(57)【要約】  本発明の主題は、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、かつ／又は前記症状を特徴とする疾患の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドである。病気の症状は、対象における吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択されうる。前記抗体又は断片又はスキャフォールドは、ＡＤＭのアミノ酸１−５２（配列番号１）又はその断片に結合することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドであって、ＡＤＭ（１−５２；配列番号１）又はその断片に結合する抗体又は断片又はスキャフォールド。
【請求項２】
ＡＤＭのＮ末端部（アミノ酸１−２１）：
ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号４）
に結合する請求項１に記載の、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
【請求項３】
ＡＤＭのアミノ酸２１−４２：
ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号３）
からなる中間領域（ＭＲ−）ＡＤＭの部分に結合することを特徴とする請求項１又は２に記載の、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体断片又はアドレノメデュリンに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
【請求項４】
前記病気の症状が、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、及び／又は嘔吐の群から選択される請求項１〜３の何れか一項に記載の、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体断片又はアドレノメデュリンに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
【請求項５】
前記病気が、≧１０ｍｇ／Ｌである試料中のＣ反応性タンパク質の量（ＣＲＰ）を特徴とし、かつ／又は試料中のＴＮＦの量が≧５０ｐｇ／ｍｌであり、かつ／又は試料中のバイオＡＤＭの量が≧４３ｐｇ／ｍｌであり、かつ／又は前記それを必要とする対象の平均動脈圧が低下している請求項１〜４の何れか一項に記載の、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体断片又はアドレノメデュリンに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
【請求項６】
そのような症状又は病気の治療及び／又は予防を必要とする患者における前記病気が、炎症状態、自己免疫疾患、代謝性疾患、脳疾患、心血管疾患、及び薬物誘発性疾患を含む適応症の群から選択される請求項１〜５の何れか一項に記載の、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体断片又はアドレノメデュリンに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
【請求項７】
前記病気が片頭痛である請求項１〜５の何れか一項に記載の、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体断片又はアドレノメデュリンに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
【請求項８】
単一特異性である請求項１〜７の何れか一項に記載の病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
【請求項９】
ビアコア２０００システムを使用したラベルフリー表面プラズモン共鳴で少なくとも１０-7ＭのＡＤＭに対する結合親和性を示す請求項１〜８の何れか一項に記載の、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
【請求項１０】
ＡＤＭ結合タンパク質１（補体Ｈ因子）ではない請求項１〜９の何れか一項に記載の、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
【請求項１１】
ＡＤＭのＮ末端（アミノ酸１）を認識し、それに結合する請求項１〜１０の何れか一項に記載の、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
【請求項１２】
血清、血液、血漿中のＡＤＭの半減期（ｔ１／２半滞留時間）を少なくとも１０％、好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは＞５０％、最も好ましくは＞１００％増大させるＡＤＭ安定化抗体又は断片又はスキャフォールドである請求項１〜１１の何れか一項に記載の、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
【請求項１３】
ヒト組換えＡＤＭ受容体を発現しているＣＨＯ−Ｋ１細胞において、ｈＡＤＭ２２−５２を参照拮抗薬として使用して、ＡＤＭの生物活性を８０％以下、好ましくは５０％以下遮断する請求項１〜１２の何れか一項に記載の、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
【請求項１４】
前記対象が、化学療法、生物学的生物製剤、抗生物質による治療、又は抗ウイルス化合物による治療を受ける請求項１〜１３の何れか一項に記載の病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
【請求項１５】
前記抗体又は断片が、ＡＤＭに結合するヒトモノクローナル抗体若しくは断片又はその抗体断片であり、重鎖が配列：
ＣＤＲ１：配列番号５
ＧＹＴＦＳＲＹＷ
ＣＤＲ２：配列番号６
ＩＬＰＧＳＧＳＴ
ＣＤＲ３：配列番号７
ＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹ
を含み、軽鎖が配列：
ＣＤＲ１：配列番号８
ＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹ
ＣＤＲ２：
ＲＶＳ
ＣＤＲ３：配列番号９
ＦＱＧＳＨＩＰＹＴ
を含む
請求項１〜１４の何れか一項に記載の、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
【請求項１６】
ＶＨ領域として：
配列番号１０（ＡＭ−ＶＨ−Ｃ）
ＱＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＭＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＴＧＹＴＦＳＲＹＷＩＥＷＶＫＱＲＰＧＨＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＫＡＴＩＴＡＤＴＳＳＮＴＡＹＭＱＬＳＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＨＨＨＨＨＨ
配列番号１１（ＡＭ−ＶＨ１）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＲＹＷＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＨＨＨＨＨＨ
配列番号１２（ＡＭ−ＶＨ２−Ｅ４０）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＲＹＷＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＨＨＨＨＨＨ
配列番号１３（ＡＭ−ＶＨ３−Ｔ２６−Ｅ５５）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＴＧＹＴＦＳＲＹＷＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＨＨＨＨＨＨ
配列番号１４（ＡＭ−ＶＨ４−Ｔ２６−Ｅ４０−Ｅ５５）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＴＧＹＴＦＳＲＹＷＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＨＨＨＨＨＨ
を含む群より選択される配列を含み、ＶＬ領域として以下の配列：
配列番号１５（ＡＭ−ＶＬ−Ｃ）
ＤＶＬＬＳＱＴＰＬＳＬＰＶＳＬＧＤＱＡＴＩＳＣＲＳＳＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹＬＥＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹＲＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＬＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＩＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号１６（ＡＭ−ＶＬ１）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹＬＮＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＲＬＩＹＲＶＳＮＲＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＩＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号１７（ＡＭ−ＶＬ２−Ｅ４０）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹＬＥＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＲＬＩＹＲＶＳＮＲＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＩＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
を含む群より選択される配列を含む
請求項１５に記載の、対象における、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するためのヒトモノクローナル抗体又はＡＤＭに結合する断片又はその抗体断片。
【請求項１７】
重鎖として次の配列：
配列番号２２
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＲＹＷＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＮＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
又はこの配列と＞９５％同一である配列を含み、
軽鎖として次の配列：
配列番号２３
ＤＶＶＬＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹＬＥＷＹＬＱＲＰＧＱＳＰＲＬＬＩＹＲＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＩＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
又はこの配列と＞９５％同一である配列を含む
請求項１５に記載の、対象における、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するためのヒトモノクローナル抗体又はＡＤＭに結合する断片又はその抗体断片。
【請求項１８】
請求項１〜１７の何れか一項に記載の抗体又は断片又はスキャフォールドを含む、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための医薬製剤。
【請求項１９】
重鎖として次の配列：
配列番号２２
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＲＹＷＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＮＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
又はこの配列と＞９５％、好ましくは＞９８％同一である配列を含み、軽鎖として次の配列：
配列番号２３
ＤＶＶＬＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹＬＥＷＹＬＱＲＰＧＱＳＰＲＬＬＩＹＲＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＩＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
又はこの配列と＞９５％、好ましくは＞９８％同一である配列を含む
抗体。
【請求項２０】
請求項１９に記載の抗体を含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の主題は、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、かつ／又は前記（ｓａｉｄ）症状を特徴とする疾患の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドである。病気の症状は、対象における吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択されうる。前記抗体又は断片又はスキャフォールドは、ＡＤＭのアミノ酸１−５２（配列番号１）又はその断片に結合することができる。
【背景技術】
【０００２】
多様な疾患又は病気は、共通の、部分的に非特異的な症状を有することがあり、その症状は、それを患っている個人にとって不快なものから耐えられないものまでさまざまでありうる。非常に多くの場合、複数の症状を経験している人は、これらの症状を緩和するために数種の薬を服用する必要がある。多くのさまざまな基礎疾患又は病気に関連する症状の治療又は予防の新しい形態に対する継続的な必要性が存在する。特に、基礎疾患又は病気に関連する複数の症状の治療又は予防に使用できる薬剤又は薬物を提供することが有用であろう。本発明は、その必要性に対処する。
【発明の概要】
【０００３】
ペプチドアドレノメデュリン（ＡＤＭ）は、１９９３年にヒト褐色細胞腫から単離された５２アミノ酸からなる新規降圧ペプチドとして初めて報告された（Ｋｉｔａｍｕｒａ  Ｋ．  ｅｔ  ａｌ．  １９９３．  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  Ｖｏｌ．  １９２  （２）：  ５５３−５６０）。同じ年に、１８５個のアミノ酸からなる前駆体ペプチドをコードするｃＤＮＡと、その前駆体ペプチドの完全なアミノ酸配列も報告された。とりわけ、Ｎ末端に２１個のアミノ酸のシグナル配列を含む前駆体ペプチドは、「プレプロアドレノメデュリン」（プレプロＡＤＭ）と呼ばれる。本明細書では、指定されるアミノ酸位置はすべて、通常、１８５個のアミノ酸を含むプレプロＡＤＭに関する。ペプチドアドレノメデュリン（ＡＤＭ）は、５２個のアミノ酸（配列番号１）を含むペプチドであって、プレプロＡＤＭからタンパク質分解的切断によって形成され、プレプロＡＤＭの９５〜１４６番目のアミノ酸を含むペプチドである。今のところ、プレプロＡＤＭの切断で形成されたペプチド断片のほんの少数の断片、具体的には生理学的に活性なペプチドであるアドレノメデュリン（ＡＤＭ）及びプレプロＡＤＭの２１個のシグナルペプチドの後に続く２０個のアミノ酸（２２−４１）を含むペプチドである「ＰＡＭＰ」が、より正確に特徴付けられている。１９９３年のＡＤＭの発見及び特徴付けは、集中的な研究活動の引き金となり、その結果はさまざまな総説論文にまとめられており、本明細書に関連しては、特に「ペプチド」のＡＤＭをテーマとして扱う号に見出される論文を特に参照する（論説、Ｔａｋａｈａｓｈｉ  Ｋ．  ２００１．  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ２２：１６９１）及び（Ｅｔｏ  Ｔ．  ２００１．  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ    ２２：  １６９３−１７１１）。さらなる総説は（Ｈｉｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．  ２０００．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ２１（２）：１３８−１６７）である。これまでの科学的研究で、とりわけＡＤＭは多機能調節ペプチドとみなされうることが分かっっている。ＡＤＭは、グリシンによって伸長された不活性型で循環系に放出される（Ｋｉｔａｍｕｒａ  Ｋ．  ｅｔ  ａｌ．  １９９８．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｒｅｓ．  Ｃｏｍｍｕｎ．  ２４４（２）：５５１−５５５）。ＡＤＭに特異的で、おそらく同様にＡＤＭの効果を調節する結合タンパク質も存在する（Ｐｉｏ  Ｒ．  ｅｔ  ａｌ．  ２００１．  Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２７６（１５）：１２２９２−１２３００）。これまでの研究で最も重要であるＡＤＭ及びＰＡＭＰの生理的効果は、血圧に影響を及ぼす効果であった。
【０００４】
ＡＤＭは効果的な血管拡張因子であり、降圧効果をＡＤＭのＣ末端部分の特定のペプチドセグメントと関連付けることができる。さらに、プレプロＡＤＭから形成される上記のさらなる生理活性ペプチドＰＡＭＰも、ＡＤＭとは異なる作用機序を有するようであっても、同様に降圧作用を示すことが見出されている。
【０００５】
