(57)【要約】  本発明は、抗体組成物の安定性を改善するという当該技術分野における現行の必要性に対処する。本発明は、広く、低用量抗体組成物を安定化し、コーティングを有する容器手段へのタンパク質吸着を阻害する新規製剤に関する。より具体的には、以下に記載する発明は、発酵槽、バイオリアクター、バイアル瓶、フラスコ、バッグ、注射器、ゴム栓、チューブなどの容器手段内で加工、開発、製剤化、製造及び／又は保管される低投与量抗体組成物を安定化し、タンパク質吸着を阻害する製剤に対する当該技術分野における必要性に対処する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗体組成物を安定化する製剤であって、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝剤液と、（ｉｉ）ポリソルベートと、（ｉｉｉ）約７０μｇ未満の用量の１種以上の抗体とを含み、コーティングを有する容器手段に収容された製剤。
【請求項２】
前記緩衝剤が、ヒスチジン、リン酸塩、又は酢酸塩である、請求項１に記載の製剤。
【請求項３】
前記ポリソルベートが、ポリソルベート２０又はポリソルベート８０であり、前記製剤中の前記ポリソルベートの最終濃度が、前記製剤の体積あたり少なくとも０．００１％〜０．２％のポリソルベート重量である、請求項１に記載の製剤。
【請求項４】
前記容器手段が、バイアル瓶、バイアル瓶栓、バイアル瓶クロージャ、ガラスクロージャ、ゴムクロージャ、プラスチッククロージャ、注射器、注射器栓、注射器プランジャ、フラスコ、ビーカー、メスシリンダー、発酵槽、バイオリアクター、チューブ、パイプ、バッグ、ジャー、アンプル、カートリッジ、及び使い捨て注射器ペンからなる群のうちの１種以上から選択される、請求項１に記載の製剤。
【請求項５】
前記容器手段が、二酸化ケイ素コーティング又は疎水性コーティングを有する、請求項１に記載の製剤。
【請求項６】
前記ｐＨ緩衝液が、糖又は糖アルコールを更に含む、請求項１に記載の製剤。
【請求項７】
前記ｐＨ緩衝液が、Ｌ−メチオニン又はエチレンジアミン四酢酸を更に含む、請求項１に記載の製剤。
【請求項８】
抗ＣＤ３二重特異性抗体組成物を安定化する製剤であって、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝剤液と、（ｉｉ）ポリソルベートと、（ｉｉｉ）約７０μｇ未満の用量の抗ＣＤ３二重特異性抗体とを含み、コーティングを有する容器手段に収容された製剤。
【請求項９】
前記緩衝剤が、ヒスチジン、リン酸塩、又は酢酸塩である、請求項８に記載の製剤。
【請求項１０】
前記ポリソルベートが、ポリソルベート２０又はポリソルベート８０であり、前記製剤中の前記ポリソルベートの最終濃度が、前記製剤の体積あたり少なくとも０．００１％〜０．２％のポリソルベート重量である、請求項８に記載の製剤。
【請求項１１】
前記容器手段が、バイアル瓶、バイアル瓶栓、バイアル瓶クロージャ、ガラスクロージャ、ゴムクロージャ、プラスチッククロージャ、注射器、注射器栓、注射器プランジャ、フラスコ、ビーカー、メスシリンダー、発酵槽、バイオリアクター、チューブ、パイプ、バッグ、ジャー、アンプル、カートリッジ、及び使い捨て注射器ペンからなる群のうちの１種以上から選択される、請求項８に記載の製剤。
【請求項１２】
前記容器手段が、二酸化ケイ素コーティング又は疎水性コーティングを有する、請求項８に記載の製剤。
【請求項１３】
前記ｐＨ緩衝液が、糖又は糖アルコールを更に含む、請求項８に記載の製剤。
【請求項１４】
前記ｐＨ緩衝液が、Ｌ−メチオニン又はエチレンジアミン四酢酸を更に含む、請求項８に記載の製剤。
【請求項１５】
抗体組成物を収容する方法であって、注射のために準備され、約７０μｇ未満の用量の活性成分としての少なくとも１種の抗体を含む抗体組成物を、コーティングを有する容器手段に提供することを含み、前記医薬組成物が、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝液及び（ｉｉ）ポリソルベートを含む製剤中に存在する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の相互参照）
本出願は２０１７年９月２９日に出願された米国仮出願第６２／５６５１７８号の利益を主張するものである。前述の出願の全内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は、概して、免疫学、腫瘍学、抗体製剤、タンパク質の安定性及びプロセス開発の分野に関する。より具体的には、本発明は、低用量抗体組成物の、コーティングを有する容器へのタンパク質吸着を阻害する新規製剤に関する。
【背景技術】
【０００３】
安全かつ有効であると承認されたバイオ医薬品及び臨床開発中のものは、様々な投与スケジュールを有する。したがって、投与しなければならないタンパク質の量に応じて、様々な濃度及び体積を有するこれらのバイオ医薬品が、薬物製品製剤中に提供される。原薬タンパク質のかなりの部分がバイアル瓶又は注射器などの容器の表面上に吸着する場合、低濃度タンパク質製剤が不安定になる場合がある。更に、活性タンパク質濃度が変化すると、患者に対して予想よりも低い用量しか投与されなくなる場合がある。加えて、多くのバイオ医薬品が製剤化され、更なる操作なしに臨床投与する準備が整った状態で提供されている。しかしながら、多くの製品は、看護師、薬剤師、及び／又は医師による様々な程度のハンドリングを必要とする。ハンドリング及び投与中、薬物製品製剤中のタンパク質の物理的及び化学的安定性を維持しなければならない。タンパク質製剤を静脈注射（ｉ．ｖ．）溶液で低濃度に希釈した場合、それによって、賦形剤濃度が低下し、元々の薬物製品製剤の組成及び特性が変化して、安定性が失われる場合がある。ｉ．ｖ．ルートを介してバイオ医薬製品を送達する場合には、タンパク質の生物物理化学的特性、製剤の組成、送達される活性タンパク質の濃度、希釈剤の選択、接触面、並びに注入の時間及び速度を含むいくつかの要因を考慮しなければならない。ここで、接触面は、タンパク質がその両親媒性の性質に起因して界面エネルギーを最小化するので特に興味深い。注射器並びにｉ．ｖ．注入用の容器及びラインにおいて様々なプラスチックポリマーを広く使用すると、吸着によりンパク質が失われるリスクが、特に低用量で顕著である。したがって、特に低用量製品の場合、薬物製品の開発中に、フィルター、容器、注射器、及びチューブへの吸着によるタンパク質の損失について調査し、対処しなければならない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
したがって、低用量タンパク質に好適な製剤が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
