(57)【要約】以下のａ）〜ｄ）からなる組成物と、それの製造方法、及び、薬剤としての、もしくは治療、特に腹膜透析においてのそれの使用。ａ）含有量がａ）〜ｄ）の総重量の５〜７５重量％である、マルトース、グリセロール、アミノ酸、オリゴペプチド、又はそれらの１以上の混合物、ｂ）含有量がマルトースの含有量の１／２未満、且つ、総含有量がａ）〜ｄ）の総重量の５重量％未満であるグルコース、ｃ）あわせたときの含有量がマルトースの含有量の１／２未満であるＤＰ３及びＤＰ４のグルカン分子、ｄ）ａ）、ｂ）及びｃ）とあわせて１００重量％となる含有量のＤＰ＞４のグルカン分子であって、ＤＰ＞１０のグルカン分子が、ａ）〜ｄ）の総重量の１５〜８５重量％の量で存在し、ＤＰ＞２４のグルカン分子が、ａ）〜ｄ）の総重量の２〜６０重量％の量で存在し、ＤＰ＞５５のグルカン分子が、ａ）〜ｄ）の総重量の１５重量％未満の量で存在する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下のａ）〜ｄ）を含むことを特徴とする組成物。
ａ）含有量がａ）〜ｄ）の総重量の５〜７５重量％の、マルトース、グリセロール、アミノ酸、オリゴペプチド、又はそれらの１以上の混合物からなる群から選択される化合物、
ｂ）含有量がａ）の含有量の１／２未満、且つ、総含有量がａ）〜ｄ）の総重量の５重量％未満のグルコース、
ｃ）あわせたときの含有量がａ）の含有量の１／２未満の、ＤＰ３及びＤＰ４のグルカン分子、
ｄ）ａ）、ｂ）及びｃ）とあわせて１００重量％となる含有量の、ＤＰ＞４のグルカン分子であって、
−ＤＰ＞１０のグルカン分子が、ａ）〜ｄ）の総重量の１５〜８５重量％の量で存在する。
−ＤＰ＞２４のグルカン分子が、ａ）〜ｄ）の総重量の２〜６０重量％の量で存在する。
−ＤＰ＞５５のグルカン分子が、ａ）〜ｄ）の総重量の１５重量％未満の量で存在する。
【請求項２】
−ａ）〜ｄ）をあわせたときの重量平均分子量が、Ｍｗ０．８〜１５ｋＤ、及び
−ａ）〜ｄ）をあわせたときの数平均分子量が、Ｍｎ０．２〜３ｋＤであることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
ＤＰ＞１１１のグルカン分子が、１．５重量％未満の量で存在することを特徴とする、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
ＤＰ＞２４６のグルカン分子が、０．６重量％未満の量で存在することを特徴とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
ＤＰ＞１０のグルカン分子が、２０〜８０重量％の量で存在することを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
ＤＰ＞１０のグルカン分子が、３５〜８０重量％の量で存在することを特徴とする、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記グルコースを、ａ）の含有量の１／３未満の含有量で含むことを特徴とする、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記グルコースを、少なくとも０．１重量％の含有量で含むことを特徴とする、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
ＤＰ３及びＤＰ４のグルカン分子をあわせた含有量が、ａ）の含有量の１／３未満であることを特徴とする、請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
ＤＰ３及びＤＰ４のグルカン分子をあわせた含有量が、少なくとも０．１重量％であることを特徴とする、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
化合物ａ）又はａ）の化合物の混合物を、８〜６５重量％の含有量で含むことを特徴とする、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
ＤＰ＞４のグルカン分子を、ａ）〜ｄ）の総重量の１６重量％超えの含有量で含むことを特徴とする、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記グルカン分子は誘導体化されることを特徴とする、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
成分ａ）はマルトースであることを特徴とする、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか一項の組成物に対して水を含むことを特徴とする液体水性組成物。
【請求項１６】
浸透圧が２８０〜４５０mosm/kgであることを特徴とする、請求項１５の液体水性組成物。
【請求項１７】
薬剤として用いる、又は治療において用いることを特徴とする、請求項１〜１４のいずれか一項の組成物、又は、請求項１５〜１６のいずれか一項の液体水性組成物。
【請求項１８】
−腹膜治療液もしくは溶液
−透析液もしくは溶液、特に腹膜透析液もしくは溶液
−消化管洗浄液等の消化器液
−栄養液
−栄養輸液
−薬物投与液
−解毒液
−特に生理的体液用の、より具体的には血液、血漿、血清、又は間質液の代用物又は添加物である、生理的代用物又は添加剤調製物
−手術後の癒着抑制液
−浣腸用液
−下剤
−浸透圧剤、特に浸透推進剤
−乳児食
−細胞毒性が低減した医薬品
としての使用、又は腎疾患の治療での使用のための、請求項１〜１４のいずれか一項の組成物、又は請求項１５〜１６のいずれかの液体水性組成物。
【請求項１９】
請求項１５又は１６に記載の液体水性組成物、又は請求項１〜１４のいずれか一項の組成物を製造する方法であって、
−固形分が１０重量％〜６０重量％であるデンプンの水溶液を調製する工程；
−アミログルコシダーゼ及び／又はアミラーゼから選択される酵素の特定の組み合わせを用いて、前記水溶液を連続的に処理することによる糊化工程；
−前記水溶液の精製工程；
−分子量が４００００Ｄを超える分子量糖類画分を排除又は減少させて、他の画分を回収するような方法で、前記水溶液を分画する工程；
−マルトース、グリセロール、アミノ酸、オリゴペプチド、又はそれらの１以上の混合物からなる群から選択される化合物、及び、任意にグルコースを添加する工程；
からなる、請求項１〜１４のいずれか一項で定義される組成物、又は、請求項１５〜１６のいずれかで定義される液体水性組成物を得る製造方法。
【請求項２０】
請求項１５〜１６のいずれかの液体水性組成物、又は請求項１〜１４のいずれか一項の組成物を含有する、少なくとも１つのコンパートメントを備える容器又はキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、組成物の一種としての浸透圧活性組成物（osmotically active composition）等、そのような組成物を含む水溶液、及びその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
とりわけ腹膜透析の分野において、糖類ポリマー調製物（「調製物」は「調整物」と呼ばれる場合もある。）を含めた、非常に様々な浸透圧活性組成物、及び、臨床又は動物モデルにおけるそれらの透析パラメータについて記載する多くの研究が成し遂げられてきたが、それらの組成物のパラメータを規定するために様々な測定方法が適用されてきた。非常によく記載される医療用途のための医療用糖類ポリマー調製物がイコデキストリンである。
【０００３】
半永久的な透析治療は、透析材料（チューブ、透析材料及び溶液）と患者の組織との相互作用により、依然として重大な副作用を引き起こす。
【０００４】
血液透析（ＨＤ）は、最も一般的に用いられる透析治療である。各副作用には、炎症及び心血管系合併症が含まれ、死亡率を高めている。
【０００５】
腹膜透析（ＰＤ）は、体外血液透析に代わるものの代表である。これは大掛かりな器具類に依存しないという利点があり、自宅で行うことができる。さらに、ＰＤは、患者の血液を体から引き出す必要がない。代わりに、この方法では、患者の腹膜毛細血管組織（peritoneal capillary tissue）を膜として使用し、血液と透析液の間で液体や溶解物質（電解質、尿素、グルコース、その他の小分子）を交換する。ＰＤ−液（以下：ＰＤＦ）は、常設のチューブを介して腹部に導入され、腹膜透析貯留（dwell）の終了時に排出される。このような貯留は、さまざまな期間、さまざまな時間間隔で繰り返し実行することができる。おそらく、ＰＤの最も重要な利点は、血液透析（ＨＤ）と比較して、残留する腎臓の活動性を大幅に維持することである。これは、一定量の体液を自然な方法で排出できる患者にとって有利なだけでなく、腹膜透析治療自体にとっても非常に有利であり、腹膜透析液からゆっくり代謝可能な低分子量成分をかなりの量排泄することができる。
【０００６】
一般的なＰＤＦは、浸透圧剤（osmotic agent）としてグルコースを１〜５％の濃度で使用して、液体と毒性物質を血液から透析液へと移動させる。グルコースは血液の低分子量成分である（通常の濃度は約０．１％）。従来のＰＤＦの高グルコース濃度は、透析液から患者の血流へのグルコースの逆拡散につながり、高血糖を引き起こす恐れのあるグルコースのオーバーチャージ状態を生み出す。多くの透析患者は糖尿病であるため、高血糖はとりわけ問題である。
【０００７】
この問題に対処する１つの方法としては、グルコースに代わる代替の浸透圧剤として糖類ポリマーを使用することである。多糖類が記載された先行技術を上に提示する。
【０００８】
グルコースポリマーの全般的な利点は、腹膜及び血液中で、グルコースに分解されず、マルトース及びマルトトリオースにのみ分解されることである。これらの分子は両方とも、体内での代謝が大幅に少なく、大部分は残留腎機能及び／又は逆透析によって次の貯留の透析液に排泄される。
【０００９】
特にポリグルコース系のＰＤＦのもう１つの利点は、これらの溶液がこれら自身の浸透圧を維持することである。一部の浸透物質が体内の吸収によって失われると同時に、腹腔内アミラーゼがポリマーをより小さな糖類に切断し、それによって残っている腹腔内マルトデキストリンの浸透圧を増加させる。その結果、多糖類系ＰＤＦは低浸透圧で投与でき、限外ろ過による液体の吸収（resorption）を何時間も継続する。
【００１０】
１９８６年、ミストリーら（Mistry et al.）及びウィンチェスターら（Winchester et al.）は、それぞれ独立に、非特許文献１においてグルコースポリマーを含むＰＤＦについて述べている。ミストリーは、ＤＰ１〜１０のグルコースポリマーを含むポリマー調製物を、ウィンチェスターは、ＤＰ＜６の分子が５重量％未満のポリマー調製物について述べている。
【００１１】
