されるシステアミン前駆体の設計および使用に意味を有する。最初に、それは、病変組織を含む複数の組織および臓器（腸のみとは対照的に）における原位置システアミン生成を伴う治療アプローチを可能にする。第２の態様では、パントテネートキナーゼ欠損対象を治療するために使用され得る、パントテネートキナーゼにより触媒される初期合成ステップの下流に、補酵素Ａ前駆体（４−ホスホパンテテイン）の細胞送達を可能にする。これらの２つのカテゴリーの疾患を治療するためにシステアミン前駆体を使用するための方法を以下に記載し、いくつかの例を挙げて説明する。
【０１０３】
１つのアプローチにおいて、これらの臓器（およびその他）は全て、ＶＮＮ１またはＶＮＮ２遺伝子のいずれかから発現されるパンテテイナーゼを含むため、腎臓、肝臓、肺、および結合組織の疾患、ならびに感染性疾患を効果的に治療することができる。この方法は、（ｉ）腸内で分解され得るシステアミン前駆体を患者に投与して、４−ホスホパンテテインの１つまたは２つの分子を生じさせ、その一部は（ｉｉ）腸細胞によって吸収され、血液中に入り（４−ホスホパンテテインが比較的安定している）、次いで循環を介して（ｉｉｉ）病変臓器を通過し、（ｉｖ）ホスファターゼおよびパンテテイナーゼによって分解されて、疾患の部位でシステアミンを生じることができる。
【０１０４】
この治療方法の利点としては、（ｉ）等価用量あたり腸から吸収されるシステアミンを用いて達成され得る疾患の部位におけるより高いシステアミン濃度、（ｉｉ）結果としてより低い毒性をもたらす、より低い血漿システアミン濃度（４−ホスホパンテテインは、循環送達ビヒクルである）、（ｉｉｉ）システアミンよりも長い血中半減期（４−ホスホパンテテインの場合の３時間以上に対して、システアミンの場合約２５分）、これが投与間隔を長くし、それによって患者の便宜性を高める、および（ｉｖ）例えば、ＮＡＳＨ（Ｓａｔｏ  Ｗ．ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｐａｔｏｌ  Ｒｅｓ．３４：２５６（２００６））などの代謝性疾患およびある特定の炎症性疾患（Ｎａｑｕｅｔ  Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｓｏｃ  Ｔｒａｎｓ．４２：１０９４（２０１４））を含む、パンテテイナーゼの過剰発現が病原性である疾患組織にシステアミンを選択的に標的とする能力を挙げることができる。炎症はしばしば感染部位に存在するため、感染部位での選択的システアミン生成も可能であり、システアミンが抗菌性、抗ウイルス性、または抗寄生虫作用を有する環境で有用である。したがって、４′−ホスホパンテテインは、腸内で吸収され、血液中を循環し、次いで、腎臓と同様に構成的に、または炎症と同様に活性疾患の提示として、パンテテイナーゼを発現する臓器または疾患組織においてシステアミンに分解され得る。
【０１０５】
４−ホスホパンテチン−腎疾患の場合にジスルフィドを生じる
上記のように、パンテテイナーゼ（ＶＮＮ１およびＶＮＮ２遺伝子の両方によってコードされる）は、腎臓において高レベルで発現される。したがって、いくつかの循環４−ホスホパンテテインは、腎臓において分解され、システアミンを生じる。腎臓特異的システアミン生成の利点としては、胃腸管によるシステアミン吸収を介して達成されるよりも高い組織レベル、およびより少ないシステアミンの血中レベルの上昇と関連した副作用（例えば、悪臭呼吸および発汗、悪心、嘔吐、食欲不振、および胃痛）が挙げられる。システアミン療法に応答性の腎疾患としては、線維性疾患（例えば、糸球体腎炎）、ならびに腎症性シスチン症を含む代謝性疾患（腎不全は、システアミン療法によって１０年まで遅延する可能性のある主要な合併症である）が挙げられる。
【０１０６】
シスチン尿症は、再発性の腎結石（腎石症）と関連した別の遺伝性腎疾患である。平均して、成人患者は、３年毎に腎臓結石と関連した疼痛、感染症、または他の合併症のために外科処置を必要とし、平均的な患者は、中年までに腎石症に対して７回の外科的処置を受けた。シスチン尿症の患者は、腎臓損失の危険性が高く、腎摘除術が必要である。わずかではあるが有意な割合の症例（１〜３％）が、末期腎疾患を発症し、透析または腎臓移植で治療しなければならない。
【０１０７】
シスチン尿症は、低親和性シスチン輸送体ｒＢＡＴ（ヘテロ二量体）をコードする２つの遺伝子（ＳＬＣ３Ａ１およびＳＬＣ７Ａ９）のうちの１つの突然変異によって引き起こされる。疾患伝達は、常染色体劣性であり、いずれかの遺伝子の２つの欠損コピーを受け継いだ個体は、シスチン尿症を発症する。
【０１０８】
健康なヒト対象では、糸球体を通して濾過されたシスチンの０．４％のみが、最終的に尿中に排出される。他の９９．６％は、ｒＢＡＴによって（また別の輸送体によってより少ない程度で）近位尿細管に再吸収される。ｒＢＡＴに欠陥があると、シスチンが腎盂に集まるため、高濃度のシスチンが尿中に残る。シスチンは結石として沈殿し、尿管の閉塞および重度の疼痛を引き起こす可能性がある。腎臓結石はまた、感染症の危険性を高める。（シスチン尿症の全ての患者が結石を発達させるわけではなく、疾患のスペクトルはかなり広い）。
【０１０９】
石を発達させるシスチン尿症患者の初期治療は、食事療法であり、１日あたり５リットルまでの液体を飲むこと、および尿を約ｐＨ７．５にアルカリ性化することであり、これがシスチンの溶解度を増加させる。第二選択療法は、システインとの混合ジスルフィドを形成することができるチオール化合物の投与である。混合ジスルフィドは、シスチンよりも溶解度が高いため、尿中に溶解したままである。ペニシラミンおよびチオプロニンのチオールは、このように使用されてきたが、ほとんどの患者には十分に忍容されない。アルファ−メルカプトプロピオニルグリシンはまた、シスチン尿症についてＵＳ  ＦＤＡによって承認されているが、患者の約３分の１には忍容されない。
【０１１０】
腸内で４−ホスホパンテテインに分解可能であり、次いで吸収され、循環に入り、最終的にパンテテインに分解された後、腎臓のパンテテイナーゼによってシステアミンに分解される、経口投与されたシステアミン前駆体は、シスチン尿症の治療化合物の有用なクラスである。システアミンは、シスチンとのジスルフィド交換を介してシステインとの混合ジスルフィドを容易に形成し、システアミン−システインジスルフィドは、水溶液（例えば、尿）中でシスチンよりも溶解度が高い。この治療アプローチは、腎臓におけるシステアミンの形成を伴うため、腸内で形成され、そこから吸収されるシステアミンに必要とされるよりも低い用量のシステアミン前駆を必要とする（そのわずかな部分のみが、腎臓に到達する）。
【０１１１】
アルギニンコドンをシステインコドンに変える突然変異によって引き起こされる疾患を含む、酸化的損傷および遺伝性疾患と関連した線維性疾患を含む、システアミン療法に適した他の腎疾患は、同様のアプローチを用いて治療することができる。腎臓の血液供給は、心拍出量の主要な部分であり、吸収された４−ホスホパンテテインのかなりの部分の、腎臓への送達を確実にする。
【０１１２】
より一般的には、４−ホスホパンテテイン（４−ホスホパンテテインジスルフィドを含む）に分解可能なシステアミン前駆体は、治療用量のシステアミンを、有意なレベルのホスファターゼおよびパンテテイナーゼを発現する全ての臓器に提供するために有用である。例えば、酸化的損傷と関連した肺の疾患を治療することができる。
【０１１３】
これらの治療方法のための有用なシステアミン前駆体としては、補酵素Ａ、デホスホ補酵素Ａ、および４′−ホスホパンテテインを含有するジスルフィドが挙げられ、各々が、ジスルフィド結合の還元によって（４′−ホスホパンテテインを含有するジスルフィドの場合）、またはジスルフィド結合の還元に続いて酵素分解によって（補酵素Ａおよびデホスホ補酵素Ａを含有するジスルフィドの場合）、胃腸管で４′−ホスホパンテテインに分解され得る。いくつかの実施形態では、４′−ホスホパンテテインの２つの分子を提供するシステアミン前駆体は、１つを提供するものよりも好ましい。例えば、４′−ホスホパンテテイン−デホスホ補酵素Ａ混合ジスルフィド、またはホモ二量体４′−ホスホパンテテインジスルフィドは、システイン−４−ホスホパンテテイン混合ジスルフィドよりも多くの原位置システアミン生成能力を送達することができる。別の有用なクラスのシステアミン前駆体は、４′−ホスホパンテテインに分解可能な１つまたは２つのチオールに結合したジチオールを含む。例えば、ジヒドロリポ酸は、ジスルフィド結合を介して、４′−ホスホパンテテインの１つまたは２つの分子に連結される。
【０１１４】
より一般的には、４′−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、または補酵素Ａ、および別のチオールからなる任意のジスルフィドは、ジスルフィド結合の還元および（デホスホ補酵素Ａまたは補酵素Ａの場合）胃腸管における部分的分解後、４′−ホスホパンテテインの供給源となり得る。胃腸上皮を通って輸送された後、循環に達すると、４′−ホスホパンテテインは、血清ホスファターゼによってパンテテインに分解され（しかしながら、これは遅い反応である）、次いでパンテテイナーゼによって血中でシステアミンおよびパントテネートに分解され得るか（高速反応）、または４′−ホスホパンテテインは、ホスファターゼおよびパンテテイナーゼを発現する組織と接触すると分解され得る。例えば、ＡＣＰ１、ＡＣＰ２、ＡＣＰ５、およびＡＣＰＴ遺伝子によってコードされる酸ホスファターゼ、ならびにＡＬＰＩ、ＡＬＰＬ、ＡＬＰＰ、およびＡＬＰＰＬ２遺伝子によってコードされるアルカリホスファターゼを含む、ホスファターゼは（集合的に）広く発現される。ＶＮＮ１でコードされたパンテテイナーゼを発現する組織としては、肝臓、腎臓、心臓、および胃腸管が挙げられ、一方ＶＮＮ２でコードされたパンテテイナーゼは、腎臓、膀胱、膵臓、脾臓、肺、造血系（例えば、骨髄、リンパ節、扁桃）、結合組織（平滑筋、脂肪組織）において発現され、より低い程度で、甲状腺、副腎、心臓、および生殖器官（睾丸、卵巣、卵管、子宮内膜）において発現される。ＶＮＮ３遺伝子は、偽遺伝子として記載されているが、いくつかの報告は、機能的な役割を示唆する、異なるＶＮＮ３発現を記載している。ＶＮＮ３は、広く発現される。バニリンファミリー遺伝子の組織および細胞株の発現に関するデータは、タンパク質アトラスなどの公用データベース（ｗｗｗ．ｐｒｏｔｅｉｎａｔｌａｓ．ｏｒｇ）およびいくつかの刊行物（例えば、Ｊａｎｓｅｎ，Ｐ．Ａ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｖａｎｉｎ  Ｇｅｎｅ  Ｆａｍｉｌｙ  ｉｎ  Ｎｏｒｍａｌ  ａｎｄ  Ｉｎｆｌａｍｅｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｋｉｎ：Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ．Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ  １２９：２１６７−２１７４，２００９）において見出すことができる。
【０１１５】
パントテネートキナーゼ関連神経変性（ＰＫＡＮ）
４−ホスホパンテテインを送達するジスルフィドシステアミン前駆体が、治療的に使用され得る第２の治療方法は、パントテネートキナーゼ関連神経変性（ＰＫＡＮ）として知られる疾患によって例示される。システアミンは、パーキンソン病、ハンチントン病、および脳鉄蓄積による神経変性（ＮＢＩＡ）を含む、いくつかの神経変性疾患において治療上有効であるという前臨床的および臨床的証拠がある。ＮＢＩＡは、他の症状の中で、進行性錐体外路兆候、運動発達の遅延、および認知低下と可変的に関連する、稀で臨床的に異種の疾患群を指す。発症年齢は、乳児期から成人後期に及ぶ。症状の出現は、進行速度と同様に大きく異なる。その結果、診断は通常、脳のＭＲＩ走査での基底核における異常な鉄蓄積の観察によって示唆される。小脳萎縮もまた存在し得る。ＮＢＩＡは、ＰＡＮＫ２、ＰＬＡ２Ｇ６、Ｃ１９ｏｒｆ１２、ＦＡ２Ｈ、ＡＴＰ１３Ａ２、ＷＤＲ４５、ＣＯＡＳＹ、ＦＴＬ、ＣＰ、およびＤＣＡＦ１７の１０個の遺伝子のうちのいずれかの突然変異と関連している。Ｘ染色体上に位置するＷＤＲ４５遺伝子の突然変異を除いて、ＮＢＩＡは常染色体劣性疾患として伝染する。
【０１１６】
最も一般的な種類のＮＢＩＡ（全症例の３０〜５０％）は、パントテネートキナーゼ２（ＰＡＮＫ２）をコードする遺伝子における突然変異によって引き起こされる、パントテネートキナーゼ関連神経変性（ＰＫＡＮ）である。ミトコンドリアに局在するパントテネートキナーゼ２は、パントテン酸をリン酸化して４−ホスホパントテン酸を生成し、それが４−ホスホパントテノイル−システインに変換され、その後４−ホスホパンテテインに脱炭酸される（図１１を参照）。ＰＡＮＫ２触媒化ステップの下流の代謝産物である、４′−ホスホパンテテインの供給源を提供することは、機能的ＰＡＮＫ２酵素の要件を克服する。補酵素Ａおよびデホスホ補酵素Ａの両方は、胃腸管で４′−ホスホパンテテインに分解され得る。したがって、４′−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、または補酵素Ａ、および別のチオールからなる任意のジスルフィドは、ＰＡＮＫ２の欠損を補完することができる。
【０１１７】
ある特定の実施形態では、４′−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、または補酵素Ａを含有するジスルフィドを、ＰＡＮＫ２欠損に罹患している患者に投与して、疾患症状を改善することができる。具体的には、ジスルフィドは、図１９（表１Ｃおよび１Ｄ）、図２０（表１Ｅ）、および図２１に示される（少なくとも１つの４′−ホスホパンテテイン、１つのデホスホ補酵素Ａ、または１つの補酵素Ａを含む化合物のサブセット；図の命名法ではそれぞれチオール３、４、および５）。
【０１１８】
本出願のジスルフィドシステアミン前駆体は、上で概説した治療方法を実施するために特に適している。（ｉ）ジスルフィドが空気中で安定であり（すなわち、酸素に対して安定である）、したがってチオールよりも配合および保存が容易であり、より長い期間安定であるため、（ｉｉ）チオール基は、ジスルフィドが吸収部位の近くの小腸で還元されるまで保護されるため、（ｉｉｉ）付加的または相補的な治療特性を有する第２のチオールが同時に送達され得るため、ジスルフィドは、４′−ホスホパンテテイン（および最終的にシステアミン）を送達するための有効な方法を提供する。例えば、いくつかの実施形態では、システアミン−４−ホスホパンテテイン混合ジスルフィド、システアミン−デホスホ補酵素Ａ混合ジスルフィド、およびシステアミン−補酵素Ａ混合ジスルフィドは、有用な治療化合物である。
【０１１９】
Ｎ−アセチルシステアミンジスルフィド（化合物３）
特定の実施形態では、システアミン前駆体は、化合物３またはその薬学的に許容される塩である。２つのＮ−アセチルシステアミンのホモ二量体は、２つの方法で使用できるシステアミンの効率的な送達ビヒクルであり、単剤として投与するか、または１つ以上の他のシステアミン前駆体と組み合わせて投与することができる。いずれの場合も、目標は、治療範囲内の持続的な血中Ｎ−アセチルシステアミンおよびシステアミンレベル（例えば、血漿中５マイクロモルより大きく７５マイクロモル未満、または１０マイクロモルより大きく６５マイクロモル未満）を可能な限り長い時間提供することである。
【０１２０】
化合物３が単剤として投与されるそれらの実施形態では、それは、好ましくは、少なくとも２つの放出プロファイル：早期放出プロファイルおよび後期放出プロファイルを提供する方法で配合される。早期放出製剤（別名即時放出）は、経口投与後１０分以内に化合物３の放出を開始する。後期放出製剤は、約２〜４時間後に相当量の化合物３を放出し始める。２つの製剤は、それらを単一の剤形で一緒に摂取できるように、混合することができる。早期放出用に配合された化合物３の用量と後期放出用に配合された用量の比は、少なくとも１：２であり、最大１：８（例えば、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８）の範囲であり得る。一実施形態では、早期および後期放出用量成分は、両方ともマイクロビーズとして配合される。２つの放出プロファイルを有するマイクロビーズは、別個に製造され、次いで、所望の比率で一緒に混合されて、剤形（例えば、サシェ）を生成することができる。そのアプローチは、早期対後期放出マイクロビーズの比率が異なる用量の製造を容易にする。２種類のマイクロビーズの異なる比率を使用して、患者のための治療を個別化することができる。
【０１２１】
いくつかの実施形態では、化合物３は、３つの放出プロファイル：早期、中期および後期で配合される。早期放出成分は、経口投与後１０分以内に化合物３の放出を開始し、中期放出成分は、摂取後約２〜４時間に相当量の化合物３を放出し始め、後期製剤は摂取後約３〜６時間で放出するを開始する。３つの放出成分は、それらを単一の剤形で一緒に摂取できるように、混合することができる。３つの用量成分（早期：中期：後期）の化合物３の比率は、少なくとも１：２：２である。中期および後期成分の化合物３は、独立して、早期成分の量の２〜８倍の間で変動し得るが、後期放出成分は、少なくとも中期放出成分と等しい（例えば、１：２：８、１：４：６、１：４：４、１：５：５、１：６：８など）。一実施形態では、早期、中期、および後期放出用量成分は全てマイクロビーズとして配合され、別個に製造され、次いで、所望の比率（例えば、胃腸および肝臓の生理学に合わせてカスタマイズされた比率）で一緒に混合されて、剤形（例えば、サシェ）を生成することができる。
【０１２２】
特定の実施形態では、後期用量成分、または中期および後期用量成分の両方は、胃内での長期滞留のために配合される（胃内滞留性製剤）。他の実施形態では、後期、または中期および後期の両方の用量成分が、持続放出用に配合される。特定の実施形態では、２成分または３成分剤形は、食事、好ましくは少なくとも５００カロリー、より好ましくは少なくとも７００カロリーを含む食事とともに摂取される。好ましくは、食事は栄養的に複合的であり（例えば、いくつかの種類の自然食品を含有する）、カロリー含有量の少なくとも２５％が脂肪に由来する。
【０１２３】
化合物３が少なくとも１つの追加のシステアミン前駆体と同時投与されるこれらの実施形態では、少なくとも１つの他のシステアミン前駆体の放出プロファイルを補完する放出プロファイルを提供するように配合され、システアミン前駆体が一緒になって治療範囲内の血漿システアミン濃度を可能な限り長い時間提供する。好ましい実施形態では、化合物３は、投与後の最初の１〜３時間でシステアミンを提供し、少なくとも１つの追加のシステアミン前駆体は、例えば、１２時間の投与間隔で、３〜６、３〜８、４〜１０、または３〜１２時間、システアミンを提供する。そのような実施形態では、化合物３は、即時放出用に配合され得る。特定の実施形態では、化合物３と同時投与される少なくとも１つの追加のシステアミン前駆体は、化合物１またはその薬学的に許容される塩である。
【０１２４】
システアミン前駆体からのシステアミン生産の促進剤
本発明の方法および組成物は、システアミン産生の促進剤を利用することができる。システアミンの血中レベルを制御することにおける付加的な柔軟性は、システアミン前駆体を、腸内でシステアミン前駆体をシステアミンに化学的かつ酵素的に分解するため、システアミンを血液中に吸収するため、およびシステアミンが腸、血液、または組織中で迅速に異化されることを防ぐために必要なステップの促進剤と組み合わせることによって達成することができる。これらのいくつかのステップの各々に特異的な促進剤が存在する。したがって、本明細書に説明されるシステアミン前駆体のうちのいずれかは、任意に、システアミン生成もしくは小腸取り込みを促進するか、またはシステアミン分解を遅くする薬剤と同時配合もしくは同時投与するか、または順次投与することができる。
【０１２５】
ジスルフィドシステアミン前駆体をシステアミンに変換する第１のステップは、２つのチオールを産生するためのジスルフィドを還元である。胃腸管内の酸化還元環境は、システアミン前駆体をそれらのそれぞれのチオールに定量的に還元し、それによってシステアミン生成を制限するために十分な還元当量を含有しないことがある。例えば、胃液中の還元剤グルタチオンおよびシステインの濃度は、非常に低いか、または検出不能である（Ｎａｌｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｌ  Ｉｎｔ．３２：４４９（１９９４））。さらに、高用量のパンテチンに関する小規模臨床研究では、パンテテインの多くが便中に変化しないまま排出され、明らかに不完全なジスルフィド結合の還元を反映している（Ｗｉｔｔｗｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．７６：４（１９８５）を参照）。この潜在的な制約に対処するために、還元剤をジスルフィドシステアミン前駆体と同時投与もしくは同時配合するか、またはシステアミン前駆体の前または後に投与することができ、それによりそれらを必要な時間および場所で利用できるようにする。還元剤は、ジスルフィド結合の還元を促進し、２つのチオールを遊離させ得るか、またはチオール−ジスルフィド交換反応を促進することができ、チオール（Ａ）およびジスルフィド（Ｂ−Ｃ）が反応して、新たなジスルフィド（Ａ−ＢまたはＡ−Ｃ）およびチオール（ＢまたはＣ）を産生し、それによって元のジスルフィド（例えば、システアミン、パンテテイン、またはシステアミンに分解可能な化合物）中のチオールのうちの１つを放出する。
【０１２６】
様々な還元剤を使用して、胃腸管でのジスルフィドの還元またはチオール−ジスルフィド交換を促進することができる。還元剤は、ジスルフィドシステアミン前駆体を直接還元するか、または順にジスルフィドシステアミン前駆体を還元するか、もしくはチオール−ジスルフィド交換に関与する、グルタチオンジスルフィドなどの他のジスルフィドを還元することができる。いくつかの実施形態では、還元能力を有する生理学的化合物（すなわち、体内に通常見られる物質）または食品由来の化合物を使用して、ジスルフィドシステアミン前駆体の還元を促進するか、またはチオール−ジスルフィド交換反応を促進することができる。アスコルビン酸（ビタミンＣ）、トコフェロール（ビタミンＥ）、またはジチオールジヒドロリポ酸、強力な還元剤などの、通常、体内および食品中に存在し得る他の化合物のように、チオールグルタチオンまたはシステインなどの生理学的還元剤（いずれも胆汁および腸細胞分泌の結果として小腸に存在する）が使用されてもよい。図１７に列挙された任意のチオールのように、Ｎ−アセチルシステインなどのチオールおよびニコチンアミドアデニンジヌクレオチド（ＮＡＤＨ）などの非チオールを含む、他の広く利用可能な還元剤を使用することもできる。好ましい還元剤としては、局所胃腸管酸化還元環境の変化をもたらすために必要な用量で安全であることが知られているものが挙げられる。投与期間あたり、数グラムまで、例えば０．５〜５グラムの還元剤が必要とされ得る。還元剤の同時投与から利益を得ることができるジスルフィドシステアミン前駆体を図１３に示す。特に、化合物１〜３は、本明細書に説明されるように、１つ以上の還元剤の同時投与または適切な回数のその後の投与から利益を得ることができる。２つ以上の還元剤を組み合わせてもよい。好ましくは、還元剤は３００ダルトン未満の分子量を有する。
【０１２７】
成人は、毎日４００〜１，０００ミリリットル（ｍＬ）以上の胆汁を産生し、７５０ｍＬが、平均量として推定されている（Ｂｏｙｅｒ，Ｃｏｍｐｒ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．３：３２（２０１３））。胆汁は、１日中肝臓で産生される。一部は胆嚢に貯蔵されるが、残りは絶食状態であっても、胆汁の安定したゆっくりとした流れを提供する（胆汁は、排泄機能を果たすとともに消化および脂肪吸収を助ける）。食事は、ペプチドホルモンセクレチンおよびコレシストキニンの十二指腸分泌を刺激し、胆汁産生および胆嚢収縮をそれぞれ刺激する。胆汁中のチオールの濃度は、およそ４ｍＭであり、主にグルタチオンからなるが、ガンマ−グルタミルシステイン、システイニルグリシン、およびシステインも含む（Ｅｂｅｒｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５６：２１１５（１９８１）、ＡｂｂｏｔｔおよびＭｅｉｓｔｅｒ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ  ２５８：６１９３（１９８４））。
【０１２８】
システインおよび、より低い程度で、グルタチオンもまた、管腔内酸化還元能力を調節するために腸細胞によって胃腸管の内腔に分泌される。ラットの空腸からの腸液中のチオール濃度は、胆汁からの寄与とは無関係に直接測定されている。絶食ラットでは、６０〜２００μＭ、摂食動物では１２０〜３００μＭの範囲である（Ｈａｇｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２５９：Ｇ５２４（１９９０）、ＤａｈｍおよびＪｏｎｅｓ，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２６７：Ｇ２９２（１９９４））。さらに、胆汁分泌とは異なり、内腔チオールレベルの維持は動的プロセスであり、それにより酸化分子（例えば、ジスルフィドシステアミン前駆体）の腸レベルの上昇は、少なくともある程度、腸細胞によるシステイン産生の増加によって対抗され得る（Ｄａｈｍ  ａｎｄ  Ｊｏｎｅｓ，Ｊ．Ｎｕｔｒ．１３０：２７３９（２０００））。ヒトの小腸は、１日あたり約１．８リットルの流体、結腸は約０．２リットルで合計約２リットルを分泌する。分泌液中のチオール（主にシステイン）の濃度は、胃腸管の領域、内腔の酸化還元能力、および食事によって変化する。
【０１２９】
胃腸チオールの総濃度（胆汁および腸細胞由来の両方）は、システアミン前駆体をチオールに変換するために必要なジスルフィド結合の還元および／またはチオール−ジスルフィド交換の速度および程度に影響し、これはシステアミンへの分解における必須の第１ステップである。食事後の上部胃腸管で利用可能な還元等価物の量は、いくつかの仮定を行うことによって推定することができる。例えば、（ｉ）量の多い食事後１時間に２００ｍＬ、２〜３時間後にさらに１００ｍＬの胆汁が分泌され、（ｉｉ）胆汁中のチオール濃度が、４ｍＭであると仮定すると、胆汁中のチオール還元力のミリ当量は、０．３Ｌ×０．００４モル／Ｌ＝０．００１２モルのチオール（１．２ミリモル）になる。さらに、小腸の腸細胞が食事後４時間の間に追加の４００ミリリットルを分泌し、２００ｕＭのチオール濃度で、０．４リットル×０．０００２モル／リットル＝８０マイクロモルの管腔チオールを付加的にもたらすと仮定する。胆汁チオールと組み合わせると、合計約１．２８ミリモルが、食物のジスルフィドを低減し、腸の酸化還元ポテンシャルを維持するために利用可能である。これは、チオール分泌の上限の推定値（かなり大きい場合がある）ではなく、食事後の数時間の小腸におけるチオールの正常レベルの値である。
【０１３０】
０．５グラム用量のシステアミン−（Ｒ）−パンテテインジスルフィド（ＭＷ：３５３．５２ｇ／Ｌ）は、約１．４１ミリモルのジスルフィド結合を含有し、したがって、原則的に、内在性レベルのチオールによって（他の生理学的目的のために内腔チオールの必要性を無視して）、チオールに変換することができる（ジスルフィド結合の還元またはチオール−ジスルフィド交換のいずれかを介して）。
【０１３１】
より一般的には、１．２５ミリモル過剰のシステアミン前駆体用量は、外因性還元剤の同時投与から利益を得ることができる。食物中に通常存在する多くの天然産物は、システアミン前駆体の還元またはチオール−ジスルフィド交換を促進する還元力を提供することができ、主要な内在性腸チオールのシステインまたはグルタチオンを含む。Ｎ−アセチルシステイン、Ｎ−アセチルシステインエチルエステル、またはＮ−アセチルシステインアミドなどのシステインまたはグルタチオン類似体を使用することもできる。アスコルビン酸は、ジスルフィド結合を還元することができる別の薬剤である（Ｇｉｕｓｔａｒｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  １９：２５２（２００８））。例えば、１グラムのジスルフィドシステアミン前駆体システアミン−（Ｒ）−パンテテインジスルフィドに等しい還元力を提供するために必要なアスコルビン酸の用量は、以下のように計算することができる。
【０１３２】
アスコルビン酸の分子量（１７６．１２ｇ／ｍｏｌ）は、化合物１としても知られる、システアミン−（Ｒ）−パンテテインジスルフィドの分子量（３５３．５２ｇ／ｍｏｌ）の約半分である。したがって、１グラムのアスコルビン酸は、２グラム用量の化合物１中のジスルフィド結合の数に対して等モルの還元等価物を有する。米国食品栄養委員会が推奨するビタミンＣの１日の摂取量は、女性の場合わずか７５ミリグラム、男性の場合９０ミリグラムであるが、多くの人々は、１日あたり１グラム以上の用量を含む、はるかに多い用量を摂取しており、有害作用は明らかに少ないか、または有害作用がない。
【０１３３】
同様の論拠は、化合物１の用量をモル単位で一致させるために必要な他の還元剤の量をもたらす。例えば、システイン（分子量：１２１．１５ダルトン）は、化合物１の質量の約３４％であり、Ｎ−アセチルシステイン（分子量：１６３．１９５ダルトン）は、化合物１の質量の約４６％であり、アルファリポ酸（分子量：２０８．３４ダルトン）は、化合物１の質量の約５９％であり、以下同様である。アルファリポ酸およびＮ−アセチルシステインは、非規制状態を示す、持続放出製剤を含めて、それぞれ６００および１，０００ｍｇのカプセルおよび錠剤中で、ビタミンストアおよびインターネット上で広く入手可能である。それらの分子量に基づいて他のジスルフィドシステアミン前駆体についても同様の計算を行うことができる。
【０１３４】
胆汁はチオールの主な供給源であり、胆汁は小腸および大腸の長さに沿って連続的に希釈されるため、システアミン前駆体の還元のための余分な還元力は、空腸、回腸、または結腸において十二指腸よりも有用であり得る。したがって、遠位小腸および／または大腸における還元剤を放出するように設計された製剤は、ジスルフィドシステアミン前駆体の特に有用な補充剤であり得る。アスコルビン酸および他の還元剤の持続放出製剤は、市販されている。あるいは、アスコルビン酸をシステアミン前駆体と同時配合して、両方の薬剤の同時送達を確実にすることができる。
【０１３５】
異なる生物学的還元剤と関連した電気化学的能力（還元力）は知られており、それらの使用についてのガイドを提供するが、異なるジスルフィドシステアミン前駆体を還元するそのような薬剤の能力は、経験的に最もよく決定される。
【０１３６】
チオール−ジスルフィド交換反応の反応速度は、ｐＨの影響を強く受ける（すなわち、低いｐＨによって遅くなる）。そのような交換反応は、システアミンをシステアミン混合ジスルフィドから、またはパンテテインをパンテテシンジスルフィドから遊離するためのジスルフィド結合の還元に対する代替機序である。チオール−ジスルフィド交換反応の反応速度を高めるために、塩基性化合物を、ジスルフィドシステアミン前駆体と同時投与または同時配合してもよく、それによりそれらは、必要とされる時間および場所で利用可能になる。重炭酸塩などの生理学的化合物は、膵液中に高濃度で存在し、局所胃腸ｐＨを調節するために使用され得る。
【０１３７】
多くのシステアミン前駆体をシステアミンに変換することにおける必須のステップは、ヒトのＶＮＮ１およびＶＮＮ２遺伝子によってコードされる酵素パンテテイナーゼである。パンテテインおよびパンテテインジスルフィド（パンテチンを含む）は、システアミンを生じるためにこの酵素を必要とする。パンテテイナーゼはまた、最終的に、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、および適切な類似体および誘導体などの、胃腸管でパンテテインに変換可能な化合物からのシステアミン生成のために必要とされる。胃腸管における正常レベルのパンテテイナーゼは、薬理学的用量によって提供される全てのパンテテイン分子を定量的に切断するために十分でない場合がある。この制約に対処するために、パンテテイナーゼ発現を誘導する化合物を、パンテテインまたはパンテテインに変換可能な化合物を含有するシステアミン前駆体と同時投与または同時配合して、必要とされる時間および場所（すなわち、パンテテインが存在する時期および場所）において、胃腸管内のパンテテイナーゼの量を増加させることができる。パンテテイナーゼの発現を誘導する薬剤としては、ある特定の食物成分を含む生理学的物質と、ＦＤＡ承認された薬物を含む薬剤の両方が挙げられる。ＶＮＮ１の生理学的誘導因子としては、転写因子ＮＦ−Ｅ２関連因子−２（より一般的に、頭字語でＮｒｆ２と呼ばれる）、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体アルファ（ＰＰＡＲアルファ）、およびペルオキシソーム増殖因子活性化受容体ガンマ（ＰＰＡＲガンマ）を介して作用する様々な物質を含む。
【０１３８】
Ｎｒｆ２活性化を誘導する因子（核への移行を介して）としては、天然産物およびある特定の薬物の両方が挙げられる。例えば、ブロッコリー、芽キャベツ、キャベツ、およびカリフラワーなどのアブラナ科野菜に存在するイソチオシアネートであるスルフォラファンは、Ｎｒｆ２を介してＶＮＮ１の発現を誘導する。スルフォラファンが豊富な食品（例えば、芽キャベツ）を使用して、パンテテイナーゼの発現を誘導することができ、またはスルフォラファンを、医薬組成物中の純物質として投与することができる。Ｓ−アリルシステインおよびジアリルトリスルフィド（いずれもタマネギ、ニンニク、およびニンニク抽出物中に存在する）を含む、ある特定の食品由来チオールもまたＮｆｒ２を誘導し、システアミン前駆体とともに投与される食事に含めることができる。あるいは、いずれかの化合物を純粋な形態で得て、医薬組成物中で投与することができる。一部の多価不飽和脂肪酸、酸化脂肪、オメガ３脂肪酸、および天然に存在する脂質オレイルエタノールアミド（ＯＥＡ）を含む、ある特定の食品中に存在する脂質もまた、Ｎｒｆ２および／またはＰＰＡＲアルファを誘導する。酸化脂肪が豊富な食品としては、フライドポテトおよび他の揚げ物が挙げられ、システアミンを生成するためにパンテテイナーゼ切断を必要とするシステアミン前駆体と同時投与することができる。オメガ３脂肪酸は魚に存在し、魚油抽出物中、および医薬組成物で使用するための純粋な形態で入手可能である。
【０１３９】
天然に存在するＰＰＡＲアルファリガンドとしては、ロイコトリエンＢ４、８−ヒドロキシエイコサテトラエン酸、およびある特定のファミリーメンバーを含むアラキドン酸およびアラキドン酸代謝産物などの内在性化合物が挙げられる。薬理学的ＰＰＡＲアルファリガンドとしては、フィブラート（例えば、ベンザフィブラート、シプロフィブラート、クリノフィブラート、クロフィブラート、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル）、ピリニクス酸（Ｗｙ１４６４３）、およびジ（２−エチルヘキシル）フタレート（ＤＥＨＰ）が挙げられる。任意の天然または合成のＰＰＡＲアルファリガンドは、システアミンを産生するためにパンテテイナーゼ切断を必要とするシステアミン前駆体と同時配合または同時投与され得る。ＰＰＡＲリガンドの概説については、Ｇｒｙｇｉｅｌ−Ｇｏｒｎｉａｋ，Ｂ．Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  １３：１７（２０１４）を参照されたい。
【０１４０】
天然および合成のＰＰＡＲＧアゴニストを使用して、パンテテイナーゼ遺伝子ＶＮＮ１および／またはＶＮＮ２のＮｒｆ２媒介転写を刺激することもできる。天然産物ＰＰＡＲＧアゴニストとしては、アラキドン酸および代謝産物が挙げられ、１５−ヒドロキシエイコサテトラエン酸（１５（Ｓ）−ＨＥＴＥ、１５（Ｒ）−ＨＥＴＥ、および１５（Ｓ）−ＨｐＥＴＥ）、９−ヒドロキシオクタデカジエン酸、１３−ヒドロキシオクタデカジエン酸、１５−デオキシ−（デルタ）１２，１４−プロスタグランジンＪ２、およびプロスタグランジンＰＧＪ２、ならびにホノキオール、アモルフルチン１、アモルフルチンＢ、およびアモルファスチルボールを含む。他の天然産物は、ＰＰＡＲＧおよびＰＰＡＲＡの両方を活性化し、ゲニステイン、ビオカニンＡ、サルガキン酸、サルガヒドロキン酸、レスベラトロール、およびアモルファスチルボールを含む。天然産物ＰＰＡＲＧアゴニストは、Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ９２：７３（２０１４）に説明および概説されている。薬理学的ＰＰＡＲガンマアゴニストとしては、チアゾリジンジオン（グリタゾンとも呼ばれる、例えばピオグリタゾン、ロシグリタゾン、ロベグリタゾン）が挙げられる。赤身肉由来のヘムもまた、ＶＮＮ１発現を誘導する。パンテテイナーゼ発現を刺激するＰＰＡＲＡまたはＰＰＡＲＧアゴニストは、パンテテインまたは腸内でパンテテインに分解可能な化合物を含有するシステアミン前駆体と同時投与または同時配合することができる。パンテテイナーゼ発現の２つ以上の誘導因子を組み合わせて、発現を促進するか、または任意の単一薬剤の用量を低減することができる。
【０１４１】
システアミンを全身で生物学的に利用可能にする別の重要なステップは、腸上皮全体の吸収である。腸管腔からのシステアミンの取り込みは、輸送体によって媒介され、その天然レベルは腸管腔内の全てのシステアミンを輸送するには十分に高くない場合がある。したがって、システアミン輸送体の発現を誘導する化合物は、システアミン前駆体と同時投与または同時配合してシステアミンの吸収を高めることができる。システアミンは、有機カチオン輸送体１、２、および３によって（ＯＣＴ１、ＯＣＴ２、およびＯＣＴ３遺伝子によってコードされ、ＳＬＣ２２Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ２、およびＳＬＣ２２Ａ３遺伝子とも呼ばれる）、ならびに恐らくは他の輸送体タンパク質によって腸上皮全体に輸送される。有機カチオン輸送体発現の誘導因子としては、転写因子ＰＰＡＲアルファおよびＰＰＡＲガンマ、プレグナンＸ受容体（ＰＸＲ）、レチノイン酸受容体（ＲＡＲ）、および（ＯＣＴ１の場合）ＲＸＲ受容体、ならびにグルココルチコイド受容体が挙げられる。したがって、これらの受容体の天然または合成リガンドのいずれかを使用して、ＯＣＴ発現を増加させ、結果として腸上皮細胞によるシステアミンの取り込みを促進することができる。システアミン輸送体（複数可）の発現を刺激する薬剤は、任意の種類のシステアミン前駆体と同時投与または同時配合されてもよい。
【０１４２】
人体におけるシステアミンの排出半減期（Ｃｍａｘから静脈内ボーラス後の半Ｃｍａｘまでの時間）は、約２５分である。システアミンの用量の一部は、遊離システインとの、タンパク質のシステイニル残基との、およびグルタチオンとの混合ジスルフィドを含む、種々のジスルフィドに変換される。薬理学的介入は、その排出の様式を防止することができず、いずれの場合でもシステアミンのプールがさらなるジスルフィド交換のために利用可能なままである。しかしながら、システアミンを不可逆的に変換し、それを効果的に身体から除去する、システアミン異化経路がある。システアミンをヒポタウリンに酸化する酵素システアミンジオキシゲナーゼは、システアミン排出において重要な因子である。その後、ヒポタウリンは、タウリンへとさらに酸化される。システアミン前駆体とこれらの異化産物の一方または両方との同時投与は、最終産物の阻害によってシステアミン異化を遅らせる場合がある。したがって、ある特定の実施形態では、システアミン前駆体は、ヒポタウリンおよび／またはタウリンとの最適な時間的順序で同時配合、同時投与、または投与される。
【０１４３】
図１３は、チオール構成体、生成され得るシステアミン分子の数、システアミンを生成するために必要な代謝ステップ、インビボシステアミン生成の潜在的に有用な促進剤、およびシステアミン放出プロファイルに基づくシステアミン前駆物質の分類を示す。システアミン輸送体（複数可）のより高い発現を誘導する化合物（図１３には示されていない）は、全ての種類のシステアミン前駆体に有用である。腸内容物をアルカリ化し、それによってチオール−ジスルフィド交換および／またはジスルフィド結合の還元を促進する化合物（図１３には示されていない）は、ジスルフィドシステアミン前駆体に有用である。
【０１４４】
要約すると、システアミン血中レベルの制御における柔軟性は、（ｉ）選択された特性を有する１種以上のシステアミン前駆体、（ｉｉ）インビボシステアミン前駆体分解および／またはシステアミン吸収の１種以上の促進剤、（ｉｉｉ）システアミン異化の１種以上の阻害剤、（ｉｖ）１種以上の製剤（例えば、即時、遅延、持続、胃内滞留性、もしくは結腸標的、または組み合わせ）を用いる、および（ｖ）効果的に分解および吸収され得る量での、システアミン前駆体（複数可）および促進剤（複数可）の胃腸管の標的化セグメントへの最適な同時送達を可能にする投与スケジュールの同時配合または同時投与によって達成され得る。これらのツールの個別化された適用の結果は、システアミン血中レベルを治療範囲内に長期間維持し、既存の化合物および製剤と比較して、疾患に対する優れた薬理学的効果をもたらす。
【０１４５】
医薬組成物
