(57)【要約】  本発明は概して治療用化合物の分野に関する。より詳細には、本発明は、ある特定の４−［［（７−アミノピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ］メチル］ピペリジン−３−オール化合物（本明細書においては「ＡＰＰＡＭＰ化合物」と呼ぶ）に関しており、その化合物はとりわけ、ＣＤＫ（例えば、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、ＣＤＫ９、ＣＤＫ１０、ＣＤＫ１１、ＣＤＫ１２、ＣＤＫ１３等）を阻害する（例えば、選択的に阻害する）。また本発明は、そのような化合物を含む医薬組成物、ならびにこのような化合物及び組成物の、インビトロとインビボの両方でＣＤＫを阻害する用途及び障害を治療する用途にも関する。この障害としては、ＣＤＫに関連する障害；サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）の不適切な活性により生じる障害；ＣＤＫ変異に関連する障害；ＣＤＫ過剰発現に関連する障害；ＣＤＫの上流経路活性化に関連する障害；ＣＤＫの阻害によって寛解する障害；増殖性障害；癌；ウイルス感染症（ＨＩＶを含む）；神経変性障害（アルツハイマー病及びパーキンソン病を含む）；虚血；腎疾患；心血管障害（アテローム性動脈硬化症を含む）ならびに自己免疫障害（関節リウマチを含む）が含まれる。任意に、上記の治療は、さらなる活性薬剤を用いた治療（例えば、同時治療又は逐次治療）をさらに含み、上記のさらなる活性薬剤は、例えばアロマターゼ阻害剤、抗エストロゲン剤、Ｈｅｒ２遮断薬、細胞傷害性化学療法剤等である。2020534346.tif 000030【選択図】なし
2020534346.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式の化合物、又はその薬学的に許容できる塩、水和物もしくは溶媒和物から選択される化合物。
【化１】
2020534346.tif 000025
【請求項２】
下記式の化合物、又はその薬学的に許容できる塩、水和物もしくは溶媒和物である、請求項１に記載の化合物。
【化２】
2020534346.tif 000026
【請求項３】
下記式の化合物、又はその薬学的に許容できる塩、水和物もしくは溶媒和物である、請求項１に記載の化合物。
【化３】
2020534346.tif 000027
【請求項４】
下記式の化合物、又はその薬学的に許容できる塩、水和物もしくは溶媒和物である、請求項１に記載の化合物。
【化４】
2020534346.tif 000028
【請求項５】
下記式の化合物、又はその薬学的に許容できる塩、水和物もしくは溶媒和物である、請求項１に記載の化合物。
【化５】
2020534346.tif 000029
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物と、薬学的に許容できる担体又は希釈剤とを含む組成物。
【請求項７】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物と、薬学的に許容できる担体又は希釈剤とを混合するステップを含む組成物の調製方法。
【請求項８】
インビトロ又はインビボにおいて細胞でのＣＤＫ機能を阻害する方法であって、有効量の請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物と、前記細胞を接触させることを含む前記方法。
【請求項９】
インビトロ又はインビボにおいて、細胞増殖（例えば、細胞の増殖）を制御する（例えば、阻害する）か、細胞周期の進行を阻害するか、アポトーシスを促進するか、又はこれらのうちの１つ以上の組合せを行う方法であって、有効量の請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物と、細胞を接触させることを含む前記方法。
【請求項１０】
療法により人体又は動物体を治療する方法において使用するための、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
障害の治療方法において使用するための、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
障害の治療方法において使用するための薬物の製造における、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１３】
治療が必要な対象に、治療有効量の請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を投与することを含む障害の治療方法。
【請求項１４】
前記障害が、ＣＤＫに関連する障害；サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）の不適切な活性により生じる障害；ＣＤＫ変異に関連する障害；ＣＤＫ過剰発現に関連する障害；ＣＤＫの上流経路活性化に関連する障害；又はＣＤＫの阻害によって寛解する障害である請求項１１記載の使用のための化合物、請求項１２記載の使用又は請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
前記障害が、増殖性障害；癌；ウイルス感染症（例えば、ＨＩＶ）；神経変性障害（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病）；虚血；腎疾患；心血管障害（例えば、アテローム性動脈硬化症）；又は自己免疫障害（例えば、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、乾癬、又はシェーグレン症候群）である請求項１１記載の使用のための化合物、請求項１２記載の使用又は請求項１３記載の方法。
【請求項１６】
前記障害が増殖性障害である請求項１１記載の使用のための化合物、請求項１２記載の使用又は請求項１３記載の方法。
【請求項１７】
前記障害が癌である請求項１１記載の使用のための化合物、請求項１２記載の使用又は請求項１３記載の方法。
【請求項１８】
前記治療が、さらなる活性薬剤を用いた治療（例えば、同時治療又は逐次治療）をさらに含み、前記さらなる活性薬剤がアロマターゼ阻害剤である請求項１１及び１４〜１７のいずれか１項に記載の使用のための化合物、請求項１２及び１４〜１７のいずれか１項に記載の使用、又は請求項１３〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記アロマターゼ阻害剤がエキセメスタン（アロマシンとしても知られる）、レトロゾール（フェマーラとしても知られる）又はアナストロゾール（アリミデックスとしても知られる）である請求項１８記載の使用のための化合物、請求項１８記載の使用又は請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
前記障害が乳癌（例えば、前記アロマターゼ阻害剤に耐性のある乳癌）である請求項１８もしくは１９に記載の使用のための化合物、請求項１８もしくは１９に記載の使用、又は請求項１８もしくは１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記治療が、さらなる活性薬剤を用いた治療（例えば、同時治療又は逐次治療）をさらに含み、前記さらなる活性薬剤が抗エストロゲン剤である請求項１１及び１４〜１７のいずれか１項に記載の使用のための化合物、請求項１２及び１４〜１７のいずれか１項に記載の使用、又は請求項１３〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記抗エストロゲン剤がフェソロデックス（フルベストラント及びＩＣＩ１８２７８０としても知られる）、タモキシフェン（ノルバデックスとしても知られる）又はヒドロキシタモキシフェンである請求項２１記載の使用のための化合物、請求項２１記載の使用又は請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
前記障害が乳癌（例えば、前記抗エストロゲン剤に耐性のある乳癌）である請求項２１もしくは２２に記載の使用のための化合物、請求項２１もしくは２２に記載の使用、又は請求項２１もしくは２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記治療が、さらなる活性薬剤を用いた治療（例えば、同時治療又は逐次治療）をさらに含み、前記さらなる活性薬剤がＨｅｒ２遮断薬である請求項１１及び１４〜１７のいずれか１項に記載の使用のための化合物、請求項１２及び１４〜１７のいずれか１項に記載の使用、又は請求項１３〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記Ｈｅｒ２遮断薬がハーセプチン、ペルツズマブ又はラパチニブである請求項２４記載の使用のための化合物、請求項２４記載の使用又は請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
前記治療が、さらなる細胞傷害性化学療法剤を用いた治療（例えば、同時治療又は逐次治療）をさらに含む請求項１１及び１４〜１７のいずれか１項に記載の使用のための化合物、請求項１２及び１４〜１７のいずれか１項に記載の使用、又は請求項１３〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記細胞傷害性化学療法剤がタキサン（例えば、タクソールとしても知られるパクリタキセル；タキソテールとしても知られるドセタキセル）、シクロホスファミド又は代謝拮抗薬（例えば、カルボプラチン、カペシタビン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、エピルビシン、５−フルオロウラシル等）である請求項２６記載の使用のための化合物、請求項２６記載の使用又は請求項２６記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１７年９月２０日に出願した英国特許出願番号第１７１５１９４．５号に関連しており、該出願の内容は、参照によりその全体が本明細書に援用される。
【０００２】
本発明は概して治療用化合物の分野に関する。より詳細には、本発明は、特定の４−［［（７−アミノピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ］メチル］ピペリジン−３−オール化合物（本明細書においては「ＡＰＰＡＭＰ化合物」と呼ぶ）に関しており、その化合物はとりわけ、ＣＤＫ（例えば、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、ＣＤＫ９、ＣＤＫ１０、ＣＤＫ１１、ＣＤＫ１２、ＣＤＫ１３等）を阻害する（例えば、選択的に阻害する）。また本発明は、このような化合物を含む医薬組成物、ならびにそのような化合物及び組成物の、インビトロとインビボの両方でＣＤＫを阻害する用途及び障害を治療する用途にも関する。この障害としては、ＣＤＫに関連する障害；サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）の不適切な活性により生じる障害；ＣＤＫ変異に関連する障害；ＣＤＫ過剰発現に関連する障害；ＣＤＫの上流経路活性化に関連する障害；ＣＤＫの阻害によって寛解する障害；増殖性障害；癌；ウイルス感染症（ＨＩＶを含む）；神経変性障害（アルツハイマー病及びパーキンソン病を含む）；虚血；腎疾患；心血管障害（アテローム性動脈硬化症を含む）；ならびに自己免疫障害（関節リウマチを含む）が含まれる。任意に、上記の治療は、さらなる活性薬剤を用いた治療（例えば、同時治療又は逐次治療）をさらに含み、上記のさらなる活性薬剤は、例えばアロマターゼ阻害剤、抗エストロゲン剤、Ｈｅｒ２遮断薬、細胞傷害性化学療法剤等である。
【背景技術】
【０００３】
本発明と本発明が関する技術の水準をさらに十分に記載し、開示するために、本明細書においては多数の文献を引用している。これらの各文献は、あたかも個々の文献がそれぞれ参照によって詳細にかつ個別に援用されていると示されているように、参照によりその全体が本開示に援用される。
【０００４】
本明細書とこれに続く特許請求の範囲とを通し、文脈から別段の意が必要とされない限り、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という語と、その変化形（「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ」及び「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」等）は、述べられている整数もしくは工程、又は整数もしくは工程の群を含むことを含意しているが、他のいかなる整数もしくは工程、又は整数もしくは工程の群を排除するものではないことが理解されよう。
【０００５】
本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用される場合、文脈から明らかに別様に示されていない限り、単数形「ａ」「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は複数指示物を含むことに留意が必要である。したがって、例えば「医薬担体」という言及は、このような担体の２個以上の混合物等を含む。
【０００６】
本明細書においては、範囲はしばしば「およそ（約）」の一特定値から、かつ／又は「およそ（約）」の別の特定値までとして表されている。このような範囲が表されている場合、別の実施形態は、その一特定値から、かつ／又は他方の特定値までを含む。同様に、先行詞として「約」を使用することによって数値が近似値として表されている場合、その特定値が別の実施形態を形成するということが理解されよう。
【０００７】
本開示は、本発明を理解するのに有用であり得る情報を含む。その情報は、本明細書において提供される任意の情報が先行技術であるという承認をするものではなく、又はここで請求される発明に関連があることを承認するものではない。又は、詳細にもしくは暗黙的に参照されている任意の文献が先行技術であることを承認するものではない。
【０００８】
サイクリン依存性プロテインキナーゼ（ＣＤＫ）
サイクリン依存性プロテインキナーゼ（ＣＤＫ）は、２１個のセリン／スレオニンプロテインキナーゼのファミリーの触媒サブユニットであり（例えば、２００９年のＭａｌｕｍｂｒｅｓらの文献を参照のこと）、それらのうちのいくつかは、成長段階を通しての細胞進行、ＤＮＡ複製及び有糸分裂を制御する（例えば、１９９５年のＰｉｎｅｓら；１９９５年のＭｏｒｇａｎらの文献を参照のこと）。細胞周期の別の段階を通しての適切な進行と、細胞周期の次の段階への移行には、特定のＣＤＫの活性化が必要とされる。ＣＤＫ４とＣＤＫ６は、成長期（Ｇ１）を通しての進行に必要とされ、ＣＤＫ２はＤＮＡ合成（Ｓ期）で、そしてＣＤＫ１は有糸分裂と細胞分裂（Ｍ期）で必要とされる。細胞周期ＣＤＫ活性化の調節は、細胞周期の段階を通しての正しい細胞進行のタイミングに極めて重要であり、それらの活性は多くの段階で調節される。その段階としては、特定サイクリン（Ａ、Ｂ、Ｄ及びＥクラスのサイクリン；これらのサイクリンは細胞周期の段階を通して合成され、分解される）、ＣＤＫ阻害剤（ＣＤＫＩ）、特にＣＩＰ／ＫＩＰ及びＩＮＫ型ＣＤＫＩ（例えば、１９９５年のＳｈｅｒｒらの文献を参照のこと）との複合体形成、ならびに特定残基におけるリン酸化及び脱リン酸化が含まれる。活性化ループ（Ｔループと呼ばれる）における特定スレオニン残基のリン酸化状態は、細胞周期ＣＤＫの活性に対し重要な修飾である（例えば、１９９４年のＦｉｓｈｅｒらの文献を参照のこと）。
【０００９】
ＣＤＫ自身はめったに変異しないので、ＣＤＫ活性の調節解除が、一般に高い活性及び／又は不適当な活性に起因する多くの病状の重要な要素である。細胞周期ＣＤＫにおける変異のまれな例としては、ＩＮＫ４  ＣＤＫＩへの非感受性を生じさせる遺伝性メラノーマを有するＣＤＫ４ファミリーが挙げられる（例えば、１９９６年のＺｕｏらの文献を参照のこと）。ｐ１６ＩＮＫ４及びｐ１４ＡＲＦ  ＣＤＫＩをコードするＣＤＫＮ２Ａ遺伝子における不活性化変異は、遺伝性メラノーマにおいて起こることがより多く（例えば、２０１０年のＨａｎｓｓｏｎらの文献を参照のこと）、これらの変異は、罹患した家族での乳癌及び膵臓癌のよい多い発生率にも関連している（例えば、２０００年のＢｏｒｇらの文献を参照のこと）。ＣＤＫ４及びＣＤＫ６は癌において増幅され、かつ／又は過剰発現することができ、それらのサイクリンエフェクターであるＤ型サイクリンもしばしば増幅され、かつ／又は過剰発現するが、ＣＤＫ４／ＣＤＫ６阻害剤（ＩＮＫ４遺伝子）は多くの種類の癌で頻繁に欠失し、かつ／又は後成的なサイレンシングを経る（例えば、２００２年のＯｒｔｅｇａらの文献を参照のこと）。Ｅ型サイクリンは活性化のためＣＤＫ２と相互作用し、癌において頻繁に過剰発現するが、ＣＤＫ２、ならびにＣＤＫ１に作用するｐ２１及びｐ２７阻害タンパク質は、癌においてエピジェネティックにサイレンシングされる（例えば、２００１年のＭａｌｕｍｂｒｅｓらの文献；２００７年のＪｏｎｅｓらの文献を参照のこと）。したがって細胞周期ＣＤＫの活性の上方制御は、癌の発生と進行に欠くことのできないものである。
