(57)【要約】  本開示は、治療有効量のＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト、例えばＡｃｔＲＩＩ受容体結合分子、例えばビマグルマブ抗体などのＡｃｔＲＩＩ受容体抗体を用いる、尿失禁を予防及び／又は治療するための新規な使用及び方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
尿失禁の症状を示すか又は尿失禁を発症する危険性のある対象を治療する際に使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト。
【請求項２】
前記尿失禁は、腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁及び反射性尿失禁からなる群から選択される失禁である、請求項１に記載の尿失禁を治療する際に使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト。
【請求項３】
尿失禁を治療するための方法であって、尿失禁の症状を示すか又は尿失禁を発症する危険性がある対象に有効量のＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストを投与することを含む方法。
【請求項４】
前記尿失禁は、腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁及び反射性尿失禁からなる群から選択される失禁である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、ＡｃｔＲＩＩ受容体結合分子である、請求項１若しくは２に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は請求項３若しくは４に記載の治療の方法。
【請求項６】
前記ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分である、請求項１若しくは２に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は請求項３若しくは４に記載の治療の方法。
【請求項７】
前記ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、配列番号１８１のアミノ酸１９〜１３４（配列番号１８２）からなるＡｃｔＲＩＩＢのエピトープに結合する抗ＡｃｔＲＩＩ抗体又はその抗原結合性部分である、請求項１若しくは２に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は請求項３若しくは４に記載の治療の方法。
【請求項８】
前記ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分であり、前記抗体又はその抗原結合性部分は、配列番号１〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１５〜２８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号２９〜４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４３〜５６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号５７〜７０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７１〜８４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む、請求項１若しくは２に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は請求項３若しくは４に記載の治療の方法。
【請求項９】
前記ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分であり、前記抗体又はその抗原結合性部分は、
（ａ）配列番号１の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１５の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号２９の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号５７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１６の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３０の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号５８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｃ）配列番号３の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１７の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３１の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号５９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｄ）配列番号４の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１８の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３２の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｅ）配列番号５の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１９の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３３の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４７の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６１の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７５の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｆ）配列番号６の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２０の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３４の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４８の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６２の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７６の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｇ）配列番号７の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２１の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３５の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４９の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６３の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７７の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｈ）配列番号８の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２２の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３６の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５０の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６４の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７８の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｉ）配列番号９の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２３の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３７の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５１の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６５の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７９の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｊ）配列番号１０の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２４の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３８の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５２の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６６の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８０の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｋ）配列番号１１の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２５の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３９の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｌ）配列番号１２の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２６の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号４０の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｍ）配列番号１３の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２７の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号４１の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、又は
（ｎ）配列番号１４の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２８の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号４２の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号７０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３
を含む、請求項１若しくは２に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は請求項３若しくは４に記載の治療の方法。
【請求項１０】
前記ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分であり、前記抗体は、配列番号１４６〜１５０及び１５６〜１６０からなる群から選択される少なくとも１つの配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長重鎖アミノ酸配列並びに配列番号１４１〜１４５及び１５１〜１５５からなる群から選択される少なくとも１つの配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長軽鎖アミノ酸配列を含む、請求項１若しくは２に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は請求項３若しくは４に記載の治療の方法。
【請求項１１】
前記ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分であり、前記抗体又はその抗原結合性部分は、
（ａ）配列番号９９の可変重鎖配列及び配列番号８５の可変軽鎖配列；
（ｂ）配列番号１００の可変重鎖配列及び配列番号８６の可変軽鎖配列；
（ｃ）配列番号１０１の可変重鎖配列及び配列番号８７の可変軽鎖配列；
（ｄ）配列番号１０２の可変重鎖配列及び配列番号８８の可変軽鎖配列；
（ｅ）配列番号１０３の可変重鎖配列及び配列番号８９の可変軽鎖配列；
（ｆ）配列番号１０４の可変重鎖配列及び配列番号９０の可変軽鎖配列；
（ｇ）配列番号１０５の可変重鎖配列及び配列番号９１の可変軽鎖配列；
（ｈ）配列番号１０６の可変重鎖配列及び配列番号９２の可変軽鎖配列；
（ｉ）配列番号１０７の可変重鎖配列及び配列番号９３の可変軽鎖配列；
（ｊ）配列番号１０８の可変重鎖配列及び配列番号９４の可変軽鎖配列；
（ｋ）配列番号１０９の可変重鎖配列及び配列番号９５の可変軽鎖配列；
（ｌ）配列番号１１０の可変重鎖配列及び配列番号９６の可変軽鎖配列；
（ｍ）配列番号１１１の可変重鎖配列及び配列番号９７の可変軽鎖配列；又は
（ｎ）配列番号１１２の可変重鎖配列及び配列番号９８の可変軽鎖配列
を含む、請求項１若しくは２に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は請求項３若しくは４に記載の治療の方法。
【請求項１２】
前記抗体は、
（ａ）配列番号１４６の重鎖配列及び配列番号１４１の軽鎖配列；
（ｂ）配列番号１４７の重鎖配列及び配列番号１４２の軽鎖配列；
（ｃ）配列番号１４８の重鎖配列及び配列番号１４３の軽鎖配列；
（ｄ）配列番号１４９の重鎖配列及び配列番号１４４の軽鎖配列；
（ｅ）配列番号１５０の重鎖配列及び配列番号１４５の軽鎖配列；
（ｆ）配列番号１５６の重鎖配列及び配列番号１５１の軽鎖配列；
（ｇ）配列番号１５７の重鎖配列及び配列番号１５２の軽鎖配列；
（ｈ）配列番号１５８の重鎖配列及び配列番号１５３の軽鎖配列；
（ｉ）配列番号１５９の重鎖配列及び配列番号１５４の軽鎖配列；又は
（ｊ）配列番号１６０の重鎖配列及び配列番号１５５の軽鎖配列
を含む、請求項６〜１１のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は方法。
【請求項１３】
前記ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分であり、前記抗体は、ｐＢＷ５２２（ＤＳＭ２２８７３）又はｐＢＷ５２４（ＤＳＭ２２８７４）によってコードされる、請求項１若しくは２に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は請求項３若しくは４に記載の治療の方法。
【請求項１４】
尿失禁を治療及び／又は予防する際に使用するためのビマグルマブ又はその抗原結合部分。
【請求項１５】
尿失禁を治療及び／又は予防するための方法であって、尿失禁の症状を示すか又は尿失禁を発症する危険性がある対象に有効量のビマグルマブを投与することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、アクチビン受容体ＩＩ型（ＡｃｔＲＩＩ）アンタゴニスト、例えばアクチビン、増殖分化因子（ＧＤＦ）、骨形態形成タンパク質（ＢＭＰ）及びミオスタチンのヒトＡｃｔＲＩＩ受容体への結合をアンタゴナイズすることができる分子、例えばＡｃｔＲＩＩＡ及び／又はＡｃｔＲＩＩＢに対するアンタゴニスト抗体、例えばビマグルマブの分野におけるものである。特に、本開示は、対象に治療有効量のＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストを投与することにより、尿失禁を治療及び予防することに関する。
【背景技術】
【０００２】
アクチビンＩＩＢ型受容体（ＡｃｔＲＩＩＢ）は、形質転換増殖因子ベータ（ＴＧＦ−β）スーパーファミリーの様々なメンバーに対するシグナル伝達受容体である。このファミリーのメンバーは、アクチビンＡ、ノダル（ｎｏｄａｌ）、ＢＭＰ２、ＢＭＰ６、ＢＭＰ７、ＢＭＰ９、ＧＤＦ５、ＧＤＦ８（ミオスタチン）及びＧＤＦ１１を含み、これらは、すべて筋肉の負の調節に関与する（Ａｋｐａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００９）。
【０００３】
ミオスタチン（ＧＤＦ８）は、アクチビン受容体ＩＩ型を介して（主にＡｃｔＲＩＩＢを介して）作用し、それによって発信されたシグナル伝達は、タンパク質合成並びに筋細胞分化及び増殖の阻害に関与するＳＭＡＤ  ２／３経路を通過する。ミオスタチンの阻害又は遺伝的除去は、筋肉量及び筋肉強度を増加させる（Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ  ２００５，Ｌｅｅ  ａｎｄ  ＭｃＰｈｅｒｒｏｎ  ２００１，Ｗｈｉｔｔｅｍｏｒｅ  ｅｔ  ａｌ  ２００３）。
【０００４】
ビマグルマブは、アクチビン受容体ＩＩＢ型（ＡｃｔＲＩＩＢ）に、その天然のリガンドであるミオスタチン又はアクチビンよりも大きい親和性で競合的に結合するように開発された、ＢＹＭ３３８又はＭＯＲ０８１５９としても知られているモノクローナル抗体のＩＮＮ（国際一般名）である。ビマグルマブは、国際公開第２０１０／１２５００３号パンフレットにおいて開示されており、これは、あたかも完全に記載されるかのように参照により本明細書に組み込まれる。国際公開第２０１０／１２５３００３号パンフレットにおいて開示されるビマグルマブ配列は、表１に掲載される。
【０００５】
ビマグルマブは、完全ヒト抗体（修飾ＩｇＧ１、２３４−２３５−Ａｌａ−Ａｌａ、λ２；Ｆｃ領域における残基のナンバリングは、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  ｉｎｔｅｒｅｓｔ．５ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ−ＵＳ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ｎｏ  ９１−３２４２，ｐｐ６６２，６８０，６８９（１９９１）のＥＵインデックスのナンバリングである）又はＫａｂａｔナンバリング方式による２３２−２３３−Ａｌａ−Ａｌａであり、これは、ＡｃｔＲＩＩＡ及びＢのリガンド結合ドメインに結合し（ビマグルマブは、ＡｃｔＲＩＩ結合分子である）、それにより、骨格筋成長の天然の阻害剤としての役割を果たすミオスタチン及びアクチビンを含むそのリガンドの結合及び続くシグナル伝達を予防する。
【０００６】
ビマグルマブは、ヒト及びマウスＡｃｔＲＩＩＢと交差反応性であり、ヒト、カニクイザル、マウス及びラット骨格筋細胞に対して有効である。ＡｃｔＲＩＩＢは、骨格筋、脂肪組織及び心臓を含む様々な器官に広く分散する（Ｒｅｂｂａｐｒａｇａｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｙｏｓｔａｔｉｎ  ｓｉｇｎａｌｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ａ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  β−ｌｉｋｅ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｐａｔｈｗａｙ  ｔｏ  ｂｌｏｃｋ  ａｄｉｐｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｍｏｌｅｃ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．２００３；２３：７２３０−７２４２）。
【０００７】
骨盤底機能障害は、患者の骨盤部に影響を与える。骨盤部は、筋肉及び靭帯によって所定の位置に保持される膀胱及び尿道を含む様々な解剖学的構造を含む。これらの組織が損傷するか、伸ばされるか又はそうでなければ脆弱化されると、尿失禁が結果として生じ得る。尿失禁は、膀胱制御の損失として定義される臨床的症候群である。尿失禁は、膀胱の内部の圧力が尿道の抵抗力よりも大きいという理由のため、尿道を調節する能力の減少に起因することがよくある。
【０００８】
例えば、括約筋の脆弱化、出産又は前立腺切除の結果としての尿の自制における衰えにより、膀胱を実際に制御することができなくなることがよくある。膀胱制御の損失の重症度は、２４時間ごとの排尿の数の増加といったものから、時々尿を漏出する、突然排尿したいという切迫感を有する夜間多尿エピソードといったものまで及ぶ。さらに、膀胱制御の損失の症状は、（ｉ）突然の咳、くしゃみ、笑い、重いものを持ち上げること及び運動後の失禁、又は（ｉｉ）止めることができない、排尿したいという切迫感を引き起こす膀胱の筋肉壁の不随意性の収縮、又は（ｉｉｉ）膀胱が、身体が作っている量と同程度の量の尿を保持することができず、且つ／若しくは膀胱を完全に空にすることができず、少量の尿漏れを引き起こす（患者は、尿道からの尿の「滴下」を常に経験している）といったものである。
【０００９】
いくつかのタイプの尿失禁（ＵＩ）が知られている。例えば、腹圧性尿失禁（ＳＵＩ）は、膀胱に圧力をかける突然の身体の動きの結果として生じ得る。例えば、トイレに間に合うまで尿を保持することができない切迫性尿失禁は、膀胱の筋肉が脆弱化した結果である。膀胱は、癌、炎症、感染症又は膀胱結石のような軽い疾病又は病気の結果として尿を漏出し得る。失禁の他の形態は、反射性尿失禁、心因性尿失禁及び神経因性尿失禁として知られている。
【００１０】
失禁の治療に利用可能な薬理療法は、限られている。女性における腹圧性尿失禁を治療するために使用することができる治療は、Ｒｏｖｎｅｒ  ＥＳ，Ｗｅｉｎ  ＡＪ．Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｐｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｓｔｒｅｓｓ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ．Ｒｅｖｉｅｗｓ  ｉｎ  Ｕｒｏｌｏｇｙ  ２００４，６：Ｓ２９−Ｓ４７において記載されている。標準的なケアは、骨盤底理学療法及び外科手技（例えば、スリング；膀胱頸部吊り上げ術）である。尿道中に注射される生物学的及び他の物質が腹圧性尿失禁の症状を治療するために試験されたが、ごくわずかな成果のみがあった（Ｌｅｅ  ＰＥ，Ｋｕｍｇ  ＲＣ，Ｄｒｕｔｚ  ＨＰ．Ｐｅｒｉｕｒｅｔｈｒａｌ  ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ  ｆａｔ  ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ａｓ  ａ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｆｏｒ  ｆｅｍａｌｅ  ｓｔｒｅｓｓ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ−ａ  ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ  ｄｏｕｂｌｅ−ｂｌｉｎｄ  ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｔｒｉａｌ．Ｊ  Ｕｒｏｌ  ２００１，１６５：１５３−１５８）。用量漸増研究における尿道の括約筋中への自己の筋肉由来の幹細胞（ＡＭＤＣ）の注射は、いくらか陽性の結果を示したが、最も高い用量のＡＭＤＣの受けた患者のみが平均パッド重量における統計的に有意な低下を有した（Ｐｅｔｅｒｓ  ＫＭ，Ｄｍｏｃｈｏｗｓｋｉ  ＲＲ，Ｃａｒｒ  ＬＫ，Ｍａｇａｌｉ  Ｒ，Ｋａｕｆｍａｎ  ＭＲ，Ｓｉｒｌｓ  ＬＴ，Ｈｅｒｓｃｈｏｒｎ  Ｓ，Ｂｉｒｃｈ  Ｃ，Ｋｕｌｔｇｅｎ  ＰＬ，Ｃｈａｎｃｅｌｌｏｒ  ＭＢ．Ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ  ｍｕｓｃｌｅ  ｄｅｒｉｖｅｄ  ｃｅｌｌｓ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｓｔｒｅｓｓ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ  ｉｎ  ｗｏｍｅｎ．Ｊ  Ｕｒｏｌ  ２０１４，１９２：４６９−４７６．）。腹圧性尿失禁を治療するためのデュロキセチンの使用が試験されたが、結果は、様々であった（Ｎｏｒｔｏｎ  ＰＡ，Ｚｉｎｎｅｒ  ＮＲ，Ｙａｌｃｉｎ  Ｉ，Ｂｕｍｐ  ＲＣ．Ｄｕｌｏｘｅｔｉｎｅ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ  ｓｔｕｄｙ  ｇｒｏｕｐ．Ｄｕｌｏｘｅｔｉｎｅ  ｖｅｒｓｕｓ  ｐｌａｃｅｂｏ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｓｔｒｅｓｓ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ．Ａｍ  Ｊ  Ｏｂｓｔｅｔ  Ｇｙｎｅｃｏｌ  ２００２，１８７：４０−４８；Ｄｍｏｃｈｏｗｓｋｉ  ＲＲ，Ｍｉｋｌｏｓ  ＪＲ，Ｎｏｒｔｏｎ  ＰＡ，ｅｔ  ａｌ．ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｄｕｌｏｘｅｔｉｎｅ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ  ｓｔｕｄｙ  ｇｒｏｕｐ．Ｄｕｌｏｘｅｔｉｎｅ  ｖｅｒｓｕｓ  ｐｌａｃｅｂｏ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍｅｒｉｃａ  ｗｏｍｅｎ  ｗｉｔｈ  ｓｔｒｅｓｓ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ．Ｊ  Ｕｒｏｌ  ２００３，１７０：１２５９−１２６３）。
【００１１】
骨盤底筋の尿力学的な所見及び組織病理形態に対するテストステロンの効果が腹圧性尿失禁のラットモデルにおいて研究された。テストステロンは、治療したラットにおいて尿漏出圧を改善し、筋線維のサイズを有意に増加させ、テストステロンが腹圧性尿失禁のラットモデルに対して予防的及び治癒的効果の両方を有することを示唆した（Ｍａｍｍａｄｏｖ  Ｒ，Ｓｉｎｓｉｒ  Ａ，Ｔｕｇｌｕ  Ｉ，Ｅｙｒｅｎ  Ｖ，Ｇｕｒｅｒ  Ｅ，Ｏｚｙｕｒｔ  Ｃ．Ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｎ  ｕｒｏｄｙｎａｍｉｃ  ｆｉｎｄｉｎｇｓ  ａｎｄ  ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｐｅｌｖｉｃ  ｆｌｏｏｒ  ｍｕｓｃｌｅｓ  ｉｎ  ｆｅｍａｌｅ  ｒａｔｓ  ｗｉｔｈ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｌｙ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｓｔｒｅｓｓ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ．Ｉｎｔ  Ｕｒｏｌ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  ２０１１，４３：１００３−１００８）。遊離テストステロンレベルも治療グループにおいてより高かったため、腹圧性尿失禁を有する女性において、補足のステロイド性テストステロンの副作用に関する懸念が可能性としてある。
【００１２】
ＵＩにおけるアンドロゲンの効果が広く研究された。これらの研究は、アンドロゲンが腹圧性尿失禁において実質的な役割を果たし得ることを示唆する（Ｂａｉ  ＳＷ，Ｊｕｎｇ  Ｂｈ，Ｃｈｕｎｇ  ＢＣ，ｅｔ  ａｌ．Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ  ｓｔｅｒｏｉｄ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ａｎｄ  ｌｏｗｅｒ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｔｒａｃｔ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌ  ｗｏｍｅｎ．Ｙｏｎｓｅｉ  Ｍｅｄ  Ｊ  ２００３，４４：２７９−２８７；Ｊｕｎｇ  ＢＨ，Ｂａｉ  ＳＷ，Ｃｈｕｎｇ  ＢＣ．Ｕｒｉｎａｒｙ  ｐｒｏｆｉｌｅ  ｏｆ  ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ  ｓｔｅｒｏｉｄｓ  ｉｎ  ｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌ  ｗｏｍｅｎ  ｗｉｔｈ  ｓｔｒｅｓｓ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ．Ｊ  Ｒｅｐｒｏｄ  Ｍｅｄ  ２００１，４６：９６９−９７４；Ｂａｉ  ＳＷ，Ｊｕｎｇ  Ｂｈ，Ｃｈｕｎｇ  ＢＳ，ｅｔ  ａｌ．Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｐｒｏｆｉｌｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ  ｓｔｅｒｏｉｄｓ  ａｎｄ  ｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌ  ｗｏｍｅｎ  ｗｉｔｈ  ｓｔｒｅｓｓ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ．Ｎｅｕｒｏｕｒｏｌ  Ｕｒｏｄｙｎａｍ  ２００３，２２：１９８−２０４）。運動に起因する筋肉量における増加が局所的なアンドロゲン濃度における増加を引き起こし得ることが示され得る（Ａｉｚａｗａ  Ｋ，Ｉｅｍｉｔｓｕ  Ｍ，Ｍａｅｄａ  Ｓ，Ｍｅｓａｋｉ  Ｎ，Ｕｓｈｉｄａ  Ｔ，Ａｋｉｍｏｔｏ  Ｔ．Ｅｎｄｕｒａｎｃｅ  ｅｘｅｒｃｉｓｅ  ｔｒａｉｎｉｎｇ  ｅｎｈａｎｃｅｓ  ｌｏｃａｌ  ｓｅｘ  ｓｔｅｒｏｉｄｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｉｎ  ｓｋｅｌｅｔａｌ  ｍｕｓｃｌｅ．Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  ｓｃｉｅｎｃｅ  ｉｎ  ｓｐｏｒｔｓ  ａｎｄ  ｅｘｅｒｃｉｓｅ  ２０１１，４３（１１）：２０７２−２０８０）。しかしながら、アンドロゲンの作用は、複雑であり、同化作用、ホルモンの調整、受容体発現、一酸化窒素調整又はこれらの因子の組み合わせに依存し得る（Ｈｏ  ＭＨ，Ｂｈａｔｉａ  ＮＮ，Ｂｈａｓｉｎ  Ｓ．Ａｎａｂｏｌｉｃ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ａｎｄｒｏｇｅｎｓ  ｏｎ  ｍｕｓｃｌｅｓ  ｏｆ  ｆｅｍａｌｅ  ｐｅｌｖｉｃ  ｆｌｏｏｒ  ａｎｄ  ｌｏｗｅｒ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｔｒａｃｔ．Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｏｓｔｅｔｒｉｃｓ  ａｎｄ  Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙ  ２００４，１６（５）：４０５−４０９）。アナボリックステロイドは、筋肉量及び筋肉強度を増加させ得るが、既知の潜在的リスクのために使用が限られている。
【００１３】
腹圧性尿失禁を模倣するために卵巣切除ラットモデルを使用する予備的なインビボにおける研究は、腹圧性尿失禁の治療のためのＳＡＲＭの使用の見込みを支持する（Ｋａｄｅｋａｗａ  ｅｔ  ａｌ，ＡＵＡ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  ２０１５，Ｎｅｗ  Ｏｒｌｅａｎｓ，ＬＡ．ＰＤ２７−１１）。選択的アンドロゲン受容体修飾物質（ＧＳＫ２８４９４６６Ａ）の使用により、尿道基線圧（ＵＢＰ）及びくしゃみ反射振幅（ＡＵＲＳ）を、ビヒクルコントロールと比較してそれぞれ６４パーセント及び７４パーセントだけ増加させ得ることを実証することができた。組織学的に、ＳＡＲＭ治療動物は、コントロールグループにおいて観察された尿道の筋肉における萎縮が逆転した。
【００１４】
１９８４年、Ａ．Ｇｒｕｎｅｂｅｒｇｅｒ、Ｎ．Ｔｏｍｍｅｎ及びＤ．Ｆｏｓｔｅｒは、ベータ２−アドレナリン作動性クレンブテロールによる女性及び子供における尿失禁の治療の成功について初めて報告した。これらの著者らによれば、ほとんどの患者において、クレンブテロール治療の効果は、治療の第１週で既に明らかになった（Ｇｒｕｎｅｂｅｒｇｅｒ  Ａ．Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｍｏｔｏｒ  ｕｒｇｅ−ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ  ｗｉｔｈ  ｃｌｅｎｂｕｔｅｒｏｌ，ａｎｄ  ｆｌａｖｏｘａｔｅ  ｈｙｄｒｏｈｌｏｒｉｄｅ．Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｂｓｔｅｔｒｉｃｓ  ａｎｄ  Ｇｙｎａｅｃｏｌｏｇｙ  １９８４；９１：２７５−２７８）。Ｖａｌｒｌｅｖらは、１９８８〜１９９７年の期間のクレンブテロールによる尿失禁の治療に関するその経験について要約している（Ｂ．Ｚｏｚｉｋｏｖ，Ｓ．Ｉ．Ｋｕｎｃｈｅｖ＆Ｃｈｒ．Ｖａｒｌｅｖ：Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｌｅｎｂｕｔｅｒｏｌ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ；Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｕｒｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ  ３３：４１３−４１６，２００１）。Ｖａｌｒｌｅｖらは、尿失禁の治療における９０を超える薬剤の効果について公表されている事実にもかかわらず、１００％の成功（例えば、膀胱状態の患者による評価（ＰＰＢＣ）によれば、膀胱を有効に制御する能力の完全な回復、例えば突然排尿したいという切迫感がない又は夜間多尿エピソードがない）が、薬剤が多数あるにもかかわらず、報告されていないことを明らかにした。尿失禁（ＵＩ）のための現在のほとんどの治療は、神経系を調整し、オキシブチニン及びプロパンテリンなどの非選択的抗コリン薬又はトルテロジン、トロスピウム、ソリフェナシン、ダリフェナシン及びフェソテロジンなどの抗ムスカリン薬を含む。ＵＩのためのアドレナリン作動性修飾物質は、三環系抗うつ薬（例えば、イミプラミン及びアミトリプチリン）並びにベータ３−アドレナリン作動性受容体アゴニスト（例えば、ミラベグロン）を含む。他の尿失禁剤は、フラボキサート及びジサイクロミンなどの筋弛緩薬（例えば、排尿筋を弛緩する）である。オナボツリナムトキシンＡなどのボツリヌス毒素が神経因性の尿失禁において使用された。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