本発明は、（ｉ）システアミンの高いピーク濃度と関連した副作用を低減するため、（ｉｉ）システアミンの治療量以下のトラフ濃度によって引き起こされる治療不十分を低減するため、および（ｉｉｉ）患者の便宜性を改善し、したがって１日あたりの投与回数を減らすことによって治療法を遵守するために、長期間にわたってシステアミンの治療上有効な血漿濃度を達成するように配合された組成物を提供する。本発明の化合物および製剤はまた、（ｉ）既存のシステアミン製剤と比較して、改善された感覚刺激特性を提供し、（ｉｉ）胃腸副作用の既知の原因である、遊離システアミンと胃上皮との接触を低減し、（ｉｉ）用量および送達部位（複数可）を胃腸管における関連する消化および吸収プロセスと一致させることによって、治療的システアミン血中レベルを達成するために必要とされるシステアミン前駆体の用量を最小限にするように設計され、この目的は、（ｉｉｉ）システアミン前駆体の分解および吸収を、それらのプロセスの促進剤との同時配合または同時投与によって最適化することによって達成され得る。
【０１４６】
本発明の組成物の場合、システアミン前駆体またはその塩の、口内での曝露を防止するために、全ての製剤に薬学的賦形剤が含まれる。苦味または他の不快な味をマスキングするための配合方法としては、いくつかの層に塗布することができるコーティングが挙げられる。香味剤および染料を使用することもできる。許容される口あたりおよび／または味を有する医薬組成物を産生する方法は、当該分野で知られている（例えば、他の箇所で引用されている薬学的製剤の教科書を参照。特許文献はまた、感覚刺激的に許容される医薬組成物を産生するための方法を提供する（例えば、米国特許公開第２０１０／００６２９８８号を参照。）
【０１４７】
胃内滞留性組成物
第１の組成物は、胃内滞留性製剤中でシステアミン前駆体またはその塩を提供する。様々な胃内滞留技術が当該分野で知られており、そのいくつかは市販製品において良好に使用されている。概説については、例えば、Ｐａｈｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｒｅｃｅｎｔ  Ｐａｔｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ａｎｄ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ，６：２７８（２０１２）、およびＨｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｉｃ  ｒｅｔｅｎｔｉｖｅ  ｄｏｓａｇｅ  ｆｏｒｍｓ：ａ  ｒｅｖｉｅｗ．Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ｉｎ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ２０：４５９（２００３）を参照されたい。
【０１４８】
胃内滞留性製剤は、胃内でシステアミン前駆体の持続放出を提供する。その後のインビボでのシステアミン前駆体の種類に応じて、システアミン生成は、胃で、またはシステアミンが最も効率的に吸収される組織である小腸で開始し得る。いくつかのシステアミン前駆体は、たとえ胃または小腸において医薬組成物から放出されたとしても、大腸においてシステアミンに変換され続けることがある。例えば、胃で放出されるジスルフィドシステアミン前駆体は、主に胃の酸性、酸化性環境において酸化状態で残る場合があり、小腸で還元剤（例えば、胆汁グルタチオン）に遭遇した後にシステアミンを放出し始める。胃内滞留性組成物は、摂取後１〜４時間、好ましくは１〜６時間、より好ましくは１〜８時間、１〜１０時間、またはそれ以上の間に、上昇した血中システアミンレベルを生じる。
【０１４９】
システアミン重酒石酸塩に推奨されるものとは反対に（例えば、Ｐｒｏｃｙｓｂｉ（登録商標）ＦＤＡ完全処方情報を参照）、システアミン前駆体の胃内滞留性製剤は、食品とともに、好ましくは、胃排出を遅らせるために十分なカロリー含有量および栄養素密度を含む食事とともに投与されるべきである。栄養素稠密な食事は、小腸において（および胃ではより低い程度で）浸透圧受容体および化学受容体を誘発し、これが胃の運動性を低下させ、それによって排出を遅延させる神経およびホルモンシグナルを刺激する効果を有する。胃排出を遅らせることは、胃内滞留性組成物の効果を延長するための機序である。しかしながら、大量の食物または液体で胃を満たすことは、胃の運動性を促進し、排出速度を上げる傾向があり、したがって、栄養素密度は、容量よりも重要な食事の特性である。十二指腸に排出する前に幽門洞および幽門内で小さな粒子に粉砕しなければならない固体食品は、液体または半液体食品と比較して胃の滞留を延長する。液体食品の中で、高粘度の液体は、低粘度の液体と比較して胃排出を遅らせることができる。高浸透圧内容物を有する食品は、十二指腸浸透圧受容体を誘発して、胃排出を遅らせる信号を伝達する。胃内のシステアミン前駆体の放出（例えば、胃内滞留性製剤からの）は、胃内容物、したがって十二指腸内容物の浸透圧を増加させることができる。
【０１５０】
ある特定の実施形態では、ジスルフィドシステアミン前駆体は、胃の酸性、酸化環境がジスルフィドを酸化形態で維持する傾向があり、それによってシステアミン毒性の原因の１つと考えられる胃上皮のシステアミンへの曝露を制限するため、胃内滞留性製剤に好ましい。十二指腸に入り、高（ミリモル）濃度のグルタチオン、システイン、および他の還元剤を含有する胆汁と混合すると、ジスルフィドは還元され、それによってパンテテイナーゼに曝露される場所、およびシステアミン輸送体が腸細胞上で発現される場所で、遊離チオールを産生する。
【０１５１】
小腸における脂肪の存在は、胃排出の最も強力な既知の阻害剤であり、幽門領域における近位の胃の弛緩および収縮の減少につながる。脂肪が小腸において吸収され、もはや胃への阻害シグナルを誘発しなくなると、胃の運動は正常なパターンを再開する。したがって、胃内滞留性製剤は、理想的には、脂肪食品を含む食事とともに投与され得る。タンパク質が豊富な食事もまた、より低い程度で、炭水化物が豊富な食事はさらに低い程度で、胃排出を遅くする。
【０１５２】
胃内滞留性組成物はまた、ある特定の脂質を含む、胃排出を遅らせる化合物とともに投与することができ、例えば少なくとも１２個の炭素原子を有する脂肪酸は、腸内分泌細胞からのコレシストキニン放出を刺激し、胃の運動を低下させるが、より短い炭素細胞を有する脂肪酸は、それほど効果的ではない。いくつかの実施形態では、食物または食事には、炭素鎖が１２以上の脂肪酸（例えば、オレイン酸、ミリスチン酸、ミリスチン酸トリエタノールアミン、脂肪酸塩）を含む脂肪酸またはトリグリセリドが補充されてもよい。
【０１５３】
脂肪およびタンパク質は、それらが十二指腸に達すると、グレリン、コレシストキニン（ＣＣＫ）、およびグルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ１）を含むいくつかの腸ホルモンの分泌を刺激する。ＣＣＫは、ＣＣＫ１受容体（ＣＣＫ１Ｒ、以前はＣＣＫ−Ａ受容体と呼ばれていた）に結合することによって胃排出を遅らせる。いくつかの実施形態では、経口的に活性なＣＣＫアゴニストまたは模倣物、ＣＣＫ１Ｒの正のアロステリック調節剤、または内在性ＣＣＫの放出を促進する、もしくはＣＣＫ分解を阻害する薬剤、またはそうでなければそれらの機序もしくは他の機序のいくつかの組み合わせによってＣＣＫ作用を延長する薬剤は、胃内滞留性組成物とともに投与され、胃排出を遅らせ、胃内滞留組成物の胃滞留を延長させる。ＣＣＫは、８アミノ酸から５３アミノ酸までの範囲のいくつかの形態（例えば、ＣＣＫ−８、ＣＣＫ−５３）で存在するペプチドである。ペプチドの経口投与は、それらが胃腸管で消化されるため有効ではない。小分子ＣＣＫアゴニストは、いくつかの研究グループによって開発され、試験されている。例えば、ＳＲ−１４６、１３１および関連化合物は、Ｓａｎｏｆｉの科学者によって開発された（米国特許第５，７３１，３４０号および同第６，３８０，２３０号、参照により本明細書に組み込まれる）。
【０１５４】
ある特定のプロテアーゼ阻害剤は、ＣＣＫ産生もしくは放出を誘導するか、またはその半減期を延長するか、またはそうでなければ食物由来の混合物および純粋な化合物の両方を含むその効果を増強する。例えば、ジャガイモ由来のプロテアーゼ阻害剤濃縮物の摂取は、大豆ペプトンおよび大豆ベータ−コングリシニンペプトンの摂取と同様に、ＣＣＫレベルの上昇と関連する。カモステートは、内在性ＣＣＫ放出の刺激、および結果的に胃排出の減速を含む、多面発現効果を有する合成プロテアーゼ阻害剤である。メシル酸カモスタットは、ヒトにおいて広範に使用されている薬学的塩である。ＦＯＹ−２５１は、カモスタットの活性代謝産物である。いくつかの実施形態では、ＣＣＫ産生もしくは放出を刺激する、またはＣＣＫ半減期を延長する、またはそうでなければＣＣＫ効果を増強する薬剤は、胃排出を遅らせる量の胃内滞留性組成物と同時配合または同時投与される。いくつかの実施形態では、カモスタット、ＦＯＹ−２５１、またはカモスタットのプロドラッグ、誘導体、もしくは活性代謝産物、またはその薬学的に許容される塩は、胃内滞留性組成物と、５０〜３００ｍｇ／ｋｇまたは１００〜２５０ｍｇ／ｋｇの範囲の量で同時配合または同時投与される。
【０１５５】
胃排出もまた、粥状液の酸性化によって遅くなる。例えば、クエン酸および酢酸は、胃排出を遅延させることが示されている。いくつかの実施形態では、食物または食事としては、クエン酸の天然源（例えば、オレンジ、レモン、ライム、グレープフルーツ、もしくは他の柑橘類の豊富な果物の果肉もしくは果汁）、または酢酸（例えば、酢、ピクルス、もしくは他の漬けた野菜）、または乳酸（例えば、ザワークラウトもしくはキムチ）が挙げられる。いくつかの実施形態では、胃粥状液のｐＨをｐＨ４より下またはｐＨ３．５より下に低下させるために十分な量の酸性食品または液体の量は、胃内滞留性組成物とともに投与される。
【０１５６】
グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ１）は、食物、特に摂取した脂肪に応答して十二指腸内の細胞によって放出され、胃排出に影響を及ぼす別の腸ホルモンである。経口投与されたＧＬＰ１受容体アゴニストは、いくつかの研究グループによって発見されている（例えば、Ｓｌｏｏｐ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ５９：３０９９（２０１０））。ＧＬＰ１受容体の正のアロステリック調節剤（アゴニスト自体ではないが、内在性ＧＬＰ１を増強する）は、別のカテゴリーのＧＬＰ１Ｒ刺激剤である（例えば、Ｗｏｏｔｔｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．３３６：５４０（２０１１）、Ｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ａｎｄ  Ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ  ４１：１４７０（２０１３）、また各々が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第２００６／０２８７２４２号、同第２００７／００２１３４６号、同第２００７／００９９８３５号、同第２０１３／０２２５４８８号、および同第２０１３／０１７８４２０号も参照されたい）。内在性ＧＬＰ１の存在下でＧＬＰ−１受容体シグナル伝達を正に調節する化合物の中には、ＧＬＰ−１受容体上のアロステリック部位に結合し、内在性リガンド（ペプチドであるＧＬＰ−１は、いくつかの形式で存在する。）の結合の際に受容体シグナル伝達に正の影響を及ぼすことによって作用する、ケルセチンがある。いくつかのケセルチン類似体もまた、内在性ＧＬＰ１の正の調整剤である。ケルセチンは、多くの果物、野菜、葉類、および穀物に存在するフラボノールである。それは健康補助食品、飲料、および食品の成分として使用されている。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ−１受容体アゴニストまたはＧＬＰ−１の正のアロステリック調節剤は、胃排出を遅延させるために十分な量で胃内滞留性組成物と同時配合または同時投与される。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ−１受容体アゴニストまたは正のアロステリック調節剤は、ケルセチンまたはケルセチンの類似体、誘導体、または活性代謝産物である。ある特定の小分子薬物はまた、胃排出時間を遅らせることができ、胃内滞留性組成物と同時投与または同時配合することもできる。
【０１５７】
胃排出もまた、粥状液の酸性化によって遅くなる。例えば、クエン酸および酢酸は、胃排出を遅延させることが示されている。いくつかの実施形態では、食物または食事としては、クエン酸の天然源（例えば、オレンジ、グレープフルーツ、もしくは他の柑橘類の豊富な果物）、または酢酸（例えば、酢、ピクルス、もしくは他の漬けた野菜）、または乳酸（例えば、ザワークラウトもしくはキムチ）が挙げられる。いくつかの実施形態では、酸性食品または液体を胃内滞留性組成物とともに投与することによって、粥状液のｐＨを４より下または３．５より下に低下させる。
【０１５８】
米国特許第８，７４１，８８５号は、活性薬学的成分をオピオイドと組み合わせることによって、胃内滞留性医薬組成物（例えば、浮遊性、膨潤性、または粘膜付着性組成物）の胃内滞留を延長するための方法を説明している。同時配合オピオイドの目的は、胃排出を遅らせることである。胃不全麻痺、または深刻なうっ血性胃腸運動は、オピオイド療法のよく知られた潜在的に重篤な合併症である。
【０１５９】
持続放出組成物
第２の組成物は、非胃内滞留性持続放出製剤中のシステアミン前駆体またはその塩を提供する。持続放出製剤は、当該分野において周知である：Ｗｅｎ，Ｈ．およびＰａｒｋ，Ｋ．（編）Ｏｒａｌ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ：Ｔｈｅｏｒｙ  ｔｏ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ．Ｗｉｌｅｙ，２０１０、Ａｕｇｓｂｕｒｇｅｒ，Ｌ．Ｌ．およびＨｏａｇ，Ｓ．Ｗ．（編）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ−Ｔａｂｌｅｔｓ，第３巻：Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｐｒｏｃｅｓｓ  Ｃｏｎｔｒｏｌ．ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，２００８。持続放出成分は、錠剤、粉末、または微粒子が充填されたカプセルであってもよい。任意に、粒子は、サイズ、組成物（例えば、持続放出ポリマーの種類もしくは濃度）、またはコーティング剤の種類もしくは厚さ、またはコーティング剤の複数の層でコーティングされた場合の層の数および組成物が異なっていてもよく、それにより薬物が、異なる速度または異なる開始時間に個々の粒子から放出され、それによって全ての粒子が実質的に同一である製剤と比較して、長期間にわたる薬物放出を凝集体において提供する。持続放出製剤は、任意に、胃での溶解を防止するｐＨ感受性材料（腸溶性コーティングと呼ばれる）でコーティングされてもよい。単一組成物中の微粒子は、１種以上のコーティング剤の種類または厚さが異なっていてもよい。例えば、コーティングが溶解するｐＨは、異なっていてもよい。そのような混合組成物に使用される２種以上の微粒子は、厳密な仕様に分けて別々に製造され、次いでインビボでの長期薬物放出を達成する比でブレンドされてもよい。
【０１６０】
持続放出組成物は、胃および／または小腸（腸溶性コーティングされている場合は前者ではない）におけるシステアミン前駆体の長期放出をもたらし、結果としてインビボでのシステアミン生成を持続させることができる。持続放出製剤は、平均胃通過時間および小腸通過時間の合計にほぼ等しい期間、例えば、絶食状態で投与される場合は３〜５時間、食物または食事とともに投与される場合は５〜８時間にわたって薬物を放出するように設計することができる。あるいは、持続放出製剤は、大腸でシステアミン前駆体を放出し続けるように、平均胃通過時間および小腸通過時間の合計よりも長く薬物を放出するよう設計することができる。いくつかの実施形態では、そのような持続放出組成物は、絶食状態で投与した場合に４〜８時間、または食事とともに投与した場合に６〜１０時間またはそれ以上にわたってシステアミン前駆体を放出することができる。
【０１６１】
持続放出製剤は、摂取後１〜４時間、好ましくは１〜６時間、より好ましくは１〜８時間、さらに好ましくは１〜１０時間またはそれ以上にわたって血中システアミンレベルの上昇をもたらし得る。システアミン前駆体の持続放出製剤は、食物とともに、または食事の間に、および任意にシステアミン前駆体分解またはシステアミン吸収の促進剤とともに投与することができる。食品は、遊離システアミン、特に脂肪性食品の吸収を阻害する傾向があり、システアミン塩を空腹時に摂取することが一般的に推奨されるが、少量のアップルソースまたは類似の食品は許容される。
【０１６２】
混合製剤
いくつかの組成物は、必然的に、主に薬物放出の速度を制御するものと、主に薬物放出の解剖学的部位を制御するものとの２つの種類の製剤の要素を有する。例えば、胃内滞留性製剤は、常に持続放出製剤中に薬物を含有する。そうでなければ、長期胃内滞留には何の意味もない。しかしながら、単一の胃内滞留性製剤中に即時放出成分および持続放出成分を組み合わせる方法がある。例えば、即時放出成分は、胃で急速に溶解するか、または急速に崩壊する外層を形成することができ、本明細書に説明される胃内滞留機序のうちの１つ以上によって胃に残留するコア持続放出成分を残す。しかしながら、全ての種類の製剤を生産的に組み合わせることはできない。例えば、腸溶性コーティングされた胃内滞留性製剤は、胃内で薬物を放出するように胃内滞留性製剤が設計されており、胃内放出が酸性媒体での溶解に対して耐性があるコーティングによって遮断されるため、逆効果である。
【０１６３】
異なる時間的または解剖学的薬物放出プロファイルを有する組成物は、適切なシステアミン前駆体と、および任意にシステアミン生成または吸収の促進剤と組み合わせた場合、治療範囲内の血中システアミンレベルを０．５〜６時間、より好ましくは０．５〜８時間、最も好ましくは０．５〜１２、０．５〜１５時間、またはそれ以上にわたってもたらす。製剤の生産的組み合わせの例としては、最大２種までの薬物放出成分を含む混合製剤、ならびにインビボでのシステアミン生成および吸収の量およびタイミングを個々の患者のニーズに対して調整するために様々な量および比で組み合わせることができる別々に配合された組成物が挙げられる。
【０１６４】
第３の組成物は、小腸でのシステアミン前駆体またはその塩の遅延放出用に配合された第１の腸溶性コーティング成分と、小腸および大腸の近位部分全体でのシステアミン前駆体またはその塩の持続放出用に配合された腸溶性コーティングされた微粒子の第２成分との混合製剤を提供する。この混合製剤は、最初に血液中の上昇したシステアミンレベルを達成するために第１の成分を提供し、第２の成分は、経時的に血液中のシステアミンレベルを維持する。
【０１６５】
第４の組成物は、（ｉ）システアミン前駆体またはその塩の持続放出胃内滞留性製剤と、（ｉｉ）胃で薬物を放出するように設計されたシステアミン前駆体またはその塩の即時放出製剤と、を含む、混合製剤を提供する。混合製剤の第２の成分は、組成物の外面上にあり、胃内容物と接触すると直ちに溶解し始める。それは、胃では必ずしもそうではないが、システアミンを生成する最初のものである。第１の（胃内滞留性）成分は、胃でのシステアミン前駆体の長期放出をもたらし、続いて小腸全体にわたるインビボでのシステアミン生成、およびシステアミン前駆体の特性に応じて大腸内への生成をもたらす。２つの成分からのシステアミンのインビボ生成および吸収を合わせたものは、混合組成物の投与後１時間以内に開始し、少なくとも５時間、好ましくは治療濃度範囲内で８、１０、１２時間、またはそれ以上にわたって持続する。
【０１６６】
第５の組成物において、第１の成分は、胃での即時放出用に配合され、システアミン前駆体、好ましくはシステアミン混合ジスルフィドもしくはパンテテインジスルフィド、またはその塩を含み、第２の成分は、システアミン前駆体、またはその塩の持続放出用に配合される。第１の成分は、第１の成分の溶解または崩壊後に第２の成分が無傷のままであるように、組成物の外面上にある。この第５の組成物の混合製剤は、即時放出成分からの血漿システアミン濃度の初期上昇を生じ、６時間、８時間、１０時間、またはそれ以上のインビボでのシステアミン産生の継続により、第２の（持続放出）成分からのシステアミンの上昇したレベルを維持することができる。胃から大腸までの胃腸管に沿ったシステアミン前駆体（またはいくつかの異なるシステアミン前駆体）の放出は、システアミン前駆体の量を、腸の全てのセグメントにおけるパンテヘチナーゼおよびシステアミン輸送体のレベルと一致させることを可能にし、それによってシステアミンの生成および吸収を最大にする。システアミンの連続的な小腸生成および吸収は、曝露を延長するための高いＣｍａｘに依存することを回避し、それによって高いピークレベルに伴うシステアミン副作用を低減する。したがって、システアミン前駆体の混合製剤は、システアミンの作用に感受性のある多数の障害に対するシステアミンの投与を可能にする。
【０１６７】
第６の組成物において、第１の成分は、胃での即時放出用に配合され、システアミン前駆体、好ましくはシステアミン混合ジスルフィドもしくはパンテテインジスルフィド、またはその塩を含み、第２の成分は、回腸および／または結腸でのシステアミン前駆体、またはその塩の持続放出用に配合される。この第６の組成物の混合製剤は、第１ピークが急速に減少する頃に、即時放出成分からの血漿システアミンレベルの初期上昇、ならびに回腸および結腸標的成分からの血漿システアミンレベルの第２の上昇をもたらすことができる。第２の成分は、食品の有無にかかわらず投与されたかどうかに応じて、投与から４〜８時間後にシステアミン前駆体を放出し始めることができる。胃から大腸までの胃腸管に沿ったシステアミン前駆体（または異なるシステアミン前駆体）の制御放出は、システアミン前駆体の量を、腸の全てのセグメントにおけるパンテヘチナーゼおよびシステアミン輸送体のレベルと一致させることを可能にし、システアミンの生成および吸収を最大にする。
【０１６８】
化合物
本発明の薬学的に許容される組成物は、１種以上のシステアミン前駆体、またはその薬学的に許容される塩（複数可）を含む。本発明の塩としては、限定されないが、アルカリ金属、例えば、ナトリウム、カリウムの塩；アルカリ土類金属、例えば、カルシウム、マグネシウム、およびバリウムの塩；ならびに有機塩基、例えば、アミン塩基および無機塩基の塩が挙げられる。例示的な塩は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１７ｔｈ  ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９８５，ｐ．１４１８、Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ６６：１（１９７７）、およびＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｕｓｅ（Ｐ．Ｈ．ＳｔａｈｌおよびＣ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ編），Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００８に見出され、その各々は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１６９】
本発明の組成物は、投与後の最初の４時間以内、好ましくは投与後の最初の２時間以内、および最も好ましくは最初の１時間以内に治療範囲内のシステアミンの血漿濃度を達成するために、胃内滞留性製剤または混合製剤の成分中にシステアミン前駆体またはその塩を含むことができる。システアミン血漿濃度は、好ましくは少なくとも５時間、好ましくは６時間、より好ましくは８時間、１０時間、またはそれ以上にわたって治療範囲内に留まる。この製剤は、酵素的に分解してパンテテインなどのシステアミンを産生することができるチオールシステアミン前駆体、または４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、もしくは補酵素Ａなどの胃腸管内でパンテテイン（およびそれからシステアミン）に分解することができる化合物、または胃腸管内でパンテテイン（および次いでシステアミン）に分解することができるその誘導体またはプロドラッグを含んでもよい。あるいは、システアミン前駆体は、システアミンまたは分解してシステアミンを産生することができる化合物を、別のチオール含有有機硫黄化合物と反応させてジスルフィド化合物を形成することによって形成されてもよい。ジスルフィドシステアミン前駆体またはその塩は、システアミンを、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、もしくはＮ−アセチルシステアミンなどのチオールシステアミン前駆体を反応させることによって、またはシステアミンを、Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）、Ｎ−アセチルシステインアミド、Ｎ−アセチルシステインエチルエステル、ホモシステイン、グルタチオン（ＧＳＨ）、アリルメルカプタン、フルフリルメルカプタン、ベンジルメルカプタン、チオテルピネオール（グレープフルーツメルカプタン）、３−メルカプトピルビン酸、Ｌ−システイン、Ｌ−システインエチルエステル、Ｌ−システインメチルエステル、チオシステイン、システイニルグリシン、ガンマ−グルタミルシステイン、ガンマ−グルタミルシステインエチルエステル、グルタジオンモノエチルエステル、グルタチオンジエチルエステル、メルカプトエチルグルコンアミド、チオサリチル酸、チオプロニン、またはジエチルジチオカルバミン酸を含む他のチオールと反応させることによって形成することができる。チオールシステアミン前駆体またはシステアミンは、ジヒドロリポ酸、メソ−２，３−ジメルカプトコハク酸（ＤＭＳＡ）、２，３−ジメルカプトプロパンスルホン酸（ＤＭＰＳ）、２，３−ジメルカプト−１−プロパノール（ジメルカプロール）、ブシラミン、またはＮ，Ｎ′−ビス（２−メルカプトエチル）イソフタルアミド（ＢＤＴＨ２）などのジチオールと反応させて、ジスルフィドシステアミン前駆体を形成することもできる。ジスルフィドシステアミン前駆体を形成するために使用することができるチオールの一覧については図１７を、ジスルフィドシステアミン前駆体を形成するために結合することができるチオールの対を要約する表については図１８〜２１を参照されたい。システアミン前駆体を形成するのに適した他のチオールは、当該分野において知られている。例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＰＣＴ特許公開第ＷＯ１９９３／００６８３２号は、中でもＮ，Ｎ−ジメチルシステイン、チオコリン、アミノプロパンチオール、アミノブタンチオール、およびアミノペンタンチオールを含む、図１７に含まれない追加の有用なチオールを開示する
【０１７０】
形成されたジスルフィドは、使用されるシステアミン前駆体の特性（例えば、システアミンを形成するために必要とされる分解ステップの数）に依存して、胃でのシステアミンの放出を遅延させ、および／またはその小腸でのインビボ生成および吸収を促進し得る。図１３は、システアミン前駆体の分類を示し、選択された薬理学的に関連する特性を要約する。図１８〜図２１は、多くのジスルフィドシステアミン前駆体のシステアミン収率に関する情報を提供する。胃は一般に、小腸よりも酸化的かつ酸性の環境である。胃内容物が十二指腸に入ると、それらは胃酸を中和する重炭酸塩を含有する膵液、およびミリモル濃度の生理学的還元剤グルタチオンならびにシステインを含む関連チオールを含有する胆汁と混合する。その結果、ジスルフィドは、胃で酸化されたままである傾向があり、小腸において還元されるか、またはチオールとのジスルフィド交換反応に関与する可能性が高くなる。ジスルフィド交換反応は、一般に、チオール型よりもはるかに求核性であるチオレートイオンによって触媒され、チオレートイオンの形成は、胃の酸性環境では好ましくない。
【０１７１】
例えば、チオールシステアミン前駆体であるパンテテインは、ホモ二量体ジスルフィドを形成することができ、ここで２つのパンテテインが共有結合してパンテチン（ジスルフィドシステアミン前駆体）を形成する。いくつかの好ましい実施形態では、システアミン前駆体は、例えば、システアミンをパンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、もしくは補酵素Ａのいずれかと接合することによって形成される混合システアミンジスルフィドによって、または４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、もしくは補酵素Ａのいずれかでパンテテインを酸化することによって形成される対応する混合パンテテインジスルフィド、または胃腸管内で親化合物に変換可能な好適なプロドラッグもしくは類似体によって提供されるように、複数のシステアミンを提供する。また、４−ホスホパンテテインは、デホスホ補酵素Ａもしくは補酵素Ａにジスルフィド結合され得るか、またはデホスホ補酵素Ａは、ジスルフィド結合して、システアミン前駆体をインビボで２種のシステアミンを生じることができるようにすることができる。図１３は、異なるクラスのシステアミン前駆体からインビボで生成され得るシステアミンの数を示す。図１８〜図２１は、特異的なジスルフィドシステアミン前駆体を示す。インビボで２つのシステアミンを生じるものが表の上部に列挙され、システアミンを生じるために必要とされる分解ステップの数と同様に、各ジスルフィドについてのシステアミンの画分収率（パーセント）も示される。いくつかの実施形態では、システアミンまたは有機硫黄の反応性チオール基は、アセチル基、エステル基、グルタミル、スクシニル、フェニルアラニル、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、および／または葉酸塩などの置換基を含むように修飾することができる。
【０１７２】
好ましい実施形態では、本発明の組成物は、胃内滞留性製剤の成分および／または混合製剤の成分中のパンテテイン、パンテテイン含有パンテテイン、またはその塩を含み、投与後５〜１０時間以上にわたってシステアミンの上昇した血中レベルを持続することができる。組成物は、親化合物の少なくとも１つのシステアミンへの化学的還元または酵素的変換を必要とするシステアミン前駆体であってよく、それによってシステアミンの放出を遅延させる。この製剤は、パンテテインまたは胃腸管内でパンテテインに分解され得る化合物（例えば、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、または補酵素Ａ；総称してパンテテイン前駆体）を含んでもよく、パンテテインのチオール基またはパンテテイン前駆体を別の有機硫黄化合物のチオール基と反応させて、ジスルフィド化合物を形成する。パンテテイナーゼは胃よりも腸内でより高いレベルで発現され、小腸の管腔は、胃よりも還元環境であるため、ジスルフィドシステアミン前駆体のパンテテイン成分は、小腸でシステアミンに変換され、その後吸収される。例えば、パンテテインは、２つのパンテテインが共有結合してパンテチンを形成する、ホモ二量体ジスルフィドを形成することができる。パンテテイン含有システアミン前駆体はまた、パンテテイン混合ジスルフィドを含むことができ、パンテテインチオールは、チオール基と反応してジスルフィドを形成する。好ましい実施形態では、パンテテイン前駆体は、例えば、システアミンおよびパンテテインから形成される混合ジスルフィドによって（これは、還元され、続いてパンテテイナーゼによって切断されると、２つのシステアミンおよび１つのパントテン酸を生じる）、または混合ジスルフィドパンテテイン−補酵素Ａによって（還元され、続いて分解され、次いでパンテテイナーゼによって切断されると、２つのシステアミン、２つのパントテン酸、およびＡＤＰを生じる）提供されるような２つ以上のシステアミンを提供する。腸内で分解すると２つのシステアミンを生じる他のジスルフィドシステアミン前駆体を図１８〜２１に示す。いくつかの実施形態では、パンテテインまたは有機硫黄化合物の反応性チオール基は、アセチル基、メチルエステル、エチルエステル、グルタミル、スクシニル、フェニルアラニル、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）および／または葉酸塩などの置換基を含むように修飾されてもよい。
【０１７３】
システアミンを生成するためにパンテテイナーゼ切断を必要とするシステアミン前駆体と、システアミンを生成するために化学的還元のみを必要とするシステアミン前駆体（システアミン混合ジスルフィド）との区別は、適切に還元する環境が腸内に存在する（または薬理学的に作成され得る）ことを条件として、前駆体化合物の、システアミンへの変換の反応速度が、一般に第２のカテゴリーでより迅速であるため重要である。還元に続いてパンテテイナーゼ切断を必要とするシステアミン前駆体（例えば、パンテチン）と、最初に還元、次いでパンテテインへの分解、次いでパンテテイナーゼ切断を必要とするシステアミン前駆体（例えば、４−ホスホパンテチン、デホスホ補酵素Ａ、または補酵素Ａを含有するジスルフィド）とをさらに区別することができる。後者のクラスのジスルフィドシステアミン前駆体によって必要とされる付加的な分解ステップ（複数可）は、システアミン産生の期間を、より長い期間にわたって遅くし、延長する。
【０１７４】
本発明の化合物は、化学合成の分野の当業者に知られている様々な方法で調製することができる。システアミン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、または補酵素Ａ、および他のチオール（図１７参照）を含むチオールを調製する方法は、当該分野で周知である。補酵素Ａ、パンテチン、Ｎ−アセチルシステアミン、およびグルタチオンは、栄養補助食品として市販されている。図１７の他のチオールのほとんどは、化学会社から容易に入手できる。
【０１７５】
システアミン前駆体の合成
チオールおよびジスルフィドシステアミン前駆体の両方を含む本発明の化合物は、Ｍａｎｄｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，６：４８０１（２００４）に説明されているものなどの、当該分野において知られている方法および手順を用いて容易に入手可能な出発材料から調製することができる。パンテチンの製造方法は、米国特許第３，３００，５０８号および第４，０６０，５５１号に説明されており、これらの各々は、参照により本明細書に組み込まれる。液体のパンテテインを固体に変換する方法は、日本特許公開第ＪＰ−Ａ−Ｓ５０−８８２１５号およびＪＰ−Ａ−Ｓ５５−３８３４４号に開示されている。典型的または好ましいプロセス条件（すなわち、反応温度、時間、反応物のモル比、溶媒、圧力等）が示されている場合、他に記載のない限り、他のプロセス条件を使用することもできることが理解されるであろう。最適な反応条件は、使用される特定の反応物または溶媒によって変化し得るが、そのような条件は、当業者が日常的な最適化手順によって決定することができる。
【０１７６】
好ましい実施形態では、本発明の組成物は、１つ以上のジスルフィドシステアミン前駆体を含む。酸化形態のチオールであるジスルフィドは、高価な試薬または装置なしに構成体チオールから容易に形成される。さらに、ジスルフィドは、空気に曝露されたチオール化合物の長期安定性を制限し得る酸化の影響を受けない。したがって、製造、コスト、貯蔵コスト、出荷、および患者の便宜（すなわち、長い貯蔵寿命）に関して、ジスルフィド形態のシステアミン前駆体は、チオール形態よりも好ましい。
【０１７７】
いくつかの実施形態では、混合ジスルフィドシステアミン前駆体は、２つの異なるチオールが接合し、３つの反応産物を形成することにより合成され、チオールＡおよびＢは、接合してジスルフィドＡ−Ａ、Ａ−Ｂ、およびＢ−Ｂを形成することができる。例えば、システアミンをパンテテインを反応させることによって形成されるジスルフィドは、システアミン−システアミン（シスタミンと呼ばれる）、システアミン−パンテテイン、およびパンテテイン−パンテテイン（パンテチンと呼ばれる）を含む。３つの化合物は全て、システアミンを提供することにおいて有用であり、実際に各化合物をシステアミンに変換することに関与する異なるステップは、システアミンがジスルフィド結合の還元によって、または還元ステップと酵素的分解ステップの組み合わせによってインビボで生成される期間を延長することによって薬理学的に有益であり得る。したがって、精製なしに（未反応のチオールおよび／または溶媒などの不要の不純物を除去することを除いて）３つの酸化産物全てを同時配合することは、薬理学的に有用であり得る。これは特に、２つの反応したチオールがそれぞれシステアミン（例えばパンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、Ｎ−アセチルシステイン、または適切な類似体およびプロドラッグ）に変換可能である場合、またはシステアミン自体をシステアミンに変換可能なチオールと反応させる場合に該当する。結果として、ある特定の実施形態では、各々がシステアミンに変換可能な（またはそれらのうちの１つがシステアミンである）２つの異なるチオールを反応させることによって形成される３つのジスルフィドは全て、単一の組成物中に同時配合される。この合成および配合の方法は、より複雑な合成ステップ、または酸化反応において同時に生成される２つのホモ二量体ジスルフィドから混合ジスルフィドを分離するために必要な合成後精製ステップを必要としない。（未反応のチオールおよび他の不純物は、当然のことながら、医薬組成物を配合する前に除去されなければならない。）
【０１７８】
３つのジスルフィドの混合物の製造および同時配合の利点は、システアミンに変換可能なチオールを、システアミンに変換可能でない第２のチオールと反応させることによって作製されるジスルフィドシステアミン前駆体の場合には完全には実現されない。例えば、パンテテインをＮ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）と反応させることによって形成される３つのジスルフィドは、パンテテイン−パンテテイン（パンテチン）、パンテテイン−ＮＡＣ、およびＮＡＣ−ＮＡＣである。最初の２つの化合物は、システアミン前駆体であり、３番目の（ＮＡＣ−ＮＡＣ）はそうではない。しかしながら、ＮＡＣ−ＮＡＣは、それにもかかわらず、化学的還元の際に、２つのＮＡＣ分子をもたらす結果として、腸酸化還元環境または有益な医学的特性の調節に関して有益な薬理学的特性を有し得る。したがって、ある特定の実施形態では、システアミンまたはインビボでシステアミンに変換可能なチオールを、インビボでシステアミンに変換可能でない第２のチオールと反応させることによって形成される３つのジスルフィド産物の全てが、単一組成物中に同時配合される。
【０１７９】
２つの異なるチオールが酸化される場合の反応産物の予想される比は、２つのチオールのモル比、２つのチオールの絶対濃度、ｐＨ、および／または各チオールのスルフヒドリル基の周囲の化学環境に依存する。チオールＡとチオールＢとの比が１：１である場合、反応産物Ａ−Ａ、Ｂ−Ｂ、Ａ−Ｂの予想モル比は、約１：１：２である。（予想された比からの偏差は、例えば、スルフヒドリルへの原子結合の電気陰性度によって影響され得るジスルフィド結合形成の反応速度に影響し得るチオールに隣接した化学結合の相違の結果として生じ得る。任意の偏差は、当該分野において知られている方法を使用して予測または測定することができる。）反応産物の比は、２つのチオールのモル比を変化させることによって変更することができる。例えば、Ｂ−Ｂに対してＡ−ＡおよびＡ−Ｂの割合を増加させるために、チオールＡのモル濃度をチオールＢのモル濃度に対して増加させてもよい。２つのチオールを反応させる場合、一方がシステアミンまたはシステアミンに分解可能な化合物（チオールＡ）であり、もう一方は、システアミンに分解可能でないチオール（チオールＢ）であり、第１のチオールのモル濃度は、産生されるシステアミン前駆体の割合を増加させるために、第２のチオールのモル濃度に対して増加させることができる．例えば、チオールＡおよびＢを２：１のモル比で反応させると、Ｂ−Ｂ（システアミン前駆体でない）に対するＡ−ＡおよびＡ−Ｂ（両方のシステアミン前駆体）の割合を増加させる。
【０１８０】
特定の実施形態では、触媒の包含により、２つの異なるチオールの酸化を促進し、および／または反応産物の混合を変更することができる（ＭｕｓｉｅｊｕｋおよびＷｉｔｔ（２０１５）に概説される）。例えば、過酸化水素もしくはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などの酸化剤、または銅、マンガン、もしくはテルル化物などの金属、またはヨウ素、ジエチルアゾジカルボキシレート（または関連化合物）、またはジクロロジシアノキノン（ＤＤＱ）を追加することができる。最適な溶媒系、触媒濃度、および反応条件を経験的に決定することにより、触媒の最適な性能を達成することができる。
