(57)【要約】  ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を使用する併用療法のための投与レジメンが提供される。例えば、投与レジメンは、（ｉ）ＧＰＣ３標的化剤が投与される負荷期間と、それに続く（ｉｉ）ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤が投与される維持期間を含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＰＤ−１系結合アンタゴニストとの併用療法において使用するための、個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延させるための医薬組成物であって、有効成分としてＧＰＣ３標的化剤を含み、
併用療法が、（ｉ）ＧＰＣ３標的化剤が投与される負荷期間と、それに続く（ｉｉ）ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤が投与される維持期間を含む、医薬組成物。
【請求項２】
ＧＰＣ３標的化剤が、およそ８００ｍｇ／個体〜およそ３，２００ｍｇ／個体の用量で負荷期間内に１回以上投与される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
負荷期間が、２週間以内または１週間以内である、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
負荷期間内に投与されるＧＰＣ３標的化剤の総量が、およそ１，６００ｍｇ／個体〜およそ４，８００ｍｇ／個体である、請求項１から３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
ＧＰＣ３標的化剤が、およそ１，６００ｍｇ／個体の用量で負荷期間内に１回または２回投与される、請求項１から４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
負荷期間内のＧＰＣ３標的化剤の最後の投与と、維持期間内のＰＤ−１系結合アンタゴニストまたはＧＰＣ３標的化剤の最初の投与とが時間的に２〜４日間離れている、請求項１から５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、およそ１，０００ｍｇ／個体〜およそ１，４００ｍｇ／個体の用量で維持期間内に１回以上投与され、ＧＰＣ３標的化剤が、およそ８００ｍｇ／個体〜およそ２，０００ｍｇ／個体の用量で維持期間内に１回以上投与される、請求項１から６のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、およそ１，２００ｍｇ／個体の用量で３週間に１回投与され、ＧＰＣ３標的化剤が、およそ１，６００ｍｇ／個体の用量で１週間に１回または３週間に１回投与される、請求項１から７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
維持期間が、治療サイクルを含み、１つの治療サイクルが、
（１）およそ１，２００ｍｇ／個体のＰＤ−１系結合アンタゴニストを３週間に１回投与すること、および
（２）およそ１，６００ｍｇ／個体のＧＰＣ３標的化剤を１週間に１回、３週間投与すること
を含み、治療サイクルが反復される、請求項１から７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
負荷期間および／または維持期間内のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび／またはＧＰＣ３標的化抗体の投与が、静脈内注射または注入である、請求項１から９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
負荷期間および／または維持期間内のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび／またはＧＰＣ３標的化抗体の投与が、皮下注射である、請求項１から９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群から選択される、請求項１から１１のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、
（１）配列番号１９のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号２０のＨＶＲ−Ｈ２配列および配列番号２１のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号２２のＨＶＲ−Ｌ１配列、配列番号２３のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号２４のＨＶＲ−Ｌ３配列を含む軽鎖とを含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体、
（２）配列番号２５もしくは２６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体、または
（３）アテゾリズマブ
である、請求項１から１２のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
ＧＰＣ３標的化剤が、
（１）配列番号４２のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号４３のＨＶＲ−Ｈ２配列および配列番号４４のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号４５のＨＶＲ−Ｌ１配列、配列番号４６のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号４７のＨＶＲ−Ｌ３配列を含む軽鎖とを含む抗ＧＰＣ３抗体、
（２）配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号５２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む抗ＧＰＣ３抗体、または
（３）コドリツズマブ
である、請求項１から１３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
がんが、肝がん、乳がん、肺がん、卵巣がん、胃がん、膀胱がん、膵臓がん、子宮内膜がん、結腸がん、腎臓がん、食道がんおよび前立腺がんからなる群から選択される、請求項１から１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を使用する併用療法のための有効な投与レジメンに関する。
【背景技術】
【０００２】
肝細胞がんは、報告によれば、世界中でがんによる死亡の５番目の主因であり、毎年およそ６００，０００人の死亡に相当する（Ｌｌｏｖｅｔ  ＪＭ、Ｂｕｒｒｏｕｇｈｓ  Ａ、Ｂｒｕｉｘ  Ｊ；Ｌａｎｃｅｔ（２００３）、３６２、１９０７〜１７）。ほとんどの肝細胞がんの患者は、疾患を有すると診断された後１年以内に死亡する。残念ながら、肝細胞がんの症例は、治癒的療法に対して稀にしか応答しない後期で診断されることが頻繁にある。さらに、化学療法、化学塞栓療法、アブレーションおよび陽子線治療を含めた医学的処置は、このような患者には不十分にしか有効ではない。多数の患者が、血管進入および複数の肝内転移を伴う疾患の再発を示し、これは、進行期へと迅速に進行する。その５年生存率は、わずか７％である（Ｂｏｓｃｈ  ＦＸ、Ｒｉｂｅｓ  Ｊ、Ｃｌｅｒｉｅｓ  Ｒ；Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  （２００４）、１２７、Ｓ５〜１６）。局所病巣の摘出に適している肝細胞がんの患者は、その５年生存率は依然として１５％および３９％のレベルのままであるものの、比較的良好な予後を有する（Ｔａｋｅｎａｋａ  Ｋ、Ｋａｗａｈａｒａ  Ｎ、Ｙａｍａｍｏｔｏ  Ｋ、Ｋａｊｉｙａｍａ  Ｋ、Ｍａｅｄａ  Ｔ、Ｉｔａｓａｋａ  Ｈ、Ｓｈｉｒａｂｅ  Ｋ、Ｎｉｓｈｉｚａｋｉ  Ｔ、Ｙａｎａｇａ  Ｋ、Ｓｕｇｉｍａｃｈｉ  Ｋ；Ａｒｃｈ  Ｓｕｒｇ  （１９９６）、１３１、７１〜６）。したがって、当技術分野では、このような悪性疾患肝細胞がんの新規療法が求められてきた。
【０００３】
肝細胞がんは、報告によれば、日本では、原発性肝がんの症例の９０％超に相当する。このような肝細胞がんを治療するための医学的方法として、例えば、化学療法ベースの経カテーテル動脈塞栓（ＴＡＥ）療法が挙げられ、これは、肝動脈（腫瘍への栄養供給経路として役立つ）へオイルベースの造影剤（リピオドール）、抗がん剤および閉塞物質（ゲルフォーム）の混合物を注入し、栄養動脈の閉塞をもたらすことによって、肝細胞がんの選択的壊死を誘導することを含む。さらに、経皮エタノール注入、経皮マイクロ波血液凝固療法および高周波アブレーションなどの侵襲的アプローチが使用される。また、治験が、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、ウラシル−テガフール（ＵＦＴ）、マイトマイシンＣ（ＭＭＣ）、ミトキサントロン（ＤＨＡＤ）、アドリアマイシン（ＡＤＲ）、エピルビシン（ＥＰＩ）およびシスプラチン（ＣＤＤＰ）などの化学療法薬を、単独でまたはインターフェロン（ＩＦＮ）と組み合わせて使用する全身化学療法で実施されている（Ｙｅｏ  Ｗ、Ｍｏｋ  ＴＳ、Ｚｅｅ  Ｂ、Ｌｅｕｎｇ  ＴＷ、Ｌａｉ  ＰＢ、Ｌａｕ  ＷＹ、Ｋｏｈ  Ｊ、Ｍｏ  ＦＫ、Ｙｕ  ＳＣ、Ｃｈａｎ  ＡＴ、Ｈｕｉ  Ｐ、Ｍａ  Ｂ、Ｌａｍ  ＫＣ、Ｈｏ  ＷＭ、Ｗｏｎｇ  ＨＴ、Ｔａｎｇ  Ａ、Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＰＪ；Ｊ  Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ  （２００５）、９７、１５３２〜８）。
【０００４】
一方、ソラフェニブの経口活性形態（ネクサバール、ＢＡＹ４３−９００６）が承認されており、より有利なことに、これは、Ｒａｆ／ＭＥＫ／ＥＲＫシグナル伝達においてＲａｆキナーゼを阻害し、一方で、ＶＥＧＦＲ−２、ＶＥＧＦＲ−３およびＰＤＧＦＲ−βチロシンキナーゼを標的化することによって血管新生抑制効果を発揮することによってがん細胞の増殖を阻止し、上記の化学療法薬よりも有効である。ソラフェニブの有効性は、進行肝細胞がんを標的とする２種の第ＩＩＩ相多施設プラセボコントロール試験（ソラフェニブＨＣＣ評価無作為化プロトコール（ＳＨＡＲＰ）治験およびアジア−太平洋（Ａｓｉａ−Ｐａｃｉｆｉｃ）治験）において研究されている。ソラフェニブは、生存期間を延長すると確認され、これらの治験の両方において０．６８のＨＲを有する。ＳＨＡＲＰ治験では、ソラフェニブは、生存期間をプラセボを用いた場合の７．９カ月に対して１０．７カ月に延長した。アジア治験では、この薬剤は、生存期間をプラセボを用いた場合の４．２カ月に対して６．５カ月に延長した。しかし、この薬剤は、低い客観的奏効率を有しており、画像で腫瘍悪化までの時間を延長したが（欧州および米国の治験における２．８カ月に対して５．５カ月およびアジアの治験における１．４カ月に対して２．８カ月）、臨床症状悪化までの時間の延長を示さなかった。アジアのコホートは、おそらくは、その治療が、アジア領域では、欧州および米国と比較して、疾患プロセスの間のわずかに遅いステージで開始したために、短期間の延命を示した（Ｌｌｏｖｅｔ  Ｊ、Ｒｉｃｃｉ  Ｓ、Ｍａｚｚａｆｅｒｒｏ  Ｖ、Ｈｉｌｇａｒｄ  Ｐ、Ｇａｎｅ  Ｅら  Ｓｏｒａｆｅｎｉｂ  ｉｎ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．  Ｎｅｗ  Ｅｎｇ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．（２００８）３５９、３７８〜９０およびＣｈｅｎｇ  ＡＬ、Ｃｈｅｎ  Ｚ、Ｔｓａｏ  ＣＪ、Ｑｉｎ  Ｓ、Ｋｉｍ  ＪＳら  Ｅｆｆｉｃａｃｙ  ａｎｄ  ｓａｆｅｔｙ  ｏｆ  ｓｏｒｅｆａｎｉｂ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ａｓｉａ−Ｐａｃｉｆｉｃ  ｒｅｇｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ：ａ  ｐｈａｓｅ  ＩＩＩ  ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ、ｄｏｕｂｌｅ−ｂｌｉｎｄ、ｐｌａｃｅｂｏ−ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｔｒｉａｌ．  Ｌａｎｃｅｔ  Ｏｎｃｏｌ．（２００９）１０、２５〜３４）。
【０００５】
肝がんが進行するにつれ、一般に、拒食症、体重減少、全身倦怠、触知できる右季肋部塊、右季肋部疼痛、腹部膨満感、発熱および黄疸などの肝臓機能障害と関連しているその特定の症状が観察される。しかし、化学療法薬（例えば、ソラフェニブ）は、下痢または便秘、貧血、感染または敗血症（致死的重症度を有する）を引き起こす免疫系の抑制、出血、心臓毒性、肝臓毒性、腎毒性、拒食症および体重減少などのその固有の有害反応を含めた克服されるべき合併症を有する。
【０００６】
肝がんでは、特に初期ステージの症状は最初に観察されないが、一般に、拒食症、体重減少、全身倦怠、触知できる右季肋部塊、右季肋部疼痛、腹部膨満感、発熱および黄疸などの肝臓機能障害と関連しているその特定の症状が、肝がんの進行につれて観察される。臨床観察結果によれば、このような症状は、化学療法薬の使用によって増強される。例えば、検出可能な肝がん細胞を有する患者における拒食症および拒食症と関連しているか、またはそれとは独立している体重減少などの症状は、患者への化学療法薬の投与によって、化学療法薬の使用を伴わない場合よりも増強され得る。いくつかの場合には、化学療法薬の使用は、このような症状を有する患者に対しては中止されなくてはならない。これらの増強される症状は、化学療法薬を用いる治療にとって障害である。したがって、例えば、治療効果の改善または治療されるべき患者のＱＯＬの改善の観点から優れた療法の確立が求められてきた。
【０００７】
グリピカン３（ＧＰＣ３）は、肝がんにおいて高レベルで発現されることが頻繁にあり、そのようなものとして、肝がんにおけるその機能の同定において、または肝がんの治療もしくは診断標的として有用であると思われる。
【０００８】
上記の状況下で、肝がんの治療標的としてＧＰＣ３を用いる薬物が開発中である。有効成分として抗ＧＰＣ３抗体を含む肝がん薬が開発されており、抗体は、ＧＰＣ３を発現する細胞に対して、抗体依存性細胞性細胞傷害（本明細書において以下、「ＡＤＣＣ」と呼ばれる）活性および／または補体依存性細胞傷害（本明細書において以下、「ＣＤＣ」と呼ばれる）活性を有する（ＷＯ２００３／０００８８３）。また、有効成分としてＡＤＣＣ活性およびＣＤＣ活性を有するヒト化抗ＧＰＣ３抗体を含むＧＰＣ３を標的とする薬物が開発されている（ＷＯ２００６／００６６９３）。さらなるＧＰＣ３を標的とする薬物が開発されており、これは、ＡＤＣＣ活性が増強されたヒト化抗ＧＰＣ３抗体（ＷＯ２００６／０４６７５１およびＷＯ２００７／０４７２９１）またはＡＤＣＣ活性およびＣＤＣ活性を有し、ならびに血漿動態が改善された抗ＧＰＣ３抗体（ＷＯ２００９／０４１０６２）を含む。ソラフェニブなどの化学療法薬との併用療法におけるこれらの抗ＧＰＣ３抗体は、例えば、化学療法薬（例えば、ソラフェニブ）の単独療法によって引き起こされる有害反応を減弱するとわかっており、また、これらの薬剤をベースとする相互作用を示すとわかった（ＷＯ２００９／１２２６６７）。したがって、肝がんを治療するための優れた方法は、例えば、治療効果の改善または治療されるべき患者のＱＯＬの改善の観点から、中軸としてＧＰＣ３を標的とする薬物を使用して確立されている過程にある。
【０００９】
他方で、Ｔ細胞への２つの異なるシグナルの提供は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）による休止Ｔリンパ球のリンパ球活性化についての広く受容されたモデルである。Ｌａｆｆｅｒｔｙ等、Ａｕｓｔ．Ｊ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．Ｓｃｉ  ５３：２７〜４２（１９７５）。このモデルは、非自己からの自己の識別および免疫寛容をさらに提供する。Ｂｒｅｔ
ｓｃｈｅｒ等、Ｓｃｉｅｎｃｅ  １６９：１０４２〜１０４９（１９７０）；Ｂｒｅｔｓｃｈｅｒ、Ｐ．Ａ．、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９６：１８５〜１９０（１９９９）；Ｊｅｎｋｉｎｓ等、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６５：３０２〜３１９（１９８７）。一次シグナル、または抗原特異的シグナルは、主要組織適合性遺伝子複合体（ＭＨＣ）に関連して提示された外来抗原ペプチドの認識後にＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を介して伝達される。第２のまたは共刺激シグナルは、抗原提示細胞（ＡＰＣ）上に発現された共刺激分子によってＴ細胞に送達され、Ｔ細胞を誘導して、クローン増殖、サイトカイン分泌およびエフェクター機能を促進させる。Ｌｅｎｓｃｈｏｗ等、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４：２３３（１９９６）。共刺激の非存在下では、Ｔ細胞は、抗原刺激に対して不応性になり得、有効な免疫応答を開始せず、消耗、または外来抗原に対する寛容をさらに生じ得る。
【００１０】
この２シグナルモデルでは、Ｔ細胞は、陽性および陰性の両方の二次共刺激シグナルを受ける。かかる陽性および陰性シグナルの調節は、免疫寛容を維持し、自己免疫を防止しつつ、宿主の防御免疫応答を最大化するために重要である。陰性二次シグナルは、Ｔ細胞寛容の誘導に必要であると思われるが、陽性シグナルは、Ｔ細胞活性化を促進する。単純な２シグナルモデルは、ナイーブリンパ球についての妥当な説明をなおも提供するが、宿主の免疫応答は、ダイナミックなプロセスであり、共刺激シグナルは、抗原曝露されたＴ細胞にも提供され得る。共刺激の機構は、治療的に興味を持たれるが、それは、共刺激シグナルの操作が、細胞ベースの免疫応答を増強または終結させるための手段を提供することが示されているからである。近年、Ｔ細胞機能不全またはアネルギーが、阻害受容体、誘導された持続性のプログラム死１ポリペプチド（ＰＤ−１）の発現と同時発生的に生じることが発見されている。結果として、ＰＤ−１、ならびにプログラム死リガンド１（ＰＤ−Ｌｌ）およびプログラム死リガンド２（ＰＤ−Ｌ２）などの、ＰＤ−１との相互作用を介してシグナル伝達する他の分子の治療的標的化は、強く興味を持たれる領域である。
【００１１】
ＰＤ−Ｌ１は、多くのがんにおいて過剰発現され、予後不良と関連する場合が多い（Ｏｋａｚａｋｉ  Ｔ等、Ｉｎｔｅｒｎ．Ｉｍｍｕｎ．２００７  １９（７）：８１３）（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  ＲＨ等、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  ２００６、６６（７）：３３８１）。興味深いことに、腫瘍反応性Ｔ細胞上のＰＤ−１の上方調節が、障害された抗腫瘍免疫応答に寄与し得ることを示す、正常組織中のＴリンパ球および末梢血Ｔリンパ球とは対照的に、腫瘍浸潤性Ｔリンパ球の大部分は、ＰＤ−１を優勢に発現する（Ｂｌｏｏｄ  ２００９  １１４（８）：１５３７）。これは、ＰＤ−１発現Ｔ細胞と相互作用するＰＤ−Ｌ１発現腫瘍細胞により媒介されたＰＤ−Ｌ１シグナル伝達の活用によるものである可能性があり、この結果Ｔ細胞の活性が弱まり、免疫監視は回避される（Ｓｈａｒｐｅ等、Ｎａｔ  Ｒｅｖ  ２００２）（Ｋｅｉｒ  ＭＥ等、２００８  Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２６：６７７）。したがって、ＰＤ−Ｌ１／ＰＤ−１相互作用の阻害は、腫瘍のＣＤ８＋Ｔ細胞媒介性死滅化を増強し得る。
【００１２】
ＰＤ−１、ならびにプログラム死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）およびプログラム死リガンド２（ＰＤ−Ｌ２）などの、ＰＤ−１との相互作用を介してシグナル伝達する他の分子の治療的標的化は、強く興味を持たれる領域である。ＰＤ−Ｌ１シグナル伝達の阻害は、がん（例えば、腫瘍免疫）ならびに急性および慢性（例えば、持続性）の両方の感染を含む感染の治療のためにＴ細胞免疫を増強するための手段として提唱されてきた。最適な治療的処置は、腫瘍増殖を直接阻害する薬剤によるＰＤ−１受容体／リガンド相互作用の遮断を組み合わせ得る。種々のがんの発達を治療、安定化、予防および／または遅延させるための最適な療法が、なおも必要とされている。
【００１３】
特許出願、特許公開およびＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ寄託番号を含む、本明細書で引用される全ての参考文献は、各個々の参考文献が出典明示により援用され
ると具体的かつ個々に示されるかのように、その全内容が本明細書に出典明示により援用される。
【発明の概要】
【００１４】
本発明者らは、個体におけるがんの治療またはその進行の遅延においてＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を使用する、かなりより有効な併用療法レジメンを予期せぬことに発見した。
【００１５】
一態様では、個体におけるがんの治療またはその進行の遅延におけるＧＰＣ３標的化剤と併用したＰＤ−１系結合アンタゴニストの適した投与レジメンが、本明細書で提供される。ある態様では、個体におけるがんの治療またはその進行の遅延におけるＰＤ−１系結合アンタゴニストと併用したＧＰＣ３標的化剤の適した投与レジメンが、本明細書で提供される。一態様では、個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延させる方法であって、個体に有効量のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび有効量のＧＰＣ３標的化剤を投与することを含む方法が、本明細書で提供される。
【００１６】
本発明は、以下を提供する：
［１］ＰＤ−１系結合アンタゴニストを用いる併用療法において使用するための、個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延させるための医薬組成物であって、有効成分としてＧＰＣ３標的化剤を含み、該併用療法が、（ｉ）ＧＰＣ３標的化剤が投与される負荷期間と、それに続く（ｉｉ）ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤が投与される維持期間を含む、医薬組成物。
［２］ＧＰＣ３標的化剤が、およそ８００ｍｇ／個体〜およそ３，２００ｍｇ／個体の用量で負荷期間内に１回以上投与される、上記の［１］に記載の医薬組成物。
［３］負荷期間が、２週間以内または１週間以内である、上記の［１］または［２］に記載の医薬組成物。
［４］負荷期間内に投与されるＧＰＣ３標的化剤の総量が、およそ１，６００ｍｇ／個体〜およそ４，８００ｍｇ／個体である、上記の［１］〜［３］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［５］ＧＰＣ３標的化剤が、およそ１，６００ｍｇ／個体の用量で負荷期間内に１回または２回投与される、上記の［１］〜［４］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［６］負荷期間内のＧＰＣ３標的化剤の最後の投与と、維持期間内のＰＤ−１系結合アンタゴニストまたはＧＰＣ３標的化剤の最初の投与とが、時間的に２〜４日離れている、上記の［１］〜［５］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［７］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、およそ１，０００ｍｇ／個体〜およそ１，４００ｍｇ／個体の用量で維持期間内に１回以上投与され、ＧＰＣ３標的化剤が、およそ８００ｍｇ／個体〜およそ２，０００ｍｇ／個体の用量で維持期間内に１回以上投与される、上記の［１］〜［６］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［８］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、およそ１，２００ｍｇ／個体の用量で３週間に１回投与され、ＧＰＣ３標的化剤が、およそ１，６００ｍｇ／個体の用量で週に１回または３週間に１回投与される、上記の［１］〜［７］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［９］維持期間が、治療サイクルを含み、１つの治療サイクルが、
（１）およそ１，２００ｍｇ／個体のＰＤ−１系結合アンタゴニストを３週間に１回投与すること、および
（２）およそ１，６００ｍｇ／個体のＧＰＣ３標的化剤を１週間に１回、３週間投与すること
を含み、治療サイクルが反復される、上記の［１］〜［７］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［１０］負荷期間および／または維持期間内のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび／またはＧＰＣ３標的化抗体の投与が、静脈内注射または注入である、［１］〜［９］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［１１］負荷期間および／または維持期間内のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび／またはＧＰＣ３標的化抗体の投与が、皮下注射である、上記の［１］〜［９］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［１２］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群から選択される、上記の［１］〜［１１］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［１３］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、
（１）配列番号１９のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号２０のＨＶＲ−Ｈ２配列および配列番号２１のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号２２のＨＶＲ−Ｌ１配列、配列番号２３のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号２４のＨＶＲ−Ｌ３配列を含む軽鎖とを含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体、
（２）配列番号２５もしくは２６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体、または
（３）アテゾリズマブ
である、上記の［１］〜［１２］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［１４］ＧＰＣ３標的化剤が、
（１）配列番号３４のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号３５のＨＶＲ−Ｈ２配列および配列番号３６のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖と、配列番号３７のＨＶＲ−Ｌ１配列、配列番号３８のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号３９のＨＶＲ−Ｌ３配列を含む軽鎖とを含む抗ＧＰＣ３抗体、
（２）配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号５２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む抗ＧＰＣ３抗体、または
（３）コドリツズマブ
である、上記の［１］〜［１３］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［１５］がんが、肝がん、乳がん、肺がん、卵巣がん、胃がん、膀胱がん、膵臓がん、子宮内膜がん、結腸がん、腎臓がん、食道がんおよび前立腺がんからなる群から選択される、上記の［１］〜［１４］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
【００１７】
［１６］がんが、ＧＰＣ３陽性がんである、［１］〜［１５］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［１７］併用療法が、有効量の化学療法薬を投与することをさらに含む、上記の［１］〜［１６］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［１８］ＧＰＣ３標的化剤が、負荷期間内に個体において２００μｇ／ｍｌ以上のＧＰＣ３標的化剤の血中トラフレベルを達成するように投与される、上記の［１］または［２］に記載の医薬組成物。
［１９］ＧＰＣ３標的化剤が、維持期間内に個体において２００μｇ／ｍｌ以上のＧＰＣ３標的化剤の血中トラフレベルを達成するように投与される、上記の［１］〜［６］のいずれか１つに記載の医薬組成物。
［２０］ＧＰＣ３標的化剤を用いる併用療法において使用するための、個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延するための医薬組成物であって、有効成分としてＰＤ−１系結合アンタゴニストを含み、
該併用療法が、（ｉ）ＧＰＣ３標的化剤が投与される負荷期間と、それに続く（ｉｉ）ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤が投与される維持期間とを含む、医薬組成物。
［２１］有効量のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を投与することを含む個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延する方法であって、（ｉ）ＧＰＣ３標的化剤が投与される負荷期間と、それに続く（ｉｉ）ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤が投与される維持期間とを含む、方法。
［２２］ＧＰＣ３標的化剤が、およそ８００ｍｇ／個体〜およそ３，２００ｍｇ／個体の用量で負荷期間内に１回以上投与される、上記の［２１］に記載の方法。
［２３］負荷期間が、２週間以内または１週間以内である、上記の［２１］または［２２］に記載の方法。
［２４］負荷期間内に投与されるＧＰＣ３標的化剤の総量が、およそ１，６００ｍｇ／個体〜およそ４，８００ｍｇ／個体である、上記の［２１］〜［２３］のいずれか１つに記載の方法。
［２５］ＧＰＣ３標的化剤が、およそ１，６００ｍｇ／個体の用量で負荷期間内に１回または２回投与される、上記の［２１］〜［２４］のいずれか１つに記載の方法。
［２６］負荷期間内のＧＰＣ３標的化剤の最後の投与と、維持期間内のＰＤ−１系結合アンタゴニストまたはＧＰＣ３標的化剤の最初の投与とが、時間的に２〜４日離れている、上記の［２１］〜［２５］のいずれか１つに記載の方法。
［２７］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、およそ１，０００ｍｇ／個体〜およそ１，４００ｍｇ／個体の用量で維持期間内に１回以上投与され、ＧＰＣ３標的化剤が、およそ８００ｍｇ／個体〜およそ２，０００ｍｇ／個体の用量で維持期間内に１回以上投与される、上記の［２１］〜［２６］のいずれか１つに記載の方法。
［２８］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、およそ１，２００ｍｇ／個体の用量で３週間に１回投与され、ＧＰＣ３標的化剤が、およそ１，６００ｍｇ／個体の用量で１週間に１回または３週間に１回投与される、上記の［２１］〜［２７］のいずれか１つに記載の方法。
［２９］維持期間が、治療サイクルを含み、１つの治療サイクルが、
（１）およそ１，２００ｍｇ／個体のＰＤ−１系結合アンタゴニストを３週間に１回投与すること、および
（２）およそ１，６００ｍｇ／個体のＧＰＣ３標的化剤を１週間に１回、３週間投与すること
を含み、治療サイクルが反復される、上記の［２１］〜［２７］のいずれか１つに記載の方法。
［３０］負荷期間および／または維持期間内のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび／またはＧＰＣ３標的化抗体の投与が、静脈内注射または注入である、上記の［２１］〜［２９］のいずれか１つに記載の方法。
［３１］負荷期間および／または維持期間内のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび／またはＧＰＣ３標的化抗体の投与が、皮下注射である、上記の［２１］〜［２９］のいずれか１つに記載の方法。
［３２］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群から選択される、上記の［２１］〜［３１］のいずれか１つに記載の方法。
［３３］ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、アテゾリズマブである、上記の［２１］〜［３２］のいずれか１つに記載の方法。
［３４］ＧＰＣ３標的化剤がコドリツズマブである、上記の［２１］〜［３３］のいずれか１つに記載の方法。
［３５］がんが、肝がん、乳がん、肺がん、卵巣がん、胃がん、膀胱がん、膵臓がん、子宮内膜がん、結腸がん、腎臓がん、食道がんおよび前立腺がんからなる群から選択される、上記の［２１］〜［３４］のいずれか１つに記載の方法。
［３６］がんが、ＧＰＣ３陽性がんである、上記の［２１］〜［３５］のいずれか１つに記載の方法。
［３７］有効量の化学療法薬を投与することをさらに含む、上記の［２１］〜［３６］のいずれか１つに記載の方法。
［３８］ＧＰＣ３標的化剤が、負荷期間内に個体において２００μｇ／ｍｌ以上のＧＰＣ３標的化剤の血中トラフレベルを達成するように投与される、上記の［２１］または［２２］に記載の方法。
［３９］ＧＰＣ３標的化剤が、維持期間内に個体において２００μｇ／ｍｌ以上のＧＰＣ３標的化剤の血中トラフレベルを達成するように投与される、上記の［２１］〜［２６］のいずれか１つに記載の方法。
［４０］（１）有効成分としてＰＤ−１系結合アンタゴニストを含む医薬組成物、
（２）有効成分としてＧＰＣ３標的化剤を含む医薬組成物、
（３）容器および
（４）ＧＰＣ３標的化剤およびＰＤ−１系結合アンタゴニストを使用する併用療法のための指示を含む添付文書またはラベルであって、該併用療法が、（ｉ）ＧＰＣ３標的化剤が投与される負荷期間と、それに続く（ｉｉ）ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤が投与される維持期間とを含む、添付文書またはラベル
を含むキット。
［４１］ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を含む、個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延させるための組合せであって、（ｉ）ＧＰＣ３標的化剤が投与される負荷期間と、それに続く（ｉｉ）ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤が投与される維持期間とを含む、組合せ。
［４２］個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延させる医薬の製造におけるＰＤ−１系結合アンタゴニストの使用であって、ここで、該医薬が、ＰＤ−１系結合アンタゴニストを含み、医薬上許容される担体を含んでいてもよく、該治療が、（ｉ）ＧＰＣ３標的化剤が投与される負荷期間と、それに続く（ｉｉ）ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤が投与される維持期間とを含む、使用。
［４３］個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延させる医薬の製造におけるＧＰＣ３標的化剤の使用であって、ここで、該医薬が、ＧＰＣ３標的化剤を含み、医薬上許容される担体を含んでいてもよく、該治療が、（ｉ）ＧＰＣ３標的化剤が投与される負荷期間と、それに続く（ｉｉ）ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤が投与される維持期間とを含む、使用。
［４４］ＰＤ−１系結合アンタゴニストを用いる併用療法において使用するための、個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延させるための医薬組成物であって、有効成分としてＧＰＣ３標的化剤を含み、該併用療法が、
（１）およそ１，０００ｍｇ／個体〜およそ１，４００ｍｇ／個体のＰＤ−１系結合アンタゴニストを３週間に１回投与すること、および
（２）およそ８００ｍｇ／個体〜およそ２，０００ｍｇ／個体のＧＰＣ３標的化剤を１週間に１回または３週間に１回投与すること
を含む、医薬組成物。
［４５］ＧＰＣ３標的化剤を用いる併用療法において使用するための、個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延させるための医薬組成物であって、有効成分としてＰＤ−１系結合アンタゴニストを含み、該併用療法が、
（１）およそ１，０００ｍｇ／個体〜およそ１，４００ｍｇ／個体のＰＤ−１系結合アンタゴニストを３週間に１回投与すること、および
（２）およそ８００ｍｇ／個体〜およそ２，０００ｍｇ／個体のＧＰＣ３標的化剤を１週間に１回または３週間に１回投与すること
を含む、医薬組成物。
［４６］  個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延させる方法であって、有効量のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を投与することを含み、
（１）およそ１，０００ｍｇ／個体〜およそ１，４００ｍｇ／個体のＰＤ−１系結合アンタゴニストを３週間に１回投与すること、および
（２）およそ８００ｍｇ／個体〜およそ２，０００ｍｇ／個体のＧＰＣ３標的化剤を１週間に１回または３週間に１回投与すること
を含む、方法。
［４７］（１）有効成分としてＰＤ−１系結合アンタゴニストを含む医薬組成物、
（２）有効成分としてＧＰＣ３標的化剤を含む医薬組成物、
（３）容器および
