(57)【要約】  潅流液を照射処理するための装置および方法が開示されている。この装置は、第１のチャンバーを規定するタンクを含む。セパレーターは、第１のチャンバーの内部に位置する。セパレーターは、第２のチャンバーを規定する。第１のチャンバーと第２のチャンバーは同心であり、かつ、実質的に環状の断面を有し、それぞれは少なくとも１つの直径と実質的に共通の縦軸を有する。潅流液は、注入口を通って第１のチャンバー中に導入される。紫外線放射デバイスは、潅流液への照射を提供するために第２のチャンバーの内部に配置されている。照射を受けた潅流液は排出口を通ってタンクから取り出される。他の装置およびシステムが記載されており、ＥＶＰを実施し、潅流液を照射処理することにより微生物を不活性化するための方法。
2020515359.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１のチャンバーを規定するタンクと；
前記第１のチャンバーの内部に位置するセパレーターであって、前記セパレーターは第２のチャンバーを規定し、ここで、前記第１のチャンバーと前記第２のチャンバーは同心であり、かつ、実質的に環状の断面を有し、それぞれは少なくとも１つの直径と実質的に共通の縦軸を有するセパレーターと；
潅流液が前記第１のチャンバー中に導入される注入口と；
前記第１のチャンバー内の照射を受けた潅流液が前記タンクから取り出される排出口と；
前記潅流液への照射を提供するための、前記第２のチャンバーの内部に配置された放射線放出デバイスと
を備える、照射装置。
【請求項２】
前記放射線放出デバイスが、紫外線放射デバイス、任意にＵＶＣランプである、請求項１に記載の装置。
【請求項３】
前記セパレーターが石英ガラス製である、請求項１に記載の装置。
【請求項４】
前記タンクがガラス製である、請求項１に記載の装置。
【請求項５】
環状断面を有するプラスチック外部保護物が、前記タンクの外面に付けられる、請求項１に記載の装置。
【請求項６】
前記第２のチャンバーの半径が約２ｃｍである、請求項１に記載の装置。
【請求項７】
前記第１のチャンバーの半径が約２．８ｃｍである、請求項１に記載の装置。
【請求項８】
前記外部保護物の半径が約３．８ｃｍである、請求項５に記載の装置。
【請求項９】
前記放射線放出デバイスの半径が約０．８ｃｍである、請求項１に記載の装置。
【請求項１０】
前記共通の縦軸の長さが約１３．４ｃｍである、請求項１に記載の装置。
【請求項１１】
潅流液を照射処理するための照射装置であって、
第１のチャンバーを規定するタンクと；
前記潅流液が前記第１のチャンバー中に導入される注入口と；
前記第１のチャンバー内の照射を受けた潅流液が前記タンクから取り出される排出口と；
前記第１のチャンバーの内部に位置し、かつ、第２のチャンバーを規定するセパレーターであって、前記第１のチャンバーから前記第２のチャンバーの間に障壁を形成するセパレーターと；
前記潅流液への照射を提供するための、前記第２のチャンバーの内部に配置された紫外線放射デバイスと
を備える、照射装置。
【請求項１３】
下部ユニットと；
該装置を開閉するために前記下部ユニットに対して移動可能であるように、前記下部ユニット上に枢動可能に取り付けられた上部ユニットと；
前記下部ユニットおよび前記上部ユニットのうちの１つの上に取り付けられた少なくとも１つの放射線源と
を備え、
前記上部ユニットおよび前記下部ユニットは、レセプタクルを受けるためのチャンバーを規定し、かつ、前記下部ユニットのサイドパネルのそれぞれは、前記レセプタクルの本体部分を支持するように構成されている溝を規定する、
照射装置。
【請求項１４】
前記少なくとも１つの放射線源は、紫外線ランプを含んでなる、請求項１３に記載の照射装置。
【請求項１５】
前記紫外線ランプは、紫外線Ａランプ、紫外線Ｂおよび紫外線Ｃのうちの１つを含んでなる、請求項１４に記載の照射装置。
【請求項１６】
前記上部ユニットが開いている間に該照射器が不注意に作動するのを防ぐために、該照射器が開いているおよび／または閉じている時を該センサーが検出するように、前記上部ユニットが前記下部ユニットの上部で上方および／または下方へ移動した時を検出するための安全センサーをさらに含んでなる、請求項１３に記載の照射装置。
【請求項１７】
前記安全センサーは、前記上部ユニットが前記下部ユニットの上部で移動した時を前記センサーが検出するように、前記下部ユニットおよび前記上部ユニット上に位置する検知プレートを含んでなる、請求項１６に記載の照射装置。
【請求項１８】
注入口および排出口を有する、外面を含んでなる細長い管状体と、
該石英管が外部の管に接続されたときに滑り嵌めを提供するための、前記注入口および前記排出口の端で前記外面に機械加工された把持手段と
を備えた、石英管。
【請求項１９】
請求項１８に記載の石英管を含んでなる、滅菌パッケージ。
【請求項２０】
前記石英管および外部の管材料に接続するように構成されているコネクターをさらに含んでなる、請求項１９に記載の滅菌パッケージ。
【請求項２１】
照射装置とレセプタクルとを備える照射システムであって、
前記照射装置は、
下部ユニットおよび、前記装置を開閉するために前記下部ユニットに対して移動可能であるように、前記下部ユニット上に枢動可能に取り付けられた上部ユニットと
前記下部ユニットおよび前記上部ユニットのうちの１つの上に取り付けられた少なくとも１つの放射線源と
を含んでなり、
ここで、前記上部ユニットおよび前記下部ユニットは、レセプタクルを受け入るためのチャンバーを規定し、前記下部ユニットのサイドパネルは、前記レセプタクルの本体部分を支持するように構成されている溝を規定し；
前記レセプタクルは、前記レセプタクル中に溶液を導入することができる注入口と；そこから溶液を取り出すことができる排出口とを含んでなり、ここで、把持手段は、前記レセプタクルが外部の管に接続されたときに滑り嵌めを提供するために、前記注入口および前記排出口の端で機械加工されている、
照射システム。
【請求項２２】
前記少なくとも１つの放射線源が紫外線ランプを含んでなる、請求項２１に記載の照射システム。
【請求項２３】
前記紫外線ランプが紫外線Ａランプ、紫外線Ｂおよび紫外線Ｃのうちの１つを含んでなる、請求項２２に記載の照射システム。
【請求項２４】
前記装置が開いている間に前記装置が不注意に作動するのを防ぐために、前記装置が開いているおよび／または閉じている時を該センサーが検出するように、前記上部ユニットが前記下部ユニットと密着している時を検出するための安全センサーさらに含んでなる、請求項２１に記載の照射システム。
【請求項２５】
前記安全センサーが、前記上部ユニットが前記下部ユニットと密着している時を前記センサーが検出するように、前記下部ユニットおよび前記上部ユニット上に位置する検知プレートを含んでなる、請求項２４に記載の照射システム。
【請求項２６】
ドナー臓器内の、ウイルスおよび細菌を含む、微生物を不活性化するための方法であって、
ａ．潅流液を生成するために潅流溶液を使用してドナー臓器でエクス・ビボ潅流（ＥＶＰ）を実施する工程；および
ｂ．ＵＶＣおよび／またはＰＤＴから任意に選択される光線療法で前記潅流液を照射処理する工程
を含んでなる、方法。
【請求項２７】
前記潅流液がＵＶＣ光照射により照射処理される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記潅流溶液がメチレンブルーなどの光活性化剤を含んでなり、光、任意に赤色光により照射処理される、請求項に記載の方法。
【請求項２９】
前記微生物が、ウイルス、任意に、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、ＨＩＶ、Ｂ型肝炎ウイルス、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン・バーウイルス、（ＥＢＶ）、およびアデノウイルスの１種以上である、請求項２６〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記微生物が、細菌、任意に、黄色ブドウ球菌；ステノトロフォモナス・マルトフィリアなどのブドウ球菌；および緑膿菌などのシュードモナス細菌の１種以上である、請求項２６〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
前記ＥＶＰが少なくとももしくは約２時間、少なくとももしくは約４時間、少なくとももしくは約６時間、少なくとももしくは約８時間または少なくとももしくは約９時間、少なくとももしくは約１２時間、任意に、最大もしくは約１８時間実施される、請求項２６〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記潅流液が少なくとも１時間、少なくとももしくは約２時間、少なくとももしくは約３時間、少なくとももしくは約４時間、少なくとももしくは約５時間、少なくとももしくは約６時間、最大もしくは約７時間、最大もしくは約８時間、最大もしくは約９時間、少なくとも１０時間、少なくとも１１時間または少なくとも１２時間以上照射処理され、任意に、前記潅流液は、少なくとも２時間および最大１８時間、任意に、最大１５時間、最大１２時間、最大９時間、最大６時間または最大４時間、任意に、前記ＥＶＰと同じ期間照射処理される、請求項２６〜３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
前記照射が前記ＥＶＰの一部の間に実施される、請求項２６〜３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記照射がほぼＥＶＰの持続時間にわたって実施される、請求項２６〜３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記ドナー臓器が感染していることが知られており、かつ、前記方法が移植前に前記ドナー臓器を汚染除去するためのものである、請求項２６〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
前記潅流液がＵＶＣまたはＰＤＴにより少なくとも２時間照射処理され；それによって、汚染除去された臓器が提供される、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記ドナー臓器が肺、腎臓、心臓または肝臓である、請求項２６〜３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
前記潅流溶液が肺の中を潅流するためのもの、任意に、Ｓｔｅｅｎ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎである、請求項２６〜３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
前記潅流溶液が心臓、腎臓または肝臓の中を潅流するためのもの、任意に、酸素運搬体を含んでなるＳｔｅｅｎ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎである、請求項２６〜３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
前記ＥＶＰが標準的なＥＶＰである、請求項２６〜３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
前記ＥＶＰがＥＶＬＰ、ＥＶＫＰ、ＥＶＨＰまたはＥＶＣＰである、請求項２６〜３７または４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
前記方法が照射の有無にかかわらずＥＶＰを実施する工程；前記潅流液またはその一部を交換する工程；および少なくとも１つの後続期間に照射を伴う１つ以上の後続期間にわたってＥＶＰを実施する工程を含んでなる、請求項２６〜４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
前記潅流液またはその一部は、約１時間ごと、約２時間ごと、または約３、４、５または６時間ごとに交換される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記方法は、照射の有無にかかわらず少なくとも３時間ＥＶＰを実施する工程；前記潅流液またはその一部を新鮮な潅流溶液と交換する工程；および例えば６時間にわたって、照射を伴うＥＶＰを実施する工程を含んでなる、請求項４２に記載の方法。
【請求項４５】
請求項１〜１７のいずれか一項に記載の照射装置を使用して行われる場合の前記照射または前記方法が、請求項２１〜２５のいずれか一項に記載の照射システムを使用して実施される、請求項２６〜３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４６】
