(57)【要約】本発明は対象の線維症及び／又は線維症関連疾患を治療するか診断するためのＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する拮抗剤（例えば、抗体又はその抗原結合部分）の薬学的用途に関するものである。【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象の組職の線維症を治療するためのＦＡＭ１９Ａ５（ｆａｍｉｌｙ  ｗｉｔｈ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ  １９，ｍｅｍｂｅｒ  Ａ５）タンパク質に対する拮抗剤（“ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤”）。
【請求項２】
線維症は、肝線維症、肺線維症、腎臓線維症、骨髄線維症、膵膓線維症、皮膚線維症、心臓線維症、動脈線維症、関節線維症、乳房線維症、筋線維症、後腹膜線維症、甲状腺線維症、リンパ節線維症、膀胱線維症、全身線維症、及び胸膜線維症からなる群から選択されることを特徴とする、請求項１に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項３】
ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤が組職内の細胞外基質タンパク質（例えば、コラーゲン）の蓄積を減少させることを特徴とする、請求項１又は２に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項４】
ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合する抗体又はその抗原結合部分（“抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体”）であることを特徴とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項５】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、キメラ抗体、ヒト化抗体又はヒト抗体であることを特徴とする、請求項４に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項６】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１１、１２及び１３を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２３、２４及び２５を含むことを特徴とする、請求項４又は５に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項７】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１４、１５及び１６を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２６、２７及び２８を含むことを特徴とする、請求項４又は５に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項８】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１７、１８及び１９を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２９、３０及び３１を含むことを特徴とする、請求項４又は５に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項９】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２０、２１及び２２を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３２、３３及び３４を含むことを特徴とする、請求項４又は５に記載のＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤。
【請求項１０】
線維症又は線維症関連疾患を試験管内診断する方法であって、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤を対象の生物学的サンプルと接触させる段階、及びサンプルのＦＡＭ１９Ａ５タンパク質水準又はＦＡＭ１９Ａ５  ｍＲＮＡ水準を測定する段階を含む、方法。
【請求項１１】
ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体であることを特徴とする、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１１、１２及び１３を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２３、２４及び２５を含むことを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１４、１５及び１６を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２６、２７及び２８を含むことを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１７、１８及び１９を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２９、３０及び３１を含むことを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２０、２１及び２２を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３２、３３及び３４を含むことを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
〔技術分野〕
（電子的方式で提出された配列リストの参照）
本出願とともに提出されたＡＳＣＩＩテキストファイル形式の電子的方式で提出された配列リスト（ファイル名：３７６３．００４ＰＣ０２＿ＳｅｑＬｉｓｔｉｎｇ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ；サイズ：１６６，８５３バイト；生成日：２０１８年６月２６日）の内容はその全部を参照することによりこの明細書に組み込まれる。
【０００２】
（技術分野）
本発明は配列相同性１９を有するファミリ、メンバーＡ５（ＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する抗体、その抗原結合断片、又はこのような抗体又はその抗原結合断片を含む組成物を使って対象（例えば、ヒト）の線維症を治療又は診断する方法を提供する。
【０００３】
〔背景技術〕
線維症は特定の傷害に反応して臓器や組職に過剰の線維性結合組織が形成されるものである。一般に、傷は普通４個の分離された段階である止血、炎症、増殖及び再形成を特徴とする過程によって秩序的で効果的な方式で治癒される（Diegelmann R.F. et al., Front Biosci 9:283-289 (2004)）。しかし、傷害が深刻であるか反復的である場合、傷治癒過程の調節障害が発生することがあり、これは損傷された組職とその付近に線維性結合組織の過度な蓄積をもたらす（Wynn T.A. et al., Nat Med 18(7): 1028-1040 (2012)）。多くの線維症性疾患（例えば、晩成肝疾患、腎臓疾患、特発性肺線維症（ＩＰＥ）及び心不全）に関連して明かされたように、このような蓄積は永久的な傷跡、臓器機能不全及び甚だしくは死亡をもたらすことができる。
【０００４】
肝臓（又は肝の）線維症は大部分の晩成肝疾患で発生する進行性炎症及び肝細胞死によって発生する傷跡組職の過度な蓄積である。肝線維症の主要原因は、晩成肝炎ウイルス感染、アルコール中毒、鉄及び銅濫用、及び非アルコール性脂肪融解（ＮＡＳＨ）を含む（Bataller R et al., J Clin Invest 115(2): 209-218 (2005)）。肝に反復的な損傷が加わったとき、肝細胞は反応性酸素種（ＲＯＳ）及び他の炎症媒介因子（例えば、ＴＧＦ−β、ＰＤＧＦ、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１及びＧＭ−ＣＳＦのようなサイトカイン）を生成し、これらは相異なる肝細胞（例えば、肝星細胞（ＨＳＣ）、筋線維症、間質線維芽細胞及び胆管上皮細胞）の活性化に役立つ。
【０００５】
活性化した肝細胞は一連の形態学的及び機能的変化（例えば、細胞骨格タンパク質平滑筋α−アクチン（α−ＳＭＡ）の出現、細胞ビタミンＡ備蓄量の損失、粗面小胞体の出現増加、及び増加したコラーゲンｍＲＮＡの発現）を経験する（Tsukada et al., Clin Chim Acta 364(1-2): 33-60 (2006)）。この活性化した細胞は損傷部位に移動し、ここでこれは多量のＥＣＭ（大部分コラーゲン、糖タンパク質及びプロテオグリカンからなる）を生成し、これは肝構造に蓄積して線維性瘢痕を形成することにより肝構造を歪める。
【０００６】
一般に、肝線維症は損傷の根源が除去されれば回復することができる。しかし、反復的な損傷が加わったときは、ＥＣＭ間に増加した架橋結合が発生することができ、これは厚い原線維（ｆｉｂｒｉｌ）の形成と肝硬変の進行をもたらす。
【０００７】
現在、多くの線維症疾患、特に肝線維症のための標準治療はない状況である。そして、利用可能に承認された治療オプションを有するものであっても（例えば、特発性肺線維症）病原体の除去が依然として最も効果的な治療である。さらに、線維症（例えば、肝線維症）の診断に現在用いることができる最も信頼的な方法は組職生検によるものである。しかし、このような方法は概して非常に侵襲的であり、多くの望まない副作用（例えば、生検部位の出血、痛症及び不便さ）をもたらす。よって、対象（例えば、ヒト）の線維症に対するより効果的な治療及び診断オプションが現在必要である。
【０００８】
〔発明の概要〕
〔課題を解決するための手段〕
対象の線維症を治療するための、ＦＡＭ１９Ａ５（ｆａｍｉｌｙ  ｗｉｔｈ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ  １９、ｍｅｍｂｅｒ  Ａ５）タンパク質に対する拮抗剤（ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ）（“ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤”）がこの明細書に開示される。
【０００９】
いくつかの具体例において、線維症は、肝線維症、肺線維症、腎臓線維症、骨髄線維症、膵膓線維症、皮膚線維症、心臓線維症、動脈線維症、関節線維症、乳房線維症、筋線維症、後腹膜線維症、甲状腺線維症、リンパ節線維症、膀胱線維症、全身線維症、及び胸膜線維症からなる群から選択される。
【００１０】
いくつかの具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、組職内への細胞外基質タンパク質（例えば、コラーゲン）の蓄積を減少させる。
【００１１】
いくつかの具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分である（“抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体”）。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体はキメラ抗体、ヒト化抗体、又はヒト抗体である。
【００１２】
いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１１、１２及び１３を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２３、２４及び２５を含む。他の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１４、１５及び１６を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２６、２７及び２８を含む。さらに他の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１７、１８及び１９を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２９、３０及び３１を含む。特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２０、２１及び２２を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３２、３３及び３４を含む。
【００１３】
また、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤と対象の生物学的サンプルを接触させる段階及びサンプルでのＦＡＭ１９Ａ５タンパク質水準又はＦＡＭ１９Ａ５  ｍＲＮＡ水準を測定する段階を含む、線維症又は線維症関連疾患を試験管内（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ）診断する方法がこの明細書に開示される。いくつかの具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体である。
【００１４】
いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１１、１２及び１３を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２３、２４及び２５を含む。特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１４、１５及び１６を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２６、２７及び２８を含む。他の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１７、１８及び１９を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２９、３０及び３１を含む。さらに他の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２０、２１及び２２を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３２、３３及び３４を含む。
【００１５】
（具体例）
具体例１．  配列相同性１９を有するファミリ、メンバーＡ５（ＦＡＭ１９Ａ５）タンパク質に対する拮抗剤を対象として投与する段階を含む、対象の線維症を治療する方法。
【００１６】
具体例２．  線維症が、肝線維症、肺線維症、腎臓線維症、骨髄線維症、膵膓線維症、皮膚線維症、心臓線維症、動脈線維症、関節線維症、乳房線維症、筋線維症、後腹膜線維症、甲状腺線維症、リンパ節線維症、膀胱線維症、全身線維症、及び胸膜線維症からなる群から選択される、具体例１の方法。
【００１７】
具体例３．  線維症が、強皮症、結合組織疾患、アルコール中毒、感染、鉄沈着、環境汚染物、放射線療法、化学療法、心臓薬、抗炎症剤、皮膚筋炎、多発性筋炎、全身性紅斑性狼瘡、骨関節炎、リウマチ性関節炎、サルコイドーシス、非アルコール性脂肪肝炎、又はこれらの任意の組合せに関連するか又はそれによって引き起こされる、具体例１又は２の方法。
【００１８】
具体例４．  線維症が肝線維症又は肺線維症である、具体例２の方法。
【００１９】
具体例５．  肝線維症が非可逆的肝硬変に関連する、具体例４の方法。
【００２０】
具体例９．  拮抗剤が、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、アプタマー、ＰＮＡ標的化ＦＡＭ１９Ａ５、又はそれを含むベクターである、具体例１〜８のいずれか一方法。
【００２１】
具体例１０．  拮抗剤が、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分（“抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分”）、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分を暗号化するポリヌクレオチド、又はそのポリヌクレオチドを含むベクターである、具体例１〜８のいずれか一方法。
【００２２】
具体例１１．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分と対象の生物学的サンプルを接触させる段階、及びサンプルでのＦＡＭ１９Ａ５のタンパク質水準又はＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を暗号化するｍＲＮＡ水準を測定する段階を含む、対象の線維症及び／又は線維症関連疾患を診断する方法。
【００２３】
具体例１２．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分と対象の生物学的サンプルを接触させる段階を含む、線維症を有する対象でのＦＡＭ１９Ａ５のタンパク質水準又はＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を暗号化するｍＲＮＡ水準を測定する方法。
【００２４】
具体例１３．  対象は、基準サンプル（線維症がない対象のサンプル）でのＦＡＭ１９Ａ５のタンパク質水準又はＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を暗号化するｍＲＮＡ水準に比べ、ＦＡＭ１９Ａ５のタンパク質水準又はＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を暗号化するｍＲＮＡ水準の少なくとも１．５倍、少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも６倍、少なくとも７倍、少なくとも８倍、少なくとも９倍、少なくとも１０倍、少なくとも１１倍、少なくとも１２倍、少なくとも１３倍、少なくとも１５倍、少なくとも２０倍、少なくとも２５倍又は少なくとも３０倍増加を示す、具体例１１又は１２の方法。
【００２５】
具体例１４．  測定前に対象から生物学的サンプルを収集する段階をさらに含む、具体例１１〜１３のいずれか一方法。
【００２６】
具体例１５．  ＦＡＭ１９Ａ５のタンパク質水準は、免疫組職化学、ウェスタンブロッティング、放射性免疫測定、酵素免疫吸着（ＥＬＩＳＡ）、放射線免疫拡散、免疫沈降分析、オクタロニー（Ｏｕｃｈｔｅｒｌｏｎｙ）免疫拡散法、ロケット免疫電気泳動、組職免疫染色法、補体固定分析、ＦＡＣＳ、又はタンパク質チップによって測定される、具体例１１〜１４のいずれか一方法。
【００２７】
具体例１６．  ＦＡＭ１９Ａ５を暗号化するｍＲＮＡ水準は、ＲＴ−ＰＣＲ、実時間ポリメラーゼ連鎖反応、又はノーザンブロットによって測定される、具体例１１〜１４のいずれか一方法。
【００２８】
具体例１７．  生物学的サンプルは、組職、細胞、血液、血清、血漿、唾液、大脳髄液、硝子体内液、又は小便を含む、具体例１１〜１６のいずれか一方法。
【００２９】
具体例１８．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）酵素免疫吸着（ＥＬＩＳＡ）で測定したとき、１０ｎＭ以下のＫＤで可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合する特性；
（ｂ）ＥＬＩＳＡによって測定したとき、１０ｎＭ以下のＫＤで膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合する特性；及び
（ｃ）（ａ）及び（ｂ）の両者から選択された特性を示す、具体例１０〜１７のいずれか一方法。
【００３０】
具体例１９．  抗体又はその抗原結合部分は、ヒトＦＡＭ１９Ａ５エピトープとの結合に対して重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む基準抗体（ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ａｎｔｉｂｏｄｙ）と交差競合（ｃｒｏｓｓ−ｃｏｍｐｅｔｅ）し、ここで、
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含むか；
（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含むか；
（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含むか；又は
（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含む、具体例１〜４６のいずれか一方法。
【００３１】
具体例２０．  ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む基準抗体と同一のＦＡＭ１９Ａ５エピトープと結合し、ここで、
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含むか；
（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含むか；
（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含むか；又は
（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含む、具体例１１０〜１９のいずれか一方法。
【００３２】
具体例２１．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９である、少なくとも１個のＦＡＭ１９Ａ５エピトープと結合する、具体例１０〜２０のいずれか一方法。
【００３３】
具体例２２．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９人、ＦＡＭ１９Ａ５エピトープにのみ結合する、具体例１０〜２０のいずれか一方法。
【００３４】
具体例２３．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分が追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープとさらに結合する、具体例１０〜２１のいずれか一方法。
【００３５】
具体例２４．  追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０、及びこれらの任意の組合せからなる群から選択される、具体例２３の方法。
【００３６】
具体例２５．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分が重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む、具体例１０〜２４のいずれか一方法。
【００３７】
具体例２６．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分の重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含む、具体例２５の方法。
【００３８】
具体例２７．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分の重鎖ＣＤＲ１がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含む、具体例２５又は２６の方法。
【００３９】
具体例２８．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分の重鎖ＣＤＲ２がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含む、具体例２５〜２７のいずれか一方法。
【００４０】
具体例２９．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分の軽鎖ＣＤＲ１がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含む、具体例２５〜２８のいずれか一方法。
【００４１】
具体例３０．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分の軽鎖ＣＤＲ２がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含む、具体例２５〜２９のいずれか一方法。
【００４２】
具体例３１．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分の軽鎖ＣＤＲ３がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含む、具体例２５〜３０のいずれか一方法。
【００４３】
具体例３２．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分が重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含み、ここで、
（ｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１１、１２及び１３を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２３、２４及び２５を含むか；
（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１４、１５及び１６を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２６、２７及び２８を含むか；
（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１７、１８及び１９を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２９、３０及び３１を含むか；又は
（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２０、２１及び２２を含み、軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３２、３３及び３４を含む、具体例１０〜３１のいずれか一方法。
【００４４】
具体例３３．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８を含む重鎖可変領域及び／又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２を含む軽鎖可変領域を含む、具体例１０〜３２のいずれか一方法。
【００４５】
具体例３４．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５を含む重鎖可変領域及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９を含む軽鎖可変領域を含む、具体例３３の方法。
【００４６】
具体例３５．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６を含む重鎖可変領域及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０を含む軽鎖可変領域を含む、具体例３３の方法。
【００４７】
具体例３６．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７を含む重鎖可変領域及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１を含む軽鎖可変領域を含む、具体例３３の方法。
【００４８】
具体例３７．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８を含む重鎖可変領域及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２を含む軽鎖可変領域を含む、具体例３３の方法。
【００４９】
具体例３８．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分が重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、ここで、重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５、３６、３７又は３８に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、具体例１０〜３２のいずれか一方法。
【００５０】
具体例３９．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分が重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、ここで、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９、４０、４１又は４２に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、具体例１０〜３２のいずれか一方法。
【００５１】
具体例４０．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分が重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、ここで、重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５、３６、３７又は３８に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９、４０、４１又は４２に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、具体例１０〜３２のいずれか一方法。
【００５２】
具体例４１．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が、キメラ抗体、ヒト抗体、又はヒト化抗体である、具体例１０〜４０のいずれか一方法。
【００５３】
具体例４２．  その抗原結合部分はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である、具体例１０〜４０のいずれか一方法。
【００５４】
具体例４３．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分がＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、又はこれらの変異体からなる群から選択される、具体例１０〜４２のいずれか一方法。
【００５５】
具体例４４．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分がＩｇＧ２、ＩｇＧ４、又はこれらの組合せである、具体例４３の方法。
【００５６】
具体例４５．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分がＩｇＧ２／ＩｇＧ４アイソタイプ（ｉｓｏｔｙｐｅ）抗体を含む、具体例４３の方法。
【００５７】
具体例４６．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分がＦｃ機能のない不変領域をさらに含む、具体例１０〜４５のいずれか一方法。
【００５８】
具体例４７．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分が第２結合部分を有する分子に連結され、これにより二重特異性分子を形成する、具体例１０〜４６のいずれか一方法。
【００５９】
具体例４８．  抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分が製剤に連結され、これにより免疫抱合体免疫抱合体を形成する、具体例１０〜４７のいずれか一方法。
【００６０】
具体例４９．  ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の拮抗剤が薬学的に許容される担体とともに製剤化される、具体例１〜４８のいずれか一方法。
【００６１】
具体例５０．  ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の拮抗剤が、静脈内、経口、非経口、髄腔内、脳室内、肺、筋肉内、皮下、硝子体内、又は心室内経路を介して投与される、具体例１〜４９のいずれか一方法。
【００６２】
具体例５１．  対象がヒトである、具体例１〜５０のいずれか一方法。
【００６３】
〔図面の簡単な説明〕
〔図１〕元気なラット（“正常”、ｎ＝３）に対する胆管結紮（ＢＤＬ）によって誘導された肝線維症を有するラット（“疾患モデル”、ｎ＝５）の血清中のＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準の比較を示す。ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準は正常対照群動物で観察された水準を超える倍数変化として示される。“＊”は正常対照群動物に比べて統計的に有意な差（ｐ＜０．００５）を表示する。
【００６４】
〔図２〕元気なラット（“正常”、ｎ＝５）に対する３ｍｇ／ｋｇブレオマイシンの気管内注射によって誘導された特発性肺線維症を有するラット（“疾患モデル”、ｎ＝５）の血清中のＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準の比較を示す。ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準は正常対照群動物で観察された水準を超える倍数変化として示される。“＊”は正常対照群動物に比べて統計的に有意な差（ｐ＜０．００５）を表示する。
【００６５】
〔図３〕確認された肝線維症、例えば肝硬変を有するヒト（患者＃１−１０）及び元気な個体（正常＃１−３）の血清中のＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準の倍数変化を示す。各棒グラフ上に表示された値は元気な個体の血清で検出されたＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の平均濃度を超える倍数変化を表示する。