尿失禁を治療するためのＦＤＡに承認された薬剤の数にもかかわらず、尿道の圧力を正常化し、且つ尿流量を安定化し、及び腹圧性尿失禁に対する有益でより顕著な陽性の効果又は例えば２４時間ごとの失禁エピソード、２４時間ごとの排尿の数、失禁当たりに排泄される容量、２４時間ごとの夜間多尿エピソード若しくは膀胱状態の患者による評価（ＰＰＢＣ）における改善に対する有益な効果を有するであろう新規な作用メカニズムを有する新たな薬剤の必要性が残っている。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本開示より以前には、アクチビンＩＩ型受容体（ＡｃｔＲＩＩＡ／Ｂ）の標的阻害は、腹圧性尿失禁（ＳＵＩ）、切迫性尿失禁（ＵＵＩ）、反射性尿失禁（ＲＵＩ）若しくは（ＮＵＩ）神経因性の尿失禁のような尿失禁又は前述の状態のための予防法又は療法として想定もされず、調査もされなかった。本明細書において開示されるように、ＢＹＭ３３８／ビマグルマブなどのＡｃｔＲＩＩＡ／Ｂ受容体アンタゴニストの全身投与は、腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁又は反射性尿失禁のような尿失禁に対して有益な効果を有することが洞察された。雌のラットにおいて、陰部神経挫滅（ＰＮＣ）又は膣拡張（ＶＤ）のいずれかのみよりも重度で長く続く損傷を引き起こすＰＮＣ及びＶＤからなる二重傷害出産シミュレーションラットモデル（Ｈａｉ−Ｈｏｎｇ  Ｊｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｕａｌ  ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  ｃｈｉｌｄｂｉｒｔｈ  ｉｎｊｕｒｉｅｓ  ｒｅｓｕｌｔ  ｉｎ  ｓｌｏｗｅｄ  ｒｅｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｕｄｅｎｄａｌ  ｎｅｒｖｅ  ａｎｄ  ｕｒｅｔｈｒａｌ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ；Ｎｅｕｒｏｕｒｏｌ  Ｕｒｏｄｙｎ．２００９  ；２８（３）：２２９−２３５．；Ｓｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  Ｈｉｓｔａｍｉｎｅ  ａｎｄ  Ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ａｆｔｅｒ  Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｃｈｉｌｄｂｉｒｔｈ  Ｉｎｊｕｒｙ  Ｉｍｐｒｏｖｅｓ  Ｓｔｒｅｓｓ  Ｕｒｉｎａｒｙ；Ｎｅｕｒｏｕｒｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｕｒｏｄｙｎａｍｉｃｓ  ３５：７０３−７１０（２０１６））を使用すると、ビマグルマブなどのＡｃｔＲＩＩＡ／Ｂ受容体アンタゴニストの有益な効果を証明することができる。本明細書において開示されるように、ＡｃｔＲＩＩＡ／Ｂ受容体アンタゴニストであるビマグルマブは、二重傷害出産シミュレーションラットモデルにおける尿失禁に対して有益な効果を有し、したがってヒトにおける腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁又は反射性尿失禁を治療するための新たな方法の開発の根拠を提供することが想定される。
【００１７】
ヒトにおける尿失禁、特に腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁又は反射性尿失禁を治療する際に使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストが本明細書において開示される。ヒトにおける尿失禁、特に腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁又は反射性尿失禁を治療するためのそのようなＡｃｔＲＩＩアンタゴニストを使用するための方法も提供される。
【００１８】
尿失禁を治療及び／又は予防するための方法が本明細書において開示される。方法は、尿失禁の症状を示しているか若しくはそれに罹患しているか、又は失禁エピソード、排尿の数の増加、夜間多尿若しくは患者評価による膀胱状態（ＰＰＢＣ）における減少のような尿失禁の症状を発症する危険性がある対象に治療有効量の、例えばビマグルマブなどのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストを投与することを含む。
【００１９】
尿失禁を治療及び／又は予防するための、本明細書において開示される方法は、以下の症状を治療するために使用することができる：
ｉ．突然、膀胱を空にすることを要する（切迫と呼ばれる）
ｉｉ．通常よりも膀胱を空にしなければならない（尿意頻数の増加と呼ばれる）
ｉｉｉ．いずれの時点で膀胱を空にしたらよいかを制御することができない（切迫尿失禁と呼ばれる）。
【００２０】
尿失禁を治療及び／又は予防する際に使用されるＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストが本明細書において開示される。尿失禁は、例えば、脆弱化又は損傷した骨盤筋に起因する骨盤底障害によって引き起こされ得るか又はそれと関連し得る。
【００２１】
腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁及び反射性尿失禁のような尿失禁状態を治療する際に使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストも本明細書において開示される。
【００２２】
一実施形態では、ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストによって治療される尿失禁は、出産又は閉経の影響に関係するか又はそれによって引き起こされる。
【００２３】
例えば、脆弱化又は損傷した骨盤筋に起因する骨盤底障害によって引き起こされるか又はそれと関連する尿失禁を治療するための方法も本明細書において開示される。方法は、尿失禁の症状を示す対象に有効量のＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストを投与することを含む。
【００２４】
いくつかの事例では、本明細書において記載される腹圧性尿失禁（ＳＵＩ）、切迫性尿失禁（ＵＵＩ）、反射性尿失禁（ＲＵＩ）又は（ＮＵＩ）神経因性の尿失禁の治療は、脆弱化又は損傷した骨盤筋に起因し、前記筋肉は、肛門挙筋の筋肉、球海綿体筋の筋肉又は外尿道括約筋である。
【００２５】
一実施形態では、尿失禁を治療する際に又は本明細書において記載される方法において使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、ＡｃｔＲＩＩ受容体結合分子であり、これは、ＡｃｔＲＩＩへのミオスタチン、ＧＤＦ１１及びアクチビンＡなどのＡｃｔＲＩＩ相互作用リガンドの接近をブロックすることができる。ＡｃｔＲＩＩ受容体結合分子は、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／又はＡｃｔＲＩＩＢ受容体に結合することができる。ＡｃｔＲＩＩ結合分子の例は、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／又はＡｃｔＲＩＩＢ受容体に結合する抗体、例えば抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体を含むが、これらに限定されない。好ましくは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体は、ビマグルマブとしても知られているＢＹＭ３３８である。
【００２６】
尿失禁を治療する際に又は本明細書において記載される方法において使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストのさらなる例は、ＡｃｔＲＩＩＡ又はＡｃｔＲＩＩＢ受容体の細胞外ドメインの可溶性形態であり、これは、ミオスタチン、ＧＤＦ１１及びアクチビンＡなどのＡｃｔＲＩＩ相互作用リガンドに結合することができる。この「受容体ボディ」は、それらのリガンドと競合することによって細胞結合ＡｃｔＲＩＩ受容体の機能を阻害する。
【００２７】
尿失禁を治療する際に又は本明細書において記載される方法において使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストであって、配列番号１８１のアミノ酸１９〜１３４（配列番号１８２）からなるＡｃｔＲＩＩＢのエピトープに結合する抗ＡｃｔＲＩＩ抗体である、ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストが本明細書において開示される。
【００２８】
尿失禁を治療する際に又は本明細書において記載される方法において使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストであって、抗ＡｃｔＲＩＩ抗体は、
（ａ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）；
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）；
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）；
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）；
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）；
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）；
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）；又は
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）及び配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むか又はそれらからなるＡｃｔＲＩＩＢエピトープに結合する、ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストが本明細書において開示される。
【００２９】
尿失禁を治療する際に又は本明細書において記載される方法において使用するためのさらなる抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体は、例えば、
ａ）抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体であって、
（ａ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）；
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）；
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）；
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）；
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）；
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）；
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）；又は
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）及び配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むＡｃｔＲＩＩＢのエピトープに結合する抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体、及び
ｂ）アンタゴニスト抗体であって、配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）；
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）；
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）；
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）；
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）；
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）；
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）；又は
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）及び配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むＡｃｔＲＩＩＢのエピトープに結合するＡｃｔＲＩＩＢに対するアンタゴニスト抗体
を含み、抗体は、約２ｐＭのＫＤを有する。
【００３０】
一実施形態では、尿失禁を治療する際に又は本明細書において記載される方法において使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、ＡｃｔＲＩＩＡに結合するよりも約１０倍以上の親和性でＡｃｔＲＩＩＢに結合する抗体である。
【００３１】
別の実施形態では、尿失禁を治療する際に又は本明細書において記載される方法において使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、配列番号１〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１５〜２８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号２９〜４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４３〜５６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号５７〜７０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７１〜８４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む抗体であり得る。
【００３２】
尿失禁を治療する際に又は本明細書において記載される方法において使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、
（ａ）配列番号１の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１５の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号２９の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号５７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１６の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３０の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号５８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｃ）配列番号３の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１７の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３１の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号５９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｄ）配列番号４の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１８の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３２の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｅ）配列番号５の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１９の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３３の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４７の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６１の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７５の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｆ）配列番号６の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２０の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３４の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４８の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６２の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７６の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｇ）配列番号７の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２１の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３５の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４９の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６３の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７７の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｈ）配列番号８の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２２の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３６の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５０の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６４の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７８の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｉ）配列番号９の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２３の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３７の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５１の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６５の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７９の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｊ）配列番号１０の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２４の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３８の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５２の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６６の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８０の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｋ）配列番号１１の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２５の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３９の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｌ）配列番号１２の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２６の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号４０の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｍ）配列番号１３の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２７の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号４１の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、又は
（ｎ）配列番号１４の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２８の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号４２の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号７０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３
を含む抗体であり得る。
【００３３】
別の実施形態では、尿失禁を治療する際に又は本明細書において記載される方法において使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、配列番号１４６〜１５０及び１５６〜１６０からなる群から選択される少なくとも１つの配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長重鎖アミノ酸配列を含む抗体であり得る。
【００３４】
さらなる実施形態では、尿失禁を治療する際に又は本明細書において記載される方法において使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、配列番号１４１〜１４５及び１５１〜１５５からなる群から選択される少なくとも１つの配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長軽鎖アミノ酸配列を含む抗体であり得る。
【００３５】
一実施形態では、尿失禁を治療する際に又は本明細書において記載される方法において使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、
（ａ）配列番号９９の可変重鎖配列及び配列番号８５の可変軽鎖配列；
（ｂ）配列番号１００の可変重鎖配列及び配列番号８６の可変軽鎖配列；
（ｃ）配列番号１０１の可変重鎖配列及び配列番号８７の可変軽鎖配列；
（ｄ）配列番号１０２の可変重鎖配列及び配列番号８８の可変軽鎖配列；
（ｅ）配列番号１０３の可変重鎖配列及び配列番号８９の可変軽鎖配列；
（ｆ）配列番号１０４の可変重鎖配列及び配列番号９０の可変軽鎖配列；
（ｇ）配列番号１０５の可変重鎖配列及び配列番号９１の可変軽鎖配列；
（ｈ）配列番号１０６の可変重鎖配列及び配列番号９２の可変軽鎖配列；
（ｉ）配列番号１０７の可変重鎖配列及び配列番号９３の可変軽鎖配列；
（ｊ）配列番号１０８の可変重鎖配列及び配列番号９４の可変軽鎖配列；
（ｋ）配列番号１０９の可変重鎖配列及び配列番号９５の可変軽鎖配列；
（ｌ）配列番号１１０の可変重鎖配列及び配列番号９６の可変軽鎖配列；
（ｍ）配列番号１１１の可変重鎖配列及び配列番号９７の可変軽鎖配列；又は
（ｎ）配列番号１１２の可変重鎖配列及び配列番号９８の可変軽鎖配列
を含む抗体であり得る。
【００３６】
本開示の別の実施形態では、尿失禁を治療する際に又は本明細書において記載される方法において使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、
（ａ）配列番号１４６の重鎖配列及び配列番号１４１の軽鎖配列；
（ｂ）配列番号１４７の重鎖配列及び配列番号１４２の軽鎖配列；
（ｃ）配列番号１４８の重鎖配列及び配列番号１４３の軽鎖配列；
（ｄ）配列番号１４９の重鎖配列及び配列番号１４４の軽鎖配列；
（ｅ）配列番号１５０の重鎖配列及び配列番号１４５の軽鎖配列；
（ｆ）配列番号１５６の重鎖配列及び配列番号１５１の軽鎖配列；
（ｇ）配列番号１５７の重鎖配列及び配列番号１５２の軽鎖配列；
（ｈ）配列番号１５８の重鎖配列及び配列番号１５３の軽鎖配列；
（ｉ）配列番号１５９の重鎖配列及び配列番号１５４の軽鎖配列；又は
（ｊ）配列番号１６０の重鎖配列及び配列番号１５５の軽鎖配列
を含む抗体であり得る。
【００３７】
さらに別の実施形態では、上記に記載される抗ＡｃｔＲＩＩ抗体は、（ｉ）配列番号１４６〜１５０及び１５６〜１６０からなる群から選択される少なくとも１つの配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長重鎖アミノ酸配列、（ｉｉ）配列番号１４１〜１４５及び１５１〜１５５からなる群から選択される少なくとも１つの配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長軽鎖アミノ酸配列、又は（ｉｉｉ）（ａ）配列番号９９の可変重鎖配列及び配列番号８５の可変軽鎖配列；（ｂ）配列番号１００の可変重鎖配列及び配列番号８６の可変軽鎖配列；（ｃ）配列番号１０１の可変重鎖配列及び配列番号８７の可変軽鎖配列；（ｄ）配列番号１０２の可変重鎖配列及び配列番号８８の可変軽鎖配列；（ｅ）配列番号１０３の可変重鎖配列及び配列番号８９の可変軽鎖配列；（ｆ）配列番号１０４の可変重鎖配列及び配列番号９０の可変軽鎖配列；（ｇ）配列番号１０５の可変重鎖配列及び配列番号９１の可変軽鎖配列；（ｈ）配列番号１０６の可変重鎖配列及び配列番号９２の可変軽鎖配列；（ｉ）配列番号１０７の可変重鎖配列及び配列番号９３の可変軽鎖配列；（ｊ）配列番号１０８の可変重鎖配列及び配列番号９４の可変軽鎖配列；（ｋ）配列番号１０９の可変重鎖配列及び配列番号９５の可変軽鎖配列；（ｌ）配列番号１１０の可変重鎖配列及び配列番号９６の可変軽鎖配列；（ｍ）配列番号１１１の可変重鎖配列及び配列番号９７の可変軽鎖配列；若しくは（ｎ）配列番号１１２の可変重鎖配列及び配列番号９８の可変軽鎖配列を含む。
【００３８】
抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体であり、上記に記載される少なくとも１つの抗体を交差ブロックするか又はそれによって交差ブロックされる、尿失禁を治療する際に又は本明細書において記載される方法において使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストも開示される。
【００３９】
別の実施形態では、尿失禁を治療する際に又は本明細書において記載される方法において使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、Ｆｃ領域の突然変異を通して改変されたエフェクター機能を有する抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体であり得る。
【００４０】
尿失禁を治療する際に又は本明細書において記載される方法において使用するための抗体の例は、ｐＢＷ５２２又はｐＢＷ５２４（それぞれ委託番号ＤＳＭ２２８７３及びＤＳＭ２２８７４の下で２００９年８月１８日にＤＳＭＺ，Ｉｎｈｏｆｆｅｎｓｔｒ．７Ｂ，Ｄ−３８１２４  Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ，Ｇｅｒｍａｎｙに委託）によってコードされる抗ＡｃｔＲＩＩ抗体である。
【００４１】
さらに、尿失禁又は腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁及び反射性尿失禁のようなその特定の形態を治療及び／又は予防するためのビマグルマブの使用であって、尿失禁は、脆弱化又は損傷した骨盤筋に起因する骨盤底障害によって引き起こされる、使用が開示される。骨盤筋は、肛門挙筋の筋肉、球海綿体筋の筋肉又は外尿道括約筋であり得、筋脆弱化又は筋損傷は、出産又は閉経の影響によって引き起こされる。
【００４２】
本明細書において記載される実用的な実施例は、二重傷害出産シミュレーションラットモデル（Ｈａｉ−Ｈｏｎｇ  Ｊｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｕａｌ  ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  ｃｈｉｌｄｂｉｒｔｈ  ｉｎｊｕｒｉｅｓ  ｒｅｓｕｌｔ  ｉｎ  ｓｌｏｗｅｄ  ｒｅｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｕｄｅｎｄａｌ  ｎｅｒｖｅ  ａｎｄ  ｕｒｅｔｈｒａｌ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ；Ｎｅｕｒｏｕｒｏｌ  Ｕｒｏｄｙｎ．２００９；２８（３）：２２９−２３５）においてビマグルマブを使用することにより、腹圧性尿失禁に対するＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストの想定される有益な効果を試験し、証明し得ることを説明する。本明細書において記載される実用的な実施例は、ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストに基づくヒトにおける腹圧性尿失禁又は切迫性尿失禁を治療するための新たな方法の開発の根拠を提供する。
【００４３】
定義
本開示がより容易に理解されるために、ある用語について最初に定義する。さらなる定義は、詳細な説明の全体にわたって記載される。
【００４４】
用語「含む」は、「包含する」を意味し、例えば、Ｘを「含む」組成物は、排他的にＸからなり得るか又は追加のもの、例えばＸ＋Ｙを包含し得る。
【００４５】
数値ｘに関しての用語「約」は、例えば、ｘ±１０％を意味する。
【００４６】
以下は、ＡｃｔＲＩＩ結合分子、より好ましくはＡｃｔＲＩＩに対するアンタゴニスト抗体、例えばビマグルマブによる治療の考え得る効果を評価するための考え得る前臨床治療措置を例証する。
【００４７】
治療は、雌のラットにおいて、陰部神経挫滅（ＰＮＣ）又は膣拡張（ＶＤ）のいずれかのみよりも重度で長く続く損傷を引き起こすＰＮＣ及びＶＤからなる、尿失禁に一般に使用される実験モデルである二重傷害出産シミュレーションラットモデル（例えば、Ｈａｉ−Ｈｏｎｇ  Ｊｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｕａｌ  ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  ｃｈｉｌｄｂｉｒｔｈ  ｉｎｊｕｒｉｅｓ  ｒｅｓｕｌｔ  ｉｎ  ｓｌｏｗｅｄ  ｒｅｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｕｄｅｎｄａｌ  ｎｅｒｖｅ  ａｎｄ  ｕｒｅｔｈｒａｌ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ；Ｎｅｕｒｏｕｒｏｌ  Ｕｒｏｄｙｎ．２００９；２８（３）：２２９−２３５；Ｓｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  Ｈｉｓｔａｍｉｎｅ  ａｎｄ  Ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ａｆｔｅｒ  Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｃｈｉｌｄｂｉｒｔｈ  Ｉｎｊｕｒｙ  Ｉｍｐｒｏｖｅｓ  Ｓｔｒｅｓｓ  Ｕｒｉｎａｒｙ；Ｎｅｕｒｏｕｒｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｕｒｏｄｙｎａｍｉｃｓ  ３５：７０３−７１０（２０１６）を使用して、尿失禁を治療する際に使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体抗体についての洞察及び想定される効果を説明することによって例証される。当業者は、他の種、特にヒトに適した実験又は投薬計画を準備する方法を知っている。
【００４８】
用語「ＡｃｔＲＩＩＡ」及び「ＡｃｔＲＩＩＢ」は、アクチビン受容体を指す。アクチビンは、少なくとも２つのＩ型（Ｉ及びＩＢ）並びに２つのＩＩ型（ＩＩＡ及びＩＩＢ、別名ＡＣＶＲ２Ａ及びＡＣＶＲ２Ｂ）受容体を含む受容体セリンキナーゼのヘテロ二量体複合体を通してシグナル伝達する。これらの受容体は、すべて膜貫通タンパク質であり、システインリッチ領域を有するリガンド結合細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン及びセリン／トレオニン特異性を有することが予測される細胞質ドメインから構成される。Ｉ型受容体は、シグナル伝達に不可欠であるが、ＩＩ型受容体は、リガンドへの結合及びＩ型受容体の発現／動員に必要とされる。Ｉ型及びＩＩ型受容体は、リガンド結合後に安定した複合体を形成し、ＩＩ型受容体によるＩ型受容体のリン酸化をもたらす。アクチビン受容体ＩＩ  Ｂ（ＡｃｔＲＩＩＢ）は、ミオスタチンに対する受容体である。アクチビン受容体ＩＩ  Ａ（Ａｃｔ  ＲＩＩＡ）もミオスタチンに対する受容体である。用語ＡｃｔＲＩＩＢ又はＡｃｔ  ＩＩＢ受容体は、配列番号１８１（ＡＡＣ６４５１５．１、ＧＩ：３７６９４４３）において定義されるヒトＡｃｔＲＩＩＢを指す。研究グレードのポリクローナル及びモノクローナル抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体は、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（登録商標），ＭＮ，ＵＳＡによって作られたものなど、当技術分野において知られている。当然のことながら、抗体は、他の種由来のＡｃｔＲＩＩＢに対して産生し、それらの種における病的な状態を治療するために使用することができ得る。
【００４９】
「ＡｃｔＲＩＩ結合分子」により、単独で又は他の分子と関連してヒトＡｃｔＲＩＩ受容体ＡｃｔＲＩＩ  Ａ及び／又はＡｃｔＲＩＩＢに結合することができる任意の分子を意味する。結合反応は、例えば、特異性が無関係であるが、理想的には同じアイソタイプの抗体、例えば抗ＣＤ２５抗体が使用されるネガティブコントロール試験を基準とした、ミオスタチンへのＡｃｔＲＩＩ受容体結合の阻害を決定するための結合アッセイ、競合アッセイ若しくはバイオアッセイ又は任意の種類の結合アッセイを含む標準的な方法（定性的アッセイ）によって示され得る。ＡｃｔＲＩＩ受容体結合分子の非限定的な例は、受容体に結合するように設計され、且つ／又は受容体に結合しやすいアプタマー又は他の核酸分子などの小分子、リガンドデコイ並びにＢ細胞又はハイブリドーマによって産生されるＡｃｔＲＩＩ受容体に対する抗体及びキメラ、ＣＤＲ移植若しくはヒト抗体又は任意のその断片、例えばＦ（ａｂ’）２及びＦａｂ断片並びに単鎖又は単一ドメイン抗体を含む。好ましくは、ＡｃｔＲＩＩ受容体結合分子は、ＡｃｔＲＩＩ受容体への天然のリガンドの結合をアンタゴナイズする（例えば、低下させる、阻害する、減少させる、遅延させる）。開示される方法、投与計画、キット、プロセス及び使用についてのいくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢ受容体結合分子が用いられる。