さらに、循環中及び他の生物学的液体中で測定できるＡＤＭの濃度は、多くの病理学的状態において、健常対照者に見られる濃度よりも有意に高いことが見出されている。したがって、うっ血性心不全、心筋梗塞、腎臓病、高血圧性障害、糖尿病、ショックの急性期、並びに敗血症及び敗血症性ショックの患者におけるＡＤＭレベルは、程度はさまざまであるが、大幅に増加する。ＰＡＭＰ濃度もまた、上述の病理学的状態のいくつかで増加するが、血漿レベルはＡＤＭと比較して低い（Ｅｔｏ，  Ｔ．、前掲）。さらに、敗血症において異常に高濃度のＡＤＭが観察され、敗血症性ショックにおいて最高濃度が観察されることが知られている（（Ｅｔｏ，  Ｔ．、前掲）並びに（Ｈｉｒａｔａ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  １９９６．  ８１（４）：  １４４９−１４５３、Ｅｈｌｅｎｚ  Ｋ．  ｅｔ  ａｌ．  １９９７．  Ｅｘｐ  Ｃｌｉｎ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  １０５：  １５６−１６２  ）、Ｔｏｍｏｄａ  Ｙ．  ｅｔ  ａｌ．  ２００１．  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ    ２２：  １７８３−１７９４  、Ｕｅｄａ  Ｓ．  ｅｔ  ａｌ．  １９９９．  Ａｍ．  Ｊ．  Ｒｅｓｐｉｒ．  Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．  １６０：  １３２−１３６、及びＷａｎｇ  Ｐ．  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ２００１．  ２２：  １８３５−１８４０を参照）。
【０００６】
片頭痛におけるアドレノメデュリンの役割についての知見は限られている。アドレノメデュリンは脳循環内で血管拡張作用を有するので、片頭痛に関与すると仮定されている。一方、片頭痛を患う患者へのヒトＡＤＭ静脈内注入の投与は、プラセボと比較して、有意に多くの頭痛又は片頭痛を誘発しなかった（Ｐｅｔｅｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．  ２００８．  Ｃｅｐｈａｌａｌｇｉａ  ２９：  ２３−３０）。さらに、Ａｋｃａｌｉらは、片頭痛患者の自然経過において血漿アドレノメデュリンレベルが低いことを報告した（Ａｋｃａｌｉ  Ａ．  ２０１６．  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ３（４）：  １５３−１５８）。一方、Ｋｉｓらは、抗片頭痛薬としてのＡＤＭ媒介増殖作用を抑制するための潜在的な治療ツールとして、新規で、強力で、特異的で、かつ可能ならば非ペプチド性の受容体拮抗薬の開発が必要であると述べている（Ｋｉｓ  ｅｔ  ａｌ．  ２００３．  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ  Ｒｅｓ  ２６  （Ｓｕｐｐｌ）：  Ｓ６１−Ｓ７０）。
【０００７】
定義
発明を詳細に記載する前に、明細書全体を通して使用される特定の技術用語の定義を提供することが便宜的であると考えられる。本発明を特定の実施形態に関して記載することになるが、この記載は限定的な意味で解釈されるべきではない。本発明の好ましい実施形態を詳細に記載する前に、本発明を理解するために重要な定義が与えられる。
【０００８】
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形の「ａ」及び「ａｎ」は、文脈が明らかにそうでないと示さない限り、それぞれの複数形も含む。
【０００９】
本発明に関連して、「約」及び「およそ」という用語は、当業者が問題の特徴の技術的効果を理解してさらに確実にするようになる精度の間隔を意味する。典型的には、この用語は、示された数値から±２０％、好ましくは±１５％、より好ましくは±１０％、さらにより好ましくは±５％外れることを示す。
【００１０】
「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は限定するものではないことが理解されるべきである。本発明では、から（ｏｆ）「なる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ）」という用語は、を（ｏｆ）「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語の好ましい実施形態であると考えられる。以下、ある群が、少なくともある特定の数の実施形態を含むと定義される場合、これは、好ましくはそれらの実施形態のみからなる群も包含することを意味する。
【００１１】
本明細書で使用される用語は、特定の実施形態のみを説明する目的のものであり、添付の特許請求の範囲によってのみ限定されることになる本発明の範囲を限定することを意図しないことも理解されるべきである。
【００１２】
本明細書で使用される場合、「吐き気」という用語は、不随意の嘔吐の衝動を伴う、胃上部の不調及び不快感の感覚を指す（Ｍｅｔｚ  Ａ．  ２０１７．  Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ  Ｆａｍｉｌｙ  Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ  Ｖｏｌ．  ３６  （９）：  ６８８−６９２）。嘔吐の前に起こることもあるが、人は嘔吐を伴わない吐き気を催しうる。吐き気は長く続くと、弱くなる症状である。吐き気は非特異的な症状であり、考えられる原因が多くあることを意味する。吐き気のいくつかの一般的な原因には、乗り物酔い、めまい、片頭痛、失神、低血糖、胃腸炎（胃感染症）、又は食中毒がある。吐き気は、化学療法を含む多くの薬の副作用又は妊娠初期のつわりなどである。吐き気はまた、不安、嫌悪感、抑うつによって引き起こされることもある。
【００１３】
本明細書で使用される場合、「頭痛」という用語は、頭又は首の領域のどこかにおける痛みの症状である。片頭痛（鋭い痛み又はずきずきする痛み）、緊張型頭痛、群発頭痛で起こる（Ｗａｌｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．  ２０１４．  Ｊ  Ｙｏｇａ  Ｐｈｙｓ  Ｔｈｅｒ  ２０１４，  ４：１）。重度の頭痛がある人では、抑うつのリスクも高くなる。頭痛は、重症であろうとなかろうと、多くの病態の結果として起こりうる。頭痛についてさまざまな分類体系が存在する。頭痛の原因としては、疲労、睡眠不足、ストレス、薬物の影響、レクリエーショナルドラッグの影響、ウイルス感染、大きな騒音、風邪、頭部負傷、非常に冷たい食物又は飲料の急速な摂取、歯又は副鼻腔の問題が挙げられうることがよく知られている。
【００１４】
頭痛は「一次性」又は「二次性」に大別される（Ｏｌｅｓｏｎ  ２００５．  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ２０（２）：  ６１−６８）。一次性頭痛は良性で反復性の頭痛であり、基礎疾患や器質的な問題によって生じるものではない。例えば、片頭痛は一次性頭痛の一種である。一次性頭痛は日常的に激しい痛みや障害を引き起こすことがあるが、危険ではない。一次性頭痛の４つのカテゴリーは次の通りである：片頭痛、緊張型頭痛（ＴＴＨ）、群発頭痛及び他の三叉神経・自律神経性頭痛、並びに他の一次性頭痛。
【００１５】
二次性頭痛は、器質性、代謝性、薬物誘発性のもので、感染症、頭部外傷、血管障害、脳出血、又は腫瘍のような基礎疾患によって引き起こされる。二次性頭痛は無害なことも危険なこともある。片頭痛は、中等度から重度であるの反復性の頭痛を特徴とする一次性頭痛疾患である（総説については、Ｄｉｅｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．  ２０１２．    Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｎｅｕｒｏｌ．  ８（３）：１６２−７１を参照）。典型的には、頭痛は頭部の半分に起こり、拍動性で、２〜７２時間続く。関連症状としては、吐き気、嘔吐、及び光、音、又は匂いに対する過敏が挙げられうる。一般に痛みは身体活動によって悪化する。前兆がみられる人は１／３に及び、典型的には短期間の視覚障害で、頭痛がすぐに起こるであろうことを示す。時折、前兆の後に頭痛がほとんど又は全く起こらないことがある。
【００１６】
本明細書で使用される場合、「筋肉痛（ｍｕｓｃｌｅ  ａｃｈｅｓ）」又は「筋肉痛（ｍｕｓｃｌｅ  ｐａｉｎ）」という用語は、「筋肉痛（ｍｙａｌｇｉａ）」とも呼ばれ、多くの疾患及び障害の症状を指す（総説については、Ｋｙｒｉａｋｉｄｅｓ  ｅｔ  ａｌ．  ２０１３．  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ２０：  ９９７−１００５を参照）。最も一般的な原因は、筋肉や筋肉群の使いすぎや伸ばしすぎである。外傷歴のない筋肉痛は、多くの場合ウイルス感染に起因する。長期にわたる筋肉痛は、代謝性ミオパシー、一部の栄養欠乏、又は慢性疲労症候群を示唆しうる。
【００１７】
本明細書で使用される場合、「背痛」という用語は、背中のどこか一部における痛みを伴う感覚を指す。背痛のエピソードは、持続期間に応じて急性、亜急性、又は慢性でありうる。鈍い痛み、突き抜けるような若しくは刺すような痛み、又は焼けるような痛みとして特徴付けられうる。痛みは脚又は足だけでなく腕や手にも広がり、感覚異常（明らかな原因のないチクチクする（ｔｉｎｇｌｉｎｇ）痛み）、脚及び腕の運動機能低下又はしびれなどがみられることがある。背痛の解剖学的分類は脊椎の分節に従って行われる：頸部痛（頚椎）、中背部痛（胸椎）、下背部痛（腰椎）、又は尾骨痛（尾骨や仙骨の痛み）であり、腰椎領域は痛みに関して最も一般的である。痛みは、脊柱（背骨）の筋肉、神経、骨、関節、又は他の構造に由来しうるが、胆嚢や膵臓などの内部構造体が原因で背中に関連痛が生じることもある（Ｃｏｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．  ２００８．  ＢＭＪ．  ３３７：ａ２７１８）。
【００１８】
本明細書で使用される場合、「震え」（「身震い（ｓｈｕｄｄｅｒｉｎｇ）」とも呼ばれる）という用語は、温血動物において早期低体温又は単に寒く感じることに応答する身体機能である。深部体温が低下すると、震え反射が誘発されて恒常性が維持される。骨格筋は小さな動きで震えるようになり、エネルギーを消費することによって温感を作り出す。人が寒気を感じることがあるので、震えは発熱に対する応答でもありうる。発熱時には視床下部の温度設定値が上昇する。設定値の上昇は体温を上昇させる（発熱）が、新たな設定値に達するまで患者は寒さを感じる。激しい震えを伴う重度の寒けを悪寒と呼ぶ。悪寒は、体温を新しい設定値まで上昇させようとする生理的な試みにおいて、患者の体が震えしているために起こる。震えは手術後に現れることもあり、麻酔後シバリングとして知られる。
【００１９】
本明細書で使用される場合、「嘔吐（ｖｏｍｉｔｉｎｇ）」という用語は、他の用語のなかでも、嘔吐（ｅｍｅｓｉｓ）及び嘔吐（ｔｈｒｏｗｉｎｇ  ｕｐ）としても知られており、不随意で強制的に、口を介して胃の内容物を排出すること、及びときに鼻を排出することである（Ｍｅｔｚ  Ａ．  ２０１７．  Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ  Ｆａｍｉｌｙ  Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ  Ｖｏｌ．  ３６  （９）：  ６８８−６９２）。嘔吐はさまざまな病態が原因で起こる可能性があり、胃炎や中毒のような病気（ａｉｌｍｅｎｔｓ）に対する特異的な応答として、又は脳腫瘍や頭蓋内圧亢進から電離放射線への過剰暴露に至る障害の非特異的な続発症として現れうる。
【００２０】
本明細書で使用される場合、そのような症状の治療及び／又は予防を必要とする患者における病気又は疾患の症状は、炎症状態、自己免疫疾患、代謝性疾患、脳疾患、心血管疾患、及び薬物誘発性疾患を含む疾患適応症の群から選択される。
【００２１】
以下、本明細書に関連する症状及び病気のタイプが非限定的なリストの形で提供される。本明細書に記載の治療又は予防は、複数のタイプの症状に向けられうることに留意されたい。さらに、所与の医学的適応症、病気、又は疾患は、複数の症状と関連しうることに留意されたい。
【００２２】
「吐き気」という症状は、腹部内の病気、例えば、閉塞性疾患（例えば、幽門閉塞、小腸閉塞、結腸閉塞、上腸間膜動脈症候群）、腸管感染症（例えばウイルスや細菌の感染）、炎症性疾患（胆嚢炎、膵炎、虫垂炎、肝炎など）、感覚運動機能障害（たとえば、胃不全麻痺、偽性腸閉塞、胃食道逆流症、慢性特発性の吐き気、機能性嘔吐、周期性嘔吐症候群、反芻症候群）、又は胆道仙痛；腹部外の病気、例えば、心肺障害、（心筋症、心筋梗塞など）、内耳疾患、（乗り物酔い、迷路炎、悪性腫瘍など）、脳内障害（例えば出血、膿瘍、水頭症、悪性腫瘍）、精神疾患（例えば、食欲不振や神経性過食症、抑うつ）、術後嘔吐、薬剤や薬物（例えば化学療法や生物製剤療法、抗生物質、抗不整脈薬、ジゴキシン、経口血糖降下薬、経口避妊薬）に伴う吐き気、内分泌／代謝疾患（例えば妊娠、尿毒症、ケトアシドーシス、甲状腺と副甲状腺の疾患、副腎機能不全）に伴う吐き気、肝不全、アルコール乱用による中毒による吐き気などと関連している可能性がある。
【００２３】
「背痛」という症状は、炎症による病気、特に典型的には２週間から３カ月続く急性期に関連している可能性があり、腰痛、外傷、負傷、感染症、がん（特に乳がん、肺がん、前立腺がんのように脊椎に広がることが知られているがん）などに関連している可能性がある。
【００２４】
「筋肉痛」又は「筋肉痛」という症状は、別個の負傷の保護を含む筋肉が過度にあまりにも頻繁に使われた捻挫、血腫、又は酷使を含む負傷又は外傷、慢性的な緊張、例えばウイルス感染に伴う横紋筋融解症による筋肉痛、圧迫損傷、例えばフィブラート及びスタチン、ＡＣＥ阻害薬、コカイン、一部の抗レトロウイルス薬による薬物関連、重度のカリウム欠乏症、線維筋痛症、エーラス・ダンロス症候群、自己免疫疾患（混合性結合組織病、全身性エリテマトーデス、リウマチ性多発筋痛症、例えば多発性筋炎、皮膚筋炎、及び封入体筋炎などの筋炎、多発性硬化症、筋痛性脳脊髄炎（慢性疲労症候群）、家族性地中海熱、結節性多発動脈炎、デビック病、限局性強皮症、サルコイドーシスを含む）、代謝性疾患（カルニチンパルミトイル基転移酵ＩＩ欠損症、コン症候群、副腎機能不全、甲状腺機能亢進症、甲状腺機能低下症、糖尿病、性腺機能低下症）、並びにチャネル病、スティックラー症候群、低カリウム血症、緊張低下（低筋緊張）、運動不耐症、肥満細胞症、末梢神経障害、好酸球増多性筋痛症候群、バルコー熱（Ｂａｒｃｏｏ  Ｆｅｖｅｒ）、ヘルペス、鉄過剰症としても知られるヘモクロマトーシス、遅発性筋肉痛、エイズ、ＨＩＶ感染症、腫瘍性骨軟化症、ビタミンＤ欠乏症、心筋梗塞に関連する可能性がある。
【００２５】
「頭痛」という症状は一次性頭痛と関連しうる。すべての頭痛の９０％が一次性頭痛である。一次性頭痛は通常、２０〜４０歳のときに初めて起こる。一次性頭痛の最も一般的なタイプは片頭痛と緊張型頭痛である。これらは異なった特徴を有する。片頭痛は典型的に、拍動性の頭部痛、吐き気、羞明（光に対する過敏症）、及び音恐怖症（音に対する過敏症）を呈する。緊張型頭痛は通常、頭の両側に非拍動性「帯状の（ｂａｎｄｌｉｋｅ）」の圧力を伴い、他の症状を伴わない。その他の非常にまれなタイプの一次性頭痛としては次のものが挙げられる。群発頭痛：重度の痛みが短期間（１５〜１８０分）起こり、通常は片目の周囲にみられ、自律神経症状（流涙、充血、鼻閉）が毎日同じ時間に起こる。群発頭痛はトリプタンで治療でき、プレドニゾン、エルゴタミン、又はリチウムで予防することができる。顔面の電撃痛、持続性片頭痛、すなわち、激しい痛みの発作を伴う持続性の片側性の痛みを特徴とする三叉神経痛又は後頭神経痛。一次性穿刺様頭痛（例えば「アイスピック痛（ｉｃｅ  ｐｉｃｋ  ｐａｉｎ）」又は「ジャブとジョルト（ｊａｂｓ  ａｎｄ  ｊｏｌｔｓ）」を１秒間から数分間、自律神経症状（流涙、充血、鼻閉）を伴わない再発性の頭痛。突然始まり、咳、くしゃみ、いきみ（頭の中の圧力を増加させうるもの）の後に数分間続く一次性の咳頭痛。「良性の」一次性咳頭痛の診断を下しうる前に、重篤な原因（二次性頭痛レッドフラグの項を参照）を除外しなければならない：ずきずきする拍動性の痛みを特徴とする一次性労作性頭痛で、運動中又は運動後に始まり、５分から２４時間続く。これらの頭痛の背後にある機序は不明であるが、おそらく緊張によって頭部の静脈が拡張し、痛みが生じるためである；性行為中に始まりオーガズム時にさらに悪化する鈍い両側性頭痛を特徴とする一次性性行為時頭痛；催眠性頭痛；頭か首の他のところの問題によって引き起こされうる二次性頭痛。これらのなかには有害ではないものもあり、例えば、頸原性頭痛（首の筋肉から生じる痛み）、頭痛のために過剰な鎮痛剤を使用している人の薬物乱用頭痛、発熱と髄膜症、又は項部硬直を呈する髄膜の炎症を特徴とする髄膜炎；脳内出血（頭蓋内出血）；くも膜下出血（急性の激しい頭痛、発熱を伴わない項部硬直）；動脈瘤破裂、動静脈奇形、実質内出血；側頭動脈炎、すなわち高齢者（平均年齢７０歳）に多い動脈の炎症性疾患、リウマチ性多発筋痛；急性閉塞隅角緑内障（眼球内圧の上昇）；けいれん又は他のてんかんの後にてんかん後の期間（発作後の状態）の一部として起こる発作後の頭痛などであり、ヘリコバクター・ピロリ感染や、セリアック病、非セリアックグルテン過敏症、過敏性腸症候群、炎症性腸疾患、胃不全麻痺、肝胆道系障害を含む胃腸障害は頭痛を引き起こすことがある。胃腸障害の治療は頭痛の寛解又は改善につながる可能性がある。
【００２６】
頭痛という用語は、一次性頭痛又は二次性頭痛として定義される。一次性頭痛は、片頭痛、緊張型頭痛（ＴＴＨ）、群発頭痛及び他の三叉神経・自律神経性頭痛、並びに他の一次性頭痛と定義される。
【００２７】