特許文献１は、ＤＰ＞１２の分子を１５％より多く含むグルコースポリマーを開示し、この調製物はＭｗ７〜３６ｋＤ、好ましくは１５〜２５ｋＤを示す。
【００１２】
特許文献２は、平均ＤＰ４〜１０のグルコースポリマー調製物を開示する。
【００１３】
特許文献３は、ＤＰ１１未満の分子を少なくとも８５重量％、ＤＰ２６未満の分子を少なくとも９９重量％含有する腹膜透析用のグルコースポリマー調製物を開示する。
【００１４】
特許文献４は、ヒトの患者の静脈内投与のための、実質的に透明で、非発熱性の、安定且つ無菌の溶液を開示しており、この溶液は、平均重合度が少なくとも４で、その分子の少なくとも９９％が２６未満のグルコース単位、その分子の少なくとも８５％が１１未満のグルコース単位、及びその分子の少なくとも２０％が４未満のグルコース単位を有する、グルコース重合体混合物を少なくとも２０％w/vを含む。
【００１５】
特許文献５は、ポリマーの少なくとも５０重量％が５０００〜３００００の範囲の分子量であり、ポリマーの少なくとも８０重量％が５０００〜５００００の範囲の分子量であり、重量平均分子量は５０００〜１０００００の範囲であり、数平均分子量は８０００未満であり、グルコースポリマー中に存在する単糖、二糖、及び三糖化合物の含有量は５重量％未満であり、グルコースポリマー中の、分子量が１０００００を超えるグルコースポリマーの含有量が５％未満である、グルコースポリマー混合物を開示する。
【００１６】
特許文献６は、任意に水素添加してもよいデンプン加水分解物を開示しており、そのグルシドスペクトラムは以下を示す：単糖類（ＤＰ＝１）の含有量が１４％未満、二糖類（ＤＰ＝２）の含有量が３５％未満、ＤＰ４〜ＤＰ１０のオリゴ糖の含有量が４２％〜７０％の範囲；ＤＰが１０を超える多糖類の含有量が３２％未満；上記のパーセンテージはすべて、乾燥物質に基づいて計算された重量パーセンテージである。
【００１７】
これまでは、透析液から患者の血液への炭水化物（以下、ＣＨＯとも略す）の逆拡散を減らすために、ＰＤ中の浸透圧剤として高平均分子量の糖類ポリマーが使用されている。このような高分子量ポリマー浸透圧剤の欠点は、高分子量分子は同じパーセンテージの低分子量分子より低い浸透圧を生み出すことである。（特定のw/v濃度に対して）浸透圧活性ポリマーのサイズが大きくなると、溶液の浸透圧は低下する。従って、同等の浸透圧を得るためには、ＣＨＯ濃度を上げる必要がある。例えば、生理的食塩水中７．５％のイコデキストリンは、生理的浸透圧をかろうじて上回り、液体限外濾過の速度は遅い。腹膜からリンパ系を介しての透析液の吸収は比較的一定であるため、結果的に透析貯留中の炭水化物摂取量が多くなる。この事実にもかかわらず、最近の新しい開発では、特許文献７のように、ＰＤＦ中のさらに高い分子量の多糖類を探している。
【００１８】
人間の血液の平均浸透圧は２７５〜２９５mOsm/kgで、塩類、他の低分子量溶質及びタンパク質などの血液中の主要な溶質によるものである。腹膜液は、血液に含まれる主要な塩類とｐＨ緩衝液を含むが、通常タンパク質を含まない。どんな腹膜治療でも、腹膜液が体内に急速に吸収されるのを避けるために、人間の血液浸透圧に近い浸透圧が必要である。腹膜透析では、患者の血液循環コンパートメントから透析液コンパートメントへの流体移動を生み出すために、最終的には血液の浸透圧を超える必要がある。腹膜治療液（ＰＴＦ）及び腹膜透析液（ＰＤＦ）に必要な浸透圧は、「浸透圧剤」の添加によって達成される。浸透圧剤の例は、グルコース及びマルトデキストリン又は他の単糖及び／又は多糖（polymeric saccharide）分子、アミノ酸、シクロデキストリン、ＰＥＧ、そのような化合物の誘導体、及びそのような化合物の混合物及び／又はその誘導体である。溶液の浸透圧はmOsm/kgで測定することができる。現在市販されているＰＤＦは、２８０〜５００mOsm/kgの浸透圧で使用される。
【００１９】
エクストラニール（Extraneal）（登録商標）は、今日販売されている唯一の多糖類含有ＰＤＦである。これには、イコデキストリン、Ｍｗ１３〜１６ｋＤ、Ｍｎ５〜６．５ｋＤのマルトデキストリン（約２．８のＰｏｌｙ−Ｄとなる）が含まれる。エクストラニール（登録商標）のＣＨＯ濃度は、ヒト血液と等浸透圧に達し、限外濾過を開始するのに必要な７．５％である。腹膜腔に注入すると、浸透圧は、８〜１２時間の間に２９０〜３２５mOsm/kgの値へと変化する（非特許文献２）が、透析液の体積はゆっくりと増加し、透析貯留中、体内へのイコデキストリンの平均吸収率は３０〜４０％と報告された（非特許文献３、非特許文献４）。イコデキストリンの進行性の消化は、低濃度アミラーゼによって血流中と同様に腹膜中でも起こっている（非特許文献４）。
【００２０】
イコデキストリンの主な欠点は、限外ろ過が非常に遅いことである。従って、通常８〜１２時間の貯留が用いられる。そのため、ほとんどの場合、エクストラニール（登録商標）は単独療法としては適用できず、８〜１２時間の１日１回の透析利用としてのみ適用され、自動透析でのイコデキストリンの使用も疑問視されている（非特許文献５）。そのため、今日では、ほとんどの場合、体液を効率的に削減するための短時間の透析貯留は、グルコース系ＰＤＦを用いて行われる。
【００２１】
これまでのところ、エクストラニール（登録商標）は、貯留時間が長く、多糖類の吸収が懸念されるため、通常１日に１回、実験的又は例外的にのみ１日に２回用いられる。
【００２２】
Ｍｗ６．４ｋＤ、Ｍｎ２．８ｋＤの実験的なグルコースポリマー調製物が、レイポルドら（非特許文献６）によって記載された。著者らは、１つの低平均分子量調製物（重量平均分子量Ｍｗ６．４ｋＤ、数平均分子量Ｍｎ２．８ｋＤ）と１つの高分子調製物（Ｍｗ１８．８ｋＤ、Ｍｎ９．４ｋＤ）にイコデキストリンを分画した。両方の調製物を、常設カテーテルを備えたウサギモデルで、７．５％の濃度にてテストした。著者らは、このモデルにおいて、２４０分の貯留は、ＰＤ患者内での長時間貯留に相当すると示唆する。この刊行物で、著者は、開始時透析液体積１００ml、２４０分貯留後の、低分子量画分のＮＵＦが約６０〜８５ml、高分子量画分のＮＵＦが約４０〜４５mlであると報告し、低分子量グルコースポリマーがより効果的にＵＦを生み出し、より高いＵＦ効率を生み出し、これらの要因は、ポリマーが腹膜腔からより容易に吸収されるという犠牲の上に現れる、と結論付ける。７．５％未満の濃度での結果は報告されていない。２４０分より短い貯留に対するＮＵＦ体積は報告されなかった。
低Ｍｗ画分と高Ｍｗ画分の間に違いはあったが、低分子量溶液とイコデキストリンを比較するデータは報告されなかった。
【００２３】
最後に、イコデキストリンＰＤＦ溶液の浸透効果を高めるために、イコデキストリンとグルコースを組み合わせた二峰性ＰＤＦが作られているが、このような溶液はもはやグルコースフリーではない（非特許文献５、７）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２４】
【特許文献１】ＥＰ  ０１１５９１１  Ａ１
【特許文献２】ＷＯ  ８３０００８７  Ａ１
【特許文献３】ＥＰ  ００７６３５５  Ａ２
【特許文献４】ＵＳ  ４，１８２，７５６  Ｂ１
【特許文献５】ＵＳ  ６，２４８，７２６  Ｂ１
【特許文献６】ＧＢ  ２  ０４２  ５４７
【特許文献７】ＵＳ２０１２／０２３８５Ａ１
【非特許文献】
【００２５】
【非特許文献１】「腹膜透析のフロンティア」、ジョン  Ｆ．  マーハー  Ｍ．Ｄ．、ジェームズ  Ｆ．  ウィンチェスター  Ｍ．Ｄ．編、１９８６年、シュプリンガー  フェアラーク、ハイデルベルク（“Frontiers in Peritoneal Dialysis”, eds: John F. Maher M.D., James F. Winchester M.D., 1986, Springer Verlag, Heidelberg）
【非特許文献２】ド  ヴァールら（De Wart et al）2001. Peritoneal Dialysis International, Vol. 21, pp. 269-274
【非特許文献３】デービス「イコデキストリンの速度論」（Davies. Kinetics of icodextrin.）Perit Dial Int 1994; 14（Suppl 2）：S45 -50
【非特許文献４】モベルリーら（Moberly et al.）2002. Kidney International, Vol. 62, Supplement 81（2002）, pp. S23-S33
【非特許文献５】フライダら（Freida et al.）2008, Kidney International Vol.73, p S102-S111
【非特許文献６】レイポルドら（Leypoldt et al.）2013, Perotoneal Dialysis International, Vol.33, pp 124-131
【非特許文献７】デュスダンパニスら（Dousdampanis et al.）2013, Internat. J. of Nephrology, Vol. 2013, Article ID424915
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２６】
本発明の目的は、以下の機能や特性のうち１つ以上を満たす組成物を提供することである。
−より低い炭水化物濃度で、イコデキストリンより高い浸透圧を示す。
−そのようなより低い炭水化物濃度で、イコデキストリンと比較して、正味限外濾過（net ultrafiltration）を増やす。
−短い透析貯留（特にヒトで２〜４時間）の間の適度な正味限外濾過を可能にする。
−イコデキストリンに比べて、そのような低減した炭水化物濃度での炭水化物吸収に対する正味限外濾過体積の比率がより高くする。
−グルコースを、最終溶液の０．２％w/v未満の最終濃度で含む。
−全貯留中に、正の浸透圧を維持するのに十分な濃度の高分子量成分を含む。
【課題を解決するための手段】
【００２７】
本発明は、以下を含むか又は以下からなる組成物を提供する。
ａ）含有量がａ）〜ｄ）の総重量の５〜７５重量％、好ましくは８〜６５重量％、より好ましくは１０〜５５重量％の、マルトース、グリセロール、アミノ酸、オリゴペプチド、又はそれらのうち１以上の混合物からなる群から選択される化合物、好ましくはマルトースである。
ｂ）含有量がａ）の含有量の１／２未満、好ましくは１／３未満、且つ、総含有量がａ）〜ｄ）の総重量の５重量％未満のグルコースである。
ｃ）あわせたときの含有量がａ）の含有量の１／２未満、好ましくは１／３未満のＤＰ３及びＤＰ４のグルカン分子である。
ｄ）ａ）、ｂ）及びｃ）とあわせて１００重量％となる含有量の、ＤＰ＞４のグルカン分子である。このとき、
−ＤＰ＞１０のグルカン分子が、ａ）〜ｄ）の総重量の１５〜８５重量％、好ましくは２０〜８０重量％、さらに好ましくは３５〜８０重量％の量で存在する。