【００５０】
「シグナル伝達活性」は、受容体への増殖因子の結合などのタンパク質間相互作用によって通常開始され、ある細胞のある部分からある細胞の別の部分へのシグナルの伝達をもたらす生化学的因果関係を指す。一般に、伝達は、一連の反応において、１つ以上のタンパク質上の１つ以上のチロシン、セリン又はトレオニン残基の特異的なリン酸化を伴い、シグナル伝達を引き起こす。最後から二番目のプロセスは、典型的に、核のイベントを含み、遺伝子発現における変化をもたらす。
【００５１】
本明細書において言及される用語「抗体」は、抗体全体及びその任意の抗原結合断片（すなわち「抗原結合性部分」）又は単鎖を含む。天然に存在する「抗体」は、ジスルフィド結合によって相互接続された少なくとも２つの重（Ｈ）鎖及び２つの軽（Ｌ）鎖を含む糖タンパク質である。それぞれの重鎖は、重鎖可変領域（ＶＨと本明細書において略される）及び重鎖定常領域からできている。重鎖定常領域は、３つのドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３からできている。それぞれの軽鎖は、軽鎖可変領域（ＶＬと本明細書において略される）及び軽鎖定常領域からできている。軽鎖定常領域は、１つのドメイン、ＣＬからできている。ＶＨ領域及びＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と称される、より保存された領域が点在する相補性決定領域（ＣＤＲ）と称される超可変性の領域にさらに細分することができる。それぞれのＶＨ及びＶＬは、以下の順でアミノ末端からカルボキシ末端に配置される３つのＣＤＲ及び４つのＦＲから構成される：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４。重鎖及び軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含有する。抗体の定常領域は、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）及び古典的補体系の第１の構成成分（Ｃｌｑ）を含む宿主組織又は宿主因子への免疫グロブリンの結合を媒介し得る。
【００５２】
本明細書において使用される抗体の「抗原結合性部分」（又は単に「抗原部分」）という用語は、完全長又は抗原（例えば、ＡｃｔＲＩＩＢの一部分）に特異的に結合する能力を保持する抗体の１つ以上の断片を指す。抗体の抗原結合性の機能は、完全長抗体の断片によって実行され得ることが示された。抗体の「抗原結合性部分」という用語の範囲内に包含される結合断片の例は、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１ドメインからなる一価の断片であるＦａｂ断片；ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された、それぞれ同じ抗原に結合する２つのＦａｂ断片を含む二価の断片であるＦ（ａｂ）２断片；ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；抗体の単一のアームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片；ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９  Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６）；並びに単離相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。
【００５３】
さらに、Ｆｖ断片の２つのドメイン、ＶＬ及びＶＨは、別々の遺伝子によってコードされるが、それらは、ＶＬ及びＶＨ領域がペアになり、一価の分子（単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られている。例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；及びＨｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５：５８７９−５８８３を参照されたい）を形成する単一のタンパク質鎖としてそれらが作られるのを可能にする合成リンカーによる組換え方法を使用してつなぐことができる。そのような単鎖抗体も抗体の「抗原結合性領域」という用語の範囲内に包含されるように意図される。これらの抗体断片は、当業者に知られている従来の技術を使用して得られ、断片は、インタクト抗体と同じように実用性についてスクリーニングされる。
【００５４】
用語「交差ブロックする」、「交差ブロックされた」及び「交差ブロックすること」は、抗体又は他の結合剤が、標準的な競合的結合アッセイにおいて、ＡｃｔＲＩＩＢ、特にリガンド結合ドメインへの他の抗体又は結合剤の結合に干渉する能力を意味するために区別なく本明細書において使用される。
【００５５】
本明細書において使用される用語「モノクローナル抗体」は、単一分子組成の抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対する単一の結合特異性及び親和性を示す。
【００５６】
本明細書において使用される用語「ヒト抗体」は、フレームワーク領域及びＣＤＲ領域の両方がヒト起源の配列に由来する可変領域を有する抗体を含むことが意図される。さらに、抗体が定常領域を含有する場合、定常領域も、そのようなヒト配列、例えばヒト生殖細胞系列配列若しくはヒト生殖細胞系列配列の突然変異バージョン又は例えばＫｎａｐｐｉｋ，ｅｔ  ａｌ．（２０００．Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  ２９６，５７−８６）において記載されるヒトフレームワーク配列分析に由来するコンセンサスフレームワーク配列を含有する抗体に由来する。本開示のヒト抗体は、ヒト配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、インビトロにおけるランダム突然変異誘発若しくは部位特異的突然変異誘発又はインビボにおける体細胞変異によって導入された突然変異）を含み得る。しかしながら、本明細書において使用される用語「ヒト抗体」は、マウスなどの他の哺乳動物種の生殖細胞系に由来するＣＤＲ配列が、ヒトフレームワーク配列上に移植された抗体を含むことを意図されない。
【００５７】
ヒトモノクローナル抗体は、不死化細胞に融合された、ヒト重鎖導入遺伝子及び軽鎖導入遺伝子を含むゲノムを有する、トランスジェニック非ヒト動物、例えばトランスジェニックマウスから得られるＢ細胞を含むハイブリドーマによって産生される。
【００５８】
本明細書において使用される用語「組換えヒト抗体」は、ヒト免疫グロブリン遺伝子についてトランスジェニックな若しくは染色体を導入した動物（例えば、マウス）又はそれから調製されたハイブリドーマから単離される抗体、ヒト抗体を発現するように形質転換された宿主細胞から、例えばトランスフェクトーマから単離される抗体、組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリーから単離される抗体及びヒト免疫グロブリン遺伝子のすべて又は一部分の配列を他のＤＮＡ配列に接合することを伴う任意の他の手段によって調製、発現、作製又は単離される抗体など、組換え手段によって調製、発現、作製又は単離されるすべてのヒト抗体を含む。そのような組換えヒト抗体は、フレームワーク領域及びＣＤＲ領域がヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する。ある実施形態では、しかしながら、そのような組換えヒト抗体は、インビトロ突然変異誘発（又はヒトＩｇ配列についてトランスジェニックである動物が使用される場合、インビボ体細胞突然変異誘発）にかけることができ、したがって、組換え抗体のＶＨ及びＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖細胞系列ＶＨ及びＶＬ配列に由来し、それに関係するが、インビボにおいてヒト抗体生殖細胞系列レパートリー内に天然に存在しないことがあり得る配列である。
【００５９】
本明細書において使用されるように、「アイソタイプ」は、重鎖定常領域遺伝子によって提供される抗体のクラス（例えば、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＧ１又はＩｇＧ２などのＩｇＧ）を指す。
【００６０】
本明細書において使用されるように、「ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドに結合する」抗体は、約１００ｎＭ以下、約１０ｎＭ以下又は約１ｎＭ以下のＫＤでヒトＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドに結合する抗体を指すことが意図される。「ＡｃｔＲＩＩＢ以外の抗原と交差反応する」抗体は、約１０×１０−９Ｍ以下、約５×１０−９Ｍ以下又は約２×１０−９Ｍ以下のＫＤでその抗原に結合する抗体を指すことが意図される。「特定の抗原と交差反応しない」抗体は、約１．５×１０−８Ｍ以上のＫＤ又は約５〜１０×１０−８Ｍ若しくは約１×１０−７Ｍ以上のＫＤでその抗原に結合する抗体を指すことが意図される。ある実施形態では、抗原と交差反応しないそのような抗体は、標準的な結合アッセイにおいてこれらのタンパク質に対して本質的に検出できない結合を示す。ＫＤは、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）システムなどのバイオセンサーシステム又は溶液平衡滴定を使用して決定され得る。
【００６１】
本明細書において使用されるように、用語「アンタゴニスト抗体」は、ミオスタチンの又はアクチビン若しくはＧＤＦ−１１などの他のＡｃｔＲＩＩＢリガンドの存在下においてＡｃｔＲＩＩＢ誘発性シグナル伝達活性を阻害する抗体及び／又はミオスタチン又はアクチビン若しくはＧＤＦ−１１などの他のＡｃｔＲＩＩＡリガンドの存在下においてＡｃｔＲＩＩＡ誘発性シグナル伝達活性を阻害する抗体を指すことが意図される。これを検出するためのアッセイの例は、ミオスタチン誘発性シグナル伝達の阻害（例えば、Ｓｍａｄ依存性レポーター遺伝子アッセイによる）、ミオスタチン誘発性Ｓｍａｄリン酸化の阻害（Ｐ−Ｓｍａｄ  ＥＬＩＳＡ）及び骨格筋細胞分化のミオスタチン誘発性阻害の阻害（例えば、クレアチンキナーゼアッセイによる）を含む。
【００６２】
いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドに結合する抗体は、約１０ｎＭ以下、約１ｎＭ以下又は約１００ｐＭ以下のＩＣ５０において、Ｓｍａｄ依存性レポーター遺伝子アッセイで測定されるようにミオスタチン誘発性シグナル伝達を阻害する。
【００６３】
本明細書において使用される用語「ＫＤ」は、解離定数を指すことが意図され、これは、Ｋｄ対Ｋａの比から得られ（すなわちＫｄ／Ｋａ）、モル濃度（Ｍ）として表現される。抗体についてのＫＤ値は、当技術分野において十分に確立された方法を使用して決定することができる。抗体のＫＤを決定する方法は、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）のバイオセンサーシステムなどの表面プラズモン共鳴法又は溶液平衡滴定（ＳＥＴ）を使用することによるものである（Ｆｒｉｇｕｅｔ  Ｂ  ｅｔ  ａｌ．（１９８５）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ；７７（２）：３０５−３１９及びＨａｎｅｌ  Ｃ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ；３３９（１）：１８２−１８４を参照されたい）。
【００６４】
本明細書において使用されるように、用語「ＡＤＣＣ」又は「抗体依存性細胞傷害」活性は、ヒトＢ細胞排除活性を指す。ＡＤＣＣ活性は、当技術分野において知られているヒトＢ細胞排除アッセイによって測定することができる。
【００６５】
本明細書において使用されるように、用語「最適化された」は、ヌクレオチド配列が、産生細胞又は生物体、通常真核細胞、例えばピキア属（Ｐｉｃｈｉａ）の細胞、トリコデルマ属（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ）の細胞、チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）又はヒト細胞において好ましいコドンを使用してアミノ酸配列をコードするように改変されていることを意味する。最適化されたヌクレオチド配列は、「親」配列としても知られている出発ヌクレオチド配列によってもともとコードされるアミノ酸配列を完全に又はできるだけ保持するように操作される。本明細書における最適化された配列は、ＣＨＯ哺乳動物細胞において好ましいコドンを有するように操作されているが、他の真核細胞におけるこれらの配列の発現の最適化も本明細書において想定される。最適化されたヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列も、最適化されたアミノ酸配列と呼ばれる。
【００６６】
本明細書において使用されるように、本発明の化合物の「治療有効量」という用語は、対象の生物学的又は医学的応答を誘起するであろう、例えば症状を寛解させるか、状態を軽減するか、疾患進行を遅らせるか若しくは遅延させるか、又は疾患を予防するであろうなどの本発明の化合物の量を指す。非限定的な一実施形態では、用語「治療有効量」は、対象に投与された場合、尿失禁と関連する状態を少なくとも部分的に軽減し、阻害し、予防し、且つ／又は寛解させるのに有効である本発明の化合物の量を指す。尿失禁の症状／状態は、（ｉ）突然の咳、くしゃみ、笑い、重いものを持ち上げること及び運動後の失禁、又は（ｉｉ）止めることができない、排尿したいという切迫感を引き起こす膀胱の筋肉壁の不随意性の収縮、又は（ｉｉｉ）膀胱が、身体が作っている量と同程度の量の尿を保持することができず、且つ／若しくは膀胱を完全に空にすることができず、少量の尿漏れを引き起こす（患者は、尿道からの尿の「滴下」を常に経験している）といったものである。
【００６７】
本明細書において使用されるように、尿失禁という用語は、２４時間ごとの失禁エピソード、２４時間ごとの排尿の数、失禁当たりに排泄される容量、２４時間ごとの夜間多尿エピソード又は膀胱状態の患者による評価における改善のようなすべての程度又は敏感性の膀胱制御の損失を指す。重症度は、咳又はくしゃみをした場合に時々尿を漏出するといったものから、排尿したいという突然の切迫感を有するといったものまで及ぶ。それは、膀胱の内部の圧力が尿道の抵抗力よりも大きい場合に生じる。尿失禁は、通常、膀胱の垂れ下がり、肛門挙筋及び球海綿体筋を含む骨盤筋の伸び並びに尿道括約筋の脆弱化による、尿道を調節する能力における減少に起因することが報告されている。いくつかのタイプの尿失禁がある。腹圧性尿失禁（ＳＵＩ）は、身体の動きにより膀胱に対して圧力が突然かかる場合に生じる。切迫性尿失禁（ＵＵＩ）は、膀胱の筋肉の敏感性により、トイレに間に合うまで尿を保持することができない場合、及び膀胱が、膀胱癌、膀胱炎症、膀胱下尿道閉塞、膀胱結石又は膀胱感染症を含む医学的状態などの極度の刺激により尿を漏出する場合に生じる。心因性尿失禁は、認知症により生じる。神経因性の尿失禁（ＮＵＩ）は、泌尿器系を支配する神経に対する損傷により生じる。緊張性尿失禁は、若い及び中年の女性における膀胱制御障害の最も一般的なタイプである。腹圧性尿失禁は、膀胱が身体活動中に尿を漏出するときに生じる。それは、咳をしているか、運動を行っているか又は重いものを持ち上げているときに起こり得る。病因は、妊娠又は閉経である。男性は、良性前立腺過形成又は前立腺癌外科治療後に緊張性尿失禁を発症し得る。失禁当たりに排泄される尿の量は、数滴〜１００ｍＬ以上で変動し得る。ある場合には、それは、出産の影響に関係する。それは、閉経のときあたりにも始まり得る。反射性尿失禁は、排尿筋収縮及び括約筋弛緩についての神経学的な制御メカニズムの機能障害を伴う。ＲＵＩは、脳卒中、パーキンソン病、脳腫瘍、脊髄損傷又は多発性硬化症の結果として生じることがある。ＲＵＩ患者は、排泄の必要を自覚することなく断続的な排尿を経験する。
【００６８】
腹圧性尿失禁は、切迫性尿失禁（ＵＵＩ）と同時に存在することがある。切迫性尿失禁は、過活動又は過敏性膀胱として知られている症候群の一部であり、これは、切迫性尿失禁を伴うか又は伴わない頻発及び／又は切迫の症状を含む。失禁を有する患者の７５パーセントは、高齢の女性である。腹圧性尿失禁（ＳＵＩ）は、腹部の圧力を増加させる活動（例えば、咳、くしゃみ、身体運動）中の尿の不随意性の漏出であるが、３５パーセント以下の成人女性がかかっている（Ｌｕｂｅｒ  ＫＭ．Ｔｈｅ  ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ，ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ，ａｎｄ  ｒｉｓｋ  ｆａｃｔｏｒｓ  ｆｏｒ  ｓｔｒｅｓｓ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ．Ｒｅｖ  Ｕｒｏｌ（ｓｕｐｐｌ．）２００４；６：Ｓ３）。
【００６９】
本明細書において使用されるように、任意の疾患又は障害を「治療する」、「治療すること」又は「治療」という用語は、一実施形態において、疾患又は障害を寛解させる（すなわち疾患又はその臨床症状の少なくとも１つの発症を遅らせるか、又は抑えるか、又は低下させる）ことを指す。別の実施形態では、「治療する」、「治療すること」又は「治療」は、患者によって識別可能でなくてもよいものを含む少なくとも１つの身体的なパラメーターを軽減するか又は寛解させることを指す。さらに別の実施形態では、「治療する」、「治療すること」又は「治療」は、身体的に（例えば、識別可能な症状の安定）、生理学的に（例えば、身体的なパラメーターの安定）又はその両方で疾患又は障害を調整することを指す。さらに別の実施形態では、「治療する」、「治療すること」又は「治療」は、疾患又は障害の発病、又は発症、又は進行を予防するか又は遅延させることを指す。
【００７０】
本明細書において使用されるように、対象は、そのような対象がそのような治療から生物学的に、医学的に又は生活の質において利益を得る場合、治療「を必要としている」。
【発明を実施するための形態】
【００７１】
ＡｃｔＲＩＩ受容体に対して特異的な抗体、例えばビマグルマブは、これらの受容体を通したシグナル伝達を減少させ、尿失禁の予防及び／又は治療をもたらし得ることが想定される。腹圧性尿失禁（ＳＵＩ）は、世界的に有病率が増加しており、病気にかかっている個人における生活の質に対する影響は、非常に有害である。女性における出産時外傷、閉経及び加齢に起因する骨盤底筋系の脆弱化は、尿道の支持の不足をもたらし、緊張性尿失禁をもたらすことがあり、神経支配の変化及びフィードバックメカニズムは、切迫尿失禁に至ることがある。緊張性尿失禁を治療するための有効な薬学的介入は、限られている。
【００７２】
そのため、一態様では、本開示は、尿失禁を治療する際に使用するためのＡｃｔＲＩＩ結合分子、例えばビマグルマブ又は前記抗体の抗原結合性部分を含む機能的タンパク質を提供する。好ましくは、ＡｃｔＲＩＩ抗体は、ヒトＡｃｔＲＩＩＢタンパク質及びヒトＡｃｔＲＩＩＡタンパク質に結合する。ヒトＡｃｔＲＩＩＢのポリペプチド配列は、配列番号１８１（ＡＡＣ６４５１５．１、ＧＩ：３７６９４４３）において詳述される。ヒトＡｃｔＲＩＩＡタンパク質は、Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号ＡＡＨ６７４１７．１（ＮＰ＿００１６０７．１、ＧＩ：４５０１８９７）を有する。一実施形態では、尿失禁を治療する際に使用するための抗体又は機能的タンパク質は、哺乳動物に由来し、ヒト又はラクダ科動物などの起源を有する。したがって、尿失禁を治療する際に使用するための抗体は、キメラ、ヒト又はヒト化抗体であり得る。特定の実施形態では、尿失禁を治療する際に使用するための抗ＡｃｔＲＩＩ抗体は、ヒト標的タンパク質ＡｃｔＲＩＩＢに対して特異的であり、ＡｃｔＲＩＩＢ及びＡｃｔＲＩＩＡ又はその断片に結合する抗原結合性領域を有するヒトモノクローナル抗体であるとして特徴付けられる。
【００７３】
一実施形態では、尿失禁を治療する際に使用するための抗体は、アゴニスト活性がないか又は低いＡｃｔＲＩＩアンタゴニストである。別の実施形態では、抗体又はその機能的断片は、標的タンパク質ＡｃｔＲＩＩに結合し、基底レベルまでＡｃｔＲＩＩへのミオスタチンの結合を減少させる。この実施形態のさらなる態様では、本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用するための抗体又はその機能的断片は、ミオスタチンがＡｃｔＲＩＩＢに結合することを完全に予防する。さらなる実施形態では、本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を致傷する際に使用するための抗体又はその機能的断片は、Ｓｍａｄ活性化を阻害する。さらなる実施形態では、本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用するための抗体又はその機能的断片は、Ｓｍａｄ依存性経路を介しての骨格の分化のアクチビン受容体ＩＩＢ型媒介性ミオスタチン誘発性の阻害を阻害する。
【００７４】
結合は、抗体によるアンタゴニズム又はアゴニズムのいずれかである活性を測定するために使用することができる１つ以上のアッセイによって決定され得る。好ましくは、アッセイは、ＥＬＩＳＡによるＡｃｔＲＩＩＢへのミオスタチン結合の阻害、ミオスタチン誘発性シグナル伝達の阻害（例えば、Ｓｍａｄ依存性レポーター遺伝子アッセイによる）、ミオスタチン誘発性Ｓｍａｄリン酸化の阻害（Ｐ−Ｓｍａｄ  ＥＬＩＳＡ）及び骨格筋細胞分化のミオスタチン誘発性阻害の阻害（例えば、クレアチンキナーゼアッセイによる）を含む、ＡｃｔＲＩＩＢに対する抗体の効果の少なくとも１つを測定する。
【００７５】
一実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢのミオスタチン結合領域（すなわちリガンド結合ドメイン）に特異的に結合する抗体を含む組成物は、それを必要としている患者において、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられ得るか又は尿失禁を治療する際に使用され得る。このリガンド結合ドメインは、配列番号１８１のアミノ酸１９〜１３４からなり、本明細書において配列番号１８２に指定した。リガンド結合ドメインは、いくつかの下記に記載されるエピトープを含む。
【００７６】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、約１００ｎＭ以下、約１０ｎＭ以下、約１ｎＭ以下のＫＤでＡｃｔＲＩＩＢに結合する。好ましくは、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、１００ｐＭ以下（すなわち約１００ｐＭ、約５０ｐＭ、約１０ｐＭ、約２ｐＭ、約１ｐＭ又はそれを超える）の親和性でＡｃｔＲＩＩＢに結合する。一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、約１〜約１０ｐＭの親和性でＡｃｔＲＩＩＢに結合する。
【００７７】
別の実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、ＡｃｔＲＩＩＡと交差反応し、等しい親和性又はＡｃｔＲＩＩＡに結合するよりも約１、２、３、４若しくは５倍の親和性、より好ましくは約１０倍、さらにより好ましくは約２０、３０、４０若しくは５０倍、さらにより好ましくは約１００倍の親和性でＡｃｔＲＩＩＢに結合する。
【００７８】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、１００ｐＭ以上（すなわち約２５０ｐＭ、約５００ｐＭ、約１ｎＭ、約５ｎＭ又はそれを超える）の親和性でＡｃｔＲＩＩＡに結合する。
【００７９】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、ＩｇＧ２アイソタイプである。
【００８０】
別の実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、ＩｇＧ１アイソタイプである。さらなる実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、ＩｇＧ１アイソタイプであり、Ｆｃ領域の突然変異を通して改変されたエフェクター機能を有する。前記改変されたエフェクター機能は、ＡＤＣＣ及びＣＤＣ活性の低下であり得る。一実施形態では、前記改変されたエフェクター機能は、ＡＤＣＣ及びＣＤＣ活性の静止である。
【００８１】
別の関係する実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）活性もＣＤＣ活性も有していない完全ヒト又はヒト化ＩｇＧ１抗体であり、配列番号１８１のアミノ酸１９〜１３４からなるＡｃｔＲＩＩＢの領域に結合する。
【００８２】
別の関係する実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）活性又はＣＤＣ活性が低下した完全ヒト又はヒト化ＩｇＧ１抗体であり、配列番号１８１のアミノ酸１９〜１３４からなるＡｃｔＲＩＩＢの領域に結合する。
【００８３】
本開示は、尿失禁を予防及び／又は治療する際に使用するためのヒト又はヒト化抗ＡｃｔＲＩＩ抗体を含む組成物の使用にも関する。
【００８４】
ある実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、特定の重鎖及び軽鎖配列に由来し、且つ／又は特定のアミノ酸配列を含むＣＤＲ領域などの特定の構造的な特徴を含む。本開示は、単離ＡｃｔＲＩＩＢ抗体、そのような抗体を作るための方法、そのような抗体を含む免疫複合体及び多価又は多重特異性分子並びに抗体、免疫コンジュゲート又は二重特異性分子を含有する医薬組成物を提供する。
【００８５】
別の関係する実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、ビマグルマブである。ビマグルマブは、アクチビン受容体ＩＩＢ型（ＡｃｔＲＩＩ）に、その天然のリガンドであるミオスタチン又はアクチビンよりも大きい親和性で競合的に結合するように開発された、ＢＹＭ３３８又はＭＯＲ０８１５９としても知られているモノクローナルヒト抗体のＩＮＮ（国際一般名）である。ビマグルマブは、国際公開第２０１０／１２５００３号パンフレットにおいて開示されている。国際公開第２０１０／１２５３００３号パンフレットにおいて開示されるビマグルマブ配列は、表１に掲載される。
【００８６】
別の関係する実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、抗体ＭＯＲ０８２１３である。ＭＯＲ０８２１３は、アクチビン受容体ＩＩＢ型（ＡｃｔＲＩＩ）に、その天然のリガンドであるミオスタチン又はアクチビンよりも大きい親和性で競合的に結合するように開発されたモノクローナル抗体である。ＭＯＲ０８２１３は、国際公開第２０１０／１２５００３号パンフレットにおいて開示されている。国際公開第２０１０／１２５３００３号パンフレットにおいて開示されるＭＯＲ０８２１３配列は、表２に掲載される。
【００８７】
さらに、本明細書において記載される本発明の治療方法及び使用は、骨盤底筋訓練運動と組み合わせることができる。
【００８８】
【表１】
2020525421.tif 000002
【００８９】
ビマグルマブのＶＬ及びＶＨコード領域を含む、ｐＢＷ５２４と命名されたプラスミドは、委託番号ＤＳＭ２２８７４の下で２００９年８月１８日にＤＳＭＺ，Ｉｎｈｏｆｆｅｎｓｔｒ．７Ｂ，Ｄ−３８１２４  Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ，Ｇｅｒｍａｎｙに委託された。
【００９０】
【表２】
2020525421.tif 000003
【００９１】
ＭＯＲ０８２１３のＶＬ及びＶＨコード領域を含む、ｐＢＷ５２２と命名されたプラスミドは、委託番号ＤＳＭ２２８７３の下で２００９年８月１８日にＤＳＭＺ，Ｉｎｈｏｆｆｅｎｓｔｒ．７Ｂ，Ｄ−３８１２４  Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ，Ｇｅｒｍａｎｙに委託された。
【００９２】
代替の実施形態では、本開示は、以下の態様に関する：
１．脆弱化又は損傷した骨盤筋に起因する骨盤底障害と関連するか又はそれによって引き起こされる尿失禁を含む尿失禁を治療及び／又は予防する際に使用されるＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト。骨盤筋は、肛門挙筋の筋肉、球海綿体筋の筋肉又は外尿道括約筋であり得、筋脆弱化又は筋損傷は、出産又は閉経の影響によって引き起こされる。
【００９３】
２．ＡｃｔＲＩＩアンタゴニストは、約３〜１０ｍｇ／ｋｇの用量でそれを必要としている患者に投与される、態様１に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト。
【００９４】
３．前記ミオスタチンアンタゴニストは、約３又は約１０ｍｇ／ｋｇ体重の用量で投与される、態様２に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト。代わりに、ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、約３、４、５、６、７、８、９又は約１０ｍｇ／ｋｇ体重の用量で投与される。
【００９５】
４．前記ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、静脈内又は皮下に投与される、態様１〜３に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト。
【００９６】
５．前記ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストアンタゴニストは、４週間ごとに投与される、態様１〜４のいずれかに記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト。代わりに、ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、皮下に毎週投与することができる。代わりに、ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、８週間ごとに投与することができる。
【００９７】
６．前記ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、少なくとも３か月にわたって投与される、態様１〜５のいずれかに記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト。
【００９８】
７．前記ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、１２か月以下にわたって投与される、態様１〜６のいずれかに記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト。好ましくは、ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストアンタゴニストは、少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１若しくは１２か月又はそれ未満にわたって投与される。
【００９９】
８．尿失禁を治療及び／又は予防するための方法であって、尿失禁を有するか又は尿失禁を発症する危険性のある対象に有効量のＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストを投与することを含む方法。
【０１００】
９．尿失禁を治療するための方法であって、尿失禁の症状を示す／それに罹患している対象に有効量のＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストを投与することを含む方法。
【０１０１】
１０．約３〜１０ｍｇ／ｋｇの用量でそれを必要としている患者にＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストを投与することを含む、態様８又は９に記載の方法。
【０１０２】
１１．約３又は約１０ｍｇ／ｋｇ体重の用量でそれを必要としている患者にＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストを投与することを含む、態様８又は９に記載の方法。
【０１０３】
１２．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストを静脈内又は皮下に投与することを含む、態様８又は９に記載の方法。
【０１０４】
１３．４週間ごとにＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストを投与することを含む、態様８〜１０のいずれか一項に記載の方法。代わりに、ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、態様１３に記載の方法において皮下に毎週投与することができる。
【０１０５】
１４．少なくとも３か月にわたってＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストを投与することを含む、態様８〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【０１０６】
１５．１２か月以下にわたってＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストを投与することを含む、態様１４に記載の方法。
【０１０７】
１６．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分である、態様１〜７のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は態様８〜１５のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０１０８】
１７．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合部分であり、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体は、ビマグルマブ又はその抗原結合性部分である、態様１〜７のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は態様８〜１５のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０１０９】
１８．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分であり、抗体は、配列番号１４６〜１５０及び１５６〜１６０からなる群から選択される少なくとも１つの配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長重鎖アミノ酸配列を含み、抗体は、配列番号１４１〜１４５及び１５１〜１５５からなる群から選択される少なくとも１つの配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長軽鎖アミノ酸配列を含む、態様１〜７のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は態様８〜１５のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０１１０】
１９．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分であり、抗体は、ｐＢＷ５２２（ＤＳＭ２２８７３）又はｐＢＷ５２４（ＤＳＭ２２８７４）によってコードされる、態様１〜７のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は態様８〜１５のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０１１１】
２０．ビマグルマブは、約３〜１０ｍｇ／ｋｇ体重の用量で４週間ごとに静脈内に投与される、態様１〜７のいずれか一項に記載の使用のためのビマグルマブ若しくはその抗原結合性部分又は態様８〜１５のいずれか一項に記載の治療の方法。ビマグルマブは、約３〜１０ｍｇ／ｋｇ体重の用量で皮下に毎週投与される、態様２０に記載の使用のためのビマグルマブ又はその抗原結合性部分。