【００６６】
〔図４〕対照群抗体（“ＮＨＩ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“１−６５”、“３−２”及び“１−２８”）で治療された心筋梗塞誘導動物の左心室組職のＨ＆Ｅ（ヘマトキシリン及びエオシン）の比較を示す。元気な動物（すなわち、心筋梗塞誘導なし、“ナイーブ”）が追加対照群として使われた。
【００６７】
〔図５ａ及び図５ｂ〕心筋梗塞誘導動物の左心室組職でのコラーゲン蓄積の比較を示す。心筋梗塞誘導動物は、対照群抗体（“ＮＨＩ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“１−６５”、“３−２”及び“１−２８”）が投与された。元気な動物（すなわち、心筋梗塞誘導なし、“ナイーブ”）が追加対照群として使われた。図５ａはマッソントリクローム（Ｍａｓｓｏｎ’ｓ  ｔｒｉ−ｃｈｒｏｍｅ）染色を使ってコラーゲン蓄積を示す。図５ｂは全体左心室領域に対する線維性領域の比率でコラーゲン蓄積（すなわち、線維性領域）を示す。データは平均±Ｓ．Ｄ．で表示される（グループ当たりｎ＝５−８）。棒上の“＊＊＊／＊＊”は“ナイーブ”グループ（元気な動物）に比べて統計的に有意な差を表示する（それぞれｐ＜０．００１、ｐ＜０．０５）。棒上の“＃”は“ＮＨＩ”グループ（心筋梗塞誘導＋対照群抗体）に比べて統計的に有意な差を表示する（ｐ＜０．０５）。
【００６８】
〔図６ａ〕ジメチルニトロソアミン（ＤＭＮ）−媒介線維症動物モデルにおける抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の抗線維症効果を評価するための投与スケジュールを提示する。暗灰色ボックスはＤＭＮが肝線維症を誘導するために動物に投与されたときを示す。薄灰色ボックスは対照群（ヒトＩｇＧ）抗体又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が投与されたときを示す。
【００６９】
〔図６ｂ、図６ｃ、図６ｄ及び図６ｅ〕対照群抗体（“Ｇ２”、ヒトＩｇＧ）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“Ｇ３”）が投与されたＤＭＮ処置された動物の肝でのコラーゲン生成の比較を示す。代表的なナイーブ／元気な動物（“ＧＩ”）も比較の目的で示す。図６ｂ及び図６ｃで、コラーゲン生成はシリウスレッド（Ｓｉｒｉｕｓ  Ｒｅｄ）染色（全体コラーゲン染色）によって表示される。図６ｂは対照群抗体（Ｇ２）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（Ｇ３）が投与されたＤＭＮ処置された動物の肝でのシリウスレッド染色の代表的な免疫組職化学イメージを提供する。図６ｃは肝組織切片に対するシリウスレッド−陽性細胞のパーセント（平均±Ｓ．Ｄ．）を提供する。図６ｄ及び図６ｅで、タイプＩコラーゲンの特異的生成が提供される。図６ｄは対照群抗体（Ｇ２）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（Ｇ３）が投与されたＤＭＮ処置された動物の肝でのタイプＩコラーゲン染色の代表的な免疫組職化学イメージを提供する。図６ｅは全体染色された肝組織切片に対するタイプＩコラーゲン発現のパーセント（平均±Ｓ．Ｄ．）を提供する。図６ｃ及び図６ｅではＳＰＳＳ  ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ  １９を使って統計分析が行われた。棒上の“＊＊”は“Ｇ１”グループ（元気な動物）に比べて統計的に有意な差（ｐ＜０．０１）を示す。“＃”及び“＃＃”は対照群抗体（Ｇ２）で治療された動物に比べて統計的に有意な差（それぞれｐ＜０．０５；ｐ＜０．０１）を示す。
【００７０】
〔図７ａ及び図７ｂ〕対照群抗体（Ｇ２）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（Ｇ３）が投与されたＤＭＮ処置された動物の肝でのＴＧＦ−β生成の比較を示す。ナイーブ／元気な動物（ＧＩ）も比較の目的で示される。図７ａは肝サンプルのＴＧＦ−β染色の代表的な免疫組職化学イメージを提供する。図７ｂは肝組織切片に対するＴＧＦ−β発現のパーセント（平均±Ｓ．Ｄ．）を提供する。統計分析はＳＰＳＳ  ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ  １９を使って行われた。棒上の“＊”及び“＊＊”は“Ｇ１”（元気な動物）に比べて統計的に有意な差（それぞれ（ｐ＜０．０５；ｐ＜０．０１）を示す。“＃＃”は対照群抗体（Ｇ２）で治療された動物に比べて統計的に有意な差（ｐ＜０．０１）を示す。
【００７１】
〔発明を実施するための形態〕
本発明は、線維症、例えば肝線維症が抗ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤、例えば抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の投与によって制御、治療、緩和又は減少することができるということを開示する。この効能の一つの可能なメカニズムは線維症に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の抗炎症効果によるものであり得る。また、本発明は、線維症、例えば肝線維症が血清中のＦＡＭ１９Ａ５の発現を測定することによって診断されることができるということを開示する。纎維形成の間に、多くの線維症の主要原因である活性化した肝星細胞（ｈｅｐａｔｉｃ  ｓｔｅｌｌａｔｅ  ｃｅｌｌｓ、ＨＳＣ）がＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を高水準で生成し、これが血清に分泌されることができる。よって、線維症及び／又は線維症関連疾患の重症度が増加すれば、血清でのＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の発現がもっと高くなる。
【００７２】
この明細書に開示された発明の容易な理解のために、多数の用語及び文句が定義される。追加の定義は詳細な説明全般で提示される。
【００７３】
Ｉ．定義
本明細書全般で、用語“１個の”又は“ある”は１個以上を意味する；例えば“１個の抗体”は１個以上の抗体を示すものとして理解される。このように、用語“１個の”（又は“ある”）、“１個以上の”及び“少なくとも１個の”はこの明細書で互いに交換して使われることができる。
【００７４】
また、“及び／又は”は２個の明示した特徴又は成分のそれぞれが残りの１個とともに又は単独で具体的に開示されるものに解釈されなければならない。よって、“Ａ及び／又はＢ”のような文句で使用された用語“及び／又は”は“Ａ及びＢ”、“Ａ又はＢ”、“Ａ”（単独）、及び“Ｂ”（単独）を含もうとするものである。同様に、“Ａ、Ｂ及び／又はＣ”のような文句で使用された用語“及び／又は”はＡ、Ｂ及びＣ；Ａ、Ｂ又はＣ；Ａ又はＣ；Ａ又はＢ；Ｂ又はＣ；Ａ及びＣ；Ａ及びＢ；Ｂ及びＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；及びＣ（単独）の様態をそれぞれ含もうとするものである。
【００７５】
ある様態が“含む”としてこの明細書に提示されれば“構成される”及び／又は“本質的に構成される”の観点で提示された他の類似した様態も提供されるものに理解される。
【００７６】
他に定義しない限り、本明細書で使用される全ての技術及び科学用語は本発明に係わる当業者に通常に理解されるものと同じ意味を有する。例えば、文献（the Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, Juo, Pei-Show, 2nd ed., 2002, CRC Press; The Dictionary of Cell and Molecular Biology, 3rd ed., 1999, Academic Press; and the Oxford Dictionary Of Biochemistry And Molecular Biology, Revised, 2000, Oxford University Press）はこの明細書で使用された大部分の用語に対する一般辞書的意味を当業者に提供する。
【００７７】
単位、接頭辞及び記号は国際単位系（Ｓｙｓｔｅｍｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｄｅＵｎｉｔｅｓ（ＳＩ））で承認された形態に表示される。数値範囲はその範囲を限定する数字を包括的に含む。特別な言及がない限り、アミノ酸配列はアミノからカルボキシの配向に左側から右側に書かれる。本明細書に提供された表題は本発明の多様な様態の制限ではなく、これらは全体的に明細書を参照したものであり得る。よって、以下で定義される用語はその全体が明細書を参照してより充分に定義される。
【００７８】
用語“約”はおよそ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）、概略で（ｒｏｕｇｈｌｙ）、前後の（ａｒｏｕｎｄ）、又は〜〜の領域内を意味するためにこの明細書に使われる。用語“約”が数値範囲とともに使われるとき、それは提示された数値の上下に境界を拡張させることによって該当範囲を変形する。一般的に、用語“約”は、例えば上に又は下に（より高く又はより低く）１０パーセントの変動まで言及された値の上下に数値を変形することができる。
【００７９】
用語“治療する”、“治療する”及び“治療”は疾患と関連する症状、余病、状態又は生化学的指標の進行、発生、深刻性又は再発を反転、改善、緩和、阻害又は遅延させる目的で対象に対して遂行される任意の介入又は過程、又は対象に活性剤を投与することを意味する。治療は疾患を有する対象又は疾患を持っていない対象に対して行われることができる（例えば、予防のため）。
【００８０】
用語“投与”は当業者に公知となった多様な方法及び送逹システム（ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｓｙｓｔｅｍｓ）のいずれかを使用して対象に治療剤又は治療剤を含む組成物を物理的に導入することを意味する。本明細書に開示される抗体のための相異なる投与経路は、静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、脊髄又は他の非経口投与経路、例えば注射（ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ）又は注入（ｉｎｆｕｓｉｏｎ）によるものを含む。用語“非経口投与”は一般的に注射による、腸内（ｅｎｔｅｒａｌ）及び局所（ｔｏｐｉｃａｌ）投与以外の投与方式を意味し、これに制限されるものではないが、静脈内、腹腔内、筋肉内、動脈内、髄腔内、リンパ内、病巣内、嚢内（ｉｎｔｒａｃａｐｓｕｌａｒ）、眼窩内（ｉｎｔｒａｏｒｂｉｔａｌ）、心臓内、皮内、経気管（ｔｒａｎｓｔｒａｃｈｅａｌ）、気管内、肺、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、脳室内、硝子体内、硬膜外、及び胸骨内胸骨内注射及び注入だけでなく、生体内電気穿孔を含む。もしくは、本明細書に開示される抗体は、非−非経口経路を介して、例えば局所、上皮又は粘膜投与経路を介して、例えば鼻腔内、経口、経膣、直腸、舌下又は局所経路を介して投与されることができる。また、投与は、例えば１回、多数回、及び／又は一回以上の延ばされた期間にかけて遂行されることができる。
【００８１】
用語“治療上有効量”は単独で又は他の治療剤と組み合わせて、対象の疾患又は障害を“治療するのに”効果的な、又は疾患又は障害（例えば、線維症又は肺線維症）の危険、潜在性、可能性又は発生を減少させるのに効果的な薬物の量を意味する。“治療上有効量”は疾患又は障害（例えば、線維症又は肺線維症）を持っているか有する危険がある対象に一部の改善や利益を提供する薬物又は治療剤の量を含む。よって、“治療上有効量”は疾患又は障害の危険、潜在性、可能性又は発生を減少させるか又は一部の緩和、軽減を提供し、及び／又は少なくとも１個の指標（例えば、線維症）を減少させ、及び／又は疾患又は障害の少なくとも１個の臨床症状を減少させる量である。
【００８２】
本発明のいくつかの様態は対象の線維症、及び／又は線維症関連疾患の診断に関するものである。本発明に関連して、出願人は、組職又は臓器の損傷時、損傷部位と線維症疾患又は傷害を有する対象の末梢血でＦＡＭ１９Ａ５発現が増加することを見つけた。よって、いくつかの具体例において、本発明は、この明細書に開示されるモノクローナル抗体又はその抗原結合部分、二重特異性分子、又は免疫抱合体を対象から得られたサンプルと接触させる段階、及びＦＡＭ１９Ａ５発現水準を測定する段階を含む対象の線維症及び／又は線維症関連疾患を診断する方法を開示する。一具体例において、線維症は肝線維症又は肺線維症である。いくつかの具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５の水準は、線維症を持っていない対象の基準サンプルでのＦＡＭ１９Ａ５の水準と比較して、該当対象のサンプルで増加する（以下を参照）。
【００８３】
用語“診断”は患者が特定の疾患又は状態で苦しんでいるかを決定するか予測するために使うことができる方法を意味する。当業者は１個以上の診断マーカー（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５）に基づいて診断することができる。ここで、診断マーカーの存在、不在、量又は量の変化は該当状態の存在、深刻性又は不在を表示する。いくつかの具体例において、対象からの生物学的サンプルにおけるＦＡＭ１９Ａ５発現の増加は線維症及び／又は線維症関連疾患の表示である。用語“診断”は１００％の正確性で特定疾患の存在又は不在を決定することを意味するものではなく、特定の経過又は成果がそうではない場合より起こる可能性が高いことを意味するものでもない。その代わりに、当業者は用語“診断”を特定の疾患が対象に存在する確率が増加することを意味するものに理解するであろう。
【００８４】
用語“診断マーカー”（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５の発現）は正常細胞から線維症組織の細胞を分離して診断することができる物質を意味し、有機生物分子、例えばポリペプチド、又は核酸（例えば、ｍＲＮＡ）、脂質、糖脂質、糖タンパク質、及び糖（単糖類、二糖類、オリゴ糖など）を含み、これらは線維症組織の細胞で増加するか減少する。線維症及び／又は線維症関連疾患に対してこの明細書で提示された診断マーカーは線維症組織の細胞で発現が増加するＦＡＭ１９Ａ５遺伝子から発現したタンパク質であり得る。
【００８５】
線維症及び／又は線維症関連疾患の診断用組成物はＦＡＭ１９Ａ５遺伝子のｍＲＮＡの発現水準又は発現したタンパク質の量を測定するための製剤を含む。このような製剤は、ＦＡＭ１９Ａ５  ｍＲＮＡに相補的な配列を有するオリゴヌクレオチド、ＦＡＭ１９Ａ５  ｍＲＮＡに特異的に結合するプライマー又は核酸プローブ、及びＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合する抗体を含む。
【００８６】
用語“対象”は任意のヒト又は非ヒト動物を含む。用語“非ヒト動物”は全ての脊椎動物、例えば哺乳類及び非哺乳類、例えば非ヒトの霊長類、羊、犬、牛、ニワトリ、両生類、爬虫類などを含む。
【００８７】
用語“配列相同性１９を有するファミリ、メンバーＡ５”又は“ＦＡＭ１９Ａ５”は５個の高度の相同性のタンパク質のＴＡＦＡファミリ（ＦＡＭ１９ファミリとも知られている）に属し、脳と脊髄で主に発現するタンパク質を意味する（Tang T. Y. et al., Genomics 83(4):727-34 (2004)）。これらのタンパク質は固定位置に保存されたシステイン残期を含み、ＣＣ−ケモカインファミリのメンバーであるマクロファージ炎症タンパク質１−アルファ（ＭＩＰ−１−アルファ）に係わる。ＴＡＦＡタンパク質は脳と脊髄の特定領域で主に発現する。これらのタンパク質は神経発生過程で成人神経幹細胞によって発生して分配されると思われる。また、ＦＡＭ１９Ａ５はＴＡＦＡ５又はケモカイン類似タンパク質ＴＡＦＡ−５（Ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ−ｌｉｋｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ＴＡＦＡ−５）とも知られている。
【００８８】
ＦＡＭ１９Ａ５は脊椎動物の脳で主に発現し、完全な中枢神経系の発生、分化、形成に重要であると思われる。また、ＦＡＭ１９Ａ５は多くの中枢神経系の損傷及び／又は退行性脳疾患（例えば、ハンチントン病、パーキンソン病、アルツハイマー病、及び脳脊髓損傷）の発病機序に有意な役割をする。中枢神経系の損傷時、神経幹細胞がＦＡＭ１９Ａ５を生成し、これは正常星状膠細胞の反応性星状膠細胞（ｒｅａｃｔｉｖｅ  ａｓｔｒｏｃｙｔｅｓ）への分化を誘導する。これらの反応性星状膠細胞は（小膠細胞とともに）広範囲なＥＣＭ（例えば、プロテオグリカン、糖タンパク質及びコラーゲン）を発現することができ、反応性神経膠症を誘導することができ、これは中枢神経系の損傷された領域を網のように取り囲んでニューロンの再生を妨げることができる。ＦＡＭ１９Ａ５に対する抗体は中枢神経系傷害及び／又は疾患の予防及び／又は治療に使われることができる（アメリカ特許第９，５７９，３９８号参照）。
【００８９】
ヒトにおいて、ＦＡＭ１９Ａ５を暗号化する遺伝子は染色体２２に位置する。次のような３種のヒトＦＡＭ１９Ａ５（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７）アイソフォームがあり、これらは選択的スプライシングによって生成されると思われる：アイソフォーム１（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−１）、これは１３２個のアミノ酸で構成される；アイソフォーム２（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−２）、これは１２５個のアミノ酸で構成される；及びアイソフォーム３（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−３）、これは５３個のアミノ酸で構成される。ヒトＦＡＭ１９Ａ５タンパク質は膜結合形態と可溶性（分泌された）形態として存在すると思われる。アイソフォーム１は１個の膜貫通領域を有する膜タンパク質であると思われる。アイソフォーム２は分泌されたタンパク質（可溶性）として文献（Tang T. Y. et al., Genomics 83(4):727-34 (2004)）に報告されており、アミノ酸位置１−２５にシグナルペプチドを含む。アイソフォーム３はＥＳＴデータに基づいて予想される。以下は３種の公知のヒトＦＡＭ１９Ａ５アイソフォームのアミノ酸配列である。
【００９０】
（Ｉ）アイソフォーム１（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−１、膜貫通タンパク質）：このアイソフォームが標準配列として選択された。
【００９１】
ＭＡＰＳＰＲＴＧＳＲＱＤＡＴＡＬＰＳＭＳＳＴＦＷＡＦＭＩＬＡＳＬＬＩＡＹＣＳＱＬＡＡＧＴＣＥＩＶＴＬＤＲＤＳＳＱＰＲＲＴＩＡＲＱＴＡＲＣＡＣＲＫＧＱＩＡＧＴＴＲＡＲＰＡＣＶＤＡＲＩＩＫＴＫＱＷＣＤＭＬＰＣＬＥＧＥＧＣＤＬＬＩＮＲＳＧＷＴＣＴＱＰＧＧＲＩＫＴＴＴＶＳ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）
（ＩＩ）アイソフォーム２（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−２、可溶性タンパク質）：
ＭＱＬＬＫＡＬＷＡＬＡＧＡＡＬＣＣＦＬＶＬＶＩＨＡＱＦＬＫＥＧＱＬＡＡＧＴＣＥＩＶＴＬＤＲＤＳＳＱＰＲＲＴＩＡＲＱＴＡＲＣＡＣＲＫＧＱＩＡＧＴＴＲＡＲＰＡＣＶＤＡＲＩＩＫＴＫＱＷＣＤＭＬＰＣＬＥＧＥＧＣＤＬＬＩＮＲＳＧＷＴＣＴＱＰＧＧＲＩＫＴＴＴＶＳ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２）
（ＩＩＩ）アイソフォーム３（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｑ７Ｚ５Ａ７−３）：
ＭＹＨＨＲＥＷＰＡＲＩＩＫＴＫＱＷＣＤＭＬＰＣＬＥＧＥＧＣＤＬＬＩＮＲＳＧＷＴＣＴＱＰＧＧＲＩＫＴＴＴＶＳ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３）
用語“ＦＡＭ１９Ａ５”は細胞によって自然に発現するＦＡＭ１９Ａ５の任意の変異体又はアイソフォームを含む。よって、本明細書に開示される抗体は同種の相異なるアイソフォーム（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５の相異なるアイソフォーム）と交差反応することができるか、又はヒト以外の種のＦＡＭ１９Ａ５（例えば、マウスＦＡＭ１９Ａ５）と交差反応することができる。もしくは、抗体はヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的であり得、他の種とは交差反応性を示すことができないこともある。ＦＡＭ１９Ａ５、又はその任意の変異体及びアイソフォームはこれらを自然に発現する細胞又は組職から分離されるか又は組み換えによって生成されることができる。ヒトＦＡＭ１９Ａ５を暗号化するポリヌクレオチドはＧｅｎＢａｎｋ受託番号Ｎｏ．ＢＣ０３９３９６を有し、次の配列を有する：
【００９２】
【表１ａ】
2020525519.tif 000002
【００９３】
用語“ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対する拮抗剤”はＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の発現を抑制する拮抗剤を意味する。このような拮抗剤は、ペプチド、核酸、又は化合物であり得る。より具体的に、拮抗剤はアンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、アプタマー、ＦＡＭ１９Ａ５標的化ＰＮＡ（ペプチド核酸）、又はこれらを含むベクターであり得る。いくつかの具体例において、拮抗剤はＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分であり得る。
【００９４】
用語“抗体”及び“抗体ら”は当該分野の用語であり、この明細書で相互交換して使用することができ、抗原に特異的に結合する抗原結合部位を有する分子を意味する。本明細書で使用される用語は全ての抗体及び任意の抗原結合断片（すなわち、“抗原結合部分”）又はこれらの単鎖を含む。一具体例において、“抗体”はジスルフィド結合によって相互連結された少なくとも２個の重鎖（Ｈ）と２個の軽鎖（Ｌ）を含む糖タンパク質、又はその抗原結合部分を意味する。他の具体例において、“抗体”は単一可変領域、例えばＶＨＨドメインを含む単鎖抗体を意味する。各重鎖は重鎖可変領域（ここで、ＶＨと略記する）と重鎖不変領域からなる。特定の自然発生抗体において、重鎖不変領域は３個のドメインＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３からなる。特定の自然発生抗体において、各軽鎖は軽鎖可変領域（ここで、ＶＬと略記する）と軽鎖不変領域からなる。軽鎖不変領域は１個のドメインＣＬからなる。
【００９５】
ＶＨ及びＶＬ領域はフレームワーク領域（ＦＲ）と称する、より保存される領域が散在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と称する、超可変性領域にさらに細分されることができる。それぞれのＶＨ及びＶＬは３個のＣＤＲと４個のＦＲからなり、これらはＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、及びＦＲ４の順にアミノ末端からカルボキシ末端に向かって配列される。重鎖及び軽鎖の可変領域は抗原と相互作用する結合ドメインを含む。抗体の不変領域は、免疫システムの多様な細胞（例えば、エフェクター細胞）及び正統補体システムの第１成分（Ｃ１ｑ）を含む宿主組職又は因子と兔疫グロブリンの結合を媒介することができる。
【００９６】
用語“Ｋａｂａｔナンバリング”及び類似の用語は当該分野に認められており、抗体、又はその抗原結合部分の重鎖及び軽鎖可変領域でアミノ酸残期をナンバリングするシステムを意味する。特定の様態で、抗体のＣＤＲはＫａｂａｔナンバリングシステムによって決定されることができる（例えば、Kabat EA & Wu TT (1971) Ann NY Acad Sci 190: 382-391 and Kabat EA et al., (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242参照）。Ｋａｂａｔナンバリングシステムを使えば、抗体重鎖分子内でＣＤＲは典型的にアミノ酸位置３１〜３５（選択的に３５以後に１個又は２個の追加のアミノ酸を含むことができる；Ｋａｂａｔナンバリング方式で３５Ａ及び３５Ｂと言及される、ＣＤＲ１）、アミノ酸位置５０〜６５（ＣＤＲ２）、及びアミノ酸位置９５〜１０２（ＣＤＲ３）に存在する。Ｋａｂａｔナンバリングシステムを使えば、抗体軽鎖分子内でＣＤＲは典型的にアミノ酸位置２４〜３４（ＣＤＲ１）、アミノ酸位置５０〜５６（ＣＤＲ２）、及びアミノ酸位置８９〜９７（ＣＤＲ３）に存在する。特定の具体例において、本明細書に開示される抗体のＣＤＲはＫａｂａｔナンバリング方式で決定された。
【００９７】
文句“Ｋａｂａｔでのようなアミノ酸位置ナンバリング”、“Ｋａｂａｔ位置”及びこれらの文法的変異は文献（Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)）で抗体編成の重鎖可変領域又は軽鎖可変領域に対して使用されたナンバリングシステムを意味する。このナンバリングシステムを使えば、実際の線形アミノ酸配列はより少ない又は追加のアミノ酸を含むことができる。これは可変領域のＦＷ又はＣＤＲの短縮、又はＦＷ又はＣＤＲへの挿入に相当する。例えば、重鎖可変領域はＨ２の残期５２以後の単一アミノ酸挿入（Ｋａｂａｔによれば、残期５２ａ）及び重鎖ＦＷ残期８２以後の挿入された残期（Ｋａｂａｔによれば、残期８２ａ、８２ｂ、及び８２ｃなど）を含むことができる（表１ｂ参照）。
【００９８】
【表１ｂ】
2020525519.tif 000003
【００９９】
残期のＫａｂａｔナンバリングは“標準”Ｋａｂａｔナンバリングされた配列と抗体の配列の相同性領域で整列によって特定の抗体に対して決定されることができる。Ｃｈｏｔｈｉａはその代わりに構造ループの位置を言及する（Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)）。Ｃｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲ−Ｈ１ループの端部はＫａｂａｔナンバリング慣例を用いてナンバリングされたとき、ループの長さによってＨ３２〜Ｈ３４の範囲で変わる（これは、Ｋａｂａｔナンバリング方式がＨ３５ＡとＨ３５Ｂに挿入を位置させるからである；３５Ａも３５Ｂも存在しなければ、ループは３２で終わる；３５Ａのみ存在すれば、ループは３３で終わる；３５Ａと３５Ｂが共に存在すれば、ループは３４で終わる）。ＡｂＭ超可変領域はＫａｂａｔ  ＣＤＲとＣｈｏｔｈｉａ構造ループ間の妥協点を表示し、Ｏｘｆｏｒｄ  ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアによって使われる。
【０１００】
ＩＭＧＴ（ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ）もＣＤＲを含む兔疫グロブリン可変領域に対するナンバリングシステムを提供する。例えば、文献（Lefranc, M.P. et al, Dev. Comp. Immunol. 27: 55-77(2003)）を参考し、これはこの明細書に参照することにより組み込まれる。ＩＭＧＴナンバリングシステムは５，０００個を超える配列の整列、構造データ、及び超可変ループの特性化に基づいており、全ての種に対して可変領域とＣＤＲ領域の容易な比較ができるようにする。ＩＭＧＴナンバリングスキーマによれば、ＶＨ−ＣＤＲ１は位置２６〜３５にあり、ＶＨ−ＣＤＲ２は位置５１〜５７にあり、ＶＨ−ＣＤＲ３は位置９３〜１０２にあり、ＶＬ−ＣＤＲ１は位置２７〜３２にあり、ＶＬ−ＣＤＲ２は位置５０〜５２にあり、ＶＬ−ＣＤＲ３は位置８９〜９７にある。
【０１０１】
本明細書で開示される全ての重鎖不変領域アミノ酸位置に対し、ナンバリングは配列化した最初のヒトＩｇＧ１である骨髄腫タンパク質ＥＵのアミノ酸配列を説明した文献（Edelman et al., 1969, Proc. Natl. Acad. Set USA 63(1):78-85）で最初に提示されたＥＵインデックスによる。また、ＥｄｅｌｍａｎらのＥＵインデックスは文献（Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed., United States Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda）にも提示されている。よって、文句“Ｋａｂａｔに提示されたＥＵインデックス”又は“ＫａｂａｔのＥＵインデックス”及び“Ｋａｂａｔに提示されたＥＵインデックスによる位置”及びこれらの文法的変異はＫａｂａｔ  １９９１に提示されたもののようなＥｄｅｌｍａｎらのヒトＩｇＧ１ＥＵ抗体に基づく残期ナンバリングシステムを意味する。
【０１０２】
可変領域（重鎖及び軽鎖の両者）及び軽鎖不変領域アミノ酸配列に使用されるナンバリングシステムはＫａｂａｔ  １９９１に提示されたものである。
【０１０３】
抗体は兔疫グロブリン分子の任意のタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ又はＩｇＹ）、任意のクラス（例えば、ＩｇＤ、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１又はＩｇＡ２）、又は任意のサブクラス（例えば、ヒトでＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４；及びマウスでのＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ３）を有することができる。兔疫グロブリン、例えばＩｇＧ１はいくつかのアロタイブとして存在し、これらは多くても少数のアミノ酸が互いに異なる。本明細書に開示される抗体は、通常知られたアイソタイプ、クラス、サブクラス、又はアロタイブのいずれかから由来することができる。特定の具体例において、本明細書に開示される抗体はＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４サブクラス又はこれらの任意のハイブリッドである。特定の具体例において、抗体はヒトＩｇＧ１サブクラス又はヒトＩｇＧ２又はヒトＩｇＧ４サブクラスのものである。
【０１０４】
“抗体”は、例として、自然発生及び非自然発生抗体；モノクローナル及びポリクローナル抗体；キメラ及びヒト化抗体；ヒト及び非ヒト抗体、完全合成抗体；単鎖抗体；単一特異的抗体；多重特異的抗体（二重特異性抗体を含み）；２個の重鎖と２個の軽鎖分子を含む四量体抗体；抗体軽鎖モノマー；抗体重鎖モノマー；抗体軽鎖二量体；抗体重鎖二量体；抗体軽鎖−抗体重鎖対；細胞内抗体；ヘテロ結合抗体；１価抗体；ラクダ化抗体；アフィボディー；抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体（例えば、抗抗Ｉｄ抗体を含み）、及び充分に抗原結合することができる単一モノマー可変抗体ドメイン（例えば、ＶＨドメイン又はＶＬドメイン）からなる結合分子を含む単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）を含む（Harmen M. M. and Haard H. J. Appl Microbiol Biotechnol. 77(1): 13-22 (2007)）。
【０１０５】
本明細書で使用される用語抗体の“抗原結合部分”は抗原（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する能力を保有した抗体の１個以上の断片を意味する。このような“断片”は、例えば、約８〜約１５００個のアミノ酸の長さ、適切には約８〜約７４５個のアミノ酸の長さ、適切には約８〜約３００個、例えば約８〜約２００個のアミノ酸、又は約１０個〜約５０又は１００個のアミノ酸の長さである。抗体の抗原結合機能は全長抗体の断片によって遂行されることができるというのが明かされた。抗体、例えば、この明細書に開示される抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の“抗原結合部分”と言う用語に含まれる結合断片の例は、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、及びＣＨ１ドメインからなる１価断片であるＦａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域でジスルフィドブリッジによって連結された２個のＦａｂ断片を含む２価断片であるＦ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一腕のＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片、及びジスルフィド連結されたＦｖｓ（ｓｄＦｖ）；（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ward et ( a1l9.8, 9) Nature 341:544- 546）；及び（ｖｉ）分離された相補性決定領域（ＣＤＲ）又は（ｖｉｉ）合成リンカーによって選択的に連結されることができる２個以上の分離されたＣＤＲの組合せを含む。また、Ｆｖ断片の２個のドメインであるＶＬとＶＨは別個の遺伝子によってコーディングされるが、これらは合成リンカーによって、組み換え方法を使用して、連結されることができる。これにより、ＶＬとＶＨ領域が対を成して１価分子を形成した単一タンパク質鎖となることができる（単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）と言う）（例えば、Bird et al. (1988) Science 242:423-426; and Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883)参照）。このような単鎖抗体も抗体の“抗原結合部分”という用語内に含まれる。これらの抗体断片は当業者に公知となった従来の技術によって得られ、断片は無損傷抗体と同一の方式で有用にスクリーニングされる。抗原結合部分は組み換えＤＮＡ技術によって、又は無損傷兔疫グロブリンの酵素又は化学切断によって生成されることができる。
