(57)【要約】本発明は、マルチＦｃ治療薬による治療に対して不適切な応答を示す炎症性または自己免疫疾患を有する患者の同定方法と、不活性化Ｃ３ｂ（ｉＣ３ｂ）および／またはマルチＦｃ治療薬に対する類似の応答に基づいてｉＣ３ｂの代替物として使用することができる追加の補体成分の、前記患者の循環レベルに基づいて、前記患者に対するマルチＦｃ治療薬の最適用量を決定する方法とを提供する。本発明はさらに、自己免疫疾患および炎症性疾患の治療におけるそのようなマルチＦｃ治療薬の使用における改善を提供する。【選択図】図６Ｂ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
マルチＦｃ治療薬に対して不適切な応答を有すると決定された患者における炎症性疾患または自己免疫疾患を治療する方法であって、前記マルチＦｃ治療薬の第１の投与期間中の開始用量の少なくとも約１０５％の用量で前記マルチＦｃ治療薬の第１の累積漸増用量を投与することを含み、前記患者が、
（ａ）前記マルチＦｃ治療薬の前記開始用量の投与後の所定の閾値よりも低いｉＣ３ｂの血中レベル、または
（ｂ）ベースラインから約１０％未満の変化パーセントであるｉＣ３ｂの血中レベルを有すると決定されている、方法。
【請求項２】
前記第１の累積漸増用量の前記マルチＦｃ治療薬の投与後に前記患者の前記血中ｉＣ３ｂレベルを決定することと、前記患者が
（ａ）前記マルチＦｃ治療薬の前記開始用量の投与後の所定の閾値よりも低いｉＣ３ｂの血中レベル、または
（ｂ）ベースラインから約１０％未満の変化パーセントであるｉＣ３ｂの血中レベルを有すると決定された場合に、
前記第１の累積漸増用量よりも多い、前記マルチＦｃ治療薬の第２の累積漸増用量を第２の投与期間にわたって投与することと、をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記血中ｉＣ３ｂのレベルの決定が、前記所定のｉＣ３ｂ閾値が満たされるまで、またはｉＣ３ｂのレベルが約１０％を超えて変化するまで、前記マルチＦｃ治療薬の累積漸増用量を継続しながら繰り返される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
マルチＦｃ治療薬の有効用量を決定するための方法であって、
（ａ）前記マルチＦｃ治療薬を、それを必要とする対象に前記マルチＦｃ治療薬の開始用量で投与することと、
（ｂ）前記対象における循環ｉＣ３ｂのレベルを測定することと、
（ｃ）前記対象における前記ｉＣ３ｂの循環レベルが所定の閾値を下回るとき、または前記ｉＣ３ｂのレベルが約１０％未満で変化している場合に、前記対象が前記マルチＦｃ治療薬の第１の累積漸増用量を必要とすると決定することと、
（ｄ）前記マルチＦｃ治療薬の第１の累積漸増用量を投与することと、を含む、方法。
【請求項５】
（ｅ）前記マルチＦｃ治療薬の前記第１の累積漸増用量の投与後に、前記患者の血中ｉＣ３ｂレベルの前記決定を繰り返すことと、
（ｆ）前記ｉＣ３ｂのレベルが所定の閾値より低い場合、または前記ｉＣ３ｂのレベルが約１０％未満で変化している場合、以前に投与された累積漸増用量よりも多い前記マルチＦｃ治療薬の第２の累積漸増用量を投与することと、をさらに含む、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記血中ｉＣ３ｂレベルの繰り返しの決定が、前記所定のｉＣ３ｂ閾値が満たされるまで、または前記ｉＣ３ｂのレベルが約１０％を超えて変化するまで、前記マルチＦｃ治療薬の累積投与量を継続しながら繰り返される、請求項４または５に記載の方法。
【請求項７】
累積漸増用量を投与することが、前記投与期間を通して前記マルチＦｃ治療薬の漸増用量を投与することを含む、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
累積漸増用量を投与することが、前記投与期間中に漸増用量および増分用量の両方を投与することを含む、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
前記マルチＦｃ治療薬が、
（ａ）第１のＦｃドメインモノマー、リンカー、および第２のＦｃドメインモノマーを含む第１のポリペプチドと、
（ｂ）第３のＦｃドメインモノマーを含む第２のポリペプチドと、
（ｃ）第４のＦｃドメインモノマーを含む第３のポリペプチドと、を含み、
前記第１のＦｃドメインモノマーと前記第３のＦｃドメインモノマーとが結合して第１のＦｃドメインを形成し、前記第２のＦｃドメインモノマーと前記第４のＦｃドメインモノマーとが結合して第２のＦｃドメインを形成する、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記マルチＦｃ治療薬が、
（ａ）ＩｇＧの少なくとも第１および第２のＦｃフラグメントを含むポリペプチドと、
（ｂ）少なくとも１つのＣＨ２ドメインおよび少なくとも１つのヒンジ領域を含むＩｇＧの前記第１のＦｃフラグメントのうちの少なくとも１つと、を含み、
前記ＩｇＧの第１および第２のＦｃフラグメントは、前記少なくとも１つのヒンジ領域を介して結合して鎖を形成し、前記ポリペプチドは、実質的に同様の複数の鎖をさらに含み、前記実質的に同様の複数の鎖が、実質的に平行な関係で前記複数の鎖のうちの他の少なくとも１つに結合して二量体を形成する、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
複数の平行な鎖が多量体を形成する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記マルチＦｃ治療薬が、２つ以上のＦｃドメインを含むポリペプチドを含み、
各Ｆｃドメインが２つのＦｃドメインモノマーで構成され、
各Ｆｃドメインモノマーは、
（ｉ）ＣＨ１ドメインおよびＣＨ２ドメインと、
（ｉｉ）Ｎ末端ヒンジ領域と、
（ｉｉｉ）Ｃ末端に融合した多量体化ドメインと、で構成され、
前記多量体化ドメインが前記Ｆｃドメインを多量体に構築させる、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
前記多量体化ドメインが、ＩｇＭまたはＩｇＡに由来する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記マルチＦｃ治療薬が、５つまたは６つのＦｃドメインポリペプチドを含み、各Ｆｃドメインポリペプチドは、それぞれ
（ａ）隣接するＦｃドメインポリペプチドのシステイン残基にジスルフィド結合を介して結合したシステイン残基と、
（ｂ）多量体化ドメインと、を含む２つのＦｃドメインモノマーを含み、
前記多量体化ドメインが前記Ｆｃドメインポリペプチドを多量体に構築させる、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
前記多量体化ドメインがＩｇＭまたはＩｇＡに由来する、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記マルチＦｃ治療薬が、静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）、ＩＶＩＧの凝集免疫グロブリン画分、およびＳＩＦ３（商標）からなる群から選択される、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】
前記マルチＦｃ治療薬が、クラスターストラドマー（ｓｔｒａｄｏｍｅｒ）、シリアルストラドマー、または多量体化ストラドマーを含む、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１８】
前記マルチＦｃ治療薬がＧＬ−２０４５を含む、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１９】
前記マルチＦｃ治療薬の前記累積漸増用量が、前記マルチＦｃ治療薬の前記以前に投与された用量の少なくとも約１１０％である、請求項１〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】
前記マルチＦｃ治療薬の前記累積漸増用量が、前記マルチＦｃ治療薬の前記以前に投与された用量の少なくとも約１１５％である、請求項１〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２１】
前記マルチＦｃ治療薬の前記累積漸増用量が、前記マルチＦｃ治療薬の前記以前に投与された用量の少なくとも約１２０％である、請求項１〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２２】
前記マルチＦｃ治療薬の前記累積漸増用量が、前記マルチＦｃ治療薬の前記以前に投与された用量の少なくとも約１２５％である、請求項１〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
前記マルチＦｃ治療薬の前記累積漸増用量が、前記マルチＦｃ治療薬の前記以前に投与された用量の少なくとも約１５０％である、請求項１〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２４】
前記マルチＦｃ治療薬の前記累積漸増用量が、前記マルチＦｃ治療薬の前記以前に投与された用量の少なくとも約１７５％である、請求項１〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２５】
前記マルチＦｃ治療薬の前記累積漸増用量が、前記マルチＦｃ治療薬の前記以前に投与された用量の少なくとも約２００％、またはそれ以上である、請求項１〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】
前記ｉＣ３ｂの所定の閾値が、約２５μｇ／ｍＬ〜約３００μｇ／ｍＬである、請求項１〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
前記ｉＣ３ｂの所定の閾値が、約５０μｇ／ｍＬ〜約２００μｇ／ｍＬである、請求項１〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】
前記ｉＣ３ｂの所定の閾値が、約７５μｇ／ｍＬ〜約１２５μｇ／ｍＬである、請求項１〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
前記ｉＣ３ｂの所定の閾値が、約１００μｇ／ｍＬである、請求項１〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】
前記ｉＣ３ｂの所定の閾値が、ｉＣ３ｂ＋である好中球および単球の約２５％である、請求項１〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項３１】
前記ｉＣ３ｂの所定の閾値が、ベースラインｉＣ３ｂ  ＭＦＩの約１２５％のｉＣ３ｂ平均蛍光強度（ＭＦＩ）である、請求項１〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項３２】
前記パーセント変化が約２０％未満である、請求項１〜２５のいずれかに記載の方法
【請求項３３】
前記パーセント変化が約３０％未満である、請求項１〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項３４】
前記パーセント変化が約４０％未満である、請求項１〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項３５】
前記パーセント変化が約５０％未満である、請求項１〜２５のいずれかに記載の方法。
【請求項３６】
前記ｉＣ３ｂレベルが、ｉＣ３ｂの代替マーカーの測定によって決定される、請求項１〜３５のいずれかに記載の方法。
【請求項３７】
前記ｉＣ３ｂの代替マーカーが、ｉＣ３ｂ１、ｉＣ３ｂ２、Ｃ３ａ、Ｃ３ａ  ｄｅｓＡｒｇ、Ｃ４ａ、Ｃ４ａ  ｄｅｓＡｒｇ、Ｃ３ｆ、Ｃ３ｄｇ、Ｃ３ｄ、およびＣ３ｇからなる群から選択される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記ｉＣ３ｂの代替マーカーについての前記所定の閾値が約３０ｎｇ／ｍＬ未満である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３９】
前記ｉＣ３ｂの代替マーカーについての前記所定の閾値が約２０ｎｇ／ｍＬ未満である、請求項３６に記載の方法。
【請求項４０】
前記ｉＣ３ｂの代替マーカーについての前記所定の閾値が約１０ｎｇ／ｍＬ未満である、請求項３６に記載の方法。
【請求項４１】
前記ｉＣ３ｂの代替マーカーについての前記所定の閾値が約５ｎｇ／ｍＬ未満である、請求項３６に記載の方法。
【請求項４２】
前記代替マーカーの前記パーセント変化が約１０％未満である、請求項３６〜４１のいずれかに記載の方法。
【請求項４３】
前記代替マーカーの前記パーセント変化が約２０％未満である、請求項３６〜４１のいずれかに記載の方法。
【請求項４４】
前記代替マーカーの前記パーセント変化が約３０％未満である、請求項３６〜４１のいずれかに記載の方法。
【請求項４５】
前記代替マーカーの前記パーセント変化が約４０％未満である、請求項３６〜４１のいずれかに記載の方法。
【請求項４６】
前記代替マーカーの前記パーセント変化が約５０％未満である、請求項３６〜４１のいずれかに記載の方法。
【請求項４７】
前記自己免疫または炎症性疾患が、自己免疫性血球減少症、特発性血小板減少性紫斑病、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、喘息、川崎病、ギラン・バレー症候群、スティーブンス・ジョンソン症候群、結腸クローン病、糖尿病、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー、重症筋無力症、抗第ＶＩＩＩ因子自己免疫疾患、皮膚筋炎、血管炎、ぶどう膜炎、およびアルツハイマー病からなる群から選択される、請求項１〜４６のいずれかに記載の方法。
【請求項４８】
前記ｉＣ３ｂレベルがイムノアッセイによって決定される、請求項１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項４９】
前記イムノアッセイがＥＬＩＳＡまたはウエスタンブロットを含む、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記ｉＣ３ｂレベルがフローサイトメトリーによって決定される、請求項１〜４９のいずれかに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の参照
本出願は、２０１６年１２月９日に出願された米国仮特許出願第６２／４３２，４０７号の優先権を主張し、その内容はその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
電子的に提出されたテキストファイルの説明
本明細書と共に電子的に提出されたテキストファイルの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる：配列表のコンピュータ可読フォーマットのコピー（ファイル名：ＧＬＩＫ＿０２０＿０１ＷＯ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ、記録日：２０１７年１２月８日、ファイルサイズ１５キロバイト）。
【０００３】
本発明は、一般に免疫学、自己免疫、炎症、および腫瘍免疫学の分野に関する。より具体的には、本発明は、マルチＦｃ治療薬に対する患者の応答を決定するための方法、およびマルチＦｃ治療薬の有効用量を決定するための方法に関する。本発明はさらに、自己免疫疾患および炎症性疾患などの病的状態を治療することに関する。
【背景技術】
【０００４】
ヒト血漿由来の免疫グロブリン産物は、１９５０年代初頭から免疫不全障害の治療に、そして最近では自己免疫疾患および炎症性疾患の治療に使用されてきた。ヒトＩＶＩＧ（ＩＶＩＧ）は、プールされたヒト血漿から製造された滅菌され精製された免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）産物であり、それは典型的には９０％を超える未修飾ＩｇＧを含み、わずかな量および可変量の凝集免疫グロブリン、ＩｇＡまたはＩｇＭを含む（Ｒｕｔｔｅｒ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ａｍ  Ａｃａｄ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ，２００１，Ｊｕｎ；４４（６）：１０１０−１０２４）。ＩＶＩＧは当初、低ＩｇＧレベルの患者における日和見感染を予防するためのＩｇＧ補充療法として使用された（Ｂａｅｒｅｎｗａｌｄｔ、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｒｅｖ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ，６（３），ｐ４２５−４３４，２０１０）。今日、ＩＶＩＧの最も一般的な用途は慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチーの治療にあり、そして一次および二次免疫不全における使用に加えて、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー（ＣＩＤＰ）、多巣性運動ニューロパチー（ＭＭＮ）、ギラン・バレー症候群、および川崎病を含む自己免疫疾患の治療に認可されている。ＩＶＩＧはまた、炎症性ミオパチー（多発性筋炎、皮膚筋炎、および封入体筋炎）、イートン・ランバート症候群、重症筋無力症、および全身硬直症候群を含む他の自己免疫疾患において確立された役割を有する。
【０００５】
微量（１〜５％）のＩｇＧがＩＶＩＧ内の凝集形態として存在し、そしてＩｇＧ二量体はＩＶＩＧの約５〜１５％を構成し得ることが観察されている。前臨床試験および臨床試験は、これらのＩＶＩＧの凝集画分が病理学的免疫複合体によって媒介されるある種の自己免疫疾患の治療に偏って有効であり、ほとんどの活性がこれらのＩＶＩＧ凝集体のＦｃ部分に分離されることを示す。したがって、ＩＶＩＧのごくわずかなパーセントではあるが、ＩＶＩＧの最も有効な割合はマルチＦｃ凝集体である（Ａｕｇｅｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｌｕｔ，５０，１９８５、Ｔｅｅｌｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ，Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ，９６，２００１、Ｂａｚｉｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ，１２７，２００４を参照されたい）。ＩＶＩＧ凝集体と同様に、多価ＦｃをＦｃ受容体に提示し、ひいては低親和性Ｆｃ受容体にさえ強く結合する化合物を用いるＩＶＩＧ療法の代替法が記載されている（米国特許出願公開第２０１０／０２３９６３３号、同第２０１３／０１５６７６５号、同第２０１５／０２１８２３６号、同第２０１６／０２２９９１３号、同第２０１０／０１４３３５３号ならびにＰＣＴ国際出願公開第ＷＯ２０１７／０１９５６５号、同第ＷＯ２０１５／１３２３６４号、および同第ＷＯ２０１５／１３２３６５号を参照されたい）。