【０１８１】
他の実施形態では、非対称ジスルフィドは、チオールと対称ジスルフィドとの間のチオール−ジスルフィド交換反応を介して産生することができる。この種類の反応は、２つの異なるチオールの酸化のように、全ての可能な生成物（対称および非対称のジスルフィド）の混合物を提供する。しかしながら、チオールよりもモル過剰の対称ジスルフィドを提供することによって、非対称ジスルフィドの形成が優遇され、最適化された条件下での主要な反応産物となる場合さえある。実施例１５および１６は、チオ−ジスルフィド交換を介したパンテテイン−システアミンジスルフィドの合成を説明する。この方法は、システアミンをチオールとし、パンテチンをジスルフィドとして、ならびにパンテテインをチオールとし、シスタミンをジスルフィドとして機能する。チオール：ジスルフィド交換反応の好ましい実施形態では、チオール対ジスルフィド（例えば、システアミン：パンテチン）のモル比は、２：１〜４：１、２．５：１〜３．５：１、２．７：１〜３．３：１である。特定の実施形態では、溶媒はメタノールであり、反応時間は１〜２０時間、または１〜１２時間、または１〜６時間である。特定の実施形態では、チオール：ジスルフィド交換反応の生成物（例えば、ＴＴＩ−０１０２）は、その後沈殿される（例えば、実施例１７に説明されるように）。
【０１８２】
あるいは、別の実施形態では、医薬組成物に使用されるシステアミン前駆体の比は、混合ジスルフィド酸化反応の３つの反応産物を純粋なジスルフィドと組み合わせることによって調整することができる。例えば、チオールのシステアミン（Ｃ）およびパンテテイン（Ｐ）が１：１のモル比で酸化された場合、これらを複合して３つの産物：Ｃ−Ｃ、Ｐ−Ｐ、およびＣ−Ｐをおよそ１：１：２の比で形成する。純粋なパンテチン（Ｐ−Ｐ）は、混合物のインビボでのシステアミン生成特性を延長するために、任意の所望の量で混合物に添加することができる。パンテチンの開始量を２倍にすると、１：２：２の比が得られる。出発量のパンテチンの４倍を添加すると、１：２：５の比が得られる。
【０１８３】
独立して生成された２つの混合ジスルフィド反応産物を組み合わせて、システアミン前駆体の新規の比を達成することもできる。例えば、システアミン−パンテテイン反応産物（Ｃ−Ｃ、Ｐ−Ｐ、およびＣ−Ｐ）を、Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）−システアミン（Ｃ）酸化反応からの当モル量の反応産物（１：１：２の比のＣ−Ｃ、ＮＡＣ−ＮＡＣ、およびＣ−ＮＡＣ）と組み合わせる場合、混合物は、５つの化合物を含有することになり、それらのうちの１つであるＮＡＣ−ＮＡＣは、システアミンに変換することができない。他の４つのジスルフィド、Ｐ−Ｐ、Ｃ−Ｃ、Ｃ−Ｐ、Ｃ−ＮＡＣは、およそ１：２：２：２のモル比で存在する。任意に、パンテテインを添加して、比を例えば２：２：２：２（より単純に１：１：１：１として表す）にするか、または１：１：１：５の比になるようにより多くの量を添加することができる。したがって、医薬組成物中のジスルフィドのモル比は、様々な方法によって制御することができる。別の例では、システアミン−パンテテイン反応産物（Ｃ−Ｃ、Ｐ−Ｐ、およびＣ−Ｐ）を、４−ホスホパンテテイン（４Ｐ）−システアミン（Ｃ）酸化反応（すなわち、１：１：２の比のＣ−Ｃ、４Ｐ−４Ｐ、およびＣ−４Ｐ）と組み合わせて、５つのジスルフィドの混合物を１：１：１：２：２の比で産生してもよい。
【０１８４】
要約すると、システアミン前駆体ジスルフィドを作製するために１つのチオールを酸化する場合、１つの産物のみが存在する（例えば、パンテテイン＋パンテテイン＝パンテチン）。２つのチオールを酸化する場合、３つの産物が存在し、それらのうちの２つまたは３つは、チオールの一方もしくは両方がシステアミンに分解可能であるか、またはシステアミンであるかに依存して、システアミン前駆体である。システアミン前駆体の混合物は、これらの２つの種類の反応の産物を組み合わせることによって最も容易に作製される。混合物は、種々のモル比の、純粋なジスルフィドまたは３成分のジスルフィド混合物を含み得る。しかしながら、ヘテロ二量体システアミン前駆体はまた、純粋な形態で、精製後に、または他のホモもしくはヘテロ二量体システアミン前駆体と組み合わせて使用することもできる。
【０１８５】
あるいは、より洗練された化学的方法を用いることにより、特異的混合ジスルフィド（非対称ジスルフィドとも呼ばれる）を選択的に合成することができる（例えば、システアミンおよびパンテテインを組み合わせて、実質的にジスルフィドシステアミン−パンテテインのみを形成することができる）。これらの方法は、広範囲の硫黄保護基およびそれらの除去のための戦略を用いる。最も広く使用されている方法は、スルフェニル誘導体をチオールまたはその誘導体で置換することを伴う。一般に利用されるスルフェニル誘導体としては、スルフェニルクロリド、Ｓ−アルキルチオスルフェートおよびＳ−アリールチオスルフェート（ブンテ塩）、Ｓ−（アルキルスルファニル）イソチオウレア、ベンゾチアゾール−２−イルジスルフィド、ベンゾトリアゾリルスルフィド、ジチオペルオキシエステル、（アルキルスルファニル）ジアルキルスルホニウム塩、２−ピリジルジスルフィドおよび誘導体、Ｎ−アルキルテトラゾリルジスルフィド、スルフェンアミド、スルフェニルジメシルアミン、スルフェニルチオシアネート、４−ニトロアレンスルフェナニリド、チオールスルフィネートおよびチオールスルホネート、スルファニルスルフィナミジン、チオニトライト、スルフェニルチオカーボネート、チオイミド、チオホスホニウム塩、および５，５−ジメチル−２−チオキソ−１，３，２−ジオキサホスホリナン−２−イルジスルフィドが挙げられる。さらに他の手順には、チオールとスルフィニルベンズイミダゾールとの反応、ロジウム触媒によるジスルフィド交換、電気化学的方法、およびアゾジカルボン酸ジエチルの使用が含まれる。これらおよび他の方法は、Ｍｕｓｉｅｊｕｋ，Ｍ．およびＤ．Ｗｉｔｔ．Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ４７：９５（２０１５）によって概説されている。したがって、適度な努力で、関心対象の特異的混合（非対称）ジスルフィドを作製することができる。実施例１および２は、本発明の混合ジスルフィドの合成手順を提供する。
【０１８６】
さらに他の実施形態では、混合ジスルフィドは、置換基（例えば、アシル基）を対称ジスルフィドの一端に優先的に結合することにより（すなわち、ヘミアシル化）、対称ジスルフィドから合成することができる。例えば、システアミンおよびパンテテインはパントテネート部分が異なるため、ジスルフィドシスタミンをパントテネートによってヘミアシル化して、システアミン−パンテテインジスルフィドを産生することができる。反応物の濃度を最適化し、カップリング剤を添加してアシル化を促進した場合、この手順は９５％超の収率を得ることができる。シスタミンは両端に反応性アミノ基を含有するため、非対称ジスルフィドを作製するための魅力的な開始点である。実施例１４は、反応性中間体を介した置換基パントテン酸によるシスタミンのヘミアシル化を介したパンテテイン−システアミンジスルフィドの効率的な合成を説明する。特定の実施形態では、アシル基のジスルフィドに対するモル比は、１：２〜１：４である。特定の実施形態では、アシル化反応は、３：１〜５：１のＤＣＣ：アシル基のモル比でのＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）の添加により促進される。特定の実施形態において、アシル化反応は、１：１〜１：３のＨＯＢｔ：アシル基のモル比での１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）の添加により促進される。
【０１８７】
立体化学
本発明の化合物のいくつかは、複数の鏡像異性体形態で存在する。特に、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、および補酵素Ａは、パントテノイル部分にキラル炭素を含む。したがって、これらの化合物の各々は、Ｄ−もしくはＬ−鏡像異性体として、またはパンテテノイル基に関して２つのラセミ混合物として存在することができる。しかしながら、ヒトパンテテイナーゼ（ＶＮＮ１およびＶＮＮ２遺伝子によってコードされる）は、Ｄ−パンテテインに特異的である。（Ｂｅｌｌｕｓｓｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ  ６：５０５（１９７４））。それ故に、Ｄ−パンテテイン（およびＬ−パンテテインではない）のみがシステアミン前駆体であり、したがって本発明は、Ｄ−パンテテインのみ、および４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、および補酵素ＡのＤ−鏡像異性体、ならびに胃腸管でそれらの化合物に変換可能な類似体またはプロドラッグのみに関する。同様に、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、および補酵素Ａ、または任意の適切な類似体もしくはプロドラッグを含有する全てのジスルフィドは、Ｄ−鏡像異性体のみを用いる。
【０１８８】
アミノ酸およびアミノ酸誘導体のＬ−鏡像異性体が好ましい。したがって、本明細書において「システイン」とは、Ｌ−システイン、ホモシステインからＬ−ホモシステインを指し、Ｎ−アセチルシステイン、Ｎ−アセチルシステインアミド、Ｎ−アセチルシステインエチルエステル、システインメチルエステル、システインエチルエステル、システイニルグリシン、およびガンマグルタミルシステインなどのシステイン誘導体は、全てシステインのＬ−鏡像異性体を用いて形成される。
【０１８９】
ジヒドロリポ酸の場合、Ｒ鏡像異性体が好ましく、それは人体で作製された鏡像異性体であるためである。一般に、人体に通常存在するか、または食品中に存在する化合物については、天然に存在する鏡像異性体が好ましい。
【０１９０】
塩形態および結晶化
本発明のシステアミン前駆体を含む任意の化合物の薬学的特性は、対イオンまたは塩との会合により改善され得る。改善される可能性のある特定の特性は、安定性（例えば、吸湿性が低い、酸化の影響を受けにくい、熱、湿度、およびｐＨの極端な変化に対する耐性が高い）、結晶を形成する傾向の向上、製剤の容易さ（粉末などの化合物の固体形状の特性に関して）である。
【０１９１】
結晶化は、例えば、カラムクロマトグラフィーよりも、より安価で、より速く、より拡張性のある精製方法であるため、塩形態が化合物の結晶化特性を改善する可能性は特に重要である。小分子の沈殿を誘発するための方法は、当該分野で知られている（例えば、ＣｈｅｎらによるＣｒｙｓｔａｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  ａｎｄ  Ｄｅｓｉｇｎ，１１（４），２０１１の概説を参照されたい）。結晶化は、標的化合物の飽和溶液を冷却することによって、または化合物の溶液への反溶媒（標的化合物が難溶性である液体）の添加によって（Ｍｏｓｔａｆａら、Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ６３：５４５７−５４６７，２００８）、または結晶形成を促進する表面（例えば、スクラッチされたガラス）の導入によって、または結晶種の添加によって、またはポリマーを含む（Ｅｄｕｅｎｇら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ２５６：１９３−２０２，２０１７）、標的化合物と共結晶化するであろう化合物の添加によって（ＫｏｒｏｔｋｏｖａおよびＫａｒａｔｃｈｖｉｌ，Ｐｒｏｃｅｄｉａ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １０：４７３−４７６，２０１４）、誘発することができる。工業用結晶化プロセスは、バッチ形式で、またはますます連続プロセスを介して実施することができる（Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ３：３５４−３６４，２０１７）。
【０１９２】
結晶化は、２つの方法のいずれかで使用することができる：目的のジスルフィド化合物を、不純物の存在下で選択的に結晶化することができる（不純物は溶液中に残り、したがって結晶化後に容易に除去することができる）か、または、目的の化合物を溶液中に残しながら、１つ以上の不純物を結晶化することができる。２つのアプローチは、順次（次々と）組み合わせることができる。
【０１９３】
システアミン前駆体は、比較的大きな用量（１日あたり１グラム超、あるいは成人では最大１０グラムまで）で投与されることが多いため、いずれの塩も安全である必要がある。したがって、天然産物であり、食事中に有意なレベルで存在し、心地よい感覚刺激特性を有する塩が好ましい。そのような塩の例には、酢酸塩、クエン酸塩、および酒石酸塩が含まれるが、それらに限定されない。結晶形成を誘発するシステアミン前駆体の塩形態は、薬学的に好ましい塩形態と重複しない場合があり、その場合、結晶化を助けるために塩形態を特異的に生成し、次いで溶媒中に再溶解して、塩を好ましい薬学的塩に転換してもよい。結晶形成を促進する傾向がある大きな塩には、安息香酸塩およびナフトエート（ナフトエ酸）が含まれる。
【０１９４】
分離方法
上記で概説した合成経路のほとんどは、９９％を超える純度（すなわち、薬物規制機関によって必要とされる範囲内）の混合ジスルフィドを産生することができない。結晶化はまた、薬物不純物を許容可能なレベルに低減するのに十分に選択的ではない場合がある。したがって、強固な分離方法が必要となり得る。したがって、特定の実施形態では、任意の合成方法を、合成において生成された他の化合物（他のジスルフィドを含む）から所望の生成物（すなわち、混合ジスルフィドシスタミン前駆体）を分離するための効率的なスキームと組み合わせることができる。結晶化以外の有用な分離方法には、サイズ、電荷、疎水性、親和性、または他の特性に基づいて小分子を分離する樹脂を含む、様々なクロマトグラフィー手順が含まれる。
【０１９５】
製剤
医薬品として用いる場合、システアミン前駆体、またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグは、医薬組成物の形態で投与することができる。これらの組成物は、製薬業界で周知の様々な方法で調製することができ、様々な賦形剤および配合技術によって制御された時間に胃腸管の特定の部分に薬物を放出するように作製することができる。例えば、製剤は、特定の疾患に対処し、治療有効性を達成するために必要なシステアミンの血中レベルを達成し、薬物効果の所望の持続時間を可能にし、異なる組み合わせで投与されて、システアミン代謝における患者間変動を説明することができる様々な薬物放出特性を有する組成物のセットを提供するために調整されてもよい。投与は、主に経口経路によるものであり、坐剤によって補われてもよい。システアミン前駆体はまた、例えば、還元剤、緩衝液、パンテテイナーゼ誘導剤、または腸上皮細胞によるシステアミン取り込みの誘導剤を含む、インビボでのシステアミンの生成または吸収を促進する薬剤と同時配合することもできる。
【０１９６】
医薬組成物は、１種以上の薬学的に許容される担体を含むことができる。本発明の方法で使用するための医薬組成物の作製において、システアミン前駆体、その薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはプロドラッグは、典型的には賦形剤と混合されるか、賦形剤によって希釈されるか、または例えば、カプセル、錠剤、サシェ、紙、バイアル、もしくは他の容器の形態の担体に封入される。本発明の活性成分は、薬学的に許容される賦形剤または担体の存在下、単独で、または混合物として投与することができる。賦形剤または担体は、投与の様式および経路、薬物放出の標的とされる胃腸管の領域、および薬物放出の意図される時間プロファイルに基づいて選択される。賦形剤が希釈剤として働く場合、賦形剤は、ビヒクル、担体、マトリックス、または有効成分のための他の媒体として作用する固体、半固体、または液体物質（例えば、生理食塩水）であり得る。したがって、組成物は、錠剤、粉末、顆粒、ロゼンジ、サシェ、カシェ、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤、溶液、シロップ、ならびに軟質および硬質ゼラチンカプセルの形態であり得る。当該分野で知られているように、賦形剤の種類および量は、意図される薬物放出特性に依存して変化する。得られる組成物は、防腐剤またはコーティングなどの付加的な薬剤を含むことができる。
【０１９７】
好適な薬学的担体、ならびに薬学的製剤に使用するための薬学的必需品は、この分野における周知の参考文献であるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ  Ｅｄ．，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｅｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００５）、およびＵＳＰ／ＮＦ（米国薬局方および国家医薬品）、または対応する欧州もしくは日本の参考資料に説明されている。好適な賦形剤の例は、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アカシアガム、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、アルギン酸塩、トラガカント、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微結晶セルロース、セルロース誘導体、ポリビニルピロリドン、ポリ（乳酸−グリコール酸共重合体）（ＰＬＧＡ）、セルロース、水、シロップ、メチルセルロース、植物油、ポリエチレングリコール、疎水性不活性マトリックス、カルボマー、ヒプロメロース、ｇｅｌｕｃｉｒｅ  ４３／０１、ドキュセートナトリウム、および白蝋である。製剤として、タルク、ステアリン酸マグネシウム、および鉱物油などの潤滑剤；湿潤剤；乳化剤および懸濁化剤；メチルおよびプロピルヒドロキシ安息香酸塩などの保存剤；甘味剤；ならびに香味剤を追加で挙げることができる。他の例示的な賦形剤およびそれらの使用の詳細は、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，６ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｒｏｗｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｄｓ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ（２００９）に説明されている。
【０１９８】
医薬組成物は、システアミン前駆体のシステアミンへのインビボ分解を促進するか、またはシステアミンの腸吸収を促進する他の薬剤と任意に同時配合または同時投与される、システアミン前駆体塩を含むことができる。医薬組成物はまた、標的疾患におけるシステアミンの薬理学的効果を補完する他の治療薬を含んでもよい。インビボでのシステアミンの産生または吸収の例示的な促進剤、および本明細書に説明される組成物に含まれ得る例示的な治療剤が本明細書に提供される。
【０１９９】
本発明の組成物は、単一の活性成分（すなわち、単一のシステアミン前駆体）、または単一の単位剤形中の第１および第２の活性成分の組み合わせ、または単一の単位剤形中の第１、第２、第３、および任意に第４の活性成分、および任意に第５の成分の組み合わせを含有してもよい。２つの活性成分を有する組成物では、両方の成分がシステアミン前駆体であり得るか、または１つの成分がインビボでのシステアミン産生の促進剤（例えば、ジスルフィドシステアミン前駆体の還元を促進する還元剤もしくはパンテテイナーゼの腸内発現の増加を誘導する薬剤）、またはシステアミンの腸吸収の促進剤（例えば、ＯＣＴ１、ＯＣＴ２、もしくはＯＣＴ３などの１種以上の有機カチオン輸送体の増加した発現を誘導する薬剤）であり得る。３つまたは４つの活性成分を有する組成物では、全ての成分が、システアミン前駆体であり得るか、または１つもしくは２つの成分が、インビボでのシステアミン産生および／もしくは腸吸収の促進剤であり得る。２つ以上のシステアミン前駆体を有する組成物において、システアミン前駆体の種類は、持続期間にわたってインビボでのシステアミン産生を達成するように選択される。例えば、１つのシステアミンを生成するためにジスルフィド結合の還元のみを必要とし、したがってジスルフィド結合の還元に寄与する酸化還元環境を有する胃腸管の領域に到達した直後にシステアミンを生成し始めるであろう混合ジスルフィドシステアミン前駆体は、パンテテインと、またはシステアミンを生じるためにジスルフィド結合の還元およびパンテテイナーゼ切断の両方を必要とするパンテテインジスルフィドと混合することができ、任意に、腸でパンテテインに分解可能な化合物、またはパンテテインおよびしたがってシステアミンを生成するために追加のステップを必要とする、そのような化合物を含有するジスルフィドと組み合わせることができる。腸でパンテテインに分解可能な化合物としては、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、ならびに好適な類似体および誘導体が挙げられる。インビボでのシステアミン産生の時間経過は、システアミン前駆体とシステアミンとの間の分解ステップの数によって変化する。いくつかの実施形態では、複数のシステアミン前駆体を含む組成物は、粉末として、顆粒として、または液体として、すなわち大量の薬物を収容することができる製剤タイプとして配合される。
【０２００】
医薬組成物はまた、製剤の性能を高める１種以上の薬剤を含むことができる。例えば、胃内滞留性組成物は、胃内の組成物の滞留を延長するために胃排出を遅くする化合物を含み得る。
【０２０１】
２つのシステアミン前駆体成分を含む組成物において、第１および第２の成分は、例えば、約１：１．５〜約１：４の比で存在し得る。３つのシステアミン前駆体成分を含む組成物において、第１、第２、および第３成分は、例えば、約１：１：２〜約１：４：４の比で存在してもよい。４つの活性成分を含む組成物では、第１〜第４の活性成分は、例えば、約１：１：１：２〜約１：２：５：５の比で存在してもよい。５つの活性成分を含む組成物において、第１〜第５の活性成分は、例えば、約１：１：２：２：２〜約１：１：２：５：５：８の比で存在してもよい。
【０２０２】
いくつかの実施形態では、２つ以上のシステアミン前駆体を含有する組成物は、迅速なインビボでのシステアミン産生のために選択された１つの前駆体（例えば、単にジスルフィド結合の還元を必要とする）、およびより中程度またはより遅いインビボでのシステアミンへの変換のために選択された第２の前駆体（例えば、化学的還元および少なくとも１つの酵素分解ステップを必要とする）を含む。いくつかの実施形態では、２つ以上のシステアミン前駆体を含む医薬組成物は、少なくとも１つの前駆体がシステアミン混合ジスルフィドであり、これがジスルフィド結合の還元の際にシステアミンを生じることができる。さらに関連した実施形態では、少なくとも１つの付加的な成分は、ジスルフィド含有パンテテインまたは胃腸管でパンテテインに分解可能な化合物である。
【０２０３】
組成物は、固形単位剤形（例えば、錠剤またはカプセル）で配合することができ、各投与量は、例えば、５０〜８００ｍｇの第１成分の有効成分を含有する。例えば、投与量は、約５０ｍｇ〜約８００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約７００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約６００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約５００ｍｇ、約７５ｍｇ〜約８００ｍｇ、約７５ｍｇ〜約７００ｍｇ、約７５ｍｇ〜約６００ｍｇ、約７５ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約７００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約８００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約７００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約６００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約５００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約７００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約４５０ｍｇ〜約７００ｍｇ、約４５０ｍｇ〜約６００ｍｇの第１成分の有効成分を含有し得る。
【０２０４】
代替実施形態では、組成物は、液体または粉末単位剤形で配合することができ、各投与単位は、約２５０ｍｇ〜約１０，０００ｍｇのシステアミン前駆体を含有する。例えば、投与量は、約２５０ｍｇ〜約１０，０００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約８，０００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約６，０００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約５，０００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約１０，０００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約８，０００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約６，０００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約５，０００ｍｇ、約７５０ｍｇ〜約１０，０００ｍｇ、約７５０ｍｇ〜約８，０００ｍｇ、約７５０ｍｇ〜約６，０００ｍｇ、約７５０ｍｇ〜約５，０００ｍｇ、約１，２５０ｍｇ〜約１０，０００ｍｇ、約１，２５０ｍｇ〜約８，０００ｍｇ、約１，２５０ｍｇ〜約６，０００ｍｇ、約１，２５０ｍｇ〜約５，０００ｍｇ、約２，０００ｍｇ〜約１０，０００ｍｇ、約２，０００ｍｇ〜約８，０００ｍｇ、約２，０００ｍｇ〜約６，０００ｍｇ、約２，０００ｍｇ〜約５，０００ｍｇ、約３，０００ｍｇ〜約６，０００ｍｇの第１成分の有効成分を含有し得る。
【０２０５】
第１および第２のシステアミン前駆体成分を有する組成物では、固体単位剤形中の第２の活性成分の量は、例えば５０〜７００ｍｇで変化し得る。例えば、投与量は、約５０ｍｇ〜約７００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約６００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約５００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約４５０ｍｇ、約７５ｍｇ〜約７００ｍｇ、約７５ｍｇ〜約６００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約７００ｍｇ；約１００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約７００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約６００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約５００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約４００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約７００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約４５０ｍｇ〜約７００ｍｇ、約４５０ｍｇ〜約６００ｍｇ、約４５０ｍｇ〜約５００ｍｇを含有し得る。第１の活性成分としてのシステアミン前駆体および第２の活性成分としてのインビボでのシステアミン生成の促進剤を有する組成物において、単位剤形中の第２の活性成分の量は、例えば、０．１ｍｇ〜４００ｍｇで変化し得る。
【０２０６】
第１および第２のシセアミン前駆体成分を含む代替実施形態では、液体または粉末単位剤形中の第２の活性成分の量は、例えば、約２５０ｍｇ〜約６，０００ｍｇで変化し得る。例えば、投与量は、１用量あたり約２５０ｍｇ〜約６，０００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約５，０００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約４，０００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約３，０００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約２，０００ｍｇ；約５００ｍｇ〜約６，０００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約５，０００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約４，０００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約３，０００ｍｇ、約７５０ｍｇ〜約６，０００ｍｇ、約７５０ｍｇ〜約５，０００ｍｇ、約７５０ｍｇ〜約４，０００ｍｇ、約７５０ｍｇ〜約３，０００ｍｇ、約１，２５０ｍｇ〜約６，０００ｍｇ、約１，２５０ｍｇ〜約５，０００ｍｇ、約１，２５０ｍｇ〜約４，０００ｍｇ、約１，２５０ｍｇ〜約３，０００ｍｇ、約２，０００ｍｇ〜約６，０００ｍｇ、約２，０００ｍｇ〜約５，０００ｍｇ、約２，０００ｍｇ〜約４，０００ｍｇ、約２，０００ｍｇ〜約３，０００ｍｇ、約２，５００ｍｇ〜約５，０００ｍｇの第２成分の有効成分を含有し得る
【０２０７】
第３の、または第３および第４のシステアミン前駆体成分を含む固体組成物において、単位投与量は、約５０ｍｇ〜約４００ｍｇの第３の活性成分、および存在する場合には第４の活性成分の各々を含有することができる。例えば、投与量は、約５０ｍｇ〜約４００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約３５０ｍｇ、約５０ｍｇ〜約３００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約７５ｍｇ〜約４００ｍｇ、約７５ｍｇ〜約３５０ｍｇ、約７５ｍｇ〜約３００ｍｇ、約７５ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約３５０ｍｇ、約１００ｍｇ〜約３００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約４００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約３５０ｍｇ、または約２５０ｍｇ〜約３００ｍｇを含有することができる。５つの活性成分を有する組成物において、５つの成分の単位投与量は、約５０ｍｇ〜約３００ｍｇの範囲であり得る。第４の活性成分、また任意に第３の活性成分としてインビボでのシステアミン生成の促進剤を有する組成物において、単位剤形中の第４の活性成分および任意に第３の活性成分の量は、例えば、０．１ｍｇ〜４００ｍｇで変化し得る。
【０２０８】
液体または粉末単位剤形中の第３、または第３および第４のシステアミン前駆体成分を含む代替実施形態では、第３および任意に第４の活性成分の単位投与量は、例えば、約２５０ｍｇ〜約４，０００ｍｇで変化し得る。例えば、投薬量は、１用量あたり約２５０ｍｇ〜約４，０００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約３，０００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約２，０００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約１，０００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約４，０００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約３，０００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約２，０００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約１，０００ｍｇ、約７５０ｍｇ〜約４，０００ｍｇ、約７５０ｍｇ〜約３，０００ｍｇ、約７５０ｍｇ〜約２，０００ｍｇ、約７５０ｍｇ〜約１，０００ｍｇ、約１，０００ｍｇ〜約４，０００ｍｇ、約１，０００ｍｇ〜約３，０００ｍｇ、約１，０００ｍｇ〜約２，０００ｍｇ、約１，０００ｍｇ〜約１，５００ｍｇ、約１，５００ｍｇ〜約４，０００ｍｇ、約１，５００ｍｇ〜約３，０００ｍｇ、約１，５００ｍｇ〜約２，０００ｍｇ、約２，０００ｍｇ〜約４，０００ｍｇ、約２，０００ｍｇ〜約３，０００ｍｇの第３および任意に第４の活性成分の有効成分を含有し得る
【０２０９】
医薬組成物は、当該分野において知られている手順を用いることによって、患者への投与後に活性成分の即時、遅延、胃内滞留性、持続、または結腸放出（制御放出と総称される）を提供するように配合することができる。
【０２１０】
錠剤などの固体組成物を調製するために、有効成分（複数可）（例えば、いくつかのシステアミン前駆体）を１種以上の薬学的賦形剤と混合して、本発明の化合物の均質な混合物を含有する固体バルク製剤組成物を形成することができる。これらのバルク製剤組成物を均質とする場合、有効成分は、典型的に組成物全体に均一に分散され、それにより組成物を、錠剤、カプセル、または微粒子などの同等に有効な単位剤形に容易に細分することができる。次いで、この固体バルク製剤を上記の種類の単位剤形に細分する。
【０２１１】
あるいは、１種以上の薬学的賦形剤と混合された有効成分（複数可）の２つの均質なバッチを調製することができ、各々が異なる濃度の有効成分（複数可）を使用する。次いで、第１の混合物を使用してコアを形成し、第２の混合物はコアの周りにシェルを形成して、可変薬物放出特性を有する組成物を形成することができる。高濃度バッチがコア中に位置し、より低い濃度のバッチがシェル中に位置する場合、一旦シェルが実質的に溶解または浸食すると、薬物放出の初期の適度な速度の後に、より速い薬物放出速度が続く。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、シェル中よりもコア中に高濃度の有効成分（複数可）を含有する。コア：シェル中のシステアミン前駆体濃度の比は、例えば、約１．５：１〜４：１の範囲であり得る。賦形剤はまた、薬物放出速度に影響を及ぼすように、２つのバッチ間の種類または濃度が異なる場合もある。いくつかの実施形態では、コア中のポリマー（複数可）または他のマトリックス形成成分は、シェルからよりもゆっくりと有効成分（複数可）を放出する。そのような実施形態では、より高い濃度のコア中のシステアミン前駆体（複数可）は、より遅い速度の薬物放出によって部分的にまたは完全に平衡され、システアミン前駆体放出の持続期間、およびしたがってインビボでのシステアミン生成の持続期間、腸吸収、および上昇した血中レベルを延長する。シェル層が適用される前に、１つ以上のコーティングがコアに適用されてもよく、追加のコーティングをシェルに適用して、効率的な製造プロセスを可能にし、および／または胃腸管内の薬物放出のタイミングおよび位置を含む、所望の薬理学的特性の提供を助けることができる。
【０２１２】
本発明の医薬組成物は、システアミン産生に至る機序（複数可）または分解ステップの数が異なるシステアミン前駆体の混合物を放出するように配合されたものを含む。具体的には、２つ、３つ、４つ、または５つのシステアミン前駆体の混合物であり、各々がシステアミンを放出することから離れた１つ、２つ、３つ、またはそれ以上の化学的および／または酵素的分解ステップである。例えば、１つのステップは、ジスルフィド結合の還元（システアミン混合ジスルフィドの場合）またはパンテテイナーゼ切断（パンテテインの場合）であり得る。２つのステップは、ジスルフィド結合の還元、その後のパンテテイナーゼ切断（パンテテインジスルフィドの場合）、またはホスファターゼ切断、その後のパンテテイナーゼ切断（４−ホスホパンテテインの場合）であり得る。３つのステップは、（例えば、ホスファターゼによる）パンテテインへの分解の前または後に続くジスルフィド結合の還元、続いて（例えば、４−ホスホパンテテインジスルフィドの場合）パンテテイナーゼ切断であり得る。４つのステップは、ジスルフィド結合の還元、その後のパンテテインへの２つの分解段階（例えば、エクトヌクレオチドジホスファターゼによるアデニンヌクレオチド部分の除去、その後のホスファターゼによる４′ホスフェートの除去）、続いてパンテテイナーゼ切断（例えば、補酵素Ａまたはデホスホ補酵素Ａジスルフィド）であり得る。システアミンへの異なる化学的および／または酵素的分解経路を有するシステアミン前駆体を組み合わせる目的は、システアミンが腸から産生され、腸から吸収される時間を延長し、その結果、治療上有効なシステアミン血中レベルの持続時間を延長することである。いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物は、少なくとも２つのシステアミン前駆体を含み、さらなる実施形態では、医薬組成物は３つのシステアミン前駆体を含有する。
【０２１３】
本発明の医薬組成物は、混合放出用に配合することができ、これは１つの組成物が２つの薬物放出プロファイルを含むことを意味する。例えば、即時放出製剤を持続放出製剤と組み合わせることができる。（例えば、図１４の化合物Ｆを参照されたい。）そのような組成物では、第１の活性成分は、摂取後約５分〜約３０分の間に開始する即時放出用に配合され得る。例えば、第１の活性成分は、組成物の摂取後５分、１０分、１５分、２０分、２５分、３０分、または４５分後に放出され得る。第１の活性成分は、治療範囲内のシステアミン血漿濃度が、摂取後約１５分〜３時間、好ましくは３０分〜２時間の間に達成されるように配合される。例えば、治療的血漿システアミン濃度は、組成物の摂取から０．５時間、１時間、２時間、または３時間後に到達し得る。使用されるシステアミン前駆体の種類（例えば、チオール、システアミン混合ジスルフィド、パントテシンジスルフィド、補酵素Ａジスルフィド、Ｎ−アセチルシステアミンジスルフィド等）は、システアミンの治療的血中濃度に到達する時間の長さ、および治療的血中濃度が維持される期間に影響を及ぼす。
【０２１４】
２つ、３つ、および任意に４つまたは５つの活性成分を有する組成物（例えば、複数のシステアミン前駆体ならびに／またはインビボでのシステアミン生成および吸収の促進剤）において、第２、第３および／または第４および／または第５の活性成分の各々が、摂取後約１時間〜約８時間の間に組成物からの制御放出を開始するように配合される。制御放出組成物は、遅延放出および／または持続放出製剤を含み得る。例えば、第２、第３、および／または第４の活性成分は、組成物の摂取後１時間、１．５時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、または８時間から放出され得る。第２、第３、および／または第４の活性成分は配合され、それによってシステアミンの血漿濃度（全ての活性成分の寄与を反映する）が、摂取後約３０分〜２時間の間に開始して治療範囲内で維持され、６〜１０時間、より好ましくは、摂取後８〜１２時間、またはより長い期間にわたって延長する。例えば、血漿システアミン濃度は、組成物の活性成分の摂取後６時間、８時間、１０時間、１２時間、１５時間、２０時間、または２４時間にわたって治療範囲内で持続され得る。患者の年齢およびサイズ、治療される疾患、および患者のシステアミン代謝速度に依存して、数時間にわたって治療的血中レベルを達成するために十分なシステアミン前駆体を送達するために、２つ以上の組成物が必要とされ得る。
【０２１５】
混合製剤を含む医薬組成物の代替物または補完物として、いくつかの実施形態では、単一種の製剤からなる組成物を産生することができる。すなわち、即時放出または持続放出製剤などの時間ベースの製剤、および胃内滞留性、遅延放出、および結腸指向性製剤などの解剖学的標的製剤を、別々の組成物として投与するために調製することができる。異なる薬物放出特性（時間ベースであるか、または解剖学的／生理学的ベースかにかかわらず）を有する医薬組成物の集合体を配合することは、ある特定の利点を有する。例えば、そのような組成物を、異なる組み合わせおよび比で異なる患者に投与して、長期にわたり治療範囲内の血中システアミンレベルをもたらすことができる。すなわち、特定のスケジュールで投与される１つ、２つ、３つ、またはそれ以上の組成物からなる治療レジメンは、個々の患者のシステアミン生成、吸収、および代謝能に合わせて調整することができる。これらの能力は、患者間で異なることが知られているため、異なるシステアミン前駆体および異なる薬物放出特性を含む複数の均質な組成物の配合は、異なる患者に対して異なる比で組み合わせることができ、既存のシステアミン製剤の既知の限界に対処する。