感染症により臓器が移植における使用に不適格とされた場合に、感染症を患っている個体から得られたドナー臓器をレシピエントへの移植用に救う方法であって、
ａ．エクス・ビボシステムにおいて、第１の期間中に、潅流溶液で前記ドナー臓器の中を潅流する工程（ここで、前記期間は、前記個体が潅流液を生成するために感染していなかったことに基づいて決定される）；および
ｂ．前記臓器の潅流と同時に適用される第２の期間中に、前記潅流液を照射処理する工程（ここで、前記第２の期間は９時間以下である）
を含んでなる、方法。
【請求項４７】
前記潅流液が少なくとも２時間または本明細書に記載の期間にわたって照射処理される、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記方法が前記臓器を移植する工程をさらに含んでなる、請求項２６〜４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４９】
感染した臓器を移植する方法であって、
潅流液を提供するためにエクス・ビボ潅流（ＥＶＰ）により潅流溶液で感染した臓器の中を潅流する工程；
ＵＶＣまたはＰＤＴから選択される光線療法で前記潅流液を少なくとも２時間照射処理する工程；および
潅流および光線療法で処置された臓器を対象に移植する工程
を含んでなる、方法。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の参照】
【０００１】
本出願は、２０１７年４月４日に出願された米国仮特許出願第６２／４８１，５２３号の優先権に基づき米国特許法第１１９条の利益を主張する特許協力条約に基づく出願であり、その全体が引用することにより本明細書の一部とされる。
【技術分野】
【０００２】
本発明は、全体として、エクス・ビボ（ｅｘ  ｖｉｖｏ）潅流および紫外線照射または光線力学的治療（ＰＤＴ）を用いて、肺などのドナー臓器内の微生物、好ましくは、ＨＣＶウイルス、ＨＩＶ、Ｂ型肝炎、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン・バーウイルス、（ＥＢＶ）、およびアデノウイルスの１種以上などのウイルスまたはブドウ球菌、例えば、黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)、ステノトロフォモナス・マルトフィリア(Stenotrophomonas maltophilia)、およびシュードモナス細菌、例えば、緑膿菌などの細菌を不活性化するためのシステムおよび方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
移植を必要とする患者の増大する待機リストを満たすには、適切なドナー臓器の数が不十分である。
【０００４】
例えば、肺移植は、末期肺疾患の患者の命を救う。しかしながら、肺移植を待っている患者の数は、利用可能なドナーの数を大きく超えている。さらに、末期肺疾患の患者リストは増え続けている。
【０００５】
世界規模で１億３千万〜１億５千万人の慢性Ｃ型肝炎患者（北米では約２％）と推測される。Ｃ型肝炎ウイルス陽性（ＨＣＶ＋）ドナーは、レシピエントへの感染リスクが９０％を超えるため、一般的には、肺移植には提供されない。直接作用型抗ウイルス薬（ＤＡＡ）は、ＨＣＶ＋ドナー肺からのウイルス伝播後のドナーレシピエントを治療するのに有用であり得る(Khan B et al. Am J Transplant 2017. Doi: 10.1111/ajt.14137)。ＨＣＶ＋ドナーをリストに追加すると、北米で年間約１，０００人の新規ドナーとなる。
【０００６】
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）のウイルス負荷を減らしおよび／またはドナー肺に存在するウイルスを不活性化することにより臓器利用可能性が高まる可能性がある。
【０００７】
他の臓器に存在するウイルス負荷または細菌負荷を減らすことにより、同様に、他の臓器の利用可能性も高まる可能性がある。
【０００８】
エクス・ビボ潅流は、ドナー腎臓で使用され、肺および心臓などの他の臓器でも使用されている。
【０００９】
例えば、エクス・ビボ肺潅流（ＥＶＬＰ）は、移植前に、肺の生存率を評価しおよび／または肺を処置するための方法である。ＥＶＬＰなどの戦略は、Inci I, Ampollini L, Arni S, et al. Ex vivo reconditioning of marginal donor lungs injured by acid aspiration. The Journal of Heart and Lung Transplantation. 2008;27(11):1229-
1236；Nakajima D, Liu M, Ohsumi A, et al. Lung Lavage and Surfactant Replacement During Ex Vivo Lung Perfusion for Treatment of Gastric Acid Aspiration-Induced Donor Lung Injury. The Journal of Heart and Lung Transplantation. 2017;36(5):577-585. doi:10.1016/j.healun.2016.11.010；Machuca TN, Mercier O, Collaud S, et al. Lung Transplantation With Donation After Circulatory Determination of Death Donors and the Impact of Ex Vivo Lung Perfusion: DCDD Lung Transplantation and EVLP. American Journal of Transplantation. 2015;15(4):993-1002. doi:10.1111/ajt.13124およびMachuca TN, Hsin MK, Ott HC, et al. Injury-specific ex vivo treatment of the donor lung: pulmonary thrombolysis followed by successful lung transplantation. American journal of respiratory and critical care medicine. 2013;188(7):878-880に記載されているように、誤嚥性肺炎、肺水腫および肺塞栓症が原因で損傷したドナー肺を処置するために使用されてきた。ＥＶＬＰでは、肺を体温においてエクス・ビボで潅流・換気を行い、生理学的状態を模倣する。
【００１０】
光源を使用して微生物を不活性化するための方法は、当技術分野で公知である。例えば、米国特許第７，９９３，５８０号には、回分反応器内の生体液に存在する微生物を効果的に不活性化するために、１つ以上の光源から放出される単色または多色の光を使用する方法が開示されている。別の例として、米国第１０／１９６０２０号には、少なくとも１つの細長いＵＶランプを囲む全体として環状の細長い反応チャンバーの形でＵＶ反応器を提供し、ＵＶランプの長さに沿って方向づけられた一次流動で反応チャンバー内の生体液を移動させ、流体内で循環二次流動を誘導し、一次流動に二次流動を重ね合わせることが開示されている。さらなる例として、米国特許第６，４４７，７２０号には、流体の紫外線殺菌のためのシステムが教示されており、ここでは、紫外光源は流体中に沈められ、未処理の流入物は沈められた光源を流れ過ぎてシステムに入り、処理済みの殺菌流出物として排出される。
【００１１】
光線力学的療法（ＰＤＴ）は、血液バンクでの血液成分の滅菌に使用される別の光線に基づく療法である(Mohr H, Steil L, Gravemann U, et al. BLOOD COMPONENTS: A novel approach to pathogen reduction in platelet concentrates using short-wave ultraviolet light: UVC IRRADIATION FOR PATHOGEN REDUCTION IN PCs. Transfusion. 2009;49(12):2612-2624. doi:10.1111/j.1537-2995.2009.02334.x；Steinmann E, Gravemann U, Friesland M, et al. Two pathogen reduction technologies-methylene blue plus light and shortwave ultraviolet light-effectively inactivate hepatitis C virus in blood products: INACTIVATION OF HCV IN BLOOD PRODUCTS. Transfusion. 2013;53(5):1010-1018. doi:10.1111/j.1537-2995.2012.03858.x；Floyd RA, Schneider Jr. JE, Dittmer DP. Methylene blue photoinactivation of RNA viruses. Antiviral Research. 2004;61(3):141-151. doi:10.1016/j.antiviral.2003.11.004およびMuller-Breitkreutz K, Mohr H. Hepatitis C and human immunodeficiency virus RNA degradation by methylene blue/light treatment of human plasma. Journal of medical virology. 1998;56(3):239-245)。ＰＤＴには、光増感剤と呼ばれる薬物の投与が含まれる。この光増感剤は、活性化するのに特定の波長での光照射を必要とし、安定状態（基底状態）から励起状態（一重項状態）へと移行し、その後、反応性酸素種（ＲＯＳ）が形成される減衰相が続く。この療法により、ＨＣＶおよびＨＩＶ−１を含むウイルスに不可逆的な光損傷を引き起こす一連の光生物学的プロセスが生じる(Bachmann B, Knuver-Hopf J, Lambrecht B, Mohr H. Target structures for HIV-1 inactivation by methylene blue and light. Journal of medical virology. 1995;47(2):172-178；Bachmann B, Knuver-Hopf J, Lambrecht B, Mohr H. Target structures for HIV-1 inactivation by methylene blue and light. Journal of medical virology. 1995;47(2):172-178)。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明の目的は、光線療法でドナー臓器の潅流液を処理することにより、ドナー臓器、任意にドナー肺内の病原体負荷を減らしおよび／または微生物を不活性化することである。本発明の目的は、エクス・ビボ潅流を使用して、ドナー臓器内の微生物、好ましくは、ＨＣＶウイルス、ＨＩＶ、Ｂ型肝炎、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン・バーウイルス、（ＥＢＶ）、およびアデノウイルスの１種以上などのウイルスまたはブドウ球菌、例えば、黄色ブドウ球菌、ステノトロフォモナス・マルトフィリア、およびシュードモナス細菌、例えば、緑膿菌の１種以上などの細菌を減らしおよび／または不活性化することである。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
次の概要は、以下のより詳細な説明を読者に紹介することを意図しており、特許請求された主題を定義または限定することを意図していない。
【００１４】
ある側面によれば、本主題は、
第１のチャンバーを規定するタンクと；
前記第１のチャンバーの内部に位置するセパレーターであって、前記セパレーターは第２のチャンバーを規定し、ここで、前記第１のチャンバーと前記第２のチャンバーは同心であり、かつ、実質的に環状の断面を有し、それぞれは少なくとも１つの直径と実質的に共通の縦軸を有するセパレーターと；
潅流液が前記第１のチャンバー中に導入される注入口と；
前記第１のチャンバー内の照射を受けた潅流液が前記タンクから取り出される排出口と；
前記潅流液への照射を提供するための、前記第２のチャンバーの内部に配置された放射線放出デバイスと
を備える、照射装置に関する。
【００１５】
