(57)【要約】  本発明は、微粒子の形態のルーメン耐性組成物、その製造方法及びそのような組成物を含有する飼料に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
微粒子の形態のルーメン耐性組成物であって、各々の微粒子が：
ｉ）コア；及び
ｉｉ）異なる組成を有するコアの少なくとも２つのコーティング層；
を含有し、
前記コアが：
ａ）アミノ酸、ビタミン、酵素、タンパク質、炭水化物、プロバイオティクス微生物、プレバイオティック食品、鉱塩、コリン、コリンの誘導体及び有機酸から成る群から選択される１つ以上の生理活性物質；及び
ｂ）結合物質、不活性物質及び押出助剤から成る群から選択される物質を含むマトリックス
を含み、
コアのコーティング層の各々が、植物レシチン、エトキシル化油及びアルギネートから成る乳化物質の群、及び／又は脂肪酸から成る群及び／又はメタクリレートコポリマーから成る群、から選択される少なくとも１つの汚染物質を含むことを特徴とする、前記の組成物。
【請求項２】
前記乳化物質が、ダイズ又はヒマワリレシチン、エトキシル化ヒマシ油、アルカリ金属アルギネート及びアルギン酸マグネシウム又はそれらの組合せから成る群から選択されることを特徴とする、前記請求項に記載の組成物。
【請求項３】
前記汚染脂肪酸が、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ステアリン酸又はそれらの組合せから成る群から選択されることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記汚染メタクリレートコポリマーが、ＰＭＭＡポリメチルメタクリレートであることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記微粒子が、少なくとも２つのコーティング層を含み；各々のコーティング層が、コーティング層の重量に関して０．０１重量％〜４０重量％の間に含まれる量の汚染物質を含むことを特徴とする、請求項１又は２又は３又は４に記載の組成物。
【請求項６】
各々のコーティング層が、コーティング層の重量に関して０．１重量％〜６重量％の間に含まれる量の乳化物質を含むことを特徴とする、前記請求項に記載の組成物。
【請求項７】
各々のコーティング層が、１０％〜３５％の間に含まれる量の汚染脂肪酸を含むことを特徴とする、請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
１つ又は各々のコーティング層が、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ステアリン酸又はそれらの組合せを含む、前記請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
１つ又は各々のコーティング層が、ダイズ又はヒマワリレシチンを含む、前記請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０】
１つ又は各々のコーティング層が、エトキシル化ヒマシ油を含む、前記請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１】
１つ又は各々のコーティング層が、アルギン酸マグネシウム又はナトリウムを含む、前記請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１２】
１つ又は各々のコーティング層が、ポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）を含む、前記請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１３】
２つのコーティング層が、異なる量の汚染物質を含む、前記請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記２つのコーティング層が、植物レシチン、エトキシル化油及びアルギネートから成る異なる量の乳化物質、及び／又は、メタクリレートコポリマーから成る群及び／又は脂肪酸から成る群の異なる量の物質を含む、前記請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記２つのコーティング層が下記のものである、前記請求項のいずれか１項に記載の組成物：
脂肪、水素添加油、脂肪酸のモノグリセリド及びジグリセリド、脂肪酸エステル及び脂肪酸アルコールから成る群から選択される１つ以上の疎水性物質を含む、少なくとも１つのコーティング層；及び
マイクロクリスタリンワックス、パラフィンワックス、植物ワックス及び食用合成ワックスから成る群から選択される１つ以上の疎水性物質を含む、少なくとも１つのコーティング層。
【請求項１６】
各々の微粒子において、コーティング層の総重量が、微粒子重量の１０％〜５０％の間である、前記請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１７】
前記コアが、１．５％〜６．５％の間に含まれる重量の崩壊剤を含むことを特徴とする、前記請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１８】
前記コアが崩壊剤を含み、前記崩壊剤が、ルーメン後の水性環境の存在下にそれ自身の状態又は構成を変性して、この変性に続いて、コアの崩壊作用を決定する傾向にある物質であるか、又は、前記崩壊剤が、コアの崩壊を助けるためにルーメン後の水性環境中で水を回収又は吸収する傾向にある、前記請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１９】
前記崩壊剤が、下記のものから成る群から選択されることを特徴とする、請求項１７又は１８に記載の組成物：
乾燥形態のアミド、植物レシチン、エトキシル化油、脂肪酸のモノグリセリド及びジグリセリド、乾燥形態の寒天、ポリカルボン酸及びアンモニウムの重炭酸塩又はアルカリ金属の重炭酸塩を含む発泡性混合物、乾燥形態のセルロース、及び、メタクリレートコポリマー。
【請求項２０】
前記コアが、０．５ｍｍ〜２ｍｍの間に含まれる高さの円筒形状、又は、０．５ｍｍ〜２ｍｍの間に含まれる直径の回転楕円体形状を有することを特徴とする、前記請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２１】
下記の工程を含むことを特徴とする、前記請求項のいずれか１項に記載の組成物の調製方法：
アミノ酸、ビタミン、酵素、タンパク質、炭水化物、プロバイオティクス微生物、プレバイオティック食品、鉱塩、コリン、コリンの誘導体及び有機酸から成る群から選択される１つ以上の生理活性物質；結合物質、不活性物質、押出助剤、及び崩壊剤を含む混合物を押出す工程；
場合により、微粒子を球状化に供する工程；
１つ以上のコーティング層を形成する工程。
【請求項２２】
請求項１〜２０のいずれか１項に記載の組成物を含む動物飼料用プレ混合物。
【請求項２３】