この「発明の概要」は、「発明を実施するための形態」において以下に更に説明される簡潔な形態で概念の選定を紹介するために提供される。この「発明の概要」は、請求される発明主題の主要な特徴又は必須の特徴を特定することを意図するものではなく、また請求される主題の範囲を決定する際の補助として使用されることも意図していない。
【０００６】
本発明は、広く、低用量抗体組成物を安定化し、容器手段へのタンパク質吸着を阻害する新規製剤に関する。具体的な一実施形態では、本発明は、容器−コーティング相互作用、剪断力、出荷時の撹拌に対して低用量抗体組成物を安定化する新規製剤を目的とし、そして、
特定の実施形態では、本発明は、組成物を安定化する製剤であって、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝液と、（ｉｉ）ポリソルベートと、（ｉｉｉ）約７０μｇ未満の用量の１つ以上の抗体とを含み、コーティングを有する容器手段に含まれた製剤に関する。特定の実施形態では、製剤のｐＨ緩衝液は、約５〜約７．４のｐＨを有する。他の実施形態では、緩衝剤は、ヒスチジン、リン酸塩、又は酢酸塩である。別の実施形態では、製剤のポリソルベートは、ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ（商標）２０）及びポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ（商標）８０）からなる群から選択される。具体的な一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート８０である。特定の実施形態では、製剤中のポリソルベート８０の最終濃度は、製剤の体積あたり、少なくとも０．００１％〜０．１％のポリソルベート８０重量である。特定の実施形態では、製剤中のポリソルベート２０の最終濃度は、製剤の体積あたり、少なくとも０．００１％〜０．１％のポリソルベート２０重量である。
【０００７】
特定の一実施形態では、抗体製剤は、容器手段に収容される。特定の実施形態では、容器手段は、バイアル瓶、バイアル瓶栓、バイアル瓶クロージャ、ガラスクロージャ、ゴムクロージャ、プラスチッククロージャ、注射器、注射器栓、注射器プランジャ、フラスコ、ビーカー、メスシリンダー、発酵槽、バイオリアクター、チューブ、パイプ、バッグ、ジャー、アンプル、カートリッジ、及び使い捨て注射器ペンからなる群のうちの１つ以上から選択される。特定の実施形態では、容器手段は、コーティングされている。具体的な実施形態では、容器手段は、二酸化ケイ素コーティングを有する。他の実施形態では、容器手段は、疎水性コーティングを有する。特定の実施形態では、抗体製剤は、糖を更に含む。他の実施形態では、製剤は、糖アルコールを更に含む。別の実施形態では、抗体製剤は、Ｌ−メチオニン又はエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を更に含む。
【０００８】
別の実施形態では、本発明は、抗ＣＤ３二重特異性抗体組成物を安定化する製剤であって、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝液と、（ｉｉ）ポリソルベートと、（ｉｉｉ）約７０μｇ未満の用量の抗ＣＤ３二重特異性抗体とを含み、コーティングを有する容器手段に収容された製剤に関する。特定の実施形態では、製剤のｐＨ緩衝液は、約５〜７．４のｐＨを有する。他の実施形態では、緩衝剤は、ヒスチジン、リン酸塩、又は酢酸塩である。別の実施形態では、製剤のポリソルベートは、ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ（商標）２０）及びポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ（商標）８０）からなる群から選択される。具体的な一実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート８０である。特定の実施形態では、製剤中のポリソルベート８０の最終濃度は、製剤の体積あたり、少なくとも０．００１％〜０．１％のポリソルベート８０重量である。特定の実施形態では、製剤中のポリソルベート２０の最終濃度は、製剤の体積あたり、少なくとも０．００１％〜０．１％のポリソルベート２０重量である。
【０００９】
一実施形態では、抗ＣＤ３二重特異性抗体製剤は、容器手段内に収容される。いくつかの実施形態では、容器手段は、バイアル瓶、バイアル瓶栓、バイアル瓶クロージャ、ガラスクロージャ、ゴムクロージャ、プラスチッククロージャ、注射器、注射器栓、注射器プランジャ、フラスコ、ビーカー、メスシリンダー、発酵槽、バイオリアクター、チューブ、パイプ、バッグ、ジャー、アンプル、カートリッジ、及び使い捨てペンからなる群のうちの１つ以上から選択される。特定の実施形態では、容器手段は、コーティングされている。具体的な実施形態では、容器手段は、疎水性コーティングを有する。他の実施形態では、抗体製剤は、糖を更に含む。別の実施形態では、製剤は、糖アルコールを更に含む。別の実施形態では、抗体製剤は、Ｌ−メチオニン又はＥＤＴＡを更に含む。
【００１０】
別の態様では、本発明は、抗体組成物を収容する方法であって、注射のために準備され、約７０μｇ未満の用量の活性成分としての少なくとも１つの抗体を含む抗体組成物を、コーティングを有する容器手段に提供することを含み、医薬組成物が、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝液及び（ｉｉ）ポリソルベートを含む製剤中に存在する方法を提供する。
【００１１】
本発明の他の特徴及び利点は、以下の詳細な説明、その実施形態、及び特許請求の範囲から明らかとなるであろう。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
定義
本明細書で使用するとき、用語「約」は、例えば、本発明の説明において用いられる組成物中の成分の量、濃度、体積、プロセス温度、プロセス時間、収率、流量、圧力、及びこれらの範囲を修飾するために使用される。用語「約」は、例えば、化合物、組成物、濃縮物の作製、又は製剤の使用のために使用される典型的な測定及びハンドリング手順を通じて、これらの手順における不注意による誤りを通じて、方法を実行するために使用される出発物質又は成分の製造、供給源、又は純度の差を通じて、並びに他の同様の考慮事項を通じて生じ得る数量のばらつきを指す。用語「約」はまた、特定の初期濃度又は混合物を有する製剤の熟成に起因して異なる量、及び特定の初期濃度又は混合物を有する製剤の混合又は加工に起因して異なる量も包含する。用語「約」によって修飾される場合、本明細書に添付される「特許請求の範囲」は、このような等価物を含む。
【００１３】