【０２１６】
好ましくは、２つ以上の医薬組成物の組み合わせは、システアミン血中レベルを、摂取後少なくとも２〜８時間、より好ましくは摂取後１〜８時間、さらにより好ましくは２〜１０時間、最も好ましくは１〜１０時間、１〜１２時間、１〜１４時間、またはそれ以上にわたって治療範囲内に維持することができる。異なる薬物放出プロファイルを有する異なるシステアミン前駆体を含有する別々に配合された医薬組成物は、治療的に有効なシステアミン血中濃度を長期間達成するために投与レジメンを個別化するために必要な投与の柔軟性を提供する。
【０２１７】
胃排出時間および大腸通過時間が、健康な個体間で大幅に（２倍以上まで）変化することがよく報告されている。腸酸化還元環境およびパンテテイナーゼ活性のレベルもまた、個体間で変化することが知られている。これらおよび他の因子は、システアミン投与後に観察される血漿システアミンレベルの広い個体間の変動を説明すると考えられる。例えば、健康なボランティアにおける即時放出システアミン重酒石酸塩薬物動態の研究では、食事とともに投与された６００ｍｇ経口投与後のピークシステアミン血中レベル（Ｃｍａｘ）は、７マイクロモルから５７．３マイクロモルまで８倍以上変化した。（Ｄｏｈｉｌ  Ｒ．ａｎｄ  Ｐ．Ｒｉｏｕｘ，Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ２：１７８（２０１３））。同じ研究において、食事とともに投与された６００ｍｇの遅延放出システアミン重酒石酸塩に続くＣｍａｘは、２．１ｕＭから２５．４ｕＭまで１２倍変化した。システアミン血漿レベルの患者間変動は、システアミンを絶食患者に投与した場合に極端ではなかったが、依然として最大４倍であった。（システアミンは、Ｃｙｓｔａｇｏｎ（登録商標）の場合のように６時間毎、またはＰｒｏｃｙｓｂｉ（登録商標）の場合のように１２時間毎に投与されるとき、食事時間を完全に避けることは困難である）。
【０２１８】
現在のシステアミン配合および投与方法は、対象間の変動に対処するための１つのツール、すなわち用量を上げるまたは下げることのみを提供する。本発明のシステアミン前駆体、インビボでのシステアミン生成および吸収の促進剤、薬物配合方法および薬物投与方法は、高いＣｍａｘとしばしば関連する許容されない毒性、または長期の治療閾値を下回る血中レベルと関連する不適切な治療効果を招くことなく、個々の患者に対して化合物、剤形、および投与レジメンを調整することによって、治療的血中システアミンレベルを達成するための複数のツールを提供する。
【０２１９】
別々に配合された組成物の別の利点は、それらが食事に関して異なる時間に投与され得ることである。これは、システアミン前駆体の異なるクラスおよび異なる種類の製剤が食事とは異なって相互作用するため、有用な選択肢である。例えば、胃内滞留時間を最大にするために、胃内滞留性製剤を食事とともに、または食事の直後、好ましくは栄養豊富な食事とともに投与する必要がある。逆に、ジスルフィド結合の還元によってシステアミンに迅速に変換され得るシステアミン混合ジスルフィドを含む即時放出製剤は、好ましくは、量の多い食事とともに投与されてはならない。量の多い食事は、一部の個体においてシステアミンの吸収を妨げるが、食事は、胃の中で（存在するとしても）システアミンをほとんど産生しないある特定のシステアミン前駆体、例えばパンテテインジスルフィドと適合し、これが小腸でシステアミンに変換される傾向がある。
【０２２０】
本発明の化合物および製剤で可能な個別化した投与レジメンは、システアミンの腸内吸収における広範囲の個体間変動が十分に文書化されているが、個体内変動が比較的に中程度であることも同様に十分に立証されるため特に有用である。すなわち、所与の対象は、同様の状況下で複数の機会に投与された場合、実質的に同様にシステアミンの用量を吸収し、代謝する。したがって、特定の患者のために治療範囲内の血中システアミンレベルをもたらすように個別化された投与レジメンは、比較的安定であり、経時的に予測可能な結果をもたらすはずである。
【０２２１】
持続放出製剤は、当該分野において知られている方法を用いて、広範囲に変化する期間にわたって薬物を放出するように設計することができる。（Ｗｅｎ，Ｈ．およびＰａｒｋ，Ｋ．編：Ｏｒａｌ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ：Ｔｈｅｏｒｙ  ｔｏ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｗｉｌｅｙ，２０１０、Ｗｅｌｌｓ，Ｊ．Ｉ．およびＲｕｂｉｎｓｔｅｉｎ，Ｍ．Ｈ．編：Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｌｅａｓｅ，第Ｉ巻および第ＩＩ巻，Ｅｌｌｉｓ  ａｎｄ  Ｈｏｒｗｏｏｄ，１９９１、およびＧｉｂｓｏｎ，Ｍ．編：Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ：Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｇｕｉｄｅ  ｆｒｏｍ  Ｃａｎｄｉｄａｔｅ  Ｄｒｕｇ  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍ，第２版，Ｉｎｆｏｒｍａ，２００９。）
【０２２２】
図１４、図１５、および図１６は、本発明の医薬組成物の例を提供し、有効成分（システアミン前駆体、システアミン前駆体のシステアミンへの変換の促進剤、およびシステアミン腸吸収の促進剤）、用量範囲（全ての活性成分を組み合わせる場合）、製剤の種類（混合製剤を含む）、組成物の組み合わせ、および投与方法（例えば、食品とともにまたは食事とともに）などの態様を例示することが意図される。有効成分としては、システアミン前駆体、ならびにインビボでのシステアミン生成の促進剤、およびシステアミンの腸吸収の促進剤が挙げられる。
【０２２３】
経口投与のための製剤
本発明によって企図される医薬組成物としては、経口投与用に配合されたもの（「経口剤形」）が挙げられる。経口剤形は、例えば、錠剤、カプセル、液体溶液もしくは懸濁液、粉末、または液体もしくは固体の結晶もしくは顆粒の形態であり得、これらは活性成分（複数可）を非毒性の薬学的に許容される賦形剤との混合物中に含有する。液体、粉末、結晶、または顆粒として配合される場合、用量は、単位用量を明確に画定する方法で包装されてもよい。例えば、粉末または顆粒または微粒子が、サシェに包装されてもよい。液体は、ガラスまたはプラスチック容器に包装されてもよい。
【０２２４】
賦形剤は、薬理学、医薬品、および医薬品製造の分野の当業者に知られている他の考慮事項の中から、許容される感覚刺激特性を提供し、薬物放出特性を制御し、効率的な製造を容易にし、医薬組成物の長期間の安定性を保証するように選択される。賦形剤は、例えば、不活性希釈剤または充填剤（例えば、スクロース、ソルビトール、糖、マンニトール、微結晶性セルロース、ジャガイモデンプンを含むデンプン、炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、乳糖、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、またはリン酸ナトリウム）；造粒剤および崩壊剤（例えば、微晶質セルロースを含むセルロース誘導体、ジャガイモデンプンを含むデンプン、クロスカルメロースナトリウム、アルギン酸塩、またはアルギン酸）；結合剤（例えば、スクロース、グルコース、ソルビトール、アカシア、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、デンプン、アルファ化デンプン、微晶質セルロース、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、ポリビニルピロリドン、またはポリエチレングリコール）；ならびに潤滑剤、滑剤、および粘着防止剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸、シリカ、水素化植物油、またはタルク）であってもよい。他の薬学的に許容される賦形剤は、着色剤、香味剤、可塑剤、湿潤剤、防腐剤、緩衝剤、安定化剤等であり得る。これらの賦形剤の多くは、様々な化学的形態で複数の賦形剤製造業者によって販売され、および／または異なる濃度で、および／または他の賦形剤との様々な組み合わせで使用することができ、性能特性の差異を保証する。特定の賦形剤は、製剤中で複数の目的を達成することができる。
【０２２５】
経口投与のための製剤はまた、チュアブル錠剤として、有効成分が不活性固体希釈剤（例えば、ジャガイモデンプン、乳糖、微結晶セルロース、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、またはカオリン）と混合された硬質ゼラチンカプセルとして、または活性成分が水もしくは油性媒体、例えばピーナッツ油、液体パラフィン、もしくはオリーブ油と混合された軟質ゼラチンカプセルとして提示されてもよい。粉末、顆粒、およびペレットは、例えば、ミキサー、流動床装置、または噴霧乾燥装置を使用して、従来の方法で錠剤およびカプセルの下で上述の成分を用いて調製されてもよい。
【０２２６】
有用な製剤の１つのカテゴリーは、薬物が放出される場所に重要な意味を有するが、主として薬物放出の速度（例えば、即時および持続放出製剤）を制御する。有用な製剤の第２のカテゴリーは、放出のタイミングに重要な意味を有するが、主として薬物放出の解剖学的部位（例えば、胃における薬物放出のための胃内滞留性製剤、大腸の結腸標的製剤）を制御する。腸溶性コーティング製剤は、酸性胃環境で無傷のままであるように設計され、しばしば解剖学的標的の一種であるよりアルカリ性の小腸で溶解するように設計されているが、しばしば遅延放出製剤と称され、時間制御要素を強調する。しかしながら、結腸標的製剤はまた、胃での溶解を防止するための腸溶性コーティングを有してもよく、解剖学的標的化と薬物放出速度の制御との間の複雑な関係を強調する。さらに、時間ベースおよび解剖学的または生理学的に標的化された製剤に使用される賦形剤の間には、広範な重複がある。これらの種類の製剤を様々な方法で組み合わせて、時間および空間の両方において、異なる薬物放出プロファイルを有する複数の組成物を作製することができる。そのような組成物は、順に異なる量および比率で組み合わせて、患者間の生化学的および生理学的変動、ならびに疾患の種類、程度、および活性の変動に対応するように治療レジメンを個別化することができる。
【０２２７】
胃内滞留性製剤
胃内滞留性製剤は、胃内の本発明の組成物から、システアミン前駆体またはその塩を放出するため、および長期間にわたって胃内の組成物の活性成分（複数可）の放出を制御するために用いてもよい。言換すれば、胃内滞留性製剤のポイントは、長期胃内滞留であるため、付随する賦形剤は、胃内滞留性剤形が胃に残留すると予想される期間全体にわたって、および任意に小腸を通って結腸に移行する時間を含めてより長い期間にわたって、有効成分の持続放出を提供するはずである。本発明の活性成分の胃内滞留は、粘膜付着、浮揚、沈降、膨潤、および膨張などの様々な機序によって、ならびに／または胃排出を遅らせる薬理学的薬剤の同時投与によって達成されてもよい。胃内滞留性製剤に使用される賦形剤、ならびに医薬組成物のサイズおよび形状は、胃内滞留の機序によって異なる。
【０２２８】
粘膜付着性／生体付着性胃内滞留性製剤
粘膜付着は、進行中の粘液産生の結果として表面から自然に除去されるまで、製剤中で利用されるポリマーの胃腸粘液層への付着に関する。時には粘膜付着と互換的に使用される生体付着もまた、胃腸上皮細胞の表面上の分子への医薬組成物のポリマーまたは他の成分の付着を包含する。粘膜付着および生体付着の目的は、医薬組成物が、システアミン前駆体切断（すなわち、その表面上でパンテテイナーゼを発現する細胞）および循環へのシステアミン取り込みおよび輸送（例えば、有機カチオン輸送体を発現する細胞）が可能な細胞型を含む、胃腸上皮細胞に近接している時間を増加させることである。粘膜付着性ポリマーは、錠剤またはカプセルなどの大きな剤形、および微粒子またはマイクロスフェアなどの小さな剤形を配合する際に使用することができる。蠕動、ムチン型、ムチン代謝回転速度、胃腸内ｐＨ、絶食／摂食状態、および摂食状態での食品の種類などの様々な生理学的要因が、粘膜付着の程度および持続性に影響を及ぼす。粘膜付着の機序は、ポリマーと粘液との境界における静電結合および水素結合の形成によるものと考えられている。一般に、粘膜付着は、胃腸管粘膜に対する親和性を有するポリマーで達成され、ポリアクリル酸、メタクリル酸およびその誘導体または両方、ポリブレン、ポリリシン、ポリカルボフィル、カルボマー、アルギン酸塩、キトサン、コレスチラミン、ガム、レクチン、ポリエチレンオキシド、スクラルファート、トラガカント、デキストリン（例えば、ヒドロキシプロピルベータ−シクロデキストリン）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、グリアジン、セルロースおよびセルロース誘導体、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、またはそれらの混合物などの、合成または天然の生体付着性物質から選択される。例えば、商品名ＣＡＲＢＯＰＯＬ（例えば、Ｃａｒｂｏｐｏｌ  ９７４Ｐおよび９７１Ｐ）ならびにＰＯＬＹＣＡＲＢＯＰＨＩＬで入手可能な架橋アクリルおよびメタクリル酸コポリマーが、粘膜付着性製剤において使用されている。（ＨｏｍｂａｃｈＪ．およびＡ．Ｂｅｒｎｋｏｐ−Ｓｃｈｎｕｒｃｈ．Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  １９７：２５１（２０１０））。他の生体付着性カチオンポリマーとしては、酸性ゼラチン、ポリガラクトサミン、ポリ−アミノ酸、例えばポリリシン、ポリオルニチン、ポリ四級化合物、プロラミン、ポリイミン、ジエチルアミノエチルデキストラン（ＤＥＡＥ）、ＤＥＡＥ−イミン、ポリビニルピリジン、ポリチオジエチルアミノメチルエチレン（ＰＴＤＡＥ）、ポリヒスチジン、ＤＥＡＥ−メタクリレート、ＤＥＡＥ−アクリルアミド、ポリ−ｐ−アミノスチレン、ポリオキセタン、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＬ、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＳ、ＧＡＦＱＵＡＴ、ポリアミドアミン、カチオン性デンプン、ＤＥＡＥ−デキストラン、ＤＥＡＥ−セルロース、およびコポリメタクリレート（ＨＰＭＡのコポリマーを含む）、Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）−メタクリルアミド（例えば、米国特許第６，２０７，１９７号を参照）が挙げられる。
【０２２９】
粘膜付着は、小さな粒子（例えば、微粒子）に適用される場合に最も効果的である。粘膜付着性製剤は、浮遊性製剤、膨張／膨潤製剤、または任意の種類の持続放出製剤を含む、１つ以上の他の胃内滞留性製剤方法と組み合わせることができる。
【０２３０】
浮遊性胃内滞留性製剤
胃内滞留機序としての浮遊は、胃での浮力を保つように、胃液および／または粥状液（胃で部分的に消化された食物）よりも低い嵩密度を有する活性成分（例えば、システアミン前駆体）の配合において効果的である。一般に、１立方センチメートルあたり１グラム未満の密度が望ましく、より好ましくは１立方センチメートルあたり０．９グラム未満の密度である。浮力は、（ｉ）脂質を含む低密度物質を使用すること、（ｉｉ）組成物の中心に気泡（複数可）を予め形成すること、または（ｉｉｉ）インビボで気泡を発生するために発泡性賦形剤を使用することによって達成することができる。後者の種類の医薬組成物は、発泡性賦形剤によって生成されたガスが、組成物中に残り、それによりその浮力に寄与するように設計されなければならない。例えば、発泡性賦形剤は、組成物中に泡を閉じ込めるために、ポリマーのマトリックスに包埋することができる。後者の種類の浮揚性製剤は、一般に、膨潤性ポリマーまたは多糖類および発泡性カップル（例えば、重炭酸ナトリウムおよびクエン酸もしくは酒石酸）、または閉じ込められた空気のチャンバを含むマトリックスまたは体温で液体胃内容物との接触時にガスを発生する液体を用いて調製した。浮遊性胃内滞留性製剤は、広範囲に概説されている（例えば、Ｋｏｔｒｅｋａ，Ｕ．Ｋ．Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ｉｎ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，２８：４７（２０１１））。
【０２３１】
胃内滞留のために設計された浮遊性医薬組成物は、当該分野ではしばらく前から知られている。例えば、米国特許第４，１２６，６７２号、同第４，１４０，７５５号、および同第４，１６７，５５８号は、各々が参照により本明細書に組み込まれ、胃液の密度（すなわち、１立方センチメートルあたり１グラム未満）よりも低い密度を有する錠剤形態の「流体力学的に平衡された」薬物送達系（ＨＢＳ）について説明している。結果として、組成物は、胃液または粥状液上に浮遊し、それによって胃の筋肉収縮の間に幽門を通しての放出を回避する。薬物は、メチルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース）またはカルボキシメチルセルロースナトリウムなどのセルロース由来の親水コロイドから連続的に放出され、胃液と接触すると、組成物の表面に水不透過性バリアを形成し、これが徐々に浸食し、ゆっくり薬物を放出する。即時放出用に配合された外層および持続放出用に配合された内層を有する２層浮遊性錠剤もまた、参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第４，１４０，７５５号に開示されている。
【０２３２】
Ｌ−ドーパおよびデカルボキシラーゼ阻害剤の持続送達のための同様の流体力学的に平衡した浮遊性製剤も説明されている（米国特許第４，４２４，２３５号を参照）。アラビアガム、トラガントガム、ローカストビーンガム、グアーガム、カラヤガム、アガー、ペクチン、カラギーン、可溶性および不溶性アルギン酸塩、カルボキシポリメチレン、ゼラチン、カゼイン、ゼイン、およびベントナイトなどの親水コロイドは、本発明の浮遊性製剤の調製において有用であり得る。浮遊性製剤は、蜜蝋、セチルアルコール、ステアリルアルコール、モノステアリン酸グリセリル、水素化ヒマシ油、および水素化綿実油から選択される脂肪物質または脂肪物質の混合物を約６０％まで含むことができる（油脂は胃液よりも密度が低い）。浮遊性製剤は、システアミン前駆体の持続放出を促進し、より長い時間にわたって上昇した血漿システアミンレベルを提供することができる。長期の血漿システアミンレベルの上昇は、より少ない頻度での投与を可能にする。
【０２３３】
本発明の浮遊性組成物は、ガス発生剤を含有してもよい。ガス発生化合物を用いて浮遊組成物を配合する方法は、当該分野において知られている。例えば、重炭酸ナトリウムを含有する浮遊性小カプセルは、米国特許第４，１０６，１２０号に説明されている。ガス発生に基づく同様の浮遊性顆粒は、米国特許第４，８４４，９０５号に説明されている。浮動カプセルは、米国特許第５，１９８，２２９号に説明されている。
【０２３４】
浮遊性組成物は、任意に、酸源およびガス発生炭酸塩または重炭酸塩剤を含有してもよく、これらは一緒に、発泡性カップルとして作用し、製剤に浮力を与える二酸化炭素ガスを産生する。可溶性有機酸およびアルカリ金属炭酸塩からなる発泡性カップルは、混合物が水と接触するとき、またはアルカリ性成分が酸性液体（例えば、胃液）と接触するときに、二酸化炭素を形成する。使用される酸の典型的な例としては、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、フマル酸、またはアジピン酸が挙げられる。使用されるガス発生アルカリの典型的な例としては、重炭酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸グリシンナトリウム、セスキ炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、重炭酸カリウム、炭酸カルシウム、重炭酸アンモニウム、重亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム等が挙げられる。ガス発生剤は、水との接触、または胃液中の塩酸と接触することにより誘発される酸源と相互作用して、組成物のマトリックス中に閉じ込められ、その浮遊特性を改善する二酸化炭素または二酸化硫黄を生成する。一実施形態では、ガス発生剤は重炭酸ナトリウムであり、酸源はクエン酸である。
【０２３５】
組成物が、胃に到達した直後に胃液および／または粥状液よりも軽くない場合、幽門を介して速やかに追放される可能性があるため、浮遊動態は重要である。予め形成された気泡を含む組成物または脂質などの低密度物質を含む組成物などのいくつかの組成物は、摂取時に胃液および粥状液よりも密度が低い。胃に到達した後に胃液および／または粥状液の密度よりも低い密度を達成しなければならない浮遊性組成物（すなわち、発泡性製剤）の場合、１立方センチメートルあたり１グラム未満の密度は、好ましくは３０分以内、より好ましくは１５分以内に到達し、最も好ましくは胃液と接触した後１０分以内に到達する。浮遊期間も重要であり、薬物放出期間と一致させるべきである。すなわち、組成物が６時間以上薬物を放出するように設計されている場合、それはまた、６時間にわたって浮遊することができなければならない。好ましくは、浮遊性組成物は、少なくとも５時間、より好ましくは７．５時間、さらにより好ましくは１０時間以上、１未満の密度を維持する。
【０２３６】
大用量のシステアミン前駆体（例えば、２〜１０グラム）が、いくつかのシステアミン感受性疾患を効果的に治療し、および／または成体対象において適切な血中レベルを達成するために必要であり得る。標準剤形（例えば、錠剤、カプセル）に含まれ得る任意の活性剤の量は、患者が大きな組成物を飲み込む能力によって制限されるため、さらに複数の錠剤またはカプセルの投与が、不便または不快（嚥下障害の患者には不可能）になり得るため、単位剤形中の活性剤の量を制限しない代替剤形が有用である。粉末、顆粒、および液体は、サイズが制限されない剤形の例であるが、適切な包装（例えば、サシェまたはバイアル）によって単位投与量で送達され得る。本発明のいくつかの実施形態では、本発明の浮遊性胃内滞留性組成物は、液体形態で投与される。さらなる実施形態では、液体組成物は、アルギン酸塩を含む。他の実施形態では、有効医薬成分は、食品に振りかけることができる粉末または顆粒の形態で送達される。
【０２３７】
液体胃内滞留性浮遊性薬物送達系の１つの種類は、賦形剤としてアルギン酸塩を利用する。アルギン酸は、１，４−グリコシド結合によって接続されたベータ−Ｄ−マンヌロン酸およびアルファ−Ｌ−グルロン酸残基から作製される線状ブロック多糖コポリマーである。これは、持続放出ポリマーとしての使用を含めて、医薬組成物における広範囲の目的に使用される（Ｍｕｒａｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｉｏｐｈａｒｍ  ５０：２２１（２０００）を参照）。Ｇａｖｉｓｃｏｎは、制酸剤を含む浮遊性液体アルギン酸塩製剤のブランド名である。それは数十年にわたって胃食道逆流を治療するために使用されているため、慢性アルギン酸塩摂取の安全性は十分に確立されている。小分子薬物を有するアルギン酸塩の浮遊性製剤が説明されている（Ｋａｔａｙａｍａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｌ  Ｐｈａｒｍ  Ｂｕｌｌ．２２：５５（１９９９）、およびＩｔｏｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ  Ｉｎｄ  Ｐｈａｒｍ．３６：４４９（２０１０）を参照）。胃内容物の表面上に層を形成する浮遊性製剤は、ラフト形成製剤と称されることがある。ラフト形成浮遊性／ゲル化持続放出組成物は、Ｐｒａｊａｐａｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １６８：１５１（２０１３）、およびＮａｇａｒｗａｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．５：２８２（２００８）によって説明されている。
【０２３８】
参照により本明細書に組み込まれる米国特許第４，７１７，７１３号は、胃内容物と接触すると、胃の中に半固体のゲル様マトリックスを形成し、それによってゼラチン状マトリックスからの薬物の制御放出をもたらす、液体（飲用に適した）製剤を開示する。キサンタンガム、アルギン酸ナトリウム、ゼラチンまたは他のポリマーおよびカラギーナンなどの複合コアセルベート対、および熱ゲル化メチルセルロースを含むゲル形成ビヒクルが開示されており、その全てまたはサブセットを様々な比で組み合わせて、懸濁した薬学的活性剤（複数可）の溶解および／または拡散速度に影響を及ぼすことができる。使用される他の賦形剤としては、ゲル化の促進剤としても、ゲルを浮遊させるためのガス発生剤としても有効な、炭酸カルシウムなどの炭酸塩化合物が挙げられる。キシログルカンおよびゲランガムもまた、ゲル化剤として、またはゲル化剤の組み合わせとして使用することができる。
【０２３９】
液体（飲用に適した）浮遊性製剤としては、液体懸濁液（濃縮物もしくは使用の準備ができている）または液体（例えば、水、ジュースもしくは他の飲料）に加えることができる粉末として提供され得る微粒子を挙げることができる。浮遊性胃内滞留性組成物はまた、食品の上に振りかけるか、または他の方法で混合される粉末の形態で送達されてもよい。
【０２４０】
浮遊性胃内滞留性製剤としては、粘膜付着性ポリマーまたは他の粘膜付着性成分を挙げることができ（米国特許第６，２０７，１９７号および同第８，７７８，３９６号を参照）、ポリエチレンオキシド、ポリビニルアルコール、アルギン酸ナトリウム、エチルセルロース、ポリ（乳酸）コグリコール酸（ＰＬＧＡ）、ポリ乳酸、ポリメタクリレート、ポリカプロラクトン、ポリエステル、ポリアクリル酸、およびポリアミドなどのポリマーを利用することができる。
【０２４１】
胃内滞留性組成物の膨潤および膨張
膨潤および膨張は、胃液と接触すると、組成物が幽門を通って胃から出ることを妨げる程度まで膨潤する、胃内滞留機序である。結果として、組成物は、長期間にわたって、例えば、組成物の表面が幽門の直径よりも小さくなるまで浸食されるまで、または食物が胃から実質的に空になるまで、長期間にわたって胃内に滞留し、その時、強い筋肉収縮（「ハウスキーパー波」と呼ばれることもある）が胃を掃引し、その内容物を取り除く。組成物は、膨潤状態または膨張状態でおよそ１４〜１６ｍｍの直径を超えるため、幽門括約筋を通過することから除外される。好ましくは、組成物は、１６〜１８ｍｍの直径を超える。膨潤は、浮遊性と組み合わせてもよく、これが特に摂食状態で、幽門から製剤を遠ざける。
【０２４２】
胃液との接触時に膨潤し、結果として胃内に滞留する製剤の概念は、１９６０年代から知られている。米国特許第３，５７４，８２０号は、幽門を通過することができず、したがって胃に保持されるようなサイズまで、胃液と接触して膨潤する錠剤を開示している。同様に、米国特許第５，００７，７９０号は、ポリマーと混合された薬物分子の緩慢な溶解を可能にしながら、急速に膨潤して胃の保持を促進する、親水性で水膨潤性の架橋ポリマーからなる錠剤またはカプセルを説明している。
【０２４３】
参照により本明細書に組み込まれる米国特許公開第２００３／０１０４０５３号は、活性成分がポリ（エチレンオキシド）とヒドロキシプロピルメチルセルロースとの組み合わせから形成された固体単位マトリックス中に分散されている医薬品の送達のための単位剤形錠剤を開示している。この組み合わせは、放出速度制御および再現性の点で独特の利点を提供すると同時に、胃内滞留をもたらす錠剤の膨潤、および薬物の放出が起こった後に胃腸管から錠剤を取り除く錠剤の崩壊の両方を可能にすると言われている。参照により本明細書に組み込まれ、またＤｅｐｏＭｅｄに譲渡された米国特許第６，３４０，４７５号は、水を吸収すると、摂食モード中に胃内の剤形の滞留を促進するために十分に大きいサイズまで膨潤する、親水性ポリマーからなるポリマーマトリックスに組み込むことによって開発された活性成分の単位経口剤形を強調する。ポリマーマトリックスは、ポリ（エチレンオキシド）、セルロース、架橋ポリアクリル酸、キサンタンガム、およびヒドロキシメチル−セルロース、ヒドロキシエチル−セルロース、ヒドロキシプロピル−セルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、カルボキシメチル−セルロース、および微晶質セルロースのようなアルキル置換セルロースからなる群から選択されるポリマーで形成される。
【０２４４】
さらに、ガムベースの膨潤性胃内滞留系もまた、ＤｅｐｏＭｅｄ研究者によって開発されている。参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，６３５，２８０号は、水を吸収すると、摂食モード中に胃内の剤形の滞留を促進するために十分に大きいサイズまで膨潤する、固体ポリマーマトリックスを形成する１つ以上のポリマーを含む、高度に水溶性の薬物の制御放出経口剤形を開示している。ポリマーマトリックスは、ポリ（エチレンオキシド）、セルロース、アルキル置換セルロース、架橋ポリアクリル酸、およびキサンタンガムから選択されるポリマーから形成されてもよい。参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，４８８，９６２号は、嚥下に便利なままで幽門を通過することを防止する最適な錠剤形状を開示している。錠剤は、セルロースポリマーおよびそれらの誘導体、多糖類およびそれらの誘導体、ポリアルキレンオキシド、ポリエチレングリコール、キトサン、ポリ（ビニルアルコール）、キサンタンガム、無水マレイン酸コポリマー、ポリ（ビニルピロリドン）、デンプンおよびデンプン系ポリマー、マルトデキストリン、ポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）、ポリ（エチレンイミン）、ポリウレタンヒドロゲル、架橋ポリアクリル酸およびそれらの誘導体、ならびにブロックコポリマーおよびグラフトポリマーを含む上に列挙されたポリマーのコポリマーを含む、水膨潤性ポリマーを使用して作製される。
【０２４５】
参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，７２３，３４０号は、膨潤性胃内滞留性組成物を作製するための最適なポリマー混合物を開示する。混合物は、実質的に完全な薬物放出の際に組成物の小腸への通過を確実にするために、膨潤および薬物放出パラメータの最適制御、ならびに溶解／浸食パラメータの制御を提供する。好ましいポリマー混合物は、ポリ（エチレンオキシド）とヒドロキシプロピルメチルセルロースとの組み合わせを含む。好ましい分子量範囲および粘度範囲は、ポリマー混合物について提供される。
【０２４６】
上記の特許公報に記載された方法は、複数の刊行物に説明されている４つのＵ．Ｓ．ＦＤＡ承認の膨潤性胃内滞留性製剤を配合するために使用されている（例えば、Ｂｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．３：５４１（２００６）において概説されている）。
【０２４７】
参照により本明細書に組み込まれる米国特許公開第２００８／０２２００６０号は、弱ゲル化剤、強ゲル化剤、およびガス発生剤の混合物で造粒された活性物質を含む胃内滞留性製剤を開示している。ここで、強力なゲル化剤は、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロースを除くヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、キサンタンガム、グアーガム、カラギーナンガム、ローカストビーンガム、アルギン酸ナトリウム、アガー−アガー、ゼラチン、改質デンプン、カルボキシビニルポリマーのコポリマー、アクリレートのコポリマー、オキシエチレンとオキシプロピレンのコポリマー、およびそれらの混合物からなる群から選択される。この特許は、製造方法も説明している。米国特許第７，６７４，４８０号は、超崩壊剤、タンニン酸、および１つ以上のヒドロゲルを含む混合物を用いて非常に急速な膨潤をもたらす、膨潤性の胃内滞留性製剤法を開示している。参照により本明細書に組み込まれる米国特許公開第２００４／０２１９１８６号は、キサンタンガムまたはローカストビーンガムまたはそれらの組み合わせに基づいて、多糖から形成されたゲルを含む膨張性胃内滞留デバイスを提供する。参照により本明細書に組み込まれる米国特許公開第２００６／０１７７４９７号は、胃内滞留のためのプラットフォーム技術として、ゲランガムベースの経口制御放出剤形を開示している。剤形は、グアーガム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム塩、キサンタンガムなどの親水性ポリマーをさらに含む。
【０２４８】
米国特許第６，６６０，３００号は、膨潤および薬物放出が組成物の別々の区画によって達成される、水溶性薬物を送達するために適した二相性膨潤性胃内滞留性製剤技術を開示しており、内部固体粒状相は、薬物および１種以上の親水性ポリマー、１種以上の疎水性ポリマーおよび／または１種以上の疎水性材料（蝋、脂肪アルコール、および／もしくは脂肪酸エステルなど）を含む。１種以上の疎水性ポリマーおよび／または１種以上の疎水性材料（蝋、脂肪アルコール、および／もしくは脂肪酸エステルなど）を使用して、外部固体連続相（薬物含有内部相の顆粒が包埋されている）が形成される。錠剤およびカプセルが開示される。
【０２４９】
膨潤性または膨張性マトリックス製剤に有用な他の賦形剤としては、（ｉ）水膨潤性ポリマーマトリックス、および（ｉｉ）以下：ポリアルキレンオキシド、特にポリ（エチレンオキシド）、ポリエチレングリコールおよびポリ（エチレンオキシド）−ポリ（プロピレンオキシド）コポリマー；セルロースポリマー；好ましくはアクリル酸、メタクリル酸、メチルアクリレート、エチルアクリレート、メチルメタクリレート、エチルメタクリレート、およびそれらのコポリマーから、互いにまたはアミノエチルアクリレートなどの付加的なアクリレート種とともに形成される、アクリル酸およびメタクリル酸ポリマー、それらのコポリマーおよびエステル；無水マレイン酸コポリマー；ポリマレイン酸；ポリアクリルアミド自体などのポリ（アクリルアミド）、ポリ（メタクリルアミド）、ポリ（ジメチルアクリルアミド）、およびポリ（Ｎ−イソプロピル−アクリルアミド）；ポリ（ビニルアルコール）などのポリ（オレフィンアルコール）、ポリ（ビニルピロリドン）などのポリ（Ｎ−ビニルラクタム）、ポリ（Ｎ−ビニルカプロラクタム）、およびそれらのコポリマー；グリセロール、ポリグリセロール（特に高度に分岐したポリグリセロール）、プロピレングリコール、および１つ以上のポリアルキレンオキシドで置換されたトリメチレングリコールなどのポリオール、例えば、モノ−、ジ−、およびトリ−ポリオキシエチレン化グリセロール、モノ−およびジ−ポリオキシエチレン化プロピレングリコール、ならびにモノ−およびジ−ポリオキシエチル化トリメチレングリコール；ポリオキシエチレン化ソルビトールおよびポリオキシエチレン化グルコース；ポリ（メチルオキサゾリン）およびポリ（エチルオキサゾリン）を含むポリオキサゾリン；ポリビニルアミン；ポリビニルアセテート自体ならびにエチレン−ビニルアセテートコポリマー、ポリビニルアセテートフタレート等を含む、ポリビニルアセテート；ポリエチレンイミンなどのポリイミン；デンプンおよびデンプンベースのポリマー；ポリウレタンヒドロゲル；キトサン；多糖ガム；ゼリン；ならびにシェラック、シェラック−アセチルアルコール、およびシェラックｎ−ブチルステアレートから選択される親水性ポリマーが挙げられる。胃内滞留性製剤はまた、浮遊性製剤、粘膜付着性製剤、膨張性マトリックス製剤、改変形状製剤、および／または磁性製剤の任意の組み合わせを含んでもよい。
【０２５０】
いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物は、幽門を通過することを阻害する大きさに膨潤した結果、胃内に保持される胃内滞留性組成物である。さらなる実施形態では、胃内滞留性組成物は、膨潤機序および浮遊機序の両方によって胃内に滞留する。
【０２５１】
展開、形状変化性胃内滞留性製剤
液体胃内容物と接触すると展開、除圧、または他の方法でサイズおよび／もしくは形状を変化させる医薬組成物も説明されており、本発明の化合物および製剤の適切な送達ビヒクルである。そのような組成物は、胃の形状を、幽門を通過しにくい大きさおよび／または幾何形状に変化させるという点で、膨潤／膨張性胃内滞留性製剤と同様の原理を用いる。展開、伸展、または他の形状変化性の胃内滞留性組成物を作製するための方法および材料は、当該分野において知られている。例えば、米国特許第３，８４４，２８５号は、反芻動物における獣医学的使用を意図した様々なそのような装置を説明しているが、基本原理は、ヒト胃内滞留性製剤にも適用される。米国特許第４，２０７，８９０号は、胃液と接触すると膨潤して展開する「有効な膨張量の膨張剤をその中に含有する、崩壊した、膨張可能な、無孔のポリマーエンベロープ」からなり、その結果として拡張した状態で胃内に滞留する、制御放出薬物送達系を説明している。組成物は、崩壊した形態のカプセルの内部に投与される。展開および形状変化性胃内滞留性組成物が概説されている（例えば、Ｋｌａｕｓｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ９０：１４３（２００３））。
【０２５２】
「アコーディオンピル」と呼ばれる例示的な展開胃内滞留技術は、Ｉｎｔｅｃ  Ｐｈａｒｍａ（Ｊｅｒｕｓａｌｅｍ，Ｉｓｒａｅｌ）によって開発されている。様々な形状の多層の平面構造は（少なくとも１つの層が薬物を含有する）、Ｋａｇａｎ，Ｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １１３：２０８（２００６）に説明されているように、アコーディオンまたは階段状の形状に折り畳まれ、カプセル内に包装される。アコーディオンピルおよび関連技術のさらなる特徴は、その構築に好ましく使用される薬学的賦形剤を含めて、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，６８５，９６２号に開示されている。カプセルは、胃内容物との接触時に溶解し、折り畳まれた組成物を放出し、これが急速に展開し、その後、通常の食事とともに投与された場合、最大１２時間にわたって胃内に滞留する。
【０２５３】
他の胃内滞留技術としては、超多孔質ヒドロゲルおよびイオン交換樹脂系が挙げられる。超多孔質ヒドロゲルは、多数の相互接続された孔を介して急速に水を取り込むため、急速に（液体接触から１分以内に）膨潤する。組成物は、クロスカルメロースナトリウム（例えば、商品名：Ａｃ−Ｄｉ−Ｓｏｌ）などの親水性ポリマーとの同時配合による胃収縮の力に耐えるために十分な機械的強度を保持しながら、それらの元のサイズの１００倍以上まで膨潤し得る。イオン交換樹脂ビーズを、負電荷の薬物で充填し、ガス発生剤（例えば、二酸化炭素ガスを生成するために胃液中の塩化物イオンと反応する重炭酸塩）を用いて浮遊させることができる。ビーズは、ガスを捕捉する半透膜に封入され、ビーズの長期浮遊をもたらす。
【０２５４】
胃内滞留性製剤はまた、粘膜付着性、浮遊性、ラフト形成性、膨潤性、展開／形状変化性、超多孔性ヒドロゲルまたはイオン交換樹脂製剤の任意の組み合わせを含み得る。そのような組み合わせは、当業者に知られている。例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、米国特許第８，７７８，３９６号（「微粒子を含む多単位胃内滞留性薬学的剤形」）は、微粒子からなる複合粘膜付着性浮遊胃内滞留性製剤を説明している。
【０２５５】
本発明の組成物は、胃内滞留をさらに促進するために膨潤性および／または粘膜付着特性を有する親水性ポリマーを含み得るが、これに限定されない。本発明の組成物に組み込むために適した膨潤性および／または粘膜付着特性を有する親水性ポリマーとしては、ポリアルキレンオキシド；セルロースポリマー；アクリル酸およびメタクリル酸ポリマー、およびそれらのエステル、無水マレイン酸ポリマー；ポリマレイン酸；ポリ（アクリルアミド）；ポリ（オレフィンアルコール）；ポリ（Ｎ−ビニルラクタム）；ポリオール；ポリオキシエチル化糖類；ポリオキサゾリン；ポリビニルアミン；ポリビニルアセテート；ポリイミン；デンプンおよびデンプン系ポリマー；ポリウレタンヒドロゲル；キトサン；多糖類ガム；ゼイン；シェラック系ポリマー；ポリエチレンオキシド、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、メチルセルロース、ポリアクリル酸、マルトデキストリン、アルファ化デンプン、およびポリビニルアルコール、それらのコポリマーおよび混合物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２５６】