【００１０】
ＣＤＫファミリーの別のメンバーであるＣＤＫ７は、サイクリンＨ及びＭＡＴ１と複合化し、Ｔ−ループの活性化において細胞周期ＣＤＫをリン酸化して、それらの活性を促進する（例えば、１９９４年のＦｉｓｈｅｒらの文献を参照のこと）。よって、ＣＤＫ７を阻害することにより、細胞周期進行を阻害する有力な手段が得られると提案されており、少なくとも大半の細胞型で、細胞周期に対してＣＤＫ２、ＣＤＫ４及びＣＤＫ６の絶対的な必要性は乏しいことについて、マウスでの遺伝子ノックアウト研究から説得力のある証拠があることを考慮すると、かかる手段は特に適切あり得る（例えば、２００９年のＭａｌｕｍｂｒｅｓらの文献を参照のこと）。一方、別の腫瘍はいくつかを必要とするが、他の間期ＣＤＫ（ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ６）とは無関係であると思われる。最近の遺伝子研究及び生化学研究により、細胞周期進行に対するＣＤＫ７の重要性が確かめられている（例えば、２００７年のＬａｒｏｃｈｅｌｌｅらの文献；２０１２年のＧａｎｕｚａらの文献を参照のこと）。
【００１１】
ＣＤＫ活性化キナーゼ（ＣＡＫ）としての役割に加え、ＣＤＫ７／サイクリンＨ／ＭＡＴ１は、基本転写因子ＴＦＩＩＨと複合化して、ＲＮＡポリメラーゼＩＩ（ＰｏｌＩＩ）のＣ末端ドメイン（ＣＴＤ）をリン酸化する（例えば、１９９５年のＬｕらの文献；１９９５年のＳｅｒｉｚａｗａらの文献を参照のこと）。ファミリーの他のメンバーであるＣＤＫ９も、ＰｏｌＩＩ  ＣＴＤリン酸化に必要とされる。ＰｏｌＩＩ  ＣＴＤは、チロシン−セリン−プロリン−スレオニン−セリン−プロリン−セリン（ＹＳＰＴＳＰＳ）配列を有する７つのアミノ酸反復からなり、哺乳動物ＰｏｌＩＩ  ＣＴＤには５２個のＹＳＰＴＳＰＳ七つ組反復が存在する。転写開始時にＰｏｌＩＩが遺伝子プロモーターから放出されるには、ＣＤＫ７及びＣＤＫ９によるセリン−２（Ｓ２）とセリン−５（Ｓ５）のリン酸化が必要とされる。ＣＤＫ７はＣＤＫ９の上流で作用すると思われ、ＣＤＫ７によるＳ５リン酸化は、ＣＤＫ９によるＳ２リン酸化よりも前に生じる（例えば、２０１２年のＬａｒｏｃｈｅｌｌｅらの文献を参照のこと）。フラボピリドールならびにＣＤＫ７とＣＤＫ９を阻害するＣＤＫ阻害剤等の転写阻害剤も、癌においてＣＤＫ７とＣＤＫ９を阻害することの潜在的な有用性を示している（例えば、２００８年のＷａｎｇらの文献を参照のこと）。ＰｏｌＩＩ  ＣＴＤのリン酸化における作用に加え、ＣＤＫ７とＣＤＫ９は、乳癌に関連するエストロゲン受容体（ＥＲ）（例えば、２０００年のＣｈｅｎらの文献を参照のこと）、レチノイド受容体（例えば、１９９７年のＲｏｃｈｅｔｔｅ−Ｅｇｌｙら；２０００年のＢａｓｔｉｅｎらの文献を参照のこと）、アンドロゲン受容体（例えば、２０１１年のＣｈｙｍｋｏｗｉｔｃｈら；２０１０年のＧｏｒｄｏｎらの文献を参照のこと）を含むいくつかの転写因子、ならびに腫瘍抑制因子ｐ５３（例えば、１９９７年のＬｕら；１９９７年のＫｏら；２００６年のＲａｄｈａｋｒｉｓｈｎａｎら；２００６年のＣｌａｕｄｉｏらの文献を参照のこと）の活性の調節に関係があるとされている。ＣＤＫ８は、転写因子とＰｏｌ  ＩＩ基本転写機構の間の相互作用に関する機構により遺伝子転写を制御するメディエーター複合体の要素であり、転写因子をリン酸化もしてその活性を制御する（例えば、２００９年のＡｌａｒｃｏｎらの文献を参照のこと）。また、ＣＤＫ８は転写再開制御に対しても重要であると思われる。ＣＤＫ８遺伝子は４０〜６０％の結腸直腸癌で増幅されており、その一方ＣＤＫ８のサイクリンパートナーであるサイクリンＣは多くの癌種で上方制御されているという知見により、癌におけるＣＤＫ８の重要性が注目を浴びている。一方、機能的研究が、癌におけるＣＤＫ８の発癌的役割を支持している（例えば、２０１１年のＸｕらの文献を参照のこと）。メディエーター活性の制御におけるＣＤＫ１１の潜在的な役割が説明されており、転写制御におけるＣＤＫ１１の役割が示されており（例えば、２０１２年のＤｒｏｇａｔらの文献を参照のこと）、その一方ＣＤＫ１１はＳ２  ＰｏｌＩＩ  ＣＴＤをリン酸化する能力も、転写におけるＣＤＫ１２及びＣＤＫ１３の関与を示し；ＣＤＫ１２はゲノム安定性の維持にも（例えば、２０１０年のＢａｒｔｋｏｗ���ａｋらの文献；２０１１年のＢｌａｚｅｋらの文献；２０１２年のＣｈｅｎｇらの文献を参照のこと）。
【００１２】
上記のＣＤＫ及び他のＣＤＫに関する、癌におけるかなりたくさんの証拠に加え（例えば、ＣＤＫ１０；例えば、２００８年のＬｏｒｎｓらの文献；２０１２年のＹｕらの文献を参照のこと）、ＣＤＫはＨＩＶを含めたウイルス感染症（例えば、２００２年のＫｎｏｃｋｅａｒｔらの文献を参照のこと）、アルツハイマー病及びパーキンソン病を含めた神経変性障害（ここで特に着目するのはＣＤＫ５である。例えば２００５年のＭｏｎａｃｏらの文献；２００８年のＦａｔｅｒｎａらの文献を参照のこと）、虚血、腎疾患を含めた増殖性障害（例えば、２００６年のＭａｒｓｈａｌｌらの文献を参照のこと）、アテローム性動脈硬化症を含めた心血管障害、ならびに関節リウマチを含めた自己免疫障害においても重要である。実際、ＣＤＫ７阻害は、ＮＦ−κＢ活性化及びＩＬ−１β／ＩＬ−６分泌の遮断を介して関節リウマチの炎症を抑制することが示されている（例えば、２０１８年のＨｏｎｇらの文献を参照のこと）。さらに、ＣＤＫ７阻害がＮＦ−κＢシグナル伝達経路を阻止する能力は、ＣＤＫ７阻害剤がさまざまな自己免疫疾患を治療する潜在的に幅広い能力を示している（例えば、２００４年のＢａｃｈｅｒらの文献を参照のこと）。
【００１３】
小分子ＣＤＫ阻害剤の開発により、多くのヒト疾患、特に癌の治療において潜在的に有力なアプローチがもたらされる。したがって、細胞周期進行の阻害は、選択的ＣＤＫ１阻害剤（ＣＤＫ１は細胞周期に必要不可欠であると思われるので）、もしくは選択的ＣＤＫ７阻害剤（ＣＤＫ７は細胞周期ＣＤＫを制御するので）の開発により達成されるか、又は全ての細胞周期ＣＤＫに対する活性を有する阻害剤を用いて達成される可能性がある。いくつかの証拠は、選択的ＣＤＫ４／ＣＤＫ６阻害剤又はＣＤＫ２阻害剤が特定条件に対する有用性（例えば、造血器腫瘍におけるＣＤＫ４／ＣＤＫ６、及び神経膠芽腫又は骨肉腫におけるＣＤＫ２）を有する可能性があることを示しており、したがってこれらのＣＤＫに対する選択的阻害剤の開発は有用であり得、選択性はおそらく毒性の問題の助けとなるであろう。
【００１４】
公知化合物
２０１５年のＢｏｎｄｋｅらの文献は、ＣＤＫ阻害剤として特定のピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５，７−ジアミン化合物を記載しており、例えば、以下の化合物（その中でＰＰＤＡ−００１と呼ばれる）が挙げられている：
【化１】
2020534346.tif 000003
【発明の概要】
【００１５】
改善された特性を有する新規化合物
本明細書中に記載されたＡＰＰＡＭＰ化合物は、驚くべきことに、そして予想外に、例えば、２０１５年のＢｏｎｄｋｅらの文献に示されるような、公知の構造的に類似する化合物よりも優れている。
【００１６】
例えば、ここに記述されているＡＰＰＡＭＰ化合物は、１つ以上の重要で有利な特性、例えば、ＣＤＫ７効力の向上；ＣＤＫ２に対するＣＤＫ７の選択性の改善；ヒト血漿中の遊離画分（ｆｒｅｅ  ｆｒａｃｔｉｏｎ)の改善；ＭＤＣＫ−ＭＤＲ１及び／又はＭＤＣＫ−ＢＣＲＰ排出（ｅｆｆｌｕｘ）の低下に関して、実質的な改善をもたらす。
【００１７】
いかなる特定の理論にも束縛されることを望むものではないが、本発明者らは、置換基の特定の組み合わせ及びそれらの位置が特許請求される化合物の格別な特性を生じさせると考える。
【００１８】
発明の概要
本発明の一態様は、本明細書に記載のある特定の４−［［（７−アミノピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ］メチル］ピペリジン−３−オール化合物（本明細書においては「ＡＰＰＡＭＰ化合物」と呼ばれる）に関する。
【００１９】
本発明の別の態様は、本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物と、薬学的に許容できる担体又は希釈剤とを含む組成物（例えば、医薬組成物）に関する。
【００２０】
本発明の別の態様は、本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物と、薬学的に許容できる担体又は希釈剤とを混合するステップを含む組成物（例えば、医薬組成物）の調製方法に関する。
【００２１】
本発明の別の態様は、インビトロ又はインビボにおいて、ＣＤＫ（例えば、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、ＣＤＫ９、ＣＤＫ１０、ＣＤＫ１１、ＣＤＫ１２、ＣＤＫ１３等）の機能（例えば、細胞での機能）を阻害する方法に関しており、この方法は、有効量の本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物と、上記の細胞を接触させることを含む方法である。
【００２２】
本発明の別の態様は、インビトロ又はインビボにおいて、細胞増殖（例えば、細胞の増殖）を制御する（例えば、阻害する）か、細胞周期進行を阻害するか、アポトーシスを促進するか、又はこれらのうちの１つ以上の組合せを行う方法に関しており、この方法は、有効量の本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物と、細胞を接触させることを含む方法である。
【００２３】
本発明の別の態様は、治療により人体又は動物体を治療する方法において使用するための本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物に関しており、例えば本明細書に記載の障害（例えば、疾患）の治療方法において使用するための化合物に関する。
【００２４】
本発明の別の態様は、本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物の薬物製造における使用に関しており、その薬物は、例えば本明細書に記載の障害（例えば、疾患）の治療方法等の治療方法において使用するための薬物である。
【００２５】
本発明の別の態様は、例えば本明細書に記載の障害（例えば、疾患）の治療方法等の治療方法に関しており、この方法は、治療有効量の本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物を、好ましくは医薬組成物の形態で、治療の必要な対象に投与することを含む方法である。
【００２６】
一実施形態においては、上記の治療は、さらなる活性薬剤を用いた治療（例えば、同時治療又は逐次治療）をさらに含み、上記のさらなる活性薬剤は、例えば本明細書に記載のアロマターゼ阻害剤、抗エストロゲン剤、Ｈｅｒ２遮断薬、細胞傷害性化学療法剤等である。
【００２７】
本発明の別の態様は、（ａ）本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物、好ましくは医薬組成物として、好適な容器内に、かつ／又は好適な包装を用いて提供されるもの；及び（ｂ）使用についての説明書、例えば、上記の化合物の投与法について文書化された説明書を含むキットに関する。
【００２８】
本発明の別の態様は、本明細書に記載の合成方法、又は本明細書に記載の合成方法を含む方法によって得ることができるＡＰＰＡＭＰ化合物に関する。
【００２９】
本発明の別の態様は、本明細書に記載の合成方法、又は本明細書に記載の合成方法を含む方法によって得られたＡＰＰＡＭＰ化合物に関する。
【００３０】
本発明の別の態様は、本明細書に記載の新規中間体に関しており、この中間体は、本明細書に記載の合成方法での使用に好適である。
【００３１】
本発明の別の態様は、上記のような本明細書に記載の新規中間体の、本明細書に記載の合成方法における使用に関する。
【００３２】
当業者によって理解されるように、本発明の一態様の特長及び好ましい実施形態は、本発明の他の態様にも関する。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
化合物
本発明の一態様はある特定の化合物に関しており、その化合物はピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５，７−ジアミンに関する。
【化２】
2020534346.tif 000004
【００３４】
より詳細には、化合物は、４−［［（７−アミノピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ］メチル］ピペリジン−３−オール
【化３】
2020534346.tif 000005
に関する。
【００３５】
さらにより詳細には、化合物は、下記の構造式：
【化４】
2020534346.tif 000006
（式中、−Ｒ３、−Ｒ６、及び−Ｒ７は、本明細書において定義されるとおりである）
を有する特定の置換された４−［［（７−アミノピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ］メチル］ピペリジン−３−オール化合物である。
【００３６】
したがって、本発明の１つの態様は、下記式の化合物、又はその薬学的に許容される塩、水和物、もしくは溶媒和物（便宜上、本明細書では集合的に「４−［［（７−アミノピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ］メチル］ピペリジン−３−オール化合物」及び「ＡＰＰＡＭＰ化合物」と呼ぶ）から選択される化合物である：
【化５】
2020534346.tif 000007
【００３７】
実質的に精製された形態
本発明の一態様は、実質的に精製された形態及び／又は混入物が実質的に存在しない形態の、本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物に関する。
【００３８】
一実施形態においては、実質的に精製された形態は、少なくとも５０重量％であり、例えば少なくとも６０重量％、例えば少なくとも７０重量％、例えば少なくとも８０重量％、例えば少なくとも９０重量％、例えば少なくとも９５重量％、例えば少なくとも９７重量％、例えば少なくとも９８重量％、例えば少なくとも９９重量％である。
【００３９】
別段の定めがない限り、実質的に精製された形態は、任意の立体異性形態又は任意の鏡像異性形態の化合物を指す。例えば、一実施形態においては、実質的に精製された形態は立体異性体の混合物を指し、すなわち他の化合物に関して精製されている形態を指す。一実施形態においては、実質的に精製された形態は１つの立体異性体を指し、例えば光学的に純粋な立体異性体を指す。一実施形態においては、実質的に精製された形態は、鏡像異性体の混合物を指す。一実施形態においては、実質的に精製された形態は、鏡像異性体の等モル混合物（すなわち、ラセミ混合物、ラセミ化合物）を指す。一実施形態においては、実質的に精製された形態は、１つの鏡像異性体を指し、例えば光学的に純粋な鏡像異性体を指す。
【００４０】
一実施形態においては、混入物は５０重量％以下であり、例えば４０重量％以下、例えば３０重量％以下、例えば２０重量％以下、例えば１０重量％以下、例えば５重量％以下、例えば３重量％以下、例えば２重量％以下、例えば１重量％以下である。
【００４１】
定めがない限り、混入物は他の化合物を指し、すなわち立体異性体又は鏡像異性体以外の化合物を指す。一実施形態においては、混入物は他の化合物と、他の立体異性体とを指す。一実施形態においては、混入物は他の化合物と、他方の鏡像異性体とを指す。
【００４２】