別の側面によれば、本主題は、臓器潅流液を照射処理するための照射装置に関する。一態様では、前記装置は、
第１のチャンバーを規定するタンクと；
前記潅流液が前記第１のチャンバー中に導入される注入口と；
前記第１のチャンバー内の照射を受けた潅流液が前記タンクから取り出される排出口と；
前記第１のチャンバーの内部に位置し、かつ、第２のチャンバーを規定するセパレーターであって、前記第１のチャンバーから前記第２のチャンバーの間に障壁を形成するセパレーターと；
前記潅流液への照射を提供するための、前記第２のチャンバーの内部に配置された紫外線放射デバイスと
を備える。
【００１６】
一態様では、前記潅流液は肺潅流液である。
【００１７】
一態様では、前記放射線放出デバイスは紫外線放射デバイスである。
【００１８】
一態様では、前記放射線放出デバイスはＵＶＣランプである。
【００１９】
別の態様では、前記セパレーターは石英ガラス製である。
【００２０】
さらなる態様では、前記タンクはガラス製である。
【００２１】
一態様では、環状断面を有するプラスチック外部保護物は、前記タンクの外面に付けられる。
【００２２】
別の側面によれば、
下部ユニットと；
該装置を開閉するために前記下部ユニットに対して移動可能であるように、前記下部ユニット上に枢動可能に取り付けられた上部ユニットと；
前記下部ユニットおよび前記上部ユニットのうちの１つの上に取り付けられた少なくとも１つの放射線源と
を備える照射装置であって、
ここで、前記上部ユニットおよび前記下部ユニットは、レセプタクル（receptacle）を受けるためのチャンバーを規定し、かつ、前記下部ユニットのサイドパネルのそれぞれは、前記レセプタクルの本体部分を支持するように構成されている溝を規定する、
照射装置が開示されている。一態様では、前記少なくとも１つの放射線源は、紫外線ランプを含んでなる。
【００２３】
別の態様では、前記紫外線ランプは、紫外線Ａランプ、紫外線Ｂおよび紫外線Ｃのうちの１つを含んでなる。
【００２４】
さらなる態様では、前記照射装置は、前記装置が開いている間にそれが不注意に作動するのを防ぐために、前記装置が開いているおよび／または閉じている時を該センサーが検出するように、前記上部ユニットが前記下部ユニットの上部で上方および／または下方へ移動した時を検出するための安全センサーをさらに含んでなる。
【００２５】
一態様では、前記安全センサーは、前記上部ユニットと前記下部ユニットが接触していない時を前記センサーが検出するように、前記下部ユニットおよび前記上部ユニット上に位置する検知プレートを含んでなる。
【００２６】
別の側面によれば、
注入口および排出口を有する、外面を含んでなる細長い管状体と、
該石英管が外部の管に接続されたときに滑り嵌めを提供するための、前記注入口および前記排出口の端で前記外面に機械加工された把持手段と
を備えた、石英管が開示されている。
【００２７】
一態様では、滅菌パッケージは、上記の石英管を含んでなる。
【００２８】
別の態様では、前記滅菌パッケージは、前記石英管および外部の管材料に接続するように構成されているコネクターをさらに含んでなる。
【００２９】
一側面によれば、
照射装置およびレセプタクル
を備える照射システムであって、
前記照射装置は、
下部ユニットおよび、前記装置を開閉するために前記下部ユニットに対して移動可能であるように、前記下部ユニット上に枢動可能に取り付けられた上部ユニットと
前記下部ユニットおよび前記上部ユニットのうちの１つの上に取り付けられた少なくとも１つの放射線源と
を含んでなり、
ここで、前記上部ユニットおよび前記下部ユニットは、レセプタクルを受けるためのチャンバーを規定し、前記下部ユニットの各サイドパネルは、前記レセプタクルの本体部分を支持するように構成されている溝を規定し；
前記レセプタクルは、前記レセプタクル中に溶液を導入することができる注入口と；そこから溶液を取り出すことができる排出口とを含んでなり、ここで、把持手段は、前記レセプタクルが外部の管に接続されたときに滑り嵌めを提供するために、前記注入口および前記排出口の端で機械加工されている、
照射システムが開示されている。
【００３０】
一態様では、前記少なくとも１つの放射線源は、紫外線ランプを含んでなる。
【００３１】
別の態様では、前記紫外線ランプは、紫外線Ａランプ、紫外線Ｂおよび紫外線Ｃまたは赤色光を放出するランプ、任意に赤色光ランプ、または赤色光を含んでなる光源のうちの１つを含んでなる。
【００３２】
さらなる態様では、前記照射装置は、前記装置が開放構成にある間に前記装置が不注意に作動するのを防ぐために、前記照射器が開いているおよび／または閉じている時を該センサーが検出するように、前記上部ユニットが前記下部ユニットの上部で上方および／または下方へ移動した時を検出するための安全センサーをさらに含んでなる。
【００３３】
一態様では、前記安全センサーは、前記上部ユニットが前記下部ユニットの上部で移動した時を前記センサーが検出するように、前記下部ユニットおよび前記上部ユニット上に位置する検知プレートを含んでなる。
【００３４】
さらなる側面によれば、本主題は、移植前にドナー臓器内のウイルスおよび細菌を含む微生物を減らしおよび／または不活性化するための方法であって、潅流液を生成するために潅流溶液を使用してドナー臓器でエクス・ビボ潅流（ＥＶＰ）を実施する工程；および例えば本明細書に記載の照射装置を使用して前記潅流液を照射処理する工程を含んでなる、方法に関する。
【００３５】
一態様では、前記ドナー臓器はドナー肺であり、前記ＥＶＰはエクス・ビボ肺潅流（ＥＶＬＰ）である。
【００３６】
一態様では、前記照射はＵＶＣ照射である。ある態様では、前記照射は、赤色光照射を含んでなるまたはからなる。
【００３７】
前記照射は、任意に、前記ＥＶＰの一部の間にまたは前記ＥＶＰの全時間中に実施される。
【００３８】
ある態様では、前記方法は、少なくとももしくは約２時間、少なくとももしくは約４時間、少なくとももしくは約６時間、少なくとももしくは約８時間または少なくとももしくは約９時間、任意に、最大もしくは約１８時間実施される前記ドナー臓器での標準的なＥＶＰを実施する工程を含んでなる。
【００３９】
ある態様では、前記照射は、少なくとも２時間および最大１８時間、任意に、最大１５時間、最大１２時間、最大９時間、最大６時間または最大４時間、任意に、前記ＥＶＰと同じ期間実施される。
【００４０】
別の態様では、メチレンブルーなどの光増感剤が前記潅流溶液に添加され、前記照射は、赤色光照射を含んでなるまたはからなる。任意の殺ウイルス性／殺菌性光増感剤を前記活性化光と組み合わせて使用することができる。
【００４１】
いくつかの態様では、前記潅流液または前記潅流液の一部は、前記ＥＶＰ中に潅流溶液と交換され、前記方法は、前記ドナー臓器で第２のＥＶＰを実施する工程を含んでなる。例えば、第１のＥＶＰは、約１時間、約２時間、約３時間実施することができ、第２のＥＶＰは、約１〜６時間実施される。
【００４２】
本開示の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明から明らかになるであろう。しかしながら、本開示の趣旨および範囲内の様々な変更および修飾はこの詳細な説明から当業者に明らかになるため、詳細な説明および具体的な例は、本開示の好ましい態様を示しているが、説明のためだけに示されていることを理解されたい。
【００４３】
本明細書に記載の態様のより良い理解のためと、それらをいかに実行するかをより明確に示すために、ここで、ほんの一例として、少なくとも１つの例示的な態様を示す添付図面を参照する。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１Ａ】潅流液を照射処理するための装置の図である。
【図１Ｂ】図１Ａの装置の斜視図である。
【図２】図１Ａの装置の断面図である。
【図３】紫外線放射デバイスの図である。
【図４】ＥＶＬＰシステムの概略図である。
【図５】様々な処置後の肺潅流液および肺組織におけるウイルス負荷率％の変化を示す一連のグラフである。
【図６】様々な処置後の肺潅流液におけるウイルス負荷率％を示すグラフである。
【図７】ミニＥＶＬＰを示す概略図である。
【図８】ＵＶＣがＳｔｅｅｎ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ中のアルブミンに影響を及ぼさないことを示すポリアクリルアミドゲルである。
【図９】ミニＥＶＬＰおよびＵＶＣ曝露後のウイルス負荷率％を示すグラフである。
【図１０】感染性アッセイを示す概略図である。
【図１１Ａ】ＵＶＣ照射で処置した潅流液における感染性およびアルブミンレベルを示すグラフである。
【図１１Ｂ】ＵＶＣで処置した潅流液におけるアルブミンのレベルを示すブロットである。
【図１２Ａ】潅流液における緑膿菌のレベルに対するＵＶＣおよび抗生物質の効果を示すグラフである。
【図１２Ｂ】潅流液におけるＳ．マルトフィリアのレベルに対するＵＶＣおよび抗生物質の効果を示すグラフである。
【図１２Ｃ】潅流液における黄色ブドウ球菌のレベルに対するＵＶＣおよび抗生物質の効果を示すグラフである。
【図１３】試験した条件の概要を示す概略図である。
【図１４Ａ】徹底的な洗浄、ＵＶＣおよびＰＤＴの条件下でのＥＶＬＰ段階中の生理学的パラメーターを示す一連のグラフである。
【図１４Ｂ】処置肺および対照肺の潅流液におけるＨＣＶウイルス負荷を示す一連のグラフである。
【図１５Ａ】抗ＨＣＶコア抗体を使用して染色されたＨＣＶビリオンを示す一連の画像である。
【図１５Ｂ】ＨＣＶのＰＣＲ検出を示す一連のグラフである。
【図１５Ｃ】ＨＣＶ感染性に対する赤色光線療法の効果を示すグラフである。
【図１５Ｄ】臨床試験の概略図である。
【図１５Ｅ】ＥＶＬＰ中および移植後の生理学的パラメーターを示す一連のグラフである。
【図１６】ＥＶＬＰシステムのブロック図を示す。
【図１７】照射システムの図を示す。
【図１８】石英管の例示的な態様を示す。
【図１９Ａ】照射システムの例示的な態様を示す。
【図１９Ｂ】照射システムの例示的な態様を示す。
【図１９Ｃ】照射システムの例示的な態様を示す。
【図１９Ｄ】照射システムの例示的な態様を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４５】
本明細書では、エクス・ビボ潅流（ＥＶＰ）システムで潅流液を照射処理するための照射器を説明する。本明細書では、ＥＶＰ循環路内で臓器中を循環している潅流液を処置し、感染した臓器内のウイルスおよび細菌を不活性化してその臓器を移植に安全な状態にすることにより、ＵＶＣなどの光線療法および例えばメチレンブルーを使用した光化学療法（ＰＤＴ）をＥＶＰで使用することができることが実証されている。
【００４６】
用語「ＥＶＰ」または「エクス・ビボ潅流」とは、ドナーから採取されたドナー臓器の潅流を指し、例えば、常温ＥＶＰおよび低温ＥＶＰが含まれる。ＥＶＰが肺ＥＶＰである場合、ＥＶＬＰと呼ばれ、ＥＶＰが腎臓ＥＶＰである場合、ＥＶＫＰと呼ぶことができ、ＥＶＰが心臓ＥＶＰである場合、ＥＶＣＰと呼ぶことができ、ＥＶＰが肝臓ＥＶＰである場合、ＥＶＨＰと呼ぶことができる。
【００４７】
本明細書において使用される用語「標準的なＥＶＰ」とは、当技術分野で知られている時間の長さおよび条件下で、酸素運搬体の有無にかかわらずＳｔｅｅｎ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（商標）などの栄養溶液（すなわち潅流溶液）をドナー臓器の血管中に送り込むことを含む。臓器に応じて、ＥＶＰは、臓器特異的成分を含んでなる場合がある。例えば、肺の場合、ベンチレーターにより酸素が供給される。例えば、本明細書において使用される用語「標準的なＥＶＬＰ」とは、ベンチレーターから酸素を供給すると同時にＳｔｅｅｎ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（商標）などの栄養溶液（すなわち潅流溶液）を肺の血管中に送り込むこと（ＸＶＩＶＯ）を含む。
【００４８】
本明細書において使用される用語「潅流溶液」とは、臓器を潅流するために使用される任意の溶液を意味する。例えば、Ｓｔｅｅｎ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（商標）は、ＥＶＬＰを含むＥＶＰに一般的に使用されるが、他の肺潅流溶液も、例えば、米国特許出願第２０１８００７０５８３号に開示されているように記載されている。潅流溶液は、例えば、ＳＴＥＥＮ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＸＶＩＶＯ  Ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ、スウェーデン、イェーテボリ）に加えて、赤血球濃縮液などの酸素運搬体、全血などの血液、無細胞性ヘモグロビン系酸素運搬体（ＨＢＯＣ）、またはＨＢＯＣと血漿（ＨＢＯＣ＋Ｐｌａｓｍａ）も含む場合がある。例えば、ドナー臓器が心臓、腎臓または肝臓である場合に酸素運搬体が使用され得る。