組成物からの活性成分の放出は、それらの放出遅延特性について製薬分野で周知の賦形剤を含む適切な遅延剤の使用によって達成することができる。そのような放出遅延剤の例として、ポリマー放出遅延剤、非ポリマー放出遅延剤、またはそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２５７】
本発明の目的に用いられるポリマー放出遅延剤としては、セルロース誘導体；多価アルコール；糖類、ガム、およびそれらの誘導体；ビニル誘導体、ポリマー、コポリマー、またはそれらの混合物；マレイン酸コポリマー；ポリアルキレンオキシドまたはそのコポリマー；アクリル酸ポリマーおよびアクリル酸誘導体；またはそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。セルロース誘導体としては、エチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、またはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。多価アルコールとしては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）またはポリプロピレングリコール、またはそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。糖類、ガム、およびそれらの誘導体としては、デキストリン、ポリデキストリン、デキストラン、ペクチンおよびペクチン誘導体、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、デンプン、ヒドロキシプロピルデンプン、グアーガム、ローカストビーンガム、キサンタンガム、カラヤガム、トラガカントガム、カラギーナン、アカシアガム、アラビアガム、フェヌグリーク繊維、もしくはゲランガム等、またはそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。ビニル誘導体、ポリマー、コポリマー、またはそれらの混合物としては、ポリビニルアセテート、ポリビニルアルコール、ポリビニルアセテート（８部ｗ／ｗ）、およびポリビニルピロリドン（２部ｗ／ｗ）の混合物（Ｋｏｌｌｉｄｏｎ  ＳＲ）、ビニルピロリドンのコポリマー、ビニルアセテートコポリマー、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、またはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。ポリアルキレンオキシドまたはそのコポリマーとしては、ポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシド、ポリ（オキシエチレン）−ポリ（オキシプロピレン）ブロックコポリマー（ポロキサマー）、またはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。マレイン酸コポリマーとしては、ビニルアセテート無水マレイン酸コポリマー、ブチルアクリレートスチレン無水マレイン酸コポリマー等、またはそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。アクリル酸ポリマーおよびアクリル酸誘導体としては、カルボマー、メタクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリアクリレート、ポリメタクリレート等、またはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。ポリメタクリレートとしては、ａ）メタクリル酸、メタクリル酸エステル、アクリル酸、およびアクリル酸エステルから選択されるモノマーから形成されるコポリマー、ｃ）エチルアクリレート、メチルメタクリレート、およびトリメチルアンモニオエチルメタクリレートクロリド等から選択されるモノマーから形成されるコポリマー、またはそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。本発明の目的に用いられる非ポリマー性放出遅延剤としては、脂肪、油、蝋、脂肪酸、脂���酸エステル、長鎖一価アルコール、およびそれらのエステル、またはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。実施形態では、本発明で用いられる非ポリマー放出遅延剤としては、Ｃｕｔｉｎａ（水素化ヒマシ油）、Ｈｙｄｒｏｂａｓｅ（水素化大豆油）、Ｃａｓｔｏｒｗａｘ（水素化ヒマシ油）、Ｃｒｏｄｕｒｅｔ（水素化ヒマシ油）、Ｃａｒｂｏｗａｘ、Ｃｏｍｐｒｉｔｏｌ（ベヘン酸グリセリル）、Ｓｔｅｒｏｔｅｘ（水素化綿実油）、Ｌｕｂｒｉｔａｂ（水素化綿実油）、Ａｐｉｆｉｌ（黄色の蝋）、Ａｋｏｆｉｎｅ（水素化綿実油）、Ｓｏｆｔｔｉｓａｎ（水素化パーム油）、Ｈｙｄｒｏｃｏｔｅ（水素化大豆油）、Ｃｏｒｏｎａ（ラノリン）Ｇｅｌｕｃｉｒｅ（マクロゴールグリセリドラウリク）、Ｐｒｅｃｉｒｏｌ（パルミトステアリン酸グリセリル）、Ｅｍｕｌｃｉｒｅ（セチルアルコール）、プルロールジイソステアリク（ジイソステアリン酸ポリグリセリル）、およびＧｅｌｅｏｌ（ステアリン酸グリセリル）、ならびにそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２５８】
本発明の胃内滞留性組成物は、モノリシックもしくは多層の剤形またはインレイ系などの形態であってもよいが、これらに限定されない。本発明の一実施形態では、胃内滞留性組成物は、二層または三層の固体剤形の形態である。例示的な実施形態では、経口投与のための膨張性二層系の形態の固体医薬組成物は、胃腸管に到達した直後に第１の層から活性医薬成分を送達し、第２の層と同じであっても異なっていてもよいさらなる医薬剤を、特定の期間にわたって修正された様式で送達するように適合される。第２の層は、組成物中で膨張するように配合されてよく、それによって胃における組成物の保持を延長する。
【０２５９】
さらなる例示的な実施形態では、経口投与のための固体医薬組成物は、２つの層を含み、一方の層は、適切な放出遅延剤とともに活性成分を含み、もう一方の層は、他の賦形剤と組み合わせて膨潤剤を含む。本発明の別の実施形態では、経口投与のための固体医薬組成物は、胃内滞留を確実にする賦形剤を含む第２の錠剤の内部に配置された活性成分（複数可）を含有する第１の錠剤を含む特殊な剤形である、インレイ系を含有する。この系では、活性成分を含有する錠剤は小さく、少なくとも片側を除いた全ての面が膨潤性ポリマーもしくは浮遊系、または両方を含む賦形剤のブレンドで被覆され、胃内滞留を確実にする。
【０２６０】
本発明のさらに別の実施形態では、剤形は任意にコーティングされてもよい。表面コーティングは、感覚刺激目的のため（特に、臭いもしくは不快な味を有するチオールもしくはジスルフィド）、薬物標識目的のため（例えば、剤形のための色分けシステム）、美容目的のため、圧縮された剤形を寸法的に安定化するため、または薬物放出を遅延させるために用いることができる。表面コーティングは、経腸的使用に適した任意の従来のコーティングであってもよい。コーティングは、従来の成分を用いる任意の従来技術を使用して行うことができる。表面コーティングは、例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルアルコール、ポリメタクリレート等であるが、これらに限定されない従来のポリマーを使用する速溶性フィルムを使用して得ることができる。コーティング賦形剤およびそれらを使用するための方法は、当該分野において周知である。例えば、ＭｃＧｉｎｉｔｙ，Ｊａｍｅｓ  Ｗ．およびＬｉｎｄａ  Ａ．Ｆｅｌｔｏｎ、Ａｑｕｅｏｕｓ  Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｃｏａｔｉｎｇｓ  ｆｏｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ，第３版，Ｉｎｆｏｒｍａ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，２００８を参照されたい。
【０２６１】
さらに、本発明の別の実施形態では、組成物は、腸管内でより長い滞留時間を必要とする活性剤を効果的に送達するために、腸内での長期通過を有する、ペレット、マイクロスフェア、マイクロカプセル、マイクロビーズ、マイクロ粒子、またはナノ粒子が挙げられるが、これらに限定されない。多微粒子系は、（ｉ）生体付着性もしくは粘膜付着性であってよく、それにより胃腸管通過を遅延させるか、または（ｉｉ）胃内容物の上に浮遊し、任意にゲル様層を形成することができるか、または（ｉｉｉ）ｐＨ感受性外層もしくは小腸の軽度の酸性環境において、または回腸の中性からわずかに塩基性の環境（典型的には最高ｐＨを有する腸セグメント）において溶解する層でコーティングされ得るか、または（ｉｖ）は、ヒト酵素によって消化されないが、腸内細菌によって産生される酵素によって消化され、遠位回腸および結腸での薬物放出につながる薬物を含有するポリマーを使用して形成されてもよい。実施形態では、本発明の組成物は、多微粒子の形態で、胃内滞留性である。そのような多粒子系は、ペレット化、造粒、噴霧乾燥、噴霧凝結等を含むが、これらに限定されない方法によって調製することができる。
【０２６２】
適切な高分子放出制御剤を、本発明の組成物に用いることができる。一実施形態では、ポリマー放出制御剤は、ｐＨ非依存性またはｐＨ依存性またはそれらの任意の組み合わせである。別の実施形態では、本発明の組成物に用いられるポリマー放出制御剤は、膨潤または非膨潤であり得る。さらなる実施形態では、本発明の組成物に用いることができるポリマー放出制御剤としては、セルロース誘導体、糖類もしくは多糖類、ポリ（オキシエチレン）−ポリ（オキシプロピレン）ブロックコポリマー（ポロキサマー）、ビニル誘導体またはそのポリマーもしくはコポリマー、ポリアルキレンオキシドおよびその誘導体、マレイン酸コポリマー、アクリル酸誘導体等、またはそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２６３】
経口使用のための制御放出組成物は、活性薬物物質の溶解および／または拡散を制御することによって活性薬物を放出するように構築されてもよい。制御放出を得て、それによって血漿濃度対時間プロファイルを最適化するために、多くの戦略のうちのいずれかを遂行することができる。一例では、制御放出は、例えば、様々な種類の制御放出組成物およびコーティングを含む、様々な製剤パラメータおよび成分の適切な選択によって得られる。したがって、薬物は、適切な賦形剤とともに、投与時に制御された様式で薬物を放出する医薬組成物に配合される。例としては、単一または複数の単位錠剤またはカプセル組成物、油性溶液、液体、懸濁液、乳液、マイクロカプセル、マイクロスフェア、ナノ粒子、粉末、および顆粒が挙げられる。ある特定の実施形態では、組成物は、生分解性、ｐＨ、および／または温度感受性ポリマーコーティングを含む。
【０２６４】
溶解または拡散制御放出は、化合物の錠剤、カプセル、ペレット、もしくは顆粒製剤の適切なコーティングによって、または化合物を適切なマトリックスに組み込むことによって達成することができる。制御放出コーティングとしては、上述のコーティング物質のうちの１つ以上、および／または例えば、シェラック、蜜蝋、グリコワックス（ｇｌｙｃｏｗａｘ）、ヒマシ油蝋、カルナウバ蝋、ステアリルアルコール、モノステアリン酸グリセリル、ジステアリン酸グリセリル、パルミトステアリン酸グリセロール、エチルセルロース、アクリル樹脂、ジ−ポリ乳酸、酢酸酪酸セルロース、ポリビニルクロリド、ポリビニルアセテート、ビニルピロリドン、ポリエチレン、ポリメタクリレート、メチルメタクリレート、２−ヒドロキシメタクリレート、メタクリレートヒドロゲル、１，３−ブチレングリコール、エチレングリコールメタクリレート、および／またはポリエチレングリコールを挙げることができる。制御放出マトリックス製剤において、マトリックス材料として、例えば、水和メチルセルロース、カルナウバ蝋、およびステアリルアルコール、カルボポール９３４、シリコーン、グリセリルトリステアレート、メチルアクリレート−メチルメタクリレート、ポリビニルクロリド、ポリエチレン、および／またはハロゲン化フルオロカーボンを挙げることもできる。
【０２６５】
あるいは、ある特定のシステアミン前駆体、またはインビボでのシステアミンの生成または吸収の促進剤を配合し、医療用食品として投与してもよい。医療用食品は、薬物ではなく食品としてＵＳ  ＦＤＡによって規制されている。医療用食品を配合するための方法は、当該分野において知られている。食品または飲料中の活性化合物を調製および投与するための方法の説明については、例えば、米国特許公開第２０１０／０２６１７９１号を参照されたい。オランダに本拠を置く医療食品会社であるＮｕｔｒａｃｉａは、薬理学的に活性な薬剤を食品または飲料と組み合わせる方法を記載した２５０以上の特許出願および特許を有している。
【０２６６】
コーティング
本発明の錠剤またはカプセルなどの経口送達用に配合された医薬組成物は、遅延放出または延長放出の利点をもたらす剤形を提供するためにコーティングまたは他の方法で化合することができる。コーティングは、（例えば、制御放出製剤を達成するために）所定のパターンで活性薬物物質を放出するように適合させることができるか、または例えば、腸溶性コーティング（例えば、ｐＨ感受性であるポリマー（「ｐＨ制御放出」）、緩慢またはｐＨ依存的膨潤速度、溶解または浸食を有するポリマー（「時間制御放出」）、酵素によって分解されるポリマー（「酵素制御放出」または「生分解性放出」）、および圧力の増加によって破壊される強固な層を形成するポリマー（「圧力制御放出」））の使用によって胃の通過後まで活性薬物物質を放出しないように適合されてもよい。本明細書に説明される医薬組成物に使用できる例示的な腸溶性コーティングとして、糖コーティング、フィルムコーティング（例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、メチルヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、アクリレートコポリマー、ポリエチレングリコール、および／またはポリビニルピロリドンに基づく）、またはメタクリル酸コポリマー、セルロースアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート、ポリビニルアセテートフタレート、シェラック、および／またはエチルセルロースに基づくコーティングが挙げられる。さらに、例えば、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルなどの時間遅延材料を用いてもよい。
【０２６７】
例えば、錠剤またはカプセルは、内部投与量成分および外部投与量成分を含むことができ、後者は、前者に対してエンベロープの形態である。２つの成分は、胃内の崩壊に抵抗し、内部成分が十二指腸に無傷で通過するか、または放出が遅れることを可能にする腸溶層によって分離することができる。
【０２６８】
腸溶性コーティングが使用される場合、望ましくは、実質的な量の薬物が下部胃腸管で放出される。あるいは、漏出性腸溶性コーティングを使用して、即時放出製剤と遅延放出製剤の中間の放出プロファイルを提供することができる。例えば、米国特許出願第２００８／００２００４１（Ａ１）号は、腸液に接触すると放出される残りの成分とともに、胃液と接触すると有効成分の少なくとも一部を放出する腸溶性材料でコーティングされた医薬製剤を開示する。
【０２６９】
遅延放出または延長放出をもたらすコーティングに加えて、固体錠剤組成物は、望ましくない化学変化（例えば、活性薬物物質の放出前の化学分解）から組成物を保護するように適合されたコーティングを含み得る。コーティングは、Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、第５および６巻、ＳｗａｒｂｒｉｃｋおよびＢｏｙｌａｎｄ編、２０００、に説明されているものと同様の方法で固体剤形に適用することができる。
【０２７０】
制御放出製剤の場合、組成物の活性成分は、小腸における放出の標的とされ得る。製剤は、組成物が胃で見出される低いｐＨ環境に耐性があるが、小腸のより高いｐＨ環境に感受性であるように腸溶性コーティングを含み得る。小腸における活性成分の放出を制御するために、多粒子製剤を用いて、活性成分の同時放出を防止してもよい。多粒子組成物は、微晶質セルロース系ゲルに分散されたシステアミン前駆体またはその塩を含む疎水性相、およびヒドロゲルを含有する親水性相を含む、複数の個々の腸溶性コーティングされたコアを含んでもよい。微晶質セルロース（ＭＣＣ）は、コアが腸内で溶解または侵食されている間に、システアミン前駆体またはその塩の放出制御ポリマーとして機能し、用量ダンピングを防止し、システアミン前駆体またはその塩を安定化する。コアまたはコーティング層中の賦形剤に関して異なる２つ以上の多粒子組成物は、より長い期間にわたって活性成分（例えば、システアミン前駆体）を放出するように、１つの医薬組成物（例えば、カプセル、粉末、または液体）に複合されてもよい。あるいは、２つ以上の微粒子のバッチにおいて異なる濃度の賦形剤を使用し、次いで、標的化薬物放出プロファイルをもたらすように選択された比（例えば、１：１）で異なるバッチからの微粒子を組み合わせることによって、同じ効果を達成することができる。
【０２７１】
この組成物は、約１５％ｗ／ｗ〜約７０％ｗ／ｗのシステアミン前駆体またはその塩、約２５％ｗ／ｗ〜約７５％ｗ／ｗの微晶質セルロース、および約２％ｗ／ｗ〜約１５％ｗ／ｗのメチルセルロースを含み、％ｗ／ｗは、腸溶性コーティングされたコアの％ｗ／ｗである。
【０２７２】
場合によって、タンパク質性サブコーティング層は、システアミン前駆体またはその塩の安定性をさらに高めるため、個々のコアを覆い、個々のコアをそれぞれの腸溶性コーティングから分離する連続的なタンパク質性サブコーティング層を含むことが有利であり得る。連続的なタンパク質性サブコーティングは、システアミン前駆体またはその塩が腸溶性コーティングと混合するのを防止するように適合される。いくつかの好ましいタンパク質性サブコーティングは以下の属性を有する：サブコーティングは、コアに付着したゼラチンフィルムを含むことができ、および／またはサブコーティングは、乾燥タンパク質性ゲルを含むことができる。
【０２７３】
特定の実施形態では、腸溶性コーティングされたコアは、０．１Ｎ  ＨＣｌ溶液中に置かれた約２時間以内に約２０％以下のシステアミン前駆体またはその塩を放出し、その後、実質的に中性のｐＨ環境に置かれた約８時間以内に、約８５％以上のシステアミン前駆体またはその塩を放出する。
【０２７４】
好ましくは、腸溶性コーティングされたコアは、回転楕円体であり、直径３ｍｍ以下である。
【０２７５】
別々に投与された組成物の胃での付着を防止するために、本発明の組成物は、抗付着剤でコーティングすることができる。抗付着剤はまた、微粒子が互いに粘着するのを防止するために使用されてもよい。例えば、組成物は、微晶質セルロース粉末の薄い最外層で被覆されていてもよい。あるいは、胃液に不溶であるが透過性および膨潤性のポリマーでコーティングすることによって付着を防止することができる。例えば、３０％ポリアクリレート分散液（例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＮＥ３０Ｄ、Ｅｖｏｎｉｋ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ）は、胃における浮遊性ミニ錠剤の付着を防止することが示されている（Ｒｏｕｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ４３：１６５（１９９７）を参照）。
【０２７６】
腸溶性コーティングに使用される列挙された賦形剤の市販形態としては、例えば、種々のブランドのポリメタクリレート（アミノメタクリレートコポリマー、アンモニオメタクリレートコポリマー、エチルアクリレートコポリマー分散物、メチルメタクリレートコポリマー分散物、メタクリル酸コポリマー、およびメタクリル酸コポリマー分散物を含む、化学的に均一な化合物群）が挙げられ、これらは、Ａｓｈｌａｎｄ，ＢＡＳＦ  Ｆｉｎｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｋｏｌｌｉｃｏａｔ製品ライン）、ＣｏｌｏｒＣｏｎ（Ａｃｒｙｌ−ＥＺＥ製品ライン）、Ｅａｓｔｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ（Ｅａｓｔａｃｒｙｌ製品ライン）、およびＥｖｏｎｉｋ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ（Ｅｕｄｒａｇｉｔ製品ライン）を含むが、これらに限定されない企業によって製品ラインとして販売されている。
【０２７７】
回腸および結腸の薬物放出のための製剤
いくつかの実施形態では、回腸および／または結腸標的製剤を使用して、システアミン前駆体を遠位回腸および結腸に送達することができる。（「結腸標的」という用語は、回腸標的製剤および結腸標的製剤の両方を指すために本明細書で使用される。回腸内で薬物を放出し始めるいずれの組成物もまた、結腸内で薬物を放出する可能性があり、回腸で放出されるいくつかの薬物は、結腸に達する可能性がある）。結腸標的組成物の薬物送達の利点には、大腸の上皮との長期の接触および部位特異的送達のために利用できる結腸細菌の存在が含まれる。
【０２７８】
薬物動態の観点から、システアミンの結腸吸収は、その極めて短い半減期に起因して、血中レベルを治療範囲内で維持するために胃腸管で連続的に産生（および吸収）されなければならないため望ましい。摂取した医薬組成物（そうでなければ胃内滞留性組成物）は、絶食状態で摂取した場合、摂取後３〜５時間（平均して、ほとんどの対象において）、または食品とともに摂取した後６〜１０時間（平均して、ほとんどの対象において）で結腸に到着し得る。その剤形が結腸に到達した後に血液システアミンレベルを治療範囲内で維持する唯一の方法は、システアミンが生成され、結腸に吸収されることを確実にすることである。小腸内に放出されたいくつかのシステアミン前駆体は、結腸にそのまま入り、結腸でシステアミンに分解され得る。しかしながら、結腸での強固なシステアミン生成を提供するために、システアミン前駆体は、結腸（または回腸）で放出されるように配合されるべきであり、そこでシステアミンに分解されて吸収され得る。結腸標的組成物は、システアミン感受性疾患の治療法として単独で使用することを意図するものではなく、むしろ胃腸管の他の領域に向けた製剤を補完するものである。
【０２７９】
結腸標的送達に対する２つのアプローチが広範に開発されており、以下に説明する。
【０２８０】
第１のアプローチは、腸内細菌によって結腸内で産生された酵素の利用を含む。腸内細菌は、唾液、胃液、腸液、または膵液中に存在するヒト酵素によって消化されない種々のポリマーを消化することができる。そのようなポリマーを含有する医薬組成物は、消化することができず、したがって、ポリマーと混和された有効成分は、それらが遠位回腸（細菌の密度が上昇し始める）または結腸（結腸内容物の１ミリリットルあたり１兆個の細菌が存在し得る）における腸内細菌によって産生された酵素に遭遇するまで逃げることができない。
【０２８１】
システアミン前駆体および／または他の有効成分（例えば、インビボシステアミン生成または吸収の促進剤）は、薬物放出を遅延させ、腸内細菌によって産生される酵素によってのみ（ヒト胃腸管において）消化可能であるポリマーと混合することができる。腸内細菌による選択的分解に基づく結腸標的薬物送達に使用されるポリマーには、デキストランヒドロゲル（Ｈｏｖｇａａｒｄ，Ｌ．およびＨ．Ｂｒｏｎｄｓｔｅｄ，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ＲｅＩ．３６：１５９（１９９５））、架橋コンドロイチン（Ｒｕｂｉｎｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．９：２７６（１９９２））、およびアゾ芳香族部分を含有するヒドロゲル（Ｂｒｏｎｄｓｔｅｄ，Ｈ．およびＪ．Ｋｏｐｏｅｃｅｋ，Ｐｈａｒｍ  Ｒｅｓ．９：１５４０（１９９２）、ならびにＹｅｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ＲｅＩ．３６：１０９（１９９５））が含まれる。
【０２８２】
胃および小腸で安定な前駆体を形成し、腸内微生物叢による酵素切断の際に大腸内で薬物を放出する担体との薬物の共有結合；これらの前駆体の例として、アゾ複合体、シクロデキストリン複合体、グリコシド複合体、グルクロン酸塩複合体、デキストラン複合体、ポリペプチドおよびポリマー複合体が挙げられる。基本原理は、薬物と担体とを連結する共有結合が、ヒト酵素によって消化不可能であるが、腸内細菌酵素によって消化可能でなければならないということである。
【０２８３】
第２のアプローチは、胃腸管の他の部分に対して、回腸での高いｐＨの利用を含む。健康な対象では、胃腸管のｐＨは、十二指腸（近位から遠位十二指腸までおよそｐＨ５．５〜６．６）から回腸末端（およそｐＨ７〜７．５）まで増加し、次いで盲腸で減少し（ｐＨ約６．４）、結腸の右側から左側に向かって最終値約ｐＨ７まで再び増加する。
【０２８４】
組成物は、中性から軽度アルカリ性ｐＨ（例えば、ｐＨ６．５以上、ｐＨ６．８以上、またはｐＨ７以上）でのみ溶解するｐＨ感受性ポリマーでコーティングすることができる。ｐＨ感受性コーティングの下には、持続放出製剤があり、そこから薬物が、拡散、浸食、または組み合わせによって徐々に放出される。このアプローチは、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，９００，２５２号に説明されている。
【０２８５】
腸内細菌およびｐＨに基づく結腸標的法を組み合わせることができる。例えば、Ｎａｅｅｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｌｌｏｉｄｓ  Ｓｕｒｆ  Ｂ  Ｂｉｏｉｎｔｅｒｆａｃｅｓ  Ｓ０９２７（２０１４）を参照されたい。この研究では、細菌消化性ポリマーを使用して形成されたコーティングされたナノ粒子が説明されている。薬物を含有する液体で充填したカプセルを結腸に送達するためのｐＨおよび細菌酵素消化を組み合わせた別の技術は、米国特許公開第２００７／０２４３２５３号に説明されており、デンプン、アミロース、アミロペクチン、キトサン、硫酸コンドロイチン、シクロデキストリン、デキストラン、プルラン、カラギーナン、スクレログルカン、キチン、クルデュラン、およびレバンを含むポリマーを、約ｐＨ５以上で溶解するｐＨ感受性コーティングと一緒に利用する製剤を開示している。
【０２８６】
結腸標的薬物送達のための他のアプローチは、（ｉ）マルチコーティング製剤が胃を通過すると外皮が溶解し始め、コーティングの厚さおよび組成に基づいて、ほぼ小腸の通過時間である３〜５時間のラグタイム後に薬物が放出される、時間放出系、（ｉｉ）アゾ−およびジスルフィドポリマーの組み合わせが、結腸の低酸化還元電位に応答して薬物放出を提供する、酸化還元感受性ポリマー、（ｉｉｉ）結腸粘膜に選択的に付着し、剤形の通過を遅らせて薬物が薬物を放出することを可能にする、生体付着性ポリマー、および／または（ｉｖ）薬物が浸透圧のために半透膜を介して放出される、浸透圧制御薬物送達を用いる。
【０２８７】
Ｄａｖｉｄ  Ｒ．Ｆｒｉｅｎｄによる書籍「Ｏｒａｌ  Ｃｏｌｏｎ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ」（ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，１９９２）は、デキストランベースの送達系、グリコシド／グリコシダーゼベースの送達、アゾ結合プロドラッグ、ヒドロキシプロピルメタクリルアミドコポリマー、および結腸送達のための他のマトリックスなどの、より古い結腸標的方法（それらのうち多くは依然として有用である）を提供し、概説している。結腸標的薬物送達は、より最近では、例えば、Ｂａｎｓａｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｏｌｉｍ  Ｍｅｄ．４４：１０９（２０１４）によって概説されている。最近のアプローチとしては、腸内細菌によって産生される酵素によってのみ消化可能な新規ポリマーの使用が挙げられ、様々な植物に見られる天然ポリマー、ならびにマイクロビーズ、ナノ粒子、および他の微粒子が含まれる。
【０２８８】
治療方法
本発明は、システアミン感受性疾患および障害を治療するために有用な新規の組成物および方法に関する。治療は、胃腸管でシステアミンに変換可能なシステアミン前駆体の経口投与を必要とする。重要なクラスのシステアミン前駆体は、インビボで還元すると２つのチオールを提供する混合ジスルフィドである。両方のチオールが、インビボでシステアミンに変換可能であり得るか、または１つだけであってもよい。両方のチオールがシステアミンに変換可能であるシステアミン前駆体は、シスチン症、嚢胞性線維症、マラリア、ならびにウイルスおよび細菌感染症を含む疾患の治療剤の好ましいクラスである。そのような混合ジスルフィドの非限定的な例としては、システアミン−パンテテインおよびシステアミン−４−ホスホパンテテインが挙げられる。
【０２８９】
いくつかの他の疾患では、システアミンに変換可能でない第２のチオールを選択して、システアミンの治療効果を補完または増強することができる。ある特定の実施形態では、神経変性および精神神経疾患の治療のための混合ジスルフィドシステアミン前駆体として、以下のＮ−アセチルシステイン、システインメチルエステル、システインエチルエステル、ガンマグルタミルシステイン、ガンマグルタミルシステインエチルエステル、ホモシステイン、システイン、およびジヒドロリポ酸の群からの第２のチオールが挙げられる。
【０２９０】
混合ジスルフィドシステアミン前駆体の組み合わせは、特定の疾患の病態生理に対処すること、または疾患状態、疾患活性、薬物代謝、もしくは薬物感受性における患者間の変動を説明するように治療レジメンを調整することにおけるさらなる柔軟性をもたらす。例えば、両方のチオールがインビボでシステアミンに変換可能な混合ジスルフィドは、ただ１つのチオールがインビボでシステアミンに変換可能な混合ジスルフィドと同時投与されてもよい。２種類の混合ジスルフィドの比は、約１：１から約１：１０まで変化してもよい。
【０２９１】
システアミン前駆体は、（ｉ）前駆体のシステアミンへのインビボ変換、および（ｉｉ）その後の腸細胞によるシステアミンの吸収に必要な生化学的プロセスを促進する薬剤と同時投与することができる。そのような促進剤は、特定の疾患におけるシステアミン前駆体の治療効果を増大または補完するために、または特定の患者のための治療レジメンを個別化するために選択および投与され得る。例えば、ジスルフィドシステアミン前駆体を、ジスルフィド結合の還元を促進する還元剤と同時投与することができる。還元剤は、チオールグルタチオン、システイン、ホモシステイン、ガンマ−グルタミルシステインなどの生理学的化合物であってもよく、またはそれらの化合物のうちの１つの類似体、例えばＮ−アセチルシステイン、システインメチルエステル、システインエチルエステル、もしくはガンマグルタミルシステインエチルエステルなどであってもよく、またはジヒドロリポ酸などのジチオール、もしくはビタミンＣ（アスコルビン酸）などの非チオール還元剤であってもよい。
【０２９２】
本発明の混合ジスルフィドから放出されたシステアミンおよび他のチオールは、いくつかの機序のうちのいずれかを介して治療効果を提供し得る。
【０２９３】
システアミンは、（ｉ）酸化防止剤、（ｉｉ）還元剤およびチオール−ジスルフィド交換の参与剤、（ｉｉｉ）酵素阻害剤、ならびに（ｉｖ）銅キレート化剤を含む、体内で多面的な化学的および薬理学的効果を有する。システアミンはまた、ある特定の疾患関連化学物質およびタンパク質の血漿レベルを調節する。例えば、システアミンは、（ｖ）その高いレベルが心臓疾患およびアテローム性動脈硬化症と関連している、トリグリセリドおよび低密度リポタンパク質関連コレステロールを低下させ、（ｖｉ）その高いレベルが代謝性症候群および他の疾患と関連している、総アディポネクチンならびにアディポネクチン多量体の相対存在量を低下させる。システアミンはまた、（ｖ）抗寄生虫、（ｖｉ）抗細菌、および（ｖｉｉ）抗ウイルス作用、ならびに（ｖｉｉｉ）抗線維化作用を有し、全て不確実な機序を介する。
（ｉ）システアミンは、還元基を提供することによって、反応性酸素種（ＲＯＳ）を中和する抗酸化剤として直接作用することができる。
（ｉｉ）システアミンは、体内の主要な抗酸化物質であるグルタチオン（ＧＳＨ）、ならびに血清中および胃腸管中の重要な抗酸化物質であるシステインを含む、他の生理学的抗酸化物質のレベルを高めることができる。システアミンの抗酸化剤およびＧＳＨ回復特性は、高レベルの酸化脂質、タンパク質、または小分子（しばしば低レベルのＧＳＨを伴う）が病因に寄与する広範囲の疾患に関連する。異常酸化産物が寄与因子である疾患として、神経変性疾患、嚢胞性線維症、およびＨＩＶ感染症と関連した免疫機能不全が挙げられる（Ｈｅｒｚｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．９４：１９６７（１９９７）、およびＢｈａｓｋａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  ＢｉｏｌＣｈｅｍ．２９０：１０２０（２０１５）を参照）。トリペプチドであるＧＳＨは、腸内のプロテアーゼによってその構成体アミノ酸に分解される。したがって、経口ＧＳＨは、体内にＧＳＨを送達する効率的な方法ではない。システアミン療法は、ＧＳＨレベルを高める効果的な方法である。
（ｉｉｉ）システアミンは、ジスルフィドおよびシステイン含有ジスルフィド（シスチンを含む）を含有するグルタチオンとのチオール−ジスルフィド交換反応を化学的に減少させるか、またはそれに参与し、それにより遊離グルタチオンおよびシステインを産生し、順に他の酸化化合物を還元するか、または反応性酸素種を中和することができる。遊離システイン（例えば、システアミン−シスチン交換から生成される）もまた、グルタチオン合成に利用することができる。遊離シスチンおよびシステインとのチオール−ジスルフィド交換を促進することに加えて、システアミンはまた、細胞性抗酸化物質防御機序を制御する様々な酸化還元感知タンパク質を含む、タンパク質中のシスチンおよびシステイニル残基と相互作用することができる。システアミンはまた、システインおよびシステイン−システアミン混合ジスルフィド（両方が機能的シスチノシン遺伝子が存在しない場合にリソソームを出ることができる）を形成するリソソームシスチンとのチオール−ジスルフィド交換反応を介して、シスチン症における病理学的シスチン蓄積を阻害する。（システイン−システアミンジスルフィドは、ＰＱＬＣ２遺伝子によってコードされるリジン／ヘプタヘリカルタンパク質輸送体によって輸送される）。
（ｉｖ）システアミンは、ハンチントン病の病因に関与する細胞質酵素である組織トランスグルタミナーゼ（トランスグルタミナーゼ２またはＴＧ２とも呼ばれる）を阻害する。２つのシステアミンのジスルフィドであるシスタミンもまた、ＴＧ２阻害剤であり、ハンチントン病モデルではシステアミンよりも広範に試験されている。しかしながら、細胞質の強い還元環境では、実質的に全てのシスタミンがシステアミンに還元される。したがって、システアミンは、シスタミンの活性型である可能性が高い（Ｊｅｉｔｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．６９：９６１（２００５）を参照）。シスタミンは、ハンチントン病のいくつかのマウスモデルにおいて運動機能を改善し、寿命を延ばす。これらの有益な効果は、シスタミン治療により増加する脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）によって媒介され得る。シスタミンはまた、細胞質酵素カスパーゼ−３を阻害し、これもシステアミン生成による可能性が高い。ハンチントン病遺伝子の異常な病原体であるハンチンチンは、カスパーゼ−３の活性化を誘導し、その結果、培養細胞におけるミトコンドリアからのシトクロームｃの放出をもたらし、最終的にアポトーシスにつながる。高濃度（例えば、２５ミリモル）で、システアミンはまた、血管新生、創傷治癒、および組織リモデリングにおいて生理学的役割を果たす亜鉛依存性エンドペプチダーゼの群であるマトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）を阻害する。ＭＭＰは、いくつかの癌において過剰発現され、細胞外マトリックスを分解することによって浸潤および転移に寄与する。システアミンは、インビトロでの膵臓癌細胞による移動および浸潤、ならびにインビボでの膵臓癌異種移植の増殖を阻害する（Ｆｕｊｉｓａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ．７：ｅ３４４３７（２０１２））。
（ｖ）システアミンは、いくつかの他のチオールと同様に、強力な銅キレート剤であり、疾患関連腎不全の結果として既に低い銅およびセルロプラスミンレベルを有する一部のシスチン症患者において主要な副作用の原因となり得る。しかしながら、銅キレート化は、神経変性疾患、例えばアルツハイマー病において治療的に有益であり得る。
（ｖｉ）システアミンは、慢性腎臓疾患の２つのマウスモデルにおいて、酸化タンパク質のレベルを低減し、ＴＧＦ−ベータ非依存性機序を介して筋線維芽細胞の増殖を阻害する。筋線維芽細胞は、コラーゲンを含む細胞外マトリックスを産生し、異常な筋線維芽細胞の増殖は、腎臓の疾患（例えば、アルポート病、局所分節性糸球体硬化症）、肺（例えば、嚢胞性肺線維症、慢性閉塞性肺疾患）および肝臓（例えば、非アルコール性脂肪肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎およびアルコール性脂肪性肝炎）を含む、多様な慢性線維性疾患における瘢痕化、収縮および器官機能の喪失と関連している。
（ｖｉｉ）システアミンは、宿主の炎症反応を不都合に調節することなく、インビトロおよびマラリアのマウスモデルの両方において、マラリア（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  Ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）を引き起こす寄生虫の増殖を阻害する。システアミン前駆体パンテチンの投与は、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｂｅｒｇｈｅｉ  ＡＮＫＡ株に感染したマウスの脳症候群を予防する。システアミンはまた、抗マラリア薬の治療的に重要なアルテミシニンファミリーを増強する。いくつかの実施形態では、新生アルテミシニン耐性Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ株および脳マラリアを含む、アルテミシニン−システアミン前駆体の組み合わせを用いてマラリアを治療する。マラリアの治療のための好ましいシステアミン前駆体は、２つのシステアミンが生成され得るものであり、すなわち還元時に生成されるチオールの両方がシステアミンに変換可能なジスルフィドシステアミン前駆体である。例示的なジスルフィドシステアミン前駆体には、システアミンとパンテテインまたはシステアミンと４−ホスホパンテテインとを接合させることによって形成されるものが含まれる。ジスルフィドシステアミン前駆体と同時投与されるジスルフィド結合の還元の好ましい促進剤としては、チオールパンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、および補酵素Ａが含まれ、それらの各々はシステアミン前駆体である。
（ｖｉｉｉ）システアミンは、脂肪細胞によって産生されるシグナル伝達分子であるアディポネクチンの多量体化を促進する。低レベルのアディポネクチンは、インスリン耐性および炎症と関連し、Ｉ型およびＩＩ型糖尿病の両方の病因に寄与し得る。高分子量アディポネクチンは、インスリンシグナル伝達を仲介するのに役立ち得る。２４週間にわたってシステアミンで治療された非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）は、高分子量アディポネクチン多量体のレベルが増加した。システアミンは、糖尿病などのインスリン耐性代謝疾患を含む、低アディポネクチンレベルと関連した症状において治療的に有用であり得る。総アディポネクチンに加えて、アディポネクチン多量体の分布は、独立して、個体および集団間の代謝特性の変動性を説明することができる。
（ｉｘ）システアミンは、多面的な抗ウイルス効果を有する。例えば、それは、感染性ウイルス粒子の産生を干渉することによって、プロウイルスＤＮＡ形成を遮断することによって、またはタンパク質のシステイン残基との混合ジスルフィドを形成することによって、ＨＩＶ複製を阻害することができ、それにより細胞膜のジスルフィド架橋構造を改変し、ウイルスの吸着を制限する。システアミンはまた、Ｈ５Ｎ１、Ｈ１Ｎ２、Ｈ２Ｎ２、Ｈ３Ｎ２、Ｈ３Ｎ８、Ｈ５Ｎ１、Ｈ５Ｎ２、Ｈ５Ｎ３、Ｈ５Ｎ８、Ｈ５Ｎ９、Ｈ７Ｎ１、Ｈ７Ｎ２、Ｈ７Ｎ３、Ｈ７Ｎ４、Ｈ７Ｎ７、Ｈ９Ｎ２およびＨ１０Ｎ７などの鳥インフルエンザウイルス亜型を含む、インフルエンザウイルスＡ型、Ｂ型およびＣ型の増殖を阻害することができる。システアミンはまた、スペイン、アジア、および香港インフルエンザウイルス株、ならびにブタ、ウマ、およびイヌインフルエンザウイルスの増殖を阻害することもできる。米国特許第８，４１５，３９８号は、システアミンの抗ウイルス用途を開示している。
