(57)【要約】  企図される組成物及び方法は、自己免疫応答を下方調節し、且つ／又は自己抗原提示細胞に対する免疫応答を上方調節するための種々の免疫調節剤を使用する。
2020535809.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
免疫抑制部分に結合された親和性部分を含むキメラ免疫調節分子であって、
前記親和性部分は、自己抗原に対する結合特異性を有し、
前記免疫抑制部分は、ＩＬ−８、ＩＬ−３４、ＴＧＦ−β及びＢ７−Ｈ４からなる群から選択される、キメラ免疫調節分子。
【請求項２】
前記親和性部分と前記免疫抑制部分との間のペプチドリンカーをさらに含む、請求項２に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項３】
前記親和性部分は、インスリン又はα−シヌクレインをコードするｍＲＮＡの翻訳産物に対する結合特異性を有する、請求項１又は２に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項４】
インスリンをコードする前記ｍＲＮＡの前記翻訳産物は、前記ｍＲＮＡのＡＵＧ３４１で開始するＡＬＴ−ＯＲＦ産物である、請求項３に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項５】
前記親和性部分は、抗体若しくはその断片、Ｔ細胞受容体部分、ｓｃＦＶ又はｍＲＮＡディスプレイによって単離された高親和性ペプチドを含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項６】
前記親和性部分は、Ｆｃ部分を含む部分を介して前記免疫抑制部分に結合される、請求項１〜５のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子をコードする配列部分を含む組換え核酸。
【請求項８】
前記配列部分は、恒常的に活性なプロモーターの制御下にある、請求項７に記載の組換え核酸。
【請求項９】
前記配列部分は、膵臓特異的プロモーターの制御下にある、請求項８に記載の組換え核酸。
【請求項１０】
ウイルスゲノムの少なくとも一部又は細菌ベクターの少なくとも一部である、請求項８又は９に記載の組換え核酸。
【請求項１１】
請求項１〜６のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子を、薬学的に許容し得る担体と組み合わせて含む医薬組成物。
【請求項１２】
請求項８〜１０のいずれか一項に記載の組換え核酸を含む薬学的に許容し得る組換えウイルスを、薬学的に許容し得る担体と組み合わせて含む医薬組成物。
【請求項１３】
前記組換えウイルスは、任意選択的にＥ２ｂ遺伝子が欠失されたＡｄ５ウイルスである、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
免疫刺激部分に結合された親和性部分を含むキメラ免疫調節分子であって、前記親和性部分は、自己抗原に対する結合特異性を有する、キメラ免疫調節分子。
【請求項１５】
前記親和性部分は、インスリン又はα−シヌクレインをコードするｍＲＮＡの翻訳産物に対する結合特異性を有する、請求項１４に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項１６】
インスリンをコードする前記ｍＲＮＡの前記翻訳産物は、前記ｍＲＮＡのＡＵＧ３４１で開始するＡＬＴ−ＯＲＦ産物である、請求項１５に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項１７】
前記親和性部分は、抗体若しくはその断片、Ｔ細胞受容体部分、ｓｃＦＶ又はｍＲＮＡディスプレイによって単離された高親和性ペプチドを含む、請求項１４〜１６のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項１８】
前記免疫刺激部分は、ＩＬ１５部分、ＩＬ１５受容体α鎖部分及びＦｃ部分を含む、請求項１４〜１７のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項１９】
請求項１４〜１８のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子をコードする配列部分を含む組換え核酸。
【請求項２０】
前記配列部分は、恒常的に活性なプロモーターの制御下にある、請求項１９に記載の組換え核酸。
【請求項２１】
前記組換え核酸は、ウイルスゲノムの少なくとも一部又は細菌ベクターの少なくとも一部である、請求項１９又は２０に記載の組換え核酸。
【請求項２２】
請求項１４〜１８のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子を、薬学的に許容し得る担体と組み合わせて含む医薬組成物。
【請求項２３】
ＭＨＣ複合体に結合された自己抗原に対する特異性を有するＴ細胞受容体の少なくとも部分をコードする組換え核酸を含む、遺伝子操作されたＮＫ細胞。
【請求項２４】
ＮＫ９２誘導体である、請求項２３に記載の遺伝子操作されたＮＫ細胞。
【請求項２５】
前記Ｔ細胞受容体の前記部分は、ＴＣＲ−α、ＴＣＲ−β鎖並びに任意選択的にＣＤ３γ及びＣＤ３δ鎖の少なくとも１つを含む、請求項２３又は２４に記載の遺伝子操作されたＮＫ細胞。
【請求項２６】
前記自己抗原は、インスリン又はα−シヌクレインをコードするｍＲＮＡの翻訳産物である、請求項２３〜２５のいずれか一項に記載の遺伝子操作されたＮＫ細胞。
【請求項２７】
インスリンをコードする前記ｍＲＮＡの前記翻訳産物は、前記ｍＲＮＡのＡＵＧ３４１で開始するＡＬＴ−ＯＲＦ産物である、請求項２６の遺伝子操作されたＮＫ細胞。
【請求項２８】
請求項２６又は２７に記載の遺伝子操作されたＮＫ細胞を、薬学的に許容し得る担体と組み合わせて含む医薬組成物。
【請求項２９】
自己免疫疾患の治療における、請求項１〜７又は１４〜１８のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子の使用。
【請求項３０】
前記自己免疫疾患は、１型糖尿病又はパーキンソン病である、請求項２９に記載の使用。
【請求項３１】