【０１０６】
用語“可変領域”又は“可変ドメイン”は当該分野で通常に互いに交換して使われる。可変領域は典型的に抗体の一部分、一般的に軽鎖又は重鎖の一部分、典型的に成熟した重鎖でのアミノ末端約１１０〜１２０個のアミノ酸及び成熟した軽鎖での約９０〜１１５個のアミノ酸を意味し、これらは抗体間に配列が鉱範に異なり、その特定抗原に対する特定抗体の結合及び特異性のため使われる。配列変動性は相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる領域に集中し、可変領域でより高度に保存された領域はフレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。
【０１０７】
軽鎖及び重鎖のＣＤＲは抗原と抗体の相互作用及び特異性を主に担当すると思われる。特定の具体例において、可変領域はヒト可変領域である。特定の具体例において、可変領域はげっ歯類又はネズミ科ＣＤＲとヒトフレームワーク領域（ＦＲ）を含む。特定の具体例において、可変領域は霊長類（例えば、非ヒトの霊長類）可変領域である。特定の具体例において、可変領域はげっ歯類又はネズミ科ＣＤＲと霊長類（例えば、非ヒトの霊長類）フレームワーク領域（ＦＲ）を含む。
【０１０８】
用語“重鎖”は、抗体に関連して使われるとき、不変ドメインのアミノ酸配列に基づいて、任意の相異なるタイプ、例えばアルファ（α）、デルタ（δ）、エプシロン（ε）、ガンマ（γ）及びミュー（μ）を意味することができ、これらはそれぞれＩｇＧのサブクラス、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４を含めて、抗体のＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭクラスを発生させる。
【０１０９】
用語“軽鎖”は、抗体に関連して使われるとき、不変ドメインのアミノ酸配列に基づいて任意の相異なるタイプ、例えばカッパ（κ）及びラムダ（λ）を意味することができる。軽鎖アミノ酸配列は当該分野によく知られている。特定の具体例において、軽鎖はヒト軽鎖である。
【０１１０】
用語“ＶＬ”及び“ＶＬドメイン”は互いに交換して使われ、抗体の軽鎖可変領域を意味する。
【０１１１】
用語“ＶＨ”及び“ＶＨドメイン”は互いに交換して使われ、抗体の重鎖可変領域を意味する。
【０１１２】
用語“不変領域”又は“不変ドメイン”は互いに交換することができ、当該分野での通常の意味を有する。不変ドメインは抗体部分であり、例えば抗体と抗原の結合には直接関与しないがＦｃ受容体との相互作用のような多様なエフェクター機能を示すことができる軽鎖及び／又は重鎖のカルボキシ末端部分である。兔疫グロブリン分子の不変領域は、一般的に兔疫グロブリン可変領域に比べてもっと保存されたアミノ酸配列を有する。
【０１１３】
用語“Ｆｃ領域”（断片結晶化可能な領域）又は“Ｆｃドメイン”又は“Ｆｃ”は免疫システムの多様な細胞（例えば、エフェクター細胞）上に位置するＦｃ受容体又は正統補体システムの第１成分（Ｃ１ｑ）との結合を含み、宿主組職又は因子と兔疫グロブリンの結合を媒介する抗体の重鎖のＣ末端領域を意味する。よって、Ｆｃ領域は第１不変領域兔疫グロブリンドメイン（例えば、ＣＨ１又はＣＬ）を除いた抗体の不変領域を含む。ＩｇＧ、ＩｇＡ及びＩｇＤ抗体アイソタイプにおいて、Ｆｃ領域は抗体の２個の重鎖の第２（ＣＨ２）及び第３（ＣＨ３）不変ドメインから来由した２個の同じタンパク質断片を含む；ＩｇＭ及びＩｇＥＦｃ領域は、各ポリペプチド鎖に３個の重鎖不変ドメイン（ＣＨドメイン２〜４）を含む。ＩｇＧの場合、Ｆｃ領域は兔疫グロブリンドメインＣγ２及びＣγ３とＣγ１とＣγ２間のヒンジを含む。兔疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は多様であるが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は一般的に位置Ｃ２２６又はＰ２３０にあるアミノ酸残期（又はこれら２個のアミノ酸間のアミノ酸）から重鎖のカルボキシ末端まで延びるのように限定され、ここでナンバリングはＫａｂａｔでのようなＥＵインデックスによる。ヒトＩｇＧＦｃ領域のＣＨ２ドメインは約アミノ酸２３１から約アミノ酸３４０まで延び、ＣＨ３ドメインはＦｃ領域でＣｍドメインのＣ末端側に位置する。すなわち、それはＩｇＧの約アミノ酸３４１から約アミノ酸４４７まで延びる。この明細書に使われたＦｃ領域は任意のアロタイブ変異体を含む自生配列Ｆｃ、又は変異体Ｆｃ（例えば、非自然発生Ｆｃ）であり得る。また、Ｆｃは分離された状態の領域を意味するか又は“Ｆｃ融合タンパク質”（例えば、抗体又は免疫付着（ｉｍｍｕｎｏａｄｈｅｓｉｏｎ））とも言う、“Ｆｃ領域を含む結合タンパク質”のような、Ｆｃを含むタンパク質ポリペプチドに関連した領域を意味する。
【０１１４】
“自生配列Ｆｃ領域”又は“自生配列Ｆｃ”は自然で発見されたＦｃ領域のアミノ酸配列と同じアミノ酸配列を含む。自生配列ヒトＦｃ領域は、自生配列ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域；自生配列ヒトＩｇＧ２  Ｆｃ領域；自生配列ヒトＩｇＧ３  Ｆｃ領域；及び自生配列ヒトＩｇＧ４  Ｆｃ領域だけではなく、これらの自然発生変異体を含む。自生配列ＦｃはＦｅの多様なアロタイブを含む（例えば、Jefferis et al. (2009) mAbs 1:1; Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520(２０１４年１０月２０日オンライン公開)参照）。
【０１１５】
“Ｆｃ受容体”又は“ＦｃＲ”は兔疫グロブリンのＦｃ領域に結合する受容体である。ＩｇＧ抗体に結合するＦｃＲはＦｃγファミリの受容体を含み、これら受容体の対立遺伝子変異及び他の方式でスプライスされた形態を含む。Ｆｃγファミリは３個の活性化受容体（マウスのＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＩ、及びＦｃγＲＩＶ；ヒトのＦｃγＲＩＡ、ＦｃγＲＩＩＡ、及びＦｃγＲＩＩＩＡ）と１個の抑制性受容体（ＦｃγＲＩＩＢ）からなる。ヒトＩｇＧ１は大部分のヒトＦｃ受容体と結合し、最も強いＦｃエフェクター機能を導出する。それが結合する活性化Ｆｃ受容体の種類に対してはネズミ科ＩｇＧ２ａと同等であると見なされる。一方、ヒトＩｇＧ４は最小限のＦｃエフェクター機能を導出する（Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520 (２０１４年１０月２０日オンライン公開)参照）。
【０１１６】
不変領域は、１個以上のエフェクター機能を除去するために、例えば組み換え技術によって操作可能である。“エフェクター機能”は抗体Ｆｃ領域とＦｃ受容体又はリガンドの相互作用、又はそれから生ずる生化学的イベントを意味する。例示的な“エフェクター機能”はＣ１ｑ結合、補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）、Ｆｃ受容体結合、ＦｃγＲ−媒介エフェクター機能、例えばＡＤＣＣ及び抗体依存性細胞媒介食作用（ＡＤＣＰ）、及び細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体；ＢＣＲ）のダウン調節を含む。このようなエフェクター機能は一般的にＦｃ領域が結合ドメイン（例えば、抗体可変領域）と組み換えられることを必要とする。よって、用語“Ｆｃ機能がない不変領域”はＦｃ領域によって媒介された１個以上のエフェクター機能が減少するかない不変領域を含む。
【０１１７】
抗体のエフェクター機能は相異なる接近法によって減少又は回避することができる。抗体のエフェクター機能はＦｃ領域を欠いた抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、又はモノマーＶＨ又はＶＬドメインからなるｓｄＡｂ）を使って減少するか回避することができる。もしくは、Ｆｃ領域の他の価値ある属性（例えば、延ばされた半減期及びヘテロ二量化）は保有しながら抗体のエフェクター機能を減少させるためにいわゆるアグリコシル化（ａｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ）抗体がＦｃ領域で特定の残期に連結された糖を除去することによって生成されることができる。アグリコシル化抗体は、例えば糖が付着された残期を欠失又は変更して糖を酵素的に除去することにより、グリコシル化阻害剤の存在の下で培養された細胞で抗体を生成することにより、又はタンパク質をグリコシル化することができない細胞（例えば、バクテリア宿主細胞）で抗体を発現することにより生成されることができる（例えば、アメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号参照）。他の接近法は、エフェクター機能が減少したＩｇＧサブクラスからのＦｃ領域を用いるものである。例えば、ＩｇＧ２及びＩｇＧ４抗体はＩｇＧ１及びＩｇＧ３より低い水準のＦｃエフェクター機能を有することを特徴とする。Ｆｃ部分のＣＨ２ドメインでヒンジ領域に最も近くにある残期が抗体のエフェクター機能を担当し、それは先天免疫システムのエフェクター細胞上でＣ１ｑ（補体）及びＩｇＧ−Ｆｃ受容体（ＦｃγＲ）に対してかなり重畳した結合部位を含む（Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520(２０１４年１０月２０日オンライン公開)参照）。よって、Ｆｃエフェクター機能が減少するかない抗体は、例えばＩｇＧ４アイソタイプのＩｇＧ抗体からのＣＨ２ドメインとＩｇＧ１アイソタイプのＩｇＧ抗体からのＣＨ３ドメインを含むキメラＦｃ領域、又はＩｇＧ２からのヒンジ領域とＩｇＧ４からのＣＨ２領域を含むキメラＦｃ領域（例えば、Lau C. et al. J. Immunol. 191:4769-4777 (2013)参照）、又は変更されたＦｃエフェクター機能、例えば減少するかないＦｃ機能をもたらす突然変異を有するＦｃ領域を生成することによって製造できる。突然変異を有するこのようなＦｃ領域は当該分野に公知となっている。例えば、アメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号とそれに引用されたアメリカ出願及びＰＣＴ出願と文献（An et al. mAbs 1:6, 572- 579 (2009)）を参照し、これらはその全体をこの明細書に参照することにより組み込まれる。
【０１１８】
“ヒンジ”、“ヒンジドメイン”又は“ヒンジ領域”又は“抗体ヒンジ領域”はＣＨ１ドメインをＣＨ２ドメインに連結し、ヒンジの上部、中央、及び下部の部分を含む重鎖不変領域のドメインを意味する（Roux et al. J. Immunol. 1998 161:4083）。ヒンジは抗体の結合領域とエフェクター領域との間に可撓性の水準を変化させ、また２個の重鎖不変領域間に分子間ジスルフィド結合のための部位を提供する。本明細書で提示されるヒンジは全てのＩｇＧアイソタイプに対してＧｌｕ２１６から始まってＧｌｙ２３７で終わる（Roux et al 19., 98 J Immunol 161:4083）。野生型ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４ヒンジの配列が当該分野に公知となっている（例えば、Kabat EA et al., (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242; Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520(２０１４年１０月２０日オンライン公開)参照）。
【０１１９】
用語“ＣＨ１ドメイン”は重鎖不変ドメインで可変領域とヒンジを連結する重鎖不変領域を意味する。本明細書に提示されたＣＨ１ドメインはＡ１１８から始まってＶ２１５で終わる。用語“ＣＨ１ドメイン”は野生型ＣＨ１ドメインだけでなく、その自然に存在する変異体（例えば、アロタイブ）を含む。（野生型及びアロタイブを含む）ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４のＣＨ１ドメイン配列は当該分野に公知となっている（例えば、Kabat EA et a (1991) supra and Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520(２０１４年１０月２０日オンライン公開)参照）。例示的なＣＨ１ドメインは、抗体の生物学的活性、例えば半減期を変形する突然変異を有するＣＨ１ドメインを含み、これらは、例えばアメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号及びそれに引用されたアメリカ特許及び出願とＰＣＴ出願に開示されている。
【０１２０】
用語“ＣＨ２ドメイン”は重鎖不変ドメインでヒンジとＣＨ３ドメインを連結する重鎖不変領域を意味する。本明細書に提示されたＣＨ２ドメインはＰ２３８から始まってＫ３４０で終わる。用語“ＣＨ２ドメイン”は野生型ＣＨ２ドメインだけでなくその自然に存在する変異体（例えば、アロタイブ）を含む。（野生型及びアロタイブを含む）ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４のＣＨ２ドメイン配列は当該分野に公知となっている（例えば、Kabat EA et al., (1991) supra and Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520(２０１４年１０月２０日オンライン公開)参照）。例示的なＣＨ２ドメインは、抗体の生物学的活性、例えば半減期及び／又は減少したＦｃエフェクター機能を変形する突然変異を有するＣＨ２ドメインを含み、これらは、例えばアメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号及びそれに引用されたアメリカ特許及び出願とＰＣＴ出願に開示されている。
【０１２１】
用語“ＣＨ３ドメイン”は重鎖不変ドメインでＣＨ２ドメインに対してＣ末端である重鎖不変領域を意味する。本明細書に提示されたＣＨ３ドメインはＧ３４１から始まってＫ４４７で終わる。用語“ＣＨ３ドメイン”は野生型ＣＨ３ドメインだけでなくその自然に存在する変異体（例えば、アロタイブ）を含む。（野生型及びアロタイブを含む）ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４のＣＨ３ドメイン配列は当該分野に公知となっている（例えば、Kabat EA et al., (1991) supra and Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520(２０１４年１０月２０日オンライン公開)参照）。例示的なＣＨ３ドメインは、抗体の生物学的活性、例えば半減期を変形する突然変異を有するＣＨ３ドメインを含み、これらは、例えばアメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号及びそれに引用されたアメリカ特許及び出願とＰＣＴ出願に開示されている。
【０１２２】
本明細書で開示される“アイソタイプ”は重鎖不変領域遺伝子によって暗号化される抗体クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、及びＩｇＥ抗体）を意味する。
【０１２３】
“アロタイブ”は少数のアミノ酸に違いがある特定のアイソタイプグループ内で自然発生した変異体を意味する（例えば、Jefferis et al. (2009) mAbs 1:1参照）。本明細書に提示された抗体は任意のアロタイブを有することができる。ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４のアロタイブは当該分野に公知となっている（例えば、Kabat EA et a (l1.,991) supra; Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520(２０１４年１０月２０日オンライン公開)；及びLefranc MP, mAbs 1:4, 1- 7(2009)参照）。
【０１２４】
用語“抗原を認識する抗体”及び“抗原に特異的な抗体”は用語“抗原に特異的に結合する抗体”とともにこの明細書で互いに交換して使われる。
【０１２５】
本明細書で開示される“分離された抗体”は相異なる抗原特異性を有する他の抗体が実質的にない抗体を意味する（例えば、ＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する分離された抗体はＦＡＭ１９Ａ５以外の抗原に特異的に結合する抗体が実質的にない）。しかし、ＦＡＭ１９Ａ５のエピトープに特異的に結合する分離された抗体は相異なる種からの他のＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対して交差反応性を有することができる。
【０１２６】
“結合親和性”は一般的に分子（例えば、抗体）の単一結合部位とその結合パートナー（例えば、抗原）間の非共有相互作用の合計強度を意味する。特別な言及がない限り、本明細書で使用される“結合親和性”は結合対のメンバー（例えば、抗体と抗原）間の１：１相互作用を反映する固有の結合親和性を意味する。パートナーＹに対する分子Ｘの親和性は一般的に解離定数（ＫＤ）によって表示されることができる。親和性は、これに制限されるものではないが、平衡解離定数（ＫＤ）、及び平衡結合定数（ＫＡ）を含む、当該分野に公知となっている多数の方式で測定及び／又は表示されることができる。ＫＤはｋｏｆｆ／ｋｏｎの商から計算され、モル濃度（Ｍ）として表示され、ＫＡはｋｏｎ／ｋｏｆｆの商から計算される。ｋｏｎは、例えば抗原に対する抗体の結合速度定数を意味し、ｋｏｆｆは、例えば抗原に対する抗体の解離速度定数を意味する。ｋｏｎ及びｋｏｆｆは免疫分析（例えば、酵素免疫吸着（ＥＬＩＳＡ））、ＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）又は結合平衡除外法（ＫｉｎＥｘＡ（登録商標））のような、当業者に公知となった技術によって決定されることができる。
【０１２７】
用語“特異的に結合する”、“特異的に認識する”、“特異的結合”、“選択的結合”及び“選択的に結合する”は抗体に関連して類似の用語で、抗原（例えば、エピトープ又は免疫複合体）に分子（例えば、抗体）が結合することを意味し、このような結合は当業者によって理解される通りである。例えば、抗原に特異的に結合する分子は、例えば免疫分析、ＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）、ＫｉｎＥｘＡ（登録商標）３０００機器（Ｓａｐｉｄｙｎｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｂｏｉｓｅ、ＩＤ）、又は当該分野に公知となった他の分析によって決定されたとき、一般的にもっと低い親和性で他のペプチド又はポリペプチドに結合することができる。特定の具体例において、抗原に特異的に結合する分子は、この分子が他の抗原に結合するときのＫＡより少なくとも２ｌｏｇｓ、２．５ｌｏｇｓ、３ｌｏｇｓ、４ｌｏｇｓ又はそれ以上大きなＫＡでその抗原に結合する。
【０１２８】
抗体は典型的に１０−５〜１０−１１Ｍ以下の解離定数によって反映される、高親和性で同族抗原に特異的に結合する。約１０−４Ｍを超えるＫＤは一般的に非特異的結合を示すと見なされる。抗原と“特異的に結合する”抗体は高親和性で抗原及び実質的に同じ抗原に結合する抗体を意味し、これは、例えば決まった抗原を使って免疫分析（例えば、ＥＬＩＳＡ）又はＢＩＡＣＯＲＥＴＭ  ２０００機器で表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）技術によって決定されたとき、１０−７Ｍ以下、好ましくは１０−８Ｍ以下、より好ましくは１０−９Ｍ以下、及び最もましくは１０−８Ｍ〜１０−１０Ｍ以下のＫＤを有することを意味し、この抗体は関係ない抗原には高親和性で結合しない。
【０１２９】
“抗原”は任意の天然又は合成免疫原性物質、例えばタンパク質、ペプチド又はハブテンを意味する。抗原はＦＡＭ１９Ａ５又はその断片であり得る。
【０１３０】
“エピトープ”は当該分野の用語であり、抗体が特異的に結合することができる抗原の局所領域を意味する。エピトープは、例えばポリペプチドの連続（ｃｏｎｔｉｇｕｏｕｓ）アミノ酸（線形又は連続エピトープ）であり得るか、又はエピトープは、例えばポリペプチド又はポリペプチドらの２個以上の非連続領域が合わせられたもの（立体構造、非線形、不連続、又は非連続エピトープ）であり得る。連続アミノ酸から形成されたエピトープは、いつもそうではないが、典型的に変性溶媒に露出されるときに保有され、３次フォルディングによって形成されたエピトープは典型的に変性溶媒で処理するときに喪失される。エピトープは典型的に独特な空間立体構造で少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５又は２０個のアミノ酸を含む。エピトープが特定の抗体によって結合されたことを決定する方法（すなわち、エピトープマッピング）は当該分野によく知られており、これは、例えば免疫ブロッティング及び免疫沈降分析を含み、（例えば、ＦＭＡＭ１９Ａ５からの）重畳又は連続ペプチドが特定の抗体（例えば、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体）との反応性に対して試験される。エピトープの空間的立体形態を決定する方法は当該分野の技術及びこの明細書に開示されるものなどを含み、例えばＸ線結晶学、２次元核磁気共鳴及びＨＤＸ−ＭＳを含む（例えば、Epitope Mapping Protocols in Methods in Molecular Biology, Vol. 66, G. E. Morris, Ed. (1996)参照）。
【０１３１】
特定の具体例において、抗体が結合したエピトープは、例えばＮＭＲ分光法、Ｘ線回折結晶学研究、ＥＬＩＳＡ分析、質量分光法と結合された水素／重水素交換（例えば、液体クロマトグラフィーエレクトロスプレイ質量分析法）、アレイ基盤オリゴペプチド走査分析、及び／又は突然変異誘発マッピング（例えば、部位特異的突然変異誘発マッピング）によって決定されることができる。Ｘ線結晶学の場合、結晶化は当該分野に公知となった方法のいずれかを使って達成されることができる（例えば、Giege R et a (l1.9, 94) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 50(Pt 4): 339-350; McPherson A (1990) Eur J Biochem 189: 1-23; Chayen NE (1997) Structure 5: 1269- 1274; McPherson A (1976) J Biol Chem 251 : 6300-6303参照）。抗体：抗原結晶はよく知られているＸ線回折技術を使って研究されることができ、この場合、Ｘ−ＰＬＯＲ（Yale University, 1992, distributed by Molecular Simulations, Inc.; see, e.g., Meth Enzymol (1985) volumes 114 & 115, eds Wyckoff HW et al.,; アメリカ特許公開第２００４／００１４１９４号参照), and BUSTER (Bricogne G (1993) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 49(Pt 1): 37-60; Bricogne G (1997) Meth Enzymol 276A: 361-423, ed Carter CW; Roversi P et al., (2000) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 56(Pt 10): 1316-1323)のようなコンピュータソフトウェアを使うことができる。突然変異誘発マッピング研究は当業者に公知となった任意の方法を使って遂行されることができる。アラニン走査突然変異誘発技術を含む突然変異誘発技術は、例えば文献（Champe M et al., (1995) J Biol Chem 270: 1388-1394 and Cunningham BC & Wells JA (1989) Science 244: 1081- 1085）を参考する。
【０１３２】
用語“エピトープマッピング”は抗体−抗原認識に対する分子決定基の確認過程を意味する。
【０１３３】
２個以上の抗体に関連して、用語“同じエピトープに結合する”は抗体がアミノ酸残期の同じセグメントに結合することを意味する。抗体がこの明細書に開示された抗体と“ＦＡＭ１９Ａ５上の同じエピトープ”に結合するかを決定する技術は、エピトープマッピング法、例えばエピトープの原子分解能を提供する抗原：抗体複合体の結晶のＸ線分析及び水素／重水素交換質量分光法（ＨＤＸ−ＭＳ）を含む。他の方法は抗体と抗原断片又は抗原の突然変異された変異体の結合をモニタリングし、ここで抗原配列内でアミノ酸残期の変形による結合の損失が主にエピトープ成分の表示として見なされる。これに加え、エピトープマッピングのためのコンピュータ組合せ方法も使われることができる。これらの方法は組み換えファージディスプレイペプチドライブラリから特定の短いペプチドを親和性分離することができる該当抗体の能力に依存する。同じＶＨ及びＶＬ又は同じＣＤＲ１、２及び３配列を有する抗体は同じエピトープに結合すると予想される。
【０１３４】
“標的との結合に対して他の抗体と競合する抗体”は他の抗体と標的の結合を（部分的に又は完全に）阻害する抗体を意味する。２個の抗体が標的との結合に対して互いに競合するか、すなわち１個の抗体が他の抗体と標的の結合を阻害するか否かと阻害する程度は公知となった競合実験によって決定されることができる。特定の具体例において、抗体は他の抗体と標的の結合で競合し、この結合を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％又は１００％まで阻害する。阻害又は競合の水準は、抗体が“遮断抗体”（すなわち、標的と先にインキュベーションされた低温抗体）であるかによって違うことができる。競合分析は、例えばEd Harlow and David Lane, Cold Spring Harb Protoc; 2006; doi: 10.1101/pdb.prot4277 or in Chapter 11 of "Using Antibodies" by Ed Harlow and David Lane, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, USA 1999）の第１１章に説明された通りに遂行されることができる。競合抗体は同じエピトープ、重畳エピトープ又は隣接エピトープ（例えば、立体障害による）に結合する。
【０１３５】
他の競合結合分析は、固相直接又は間接放射性免疫測定（ＲＩＡ）、固相直接又は間接酵素免疫測定法（ＥＩＡ）、サンドイッチ競合分析（Stahli et al., Methods in Enzymology 9:242 (1983)参照）；固相直接ビオチン−アビジンＥＩＡ（Kirkland et al., J. Immunol. 137:3614 (1986)参照）；固相直接標識分析、固相直接標識サンドイッチ分析（Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press (1988)参照）；１−１２５標識を使った固相直接標識ＲＩＡ（Morel et αΙ., ΜοΙ. Immunol. 25(1):7 (1988)参照）；固相直接ビオチン−アビジンＥＩＡ（Cheung et al, Virology 176:546 (1990)参照）；及び直接標識ＲＩＡ（Moldenhauer et al, Scand. J. Immunol. 32:77 (1990)参照）を含む。
【０１３６】
“二重特異性”又は“二元機能抗体”は２個の相異なる重鎖／軽鎖対と２個の相異なる結合部位を有する人工ハイブリッド抗体である。二重特異性抗体はハイブリドーマの融合又はＦａｂ’断片の連結を含むさまざまな方法によって生成されることができる（例えば、Songsivilai & Lachmann, Clin. Exp. Immunol. 79:315-321 (1990); Kostelny et al., J. Immunol. 148, 1547-1553 (1992)参照）。
【０１３７】
“モノクローナル抗体”は特定のエピトープに対して単一結合特異性及び親和性を示す抗体又は全ての抗体が特定のエピトープに対して単一結合特異性及び親和性を示す抗体の組成物を意味する。よって、用語“ヒトモノクローナル抗体”は単一結合特異性を示し、ヒト生殖細胞兔疫グロブリン配列から来由した可変及び選択的不変領域を有する抗体又は抗体組成物を意味する。一具体例において、ヒトモノクローナル抗体はトランスジェニック非ヒト動物、例えば不死化細胞に融合したヒト重鎖導入遺伝子と軽鎖導入遺伝子を含むゲノムを有する、トランスジェニックマウスから得られたＢ細胞を含むハイブリドーマによって生成される。
【０１３８】
“組み換えヒト抗体”は、（ａ）ヒト免疫グロブリン遺伝子に対して導入遺伝子又はトランス染色体性（ｔｒａｎｓｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌ）である動物（例えば、マウス）から分離された抗体又はそれから製造されたハイブリドーマ、（ｂ）抗体を発現するように形質転換された宿主細胞から、例えばトランスフェクトーマ（ｔｒａｎｓｆｅｃｔｏｍａ）から分離された抗体、（ｃ）組み換え、組合ヒト抗体ライブラリから分離された抗体、及び（ｄ）他のＤＮＡ配列に対するヒト兔疫グロブリン遺伝子配列をスプライシングを伴う任意の他の手段によって製造、発現、生成又は分離された抗体のような、組み換え手段によって製造、発現、生成又は分離された全てのヒト抗体を含む。このような組み換えヒト抗体は生殖細胞遺伝子によって暗号化されるが、例えば抗体成熟化中に発生する後続再配列及び突然変異を含む特定のヒト生殖細胞兔疫グロブリン配列を用いる可変及び不変領域を含む。当該分野に公知となったように（例えば、Lonberg (2005) Nature Biotech. 23(9): 1117- 1125参照）、可変領域は外来抗原に対して特異的な抗体を形成するように再配列した多様な遺伝子によって暗号化された、抗原結合ドメインを含む。再配列に加え、可変領域は外来抗原に対する抗体の親和性を増加させるために多数の単一アミノ酸変化（体細胞突然変異又は超突然変異という）によってさらに変形されることができる。不変領域は抗原に対する追加の反応（すなわち、アイソタイプスイッチ）によって変わるであろう。よって、抗原に反応して軽鎖及び重鎖兔疫グロブリンポリペプチドを暗号化する再配列されて体細胞突然変異された核酸分子は元の核酸分子と配列同一性を有することができないが、実質的に同一であるかほぼ同一であろう（すなわち、少なくとも８０％の同一性を有する）。
【０１３９】
“ヒト抗体（ＨｕＭＡｂ）”はフレームワークとＣＤＲ領域の両者がヒト生殖細胞兔疫グロブリン配列から来由した可変領域を有する抗体を意味する。また、この抗体が不変領域を含めば、不変領域もヒト生殖細胞兔疫グロブリン配列から来由する。本明細書に開示された抗体は、ヒト生殖細胞兔疫グロブリン配列によって暗号化されないアミノ酸残期（例えば、試験管内無作為又は部位特異的突然変異の誘発によって又は生体内体細胞突然変異によって導入された突然変異）を含むことができる。しかし、この明細書に開示された“ヒト抗体”はマウスのような他の哺乳類種の生殖細胞から来由したＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列に移植された抗体は含まない。用語“ヒト抗体”と“完全なヒト抗体”は同義語として使われる。
【０１４０】
“ヒト化”抗体は非ヒト抗体のＣＤＲドメイン外のアミノ酸の一部、大部分又は全部がヒト兔疫グロブリンから来由した相応するアミノ酸に置換された抗体を意味する。抗体のヒト化形態の一具体例において、ＣＤＲドメイン外のアミノ酸の一部、大部分又は全部がヒト兔疫グロブリンからのアミノ酸に置換され、１個以上のＣＤＲ領域内のアミノ酸の一部、大部分又は全部はそのまま残る。アミノ酸の小さい添加、欠失、挿入、置換又は変形は、これらが抗体が特定抗原に結合する能力を無くさない限り、許容される。“ヒト化抗体”は元の抗体のものと類似した抗原特異性を保有する。
【０１４１】
“キメラ抗体”は１個の種から可変領域が来由し、他の種から不変領域が来由した抗体、例えばマウス抗体から可変領域が来由し、ヒト抗体から不変領域が来由した抗体を意味する。
【０１４２】
用語“交差反応する”は相異なる種からのＦＡＭ１９Ａ５に結合するこの明細書に開示された抗体の能力を意味する。例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合するこの明細書に開示された抗体も他の種のＦＡＭ１９Ａ５（例えば、マウスＦＡＭ１９Ａ５）にも結合することができる。交差反応性は結合分析（例えば、ＳＰＲ、ＥＬＩＳＡ）で精製された抗原との特異的反応性を検出することにより、又はＦＡＭ１９Ａ５を生理学的に発現する細胞との結合、又は機能的相互作用を検出することにより測定されることができる。交差反応性を決定する方法は、この明細書に開示される標準結合分析、例えばＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）  ２０００ＳＰＲ機器（Ｂｉａｃｏｒｅ  ＡＢ、Ｕｐｐｓａｌａ、Ｓｗｅｄｅｎ）を使ったＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）分析、又はフローサイトメトリー技術を含む。
【０１４３】
本明細書で、ある物体に適用された用語“自然発生”は物体が自然で発見されることができるという事実を意味する。例えば、自然の出処から分離されることができ、実験室でヒトによって意図的に変形されなかった有機体に存在するポリペプチド又はポリヌクレオチド配列は自然発生である。
【０１４４】
“ポリペプチド”は少なくとも２個の連続的に連結されたアミノ酸残期を含む鎖を意味し、鎖の長さに上限はない。タンパク質における１個以上のアミノ酸残期は、これに制限されるものではないが、グリコシル化、リン酸化又はジスルフィド結合形成のような変形を含むことができる。“タンパク質”は１個以上のポリペプチドを含むことができる。
【０１４５】