−ＤＰ＞２４のグルカン分子が、ａ）〜ｄ）の総重量の２〜６０重量％、好ましくは４〜５８重量％、より好ましくは５〜５６重量％の量で存在する。
−ＤＰ＞５５のグルカン分子が、ａ）〜ｄ）の総重量の１５重量％未満、好ましくは１２重量％未満の量で存在する。
【００２８】
ａ）〜ｄ）をあわせたときの重量平均分子量は、Ｍｗ０．８〜１５ｋＤ、好ましくはＭｗ１．０〜１０ｋＤ、より好ましくはＭｗ１．２〜６．２ｋＤ、又は、１〜６．２ｋＤ、より好ましくは１．４〜６ｋＤ、より好ましくは１．６〜５．８ｋＤであってよい。
【００２９】
ａ）〜ｄ）をあわせたときの数平均分子量は、Ｍｎ０．２〜３ｋＤ、好ましくはＭｎ０．３〜３ｋＤ、より好ましくはＭｎ０．５〜３ｋＤ、又は、０．７〜３ｋＤ、好ましくは０．８〜２．７ｋＤ、より好ましくは０．９〜２．６ｋＤであってよい。
【００３０】
これらＭｗ値とＭｎ値は、例えばＭｗ１〜６．２ｋＤとＭｎ０．７〜３ｋＤといった任意の組み合わせで、組み合わせることができる。
【００３１】
ａ）において、マルトースを単独で使用してもよい。マルトースを、前述のアミノ酸、オリゴペプチド、及び／又はグリセロールなど、インスリン分泌に影響を与えない他の低分子量（Ｍｗ）分子によって部分的又は完全に置き換えてもよい。そのような化合物は、現在適用されている低分子量浸透圧剤の例である。
【００３２】
属性（attribute）の「好ましくは」、「より好ましくは」、「さらにより好ましくは」などで示される特徴は、任意の組み合わせで、つまり、これらの属性のいずれでも示されない特徴と組み合わせることができる。例えば、属性「好ましくは」で示される特徴は、そのような属性のいずれも含まない特徴、又は属性「より好ましく」を含む特徴等と組み合わせることができる。
【００３３】
数字および単位に関連する記号「〜」は、別段の指示がない限り、範囲を示す。
【００３４】
本発明はまた、そのような組成物及び水を含む液体水性組成物（liquid aqueous composition）を提供する。
【００３５】
さらなる態様において、本発明は、医薬としての使用又は治療における使用のための前記組成物又は前記液体水性組成物を提供し、具体的な使用については詳細な説明で述べる。
【００３６】
本発明はまた、以下の工程からなる、上記液体水性組成物を製造する方法を提供する。
−固形分が１０重量％から６０重量％までのデンプンの水溶液を調製する工程。
−アミログルコシダーゼ及び／又はアミラーゼから選択される酵素の特定の組み合わせで連続的に前記水溶液を処理することによる糊化工程。
−前記水溶液を精製する工程。
−４００００Ｄを超える、好ましくは１８ｋＤを超える分子量を有する分子量糖類画分（saccharide fraction）を排除又は減少させて、他の画分を回収する（recover）ような方法で、前記水溶液を分画する工程。
−マルトース、グリセロール、アミノ酸、オリゴペプチド、又はそれらのうち１つ以上の混合物からなる群から選択される化合物、及び任意でグルコースを添加する工程。
【００３７】
これにより、特に、分画によって、及びマルトース、グリセロール、アミノ酸又はオリゴペプチド、任意でグルコースを添加することによって、本発明の組成物が得られ、又は溶液中に得られる。
【００３８】
本発明はまた、上記の液体水性組成物又は本発明の組成物を含む少なくとも１つのコンパートメントを備える容器又はキットを提供する。
【００３９】
全体的な又は特定の実施形態において、本発明により以下の利点のうちの１以上に到達することができる。
−上記組成物は浸透圧活性（osmotical activity）を示す。この意味で、上記組成物は浸透圧活性組成物とも呼ばれる。
−上記液体組成物は、生理的レベルよりも多くのグルコースを含まない（最大０．２％）。
−高分子量（４０ｋＤ超え、さらに好ましくは１８ｋＤ超え）の糖類の画分が大幅に減少している。
−平均分子量がイコデキストリンより低い組成物。この組成物は、イコデキストリンと比較して、１８ｋＤ及び４０ｋＤを超える高分子量糖類をそれぞれ大幅に削減している。
−初代ヒト中皮細胞培養に対するイコデキストリンの細胞毒性効果が減少する。このような細胞毒性効果は、イコデキストリンの高分子量糖類画分に少なくとも部分的に関連があると考えられている。本発明は、細胞毒性の可能性のある高分子量画分を排除または低減する（好ましくは、４０ｋＤ超えが組成物全体の０．６重量％未満、好ましくは０．３重量％未満、さらにより好ましくは１８ｋＤ超えが組成物全体の１．５％未満）。
−本発明の組成物は、生理的濃度の塩類の存在下でＰＴＦ又はＰＤＦに唯一の浸透圧剤として適用される場合、２〜７．２％の総ＣＨＯ（w/v）濃度で、好ましくは２．２〜７％、好ましくは２．４〜６．８％、好ましくは２．６〜６．６％の総ＣＨＯ（w/v）濃度で、等浸透圧を生み出すか、又は、高浸透圧（ヒト血液の生理的浸透圧よりも高い）を生み出すことができる。
−本発明に従って、医療用途において、浸透圧剤として作用する組成物、好ましいＰＴＦ、好ましいＰＤＦが提供される。該組成物は、単独で、又は低分子量浸透圧剤と一緒に、十分に高い浸透圧を生み出して、患者の腹膜腔への腹膜透析液の注入後、腹膜全体に水及び老廃物を拡散させることができる。１つの浸透圧剤、又は浸透圧剤の組み合わせに加えて、そのような医療用液体は、ヒトの体液に匹敵する量のさまざまな生理的に重要な電解質を含む。
【００４０】
市販のＰＤＦ（エクストラニール（登録商標）、バクスター）に現在用いられているマルトデキストリン（イコデキストリン）と比較して、浸透圧剤の有効性の観点から、本発明の組成物及びその誘導体は、驚くべきことに以下の効果の１つ以上によりイコデキストリンと区別することができる。
−短期間貯留時の経毛細管限外ろ過（ＴＣＵＦ）の大幅な増加。ＴＣＵＦについては詳細な説明で定義する。
−短期間貯留時の正味限外ろ過（ＮＵＦ）の大幅な増加。ＮＵＦについては詳細な説明で定義する。
−単位時間あたりのＴＣＵＦ（ml/h）の大幅な増加。
−単位時間あたりのＮＵＦ（ml/h）の大幅な増加。
−単位炭水化物（ＣＨＯ）吸収あたりのＴＣＵＦ（ml/g）の大幅な増加。
−単位ＣＨＯ濃度あたりのＮＵＦ（ml/g）の大幅な増加。
−ＰＤＦ中の全体的なＣＨＯ濃度がより低い。
−本発明の枠組みで得られた結果は、貯留時間の短縮、ＣＨＯ濃度の低下、及び、結果として生じる貯留あたりのＣＨＯ吸収の減少により、１日に２度、３度又は４度、溶液を適用できることを示唆する。このような限外ろ過の増加により、一定の場合において、単独療法として糖類ポリマー系ＰＤが可能になるであろう。糖尿病ＰＤ患者の場合、日中の糖類ポリマー系ＰＤの部分が増加すると大きな利益が得られ、高血糖症の現在の問題をさらに軽減する。
−本発明によれば、本発明の組成物は、以下の特徴により、上記の限外濾過効率を高める。
a）短い透析貯留中の効率的な浸透剤であること。
b）切断可能な結合の蓄積が高く、長い貯留中浸透圧の維持を可能にすること。
定義：
【００４１】
溶液の溶解固形成分（例えば、腹膜透析液中のグルコースポリマー混合物）の濃度の記載のために、本特許出願では、与えられた化合物の重量を溶液の体積で割った値に相当する体積パーセンテージ（％w/v）を用いた。例えば１０％w/vは、最終溶液１００ml中に関連の化合物が１０gあることに相当する。これは、このような溶液の薬理学的記載において一般的に適用されている標準的な記載方法である。
【００４２】
本出願において、用語「グルカン」とは、Ｄ−グルコースモノマーからなるオリゴマー及び／又はポリマー分子（＝グルカン分子）の任意の組成物又は多分散混合物を意味し、Ｄ−グルコースモノマーがグリコシド結合により連結される。用語「グルカン」の代わりに、用語「グルコースポリマー」を使用してもよい。グルカン分子の重合度（ＤＰ）は、本発明での定義により、少なくとも３である。本発明では、ダイマー（ＤＰ  ２）を「マルトース」と呼び、モノマーを「グルコース」と呼び、これらの用語は公知の意味を有する。
【００４３】
本発明のグルカンは、好ましくは「α−グルカン」である。「α−グルカン」という用語は、Ｄ−グルコースモノマーがα−グリコシド結合により連結されているグルカンを意味する。
【００４４】
用語「デキストリン」は、α−１，４及び／又はα−１，６グリコシド結合、好ましくは両方を含むグルカンを意味する。デキストリンには、マルトデキストリンとシクロデキストリンが含まれてよい。デキストリンは、デンプン加水分解又は他の方法により得ることができるが、これに限らない。特別なデキストリンは、イコデキストリン、又は、分子量１８０ダルトンから２００キロダルトン（ｋＤ）のデンプン加水分解生成物である。
【００４５】
「マルトデキストリン」という用語は、シクロデキストリンを含まないデキストリンを意味する。特別な場合、マルトデキストリンは、イコデキストリン、又は分子量１８０ダルトンから２００キロダルトンの他の直鎖状又は分岐状の非環状デキストリンである。マルトデキストリンは、デンプンの限られた加水分解から生成され得る。デンプンは、α（１，４）グリコシド結合によって結合された直鎖のグルコースポリマーであるアミロースと、糖類ポリマーに分岐導入するα（１，６）グリコシド結合を約１０％含むアミロペクチンの２種類のグルコースポリマーから構成される。デンプンの初期組成、加水分解の条件、又は特定の酵素の添加の結果として、得られるマルトデキストリンは異なる分岐程度（例えば、０〜４０％）を有することができる。
【００４６】
「デキストラン」という用語は、α−１，３分岐をもつα−１，６−グルカンを意味する。
【００４７】
グルカン又はグルカン分子の「誘導体」又は「誘導体化された」という用語は、酵素的、化学的及び／又は物理的修飾に由来する修飾された分子又は分子集団を意味する。例えば、ポリマー結合を加水分解してもよいし、又は、追加の結合を生成してもよいし、又は、グルカン内の官能基、特にヒドロキシル基を誘導体化又は置換してもよい。
【００４８】
デンプン誘導体とは、デンプンの、１つ又は複数の工程での、酵素的、化学的及び／又は物理的修飾から生じる加工デンプン（modified starch）を意味する。
【００４９】
「オリゴペプチド」という用語は、２〜１０個のアミノ酸で構成されるペプチドを意味する。従って、「オリゴペプチド」という用語は、二アミノ酸（bi-amino acids）、すなわちアミノ酸二つから構成されるペプチドを包含する。オリゴペプチドは、好ましくは二アミノ酸であり、従ってオリゴペプチドという用語は、特定の実施形態では二アミノ酸という用語で置き換えることができる。
【００５０】