請求項２２に記載のプレ混合物を含む飼料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、畜産使用のための生理活性物質の制御放出組成物に関する。特に、本発明の主題は、それらが含有する生理活性物質を制御されたやり方で放出することが可能な微粒子を含む組成物、そのような微粒子の製造方法、及び畜産でのそれらの使用である。
【背景技術】
【０００２】
家畜の食事に添加物を添加する又は栄養補助するために、生理活性物質が、それらの健康状態を改善する、それらの生産的な寿命を増加させる、及びそれらの畜産性能を増加させるために使用できるということは、公知である。
【０００３】
こうして使用される生理活性物質は、例えば、アミノ酸、ビタミン、酵素、栄養物、例えば、タンパク質及び炭水化物、プロバイオティクス微生物、プレバイオティック食品、鉱塩、コリン及びその誘導体を含む。
【０００４】
上述の生理活性物質のいくつかは、すでに、家畜飼養用に使用される飼料中に普通存在する。しかし、時々、食事中に存在するこれらの活性物質の摂取は、高い生産性の状態又は不足に対応するには不適当又は不十分なことがある。
【０００５】
栄養特性を有するこれらの生理活性物質は、処方製品（プレ混合物又は補完飼料）を通して動物に口から投与され、そこでは、前記活性物質は、媒体と混合することによって「希釈」されて；得られる製品は、その後、飼料に添加される。
【０００６】
しかし、活性物質及びこれらの活性物質を含有する飼料は、動物消化管の最初のセクションで酵素化学分解を受ける。（腸に到達するよりも前に、食品が３つの前胃プラス腺胃を通過しなければならない）反芻動物の場合は、２つの主な付随要因が原因で、分解が特に極めて強いことがある：前胃中（特にルーメン（第一胃）中）での飼料の長い移動時間、及び、ルーメンを通過している分子のほとんどに対する分解作用を果たす微生物フローラの存在。
【０００７】
ルーメン（第一胃）微生物の作用は、コリンなどのいくつかの活性物質を化学的に変え、それらを、初期の化合物に比べて著しく低減された生物的活性を持つ又はより低い栄養価を持つ物質に、変換する。
【０００８】
更に、前記活性物質は、熱及び／又は圧力及び／又はスチームの適用に起因して、圧密処理の間と同様に、配合物の調製の間に、特に混合、包装及び貯蔵フェーズの間に、更に分解を受ける。
【０００９】
ルーメンに続く時に物質の放出を可能にする、ルーメン環境での分解から保護されるルーメン保護形態で生理活性物質を放出するための解決を与えようとして、いくつかの製品が提案されてきた。
【００１０】
ＵＳ３９５９４９３は、反芻動物への経口投与用のルーメンバイパス製品を記載する。前記製品は、粒子の形態であり、粒子の重量に関して少なくとも６０重量％の量で存在してルーメン環境に対して耐性の保護物質及び４０％より少ない量の生物活性物質を含む。この保護物質は、反芻動物中でより低い消化管で消化でき、１４〜２２個の炭素原子を含む飽和及び不飽和脂肪酸から成る。
【００１１】
ＵＳ６７９７２９１は、湿潤組成物中の吸湿成分を安定化させる方法を記載し、例えばワックス、脂肪酸、アルコール又は脂肪酸から導かれるエステル、ステロール、リン脂質及び水素添加油から成る脂質コーティング中での前記吸湿成分のカプセル化を含む。
【００１２】
しかし、これらの文献に記載の製品は、乏しい保存安定性、低濃度の活性物質及びルーメン後の低減された消化性によって特徴付けられる。
【００１３】
ＵＳ２０１１／２５０２８６は、脂肪酸の層及び脂肪酸とグリセリドの第２の層によってコーティングされているコア中に配置された生理活性物質の制御放出用の微粒子又は顆粒の形態の組成物を記載する。
【００１４】
ＥＰ２２７４９９０は、補完反芻動物飼料組成物を製造する方法を記載し、５０℃〜９０℃の間の融点を有する動物油又は植物油から選択される保護剤の混合物の調製；レシチン及びアミノ酸；及び固体にするためにこの混合物の水中へのドリッピング、を含む。
【００１５】
ＵＳ４８７６０９７は、化学的に変性されたセルロースを含むｐＨ変化に敏感で制御された親水性を持つコーティングを含む組成物を記載する。
【００１６】
ＵＳ８９０６４０７は、エチルセルロースベースのコーティングを含む組成物を記載する。
【００１７】
しかし、ここに記載された組成物は、飼料又は栄養補助の製造の間に安定性が乏しく、そこでは、それらは、それらのコーティング層を除去できてこうして製品を効果のないものにする他の成分と混合される。
【００１８】
そのような公知の組成物の別のもう１つの欠点は、例えばコーンサイレージを含有する酸性成分と混合することで、組成物が動物に投与される前でさえ、コーティングが反応する原因になり得ることである。
【００１９】
ＥＰ１７９１５３２は、コア及び２つのコーティング層を含む、反芻動物のルーメン後の区域における生理活性物質の制御放出に適した微粒子組成物を記載する。第１のコーティング層は、４０℃〜７４℃の融点及び１２〜２２個の炭素原子の鎖を持つ、脂肪、脂肪酸、水素添加油、脂肪酸のモノグリセリド及びジグリセリド、脂肪酸のエステル、脂肪族アルコールから選択される第１の疎水性物質を含む。第２のコーティング層は、８０℃〜１００℃の間の融点を持つ、マイクロクリスタリンワックス、パラフィンワックス、植物及び合成ワックスから選択される第２の疎水性物質を含む。
【００２０】
この文献に記載の組成物は、高度のルーメン交差（バイパス）、良好な生体内効果、優れた耐薬品性、耐熱性及び機械抵抗、及び高い混合性及びペレット化特性を保証する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２１】
しかし、微粒子組成物中に含まれる物質のルーメン後の消化性を更に改善して、これらの物質の総生物学的利用能を高めることが、望ましい。
【００２２】
こうして、本発明の目的は、第４胃（皺胃）から小腸までの動物消化路中で、従来技術の水準の組成物の欠点を有さない、制御されたやり方で含有物質を放出することが可能な畜産使用のための組成物を与えることである。
【課題を解決するための手段】
【００２３】
前記目的は、ルーメン耐性組成物で達成され、その主な特徴は、特許請求の範囲の請求項１に特定され、そのような組成物の調製方法の特徴は、それぞれの独立形式の請求項に特定され、前記組成物を含む飼料プレ混合物の特徴は、プレ混合物に関するそれぞれの独立形式の請求項に特定され、そして、前記プレ混合物を含む飼料組成物の特徴は、独立形式の請求項に特定される。本発明の組成物の他の特徴は、残りの引用形式の請求項に特定される。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本発明の組成物の利点は、それが、制御されたやり方でルーメン後の帯域中で生理活性物質を放出して、これらの物質の総生物学的利用能の改善を達成するという事実に存する。
【００２５】
本発明の意味では、用語「ルーメンバイパス」とは、経口投与された物質の総重量に関して、胃及び腸である動物ルーメン後の領域に到達する物質の重量パーセンテージを示す。
【００２６】
それに対して、物質の「ルーメン後の消化性」という用語は、経口投与された物質の総重量に関して、ルーメン後の区域で排他的にコーティングから遊離されて、溶解して、こうしてそれを消化可能又は吸収性にする物質の重量パーセンテージを意味する。