【０２９４】
特定の疾患において、システアミンは、上記の作用機序のうちの１つを介して、複数の機序を介して、またはまだ同定されていない１つ以上の機序を介して作用し得る。
【０２９５】
システアミン有効性の証拠がある疾患および障害には、シスチン症；神経変性疾患；神経発達障害、例えば、レット症候群；ミトコンドリア障害、例えば、Ｌｅｉｇｈ症候群、ＭＥＬＡＳ、ＭＥＲＦＦ、フリードライヒ運動失調症およびＰＯＬＧ遺伝子の突然変異に関連する病態、ならびにいくつかの形態の自閉症；腎臓（例えば、アルポート病、局所分節性糸球体硬化症（ＦＳＧＳ））、肝臓（例えば、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＳＨ）およびアルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ））、ならびに肺（肺線維症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、嚢胞性線維症（ＣＦ）の線維性疾患；寄生虫感染症（例えば、マラリアおよび脳マラリア）；鎌状赤血球貧血症；癌；脳卒中；ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａなどのバイオフィルム形成細菌を含む細菌感染；インフルエンザウイルスおよびヒト免疫不全ウイルス感染症（ＡＩＤＳ）を含むウイルス感染症；代謝性症候群Ｘおよび非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）含む代謝性疾患；銅および中毒を含む金属中毒；放射線毒性からの保護が挙げられる。
【０２９６】
システアミンまたはシステアミンに分解可能な化合物にジスルフィド結合した他のチオールは、相補的な治療効果を提供することができる。例えば、システアミンをＬ−システインと、またはＬ−システインメチルエステル、Ｌ−システインエチルエステル、Ｎ−アセチルシステイン、Ｎ−アセチルシステインエチルエステルまたはＮ−アセチルシステインアミドなどのＬ−システイン誘導体と反応させることによって形成されるジスルフィドは、神経変性疾患の治療における、または毒性金属のキレート化および排泄における補完的な有効性を有し得る。
【０２９７】
本発明の組成物は、システアミン血中レベルのより良好な制御を可能にする（すなわち、長期間にわたってシステアミンを治療範囲内で維持する）ことによって、また混合ジスルフィドの場合には、任意に第２の治療的チオール部位を提供することによって、これらの疾患の改善された治療を提供し、それにより有効性および患者の利便性を改善しつつ、副作用および患者の治療への不遵守を低減する。
【０２９８】
神経変性疾患
神経変性疾患には、ハンチントン病（ＨＤ）、パーキンソン病（ＰＤ）、アルツハイマー病（ＡＤ）および脳鉄蓄積を伴う神経変性（ＮＢＩＡ）（Ｈａｌｌｅｒｖｏｒｄｅｎ−Ｓｐａｔｚ症候群とも呼ばれる）が含まれる。既知の遺伝子突然変異によって様々な程度で引き起こされるこれらの疾患は、ニューロン死を含むニューロンの構造または機能の進行性喪失を特徴とする。ＨＤは、ＨＴＴ遺伝子のエクソン１におけるＣＡＧトリプレットの拡大に全面的に起因するが、ＮＢＩＡは、約１０個の遺伝子の突然変異と関連し、最も一般的なものはＰＡＮＫ２（症例の３０〜５０％）である。ＰＤおよびＡＤ症例のごく一部は、遺伝的起源である。神経変性疾患はまた、様々なタンパク質のミスフォールディング異常（例えば、アルファ−シヌクレインの凝集、タウタンパク質の高リン酸化および凝集、ならびにベータアミロイドタンパク質の凝集）、ならびにタンパク質分解経路の誤調節（例えば、ユビキチン−プロテアソーム経路および自食作用−リソソーム経路）、膜障害、ミトコンドリア機能不全、軸索輸送の欠陥またはプログラムされた細胞死経路の誤調節（例えば、アポトーシスおよび自食作用）と関連している。
【０２９９】
ハンチントン病（ＨＤ）細胞は、シスタチオニン由来のシステインの重要な生成因子である酵素シスタチオニンガンマ−リアーゼ（ＣＳＥ）のレベルが非常に低い。この欠損は、転写レベルで起こり、神経変性の重要な媒介物質であり得る。ＨＤ組織およびＨＤの動物モデルへのシステインの投与は、酸化的ストレスおよび他の異常を逆転させる。鉄蓄積を伴う神経変性、パーキンソン病、アルツハイマー病、および神経発達障害、例えば、レット症候群および他のＭＥＣＰ−２関連障害を含む、他の神経変性疾患におけるシステイン効力の証拠も存在する。しかしながら、経口投与されたシステインは、低いバイオアベイラビリティを有し、大用量で毒性があり得る。
【０３００】
システアミンは、血液脳関門を通過し、インビボでシステインの形成を促進し（例えば、シスチンとのチオール−ジスルフィド交換によって）、システイン生合成のための硫黄源を提供することができる。システアミンは、ＨＤの３つの異なるマウスモデルにおいて有益な効果を呈している。４つの研究は、Ｒ６／２マウスモデルにおいて有益な効果を示している。Ｒ６／２  ＨＤマウスモデルは、非常に長いＣＡＧトリプレット反復を有する突然変異ヒトＨＴＴ対立遺伝子のエクソン１を発現する導入遺伝子を含む。システアミンの有益な影響には、体重減少および運動異常の改善、ならびに生存の延長が含まれる。ある研究では、Ｒ６／１マウスモデルにおいても利点が示され、より小さい伸長のＣＡＧ反復およびより軽度の表現型を有するエクソン１導入遺伝子を含む。システアミンはまた、伸長ＣＡＧ反復を有する全長ＨＴＴ遺伝子を含む、ＨＤのＹＡＣ１２８マウスモデルにおいて有益であることが示されている。システアミンの作用機序は不明である。
【０３０１】
２０１４年２月、Ｒａｐｔｏｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｒｐ．は、ハンチントン病におけるＲＰ１０３（遅延放出システアミン重酒石酸塩）の進行中の３年間の第２／３相臨床試験の予定された１８ヶ月間の中間分析からの結果を発表した。合計９６名のＨＤ患者を、ＲＰ１０３またはプラセボでの治療に無作為に割り付けた。ＲＰ１０３で治療した患者に、シスチン症のために使用した用量のおよそ半分の、１日あたり１２００ｍｇのシステアミンを投与した。８９名の患者が、最初の１８ヶ月の相を完了した。試験に参加した全９６名の患者の分析は、研究の主要なエンドポイントであるＲＰ１０３で治療した患者における総モータースコア（ＴＭＳ）の、よりゆっくりした悪化に向かう肯定的な傾向を示した。ＴＭＳの進行は、プラセボで治療した患者に対して、ＲＰ１０３で治療した患者において、治療後１８ヶ月で３２％遅かった（それぞれ４．５１対６．６８、ｐ＝０．１９）。同時のテトラベナジンを摂取していない６６名の患者において、ＲＰ１０３治療は、プラセボ群と比較したとき、ＴＭＳによって測定されるように、疾患進行の統計的に有意な遅延をもたらした（それぞれ２．８４点対６．７８、ｐ＝０．０３）。
【０３０２】
本明細書に説明される神経変性疾患または精神疾患の治療のために、システアミン前駆体は、望ましくは以下の混合ジスルフィドの群から選択される：システアミン＋パンテテイン、システアミン＋システイン、システアミン＋Ｎ−アセチルシステイン、システアミン＋Ｎ−アセチルシステインアミド、システアミン＋Ｎ−アセチルシステインエチルエステル、システアミン＋３−メルカプトピルビン酸塩、システアミン＋γ−グルタミルシステインエチルエステル、パンテテイン＋システイン、パンテテイン＋Ｎ−アセチルシステイン、システアミン＋Ｎ−アセチルシステインアミド、パンテテイン＋Ｎ−アセチルシステインエチルエステル、パンテテイン＋３−メルカプトピルビン酸塩、パンテテイン＋γ−グルタミルシステインエチルエステル、２システアミン＋ジヒドロリポ酸、２パンテテイン＋ジヒドロリポ酸、システアミン＋パンテテイン＋ジヒドロリポ酸、システアミン＋ＡＤ４＋ジヒドロリポ酸、およびシステアミン＋Ｎ−アセチルシステインエチルエステル＋ジヒドロリポ酸。治療レジメンは、任意に、還元剤、パンテテイナーゼ誘導剤、またはＰＰＡＲアゴニストなどの本明細書に説明される促進剤を含む。
【０３０３】
肝疾患
非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）は、米国および欧州で最も一般的な慢性肝疾患であり、その発生率は、アジア太平洋地域で急速に増加している。米国におけるＮＡＦＬＤ有病率の推定値は、２３％〜３３．６％に及ぶ。代謝性症候群の患者の８０％まで（米国ではおよそ４，７００万人）が、ＮＡＦＬＤを有する可能性があると推定されている。一部の患者では、ＮＡＦＬＤは、潜在的に致命的な疾患である非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、および肝不全の原因の増加に進行し、推定罹患率は、米国において２％〜５．７％である。
【０３０４】
ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、またはアルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）のＦＤＡ承認治療は存在しない。抗酸化ビタミンＥ、血糖降下剤メトホルミン、ならびにＰＰＡＲガンマアゴニストピオグリタゾンおよびロシグリタゾンを含む様々な薬剤の臨床試験は、期待外れの結果をもたらした。ファルネソイドＸ受容体アゴニストである半合成胆汁酸誘導体オベチコール酸の第２相臨床試験が有望視されている。インスリン耐性を標的とする他の実験的治療法が試験されている。
【０３０５】
２０１１年に、Ｄｏｈｉｌら（Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．３３：１０３６（２０１１））は、ＮＡＦＬＤを有する１１名の小児において、腸溶性コーティングされたシステアミンの小規模オープンラベルの２４週間パイロット試験を行った。システアミンは、１１名の患者のうち７名において、肝酵素ＡＬＴおよびＡＳＴ（肝細胞障害の指標）の血清レベルを低減し、この効果は、治療終了後６ヶ月間持続した。しかしながら、体格指数（ＢＭＩ）に影響はなかった。このオープンラベル第２ａ相臨床試験には、中度〜重度のＮＡＦＬＤならびにベースラインＡＬＴおよびＡＳＴレベルの正常値の上限の少なくとも２倍の、生検で確認された診断を有する小児が関与した。これらの患者には、腸溶性コーティングされたシステアミンを１日２回６ヶ月間与え、その後６ヶ月間の治療後モニタリング期間を設けた。全患者の中で、ＡＬＴが平均５４％低減し（ｐ＝０．００４）、ベースラインから少なくとも５０％のＡＬＴ低減の既定の主要評価項目を満たしていた。さらに、患者には、ＡＳＴ（平均４１％低減、ｐ＝０．０２）、サイトケラチン１８（平均４５％低減、ｐ＝０．０２６）、およびアディポネクチン（平均３５％低減、ｐ＝０．０２３）を含む、二次的エンドポイントの改善が見られた。血清トランスアミナーゼは、薬物離脱後に測定され、ＡＬＴおよびＡＳＴの低減は、治療相後６ヶ月の間に持続した。Ｄｏｈｉｌらによる概念研究のこの証明に続いて、Ｒａｐｔｏｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｒｐ．は、国立糖尿病・消化器・腎疾病研究所（ＮＩＤＤＫ）と協働で臨床試験を開始した。小児における非アルコール性脂肪肝疾患の治療のためのシステアミン重酒石酸塩遅延放出（ＣｙＮＣｈ）と呼ばれるこの試験は、ＮＩＤＤＫが後援しているＮＡＳＨ臨床研究ネットワークの１０ヶ所の米国センターにおいて１６０名の小児科の参加者を登録した。
【０３０６】
ＣｙＮＣｈは、遅延放出システアミン（ＲＰ１０３）カプセル（６５ｋｇ以下の患者の場合、１日２回３００ｍｇを経口的に、６５超〜８０ｋｇの患者の場合、１日２回３７５ｍｇを経口的に、または８０ｋｇ超の患者の場合、１日２回４５０ｍｇを経口的に）または組織学的に確認されたＮＡＦＬＤを有する小児にはプラセボのいずれかによる治療の、多施設二重マスク無作為化プラセボ対照第ＩＩｂ相臨床試験である。肝臓のシステアミンの初回通過代謝は、腸によって吸収されたシステアミンの約４０％を除去するため、シスチン症を治療するために使用されるものよりほぼ３倍低いシステアミン用量が可能であり、これはシステアミン感受性疾患の全身治療にとって障害であるが、肝疾患の治療においては利点である。
【０３０７】
システアミン治療から利益を得ることができる他の肝疾患には、アルコール性脂肪性肝炎および急性または慢性肝不全が含まれる。
【０３０８】
本明細書に説明される肝疾患の治療のために、システアミン前駆体は、望ましくは以下の混合ジスルフィドの群から選択される：システアミン＋パンテテイン、システアミン＋システイン、システアミン＋Ｎ−アセチルシステイン、システアミン＋Ｎ−アセチルシステインエチルエステル、システアミン＋グルタチオン、システアミン＋グルタチオン−モノエチルエステル、システアミン＋グルタチオン−ジエチルエステル、システアミン＋γ−グルタミル−システイン、システアミン＋γ−グルタミルシステインエチルエステル、システアミン＋システイニルグリシン、システアミン＋ジヒドロリポ酸、パンテテイン＋システイン、パンテテイン＋Ｎ−アセチルシステイン、パンテテイン＋Ｎ−アセチルシステインエチルエステル、パンテテイン＋グルタチオン、パンテテイン＋グルタチオン−モノエチルエステル、パンテテイン＋グルタチオン−ジエチルエステル、パンテテイン＋ガンマ−グルタミル−システイン、パンテテイン＋γ−グルタミルシステインエチルエステル、パンテテイン＋システイニルグリシン、パンテテイン＋ジヒドロリポ酸、２システアミン＋ジヒドロリポ酸、２パンテテイン＋ジヒドロリポ酸、２Ｎ−アセチルシステイン＋ジヒドロリポ酸、ＮＡＣ＋システアミン＋ジヒドロリポ酸、システアミン＋パンテテイン＋ジヒドロリポ酸、Ｎ−アセチルシステアミン＋パンテテイン＋ジヒドロリポ酸、およびシステアミン＋システイン＋ジヒドロリポ酸。治療レジメンは、任意に、還元剤、パンテテイナーゼ誘導剤、またはＰＰＡＲアゴニストなどの本明細書に説明される促進剤を含む。
【０３０９】
マラリア
マラリアにおけるシステアミンの有効性についてのインビトロおよびインビボの証拠は、唯一の治療としても、アルテメシニンの増強剤としても、上記に説明されている。システアミン治療は、マラリアおよび脳マラリア患者に利益をもたらす可能性がある。
【０３１０】
アルテメシニンに対する耐性は、アルテミシニン治療後の寄生虫の有意に遅延されたクリアランスを特徴とする。アルテミシニン誘導体は、１時間の位数の半減期を有し、したがって、数日にわたって少なくとも１日１回の投与を必要とする。例えば、ＷＨＯが承認したコアルテムエーテル（アルテムエーテル−ルメファントリン）の成人用量は、０、８、２４、３６、４８、および６０時間（６回投与）で４錠である。同様の短い半減期のため、システアミンは、システアミン前駆体の即時放出製剤を使用する場合、同じスケジュールに従って投与され得るか、または１２時間毎に３日間、シスチン症の患者の治療に使用される用量と同様の用量で、すなわち、成人で２．５ｇ／日で投与され得る。
【０３１１】
シスチン症
シスチン症は、稀な常染色体劣性遺伝性リソソーム蓄積症である。これは、遺伝性腎ファンコニー症候群の最も頻繁かつ潜在的に治療可能な原因である。未治療の腎機能は、人生の最初の１０年の終わりまでに急速に悪化し、腎臓移植を必要とする末期の腎臓疾患につながる。シスチン症管理における２つの主要なマイルストーンである、システアミンによるシスチン枯渇療法および腎臓同種移植は、シスチン症患者の予後にかなりの影響を与えた。しかしながら、システアミン療法の遵守は、重大な副作用およびシステアミン重酒石酸塩（Ｃｙｓｔａｇｏｎ（登録商標））の即時放出製剤を使用する場合の厳密な６時間毎の投与レジメンに起因して大きな問題となっている。最近では、システアミン重酒石酸塩（Ｐｒｏｃｙｓｂｉ（登録商標））の新しい１日２回の遅延放出腸溶性コーティング製剤が、シスチン症の治療のために、米国のＦＤＡによって、および欧州のＥＭＡによって承認され、Ｃｙｓｔａｇｏｎ（登録商標）に対する安全かつ有効な代替であることが示された。システアミンの推奨維持用量（即時放出製剤（Ｃｙｓｔａｇｏｎ（登録商標））の場合は６時間毎または遅延放出製剤（Ｐｒｏｃｙｓｂｉ（登録商標））の場合は１日２回）は、１日に体表面積１平方メートルあたり１．３グラムである。白血球シスチンレベルがＷＢＣタンパク質１ミリグラムあたり１ナノモル１／２シスチンより高いままである場合、用量は１．９５グラム／ｍ２／日まで増加させることができる。
【０３１２】
本明細書に説明されるシスチン症の治療のために、システアミン前駆体は、望ましくは以下の群の混合ジスルフィドの群から選択される：システアミン＋パンテテイン、システアミン＋Ｎ−アセチルシステアミン、システアミン＋アリルメルカプタン、システアミン＋システイン、システアミン＋３−メルカプトピルビン酸塩、Ｎ−アセチルシステアミン＋パンテテイン、Ｎ−アセチルシステアミン＋Ｎ−アセチルシステアミン、Ｎ−アセチルシステアミン＋アリルメルカプタン、Ｎ−アセチルシステアミン＋システイン、およびＮ−アセチルシステアミン＋３−メルカプトピルビン酸塩。治療レジメンは、任意に、還元剤、パンテテイナーゼ誘導剤、またはＰＰＡＲアゴニストなどの本明細書に説明される促進剤を含む。
【０３１３】
遺伝性ミトコンドリア病
システアミンは、スーパーオキシドフリーラジカル、アルデヒド（脂質過酸化の毒性産物）、および過酸化水素を含むＲＯＳを直接除去する。システアミンはまた、ジスルフィド結合の還元による、ならびにシステインおよびシステイン−システアミン混合ジスルフィドを生じるシスチンとの反応を含む、チオール−ジスルフィド交換反応に関与することによって、他の還元チオールの形成に寄与する。この反応は、細胞性システインプールを増加させる。システインは、グルタチオン（ＧＳＨ）生合成における律速基質である。グルタチオンは、システイン、グルタミン酸塩、およびグリシンのアミノ酸からなるトリペプチドである。
【０３１４】
低いＧＳＨレベルは、ミトコンドリア機能を損ない、遺伝性ミトコンドリア病を悪化させる場合がある。Ｓａｌｍｉら（Ｓｃａｎｄｉｎａｖｉａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，２０１２）は、生化学的および／または遺伝的に確認されたミトコンドリア病を有する小児の群を研究し、血漿チオールレベルおよび酸化還元状態の変化を見出し、酸化ストレスの増加および抗酸化物質の枯渇を示した。システインを含む細胞チオールレベルを増加させるシステアミンの能力は、ミトコンドリア病を有する患者の相対チオール欠乏に潜在的に対処することができる。システアミンがＲＯＳを直接除去する能力は、増加した酸化ストレスに対抗し、これらの疾患における損なわれたミトコンドリア機能を改善し得る。
【０３１５】
２０１４年、Ｒａｐｔｏｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓは、Ｌｅｉｇｈ症候群および他の遺伝性ミトコンドリア病を有する患者において、その遅延放出システアミンであるＲＰ１０３を、最大１．３ｇ／ｍ２／日を２つの分割用量で１２時間毎に最大６ヶ月間投与する、オープンラベルの用量漸増型第２相試験を開始した。
【０３１６】
例示的な遺伝性ミトコンドリア病としては、フリードライヒ運動失調症、レーバー遺伝性視神経症、ミオクローヌス癲癇およびぼろ赤色線維、ミトコンドリア脳心筋症、乳酸アシドーシスおよび脳卒中様症候群（ＭＥＬＡＳ）、ケーン・セイヤー症候群、亜急性壊死脳症（Ｌｅｉｇｈ症候群）、およびミトコンドリア心筋症、ならびに複数のミトコンドリアＤＮＡ欠失による他の症候群が挙げられる。さらなるミトコンドリア病としては、神経筋衰弱、運動失調症および網膜色素変性症（ＮＡＲＰ）、進行性外眼瞼麻痺（ＰＥＯ）、ならびにＯＸＰＨＯＳ複合体の機能不全に関する複合Ｉ疾患、複合ＩＩ疾患、複合ＩＩＩ疾患、複合ＩＶ疾患および複合Ｖ疾患が挙げられる。また、ＰＯＬＧ遺伝子の突然変異、ならびにある形態の自閉症も含まれる。
【０３１７】
本明細書に説明されるミトコンドリア病の治療のために、システアミン前駆体は、望ましくは以下の混合ジスルフィドの群から選択される：システアミン＋パンテテイン、システアミン＋Ｎ−アセチルシステアミン、システアミン＋３−メルカプトピルビン酸塩、システアミン＋ジヒドロリポ酸、２システアミン＋ジヒドロリポ酸、２パンテテイン＋ジヒドロリポ酸、システアミン＋パンテテイン＋ジヒドロリポ酸、システアミン＋Ｎ−アセチルシステアミン＋ジヒドロリポ酸、およびシステアミン＋パンテテイン＋ジヒドロリポ酸。治療レジメンは、任意に、還元剤、パンテテイナーゼ誘導剤、またはＰＰＡＲアゴニストなどの本明細書に説明される促進剤を含む。
【０３１８】
嚢胞性線維症および他の慢性呼吸器病態
嚢胞性線維症（ＣＦ）は、様々な上皮細胞において発現されるｃＡＭＰ調節塩化物チャネルをコードする、ＣＦＴＲ遺伝子における機能喪失突然変異によって引き起こされる。ＣＦＴＲ機能の欠損は、呼吸器細菌感染症、膵臓機能不全、および男性不妊症に対する感受性の増加を伴う慢性肺炎症を含む主要な臨床症状につながる。３つの塩基欠失突然変異ΔＦ５０８は、北欧および北米におけるＣＦの約７０〜９０％を占める。ΔＦ５０８−ＣＦＴＲは、補正分子によって原形質膜で救出された場合、部分的クロリドチャネル活性を保持することができるが、この場合ΔＦ５０８−ＣＦＴＲは、原形質膜から迅速にリサイクルされ、リソソーム分解に転換される。したがって、原形質膜でΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定化させることは、依然として困難な課題である。機能的ＣＦＴＲの喪失は、反応性酸素種（ＲＯＳ）およびＢＥＣＮ１のトランスグルタミナーゼ２媒介性架橋および細胞内アグレソーム内のホスファチジルイノシトール３−キナーゼ（ＰｔｄＩｎｓ３Ｋ）クラスＩＩＩの隔離を誘導し、肺の炎症につながる。シスタミンは、ＢＥＣＮ１機能および自食作用を回復させることができ、ヒト細胞における、およびΔＦ５０８−ＣＦＴＲ突然変異についてホモ接合性のマウスモデルの気道におけるＳＱＳＴＭ１蓄積および鈍的な炎症を低減することができる。さらに、シスタミンの投与は、細胞内輸送を救済し、上皮細胞の原形質膜で完全に機能的なΔＦ５０８−ＣＦＴＲを安定化することができ、ＣＦＴＲコレクタ分子の有益な効果を補完する。自食作用を救済し、炎症を制御するシスタミンの効果は、薬物ウォッシュアウト後も十分に及ぶが、離脱中のＣＦＴＲ枯渇によって消滅する。システアミン（Ｎｏｖａｂｉｏｔｉｃｓ（登録商標）からのＬｙｎｏｖｅｘ（登録商標））は、現在入手可能な粘液溶解剤と少なくとも同等の粘液溶解活性を示した。システアミンは、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａおよび他のＣＦ病原体に対して殺菌性であった。システアミン活性は、ＣＦ肺に特徴的な高いイオン濃度には感受性でなかった。システアミンは、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａバイオフィルムの形成を防ぎ、確立されたＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａバイオフィルムを破壊した。システアミンは、従来のＣＦ抗生物質と相乗的であり、ＣＦ細菌病原体の抗生物質耐性を逆転させる。経口（ゲルカプセル）形態のＬｙｎｏｖｅｘ（登録商標）は、第ＩＩａ相試験を完了した。Ｎｏｖａｂｉｏｔｉｃｓは、粘液溶解性効果および抗菌効果の両方を有する単一治療として、嚢胞性線維症のため、またＣＯＰＤおよび、他の慢性呼吸器病態のためのＬｙｎｏｖｅｘを開発している。
【０３１９】
本明細書に説明される肺疾患の治療のために、システアミン前駆体は、望ましくは以下の群の混合ジスルフィドの群から選択される：システアミン＋パンテテイン、システアミン＋Ｎ−アセチルシステアミン、システアミン＋アリルメルカプタン、システアミン＋システイン、システアミン＋３−メルカプトピルビン酸塩、Ｎ−アセチルシステアミン＋パンテテイン、Ｎ−アセチルシステアミン＋Ｎ−アセチルシステアミン、Ｎ−アセチルシステアミン＋アリルメルカプタン、Ｎ−アセチルシステアミン＋システイン、およびＮ−アセチルシステアミン＋３−メルカプトピルビン酸塩。治療レジメンは、任意に、還元剤、パンテテイナーゼ誘導剤、またはＰＰＡＲアゴニストなどの本明細書に説明される促進剤を含む。
【０３２０】
腎疾患
システアミンは、腎線維症の２つのマウスモデル、すなわち、尿管狭窄および腎虚血／再灌流傷害において有効であった（Ｏｋａｍｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．２５：４３（２０１４））。これらの結果は、酸化的ストレスの低減および腎傷害に対する筋線維芽細胞応答の減弱を含む、ＴＧＦ−β非依存性機序によるシステアミンの、以前に認識されていない抗線維化作用を示唆している。
【０３２１】
線維症はまた、局所分節性糸球体硬化症、アルポート症候群、および薄い基底膜疾患を含む、糸球体疾患の遺伝型の主要な明示の１つである。
【０３２２】
本明細書に説明される腎疾患の治療のために、システアミン前駆体は、望ましくは以下の群の混合ジスルフィドの群から選択される：システアミン＋パンテテイン、システアミン＋Ｎ−アセチルシステアミン、システアミン＋アリルメルカプタン、システアミン＋システイン、システアミン＋３−メルカプトピルビン酸塩、Ｎ−アセチルシステアミン＋パンテテイン、Ｎ−アセチルシステアミン＋Ｎ−アセチルシステアミン、Ｎ−アセチルシステアミン＋アリルメルカプタン、Ｎ−アセチルシステアミン＋システイン、およびＮ−アセチルシステアミン＋３−メルカプトピルビン酸塩。治療レジメンは、任意に、還元剤、パンテテイナーゼ誘導剤、またはＰＰＡＲアゴニストなどの本明細書に説明される促進剤を含む。
【０３２３】
実施例１０は、システアミン前駆体のラットの薬物動態研究を説明し、システアミン前駆体の投与後のシステアミンの腎臓レベルは、システアミン重酒石酸塩の投与後に報告されたものよりも、用量投与後１０．５時間ではるかに高かった（Ｄｏｈｉｌ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．４：１７０（２０１２））。
【０３２４】
システイン突然変異に対してアルギニンによって引き起こされる遺伝性疾患
ある特定の遺伝性疾患は、本発明の方法および組成物を用いて治療することができる。例えば、疾患によって引き起こされる突然変異には、アルギニンのコドンをシステインのコドンに改変するＤＮＡ配列変化が含まれる。そのような突然変異のサブセットは、部分的な機能を保持するか、または少なくともリボソームによって完全に合成され、それらの正常な目的地（例えば、原形質膜、ミトコンドリア、核等）に輸送されるのに十分に安定なタンパク質において生じる。システアミンは、異常なシステイン残基とジスルフィド結合を形成することができ、そのようにしてアルギニンをある程度模倣し、それにより正常なタンパク質機能をある程度回復させることができる（例えば、Ｇａｈｌ  ｅｔ  ａｌ．Ａｍ  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｇｅｎｅｔ  ２０：４０９（１９８５）参照）。したがって、アルギニンからシステアミンへの変化を伴う任意の遺伝性疾患は、システアミン前駆体療法の候補である。そのような疾患としては、第ＶＩＩＩ因子遺伝子におけるアルギニンからシステアミンへの突然変異による血友病Ａ；ＣＰＴ１Ｃ遺伝子におけるアルギニンからシステアミンへの突然変異に起因する純粋常染色体優性痙性対麻痺；ＴＧＭ６遺伝子におけるアルギニンからシステアミンへの突然変異に起因する脊髄小脳失調症３５；および多くの他の疾患が挙げられる。
【０３２５】
システアミン前駆体および促進剤で可能なシステアミンの持続レベルは、突然変異タンパク質の進行中のシステアミン化の必要性をよりよく解決する。
【０３２６】
本明細書に説明されるアルギニンからシステインへの突然変異によって引き起こされる遺伝性疾患の治療のために、システアミン前駆体は、望ましくは以下の群の混合ジスルフィドの群から選択される：システアミン＋パンテテイン、システアミン＋Ｎ−アセチルシステアミン、システアミン＋アリルメルカプタン、システアミン＋システイン、システアミン＋３−メルカプトピルビン酸塩、Ｎ−アセチルシステアミン＋パンテテイン、Ｎ−アセチルシステアミン＋Ｎ−アセチルシステアミン、Ｎ−アセチルシステアミン＋アリルメルカプタン、Ｎ−アセチルシステアミン＋システイン、およびＮ−アセチルシステアミン＋３−メルカプトピルビン酸塩。治療レジメンは、任意に、還元剤、パンテテイナーゼ誘導剤、またはＰＰＡＲアゴニストなどの本明細書に説明される促進剤を含む。
【０３２７】
心血管疾患
慢性高コレステロール血症と関連したアテローム性動脈硬化症に起因する心疾患、および虚血性心疾患は、システアミン前駆体で治療可能である。
【０３２８】
本明細書に説明される心血管疾患の治療のために、システアミン前駆体は、望ましくは以下の混合ジスルフィドの群から選択される：システアミン＋補酵素Ａ、Ｎ−アセチルシステアミン＋補酵素Ａ、パンテテイン＋補酵素Ａ、デホスホ−補酵素Ａ＋補酵素Ａ、補酵素Ａ＋補酵素Ａ、システアミン＋パンテテイン、システアミン＋Ｎ−アセチルシステアミン、システアミン＋パンテテイン、システアミン＋ブシラミン、パンテテイン＋ブシラミン、パンテテイン＋ジヒドロリポ酸、補酵素Ａ＋ジヒドロリポ酸、２システアミン＋ブシラミン、２システアミン＋ジヒドロリポ酸、システアミン＋パンテテイン＋ブシラミン、およびシステアミン＋パンテテイン＋ジヒドロリポ酸。治療レジメンは、任意に、還元剤、パンテテイナーゼ誘導剤、またはＰＰＡＲアゴニストなどの本明細書に説明される促進剤を含む。
【０３２９】
神経発達障害
レット症候群および他のＭＥＣＰ２関連障害を含む神経発達障害は、システアミン前駆体で治療可能である。
【０３３０】
他の疾患
鎌状赤血球貧血症患者からの赤血球の、システアミンへの曝露は、低酸素条件下での鎌状化の著しい阻害、平均血球ヘモグロビン濃度の減少、および酸素親和性の有意な増加をもたらした。システアミン治療した赤血球の酸素親和性は、未処理の鎌状赤血球よりもそれらの平均血球ヘモグロビン濃度に依存しなかった。
【０３３１】
システアミンの抗新生物効果は、癌細胞系および異種移植モデルにおいて実証されている（Ｆｕｊｉｓａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，ｅ３４４３７（２０１２））。特に、システアミンは毒性のない用量依存的様式でマウスの生存を延長した。マトリックスメタロプロテアーゼ活性は、動物異種移植片およびシステアミンで治療した癌細胞株において有意に減少した。
【０３３２】
長期間のシステアミン療法は、アディポネクチンの多量体化を促進し、システアミンがインスリン耐性、酸化ストレス、および低下したアディポネクチンレベルと関連した病態、ならびに虚血性傷害において治療的であり得ることを示唆している。
【０３３３】
本明細書に説明される血液病の治療のために、システアミン前駆体は、望ましくは以下の群の混合ジスルフィドの群から選択される：システアミン＋パンテテイン、システアミン＋Ｎ−アセチルシステアミン、システアミン＋Ｎ−アセチルシステインエチルエステル、システアミン＋Ｎ−アセチルシステインアミド、Ｎ−アセチルシステアミン＋Ｎ−アセチルシステアミン、およびシステアミン＋アリルメルカプタン。治療レジメンは、任意に、還元剤、パンテテイナーゼ誘導剤、またはＰＰＡＲアゴニストなどの本明細書に説明される促進剤を含む。
【０３３４】
本明細書に説明される感染性疾患の治療のために、システアミン前駆体は、望ましくは以下の群の混合ジスルフィドの群から選択される：システアミン＋パンテテイン、システアミン＋Ｎ−アセチルシステアミン、システアミン＋アリルメルカプタン、システアミン＋システイン、システアミン＋３−メルカプトピルビン酸塩、Ｎ−アセチルシステアミン＋パンテテイン、Ｎ−アセチルシステアミン＋Ｎ−アセチルシステアミン、Ｎ−アセチルシステアミン＋アリルメルカプタン、Ｎ−アセチルシステアミン＋システイン、およびＮ−アセチルシステアミン＋３−メルカプトピルビン酸塩。治療レジメンは、任意に、還元剤、パンテテイナーゼ誘導剤、またはＰＰＡＲアゴニストなどの本明細書に説明される促進剤を含む。
【０３３５】
投与レジメン
システアミン感受性障害の治療における血漿システアミンレベルを調節するための本方法は、１つ以上のシステアミン前駆体および任意にインビボでのシステアミン生成および／または吸収の１種以上の促進剤を含む１つ以上の組成物を、システアミン感受性疾患または障害の有効な治療を提供するのに十分なシステアミンの血漿レベルの上昇をもたらすために十分な時間および量で投与することによって実行される。例えば、胃内滞留性および非胃内滞留性持続放出製剤の両方は、それら自体で、３、５、８時間、またはそれ以上にわたってシステアミン前駆体の放出をもたらすことができるが、治療濃度範囲内のシステアミンのより安定した血中レベルをより長い期間達成するために、それらの製剤型のいずれかを、即時放出、遅延放出、または結腸標的組成物などの１種以上の他の組成物と同時投与することが望ましい場合がある。混合製剤と呼ばれる２種類の製剤を含有する組成物を投与することもできる。
【０３３６】
組成物の投与の量および頻度は、例えば投与されるもの（例えば、どのシステアミン前駆体、どの促進剤、どの種類の製剤）、疾患、患者の状態、および投与様式に応じて変化し得る。治療的適用において、組成物は、上昇したＷＢＣシスチンレベル（例えば、シスチン症）に罹患している患者に、ＷＢＣシスチンレベルを、好ましくは推奨レベルより低く減少させるか、または少なくとも部分的に減少させるために十分な量で投与することができる。投与量は、疾患の種類および進行の程度、痛みの重症度（例えば、急性、亜急性、または慢性）、特定患者の年齢、体重、および全身状態、選択された組成物の相対的な生物学的有効性、システアミン代謝における個体間の変動、賦形剤の配合、投与経路、ならびに主治医の判断のような変数に依存する可能性がある。有効用量は、インビトロまたは動物モデル試験系から誘導された用量反応曲線から推定することができる。有効用量は、例えば、シスチン症の場合、ＷＢＣシスチンレベルを減少させること、ＮＡＳＨの場合、肝線維症を停止または逆行させること、神経変性疾患の場合、臨床的に検証された試験によって測定される認知、運動、または情緒的機能を改善することによって、望ましい臨床転帰をもたらす用量である。
【０３３７】
用量あたりのシステアミン前駆体またはその塩の量は変動し得る。システアミン重酒石酸塩の用量範囲の上端は、１日に体表面積１万平方メートルあたり１．９５グラム（単にシステアミンの重量を数える）であり、これは平均成人のシステアミン塩基約３．７グラム／日に相当する。しかしながら、その量のシステアミンは、重大な副作用および場合によっては治療の中止と関連する。
【０３３８】
システアミン前駆体の分子量は、インビボでシステアミンに変換可能な画分ほど広く変化する。いくつかの例は、その変化を説明するのに役立つ場合がある。システアミン塩基の分子量は、７７．１５ｇ／ｍｏｌである。チオールパンテテインの分子量は、２７８．３７ｇ／ｍｏｌである。したがって、システアミン−パンテテインジスルフィドは、およそ３５３．５２の分子量（酸化反応で失われた２つのプロトンに対して調整）を有し、併せて１５４．３重量の２つのシステアミンにインビボで変換可能である。したがって、システアミン−パンテテインジスルフィドの約４３．６％がシステアミンに変換可能である。インビボでのシステアミン−パンテテインジスルフィドのシステアミンへの１００％変換を仮定し、さらに同等の生物学的利用能を仮定すると、システアミン−パンテテインジスルフィドの最大用量は、７０ｋｇの成人に対して８．５グラム／日、または約０．１２グラム／ｋｇ／日の範囲である。システアミン前駆体の生物学的利用能は、患者のインビボでのシステアミンの生成および吸収能力と一致するように投与された場合、システアミン塩よりも適度に高いと予想される。システアミン前駆体のシステアミンへのインビボ変換は、１００％である可能性は低いが、薬物動態パラメータへの投与レジメンの較正によって、およびシステアミン前駆体の分解および吸収の適切な促進剤の同時投与によって、非常に高い変換率が達成され得る。
【０３３９】
ジスルフィドパンテチンは、分子量が５５４．７２３ｇ／ｍｏｌであり、還元およびパンテテイナーゼ切断の際に２つのシステアミン分子を生じる（すなわち、パンテチンの２７．８％がシステアミンになる）。したがって、上記と同じ仮定を行うと、パンテチンの最大用量は、７０ｋｇの成人に対して１３グラム／日、または約０．１９グラム／ｋｇ／日の範囲である。
【０３４０】
補酵素Ａのような大きなシステアミン前駆体（分子量７６７．５３５ｇ／ｍｏｌ）については、システアミン１分子しか得られないため、システアミンに変換可能な用量の画分はわずか約１０％であり、その結果、補酵素Ａの最大用量は、７０ｋｇの成人に対して最大３７グラム／日、または約０．５グラム／ｋｇ／日であり得る。その理由から、補酵素Ａは、良好な治療効果のためにシステインの高血中レベルを必要とする疾患の唯一の治療として好まれないが、システアミンをより効率的に送達する他のシステアミン前駆体と組み合わせることができる。
【０３４１】
有用なシステアミン前駆体用量の範囲の下限は、副作用および忍容性の限界によって決定されるのではなく、全体として効力によって決定され、これは疾患毎に大幅に異なる可能性がある。例えば、肝臓による最初の通過代謝（血液から吸収されたシステアミンの約４０％を取り除く）は、肝臓へのシステアミン送達に影響を及ぼさないため、肝疾患の有効用量の範囲は他の疾患よりも低い。
【０３４２】
例えば、対象は、約０．０１ｇ／ｋｇ〜約０．５ｇ／ｋｇのシステアミン前駆体を受けることができる。一般に、システアミンおよびパンテテイン化合物は、ピーク血漿濃度が１μＭ〜４５μＭの範囲にあるような量で投与される。例示的な投与量は、約０．０１〜約０．２ｇ／ｋｇ、約０．０５〜約０．２ｇ／ｋｇ、約０．１〜約０．２ｇ／ｋｇ、約０．１５〜約０．２ｇ／ｋｇ、約０．０５ｇ／ｋｇ〜約０．２５ｇ／ｋｇ、約０．１ｇ／ｋｇ〜約０．２５ｇ／ｋｇ、約０．１５ｇ／ｋｇ〜約０．２５ｇ／ｋｇ、約０．１ｇ／ｋｇ〜約０．５０ｇ／ｋｇ、約０．２〜約０．５ｇ／ｋｇ、約０．３〜約０．５ｇ／ｋｇ、または約０．３５〜約０．５ｇ／ｋｇであり得る。例示的な投与量は、約０．００５ｇ／ｋｇ、約０．０１ｇ／ｋｇ、約０．０１５ｇ／ｋｇ、約０．０２ｇ／ｋｇ、約０．０３ｇ／ｋｇ、約０．０５ｇ／ｋｇ、約０．１ｇ／ｋｇ、約０．１５ｇ／ｋｇ、約０．２ｇ／ｋｇ、または約０．５ｇ／ｋｇである。例示的なピーク血漿濃度は、５〜２０μＭ、５〜１５μＭ、５〜１０μＭ、１０〜２０μＭ、１０〜１５μＭ、または１５〜２０μＭの範囲であり得る。ピーク血漿濃度は、２〜１４時間、４〜１４時間、６〜１４時間、６〜１２時間、または６〜１０時間維持することができる。
【０３４３】
治療の頻度も異なり得る。対象は、１日あたり１回以上（例えば、１回、２回、もしくは３回）、または非常に多くの時間毎に（例えば、約８、１２、または２４時間毎に）治療することができる。好ましくは、医薬組成物は、２４時間に１回または２回投与される。治療の時間経過は、異なる期間であってよく、例えば２、３、４、５、６、７、８、９、１０日間、またはそれ以上の日数、２週間、１ヶ月間、２ヶ月間、４ヶ月間、６ヶ月間、８ヶ月間、１０ヶ月間、１年超、または生涯にわたる。例えば、治療は、１日２回を３日間、１日２回を７日間、１日２回を１０日間であり得る。治療サイクルは、間隔をあけて、例えば、毎週、隔月、または毎月に繰り返すことができ、これは治療を施さない期間で区切られる。治療は、単一の治療であり得るか、または対象の寿命（例えば、長年）の長さであり得る。
【０３４４】
併用療法
インビトロデータは、システアミンが、ＣＹＰ２Ａ６またはＣＹＰ３Ａ４によってではなく、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｂ６、ＣＹＰ２Ｃ８、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６、およびＣＹＰ２Ｅ１を含む複数のＣＹＰ酵素によって代謝される可能性があることを示唆している。システアミンは、インビトロでＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ａ６、ＣＹＰ２Ｂ６、ＣＹＰ２Ｃ８、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ２Ｅ１、およびＣＹＰ３Ａ４の阻害剤ではない。インビトロでは、システアミンは、Ｐ−ｇｐおよびＯＣＴ２の基質であるが、ＢＣＲＰ、ＯＡＴＰ１Ｂ１、ＯＡＴＰ１Ｂ３、ＯＡＴ１、ＯＡＴ３、およびＯＣＴ１の基質ではない。システアミンは、ＯＡＴ１、ＯＡＴ３、およびＯＣＴ２の阻害剤ではない。
【０３４５】
システアミンと他の化合物との相互作用は知られておらず、したがってシステアミン前駆体を、上に列挙した複数の適応症の治療に使用されるいくつかの他の薬物とともに使用することができる。例えば：
【０３４６】