分子量測定は、ゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ）、特にＧＰＣ−ＲＩ、又は、イオン交換クロマトグラフィー、又は両者の組み合わせによって行うことができる。グルカンに関する限りは、ＧＰＣ又はＧＰＣ−ＲＩが好ましい。アミノ酸又はペプチドに関する限りは、イオン交換クロマトグラフィーが好ましい。グルカン、及び、グリセロール、アミノ酸、オリゴペプチド、又はそれらのうち１つ以上の混合物を含む組成物中の（平均）分子量に対する結果を得るために、グルカンの分子量及び他の成分の分子量を単独で決定し、その結果を組み合わせて、例えば組成物の成分ａ）〜ｄ）に対する平均分子量を得ることができる。従って、そのような組成物の場合、Ｍｗ及びＭｎを決定するための方法は、ＧＰＣ又はＧＰＣ−ＲＩとイオン交換クロマトグラフィーとの組み合わせであることが好ましい。成分ａ）がマルトースの場合、分子量は１つの試料で、好ましくはＧＰＣ又はＧＰＣ−ＲＩを用いて測定することができる。
【００５１】
分子量（Ｍ、単位g/Mol）は、任意の分子又はポリマーに対して計算することができる。例えば、グルカン分子の分子量は、下記式で与えられる。
Ｍ（i単位のグルカン分子）=１８０g/Mol＋（i−1）*１６２g/Mol
ここで、１８０g/Molはグルコースの分子量、１６２g/Molは加水分解による重合後に追加されたグルコース単位１個についての分子量である。
【００５２】
糖類調製物の分子量を適切に特徴付けることができるただ１つの数字はない。従って、さまざまな記述子が用いられる。最も一般的に用いられるのは、「重量平均分子量」（Ｍｗ）と「数平均分子量」（Ｍｎ）であり、ＭｗとＭｎは下記式（１）及び式（２）によって求めることができる。
ここでｎｉは分子量Ｍｉの分子の数である。Ｍｗは特に糖類調製物の高分子量含有量の変化の影響を受けやすいが、Ｍｎは試料中の低分子量分子の変化に大きく影響される。
【００５３】
【数１】
2020515323.tif 000002
【００５４】
グリセロールの分子量は９２ダルトン、又は９２g/Molである。
【００５５】
アミノ酸の分子量は７５〜２０５g/Molである。
【００５６】
オリゴペプチドの分子量は、それらを構成するアミノ酸それぞれの分子量を合計したものから各ペプチド結合に対しペプチド結合形成時の１水分子の損失に相当する１８g/Molを引く。
【００５７】
アミノ酸及び／又はペプチドの混合物の平均ＭＷ（Ｍｗ及びＭｎ）は、糖類の混合物に対するＭＷと同じく式（１）（２）で計算することができる。
混合物内の個々のアミノ酸又はオリゴペプチドの量は既知であるか、又は合計されたものである。
【００５８】
糖類と非糖類の混合物の平均ＭＷ（Ｍｗ及びＭｎ）は、例えば、糖類又はアミノ酸のＭＷと同じく式（１）（２）で計算することができる。
混合物の異なる成分全ての量とそれらの分子量は、既知であるか、又は合計されたものである。多くの場合、アミノ酸混合物の組成はサプライヤーによって分析されて知らされているか、そうでなければ以下に述べるようにそれらを決定することができる。
【００５９】
アミノ酸の混合物又はペプチドの組成を分析するための信頼できる技術は、ポストカラム誘導体化（例えばニンヒドリンでの）を備えた、イオン交換クロマトグラフィーを伴う（アンダース（Anders）  ＪＣ．アミノ酸分析の進歩。バイオファーム  インターナショナル  ２００２；４：３２〜３９）。
【００６０】
試料の「多分散指数」（Ｐｏｌｙ−Ｄ）は、Ｍｗ／Ｍｎの比として計算することができる。
【００６１】
ポリマー分子の重合度は、下記式で定義される。
ＤＰ＝Ｍ（ポリマー分子）／Ｍ（モノマー）。ここで、グルカンの場合、Ｍ（モノマー）は１６２g/molである。
【００６２】
従って、グルカン分子の分子量（Ｍ）はすべてＤＰとして表現でき、逆も同様である。
【００６３】
ＤＰｗ及びＤＰｎという用語は、重量平均重合度と数平均重合度を意味し、次のように定義される。
ＤＰｗ＝Ｍｗ／Ｍ（モノマー）
ＤＰｎ＝Ｍｎ／Ｍ（モノマー）
【００６４】
分子量と重合度、及びそれらの平均値は、好ましくは、ゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ）により、好ましくは屈折率（ＲＩ）検出を備えるゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ−ＲＩ）により測定される。特にペプチド／アミノ酸の場合、イオン交換クロマトグラフィーも可能である。具体的な方法については、実施例でさらに説明する。
【００６５】
所定の分子量範囲の分子画分の量は、さまざまな方法で示すことができる。そうするための非常に一般的で有用な方法は、そのような画分の量を組成物全体の重量パーセンテージとして表すことである（そのような組成物が最終溶液で用いられる最終濃度がなんであろうと）。本発明では、成分ａ）、ｂ）、ｃ）又はｄ）の重量パーセンテージを、ａ）＋ｂ）＋ｃ）＋ｄ）の総重量のパーセントで表す。ａ）＋ｂ）＋ｃ）＋ｄ）の総重量を、「総ＣＨＯ」とも呼ぶ。ａ）＋ｂ）＋ｃ）＋ｄ）の総重量に関連するパーセンテージは、乾燥物質に基づいて計算される。
【００６６】
グルコースポリマー調製物中のグルカン分子の重量パーセンテージ、又はグルカン分子の、ＤＰ又は他の方法によって定義される画分の重量パーセンテージは、ＧＰＣ、特にＧＰＣ−ＲＩによって決定できる。グルカン分子又は画分の重量パーセンテージは、特に、ＧＰＣクロマトグラムの前記グルカン分子／画分の面積を決定し、それが関係するであろう種、例えばすべてのグルカン分子の面積との関係を決めることによって決定できる。本発明の組成物内のすべてのグルカンの面積を知ることにより、ａ）〜ｄ）（ここでａ）〜ｄ）は上記で定義されたとおり）内の、グルカン分子の、又はグルカン分子の画分の重量パーセンテージを、例えば下記式から算出できる。
対象となる画分又は分子の重量％
＝[（対象となる分子又は画分の面積）／（総ＣＨＯの面積）] * １００
ここで、上記面積はＧＰＣクロマトグラム中の面積を意味する。
【００６７】
分子又は画分のパーセンテージを決める詳細な手順は、この分野の当業者には公知であり、その方法を詳細に限定する必要はない。公知のように、ＧＰＣでは、溶出溶媒中のポリマーの重量濃度を、検出器でモニターすることができる。分子量は、分子量標準を用いて決定できる。実施例では、上記の手順と組み合わせることのできる測定について説明する：グルコースポリマー調製物の総量又は濃度は、背景差分を行った後のＧＰＣクロマトグラムの曲線下の面積に相当し、続いて、分子量標準、特にイコデキストリン、マルトース及びグルコース標準を用いて較正する。
分子量画分又は分子の定量化は、デキストラン分子量標準等の分子量標準や、イコデキストリンを比較標準として用いて評価することができる。
【００６８】
液体組成物においては、代わりに、成分の重量パーセントを、液体組成物全体の全質量に基づいて定義してもよい。
【００６９】
本発明では、「生理的塩類濃度（Physiological Concentrations of Salts）」という用語は、以下の濃度を記載するために使用される。
・約１００から約１５０mEq/Lまでの濃度のナトリウム
・約０から約１０mEq/Lまでの濃度のカリウム
・約０から約１０mEq/Lまでの濃度のカルシウム
・約０から約１０mEq/Lまでの濃度のマグネシウム
【００７０】
本出願で使用される「腹膜治療液」（ＰＴＦ）という用語は、血液中に見られる濃度に匹敵する濃度で生理的量の様々な電解質を含む水溶液を指す。一般的な腹膜透析液には、以下が含まれてよい。
・約１００から約１５０mEq/Lまでの濃度のナトリウム
・約０から約１０mEq/Lまでの濃度のカリウム
・約０から約１０mEq/Lまでの濃度のカルシウム
・約０から約１０mEq/Lまでの濃度のマグネシウム
・グルコース及び／又はマルトデキストリン又は他の単糖及び／又は高糖分子、アミノ酸及びペプチド、シクロデキストリン、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、グリセロール、デキストラン、及び、浸透圧を生み出すのに十分に高濃度の他の生体適合性化合物、そのような化合物の誘導体、及びそのような化合物の混合物、及び／又はそれらの誘導体等の「浸透圧剤」であって、該浸透圧剤は最終的に組み合わされた濃度が０．５から２０％の間である。
【００７１】
腹膜自体の治療又は全身治療を実行するために、ＰＴＦを腹膜に投与することができる。腹膜治療の例は、腹膜癌又は腹膜感染症に対する化学療法である。腹水による全身治療の非常に一般的な例が腹膜透析であり、ほとんどの場合、腎機能不全のためであり、低分子廃棄物が血液循環から排除される。
【００７２】
「腹膜透析液」（ＰＤＦ）は、血液を浄化し、その構成要素のバランスをとるために、患者から血液老廃物と水を除去するのに十分な、例えば１〜１６時間の期間、透析を必要とする患者の腹膜腔に導入され維持される液体混合物である。前記期間の終わりに、「透析物質（dialysate）」が患者の腹膜腔から除去される。
【００７３】
腹膜透析の貯留時間は、例えば自動腹膜透析（ＡＤＰ）の場合２時間未満；例えば、連続携行式腹膜透析（ＣＡＰＤ）では４時間から６時間にわたって；例えば終日又は一晩中の貯留といった長時間の透析貯留では、８から１２時間というように様々である。本出願では、６時間までの貯留を短いＰＤ貯留と呼び、８時間以上の貯留を長い貯留と呼ぶ。
【００７４】
「限外ろ過」（ＵＦ）という用語は、単位時間あたりの液体及び溶解物質（例えば、液体、電解質、尿素、クレアチニン、グルコース、及び他の小分子）の交換を表す。透析中の限外濾過は、血液コンパートメントから透析液を含む腹膜コンパートメントへと起こる。一方、小分子もしくは液体の、透析液から血液へのリンパ吸収又は逆限外ろ過のいずれかによって、透析液から溶質及び液体が患者体内（patient’s system）に逆移動する場合がある。
【００７５】
本発明の文脈において、経毛細血管限外ろ過（transcapilary ultrafiltration）という用語は、腹膜透析貯留中に体から透析液に移動するすべての体液に対応する。
【００７６】
正味限外濾過（ＮＵＦ）という用語は、最初に投与されたＰＤ液の量（ＩＰＦＶ）から、透析貯留の終わりに回収された透析液量（ＲＤＶ）を引いて求められる。
NUF ＝ IPFV − RDV
ＮＵＦは、透析液のリンパ吸収（ＬＡ）（腹腔から体内へ）に対する経毛細血管限外ろ過（ＴＣＵＦ）（血液から透析液へ）の結果である。
NUF ＝ TCUF − LA
【００７７】
正味限外ろ過は、透析の目的の１つに対応する正値（positive）（患者から透析液への流体除去）の可能性もあるし、又は、透析貯留の時間にわたって浸透圧が十分に維持されなかった場合など、負値（negative）（腹膜から患者への全体的な液体の取り込み）の可能性もある。
【００７８】
リンパ吸収（ＬＡ）は、デキストラン７０などの腹腔内に投与されたボリュームマーカーの量的損失を乗算した、最初に投与されたＰＤ液Vol(PDF)iに基づき、以下の式（３）により評価できる。
【数２】
2020515323.tif 000003