【００２７】
物質の「総生物学的利用能」という用語は、経口投与された物質の総重量に関して、生物学的に活性な形態で動物体循環に到達する物質の重量パーセンテージを示すために、使用される。
【００２８】
こうして、物質の総生物学的利用能は、ルーメンバイパス及びルーメン後の消化性という２つの値の組合せによって、定義される。
【００２９】
実際、製薬産業で公知の方法論を使用することで、本発明の組成物を用いて投与される生理活性物質は、従来技術の水準の組成物よりも高いパーセンテージで、非分解形態で生物学的利用性があることが、確立された。
【００３０】
更に、本発明の畜産使用のための組成物は、制御された化学的及び物理的特性を有し、機械構造的分解に対して耐性である。
【００３１】
本発明のルーメン耐性組成物及びその製造方法のこれらの及び他の利点は、いくつかの実施形態の下記の詳細な記述から、当業者には明らかであろう。
【００３２】
本発明のルーメン耐性組成物は、微粒子の形態であり、そこでは、各々の微粒子は、コア及び１つ以上のコーティング層を含む。
【００３３】
前記コアは、一般に固体の形態である１つ以上の生理活性物質又は成分及びマトリックスを含有する。
【００３４】
非分解形態で動物に投与されるべきいかなる物質も、本発明の組成物の微粒子のコア中に、原則として含有することができる。公知のように、微粒子のコア中に含有する生理活性物質は、下記のものから成る群から選択できる：アミノ酸、ビタミン、酵素、タンパク質及び炭水化物などの栄養物、プロバイオティクス微生物、プレバイオティック食品、鉱塩、乳酸、フマル酸、ソルビン酸、ギ酸、クエン酸、リンゴ酸、酢酸、酪酸及びプロピオン酸などの酸の混合物、コリン及びコリン誘導体、例えば、塩化コリン、重酒石酸コリン、クエン酸脱水素化コリン、重炭酸コリン、コリン硫酸及び水酸化コリン。これらの生理活性物質は、異なる重量比で一緒に混合できるか又は単独で使用できる。
【００３５】
好ましい実施形態では、生理活性物質は、下記のものから選択される：メチオニン、コリン、塩化コリン、リジン、リジン塩酸塩、リジン硫酸塩、ビタミンＣ及びその誘導体、ビタミンＡ及びその誘導体、ビタミンＥ及びその誘導体、ビタミンＤ３及びその誘導体、ビタミンＢ１及びその誘導体、ビタミンＢ２及びその誘導体、ビタミンＢ６及びその誘導体、ビタミンＢ１２、ビタミンＨ、ビタミンＰＰ及びその誘導体及び、乳酸、フマル酸、ソルビン酸、ギ酸、クエン酸、リンゴ酸、酢酸、酪酸及びプロピオン酸を含む酸の混合物。
【００３６】
均一の不均質混合物を得るために生理活性物質と混合される前記マトリックスは、不活性物質及び結合作用を有する物質から選択される少なくとも１つの物質を含む。
【００３７】
マトリックス中で使用される結合作用を持つ物質は、典型的に、ゴム、セルロース及びその誘導体、アミド及び誘導体、ワックス及び誘導体及び脂肪及び誘導体などの植物又は合成起源の無毒の物質である。
【００３８】
有利には、植物ワックス、例えば、カルナウバロウ、ライスワックス、マイクロクリスタリン（微結晶性）ワックス、脂肪及びそれらの誘導体が、使用される。好ましい実施形態では、結合剤は、有利には１：１である１：３〜３：１の重量比でのライスワックス及び微結晶性ワックスの組合せである。
【００３９】
別の実施形態では、結合剤は、有利には１：１である１：３〜３：１の重量比でのライスワックス及び脂肪酸誘導体の組合せである。脂肪酸の誘導体として、亜鉛、マグネシウム又はカルシウム塩などの塩を使用できる。
【００４０】
マトリックスの形成で使用される不活性成分は、滑り物質であり、そして、一般に、シリケートのカテゴリーに属し、特に疎水性シリケート、例えば、コロイドシリカ、合成アモルファスシリカ、沈降シリカ、ケイ酸アルミニウムナトリウム、ケイ酸カルシウム、タルク、カオリン、疎水性合成ゼオライトのカテゴリーに属する。
【００４１】
本発明の組成物のコア中の結合物質及び不活性物質の総重量は、好ましくは、コアの総重量の１％〜７０％の間である。より好ましくは、結合及び不活性作用を有する物質の合計量は、合計コア重量の、１０％〜３０重量％の間、更により好ましくは１２％〜１７重量％の間である。
【００４２】
本発明によれば、顆粒（粒子）のコアは、少なくとも１つの崩壊剤を含むことができる。
【００４３】
この崩壊剤は、本発明の組成物のコア中に、コアの総重量に関して好ましくは１％〜２０％の間に含まれる重量で存在する。より好ましくは、崩壊剤物質の重量は、コアの総重量の１．５重量％〜６重量％の間、更により好ましくは、２％〜５％の間に含まれる。
【００４４】
本発明の意味では、崩壊剤という用語は、ルーメン後の水性環境の存在下にそれ自身の状態又は作用を変性することが可能で、それが水性環境と一旦相互作用したらコアの急速な崩壊を引き起こすことが可能な、物質を示すか、又は、それは、コアの崩壊を助けることが可能か又はコア中の水を回収可能な物質である。こうして、活性成分は、崩壊剤の作用のおかげで改善されたルーメン後の消化性を与えられることができる
【００４５】
実際、組成物がルーメン後の環境と一旦接触すると、前記崩壊剤は生理活性物質の放出を改善することが、驚いたことに見出された。
【００４６】
この目的に適した崩壊剤物質は、乳化剤、増粘剤、発泡性混合物、多糖類及びメタクリレートポリマーである。
【００４７】
好ましくは、本発明の組成物のコア中で上記で特定される量で使用できる崩壊剤化合物は、下記の群から選択される：乾燥形態のアミド；植物レシチン、例えば、ダイズレシチン又はヒマワリレシチン、又はそれらの組合せ；エトキシル化油；脂肪酸のモノグリセリド及びジグリセリド；乾燥形態のアラビアゴム又は寒天；二酸化炭素を展開可能な発泡性混合物、例えば、クエン酸又は酒石酸などの少なくとも１つのポリカルボン酸及びアンモニウムの又はアルカリ金属の少なくとも１つの重炭酸塩から形成されるもの、例えば、クエン酸及び炭酸水素ナトリウムの組合せ；乾燥形態の及び／又はあらかじめウェットではないセルロース；及びメタクリレートポリマー、又はそれらの組合せ。乾燥形態のセルロースに関して、それが水性ルーメン後の環境と接触する時は、それは、湿気を吸収して膨潤し、それ故に活性成分を含有するコアの崩壊を促進する傾向がある、ということに留意するべきである。
【００４８】
本発明の組成物の微粒子は、異なる組成を有する少なくとも２つのコアコーティング層を含む。
【００４９】
好ましくは、各々の層は、第１層と第２層との間に異なる量の汚染物質を含む。要するに、全ての層は、品質及びパーセンテージの両方に関して異なる汚染物質を含有することができる。
【００５０】
パーセンテージ及び／又はタイプの汚染物質の選択は、活性成分のより高い溶解性又は崩壊剤の存在に例えば起因するコアタイプ及び特徴に依存し得る。より高い溶解性を持つ活性成分及び崩壊剤を有するコアの場合は、コアは、より低く容易に崩壊する顆粒よりもより低く汚染された層で被覆できる。例えば、塩化コリン及びリジンＨＣｌは、メチオニン又はニコチン酸よりもかなり高い溶解性を有し、その結果、最適の性能を持つ製品を得るために、異なる成分が使用されるべきである。
【００５１】