【０１１２】
２１．尿失禁を治療及び／又は予防する際に使用するための、１５０ｍｇ／ｍｌのビマグルマブ又はその抗原結合部分を含む組成物。
【０１１３】
２２．尿失禁を治療及び／又は予防する際に使用するための、１５０ｍｇ／ｍｌのビマグルマブ又はその抗原結合部分を含む単位投薬形態。さらなる実施形態では、単位投薬形態、すなわちバイアルは、１００〜２００ｍｇ／ｍｌのビマグルマブ、好ましくは１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０，１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、２００ｍｇ／ｍｌのビマグルマブを含む。
【０１１４】
２３．尿失禁を治療及び／又は予防する際に使用するための、溶液により希釈された１つ以上のバイアルからの適切な量のビマグルマブを含む注入バッグ。溶液は、好ましくは、デキストロース溶液である。
【０１１５】
いくつかのさらなる実施形態では、本発明の方法において使用されるか又は尿失禁を治療及び／若しくは予防する際に使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又はビマグルマブなどの抗ＡｃｔＲＩＩ抗体は、約１、２、３、４、５、５、６、７、８、９、１０ｍｇ／ｋｇ体重の用量で投与される。
【０１１６】
尿失禁を治療及び／又は予防するための医薬の製造のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストが本明細書において開示される。
【０１１７】
別の関係する実施形態では、尿失禁を治療及び／又は予防するための医薬の製造のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、ビマグルマブ又はＭＯＲ０８２１３である。
【０１１８】
さらなる実施形態では、本明細書において開示される態様は、すべて他の態様のいずれかと組み合わせて使用することができる。
【０１１９】
本開示の様々な態様は、以下のサブセクションにおいてさらに詳細に記載される。様々な種のＡｃｔＲＩＩへの抗体の結合能力を評価する標準的なアッセイは、当技術分野において知られており、例えばＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット及びＲＩＡを含む。抗体の結合親和性は、Ｂｉａｃｏｒｅ分析又は溶液平衡滴定によってなど、当技術分野において知られている標準的なアッセイによっても判断することができる。Ｂｉａｃｏｒｅなどの表面プラズモン共鳴法に基づいた技術は、結合親和性の計算を可能にする結合反応速度を決定することができる。
【０１２０】
したがって、当技術分野で知られており、本明細書において記載される手法に従って決定されるこれらのＡｃｔＲＩＩの機能的な特性（例えば、生化学的、免疫化学的、細胞の、生理学的又は他の生物学的活性など）の１つ以上を「阻害する」抗体は、抗体の非存在下において（例えば、又は特異性が無関係のコントロール抗体が存在する場合に）見られるものと比べた特定の活性における統計的に有意な減少に関係することが理解されるであろう。ＡｃｔＲＩＩ活性を阻害する抗体は、測定されたパラメーターの少なくとも１０％、少なくとも５０％、８０％又は９０％、そのような統計的に有意な減少に影響を及ぼし、ある実施形態では、本開示の抗体は、ＡｃｔＲＩＩＢ機能活性の９５％、９８％又は９９％超を阻害し得る。
【０１２１】
抗体又は他の結合剤がＡｃｔＲＩＩへの別の抗体又は結合分子の結合に干渉することができる能力又は程度及びしたがってそれが本開示に従って交差ブロックすると言うことができるかどうかは、標準的な競合結合アッセイを使用して決定することができる。１つの適したアッセイは、Ｂｉａｃｏｒｅ技術の使用を伴い（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ機器（Ｂｉａｃｏｒｅ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）を使用することによる）、これは、表面プラズモン共鳴技術を使用して、相互作用の程度を測定することができる。交差ブロックを測定するための別のアッセイは、ＥＬＩＳＡベースのアプローチを使用する。さらなるアッセイは、ＦＡＣＳ分析を使用し、ＡｃｔＲＩＩＢ発現細胞への結合についての様々な抗体の競合が試験される。
【０１２２】
本開示によれば、本開示による交差ブロック抗体又は他の結合剤は、抗体又は結合剤の組み合わせ（混合物）について記録された結合が最大の理論的な結合の８０％〜０．１％（例えば、８０％〜４％）、詳細には最大の理論的な結合の７５％〜０．１％（例えば、７５％〜４％）、より詳細には２つの抗体又は結合剤の組み合わせの最大の理論的な結合（上記に定義される）の７０％〜０．１％（例えば、７０％〜４％）、より詳細には６５％〜０．１％（例えば、６５％〜４％）となるように、記載されるＢＩＡｃｏｒｅ交差ブロックアッセイにおいてＡｃｔＲＩＩＢに結合する。
【０１２３】
抗体は、試験抗体が、ポジティブコントロールウェル（すなわち、抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体及びＡｃｔＲＩＩＢが同じであるが、「試験」交差ブロック抗体がない）と比較した場合、６０％〜１００％、詳細には７０％〜１００％、より詳細には８０％〜１００％でＡｃｔＲＩＩＢへの抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体の結合の低下を引き起こすことができる場合、ＥＬＩＳＡアッセイにおいて本開示の抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体を交差ブロックすると定義される。本明細書に挙げられる交差ブロック抗体の例は、ビマグルマブ及びＭＯＲ０８２１３（国際公開第２０１０／１２５００３号パンフレットにおいて開示される）である。
【０１２４】
組換え抗体
本開示内で使用される組成物中に含まれる抗体、例えばビマグルマブなどのＡｃｔＲＩＩに対するアンタゴニスト抗体は、本明細書において記載される、単離され、構造的に特徴付けられたヒト組換え抗体を含む。本発明の組成物中に含まれる抗体のＶＨアミノ酸配列は、配列番号９９〜１１２において示される。本発明の組成物中に含まれる抗体のＶＬアミノ酸配列は、それぞれ配列番号８５〜９８において示される。本発明の組成物中に含まれる抗体の好ましい完全長重鎖アミノ酸配列の例は、配列番号１４６〜１５０及び１５６〜１６０において示される。本発明の組成物中に含まれる抗体の好ましい完全長軽鎖アミノ酸配列の例は、それぞれ配列番号１４１〜１４５及び１５１〜１５５において示される。本発明の組成物中に含まれる他の抗体は、アミノ酸欠失、挿入又は置換によって突然変異されているが、ＣＤＲ領域において、上記に記載される配列において示されるＣＤＲ領域と少なくとも６０、７０、８０、９０、９５、９７又は９９パーセントの同一性を有するアミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、それは、上記に記載される配列において示されるＣＤＲ領域と比較した場合、１、２、３、４又は５つ以下のアミノ酸をＣＤＲ領域においてアミノ酸欠失、挿入又は置換によって突然変異させた突然変異アミノ酸配列を含む。
【０１２５】
さらに、可変重鎖親ヌクレオチド配列は、配列番号１２７〜１４０において示される。可変軽鎖親ヌクレオチド配列は、配列番号１１３〜１２６において示される。哺乳動物細胞における発現のために最適化された完全長軽鎖ヌクレオチド配列は、配列番号１６１〜１６５及び１７１〜１７５において示される。哺乳動物細胞における発現のために最適化された完全長重鎖ヌクレオチド配列は、配列番号１６６〜１７０及び１７６〜１８０において示される。尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる他の抗体は、突然変異されているが、上記に記載される配列に対して少なくとも６０パーセント以上（すなわち８０、９０、９５、９７、９９又はそれを超える）の同一性を有するアミノ酸を含むか又は核酸によってコードされる。いくつかの実施形態では、それは、上記に記載される配列において示される可変領域と比較した場合、１、２、３、４又は５つ以下のアミノ酸を可変領域においてアミノ酸欠失、挿入又は置換によって突然変異させた突然変異アミノ酸配列を含む。
【０１２６】
これらの抗体のそれぞれは、同じエピトープに結合し、同じ親抗体からの子孫であるため、ＶＨ、ＶＬ、完全長軽鎖及び完全長重鎖配列（ヌクレオチド配列及びアミノ酸配列）は、本開示の他の抗ＡｃｔＲＩＩＢ結合分子を作製するために「混合し、対にする」ことができる。そのような「混合し、対にした」抗体のＡｃｔＲＩＩＢ結合は、上記に記載される結合アッセイを使用して及び例えばＥＬＩＳＡなどのよく知られている方法において試験することができる。これらの鎖を混合し、対にする場合、特定のＶＨ／ＶＬペア由来のＶＨ配列は、構造的に類似するＶＨ配列と交換されるべきである。同様に、特定の完全長重鎖／完全長軽鎖ペア由来の完全長重鎖配列は、構造的に類似する完全長重鎖配列と交換されるべきである。同様に、特定のＶＨ／ＶＬペア由来のＶＬ配列は、構造的に類似するＶＬ配列と交換されるべきである。同様に、特定の完全長重鎖／完全長軽鎖ペア由来の完全長軽鎖配列は、構造的に類似する完全長軽鎖配列と交換されるべきである。したがって、一態様では、本開示は、配列番号９９〜１１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域；及び配列番号８５〜９８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を有する組換え抗ＡｃｔＲＩＩ抗体又はその抗原結合領域を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を提供する。
【０１２７】
別の態様では、本開示は、
（ｉ）配列番号９９〜１１２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む完全長重鎖；及び配列番号８５〜９８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む完全長軽鎖を有する単離組換え抗ＡｃｔＲＩＩ抗体、又は
（ｉｉ）その抗原結合部分を含む機能的タンパク質
を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いることができるか又は尿失禁を治療する際に使用することができる組成物を提供する。
【０１２８】
別の態様では、本開示は、
（ｉ）配列番号１２７〜１４０からなる群から選択される哺乳動物の細胞における発現のために最適化されたヌクレオチド配列によってコードされる完全長重鎖及び配列番号１１３〜１２６からなる群から選択される哺乳動物の細胞における発現のために最適化されたヌクレオチド配列によってコードされる完全長軽鎖を有する単離組換え抗ＡｃｔＲＩＩ抗体、又は
（ｉｉ）その抗原結合部分を含む機能的タンパク質
を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いることができるか又は尿失禁を治療する際に使用することができる組成物を提供する。
【０１２９】
本発明の組成物中に含まれる抗体のＶＨ  ＣＤＲ１のアミノ酸配列の例は、配列番号１〜１４において示される。抗体のＶＨ  ＣＤＲ２のアミノ酸配列は、配列番号１５〜２８において示される。抗体のＶＨ  ＣＤＲ３のアミノ酸配列は、配列番号２９〜４２において示される。抗体のＶＬ  ＣＤＲ１のアミノ酸配列は、配列番号４３〜５６において示される。抗体のＶＬ  ＣＤＲ２のアミノ酸配列は、配列番号５７〜７０において示される。抗体のＶＬ  ＣＤＲ３のアミノ酸配列は、配列番号７１〜８４において示される。ＣＤＲ領域は、Ｋａｂａｔ方式（Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，１９９１  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．９１−３２４２）を使用して定められる。ＣＤＲ領域を決定する代替の方法は、Ｃｈｏｔｈｉａ（Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．１９８９，Ｎａｔｕｒｅ，３４２：８７７−８８３）によって考案された方法を使用する。Ｃｈｏｔｈｉａの定義は、構造的なループ領域の場所に基づく。しかしながら、Ｃｈｏｔｈｉａによって使用されたナンバリング方式の変更により（例えば、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｉｏｃｈｅｍ．ｕｃｌ．ａｃ．ｕｋ／〜ｍａｒｔｉｎ／ａｂｓ／ＧｅｎｅｒａｌＩｎｆｏ．ｈｔｍｌ及びｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｉｏｉｎｆ．ｏｒｇ．ｕｋ／ａｂｓ／を参照されたい）、この方式は、現在ではそれほど一般に使用されていない。ＣＤＲを定義するための他の方式が存在し、さらにこれらの２つのウェブサイトにおいて言及されている。
【０１３０】
これらの抗体のそれぞれがＡｃｔＲＩＩＢに結合することができ、抗原結合性の特異性がＣＤＲ１、２及び３領域によって主として提供されると仮定すると、ＶＨ  ＣＤＲ１、２及び３配列並びにＶＬ  ＣＤＲ１、２及び３配列は、「混合し、対にする」ことができる（すなわち異なる抗体由来のＣＤＲを混合し、対にすることができ、ＶＨ  ＣＤＲ１、２及び３並びにＶＬ  ＣＤＲ１、２及び３を含有するそれぞれの抗体は、本開示の他の抗ＡｃｔＲＩＩ結合分子を作製する。そのような「混合し、対にした」抗体のＡｃｔＲＩＩＢ結合は、上記及び実施例において記載される結合アッセイ（例えば、ＥＬＩＳＡ）を使用して試験することができる。ＶＨ  ＣＤＲ配列を混合し、対にする場合、特定のＶＨ配列由来のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及び／又はＣＤＲ３配列は、構造的に類似するＣＤＲ配列と交換されるべきである。同様に、ＶＬ  ＣＤＲ配列を混合し、対にする場合、特定のＶＬ配列由来のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及び／又はＣＤＲ３配列は、構造的に類似するＣＤＲ配列と交換されるべきである。１つ以上のＶＨ及び／又はＶＬ  ＣＤＲ領域配列を、モノクローナル抗体について本明細書において示されたＣＤＲ配列由来の構造的に類似する配列と置換することによって新規なＶＨ及びＶＬ配列を作製し得ることは、当業者に容易に明らかになるであろう。
【０１３１】
尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられ得るか又は尿失禁を治療する際に使用され得る抗ＡｃｔＲＩＩ抗体又はその抗原結合部分は、配列番号１〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１５〜２８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号２９〜４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４３〜５６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号５７〜７０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７１〜８４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を有する。
【０１３２】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、配列番号１の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１５の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号２９の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号５７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１３３】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、配列番号２の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号１６の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３０の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号５８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１３４】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、配列番号３の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１７の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３１の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号５９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１３５】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、配列番号４の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１８の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３２の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１３６】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、配列番号５の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１９の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３３の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４７の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６１の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７５の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１３７】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、配列番号６の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２０の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３４の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４８の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６２の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７６の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１３８】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、配列番号７の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２１の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３５の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４９の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６３の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７７の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１３９】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、配列番号８の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２２の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３６の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５０の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６４の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７８の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１４０】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、配列番号９の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２３の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３７の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５１の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６５の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７９の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１４１】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、配列番号１０の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２４の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３８の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５２の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６６の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８０の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１４２】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、配列番号１１の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２５の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３９の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１４３】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、配列番号１２の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２６の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号４０の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１４４】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、配列番号１３の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２７の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号４１の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１４５】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、配列番号１４の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２８の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号４２の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号７０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
【０１４６】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、（ａ）配列番号８５の可変重鎖配列及び配列番号９９の可変軽鎖配列；（ｂ）配列番号８６の可変重鎖配列及び配列番号１００の可変軽鎖配列；（ｃ）配列番号８７の可変重鎖配列及び配列番号１０１の可変軽鎖配列；（ｄ）配列番号８８の可変重鎖配列及び配列番号１０２の可変軽鎖配列；（ｅ）配列番号８９の可変重鎖配列及び配列番号１０３の可変軽鎖配列；（ｆ）配列番号９０の可変重鎖配列及び配列番号１０４の可変軽鎖配列；（ｇ）配列番号９１の可変重鎖配列及び配列番号１０５の可変軽鎖配列；（ｈ）配列番号９２の可変重鎖配列及び配列番号１０６の可変軽鎖配列；（ｉ）配列番号９３の可変重鎖配列及び配列番号１０７の可変軽鎖配列；（ｊ）配列番号９４の可変重鎖配列及び配列番号１０８の可変軽鎖配列；（ｋ）配列番号９５の可変重鎖配列及び配列番号１０９の可変軽鎖配列；（ｌ）配列番号９６の可変重鎖配列及び配列番号１１０の可変軽鎖配列；（ｍ）配列番号９７の可変重鎖配列及び配列番号１１１の可変軽鎖配列；又は（ｎ）配列番号９８の可変重鎖配列及び配列番号１１２の可変軽鎖配列を含む。
【０１４７】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、（ａ）配列番号１４６の重鎖配列及び配列番号１４１の軽鎖配列；（ｂ）配列番号１４７の重鎖配列及び配列番号１４２の軽鎖配列；（ｃ）配列番号１４８の重鎖配列及び配列番号１４３の軽鎖配列；（ｄ）配列番号１４９の重鎖配列及び配列番号１４４の軽鎖配列；（ｅ）配列番号１５０の重鎖配列及び配列番号１４５の軽鎖配列；（ｆ）配列番号１５６の重鎖配列及び配列番号１５１の軽鎖配列；（ｇ）配列番号１５７の重鎖配列及び配列番号１５２の軽鎖配列；（ｈ）配列番号１５８の重鎖配列及び配列番号１５３の軽鎖配列；（ｉ）配列番号１５９の重鎖配列及び配列番号１５４の軽鎖配列；又は（ｊ）配列番号１６０の重鎖配列及び配列番号１５５の軽鎖配列を含む。
【０１４８】
本明細書において使用されるように、ヒト抗体は、抗体の可変領域又は完全長鎖がヒト生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子を使用する系から得られる場合、特定の生殖細胞系列配列「の産物である」又は「に由来する」重鎖若しくは軽鎖可変領域又は完全長重鎖若しくは軽鎖を含む。そのような系は、ヒト免疫グロブリン遺伝子を有するトランスジェニックマウスを関心のある抗原で免疫化すること、又は関心のある抗原によりファージ上に表されたヒト免疫グロブリン遺伝子ライブラリーをスクリーニングすることを含む。ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列「の産物である」又は「に由来する」ヒト抗体は、そのため、ヒト抗体のアミノ酸配列をヒト生殖細胞系列免疫グロブリンのアミノ酸配列と比較し、ヒト抗体の配列に配列が最も近い（すなわち最も大きい％同一性）ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列を選択することによって同定することができる。特定のヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列「の産物である」又は「に由来する」ヒト抗体は、例えば、天然に存在する体細胞突然変異又は部位特異的突然変異の故意の導入により、生殖細胞系列配列と比較してアミノ酸差異を含有し得る。しかしながら、選択されるヒト抗体は、典型的に、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列に対してアミノ酸配列が少なくとも９０％同一であり、他の種の生殖細胞系列免疫グロブリンアミノ酸配列（例えば、マウス生殖細胞系列配列）と比較した場合、ヒトであるとしてヒト抗体を同定するアミノ酸残基を含有する。ある場合には、ヒト抗体は、生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列に対してアミノ酸配列が少なくとも８０％、９０％若しくは少なくとも９５％又はさらに少なくとも９６％、９７％、９８％若しくは９９％同一である。典型的に、特定のヒト生殖細胞系列配列に由来するヒト抗体は、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列と１０以下のアミノ酸差異のみを表すであろう。ある場合には、ヒト抗体は、生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子によってコードされるアミノ酸配列と５つ以下又はさらに４、３、２若しくは１つ以下のアミノ酸差異のみを表し得る。
【０１４９】
一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、ｐＢＷ５２２又はｐＢＷ５２４（それぞれ委託番号ＤＳＭ２２８７３及びＤＳＭ２２８７４の下で２００９年８月１８日にＤＳＭＺ，Ｉｎｈｏｆｆｅｎｓｔｒ．７Ｂ，Ｄ−３８１２４  Ｂｒａｕｎｓｃｈｗｅｉｇ，Ｇｅｒｍａｎｙに委託）によってコードされる抗体である。
【０１５０】
相同抗体
さらに別の実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、本明細書において記載される抗体のアミノ酸配列及びヌクレオチド配列に相同である完全長重鎖及び軽鎖アミノ酸配列；完全長重鎖及び軽鎖ヌクレオチド配列、可変領域重鎖及び軽鎖ヌクレオチド配列又は可変領域重鎖及び軽鎖アミノ酸配列を有し、抗体は、本開示の抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体の所望の機能的な特性を保持する。
【０１５１】
例えば、本開示は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む単離組換え抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体（又はその抗原結合部分を含む機能的タンパク質）を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物であって、重鎖可変領域は、配列番号９９〜１１２からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８０％又は少なくとも９０％（好ましくは少なくとも９５、９７若しくは９９％）同一であるアミノ酸配列を含み；軽鎖可変領域は、配列番号８５〜９８からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８０％又は少なくとも９０％（好ましくは少なくとも９５、９７若しくは９９％）同一であるアミノ酸配列を含む、組成物を提供し、代わりに、組成物は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む組換え抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体（又はその抗原結合部分を含む機能的タンパク質）を含み、重鎖可変領域は、配列番号９９〜１１２からなる群から選択されるアミノ酸配列と比較して５つ以下のアミノ酸、又は４つ以下のアミノ酸、又は３つ以下のアミノ酸、又は２つ以下若しくは１つ以下のアミノ酸の変化を含み；軽鎖可変領域は、配列番号８５〜９８からなる群から選択されるアミノ酸配列と比較して５つ以下のアミノ酸、又は４つ以下のアミノ酸、又は３つ以下のアミノ酸、又は２つ以下若しくは１つ以下のアミノ酸の変化を含み、抗体は、以下の機能的な特性の少なくとも１つを示す：（ｉ）抗体は、インビトロ若しくはインビボにおいてミオスタチン結合を阻害し、（ｉｉ）Ｓｍａｄ依存性経路を通した筋肉分化の阻害を減少させ、且つ／又は（ｉｉｉ）血液学的な変化を誘発しない、特に赤血球数（ＲＢＣ）における変化がない。これに関連して、用語「変化」は、挿入、欠失及び／又は置換を指す。
【０１５２】
さらなる実施例では、本開示は、完全長重鎖及び完全長軽鎖を含む単離組換え抗ＡｃｔＲＩＩ抗体（又はその抗原結合部分を含む機能的タンパク質）を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物であって、完全長重鎖は、配列番号１４６〜１５０及び１５６〜１６０からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８０％又は少なくとも９０％（好ましくは少なくとも９５、９７若しくは９９％）同一であるアミノ酸配列を含み；完全長軽鎖は、配列番号１４１〜１４５及び１５１〜１５５からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８０％又は少なくとも９０％（好ましくは少なくとも９５、９７若しくは９９％）同一であるアミノ酸配列を含む、組成物を提供し、代わりに、組成物は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む組換え抗ＡｃｔＲＩＩ抗体（又はその抗原結合部分を含む機能的タンパク質）を含み、重鎖可変領域は、配列番号１４６〜１５０及び１５６〜１６０からなる群から選択されるアミノ酸配列と比較して５つ以下のアミノ酸、又は４つ以下のアミノ酸、又は３つ以下のアミノ酸、又は２つ以下若しくは１つ以下のアミノ酸の変化を含み；軽鎖可変領域は、配列番号１４１〜１４５及び１５１〜１５５からなる群から選択されるアミノ酸配列と比較して５つ以下のアミノ酸、又は４つ以下のアミノ酸、又は３つ以下のアミノ酸、又は２つ以下若しくは１つ以下のアミノ酸の変化を含み、抗体は、以下の機能的な特性の少なくとも１つを示す：（ｉ）抗体は、インビトロ若しくはインビボにおいてミオスタチン結合を阻害し、（ｉｉ）Ｓｍａｄ依存性経路を通した筋肉分化の阻害を減少させ、且つ／又は（ｉｉｉ）血液学的な変化を誘発しない、特にＲＢＣにおける変化がない。好ましくは、そのような抗体は、ＡｃｔＲＩＩＢ及び／又はＡｃｔＲＩＩＡのリガンド結合ドメインに結合する。これに関連して、用語「変化」は、挿入、欠失及び／又は置換を指す。
【０１５３】
別の実施例では、本開示は、完全長重鎖及び完全長軽鎖を含む単離組換え抗ＡｃｔＲＩＩ抗体（又はその抗原結合部分を含む機能的タンパク質）を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物であって、完全長重鎖は、配列番号１６６〜１７０及び１７６〜１８０からなる群から選択されるヌクレオチド配列と少なくとも８０％又は少なくとも９０％（好ましくは少なくとも９５、９７若しくは９９％）同一であるヌクレオチド配列によってコードされ；完全長軽鎖は、配列番号１６１〜１６５及び１７１〜１７５からなる群から選択されるヌクレオチド配列と少なくとも８０％又は少なくとも９０％（好ましくは少なくとも９５、９７若しくは９９％）同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、組成物を提供し、代わりに、組成物は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む組換え抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体（又はその抗原結合部分を含む機能的タンパク質）を含み、重鎖可変領域は、配列番号１６６〜１７０及び１７６〜１８０からなる群から選択されるアミノ酸配列と比較して５つ以下のアミノ酸、又は４つ以下のアミノ酸、又は３つ以下のアミノ酸、又は２つ以下若しくは１つ以下のアミノ酸の変化を含み；軽鎖可変領域は、配列番号１６１〜１６５及び１７１〜１７５からなる群から選択されるアミノ酸配列と比較して５つ以下のアミノ酸、又は４つ以下のアミノ酸、又は３つ以下のアミノ酸、又は２つ以下若しくは１つ以下のアミノ酸の変化を含み、抗体は、以下の機能的な特性の少なくとも１つを示す：（ｉ）抗体は、インビトロ若しくはインビボにおいてミオスタチン結合を阻害し、（ｉｉ）Ｓｍａｄ依存性経路を通した筋肉分化の阻害を減少させ、且つ／又は（ｉｉｉ）血液学的な変化を誘発しない、特にＲＢＣにおける変化がない。好ましくは、そのような抗体は、ＡｃｔＲＩＩＢのリガンド結合ドメインに結合する。これに関連して、用語「変化」は、挿入、欠失及び／又は置換を指す。