用語“核酸分子”はＤＮＡ分子及びＲＮＡ分子を含む。核酸分子は一本鎖又は二本鎖であり得、ｃＤＮＡであり得る。
【０１４６】
用語“保存的アミノ酸置換”はアミノ酸残期が類似の測鎖を有するアミノ酸残期に置換されることを意味する。類似の測鎖を有するアミノ酸残期のファミリは当該分野に規定されている。これらのファミリは塩基性測鎖（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性測鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性測鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン、トリプトファン）、非極性測鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン）、ベータ分岐測鎖（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）及び芳香族測鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を有するアミノ酸を含む。特定の具体例において、抗ＴＩＭ３抗体で予想された非必須アミノ酸残期が同じ測鎖ファミリからの他のアミノ酸残期に置換される。抗原結合を害しないヌクレオチド及びアミノ酸同類置換を確認する方法は当該分野によく知られている（例えば、Brummell et al., Biochem. 32: 1180-1187 (1993); Kobayashi et al. Protein Eng. 12(10):879-884 (1999); and Burks et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94:412-417 (1997)参照）。
【０１４７】
核酸の場合、用語“実質的な相同性”は２個の核酸、又はこれらの指定された配列が最適に整列されて比較されたとき、同一であることを示す。この際、ヌクレオチドの少なくとも約８０％、少なくとも約９０％〜９５％又は少なくとも約９８％〜９９．５％で適切なヌクレオチドの挿入又は欠失を有する。もしくは、実質的な相同性はセグメントが選択的混成化条件の下でその本の補体と混成化するときに存在する。
【０１４８】
ポリペプチドの場合、用語“実質的な相同性”は２個のポリペプチド、又はこれらの指定された配列が最適に整列されて比較されたとき、同一であることを意味する。この際、アミノ酸の少なくとも約８０％、少なくとも約９０％〜９５％、又は少なくとも約９８％〜９９．５％で、適切なアミノ酸の挿入又は欠失を有する。
【０１４９】
２個の配列間の同一性パーセントは２個の配列の最適整列のために導入されなければならない、ギャップの数、及び各ギャップの長さを考慮した、配列によって共有された同じ位置の数の関数である（すなわち、相同性％＝同じ位置の＃／位置の総＃×１００）。配列の比較及び２個の配列間の同一性パーセントは以下の非制限的例に説明するもののような数学的アルゴリズムを使って決定されることができる。
【０１５０】
２個のヌクレオチド配列間の同一性パーセントはＧＣＧソフトウェアパッケージのＧＡＰプログラム（ｗｏｒｌｄｗｉｄｅｗｅｂ．ｇｃｇ．ｃｏｍで用いることができる）を使って決定されることができ、これはＮＷＳｇａｐｄｎａ.ＣＭＰマトリックス及びギャップ加重値４０、５０、６０、７０又は８０及び長さ荷重値１、２、３、４、５又は６を使う。２個のヌクレオチド又はアミノ酸配列間の同一性パーセントもＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に統合されたＥ．Ｍｅｙｅｒｓ  ａｎｄ  Ｗ．Ｍｉｌｌｅｒ（CABIOS, 4: 11-17 (1989)）のアルゴリズムを使って決定されることができ、これはＰＡＭ１２０加重残期表、ギャップ長さペナルティー１２及びギャップペナルティ４を使う。これに加え、２個のアミノ酸配列間の同一性パーセントはＧＣＧソフトウェアパッケージのＧＡＰプログラムに統合されたＮｅｅｄｌｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｗｕｎｓｃｈ（J. Mol. Biol. (48):444-453 (1970)）アルゴリズム（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍで用いることができる）を使って決定されることができ、これはＢｌｏｓｓｕｍ６２マトリックス又はＰＡＭ２５０マトリックス、及びギャップ加重値１６、１４、１２、１０、８、６又は４及び長さ荷重値１、２、３、４、５又は６を使う。
【０１５１】
本明細書に開示される核酸及びタンパク質配列は、例えば関連の配列を確認するために公共データベースで検索を遂行するための“クエリー配列”として使われることができる。このような検索は文献（Altschul, et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-10）のＮＢＬＡＳＴ及びＸＢＬＡＳＴプログラム（バージョン２．０）を使って遂行されることができる。ＢＬＡＳＴヌクレオチド検索はＮＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝１００、単語長さ＝１２の下で遂行されることができ、これによりこの明細書に開示された核酸分子と相同性のヌクレオチド配列が得られる。ＢＬＡＳＴタンパク質検索は、ＸＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝５０、単語長さ＝３の下で遂行されることができ、これによりこの明細書に開示されたタンパク質分子と相同性のアミノ酸配列が得られる。比較目的でギャップがある整列を得るために、Ｇａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴが文献（Altschul et al, (1997) Nucleic Acids Res. 25(17):3389-3402）に説明された通りに用いることができる。ＢＬＡＳＴ及びＧａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴプログラムを用いるとき、各プログラム（例えば、ＸＢＬＡＳＴ及びＮＢＬＡＳＴ）のデフォルト変数を用いることができる（ｗｏｒｌｄｗｉｄｅｗｅｂ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ参照）
核酸は、全細胞に、細胞溶解物に、又は部分的に精製された形態又は実質的に純粋な形態に存在することができる。核酸はアルカリ性／ＳＤＳ処理、ＣｓＣｌバンディング、カラムクロマトグラフィー、アガロースゲル電気泳動及び当該分野によく知られている他の技術を含む標準技術によって、他の細胞成分又は他の汚染物、例えば他の細胞核酸（例えば、染色体の残り部分）又はタンパク質から精製されたとき、“分離されるか”又は“実質的に純粋である”（F. Ausubel, et al., ed. Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing and Wiley Interscience, New York (1987)参照）。
【０１５２】
核酸、例えばｃＤＮＡは遺伝子配列を提供するための標準技術によって突然変異されることができる。コーディング配列の場合、これらの突然変異は要望の通りにアミノ酸配列に影響を及ぼすことができる。特に、本明細書に提示された天然Ｖ、Ｄ、Ｊ、不変、スイッチ及び他のこのような配列と実質的に相同性を有するかそれから来由したＤＮＡ配列が考慮される（ここで、“来由した”は配列が他の配列と同一であるか又はそれから変形されたことを意味する）。
【０１５３】
用語“ベクター”はそれが連結された他の核酸を輸送することができる核酸分子を意味する。一種類のベクターは“プラスミド”であり、これは追加のＤＮＡセグメントがライゲーションされることができる円形の二重本ＤＮＡループを意味する。他の種類のベクターはウイルスベクターであり、ここで追加のＤＮＡセグメントがウイルスゲノムにライゲーションされることができる。特定のベクター（例えば、バクテリア複製起源を有するバクテリアベクター及びエピソーム哺乳類ベクター）はこれらが導入された宿主細胞で自己複製することができる。他のベクター（例えば、非エピソーム哺乳類ベクター）は、宿主細胞に導入されるとき、宿主細胞のゲノムに統合することができ、これにより宿主ゲノムとともに複製される。さらに、特定のベクターはこれらが作動可能に連結された遺伝子の発現を指示することができる。このようなベクターはこの明細書で“組み換え発現ベクター”（又は簡単に“発現ベクター”）と言及される。一般的に、組み換えＤＮＡ技術で有用性を有する発現ベクターは主にプラスミド形態である。本明細書で、“プラスミド”と“ベクター”はプラスミドがベクターの最もよく使われる形態であるから互いに交換して使われることができる。しかし、ウイルス（例えば、複製結合レトロウイルス、アデノウイルス及びアデノ関連ウイルス）ベクターのような他の形態の発現ベクターも含まれ、これらは同等な機能をする。
【０１５４】
用語“組み換え宿主細胞”（又は簡単に“宿主細胞”）は細胞に自然に存在しない核酸を含む細胞を意味し、組み換え発現ベクターが導入された細胞であり得る。このような用語は特定の該当細胞だけではなく、このような細胞の子孫も言及することが理解されなければならない。突然変異又は環境的影響によって後続世代では特定の変形が起こることができるから、このような子孫は実際に母細胞と同一であることはできないが、依然としてこの明細書で使用された用語“宿主細胞”の範囲内に含まれる。
【０１５５】
用語“連結される”は２個以上の分子の会合を意味する。連結は共有連結又は非共有連結であり得る。また、連結は遺伝子連結（すなわち、組み換えによる融合）であり得る。このような連結は化学的結合及び組み換えタンパク質生成のような当該分野に認められたさまざまな技術を使って達成されることができる。
【０１５６】
用語“治療上有効量”は単独で又は他の治療剤と組み合わせて、対象の疾患又は障害を“治療”するのに効果的な、あるいは疾患又は障害（例えば、肝線維症又は肺線維症）の危険、潜在性、可能性又は発生を減少させるのに効果的な薬物の量を意味する。“治療上有効量”は癌に関連した疾患又は障害を持っているか有する危険がある対象に一部の改善又は利益を提供する薬物又は治療剤の量を含む。よって、“治療上有効量”は線維症に関連した疾患又は障害の危険、潜在性、可能性又は発生を減少させるか又は一部の緩和、軽減を提供し、及び／又は少なくとも１個の指標（例えば、線維症又は線維症組織形成の開始）を減少させ、及び／又は線維症に関連した疾患又は障害の少なくとも１個の臨床症状を減少させる量である。
【０１５７】
ＩＩ．線維症の治療方法
ＦＡＭ１９Ａ５に対する拮抗剤を対象に投与する段階を含む、対象の線維症を治療、減少、緩和、制御、又は阻害する方法がこの明細書に開示される。線維症は特定の傷害に反応して臓器や組職に過剰の線維性結合組織が形成される疾患である。一般に、傷は普通４個の分離された段階である止血、炎症、増殖及び再形成を特徴とする過程で秩序的で効果的な方式で治癒される（Diegelmann R.F. et al., Front Biosci 9:283-289 (2004)）。しかし、傷害が深刻であるか反復的である場合、傷治癒過程の調節障害が発生することがあり、これは損傷部位で細胞外基質タンパク質（ＥＣＭ）（例えば、コラーゲン、糖タンパク質及びプロテオグリカン）の過度な蓄積を引き起こす。これは損傷された組職とその付近に多量の纎維結合組織の形成をもたらすことができる（Wynn T.A. et al., Nat Med 18(7): 1028-1040 (2012)）。多くの線維症疾患（例えば、晩成肝疾患、腎臓疾患、特発性肺線維症（ＩＰＥ）及び心不全）に関連して、このような蓄積は永久的な傷跡、臓器機能不全、そして甚だしくは死亡をもたらすことができる。
【０１５８】
いくつかの具体例において、拮抗剤は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分（“抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分”）、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分を暗号化するポリヌクレオチド、又はそのポリヌクレオチドを含むベクターである。特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体またはその抗原結合部分はＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合してＦＡＭ１９Ａ５活性を減少させる。
【０１５９】
いくつかの具体例において、線維症は、陽性（すなわち、症状を引き起こさない）である。他の具体例において、線維症は可逆的又は非可逆的な病理学的状態に関連する。いくつかの具体例において、線維症は、肝線維症、肺線維症、腎臓線維症、骨髄線維症、膵膓線維症、皮膚線維症、心臓線維症、動脈線維症、関節線維症、乳房線維症、筋線維症、後腹膜線維症、甲状腺線維症、リンパ節線維症、膀胱線維症、全身線維症、及び胸膜線維症からなる群から選択される。一具体例において、線維症は肝線維症又は肺線維症である。いくつかの具体例において、本明細書に開示される方法は、線維症、線維症に関連した症状、線維症の基本的な原因、又はこれらの組合せを弱化、反転、改善、緩和、阻害、遅延又は防止する。
【０１６０】
肝が損傷されたとき、この損傷は星霜マクロファージ及びＫｕｐｆｆｅｒ−Ｂｒｏｗｉｃｚ細胞とも知られた、クッパー細胞によって炎症を引き起こすか誘導し、肝星細胞が活性化して肝線維症及び肝硬変を引き起こす。よって、本発明は、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤を対象に投与する段階を含む、対象の線維症を減少、予防、又は治療する方法を含む。
【０１６１】
線維症は多様な組職や臓器で発生することができる。このような組職又は臓器の例は、これに制限されるものではないが、肝（肝線維症）、肺（肺線維症）、腎臓（腎臓線維症）、骨（骨髄線維症）、膵膓（膵膓線維症）、皮膚（皮膚線維症）、心臓（心臓線維症）、動脈（動脈線維症）、関節（関節線維症）乳房（乳房線維症）、筋肉（筋線維症）、後腹膜領域（後腹膜線維症）、甲状腺（甲状腺線維症）、リンパ節（リンパ節線維症）、膀胱（膀胱線維症）、及び肺の内臓胸膜（胸膜線維症）を含む。本明細書で使用される用語“線維症”は侵犯された組職の部位及び／又は原因にかかわらず全種類の線維症を含む。
【０１６２】
いくつかの具体例において、本発明の方法によって治療可能な線維症は、非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）を含む。ＮＡＳＨは２１世紀の公衆健康の脅威として浮上している。ＮＡＳＨに関連した基本的な複合代謝機能不全及び肝硬変の臨床的終点に対処するのに多くの満たされていない要求がある。
【０１６３】
線維症は、物理的な傷害（例えば、外傷又は反復的なストレス）、疾患又は障害（例えば、肝炎ウイルス感染）、毒物（例えば、アルコール）に露出されるか、あるいはこれらの組合せによって発生するかあるいはこれらに関連することができる。線維症の原因の非制限的例は、強皮症、結合組織疾患、アルコール中毒、感染、鉄沈着、環境汚染物、放射線療法、化学療法、心臓薬、抗炎症剤、皮膚筋炎、多発性筋炎、全身性紅斑性狼瘡、骨関節炎、リウマチ性関節炎、サルコイドーシス、及び非アルコール性脂肪肝炎を含むことができる。
【０１６４】
いくつかの具体例において、本明細書に開示される方法は、線維症又は線維症関連疾患又は障害の任意の等級又は段階を治療することができる。線維症又は線維症関連疾患又は障害に関連して使用された用語“等級”は特定の疾患や障害に関連した壊死及び炎症（“壊死炎症”）の重症度を意味する。線維症又は線維症関連疾患又は障害に関連して使用された用語“段階”は進行程度を意味し、最終段階になれば、死亡又は臓器不全（例えば、肝線維症の場合、肝硬変）が起こる（Goodman Z.D., J Hepatol 47(4): 598-607 (2007)）。各等級及び／又は段階に対する正確な定義は特定の疾患又は障害及び／又は使用された点数システム（例えば、Ｋｎｏｄｅｌｌシステム、肝炎活性指数のＩｓｈａｋ変形（Ishak Modification of Hepatitis Activity Index）、ＭＥＴＡＶＩＲシステム、Ｓｃｈｅｕｅｒシステム、及びＢａｔｔｓ−Ｌｕｄｗｉｇシステム）による。
【０１６５】
一具体例において、本方法で治療される対象は、ラット又はマウスのような非ヒト動物である。一具体例において、本方法で治療される対象はヒトである。
【０１６６】
いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はこれらの抗原結合部分、又はこれらの組合せは線維症を治療するための１個以上の追加の製剤（例えば、特発性肺線維症のためのピルフェニドン（ＥＳＢＲＩＥＴ（登録商標））又はニンテダニブ（ＯＦＥＶ（登録商標）））と組み合わせて投与されることができる。１個以上の追加の治療薬物の容量及び投与は当該分野に公知となっており、例えば各薬物の製品ラベルに提示される。
【０１６７】
特定の具体例において、本発明はＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤を対象に投与する段階を含む、対象の線維症を予防する方法を含む。線維症は、対象にＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤を予防的投与して纎維形成の開示を遮断することによって防止されることができる。
【０１６８】
ＩＩＩ．線維症の診断方法
現在、線維症を診断するのに用いることができる最も信頼性ある方法は組職生検によるものである。しかし、このような方法は、概して非常に侵襲的であり、多様な望まない副作用（例えば、生検部位出血、痛症及び不便さ）をもたらす。よって、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部位を対象の生物学的サンプルと接触させる段階、及びサンプルでのＦＡＭ１９Ａ５のタンパク質水準又はＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を暗号化するｍＲＮＡ水準を測定する段階を含む、対象の線維症及び／又は線維症関連疾患を診断する方法がこの明細書に開示される。いくつかの具体例において、生物学的サンプルでのＦＡＭ１９Ａ５のタンパク質水準又はＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を暗号化するｍＲＮＡ水準は、基準サンプル（例えば、線維症がない対象のサンプル）でのＦＡＭ１９Ａ５のタンパク質水準又はＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を暗号化するｍＲＮＡ水準と比較して、少なくとも１．５倍、少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも６倍、少なくとも７倍、少なくとも８倍、少なくとも９倍、少なくとも１０倍、少なくとも１１倍、少なくとも１２倍、少なくとも１３倍、少なくとも１５倍、少なくとも２０倍、少なくとも２５倍又は少なくとも３０倍高い。
【０１６９】
本発明に関連して、出願人は線維症及び／又は線維症関連疾患を有する対象が末梢血と損傷された組職部位でＦＡＭ１９Ａ５をもっと高い水準で発現することを明らかにした（例えば、実施例６〜１０参照）。したがって、本明細書に開示される方法は、対象のＦＡＭ１９Ａ５（タンパク質及び／又はｍＲＮＡ）発現水準を測定することにより、対象の線維症及び／又は線維症関連疾患を診断するのに使われることができ、この場合、基準水準（例えば、線維症及び／又は線維症関連疾患がない対象でのＦＡＭ１９Ａ５発現水準）に比べて増加した発現は対象が線維症関連疾患又は障害を有することを示唆するであろう。いくつかの具体例において、本発明は線維症疾患又は障害を有すると疑われる対象でのＦＡＭ１９Ａ５タンパク質水準を測定することにより、線維症関連疾患又は障害の存在を確認するのに使われることができる。他の具体例において、本発明は線維症及び／線維症関連疾患を診断するのに使われる他の分析と組み合わせて対象のＦＡＭ１９Ａ５タンパク質水準を測定することを提供する。
【０１７０】
いくつかの具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５のタンパク質水準は、免疫組職化学、ウェスタンブロッティング、放射性免疫測定、酵素免疫吸着（ＥＬＩＳＡ）、放射性免疫拡散、免疫沈降分析、オクタロニー（Ｏｕｃｈｔｅｒｌｏｎｙ）免疫拡散法、ロケット免疫電気泳動、組職免疫染色法、補体固定分析、ＦＡＣＳ、又はタンパク質チップによって測定される。一具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を暗号化するｍＲＮＡの水準は、ＲＴ−ＰＣＲ、実時間ポリメラーゼ連鎖反応、又はノーザンブロットによって測定される。いくつかの具体例において、生物学的サンプルは、組職、細胞、血液、血清、血漿、唾液、大脳髄液、硝子体内液、又は小便を含む。線維症素子で発現したＦＡＭ１９Ａ５タンパク質は血清に漏出することができ、ここでタンパク質は前記羅列された分析のいずれかによって測定されることができる。よって、本発明は線維症及び／又は線維症関連疾患を有すると疑われる対象の血清でＦＡＭ１９Ａ５タンパク質発現を測定する方法を提供する。よって、この方法は大部分の現在利用可能な診断方法（例えば、生検）より便利であり、侵襲的でないことができる。
【０１７１】
ＩＶ．本発明に有用なＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤
いくつかの具体例において、本発明に有用なＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｄｓＲＮＡ、アプタマー、ＦＡＭ１９Ａ５を特異的に標的化するＰＮＡ（ペプチド核酸）、又はこれらを含むベクターである。他の具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５拮抗剤は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に特異的に結合する抗体、又はその抗原結合部分（“抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体”）、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体を暗号化するポリヌクレオチド、又はこれらのポリヌクレオチドを含むベクターである。
【０１７２】
本明細書に開示される方法に有用な抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、特定の機能的特徴又は特性を特徴とするモノクローナル抗体を含む。例えば、この抗体は、可溶性ＦＡＭ１９Ａ５及び膜結合ＦＡＭ１９Ａ５を含むヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する。可溶性及び／又は膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合することに加え、また、本明細書に開示される抗体は（ａ）１０ｎＭ以下のＫＤで可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合するか；（ｂ）１ｎＭ以下のＫＤで膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に結合するか；又は（ａ）と（ｂ）の両者を示す。
【０１７３】
いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、例えば１０−７Ｍ以下、１０−８Ｍ以下、１０−９Ｍ（１ｎＭ）以下、１０−１０Ｍ（０．１ｎＭ）以下、１０−１１Ｍ以下、又は１０−１２Ｍ（１ｐＭ）以下、例えば１０−１２Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１１Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１０Ｍ〜１０−７Ｍ、又は１０−９Ｍ〜１０−７Ｍ、例えば１０−１２Ｍ、５×１０−１２Ｍ、１０−１１Ｍ、５×１０−１１Ｍ、１０−１０Ｍ、５×１０−１０Ｍ、１０−９Ｍ、５×１０−９Ｍ、１０−８Ｍ、５×１０−８Ｍ、１０−７Ｍ又は５×１０−７ＭのＫＤの高親和性で可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５又は膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する。多様なヒトＦＡＭ１９Ａ５に対する抗体の結合能力を評価する標準分析は当該分野に公知となっている。例えば、ＥＬＩＳＡ、ウェスタンブロッティング及びＲＩＡを含む。適切な分析が実施例で詳細に説明される。抗体の結合キネティクス（例えば、結合親和性）もＥＬＩＳＡ、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）分析又はＫｉｎＥｘＡ（登録商標）のような当該分野に公知となった標準分析によって評価されることができる。ＦＡＭ１９Ａ５の機能的特性（例えば、リガンド結合）に対する抗体の効果を評価する分析が以下でかつ実施例でより詳細に説明される。
【０１７４】
いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、例えばＥＬＩＳＡによって決定されるとき、１０−７Ｍ以下、１０−８Ｍ（１０ｎＭ）以下、１０−９Ｍ（１ｎＭ）以下、１０−１０Ｍ以下、１０−１２Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１１Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１０Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−９Ｍ〜１０−７Ｍ、又は１０−８Ｍ〜１０−７ＭのＫＤで可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５と結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、１０ｎＭ以下、例えば０．１〜１０ｎＭ、０．１〜５ｎＭ、０．１〜１ｎＭ、０．５〜１０ｎＭ、０．５〜５ｎＭ、０．５〜１ｎＭ、１〜１０ｎＭ、１〜５ｎＭ、又は５〜１０ｎＭのＫＤで可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５と結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＬＩＳＡによって決定されるとき、約１ｐＭ、２ｐＭ、３ｐＭ、４ｐＭ、５ｐＭ、６ｐＭ、７ｐＭ、８ｐＭ、９ｐＭ、１０ｐＭ、２０ｐＭ、３０ｐＭ、４０ｐＭ、５０ｐＭ、６０ｐＭ、７０ｐＭ、８０ｐＭ、９０ｐＭ、１００ｐＭ、２００ｐＭ、３００ｐＭ、４００ｐＭ、５００ｐＭ、６００ｐＭ、７００ｐＭ、８００ｐＭ又は９００ｐＭ、又は約１ｎＭ、２ｎＭ、３ｎＭ、４ｎＭ、５ｎＭ、６ｎＭ、７ｎＭ、８ｎＭ又は９ｎＭ、又は約１０ｎＭ、２０ｎＭ、３０ｎＭ、４０ｎＭ、５０ｎＭ、６０ｎＭ、７０ｎＭ、８０ｎＭ又は９０ｎＭのＫＤで可溶性ヒトＦＡＭ１９Ａ５と特異的に結合する。
【０１７５】
いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、例えばＥＬＩＳＡによって決定されるとき、１０−７Ｍ以下、１０−８Ｍ（１０ｎＭ）以下、１０−９Ｍ（１ｎＭ）以下、１０−１０Ｍ以下、１０−１２Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１１Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−１０Ｍ〜１０−７Ｍ、１０−９Ｍ〜１０−７Ｍ、又は１０−８Ｍ〜１０−７ＭのＫＤで膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５と結合する。特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＬＩＳＡによって決定されるとき、１０ｎＭ以下、例えば０．１〜１０ｎＭ、０．１〜５ｎＭ、０．１〜１ｎＭ、０．５〜１０ｎＭ、０．５〜５ｎＭ、０．５〜１ｎＭ、１〜１０ｎＭ、１〜５ｎＭ又は５〜１０ｎＭのＫＤで膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５と特異的に結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＬＩＳＡによって決定されるとき、約１ｐＭ、２ｐＭ、３ｐＭ、４ｐＭ、５ｐＭ、６ｐＭ、７ｐＭ、８ｐＭ、９ｐＭ、１０ｐＭ、２０ｐＭ、３０ｐＭ、４０ｐＭ、５０ｐＭ、６０ｐＭ、７０ｐＭ、８０ｐＭ、９０ｐＭ、１００ｐＭ、２００ｐＭ、３００ｐＭ、４００ｐＭ、５００ｐＭ、６００ｐＭ、７００ｐＭ、８００ｐＭ又は９００ｐＭ、又は約１ｎＭ、２ｎＭ、３ｎＭ、４ｎＭ、５ｎＭ、６ｎＭ、７ｎＭ、８ｎＭ又は９ｎＭ、又は約１０ｎＭ、２０ｎＭ、３０ｎＭ、４０ｎＭ、５０ｎＭ、６０ｎＭ、７０ｎＭ、８０ｎＭ又は９０ｎＭのＫＤで膜結合ヒトＦＡＭ１９Ａ５と結合する。
【０１７６】
特定の具体例において、本明細書に開示される方法に有用な抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ヒトＦＡＭ１９Ａ５エピトープとの結合についてこの明細書に開示されるＣＤＲ又は可変領域を含む抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体と交差競合する（又は結合を阻害する）。
【０１７７】
特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む基準抗体の結合を阻害する。ここで、（ｉ）基準抗体の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３のアミノ酸配列を含み、基準抗体の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含むか；（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含むか；（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含むか；（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含むか；（ｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８９のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９４のアミノ酸配列を含むか；（ｖｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９６のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９８のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１００のアミノ酸配列を含むか；（ｖｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０６のアミノ酸配列を含むか；（ｖｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０７のアミ��酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１２のアミノ酸配列を含むか；（ｉｘ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１３のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１８のアミノ酸配列を含むか；（ｘ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２４のアミノ酸配列を含むか；（ｘｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２６のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２８のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３０のアミノ酸配列を含むか；（ｘｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のアミノ酸配列を含むか；（ｘｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２のアミノ酸配列を含むか；（ｘｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４３のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４８のアミノ酸配列を含むか；又は（ｘｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４９のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５４のアミノ酸配列を含む。
【０１７８】