【００７９】
その後、経毛細血管限外ろ過（ＴＣＵＦ）を、下記式により、リンパ吸収と正味限外ろ過を足して計算することができる。
TCUF ＝ NUF ＋ LA
【００８０】
「総ＣＨＯ」という用語は、ＰＴＦに存在する炭水化物の総量に適用される。
【００８１】
「ＣＨＯ吸収」という用語は、腹膜透析（ＰＤ）貯留中に、腹膜内のＰＤＦから患者が吸収する総「炭水化物量」（ＣＨＯ）を表すために適用される。炭水化物の吸収は、透析貯留中に体内に吸収される代謝可能な浸透剤という意味として評価される。これは、最初に投与されたＰＤ液の総炭水化物量から回収された透析液の総炭水化物量を差し引くことによって求められる。
【００８２】
炭水化物誘導体であるグリセロールも炭水化物と見なし、適用される場合、用語「総ＣＨＯ」及び「ＣＨＯ吸収」内に入れる。
【００８３】
厳密に言えば、アミノ酸及びペプチドは窒素原子も含むため、炭水化物ではない。しかし、総ＣＨＯ及びＣＨＯ吸収の対象が主にＰＴＦ内の代謝可能な成分を推定することであるため、及び簡単化のために、我々は用語「総ＣＨＯ」及び「ＣＨＯ吸収」内にアミノ酸とオリゴペプチドを入れることとする。
【００８４】
用語「ＣＨＯ吸収あたりのＮＵＦの割合」は、透析貯留中のＣＨＯ吸収の総重量（mg）に対するＮＵＦ体積（ml）の割合を表すために用いられる。
【００８５】
「生理的血液に近いｐＨ」とは６．５〜８、好ましくは６．８〜７．７、より好ましくは７〜７．５のｐＨに相当する。
【００８６】
以下、分子量の範囲を記載する。範囲のそれぞれは、１以上の鎖長のグルカン分子を含み、ＤＰで表される。この範囲は、こうした範囲が示される先行技術との比較を容易にすることを意図している。さらに、これらの範囲は、「発明を実施するための形態」に記載するように、本発明の特定の実施形態を定義するために使用される。これらの範囲の境界は端数処理した値（rounded values）であることに留意されたい。これは、多くの刊行物や特許においてそのようなものとして用いられてきたので、グルコースポリマーに関する先行する刊行物や特許についての我々の分析に、ＤＰ情報を以下のように取り込むことができる。
【００８７】
ＤＰ              分子量（Ｄ）          分子量範囲（Ｄ）
１                １８０                ＜２００
２                ３４２                ２００〜４００
３                ５０４                ４００〜６００
４                ６６７                ６００〜７５０
５                ８２９                ７５０〜９００
６                ９９１                ９００〜１０００
７              １１５３                １０００〜１２５０
８              １３１５                １２５０〜１４００
９              １４７７                １４００〜１５００
１０            １６３９                １５００〜１７５０
１１            １８０２                １７５０〜１９００
１２            １９６４                １９００〜２０００
１３            ２１２６                ２０００〜２２５０
１４            ２２８８                ２２５０〜２４００
１５            ２４５０                ２４００〜２５００
１６            ２６１２                ２５００〜２７５０
１７            ２７７４                ２７５０〜２８００
１８            ２９３７                ２８００〜３０００
１９            ３０９９                ３０００〜３２５０
２０            ３２６１                ３２５０〜３３００
２１            ３４２３                ３３００〜３５００
２２〜２４                              ３５００〜４０００
２５〜２７                              ４０００〜４５００
２８〜３０                              ４５００〜５０００
３１〜３３                              ５０００〜５５００
３４〜３６                              ５５００〜６０００
３７〜３９                              ６０００〜６５００
４０〜４３                              ６５００〜７０００
４４〜４６                              ７０００〜７５００
４７〜４９                              ７５００〜８０００
５０〜５５                              ８０００〜９０００
５６〜６１                              ９０００〜１００００
６２〜６７                              １０Ｋ〜１１Ｋ
６８〜７３                              １１Ｋ−１２Ｋ
７４〜７６                              １２Ｋ〜１２．５Ｋ
７７〜８０                              １２．５Ｋ〜１３Ｋ
８１〜８６                              １３Ｋ〜１４Ｋ
８７〜９２                              １４Ｋ〜１５Ｋ
９３〜９８                              １５〜１６Ｋ
９９〜１０４                            １６Ｋ〜１７Ｋ
１０５〜１１０                          １７Ｋ〜１８Ｋ
１１１〜１１７                          １８Ｋ〜１９Ｋ
１１８〜１２３                          １９Ｋ〜２０Ｋ
１２４〜１２９                          ２０〜２１Ｋ
【発明を実施するための形態】
【００８８】
この「発明を実施するための形態」に記載される実施形態は、本発明において、任意の組み合わせで、もしくは部分的に組み合わせて、組み合わせることができる。
【００８９】
本発明の組成物は、分子量分布に２つのピークが存在することを意味するバイモーダル組成物であってよく、１つのピークはより小さな分子量領域に、１つはより高い分子量領域にある。この態様では、上記組成物は、グルカン（好ましくはアルファ−グルカン）ポリマー調製物、優先的にマルトデキストリン又はマルトデキストリン誘導体を含むことができ、さらなる成分として、マルトース、グルコース、グリセロール、アミノ酸、及び／又はオリゴペプチドを含むことができ、これらを上記ポリマー調製物に添加することができる。例えば、腹膜透析では、バイモーダル浸透圧剤が、マルトース、グルコース、グリセロール、アミノ酸、及び／又はオリゴペプチドが添加されたマルトデキストリン調製物（例えば、イコデキストリン）であってよい。
【００９０】
本明細書において、用語「アミノ酸」又は「ペプチド」が単数で用いられる場合でも、複数、特にこれらの混合物が包含される。
【００９１】
用語「ポリマー」は、「オリゴマー」も包含することとする。
【００９２】
好ましいグルカンとしては、デキストリン、デキストラン、及び／又はそれらの誘導体である。好ましいデキストリンはマルトデキストリンである。
【００９３】
上記組成物は固体組成物であってよい。組成物は乾燥組成物であってよい。組成物は、後述の本発明の方法により得られる液体水性組成物を乾燥することにより得ることもできる。
【００９４】
本発明の組成物は、さらなる成分、例えば、塩類、ａ）〜ｄ）で定義されたもの以外の化合物、微量元素、酵素、他の浸透剤、及び／又は医薬品有効成分のうちの１つ以上を含んでもよい。好ましくは、成分ａ）〜ｄ）は、組成物全体の少なくとも９０重量％、さらにより好ましくは少なくとも９５重量％、より好ましくは少なくとも９８重量％である。
【００９５】
さらなる関連する態様においては、本願請求項の組成物を他の浸透圧剤と混合することができる。
【００９６】
ＤＰ＞１０、ＤＰ＞２４、ＤＰ＞５５のグルカン分子、又は、より高いＤＰをもつ以下に述べるさらなるグルカン分子は、ＤＰ＞４のグルカン分子である成分ｄ）の一部又は画分である。
【００９７】
成分ｂ）（グルコース）又はｃ）（ＤＰ３及びＤＰ４のグルカン分子）の範囲が「未満」という表現で示される場合、そのような範囲の下限は０重量％超え、好ましくはａ）〜ｄ）の総重量の少なくとも０．０１重量％、より好ましくはａ）〜ｄ）の総重量の少なくとも０．１重量％である。よって、成分ｂ）及びｃ）は常に存在する。
【００９８】
他の成分の範囲が「未満」という表現で示される場合、そのような範囲の下限は、ａ）〜ｄ）の総重量の好ましくは０重量％超え、より好ましくは少なくとも０．０１重量％であり、さらにより好ましくは、ａ）〜ｄ）の総重量の少なくとも０．１重量％である。
【００９９】
上記組成物のＭｗは、Ｍｗ０．８〜１５ｋＤ、好ましくはＭｗ１〜１０ｋＤ、より好ましくは１．２〜６．２ｋＤ又は１．０〜６．２ｋＤ、より好ましくは１．４〜６ｋＤ、より好ましくは１．６〜５．８ｋＤの範囲である。他の可能な範囲は、１．３〜６ｋＤ、１．５〜５．８ｋＤ、１．５〜５ｋＤである。
【０１００】
Ｍｗのこれらの範囲は、Ｍｎの任意の範囲と組み合わせることができる。上記組成物のＭｎは、好ましくは０．２〜３ｋＤ、好ましくは０．３〜３ｋＤ、より好ましくは０．５〜３ｋＤ又は０．７〜３ｋＤ、より好ましくは０．８〜２．７ｋＤ、より好ましくは０．９〜２．６ｋＤの範囲である。他の範囲は１〜２．７ｋＤ、１．２〜２．５ｋＤである。
【０１０１】
上記組成物の一実施形態では、ＤＰ＞１１１のグルカン分子が、ａ）〜ｄ）の総重量の１．５重量％未満の量で存在する。
【０１０２】
上記組成物の一実施形態では、ＤＰ＞２４６のグルカン分子が、ａ）〜ｄ）の総重量の０．６重量％未満の量で存在する。
【０１０３】
一実施形態では、上記組成物は、グルコースを、組成物の成分ａ）（マルトース、グリセロール、アミノ酸、オリゴペプチド、又はこれらの１以上の混合物からなる群から選択される化合物）の含有量の１／３未満の含有量で、具体的には、マルトースが成分ａ）として使用される場合、マルトースの含有量の１／３未満の含有量で含む。