一実施形態においては、実質的に精製された形態は少なくとも６０％光学的に純粋であり（すなわち、モル基準で化合物の６０％が所望の立体異性体又は鏡像異性体であり、４０％は所望でない立体異性体又は鏡像異性体である）、例えば少なくとも７０％光学的に純粋であり、例えば少なくとも８０％光学的に純粋であり、例えば少なくとも９０％光学的に純粋であり、例えば少なくとも９５％光学的に純粋であり、例えば少なくとも９７％光学的に純粋であり、例えば少なくとも９８％光学的に純粋であり、例えば少なくとも９９％光学的に純粋である。
【００４３】
異性体
ある特定の化合物は、１個以上の特定の幾何学形態、光学的形態、鏡像異性形態、ジアステレオ異性形態、エピマー形態、アトロピック（ａｔｒｏｐｉｃ）形態、立体異性形態、互変異性形態、立体配座形態又はアノマー形態、たとえば限定せずにｃｉｓ−及びｔｒａｎｓ−形態；Ｅ−及びＺ−形態；ｃ−、ｔ−及びｒ−形態；ｅｎｄｏ−及びｅｘｏ−形態；Ｒ−、Ｓ−及びｍｅｓｏ−形態；Ｄ−及びＬ−形態；ｄ−及びｌ−形態；（＋）及び（−）形態；ケト−、エノール−及びエノラート−形態；ｓｙｎ−及びａｎｔｉ−形態；シンクリナル−及びアンチクリナル−形態；α−及びβ−形態；アキシアル及びエカトリアル形態；舟型−、いす型−、ねじれ型−、エンベロープ型−及び半いす形−形態；ならびにそれらの組合せで存在し得、以降、まとめて「異性体」（又は「異性形態」）と呼ぶ。
【００４４】
構造のクラスへの言及には、そのクラス内にある構造異性形態が適切に含まれてもよい（例えば、Ｃ1-7アルキルにはｎ−プロピル及びイソプロピルが含まれ；ブチルにはｎ−、ｉｓｏ−、ｓｅｃ−及びｔｅｒｔ−ブチルが含まれ；メトキシフェニルにはオルト−、メタ−及びパラ−メトキシフェニルが含まれる）。しかしながら、特定の基又は置換パターンへの言及には、空間内の位置ではなく原子間の結合に関して異なる他の構造（ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ）異性体（又は構造（ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ）異性体）が含まれることは意図されていない。例えば、メトキシ基−ＯＣＨ3への言及は、その構造異性体であるヒドロキシメチル基−ＣＨ2ＯＨへの言及として解釈されるべきではない。同様にして、オルト−クロロフェニルへの明確な言及は、その構造異性体であるメタ−クロロフェニルへの言及として解釈されるべきではない。
【００４５】
上記の除外は、例えば以下の互変異性対：ケト／エノール（以下に図示する）、イミン／エナミン、アミド／イミノアルコール、アミジン／アミジン、ニトロソ／オキシム、チオケトン／エンチオール、Ｎ−ニトロソ／ヒドロキシアゾ、及びニトロ／アシニトロにおける、例えばケト−、エノール−及びエノラート−形態等の互変異性形態には関係がない。本明細書においては、１つの互変異性体への言及は、両方の互変異性体を包含するよう意図される。
【化６】
2020534346.tif 000008
【００４６】
１つ以上の同位体置換がなされた化合物は、「異性体」という用語に特定的にに含まれることに留意されたい。例えば、Ｈは、1Ｈ、2Ｈ（Ｄ）及び3Ｈ（Ｔ）を含めたいずれの同位体形態であってもよく；Ｃは、12Ｃ、13Ｃ及び14Ｃを含めたいずれの同位体形態であってもよく；Ｏは、16Ｏ及び18Ｏを含めたいずれの同位体形態であってもよい等である。
【００４７】
別段の定めがない限り、特定の化合物への言及は、その混合物（例えばラセミ混合物）を含めた、上記のような異性体形態全てを含む。このような異性体形態の調製方法（例えば、不斉合成）及び分割方法（例えば、分別結晶法及びクロマトグラフィー手段）は、いずれも当業者に公知であるか、あるいは、本明細書で教示される方法又は公知方法を公知様式で適合させることによって容易に得られる。
【００４８】
塩
対応する化合物の塩、例えば薬学的に許容できる塩を調製し、精製し、かつ／又は取り扱うことが便利であるか又は望ましくあり得る。薬学的に許容できる塩の例は、Ｂｅｒｇｅら，１９７７，「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ  Ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ  Ｓａｌｔｓ」，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，６６巻，１−１９頁で考察されている。
【００４９】
例えば、化合物がアニオン性であるか、又はアニオン性であり得る官能基（例えば、−ＣＯＯＨは−ＣＯＯ-であってもよい）を有する場合、塩は好適なカチオンを用いて形成され得る。
【００５０】
好適な無機カチオンの例としては、Ｎａ+及びＫ+等のアルカリ金属イオン、Ｃａ2+及びＭｇ2+等のアルカリ土類カチオン、ならびにＡｌ3+及びアンモニウムイオン（すなわち、ＮＨ4+）等の他のカチオンが挙げられるがこれらに限定されない。好適な有機カチオンの例としては、置換アンモニウムイオン（例えば、ＮＨ3Ｒ+、ＮＨ2Ｒ2+、ＮＨＲ3+、ＮＲ4+）が挙げられるがこれらに限定されず、例えば式中、Ｒはそれぞれ独立して直鎖又は分岐の飽和Ｃ1-18アルキル、Ｃ3-8シクロアルキル、Ｃ3-8シクロアルキル−Ｃ1-6アルキル及びフェニル−Ｃ1-6アルキルであり、フェニル基は任意に置換されている。いくつかの好適な置換アンモニウムイオンの例は、エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミン及びトロメタミン、ならびにリジン及びアルギニン等のアミノ酸から誘導されるイオンである。一般的な四級アンモニウムイオンの例はＮ（ＣＨ3）4+である。
【００５１】
化合物がカチオン性であるか、又はプロトン付加によってカチオン性となってもよい官能基（例えば、−ＮＨ2は−ＮＨ3+となってもよい）を有する場合、塩は好適なアニオンを用いて形成されてもよい。
【００５２】
例えば、親構造がカチオン性基（例えば、−ＮＭｅ2+）を含むか、又はプロトン付加によってカチオン性となってもよい官能基（例えば、−ＮＨ2は−ＮＨ3+となってもよい）を有する場合、塩は好適なアニオンを用いて形成されてもよい。四級アンモニウム化合物の場合には、正電荷と釣り合いをとるために、対アニオンが一般的には常に存在する。化合物が、カチオン性基（例えば、−ＮＭｅ2+、−ＮＨ3+）に加え、アニオンを形成することができる基（例えば、−ＣＯＯＨ）も含む場合は、分子内塩（双性イオンとも呼ばれる）が形成されてもよい。
【００５３】
好適な無機アニオンの例としては、以下の無機酸：塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、亜硫酸、硝酸、亜硝酸、リン酸及び亜リン酸から誘導されるアニオンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５４】
好適な有機アニオンの例としては、以下の有機酸：２−アセチルオキシ安息香酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、ケイ皮酸、クエン酸、エデト酸、１，２−エタンジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシナフタレンカルボン酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、パントテン酸、フェニル酢酸、フェニルスルホン酸、プロピオン酸、ピルビン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、酒石酸、トルエンスルホン酸及び吉草酸から誘導されるアニオンが挙げられるが、これらに限定されない。好適なポリマー有機アニオンの例としては、以下のポリマー酸：タンニン酸、カルボキシメチルセルロースから誘導されるアニオンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５５】
別段の定めがない限り、特定の化合物への言及は、その塩形態も含む。
【００５６】
溶媒和物及び水和物
対応する化合物の溶媒和物を調製し、精製し、かつ／又は取り扱うことが便利であるか又は望ましくあり得る。本明細書においては、「溶媒和物」という用語は、溶質（例えば、化合物、化合物の塩）と溶媒の複合体を指す従来の意味で使用される。溶媒が水の場合、溶媒和物は好都合に水和物と呼ばれてもよく、例えば一水和物、二水和物、三水和物等と呼ばれてもよい。
【００５７】
別段の定めがない限り、特定の化合物への言及は、その溶媒和物形態及び水和物形態も含む。
【００５８】
化学的保護形態
化合物を化学的保護形態で調製し、精製し、かつ／又は取り扱うことが便利であるか又は望ましくあり得る。本明細書においては、「化学的保護形態」という用語は、従来の化学的意味で使用され、特定された条件（例えば、ｐＨ、温度、照射、溶媒等）の下での望ましくない化学反応から、１個以上の反応性官能基が保護されている化合物に関する。実際には、周知の化学的方法を使用して、保護しなければ特定条件下で反応性である官能基を可逆的に非反応性にする。化学的保護形態では、１個以上の反応性官能基は、保護された基又は保護している基（あるいは、マスクされた基もしくはマスクしている基、又はブロックされた基もしくはブロックしている基）の形態である。反応性官能基を保護することにより、保護基に影響を及ぼすことなく、他の無保護の反応性官能基に関わる反応を行うことができ；通常は次のステップで、分子の残り部分に実質的に影響を及ぼすことなく保護基を取り除くか、又はマスキング基を変換してもよい。例えば、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」（Ｔ．Ｇｒｅｅｎ及びＰ．Ｗｕｔｓ；第４版；Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，２００６）を参照のこと。
【００５９】
多種多様の上記のような「保護」方法、「ブロック」方法又は「マスキング」方法が幅広く使用されており、有機合成において周知である。例えば、特定された条件下でともに反応性である２個の非等価な反応性官能基を有する化合物を誘導体化して、その官能基のうち１つを「保護」し、したがって特定条件下で無反応性であるようにしてもよく；そのように保護して、１つの反応性官能基のみを効果的に有する反応体としてその化合物を使用してもよい。保護基は、所望の反応（他の官能基に関わる反応）の完了後、「脱保護」してもとの官能基に戻してもよい。
【００６０】
例えば、ヒドロキシ基をエーテル（−ＯＲ）又はエステル（−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ）として保護してもよい。このエーテル又はエステルは、例えばｔ−ブチルエーテル；ベンジルエーテル、ベンズヒドリル（ジフェニルメチル）エーテルもしくはトリチル（トリフェニルメチル）エーテル；トリメチルシリルエーテルもしくはｔ−ブチルジメチルしリルエーテル；又はアセチルエステル（−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ3、−ＯＡｃ）である。
【００６１】
例えばアミノ基を、例えばアミド（−ＮＲＣＯ−Ｒ）もしくはウレタン（−ＮＲＣＯ−ＯＲ）として；又は、好適な場合には（例えば、環状アミン類）、ニトロキシドラジカルとして（＞Ν−Ｏ・）保護してもよい。このアミド又はウレタンは、例えばアセトアミド（−ＮＨＣＯ−ＣＨ3）；ベンジルオキシアミド（−ＮＨＣＯ−ＯＣＨ2Ｃ6Ｈ5、−ＮＨ−Ｃｂｚ）；ｔ−ブトキシアミド（−ＮＨＣＯ−ＯＣ（ＣＨ3）3、−ＮＨ−Ｂｏｃ）；２−ビフェニル−２−プロポキシアミド（−ＮＨＣＯ−ＯＣ（ＣＨ3）2Ｃ6Ｈ4Ｃ6Ｈ5、−ＮＨ−Ｂｐｏｃ）、９−フルオレニルメトキシアミド（−ＮＨ−Ｆｍｏｃ）、６−ニトロベラトリルオキシアミド（−ＮＨ−Ｎｖｏｃ）、２−トリメチルシリルエチルオキシアミド（−ＮＨ−Ｔｅｏｃ）、２，２，２−トリクロロエチルオキシアミド（−ＮＨ−Ｔｒｏｃ）、アリルオキシアミド（−ＮＨ−Ａｌｌｏｃ）、２（−フェニルスルホニル）エチルオキシアミド（−ＮＨ−Ｐｓｅｃ）である。
【００６２】
プロドラッグ
化合物をプロドラッグの形態で調製し、精製し、かつ／又は取り扱うことが便利であるか又は望ましくあり得る。本明細書において使用される場合、「プロドラッグ」という用語は、インビボで所望の活性化合物を生成する化合物に関する。典型的には、プロドラッグは不活性であるか、又は所望の活性化合物よりも活性が低いが、有利な取り扱い特性、投与特性又は代謝特性を提供し得る。
【００６３】
例えば、いくつかのプロドラッグは、活性化合物のエステル（例えば、生理学的に許容できる代謝的不安定性エステル）である。代謝中、エステル基（−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ）が開裂して活性薬物を生成する。そのようなエステルは、例えば親化合物中のカルボン酸基（−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ）のいずれかをエステル化することによって形成させてもよく、必要に応じて、親化合物に存在する任意の他の反応基をあらかじめ保護し、その後必要であれば脱保護して形成させてもよい。
【００６４】
また、いくつかのプロドラッグは酵素学的に活性化されて、活性化合物を生成するか、又はさらなる化学反応で活性化合物を生成する化合物を生成する（例えば、抗体指向性酵素プロドラッグ療法（ＡＤＥＰＴ）、遺伝子指向性酵素プロドラッグ療法（ＧＤＥＰＴ）、脂質指向性酵素プロドラッグ療法（ＬＩＤＥＰＴ）等での場合）。例えば、プロドラッグは糖誘導体もしくは他のグリコシド複合体であってもよく、又はアミノ酸エステル誘導体であってもよい。
【００６５】
組成物
本発明の一態様は、本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物と、薬学的に許容できる担体、希釈剤又は賦形剤とを含む組成物（例えば、医薬組成物）に関する。
【００６６】
本発明の別の態様は、本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物と、薬学的に許容できる担体、希釈剤又は賦形剤とを混合することを含む、組成物（例えば、医薬組成物）の調製方法に関する。
【００６７】
用途
本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物は、例えば増殖性障害の治療（「抗増殖剤」として）、癌の治療（「抗癌剤」として）、ウイルス感染症の治療（「抗ウイルス剤」として）、神経変性疾患の治療（「抗神経変性剤」として）等において有用である。
【００６８】
ＣＤＫ阻害方法における用途
本発明の一態様は、インビトロ又はインビボにおいて、ＣＤＫ（例えば、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、ＣＤＫ９、ＣＤＫ１０、ＣＤＫ１１、ＣＤＫ１２、ＣＤＫ１３等）の機能（例えば、細胞での機能）を阻害する方法に関しており、この方法は、有効量の本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物と、上記の細胞を接触させることを含む方法である。
【００６９】
当業者は、候補化合物がＣＤＫ（例えば、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、ＣＤＫ９、ＣＤＫ１０、ＣＤＫ１１、ＣＤＫ１２、ＣＤＫ１３等）を阻害するか否かを容易に測定することができる。例えば、好適なアッセイは、本明細書に記載されているか、当業者に公知である。
【００７０】
一実施形態においては、上記の方法はインビトロで行われる。
一実施形態においては、上記の方法はインビボで行われる。
【００７１】
一実施形態においては、ＡＰＰＡＭＰ化合物は、薬学的に許容できる組成物の形態で提供される。
【００７２】
任意の種類の細胞を処理してもよく、その細胞としては、脂肪、肺、胃腸（例えば、腸、結腸を含む）、乳房（乳腺）、卵巣、前立腺、肝臓（肝）、腎臓（腎）、膀胱、膵臓、脳及び皮膚が含まれる。
【００７３】
例えば、細胞試料をインビトロで成長させ、この細胞と化合物を接触させ、化合物がその細胞に及ぼす効果を観測してもよい。「効果」の例としては、細胞の形態的状態（例えば、生存又は死亡等）を測定してもよい。化合物が細胞に影響を及ぼすと見出された場合、このことを、同じ細胞型の細胞を保有する患者の治療法において、化合物の効力の予後マーカー又は診断マーカーとして使用してもよい。