頭痛の診断又は評価は、当該技術分野において充分に確立されている。評価は、患者の症状の特徴づけなどの主観的な尺度に基づいて行うことができる。例えば、片頭痛は以下の基準に基づいて診断される。１）４〜７２時間続く発作的な頭痛；２）次の症状のうち２つを伴う：片側の痛み、ズキズキする痛み、運動時の増悪、及び中等度又は重度の強度の痛み；並びに３）次の症状のうちの１つ：吐き気又は嘔吐、及び羞明又は音恐怖症（Ｇｏａｄｓｂｙ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎ．  Ｅｎｇｌ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  ３４６：２５７−２７０，  ２００２）。
【００２８】
「震え」という症状は、発熱、寒冷過敏症、閉経、パニック発作、不安、細菌感染、リケッチア感染、ウイルス感染、薬物離脱などと関連している可能性がある。
【００２９】
「嘔吐」という症状は、胃炎（胃壁の炎症）、胃腸炎、胃食道逆流症、セリアック病、非セリアックグルテン過敏症、幽門狭窄、腸閉塞、過食、急性腹症及び／又は腹膜炎、イレウス、食物アレルギー（しばしばじんましんや腫れを伴う）；胆嚢炎、膵炎、虫垂炎、肝炎；食中毒、牛乳タンパク質に対するアレルギー反応、例えば牛乳アレルギー又は乳糖不耐症；乗り物酔い、メニエール病、脳震盪、脳出血、片頭痛、脳腫瘍、良性頭蓋内圧亢進症及び水頭症、高カルシウム血症などの代謝障害、尿毒症性副腎機能不全、低血糖、高血糖、薬物反応、アルコール中毒、オピオイド取り込み、選択的セロトニン再取り込み阻害薬；化学療法薬の使用；さまざまなウイルス及び細菌、例えばノロウイルス、インフルエンザによって引き起こされる胃炎；又は神経性過食症及びパージ障害などの精神／行動疾患と関連する可能性がある。
【図面の簡単な説明】
【００３０】
【図１】アドレシズマブ群とプラセボと比較して、病気スコアを示す。
【図２】図２は、Ｔ２７０（時点２７０分）及びＴ３００（時点３００分）における治療群別の病気スコアの分布をそれぞれ示す（図２Ａ及びＢ）。
【図３Ａ−Ｂ】効果に対する単一病気スコア構成要素の寄与を図３に示す：Ａ）吐き気、Ｂ）頭痛、Ｃ）筋肉痛、Ｄ）背痛、及びＥ）震え。
【図３Ｃ−Ｄ】効果に対する単一病気スコア構成要素の寄与を図３に示す：Ａ）吐き気、Ｂ）頭痛、Ｃ）筋肉痛、Ｄ）背痛、及びＥ）震え。
【図３Ｅ】効果に対する単一病気スコア構成要素の寄与を図３に示す：Ａ）吐き気、Ｂ）頭痛、Ｃ）筋肉痛、Ｄ）背痛、及びＥ）震え。
【図４】図４は別の評価を示す。ここで別のスコアである病気（Ｓｉｃｋｎｅｓｓ）スコアは、全体的な病気に関する単一の質問を用いて、０から１０までのスケールで評価された。
【図５】健常ヒトにおけるＮＴ−Ｈの投与後のＡＤＭ値を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
以下、本発明の実施形態を提供する。
実施形態は一般に、同じカテゴリー（製品、プロセス、使用、方法）の任意の他の実施形態と組み合わせることができることに留意されたい。
【００３２】
本発明の一実施形態は、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防における使用のための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関する。症状は、それを必要とする対象における吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択されうる。前記抗体又は断片又はスキャフォールドは、以下に詳述されるように、成熟ＡＤＭ、例えばアミノ酸１−５２（配列番号１）のＡＤＭ、又は成熟ＡＤＭの断片、例えば中間領域（Ｍｉｄ−Ｒｅｇｉｏｎａｌ）ＡＤＭ（ＭＲ−ＡＤＭ）（配列番号３）、又はＮ末端ＡＤＭ（配列番号４）に結合する。
【００３３】
したがって、本発明の別の実施形態は、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防における使用のための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、前記抗体又は断片又はスキャフォールドは、成熟ＡＤＭ、例えばアミノ酸１−５２（配列番号１）のＡＤＭ又は上記で画定された断片に結合する。
【００３４】
本発明のさらなる実施形態は、それを必要とする対象における吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐などの症状を特徴とする病気の治療又は予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、前記抗体又は断片又はスキャフォールドは、成熟ＡＤＭ、例えばアミノ酸１−５２（配列番号１）のＡＤＭ又は上記で画定された断片に結合する。
【００３５】
さらなる実施形態では、本発明は、それを必要とする対象における病気の治療又は予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、前記抗体又は断片又はスキャフォールドは、成熟ＡＤＭ、例えばアミノ酸１−５２（配列番号１）のＡＤＭ又は上記で画定された断片に結合し、病気は適応症から選択され、試料中のＣ反応性タンパク質の量（ＣＲＰ）は≧１０ｍｇ／Ｌであり、試料中のＴＮＦの量は≧５０ｐｇ／ｍｌであり、かつ／又は試料中のバイオＡＤＭの量は≧４３ｐｇ／ｍｌであり、かつ／又は平均動脈圧は低下している。
【００３６】
さらなる実施形態では、本発明は、それを必要とする対象における病気の治療又は予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、前記抗体又は断片又はスキャフォールドは、成熟ＡＤＭ、例えばアミノ酸１−５２（配列番号１）のＡＤＭ又は上記で画定された断片に結合し、病気は片頭痛である。
【００３７】
さらなる実施形態では、本発明は、それを必要とする対象における病気の治療又は予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、前記抗体又は断片又はスキャフォールドは、成熟ＡＤＭ、例えばアミノ酸１−５２（配列番号１）のＡＤＭ又は上記に画定された断片に結合し、病気は片頭痛であり、それを必要とする対象の試料中のＣ反応性タンパク質の量（ＣＲＰ）は≧１０ｍｇ／Ｌであり、かつ／又は試料中のＴＮＦの量は≧５０ｐｇ／ｍｌであり、かつ／又は試料中のバイオＡＤＭの量は≧４３ｐｇ／ｍｌであり、かつ／又は平均動脈圧は低下している。
【００３８】
さらなる実施形態では、本発明は、それを必要とする対象における病気の治療又は予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、前記抗体又は断片又はスキャフォールドは、成熟ＡＤＭ、例えばアミノ酸１−５２（配列番号１）のＡＤＭ又は上記に画定された断片に結合し、病気は片頭痛であり、それを必要とする対象の試料中のＣ反応性タンパク質の量（ＣＲＰ）は≧１０ｍｇ／Ｌであり、かつ／又は試料中のＴＮＦの量は≧５０ｐｇ／ｍｌであり、かつ／又は試料中のバイオＡＤＭの量は≧４３ｐｇ／ｍｌであり、かつ／又は平均動脈圧は低下しており、それを必要とする対象は、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される疾患症状の少なくとも１つを示す。
【００３９】
本発明の一実施形態では、試料は、全血、血漿、及び血清を含む群から選択される。
【００４０】
平均動脈圧（ＭＡＰ）は、１回の心周期における患者の動脈の平均血圧と定義される。重要臓器への灌流の指標と考えられている。７０ｍｍＨｇ超のＭＡＰが平均的な人の臓器を維持するのに充分であると考えられている。本発明に関連して、「平均動脈圧が低下している」という用語は、７５ｍｍＨｇ未満のＭＡＰを意味する。
【００４１】
成熟アドレノメデュリンペプチドはアミド化ペプチド（ＡＤＭ−ＮＨ2）であり、５２個のアミノ酸（配列番号１）を含み、プレプロＡＤＭ１−１４６のアミノ酸９５−１４６を含み、プレプロＡＤＭからタンパク質分解的切断によって形成される。成熟ＡＤＭ、バイオＡＤＭ、及びＡＤＭ−ＮＨ2は、本出願全体を通して同義的に使用され、配列番号１による分子である。
【００４２】
本発明の別の実施形態は、前述の実施形態による、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、前記抗体又は断片又はスキャフォールドはＡＤＭのＮ末端部（アミノ酸１−２１）：
ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号４）
に結合する。
【００４３】
本発明の別の実施形態は、必要に応じて前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体断片又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、前記抗体、抗体断片、又は非Ｉｇスキャフォールドは、アドレノメデュリンの中間領域部分、アミノ酸２１−４２：
ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号３）
に結合することを特徴とする。
【００４４】
本発明の別の実施形態は、前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、前記抗体又は抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドが、単一特異性、特に単一クローン性である。
【００４５】
本発明の別の実施形態は、前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、前記抗体又は断片又はスキャフォールドは、ビアコア２０００システムを使用したラベルフリー表面プラズモン共鳴で少なくとも１０-7ＭのＡＤＭに対する結合親和性を示す。
【００４６】
本発明の別の実施形態は、前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、そこにおいて前記抗体又は断片又はスキャフォールドは、ＡＤＭ結合タンパク質１（補体Ｈ因子）ではない。
【００４７】
本発明の別の実施形態は、前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、前記抗体又は断片又はスキャフォールドは、ＡＤＭのＮ末端（アミノ酸１）を認識し、それに結合する。
【００４８】
本発明の別の実施形態は、前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、前記抗体又は断片又はスキャフォールドは、血清、血液、血漿中のＡＤＭの半減期（ｔ1/2半滞留時間）を、少なくとも１０％、好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは＞５０％、最も好ましくは＞１００％増大させるＡＤＭ安定化抗体又は断片又はスキャフォールドである。
【００４９】
本発明の別の実施形態は、前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、前記抗体又は断片又はスキャフォールドは、ヒト組換えＡＤＭ受容体を発現しているＣＨＯ−Ｋ１細胞において、ｈＡＤＭ２２−５２を参照拮抗薬として使用して、ＡＤＭの生物活性を８０％以下、好ましくは５０％以下遮断する。
【００５０】
本発明の別の実施形態は、前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又は対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、前記それを必要とする対象は、片頭痛、ウイルス感染症、薬物誘発性疾患症状（例えば、化学療法によって誘発される、又は生物製剤、抗生物質、抗ウイルス化合物などによる治療によって誘発される）を含む群から選択される疾患に罹患している対象の群から選択される。特定の実施形態では、疾患又は病気（これらの用語は交換可能に使用することができる）は片頭痛である。
【００５１】
本発明の別の実施形態は、前述の実施形態の何れかによる、対象における吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療又は予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、前記対象はがん治療（化学療法）を受ける。
【００５２】
化学療法は、標準化された化学療法レジメンの一部として、１つ又は複数の抗がん剤（化学療法剤）を使用するがん治療のカテゴリーである。化学療法剤としては次の薬物カテゴリーが挙げられうる：アルキル化剤、キナーゼ阻害剤、ビンカアルカロイド、アントラサイクリン、代謝拮抗剤、アロマターゼ阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、モノクローナル抗体や、サイトカイン、遺伝子治療ベクター、アンチセンス、ペプチド分子などの人工（ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ）抗がん剤。
【００５３】
本発明の別の実施形態は、前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又は対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関し、前記抗体又は断片は、ＡＤＭのＮ末端領域（アミノ酸１−２１）（配列番号４）に結合するヒトモノクローナル抗体若しくは断片又はその抗体断片であり、重鎖は配列：
ＣＤＲ１：配列番号５
ＧＹＴＦＳＲＹＷ
ＣＤＲ２：配列番号６
ＩＬＰＧＳＧＳＴ
ＣＤＲ３：配列番号７
ＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹ
を含み、軽鎖は配列：
ＣＤＲ１：配列番号８
ＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹ
ＣＤＲ２：
ＲＶＳ
ＣＤＲ３：配列番号９
ＦＱＧＳＨＩＰＹＴ
を含む。
【００５４】
本発明の別の実施形態は、前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又は対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するためのヒトモノクローナル抗体又はＡＤＭに結合する断片又はその抗体断片に関し、前記抗体又は断片は、ＶＨ領域として、
配列番号１０（ＡＭ−ＶＨ−Ｃ）
ＱＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＭＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＴＧＹＴＦＳＲＹＷＩＥＷＶＫＱＲＰＧＨＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＫＡＴＩＴＡＤＴＳＳＮＴＡＹＭＱＬＳＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＨＨＨＨＨＨ
配列番号１１（ＡＭ−ＶＨ１）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＲＹＷＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＨＨＨＨＨＨ
配列番号１２（ＡＭ−ＶＨ２−Ｅ４０）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＲＹＷＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＨＨＨＨＨＨ
配列番号１３（ＡＭ−ＶＨ３−Ｔ２６−Ｅ５５）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＴＧＹＴＦＳＲＹＷＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＨＨＨＨＨＨ
配列番号１４（ＡＭ−ＶＨ４−Ｔ２６−Ｅ４０−Ｅ５５）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＴＧＹＴＦＳＲＹＷＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＨＨＨＨＨＨ
を含む群より選択される配列を含み、ＶＬ領域として次の配列：
配列番号１５（ＡＭ−ＶＬ−Ｃ）
ＤＶＬＬＳＱＴＰＬＳＬＰＶＳＬＧＤＱＡＴＩＳＣＲＳＳＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹＬＥＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹＲＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＬＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＩＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号１６（ＡＭ−ＶＬ１）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹＬＮＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＲＬＩＹＲＶＳＮＲＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＩＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号１７（ＡＭ−ＶＬ２−Ｅ４０）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹＬＥＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＲＬＩＹＲＶＳＮＲＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＩＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
を含む。
【００５５】