いくつかの具体例において、基準抗体は、（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３５及び３９をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３６及び４０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３７及び４１をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３８及び４２をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１５５及び１６６をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１５６及び１６７をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｇ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１５７及び１６８をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｈ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１５８及び１６９をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１５９及び１７０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｊ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６０及び１７１をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｋ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６１及び１７２をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｌ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６２及び１７３をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｍ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６３及び１７４をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｎ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６４及び１７５をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；又は（ｏ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６５及び１７６をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列を含む。
【０１７９】
特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、このような基準抗体とヒトＦＡＭ１９Ａ５の結合を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％又は９０％又は１００％まで阻害する。競合抗体は同じエピトープ、重畳エピトープ又は隣接エピトープ（例えば、立体障害による）と結合する。２個の抗体が標的との結合に対して互いに競合するか否かはＲＩＡ及びＥＩＡのような当該分野に公知となった競合実験によって決定されることができる。
【０１８０】
特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３と軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含むこの明細書に開示される基準抗体と同じＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合する。ここで、（ｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含むか；（ｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含むか；（ｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含むか；（ｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含むか；（ｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８９のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９４のアミノ酸配列を含むか；（ｖｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９６のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９８のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１００のアミノ酸配列を含むか；（ｖｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ��Ｄ  ＮＯ：１０６のアミノ酸配列を含むか；（ｖｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１２のアミノ酸配列を含むか；（ｉｘ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１３のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１８のアミノ酸配列を含むか；（ｘ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２４のアミノ酸配列を含むか；（ｘｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２６のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２８のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３０のアミノ酸配列を含むか；（ｘｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３１のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３２のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３６のアミノ酸配列を含むか；（ｘｉｉｉ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３７のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３８のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３９のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４０のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４２のアミノ酸配列を含むか；（ｘｉｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４３のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４４のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４５のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４８のアミノ酸配列を含むか；又は（ｘｖ）重鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４９のアミノ酸��列を含み、重鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５０のアミノ酸配列を含み、重鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５１のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ１はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５２のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ２はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５３のアミノ酸配列を含み、軽鎖ＣＤＲ３はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５４のアミノ酸配列を含む。
【０１８１】
いくつかの具体例において、基準抗体は、（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３５及び３９をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３６及び４０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３７及び４１をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３８及び４２をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１５５及び１６６をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１５６及び１６７をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｇ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１５７及び１６８をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｈ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１５８及び１６９をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１５９及び１７０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｊ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６０及び１７１をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｋ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６１及び１７２をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｌ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６２及び１７３をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｍ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６３及び１７４をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；（ｎ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６４及び１７５をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；又は（ｏ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６５及び１７６をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列を含む。
【０１８２】
２個の抗体が同じエピトープに結合するか否かを決定する技術は、例えばエピトープマッピング方法、例えばエピトープの原子分解能を提供する抗原抗体複合体結晶のＸ線分析及び水素／重水素交換質量分光法（ＨＤＸ−ＭＳ）、抗体と抗原断片又は抗原の突然変異された変異体の結合をモニタリングする方法（ここで、抗原配列内でアミノ酸残期の変形による結合は損失が主にエピトープ成分の表示として見なされる）、エピトープマッピング用コンピュータ組合方法を含む。
【０１８３】
本明細書に開示される方法に有用な抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、例えば抗体とヒトＦＡＭ１９Ａ５の断片の結合によって決定されるとき、成熟したヒトＦＡＭ１９Ａ５の少なくとも１個のエピトープと結合することができる。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＴＬＤＲＤＳＳＱＰＲＲＴＩＡＲＱＴＡＲＣ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２のアミノ酸残期４２〜６１）のアミノ酸配列内に位置する断片、例えばＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６の少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸を有するエピトープと結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２のアミノ酸残期４６〜５１（すなわち、ＤＳＳＱＰＲ）、例えばアミノ酸残期４６、５０及び５２（すなわち、Ｄ−−−Ｐ−Ｒ）、例えばアミノ酸残期４６、４７、４８及び５０（すなわち、ＤＳＳ−Ｐ）に相当する１個以上のアミノ酸でＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６に結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＣＤＭＬＰＣＬＥＧＥＧＣＤＬＬＩＮＲＳＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２のアミノ酸９０〜１０９）のアミノ酸配列内に位置する断片、例えばＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９の少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸を有するエピトープと結合する。特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４の１個以上のアミノ酸残期９９〜１０７（すなわち、ＥＧＣＤＬＬＩＮＲ）、例えばアミノ酸残期１０２、１０３、１０５及び１０７（すなわち、ＤＬ−Ｉ−Ｒ）、例えばアミノ酸残期９９、１００、１０２、１０３、１０５及び１０７（すなわち、ＥＧ−ＤＬ−Ｉ−Ｒ）、例えばアミノ酸残期９９、１００及び１０７（すなわち、ＥＧ−−−−−−Ｒ）でＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９に結合する。
【０１８４】
いくつかの具体例において、少なくとも１個のエピトープは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６と少なくとも９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を有する。いくつかの具体例において、少なくとも１個のエピトープは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９と少なくとも９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を有する。
【０１８５】
いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、６、７、８、９又は１０、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、６、７、８、９又は１０のアミノ酸配列内に位置する断片、例えばＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、６、７、８、９又は１０の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸を有するエピトープである、ヒトＦＡＭ１９Ａ５にのみ結合する。
【０１８６】
いくつかの具体例において、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６又はその断片と天然立体配座（すなわち、未変性）状態で結合する。いくつかの具体例において、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９又はその断片と天然立体配座（すなわち未変性）状態で結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はグリコシル化及び非グリコシル化ヒトＦＡＭ１９Ａ５の両者と結合する。
【０１８７】
いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は１個以上の追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープとさらに結合する。よって、特定の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６のエピトープと追加のエピトープ又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９のエピトープと追加のエピトープに結合する。他の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５のエピトープ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９のエピトープ及び追加のエピトープに結合することができる。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６のエピトープ、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０のエピトープ及び追加のエピトープに結合する。いくつかの具体例において、１個以上の追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープは、ＱＬＡＡＧＴＣＥＩＶＴＬＤＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、エピトープＦ１）、ＴＬＤＲＤＳＳＱＰＲＲＴＩＡＲＱＴＡＲＣ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、エピトープＦ２）、ＴＡＲＣＡＣＲＫＧＱＩＡＧＴＴＲＡＲＰＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、エピトープＦ３）、ＡＲＰＡＣＶＤＡＲＩＩＫＴＫＱＷＣＤＭＬ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、エピトープＦ４）、ＣＤＭＬＰＣＬＥＧＥＧＣＤＬＬＩＮＲＳＧ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９、エピトープＦ５）、又はＮＲＳＧＷＴＣＴＱＰＧＧＲＩＫＴＴＴＶＳ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０、エピトープＦ６）、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０又はこれらの任意の組合せのアミノ酸配列内に位置する断片から選択される。ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０のアミノ酸配列内に位置する断片は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：９又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０のいずれかの１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸を有する断片を含む。いくつかの具体例において、１個以上の追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、６、７、８、９又は１０、又はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、６、７、８、９又は１０のアミノ酸配列内に位置する断片、例えばＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５、６、７、８、９又は１０の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９又は２０個のアミノ酸を有する断片、又はこれらの任意の組合せから選択される。いくつかの具体例において、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、１個以上の追加のエピトープに天然立体配座（すなわち、未変性）状態で結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、１個以上の追加のＦＡＭ１９Ａ５エピトープのグリコシル化及び非グリコシル化形態の両者に結合する。
【０１８８】
いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＥＰ２、ＥＰ４及び／又はＥＰ８として確認された少なくとも１個のＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合し、ここで、ＥＰ２はアミノ酸ＤＳＳＱＰ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６６）を含み、ＥＰ４はアミノ酸ＡＲＣＡＣＲＫ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８）を含み、ＥＰ８はアミノ酸ＴＣＴＱＰＧＧＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２）を含む。いくつかの具体例において、少なくとも１個のエピトープは、ＥＰ２、ＥＰ４又はＥＰ８と少なくとも９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を有する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、単にＥＰ２にのみ結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＥＰ４及びＥＰ８に結合する。
【０１８９】
いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＰ６、ＥＰ７又はＥＰ８として確認された少なくとも１個のＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合し、ここで、ＥＰ６はアミノ酸ＫＴＫＱＷＣＤＭＬ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７０）を含み、ＥＰ７はアミノ酸ＧＣＤＬＬＩＮＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７１）を含み、ＥＰ８はアミノ酸ＴＣＴＱＰＧＧＲ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２）を含む。いくつかの具体例において、少なくとも１個のエピトープは、ＥＰ６、ＥＰ７又はＥＰ８と少なくとも９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を有する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は単にＥＰ６、ＥＰ７又はＥＰ８にのみ結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＥＰ６、ＥＰ７及びＥＰ８に結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＥＰ７及びＥＰ８に結合する。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＥＰ７に結合する。
【０１９０】
いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６５、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６６、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６９、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７０、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７１、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：７２及びこれらの任意の組合せからなる群から選択される１個以上のＦＡＭ１９Ａ５エピトープに結合する。
【０１９１】
特定の具体例において、例えば免疫分析（例えば、ＥＬＩＳＡ）、表面プラズモン共鳴、又は結合平衡除外法によって測定されるとき、ＦＡＭ１９Ａファミリの他のタンパク質より２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又はそれより高い親和性でＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）と結合する抗体又はその抗原結合部分がこの明細書に開示される。特定の具体例において、例えば免疫分析によって測定されるとき、ＦＡＭ１９Ａファミリの他のタンパク質との交差反応性なしにＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に結合する抗体又はその抗原結合部分がこの明細書に開示される。
【０１９２】
特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は自生抗体ではないか又は自然発生抗体ではない。例えば、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、例えばより多いか、より少ないか、又は相異なるタイプの翻訳後修飾（ｐｏｓｔ−ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ）を有することにより、自然発生の抗体のものとは異なる翻訳後修飾を有する。
【０１９３】
Ｖ．例示的な抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体
本明細書に開示される方法に使われることができる特定の抗体はこの明細書に開示されるＣＤＲ及び／又は可変領域配列を有する抗体、例えばモノクローナル抗体だけでなくこれらの可変領域又はＣＤＲ配列と少なくとも８０％同一性（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％又は少なくとも９９％同一性）を有する抗体である。本発明の相異なる抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体のＶＨ及びＶＬアミノ酸配列がそれぞれ表４及び５に提示される。
【０１９４】
【表２】
2020525519.tif 000004
【０１９５】
【表３】
2020525519.tif 000005
【０１９６】
【表４】
2020525519.tif 000006
【０１９７】
【表５】
2020525519.tif 000007
【０１９８】
したがって、重鎖及び軽鎖可変領域を含む分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分がこの明細書に開示される。ここで、重鎖可変領域は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３５−３８又は１５５−１６５のアミノ酸配列を含む。他の具体例において、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３５−３８又は１５５−１６５からなる群から選択される重鎖可変領域のＣＤＲを含む。
【０１９９】
また、重鎖及び軽鎖可変領域を含む分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分が開示される。ここで、軽鎖可変領域は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３９−４２又は１６６−１７６のアミノ酸配列を含む。他の具体例において、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３９−４２又は１６６−１７６からなる群から選択される軽鎖可変領域のＣＤＲを含む。
【０２００】
特定の具体例において、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３５−３８又は１５５−１６５からなる群から選択される重鎖可変領域のＣＤＲ及びＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３９−４２又は１６６−１７６からなる群から選択される軽鎖可変領域のＣＤＲを含む。
【０２０１】
また、重鎖及び軽鎖可変領域を含む分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分が開示される。ここで、（ｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３５のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３９のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３６のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４０のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３７のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４１のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３８のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４２のアミノ酸配列を含み；（ｖ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５５のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６６のアミノ酸配列を含み；（ｖｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５６のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６７のアミノ酸配列を含み；（ｖｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５７のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６８のアミノ酸配列を含み；（ｖｉｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５８のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６９のアミノ酸配列を含み；（ｉｘ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５９のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７０のアミノ酸配列を含み；（ｘ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６０のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７１のアミノ酸配列を含み；（ｘｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６１のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７２のアミノ酸配列を含み；（ｘｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６２のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７３のアミノ酸配列を含み；（ｘｉｉｉ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７４のアミノ酸配列を含み；（ｘｉｖ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６４のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７５のアミノ酸配列を含み；及び（ｘｖ）重鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６５のアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７６のアミノ酸配列を含む。
【０２０２】
重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分がこの明細書に開示される。、ここで、重鎖可変領域は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３５−３８又は１５５−１６５に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
【０２０３】
また、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分がこの明細書に開示される。ここで、軽鎖可変領域は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３９−４２又は１６６−１７６に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
【０２０４】