（４）ＧＰＣ３標的化剤およびＰＤ−１系結合アンタゴニストを使用する併用療法のための指示を含む添付文書またはラベルであって、該併用療法が、
（ａ）およそ１，０００ｍｇ／個体〜およそ１，４００ｍｇ／個体のＰＤ−１系結合アンタゴニストを３週間に１回投与すること、および
（ｂ）およそ８００ｍｇ／個体〜およそ２，０００ｍｇ／個体のＧＰＣ３標的化剤を１週間に１回または３週間に１回投与すること
を含む、添付文書またはラベル
を含むキット。
［４８］個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延させる組合せであって、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を含み、
（１）およそ１，０００ｍｇ／個体〜およそ１，４００ｍｇ／個体のＰＤ−１系結合アンタゴニストを３週間に１回投与すること、および
（２）およそ８００ｍｇ／個体〜およそ２，０００ｍｇ／個体のＧＰＣ３標的化剤を１週間に１回または３週間に１回投与すること
を含む、組合せ。
［４９］個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延させる医薬の製造におけるＰＤ−１系結合アンタゴニストの使用であって、ここで、該医薬が、ＰＤ−１系結合アンタゴニストを含み、医薬上許容される担体を含んでいてもよく、該治療が、
（１）およそ１，０００ｍｇ／個体〜およそ１，４００ｍｇ／個体のＰＤ−１系結合アンタゴニストを３週間に１回投与すること、および
（２）およそ８００ｍｇ／個体〜およそ２，０００ｍｇ／個体のＧＰＣ３標的化剤を１週間に１回または３週間に１回投与すること
を含む、使用。
［５０］個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延させる医薬の製造におけるＧＰＣ３標的化剤の使用であって、ここで、該医薬が、ＧＰＣ３標的化剤を含み、医薬上許容される担体を含んでいてもよく、該治療が、
（１）およそ１，０００ｍｇ／個体〜およそ１，４００ｍｇ／個体のＰＤ−１系結合アンタゴニストを３週間に１回投与すること、および
（２）およそ８００ｍｇ／個体〜およそ２，０００ｍｇ／個体のＧＰＣ３標的化剤を１週間に１回または３週間に１回投与すること
を含む、使用。
【００１８】
ある態様では、有効量の、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を投与することを含む、がんを有する個体において腫瘍細胞に対する免疫応答を増強する方法が、本明細書で提供される。例えば、腫瘍細胞に対する免疫応答の増強として、マクロファージおよび多核巨細胞を含む免疫細胞の、腫瘍組織への浸潤が挙げられる。別の例については、腫瘍細胞に対する免疫応答の増強として、腫瘍が浸潤したリンパ球（ＴＩＬ）におけるＣＤ４５陽性リンパ球、ＣＤ３ε陽性リンパ球およびＣＤ８陽性Ｔリンパ球の増大が挙げられる。
【００１９】
上述および本明細書に記載される方法、使用、組成物およびキットの一部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニストは、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群から選択される。一部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニストは、抗体である。一部の実施形態では、この抗体は、ヒト化抗体、キメラ抗体またはヒト抗体である。一部の実施形態では、この抗体は、抗原結合断片である。一部の実施形態では、この抗原結合断片は、Ｆａｂ、
Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖおよびＦｖからなる群から選択される。
【００２０】
一部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニストは、ＰＤ−１結合アンタゴニストである。一部の実施形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、そのリガンド結合パートナーへのＰＤ−１の結合を阻害する。一部の実施形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１へのＰＤ−１の結合を阻害する。一部の実施形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２へのＰＤ−１の結合を阻害する。一部の実施形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２の両方へのＰＤ−１の結合を阻害する。一部の実施形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、抗体である。一部の実施形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＭＤＸ−１１０６（ニボルマブ（Ｎｉｖｏｌｕｍａｂ））、ＭＫ−３４７５（ペンブロリズマブ（Ｐｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ）、ラムブロリズマブ（Ｌａｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ））、ＣＴ−０１１（ピディリズマブ（Ｐｉｄｉｌｉｚｕｍａｂ））、ＰＤＲ００１、ＲＥＧＮ２８１０、ＢＧＢＡ３１７、ＳＨＲ−１２１０、ＡＭＰ−５１４（ＭＥＤＩ０６８０）およびＡＭＰ−２２４からなる群から選択される。
【００２１】
一部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストである。一部の実施形態では、このＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１へのＰＤ−Ｌ１の結合を阻害する。一部の実施形態では、このＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、Ｂ７−１へのＰＤ−Ｌ１の結合を阻害する。一部の実施形態では、このＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１およびＢ７−１の両方へのＰＤ−Ｌ１の結合を阻害する。一部の実施形態では、このＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、抗体である。一部の実施形態では、このＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、アテゾリズマブ（Ａｔｅｚｏｌｉｚｕｍａｂ）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＤＸ−１１０５、アベルマブ（Ａｖｅｌｕｍａｂ）およびＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ（Ｄｕｒｖａｌｕｍａｂ））からなる群から選択される。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号１９のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号２０のＨＶＲ−Ｈ２配列および配列番号２１のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖；ならびに／または配列番号２２のＨＶＲ−Ｌ１配列、配列番号２３のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号２４のＨＶＲ−Ｌ３配列を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号２５もしくは２６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に引用により援用されるＷＯ２０１０／０７７６３４および米国特許第８，２１７，１４９号に記載される抗体ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０の３つの重鎖ＨＶＲ配列および／または抗体ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０の３つの軽鎖ＨＶＲ配列を含む。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、抗体ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０の重鎖可変領域配列および／または抗体ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０の軽鎖可変領域配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、アテゾリズマブである。
【００２２】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、抗体である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、イムノアドヘシンである。
【００２３】
上述および本明細書に記載される方法、使用、組成物およびキットのいくつかの実施形態では、抗ＧＰＣ３抗体は、ヒト化抗体、キメラ抗体またはヒト抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、抗原結合断片である。いくつかの実施形態では、抗原結合断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖおよびＦｖからなる群から選択される。
【００２４】
いくつかの実施形態では、抗ＧＰＣ３抗体は、ＧＣ３３またはコドリツズマブである。
一部の実施形態では、この抗ＧＰＣ３抗体は、配列番号４２のＨＶＲ−Ｈ１配列、配列番号４３のＨＶＲ−Ｈ２配列および配列番号４４のＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖；ならびに／または配列番号４５のＨＶＲ−Ｌ１配列、配列番号４６のＨＶＲ−Ｌ２配列および配列番号４７のＨＶＲ−Ｌ３配列を含む軽鎖を含む。一部の実施形態では、この抗ＧＰＣ３抗体は、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または配列番号５１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、この抗ＧＰＣ３抗体は、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖および／または配列番号５２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。任意の他の実施形態と組み合わされ得る一部の実施形態では、抗ＧＰＣ３抗体は、ＧＣ３３でもコドリツズマブでもない。
【００２５】
一部の実施形態では、本明細書に記載される抗体（例えば、ＰＤ−１系結合アンタゴニスト抗体または抗ＧＰＣ３抗体）は、非グリコシル化部位変異を含む。一部の実施形態では、この非グリコシル化部位変異は、置換変異である。一部の実施形態では、この置換変異は、アミノ酸残基Ｎ２９７、Ｌ２３４、Ｌ２３５および／またはＤ２６５（ＥＵ番号付け）にある。一部の実施形態では、この置換変異は、Ｎ２９７Ｇ、Ｎ２９７Ａ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５ＡおよびＤ２６５Ａからなる群から選択される。一部の実施形態では、この置換変異は、Ｄ２６５Ａ変異およびＮ２９７Ｇ変異である。一部の実施形態では、この非グリコシル化部位変異は、この抗体のエフェクター機能を低減させる。一部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体または抗ＰＤ−Ｌ２抗体）は、ＥＵ番号付けに従って２９７位においてＡｓｎからＡｌａへの置換を有するヒトＩｇＧ１である。
【００２６】
上述および本明細書に記載される方法、使用、組成物およびキットの一部の実施形態では、このがんはＧＰＣ３陽性がんである。一部の実施形態では、このがんは、肝がん、乳がん、肺がん、卵巣がん、胃がん、膀胱がん、膵臓がん、子宮内膜がん、結腸がん、腎臓がん、食道がん、前立腺がん、または本明細書に記載される他のがんである。一部の実施形態では、この個体は、がんを有する、またはがんと診断されている。一部の実施形態では、この個体中のがん細胞は、ＰＤ−Ｌ１を発現する。
【００２７】
上述および本明細書に記載される方法、使用、組成物およびキットの一部の実施形態では、この治療、またはヒトＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体の投与は、治療の休止後に、個体において持続性の応答をもたらす。一部の実施形態では、この抗ＧＰＣ３抗体は、ＰＤ−１系結合アンタゴニストの前に、ＰＤ−１系結合アンタゴニストと同時に、またはＰＤ−１系結合アンタゴニストの後に投与される。一部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体は、同じ組成物中にある。一部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体は、別々の組成物中にある。
【００２８】
上述および本明細書に記載される方法、使用、組成物およびキットの一部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび／または抗ＧＰＣ３抗体は、静脈内、筋肉内、皮下、局所、経口、経皮、腹腔内、眼窩内、移植により、吸入により、髄腔内、脳室内または鼻腔内投与される。上記および本明細書に記載される方法、使用、組成物およびキットの一部の実施形態では、治療は、個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延させるための化学療法剤を投与することをさらに含む。一部の実施形態では、個体は、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび抗ＧＰＣ３抗体との併用治療の前に、化学療法剤で治療されている。一部の実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび／または抗ＧＰＣ３抗体の組合せによって治療された個体は、化学療法剤治療に対して難治性である。本出願を通じて記載される方法、使用、組成物およびキットの一部の実施形態は、がんを治療するまたはその進行を遅延させるための化学療法剤を投与することをさらに含む。
【００２９】
上記および本明細書に記載される方法、使用、組成物およびキットの一部の実施形態では、個体中のＣＤ８  Ｔ細胞は、この組合せの投与の前と比較して増強されたプライミング、活性化、増殖および／または細胞溶解活性を有する。一部の実施形態では、ＣＤ８  Ｔ細胞の数は、この組合せの投与の前と比較して上昇する。一部の実施形態では、このＣＤ８  Ｔ細胞は、抗原特異的ＣＤ８  Ｔ細胞である。
【００３０】
本明細書に記載される種々の実施形態の特性のうち１つ、一部または全てが組み合わされて、本発明の他の実施形態を形成し得ることを、理解すべきである。本発明のこれらおよび他の態様は、当業者に明らかとなる。本発明のこれらおよび他の実施形態は、以下の詳細な説明によってさらに記載される。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】溶媒対照、１ｍｇ／ｋｇまたは５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３のいずれかで週３回処置された各マウスにおける、ヒトＧＰＣ３を発現するＨｅｐａ１−６腫瘍体積変化を示す図である。矢印は、注射の日付を示す。各群あたり５匹のマウスを処置した。
【図２Ａ】溶媒対照または５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３のいずれかで処置されたマウスから摘出された組織のヘマトキシリンおよびエオシン染色（ＨＥ）またはＦ４／８０免疫組織化学的染色（ＩＨＣ）の画像を示す図である。
【図２Ｂ】溶媒対照または５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３のいずれかで処置されたマウスから摘出された組織のヘマトキシリンおよびエオシン染色（ＨＥ）またはＰＤ−Ｌ１免疫組織化学的染色（ＩＨＣ）の画像を示す図である。矢印は、浸潤免疫細胞の細胞膜において観察されたＰＤ−Ｌ１免疫反応性を示す。
【図３Ａ】単独療法（ｍＧＣ３３または１０Ｆ．９Ｇ２（抗ＰＤ−Ｌ１））または組合せ（ｍＧＣ３３＋１０Ｆ．９Ｇ２）のいずれかで処置された各マウスにおける、ヒトＧＰＣ３を発現するＣＴ２６腫瘍体積変化を示す図である。矢印は、注射の日付を示す。各群あたり５匹のマウスを処置した。各群における腫瘍体積の平均およびＳＤバーをプロットした。
【図３Ｂ】単独療法（ｍＧＣ３３または１０Ｆ．９Ｇ２（抗ＰＤ−Ｌ１））または組合せ（ｍＧＣ３３＋１０Ｆ．９Ｇ２）のいずれかで処置された、ＣＴ２６／ｈＧＰＣ３担がんマウスにおける無増悪生存率を示す図である。増悪は、腫瘍の大きさが１００ｍｍ3超に達した場合に定義された。
【図４Ａ】単独療法または組合せのいずれかで処置された各マウスにおけるヒトＧＰＣ３を発現するＣＴ２６腫瘍体積変化を示す図である。矢印は、投与の日付を示す。各群あたり５匹のマウスを処置した。各群における腫瘍体積の平均およびＳＤバーをプロットした。５ｍｇ／ｋｇまたは２５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３、１０Ｆ．９Ｇ２、５ｍｇ／ｋｇまたは２５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３＋１０Ｆ．９Ｇ２の腫瘍増殖阻害値は、それぞれ、５２％、５８％、６８％、７５％および８５％であった。
【図４Ｂ】２９日目の個体別の腫瘍体積を示す図である。各群における腫瘍体積の平均（＊）もプロットした。
【図５Ａ】溶媒対照、１ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇまたは２５ｍｇ／ｋｇのｍＧＣ３３、１０Ｆ．９Ｇ２または５ｍｇ／ｋｇもしくは２５ｍｇ／ｋｇのＧＣ３３および１０Ｆ．９Ｇ２の組合せのいずれかで処置された各マウスにおける、ヒトＧＰＣ３を発現するＨｅｐａ１−６腫瘍体積変化を示す図である。矢印は、注射の日付を示す。各群あたり５匹のマウスを処置した。
【図５Ｂ】３４日目の各処置群における個体別の腫瘍面積または腫瘍面積の平均＋ＳＤを示す図である。腫瘍面積（ｍｍ2）は、各マウスから摘出された腫瘍組織のＨＥ染色後に（腫瘍組織の長径の長さ（ｍｍ））ｘ（腫瘍組織の短径の長さ（ｍｍ））によって算出した。各腫瘍組織の病理学的評価の結果をグラフの下に加えた。疾患の病理学的な進行（ｐＰＤ）は、「腫瘍の退縮が見られなかった」と定義した。病理学的な部分退縮（ｐＰＲ）は、「免疫細胞浸潤を伴う腫瘍細胞の変性および／または壊死が見られた」と定義した。病理学的な完全退縮（ｐＣＲ）は、「腫瘍移植部位に腫瘍細胞が見られなかった」と定義した。
【図６】図６は、臨床治験の設計を示す模式図である。コホート１では、３または６人の患者が登録されている。臨床治験の用量漸増部分では、患者において用量制限毒性が観察されない場合または用量制限毒性が６人の患者中１人以下の患者において観察される場合には、その他の６人の患者はコホート２に登録される。用量制限毒性が３人の患者中２人以上において観察される場合または用量制限毒性が６人の患者において観察される場合には、その他の６人の患者は、コホート３に登録される。用量漸増部分後、患者が用量漸増部分において許容できると確認されているより高い用量で治療される拡大コホートに、少なくとも９人のその他の患者が登録される。
【図７Ａ】図７Ａは、コホート１に登録された患者のすべてにおけるＧＣ３３のトラフ濃度の変化を示す図である。図７Ａ中の水平線は、ＧＣ３３濃度における望ましいトラフ濃度として２３０μｇ／ｍＬを示す。
【図７Ｂ】図７Ｂは、コホート１における４日目での負荷用量を有する患者のすべてにおけるＧＣ３３のトラフ濃度の変化を示す図である。図７Ｂ中の水平線は、ＧＣ３３濃度における望ましいトラフ濃度として２３０μｇ／ｍＬを示す。
【図８Ａ】図８Ａは、コホート２に登録された患者のすべてにおけるＧＣ３３のトラフ濃度の変化を示す図である。図８Ａ中の水平線は、ＧＣ３３濃度における望ましいトラフ濃度として２３０μｇ／ｍＬを示す。
【図８Ｂ】図８Ｂは、コホート１における４日目での負荷用量を有する患者のすべてにおけるＧＣ３３のトラフ濃度の変化を示す図である。図８Ｂ中の水平線は、ＧＣ３３濃度における望ましいトラフ濃度として２３０μｇ／ｍＬを示す。
【図９】図９は、ＧＣ３３の平均トラフ濃度を示す図である。実線は、コホート１に登録された３人の患者におけるＧＣ３３の平均トラフ濃度を示す。点線は、コホート２および拡大コホートに登録された１７人の患者における平均トラフ濃度を示す。
【図１０Ａ】図１０Ａは、ＧＣ３３の最初の投薬から８日目でのベースラインＡＦＰ値からのＡＦＰの変化パーセントを示す図である。アスタリスクマーク（＊）は、ベースラインＡＦＰ値が１００ｎｇ／ｍＬを超える患者を示す。
【図１０Ｂ】図１０Ｂは、治療の間の最良のＡＦＰ応答を示す図である。最良のＡＦＰ応答は、ＡＦＰ値が、処置によってベースラインから減少される場合にＡＦＰの最大変化パーセントとして、または治療によってＡＦＰ値が減少されない場合にＡＦＰの最小変化パーセントのいずれかとして算出される。アスタリスクマーク（＊）は、ベースラインＡＦＰ値が１００ｎｇ／ｍＬを超える患者を示す。
【図１１Ａ】図１１Ａは、有効性評価の集団における無増悪生存（ＰＦＳ）のカプラン−マイヤープロットを示す図である。点線は、８００ｍｇのＧＣ３３によって治療された集団のＰＦＳを示し、実線は、１６００ｍｇのＧＣ３３によって治療された集団のＰＦＳを示す。
【図１１Ｂ】図１１Ｂは、有効性評価のための集団における全生存（ＯＳ）のカプラン−マイヤープロットを示す図である。点線は、８００ｍｇのＧＣ３３によって治療された集団のＯＳを示し、実線は、１６００ｍｇのＧＣ３３によって治療された集団のＯＳを示す。
【図１１Ｃ】図１１Ｃは、１６００ｍｇのＧＣ３３投薬を有するもののみの有効性評価のための集団におけるＰＦＳのカプラン−マイヤープロットを示す図である。実線は、４日目でのＧＣ３３の負荷用量を有する集団のＰＦＳを示し、点線は、４日目でのＧＣ３３の負荷用量を有さない集団のＰＦＳを示す。
【図１１Ｄ】図１１Ｄは、１６００ｍｇのＧＣ３３投薬を有するもののみの有効性評価のための集団におけるＯＳのカプラン−マイヤープロットを示す図である。実線は、４日目でのＧＣ３３の負荷用量を有する集団のＯＳを示し、点線は、４日目でのＧＣ３３の負荷用量を有さない集団のＯＳを示す。
【図１１Ｅ】図１１Ｅは、ベースラインＡＦＰ値が１００ｎｇ／ｍＬを超えるもののみの有効性評価のための集団におけるＰＦＳのカプラン−マイヤープロットを示す図である。点線は、８００ｍｇのＧＣ３３によって処置された集団のＰＦＳを示し、実線は、１６００ｍｇのＧＣ３３によって処置された集団のＰＦＳを示す。
【図１１Ｆ】図１１Ｆは、ベースラインＡＦＰ値が１００ｎｇ／ｍＬを超えるもののみの有効性評価のための集団におけるＯＳのカプラン−マイヤープロットを示す図である。点線は、８００ｍｇのＧＣ３３によって治療された集団のＯＳを示し、実線は、１６００ｍｇのＧＣ３３によって治療された集団のＯＳを示す。
【図１１Ｇ】図１１Ｇは、１６００ｍｇのＧＣ３３投薬を有し、ベースラインＡＦＰ値が１００ｎｇ／ｍＬを超えるもののみの有効性評価のための集団におけるＰＦＳのカプラン−マイヤープロットを示す図である。実線は、４日目のＧＣ３３の負荷用量を有する集団のＰＦＳを示し、点線は、４日目のＧＣ３３の負荷用量を有さない集団のＰＦＳを示す。
【図１１Ｈ】図１１Ｈは、１６００ｍｇのＧＣ３３投薬を有し、ベースラインＡＦＰ値が１００ｎｇ／ｍＬを超えるもののみの有効性評価のための集団におけるＯＳのカプラン−マイヤープロットを示す図である。実線は、４日目のＧＣ３３の負荷用量を有する集団のＯＳを示し、点線は、４日目のＧＣ３３の負荷用量を有さない集団のＯＳを示す。
【発明の詳細な説明】
【００３２】
本願におけるデータは、ＧＰＣ３標的化剤の抗ＰＤ−Ｌ１免疫療法との組合せのための投与レジメンが、腫瘍増殖の阻害の増強、奏効率の増大および持続性応答をもたらしたことを示す。本発明者らは、本明細書において提供された併用療法の投与レジメンの利益を実証した：本明細書において提供された投与レジメンに従ってＧＰＣ３標的化剤およびＰＤ−１系結合アンタゴニストを投与することが、治療効果の増大（例えば、腫瘍応答の増強、抗腫瘍活性の増強、アルファフェトプロテイン（ＡＦＰ）の大きな減少など）および／または持続性の長期間反応をもたらす。
【００３３】
［Ｉ．定義］
本発明を詳細に記載する前に、本発明が、特定の組成物または生物学的系に限定されず、当然変動し得ることを理解すべきである。本明細書で使用される用語法は、特定の実施形態を記載することのみを目的としており、限定を意図しないこともまた、理解すべきである。
【００３４】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用する場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」および「この（ｔｈｅ）」は、文脈が明らかに他を示さない限り、複数の指示対象を含む。したがって、例えば、「１つの分子（ａ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ）」に対する言及は、２つ以上のかかる分子の組合せなどを含んでいてもよい。
【００３５】
用語「約」とは、本明細書で使用する場合、本技術分野の当業者に即座に知られるそれぞれの値についての、通常の誤差範囲を指す。本明細書の「約」値またはパラメータに対する言及は、その値またはパラメータ自体に関する実施形態を含む（および記述する）。
【００３６】
本明細書に記載される本発明の態様および実施形態は、その態様および実施形態を「含む」、それら「からなる」およびそれら「から本質的になる」ことを含むと理解される。
【００３７】
用語「ＰＤ−１系結合アンタゴニスト」とは、ＰＤ−１シグナル伝達系に対するシグナル伝達から生じるＴ細胞機能不全を除去するように、ＰＤ−１系結合パートナーとその結合パートナーのうちいずれか１以上との相互作用を阻害する分子を指し、Ｔ細胞機能（例えば、増殖、サイトカイン産生、標的細胞死滅）を回復または増強させる結果となる。本明細書で使用する場合、ＰＤ−１系結合アンタゴニストには、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストが含まれる。
【００３８】
用語「ＰＤ−１結合アンタゴニスト」とは、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２などのその結合パートナーのうち１以上との相互作用から生じるシグナル伝達を減少、遮断、阻害、無効化または干渉する分子を指す。一部の実施形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、その結合パートナーのうち１以上へのＰＤ−１の結合を阻害する分子である。具体的な一態様では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２へのＰＤ−１の結合を阻害する。例えば、ＰＤ−１結合アンタゴニストには、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２との相互作用から生じるシグナル伝達を減少、遮断、阻害、無効化または干渉する抗ＰＤ−１抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、ならびに他の分子が含まれる。一実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１を通したシグナル伝達を媒介するＴ細胞上に発現される細胞表面タンパク質により媒介されるか、又はそのようなタンパク質を通したネガティブな共刺激シグナルを低減させて、機能不全Ｔ細胞の非機能不全性を低下させる（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答を増強する）。一部の実施形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−１抗体である。具体的な一態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書に記載されるＭＤＸ−１１０６（ニボルマブ）である。ある具体的な一態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書に記載されるＭＫ−３４７５（ラムブロリズマブ）である。ある具体的な一態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書に記載されるＣＴ−０１１（ピディリズマブ）である。ある具体的な一態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、本明細書に記載されるＡＭＰ−２２４またはＡＭＰ−５１４（ＭＥＤＩ０６８０）である。ある特定の態様では、ＰＤ−１アンタゴニストは、本明細書に記載されるＰＤＲ００１、ＲＥＧＮ２８１０、ＢＧＢ  Ａ３１７およびＳＨＲ−１２１０からなる群から選択される。
【００３９】
用語「ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト」とは、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１、Ｂ７−１などのその結合パートナーのうちいずれか１以上との相互作用から生じるシグナル伝達を減少、遮断、阻害、無効化または干渉する分子を指す。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、その結合パートナーへのＰＤ−Ｌ１の結合を阻害する分子である。具体的な一態様では、このＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１および／またはＢ７−１へのＰＤ−Ｌ１の結合を阻害する。一部の実施形態では、このＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストには、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１、Ｂ７−１などのその結合パートナーのうち１以上との相互作用から生じるシグナル伝達を減少、遮断、阻害、無効化または干渉する抗ＰＤ−Ｌ１抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、ならびに他の分子が含まれる。一実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１を通したシグナル伝達を媒介するＴ細胞上に発現される細胞表面タンパク質により媒介されるか、又はそのようなタンパク質を通したネガティブな共刺激シグナルを低減させて、機能不全Ｔ細胞の非機能不全性を低下させる（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答を増強する）。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。具体的な一態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に記載されるＹＷ２４３．５５．Ｓ７０またはアテゾリズマブである。ある具体的な一態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に記載されるＭＤＸ−１１０５である。ある特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に記載されるアベルマブである。さらなるある具体的な一態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に記載されるＭＰＤＬ３２８０Ａである。さらなるある具体的な一態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に記載されるＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）である。
【００４０】
用語「ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニスト」とは、ＰＤ−Ｌ２とＰＤ−１などのその結合パートナーのうちいずれか１以上との相互作用から生じるシグナル伝達を減少、遮断、阻害、無効化または干渉する分子を指す。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、その結合パートナーのうち１以上へのＰＤ−Ｌ２の結合を阻害する分子である。具体的な一態様では、このＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、ＰＤ−１へのＰＤ−Ｌ２の結合を阻害する。一部の実施形態では、このＰＤ−Ｌ２アンタゴニストには、ＰＤ−Ｌ２とＰＤ−１などのその結合パートナーのうちいずれか１以上との相互作用から生じるシグナル伝達を減少、遮断、阻害、無効化または干渉する抗ＰＤ−Ｌ２抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、ならびに他の分子が含まれる。一実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、機能不全性Ｔ細胞をあまり機能不全でなくする（例えば、抗原認識に対するエフェクター応答を増強する）ように、ＰＤ−Ｌ２を介したシグナル伝達を媒介するＴ細胞上で発現される細胞表面タンパク質によってまたはそれを介して媒介されるネガティブな共刺激シグナルを低減させる。一部の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、イムノアドヘシンである。
【００４１】
用語「機能不全」とは、免疫機能不全の文脈において、抗原性刺激に対する免疫応答性が低減した状態を指す。この用語は、消耗、および／または、抗原認識が生じ得るが、次の免疫応答が、感染または腫瘍増殖を制御するには効果がないアネルギーの、両方の共通要素を含む。
【００４２】
用語「機能不全性」は、本明細書で使用する場合、抗原認識に対する耐性または不応答性、具体的には、抗原認識を下流のＴ細胞エフェクター機能、例えば、増殖、サイトカイン産生（例えば、ＩＬ−２）および／または標的細胞死滅へと転換する能力の障害もまた含む。
【００４３】
用語「アネルギー」（ａｎｅｒｇｙ）とは、Ｔ細胞受容体を介して伝達される不完全または不十分なシグナル（例えば、ｒａｓ活性化の非存在下での細胞内Ｃａ+2増加）から生じる、抗原刺激に対する不応答性の状態を指す。Ｔ細胞アネルギーは、共刺激の非存在下での抗原による刺激の際にも生じ得、これによって、共刺激の情況であっても、抗原による引き続く活性化に対して耐性になる細胞を生じる。無応答性状態は、インターロイキン−２の存在によって無効化され得ることが多い。アネルギー性Ｔ細胞は、クローン増殖を受けず、および／またはエフェクター機能を獲得しない。
【００４４】
用語「消耗」とは、多くの慢性感染およびがんの間に生じる持続性のＴＣＲシグナル伝達から生じるＴ細胞機能不全の状態としての、Ｔ細胞消耗を指す。これは、不完全なまたは欠損したシグナル伝達を介してではなく、持続性のシグナル伝達から生じるという点で、アネルギーから区別される。これは、乏しいエフェクター機能、阻害受容体の持続性の発現、および機能的エフェクターまたはメモリーＴ細胞のものとは異なる転写状態によって規定される。消耗は、感染および腫瘍の最適な制御を防止する。消耗は、外的陰性調節経路（例えば、免疫調節性サイトカイン）ならびに細胞固有の陰性調節（共刺激）経路（ＰＤ−１、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４など）の両方から生じ得る。
【００４５】
「Ｔ細胞機能を増強する」とは、持続性のもしくは増幅された生物学的機能を有するように、または消耗したもしくは不活性なＴ細胞を再生もしくは再活性化するようにＴ細胞を誘導する、そのようにさせるまたはそのように刺激することを意味する。Ｔ細胞機能を増強することの例には、以下が含まれる：介入前のそのレベルと比較した、ＣＤ８+Ｔ細胞からのγ−インターフェロンの増加した分泌、増加した増殖、増加した抗原応答性（例えば、ウイルス、病原体または腫瘍のクリアランス）。一実施形態では、増強のレベルは、少なくとも５０％、あるいは６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１２０％、１５０％、２００％である。この増強を測定する方法は、当業者に公知である。
【００４６】
「Ｔ細胞機能不全性障害」は、抗原性刺激に対する応答性の減少によって特徴付けられる、Ｔ細胞の障害または状態である。特定の一実施形態では、Ｔ細胞機能不全性障害は、ＰＤ−１を介した不適切な増加したシグナル伝達と特異的に関連する障害である。ある一実施形態では、Ｔ細胞機能不全性障害は、Ｔ細胞が、アネルギー性であるか、またはサイトカインを分泌する能力、増殖する能力もしくは細胞溶解活性を実行する能力が減少している、障害である。具体的な一態様では、この減少した応答性は、免疫原を発現する病原体または腫瘍の、制御を不効率にする。Ｔ細胞機能不全によって特徴付けられるＴ細胞機能不全性障害の例としては、未解決の急性感染、慢性感染および腫瘍免疫が挙げられる。
【００４７】
「腫瘍免疫」とは、腫瘍が免疫認識およびクリアランスを逃れるプロセスを指す。したがって、治療概念として、腫瘍免疫は、かかる回避が減弱され、腫瘍が免疫系によって認識および攻撃される場合に、「治療される」。腫瘍認識の例としては、腫瘍結合、腫瘍収縮および腫瘍クリアランスが挙げられる。
【００４８】
「免疫原性」とは、免疫応答を誘発する個々の物質の能力を指す。腫瘍は、免疫原性であり、腫瘍免疫原性を増強することは、免疫応答による腫瘍細胞のクリアランスに役立つ。腫瘍免疫原性を増強することの例として、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を用いる治療が挙げられる。
【００４９】
「持続性の応答」とは、治療の休止後に腫瘍増殖を低減させることに対する持続性の効果を指す。例えば、腫瘍サイズは、投与期の開始時のサイズと比較して、同じまたはより小さいままであり得る。一部の実施形態では、この持続性の応答は、治療持続期間と少なくとも同じ持続期間を有し、治療持続期間の少なくとも１．５×、２．０×、２．５×または３．０×の長さの持続期間を有する。
【００５０】
用語「医薬組成物」または「医薬製剤」とは、有効成分の生物活性が、有効であることを可能にするような形態であり、組成物または製剤が投与される対象にとって容認しがたく毒性であるさらなる構成成分を含有しない組成物または調製物を指す。このような組成物または製剤は無菌である。「薬学的に許容される」賦形剤（ビヒクル、添加剤）は、使用される活性成分の有効用量を提供するために、対象哺乳動物に合理的に投与され得る賦形剤である。