【０００６】
米国特許出願公開第２０１３／０１５６７６５号に記載されているＧＬ−２０４５は、ＩＶＩＧの組換え模倣物である多量体化一般的ストラドマー（ｓｔｒａｄｏｍｅｒ）である。ＧＬ−２０４５は、免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｇ１  Ｆｃが結合するリガンドの大部分または全部に結合する。さらに、ＧＬ−２０４５は、すべての標準的受容体および補体Ｃ１ｑに高い親和性および結合力で結合し、そしてＩＶＩＧと比較して１０〜１，０００倍大きいインビトロ効力を有する。そのように、ＧＬ−２０４５はまた、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、慢性炎症性多発ニューロパチー、多病巣性運動ニューロパチー、重症筋無力症、臓器移植、および関節リウマチを含むがこれらに限定されない広範囲の自己免疫疾患の治療において潜在的な臨床的有用性を有する。
【０００７】
ＩＶＩＧは、医師の医療設備で最も広く処方されている薬の１つであるが、製造コストの高さ、ロット間の変動、任意の投与量での変動する有効性、有効性に対する十分な投薬を示すバイオマーカーの欠如、１〜２日の注入時間、高タンパク質負荷、腎毒性可溶化剤の使用、および感染汚染のリスクなど、いくつかの欠点がある。さらに、ＩＶＩＧは一般に３〜６週ごとに０．６〜２ｇ／Ｋｇの範囲の用量にわたって処方されているが、有効性は様々であり、患者の約５０〜７５％が治療に応答する。現在の標準治療では、どの患者が所与のＩＶＩＧ投与量に応答するかどうかを予測することができない。患者が適切な用量のＩＶＩＧをいつ摂取したかを決定するために利用可能なバイオマーカーも現在存在しない。合成マルチＦｃ治療薬（すなわち、ＧＬ−２０４５および他のもの）の使用は、ＩＶＩＧの多くの欠点を克服しながら、有効性および効力の増大を実証している。合成の組換え生産されたマルチＦｃ治療薬の使用はまた、レシピエントにおける異常な炎症反応の可能性、例えば異なるＩＶＩＧブランドおよびロットにおける様々な量のＩｇＡの移動、またはウイルス（ジカなど）またはプリオン感染の潜在的な移動の可能性を実質的に減少させる。しかしながら、マルチＦｃ治療薬の特定の用量に対する特定の患者の応答を予測し、ならびに、臨床的に有効な用量を特定するという課題は残っている。
【０００８】
すべての免疫グロブリン産物と同様に、マルチＦｃ治療薬のための治療プロトコルは、不適切な投与のリスク（すなわち基礎疾患または障害を効果的に治療できないこと）と、マルチＦｃ治療薬の場合、低血圧、発熱、過剰なタンパク質負荷による腎機能障害を含む過剰投与もしくは注入速度のリスク、または過剰かつ不必要なコストとのバランスをとらなければならない。そのため、最大有効治療用量が最小量のマルチＦｃ産物で達成されるように、マルチＦｃ生成物の有効用量の決定を可能にする方法に対する当該技術分野における必要性がある。そのような方法は、有害な副作用のリスクを最小にしながら治療的に有益な効果の最適化を可能にするであろう。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】米国特許出願公開第２０１０／０２３９６３３号明細書
【特許文献２】米国特許出願公開第２０１３／０１５６７６５号明細書
【特許文献３】米国特許出願公開第２０１５／０２１８２３６号明細書
【特許文献４】米国特許出願公開第２０１６／０２２９９１３号明細書
【特許文献５】米国特許出願公開第２０１０／０１４３３５３号明細書
【特許文献６】国際公開第２０１７／０１９５６５号
【特許文献７】国際公開第２０１５／１３２３６４号
【特許文献８】国際公開第２０１５／１３２３６５号
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｒｕｔｔｅｒ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ａｍ  Ａｃａｄ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ，２００１，Ｊｕｎ；４４（６）：１０１０−１０２４
【非特許文献２】Ｂａｅｒｅｎｗａｌｄｔ、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｒｅｖ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ，６（３），ｐ４２５−４３４，２０１０
【非特許文献３】Ａｕｇｅｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｌｕｔ，５０，１９８５、Ｔｅｅｌｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ，Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ，９６，２００１
【非特許文献４】Ｂａｚｉｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ，１２７，２００４
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明の方法は、マルチＦｃ治療薬による治療に対して不適切な応答を示す炎症性または自己免疫疾患を有する患者の同定、およびｉＣ３ｂとして知られている「不活性化Ｃ３ｂ」の患者の循環レベルに基づく前記患者に対するマルチＦｃ治療薬の最適用量の決定を提供する。本発明の方法はまた、ｉＣ３ｂレベルに対するマルチＦｃ治療薬の効果を評価するために、マルチＦｃ治療薬の開始用量の使用を提供する。本発明の方法はまた、マルチＦｃ治療薬に対する類似の応答に基づいて、ｉＣ３ｂの代替物として使用され得る他の補体成分を提供する。これらの方法は、少なくとも部分的には、ｉＣ３ｂのレベルがインビトロのマルチＦｃ治療薬の有効性と相関し、自己免疫疾患および炎症性疾患の治療におけるそのような治療薬の使用における改善をもたらすという予想外の発見に基づく。
【００１２】
いくつかの実施形態では、本発明は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答を有すると決定された患者における自己免疫疾患または炎症性疾患を治療する方法であって、前記マルチＦｃ治療薬の第１の投与期間中の開始用量の少なくとも約１０５％の用量で前記マルチＦｃ治療薬の第１の累積漸増用量を投与することを含み、ここで、前記患者が、マルチＦｃ治療薬の開始用量の投与後の所定の閾値よりも低いｉＣ３ｂの血中レベル、またはベースラインから約１０％未満の変化であるｉＣ３ｂの血中レベルを有すると決定されている、方法を提供する。
【００１３】
いくつかの実施形態では、本発明は、マルチＦｃ治療薬の開始用量を投与することと、患者におけるｉＣ３ｂの血中レベルを決定することと、ｉＣ３ｂの血中レベルが所定の閾値より高い場合、またはベースラインのｉＣ３ｂ測定値から少なくとも１０％増加している場合、マルチＦｃ治療薬の開始用量に対する応答の妥当性を決定することと、を含む、患者における自己免疫疾患または炎症性疾患を治療する方法を提供する。
【００１４】
本発明の方法は、第１の累積漸増用量のマルチＦｃ治療薬の投与後に患者の血中ｉＣ３ｂレベルの決定を繰り返すことと、ｉＣ３ｂのレベルが所定の閾値より低いと決定された場合、またはベースラインから約１０％未満の変化でｉＣ３ｂの血中レベルが決定された場合、以前に投与された用量より多いマルチＦｃ治療薬の第２の累積漸増用量を第２の投与期間にわたって投与することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、繰り返されるｉＣ３ｂの測定およびマルチＦｃ治療薬の追加の累積漸増用量の投与は、所定のｉＣ３ｂ閾値が満たされるまで、またはｉＣ３ｂの血中レベルがベースラインから約１０％を超えて変化するまで継続される。
【００１５】
いくつかの態様では、本発明は、（ａ）マルチＦｃ治療薬を、それを必要とする対象に前記マルチＦｃ治療薬の開始用量で投与することと、（ｂ）対象における循環ｉＣ３ｂのレベルを測定することと、（ｃ）対象におけるｉＣ３ｂの循環レベルが所定の閾値を下回るとき、またはベースラインから約１０％未満の変化であるｉＣ３ｂの血中レベルのとき、対象がマルチＦｃ治療薬の第１の累積増量用量を必要とすると決定することと、（ｄ）マルチＦｃ治療薬の第１の累積漸増用量を投与することと、を含む方法を提供する。さらなる実施形態では、マルチＦｃ治療薬の有効用量を決定するために本明細書で提供する方法は、（ｅ）マルチＦｃ治療薬の第１の累積漸増用量の投与後に患者の血中ｉＣ３ｂレベルの決定を繰り返すことと、（ｆ）ｉＣ３ｂのレベルが所定の閾値を下回る場合、またはベースラインから約１０％未満の変化であるｉＣ３ｂの血中レベルの場合、以前に投与された累積漸増用量よりも多いマルチ治療薬の第２の累積漸増用量を投与することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂの決定および累積漸増用量の投与は、所定のｉＣ３ｂ閾値が満たされるまで、またはｉＣ３ｂの血中レベルがベースラインから約１０％を超えて変化するまで繰り返される。
【００１６】
いくつかの実施形態では、累積漸増用量は、投与期間を通してマルチＦｃ治療薬の漸増用量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、累積漸増用量は、投与期間中に漸増用量および１つ以上の増分用量の両方を投与することを含む。
【００１７】
いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬は、（ａ）第１のＦｃドメインモノマー、リンカー、および第２のＦｃドメインモノマーを含む第１のポリペプチドと、（ｂ）第３のＦｃドメインモノマーを含む第２のポリペプチドと、（ｃ）第４のＦｃドメインモノマーを含む第３のポリペプチドと、を含み、前記第１のＦｃドメインモノマーと前記第３のＦｃドメインモノマーとが結合して第１のＦｃドメインを形成し、前記第２のＦｃドメインモノマーと前記第４のＦｃドメインモノマーとが結合して第２のＦｃドメインを形成する。
【００１８】
いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬は、（ａ）ＩｇＧの少なくとも第１および第２のＦｃフラグメントを含むポリペプチドと、（ｂ）少なくとも１つのＣＨ２ドメインおよび少なくとも１つのヒンジ領域を含むＩｇＧの第１のＦｃフラグメントの少なくとも１つと、を含み、ＩｇＧの第１および第２のＦｃフラグメントは、少なくとも１つのヒンジ領域を介して結合して鎖を形成し、ポリペプチドは、実質的に同様の複数の鎖をさらに含み、前記実質的に同様の複数の鎖が、実質的に平行な関係で前記複数の鎖のうちの他の少なくとも１つに結合して二量体を形成する。さらなる実施形態では、複数の平行鎖は多量体を形成する。
【００１９】
いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬は、２つ以上のＦｃドメインを含むポリペプチドを含み、各Ｆｃドメインは２つのＦｃドメインモノマーで構成され、各Ｆｃドメインモノマーは（ａ）ＣＨ１ドメインおよびＣＨ２ドメインと、（ｂ）Ｎ末端ヒンジ領域と、（ｃ）Ｃ末端に融合した多量体化ドメインと、で構成され、多量体化ドメインはＦｃドメインを多量体に構築させる。さらなる態様において、多量体化ドメインはＩｇＭまたはＩｇＡに由来する。
【００２０】
いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬は、コア部分に結合した少なくとも１つのＦｃドメインをそれぞれ含む２つ以上のポリペプチドを含み、各Ｆｃドメインは、（ａ）ＣＨ１およびＣＨ２ドメインと（ｂ）Ｎ末端ヒンジ領域と、でそれぞれ構成される２つのＦｃドメインモノマーで構成される。いくつかの実施形態では、コア部分はポリスチレンビーズである。いくつかの実施形態では、ＦｃドメインのそれぞれはさらにＩｇＭ  ＣＨ４ドメインを含み、コア部分はＪ鎖を含み、その結果、複数のＦｃγ受容体に結合することができるバイオミメティック（ｂｉｏｍｉｍｅｔｉｃ）が得られる。
【００２１】
いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬は５つまたは６つのＦｃドメインポリペプチドを含み、各Ｆｃドメインポリペプチドは、ジスルフィド結合を介して隣接Ｆｃドメインポリペプチドのシステイン残基に結合したシステイン残基と、多量体化ドメインをそれぞれ含む２つのＦｃドメインモノマーを含み、多量体化ドメインはＦｃドメインポリペプチドを多量体に構築させる。さらなる態様において、多量体化ドメインはＩｇＭまたはＩｇＡに由来する。
【００２２】
いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬は、３、４、５、または６つのＦｃドメインを含む。
【００２３】
いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬は、静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）の凝集免疫グロブリン画分を含む。いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬はＧＬ−２０４５を含む。
【００２４】
いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬の累積漸増用量は、マルチＦｃ治療薬の開始用量の少なくとも約１１０％である。いくつかの実施形態では、累積漸増用量は、マルチＦｃ治療薬の開始用量の少なくとも約１１５％、１２０％、１２５％、１５０％、１７５％または２００％である。
【００２５】
いくつかの実施形態では、それを下回るとマルチＦｃ治療薬の追加用量が投与されるｉＣ３ｂの所定の閾値は、アッセイバックグラウンドより約２５μｇ／ｍＬ〜３００μｇ／ｍＬ高い。さらなる実施形態では、それを下回るとマルチＦｃ治療薬の追加用量が投与されるｉＣ３ｂの所定の閾値は、アッセイバックグラウンドより約５０μｇ／ｍＬ〜２００μｇ／ｍＬ高い。さらなる実施形態では、それを下回るとマルチＦｃ治療薬の追加用量が投与されるｉＣ３ｂの所定の閾値は、アッセイバックグラウンドより約７５μｇ／ｍＬ〜１２５μｇ／ｍＬ高い。なおさらなる実施形態では、それを下回るとマルチＦｃ治療薬の追加用量が投与されるｉＣ３ｂの所定の閾値は、アッセイバックグラウンドより１００μｇ／ｍＬ高い。いくつかの実施形態では、それを下回るとマルチＦｃ治療薬の追加用量が投与されるｉＣ３ｂの所定の閾値は、ｉＣ３ｂ＋である好中球および単球の約２５％である。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂレベルのパーセント変化はベースラインから約２０％未満である。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂレベルのパーセント変化はベースラインから約３０％未満である。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂレベルのパーセント変化はベースラインから約４０％未満である。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂレベルのパーセント変化はベースラインから約５０％未満である。
【００２６】
いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂレベルは、ｉＣ３ｂ１および／またはｉＣ３ｂ２の測定によって決定される。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂのレベルは、ｉＣ３ｂ代替マーカーの測定によって決定される。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂ代替マーカーは、Ｃ３ａ、Ｃ３ａ  ｄｅｓＡｒｇ、Ｃ４ａ、Ｃ４ａ  ｄｅｓＡｒｇ、Ｃ３ｆ、Ｃ３ｃ、Ｃ３ｄｇ、Ｃ３ｄおよびＣ３ｇからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂ代替マーカーの所定の閾値は約３０ｎｇ／ｍＬ未満である。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂ代替マーカーの所定の閾値は約２０ｎｇ／ｍＬ未満である。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂ代替マーカーの所定の閾値は約１０ｎｇ／ｍＬ未満である。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂ代替マーカーの所定の閾値は約５ｎｇ／ｍＬ未満である。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂ代替マーカーのパーセント変化は約１０％未満である。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂ代替マーカーのパーセント変化は約２０％未満である。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂ代替マーカーのパーセント変化は約３０％未満である。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂ代替マーカーのパーセント変化は約４０％未満である。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂ代替マーカーのパーセント変化は約５０％未満である。
【００２７】