本発明によれば、汚染物質、又は、その不存在下ではこのコーティング層が有するであろう特徴を変える物質は、乳化物質、例えば、植物レシチン、エトキシル化油及びアルギネートから成る群、及び／又は脂肪酸の群及び／又はメタクリレートコポリマーの群、から選択される。少なくとも２つのコーティング層中の乳化物質として、ダイズ又はヒマワリレシチン、エトキシル化ヒマシ油、アルカリ金属アルギン酸塩及びマグネシウムが、有利に使用できる。少なくとも２つのコーティング層中の汚染脂肪酸として、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ステアリン酸又はそれらの組合せが、有利に使用できる。少なくとも２つのコーティング層中の汚染コポリマーとして、ＰＭＭＡ（ポリメチルメタクリレート）が、有利に使用できる。少なくとも２つのコーティング層中の汚染物質として、乳化物質及び／又は汚染脂肪酸及び／又は汚染メタクリレートコポリマーの異なる組合せが、有利に使用できる。
【００５２】
本発明の好ましい実施形態によれば、各々のコーティング層は、コーティング層の重量の０．０１重量％〜１５重量％の間に含まれる量の乳化物質を含む。より好ましくは、各々のコーティング層は、コーティング層の重量の０．１重量％〜６重量％の間に含まれる量の乳化物質を含む。
【００５３】
本発明の好ましい実施形態によれば、各々のコーティング層は、コーティング層の重量の１重量％〜４０重量％の間に含まれる量の汚染脂肪酸を含む。より好ましくは、各々のコーティング層は、コーティング層の重量の１０重量％〜３５重量％の間に含まれる量の汚染脂肪酸を含む。
【００５４】
各々の微粒子では、コーティング層の総重量は、微粒子の重量の１０％〜５０％の間である。より好ましくは、コーティング層の総重量は、微粒子の重量の１５％〜４０％の間である。
【００５５】
２つのコーティングが異なる組成物を有するという事実は、コーティング層のルーメン後の透過性の調節を可能にし、それ故に、それらは、ルーメン内での保護及び連続する消化管における徐々の放出という二重の機能を有する。要するに、２つの異なるコーティング層の存在は、ルーメン抵抗性とルーメン後の消化性との間の最適の妥協、及びその結果、生物学的利用能を達成するために、コーティング中の汚染物質の作用を調節可能にする。
【００５６】
更に言い換えると、異なる組成を有する交互層を適用することによって、全コーティング層の透過性を調節することが可能である。このようにして、生理学的理由でそれがルーメン区域を一旦通過すると、それが弱くなって利用しやすくなるまで、増加する分解を何時間も受ける製品の「活性化」としてルーメン中の８時間の存在を「利用する」ことをいつも鑑みると、より透過性な／消化できる層は、より低い透過性な／消化できる層と交互である。なぜなら、当業者に公知のように、この種類の製品でのルーメン中の移動時間は６〜８ｈと推定されるからである。
【００５７】
好ましくは、２つのコーティング層は、外部層及びより内部の層から成る。例えば、外部コーティングは、ルーメン環境条件で例えば少なくとも８時間安定な撥水フィルムを形成する物質で構成されている少なくとも第１の層と、例えば７５℃〜９０℃の間の温度に耐性であって機械的摩耗及び衝撃に対する保護のための少なくとも１つの第２の保護層と、を含む。
【００５８】
さらに特に好ましい形態では、各々の層の汚染物質は、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ステアリン酸、又はそれらの組合せを含む。特に、汚染物質は、単独の脂肪酸を含み、それは、コーティング層として使用される水素化ワックス及びトリグリセリドよりもかなり消化しやすく、それ故に、より容易に消化される傾向にあり、その結果、時間が経てばコーティング構造中にマイクロチャンネル（損傷）を形成し、こうして水が徐々に入ることを可能にする。
好ましくは、１つ又は各々の層の乳化物質は、ヒマワリ又はダイズのレシチンを含み、それらは、水をゆっくりとコーティング層に入れさせる機能を有する。
１つの実施形態では、１つ又は各々の層の乳化物質は、エトキシル化ヒマシ油を含む。
１つの実施形態では、１つ又は各々の層の乳化物質は、アルギン酸マグネシウム又はナトリウムを含む。この物質は、ワックス及びトリグリセリドよりも消化しやすく、そして、より容易に消化される傾向があり、その結果、時間が経てばコーティングの構造中にマイクロチャンネル（損傷）を形成し、水が徐々に入ることを可能にする。
【００５９】
１つの実施形態では、１つ又は各々の層の汚染脂肪酸は、パルミチン酸を含み、それは、容易に消化できる傾向があり、その結果、時間が経てばコーティングの構造中にマイクロチャンネル（損傷）を形成し、水が徐々に入ることを可能にする。
１つの実施形態では、１つ又は各々の層の汚染脂肪酸は、オレイン酸を含む。
１つの実施形態では、１つ又は各々の層の汚染脂肪酸は、リノール酸を含む。
１つの実施形態では、１つ又は各々の層の汚染脂肪酸は、リノレン酸を含む。
１つの実施形態では、１つ又は各々の層の汚染脂肪酸は、ステアリン酸を含む。
１つの実施形態では、１つ又は各々の層の汚染脂肪酸は、上述の脂肪酸の組合せを含む。
１つの実施形態では、汚染物質は、ポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）を含み：酸性（胃）ｐＨで可溶性となるｐＨ依存性ポリマーであり、その一方でそれは、弱酸ｐＨ（５）と弱塩基性ｐＨ（８）との間では固体のままであり：この範囲は、健康な動物のルーメンで見出されるｐＨ値を含む。その結果、それは、もしも胃液によってウェットならば溶解するが、もしもルーメン液によってウェットならば溶解しない。
【００６０】
本発明の実施形態によれば、組成物の微粒子は、３つの、４つの又はそれ以上のコーティング層を含む被覆を形成するように前記第１の層及び第２の層が繰り返し堆積されて、製造できる。
【００６１】
更に、本発明の組成物の微粒子は、前記第１の層及び第２の層で示されるものとは異なる組成を有するコーティング層を、更に含むことができる。
【００６２】
実際、第１の層及び第２の層のこの繰返した交互の配置、及び／又は、異なる配合を持つ層の更なる適用は、微粒子の透水性を、ルーメン区域を越えるのに必要な期間、耐水性のままであるように調節することを可能にする、ということが見出された。この期間は、微粒子のサイズ、それらの比重及び浮力、すなわち、ルーメン内容物が細かく分けられる層の内部のそれらの配列によって変化できるが、普通は、６〜８時間の範囲内である。その代わりに、微粒子がルーメン後の消化管の領域の内部で費やす時間は、更なる２４時間以内に一般に定量化できる。
【００６３】
本発明の組成物の微粒子は、反芻動物の消化環境での最初の１０〜１２時間の浸漬では有利には不浸透性であり、その後、それらは外部環境に対してますます浸透性になる。
【００６４】
コアの前記第１のコーティング層は、疎水性特性を有する１つ以上の生理学的に許容される物質から成る。
【００６５】
前記第１の層を形成する疎水性物質は、下記のものから成る群から選択される：脂肪、脂肪酸、水素添加油、脂肪酸のモノグリセリド及びジグリセリド、亜鉛、マグネシウム又はカルシウムステアリン酸塩などの脂肪酸の塩、脂肪族アルコール及び脂肪酸のエステル、及びそれらの混合物。
【００６６】