【００５１】
本明細書で使用する場合、用語「治療」とは、臨床病理学の過程の間に、治療される個体または細胞の天然の過程を改変するように設計された臨床的介入を指す。治療の望ましい効果としては、疾患進行の速度を減少させること、病状を改善または緩和すること、および寛解または予後の改善が挙げられる。例えば、がんに関連付けられる１以上の症状が緩和又は除去される場合、個体は成功裏に「治療」されたことになる。このような症状の緩和又は除去には、がん細胞の増殖の低減（又はがん細胞の破壊）、腫瘍増大の低減、疾患に起因する症状の低減、疾患罹患者の生活の質の上昇、疾患を治療するために必要な他の薬剤の用量の減少、および／または個体生存の延長が含まれるが、これらに限定されない。
【００５２】
本明細書で使用する場合、「疾患の進行を遅延させる」とは、疾患（例えば、がん）の発達を延期する、邪魔する、減速する、遅らせる、安定化する、および／または先延ばしにすることを意味する。この遅延は、治療されている疾患および／または個体の履歴に依存して、変動する長さの時間であり得る。当業者に明らかなように、十分なまたは顕著な遅延は、個体が疾患を発達させないという点において、事実上、予防を包含し得る。例えば、後期がん、例えば、転移の発達が、遅延され得る。
【００５３】
「有効量」は、特定の障害の測定可能な改善または予防をもたらすために必要とされる、少なくとも最小量である。本明細書では、有効量は、患者の病状、年齢、性別および体重、ならびに抗体が個体において所望の応答を惹起する能力などの因子に従って変動し得る。有効量は、治療的に有益な効果が治療の任意の毒性または有害な効果を上回る量でもある。予防的使用について、有益なまたは所望の結果には、リスクを排除もしくは低減させること、重症度を低下させること、または疾患、その合併症、および疾患の発達の間に示される中間の病理学的表現型の生化学的、組織学的および／もしくは行動学的症候を含む疾患の発病を遅延させることなどの結果が含まれる。治療的使用について、有益なまたは所望の結果には、疾患から生じる１以上の症候を減少させること、疾患に罹患している者の生活の質を増加させること、疾患を治療するために必要とされる他の薬物療法の用量を減少させること、標的化などを介した別の療法の効果を増強すること、疾患の進行を遅延させること、および／または生存を延長させることなどの臨床結果が含まれる。がんまたは腫瘍の場合、有効量の薬物は、がん細胞の数を低減させること；腫瘍サイズを低減させること；末梢臓器中へのがん細胞浸潤を阻害すること（即ち、ある程度まで減速させること、または望ましくは停止させること）；腫瘍転移を阻害すること（即ち、ある程度まで減速させること、または望ましくは停止させること）；腫瘍増殖をある程度まで阻害すること；および／または障害と関連する症候のうち１以上をある程度まで軽減することにおいて、効果を有し得る。有効量は、１以上の投与で投与され得る。本発明の目的のために、薬物、化合物または医薬組成物の有効量は、直接的または間接的のいずれかで予防的または治療的処置を達成するために十分な量である。臨床的状況において理解されるように、薬物、化合物または医薬組成物の有効量は、別の薬物、化合物または医薬組成物と併せて達成されてもされなくてもよい。したがって、「有効量」は、１以上の治療剤を投与する観点から考慮されてよく、１以上の他の薬剤と併せて所望の結果が達成され得るまたは達成される場合、単一の薬剤が有効量で与えられたとみなされ得る。
【００５４】
本明細書において、「とともに」および「と併用して」とは、ある治療様式の、別の治療様式に加えた投与を指す。そのようなものとして、「とともに」および「と併用して」とは、個体への、ある治療様式の、もう一方の治療様式の投与の前の、その間のまたはその後の投与を指す。
【００５５】
「障害」は、哺乳動物を問題の障害に罹りやすくする病理学的状態を含む慢性および急性の障害または疾患が含まれるがこれらに限定されない、治療から利益を得る任意の状態である。
【００５６】
用語「細胞増殖性疾患」および「増殖性疾患」とは、ある程度の異常な細胞増殖と関連する障害を指す。一実施形態では、この細胞増殖性疾患は、がんである。一実施形態では、この細胞増殖性疾患は、腫瘍である。
【００５７】
「腫瘍」とは、本明細書で使用する場合、悪性であるか良性であるかに関わらない、全ての新生物性の細胞増殖（ｇｒｏｗｔｈ）および増殖（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）、ならびに全ての前がん性およびがん性の細胞および組織を指す。用語「がん」、「がん性」、「細胞増殖性疾患」、「増殖性疾患」および「腫瘍」は、本明細書では、相互に排他的に言及されるわけではない。
【００５８】
用語「がん」および「がん性」とは、典型的には調節されない細胞増殖によって特徴付けられる哺乳動物における生理的状態を指す、またはかかる状態を記述する。がんの例としては、がん腫、リンパ腫、芽腫、肉腫、および白血病またはリンパ系悪性腫瘍が挙げられるがこれらに限定されない。かかるがんのより特定の例としては、扁平上皮がん（例えば、上皮性扁平細胞がん）、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺の腺がんおよび肺扁平上皮がん腫などの肺がん、腹膜のがん、肝細胞がん、胃腸がんおよび消化管間質がんを含む胃（ｇａｓｔｒｉｃ）または胃（ｓｔｏｍａｃｈ）がん、膵臓がん、神経膠芽腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝がん、膀胱がん、尿路のがん、肝がん、乳がん、大腸がん、直腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜または子宮がん、唾液腺がん、腎臓または腎がん、前立腺がん、外陰部がん、甲状腺がん、肝細胞がん、肛門がん、陰茎がん、メラノーマ、表在性拡大型メラノーマ、悪性黒子型メラノーマ、末端部黒子メラノーマ、結節性メラノーマ、多発性骨髄腫およびＢ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）；小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ；中悪性度／濾胞性ＮＨＬ；中悪性度びまん性ＮＨＬ；高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ；高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ；高悪性度小型非切れ込み核細胞性ＮＨＬ；巨大腫瘤病変ＮＨＬ；マントル細胞リンパ腫；ＡＩＤＳ関連リンパ腫；およびワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症を含む）；慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）；急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）；ヘアリー細胞白血病；慢性骨髄芽球性白血病；および移植後リンパ増殖性疾患（ＰＴＬＤ）、ならびに母斑症と関連する異常な血管増殖、浮腫（例えば、脳腫瘍に関連するもの）、メイグス症候群、脳、および頭頸部がん、ならびに関連する転移が挙げられるがこれらに限定されない。特定の実施形態では、本発明の抗体による治療に適したがんには、乳がん、結腸直腸がん、直腸がん、非小細胞肺がん、膠芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、腎細胞がん、前立腺がん、肝がん、膵臓がん、軟組織肉腫、カポジ肉腫、カルチノイドがん腫、頭頸部がん、卵巣がん、中皮腫および多発性骨髄腫が含まれる。一部の実施形態では、がんは、小細胞肺がん、神経膠芽腫、神経芽腫、メラノーマ、乳がん、胃がん、結腸直腸がん（ＣＲＣ）および肝細胞がんから選択される。さらに、一部の実施形態では、がんは、これらのがんの転移型を含む、非小細胞肺がん、結腸直腸がん、神経膠芽腫、乳がんおよび肝細胞がんから選択される。
【００５９】
用語「細胞傷害性剤」とは、本明細書で使用する場合、細胞にとって有害な（例えば、細胞死を引き起こす、増殖を阻害する、または細胞機能を他の方法で妨害する）、任意の薬剤を指す。細胞傷害性剤としては、放射性同位体（例えば、Ａｔ211、Ｉ131、Ｉ125、Ｙ90、Ｒｅ186、Ｒｅ188、Ｓｍ153、Ｂｉ212、Ｐ32、Ｐｂ212、およびＬｕの放射性同位体）；化学療法剤；増殖阻害性剤；酵素およびその断片、例えば核酸分解酵素；および毒素、例えば、低分子毒素、または、細菌、真菌、植物もしくは動物起源の酵素的に活性な毒素（それらの断片および／もしくはバリアントを含む）が挙げられるがこれらに限定されない。例示的な細胞傷害性剤としては、抗微小管剤、白金配位錯体、アルキル化剤、抗生物質剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、代謝拮抗薬、トポイソメラーゼＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモンアナログ、シグナル伝達経路阻害剤、非受容体チロシンキナーゼ血管新生阻害剤、免疫療法剤、アポトーシス促進剤、ＬＤＨ−Ａの阻害剤、脂肪酸生合成の阻害剤、細胞周期シグナル伝達阻害剤、ＨＤＡＣ阻害剤、プロテアソーム阻害剤、およびがん代謝の阻害剤から選択され得る。一実施形態では、この細胞傷害性剤は、タキサンである。一実施形態では、このタキサンは、パクリタキセルまたはドセタキセルである。一実施形態では、この細胞傷害性剤は、白金剤である。一実施形態では、この細胞傷害性剤は、ＥＧＦＲのアンタゴニストである。一実施形態では、このＥＧＦＲのアンタゴニストは、Ｎ−（３−エチニルフェニル）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）キナゾリン−４−アミン（例えば、エルロチニブ）である。一実施形態では、この細胞傷害性剤は、ＲＡＦ阻害剤である。一実施形態では、このＲＡＦ阻害剤は、ＢＲＡＦおよび／またはＣＲＡＦ阻害剤である。一実施形態では、このＲＡＦ阻害剤は、ベムラフェニブである。一実施形態では、この細胞傷害性剤は、ＰＩ３Ｋ阻害剤である。
【００６０】
「化学療法薬」としては、ナイトロジェンマスタード類似体、アルキルスルホネート、エチレンイミン、ニトロソウレア、エポキシド、その他のアルキル化剤、葉酸類似体、プリン類似体、ピリミジン類似体、その他の代謝拮抗剤、ビンカアルカロイドまたは類似体、ポドフィロトキシン誘導体、カンプトテカン類似体、コルヒチン誘導体、タキサン、その他の植物アルカロイドまたは天然物、アクチノマイシン、アントラサイクリンまたは関連物質、その他の細胞傷害性抗生物質、白金化合物、メチルヒドラジン、キナーゼ阻害剤、酵素、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、レチノイド、免疫チェックポイント阻害剤、抗体およびその他の分子標的薬が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６１】
「化学療法剤」としてはまた、がんの治療において有用な化合物が挙げられる。化学療法剤の例としては、エルロチニブ（タルセバ（商標）、ジェネンテック／ＯＳＩ  Ｐｈａｒｍ．）、ボルテゾミブ（ベルケード（商標）、Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ  Ｐｈａｒｍ．）、ジスルフィラム、エピガロカテキンガレート、サリノスポラミドＡ、カーフィルゾミブ、１７−ＡＡＧ（ゲルダナマイシン）、ラディシコール、乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨ−Ａ）、フルベストラント（フェソロデックス（商標）、アストラゼネカ）、スニチニブ（スーテント（商標）、ファイザー／Ｓｕｇｅｎ）、レトロゾール（フェマーラ（商標）、ノバルティス）、イマチニブメシル酸塩（グリベック（商標）、ノバルティス）、フィナスネート（ｆｉｎａｓｕｎａｔｅ）（バタラニブ（商標）、ノバルティス）、オキサリプラチン（エロキサチン（商標）、サノフィ）、５−ＦＵ（５−フルオロウラシル）、ロイコボリン、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（商標）、ワイス）、ラパチニブ（タイケルブ（商標）、ＧＳＫ５７２０１６、グラクソスミスクライン）、ロナファルニブ（ＳＣＨ  ６６３３６）、ソラフェニブ（ネクサバール（商標）、バイエルラボ）、ゲフィチニブ（イレッサ（商標）、アストラゼネカ）、ＡＧ１４７８、アルキル化剤、例えば、チオテパおよびシトキサン（商標）シクロホスファミド；スルホン酸アルキル、例えば、ブスルファン、インプロスルファンおよびピポスルファン；アジリジン、例えば、ベンゾドパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、カルボコン、メツレドパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）およびウレドパ（ｕｒｅｄｏｐａ）；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホルアミドおよびトリメチロメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）などのエチレンイミンおよびメチルメラミン；アセトゲニン（特に、ブラタシンおよびブラタシノン（ｂｕｌｌａｔａｃｉｎｏｎｅ））；カンプトテシン（トポテカンおよびイリノテカンなど）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン（ｃａｒｚｅｌｅｓｉｎ）およびビセレシン合成アナログなど）；クリプトフィシン（特に、クリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；副腎皮質ステロイド（プレドニゾンおよびプレドニゾロンなど）；シプロテロンアセテート；５α−レダクターゼ（フィナステリドおよびデュタステリドなど）；ボリノスタット、ロミデプシン、パノビノスタット、バルプロ酸、モセチノスタット  ドラスタチン；アルデスロイキン、タルク  デュオカルマイシン（合成アナログ、ＫＷ−２１８９およびＣＢ１−ＴＭ１など）；エリュテロビン；パンクラチスタチン（ｐａｎｃｒａｔｉｓｔａｔｉｎ）；サルコジクチン（ｓａｒｃｏｄｉｃｔｙｉｎ）；スポンジスタチン（ｓｐｏｎｇｉｓｔａｔｉｎ）；ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシル、クロマファジン（ｃｈｌｏｍａｐｈａｚｉｎｅ）、クロロホスファミド（ｃｈｌｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベンビチン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン（ｐｈｅｎｅｓｔｅｒｉｎｅ）、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソウレア類、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチンおよびラニムスチン；抗生物質、例えば、エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特に、カリケアマイシンγ１Ｉおよびカリケアマイシンω１Ｉ（Ａｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．１９９４  ３３：１８３〜１８６）；ダイネミシン（ｄｙｎｅｍｉｃｉｎ）Ａを含むダイネミシン；ビスホスホネート、例えば、クロドロネート；エスペラミシン；ならびにネオカルジノスタチンクロモフォアおよび関連の色素タンパク質エンジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アントラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン（ｃａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カミノマイシン（ｃａｍｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルジノフィリン（ｃａｒｚｉｎｏｐｈｉｌｉｎ）、クロモマイシン（ｃｈｒｏｍｏｍｙｃｉｎｉｓ）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン（ｄｅｔｏｒｕｂｉｃｉｎ）、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、アドリアマイシン（商標）（ドキソルビシン）、モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシンおよびデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン（ｅｓｏｒｕｂｉｃｉｎ）、イダルビシン、マルセロマイシン（ｍａｒｃｅｌｌｏｍｙｃｉｎ）、マイトマイシン、例えば、マイトマイシンＣ、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；代謝拮抗剤、例えば、メトトレキサートおよび５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸アナログ、例えば、デノプテリン（ｄｅｎｏｐｔｅｒｉｎ）、メトトレキサート、プテロプテリン（ｐｔｅｒｏｐｔｅｒｉｎ）、トリメトレキサート；プリンアナログ、例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン（ｔｈｉａｍｉｐｒｉｎｅ）、チオグアニン；ピリミジンアナログ、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン；アンドロゲン、例えば、カルステロン（ｃａｌｕｓｔｅｒｏｎｅ）、ドロモスタノロンプロピアナート、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗副腎剤、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補充薬、例えば、フロリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ  ａｃｉｄ）；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド（ａｌｄｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ  ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ）；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル（ｂｅｓｔｒａｂｕｃｉｌ）；ビスアントレン（ｂｉｓａｎｔｒｅｎｅ）；エダトレキサート；デフォファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）；デメコルチン；ジアジコン（ｄｉａｚｉｑｕｏｎｅ）；エルフォミチン（ｅｌｆｏｍｉｔｈｉｎｅ）；エリプチニウムアセタート（ｅｌｌｉｐｔｉｎｉｕｍ  ａｃｅｔａｔｅ）；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダミン；メイタンシノイド、例えば、メイタンシンおよびアンサミトシン（ａｎｓａｍｉｔｏｃｉｎ）；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダムノール（ｍｏｐｉｄａｍｎｏｌ）；ニトラエリン（ｎｉｔｒａｅｒｉｎｅ）；ペントスタチン；フェナメット（ｐｈｅｎａｍｅｔ）；ピラルビシン；ロソキサントロン（ｌｏｓｏｘａｎｔｒｏｎｅ）；ポドフィリン酸（ｐｏｄｏｐｈｙｌｌｉｎｉｃ  ａｃｉｄ）；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（商標）多糖複合体（ＪＨＳ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｅｕｇｅｎｅ、Ｏｒｅｇ．）；ラゾキサン；リゾキシン（ｒｈｉｚｏｘｉｎ）；シゾフラン（ｓｉｚｏｆｕｒａｎ）；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特に、Ｔ−２毒素、ベラクリンＡ（ｖｅｒｒａｃｕｒｉｎ  Ａ）、ロリジンＡおよびアングイジン（ａｎｇｕｉｄｉｎｅ））；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、タキソール（パクリタキセル；ブリストルマイヤーズスクイブ  オンコロジー、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ、Ｎ．Ｊ．）、アブラキサン（商標）（クレモルホールフリー）、パクリタキセルのアルブミン改変型ナノ粒子製剤（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ、Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ、Ｉｌｌ．）およびタキソテール（商標）（ドセタキセル、ドキセタキセル（ｄｏｘｅｔａｘｅｌ）；サノフィアベンティス）；クロラムブシル；ジェムザール（商標）（ゲムシタビン）；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金アナログ、例えば、シスプラチンおよびカルボプラチン；ビンブラスチン；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ナベルビン（商標）（ビノレルビン）；ノバントロン（ｎｏｖａｎｔｒｏｎｅ）；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビン（ゼローダ（商標））；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ  ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイド、例えば、レチノイン酸；ならびに上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸および誘導体が挙げられる。
【００６２】
化学療法剤としては、アレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ）、ベバシズマブ（アバスチン（商標）、ジェネンテック）；セツキシマブ（アービタックス（商標）、Ｉｍｃｌｏｎｅ）；パニツムマブ（ベクチビックス（商標）、アムジェン）、リツキシマブ（リツキサン（商標）、ジェネンテック／バイオジェン  Ｉｄｅｃ）、ペルツズマブ（オムニターグ（商標）、２Ｃ４、ジェネンテック）、トラスツズマブ（ハーセプチン（商標）、ジェネンテック）、トシツモマブ（Ｂｅｘｘａｒ、Ｃｏｒｉｘｉａ）および抗体薬物コンジュゲート、ゲムツズマブオゾガミシン（マイロターグ（商標）、ワイス）などの抗体が挙げられる。本発明の化合物との併用薬剤としての治療可能性を有するさらなるヒト化モノクローナル抗体には、以下が含まれる：アポリズマブ、アセリズマブ（ａｓｅｌｉｚｕｍａｂ）、アトリズマブ、バピニューズマブ、ビバツズマブメルタンシン（ｂｉｖａｔｕｚｕｍａｂ  ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ）、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ（ｃｅｄｅｌｉｚｕｍａｂ）、セルトリズマブペゴル、シドフシツズマブ（ｃｉｄｆｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、シドツズマブ（ｃｉｄｔｕｚｕｍａｂ）、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エプラツズマブ、エルリズマブ（ｅｒｌｉｚｕｍａｂ）、フェルビズマブ（ｆｅｌｖｉｚｕｍａｂ）、フォントリズマブ、ゲムツズマブオゾガミシン、イノツズマブオゾガミシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、モトビズマブ（ｍｏｔｏｖｉｚｕｍａｂ）、ナタリズマブ、ニモツズマブ（ｎｉｍｏｔｕｚｕｍａｂ）、ノロビズマブ（ｎｏｌｏｖｉｚｕｍａｂ）、ヌマビズマブ（ｎｕｍａｖｉｚｕｍａｂ）、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリズマブ（ｐａｓｃｏｌｉｚｕｍａｂ）、ペクフシツズマブ（ｐｅｃｆｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、ペクツズマブ（ｐｅｃｔｕｚｕｍａｂ）、パキセリズマブ、ラリビズマブ（ｒａｌｉｖｉｚｕｍａｂ）、ラニビズマブ、レスリビズマブ（ｒｅｓｌｉｖｉｚｕｍａｂ）、レスリズマブ、レシビズマブ（ｒｅｓｙｖｉｚｕｍａｂ）、ロベリズマブ（ｒｏｖｅｌｉｚｕｍａｂ）、ルプリズマブ（ｒｕｐｌｉｚｕｍａｂ）、シブロツズマブ（ｓｉｂｒｏｔｕｚｕｍａｂ）、シプリズマブ、ソンツズマブ（ｓｏｎｔｕｚｕｍａｂ）、タカツズマブテトラキセタン（ｔａｃａｔｕｚｕｍａｂ  ｔｅｔｒａｘｅｔａｎ）、タドシズマブ（ｔａｄｏｃｉｚｕｍａｂ）、タリズマブ、テフィバズマブ（ｔｅｆｉｂａｚｕｍａｂ）、トシリズマブ、トラリズマブ（ｔｏｒａｌｉｚｕｍａｂ）、ツコツズマブセルモロイキン（ｔｕｃｏｔｕｚｕｍａｂ  ｃｅｌｍｏｌｅｕｋｉｎ）、ツクシツズマブ（ｔｕｃｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、ウマビズマブ（ｕｍａｖｉｚｕｍａｂ）、ウルトキサズマブ、ウステキヌマブ、ビジリズマブ、およびインターロイキン−１２  ｐ４０タンパク質を認識するように遺伝的に改変された組換えの排他的にヒト配列の全長ＩｇＧ１λ抗体である抗インターロイキン−１２（ＡＢＴ−８７４／Ｊ６９５、ワイスリサーチおよびアボットラボラトリーズ）。
【００６３】
「増殖阻害性剤」とは、本明細書で使用する場合、インビトロまたはインビボのいずれかで細胞の増殖を阻害する化合物または組成物を指す。一実施形態では、増殖阻害性剤は、その抗体が結合する抗原を発現する細胞の増殖を防止または低減させる増殖阻害性抗体である。ある一実施形態では、この増殖阻害性剤は、Ｓ期の細胞の百分率を有意に低減させる薬剤であり得る。増殖阻害性剤の例としては、細胞周期進行を（Ｓ期以外の場所で）ブロックする薬剤、例えば、Ｇ１停止およびＭ期停止を誘導する薬剤が挙げられる。古典的なＭ期ブロッカーとしては、ビンカ（ビンクリスチンおよびビンブラスチン）、タキサン、ならびにトポイソメラーゼＩＩ阻害剤、例えば、ドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシン、エトポシドおよびブレオマイシンが含まれる。Ｇ１停止させる薬剤、例えば、ＤＮＡアルキル化剤、例えば、タモキシフェン、プレドニゾン、ダカルバジン、メクロレタミン、シスプラチン、メトトレキサート、５−フルオロウラシルおよびａｒａ−Ｃは、Ｓ期停止にも波及する。さらなる情報は、ＭｅｎｄｅｌｓｏｈｎおよびＩｓｒａｅｌ編、Ｔｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ、Ｃｈａｐｔｅｒ  １、Ｍｕｒａｋａｍｉ等による表題「Ｃｅｌｌ  ｃｙｃｌｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ，ａｎｄ  ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  ｄｒｕｇｓ」（Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、１９９５）の、例えばｐ．１３中に見出され得る。タキサン（パクリタキセルおよびドセタキセル）は、イチイの木から共に誘導される抗がん薬物である。ヨーロッパイチイから誘導されたドセタキセル（タキソテール（商標）、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ）は、パクリタキセルの半合成アナログ（タキソール（商標）、ブリストルマイヤーズスクイブ）である。パクリタキセルおよびドセタキセルは、チューブリンダイマーからの微小管のアセンブリを促進し、脱重合を防止することによって微小管を安定化して、細胞における有糸分裂の阻害を生じる。
【００６４】
「放射線療法」とは、正常に機能するその能力または細胞を完全に破壊するその能力を制限するような細胞への十分な損傷を誘導するための定方向のガンマ線またはベータ線の使用を意味する。投薬量および治療の持続期間を決定するための当該技術分野で公知の多くの方法が存在することが理解される。典型的な治療は、１回限りの投与として与えられ、典型的な投薬量は、１日当たり１０から２００単位（グレイ）までの範囲である。
【００６５】
治療を目的とした「対象」または「個体」とは、ヒト、飼育動物および家畜、ならびに動物園動物、競技用動物または愛玩動物、例えば、イヌ、ウマ、ネコ、ウシなどを含む、哺乳動物として分類される任意の動物を指す。好ましくは、この哺乳動物はヒトである。
【００６６】
本明細書で、用語「抗体」は、最も広い意味で使用され、それらが所望の生物活性を示す限り、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）および抗体断片を具体的にカバーする。
【００６７】
「単離された」抗体は、同定されており、かつその天然の環境の成分から分離および／または回収された抗体である。その天然の環境の夾雑物成分は、抗体についての研究、診断的または治療的使用に干渉する物質であり、酵素、ホルモン、および他のタンパク質性または非タンパク質性の溶質が含まれ得る。一部の実施形態では、抗体は、（１）例えばＬｏｗｒｙ法によって決定されるように、９５重量％超の抗体まで、一部の実施形態では９９重量％超まで；（２）例えばスピニングカップシークエネーターの使用によって、Ｎ末端もしくは内部アミノ酸配列の少なくとも１５残基を取得するのに十分な程度まで、または（３）例えば、クマシーブルーもしくは銀染色を使用して、還元もしくは非還元条件下でのＳＤＳ−ＰＡＧＥによって均質になるまで、精製される。抗体の天然の環境の少なくとも１つの成分が存在しないので、単離された抗体には、組換え細胞内のｉｎ  ｓｉｔｕの抗体が含まれる。しかし、通常、単離された抗体は、少なくとも１回の精製工程によって調製される。
【００６８】
「天然抗体」は、通常、２つの同一の軽（Ｌ）鎖および２つの同一の重（Ｈ）鎖から構成される、約１５０，０００ダルトンのヘテロ４量体糖タンパク質である。各軽鎖は、１つのジスルフィド共有結合によって重鎖に連結されるが、ジスルフィド連結の数は、異なる免疫グロブリンアイソタイプの重鎖間で変動する。各重鎖および軽鎖は、一定の間隔を空けた鎖内ジスルフィド架橋もまた有する。各重鎖は、一方の末端において１つの可変ドメイン（ＶH）を有し、その後にいくつかの定常ドメインを有する。各軽鎖は、一方の末端において１つの可変ドメイン（ＶL）を有し、その他方の末端において１つの定常ドメインを有する；軽鎖の定常ドメインは、重鎖の第１の定常ドメインと整列し、軽鎖可変ドメインは、重鎖の可変ドメインと整列する。特定のアミノ酸残基は、軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの間の接触面を形成すると考えられる。
【００６９】
用語「定常ドメイン」とは、免疫グロブリンの他の部分、抗原結合部位を含む可変ドメインと比較してより保存されたアミノ酸配列を有する、免疫グロブリン分子の部分を指す。定常ドメインは、重鎖のＣH１、ＣH２およびＣH３ドメイン（集合的に、ＣＨ）、ならびに軽鎖のＣＨＬ（またはＣＬ）ドメインを含む。
【００７０】
抗体の「可変領域」または「可変ドメイン」とは、抗体の重鎖または軽鎖のアミノ末端ドメインを指す。重鎖の可変ドメインは、「ＶH」と呼ばれ得る。軽鎖の可変ドメインは、「ＶL」と呼ばれ得る。これらのドメインは、一般に、抗体の最も可変性の部分であり、抗原結合部位を含む。
【００７１】
用語「可変」とは、可変ドメインの特定の部分が、抗体間で配列において広範に異なり、その特定の抗原に対する各特定の抗体の結合および特異性において使用されるという事実を指す。しかし、可変性は、抗体の可変ドメインの全体に均等に分布するわけではない。可変性は、軽鎖および重鎖の両方の可変ドメイン中の、超可変領域（ＨＶＲ）と呼ばれる３つのセグメントに集中している。可変ドメインのより高く保存された部分は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。天然の重鎖および軽鎖の可変ドメインは、各々、ベータ−シート構造を接続し、一部の場合にはベータ−シート構造の一部を形成するループを形成する３つのＨＶＲによって接続された、ベータ−シート立体配置を主として取る４つのＦＲ領域を含む。各鎖中のＨＶＲは、ＦＲ領域によって、他方の鎖由来のＨＶＲとごく接近して一緒に維持され、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔ等、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅ
ｒｅｓｔ、Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．（１９９１）を参照のこと）。定常ドメインは、抗原への抗体の結合に直接関与しないが、種々のエフェクター機能、例えば、抗体依存性細胞傷害における抗体の関与を示す。
【００７２】
任意の哺乳動物種由来の抗体（免疫グロブリン）の「軽鎖」は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいてカッパ（「κ」）およびラムダ（「λ」）と呼ばれる、２つの明らかに異なる型のうちの１つに割り当てられ得る。
【００７３】
用語ＩｇＧ「アイソタイプ」または「サブクラス」は、本明細書で使用する場合、それらの定常領域の化学的および抗原性特性によって規定される免疫グロブリンのサブクラスのいずれかを意味する。
【００７４】
それらの重鎖の定常ドメインのアミノ酸配列に依存して、抗体（免疫グロブリン）は、異なるクラスに割り当てられ得る。免疫グロブリンの５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧおよびＩｇＭが存在し、これらのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２へとさらに分けられ得る。異なるクラスの免疫グロブリンに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれ、α、γ、ε、γおよびμと呼ばれる。異なるクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造および３次元立体配置は、周知であり、例えば、Ａｂｂａｓ等  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、４ｔｈ  ｅｄ．（Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｃｏ．、２０００）に、一般に記載されている。抗体は、抗体と１以上の他のタンパク質またはペプチドとの共有結合的または非共有結合的会合によって形成される、より大きい融合分子の一部であり得る。
【００７５】
用語「全長抗体」、「インタクトな抗体」および「全抗体」は、本明細書で相互交換可能に使用されて、その実質的にインタクトな形態での抗体を指し、以下に定義される抗体断片ではない。これらの用語は、特に、Ｆｃ領域を含む重鎖を有する抗体を指す。
【００７６】
本明細書の目的のために、「ネイキッド抗体」は、細胞傷害性部分または放射標識にコンジュゲートされていない抗体である。
【００７７】
「抗体断片」は、好ましくはその抗原結合領域を含む、インタクトな抗体の一部分を含む。一部の実施形態では、本明細書に記載される抗体断片は、抗原結合断片である。抗体断片の例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）2、ｓｃＦｖおよびＦｖ断片；ディアボディ；直鎖状抗体；単鎖抗体分子；ならびに抗体断片から形成された多重特異性抗体が挙げられる。
【００７８】
抗体のパパイン消化は、各々が単一抗原結合部位を有する、「Ｆａｂ」断片と呼ばれる２つの同一の抗原結合断片、およびその名称が容易に結晶化するその能力を反映している１つの残留「Ｆｃ」断片を生じる。ペプシン処理は、２つの抗原結合部位を有し、なおも抗原を架橋することが可能である、１つのＦ（ａｂ’）2断片を生じる。
【００７９】
「Ｆｖ」は、完全な抗原結合部位を含む最小抗体断片である。一実施形態では、二鎖Ｆｖ種は、緊密に非共有結合的に会合した１つの重鎖および１つの軽鎖可変ドメインのダイマーからなる。単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）種では、１つの重鎖および１つの軽鎖可変ドメインは、軽鎖および重鎖が、二鎖Ｆｖ種中のものと類似の「ダイマー」構造で会合し得るように、柔軟なペプチドリンカーによって共有結合的に連結され得る。「Ｆｖ」は、各可変ドメインの３つのＨＶＲが相互作用してＶＨ−ＶＬダイマーの表面上の抗原結合部を規定する、この立体配置で存在する。集合的に、６つのＨＶＲが、抗体に抗原結合特異性を付与する。しかし、単一可変ドメイン（または抗原に対して特異的な３つのＨＶＲのみを含むＦｖの半分）でさえ、結合部位全体よりもより低い親和性ではあるが、抗原を認識および結合する能力を有する。
【００８０】
Ｆａｂ断片は、重鎖および軽鎖可変ドメインを含み、軽鎖の定常ドメインおよび重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）もまた含む。Ｆａｂ’断片は、抗体ヒンジ領域由来の１以上のシステインを含む重鎖ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端における数残基の追加の分、Ｆａｂ断片とは異なる。Ｆａｂ’−ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が遊離チオール基を有する、Ｆａｂ’についての本明細書での命名である。Ｆ（ａｂ’）2抗体断片は、元々、それらの間にヒンジシステインを有するＦａｂ’断片の対として産生された。抗体断片の他の化学カップリングも公知である。
【００８１】