【０１０４】
一実施形態では、上記組成物は、ＤＰ３及びＤＰ４のグルカン分子をあわせて、組成物の成分ａ）（マルトース、グリセロール、アミノ酸、オリゴペプチド、又はこれらの１以上の混合物からなる群から選択される化合物）の含有量の１／３未満の含有量で、具体的には、マルトースが成分ａ）として使用される場合、マルトースの含有量の１／３未満の量で含む。
【０１０５】
一実施形態では、上記組成物は、組成物の成分a）（マルトース、グリセロール、アミノ酸、オリゴペプチド、又はこれらの１以上の混合物からなる群から選択される化合物）、特にマルトースを、ａ）〜ｄ）の総重量の８〜６５重量％の含有量で含む。
【０１０６】
一実施形態では、上記組成物は、ＤＰ＞４のグルカン分子を、ａ）〜ｄ）の総重量の１６重量％を超える、好ましくは２１重量％を超える含有量で含む。
【０１０７】
一実施形態では、ＤＰ３及びＤＰ４のグルカン分子の含有量は、あわせると、ａ）〜ｄ）の総重量の１５重量％未満、より好ましくは、ａ）〜ｄ）の総重量の１０重量％未満、さらにより好ましくは、ａ）〜ｄ）の総重量の５重量％未満である。
【０１０８】
一実施形態では、分子量０．８〜１．５ｋＤ又はＤＰ５〜ＤＰ９のグルカン分子の含有量は、総ＣＨＯの４〜３９重量％、好ましくは６〜２３重量％である。
【０１０９】
一実施形態では、分子量１．５〜４．５ｋＤ又はＤＰ１０〜ＤＰ２７のグルカン分子の含有量は、総ＣＨＯの１６〜６０重量％、好ましくは２０〜６０重量％である。
【０１１０】
一実施形態では、分子量４．５〜９ｋＤ又はＤＰ２８〜ＤＰ５５のグルカン分子の含有量は、総ＣＨＯの４８重量％未満、好ましくは４５重量％未満である。
【０１１１】
一実施形態では、９ｋＤより小さい分子量の、又はＤＰ＜５５のグルカン分子の含有量は、総ＣＨＯの８５重量％超、より好ましくは総ＣＨＯの９０重量％超である。
【０１１２】
一実施形態では、分子量０．８〜４．５ｋＤ、又はＤＰ５〜ＤＰ２７のグルカン分子の含有量は、総ＣＨＯの１８重量％超え、好ましくは２５重量％超え、さらにより好ましくは３０重量％を超えである。
【０１１３】
一実施形態では、ＤＰ３及び４のグルカン分子の含有量は、総ＣＨＯの３０重量％未満、好ましくは２〜２６重量％、より好ましくは２〜１５重量％、さらにより好ましくは２〜１０重量％である。
【０１１４】
一実施形態では、ＤＰ５及び６のグルカン分子の含有量は、総ＣＨＯの３５重量％未満、好ましくは１〜１５重量％である。
【０１１５】
一実施形態では、ＤＰ７〜１０のグルカン分子の含有量は、総ＣＨＯの３５重量％未満、好ましくは１〜１８重量％である。
【０１１６】
一実施形態では、ＤＰ＜１０のグルカン分子の含有量は、総ＣＨＯの１５〜８５重量％、好ましくは２０〜８０重量％である。
【０１１７】
一実施形態では、ＤＰ＞２５のグルカン分子の含有量は、総ＣＨＯの１．９〜５９．５重量％、好ましくは３．９〜５７．５重量％、好ましくは４．９〜５５．８重量％である。
【０１１８】
一実施形態では、ＤＰ＞３０のグルカン分子の含有量は、総ＣＨＯの５９重量％未満、好ましくは５５重量％未満、より好ましくは５０重量％未満である。
【０１１９】
一実施形態では、ＤＰ＞１１１のグルカン分子の含有量は、総ＣＨＯの１．５重量％未満である。
【０１２０】
一実施形態では、ＤＰ＞２４６のグルカン分子の含有量は、総ＣＨＯの０．６重量％未満である。
【０１２１】
前述したように、この明細書の特徴は、任意の方法及び任意の数で組み合わせることができる。１つの可能な組み合わせのみを反映する非常に具体的な実施形態において、本発明は、以下を含む組成物を提供する。
ａ）含有量がａ）〜ｄ）の総重量の５〜７５重量％、好ましくは８〜６５重量％、さらにより好ましくは１０〜５５重量％の、マルトース、グリセロール、アミノ酸、オリゴペプチド、又はこれらの１以上の混合物からなる群から選択される化合物、好ましくはマルトースである。
ｂ）含有量がａ）の含有量の１／２未満、好ましくは１／３未満、且つ、総含有量がａ）〜ｄ）の総重量の５重量％未満のグルコースである。
ｃ）あわせたときの含有量がａ）の含有量の１／２未満、好ましくは１／３未満のＤＰ３及びＤＰ４のグルカン分子である。
ｄ）ａ）、ｂ）及びｃ）とあわせて１００重量％となる含有量の、ＤＰ＞４のグルカン分子である。
このとき、
−ＤＰ３及び４のグルカン分子は、ａ）〜ｄ）の総重量の３０重量％未満、好ましくは２〜２６重量％の量で存在する。
−ＤＰ５及び６のグルカン分子は、ａ）〜ｄ）の総重量の３５重量％未満、好ましくは１〜１５重量％の量で存在する。
−ＤＰ７〜１０のグルカン分子は、ａ）〜ｄ）の総重量の３５重量％未満、好ましくは１〜１８重量％の量で存在する。
−ＤＰ＜１０のグルカン分子は、ａ）〜ｄ）の総重量の１５〜８５重量％、好ましくは２０〜８０重量％の量で存在する。
−ＤＰ＞１０のグルカン分子は、ａ）〜ｄ）の総重量の１５〜８５重量％、好ましくは２０〜８０重量％、さらに好ましくは３５〜８０重量％の量で存在する。
−ＤＰ＞２４のグルカン分子は、ａ）〜ｄ）の総重量の２〜６０重量％、好ましくは４〜５８重量％、好ましくは５〜５６重量％の量で存在する。
−ＤＰ＞２５のグルカン分子は、ａ）〜ｄ）の総重量の１．９〜５９．５重量％、好ましくは３．９〜５７．５重量％、好ましくは４．９〜５５．８重量％の量で存在する。
−ＤＰ＞３０のグルカン分子は、ａ）〜ｄ）の総重量の５９重量％未満、好ましくは５５重量％未満、より好ましくは５０重量％未満の量で存在する。
−ＤＰ＞５５のグルカン分子は、ａ）〜ｄ）の総重量の１５重量％未満、好ましくは１２重量％未満、より好ましくは１０重量％未満、さらにより好ましくは8重量％未満の量で存在する。
−ＤＰ＞１１１のグルカン分子は、ａ）〜ｄ）の総重量の１．５重量％未満の量で存在する。
−ＤＰ＞２４６のグルカン分子は、ａ）〜ｄ）の総重量の０．６重量％未満の量で存在する。
【０１２２】
ａ）〜ｄ）をあわせたときの重量平均分子量は、Ｍｗ０．８〜１５ｋＤ、好ましくはＭｗ１．０〜１０ｋＤ、より好ましくはＭｗ１．２〜６．２ｋＤ又は１．０〜６．２ｋＤ、より好ましくは１．４〜６ｋＤ、より好ましくは１．６〜５．８ｋＤである。
【０１２３】
ａ）〜ｄ）をあわせたときの数平均分子量は、Ｍｎ０．２〜３ｋＤ、好ましくはＭｎ０．３〜３ｋＤ、より好ましくはＭｎ０．５〜３ｋＤ又は０．７〜３ｋＤ、より好ましくは０．８〜２．７ｋＤ、さらにより好ましくは０．９〜２．６ｋＤである。Ｍｗ及びＭｎの範囲は、任意の方法で組み合わせることができる。
【０１２４】
以下、分岐（branching）に関する実施形態について説明する。
【０１２５】
分岐の％値が示されている場合、これらの値はmol％を意味する。本明細書では、分岐度は、ランダムに分布した分子量をもつ本発明のグルカンの試料で測定されたすべてのグルコースモノマーの総数に対する、分岐を含む（すなわち、グルカン分子内の３つの結合によって組み込まれる）グルコースモノマーのパーセンテージ数と定義する。
【０１２６】
分岐度は、標準的なメチル化分析方法、あるいはメチル化後の還元分解方法によって測定される。これらの方法は、特許出願ＷＯ  ２００７  １２８５５９  Ａ２に記載されているように実施することができるが、本発明では、ＷＯ  ２００７  １２８５５９  Ａ２で測定されたフルクタンの代わりにグルカンを用いる。
【０１２７】
本発明の一実施形態では、グルカン出発材料又は最終調製物の分岐は、出発材料の選択を含むパラメータ、分枝酵素の使用、及び／又は、最終製品の目的とする分岐に好都合に選択される物理化学的条件でのインキュベーションによって変わり得る。
好ましい物理化学的条件には、酸性又は塩基性ｐＨ、２０〜１５０℃の温度、１０バールまでの圧力、可変時間（１分から１００時間）、酵素処理前、酵素処理中、酵素処理後でのインキュベーションが含まれる。
【０１２８】
分枝酵素（branching enzyme）としては、例えばアミラーゼ、アミログルコシダーゼ、及びトランスグルコシダーゼが挙げられる。
【０１２９】
デンプン又はデキストリン中のポリグルコース鎖は、主に、アルファ１，４結合によって形成される。デンプンの分岐又はデキストリンの分岐は、アルファ１，６結合のパーセンテージで決められる。
【０１３０】
デキストランは、主に、アルファ１，６結合によって形成されるポリグルコース鎖を含有する。デキストランの分岐は、アルファ１，３結合のパーセンテージとして定義される。
【０１３１】
本発明の枠組みにおいて、分岐という用語は、グルカン調製物内の任意の多様な種類の結合に拡大されるものとする。
【０１３２】
本発明は、特に、糖類ポリマーがデキストリン又はデキストリン誘導体であり、好ましくは、１，６グリコシド結合によるデキストリン分岐が、１１％超え、好ましくは１２％超え、さらにより好ましくは１３％超え、なおより好ましくは１５％超え、又は１７．５％超え、又は２０％超えである、本発明の組成物の一部であり得る可溶性糖類ポリマーの上記調製物に関する。
【０１３３】
本発明は、特に、糖類ポリマーがデキストリンであり、１，６グリコシド結合による分岐が７％未満、好ましくは６％未満、より好ましくは５％未満、さらにより好ましくは４％未満、又は３％未満、又は２％未満、又は１％未満、又は０．１％未満である、本発明の組成物の一部であり得る可溶性糖類ポリマーの上記調製物に関する。
【０１３４】
糖類ポリマー組成物の低又は高分岐の選択肢は、次の目的を意図していてよい：高度に分岐したグルカンは、アミラーゼの活性下でよりゆっくりと分解し、よって腹膜透析時によりゆっくりと分解する。患者の残存腎機能に応じて、ポリマーの安定性を調整することができる。
【０１３５】
例えば濃縮した（例えば３〜６％）溶液中の分岐の少ない又は分岐のない糖類ポリマーは、残存腎機能の高い患者に適用することができる。分解酵素による分解の増加は、分子量の小さい分解生成物の可能な取り込みを高め、限外ろ過を低く保ち、透析液から患者体内への液体の逆拡散を可能にさえするであろう。マルトース、イソマルトースなどの分子量の小さい化合物は、細胞内マルターゼによってグルコースに変換される前に腎臓によって排出されるであろう。その結果、低分子量生成物が透析液に入るのを保証するのに十分な限外ろ過が起こるが、全体的に低い限外ろ過が残存腎機能を維持する。
【０１３６】
低アルファ１−６分岐は、さらに、小麦アレルギーの疑いのある患者にとって有利である。
【０１３７】
例えば高度に分岐したマルトデキストリンを有する高濃度溶液（例えば５〜７．５％）は、残存腎機能が低いかもしくはもうない患者に適用でき、透析貯留中、より長い時間高浸透圧を維持し、患者によるＣＨＯの取り込みを減らして、ＵＦ率とＮＵＦを高め、酵素分解を減らす。
【０１３８】
上記組成物の一実施形態では、グルカン又はグルカン分子は誘導体化される。「誘導体化」の定義は、先に述べた。
【０１３９】