【００４９】
本明細書において使用される用語「潅流液」とは、エクス・ビボ潅流に使用されたまたは使用中の潅流溶液、例えば、肺、腎臓、心臓または肝臓ＥＶＰなどで、少なくとも１回臓器中に送り込まれた潅流溶液を意味する。
【００５０】
本明細書において使用される用語「肺潅流液」とは、肺中に送り込まれた、ＥＶＬＰに使用されるＳｔｅｅｎ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（商標）などの潅流溶液を意味する。同様に、本明細書において使用される「腎臓潅流液」とは、腎臓中に送り込まれたＥＶＫＰに使用される潅流溶液を意味する。以下省略。
【００５１】
本明細書において使用される用語「Ｓｔｅｅｎ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（商標）」とは、ヒト血清アルブミン、デキストランおよび細胞外電解質組成物（低Ｋ＋）を含有する、ＥＶＬＰ用に特別に開発された、最適化されたコロイド浸透圧を有する緩衝デキストラン含有細胞外系溶液を意味する。Ｓｔｅｅｎ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎは、典型的にはＥＶＬＰの場合と同様に、無細胞性であってよくおよび／または酸素運搬体をさらに含んでよい。
【００５２】
本明細書において使用される「約」、「実質的に」、および「およそ」などの程度の用語は、最終結果が著しく変わらないように変更された用語の妥当な量の偏差を意味する。これらの程度の用語は、この偏差が変更する単語の意味を否定しない場合、変更された用語の少なくとも±５％の偏差を含むと解釈されるべきである。
【００５３】
特に断りがない限り、本開示に関連して使用される科学用語および技術用語は、当業者によって一般的に理解される意味を有するものとする。さらに、文脈上必要とされない限り、単数形の用語は複数形を含み、複数形の用語は単数形を含むものとする。
【００５４】
以下の説明では、特許請求された主題の例を示すために具体的な詳細を説明する。しかしながら、以下に記載される態様は、特許請求された主題を定義または限定することを意図するものではない。
【００５５】
例示の単純化および明瞭化のために、適当と考えられる場合には、対応するまたは類似の要素またはステップを示すために、図面間で参照番号を繰り返すことがあることは理解されよう。本明細書に記載の主題の例示的な態様の完全な理解を与えるために、数多くの具体的な詳細が示される。しかしながら、本明細書に記載の態様はこれらの具体的な詳細なしで実施し得ることを当業者は理解するであろう。他の例では、本主題を不明瞭にしないように、周知の方法、手順および成分は詳細に説明されていない。さらに、この説明は、決して主題の範囲を限定するものではなく、むしろ様々な態様を例示するものと見なされるべきである。
【００５６】
図１Ａおよび１Ｂに示すように、溶液（すなわち潅流溶液／潅流液、任意に潅流液と呼ばれる）を照射処理するための装置は、内部チャンバーを規定するタンク１０３を有する。タンクは直立型である場合があり、その高さはそのスパンよりも大きい場合がある。タンクはガラスまたは他の好適な材料で作られていてよい。タンクはほぼ円形の断面を有し得る。一態様では、タンクの直径は２〜５センチメートルであり得る。タンクは、四角形、五角形、六角形、七角形または八角形などの多角形の断面を有する場合もある。
【００５７】
図１Ａおよび１Ｂに示すように、プラスチック外部保護物１０５は、タンク１０３の外面に付けられる。プラスチック外部保護物はタンクの形状をとってもよい。プラスチック外部保護物は、ほぼ円形の断面を有し得る。一態様では、前記プラスチック外部保護物の半径は、３〜６センチメートルであり得る。例えば、前記プラスチック外部保護物の半径は、約３．８、または任意に３．７７センチメートルであり得る。
【００５８】
タンク１０３は、上部および下部を備えた内部チャンバー１０７を規定する。タンクの上層部分は、一般的に円筒であり得る。タンク１０１の下部は、一般的に円筒であり得る。
【００５９】
タンク１０３は供給口１０９を有する。供給口１０９は、臓器から来る潅流液をチャンバー１０７の上部に導入する。タンク１０３は、潅流液をチャンバー１０７に導入するための１つ以上の供給口を備えていてよい。供給口１０９は、潅流液を下方にチャンバー上部に向けるエルボを含み得る。供給口１０９は、潅流液を上方にチャンバー上部に向けるエルボをさらに含み得る。供給口１０９を通過する潅流液の流れは、定流で、臓器サイズに応じて毎分１〜３リットルの範囲であり得る。
【００６０】
一態様では、臓器内で定流を確保しおよび／または臓器サイズに適合させるために、前記流速は毎分１．５リットルである。別の態様では、臓器内で定流を確保しおよび／または臓器サイズに適合させるために、前記流速は毎分２リットルである。さらなる態様では、臓器内で定流を確保しおよび／または臓器サイズに適合させるために、前記流速は毎分２．５リットルである。
【００６１】
いくつかの態様では、前記潅流液は肺潅流液である。一態様では、肺内で定流を確保しおよび／または肺サイズに適合させるために、前記流速は毎分１．５リットルである。別の態様では、肺内で定流を確保しおよび／または肺サイズに適合させるために、前記流速は毎分２リットルである。さらなる態様では、肺内で定流を確保しおよび／または肺サイズに適合させるために、前記流速は毎分２．５リットルである。
【００６２】
タンク１０３は、潅流液がタンク１０３から取り出される排出口１１１を含んでなる。排出口は、チャンバーの下部に位置し得る。排出口１１１でタンク１０３から取り出された潅流液は、照射処理される。このタンクは、チャンバー１０７から照射を受けた潅流液を取り出すための１つ以上の排出口を含んでなり得る。
【００６３】
セパレーター１１３は、チャンバー１０７の内側に第２のチャンバー１１５を規定する。 このセパレーターは、タンクの軸線に沿って延びている場合がある。第２のチャンバー１１５は円筒形状を有し得る。放射線放出デバイス、任意に紫外線放射デバイス１２０は、第２のチャンバー１１５の内側に配置されている。放射線放出デバイス、任意に紫外線放射デバイスは、チャンバー１０７内を流れる潅流液への照射を提供し得る。セパレーター１１３により、第２のチャンバー１１５はチャンバー１０７から離されている。セパレーター１１３は、第２のチャンバー１１５とチャンバー１０７との間の障壁として機能する。放射線放出デバイスは、赤色光発光デバイスであってもよい。
【００６４】
一態様では、チャンバー１０７と第２のチャンバー１１５は、同心であり、かつ、実質的に環状の断面を有し、各々は少なくとも１つの直径と実質的に共通の縦軸を有する。
【００６５】
一態様では、円形の中空円筒は、第１のチャンバー１０７の内側に形成される。この円形中空円筒は、第１のチャンバーおよび第２のチャンバーの２つの同心円筒部とタンクの２つの平行な環状底面に囲まれた三次元領域である。２つの平行な環状底面は、円筒の軸に垂直であり得る。潅流液がタンク１０３に入ると、潅流液は、円形中空円筒内に収容される。ひとたび円形中空円筒内に入ると、潅流液は、第２のチャンバー１１５の内側に位置する放射線放出デバイスの周りを通過する。潅流液は、円形中空円筒の内側で定流を有し得る。
【００６６】
図２は、潅流液を照射処理するための装置の例示的態様の断面図を示す。チャンバー１０７と第２のチャンバー１１５は同心であり、かつ、実質的に環状の断面を有する。チャンバー１０７の半径は、約２．８センチメートル、任意に２．７７センチメートルであり得る。第２のチャンバー１１５の半径は、約２センチメートルであり得る。プラスチック外部保護物もまた、第１のチャンバーおよび第２のチャンバーと同心である。例えば、プラスチック外部保護物１０５の半径は、約３．８センチメートル、任意に３．７７センチメートルであり得る。
【００６７】
共通の縦軸の長さは、１０〜２０センチメートルであり得る。図１Ａに戻ると、共通の縦軸の長さは、約１３．３センチメートル、任意に１３．３６センチメートルであり得る。潅流液がチャンバー１０７内を流れると、第２のチャンバーの内側に配置された放射線放出デバイスにより潅流液への照射が提供される。
【００６８】
セパレーター１１３は、石英ガラス、または他の好適な材料で作られていてよい。石英ガラスの光学的および熱的特性は、その純度から他のタイプのガラスよりも優れている。例えば、石英ガラスは熱膨張係数が低いことから、放射線放出デバイスと潅流液を収容するチャンバーとの間に障壁を形成するのに有用な材料となる。セパレーターとしての石英ガラスは、紫外（ＵＶ）から近赤外（ＩＲ）に及ぶ広い透過範囲を有し得る。石英ガラスは、その強度と高融点（通常のガラスに比べて）のために、放射線放出デバイスのエンベロープとして使用される。
【００６９】
例えば、紫外線放射デバイスはＵＶＣ放射デバイスであり得る。例えば、紫外線放射デバイスは紫外線Ｃ（ＵＶＣ）ランプであり得る。紫外線放射デバイスは、実質的に環状の断面を有する円筒形状を有し得る。赤色光発光デバイスも同様に、実質的に環状の断面を有する円筒形状を有し得る。
【００７０】
図３は、紫外線放射デバイスの例示的な態様を示す。このデバイスの直径は約１．６センチメートルであり得る。このデバイスの縦方向の長さは、約１３．４センチメートル、任意に１３．３６センチメートルであり得る。
【００７１】
図２に戻ると、第２のチャンバー１１５の内側に紫外線放射デバイス１２０などの放射線放出デバイスが示されている。この態様では、紫外線放射デバイス１２０は、第２のチャンバー１１５と同心である。紫外線放射デバイス１２０の半径は、約０．８センチメートルであり得る。
【００７２】
作動中、潅流液は、供給口（または溶液注入口）を通って照射装置に入る。潅流液は、臓器中の潅流の結果として、例えば、ＨＣＶウイルス、ＨＩＶ、Ｂ型肝炎、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン・バーウイルス、（ＥＢＶ）、およびアデノウイルスの１種以上などのウイルスならびに／またはブドウ球菌、例えば、黄色ブドウ球菌、ステノトロフォモナス・マルトフィリア、およびシュードモナス細菌、例えば、緑膿菌の１種以上などの細菌などの微生物を含有する可能性がある栄養溶液である。潅流液は、制御された流速で照射装置に入る。照射を受けた潅流液は、同じ流速で照射装置から出すことができる。制御された流速は、毎分０．１〜３リットルであり得る。例えば、肺潅流液は、照射装置に毎分１．５リットルの流速で入れることができる。別の例として、潅流液は、照射装置に毎分２リットルの流速で入れることができる。さらなる例として、潅流液は、照射装置に毎分２．５リットルの流速で入れることができる。潅流流速は、臓器のサイズに基づいて選択される。
【００７３】
ひとたび照射装置に入ると、潅流液は、典型的には、最小限の期間にわたり連続照射、例えば、紫外線放射デバイスからのＵＶＣ光または赤色光発光デバイスからの赤色光に曝される。例えば、紫外線放射デバイスはＵＶＣランプであり得る。ＵＶＣランプは、１００ｎｍ〜２８０ｎｍの波長を有する電磁放射線を放出し得る。例えば、ＵＶＣランプは、２５３．７ｎｍの波長で電磁放射線を放出する。ＵＶＣ電球は、０．９ジュール／秒（またはワット）の速度でエネルギーを伝達し得る。ＵＶＣランプの放射強度は、４５０μＷ／ｃｍ２（μＷ＝１０〜６Ｊ／秒の場合）であり得る。赤色光発光デバイスは、赤色光ランプであってよく、特に波長６２０ｎｍ〜６４０ｎｍを発する約６２０ｎｍ〜約７５０ｎｍの赤色光を提供し得る。
【００７４】
図１７を参照すると、溶液に照射を提供するための照射システム１７００の図が示されている。例えば、溶液は、潅流液であり得る。照射システム１７００は、照射器１７０１および（照射）レセプタクル１７０３を含む。例えば、照射システムは、正確に制御可能な線量の照射が溶液に効率的に送達されるように、溶液を照射することができる。
【００７５】
図１７に戻って参照すると、照射器１７０１は、下部ユニット１７０５および上部ユニット１７０７を含む。例えば、この下部ユニットは、底面であり得る。例えば、この上部ユニットは、照射器を開閉するために下部ユニットに対して移動可能であるように、下部ユニットに枢動可能に取り付けられる。ホルダー１７１８を使用して、上部ユニットを開閉することができる。
【００７６】
下部ユニット１７０５および上部ユニット１７０７の少なくとも一方、好ましくは、各々の内部には、放射線源１７１２および１７１３があり、例えば、この放射線源はランプであり得る。例えば、照射器は、１つ以上の反応器、任意に４つの反応器を含むことができる。例えば、反応器は、電力ユニットと、例えば、１つ以上のランプ（または電球）などの放射線源を含む。例えば、これらのランプは、細長くおよび／または管状であり得る。例えば、複電圧（１２７Ｖ／２２０Ｖ）ＡＣ電源コードを電源出力口に接続して、反応器に電力を供給することができる。