これらの疎水性物質は、好ましくは下記のものから選択される：硬化大豆油、硬化菜種油、硬化綿油、硬化パーム油、硬化亜麻仁油、ナトリウムグリセリル  モノ−、ジ−、トリ−ステアリン酸塩、カルシウムステアリン酸塩、マグネシウムステアリン酸塩、亜鉛ステアリン酸塩、ステアリルアルコール、セチルステアリルアルコール。
【００６７】
有利には、疎水性物質は、硬化パーム油及び／又は硬化大豆油から選択される。
【００６８】
前記第１の層の外側上に配置される第２の層は、少なくとも１つの第２の生理学的に許容される物質、又は疎水性特性を有する物質の混合物を含む。前記第２の疎水性物質又は物質の混合物は、機械的応力に耐性であり、その化学的物理的特性を８０℃の温度まで変化しないで維持する。
【００６９】
前記第２の層の中に含まれる前記第２の疎水性物質は、マイクロクリスタリンワックス、パラフィンワックス、植物ワックス及び食用合成ワックスから成る群から選択される。有利には、前記第２の疎水性物質は、ライスワックス、カルナウバロウ及び／又はマイクロクリスタリンワックスから成る群から選択される。
【００７０】
コア崩壊剤に関して、それらは、ダイズレシチンのみを含むことができ、それは、乳化剤として、コアの内部の水を回収する機能を有して、活性成分と水との接触を高め、それらの可溶化を助ける。
【００７１】
あるいは、崩壊剤は、クエン酸及び炭酸水素ナトリウムの組合せを含む。それらは、コアを膨潤させる機能を有する発泡性混合物である。混合物中のクエン酸及び炭酸水素ナトリウムのそれぞれのパーセンテージは、前者が３０％〜７０％で後者が７０％〜３０％の範囲内にあり、より好ましくは５０％−５０％である。
【００７２】
別のもう１つの実施形態では、崩壊剤は、ダイズレシチン及びクエン酸／炭酸水素ナトリウムの組合せを含む。上記の２つの機能は組み合わされ、すなわち、レシチンは、内部に向って水を引き付け、可溶化を助けると同時に、発泡性酸／塩基反応を助ける。
【００７３】
混合物中のダイズレシチン、クエン酸及び炭酸水素ナトリウムのそれぞれのパーセンテージは、それぞれ、３０％〜６０％、２０％〜４０％及び２０％〜４０％の範囲内に含まれ、より好ましくは、４０％（レシチン）、３０％（クエン酸）及び３０％（炭酸水素ナトリウム）である。
【００７４】
好ましくは、崩壊剤は、ヒマワリレシチンのみを含む。
【００７５】
好ましくは、崩壊剤は、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）を含み：あらかじめウェットではないインサート乾燥である。なぜなら、もしもそれがコア製造の間にウェットであるならば、それは、ルーメン後のフェーズで要求される崩壊機能を果たすことができないであろうからである。
【００７６】
好ましくは、崩壊剤は、ＣＭＣと同様の機能を有する乾燥インサートコーンスターチを含む。
【００７７】
好ましくは、崩壊剤は、ダイズレシチンと同様の機能を有するエトキシル化ヒマシ油を含む。
【００７８】
好ましくは、崩壊剤は、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸及び／又はステアリン酸、又はそれらの組合せを含む。すなわち、それらは単独の脂肪酸であり、それらは、消化できるのであって、コア中に使用される結合剤よりも容易に消化される傾向があり、その結果、それらを含有するコアを、より消化できるようにする傾向がある。
【００７９】
好ましくは、崩壊剤は、寒天−アラビアゴムを含み、それらは、一旦ウェットになるとそれらを膨潤させるように、乾燥形態でインサートされる。更に、上述の脂肪酸に関しては同様に、それらは、押出結合剤として使用される伝統的な植物ワックス及びライスワックスよりも、かなり消化しやすいのであり、こうして、それらは、より容易に消化される傾向があり、その結果、それらを含有するコアを、より消化しやすくする。
【００８０】
好ましくは、崩壊剤は、ポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）を含み：酸性（胃）ｐＨで可溶性となるｐＨ依存性ポリマーであり、その一方でそれは、弱酸ｐＨ（５）と弱塩基性ｐＨ（８）との間では固体のままであり：この範囲は、健康な動物のルーメンで見出されるｐＨ値を含む。その結果、ＰＭＭＡは、もしも胃液によってウェットならば溶解するが、もしもルーメン液によってウェットならば溶解しない。
【００８１】
本開示の好ましい形態では、本開示のルーメン耐性組成物は、コーティング層の中に上記で定義されるような汚染物質及び上記で定義されるようなコア中の崩壊剤のいかなる組合せをも含む。
【００８２】
その結果として、この組合せは、それがない製品に比べて得られるべきルーメン後の消化性の改善を可能にすることが起き、ルーメン後の消化性の前記改善は、コーティング層中の汚染物質とコア中の崩壊剤との間の相乗作用が原因で活性成分に与えられる。
【００８３】
本発明は、上述の微粒子組成物の調製方法にも関する。
【００８４】
当該方法は、コアを形成する物質、すなわち、生理活性物質、マトリックス物質及び崩壊剤物質を混合する工程を含み、それは、混合、切断、加熱及び冷却を備えた容器中で実施される。混合は、均一な混合物が得られるまで、実施される。
【００８５】
高い微小粒度分布を持つ生理活性物質の場合は、予備的な微粉化処理が必要になることがある。上記で強調されているように、コアは、１つ以上の生理活性物質を含むことができ、得られる混合物は、その後の処理工程の間に、特にコーティング作業の間に、コアがインタクトのままであるほど十分に固体でなければならない。
【００８６】
本発明の微粒子の組成物を調製する方法は、こうして得た混合物のその後の押出工程を含む。
【００８７】
得られた混合物は、要求される形状及びサイズの微粒子を得るように、押出機中に押出される。
【００８８】
当業者に公知の押出機は、有利には、実施される処理に基づき温度勾配の適用を可能にする加熱及び冷却手段を備えたセクター及び、供給及び混合を備えた二軸押出機である。押出機のヘッドは、加熱可能な及び／又は冷却可能なダイを備え、そして、所定の直径を持つ複数の出口穴を備える。
【００８９】
ダイの外側で、組成物は、微粒子コアの長さの調節を可能にする可変スピードでのカッターで、切断に付する。
【００９０】
こうして得られたコアは、望ましくない寸法の廃棄物及び粉末を除去するために、冷却及びふるい分けに付する。
【００９１】
この時点で、コアは、コーティング工程に付することができる。
【００９２】
本発明の別の実施形態では、コーティング工程よりも前に、冷却及びふるい分け後に得られたコアは、その形状を修正するために球状化操作に又は別のもう１つの処理に付する。球状化操作は、軟化剤、増粘剤及び凝集剤などの助剤及び空気中でブローする回転ディスクスフェロナイザーで実施できる。
【００９３】
回転楕円体形状は、円筒形状に比べて、より大きなコンパクトさ、滑らかさ、被覆性及び混合性という利点を有する。
【００９４】
実際、本発明によれば、回転楕円体形状は、得られるべきコーティングの一層良い均一性を可能にし、これは、同じ厚さの適用される保護層ではコーティングのより効果的な保護作用を可能にすることが、見出された。
【００９５】