【００７４】
細胞増殖等を阻害する方法における用途
本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物は、例えば（ａ）細胞増殖の制御（例えば、阻害）；（ｂ）細胞周期進行の阻害；（ｃ）アポトーシスの促進；又は（ｄ）これらのうちの１つ以上の組合せを行う。
【００７５】
本発明の一態様は、インビトロ又はインビボにおいて、細胞増殖（例えば、細胞の増殖）を制御する（例えば、阻害する）か、細胞周期進行を阻害するか、アポトーシスを促進するか、又はこれらのうちの１つ以上の組合せを行う方法に関しており、この方法は、有効量の本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物と、細胞を接触させることを含む方法である。
【００７６】
一実施形態においては、上記の方法は、インビトロ又はインビボにおいて、細胞増殖（例えば、細胞の増殖）を制御する（例えば、阻害する）方法であり、この方法は、有効量の本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物と、細胞を接触させることを含む。
【００７７】
一実施形態においては、上記の方法はインビトロで行われる。
一実施形態においては、上記の方法はインビボで行われる。
【００７８】
一実施形態においては、ＡＰＰＡＭＰ化合物は、薬学的に許容できる組成物の形態で提供される。
【００７９】
任意の種類の細胞を処理してもよく、その細胞としては、肺、胃腸（例えば、腸、結腸を含む）、乳房（乳腺）、卵巣、前立腺、肝臓（肝）、腎臓（腎）、膀胱、膵臓、脳及び皮膚が含まれる。
【００８０】
当業者は、候補化合物が細胞増殖等を制御する（例えば、阻害する）か否かを容易に測定することができる。例えば、特定の化合物によって与えられる活性の評価に便利に使用されてもよいアッセイが、本明細書において記載されている。
【００８１】
例えば、細胞試料（例えば、腫瘍からの細胞）をインビトロで成長させ、この細胞と化合物を接触させ、化合物がその細胞に及ぼす効果を観測してもよい。「効果」の例としては、細胞の形態的状態（例えば、生存又は死亡等）を測定してもよい。化合物が細胞に影響を及ぼすと見出された場合、このことを、同じ細胞型の細胞を保有する患者の治療法において、化合物の有効性の予後マーカー又は診断マーカーとして使用してもよい。
【００８２】
治療法における用途
本発明の別の態様は、治療により人体又は動物体を治療する方法において使用するための本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物に関しており、例えば本明細書に記載の障害（例えば、疾患）の治療方法において使用するための化合物に関する。
【００８３】
薬物の製造における用途
本発明の別の態様は、本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物の薬物製造における使用に関しており、その薬物は、例えば本明細書に記載の障害（例えば、疾患）の治療方法等の治療方法において使用するための薬物である。
【００８４】
一実施形態においては、上記の薬物はＡＰＰＡＭＰ化合物を含む。
【００８５】
治療方法
本発明の別の態様は、例えば本明細書に記載の障害（例えば、疾患）の治療方法等の治療方法に関しており、この方法は、治療有効量の本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物を、好ましくは医薬組成物の形態で、治療の必要な対象に投与することを含む方法である。
【００８６】
治療される障害
一実施形態（例えば、治療法において使用する実施形態、薬物製造における使用の実施形態、治療方法の実施形態）においては、治療は、ＣＤＫに関連する障害（例えば、疾患）；ＣＤＫの不適切な活性により生じる障害（例えば、疾患）；ＣＤＫ変異に関連する障害（例えば、疾患）；ＣＤＫ過剰発現に関連する障害（例えば、疾患）；ＣＤＫの上流経路活性化に関連する障害（例えば、疾患）；ＣＤＫの阻害（例えば、選択的阻害）によって寛解する障害（例えば、疾患）の治療である。
【００８７】
一実施形態（例えば、治療法において使用する実施形態、薬物製造における使用の実施形態、治療方法の実施形態）においては、治療は、増殖性障害；癌；ウイルス感染症（例えば、ＨＩＶ）；神経変性障害（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病）；虚血；腎疾患；心血管障害（例えば、アテローム性動脈硬化症）；又は自己免疫障害（関節リウマチを含む）の治療である。
【００８８】
治療される障害−ＣＤＫに関連する障害
一実施形態（例えば、治療法において使用する実施形態、薬物製造における使用の実施形態、治療方法の実施形態）においては、治療は、ＣＤＫ（例えば、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、ＣＤＫ９、ＣＤＫ１０、ＣＤＫ１１、ＣＤＫ１２、ＣＤＫ１３等）、特にＣＤＫ７に関連する障害（例えば、疾患）の治療である。
【００８９】
一実施形態においては、治療は、ＣＤＫ（例えば、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、ＣＤＫ９、ＣＤＫ１０、ＣＤＫ１１、ＣＤＫ１２、ＣＤＫ１３等）、特にＣＤＫ７の不適切な活性により生じる障害（例えば、疾患）の治療である。
【００９０】
一実施形態においては、治療は、ＣＤＫ変異；ＣＤＫ過剰発現（例えば、対応する正常細胞と比較して；例えば、過剰発現が１．５倍、２倍、３倍、５倍、１０倍、２０倍もしくは５０倍）；又はＣＤＫの上流経路活性化に関連する障害（例えば、疾患）の治療である。
【００９１】
一実施形態においては、治療は、ＣＤＫ（例えば、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、ＣＤＫ９、ＣＤＫ１０、ＣＤＫ１１、ＣＤＫ１２、ＣＤＫ１３等）、特にＣＤＫ７の阻害（例えば、選択的阻害）によって寛解する障害（例えば、疾患）の治療である。
【００９２】
治療される障害−増殖性障害
一実施形態（例えば、治療法において使用する実施形態、薬物製造における使用の実施形態、治療方法の実施形態）においては、治療は増殖性障害の治療である。
【００９３】
本明細書において使用される場合、「増殖性障害」という用語は、不必要であるか又は制御されていない、過剰又は異常な細胞の細胞増殖に関しており、その細胞増殖は望まれない細胞増殖であり、例えば新生物成長又は過形成性成長等である。
【００９４】
一実施形態においては、治療は、良性細胞増殖、前癌性細胞増殖又は悪性細胞増殖を特徴とする増殖性障害の治療である。
【００９５】
一実施形態においては、治療は、過形成；新生物；腫瘍（例えば、組織球腫、グリオーマ、星状細胞腫、骨腫）；癌；乾癬；骨疾患；線維増殖性障害（例えば、結合組織の線維増殖性障害）；肺線維症；アテローム性動脈硬化症；又は血管中の平滑筋細胞増殖（例えば、狭窄もしくは血管形成術後の再狭窄）の治療である。
【００９６】
治療される障害−癌
一実施形態（例えば、治療法において使用する実施形態、薬物製造における使用の実施形態、治療方法の実施形態）においては、治療は癌の治療である。
【００９７】
一実施形態においては、治療は癌転移の治療である。
【００９８】
癌に含まれるのは以下のものである。
（１）癌腫。重層扁平上皮（扁平上皮癌）から生じる腫瘍、ならびに臓器及び腺（腺癌）内に生じる腫瘍が含まれる。
例としては、乳房、結腸、肺、前立腺、卵巣が挙げられる。
【００９９】
（２）肉腫。骨肉腫及び骨原性肉腫（骨）；
軟骨肉腫（軟骨）；平滑筋肉腫（平滑筋）；横紋筋肉腫（骨格筋）；中皮肉腫及び中皮腫（体腔の膜裏層）；線維肉腫（線維組織）；血管肉腫及び血管内皮腫（血管）；脂肪肉腫（脂肪組織）；グリオーマ及び星状細胞腫（脳に存在する神経原性結合組織）；粘液肉腫（一次胚結合組織）；間葉腫又は混合性中胚葉腫瘍（混合性結合組織型）が含まれる。
【０１００】
（３）骨髄腫。
【０１０１】
（４）造血器腫瘍。骨髄性白血病及び顆粒球性白血病（骨髄及び顆粒球白血球系の悪性腫瘍）；リンパ性、リンパ球性及びリンパ芽球性白血病（リンパ及びリンパ球血球系の悪性腫瘍）；真性多血症（様々な血液細胞産物（しかし赤血球が一番多い）の悪性腫瘍）が含まれる。
【０１０２】
（５）リンパ腫。ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫が含まれる。
【０１０３】
（６）混合型。例えば腺扁平上皮癌；混合性中胚葉性腫瘍；癌肉腫；奇形癌腫が含まれる。
【０１０４】
例えば、一実施形態においては、治療は乳癌の治療である。
【０１０５】
一実施形態においては、癌は癌幹細胞を特徴とするか、又は癌幹細胞をさらなる特徴とする。
【０１０６】
一実施形態においては、癌はＣＤＫ（例えば、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、ＣＤＫ９、ＣＤＫ１０、ＣＤＫ１１、ＣＤＫ１２、ＣＤＫ１３等）、特にＣＤＫ７と関連がある。
【０１０７】
一実施形態においては、癌はＣＤＫ（例えば、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、ＣＤＫ９、ＣＤＫ１０、ＣＤＫ１１、ＣＤＫ１２、ＣＤＫ１３等）、特にＣＤＫ７の不適切な活性を特徴とするか、又はその不適切な活性をさらなる特徴とする。
【０１０８】
一実施形態においては、癌はＣＤＫ（例えば、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、ＣＤＫ９、ＣＤＫ１０、ＣＤＫ１１、ＣＤＫ１２、ＣＤＫ１３等）、特にＣＤＫ７の過剰発現を特徴とするか、又はその過剰発現をさらなる特徴とする。
【０１０９】
抗癌効果は、１個以上の機構により生じてもよい。その機構には、細胞増殖の制御、細胞周期進行の阻害、血管新生（新しい血管の形成）の阻害、転移（発生点からの腫瘍の広がり）の阻害、細胞移動（体の他の部分への癌細胞の広がり）の阻害、浸潤（隣接する正常組織への腫瘍細胞の広がり）の阻害、アポトーシス（プログラム細胞死）の促進、壊死による死、又はオートファジーによる死の誘発が含まれるがこれらに限定されない。本明細書に記載される化合物は、本明細書において論じられている機構から独立して、本明細書に記載の癌の治療に使用してもよい。
【０１１０】
治療される障害−ウイルス感染症
一実施形態（例えば、治療法において使用する実施形態、薬物製造における使用の実施形態、治療方法の実施形態）においては、治療はウイルス感染症の治療である。
【０１１１】
一実施形態においては、治療は、
（グループＩ）ｄｓＤＮＡウイルス、例えばアデノウイルス、ヘルペスウイルス、ポックスウイルス；
（グループＩＩ）ｓｓＤＮＡウイルス、例えばパルボウイルス；
（グループＩＩＩ）ｄｓＲＮＡウイルス、例えばレオウイルス；
（グループＩＶ）（＋）ｓｓＲＮＡウイルス、例えばピコルナウイルス、トガウイルス；
（グループＶ）（−）ｓｓＲＮＡウイルス、例えばオルソミクソウイルス、ラブドウイルス；
（グループＶＩ）ｓｓＲＮＡ−ＲＴウイルス、例えばレトロウイルス；又は
（グループＶＩＩ）ｄｓＤＮＡ−ＲＴウイルス、例えばヘパドナウイルスによるウイルス感染の治療である。
【０１１２】
上で使用される場合、ｄｓ：二重鎖；ｓｓ：＋鎖；（＋）ｓｓＲＮＡ：＋鎖ＲＮＡ；（−）ｓｓＲＮＡ：−鎖ＲＮＡ；ｓｓＲＮＡ−ＲＴ：生活環にＤＮＡ中間体を有する（＋鎖）ＲＮＡである。
【０１１３】
一実施形態においては、治療は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）；Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）；Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）；ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）；サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）；又はエプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）；カポジ肉腫に関連するヒトヘルペスウイルス８型（ＨＨＶ）；コクサッキーウイルスＢ３型；ボルナウイルス；インフルエンザウイルスの治療である。
【０１１４】
治療される障害−自己免疫障害
一実施形態（例えば、治療法において使用する実施形態、薬物製造における使用の実施形態、治療方法の実施形態）において、治療は、自己免疫障害の治療である。
【０１１５】
一実施形態において、治療は、結合組織、関節、皮膚、又は眼に関連する自己免疫障害の治療である。
【０１１６】
一実施形態において、治療は、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、乾癬、又はシェーグレン症候群の治療である。
【０１１７】
治療
本明細書において障害の治療と関係して使用される場合、「治療」という用語は、一般に例えば障害の進行の阻害等の、いくつかの所望の治療効果が達成される、ヒト又は動物（例えば、獣医学用途で）の治療に関する。また、「治療」という用語には、進行速度の減少、進行速度の停止、障害の症状の軽減、障害の寛解、及び障害の治癒が含まれる。予防手段（すなわち、予防法）としての治療も含まれる。例えば、まだ障害を生じさせていないが、障害を生じさせるリスクのある患者での使用が、「治療」という用語に包含される。
【０１１８】
例えば、治療には、癌の予防法、癌の発生率を下げること、癌の症状の緩和等が含まれる。
【０１１９】
本明細書において使用される場合、「治療有効量」という用語は、所望の治療計画に従って投与された際に、妥当な有益度／リスク比に応じていくつかの所望の治療効果を生じさせるのに有効な、化合物、又は化合物を含む材料、組成物、もしくは剤形の量に関する。
【０１２０】
併用療法
「治療」という用語には、２つ以上の治療又は療法を、例えば逐次又は同時に組み合わせた併用治療及び併用療法が含まれる。例えば、本明細書に記載の化合物を、例えば他の薬剤と組み合わせて、併用療法で使用してもよい。治療及び療法の例としては、化学療法（例えば薬物、抗体（例えば、免疫療法の場合）、プロドラッグ（例えば、光線力学的療法、ＧＤＥＰＴ、ＡＤＥＰＴ等の場合）を含めた活性薬剤の投与）；外科手術；放射線療法；光線力学的療法；遺伝子療法；及び食事制限が挙げられる。
【０１２１】
本発明の一態様は、以下に記載する、１つ以上（例えば、１、２、３、４つ等）のさらなる治療薬と組み合わせた本明細書に記載の化合物に関する。
【０１２２】
特定の組合せは医師の自己の判断で行われ、医師は自身の一般知識と、熟練の一般医に公知の投与計画とを使用して用量を選択する。
【０１２３】
薬剤（すなわち、本明細書に記載の化合物と、１つ以上の他の薬剤）は、同時又は逐次に投与してもよく、個人で異なる投与計画で異なる経路により投与してもよい。例えば、逐次投与する場合、薬剤は密な間隔で（例えば、５〜１０分間にわたって）、又はより長い間隔で（例えば、１、２、３、４時間以上空けるか、もしくは必要であればさらに長い期間を空けて）投与することができ、詳細な投与計画は治療薬の特性に応じる。
【０１２４】
薬剤（すなわち、本明細書に記載の化合物と、１つ以上の他の薬剤）は、１つの剤形に一緒に製剤されてもよく、あるいは、個々の薬剤を別々に製剤し、キットの形態で、任意に使用説明書と共に、一緒に提供されてもよい。
【０１２５】
本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物を用いた治療と共に投与するか、又は組み合わせてもよいさらなる薬剤／療法の例としては、以下のものが挙げられる。
アロマターゼ阻害剤、例えばエキセメスタン（アロマシンとしても知られる）、レトロゾール（フェマーラとしても知られる）、アナストロゾール（アリミデックスとしても知られる）等；
抗エストロゲン剤、例えばフェソロデックス（フルベストラント及びＩＣＩ１８２７８０としても知られる）、タモキシフェン（ノルバデックスとしても知られる）、ヒドロキシタモキシフェン等；
Ｈｅｒ２遮断薬、例えばハーセプチン、ペルツズマブ、ラパチニブ等；
細胞傷害性化学療法剤、例えばタキサン（例えば、タクソールとしても知られるパクリタキセル；タキソテールとしても知られるドセタキセル）、シクロホスファミド、代謝拮抗薬（例えば、カルボプラチン、カペシタビン、ゲムシタビン、ドキソルビシン、エピルビシン、５−フルオロウラシル等）等。