【００７７】
例えば、２つのランプを下部ユニットに取り付けることができる。例えば、２つのランプを上部ユニットに取り付けることができる。例えば、照射器が閉鎖位置にある時、上部ユニットと下部ユニットがチャンバーを形成する。例えば、照射を受ける溶液は、ランプからの紫外線などの放射線にそれを曝すことができるレセプタクル中に送り込まれるか、そうでなければレセプタクルを通ってチャンバーを移動する。チャンバーは所定の幅を有し得る。
【００７８】
例えば、前記ランプは、ＵＶ−Ａ光を提供するための紫外線Ａ（ＵＶ−Ａ）ランプであり得る。例えば、ＵＶ−Ａランプは、約３２０ｎｍ〜約４００ｎｍの光を放出することができる。例えば、前記ランプは、ＵＶ−Ｂ光を提供するための紫外線Ｂ（ＵＶ−Ｂ）ランプであり得る。例えば、ＵＶ−Ｂランプは、約２９０ｎｍ〜約３２０ｎｍの光を放出することができる。例えば、前記ランプはまた、赤色光ランプであってよく、約６２０ｎｍ〜約７５０ｎｍの、特に６２０ｎｍ〜６４０ｎｍを含む赤色光を提供し得る。
【００７９】
例えば、前記照射器には、照射を提供するための４つのＵＶランプまたは４つの赤色光ランプが装備されている。例えば、照射器の下部ユニットおよび上部ユニットには、それぞれ２つのＵＶ−Ｃランプを装備することができる。例えば、ＵＶ−Ｃランプは、下部ユニットおよび上部ユニットのプラットフォーム上に取り付けることができる。例えば、ＵＶ−Ｃランプは、約２９ボルトの電圧、約０．１７アンペアの電流および約４ワットの電力で動作することができる。例えば、これらのランプは平行にすることができる。例えば、これらのランプは、細長くかつ管状であり得る。
【００８０】
例えば、前記下部ユニットおよび前記上部ユニットは、前記照射器内のレセプタクル（例えば、管）内部の溶液への均一な照射を提供するための複数のランプを含むことができる。例えば、照射器は、照射への均一な曝露を提供するための少なくとも２つのランプを含むことができる。例えば、照射器は、４Ｗで動作する４つの低圧水銀ＵＶＣランプ（２５４ｎｍで動作）を含むプラットフォームであり得る。例えば、各ランプは、石英管と接触した時に３１ｍＷ／ｃｍ２の光出力密度を提供し、１ランプあたり石英管の中心でおよそ２４ｍＷ／ｃｍ２である。例えば、これは、４つのランプを一緒に使用した場合、石英管の中心で合計およそ９６ｍＷ／ｃｍ２であることを表す。
【００８１】
例えば、前記照射器が閉鎖位置にある時、前記上部ユニットと前記下部ユニットがチャンバーを形成し、前記ランプを包囲する。例えば、この上部ユニットは、照射器を開閉するために下部ユニットに対して移動可能であるように、下部ユニット上に枢動可能に取り付けられる。例えば、上部ユニットと下部ユニットは、レセプタクルを受けるためのチャンバーを規定する。例えば、下部ユニットのサイドパネルは、レセプタクルの本体部分を支持するように構成されている溝を規定する。
【００８２】
図１７に戻って参照すると、下部ユニット１７０５は、下部ユニットの各側にサイドパネル１７１６を有する。各サイドパネルは、照射プロセス中にレセプタクル１７０３を支持することができる溝１７１７を規定する。上部ユニット１７０７は、上部ユニットの各側にサイドパネル１７１４を有し、各サイドパネルは、照射中にレセプタクルの本体部分を収容するための溝１７１５を規定する。例えば、溝１７１５および１７１７は、照射器が閉鎖位置にある時、サイドパネル１７１４および１７１６において側面開口部を規定する。例えば、下部ユニット１７０５および上部ユニット１７０７上のランプは、レセプタクルを収容するキャビティを規定することができる。例えば、このキャビティは、下部ユニットと上部ユニットの間の隙間または容積である。例えば、レセプタクルは、照射プロセス中にそのような隙間に配置される。
【００８３】
例えば、照射器によって汚染除去する溶液（例えば、潅流液）を供給するために、キャビティの内側に使い捨ての石英管を配置することができる。例えば、使い捨ての石英管は、キャビティに挿入された時に、ランプに隣接してまたはランプと接触して配置され得る。
【００８４】
例えば、前記照射器には、照射を提供するための１つのランプを装備することができる。例えば、前記照射器には、照射を提供するための２つ以上のランプを装備することができる。例えば、これらのランプは容易に交換できる。例えば、これらのランプは、上部ユニットおよび下部ユニットから除去または離脱し得るなど、照射器から取り出すことができる。例えば、ユーザーは、照射器からＵＶ−Ｂランプを取り出し、ＵＶ−ＣランプまたはＵＶ−Ａランプと交換することができる。例えば、ランプは、外部スリーブと、電流をランプに供給するソケットまたはコネクター部材をその端部に有するランプ回路とを含むことができる。ランプの例としては、紫外線を生成可能な水銀蒸気ランプが挙げられる。照射器の内側に照射を提供するために、任意の数の照射ランプを採用し得ることは、当業者ならば理解されよう。例えば、照射器は、適切な照射線量を確実に受けながら、所望の速度の溶液スループットを達成するように設計することができる。
【００８５】
例えば、前記ランプは、ＵＶ−Ａ光を提供するための紫外線Ａ（ＵＶ−Ａ）ランプであり得る。例えば、ＵＶ−Ａランプは、約３２０ｎｍ〜約４００ｎｍの光を放出することができる。例えば、前記ランプは、ＵＶ−Ｂ光を提供するための紫外線Ｂ（ＵＶ−Ｂ）ランプであり得る。例えば、ＵＶ−Ｂランプは、約２９０ｎｍ〜約３２０ｎｍの光を放出することができる。例えば、前記ランプは、ＵＶ−Ｃ光を提供するための紫外線Ｃ（ＵＶ−Ｃ）ランプであり得る。例えば、ＵＶ−Ｃランプは、約１００ｎｍ〜約２８０ｎｍの光を放出することができる。例えば、前記照射器には、照射を提供するための４つのＵＶ−Ｃランプを装備することができる。例えば、照射器の下部ユニットおよび上部ユニットには、それぞれ２つのＵＶ−Ｃランプを装備することができる。他の態様では、前記ランプは赤色光ランプであり、約６２０ｎｍ〜約７５０ｎｍの、特に波長６２０ｎｍ〜６４０ｎｍを含む赤色光を提供する。
【００８６】
例えば、照射器が閉鎖位置にある時、上部ユニットと下部ユニットが照射チャンバーを形成する。例えば、照射を受ける溶液は、ランプからの紫外線にそれを曝すことができるレセプタクル中に送り込まれるか、そうでなければレセプタクルを通ってチャンバーを移動する。例えば、レセプタクルは石英管であり得る。例えば、石英ランプは、放射線チャンバー内の石英に触れている可能性がある。例えば、石英管はランプに近接して配置され得る。例えば、石英管は、ランプに隣接して配置され得る。
【００８７】
例えば、ランプは、１６ｍｍの直径を有し得る。例えば、ランプは、約１２ｍｍ〜約２０ｍｍの直径を有し得る。例えば、ランプは、約８ｍｍ〜約２４ｍｍの直径を有し得る。例えば、ランプは、１３６ｍｍの長さを有し得る。例えば、ランプは、約１３０ｍｍ〜約１４２ｍｍの長さを有し得る。例えば、ランプは、約１２４ｍｍ〜約１５２ｍｍの長さを有し得る。例えば、ランプは、約１１８ｍｍ〜約１５８ｍｍの長さを有し得る。
【００８８】
例えば、ランプは、３１ｍＷ／ｃｍ２のフルエンスをもたらし得る。例えば、ランプは、約２５ｍＷ／ｃｍ２〜約３７ｍＷ／ｃｍ２のフルエンスをもたらし得る。例えば、ランプは、約１９ｍＷ／ｃｍ２〜約４３ｍＷ／ｃｍ２のフルエンスをもたらし得る。例えば、ランプは、約１３ｍＷ／ｃｍ２〜約４９ｍＷ／ｃｍ２のフルエンスをもたらし得る。
【００８９】
例えば、ランプは、１〜２００Ｈｚの周波数で赤色光または紫外線（ＵＶ−Ａ線、ＵＶ−Ｂ線およびＵＶ−Ｃ線など）をパルスにすることができ、１ナノ秒〜１秒の持続時間を有する。例えば、パルスの周波数は約５０Ｈｚである。例えば、パルスの持続時間は約２ミリ秒であり得る。
【００９０】
図１７に戻って参照すると、照射器にオン／オフボタン１７１０が示されている。例えば、オン／オフボタン１７１０は、照射器の制御ユニットに配置され得る。
【００９１】
図１９Ａ、１９Ｂ、１９Ｃおよび１９Ｄを参照すると、レセプタクル１７０３は、照射器１７０１の内側のキャビティに配置される。レセプタクルの注入口１７２３および排出口１７２１は図１９Ｄに示されている。例えば、レセプタクルは石英管であり得る。図１９Ａおよび１９Ｂでは、照射器１７０１は開放位置である。例えば、石英管はまた、ＥＶＰシステムに接続され得る。石英管の注入口はＥＶＰシステムの排出口に接続され、石英の排出口はＥＶＰシステムの注入口に接続され得る。図１９Ｂおよび１９Ｃに示されるように、ユーザーは、ホルダー１７１８を使用することにより照射器１７０１を閉じようとしているところである。図１９Ｄでは、上部ユニットが下部ユニットの上部に置かれているため、照射器１７０１は閉じられている。また、照射器が開いているおよび／または閉じている時を検出するための安全センサーに接続するケーブル１９１１も示されている。このケーブルは、デバイスの動作を制御する照射器の制御ユニットに接続され得る。例えば、安全センサーは、装置が開いているおよび／または閉じている時を安全センサーが検出するように、上部ユニットが下部ユニットと密着している時を検出することができる。例えば、安全センサーは、装置が開いている間に装置が不注意に作動するのを防ぐことができる。
【００９２】
例えば、照射器に電源が入ると、溶液が石英管内を注入口から排出口まで流れる時に、ランプが電子ビームまたは他の同等の照射ビームを生成し、このビームが石英管に向けられ、石英管内の溶液が照射処理される。例えば、照射は石英管の外面全体に沿って提供される。石英管の中を流れる潅流溶液が照射を受けると、照射を受けた潅流溶液はその排出口から石英管を出る。
【００９３】
例えば、前記照射器は、照射器が開いているおよび／または閉じている時を検出するように、前記上部ユニットが前記下部ユニットの上部で上方および／または下方へ移動した時を検出するための安全センサーを含む。例えば、照射器は、上部ユニットが開いている間にそれが不注意に作動するのを防ぐ安全センサーを有し得る。照射器が開いている時、安全センサーはランプをオフにしおよび／または防がなければ潜在的に有害であり、オペレーターに危険をもたらす放射線を放出するのを防ぐ。
【００９４】
例えば、安全センサーは、照射器が開放および／または閉鎖位置にある時を検出するための２対の平行な検知プレートからなる構造であり得る。例えば、各プレート対は、上部ユニットが下部ユニットの上部で移動した時を安全センサーが検出するように、下部ユニットと上部ユニットのそれぞれに配置され得る。従って、安全センサーは、上部ユニットが開いているおよび／または閉じている時を検出する。
【００９５】
図１７に戻って参照すると、照射レセプタクル１７０３が示されている。例えば、照射レセプタクルは管であり得る。例えば、照射レセプタクルは石英管であり得る。レセプタクル１７０３は、溶液がレセプタクル中に導入される注入口１７２３を有する。例えば、その溶液は溶液（例えば、潅流液／潅流溶液、Ｓｔｅｅｎ（商標）溶液等）であり得る。レセプタクル１７０３は、照射を受けた溶液をそこから取り出すことができる排出口１７２１を有する。
【００９６】
例えば、レセプタクルが照射器によって照射を受け、溶液がレセプタクルを通って循環している時に溶液中の微生物の不活性化が起こり、紫外線または赤色光による溶液の照射が可能になる。例えば、レセプタクル中の溶液は光源の近くを循環路に沿って流れる。光源は、任意に、ＵＶ光源または赤色光源である。例えば、ＵＶ光源はＵＶ−Ａランプであり得る。例えば、ＵＶ光源はＵＶ−Ｂランプであり得る。例えば、ＵＶ光源はＵＶ−Ｃランプであり得る。
【００９７】
図１８を参照すると、外面１８０２を含む細長い管状体を有する石英管１８００が示されている。石英管１８００は、溶液が石英管中に導入される注入口１８０６を有する。レセプタクル１８００は、溶液をそこから取り出すことができる排出口１８０４を有する。例えば、把持手段は、石英管が外部の管に接続されたときに滑り嵌めを提供するために、注入口および排出口の端で外面に機械加工することができる。
【００９８】
例えば、石英管は、１３３ｍｍの長さを有し得る。例えば、石英管は、約１００ｍｍ〜約１７０ｍｍの長さを有し得る。例えば、石英管は、約７０ｍｍ〜約２００ｍｍの長さを有し得る。例えば、石英管は、約３０ｍｍ〜約２４０ｍｍの長さを有し得る。
【００９９】
例えば、石英管は単体として販売することができる。例えば、石英は滅菌パッケージで販売することができる。例えば、石英は容易に滅菌することができる。
【０１００】
図１７に戻って参照すると、レセプタクル１７０３は、図１８に記載されるような石英管であり得る。レセプタクルは、注入口１７２３に把持手段１７２３Ａを有し、排出口１７２１に把持手段１７２１Ａを有する。例えば、把持手段は、レセプタクルの注入口および排出口に機械加工することができる。把持手段は、それらがコネクターまたは管に接続されたときに滑り嵌めを提供するために使用することができる。