本明細書で使用するとき、「抗体」は、特に断らない限り、様々な単量体、二重特異的、多量体、及びキメラの形態を含む免疫グロブリンの全てのアイソタイプ（ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＩｇＹ）を指す。具体的には、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）、及び抗体様ポリペプチド、例えば、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）分子、単鎖抗体、ヒト抗体、抗体断片、キメラ抗体、及びヒト化抗体が、用語「抗体」に包含される。
【００１４】
用語「医薬品又は薬物」は、本明細書で使用するとき、患者に適正に投与された場合に所望の治療効果を誘導することができる化学物質又は組成物を指す。
【００１５】
用語「医薬的に許容される」とは、動物における使用について、特にヒトにおける使用について、連邦政府又は州政府の規制機関によって承認されているか、又は米国薬局方、欧州薬局方、若しくは他の一般に認められている薬局方に列挙されていることを意味する。
【００１６】
対象となる抗原に特異的に結合する抗体（その抗体断片を含む）を含む液体製剤に関連して本明細書で使用するとき、用語「安定性」、「安定な」、及び「安定化する」とは、本発明の製造、調製、輸送、及び保管の条件下で調製されたときにその生物活性又は物理的一体性を失う（例えば、凝集、沈殿、吸着）ことに対する、液体抗体製剤中の抗体（その抗体断片を含む）の耐性を指す。本発明の「安定な」製剤は、参照製剤と比較して、所与の製造、調製、輸送、及び保管の条件下で、改善された生物物理的及び化学的一体性プロファイルを示す。
【００１７】
別途定義されない限り、本明細書で使用される科学用語及び技術用語は、当業者により一般的に理解される意味を有するものとする。更に、文脈によって別途必要とされない限り、単数形の用語は複数を含むものとし、複数の用語は単数を含むものとする。
【００１８】
製剤
本発明は、溶液中に存在している間の抗体組成物の安定性を改善するという当該技術分野における現行の必要性に対処する。したがって、本発明は、広く、タンパク質及び抗体組成物を安定化する新規製剤に関する。より具体的には、以下に記載する発明は、発酵槽、バイオリアクター、バイアル瓶、フラスコ、バッグ、注射器、ゴム栓、チューブなどの容器手段内で加工、開発、製剤化、製造及び／又は保管される抗体組成物を安定化し、タンパク質吸着を阻害する製剤に対する当該技術分野における必要性に対処する。「背景技術」において上述したように、抗体組成物の化学的安定性、抗体組成物の物理的／熱安定性、抗体組成物と容器／クロージャシステムとの適合性、抗体組成物と不活性成分（例えば、緩衝剤、塩、賦形剤、凍結保護剤）との間の相互作用、製造プロセス、剤形、投与量、出荷、保管及びハンドリング中に遭遇する環境条件（例えば、温度、湿度、剪断力）、並びに製造と使用との間の時間の長さを含むがこれらに限定されない様々な要因が、抗体組成物の安定性に影響を与える。
【００１９】
本発明の抗体組成物の安定性は、当業者に周知かつ常用されている標準的な技術を使用して容易に決定される。例えば、光散乱、光学密度、沈降速度遠心分離、沈降平衡遠心分離、円偏光二色性（ＣＤ）、ローリーアッセイ、ビシンコニン酸（ＢＣＡ）アッセイ、抗体結合などを含むがこれらに限定されない方法によって、安定性、凝集、活性、微粒子形成、タンパク質（濃度）損失などについて抗体組成物をアッセイする。
【００２０】
本明細書に詳細に記載するとおり、本発明は、Ｔｗｅｅｎ（商標）２０又はＴｗｅｅｎ（商標）８０などの界面活性剤を用いて低用量（＜７０μｇ）抗体組成物を製剤化すると、安定性が著しく高まり、コーティングを有する容器手段へのタンパク質吸着を阻害するという予想外かつ驚くべき結果に関する。例えば、本発明では（例えば、実施例２を参照）、９％スクロース、０．４ｍｇ／ｍＬ  Ｌ−メチオニン、及び５０μＭ  ＥＤＴＡを含むｐＨ５．２酢酸塩緩衝剤中で製剤化され、非コーティングバイアル瓶に充填された、約３０μｇの用量のドゥボルツキシズマブとして知られる二重親和性再標的化分子が、水平軌道振盪器を介して３日感穏やかに撹拌した後、３６％の最大タンパク質回収率しか有しないことが観察された。（水平軌道振盪器を使用して、抗体組成物の典型的な加工、出荷、及び保管の条件をシミュレートした）。様々な種類のコーティングバイアル瓶に充填された同じ製剤は、７６％の最大タンパク質回収率を有していた。しかしながら、驚くべきことに、９％スクロース、０．４ｍｇ／ｍＬ  Ｌ−メチオニン、５０μＭ  ＥＤＴＡ、及び０．０１％  Ｔｗｅｅｎ（商標）８０を含むｐＨ５．２酢酸塩緩衝剤中で製剤化され、様々な種類のコーティングバイアル瓶に充填された、約３０μｇの用量のドゥボルツキシズマブは、少なくとも９７％のタンパク質回収を有していることが観察された。したがって、これらのデータは、低用量抗体組成物製剤の場合、界面活性剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ（商標）８０）とコーティングされた容器手段との組み合わせが、抗体組成物の安定性を高めることを示している。
【００２１】
これらの実験では、抗体組成物を、様々なコーティングされた及びコーティングされていない容器手段（例えば、表３〜６を参照されたい）に充填し、撹拌を介して模擬出荷及びハンドリング条件に供した。これらの実験では、コーティングを有する容器手段は、コーティングされていない容器と比較して高いタンパク質回収率を示すことが観察された。更に、７０μｇ以下のタンパク質を含有する製剤については、特に製剤ｐＨがタンパク質の等電点未満である場合、９０％よりも高いタンパク質回収率を達成するには、コーティングを有する容器手段の使用及び界面活性剤の添加の両方が必要であることが観察された。
【００２２】
したがって、本明細書に記載の発明は、低用量抗体組成物を安定化する新規製剤を目的とする。これらの低用量抗体組成物は、ドゥボルツキシズマブ、抗ＩＬ１ＲＡＰ×ＣＤ３（国際公開第２０１７０７９１２１号）、抗ＢＣＭＡ×ＣＤ３（国際公開第２０１７０３１１０４号）、抗ＣＤ１２３×ＣＤ３（国際公開第２０１６０３６９３７号）、抗ＰＳＭＡ×ＣＤ３（国際公開第２０１６１７９５１８号）、及び抗ＲＯＲ１×ＣＤ３（国際公開第２０１７１２７４９９号）などの二重特異性ＣＤ３リダイレクションコンストラクトを含み得る。組成物はまた、任意の他の抗体の低用量製剤も含み得る。本明細書に開示される新規製剤は、抗体組成物の安定性に影響を及ぼす様々な要因（例えば、剪断力、出荷時の撹拌、容器相互作用、吸着、吸収、製造プロセス、温度、湿度、製造と使用との間の時間の長さなど）に対して、コーティングを有する容器手段内の低用量抗体組成物を安定化する。
【００２３】
特定の実施形態では、本発明は、低用量抗体組成物を安定化する製剤であって、ｐＨが約５〜約７．４であるｐＨ緩衝液と、ポリソルベートと、１つ以上の抗体とを含み、コーティングを有する容器手段に含まれた製剤を目的とする。