あるいは、本発明のルーメン耐性組成物のコアは、下記の技術を通して得ることができる：
−乾燥及び／又は湿潤組成物、しかも、生理活性物質は、不規則な微粒子を形成するまでマトリックス物質と混合される；
−マトリックス物質と一緒に圧縮；
−ドリッピング：しかも、生理活性物質は、冷却液中にドリップされる混合物を形成するワックス又は溶融ワックス中に分散される；
−噴霧冷却：しかも、生理活性物質は、溶融マトリックス中に分散され、冷却塔中に噴霧される；
−コアセルベーション：しかも、生理活性物質は、マトリックスを持つ溶液中で溶融され、その後、硬化剤（例えばＣａＣｌ２）及び水の溶液中に注入される。こうして得られた球は、その後、乾燥され潜在的に被覆される。
【００９６】
本発明の実施形態によれば、ルーメン耐性組成物の微粒子のコアは、円筒形状を有し、その高さは、０．５ｍｍ〜２ｍｍの間に含まれる。別の実施形態によれば、ルーメン耐性組成物の微粒子のコアは、実質的に回転楕円体形状を有し、その直径は、０．５ｍｍ〜２ｍｍの間に含まれる。
【００９７】
その後、こうして得られたコアは、コーティング工程に付する。コーティング層は、当業者に公知のコーティング技術によって、パンの中で適用できる。あるいは、例えばトップ噴霧流動床、ボトム噴霧流動床又は接線噴霧流動床などの流動床コーティング技術；又は、単独の成分又は成分の混合物での噴霧技術、又は乾燥コーティング技術を使用できる。
【００９８】
本発明の更なる利点及び特徴が、下記の詳細及び下記の例に関してそれらの実施形態の非限定的な記述から、当業者には明らかであろう。
【００９９】
例
下記の例では、下記の分析及び検査具が使用された：
・微粒子寸法線検査用の、各々の単一の製造工程の終わりに配置されるふるい；
・目視検査用の顕微鏡；
・耐熱性検査用の融点計器；
・硬度及び機械抵抗検査用の硬度計；
・活性成分（濃度）の定量用の自動滴定装置又はＨＰＬＣ；
・ルーメンバイパスの程度を決定するための医薬品溶解機。使用の実験条件は、約６．８の「ルーメン」ｐＨを持つ溶液中での８時間の存在、１５ｒｐｍ、３９℃であった。
・ＤａｉｓｙＩＩ  ＡＮＫＯＭ：ルーメンバイパスの程度を決定するための、市販の実験室の人工ルーメン。使用の実験条件は、３９℃、ルーメン条件での８時間の存在、「ルーメン接種源」のインサーションでの「ルーメン」ｐＨの緩衝溶液及びルーメン嫌気状態の再現（当業者に公知の大学手順による）であった。品質管理フェーズで標準的に試験されたｐＨは、６．８である。
・ルーメン後の消化性の程度を決定するための医薬品溶解機。使用の実験条件は、「Ｂｏｉｓｅｎ試験」として当業者に公知の手順に従い、特に、それらは下記のものであった：
３９℃、３０ｒｐｍ、２ｈ、「胃の」ｐＨ（２．０）＋ペプシン接種源を持つ緩衝溶液。
３９℃、３０ｒｐｍ、４ｈ、「腸の」ｐＨ（６．８）＋パンクレアチン接種源を持つ緩衝溶液。
３９℃、３０ｒｐｍ、１８ｈ、「腸の」ｐＨ（６．８）＋リパーゼ及び胆汁抽出物接種源を持つ緩衝溶液。
【０１００】
例１−塩化コリンを含有する微粒子の調製
例１．１
９９％の純度を持つ４２５ｋｇの塩化コリンが、１０ｋｇの噴霧ライスワックス、１５ｋｇの亜鉛ステアリン酸塩、１０ｋｇのダイズレシチン及び４０ｋｇのシリカと混合された。混合物は、下記のプログラムに従って異なる温度勾配のセクターを持つ押出機を使用して、押出された。
セクター１  セクター２  セクター３  セクター４  セクター５  セクター６
８５℃      ８５℃      ５０℃      ５０℃      ４５℃      ６５℃
【０１０１】
こうして得られたコアは、塩化コリンで８５％の濃度を有した。その後、コアは、パン中でのコーティングに付された。
【０１０２】
第１のコーティング層が形成され、４００ｋｇの微粒子を、下記のものを含む１２０ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
６５重量％の硬化パーム油；
３２重量％のパルミチン酸；
３重量％のダイズレシチン。
【０１０３】
その後、第２のコーティング層が形成され、第１の層によってコーティングされた微粒子を、下記のものを含む４０ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
５０重量％の硬化パーム油；
５０重量％のライスワックス。
【０１０４】
上記で示されたパーセンテージの全ては、被覆層の総重量に基づき重量パーセンテージである。
【０１０５】
こうして得られた微粒子は、微粒子の総重量に関して６０重量％の塩化コリン濃度を有した。
【０１０６】
その後、微粒子は、Ｂｏｉｓｅｎ法を使用してルーメンバイパスの程度、ルーメン後の消化性及び総生物学的利用能の評価に付された。Ｂｏｉｓｅｎ法の完全な記述として、下記の出版物が参照される：S. Boisen, J. A. Fernandez “Prediction of total tract digestibility of energy feedstuffs and pig diets by in vitro analyses” Animal Feed Science Technology 68, 277-286, 1997。
【０１０７】
インビトロの結果が、表１に強調される。
【表１】
2020508082.tif 000002
【０１０８】
例１．２
９９％の純度を持つ４２５ｋｇの塩化コリンが、１０ｋｇの噴霧ライスワックス、１５ｋｇの亜鉛ステアリン酸塩、１０ｋｇのダイズレシチン、５ｋｇのクエン酸、５ｋｇの炭酸水素ナトリウム及び３０ｋｇのシリカと混合された。混合物は、下記のプログラムに従って異なる温度勾配のセクターを持つ押出機を使用して、押出された。
セクター１  セクター２  セクター３  セクター４  セクター５  セクター６
７０℃      ７５℃      ８０℃      ８０℃      ８０℃      ８５℃
【０１０９】
こうして得られたコアは、塩化コリンで８５％の濃度を有した。その後、コアは、パン中でのコーティングに付された。
【０１１０】
第１のコーティング層が形成され、４００ｋｇの微粒子を、下記のものを含む１００ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
７５重量％の硬化パーム油；
２３重量％のパルミチン酸；
２重量％のエトキシル化ヒマシ油．
【０１１１】
その後、第２のコーティング層が形成され、第１の層によってコーティングされた微粒子を、下記のものを含む６０ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
５０重量％の硬化菜種油；
４５重量％のカルナウバロウ；
５重量％のポリメチルメタクリレート。
【０１１２】
上記で示されたパーセンテージの全ては、被覆層の総重量に基づき重量パーセンテージである。
【０１１３】
こうして得られた微粒子は、微粒子の総重量に関して６０重量％の塩化コリン濃度を有した。
【０１１４】