さらなる実施形態では、それを下回るとマルチＦｃ治療薬の追加用量が投与されるｉＣ３ｂの所定の閾値は、ベースラインｉＣ３ｂ  ＭＦＩの約１２５％のｉＣ３ｂ  ＭＦＩである。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂレベルはイムノアッセイによって決定される。さらなる態様において、イムノアッセイはＥＬＩＳＡまたはウエスタンブロットである。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂレベルはフローサイトメトリーによって決定される。
【００２８】
いくつかの実施形態では、患者は、患者のベースラインｉＣ３ｂレベルから１０％未満で変化しているｉＣ３ｂの血中レベルを有するとき、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答を有すると決定される。いくつかの実施形態では、患者が、以前の患者のｉＣ３ｂまたはｉＣ３ｂ代替物レベルから１０％未満で変化しているｉＣ３ｂまたはｉＣ３ｂ代替物の血中レベル（例えば、累積漸増用量の投与後に決定されたｉＣ３ｂレベルから１０％未満の変化）を有するとき、患者はマルチＦｃ治療薬に対して不十分な応答を有すると決定される。いくつかの実施形態では、患者の血中レベルは１５％未満で変化している。いくつかの実施形態では、患者の血中レベルは２０％未満で変化している。さらなる実施形態では、患者の血中レベルは、５０％未満、１００％未満、２００％未満、またはそれ以上で変化している。
【００２９】
いくつかの実施形態では、本発明の方法は自己免疫疾患または炎症性疾患の治療に使用される。さらなる実施形態では、自己免疫性または炎症性疾患は、自己免疫性血球減少症、特発性血小板減少性紫斑病、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、喘息、川崎病、ギラン・バレー症候群、スティーブンス・ジョンソン症候群、結腸クローン病、糖尿病、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー、重症筋無力症、抗第ＶＩＩＩ因子自己免疫疾患、皮膚筋炎、血管炎、ぶどう膜炎およびアルツハイマー病からなる群から選択される。
【図面の簡単な説明】
【００３０】
【図１Ａ】ＳＵＤＨＬ４およびＲａｍｏｓ細胞のリツキシマブ誘発性補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）のＧＬ−２０４５、ＨＡＧＧ、およびＩＶＩＧによる阻害を示す。
【図１Ｂ】同上。
【図２】Ｈ因子が十分な血清中のＧＬ−２０４５、ＨＡＧＧ、およびＩＶＩＧによって誘導された補体分割産物の濃度を示す。
【図３】Ｈ因子欠乏血清中のＧＬ−２０４５、ＨＡＧＧ、およびＩＶＩＧによって誘導された補体分割産物の濃度を示す。
【図４】Ｈ因子で再構成されたＨ因子枯渇血清中のＣ３ａおよびＣ５ａの濃度に対するＧＬ−２０４５、ＨＡＧＧおよびＩＶＩＧの効果を示す。
【図５】Ｈ因子の存在下での代替形態のＣ３コンバターゼに対するＧＬ−２０４５の阻害活性を示す。
【図６Ａ】Ｈ因子およびＩ因子の両方の存在下での代替Ｃ３コンバターゼ活性に対するＧＬ−２０４５の効果（図６Ａ）、およびｉＣ３ｂの産生に対するマルチＦｃ治療薬の効果（図６Ｂ、６Ｃ）を示す。
【図６Ｂ】同上。
【図６Ｃ】同上。
【図７】腎炎のＴｈｙ−１モデルにおけるタンパク尿に対するＧ９９８の効果を示す。
【図８】ｉＣ３ｂ試験およびマルチＦｃ治療薬の投与についての可能性のある実施形態を示す。
【図９】マルチＦｃ治療薬の試験および投与で使用することができるｉＣ３ｂとｉＣ３ｂの様々な代替マーカーとの間のモルベースでの関係を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
不活性化Ｃ３ｂ（ｉＣ３ｂ）の血中レベルに基づいてマルチＦｃ治療薬で治療された患者における不適切な免疫応答を第一に決定することを含む自己免疫疾患および炎症性疾患の治療方法が本明細書に提供される。第二に、その後および漸増用量のマルチＦｃ治療薬を投与し、ｉＣ３ｂまたはｉＣ３ｂ代替物の血中レベルを測定して、所定の時点における所定の患者におけるマルチＦｃ治療薬の治療有効用量を決定する。これらの方法は、ｉＣ３ｂレベルがＧＬ−２０４５、Ｇ９９４、およびＧ９９８の有効性と相関しているという予想外の発見に基づいている。本明細書に提供される方法は、自己免疫疾患、炎症性疾患、アレルギー、抗体媒介性疾患、および補体媒介性疾患を治療するために有用性を有する。
【００３２】
本明細書で使用される場合、請求項および／または明細書中の用語「含む」と共に使用されるときの「ａ」または「ａｎ」という単語の使用は、「１つ」を意味し得るが、それはまた「１つ以上」、「少なくとも１つ」、および「１つまたは複数」の意味とも一致する。本明細書に引用されたすべての参考文献は参照によりその全体が組み込まれる。
【００３３】
補体活性化およびｉＣ３ｂ
本発明の方法は、部分的に、補体カスケードの活性化ならびに特異的補体切断および／または分解産物（例えば、ｉＣ３ｂ）の生成を測定して、マルチＦｃ治療薬に対する患者の応答を決定することを含む。本明細書に記載されるいくつかのマルチＦｃ治療薬は、少なくとも、補体成分に多価Ｆｃを提示することが可能である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のマルチＦｃ治療薬は、標準Ｆｃ受容体（例えば、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、またはＦｃγＲＩＩＩ）および補体成分の両方に多価Ｆｃを提示することができ、本明細書に記載のマルチＦｃ治療薬のいくつかは多価Ｆｃを主に補体成分に提示できるが、低親和性Ｆｃ受容体には提示しない。本明細書で使用される場合、用語「補体」は、補体系または補体カスケードとして文献中に言及されることがある補体カスケードの任意のタンパク質を指す。本明細書で使用される場合、用語「補体結合」または「補体への結合」は、補体カスケードの任意の成分の結合を指す。補体カスケードの成分は当技術分野において既知であり、例えば、Ｊａｎｅｗａｙ’ｓ  Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ，８ｔｈ  Ｅｄ．，Ｍｕｒｐｈｙ  ｅｄ．，Ｇａｒｌａｎｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，２０１２に記載されている。現在知られている３つの主な補体経路があり、古典的経路、第２経路、およびレクチン結合経路である。古典的補体経路は、タンパク質Ｃ１ｑが１分子以上のインタクトおよび結合免疫グロブリンＩｇＭ、あるいは少なくとも２分子のインタクトおよび結合免疫グロブリンＩｇＧ１、ＩｇＧ２、もしくはＩｇＧ３に結合した後に活性化され、その後Ｃ１ｑＣ１ｒＣ１ｓが形成されＣ４を切断させる。補体活性化は補体依存性細胞溶解（ＣＤＣ）につながる。過剰な補体活性化は有害となる可能性があり、重症筋無力症、溶血性尿毒症症候群（ＨＵＳ）、および発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）を含む多くの疾患と関連している。
【００３４】
補体活性化の異なる経路は、古典的Ｃ３コンバターゼ（Ｃ４ｂＣ２ａ）または代替的Ｃ３コンバターゼ（Ｃ３ｂＢｂ）の作用を介してのＣ３ｂの生成に収束する。Ｃ３ｂ自体は、代替Ｃ３コンバターゼ、ならびにそれぞれ下流の補体活性化を媒介する古典的および代替Ｃ５コンバターゼの重要な成分である。Ｃ３ｂの半減期は、他のタンパク質への結合によって安定化されない限り、１秒未満であると考えられている。Ｃ３ｂは、Ｃ３ｂ−Ｃ３ｂ−ＩｇＧ共有結合複合体の形成、Ｃ４ｂＣ２ａ複合体への結合による古典的なＣ５コンバターゼ（Ｃ４ｂＣ２ａＣ３ｂ）の生成、Ｂ因子との会合およびＤ因子による切断を介したＣ３コンバターゼ（Ｃ３ｂＢｂ）の生成をもたらす微生物または宿主細胞表面のオプソニン化、ならびに既に形成されているＣ３コンバターゼ（Ｃ３ｂＢｂ）との結合による、代替Ｃ５コンバターゼ（Ｃ３ｂＢｂＣ３ｂ）の形成、を含む多くの方法で安定化できる。
【００３５】
結合していない場合、Ｃ３ｂは「不活性化」Ｃ３ｂまたは「ｉＣ３ｂ」に分解され、部分的にＨ因子およびＩ因子の両方の作用によって促進される。Ａｒｇ１２８１−Ｓｅｒ１２８２間のＣ３ｂの切断はＣ３ｂのｉＣ３ｂ１への不活性化をもたらす。Ａｒｇ１２９８−Ｓｅｒ１２９９間のさらなる切断は、ｉＣ３ｂ１からのＣ３ｆの放出をもたらし、ｉＣ３ｂ２を生成する。本明細書で使用される場合、ｉＣ３ｂは、ｉＣ３ｂ１および／またはｉＣ３ｂ２のいずれかを指し得、そしてｉＣ３ｂの測定は、ｉＣ３ｂ１またはｉＣ３ｂ２のいずれかを検出し得るか、またはｉＣ３ｂ１およびｉＣ３ｂ２の両方を検出し得る。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂはさらにＣ３ｃおよびＣ３ｄｇに分解され得、そしてＣ３ｄｇはさらにＣ３ｄおよびＣ３ｇに分解され得る。用語「ｉＣ３ｂ生成」および「ｉＣ３ｂ産生」は、本明細書では互換的に使用され、ｉＣ３ｂの存在またはそのレベルの変化をもたらす、Ｈ因子およびＩ因子によって増強されるＣ３ｂの不活性化として科学文献が記載するものを指す（例えば、Ｈ因子および／またはＩ因子により増強されたＣ３ｂの不活性化）。その名前にもかかわらず、ｉＣ３ｂは生物学的に不活性ではない。活性Ｃ３ｂとは異なり、ｉＣ３ｂの生成は２つの方法で下流の補体活性化を阻害する。第一に、Ｈ因子およびＩ因子活性によって増強されたＣ３ｂのｉＣ３ｂへの切断は、Ｃ５コンバターゼの形成に利用可能なＣ３ｂの量を制限し、したがって、Ｃ５ａおよび膜侵襲撃複合体（ＭＡＣ）（ｓｃ５ｂ−９または末端補体複合体（ＴＣＣ）とも呼ばれる）などの下流の炎症性補体産物の生成を制限する。第二に、Ｃ３ｂとは異なり、ｉＣ３ｂはＢ因子に結合することができず、それによって代替補体活性化中のさらなるＣ３コンバターゼの形成を制限し、補体活性化ループを妨げる。
【００３６】
いくつかの研究は病理学的補体活性化を示す活性化フラグメントとしてｉＣ３ｂを記載しているが（Ｏｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，米国特許第９，１６４，０８８号を参照されたい）、ｉＣ３ｂは強力な抗炎症性および免疫寛容原性特性を有することが十分に立証されている。例えば、補体受容体３（ＣＲ３）へのｉＣ３ｂの結合は、単球の樹状細胞への分化を減少させ、そして長期にわたる免疫寛容原性応答を媒介した（Ｓｃｈｍｉｄｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．，５５（１）、ｐｐ．３１−３８，（２００６））。ｉＣ３ｂはまた、骨髄系由来サプレッサー細胞（ＭＤＳＣ）の生成を促進し（Ｈｓｉｅｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ、１２１（１０），ｐｐ．１７６０−１７６８，（２０１３））、そしてＴＧＦβ２およびＩＬ−１０の誘導を促進した（Ａｍａｒｉｌｙｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．，４０（３），ｐｐ．６９９−７０９，（２０１０）を参照されたい）。さらに、Ｃ３ｂの超短半減期とは対照的に、ｉＣ３ｂは３０〜９０分という比較的長い半減期を有し、これは持続的な抗炎症性反応を媒介するｉＣ３ｂの能力を示唆している。
【００３７】
本発明者らは、循環ｉＣ３ｂおよびｉＣ３ｂと並行して変化する補体成分（すなわち、ｉＣ３ｂ代替物）のレベルが、マルチＦｃ治療薬（例えば、ＧＬ−２０４５、Ｇ９９４、Ｇ９９８、ＩＶＩＧ、ＳＩＦ３（商標））の相対的治療効果を示すことを予想外に見出した。したがって、Ｏｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌの教示とは著しく対照的に、本明細書に記載のデータは、より高いレベルのｉＣ３ｂが自己免疫障害および炎症性障害の治療に望ましいことを示している。ｉＣ３ｂ生成は一般に補体カスケードの初期活性化を必要とし、補体活性化の非存在下では有意な程度に起こるとは予想されないので、補体カスケード活性化が自己免疫疾患および炎症性疾患において有害であるという教示の発生にもかかわらず、初期補体活性化は、自己免疫疾患および炎症性疾患をマルチＦｃ治療薬で治療するのに望ましいことになる。Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓを標的とするモノクローナル抗体の使用など、上流の古典的経路の補体活性化を遮断するためのモノクローナル抗体または小分子アプローチは、補体活性化の開始を阻害し、したがって長寿命の抗炎症性ｉＣ３ｂを生成しない。同様に、モノクローナル抗体またはＣ５を標的とする小分子の使用のような、抗Ｃ５モノクローナル抗体または下流の補体活性化をブロックするための小分子アプローチは、補体活性化を開始させるとは考えられず、長寿命の抗炎症性ｉＣ３ｂを生成しない。対照的に、六量体Ｃ１ｑに対して多機能性Ｆｃを提示する、本明細書に記載のＩＶＩＧ凝集体および組換えバイオミメティックを含むマルチＦｃ治療薬は、上流補体活性化ならびに抗炎症性ｉＣ３ｂの生成を開始し、その後にＣ３／Ｃ３ｂのレベルで補体カスケードの下流活性化を遮断することによって抗炎症性ｉＣ３ｂを生成する。
【００３８】
マルチＦｃ治療薬により観察された補体カスケードの初期活性化に続いて補体カスケードの阻害が続き、これはＣＤＣの阻害と関連している。本明細書中のデータは、ｉＣ３ｂ生成が初期活性化およびそれに続く補体カスケードのシャットダウンの両方に依存することを実証している。したがって、ｉＣ３ｂの生成は、（１）上流補体切断産物（Ｃ３ａおよびＣ４ａなど）の生成、および（２）生成された少量のＣ５ａおよびＴＣＣのみによるＣＤＣなどの下流エフェクター機構の阻害を伴う。生成されたＣ５ａおよびＴＣＣの量は一般にベースライン値の約２倍であり、ベースラインを超えて増加したにもかかわらず正常範囲内に留まる可能性がある。
【００３９】
いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂは、Ａｒｇ１２８１〜Ｓｅｒ１２８２間のＣ３ｂの切断によって生成されるｉＣ３ｂ１の形態であってよい。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂは、ｉＣ３ｂ２およびＣ３ｆを産生するｉＣ３ｂ１の切断によって生成されたｉＣ３ｂ２の形態であってよい。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂレベルの評価は、ｉＣ３ｂ１および／またはｉＣ３ｂ２の検出を含む。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂレベルの評価は、ｉＣ３ｂ代替物の検出または測定を含む。本明細書では、「ｉＣ３ｂ代替物」および「ｉＣ３ｂ代替マーカー」という用語は互換的に使用され、補体カスケードの成分、またはｉＣ３ｂ自体の成分を指し、そのレベルはｉＣ３ｂのレベルと相関する。ｉＣ３ｂ代替物には、Ｃ３ｆ、Ｃ３ｃ、Ｃ３ｄｇ、Ｃ３ｄ、および／またはＣ３ｇを含むｉＣ３ｂ切断産物、ならびにＣ３ａ、Ｃ３ａ  ｄｅｓａｒｇ、Ｃ４ａ、および／またはＣ４ａ  ｄｅｓａｒｇを含む上流相補体切断産物が含まれる。
【００４０】
ｉＣ３ｂとｉＣ３ｂの種々の代替マーカーとの間のモルベースでの関係の概略図を図９に提供する。Ｃ３コンバターゼによるＣ３の切断は、等モル量のＣ３切断産物Ｃ３ａおよびＣ３ｂを生成する。上記のように、Ｃ３ｂは不安定であり、安定化されない場合、１秒未満でｉＣ３ｂに分解される。安定なＣ３ｂの生成が阻害された場合（すなわち、マルチＦｃ治療薬による治療によって）、Ｃ３の切断は等モル量のＣ３ａおよびｉＣ３ｂの生成をもたらす。したがって、補体カスケードを活性化し、安定なＣ３ｂの生成を阻害もするマルチＦｃ治療薬の状況において、そして感染またはＣ３ｂを安定化させる他の力がない場合、Ｃ３ａのレベルはｉＣ３ｂのレベルに比例して増加する。そのような場合、Ｃ３ａの測定値は、ｉＣ３ｂの測定値の代替として使用することができる。さらに、生物学的に活性なＣ３ａは、Ｃ末端アルギニンの除去によって、より活性ではないがより安定なＣ３ａ  ｄｅｓＡｒｇ（アシル化刺激タンパク質（ＡＳＰ）とも呼ばれる）に異化され得る。したがって、いくつかの実施形態では、レベルＣ３ａ  ｄｅｓＡｒｇは、患者のｉＣ３ｂ下流のレベルを決定するための代替物として使用されてもよい。いくつかの実施形態では、Ｃ３ａおよびＣ３ａ  ｄｅｓＡｒｇの組み合わせたレベルは、下流のｉＣ３ｂレベルの代替として使用され得る。さらなる実施形態では、Ｃ４ａおよび／またはＣ４ａ  ｄｅｓＡｒｇのレベルは、患者のｉＣ３ｂレベルが所定の閾値を下回るかどうか、または患者のｉＣ３ｂレベルがベースラインレベルから１０％未満の変化を有するかどうかを決定するためにｉＣ３ｂレベルの代替として使用される。いくつかの実施形態では、Ｃ３ａ／Ｃ３ａ  ｄｅｓＡｒｇ測定は、開始用量の投与後３０分〜１２日以上の間に行われる。いくつかの実施形態では、患者のベースラインレベルから５０％未満のＣ３ａおよび／またはＣ３ａ  ｄｅｓＡｒｇレベルの変化は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答を示す。いくつかの実施形態では、患者のベースラインレベルから４０％未満のＣ３ａおよび／またはＣ３ａ  ｄｅｓＡｒｇレベルの変化は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答を示す。いくつかの実施形態では、患者のベースラインレベルから３０％未満のＣ３ａおよび／またはＣ３ａ  ｄｅｓＡｒｇレベルの変化は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答を示す。いくつかの実施形態では、患者のベースラインレベルから２０％未満のＣ３ａおよび／またはＣ３ａ  ｄｅｓＡｒｇレベルの変化は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答を示す。いくつかの実施形態では、患者のベースラインレベルから１０％未満のＣ３ａおよび／またはＣ３ａ  ｄｅｓＡｒｇレベルの変化は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答を示す。
【００４１】