【００２４】
別の実施形態では、本発明は、抗ＣＤ３二重特異性抗体組成物を安定化する製剤であって、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝液と、（ｉｉ）ポリソルベートと、（ｉｉｉ）約７０μｇ未満の用量の抗ＣＤ３二重特異性抗体とを含み、コーティングを有する容器手段に含まれた製剤を目的とする。
【００２５】
別の実施形態では、本発明は、ドゥボルツキシズマブ組成物を安定化する製剤であって、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝液と、（ｉｉ）ポリソルベートと、（ｉｉｉ）約７０μｇ未満の用量のドゥボルツキシズマブとを含み、コーティングを有する容器手段に含まれた製剤を目的とする。ドゥボルツキシズマブは、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１／６０４８９３８号に記載されている。
【００２６】
別の実施形態では、本発明は、イコルキュマブ組成物を安定化する製剤であって、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝液と、（ｉｉ）ポリソルベートと、（ｉｉｉ）約７０μｇ未満の用量のイコルキュマブとを含み、コーティングを有する容器手段に含まれた製剤を目的とする。イコルキュマブは、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第９，５１８，１２９号に記載されている抗トロンビン抗体である。
【００２７】
別の実施形態では、本発明は、ダラツムマブ組成物を安定化する製剤であって、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝液と、（ｉｉ）ポリソルベートと、（ｉｉｉ）約７０μｇ未満の用量のダラツムマブとを含み、コーティングを有する容器手段に含まれた製剤を目的とする。ダラツムマブは、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第７，８２９，６７３号に記載されている。
【００２８】
別の実施形態では、本発明は、ウステキヌマブ組成物を安定化する製剤であって、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝液と、（ｉｉ）ポリソルベートと、（ｉｉｉ）約７０μｇ未満の用量のウステキヌマブとを含み、コーティングを有する容器手段に含まれた製剤を目的とする。ウステキヌマブは、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，９０２，７３４号に記載されている。
【００２９】
別の実施形態では、本発明は、シルクマブ組成物を安定化する製剤であって、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝液と、（ｉｉ）ポリソルベートと、（ｉｉｉ）約７０μｇ未満の用量とを含み、コーティングを有する容器手段に含まれた製剤を目的とする。シルクマブは、参照により本明細書に組み込まれる米国再発行特許第４３，６７２号に記載されている。
【００３０】
別の実施形態では、本発明は、抗ＮＫＧ２Ｄ抗体組成物を安定化する製剤であって、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝液と、（ｉｉ）ポリソルベートと、（ｉｉｉ）約７０μｇ未満の用量の抗ＮＫＧ２Ｄ抗体とを含み、コーティングを有する容器手段に含まれた製剤を目的とする。一実施形態では、当該抗ＮＫＧ２Ｄ抗体は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第７，８７９，９８５号に記載されている。
【００３１】
別の実施形態では、本発明は、抗ＩＬ１ＲＡＰ×ＣＤ３二重特異性抗体組成物を安定化する製剤であって、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝液と、（ｉｉ）ポリソルベートと、（ｉｉｉ）約７０μｇ未満の用量の抗ＩＬ１ＲＡＰ×ＣＤ３二重特異性製抗体とを含み、コーティングを有する容器手段に含まれた製剤を目的とする。一実施形態では、当該ＩＬ１ＲＡＰ×ＣＤ３二重特異性抗体は、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１７０７９１２１号に記載されている。
【００３２】
別の態様では、本発明は、抗体組成物を収容する方法であって、注射のために準備され、約７０μｇ未満の用量の活性成分としての少なくとも１つの抗体を含む抗体組成物を、コーティングを有する容器手段に提供することを含み、医薬組成物が、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝液及び（ｉｉ）ポリソルベートを含む製剤中に存在する方法を提供する。
【００３３】
界面活性剤
上記のように、本発明は、抗体組成物の安定性に影響を及ぼす様々な要因（例えば、剪断力、出荷時の撹拌、シリコーン油相互作用、吸着、製造プロセス、温度、湿度、製造と使用との間の時間の長さなど）に対して抗体組成物を安定化する製剤を目的とする。特定の実施形態では、本発明は、界面活性剤を含む製剤を目的とする。
【００３４】
界面活性剤（又は表面活性剤）は、一般に、（ａ）親水性の基若しくは部分と親油性（疎水性）の基若しくは部分とを含む両親媒性の分子又は化合物、及び／又は（ｂ）溶液の表面張力を低下若しくは低減する分子、物質、若しくは化合物として定義される。本明細書で定義するとき、本発明の「界面活性剤」は、抗体組成物製剤の表面張力を低下させる任意の分子又は化合物である。
【００３５】
本発明の製剤に使用される界面活性剤は、本明細書に記載の抗体組成物を安定化し、容器へのタンパク質吸着を阻害する任意の界面活性剤又は任意の界面活性剤の組み合わせを含む。したがって、本発明の界面活性剤としては、ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ（商標）２０）、ポリソルベート４０（Ｔｗｅｅｎ（商標）４０）、ポリソルベート６０（Ｔｗｅｅｎ（商標）６０）、ポリソルベート６５（Ｔｗｅｅｎ（商標）６５）、ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ（商標）８０）、ポリソルベート８５（Ｔｗｅｅｎ（商標）８５）、Ｔｒｉｔｏｎ（商標）Ｎ−１０１、Ｔｒｉｔｏｎ（商標）Ｘ−１００、オキシトキシノール４０、ノノキシノール−９、トリエタノールアミン、トリエタノールアミンポリペプチドオレエート、ポリオキシエチレン−６６０ヒドロキシステアレート（ＰＥＧ−１５、Ｓｏｌｕｔｏｌ  Ｈ  １５）、ポリオキシエチレン−３５−リシノレアート（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ（商標））、大豆レシチン、ポロキサマー、ヘキサデシルアミン、オクタデシルアミン、オクタデシルアミノ酸エステル、リゾレシチン、ジメチル−ジオクタデシルアンモニウムブロミド、メトキシヘキサデシルグルセロール、プルロニックポリオール、ポリアミン（例えば、ピラン、デキストラン硫酸、ポリＩＣ、カーボポール）、ペプチド（例えば、ムルアミルペプチド及びジペプチド、ジメチルグリシン、タフトシン）、油エマルション、ミネラルゲル（例えば、リン酸アルミニウム）、及び免疫刺激複合体（ＩＳＣＯＭＳ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３６】