自己免疫疾患の治療のための医薬組成物の製造における、請求項８〜１０又は１９〜２１のいずれか一項に記載の組換え核酸の使用。
【請求項３２】
前記自己免疫疾患は、１型糖尿病又はパーキンソン病である、請求項２９に記載の使用。
【請求項３３】
自己免疫疾患と診断された患者を治療する方法であって、
それを必要とする患者に、請求項１〜７又は１４〜１８のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子を投与すること
を含む方法。
【請求項３４】
請求項２３〜２７のいずれか一項に記載の遺伝子操作されたＮＫ細胞を前記患者に投与するステップをさらに含む、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記患者は、１型糖尿病又はパーキンソン病と診断されている、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
免疫抑制サイトカインに結合された自己抗原部分を含むキメラ免疫調節分子。
【請求項３７】
前記自己抗原部分は、ミスフォールドされた自己抗原を含む、請求項３６に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項３８】
前記自己抗原部分は、インスリン又はα−シヌクレインをコードするｍＲＮＡの翻訳産物を含む、請求項３６又は３７に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項３９】
インスリンをコードする前記ｍＲＮＡの前記翻訳産物は、前記ｍＲＮＡのＡＵＧ３４１で開始するＡＬＴ−ＯＲＦ産物である、請求項３８に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項４０】
前記自己抗原部分は、Ｆｃ部分又は可動性リンカーを含む部分を介して前記免疫抑制サイトカインに結合される、請求項３６〜３９のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項４１】
前記免疫抑制サイトカインは、ＩＬ−８、ＩＬ−３４、ＴＧＦ−β及びＢ７−Ｈ４からなる群から選択される、請求項３６〜４０のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項４２】
請求項３６〜４１のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子をコードする配列部分を含む組換え核酸。
【請求項４３】
前記配列部分は、膵臓特異的プロモーターの制御下にある、請求項４２に記載の組換え核酸。
【請求項４４】
前記組換え核酸は、ウイルスゲノムの少なくとも一部又は細菌ベクターの少なくとも一部である、請求項４２又は４３に記載の組換え核酸。
【請求項４５】
請求項３６〜４１のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子を、薬学的に許容し得る担体と組み合わせて含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、２０１７年９月２９日に出願された、本発明者らの同時係属中の米国仮特許出願第６２／５６５，６７９号明細書の優先権を主張する。
【０００２】
本発明の分野は、それが特にＩ型糖尿病及びパーキンソン病に関するため、様々な自己抗原タンパク質に対する自己免疫を低下させるための組成物及び方法である。
【背景技術】
【０００３】
以下の説明には、本発明を理解するのに有用であり得る情報が含まれる。これは、本明細書で提供する情報のいずれかが従来の技術であるか若しくはここで特許請求される本発明と関連すること、又は具体的に若しくは暗黙に引用されたいずれかの刊行物が従来の技術であることを認めるものではない。
【０００４】
本明細書で特定したすべての刊行物及び特許出願は、あたかもそれぞれ個々の刊行物又は特許出願が具体的且つ個々に参照によって組み込まれることが示されるかのような程度まで参照によって組み込まれる。組み込まれた参考文献における用語の定義又は使用が、本明細書で提供されるその用語の定義と一致しないか又は相反する場合、本明細書で提供されるその用語の定義を適用し、参考文献におけるその用語の定義を適用しない。
【０００５】
Ｉ型糖尿病は、自己免疫疾患と特徴付けることができ、免疫系に対する様々な分子標的が提案されてきた。例えば、亜鉛輸送体タンパク質ＺｎＴ８のＣ末端部分は、米国特許第９０２３９８４号明細書で論じられている通り、潜在的な免疫原性断片として記載された。別の手法では、米国特許出願公開第２０１６／０３６１３９７号明細書に記載されている通り、免疫原性である少なくとも１つの断片を有するプレプロインスリンエピトープを含む２つ以上のオーバーラップする断片を含む組成物が用いられる。ここで、発明者らは、自己免疫状況における抗原曝露がＴ細胞サブセット（例えば、Ｔｈ１に対するＴｈ２）、サイトカイン産生及び／又は制御性Ｔ細胞誘導における有益な変化を刺激し、それによって寛容性を獲得できることを企図している。こうした手法及び他の手法は、少なくとも概念上魅力的であるが、こうした組成物及び方法を使用する治療的に有効なレジメンは、開発されていない。より最近では、ヒトプレプロインスリンｍＲＮＡからの不完全なリボソーム産物がＩ型糖尿病に関連して抗原性であることが記載され、国際公開第２０１７／１２５５８６号パンフレットにおいて論じられている通り、不完全なリボソーム産物に対する抗体又は細胞傷害性Ｔ細胞を使用するＩ型糖尿病のための様々な試験組成物及び試験方法が提案された。ここで、著者らは、Ｉ型糖尿病を治療するための、不完全なリボソーム産物に対する免疫寛容性の獲得も想定している。
【発明の概要】
【０００６】
したがって、免疫寛容性を獲得する様々な方法が当技術分野で公知であるにもかかわらず、様々な自己免疫疾患、特に１型糖尿病を治療するか又は回復させるための免疫療法のための改良された組成物及び方法の必要性が依然として存在する。
【０００７】
本発明の主題は、自己抗原、特にインスリン及びα−シヌクレインをコードする配列のｍＲＮＡ発現産物に関する免疫調節を標的とする種々の免疫調節組成物及び方法を対象とする。
【０００８】
本発明の主題の一態様では、本発明者らは、免疫抑制部分に結合された親和性部分を含むキメラ免疫調節分子及びこのキメラ免疫調節分子をコードする核酸を企図する。