本発明の別の実施形態は、前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又は対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するためのヒトモノクローナル抗体又はＡＤＭに結合する断片又はその抗体断片に関し、前記抗体又は断片は、重鎖として次の配列：
配列番号２２
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＲＹＷＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＮＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳｃＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
を含み、軽鎖として次の配列：
配列番号２３
ＤＶＶＬＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹＬＥＷＹＬＱＲＰＧＱＳＰＲＬＬＩＹＲＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＩＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
を含む。
【００５６】
本発明の特定の実施形態では、本発明の抗体は、重鎖として次の配列：
配列番号２２
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＲＹＷＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＮＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
又はこの配列と＞９５％、好ましくは＞９８％、好ましくは＞９９％同一である配列を含み、軽鎖として次の配列：
配列番号２３
ＤＶＶＬＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹＬＥＷＹＬＱＲＰＧＱＳＰＲＬＬＩＹＲＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＩＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
又はこの配列と＞９５％、好ましくは＞９８％、好ましくは＞９９％同一である配列を含む。
【００５７】
２つのアミノ酸配列間の同一性を評価するには、ペアワイズアラインメントが行われる。同一性は、アラインメントにおいて直接一致するアミノ酸の割合を定義する。
【００５８】
上記に概説した抗体を含む医薬組成物。
【００５９】
本発明の別の実施形態は、吐き気に対する既知の薬剤と組み合わせて使用される、前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関する。
【００６０】
本発明の別の実施形態は、頭痛に対する既知の薬剤と組み合わせて使用される、前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関する。
【００６１】
本発明の別の実施形態は、筋肉痛に対する既知の薬剤と組み合わせて使用される、前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関する。
【００６２】
本発明の別の実施形態は、震えに対する既知の薬剤と組み合わせて使用される、前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関する。
【００６３】
本発明の別の実施形態は、嘔吐に対する既知の薬剤と組み合わせて使用される、前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関する。
【００６４】
本発明の別の実施形態は、背痛に対する既知の薬剤と組み合わせて使用される、前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関する。
【００６５】
本発明の別の実施形態は、前述の実施形態の何れかによる抗体又は断片又はスキャフォールドを含む、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための医薬製剤に関する。
【００６６】
本発明の別の実施形態は、溶液、好ましくはすぐに使用できる溶液である、前述の実施形態による、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための医薬製剤に関する。
【００６７】
本発明の別の実施形態は、凍結乾燥状態にある、前述の実施形態による、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又は対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための医薬製剤に関する。
【００６８】
本発明の別の実施形態は、筋肉内に投与される、そのような製剤に関する前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための医薬製剤に関する。
【００６９】
本発明の別の実施形態は、血管内に投与される、そのような製剤に関する前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための医薬製剤に関する。
【００７０】
本発明の別の実施形態は、注入によって投与される、前述の実施形態による、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又は対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための医薬製剤に関する。
【００７１】
本発明の別の実施形態は、全身投与されることになる、そのような製剤に関する前述の実施形態の何れかによる、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、嘔吐の群から選択される病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又は対象における片頭痛などのそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための医薬製剤に関する。
【００７２】
本明細書で使用される場合、「病気スコア（ｉｌｌｎｅｓｓ  ｓｃｏｒｅ）」の定義は、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、及び嘔吐を含むＬＰＳ誘発性臨床症状に関する。これらの症状を１つのスコア（＝病気スコア）にまとめた：一例として、嘔吐（直前の３０分間に嘔吐したかに応じて、０又は３）を除く各症状を０〜５のスケールで示した。病気スコアは、すべての症状の合計である（理論値０〜２８）。
【００７３】
抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドに関する本明細書に記載の実施形態は、病気に関連する症状の治療又は予防のために適用されることが意図され、したがって、必ずしも、基礎疾患として考慮されるべき急性疾患又は急性病態自体に対する一次治療又は第一選択治療の何れの方法も対象としているわけではないことが強調されるべきである。これは、本発明が、例えば、がん、敗血症、敗血症性ショック、ＣＯＰＤ、うっ血性心疾患（急性心不全）を癒す／治す方法を提供しないことを意味する。
【００７４】
さらに、本発明の実施形態では、抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、単一特異性である。単一特異性抗ＡＤＭ抗体又は単一特異性抗ＡＤＭ抗体断片又は単一特異性抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、前記抗体又は抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドが、標的ＡＤＭ内の少なくとも５個のアミノ酸を包含する１つの特定領域に結合することを意味する。単一特異性抗ＡＤＭ抗体又は単一特異性抗ＡＤＭ抗体断片又は単一特異性抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、すべてが同じ抗原に対して親和性を有する抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドである。
【００７５】
特定の好ましい実施形態では、本発明は、単一特異性抗ＡＤＭ抗体又は単一特異性抗ＡＤＭ抗体断片又は単一特異性抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドを提供し、前記抗体又は抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドは、標的ＡＤＭ内の少なくとも４個のアミノ酸を包含する１つの特定領域に結合することを特徴とする。別の特別な実施形態では、抗ＡＤＭ抗体又はＡＤＭに結合する抗体断片は、単一特異性抗体である。単一特異性とは、前記抗体又は抗体断片が、標的ＡＤＭ内の好ましくは少なくとも４個又は少なくとも５個のアミノ酸を包含する１つの特定領域に結合することを意味する。単一特異的抗体又は断片は、すべて同じ抗原に対して親和性を有する抗体又は断片である。モノクローナル抗体は単一特異性であるが、単一特異性抗体は、共通の生殖細胞からそれらを産生する以外の手段によっても産生されうる。
【００７６】
本発明による抗体は、抗原に特異的に結合する免疫グロブリン遺伝子によって実質的にコードされる１つ又は複数のポリペプチドを含むタンパク質である。認識される免疫グロブリン遺伝子は、カッパ、ラムダ、アルファ（ＩｇＡ）、ガンマ（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）、デルタ（ＩｇＤ）、イプシロン（ＩｇＥ）、及びミュー（ＩｇＭ）定常領域遺伝子、並びに無数の免疫グロブリン可変領域遺伝子を含む。全長免疫グロブリン軽鎖は、一般に、約２５ｋＤａ又は２１４アミノ酸長である。全長免疫グロブリン重鎖は、一般に、約５０ｋＤａ又は４４６アミノ酸長である。軽鎖は、ＮＨ2末端の可変領域遺伝子（約１１０アミノ酸長）及びＣＯＯＨ末端のカッパ又はラムダ定常領域遺伝子によってコードされる。重鎖は可変領域遺伝子（約１１６アミノ酸長）と他の定常領域遺伝子の１つによって同様にコードされる。
【００７７】
抗体の基本的な構造単位は一般に四量体であり、２つの同一の免疫グロブリン鎖の対からなり、それぞれの対は１つの軽鎖と１つの重鎖を有する。各対において、軽鎖及び重鎖可変領域が抗原に結合し、定常領域はエフェクター機能を媒介する。免疫グロブリンはまた、例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、及び（Ｆａｂ’）２、並びに二官能性ハイブリッド抗体、並びに単鎖を含むさまざまな他の形態で存在する（例えば、Ｌａｎｚａｖｅｃｃｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．  １９８７．  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １７：  １０５；Ｈｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ  １９８８．  ＰＮＡＳ  ８５：５８７９−５８８３；Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．  １９８８．  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；Ｈｏｏｄ  ｅｔ  ａｌ．  １９８４．  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，  Ｂｅｎｊａｍｉｎ，  Ｎ．Ｙ．，  ２ｎｄ  ｅｄ．；Ｈｕｎｋａｐｉｌｌｅｒ  ａｎｄ  Ｈｏｏｄ，  １９８６．  Ｎａｔｕｒｅ  ３２３：  １５−１６）。免疫グロブリン軽鎖又は重鎖可変領域は、相補性決定領域（ＣＤＲ）とも呼ばれる３つの超可変領域で途切れたフレームワーク領域を含む（Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，  Ｅ．  Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ，  Ｕ．Ｓ．  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，  １９８３を参照）。上記のように、ＣＤＲは主に抗原のエピトープへの結合に関与する。免疫複合体は、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体若しくはヒト抗体などの抗体、又は抗原に特異的に結合した機能性抗体断片である。
【００７８】
キメラ抗体は、軽鎖及び重鎖遺伝子が、典型的には遺伝子工学によって、異なる種に属する免疫グロブリン可変領域及び定常領域遺伝子から構築された抗体である。例えば、マウスモノクローナル抗体の遺伝子の可変セグメントは、カッパ及びガンマ１又はガンマ３などのヒト定常セグメントに連結することができる。一例では、治療用キメラ抗体は、したがって、マウス抗体由来の可変又は抗原結合ドメイン及びヒト抗体由来の定常又はエフェクタードメインからなるハイブリッドタンパク質であるが、他の哺乳動物種を使用することができ、又は可変領域は分子技術によって作製することができる。キメラ抗体を作製する方法は、当該分野で周知であり、例えば、米国特許第５，８０７，７１５号明細書を参照されたい。「ヒト化」免疫グロブリンは、ヒトフレームワーク領域及び非ヒト（マウス、ラット、又は合成など）の免疫グロブリン由来の１つ又は複数のＣＤＲを含む免疫グロブリンである。ＣＤＲを提供する非ヒト免疫グロブリンは「ドナー」と呼ばれ、フレームワークを提供するヒト免疫グロブリンは「アクセプター」と呼ばれる。一実施形態では、すべてのＣＤＲはヒト化免疫グロブリンのドナー免疫グロブリンに由来する。定常領域は存在する必要はないが、存在する場合には、それらはヒト免疫グロブリン定常領域と実質的に、すなわち、少なくとも約８５〜９０％同一でなければならず、例えば約９５％以上同一でなければならない。したがって、おそらくＣＤＲを除いて、ヒト化免疫グロブリンのすべての部分は、天然ヒト免疫グロブリン配列の対応する部分と実質的に同一である。「ヒト化抗体」は、ヒト化軽鎖及びヒト化重鎖免疫グロブリンを含む抗体である。ヒト化抗体は、ＣＤＲを提供するドナー抗体と同じ抗原に結合する。ヒト化免疫グロブリン又は抗体のアクセプターフレームワークは、ドナーフレームワークから取られたアミノ酸による限定された数の置換を有しうる。ヒト化又は他のモノクローナル抗体は、抗原結合又は他の免疫グロブリン機能に実質的に影響を及ぼさないさらなる保存的アミノ酸置換を有することができる。例示的な保存置換は、グリシン、アラニン；バリン、イソロイシン、ロイシン；アスパラギン酸、グルタミン酸；アスパラギン、グルタミン；セリン、トレオニン；リシン、アルギニン；及びフェニルアラニン、チロシンなどの置換である。ヒト化免疫グロブリンは、遺伝子工学を用いて構築することができる（例えば、米国特許第５，５８５，０８９号明細書を参照）。ヒト抗体は、軽鎖及び重鎖遺伝子がヒト由来である抗体である。ヒト抗体は、当該技術分野で公知の方法を用いて作製することができる。ヒト抗体は、目的の抗体を分泌するヒトＢ細胞を不死化することによって産生することができる。不死化は、例えば、ＥＢＶ感染によって、又はヒトＢ細胞を骨髄腫若しくはハイブリドーマ細胞と融合させてトリオーマ細胞を作製することによって達成することができる。ヒト抗体はまた、ファージディスプレイ法（例えば、Ｄｏｗｅｒら，ＰＣＴ国際公開第９１／１７２７１号パンフレット、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、ＰＣＴ国際公開第９２／００１０４７号パンフレット、及びＷｉｎｔｅｒ、ＰＣＴ国際公開第９２／２０７９１号パンフレットを参照）によって作ることができる、又はヒトコンビナトリアルモノクローナル抗体ライブラリー（Ｍｏｒｐｈｏｓｙｓのウェブサイトを参照）から選択することができる。ヒト抗体はまた、ヒト免疫グロブリン遺伝子をもつトランスジェニック動物を使用することによって調製することもできる（例えば、ＰＣＴ国際公開第９３／１２２２７号パンフレット及びＰＣＴ国際公開第９１／１０７４１号パンフレットを参照）。
【００７９】
したがって、抗ＡＤＭ抗体は、当該技術分野で公知のフォーマットを有することができる。例は、ヒト抗体、モノクローナル抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、ＣＤＲ移植抗体である。好ましい実施形態では、本発明による抗体は、例えば、ＩｇＧ、典型的な全長免疫グロブリン、又は重鎖及び／又は軽鎖の少なくともＦ可変ドメインを含む抗体断片（断片抗原結合）、例えばこれらに限定されるものではないが、Ｆａｂミニボディを含むＦａｂ断片、一本鎖Ｆａｂ抗体、エピトープタグを有する一価Ｆａｂ抗体、例えばＦａｂ−Ｖ５Ｓ×２；ＣＨ３ドメインで二量化された二価Ｆａｂ（ミニ抗体）；例えば、異種ドメインを用いた多量化を介して、例えば、ｄＨＬＸドメイン、例えばＦａｂ−ｄＨＬＸ−ＦＳ×２の二量化を介して形成される二価のＦａｂ又は多価のＦａｂ；Ｆ（ａｂ’）２断片、ｓｃＦｖ断片、多量化された多価又は／及び多特異的ｓｃＦｖ断片、二価及び／又は二種特異的糖尿病性断片、ＢＩＴＥ（二重特異性Ｔ細胞誘導抗体）、三価抗体、例えば、Ｇとは異なるクラスの多価抗体；単一ドメイン抗体、例えばラクダ又は魚の免疫グロブリンに由来するナノバイト、及び多数の他のものとして組換え的に作製された抗体である。
【００８０】
抗ＡＤＭ抗体にくわえて、他の生体高分子スキャフォールドは、標的分子を複合体化するために当該技術分野で周知であり、高度に標的化された特異的生体高分子の生成に使用されている。例として、アプタマー、シュピーゲルマー（ｓｐｉｅｇｅｌｍｅｒｓ）、アンチカリン、及びコノトキシンがある。抗体フォーマットの説明については、国際公開第２０１３／０７２５１３号パンフレットの図１ａ、１ｂ、及び１ｃを参照されたい。
【００８１】