【０１５４】
様々な実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、上記に論じられる機能的な特性の１つ以上、２つ以上又は３つを示し得る。抗体は、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体又はキメラ抗体であり得る。好ましくは、抗体は、完全ヒトＩｇＧ１抗体である。他の実施形態では、ＶＨ及び／又はＶＬアミノ酸配列は、上記に示される配列と少なくとも８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％同一であり得る。他の実施形態では、ＶＨ及び／又はＶＬアミノ酸配列は、１、２、３、４又は５つ以下のアミノ酸の位置におけるアミノ酸置換を除いて同一であり得る。それぞれ配列番号９９〜１１２及び配列番号８５〜９８のＶＨ及びＶＬ領域に対して高い（すなわち８０％以上の）同一性を有するＶＨ及びＶＬ領域を有する抗体は、それぞれ核酸分子配列番号１２７〜１４０及び１１３〜１２６の突然変異誘発（例えば、部位特異的又はＰＣＲ媒介性突然変異誘発）によって得ることができ、その後、本明細書において記載される機能的アッセイを使用して、保持された機能（すなわち上記に示される機能）についてコード改変抗体を試験することができる。
【０１５５】
他の実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される抗体の完全長重鎖及び／又は完全長軽鎖アミノ酸配列は、上記に示される配列と少なくとも８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％同一であり得るか、又は１、２、３、４若しくは５つ以下のアミノ酸の位置におけるアミノ酸の変化を除いて同一であり得る。それぞれ配列番号１４６〜１５０及び１５６〜１６０のいずれかの完全長重鎖並びに配列番号１４１〜１４５及び１５１〜１５５のいずれかの完全長軽鎖と高い（すなわち少なくとも８０％以上の）同一性を有する完全長重鎖及び完全長軽鎖を有する抗体は、それぞれ核酸分子配列番号１６６〜１７０及び１７６〜１８０並びに配列番号１６１〜１６５及び１７１〜１７５の突然変異誘発（例えば、部位特異的又はＰＣＲ媒介性突然変異誘発）によって得ることができ、その後、本明細書において記載される機能的アッセイを使用して、保持された機能（すなわち上記に示される機能）についてコード改変抗体を試験することができる。
【０１５６】
他の実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される抗体の完全長重鎖及び／又は完全長軽鎖ヌクレオチド配列は、上記に示される配列と少なくとも８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％同一であり得る。
【０１５７】
他の実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される抗体の重鎖及び／又は軽鎖ヌクレオチド配列の可変領域は、上記に示される配列と少なくとも８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％同一であり得るか、又は１、２、３、４若しくは５つ以下のアミノ酸の位置におけるアミノ酸の変化を除いて同一であり得る。
【０１５８】
本明細書において使用されるように、２つの配列間のパーセント同一性は、配列によって共有される同一の位置の数の関数であり（すなわち％同一性＝同一の位置の＃／位置の＃の合計×１００）、ギャップの数及びそれぞれのギャップの長さを考慮に入れており、これは、２つの配列の最適なアライメントのために導入される必要がある。配列の比較及び２つの配列間のパーセント同一性の決定は、下記に記載されるように、数学的なアルゴリズムを使用して達成することができる。
【０１５９】
２つのアミノ酸配列間のパーセント同一性は、ＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれたＥ．Ｍｅｙｅｒｓ及びＷ．Ｍｉｌｌｅｒ（Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ．，４：１１−１７，１９８８）のアルゴリズムを使用し、ＰＡＭ１２０残基重み付け表、１２のギャップ長ペナルティー及び４のギャップペナルティーを使用して決定することができる。加えて、２つのアミノ酸配列間のパーセント同一性は、ＧＣＧソフトウェアパッケージにおけるＧＡＰプログラムに組み込まれたＮｅｅｄｌｅｍａｎ及びＷｕｎｓｃｈ（Ｊ．Ｍｏｌ，Ｂｉｏｌ．４８：４４４−４５３，１９７０）アルゴリズム（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍで入手可能）を使用し、Ｂｌｏｓｓｏｍ  ６２マトリックス又はＰＡＭ２５０マトリックス並びに１６、１４、１２、１０、８、６又は４のギャップウェイト及び１、２、３、４、５又は６の長さウェイトを使用して決定することができる。
【０１６０】
保存的修飾を有する抗体
ある実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域並びにＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域を有し、これらのＣＤＲ配列の１つ以上は、本明細書において記載される抗体に基づく特定のアミノ酸配列又は１、２、３、４若しくは５つのアミノ酸の変化を含むその変異配列又はその保存的修飾を有し、抗体は、本開示の抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体の所望の機能的な特性を保持する。したがって、本開示は、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域並びにＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３配列を含む軽鎖可変領域からなる単離組換え抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体又はその抗原結合部分を含む機能的タンパク質を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物であって、重鎖可変領域ＣＤＲ１アミノ酸配列は、配列番号１〜１４又は１、２、３、４若しくは５つのアミノ酸の変化を含むその変異配列及びその保存的修飾からなる群から選択され；重鎖可変領域ＣＤＲ２アミノ酸配列は、配列番号１５〜２８又は１、２、３、４若しくは５つのアミノ酸の変化を含むその変異配列及びその保存的修飾からなる群から選択され；重鎖可変領域ＣＤＲ３アミノ酸配列は、配列番号２９〜４２又は１、２、３、４若しくは５つのアミノ酸の変化を含むその変異配列及びその保存的修飾からなる群から選択され；軽鎖可変領域ＣＤＲ１アミノ酸配列は、配列番号４３〜５６又は１、２、３、４若しくは５つのアミノ酸の変化を含むその変異配列及びその保存的修飾からなる群から選択され；軽鎖可変領域ＣＤＲ２アミノ酸配列は、配列番号５７〜７０又は１、２、３、４若しくは５つのアミノ酸の変化を含むその変異配列及びその保存的修飾からなる群から選択され；ＣＤＲ３アミノ酸配列の軽鎖可変領域は、配列番号７１〜８４又は１、２、３、４若しくは５つのアミノ酸の変化を含むその変異配列及びその保存的修飾からなる群から選択される、組成物を提供する。好ましくは、抗体は、以下の機能的な特性の少なくとも１つを示す：（ｉ）抗体は、インビトロ若しくはインビボにおいてミオスタチン結合を阻害し、（ｉｉ）Ｓｍａｄ依存性経路を通した筋肉分化の阻害を減少させ、且つ／又は（ｉｉｉ）血液学的な変化を誘発しない、特にＲＢＣにおける変化がない。
【０１６１】
様々な実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される抗体は、上記に掲載される機能的な特性の一方又は両方を示し得る。そのような抗体は、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体又はキメラ抗体であり得る。
【０１６２】
他の実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、哺乳動物細胞における発現のために最適化され、完全長重鎖配列及び完全長軽鎖配列を有し、これらの配列の１つ以上は、本明細書において記載される抗体に基づく特定のアミノ酸配列又はその保存的修飾を有し、抗体は、本開示の抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体の所望の機能的な特性を保持する。したがって、本開示は、完全長重鎖及び完全長軽鎖からなる、哺乳動物細胞における発現のために最適化された単離モノクローナル抗ＡｃｔＲＩＩ抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物であって、完全長重鎖は、配列番号１４６〜１５０及び１５６〜１６０又は１、２、３、４若しくは５つのアミノ酸の変化を含むその変異配列及びその保存的修飾の群から選択されるアミノ酸配列を有し；完全長軽鎖は、配列番号１４１〜１４５及び１５１〜１５５又は１、２、３、４若しくは５つのアミノ酸の変化を含むその変異配列及びその保存的修飾の群から選択されるアミノ酸配列を有し；抗体は、以下の機能的な特性の少なくとも１つを示す：（ｉ）抗体は、インビトロ若しくはインビボにおいてミオスタチン結合を阻害し、（ｉｉ）Ｓｍａｄ依存性経路を通した筋肉分化の阻害を減少させ、且つ／又は（ｉｉｉ）血液学的な変化を誘発しない、特にＲＢＣにおける変化がない、組成物を提供する。
【０１６３】
様々な実施形態では、抗体は、上記に掲載される機能的な特性の一方又は両方を示し得る。そのような抗体は、例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体又はキメラ抗体であり得る。
【０１６４】
本明細書において使用されるように、用語「保存的配列修飾」は、アミノ酸配列を含有する抗体の結合の特徴に著しく影響を与えもせず、改変もしないアミノ酸修飾を指すことが意図される。そのような保存的修飾は、アミノ酸置換、追加及び欠失を含む。修飾は、部位特異的突然変異誘発及びＰＣＲ媒介性突然変異誘発などの当技術分野において知られている標準的な技術によって本開示の抗体中に導入することができる。
【０１６５】
保存的アミノ酸置換は、類似する側鎖を有するアミノ酸残基とアミノ酸残基とが交換される置換である。類似する側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当技術分野において定義されている。これらのファミリーは、塩基性側鎖（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン、トリプトファン）、無極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン）、ベータ分岐側鎖（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）及び芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を有するアミノ酸を含む。したがって、本開示の抗体のＣＤＲ領域内の１つ以上のアミノ酸残基は、同じ側鎖ファミリー由来の他のアミノ酸残基と交換することができ、改変された抗体は、本明細書において記載される機能的アッセイを使用して、保持された機能について試験することができる。
【０１６６】
開示される組成物中に含まれる抗ＡｃｔＲＩＩ抗体と同じエピトープに結合する抗体
別の実施形態では、本開示は、本明細書において記載される様々な特定の抗ＡｃｔＲＩＩ抗体と同じエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法における又は尿失禁を治療する際に使用される組成物の使用を提供する。ＡｃｔＲＩＩＡ及びＡｃｔＲＩＩＢへのミオスタチン結合をブロックすることができる、実施例において記載されるすべての抗体は、高い親和性でＡｃｔＲＩＩＡ及びＡｃｔＲＩＩＢにおけるエピトープの１つに結合し、前記エピトープは、配列番号１８１のアミノ酸１９〜１３４に含まれる。
【０１６７】
さらなる抗体は、そのため、標準的なＡｃｔＲＩＩＢ結合アッセイにおいて本開示の他の抗体と交差競合する（例えば、統計的に有意に結合を競合的に阻害する）それらの能力に基づいて同定することができる。試験抗体が、ヒトＡｃｔＲＩＩＢに対する、本発明の組成物中に含まれる抗体の結合を阻害する能力は、試験抗体が、前記抗体とヒトＡｃｔＲＩＩＢへの結合について競合し得ることを実証し、そのような抗体は、非限定的な理論によれば、競合する抗体と、ヒトＡｃｔＲＩＩＢ上の同じ又は関係する（例えば、構造的に類似するか又は空間的に近位の）エピトープに結合し得る。ある実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において用いられるか又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体と、ヒトＡｃｔＲＩＩＢ及びＡｃｔＲＩＩＡ上の同じエピトープに結合する抗体は、ヒト組換え抗体である。そのようなヒト組換え抗体は、実施例において記載されるように調製し、単離することができる。
【０１６８】
したがって、本開示は、配列番号８５において詳述される可変重鎖配列及び配列番号９９において詳述される可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープに結合し且つ／又はそれと結合について競合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を提供する。
【０１６９】
したがって、本開示は、配列番号８６において詳述される可変重鎖配列及び配列番号１００において詳述される可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を提供する。
【０１７０】
したがって、本開示は、配列番号８７において詳述される可変重鎖配列及び配列番号１０１において詳述される可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を提供する。
【０１７１】
したがって、本開示は、配列番号８８において詳述される可変重鎖配列及び配列番号１０２において詳述される可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を提供する。
【０１７２】
したがって、本開示は、配列番号８９において詳述される可変重鎖配列及び配列番号１０３において詳述される可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を提供する。
【０１７３】
したがって、本開示は、配列番号９０において詳述される可変重鎖配列及び配列番号１０４において詳述される可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を提供する。
【０１７４】
したがって、本開示は、配列番号９１において詳述される可変重鎖配列及び配列番号１０５において詳述される可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を提供する。
【０１７５】
したがって、本開示は、配列番号９２において詳述される可変重鎖配列及び配列番号１０６において詳述される可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を提供する。
【０１７６】
したがって、本開示は、配列番号９３において詳述される可変重鎖配列及び配列番号１０７において詳述される可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を提供する。
【０１７７】
したがって、本開示は、配列番号９４において詳述される可変重鎖配列及び配列番号１０８において詳述される可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を提供する。
【０１７８】
したがって、本開示は、配列番号９５において詳述される可変重鎖配列及び配列番号１０９において詳述される可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を提供する。
【０１７９】
したがって、本開示は、配列番号９６において詳述される可変重鎖配列及び配列番号１１０において詳述される可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を提供する。
【０１８０】
したがって、本開示は、配列番号９７において詳述される可変重鎖配列及び配列番号１１１において詳述される可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を提供する。
【０１８１】
したがって、本開示は、配列番号９８において詳述される可変重鎖配列及び配列番号１１２において詳述される可変軽鎖配列を有する抗体によって認識されるエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を提供する。
【０１８２】
より詳細なエピトープマッピング実験後、本発明の組成物の好ましい抗体の結合領域は、より明確に定義される。
【０１８３】
したがって、本開示は、配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）を含むエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を提供する。
【０１８４】
本開示は、配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）を含むエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物も提供する。
【０１８５】
本開示は、配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）を含むエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物も提供する。
【０１８６】
本開示は、配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）を含むエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物も提供する。
【０１８７】
本開示は、配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）を含むエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物も提供する。
【０１８８】
本開示は、配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）を含むか又はそれからなるエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物も提供する。
【０１８９】
本開示は、配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）を含むか又はそれからなるエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物も提供する。
【０１９０】
本開示は、これらの配列からなるエピトープ又はこれらのエピトープ領域の組み合わせを含むエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物も提供する。
【０１９１】
したがって、本開示は、配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）及び配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）を含むか又はそれからなるエピトープに結合する抗体を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物も提供する。
【０１９２】
操作され修飾された抗体
尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、修飾抗体を操作するために、出発物質として、本明細書において示される１つ以上のＶＨ及び／又はＶＬ配列を有する抗体を使用してさらに調製することができ、この修飾抗体は、出発抗体から改変された特性を有し得る。抗体は、一方又は両方の可変領域（すなわちＶＨ及び／又はＶＬ）内、例えば１つ以上のＣＤＲ領域内の及び／又は１つ以上のフレームワーク領域内の１つ以上の残基を修飾することによって操作することができる。加えて又は代わりに、抗体は、例えば、抗体のエフェクター機能を改変するために、定常領域内の残基を修飾することによって操作することができる。
【０１９３】
実行することができるあるタイプの可変領域遺伝子操作は、ＣＤＲ移植である。抗体は、主に、６つの重鎖及び軽鎖相補性決定領域（ＣＤＲ）に位置するアミノ酸残基を通して標的抗原と相互作用する。このような理由のため、ＣＤＲ内のアミノ酸配列は、ＣＤＲの外側の配列よりも個々の抗体間でより多様である。ＣＤＲ配列がほとんどの抗体−抗原相互作用を担うため、異なる特性を有する異なる抗体由来のフレームワーク配列上に移植された特定の天然に存在する抗体由来のＣＤＲ配列を含む発現ベクターを構築することにより、特定の天然に存在する抗体の特性を模倣する組換え抗体を発現させることが可能である（例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ，Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，１９９８  Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２７；Ｊｏｎｅｓ，Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，１９８６  Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５；Ｑｕｅｅｎ，Ｃ．ｅｔ  ａｌ．，１９８９  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８６：１００２９−１００３３；Ｗｉｎｔｅｒに対する米国特許第５，２２５，５３９号明細書並びにＱｕｅｅｎらに対する米国特許第５，５３０，１０１号明細書；米国特許第５，５８５，０８９号明細書；米国特許第５，６９３，７６２号明細書及び米国特許第６，１８０，３７０号明細書を参照されたい）。
【０１９４】
したがって、本開示の別の実施形態は、それぞれ配列番号１〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＣＤＲ１配列；配列番号１５〜２８からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＣＤＲ２配列；配列番号２９〜４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＣＤＲ３配列を含む重鎖可変領域；並びにそれぞれ配列番号４３〜５６からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＣＤＲ１配列；配列番号５７〜７０からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するＣＤＲ２配列；及び配列番号７１〜８４からなる群から選択されるアミノ酸配列からなるＣＤＲ３配列を有する軽鎖可変領域を含むモノクローナル抗ＡｃｔＲＩＩ抗体又はその抗原結合部分を含む機能的タンパク質を含む、尿失禁を治療するための本発明の方法における又は尿失禁を治療する際に使用される組成物の使用に関する。したがって、そのような抗体は、モノクローナル抗体のＶＨ及びＶＬ  ＣＤＲ配列を含有するが、これらの抗体と異なるフレームワーク配列を含有し得る。
【０１９５】
そのようなフレームワーク配列は、生殖細胞系列抗体遺伝子配列を含む公的なＤＮＡデータベース又は公開された参考文献から得ることができる。例えば、ヒト重鎖及び軽鎖可変領域遺伝子についての生殖細胞系列ＤＮＡ配列は、「ＶＢａｓｅ」ヒト生殖細胞系列配列データベースにおいて（ｗｗｗ．ｍｒｃ−ｃｐｅ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／ｖｂａｓｅでインターネット上において入手可能）並びにＫａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．，［前掲］；Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎ，Ｉ．Ｍ．，ｅｔ  ａｌ．，１９９２  Ｊ．ｆｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７：７７６−７９８；及びＣｏｘ，Ｊ．Ｐ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，１９９４  Ｅｕｒ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：８２７−８３６において見つけることができる。
【０１９６】
本開示の抗体において使用するためのフレームワーク配列の例は、本開示の選択される抗体によって使用されるフレームワーク配列に構造的に類似するもの、例えば本開示のモノクローナル抗体によって使用されるコンセンサス配列及び／又はフレームワーク配列である。ＶＨ  ＣＤＲ１、２及び３配列並びにＶＬ  ＣＤＲ１、２及び３配列は、フレームワーク配列が由来する生殖細胞系列免疫グロブリン遺伝子において見つけられる配列と同一の配列を有するフレームワーク領域上に移植することができるか、又はＣＤＲ配列は、生殖細胞系列配列と比較して１つ以上の突然変異を含有するフレームワーク領域上に移植することができる。例えば、ある事例では、抗体の抗原結合能力を維持又は増強するためにフレームワーク領域内の残基を突然変異させることが有益であることがわかった（例えば、Ｑｕｅｅｎらに対する米国特許第５，５３０，１０１号明細書；米国特許第５，５８５，０８９号明細書；米国特許第５，６９３，７６２号明細書及び米国特許第６，１８０，３７０号明細書を参照されたい）。
【０１９７】
別のタイプの可変領域修飾は、ＶＨ及び／又はＶＬ  ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及び／又はＣＤＲ３領域内のアミノ酸残基を突然変異させることであり、それにより関心のある抗体の１つ以上の結合特性（例えば、親和性）を改善し、これは、「親和性成熟」として知られている。部位特異的突然変異誘発又はＰＣＲ媒介性突然変異誘発は、突然変異を導入するために実行することができ、抗体結合又は関心のある他の機能的な特性に対する効果は、本明細書において記載され、実施例において提供されるように、インビトロ又はインビボにおけるアッセイにおいて評価することができる。保存的修飾（上記に論じられる）は、導入することができる。突然変異は、アミノ酸置換、追加又は欠失であり得る。加えて、典型的に、ＣＤＲ領域内の１、２、３、４又は５つ以下の残基が改変される。
【０１９８】
したがって、別の実施形態では、本開示は、配列番号１〜１４を有する群から選択されるアミノ酸配列又は配列番号１〜１４と比較して１、２、３、４若しくは５つのアミノ酸置換、欠失若しくは追加を有するアミノ酸配列からなるＶＨ  ＣＤＲ１領域；配列番号１５〜２８からなる群から選択されるアミノ酸配列又は配列番号１５〜２８と比較して１、２、３、４若しくは５つのアミノ酸置換、欠失若しくは追加を有するアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ２領域；配列番号２９〜４２からなる群から選択されるアミノ酸配列又は配列番号２９〜４２と比較して１、２、３、４若しくは５つのアミノ酸置換、欠失若しくは追加を有するアミノ酸配列を有するＶＨ  ＣＤＲ３領域；配列番号４３〜５６からなる群から選択されるアミノ酸配列又は配列番号４３〜５６と比較して１、２、３、４若しくは５つのアミノ酸置換、欠失若しくは追加を有するアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ１領域；配列番号５２〜７０からなる群から選択されるアミノ酸配列又は配列番号５２〜７０と比較して１、２、３、４若しくは５つのアミノ酸置換、欠失若しくは追加を有するアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ２領域；及び配列番号７１〜８４からなる群から選択されるアミノ酸配列又は配列番号７１〜８４と比較して１、２、３、４若しくは５つのアミノ酸置換、欠失若しくは追加を有するアミノ酸配列を有するＶＬ  ＣＤＲ３領域を有する重鎖可変領域からなる、尿失禁を治療するための本発明の方法における又は尿失禁を治療する際に使用される単離ヒト抗ＡｃｔＲＩＩモノクローナル抗体又はその抗原結合部分を含む機能的タンパク質の使用を提供する。
【０１９９】
ラクダ科動物の抗体
ラマ種（アルパカ（Ｌａｍａ  ｐａｃｃｏｓ）、ラマ（Ｌａｍａ  ｇｌａｍａ）及びビクーニャ（Ｌａｍａ  ｖｉｃｕｇｎａ））などの新世界のメンバーを含む、ラクダ及びヒトコブラクダ科のメンバー（フタコブラクダ（Ｃａｍｅｌｕｓ  ｂａｃｔｒｉａｎｕｓ）及びヒトコブラクダ（Ｃａｍｅｌｕｓ  ｄｒｏｍｅｄａｒｉｕｓ））から得られる抗体タンパク質は、サイズ、構造的な複雑さ及びヒト対象に対する抗原性を基準にして特徴付けられた。自然界で見つけられる哺乳動物のこの科由来のあるＩｇＧ抗体は、軽鎖を欠き、したがって他の動物由来の抗体についての２つの重鎖及び２つの軽鎖を有する典型的な４鎖四次構造とは構造的に別である（国際公開第９４／０４６７８号パンフレットを参照されたい）。
【０２００】
ＶＨＨとして同定される小さい単一可変ドメインであるラクダ科動物抗体の領域は、標的に対して高い親和性を有する小さいタンパク質を産出するために遺伝子操作によって得ることができ、「ラクダ科動物ナノボディ」として知られている低分子量抗体由来タンパク質がもたらされる（米国特許第５，７５９，８０８号明細書；Ｓｔｉｊｌｅｍａｎｓ，Ｂ．ｅｔ  ａｌ．，２００４  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７９：１２５６−１２６１；Ｄｕｍｏｕｌｉｎ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，２００３  Ｎａｔｕｒｅ  ４２４：７８３−７８８；Ｐｌｅｓｃｈｂｅｒｇｅｒ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．２００３  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ  １４：４４０−４４８；Ｃｏｒｔｅｚ−Ｒｅｔａｍｏｚｏ，Ｖ．ｅｔ  ａｌ．２００２  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ  ８９：４５６−６２；及びＬａｕｗｅｒｅｙｓ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．１９９８  ＥＭＢＯ  Ｊ  １７：３５１２−３５２０を参照されたい）。ラクダ科動物抗体及び抗体断片の操作ライブラリーは、例えば、Ａｂｌｙｎｘ，Ｇｈｅｎｔ，Ｂｅｌｇｉｕｍから市販で入手可能である。非ヒト起源の他の抗体と同様に、ラクダ科の動物の抗体のアミノ酸配列は、ヒト配列により密接に類似している配列を得るために組換えで改変することができる、すなわち、ナノボディは、「ヒト化する」ことができる。したがって、ヒトに対するラクダ科動物抗体の天然の低い抗原性は、さらに低下させることができる。
【０２０１】
ラクダ科動物ナノボディは、ヒトＩｇＧ分子の分子量のおよそ１０分の１の分子量を有し、タンパク質は、わずか数ナノメーターの物理的な直径を有する。サイズが小さいことの１つの結果として、ラクダ科動物ナノボディは、より大きい抗体タンパク質に対して機能的に目立たない抗原性部位に結合することができ、すなわち、ラクダ科動物ナノボディは、古典的な免疫学的技術を使用して、そうでなければ隠れたままである抗原を検出する試薬として及び可能性のある治療剤として有用である。したがって、サイズが小さいことのさらに別の結果として、ラクダ科動物ナノボディは、標的タンパク質の溝又は狭い裂け目における特異的な部位への結合の結果として阻害することができ、したがって古典的な抗体の機能よりも古典的低分子量薬剤の機能に密接に類似している能力において役に立つことができる。
【０２０２】
低分子量及びコンパクトなサイズにより、非常に耐熱性であり、極度のｐＨ及びタンパク分解性の消化に対して安定しており、抗原性に乏しくなるラクダ科動物ナノボディがさらにもたらされる。別の結果として、ラクダ科動物ナノボディは、循環系から組織中に容易に移動し、さらに血液脳関門を横断し、神経組織に影響を与える障害を治療することができる。ナノボディは、血液脳関門を横切る薬剤輸送をさらに促進することができる（米国特許出願公開第２００４／０１６１７３８号明細書を参照されたい）。ヒトに対する低い抗原性と組み合わせたこれらの特徴は、治療薬としての大きい可能性を示す。さらに、これらの分子は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）などの原核細胞において完全に発現させることができ、バクテリオファージにより融合タンパク質として発現され、機能的である。
【０２０３】
したがって、一実施形態では、本開示は、尿失禁を治療するための本発明の方法における又は尿失禁を治療する際に使用される、ＡｃｔＲＩＩＢに対して高い親和性を有するラクダ科動物の抗体又はナノボディを含む組成物の使用に関する。本明細書におけるある実施形態では、ラクダ科動物の抗体又はナノボディは、ラクダ科の動物において天然に産生され、すなわち他の抗体について本明細書において記載される技術を使用して、ＡｃｔＲＩＩＢ又はそのペプチド断片による免疫後にラクダ科動物によって産生される。代わりに、抗ＡｃｔＲＩＩＢラクダ科動物ナノボディは、操作され、すなわち例えば本明細書における実施例において記載されるように標的としてＡｃｔＲＩＩＢを用いるパニング手順を使用して、適切に突然変異誘発させたラクダ科動物ナノボディタンパク質を表すファージのライブラリーから選択によって産生される。操作されたナノボディは、４５分間〜２週間のレシピエント対象における半減期を有するように遺伝子操作によってさらにカスタマイズすることができる。特定の実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用されるか又は尿失禁を治療する際に使用されるラクダ科動物の抗体又はナノボディは、例えば、国際公開第９４／０４６７８号パンフレットにおいて記載されるように、ナノボディ又は単一ドメイン抗体フレームワーク配列中に本開示のヒト抗体の重鎖又は軽鎖のＣＤＲ配列を移植することによって得られる。
【０２０４】
非抗体骨格