同様の実施形態が、Ｃ４ａおよびその分解産物Ｃ４ａ  ｄｅｓＡｒｇについて企図されている。ｉＣ３ｂは一般に補体活性化の非存在下では生成され得ない。Ｃ４は古典的経路の活性化によりＣ４ａおよびＣ４ｂに切断されるので、Ｃ４ｂは古典的経路およびレクチン経路に対するＣ３コンバターゼに組み込まれる。本発明者らはまた、マルチＦｃ治療薬による古典的経路の活性化時に、古典的経路の活性化の副産物である予想される望ましいＣ４ａ生成がｉＣ３ｂ生成に対応することを見出した。理論に縛られることなく、これはマルチＦｃ治療薬（例えば、ＩＶＩＧまたはＧＬ−２０４５）が最初に古典的補体経路を活性化し、その後補体活性化が主としてＣ３／Ｃ３ｂのレベルで終了するため、ｉＣ３ｂが生成すると考えられる。Ｃ４ａおよび／またはＣ４ａ分解産物、Ｃ４ａ  ｄｅｓＡｒｇ、またはＣ４ａとＣ４ａ  ｄｅｓＡｒｇの組み合わせの生成は、古典的な経路活性化を示し、そしてＣ３／Ｃ３ｂのレベルで補体活性化を遮断するマルチＦｃ治療薬の状況においては、ｉＣ３ｂの適切な生成のための代替でもある。そのように、いくつかの実施形態では、Ｃ４ａおよび／またはＣ４ａ  ｄｅｓＡｒｇのレベルは、下流のｉＣ３ｂレベルの代替として使用することができる。さらなる態様では、Ｃ４ａおよびＣ４ａ  ｄｅｓＡｒｇの組み合わせたレベルは、下流のｉＣ３ｂレベルの代替として使用することができる。
【００４２】
さらなる実施形態では、Ｃ４ａおよび／またはＣ４ａ  ｄｅｓＡｒｇのレベルは、患者のｉＣ３ｂレベルが所定の閾値を下回るかどうか、または患者のｉＣ３ｂレベルがベースラインレベルから１０％未満の変化を有するかどうかを決定するためにｉＣ３ｂレベルの代替として使用される。いくつかの実施形態では、Ｃ４ａ／Ｃ４ａ  ｄｅｓＡｒｇ測定は、開始用量の投与後５分〜９６時間の間に行われる。いくつかの実施形態では、患者のベースラインレベルからの５０％未満のＣ４ａおよび／またはＣ４ａ  ｄｅｓＡｒｇレベルの変化は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答を示す。いくつかの実施形態では、患者のベースラインレベルからの４０％未満のＣ４ａおよび／またはＣ４ａ  ｄｅｓＡｒｇレベルの変化は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答を示す。いくつかの実施形態では、患者のベースラインレベルからの３０％未満のＣ４ａおよび／またはＣ４ａ  ｄｅｓＡｒｇレベルの変化は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答を示す。いくつかの実施形態では、患者のベースラインレベルからの２０％未満のＣ４ａおよび／またはＣ４ａ  ｄｅｓＡｒｇレベルの変化は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答を示す。いくつかの実施形態では、患者のベースラインレベルからの１０％未満のＣ４ａおよび／またはＣ４ａ  ｄｅｓＡｒｇレベルの変化は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答を示す。
【００４３】
マルチＦｃ治療薬
本明細書で使用される場合、用語「バイオミメティック」、「バイオミメティック分子」、「バイオミメティック化合物」、および関連用語は、ＩＶＩＧ、モノクローナル抗体、または抗体のＦｃフラグメントなどの別の天然に存在する化合物の機能を模倣する人造化合物を指す。「生物学的に活性な」バイオミメティックは、それらの天然に存在する対応物と同じまたは類似の生物学的活性を有する化合物である。「天然に存在する」とは、生物中に通常見出される分子またはその一部を意味する。天然に存在するとは、実質的に天然に存在することも意味する。「免疫学的に活性な」バイオミメティックは、抗体、サイトカイン、インターロイキン、および当技術分野において既知の他の免疫学的分子などの天然に存在する免疫学的に活性な分子と同じまたは類似の免疫学的活性を示すバイオミメティックである。好ましい実施形態では、本発明で使用するためのバイオミメティックは、本明細書で定義されているようなマルチＦｃ治療薬（例えばストラドマー）である。
【００４４】
本明細書で使用される「単離された」ポリペプチドまたはペプチドという用語は、天然に存在する対応物を持たないか、または例えば膵臓、肝臓、脾臓、卵巣、精巣、筋肉、関節組織、神経組織、胃腸組織、または乳房組織もしくは腫瘍組織（例えば、乳癌組織）などの組織において、または血液、血清もしくは尿などの体液においてそれに当然付随する成分から分離または精製されたポリペプチドまたはペプチドを指す。典型的には、ポリペプチドまたはペプチドは、それが乾燥重量で少なくとも７０％、タンパク質およびそれが天然に会合している他の天然に存在する有機分子を含まない場合、「単離された」とみなされる。好ましくは、本発明のポリペプチド（またはペプチド）の調製物は、乾燥重量の少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％、最も好ましくは少なくとも９９％が本発明のポリペプチド（ペプチド）である。化学的に合成されたポリペプチドまたはペプチドはそれに当然付随する成分から本質的に分離されているので、合成ポリペプチドまたはペプチドは「単離されている」。本発明の単離されたポリペプチド（またはペプチド）は、例えば、そのポリペプチドまたはペプチドをコードする組換え核酸の発現によって、または化学合成によって得ることができる。天然に由来する起源とは異なる細胞系で産生されるポリペプチドまたはペプチドは、それに当然付随する成分を必然的に含まないために「単離されている」。好ましい実施形態では、本発明の単離されたポリペプチドは、ＩｇＧ１  ＦｃモノマーおよびＩｇＧ２ヒンジ多量体化ドメインに対応する配列（配列番号１）のみを含み、クローニングまたはタンパク質の精製に役立ち得るさらなる配列を含まない。（例えば、導入された制限酵素認識部位または精製タグ）。単離度または純度は、任意の適切な方法、例えばカラムクロマトグラフィー、ポリアクリルアミドゲル電気泳動、またはＨＰＬＣ分析によって測定することができる。
【００４５】
本明細書で使用される場合、「マルチＦｃ治療薬」とは、少なくとも補体系の構成要素に多価（すなわち、２つ以上）のＦｃを提示することができるバイオミメティックタンパク質を指す。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のマルチＦｃ治療薬は、標準Ｆｃ受容体（例えば、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩＩａ、および／またはＦｃγＲＩＩＩｂ）および補体成分の両方に多価Ｆｃを提示することができる。マルチＦｃ治療薬は多量体化されていてもいなくてもよい。本明細書に記載の方法に従って使用されるマルチＦｃ治療薬は、米国特許出願公開第２０１５／０２１８２３６号、同第２０１６／０２２９９１３号、同第２０１７／００８８６０３号、同第２０１７／００８１４０６号、同第２０１７／００２９５０５号、同第２０１０／０１４３３５３号、同第２０１０／０２３９６３３号、同第２０１３／０１５６７６５号、ならびにＰＣＴ国際公開第ＷＯ２０１６／００９２３２号、同第ＷＯ２０１５／１３２３６４号、同第ＷＯ２０１５／１３２３６５号、同第ＷＯ２０１５／１５８８６７号、同第ＷＯ２０１６／１３９３６５号、同第ＷＯ２０１７／００５７６７号、同第ＷＯ２０１７／０１３２０３号、同第ＷＯ２０１７／０３６９０５号、同第ＷＯ２０１５／１６８６４３号および同第ＷＯ２０１７／１５１９７１号に開示されているものなどの一般的なマルチＦｃ化合物を指すことができ、そしてＩＶＩＧおよび多量体ＩＶＩＧ画分を含むＩＶＩＧ治療薬を含み得る。各Ｆｃ治療薬の定義に使用される構造的言語はわずかに異なるが、本発明の方法に従って使用するための各マルチＦｃ治療薬は、２つ以上のＦｃ受容体または補体成分への結合を可能にする少なくとも２つのＦｃドメインを含む。最低でも、Ｆｃドメインは、結合してＦｃ受容体または補体成分に結合することができる機能的二量体を形成するために会合する２つのペプチド鎖またはアームを含む二量体ポリペプチド（またはより大きいポリペプチドの二量体領域）である。いくつかの実施形態では、各Ｆｃドメインは多量体化ドメインをさらに含む。そのような実施形態では、前記多量体化ドメインはまた、二量体の多量体ポリペプチドへの構築を促進することができる機能的多量体化ドメインを形成するように会合する２本のペプチド鎖またはアームを含む二量体ポリペプチドである。したがって、本明細書で論じられている個々のフラグメントおよびドメインの機能的形態は一般に二量体形態で存在する。本明細書で論じられている個々のフラグメントおよびドメインのモノマーは、機能的な二量体構造を形成するために第２の鎖またはアームと会合しなければならない一本鎖またはアームである。一本鎖またはアーム間の会合（例えば、システイン結合または静電相互作用）の性質は、それが機能的Ｆｃドメインまたは多量体化ドメインの形成を可能にする限り、重要ではない。
【００４６】
「直接連結された」とは、介在配列または外来性の配列、例えばＤＮＡまたはクローニングフラグメントへの制限酵素認識部位の挿入に由来するアミノ酸配列なしに互いに連結された２つの配列を意味する。当業者は、多量体化能力が実質的に影響を受けない限り、「直接結合」がアミノ酸の付加または除去を包含することを理解するであろう。
【００４７】
「相同」とは、所与の核酸またはアミノ酸配列の全配列にわたる同一性を意味する。例えば、「８０％相同」とは、所与の配列が請求された配列と約８０％の同一性を共有し、挿入、欠失、置換、およびフレームシフトを含み得ることを意味する。当業者は、配列の全長にわたって配列同一性を決定するために挿入および欠失を考慮に入れるために配列アラインメントを行うことができることを理解するであろう。
【００４８】
ＩＶＩＧは新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に結合して完全に飽和させること、およびそのようなＦｃＲｎの競合的阻害はＩＶＩＧの生物学的活性において重要な役割を果たす可能性があることが記載されている（例えばＦ．Ｊｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００５，６６（４）４０３−４１０）。Ｆｃγ受容体に強く結合する免疫グロブリンもまた少なくともある程度ＦｃＲｎに結合するので、当業者は、２つ以上のＦｃγ受容体に結合することができるマルチＦｃ治療薬もまたＦｃＲｎに結合し、それを完全に飽和させることを認識するであろう。
【００４９】
ＤＥＬおよびＥＥＭ多形体と呼ばれる２つのＩｇＧ１のヒト多形体がある。ＤＥＬ多形体は、３５６位にＤおよび３５８位にＬを有し、ＥＥＭ多形体は、３５６位にＥおよび３５８位にＭを有する（Ｋａｂａｔ番号付け、配列番号２および３、それぞれＥＥＭおよびＤＥＬ多形体）。本明細書に記載のマルチＦｃ治療薬は、ＤＥＬまたはＥＥＭ  ＩｇＧ１多形体のいずれかを含み得る。したがって、特定の変異体についての文章がＤＥＬ多形性に関連して明示的に提示されるとしても、当業者は、同じ結果が得られるようにＥＥＭ多形性に対して同じ変異がなされ得ることを理解するであろう。
【００５０】
Ｆｃフラグメントおよびドメイン
Ｆｃフラグメント
「Ｆｃフラグメント」は、免疫グロブリンのカルボキシ末端に常に見られるタンパク質領域またはタンパク質折り畳み構造を説明するために使用される技術用語である。Ｆｃフラグメントは、不完全かつ不十分なプロセスである酵素消化、例えばパパイン消化の使用によりモノクローナル抗体のＦａｂフラグメントから単離することができる（Ｍｉｈａｅｓｃｏ  Ｃ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｖｏｌ  １２７，４３１−４５３（１９６８））。Ｆａｂフラグメント（抗原結合ドメインを含む）と共に、Ｆｃフラグメントはホロ抗体、ここでは完全な抗体を構成する。Ｆｃフラグメントは抗体重鎖のカルボキシ末端部分からなる。Ｆｃフラグメント中の鎖の各々は、長さが約２２０〜２６５アミノ酸であり、そして鎖は多くの場合ジスルフィド結合を介して結合している。Ｆｃフラグメントは多くの場合１つ以上の独立した構造的折り畳みまたは機能的サブドメインを含む。特に、Ｆｃフラグメントは、Ｆｃ受容体に結合する最小構造として本明細書中に定義されるＦｃドメインを包含する。単離されたＦｃフラグメントは、二量体化されている２つのＦｃフラグメントモノマー（例えば、抗体重鎖の２つのカルボキシ末端部分、本明細書中でさらに定義される）で構成される。２つのＦｃフラグメントモノマーが会合すると、得られるＦｃフラグメントは補体および／またはＦｃ受容体結合活性を有する。
【００５１】
Ｆｃ部分フラグメント
「Ｆｃ部分フラグメント」は、抗体の全Ｆｃフラグメントを満たさないものを含むが、Ｆｃ受容体結合活性および／または補体結合活性を含む、Ｆｃフラグメントと同じ活性を有するのに十分な構造を保持するドメインである。したがって、Ｆｃ部分フラグメントは、Ｆｃ部分ドメインが由来する抗体のアイソタイプに応じて、ヒンジ領域の一部もしくは全部、ＣＨ２ドメインの一部もしくは全部、ＣＨ３ドメインの一部もしくは全部、および／またはＣＨ４ドメインの一部もしくは全部を欠いていてもよい。Ｆｃ部分フラグメントの他の例は、ＩｇＧ１のＣＨ２およびＣＨ３ドメインを含む分子を含む。この例では、Ｆｃ部分フラグメントはＩｇＧ１に存在するヒンジドメインを欠いている。Ｆｃ部分フラグメントは、２つのＦｃ部分フラグメントモノマーで構成される。本明細書でさらに定義されるように、２つのそのようなＦｃ部分フラグメントモノマーが会合するとき、得られるＦｃ部分フラグメントはＦｃ受容体結合活性および／または補体結合活性を有する。
【００５２】
Ｆｃドメイン
本明細書で使用される場合、「Ｆｃドメイン」とは、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）に結合することができる、またはそれによって結合され得る最小領域（より大きなポリペプチドに関して）または最小タンパク質折り畳み構造（単離タンパク質に関して）を表す。ＦｃフラグメントおよびＦｃ部分フラグメントの両方において、Ｆｃドメインは、分子のＦｃ受容体への結合を可能にする最小結合領域である。Ｆｃドメインは、Ｆｃ受容体によって結合される別個のホモ二量体ポリペプチドに限定され得るが、Ｆｃドメインは、Ｆｃフラグメントの一部または全部、ならびにＦｃ部分フラグメントの一部または全部であり得ることもまた明らかであろう。用語「Ｆｃドメイン」が本発明において使用される場合、それは１つより多いＦｃドメインを意味すると当業者によって認識されるであろう。Ｆｃドメインは、２つのＦｃドメインモノマーで構成される。本明細書でさらに定義されるように、２つのそのようなＦｃドメインモノマーが会合すると、得られるＦｃドメインはＦｃ受容体結合活性および／または補体結合活性を有する。したがって、Ｆｃドメインは補体および／またはＦｃ受容体に結合することができる二量体構造である。
【００５３】
Ｆｃ部分ドメイン
本明細書で使用される場合、「Ｆｃ部分ドメイン」は、Ｆｃドメインの一部を説明する。Ｆｃ部分ドメインは、個々の重鎖定常領域ドメイン（例えば、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３およびＣＨ４ドメイン）ならびに異なる免疫グロブリンクラスおよびサブクラスのヒンジ領域を含む。したがって、本発明のヒトＦｃ部分ドメインは、ＩｇＧ１のＣＨ１ドメイン、ＩｇＧ１のＣＨ２ドメイン、ＩｇＧ１のＣＨ３ドメイン、ならびにＩｇＧ１およびＩｇＧ２のヒンジ領域を含む。他の種における対応するＦｃ部分ドメインは、その種に存在する免疫グロブリンおよびその命名に依拠するだろう。好ましくは、本発明のＦｃ部分ドメインは、ＩｇＧ１のＣＨ１、ＣＨ２およびヒンジドメインならびにＩｇＧ２のヒンジドメインを含む。本発明のＦｃ部分ドメインは、これらのドメインおよびヒンジのうちの２つ以上の組み合わせをさらに含み得る。しかしながら、本発明の個々のＦｃ部分ドメインおよびそれらの組み合わせは、ＦｃＲに結合する能力を欠いている。したがって、Ｆｃ部分ドメインおよびそれらの組み合わせは、Ｆｃドメインを満たさないものを含む。Ｆｃ部分ドメインは、互いに結合して、補体および／またはＦｃ受容体結合活性を有するペプチドを形成し、かくしてＦｃドメインを形成し得る。本発明において、Ｆｃ部分ドメインは、本明細書に記載されるように、本発明の方法に従って使用されるマルチＦｃ治療薬を作製するための構成要素としてＦｃドメインと共に使用される。各Ｆｃ部分ドメインは、２つのＦｃ部分ドメインモノマーで構成される。このような２つのＦｃ部分ドメインモノマーが会合すると、Ｆｃ部分ドメインが形成される。
【００５４】
上記のように、Ｆｃフラグメント、Ｆｃ部分フラグメント、ＦｃドメインおよびＦｃ部分ドメインのそれぞれは、二量体タンパク質またはドメインである。したがって、これらの分子のそれぞれは、会合して二量体タンパク質またはドメインを形成する２つのモノマーで構成される。ホモ二量体形態の特徴および活性は上で論じられているが、モノマーペプチドは以下のように論じられる。
【００５５】
Ｆｃフラグメントモノマー
本明細書で使用される場合、「Ｆｃフラグメントモノマー」は、他のＦｃフラグメントモノマーと会合したときＦｃフラグメントを構成する一本鎖タンパク質である。したがって、Ｆｃフラグメントモノマーは、ホロ抗体のＦｃフラグメントを構成する抗体重鎖の１つのカルボキシ末端部分（例えば、ＩｇＧのヒンジ領域、ＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインを含む重鎖の連続部分）である。一実施形態では、Ｆｃフラグメントモノマーは、少なくとも、隣接して連結してペプチドを形成する１本のヒンジ領域の鎖（ヒンジモノマー）、１本のＣＨ２ドメインの鎖（ＣＨ２ドメインモノマー）および１本のＣＨ３ドメインの鎖（ＣＨ３ドメインモノマー）を含む。一実施形態では、ＣＨ２、ＣＨ３およびヒンジドメインは異なるアイソタイプに由来する。特定の実施形態では、Ｆｃフラグメントモノマーは、ＩｇＧ２ヒンジドメインならびにＩｇＧ１のＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインを含有する。
【００５６】
Ｆｃドメインモノマー
本明細書で使用される場合、「Ｆｃドメインモノマー」は、別のＦｃドメインモノマーと会合したとき、補体および／または標準Ｆｃ受容体に結合し得るＦｃドメインを構成する一本鎖タンパク質を指す。２つのＦｃドメインモノマーの会合は１つのＦｃドメインを作り出す。
【００５７】
一実施形態では、Ｆｃドメインモノマーは、アミノ末端からカルボキシ末端に、ＩｇＧ１ヒンジ、ＩｇＧ１  ＣＨ２とＩｇＧ１  ＣＨ３、およびＩｇＧ２ヒンジを含むＦｃドメインを含む。
【００５８】
マルチＦｃ治療薬