「単鎖Ｆｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体断片は、抗体のＶＨおよびＶＬドメインを含み、これらのドメインは、単一ポリペプチド鎖中に存在する。一般に、ｓｃＦｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間に、ｓｃＦｖが抗原結合にとって所望の構造を形成するのを可能にするポリペプチドリンカーをさらに含む。ｓｃＦｖの総説については、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｅｎ、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、ｖｏｌ．１１３、ＲｏｓｅｎｂｕｒｇおよびＭｏｏｒｅ編、（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９４）、ｐｐ．２６９〜３１５を参照のこと。
【００８２】
用語「ディアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）」とは、２つの抗原結合部位を有する抗体断片を指し、これらの断片は、同じポリペプチド鎖（ＶＨ−ＶＬ）中に、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に接続された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。同じ鎖上の２つのドメイン間のペアリングを可能にするには短すぎるリンカーを使用することによって、これらのドメインは、別の鎖の相補的ドメインとペアリングするようにさせられ、２つの抗原結合部位を創出する。ディアボディは、二価または二重特異性であり得る。ディアボディは、例えば、ＥＰ４０４，０９７；ＷＯ１９９３／０１１６１；Ｈｕｄｓｏｎ等、Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９〜１３４（２００３）；およびＨｏｌｌｉｎｇｅｒ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４〜６４４８（１９９３）中に、より完全に記載されている。トリアボディ（ｔｒｉａｂｏｄｙ）およびテトラボディ（ｔｅｔｒａｂｏｄｙ）もまた、Ｈｕｄｓｏｎ等、Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９〜１３４（２００３）中に記載されている。
【００８３】
用語「モノクローナル抗体」とは、本明細書で使用する場合、実質的に均一な抗体の集団から取得された抗体を指し、例えば、この集団を構成する個々の抗体は、微量で存在し得る可能な変異、例えば、天然に存在する変異を除き、同一である。したがって、修飾語「モノクローナル」は、別々の抗体の混合物ではない抗体の特性を示す。特定の実施形態では、かかるモノクローナル抗体には、典型的には、標的を結合するポリペプチド配列を含む抗体が含まれ、ここで、標的結合ポリペプチド配列は、複数のポリペプチド配列からの単一標的結合ポリペプチド配列の選択を含むプロセスによって取得されたものである。例えば、この選択プロセスは、複数のクローン、例えば、ハイブリドーマクローン、ファージクローンまたは組換えＤＮＡクローンのプールからの独自のクローンの選択であり得る。選択された標的結合配列は、例えば、標的に対する親和性を改善するため、標的結合配列をヒト化するため、細胞培養物中でのその産生を改善するため、そのインビボでの免疫原性を低減させるため、多重特異性抗体を創出するためなどに、さらに変更され得、変更された標的結合配列を含む抗体もまた、本発明のモノクローナル抗体であることを、理解すべきである。異なる決定基（エピトープ）に対する異なる抗体を典型的には含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原上の単一決定基に対するものである。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体調製物は、典型的には他の免疫グロブリンが夾雑していないという点で、有利である。
【００８４】
修飾語「モノクローナル」は、抗体の実質的に均一な集団から取得されるという抗体の特性を示し、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とするとは解釈されるべきではない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、例えば以下を含む種々の技術によって作製され得る：ハイブリドーマ法（例えば、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ、Ｎａｔｕｒｅ、２５６：４９５〜９７（１９７５）；Ｈｏｎｇｏ等、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ、１４（３）：２５３〜２６０（１９９５）、Ｈａｒｌｏｗ等、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ、２ｎｄ  ｅｄ．１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇ等、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｔ−Ｃｅｌｌ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ  ５６３〜６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、Ｎ．Ｙ．、１９８１））、組換えＤＮＡ法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照のこと）、ファージディスプレイテクノロジー（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ等、Ｎａｔｕｒｅ、３５２：６２４〜６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓ等、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１〜５９７（１９９２）；Ｓｉｄｈｕ等、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９〜３１０（２００４）；Ｌｅｅ等、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３〜１０９３（２００４）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０１（３４）：１２４６７〜１２４７２（２００４）；およびＬｅｅ等、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２８４（１−２）：１１９〜１３２（２００４）を参照のこと）、ならびにヒト免疫グロブリン配列をコードするヒト免疫グロブリン遺伝子座または遺伝子の一部または全てを有する動物においてヒトまたはヒト様抗体を産生するためのテクノロジー（例えば、ＷＯ１９９８／２４８９３；ＷＯ１９９６／３４０９６；ＷＯ１９９６／３３７３５；ＷＯ１９９１／１０７４１；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：２５５１（１９９３）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ等、Ｎａｔｕｒｅ  ３６２：２５５〜２５８（１９９３）；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ等、Ｙｅａｒ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：３３（１９９３）；米国特許第５，５４５，８０７号；米国特許第５，５４５，８０６号；米国特許第５，５６９，８２５号；米国特許第５，６２５，１２６号；米国特許第５，６３３，４２５号；および米国特許第５，６６１，０１６号；Ｍａｒｋｓ等、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９〜７８３（１９９２）；Ｌｏｎｂｅｒｇ等、Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８５６〜８５９（１９９４）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ、Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８１２〜８１３（１９９４）；Ｆｉｓｈｗｉｌｄ等、Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８４５〜８５１（１９９６）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ、Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８２６（１９９６）；ならびにＬｏｎｂｅｒｇおよびＨｕｓｚａｒ、Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５〜９３（１９９５）を参照のこと）。
【００８５】
本明細書のモノクローナル抗体には、重鎖および／または軽鎖の一部が、特定の種に由来する抗体または特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体における対応する配列と同一または相同であるが、鎖（複数可）の残部が、別の種に由来する抗体または別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体における対応する配列と同一または相同である「キメラ」抗体、ならびにそれらが所望の生物活性を示す限りにおいてかかる抗体の断片が、具体的に含まれる（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号；およびＭｏｒｒｉｓｏｎ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８１：６８５１〜６８５５（１９８４）を参照のこと）。キメラ抗体には、抗体の抗原結合領域が、例えば目的の抗原を用いてマカクザルを免疫化することによって産生される抗体から誘導される、ＰＲＩＭＡＴＴＺＥＤ（商標）抗体が含まれる。
【００８６】
非ヒト（例えば、マウス）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト免疫グロブリン由来の最小配列を含むキメラ抗体である。一実施形態では、ヒト化抗体は、レシピエントのＨＶＲ由来の残基が、所望の特異性、親和性、および／または能力を有する、マウス、ラット、ウサギまたは非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）のＨＶＲ由来の残基によって置き換えられた、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。一部の例では、ヒト免疫グロブリンのＦＲ残基は、対応する非ヒト残基によって置き換えられる。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体中にもドナー抗体中にも見出されない残基を含み得る。これらの改変は、抗体の性能をさらに洗練するために行われ得る。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つの、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、ここで、超可変ループの全てまたは実質的に全ては、非ヒト免疫グロブリンのものと対応し、ＦＲの全てまたは実質的に全ては、ヒト免疫グロブリン配列のものである。このヒト化抗体は、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部分、典型的にはヒト免疫グロブリンの一部を含んでいてもよい。さらなる詳細については、例えば、Ｊｏｎｅｓ等、Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２〜５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ等、Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３〜３２９（１９８８）；およびＰｒｅｓｔａ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３〜５９６（１９９２）を参照のこと。例えば、ＶａｓｗａｎｉおよびＨａｍｉｌｔｏｎ、Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ、Ａｓｔｈｍａ  ＆  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：１０５〜１１５（１９９８）；Ｈａｒｒｉｓ、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ  ２３：１０３５〜１０３８（１９９５）；ＨｕｒｌｅおよびＧｒｏｓｓ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．５：４２８〜４３３（１９９４）；ならびに米国特許第６，９８２，３２１号および米国特許第７，０８７，４０９号もまた参照のこと。
【００８７】
「ヒト抗体」は、ヒトによって産生され、および／または本明細書に開示されるようなヒト抗体を作製するための技術のいずれかを使用して作製された抗体のものと対応するアミノ酸配列を有する抗体である。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を具体的に排除する。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリーを含む、当該技術分野で公知の種々の技術を使用して産生され得る。ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＷｉｎｔｅｒ、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２７：３８１（１９９１）；Ｍａｒｋｓ等、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２２：５８１（１９９１）。ヒトモノクローナル抗体の調製のために、Ｃｏｌｅ等、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ、Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ、ｐ．７７（１９８５）；Ｂｏｅｒｎｅｒ等、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４７（１）：８６〜９５（１９９１）に記載される方法もまた、利用可能である。ｖａｎ  Ｄｉｊｋおよびｖａｎ  ｄｅ  Ｗｉｎｋｅｌ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．、５：３６８〜７４（２００１）もまた参照のこと。ヒト抗体は、抗原性曝露に応答してかかる抗体を産生するように改変されているが、その内因性の遺伝子座が無効化にされている、トランスジェニック動物、例えば、免疫ゼノマウスに抗原を投与することによって調製され得る（例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）テクノロジーに関しては、米国特許第６，０７５，１８１号および米国特許第６，１５０，５８４号を参照のこと）。例えば、ヒトＢ細胞ハイブリドーマテクノロジーを介して生成されるヒト抗体に関しては、Ｌｉ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、１０３：３５５７〜３５６２（２００６）もまた参照のこと。
【００８８】
「種依存的抗体」は、第２の哺乳動物種由来の抗原のホモログに対して有する結合親和性よりも、第１の哺乳動物種由来の抗原に対してより強い結合親和性を有する抗体である。通常、この種依存的抗体は、ヒト抗原に「特異的に結合する」（例えば、約１×１０-7Ｍ以下、好ましくは約１×１０-8Ｍ以下、好ましくは約１×１０-9Ｍ以下の結合親和性（Ｋｄ）値を有する）が、第２の非ヒト哺乳動物種由来の抗原のホモログに対して、ヒト抗原に対するその結合親和性よりも、少なくとも約５０分の１または少なくとも約５００分の１または少なくとも約１０００分の１弱い、結合親和性を有する。この種依存的抗体は、上に定義したような種々の型の抗体のいずれかであり得るが、好ましくは、ヒト化またはヒト抗体である。
【００８９】
用語「超可変領域」、「ＨＶＲ」または「ＨＶ」とは、本明細書で使用する場合、配列が超可変であるおよび／または構造的に規定されたループを形成する、抗体可変ドメインの領域を指す。一般に、抗体は、６つのＨＶＲを含む；３つはＶＨ中（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）、３つはＶＬ中（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）。天然抗体では、Ｈ３およびＬ３は、６つのＨＶＲのうち最大の多様性を示し、特に、Ｈ３は、抗体に優れた特異性を付与することにおいて独自の役割を果たすと考えられている。例えば、Ｘｕ等、Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １３：３７〜４５（２０００）；ＪｏｈｎｓｏｎおよびＷｕ、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２４８：１〜２５（Ｌｏ編、Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、Ｎ．Ｊ．、２００３）を参照のこと。実際、重鎖のみからなる天然に存在するラクダ科の抗体は、軽鎖の非存在下で、機能的かつ安定である。例えば、Ｈａｍｅｒｓ−Ｃａｓｔｅｒｍａｎ等、Ｎａｔｕｒｅ  ３６３：４４６〜４４８（１９９３）；Ｓｈｅｒｉｆｆ等、Ｎａｔｕｒｅ  Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．３：７３３〜７３６（１９９６）を参照のこと。
【００９０】
いくつかのＨＶＲ表現が使用されており、本明細書において包含される。カバット相補性決定領域（ＣＤＲ）は、配列可変性に基づいており、最も一般的に使用されるものである（Ｋａｂａｔ等、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．（１９９１））。Ｃｈｏｔｈｉａは、代わりに、構造的ループの位置に言及している（ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１〜９１７（１９８７））。ＡｂＭ  ＨＶＲは、カバットのＨＶＲとＣｈｏｔｈｉａの構造的ループとの間の妥協を示しており、Ｏｘｆｏｒｄ  ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデル化ソフトウェアによって使用されている。「ｃｏｎｔａｃｔ」ＨＶＲは、入手可能な複雑な結晶構造の解析に基づく。これらのＨＶＲの各々由来の残基は、以下に示される。
【００９１】
【表１】
2020534335.tif 000002
【００９２】
ＨＶＲは、以下のような「拡大ＨＶＲ」を含み得る：ＶＬ中の２４−３６または２４−３４（Ｌ１）、４６−５６または５０−５６（Ｌ２）および８９−９７または８９−９６（Ｌ３）ならびにＶＨ中の２６−３５（Ｈ１）、５０−６５または４９−６５（Ｈ２）および９３−１０２、９４−１０２または９５−１０２（Ｈ３）。これらの可変ドメイン残基は、これらの定義の各々について、Ｋａｂａｔ等、上記に従って番号付けされる。
【００９３】
「フレームワーク」または「ＦＲ」残基は、本明細書に定義されるようなＨＶＲ残基以外の可変ドメイン残基である。
【００９４】
用語「カバットの可変ドメイン残基番号付け」または「カバットのアミノ酸位置番号付
け」およびそれらのバリエーションは、Ｋａｂａｔ等における、上記中の抗体の編集物の重鎖可変ドメインまたは軽鎖可変ドメインのために使用される番号付けシステムを指す。この番号付けシステムを使用して、実際の直鎖状アミノ酸配列は、可変ドメインのＦＲもしくはＨＶＲの短縮またはそれら中への挿入に対応する、より少ないまたはさらなるアミノ酸を含み得る。例えば、重鎖可変ドメインは、Ｈ２の残基５２の後の単一アミノ酸挿入（カバットに従う残基５２ａ）および重鎖ＦＲの残基８２の後の挿入された残基（例えば、カバットに従う残基８２ａ、８２ｂおよび８２ｃなど）を含み得る。残基のカバット番号付けは、抗体の配列と「標準的な」カバット番号付けされた配列との相同性の領域におけるアラインメントによって、所与の抗体について決定され得る。
【００９５】
このカバット番号付けシステムは、可変ドメイン中の残基（軽鎖のおよそ残基１−１０７および重鎖の残基１−１１３）に言及する場合に、一般に使用される（例えば、Ｋａｂａｔ等、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ．５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．（１９９１））。「ＥＵ番号付けシステム」または「ＥＵインデックス」は、免疫グロブリン重鎖定常領域中の残基に言及する場合に、一般に使用される（例えば、上記Ｋａｂａｔ等において報告されたＥＵインデックス）。「カバットのＥＵインデックス」とは、ヒトＩｇＧ１  ＥＵ抗体の残基番号付けを指す。
【００９６】
表現「直鎖状抗体」とは、Ｚａｐａｔａ等（１９９５  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ、８（１０）：１０５７〜１０６２）に記載される抗体を指す。簡潔に述べると、これらの抗体は、相補的軽鎖ポリペプチドと一緒になって一対の抗原結合領域を形成する一対のタンデムＦｄセグメント（ＶＨ−ＣＨ１−ＶＨ−ＣＨ１）を含む。直鎖状抗体は、二重特異性または単一特異性であり得る。
【００９７】
本明細書で使用する場合、用語「結合する」、「〜に特異的に結合する」または「〜に対して特異的である」とは、測定可能かつ再現性のある相互作用、例えば、標的と抗体との間の結合を指し、生体分子を含む分子の不均一な集団の存在下での標的の存在を決定する。例えば、標的（これはエピトープであり得る）に結合するまたは特異的に結合する抗体は、他の標的に結合するよりも、より大きい親和性、結合活性で、より容易に、および／またはより長い持続期間で、この標的を結合する抗体である。一実施形態では、無関係な標的への抗体の結合の程度は、例えばラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）によって測定される場合、標的への抗体の結合の約１０％未満である。特定の実施形態では、標的に特異的に結合する抗体は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭまたは≦０．１ｎＭの解離定数（Ｋｄ）を有する。特定の実施形態では、抗体は、異なる種由来のタンパク質間で保存されたタンパク質上のエピトープに特異的に結合する。ある一実施形態では、特異的結合は、排他的な結合を含み得るが、それを必要としない。
【００９８】
用語「負荷期間」とは、本明細書において、個体に単数または複数の治療薬の１以上の用量が投与される期間を指し、維持期間または維持投薬期間が続く。併用療法の負荷期間内に、ＧＰＣ３標的化剤のみが投与されてもよく、ＧＰＣ３標的化剤およびＰＤ−１系結合アンタゴニストの両方が投与されてもよい。負荷期間内に投与される治療薬（複数可）の各用量の量は、維持期間内に達せられ得るものよりも早く、治療薬の所望の定常状態濃度に達するように、維持期間内に投与される治療薬（複数可）の各用量を超えるか、もしくはそれと同様である、および／または負荷期間内の用量（複数可）は、維持期間内の用量（複数可）よりも頻繁に投与される。
【００９９】
本明細書において用語「維持期間」または「維持投薬期間」とは、個体に治療薬（単数または複数）の１以上の用量が投与される期間を指す。普通、維持期間内では、治療薬（単数または複数）の１以上の用量は、本明細書において記載されるような間隔をあけた投与間隔で投与される。維持期間は、適当である限り延長されてもよく、例えば、維持期間は、治療薬（単数または複数）の用量（複数可）が、１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回以上、１５回以上、２０回以上、３０回以上、４０回以上、５０回以上または１００回以上投与され得るように長い。
【０１００】
本明細書において用語「投与間隔」（個々の投与の間の間隔）とは、ｎ番目の用量の投与（ｎは、１またはそれより大きい整数である）と（ｎ＋１）番目の用量の投与の間の間隔を指す。本明細書において「ｎ番目の用量」とは、負荷期間内に投与される任意の用量または維持期間内に投与される任意の用量であり得る。一実施形態では、本開示のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび／またはＧＰＣ３標的化剤の投与間隔は、１日以上の最短期間であり、３カ月以内の最大期間であり、具体的には、例えば、１日、２日、３日、４日、５日、６日、１週間、１０日、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間、１カ月、２カ月または３カ月であり得る。投与間隔はまた、それらとは異なって表されてもよく、例えば、毎日１回、毎週１回または３週に１回のように特定されてもよく、例えば、毎日、毎週、または３週間ごとのように特定されてもよい。投与間隔はまた、異なって表されてもよく、例えば、７日サイクルのうち１日目に、または２１日サイクルのうち１日目にのように特定されてもよい。
【０１０１】
［ＩＩ．ＰＤ−１系結合アンタゴニスト］
個体に有効量の、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を投与することを含む、個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延する方法が、本明細書で提供される。また、個体に有効量の、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を投与することを含む、がんを有する個体において腫瘍細胞に対する免疫応答を増強する方法も本明細書で提供される。例えば、腫瘍細胞に対する免疫応答の増強として、マクロファージおよび多核巨細胞を含む免疫細胞の、腫瘍組織への浸潤が挙げられる。ある例については、腫瘍細胞に対する免疫応答の増強として、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）におけるＣＤ４５陽性リンパ球、ＣＤ３ε陽性リンパ球およびＣＤ８陽性Ｔリンパ球の増大が挙げられる。例えば、ＰＤ−１系結合アンタゴニストには、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストが挙げられる。ＰＤ−１（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ  ｄｅａｔｈ  １）は、当該技術分野で、「ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ  ｃｅｌｌ  ｄｅａｔｈ  １」、ＰＤＣＤ１、ＣＤ２７９およびＳＬＥＢ２とも呼ばれる。ＰＤ−Ｌ１（プログラム死リガンド１）は、当該技術分野で、「ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ  ｄｅａｔｈ  １  ｌｉｇａｎｄ  １」、ＰＤＣＤ１ＬＧ１、ＣＤ２７４、Ｂ７−ＨおよびＰＤ−Ｌ１とも呼ばれる。ＰＤ−Ｌ２（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ  ｄｅａｔｈ  ｌｉｇａｎｄ  ２）は、当該技術分野で、「ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ  ｄｅａｔｈ  １  ｌｉｇａｎｄ  ２」、ＰＤＣＤ１ＬＧ２、ＣＤ２７３、Ｂ７−ＤＣ、ＢｔｄｃおよびＰＤＬ２とも呼ばれる。一部の実施形態では、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２は、ヒトのＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２である。
【０１０２】
一部の実施形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、そのリガンド結合パートナーへのＰＤ−１の結合を阻害する分子である。具体的な一態様では、このＰＤ−１リガンド結合パートナーは、ＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２である。ある実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、その結合パートナーへのＰＤ−Ｌ１の結合を阻害する分子である。具体的な一態様では、ＰＤ−Ｌ１結合パートナーは、ＰＤ−１および／またはＢ７−１である。ある一実施形態では、このＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、その結合パートナーへのＰＤ−Ｌ２の結合を阻害する分子である。具体的な一態様では、ＰＤ−Ｌ２結合パートナーは、ＰＤ−１である。このアンタゴニストは、抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質またはオリゴペプチドであり得る。
【０１０３】
一部の実施形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−１抗体（例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体またはキメラ抗体）である。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−１抗体は、ＭＤＸ−１１０６（ニボルマブ）、ＭＫ−３４７５（ラムブロリズマブ）およびＣＴ−０１１（ピディリズマブ）からなる群から選択される。一部の実施形態では、このＰＤ−１結合アンタゴニストは、イムノアドヘシン（例えば、定常領域（例えば、免疫グロブリン配列のＦｃ領域）に融合されたＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２の細胞外またはＰＤ−１結合部分を含むイムノアドヘシン）である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＡＭＰ−２２４またはＡＭＰ−５１４（ＭＥＤＩ０６８０）である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤＲ００１、ＲＥＧＮ２８１０、ＢＧＢ  Ａ３１７、ＳＨＲ−１２１０、ＢＩ７５４０９１、ＪＮＪ−６３７２３２８３、ＭＧＡ０１２、ＰＦ−０６８０１５９１、ＪＳ−００１およびＴＳＲ−０４２からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、アテゾリズマブ、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＤＸ−１１０５、アベルマブ、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）、ＫＮ０３５、ＣＸ−０７２、ＬＹ３３００００５４およびＦＡＺ０５３からなる群から選択される。抗体ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０は、ＷＯ２０１０／０７７６３４に記載された抗ＰＤ−Ｌ１である。ＭＤＸ−１１０５は、ＢＭＳ−９３６５５９としても知られ、ＷＯ２００７／００５８７４に記載された抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。アベルマブは、ＷＯ２０１３０７９１７４に記載された抗ＰＤＬ１抗体である。ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）は、ＷＯ２０１１／０６６３８９およびＵＳ２０１３／０３４５５９に記載された抗ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体である。ニボルマブは、ＭＤＸ−１１０６−０４、ＭＤＸ−１１０６、ＯＮＯ−４５３８、ＢＭＳ−９３６５５８およびオプジーボ（商標）としても知られ、ＷＯ２００６／１２１１６８に記載された抗ＰＤ−１抗体である。ペンブロリズマブは、ＭＫ−３４７５、Ｍｅｒｃｋ  ３４７５、ラムブロリズマブ、キイトルーダ（商標）およびＳＣＨ−９００４７５としても知られ、ＷＯ２００９／１１４３３５に記載された抗ＰＤ−１抗体である。ＣＴ−０１１は、ｈＢＡＴ、ｈＢＡＴ−１またはピディリズマブとしても知られ、ＷＯ２００９／１０１６１１に記載された抗ＰＤ−１抗体である。ＡＭＰ−２２４は、Ｂ７−ＤＣＩｇとしても知られ、ＷＯ２０１０／０２７８２７およびＷＯ２０１１／０６６３４２に記載されたＰＤ−Ｌ２−Ｆｃ融合可溶型受容体である。
【０１０４】
一部の実施形態では、このＰＤ−１系結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１との間および／
またはＰＤ−Ｌ１とＢ７−１との間の結合を阻害することが可能である。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、モノクローナル抗体である。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆｖ、ｓｃＦｖおよび（Ｆａｂ’）2断片からなる群から選択される抗体断片である。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ヒト化抗体である。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ヒト抗体である。
【０１０５】
本発明の方法のために有用な抗ＰＤ−Ｌ１抗体およびそれを作製するための方法の例は、本明細書に引用することにより援用される、ＰＣＴ特許出願ＷＯ２０１０／０７７６３４、ＷＯ２００７／００５８７４、ＷＯ２０１１／０６６３８９および米国特許出願公開第ＵＳ２０１３／０３４５５９号に記載されている。本発明において有用な抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、かかる抗体を含む組成物を含め、がんを治療するためにＧＰＣ３標的化剤と組み合わせて使用され得る。
【０１０６】
［抗ＰＤ−１抗体］
一部の実施形態では、この抗ＰＤ−１抗体は、ＭＤＸ−１１０６である。「ＭＤＸ−１１０６」の代替的名称としては、ＭＤＸ−１１０６−０４、ＯＮＯ−４５３８、ＢＭＳ−９３６５５８またはニボルマブが挙げられる。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−１抗体は、ニボルマブ（ＣＡＳ登録番号：９４６４１４−９４−４）である。なおさらなる一実施形態では、配列番号１由来の重鎖可変領域アミノ酸配列を含む重鎖可変領域および／または配列番号２由来の軽鎖可変領域アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、単離された抗ＰＤ−１抗体が提供される。なおさらなる一実施形態では、重鎖および／または軽鎖配列を含む単離された抗ＰＤ−１抗体が提供され、ここで、
（ａ）この重鎖配列は、配列番号１に記載の重鎖配列と、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有し、
（ｂ）この軽鎖配列は、配列番号２に記載の軽鎖配列と、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する。
【０１０７】
［抗ＰＤ−Ｌ１抗体］
一部の実施形態では、製剤中の抗体は、重鎖および／または軽鎖配列中に、少なくとも１つのトリプトファン（例えば、少なくとも２つ、少なくとも３つまたは少なくとも４つ）を含む。一部の実施形態では、アミノ酸トリプトファンは、抗体のＣＤＲ領域、フレームワーク領域および／または定常領域中にある。一部の実施形態では、この抗体は、ＣＤＲ領域中に２つまたは３つのトリプトファン残基を含む。一部の実施形態では、製剤中の抗体は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。ＰＤ−Ｌ１（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ  ｄｅａｔｈ  ｌｉｇａｎｄ  １）は、ＰＤ−Ｌ１、Ｂ７−Ｈ１、Ｂ７−４、ＣＤ２７４およびＢ７−Ｈとしても知られ、膜貫通タンパク質であり、ＰＤ−１とのその相互作用は、Ｔ細胞活性化およびサイトカイン産生を阻害する。一部の実施形態では、本明細書に記載される抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ヒトＰＤ−Ｌ１に結合する。本明細書に記載される方法において使用され得る抗ＰＤ−Ｌ１抗体の例は、本明細書に引用することにより援用される、ＰＣＴ特許出願ＷＯ２０１０／０７７６３４Ａ１および米国特許第８，２１７，１４９号に記載されるアテゾリズマブまたは抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。
【０１０８】
一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１との間および／またはＰＤ−Ｌ１とＢ７−１との間の結合を阻害することが可能である。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、モノクローナル抗体である。一部の実施形態では、この
抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆｖ、ｓｃＦｖおよび（Ｆａｂ’）2断片からなる群から選択される抗体断片である。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ヒト化抗体である。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ヒト抗体である。
【０１０９】
ＷＯ２０１０／０７７６３４Ａ１および米国特許第８，２１７，１４９号に記載される抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、本明細書に記載される方法において使用され得る。一部の実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、配列番号３の重鎖可変領域配列および／または配列番号４の軽鎖可変領域配列を含む。なおさらなる一実施形態では、重鎖および／または軽鎖配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで、
（ａ）この重鎖配列は、配列番号３に記載の重鎖配列と、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有し、
（ｂ）この軽鎖配列は、配列番号４に記載の軽鎖配列と、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する。