本発明による抗体断片は、本発明による抗体の抗原結合断片である。
【００８２】
好ましい実施形態では、ＡＤＭ抗体フォーマットは、Ｆｖ断片、ｓｃＦｖ断片、Ｆａｂ断片、ｓｃＦａｂ断片、（Ｆａｂ）２断片、及びｓｃＦｖ−Ｆｃ融合タンパク質を含む群から選択される。別の好ましい実施形態では、抗体フォーマットは、ｓｃＦａｂ断片、Ｆａｂ断片、ｓｃＦｖ断片、及びＰＥＧ化断片などのそのバイオアベイラビリティ最適化結合体を含む群から選択される。最も好ましいフォーマットの１つはｓｃＦａｂフォーマットである。
【００８３】
非Ｉｇスキャフォールドは、タンパク質スキャフォールドであることができ、リガンド又は抗原に結合できるので、抗体模倣物として使用することができる。非Ｉｇスキャフォールドは、テトラネチンをベースとする非Ｉｇグロブリンスキャホールド（例えば米国特許出願公開第２０１０／００２８９９５号明細書に記載）、フィブロネクチンスキャホールド（例えば欧州特許第１２６６０２５号明細書に記載）、リポカリンをベースとするスキャフォールド（例えば国際公開第２０１１／１５４４２０号パンフレットに記載、ユビキチンスキャホールド（例えば国際公開第２０１１／０７３２１４号パンフレットに記載）、トランスファリング（ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎｇ）スカフォールド（例えば米国特許出願公開第２００４／００２３３３４号明細書に記載）、プロテインＡスキャフォールド（例えば欧州特許第２２３１８６０号明細書に記載）、アンキリンリピートをベースとするスキャフォールド（例えば国際公開第２０１０／０６０７４８号パンフレットに記載）、マイクロタンパク質（好ましくはシスチンノットを形成するマイクロタンパク質）スキャフォールド（例えば欧州特許第２３１４３０８号明細書に記載）、Ｆｙｎ  ＳＨ３ドメインをベースとするスキャフォールド（例えば国際公開第２０１１／０２３６８５号パンフレットに記載）、ＥＧＦＲ−Ａドメインをベースとする足場（例えば国際公開第２００５／０４０２２９号パンフレットに記載）、及びクニッツドメインをベースとするスキャフォールド（例えば欧州特許第１９４１８６７号明細書に記載）を含む群から選択されうる。
【００８４】
本発明の一実施形態では、本発明による抗体は次のように作製することができる：Ｂａｌｂ／ｃマウスを、０日目及び１４日目に１００μｇのＡＤＭ−ペプチド−ＢＳＡ−結合体（１００μｌの完全フロイントアジュバントに乳化）及び２１日目及び２８日目に５０μｇ（１００μｌの不完全フロイントアジュバント中）で免疫した。融合実験を行う３日前に、１００μｌ生理食塩水に溶かした５０μｇの結合体を、１回の腹腔内注射及び１回の静脈内注射として動物に投与した。免疫したマウス由来の脾細胞及び骨髄腫細胞株ＳＰ２／０の細胞を、１ｍｌの５０％ポリエチレングリコールと３７℃で３０秒間融合させた。洗浄後、細胞を９６ウェル細胞培養プレートに播種した。ＨＡＴ培地（２０％ウシ胎児血清及びＨＡＴ栄養補助剤（ＨＡＴ−Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）を補充したＲＰＭＩ１６４０培地）で増殖させることによってハイブリッドクローンを選択した。２週間後、ＨＡＴ培地をＨＴ培地に替え３回継代し、その後正常細胞培地に戻す。融合の３週間後に、細胞培養上清を抗原特異的ＩｇＧ抗体について一次スクリーニングした。陽性の試験済みマイクロ培養物を、増殖のために２４ウェルプレートに移した。再試験後、選択した培養物をクローン化し、限界希釈法を用いて再クローン化し、アイソタイプを決定した（Ｌａｎｅ，  Ｒ．Ｄ．  １９８５．  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｍｅｔｈ．  ８１：  ２２３−２２８、Ｚｉｅｇｌｅｒ  Ｂ．  ｅｔ  ａｌ．  ｌ９９６．  Ｈｏｒｍ．  Ｍｅｔａｂ．  Ｒｅｓ．  ２８：  １１−１５も参照）。
【００８５】
抗体はまた、次の手順に従ってファージディスプレイを用いて作製することができる：ＡＤＭペプチドに対する組換え一本鎖Ｆ−可変ドメイン（ｓｃＦｖ）を単離するためにヒトナイーブ抗体遺伝子ライブラリーＨＡＬ７／８が使用される。２つの異なるスペーサーを介してＡＤＭペプチド配列に連結されたビオチンタグが入ったペプチドの使用を含むパニング法を用いて、抗体遺伝子ライブラリーをスクリーニングした。非特異的に結合した抗原及びストレプトアビジン結合した抗原を使用するパニングラウンドの混合物を使用して、非特異的バインダーのバックグラウンドを最小限にした。３ラウンド目のパニングからの溶出ファージが、モノクローナルなｓｃＦｖを発現する大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）株を作り出すために使用されている。これらのクローン株の培養からの上清が抗原ＥＬＩＳＡ試験に直接使用されている（その全体が本明細書に援用される国際公開第２０１３／０７２５１３号パンフレットに引用されている参考文献を参照）。
【００８６】
マウス抗体のヒト化は次の手順に従って行うことができる：マウス由来の抗体のヒト化のために、抗体配列を、相補的決定領域（ＣＤＲ）を含むフレームワーク領域（ＦＲ）と抗原との構造的相互作用について分析する。構造モデリングに基づいて、ヒト由来の適切なＦＲを選択し、マウスＣＤＲ配列をヒトＦＲに移植する。ＣＤＲ又はＦＲのアミノ酸配列の変異が、ＦＲ配列の種の転換によって消失した構造的相互作用を回復するために導入されてもよい。ＡＤＭ抗体フォーマットが、Ｆｖ断片、ｓｃＦｖ断片、Ｆａｂ断片、ｓｃＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ）２断片、及びｓｃＦｖ−Ｆｃ融合タンパク質を含む群から選択される好ましい実施形態では、構造的相互作用のこの回復は、ファージディスプレイライブラリーを使用するランダムアプローチによって、又は分子モデリングに導かれる指向性（ｄｉｒｅｃｔｅｄ）アプローチによって達成することができる（Ａｌｍａｇｒｏ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｓｓｏｎ    ２００８．  Ｆｒｏｎｔ  Ｂｉｏｓｃｉ．  １３：  １６１９−３３）。別の好ましい実施形態では、抗体フォーマットは、ｓｃＦａｂ断片、Ｆａｂ断片、ｓｃＦｖ断片、及びＰＥＧ化断片などのそのバイオアベイラビリティ最適化結合体を含む群から選択される。最も好ましいフォーマットの１つはｓｃＦａｂフォーマットである。別の好ましい実施形態では、抗ＡＤＭ抗体、抗ＡＤＭ抗体断片、又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、全長抗体、抗体断片、又は非Ｉｇスキャフォールドである。
【００８７】
好ましい実施形態では、抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、ＡＤＭ中に含まれる少なくとも５アミノ酸長のエピトープに向けられ、それに結合することができる。
【００８８】
別の好ましい実施形態では、抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、ＡＤＭ中に含まれる少なくとも４アミノ酸長のエピトープに向けられ、それに結合することができる。
【００８９】
本発明の１つの特定の実施形態では、抗ＡＤＭ抗体又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体断片又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、患者の急性疾患又は急性病態の治療に使用するために提供され、そこにおいて前記抗体又は断片又はスキャフォールドは、ＡＤＭ結合タンパク質１（ＡＤＭ−ｂｉｎｄｉｎｇ−  Ｐｒｏｔｅｉｎ−１）（補体Ｈ因子）ではない。急性疾患又は急性病態は片頭痛でありうる。
【００９０】
本発明の１つの特定の実施形態では、抗ＡＤＭ抗体又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体断片又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、患者の急性疾患又は急性病態の治療に使用するために提供され、前記抗体又は抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドは、成熟ヒトＡＤＭのアミノ酸１−４２の配列内の好ましくは少なくとも４つ又は少なくとも５つのアミノ酸の領域に結合する。
【００９１】
上記急性疾患又は急性病態は、頭痛、好ましくは一次性頭痛、最も好ましくは片頭痛でありうる。
【００９２】
本発明の１つの特定の実施形態では、抗ＡＤＭ抗体又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体断片又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、患者の急性疾患又は急性病態の治療に使用するために提供され、前記抗体又は断片又はスキャフォールド、成熟ヒトＡＤＭのアミノ酸１−２１の配列
ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号４）
内の好ましくは少なくとも４個又は少なくとも５個のアミノ酸の領域に結合する。
【００９３】
上記急性疾患又は急性病態は片頭痛でありうる。
【００９４】
本発明の好ましい実施形態では、前記抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、ＡＤＭのＮ末端部（アミノ酸１−２１）に位置するＡＤＭの領域に結合する。
【００９５】
別の好ましい実施形態では、前記抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、ＡＤＭのＮ末端（アミノ酸１）を認識し、それに結合する。Ｎ末端は、配列番号１又は４の「Ｙ」であるアミノ酸１が抗体結合に必須であることを意味する。前記抗体又は断片又は非Ｉｇスキャフォールドは、Ｎ末端伸長ＡＤＭにも、Ｎ末端修飾ＡＤＭにも、Ｎ末端分解ＡＤＭにも結合しないことになる。
【００９６】
好ましい実施形態では、抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、ＡＤＭ、好ましくはヒトＡＤＭに含まれる少なくとも５アミノ酸長のエピトープに向けられ、それに結合することができる。
【００９７】
好ましい実施形態では、抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、ＡＤＭ、好ましくはヒトＡＤＭに含まれる少なくとも４アミノ酸長のエピトープに向けられ、それに結合することができる。
【００９８】
１つの特定の実施形態では、本発明による抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドを使用することが好ましく、前記抗ＡＤＭ抗体又は前記抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、血清、血液、血漿中のＡＤＭの半減期（ｔ1/2；半滞留時間）を、少なくとも１０％、好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは＞５０％、最も好ましくは＞１００％増大させるＡＤＭ安定化抗体又はＡＤＭ安定化抗体断片又はＡＤＭ安定化非Ｉｇスキャフォールドである。ＡＤＭの半減期（半滞留時間）は、ＡＤＭの定量用イムノアッセイを使用して、ＡＤＭ安定化抗体又はＡＤＭ安定化抗体断片又はＡＤＭ安定化非Ｉｇスキャフォールドの非存在下及び存在下で、それぞれヒト血漿中で決定することができる。
【００９９】
以下のステップを行うことができる。
−ＡＤＭは、ＡＤＭ安定化抗体又はＡＤＭ安定化抗体断片又はＡＤＭ安定化非ＩＧスキャフォールドの不在下及び存在下で、ヒトクエン酸血漿にそれぞれ希釈でき、２４℃でインキュベートすることができる。
−選択された時点（例えば２４時間以内）でアリコートを採取し、−２０℃で凍結することによってＡＤＭの分解を止めることができる。
−選択されたアッセイが安定化抗体によって影響されない場合、ＡＤＭの量はｈＡＤＭイムノアッセイによって直接決定することができる。代替的に、アリコートを（ＨＣＩのような）変性剤で処理し、試料を（例えば遠心分離によって）除去した後、ｐＨは中和でき、ＡＤＭはＡＤＭイムノアッセイによって定量することができる。代替的に、非イムノアッセイ技術（例えばＲＰ−ＨＰＬＣ）をＡＤＭ定量に使用することができる。
−ＡＤＭの半減期は、ＡＤＭ安定化抗体又はＡＤＭ安定化抗体断片又はＡＤＭ安定化非ＩＧスキャフォールドの非存在下及び存在下でインキュベートしたＡＤＭについて計算される。
−半減期の増大は、ＡＤＭ安定化抗体又はＡＤＭ安定化抗体断片又はＡＤＭ安定化非Ｉｇスキャフォールドの不存在下でインキュベートされたＡＤＭと比較して、安定化ＡＤＭについて計算される。
【０１００】
ＡＤＭの半減期の２倍の増加は、１００％の半減期の増大である。半減期（半滞留時間）とは、特定の化学物質又は薬物の濃度が、特定の体液又は血液中のベースライン濃度の半分に低下するまでにかかる期間と定義される。
【０１０１】
特定の実施形態では、前記抗ＡＤＭ抗体、抗ＡＤＭ抗体断片、又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、非中和抗体、断片、又は非Ｉｇスキャフォールドである。中和抗ＡＤＭ抗体、抗ＡＤＭ抗体断片、又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、ＡＤＭの生物活性を、ほぼ１００％、少なくとも９０％超、好ましくは少なくとも９５％超に遮断することになる。
【０１０２】
対照的に、非中和抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、ＡＤＭの生物活性を、１００％未満、好ましくは９５％未満、好ましくは９０％未満、より好ましくは８０％未満、さらにより好ましくは５０％未満に遮断する。これは、非中和抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非ＩｇスキャフォールドにしているＡＤＭの残存生物活性が、０％超、好ましくは５％超、好ましくは１０％超、より好ましくは２０％超、より好ましくは５０％超であることになることを意味する。これに関連して、それが抗体、「非中和抗ＡＤＭ活性」をもつ抗体又は抗体断片又は非Ｉｇスキャホールであり、本明細書では簡潔のためにまとめて「非中和」抗ＡＤＭ抗体、抗体断片、又は非Ｉｇスキャフォールドと呼ばれ、例えばＡＤＭの生物活性を８０％未満に遮断する分子は、ＡＤＭに結合する分子又は複数の分子（ａ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ｏｒ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ）と定義され、ＣＲＬＲ（カルシトニン受容体様受容体）及びＲＡＭＰ３（受容体活性調節タンパク質３）からなる機能性ヒト組換えＡＤＭ受容体を発現している真核細胞株の培養物への添加に際して、並行して添加されるヒト合成ＡＤＭペプチドの作用を通して、その細胞株によって産生されるｃＡＭＰの量を減少させ、前記添加ヒト合成ＡＤＭは、分析される非中和抗体の非存在下で、ｃＡＭＰ合成の半最大刺激（ｈａｌｆ−ｍａｘｉｍａｌ  ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ）をもたらす量で添加され、前記ＡＤＭ結合分子によるｃＡＭＰの減少は、分析されるＡＤＭ結合非中和分子を、分析される非中和抗体で得られるｃＡＭＰ合成の最大減少を得るのに必要とされる量の１０倍の量で添加した場合でも、８０％以下の程度で起こる。同じ定義が、他の範囲、９５％、９０％、５０％などにも当てはまる。
【０１０３】
本発明の特定の実施形態では、抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドが使用され、前記抗体又は抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドは、（ベースライン値の）８０％未満、好ましくは５０％未満にＡＤＭの生物活性を遮断する。これは循環ＡＤＭをそれぞれ８０％以下又は５０％以下に遮断するという意味である。ＡＤＭの生物活性の前記の限定された遮断は、ＡＤＭに対する抗体、抗体断片、又は非Ｉｇスキャフォールドの過剰を意味する、抗体、抗体断片、又は非Ｉｇスキャフォールドの過剰濃度でさえ生じることが理解されている。前記の限定された遮断は、ＡＤＭバインダー自体の固有の特性である。これは、前記抗体、抗体断片、又は非Ｉｇスキャフォールドが、それぞれ８０％又は５０％の最大阻害を有することを意味する。暗にこれは、適切な量又は過剰量の抗体、抗体断片、又は非Ｉｇスキャフォールドがそれぞれ投与されても、２０％又は５０％の残存ＡＤＭ生物活性が依存として存在することを意味する。
【０１０４】
好ましい実施形態では、前記抗ＡＤＭ抗体、抗ＡＤＭ抗体断片、又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、ＡＤＭの生物活性を少なくとも５％遮断することになる。暗にこれは、９５％の残存循環ＡＤＭ生物活性が依然として存在することを意味する。これは、前記抗ＡＤＭ抗体、抗ＡＤＭ抗体断片、又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドの投与後に残存する生物活性のより低い閾値である。生物活性とは、物質がその相互作用の後に、生体又は組織又は器官又は機能単位に対して生体内又はインビトロで（例えばアッセイにおいて）受ける影響と定義される。ＡＤＭの生物活性の場合、これはヒト組換えＡＤＭ受容体ｃＡＭＰ機能アッセイにおけるＡＤＭの作用でありうる。したがって、本発明によれば、生物活性は、ＡＤＭ受容体ｃＡＭＰ機能アッセイによって定義される。そのようなアッセイにおけるＡＤＭの生物活性を決定するために、以下のステップをおこなうことができる。
−用量反応曲線は、前記ヒト組換えＡＤＭ受容体ｃＡＭＰ機能アッセイにおいてＡＤＭを用いて行われる。
−半最大ｃＡＭＰ刺激のＡＤＭ濃度を計算することができる。