当業者は、界面活性剤の存在下及び非存在下で特定の抗体組成物製剤の表面張力を測定することによって、好適な界面活性剤又は界面活性剤の組み合わせを容易に決定することができる。あるいは、界面活性剤は、抗体組成物の吸着を低減、阻害、又は防止するその能力について定性的に（例えば、微粒子形成の目視検査）又は定量的に（例えば、光散乱、沈降速度遠心分離、光学密度、抗原性）評価される。
【００３７】
容器手段
特定の実施形態では、本発明は、容器手段に収容された抗体組成物の製剤を目的とする。本明細書で定義するとき、本発明の「容器手段」は、研究、加工、開発、製剤化、製造、保管及び／又は投与中に抗体組成物を「収容する」、「保持する」、「混合する」、「ブレンドする」、「分注する」、「注射する」、「移動させる」、「噴霧する」ためなどに使用される、任意の合成物を含む。例えば、本発明の容器手段としては、一般的な実験室用ガラス器具、フラスコ、ビーカー、メスシリンダー、発酵槽、バイオリアクター、チューブ、パイプ、バッグ、ジャー、バイアル瓶、バイアル瓶クロージャ（例えば、ゴム栓、ねじ蓋）、アンプル、注射器、注射器栓、注射器プランジャ、ゴムクロージャ、プラスチッククロージャ、ガラスクロージャなどが挙げられるが、これらに限定されない。本発明の容器手段は、製造材料によって限定されず、コーティングされた又はコーティングされていないガラスなどの材料を含む。
【００３８】
当業者であれば、上記の容器手段が、決して網羅的なリストではなく、加工、開発、製剤化、製造、保管、及び／又は投与中に抗体又は抗体組成物を収容する、保持する、混合する、ブレンドする、分注する、注射する、移動させる、噴霧するためなどに使用される様々な容器手段に関する当業者に対する指針としての役割を果たすだけであることを理解するであろう。本発明における使用が企図される追加の容器手段は、Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｌａｓｔｉｃ  Ｃｏｒｐ．（Ｌｉｍａ，ＯＨ）、ＶＷＲ（商標）（Ｗｅｓｔ  Ｃｈｅｓｔｅｒ，ＰＡ）、ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｆｒａｎｋｌｉｎ  Ｌａｋｅｓ，ＮＪ）、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｃ．（Ｈａｍｐｔｏｎ，ＮＨ）、Ｓｃｈｏｔｔ（商標）（Ｍａｉｎｚ，Ｇｅｒｍａｎｙ）、Ｏｍｎｉ  Ｇｌａｓｓ（Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）、Ｗｅｓｔ  Ｐｈａｒｍａ（Ｅｘｔｏｎ，ＰＡ）、Ｇｅｒｒｅｓｈｅｉｍｅｒ（Ｄｕｓｓｅｌｄｏｒｆ，Ｇｅｒｍａｎｙ）、及びＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）などの実験機器の販売業者及び製造業者から公開されたカタログに見出すことができる。
【００３９】
容器手段の表面及び／又はコーティングに関しては一般的な知識が豊富に存在する。非網羅的リストには、プラズマ支援化学蒸着によって沈着したポリエチレンオキシド／グリコール様及び他のコーティングが含まれる、例えば、Ｅｒｉｋａ  Ｅ．Ｊｏｈｎｓｔｏｎ  Ｅ．Ｅ．，Ｂｒｙｅｒｓ  Ｊ．Ｄ．，Ｒａｔｎｅｒ  Ｂ．Ｄ．Ｌａｎｇｍｕｉｒ  ２００５，２１，８７０−８８１；Ｓａｒｄｅｌｌａ  Ｅ．，Ｇｒｉｓｔｉｎａ  Ｒ．，Ｓｅｎｅｓｉ  Ｇ．Ｓ．，ｄ’Ａｇｏｓｔｉｎｏ  Ｒ．，Ｆａｖｉａ  Ｐ．Ｐｌａｓｍａ  Ｐｒｏｃｅｓｓ．Ｐｏｌｙｍ．２００４，１，６３−７２；Ｓｈｅｎ  Ｍ．，Ｍａｒｔｉｎｓｏｎ  Ｌ．，Ｗａｇｎｅｒ  Ｍ．Ｓ．，Ｃａｓｔｎｅｒ  Ｄ．Ｇ．，Ｒａｔｎｅｒ  Ｂ．Ｄ．，Ｈｏｒｂｅｔｔ  Ｔ．Ａ．Ｊ．Ｂｉｏｍａｔｅｒ．Ｓｃｉ．Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｅｄｎ．２００２，１３，３６７−３９０；Ｓｈｅｎ  Ｍ．，Ｐａｎ  Ｙ．Ｖ．，Ｗａｇｎｅｒ  Ｍ．Ｓ．，Ｈａｕｃｈ  Ｋ．Ｄ．，Ｃａｓｔｎｅｒ  Ｄ．Ｇ．，Ｒａｔｎｅｒ  Ｂ．Ｄ．，Ｈｏｒｂｅｔｔ  Ｔ．Ａ．Ｊ．Ｂｉｏｍａｔｅｒ．Ｓｃｉ．Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｅｄｎ．２００１，１２，９６１−９７８；米国特許第５，１５３，０７２号；Ｌｏｐｅｚ  Ｇ．Ｐ．，Ｒａｔｎｅｒ  Ｂ．Ｄ．Ｊ．Ｐｏｌｙｍ．Ｓｃｉ．Ａ−Ｐｏｌｙｍ．Ｃｈｅｍ．１９９２，３０，２４１５−２４２５；及び米国特許第５，００２，７９４号を参照されたい。沈着する（誘導体化された）アルカンチオールコーティングについては、例えば、Ｌｉ  Ｌ．Ｙ．，Ｃｈｅｎ  Ｓ．Ｆ．，Ｒａｔｎｅｒ  Ｂ．Ｄ．，Ｊｉａｎｇ  Ｓ．Ｙ．Ｊ．Ｐｈｙｓ．Ｃｈｅｍ．Ｂ  ２００５，１０４，２９３４−２９４１；Ｃｈｉｒａｋｕｌ  Ｐ．，Ｐｅｒｅｚ−Ｌｕｎａ  Ｖ．Ｈ．，Ｏｗｅｎ  Ｈ．，Ｌｏｐｅｚ  Ｇ．Ｐ．Ｌａｎｇｍｕｉｒ  ２００２，１８，４３２４−４３３０；Ｐｒｉｍｅ  Ｋ．Ｌ．，Ｗｈｉｔｅｓｉｄｅｓ  Ｇ．Ｍ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９３，１１５，１０７１４−１０７２１；Ｐａｌｅ−Ｇｒｏｓｄｅｍａｎｇｅ  Ｃ．，Ｓｉｍｏｎ  Ｆ．Ｓ．，Ｐｒｉｍｅ  Ｋ．Ｌ．，Ｗｈｉｔｅｓｉｄｅｓ  Ｇ．Ｍ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９９１，１１３，１２−２０を参照されたい。オルガノシランコーティングについては、例えば、Ｓｅｉｇｅｒｓ  Ｃ．，Ｂｉｅｓａｌｓｋｉ  Ｍ．，Ｈａａｇ  Ｒ．Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．２００４，１０，２８３１−２８３８；米国特許出願公開第２００３／００９２８７９号Ｙａｎｇ  Ｚ．，Ｇａｌｌｏｗａｙ  Ｊ．Ａ．，Ｙｕ  Ｈ．Ｌａｎｇｍｕｉｒ  １９９９，１５，８４０５−８４１１；Ｌｅｅ  Ｓ．Ｗ．，Ｌａｉｂｉｎｉｓ  Ｐ．