その後、微粒子は、Ｂｏｉｓｅｎ法を使用してルーメンバイパスの程度、ルーメン後の消化性及び総生物学的利用能の評価に付された。Ｂｏｉｓｅｎ法の完全な記述として、下記の出版物が参照される：S. Boisen, J. A. Fernandez “Prediction of total tract digestibility of energy feedstuffs and pig diets by in vitro analyses” Animal Feed Science Technology 68, 277-286, 1997。
【０１１５】
インビトロの結果が、表２に強調される。
【表２】
2020508082.tif 000003
【０１１６】
例１．３
例１．２の手順で得られた押出コアは、球状化用助剤として７５％塩化コリン水性液の使用で球状化された。その後、それらは、パンの中で被覆された。
【０１１７】
第１のコーティング層が形成され、４００ｋｇの回転楕円体微粒子を、下記のものを含む１２５ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
７２重量％の硬化パーム油；
２５重量％のパルミチン酸；
３重量％のエトキシル化ヒマシ油。
【０１１８】
その後、第２のコーティング層が形成され、第１の層によってコーティングされた微粒子を、下記のものを含む２０ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
５０重量％の硬化パーム油；
５０重量％のライスワックス。
【０１１９】
最後に、１００％のポリメチルメタクリレートを含有する２０ｋｇの第３コーティング層が、形成された。
【０１２０】
上記で示されたパーセンテージの全ては、被覆層の総重量に基づき重量パーセンテージである。
【０１２１】
こうして得られた微粒子は、微粒子の総重量に関して６０重量％の塩化コリン濃度を有した。
【０１２２】
インビトロの結果が、表３に強調される。
【表３】
2020508082.tif 000004
【０１２３】
例２−リジンＨＣｌを含有する微粒子の調製
例２．１
４００ｋｇの微粉化リジン塩酸塩が、６０ｋｇの粒状ライスワックス、４８ｋｇのパーダー化粉末、及び１２ｋｇのダイズレシチンと混合された。混合物は、下記のプログラムに従って異なる温度勾配のセクターを持つ押出機を使用して、押出された。
セクター１  セクター２  セクター３  セクター４  セクター５  セクター６
８５℃      ６５℃      ５０℃      ５０℃      ５０℃      ５０℃
【０１２４】
こうして得られたコアは、リジン塩酸塩で７５％の濃度を有した。その後、コアは、パン中でのコーティングに付された。
【０１２５】
第１のコーティング層が形成され、３５０ｋｇの微粒子を、下記のものを含む１００ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
９５重量％の硬化パーム油；
５重量％のヒマワリレシチン。
【０１２６】
その後、第２のコーティング層が形成され、第１の層によってコーティングされた微粒子を、下記のものを含む７５ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
５０重量％の硬化菜種油；
４８重量％のカルナウバロウ；
２重量％のヒマワリレシチン。
【０１２７】
上記で示されたパーセンテージの全ては、被覆層の総重量に基づき重量パーセンテージである。
【０１２８】
こうして得られた微粒子は、微粒子の総重量に関して５０重量％のリジン塩酸塩濃度を有した。
【０１２９】
その後、微粒子は、Ｂｏｉｓｅｎ法を使用してルーメンバイパスの程度、ルーメン後の消化性及び総生物学的利用能の評価に付された。Ｂｏｉｓｅｎ法の完全な記述として、下記の出版物が参照される：S. Boisen, J. A. Fernandez “Prediction of total tract digestibility of energy feedstuffs and pig diets by in vitro analyses” Animal Feed Science Technology 68, 277-286, 1997。
【０１３０】
インビトロの結果が、表４に強調される。
【表４】
2020508082.tif 000005
【０１３１】
例２．２
３２４ｋｇの微粉化リジン塩酸塩が、６４ｋｇのライスワックス噴霧及び１２ｋｇのダイズレシチンと混合された。混合物は、下記のプログラムに従って異なる温度勾配のセクターを持つ押出機を使用して、押出された。
セクター１  セクター２  セクター３  セクター４  セクター５  セクター６
８５℃      ８５℃      ８０℃      ８０℃      ８０℃      ８０℃
【０１３２】
こうして得られたコアは、リジン塩酸塩で８０％の濃度を有した。コアは、球状化助剤として５０％リジン塩酸塩水溶液を使用して球状化され、その後、パン中でのコーティングに付された。
【０１３３】
第１のコーティング層が形成され、３５０ｋｇの微粒子を、下記のものを含む９０ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
７５重量％の硬化パーム油；
２３重量％のパルミチン酸；
２重量％のエトキシル化ヒマシ油。
【０１３４】
その後、第２のコーティング層が形成され、第１の層によってコーティングされた微粒子を、下記のものを含む５０ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
４８重量％の硬化菜種油；
５２重量％のライスワックス；
２重量％のヒマワリレシチン。
【０１３５】
その後、第３のコーティング層が形成され、第２の層によってコーティングされた微粒子を、第１の層と同一のコーティング混合物４０ｋｇでコーティングした。
【０１３６】
その後、第４のコーティング層が形成され、第３の層によってコーティングされた微粒子を、第２の層と同一のコーティング混合物３０ｋｇでコーティングした。
【０１３７】
上記で示されたパーセンテージの全ては、被覆層の総重量に基づき重量パーセンテージである。
【０１３８】
こうして得られた微粒子は、微粒子の総重量に関して５０重量％のリジン塩酸塩濃度を有した。
【０１３９】
その後、微粒子は、Ｂｏｉｓｅｎ法を使用してルーメンバイパスの程度、ルーメン後の消化性及び総生物学的利用能の評価に付された。Ｂｏｉｓｅｎ法の完全な記述として、下記の出版物が参照される：S. Boisen, J. A. Fernandez “Prediction of total tract digestibility of energy feedstuffs and pig diets by in vitro analyses” Animal Feed Science Technology 68, 277-286, 1997。
【０１４０】
インビトロの結果が、表５に強調される。
【表５】
2020508082.tif 000006
【０１４１】
例３−ＤＬ−メチオニンを含有する微粒子の調製
例３．１
４３０ｋｇのＤＬ−メチオニンが、３０ｋｇのライスワックス噴霧、２５ｋｇの硬化パーム油、５ｋｇのシリカ、５ｋｇのクエン酸及び５ｋｇの炭酸水素ナトリウムと混合された。混合物は、下記のプログラムに従って異なる温度勾配のセクターを持つ押出機を使用して、押出された。