【０００９】
好ましくは、親和性部分は、自己抗原に対する結合特異性を有し、最も好ましくは、親和性部分は、インスリン（例えば、ｍＲＮＡのＡＵＧ３４１で開始するＡＬＴ−ＯＲＦ産物）又はα−シヌクレインをコードするｍＲＮＡの翻訳産物に対する結合特異性を有する。親和性部分について、こうした部分は、抗体若しくはその断片、Ｔ細胞受容体部分、ｓｃＦｖ又はｍＲＮＡディスプレイによって単離された高親和性ペプチドを含み得ることが企図される。したがって、キメラ免疫調節分子は、Ｆｃ部分も含むことができる。本発明の主題を限定しないが、好ましい免疫抑制部分には、ＩＬ−８、ＩＬ−３４、ＴＧＦ−β及びＢ７−Ｈ４が含まれる。
【００１０】
組換え核酸が企図される場合、キメラ分子をコードする配列部分は、誘導可能であるか、又は恒常的に活性であるか、又は組織特異的なプロモーター（例えば、膵臓特異的プロモーター）の制御下にあり得る。こうした組換え核酸は、単離された断片又はウイルスゲノムの少なくとも一部若しくは細菌ベクターの少なくとも一部であり得る。
【００１１】
したがって、本発明者らは、キメラ免疫調節分子又は本明細書に示した組換え核酸を含む薬学的に許容し得る組換えウイルス（例えば、Ｅ２ｂ遺伝子が欠失されたＡｄ５）を、薬学的に許容し得る担体と典型的には組み合わせて含む医薬組成物も企図する。
【００１２】
さらなる企図される態様では、本発明者らは、免疫刺激部分に結合された親和性部分を含むキメラ免疫調節分子及びこのキメラ免疫調節分子をコードする核酸であって、親和性部分は、自己抗原に対する結合特異性を有する、キメラ免疫調節分子及びこのキメラ免疫調節分子をコードする核酸も企図する。特に企図される親和性部分は、インスリン（例えば、ｍＲＮＡのＡＵＧ３４１で開始するＡＬＴ−ＯＲＦ産物）又はα−シヌクレインをコードするｍＲＮＡの翻訳産物に対する結合特異性を有する。上で企図された分子と同様に、親和性部分は、抗体若しくはその断片、Ｔ細胞受容体部分、ｓｃＦｖ又はｍＲＮＡディスプレイによって単離された高親和性ペプチドを含むことができ、キメラ分子は、ＩＬ１５部分、ＩＬ１５受容体α鎖部分及びＦｃ部分をさらに含む。したがって、特に好ましい分子は、上に記載した通りの親和性部分を有するＡＬＴ８０３スキャフォールドに基づくものであり得る。したがって、本発明者らは、本明細書に示したキメラ免疫調節分子を、薬学的に許容し得る担体と典型的には組み合わせて含む医薬組成物も企図する。
【００１３】
一層さらに企図される態様では、本発明者らは、自己抗原に対する特異性を有するＴ細胞受容体の少なくとも部分をコードする組換え核酸を含む、遺伝子操作されたＮＫ細胞を企図する。好ましくは、ＮＫ細胞は、ＮＫ９２誘導体であり、及び／又はＴ細胞受容体の部分は、ＴＣＲ−α、ＴＣＲ−β鎖及びＣＤ３ζ鎖を含む。上に記述した通り、自己抗原は、インスリン又はα−シヌクレインをコードするｍＲＮＡの翻訳産物であることが概して好ましい。したがって、本明細書に示した通りの遺伝子操作されたＮＫ細胞を含む医薬組成物が企図される。同様に、一層さらなる企図される態様では、本発明者らは、自己免疫疾患、特に１型糖尿病又はパーキンソン病を治療するための、本明細書に記載した通りのキメラ免疫調節分子及び改変されたＮＫ細胞の使用及び方法も企図する。
【００１４】
同様の数字が同様の構成成分を表す添付の図面と共に、以下の好ましい実施形態の詳細な説明から本発明の主題の様々な目的、特徴、態様及び利点がより明らかになる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】インスリンをコードする典型的なｍＲＮＡ配列であり、ここで、翻訳産物は、ｍＲＮＡ配列の下に表される。
【図２】プレプロインスリンＯＲＦ及びＡＬＴ−ＯＲＦに対する潜在的な開始コドンを、それぞれの開始コドンの使用頻度の尤度スコアと共に示す、図１の配列の概略的例示である。
【図３】自己免疫エピトープに対する親和性部分と免疫刺激性部分とを含むキメラ構築物の概略的例示である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明者らは、様々な自己免疫疾患、特にＩ型糖尿病及びパーキンソン病を、自己免疫疾患と関連するある種のタンパク質に関するネオエピトープ／抗原を使用することによって治療し得ることを発見した。ここで、ネオエピトープ又は抗原は、免疫応答を減弱し、且つ／又はネオエピトープ若しくは抗原提示細胞を根絶するための、１つ又は複数の免疫抑制性因子及び／又は細胞に基づく構築物に関連して使用される。
【００１７】
特に好ましい態様では、自己免疫反応の重症度は、自己免疫疾患と関連するタンパク質（例えば、ネオエピトープ又は抗原）に結合する親和性部分を有し、且つ抑制性効果を有する免疫調節性部分をさらに有するキメラタンパク質によって軽減させることができる。こうしたキメラタンパク質は、自己免疫性の反応性の細胞を減少させ、且つこのタンパク質に対する寛容性を増進させると考えられる。自己免疫性の反応性の抗原提示細胞を根絶するか又はその数を減少させるために、自己免疫疾患と関連し、したがってグランザイム及びパーフォリンの放出を介してＮＫ細胞死滅を誘発する、ＭＨＣ結合タンパク質と結合する（例えば、患者の反応性のＴ細胞から得られた）キメラＴ細胞受容体を有する遺伝子改変されたＮＫ細胞を用いることができる。代わりに又はさらに、ＡＬＴ８０３（すなわちＩＬ−１５受容体α／ＩｇＧ１  Ｆｃ融合タンパク質に結合されたＩＬ−１５変異体（ＩＬ−１５Ｎ７２Ｄ）タンパク質）をベースとし、且つ自己免疫疾患と関連するタンパク質に結合する親和性部分を有するＴｘＭハイブリッド構築物を作製することができる。このようにして、自己免疫性の反応性の抗原提示細胞に対する特異性を用いる、ＮＫに基づく細胞死滅が刺激され、これが自己免疫を低下させ、さらに排除すると考えられる。
【００１８】