Ｅ．Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  １９９８，１９，１６６０−１６７５；及び米国特許第６，２３５，３４０号を参照されたい。ヒドロゲルコーティングについては、例えば、米国特許第６，８４４，０２８号を参照されたい。ポリ−Ｌ−リジン／ポリエチレングリコールコーティングについては、例えば、米国特許出願公開第２００２／０１２８２３４号、Ｈｕａｎｇ  Ｎ．Ｐ．，Ｍｉｃｈｅｌ  Ｒ．，Ｖｏｒｏｓ  Ｊ．，Ｔｅｘｔｏｒ  Ｍ．，Ｈｏｆｅｒ  Ｒ．，Ｒｏｓｓｉ  Ａ．，Ｅｌｂｅｒｔ  Ｄ．Ｌ．，Ｈｕｂｂｅｌｌ  Ｊ．Ａ．，Ｓｐｅｎｃｅｒ  Ｎ．Ｄ．Ｌａｎｇｍｕｉｒ  ２���０１，１７，４８９−４９８；Ｋｅｎａｕｓｉｓ  Ｇ．Ｌ．Ｖｏｒｏｓ  Ｊ．，Ｅｌｂｅｒｔ  Ｄ．Ｌ．，Ｈｕａｎｇ  Ｎ．，Ｈｏｆｅｒ  Ｒ．，Ｒｕｉｚ−Ｔａｙｌｏｒ  Ｌ．，Ｔｅｘｔｏｒ  Ｍ．，Ｈｕｂｂｅｌｌ  Ｊ．Ａ．，Ｓｐｅｎｃｅｒ  Ｎ．Ｄ．Ｊ．Ｐｈｙｓ．Ｃｈｅｍ．Ｂ  ２０００，１０４，３２９８−３３０９を参照されたい。ポリエチレンオキシドグラフトコーティングについては、例えば、Ｓｏｆｉａ  Ｓ．Ｊ．，Ｐｒｅｍｎａｔｈ．Ｖ．，Ｍｅｒｒｉｌｌ  Ｅ．Ｗ．Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  １９９８，３１，５０５９−５０７０を参照されたい。これらの例は、多数の利用可能な表面処理及び／又はコーティングの可能性を表すが、網羅的に収集したものではない。
【００４０】
現在、上記の好ましいタンパク質吸着阻止特性の全てを含む市販の医薬品パッケージ（コーティングされた又はコーティングされていない）存在しないが、いくつかの望ましい特性を有する一方で、タンパク質吸着を阻止するのではなく、むしろ促進するいくつかの特性を依然として有する傾向がある。ガラス（ホウケイ酸塩、ソーダ石灰など）は親水性及び水素結合受容性であるが、高度にイオン性であり、タンパク質結合を阻止する立体障害を有さない。表面上の液体製剤条件（ｐＨ５〜９）下における高密度の負電荷は、タンパク質（すなわち、リジン、ヒスチジン、及びアミノ末端）における正に帯電した残基のイオン性結合を促進する。表面を不動態化し、注射器内の潤滑性を提供するためのガラスのシリコーン処理は、立体的にブロックされた比較的非イオン性の表面をもたらすが、シリコーンオイルが、その水素結合受容能を低下させると同時に表面を非常に疎水性にする。シリコーンオイル処理はまた、表面を離れ、溶液に入るシリコーン液滴として、注射器内に望ましくない粒子状物質を生成させる場合がある。疎水性表面は、水を排除し、タンパク質の吸着を容易化する傾向がある。タンパク質が遭遇する環境の疎水性はまた、タンパク質の疎水性コアが表面と相互作用し、その天然構造を展開して最小自由エネルギー構造を得ようとするので、タンパク質の変性を引き起こし得る。医学的に関連する粒子／凝集体を含有する溶液／懸濁液のための非粘着性を有する疎水性コーティングは、プラズマ化学気相成長法によって既に調製されている。例えば、米国特許第６，５９９，５９４号を参照されたい。
【００４１】
したがって、本発明の新規製剤は、組成物の研究、加工、開発、製剤化、製造、保管、及び／又は投与の様々な段階全体をとおして、容器手段に含まれた低用量抗体製剤を安定化し、吸着を阻害する点で特に有利である。本発明の新規製剤は、物理的／熱ストレス（例えば、温度、湿度、剪断力など）に対して抗体組成物を安定化するだけでなく、抗体組成物と容器／クロージャシステム（例えば、シリコーン処理された容器手段）との適合性などの負の要因又は影響に対する、抗体組成物の安定性を高め、吸着を阻害する。
【００４２】
したがって、本発明の新規製剤は、抗体組成物の安定化に特に有用である。
【００４３】
賦形剤及びｐＨ
本発明における抗体組成物の製剤は、１つ以上の賦形剤を含む。本明細書で使用するとき、用語「賦形剤」は、所望の稠度、粘度、又は安定化効果を提供するために製剤に添加される任意の非治療薬を意味する。
【００４４】
特定の実施形態では、本発明の医薬製剤は、約５〜約７．４の範囲のｐＨを維持するのに好適な緩衝剤を含む。本発明の製剤に使用するのに好適な例示的な緩衝剤としては、例えば、ヒスチジン又は酢酸塩緩衝剤が挙げられる。一実施形態では、ヒスチジン緩衝剤は、１０ｍＭの濃度で調製される。
【００４５】
本発明の製剤内に含有されるヒスチジンの量は、約１ｍＭ〜約５０ｍＭ、約２ｍＭ〜約２０ｍＭ、約３ｍＭ〜約１２ｍＭ、又は約１０ｍＭで変動し得る。
【００４６】
本発明の医薬製剤はまた、１種以上の炭水化物、例えば１種以上の糖を含んでいてもよい。糖は、還元糖又は非還元糖であってよい。「還元糖」は、例えば、ケトン又はアルデヒド基を有する糖を含み、反応性ヘミアセタール基を含有し、これによって、当該糖が還元剤として作用することが可能になる。
【００４７】
還元糖の具体例としては、フルクトース、グルコース、グリセルアルデヒド、ラクトース、アラビノース、マンノース、キシロース、リボース、ラムノース、ガラクトース及びマルトースが挙げられる。非還元糖は、アセタールであり、メイラード反応を開始するためにアミノ酸又はポリペプチドとは実質的に反応しない、アノマー炭素を含み得る。非還元糖の具体例としては、スクロース、トレハロース、ソルボース、スクラロース、ソルビトール、マンニトール、メレジトース、及びラフィノースが挙げられる。糖酸としては、例えば、サッカリン酸、グルコン酸、及び他のポリヒドロキシ糖、並びにこれらの塩が挙げられる。
【００４８】
本発明の製剤内に含有される糖の量は、製剤が使用される特定の状況及び意図する目的に応じて変化するであろう。特定の実施形態では、製剤は、約０．１％〜約２０％の糖、約０．５％〜約２０％の糖、約１％〜約２０％の糖、約２％〜約１５％の糖、約３％〜約１０％の糖、約４％〜約１０％の糖、又は約５％〜約１０％の糖を含有し得る。例えば、本発明の医薬製剤は、約０．５％、約１．０％、約１．５％、約２．０％、約２．５％、約３．０％、約３．５％、約４．０％、約４．５％、約５．０％、約５．５％、約６．０％、６．５％、約７．０％、約７．５％、約８．０％、約８．５％、約９．０％、約９．５％、約１０．０％、約１０．５％、約１１．０％、約１１．５％、約１２．０％、約１２．５％、約１３．０％、約１３．５％、約１４．０％、約１４．５％、約１５．０％、約１５．５％、約１６．０％、１６．５％、約１７．０％、約１７．５％、約１８．０％、約１８．５％、約１９．０％、約１９．５％、又は約２０．０％の糖｛例えば、スクロース）を含み得る。
【００４９】
本発明は以下の非限定的な実施形態も提供する。
【００５０】
実施形態
１．抗体組成物を安定化する製剤であって、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝液と、（ｉｉ）ポリソルベートと、（ｉｉｉ）約７０μｇ未満の用量の１つ以上の抗体とを含み、コーティングを有する容器手段に収容された製剤。