【０１０１】
例えば、レセプタクル／石英管は、システム（ＥＶＰシステム、ＥＶＬＰシステム、ＥＶＫＰシステム、ＥＶＣＰシステム、ＥＶＨＰシステムなど）に直列に接続することができる。例えば、このようなシステムの管は、オス／メスコネクターを使用することにより石英管に接続することができる。例えば、オス／メスコネクターは、ＰＶＣで作られていてよい。例えば、オスおよびメスコネクターは、２つの対向する端部を有する中央通路を規定する細長い要素を規定することができる。
【０１０２】
図１８に戻って参照すると、オスコネクター１８２１は、石英管の注入口１８０６に接続されている。オスコネクター１８２１は、一端にメスプラグ受入開口部１８２５を、他端に管受入開口部１８２７を有する。メスコネクター１８３１は、石英管の排出口１８０４に接続されている。メスコネクター１８３１は、一端にオスプラグ受入開口部１８３５を、他端に管受入開口部１８３７を有する。例えば、メスプラグ受入開口部は、オスコネクターおよびメスコネクターが接続されている時にオスプラグ受入開口部を受けるように構成されている（図示せず)。
【０１０３】
オスコネクターおよびメスコネクターは、コネクター内の流体の流れを停止させるためのストップフローボタン／ピン１８４０を含む。コネクター内の流体の流れは、コネクターを石英管および／またはシステム管材料に接続している時に停止させることができる。
【０１０４】
図１８に示されるように、オスコネクター１８２１は、注入口１８０６が管受入開口部１８２７に嵌合されると石英管１８００に接続される。メスコネクター１８３１は、排出口１８０４が管受入開口部１８３７に嵌合されると石英管１８００に接続される。
【０１０５】
例えば、オスコネクターおよび／またはメスコネクターは単体として販売することができる。例えば、コネクターは滅菌パッケージで販売することができる。
【０１０６】
例えば、石英管は、１つ以上のコネクター付きで販売することができる。例えば、滅菌パッケージは、１つ以上のコネクター付きの石英管を含んでなり得る。
【０１０７】
例えば、石英管は、２１．６ｍｍの壁厚を有し得る。例えば、石英管は、約１８．６ｍｍ〜約２４．６ｍｍの壁厚を有し得る。例えば、石英管は、約１５．６ｍｍ〜約２７．６ｍｍの壁厚を有し得る。例えば、石英管は、約１２．６ｍｍ〜約３０．６ｍｍの壁厚を有し得る。
【０１０８】
例えば、石英管を通過する溶液の流速は、１Ｌ／分であり得る。例えば、溶液の流速は、溶液の流速は、約０．８Ｌ／分〜約１．２Ｌ／分であり得る。例えば、溶液の流速は、約０．６Ｌ／分〜約１．４Ｌ／分であり得る。例えば、溶液の流速は、約０．４Ｌ／分〜約１．６Ｌ／分であり得る。
【０１０９】
例えば、照射中の照射器およびレセプタクル（例えば、管）内の温度は、３７℃であり得る。例えば、その温度は、約３５℃〜約３９℃であり得る。例えば、その温度は、約３３℃〜約４１℃であり得る。例えば、その温度は、約３０℃〜約４４℃であり得る。
【０１１０】
例えば、石英管は交換可能であり得る。例えば、石英管は容易に滅菌することができる。例えば、石英管はガラス質エンベロープ材料として使用することができる。例えば、石英管は約１１００℃までの高い動作温度に耐えることができる。いくつかの態様では、石英管。
【０１１１】
例えば、レセプタクルは、ＥＶＰシステム、任意にＥＶＬＰシステム、例えば、図１６に記載したＥＶＬＰシステムなどに接続され得る。例えば、レセプタクルは、潅流溶液／潅流液への照射を提供するためのＥＶＰシステムのさまざまなポイントで接続され得る。
【０１１２】
本明細書に記載の照射装置およびシステムは、例えば、ＥＶＬＰ、ＥＶＫＰ、ＥＶＣＰおよびＥＶＨＰとともに使用することができる。
【０１１３】
それに従って、潅流液は、肺潅流液、腎臓潅流液、心臓潅流液、肝臓潅流液または移植前に潅流し得る任意の臓器からの潅流液であり得る。
【０１１４】
ＥＶＬＰシステムの概略図を図４に示している。ＸＶＩＶＯ（商標）チャンバーは４０１で示されている。肺４０３は、ＸＶＩＶＯ（商標）チャンバー４０１内に配置されている。ＩＣＵベンチレーターは、ＸＶＩＶＯ（商標）チャンバーに接続され、ＸＶＩＶＯ（商標）チャンバー（Ｖｉｔｒｏｌｉｆｅ  ＡＢ（スウェーデン）から入手可能なＸＶＩＶＯ（登録商標）チャンバー）内の臓器に呼吸気を送る。リザーバーは４０５で示されている。肺潅流液は肺を出て、リザーバー４０５に入る。肺潅流液は、肺を出た後、照射装置（図示せず）を通過する場合がある。一態様では、肺潅流液は、ポンプを出た後、酸素化装置に入る前に照射装置を通過する場合がある。他の態様では、肺潅流液は、ＥＶＬＰ循環路の他のポイントで照射装置を通過する場合がある。
【０１１５】
そこから、肺潅流液は、遠心ポンプ４０９を使用して膜型（脱）酸素化装置４１１中に送り込まれ、そこで、ガス混合物（例えば、８６％Ｎ２、８％ＣＯ２および６％Ｏ２）によって脱酸素化され、正常体温まで温められ、熱交換器（ヒーター／クーラー）４１３に送り込まれる。次に、肺潅流液は、肺４０３に再入する前に、任意に、白血球フィルター４０７を通過する。
【０１１６】
図１６を参照すると、照射器を含むＥＶＬＰシステム１６００のブロック図が示されている。ＥＶＬＰシステム１６００は、照射システム１６１７、臓器チャンバー１６０１、ＩＣＵベンチレーター１６１５、リザーバー１６０５、遠心ポンプ１６０９、膜（脱酸素化装置）１６１１、脱酸素化ガスタンク１６２１、ヒーター／クーラー交換器１６１３および白血球フィルター１６０７を含む。例えば、照射器は照射システムの一部である。例えば、照射システムは、溶液を照射処理するためのＥＶＰシステムとともに使用することもできる。例えば、照射システムは、溶液を照射処理するためのＥＶＫＰシステムとともに使用することもできる。例えば、照射システムは、溶液を照射処理するためのＥＶＣＰシステムとともに使用することもできる。例えば、照射システムは、溶液を照射処理するためのＥＶＨＰシステムとともに使用することもできる。
【０１１７】
図１６に戻って参照すると、白血球フィルター１６０７の排出口は、潅流溶液／潅流液が白血球フィルターから照射システムへ流れる１６３１ように、照射システムの注入口に接続されている。照射システムの排出口は、照射を受けた潅流溶液／潅流液が照射システムから１６０１の臓器チャンバーへ流れる１６３２ように、臓器チャンバー１６０１の注入口に接続されている臓器チャンバー−肺接続と臓器チャンバー−リザーバー接続の間にブリッジクランプ１６２３がある。作動すると、ブリッジクランプは、潅流溶液が臓器チャンバーを通過することなく照射システム１６１７からリザーバー１６０５へ流れることを可能にする。
【０１１８】
例えば、照射システム１６１７は図１Ａおよび１Ｂならびに図２に記載した装置であり得る。例えば、照射システム１６１７は、図１７および１９Ａ〜Ｄに記載したシステムであり得る。
【０１１９】
例えば、臓器チャンバーは、ＸＶＩＶＯ（商標）チャンバーであり得る。例えば、臓器（肺など）１６０３は、処置のためにＸＶＩＶＯ（商標）チャンバー１６０１内に配置され得る。
【０１２０】
例えば、照射システム１６１７は、膜（脱酸素化装置）と白血球フィルターとの間に接続され得る。例えば、照射システムは、遠心ポンプと膜（脱酸素化装置）との間に接続され得る。例えば、照射システムは、リザーバーと遠心ポンプとの間に接続され得る。例えば、照射システムは、臓器チャンバーとリザーバーとの間に接続され得る。
【０１２１】
当業者は、他のシステム（ＥＶＰ、ＥＶＫＰ、ＥＶＣＰおよびＥＶＨＰシステムなど）が、人工呼吸器を備えていない場合があることを認識するであろう。この場合、照射システム、特には、照射器は、そのようなシステムの主回路内のどこにでも、好ましくは臓器チャンバーに入る前に、配置し得る。
【０１２２】
また、潜在的に感染性の微生物のドナー臓器を汚染除去するための方法も提供される。ドナー臓器内の、例えば、ＨＣＶウイルス、ＨＩＶ、Ｂ型肝炎、ＣＭＶ、ＥＢＶ、およびアデノウイルスの１種以上などのウイルスまたはブドウ球菌、例えば、黄色ブドウ球菌、ステノトロフォモナス・マルトフィリア、およびシュードモナス細菌、例えば、緑膿菌の１種以上などの細菌を含む微生物を不活性化するための方法の例を本明細書に記載している。
【０１２３】
それに従って、本発明の側面として、ドナー臓器内の、ウイルスおよび細菌を含む微生物を不活性化する方法があり、その方法は、
潅流液を生成するために潅流溶液を使用してドナー臓器でエクス・ビボ潅流（ＥＶＰ）を実施する工程；および
その潅流液を照射処理する工程
を含んでなる。
【０１２４】
一態様では、前記溶液（例えば、潅流液）は、ＵＶＣ光照射で処置され得る。別の態様では、前記潅流溶液は、メチレンブルーなどの光活性化剤を含んでなり、赤色光で照射処理され得る。
【０１２５】
この方法は、例えば、ＨＣＶウイルス、ＨＩＶ、Ｂ型肝炎ウイルス、ＣＭＶ、ＥＢＶ、およびアデノウイルスの１種以上を含むウイルスおよび／またはブドウ球菌、例えば、黄色ブドウ球菌；ステノトロフォモナス・マルトフィリア、およびシュードモナス細菌、例えば、緑膿菌の１種以上などの細菌などの微生物を不活性化することであり得る。
【０１２６】
ある態様では、前記方法は、前記ドナー臓器でＥＶＰを実施する工程を含んでなり、少なくとももしくは約２時間、少なくとももしくは約４時間、少なくとももしくは約６時間、少なくとももしくは約８時間または少なくとももしくは約９時間、少なくとももしくは約１２時間、任意に、最大もしくは約１８時間実施される。
【０１２７】
ＵＶＣ光照射および／またはＰＤＴは、１時間以内または２時間以内に微生物を効率的に不活性化し得る。それに従って、前記潅流液は、少なくとも１時間、少なくとももしくは約２時間、少なくとももしくは約３時間、少なくとももしくは約４時間、少なくとももしくは約５時間、少なくとももしくは約６時間、最大もしくは約７時間、最大もしくは約８時間、最大もしくは約９時間、少なくとも１０時間、少なくとも１１時間または少なくとも１２時間以上照射処理され得る。例えば、この照射は、少なくとも２時間および最大１８時間、任意に、最大１５時間、最大１２時間、最大９時間、最大６時間または最大４時間、任意に、前記ＥＶＰと同じ期間実施され得る。
【０１２８】
前記照射は、任意に、前記ＥＶＰの一部の間にまたは前記ＥＶＰの全時間中に実施される。
【０１２９】
いくつかの態様では、前記方法は、本明細書に記載の装置、システムまたはデバイスの１種以上を使用する。
【０１３０】
ある態様では、前記方法は、移植のために臓器を汚染除去するためのものであり、ここで、前記方法は、潅流液を提供するためにＥＶＰにより潅流溶液で感染した臓器の中を潅流する工程と；ＵＶＣまたはＰＤＴから選択される光線療法で前記潅流液を少なくとも２時間照射処理する工程と；それによって汚染除去された臓器を提供する工程とを含んでなる。
【０１３１】
一態様では、前記照射はＵＶＣである。
【０１３２】
別の態様では、前記潅流溶液は光増感剤を含んでなる。この光増感剤はメチレンブルーであり得る。メチレンブルーを使用する態様では、前記照射は赤色光である。他の例としては、光によって活性化されるとエンベロープウイルスに対して殺ウイルス性となる光増感剤ベンゾポルフィリン誘導体一酸環Ａ(benzoporphyrin derivative monoacid ring A)（ＢＰＤ−ＭＡ）が挙げられる。
【０１３３】
いくつかの態様では、前記ＥＶＰ循環路は、照射を提供する照射器を含んでなる。他の態様では、前記照射器は、本明細書で図１Ａ、１Ｂ、２、１７および１９Ａ〜Ｄに記載したあるいはＵＶランプ仕様またはレセプタクルなどの本明細書に記載の構成要素を含んでなる照射器である。
【０１３４】
一態様では、前記臓器は肺、腎臓、心臓および肝臓から選択される。
【０１３５】
一態様では、前記ＥＶＰは標準的なＥＶＰである。ある態様では、前記ＥＶＰはＥＶＬＰである。
【０１３６】
標準的なＥＶＬＰは、ベンチレーターから酸素を供給すると同時にＳｔｅｅｎ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（商標）などの栄養溶液を肺の血管中に送り込むことを含む。
【０１３７】
ある態様では、前記潅流溶液はＳｔｅｅｎ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎである。
【０１３８】
ある態様では、前記潅流溶液は酸素運搬体を含んでなる。
【０１３９】
一態様では、ドナー臓器内の微生物を減らしおよび／または不活性化する方法は、照射の有無にかかわらず標準的なＥＶＰを実施する工程；その潅流液を交換する工程；および照射を伴い再びＥＶＰを実施する工程を含む。一態様では、前記潅流液またはその一部は約１時間ごとに交換され得る。一態様では、前記潅流液は２時間ごとに交換され得る。一態様では、前記潅流液は３、４、５または６時間ごとに交換され得る。ある態様では、この方法は、照射の有無にかかわらず少なくとも３時間ＥＶＰを実施する工程；その潅流液またはその一部を新鮮な潅流溶液と交換する工程；および照射を伴いＥＶＰを、例えば、６時間実施する工程を含む。