本発明の方法は、Ｆｃが機能性を保持している、任意のマルチＦｃドメイン含有化合物に対する対象の応答を決定することを提供する。特定の実施形態では、本発明の方法は、ＧＬ−２０４５、Ｇ９９４、Ｇ９９８、またはこれらのそれぞれの内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、米国特許出願公開第２０１０／０２３９６３３号または同第２０１３／０１５６７６５号、ＰＣＴ国際公開第ＷＯ２０１７／０１９５６５号、およびＰＣＴ国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０４３５３８号に記載されている、別のストラドマーなどのマルチＦｃ治療薬に対して対象が適切な応答を有するかどうかを決定するのに使用する。さらに、追加のマルチＦｃ治療薬が記載されている（米国特許出願公開第２０１５／０２１８２３６号、同第２０１６／０２２９９１３号、同第２０１０／０１４３３５３号、同第２０１７／００８８６０３号、第２０１７／００８１４０６号、および第２０１７／００２９５０５号、ならびにＰＣＴ国際公開第ＷＯ２０１５／１３２３６４号、同第ＷＯ２０１５／１３２３６５号、同第ＷＯ２０１５／１５８８６７号、同第ＷＯ２０１５／１６８６４３号、同第ＷＯ２０１６／００９２３２号、同第ＷＯ２０１６／１３９３６５号、同第ＷＯ２０１７／００５７６７号、同第ＷＯ２０１７／０１３２０３号、同第ＷＯ２０１７／０３６９０５号、および同第ＷＯ２０１７／１５１９７１号を参照、これらのそれぞれは参照により組み込まれる）。
【００５９】
これらの説明は個々の構成要素を説明するのに使用される言語がわずかに異なるが、これらのマルチＦｃ治療薬は、上記および米国特許出願公開第２０１０／０２３９６３３号および同第２０１３／０１５６７６５号に開示されるストラドマーと実質的に構造的および／または機能的に類似する。各々は本質的に、少なくとも２つの機能的Ｆｃドメイン（例えばストラドマー単位）を形成するように会合した直列に連結されたＦｃドメインモノマーを含む二量体ポリペプチドで構成されるポリペプチドを記載する。Ｆｃドメインモノマーを連結するリンカーは、共有結合（例えば、ペプチド結合）、ペプチドリンカー、または非ペプチドリンカーであり得る。さらに、機能的Ｆｃドメインを形成するためのＦｃドメインモノマー間の会合の性質は、それが標準Ｆｃ受容体および／または補体成分に結合（例えばシステイン結合または静電相互作用）することができる機能的Ｆｃドメインの形成を可能にする限り重要ではない。
【００６０】
ストラドマー
いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬はストラドマー（例えばＧＬ−２０４５）である。米国特許出願公開第２０１０／０２３９６３３号は、自己免疫疾患や他の炎症状態を含む病的状態の治療のためのストラドマーの個々の構成要素間の制限部位および親和性タグを含む短い配列を含むＩＶＩＧの規則正しい多量体化免疫グロブリンＦｃバイオミメティック（ストラドマーとして知られる生物学的に活性な規則正しい多量体）を作製するための結合免疫グロブリンＦｃドメインの使用を開示する。その全体が参照により本明細書に組み込まれる、ＵＳ２０１０／０２３９６３３を参照されたい。米国特許出願公開第２０１３／０１５６７６５号は、個々の成分が制限部位または親和性タグによって分離されるのではなく直接連結されているストラドマーを開示している。ＵＳ２０１３／０１５６７６５はまた、Ｎ末端連結化合物（ＧＬ−２０１９、ＵＳ２０１０／０２３９６３３に記載されている）と比較して増強された多量体化を示す、そのＣ末端に直接連結されたＩｇＧ２ヒンジ多量体化ドメインを有するＩｇＧ１  Ｆｃドメインを含む多量体化ストラドマー（ＧＬ−２０４５）を具体的に開示する。その全体が参照により本明細書に組み込まれる、ＵＳ  ２０１３／０１５６７６５を参照されたい。ＧＬ−２０４５の構造は、ＩｇＧ１ヒンジ−ＩｇＧ１ＣＨ２  ＩｇＧ１  ＣＨ３−ＩｇＧ２ヒンジであり、ＧＬ−２０４５は、配列番号４および５として提供される（それぞれＥＥＭおよびＤＥＬ多形体）。
【００６１】
本発明の方法で使用するためのストラドマーは、補体および／または標準Ｆｃ受容体に結合することができるバイオミメティック化合物である。さらに、当業者は、ストラドマーの任意の立体配座（例えば、連続、クラスター、コア、またはＦｃフラグメント）が本明細書に記載の方法に従って使用され得ることを理解するであろう。連続ストラドマーは、少なくとも２つの連続的に連結されたＦｃドメインで構成される二量体ペプチドである。したがって、連続ストラドマーは、２つ以上のＦｃ受容体に結合することができる。
【００６２】
クラスターストラドマーは、放射状形態を有し、そして多量体化する中央部分「ヘッド」および２つ以上の「レッグ」を有するストラドマーであり、各レッグは少なくとも１つのＦｃ受容体および／または補体に結合できる１つ以上のＦｃドメインを含む。クラスターストラドマーは「多量体化ストラドマー」とも呼ばれる（例えば、ＧＬ−２０４５）。明らかになるように、上記で論じられたＦｃフラグメント、Ｆｃ部分フラグメント、ＦｃドメインおよびＦｃ部分ドメインは、種々のストラドマー立体配座の構築において使用される。さらに、最初に製造されて二量体ストラドマー単位を形成し、次に多量体化ドメイン（例えば、ＩｇＧ２ヒンジ）の包含を介して多量体化して本発明のクラスターストラドマーである多量体構造を形成するのは、やはり上記で論じられた個々のＦｃドメインモノマーおよびＦｃ部分ドメインモノマーである。具体的なストラドマーは、ＵＳ２０１０／０２３９６３３およびＵＳ２０１３／０１５６７６５に非常に詳細に記載されており、その両方の内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００６３】
コアストラドマーは、１つ以上のＦｃドメインを含む２つ以上のポリペプチドが結合するコア部分を含み、それによって２つ以上のＦｃγ受容体に結合することができるバイオミメティック化合物を作り出す。Ｆｃフラグメント、Ｆｃ部分フラグメント、連続ストラドマー、またはクラスターストラドマー単位は、これらの分子がそれぞれ少なくとも１つのＦｃドメインを含んでいるため、コアストラドマー中のコアストラドマー単位の一方または両方（それらが２つのＦｃドメインを含む場合）としてそれぞれ独立して働き得る。いくつかの実施形態では、コア部分はポリスチレンビーズである。いくつかの実施形態では、各ＦｃドメインはさらにＩｇＭ  ＣＨ４ドメインを含み、コア部分はＪ鎖を含み、その結果、複数のＦｃγ受容体に結合することができるバイオミメティックが得られる。
【００６４】
当業者は、ストラドマーが抗原結合Ｆａｂフラグメントを含まないことを理解するであろう。そのようなＦａｂ含有化合物は一般に「ストラドボディ」と呼ばれる。したがって、一態様では、本発明に従って有用なマルチＦｃ治療薬は、抗原結合Ｆａｂドメインを特異的に欠く。
【００６５】
いくつかの実施形態では、二量体ポリペプチドは、二量体ポリペプチドの多量体タンパク質への構築を促進する多量体化ドメインを含む。本明細書で使用される場合、「多量体化ドメイン」とは、Ｆｃドメインを含むポリペプチドの多量体Ｆｃタンパク質への構築を容易にするドメインを指す。多量体化ドメインの性質は、二量体ポリペプチドを、現在の多価ＦｃからＦｃ受容体および／または補体成分にできるマルチＦｃタンパク質（例えば、マルチＦｃ治療薬）への構築を可能とする限り重要ではない。いくつかの実施形態では、多量体化ドメインはＩｇＧ２ヒンジである。いくつかの実施形態では、二量体ポリペプチドは末端ＩｇＭ  ＣＨ４ドメインを含む。いくつかの実施形態では、そのようなドメインの包含は、コアストラドマーを形成するための、Ｊ鎖などのコア部分とのストラドマーの自己凝集を可能にする。
【００６６】
補体優先（Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ−ｐｒｅｆｅｒｅｎｔｉａｌ）ストラドマー、一般的なストラドマー、および六量体ストラドマー
ＰＣＴ国際公開第ＷＯ２０１７／０１９５６５６号はストラドマーを含む補体優先マルチＦｃ治療薬を記載し、そしてＰＣＴ国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０４３５３８号はストラドマーを含む一般的および六量体マルチＦｃ治療薬を記載し、それらの基本構造は上記に記載される。これらのストラドマーは多量体化ドメインを含み、さらにＦｃドメインのＣＨ１および／またはＣＨ２領域に点突然変異を含む。特定の点突然変異は、正常な非凝集ヒト免疫グロブリンＦｃと比較して、補体優先的ストラドマーがＣ１ｑのような１つ以上の補体成分に優先的に結合することを可能にする（ＷＯ２０１７／０１９５６５６）。この優先的結合は、補体成分への結合の増加を介して直接的に、または標準Ｆｃ受容体へのストラドマーの結合の減少を介して間接的に達成される。それ自体、これらの化合物は、マルチＦｃ治療薬に多量体化することができ、さらに補体成分に優先的に結合することができるストラドマー単位を含む。同様に、一般的なストラドマーに存在する点変異の特定の組み合わせは、変異の特定の組み合わせに応じて増加したまたは減少した親和性で補体成分および／またはＦｃ受容体に結合することを可能にし、六量体ストラドマーが６つのＦｃドメインを含む多量体化Ｆｃ治療薬を優先的に形成することを可能にする（ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０４３５３８）。
【００６７】
Ｆｃ受容体の選択的免疫調節剤（ＳＩＦ）
米国特許出願公開第２０１６／０２２９９１３号は、第１のＦｃドメインモノマー、リンカー、および第２のＦｃドメインモノマーを含む第１のポリペプチド、第３のＦｃドメインモノマーを含む第２のポリペプチド、および第４のＦｃドメインモノマーを含む第３のポリペプチドを含む、Ｆｃ受容体（ＳＩＦ）の選択的免疫調節剤を記載している。前記第１および第３のＦｃドメインモノマーは結合して第１のＦｃドメインを形成し、および前記第２および第４のＦｃドメインモノマーは結合して第２のＦｃドメインモノマーを形成する。したがって、これらの化合物は、３つの独立したポリペプチドの会合を通して２つの機能的Ｆｃドメインを形成する（ＳＩＦ３（商標））。米国特許出願公開第２０１６／０２２９９１３号に開示されているさらなる実施形態は、５個までのＦｃドメインモノマーを含む化合物の形成を記載している。これらの化合物は、本質的に、連続的に連結されたＦｃドメイン（米国特許出願公開第２００５／０２４９７２３号および同第２０１０／０２３９６３３号を参照および配列変異を介して構築する個々のＦｃドメインモノマー（その変形は、米国特許出願公開第２００６／００７４２２５号に開示されている）を含む。そのようなものとして、最終結果は連続のストラドマーに似たマルチＦｃ治療薬である。ＵＳ２０１６／０２２９９１３に記載されているＳＩＦ３（商標）化合物は、多量体化ドメインを含まない。さらなるＳＩＦの実施形態は、ＰＣＴ国際公開第ＷＯ２０１７／１５１９７１号に記載されている。
【００６８】
尾部Ｆｃ多量体
米国特許出願公開第２０１５／０２１８２３６号は、それを必要とする患者にマルチＦｃ治療薬を投与することを含む、自己免疫疾患または炎症性疾患の治療方法を開示している。そこに記載されているマルチＦｃ治療薬は、５、６、または７個のポリペプチドモノマー単位を含み、各モノマー単位は、２つのＩｇＧ重鎖定常領域を含むＦｃ受容体結合部分を含む。各ＩｇＧ重鎖定常領域は、隣接するポリペプチドモノマーのＩｇＧ重鎖定常領域のシステイン残基にジスルフィド結合を介して結合したシステイン残基を含む。ＵＳ２０１５／０２１８２３６に記載されているペプチド「モノマー」は２つのＩｇＧ重鎖で構成されるので、それらは実際には二量体タンパク質（例えば、Ｆｃドメイン）である。ＵＳ２０１５／０２１８２３６のいくつかの実施形態では、モノマー単位は、モノマー単位のポリマー（例えば、多量体）への構築を容易にする尾部領域をさらに含む。そのように、その中で使用されている「尾部」は、本明細書およびＵＳ２０１０／０２３９６３３およびＵＳ２０１３／０１５６７６５に記載されている多量体化ドメインと機能的に同等である。この化合物は、上記のように構築してクラスターストラドマーを形成する多量体化ドメインを有するストラドマー単位を本質的に含む。追加の尾部Ｆｃ多量体は、ＰＣＴ国際公開第ＷＯ２０１６／００９２３２号および同第ＷＯ２０１７／００５７６７号に記載されている。
【００６９】
３０９位に変異を含むＦｃマルチマー
ＰＣＴ国際公開第ＷＯ２０１５／１３２３６４号、同第ＷＯ２０１５／１３２３６５号、同第ＷＯ２０１５／１５８８６７号、同第ＷＯ２０１７／０３６９０５号、同第ＷＯ２０１７／０１３２０３号、および同第ＷＯ２０１６／１３９３６５号、ならびに米国特許出願公開第２０１７／００８１４０６号、同第２０１７／００８８６０３号、および同第２０１７／００２９５０５号には、各ポリペプチドモノマーがＦｃドメインを含むポリペプチドモノマー単位で構成されるマルチＦｃ治療薬が記載されている。前記各Ｆｃドメインは、２つの重鎖Ｆｃ領域で構成され、それぞれ３０９位にシステインを含み（ＷＯ２０１５／１３２３６５およびＷＯ２０１６／１３９３６５）、または３０９位にシステイン以外のアミノ酸を含む（ＷＯ２０１５／１３２３６４、ＷＯ２０１７／０３６９０５、およびＷＯ２０１７／０１３２０３）。そのようなものとして、ＰＣＴ国際公開第ＷＯ２０１５／１３２３６４号、同第ＷＯ２０１５／１３２３６５号、同第ＷＯ２０１５／１５８８６７号、同第ＷＯ２０１７／０３６９０５号、同第ＷＯ２０１７／０１３２０３号、および同第ＷＯ２０１６／１３９３６５号、ならびに米国特許出願公開第２０１７／００８１４０６号、同第２０１７／００８８６０３号、および同第２０１７／００２９５０５号に記載されているポリペプチド「モノマー」実際には二量体タンパク質である（例えば、本明細書で使用されるＦｃドメインモノマー）。各重鎖Ｆｃ領域は、そのＣ末端で尾部に融合されており、それによってモノマーを多量体に構築させる。そのように、そこで使用される「尾部」は、本明細書に記載される多量体化ドメインと機能的に同等である。その中の好ましい実施形態では、マルチＦｃ治療薬は三量体または六量体多量体である。この化合物は、上記のように構築させてクラスターストラドマーを形成する多量体化ドメインを有するストラドマー単位を本質的に含む。
【００７０】
連続に連結されたＦｃドメインモノマーで構成されるＦｃ多量体
米国特許出願公開第２０１０／０１４３３５３号は、ＩｇＧの少なくとも第１および第２のＦｃフラグメント、少なくとも１つのＣＨ２ドメインおよびヒンジ領域を含むＩｇＧの第１のＩｇＧフラグメントの少なくとも１つを含み、ＩｇＧの第１および第２のＦｃフラグメントはヒンジを介して結合して鎖を形成する、マルチＦｃ治療薬を記載している。ＵＳ２０１０／０１４３３５３のいくつかの実施形態では、実質的に同様の鎖が会合して二量体を形成する。ＵＳ２０１０／０１４３３５３の他の実施形態では、複数の実質的に同様の鎖が会合して多量体を形成する。本明細書に記載されるように、ＦｃフラグメントはＦｃドメインを包含する。そのように、ＵＳ２０１０／０１４３３５３に開示されている治療薬は、少なくとも２つのＦｃ受容体に結合して多量体を構築することができる多量体化Ｆｃ治療薬を含む。
【００７１】
治療方法
本発明の方法はさらに、自己免疫疾患および炎症性疾患を治療する方法であって、少なくとも１回の累積漸増用量のマルチＦｃ治療薬を患者に投与することを含み、患者が、以前に投与されたマルチＦｃ治療薬に対して不適切な応答を有すると決定されている、方法を提供する。
【００７２】
いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬に対する「不適切な応答」とは、マルチＦｃ治療薬の以前に投与された用量の投与後の所定の閾値より低いｉＣ３ｂの血中レベルを指す。いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬に対する「不適切な応答」とは、マルチＦｃ治療薬の以前に投与された用量の投与後のベースラインの約１０％未満のｉＣ３ｂの血中レベルの変化を指す。いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬に対する「不適切な応答」とは、マルチＦｃ治療薬の以前に投与された用量の投与後のベースラインの約２５％未満、または約５０％未満のｉＣ３ｂの血中レベルの変化を指す。いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬に対する「不適切な応答」とは、患者および／または患者集団について確立された正常値内に留まるｉＣ３ｂの血中レベルの変化を指す。いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬に対する「不適切な応答」とは、マルチＦｃ治療薬の以前に投与された用量の投与後のベースラインｉＣ３ｂ測定値に対して１０％未満、２５％未満、または５０％未満を超える増加である、ｉＣ３ｂの血中レベルの増加を指す。いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬に対する「不適切な応答」とは、集団について確立された正常値の約１５０％以内に留まるｉＣ３ｂの血中レベルの変化を指す。
【００７３】
いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬の以前に投与された用量は、対象に投与されたマルチＦｃ治療薬に対して適切な応答をもたらすことができないことが知られている。そのような実施形態では、適切な反応を引き出すことができない用量でのマルチＦｃの投薬は、対象において典型的には観察されないアレルギー反応または他の異常な免疫反応などのマルチＦｃ治療薬の潜在的なオフターゲット効果を評価するため、投与され得る。その後、マルチＦｃ治療薬の漸増用量をその後投与することができる。
【００７４】
マルチＦｃ治療薬の以前に投与された用量に対して不適切な応答を有すると決定された患者は、「累積漸増用量」であって、「漸増用量」または漸増用量と１つ以上の「増分用量」のいずれかで構成される「累積漸増用量」で治療され得る。本明細書で使用される場合、「以前に投与された用量」は、前の投与期間中に患者に投与されたマルチＦｃ治療薬の投与量を指す。いくつかの実施形態では、以前に投与された用量は累積漸増用量を指す。いくつかの実施形態では、以前に投与された用量は開始用量を指す。本明細書で使用される場合、「開始用量」とは、上記マルチＦｃ治療薬の最も低い一般的に使用される用量を指す。いくつかの実施形態では、開始用量は、所与の疾患または障害に対するマルチＦｃ治療薬の商業的に承認された最低用量であり得る。本明細書で使用される場合、「商業的に承認された最低用量」とは、指示された疾患または障害の治療に承認されている所与のマルチＦｃ治療薬の最低用量を指す。しかしながら、所与の疾患または障害に対する医療標準治療は、商業的に承認された最低用量よりも低い用量のマルチＦｃ治療薬での治療の開始が必要され得る。そのような実施形態では、開始用量は、商業的に承認された最低用量または医療標準治療用量の９０％、８０％、７０％、６０％、５０％以下であり得る。あるいは、所与の疾患または障害に対する医療標準治療は、より高用量のマルチＦｃ治療薬での治療の開始を必要とし得る。そのような実施形態では、開始用量は、商業的に承認された最低用量の１０５％、１１０％、１２５％、１５０％、２００％、２５０％、またはそれ以上であり得る。例えば、免疫不全疾患を治療するためのＩＶＩＧの商業的に承認された最低用量は６００ｍｇ／Ｋｇであり得るが、ＣＩＤＰのような自己免疫性状態の医療標準治療の処置は２０００ｍｇ／Ｋｇであり得る。商業的に承認された最低用量が定義されていない場合、開始用量はまた、製造業者および／または医師によって推奨される初期用量、またはその後科学文献に記載されている初期用量を指すこともある。したがって、一実施形態では、開始用量は、マルチＦｃ治療薬またはＩＶＩＧで治療されている特定の患者に与えられる実際の最初の用量である。