知られている非免疫グロブリンフレームワーク又は骨格は、Ａｄｎｅｃｔｉｎｓ（フィブロネクチン）（Ｃｏｍｐｏｕｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ．，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）、アンキリン（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ  ＡＧ，Ｚｕｒｉｃｈ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）、ドメイン抗体（Ｄｏｍａｎｔｉｓ，Ｌｔｄ（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）及びＡｂｌｙｎｘ  ｎｖ（Ｚｗｉｊｎａａｒｄｅ，Ｂｅｌｇｉｕｍ））、リポカリン（Ａｎｔｉｃａｌｉｎ）（Ｐｉｅｒｉｓ  Ｐｒｏｔｅｏｌａｂ  ＡＧ，Ｆｒｅｉｓｉｎｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）、小型モジュール免疫医薬品（Ｔｒｕｂｉｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  Ｉｎｃ．，Ｓｅａｔｔｌｅ，ＷＡ）、マキシボディー（Ａｖｉｄｉａ，Ｉｎｃ．（Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ））、プロテインＡ（Ａｆｆｉｂｏｄｙ  ＡＧ，Ｓｗｅｄｅｎ）及びａｆｆｉｌｉｎ（ガンマクリスタリン又はユビキチン）（Ｓｃｉｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ＧｍｂＨ，Ｈａｌｌｅ，Ｇｅｒｍａｎｙ）、タンパク質エピトープミメティック（Ｐｏｌｙｐｈｏｒ  Ｌｔｄ，Ａｌｌｓｃｈｗｉｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を含むが、これらに限定されない。
【０２０５】
（ｉ）フィブロネクチン骨格
フィブロネクチン骨格は、好ましくは、フィブロネクチンＩＩＩ型ドメインをベースとする（例えば、フィブロネクチンＩＩＩ型の第１０のモジュール（１０  Ｆｎ３ドメイン））。フィブロネクチンＩＩＩ型ドメインは、２つのベータシート間に分布している７又は８つのベータストランドを有し、ベータシートは、それら自体、互いに接して納まっており、タンパク質のコアを形成し、ベータストランドを互いに接続し、溶媒に曝露されるループ（ＣＤＲと似ている）をさらに含有する。ベータシートサンドイッチのそれぞれの端に少なくとも３つのそのようなループがあり、その端は、タンパク質の境界となり、ベータストランドの方向に対して垂直である（米国特許第６，８１８，４１８号明細書）。
【０２０６】
全体的なフォールドは、最も小さい機能的抗体断片、ラクダ及びラマＩｇＧにおける抗原認識単位全体を含む重鎖の可変領域の全体的なフォールドに密接に関係するが、これらのフィブロネクチンベースの骨格は、免疫グロブリンではない。この構造のため、この非免疫グロブリン抗体は、抗体の抗原結合特性に性質及び親和性において類似する抗原結合特性を模倣する。これらの骨格は、インビボにおける抗体の親和性成熟のプロセスに類似する、インビトロにおけるループの無作為化及びシャッフリングストラテジーにおいて使用することができる。フィブロネクチンベースの分子は、骨格として使用することができ、分子のループ領域は、標準的なクローニング技術を使用して本開示のＣＤＲと交換することができる。
【０２０７】
（ｉｉ）アンキリン−分子パートナー
この技術は、様々な標的への結合に使用することができる可変領域を運ぶための骨格として、アンキリン由来リピートモジュールを有するタンパク質を使用することをベースとする。アンキリンリピートモジュールは、２つの逆平行α−ヘリックス及びβ−ターンからなる３３アミノ酸ポリペプチドである。可変領域の結合は、リボソームディスプレーを使用することによって大部分が最適化される。
【０２０８】
（ｉｉｉ）マキシボディー／Ａｖｉｍｅｒ−Ａｖｉｄｉａ
Ａｖｉｍｅｒは、ＬＲＰ−１などの天然のＡドメイン含有タンパク質に由来する。これらのドメインは、本来、タンパク質間相互作用に使用され、ヒトでは、２５０を超えるタンパク質が構造的にＡドメインをベースにする。Ａｖｉｍｅｒは、アミノ酸リンカーを介して連結された多くの異なる「Ａドメイン」単量体（２〜１０）からなる。例えば、米国特許出願公開第２００４／０１７５７５６号明細書；米国特許出願公開第２００５／００５３９７３号明細書；米国特許出願公開第２００５／００４８５１２号明細書；及び米国特許出願公開第２００６／０００８８４４号明細書において記載される手法を使用して、標的抗原に結合することができるＡｖｉｍｅｒを作製することができる。
【０２０９】
（ｖｉ）プロテインＡ−Ａｆｆｉｂｏｄｙ
Ａｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標）親和性リガンドは、プロテインＡのＩｇＧ結合ドメインの１つの骨格をベースとする３ヘリックスバンドルから構成される小さい単純タンパク質である。プロテインＡは、細菌である黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）由来の表面タンパク質である。この骨格ドメインは、５８のアミノ酸からなり、このうちの１３のものが、多くのリガンド変異体を有するＡｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標）ライブラリーを生成するために無作為に選択される（例えば、米国特許第５，８３１，０１２号明細書を参照されたい）。Ａｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標）分子は、抗体を模倣し、それらは、１５０ｋＤａである抗体の分子量と比較して６ｋＤａの分子量を有する。サイズが小さいにもかかわらず、Ａｆｆｉｂｏｄｙ（登録商標）分子の結合部位は、抗体の結合部位に類似する。
【０２１０】
（ｖ）Ａｎｔｉｃａｌｉｎ−Ｐｉｅｒｉｓ
Ａｎｔｉｃａｌｉｎ（登録商標）は、Ｐｉｅｒｉｓ  ＰｒｏｔｅｏＬａｂ  ＡＧ社よって開発された商品である。それらは、化学的に感受性の又は不溶性の化合物の生理学的輸送又は貯蔵に一般に関与する小さくて頑強なタンパク質の広く存在するグループであるリポカリンに由来する。いくつかの天然のリポカリンがヒト組織又は体液中に存在する。
【０２１１】
タンパク質の構成は、免疫グロブリンと良く類似しており、強固なフレームワーク上に超可変ループがある。しかしながら、抗体又はそれらの組換え断片とは対照的に、リポカリンは、１６０〜１８０アミノ酸残基を有する単一ポリペプチド鎖から構成され、単一免疫グロブリンドメインよりもごくわずかにのみ大きい。
【０２１２】
結合ポケットを構成する４つのループのセットは、顕著な構造的柔軟性を示し、様々な側鎖を許容する。結合部位は、したがって、高い親和性及び特異性で様々な形状をした決められた標的分子を認識するために独自開発のプロセスにおいて作り変えることができる。
【０２１３】
リポカリンファミリーの１つのタンパク質、オオモンシロチョウ（Ｐｉｅｒｉｓ  ｂｒａｓｓｉｃａｅ）のビリン結合タンパク質（ＢＢＰ）は、４つのループのセットを突然変異誘発することによってａｎｔｉｃａｌｉｎを開発するために使用された。「ａｎｔｉｃａｌｉｎ」を記載する特許出願の１つの例は、国際公開第１９９９／１６８７３号パンフレットである。
【０２１４】
（ｖｉ）Ａｆｆｉｌｉｎ−Ｓｃｉｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ
ＡＦＦＩＬＩＮ（商標）分子は、タンパク質及び小分子に対して特異的な親和性を有するように設計された小さい非免疫グロブリンタンパク質である。新たなＡＦＦＩＬＩＮ（商標）分子は、２つのライブラリーから非常に迅速に選択することができ、それぞれのライブラリーは、異なるヒト由来骨格タンパク質をベースとする。
【０２１５】
ＡＦＦＩＬＩＮ（商標）分子は、免疫グロブリンタンパク質に対していかなる構造的な相同性も示さない。Ｓｃｉｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓは、２つのＡＦＦＩＬＩＮ（商標）骨格を用いており、この一方は、ガンマクリスタリン、ヒト構造的眼水晶体タンパク質であり、他方は、「ユビキチン」スーパーファミリータンパク質である。ヒト骨格は、両方とも非常に小さく、高い温度安定性を示し、ｐＨの変化及び変性剤に対してほぼ抵抗性である。この高い安定性は、主にタンパク質の拡張ベータシート構造によるものである。ガンマクリスタリン由来タンパク質の例は、国際公開第２００１／００４１４４号パンフレットにおいて記載されており、「ユビキチン様」タンパク質の例は、国際公開第２００４／１０６３６８号パンフレットにおいて記載されている。
【０２１６】
（ｖｉｉ）タンパク質エピトープミメティック（ＰＥＭ）
ＰＥＭは、タンパク質間相互作用に関与する主な二次構造である、タンパク質のベータ−ヘアピン二次構造を模倣する中型の環状ペプチド様分子（ＭＷ  １〜２ｋＤａ）である。
【０２１７】
代替のフレームワーク又は骨格中への抗原結合性ドメインの移植
結果として生じるポリペプチドがＡｃｔＲＩＩＢに特異的に結合する少なくとも１つの結合領域を含む限り、種々様々の抗体／免疫グロブリンフレームワーク又は骨格を用いることができる。そのようなフレームワーク又は骨格は、５つの主なイディオタイプのヒト免疫グロブリン又はその断片を含み（本明細書の他の箇所で開示されるものなど）、好ましくはヒト化された側面を有する、他の動物種の免疫グロブリンを含む。ラクダ科動物において同定されるものなどの単一重鎖抗体は、この点に関して特に関心がある。新規なフレームワーク、骨格及び断片は、当業者によって発見され、開発され続けている。
【０２１８】
一態様では、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物は、開示される抗体のＣＤＲを移植することができる非免疫グロブリン骨格を使用する非免疫グロブリンベースの抗体を含み得る。知られているか又は今後の非免疫グロブリンフレームワーク及び骨格は、それらが配列番号１８１の標的タンパク質（好ましくは配列番号１８２において示されるそのリガンド結合ドメイン）に対して特異的な結合領域を含む限り用いられ得る。そのような化合物は、「標的特異的結合領域を含むポリペプチド」として本明細書において知られている。非免疫グロブリンフレームワークの例は、下記のセクションにおいてさらに記載される（ラクダ科動物の抗体及び非抗体骨格）。
【０２１９】
フレームワーク又はＦｃの操作
尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる操作された抗体は、例えば、抗体の特性を改善するために修飾がＶＨ及び／又はＶＬ内のフレームワーク残基に対してなされた抗体を含む。典型的に、そのようなフレームワーク修飾は、抗体の免疫原性を減少させるためになされる。例えば、１つのアプローチは、１つ以上のフレームワーク残基を対応する生殖細胞系列配列に「復帰突然変異させる」ことである。より詳細には、体細胞突然変異を受けた抗体は、この抗体が由来する生殖細胞系列配列と異なるフレームワーク残基を含有し得る。そのような残基は、この抗体が由来する生殖細胞系列配列と抗体フレームワーク配列とを比較することによって同定することができる。フレームワーク領域の配列をそれらの生殖細胞系列の配置に戻すために、体細胞突然変異は、例えば、部位特異的突然変異誘発又はＰＣＲ媒介性突然変異誘発によって生殖細胞系列配列に「復帰突然変異させる」ことができる。そのような「復帰突然変異させた」抗体も本開示の組成物中に含むことができる。
【０２２０】
別のタイプのフレームワーク修飾は、Ｔ細胞エピトープを除去し、それにより、抗体の可能性として考えられる免疫原性を低下させるために、フレームワーク領域内又はさらに１つ以上のＣＤＲ領域内の１つ以上の残基を突然変異させることを含む。このアプローチは、「脱免疫化」とも呼ばれ、米国特許出願公開第２００３／０１５３０４３号明細書においてさらに詳細に記載されている。
【０２２１】
フレームワーク又はＣＤＲ領域内になされる修飾に加えて又はその代わりに、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される抗体は、典型的に、血清半減期、補体結合、Ｆｃ受容体結合及び／又は抗原依存性細胞傷害など、抗体の１つ以上の機能的な特性を改変するためにＦｃ領域内に修飾を含むように操作され得る。さらに、本開示の組成物中に含まれる抗体は、抗体の１つ以上の機能的な特性をさらに改変するために化学的に修飾され得る（例えば、１つ以上の化学成分を抗体に付けることができる）か、又はそのグリコシル化を改変するために修飾され得る。これらの実施形態のそれぞれは、下記にさらに詳細に記載される。Ｆｃ領域における残基のナンバリングは、ＫａｂａｔのＥＵインデックスのナンバリングとする。
【０２２２】
一実施形態では、ＣＨ１のヒンジ領域は、ヒンジ領域におけるシステイン残基の数を改変させる、例えば増加又は減少させるために修飾される。このアプローチは、米国特許第５，６７７，４２５号明細書においてさらに記載されている。ＣＨ１のヒンジ領域中のシステイン残基の数は、例えば、軽鎖及び重鎖の組み立てを容易にするために又は抗体の安定性を増加させる若しくは減少させるために改変される。
【０２２３】
別の実施形態では、抗体のＦｃヒンジ領域は、抗体の生物学的半減期を減少させるために突然変異される。より詳細には、抗体が天然のＦｃ−ヒンジドメインＳｐＡ結合に比べてブドウ球菌プロテインＡ（ＳｐＡ）への結合が弱くなるように、１つ以上のアミノ酸突然変異がＦｃ−ヒンジ断片のＣＨ２−ＣＨ３ドメイン境界領域中に導入される。このアプローチは、米国特許第６，１６５，７４５号明細書においてさらに詳細に記載されている。
【０２２４】
別の実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用されるか又は尿失禁を治療する際に使用される抗体は、その生物学的半減期を増加させるために修飾される。様々なアプローチが可能である。例えば、米国特許第６，２７７，３７５号明細書において記載されるように、以下の突然変異の１つ以上を導入することができる：Ｔ２５２Ｌ、Ｔ２５４Ｓ、Ｔ２５６Ｆ。代わりに、生物学的半減期を増加させるために、抗体は、米国特許第５，８６９，０４６号明細書及び米国特許第６，１２１，０２２号明細書において記載されるように、ＩｇＧのＦｃ領域のＣＨ２ドメインの２つのループから得られるサルベージ受容体結合エピトープを含有するようにＣＨ１又はＣＬ領域内で改変させることができる。
【０２２５】
さらに他の実施形態では、Ｆｃ領域は、抗体のエフェクター機能を改変するために、少なくとも１つのアミノ酸残基を異なるアミノ酸残基と交換することによって改変される。例えば、１つ以上のアミノ酸は、抗体がエフェクターリガンドに対して改変された親和性を有するが、親抗体の抗原結合性能力を保持するように異なるアミノ酸残基と交換することができる。親和性が改変されるエフェクターリガンドは、例えば、Ｆｃ受容体又は補体のＣ１構成成分であり得る。このアプローチは、両方ともＷｉｎｔｅｒらによる米国特許第５，６２４，８２１号明細書及び米国特許第５，６４８，２６０号明細書においてさらに詳細に記載されている。特に残基２３４及び２３５を突然変異させ得る。特に、これらの突然変異は、アラニンへの突然変異であり得る。したがって、一実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、アミノ酸２３４及び２３５の一方又は両方でＦｃ領域における突然変異を有する。別の実施形態では、アミノ酸２３４及び２３５の一方又は両方は、アラニンに置換され得る。アラニンへのアミノ酸２３４及び２３５の両方の置換は、ＡＤＣＣ活性の低下をもたらす。
【０２２６】
別の実施形態では、記載される抗体のアミノ酸残基から選択される１つ以上のアミノ酸は、抗体が、改変されたＣ１ｑ結合及び／又は低下した若しくは消失した補体依存性細胞障害作用（ＣＤＣ）を有するように異なるアミノ酸残基と交換することができる。このアプローチは、米国特許第６，１９４，５５１号明細書においてさらに詳細に記載されている。
【０２２７】
別の実施形態では、記載される抗体の１つ以上のアミノ酸残基は、それによって抗体が補体を固定する能力を改変するために改変される。このアプローチは、国際公開第９４／２９３５１号パンフレットにおいてさらに記載されている。
【０２２８】
さらに別の実施形態では、記載される抗体のＦｃ領域は、１つ以上のアミノ酸を修飾することにより、抗体が抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を媒介する能力を増加させるために及び／又はＦｃγ受容体に対する抗体の親和性を増加させるために修飾される。このアプローチは、国際公開第００／４２０７２号パンフレットにおいてさらに記載されている。加えて、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、ＦｃγＲＩＩＩ及びＦｃＲｎに対するヒトＩｇＧ１上の結合部位は、マッピングされており、結合が改善された変異体が記載されている（Ｓｈｉｅｌｄｓ，Ｒ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，２００１  Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｎ．２７６：６５９１−６６０４を参照されたい）。
【０２２９】
さらに別の実施形態では、本開示の組成物中に含まれる抗体のグリコシル化が修飾される。例えば、アグリコシル化抗体を作ることができる（すなわち、抗体は、グリコシル化を欠く）。グリコシル化は、例えば、抗原に対する抗体の親和性を増加させるために改変することができる。そのような炭水化物修飾は、例えば、抗体配列内のグリコシル化の１つ以上の部位を改変することによって達成することができる。例えば、それによってその部位でのグリコシル化を排除するために１つ以上の可変領域フレームワークグリコシル化部位の排除をもたらす１つ以上のアミノ酸置換を行うことができる。そのようなアグリコシル化は、抗原に対する抗体の親和性を増加させ得る。そのようなアプローチは、Ｃｏらによる米国特許第５，７１４，３５０号明細書及び米国特許第６，３５０，８６１号明細書においてさらに詳細に記載されている。
【０２３０】
本開示によって想定される、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される抗体の別の修飾は、結果として生じる分子の半減期を増加させるための、前記抗体の少なくとも抗原結合性領域の、ヒト血清アルブミン又はその断片などの血清タンパク質へのコンジュゲート又はタンパク質融合である（例えば、欧州特許第０３２２０９４号明細書を参照されたい）。
【０２３１】
他には、結果として生じる分子の半減期を増加させるための、本開示の組成物中に含まれる抗体の少なくとも抗原結合性領域の、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質に結合することができるタンパク質への融合が可能性として考えられる（例えば、欧州特許第０４８６５２５号明細書を参照されたい）。
【０２３２】
改変された抗体を操作する方法
上記に論じられるように、本明細書において示されるＣＤＲ配列、ＶＨ及びＶＬ配列又は完全長重鎖及び軽鎖配列を有する抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体は、それに付けられるＣＤＲ配列、完全長重鎖及び／若しくは軽鎖配列、ＶＨ及び／若しくはＶＬ配列又は定常領域を修飾することにより、新たな抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体を作製するために使用することができる。したがって、本開示の別の態様では、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体の構造的な特徴は、ヒトＡｃｔＲＩＩＢへの結合など、本発明の方法において使用される前記抗体の少なくとも１つの機能的な特性を保持するが、さらにＡｃｔＲＩＩＢの１つ以上の機能的な特性を阻害する（例えば、Ｓｍａｄ活性化の阻害）、構造的に関係する抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体を作製するために使用される。
【０２３３】
例えば、本開示の尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための若しくは尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体の１つ以上のＣＤＲ領域又はその突然変異体は、上記に論じられるように、本開示の組成物中に含まれる、組換えで操作されたさらなる抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体を作製するために、知られているフレームワーク領域及び／又は他のＣＤＲと組換えで組み合わせることができる。他のタイプの修飾は、前のセクションにおいて記載されるものを含む。操作方法のための出発物質は、本明細書において提供される１つ以上のＶＨ及び／若しくはＶＬ配列又はその１つ以上のＣＤＲ領域である。操作された抗体を作製するために、本明細書において提供される１つ以上のＶＨ及び／若しくはＶＬ配列又はその１つ以上のＣＤＲ領域を有する抗体を実際に調製する（すなわちタンパク質として発現させる）ことは必要ではない。正確に言うと、配列中に含有される情報は、元の配列が由来する「第２世代の」配列を作製するために出発物質として使用され、次いで、「第２世代の」配列は、調製され、タンパク質として発現される。
【０２３４】
改変された抗体配列は、配列番号２９〜４２及び配列番号７１〜８４からなる群から選択される決まったＣＤＲ３配列又は米国特許出願公開第２００５／０２５５５５２号明細書において記載される最小限の本質的な結合決定基並びにＣＤＲ１及びＣＤＲ２配列上に多様性を有する抗体ライブラリーをスクリーニングすることによって調製することもできる。スクリーニングは、ファージディスプレー技術などの抗体ライブラリーから抗体をスクリーニングするのに適切な任意のスクリーニング技術に従って実行することができる。
【０２３５】
標準的な分子生物学の技術は、改変された抗体配列を調製し、発現させるために使用することができる。改変された抗体配列によってコードされる抗体は、本明細書において記載される抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体の機能的な特性の１つ、いくつか又はすべてを保持する抗体であり、これらの機能的な特性は、ヒトＡｃｔＲＩＩＢへの特異的結合及びＳｍａｄ活性化の阻害を含むが、これらに限定されない。
【０２３６】
改変された抗体は、上記に論じられる機能的な特性の１つ以上、２つ以上又は３つ以上を示し得る。
【０２３７】
改変された抗体の機能的な特性は、実施例において示されるもの（例えば、ＥＬＩＳＡ）など、当技術分野において利用可能な及び／又は本明細書において記載される標準的なアッセイを使用して判断することができる。
【０２３８】
突然変異は、抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体コード配列のすべて又は一部に無作為に又は選択的に導入することができ、結果として生じる修飾抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体は、結合活性及び／又は本明細書において記載される他の機能的な特性についてスクリーニングすることができる。突然変異の方法は、当技術分野において記載されている。例えば、国際公開第０２／０９２７８０号パンフレットは、飽和突然変異誘発、合成ライゲ−ションアセンブリー又はその組み合わせを使用して、抗体突然変異体を作製し、スクリーニングするための方法を記載する。代わりに、国際公開第０３／０７４６７９号パンフレットは、抗体の生理化学的な特性を最適化するためにコンピューターによるスクリーニング方法を使用する方法を記載する。
【０２３９】
本開示の組成物中に含まれる抗体をコードする核酸分子
哺乳動物細胞における発現のために最適化された完全長軽鎖ヌクレオチド配列の例は、配列番号１６１〜１６５及び１７１〜１７５において示される。哺乳動物細胞における発現のために最適化された完全長重鎖ヌクレオチド配列の例は、配列番号１６６〜１７０及び１７６〜１８０において示される。
【０２４０】
核酸は、細胞全体内において、細胞溶解物中に存在し得るか、又は部分的に精製された若しくは実質的に純粋な形態をした核酸であり得る。核酸は、アルカリ／ＳＤＳ処置、ＣｓＣｌバンディング、カラムクロマトグラフィー、アガロースゲル電気泳動及び当技術分野においてよく知られている他のものを含む標準的な技術により、他の細胞構成成分又は他の混入物、例えば他の細胞の核酸又はタンパク質から精製されている場合、「単離されている」又は「実質的に純粋にされている」。Ｆ．Ａｕｓｕｂｅｌ，ｅｔ  ａｌ．，ｅｄ．１９８７  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを参照されたい。核酸は、標準的な分子生物学の技術を使用して得ることができる。ハイブリドーマ（例えば、下記にさらに記載されるようにヒト免疫グロブリン遺伝子を有するトランスジェニックマウスから調製されたハイブリドーマ）によって発現される抗体について、ハイブリドーマによって作られる抗体の軽鎖及び重鎖をコードするｃＤＮＡは、標準的なＰＣＲ増幅又はｃＤＮＡクローニング技術によって得ることができる。免疫グロブリン遺伝子ライブラリーから得られる抗体について（例えば、ファージディスプレー技術を使用して）、抗体をコードする核酸は、ライブラリーのメンバーである様々なファージクローンから取り出すことができる。
【０２４１】
ＶＨ及びＶＬセグメントをコードするＤＮＡ断片が得られたら、これらのＤＮＡ断片は、例えば、可変領域遺伝子を完全長抗体鎖遺伝子、Ｆａｂ断片遺伝子又はｓｃＦｖ遺伝子に変換するために標準的な組換えＤＮＡ技術によってさらに処理することができる。これらの処理で、ＶＬ又はＶＨコードＤＮＡ断片は、別のＤＮＡ分子に又は抗体定常領域若しくは可動性リンカーなどの別のタンパク質をコードする断片に適切に作用するように連結される。これに関連して使用される用語「適切に作用するように連結される」は、２つのＤＮＡ断片が、例えば、２つのＤＮＡ断片によってコードされるアミノ酸配列がインフレームとなるように又はタンパク質が所望のプロモーターのコントロールの下で発現されるように、機能的になるようにつながれることを意味することが意図される。
【０２４２】
ＶＨ領域をコードする単離ＤＮＡは、ＶＨコードＤＮＡを、重鎖定常領域（ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３）をコードする別のＤＮＡ分子に適切に作用するように連結することにより、完全長重鎖遺伝子に変換することができる。ヒト重鎖定常領域遺伝子の配列は、当技術分野において知られており（例えば、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．［前掲］を参照されたい）、これらの領域を包含するＤＮＡ断片は、標準的なＰＣＲ増幅によって得ることができる。重鎖定常領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭ又はＩｇＤ定常領域であり得る。重鎖定常領域は、ＩｇＧ１アイソタイプから選択することができる。Ｆａｂ断片重鎖遺伝子について、ＶＨコードＤＮＡは、重鎖ＣＨ１定常領域のみをコードする別のＤＮＡ分子に適切に作用するように連結することができる。
【０２４３】
ＶＬ領域をコードする単離ＤＮＡは、ＶＬコードＤＮＡを、軽鎖定常領域、ＣＬをコードする別のＤＮＡ分子に適切に作用するように連結することにより、完全長軽鎖遺伝子（及びＦａｂ軽鎖遺伝子）に変換することができる。ヒト軽鎖定常領域遺伝子の配列は、当技術分野において知られており（例えば、Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．［前掲］を参照されたい）、これらの領域を包含するＤＮＡ断片は、標準的なＰＣＲ増幅によって得ることができる。軽鎖定常領域は、カッパ又はラムダ定常領域であり得る。
【０２４４】
ｓｃＦｖ遺伝子を作製するために、ＶＨ及びＶＬコードＤＮＡ断片は、ＶＨ及びＶＬ配列を、ＶＬ及びＶＨ領域が可動性リンカーによってつながれた連続した単鎖タンパク質として発現することができるように、例えばアミノ酸配列（Ｇｌｙ４−Ｓｅｒ）３をコードする可動性リンカーをコードする別の断片に適切に作用するように連結される（例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；Ｈｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０  Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４を参照されたい）。
【０２４５】
モノクローナル抗体の生成
モノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、従来のモノクローナル抗体についての手法、例えばＫｏｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５  Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５）の標準的な体細胞ハイブリダイゼーション技術を含む様々な技術によって産生することができる。モノクローナル抗体を産生するための多くの技術、例えばＢリンパ球のウイルス性又は発癌性形質転換を用いることができる。
【０２４６】
ハイブリドーマを調製するための動物系は、マウス系である。マウスにおけるハイブリドーマ産生は、十分に確立されている手順である。免疫プロトコール及び融合のための免疫化脾細胞の単離のための技術は、当技術分野において知られている。融合パートナー（例えば、マウス骨髄腫細胞）及び融合手順も知られている。
【０２４７】
尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれるキメラ又はヒト化抗体は、上記に記載されるように調製されたマウスモノクローナル抗体の配列に基づいて調製することができる。重鎖及び軽鎖免疫グロブリンをコードするＤＮＡは、関心のあるマウスハイブリドーマから得ることができ、標準的な分子生物学の技術を使用して、非マウス（例えば、ヒト）免疫グロブリン配列を含有するように操作することができる。例えば、キメラ抗体を作製するために、マウス可変領域は、当技術分野において知られている方法を使用して、ヒト定常領域に連結することができる（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号明細書を参照されたい）。ヒト化抗体を作製するために、マウスＣＤＲ領域は、当技術分野において知られている方法を使用して、ヒトフレームワーク中に挿入することができる（例えば、米国特許第５２２５５３９号明細書；米国特許第５５３０１０１号明細書；米国特許第５５８５０８９号明細書；米国特許第５６９３７６２号明細書及び米国特許第６１８０３７０号明細書を参照されたい）。
【０２４８】
ある実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、ヒトモノクローナル抗体である。ＡｃｔＲＩＩＢに対して特異的なそのようなヒトモノクローナル抗体は、マウス系ではなくヒト免疫系の一部を有するトランスジェニック又は染色体導入マウスを使用して生成され得る。これらのトランスジェニック及び染色体導入マウスは、それぞれＨｕＭＡｂマウス及びＫＭマウスと本明細書において呼ばれるマウスを含み、本明細書において「ヒトＩｇマウス」と総称して呼ばれる。（例えば、Ｌｏｎｂｅｒｇ，ｅｔ  ａｌ．，１９９４  Ｎａｔｕｒｅ  ３６８（６４７４）：８５６−８５９を参照されたい）。米国特許第５，５４５，８０６号明細書；米国特許第５，５６９，８２５号明細書；米国特許第５，６２５，１２６号明細書；米国特許第５，６３３，４２５号明細書；米国特許第５，７８９，６５０号明細書；米国特許第５，８７７，３９７号明細書；米国特許第５，６６１，０１６号明細書；米国特許第５，８１４，３１８号明細書；米国特許第５，８７４，２９９号明細書；米国特許第５，７７０，４２９号明細書；及び米国特許第５，５４５，８０７号明細書；並びに国際公開第９２／１０３９１８号パンフレット、国際公開第９３／１２２２７号パンフレット、国際公開第９４／２５５８５号パンフレット、国際公開第９７／１１３８５２号パンフレット、国際公開第９８／２４８８４号パンフレット；国際公開第９９／４５９６２号パンフレット；及び国際公開第０１／１４４２４号パンフレットをさらに参照されたい。
【０２４９】
別の実施形態では、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれるヒト抗体は、ヒト重鎖導入遺伝子及びヒト軽鎖導入染色体を有するマウスなどの導入遺伝子及び導入染色体上にヒト免疫グロブリン配列を有するマウスを使用して産生することができる。本明細書において「ＫＭマウス」と呼ばれるそのようなマウスは、国際公開第０２／４３４７８号パンフレットにおいて詳細に記載されている。
【０２５０】
さらに、ヒト免疫グロブリン遺伝子を発現する代替のトランスジェニック動物系は、当技術分野において入手可能であり、本開示の抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体を産生するために使用することができる。例えば、Ｘｅｎｏｍｏｕｓｅ（Ａｂｇｅｎｉｘ，Ｉｎｃ．）と呼ばれる代替のトランスジェニック系を使用することができる。そのようなマウスは、例えば、米国特許第５，９３９，５９８号明細書；米国特許第６，０７５，１８１号明細書；米国特許第６，１１４，５９８号明細書；米国特許第６，１５０，５８４号明細書及び米国特許第６，１６２，９６３号明細書において記載されている。
【０２５１】
本開示の組成物中に含まれるヒト組換え抗体は、ヒト免疫グロブリン遺伝子のライブラリーをスクリーニングするためにファージディスプレー方法を使用して調製することもできる。ヒト抗体を単離するためのそのようなファージディスプレー方法は、当技術分野において確立されているか又は下記の実施例において記載される。例えば、米国特許第５，２２３，４０９号明細書；米国特許第５，４０３，４８４号明細書；米国特許第５，５７１，６９８号明細書；米国特許第５，４２７，９０８号明細書；米国特許第５，５８０，７１７号明細書；米国特許第５，９６９，１０８号明細書；米国特許第６，１７２，１９７号明細書；米国特許第５，８８５，７９３号明細書；米国特許第６，５２１，４０４号明細書；米国特許第６，５４４，７３１号明細書；米国特許第６，５５５，３１３号明細書；米国特許第６，５８２，９１５号明細書及び米国特許第６，５９３，０８１号明細書を参照されたい。
【０２５２】
尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれるヒトモノクローナル抗体は、免疫に際してヒト抗体応答を生成することができるようにヒト免疫細胞を再構成したＳＣＩＤマウスを使用して調製することもできる。そのようなマウスは、例えば、米国特許第５，４７６，９９６号明細書及び米国特許第５，６９８，７６７号明細書において記載されている。
【０２５３】
ヒトモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマの生成
尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれるヒトモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマを生成するために、免疫化されたマウス由来の脾細胞及び／又はリンパ節細胞を単離し、マウス骨髄腫細胞株などの適切な不死化細胞株に融合することができる。結果として生じるハイブリドーマは、抗原に特異的な抗体の産生についてスクリーニングすることができる。例えば、免疫化されたマウス由来の脾リンパ球の単細胞浮遊液を５０％  ＰＥＧにより６分の１の数のＰ３Ｘ６３−Ａｇ８．６５３非分泌マウス骨髄腫細胞（ＡＴＣＣ、ＣＲＬ  １５８０）と融合することができる。細胞は、平底マイクロタイタープレート中でおよそ２×１４５で平板培養し、次いで２０％胎児クローン血清、１８％「６５３」条件培地、５％  ｏｒｉｇｅｎ（ＩＧＥＮ）、４ｍＭ  Ｌ−グルタミン、１ｍＭピルビン酸ナトリウム、５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、０：０５５ｍＭ  ２−メルカプトエタノール、５０ユニット／ｍｌペニシリン、５０ｍｇ／ｍｌストレプトマイシン、５０ｍｇ／ｍｌゲンタマイシン及び１×ＨＡＴ（Ｓｉｇｍａ；ＨＡＴは、融合の２４時間後に追加される）を含有する選択培地中で２週間のインキュベーションを続ける。およそ２週間後、細胞は、ＨＡＴをＨＴと交換した培地中で培養することができる。個々のウェルは、次いで、ヒトモノクローナルＩｇＭ及びＩｇＧ抗体についてＥＬＩＳＡによってスクリーニングすることができる。大規模なハイブリドーマ増殖が生じたら、一般に１０〜１４日後に培地を観察することができる。抗体分泌ハイブリドーマは、再度平板培養し、再度スクリーニングすることができ、ヒトＩｇＧについてなお陽性である場合、モノクローナル抗体は、限界希釈によって少なくとも２回サブクローニングすることができる。安定したサブクローンは、次いで、特徴付けのために組織培養培地中で少量の抗体を生成するようにインビトロにおいて培養することができる。
【０２５４】