−一定の半最大ｃＡＭＰ刺激ＡＤＭ濃度用量反応曲線（１００μｌの最終濃度まで）は、それぞれ、ＡＤＭ安定化抗体又はＡＤＭ安定化抗体断片又はＡＤＭ安定化非Ｉｇスキャフォールドによって行われる。
【０１０５】
５０％の前記ＡＤＭ安定化抗体による（最大投与量での）最大阻害は、前記ＡＤＭ抗体又は前記ＡＤＭ抗体断片又は前記ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドが、それぞれ、生物活性をベースライン値の５０％まで遮断することを意味する。８０％の前記ＡＤＭバイオアッセイにおける最大阻害は、前記抗ＡＤＭ抗体又は前記抗ＡＤＭ抗体断片又は前記抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドが、それぞれ、ＡＤＭの生物活性を８０％まで遮断することを意味する。これは、ＡＤＭ生物活性を８０％以下に遮断するという意味である。
【０１０６】
好ましい実施形態では、調節抗ＡＤＭ抗体又は調節抗ＡＤＭ抗体断片又は調節抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドが使用される。「調節」抗ＡＤＭ抗体又は調節抗ＡＤＭ抗体断片又は調節抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、血清、血液、血漿中のＡＤＭの半減期（ｔ半滞留時間）を、少なくとも１０％、好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは＞５０％、最も好ましくは＞１００％増大させ、ＡＤＭの生物活性を８０％未満、好ましくは５０％未満に遮断する抗体又はＡＤＭ抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドであり、前記抗ＡＤＭ抗体、抗ＡＤＭ抗体断片、又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、ＡＤＭの生物活性を少なくとも５％遮断することになる。生物活性の半減期及び遮断に関連するこれらの値を決定するために、これらの値を前述のアッセイとの関連で理解する必要がある。これは、循環ＡＤＭをそれぞれ８０％以下又は５０％以下に遮断するという意味である。これは、それぞれ２０％の残存ＡＤＭ生物活性が依然として存在する、又は５０％の残存ＡＤＭ生物活性が依然として存在することを意味する。このような調節抗ＡＤＭ抗体又は調節抗ＡＤＭ抗体断片又は調節抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、投与の投薬（ｔｈｅ  ｄｏｓｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）が促進されるという利点を提供する。ＡＤＭ生物活性を部分的に遮断又は部分的に低下させることと、生体内半減期を増加させること（ＡＤＭの生物活性の増加）との組み合わせは、抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド投薬の有益な簡便性をもたらす。過剰な内在性ＡＤＭの状況では、活性低下効果は抗体又は断片又はスキャフォールドの主要な効果であり、ＡＤＭの（負の）効果を制限する。低い又は正常な内在性ＡＤＭ濃度の場合、抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドの生物学的効果は、（部分的に遮断することによる）低下と、ＡＤＭ半減期の増加による増加との組み合わせである。したがって、非中和及び調節ＡＤＭ抗体又はＡＤＭ抗体断片又はＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、ＡＤＭの生物活性をある特定の生理学的範囲内に保つためにＡＤＭ生物活性バッファーのように作用する。
【０１０７】
本発明による抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドは、親和定数が１０-7Ｍ超、好ましくは１０-8Ｍ超であるヒトＡＤＭに対する親和性を示し、好ましい親和性は、１０-9Ｍより大きく、最も好ましくは１０-10Ｍより高い。当業者は、より高投与量の化合物を適用することによって、より低い親和性を補うと考えることができ、この手段は本発明の範囲外にはならないことを知っている。親和定数は、国際公開第２０１３／０７２５１３号パンフレットの実施例１に記載の方法に従って決定することができる。
【０１０８】
「ＡＤＭ結合タンパク質」という用語は、ＡＤＭ結合タンパク質１（補体Ｈ因子）を含むことが強調されるべきである。しかし、本発明による定義によるＡＤＭ結合タンパク質は、非中和抗ＡＤＭ抗体／抗体断片／非Ｉｇスキャフォールドでもなく、調節抗ＡＤＭ抗体／抗体断片／非Ｉｇスキャフォールドでもない。さらに、本発明の主題は、本発明による患者の急性疾患又は急性病態の治療に使用するためのさらなる抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドであり、前記抗体又は抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドは、さらなる活性成分と組み合わせて使用することができる。
【０１０９】
さらに、本発明の主題は、本発明による抗ＡＤＭ抗体又は抗ＡＤＭ抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドを含む医薬製剤である。さらに、本発明の主題は本発明による医薬製剤であり、前記医薬製剤は、溶液、好ましくはすぐに使用できる溶液である。別の実施形態では、本発明の主題はさらに、本発明による医薬製剤であり、前記医薬製剤は、使用前に溶解される乾燥状態にある。前記医薬製剤は筋肉内に投与することができる。前記医薬製剤は、血管内に投与することができる。前記医薬製剤は、注入によって投与することができる。別の実施形態では、本発明の主題はさらに、本発明による医薬製剤であり、前記医薬製剤凍結乾燥状態にある。
【０１１０】
本発明の別のより好ましい実施形態では、本発明は、患者における病気の症状の治療又は予防に使用するための抗ＡＤＭ抗体又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体断片又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドを含む医薬製剤を提供し、前記医薬製剤は、それを必要とする患者に投与されることになる。
【０１１１】
本発明の別の実施形態では、本発明による医薬製剤は、上記で定義した病気に関連する症状の治療及び／又は予防のために患者に投与されることになり、ただし、前記患者がそのような治療を必要としていることを条件とする。
【０１１２】
一実施形態では、本発明によるＡＤＭ抗体又はＡＤＭ抗体断片又はＡＤＭ非ＩＧスキャフォールドは、非中和ＡＤＭ抗体又は非中和ＡＤＭ抗体断片又は非中和ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドである。
【０１１３】
本明細書で使用される場合、抗体フォーマットは、Ｆｖ断片、ｓｃＦｖ断片、Ｆａｂ断片、ｓｃＦａｂ断片、（Ｆａｂ）２断片、及びｓｃＦｖ−Ｆｃ融合タンパク質を含む群から選択される。
【０１１４】
本発明の実施形態では、それを必要とする患者の治療に使用するための、前述の実施形態の何れかによるＡＤＭ抗体又はＡＤＭ抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールド、そこにおいて、前記抗体又は断片は、少なくとも０．５ｍｇ／ｋｇ体重、具体的には少なくとも１．０ｍｇ／ｋｇ体重、より具体的には１．０〜２０．０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば２．０〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、２．０〜８．０ｍｇ／ｋｇ体重、又は２．０〜５．０ｍｇ／ｋｇ体重の投与量で投与することができる。
【０１１５】
本発明の実施形態では、本明細書で言及される病気の症状は、敗血症、糖尿病、がん、心不全（急性心不全）、及び敗血症性ショックを含む群から選択される何れの疾患とも関連しない。
【０１１６】
本発明の好ましい実施形態では、前述の実施形態の何れかによるＡＤＭ抗体又はＡＤＭ抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドの何れかを使用して治療又は予防される病気の症状は、片頭痛と関連する。
【０１１７】
本発明の好ましい実施形態では、前述の実施形態の何れかによるＡＤＭ抗体又はＡＤＭ抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドの何れかを使用して治療又は予防される病気の症状は、ウイルス感染と関連し、ウイルスは、ヘパドナウイルス科、アデノウイルス科、ヘルペスウイルス科、インフルエンザウイルス、アレナウイルス科、フィロウイルス科、トガウイルス科、ノロウイルス、フラビウイルス科、レトロウイルス科、麻疹ウイルス、レオウイルス科、エンテロウイルス科、ピコルナウイルス科、カリシウイルス科などを含む群から選択される。
【０１１８】
本発明の好ましい実施形態では、前述の実施形態の何れかによるＡＤＭ抗体又はＡＤＭ抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドの何れかを使用して治療又は予防される病気の症状は、化学療法、生物製剤（例えば抗体若しくはその断片）、抗生物質、又は上記の病気の症状の何れかを引き起こす任意の薬剤による療法などの原疾患の薬物治療と関連する。
【０１１９】
本発明のさらなる好ましい実施形態は、前述の実施形態の何れかによるＡＤＭ抗体又はＡＤＭ抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドを、それを必要とする対象に投与することを含む、前述の実施形態の何れかに定義される症状を治療する（例えば治療する、治す、緩和する、改善する、寛解するなど）又は予防する方法に関する。対象はヒトであることが好ましい。
【０１２０】
ＡＤＭ抗体又はＡＤＭ抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドの投与は、経口、静脈内、皮下、動脈内、筋肉内、心臓内、髄腔内、胸腔内、腹腔内、脳室内、舌下、経皮、及び／又は吸入を含む当該技術分野で公知の任意の手段によって行うことができる。投与は、全身的に、例えば静脈内で、又は局所的に行うことができる。
【０１２１】
一態様では、本発明は、有効量のＡＤＭ抗体又はＡＤＭ抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドを個人に投与することを含む、個人における頭痛、好ましくは一次性頭痛、より好ましくは片頭痛を治療又は予防する方法を提供する。
【０１２２】
さらなる実施形態では、本発明は、有効量のＡＤＭ抗体又はＡＤＭ抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドを個人に投与することを含む、個体における好ましくは一次性頭痛、より好ましくは片頭痛を改善する、制御する、その発生を減少させる、又はその発症若しくは進行を遅延させる方法を提供する。
【０１２３】
ＡＤＭ抗体又はＡＤＭ抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドは、頭痛の前、頭痛の間、かつ／又は頭痛の後に投与することができる。いくつかの実施形態では、ＡＤＭ抗体又はＡＤＭ抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドは、頭痛の発作の前に投与される。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、ＡＤＭ抗体又はＡＤＭ抗体断片又は非Ｉｇスキャフォールドは、頭痛を治療するための別の薬剤などの別の薬剤と一緒に投与することができる。
【０１２５】
頭痛の「発症」又は「進行」は、初発症状及び／又はあとに続く障害の進行を意味する。頭痛の発症は、当該技術分野で周知の標準的な臨床技術を使用して検出及び評価することができる。しかし、発生はまた、検出不能な場合がある進行も指す。本発明では、発生又は進行は、症状の生物学的経過を指す。「進行」は、発生、再発、発症を含む。本明細書で使用される場合、頭痛の「発症」又は「発生」は、最初の発症及び／又は再発を含む。
【０１２６】
本明細書で使用される場合、薬物、化合物、又は医薬組成物の「有効投与量」又は「有効量」は、有益な又は所望の結果をもたらすのに充分な量である。予防的使用の場合、有益又は所望の結果は、疾患の生化学的症状、組織学的症状、及び／又は行動症状、その合併症、並びに疾患の発症中に現れる中間的な病理学的表現型を含む疾患のリスクを除去又は低減すること、重症度を軽減すること、又は開始を遅らせることなどの結果を含む。治療的使用の場合、有益な又は所望の結果は、痛みの強度、持続時間、又は頭痛発作の頻度を減少させること、並びに頭痛から生じる１つ又は複数の（生化学的、組織学的及び／又は行動）症状を減少させること、例えば、疾患の発症中に現れるその合併症及び中間的な病理学的表現型を減少させること、例えば、その合併症及び疾患の発症中に現れる中間的な病理学的表現型を減少させること、疾患を患う人々の生活の質を上げること、疾患を治療するために必要な他の薬剤の投与量を減少させること、別の薬剤の効果を増強すること、並びに／又は患者の疾患の進行を遅らせることなどの臨床結果を含む。有効投与量は、１回又は複数回の投与で投与することができる。本発明では、薬物、化合物、又は医薬組成物の有効投与量は、直接的又は間接的に予防的又は治療的処置を達成するのに充分な量である。臨床的な状況において理解されるように、薬物、化合物、又は医薬組成物の有効な投与量は、別の薬物、化合物、又は薬学的組成物と一緒に達成されてもよく、又は達成されなくてもよい。したがって、「有効量」は、１つ又は複数の治療剤を投与する状況で考えることができ、単一の薬剤は、１つ又は複数の他の薬剤と組み合わせて所望の結果が達成されうる、又は達成される場合、有効量で投与されると考えることができる。
【０１２７】
以下の実施形態が本発明の主題である。
１．病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールドであって、ＡＤＭ（１−５２；配列番号１）又はその断片に結合する抗体又は断片又はスキャフォールド。
２．ＡＤＭのＮ末端部（アミノ酸１−２１）：
ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号４）
に結合する項目１による、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
３．ＡＤＭのアミノ酸２１−４２：
ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号３）
からなる中間領域（ＭＲ−）ＡＤＭの部分に結合することを特徴とする、項目１〜２の何れかによる、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体断片又はアドレノメデュリンに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
４．病気の症状が、吐き気、頭痛、筋肉痛、背痛、震え、及び／又は嘔吐の群から選択される、項目１〜３の何れかによる、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体断片又はアドレノメデュリンに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
５．病気が、≧１０ｍｇ／Ｌである試料中のＣ反応性タンパク質の量（ＣＲＰ）を特徴とし、かつ／又は試料中のＴＮＦの量が≧５０ｐｇ／ｍｌであり、かつ／又は試料中のバイオＡＤＭの量が≧４３ｐｇ／ｍｌであり、かつ／又は前記それを必要とする対象の平均動脈圧が低下している、項目１〜４の何れかによる、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体断片又はアドレノメデュリンに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
６．そのような症状又は病気の治療及び／又は予防を必要とする患者における病気が、炎症状態、自己免疫疾患、代謝性疾患、脳疾患、心血管疾患、及び薬物誘発性疾患を含む適応症の群から選択される、項目１〜５の何れかによる、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体断片又はアドレノメデュリンに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
７．病気が片頭痛である、項目１〜５の何れかによる、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又はＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体断片又はアドレノメデュリンに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
８．単一特異性である、項目１〜７の何れか１つによる、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
９．ビアコア２０００システムを使用したラベルフリー表面プラズモン共鳴で少なくとも１０-7ＭのＡＤＭに対する結合親和性を示す、項目１〜８の何れかによる、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
１０．ＡＤＭ結合タンパク質１（補体Ｈ因子）ではない、項目１〜９の何れかによる、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
１１．ＡＤＭのＮ末端（アミノ酸１）を認識し、それに結合する、前述の請求項の何れかによる、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