また、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む、分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分がこの明細書に開示される。ここで、重鎖可変領域は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３５−３８又は１５５−１６５に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変領域は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３９−４２又は１６６−１７６に提示されたアミノ酸配列と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％又は約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
【０２０５】
いくつかの具体例において、本発明は分離された抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体、又はその抗原結合部分を提供する。これは、
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３５及び３９をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３６及び４０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３７及び４１をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３８及び４２をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１５５及び１６６をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１５６及び１６７をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｇ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１５７及び１６８をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｈ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１５８及び１６９をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１５９及び１７０をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｊ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６０及び１７１をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｋ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６１及び１７２をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｌ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６２及び１７３をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｍ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６３及び１７４をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；
（ｎ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６４及び１７５をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列；又は
（ｏ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１６５及び１７６をそれぞれ含む重鎖及び軽鎖可変領域配列
を含む。
【０２０６】
特定の具体例において、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は、（ｉ）２−１３の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は２−１３の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｉｉ）３−２の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は３−２の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｉｉｉ）１−６５の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は１−６５の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｉｖ）１−２８の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は１−２８の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｖ）Ｐ２−Ｃ１２の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ２−Ｃ１２の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｖｉ）１３Ｂ４の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は１３Ｂ４の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｖｉｉ）１３Ｆ７の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は１３Ｆ７の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｖｉｉｉ）１５Ａ９の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又は１５Ａ９の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｉｘ）Ｐ１−Ａ０３の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ１−Ａ０３の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｘ）Ｐ１−Ａ０８の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ１−Ａ０８の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉ）Ｐ１−Ｆ０２の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ１−Ｆ０２の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉｉ）Ｐ２−Ａ０１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ２−Ａ０１の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉｉｉ）Ｐ２−Ａ０３の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ２−Ａ０３の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；（ｘｉｖ）Ｐ２−Ｆ０７の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ２−Ｆ０７の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せ；又は（ｘｖ）Ｐ２−Ｆ１１の重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの組合せ、及び／又はＰ２−Ｆ１１の軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３、又はこれらの任意の組合せを含む。本明細書に開示される相異なる抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体に対するＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列が表２に提供されている。本明細書に開示される相異なる抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体に対するＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列��表３に提供される。
【０２０７】
２−１３に対するＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１１、１２及び１３に提示される。２−１３に対するＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２３、２４及び２５に提示される。３−２に対するＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１４、１５及び１６に提示される。３−２に対するＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２６、２７及び２８に提示される。１−６５に対するＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１７、１８及び１９に提示される。１−６５に対するＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２９、３０及び３１に提示される。１−２８に対するＶＨ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：２０、２１及び２２に提示される。１−２８に対するＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列はそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３２、３３及び３４に提示される。
【０２０８】
いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３
を含む。
【０２０９】
特定の具体例において、抗体又はその抗原結合部分は前記ＶＨ  ＣＤＲの１個、２個、又は３個の全部を含む。
【０２１０】
いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３
を含む。
【０２１１】
特定の具体例において、抗体又はその抗原結合部分は前記ＶＬ  ＣＤＲの１個、２個、又は３個の全部を含む。
【０２１２】
いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３
（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３
を含む。
【０２１３】
いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３
を含む。
【０２１４】
特定の具体例において、抗体又はその抗原結合部分は前記ＶＨ  ＣＤＲの１個、２個、又は３個の全部を含む。
【０２１５】
いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３
を含む。
【０２１６】
特定の具体例において、抗体又はその抗原結合部分は前記ＶＬ  ＣＤＲの１個、２個、又は３個の全部を含む。
【０２１７】
いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１６のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３
（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３
を含む。
【０２１８】
いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；及び／又は
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３
を含む。
【０２１９】
特定の具体例において、抗体又はその抗原結合部分は前記ＶＨ  ＣＤＲの１個、２個、又は３個の全部を含む。
【０２２０】
いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３
を含む。
【０２２１】
特定の具体例において、抗体又はその抗原結合部分は前記ＶＬ  ＣＤＲの１個、２個、又は３個の全部を含む。
【０２２２】
いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１７のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１８のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１９のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３
（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３
を含む。
【０２２３】
いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、本発明の抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３
を含む。
【０２２４】
特定の具体例において、抗体又はその抗原結合部分は前記ＶＨ  ＣＤＲの１個、２個、又は３個の全部を含む。
【０２２５】
いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３
を含む。
【０２２６】
特定の具体例において、抗体又はその抗原結合部分は前記ＶＬ  ＣＤＲの１個、２個、又は３個の全部を含む。
【０２２７】
いくつかの具体例において、ヒトＦＡＭ１９Ａ５に特異的に結合する、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は：
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２０のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ１；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２１のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ２；
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含むＶＨ  ＣＤＲ３
（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ１；
（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ２；及び／又は
（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含むＶＬ  ＣＤＲ３
を含む。
【０２２８】
特定の具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は前記ＣＤＲの１個、２個、３個、４個、５個又は６個を含む。
【０２２９】
本明細書に開示されるＶＨドメイン、又はその１個以上のＣＤＲは重鎖、例えば全長重鎖を形成するために不変ドメインに連結されることができる。同様に、ＶＬドメイン、又はその１個以上のＣＤＲは軽鎖、例えば全長軽鎖を形成するために不変ドメインに連結されることができる。全長重鎖と全長軽鎖は組み合せられて全長抗体を形成することができる。
【０２３０】
したがって、特定の具体例において、抗体軽鎖及び重鎖、例えば分離された軽鎖及び重鎖を含む抗体がこの明細書に開示される。軽鎖に関連して、特定の具体例において、本明細書に開示される抗体の軽鎖はカッパ軽鎖である。他の特定の具体例において、本明細書に開示される抗体の軽鎖はラムダ軽鎖である。さらに他の特定の具体例において、本明細書に開示される抗体の軽鎖はヒトカッパ軽鎖又はヒトラムダ軽鎖である。特定の具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）ポリペプチドに特異的に結合する、本明細書に開示される抗体はこの明細書に開示される任意のＶＬ又はＶＬ  ＣＤＲアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、軽鎖の不変領域はヒトカッパ軽鎖不変領域のアミノ酸配列を含む。特定の具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）ポリペプチドに特異的に結合する、本明細書に開示される抗体はこの明細書に開示されるＶＬ又はＶＬ  ＣＤＲアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、軽鎖の不変領域はヒトラムダ軽鎖不変領域のアミノ酸配列を含む。ヒト不変領域配列の非制限的例は当該分野に公知となっている（例えば、アメリカ特許第５，６９３，７８０号及びKabat EA et al, (1991)（上記）を参照）。
【０２３１】
重鎖に関連して、いくつかの具体例において、本明細書に開示される抗体の重鎖は、アルファ（α）、デルタ（δ）、エプシロン（ε）、ガンマ（γ）又はミュー（μ）重鎖であり得る。他の特定の具体例において、本明細書に開示される抗体の重鎖は、ヒトアルファ（α）、デルタ（δ）、エプシロン（ε）、ガンマ（γ）又はミュー（μ）重鎖を含むことができる。一具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する、本明細書に開示される抗体はこの明細書に開示されるＶＨ又はＶＨ  ＣＤＲアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、重鎖の不変領域はヒトガンマ（γ）重鎖不変領域のアミノ酸配列を含む。他の具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する、本明細書に開示される抗体はこの明細書に開示されるＶＨ又はＶＨ  ＣＤＲアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、重鎖の不変領域はこの明細書に開示されるとか当該分野に公知となったヒト重鎖のアミノ酸配列を含む。ヒト不変領域配列の非制限的例は当該分野に公知となっている（例えば、アメリカ特許第５，６９３，７８０号及びKabat EA et al., (1991)（上記）を参照）。
【０２３２】
いくつかの具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する、本明細書に開示される抗体はこの明細書に開示されるＶＨ又はＶＨ  ＣＤＲ及びＶＬ又はＶＬ  ＣＤＲを含むＶＬドメイン及びＶＨドメインを含み、ここで、不変領域はＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ又はＩｇＹ兔疫グロブリン分子、又はヒトＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ又はＩｇＹ兔疫グロブリン分子の不変領域のアミノ酸配列を含む。他の特定の具体例において、ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に特異的に結合する、本明細書に開示される抗体はこの明細書に開示される任意のアミノ酸配列を含むＶＬドメイン及びＶＨドメインを含み、ここで、不変領域はＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ又はＩｇＹ兔疫グロブリン分子、兔疫グロブリン分子の任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１及びＩｇＡ２）の不変領域のアミノ酸配列を含む。いくつかの具体例において、不変領域はサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４）及びアロタイブ（例えば、Ｇ１ｍ、Ｇ２ｍ、Ｇ３ｍ及びｎＧ４ｍ）及びこれらの変異体を含む、自然発生のヒトＩｇＧの不変領域のアミノ酸配列を含む（例えば、Vidarsson G. et al. Front Immunol. 5:520（２０１４年１０月２０日オンライン公開）及びJefferis R. and Lefranc MP, mAbs 1:4, 1-7(2009)参照）。いくつかの具体例において、不変領域は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４、又はこれらの変異体の不変領域のアミノ酸配列を含む。
【０２３３】
特定の具体例において、本明細書に開示される抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＦｃエフェクター機能、例えば補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）及び／又は抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を持っていない。エフェクター機能はＦｃ領域によって媒介され、Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインでヒンジ領域に最も近くにある残期が抗体のエフェクター機能を担当し、それは先天免疫システムのエフェクター細胞上でＣ１ｑ（補体）及びＩｇＧ−Ｆｃ受容体（ＦｃγＲ）に対してかなり重畳した結合部位を含む。また、ＩｇＧ２及びＩｇＧ４抗体はＩｇＧ１及びＩｇＧ３抗体より低い水準のＦｃエフェクター機能を有する。抗体のエフェクター機能は次のように当該分野に公知となった相異なる接近法によって減少するか回避されることができる：（１）Ｆｃ領域を欠いた抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、又はモノマーＶＨ又はＶＬドメインからなるｓｄＡｂ）の使用；（２）糖が付着された残期の欠失又は変更、酵素的に糖の除去、グリコシル化阻害剤の存在の下で培養された抗体の生成、又はタンパク質をグリコシル化することができない細胞（例えば、バクテリア宿主細胞）での抗体の発現によって生成されることができる、アグリコシル化抗体の生成（例えば、アメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号参照）；（３）エフェクター機能が減少したＩｇＧサブクラスからＦｃ領域（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４抗体からのＦｃ領域又はＩｇＧ２又はＩｇＧ４抗体からのＣＨ２ドメインを含むキメラＦｃ領域）の利用（例えば、アメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号及びLau C. et al. J. Immunol. 191:4769- 4777 (2013)参照）；及び（４）Ｆｃ機能が減少するかない突然変異を有するＦｃ領域の生成（例えば、アメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号及びそれに引用されたアメリカ出願及びＰＣＴ出願とAn et al. mAbs 1:6, 572-579 (2009)を参照）。
【０２３４】
したがって、いくつかの具体例において、本明細書に開示される抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、又はモノマーＶＨ又はＶＬドメインからなるｓｄＡｂである。このような抗体断片は当該分野によく知られており、以上で説明されている。
【０２３５】
いくつかの具体例において、本明細書に開示される抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分はＦｃエフェクター機能が減少するかないＦｃ領域を含む。いくつかの具体例において、不変領域は、ヒトＩｇＧ２又はＩｇＧ４のＦｃ領域のアミノ酸配列を含む。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体は、ＩｇＧ２／ＩｇＧ４アイソタイプのものである。いくつかの具体例において、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体はＩｇＧ４アイソタイプのＩｇＧ抗体からのＣＨ２ドメインとＩｇＧ１アイソタイプのＩｇＧ抗体からのＣＨ３ドメインを含むキメラＦｃ領域、又はＩｇＧ２からのヒンジ領域とＩｇＧ４からのＣＨ２領域を含むキメラＦｃ領域、又はＦｃ機能が減少するかない突然変異を有するＦｃ領域を含む。Ｆｃエフェクター機能が減少するかないＦｃ領域は当該分野に公知となったものを含む（例えば、Lau C. et al. J. Immunol. 191:4769-4777 (2013)；An et al., mAbs 1:6, 572-579 (2009)；及びアメリカ特許公開第２０１２０１００１４０号及びそれに引用されたアメリカ特許と特許公開及びＰＣＴ公開を参照）。また、Ｆｃエフェクター機能が減少するかないＦｃ領域は当業者によって易しく作られることができる。
【０２３６】
ＶＩ．核酸分子
本発明の他の様態はこの明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分のいずれか１個を暗号化する１個以上の核酸分子に関するものである。核酸は、全体細胞に、細胞溶解物に、又は部分的に精製された形態又は実質的に純粋な形態に存在することができる。核酸はアルカリ性／ＳＤＳ処理、ＣｓＣｌバンディング、カラムクロマトグラフィー、制限酵素、アガロースゲル電気泳動及び当該分野によく公知となった他の技術を含む標準技術によって、他の細胞成分又は他の汚染物、例えば他の細胞核酸（例えば、他の染色体ＤＮＡ、例えば自然で分離されたＤＮＡに連結された染色体ＤＮＡ）又はタンパク質から精製されたとき、“分離されるか”又は“実質的に純粋である”（F. Ausubel, et al. , ed. (1987) Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing and Wiley Interscience, New York参照）。本明細書に開示される核酸は、例えばＤＮＡ又はＲＮＡであり得、イントロン配列を含むことも含まないこともできる。特定の具体例において、核酸はｃＤＮＡ分子である。
【０２３７】
本明細書に開示される核酸は標準分子生物学技術によって得られることができる。ハイブリドーマ（例えば、以下で詳細に記述されるヒト兔疫グロブリン遺伝子を有するトランスジェニックマウスから製造されたハイブリドーマ）によって発現した抗体の場合、このハイブリドーマによって製造された抗体の軽鎖及び重鎖を暗号化するｃＤＮＡは標準ＰＣＲ増幅又はｃＤＮＡクローニング技術によって得られることができる。兔疫グロブリン遺伝子ライブラリ（例えば、ファージディスプレイ技術を使用）から得られた抗体の場合、この抗体を暗号化する核酸がライブラリから回収されることができる。
【０２３８】
本明細書に開示される特定の核酸分子は本発明の多様な抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体のＶＨ及びＶＬ配列を暗号化するものである。このような抗体のＶＨ配列を暗号化する例示的なＤＮＡ配列がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：４３−４６及び１７７に提示される。このような抗体のＶＬ配列を暗号化する例示的なＤＮＡ配列はＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：４７−５０及び１７８に提示される。
【０２３９】
【表６】
2020525519.tif 000008
【０２４０】
【表７】
2020525519.tif 000009
【０２４１】
本明細書に開示される抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の製造方法は、シグナルペプチドとともに重鎖及び軽鎖を暗号化するヌクレオチド配列、例えばそれぞれＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：４３及び４７、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：４４及び４８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：４５及び４９、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：４６及び５０、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１７７及び１７８を含む細胞株で抗体の関連重鎖及び軽鎖を発現することを含むことができる。これらのヌクレオチド配列を含む宿主細胞は本発明に含まれる。
【０２４２】
ＶＨ及びＶＬセグメントを暗号化するＤＮＡ断片が得られた後、これらのＤＮＡ断片は、例えば可変領域遺伝子を全長抗体鎖遺伝子、Ｆａｂ断片遺伝子又はｓｃＦｖ遺伝子に転換するために、標準組み換えＤＮＡ技術によってさらに操作されることができる。これらの操作において、ＶＬ又はＶＨ暗号化ＤＮＡ断片は抗体不変領域又は可撓性リンカーのような他のタンパク質を暗号化する他のＤＮＡ断片に作動可能に連結される。用語“作動可能に連結される”は２個のＤＮＡ断片によって暗号化されたアミノ酸配列がインフレーム（ｉｎ−ｆｒａｍｅ）を維持するように２個のＤＮＡ断片が連結されることを意味する。
【０２４３】
ＶＨ領域を暗号化する分離されたＤＮＡはＶＨ暗号化ＤＮＡを重鎖不変領域（ヒンジ、ＣＨ１、ＣＨ２及び／又はＣＨ３）を暗号化する他のＤＮＡ分子に作動可能に連結することにより全長重鎖遺伝子に転換されることができる。ヒト重鎖不変領域遺伝子の配列は当該分野に公知となっており（例えば、Kabat, E. A., et al., (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242参照）、これらの領域を含むＤＮＡ断片が標準ＰＣＲ増幅によって得られることができる。重鎖不変領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭ又はＩｇＤ不変領域、例えばＩｇＧ２及び／又はＩｇＧ４不変領域であり得る。Ｆａｂ断片重鎖遺伝子の場合、ＶＨ暗号化ＤＮＡは単に重鎖ＣＨ１不変領域のみを暗号化する他のＤＮＡ分子に作動可能に連結されることができる。
【０２４４】
ＶＬ領域を暗号化する分離されたＤＮＡはＶＬ暗号化ＤＮＡを軽鎖不変領域ＣＬを暗号化する他のＤＮＡ分子に作動可能に連結することにより、全長軽鎖遺伝子に転換されることができる。ヒト軽鎖不変領域遺伝子の配列は当該分野に公知となっており（例えば、Kabat, E. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242参照）、これらの領域を含むＤＮＡ断片が標準ＰＣＲ増幅によって得られることができる。軽鎖不変領域はカッパ又はラムダ不変領域であり得る。
【０２４５】
ｓｃＦｖ遺伝子を生成するために、ＶＨ及びＶＬ暗号化ＤＮＡ断片が可撓性リンカーを暗号化する、例えばアミノ酸配列（Ｇｌｙ４−Ｓｅｒ）３を暗号化する他の断片に作動可能に連結され、これによりＶＬとＶＨ領域が可撓性リンカーによって連結された状態でＶＨ及びＶＬ配列が連続単鎖タンパク質として発現することができる（例えば、Bird et al. (1988) Science 242:423-426; Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883; McCafferty et al., (1990) Nature 348:552-554参照）。
【０２４６】
いくつかの具体例において、本発明は抗体又はその抗原結合部分を暗号化するヌクレオチド配列を含む分離された核酸分子を含むベクターを提供する。他の具体例において、ベクターは遺伝子療法に使われることができる。
【０２４７】
本発明に適切なベクターは、発現ベクター、ウイルスベクター、及びプラスミドベクターを含む。一具体例において、ベクターはウイルスベクターである。
【０２４８】
発現ベクターは、適切な宿主細胞に導入されたとき、挿入されたコーディング配列の転写及び翻訳のための必須要素、又はＲＮＡウイルスベクターの場合、複製及び翻訳のための必須要素を含む任意の核酸構成物を意味する。発現ベクターは、プラスミド、ファージミド、ウイルス、及びこれらの誘導体を含むことができる。
【０２４９】
本発明の発現ベクターは、この明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分を暗号化するポリヌクレオチドを含むことができる。一具体例において、抗体又はその抗原結合部分に対するコーディング配列は発現制御配列に作動可能に連結される。２個の核酸配列は、これらが各成分核酸配列がその機能性を保有するように許容する方式で共有連結されるとき、作動可能に連結されるものである。コーディング配列及び遺伝子発現制御配列は、コーディング配列の発現又は転写及び／又は翻訳が遺伝子発現制御配列の影響又は制御下の方式でこれらが共有連結されるとき、作動可能に連結されると言われる。２個のＤＮＡ配列は５’遺伝子発現配列でプローモーターの誘導がコーディング配列の転写をもたらし、２個のＤＮＡ配列の連結の本質が（１）フレームシフト突然変異の導入をもたらすか、（２）コーディング配列の転写を指示するプローモーター領域の能力を妨げるか、又は（３）タンパク質に翻訳される対応ＲＮＡ転写体の能力を妨げなければ、作動可能に連結されると言われる。よって、遺伝子発現配列は、この遺伝子発現配列がコーディング核酸配列の転写を行うことができれば、コーディング核酸配列に作動可能に連結されたものであり、これによって得られた転写体は所望の抗体又はその抗原結合部分に翻訳される。
【０２５０】