本発明の主題の一例では、本発明者らは、インスリンｍＲＮＡが、図１に表したように、そこから遺伝情報がタンパク質に翻訳され得る複数の開始コドンの可能性を有することに注目した。図２にも概略的に表したように、６０位の適切な開始コドンがプレプロインスリンの形成をもたらすのに対して、７２、３４１及び４４２位の３つの追加の開始コドンが利用可能である。β細胞において正しくない開始コドンが使用される場合、本発明者らは、ここで、（フレームシフトの又はインフレームタンパク質ミスフォールディングの結果であり得る）インスリンに基づくネオエピトープが形成され、次いでこれが膵臓におけるβ細胞に対する免疫応答の引き金となることを想定する。より具体的には、図１は、完全長インスリンｍＲＮＡを示し、真正のＰＰＩ  ＯＲＦを黒い大文字で、５’及び３’ＵＴＲを灰色の大文字で、且つポリ（Ａ）シグナル配列を灰色の太字で示す。プレプロインスリン（ＰＰＩ）アミノ酸配列は、濃いフォントで示され（配列番号１）、＋２リーディングフレームのＳＮＰバリアントを有するアミノ酸配列（配列番号２及び配列番号３）は、小さい薄い灰色フォントで示され、代替オープンリーディングフレーム（ＡＬＴ−ＯＲＦ）のアミノ酸配列は、ｍＲＮＡ配列の下に太い灰色で示される。ｍＲＮＡ内のすべてのＡＵＧコドンを黒い枠で囲み、翻訳開始部位として使用されるものは、より薄い灰色（得られるアミノ酸配列に相当する）で示す。＊は、所与のアミノ酸配列内の終止コドンを示す。推定上の非ＡＵＧ（ＣＵＧ）開始部位は、薄い灰色の破線で囲む。３’−ＵＴＲ  ＳＮＰには注釈を付け、通常ではないポリペプチド内の潜在的に影響を受けているアミノ酸であるため、両方の多型を表す。上に記述した通り、図２は、完全長ヒトインスリンｍＲＮＡの概略図を表す。５’及び３’ＵＴＲは、黒で、ＡＵＧで開始するインスリンコードＯＲＦは、濃い灰色で表す。代替の翻訳開始部位は、イタリックで示し、ポリ（Ａ）テールは、太字で示す。アウトオブフレームポリペプチドをコードするＡＬＴ−ＯＲＦは、灰色で示し、最初のアミノ酸（１）及びポリ（Ａ）テールの前の最後のアミノ酸（４３）を表す。図２の右側には、ＮｅｔＳｔａｒｔ  １．０予測サーバーによって予測される、インスリンｍＲＮＡ配列内のあらゆるＡＵＧコドンについての翻訳開始スコアを示す。０．５を超える予測スコアは、ほぼ確実な翻訳開始コドンと考えられる。本明細書での使用に適したさらなる詳細及び考察は、他に記載されている（Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ２３，５０１−５０７（２０１７））。このように、代替開始コドン使用に起因するすべてのポリペプチド産物は、インスリンに基づくネオエピトープ／抗原と考えられる。
【００１９】
上記を考慮して、自己免疫攻撃を低下させ、且つ寛容性を獲得するために、本発明者らは、ここで、インスリンに基づくネオエピトープ若しくはＡＬＴ−ＯＲＦ（これは、ミスフォールドされたＰＰＩでもあり得る）に結合する第１の部分を含むか、又は第１の部分としてのＡＬＴ−ＯＲＦ（これは、膜結合され且つ／又はＭＨＣ複合体に結合され得る）に基づき、且つ免疫抑制性効果を提供し、且つ／又は免疫寛容性の獲得に寄与する第２の部分を有するネオエピトープを含むことができるキメラタンパク質構築物を調製できることを企図する。
【００２０】
最も典型的には、結合部分は、特定の自己抗原又はネオエピトープ自体に対して特異的であり得るか、又は特定の自己抗原若しくはネオエピトープが抗原提示細胞上のＭＨＣ複合体に結合されている場合の特定の自己抗原／ネオエピトープに対して特異的であり得る。最も典型的には、結合部分が特定の自己抗原又はネオエピトープ自体に対して特異的である場合、この結合部分は、自己抗原／ネオエピトープに対する公知の且つ定義された親和性を有するｓｃＦｖであり得る。こうしたｓｃＦｖは、インビボ又はインビトロで産生された抗体のＶＨ及びＶＬ部分をベースとすることができるか、又は自己免疫疾患を有する患者由来の自己抗原／ネオエピトープに対する抗体をベースとすることができる。代わりに、こうしたｓｃＦｖ部分は、餌（ｂａｉｔ）として自己抗原／ネオエピトープを使用して、高多様性のＲＮＡディスプレイライブラリをスクリーニングすることから得ることもできる。他の例では、結合部分が、ＭＨＣ複合体に結合された特定の自己抗原又はネオエピトープに対して特異的である場合、好適な結合部分には、特に組換え型Ｔ細胞受容体α及びβ鎖（又はその抗原結合部分）が含まれる。容易に分かる通り、こうしたＴ細胞受容体は、確立されたプロトコルに従い、自己免疫疾患を有する患者のＴ細胞から単離することができる。自己抗原がシヌクレイン又はそのスプライスバリアントである場合、αシヌクレインに関する好適な配列は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢにおいて受託番号Ｐ３７８４０で参照され、αシヌクレインをコードする様々なｍＲＮＡ配列は、例えば、ＥＭＢＬ受託番号Ｌ０８８５０、Ｌ３６６７４、Ｌ３６６７５及びＤ３１８３９で参照される。
【００２１】
しかし、さらなる代替態様では、結合部分は、自己抗原／ネオエピトープ又はアプタマー若しくは他の合成の結合剤に高親和性（例えば、ＫＤ＜１０７Ｍ）で結合するペプチド又はタンパク質など、ｓｃＦｖ又はＴＣＲ以外の実体も含み得ることに留意するべきである。さらに、好適なネオエピトープは、オミクス分析を使用して特定することもできることが理解されるであろう。さらに、本明細書で特定された自己抗原／ネオエピトープは、（例えば、ｎｅｔＭＨＣを使用する）患者のＭＨＣ型への結合のコンピュータによる分析を介してさらに性格付けできることがさらに好ましい。したがって、結合部分は、様々な合成起源、特に高多様性のライブラリ（例えば、ＲＮＡ／ファージディスプレイライブラリ）から、又は下により詳細にさらに記載する通りの自己抗原／ネオエピトープ反応性のＴ細胞の単離及びその後のＴ細胞受容体の単離により特定又は調製され得ることが理解されるであろう。
【００２２】