【０１４０】
ある態様では、前記方法は、照射の有無にかかわらずＥＶＰを実施する工程；その潅流液またはその一部を交換する工程；および少なくとも１つの後続期間に照射を伴う１つ以上の後続期間にわたってＥＶＰを実施する工程を含んでなる。
【０１４１】
ある態様では、前記ＥＶＰはＥＶＬＰである。別の態様では、前記ＥＶＰはＥＫＰである。さらに別の態様では、前記ＥＶＰはＥＶＣＰである。さらに別の態様では、前記ＥＶＰはＥＶＨＰである。
【０１４２】
本明細書に記載の方法は、ウイルスまたは細菌に感染していることがわかっているかどうかにかかわらず、任意の臓器で使用することができる。本明細書に記載の光線療法を使用することにより、汚染を防ぐことができまたは移植前に定期検査されないもしくは検出されない感染の伝播を防ぐことができる。
【０１４３】
本明細書に記載の方法は、特に、例えば、ＨＣＶ陽性である臓器の救済を可能にし得る。それに従って、さらなる側面は、感染症により臓器が移植における使用に不適格とされた場合に、感染症を患っている個体から得られたドナー臓器をレシピエントへの移植用に救う方法であって、エクス・ビボシステムにおいて、第１の期間中に、潅流溶液で前記臓器の中を潅流する工程であって、ここで、前記期間は、前記個体は潅流液を生成するために感染していなかったことに基づいて決定される、工程と；前記臓器の潅流と同時に適用される第２の期間中に、前記潅流液を照射処理する工程であって、ここで、前記第２の期間は９時間以下である、工程
とからなる方法を含む。
【０１４４】
ある態様では、前記潅流液は、少なくとも２時間または本明細書に記載の期間にわたって照射処理される。流速などのパラメーターは、例えば、本明細書に記載のパラメーターであり得る。
【０１４５】
いくつかの態様では、前記方法は、臓器を移植することをさらに含んでなる。
【０１４６】
さらに他の態様では、潅流液を照射処理した後、その潅流液は、移植の前または後に感染性について任意に評価され得る。
【０１４７】
それに従って、感染した臓器を移植する方法も提供され、その方法は、
潅流液を提供するためにエクス・ビボ潅流（ＥＶＰ）により潅流溶液で感染した臓器の中を潅流する工程；
ＵＶＣまたはＰＤＴから選択される光線療法で前記潅流液を少なくとも２時間照射処理する工程；および
潅流および光線療法で処置された臓器を対象に移植する工程
を含んでなる。
【０１４８】
潅流およびＵＶＣまたは赤色光を含んでなる光による照射は、本明細書に記載のパラメーターのいずれかによるものであり得る。
【０１４９】
前述のように、ＰＤＴが使用される場合、潅流溶液は、メチレンブルーなどの光活性化剤を含んでなる。
【０１５０】
一態様では、ドナー肺内の微生物、任意に、ＨＣＶウイルス、ＨＩＶ、Ｂ型肝炎、ＣＭＶ、ＥＢＶ、およびアデノウイルスの１種以上などのウイルスまたは細菌を減らすための方法は、標準的なＥＶＬＰ中に肺潅流液にＵＶＣ照射を実施する工程、好ましくは、ＥＶＬＰ中に肺潅流液にＵＶＣ照射を少なくとも２時間、任意に２〜１２時間実施する工程を含んでなる。ＵＶＣ照射は、上記のように、肺潅流液を照射処理するための装置に肺潅流液を通すことを含む。実施例に示されるように、ＵＶＣ照射は、Ｓｔｅｅｎ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（商標）中のアルブミンに影響を及ぼさない。
【０１５１】
以下の限定されない例は、本開示の例示である。
【実施例】
【０１５２】
実施例１
ＨＣＶの組織および肺潅流液レベルの変化におけるＥＶＬＰの効果
方法
肺移植のために取り出したＨＣＶ＋ヒト肺を評価した。使用した回収およびフラッシュ技術は臨床実務と同様である。両方の肺ブロックを分割し、２つの別のＥＶＬＰ循環路に置き、比較した。ウイルス力価はｑｔＰＣＲにより測定した。
群１：対照ｎ＝３には、標準ＥＶＬＰを９時間施した（対照）。
群２：循環路／潅流液交換ｎ＝３。循環路および潅流交換は３時間とした。
【０１５３】
結果
図５は、見られたウイルス負荷の低下を示す。
【０１５４】
表１は、ウイルス負荷は、低ウイルス血のドナーの肺では検出できなかったことを示す。
【０１５５】
【表１】
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【０１５６】
実施例２
ＥＶＬＰ中で使用するための光に基づく療法（ＵＶＣおよびＰＤＴ）のための適用のためのデバイス
ＵＶＣ光照射（２５３．７ｎｍ；４５０マイクロＷ／ｃｍ２）は、細胞培養物中のＨＣＶを不活性化するために使用することができる（例えば、ヒト血清中で６０秒以内および２分以内）。
【０１５７】
特注の照射装置を設計し、図１および２で示されるように試験した。
【０１５８】
実施例３
肺潅流液のＨＣＶ量および感染性に対するＵＶＣの効果
方法
潅流液照射：ＵＶＣ：２５３．７ｎｍ；４５０マイクロＷ／ｃｍ２
肺移植のために取りだしたＨＣＶ＋ヒト肺を評価した。使用した回収およびフラッシュ技術は臨床実務と同様である。両方の肺ブロックを分割し、２つの別のＥＶＬＰ循環路に置き、比較した（群１および２）。ウイルス力価はｑｔＰＣＲにより測定した。
群１：対照ｎ＝３には、標準ＥＶＬＰを９時間施した。
群２：ＵＶＣ  ｎ＝３；ＵＶＣ照射９時間
群３：循環路／潅流液交換（洗浄）ｎ＝３。標準ＥＶＬＰ  ３時間／循環路／潅流液／標準ＥＶＬＰ交換６時間
【０１５９】
結果
結果を図６に示す。
【０１６０】
実施例４
ミニＥＶＬＰ循環路および照射器
ミニＥＶＬＰおよび照射器を図７で示されるように構成した。これは光波長／フルエンス(例えば、単位面積を通過する粒子の流れ）の評価に適切である。これをＵＶＣ曝露後の潅流溶液分解に及ぼす影響を評価するために使用した。使用したＵＶＣ電球は０．９Ｊ／秒；２５３．７ｎｍおよび／または４Ｗ／２９Ｖ／０．１７Ａ、直径１６ｍｍ、長さ１３６ｍｍであり、３１ｍＷ／ｃｍ２のフルエンスを提供した。このモデルでは、照射器は、ＵＶ球を収容する石英管と溶液を受けるためのチャンバーを形成する、任意に長さ１３３ｍｍおよび壁厚２１．６ｍｍまでの管を備えた通常のガラスとを含んでなる。プライミング容量は１５０ｍＬであった。溶液を照射器に送り込む。溶液は肺潅流液であり得る。遠心ポンプは溶液を照射器に制御された流速で送り込む。制御された流速は毎分０．１〜２リットルであり得る。溶液は照射器を出てリザーバーへ送られる。外部ヒーターはリザーバーの内部の溶液に熱を供給し得る。リザーバーの内部の溶液は遠心ポンプによって再び照射器に送られてよい。栓がリザーバーからのサンプルを回収してもよい。
【０１６１】
方法および結果
ミニＥＶＬＰで照射を受けたＦｒｅｓｈ  Ｓｔｅｅｎ溶液（１５０ｍＬ）を非照射Ｓｔｅｅｎ潅流溶液と比較した。溶液を１８０分間試験し、二重バリデーションを行った。図８に示すように、血清アルブミンに対する効果は見られなかった。
【０１６２】
ＵＣＶはまた、ＥＶＬＰミニ循環路でＨＣＶを除去することもできる。Ｆｒｅｓｈ  Ｓｔｅｅｎ溶液（１５０ｍＬ）をＨＣＶ血清（ＨＣＶ＋肺ドナー由来）でトランスフェクトした。初期ウイルス負荷は、平均６０００ＵＩ／ｍＬであった。潅流液照射は３時間（ＵＩＶＣ−０．９Ｊ／秒）行った。結果を図９に示す。逆三角形により示されるように、３例中２例で、ＵＶＣ曝露の１２０分後にウイルス負荷は検出されなかった。
【０１６３】
これらの実施例において、標準ＥＶＬＰがドナー肺中の微生物、好ましくは、例えば、ＨＣＶウイルス、ＨＩＶ、Ｂ型肝炎、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン・バーウイルス、（ＥＢＶ）、およびアデノウイルスの１種以上などのウイルスを減少させ、この効果は例えば３時間の循環路潅流液交換によって増強されることが実証される。ＵＶＣはＨＣＶの不活性化に有効である。
【０１６４】
実施例５
感染性アッセイ
図１０で示されるように、ＪＦＨ−１  ＨＣＶ株をＨｕｈ  ７．５１肝細胞をトランスフェクトするために使用する。ミニＥＶＬＰシステムで使用するための、作製済ＨＶＳを含むＴｒａｎｓｆｅｃｔ  Ｓｔｅｅｎ溶液を作製可能であり、例えば、微生物、好ましくは、ウイルス、例えば、ＨＣＶウイルス、ＨＩＶ、Ｂ型肝炎、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン・バーウイルス、（ＥＢＶ）、およびアデノウイルスの１種以上を不活性化するための好適または最適な条件を決定するために使用可能である。
【０１６５】
実施例６
方法
８名のＨＣＶ＋ドナーからの摘出肺を試験に用いた。両方の肺ブロックを分離し、２つの独立したＥＶＬＰ循環路に９時間置いた。一方の肺を対照肺（標準ＥＶＬＰプロトコール）として使用し、他方の肺に種々の処置条件を施した：１：強度の肺洗浄（３時間のＥＶＬＰ後に潅流液および循環路の交換）；２：特定のデザインデバイスを用いて循環路に紫外線Ｃ（ＵＶＣ）光を照射。ウイルス負荷へのＵＶＣ光の効果もまた、特定のデザインのＥＶＬＰミニ循環路（肺を含まない循環路）で、種々のウイルス量を用いて評価した。ウイルス負荷は、Ａｂｂｏｔｔ  ＲｅａｌＴｉｍｅ  ＨＣＶアッセイを用いて肺および潅流液において種々の時点で評価した。
【０１６６】
結果
８名のうち２名のドナーで、ＥＶＬＰ中の肺にＨＣＶウイルスは検出されず、これはドナーのウイルス血の低さと関連していた。残りの６名のドナーでは、肺洗浄がＨＣＶ力価を減少させるのに最も効果的な処置であった：洗浄群での８５．８％（±２．８３；ｎ＝３）に対して、ＵＶＣ群では５７．６％（±６．７８；ｎ＝２）、対照群では（１９．７８％（±２５．７３；ｎ＝０７）（図６）。ＵＶＣ照射は種々のＨＣＶ用量でミニＥＶＬＰ循環路において極めて有効であった。ＥＶＬＰに対する１８０分のＵＶＣ照射の後、ウイルス負荷は最初の負荷から９５．７％（±４．３；ｎ＝３）減少した（図９）。２例では、検出できないウイルス負荷に達した。
【０１６７】
ＥＶＬＰは、ドナー肺由来の微生物、好ましくは、ウイルス、例えば、ＨＣＶウイルス、ＨＩＶ、Ｂ型肝炎、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン・バーウイルス、（ＥＢＶ）、およびアデノウイルスの１種以上を有意に減少させるためのプラットフォームとなり得る。このアプローチが伝播のリスクの軽減につながるかどうかは分からない。ＵＶＣなどの補助的治療戦略は、ドナー肺における完全な除去をもたらし得る。
【０１６８】
実施例６
潅流液の感染性は肝細胞モデルで評価した。
紫外線Ｃ照射を、潅流溶液からのヒトアルブミンをなお見えるように維持しつつ、感染した臓器の潅流溶液中のＣ型肝炎ウイルスを不活性化するための好適な技術として評価した。特注の小型化潅流システム（ミニＥＶＬＰ）と図７に示され実施例４に記載されている照射器を使用した。実施例４に記載されているにように無細胞性臓器潅流溶液でプライムした後、特定のＨＣＶ（ＪＦＨ−１、１．５  １０６コピー／ｍＬ）サロゲートを用いてこの溶液をスパイクした。このシステムを３７℃および１ｌ／分で１８０分間試験した。２群を試験した（各ｎ＝６）：１）対照、紫外線Ｃ照射無し、および２）３１ｍＷ／ｃｍ２の光フルエンスのＵＶＣ。試験中、種々の時点でサンプルを採種し、その後、肝細胞培養におけるサンプルのトランスフェクション（Ｈｕｈ  ７．５．１）を行って感染性の低下を試験した。アルブミン（臓器潅流溶液の重要成分）濃度および分解に対するＵＶＣの効果も試験した。図１１Ａ（線グラフ）は、アルブミン濃度は安定し、２群間に有意差は検出されなかったことを示す。ＵＶＣ群において、１５０分のＵＶＣ照射後に感染性は見られず、対照群はなお感染性があった（図１１Ａ、棒グラフ）。
【０１６９】
６時間および９時間のＵＶＣ処置後に、ポリアクリルアミドゲル電気泳動により示されるように、アルブミンは十分に無傷である（図１１Ｂ）。
【０１７０】
実施例７
目的：肺移植は末期肺疾患患者にとっての救命療法である。エクス・ビボ肺潅流（ＥＶＬＰ）は、臓器温存に、また、移植前の肺感染治療に使用される。紫外線Ｃ（ＵＶＣ）照射は、輸液前に血液製剤として使用される有効な殺ウイルス処置および殺菌処置である。本試験では、小型化ＥＶＬＰモデルにおける一般的な細菌性病原体に対するＵＶＣ光照射および抗生物質治療の効果を検討した。
【０１７１】
方法：低カリウム−デキストラン肺潅流溶液とＬｙｓｏｇｅｎｙ  Ｂｒｏｔｈ（ＬＢ）培地の混合物を１，０×１０５ＣＦＵ／ｍＬの黄色ブドウ球菌、ステノトロフォモナス・マルトフィリア、および緑膿菌でスパイクした。ミニＥＶＬＰおよびＵＶＣ照射器を使用した（図７）。プライミング後、循環路を３群（各ｎ＝４）に分け、１８０分間評価した：１）対照（処置無し）；２）ＵＶＣ（２３６ｎｍ、９Ｊ／ｃｍ２）および３）抗生物質（イミペネム／シラスタチン、３３３ｍｇ／Ｌ）。種々の時点でサンプルを採種し、ＬＢ寒天培養プレートおよび細菌ＤＮＡ  ｑＰＣＲアッセイを用いて分析した。