ヒトモノクローナル抗体を精製するために、選択されたハイブリドーマは、モノクローナル抗体精製のために２リットルのスピナーフラスコ中で増殖させることができる。上清は、プロテインＡ−セファロース（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）によるアフィニティークロマトグラフィー前にろ過し、濃縮することができる。溶出されたＩｇＧは、純度を確かめるためにゲル電気泳動及び高速液体クロマトグラフィーによってチェックすることができる。バッファー溶液は、ＰＢＳに交換することができ、濃度は、１．４３の吸収係数を使用してＯＤ２８０によって決定することができる。モノクローナル抗体は、等分し、−８０℃で保存することができる。
【０２５５】
モノクローナル抗体を産生するトランスフェクトーマの生成
尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる抗体は、例えば、当技術分野においてよく知られているように、組換えＤＮＡ技術及び遺伝子トランスフェクション方法の組み合わせを使用して宿主細胞トランスフェクトーマにおいて産生することもできる（例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：１２０２）。
【０２５６】
例えば、抗体又はその抗体断片を発現させるために、部分的な又は完全長軽鎖及び重鎖をコードするＤＮＡは、標準的な分子生物学の技術によって得ることができ（例えば、関心のある抗体を発現するハイブリドーマを使用するＰＣＲ増幅又はｃＤＮＡクローニング）、ＤＮＡは、遺伝子が転写及び翻訳制御配列に適切に作用するように連結されるように発現ベクター中に挿入することができる。これに関連して、用語「適切に作用するように連結される」は、ベクター内の転写及び翻訳制御配列が、抗体遺伝子の転写及び翻訳を調節するといったそれらの意図される機能を果たすように、抗体遺伝子がベクター中にライゲーションされることを意味することが意図される。発現ベクター及び発現制御配列は、使用される発現宿主細胞と適合するように選択される。抗体軽鎖遺伝子及び抗体重鎖遺伝子は、別々のベクター中に挿入することができるか、又はより典型的には、両方の遺伝子は、同じ発現ベクター中に挿入される。抗体遺伝子は、標準的な方法によって発現ベクター中に挿入される（抗体遺伝子断片及びベクター上の相補的な制限部位のラーゲ−ション又は制限部位が存在しない場合、平滑末端ラーゲ−ション）。本明細書において記載される抗体の軽鎖及び重鎖可変領域は、ＶＨセグメントがベクター内のＣＨセグメントに適切に作用するように連結され、ＶＬセグメントがベクター内のＣＬセグメントに適切に作用するように連結されるように、所望のアイソタイプの重鎖定常領域及び軽鎖定常領域を既にコードしている発現ベクター中にそれらを挿入することにより、任意の抗体アイソタイプの完全長抗体遺伝子を作製するために使用することができる。加えて又は代わりに、組換え発現ベクターは、宿主細胞からの抗体鎖の分泌を容易にするシグナルペプチドをコードすることができる。抗体鎖遺伝子は、シグナルペプチドが抗体鎖遺伝子のアミノ末端にインフレームで連結されるように、ベクター中にクローニングすることができる。シグナルペプチドは、免疫グロブリンシグナルペプチド又は異種シグナルペプチド（すなわち非免疫グロブリンタンパク質由来のシグナルペプチド）であり得る。
【０２５７】
抗体鎖遺伝子に加えて、本開示の組換え発現ベクターは、宿主細胞における抗体鎖遺伝子の発現を制御する調節配列を有する。用語「調節配列」は、抗体鎖遺伝子の転写又は翻訳を制御するプロモーター、エンハンサー及び他の発現制御エレメント（例えば、ポリアデニル化シグナル）を含むことが意図される。そのような調節配列は、例えば、Ｇｏｅｄｄｅｌ（Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  １８５，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ  １９９０）において記載されている。調節配列の選択を含む発現ベクターの設計は、形質転換される宿主細胞の選択、所望されるタンパク質の発現のレベルなどの因子に依存し得ることが当業者によって十分に理解されるであろう。哺乳動物宿主細胞発現のための調節配列は、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）、アデノウイルス（例えば、アデノウイルス主要後期プロモーター（ＡｄＭＬＰ））及びポリオーマに由来するプロモーター及び／又はエンハンサーなど、哺乳動物細胞における直接的な高レベルのタンパク質発現を指示するウイルス性のエレメントを含む。代わりに、ユビキチンプロモーター又はＰ−グロビンプロモーターなどの非ウイルス性の調節配列が使用され得る。さらに、ＳＶ４０初期プロモーター及びヒトＴ細胞白血球ウイルス１型の末端反復配列由来の配列を含有するＳＲａプロモーター系など、異なる供給源由来の配列から構成される調節エレメント（Ｔａｋｅｂｅ，Ｙ．ｅｔ  ａｌ．，１９８８  Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．８：４６６−４７２）。
【０２５８】
抗体鎖遺伝子及び調節配列に加えて、組換え発現ベクターは、宿主細胞におけるベクターの複製を調節する配列（例えば、複製開始点）及び選択可能マーカー遺伝子などのさらなる配列を有し得る。選択可能マーカー遺伝子は、ベクターが導入された宿主細胞の選択を容易にする（例えば、米国特許第４，３９９，２１６号明細書、米国特許第４，６３４，６６５号明細書及び米国特許第５，１７９，０１７号明細書を参照されたい）。例えば、典型的に、選択可能マーカー遺伝子は、ベクターが導入された宿主細胞に、Ｇ４１８、ハイグロマイシン又はメトトレキサートなどの薬剤に対する抵抗力を与える。選択可能マーカー遺伝子は、ジヒドロ葉酸レダクターゼ（ＤＨＦＲ）遺伝子（メトトレキサートによるｄｈｆｒ−宿主細胞の選択／増幅において使用するため）及びｎｅｏ遺伝子（Ｇ４１８選択のため）を含む。
【０２５９】
軽鎖及び重鎖の発現のために、重鎖及び軽鎖をコードする発現ベクターは、標準的な技術によって宿主細胞中にトランスフェクトされる。用語「トランスフェクション」の様々な形態は、一般に、原核生物又は真核生物宿主細胞中への外因性ＤＮＡの導入に使用される種々様々の技術、例えばエレクトロポレーション、リン酸カルシウム沈殿、ＤＥＡＥ−デキストラントランスフェクション及び他の同種のものを包含することが意図される。原核生物又は真核生物宿主細胞において本開示の抗体を発現させることは、理論的に可能である。真核細胞、特に哺乳動物宿主細胞における抗体の発現は、そのような真核細胞、特に哺乳動物細胞が、適切にフォールドされた免疫学的に活性な抗体を組み立て、分泌する可能性が原核細胞よりも高いために取り上げられる。抗体遺伝子の原核生物による発現は、高収量の活性抗体の産生にとって効果的でないことが報告された（Ｂｏｓｓ，Ｍ．Ａ．ａｎｄ  Ｗｏｏｄ，Ｃ．Ｒ．，１９８５  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ  ６：１２−１３）。
【０２６０】
本開示の組成物中に含まれる組換え抗体を発現するための哺乳動物宿主細胞は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞）（例えば、Ｒ．Ｊ．Ｋａｕｆｍａｎ  ａｎｄ  Ｐ．Ａ．Ｓｈａｒｐ，１９８２  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５９：６０１−６２１において記載されるように、ＤＨＦＲ選択可能マーカーと共に使用される、Ｕｒｌａｕｂ  ａｎｄ  Ｃｈａｓｉｎ，１９８０  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ７７：４２１６−４２２０において記載されるｄｈｆｒ−ＣＨＯ細胞を含む）、ＮＳＯ骨髄腫細胞、ＣＯＳ細胞及びＳＰ２細胞を含む。一実施形態では、宿主細胞は、ＣＨＯ  Ｋ１ＰＤ細胞である。特に、ＮＳＯ骨髄腫細胞との使用について、別の発現系は、国際公開第８７／０４４６２号パンフレット、国際公開第８９／０１０３６号パンフレット及び欧州特許第３３８，８４１号明細書において示されるＧＳ遺伝子発現系である。本開示の組成物中に含まれる組換え抗体を発現するための哺乳動物宿主細胞は、例えば、米国特許第６，９４６，２９２Ｂ２号明細書において記載されるように、ＦＵＴ８遺伝子発現が欠損した哺乳動物細胞系を含む。抗体遺伝子をコードする組換え発現ベクターが哺乳動物宿主細胞中に導入される場合、抗体は、宿主細胞における抗体の発現又は宿主細胞が増殖する培養培地中への抗体の分泌を可能にするのに十分な期間、宿主細胞を培養することによって産生される。抗体は、標準的なタンパク質精製方法を使用して、培養培地から取り出すことができる。
【０２６１】
医薬組成物
別の態様では、本開示は、医薬として許容されるキャリヤと一緒に製剤される、上記に記載される抗体／モノクローナル抗体又はその抗原結合性部分の１つ又は組み合わせを含有する、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物、例えば医薬組成物を提供する。そのような組成物は、記載される抗体、又は免疫複合体、又は二重特異性分子の１つ又は組み合わせ（例えば、２つ以上の異なる）を含み得る。例えば、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される医薬組成物は、標的抗原上の異なるエピトープに結合するか又は相補的な活性を有する抗体の組み合わせを含むことができる。
【０２６２】
尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される医薬組成物は、併用療法で投与することもでき、すなわち他の薬剤と組み合わせることもできる。例えば、併用療法は、少なくとも１つの他の筋肉量／筋肉強度を増加させる薬剤、例えばＩＧＦ−１若しくはＩＧＦ−１の変異体、抗ミオスタチン抗体、ミオスタチンプロペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢに結合するが活性化しないミオスタチンデコイタンパク質、ベータ２アゴニスト、グレリンアゴニスト、ＳＡＲＭ、ＧＨアゴニスト／ミメティック又はフォリスタチンと組み合わせた本開示の抗ＡｃｔＲＩＩ抗体を含むことができる。併用療法において使用することができる治療剤の例は、本開示の抗体の使用についてのセクションにおいてより詳細に下記に記載される。
【０２６３】
本明細書において使用されるように、「医薬として許容されるキャリヤ」は、任意の及びすべての溶剤、分散媒、コーティング、抗菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延剤並びに生理学的に適合する同様のものを含む。キャリヤは、静脈内、筋肉内、皮下、非経口、脊髄又は表皮投与（例えば、注射又は注入による）、好ましくは静脈内注射又は注入に適しているべきである。投与のルートに依存して、活性化合物、すなわち抗体、免疫複合体又は二重特異性分子は、化合物を不活性化し得る酸及び他の天然の条件の作用から化合物を保護するための材料でコーティングされ得る。
【０２６４】
尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される医薬組成物は、医薬として許容される酸化防止剤も含み得る。医薬として許容される酸化防止剤の例は、アスコルビン酸、システイン塩酸塩、硫化水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム及び他の同種のものなどの水溶性の酸化防止剤；アスコルビルパルミタート、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、レシチン、没食子酸プロピル、アルファ−トコフェロール及び他の同種のものなどの油溶性の酸化防止剤；並びにクエン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ソルビトール、酒石酸、リン酸及び他の同種のものなどの金属キレート剤を含む。
【０２６５】
本開示の医薬組成物において用いられ得る、適した水性及び非水性のキャリヤの例は、水、エタノール、ポリオール（グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール及び他の同種のものなど）、並びにその適した混合物、オリーブ油などの植物油、並びにオレイン酸エチルなどの注射用の有機エステルを含む。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング剤の使用により、分散液の場合、必要とされる粒径の維持により、及び界面活性剤の使用により維持することができる。
【０２６６】
尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用されるこれらの組成物は、保存剤、湿潤剤、乳化剤及び分散剤などの補助剤も含有し得る。微生物の存在の予防は、上記の滅菌法並びに様々な抗菌剤及び抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸及び他の同種のものの組み入れの両方によって確実にされ得る。組成物中に糖、塩化ナトリウム及び他の同種のものなどの等張剤を含むことも望ましいことがあり得る。加えて、注射用の医薬形態の長期の吸収は、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンなどの吸収を遅延させる薬剤の組み入れによってもたらされ得る。
【０２６７】
医薬として許容されるキャリヤは、滅菌注射用溶液又は分散液の即時調製のための滅菌水溶液又は分散液及び滅菌粉末を含む。医薬として活性な物質についてのそのような媒体及び薬剤の使用は、当技術分野において知られている。任意の従来の媒体又は薬剤が活性化合物と不適合性である場合を除いて、本開示の医薬組成物におけるその使用が想定される。補足の活性化合物も組成物中に組み込むことができる。
【０２６８】
治療用組成物は、製造及び貯蔵の条件下で滅菌され、安定していなければならない。組成物は、溶液、マイクロエマルション、リポソーム又は高薬剤濃度に適した他の規則正しい構造物として製剤することができる。キャリヤは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール及び液体ポリエチレングリコール並びに他の同種のもの）、並びにその適した混合物を含有する溶媒又は分散媒であり得る。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用により、分散液の場合、必要とされる粒径の維持により、及び界面活性剤の使用により維持することができる。多くの場合、組成物中に等張剤、例えば糖、マンニトールなどの多価アルコール、ソルビトール又は塩化ナトリウムを含むことができる。注射用の組成物の長期の吸収は、吸収を遅延させる薬剤、例えばモノステアリン酸塩及びゼラチンを組成物中に含むことによってもたらすことができる。
【０２６９】
滅菌注射用溶液は、必要に応じて、上記に列挙される薬剤の１つ又はその組み合わせと共に適切な溶剤中に必要とされる量で活性化合物を組み込み、その後に続く滅菌精密濾過によって調製することができる。通常、分散液は、塩基性分散媒及び上記に列挙されるものからの必要とされる他の薬剤を含有する滅菌ビヒクル中に活性化合物を組み込むことによって調製される。滅菌注射用溶液の調製のための滅菌粉末の場合、調製の方法は、そのあらかじめ滅菌ろ過された溶液から活性薬剤及び任意のさらなる所望の薬剤の粉末を産出する真空乾燥及び凍結乾燥（冷凍乾燥）である。
【０２７０】
単一の投薬形態を産生するためにキャリヤ物質と組み合わせることができる活性薬剤の量は、治療されている対象及び投与の特定のモードに依存して変動するであろう。単一の投薬形態を産生するためにキャリヤ物質と組み合わせることができる活性薬剤の量は、通常、治療効果をもたらす組成物の量となるであろう。通常、１００パーセントのうち、この量は、医薬として許容されるキャリヤと組み合わせて約０．０１パーセント〜約９９パーセントの活性薬剤、約０．１パーセント〜約７０パーセント又は約１パーセント〜約３０パーセントの活性薬剤の範囲にわたるであろう。
【０２７１】
投薬プログラムは、最適な所望される応答（例えば、治療応答）をもたらすために調整される。例えば、１回のボーラス投与によって投与され得るいくつか分けた用量がある期間にわたって投与され得るか、又は用量は、治療上の状況の要件によって示されるように相応に低下若しくは増加され得る。投与の容易性及び投薬量の均一性のために投薬単位形態で非経口組成物を製剤することは、とりわけ有利である。本明細書において使用される投薬単位形態は、治療される対象に対する単位投薬量として適した物理的に個別の単位を指し、それぞれの単位は、必要とされる医薬キャリヤと共同して、所望の治療効果をもたらすように計算された所定の量の活性化合物を含有する。本開示の投薬単位形態についての規格は、活性化合物の特有の特徴及び実現される特定の治療効果並びに個人における敏感性の治療のためのそのような活性化合物を合成することの当技術分野における固有の限界によって必然的に決められるか又はそれに直接依存する。
【０２７２】
尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物を含む抗体の投与について、抗体投薬量は、宿主体重に関して約０．０００１〜約１００ｍｇ／ｋｇ、より一般には約０．０１〜約３０ｍｇ／ｋｇの範囲にわたる。例えば、投薬量は、約１〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲内の約１ｍｇ／ｋｇ体重、約３ｍｇ／ｋｇ体重、約５ｍｇ／ｋｇ体重又は約１０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０ｍｇ／ｋｇ体重である。投薬は、必要に応じて繰り返され、約１週間当たり１回〜約１０週間ごとに１回の範囲であり得、例えば４〜８週間ごとに１回であり得る。
【０２７３】
投与は、例えば、静脈内に実行される。尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される抗ＡｃｔＲＩＩ抗体、例えばビマグルマブについての投薬プログラムは、静脈内投与による４週間ごとに１回の約１ｍｇ／ｋｇ体重又は約３ｍｇ／ｋｇ体重又は約１０ｍｇ／ｋｇ体重を含む。
【０２７４】
投与は、例えば、皮下で実行される。尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される抗ＡｃｔＲＩＩ抗体、例えばビマグルマブについての投薬プログラムは、皮下投与による１週間当たり１回の約１ｍｇ／ｋｇ体重又は約３ｍｇ／ｋｇ体重又は約１０ｍｇ／ｋｇ体重を含む。
【０２７５】
いくつかの方法では、異なる結合特異性を有する２つ以上のモノクローナル抗体は、本開示の組成物中に含まれ、したがって並行して投与されるが、その場合、投与されるそれぞれの抗体の投薬量は、示される範囲内にある。抗体は、一般に、複数回投与される。１回の投薬間の間隔は、例えば、毎週、毎月、３か月ごと、６か月ごと又は毎年であり得る。期間は、患者における標的抗原に対する抗体の血中レベルの測定によって示されるように不定期でもあり得る。いくつかの方法では、投薬量は、約１〜約１０００μｇ／ｍｌ、いくつかの方法では約２５〜約３００μｇ／ｍｌの血漿抗体濃度を実現するために調整される。例えば、ＡｃｔＲＩＩ抗体は、抗ミオスタチン抗体と同時投与することができ得る。
【０２７６】
投薬量及び頻度は、患者における抗体の半減期に依存して変動する。一般に、ヒト抗体は、最長の半減期を示し、ヒト化抗体、キメラ抗体及び非ヒト抗体がこれに続く。投薬量及び投与の頻度は、治療が予防的であるか又は治療的であるかに依存して変動することができる。予防的な適用では、比較的低い投薬量が長い期間にわたって比較的短い間隔で投与される。患者の中には、その後、生涯にわたって治療を受け続ける者もいる。治療的な適用では、比較的短い間隔での比較的高い投薬量が、疾患の進行が低下するか若しくは終結するまで又は患者が疾患の症状の部分的な若しくは完全な寛解を示すまで場合により必要とされる。その後、患者に予防的な措置を施すことができる。
【０２７７】
尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される組成物中に含まれる「治療的に有効な投薬量」の抗ＡｃｔＲＩＩ抗体の投与は、疾患症状の重症度における減少、疾患無症状の期間の頻度及び継続期間の増加又は疾患罹患による欠陥若しくは能力障害の予防、すなわち自制機能の増加をもたらすことができる。疾患症状は、（ｉ）突然の咳、くしゃみ、笑い、重いものを持ち上げること及び運動後の失禁、又は（ｉｉ）止めることができない、排尿したいという切迫感を引き起こす膀胱の筋肉壁の不随意性の収縮、又は（ｉｉｉ）膀胱が、身体が作っている量と同程度の量の尿を保持することができず、且つ／若しくは膀胱を完全に空にすることができず、少量の尿漏れを引き起こす（患者は、尿道からの尿の「滴下」を常に経験している）といったものである。
【０２７８】
活性化合物は、移植片、経皮パッチ及びマイクロカプセル化された送達系を含む放出制御製剤など、急速な放出から化合物を保護するであろうキャリヤと共に調製することができる。エチレン酢酸ビニル、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル及びポリ乳酸など、生分解性で生体適合性のポリマーを使用することができる。そのような製剤の調製のための多くの方法が特許を取得しており、通常、当業者に知られている。例えば、Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｊ．Ｒ．Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９７８を参照されたい。
【０２７９】
治療用組成物は、当技術分野において知られている医療デバイスにより投与することができる。
【０２８０】
本開示の使用及び方法
尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される開示される組成物及び開示される抗体は、それらが、尿失禁の治療、又は尿失禁にかかっている患者の状態の寛解、又は尿失禁と関連する症状の低下に影響を及ぼすため、治療上の実用性を有する。
【０２８１】
本明細書において使用される用語「対象」又は「個人」は、ヒト、特に尿失禁に罹患している患者を指すことが意図される。
【０２８２】
したがって、本開示は、本明細書において開示される組成物又は開示されるＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト、例えばＡｃｔＲＩＩ結合分子、より好ましくはＡｃｔＲＩＩに対する抗体、例えばビマグルマブ又はＢＹＭ３３８がＡｃｔＲＩＩの機能を阻害し、すなわちアンタゴナイズし、それによって様々なタイプの尿失禁における改善をもたらす治療の方法にも関する。本開示は、尿失禁を予防及び又は治療するための方法であって、治療有効量のＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト、例えば好ましくはＡｃｔＲＩＩＢ結合分子、より好ましくはＡｃｔＲＩＩＢに対するアンタゴニスト抗体、例えばビマグルマブ若しくはＢＹＭ３３８又は開示される組成物を患者に投与することを含む方法を提供する。
【０２８３】
開示される治療の方法において使用することができるＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト、例えばＡｃｔＲＩＩ結合分子、好ましくはＡｃｔＲＩＩＢに対するアンタゴニスト抗体、例えばビマグルマブ又はＢＹＭ３３８の例は、上記に詳細に開示又は記載されるものである。ある実施形態では、ＡｃｔＲＩＩ抗体（例えば、ビマグルマブ又はＢＹＭ３３８）は、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用される、本明細書において開示される組成物中に含まれる。
【０２８４】
本開示は、上記に記載される尿失禁の様々な形態を治療するための医薬の製造におけるＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト、例えばＡｃｔＲＩＩＡ又はＡｃｔＲＩＩＢ受容体結合分子、好ましくはＡｃｔＲＩＩに対するアンタゴニスト抗体、例えばＢＹＭ３３８の使用にも関する。
【０２８５】
ＡｃｔＲＩＩ結合分子、好ましくはＡｃｔＲＩＩに対するアンタゴニスト抗体、例えばビマグルマブ又はＢＹＭ３３８は、単独の活性薬剤として又は他の薬剤、例えばＩＧＦ−１若しくはＩＧＦ−１の変異体、抗ミオスタチン抗体、ミオスタチンプロペプチド、ＡｃｔＲＩＩＢに結合するが、活性化しないミオスタチンデコイタンパク質、ベータ２アゴニスト、グレリンアゴニスト、ＳＡＲＭ、ＧＨアゴニスト／ミメティック又はフォリスタチンと共に例えばその補助剤として若しくはそれと組み合わせて投与され得る。
【０２８６】
前述に従って、本開示は、さらなる態様において、治療有効量のＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト、好ましくはＡｃｔＲＩＩ結合分子、より好ましくはＡｃｔＲＩＩに対するアンタゴニスト抗体、例えばビマグルマブ又はＢＹＭ３３８及び少なくとも１つの第２の原薬の同時投与、例えば同時に又は順に投与することを含む上記に定義される方法又は使用であって、前記第２の原薬は、ＩＧＦ−１若しくはＩＧＦ−１の変異体、抗ミオスタチン抗体、ミオスタチンプロペプチド、ＡｃｔＲＩＩに結合するが活性化しないミオスタチンデコイタンパク質、ベータ２アゴニスト、グレリンアゴニスト、ＳＡＲＭ、ＧＨアゴニスト／ミメティック又はフォリスタチンである、方法又は使用を提供する。
【０２８７】
キット
本発明は、ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト、例えばＡｃｔＲＩＩ受容体結合分子（例えば、ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体若しくはその抗原結合断片、例えばビマグルマブ若しくはＢＹＭ３３８）又はＡｃｔＲＩＩ受容体（すなわちＡｃｔＲＩＩＢ受容体）結合分子（例えば、抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体若しくはその抗原結合断片）（例えば、液体若しくは凍結乾燥形態の）又はＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストを含む医薬組成物（上記に記載）を含み得る、尿失禁を治療するための本発明の方法において使用するための又は尿失禁を治療する際に使用されるキットも包含する。加えて、そのようなキットは、ＡｃｔＲＩＩアンタゴニストを投与するための手段（例えば、シリンジ及びバイアル、充填済みのシリンジ、充填済みのペン）並びに使用のための説明書を含み得る。これらのキットは、例えば、密封されたミオスタチンアンタゴニスト、例えばＢＹＭ３３８と組み合わせた送達のためにさらなる治療剤（上記に記載）を含有し得る。
【０２８８】
句「投与するための手段」は、あらかじめ充填されたシリンジ、バイアル及びシリンジ、ペン型注射器、自動注入装置、ｉ．ｖ．点滴及びバッグ、ポンプなどを含むが、これらに限定されない、薬剤を患者に全身的に投与するための任意の利用可能な器具を示すために使用される。そのようなアイテムにより、患者は、薬剤を自己投与し得る（すなわち自分のために薬剤を投与する）か、又は医師が薬剤を投与し得る。
【０２８９】
キットのそれぞれの構成成分は、一般に、個々の容器内に密封されており、様々な容器は、すべて使用のための説明書と一緒に単一のパッケージ内にある。
【０２９０】
ＡｃｔＲＩＩアンタゴニストが尿失禁の治療において理想的な候補となり、以下の１つ以上などの治療上の利点を有し得ることが想定された：
ｉ．２４時間ごとの失禁エピソードの数の低下；
ｉｉ．２４時間ごとの排尿の数の低下；
ｉｉｉ．排尿／失禁エピソード当たりに排泄される容量の低下；
ｉｖ．切迫尿失禁エピソードの数の低下；
ｖ．２４時間ごとの夜間多尿エピソードの数の低下；
ｖｉ．切迫に付随するか又は切迫によって直ちに生じる尿の不随意性の漏出の数の低下；
ｖｉｉ．膀胱状態の患者による評価（ＰＰＢＣ）における改善］。
【０２９１】
ＰＰＢＣ評価基準は、６段階の評価基準により患者の現在の膀胱状態についての患者の印象を採点するように患者に求める世界的な評価ツールであり、１：「全く問題がない」〜２：「いくつかの非常に軽症の問題がある」、３：「いくつかの軽症の問題がある」、４：「（いくつかの）中程度の問題がある」、５：「重度の問題がある」、６：「多くの重度の問題がある」である。ＰＰＢＣスコアにおいて、改善は、ベースラインからベースライン後までの少なくとも１段階の改善として定義することができ、大幅な改善は、ベースラインからベースライン後までの少なくとも２段階の改善として定義することができる。
【０２９２】
当業者は、尿失禁の非外科的治療の比較試験を設計する方法を知っている。尿失禁の非外科的治療の９６の無作為化比較試験（ＲＣＴ）についてのシステマティックレビューがＳｈａｍｌｉｙａｎ及び共同研究者らによって公開されている（Ｔａｔｙａｎａ  Ａ．Ｓｈａｍｌｉｙａｎ，ＭＤ，ＭＳ；Ｒｏｂｅｒｔ  Ｌ．Ｋａｎｅ，ＭＤ；Ｊｅａｎ  Ｗｙｍａｎ，ＰｈＤ；ａｎｄ  Ｔｉｍｏｔｈｙ  Ｊ．Ｗｉｌｔ：Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  Ｒｅｖｉｅｗ：Ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｔｒｉａｌｓ  ｏｆ  Ｎｏｎｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｕｒｉｎａｒｙ  Ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ  ｉｎ  Ｗｏｍｅｎ；Ｍａｒｃｈ  １８，２００８  Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  Ｖｏｌｕｍｅ  １４８，Ｎｕｍｂｅｒ  ６，ｐａｇｅｓ  ４５９  ｔｏ  ４７４。例えば、抗体ビマグルマブを使用する臨床試験は、ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ識別名ＮＣＴ００６８９１０４：Ｓｔｕｄｙ  ｔｏ  Ｔｅｓｔ  ｔｈｅ  Ｅｆｆｉｃａｃｙ  ａｎｄ  Ｓａｆｅｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｂｅｔａ−３  Ａｇｏｎｉｓｔ  Ｍｉｒａｂｅｇｒｏｎ（ＹＭ１７８）ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  Ｗｉｔｈ  Ｓｙｍｐｔｏｍｓ  ｏｆ  Ｏｖｅｒａｃｔｉｖｅ  Ｂｌａｄｄｅｒの下で行われた研究と同様に設計することができ得る。
【０２９３】
配列
【０２９４】
【表３】
2020525421.tif 000004
【０２９５】
【表４】
2020525421.tif 000005
【０２９６】
【表５】
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【０２９７】
【表６】
2020525421.tif 000007
【０２９８】
【表７】
2020525421.tif 000008
【０２９９】
【表８】
2020525421.tif 000009
【０３００】
【表９】
2020525421.tif 000010
【０３０１】
【表１０】
2020525421.tif 000011
【０３０２】
【表１１】
2020525421.tif 000012
【０３０３】
【表１２】
2020525421.tif 000013
【０３０４】
【表１３】
2020525421.tif 000014
【０３０５】
【表１４】
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【０３０６】
【表１５】
2020525421.tif 000016
【０３０７】
【表１６】
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【０３０８】
【表１７】
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【０３０９】
【表１８】
2020525421.tif 000019
【０３１０】
【表１９】
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【０３１１】
【表２０】
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【０３１２】
開示される方法、治療、レジメン、使用及びキットの実施形態は、ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト、例えばＡｃｔＲＩＩＢ結合分子を用いる。さらなる実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢ結合分子は、ＡｃｔＲＩＩＢに対する拮抗的な抗体である。
【０３１３】
開示される方法、治療、レジメン、使用及びキットのいくつかの実施形態では、抗体は、ビマグルマブである。
【０３１４】
本開示の１つ以上の実施形態の詳細は、上記の添付の説明において記載される。本明細書において記載されるものに類似するか又はそれと均等であるいかなる方法及び材料も本開示の実施又は試験において使用することができる。本開示の他の特徴、目的及び利点は、説明及び請求項から明らかになるであろう。本明細書及び添付の請求項では、単数形は、文脈上明らかに他の意味に解すべき場合を除いて複数の指示物を含む。特に定義されない限り、本明細書において使用される技術用語及び科学用語は、すべて本開示が属する当技術分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。以下の実施例は、本開示をより詳細に例証することを目的とし、その範囲を限定することを目的とするものでは決してない。
【実施例】
【０３１５】
一般的な手法
（ｉ）機能的アッセイ、（ｉｉ）レポーター遺伝子アッセイ（ＲＧＡ）、（ｉｉｉ）ＨＥＫ２９３Ｔ／１７細胞株の培養、（ｉｖ）ミオスタチン誘発性ルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイ、（ｖ）特異性ＥＬＩＳＡ、（ｖｉ）ＡｃｔＲＩＩＢ／Ｆｃ−ミオスタチン結合相互作用ＥＬＩＳＡ、（ｖｉｉ）ｈＡｃｔＲＩＩＢ及びｈＡｃｔＲＩＩＡ発現細胞でのＦＡＣＳ滴定、（ｖｉｉｉ）初代ヒト骨格筋細胞に対する結合、（ｉｘ）表面プラズモン共鳴（Ｂｉａｃｏｒｅ）を使用する、選択された抗ヒトＡｃｔＲＩＩＢ  Ｆａｂの親和性の決定、（ｘ）ＣＫアッセイ、（ｘｉ）動物モデル、（ｘｉｉ）治療プロトコール、（ｘｉｉｉ）統計分析、（ｘｉｉｉｉ）パニング、（ｘｖ）抗体の同定及び特徴付け、（ｘｖｉ）第１の親和性成熟に由来する抗体の最適化、（ｘｖｉｉ）親和性成熟Ｆａｂ（第１の成熟）のＩｇＧ２変換、（ｘｖｉｉｉｉ）第２の親和性成熟、（ｘｘ）ＩｇＧ２変換及びＩｇＧ２の特徴付け（第２の成熟）、（ｘｘｉ）インビボにおけるマウス研究における抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体の特徴付け、（ｘｘｉｉ）ＳＥＴによる親和性の確認、（ｘｘｉｉｉ）交差ブロック研究、並びに（ｘｘｉｖ）エピトープマッピングの詳細及び技術のようなＡｃｔＲＩＩＢ抗体、それらの特徴付け及びそれに関係する方法は、国際公開第２０１０／１２５００３号パンフレットにおいて開示されている。ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストビマグルマブを腹圧性尿失禁のための治療を開発するために使用することができるかどうかを研究するために二重傷害出産シミュレーションラットモデルを使用する。前記二重傷害出産シミュレーションラットモデルは、Ｈａｉ−Ｈｏｎｇ  Ｊｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｕａｌ  ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  ｃｈｉｌｄｂｉｒｔｈ  ｉｎｊｕｒｉｅｓ  ｒｅｓｕｌｔ  ｉｎ  ｓｌｏｗｅｄ  ｒｅｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｕｄｅｎｄａｌ  ｎｅｒｖｅ  ａｎｄ  ｕｒｅｔｈｒａｌ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ；Ｎｅｕｒｏｕｒｏｌ  Ｕｒｏｄｙｎ．２００９；２８（３）：２２９−２３５及びＳｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  Ｈｉｓｔａｍｉｎｅ  ａｎｄ  Ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ａｆｔｅｒ  Ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  Ｃｈｉｌｄｂｉｒｔｈ  Ｉｎｊｕｒｙ  Ｉｍｐｒｏｖｅｓ  Ｓｔｒｅｓｓ  Ｕｒｉｎａｒｙ；Ｎｅｕｒｏｕｒｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｕｒｏｄｙｎａｍｉｃｓ  ３５：７０３−７１０（２０１６））において開示されている。Ｊｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００９のＡｎｉｍａｌ  ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ，Ｃｈｉｌｄｂｉｒｔｈ  ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｉｎｊｕｒｙ  ｍｏｄｅｌｓ  ａｎｄ  Ｌｅａｋ  ｐｏｉｎｔ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ（ＬＰＰ）ｗｉｔｈ  ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ  ｎｅｕｒｏｍｕｓｃｕｌａｒ  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｒｅｃｏｒｄｉｎｇｓと題する材料及び方法のセクションは、あたかも完全に示されるかのように本明細書に参照により組み込まれる。