２．緩衝剤が、ヒスチジン、リン酸塩、又は酢酸塩である、実施形態１に記載の製剤。
３．当該ポリソルベートが、ポリソルベート２０又はポリソルベート８０であり、当該製剤中の当該ポリソルベートの最終濃度が、当該製剤の体積あたり少なくとも０．００１％〜０．２％のポリソルベート重量である、実施形態１に記載の製剤。
４．当該容器手段が、バイアル瓶、バイアル瓶栓、バイアル瓶クロージャ、ガラスクロージャ、ゴムクロージャ、プラスチッククロージャ、注射器、注射器栓、注射器プランジャ、フラスコ、ビーカー、メスシリンダー、発酵槽、バイオリアクター、チューブ、パイプ、バッグ、ジャー、アンプル、カートリッジ、及び使い捨て注射器ペンからなる群のうちの１種以上から選択される、実施形態１に記載の製剤。
５．当該容器手段が、二酸化ケイ素コーティング又は疎水性コーティングを有する、実施形態１に記載の製剤。
６．当該ｐＨ緩衝液が、糖又は糖アルコールを更に含む、実施形態１に記載の製剤。
７．当該ｐＨ緩衝液が、Ｌ−メチオニン又はエチレンジアミン四酢酸を更に含む、実施形態１に記載の製剤。
８．抗ＣＤ３二重特異性抗体組成物を安定化する製剤であって、（ｉ）約５〜約７．４のｐＨを有するｐＨ緩衝液と、（ｉｉ）ポリソルベートと、（ｉｉｉ）約７０μｇ未満の用量の抗ＣＤ３二重特異性抗体とを含み、コーティングを有する容器手段に収容された製剤。
９．緩衝剤が、ヒスチジン、リン酸塩、又は酢酸塩である、実施形態８に記載の製剤。
１０．緩衝剤が、ヒスチジン、リン酸塩、又は酢酸塩である、実施形態８に記載の製剤。
１１．当該ポリソルベートが、ポリソルベート２０又はポリソルベート８０であり、当該製剤中の当該ポリソルベートの最終濃度が、当該製剤の体積あたり少なくとも０．００１％〜０．２％のポリソルベート重量である、実施形態８に記載の製剤。
１２．当該容器手段が、バイアル瓶、バイアル瓶栓、バイアル瓶クロージャ、ガラスクロージャ、ゴムクロージャ、プラスチッククロージャ、注射器、注射器栓、注射器プランジャ、フラスコ、ビーカー、メスシリンダー、発酵槽、バイオリアクター、チューブ、パイプ、バッグ、ジャー、アンプル、カートリッジ、及び使い捨て注射器ペンからなる群のうちの１種以上から選択される、実施形態８に記載の製剤。
１３．当該容器手段が、二酸化ケイ素コーティング又は疎水性コーティングを有する、実施形態８に記載の製剤。
１４．当該ｐＨ緩衝液が、糖又は糖アルコールを更に含む、実施形態８に記載の製剤。
１５．当該ｐＨ緩衝液が、Ｌ−メチオニン又はエチレンジアミン四酢酸を更に含む、実施形態８に記載の製剤。
【実施例】
【００５１】
下記実施例は、先の開示を補い、本明細書に記載された主題のより良好な理解を提供するために提供される。これらの実施例は、記載された主題を限定すると解釈されるべきでない。本明細書に記載された実施例及び実施形態は例示のみを目的とするものであり、それらを考慮した種々の改変又は変更は、当業者に明らかであり、また、本発明の真の範囲内に含まれ、かつ本発明の真の範囲から逸脱することなくなされ得ることが理解される。
【００５２】
実施例１：非コーティングガラスバイアル瓶における様々な濃度の抗体の吸着損失
ＣＤ１９及びＣＤ３を標的とするＤＡＲＴであるドゥボルツキシズマブを、様々なタンパク質濃度で、非コーティングＴｙｐｅ  １ガラス２Ｒバイアル瓶に充填し、いくつかの用量レベル：３μｇ、７μｇ、３０μｇ、７０μｇ、及び７００μｇでの吸着損失の程度を評価した。製剤は、ｐＨ５．２で、１０ｍＭ酢酸塩、０．０１％（ｗ／ｖ）ポリソルベート８０、９０ｍｇ／ｍＬスクロース、０．４ｍｇ／ｍＬ  Ｌ−メチオニン、及び５０μＭ  ＥＤＴＡ二ナトリウムを含有していた。バイアル瓶を２５０ｒｐｍに設定した軌道振盪器内に３〜４日間入れておいた。溶液をバイアル瓶から取り出し、プロテインＡ  ＨＰＬＣ測定又は内部蛍光のいずれかに基づいて、タンパク質濃度を対照サンプルと比較した。表１は、より高いタンパク質濃度と比較して、低タンパク質濃度ではドゥボルツキシズマブの回収率がはるかに低いことを示す。
【００５３】
【表１】
2020535181.tif 000002
【００５４】
実施例２：吸着に対する非イオン性界面活性剤、抗体、及び容器の種類の影響
抗トロンビンＩｇＧ４抗体であるイコルキュマブを、３つの異なるｐＨ値で、０．０２％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０を含む又は含まない製剤緩衝剤で、０．０１ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度に希釈した。製剤は、ｐＨ５．０、６．０、及び７．０で、１０ｍＭヒスチジン及び８．５％（ｗ／ｖ）スクロースを含有していた。希釈したタンパク質溶液を、２Ｒの非コーティングＴｙｐｅ  １ガラスバイアル瓶（Ｓｃｈｏｔｔ  Ｆｉｏｌａｘ）、２ＲのＳｃｈｏｔｔ  Ｔｙｐｅ  １  Ｐｌｕｓコーティングバイアル瓶、２ＲのＳｃｈｏｔｔ  ＴｏｐＬｙｏコーティングバイアル瓶、又は０．５ｍＬのＤａｉｋｙｏ  Ｃｒｙｓｔａｌ  Ｚｅｎｉｔｈバイアル瓶に、０．３ｍＬの充填体積（３０μｇイコルキュマブ）になるまで充填した。表１は、各バイアル瓶の材料を記載する。各バイアル瓶を、２５０ｒｐｍに設定した軌道振盪器に３日間入れておいた。溶液をバイアル瓶から取り出し、内部蛍光に基づいて、タンパク質濃度を対照サンプルと比較した。
【００５５】
製剤中にポリソルベート２０を含まない場合、タンパク質は、ｐＨにかかわらず、４種類のバイアル瓶の全てに吸着された（表３）。０．０２％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０を添加した場合、タンパク質はｐＨ依存的にＴｙｐｅ  １ガラスに吸着され、ｐＨ５．０及び６．０でより多くの吸着が生じ、ｐＨ７．０ではより吸着が少なかった。このタンパク質の等電点は、約６．２である。０．０２％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０の存在下では、Ｔｙｐｅ  １  Ｐｌｕｓ、ＴｏｐＬｙｏ、又はＣｒｙｓｔａｌ  Ｚｅｎｉｔｈのバイアル瓶におけるタンパク質の吸着損失は最小限であった。
【００５６】
【表２】
2020535181.tif 000003
【００５７】
【表３】
2020535181.tif 000004
【００５８】