本発明の組成物は、限定されないが、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤ドネペジル（Ａｒｉｃｅｐｔ（登録商標））、リバスチグミン（Ｅｘｅｌｏｎ（登録商標））、またはガランタミン（Ｒａｚａｄｙｎｅ（登録商標））などの１種以上の抗神経変性薬と組み合わせて投与して、軽度から中度のアルツハイマー病を治療することができ、メマンチン（Ｎａｍｅｎｄａ（登録商標））は軽度から重度のアルツハイマー病を治療するため、カルビドパと組み合わせたレボドパ（例えば、Ｐａｒｃｏｐａ（登録商標）、Ｓｉｎｅｍｅｔ（登録商標））はパーキンソン病を治療するため、またプラミペキソール（Ｍｉｒａｐｅｘ（登録商標））、ロピニロール（Ｒｅｑｕｉｐ（登録商標））およびロチゴチン（パッチとして与えられるＮｅｕｐｒｏ（登録商標））を含むドーパミンアゴニスト、例えば症状緩和のために使用されるアポモルフィン（Ａｐｏｋｙｎ（登録商標））、セレギリン（Ｅｌｄｅｐｒｙｌ（登録商標）、Ｚｅｌａｐａｒ（登録商標））およびラサギリン（Ａｚｉｌｅｃｔ（登録商標））を含むＭＡＯ−Ｂ阻害剤、カテコールＯ−メチルトランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）阻害剤、エンタカポン（Ｃｏｍｔａｎ（登録商標））、抗コリン作用薬（Ｃｏｇｅｎｔｉｎ（登録商標））、アマンタジン、鎮静剤、抗うつ剤、および他の薬物はパーキンソン病およびアルツハイマー病（これらの障害に関連した行動問題を含む）を管理するため、テトラベナジン（Ｘｅｎａｚｉｎｅ（登録商標））およびオランザピン、アリピプラゾール、リスペリドン、またはチアプリドなどの他の認可されていない抗喘息治療薬はハンチントン病のために投与することができる。
【０３４７】
ミトコンドリア病のＦＤＡ承認された治療はないが、ビタミン、微量栄養素、および補酵素Ｑ１０などの薬理学的に活性な物質が試験されている。最初に電子輸送鎖と相互作用するように設計されたキノンＥＰＩ−７４３は、グルタチオンのレベルを上昇させる働きをし、ミトコンドリア病の臨床試験中である。
【０３４８】
アルポート症候群に対する明確な治療は存在しないが、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤は、タンパク尿および腎疾患の進行を低減することができることが研究によって示されている。
【０３４９】
アルテミシニンは、有効性および依然として少数の耐性株に起因して、最も重要な抗マラリア薬である。アルテミシニンは、耐性株の出現を低減するための単剤療法としては推奨されていないが、これは既に一部の地域で発生している。化学的にアルテメシニンは、その抗マラリア活性にとって重要であると考えられる特異な過酸化物架橋を含む、セスキテルペンラクトンである。アルテスナート（水溶性：経口、直腸、筋肉内、または静脈内用）、アルテメテル（脂溶性：経口、直腸、または筋肉内用）、ジヒドロアルテミシニン、アルテリン酸、およびアルテモチルを含む、アルテミシニンの半合成誘導体が開発された。他の類似体も合成されている（例えば、Ｐｏｓｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４２：３００（１９９９））。
【０３５０】
代謝症候群を治療するために使用される薬物は、患者に存在する代謝症候群の特定の成分を標的とするように調整される。スタチンおよびフィブラートを含むコレステロール低下剤は、一部の患者において有用である。様々なクラスの血圧治療薬を使用することもできる。２型糖尿病を治療するために使用される薬物には、メトホルミンが含まれる。
【０３５１】
システアミン前駆体は、上記の薬剤のうちのいずれかと組み合わせることができる。
【０３５２】
バイオマーカー
本発明の治療方法は、投与レジメンまたは患者選択を選択するためのガイドとして、１つ以上のバイオマーカーに従うことを含むことができる。バイオマーカーは、以下のように測定することができる：
【０３５３】
血漿システアミン薬物動態は、２区画モデルに基づいて、吸収および排出半減期、ならびに腸内産生および吸収の速度が排出速度よりも遅い薬物の「フリップフロップ」薬物動態プロファイル特性を決定する。
【０３５４】
シスチン症：１ｎｍｏｌの１／２シスチン／ｍｇ  ＷＢＣタンパク質よりも低い投与前白血球（ＷＢＣ）シスチンレベル。治療が十分に忍容されることを条件とする。投与前ＷＢＣシスチンレベルが、２ｎｍｏｌの１／２シスチン／ｍｇタンパク質よりも低い場合、患者は依然として治療から利益を受けることができる。
【０３５５】
ミトコンドリア疾患：例示的なミトコンドリア活性マーカーとしては、遊離チオールレベル、グルタチオン（ＧＳＨ）、還元グルタチオン（ＧＳＳＨ）、総グルタチオン、高度酸化タンパク質産物（ＡＯＰＰ）、第二鉄還元抗酸化力（ＦＲＡＰ）、乳酸、ピルビン酸、乳酸塩／ピルビン酸比、ホスホクレアチン、ＮＡＤＨ（ＮＡＤＨ＋Ｈ＋）またはＮＡＤＰＨ（ＮＡＤＰＨ＋Ｈ＋）、ＮＡＤ、またはＮＡＤＰレベル、ＡＴＰ、嫌気性閾値、還元型補酵素Ｑ、酸化型補酵素Ｑ；総補酵素Ｑ、酸化型シトクロームＣ、還元型シトクロームＣ、酸化型シトクロームＣ／還元型シトクロームＣ比、アセトアセテート、β−ヒドロキシブチラート、アセトアセテート／β−ヒドロキシブチレート比、８−ヒドロキシ−２′−デオキシグアノシン（８−ＯＨｄＧ）、反応性酸素種のレベル、酸素消費のレベル（ＶＯ２）、二酸化炭素輩出のレベル（ＶＣＯ２）、および呼吸商（ＶＣＯ２／ＶＯ２）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０３５６】
神経変性疾患：神経変性疾患におけるシステアミン活性は、ＣＮＳにおけるシナプス可塑性に必要なＮＦｋＢ経路の活性化、スルビビン（ＢＩＲＣ５）およびＢｃｌ−２様タンパク質１２（ＢＣＬ２Ｌ１２）の上方調節（どちらもよく特徴付けられた抗アポトーシスタンパク質）、熱ショックタンパク質（ＨＳＰ４０、ＨＳＰ９０）の発現の増加、ＨＤ、ＡＤ、およびＰＤを含むタンパク質オリゴマー化を含む神経変性障害に有益なタンパク質ミスフォールディングを伴う病状の緩和、ＢＤＮＦの発現および分泌の増加（さらにニューロンの生存および成長を支援する）、トランスグルタミナーゼおよびカスパーゼの阻害、または単純に、ＨＤに有意に影響を与える可能性がある脳の遊離システインの増加に潜在的に関連し得る。
【０３５７】
線維性疾患：製品の投与は、システアミンの全身レベルを増加させ、ＴＧＦ−β経路を介したシグナル伝達を遮断し、筋線維芽細胞の活性化および増殖を阻害し、多種多様なマトリックス成分の発現を阻害し、ＭＭＰ−１およびＭＭＰ−３を上方調節する。
【０３５８】
寄生虫感染症：製品の投与が、マラリアおよび脳マラリアの治療のためのアルテミシニンおよび誘導体との相乗効果を有するであろうシステアミンの全身レベルを増加させることが企図される。
【０３５９】
全ての徴候について、有害事象は適切な基準を用いて測定される。有害事象としては、皮膚発疹、皮膚病変、発作、嗜眠、うずき、うつ病、脳症、胃腸潰瘍および／または出血、悪心、嘔吐、食欲不振（拒食症）、下痢、発熱、ならびに腹痛が挙げられる。ＡＥの重症度は、有害事象共通用語規準（ＣＴＣＡＥ）バージョン３．０［Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｇｒａｍ，２００３］またはそうでなければ以下を使用して分類される。軽度（グレード１）：経験がわずかであり、対象に対する著しい不快感または日常生活動作（ＡＤＬ）の変化を引き起こさない。対象は、症状を自覚しているが、症状は容易に忍容される。中度（グレード２）：経験が対象にとって不都合または懸念事項であり、ＡＤＬの干渉を引き起こすが、対象は、ＡＤＬを継続することができる。重度（グレード３）：経験は、ＡＤＬを著しく干渉し、対象は、動けなくなり、および／またはＡＤＬを継続することができなくなる。致命的（グレード４）：調査者の見解において、対象は、事象が起こったときにその事象から即時の死の危険に曝される（すなわち、より重篤な形態で起こり、死を引き起こしていたかもしれない事象を含まない）。上記で定義したＣＴＣＡＥ規準により、グレード５のカテゴリーは死亡である
【０３６０】
キット
本明細書に説明される医薬組成物のいずれも、一連の指示とともに、すなわちキットを形成するために一緒に使用することができる。キットは、本明細書に説明されている療法としての医薬組成物の使用のための説明書を含むことができる。例えば、説明書は、システアミン感受性障害の治療において血漿中のシステアミン濃度を調節するための本発明の化合物の使用のための投薬および治療法を提供することができる。
【０３６１】
配合剤は、キットとして一緒に包装することができる。非限定的な例としては、例えば、２つの丸剤、丸剤および粉末、坐剤および丸剤、錠剤等を含むキットが挙げられる。さらに、単位用量キットは、組成物の調製および投与のための説明書を含むことができる。キットは、１人の患者のための１回使用単位用量、特定の患者のための複数回の使用（一定用量で、または個々の化合物は、治療が進むにつれて効力が異なる可能性がある）として製造することができるか、またはキットは、複数の患者への投与に適した複数の用量（「バルク包装」）を含み得る。キット構成要素は、カートン、ブリスターパック、ボトル、チューブ等に組み立てることができる。
【実施例】
【０３６２】
以下の実施例は、本明細書で請求される方法およびシステムがどのように実施され評価されるかについての完全な開示および記載を当業者に提供するために提示され、本発明の純粋な例示であり、発明者が発明と見なす範囲を限定することを意図しない。
【０３６３】
実施例１．混合ジスルフィドの効率的な合成
混合ジスルフィドの効率的な合成のための多様な方法は、いくつかの研究グループによって説明されており（Ｗｉｔｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｌａｎｇｍｕｉｒ  ２３：２３１８（２００７）、Ｍｕｓｉｅｊｕｋ  ｅｔ  ａｌ．Ｏｒｇ．Ｐｒｅｐ．ａｎｄ  Ｐｒｏｃ．４７．２：９５（２０１５）による概説を参照）、システインおよびシステイン類似体に特異的な方法を含む（例えば、Ｓｚｙｍｅｌｆｅｊｎｉｋ  ｅｔ  ａｌ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ２２：３５２８（２００７）、Ｇｏｒｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．７５．５：１８１１（２０１０））。例えば、チオール−ジスルフィド交換を促進するための２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノベンゾキノン（ＤＤＱ）の使用に基づく最近の改良が報告されている（Ｍｕｓｉｅｊｕｋ  ｅｔ  ａｌ．ＲＳＣ  Ａｄｖａｎｃｅｓ  ５．４０：３１３４７（２０１５））。
【０３６４】
これらの方法は、２つの異なるチオールを組み合わせたとき、混合ジスルフィドの（２つのホモ二量体ジスルフィドに対する）優先的合成を可能にする。本実施例では、チオー、システアミン、およびパンテテインを、Ａｎｔｏｎｉｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ３：３６３（２００７）によって説明される手順を用いてカップリングさせる。この手順の変形を使用して、他の対のチオールを選択的にカップリングさせることもできる。
【０３６５】
この手順のための試薬は、（ｉ）ビス（５，５−ジメチル−２−チオノ−１，３，２−ジオキサホスホリナニル）ジスルフィド（略して「ジチオリン酸試薬」と称する）、（ｉｉ）臭素、（ｉｉｉ）システアミン、（ｉｖ）ジクロロメタン、および（ｖ）パンテテインである。全ての試薬は、医薬品グレードである。
ステップ１．乾燥（無水）ジクロロメタン中のジチオリン酸試薬の７ミリモル溶液を、窒素雰囲気下、−５℃で作製する（例えば、２７．６グラムのジスルフィド試薬を１リットルのジクロロメタンを添加する）。
ステップ２．窒素雰囲気下、−５℃で上記溶液に臭素を６ミリモルの最終濃度まで添加する。
ステップ３．乾燥ジクロロメタン中のパンテテインの１１ミリモル溶液を作製する。
ステップ４．ステップ２を完了してから３０分後、ステップ２で作製した溶液の体積の５パーセントである体積のパンテテイン溶液（ステップ３からの）を添加する（例えば、５０ｍＬのパンテテイン溶液を、１リットルのステップ２溶液に添加する）。室温で３０分間撹拌する。
ステップ５．反応産物を脱イオン水（５００ミリリットル）で洗浄し、次いで無水ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、真空下で蒸発させる。
ステップ６．残渣をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＣＨ２Ｃｌ２−ヘキサン、１：１）によって精製して、ジスルフィド試薬−パンテテイン（ＤＲ−Ｐ）の純粋なジスルフィドを得る。
ステップ７．ジクロロメタン中に懸濁したＤＲ−Ｐの０．５ミリモル溶液に、システアミン（乾燥ジクロロメタン中、０．５ミリモル）およびトリエタノールアミン（２ミリモル）を６：４：２（ＤＲ−Ｐ：システアミン：トリエタノールアミン）の比で添加し、室温で１５分間撹拌する。
ステップ８．ステップ７の反応体積に、（ｉ）５体積のジクロロメタン、（ｉｉ）５体積の蒸留水、および（ｉｉｉ）５体積の（ａ）ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液または（ｂ）１Ｍ  ＨＣｌのいずれかを添加する。
ステップ９．ステップ８からの有機層を無水ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、真空下で蒸発させる
ステップ１０．ステップ９からの残渣を懸濁し、シリカゲル上でカラムクロマトグラフィーによって精製する。
【０３６６】
上記プロトコルに関する詳細および選択的ジスルフィド合成のための多数の他のプロトコルへの参照は、Ｍｕｓｉｅｊｕｋ，Ｍ．およびＤ．Ｗｉｔｔ．Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ４７：９５（２０１５）に見出すことができる。
【０３６７】
実施例２．システインまたはシステイン類似体を含有する混合ジスルフィドの選択的合成
混合ジスルフィドシステアミン前駆体の産生に有用なチオールの中には、システイン、システインエチルエステル、システインメチルエステル、Ｎ−アセチルシステイン、Ｎ−アセチルシステインエチルエステル、Ｎ−アセチルシステインアミドおよびホモシステイン、ならびにシステイングリシン、ガンマグルタミルシステイン、ガンマグルタミルシステインエチルエステルを含むシステイン含有化合物、ならびにグルタチオン（グリシン、Ｌ−システイン、およびＬ−グルタメートのトリペプチドであり、Ｌ−システインのアミノ部位とのイソペプチド結合を有するＬ−グルタメートを含む）およびグルタチオン誘導体がある。
【０３６８】
上記および他のシステイン誘導体またはシステイン含有化合物をシステアミン、Ｎ−アセチルシステアミン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、またはこれらの化合物の適切な類似体もしくは誘導体にカップリングするための有用なプロトコルは、Ｓｚｙｍｅｌｆｅｊｎｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ２２：３５２８（２００７）に説明されている。
【０３６９】
この方法は、システイン誘導体に対する５，５−ジメチル−２−チオキソ−１，３，２−ジオキサホスホリナン−２−イルジスルファニル誘導体の選択的反応性を利用して、ほぼ独占的に非対称ジスルフィドを産生する。例えば、Ｎ−アセチルシステインおよびシステインエチルエステルを用いて、それぞれ９３％および９８％の収率で様々な非対称ジスルフィドを合成した（Ｓｚｙｍｅｌｆｅｊｎｉｋ  ｅｔ  ａｌ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ２００７）。
【０３７０】
本実施例では、パンテテインは、システインエチルエステルに連結している。（図１８のジスルフィド表１Ｂを参照。ジスルフィドシステアミン前駆体「２＋１３」は、システインエチルエステルに結合したジスルフィドである）。
【０３７１】
この手順の第１ステップは、（５，５−ジメチル−２−チオキソ−１，３，２−ジオキサホスホリナン−２−イル）ジスルファニルブロミドの合成であり、次いでそれをステップ２のパンテテインに連結させる。ステップ５から出発して、パンテテインはジチオリン酸アニオンの優れた脱離基特性を利用して、システインエチルエステルにジスルフィド結合される。
ステップ１．無水ジクロロメタン（１００ｍＬ）中の５，５−ジメチル−２−チオキソ−１，３，２−ジオキサホスホリナン−２−イル）ジスルフィド（例えば、２．７６グラム、７．０ミリモル）の溶液に、窒素ガス下、−３０℃で臭化物（０．９６グラム、６．０ミリモル）を添加する。反応を１５分間進行させる。
ステップ２．上記に、無水ジクロロメタン（５ｍＬ）中のパンテテイン（３．０６２グラム、１１ミリモル）の溶液を添加する。混合物を室温で３０分間撹拌する。
ステップ３．混合物を蒸留脱イオン水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水ＭｇＳＯ４を用いて乾燥させた後、濾過し、真空下で蒸発させる。
ステップ４．残渣を、カラムクロマトグラフィー（シリカゲル、１：１ジクロロメタン：ヘキサン混合物を使用）によって精製して、（５，５−ジメチル−２−チオキソ−１，３，２−ジオキサホスホリナン−２−イル）ジスルファニル−パンテテインを得る（後続のステップにおいてジスルフィド１として言及される）。
ステップ５．ジクロロメタン（６ｍＬ）中のジスルフィド１（０．５ミリモル）の溶液に、ジクロロメタン（４ｍＬ）中のシステインエチルエステル塩酸塩（０．５ミリモル）およびトリエチルアミン（０．２８ｍＬ、２．０ミリモル）の溶液を添加する。室温で１５分間撹拌する。
ステップ７．混合物をジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈し、次いで（ｉ）１Ｍ  ＫＨＳＯ４（２５ｍＬ）または（ｉｉ）０．２５Ｍ  ＮａＯＨ（２５ｍＬ）のいずれかで洗浄する。
ステップ８．無水ＭｇＳＯ４を用いて乾燥させ、濾過し、真空下で蒸発させる。
ステップ８．残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ジクロロメタン：メタノールの２５：１混合物を使用）によって精製するか、またはクロロホルム中で再結晶化させる。
【０３７２】
この小規模な合成は、最適な合成条件を見出すように調整することができる（例えば、９０％超、または９５％超の混合ジスルフィドを生じる）。その後、反応をスケールアップして薬理学的量のジスルフィドを産生することができる。他のシステイン類似体は、システアミン、Ｎ−アセチルシステアミン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、または適切な類似体もしくは誘導体に、この手順の変形を用いて連結させることができる。
【０３７３】
さらなる詳細については、Ｓｚｙｍｅｌｆｅｊｎｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ２２：３５２８（２００７）を参照されたい。
【０３７４】
実施例５．化合物１および化合物３の同時配合
７００重量部の化合物１（パンテテイン−システアミン二塩酸塩）、２００重量部の化合物３（ｎ−アセチルシステアミン−ｎ−アセチルシステアミン二塩酸塩）、６４０重量部の蒸留水、および２，０００重量部の食品グレードの微晶質セルロースを、室温で完全にブレンドする。得られた粉末状混合物を、１カプセルあたり８００ｍｇの標準的な２ピース硬質ゼラチンカプセルに充填するために使用する。
【０３７５】
実施例６．化合物２および化合物３ならびにシスタミンの同時配合
６５０重量部の化合物２（パンテテイン−ｎ−アセチルシステアミン二塩酸塩）、６５０重量部の化合物３（ｎ−アセチルシステアミン−ｎ−アセチルシステアミン二塩酸塩）、２００重量部のシステアミン、および１０９０重量部の蒸留水、ならびに２０００重量部の食品グレードの微晶質セルロースを室温で完全にブレンドする。得られた粉末状の混合物を使用して、１サシェあたり３，０００ミリグラムの紙製サシェを充填する。
【０３７６】
実施例７．化合物３の胃内滞留性製剤
本発明の例示的な胃内滞留性製剤は、薬物送達を最適化するように設計されたポリマーベースの技術であるＡｃｕｆｏｒｍ（登録商標）（Ｄｅｐｏｍｅｄ）である。Ａｃｕｆｏｒｍは、組成物の錠剤が約５〜１０時間にわたって胃内に滞留することを可能にする独特の膨潤性ポリマーの使用により、上部胃腸（ＧＩ）管への化合物３の医薬組成物の標的化され、制御された送達を可能にする。この間に、錠剤の活性成分である化合物３は、所望の速度および時間で上部ＧＩ管に着実に送達される。この緩やかで持続的な放出により、より多くの薬物が上部ＧＩ管に吸収され、１日１回または２回投与の利便性を伴う、より優れた治療効能および増加した治療忍容性の可能性が提供される。
【０３７７】
実施例８．腎症性シスチン症の療法
シスチン症を有する３人の患者の用量配合および治療レジメンは、患者集団における人口統計的変動性および薬物吸収および代謝および応答における個体間生化学的変動は、本発明によって提供される薬物および剤形の柔軟性を利用することによって克服することができる。これらの実施例は、システアミン前駆体選択、剤形選択、および用量レジメン個別化の原理を説明する。
【０３７８】
患者１：腎ファンコニー症候群による成長障害および過剰排尿を伴って、受診後にシスチン症と新たに診断された１８ヶ月の乳児。この患者において、固形薬剤は許容されない。現在入手可能な種類の固形薬剤は、原則として粉砕して食品と混合することができるが、実際の用量は、特に未消費の薬物−食品混合物が将来の食事のために保存され、未消費の薬物に金銭を浪費することを回避する場合、（ｉ）摂取された薬物−食品混合物の量、（ｉｉ）混合物の均質性、（ｉｉｉ）薬物−食品相互作用の可能性、および（ｉｖ）食品を保存および調製するための条件（例えば加熱）を含む様々な不良に制御された変数に依存する。さらなる問題は、６時間の投与間隔（システアミンの即時放出製剤であるＣｙｓｔａｇｏｎ（登録商標）で必要とされる）は、乳児の食事時間または両親の睡眠スケジュールに適合しないことである。
【０３７９】
好ましい剤形は、乳児の食事時間でなくても完全に消費され、薬物の均一濃度を含有し、少量の未消費のまたは吐き戻された薬物が、摂取された総用量に対してわずかな影響しか及ぼさないように、十分に希釈されるであろう。さらに、投与間隔が６時間ではなく１２時間に延長できる場合、所定の療法の遵守が改善される（この場合、乳児の両親による遵守）。
【０３８０】
この１４ｋｇの乳児のために選択された剤形は、シロップ１ミリリットルあたり５０ｍｇの濃度で、甘味飲料シロップに遅延放出微粒子として配合された、化合物３である。
【０３８１】
疾患制御は、白血球シスチンレベルの定期的な測定によってモニタリングされる。全てのシスチン症患者の治療目標は、白血球（ＷＢＣ）シスチンをＷＢＣタンパク質１ｍｇあたり１ナノモル未満の１／２シスチン未満に抑制することである。治療開始後４〜６週間に典型的に実施される第１のシスチン測定が、不適切なシスチン抑制を示した場合、用量を２つの分割用量で１０００ｍｇ／日に増加させてもよい。この高用量が依然としてＷＢＣシスチンレベルを制御する際に有効でない場合、用量を１５０ｍｇ／日の増分でさらに増加させることができる。（高用量のシステアミン−パンテテインジスルフィドは、システアミン重酒石酸塩製剤と関連した高いＣｍａｘを生じないため、必要であれば用量をさらに増加させるための相当の余地がある）。
【０３８２】
ＷＢＣシスチンの適切な抑制が１，５００ｍｇ／日で達成されない場合、副作用のモニタリング中に用量をさらに増加させることができるか、または第２のシステアミン−パンテテイン製剤を添加して、１２時間の投与期間の後半に血漿システアミンレベルを増加させることができる。例えば、主として摂取後６〜１２時間の間にシステアミンを提供するように設計された持続放出液体微粒子製剤を、血漿システアミンレベルまたは好ましくはＷＢＣシスチンレベルを測定することによって経験的に決定される比で、元のシロップと混合することができる。
【０３８３】
液体製剤は、食事とともにまたは食事の間（母乳、配合乳、または乳児用食品を問わない）を含む、任意の時点での迅速な投与に適合する。９〜１０ｍＬの投与量は、１８ヶ月児にとってわずかな消費量であるが、少量（例えば、口からの漏出またはげっぷに起因する）の消費の失敗が総用量にあまり影響を与えないのに十分な量である。甘味料は、薬物の魅力を高める。
【０３８４】
微粒子は、５０〜５００マイクロメートル、および好ましくは１００〜４００マイクロメートルのサイズ範囲にあり、したがって、特に懸濁剤（例えば、３％の低分子量のカルボキシメチルセルロースおよび０．２５％のＴＷＥＥＮ  ２０）の存在下では、長期間液内中に懸濁し続けることができる。そのサイズ範囲内で別々に産生された粒子のバッチを、最終産物中で混合して、薬物放出の持続時間を広げる（例えば、７５、１５０、および４５０マイクロメートルの粒子の別々のバッチを、１：２：１の比で混合する）。粒径は、ＡＳＴＭ規格に準拠するＵＳＰ標準ワイヤメッシュ篩を有する篩シェーカーによる篩分析を使用して決定することができる。
【０３８５】
粒子は、湿式混練プロセスを用いて１種以上のマトリックス賦形剤と均質に混和され、少なくとも３つのコーティングによって取り囲まれた薬剤の内部コアからなる。コア賦形剤は、微晶質セルロース、デンプン、ポリビニルピロリドン、ポリビニルピロリドン−酢酸ビニルコポリマー、または湿式混練法に適合する他の賦形剤である。薬物負荷（最終産物中の薬物の割合、質量別）は、５０〜９０％である。
【０３８６】
第１のコーティングは、粒子のサイズを固定するのを助け、拡散膜として機能し、調節された薬物放出を可能にする。（ｉ）セルロース誘導体（例えば、ヒドロキシプロピルセルロースフタレート、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロースアセテート、カルボキシメチル−セルロースアセテートブチレート）、またはメタクリル酸とアクリル酸のエステルのコポリマー、またはメチルメタクリレートと、（ｉｉ）脂質賦形剤（例えば、水素化綿実大豆油またはヒマシ油）と、（ｉｉｉ）適切な可塑剤（例えば、ジエチルフタレートまたはモノグリセロールアセテート）との３成分混合物からなる。
【０３８７】
第２、第３、および任意の追加のコーティングは、親水性層と最も外側に親水性層を有する親油性層との間で交互になる。外側の親水性層は、酸性ｐＨでの溶解に対して耐性があるが、ジメチルアミノエチルメタクリレート、メタクリル酸、およびメタクリル酸エステルなどの中性またはほぼ中性のｐＨ（例えば、ｐＨ６以上）で溶解しやすいｐＨ感受性賦形剤から様々な比で形成される腸溶性コーティングを提供し、集合的にポリ（メタ）アクリレートまたはメタクリル酸／エチルアクリレートコポリマーと呼ばれることがあり、任意にヒドロキシプロピルメチルセルロースとブレンドされる。これらの賦形剤で作製された市販の腸溶性コーティングは、商品名Ａｃｒｙｌ−ＥＺＥ，Ａｃｒｙｌ−ＥＺＥ  ＭＰ（Ｃｏｌｏｒｃｏｎ，Ｉｎｃ．）、Ｅａｓｔａｃｒｙｌ  ３０Ｄ（Ｅａｓｔｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．）、様々なＥｕｄｒａｇｉｔ製品、例えばＥｕｄｒａｇｉｔ  Ｌ  １００（Ｅｖｏｎｉｋ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ）、Ｋｏｌｌｉｃｏａｔ  ＭＡＥ  ３０  ＤおよびＫｏｌｌｉｃｏａｔ  ＭＡＥ  ３０  ＤＰ（ＢＡＳＦ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）で市販されている。
【０３８８】
親油性コーティング（複数可）は、脂肪酸、カルナウバ蝋、蜜蝋等を含むことができる。
【０３８９】
粒子は、少なくとも６時間、好ましくは８時間以上続く延長された薬物放出プロファイルを達成するために、異なるバッチ内の異なる数のコーティング、異なるコーティングの厚さ、または異なるコーティング組成を有する別々のバッチで製造することができる。
【０３９０】
薬物は、甘味剤および懸濁化剤を用いて微粒子の水性懸濁液として提供され得るか、または使用時に再構成されるように設計された乾燥混合物として提供され得る。いずれの場合でも、液体製剤は、微粒子の長期懸濁を促進するレオロジー特性を有する。
【０３９１】
液体送達用に配合された制御放出微粒子は、米国特許第５，４０５，６１９号に開示されており、上記の要素のうちの多くを包含しながら、さらなる有用な賦形剤および製剤および製造方法の詳細を提供する。
【０３９２】
患者２：シスチン症を有する１０歳、３５ｋｇの少年は、Ｃｙｓｔａｇｏｎ（登録商標）で７年間治療されている。彼の現在の用量は、１日４回７００ｍｇ（１日あたり２．８グラム）であり、これは３５ｋｇの患者にとって異常に高い。用量は、６時間毎に６個の丸剤（４個の１５０ｍｇ錠および２個の５０ｍｇ錠）、または１日あたり２４個の丸剤である。この若い患者は、深夜０時に起き、午前６時に服薬することを嫌い、巨大な（サイズ０）丸剤を飲み込むことを嫌がり、Ｃｙｓｔａｇｏｎ（登録商標）がしばしば引き起こす体臭および口臭を嫌っている（彼の友人がそれに気づき、彼をからかう）。彼は、服薬をスキップするため、またはそれが可能でない場合は、システアミンの副作用を軽減するために様々な戦略を立てた。彼は、例えば、大量の食事とともに、または食事の直後に薬物を摂取することによっていくつかの副作用を避けることができ、より少量のシステアミンが食品、特にタンパク質または脂肪とともに吸収されることを学んだ。学校の看護師が、彼が昼食を取る前に全ての薬を飲み込むのを見守っていないときはいつでも、学校でこれを達成することができ、一般に各丸剤を飲み込むために長い時間をかけることによって行うことができる。これらの回避策の結果として、彼のＷＢＣシスチンレベルは、典型的には２．５ナノモル１／２シスチン／ｍｇタンパク質を超える。不十分な代謝調節に対処するために、彼の医師は、少年のシステアミンの用量を現在の高レベルまで増加させたため、実際に処方のとおり摂取される場合には治療量を超えることになる。この過剰用量の結果、少年は、実際に処方のとおり全用量を空腹時に摂取したとき、そのような場合に副作用を経験する可能性が高くなる。
【０３９３】
この患者のための好ましい剤形は、彼が経験する副作用のほとんどの近似原因である薬物摂取に続く高いピークシステアミン血中レベルを排除するものであり、（患者および両親にとって迷惑な）深夜および午前６時に起床する必要性をなくし、６時間毎に６個の丸剤を飲み込む負担を軽減し、全ての関連する芝居とともに、学校での投与の必要性を排除し、より良い服薬遵守を奨励することによって、より良い疾患制御を達成しながら高用量を低減することを可能にする。
【０３９４】
この患者のために最初に選択された剤形は、高用量（例えば、５０〜１５０ｍｇ／ｋｇ）で投与される、即時放出（ＩＲ）用に配合された化合物１であり、続いて、化合物１の投与から３時間以上後に、アスコルビン酸が投与される。化合物１およびアスコルビン酸の両方は、必要量の食品または飲料と一緒に開封し、組み合わせることができる、様々なサイズの色分けされたサシェに包装された、粉末状の形態の微粒子として提供することができる。粉末は、牛乳および甘いシリアル（患者の好みの朝食）と、脂肪およびタンパク質が豊富な食事を含む他のほとんどの食事と混合することができる。
【０３９５】
投薬レジメンは、８時間の投薬間隔にわたって上昇した血漿システアミンレベルを提供することができる。２種類の粉末の比および投与のタイミングは、個々の患者におけるシステアミンの時間−濃度プロファイルを最適化するように容易に調整することができる。
【０３９６】
この化合物１の粉末製剤は、即時放出、遅延放出、または持続放出を提供するために、様々な任意のコーティングを有するイオン交換樹脂コアを利用することができる。得られた粉末は、直接または水もしくは他の液体中に懸濁させた後に、食品に添加することができる。
【０３９７】
即時放出粉末は、ポリスチレンスルホン酸ナトリウム（例えば、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＩＲＰ６９ブランドの樹脂、Ｒｏｈｍ  ａｎｄ  Ｈａａｓによって販売されている）などのコーティングされていないイオン交換樹脂と混和された薬物からなる。合成ステップは、次のとおりである。
ステップ１．システアミン−パンテテインジスルフィドを蒸留水に溶解する。
ステップ２．ステップ１の溶液にＡｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＩＲＰ６９を添加し、１時間撹拌し、その間に薬物−樹脂複合体が形成される。
ステップ３．濾過によって水を除去し、薬物−樹脂混合物を蒸留水で２回すすぎ、任意の置換塩イオンを除去する。
ステップ４．含水量が３％〜７％になるまで薬物−樹脂混合物を乾燥させ、標準４０メッシュスクリーンを備えたＣＯ−ＭＩＬデバイス（Ｑｕａｄｒｏ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｃｏｒｐ．）を通過させ、これが約４１０マイクロメートルを超える粒径を有する顆粒の通過を制限する（すなわち、メッシュを通過する顆粒は、約４１０マイクロメートルより小さい）。
【０３９８】
患者３．腎臓移植後、糖尿病、甲状腺機能低下症、および嚥下障害に罹患している２２歳のシスチン症患者は、１２種を超える薬物療法で治療され、多くは１日に数回投与される。彼女のシスチン症は、Ｐｒｏｃｙｓｂｉ（登録商標）により、２，４００ｍｇ／日を２つの分割用量で治療される（１用量あたり８個のサイズ０の１５０ｍｇカプセル）。しかしながら、彼女は、Ｐｒｏｃｙｓｂｉ（登録商標）摂取後に重度の胃痛、ならびに吐き気および嘔吐を頻繁に経験し、これらの胃腸の副作用は、しばしば彼女がスケジュールどおりに他の薬物を服用することを妨げるか、または他の薬物を吐き出させた。これは、彼女の免疫抑制レジメンに関して特に懸念事項であり、そのレジメンがなければ彼女は移植された腎臓を失うリスクがある。
【０３９９】
ＷＢＣシスチンの制御は、かろうじて適切であり、異なる訪問時にタンパク質１ｍｇあたり１〜１．４５ナノモルの１／２シスチンの範囲である。胃腸の副作用の原因を発見する努力において、彼女の医師は、摂取１時間後に血漿システアミンレベルを測定し、それが７８マイクロモルであることを見出した。その高いレベルは、確かに彼女の胃腸症状を説明することができるが、彼女の医師は、限界シスチン制御の観点から彼女のＰｒｏｃｙｓｂｉ（登録商標）用量を低減することに気が進まない。
【０４００】
この患者のための好ましい剤形は、高いピークシステアミン血中レベルによって引き起こされる可能性が高い胃腸の副作用を排除するか、または少なくとも軽減すると同時に、患者の他の薬物とともに重要な身体的および心理的負担を表す、丸剤の数も低減する。
【０４０１】
この患者のために選択される剤形は、高用量（例えば、５０〜１５０ｍｇ／ｋｇ）で投与される化合物１と、同時に投与される低用量のシスタミン（例えば、１０〜４０ｍｇ／ｋｇ）との組み合わせである。
【０４０２】
実施例９．非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の治療法
耐糖能障害、胃食道逆流症（ＧＥＲＤ）、および３６の体格指数（ＢＭＩ）である体重超過の飲酒しない５０歳男性は、日常的検査で肝臓酵素が上昇していることが注目されている。アスパラギン酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）およびアラニントランスアミナーゼ（ＡＬＴ）の両方が正常範囲の上限の４倍を超えている。有意に上昇した肝臓酵素の発見は、肝臓細胞の損傷を示唆し、肝疾患の診断後の治療につながった。肝臓癌およびウイルス性肝炎の検査は陰性であり、上昇した肝臓酵素の他の潜在的な感染性および毒物学的原因は除外され、肝臓生検を促進する。生検では、脂肪症、肝細胞のバルーニング、炎症、および著しい線維症が明らかになる。これらの知見は、臨床像の文脈において、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の診断につながった。
【０４０３】
患者は、食事を変更し、適度な運動のプログラムを開始するよう指示される。６ヶ月間のダイエットとライフスタイルのカウンセリングは、体重減少、耐糖能の改善、またはＡＬＴもしくはＡＳＴレベルの低下をもたらさず、薬物療法の開始を促した。患者を、インサイチュのゲル化液として配合された化合物２を用いて治療する。目標用量は、体重１ｋｇあたり２０ｍｇのシステアミン遊離塩基であり、開始用量は、その量の１／４であり、目標用量まで４〜６週間かけて徐々に増加するが、任意の副作用（すなわち、より緩慢な用量漸増または重大な副作用の場合には最終用量の低下）について調節する。
【０４０４】
還元剤ビタミンＣおよびビタミンＥは、患者の便宜（例えば、昼食前および就寝前）において、各用量の化合物２の２〜４時間後に、近位小腸での遅延放出用に配合されたカプセル形態で投与され、相補的な治療薬として、胃腸管におけるジスルフィド結合の還元を促進する（ひいてはシステアミン−Ｎ−アセチルシステインの、その２つの成分のチオールへの変換を最大にする）。ビタミンＣの日用量は２グラムであり、ビタミンＥの日用量は、８００国際単位のアルファトコフェロール、ＲＲＲ立体異性体であり、これは１日あたり５３３．３ミリグラムに相当する（１ＩＵのトコフェロールは、ＲＲＲ−アルファ−トコフェロールの２／３ミリグラムとして定義される）。それらの量の半分が、１日２回投与される。ビタミンＣおよびビタミンＥのレジメンは、ＮＡＳＨ患者の肝線維症スコアを低減することにおいて有効であることが以前に示されている（Ｈａｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．９８：２４８５（２００３）を参照）。
【０４０５】
この実質的な量の薬物を錠剤またはカプセルの形態で摂取するには、１日あたり１２個の大きな丸剤（他の薬物を含まない）を飲み込むことが必要であり、患者にとって苦痛である。薬物の不快な味をマスクした賦形剤を含む甘味飲料として提供される液体製剤は、食事とともに飲み込まれ、薬物摂取を容易にし、それにより服薬遵守を改善するように設計される。（事実、実質的により多量のシステアミン前駆体は、液体製剤を介して容易に投与することができる。）液体ゲル化製剤の第２の利点は、それが食品よりも軽いことであり、そのためゲル形態で粥状液の上に浮遊し、酸性胃内容物の食道への逆流に対する保護層を提供する。（Ｇａｖｉｓｃｏｎ（登録商標）、Ａｌｇｉｃｏｎ（登録商標）、およびＧａｓｔｒｏｎ（登録商標）などの液体ゲル化製剤は、胃食道逆流の治療のために最初に開発された。）
【０４０６】
実施例１０．化合物２の薬物動態研究（Ｎ−アセチルシステアミン−（Ｒ）−パンテテインジスルフィド）
図２５に示すように、Ｎ−アセチルシステアミン−（Ｒ）−パンテテインジスルフィド（図１７のチオール６および２を組み合わせることによって作製されたジスルフィド、したがって化合物２と呼ばれる）を合成した。次いで、化合物２を、３用量レベルで雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに経口投与し、特にシステアミン産生の時間経過に関して、その薬物動態（ＰＫ）パラメータを評価した。
【０４０７】
体重１キログラムあたりのシステアミン塩基のミリグラムで表される用量を計算し、本明細書において以下のように表す：化合物２の１分子は、ジスルフィド結合の還元、Ｎ−アセチルシステアミンの脱アセチル化（システアミンを生じる）、およびパンテテイナーゼによるパンテテインの切断（１つのシステアミンおよび１つのパントテン酸を生成する）の際に、２つのシステアミン分子を生じる。したがって、１モルの化合物２（重量３９５．５４グラム）は、２モルのシステアミンを生じ、各々が７７．１５グラム／モル×２＝１５４．３グラムである。したがって、質量基準で、１５４．３／３９５．５４＝３８．５％の化合物２が、分解後にシステアミンに変換可能である。反対に、システアミン塩基に関して化合物２の用量を計算するには、システアミン塩基の用量に２．５９７４を乗じる。例えば、化合物２の３０ｍｇ／ｋｇのシステアミン塩基の等価用量を計算するには、３０ｍｇ／ｋｇ×２．５９７４＝７７．９２ｍｇ／ｋｇとなる。したがって、以下の考察および添付の図において、「３０ｍｇ／ｋｇ」用量の化合物２は、７７．９２ｍｇ／ｋｇが投与されたことを意味し、「６０ｍｇ／ｋｇ」用量の化合物２は、１５５．８４ｍｇ／ｋｇが投与されたことを意味し、「１２０ｍｇ／ｋｇ」用量の化合物２は、３１１．６８ｍｇ／ｋｇが投与されたことを意味する。システアミン塩に関する文献で広く使用されているこの命名法の目的は、異なるシステアミン前駆体およびシステアミン塩の用量の比較を容易にすることである。
【０４０８】
化合物２を、およそ３０ｍｇ／ｋｇ（群１）、６０ｍｇ／ｋｇ（群２）、および１２０ｍｇ／ｋｇ（群３）のシステアミン塩基を送達するように選択された用量で、３つの群のラット（１群あたり３匹のラット）に強制経口投与で投与した。絶食ラットに投与する前に、全ての用量を３ミリリットルの生理食塩水中に溶解した（しかしながら、１２０ｍｇ／ｋｇの用量は生理食塩水に完全に溶解しなかったため、ラットは、実際には、計画した用量よりも少ない用量を受けた。以下の組織分析の考察を参照されたい）。