【０１１０】
一実施形態では、この抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３配列を含む重鎖可変領域ポリペプチドを含み、ここで、
（ａ）このＨＶＲ−Ｈ１配列は、ＧＦＴＦＳＸ1ＳＷＩＨ（配列番号５）であり；
（ｂ）このＨＶＲ−Ｈ２配列は、ＡＷＩＸ2ＰＹＧＧＳＸ3ＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号６）であり；
（ｃ）このＨＶＲ−Ｈ３配列は、ＲＨＷＰＧＧＦＤＹ（配列番号７）であり；
ここでさらに、Ｘ1は、ＤまたはＧであり；Ｘ2は、ＳまたはＬであり；Ｘ3は、ＴまたはＳである。具体的な一態様では、Ｘ1はＤであり；Ｘ2はＳであり、Ｘ3はＴである。
【０１１１】
ある態様では、このポリペプチドは、式：（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（ＨＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−ＦＲ４）に従う、ＨＶＲ間に並べられた可変領域重鎖フレームワーク配列をさらに含む。さらなるある態様では、これらのフレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。さらなる一態様では、これらのフレームワーク配列は、ＶＨサブグループＩＩＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらのフレームワーク配列のうち少なくとも１つは、以下である：
ＨＣ−ＦＲ１は、ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳ（配列番号８）であり
ＨＣ−ＦＲ２は、ＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶ（配列番号９）であり
ＨＣ−ＦＲ３は、ＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲ（配列番号１０）であり
ＨＣ−ＦＲ４は、ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ（配列番号１１）である。
【０１１２】
なおさらなる一態様では、この重鎖ポリペプチドは、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３を含む可変領域軽鎖とさらに組み合わされ、ここで、
（ａ）このＨＶＲ−Ｌ１配列は、ＲＡＳＱＸ4Ｘ5Ｘ6ＴＸ7Ｘ8Ａ（配列番号１２）であり；
（ｂ）このＨＶＲ−Ｌ２配列は、ＳＡＳＸ9ＬＸ10Ｓ（配列番号１３）であり；
（ｃ）このＨＶＲ−Ｌ３配列は、ＱＱＸ11Ｘ12Ｘ13Ｘ14ＰＸ15Ｔ（配列番号１４）であり；
ここで、Ｘ4は、ＤまたはＶであり；Ｘ5は、ＶまたはＩであり；Ｘ6は、ＳまたはＮで
あり；Ｘ7は、ＡまたはＦであり；Ｘ8は、ＶまたはＬであり；Ｘ9は、ＦまたはＴであり；Ｘ10は、ＹまたはＡであり；Ｘ11は、Ｙ、Ｇ、ＦまたはＳであり；Ｘ12は、Ｌ、Ｙ、ＦまたはＷであり；Ｘ13は、Ｙ、Ｎ、Ａ、Ｔ、Ｇ、ＦまたはＩであり；Ｘ14は、Ｈ、Ｖ、Ｐ、ＴまたはＩであり；Ｘ15は、Ａ、Ｗ、Ｒ、ＰまたはＴである。なおさらなる一態様では、Ｘ4はＤであり；Ｘ5はＶであり；Ｘ6はＳであり；Ｘ7はＡであり；Ｘ8はＶであり；Ｘ9はＦであり；Ｘ10はＹであり；Ｘ11はＹであり；Ｘ12はＬであり；Ｘ13はＹであり；Ｘ14はＨであり；Ｘ15はＡである。
【０１１３】
なおさらなる一態様では、この軽鎖は、式：（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｌ２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）に従ってＨＶＲ間に並べられた可変領域軽鎖フレームワーク配列をさらに含む。なおさらなる一態様では、これらのフレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。なおさらなる一態様では、これらのフレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらのフレームワーク配列のうち少なくとも１つは、以下である：
ＬＣ−ＦＲ１は、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣ（配列番号１５）であり
ＬＣ−ＦＲ２は、ＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹ（配列番号１６）であり
ＬＣ−ＦＲ３は、ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣ（配列番号１７）であり
ＬＣ−ＦＲ４は、ＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ（配列番号１８）である。
【０１１４】
ある一実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体または抗原結合断片が提供され、ここで、
（ａ）この重鎖は、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３を含み、ここでさらに、
（ｉ）このＨＶＲ−Ｈ１配列は、ＧＦＴＦＳＸ1ＳＷＩＨであり；（配列番号５）
（ｉｉ）このＨＶＲ−Ｈ２配列は、ＡＷＩＸ2ＰＹＧＧＳＸ3ＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号６）であり
（ｉｉｉ）このＨＶＲ−Ｈ３配列は、ＲＨＷＰＧＧＦＤＹ（配列番号７）であり、
（ｂ）この軽鎖は、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３を含み、ここでさらに、
（ｉ）このＨＶＲ−Ｌ１配列は、ＲＡＳＱＸ4Ｘ5Ｘ6ＴＸ7Ｘ8Ａ（配列番号１２）であり
（ｉｉ）このＨＶＲ−Ｌ２配列は、ＳＡＳＸ9ＬＸ10Ｓであり；（配列番号１３）かつ
（ｉｉｉ）このＨＶＲ−Ｌ３配列は、ＱＱＸ11Ｘ12Ｘ13Ｘ14ＰＸ15Ｔであり；（配列番号１４）
ここで、Ｘ1は、ＤまたはＧであり；Ｘ2は、ＳまたはＬであり；Ｘ3は、ＴまたはＳであり；Ｘ4は、ＤまたはＶであり；Ｘ5は、ＶまたはＩであり；Ｘ6は、ＳまたはＮであり；Ｘ7は、ＡまたはＦであり；Ｘ8は、ＶまたはＬであり；Ｘ9は、ＦまたはＴであり；Ｘ10は、ＹまたはＡであり；Ｘ11は、Ｙ、Ｇ、ＦまたはＳであり；Ｘ12は、Ｌ、Ｙ、ＦまたはＷであり；Ｘ13は、Ｙ、Ｎ、Ａ、Ｔ、Ｇ、ＦまたはＩであり；Ｘ14は、Ｈ、Ｖ、Ｐ、ＴまたはＩであり；Ｘ15は、Ａ、Ｗ、Ｒ、ＰまたはＴである。具体的な一態様では、Ｘ1はＤであり；Ｘ2はＳであり、Ｘ3はＴである。ある一態様では、Ｘ4はＤであり；Ｘ5はＶであり；Ｘ6はＳであり；Ｘ7はＡであり；Ｘ8はＶであり；Ｘ9はＦであり；Ｘ10はＹであり；Ｘ11はＹであり；Ｘ12はＬであり；Ｘ13はＹであり；Ｘ14はＨであり；Ｘ15はＡである。さらなるある一態様では、Ｘ1はＤであり；Ｘ2はＳであり、Ｘ3はＴであり、Ｘ4はＤであり；Ｘ5はＶであり；Ｘ6はＳであり；Ｘ7はＡであり；Ｘ8はＶであり；Ｘ9はＦであり；Ｘ10はＹであり；Ｘ11はＹであり；Ｘ12はＬであり；Ｘ13はＹであり；Ｘ14はＨであり、Ｘ15はＡである。
【０１１５】
さらなる一態様では、この重鎖可変領域は、（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（ＨＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲ間に並べられた１以上のフレームワーク配列を含み、かつ、この軽鎖可変領域は、（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｌ２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲ間に並べられた１以上のフレームワーク配列を含む。なおさらなる一態様では、これらのフレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。なおさらなる一態様では、これらの重鎖フレームワーク配列は、カバットサブグループＩ、ＩＩまたはＩＩＩ配列に由来する。なおさらなる一態様では、この重鎖フレームワーク配列は、ＶＨサブグループＩＩＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらの重鎖フレームワーク配列のうち１以上は、配列番号８、９、１０および１１として記載される。なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列は、カバットカッパＩ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶサブグループ配列に由来する。なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列のうち１以上は、配列番号１５、１６、１７および１８として記載される。
【０１１６】
なおさらなる具体的な一態様では、この抗体は、ヒトまたはマウスの定常領域をさらに含む。なおさらなる一態様では、このヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択される。なおさらなる具体的な一態様では、このヒト定常領域は、ＩｇＧ１である。なおさらなる一態様では、このマウス定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３からなる群から選択される。なおさらなる一態様では、このマウス定常領域は、ＩｇＧ２Ａである。なおさらなる具体的な一態様では、この抗体は、低減されたまたは最小のエフェクター機能を有する。なおさらなる具体的な一態様では、この最小のエフェクター機能は、「エフェクターなしＦｃ変異」または非グリコシル化から生じる。なおさらなる一実施形態では、このエフェクターなしＦｃ変異は、定常領域中のＮ２９７ＡまたはＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ａ置換である。
【０１１７】
さらなるある一実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで、
（ａ）この重鎖は、それぞれ、ＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨ（配列番号１９）、ＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号２０）およびＲＨＷＰＧＧＦＤＹ（配列番号２１）と少なくとも８５％の配列同一性を有する、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３配列をさらに含む、または
（ｂ）この軽鎖は、それぞれ、ＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号２２）、ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号２３）およびＱＱＹＬＹＨＰＡＴ（配列番号２４）と少なくとも８５％の配列同一性を有する、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３配列をさらに含む。具体的な一態様では、この配列同一性は、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％である。
【０１１８】
ある態様では、この重鎖可変領域は、（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（ＨＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲ間に並べられた１以上のフレームワーク配列を含み、かつ、この軽鎖可変領域は、（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｌ２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲ間に並べられた１以上のフレームワーク配列を含む。ある態様では、これらのフレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。なおさらなる一態様では、これらの重鎖フレームワーク配列は、カバットサブグループＩ、ＩＩまたはＩＩＩ配列に由来する。なおさらなる一態様では、この重鎖フレームワーク配列は、ＶＨサブグループＩＩＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらの重鎖フレームワーク配列のうち１以上は、配列番号８、９、１０および１１として記載される。なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列は、カバットカッパＩ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶサブグループ配列に由来する。なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列のうち１以上は、配列番号１５、１６、１７および１８として記載される。
【０１１９】
なおさらなる具体的な一態様では、この抗体は、ヒトまたはマウスの定常領域をさらに含む。なおさらなる一態様では、このヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択される。なおさらなる具体的な一態様では、このヒト定常領域は、ＩｇＧ１である。なおさらなる一態様では、このマウス定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３からなる群から選択される。なおさらなる一態様では、このマウス定常領域は、ＩｇＧ２Ａである。なおさらなる具体的な一態様では、この抗体は、低減されたまたは最小のエフェクター機能を有する。なおさらなる具体的な一態様では、この最小のエフェクター機能は、「エフェクターなしＦｃ変異」または非グリコシル化から生じる。なおさらなる一実施形態では、このエフェクターなしＦｃ変異は、定常領域中のＮ２９７ＡまたはＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ａ置換である。
【０１２０】
さらなる一実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含む単離された抗ＰＤＬ１抗体が提供され、ここで、
（ａ）この重鎖配列は、配列番号２５に記載の重鎖配列と少なくとも８５％の配列同一性を有し、および／または
（ｂ）この軽鎖配列は、配列番号４に記載の軽鎖配列と少なくとも８５％の配列同一性を有する。
具体的な一態様では、この配列同一性は、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％である。ある態様では、この重鎖可変領域は、（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（ＨＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲ間に並べられた１以上のフレームワーク配列を含み、かつ、この軽鎖可変領域は、（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｌ２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲ間に並べられた１以上のフレームワーク配列を含む。更なる態様では、これらのフレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。さらなる一態様では、これらの重鎖フレームワーク配列は、カバットサブグループＩ、ＩＩまたはＩＩＩ配列に由来する。なおさらなる一態様では、この重鎖フレームワーク配列は、ＶＨサブグループＩＩＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらの重鎖フレームワーク配列のうち１以上は、配列番号８、９、１０およびＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２７）として記載される。
なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列は、カバットカッパＩ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶサブグループ配列に由来する。なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列のうち１以上は、配列番号１５、１６、１７および１８として記載される。
【０１２１】
なおさらなる具体的な一態様では、この抗体は、ヒトまたはマウスの定常領域をさらに含む。なおさらなる一態様では、このヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択される。なおさらなる具体的な一態様では、このヒト定常領域は、ＩｇＧ１である。なおさらなる一態様では、このマウス定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３からなる群から選択される。なおさらなる一態様では、このマウス定常領域は、ＩｇＧ２Ａである。なおさらなる具体的な一態様では、この抗体は、低減されたまたは最小のエフェクター機能を有する。なおさらなる具体的な一態様では、この最小のエフェクター機能は、原核細胞における産生から生じる。なおさらなる具体的な一態様では、この最小のエフェクター機能は、「エフェクターなしＦｃ変異」または非グリコシル化から生じる。なおさらなる一実施形態では、このエフェクターなしＦｃ変異は、定常領域中のＮ２９７ＡまたはＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ａ置換である。
【０１２２】
さらなる一態様では、この重鎖可変領域は、（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（ＨＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲ間に並べられた１以上のフレームワーク配列を含み、かつ、この軽鎖可変領域は、（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｌ２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲ間に並べられた１以上のフレームワーク配列を含む。なおさらなる一態様では、これらのフレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。なおさらなる一態様では、これらの重鎖フレームワーク配列は、カバットサブグループＩ、ＩＩまたはＩＩＩ配列に由来する。なおさらなる一態様では、この重鎖フレームワーク配列は、ＶＨサブグループＩＩＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらの重鎖フレームワーク配列のうち１以上は、以下である：
ＨＣ−ＦＲ１は、ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳ（配列番号２９）であり、
ＨＣ−ＦＲ２は、ＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡ（配列番号３０）であり、
ＨＣ−ＦＲ３は、ＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲ（配列番号１０）であり、
ＨＣ−ＦＲ４は、ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２７）である。
【０１２３】
なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列は、カバットカッパＩ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶサブグループ配列に由来する。なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列のうち１以上は、以下である：
ＬＣ−ＦＲ１は、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣ（配列番号１５）であり、
ＬＣ−ＦＲ２は、ＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹ（配列番号１６）であり、
ＬＣ−ＦＲ３は、ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣ（配列番号１７）であり、
ＬＣ−ＦＲ４は、ＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号２８）である。
【０１２４】
なおさらなる具体的な一態様では、この抗体は、ヒトまたはマウスの定常領域をさらに含む。なおさらなる一態様では、このヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択される。なおさらなる具体的な一態様では、このヒト定常領域は、ＩｇＧ１である。なおさらなる一態様では、このマウス定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３からなる群から選択される。なおさらなる一態様では、このマウス定常領域は、ＩｇＧ２Ａである。なおさらなる具体的な一態様では、この抗体は、低減されたまたは最小のエフェクター機能を有する。なおさらなる具体的な一態様では、この最小のエフェクター機能は、「エフェクターなしＦｃ変異」または非グリコシル化から生じる。なおさらなる一実施形態では、このエフェクターなしＦｃ変異は、定常領域中のＮ２９７ＡまたはＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ａ置換である。
【０１２５】
さらなる実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含む抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで、
（ｃ）この重鎖は、それぞれ、ＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨ（配列番号１９）、ＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号２０）およびＲＨＷＰＧＧＦＤＹ（配列番号２１）と少なくとも８５％の配列同一性を有する、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３配列をさらに含み、
および／または
（ｄ）この軽鎖は、それぞれ、ＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡ（配列番号２２）、ＳＡＳＦＬＹＳ（配列番号２３）およびＱＱＹＬＹＨＰＡＴ（配列番号２４）と少なくとも８５％の配列同一性を有する、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３配列をさらに含む。
具体的な一態様では、この配列同一性は、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％である。
【０１２６】
ある態様では、この重鎖可変領域は、（ＨＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｈ１）−（ＨＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｈ２）−（ＨＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｈ３）−（ＨＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲ間に並べられた１以上のフレームワーク配列を含み、かつ、この軽鎖可変領域は、（ＬＣ−ＦＲ１）−（ＨＶＲ−Ｌ１）−（ＬＣ−ＦＲ２）−（ＨＶＲ−Ｌ２）−（ＬＣ−ＦＲ３）−（ＨＶＲ−Ｌ３）−（ＬＣ−ＦＲ４）として、ＨＶＲ間に並べられた１以上のフレームワーク配列を含む。さらなる一態様では、これらのフレームワーク配列は、ヒトコンセンサスフレームワーク配列に由来する。なおさらなる一態様では、これらの重鎖フレームワーク配列は、カバットサブグループＩ、ＩＩまたはＩＩＩ配列に由来する。なおさらなる一態様では、この重鎖フレームワーク配列は、ＶＨサブグループＩＩＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらの重鎖フレームワーク配列のうち１以上は、配列番号８、９、１０およびＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫ（配列番号３１）として記載される。
【０１２７】
なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列は、カバットカッパＩ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶサブグループ配列に由来する。なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列は、ＶＬカッパＩコンセンサスフレームワークである。なおさらなる一態様では、これらの軽鎖フレームワーク配列のうち１以上は、配列番号１５、１６、１７および１８として記載される。なおさらなる具体的な一態様では、この抗体は、ヒトまたはマウスの定常領域をさらに含む。なおさらなる一態様では、このヒト定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４からなる群から選択される。なおさらなる具体的な一態様では、このヒト定常領域は、ＩｇＧ１である。なおさらなる一態様では、このマウス定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ、ＩｇＧ３からなる群から選択される。なおさらなる一態様では、このマウス定常領域は、ＩｇＧ２Ａである。なおさらなる具体的な一態様では、この抗体は、低減されたまたは最小のエフェクター機能を有する。なおさらなる具体的な一態様では、この最小のエフェクター機能は、「エフェクターなしＦｃ変異」または非グリコシル化から生じる。なおさらなる一実施形態では、このエフェクターなしＦｃ変異は、定常領域中のＮ２９７ＡまたはＤ２６５Ａ／Ｎ２９７Ａ置換である。
【０１２８】
なおさらなる一実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで、
（ａ）この重鎖配列は、配列番号２６に記載の重鎖配列と少なくとも８５％の配列同一性を有し、または
（ｂ）この軽鎖配列は、配列番号４に記載の軽鎖配列と少なくとも８５％の配列同一性を有する。
【０１２９】
一部の実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで、この軽鎖可変領域配列は、配列番号４のアミノ酸配列と、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する。一部の実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで、この重鎖可変領域配列は、配列番号２６のアミノ酸配列と、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する。一部の実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで、この軽鎖可変領域配列は、配列番号４のアミノ酸配列と、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有し、かつ、この重鎖可変領域配列は、配列番号２６のアミノ酸配列と、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％の配列同一性を有する。一部の実施形態では、重鎖および／または軽鎖のＮ末端における１、２、３、４または５つのアミノ酸残基は、欠失、置換または改変され得る。
【０１３０】
なおさらなる一実施形態では、重鎖および軽鎖配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで、
（ａ）この重鎖配列は、配列番号３２に記載の重鎖配列と少なくとも８５％の配列同一性を有し、および／または
（ｂ）この軽鎖配列は、配列番号３３に記載の軽鎖配列と少なくとも８５％の配列同一性を有する。
なおさらなる一実施形態では、重鎖および軽鎖配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで、
（ａ）この重鎖配列は、配列番号５５に記載の重鎖配列と少なくとも８５％の配列同一性を有し、および／または
（ｂ）この軽鎖配列は、配列番号３３に記載の軽鎖配列と少なくとも８５％の配列同一性を有する。
【０１３１】
一部の実施形態では、重鎖および軽鎖配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで、この軽鎖配列は、配列番号３３のアミノ酸配列と、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％の配列同一性を有する。一部の実施形態では、重鎖および軽鎖配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで、この重鎖配列は、配列番号３２または５５のアミノ酸配列と、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％の配列同一性を有する。一部の実施形態では、重鎖および軽鎖配列を含む単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体が提供され、ここで、この軽鎖配列は、配列番号３３のアミノ酸配列と、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％の配列同一性を有し、かつ、この重鎖配列は、配列番号３２または５５のアミノ酸配列と、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％の配列同一性を有する。
【０１３２】
一部の実施形態では、この単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、非グリコシル化されている。抗体のグリコシル化は、典型的には、Ｎ−結合型またはＯ−結合型のいずれかである。Ｎ−結合型とは、アスパラギン残基の側鎖への糖（炭水化物）部分の結合を指す。トリペプチド配列アスパラギン−Ｘ−セリンおよびアスパラギン−Ｘ−スレオニン（ここで、Ｘはプロリン以外の任意のアミノ酸である）は、アスパラギン側鎖への糖（炭水化物）部分の酵素的付加のための認識配列である。したがって、ポリペプチド中のこれらのトリペプチド配列のいずれかの存在は、潜在的グリコシル化部位を創出する。Ｏ結合グリコシル化とは、ヒドロキシアミノ酸、最も一般的にはセリンまたはスレオニンへの、糖類Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトースまたはキシロースのうち１つの付加を指すが、５−ヒドロキシプロリンまたは５−ヒドロキシリジンもまた使用され得る。抗体からのグリコシル化部位の除去は、上記トリペプチド配列（Ｎ結合グリコシル化部位について）のうち１つが除去されるようにアミノ酸配列を変更することによって、簡便には達成される。この変更は、グリコシル化部位内のアスパラギン、セリンまたはスレオニン残基の、別のアミノ酸残基（例えば、グリシン、アラニンまたは保存的置換）による置換によって行われ得る。
【０１３３】
本明細書の実施形態のいずれかでは、この単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ヒトＰＤ−Ｌ１、例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ寄託番号Ｑ９ＮＺＱ７．１に示されるヒトＰＤ−Ｌ１、またはそのバリアントに結合し得る。
【０１３４】
なおさらなる一実施形態では、本明細書に記載される抗体のいずれかをコードする単離された核酸が提供される。一部の実施形態では、この核酸は、以前に記載した抗ＰＤ−Ｌ１抗体のいずれかをコードする核酸の発現に適切なベクターをさらに含む。なおさらなる具体的な一態様では、このベクターは、核酸の発現に適切な宿主細胞中にある。なおさらなる具体的な一態様では、この宿主細胞は、真核細胞または原核細胞である。なおさらなる具体的な一態様では、この真核細胞は、哺乳動物細胞、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である。
【０１３５】
抗体またはその抗原結合断片は、当該技術分野で公知の方法を使用して、例えば、以前に記載した抗ＰＤ−Ｌ１抗体または抗原結合断片のいずれかをコードする核酸を発現に適切な形態で含む宿主細胞を、かかる抗体または断片を産生するのに適切な条件下で培養すること、およびこの抗体または断片を回収することを含むプロセスによって、作製され得る。
【０１３６】
［ＩＩＩ．  ＧＰＣ３標的化剤］
個体に有効量のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を投与することを含む、個体においてがんを治療するまたはその進行を遅延する方法が、本明細書で提供される。また、個体に有効量のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を投与することを含む、がんを有する個体において腫瘍細胞に対する免疫応答を増強する方法もまた、本明細書で提供される。例えば、腫瘍細胞に対する免疫応答の増強として、マクロファージおよび多核巨細胞を含む免疫細胞の、腫瘍組織への浸潤が挙げられる。ある例については、腫瘍細胞に対する免疫応答の増強として、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）におけるＣＤ４５陽性リンパ球、ＣＤ３ε陽性リンパ球およびＣＤ８陽性Ｔリンパ球の増大が挙げられる。
【０１３７】
いくつかの実施形態では、ＧＰＣ３標的化剤は、抗ＧＰＣ３抗体である。ヒトグリピカン３（ＧＰＣ３）と結合する抗体が、本明細書において提供される。「ＧＰＣ３」の別名として、ＳＧＢ、ＤＧＳＸ、ＭＸＲ７、ＳＤＹＳ、ＳＧＢＳ、ＯＣＩ−５、ＳＧＢＳ１およびＧＴＲ２−２が挙げられる。用語「ＧＰＣ３」とは、本明細書において、任意のヒト供給源由来の任意の天然ＧＰＣ３を指す。この用語は、「全長」およびプロセシングされていないＧＰＣ３ならびに限定されるものではないが、ＧＰＣ３のＣ末端ペプチドを含む、細胞におけるプロセシングに起因するＧＰＣ３の任意の形態（例えば、成熟タンパク質）を包含する。この用語はまた、ＧＰＣ３の天然に存在するバリアントおよびアイソフォーム、例えば、スプライスバリアントまたは対立遺伝子バリアントを包含する。例えば、ＧＰＣ３の説明および配列は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ５１６５４．１で提供されている。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、抗ＧＰＣ３抗体は、ＧＰＣ３と結合し、がん細胞の細胞増殖（ｃｅｌｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ）または増殖（ｇｒｏｗｔｈ）を阻害する。いくつかの実施形態では、抗ＧＰＣ３抗体は、コドリツズマブ（ｃｏｄｒｉｔｕｚｕｍａｂ）である。
【０１３９】
いくつかの実施形態では、抗ＧＰＣ３抗体としては、細胞傷害性物質とコンジュゲートしている１Ｇ１２抗体（ＷＯ２００３／１００４２９）（ＢｉｏＭｏｓａｉｃｓ  Ｉｎｃ．によってカタログ番号Ｂ０１３４Ｒの下で販売される）を含む抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）（ＷＯ２００７／１３７１７０）を挙げることができる。
【０１４０】
いくつかの実施形態では、抗ＧＰＣ３抗体は、ＷＯ２００６／００６６９３またはＷＯ２００７／０４７２９１に記載されるヒト化抗ＧＰＣ３抗体である。
【０１４１】
いくつかの実施形態では、抗ＧＰＣ３抗体は、ＷＯ２００６／００６６９３またはＷＯ２００９／０４１０６２に記載されたヒト化抗ＧＰＣ３抗体を含む。いくつかの実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含むヒト化抗ＧＰＣ３抗体が提供され、ここで、
（ａ）重鎖は、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３を含み、さらに
（ｉ）ＨＶＲ−Ｈ１配列は、ＤＹＳＭＨ（配列番号３４）であり、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｈ２配列は、ＷＩＮＴＥＴＧＥＰＴＹＡＤＤＦＫＧ（配列番号３５）であり、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｈ３配列は、ＬＹ（配列番号３６）であり、
（ｂ）軽鎖は、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３を含み、さらに
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１配列は、ＫＳＳＱＳＬＬＨＳＤＧＫＴＦＬＮ（配列番号３７）であり、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２配列は、ＬＶＳＲＬＤＳ（配列番号３８）であり、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３配列は、ＣＱＧＴＨＦＰＲＴ（配列番号３９）である。
特定の態様では、抗ＧＰＣ３抗体は、ヒト化されている。ヒト化抗ＧＰＣ３抗体は、ヒト化の鋳型として、配列番号４０によって表される重鎖フレームワーク配列または配列番号４１によって表される軽鎖フレームワーク配列に対して高い配列同一性を有する適切に選択されたヒトフレームワーク配列を使用して調製され得る。
【０１４２】
いくつかの実施形態では、重鎖および軽鎖可変領域配列を含む抗ＧＰＣ３キメラ抗体またはヒト化抗ＧＰＣ３抗体が本明細書において提供され、ここで、
（ａ）重鎖は、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３を含み、さらに