別の実験では、様々なレベルのポリソルベート８０を含有する製剤緩衝剤中０．１ｍｇ／ｍＬの濃度で、ドゥボルツキシズマブを評価した。製剤は、ｐＨ５．２で、１０ｍＭ酢酸塩、９％スクロース、０．４ｍｇ／ｍＬ  Ｌ−メチオニン、５０μＭ  ＥＤＴＡ二ナトリウム、及び０，０．０１％（ｗ／ｖ）及び０．１％（ｗ／ｖ）ポリソルベート８０を含有していた。希釈したタンパク質溶液を、２Ｒの非コーティングＴｙｐｅ  １ガラスバイアル瓶（Ｓｃｈｏｔｔ  Ｆｉｏｌａｘ）、２ＲのＳｃｈｏｔｔ  Ｔｙｐｅ  １  Ｐｌｕｓコーティングバイアル瓶、又は２ＲのＳｃｈｏｔｔ  ＴｏｐＬｙｏコーティングバイアル瓶に、０．３ｍＬの充填体積（３０μｇドゥボルツキシズマブ）になるまで充填した。バイアル瓶を２５０ｒｐｍに設定した軌道振盪器内に３日間入れておいた。溶液をバイアル瓶から取り出し、プロテインＡ  ＨＰＬＣ測定に基づいて、タンパク質濃度を対照サンプルと比較した。
【００５９】
製剤中にポリソルベート８０を含まない場合、３種類のバイアル瓶の全てに吸着された（表４）。０．０１％（ｗ／ｖ）ポリソルベート８０を添加した場合、タンパク質はＴｙｐｅ  １ガラスには吸着されたが、Ｔｙｐｅ  １  Ｐｌｕｓ及びＴｏｐＬｙｏのバイアル瓶では最小限の吸着損失しか生じなかった。このタンパク質の等電点は、約８．７である。
【００６０】
【表４】
2020535181.tif 000005
【００６１】
別の実験では、異なる製剤において、いくつかの異なる抗体を０．０１ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度に希釈した。約８．４の等電点を有する抗ＣＤ３８  ＩｇＧ１抗体である  ダラツムマブは、ｐＨ５．６で、１０ｍＭヒスチジン、３００ｍＭソルビトール、０．０４％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０、１ｍｇ／ｍＬ  Ｌ−メチオニンを用いて製剤化した。約９の等電点を有する抗ＩＬ１２／ＩＬ２３  ＩｇＧ１抗体であるウステキヌマブは、ｐＨ６で、５．５ｍＭヒスチジン、０．００４％（ｗ／ｖ）ポリソルベート８０、７．６％（ｗ／ｖ）スクロースを用いて製剤化した。約８の等電点を有する抗ＩＬ６  ＩｇＧ１抗体であるシルクマブは、ｐＨ５で、１０ｍＭ酢酸塩、５％（ｗ／ｖ）ソルビトール、０．０４％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０を用いて製剤化した。約７．８の等電点を有する二重特異性抗ＩＬ１Ｒａｐ×ＣＤ３  ＩｇＧ４抗体は、ｐＨ５．２で、１０ｍＭ酢酸塩、８％（ｗ／ｖ）スクロース、０．０４％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０、５０μＭ  ＥＤＴＡ二ナトリウムを用いて製剤化した。希釈したタンパク質溶液を、２Ｒの非コーティングＴｙｐｅ  １ガラスバイアル瓶（Ｓｃｈｏｔｔ  Ｆｉｏｌａｘ）、２ＲのＳｃｈｏｔｔ  Ｔｙｐｅ  １  Ｐｌｕｓコーティングバイアル瓶、又は２ＲのＳｃｈｏｔｔ  ＴｏｐＬｙｏコーティングバイアル瓶に１．５ｍＬの充填体積（１５μｇ全タンパク質）になるまで、そして、０．５ｍＬのＤａｉｋｙｏ  Ｃｒｙｓｔａｌ  Ｚｅｎｉｔｈバイアル瓶に０．３ｍＬの充填体積（３μｇ全タンパク質）になるまで充填した。バイアル瓶を２５０ｒｐｍに設定した軌道振盪器内に４時間入れておいた。溶液をバイアル瓶から取り出し、内部蛍光に基づいて、タンパク質濃度を対照サンプルと比較した。
【００６２】
４つの製剤全てにおいて、ｐＨは、タンパク質の等電点未満であった。４つのタンパク質はそれぞれＴｙｐｅ  １ガラスには吸着されたが、Ｔｙｐｅ  １  Ｐｌｕｓ、ＴｏｐＬｙｏ、又はＣｒｙｓｔａｌ  Ｚｅｎｉｔｈバイアル瓶では最小限の吸着損失しか示さなかった（表５）。
【００６３】
【表５】
2020535181.tif 000006
【００６４】
実施例３：ｐＨの関数としての吸着抗体
抗ＮＫＧ２Ｄ  ＩｇＧ４抗体を、３つの異なる製剤緩衝剤で０．０１ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度に希釈した（表６）。製剤緩衝液Ａは、ｐＨ５．０で、１０ｍＭ酢酸塩、０．０４％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０、５％（ｗ／ｖ）ソルビトールを含有していた。製剤緩衝液Ｂは、ｐＨ６．０で、１０ｍＭヒスチジン、０．０４％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０、８．５％（ｗ／ｖ）スクロースを含有していた。製剤緩衝液Ｃは、ｐＨ７．４で、１０ｍＭリン酸塩、０．０４％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０、５％（ｗ／ｖ）ソルビトールを含有していた。希釈したタンパク質溶液を、２Ｒの非コーティングＴｙｐｅ  １ガラスバイアル瓶（Ｓｃｈｏｔｔ  Ｆｉｏｌａｘ）、２ＲのＳｃｈｏｔｔ  Ｔｙｐｅ  １  Ｐｌｕｓコーティングバイアル瓶、又は２ＲのＳｃｈｏｔｔ  ＴｏｐＬｙｏコーティングバイアル瓶に１．５ｍＬの充填体積（１５μｇ全抗ＮＫＧ２Ｄ）になるまで、そして、０．５ｍＬのＤａｉｋｙｏ  Ｃｒｙｓｔａｌ  Ｚｅｎｉｔｈバイアル瓶に０．３ｍＬの充填体積（３μｇ全ＮＫＧ２Ｄ）になるまで充填した。バイアル瓶を２５０ｒｐｍに設定した軌道振盪器内に４時間入れておいた。溶液をバイアル瓶から取り出し、内部蛍光に基づいて、タンパク質濃度を対照サンプルと比較した。
【００６５】
このタンパク質の等電点は約６．８であるので、緩衝剤Ａ及びＢは、タンパク質の等電点を下回るが、緩衝液Ｃは上回る。タンパク質はｐＨ依存的にＴｙｐｅ  １ガラスに吸着され、低ｐＨでより多くの吸着が生じ、ｐＨ７．４では最小限の吸着しか生じなかった。３つの製剤全てにおいて、Ｔｙｐｅ  １  Ｐｌｕｓ、ＴｏｐＬｙｏ、又はＣｒｙｓｔａｌ  Ｚｅｎｉｔｈのバイアル瓶におけるタンパク質の吸着損失は最小限であった。
【００６６】
【表６】
2020535181.tif 000007
【００６７】
実施例４：５ヶ月間後のＴｙｐｅ  １  Ｐｌｕｓバイアル瓶に保管した抗体製剤の安定性の検査
ドゥボルツキシズマブを、ｐＨ５．２で、１０ｍＭ酢酸塩、０．０１％ポリソルベート８０、９％スクロース、０．４ｍｇ／ｍＬ  Ｌ−メチオニン、及び５０μＭ  ＥＤＴＡ二ナトリウムを含有する製剤緩衝剤で、０．１ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度に希釈した。希釈したタンパク質溶液を、２ＲのＳｃｈｏｔｔ  Ｔｙｐｅ  １  Ｐｌｕｓバイアル瓶に０．３ｍＬの充填体積（３０μｇドゥボルツキシズマブ）になるまで充填した。タンパク質を５℃で５ヶ月間保管した。以下の属性を試験した：プロテインＡ  ＨＰＬＣによるタンパク質濃度、抗原結合アッセイによる相対力価、ＳＥ−ＨＰＬＣによるモノマー％、ＣＥ−ＳＤＳによる純度、及びＩＥ−ＨＰＬＣによる電荷変異型（charge variants）（表７）。
【００６８】
【表７】
2020535181.tif 000008
【００６９】
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