【０１２６】
したがって、一実施形態においては、上記の治療は、さらなる活性薬剤を用いた治療（例えば、同時治療又は逐次治療）をさらに含み、そのさらなる活性薬剤は、例えばアロマターゼ阻害剤、抗エストロゲン剤、Ｈｅｒ２遮断薬、細胞傷害性化学療法剤等である。
【０１２７】
アロマターゼ阻害剤及び／又は抗エストロゲン剤を用いた併用療法
エストロゲン受容体（ＥＲα）は乳癌の７０％で発現しており、この場合、乳癌の発生と進行の大きな要因であるとして認識されている。
【０１２８】
したがってＥＲαは、ＥＲα−陽性乳癌において、補助療法の有力な標的である。抗エストロゲン剤を用いた、エストロゲン生合成の阻害（例えば、アロマターゼ阻害剤を使用して）によるＥＲαの活性の阻害は再発を減らし、患者生存を改善する（例えば、１９９８年のＯｓｂｏｒｎｅの文献；２０１０年のＣｕｚｉｃｋらの文献を参照のこと）。タモキシフェン（ノルバデックス）は、エストロゲン受容体への結合をエストロゲンと競合することによって作用して、ＥＲα活性を阻害する抗エストロゲン剤である。重要なことには、ＥＲα−陽性乳癌を有する患者の多くは、これらのホルモン療法中に再発し、耐性腫瘍はほとんどＥＲα−陽性のままである（例えば、２００２年のＡｌｉらの文献；２００３年のＪｏｈｎｓｔｏｎらの文献；２０１１年のＡｌｉらの文献；２０１１年のＯｓｂｏｒｎｅらの文献を参照のこと）。
【０１２９】
タモキシフェンは、選択的エストロゲン受容体調節物質（ＳＥＲＭ）として知られる抗エストロゲン剤のクラスの典型的な例であり、乳房では抗エストロゲン性であるが、心血管系及び骨等の他の組織ではしばしばエストロゲン様活性を有する。タモキシフェンは、閉経前及び閉経後の女性において、ＥＲα−陽性乳癌の治療で最初に使われる補助薬剤として幅広く使用されている。フルベストラント（フェソロデックス）は、ＥＲαへの結合をエストロゲンと競合してＥＲαの活性化を防ぎ、またＥＲαタンパク質の下方制御も促進する抗エストロゲン剤である。このように、フルベストラントは、選択的エストロゲン受容体抑制物質（ＳＥＲＤ）として知られる抗エストロゲン剤のクラスの例である。フルベストラントは、タモキシフェン等の最初に使用される補助薬剤での治療後に再発を経たＥＲα−陽性乳癌患者の治療において、主に使用される。
【０１３０】
アロマターゼは、アンドロゲンのエストロゲンへの変換において、律速段階を触媒するチトクロムＰ４５０酵素である。臨床的に、アナストロゾール（アリミデックス）及びレトロゾール（フェマーラ）は、アロマターゼ複合体の競合的阻害薬であり、一方、エキセメスタン（アロマシン）はアロマターゼの不可逆阻害剤である。アロマターゼ阻害剤は、エストロゲン生合成を阻害し、それにより循環エストロゲンの濃度を阻害し、その結果、エストロゲンの入手可能性を制限することによって、ＥＲα活性化を防ぐ。
【０１３１】
ＥＲαタンパク質へのエストロゲンの結合は、ＤＮＡ結合領域（ＤＢＤ）に対しＣ末端のリガンド（ホルモン）結合領域（ＬＢＤ）で生じ、ＥＲα二量体化、核移行、及び標的遺伝子の調節領域でのＤＮＡへの結合を促進して、この標的遺伝子の発現を制御する。ＥＲαのリン酸化は、ＤＮＡ結合及び転写活性化を含めた、ＥＲα活性を制御する重要な機構を提供する。特に、ＥＲαによる転写活性化にとって重要な、ＤＢＤに対しＮ末端の領域（転写活性化機能１（ＡＦ−１）として知られる）におけるセリン−１１８でのＥＲαリン酸化は、ＥＲα活性化において極めて早く起こるイベントの１つである。セリン−１１８リン酸化は、ＣＤＫ７を含む転写因子複合体ＴＦＩＩＨのエストロゲン刺激動員によって媒介される。エストロゲン結合ＬＢＤへのエストロゲン刺激ＴＦＩＩＨ動員により、セリン−１１８のＣＤＫ７媒介リン酸化が可能になり、ＥＲα活性が促進される。ＣＤＫ７過剰発現は、アロマターゼ阻害剤によって引き起こされる低エストロゲン濃度の条件下でＥＲα活性を促進することができ、タモキシフェン結合ＥＲαの活性化を導く（例えば、１９９３年のＡｌｉら；２０００年のＣｈｅｎら；２００２年のＣｈｅｎらの文献を参照のこと）。
【０１３２】
これらの知見により、本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物をアロマターゼ阻害剤又は抗エストロゲン剤と組み合わせ、乳癌患者の治療に使用する根拠が提供される。そのような併用療法は、アロマターゼ阻害剤耐性又は抗エストロゲン剤耐性が発生した後の乳癌患者の治療において特に有用である。そのような併用療法は、毒性を下げるために、使用するＡＰＰＡＭＰ化合物、抗エストロゲン剤及び／又はアロマターゼ阻害剤の量及び／又は濃度を少なくすることも可能である。
【０１３３】
エストロゲン反応性ＥＲα−陽性ＭＣＦ−７乳癌細胞株における、特定のピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５，７−ジアミン化合物（ＰＰＤＡ−００１、ＩＣＥＣ０９４２とも呼ばれる）を抗エストロゲン剤（４−ヒドロキシタモキシフェン、又はフェソロデックス）と組み合わせた相乗効果を示す研究は、２０１５年のＢｏｄｋｅらの文献に記載されている。薬剤は協同的に作用して、乳癌細胞の増殖を阻害する。
【０１３４】
したがって、一実施形態においては、上記の治療はさらなる活性薬剤を用いた治療（例えば、同時治療又は逐次治療）をさらに含み、そのさらなる活性薬剤はアロマターゼ阻害剤であり、例えばエキセメスタン（アロマシンとしても知られる）、レトロゾール（フェマーラとしても知られる）又はアナストロゾール（アリミデックスとしても知られる）である。一実施形態においては、上記の障害は乳癌（例えば、上記のアロマターゼ阻害剤に対し耐性のある乳癌）である。
【０１３５】
また、一実施形態においては、上記の治療はさらなる活性薬剤を用いた治療（例えば、同時治療又は逐次治療）をさらに含み、そのさらなる活性薬剤は抗エストロゲン剤であり、例えばフェソロデックス（フルベストラント及びＩＣＩ１８２７８０としても知られる）、タモキシフェン（ノルバデックスとしても知られる）又はヒドロキシタモキシフェンである。一実施形態においては、上記の障害は乳癌（例えば、上記の抗エストロゲン剤に対し耐性のある乳癌）である。
【０１３６】
他の用途
本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物は、ＣＤＫ（例えば、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、ＣＤＫ９、ＣＤＫ１０、ＣＤＫ１１、ＣＤＫ１２、ＣＤＫ１３等）を阻害する細胞培養液添加剤としても使用してよい。
【０１３７】
本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物は、例えば、考察中の化合物と処理することにより候補のホストが利益を得る可能性があるかどうかを判断するために、インビトロアッセイの一部としても使用してよい。
【０１３８】
本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物は、他の活性化合物や他のＣＤＫ（例えば、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、ＣＤＫ９、ＣＤＫ１０、ＣＤＫ１１、ＣＤＫ１２、ＣＤＫ１３等）阻害剤等を同定するために、例えばアッセイで標準物質としても使用してよい。
【０１３９】
キット
本発明の一態様は、（ａ）本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物、又は本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物を含む組成物、例えば、好ましくは好適な容器内に、かつ／又は好適な包装を用いて提供されたもの；及び（ｂ）使用についての説明書、例えば、上記の化合物又は組成物の投与法について文書化された説明書を含むキットに関する。
【０１４０】
文書化された説明書は、活性成分が治療するのに好適な適応症のリストも含んでよい。
【０１４１】
投与経路
ＡＰＰＡＭＰ化合物又はそのＡＰＰＡＭＰ化合物を含む医薬組成物は、任意の好都合な投与経路により、全身的、末梢的又は局所的のいずれでも（すなわち、所望の作用部位で）対象に投与してよい。
【０１４２】
投与経路の例としては、経口（例えば、摂取による投与）；口腔内；舌下；経皮（例えば、パッチ、硬膏剤等による投与が含まれる）；経粘膜（例えば、パッチ、硬膏剤等による投与が含まれる）；鼻腔内（例えば、鼻腔スプレーによる投与）；眼内（例えば、点眼薬による投与）；経肺（例えば、エアロゾルを使用して、例えば口又は鼻を経た吸入又は通気療法による投与）；経直腸（例えば、座薬又は浣腸による投与）；膣内（例えば、膣坐剤による投与）；非経口、例えば皮下、皮内、筋肉内、静脈内、動脈内、心臓内、髄腔内、脊髄内、嚢内、嚢下、眼窩内、腹腔内、気管内、表皮下、関節内、くも膜下及び胸骨内を含めた注射による投与；例えば皮下又は筋肉内のデポー又はリザーバの移植による投与が挙げられる。
【０１４３】
対象／患者
対象／患者は、脊索動物、脊椎動物、哺乳動物、有胎盤哺乳動物、有袋類（例えば、カンガルー、ウォンバット）、齧歯類（例えば、モルモット、ハムスター、ラット、マウス）、ネズミ科動物（例えば、マウス）、ウサギ目動物（例えば、ウサギ）、鳥類（例えば、トリ）、イヌ科動物（例えば、イヌ）、ネコ科動物（例えば、ネコ）、ウマ科動物（例えば、ウマ）、ブタ（ｐｏｒｃｉｎｅ）（例えば、ブタ（ｐｉｇ））、ヒツジ（ｏｖｉｎｅ）（例えば、ヒツジ（ｓｈｅｅｐ））、ウシ科動物（例えば、ウシ）、霊長類、サル（ｓｉｍｉａｎ）（例えば、サル（ｍｏｎｋｅｙ）又は類人猿）、サル（ｍｏｎｋｅｙ）（例えば、マーモセット、ヒヒ）、類人猿（例えば、ゴリラ、チンパンジー、オランウータン、テナガザル）、又はヒトであってもよい。
【０１４４】
さらに、対象／患者は、任意の発達形態であってもよく、例えば胎児であってもよい。
【０１４５】
好ましい一実施形態においては、対象／患者はヒトである。
【０１４６】
製剤
ＡＰＰＡＭＰ化合物は単独で投与することも可能であるが、医薬組成物（例えば、組成物、調剤品、薬物）として提供することが好ましく、この医薬組成物は、１種以上の本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物を、１種以上の他の薬学的に許容できる成分と一緒に含む。この薬学的に許容できる成分は当業者に周知であり、これには、薬学的に許容できる担体、希釈剤、賦形剤、アジュバント、充填剤、緩衝剤、防腐剤、抗酸化剤、滑沢剤、安定剤、可溶化剤、界面活性剤（例えば、湿潤剤）、マスキング剤、着色剤、香味剤及び甘味剤が含まれる。製剤は、他の活性薬剤、例えば、他の治療薬又は予防薬をさらに含んでもよい。
【０１４７】
したがって、本発明は、上で規定された医薬組成物をさらに提供し、かつ、１種以上の本明細書に記載のＡＰＰＡＭＰ化合物を、１種以上の他の薬学的に許容できる成分と一緒に混合することを含む、医薬組成物の作製方法をさらに提供する。上記の薬学的に許容できる成分は当業者に周知であり、例えば担体、希釈剤、賦形剤等である。個別の単位（例えば、錠剤等）として製剤される場合は、各単位は所定量（用量）の上記の化合物を含有する。
【０１４８】
「薬学的に許容できる」という用語は、本明細書において使用される場合、信頼できる医学的判断の範囲内で、過剰な毒性、刺激作用、アレルギー反応、又は他の問題もしくは合併症なしに、妥当な効果／リスク比と釣り合って、問題の対象（例えば、ヒト）の組織と接触して使用するのに好適な化合物、成分、物質、組成物、剤形などに関する。各担体、希釈剤、賦形剤等は、製剤の他の成分と適合性であるという意味でも、「許容できる」必要がある。
【０１４９】
好適な担体、希釈剤、賦形剤等は、標準的な医薬教書、例えば、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」，第１８版，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９９０；及び「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ」，第５版，２００５において見出すことができる。
【０１５０】
上記の製剤は、薬学の技術分野で周知の任意の方法によって調製してもよい。このような方法は、上記の化合物を、１種以上の副成分を構成する担体と合わせるステップを含む。一般に、上記の製剤は、上記の化合物を担体（例えば、液体担体、微粉化された固体担体等）と均一かつ密に合わせ、次いで必要に応じて製品を成形することにより調製する。
【０１５１】
上記の製剤は、速放性又は徐放性（ｓｌｏｗ  ｒｅｌｅａｓｅ）；即時放出性、遅延放出性、徐放性（ｔｉｍｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）、もしくは持続放出性（ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）；又はそれらの組合せを提供するよう調製してもよい。
【０１５２】
製剤は好適に液体、溶液（例えば、水性、非水性）、懸濁液（例えば、水性、非水性）、乳濁液（例えば、水中油型、油中水型）、エリキシル、シロップ、舐剤、洗口液、ドロップ、錠剤（例えば、コーティングした錠剤が含まれる）、顆粒剤、粉剤、トローチ剤、香錠、カプセル（例えば、硬質ゼラチンカプセル及び軟質ゼラチンカプセルが含まれる）、カシェ剤、丸剤、アンプル、巨丸剤、坐剤、膣坐剤、チンキ、ゲル剤、ペースト剤、軟膏、クリーム、ローション剤、油剤、フォーム剤、スプレー、噴霧剤又はエアロゾル剤の形態であってもよい。
【０１５３】
製剤は、１種以上の化合物と、任意に１種以上の他の薬学的に許容できる成分とを浸透させたパッチ、絆創膏、包帯、包帯材等として好適に提供してもよい。この薬学的に許容できる成分には、例えば浸透（ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎ）増強剤、浸透（ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ）増強剤及び吸収増強剤が含まれる。製剤は、デポー又はリザーバの形態で好適に提供してもよい。
【０１５４】
上記の化合物は、１種以上の他の薬学的に許容できる成分に溶かすか、懸濁させるか、又はそれと混合してもよい。上記の化合物は、リポソーム内で提供するか、又は例えば血液成分もしくは１種以上の臓器を標的にして化合物を向かわせるよう設計された他の微粒子内で提供してもよい。
【０１５５】
経口投与（例えば、摂取による投与）に好適な製剤としては、液体、溶液（例えば、水性、非水性）、懸濁液（例えば、水性、非水性）、乳濁液（例えば、水中油型、油中水型）、エリキシル、シロップ、舐剤、錠剤、顆粒剤、粉剤、カプセル、カシェ剤、丸剤、アンプル、巨丸剤が挙げられる。
【０１５６】
口腔内投与に好適な製剤としては、洗口液、トローチ剤、香錠、ならびにパッチ、絆創膏、デポー及びリザーバが挙げられる。トローチ剤は通常、風味付けした主成分中に上記の化合物を含む。この風味付けした主成分は通常、スクロール及びアラビアゴム又はトラガカントゴムである。香錠は通常、ゼラチン及びグリセリン、又はスクロース及びアラビアゴム等の不活性マトリックス中に上記の化合物を含む。洗口液は通常、好適な液体担体中に上記の化合物を含む。
【０１５７】
舌下投与に好適な製剤としては、錠剤、トローチ剤、香錠、カプセル及び丸剤が挙げられる。
【０１５８】
経口経粘膜投与に好適な製剤としては、液体、溶液（例えば、水性、非水性）、懸濁液（例えば、水性、非水性）、乳濁液（例えば、水中油型、油中水型）、洗口液、トローチ剤、香錠、ならびにパッチ、絆創膏、デポー及びリザーバが挙げられる。
【０１５９】
非経口経粘膜投与に好適な製剤としては、液体、溶液（例えば、水性、非水性）、懸濁液（例えば、水性、非水性）、乳濁液（例えば、水中油型、油中水型）、座剤、膣坐剤、ゲル剤、ペースト剤、軟膏、クリーム、ローション剤、油剤、ならびにパッチ、絆創膏、デポー及びリザーバが挙げられる。
【０１６０】
経皮投与に好適な製剤としては、ゲル剤、ペースト剤、軟膏、クリーム、ローション剤及び油剤、ならびにパッチ、絆創膏、包帯、包帯材、デポー及びリザーバが挙げられる。
【０１６１】