１２．血清、血液、血漿中のＡＤＭの半減期（ｔ１／２半滞留時間）を少なくとも１０％、好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは＞５０％、最も好ましくは＞１００％増大させるＡＤＭ安定化抗体又は断片又はスキャフォールドである、前述の請求項の何れかによる、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
１３．ヒト組換えＡＤＭ受容体を発現しているＣＨＯ−Ｋ１細胞において、ｈＡＤＭ２２−５２を参照拮抗薬として使用して、ＡＤＭの生物活性を８０％以下、好ましくは５０％以下遮断する、前述の項目の何れかによる、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
１４．前記対象が、化学療法、生物学的生物製剤（ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ）、抗生物質による治療、又は抗ウイルス化合物による治療を受ける、前述の項目の何れかによる、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
１５．前記抗体又は断片が、ヒトモノクローナル抗体又はＡＤＭに結合する断片又はその抗体断片であり、重鎖が配列：
ＣＤＲ１：配列番号５
ＧＹＴＦＳＲＹＷ
ＣＤＲ２：配列番号６
ＩＬＰＧＳＧＳＴ
ＣＤＲ３：配列番号７
ＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹ
を含み、軽鎖が配列：
ＣＤＲ１：配列番号８
ＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹ
ＣＤＲ２：
ＲＶＳ
ＣＤＲ３：配列番号９
ＦＱＧＳＨＩＰＹＴ
を含む
前述の項目の何れかによる、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体又は抗アドレノメデュリン抗体断片又は抗ＡＤＭ非Ｉｇスキャフォールド。
１６．ＶＨ領域として：
配列番号１０（ＡＭ−ＶＨ−Ｃ）
ＱＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＭＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＴＧＹＴＦＳＲＹＷＩＥＷＶＫＱＲＰＧＨＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＮＥＫＦＫＧＫＡＴＩＴＡＤＴＳＳＮＴＡＹＭＱＬＳＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＨＨＨＨＨＨ
配列番号１１（ＡＭ−ＶＨ１）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＲＹＷＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＨＨＨＨＨＨ
配列番号１２（ＡＭ−ＶＨ２−Ｅ４０）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＲＹＷＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＨＨＨＨＨＨ
配列番号１３（ＡＭ−ＶＨ３−Ｔ２６−Ｅ５５）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＴＧＹＴＦＳＲＹＷＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＨＨＨＨＨＨ
配列番号１４（ＡＭ−ＶＨ４−Ｔ２６−Ｅ４０−Ｅ５５）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＴＧＹＴＦＳＲＹＷＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＥＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＨＨＨＨＨＨ
を含む群より選択される配列を含み、ＶＬ領域として以下の配列：
配列番号１５（ＡＭ−ＶＬ−Ｃ）
ＤＶＬＬＳＱＴＰＬＳＬＰＶＳＬＧＤＱＡＴＩＳＣＲＳＳＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹＬＥＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹＲＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＬＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＩＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号１６（ＡＭ−ＶＬ１）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹＬＮＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＲＬＩＹＲＶＳＮＲＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＩＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号１７（ＡＭ−ＶＬ２−Ｅ４０）
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹＬＥＷＦＱＱＲＰＧＱＳＰＲＲＬＩＹＲＶＳＮＲＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＩＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
を含む群より選択される配列を含む
項目１５による、対象において、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するためのヒトモノクローナル抗体又はＡＤＭに結合する断片又はその抗体断片。
１７．重鎖として次の配列：
配列番号２２
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＲＹＷＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＮＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
又はこの配列と＞９５％同一である配列を含み、
軽鎖として次の配列：
配列番号２３
ＤＶＶＬＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹＬＥＷＹＬＱＲＰＧＱＳＰＲＬＬＩＹＲＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＩＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
又はこの配列と＞９５％同一である配列を含む
項目１５による、対象において、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するためのヒトモノクローナル抗体又はＡＤＭに結合する断片又はその抗体断片。
１８．項目１〜１７の何れかによる抗体又は断片又はスキャフォールドを含む、病気の症状の治療若しくは予防に使用するための、又はそれを必要とする対象におけるそのような症状を特徴とする病気の治療若しくは予防に使用するための医薬製剤。
１９．重鎖として次の配列：
配列番号２２
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＳＲＹＷＩＥＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＥＩＬＰＧＳＧＳＴＮＹＮＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
又はこの配列と＞９５％、好ましくは＞９８％同一である配列を含み、軽鎖として次の配列：
配列番号２３
ＤＶＶＬＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＲＳＳＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹＬＥＷＹＬＱＲＰＧＱＳＰＲＬＬＩＹＲＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＩＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
又はこの配列と＞９５％、好ましくは＞９８％同一である配列を含む
抗体。
２０．項目１９による抗体を含む医薬組成物。
【実施例】
【０１２８】
抗体の生成とその親和定数の決定
ヒト抗体及びマウス抗体をいくつか作製し、それらの親和定数を決定した（表１参照）。
【０１２９】
免疫のためのペプチド／結合体：
ペプチドのウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）への結合のための追加のＮ末端システイン（選択したＡＤＭ配列内にシステインが存在しない場合）残基をもつ免疫用ペプチドを合成した（ＪＰＴ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、ベルリン、ドイツ）。表１を参照されたい。Ｓｕｌｆｏｌｉｎｋカップリングゲル（Ｐｅｒｂｉｏ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、ボン、ドイツ）を使用することによってペプチドをＢＳＡに共有結合させた。カップリング手順は、Ｐｅｒｂｉｏのマニュアルに従って行った。
【０１３０】
マウス抗体は以下の方法に従って生成した。
【０１３１】
Ｂａｌｂ／ｃマウスを、０日目及び１４日目に１００μｇのペプチド−ＢＳＡ−結合体（１００μｌの完全フロイントアジュバントに乳化）及び２１日目及び２８日目に５０μｇ（１００μｌの不完全フロイントアジュバント中）で免疫した。融合実験を行う３日前に、１００μｌ生理食塩水に溶かした５０μｇの結合体を、１回の腹腔内注射及び１回の静脈内注射として動物に投与した。
【０１３２】
免疫したマウス由来の脾細胞及び骨髄腫細胞株ＳＰ２／０の細胞を、１ｍｌの５０％ポリエチレングリコールと３７℃で３０秒間融合させた。洗浄後、細胞を９６ウェル細胞培養プレートに播種した。ＨＡＴ培地（２０％ウシ胎児血清及びＨＡＴ栄養補助剤（ＨＡＴ−Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）を補充したＲＰＭＩ１６４０培地）で増殖させることによってハイブリッドクローンを選択した。２週間後、ＨＡＴ培地をＨＴ培地に替え３回継代し、その後正常細胞培地に戻す。
【０１３３】
融合の３週間後に、細胞培養上清を抗原特異的ＩｇＧ抗体について一次スクリーニングした。陽性の試験済みマイクロ培養物を、増殖のために２４ウェルプレートに移した。再試験後、選択した培養物をクローン化し、限界希釈法を用いて再クローン化し、アイソタイプを決定した（Ｌａｎｅ，  Ｒ．Ｄ．  １９８５．  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｍｅｔｈ．  ８１：  ２２３−２２８；  Ｚｉｅｇｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．  １９９６．  Ｈｏｒｍ．  Ｍｅｔａｂ．  Ｒｅｓ．  ２８：  １１−１５も参照）。
【０１３４】
マウスモノクローナル抗体の作製：
抗体は、標準的な抗体作製法（Ｍａｒｘ  ｅｔ  ａｌ，  １９９７．  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，  ＡＴＬＡ  ２５，  １２１）によって作成し、プロテインＡで精製した。ＳＤＳゲル電気泳動分析に基づくと、抗体純度は＞９５％であった。
【０１３５】
ヒト抗体：
ヒト抗体は、ファージディスプレイを用いて以下の手順に従って作製した。
【０１３６】
ＡＤＭペプチドに対する組換え一本鎖Ｆ可変ドメイン（ｓｃＦｖ）を単離するために、ヒトナイーブ抗体遺伝子ライブラリーＨＡＬ７／８を使用した。抗体遺伝子ライブラリーを、ＡＤＭペプチド配列に２つの異なるスペーサーを介して連結したビオチンタグが入ったペプチドの使用を含むパニング法でスクリーニングした。非特異的結合抗原及びストレプトアビジン結合抗原を用いたパニングラウンドの混合物を使用して、非特異的バインダーのバックグラウンドを最小限にした。モノクローナルｓｃＦｖ発現大腸菌株を作製するために、３ラウンド目のパニングから溶出したファージを使用した。これらのクローン株の培養からの上清は、抗原ＥＬＩＳＡ試験に直接使用されている（Ｈｕｓｔ  ｅｔ  ａｌ．  ２０１１．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １５２，  １５９−１７０；  Ｓｃｈｕｔｔｅ  ｅｔ  ａｌ．  ２００９．  ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ  ４，  ｅ６６２５も参照）。
【０１３７】
抗原に対する陽性ＥＬＩＳＡシグナル及びストレプトアビジンコートマイクロタイタープレートに対する陰性に基づいて陽性クローンを選択した。さらなる特徴付けのために、ｓｃＦｖオープンリーディングフレームを発現プラスミドｐＯＰＥ１０７（Ｈｕｓｔ  ｅｔ  ａｌ．  ２０１１．  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １５２，  １５９−１７０）にクローン化し、固定化金属イオンアフィニティークロマトグラフィーによって培養上清から捕捉し、サイズ排除クロマトグラフィーによって精製した。
【０１３８】
親和定数：
ＡＤＭに対する抗体の親和性を決定するために、ビアコア２０００システム（ＧＥヘルスケア・ヨーロッパＧｍｂＨ（フライブルグ、ドイツ）を使用したラベルフリー表面プラズモン共鳴を用いて、固定化抗体へのＡＤＭの結合のキネティクスを測定した。抗体の可逆的固定化は、製造業者の指示（マウス抗体捕捉キット；ＧＥヘルスケア）に従って、ＣＭ５センサー表面に高密度で共有結合された抗マウスＦｃ抗体を使用して行った（Ｌｏｒｅｎｚ  ｅｔ  ａｌ．  ２０１１．  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．  ５５（１）：  １６５−１７３）。
【０１３９】
モノクローナル抗体は、下記に示すヒト及びマウスのＡＤＭのＡＤＭ領域に対してそれぞれ作製した。次の表は、さらなる実験で使用される、得られた抗体の選択を示す。選択は標的領域に基づいた。
【０１４０】
【表１】
2020535151.tif 000002
【０１４１】
酵素消化による抗体断片の生成
Ｆａｂ及びＦ（ａｂ）２断片の生成は、マウス全長抗体ＮＴ−Ｍの酵素消化によって行った。抗体ＮＴ−Ｍを、ａ）ペプシンをベースとするＦ（ａｂ）２調製キット（ピアス４４９８８）及びｂ）パパインをベースとするＦａｂ調製キット（ピアス４４９８５）を使用して消化した。断片化手順は、供給業者から提供された指示に従って行った。Ｆ（ａｂ）２断片化の場合、消化を３７℃で８時間行った。Ｆａｂ断片化消化をそれぞれ１６時間行った。
【０１４２】
Ｆａｂ生成と精製の手順：
固定化パパインを、樹脂を０．５ｍｌの消化バッファーで洗浄し、カラムを５０００×ｇで１分間遠心分離することによって平衡化した。その後、バッファーを廃棄した。保存溶液を除去し、消化バッファーで洗浄し、その後、毎回１０００×ｇで２分間遠心分離することによって脱塩カラムを調製した。０．５ｍｌの調製したＩｇＧ試料を、平衡化固定化パパインが入ったスピンカラムチューブに加えた。消化反応のインキュベーション時間は、卓上ロッカーで３７℃にて１６時間行った。カラムを５０００×ｇで１分間遠心分離して、固定化パパインから消化物を分離した。その後、樹脂を０．５ｍｌのＰＢＳで洗浄し、５０００×ｇで１分間遠心分離した。洗浄画分を消化済み抗体に加え、その結果全試料体積は１．０ｍｌであった。ＮＡｂプロテインＡカラムをＰＢＳ及びＩｇＧ溶出バッファーを用いて室温で平衡化した。カラムを１分間遠心分離して保存溶液（０．０２％アジ化ナトリウム含有）を除去し、２ｍｌのＰＢＳを加えることによって平衡化し、再び１分間遠心分離し、フロースルーを廃棄した。試料をカラムに載せ、反転によって再懸濁した。インキュベーションは、室温にて、転倒混合（ｅｎｄ−ｏｖｅｒ−ｅｎｄ  ｍｉｘｉｎｇ）で１０分間行った。カラムを１分間遠心分離し、Ｆａｂ断片を含むフロースルーを保存した（参考文献：Ｃｏｕｌｔｅｒ  ａｎｄ  Ｈａｒｒｉｓ  １９８３．  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｍｅｔｈ．  ５９，  １９９−２０３．；Ｌｉｎｄｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．  ２０１０．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．  ７０，  ２７７−８７；Ｋａｕｆｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．  ２０１０．  ＰＮＡＳ．  １０７，  １８９５０−５．；Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．  ２０１０．  ＰＮＡＳ．  １０７，  １４７２７−３２；Ｕｙｓａｌ  ｅｔ  ａｌ．  ２００９  Ｊ．  Ｅｘｐ．  Ｍｅｄ．  ２０６，  ４４９−６２；Ｔｈｏｍａｓ  ｅｔ  ａｌ．  ２００９．  Ｊ．  Ｅｘｐ．  Ｍｅｄ．  ２０６，  １９１３−２７；Ｋｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．  ２００９  Ｊ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  １８５，  １２７５−８４０）。
【０１４３】
Ｆ（ａｂ´）２断片の生成及び精製のための手順：