【００７５】
一実施形態では、以前に投与された用量のマルチＦｃ治療薬に対して不適切な応答を有すると判定された患者において炎症性疾患を治療する方法であって、１つ以上の漸増用量を患者に投与することを含む方法が提供される。本明細書で使用される場合、「漸増用量」は、以前に投与された用量のマルチＦｃ治療薬よりも多い量であるか、または予想よりも頻繁に与えられるかのいずれかであるマルチＦｃ治療薬の用量である。そのような１つ以上の漸増用量は、合計でマルチＦｃ治療薬の「累積漸増用量」である。本明細書で使用される場合、「累積漸増用量」とは、所与のマルチＦｃ治療薬の以前に投与された用量より累積的に多い投与期間中に投与されるマルチＦｃ治療薬の用量である。いくつかの実施形態では、累積漸増用量は、以前に投与された用量より約１０５％、１１０％、１１５％、１２０％、１２５％、１５０％、２００％以上である。いくつかの実施形態では、累積漸増用量は、投与期間を通して投与される漸増用量を含み、この漸増用量は、以前の投与期間中に投与されたマルチＦｃ治療薬の用量よりも多い。いくつかの実施形態では、漸増用量は、以前の投与期間中に投与されたマルチＦｃ治療薬の用量より約１０５％、１１０％、１１５％、１２０％、１２５％、１５０％、もしくは２００％以上である。いくつかの実施形態では、累積漸増用量は、前の投与期間中の量と等しい量であり、それよりも頻繁に投与される漸増用量を含む。いくつかの実施形態では、漸増用量は、所与の投与期間中に、以前に投与されたマルチＦｃ治療薬の用量より少なくとも１回多く投与される。いくつかの実施形態では、漸増用量は、所与の投与期間中に、以前に投与されたマルチＦｃ治療薬の用量より少なくとも２、３、４、５、１０、１５、２０回以上投与される。
【００７６】
投与期間中の任意の時点で、ｉＣ３ｂの血中レベルを測定することができ、それに応じて前記投与期間中に投与されるマルチＦｃの用量を調整することができる。そのような実施形態では、累積漸増用量は、投与期間の一部に投与された漸増用量と、それに続く残りの投与期間に投与された「増分用量」とを含み得る。本明細書で使用される場合、「増分用量」は、漸増用量よりも量が多く、漸増用量と同じ投与期間内に投与されるマルチＦｃ治療薬の用量である。いくつかの実施形態では、増分用量は、漸増用量の後に与えられ、漸増用量よりも多い単回投与期間内に与えられる増加用量である。いくつかの実施形態では、増分投与量は、単回の投与期間内に与えられる投与量であり、漸増用量について以前に予想された投与スケジュールよりも頻繁に投与される。いくつかの実施形態では、増分投与量は、同じ投与期間中に投与される漸増用量の約１０５％、１１０％、１１５％、１２０％、１２５％、１５０％、もしくは２００％またはそれ以上である。そのように、いくつかの実施形態では、累積漸増用量は、同じ投与期間中に投与される漸増用量および１つ以上の増分用量を含み得る。例示的な投与計画の概略図を図８に提供する。
【００７７】
さらなる例として、成人男性に対する液体Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）（Ｂａｘａｌｔａによって製造されたヒト免疫グロブリン輸液）の皮下投与のための推奨される初期用量は、４週間ごとに４００ｍｇ／Ｋｇである。この例では、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）の開始用量は４００ｍｇ／ｋｇである。本明細書に記載の方法によって、患者がマルチＦｃ治療薬の初期用量に対して不適切な応答を示したと判断された場合、累積漸増用量が投与される。この明確な例では、累積漸増用量は、投与期間の間投与される漸増用量、例えば５００ｍｇ／Ｋｇを含み得る。あるいは、累積漸増用量は漸増用量を含み得、ここで漸増用量は開始用量と量が等しく（例えば４００ｍｇ／ｍＬ）、そして開始用量よりも頻繁に投与される（例えば開始用量の少なくとも２回以上）。あるいは、累積漸増用量は、投与期間の一部に投与されるこれらの漸増用量のいずれか、および投与期間の残りに投与される増分用量（例えば、５５０ｍｇ／Ｋｇ）を含み得る。
【００７８】
本明細書で使用される場合、「投与期間」とは、マルチＦｃ治療薬が投与される期間を指す。投与期間は、少なくとも１日、２日、３日、４日、１週間、１ヶ月、６ヶ月、またはそれ以上であり得る。いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬は、投与期間中に少なくとも１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回またはそれ以上投与することができる。明確な例として、投与期間は６ヶ月であり得、ここでマルチＦｃ治療薬は毎月１回、合計６回投与される。本明細書に記載の方法は、少なくとも１、２、３、４、５、１０、１５、またはそれ以上の投与期間にわたってマルチＦｃ治療薬を投与することを含み得る。
【００７９】
本明細書に記載の方法に従って使用するために、本明細書で定義するマルチＦｃ治療薬の用量（例えば、漸増用量および増分用量）をいくつかの投与期間にわたっていくつかの方法で組み合わせることができる。漸増用量、増分用量、累積漸増用量、および投与期間の間の関係を図８に示す。図８に開示された実施形態は、例示を目的としたものにすぎず、本明細書に記載の方法を限定するものではない。
【００８０】
いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答は、患者におけるｉＣ３ｂまたは代替ｉＣ３ｂマーカーの循環レベルを測定することによって決定される。いくつかの実施形態では、所定の閾値より低いｉＣ３ｂのレベルは、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答の指標である。そのような実施形態では、漸増用量のマルチＦｃ治療薬を投与することができる。いくつかの実施形態では、所定の閾値より高いｉＣ３ｂのレベルは、マルチＦｃ治療薬に対する適切な応答の指標である。そのような実施形態では、漸増用量のマルチＦｃ治療薬を投与しなくてもよい。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂの所定の閾値は、約２５μｇ／ｍＬ〜約３００μｇ／ｍＬでアッセイバックグラウンドを上回る。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂの所定の閾値は、約５０μｇ／ｍＬ〜約２００μｇ／ｍＬでアッセイバックグラウンドより上回る。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂの所定の閾値は、約７５μｇ／ｍＬ〜約１２５μｇ／ｍＬでアッセイバックグラウンドを上回る。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂの所定の閾値は、約１００μｇ／ｍＬアッセイバックグラウンドを上回る。いくつかの実施形態では、患者のベースラインレベルから１０％未満のｉＣ３ｂレベルの変化は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答の指標である。いくつかの実施形態では、患者の以前に決定されたｉＣ３ｂレベルからの１０％未満のｉＣ３ｂレベルの変化は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答の指標である。いくつかの実施形態では、２０％未満、２５％未満、３０％未満、３５％未満、４０％未満、または５０％未満のｉＣ３ｂレベルの変化は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答の指標である。
【００８１】
さらなる実施形態では、患者のベースラインレベルから１０％未満のｉＣ３ｂの代替マーカー（例えば、Ｃ４ａ、Ｃ４ａ  ｄｅｓＡｒｇ、Ｃ３ａ、Ｃ３ａ  ｄｅｓＡｒｇ、Ｃ３ｆ、Ｃ３ｃ、Ｃ３ｄｇ、Ｃ３ｄ、および／またはＣ３ｇ）のレベルの変化は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答の指標である。いくつかの実施形態では、患者の以前に決定されたｉＣ３ｂレベルからの１０％未満のｉＣ３ｂの代替マーカーのレベルの変化は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答の指標である。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂの代替マーカーのレベルの２０％未満、２５％未満、３０％未満、３５％未満、４０％未満、または５０％未満の変化は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答の指標である。いくつかの実施形態では、患者のベースラインからのまたは、患者の以前に決定されたｉＣ３ｂレベルからの１０％未満のｉＣ３ｂの代替マーカー（例えば、Ｃ４ａ、Ｃ４ａ  ｄｅｓＡｒｇ、Ｃ３ａ、Ｃ３ａ  ｄｅｓＡｒｇ、Ｃ３ｆ、Ｃ３ｃ、Ｃ３ｄｇ、Ｃ３ｄ、および／またはＣ３ｇ）のレベルの増加は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答の指標である。いくつかの実施形態では、患者のベースラインからのまたは患者の以前に決定されたｉＣ３ｂレベルからの、ｉＣ３ｂの代替マーカーのレベルの２０％未満、２５％未満、３０％未満、３５％未満、４０％未満、または５０％未満の増加は、マルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答の指標である。いくつかの実施形態では、所定の閾値より低いｉＣ３ｂの代替マーカーのレベルはマルチＦｃ治療薬に対する不適切な応答の指標である。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂの代替マーカーの所定の閾値は約５ｎｇ／ｍＬ〜約３０ｎｇ／ｍＬである。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂの代替マーカーの所定の閾値は、約１０ｎｇ／ｍＬ〜約２０ｎｇ／ｍＬである。
【００８２】
ｉＣ３ｂレベルに関して本明細書で使用される用語「決定する」、「測定する」、および「定量する」は、特定の時点でのｉＣ３ｂアッセイによるｉＣ３ｂの血中レベルの評価を指す。ｉＣ３ｂ生成が評価される時点は、投与前、適切な患者におけるマルチＦｃ治療薬の使用後、５分未満、１５分、３０分、１時間、２時間、４時間、１２時間、２４時間、２日、３日、７日、１４日、１ヶ月以上であり得る。上記のように、いくつかの実施形態では、上流補体切断産物（例えば、Ｃ３ａ、Ｃ３ａ  ｄｅｓＡｒｇ、Ｃ４ａおよび／もしくはＣ４ａ  ｄｅｓＡｒｇ）のレベル、またはｉＣ３ｂ切断および／または分解産物（例えば、ｉＣ３ｂ１、ｉＣ３ｂ２、Ｃ３ｆ、Ｃ３ｄｇ、Ｃ３ｄおよび／またはＣ３ｇ）のレベルが、下流のｉＣ３ｂレベルの代替物として使用される。患者における循環ｉＣ３ｂのレベルを決定するための本明細書に記載される方法は、ｉＣ３ｂ１、ｉＣ３ｂ２、Ｃ４ａ、Ｃ４ａ  ｄｅｓＡｒｇ、Ｃ３ａ、Ｃ３ａ  ｄｅｓＡｒｇ、Ｃ３ｆ、Ｃ３ｄｇ、Ｃ３ｄ、および／またはＣ３ｇのレベルの決定に等しく適用されるが、当業者は、そのような測定の理想的なタイミングがｉＣ３ｂとは異なり得ることを認識するであろう。ｉＣ３ｂ１、ｉＣ３ｂ２、Ｃ４ａ、Ｃ４ａ  ｄｅｓＡｒｇ、Ｃ３ａ、Ｃ３ａ  ｄｅｓＡｒｇ、Ｃ３ｆ、Ｃ３ｄｇ、Ｃ３ｄ、および／またはＣ３ｇのレベルは、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、および／またはフローサイトメトリーまたは他の類似の方法によって決定され得る。用語「ｉＣ３ｂの血中レベル」および「ｉＣ３ｂレベル」は、本明細書では互換的に使用され、所与の時点における患者または対象におけるｉＣ３ｂの循環レベルを指す。
【００８３】
ＣＤＣの阻害を決定するためのアッセイは当該分野で既知であり、そして腫瘍細胞株、新鮮な赤血球、または他の材料を使用して種々の方法で達成され得る。アッセイにおいて標的細胞のＣＤＣをもたらす補体経路を活性化するために、標的抗原に対する抗体および補体Ｃ１ｑが一般にこれらのアッセイにおいて必要である。
【００８４】
いくつかの実施形態では、循環ｉＣ３ｂのレベルは、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）またはウエスタンブロットなどの免疫検定法によって決定される。いくつかの実施形態では、循環ｉＣ３ｂのレベルは、米国特許第９，１６４，０８８号に記載されているイムノアッセイ法によって決定される。そのようなアッセイは可溶性ｉＣ３ｂを検出することができる。そのように、ｉＣ３ｂの所定の閾値は、血液サンプルから決定されたｉＣ３ｂの濃度に基づいてよい。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂは循環細胞の表面に結合していてもよい。そのような実施形態では、循環ｉＣ３ｂのレベルはフローサイトメトリーによって決定され得る。そのような実施形態では、循環ｉＣ３ｂの所定の閾値は、ｉＣ３ｂ＋である細胞の割合もしくはパーセンテージとして、および／または所与のｉＣ３ｂに対する相対平均蛍光強度（ＭＦＩ）を有する細胞の割合もしくはパーセンテージとして表すことができる。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂの所定の閾値は、ｉＣ３ｂ＋である好中球および単球の２５％である。さらなる実施形態では、ｉＣ３ｂの所定の閾値は、ベースラインのｉＣ３ｂ  ＭＦＩの１２５％のｉＣ３ｂ  ＭＦＩである。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂレベルはイムノアッセイによって決定される。可溶性および細胞結合ｉＣ３ｂを決定する方法は、所定の閾値を生成するために組み合わせてもよい（例えば、０．０２μｇ／ｍＬ未満のｉＣ３ｂ濃度および／または２５％未満のｉＣ３ｂ＋単球および好中球のパーセンテージおよび／またはベースラインの１２５％未満である単球および好中球におけるｉＣ３ｂ  ＭＦＩ）。さらなる実施態様では、イムノアッセイはＥＬＩＳＡまたはウエスタンブロットである。いくつかの実施形態では、ｉＣ３ｂレベルはフローサイトメトリーによって決定される。
【００８５】
マルチＦｃ治療薬の有効用量を決定するための追加の方法が本明細書で提供され、それはマルチＦｃ治療薬を、それを必要とする対象に開始用量で投与することと、ｉＣ３ｂの循環レベルを測定することと、対象におけるｉＣ３ｂの循環レベルが所定の閾値を下回っている場合、またはｉＣ３ｂ血中レベルの循環レベルが、マルチＦｃ治療薬の開始用量の投与後に投与前のベースラインから不適切な変化を有する場合、対象がマルチＦｃ治療薬の累積漸増用量を必要とすることを決定することと、必要ならばマルチＦｃ治療薬の累積漸増用量を投与することと、を含む。さらなる実施形態では、ｉＣ３ｂの循環レベルを決定するプロセスは、累積漸増用量の投与後に繰り返される。ｉＣ３ｂの循環レベルが第１の投与期間の累積漸増用量の投与後に所定の閾値を下回ったままである場合、またはｉＣ３ｂ血中レベルの循環レベルが投与前ベースラインからの不適切な変化を有する場合、第２の累積漸増用量が第２の投与期間中に投与される。そのような実施形態では、第２の累積増量用量は第１の累積増量用量よりも高用量である。そのような実施形態では、第２投与期間は、第１投与期間よりも短い、長い、または同じ時間であり得る。なおさらなる実施形態では、連続投与期間中にますます高用量のマルチＦｃ治療薬を投与するこのプロセスは、ｉＣ３ｂの所定の閾値に達するまで、またはｉＣ３ｂの血中レベルの循環レベルが投与前ベースラインから適切に変化するまで繰り返される。
【００８６】
ｉＣ３ｂを測定するための新しい技術、および／または既存の技術またはアッセイの感度、特異性、陽性的中率、および／または陰性的中率の変更もしくは改良は、本開示を根本的に変えるものではない。ｉＣ３ｂを評価するための新規および／または改良された技術は、本明細書に記載の方法において使用することができる。
【００８７】
当業者は、患者にマルチＦｃ治療薬を投与する行為とｉＣ３ｂの循環レベルを測定する行為とが同じ人によって行われる必要がないことを理解するであろう。したがって、いくつかの実施形態では、患者にマルチＦｃ治療薬を投与する行為およびｉＣ３ｂの循環レベルを測定する行為は、異なる人によって行われる。いくつかの実施形態では、患者にマルチＦｃ治療薬を投与する行為と、ｉＣ３ｂの循環レベルを測定する行為とは、同じ人によって行われる。さらに、いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬を患者に投与する行為およびｉＣ３ｂの循環レベルを測定する行為は、異なる地理的位置で行われる（例えば、マルチＦｃ治療薬は臨床現場で医師によって投与され、そして患者から血液を採取し、ｉＣ３ｂレベルを決定するために施設外の検査室に送る。）。いくつかの実施形態では、２つの行為は、同じ場所で、かつ／または単一の人または人々のグループの指示の下で実行される。
【００８８】
本明細書で使用される「有効用量」または「治療有効用量」は、所定の閾値を超えるｉＣ３ｂのレベルをもたらし、そしてまた疾患または状態の症状の改善または治療をもたらすマルチＦｃ治療薬の量を指す。改善は、疾患または状態、あるいは疾患または状態の症状の任意の改善または治療である。いくつかの実施形態では、改善は観察可能なまたは測定可能な改善であるか、または対象の全般的な幸福感の改善であり得る。したがって、当業者は、治療によって病状が改善される可能性があるが、その疾患に対する完全な治療法ではない可能性があることを理解する。具体的には、対象における改善は、以下のうちの１つ以上を含み得る；炎症の低減、Ｃ反応性タンパク質のような炎症性の実験室マーカーの減少、自己抗体などの自己免疫マーカーまたは血小板数、白血球数、または赤血球数における１つ以上の改善によって証明されるような自己免疫の減少、発疹または紫斑病の減少、脱力感、しびれ、またはうずきの減少、高血糖症患者における血糖値の上昇、関節痛、炎症、腫れ、または悪化の減少、けいれんおよび下痢の頻度と量の減少、狭心症の減少、組織炎症の減少、または発作頻度の減少；癌の腫瘍量の減少、腫瘍進行までの時間の増加、癌の痛みの減少、生存率の増加、または生活の質の向上、または骨粗鬆症の進行または改善の遅延。