誘導体化は、酵素的、化学的及び／又は物理的修飾により行うことができる。
【０１４０】
グルカンは、エーテル化、エステル化、アルキル化、架橋、酸化、還元、アルカリによる処理及び／又は加水分解、特に酸又は酵素加水分解によって修飾されてもよい。特に、グルカン中の１以上のＯＨ基をこの方法で修飾してもよい。
【０１４１】
特定の実施形態において、「誘導体化された」とは、グルカン中の１つ又はいくつかのＯＨ基が修飾されることを意味する。この修飾は、特にグルカンの１つ又はいくつかのＯＨ基の置換または官能化である。修飾は、１つ以上の末端ＯＨ基、還元末端のＯＨ基及び／又は他のＯＨ基での修飾であってよい。
【０１４２】
上記誘導体は、糖アルコール、特にグルシトール、糖酸、特にグルコン酸、又はアルキルグリコシドであってよい。
【０１４３】
特定の実施形態では、１つ以上のＯＨ基を−Ｏ−Ｒ基に変えることができ、ここでＲは、以下からなる群から選択される。
ｉ）特に、メチル、エチル、プロピル（ｎ−又はｉｓｏ）、ブチル（ｎ−、ｉｓｏ又はｔｅｒｔ）、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピル（ｎ−又はｉｓｏ）、ヒドロキシブチル（ｎ−、ｉｓｏ又はｔｅｒｔ）、ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）２、ＣＨ（ＣＨ２（ＯＨ））２、ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）（ＣＨＯＨＣＨ２ＯＨ）から選択される、置換または無置換の、分岐又は直鎖の、飽和又は不飽和のヒドロカルビル基、特にアルキル又はヒドロキシルアルキル。この修飾は、特に、末端又は還元ＯＨ基、場合によっては他のＯＨ基にも適用できる。
ii）ＯＨ、−Ｏ−サッカライド、−ヒドロカルビルオキシ、置換の−ヒドロカルビルオキシ、及び−スルホキシ、ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎ−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）ｎＣＯＯ−、−ＣＮ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｉ、−ＮＯ２、−（ＣＨ２）ＣＮ、−（ＣＨ２）ｎ−Ｃｌ、−（ＣＨ２）ｎ−Ｂｒ、−（ＣＨ２）ｎ−Ｉ、−（ＣＨ２）ｎ−ＮＯ２、−Ｏ−ＰＯ３２−、−Ｏ−ＰＯ３Ｈ−、−Ｏ−ＰＯ３Ｈ２、−ＮＨ２、−ＮＨ−アルキル、−Ｎ（−アルキル１、−アルキル２）、−Ｎ＋Ｈ３、−Ｎ＋Ｈ２−アルキル、−Ｎ＋Ｈ（−アルキル１、−アルキル２）、−Ｎ＋（−アルキル１、−アルキル２、−アルキル３）、−Ｂ（ＯＨ）２、−ＣＨＯ、−ＣＯ−アルキル）、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＣＨ２ＣＮ、ここで、アルキルは直鎖状又は分岐の炭素数１〜５（Ｃ１〜Ｃ５）のアルキル、部分的に不飽和なアルキルであってよい。
【０１４４】
別の実施形態において、本発明は、グルカン出発物質又は中間体又は最終調製物の水溶液を提供し、NaOClの溶液を提供し、デンプン溶液にNaOCl溶液を加えてデンプンを酸化する。このような酸化はグルカンのグルコン酸への変換につながる可能性がある。
【０１４５】
本発明の別の実施形態は、グルカン出発原料又は中間体又は最終調製物の酸及びアルコール中での溶解を提供する。そのような溶解は、１〜４０時間起こり得る。そのような溶解は、圧力下で、１００℃まで、最終的には１５０℃までのより高い温度まで加熱され得る。そのような条件下でのそのような混合物は、デンプンを加水分解し、アルキル化することができる。
【０１４６】
別の実施形態では、メチレン−、エチレン−、プロピレン−、ブチレン−オキシド等のアルキレンオキシドを用いて、グルカン出発材料又は中間体又は最終調製物にエーテル合成を施すことができる。
【０１４７】
「中間調製物」は、特に、ａ）がマルトースでない場合、ａ）を加える前の、組成物の成分ｂ）〜ｄ）の調製物を意味することを意図する。
【０１４８】
本発明のグルカンは、末端ホルムアルデヒド、アルドン酸、及び／又はフルフラールを含まないか、又は実質的に含まないことができる。
【０１４９】
さらなる態様では、本発明は、本発明の組成物及び水を含む液体水性組成物を提供する。この液体組成物は、溶液、分散液、エマルジョン、又は、溶液、分散液及び／又はエマルジョンの混合物、又は、溶液及び分散液の混合物、好ましくは、上記組成物と、存在する場合は他の成分が液相で溶解していることを意味する溶液であってよい。液相及び液組成は、主に（液相の９０体積％超、好ましくは９５体積％超）水、又は水のみであってよい。
【０１５０】
上記液体水性組成物は、透析液であってよく、又は、特に腹膜透析用の透析液として使用することができる。
【０１５１】
上記液体水性組成物は、６．８から７．７のｐＨを有することができる。
【０１５２】
上記液体水性組成物は、特に透析用の溶液である場合、緩衝剤（特に乳酸塩、酢酸塩、グルコン酸塩）、及び、アミノ酸、インスリン、例えばソルビトール、エリスリトール、マンニトール、マルチトール又はキシリトール等のポリオール、又は水素化デンプン加水分解物などの他の添加剤も含むことができる。
【０１５３】
一実施形態において、上記液体水性組成物は、２８０〜４５０mosm/kg、好ましくは２９０〜４２０mosm/kgの浸透圧を有する。
【０１５４】
本発明のさらなる態様において、上記の組成物、又は上記の液体水性組成物は、薬剤もしくは投薬としての使用、又は治療での使用を目的とする。
【０１５５】
より具体的には、上記の組成物、又は上記の組成物、又は上記の液体水性組成物は、
−特に細胞毒性が低減した腹膜治療液もしくは溶液
−特に細胞毒性が低減した、透析液もしくは溶液、特に腹膜透析液もしくは溶液
−消化管洗浄液等の消化器液
−栄養液
−栄養輸液
−薬物投与液
−解毒液
−特に生理的体液用の、より具体的には血液、血漿、血清、又は間質液の代用品又は添加物である、生理的代用物又は添加調製物
−手術後の癒着抑制液
−浣腸用液
−下剤
−浸透圧剤、特に浸透推進剤（osmotic driver）
−幼児食
−細胞毒性が低減した医薬品
としての使用、又は腎疾患の治療においての使用を目的とする。
【０１５６】
上記の組成物、又は上記の液体水性組成物は、これまでに知られている製品と比較して、細胞毒性を低減させることができる。従って、細胞毒性を低減した薬剤として、それ自体、又は言及された用途の１つ以上において使用することができる。
【０１５７】
好ましい医療溶液は、血液、血清、間質液などの生理的体液に置き換わる又は添加される溶液、又は、消化管洗浄液、浣腸（clistiers）、栄養液などの消化器用途のための溶液である。静脈内、腹腔内、又は他の皮下使用のための溶液も含まれる。好ましい医療溶液は、腹膜治療溶液である。好ましい腹膜治療溶液は、腹膜透析溶液である。
【０１５８】
医学的用途の文脈では、上記溶液を人体に適用することができ、この場合、生理的浸透圧を対象とするため、あるいは低浸透圧もしくは高浸透圧を目的とするため、浸透圧の制御が関与する。
【０１５９】
好ましい医療用途は、医療溶液をその特定の目的に適合させるための、本発明の組成物、特にバイモーダル組成物の浸透圧剤としての使用である。異なる薬液は異なる浸透圧を持つことができ、例えば、血液置換の場合、薬液の浸透圧は生理的濃度に近くすることができ、腸または腹膜で用いる場合には高浸透圧を適用することが可能である。
【０１６０】
さらなる態様では、本発明の組成物は、浸透圧剤としてＰＴＦ又はＰＤＦに用いられる。さらに関連する態様では、浸透圧剤として本願請求項の組成物を含むＰＴＦは、２つ以上の異なる本発明の組成物の組み合わせの使用を特徴とする。
【０１６１】
特にＰＤＦにおける浸透推進剤としての使用に関しては、前述の組成物を使用して、例えば腹膜透析で２，４又は６時間の貯留中に、生理的塩類濃度の緩衝溶液内で、７．５％未満、好ましくは７．２％未満の濃度にて、単独の浸透圧剤として用いた場合に、イコデキストリン７．５％より大幅に高いＮＵＦ液量を生成することができ、ＣＨＯ吸収あたりのＮＵＦの割合が同等かそれ以上である。
【０１６２】
上述のように、本発明の組成物は、以下を含むさまざまな分野で使用される。
−幼児食及び医療患者の栄養補給分野
−血漿代用品の調合分野
−経腸及び非経口治療の調剤薬分野
−ＰＴＦの製造分野、及び
−腎疾患の治療のための透析液の製造分野。
【０１６３】
「医療用途の組成物」という用語は、飲用可能であってよい消化器液、栄養補液や他の飲用用途、薬物投与及び解毒液、生理的代替製剤、又は手術後の癒着抑制液など、あらゆる種類の生理的に適用可能な溶液を含む。本発明における医療用途のための組成物の好ましい用途は、腹膜治療液（ＰＤＦ）又は腹膜透析液（ＰＴＦ）である。
【０１６４】
さらなる態様において、本発明は、透析溶液の製造に用いられる上記の組成物を提供する。
【０１６５】
さらなる態様では、本発明は、本発明による組成物を含む腹膜透析液を提供する。
【０１６６】
さらなる態様において、本発明は、上記で定義されるＰＴＦを含む医薬組成物を提供する。
【０１６７】
さらなる態様において、本発明は、腹膜透析貯留６時間以下、生理的塩類濃度の緩衝溶液内で７．５％未満の濃度にて、単独の浸透圧剤として用いた場合に、エクストラニール（登録商標）（イコデキストリン７．５％）よりも高いＵＦ又はＮＵＦ液量を生成し、ＣＨＯ（重量）吸収あたりのＮＵＦ（体積）の割合が同等かそれ以上であるような、記載の組成物の使用を提供する。
【０１６８】
以下、本発明の製品を得るための方法について説明する。
【０１６９】
本発明の組成物中のグルカンポリマー、特に成分ｂ）〜ｄ）（好ましくは組み合わせて）、又は、成分ａ）がマルトースである場合前記組成物は、工業用糖類溶液の酸及び／又は酵素加水分解；酵素的再重合（repolymerisation）及び分岐；続いて分画によって調製することができる。あるいは、それらは、そのような反応時に、混合物から反応生成物を連続的に分離し、分画を進めることによって調製されてもよい。異なる中間調製物を別々に取り出して、後で一緒に混合してもよい。マルトース、グリセロール、アミノ酸、オリゴペプチド、又はそれらの１以上の混合物からなる群から選択される化合物等、他の低分子量分子を後で加えて、目的の最終組成物を得ることができる。工業用糖液には、水飴とマルトースシロップが含まれる。工業用糖類は、糖類内容物（content）の置換、部分的な置換又は分岐のために前処理することができ、又は、この目的で、中間多糖類調製物を処理することができる。
【０１７０】
なお、さらなる態様において、本発明は、以下の工程から成る、上記の液体水性組成物を製造する方法を対象とする。
−固形分が１０重量％から８０重量％までのデンプン水溶液を調製する工程。