【０１７２】
結果：  細菌培養：１５分のＵＶＣ照射後に細菌増殖は見られなかった。抗生物質群では、経時的に細菌増殖量の低下が見られたが、１８０分の処置後にもなお細菌増殖が見られた（０対１５±２．３コロニー／プレート、ｐ＝０．０４７６）。対照群では、細菌増殖は、時間外に指数関数的に増加した。ＤＮＡ  ｑＰＣＲ分析：ＵＶＣ処置は有意に有効であり、１８０分後に対照群の１ｌｏｇの増加に対して全体的に２ｌｏｇの低下を生じた（１６Ｓ  ｒＲＮＡ分析）。さらに、ＵＶＣは、各細菌腫の単離分析後に最も有効であった（図１２Ａ〜Ｃ）。
【０１７３】
結論：  修正常温エクス・ビボ肺潅流循環路に適用されたＵＶＣ光は、潅流液中の細菌を効果的に除去した。これは、ＥＶＬＰに、現行使用されている広域スペクトル抗生物質を添加するよりも有意に効果が高かった。ＵＶＣ光は、汚染から保護するため、またはエクス・ビボで潅流した感染臓器から潅流液に流入した細菌を除去するために、循環路の無菌性を維持するための有効な補助的アプローチとなり得る。
【０１７４】
実施例８
ヒト肺試験：ＨＣＶ力価へのＥＶＬＰおよび光線療法の効果：肺組織および潅流溶液におけるＨＣＶ力価に対するＥＶＬＰそのものおよびまた光に基づく療法のプラットフォームとしての効果を評価するために、ＮＡＴ＋ＨＣＶドナーからの９つの拒絶ヒト肺。ドナーの肺を、標準プロトコールを用いて回収し、冷低カリウムデキストラン（ＬＰＤ）溶液でフラッシュし、通常の臨床実務として４℃で保存した。予備ＥＶＬＰフラッシュの後に、肺を２つの独立したＥＶＬＰ循環路に９時間置いた。一方の肺は対照群（標準ＥＶＬＰプロトコール（ｎ＝９））であり、他方は無作為に種々の処置条件に曝した（各ｎ＝３）（図１３Ａ）：（１）強度の肺洗浄（３時間のＥＶＬＰ後の潅流溶液および循環路の交換）；（２）ＥＶＬＰ潅流液への紫外Ｃ（ＵＶＣ）光（２６０ｎｍ、４Ｗ）の適用；（３）赤色光照射（６３０ｎｍ、２０ｍＷ／ｃｍ２）を伴う潅流溶液（１ｕｍｏｌ／Ｌ）に希釈したメチレンブルー（ＭＢ）を用いた光線力学的療法（ＰＤＴ）。このようなデザインの利点は、対照と処置肺の両方が同じドナーに由来するということである（ベースラインとして同じウイルス負荷）。ベースライン時および潅流中３時間毎に肺の下葉および上葉から組織生検を採種し、潅流液サンプルを経時的に採種した。全てのサンプルのウイルス負荷量を、ＲｅａｌＴｉｍｅ  ＰＣＲアッセイを用いて評価した。結果はウイルス負荷低下のパーセンテージに関して正規化した。光線療法の適用をＥＶＬＰシステムに解釈しなおすために、種々の光波長が潅流溶液の処置に適用できるＥＶＬＰ循環路にインラインで挿入するのに好適な特定のデバイス。照射器は、図１６で示されるように、白血球フィルターの下流に導入した。第１に、ＥＶＬＰ中のエクス・ビボ肺機能に関して有意差は見られず、循環路に適用されたＵＶＣまたはＰＤＴの即効性の有害な影響はないことが示唆された（図１４Ａ）。例えば、全ての群で９時間のＥＶＬＰにおいて対照肺と試験肺を比較した場合、ΔＰ／Ｆ比、最大気道圧および動的コンプライアンスに有意差は見られなかった。第２に、ＰＤＴ（（メチレンブルー１ｕｍｏｌ／Ｌ＋６３０ｎｍ／２０ｍＷ／ｃｍ２）は、潅流液のＨＣＶ力価を低下させるのに最も有効な処置であり（ベースラインからの低下率％）：対照群の６９．４９％（±０．８９）に対して９７．８７％の低下（±０．７１）（ｐ＝０．０１５３）、次は強度の肺洗浄であった：対照群の４６．５７％（±１７．８５）に対して８５．８％の低下（±２．８３）（ｐ＝０．０４６）および対照群の５４．５％（±１０．２３）に対してＵＶＣは５７．６％（±６．７８）の低下（ｐ＝０．７１９５）であった。ＰＤＴはまた、肺組織のＨＣＶ力価を低下させるためには最も有効であり：対照群の７５．４６％（±８．２）に対して９０．９６％の低下（±０．７０２８）（ｐ＝０．０１５８）、次に、強度の肺洗浄：対照群の５０．１４（±２０．０９）に対して８４．１％（±５．４９）の低下（ｐ＝０．０００２）。ＵＶＣ群は、対照と比較した場合に有意差を示さなかった：対照群の５３．３％（±１２．１）に対して５２％（±５．７）（ｐ＝０．６３７２）（図１４Ｂ）。
【０１７５】
感染性の評価
主要な効力評価項目としてのＨＣＶ  ｑＰＣＲの使用に関連する試みの一つは、ＰＤＴおよびＵＶＣがビリオンを傷害しおよび／または断片化してそれらを非感染性とすることであるが、それらはｑＰＣＲによってなお検出可能である。ｑＰＣＲは、光に基づく療法の後に最も保存されているＨＣＶ  ＲＮＡの５’ＵＴＲ領域を標的とする(Smith DB, Mellor J, Jarvis LM, et al. Variation of the hepatitis C virus 5′ non-coding region: implications for secondary structure, virus detection and typing. Journal of General Virology. 1995;76(7):1749-1761. doi:10.1099/0022-1317-76-7-1749)。この効果は、検出可能なウイルスでさえもナイーブ細胞を感染させる能力を著しく低下させているであろうことから、本発明者らのＥＶＬＰ後の潅流液中のＨＣＶ  ＲＮＡの測定は、おそらく光線療法の抗ウイルス効果の過小評価であることを強調する。理想的には、感染性試験は、光に基づく治療の後のＨＣＶ感染患者からのウイルスで反復させるが、ＨＣＶは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏシステムでは増殖抵抗性が高い。よって、ＨＣＶの感染性の低下に及ぼすＥＶＬＰ中の光線療法の効果を評価するために、ＨＣＶ分子クローン（ＪＦＨ−１、２ａ  ＨＣＶ遺伝子型）を使用した。この最近開発されたクローンは、ＨＣＶｃｃ感染に感受性が高いＨｕｈ７−ＣＤ８１肝細胞胞系統を用いて種々の治療後のＨＣＶの感染性の低下を直接評価する機会を与え(Wakita T. Isolation of JFH-1 Strain and Development of an HCV Infection System. In: Hepatitis C. Methods in Molecular BiologyTM. Humana Press; 2009:305-327. https://link-springer-com.myaccess.library.utoronto.ca/protocol/10.1007/978-1-59745-394-3_23. Accessed February 15, 2018)、ＨＣＶウイルスは、潅流溶液中でｑＰＣＲによりなお検出可能であるにもかかわらず、治療後に感染能を持たないという仮説が立てられた。この原理を検証するために、既知量のＪＦＨ−１ウイルスを循環路に添加することができ、ヒト肺試験で使用したような光照射を施すように特にデザインされたＥＶＬＰミニ循環路を使用した（図７）。２５０ｍＬの潅流溶液でプライミングした後、この溶液に１．５×１０６コピー／ｍＬのＨＣＶ  ＪＦＨ−１株を感染させた。潅流液を３７℃に加熱した後、３群（各ｎ＝４）で１８０分の処置を行った：（１）対照（光照射無し）、（２）ＵＶＣ光（２６０ｎｍ、４Ｗ）および（３）ＰＤＴ（種々の濃度でのＭＢ希釈：１ｕｍｏｌ／Ｌ、０．５ｕｍｏｌ／Ｌ、０．１ｕｍｏｌ／Ｌおよび０．０１ｕｍｏｌ／Ｌ、２つの異なる光条件：６３０ｎｍ、２０ｍＷ／ｃｍ２赤色光および通常の室内灯）。ミニ循環路で潅流時間中、１．５ｍＬのアリコートを採種し、Ｈｕｈ７．５．１肝細胞培養をスパイクするために使用し、１０％ＦＢＳを添加したＤＭＥＭ中、３７℃、および５％ＣＯ２設定下で７２時間維持した。ｐＨを調整し、３０％〜９０％の細胞コンフルエント状態を維持した。感染性を示すために、Ｈｕｈ７．５．１細胞をＤＡＰＩおよびＨＣＶ抗コア抗体で染色した後、肝細胞クラスターを計数した（図１５Ａ）。サンプルはまた治療後のウイルス力価に関してＲｅａｌＴｉｍｅ  ＰＣＲで分析した。結果をクラスター総数（ＦＦＵ／ｍＬ）で示す。ここで、全ての試験のミニＥＶＬＰ潅流液で、１８０分の照射後で平均ｑＰＣＲ  ウイルス総数は３００，０００ＩＵ／ｍＬであったが１５０分のＵＶＣ照射��後にＨｕｈ７．５．１細胞に感染性は見られなかことが実証される（図１５Ｂ）。ＰＤＴ群はＨＣＶに対してなおさらなる効力を示し、赤色光曝露だけの１５分の潅流後に感染性は見られず、この効果は光増感剤の用量に依存した（図１５Ｃ）。重要なことに、赤色光処置は、アルブミン電気泳動によって評価した場合に潅流液の特徴に影響を及ぼさなかった。メチレンブルーは環境光でも活性化されたが、その効果は赤色光よりも弱い。
【０１７６】
これらの結果を考え合わせると、１：規定のＥＶＬＰプロトコールはヒトドナー肺のＨＣＶ力価を４０％低下させること；２：３時間のＥＶＬＰ後の循環路および潅流液の交換はヒトドナー肺のＨＣＶ力価を８０％低下させること；３：ＰＤＴは、光増感剤としてＭＢを用いる場合、ヒトドナー肺のＨＣＶ力価を９８％低下させること；４：ＥＶＬＰ中に適用される光に基づく療法は、ＨＣＶを完全に不活性化することができるが、ウイルス断片はｑＰＣＲによってなお検出され得ることが示される。
【０１７７】
前臨床安全性試験
このようなアプローチを臨床ＥＶＬＰ状況に置き換えるために、ＥＶＬＰ中にＵＶＣおよびＰＤＴを適用することの安全性を、前臨床大型動物移植モデルを用いて評価した（図１５Ｄ）。
【０１７８】
このモデルにおいて、ヨークシャー雄飼育ブタ（３０〜３５ｋｇ）を麻酔および人工呼吸下で用いた。肺摘出後、肺を４℃で２時間保存した後、６時間ＥＶＬＰを行った。ＥＶＬＰ中、ブタ肺を３群（各ｎ＝４）に無作為化した：（１）対照（標準ＥＶＬＰ技術）；（２）紫外線Ｃ；（３）赤色光照射に関連する潅流溶液に希釈したメチレンブルー（ＭＢ）（１ｕｍｏｌ／Ｌ）を用いた光線力学的療法（ＰＤＴ）。ＥＶＬＰ中、肺の生理状態を評価し（肺の血管抵抗、肺の動脈圧、左心房（静脈）圧、最大気道圧、プラトー圧、動的コンプライアンス、静的コンプライアンスおよびガス交換機能−ＰＯ２）；６時間、群間のエクス・ビボ肺機能に差は無かった。ＥＶＬＰ後、左肺を移植した後に４時間の再潅流を行った。移植片の上下肺静脈の移植後血中ガスサンプルを採種し、動脈酸素（ＰａＯ２）分圧／吸気酸素画分（ＦｉＯ２）分圧の平均値を計算した。４時間の再潅流後、群間に有意差は見られず、全ての動物に良好な肺機能が見られ（図１５Ｅ）、肺移植の初期におけるアプローチの安全性が示された。
【０１７９】
結論：  光に基づく療法の効果がドナー臓器で評価された。ＥＶＬＰ中のＵＶＣおよびＰＤＴはウイルスの不活性化に極めて有効であった。前臨床試験は、これらの療法は、ＥＶＬＰ中に適用された場合、肺に対して実証可能な有害な影響を持たないことを示した。これらのデータは、ＨＣＶ陽性臓器ドナー肺を用いた臨床試験において潅流液滅菌の効果を検討するために十分な前臨床エビデンスを提供する。見られた結果を確認すべく、このようなアプローチを用いた臨床試験が始まろうとしている。これが末期肺疾患患者への移植に利用可能となるような多くのより良質の臓器につながるものと期待される。
【０１８０】
当然のことながら当業者には、記載されている態様の多くの変形がおそらくは本明細書の特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲内にあることを認識されるであろう。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１２Ｃ】
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【図１３】
2020515359.tif 000020
【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１５Ｃ】
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【図１５Ｄ】
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【図１５Ｅ】
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【図１６】
2020515359.tif 000028
【図１７】
2020515359.tif 000029
【図１８】
2020515359.tif 000030
【図１９Ａ】
2020515359.tif 000031
【図１９Ｂ】
2020515359.tif 000032
【図１９Ｃ】
2020515359.tif 000033
【図１９Ｄ】
2020515359.tif 000034
【国際調査報告】
2020515359.tif 000035
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