【００８９】
本明細書で使用される場合、「予防」とは、疾患の症状の完全な予防、疾患の症状の発症の遅延、またはその後に発症する疾患の症状の重症度の低減を意味し得る。
【００９０】
本明細書で使用される「対象」または「患者」という用語は、本明細書に記載の方法に従ってマルチＦｃ治療薬が投与される任意の哺乳動物対象を意味すると解釈される。特定の実施形態では、本開示の方法はヒト対象を治療するために使用される。本開示の方法はまた、非ヒト霊長類（例えば、サル、ヒヒ、およびチンパンジー）、マウス、ラット、ウシ、ウマ、ネコ、イヌ、ブタ、ウサギ、ヤギ、シカ、ヒツジ、フェレット、スナネズミ、モルモット、ハムスター、コウモリ、鳥類（鶏、七面鳥、アヒルなど）、魚、爬虫類を治療するためにも使用され得る。いくつかの実施形態では、本開示の方法は、Ｈ因子および／またはＩ因子が欠損していない患者または対象を治療するために使用される。いくつかの実施形態では、本開示の方法は、Ｈ因子および／またはＩ因子タンパク質の機能に影響を及ぼすＨ因子および／またはＩ因子遺伝子に変異を有さない対象患者を治療するために使用される。
いくつかの実施形態では、本開示の方法によって治療される患者は、Ｈ因子および／またはＩ因子の突然変異または欠乏に関連するおよび／またはそれによって引き起こされる溶血性尿毒症症候群、膜増殖性糸球体腎炎、または加齢性黄斑変性症に罹患していない。
【００９１】
投与経路は、当然、治療される疾患の位置および性質によって異なり、例えば、皮内、経皮（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ）、皮下（ｓｕｂｄｅｒｍａｌ）、非経口、経鼻、静脈内、筋肉内、鼻腔内、皮下（ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、経皮（ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ）、気管内、腹腔内、腫瘍内、灌流、洗浄、直接注射、および経口投与などが挙げられる。
【００９２】
一実施形態では、マルチＦｃ治療薬は、静脈内、皮下、経口、腹腔内、舌下、口腔内、経皮、直腸内、皮下インプラントによって、または筋肉内に投与される。特定の実施形態では、マルチＦｃ治療薬は静脈内、皮下または筋肉内に投与される。
【００９３】
マルチＦｃ治療薬による治療に適した病状には、アレルギー、癌、自己免疫疾患、感染症、炎症性疾患、および増加したまたは不適切な補体活性を含む、補体活性化または補体媒介エフェクター機能によって引き起こされるまたは関連する任意の疾患が含まれる。このような病状には、エクリズマブなどの補体結合薬で現在または過去に治療されたことがある病状が含まれる。エクリズマブは補体タンパク質Ｃ５（古典的補体経路においてＣ１およびＣ１ｑの下流にある補体タンパク質）に結合し、その切断およびその後の補体媒介細胞溶解を阻害する。マルチＦｃ治療薬は、当該分野で既知の他の補体結合薬に対する安全で効果的な代替物を提供する。例えば、いくつかの実施形態では、マルチＦｃ治療薬は、古典的補体経路のＣ１複合体中の最初のサブユニットであるＣ１ｑに結合する。本明細書に記載の方法での治療に適した病状には、重症筋無力症、溶血性尿毒症症候群（ＨＵＳ）、非典型溶血性尿毒症症候群（ａＨＵＳ）、発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）、膜性腎症、視神経脊髄炎、同種移植片抗体媒介拒絶反応、ループス腎炎、黄斑変性症、鎌状赤血球症、および膜性増殖性糸球体腎炎（ＭＰＧＮ）が挙げられるがこれらに限定されない。マルチＦｃ治療薬による治療に適したさらなる病状には、ＩＶＩＧを含む広範な免疫抑制療法で現在日常的に治療されているもの、または自己免疫性血球減少症、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー、ギラン・バレー症候群、重症筋無力症、抗第ＶＩＩＩ因子自己免疫疾患、皮膚筋炎、血管炎、およびぶどう膜炎などのＩＶＩＧが臨床的に有用であることが判明しているもの（Ｆ．Ｇ．ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｍｅｃｈｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２６，１１２３（１９９２）、Ｐ．Ｇａｊｄｏｓ  ｅｔ  ａｌ，Ｌａｎｃｅｔ，３２３（１９８４）、Ｙ．Ｓｕｌｔａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ  ｉｉ，７６５（１９８４）；Ｍ．Ｃ．Ｄａｌａｋａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２９，１９９３（１９９３）、Ｄ．Ｒ．Ｊａｙｎｅ  ｅｔ  ａｌ，Ｌａｎｃｅｔ  ３３７，１１３７（１９９１）、Ｐ．ＬｅＨｏａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｃｕｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｎｆｌａｍｍ．８，４９（２０００）を参照）、およびモノクローナル抗体が使用され得るかまたは既に臨床使用されている癌または炎症性疾患状態が含まれる。本発明の主題である化合物によって効果的に治療され得るものに含まれる状態には、サイトカインネットワークにおける不均衡を伴う炎症性疾患、病原性自己抗体もしくは自己攻撃性Ｔ細胞によって媒介される自己免疫障害、または慢性再発性自己免疫、炎症性、または感染症または感染プロセスの急性もしくは慢性期が含まれる。
【００９４】
さらに、補体が関与する炎症性成分を有する他の病状、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、アルツハイマー病、パーキンソン病、心筋梗塞、脳卒中、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス関連炎症、副腎白質ジストロフィー、およびてんかん性疾患、特にラスムッセン症候群、ウェスト症候群、およびレノックス−ガースト症候群を含むウイルス感染後脳炎に関連すると考えられているものなどは、マルチＦｃ治療薬による治療から恩恵を受けるであろう。
【００９５】
補体阻害は、抗体媒介疾患を減少させることが実証されている（例えば、Ｓｔｅｇａｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ２０１１  Ｎｏｖ；１１（１）：２４０５−２４１３を参照されたい）。本発明の方法はまた、抗体媒介性の疾患または状態を治療するためにも使用され得る。自己抗体は多くの既知の自己免疫疾患を媒介し、そしておそらく他の多数の自己免疫疾患において役割を果たす。本発明の方法を使用することができる認識された抗体媒介性疾患には、グッドパスチャーを含む抗糸球体基底膜抗体媒介性腎炎、固形臓器移植における抗ドナー抗体（ドナー特異的同種抗体）、視神経脊髄炎における抗Ａｑｕａｐｏｒｉｎ−４抗体、神経筋緊張症、辺縁系脳炎、およびモーバン症候群における抗ＶＧＫＣ抗体、重症筋無力症における抗ニコチン性アセチルコリン受容体および抗ＭｕＳＫ抗体、ランバートイートン筋無力症候群における抗ＶＧＣＣ抗体、腫瘍とよく関連する辺縁系脳炎における抗ＡＭＰＡＲおよび抗ＧＡＢＡ（Ｂ）Ｒ抗体、スティフパーソン症候群または過剰驚愕症における抗ＧｌｙＲ抗体、再発性の自然流産、ヒューズ症候群、および全身性エリテマトーデスにおける抗リン脂質、抗カルジオリピン、および抗β２糖タンパク質Ｉ抗体、スティフパーソン症候群、自己免疫性小脳性運動失調症または辺縁系脳炎における抗グルタミン酸デカルボキシラーゼ抗体、多くの場合、卵巣奇形腫と関連しているが、非腫瘍性であり得る若年成人および小児では顕著な運動障害を伴う辺縁系および皮質下の両方の特徴を含む新たに記載された症候群における抗ＮＭＤＡ受容体抗体、
全身性エリテマトーデスにおける抗二本鎖ＤＮＡ、抗一本鎖ＤＮＡ、抗ＲＮＡ、抗ＳＭ、および抗Ｃ１ｑ抗体、強皮症、シェーグレン症候群、抗Ｒｏ、抗Ｌａ、抗Ｓｃｌ  ７０、抗Ｊｏ−１などの多発性筋炎を含む結合組織疾患における抗核抗体および抗核小体抗体、慢性関節リウマチにおける抗リウマチ因子抗体、結節性多発動脈炎における抗Ｂ型肝炎表面抗原抗体；クレスト症候群における抗セントロメア抗体、心内膜炎におけるまたは心内膜炎のリスクとしての抗連鎖球菌抗体、橋本甲状腺炎における抗チログロブリン、抗甲状腺ペルオキシダーゼ、および抗ＴＳＨ受容体抗体、混合性結合組織病および全身性エリテマトーデスにおける抗Ｕ１  ＲＮＰ抗体、天疱瘡における抗デスモグレイン抗体および抗ケラチノサイト抗体、が含まれるが、これらに限定されない。
【００９６】
マルチＦｃ治療薬は、以下を含むがこれらに限定されない状態を治療するために使用できる、鬱血性心不全（ＣＨＦ）、血管炎、酒さ、ニキビ、湿疹、心筋炎およびその他の心筋の症状、全身性エリテマトーデス、糖尿病、脊椎症、滑膜線維芽細胞、骨髄間質、骨喪失、パジェット病、破骨細胞腫；多発性骨髄腫；乳癌、廃用性骨減少症、栄養失調、歯周病、ゴーシェ病、ランゲルハンス細胞組織球増加症、脊髄損傷、急性敗血症性関節炎、骨軟化症、クッシング症候群、単骨性線維性異形成、多発性線維性異形成、歯周組織再建、および骨折、サルコイドーシス、骨溶解性骨癌、肺癌、腎臓癌および直腸癌、骨転移、骨痛管理、および体液性悪性高カルシウム血症、強直性脊椎炎およびその他の脊椎関節症、移植拒絶反応、ウイルス感染症、血液腫瘍および新生物様症状、例えばホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫（バーキットリンパ腫、小リンパ球性リンパ腫／慢性リンパ性白血病、菌状息肉腫、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、有毛細胞性白血病およびリンパ性白血病）、Ｂ細胞性急性リンパ芽球性白血病／リンパ腫、およびＴ細胞性急性リンパ芽球性白血病／リンパ腫、胸腺腫を含むリンパ球前駆細胞の腫瘍、末梢Ｔ細胞性白血病、成人Ｔ細胞白血病／Ｔ細胞リンパ腫および大顆粒リンパ球性白血病を含む成熟ＴおよびＮＫ細胞の腫瘍、ランゲルハンス細胞組織球症、成熟したＡＭＬ、分化していないＡＭＬを含む急性骨髄性白血病などの骨髄性新生物、急性前骨髄球性白血病、急性骨髄単球性白血病、および急性単球性白血病、骨髄異形成症候群、および慢性骨髄性白血病を含む慢性骨髄増殖性疾患、中枢神経系の腫瘍、例えば脳腫瘍（神経膠腫、神経芽細胞腫、星状細胞腫、髄芽腫、上衣腫、網膜芽細胞腫）、固形腫瘍（鼻咽頭癌、基底細胞癌、膵臓癌、胆管癌、カポジ肉腫、精巣癌、子宮、膣または子宮頸癌、卵巣癌、原発肝臓癌または子宮内膜癌、血管系の腫瘍（血管肉腫および血管外皮腫））または他の癌。
【００９７】
本明細書における「癌」は、典型的には無秩序な細胞増殖を特徴とする哺乳動物における生理学的状態を指すかまたは説明する。癌の例としては、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫（脂肪肉腫、骨肉腫、血管肉腫、内皮肉腫、平滑筋肉腫、脊索腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮腫、横紋筋肉腫、線維肉腫、粘液肉腫、および軟骨肉腫が含まれる）、神経内分泌腫瘍、中皮腫、滑膜腫、神経鞘腫、髄膜腫、腺癌、黒色腫、および白血病またはリンパ性悪性腫瘍が挙げられるがこれらに限定されない。そのような癌のより特定の例には、扁平上皮癌（例えば、上皮扁平上皮癌）、小細胞肺癌を含む肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌および肺の扁平上皮癌、小細胞肺癌、腹膜の癌、肝細胞癌、胃腸癌を含む胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ  ｏｒ  ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、膵臓癌、膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝癌、膀胱癌、肝細胞腫、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌または子宮癌、唾液腺癌、腎臓癌（ｋｉｄｎｅｙ  ｏｒ  ｒｅｎａｌ  ｃａｎｃｅｒ）、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、精巣癌、食道癌、胆道の腫瘍、ユーイング腫瘍、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、ユーイング腫瘍、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、肝癌、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胚性癌腫、ウィルムス腫瘍、精巣腫瘍、肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンストロームマクログロブリン血症、骨髄異形成疾患、重鎖疾患、神経内分泌腫瘍、神経鞘腫、および他の癌腫、ならびに頭頸部癌が含まれる。
【００９８】
自己免疫疾患を治療するためにマルチＦｃ治療薬を使用することができる。本明細書で使用される「自己免疫疾患」という用語は、８０を超える疾患および状態の多様な群を指す。これらの病気や症状のすべてにおいて、根本的な問題は体の免疫システムが体そのものを攻撃するということである。自己免疫疾患は、結合組織、神経、筋肉、内分泌系、皮膚、血液、ならびに呼吸器系および消化器系を含むすべての主要な身体系に影響を及ぼす。自己免疫疾患には、例えば、全身性エリテマトーデス、慢性関節リウマチ、多発性硬化症、重症筋無力症、および１型糖尿病が含まれる。
【００９９】
本発明の組成物および方法を用いて治療可能な疾患または状態は、鎌状赤血球症、特発性血小板減少性紫斑病、同種免疫／自己免疫性血小板減少症、後天性免疫性血小板減少症、自己免疫性好中球減少症、自己免疫性溶血性貧血、パルボウイルス、Ｂ１９関連赤血球形成不全、後天性抗第ＶＩＩＩ因子自己免疫、後天的フォンビルブラント病、多発性骨髄腫および意義不明の単クローン性免疫グロブリン血症、敗血症、再生不良性貧血、赤芽球ろう、ダイヤモンド−ブラックファン貧血、新生児の溶血性疾患、免疫介在性好中球減少症、血小板輸血に対する不応性、新生児、輸血後紫斑病、溶血性尿毒症症候群、全身性血管炎、血栓性血小板減少性紫斑病、またはエバン症候群を含むがこれらに限定されない。
【０１００】
疾患または状態はまた、ギラン・バレー症候群、慢性炎症性脱髄性ポリジニューロニューロパチー、パラプロテインＩｇＭ脱髄性多発ニューロパチー、ランバート−イートン筋無力症、重症筋無力症、多巣性運動ニューロパチー、抗／ＧＭ１に関連した下部運動ニューロン症候群、脱髄、多発性硬化症および視神経炎、スティフマン症候群、抗Ｙｏ抗体を伴う腫瘍随伴性小脳変性症、腫瘍随伴性脳脊髄炎、抗Ｈｕ抗体を伴う感覚神経障害、てんかん、脳炎、骨髄炎、特にヒトＴ細胞リンパ球向性ウイルス−１に関連する骨髄症、自己免疫性糖尿病性ニューロパチー、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、または急性特発性自律神経障害ニューロパチーを含むがこれらに限定されない、神経免疫学的プロセスであり得る。
【０１０１】
疾患または状態はまた、難聴または失明に関連する炎症または自己免疫であり得る。例えば、疾患または状態は、騒音誘発性難聴または加齢性難聴などの自己免疫性難聴であってもよく、または聴覚機器（たとえば、人工内耳）などの機器の移植に関連していてもよい。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される組成物は、デバイスの移植の前に、それと同時に、またはその後に被験体に投与され得る。
【０１０２】
疾患または状態はまた、限定されないが、川崎病、関節リウマチ、フェルティ症候群、ＡＮＣＡ陽性血管炎、自発性多発性筋炎、皮膚筋炎、抗リン脂質症候群、再発性自然流産、全身性エリテマトーデス、若年性突発性関節炎、レイノー病、クレスト症候群、またはぶどう膜炎などを含む、リウマチ性疾患プロセスであり得る。
【０１０３】
疾患または状態はまた、これらに限定されないが、中毒性表皮壊死症、壊疽、肉芽腫、尋常性天疱瘡、水疱性類天疱瘡、落葉状天疱瘡を含む自己免疫性皮膚水疱症、白斑、連鎖球菌中毒性ショック症候群、強皮症、びまん性および限局性皮膚全身性硬化症を含む全身性硬化症またはアトピー性皮膚炎（特にステロイド依存性）を含む皮膚免疫疾患プロセスであり得る。
【０１０４】
疾患または状態はまた、封入体筋炎、壊死性筋膜炎、炎症性ミオパチー、筋炎、抗デコリン（ＢＪ抗原）ミオパチー、腫瘍随伴性壊死性ミオパチー、Ｘ連鎖空胞性ミオパチー、ペナシラミン誘発性多発性筋炎（ｐｅｎａｃｉｌｌａｍｉｎｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｐｏｌｙｍｙｏｓｉｔｉｓ）、アテローム性動脈硬化症、冠状動脈疾患、または心筋症を含むがこれらに限定されない筋骨格免疫疾患プロセスであり得る。
【０１０５】
疾患または状態はまた、これらに限定されないが、悪性貧血、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、セリアック病、疱疹状皮膚炎、突発性肝硬変、反応性関節炎、クローン病、ホイップル病、潰瘍性大腸炎、または硬化性胆管炎を含む胃腸免疫疾患プロセスであり得る。
【０１０６】
疾患または状態はまた、移植片対宿主病、移植片の抗体媒介拒絶反応、骨髄移植後拒絶反応、感染症後炎症、リンパ腫、白血病、新形成、喘息、抗β細胞を伴う１型糖尿病、抗体、シェーグレン症候群、混合結合組織病、アジソン病、フォクト−コヤナギ−ハラダ症候群、膜増殖性糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、橋本甲状腺炎、ウェゲナー肉芽腫、微小多発性動脈炎（ｍｉｃｒｏｐｏｌｙａｒｔｅｒｉｔｓ）、チャーグシュトラウス症候群、結節性多発動脈炎、または多臓器不全であり得る。
【０１０７】