免疫抑制性効果及び／又は免疫寛容性を提供する特に好ましい部分には、ＩＬ−８、ＴＧＦ−β、ＩＬ−２７、ＩＬ−３５、ＩＬ−３７又はＢ７Ｈ４（又はその部分）が含まれ、これらは、ペプチド結合によって結合部分と結合して、キメラタンパク質を形成することができる。例えば、ＩＬ−８についての好適な配列は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢデータベースエントリＰ１０１４５で参照することができ、ＴＧＦ−βについての好適な配列は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢデータベースエントリＰ０１１３７で参照することができ、ＩＬ−２７についての好適な配列は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢデータベースエントリＱ８ＮＥＶ９／Ｑ１４２１３で参照することができ、ＩＬ−３７についての好適な配列は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢデータベースエントリＱ９ＮＺＨ６で参照することができ、Ｂ７−Ｈ４についての好適な配列は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢデータベースエントリＱ７Ｚ７Ｄ３で参照することができる。しかし、さらに企図される様々な他の免疫抑制性の非タンパク質部分、特に企図される化合物には、テトラサイクリン系抗生物質、糖質コルチコイド型の薬物、タクロリムス、シクロスポリンなどが含まれる。個々の分子に応じて、共有結合形成の方式が異なり得、当業者は、適切な結合剤及び方法を十分に知るであろう。多数の方式の結合が適していると考えられるが、特に好ましい方式には、ｓｃＦｖのためのポリペプチド単鎖、任意選択的な介在性のリンカー配列及び免疫抑制性効果を提供する部分をコードする核酸構築物のインフレーム発現が含まれる。
【００２３】
したがって、最も典型的には、結合部分は、免疫抑制性効果及び／又は免疫寛容性を提供する第２の部分と共有結合する。例えば、結合部分がｓｃＦｖであり、第２の部分がタンパク質（例えば、ＴＧＦ−βのＩＬ−８）である場合、共有結合は、キメラタンパク質の骨格におけるペプチド結合であり得る。キメラタンパク質の構築は、クローニング及びタンパク質産生の標準の方法を使用し、細菌（例えば、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）Ｂ２１  ＣｌｅａｒＣｏｌｉ）、酵母（例えば、ピキア・パステウリス（Ｐｉｃｈｉａ  ｐａｓｔｅｕｒｉｓ）、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）など）又は真核生物（例えば、ＳＦ９細胞培養、ＣＨＯ細胞培養）産生系において実施することができる。したがって、キメラタンパク質をコードする組換え核酸も企図され、組換え核酸構築物は、線状又は環状の染色体外核酸又は宿主細胞ゲノムに組み込まれる組換え核酸であり得ることが認識されるであろう。キメラ免疫調節分子をコードする配列部分は、典型的には、産生環境では、恒常的に活性なプロモーターの制御下又はウイルス送達環境では組織特異的プロモーターの制御下にある。別の例では、１型糖尿病キメラ構築物のウイルス送達について、プロモーターは、膵臓特異的プロモーター、例えばＩＮＳ（インスリン）プロモーター、ＩＲＳ２（インスリン受容体基質２）プロモーター、Ｐｄｘ１（膵臓及び十二指腸ホメオボックス１）プロモーター、Ａｌｘ３（Ａｒｉｓｔａｌｅｓｓ様ホメオボックス３）プロモーター又はＰｐｙ（膵ポリペプチド）プロモーターであり得る。
【００２４】
代わりに、インスリンのＡＬＴ−ＯＲＦ、ミスフォールドされたタンパク質又は他のネオエピトープをベースとするか又はそれを含むある部分を含み、且つ免疫抑制性効果を提供し、且つ／又は免疫寛容性の獲得に寄与する第２の部分をさらに含むキメラタンパク質構築物を調製できることも企図される。例えば、こうしたキメラタンパク質は、ＴＧＦ−β又はＩＬ−１０（又は上に記載した通りの免疫抑制性効果及び／又は免疫寛容性を提供する他の部分）と融合させたインスリンのＡＬＴ−ＯＲＦ（図１及び２に示す通り）を含むことができる。企図されるキメラ産物は、必ずしもというわけではないが、典型的には、第１の部分と第２の部分との間に配置される可動性で強固な、場合によりさらに切断可能であり得るリンカーを有する（例えば、Ａｄｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ  Ｒｅｖ．２０１３  Ｏｃｔ；６５（１０）：１３５７−６９を参照されたい）。例えば、第１の部分と第２の部分との間の好適なリンカー配列としては、（Ｇ４Ｓ）ｎ−リンカー（ｎは、典型的には１〜１０である）が挙げられる。
【００２５】
企図されるキメラタンパク質構築物の投与は、最も典型的には、全身的な（例えば、ｉ．ｖ．注射を介する）又は局所的な（典型的には罹患した組織への）注射によるものである。投薬量及びスケジュールは、用量漸増を使用して決定することができるか、又は一般に免疫抑制又は寛容性をもたらす化合物についての生理学的濃度に従う。代わりに、企図されるキメラタンパク質構築物は、遺伝子治療の一部でもあり得、ここで、組換え核酸を含有するウイルスが患者に送達され、次いで組換え核酸が患者の宿主細胞において好ましくは組織特異的に（例えば、罹患した組織に対して組織特異的であるプロモーターを使用して）発現される。ここで、投与は、典型的には、少なくとも１０６、又は少なくとも１０８、又は少なくとも１０１０個のウイルス粒子が単回投与で注入される、ウイルスによる遺伝子治療のためのプロトコルに従う。
【００２６】
本発明の主題の別の態様では、本発明者らは、自己抗原／ネオエピトープと結合し、且つ細胞傷害性細胞上、最も好ましくはＮＫ細胞上で発現されるキメラ抗原受容体タンパク質を構築し得ることも企図する。こうした遺伝子改変された細胞は、自己抗原／ネオエピトープを呈する（抗原提示）細胞を減少させる、さらに完全に排除し、これにより次に自己免疫応答を低下させると考えられる。最も典型的には、細胞傷害性細胞又はＮＫ細胞に、典型的には当技術分野で周知のプロトコルに従い、キメラＴ細胞受容体をコードする組換え核酸を遺伝子導入する。したがって、好適な組換え核酸には、ｍＲＮＡ、線状ｄｓＤＮＡ及びウイルス発現ベクターが含まれる。
【００２７】