（ｉ）ＨＶＲ−Ｈ１配列は、ＤＹＥＭＨ（配列番号４２）であり、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｈ２配列は、ＡＬＤＰＫＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号４３）であり、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｈ３配列は、ＦＹＳＹＴＹ（配列番号４４）であり、
（ｂ）軽鎖は、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３を含み、さらに、
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１配列は、ＲＳＳＱＳＬＶＨＳＮＲＮＴＹＬＨ（配列番号４５）であり、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２配列は、ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号４６）であり、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３配列は、ＳＱＮＴＨＶＰＰＴ（配列番号４７）である。
ヒト化抗ＧＰＣ３抗体は、ヒト化の鋳型として、配列番号４８によって表される重鎖フレームワーク配列または配列番号４９によって表される軽鎖フレームワーク配列に対して高い配列同一性を有する適切に選択されたヒトフレームワーク配列を使用して調製され得る。
【０１４３】
さらなる実施形態では、第２の抗体が結合し得るエピトープと結合可能であり、前記の第２の抗体が、
重鎖および軽鎖可変領域配列を含み、ここで、
（ａ）重鎖は、ＨＶＲ−Ｈ１、ＨＶＲ−Ｈ２およびＨＶＲ−Ｈ３を含み、さらに
（ｉ）ＨＶＲ−Ｈ１配列は、ＤＹＥＭＨ（配列番号４２）であり、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｈ２配列は、ＡＬＤＰＫＴＧＤＴＡＹＳＱＫＦＫＧ（配列番号４３）であり、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｈ３配列は、ＦＹＳＹＴＹ（配列番号４４）であり、
（ｂ）軽鎖は、ＨＶＲ−Ｌ１、ＨＶＲ−Ｌ２およびＨＶＲ−Ｌ３を含み、さらに、
（ｉ）ＨＶＲ−Ｌ１配列は、ＲＳＳＱＳＬＶＨＳＮＲＮＴＹＬＨ（配列番号４５）であり、
（ｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ２配列は、ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号４６）であり、
（ｉｉｉ）ＨＶＲ−Ｌ３配列は、ＳＱＮＴＨＶＰＰＴ（配列番号４７）である、
ヒト化抗ＧＰＣ３抗体が、本明細書において提供される。
【０１４４】
さらなる実施形態では、配列番号５０によって表される重鎖可変領域の群から選択される重鎖可変領域および配列番号５１によって表される軽鎖可変領域を含むヒト化抗ＧＰＣ３抗体が提供される。さらなる代替非制限態様では、配列番号５０によって表される重鎖可変領域の群から選択される重鎖可変領域および配列番号５２によって表される軽鎖可変領域の群から選択される軽鎖可変領域を含むヒト化抗ＧＰＣ３抗体が提供される。
【０１４５】
さらなる実施形態では、配列番号５３によって表される重鎖可変領域および配列番号５４によって表される軽鎖可変領域を含むヒト化抗ＧＰＣ３抗体が提供される。
【０１４６】
本発明の抗ＧＰＣ３抗体の代替の例として、細胞傷害性活性を有する抗ＧＰＣ３抗体が挙げられる。本発明では、細胞傷害性活性の限定されない例として、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害性または抗体依存性細胞性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）活性、補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）活性およびＴ細胞をベースとする細胞傷害性活性が挙げられる。本発明では、ＣＤＣ活性は、補体系によって引き起こされる細胞傷害性活性を意味する。他方、ＡＤＣＣ活性は、標的細胞の細胞膜上に発現された膜分子と結合可能な抗原結合ドメインを含む抗原結合分子のＦｃ領域との、免疫細胞上に発現されたＦｃγ受容体を介した免疫細胞の結合によって、例えば、免疫細胞によって標的細胞を損傷する活性を意味する。対象の抗原結合分子が、ＡＤＣＣ活性を有するか、またはＣＤＣ活性を有するか否かは、当技術分野で公知の方法によって決定され得る（例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈａｐｔｅｒ  ７．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ  ｓ
ｔｕｄｉｅｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎｓ、Ｃｏｌｉｇａｎ等．，ｅｄ．（１９９３））。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、本発明の抗ＧＰＣ３抗体の代替の例として、細胞傷害性物質とコンジュゲートしている抗ＧＰＣ３抗体が挙げられる。このような抗ＧＰＣ３抗体−薬物コンジュゲート（ＡＤＣ）は、例えば、ＷＯ２００７／１３７１７０において具体的に開示されているが、本発明のコンジュゲートは、そこに記載されるものに限定されない。具体的には、細胞傷害性物質は、以下に列挙された化学療法薬のいずれかであり得るか、またはＡｌｌｅｙ等（Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．（２０１０）  １４、５２９−５３７）もしくはＷＯ２００９／１４０２４２において開示される化合物であり得る。抗原−結合分子は、適切なリンカーなどを介してこれらの化合物とコンジュゲートしている。
【０１４８】
いくつかの実施形態では、本発明の抗ＧＰＣ３抗体の代替の例として、Ｆｃγ受容体に対する天然ヒトＩｇＧのＦｃ領域の結合活性よりも高い、Ｆｃγ受容体に対する結合活性を有するＦｃγＲ結合が改変されたＦｃ領域を含む抗ＧＰＣ３抗体が挙げられる。改変は、得られたＦｃ領域が、Ｆｃγ受容体に対する天然ヒトＩｇＧ  Ｆｃ領域の結合活性よりも高い、Ｆｃγ受容体に対する結合活性を有する限り、任意の位置でのアミノ酸修飾を含み得る。抗原結合分子が、ヒトＦｃ領域としてヒトＩｇＧ１  Ｆｃ領域を含有する場合には、改変は、好ましくは、Ｆｃ領域が、位置２９７（ＥＵ番号付け）と結合している糖鎖として、フコース含有糖鎖を含有することを可能にし、Ｆｃγ受容体に対する天然ヒトＩｇＧ  Ｆｃ領域の結合活性よりも高い、Ｆｃγ受容体に対する結合活性をもたらすために有効である。このようなアミノ酸改変は、例えば、国際公開公報番号ＷＯ２００７／０２４２４９、ＷＯ２００７／０２１８４１、ＷＯ２００６／０３１３７０、ＷＯ２０００／０４２０７２、ＷＯ２００４／０２９２０７、ＷＯ２００４／０９９２４９、ＷＯ２００６／１０５３３８、ＷＯ２００７／０４１６３５、ＷＯ２００８／０９２１１７、ＷＯ２００５／０７０９６３、ＷＯ２００６／０２０１１４、ＷＯ２００６／１１６２６０、ＷＯ２００６／０２３４０３およびＷＯ２０１４／０９７６４８において報告されている。
【０１４９】
いくつかの実施態様では、本発明によって提供される抗ＧＰＣ３抗体中に含有されるＦｃ領域としてはまた、高い割合のフコース欠損糖鎖がＦｃ領域と結合するか、または高い割合の二分Ｎ−アセチルグルコサミンがＦｃ領域と結合する糖鎖の組成においてＦｃ領域に加えられるように改変されたＦｃ領域を含み得る。ＷＯ２００６／０４６７５１およびＷＯ２００９／０４１０６２は、高い割合のフコース欠損糖鎖がＦｃ領域と結合するか、または高い割合の二分Ｎ−アセチルグルコサミンが、Ｆｃ領域と結合する糖鎖の組成においてＦｃ領域に加えられるように改変されたＦｃ領域を含む抗ＧＰＣ３抗体の特定の実施例を開示する。
【０１５０】
いくつかの実施態様では、本発明において使用され得る抗ＧＰＣ３抗体として、アミノ酸残基がその等電点（ｐＩ）を変更するように改変された抗ＧＰＣ３抗体が挙げられる。抗ＧＰＣ３抗体における「アミノ酸残基の電荷の変更」の好ましい実施例は、ＷＯ２００９／０４１０６２に記載されている。
【０１５１】
いくつかの実施態様では、抗ＧＰＣ３抗体は、抗ＧＰＣ３抗体の一次構造を構成するポリペプチドの翻訳後修飾を受けている抗体の修飾された形態を含む。ポリペプチドの翻訳後修飾とは、ポリペプチド生合成の際に翻訳されたポリペプチドに与えられる化学修飾を指す。例えば、Ｎ末端グルタミンのピログルタミル化によるピログルタミン酸への修飾を受けている抗ＧＰＣ３抗体もまた、当然のことながら、本発明の抗ＧＰＣ３抗体中に含まれる。また、例えば、２個の硫黄原子間で形成される共有結合を意味する「ジスルフィド結合」によって連結している重鎖および軽鎖または重鎖を含む翻訳後修飾された抗ＧＰＣ３抗体も、本発明の抗ＧＰＣ３抗体中に含まれる。アミノ酸システイン中に含有されるチオール基は、ジスルフィド結合を形成し得るまたは第２のチオール基と架橋し得る。一般に、ＩｇＧ分子において、ＣＨ１およびＣＬ領域は、ジスルフィド結合によって連結され、重鎖を構成する２つのポリペプチドは、ＥＵ番号付けに基づいて位置２２６および２２９のシステイン残基間のジスルフィド結合によって連結される。ジスルフィド結合によるこのような連結を有する翻訳後修飾された抗ＧＰＣ３抗体もまた、本発明の抗ＧＰＣ３抗体中に含まれる。
【０１５２】
なおさらなる実施態様では、本明細書に記載される抗体のいずれかをコードする単離された核酸が提供される。いくつかの実施態様では、核酸は、これまでに記載された抗ＧＰＣ３抗体のいずれかをコードする核酸の発現に適したベクターをさらに含む。なおさらなる特定の態様では、ベクターは、核酸の発現に適した宿主細胞中にある。なおさらなる特定の態様では、宿主細胞は、真核細胞または原核細胞である。なおさらなる特定の態様では、真核細胞は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞などの哺乳動物細胞である。
【０１５３】
抗体またはその抗原結合断片は、例えば、発現に適した形態のこれまでに記載された抗ＧＰＣ３抗体または抗原結合断片のいずれかをコードする核酸を含有する宿主細胞を、このような抗体または断片を製造するのに適した条件下で培養することおよび抗体または断片を回収することを含むプロセスによって、当技術分野で公知の方法を使用して製造され得る。
【０１５４】
［ＩＶ．抗体調製］
本明細書に記載される抗体は、抗体を生成するために当該技術分野で利用可能な技術を使用して調製され、その例示的な方法は、以下のセクションに、より詳細に記載されている。
【０１５５】
この抗体は、目的の抗原（即ち、ＰＤ−Ｌ１（例えばヒトＰＤ−Ｌ１）またはＧＰＣ３（例えばヒトグリピカン３））に対するものである。好ましくは、この抗原は、生物学的に重要なポリペプチドであり、障害に罹患している哺乳動物へのこの抗体の投与は、その哺乳動物において治療的利益を生じ得る。
【０１５６】
特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、≦１μＭ、≦１５０ｎＭ、≦１００ｎＭ、≦５０ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭまたは≦０．００１ｎＭ（例えば、１０-8Ｍ以下、例えば、１０-8Ｍから１０-13Ｍ、例えば、１０-9Ｍから１０-13Ｍ）の解離定数（Ｋｄ）を有する。
【０１５７】
一実施形態では、Ｋｄは、以下のアッセイによって記載されるように、Ｆａｂバージョンの目的の抗体およびその抗原を用いて実施される放射標識抗原結合アッセイ（ＲＩＡ）によって測定される。抗原に対するＦａｂの溶液結合親和性は、標識されていない抗原の滴定系列の存在下で、最小濃度の（125Ｉ）標識された抗原によってＦａｂを平衡化し、次いで、抗Ｆａｂ抗体でコートされたプレートを用いて結合した抗原を捕捉することによって測定される（例えば、Ｃｈｅｎ等、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３：８６５〜８８１（１９９９）を参照のこと）。アッセイのための条件を確立するために、ＭＩＣＲＯＴＩＴＥＲ（商標）マルチウェルプレート（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）が、５０ｍＭ炭酸ナトリウム（ｐＨ９．６）中５μｇ／ｍｌの捕捉抗Ｆａｂ抗体（Ｃａｐｐｅｌ  Ｌａｂｓ）で一晩コートされ、引き続いて、室温（およそ２３℃）で２から５時間にわたってＰＢＳ中２％（ｗ／ｖ）のウシ血清アルブミンでブロッキングされる。非吸着剤プレート（Ｎｕｎｃ＃２６９６２０）中で、１００ｐＭまたは２６ｐＭの［125Ｉ］−抗原が、目的のＦａｂの希釈系列と混合される。次いで、目的のＦａｂは、一晩インキュベートされる；しかし、このインキュベーションは、平衡化が達成されることを確実にするために、より長い期間（例えば、約６５時間）にわたって継続し得る。その後、この混合物は、室温でのインキュベーション（例えば１時間にわたる）のために、捕捉プレートに移される。次いで、溶液が除去され、プレートが、ＰＢＳ中０．１％のポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ−２０（商標））で８回洗浄される。プレートが乾燥したら、１５０μｌ／ウェルの閃光物質（ＭＩＣＲＯＳＣＩＮＴ−２０（商標）；Ｐａｃｋａｒｄ）が添加され、プレートは、ＴＯＰＣＯＵＮＴ（商標）ガンマカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ）で１０分間計数される。最大結合の２０％以下を与える各Ｆａｂの濃度は、競合的結合アッセイにおける使用のために選択される。
【０１５８】
ある実施形態によれば、Ｋｄは、約１０反応単位（ＲＵ）で、固定化されている抗原ＣＭ５チップと共に２５℃でＢＩＡＣＯＲＥ（商標）−２０００またはＢＩＡＣＯＲＥ（商標）−３０００（ＢＩＡｃｏｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）を使用する表面プラズモン共鳴アッセイを使用して測定される。簡潔に述べると、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサーチップ（ＣＭ５、ＢＩＡＣＯＲＥ，Ｉｎｃ．）は、供給業者の指示書に従ってＮ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）を用いて活性化される。抗原は、およそ１０反応単位（ＲＵ）のカップリングされたタンパク質を達成するために、５μｌ／分の流速での注入前に、１０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ４．８で５μｇ／ｍｌ（約０．２μＭ）に希釈される。抗原の注入後、１Ｍエタノールアミンが、未反応の基をブロッキングするために注入される。反応速度論的な測定のため、０．０５％ポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ−２０（商標））界面活性剤を有するＰＢＳ（ＰＢＳＴ）中２倍希釈系列のＦａｂ（０．７８ｎＭから５００ｎＭ）が、およそ２５μｌ／分の流速で２５℃で注入される。会合速度（ｋon）および解離速度（ｋoff）は、会合および解離センサーグラムを同時にフィットさせることによって、単純な一対一Ｌａｎｇｍｕｉｒ結合モデル（ＢＩＡＣＯＲＥ（商標）Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｓｏｆｔｗａｒｅバージョン３．２）を使用して計算される。平衡解離定数（Ｋｄ）は、比ｋoff／ｋonとして計算される。例えば、Ｃｈｅｎ等、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３：８６５〜８８１（１９９９）を参照のこと。会合速度（ｏｎ−ｒａｔｅ）が、上記表面プラズモン共鳴アッセイによって１０6Ｍ-1ｓ-1を超える場合、この会合速度（ｏｎ−ｒａｔｅ）は、ストップフロー搭載分光光度計（Ａｖｉｖ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）または撹拌キュベットを備えた８０００シリーズＳＬＭ−ＡＭＩＮＣＯ（商標）分光光度計（ＴｈｅｒｍｏＳｐｅｃｔｒｏｎｉｃ）などの分光計で測定した場合、漸増濃度の抗原の存在下で、ＰＢＳ、ｐＨ７．２中の２０ｎＭ抗抗原抗体（Ｆａｂ形態）の、２５℃における蛍光放出強度（励起＝２９５ｎｍ；放出＝３４０ｎｍ、１６ｎｍ帯域通過）における増加または減少を測定する蛍光消光技術を使用することによって、決定され得る。
【０１５９】
（ｉ）抗体断片
抗体断片は、伝統的手段、例えば酵素的消化によって、または組換え技術によって、生成され得る。ある特定の状況では、抗体全体ではなく抗体断片を使用することに利点がある。より小さいサイズの断片は、迅速なクリアランスを可能にし、固形腫瘍への改善されたアクセスをもたらし得る。特定の抗体断片の概説については、Ｈｕｄｓｏｎ等（２００３）Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９〜１３４を参照のこと。
【０１６０】
種々の技術が、抗体断片の産生のために開発されてきた。伝統的には、これらの断片は、インタクトな抗体のタンパク質分解消化を介して誘導された（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔｏ等、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２４：１０７〜１１７（１９９２）；およびＢｒｅｎｎａｎ等、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２２９：８１（１９８５）を参照のこと）。しかし、これらの断片は、現在、組換え宿主細胞によって直接産生され得る。Ｆａｂ、ＦｖおよびＳｃＦｖ抗体断片は全て、Ｅ．ｃｏｌｉ中で発現され得、Ｅ．ｃｏｌｉから分泌され得、したがって、大量のこれらの断片の容易な産生を可能にする。抗体断片は、上で議論した抗体ファージライブラリーから単離され得る。あるいは、Ｆａｂ’−ＳＨ断片は、Ｅ．ｃｏｌｉから直接回収され得、Ｆ（ａｂ’）２断片を形成するために化学カップリングされ得る（Ｃａｒｔｅｒ等、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：１６３〜１６７（１９９２））。ある手法によれば、Ｆ（ａｂ’）２断片は、組換え宿主細胞培養物から直接単離され得る。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含む、増加したインビボ半減期を有するＦａｂおよびＦ（ａｂ’）２断片は、米国特許第５，８６９，０４６号に記載されている。抗体断片の産生のための他の技術は、熟練の施術者に明らかである。特定の実施形態では、抗体は、単鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）である。ＷＯ９３／１６１８５；米国特許第５，５７１，８９４号；および米国特許第５，５８７，４５８号を参照のこと。ＦｖおよびｓｃＦｖは、定常領域を欠く、インタクトな結合部位を有する唯一の種である；したがって、これらは、インビボでの使用の間の低減された非特異的結合に適切であり得る。ｓｃＦｖ融合タンパク質は、ｓｃＦｖのアミノ末端またはカルボキシ末端のいずれかにおいて、エフェクタータンパク質の融合を生じるように、構築され得る。Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、編Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋ、上記を参照のこと。この抗体断片は、例えば、米国特許第５，６４１，８７０号などに記載される、「直鎖状抗体」でもあり得る。かかる直鎖状抗体は、単一特異性または二重特異性であり得る。
【０１６１】
（ｉｉ）単一ドメイン抗体
一部の実施形態では、本発明の抗体は、単一ドメイン抗体である。単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインの全てもしくは一部分または軽鎖可変ドメインの全てもしくは一部分を含む単一ポリペプチド鎖である。特定の実施形態では、単一ドメイン抗体は、ヒト単一ドメイン抗体である（Ｄｏｍａｎｔｉｓ，Ｉｎｃ．、Ｗａｌｔｈａｍ、Ｍａｓｓ．；例えば、米国特許第６，２４８，５１６号を参照のこと）。一実施形態では、単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインの全てまたは一部分からなる。
【０１６２】
（ｉｉｉ）抗体バリアント
一部の実施形態では、本明細書に記載される抗体のアミノ酸配列改変（複数可）が企図される。例えば、抗体の結合親和性および／または他の生物特性を改善することが望まれ得る。抗体のアミノ酸配列バリアントは、抗体をコードするヌクレオチド配列中に適切な変化を導入することによって、またはペプチド合成によって、調製され得る。かかる改変には、例えば、抗体のアミノ酸配列からの残基の欠失、および／またはかかるアミノ酸配列中への残基の挿入、および／またはかかるアミノ酸配列内の残基の置換が挙げられる。欠失、挿入および置換の任意の組合せが、最終コンストラクトが所望の特性を有することを条件として、最終コンストラクトに到達するために行われ得る。アミノ酸の変更は、配列が作製された時点で、対象抗体アミノ酸配列中に導入され得る。
【０１６３】
（ｉｖ）置換、挿入および欠失バリアント
特定の実施形態では、１以上のアミノ酸置換を有する抗体バリアントが提供される。置換変異導入のための目的の部位には、ＨＶＲおよびＦＲが含まれる。保存的置換は、表１中に、「好ましい置換」の見出しの下に示される。より実質的な変化は、表１中に、「例示的置換」の見出しの下に提供され、アミノ酸側鎖クラスを参照して以下にさらに記載される。アミノ酸置換は、目的の抗体中に導入され得、産物が、所望の活性、例えば、保持／改善された抗原結合、減少した免疫原性または改善されたＡＤＣＣもしくはＣＤＣについてスクリーニングされ得る。
【０１６４】
【表２】
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【０１６５】
アミノ酸は、共通する側鎖特性に従ってグループ分けされ得る：
ａ．疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
ｂ．中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
ｃ．酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
ｄ．塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
ｅ．鎖配向に影響する残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
ｆ．芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【０１６６】
非保存的置換は、これらのクラスのうち１つのメンバーを別のクラスに交換することを伴う。
【０１６７】
１つの型の置換バリアントには、親抗体（例えば、ヒト化またはヒト抗体）の１以上の超可変領域残基を置換することが関与する。一般に、さらなる研究のために選択される得られたバリアント（複数可）は、親抗体と比較して、特定の生物特性（例えば、増加した親和性、低減された免疫原性）における改変（例えば、改善）を有し、および／または親抗体の特定の生物特性を実質的に保持している。例示的な置換バリアントは、例えば、本明細書に記載されるものなどのファージディスプレイベースの親和性成熟技術を使用して簡便に生成され得る、親和性成熟抗体である。簡潔に述べると、１以上のＨＶＲ残基が変異され、バリアント抗体がファージ上にディスプレイされ、特定の生物活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。
【０１６８】
変更（例えば、置換）は、例えば、抗体親和性を改善するために、ＨＶＲ中に行われ得る。かかる変更は、ＨＶＲ「ホットスポット」、即ち、体細胞成熟プロセスの間に高頻度で変異を受けるコドンによってコードされる残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ、Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０７：１７９〜１９６（２００８）を参照のこと）、および／またはＳＤＲ（ａ−ＣＤＲ）において作製され得、得られたバリアントのＶＨまたはＶＬは、結合親和性について試験される。二次ライブラリーを構築しそこから再選択することによる親和性成熟は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ等、Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １７８：１〜３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ等編、Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、ＮＪ、（２００１））中に記載されている。親和性成熟の一部の実施形態では、多様性が、種々の方法のいずれか（例えば、エラープローンＰＣＲ、鎖シャッフリングまたはオリゴヌクレオチド特異的変異導入法）によって、成熟のために選択された可変遺伝子中に導入される。次いで、二次ライブラリーが創出される。次いで、このライブラリーは、所望の親和性を有する任意の抗体バリアントを同定するためにスクリーニングされる。多様性を導入するための別の方法には、いくつかのＨＶＲ残基（例えば、一度に４−６残基）がランダム化される、ＨＶＲに向けた手法を含む。抗原結合に関与するＨＶＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング変異導入またはモデル化を使用して、具体的に同定され得る。特に、ＣＤＲ−Ｈ３およびＣＤＲ−Ｌ３が標的化される場合が多い。
【０１６９】
特定の実施形態では、置換、挿入または欠失は、かかる変更が抗原に結合する抗体の能力を実質的に低減させない限り、１以上のＨＶＲ内で生じさせ得る。例えば、結合親和性を実質的に低減させない保存的変更（例えば、本明細書で提供されるような保存的置換）が、ＨＶＲ中に作製され得る。かかる変更は、ＨＶＲ「ホットスポット」またはＳＤＲの外側であり得る。上に提供されるバリアントＶＨおよびＶＬ配列の特定の実施形態では、各ＨＶＲのいずれかは未変更であるか、または１、２もしくは３以下のアミノ酸置換を含む。
【０１７０】
変異導入のために標的化され得る抗体の残基または領域の同定のための有用な方法は、ＣｕｎｎｉｎｇｈａｍおよびＷｅｌｌｓ（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４４：１０８１〜１０８５に記載されるように、「アラニンスキャニング変異導入法」と呼ばれる。この方法では、抗体と抗原との相互作用が影響されるかどうかを決定するために、標的残基（例えば、荷電残基、例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓおよびｇｌｕ）の残基または基が同定され、中性または負に荷電したアミノ酸（例えば、アラニンまたはポリアラニン）によって置き換えられる。さらなる置換が、最初の置換に対する機能的感受性を示すアミノ酸位置において導入され得る。あるいは、またはさらに、抗体と抗原との間の接触点を同定するための抗原−抗体複合体の結晶構造。かかる接触残基および隣接残基は、置換のための候補として、標的化または排除され得る。バリアントは、それらが所望の特性を含むかどうかを決定するために、スクリーニングされ得る。
【０１７１】
アミノ酸配列挿入には、１残基から１００以上の残基を含むポリペプチドまでの長さの範囲のアミノ末端および／またはカルボキシル末端融合、ならびに単一または複数のアミノ酸残基の配列内挿入が含まれる。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニル残基を有する抗体が挙げられる。抗体分子の他の挿入バリアントとしては、酵素（例えば、ＡＤＥＰＴについて）または抗体の血清半減期を増加させるポリペプチドへの、抗体のＮ末端またはＣ末端への融合が挙げられる。
【０１７２】
（ｖ）グリコシル化バリアント
特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、抗体がグリコシル化される程度を増加または減少させるように変更される。抗体へのグリコシル化部位の付加または欠失は、１以上のグリコシル化部位が創出または除去されるように、アミノ酸配列を変更することによって、簡便に達成され得る。
【０１７３】
抗体がＦｃ領域を含む場合、それに結合した炭水化物が変更され得る。哺乳動物細胞によって産生される天然抗体は、典型的には、Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７にＮ−結合によって一般に結合された、分枝状の二分岐オリゴ糖を含む。例えば、Ｗｒｉｇｈｔ等  ＴＩＢＴＥＣＨ  １５：２６〜３２（１９９７）を参照のこと。このオリゴ糖には、種々の炭水化物、例えば、マンノース、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトースおよびシアル酸、ならびに二分岐オリゴ糖構造の「ステム」中のＧｌｃＮＡｃに結合したフコースが含まれ得る。一部の実施形態では、本発明の抗体中のオリゴ糖の修飾は、特定の改善された特性を有する抗体バリアントを創出するために、行われ得る。
【０１７４】
一実施形態では、Ｆｃ領域を含む抗体バリアントが提供され、ここで、Ｆｃ領域に結合した炭水化物構造は、ＡＤＣＣ機能を改善し得るフコースが低減されている、またはフコースを欠く。具体的には、野生型ＣＨＯ細胞において産生された同じ抗体上のフコースの量と比較して低減されたフコースを有する抗体が、本明細書で企図される。即ち、これらは、別のやり方で、天然ＣＨＯ細胞（例えば、天然グリコシル化パターンを生じるＣＨＯ細胞、例えば、天然ＦＵＴ８遺伝子を含むＣＨＯ細胞）によって産生される場合に有するフコースよりも低い量のフコースを有することによって特徴付けられる。特定の実施形態では、この抗体は、その上のＮ−結合グリカンの約５０％、４０％、３０％、２０％、１０％または５％未満がフコースを含む抗体である。例えば、かかる抗体中のフコースの量は、１％から８０％まで、１％から６５％まで、５％から６５％まで、または２０％から４０％までであり得る。特定の実施形態では、この抗体は、その上のＮ−結合グリカンのいずれもがフコースを含まない抗体であり、即ち、ここで、この抗体は、完全にフコースがない、またはフコースを有さない、またはアフコシル化されている。フコースの量は、例えばＷＯ２００８／０７７５４６に記載されるように、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析によって測定される場合、Ａｓｎ２９７に結合した全ての糖構造体（例えば、複合体、ハイブリッドおよび高マンノース構造）の合計に対するＡｓｎ２９７における糖鎖内のフコースの平均量を計算することによって、決定される。Ａｓｎ２９７とは、Ｆｃ領域中の約２９７位（Ｆｃ領域残基のＥｕ番号付け）に位置するアスパラギン残基を指す；しかし、Ａｓｎ２９７は、抗体における軽微な配列差異に起因して、２９７位の約±３アミノ酸上流または下流、即ち、２９４位と３００位との間にも位置し得る。かかるフコシル化バリアントは、改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。例えば、米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８号（Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ．）；米国特許出願公開第２００４／００９３６２１号（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ  Ｋｏｇｙｏ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ）を参照のこと。「脱フコシル化」または「フコース欠損」抗体バリアントに関する刊行物の例には、以下が含まれる：ＵＳ２００３／０１５７１０８；ＷＯ２０００／６１７３９；ＷＯ２００１／２９２４６；ＵＳ２００３／０１１５６１４；ＵＳ２００２／０１６４３２８；ＵＳ２００４／００９３６２１；ＵＳ２００４／０１３２１４０；ＵＳ２００４／０１１０７０４；ＵＳ２００４／０１１０２８２；ＵＳ２００４／０１０９８６５；ＷＯ２００３／０８５１１９；ＷＯ２００３／０８４５７０；ＷＯ２００５／０３５５８６；ＷＯ２００５／０３５７７８；ＷＯ２００５／０５３７４２；ＷＯ２００２／０３１１４０；Ｏｋａｚａｋｉ等  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３６：１２３９〜１２４９（２００４）；Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ等  Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）。脱フコシル化抗体を産生することが可能な細胞株の例としては、以下が挙げられる：タンパク質フコシル化が欠損したＬｅｃ１３  ＣＨＯ細胞（Ｒｉｐｋａ等  Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２��９：５３３〜５４５（１９８６）；米国特許公開第２００３／０１５７１０８号、Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ；およびＷＯ２００４／０５６３１２、Ａｄａｍｓ等、特に、実施例１１）、およびノックアウト細胞株、例えば、アルファ−１，６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８、ノックアウトＣＨＯ細胞（例えば、Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ等  Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）；Ｋａｎｄａ，Ｙ．等、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．、９４（４）：６８０〜６８８（２００６）；およびＷＯ２００３／０８５１０７を参照のこと）。
【０１７５】
抗体バリアントには、例えば、抗体のＦｃ領域に結合した二分岐オリゴ糖がＧｌｃＮＡｃによって二分された、二分枝されたオリゴ糖が、さらに提供される。かかる抗体バリアントは、低減されたフコシル化および／または改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。かかる抗体バリアントの例は、例えば、ＷＯ２００３／０１１８７８（Ｊｅａｎ−Ｍａｉｒｅｔ等）；米国特許第６，６０２，６８４号（Ｕｍａｎａ等）；米国特許出願公開第２００５／０１２３５４６号（Ｕｍａｎａ等）、およびＦｅｒｒａｒａ等、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、９３（５）：８５１〜８６１（２００６）に記載されている。Ｆｃ領域に結合したオリゴ糖中に少なくとも１つのガラクトース残基を有する抗体バリアントもまた、提供される。かかる抗体バリアントは、改善されたＣＤＣ機能を有し得る。かかる抗体バリアントは、例えば、ＷＯ１９９７／３００８７（Ｐａｔｅｌ等）；ＷＯ１９９８／５８９６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）；およびＷＯ１９９９／２２７６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）に記載されている。
【０１７６】
特定の実施形態では、本明細書に記載されるＦｃ領域を含む抗体バリアントは、ＦｃγＲＩＩＩに結合することが可能である。特定の実施形態では、本明細書に記載されるＦｃ領域を含む抗体バリアントは、ヒトエフェクター細胞の存在下でＡＤＣＣ活性を有する、またはヒト野生型ＩｇＧ１  Ｆｃ領域を含む他の点では同じ抗体と比較して、ヒトエフェクター細胞の存在下で増加したＡＤＣＣ活性を有する。
【０１７７】
（ｖｉ）Ｆｃ領域バリアント
特定の実施形態では、１以上のアミノ酸改変が、本明細書で提供される抗体のＦｃ領域中に導入され得、それによって、Ｆｃ領域バリアントを生成する。このＦｃ領域バリアントは、１以上のアミノ酸位置においてアミノ酸改変（例えば、置換）を含むヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４のＦｃ領域）を含み得る。
【０１７８】