疾患または状態は、グッドパスチャー病、固形臓器移植拒絶反応、視神経脊髄炎、神経筋緊張症、辺縁系脳炎、Ｍｏｒｖａｎ線維性舞踏病症候群、重症筋無力症、ランバートイートン筋無力症候群、自律神経障害、アルツハイマー病、アテローム性動脈硬化症、パーキンソン病、スティフパーソン症候群または過剰驚愕症、再発性の自然流産、ヒューズ症候群、全身性エリテマトーデス、自己免疫性小脳性運動失調症、強皮症を含む結合組織疾患、シェーグレン症候群、多発性筋炎、慢性関節リウマチ、結節性多発動脈炎、クレスト症候群、心内膜炎、橋本甲状腺炎、混合結合組織病、チャネル病、連鎖球菌感染症に関連した小児自己免疫性神経精神障害（ＰＡＮＤＡＳ）、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸受容体に対する抗体、特にＮＲ１、コンタクチン関連タンパク質２、ＡＭＰＡＲ、ＧｌｕＲ１／ＧｌｕＲ２、グルタミン酸デカルボキシラーゼ、ＧｌｙＲα１ａ、アセチルコリン受容体、ＶＧＣＣ  Ｐ／Ｑ型、ＶＧＫＣ、ＭｕＳＫ、ＧＡＢＡ（Ｂ）Ｒ、に関する臨床症状、アクアポリンそして天疱瘡からなる群から選択される抗体媒介性疾患であり得る。疾患または状態は変形性関節症であり得る。
【０１０８】
疾患または症状は、重症筋無力症、溶血性尿毒症症候群（ＨＵＳ）、非定型溶血性尿毒症症候群（ａＨＵＳ）、発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）、視神経脊髄炎、同種移植片の抗体媒介性拒絶反応、膜性腎症を含む腎症、ならびに膜増殖性糸球体腎炎（ＭＰＧＮ）およびループス腎炎を含む腎炎からなる群から選択される補体媒介疾患であり得る。
【０１０９】
疾患または状態は、ヘモグロビンＳＳ、ヘモグロビンＳＣ、ヘモグロビンＳβ  ０サラセミア、ヘモグロビンＳβ  ＋サラセミア、ヘモグロビンＳＤ、およびヘモグロビンＳＥを含む鎌状赤血球症などの貧血を含む血液障害であり得る。
【０１１０】
疾患または状態は、加齢黄斑変性症、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、またはパーキンソン病を含む炎症性疾患であり得る。
【０１１１】
本明細書で使用される「アレルギー」は、ＩｇＥによって媒介されるすべての免疫反応、ならびにＩｇＥ媒介反応を模倣するそれらの反応を含む。アレルギーは、ＩｇＥまたはＩｇＥ様免疫応答を引き起こす、タンパク質、ペプチド、炭水化物、およびそれらの組み合わせを含むアレルゲンによって誘発される。例示的なアレルギーとしては、ナッツアレルギー、花粉アレルギー、および昆虫刺されアレルギーが挙げられる。例示的なアレルゲンは、ツタウルシおよびオークのウルシオール、ハウスダスト抗原、白樺の花粉成分Ｂｅｔ  ｖ  １およびＢｅｔ  ｖ  ２、セロリ中の１５ｋＤ抗原、リンゴ抗原Ｍａｌ  ｄ  １、桃のＰｒｕ  ｐ３、チモシー草花粉アレルゲンＰｈｌ  ｐ  １、ライムギのＬｏｌ  ｐ  ３、Ｌｏｌ  ｐ  Ｉ、またはＬｏｌ  ｐ  Ｖ、バミューダグラスのＣｙｎ  ｄ  １、ダストダニアレルゲンダストダニＤｅｒ  ｐ１、Ｄｅｒ  ｐ２、またはＤｅｒ  ｆ１、グルテン中のα−グリアジンおよびγ−グリアジンエピトープ、ハチ毒ホスホリパーゼＡ２、落花生のＡｒａ  ｈ  １、Ａｒａ  ｈ  ２、およびＡｒａ  ｈ  ３エピトープを含む。
【０１１２】
本発明はさらに、感染病原体によって引き起こされる疾患の治療方法を含む。感染病原体には、これらに限定されないが、細菌性、真菌性、寄生虫性、およびウイルス性の物質が含まれる。そのような感染病原体の例としては、以下が挙げられる：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ属、メチシリン耐性Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  Ａｕｒｅｕｓ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ、連鎖球菌科（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃａｃｅａｅ）、ナイセリア科（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａａｃｅａｅ）、球菌、腸内細菌科（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ）、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ属、バンコマイシン耐性Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ属、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ属、シュードモナス科（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｄａｃｅａｅ）、ビブリオ科（Ｖｉｂｒｉｏｎａｃｅａｅ）、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ属、パスツレラ科（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａｃｅａｅ）、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ属、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ属、Ｂｒｕｃｅｌｌａ属、レジオネラ科（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａｃｅａｅ）、バクテロイデス科（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄａｃｅａｅ）、グラム陰性菌、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ属、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、グラム陽性菌、炭疽菌、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ属、Ｎｏｃａｒｄｉａ属、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ属、Ｂｏｒｒｅｌｉａ属、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ属、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ属、Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ属、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ属、Ｃｈｌａｍｙｄｉａｅ属、Ｃａｎｄｉｄａ属、全身真菌症、日和見真菌症、原虫、線虫、吸虫、条虫、アデノウイルス、ヘルペスウイルス（例えば、単純ヘルペスウイルスおよびエプスタインバーウイルス、ならびに帯状疱疹ウイルスを含む）、ポックスウイルス、パポバウイルス、肝炎ウイルス（例えば、Ｂ型肝炎ウイルスおよびＣ型肝炎ウイルスを含む）、パピローマウイルス、オルソミクソウイルス（例えば、Ａ型インフルエンザ、Ｂ型インフルエンザ、およびＣ型インフルエンザを含む）、パラミクソウイルス、コロナウイルス、ピコルナウイルス、レオウイルス、トガウイルス、フラビウイルス、ブニヤウイルス科、ラブドウイルス、ロタウイルス、ＲＳウイルス、ヒト免疫不全ウイルスおよびレトロウイルス。例示的な感染症としては、カンジダ症、カンジダ血症、アスペルギルス症、連鎖球菌性肺炎、連鎖球菌性皮膚病および口腔咽頭病（ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃａｌ  ｓｋｉｎ  ａｎｄ  ｏｒｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）、グラム陰性セプシス、結核、単核球症、インフルエンザ、ＲＳウイルスによる呼吸器疾患、マラリア、住血吸虫症、およびトリパノソーマ症が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１３】
本明細書に引用されたすべての参考文献は、その全体が参考として組み込まれる。
【実施例】
【０１１４】
実施例１：ＣＤＣからＧＬ−２０４５で保護された抗体オプソニン化細胞
補体媒介性細胞傷害性（ＣＤＣ）の阻害についてのＧＬ−２０４５の治療有効用量を決定するために実験を行った。手短に言えば、ＣＤ２０＋Ｂ細胞リンパ腫系、ＳＵＤＨＬ４およびＲａｍｏｓを、抗ＣＤ２０抗体（リツキシマブ、１０μｇ／ｍＬ）と共に２％ＦＢＳを含む培地中、氷上で５分間インキュベートした。リツキシマブ（ＲＴＸ）、ＧＬ−２０４５、熱凝集ＩＶＩＧ（ＨＡＧＧ）、およびＩＶＩＧ（１０、５０、１００、５００、１０００および１０，０００μｇ／ｍＬ）を正常ヒト血清と共に３７℃で１０〜１５分間インキュベートした。血清／試験化合物混合物を細胞に最終濃度６％まで添加した。試料を３７℃で４５分間インキュベートした。ＳＵＤＨＬ４およびＲａｍｏｓ細胞の細胞傷害性を、アネキシンＶ／７−ＡＡＤ染色のフローサイトメトリー検出によって測定した。両方の細胞株について、試験したＧＬ−２０４５の最大有効用量は１００μｇ／ｍＬであった。さらに、ＧＬ−２０４５は、同様の用量でＩＶＩＧよりも実質的に強力であった（図１Ａおよび図１Ｂ）。
【０１１５】
実施例２：ＧＬ−２０４５は限定された初期補体活性化を推進した。
ＧＬ−２０４５が細胞をＣＤＣから保護するメカニズムを決定するために実験を行った。無細胞系において、正常ヒト血清（ＮＨＳ）を、漸増濃度のＧＬ−２０４５、ＨＡＧＧ、およびＩＶＩＧ（１〜１０，０００μｇ／ｍＬ）と共に３７℃で９０分間インキュベートした。補体分割産物のレベルＣ４ａ、Ｃ３ａおよびＣ５ａをＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  ＣＢＡ  ｈｕｍａｎ  ａｎａｐｈｙｌａｔｏｘｉｎ  ｋｉｔ（カタログ番号５６１４１８）で評価した。この系において、ＧＬ−２０４５は、Ｃ４ａの増加によって示されるＣ４の有意な切断（図２、左パネル）、およびＣ３ａのより小さな増加によって示される中程度のＣ３の切断を媒介した（図２、中央パネル）。さらに、ＧＬ−２０４５で処理した血清は、検出可能なレベルのＣ５ａを含まなかった（図２、右パネル）。これらのデータは、Ｃ４ａ産生によって実証されるように、ＧＬ−２０４５が古典的補体活性化の初期段階を活性化するが、下流のＣ３切断を媒介する能力には限界を有し、試験用量でＣ５切断を媒介できないことを実証する。結果は、ＧＬ−２０４５が下流の活性化を媒介することができないことで限定された初期補体活性化を推進することを示した。
【０１１６】
実施例３：ＧＬ−２０４５による限定的補体活性化はＨ因子に依存していた。
下流補体活性化を阻害するＧＬ−２０４５の能力に基づいて、Ｈ因子などの補体活性化の調節因子がＧＬ−２０４５の作用に関与しているか否かを決定するために実験を行った。Ｈ因子は、代替的および古典的補体活性化の両方の重要な調節因子であり、異常なおよび過剰な補体活性化の防止において重要な役割を果たしている。Ｈ因子枯渇血清を様々な濃度のＧＬ−２０４５、ＨＡＧＧおよびＩＶＩＧ（０．０１〜１０，０００μｇ／ｍＬ）と共にインキュベートし、Ｃ４ａ、Ｃ３ａおよびＣ５ａ産生を上流（Ｃ３ａ、Ｃ４ａ）および下流（Ｃ５ａ）の指標として測定した。Ｈ因子枯渇血清において、ＧＬ−２０４５、ＨＡＧＧ、またはＩＶＩＧのいずれについても有意なレベルのＣ４ａは観察されず、これは、Ｈ因子が古典的補体経路の活性化の開始においてこれまで報告されていない役割を果たし得ることを示す（図３、左パネル）。驚くべきことに、そして正常なヒト血清とは対照的に、Ｈ因子欠乏血清において、ＧＬ−２０４５およびＩＶＩＧの両方が、Ｈ因子の非存在下で有意なレベルのＣ３ａおよびＣ５ａの両方の生成を媒介した（図３、中央および右パネル）。Ｈ因子欠乏血清のＨ因子による再構成は、１００μｇ／ｍＬのＧＬ−２０４５および１００μｇ／ｍＬのＩＶＩＧへの曝露後にＣ３ａおよびＣ５ａのレベルの濃度依存的な減少をもたらした（図４）。これらのデータは、Ｈ因子が下流の補体活性化を阻害するためのマルチＦｃ治療薬の能力を媒介することにおいて重要な役割を果たすことを示している。適切なＨ因子の存在下で、マルチＦｃ治療薬への曝露時のＣ５ａ生成の不在は、Ｃ３ｂが古典的または代替的なＣ５コンバターゼのいずれにも組み込まれず、代わりにｉＣ３ｂに分解されることを意味する。
【０１１７】
実施例４：ＧＬ−２０４５はＨ因子およびＩ因子の機能を促進し、ｉＣ３ｂ生成を増強した。
ＧＬ−２０４５、Ｈ因子、およびＩ因子間の相互作用をさらに明確にするために実験を行った。代替形態のＣ３コンバターゼは、ＧＬ−２０４５、ＨＡＧＧ、またはＩＶＩＧの存在下で、Ｈ因子あり（図５、黒いバー）またはＨ因子なし（図５、白いバー）での、Ｃ３ｂ、Ｄ因子、Ｂ因子、およびＣ３のインキュベーションによって生成した。予想されたように、Ｈ因子は、Ｃ３ａの減少によって示されている、代替Ｃ３コンバターゼの作用を阻害した。驚くべきことに、ＧＬ−２０４５の添加は、Ｃ３ａの用量依存的な減少によって注目されるように、濃度依存的にＨ因子の阻害機能を増強した（図５）。Ｈ因子はＩ因子の補因子であるので、Ｈ因子、Ｉ因子、およびＧＬ−２０４５の間の相互作用を決定するために類似の系が使用された。Ｃ３ａ生成は、増加する濃度のＩ因子（１または２５μｇ／ｍＬ）の存在下、一定の準最適濃度のＨ因子（１μｇ／ｍＬ）の存在下で測定された。ＧＬ−２０４５は、Ｈ因子およびＩ因子が濃度依存的に代替型のＣ３コンバターゼを阻害する能力を増強した（図６Ａ、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１）。したがって、ＧＬ−２０４５は、準最適濃度のＨ因子の存在下でさえ、下流の補体活性化を阻害し、そしてＨ因子およびＩ因子の機能を増強することができた。
【０１１８】
さらに、マルチＦｃ治療薬ＧＬ−２０４５、Ｇ９９４、Ｇ９９８、およびＧ１０３３の添加はすべて、有意なレベルのｉＣ３ｂを誘導した（図６Ｂおよび６Ｃ）。マルチＦｃ治療薬によって誘導されたｉＣ３ｂのレベルはいくつかの重要な点を示した。第一に、ＧＬ−２０４５とＩＶＩＧはｉＣ３ｂの増加を誘導することができたが、ＧＬ−２０４５はＩＶＩＧと比較してｉＣ３ｂのより高い全体レベルを誘導し（それぞれ約４０μｇ／ｍＬと比較して約２５０μｇ／ｍＬ）、治療閾値を超えるｉＣ３ｂレベルを生成することにおいて、ＧＬ−２０４５がＩＶＩＧよりも強力であることを示唆している。
【０１１９】
第二に、ＧＬ−２０４５、Ｇ９９４、Ｇ９９８、またはＧ１０３３の非存在下では補体カスケードの活性化はなく、したがって古典的補体経路の活性化がｉＣ３ｂ生成に必要とされるのでｉＣ３ｂは生成されない。実際、１μｇ／ｍＬでのまたはそれ以下の濃度のＧＬ−２０４５、Ｇ９９４、Ｇ９９８、またはＧ１００３は比較的少量のｉＣ３ｂを生成したが、１０〜１００μｇ／ｍＬの濃度の化合物は実質的なｉＣ３ｂ生成をもたらした。第３に、ｉＣ３ｂのレベルは１００μｇ／ｍＬのＧＬ−２０４５の存在下で２５０μｇ／ｍＬでピークに達し、そして増加する濃度のＧＬ−２０４５と共に急速に漸減するが（図６Ｂ）、これは最大の薬物効果があり、そしてマルチＦｃ治療薬の用量をさらに増加させることは有害であり得ることを示す。驚くべきことに、１００μｇ／ｍＬのＧＬ−２０４５はまたＣＤＣの阻害について試験した最大有効用量であった（図１Ａおよび図１Ｂ）。したがって、これらのデータは、ｉＣ３ｂがＧＬ−２０４５の最大治療有効用量の代わりとして役立つ可能性を示している。
【０１２０】
実施例５：ｉＣ３ｂレベルはインビボでの有効なＧＬ−２０４５用量と相関する
マウス腎炎モデルにおけるｉＣ３ｂレベルとＧＬ−２０４５の治療効果との相関を評価するために実験を行った。このモデルでは、ラットメサンギウム細胞上に存在する表面Ｔｈｙ−１抗原に対して反応性である胸腺細胞に対する抗体（ＡＴＳ）が使用されている（Ｙａｍａｍｏｔｏ  １９８７およびＪｅｆｆｅｒｓｏｎ  １９９９）。ＡＴＳの投与は補体依存性メサンギウム分解を誘発し、続いて急速なメサンギウム増殖性糸球体腎炎を誘発し、これは注射後５日以内にピークに達し、そしてその後経時的に消散する。
【０１２１】
０日目に、Ｗｉｓｔａｒラット（ｎ＝８）にマウス抗ラットＣＤ９０（Ｔｈｙ１．１）（Ｃｅｄａｒ  Ｌａｎｅ）を注射することにより疾患を誘発し、糸球体腎炎を誘発した。０、２、４および６日目に、動物を異なる用量のＣＤＣ阻害性ストラドマーで処置した。対照の非罹患動物は、抗Ｔｈｙ１抗体または他の処置を受けなかった。陽性対照タクロリムスは、抗血清注射の前の−９日目から始めて毎日１ｍｇ／ｋｇの筋肉内投与量で投与される。０日目の投与は抗血清注射の４時間前であった。投与前ならびに抗血清注射後３、５、７および９日目に尿を採取した。腎臓を研究終了時にラットから採取し、組織学的分析のために１０％ホルマリンで固定する。血清を血清ＢＵＮ分析およびｉＣ３ｂレベルの決定のために収集する。
【０１２２】
図７Ａ〜７Ｂは、腎炎のＴｈｙ−１モデルにおけるタンパク尿からの保護に対する異なる用量でのＧ９９８の効果（図７Ａ）およびタンパク尿からの保護に対するＧ９９４およびＧ９９８の効果（図７Ｂ）を示す。図７Ａは、このモデルにおける２ｍｇ／Ｋｇ  ＩＶでのＧ９９８の部分的有効性および１０ｍｇ／Ｋｇ  ＩＶ以上の用量での完全な有効性を実証する。さらなる結果は、異なる用量のマルチＦｃ治療剤Ｇ９９８が異なるレベルのｉＣ３ｂ生成、Ｃ３ａ生成、およびＣ４ａ生成と関連することを実証する。さらなる結果はまた、マルチＦｃ治療薬の最大治療効果に対応する用量はまた、ｉＣ３ｂにおいてベースラインを超える最大の増加を生じることを実証する。さらに、本発明者らは、意図せずにＣ３ａに特異的な現在のラットＥＬＩＳＡキットがＣ３もピックアップする、すなわちＣ３ａ＋Ｃ３ａ  ｄｅｓＡｒｇに特異的ではないことを見出した。図７Ｂは、５ｍｇ／Ｋｇ  ＩＶで投与されたＧ９９４およびＧ９９８の両方がこのモデルにおける完全な有効性と関連していたことを実証している。さらなる結果は、Ｇ９９４およびＧ９９８の治療有効用量（例えば、タンパク尿生成からの保護、腎炎の組織学的証拠の減少、および／またはプラセボ治療と比較したＢＵＮレベルの低下）が、血清中検出された閾値レベルを超えるｉＣ３ｂの検出と相関することを示す。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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