例えば、好ましいキメラ抗原受容体は、外部ドメインとしての、自己抗原／ネオエピトープに対する高い親和性を有するｓｃＦｖ部分又は低分子ペプチドを含み、これは、最も典型的には膜貫通ドメインに結合され、これは、続いて、複数のＩＴＡＭモチーフを含むシグナル伝達内部ドメインに結合される。例えば、好適なキメラ抗原受容体は、可動性のヒンジ領域及びＣＤ３ζ鎖に結合されたｓｃＦｖ（これは、自己抗原／ネオエピトープと結合する）抗体断片を含む。当然のことながら、ｓｃＦｖ部分は、ＣＤ３ζ−ＣＤ２８−４１ＢＢ又はＣＤ３ζ−ＣＤ２８−ＯＸ４０などの複数のシグナル伝達ドメインに結合して、シグナル伝達を増大させ得ることも理解されるであろう。当技術分野で公知のキメラ抗原受容体を産生及び発現させる多数の方法が存在し、こうした組成物及び方法のすべてが本明細書の使用に適していると考えられる（例えば、Ｍｏｌ  Ｔｈｅｒ．２０１７  Ａｕｇ  ２；２５（８）：１７６９−１７８１；又はＪ  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ．２０１６  Ｊｕｌ；２０（７）：１２８７−１２９４；又はＳｃｉ  Ｒｅｐ．２０１５；５：１１４８３を参照されたい）。キメラ抗原受容体のネオエピトープ／抗原結合ドメインに関して、上に記述したのと同じ考察を適用する。さらに、キメラ抗原受容体は、一般に、細胞傷害性細胞、特にＮＫ細胞において発現されて、ネオエピトープ／抗原を提示するすべての細胞に標的特異的な細胞傷害反応を与えることが理解されるであろう。
【００２８】
一層さらなる企図される態様では、特にネオエピトープ／抗原が抗原提示細胞上のＭＨＣ複合体に結合される場合、抗原ＭＨＣ／複合体に結合するＴ細胞受容体を発現する組換え型の細胞傷害性細胞が企図される。最も典型的には、組換え型のＴ細胞受容体は、自己抗原又はネオエピトープに対して反応性であるＴ細胞のＴ細胞受容体から産生することができる。最も典型的には、こうしたＴ細胞は、公知のプロトコルに従って単離することができる（例えば、Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｏｂｅｓ．２０１７  Ａｐｒ；２４（２）：９８−１０２；又はＤｉａｂｅｔｅｓ．２０１５  Ｊａｎ；６４（１）：１７２−８２；国際公開第２０１７／１２５５８６号パンフレット及びその米国国内段階文書；又はＰＬｏＳ  ＯＮＥ  ２０１１，Ｖｏｌ．６（１１），ｅ２７９３０）。例えば、細胞傷害性細胞がＮＫ細胞である場合、Ｔ細胞受容体のα及びβ鎖を単一の核酸（例えば、ｍＲＮＡ）からクローン化及び発現させ得ること、またＣＤ３γ及びＣＤ３δサブユニットを別の単一の核酸（例えば、ｍＲＮＡ）から発現させて、ＮＫ細胞における機能性Ｔ細胞受容体を再構築し得ることが企図される。代わりに、４つすべてのサブユニットを（典型的にはＴ２Ａ、Ｐ２Ａ及び／又はＦ２Ａ配列によって分離された）単一のｍＲＮＡから同時発現させることもできる。これに関連して、ＮＫ細胞は、典型的には、内在性ＣＤ３ζ及びＣＤ３εドメインを提供することに留意するべきである。
【００２９】
したがって、組換え型の治療用の細胞傷害性細胞、特に同種異系ＮＫ細胞又は患者からのＮＫ細胞であり得る組換え型のＮＫ細胞が企図される。しかし、ＮＫ細胞がＮＫ９２細胞又はその誘導体であることが典型的には好ましい。例えば、特に好ましいＮＫ細胞としては、こうした細胞を阻害の欠如又は低下を介して恒常的に活性化させる、少なくとも１種のキラー細胞免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ）の発現の低下又は消失を有するように遺伝子改変されているＮＫ細胞が挙げられる。こうした細胞は、ａＮＫ細胞としてＮａｎｔＫｗｅｓｔ（ＵＲＬ  ｗｗｗ．ｎａｎｔｋｗｅｓｔ．ｃｏｍを参照されたい）から市販品として得ることもできる。さらなる好適なＮＫ細胞としては、高親和性Ｆｃγ受容体（例えば、ＣＤ１６、Ｖ１５８）を発現する遺伝子操作されたＮＫ細胞が挙げられ、これは、ｈａＮＫ細胞（高親和性ナチュラルキラー細胞）としてＮａｎｔＫｗｅｓｔから市販品として入手可能である。
【００３０】
組換え型のＮＫ細胞は、１注入あたり約１０６〜１０７、又は約１０７〜１０８、又は約１０８〜１０９、又は約１０９〜１０１０個（又はさらに多くの）細胞の注入で投与されることが好ましい。注入は、単独で又は自己抗原／ネオエピトープに結合する部分を有し、及び免疫抑制性効果を提供し、且つ／又は免疫寛容性の獲得に寄与する第２の部分を有する、上に記載したキメラタンパク質構築物の投与と組み合わせて若しくはこの投与後に行うことができる。
【００３１】
本発明の主題のさらに別の態様では、本発明者らは、自己抗原／ネオエピトープ（例えば、膜結合され且つ／又はＭＨＣ複合体に結合され得るインスリンに基づくＡＬＴ−ＯＲＦネオエピトープ）に高親和性で特異的に結合するある部分を有し、且つ細胞傷害性細胞、特にＴ細胞及びＮＫ細胞に対する免疫刺激性効果を提供する第２の部分を有するキメラタンパク質構築物も企図する。上に既に記述した通り、結合部分は、好ましくは、ｓｃＦｖであるが、自己抗原／ネオエピトープに高親和性で結合するあらゆるペプチド又はタンパク質が可能である。例えば、結合部分は、単離された抗体又はＲＮＡ若しくはファージディスプレイ法から単離された分子から得ることができる。したがって、最も典型的には、キメラタンパク質構築物は、免疫刺激性タンパク質が結合部分にフレーム内に融合される単鎖ペプチド骨格を含む。
【００３２】
免疫刺激性部分は、好ましくは、細胞傷害性細胞、特にＮＫ細胞を活性化する免疫刺激性サイトカインである。したがって、好ましい免疫刺激性部分は、ＩＬ−２若しくはＩＬ−１５の少なくとも部分を含むか、又はＩＬ−１５：ＩＬ−１５受容体αスーパーアゴニスト複合体に基づくＡＬＴ８０３型スーパーカイン（ｓｕｐｅｒｋｉｎｅ）を含むことができる（Ｃｙｔｏｋｉｎｅ．２０１１  Ｄｅｃｅｍｂｅｒ；５６（３）：８０４−８１０に記載されている通り）。さらに、こうしたスーパーアゴニスト複合体は、ＩＬ−１５とＩＬ−１５受容体α鎖の少なくとも１つへのｓｃＦｖ部分の付加によって改変される（例えば、米国特許出願公開第２０１８／０２００３６６号明細書に記載されている通り）。免疫刺激性部分がＡＬＴ８０３を含む場合、その立体配置は、最も好ましくは、図３に概略的に示したＴｘＭとしてのものである。ここで、このキメラ分子は、キメラ分子の血清半減期を増大させ、またＣＤ１６を介する（高親和性）ＮＫ細胞のための結合部位を提供するＦｃ部分を含む。ＩＬ１５受容体／ＩＬ１５スーパーアゴニスト部分は、結合部分を介して自己抗原／ネオエピトープに結合される細胞傷害性細胞に対する刺激性シグナルを提供する。キメラタンパク質構築物の投与は、典型的には、全身的な（ｉ．ｖ．注射を介する）又は局所的な（典型的には腫瘍内注射を介する）注射によるものである。投薬量及びスケジュールに関して、これらのパラメータは、典型的には、ＡＬＴ８０３についての従来の投与スケジュールに従うことが企図される。