特定の実施形態では、本発明は、いくつかの、しかし全てではないエフェクター機能を有する抗体バリアントを企図し、これにより、かかる抗体バリアントは、インビボでの抗体の半減期が重要であるが、特定のエフェクター機能（例えば、補体およびＡＤＣＣ）が不要または有害である応用のための、望ましい候補になる。インビトロおよび／またはインビボの細胞傷害性アッセイが、ＣＤＣおよび／またはＡＤＣＣ活性の低減／枯渇を確認するために実施され得る。例えば、抗体が、ＦｃγＲ結合を欠く（したがって、ＡＤＣＣ活性を欠く可能性が高い）が、ＦｃＲｎ結合能を保持することを確実にするために、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイが実施され得る。ＡＤＣＣを媒介するための初代細胞、ＮＫ細胞は、ＦｃγＲＩＩＩのみを発現するが、単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩおよびＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞上でのＦｃＲ発現は、ＲａｖｅｔｃｈおよびＫｉｎｅｔ、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７〜４９２（１９９１）のｐ４６４の表３にまとめられている。目的の分子のＡＤＣＣ活性を評価するためのインビトロアッセイの非限定的な例は、米国特許第５，５００，３６２号（例えば、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ．等  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８３：７０５９〜７０６３（１９８６）を参照のこと）およびＨｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ等、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８２：１４９９〜１５０２（１９８５）；米国特許第５，８２１，３３７号（Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ，Ｍ．等、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６６：１３５１〜１３６１（１９８７）を参照のこと）に記載されている。あるいは、非放射性アッセイ方法が使用され得る（例えば、フローサイトメトリー用のＡＣＴＩ（商標）非放射性の細胞傷害性アッセイ（ＣｅｌｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ、ＣＡ；およびＣｙｔｏＴｏｘ  ９６（商標）非放射性細胞傷害性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）を参照のこと）。かかるアッセイのために有用なエフェクター細胞としては、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が挙げられる。あるいは、またはさらに、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、例えば、Ｃｌｙｎｅｓ等  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９５：６５２〜６５６（１９９８）に開示されるものなどの動物モデルにおいて、インビボで評価され得る。Ｃ１ｑ結合アッセイもまた、抗体がＣ１ｑを結合することができず、したがってＣＤＣ活性を欠くことを確認するために、実施され得る。例えば、ＷＯ２００６／０２９８７９およびＷＯ２００５／１００４０２におけるＣ１ｑおよびＣ３ｃ結合ＥＬＩＳＡを参照のこと。補体活性化を評価するために、ＣＤＣアッセイが実施され得る（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏ等、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２０２：１６３（１９９６）；Ｃｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．等、Ｂｌｏｏｄ  １０１：１０４５〜１０５２（２００３）；ならびにＣｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．およびＭ．Ｊ．Ｇｌｅｎｎｉｅ、Ｂｌｏｏｄ  １０３：２７３８〜２７４３（２００４）を参照のこと）。ＦｃＲｎ結合およびインビボクリアランス／半減期の決定もまた、当該技術分野で公知の方法を使用して実施され得る（例えば、Ｐｅｔｋｏｖａ，Ｓ．Ｂ．等、Ｉｎｔ’ｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８（１２）：１７５９〜１７６９（２００６）を参照のこと）。
【０１７９】
低減されたエフェクター機能を有する抗体には、Ｆｃ領域の残基２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７および３２９のうち１以上の置換を有するものが含まれる（米国特許第６，７３７，０５６号）。かかるＦｃバリアントには、残基２６５および２９７のアラニンへの置換を有するいわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃバリアントを含む、アミノ酸位置２６５、２６９、２７０、２９７および３２７のうち２つ以上において置換を有するＦｃバリアントが含まれる（米国特許第７，３３２，５８１号）。
【０１８０】
ＦｃＲへの改善または減退された結合を有する特定の抗体バリアントが記載されている（例えば、米国特許６，７３７，０５６号；ＷＯ２００４／０５６３１２およびＳｈｉｅｌｄｓ等、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１〜６６０４（２００１）を参照のこと）。
【０１８１】
特定の実施形態では、抗体バリアントは、ＡＤＣＣを改善する１以上のアミノ酸置換、例えば、Ｆｃ領域の２９８位、３３３位および／または３３４位（残基のＥＵ番号付け）における置換を有するＦｃ領域を含む。例示的な一実施形態では、そのＦｃ領域中に以下のアミノ酸置換を含む抗体：Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３ＡおよびＫ３３４Ａ。
【０１８２】
一部の実施形態では、変更された（即ち、改善された、または減退された、のいずれかの）Ｃ１ｑ結合および／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を生じる変更が、例えば、米国特許第６，１９４，５５１号、ＷＯ９９／５１６４２およびＩｄｕｓｏｇｉｅ等  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：４１７８〜４１８４（２０００）に記載されるように、Ｆｃ領域中になされる。
【０１８３】
増加した半減期、および胎児への母体ＩｇＧの移行を担う新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）（Ｇｕｙｅｒ等、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７（１９７６）およびＫｉｍ等、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９（１９９４））に対する改善された結合を有する抗体は、ＵＳ２００５／００１４９３４号（Ｈｉｎｔｏｎ等）に記載されている。これらの抗体は、その中にＦｃＲｎへのＦｃ領域の結合を改善する１以上の置換を有するＦｃ領域を含む。かかるＦｃバリアントには、Ｆｃ領域残基：２３８、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４または４３４のうち１以上における置換、例えば、Ｆｃ領域残基４３４の置換を有するものが含まれる（米国特許第７，３７１，８２６号）。Ｆｃ領域バリアントの他の例については、ＤｕｎｃａｎおよびＷｉｎｔｅｒ、Ｎａｔｕｒｅ  ３２２：７３８〜４０（１９８８）；米国特許５，６４８，２６０号；米国特許５，６２４，８２１号；ならびにＷＯ９４／２９３５１もまた参照のこと。
【０１８４】
（ｖｉｉ）抗体誘導体
本発明の抗体は、当該技術分野で公知であり、容易に入手可能なさらなる非タンパク質性部分を含むように、さらに改変され得る。特定の実施形態では、抗体の誘導体化に適切な部分は、水溶性ポリマーである。水溶性ポリマーの非限定的な例としては、特に限定されないが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールの共重合体、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ−１，３−ジオキソラン、ポリ−１，３，６−トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸共重合体、ポリアミノ酸（ホモポリマーまたはランダム共重合体のいずれか）、およびデキストランまたはポリ（ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロプロピレングリコール（ｐｒｏｐｒｏｐｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ）ホモポリマー、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシド共重合体、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、ならびにそれらの混合物が挙げられる。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中でのその安定性に起因して、製造における利点を有し得る。このポリマーは、任意の分子量のものであり得、分枝状または非分枝状であり得る。抗体に結合したポリマーの数は、変動し得、１つよりも多いポリマーが結合している場合、それらは、同じまたは異なる分子であり得る。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数および／または型は、特に限定されないが、改善すべき抗体の特定の特性または機能、抗体誘導体が規定された条件下で療法に使用されるかどうかなどを含む検討に基づいて、決定され得る。
【０１８５】
（ｖｉｉｉ）ベクター、宿主細胞および組換え方法
抗体は、組換え方法を使用しても産生され得る。抗抗原抗体の組換え産生のために、抗体をコードする核酸が単離され、さらなるクローニング（ＤＮＡの増幅）または発現のために、複製可能なベクター中に挿入される。抗体をコードするＤＮＡは、従来の手順を使用して（例えば、抗体の重鎖および軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することが可能なオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）容易に単離および配列決定され得る。多くのベクターが利用可能である。ベクター成分としては、一般に、特に限定されないが、シグナル配列、複製開始点、１以上のマーカー遺伝子、エンハンサーエレメント、プロモーターおよび転写終結配列のうち１以上が挙げられる。
【０１８６】
（ｉｘ）生物学的に活性な抗体を選択する
上記のように産生された抗体は、治療展望から有益な特性を有する抗体を選択するため、または抗体の生物活性を保持する製剤もしくは条件を選択するために、１以上の「生物活性」アッセイに供され得る。抗体は、その抗体が惹起された抗原に結合するその能力について試験され得る。例えば、当該技術分野で公知の方法（例えば、ＥＬＩＳＡ、ウェスタンブロットなど）が使用され得る。
【０１８７】
例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体について、抗体の抗原結合特性は、ＰＤ−Ｌ１に結合する能力を検出するアッセイにおいて評価され得る。一部の実施形態では、抗体の結合は、例えば、飽和結合；ＥＬＩＳＡ；および／または競合アッセイ（例えば、ＲＩＡ）によって決定され得る。また、抗体は、例えば、治療剤としてのその効率を評価するために、他の生物活性アッセイに供され得る。かかるアッセイは、当該技術分野で公知であり、標的抗原および抗体についての目的の使用に依存する。例えば、抗体によるＰＤ−Ｌ１遮断の生物学的効果は、例えば、米国特許第８，２１７，１４９号に記載されるように、ＣＤ８＋Ｔ細胞、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ）マウスモデルおよび／または同系腫瘍モデルにおいて評価され得る。
【０１８８】
目的の抗原上の特定のエピトープに結合する抗体（例えば、ＰＤ−Ｌ１への例の抗ＰＤ−Ｌ１抗体の結合をブロックするもの）についてスクリーニングするために、常套的クロスブロッキングアッセイ、例えば、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｅｄ  Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｄａｖｉｄ  Ｌａｎｅ（１９８８）に記載されるものが、実施され得る。あるいは、例えば、Ｃｈａｍｐｅ等、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０：１３８８〜１３９４（１９９５）に記載されるようなエピトープマッピングが、目的のエピトープに抗体が結合するかどうかを決定するために実施され得る。
【０１８９】
［Ｖ．医薬組成物および製剤］
併用療法のための医薬組成物および製剤
また、有効成分としてＰＤ−１系結合アンタゴニスト（抗ＰＤ−Ｌ１抗体など）および／またはＧＰＣ３標的化療法（抗ＧＰＣ３抗体など）ならびに医薬上許容される担体を含む医薬組成物および製剤も本明細書で提供される。
【０１９０】
本明細書に記載される「組合せ」とは、併用のための有効成分の組合せを指し、投与の際に組合せ中に別個の物質が使用されるか、またはそれらが混合物（配合剤）として提供される両方の様式を含む。
【０１９１】
本明細書において記載されるような「併用療法」とは、個体に１種より多い有効成分を一緒に投与することを指し、投与の際に別個の物質が組み合わせ中で使用される、またはそれらが混合物（組合せ調製物）として提供される両様式を含む。特定の実施形態では、併用療法は、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を使用する併用療法である。ある実施形態では、併用療法は、１種またはそれより多い二次有効成分、例えば、本明細書において記載されるような化学療法薬を含んでもよい。併用療法は、特定の投与レジメン、例えば、以下に記載されるようなものに従って実施され得る。
【０１９２】
本明細書に記載されるような医薬組成物および製剤は、所望の程度の純度を有する活性成分（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体および／または抗ＧＰＣ３抗体）を、１以上の添加されてもよい薬学的に許容される担体（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  １６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｏｓｏｌ，Ａ．編（１９８０））と混合することによって、凍結乾燥製剤または水溶液の形態で、調製され得る。薬学的に許容される担体は、一般に、使用される投薬量および濃度においてレシピエントにとって非毒性であり、特に限定されないが、バッファー、例えば、リン酸、クエン酸および他の有機酸；アスコルビン酸およびメチオニンなどの抗酸化剤；防腐剤（例えば、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロライド；ヘキサメトニウムクロライド；ベンザルコニウムクロライド；ベンゼトニウムクロライド；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えば、メチルまたはプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；およびｍ−クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニンまたはリジン；グルコース、マンノースまたはデキストリンなどの、単糖類、二糖類および他の炭水化物；キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ；糖類、例えば、ショ糖、マンニトール、トレハロースまたはソルビトール；塩形成対イオン、例えば、ナトリウム；金属錯体（例えば、Ｚｎ−タンパク質錯体）；および／または非イオン性界面活性剤、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）が挙げられる。本明細書の例示的な薬学的に許容される担体としては、間質性薬物分散剤、例えば、可溶型中性−活性ヒアルロニダーゼ糖タンパク質（ｓＨＡＳＥＧＰ）、例えば、ヒト可溶型ＰＨ−２０ヒアルロニダーゼ糖タンパク質、例えば、ｒＨｕＰＨ２０（ＨＹＬＥＮＥＸ（商標）、Ｂａｘｔｅｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ．）がさらに挙げられる。ｒＨｕＰＨ２０を含む、特定の例示的ｓＨＡＳＥＧＰおよび使用の方法は、米国特許出願公開第２００５／０２６０１８６号および米国特許出願公開第２００６／０１０４９６８号に記載されている。一態様では、ｓＨＡＳＥＧＰは、１以上のさらなるグリコサミノグリカナーゼ、例えばコンドロイチナーゼと組み合わされる。
【０１９３】
例示的な凍結乾燥抗体製剤は、米国特許第６，２６７，９５８号に記載されている。水性抗体製剤としては、米国特許第６，１７１，５８６号およびＷＯ２００６／０４４９０８に記載されるものが挙げられ、後者の製剤は、ヒスチジンアセテートバッファーを含む。一部の実施形態では、本明細書に記載される抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、約６０ｍｇ／ｍＬの濃度の抗体、約２０ｍＭの濃度のヒスチジンアセテート、約１２０ｍＭの濃度のショ糖、および０．０４％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０）を含む製剤中にあり、この製剤は、約５．８のｐＨを有する。一部の実施形態では、本明細書に記載される抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、約１２５ｍｇ／ｍＬの濃度の抗体、約２０ｍＭの濃度のヒスチジンアセテート、約２４０ｍＭの濃度のショ糖、および０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０）を含む製剤中にあり、この製剤は、約５．５のｐＨを有する。
【０１９４】
本明細書の組成物および製剤は、治療されている特定の適応症にとって必要な場合には１つよりも多い活性成分、好ましくは、互いに有害な影響を与えない相補的活性を有するもの、もまた含み得る。かかる活性成分は、意図した目的のために有効な量で組合せ中に適切に存在する。
【０１９５】
活性成分は、例えば、コアセルベーション技術または界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロースもしくはゼラチン−マイクロカプセルおよびポリ−（メチルメタクリレート）マイクロカプセル中に、コロイド状薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子およびナノカプセル）中に、またはマクロエマルジョン中に、封入され得る。かかる技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  １６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｏｓｏｌ，Ａ．編（１９８０）に開示されている。
【０１９６】
徐放性調製物が調製され得る。徐放性調製物の適切な例には、抗体を含む固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスが含まれ、このマトリックスは、造形品、例えば、フィルムまたはマイクロカプセルの形態である。インビボ投与に使用される製剤は、一般に滅菌である。無菌状態は、例えば、滅菌濾過膜を介した濾過によって、容易に達成され得る。
【０１９７】
併用療法の投与レジメン
本開示では、投薬量（用量）は、固定用量（ｍｇ／個体）によって表すだけではなく、患者個体あたりの算出された用量に対応する体重に関して算出された用量（ｍｇ／ｋｇ）で表されることもある。
【０１９８】
ある特定の実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストの投薬量は、１回以上の投与によるか否かに関わらず、約０．０１〜約５０ｍｇ／患者の体重１ｋｇの範囲となる。一部の実施形態では、使用される抗体は、例えば、毎日投与される約０．０１から約４５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１から約４０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１から約３５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１から約３０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１から約２５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１から約２０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１から約１５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１から約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１から約５ｍｇ／ｋｇまたは約０．０１から約１ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態では、この抗体は、１５ｍｇ／ｋｇで投与される。しかし、他の投薬レジメンが有用であり得る。一実施形態では、本明細書において記載される抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、２１日サイクルのうち１日目に約１００ｍｇ〜約１４００ｍｇまたは約１０００ｍｇ〜約１４００ｍｇ、例えば、約１００ｍｇ、約２００ｍｇ、約３００ｍｇ、約４００ｍｇ、約５００ｍｇ、約６００ｍｇ、約７００ｍｇ、約８００ｍｇ、約９００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１３００ｍｇまたは約１４００ｍｇの用量でヒトに投与される。この用量は、点滴など、単一用量または複数用量（例えば、２または３用量）として投与され得る。併用治療で投与される抗体の用量は、単一治療と比較して低減され得る。この療法の進行は、従来の技術によって容易にモニタリングされる。
【０１９９】
ある特定の実施形態では、本発明のＧＰＣ３標的化剤の投薬量は、患者において所定のレベルと等しい血中トラフレベルかそれより高い血中トラフレベルを達するように決定され得る。血中トラフレベルの好ましい例として、１５０ｍｇ／ｍＬ以上、１６０ｍｇ／ｍＬ以上、１７０ｍｇ／ｍＬ以上、１８０ｍｇ／ｍＬ以上、１９０ｍｇ／ｍＬ以上、２００ｍｇ／ｍＬ以上、２１０ｍｇ／ｍＬ以上、２２０ｍｇ／ｍＬ以上、２３０ｍｇ／ｍＬ以上、２４０ｍｇ／ｍＬ以上、２５０ｍｇ／ｍＬ以上、２６０ｍｇ／ｍＬ以上、２７０ｍｇ／ｍＬ以上、２８０ｍｇ／ｍＬ以上、２９０ｍｇ／ｍＬ以上、３００ｍｇ／ｍＬ以上および４００ｍｇ／ｍＬ以上を挙げることができる。そのより好ましい例として、２００ｍｇ／ｍＬ以上を挙げることができる。
【０２００】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を使用する併用療法の投与レジメンは、負荷期間および維持期間を含み得る。いくつかの実施形態では、負荷期間内にＧＰＣ３標的化剤のみまたはＰＤ−１系結合剤およびＧＰＣ３標的化剤の両方が投与される。いくつかの実施形態では、負荷期間内にＰＤ−１系結合剤およびＧＰＣ３標的化剤の両方が投与される。
【０２０１】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を使用する併用療法の投与レジメンは、（ｉ）ＧＰＣ３標的化剤が投与される負荷期間と、それに続く（ｉｉ）ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤が投与される維持期間を含み得る。ある実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を使用する併用療法の投与レジメンは、維持期間のみを含み得る。適当な投与レジメンは、有効性および／または安全性などの複数の因子を考慮することによって決定され得る。また、投与レジメンは、併用療法の有効性および安全性を損なわない限り、患者の便宜を考慮することによって決定され得る。
【０２０２】
いくつかの実施形態では、ＧＰＣ３標的化剤を含む医薬組成物または製剤は、負荷期間内に１００ｍｇ〜２，５００ｍｇ／個体、好ましくは、５００ｍｇ〜２，０００ｍｇ／個体、１，０００ｍｇ〜２，０００ｍｇ／個体、１，３００ｍｇ〜１，９００ｍｇ／個体、１，４００ｍｇ〜１，８００ｍｇ／個体、１，５００ｍｇ〜１，７００  ｍｇ／個体の用量でがんを有する個体に静脈内または皮下投与される。最も好ましい実施形態では、ＧＰＣ３標的化剤を含む医薬組成物または製剤は、負荷期間内で１，６００ｍｇ／個体の用量で１回以上、静脈内または皮下投与される。疑義を避けるために、例えば、記述「１００ｍｇ〜２，５００ｍｇ／個体」は、１００ｍｇおよび２，５００ｍｇ／個体内に含まれるすべての投薬量が、０．１ｍｇ／個体、例えば、１００ｍｇ／個体、１００．１ｍｇ／個体、１００．２ｍｇ／個体、１００．３ｍｇ／個体、．．．２４９９．８ｍｇ／個体、２４９９．９ｍｇ／個体および２，５００ｍｇ／個体のバリエーションで本明細書において具体的に、個々に列挙されることを意味するように意図されることを明記する。
【０２０３】
いくつかの実施形態では、負荷期間内の最後の用量の投与は、維持期間内最初の用量の投与から、時間的に、２日以上、３日以上、４日以上、５日以上、６日以上、１週間以上または２週間以上離れている。好ましくは、負荷期間内の最後の用量の投与は、維持期間内最初の用量の投与から、時間的に、２日、３日または４日、好ましくは、３日離れている。いくつかの実施形態では、ＧＰＣ３標的化剤抗体は、負荷期間とそれに続く維持期間内で１回、２回、３回以上投与される。ある実施形態では、負荷期間は、３週間以内、好ましくは、２週間以内、より好ましくは、１週間以内である。最も好ましい実施形態では、負荷期間は、１週間であり、ＧＰＣ３標的化剤は、負荷期間とそれに続く維持期間内で２回投与される。負荷期間内の投与間隔は、必要に応じて例えば、１日、２日、３日、４日、５日または６日と決定され得る。好ましくは、負荷期間内の投与間隔は、３日または４日、より好ましくは、３日である（すなわち、ＧＰＣ３標的化剤は、負荷期間内の１日目、４日目、８日目、．．．に投与される）。
【０２０４】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストを含む医薬組成物または製剤はＧＰＣ３標的化剤と併用してがんを有する個体に投与され、維持期間内に１００ｍｇ〜２，０００ｍｇ／個体、好ましくは、９００ｍｇ〜１，５００ｍｇ／個体、１，０００ｍｇ〜１，４００ｍｇ／個体、１，１００ｍｇ〜１，３００ｍｇ／個体の用量で静脈内または皮下投与される。最も好ましい実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストを含む医薬組成物または製剤はＧＰＣ３標的化剤と併用して投与され、維持期間内に１，２００ｍｇ／個体の用量で静脈内または皮下に投与される。疑義を避けるために、例えば、記述「１００ｍｇ〜２，０００ｍｇ／個体」は、１００ｍｇおよび２，０００ｍｇ／個体内に含まれるすべての投薬量が、０．１ｍｇ／個体、例えば、１００ｍｇ／個体、１００．１ｍｇ／個体、１００．２ｍｇ／個体、１００．３ｍｇ／個体、．．．１９９９．８ｍｇ／個体、１９９９．９ｍｇ／個体および２，０００ｍｇ／個体のバリエーションで本明細書において具体的に、個々に列挙され、有することを意味するように意図されることを明記する。
【０２０５】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストを含む医薬組成物または製剤はＧＰＣ３標的化剤と併用してがんを有する個体に投与され、維持期間内に３〜４２日の投与間隔（投与の間の間隔）で静脈内または皮下投与される。静脈内または皮下注射の適当な投与間隔は、個体の状態に従って範囲内で決定され得る。静脈内または皮下注射の具体的な投与間隔は、３日、４日、５日、６日、７日（１週間）、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日（２週間）、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、２１日（３週間）、２２日、２３日、２４日、２５日、２６日、２７日、２８日（４週間）、２９日、３０日、３１日、３２日、３３日、３４日、３５日（５週間）、３６日、３７日、３８日、３９日、４０日、４１日または４２日（６週間）である。好ましい実施形態では、投与間隔は、４日〜３５日（５週間）である。さらなる好ましい実施形態では、投与間隔は、５日〜３１日または１カ月である。最も好ましい実施形態では、投与間隔は、２１日（３週間）である。
【０２０６】
いくつかの実施形態では、ＧＰＣ３標的化剤を含む医薬組成物または製剤は、ＰＤ−１系結合アンタゴニストと併用してがんを有する個体に投与され、維持期間内に１００ｍｇ〜２，５００ｍｇ／個体、好ましくは、５００ｍｇ〜２，０００ｍｇ／個体、１，０００ｍｇ〜２，０００ｍｇ／個体、１，３００ｍｇ〜１，９００ｍｇ／個体、１，４００ｍｇ〜１，８００ｍｇ／個体、１，５００ｍｇ〜１，７００ｍｇ／個体の用量で静脈内または皮下投与される。最も好ましい実施形態では、ＧＰＣ３標的化剤を含む医薬組成物または製剤は、ＰＤ−１系結合アンタゴニストと併用して投与され、維持期間内に１，６００ｍｇ／個体の用量で静脈内または皮下投与される。疑義を避けるために、例えば、記述「１００ｍｇ〜２，５００ｍｇ／個体」は、１００ｍｇおよび２，５００ｍｇ／個体内に含まれるすべての投薬量が、０．１ｍｇ／個体、例えば、１００ｍｇ／個体、１００．１ｍｇ／個体、１００．２ｍｇ／個体、１００．３ｍｇ／個体、．．．２４９９．８ｍｇ／個体、２４９９．９ｍｇ／個体および２，５００ｍｇ／個体のバリエーションで本明細書において具体的に、個々に列挙されることを意味するように意図されることを明記する。
【０２０７】
いくつかの実施形態では、ＧＰＣ３標的化剤を含む医薬組成物または製剤は、ＰＤ−１系結合アンタゴニストと併用してがんを有する個体に投与され、維持期間内に３〜４２日の投与間隔（投与の間の間隔）で静脈内または皮下投与される。静脈内または皮下注射の適当な投与間隔は、個体の状態に従って範囲内で決定され得る。静脈内または皮下注射の具体的な投与間隔は、３日、４日、５日、６日、７日（１週間）、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日（２週間）、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、２１日（３週間）、２２日、２３日、２４日、２５日、２６日、２７日、２８日（４週間）、２９日、３０日、３１日、３２日、３３日、３４日、３５日（５週間）、３６日、３７日、３８日、３９日、４０日、４１日または４２日（６週間）である。好ましい実施形態では、投与間隔は、４日〜３５日（５週間）である。さらなる好ましい実施形態では、投与間隔は、５日〜３１日または１カ月である。最も好ましい実施形態では、投与間隔は、７日（１週間）または２１日（３週間）である。
【０２０８】
一実施形態では、
（ｉ）負荷期間は、１週間または２週間であり、負荷期間内に投与されるＧＰＣ３標的化剤の総量は、およそ１，６００ｍｇ／個体〜およそ４，８００ｍｇ／個体であり、
（ｉｉ）ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、１，２００ｍｇ／個体の用量で３週間に１回投与され、ＧＰＣ３標的化剤が、１，６００ｍｇ／個体の用量で１週間に１回または３週間に１回投与される維持期間が続く。
【０２０９】
一実施形態では、
（ｉ）負荷期間は２週間であり、ＧＰＣ３標的化剤は、１，６００ｍｇ／個体の用量で負荷期間内に投与され、
（ｉｉ）ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、１，２００ｍｇ／個体の用量で３週間に１回投与され、ＧＰＣ３標的化剤が、１回１，６００ｍｇ／個体の用量で１週間に１回または３週間に投与される維持期間が続く。
【０２１０】
一実施形態では、
（ｉ）負荷期間は１週間であり、ＧＰＣ３標的化剤が１，６００ｍｇ／個体の用量で負荷期間内に２回投与され、
（ｉｉ）ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、１，２００ｍｇ／個体の用量で３週間に１回投与され、ＧＰＣ３標的化剤が、１，６００ｍｇ／個体の用量で１週間に１回または３週間に１回投与される維持期間が続く。
【０２１１】
一実施形態では、
（ｉ）負荷期間は１週間であり、ＧＰＣ３標的化剤が１，６００ｍｇ／個体の用量で負荷期間内に３回投与され、
（ｉｉ）ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、１，２００ｍｇ／個体の用量で３週間に１回投与され、ＧＰＣ３標的化剤が、１，６００ｍｇ／個体の用量で１週間に１回または３週間に１回投与される維持期間が続く。
【０２１２】
一実施形態では、
（ｉ）負荷期間は２週間であり、ＧＰＣ３標的化剤が１，６００ｍｇ／個体の用量で負荷期間内に３回投与され、
（ｉｉ）ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、１，２００ｍｇ／個体の用量で３週間に１回投与され、ＧＰＣ３標的化剤が、１，６００ｍｇ／個体の用量で１週間に１回または３週間に１回投与される維持期間が続く。
【０２１３】
ある実施形態では、維持期間は、治療サイクルを含み得る。いくつかの実施形態では、治療サイクルは、ＰＤ−１系結合アンタゴニストが３週間に１回（すなわち、１治療サイクル中、１回）投与され、ＧＰＣ３標的化剤が１週間に１回（すなわち、１治療サイクル中、３回）投与される３週間サイクルである。３週間治療サイクルは、例えば、部分もしくは完全腫瘍奏効、腫瘍の縮小または腫瘍の消失を達成するために必要なだけ反復されてもよい。
【０２１４】
最も好ましい実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤は、表３または表４に記載されるように投与される。
【０２１５】
【表３】
2020534335.tif 000004
【０２１６】
【表４】
2020534335.tif 000005
【０２１７】
一実施形態では、維持期間のみがある。維持期間の間に、ＰＤ−１系結合アンタゴニストが、１，２００ｍｇ／個体の用量で３週間に１回投与され、ＧＰＣ３標的化剤が、１，６００ｍｇ／個体の用量で１週間に１回または３週間に１回投与される。
【０２１８】
ある実施形態では、維持期間のみがある。維持期間の間に、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤が、３週間治療サイクルに従って投与され、その中では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストが３週間に１回（すなわち、１治療サイクル中、１回）投与され、ＧＰＣ３標的化剤が１週間に１回（すなわち、１治療サイクル中、３回）投与される。３週間治療サイクルは、例えば、部分もしくは完全腫瘍奏効、腫瘍の縮小または腫瘍の消失を達成するために必要なだけ反復されてもよい。
【０２１９】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤は、同一日に、異なる日に、逐次（異なる回で）または同時に（同じ回で）投与されてもよい。ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤が同一日であるが異なる回に投与される場合、ＰＤ−１系結合アンタゴニストは、ＧＰＣ３標的化剤の前に投与されてもよく、またはＧＰＣ３標的化剤は、ＰＤ−１系結合アンタゴニストの前に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストは、ＧＰＣ３標的化剤とは別個の組成物中にある。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストは、ＰＣ３標的化剤と同一組成物中にある。
【０２２０】
２種以上の異なるＰＤ−１系結合アンタゴニストが利用可能であるいくつかの実施形態では、個体に投与される１種のＰＤ−１系結合アンタゴニストは、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を使用する併用療法の間の任意回で、別のＰＤ−１系結合アンタゴニストに変更されてもよい。
【０２２１】
２種以上の異なるＧＰＣ３標的化剤が利用可能であるいくつかの実施形態では、個体に投与される１種のＧＰＣ３標的化剤は、負荷期間の間であろうと、維持期間の間であろうと、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を使用する併用療法の間の任意回で、別のＧＰＣ３標的化剤に変更されてもよい。また、それぞれ負荷期間および維持期間において異なるＧＰＣ３標的化剤が使用されてもよい。
【０２２２】
いくつかの実施形態では、個体は、ＧＰＣ３標的化剤および／またはＰＤ−１系結合アンタゴニストの投与の前に任意の適切な前投薬を受け取ることもある。
【０２２３】
［ＶＩ．治療方法］
個体においてがんを治療する、予防するまたはその進行を遅延させる方法であって、個体に有効量のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を投与することを含む方法が、本明細書において提供される。いくつかの実施形態では、方法は、本明細書において提供される投与レジメンに従って、個体にＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を投与することを含む。
【０２２４】
一部の実施形態では、この個体はヒトである。一部の実施形態では、この個体は、ＧＰＣ３陽性がんを有する。一部の実施形態では、ＧＰＣ３陽性がんは、肝がん、乳がん、肺がん、卵巣がん、胃がん、膀胱がん、膵臓がん、子宮内膜がん、大腸がん、腎臓がん、食道がんまたは前立腺がんである。いくつかの実施態様では、この肝がんは、肝細胞がん腫である。一部の実施形態では、この乳がんは、乳房がんまたは乳腺がんである。一部の実施形態では、この乳房がんは、浸潤腺管がんである。一部の実施形態では、この肺がんは、肺腺がんである。一部の実施形態では、この大腸がんは、結腸直腸腺がんである。一部の実施形態では、個体中のがん細胞は、ＰＤ−Ｌ１を発現する。一部の実施形態では、個体中のがん細胞は、検出可能な（例えば、当該技術分野で公知の方法を使用して検出可能な）レベルでＧＰＣ３タンパク質を発現する。いくつかの実施形態では、本発明において治療されるべき個体は、ＧＰＣ３タンパク質を検出可能であるレベルで発現すると決定されているものであり得る。
【０２２５】
ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤は、同じ投与経路または異なる投与経路によって投与され得る。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストは、静脈内で、筋肉内で、皮下で、局所で、経口で、経皮で、腹腔内で、眼窩内で、移植により、吸入により、髄腔内で、脳室内でまたは鼻腔内で投与される。いくつかの実施形態では、ＧＰＣ３標的化剤は、静脈内で、筋肉内で、皮下で、局所で、経口で、経皮で、腹腔内で、眼窩内で、移植により、吸入により、髄腔内で、脳室内でまたは鼻腔内で投与される。有効量のＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤が、疾患の予防または治療のために投与され得る。ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび／またはＧＰＣ３標的化剤の適切な投薬量は、治療される疾患の型、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤の型、疾患の重症度および過程、個体の臨床状態、個体の臨床歴および治療に対する応答、ならびに主治医の裁量に基づいて決定され得る。
【０２２６】