セクター１  セクター２  セクター３  セクター４  セクター５  セクター６
８５℃      ４５℃      ４０℃      ４０℃      ３５℃      ６０℃
【０１４２】
こうして得られたコアは、８５％ＤＬ−メチオニンの濃度を有した。その後、コアは、パン中でのコーティングに付された。
【０１４３】
第１のコーティング層が形成され、４００ｋｇの微粒子を、下記のものを含む４０ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
７０重量％の硬化菜種油；
３０重量％のリノレン酸。
【０１４４】
その後、第２のコーティング層が形成され、第１の層によってコーティングされた微粒子を、下記のものを含む３５ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
３５重量％の硬化パーム油；
６５重量％のカルナウバロウ。
【０１４５】
その後、第３のコーティング層が形成され、第２の層によってコーティングされた微粒子を、第１の層と同一のコーティング混合物１０ｋｇでコーティングした。
【０１４６】
上記で示されたパーセンテージの全ては、被覆層の総重量に基づき重量パーセンテージである。
【０１４７】
こうして得られた微粒子は、微粒子の総重量に関して７０重量％のＤＬ−メチオニン濃度を有した。
【０１４８】
その後、微粒子は、Ｂｏｉｓｅｎ法を使用してルーメンバイパスの程度、ルーメン後の消化性及び総生物学的利用能の評価に付された。
【０１４９】
インビトロの結果が、表６に強調される。
【表６】
2020508082.tif 000007
【０１５０】
例３．２
前述の例の最初の部分に記載された同じ手順に続いて得た４００ｋｇの押出顆粒が、更に、３つのコーティング層を使用してパン中で被覆された。
【０１５１】
第１のコーティング層が形成され、４００ｋｇの微粒子を、下記のものを含む３５ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
８２重量％の硬化パーム油；
１８重量％のリノレン酸。
【０１５２】
その後、第２のコーティング層が形成され、第１の層によってコーティングされた微粒子を、下記のものを含む３５ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
５２重量％の硬化菜種油；
４５重量％のカルナウバロウ；
３重量％のヒマワリレシチン。
【０１５３】
その後、第３のコーティング層が形成され、第２の層によってコーティングされた微粒子を、下記のものを含む１５ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
５０重量％の硬化パーム油；
４９重量％のライスワックス；
１％のエトキシル化ヒマシ油。
【０１５４】
上記で示されたパーセンテージの全ては、被覆層の総重量に基づき重量パーセンテージである。
【０１５５】
こうして得られた微粒子は、微粒子の総重量に関して７０重量％のＤＬ−メチオニン濃度を有した。
【０１５６】
その後、微粒子は、Ｂｏｉｓｅｎ法を使用してルーメンバイパスの程度、ルーメン後の消化性及び総生物学的利用能の評価に付された。
【０１５７】
インビトロの結果が、表７に強調される。
【表７】
2020508082.tif 000008
【０１５８】
例４−Ｌ−リジン、ニコチン酸及びＤＬ−メチオニンを含有する微粒子の調製
例４．１
１８０ｋｇの９９％塩化コリンが、２４０ｋｇの９９％Ｌ−リジン塩酸塩、６５ｋｇのニコチン酸（ビタミンＰＰ）及び１４５ｋｇのＤ、Ｌ−メチオニンと混合された。２０ｋｇのクエン酸、２０ｋｇの炭酸水素ナトリウム、５ｋｇのヒマワリレシチン及び２２５ｋｇのライスワックス噴霧が、添加された。混合物は押出された。
【０１５９】
こうして得られたコアは、２０％の塩化コリン、２６．７％のＬ−リジン塩酸塩、７．２％のニコチン酸、１６．１％のＤ、Ｌ−メチオニンの濃度を有した。
【０１６０】
核は、パン中でのコーティングに付された。
【０１６１】
第１のコーティング層が形成され、４００ｋｇの微粒子を、下記のものを含む２００ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
６６重量％の硬化菜種油；
３４重量％のパルミチン酸。
【０１６２】
その後、第２のコーティング層が形成され、第１の層によってコーティングされた微粒子を、下記のものを含む１００ｋｇのコーティング混合物でコーティングした：
４８重量％の硬化パーム油；
５０重量％のライスワックス；
２重量％のダイズレシチン。
【０１６３】
例５
上述の分析方法（医薬品溶解機）を使用して、バイパスの程度及び塩化コリンの生物学的利用能を決定するために、インビトロの試験が実施された：
−９９％純度の塩化コリンから成る製品Ａ；
−顆粒の総重量に関して２５重量％の塩化コリンを含有する、噴霧冷却技術を用いて得られたマイクロカプセル化塩化コリン顆粒から成る製品Ｂ；
−顆粒の総重量に関して５０重量％の塩化コリンを含有する、特許ＥＰ１７９１５３２の例４によって得られた微粒子から成る製品Ｃ；
−上述の例１．３によって得られた微粒子から成る製品Ｄ。
【０１６４】
試験結果が、下記の表８及び表９に示される。
【０１６５】
表８は、２００ｇの製品の理論的な投与を考慮して得られた結果を示す。
【表８】
2020508082.tif 000009
【０１６６】
表８は、１００ｇの塩化コリンの理論的な投与で得られた結果を示す。
【表９】
2020508082.tif 000010
【０１６７】
例６
上述の分析方法（医薬品溶解機）を使用して、バイパスの程度及び塩化コリンの生物学的利用能を決定するために、インビトロの試験が実施された：
−９９％純度の塩化コリンから成る製品Ａ；
−顆粒の総重量に関して２５重量％の塩化コリンを含有する、噴霧冷却技術を用いて得られたマイクロカプセル化塩化コリン顆粒から成る製品Ｂ；
−顆粒の総重量に関して５０重量％の塩化コリンを含有する、特許ＥＰ１７９１５３２の例４によって得られた微粒子から成る製品Ｃ；
−上述の例１．３によって得られた微粒子から成る製品Ｄ。
−例１．３の押出形態によって得られたが、汚染物質に欠けたコーティング層で被覆された微粒子から成る製品Ｅ；
−崩壊剤の一部が、ライスワックス噴霧（結合剤）によって置換されたが、コーティング層は、例１．３に比べて２倍の量の汚染物質で「汚染された」、例１．３の押出形態によって得られた微粒子から成る製品Ｆ。
【０１６８】
試験の結果が、下記の表１０及び表１１に示される。表１０及び表１１は、崩壊剤の単なる存在が、ルーメン後のフェーズにおいてコリンを生物学的に利用可能とすることに効果的であることを、示す。
【０１６９】
表１０は、２００ｇの製品の理論的な投与を考慮して得られた結果を示す。
【表１０】
2020508082.tif 000011
【０１７０】
表１１は、１００ｇの塩化コリンの理論的な投与を考慮して得られた結果を示す。
【表１１】
2020508082.tif 000012
【国際調査報告】
2020508082.tif 000013
2020508082.tif 000014
2020508082.tif 000015