【００３３】
したがって、企図される組成物及び方法は、特定の状況の自己抗原／ネオエピトープにおける免疫抑制／免疫寛容性の獲得を可能にするだけでなく、自己抗原／ネオエピトープに対する免疫応答を別に永続化させるであろうＡＰＣの減少、さらに排除を可能にすることが理解されるであろう。代わりに又はさらに、本発明の主題のさらに別の態様では、自己抗原／ネオエピトープの、特にＡＬＴ−ＯＲＦの翻訳を阻止するアンチセンス又はｓｉＲＮＡを転写時にもたらす遺伝子治療のための組換えウイルスを産生することができる（例えば、米国特許出願公開第２０１４／０２９６３２１号明細書に記載された通りの方法を使用する）。
【００３４】
したがって、本発明者らは、免疫寛容性を獲得するために、インスリンに基づくネオエピトープに対するある部分と結合し、且つ第２の免疫抑制性部分（例えば、ＩＬ−８、ＴＧＦ−β）を有するキメラ構築物を含む１種又は複数の治療組成物を投与することにより、自己免疫疾患、特にＩ型糖尿病を治療する方法を企図する。寛容性が確立されたら（又は選択的に）、Ｔ細胞受容体を、インスリンに基づくネオエピトープに対して反応性であるＴ細胞からクローン化する。次いで、クローン化した受容体をＮＫ細胞において機能性の組換え型のＴ細胞受容体として発現させ、次いで、これを、インスリンに基づくネオエピトープを提示するすべての細胞を（典型的にはＭＨＣ  Ｉ又はＩＩ提示を介して）死滅させるために患者に戻す。
【００３５】
いくつかの実施形態では、本発明のある種の実施形態を説明及び主張するために使用される、成分の量、特性、例えば濃度、反応条件などを表す数は、場合により、用語「約」によって修飾されるものと理解されるべきである。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書及び添付の特許請求の範囲に記述する数値パラメータは、概数であり、これは、特定の実施形態によって得られることが求められる所望される特性に応じて変動し得る。いくつかの実施形態では、数値パラメータは、報告された有効桁数に照らして、また通常の丸め技術を適用することによって解釈されるべきである。本発明の広範にわたるいくつかの実施形態を記述する数値範囲及びパラメータは、概数であるが、具体的な例において記述される数値は、可能な限り正確に報告される。本発明のいくつかの実施形態において示される数値は、そのそれぞれの試験測定において見られる標準偏差に必然的に起因するいくらかの誤差を含有し得る。文脈によってそれに反することが指示されない限り、本明細書に記述されるすべての範囲は、その端点を含むと解釈されるべきであり、制約のない範囲には、商業的に実用的な数値が含まれると解釈されるべきである。同様に、値のすべてのリストは、文脈によってそれに反することが指示されない限り、中間の値を含むと見なされるべきである。
【００３６】
本明細書の説明において使用される場合及び後続する特許請求の範囲全体を通して、「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」及び「その（ｔｈｅ）」の意味には、文脈によって別様に明確に指示しない限り、複数の指示内容が含まれる。また、本明細書の説明において使用される場合、「内」の意味には、文脈によって別様に明確に指示しない限り、「内」及び「上」が含まれる。さらに、文脈によって別様に指示しない限り、用語「に結合される」には、直接的結合（互いに結合される２つの要素が互いに接触する）と間接的結合（２つの要素間に少なくとも１つの追加の要素が位置する）との両方が含まれるものとする。したがって、用語「に結合される」及び「と共に結合される」は、同義的に使用される。
【００３７】
本明細書で使用する場合、いずれかの疾患又は障害を「治療する」、「治療すること」又はその「治療」という用語は、一実施形態では、その疾患又は障害を回復させる（例えば、疾患の発生又はその臨床症状の少なくとも１つを減速、又は停止、又は低減させる）目的での１種又は複数の化合物又は組成物の投与を指す。別の実施形態では、「治療する」、「治療すること」又は「治療」は、患者によって認識可能ではない可能性があるものを含めた少なくとも１つの物理的パラメータを緩和又は回復させる目的での１種又は複数の化合物又は組成物の投与を指す。さらに別の実施形態では、「治療する」、「治療すること」又は「治療」は、症候的に（例えば、認識可能な症状の安定化）、生理学的に（例えば、癌免疫編集の逃避相を破壊すること、癌免疫編集の排除相の誘導、癌免疫編集の平衡相の復活）のいずれか又はその両方により、疾患又は障害を調節させる目的での１種又は複数の化合物又は組成物の投与を指す。さらに別の実施形態では、「治療する」、「治療すること」又は「治療」は、疾患又は障害の開始、又は発生、又は進行を予防するか又は遅延させる目的での１種又は複数の化合物又は組成物の投与を指す。用語「治療する」、「治療すること」及び「治療」は、例えば、癌の場合、疾患の安定化、部分奏効又は完全奏効をもたらし得る。しかし、特に、癌が治療抵抗性である場合、用語「治療する」、「治療すること」及び「治療」は、治癒又はさらに部分的治癒を意味しない。本明細書で使用する場合にはまた、用語「患者」は、疾患、特に癌を有すると診断されるか又は有することが疑われるヒト（大人及び子供が含まれる）又は他の哺乳類を指す。
【００３８】
既に記載したものの他に、本明細書の本発明の概念を逸脱せずにさらに多くの改変形態が可能であることが当業者に明らかであろう。したがって、本発明の主題は、添付の特許請求の範囲の範囲以外に限定されるべきではない。さらに、本明細書及び特許請求の範囲のいずれの解釈においても、すべての用語は、文脈と一致する可能な限り最も広い方式で解釈されるべきである。具体的には、用語「含む」及び「含むこと」は、非排他的な方式で要素、構成成分又はステップを指すと解釈されるべきであり、これは、言及された要素、構成成分又はステップが、明示的に言及されていない他の要素、構成成分又はステップと共に存在するか、又は利用されるか、又は組み合わされ得ることを示す。本明細書の特許請求の範囲が、Ａ、Ｂ、Ｃ、．．．及びＮからなる群から選択される何らかのものの少なくとも１つに言及する場合、その文章は、Ａ＋Ｎ又はＢ＋Ｎなどではなく、その群からの１つの要素のみを必要とすると解釈されるべきである。