錠剤は、任意に１種以上の副成分を用いて好都合な手段によって作製してもよく、例えば圧縮又は成形によって作製してもよい。圧縮錠剤は、粉末又は顆粒等の流動性形態の上記の化合物を、任意に１種以上の結合剤（例えば、ポビドン、ゼラチン、アラビアゴム、ソルビトール、トラガカントゴム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）；充填剤又は希釈剤（例えば、ラクトース、微結晶性セルロース、リン酸水素カルシウム）；滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク、シリカ）；崩壊剤（例えば、デンプングリコール酸ナトリウム、架橋ポビドン、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）；界面活性剤又は分散剤又は湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）；防腐剤（例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸プロピル、ソルビン酸）；香料、香味増強剤及び甘味剤と混合して、好適な機械で圧縮することにより調製してもよい。錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らせた上記の粉末化合物の混合物を、好適な機械で成型することによって調製してもよい。錠剤は、任意にコーティングしても、割線をいれてもよく、中にある上記の化合物の徐放性又は制御放出性を提供するために、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロースを、比率を変えて使用して製剤し、所望の放出特性を提供してもよい。錠剤は、任意にコーティングして提供して例えば放出性に影響を与えてもよく、例えば腸溶コーティングして、胃ではなく腸の部分で放出をもたらしてもよい。
【０１６２】
軟膏は通常、上記の化合物と、パラフィン系軟膏基剤又は水混和性軟膏基剤とから調製する。
【０１６３】
クリームは通常、上記の化合物と、水中油型クリーム基剤とから調製する。所望であれば、クリーム基剤の水相は、例えば約３０％ｗ／ｗ以上の多価アルコールを含んでもよい。この多価アルコールは、すなわち２個以上のヒドロキシル基を有するアルコールであり、例えばプロピレングリコール、ブタン−１，３−ジオール、マンニトール、ソルビトール、グリセロール及びポリエチレングリコールならびにそれらの組合せ等である。局所用製剤は、皮膚又は他の患部への上記の化合物の吸収又は浸透を向上させる化合物を望ましくは含んでもよい。このような経皮浸透増強剤の例としては、ジメチルスルホキシド及び関連類似体が挙げられる。
【０１６４】
乳濁液は通常、上記の化合物と、油相とから調製し、任意に単に乳化剤（他には乳化剤（ｅｍｕｌｇｅｎｔ）としても知られる）を含んでもよく、又は１種以上の乳化剤と、脂肪もしくは油もしくは脂肪及び油の両方との混合物を含んでもよい。好ましくは、親水性乳化剤が、安定剤として作用する親油性乳化剤と一緒に含まれる。油と脂肪の両方を含むことも好ましい。さらに、乳化剤は、安定化剤を伴うか又は伴わずにいわゆる乳化蝋を形成し、この蝋は、油及び／又は脂肪と共にいわゆる乳化軟膏基剤を形成し、これがクリーム製剤の油性分散相を形成する。
【０１６５】
好適な乳化剤及び乳濁液安定剤としては、Ｔｗｅｅｎ６０、Ｓｐａｎ８０、セトステアリルアルコール、ミリスチルアルコール、モノステアリン酸グリセリル及びラウリル硫酸ナトリウムが挙げられる。医薬乳濁液に使用する可能性のあるほとんどの油では上記の化合物の溶解度は非常に低くてもよいので、上記の製剤に好適な油又は脂肪の選択は、所望の美容特性を達成することに基づく。したがって、上記のクリームは、好ましくはチューブ又は他の容器からの漏れを避けるのに好適な粘稠性を有する、非グリース状、非着色性かつ洗浄可能製品である必要がある。ジイソアジピン酸エステル、ステアリン酸イソセチルエステル、ヤシ脂肪酸のプロピレングリコールジエステル、ミリスチン酸イソプロピル、オレイン酸デシル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、パルミチン酸２−エチルへキシル、又はＣｒｏｄａｍｏｌ  ＣＡＰとして知られる分岐鎖エステルの混和物といった、直鎖又は分岐鎖の一塩基性又は二塩基性アルキルエステルを使用してもよく、最後の３つが好ましいエステルである。これらは、必要な特性に応じて、単独で使用しても、組み合わせて使用してもよい。あるいは、白色軟パラフィン及び／もしくは流動パラフィン等の高融点脂質、又は他の鉱油を使用することができる。
【０１６６】
鼻腔内投与に好適な製剤としては、担体が液体である場合は、例えば鼻腔用スプレー、点鼻薬、又はネブライザーによるエアロゾル剤投与が挙げられ、上記化合物の水性又は油性溶液を含む。
【０１６７】
鼻腔内投与に好適な製剤としては、担体が固体である場合は、例えば約２０〜約５００ミクロンの粒径を有する粗粉末として提供される製剤が含まれる。この製剤は、鼻から吸入する手法で、すなわち、鼻の近くに持った上記の粉末の容器から鼻孔を経て急速に吸入して投与される。
【０１６８】
経肺投与（例えば、吸入又は通気療法による投与）に好適な製剤としては、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素又は他の好適なガスといった好適な高圧ガスを使用した加圧容器からのエアロゾルスプレーとして提供される製剤が含まれる。
【０１６９】
眼内投与に好適な製剤としては、上記の化合物が好適な担体中に（特に上記化合物では水性溶媒中に）溶解又は懸濁している点眼剤が挙げられる。
【０１７０】
経直腸投与に好適な製剤は、例えばカカオバターもしくはサリチル酸エステルといった、天然油もしくは硬化油、蝋、脂肪、半液体もしくは液体ポリオールを含む好適な基剤を用いた座剤として；又は浣腸による治療用の溶液もしくは懸濁液として提供してもよい。
【０１７１】
膣内投与に好適な製剤は、当技術分野において適切であることが公知の担体を上記の化合物に加えて含有する膣坐剤、タンポン、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、フォーム剤又はスプレー製剤として提供してもよい。
【０１７２】
非経口投与（例えば、注射による投与）に好適な製剤としては、発熱物質を含まない水性もしくは非水性等張滅菌液（例えば、溶液、懸濁液）が挙げられ、この滅菌液には、上記の化合物が溶解、懸濁、又は他の方法（例えば、リポソーム内もしくは他の微粒子内）で準備されている。そのような液体は、抗酸化剤、緩衝剤、防腐剤、安定剤、静菌剤、懸濁剤、増粘剤、及び対象のレシピエントの血液（又は他の関連体液）と製剤を等張にする溶質といった、他の薬学的に許容できる成分をさらに含有してもよい。賦形剤の例としては、例えば水、アルコール、ポリオール、グリセロール、植物油等が挙げられる。このような製剤で使用するのに好適な等張性担体の例としては、塩化ナトリウム注射剤、リンゲル液又は乳酸加リンゲル注射剤が挙げられる。
【０１７３】
典型的には、液体中の上記の化合物の濃度は、約１ｎｇ／ｍＬ〜約１０μｇ／ｍＬ、例えば約１０ｎｇ／ｍＬ〜約１μｇ／ｍＬである。製剤は、単回用量又は頻回用量の密封容器、例えば、アンプル及びバイアルで提供してもよく、また、使用直前に無菌液体担体（例えば、注射用水）の添加のみを必要とする凍結−乾燥（凍結乾燥）状態で保存してもよい。
【０１７４】
無菌の粉剤、顆粒剤及び錠剤より、即席注射溶液及び懸濁液を調製してもよい。
【０１７５】
用量
ＡＰＰＡＭＰ化合物、及びＡＰＰＡＭＰ化合物を含む組成物の適切な用量は、患者ごとに異なりうることは当業者に理解されよう。一般に、最適用量の決定は、あらゆるリスク又は有害な副作用に対する治療利益のレベルを比べて考えることを含む。選択される用量レベルは、特定のＡＰＰＡＭＰ化合物の活性、投与経路、投与の時間、ＡＰＰＡＭＰ化合物の排出速度、治療期間、組み合わせて使用する他の薬物、化合物及び／又は物質、障害の重症度、ならびに患者の種、性別、年齢、体重、状態、健康状態及び既往歴を含めた様々な要因に依存する。用量は、ＡＰＰＡＭＰ化合物の用量及び投与経路は、最終的には医師、獣医師又は臨床医の裁量によるものであるが、一般には、作用部位で、実質的に有害又は有毒の副作用を引き起こさずに所望の効果が得られる局所濃度に到達するよう選択される。
【０１７６】
投与は、治療期間全体を通じて１回の投与で行うか、連続的に又は間欠的に（例えば、適切な間隔での分割用量で）行うことができる。最も有効な投与手段及び投与量を決定する方法は当業者に周知であり、療法で使用する製剤、療法の目的、治療標的細胞、及び治療する対象に応じて変動する。治療を行う医師、獣医師又は臨床医によって選択される用量レベル及びパターンを用いて、単回又は頻回の投与を行うことができる。
【０１７７】
一般に、ＡＰＰＡＭＰ化合物の好適な用量は、１日につき、対象の体重１キログラムあたり約１０μｇ〜約２５０ｍｇ（より典型的には、約１００μｇ〜約２５ｍｇ）の範囲である。上記の化合物が塩、エステル、アミド、プロドラッグ等である場合、投与する量は親化合物に基づいて計算するので、実際に使用する重量は比例して増加する。
【実施例】
【０１７８】
化学合成
ＡＰＰＡＭＰ化合物の化学合成のための方法をここに記載する。ＡＰＰＡＭＰ化合物の合成の代替的又は改善された方法を提供するために、これら及び／又は他の周知の方法を既知の方法で改変及び／又は適合させてもよい。
【０１７９】
略語
ａｑ：水性；
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル；
Ｂｏｃ２Ｏ：ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート；
ｂｒ：ブロード；
ｃａ．：約；
ｄ：ダブレット；
ｔＢｕＸＰｈｏｓ−Ｐｄ−Ｇ３：［（２−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ−２’，４’，６’−トリイソプロピル−１，１’−ビフェニル）−２−（２’−アミノ−１，１’−ビフェニル）］パラジウム（ＩＩ）メタンスルホナート；
ＤＣＭ：ジクロロメタン；
ジオキサン：１，４−ジオキサン；
ＤＩＰＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン；
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル；
ＥｔＯＨ：エタノール；
ｈ：時間；
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー；
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー−質量分析；
ＬｉＨＭＤＳ：リチウムヘキサメチルジシラジド；
ｍ：マルチプレット；
Ｍ：モル、分子イオン；
ＭｅＣＮ：アセトニトリル；
ＭｅＯＨ：メタノール；
ｍｉｎ：分；
ＭＳ：質量分析；
ＮＣＳ：Ｎ−クロロスクシンイミド；
ＮＩＳ：Ｎ−ヨードスクシンイミド；
ＮＭＲ：核磁気共鳴；
ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）ＤＣＭ：［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）、ジクロロメタンとの錯体）；
ｑ：カルテット；
ＲＴ：室温（約２０℃）；
ＲＴ：保持時間；
ｓ：シングレット、固体；
ＳＣＸ：強陽イオン交換；
ｔ：トリプレット；
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸；
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン。
【０１８０】
他の略語は、それらの一般的に受け入れられている意味を伝えることを意図している。
【０１８１】
構造の命名は、ＣｈｅｍＤｒａｗ（登録商標）Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ １５（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）からの「Structure to Name」変換を使用して作成した。
【０１８２】
一般合成
ＡＰＰＡＭＰ化合物は、例えば、以下の化学スキームに例示される方法によって調製され得る。ギ酸エチルを用いてニトリル（Ｉ−１）をホルミル化し、続いて得られたα−ホルミルニトリルをヒドラジンと縮合させると、アミノピアラゾール（Ｉ−２）が得られる。マロン酸ジエチルと縮合させ、続いてオキシ塩化リンで塩素化すると、ピラゾロピリミジンＩ−３が得られる。アミンによる求核芳香族置換とそれに続くＢｏｃ保護により５−アミノピラゾロピリミジンＩ−４を生成させ、その後Ｂｕｃｈｗａｌｄ−Ｈａｒｔｗｉｇクロスカップリング反応を用いて中間体Ｉ−５に変換する。例えばＴＦＡを用いた中間体Ｉ−５のＢｏｃ脱保護により、化合物Ｉ−６が得られる。必要に応じて、Ｉ−６をＮＣＳを用いて塩素化して、６−クロロアナログＩ−７を得る。
【０１８３】
スキーム１
【化７】
2020534346.tif 000009
【０１８４】
上記スキームにおける反応条件は以下の通りである：（ａ）ｎＢｕＬｉ，ｉＰｒ２ＮＨ，ＥｔＯＣＨＯ，ＴＨＦ，−７８℃〜ＲＴ；（ｂ）Ｎ２Ｈ４（ａｑ），ＡｃＯＨ，ＥｔＯＨ，９０℃；（ｃ）Ｎａ（ｓ），ＥｔＯＨ，マロン酸ジエチル，還流；（ｄ）ＰＯＣｌ３，ＰｈＮＭｅ２，６０−９０℃；（ｅ）Ｒ２ＣＨ２ＮＨ２，ＤＩＰＥＡ，ＥｔＯＨ，還流；（ｆ）Ｂｏｃ２Ｏ，ＤＭＡＰ，ＤＣＭ，ＲＴ；（ｇ）ｔＢｕＸＰｈｏｓ−Ｐｄ−Ｇ３，ＬｉＨＭＤＳ，ＴＨＦ，６０℃；（ｈ）ＴＦＡ，ＤＣＭ，ＲＴ；（ｉ）ＮＣＳ，ＤＣＭ，ＲＴ。
【０１８５】
あるいは以下の化学スキームに例示されるように、Ｉ−５は、５，７−ジクロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジンのヨウ素化、続いてアミン及びＢｏｃ保護による求核芳香族置換によってヨード複素環Ｉ−８を得ることによって調製することができ、Ｉ−８をＳｕｚｕｋｉ−Ｍｉｙａｕｒａカップリング反応を使用してＩ−５に変換することができる。
【０１８６】
スキーム２
【化８】
2020534346.tif 000010
【０１８７】
上記の方法における反応条件は、下記のとおりである：(ａ)ＮＩＳ、ＭｅＣＮ、還流、（ｂ）Ｒ2 ＣＨ2 ＮＨ2、ＤＩＰＥＡ、ＥｔＯＨ、還流、(ｃ)Ｂｏｃ２Ｏ、ＤＭＡＰ、ＤＣＭ、ＲＴ、(ｄ)ＰｄＣｌ２ｄｐｐｆ）ＤＣＭ、Ｋ３ＰＯ４、ＰｈＭｅ、Ｈ２Ｏ、１００℃）。
【０１８８】
化学合成例
以下の実施例は単に本発明を説明するために提供されるものであり、本明細書に記載される本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【０１８９】
一般実験条件
全ての出発物質及び溶媒は、商業的供給源から得たか、又は文献引用に従って調製した。別段の指示がない限り、反応混合物を磁気撹拌した。
【０１９０】
カラムクロマトグラフィーは別段の指示がない限り、Ｇｒａｃｅ（商標）ＧｒａｃｅＲｅｓｏｌｖ（商標）予備充填シリカ（４０μｍ）カートリッジを使用して、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ  Ｒｆシステムなどの自動フラッシュクロマトグラフィーシステムで行った。
【０１９１】
Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＩＩＩ分光計（４００ＭＨｚ）を用いて、１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを記録した。化学シフトは、残留プロトン性溶媒の中心ピーク又は参照としてのテトラメチルシランの内部標準のいずれかを使用して、ｐｐｍで表される。スペクトルは特に明記しない限り、周囲温度で記録した。
【０１９２】
保持時間及び関連する質量イオンを決定するための分析ＬＣＭＳ実験を、以下に記載される方法１又は方法２を実行するＡｇｉｌｅｎｔ ６１１０又は６１２０シリーズシングル四重極質量分析計に連結されたＡｇｉｌｅｎｔ １２００シリーズＨＰＬＣシステムを使用して行った。
【０１９３】
分取ＨＰＬＣ精製は、Ｗａｔｅｒｓ  Ｘ−Ｂｒｉｄｇｅ  ＢＥＨ  Ｃ１８、５μｍ、１９×５０ｍｍカラムを用いて、ＭｅＣＮ及び１０ｍＭ重炭酸アンモニウム（水溶液）の勾配を用いて行った。可変波長検出器によって測定された単一波長でのＵＶによる検出後に画分を収集した。
【０１９４】
ＳＣＸ樹脂はＳｉｇｍａ  Ａｌｄｒｉｃｈ又はＳｉｌｉｃｙｃｌｅから購入し、使用前にＭｅＯＨで洗浄した。