一部の実施形態では、これらの方法は、さらなる療法をさらに含み得る。このさらなる療法は、放射線療法、手術（例えば、乳腺腫瘍摘出手術および乳房切除術）、化学療法、遺伝子療法、ＤＮＡ療法、ウイルス療法、ＲＮＡ療法、免疫療法、骨髄移植、ナノ療法、モノクローナル抗体療法、または上述の組合せであり得る。このさらなる療法は、アジュバントまたはネオアジュバント療法の形態であり得る。一部の実施形態では、このさらなる療法は、低分子酵素阻害剤または抗転移剤の投与である。一部の実施形態では、このさらなる療法は、副作用制限剤（例えば、治療の副作用の発生および／または重症度を低下させるための目的の薬剤、例えば、抗悪心剤など）の投与である。一部の実施形態では、このさらなる療法は、放射線療法である。一部の実施形態では、このさらなる療法は、手術である。一部の実施形態では、このさらなる療法は、放射線療法および手術の組合せである。一部の実施形態では、このさらなる療法は、ガンマ照射である。一部の実施形態では、このさらなる療法は、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ／ｍＴＯＲ経路を標的化する療法、ＨＳＰ９０阻害剤、チューブリン阻害剤、アポトーシス阻害剤および／または化学防御剤である。このさらなる療法は、本明細書に記載される化学療法剤のうち１以上であり得る。
【０２２７】
［ＶＩＩ．製造品またはキット］
本発明のある実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよび／またはＧＰＣ３標的化剤を含む製造品またはキットが提供される。いくつかの実施形態では、製造品またはキットは、個体においてがんを治療するもしくはその進行を遅延させるため、またはがんを有する個体の腫瘍細胞に対する免疫応答を増強するために、ＧＰＣ３標的化剤と組み合わせてＰＤ−１系結合アンタゴニストを投与するための指示を含む添付文書をさらに含む。いくつかの実施形態では、添付文書は、本明細書において提供される投与レジメンに従ってＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤を投与するための指示を含む。
【０２２８】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１系結合アンタゴニストおよびＧＰＣ３標的化剤は、同じ容器中または別々の容器中にある。適切な容器としては、例えば、ビン、バイアル、バッグおよびシリンジが挙げられる。この容器は、種々の材料、例えば、ガラス、プラスチック（例えば、ポリ塩化ビニルまたはポリオレフィン）または金属合金（例えば、ステンレス鋼またはハステロイ）から形成され得る。一部の実施形態では、この容器は、製剤を保持し、この容器上のまたはこの容器に関連したラベルが、使用のための指示を示し得る。この製造品またはキットは、他のバッファー、希釈剤、フィルター、針、シリンジおよび使用のための指示を伴う添付文書を含む、商業的および使用者の観点から望ましい他の材料を、さらに含み得る。一部の実施形態では、この製造品は、別の薬剤（例えば、化学療法剤および抗腫瘍剤）のうち１以上をさらに含む。１以上の薬剤に適切な容器には、例えば、ビン、バイアル、バッグおよびシリンジが含まれる。
【０２２９】
本明細書は、当業者が本発明を実施することを可能にするのに十分であるとみなされる。本明細書に示され記載されたものに加えた、本発明の種々の改変は、上述の説明から当業者に明らかとなり、添付の特許請求の範囲の範囲内である。本明細書で引用された全ての刊行物、特許および特許出願は、全ての目的のために、その全内容が本明細書に出典明示により援用される。
【実施例１】
【０２３０】
ヒトグリピカン−３（ＧＰＣ３）を発現するマウス細胞株
マウスがん細胞株、Ｈｅｐａ１−６（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−１８３０）およびＣＴ２６（ＡＴＣＣ受託番号ＣＲＬ−２６３８）に、ＦｕＧＥＮＥ６（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  Ｃｏｒｐ）を用いヒトＧＰＣ３発現ベクター、ｐＣＸＮＤ２／ｈＧＰＣ３（ＦＬ）［Ｉｓｈｉｇｕｒｏ  Ｔ．等，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２００８；６８：９８３２−９８３８］をトランスフェクトし、１ｍｇ／ｍＬのＧ４１８（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて選択した。Ｇ４１８の存在下でも増殖した細胞を集め、限界希釈によってコロニーを単離した。抗ヒトＧＰＣ３抗体、ＧＣ３３［Ｉｓｈｉｇｕｒｏ  Ｔ．等，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２００８；６８：９８３２−９８３８］を用いたＦＡＣＳによってヒトＧＰＣ３の発現を確認した。代表的なコロニーを選択し、実験に使用した。
【実施例２】
【０２３１】
ヒトＧＰＣ３を発現するＨｅｐａ１−６細胞株を用いたシンジェニックマウスモデルにおける抗ＧＰＣ３抗体の抗腫瘍活性
Ｈｅｐａ１−６／ｈＧＰＣ３細胞を、インキュベーター（３７℃および５％  ＣＯ２に設定した）中で細胞培養フラスコを使用して培養した。細胞を、トリプシンを用いてフラスコから剥離し、１０％（ｖ／ｖ）ＦＢＳ、０．６ｍｇ／ｍＬのＧ４１８を含有するＤ−ＭＥＭを用いて洗浄した。次いで、細胞をＤ−ＭＥＭ（２×１０8個細胞／ｍＬ）に再懸濁し、等容量のＭａｔｒｉｇｅｌを添加した。移植のための細胞濃度は、１×１０8個細胞／ｍＬとした。細胞を、各Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｊａｐａｎ）の右側腹部に皮下接種した（１×１０7個細胞／マウス）。ひとたび、触知できる腫瘍が確立されると、動物を、各群が試験開始時に同様の平均腫瘍体積を有するように試験群にランダム化した。ＰＢＳに希釈した、１または５ｍｇ／ｋｇのマウスＧＣ３３抗ヒトＧＰＣ３モノクローナル抗体［ＷＯ２００６／００６６９３］のいずれかまたは溶媒対照としてのＰＢＳを、腫瘍接種後１４、２１および２８日目に静脈内に注射した。マウスＧＣ３３は、溶媒対照と比較して、用量依存的に腫瘍増殖の阻害を示した（図１）。
【実施例３】
【０２３２】
ヒトＧＰＣ３を発現するＨｅｐａ１−６細胞株を用いたシンジェニックマウスモデルにおいて抗ＧＰＣ３抗体によって誘導された病理学的変化
マウスＧＣ３３治療によるＨｅｐａ１−６腫瘍組織における変化を評価するために、マウスＧＣ３３抗体または溶媒対照いずれかの単回注射から３または７日後のいずれかで単離された腫瘍組織を、病理学的検査に使用した。腫瘍組織を４％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ）によって固定し、ＡＭｅＸ法［Ｓｕｚｕｋｉ等，Ｊ  Ｔｏｘｉｃｏｌ  Ｓｃｉ．２００２；２７：１６５−１７２、Ｗａｔａｎａｂｅ等，Ｊ  Ｔｏｘｉｃｏｌ  Ｐａｔｈｏｌ．２０１５；２８：４３−４９］によってパラフィン中に包埋した。３マイクロメートルパラフィン切片を、ヘマトキシリンおよびエオシン（ＨＥ）を用いて、または免疫組織化学的（ＩＨＣ）に染色した。ＩＨＣ染色は、標識ストレプトアビジン−ビオチン（ＬＳＡＢ）法（ＲＴＵセイヨウワサビペルオキシダーゼストレプトアビジン）に従って実施した。Ｆ４／８０に対する抗体（マウスマクロファージのマーカー抗原；Ａ３−１、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）、ＰＤ−Ｌ１に対する抗体（マウスＢ７−Ｈ１／ＰＤ−Ｌ１のマーカー抗原；ＡＦ１０１９、Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ）を、一次抗体として使用した。ペルオキシダーゼ−ジアミノベンジジン反応によって陽性シグナルを可視化し、切片はヘマトキシリンを用いて対比染色した。
マウスＧＣ３３注射によって、腫瘍組織の末端領域における免疫細胞浸潤および腫瘍細胞死を観察した。また、マウスＧＣ３３によって治療された腫瘍組織では、腫瘍細胞死が観察された領域におけるＦ４／８０陽性マクロファージ細胞の浸潤の増大も観察されたが、溶媒対照を用いた場合にはＦ４／８０陽性細胞は、主に、腫瘍組織における間質領域において観察された（図２Ａ）。その後、溶媒対照と比較して、特に、浸潤した免疫細胞で、マウスＧＣ３３によってＰＤ−Ｌ１発現が増大され、これは、マウスＧＣ３３によってＰＤ−Ｌ１が誘導され、抗腫瘍活性を抑制し得ることを示唆した（図２Ｂ）。
【実施例４】
【０２３３】
ヒトＧＰＣ３を発現するＣＴ２６細胞株を用いたシンジェニックマウスモデルにおける、抗ＧＰＣ３抗体（ＧＣ３３）および抗ＰＤ−Ｌ１抗体（１０Ｆ．９Ｇ２）の併用における抗腫瘍活性
マウスＣＴ２６／ｈＧＰＣ３モデルにおける抗ＧＰＣ３または抗ＰＤ−Ｌ１単独療法または併用の抗腫瘍活性を評価するために、１×１０6個のＣＴ２６／ｈＧＰＣ３細胞の皮下接種後、３日目（早期治療モデル）または１５日目（確立されたモデル）のいずれかに、マウスＧＣ３３抗体および／または５００μｇの抗マウスＰＤ−Ｌ１ラット抗体、１０Ｆ．９Ｇ２（ＢｉｏＸＣｅｌｌから購入した）のいずれかを注射した。早期治療モデルでは、５または２５ｍｇ／ｋｇのマウスＧＣ３３のいずれかを、３、６、１０および１３日目に静脈内に注射し、５００μｇの抗ＰＤ−Ｌ１抗体、１０Ｆ．９Ｇ２を、単独または組合せとして同一スケジュールで注射した。確立モデルでは、５または２５ｍｇ／ｋｇのマウスＧＣ３３のいずれかを、１５および１８日目に静脈内に注射し、５００μｇの抗ＰＤ−Ｌ１抗体、１０Ｆ．９Ｇ２を、単独または併用として同一スケジュールで注射した。
【０２３４】
両モデルにおいて、２５ｍｇ／ｋｇのＧＣ３３および１０Ｆ．９Ｇ２の併用が、各単独療法によるものと比較して最も強力な抗腫瘍活性を示した（図３および４）。
【実施例５】
【０２３５】
ヒトＧＰＣ３を発現するＨｅｐａ１−６細胞株を用いたシンジェニックマウスモデルにおける、抗ＧＰＣ３抗体（ＧＣ３３）および抗ＰＤ−Ｌ１抗体（１０Ｆ．９Ｇ２）の併用における抗腫瘍活性
１、５もしくは２５ｍｇ／ｋｇのマウスＧＣ３３抗体のいずれかを週に１回で３週間、または２００μｇの抗マウスＰＤ−Ｌ１ラット抗体、１０Ｆ．９Ｇ２と、それに続き１００μｇを週に１回で２週間、単独または併用として、上記と同様のＨｅｐａ１−６を有するマウスに静脈内に注射した。上記の従来法を用いて調製したＨＥ染色切片を用いて病理学的検査を実施した。ＩＨＣについては、各マーカーについて表２に列挙された一次抗体を使用し、上記のＬＳＡＢ法またはＥＮＶ＋法のいずれかによって可視化した。各群から３匹の代表的な動物についてＩＨＣを実施した。
【０２３６】
【表５】
2020534335.tif 000006
【０２３７】
マウスＧＣ３３または１０Ｆ．９Ｇ２は、溶媒対照と比較して、腫瘍増殖の阻害を示したが、マウスＧＣ３３および１０Ｆ．９Ｇ２の併用は、最も強い抗腫瘍活性を示した（図５Ａ）。３回目の注射の５日後、全てのマウスを剖検し、腫瘍組織を病理学的に評価した。調べた腫瘍組織では、ＰＤ−Ｌ１抗体と併用した２５ｍｇ／ｋｇのマウスＧＣ３３で処置された全てのマウスにおいて、およびＰＤ−Ｌ１抗体と併用した５ｍｇ／ｋｇのマウスＧＣ３３で治療された５匹のマウスのうち４匹において、生存した腫瘍細胞は観察されなかった（図５Ｂ）。
【０２３８】
治療された腫瘍組織各々の病理学的検査によって、溶媒対照と比較して各治療により、Ｆ４／８０−陽性細胞数、腫瘍組織に浸潤した多核巨細胞（ＭＮＧＣ）およびＣＤ３陽性細胞でのＰＤ−Ｌ１発現の増大ならびにＣＤ２０６、ＣＤ１６３およびＣＤ１１ｂ陽性細胞数の減少および単核細胞（ＭＮＣ）でのＰＤ−Ｌ１発現が示された。併用によって、ＣＤ３陽性Ｔ細胞の浸潤は、各単独療法よりも増加し、これは、抗腫瘍活性と関連している傾向がある（表６）。
【０２３９】
【表６】
2020534335.tif 000007
【実施例６】
【０２４０】
ＧＣ３３（またはコドリツズマブ）は、ヒトＧＰＣ３と高親和性で結合可能である組換えヒト化ＩｇＧ１モノクローナル抗体である（ＷＯ２００６／００６６９３）。ＭＰＤＬ３２８０Ａ（またはアテゾリズマブ）は、ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ  ｄｅａｔｈ−ｌｉｇａｎｄ  １（ＰＤ−Ｌ１）と結合可能であり、ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ  ｄｅａｔｈ−１（ＰＤ−１）分子とのＰＤ−Ｌ１結合を阻害可能である組換えヒト化ＩｇＧ１モノクローナル抗体である。ＭＰＤＬ３２８０Ａは、Ｆｃγ受容体との最小結合を有する非グリコシル化抗体をもたらす、各重鎖のＣＨ２ドメイン中の２９８位のアミノ酸置換（アスパラギンからアラニンへ）を組み込む（ＷＯ２０１０／０７７６３４）。ＧＣ−２０７ＪＧ研究は、第Ｉｂ相多施設臨床治験（本明細書において以下、「研究」または「臨床治験」）として計画され、局所進行性または転移性肝細胞がん腫（ＨＣＣ）を有する患者におけるＭＰＤＬ３２８０Ａとの併用におけるＧＣ３３の安全性、認容性、抗腫瘍活性および薬物動態（ＰＫ）を評価して、この併用の投与レジメンを決定するために実施された。局所進行性または転移性ＨＣＣを有する患者における安全性および／または認容性、ＧＣ３３およびＭＰＤＬ３２８０Ａの薬物動態プロフィールおよび抗腫瘍効果の評価ならびにバイオマーカーの検索を目的としたこの試験では、最大３コホートからなるＧＣ３３の用量漸増部分および拡大部分を実施した（図６）。用量漸増部分は、３＋３設計によって試験した。ＧＣ３３の静脈内（ＩＶ）投与は、１週目の１日目および４日目に示された用量で開始し、２週目からおよびその後毎週続けた（表７）。３週間ごとの１，２００ｍｇでのＭＰＤＬ３２８０Ａのｉ．ｖ．投与を８日目から開始した。拡大部分を、用量漸増部分において許容されると確認された高用量で開始されるように計画した。
【０２４１】
【表７】
2020534335.tif 000008
【０２４２】
投与に付されたＨＣＣ患者は、根治的治療（外科的切除、肝臓移植など）に適さない組織学的に確認された進行性または転移性ＨＣＣ（線維層板型を除く）を有していた、または根治的治療後に増悪した、および少なくとも１種の薬剤を用いる全身療法に基づく過去の治療歴を有していた。適格な患者は、ＧＰＣ３免疫組織化学によって測定され、０（表１０を参照のこと）または１の米国東海岸がん臨床試験グループ活動状態およびチャイルド・ピュースコア５〜７（表１１および１２を参照のこと）を示した腫瘍サンプルにおいてＧＰＣ３高発現（２＋または３＋）を有する少なくとも１８歳であった。患者はまた、ベースラインで測定可能であった少なくとも１つの腫瘍病変を有していた。ベースラインでの腫瘍病変の測定可能性は、固形腫瘍における奏効評価基準（ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１．例えば、Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒら．、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．  ４５（２）：２２８−４７（２００９）を参照のこと）に従って決定した。その他の基準として、適当な造血機能（絶対好中球数≧１，５００／μＬ、血小板≧７５，０００／μＬ、ヘモグロビン≧９．０ｇ／ｄＬ）、肝機能（総ビリルビン≦２．０ｍｇ／ｄＬ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼおよびアラニンアミノトランスフェラーゼ≦正常レベルの上限の５倍）および腎機能（算出されたクレアチニンクリアランス≧５０ｍＬ／分）を評価した。ＨＢＶ感染を有する患者について、ＨＢＶ  ＤＮＡは、ＨＢＶの治療に関わらず登録前３カ月内で５００ＩＵ／ｍＬ未満である。登録可能な女性対象は、臨床治験治療の間および研究薬の投与の完了後少なくとも５カ月間２種類の適当な避妊法を使用することに同意した、臨床治験登録前の１４日以内に実施した血清妊娠試験について陰性であると確認された閉経前女性患者、外科的避妊の結果として、または閉経の後１年以上の経過後の妊娠の可能性のない女性および閉経後の女性以外（月経の１２カ月以上の欠如）の女性患者または外科的避妊された女性（卵巣および／または子宮の切除）とした。登録可能な男性対象は、臨床治験治療の間および研究薬の投与の完了後少なくとも９０日間バリア法に基づく避妊を使用することに同意した患者とした。
【０２４３】
ＨＣＣ腫瘍組織におけるＧＰＣ３タンパク質の発現を、ＧＰＣ３免疫組織化学的染色（ＧＰＣ３−ＩＨＣ）によって評価した。スコアは、表８に示されるような「免疫組織化学的染色スコア」（例えば、ＷＯ２０１５／１７０４８０における複合スコア２）に従って、または表９に示されるような単純化ＧＰＣ３アルゴリズムに従って決定した。
【０２４４】
【表８】
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【０２４５】
【表９】
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【０２４６】
【表１０】
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【０２４７】
【表１１】
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【０２４８】
【表１２】
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【０２４９】
他方、登録対象から、ＧＣ３３の最初の投与前４週間以内に大きな外科手術を受けた患者、脳または軟膜髄膜転移を有すると確認された患者、過去５年以内に悪性腫瘍の病歴を有する患者、Ｂ型肝炎またはＣ型肝炎を除く治療を必要とする活動的感染を有する患者、臨床治験登録前３カ月以内に臨床的に重要な静脈瘤出血の何らかの病歴を有する患者または出血についてハイリスクの静脈瘤のエビデンスを有する患者、肝臓移植を含む臓器移植の既往歴を有する患者、本試験において投与される予定の薬剤以外の抗がん剤の投与を受ける予定であった、または受けていた患者、ＧＣ３３の最初の投与前４週間以内に大手術、ＨＣＣのための局所療法、化学療法、放射線療法、ホルモン療法、免疫療法または別の治験薬を受けた患者、肝細胞がんの先行する局所領域的または全身療法と関連する有害反応を完全に乗り越えなかった患者、ＧＣ３３の最初の投与前４週間以内にインターフェロン療法を受けた患者、抗ＰＤ−１または抗ＰＤ−Ｌ１治療用抗体または経路標的化剤を用いる先行治療を有する患者、ＧＣ３３の最初の投与前６週間以内に抗細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原４（ＣＴＬＡ−４）抗体を有しており、抗ＣＴＬＡ−４抗体に由来する重度免疫関連有害効果が観察された患者、ＧＣ３３の最初の投与前２週間以内に治療目的で抗凝固剤または血小板溶解剤の投与を受けた患者（カテーテル中の詰まりの除去する目的の、または予防目的の低用量の薬剤の投与を除く）、妊娠中または授乳中の患者、ＨＩＶ陽性患者またはＡＩＤＳ関連疾患を有する患者、同様の薬剤（モノクローナル抗体、タンパク質含有調製物およびチャイニーズハムスター卵巣由来調製物）に対して過敏症の既往歴を有する患者および治験責任医師または副治験責任医師によって研究薬によって増悪される可能性があると判断される重篤併存疾患を有する患者が排除された。
【０２５０】
ＧＣ−２０７ＪＧ研究のプロトコールは、優良臨床試験基準（ＧＣＰ）のガイドラインに従って実施し、各々参加している臨床治験に関する倫理委員会によって承認された。すべての患者は、登録前に書面によるインフォームドコンセントに名前に署名した。患者は、疾患が進行しない限り、または許容できない毒性が現れない限り、ＧＣ３３およびＭＰＤＬ３２８０Ａの連続投与を受けた。
【実施例７】
【０２５１】
ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１．に従って、腫瘍奏効（または腫瘍病変の大きさ）をベースラインに基づいて評価し、投与の開始から７週間後に評価し、次いで、疾患が進行するまで６週間毎に反復的に評価する（例えばＥｉｓｅｎｈａｕｅｒら、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．  ４５（２）：２２８−４７（２００９）を参照のこと）。治験責任医師によって、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１．によって定義される疾患の状態（例えば、完全奏効（ＣＲ）、部分奏効（ＰＲ）、進行性疾患（ＰＤ）または安定疾患（ＳＤ）（例えばＥｉｓｅｎｈａｕｅｒら、前掲を参照のこと）を評価する。
【０２５２】
ＨＣＣ腫瘍組織におけるＧＰＣ３タンパク質の発現をＧＰＣ３免疫組織化学的染色（ＧＰＣ３−ＩＨＣ）によって評価する。ＧＰＣ３−ＩＨＣの測定は、Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｉｎｃ．（米国）によって行われる。各病院におけるニードル生検による切除後にホルマリン固定され、パラフィン包埋された腫瘍ブロックまたは保存記録摘除された試料から調製されたＨＣＣ腫瘍組織の未染色スライドを、免疫組織化学的染色に付す。使用された抗体は、マウスＧＣ３３抗体（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．カタログ番号：７９０−４５６４）である。用量漸増部分および拡大部分では、ＨＣＣ組織が、ＧＰＣ３−ＩＨＣによって測定されたＧＰＣ３陽性である患者が登録された。
【実施例８】
【０２５３】
ＧＣ−２０７ＪＧ研究では、これらの組合せによる有効性を以下のように測定する：
１）ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１（例えば、Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒら、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．  ４５（２）：２２８−４７（２００９）を参照のこと）によって評価される３カ月超の間の完全奏効（ＣＲ）、部分奏効（ＰＲ）および安定奏効（ＳＲ）の頻度、
２）ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１（例えば、Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒら、前掲を参照のこと）によって評価されるような奏効の持続期間、
３）ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１（例えば、Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒら、前掲を参照のこと）によって評価される全体的な奏効率（ＣＲまたはＰＲとして定義される）および疾患コントロール率（３カ月超のＣＲ、ＰＲまたはＳＤとして定義される）、
４）ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１（例えば、Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒら、前掲を参照のこと）によって評価される無憎悪期間（ＴＴＰ）および無増悪生存（ＰＦＳ）、および
５）全生存。
【０２５４】
さらに、ベースラインレベルからの研究薬の投与後のアルファフェトプロテイン（ＡＦＰ）または血清ＧＰＣ３の変化もまた、抗腫瘍活性として評価する。
【実施例９】
【０２５５】
ＧＣ−２０７ＪＧ研究では、この併用による用量制限毒性（ＤＬＴ）を評価するために３人の対象がコホート１に登録され、７人の対象がコホート２に登録された。コホート１でも、コホート２でもＤＬＴは観察されず、次いで、拡大コホートの用量レベルを、１日目および４日目の負荷用量および１２００ｍｇ  ｑ３ｗのＭＰＤＬ３２８０Ａを伴う１６００ｍｇ  ｑｗのＧＣ３３であるコホート２と同一であるように決定した。少なくとも９人の対象が拡大コホートに登録された。
【０２５６】
２０１７年４月２１日現在入手可能であるＧＣ３３（およびＭＰＤＬ３２８０Ａ）の血清濃度を測定した。コホート１では、ＧＣ３３のトラフ濃度は、１人の対象において２週間から２３０μｇ／ｍＬを上回っていたが、その他の２人の対象ではそうではなかった（図７）。他方、コホート２では、７人の対象すべてのＧＣ３３トラフ濃度は、予想されたように最初の注入後２週間から２３０μｇ／ｍＬを上回った（図８Ａ）。さらに、４日目でのＧＣ３３の負荷用量によって、ＧＣ３３のトラフ濃度が、４日目でのＧＣ３３の負荷用量を有さない対象におけるトラフ濃度と比較して２３０μｇ／ｍＬを超えて迅速に増大することが可能となった（図８Ｂ）。これら１０人の対象の平均体重は６７．９６ｋｇであり、標準偏差は１７．０３ｋｇ（４５．２〜１０３．８ｋｇ）であった。
【０２５７】
コホート１および２に登録された対象の中で、１人の対象が同意を撤回し、別の１人の対象のベースラインＧＰＣ３−ＩＨＣスコアが、適格性について、保存記録腫瘍組織はＧＰＣ３陽性であったが陰性と示されたので、抗腫瘍活性の評価について２人の対象が排除された。他方、コホート１に登録された１人の対象（１９週目の腫瘍評価で−３１．８％）、コホート２に登録された１人の対象（１３週目の腫瘍評価で−２８．６％）は、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１（例えば、Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒら、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．  ４５（２）：２２８−４７（２００９）を参照のこと）によって２０１７年７月１２日のものとして評価された腫瘍縮小を示した。（一方で、ＧＣ３３単剤療法の第ＩＩ相におけるＧＣ３３アームにおいて（ＮＰ２７８８４研究（合計でＮ＝１２５およびＧＰＣ３−ＩＨＣ  ２＋または３＋を有するものＮ＝６７）、１人の対象のみが、ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１によって部分奏効（ＰＲ）を示した）（Ａｂｏｕ−Ａｌｆａ  ＧＡら、Ｊ  Ｈｅｐａｔｏｌ．  ２０１６；６５（２）：２８９−２９５））、これは、ＧＣ３３の８００ｍｇまたは１６００ｍｇ  ｑｗいずれかの投与レジメンおよびＭＰＤＬ３２８０Ａの１２００ｍｇ  ｑ３ｗ投与レジメンの併用は、各単剤療法よりも良好な有効性を示し得ることを示唆した。
【０２５８】
ＧＣ３３単剤療法の抗腫瘍活性を評価するために、ベースライン値からの８日目のＡＦＰ変化を比較した。この評価に、上記の８人の対象（コホート１中の３人の対象およびコホート２中の７人の対象で、評価について排除されている２人の対象を排除する）に加え、拡大コホートに登録された３人の対象が加えられたが、これは、彼らが、ベースラインおよび２０１７年７月１２日のものとして８日目（２週間の許容を有する）の両方のＡＦＰデータを有していたからである。１日目に１６００ｍｇのＧＣ３３の注入を有する対象（コホート２および拡大コホート）は、１日目に８００ｍｇのＧＣ３３の注入を有する対象（コホート１）よりもかなり大きいＡＦＰ減少を示す傾向があった（ｔ検定によりｐ＝０．０３５、表１３）。コホート２および拡大コホートからの合計３人の対象は、幾分かの有害事象のために４日目のＧＣ３３の負荷用量をスキップした。第１週においてＧＣ３３の２回の負荷用量を有する対象と、ＧＣ３３の１回のみの負荷用量を有するその他のものの間のＡＦＰ変化を比較すると、第１週中４日目にＧＣ３３の負荷用量を有する場合も、有さない場合も統計上有意差は観察されなかった（ｔ検定によりｐ＝０．５８７、表１４）。
【０２５９】
【表１３】
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【０２６０】
【表１４】
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【実施例１０】
【０２６１】
拡大コホートでは、１０人の対象が登録され、投薬されたので、ＧＣ−２０７ＪＧ研究に登録された対象の総数は、２０人の対象であった。ＧＣ−２０７ＪＧ研究用量漸増コホートまたは拡大コホートのいずれかに登録された合計２０人の対象のうち、すべての対象が、ＧＣ３３およびＭＰＤＬ３２８０Ａを用いる治療を受け、この治療の安全性プロフィールに関して評価された。この研究におけるすべての対象は、少なくとも１つの有害事象を報告した：ＧＣ３３  ８００ｍｇおよびＭＰＤＬ３２８０Ａ  １２００ｍｇを受けた３人の対象では３０の有害事象が報告され、ＧＣ３３  １６００ｍｇおよびＭＰＤＬ３２８０Ａ  １２００ｍｇを受けた１７人の対象では１５３の有害事象が報告された。すべての患者中≧１０％の罹患率を有する有害事象は、発熱（８０．０％）、疲労（５０．０％）、食欲不振（３０．０％）、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼの増加、リンパ球数減少および咳（各２５．０％）、便秘および上咽頭炎（各１５．０％）、胸痛、アラニンアミノトランスフェラーゼの増加、血中ビリルビンの増加、Ｃ反応性タンパク質の増加、腹水、口内炎、喀血、中咽頭痛、低カリウム血症、筋肉痛、四肢の疼痛、上気道感染、めまい、湿疹、そう痒、発疹および高血圧症（各１０．０％）であった。≧等級３で報告された有害事象は、全体で１４人の対象で報告された；２人の対象は、ＧＣ３３  ８００ｍｇおよびＭＰＤＬ３２８０Ａ  １２００ｍｇ受け、１２人の対象は、ＧＣ３３  １６００ｍｇおよびＭＰＤＬ３２８０Ａ  １２００ｍｇを受けた。すべての対象において≧１０％の罹患率を有する≧等級３で報告された有害事象は、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼの増加およびリンパ球数の減少（各２０．０％）および腹水（１０．０％）であった。表１５に示されるように、安全性プロフィールは、コホート間で同等であった。
【０２６２】
【表１５】
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【実施例１１】
【０２６３】
８００ｍｇのＧＣ３３または１６００ｍｇのＧＣ３３のいずれかを有する対象のＧＣ３３の平均トラフ濃度が、図９に示されている。１６００ｍｇ  ｑｗ用量のＧＣ３３を用いた場合の患者のトラフ濃度は、２３０μｇ／ｍＬ超に迅速に到達し、２３０μｇ／ｍＬを上回るトラフ濃度を維持した。
【０２６４】
登録され、投薬された２０人の対象の中で、ＣＴスキャンまたはＭＲＩによる奏効の評価を全く有さなかった２人の対象を、奏効率（ＯＲＲ）、病勢コントロール率（ＤＣＲ）、無増悪生存（ＰＦＳ）および全生存（ＯＳ）などの有効性の評価から除外した。これらの２人の対象に加えて、１人の対象のベースラインＧＰＣ３−ＩＨＣスコアが陰性と示されたので２人の他の対象をＡＦＰ変化に基づく抗腫瘍活性の評価から排除し、８日目（２週間の許容を有する）ＡＦＰデータを有していなかった２人の他の対象は、最良のＡＦＰ応答、治療期間の間のベースラインからの最大ＡＦＰ減少についての評価には、これらの対象を含めた。
【０２６５】
ＧＣ３３単剤療法およびＭＰＤＬ３２８０Ａとの併用の抗腫瘍活性を評価するために、ベースライン値からの８日目でのＡＦＰ変化および最良ＡＦＰ応答。表１６に示されるように、１６００ｍｇのＧＣ３３の注入を有する対象は、８００ｍｇのＧＣ３３の注入を有する対象よりも、８日目に、より大きいＡＦＰ減少の傾向を示した（ｔ検定によりｐ＝０．０７１）。第１週中の１６００ｍｇのＧＣ３３の２回の負荷用量を有する対象と、１６００ｍｇのＧＣ３３の１回のみの負荷用量を有する他のものの間のＡＦＰ変化を比較すると、第１週中４日目にＧＣ３３の負荷用量を有する場合も、有さない場合も統計的有意差は観察されなかった（ｔ検定によりｐ＝０．５５５、表１７）。ＧＣ３３用量レベルによる最良ＡＦＰ応答を比較すると、ＧＣ３３用量レベルに関わらず、１６００ｍｇのＧＣ３３の注入を有する対象が、４日目のＧＣ３３の負荷用量を受けたか否かに関わらず、統計的有意差は観察されなかった（それぞれ、ｔ検定によりｐ＝０．４５８または０．９１４、表１８）。ベースラインＡＦＰ値が１００ｎｇ／ｍＬを上回った対象を、ＡＦＰ最良応答による評価に適用した場合には、１６００ｍｇのＧＣ３３および１２００ｍｇのＭＰＤＬ３２８０Ａを有する対象のほとんどが、ＡＦＰ減少を示したが、８００ｍｇのＧＣ３３および１２００ｍｇのＭＰＤＬ３２８０Ａを有する１人の対象は、ＡＦＰ減少を示さず（図１０）、これは、高い用量レベルのＧＣ３３およびＭＰＤＬ３２８０Ａの併用が、ＡＦＰの高い値を有するＨＣＣ患者に対して強力なＡＦＰ応答を示し得ることを示唆した。
【０２６６】
【表１６】
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【０２６７】
【表１７】
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【０２６８】
【表１８】
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【０２６９】
【表１９】
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【０２７０】
８００ｍｇのＧＣ３３および１２００ｍｇのＭＰＤＬ３２８０Ａを受けた対象（コホート１）のＯＲＲおよびＤＣＲは、それぞれ０％および６６．７％（２人のＳＤ）であった。１６００ｍｇのＧＣ３３および１２００ｍｇのＭＰＤＬ３２８０Ａを受けた対象（用量漸増部分のコホート２および拡大部分）の中で、研究治療開始後に腫瘍評価を有していた１７人の対象のうち１５人を有効性評価のための集団に含めた。これら１５人の対象のＯＲＲおよびＤＣＲは、それぞれ６．７％（１人のＰＲ）および５３．３％（１人のＰＲおよび７人のＳＤ）。ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１に従う腫瘍応答は、１６００ｍｇのＧＣ３３を有するコホートにおいてのみ見られた。
【０２７１】
腫瘍応答に加えて、ＧＣ３３の最初の注入から６または９カ月いずれかのＤＣＲも評価した。ＤＣＲは、６または９カ月で疾患の増悪を伴わない対象のパーセンテージとした。６カ月でのＤＣＲは、８００ｍｇのＧＣ３３と１６００ｍｇのＧＣ３３の間で同等であったが、１６００ｍｇのＧＣ３３を有するコホートでは、コホート１におけるものよりも（表２０）、および４日目の負荷用量を有する１６００ｍｇのＧＣ３３を有する対象において、４日目の負荷用量を有さないものよりも高いＤＣＲが観察された（表２１）。ベースラインＡＦＰレベルが１００ｎｇ／ｍＬを上回った対象の中で、４日目の負荷用量を有する１６００ｍｇのＧＣ３３を有する対象グループにおいてのみ、６カ月および９カ月の両方で病勢コントロールを有する対象が観察された（表２２および２３）。
【０２７２】
【表２０】
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【０２７３】
【表２１】
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【０２７４】
【表２２】
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【０２７５】
【表２３】
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【０２７６】
カプラン−マイヤー法によって無増悪生存（ＰＦＳ）および全生存（ＯＳ）の中央値を推定した。コホート１、２および拡大コホートの両方を含む有効性評価のための集団において、中央値ＰＦＳは４．４カ月であり、中央値ＯＳは１３．５カ月であったが、ＧＣ３３単剤療法、ＮＰ２７８８４研究の第ＩＩ相中のＧＣ３３アームでは、中央値ＰＦＳおよびＯＳは、２．６カ月および８．７カ月であり、これは、ＧＣ３３およびＭＰＤＬ３２８０Ａの併用は、ＧＣ３３単剤療法と比較してより良好な臨床有効性を示し得るということを示唆した。
【０２７７】
コホート１またはコホート２および拡大のいずれかにおける中央値ＰＦＳおよびＯＳを、表２４に示し、４日目の負荷用量を有する、有さないいずれかの１６００ｍｇのＧＣ３３を有する対象の中央値ＰＦＳおよびＯＳを、表２５に示した。ベースラインＡＦＰレベルが１００ｎｇ／ｍＬを上回った対象の中央値ＰＦＳおよびＯＳを、表２６および２７に示した。１６００ｍｇのＧＣ３３を有する対象の中央値ＯＳは、８００ｍｇのＧＣ３３を有する対象のものよりも長い傾向があるが、４日目の負荷用量を有するおよび有さない対象グループ間に差はなかった。さらに、ベースライン値としてＡＦＰが１００ｎｇ／ｍＬを上回る集団において、中央値ＰＦＳおよびＯＳは、８００ｍｇのＧＣ３３投薬を有するものと比較して１６００ｍｇのＧＣ３３を有する対象においてかなり長かった。カプラン−マイヤー曲線を図１１に示した。
【０２７８】
【表２４】
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【０２７９】
【表２５】
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【０２８０】
【表２６】
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【０２８１】
【表２７】
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【０２８２】
上記から、ＭＰＤＬ３２８０Ａとの併用におけるＧＣ３３は、局所進行性または転移性ＨＣＣを有する対象において十分に許容されると考えられた。ＧＣ３３の併用、特に、ＧＣ３３の１６００ｍｇの毎週の注入およびＭＰＤＬ３２８０Ａは、局所進行性または転移性ＨＣＣに対して特定の有効性を有すると予測された。
【０２８３】
本明細書において引用されているすべての刊行物、特許および特許出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【産業上の利用可能性】
【０２８４】
本発明は、ＧＰＣ３標的化剤および／またはＰＤ−１系結合アンタゴニストを使用する併用療法の有効性の改善、治療されるべき患者のＱＯＬの改善に寄与し、肝臓がんを含むがんの治療において有用である。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１１Ｃ】
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【図１１Ｄ】
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【図１１Ｅ】
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【図１１Ｆ】
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【図１１Ｇ】
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【図１１Ｈ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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