ウイルスベクターは、これに制限されるものではないが、レトロウイルス、例えばＭｏｌｏｎｅｙネズミ科白血病ウイルス、Ｈａｒｖｅｙネズミ科肉腫ウイルス、ネズミ科乳房腫瘍ウイルス、及びＲｏｕｓ肉腫ウイルス；レンチウイルス；アデノウイルス；アデノ関連ウイルス；ＳＶ４０タイプウイルス；ポリオーマバイロス；エプスタインバーウイルス；乳頭種ウイルス；ヘルペスウイルス；ワクシニアウイルス；ポリオウイルス；及びＲＮＡウイルス、例えばレトロウイルスからの核酸配列を含む。当該分野に公知となった他のベクターも易しく用いることができる。特定のウイルスベクターは非必須遺伝子が関心遺伝子に置換された非細胞変性（ｎｏｎ−ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ）真核生物ウイルスに基づく。非細胞変性ウイルスはレトロウイルスを含み、そのライフサイクルはゲノムウイルスＲＮＡのＤＮＡへの逆転写と後続の宿主細胞ＤＮＡへのプロウイルス組み込みを伴う。レトロウイルスはヒト遺伝子療法試験のために承認された。複製欠損性（すなわち、所望のタンパク質の合成を指示することができるが感染性粒子は製造することができない）があるレトロウイルスが最も有用である。このような遺伝子操作されたレトロウイルス発現ベクターは生体内遺伝子の高効能形質導入（ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ）で一般的な有用性を有する。複製欠損性レトロウイルスを生成する標準プロトコル（プラスミドへの外来遺伝子物質の統合、プラスミドによるパッケージング細胞株のトランスフェクション、パッケージング細胞株による組み換えレトロウイルスの生成、組職培地からウイルス粒子の収集、及びウイルス粒子による標的細胞の感染段階を含む）は文献（Kriegler, M., Gene Transfer and Expression, A Laboratory Manual, W.H. Freeman Co., New York (1990) and Murry, E. J., Methods in Molecular Biology, Vol. 7, Humana Press, Inc., Cliffton, N.J. (1991)に開示されている。
【０２５１】
一具体例において、ウイルスは二本鎖ＤＮＡウイルスであるアデノ関連ウイルスである。アデノ関連ウイルスは複製欠損を有するように操作されることができ、広範囲な細胞タイプ及び種を感染させることができる。また、アデノ関連ウイルスは熱及び脂質溶媒安全性；造血細胞を含む多様な細胞で高い形質導入頻度；及び重複感染阻害の欠如のような利点を有し、これにより多くの形質導入が可能である。報道によれば、アデノ関連ウイルスは部位特異的方式でヒト細胞ＤＮＡに統合されることができ、これにより挿入突然変異誘発の確率及びレトロウイルス感染の挿入された遺伝子発現特徴の変動性を最小化する。これに加え、野生型アデノ関連ウイルス感染が選択圧の不在の下で１００代継代以上の間に組職培養物で追跡された。これはアデノ関連ウイルスゲノム統合が相対的に安定したイベントであることを示唆する。また、アデノ関連ウイルスは染色体外方式で機能することができる。
【０２５２】
他の具体例において、ベクターはレンチウイルスから来由する。特定の具体例において、ベクターは非分裂細胞を感染させることができる組み換えレンチウイルスのベクターである。
【０２５３】
レンチウイルスゲノム及びプロウイルスＤＮＡは典型的にレトロウイルスで発見される３個の遺伝子ｇａｇ、ｐｏｌ及びｅｎｖを有し、これらの側面には２個の長い末端反復（ＬＴＲ）配列がある。ｇａｇ遺伝子は内部構造（基質、カプシド及びヌクレオカプシド）タンパク質を暗号化し、ｐｏｌ遺伝子はＲＮＡ依存性ＤＮＡポリメラーゼ（逆転写酵素）、プロテアーゼ及びインテグラーゼを暗号化し、ｅｎｖ遺伝子はウイルス外被糖タンパク質を暗号化する。５’及び３’ＬＴＲはビリオンＲＮＡの転写及びポリアデニル化を促進する作用をする。ＬＴＲは、ウイルス複製に必要な他のシス作用配列を全部含む。レンチウイルスは、ｖｉｆ、ｖｐｒ、ｔａｔ、ｒｅｖ、ｖｐｕ、ｎｅｆ及びｖｐｘ（ＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２及び／又はＳＩＶで）を含む追加の遺伝子を有する。
【０２５４】
５’ＬＴＲに隣接してゲノムの逆転写に必要な配列があり（ｔＲＮＡプライマー結合部位）、これは粒子へのウイルスＲＮＡのキャプシド形成（ｅｎｃａｐｓｉｄａｔｉｏｎ）に効果的である（Ｐｓｉ部位）。キャプシド形成（又は感染性ビリオンへのレトロウイルスＲＮＡのパッケージング）に必須な配列がウイルスゲノムから抜ける場合、このシス欠陷はゲノムＤＮＡのキャプシド形成を防止する。
【０２５５】
しかし、突然変異は全てのビリオンタンパク質の合成を依然として指示することができる。本発明はパッケージング機能を有する２個以上のベクター、すなわちｇａｇ、ｐｏｌ及びｅｎｖだけでなくｒｅｖ及びｔａｔに適切な宿主細胞をトランスフェクションすることを含む非分裂細胞を感染させることができる組み換えレンチウイルスの生成方法を提供する。以下で開示するように、機能的ｔａｔ遺伝子を欠いたベクターは特定の用途に好ましい。したがって、例えば、第１ベクターはウイルスｇａｇとウイルスｐｏｌを暗号化する核酸を提供することができ、他のベクターはウイルスｅｎｖを暗号化する核酸を提供することができ、これによりパッケージング細胞が生成される。パッケージング細胞に、移植ベクターとして確認された、異種遺伝子を提供するベクターを導入することは該当外来遺伝子を有する感染性ウイルス粒子を放出する生産細胞（ｐｒｏｄｕｃｅｒ  ｃｅｌｌ）を提供する。
【０２５６】
ベクター及び外来遺伝子の前述した構成形態によって、第２ベクターはウイルス外被（ｅｎｖ）遺伝子を暗号化する核酸を提供することができる。ｅｎｖ遺伝子はレトロウイルスを含む、ほとんど全ての適切なウイルスから来由することができる。いくつかの具体例において、ｅｎｖタンパク質はヒト及び他の種の細胞の形質導入を許容する両種性外膜タンパク質である。
【０２５７】
レトロウイルス来由ｅｎｖ遺伝子の例は、これに制限されるものではないが、Ｍｏｌｏｎｅｙネズミ科白血病ウイルス（ＭｏＭｕＬＶ又はＭＭＬＶ）、Ｈａｒｖｅｙネズミ科肉腫ウイルス（ＨａＭｕＳＶ又はＨＳＶ）、ネズミ科乳房腫瘍ウイルス（ＭｕＭＴＶ又はＭＭＴＶ）、ギボン（ｇｉｂｂｏｎ）猿白血病ウイルス（ＧａＬＶ又はＧＡＬＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）及びＲｏｕｓ肉腫ウイルス（ＲＳＶ）を含む。他のｅｎｖ遺伝子、例えば水泡性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）タンパク質Ｇ（ＶＳＶＧ）、肝炎ウイルス及びインフルエンザのものも使われることができる。
【０２５８】
ウイルスｅｎｖ核酸配列を提供するベクターはこの明細書に開示される調節配列と作動可能に会合される。
【０２５９】
特定の具体例において、ベクターは非分裂細胞を形質導入するベクターの能力を損傷させなく、ＨＩＶ毒性遺伝子ｅｎｖ、ｖｉｆ、ｖｐｒ、ｖｐｕ及びｎｅｆが欠失されたレンチウイルスベクターを含む。
【０２６０】
いくつかの具体例において、ベクターは３’ＬＴＲのＵ３領域の欠失を含むレンチウイルスベクターを含む。Ｕ３領域の欠失は完全欠失又は部分欠失であり得る。
【０２６１】
いくつかの具体例において、本明細書に開示されるＦＶＩＩＩヌクレオチド配列を含む本発明のレンチウイルスベクターは、細胞において、（ａ）ｇａｇ、ｐｏｌ、又はｇａｇ及びｐｏｌ遺伝子を含む第１ヌクレオチド配列及び（ｂ）異種ｅｎｖ遺伝子を含む第２ヌクレオチド配列でトランスフェクションされることができる。ここで、レンチウイルスベクターは機能的ｔａｔ遺伝子を欠いている。他の具体例において、細胞はｒｅｖ遺伝子を含む第４ヌクレオチド配列でさらにトランスフェクションされる。特定の具体例において、レンチウイルスベクターは、ｖｉｆ、ｖｐｒ、ｖｐｕ、ｖｐｘ及びｎｅｆ、又はこれらの任意の組合せから選択された機能的遺伝子を欠いている。
【０２６２】
特定の具体例において、レンチウイルスベクターは、ｇａｇタンパク質、Ｒｅｖ反応要素、中心ポリプリントラック（ｃＰＰＴ）、又はこれらの任意の組合せを暗号化する１個以上のヌクレオチド配列を含む。
【０２６３】
レンチウイルスベクターの例は、ＷＯ９９３１２５１、Ｗ０９７１２６２２、Ｗ０９８１７８１５、Ｗ０９８１７８１６及びＷＯ９８１８９３４に開示され、これらはその全体がこの明細書に参照することにより組み込まれる。
【０２６４】
他のベクターはプラスミドベクターを含む。プラスミドベクターは当業者によく公知となっている（例えば、Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989参照）。去る数年間プラスミドベクターは、宿主ゲノム内で複製することも統合されることもできない特性のため、生体内で細胞に遺伝子を送逹するのに特に有益なものと判明された。しかし、宿主細胞と両立するプローモーターを有するこのプラスミドはプラスミド内で作動可能に暗号化された遺伝子からペプチドを発現することができる。商業的供給者から入手可能な一部の一般的に使われるプラスミドは、ｐＢＲ３２２、ｐＵＣ１８、ｐＵＣ１９、多様なｐｃＤＮＡプラスミド、ｐＲＣ／ＣＭＶ、多様なｐＣＭＶプラスミド、ｐＳＶ４０、及びｐＢｌｕｅＳｃｒｉｐｔを含む。特定のプラスミドの追加の例は、ｐｃＤＮＡ３．１、カタログ番号Ｖ７９０２０；ｐｃＤＮＡ３．１／ｈｙｇｒｏ、カタログ番号Ｖ８７０２０；ｐｃＤＮＡ４／ｍｙｃ−Ｈｉｓ、カタログ番号Ｖ８６３２０；及びｐＢｕｄＣＥ４．１、カタログ番号Ｖ５３２２０を含み、これはいずれもＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ．）の製品である。他のプラスミドも当業者によく公知となっている。さらに、プラスミドはＤＮＡの特定の断片を除去及び／又は付加するために標準分子生物学技術を使って注文設計可能である。
【０２６５】
ＶＩＩ．抗体生成
ＦＡＭ１９Ａ５（例えば、ヒトＦＡＭ１９Ａ５）に免疫特異的に結合する抗体又はその断片は、抗体の合成のための当該分野に公知となった任意の方法によって、例えば化学的合成又は組み換え発現技術によって生成されることができる。本明細書に開示される方法は、特別な言及がない限り、分子生物学、微生物学、遺伝子分析、組み換えＤＮＡ、有機化学、生化学、ＰＣＲ、オリゴヌクレオチド合成及び変形、核酸雑種形成、及び当該分野技術範囲内の関連分野の従来の技術を用いる。この技術は、例えばこの明細書に引用された参照資料に記述され、文献（例えば、Maniatis T et al., (1982) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Sambrook J et al., (1989), Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Sambrook J et al., (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Ausubel FM et al., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons (1987 and annual updates); Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons (1987 and annual updates) Gait (ed.) (1984) Oligonucleotide Synthesis: A Practical Approach, IRL Press; Eckstein (ed.) (1991) Oligonucleotides and Analogues: A Practical Approach, IRL Press; Birren B et al., (eds.) (1999) Genome Analysis: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Pressを参照）で十分に説明される。
【０２６６】
特定の具体例において、本明細書に開示される抗体は、例えば合成、ＤＮＡ配列の遺伝子組み換えによる生成を伴う任意の手段によって製造、発現、生成又は分離された抗体（例えば、組み換え抗体）である。特定の具体例において、このような抗体は生体内動物又は哺乳類（例えば、ヒト）の抗体生殖細胞レパートリー内に自然に存在しない配列（例えば、ＤＮＡ配列又はアミノ酸配列）を含む。
【０２６７】
ＶＩＩＩ．医薬組成物
生理学的に許容される担体、賦形剤又は安定剤（Remington's Pharmaceutical Sciences (1990) Mack Publishing Co., Easton, PA）の中で所望程度の純度を有するこの明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分（例えば、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体）を含む組成物が開示される。許容される担体、賦形剤又は安定剤は用いられた投薬量及び濃度で受恵者に非毒性であり、バッファー、例えばリン酸塩、クエン酸塩及び他の有機酸；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（例えば、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロライド；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム；フェノール、ブチル又はベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えばメチル又はプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；及びｍ−クレゾール）；低分子量（約１０個残期未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば血清アルブミン、ゼラチン、又は兔疫グロブリン；親水性重合体、例えばポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、又はリシン；単糖類、二糖類、及びグルコース、マンノース、又はデキストリンを含む他の炭水化物；キレート剤、例えばＥＤＴＡ；糖、例えばスクロース、マンニトール、トレハロース又はソルビトール；塩形成対イオン、例えばナトリウム；金属複合体（例えば、Ｚｎタンパク質複合体）；及び／又は非イオン界面活性剤、例えばＴＷＥＥＮ（登録商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（登録商標）又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を含む。
【０２６８】
いくつかの具体例において、医薬組成物は、この明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分、二重特異性分子、又は免疫抱合体、及び選択的に１種以上の追加の予防又は治療剤を、薬学的に許容される担体内に含む。特定の具体例において、医薬組成物はこの明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分の有効量、及び選択的に１種以上の追加の予防又は治療剤を、薬学的に許容される担体内に含む。いくつかの具体例において、抗体は医薬組成物に含まれた唯一の活性成分である。本明細書に開示される医薬組成物はＦＡＭ１９Ａ５活性を減少させるのに有用であり、これにより線維症疾患又は状態、例えば線維症及び／又は肺線維症を治療することができる。
【０２６９】
非経口剤に使用された薬学的に許容される担体は水性ビークル、非水性ビークル、抗菌剤、等張剤、バッファー、抗酸化剤、局所痲酔剤、懸濁及び分散剤、乳化剤、金属イオン封鎖又はキレート剤及び他の薬学的に許容される物質を含む。水性ビークルの例は、塩化ナトリウム注射液、リンガー注射液、等張デキストロース注射液、滅菌水注射液、デキストロース及びラクテートリンガー注射液を含む。非水性非経口ビークルは、植物起源の固定油、綿実油、トウモロコシ油、胡麻油及びピーナッツ油を含む。静菌又は静真菌濃度の抗菌剤が複数回容器にパッケージされた非経口剤に添加されることができ、これらは、フェノール又はクレゾール、水銀剤、ベンジルアルコール、クロロブタノール、メチル及びプロピルｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル（ｐｒｏｐｙｌ  ｐ−ｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏｉｃ  ａｃｉｄ  ｅｓｔｅｒ）、チメロサール、塩化ベンザルコニウム及び塩化ベンゼトニウムを含む。等張剤は、塩化ナトリウム及びデキストロースを含む。バッファーは、リン酸塩及びクエン酸を含む。抗酸化剤は、重硫酸ナトリウムを含む。局所痲酔剤は、塩酸プロカインを含む。懸濁及び分散剤は、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース及びポリビニルピロリドンを含む。乳化剤は、ポリソルベート８０（ＴＷＥＥＮ（登録商標）８０）を含む。金属イオン封鎖又はキレート剤は、ＥＤＴＡを含む。また、薬学的担体は水混和性ビークル用エタノール、ポリエチレングリコール及びプロピレングリコールを含み、ｐＨ調整用水酸化ナトリウム、塩酸、クエン酸又は乳酸を含む。
【０２７０】
医薬組成物は、対象に対する任意の投与経路に合うように製剤化されることができる。投与経路の具体的な例は、鼻腔内、経口、非経口、髄腔内、脳室内、肺、皮下、又は心室内経路を含む。皮下、筋肉内又は静脈内注射を特徴とする非経口投与も考慮される。注射可能物質が従来の形態に、液体溶液又は懸濁液、注射前に液体中で溶液又は懸濁液になるのに適した固体形態、又はエマルジョンに製造されることができる。また、注射可能物質、溶液及びエマルジョンは１種以上の賦形剤を含む。適切な賦形剤は、例えば水、食塩水、デキストロース、グリセロール又はエタノールである。これに加え、必要に応じて、投与される医薬組成物も少量の非毒性補助物質、例えば湿潤又は乳化剤、ｐＨ緩衝剤、安定剤、溶解度増進剤、及び他のこのような製剤、例えば酢酸ナトリウム、ソルビタンモノラウレート、オレイン酸トリエタノールアミン及びシクロデキストリンを含むことができる。
【０２７１】
抗体の非経口投与用製剤は、直ぐ注射可能な滅菌溶液、皮下注射用錠剤を含む使用直前に溶媒と直ぐ合わせられることができる滅菌乾燥可溶性製品、例えば凍結乾燥された粉末、すぐ注射可能な滅菌懸濁液、使用直前にビークルと直ぐ合わせられることができる滅菌乾燥不溶性製品及び滅菌エマルジョンを含む。溶液は水性又は非水性であり得る。
【０２７２】
静脈内投与される場合、適切な担体は、生理学的食塩水又はリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、及び増粘及び溶解剤を含む溶液、例えばグルコース、ポリエチレングリコール、及びポリプロピレングリコール及びこれらの混合物を含む。
【０２７３】
抗体を含む局所用混合物は局所及び全身投与について説明したように製造される。得られた混合物は、溶液、懸濁液、エマルジョンなどであり得、クリーム、ゲル、軟膏、エマルジョン、溶液、エリクサー、ローション、懸濁液、チンキ剤、ペースト、フォーム、エアロゾル、灌注剤、スプレー、座薬、包帯、皮膚パッチ又は局所投与に適した任意の他の剤形として製剤化されることができる。
【０２７４】
本明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分は、例えば吸入による、局所投与用エアロゾルとして製剤化されることができる（例えば、アメリカ特許第４，０４４，１２６号、同第４，４１４，２０９号及び同第４，３６４，９２３号参照、この特許は炎症性疾患、特に喘息の治療に有用なステロイドの送逹のためのエアロゾルを開示する）。気道に投与するためのこの製剤は噴霧器用のエアロゾル又は溶液の形態であるか、又は吸入剤用の超微粒粉末であり得、単独で使われるか又はラクトースのような非活性担体と組み合わせて使われる。このような場合、製剤の粒子は、５０ミクロン未満、具体的に１０ミクロン未満の直径を有する。
【０２７５】
本明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分は局部又は局所適用、例えば皮膚及び粘膜に局所適用、例えば目に局所適用のために、ゲル、クリーム及びローションに製剤化されることができ、目に適用又は嚢内又は髄腔内適用のために製剤化されることができる。局所投与は経皮送逹用として考慮され、また眼又は粘膜投与、又は吸入療法用として考慮される。他の薬学的に許容される賦形剤と組み合わせて又は単独で抗体の点鼻液も投与されることができる。
【０２７６】
イオン泳動及び電気泳動装置を含む経皮パッチが当業者に公知となっており、抗体投与用として使われることができる。例えば、このようなパッチは、アメリカ特許第６，２６７，９８３号、同第６，２６１，５９５号、同第６，２５６，５３３号、同第６，１６７，３０１号、同第６，０２４，９７５号、同第６，０１０，７１５号、同第５，９８５，３１７号、同第５，９８３，１３４号、同第５，９４８，４３３号及び同第５，８６０，９５７号に開示される。
【０２７７】
特定の具体例において、本明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分を含む医薬組成物は凍結乾燥された粉末であり、これは、溶液、エマルジョン及び他の混合物として投与用に再構成できる。また、凍結乾燥された粉末は固体又はゲルとして復元及び製剤化できる。凍結乾燥された粉末は、この明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分、又はその薬学的に許容される誘導体を適切な溶媒に溶解することにより製造される。いくつかの具体例において、凍結乾燥された粉末は滅菌状態である。溶媒は粉末又は粉末から製造され、再構成溶液の安全性又は他の薬理学的成分を改善する賦形剤を含むことができる。使用可能な賦形剤は、これに制限されるものではないが、デキストロース、ソルビトール、フルクトース、コーンシロップ、キシリトール、グリセリン、グルコース、スクロース又は他の適切な製剤を含む。また、溶媒は、一具体例において、弱中性ｐＨのバッファー、例えばクエン酸塩、リン酸ナトリウム又はカリウムリン又は当業者に知られた他のバッファーを含むことができる。溶液の後続滅菌濾過に続く当業者に公知となった標準条件下の凍結乾燥は所望の製剤を提供する。いくつかの具体例において、得られた溶液は凍結乾燥用バイアルに配分されることができる。各バイアルは化合物の単回投与量又は複数回投与量を含むことができる。凍結乾燥された粉末は適切な条件の下で、例えば約４℃〜室温で保管されることができる。
【０２７８】
注射用水によるこの凍結乾燥された粉末の再構成は非経口投与用として使用するための製剤を提供する。再構成のために、凍結乾燥された粉末は滅菌水又は他の適切な担体に添加される。正確な量は選択された化合物による。このような量は経験で決定されることができる。
【０２７９】
また、本明細書に開示される抗体又はその抗原結合部分、二重特異性分子、又は免疫抱合体及びこの明細書に提示される他の組成物は、治療対象の特定の組職、受容体、又は他の身体領域に標的化するように製剤化されることができる。多くの標的化方法が当業者によく公知となっている。このような標的化方法を本組成物に使うことが考慮される。標的化方法の非制限的例は、アメリカ特許第６，３１６，６５２号、同第６，２７４，５５２号、同第６，２７１，３５９号、同第６，２５３，８７２号、同第６，１３９，８６５号、同第６，１３１，５７０号、同第６，１２０，７５１号、同第６，０７１，４９５号、同第６，０６０，０８２号、同第６，０４８，７３６号、同第６，０３９，９７５号、同第６，００４，５３４号、同第５，９８５，３０７号、同第５，９７２，３６６号、同第５，９００，２５２号、同第５，８４０，６７４号、同第５，７５９，５４２号及び第５，７０９，８７４号を含む。特定の具体例において、本明細書に開示される抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体又はその抗原結合部分は線維症及び／又は線維症に関連した疾患又は状態を治療するために使われることができる。
【０２８０】
生体内投与に使われる組成物は滅菌されることができる。例えば、滅菌濾過膜を用いる濾過によって易しく滅菌されることができる。
【０２８１】
ＩＸ．キット
本明細書に開示される１個以上の抗体、又はその抗原結合部分、二重特異性分子、又はその免疫抱合体を含むキットが開示される。いくつかの具体例において、本明細書に開示される１個以上の抗体又はその抗原結合部分のような医薬組成物の成分の１個以上で満たされた１個以上の容器、選択的な使用指示を含む薬学的パック又はキットが開示される。いくつかの具体例において、キットはこの明細書に開示される医薬組成物及び任意の予防又は治療剤を含む。
【０２８２】
（実施例）
以下の実施例で次の実験方法及び詳細な内容を参考する。
【０２８３】
（実施例１：ヒトＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の発現及び精製）
組み換えヒトＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を生成及び精製し、精製されたタンパク質を結合親和性分析に基づく抗体スクリーニング分析に使った。まず、ＦＡＭ１９Ａ５遺伝子を含むＬＰＳ−ｈＴプラスミドをバクテリアに形質転換してタンパク質過剰発現を誘導した。生成されたＦＡＭ１９Ａ５タンパク質をＮｉ−ＮＴＡ親和性クロマトグラフィー（Ｑｉａｇｅｎ，Ｖａｌｅｎｃｉａ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使って精製した。イミダゾールを徐々に高い濃度にしてＮｉカラムからＨｉｓタグされたＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を除去した。溶液中のタンパク質発現をクマシーブリリアントブルー（Ｃｏｏｍａｓｓｉｅ  Ｂｒｉｌｌｉａｎｔ  Ｂｌｕｅ）Ｒ−２５０染料を使って測定した。ＦＡＭ１９Ａ５イミダゾール含有溶液のみ取り、ＰＢＳを使ってＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を濃縮した。濃縮が完了したとき、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の純度及び濃度をウェスタンブロッティング分析で測定した。ついで、濃縮されたタンパク質を使ってＦＡＭ１９Ａ５特異的抗体に対してスクリーニングした。
【０２８４】
（実施例２：抗体ライブラリＦＡＭ１９Ａ５の生成）
ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質をニワトリの免疫化用抗原として使った。合成ペプチドＫＬＨコンジュゲート５０μｇを７５０μＬリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）に混合し、３０分間３７℃でインキュベーションした。その後、２％スクアレン内毒素ＭＰＬ（モノホスホリレート脂質Ａ種）で毒素を除去し、油中水エマルジョンアジュバント（ＲＩＢＩ＋ＭＰＬ＋ＴＤＭ＋ＣＷＳアジュバント、Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ，ＵＳＡ）を含むＴＤＷ及びＣＷＳの細胞壁成分のミコバクテリアをエマルジョン化し、これを後で３匹のニワトリに皮下注射した。ニワトリは免疫化の間におよそ２−３週の間隔で総３回免疫化した。免疫化されたニワトリから得られた抗体の力価を、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質を過剰発現したＨＥＫ２９３Ｔ細胞の細胞溶解物を使って免疫ブロッティングで測定した。３回免疫化されたニワトリの血清を１次抗体として使った。使用された２次抗体はＨＲＰ（西洋ワサビペルオキシダーゼ）（兎抗ニワトリＩｇＧ（Ｙ）−ＨＲＰ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｂｉｌｌｅｒｉａ，ＭＡ，ＵＳＡ）にコンジュゲートされた抗ニワトリＩｇＧ（Ｙ）ポリクローナル抗体であった。
【０２８５】
免疫化されたニワトリから単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を製造した。ＴＲＩ試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏ−ｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使い、前述した免疫化されたニワトリの脾臓、骨髄及び滑液嚢からＲＮＡを抽出した。Ｏｌｉｇｏ−ｄＴプライマーとＳｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔＴＭ  ＩＩＩＦｉｒｓｔ−Ｓｔｒａｎｄ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使って第１本ｃＤＮＡを合成した。ニワトリの免疫システムから得られたｃＤＮＡに対し、Ｅｘｐａｎｄ  Ｈｉｇｈ  Ｆｉｄｅｌｉｔｙ  ＰＣＲ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｒｏｃｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＩＮ，ＵＳＡ）を使って単鎖可変領域ライブラリを生成した。各反応で、ｃＤＮＡ１μＬ、各プライマー６０ｐｍｏｌ、１０×反応バッファー溶液１０μＬ、８μＬの２．５ｍＭ  ｄＮＴＰ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ，ＵＳＡ）、及びＴａｑ  ＤＮＡポリメラーゼ０．５８μＬを水と混合した。最終体積は１００μＬであった。ＰＣＲ反応を次の条件の下で遂行した：３０サイクル、（ｉ）９４℃で１５秒、（ｉｉ）５６℃で３０秒、及び（ｉｉｉ）７２℃で９０秒、その後７２℃で１０分間の最終拡張。約３５０ｂｐの長さを有する断片を含むＰＣＲ生成物を１．５％アガロースゲル上にローディングし、電気泳動後、ＱＩＡＧＥＮ  Ｇｅｌ  ＩＩ抽出キット（ＱＩＡＧＥＮ，Ｖａｌｅｎｃｉａ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使ってヌクレオチド断片を精製した。精製されたＰＣＲ生成物をＯＤ  ２６０ｎｍで判読して定量した（１ユニットＯＤ＝５０μｇ／ｍＬ）。
【０２８６】
２次ＰＣＲからの２個のＶＨ及びＶＬ第１生成物を重畳拡張ＰＣＲ（Ｏｖｅｒｌａｐ  ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ  ＰＣＲ）によって無作為に連結した。各ＰＣＲ反応物を１００ｎｇの精製されたＶＬ及びＶＨ生成物、各プライマー６０ｐｍｏｌ、１０×反応バッファー１０μＬ、８μＬの２．５ｍＭ  ｄＮＴＰ、Ｔａｑ  ＤＮＡポリメラーゼ０．５μＬ及び水と１００μＬの最終体積で混合した。ＰＣＲを次の条件の下で遂行した：２５サイクル、（ｉ）９４℃で１５秒、（ｉｉ）５６℃で３０秒、及び（ｉｉｉ）７２℃で２分、その後７２℃で１０分間の最終拡張。約７００ｂｐの長さを有する単鎖可変領域断片を含むＰＣＲ生成物を１．５％アガロースゲル上にローディングし、電気泳動後、ＱＩＡＧＥＮ  Ｇｅｌ  ＩＩ抽出キット（ＱＩＡＧＥＮ）を使ってヌクレオチド断片を精製した。精製されたＰＣＲ生成物をＯＤ２６０ｎｍで判読して定量した（１ユニットＯＤ＝５００．５μｇ／ｍＬ）。
【０２８７】
ＰＣＲ生成物のｓｃＦｖ断片とベクターｐＣｏｍｂ３Ｘ−ＳＳ（Ｔｈｅ  Ｓｃｒｉｐｐｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＣＡ、ＵＳＡ）をＳｆｉ  Ｉ制限酵素で切断（ｄｉｇｅｓｔ）した。精製された重畳ＰＣＴ生成物１００．５μｇをＳｉｆ  Ｉ  ３６０ユニット（１６ユニット当たりμｇ  ＤＮＡ、Ｒｏｃｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｐｌｅａｓａｎｔｏｎ，ＣＡ，ＵＳＡ）、１０×反応バッファー２０μＬ及び水と最終体積２００μＬで混合した。ｐＣｏｍｂ３Ｘ−ＳＳベクター２０μｇをＳｆｉ  Ｉ１２０ユニット（６ユニット当たりμｇ  ＤＮＡ）、１０×反応バッファー２０μＬ及び水と最終体積２００μＬで混合した。混合物を８時間の間に５０℃で切断した。その後、ｓｃＦｖ断片（約７００ｂｐ）及びベクター（約３４００ｂｐ）を含む切断された生成物を１％アガロースゲル上にローディングし、ゲル抽出キットＩＩ  ＱＩＡＧＥＮ（ＱＩＡＧＥＮ，Ｖａｌｅｎｃｉａ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使って精製した。Ｓｆｉ  Ｉ制限されたｐＣｏｍｂ３Ｘベクター１４００ｎｇと切断されたｓｃＦｖ断片７００ｎｇを５×リガーゼバッファー、１０μＬのＴ４  ＤＮＡリガーゼ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ，ＵＳＡ）及び水と最終体積２００μＬで混合した。混合物を１６時間の間に１６℃でインキュベーションしてライゲーション（ｌｉｇａｔｉｏｎ）を遂行した。
【０２８８】
エタノールで沈澱した後、ＤＮＡペレットを水１５μＬに溶解した。ライブラリを生成するために、ライゲーションサンプルを大腸菌（Ｅ．  ｃｏｌｉ）菌株ＥＲ２７３８（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ  Ｉｎｃ．，Ｈｉｔｃｈｉｎ，Ｈｅｒｔｆｏｒｄｓｈｉｎｅ，ＳＧ４ＯＴＹ，Ｅｎｇｌａｎｄ，ＵＫ）にバイブレーター遺伝子（遺伝子パルサー：Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使って電気穿孔によって形質転換した。細胞をスーパーブロス（ＳＢ）培地５ｍＬと混合し、３７℃で１時間の間に２５０ｒｐｍで撹拌しながらインキュベーションした。その後、１００ｍｇ／ｍＬカナマイシン３μＬをＳＢ培地１０ｍＬに添加した。ライブラリサイズを決定するために、培養物サンプル０．１μＬ、１μＬ及び１０μＬを５０μｇ／ｍＬカナマイシンを含むルリアブロス（ＬＢ）寒天板上に擦って塗った。１時間の撹拌後、１００ｍｇ／ｍＬカナマイシン４．５μＬをＬＢ培養物に添加し、さらに１時間撹拌した。その後、水中のＶＣＭ１３ヘルパーファージ２ｍＬ（＞１０１１ｃｆｕ／ｍＬ）を１００ｍｇ／ｍＬカナマイシン９２．５μＬを含む予熱されたＬＢ（１８３ｍＬ）とともにＬＢ培地に添加した。この混合物をさらに２時間の間に３７℃で２５０ｒｐｍで撹拌した。ついで、カナマイシン２８０μＬ（５０ｍｇ／ｍＬ）を培養物に添加し、３７℃でひと晩撹拌した。翌日、バクテリアペレットを高速遠心分離機（Ｂｅｃｋｍａｎ、ＪＡ−１０ローター）を使い、４℃、３，０００ｇで遠心分離した。その後、バクテリアペレットを使ってファージミドＤＮＡを抽出し、上澄み液は滅菌遠心分離瓶に移した。その後、ポリエチレングリコール−８０００（ＰＥＧ−８０００、Ｓｉｇｍａ）８ｇと塩化ナトリウム６ｇを上澄み液に添加した後、氷内で３０分間維持した。その後、上澄み液を４℃、１５，０００ｇで１５分間遠心分離した。その後、上澄み液を捨て、ファージペレットを緩衝食塩水（ＴＢＳ）で懸濁した。