【０３１６】
雌で未交尾のスプラーグドーリーラット（２００〜２５０ｇ）において陰部神経挫滅及び膣拡張によって誘発された、Ｈａｉ−Ｈｏｎｇ  Ｊｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００９及びＳｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ，２０１６によって記載されるラット腹圧性尿失禁モデルを、腹圧性尿失禁に対するビマグルマブの効果を研究するために使用する。雌で未交尾のスプラーグドーリーラット（２００〜２５０ｇ）において陰部神経挫滅及び膣拡張（ＰＮＣ＋ＶＤ）によって誘発された腹圧性尿失禁の上記に記載される実験ラットモデルにおける尿漏出圧（ＬＰＰ）及び外尿道括約筋（ＥＵＳ）筋電図検査（ＥＭＧ）について治療的介入様式で投与されたビマグルマブは、腹圧性尿失禁に対して有益な効果を有することができる。
【０３１７】
腹圧性尿失禁に対するビマグルマブの効果を調査するために、ラットは、手術の１週間後、Ｈａｉ−Ｈｏｎｇ  Ｊｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００９において記載されるプロトコールに従って治療する。
【０３１８】
【表２１】
2020525421.tif 000022
【０３１９】
機能的測定値：
ＰＮＣ＋ＶＤビヒクルグループと比較したＬＰＰ及び／又はＥＵＳＥＭＧについて、介入に際してのあらゆる可能性として考えられる統計的に有意な改善を検出し、腹圧性尿失禁に対するビマグルマブ及びクレンブテロールによる介入間の差異を調べるために、以下の機能的測定値を判断する：
１．神経傷害及び神経再生を判断するために記録される陰部神経運動枝電位（ＰＮＭＢＰ）を使用する尿漏出圧（ＬＰＰ）試験に対する応答、並びに／又は
２．外尿道括約筋筋電図（ＥＵＳ  ＥＭＧ）及び陰部神経運動枝電位（ＰＮＭＢＰ）の同時の記録により尿漏出圧（ＬＰＰ）試験を記録する可能性がある、筋肉傷害及び神経再支配を判断するための外尿道括約筋（ＥＵＳ）筋電図検査（ＥＭＧ）の記録
３．体重のモニタリング、後肢骨格筋重量（例えば、四頭筋、腓腹筋複合体、前脛骨筋）。
【０３２０】
緊張性失禁におけるプラセボ及び化合物（Ｒ）−７−（２−（１−（４−ブトキシフェニル）−２−メチルプロパン−２−イルアミノ）−１−ヒドロキシエチル）−５−ヒドロキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２（３Ｈ）−オンの酢酸塩形態を使用する臨床試験
化合物（Ｒ）−７−（２−（１−（４−ブトキシフェニル）−２−メチルプロパン−２−イルアミノ）−１−ヒドロキシエチル）−５−ヒドロキシベンゾ［ｄ］チアゾール−２（３Ｈ）−オンの酢酸塩形態を使用する臨床試験は、Ｙａｓｕｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａ  Ｄｏｕｂｌｅ−Ｂｌｉｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｔｒｉａｌ  ｏｆ  ａ／３２−ａｄｒｅｎｅｒｇｉｃ  Ａｇｏｎｉｓｔ  ｉｎ  Ｓｔｒｅｓｓ  Ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ，Ｉｎｔ  Ｕｒｏｇｙｎｅｃｏｌ  Ｊ（１９９３）４：１４６−１５１による刊行物において記載されるように設計することができる。
【０３２１】
患者の選択：
緊張性尿失禁を訴えている患者と、緊張性尿失禁及び切迫尿失禁の両方を有する患者とを選択する。さらに、４及び５のＰＰＢＣ評価基準を有する患者を選択する。尿力学的な研究は、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ  ｓｏｃｉｅｔｙのルールに従って実行する。
【０３２２】
尿力学的な研究：
治療の効果を判断するために、以下の研究を実行する／データを収集する：
・尿道側圧（例えば、Ｂｒｏｗｎ  ａｎｄ  Ｗｉｃｋｈａｍ，ＪＥＡ．Ｔｈｅ  ｕｒｅｔｈｒａｌ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｐｒｏｆｉｌｅ．Ｂｒ  Ｊ  Ｕｒｏｌ  １９６９；４１：２１１−２１７に従う）
・パッド計量試験（Ｊｏｅｒｇｅｎｓｅ  Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，Ｏｎｅ−ｈｏｕｒ  ｐａｄ  ｗｅｉｇｈｉｎｇ  ｔｅｓｔ  ｆｏｒ  ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ  ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  ｆｅｍａｌｅ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｉｎｃｏｎｔｉｎｅｎｃｅ．Ｏｂｓｔｅｔ  Ｇｙｎｅｃｏｌ  １９８７；６９：３９−４２）
・毎日の失禁の頻度／パッド交換頻度：患者は、治療前、治療中及び治療の終了時、評価基準に基づいて失禁エピソードを記録するように指示される。
・２４時間ごとの失禁エピソードの数；
・２４時間ごとの排尿の数；
・排尿／失禁エピソード当たりに排泄される容量；
・切迫尿失禁エピソードの数；
・２４時間ごとの夜間多尿エピソードの数；
・切迫に付随するか又は切迫によって直ちに生じる尿の不随意性の漏出の数；
・ＰＰＢＣ評価基準による評価。
【０３２３】
研究のエンドポイント：
主要エンドポイント：研究の初めのベースラインから研究の終了（例えば、１２週間）までの毎日の腹圧性尿失禁エピソードの頻度の変化。
【０３２４】
副次的エンドポイント：
１．２４時間ごとの失禁エピソードの数の変化；
２．２４時間ごとの排尿の数の変化；
３．排尿／失禁エピソード当たりに排泄される容量の変化；
４．切迫尿失禁エピソードの数の変化；
５．２４時間ごとの夜間多尿エピソードの数の変化；
６．切迫に付随するか又は切迫によって直ちに生じる尿の不随意性の漏出の数の変化。
【０３２５】
主要エンドポイント及び副次的エンドポイントの結果に基づく失禁の重症度における改善は、初めのステータス及び治療後のステータスを比較することによって判断する。
【０３２６】
さらに好ましい実施形態：
１．尿失禁の症状を示すか又は尿失禁を発症する危険性のある対象を治療する際に使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト。
【０３２７】
２．尿失禁は、脆弱化又は損傷した骨盤筋に起因する骨盤底障害によって引き起こされるか又はそれと関連する、実施形態１に記載の尿失禁を治療する際に使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト。
【０３２８】
３．前記尿失禁は、腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁及び反射性尿失禁からなる群から選択される失禁である、実施形態１又は２に記載の尿失禁を治療する際に使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト。
【０３２９】
４．前記尿失禁は、腹圧性尿失禁である、実施形態３に記載の尿失禁を治療する際に使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト。
【０３３０】
５．前記脆弱化又は損傷した骨盤筋は、肛門挙筋の筋肉、球海綿体筋の筋肉又は外尿道括約筋である、実施形態２に記載の尿失禁を治療する際に使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト。
【０３３１】
６．前記尿失禁は、出産又は閉経の影響に関係するか又はそれによって引き起こされる、実施形態１〜５に記載の尿失禁を治療する際に使用するためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト。
【０３３２】
７．尿失禁を治療するための方法であって、尿失禁の症状を示すか又は尿失禁を発症する危険性がある対象に有効量のＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストを投与することを含む方法。
【０３３３】
８．尿失禁は、脆弱化又は損傷した骨盤筋に起因する骨盤底障害によって引き起こされるか又はそれと関連する、実施形態７に記載の方法。
【０３３４】
９．前記尿失禁は、腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁及び反射性尿失禁からなる群から選択される失禁である、実施形態８に記載の方法。
【０３３５】
１０．前記脆弱化又は損傷した骨盤筋は、肛門挙筋の筋肉、球海綿体筋の筋肉又は外尿道括約筋である、実施形態９に記載の方法。
【０３３６】
１１．尿失禁は、出産又は閉経の影響に関係するか又はそれによって引き起こされる、実施形態１０に記載の方法。
【０３３７】
１２．腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁及び反射性尿失禁からなる群から選択される尿失禁状態と関連する骨盤筋異常を治療するための方法であって、前記骨盤筋の機能的な異常を有する対象に有効量のＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストを投与することを含む方法。
【０３３８】
１３．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、ＡｃｔＲＩＩ受容体結合分子である、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は実施形態７〜１２のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０３３９】
１４．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／又はＡｃｔＲＩＩＢ受容体に結合する、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は実施形態７〜１２のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０３４０】
１５．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分である、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は実施形態７〜１２のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０３４１】
１６．抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体は、ビマグルマブ又はその抗原結合性部分である、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は実施形態７〜１２のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０３４２】
１７．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、配列番号１８１のアミノ酸１９〜１３４（配列番号１８２）からなるＡｃｔＲＩＩＢのエピトープに結合する抗ＡｃｔＲＩＩ抗体又はその抗原結合性部分である、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は実施形態７〜１２のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０３４３】
１８．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分であり、抗ＡｃｔＲＩＩ抗体又はその抗原結合性部分は、
（ａ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）；
（ｂ）配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）；
（ｃ）配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）；
（ｄ）配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）；
（ｅ）配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）；
（ｆ）配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）；
（ｇ）配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）；又は
（ｈ）配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）及び配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むか又はそれからなるＡｃｔＲＩＩＢのエピトープに結合する、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は実施形態７〜１２のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０３４４】
１９．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分であり、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分は、
ａ）抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体又はその抗原結合部分であって、
ｉ．配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）；
ｉｉ．配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）；
ｉｉｉ．配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）；
ｉｖ．配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）；
ｖ．配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）；
ｖｉ．配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）；
ｖｉｉ．配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）；又は
ｖｉｉｉ．配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）及び配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むＡｃｔＲＩＩＢのエピトープに結合する抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体又はその抗原結合部分、及び
ｂ）アンタゴニスト抗体であって、
ｉ．配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ−配列番号１８８）；
ｉｉ．配列番号１８１のアミノ酸７６〜８４（ＧＣＷＬＤＤＦＮＣ−配列番号１８６）；
ｉｉｉ．配列番号１８１のアミノ酸７５〜８５（ＫＧＣＷＬＤＤＦＮＣＹ−配列番号１９０）；
ｉｖ．配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ−配列番号１８９）；
ｖ．配列番号１８１のアミノ酸４９〜６３（ＣＥＧＥＱＤＫＲＬＨＣＹＡＳＷ−配列番号１８７）；
ｖｉ．配列番号１８１のアミノ酸２９〜４１（ＣＩＹＹＮＡＮＷＥＬＥＲＴ−配列番号１９１）；
ｖｉｉ．配列番号１８１のアミノ酸１００〜１１０（ＹＦＣＣＣＥＧＮＦＣＮ−配列番号１９２）；又は
ｖｉｉｉ．配列番号１８１のアミノ酸７８〜８３（ＷＬＤＤＦＮ）及び配列番号１８１のアミノ酸５２〜５６（ＥＱＤＫＲ）
を含むＡｃｔＲＩＩＢのエピトープに結合するＡｃｔＲＩＩＢに対するアンタゴニスト抗体
からなる群から選択され、抗体は、約２ｐＭのＫＤを有する、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は実施形態７〜１２のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０３４５】
２０．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分であり、抗体又はその抗原結合性部分は、ヒトＡｃｔＲＩＩＡに結合するよりも１０倍以上の親和性でヒトＡｃｔＲＩＩＢに結合する、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は実施形態７〜１２のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０３４６】
２１．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分であり、抗体又はその抗原結合性部分は、配列番号１〜１４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１５〜２８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号２９〜４２からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４３〜５６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号５７〜７０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７１〜８４からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は実施形態７〜１２のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０３４７】
２２．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分であり、抗体又はその抗原結合性部分は、
（ａ）配列番号１の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１５の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号２９の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号５７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｂ）配列番号２の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１６の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３０の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号５８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｃ）配列番号３の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１７の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３１の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号５９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｄ）配列番号４の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１８の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３２の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｅ）配列番号５の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号１９の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３３の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４７の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６１の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７５の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｆ）配列番号６の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２０の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３４の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４８の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６２の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７６の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｇ）配列番号７の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２１の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３５の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号４９の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６３の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７７の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｈ）配列番号８の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２２の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３６の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５０の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号６４の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７８の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｉ）配列番号９の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２３の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３７の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５１の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６５の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号７９の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｊ）配列番号１０の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２４の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３８の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５２の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６６の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８０の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｋ）配列番号１１の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２５の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号３９の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５３の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６７の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８１の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｌ）配列番号１２の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２６の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号４０の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６８の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８２の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、
（ｍ）配列番号１３の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２７の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号４１の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号６９の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８３の軽鎖可変領域ＣＤＲ３、又は
（ｎ）配列番号１４の重鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号２８の重鎖可変領域ＣＤＲ２；配列番号４２の重鎖可変領域ＣＤＲ３；配列番号５６の軽鎖可変領域ＣＤＲ１；配列番号７０の軽鎖可変領域ＣＤＲ２；及び配列番号８４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３
を含む、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は実施形態７〜１２のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０３４８】
２３．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分であり、抗体は、配列番号１４６〜１５０及び１５６〜１６０からなる群から選択される少なくとも１つの配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長重鎖アミノ酸配列並びに配列番号１４１〜１４５及び１５１〜１５５からなる群から選択される少なくとも１つの配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する完全長軽鎖アミノ酸配列を含む、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は実施形態７〜１２のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０３４９】
２４．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分であり、抗体又はその抗原結合性部分は、
（ａ）配列番号９９の可変重鎖配列及び配列番号８５の可変軽鎖配列；
（ｂ）配列番号１００の可変重鎖配列及び配列番号８６の可変軽鎖配列；
（ｃ）配列番号１０１の可変重鎖配列及び配列番号８７の可変軽鎖配列；
（ｄ）配列番号１０２の可変重鎖配列及び配列番号８８の可変軽鎖配列；
（ｅ）配列番号１０３の可変重鎖配列及び配列番号８９の可変軽鎖配列；
（ｆ）配列番号１０４の可変重鎖配列及び配列番号９０の可変軽鎖配列；
（ｇ）配列番号１０５の可変重鎖配列及び配列番号９１の可変軽鎖配列；
（ｈ）配列番号１０６の可変重鎖配列及び配列番号９２の可変軽鎖配列；
（ｉ）配列番号１０７の可変重鎖配列及び配列番号９３の可変軽鎖配列；
（ｊ）配列番号１０８の可変重鎖配列及び配列番号９４の可変軽鎖配列；
（ｋ）配列番号１０９の可変重鎖配列及び配列番号９５の可変軽鎖配列；
（ｌ）配列番号１１０の可変重鎖配列及び配列番号９６の可変軽鎖配列；
（ｍ）配列番号１１１の可変重鎖配列及び配列番号９７の可変軽鎖配列；又は
（ｎ）配列番号１１２の可変重鎖配列及び配列番号９８の可変軽鎖配列
を含む、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は実施形態７〜１２のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０３５０】
２５．抗体は、
（ａ）配列番号１４６の重鎖配列及び配列番号１４１の軽鎖配列；
（ｂ）配列番号１４７の重鎖配列及び配列番号１４２の軽鎖配列；
（ｃ）配列番号１４８の重鎖配列及び配列番号１４３の軽鎖配列；
（ｄ）配列番号１４９の重鎖配列及び配列番号１４４の軽鎖配列；
（ｅ）配列番号１５０の重鎖配列及び配列番号１４５の軽鎖配列；
（ｆ）配列番号１５６の重鎖配列及び配列番号１５１の軽鎖配列；
（ｇ）配列番号１５７の重鎖配列及び配列番号１５２の軽鎖配列；
（ｈ）配列番号１５８の重鎖配列及び配列番号１５３の軽鎖配列；
（ｉ）配列番号１５９の重鎖配列及び配列番号１５４の軽鎖配列；又は
（ｊ）配列番号１６０の重鎖配列及び配列番号１５５の軽鎖配列
を含む、実施形態１５〜２４のいずれか一項に記載の使用又は方法のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト。
【０３５１】
２６．前記抗体は、ＡｃｔＲＩＩＢへの結合について、実施形態２５に記載の少なくとも１つの抗体を交差ブロックするか又はそれによって交差ブロックされる抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体である、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は実施形態７〜１２のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０３５２】
２７．抗体は、Ｆｃ領域の突然変異を通して改変されたエフェクター機能を有する抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体である、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は実施形態７〜１２のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０３５３】
２８．ＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニストは、抗ＡｃｔＲＩＩ受容体抗体又はその抗原結合性部分であり、抗体は、ｐＢＷ５２２（ＤＳＭ２２８７３）又はｐＢＷ５２４（ＤＳＭ２２８７４）によってコードされる、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の使用のためのＡｃｔＲＩＩ受容体アンタゴニスト又は実施形態７〜１２のいずれか一項に記載の治療の方法。
【０３５４】
２９．尿失禁を治療及び／又は予防する際に使用するためのビマグルマブ又はその抗原結合部分。
【０３５５】
３０．前記尿失禁は、腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁及び反射性尿失禁である、実施形態２９に記載の尿失禁を治療及び／又は予防する際に使用するためのビマグルマブ又はその抗原結合部分。
【０３５６】
３１．前記尿失禁は、脆弱化又は損傷した骨盤筋に起因する骨盤底障害によって引き起こされる、実施形態３０に記載の尿失禁を治療及び／又は予防する際に使用するためのビマグルマブ又はその抗原結合部分。
【０３５７】
３２．前記脆弱化又は損傷した骨盤筋は、肛門挙筋の筋肉、球海綿体筋の筋肉又は外尿道括約筋である、実施形態３１に記載の尿失禁を治療及び／又は予防する際に使用するためのビマグルマブ又はその抗原結合部分。
【０３５８】
３３．前記脆弱化又は損傷した骨盤筋は、出産又は閉経の影響に関係するか又はそれによって引き起こされる、実施形態３２に記載の尿失禁を治療及び／又は予防する際に使用するためのビマグルマブ又はその抗原結合部分。
【０３５９】
３４．尿失禁を治療及び／又は予防するための方法であって、尿失禁の症状を示すか又は尿失禁を発症する危険性がある対象に有効量のビマグルマブを投与することを含む方法。
【０３６０】
３５．前記尿失禁は、腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁及び反射性尿失禁からなる群から選択される失禁である、実施形態３４に記載の方法。
【０３６１】
３６．尿失禁は、脆弱化又は損傷した骨盤筋に起因する骨盤底障害によって引き起こされるか又はそれと関連する、実施形態３５に記載の方法。
【０３６２】
３７．前記脆弱化又は損傷した骨盤筋は、肛門挙筋の筋肉、球海綿体筋の筋肉又は外尿道括約筋である、実施形態３６に記載の方法。
【０３６３】
３８．尿失禁は、出産又は閉経の影響に関係するか又はそれによって引き起こされる、実施形態３７に記載の方法。
【０３６４】
３９．腹圧性尿失禁、切迫性尿失禁及び反射性尿失禁からなる群から選択される尿失禁状態と関連する骨盤筋異常を治療するための方法であって、前記骨盤筋の機能的な異常を有する対象に有効量のビマグルマブを投与することを含む方法。
【配列表】
2020525421000001.app
【国際調査報告】
2020525421.tif 000023
2020525421.tif 000024
2020525421.tif 000025
2020525421.tif 000026