【０１９５】
分析方法
方法１−酸性４分法：
【０１９６】
カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ｘ−Ｓｅｌｅｃｔ  ＣＳＨ  Ｃ１８、２．５μｍ、４．６ｘ３０ｍｍ
検出：別段の指示がない限り、２５４ｎｍでのＵＶ
ＭＳイオン化：エレクトロスプレー
溶媒Ａ：水／０．１％ギ酸
溶媒Ｂ：ＭｅＣＮ／０．１％ギ酸
【表Ａ】
2020534346.tif 000011
【０１９７】
方法２-塩基性４分法：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ｘ−Ｂｒｉｄｇｅ  ＢＥＨ  Ｃ１８、２．５  μｍ、４．６ｘ３０ｍｍ
溶媒Ａ：水／１０ｍＭ重炭酸アンモニウム
溶媒Ｂ：ＭｅＣＮ
（他のパラメータは、方法１と同じである）
【０１９８】
合成１
（３Ｒ，４Ｒ）−４−（（（７−（ベンジルアミノ）−３−シクロプロピルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）ピペリジン−３−オール（化合物ＡＰＰＡＭＰ−００２）
【化９】
2020534346.tif 000012
【０１９９】
工程１： ５，７−ジクロロ−３−ヨードピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン
ＭｅＣＮ（２０ｍｌ）中の５，７−ジクロロピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（６．１ｇ、３２．４ｍｍｏｌ）及びＮＩＳ（８．０３ｇ、３５．７ｍｍｏｌ）の混合物を還流下で１時間加熱した。混合物を真空下で濃縮し、残渣をＤＣＭ（２００ｍｌ）に溶解し、水（２００ｍｌ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４（ｓ）上で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。カラムクロマトグラフィー（２２０ｇカートリッジ、ＤＣＭ）による精製により、表題化合物（９．１ｇ、２８．４ｍｍｏｌ、純度９８％）を結晶性黄色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．４８（ｓ、１Ｈ）、７．７３（ｓ、１Ｈ）。
【０２００】
工程２: tert−ブチルベンジル（５−クロロ−３−ヨードピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル）カルバメート
ジオキサン（２０ｍｌ）中の上記工程１の生成物（２．００ｇ、６．２４ｍｍｏｌ、純度９８％）、ベンジルアミン（７６５μｌ、７．０１ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ(２．２３ｍｌ、１２．７ｍｍｏｌ）の混合物を８０℃で２時間加熱した。混合物を真空下で濃縮し、残渣をＴＨＦ(２０ｍｌ）に溶解した。この溶液にＢｏｃ2 Ｏ（２．０９ｇ、９．５８ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ(７８ｍｇ、０．６３７ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を４０℃で２時間加熱した。反応混合物を真空下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（１２０ｇカートリッジ、０〜５０%ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン）によって精製して、表題化合物（７１０ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ、純度９８％）を黄色固体として得た。ＬＣＭＳ（方法２）：ＲＴ１．７３分、イオン化なし。
【０２０１】
工程３: tert−ブチルベンジル（５−クロロ−３−シクロプロピルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル）カルバメート
トルエン（８ｍｌ）及び水（１ｍｌ）の混合物中のシクロプロピルボロン酸（７０．９ｍｇ、０．８２５ｍｍｏｌ）、リン酸カリウム（３５０ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）、上記工程２の生成物（４００ｍｇ、０．８０９ｍｍｏｌ、純度９８％）及びＰｄＣｌ2（ｄｐｐｆ）ＤＣＭ（１３．５ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）の混合物を１００℃で５時間加熱した。混合物を真空下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（４０ｇカートリッジ、０〜１００％ＤＣＭ／イソヘキサン）によって精製して、表題化合物（２２５ｍｇ、０．５５３ｍｍｏｌ、９８％純度）を濃い黄色のガム状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ８．１０（ｓ，１Ｈ），７．３４−７．１８（ｍ，５Ｈ），７．１２（ｓ，１Ｈ），５．００（ｓ，２Ｈ），１．９７（ｔｔ，Ｊ＝８．４，５．１Ｈｚ，１Ｈ），１．２８（ｓ，９Ｈ），０．９９−０．８９（ｍ，２Ｈ），０．８１−０．７５（ｍ，２Ｈ）。
【０２０２】
工程４：（３Ｒ，４Ｒ）−４−（（（７−（ベンジルアミノ）−３−シクロプロピルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）ピペリジン−３−オール
上記工程３の生成物（２２０ｍｇ、０．５４１ｍｍｏｌ、純度９８％）、（３Ｒ，４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（アミノメチル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（１５２ｍｇ、０．６６２ｍｍｏｌ）及びｔＢｕＢｒｅｔｔＰｈｏｓ−Ｐｄ−Ｇ３（２３．６ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ(５ｍｌ）溶液をＮ2で５分間脱気した。ＬｉＨＭＤＳ(ＴＨＦ中１Ｍ）（６０７μｌ、０．６０７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物をさらに５分間脱気した。反応混合物を６０℃で０．５時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ(５０ｍｌ）に注いだ。有機相を水（２×２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４（ｓ）で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して、褐色のゴム状物を得た。この物質をジオキサン（５ｍｌ）中の４Ｍ  ＨＣｌに溶解し、１時間放置した。混合物を真空下で濃縮し、残渣をＭｅＯＨ中のＳＣＸ樹脂（１０ｇ）のカラムにロードした。カラムをＭｅＯＨで洗浄し、次いで生成物をＭｅＯＨ中７Ｍアンモニアで溶出した。生成物を含有する画分を真空下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（１２ｇカートリッジ、０〜１０％（ＭｅＯＨ中０．７Ｍアンモニア）／ＤＣＭ）によってさらに精製して、表題化合物（１３７ｍｇ、０．３４６ｍｍｏｌ、９９％純度）を白色固体として得た。
【０２０３】
ＬＣＭＳ（方法２）：ｍ／ｚ  ３９３（Ｍ＋Ｈ）＋，３９１（Ｍ−Ｈ）−１．７１分。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８３（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５２（ｓ，１Ｈ），７．４１−７．３０（ｍ，４Ｈ），７．３０−７．１９（ｍ，１Ｈ），６．７０（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），５．３０（ｓ，１Ｈ），５．１７（ｓ，１Ｈ），４．４４（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．６１−３．４１（ｍ，１Ｈ），３．２５−３．１３（ｍ，１Ｈ），３．０３（ｔｔ，Ｊ＝９．６，４．５Ｈｚ，１Ｈ），２．９１（ｄｄ，Ｊ＝１１．６，４．５Ｈｚ，１Ｈ），２．８３−２．７２（ｍ，１Ｈ），２．３０（ｔｄ，Ｊ＝１２．１，２．６Ｈｚ，１Ｈ），２．１６（ｄｄ，Ｊ＝１１．６，９．９Ｈｚ，１Ｈ），１．９７（ｓ，１Ｈ），１．７１（ｔｔ，Ｊ＝８．４，５．２Ｈｚ，１Ｈ），１．６１−１．４９（ｍ，１Ｈ），１．４０−１．２６（ｍ，１Ｈ），１．２２−１．０５（ｍ，１Ｈ），０．８２−０．７０（ｍ，２Ｈ），０．７１−０．５６（ｍ，２Ｈ）。
【０２０４】
合成２
（３Ｒ，４Ｒ）−４−（（（３−エチル−７−（（２−フルオロベンジル）アミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）ピペリジン−３−オール（化合物ＡＰＰＡＭＰ−００１）
【化１０】
2020534346.tif 000013
【０２０５】
工程１: tert−ブチル（５−クロロ−３−エチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル）（２−フルオロベンジル）カルバメート
ジオキサン（５ｍｌ）中の５，７−ジクロロ−３−エチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（９５ｍｇ、０．４４０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ(１５４μｌ、０．８７９ｍｍｏｌ）及び２−フルオロベンジルアミン（６０．５ｍｇ、０．４８４ｍｍｏｌ）の混合物を９０℃で２時間加熱した。反応混合物をＤＣＭ(２０ｍｌ）中に抽出し、水（１０ｍｌ）で洗浄した。有機相を分離し、真空下で濃縮した。残渣をＴＨＦ(４ｍｌ）に溶解し、Ｂｏｃ２Ｏ（１２３μｌ、０．５２８ｍｍｏｌ）、続いてＤＭＡＰ(２．６９ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）で処理した。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（１２ｇカートリッジ、０〜５０％  ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン）によって精製して、表題化合物（２１９ｍｇ）を無色透明ガム状物として得た。ＬＣＭＳ（方法１）：ｍ／ｚ４０５（Ｍ＋Ｈ）＋、２．９４分。
【０２０６】
工程２：（３Ｒ，４Ｒ）−４−（（（３−エチル−７−（（２−フルオロベンジル）アミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−５−イル）アミノ）メチル）ピペリジン−３−オール
上記工程１の生成物（１４０ｍｇ）を、合成１工程４の手順を使用して、（３Ｒ，４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（アミノメチル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（９６ｍｇ、０．４１５ｍｍｏｌ）、ｔＢｕＢｒｅｔｔＰｈｏｓ−Ｐｄ−Ｇ３（１４．８ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）及びＬｉＨＭＤＳ(ＴＨＦ中１Ｍ）（３４６μｌ、０．３４６ｍｍｏｌ）と反応させ、続いてジオキサン（５ｍｌ）中４Ｍ  ＨＣｌと反応させて、表題化合物（４０ｍｇ、０．０９９ｍｍｏｌ、純度９９％）をクリーム状固体として得た。
【０２０７】
ＬＣＭＳ（方法１）：ｍ／ｚ３９９（Ｍ＋Ｈ）＋，０．９８分。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．７９（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６６（ｓ，１Ｈ），７．４０−７．２８（ｍ，２Ｈ），７．２８−７．０９（ｍ，２Ｈ），６．８６−６．６９（ｍ，１Ｈ），５．４４（ｓ，１Ｈ），５．１６（ｓ，１Ｈ），４．５１（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．６３−３．４７（ｍ，１Ｈ），３．２３−３．１３（ｍ，１Ｈ），３．０３（ｔｔ，Ｊ＝９．５，４．４Ｈｚ，１Ｈ），２．９２（ｄｄ，Ｊ＝１１．５，４．６Ｈｚ，１Ｈ），２．８７−２．７７（ｍ，１Ｈ），２．４９（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．４０−２．２９（ｍ，１Ｈ），２．２５−２．１１（ｍ，１Ｈ），１．６５−１．５０（ｍ，１Ｈ），１．３９−１．２７（ｍ，１Ｈ），１．２３−１．１２（ｍ，１Ｈ），１．１８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【０２０８】
合成３
３−（（（３−エチル−５−（（（（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシピペリジン−４−イル）メチル）アミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル（化合物ＡＰＰＡＭＰ−００３）
【化１１】
2020534346.tif 000014
【０２０９】
工程１: tert−ブチル（５−クロロ−３−エチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル）（３−シアノベンジル）カルバメート
ジオキサン（５ｍｌ）中の５，７−ジクロロ−３−エチルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン（１３６ｍｇ、０．６３１ｍｍｏｌ）、３−（アミノメチル）ベンゾニトリル（１００ｍｇ、０．７５７ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ(２２０μｌ、１．２６ｍｍｏｌ）の混合物を９０℃で４時間加熱した。反応混合物を真空下で濃縮し、残渣をＤＣＭ(１０ｍｌ）に溶解し、水（５ｍｌ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をＤＣＭ（５ｍｌ）に溶解し、Ｂｏｃ２Ｏ（１６５ｍｇ、０．７５７ｍｍｏｌ）、続いてＤＭＡＰ（３．８５ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ）で処理した。得られた混合物を室温で３時間撹拌し、次いで真空下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（１２ｇカラム、０〜５０％  ＥｔＯＡｃ／イソヘキサン）により精製して、表題化合物（２５８ｍｇ、０．５８３ｍｍｏｌ、９３％純度）を得た。ＬＣＭＳ（方法１）：ｍ／ｚ  ４３４（Ｍ＋Ｎａ）＋、３５６（Ｍ＋Ｈ−Ｃ４Ｈ８）＋、２．８７分。
【０２１０】
工程２：３−（（（３−エチル−５−（（（（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシピペリジン−４−イル）メチル）アミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル
上記工程１の生成物（２５８ｍｇ、０．５８３ｍｍｏｌ、純度９３％）を、合成１工程４の手順を使用して、（３Ｒ，４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（アミノメチル）−３−ヒドロキシピペリジン−１−カルボキシレート（１７１ｍｇ、０．７４２ｍｍｏｌ）、ｔＢｕＢｒｅｔｔＰｈｏｓ−Ｐｄ−Ｇ３（２６．４ｍｇ、０．０３１ｍｍｏｌ）及びＬｉＨＭＤＳ(ＴＨＦ中１Ｍ）（０．６８０ｍｌ、０．６８０ｍｍｏｌ）、続いてジオキサン（２ｍｌ）中の４Ｍ  ＨＣｌと反応させたが、ただし、カラムクロマトグラフィーを実施せず、代わりに生成物を分取ＨＰＬＣ(１０ｍＭ重炭酸アンモニウム（ａｑ）中の１５〜３５％ＭｅＣＮ）によって精製して、表題化合物（３１ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ、純度９９％）を得た。
【０２１１】