固定化ペプシンを、樹脂を０．５ｍｌの消化バッファーで洗浄し、カラムを５０００×ｇで１分間遠心分離することによって平衡化した。その後、バッファーを廃棄した。保存溶液を除去し、消化バッファーで洗浄し、その後、毎回１０００×ｇで２分間遠心分離することによって脱塩カラムを調製した。０．５ｍｌの調製したＩｇＧ試料を、平衡化固定化ペプシンが入ったスピンカラムチューブに加えた。消化反応のインキュベーション時間は、卓上ロッカーで３７℃にて１６時間行った。カラムを５０００×ｇで１分間遠心分離して、固定化パパインから消化物を分離した。その後、樹脂を０．５ｍｌのＰＢＳで洗浄し、５０００×ｇで１分間遠心分離した。洗浄画分を消化済み抗体に加え、その結果全試料体積は１．０ｍｌであった。ＮＡｂプロテインＡカラムをＰＢＳ及びＩｇＧ溶出バッファーを用いて室温で平衡化した。カラムを１分間遠心分離して保存溶液（０．０２％アジ化ナトリウム含有）を除去し、２ｍｌのＰＢＳを加えることによって平衡化し、再び１分間遠心分離し、フロースルーを廃棄した。試料をカラムに載せ、反転によって再懸濁した。インキュベーションは、室温にて転倒混合で１０分間行った。カラムを１分間遠心分離し、Ｆａｂ断片を含むフロースルーを保存した（参考文献：Ｍａｒｉａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．  １９９１．  Ｍｏｌ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ２８：  ６９−７７；Ｂｅａｌｅ  １９８７．  Ｅｘｐ  Ｃｏｍｐ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １１：２８７−９６；Ｅｌｌｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．  １９７２．  ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ２４（３）：３１８−２２；Ｋｅｒｂｅｌ  ａｎｄ  Ｅｌｌｉｏｔ  １９８３．  Ｍｅｔｈ  Ｅｎｚｙｍｏｌ  ９３：１１３−１４７；Ｋｕｌｋａｒｎｉ  ｅｔ  ａｌ．  １９８５．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  １９：２１１−４；Ｌａｍｏｙｉ  １９８６．  Ｍｅｔｈ  Ｅｎｚｙｍｏｌ  １２１：６５２−６６３；Ｐａｒｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．  １９８２．  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈ  ５３：１３３−７３；Ｒａｙｃｈａｕｄｈｕｒｉ  ｅｔ  ａｌ．  １９８５．  Ｍｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２２（９）：１００９−１９；Ｒｏｕｓｓｅａｕｘ  ｅｔ  ａｌ．  １９８０．  Ｍｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １７：４６９−８２；Ｒｏｕｓｓｅａｕｘ  ｅｔ  ａｌ．  １９８３．  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈ  ６４：１４１−６；Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．  １９９１．  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｔｈ  １３８：１１１−９）。
【０１４４】
ＮＴ−Ｈ抗体断片のヒト化：
抗体断片をＣＤＲグラフト法（Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．  １９８６．  Ｎａｔｕｒｅ  ３２１，  ５２２−５２５）によってヒト化した。
【０１４５】
以下のステップを実行してヒト化された配列を達成した。
−全ＲＮＡ抽出：Ｑｉａｇｅｎキットを使用してＮＴ−Ｈハイブリドーマから全ＲＮＡを抽出した。
−初回ラウンドＲＴ−ＰＣＲ：ＱＩＡＧＥＮ（登録商標）ＯｎｅＳｔｅｐ  ＲＴ−ＰＣＲキット（カタログ番号２１０２１０）を使用した。ＲＴ‐ＰＣＲは重鎖と軽鎖に特異的なプライマーセットを用いて行った。各ＲＮＡ試料について、１２の個々の重鎖及び１１の軽鎖ＲＴ−ＰＣＲ反応を、可変領域のリーダー配列をカバーする変性フォワードプライマー混合物を使用してセットアップした。リバースプライマーは重鎖及び軽鎖の定常領域に位置する。制限部位はプライマーに設計しなかった。
−反応セットアップ：５．０μｌの５×ＱＩＡＧＥＮ（登録商標）ＯｎｅＳｔｅｐ  ＲＴ−ＰＣＲバッファー、０．８μｌのｄＮＴＰミックス（１０ｍＭの各ｄＮＴＰを含む）、０．５μｌのプライマーセット、０．８μｌのＱＩＡＧＥＮ（登録商標）ＯｎｅＳｔｅｐ  ＲＴ−ＰＣＲ酵素ミックス、２．０μｌの鋳型ＲＮＡ、ＲＮａｓｅを含まない水で２０．０μｌにする。総体積２０．０μｌ；ＰＣＲ条件：逆転写：５０℃、３０分；ＰＣＲの初期活性化：９５℃、１５分、サイクル：９４℃で２５秒、５４℃で３０秒、７２℃で３０秒の２０サイクル；最終伸長：７２℃、１０分；第２ラウンドセミネスティッドＰＣＲ：第１ラウンド反応からのＲＴ−ＰＣＲ産物を第２ラウンドＰＣＲでさらに増幅した。１２の個々の重鎖及び１１の軽鎖ＲＴ−ＰＣＲ反応を、抗体可変領域に特異的なセミネスティッドプライマーセットを用いてセットアップした。
−反応セットアップ：１０μｌの２×ＰＣＲミックス；２μｌのプライマーセット；８μｌの第１ラウンドＰＣＲ産物；総体積２０μｌ；ハイブリドーマ抗体クローニング報告ＰＣＲ条件：９５℃で５分間の初期変性；９５℃で２５秒、５７℃で３０秒、６８℃で３０秒の２５サイクル；最終伸長は６８℃で１０分。
−ＰＣＲ終了後、ＰＣＲ反応試料をアガロースゲルに流し、増幅したＤＮＡ断片を可視化する。ネスティッドＲＴ−ＰＣＲによって増幅した１５個以上のクローン化ＤＮＡ断片を配列決定した後、いくつかのマウス抗体の重鎖及び軽鎖がクローン化され、正しいように思われる。タンパク質配列アラインメント及びＣＤＲ解析は、１つの重鎖及び１つの軽鎖を明らかにする。可変重鎖の位置２６、４０及び５５上のアミノ酸並びに可変光の位置４０上のアミノ酸は、結合特性にとって重要であるので、それらはマウス本来のものに復帰させることができる。結果として得られる候補を以下に示す（Ｐａｄｌａｎ  １９９１．  Ｍｏｌ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  ２８，  ４８９−４９８；  Ｈａｒｒｉｓ  ａｎｄ  Ｂａｊｏｒａｔｈ．１９９５．  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉ．  ４，  ３０６−３１０）。
【０１４６】
抗体断片配列についての注釈（配列番号１０〜１７）：太字及び下線は、Ｎ末端からＣ末端まで番号順にＣＤＲ１、２、３であり、斜体は定常領域であり、ヒンジ領域は太字の下線付き文字で強調表示され、Ｃ末端のヒスチジンタグは太字の斜体文字で強調表示されている。
【０１４７】
【化１】
2020535151.tif 000003
【０１４８】
【化２】
2020535151.tif 000004
【０１４９】
実施例２−実験的内毒素血症の健常男性被験者における抗ＡＤＭ抗体（アドレシズマブ）（ＨＡＭ８１０１）の漸増単回静脈内投与の安全性、忍容性、及び薬物動態／薬物力学に関する無作為化二重盲検プラセボ対照第Ｉ相試験
全体的試験デザイン
アドレシズマブの単回グループ毎漸増用量を、１時間かけて静脈内注入として投与した、実験的内毒素血症の間の健常男性ボランティアにおける無作為化二重盲検プラセボ対照第Ｉ相試験。連続ＬＰＳ（リポ多糖）モデル；ＬＰＳの１ｎｇ／ｋｇの初回ボーラス投与、それに続く１ｎｇ／ｋｇ／時で３時間の持続注入を使用して実験的内毒素血症を誘発した。被験者は、ＬＰＳ投与開始１時間後に、試験薬物（アドレシズマブ又はプラセボ）による治療を１コース受けることになる。全身性炎症のモデルが最近報告されている（Ｋｉｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．  ２０１７．  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｒｅｐｏｒｔｓ  ７：  ４０１４９）。
【０１５０】
アドレシズマブは０．５ｍｇ／ｋｇの投与量で１時間かけて単回注入し、後続の治療群では２．０及び８．０ｍｇ／ｋｇまで増量した（表２を参照）。
【０１５１】
【表２】
2020535151.tif 000005
【０１５２】
試験集団の選定
試験集団は健常若年（ｙｏｕｎｇ）男性ボランティアから構成された。試験に組み入れられるためには、被験者はすべての組み入れ基準を満たし、どの除外基準も満たさなければならなかった。
【０１５３】
組み入れ基準
１．試験によって義務付けられた（ｓｔｕｄｙ−ｍａｎｄａｔｅｄ）どの手続よりも前の、本試験に参加することについての書面によるインフォームド・コンセント
２．１８歳から３５歳までの男性
３．被験者は、治験登録から治験薬投与後３カ月までの間、パートナーとの間で信頼性の高い避妊法の使用に同意しなければならない。
４．ＢＭＩ１８〜３０ｋｇ／ｍ2、下限体重５０ｋｇ、上限体重１００ｋｇ
５．既往歴、身体診察、バイタルサイン、１２誘導心電図、及び臨床検査パラメーターから判断して健康であること。
【０１５４】
除外項目
１．試験期間中及び試験日の７日前までに、薬物、レクリエーショナルドラッグ、又は抗酸化ビタミンサプリメントの投与を控える意思がないこと。
２．治療日の１日前までに喫煙又は飲酒を控える意思がないこと。
３．ＬＰＳが投与された試験への以前の参加。
４．治療日の３か月前までに著しい失血を伴う手術若しくは外傷又は献血。
５．心血管疾患の既往歴、徴候、又は症状、特に次のもの
・頻繁な血管迷走神経性虚脱又は起立性低血圧の病歴
・安静時脈拍数≦４５又は≧１００拍／分
・高血圧（ＲＲ収縮期＞１６０又はＲＲ拡張期＞９０ｍｍＨｇ）
・低血圧（ＲＲ収縮期＜１００又はＲＲ拡張期＜５０ｍｍＨｇ）
・第１度房室ブロック又は複雑脚ブロックからなる心電図上の伝導異常
・何らかの慢性不整脈（ＰＡＣ、ＰＶＣを除く）
６．腎機能障害：血漿クレアチニン＞１２０μｍｏｌ／Ｌ
７．肝機能検査値（アルカリホスファターゼ、ＡＳＴ、ＡＬＴ、γ−ＧＴ）が正常値の上限の２倍を超えていること。
８．喘息の既往歴
９．アトピー体質
１０．治療日の２週間前までに、ＣＲＰが正常値の上限の２倍以上、又は感染症を含む臨床的に重大な急性疾患であること。
１１．投与日の３０日前までの治験薬による治療又は他の治験への参加。
１２．治験プロトコールを遵守できないことが判明しているか又はその疑いがあること。
１３．使用する製剤の何れかの賦形剤に対して過敏であることがわかっていること。
１４．書面によるインフォームド・コンセント（例えば、言語上又は精神上の理由のために）を自ら提供できない、かつ／又は試験に参加できないこと。
【０１５５】
エシェリキア・コーライ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）Ｏ１１３型由来のリポ多糖類（ＬＰＳ）
コントロールされた炎症状態を達成するために、リポ多糖類（ＬＰＳ、米国レファレンスエンドトキシン［エシェリキア・コーライＯ：１１３、Ｌｉｓｔ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｉｎｃ．、カリフォルニア州キャンベル、米国］）を被験者に静脈内投与した。
【０１５６】
試験階層と時間枠
投与前の血液試料をＴ＝０（ベースライン）で採取した。バイタルサインは、仰臥位又は半仰臥位で５分間安静後に測定した。血液試料及び対照群の来院のスケジュール（より詳細な情報については表２を参照）：
・治療日（０日）に、予定時間±５分で採血した。
・２４時間後（１日目）に、ＩＭＰ投与後±１時間後にフォローアップ来院と採血を計画しなければならなかった。
・７日目には、±１日間の任意の時点でフォローアップ来院を計画することができた。
・１４日目及び２８日目には、±２日間の任意の時点でフォローアップ来院を計画することができた。
・６０日目及び９０日目には、±３日間の任意の時点でフォローアップ来院を計画することができた。
【０１５７】
臨床検査モニタリング
以下の血液学的パラメーターを分析した：ヘモグロビン、ヘマトクリット、ＲＢＣ、ＭＣＶ、ＭＣＨ、ＭＣＨＣ、ＷＢＣ、血小板、白血球百分率数。
【０１５８】
血液試料を血清分離管に採集し、次の生化学的パラメーター（ＣＲＰ、ＡＦ、ＡＬＴ、ＡＳＴ、γ‐ＧＴ、クレアチンキナーゼ、ＬＤＨ、尿素‐Ｎ、クレアチニン、ナトリウム、カリウム、ＰＴ、及びＡＰＴＴ）を分析した。
【０１５９】
プライマリーエンドポイント（主要評価項目）変数は次の通りである。有害事象；アドレシズマブ投与後の最初の１０時間とフォローアップ期間（Ｔ＝２４時間、Ｔ＝７日、Ｔ＝１４日、Ｔ＝２８日、Ｔ＝６０日、Ｔ＝９０日）のバイタルサイン、例えば心拍数、血圧、酸素飽和度、体温；静脈内注入部位の局所忍容性；安全性検査パラメーター（Ｈｂ、Ｈｔ、白血球、血小板、白血球分画、ナトリウム、カリウム、クレアチニン、尿素、アルカリホスファターゼ、ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＧＧＴ、ＣＫ、ＣＲＰ、ＰＴ、ＡＰＴＴ）；アドレシズマブ投与の２及び８時間後の１２誘導心電図（ＥＣＧ）。
【０１６０】
セカンダリーエンドポイント（副次的評価項目）は次の通りである。実験的内毒素血症の間のアドレシズマブの薬物動態（ＡＵＣ、Ｃｍａｘ、Ｔ１／２、Ｃｌ、Ｖを含む）；内毒素血症日の炎症性メディエーターの血漿中濃度（ＴＮＦα、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＬ−１０を含むが、これらに限定されない）；症状病気（Ｓｙｍｐｔｏｍ  Ｉｌｌｎｅｓｓ）スコア；任意選択で、腎障害マーカー（クレアチニンクリアランスや、プロエンケファリン、ＫＩＭ−１を含むが、これらに限定されない）。
【０１６１】
【表３】
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【０１６２】
重篤な有害事象（ＳＡＥ）又は未知で重篤な副作用の疑い（Ｓｕｓｐｅｃｔｅｄ  Ｕｎｓｕｓｐｅｃｔｅｄ  Ｓｅｒｉｏｕｓ  Ａｄｖｅｒｓｅ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ）（ＳＵＳＡＲ）は、９０日間のフォローアップ期間を含む試験の全期間中に観察されなかった。
【０１６３】
結果
アドレシズマブ群ではプラセボと比較して、病気スコアの低下が早かった。
【０１６４】
２ｍｇ／ｋｇ及び８ｍｇ／ｋｇはともに、２１０分（Ｔ２１０）〜４５０分（Ｔ４５０）の時点間でプラセボより有意に低い病気スコアを有する（それぞれｐ＝０．０１１及び０．００５；ＧＬＭの反復測定）（図１）。
【０１６５】
図２は、Ｔ２７０（時点２７０分）及びＴ３００（時点３００分）における治療群別の病気スコアの分布をそれぞれ示し（図２Ａ及びＢ）、本発明の抗体の驚くべき有益な効果を裏付けている。
【０１６６】
効果に対する単一病気スコア構成要素の寄与を図３に示す：Ａ）吐き気、Ｂ）頭痛、Ｃ）筋肉痛、Ｄ）背痛、及びＥ）震え。示されたすべての症状は、有意に効果に寄与する。嘔吐は２名の患者で、それぞれ１回生じたのみで、分析できなかった。
【０１６７】
図４は別の評価を示す。ここで別のスコアである病気（Ｓｉｃｋｎｅｓｓ）スコアは、全体的な病気に関する単一の質問を用いて、０から１０までのスケールで評価された。やはりこの場合も、抗ＡＤＭ抗体（アドレシズマブ）を投与した患者では病気スコアがより早く低下する。
【０１６８】
健常ヒトにおけるＮＴ−Ｈの投与
本試験は、健常男性被験者で無作為化、二重盲検、プラセボ対照試験として行い、健常男性被験者（各群に、ｎ＝６の実薬、ｎ＝２のプラセボ）のそれぞれ８名の健常男性被験者（第１群：０，５ｍｇ／ｋｇ、第２群：２ｍｇ／ｋｇ、第３群：８ｍｇ／ｋｇ）の３つの逐次群において静脈内（ｉ．ｖ．）注入としてＮＴ‐Ｈ抗体の単一漸増投与量を投与した。
【０１６９】
主な組み入れ基準は、書面によるインフォームド・コンセント、１８歳〜３５歳、信頼できる避妊法を使用する同意、及び１８〜３０ｋｇ／ｍ2のＢＭＩであった。
【０１７０】
被験者は、研究ユニットで１時間かけてゆっくり注入することによるＮＴ−Ｈ抗体（０．５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ）又はプラセボの単回静脈内投与を受けた。
【０１７１】
４つの群のベースラインＡＤＭ値に差はなかった。ＡＤＭ値の中央値は、プラセボ群で７．１ｐｇ／ｍＬ、第１治療群（０．５ｍｇ／ｋｇ）で６．８ｐｇ／ｍＬ、第２治療群（２ｍｇ／ｋｇ）で５．５ｐｇ／ｍＬ、第３治療群（８ｍｇ／ｍＬ）で７．１ｐｇ／ｍＬであった。
【０１７２】
結果は、健常人ではＮＴ−Ｈ抗体投与後最初の１．５時間以内にＡＤＭ値が急激に上昇し、その後プラトーに達して緩やかに低下したことを示す（図５）。
【０１７３】
それぞれプラセボ及びＮＴ−Ｈ抗体の単回投与を受ける前に、プラセボ群では２名の被験者、投与群では計３名の被験者が、片頭痛の症状を報告した。各時点の後、症状が再度求められた。ＮＴ‐Ｈ抗体を投与した被験者は、投与の４時間後に片頭痛のいかなる症状も報告しなかったが、プラセボを受けた２名の被験者は、注入前と同様に片頭痛の症状に苦しんだが依然としてあった。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ−Ｂ】
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【図３Ｃ−Ｄ】
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【図３Ｅ】
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【図４】
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【図５】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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