【０２８９】
（実施例３：免疫化された抗原に対するライブラリパニング（バイオパニング）（ｂｉｏ−ｐａｎｎｉｎｇ））
磁気ビード（Ｄｙｎａｂｅａｄｓ  Ｍ−２７０  Ｅｐｏｘｙ，Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使ってバイオパニングを遂行した。およそ１×１０７ビードを室温で２０時間の間にタンパク質とともに回転撹拌することにより、組み換えＦＡＭ１９Ａ５タンパク質５μｇでコーティングした。コーティングが完了すれば、ビードをリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で４回洗浄し、室温で３％ＢＳＡを含むＰＢＳ内で１時間遮断した。その後、コーティングされたビードを前述したファージディスプレイされたｓｃＦｖとともに室温で２時間培養した。抗原コーティングされたビードに結合されなかったファージを除去するために、ビードを０．０５％Ｔｗｅｅｎ  ２０／ＰＢＳで洗浄した。その後、結合されたファージを５０μＬの０．１Ｍグリシン／塩化水素（０．１Ｍグリシン−ＨＣｌ、ｐＨ２．２）で溶出し、塩化水素とともに２Ｍ  Ｔｒｉｓ（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ９．１）３μＬで中和させた。このファージ含有上澄み液を使って大腸菌ＥＲ２７３８細胞を感染させ、ＶＣＳＭ１３ヘルパーファージを使用してひと晩増幅して救済した。また、５０μｇ／ｍＬカナマイシンを含むＬＢ寒天板上にファージ感染された培養物をブロッティングすることにより、ファージ感染された培養物からのファージ力価によって投入（インプット）及び生成（アウトプット）を決定した。翌日、ＰＥＧ−８０００とＮａＣｌを使ってファージを沈澱させ、ついでこれをバイオパニングに使った。バイオパニングは前記過程を繰り返して総５回遂行した。各増幅でファージをスクリーニングし、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質に対する高親和性を選択した。
【０２９０】
（実施例４：ファージＥＬＩＳＡによるクローンの選択）
バイオパニングから選択されたクローンを分析するために、ファージディスプレイされたｓｃＦｖから個別クローンを無作為に選択し、ＥＬＩＳＡを使ってクローンがＦＡＭ１９Ａ５組み換えタンパク質に結合することを確認した。ＦＡＭ１９Ａ５組み換えタンパク質を０．１Ｍ  ＮａＨＣＯ３バッファーに希釈し、タンパク質をウェル当たり１００ｎｇ使い、１６時間の間に４℃で９６ウェルマイクロタイタープレートをコーティングした。翌日、プレートを１時間の間に３７℃で３％ＢＳＡ／ＰＢＳで遮断した。その後、ファージ上澄み液を６％ＢＳＡ／ＰＢＳと混合し、３７℃で２時間培養した。その後、上澄み液を含むプレートを０．０５％Ｔｗｅｅｎ  ２０／ＰＢＳで洗浄した。ＨＲＰコンジュゲートされたＭ１３抗体（ａ−Ｍ１３−ＨＲＰ，Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ，ＵＳＡ）を１／５０００に希釈した。希釈された抗体５０μＬをプレートに添加し、３７℃で１時間インキュベーションした。インキュベーション及び洗浄の後、色展開のために、プレートに０．０５Ｍクエン酸緩衝液、１μｇ／ｍＬの２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリル−６−スルホン酸）（ＡＢＴＳ，Ａｍｒｅｓｃｏ，Ｓｏｌｏｎ，ＯＨ，ＵＳＡ）、及び０．１％Ｈ２Ｏ２を添加した。各ウェルに対する吸光度を４０５ｎｍで測定した。
【０２９１】
ＦＡＭ１９Ａ５組み換えタンパク質に結合するとともに高吸光度を示す２４個クローンを分析した。２４個のクローンから独特の配列を有する１３個のｓｃＦｖクローンを得た。クローンの追加選択後、最高の親和性を有するクローン１−６５を得た。
【０２９２】
（実施例５：抗ＦＡＭ１９Ａ５−ＩｇＧ２／４抗体の生成）
抗ＦＡＭ１９Ａ５  ｓｃＦｖを哺乳類発現ベクターにサブクローニングした。ＦＡＭ１９Ａ５  ｓｃＦｖ遺伝子配列で、ヒトＣκ遺伝子を軽鎖可変領域に連結し、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３遺伝子のヒト兔疫グロブリンアイソタイプＩｇＧ２／４を重鎖可変領域に連結した。制限部位（Ｇｅｎｓｃｒｉｐｔ，ＵＳＡ）を添加することにより、各軽鎖と各重鎖を有する抗体を合成した。クローニングを容易にするために、合成された遺伝子を変形された制限部位を有する哺乳類細胞発現ベクターに挿入した。まず、軽鎖遺伝子をＨｉｎｄ  ＩＩＩ及びＸｂａＩ（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ，ＵＫ）制限酵素を使ってベクターに挿入し、ついでＮｈｅＩ及びＢａｍＨＩ（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ，ＵＫ）制限酵素を使ってベクターに重鎖遺伝子を添加した。
【０２９３】
抗ＦＡＭ１９Ａ５−ＩｇＧ２／４抗体を発現及び精製するために、哺乳類細胞トランスフェクション及び過剰発現注射システムを使った。細胞培養体積の１／１０に相応する１５０ｍＭ塩化ナトリウム（ＮａＣｌ、Ｍｅｒｃｋ）内で２μｇ／ｍＬの哺乳類発現ベクターと４μｇのポリエチレンイミン（ＰＥＩ，Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｗａｒｒｉｎｇｔｏｎ，ＰＡ，ＵＳＡ）を混合した。混合物を室温で１５分間放置した。混合物をＨＥＫ２９３Ｆ細胞（２×１０６細胞／ｍＬ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に加え、ついでこれを７％ＣＯ２及び３７℃で６日間１３５ｒｐｍの撹拌条件で１００Ｕ／ｍＬペニシリン及びストレプトマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含むＦｒｅｅｓｔｙｌｅＴＭ  ２９３発現培地でインキュベーションした。細胞培養上澄み液から発現した抗ＦＡＭ１９Ａ５  ＩｇＧ２／４抗体を精製するために、タンパク質Ａビード（ＲｅｐｌｉＧｅｎ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ，ＵＳＡ）親和性ゲルクロマトグラフィーを使った。タンパク質Ａクロマトグラフィーは４−１２％Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓ勾配ゲル電気泳動上で展開された。タンパク質の大きさ及び収率をクマシーブリリアントブルー染色で確認した。
【０２９４】
（実施例６：肝線維症での血清分析）
肝線維症でのＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準を評価するために、肝線維症のラットモデル（すなわち、胆管結紮（ＢＬＤ）誘導肝線維症Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラットモデル）を使った（Kountouras et al., Br J Exp Path 65:305-311 (1984)参照）。簡単に言えば、動物をケタミンとキシラジンで痲酔した。１．５ｃｍ中間腺切開を遂行し、総胆管を位置させ、３−０絹糸結紮で二重結紮を遂行した。その後、肝線維症誘導後２１日目に動物から全血を収集し、全血から血清を分離した。
【０２９５】
血清中のＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準をＦＡＭ１９Ａ５サンドイッチＥＬＩＳＡ分析で測定した。９６ウェルＥＬＩＳＡプレートを、１００μＬ体積１−６５ヒトＩｇＧ１抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体で１μｇ／ｍＬでひと晩コーティングした。その後、プレートをＰＢＳで洗浄し、ついで室温で１時間の間にＰＢＳ中の１％ＢＳＡで遮断した。その後、プレートをＰＢＳで再洗浄し、およそ１００μＬの標準物質とサンプルを適切なウェルに分配した。その後、プレートを２時間の間に室温でインキュベーションした。その後、プレートを０．０５％ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ  ２０（すなわち、洗浄バッファー）で洗浄し、およそ１００μＬの検出抗体（西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）コンジュゲートされたヤギａ−兎ＩｇＧ抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ、Ｃａｔ  ＃  ＳＣ−２０３０）、ＰＢＳ中の１％ＢＳＡに１：５０００希釈）をウェルに添加した。プレートを１時間の間に室温でさらにインキュベーションした。洗浄バッファーで追加洗浄した後、およそ１００μＬのＯ−フェニレンジアミンジヒドロクロリド（ＯＰＤ）基質を各ウェルに添加し、プレートを室温で放置して展開させた。約１０分後、およそ１００μＬの１Ｎ  Ｈ２ＳＯ４（硫酸）をウェルに添加して反応を中断させた。吸光度を９６ウェルマイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅ，Ｖｅｒｓａ  Ｍａｘ）を用いて４９２ｎｍの波長で測定した。
【０２９６】
図１に示したように、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準は、正常（非ＢＤＬ誘導）ラットの水準に比べ、ＢＤＬ誘導肝線維症ＳＤラット（“疾患モデル”）の血清で３倍以上も高かった。
【０２９７】
（実施例７：肺線維症での血清分析）
ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準が肺線維症でも増加したかを評価するために、気管内注射でブレオマイシン３ｍｇ／ｋｇを投与することにより、７週齢の雄性ＳＤラットに特発性肺線維症を誘導した。ブレオマイシン投与後２４日目に動物から全血を収集し、全血から血清を分離した。血清中のＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準を、前記実施例６で提示したように、ＦＡＭ１９Ａ５サンドイッチＥＬＩＳＡ分析で測定した。図２に示したように、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準は、正常（特発性肺線維症なし）ラットの水準に比べ、肺線維症誘導されたＳＤラット（“疾患モデル”）の血清で１．５倍以上も高かった。
【０２９８】
（実施例８：ヒト肝線維症患者の血清分析）
肝細胞の損傷時、血清でのＡＳＴ及び／又はＡＬＴ水準が増加することができ、このような増加は主に肝損傷を示唆するものとして思われる（Gowda et al., Pan Afr Med J 3:17 (2009); Giannini et al., Arch Intern Med 163:218-224 (2003)参照）。しかし、損傷が深刻なとき（例えば、肝硬変）ＡＳＴ及びＡＬＴ水準を正常として示すことができる。よって、ＦＡＭ１９Ａ５発現が肝損傷のより良い指標であるかを評価するために、肝硬変が確認されたヒト患者の血清に対してＦＡＭ１９Ａ５サンドイッチＥＬＩＳＡ分析でＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準を測定した。
【０２９９】
２−１３抗ＦＡＭ１９Ａ５ヒトＩｇＧ１抗体を５０ｍＭ炭酸塩バッファー（Ｂｉｏ−Ｗｏｒｌｄ，Ｃａｔ．Ｃ２０７０−９．６，Ｌｏｔ．Ｃ７０−９．６１６Ｚ１１Ｃ）中に１μＬ／μＬの濃度で再構成した。その後、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体をＰＢＳ中に１：１０００の比率で希釈し、ついでこれで９６ウェルＥＬＩＳＡプレートをひと晩コーティングした。翌日、プレートをＰＢＳで洗浄し、ついで約１時間の間に室温でＰＢＳ中の１％ＢＳＡで遮断した。その後、プレートをＰＢＳで再洗浄し、およそ１００μＬの標準物質とサンプルを適切なウェルに分配した。プレートを２時間の間に室温でインキュベーションした。その後、プレートを０．０５％ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ  ２０（すなわち、洗浄バッファー）で洗浄した。その後、１μｇ／μＬの濃度で再構成された３−２抗ＦＡＭ１９Ａ５マウスＩｇＧ２ａ抗体をＰＢＳ中の１％ＢＳＡに１：２０００の比率で希釈した。この希釈された略１μＬの抗体を各ウェルに添加し、プレートを室温で２時間の間にさらにインキュベーションした。洗浄バッファーでさらに洗浄した後、およそ１００μＬの西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）コンジュゲートされたろ馬α−マウスＩｇＧ抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂ，Ｃａｔ．７１５−０３５−１５１，Ｌｏｔ．１２２４０１）（ＰＢＳ中の１％ＢＳＡに１：５０００希釈）をウェルに添加した。その後、プレートを室温で１時間の間にインキュベーションした。インキュベーションの後、プレートを洗浄バッファーで洗浄し、およそ１μＬの１−ＳＴＥＰＴＭ  Ｕｌｔｒａ  ＴＭＢ−ＥＬＩＳＡ気質溶液（Ｐｉｅｒｃｅ，Ｃａｔ．３４０２８，Ｌｏｔ．ＱＪ２０４３６５４０）を各ウェルに添加した。１０分間インキュベーションした後、およそ１００μＬの１Ｎ  Ｈ２ＳＯ４（硫酸）をウェルに添加して反応を中断させた。吸光度を、９６ウェルマイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅ，Ｖｅｒｓａ  Ｍａｘ）を用いて４５０ｎｍの波長で測定した。
【０３００】
図３に示したように、肝硬変を有する患者は、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質水準が正常の元気な個体の血清で観察されたものよりおよそ２−６倍高かった。このようなデータは前述した動物研究と一致し、ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の血清濃度が肝硬変に対する理想的な診断マーカーであり得ることを示す。
【０３０１】
（実施例９：心筋梗塞に対する効果分析）
心筋梗塞の進行中に起こる虚血性細胞死は修復反応をもたらし、このとき、損傷された組職が線維症傷跡に代替される。その後、周辺組職の再形成（例えば、左心室壁の薄肉化及び心室膨脹）が続き、結局心臓機能が損傷される（Talman et al., Cell Tissue Res 365(3):563-581 (2016); Firth et al., Cardiovasc Drugs Ther 4:1363-1374 (1990)参照）。心筋梗塞に対する抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の効果を評価するために、マウ虚血性再灌流モデルを使った。簡単に言えば、Ｂａｌｂ／ｃＡｎＮＣｒｌｊＯｒｉマウス（６週齢、雄性）（Ｏｒｉｅｎｔ  Ｂｉｏ  Ｉｎｃ．，Ｓｅｏｕｌ，Ｓｏｕｔｈ  Ｋｏｒｅａ）を購入し、およそ１週間の間に特定の病源菌無含有（ＳＰＦ）の条件の下で飼育した。その後、マウスをＺｏｌｅｔｉｌ  ５０（ＶＩＲＢＡＣ，Ｆｒａｎｃｅ）とキシラジン（Ｒｏｍｐｕｎ（登録商標）、Ｂａｙｅｒ  ＡＧ，Ｇｅｒｍａｎｙ）で深く痲酔した。痲酔された後、開胸術をマウスに施行して冠状動脈を露出させ、７−０縫合糸とＰＥ２０チューブを使って動脈を結紮して心筋梗塞を誘導した。虚血状態を４０分間維持し、このとき、ＰＥ２０チューブを除去して血液を再灌流させた。心筋梗塞誘導後３日目から抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（１−６５、３−２、又は１−２８抗体）を静脈内注射でマウスに投与し、毎週総３回注射した。ナイーブ（すなわち、元気な）マウスとＮＨＩマウスを対照群として使った。
【０３０２】
心筋梗塞誘導後２１日目にマウスを殺して心臓を収去した。心臓組職を１０％ホルマリン溶液に固定した。その後、固定された心臓組職を頂部付近で２ｍｍ厚さで横方向にスライスしてパラフィンブロックに入れ、これを５μｍ切片にさらにスライスしてガラス組職スライド上に装着して分析した。心臓組職サンプルに対してヘマトキシリン及びエオシン（Ｈ＆Ｅ）染色を遂行し、心筋梗塞関連組職再形成に対するそれぞれの抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（すなわち、１−６５、３−２、及び１−２８抗体）の効果を評価した。
【０３０３】
予想通りに、ＮＨＩ対照群グループからの心臓組職は左心室の有意な膨脹と左心室壁の薄肉化を示した（図４（“ＮＨＩ”）参照）。対照的に、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が投与されたマウスからの心臓組職はナイーブ（“元気な”）動物からの心臓組職と類似した（すなわち、左心室の膨脹減少及び左心室壁組職の保存）。
【０３０４】
この効果を確認するために、コラーゲンを染色するマッソントリクローム染色を心臓組職切片に遂行した。前述したように、コラーゲンは細胞外基質（ＥＣＭ）の主要成分であるので、組職サンプルで増加したコラーゲン蓄積部のマッソントリクローム染色は線維症の明確な指標であり得る。光学顕微鏡（Ｏｌｙｍｐｕｓ  ＢＸ５３，Ｊａｐａｎ）を使って染色されたスライドを撮影し、全体左心室領域に対する線維性領域の比率をイメージ分析機で計算した。
【０３０５】
図５ａに示したように、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が投与されたマウスはＮＨＩ対照群グループに比べてコラーゲンの蓄積がよほど少なかった。抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体治療群では、全体左心室領域のおよそ１０−１５％が線維性組職からなった（図５ｂ参照）。対照的に、ＮＨＩ対照群グループのマウスでは、線維性領域が全体左心室領域のおよそ２０％を構成した。相異なるＦＡＭ１９Ａ５抗体の中でも１−６５抗体が最大効果を有することが現れた。
【０３０６】
総合すれば、前記結果は、心筋梗塞直後、ＦＡＭ１９Ａ５抗体の投与が組職再形成及び纎維形成を大きく改善することができることを証明する。
【０３０７】
（実施例１０：ＤＭＮ（ジメチルニトロソアミン）媒介線維症モデルにおける抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の抗線維症効果）
抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の抗線維症効果を評価するために、肝線維症動物モデルを使った。簡単に言えば、ジメチルニトロソアミン（ＤＭＮ）（１０ｍｇ／ｍＬ／ｋｇの濃度で食塩水に希釈）を４週連続して３日間（毎日１回）腹腔内注射でラットに投与した。最初ＤＭＮ投与後５週目から動物は２週間毎週１回で対照群ヒトＩｇＧ抗体又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が投与された（図６ａ参照）。その後、最後の抗体投与後、その週に（すなわち、最初ＤＭＮ投与後７週目）動物を殺し、採血し、肝組織を収去した。得られた肝組織を１０％緩衝中性ホルマリンに固定した。その後、組職をパラフィンで包埋して、スライスされた組職切片（約４−５μｍ厚さ）を得た。
【０３０８】
肝線維症の進行は細胞外基質の蓄積によって確認することができる。これは細胞外基質の典型的な成分であるコラーゲンを選択的に染色させるシリウスレッド染色によって確認することができる。よって、動物における線維症進行程度を評価するために、スライスされた組職切片をシリウスレッド染色で染色し、顕微鏡を用いて１００×倍率で撮影した。その後、染色された肝組織切片内でのシリウスレッド陽性細胞の相対的頻度をイメージ分析機（Ｉｍａｇｅ  Ｐｒｏ  Ｐｌｕｓ  ７．０，ＭｅｄｉａＣｙｂｅｒｎｅｔｉｃｓ，ＵＳＡ）を使って決定した。
【０３０９】
図６ｂ及び図６ｃに示したように、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（Ｇ３）が投与されたＤＭＮ処置された動物の肝は、対照群（ヒトＩｇＧ）抗体（Ｇ２）が投与された動物に比べ、シリウスレッド陽性染色を有する領域が有意に減少した。この結果は、抗ＦＡＭ１９Ａ５投与が肝線維症組職でのＤＭＮ誘導コラーゲンの生成を阻害することができることを示唆する。
【０３１０】
前記結果を確認するために、タイプＩコラーゲンに対する免疫組職化学染色をスライスされた組職切片に対しても遂行した。簡単に言えば、スライスされた組職切片をタイプＩコラーゲンに対して染色し、顕微鏡を使って１００×倍率で撮影した。その後、全体染色された組職切片に対して陽性タイプＩコラーゲン発現を有する領域のパーセントをイメージ分析機（Ｉｍａｇｅ  Ｐｒｏ  Ｐｌｕｓ  ７．０，ＭｅｄｉａＣｙｂｅｒｎｅｔｉｃｓ，ＵＳＡ）で決定した。図６ｄ及び図６ｅに示したように、対照群抗体が投与された動物に比べ、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が投与された動物は、肝でのタイプＩコラーゲン染色が有意に減少した。これは、シリウスレッド染色からの結果を確認させる。
【０３１１】
追加の確認として、また、免疫組職化学を用いて肝線維症の発生及び進行において重要な因子である形質転換成長因子ベータ（ＴＧＦ−β）生成を定量した。簡単に言えば、スライスされた組職切片をＴＧＦ−βに対して染色し、顕微鏡を使って１００×倍率で撮影した。その後、全体染色された組職切片に対し、陽性ＴＧＦ−β発現を有する領域のパーセントをイメージ分析機（Ｉｍａｇｅ  Ｐｒｏ  Ｐｌｕｓ  ７．０，ＭｅｄｉａＣｙｂｅｒｎｅｔｉｃｓ，ＵＳＡ）を使って決定した。図７ａ及び図７ｂに示したように、対照群抗体で治療された動物に比べ、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が投与されたＤＭＮ処置された動物の肝でのＴＧＦ−β生成が有意に減少した。
【０３１２】
総合すれば、前記データは、ＤＭＮによって誘導された肝線維症の動物モデルにおいて、抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体がコラーゲンとＴＧＦ−βの生成をともに阻害することができることを示し、これはこの抗体の抗線維症効果を証明する。
【０３１３】
概要及び要約部分を含む詳細な説明部分は請求範囲を解釈するために使用されるようにすることが認められなければならない。概要及び要約部分は本発明者（ら）によって考察されたように、本発明の全部ではないが、１個以上の例示的な具体例を提示することができ、よって本発明と添付の請求項を決して制限しようとするものではない。
【０３１４】
本発明は明示された機能と及びその関係の実施を例示する機能的構成要素の助けにより以上で開示された。この機能的構成要素の境界は説明の便宜のためにこの明細書で任意に定義された。明示された機能とこの関係が適切に遂行される限り、代替の境界も定義されることができる。
【０３１５】
特定の具体例についての前述した説明は本発明の一般的な性質を充分に明らかにするものであり、第３者は当該分野の知識を適用することにより、本発明の一般的な概念から逸脱しなくて過度な実験なしに、このような特定の具体例を多様な用途に合わせて易しく変形及び／又は改造することができる。よって、このような改造及び変形はこの明細書に提示された教示及び指針に基づいて開示された具体例の等価物の意味及び範囲内にあるであろう。本明細書で使用される文句又は用語は制限するためのものではなくて説明のためのものであることが理解されなければならなく、本明細書の用語又は文句は教示及び指針を考慮して当業者によって解釈されなければならない。
【０３１６】
本発明の範囲及び領域は前述された例示の具体例のいずれかによって制限されてはいけなく、請求項及びその等価物によってのみ限定されなければならない。
【０３１７】
本明細書で引用された全ての刊行物、特許、特許出願、インターネットサイト及び受託番号／データベース配列（ポリヌクレオチドとポリペプチド配列の両者を含み）はそれぞれの個別刊行物、特許、特許出願、インターネットサイト又は受託番号／データベース配列が参考として含まれるように具体的にかつ個別的に指示されたものと同じ程度に全ての目的のためにその全部を参照することによりこの明細書に組み込まれる。
【０３１８】
このＰＣＴ出願は２０１７年６月２７日付で提出されたアメリカ仮出願第６２／５２５，６３３号及び２０１７年１１月７日付で提出された同第６２／５８２，８８６号の優先権の利益を主張し、その全部を参照することによりこの明細書に組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【０３１９】
【図１】元気なラット（“正常”、ｎ＝３）に対する胆管結紮（ＢＤＬ）によって誘導された肝線維症を有するラット（“疾患モデル”、ｎ＝５）の血清中のＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準の比較を示す。ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準は正常対照群動物で観察された水準を超える倍数変化として示される。“＊”は正常対照群動物に比べて統計的に有意な差（ｐ＜０．００５）を表示する。
【図２】元気なラット（“正常”、ｎ＝５）に対する３ｍｇ／ｋｇブレオマイシンの気管内注射によって誘導された特発性肺線維症を有するラット（“疾患モデル”、ｎ＝５）の血清中のＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準の比較を示す。ＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準は正常対照群動物で観察された水準を超える倍数変化として示される。“＊”は正常対照群動物に比べて統計的に有意な差（ｐ＜０．００５）を表示する。
【図３】確認された肝線維症、例えば肝硬変を有するヒト（患者＃１−１０）及び元気な個体（正常＃１−３）の血清中のＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の水準の倍数変化を示す。各棒グラフ上に表示された値は元気な個体の血清で検出されたＦＡＭ１９Ａ５タンパク質の平均濃度を超える倍数変化を表示する。
【図４】対照群抗体（“ＮＨＩ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“１−６５”、“３−２”及び“１−２８”）で治療された心筋梗塞誘導動物の左心室組職のＨ＆Ｅ（ヘマトキシリン及びエオシン）の比較を示す。元気な動物（すなわち、心筋梗塞誘導なし、“ナイーブ”）が追加対照群として使われた。
【図５ａ】心筋梗塞誘導動物の左心室組職でのコラーゲン蓄積の比較を示す。心筋梗塞誘導動物は、対照群抗体（“ＮＨＩ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“１−６５”、“３−２”及び“１−２８”）が投与された。元気な動物（すなわち、心筋梗塞誘導なし、“ナイーブ”）が追加対照群として使われた。図５ａはマッソントリクローム（Ｍａｓｓｏｎ’ｓ  ｔｒｉ−ｃｈｒｏｍｅ）染色を使ってコラーゲン蓄積を示す。
【図５ｂ】心筋梗塞誘導動物の左心室組職でのコラーゲン蓄積の比較を示す。心筋梗塞誘導動物は、対照群抗体（“ＮＨＩ”）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“１−６５”、“３−２”及び“１−２８”）が投与された。元気な動物（すなわち、心筋梗塞誘導なし、“ナイーブ”）が追加対照群として使われた。図５ｂは全体左心室領域に対する線維性領域の比率でコラーゲン蓄積（すなわち、線維性領域）を示す。データは平均±Ｓ．Ｄ．で表示される（グループ当たりｎ＝５−８）。棒上の“＊＊＊／＊＊”は“ナイーブ”グループ（元気な動物）に比べて統計的に有意な差を表示する（それぞれｐ＜０．００１、ｐ＜０．０５）。棒上の“＃”は“ＮＨＩ”グループ（心筋梗塞誘導＋対照群抗体）に比べて統計的に有意な差を表示する（ｐ＜０．０５）。
【図６ａ】ジメチルニトロソアミン（ＤＭＮ）−媒介線維症動物モデルにおける抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体の抗線維症効果を評価するための投与スケジュールを提示する。暗灰色ボックスはＤＭＮが肝線維症を誘導するために動物に投与されたときを示す。薄灰色ボックスは対照群（ヒトＩｇＧ）抗体又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体が投与されたときを示す。
【図６ｂ】対照群抗体（“Ｇ２”、ヒトＩｇＧ）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“Ｇ３”）が投与されたＤＭＮ処置された動物の肝でのコラーゲン生成の比較を示す。代表的なナイーブ／元気な動物（“ＧＩ”）も比較の目的で示す。図６ｂで、コラーゲン生成はシリウスレッド（Ｓｉｒｉｕｓ  Ｒｅｄ）染色（全体コラーゲン染色）によって表示される。図６ｂは対照群抗体（Ｇ２）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（Ｇ３）が投与されたＤＭＮ処置された動物の肝でのシリウスレッド染色の代表的な免疫組職化学イメージを提供する。
【図６ｃ】対照群抗体（“Ｇ２”、ヒトＩｇＧ）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“Ｇ３”）が投与されたＤＭＮ処置された動物の肝でのコラーゲン生成の比較を示す。代表的なナイーブ／元気な動物（“ＧＩ”）も比較の目的で示す。図６ｃで、コラーゲン生成はシリウスレッド（Ｓｉｒｉｕｓ  Ｒｅｄ）染色（全体コラーゲン染色）によって表示される。図６ｃは肝組織切片に対するシリウスレッド−陽性細胞のパーセント（平均±Ｓ．Ｄ．）を提供する。図６ｃではＳＰＳＳ  ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ  １９を使って統計分析が行われた。棒上の“＊＊”は“Ｇ１”グループ（元気な動物）に比べて統計的に有意な差（ｐ＜０．０１）を示す。“＃”及び“＃＃”は対照群抗体（Ｇ２）で治療された動物に比べて統計的に有意な差（それぞれｐ＜０．０５；ｐ＜０．０１）を示す。
【図６ｄ】対照群抗体（“Ｇ２”、ヒトＩｇＧ）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“Ｇ３”）が投与されたＤＭＮ処置された動物の肝でのコラーゲン生成の比較を示す。代表的なナイーブ／元気な動物（“ＧＩ”）も比較の目的で示す。図６ｄで、タイプＩコラーゲンの特異的生成が提供される。図６ｄは対照群抗体（Ｇ２）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（Ｇ３）が投与されたＤＭＮ処置された動物の肝でのタイプＩコラーゲン染色の代表的な免疫組職化学イメージを提供する。
【図６ｅ】対照群抗体（“Ｇ２”、ヒトＩｇＧ）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（“Ｇ３”）が投与されたＤＭＮ処置された動物の肝でのコラーゲン生成の比較を示す。代表的なナイーブ／元気な動物（“ＧＩ”）も比較の目的で示す。図６ｅで、タイプＩコラーゲンの特異的生成が提供される。図６ｅは全体染色された肝組織切片に対するタイプＩコラーゲン発現のパーセント（平均±Ｓ．Ｄ．）を提供する。図６ｅではＳＰＳＳ  ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ  １９を使って統計分析が行われた。棒上の“＊＊”は“Ｇ１”グループ（元気な動物）に比べて統計的に有意な差（ｐ＜０．０１）を示す。“＃”及び“＃＃”は対照群抗体（Ｇ２）で治療された動物に比べて統計的に有意な差（それぞれｐ＜０．０５；ｐ＜０．０１）を示す。
【図７ａ】対照群抗体（Ｇ２）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（Ｇ３）が投与されたＤＭＮ処置された動物の肝でのＴＧＦ−β生成の比較を示す。ナイーブ／元気な動物（ＧＩ）も比較の目的で示される。図７ａは肝サンプルのＴＧＦ−β染色の代表的な免疫組職化学イメージを提供する。
【図７ｂ】対照群抗体（Ｇ２）又は抗ＦＡＭ１９Ａ５抗体（Ｇ３）が投与されたＤＭＮ処置された動物の肝でのＴＧＦ−β生成の比較を示す。ナイーブ／元気な動物（ＧＩ）も比較の目的で示される。図７ｂは肝組織切片に対するＴＧＦ−β発現のパーセント（平均±Ｓ．Ｄ．）を提供する。統計分析はＳＰＳＳ  ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ  １９を使って行われた。棒上の“＊”及び“＊＊”は“Ｇ１”（元気な動物）に比べて統計的に有意な差（それぞれ（ｐ＜０．０５；ｐ＜０．０１）を示す。“＃＃”は対照群抗体（Ｇ２）で治療された動物に比べて統計的に有意な差（ｐ＜０．０１）を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５ａ】
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【図５ｂ】
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【図６ａ】
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【図６ｂ】
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【図６ｃ】
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【図６ｄ】
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【図６ｅ】
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【図７ａ】
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【図７ｂ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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