ＬＣＭＳ（方法２）：ｍ／ｚ４０９（Ｍ＋Ｈ）＋、１．５９分。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．９６（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），７．８４−７．７９（ｍ，１Ｈ），７．７７−７．７２（ｍ，１Ｈ），７．７２−７．６８（ｍ，１Ｈ），７．６６（ｓ，１Ｈ），７．５７（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），６．７１（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ），５．３６（ｓ，１Ｈ），５．１５（ｓ，１Ｈ），４．５０（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），３．６１−３．４３（ｍ，１Ｈ），３．２５−３．１１（ｍ，２Ｈ），３．００（ｔｔ，Ｊ＝９．５，４．３Ｈｚ，１Ｈ），２．９０（ｄｄ，Ｊ＝１１．６，４．６Ｈｚ，１Ｈ），２．８５−２．７４（ｍ，１Ｈ），２．４８（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．３７−２．２３（ｍ，１Ｈ），２．２２−２．０８（ｍ，１Ｈ），１．６０−１．４９（ｍ，１Ｈ），１．４０−１．２３（ｍ，１Ｈ），１．１７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【０２１２】
合成４
３−（（（６−クロロ−３−エチル−５−（（（（（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシピペリジン−４−イル）メチル）アミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル（化合物ＡＰＰＡＭＰ−００４）
【化１２】
2020534346.tif 000015
【０２１３】
３−（（（３エチル−５（（（（３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシピペリジン−４−イル）メチル）アミノ）ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル（化合物ＡＰＰＡＭＰ−００３）（合成３）（１２２ｍｇ，０．３０１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３ｍｌ）溶液をＮＣＳ（４０．２ｍｇ，０．３０１ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を室温で１時間攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣ（１０ｍＭ重炭酸アンモニウム（ａｑ）中の２０〜５０％ＭｅＣＮ）によって精製して、表題化合物（１７ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ、純度９８％）を黄色の粉末として得た。
【０２１４】
ＬＣＭＳ（方法２）：ｍ／ｚ  ４４０（Ｍ＋Ｈ）＋、１．９０分。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ７．８４−７．７４（ｍ，２Ｈ），７．７２（ｓ，１Ｈ），７．７２−７．６７（ｍ，１Ｈ），７．６６−７．５９（ｍ，１Ｈ），７．５３（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），６．８７−６．７７（ｍ，１Ｈ），５．１７（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），５．１３（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），３．６６−３．５０（ｍ，１Ｈ），３．３０−３．２０（ｍ，１Ｈ），３．１９−３．０６（ｍ，１Ｈ），２．９２（ｄｄ，Ｊ＝１１．６，４．６Ｈｚ，１Ｈ），２．８４−２．７５（ｍ，１Ｈ），２．５０（ｑ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），２．３８−２．２６（ｍ，１Ｈ），２．２３−２．１１（ｍ，１Ｈ），１．６６−１．５３（ｍ，１Ｈ），１．５４−１．４１（ｍ，１Ｈ），１．１８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ），１．１８−１．０４（ｍ，１Ｈ）。
【０２１５】
生物学的方法及びデータ
生物学的方法
方法１：ＣＤＫ２  ＩＣ５０
材料及び溶液：
−  ＨＥＰＥＳ（Ｓｉｇｍａ、Ｈ３３７５）。
−  オルトバナジン酸ナトリウム（Ｓｉｇｍａ、４５０２４３）。
−  ＤＴＴ（Ｓｉｇｍａ）。
−  ＭｇＣｌ２（Ｓｉｇｍａ、Ｍ１０２８）。
−  ＰＥＧ−２００００（Ｓｉｇｍａ，９５１７２）。
−  ＡＤＰ−Ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｖ９１０２、ＡＴＰを含む）。
−  ヒトＣＤＫ２／ｃｙｃＥ１（ＰｒｏＱｉｎａｓｅ、００５０−００５５−１）。
−  ヒストンＨ１（Ｍｅｒｃｋ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、１４〜１５５）。
【０２１６】
アッセイ手順：
以下の成分を含む反応混合物（６μＬ）を調製した：６０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（６０ｍＭ、ｐＨ７．５）、オルトバナジン酸ナトリウム（３μＭ）、ＰＥＧ−２００００（５０μｇ／ｍＬ）、ＤＴＴ（１．２ｍＭ）、ＭｇＣｌ２（３ｍＭ）、精製ヒトＣＤＫ２／ｃｙｃＥ１（４μｇ／ｍＬ）、ヒストンＨ１（５０μｇ／ｍＬ）、ＡＴＰ（２０μＭ）、及びＤＭＳＯの最終濃度が１％  ｗ／ｗであるような適切な濃度の試験化合物。反応混合物を３０℃で７５分間インキュベートし、その後、ＡＤＰ−Ｇｌｏ試薬（６μＬ）を加えて停止させた。反応物を２５℃で１時間インキュベートして、残留ウンデシルＡＴＰを枯渇させた。続いて、キナーゼ検出試薬（１２μＬ）を添加し、反応を２５℃で１時間進行させた後、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いた発光測定による分析を行った。
【０２１７】
方法２：ＣＤＫ７  ＩＣ５０
材料及び溶液：
方法１について上述したものに加えて：
−  ＣＤＫ７／ｃｙｃＨ／ＭＡＴ１（ＰｒｏＱｉｎａｓｅ、０３６６−０３６０−４）。
−  ＭｎＣｌ２（Ｓｉｇｍａ、Ｍ１７８７）。
−  ＣＤＫｔｉｄｅ（ＳｉｇｎａｌＣｈｅｍ、Ｃ０６−５８）。
【０２１８】
アッセイ手順：
以下の成分を含む反応混合物（６μＬ）を調製した：６０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（６０ｍＭ、ｐＨ７．５）、オルトバナジン酸ナトリウム（３μＭ）、ＰＥＧ−２００００（５０μｇ／ｍＬ）、ＤＴＴ（１．２ｍＭ）、ＭｇＣｌ２（３ｍＭ）、ＭｎＣｌ２（３ｍＭ）、精製ヒトＣＤＫ７／ｃｙｃＨ／ＭＡＴ１（４μｇ／ｍＬ）、ＣＤＫｔｉｄｅ（１０μＭ）、ＡＴＰ（８μＭ）及びＤＭＳＯの最終濃度が１％ｗ／ｗであるようあ適切な濃度の試験化合物。反応混合物を３０℃で３０分間インキュベートし、次いでＡＤＰ−Ｇｌｏ試薬（６μＬ）の添加によって停止させた。反応物を２５℃で１時間インキュベートして、残留ＡＴＰを枯渇させた。続いて、キナーゼ検出試薬（１２μＬ）を添加し、反応を２５℃で１時間進行させた後、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いた発光測定による分析を行った。
【０２１９】
方法３：ＣＤＫ９  ＩＣ５０
材料及び溶液：
方法１について上述したものに加えて：
−  ヒトＣＤＫ９／ｃｙｃＫ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｖ４１０４）。
−  ＣＤＫｔｉｄｅ（ＳｉｇｎａｌＣｈｅｍ、Ｃ０６−５８）。
【０２２０】
アッセイ手順：
以下の成分を含む反応混合物（６μＬ）を調製した：６０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（６０ｍＭ、ｐＨ７．５）、オルトバナジン酸ナトリウム（３μＭ）、ＰＥＧ−２００００（５０μｇ／ｍＬ）、ＤＴＴ（１．２ｍＭ）、ＭｇＣｌ２（３ｍＭ）、精製ヒトＣＤＫ９／ｃｙｃＫ（２．５μｇ／ｍＬ）、ＣＤＫｔｉｄｅ（３５μＭ）、ＡＴＰ（８μＭ）、及びＤＭＳＯの最終濃度が１％ｗ／ｗであるような適切な濃度の試験化合物。反応混合物を３０℃で６０分間インキュベートし、次いでＡＤＰ−Ｇｌｏ試薬（６μＬ）を加えて停止させた。反応物を２５℃で１時間インキュベートして、残留ＡＴＰを枯渇させた。続いて、キナーゼ検出試薬（１２μＬ）を添加し、反応を２５℃で１時間進行させた後、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を用いた発光測定による分析を行った。
【０２２１】
方法４：ヒト血漿タンパク質結合（ＰＰＢ）
材料及び溶液：
−  ヒト血漿（Ｓｅｒａ  Ｌａｂｓ、ＨＭＨＰＬＬＩＨＰ）。
−  ブプロピオン塩酸塩（Ｓｉｇｍａ、Ｂ１０２）。
−  ＤＰＢＳ（Ｓｉｇｍａ、Ｄ８５３７）。
−  ギ酸（Ｓｉｇｍａ、Ｆ０５０７）。
−  ＲＥＤ  Ｄｅｖｉｃｅ  Ｓｉｎｇｌｅ  Ｕｓｅ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、９０００６）。
−  内部標準溶液調製：ブプロピオン塩酸塩（５０μＬ、ＤＭＳＯ中１０ｍＭ）の溶液を、アセトニトリル（１０００ｍＬ）中の０．１％ギ酸（１ｍＬ）と合わせた。
【０２２２】
アッセイ手順：
一旦凍結した血漿を解凍し、１Ｍ乳酸溶液を使用してｐＨ７．４に調整し、この混合物の一部（７９２μＬ）を各試験化合物溶液（８μＬ、ＤＭＳＯ中０．５ｍＭ）と合わせた。得られたスパイク血漿の一部（２００μＬ）をＲＥＤ装置の試料区画に添加した。ＤＢＰＳ（３５０μＬ）をそれぞれ対応するバッファー区画に添加した。最初の試料（５０μＬ）を採取し、次いで、ＲＥＤプレートを密封し、加湿ＣＯ２（５％）雰囲気中、血漿及びＤＢＰＳ試料と一緒に、オービタルシェーカー（２００ｒｐｍ）上で３７℃で２４０分間インキュベートした。各試料ウェルを内部標準溶液（３００μＬ）で処理した。各バッファーウェル及び試料ウェルからアリコート（５０μＬ）を取り出し、それぞれインキュベートした血漿（５０μＬ）又はインキュベートしたＤＰＢＳ（５０μＬ）で置換した。プレートを密封し、遠心分離した（３５００ｒｐｍ、１５分）。上清のアリコート（１００μＬ）を水（５０μＬ）と合わせ、Ｗａｔｅｒｓ  ＴＱＳ質量分析計を用いて分析した。
【０２２３】
方法５：ＭＤＣＫ−ＭＤＲ１  Ｅｆｆｌｕｘ  Ｒａｔｉｏ
材料及び溶液：
−  ＭＤＣＫ／ＭＤＲ１  Ｒｅａｄｙ（商標）細胞プレート（Ｒｅａｄｙｃｅｌｌ）。
−  １０％ＦＢＳ、１％グルタミン２００ｍＭ、１％ペニシリン（１０，０００Ｕ／ｍＬ）−ストレプトマイシン（１０ｍｇ／ｍＬ）を補充した高グルコース細胞培養培地（Ｓｉｇｍａ，Ｄ５６７１）。
−  ＨＢＳＳバッファー（Ｇｉｂｃｏ、１４０６５−０４９）。
−  内部標準：アセトニトリル中の０．５μＭブプロピオン／０．１％ギ酸（水溶液）（１：１ｖ／ｖ）。
【０２２４】
アッセイ手順：
ＨＢＳＳアッセイバッファーをｐＨ７．４で調製し、３７℃に温めた。細胞培養培地をＲｅａｄｙｃｅｌｌプレートから除去した。基底細胞をＨＢＳＳバッファー（３×２２５μＬ）で洗浄し、成長点細胞をＨＢＳＳバッファー（３×７５μＬ）で洗浄した。細胞を加湿ＣＯ２（５％）雰囲気中で３７℃に加温し、２５０ｒｐｍで３０分間振盪した。化合物及び標準溶液を、各化合物（１０μＬ、ＤＭＳＯ中１ｍＭ）をＨＢＳＳ（９９０μＬ）で希釈することによって調製した。バッファーを注意深く基底細胞プレートから除去し、続いて成長点細胞プレートから除去した。ＨＢＳＳバッファー（２２５μＬ）及び化合物溶液（２５０μＬ）を基底細胞プレートに添加した。溶液のアリコート（２５μＬ）を内部標準（７５μＬ）と合わせ、ｔ＝０時間の試料として使用するために冷蔵した。ＨＢＳＳバッファー（７５μＬ）及び化合物溶液（１００μＬ）を成長点細胞プレートに添加した。アリコート（２５μＬ）を採取し、基底細胞プレートと同様に処理した。細胞を加湿ＣＯ２（５％）雰囲気中で３７℃に加温し、２５０ｒｐｍで２時間振盪した。インキュベーション後、各基底及び成長点溶液のアリコート（２５μＬ）を内部標準（７５μＬ）と合わせ、密封し、遠心分離した（３５００ｒｐｍ、１５分）。上清のアリコート（５０μＬ）を水（５０μＬ）と合わせて、ｔ＝０時間の試料と共に、Ｗａｔｅｒｓ  ＴＱＳ質量分析計を使用して分析した。
【０２２５】
方法６：ＭＤＣＫ−ＢＣＲＰ  Ｅｆｆｌｕｘ  Ｒａｔｉｏ
方法５と本質的に同じであるが、ＭＤＣＫ／ＭＤＲ１プレートの代わりにＭＤＣＫ／ＢＣＲＰ  Ｒｅａｄｙ（商標）細胞プレート（Ｒｅａｄｙｃｅｌｌ）を使用した。
【０２２６】
生物学的データ
ＡＰＰＡＭＰ化合物を、上記の生物学的方法を用いて評価した。
比較のために、以下の参照化合物（ＲＥＦ−００１）も評価した。
【化１３】
2020534346.tif 000016
結果のデータは、以下の表に要約されている。
【表１】
2020534346.tif 000017
【表２】
2020534346.tif 000018
【０２２７】
比較
ＣＤＫ７は重要な標的である。この重要な標的に対する効力は非常に望ましい。
【０２２８】
これらの化合物は、ＲＥＦ−００１と比較して、同様の、又はより良好な、又は実質的により良好なＣＤＫ７生化学的効力を有する：
【表３】
2020534346.tif 000019
ＣＤＫ２に対してＣＤＫ７により大きな選択性を有する化合物は、正常組織と比較して、より高い治療指数を提供し、及び／又は疾患状態の細胞に対してより大きな選択性を示すと予想される。ＣＤＫ２に対してＣＤＫ７についての改善された選択性は非常に望ましい。
【０２２９】
これらの化合物は、ＲＥＦ−００１と比較して、ＣＤＫ２に対してＣＤＫ７により良好な、又は実質的により良好な選択性を有する：
【表４】
2020534346.tif 000020
化合物がより高い遊離画分を有する場合、より多くの化合物が、血漿タンパク質に結合されるのとは対照的に、標的と相互作用するために利用可能になる。遊離画分が多いとｉｎ  ｖｉｖｏでの効力が増大し、薬理活性を得るための投与量が少なくなるはずである。より高い遊離画分は非常に望ましい。
【０２３０】
化合物はＲＥＦ−００１と比較して、ヒト血漿中（すなわち、１−ヒトＰＰＢ）で実質的に高い遊離画分を有する：
【表５】
2020534346.tif 000021
排出（ｅｆｆｌｕｘ）トランスポーターは、癌薬物耐性機序に関与している。排出トランスポーターに対する感受性が低いことは、癌治療における利点として認識されている。低いｅｆｆｌｕｘ  ｒａｔｉｏは非常に望ましい。
【０２３１】
これらの化合物は、ＲＥＦ−００１と比較して、ＭＤＣＫ−ＭＤＲ１細胞及びＭＤＣＫ−ＢＣＲＰ細胞の両方において、実質的に低いｅｆｆｌｕｘ  ｒａｔｉｏを有する：
【表６】
2020534346.tif 000022
【表７】
2020534346.tif 000023
以下の表に示すように、各化合物は、少なくとも１つの点で、しばしばいくつかの点で、ＲＥＦ−００１よりも実質的に優れている。
【表８】
2020534346.tif 000024
【０２３２】
上述では、本発明の原理、好ましい実施形態、及び実施様式を記載した。しかしながら、本発明は、論じた特定の実施形態に限定されるものとして解釈されるべきではない。その代わりに、上記の実施形態は、限定するものというよりもむしろ説明するものであるとみなされるべきである。上記の実施形態において、本発明の範囲から逸脱することなく、当業者により変形がなされてもよいことを理解する必要がある。
【０２３３】
参考文献
本発明と本発明が関する技術の技術水準をさらに十分に記載し、開示するため、本明細書においては多数の文献を引用している。これらの文献の完全な引用を以下に提供する。
【０２３４】
これらの各文献は、あたかも個々の文献がそれぞれ参照によって詳細にかつ個別に援用されていると示されているように、参照によりその全体が本開示に援用される。
【０２３５】
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【国際調査報告】
2020534346.tif 000031
2020534346.tif 000032