【図１】
2020535809.tif 000003
【図２】
2020535809.tif 000004
【図３】
2020535809.tif 000005
【手続補正書】
【提出日】令和2年7月27日(2020.7.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
免疫抑制部分に結合された親和性部分を含む、キメラ免疫調節分子であって、
前記親和性部分は、自己抗原に対する結合特異性を有し、
前記免疫抑制部分は、ＩＬ−８、ＩＬ−３４、ＴＧＦ−β及びＢ７−Ｈ４からなる群から選択される、
キメラ免疫調節分子。
【請求項２】
前記親和性部分と前記免疫抑制部分との間のペプチドリンカーをさらに含む、請求項１に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項３】
前記親和性部分は、抗体若しくはその断片、Ｔ細胞受容体部分、ｓｃＦＶ、又はｍＲＮＡディスプレイによって単離された高親和性ペプチドを含み、
任意選択で、前記親和性部分は、Ｆｃ部分を含む部分を介して前記免疫抑制部分に結合されていてもよい、
請求項１〜２のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項４】
免疫刺激部分に結合された親和性部分を含む、キメラ免疫調節分子であって、前記親和性部分は、自己抗原に対する結合特異性を有する、キメラ免疫調節分子。
【請求項５】
前記親和性部分は、インスリン又はα−シヌクレインをコードするｍＲＮＡの翻訳産物に対する結合特異性を有し、
任意選択で、インスリンをコードする前記ｍＲＮＡの前記翻訳産物は、前記ｍＲＮＡのＡＵＧ３４１で開始するＡＬＴ−ＯＲＦ産物であってもよく、
さらに任意選択で、前記親和性部分は、抗体若しくはその断片、Ｔ細胞受容体部分、ｓｃＦＶ、又はｍＲＮＡディスプレイによって単離された高親和性ペプチドを含んでもよい、
請求項１〜４のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項６】
前記免疫刺激部分は、ＩＬ１５部分、ＩＬ１５受容体α鎖部分及びＦｃ部分を含む、請求項４または５に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項７】
免疫抑制サイトカインに結合された自己抗原部分を含む、キメラ免疫調節分子。
【請求項８】
前記自己抗原部分は、ミスフォールドされた自己抗原を含むか、または
前記自己抗原部分は、インスリン又はα−シヌクレインをコードするｍＲＮＡの翻訳産物を含み、
任意選択で、インスリンをコードする前記ｍＲＮＡの前記翻訳産物は、前記ｍＲＮＡのＡＵＧ３４１で開始するＡＬＴ−ＯＲＦ産物であってもよい、
請求項７に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項９】
前記自己抗原部分は、Ｆｃ部分又は可動性リンカーを含む部分を介して前記免疫抑制サイトカインに結合されている、請求項７または８に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項１０】
前記免疫抑制サイトカインは、ＩＬ−８、ＩＬ−３４、ＴＧＦ−β及びＢ７−Ｈ４からなる群から選択される、請求項７〜９のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子。
【請求項１１】
ＭＨＣ複合体に結合された自己抗原に対する特異性を有するＴ細胞受容体の少なくとも部分をコードする組換え核酸を含む、遺伝子操作されたＮＫ細胞であって、
任意選択で、前記ＮＫ細胞は、ＮＫ９２誘導体であってもよく、
さらに任意選択で、前記Ｔ細胞受容体の前記部分は、ＴＣＲ−αと、ＴＣＲ−β鎖と、任意選択でＣＤ３γ鎖及びＣＤ３δ鎖のうちの少なくとも１つと、を含んでもよい、
遺伝子操作されたＮＫ細胞。
【請求項１２】
前記自己抗原は、インスリン又はα−シヌクレインをコードするｍＲＮＡの翻訳産物であるか、または
インスリンをコードする前記ｍＲＮＡの前記翻訳産物は、前記ｍＲＮＡのＡＵＧ３４１で開始するＡＬＴ−ＯＲＦ産物である、
請求項１１に記載の遺伝子操作されたＮＫ細胞。
【請求項１３】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子をコードする配列部分を含む、組換え核酸であって、
任意選択で、前記配列部分は、恒常的に活性なプロモーターの制御下にあってもよいか、または前記配列部分は、膵臓特異的プロモーターの制御下にあってもよく、
さらに任意選択で、前記組換え核酸は、ウイルスゲノムの少なくとも一部又は細菌ベクターの少なくとも一部であってもよい、
組換え核酸。
【請求項１４】
自己免疫疾患の治療における、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子または請求項１３に記載の組換え核酸の使用であって、任意選択で、前記自己免疫疾患は、１型糖尿病又はパーキンソン病であってもよい、使用。
【請求項１５】
自己免疫疾患と診断された患者を治療する方法であって、
それを必要とする患者に、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子を投与すること
を含む方法。
【請求項１６】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のキメラ免疫調節分子を、薬学的に許容し得る担体と組み合わせて含むか、あるいは請求項１３に記載の組換え核酸を含む薬学的に許容し得る組換えウイルスを、薬学的に許容し得る担体と組み合わせて含むか、あるいは請求項１１または１２に記載の遺伝子操作されたＮＫ細胞を、薬学的に許容し得る担体と組み合わせて含む、医薬組成物であって、
任意選択で、前記組換えウイルスは、Ａｄ５ウイルスであってもよく、さらに任意選択で、Ｅ２ｂ遺伝子が欠失していてもよい、
医薬組成物。
【国際調査報告】
2020535809.tif 000006
2020535809.tif 000007
2020535809.tif 000008
2020535809.tif 000009