【０４０９】
化合物２の用量は２５０グラムのラット用に調製されたが、薬物投与時のラットの実際の質量は２６７〜３００グラムに変動したため、体重に正規化した実際の用量は、群１において２６．１〜２７．１ｍｇ／ｋｇ、群２において５１．７〜５６．２ｍｇ／ｋｇ、群３において１０８．３〜１０９．５ｍｇ／ｋｇの範囲であった。それにもかかわらず、便宜上、これらの用量は、３０、６０、および１２０ｍｇ／ｋｇと呼ばれる。
【０４１０】
対照群のラット（群５）に、３ミリリットルの生理食塩水中のシステアミン塩酸塩を、３０ｍｇ／ｋｇのシステアミン塩基を送達するように選択された用量で、強制経口投与で投与した。（システアミンＨＣｌの質量は１１３．６ダルトンであり、そのうち７７．１５ダルトンまたは６７．９１％はシステアミン塩基である。反対に、システアミン塩基の用量からシステアミンＨＣｌの用量を計算するには、後者に１．４７を乗じる。例えば、３０ｍｇ／ｋｇのシステアミン塩基を送達するシステアミンＨＣｌ用量を計算するには、３０×１．４７＝４４．２ｍｇ／ｋｇとなる。）システアミン塩酸塩の用量は２５０グラムのラット用に調製されたが、薬物投与時のラットの実際の体重は２８１〜２８５グラムに変動したため、体重に正規化した実際の用量レベルは、群５において２６．３〜２６．７ｍｇ／ｋｇの範囲であった。
【０４１１】
ＰＫ研究の前に外科的に移植されたカロチド動脈カテーテルを介して、投与する直前、ならびに投与してから５、１０、２０、３０、４５、６０、９０、１２０、１８０、２４０、３００、および６００分後に、ラットから血液試料を得た。血漿を、遠心分離によって血液から得、瞬間凍結した。数日後、血漿試料を氷上で解凍し、各血漿試料を２つの対になった管（２０μＬ／管）に分け、そのうちの一方を（ジスルフィド結合の還元を定量した後）チオールの測定のために処理し、もう一方をジスルフィドの分析のために処理した。
【０４１２】
ジスルフィド結合を定量的に還元するために、第１の管中の血漿を、Ｄｏｈｉｌら（２０１２）によって報告されたプロトコルを使用して、５ｍＭのトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）（選択的かつ強力なジスルフィド結合の還元剤）で処理した。簡潔には、２．２ｕｌの新たに調製した５０ｍＭ  ＴＣＥＰストック溶液を、２０ｕｌの血漿に添加し、試料を３７℃で４５分間インキュベートした。２．２ｕｌの脱イオン水を添加することによって、対合した（非還元）試料中の血漿の量を調整した。
【０４１３】
ＴＣＥＰ還元ステップの後、全ての血漿試料を、内部標準を含有する３．５体積の氷冷アセトニトリル（ＡＣＮ）／１％ギ酸（ＦＡ）溶液を添加することによって除タンパクした（７７μＬのＡＣＮ／１％  ＦＡ溶液を、２２．２μＬの血漿に添加した）。内部標準を、各々ＡＣＮ／１％  ＦＡ溶液中０．２ｕｇ／ｍｌの最終濃度の、重水素化（ｄ４）システアミン（Ｔｏｒｏｎｔｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）、重水素化（ｄ８）バリン、および重水素化（ｄ８）フェニルアラニン（いずれもＣａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｉｓｏｔｏｐｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ａｎｄｏｖｅｒ，ＭＡ）から入手）であった。
【０４１４】
変性タンパク質を、エッペンドルフマイクロ遠心分離機において、４℃で１０分間、１４，０００ｒｐｍで遠心分離によってペレット化した。上清（２５ｕｌ）を新しい管に移し、７５ｕｌのＡＣＮ／０．１％  ＦＡ溶液と混合し、１５０×２ｍｍ  Ａｔｌａｎｔｉｓ親水性相互作用液体クロマトグラフィー（ＨＩＬＩＣ）カラム（Ｗａｔｅｒｓ、Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）に直接注入した。Ｎｅｘｅｒａ  Ｘ２  Ｕ−ＨＰＬＣ（Ｓｈｉｍａｄｚｕ）およびＱ−Ｅｘａｃｔｉｖｅハイブリッド四重極オービトラップ質量分析計（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて、代謝産物を分析した。５％移動相Ａ（水中１０ｍＭのギ酸アンモニウムおよび０．１％のギ酸）で１分間、続いて４０％移動相Ｂ（０．１％ギ酸を含むアセトニトリル）への線形勾配で７分間、３６０μｌ／分の流量で均一濃度でカラムを溶離した。エレクトロスプレーイオン化電圧は、３．５ｋＶであり、７０，０００分解能および３Ｈｚのデータ収集速度でｍ／ｚ  ７０〜８００のフルスキャン分析を使用してデータを取得した。陽イオンモードでの質量分析は、目的の検体からより良いシグナルを生成することが分かった。イオン化電源電圧は、−３．０ｋＶであり、ソース温度は３２５℃であった。Ｔｒａｃｅｆｉｎｄｅｒ（バージョン３．２、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して、ＭＳデータを処理した。
【０４１５】
標準曲線を、血漿中の連続希釈（１００、７５、５０、２５、１５、１０、５、３、１、および０．５ｕＭ）によって、システアミン、Ｎ−アセチルシステアミン、およびパンテテイン（全てＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから入手）について生成し、次いでそれを使用して、それらの物質の血漿濃度をＬＣ−ＭＳイオンカウントから補間する。
【０４１６】
血漿試料に加えて、胃腸内容物（胃内容物、近位小腸内容物、遠位小腸内容物、および盲腸／結腸内容物）、肝臓、腎臓および脾臓を、試験終了時（投与後１０．５時間）にラットから得て、瞬間凍結した。システアミン、Ｎ−アセチルシステアミン、およびパントテン酸の組織レベルを、胃腸内容物、ならびに肝臓および腎臓組織において測定した。組織分析のためのプロトコルは、（ｉ）凍った組織片をドライアイス上で砕いて小片を得ること、（ｉｉ）いくつかの凍結した組織片（約２５〜１５０ｕｇ）を、２つの金属ボールベアリングを備えた風袋を除いた１．５ｍｌの微量遠心管に計量し、直ちにドライアイス上で保存すること、（ｉｉｉ）組織片を、Ｒｅｔｓｃｈ  Ｃｒｙｏｍｉｌｌを使用して２５０ヘルツで５分間、低温で均質化すること、（ｉｖ）試料を２本の管に分け、２０ｕｌの懸濁した均質化組織粉末を、２．２ｕｌの５０ｍＭ  ＴＣＥＰ（最終濃度５ｍＭ）で３７℃で４５分間インキュベートするか、または２．２ｕｌの脱イオン水を添加すること、（ｖ）等量（ｗ：ｖ）のアセトニトリル：メタノール（１：１）を、両方の試料（ＴＣＥＰ、ＴＣＥＰなし）に添加し、４℃のエッペンドルフ微量遠心分離機で１０分間、１４，０００ｒｐｍでの遠心分離によって沈殿したタンパク質をペレット化すること、（ｖｉ）７５ｕｌのＡＣＮ／０．１％  ＦＡを含有する新しい管に２５ｕｌの上清を移すこと、（ｖｉｉ）血漿試料と同じカラムおよび操作条件を用いて、上記のＬＣ−ＭＳ装置に試料を注入することを必要とした。
【０４１７】
結果：化合物２を投与したラットにおいて、システアミンは、システアミンＨＣｌを投与したラットよりも著しく長い期間にわたって産生され、吸収された。システアミンＨＣｌを投与したラットにおけるピークシステアミン血漿濃度（Ｃｍａｘ）は、強制経口投与から１５分後に生じた。その後、システアミン濃度は、９０分までに最大半分以下に低下した（図３０Ａ）。対照的に、化合物２を投与したラット（１２０ｍｇ／ｋｇ、群３）のピークシステアミン濃度は、１８０分で生じた（図３０Ｂ）。さらに、システアミン塩酸塩を投与したラットにおける血漿濃度−時間曲線の形状は、高い、鋭いピークであるが、化合物２を投与したラットでは、血漿濃度−時間曲線は、プラトーにより近くなる（図３０Ａおよび３０Ｂを比較）。システアミンＨＣｌを投与したラットにおけるピーク血漿システアミン濃度（２００ｕＭ超）は、ヒト対象で観察されるよりも高く、ヒトにおいて重度の毒性と関連している。Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに低用量（２０ｍｇ／ｋｇのシステアミン塩基当量）で投与した場合、システアミン重酒石酸塩は、投与後５〜２２．５分の間に８１．９ｕＭのＣｍａｘを生じ、システインレベルは、２時間でベースラインに戻った（Ｄｏｈｉｌ  ｅｔ  ａｌ．２０１２）。
【０４１８】
（１２０ｍｇ／ｋｇラットの胃腸内容物の分析により、投与から１０時間後にラット８および９の胃にかなりの量の溶解していない薬物が滞留していたことが明らかになり、これらのラットが全用量を受けなかったことを示す。したがって、図３０Ｂの曲線は、全用量で達成されたであろうシステアミン曝露の過小評価である。）
【０４１９】
３０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、および１２０ｍｇ／ｋｇの化合物２の用量の比較（図３１Ａ）は、Ｃｍａｘの漸増およびＴｍａｘの等しく重要な進行性の遅延、Ｃｍａｘが生じる時間を明らかにし、３０ｍｇ／ｋｇ群でのピーク血漿濃度は、３０分で最初に小字、次いでそのレベルは、９０分で再び達成され、その間には非常に小さな低下があった。６０ｍｇ／ｋｇ群のＴｍａｘは９０分で生じ、１２０ｍｇ／ｋｇ群では１８０分で生じた。３用量の全てにおいて、システアミン濃度の時間曲線に対する二相性の特徴が現れ、最初の上昇は約３０分でピークに達し、次いで第２の上昇は（６０および１２０ｍｇ／ｋｇ用量群では、より高い）、１．５〜３時間でピークに達する。
【０４２０】
胃腸管におけるジスルフィド結合の還元の際に、化合物２は、２つのチオール部位：Ｎ−アセチルシステアミンおよびパンテテインを生じる。その後、システアミンは、２つの独立したプロセス、すなわち前者の脱アセチル化および後者のパンテテイナーゼ切断によって産生される。これらの２つのプロセスの時間経過は、パンテテインが切断されたときに（システアミンとともに）生成される、Ｎ−アセチルシステアミンおよびパントテン酸の腸および血漿レベルを観察することによってモニタリングすることができる。（パントテン酸は、ヒトのシステアミンよりも長い半減期を有し、ラットに現れる。）図３１Ｂは、（ｉ）Ｎ−アセチルシステアミンが、システアミンと実質的に類似の動態で血液中に吸収され（これまで知られていない）、同様の輸送機序を示唆する。さらに、高いシステアミンレベルを説明するために、胃腸管（Ｎ−アセチルシステアミンおよびシステアミンの両方が存在する）および血液の両方におけるＮ−アセチルシステアミンのシステアミンへの変換が進行中でなければならない。パントテン酸もまた、腸内容物および血漿中に存在する。パントテン酸のレベルは、最初の１時間で急激に増加し、パンテテインのパンテテイナーゼ切断によるシステアミンの産生を示し、その後９０分でわずかに低下し、次いで２４０分間までゆっくりと非常に緩やかな上昇を再開し（図３１Ｂ）、システアミン血漿レベルに対するパンテテイン切断からの早期および後期寄与の両方を示す。
【０４２１】
１０．５時間でのシステアミンの組織レベルは、１２０ｍｇ／ｋｇ群（ラット７、８、および９、投与群３を含む、図３２）の全３匹のラットの肝臓および腎臓試料の両方において、明らかに５０ｕＭを超えていた。これらの３匹のラットにおける１０時間での血漿システアミンレベルは、１．１、０、および１．５ｕＭであった。はるかに高い組織レベルは、（ｉ）血液と比較して、組織中のパンテテイナーゼのレベルが低い（もしくはより具体的には、パンテテイナーゼが一部の腎臓細胞において発現するため、ある特定の細胞型においてパンテテイナーゼレベルがより低い）、および／または（ｉｉ）血漿と比較して、組織中のデアセチラーゼがより多くなり、血液中よりも組織中でＮ−アセチルシステアミンのシステアミンへのより効率的な変換をもたらすことを反映し得る。比較のために、Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットにシステアミン重酒石酸塩（２０ｍｇ／ｋｇ）を投与したとき、システアミンの組織半減期は、２５〜２９分と推定され、システアミンの９５％以上が１５０分までに消失すると推測された（Ｄｏｈｉｌ  ｅｔ  ａｌ．２０１２）。システアミンの治療効果の大部分は、血液ではなく組織内で生じるため（腎臓がシスチン症の患者で奏効しない最初の臓器である）、投与から１０時間後の腎臓および肝臓におけるシステアミンの存在は、治療的に非常に重要である。
【０４２２】
実施例１１．異なるジスルフィドをラットに投与した後のシステアミンの薬物動態
方法
血漿中のシステアミンの薬物動態を、システアミン塩酸塩（３０ｍｇ／ｋｇ）、シスタミン二塩酸塩（３０ｍｇ／ｋｇ）、パンテチン（３０ｍｇ／ｋｇ）、またはパンテテイン−システアミンジスルフィド（別名ＴＴＩ−０１０２、化合物１）（１００ｍｇ／ｋｇ）をラットに投与した後、分析した。
【０４２３】
用量を、体重１キログラムあたり、各化合物によって送達可能なシステアミン塩基のミリグラムに関して表す。それらを以下のように計算した。ＴＴＩ−０１０２の１分子は、ジスルフィド結合の還元に際し、システアミンの１分子およびパンテテインの１分子を生じる。その後、腸のパンテテイナーゼによるパンテテインの切断により、１つのシステアミンおよび１つのパントテン酸を生じる。したがって、ＴＴＩ−０１０２の１分子は、システアミンの２分子を生じる。したがって、１モルのＴＴＩ−０１０２（式量：３５３．５２グラム）は、２モルのシステアミン（式量：７７．１５グラム／モル）を生じるため、３５３．５２グラムのＴＴＩ−０１０２あたり、７７．１５×２＝１５４．３グラムのシステアミンを送達する。したがって、質量基準で１５４．３／３５３．５２＝４３．６５％のＴＴＩ−０１０２が、分解後にシステアミンに変換可能である。反対に、システアミン塩基に関してＴＴＩ−０１０２の用量を計算するには、ＴＴＩ−０１０２の質量を、送達されたシステアミン塩基の質量で割る：３５３．５２／１５４．３＝２．２９１。したがって、ＴＴＩ−０１０２の３０ｍｇ／ｋｇのシステアミン等価用量を計算するには、３０ｍｇ／ｋｇ×２．２９１＝６８．７３ｍｇ／ｋｇとなる。したがって、以下の考察および添付の図において、「３０ｍｇ／ｋｇ」用量のＴＴＩ−０１０２は、６８．７３ｍｇ／ｋｇが投与されたことを意味し、「６０ｍｇ／ｋｇ」用量のＴＴＩ−０１０２は、１３７．４６ｍｇ／ｋｇが投与されたことを意味し、「１００ｍｇ／ｋｇ」用量のＴＴＩ−０６０２（別名化合物２）は、２２９．１ｍｇ／ｋｇが投与されたことを意味する。システアミンの薬理学文献において標準であるこの命名法の目的は、異なるシステアミン前駆体およびシステアミン塩の用量の比較を容易にすることである。（その他の３つの分子についても同様の計算を行った。システアミンＨＣｌの質量は１１３．６ダルトンであり、そのうち７７．１５ダルトンまたは６７．９１％はシステアミン塩基である。反対に、システアミン塩基の用量からシステアミンＨＣｌの用量を計算するには、後者に１．４７を乗じる。例えば、３０ｍｇ／ｋｇのシステアミン塩基を送達するシステアミンＨＣｌ用量を計算するには、３０×１．４７＝４４．２ｍｇ／ｋｇとなる。）
【０４２４】
４つの化合物の各々を、体重およそ３００グラムの３匹の雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに強制経口投与で投与した。全ての用量が、２．５ミリリットルの生理食塩水中に溶解した。
【０４２５】
ＰＫ研究の前に外科的に移植されたカロチド動脈カテーテルを介して、投与した直後（１分以内）、ならびに投与してから１０、２０、３０、４５、６０、９０、１２０、１８０、２４０、３００、および３６０分後に、ラットから血液試料を得た。血漿を、遠心分離によって血液から得、瞬間凍結して、摂氏−８０度で保管した。数日後、血漿試料を氷上で解凍し、各々を２つの対になった管（２０μＬ／管）に分け、そのうちの一方を（ジスルフィド結合の還元を定量した後）チオールの測定のために処理し、もう一方をジスルフィドの分析のために処理した。
【０４２６】
ジスルフィド結合を定量的に還元するために、第１の管中の血漿を、Ｄｏｈｉｌら（２０１２）によって報告されたプロトコルを使用して、５ｍＭのトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）（強力かつ選択的なジスルフィド結合の還元剤）で処理した。簡潔には、２．２ｕｌの新たに調製した５０ｍＭ  ＴＣＥＰストック溶液を、２０ｕｌの血漿に添加し、試料を３７℃で４５分間インキュベートした。２．２ｕｌの脱イオン水を添加することによって、対合した（非還元）試料中の血漿の量を調整した。
【０４２７】
ＴＣＥＰ還元ステップの後、全ての血漿試料を、内部標準を含有する３．５体積の氷冷アセトニトリル（ＡＣＮ）／１％ギ酸（ＦＡ）溶液を添加することによって除タンパクした（７７μＬのＡＣＮ／１％  ＦＡ溶液を、２２．２μＬの血漿に添加した）。内部標準を、各々ＡＣＮ／１％  ＦＡ溶液中０．２ｕｇ／ｍＬの最終濃度の、重水素化（ｄ４）システアミン（Ｔｏｒｏｎｔｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）、重水素化（ｄ８）バリン、および重水素化（ｄ８）フェニルアラニン（いずれもＣａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｉｓｏｔｏｐｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ａｎｄｏｖｅｒ，ＭＡ）から入手）であった。
【０４２８】
変性タンパク質を、マイクロ遠心分離機において、４℃で１０分間、１４，０００ｒｐｍで遠心分離によってペレット化した。上清（２５ｕｌ）を新しい管に移し、７５ｕｌのＡＣＮ／０．１％  ＦＡ溶液と混合し、１５０×２ｍｍ  Ａｔｌａｎｔｉｓ親水性相互作用液体クロマトグラフィー（ＨＩＬＩＣ）カラム（Ｗａｔｅｒｓ、Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）に直接注入した。Ｎｅｘｅｒａ  Ｘ２  Ｕ−ＨＰＬＣ（Ｓｈｉｍａｄｚｕ）およびＱ−Ｅｘａｃｔｉｖｅハイブリッド四重極オービトラップ質量分析計（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて、代謝産物を分析した。５％移動相Ａ（水中１０ｍＭのギ酸アンモニウムおよび０．１％のギ酸）で１分間、続いて４０％移動相Ｂ（０．１％ギ酸を含むアセトニトリル）への線形勾配で７分間、３６０μｌ／分の流量で、均一濃度でカラムを溶離した。エレクトロスプレーイオン化電圧は、３．５ｋＶであり、７０，０００分解能および３Ｈｚのデータ収集速度でｍ／ｚ  ７０〜８００のフルスキャン分析を使用してデータを取得した。陽イオンモードでの質量分析は、目的の検体からより良いシグナルを生成することが分かった。イオン化電源電圧は、−３．０ｋＶであり、ソース温度は３２５℃であった。Ｔｒａｃｅｆｉｎｄｅｒ（バージョン３．２、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して、ＭＳデータを処理した。
【０４２９】
標準曲線を、血漿中の連続希釈（１００、７５、５０、２５、１５、１０、５、３、１、および０．５ｕＭ）または関連組織マトリックスによって、システアミンおよびパンテテイン（全てＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから入手）について生成した。標準を通る最適な直線の勾配を使用して、ＬＣ−ＭＳイオンカウントからそれらの物質の血漿中濃度を計算した。
【０４３０】
血漿試料に加えて、胃腸内容物（胃内容物、近位小腸内容物、遠位小腸内容物、および盲腸／結腸内容物）を、試験終了時（投与後６時間）にラットから得て、瞬間凍結した。システアミンおよびパンテテインの組織レベルは、胃腸内容物で測定した。組織分析のためのプロトコルは、（ｉ）凍結した組織片をドライアイス上で砕いて小片を得ること、（ｉｉ）いくつかの凍結した組織片（約２５〜１５０ｕｇ）を、２つの金属ボールベアリングを備えた風袋を除いた１．５ｍｌの微量遠心管に計量し、直ちにドライアイス上で保存すること、（ｉｉｉ）組織片を、Ｒｅｔｓｃｈ  Ｃｒｙｏｍｉｌｌを使用して２５０ヘルツで５分間、低温で均質化すること、（ｉｖ）氷上の各試料を解凍し、２体積の水を添加して（ｗ：ｖ、すなわち、均質化した組織の各ミリグラムに対して２マイクロリットルの水を添加した）、およそ１：３の希釈液を作製すること、（ｖ）２０ｕｌの再懸濁した組織粉末を新しい管に除去し、２．２ｕｌの５０ｍＭ  ＴＣＥＰ（最終濃度５ｍＭ）を添加して、３７℃で４５分間インキュベートするか（ＴＣＥＰ処理された試料）、または２．２ｕｌの脱イオン水をＴＣＥＰの代わりに添加すること（ＴＣＥＰなし試料）、（ｖｉ）３．５体積のアセトニトリル：０．１％のギ酸を添加して、１５秒間渦流混合し、次いで４℃の微量遠心分離機で１０分間、１４，０００ｒｐｍでの遠心分離によって沈殿したタンパク質をペレット化すること、（ｖｉｉ）７５ｕｌのＡＣＮ／０．１％  ＦＡを含有する新しい管に２５ｕｌの上清を移すこと、（ｖｉｉ）血漿試料と同じカラムおよび操作条件を用いて、上記のＬＣ−ＭＳ装置に試料を注入することを必要とした。
【０４３１】
結果および考察：
システアミンＨＣｌ（３０ｍｇ／ｋｇ）を投与されたラットでは、血漿システアミンレベルの急速な上昇があり、薬物動態パラメータは、用量の半分が１分で吸収され、観察されたピーク濃度（約５０ｕＭ）が強制経口投与の１０分後の最初の測定時点で発生することを示す。システアミンレベルは、４時間で低マイクロモルレベルに低下する（図１）。高システアミンレベルは、口臭、体臭、吐き気、嘔吐、食欲不振、および胃痛を伴う。
【０４３２】
シスタミンＨＣｌ（３０ｍｇ／ｋｇ）を投与されたラットでは、血漿システアミンピークはより遅く（３０〜６０分の間）、より広範に（システアミンＨＣｌよりも大きなＡＵＣ）発生した。次いで、システアミンレベルは、約４時間でベースライン値に低下する（図１）。したがって、驚くべきことに、生理食塩水（すなわち、即時放出剤形）で胃に送達されたシスタミンは、システアミン自体と比較した場合、システアミンへの優れた曝露を提供するが、高いピークレベルおよび急速な排出は、システアミン塩酸塩を投与されたラットと同様である。
【０４３３】
予期せぬことに、パンテチン（３０ｍｇ／ｋｇ）を投与したラットでは、血漿システアミンレベルが２．５マイクロモルを超えることは決してない。したがって、パンテチンは、ジスルフィド結合の還元および／またはパンテテイナーゼ発現を促進する薬剤がない場合、ラットにおけるシステアミン送達剤としては不十分である。（ヒトの胃腸の生理機能は、ｐＨおよびグルタチオンの体積および濃度を含むいくつかの潜在的に重要な点で、ラットの生理機能とは異なる。）
【０４３４】
ＴＴＩ−０１０２（１００ｍｇ／ｋｇ）を投与されたラットでは、血漿システアミンレベルは９０分までピークに達せず、４時間後までに１０ｕＭ超に上昇を続け、評価した全６時間の間５ｕＭ超である。さらに、ＡＵＣ（４９９分＊ｕｇ／Ｌ）はシステアミンＨＣｌ  ＡＵＣ（３６５）よりも大きいが、一方でＣｍａｘは低い（それぞれ、３４．４ｕＭ対約５５．３ｕＭ）（図２）。したがって、ＴＴＩ−０１０２（１００ｍｇ／ｋｇ）は、システアミン塩酸塩、シスタミン二塩酸塩、またはパンテチンよりも、システアミンへのより大きな曝露を提供し、より長時間にわたって５および１０マイクロモル超の血漿レベルを提供し、かつ前者２つよりも低いＣｍａｘを示し、それらの全ては望ましい薬理学的特性である。
【０４３５】
一般に、げっ歯類のシステアミンの代謝はヒトよりも速い（例えば、半減期がより短い）ため、ラットの薬物動態パラメータは、ヒトの設定に直接変換可能であると解釈されるべきではない。用量にかかわらず。
【０４３６】
実施例１２．３０、６０、または１００ｍｇ／ｋｇでパンテテイン−システアミン混合ジスルフィド（ＴＴＩ−０１０２）を投与した後のラット血漿中のシステアミンの薬物動態
ラットにＴＴＩ−０１０２を３０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、または１００ｍｇ／ｋｇで投与すると（図２）、予想どおり、ＡＵＣは用量とともに徐々に増加する（それぞれ１７５、２５２、４９９分＊ｕｇ／Ｌ）。しかし、予期せぬことに、（ｉ）Ｃｍａｘはほぼ一定のままであり（３つの用量にわたって２９．４、３４．４、３４．４ｕＭ）、かつ（ｉｉ）血漿システアミン曝露の期間は用量とともに徐々に増加する。特に、ＡＵＣ、吸収半減期、および平均滞留時間（ＭＲＴ）における差異は、６０ｍｇ／ｋｇのＴＴＩ−０１０２用量と１００ｍｇ／ｋｇのＴＴＩ−０１０２用量との間で顕著である。したがって、高レベルの化合物１（例えば、５０〜１５０ｍｇ／ｋｇ）はほぼ理想的な薬物動態パターンを提供し、特に長期間にわたって持続する場合、副作用を引き起こすレベル以下であるが有効性に必要なレベルを超えて、血漿システアミンを保持する。
【０４３７】
実施例１３．ラットにおけるシステアミンおよびパンテテイン−システアミン混合ジスルフィド（ＴＴＩ−０１０２）の腸内代謝
システイン塩酸塩（３０ｍｇ／ｋｇ）を投与されたラット、ならびに３０、６０、および１００ｍｇ／ｋｇのラットの胃腸内容物の分析により、３つの化合物１の用量レベルの間に予期しないいくつかの違いが明らかになった（図３）。１００ｍｇ／ｋｇの化合物１を投与したラットでは、投与後６時間で、胃腸管の全てのレベル（胃、近位および遠位の小腸、結腸）に高レベルのパンテテインが存在する。近位および遠位小腸（ＳＩ）の試料では、ジスルフィド結合還元剤ＴＣＥＰの有無にかかわらず処理された。「ＴＣＥＰなし」の試料をＴＣＥＰ試料と比較すると、パンテテインの約半分がチオールの形態であり、その他の（およそ）半分は明らかに別のチオールに結合したジスルフィドであることが分かる。高濃度の遊離パンテテインが小腸に存在するという事実（近位ＳＩに６１３ｕＭ、遠位ＳＩに２１９ｕＭ）は、パンテテイナーゼ切断が、パンテテインのシステアミン（およびパントテン酸）への変換における制限要因であったことを示す。したがって、パンテテイナーゼ誘導剤の化合物１との同時投与、または化合物１（１００ｍｇ／ｋｇ）の投与後いくらかの間隔（例えば、２〜４時間）を置いての投与により、パンテテインのシステアミンへの変換を改善し、システアミンの血漿レベルが低下し始めた場合、容量投与の数時間後にシステアミンの血漿レベルの上昇が始まることが期待される。パンテテイナーゼ遺伝子（ＶＮＮ１およびＶＮＮ２）の発現を調節する天然産物は当該分野で知られており、例えば、スルフォラファン、Ｓ−アリルシステイン、ジアリルトリスルフィド、酸化脂肪、オメガ３脂肪酸、およびオレイルエタノールアミドが含まれる。パンテテイナーゼの発現を誘導する薬物には、ＰＰＡＲアルファアゴニスト、ＰＰＡＲガンマアゴニストが含まれる。一般に、Ｎｒｆ２発現を誘導する薬物または天然産物は有用である。（Ｎｒｆ２は、パンテテイナーゼの発現を活性化する転写因子である。）
【０４３８】
化合物１（１００ｍｇ／ｋｇ）ラットの近位および遠位ＳＩにおけるシステアミンレベルの分析は、それぞれ、１２９および３４ｕＭの中程度の遊離システアミン濃度を示す（ＴＣＥＰなしの試料）。ＴＣＥＰ還元後、これらのレベルは、それぞれ、４３０および８９９ｕＭに増加する。同様のパターンがパンテテインでも見られる。したがって、小腸のシステアミンのかなりの画分がジスルフィド結合しており（還元されていない化合物１の形であろうと、チオール−ジスルフィド交換を介して別のチオールに結合しているジスルフィドであろうと）、画分は近位ＳＩから遠位ＳＩに有意に増加している。これは、近位ＳＩにおけるより高濃度の胆汁由来グルタチオンの存在によって説明することができる。（胆汁は胃腸管におけるグルタチオンの主な供給源であり、腸細胞もまたグルタチオンおよびシステインを分泌すると考えられている。）したがって、胃腸管における還元力は、全ての化合物１を還元する（または還元を維持する）には不十分である。これは、化合物１のシステアミンへの変換を制限する（ジスルフィド結合還元またはパンテテイナーゼ切断に続く還元のいずれかによって）。化合物１（１００ｍｇ／ｋｇ）とともに、またはその後に、生理学的還元剤を投与すると、化合物１のシステアミンへの変換効率が向上する場合がある。例えば、グルタチオン、グルタチオンジエチルエステル、ガンマグルタミルシステイン、ジヒドロリポ酸、Ｎ−アセチルシステイン、ホモシステイン、パンテテイン、４−ホスホパンテテイン、デホスホ補酵素Ａ、補酵素Ａ、ビタミンＥ、またはアスコルビン酸を含む、様々な生理学的チオールを使用することができる。これらの薬剤のいずれも、化合物１とともに、またはその後に投与することができるか、あるいは化合物１と同時配合することができる。有用な製剤は、余分にジスルフィド結合の還元力が最も必要な時間（例えば、化合物１の放出開始から２時間後）および場所（例えば、遠位小腸）に、還元剤を提供する遅延放出または持続放出製剤を含み得る。
【０４３９】
結腸内容物（ＴＣＥＰ還元された）の分析により、システアミンおよびパンテテインの両方が高濃度であることが明らかになり、化合物１前駆体のシステアミンへの変換が不完全であることを確認し、したがって、投与後４〜１２時間の間隔の間にシステアミンの産生および吸収を増加させることにより、薬物濃度−時間曲線の形状をさらに改善する余地がある。例えば、高用量の化合物１（例えば、１００ｍｇ／ｋｇ以上）を高カロリーの食事とともに投与すると、胃からの化合物１の放出が延長されて、それが還元され、パンテテインを切断し、システアミンとして吸収される期間を延長することになるであろう。化合物１の胃内滞留性製剤は、胃からの長期放出の目的を達成する別の方法である。
【０４４０】
実施例１４．混合ジスルフィドの合成−シスタミンのアシル化
混合ジスルフィドを合成するための多種多様な方法が説明されている（ＷｉｔｔらのＬａｎｇｍｕｉｒ  ２３：２３１８（２００７）、ＭｕｓｉｅｊｕｋらのＯｒｇ．Ｐｒｅｐ．ａｎｄ  Ｐｒｏｃ．４７．２：９５（２０１５）による概説を参照されたい。）しかしながら、ジスルフィド結合形成の化学の広範な調査（例えば、Ｓｉｎｇｈ  ｅｔ  ａｌ．Ｓｕｌｆｕｒ−Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｇｒｏｕｐｓ（１９９３））にもかかわらず、チオールの特定の対を結合するための効率的な方法は、経験的に決定されなければならない。さらに、不純物プロファイル（不純物の同一性および量の両方）、拡張性（安価なプロセスおよび機器を使用）、固体状態（安定性特性の溶解度が異なる可能性のあるアモルファスまたは結晶）、および塩形態（溶解、安定性、および嗜好性にも影響を与える可能性がある）などの薬物物質の考慮点について、合成方法の開発において考慮する必要がある。
【０４４１】
以下の実施例は、本明細書で請求される方法およびシステムがどのように実施および評価されるかについての詳細な説明を当業者に提供するために提示され、これらは本発明の純粋な例示であることが意図され、発明者が発明と見なすものの範囲を限定することを意図しない。実際、可能な改善についても考察する。
【０４４２】
以下の例により、ＴＴＩ−０１０２およびその塩の合成について説明する。この方法は、他の非対称ジスルフィドの合成に適合され得る。
【０４４３】
試薬および方法。
【０４４４】
パントテネートによるシスタミンのヘミアシル化のための７つの試薬を以下に列挙する。
2020535133.tif 000016
【０４４５】
反応スキームを、図３６、パネルＡに示す。試薬１、２、および３を、ＤＭＦ（８０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１６０ｍＬ）の混合物中に溶解した。続いて、混合物を０℃に冷却し、８０ｍＬのＤＭＦ中に溶解した試薬４を滴加した。反応物を０℃で１時間撹拌し、次いで室温で一晩撹拌した。次いで、粗反応物質をシリカゲルカラムに充填し、非アシル化シスタミン、二重アシル化シスタミン（パンテチン）、およびその他の望ましくない副産物からＴＴＩ−０１０２を分離した（実施例５の詳細を参照）。ＴＴＩ−０１０２は、主要な汚染物質であるシスタミンの前に溶出する。
【０４４６】
あるいは、ＴＴＩ−０１０２または汚染物質のいずれかを選択的に結晶化し、結晶を溶解物質から分離することができる。ＴＴＩ−０１０２の塩形態および沈殿の考察については、実施例１７を参照されたい。
【０４４７】
結果
アシル化反応からのＴＴＩ−０１０２の収率は９５％〜９７％である。クロマトグラフィー精製後、プロトンＮＭＲスペクトルには検出可能な汚染ピークが存在しない（図３７）。
【０４４８】
観察
アシル化反応は、以下の利点：（ｉ）少ないステップ、（ｉｉ）容易に入手できる原材料、（ｉｉｉ）高収率（９７％）、および（ｉｖ）拡張性を有する。大規模合成では、ＴＴＩ−０１０２の選択的結晶化により、クロマトグラフィー精製を省略するか、または「研磨」ステップとして使用することができる（実施例１７を参照）。
【０４４９】
実施例１５．混合ジスルフィドの合成−システアミンおよびパンテチンのチオールジスルフィド交換
以下の例により、ＴＴＩ−０１０２およびその塩の合成について説明する。この方法は、他の非対称ジスルフィドの合成に適合され得る。
【０４５０】
試薬および方法
【０４５１】
システアミン−パンテチンのジスルフィド交換のための試薬を以下に列挙する。
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【０４５２】
反応スキームを、図３６、パネルＢに示す。最初に、試薬１および２を、２０ｍＬのＭｅＯＨ中に溶解し、室温で一晩撹拌した。１時間ほどの短い反応時間を使用してもよい。
【０４５３】
クロマトグラフィー精製
反応混合物を２グラムの分量に分割し（予想される生成物の５０％に基づいて）、真空下で蒸発させ、１０ｍＬのＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ（比率１０：３：０．１）中に再懸濁した（例えば、予想される生成物２グラムあたり１０ｍＬ）。シリカゲルカラム（Ｓｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈシリカゲルカタログ番号６０７３７、ＣＡＳ番号１１２９２６−００−８）を、予想される生成物１グラムあたり３０立方ｃｍ（１５ｇの乾燥ゲル）を使用して調製した。再懸濁した反応物質を充填した後、カラムを、３００ｍＬのＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ（比率１０：３：０．１）の溶媒混合物で洗浄し、続いて、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ（１０：４：０．１）の溶媒混合物（３００ｍｌ）で洗浄して、再びＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ（１０：５：０．１）の溶媒混合物で洗浄した。カラム画分を収集し、溶媒混合物ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（３：１）中に溶解したＴＬＣ−ＰＥＴプレート（Ｍｅｒｃｋアイテム番号９９５７７）を使用するシリカゲルの薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）によって、生成物含有量について分析した。Ｒｆが１／４のＴＬＣで生成物が検出された。純粋な生成物を含有する画分を回収し、濃縮して、真空下で乾燥した。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ）を、代表的な試料において実施した。
【０４５４】
結果
システアミン−パンテチン反応からのＴＴＩ−０１０２収率は５０％〜５５％である。クロマトグラフィー精製後、プロトンＮＭＲスペクトルには検出可能な汚染ピークが存在しない。
【０４５５】
観察
チオール−ジスルフィド交換反応は、以下の利点：（ｉ）少ないステップおよび緩やかな条件（「ワンポット」反応）、（ｉｉ）容易に入手できる安価な原料、（ｉｉｉ）中程度の収率、および（ｉｖ）拡張性を有する。チオール−ジスルフィド交換反応は、連続プロセスと互換性がある場合がある。
【０４５６】
実施例１６．混合ジスルフィドの合成−パンテテインおよびシスタミンのチオールジスルフィド交換
以下の例により、ＴＴＩ−０１０２およびその塩の合成について説明する。この方法は、他の非対称ジスルフィドの合成に適合され得る。
【０４５７】
試薬および方法
【０４５８】
パントテネートによるシスタミンのヘミアシル化のための試薬を以下に列挙する。
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【０４５９】
方法
この反応のシステアミン−パンテチンの場合（実施例１５）のように、溶媒はメタノールである。パンテテインは購入するか、またはジスルフィド結合還元によりパンテチンから生成することができる。試薬１を、１０ｍｌのＭｅＯＨ中に溶解した。続いて、試薬２の溶液を添加し、室温で１５分間撹拌した。試薬３を、別個に１０ｍｌのＭｅＯＨ中に溶解し、反応混合物に添加した。混合物全体を室温で一晩撹拌した。
【０４６０】
実施例１７．ＴＴＩ−０１０２の塩形態−物理的特性および沈殿
ＴＴＩ−０１０２を、実施例１４のように調製した。粗生成物を、水およびＤＭＦの蒸発によって得た。残渣を酢酸エチル／水中に懸濁し、沈殿したジシクロヘキシル尿素（ＤＣＵ）を濾別した。溶液を蒸発させ、メタノール中に懸濁した。沈殿物（未反応のパントテン酸）を濾別した。濾液を濃縮し、次いで少量のメタノール中に溶解した。ジクロロメタンの添加後、シスタミン塩酸塩が沈殿し、それを濾別した。溶媒の蒸発後、残渣をメタノール：アセトン（１：１０）から結晶化して、ＴＴＩ−１塩酸塩を得た。
【０４６１】
酒石酸塩が形成され、ＭｅＯＨ：ＤＣＭの混合物から結晶化した。固体形態を濾別し（沈殿）、濾液を蒸発させた。
【０４６２】
観察
ＴＴＩ−０１０２遊離塩基は、乾燥すると、透明からわずかに黄色のガラス状の固体である。この観察は、ＴＴＩ−０１０２の塩形態の調査につながった。ＴＴＩ−０１０２の酢酸塩は、遊離塩基よりも安定しており、凍結乾燥して固体形態（白色の、泡で充填された固体）にすることができ、破砕して粉末を生成することができる。ＴＴＩ−０１０２の酒石酸塩もまた、凍結乾燥して固体形態にすることができ、上記のように、酢酸塩よりも沈殿しやすいという追加の利点を有する。
【０４６３】
化合物１の酸付加塩は、以下の式のいずれかを有することができる：
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化合物１の酸付加塩の形態は、酸付加塩が形成される溶液中の化合物１に対する酸（例えば、酢酸または酒石酸などのカルボン酸）のモル比を変化させることによって、および／または塩が単離される溶液のｐＨを調整することによって、制御することができる。化合物１の酸付加塩は、ジスルフィドの分解に関する安定性などの有利な特性を示すことができる。
【０４６４】
他の実施形態
本発明は、その特定の実施形態に関連して説明されているが、さらなる修正が可能であり、本特許出願は、一般に、本発明の原理に従う任意の変形、使用、または適用を網羅することが意図され、本発明が属する技術分野の通常の技術の範囲内にある本開示からのそのような逸脱を含み、本発明の趣旨の範囲内で上述した本質的な特徴に適用され得ることが理解されるであろう。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
2020535133.tif 000040
【図９】
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【図１０】
2020535133.tif 000042
【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０Ａ】
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【図３０Ｂ】
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【図３１Ａ】
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【図３１Ｂ】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４Ａ】
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【図３４Ｂ】
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【図３５Ａ】
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【図３５Ｂ】
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【図３６Ａ】
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【図３６Ｂ】
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【図３７】
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【図３８】
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【国際調査報告】
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