−アミログルコシダーゼ及び／又はアミラーゼから選択される酵素の特定の組み合わせを用いて、前記溶液を連続的に処理することによる糊化工程。
−前記溶液の精製工程。
−分子量が４００００Ｄを超える分子量糖類画分を排除または減少させて、他の画分を回収する（recover）ような方法で、前記溶液を分画する工程。
−マルトース、グリセロール、アミノ酸、オリゴペプチド、又はそれらの１以上の混合物からなる群から選択される化合物、好ましくはマルトースを添加する工程。
【０１７１】
分画、及び、マルトース、グリセロール、アミノ酸、オリゴペプチド、又はそれらの１以上の混合物からなる群から選択される化合物、マルトース及び／又はグルコースの添加によって、前記溶液中に上記で定義された組成物が得られる。
【０１７２】
さらなる工程において、グルコースを添加することができる。グルコースは、マルトース、グリセロール、アミノ酸、オリゴペプチド、又はそれらの１以上の混合物からなる群から選択される化合物とは別々に又は一緒に添加されてもよい。例えば、マルトースを添加する場合、グルコースを含むマルトース生成物ａを添加することができる。マルトースは、例えばマルトースシロップが加えられる場合、多量のグルコースを含むことが多い。
【０１７３】
本発明の乾燥組成物は、前述のプロセスの生成物を乾燥させることにより得ることができる。
【０１７４】
特定のデンプンのアミラーゼ／アミロペクチンの初期割合を活用して、特定の用途に求められる高又は低分岐のマルトデキストリンの生成を簡素化することができる。
【０１７５】
本発明における好ましい可溶性グルコースポリマーは、デンプンの酵素処理により生成されたデキストリンである。
【０１７６】
本発明のこのような可溶性グルコースポリマーは、特に、以下の工程のいくつか又はすべての組み合わせからなるプロセスに従って調製される。
１）マルトデキストリン又は糖類ポリマー調製物の狙いとする分岐度に応じて、規定量のアミロペクチンを含むデンプンを選択する工程。
２）固形分が１０重量％から８０重量％までのデンプン水溶液を選択又は調製する工程。
３）任意で、規定の分岐を狙う場合、分岐酵素で前記水溶液を処理する工程。
４）任意で、誘導体化する工程。
５）アミログルコシダーゼ又はアミラーゼから選択される酵素の組み合わせ（例えば、ｐＨ６、８０〜９８℃で、０．１％好熱性アミラーゼ）で、好ましくは５から１０分間連続的に前記水溶液を処理することによる糊化工程。
６）任意で、いくつかの溶液に分画し（例えば、４５００〜９０００Ｄの高分子量に対して１つ、１５００〜１８０００Ｄの分子量に対して１つ、及び２００〜１５００Ｄの低分子量に対して１つ）、さらに混合する工程（このような工程は、高い柔軟性、最終調製物におけるポリマーの分子量の幅広い分布（large spectrum）、及び同時に、最終医療用途における選択されたポリマーの最高のストリンジェンシー（stringency）を可能にする）。
７）例えば活性炭による処理、又はろ過（ガラス孔フィルター、セラミックフィルター、又はフィルター膜）、又はアフィニティー処理による、前記水溶液の精製工程。
８）高分子量糖類画分、好ましくは分子量が４００００ダルトン、さらに好ましくは１８ｋＤを超える糖類画分を除去又は大幅に減少させ、他の画分を回収するような方法で、前記水溶液を分画する工程。
９）マルトース濃縮粉末又は溶液の選択又は調製工程。
１０）任意で、マルトースの添加により、低分子量画分、好ましくは２００〜１５００Ｄを前記水溶液のＮＵＦニーズに適合させ、任意でグルコースを、例えば、最終溶液のグルコース総濃度０．２％w/vまで添加する工程。
【０１７７】
上記の工程は、より一般的な方法であって、先に述べた工程をさらに定義するために用いることもできる。
【０１７８】
前記水溶液が、本発明のポリマーを水に溶解させることにより得られる場合、それは透明で無色でなければならない。好ましくは、エンドトキシン、ペプチドグリカン及びベータグルカンを含まず、及び、出発物質又はそれを生成するために使用される酵素調整剤由来の汚染物質も含まない。
【０１７９】
この効果のために、前記水溶液で使用される高分岐ポリマーはいずれも、タンパク質、細菌、細菌毒素、ウイルス、繊維、微量金属などの着色又は不要な汚染物質を除去するために精製されることが好ましい。この精製工程は、当業者に公知の技術に従って実施することができる。
【０１８０】
本発明によるプロセスの１つの工程は、適切な分子量の画分を収集して、求められるグルコースポリマー調製物を生成することにあってよい。これらの画分はそのまま組み合わせることができ、エタノールを加えてポリマーを沈殿させ、精製し、真空下で乾燥させるか、又は噴霧乾燥、又は当業者に公知の任意の技術によって乾燥させることができる。
【０１８１】
さらなる態様において、本発明は、例えば浸透圧剤としての上述の液体水性組成物、もしくは上述の乾燥組成物を含む少なくとも１つのコンパートメントを備える容器、例えばＰＤＦ容器、又はキットを目的とする。本発明による容器又はキットは、透析液のさらなる部分を含む第２のコンパートメントを有してもよく、これは、第１のコンパートメントからの酸性流体と混ざると、ｐＨ７．０から７．５の透析液を再構成する。容器の別のコンパートメントが、緩衝液を含んでもよい。第１のコンパートメント内の液体水性組成物は、１〜６又は２〜４のような酸性ｐＨを有してよい。緩衝液は、得られるｐＨをｐＨ６．５〜８、好ましくは６．８〜７．７、より好ましくは７〜７．５の範囲にするのに適したｐＨを有することができる。
【実施例】
【０１８２】
これらの実施例では、「エクストラニール」という用語は登録商標を意味する。
【０１８３】
［実施例１：工業用糖類ポリマーの調製］
【０１８４】
酸で液化した市販のコーンスターチからスターチミルクを調製する。固形分が２０〜５０％のデンプン懸濁液を、９０℃で完全に可溶化するまで攪拌により調製する。次いで、この溶液を６０℃まで冷却し、クエン酸でｐＨを６から６．５に調整する。
糊化のために、デンプンの０．１％熱安定性アルファ−アミラーゼでの処理を反応媒体中で行い、８８〜９２℃、５〜１０分間加熱することにより反応を止める。
デキストリン化のために、ｐＨを４〜５に調整し、アミラーゼの濃度を０．３％に上げ、さらに数時間反応させる。
最終溶液を、膜又はセラミックフィルター等の分画デバイスで、３０，０００  １０，０００  ５，０００ダルトン等のいくつかのステップで分画する。
【０１８５】
表１は、こうして得られた本発明による生理的塩類条件及びｐＨ６．８〜７．５での２つのＰＤＦ溶液の物理化学的特性の２つの目標のグルカン中間調製物又は組成物を示す。
【０１８６】
【表１】
2020515323.tif 000004
【０１８７】
［実施例２：実験的調製］
【０１８８】
本実施例では、Ｍｗ３．４〜６．１ｋＤ、Ｍｎ２〜３．７ｋＤの多糖調製物と最終的な浸透圧活性組成物を生成した。
すべての場合において、当該ポリマー画分は、１８ｋＤよりも高い分子量をもつポリマーを１．５重量％未満、及び、４０ｋＤを超える分子量をもつポリマーを０．６重量％未満含んだ。
【０１８９】
出発材料は、市販のエクストラニール（登録商標）のイコデキストリンであった。８０リットルのバッチを、サプライヤー推奨の０．５ｍ２ペリコン２ウルトラセル（ultracel）（登録商標）膜に、２．５バール未満の入口圧力にて３〜４L/m2で投入した。膜カットオフ１００ｋＤ、３０ｋＤ、１０ｋＤ、及び５ｋＤにわたる連続ステップを、異なるセットアップでテストした。概して、ろ過された溶液の組成濃度に応じて、各ろ過工程により約５〜１０％の保持液が生成された。こうして３つの中間糖類ポリマー調製物を生成し、以下で溶液１，２，３と呼ぶ。すべてのろ過工程は、エクストラニールの本来のバッファーで実行され、バッファーの組成とｐＨは、ワークフロー全体を通して制御された。
【０１９０】
溶液１は、ペリコン  ウルトラセル（登録商標）１００ｋＤ、３０ｋＤ、１０ｋＤ、１０ｋＤを通過する８０リットルのエクストラニールから生成され、最終的に５ｋＤフィルター上で濃縮された。
溶液２は、溶液１と同じフィルターの組み合わせを実行して生成されたが、順次、前のろ過サイクルが完了する前に、次のフィルターでのろ過を開始した。これにより時間を節約できたが、ろ過効率は低下した。
溶液３は、溶液２のように生成されたが、中間糖類ポリマー調製物を濃縮するために再度用いる前に、今回は５ｋＤ膜を追加のフィルターとして２回用いた。
結果は、非常に異なる方法で比較結果が得られることを示す。
【０１９１】
すべての溶液について、５〜２００バールの圧力で１．２ml/分にて、３００＊４．６mmの寸法のミクロスフェア６０  ＳＥＣ  ５μmカラムでのゲル浸透クロマトグラフィーにより炭水化物組成を分析した。精製水でクロマトグラフィーを実行した。イコデキストリン、７０ｋＤ、１０ｋＤ、及び５ｋＤデキストラン分子量マーカーを並行して実行して、中間調製物の組成を特定した。炭水化物濃度はＲＩ検出により測定した。要約すると、総炭水化物濃度は、バックグラウンドを差し引きいた後の曲線下面積に相当し、続けてイコデキストリン、マルトース、及びグルコース標準溶液で確立されたキャリブレーションを行った。デキストラン分子量標準と比較標準としてのイコデキストリンを用いて、分子量サイズ画分の定量化を評価した。
【０１９２】
上記画分の分子量組成の結果を表２〜５に示す。表中の「ＭＷ」は「分子量」を意味する。「Ｍｗ」は「重量平均分子量」を意味する。
【０１９３】
【表２】
2020515323.tif 000005
【０１９４】
【表３】
2020515323.tif 000006
【０１９５】
【表４】
2020515323.tif 000007
【０１９６】
【表５】
2020515323.tif 000008
【０１９７】
［実施例３：異なる浸透圧活性組成物のＭｗ及びＭｎの計算のための実施例］
【０１９８】
【表６】
2020515323.tif 000009
【０１９９】
各画分ｉにおける、Ｍｏｌでの濃度を、該画分の化合物分子数（ｎｉ）とし、画分の平均分子量を、その画分の全ての分子の分子量（Ｍｉ）とする。そうすると、nの合計値は27.5、n*Mの合計値は57.5、n*M2の合計値は200.8となる。
これらの数値を、式（１）及び式（２）に当てはめると、Ｍｗ＝3.49ｋＤ、Ｍｎ＝2.09ｋＤを算出する。
【０２００】
マルトースのＭｗ及びＭｎの計算（１％溶液）：
M(ni)  MW(Mi)(ｋＤalton)  g/L(ni*Mi)  g/L*MW(ni*Mi2)
29            0.342          10            3.42
１％マルトースの画分は、濃度２９Ｍ（ｎｉ）、分子量０．３４２ｋＤの単一画分に相当し、nの合計値は29、n*Mの合計値は10、n*M2の合計値は3.42となる。
【０２０１】
溶液３の５．７５％糖類ポリマーと１％マルトースの組成物のＭｗとＭｎを計算する。
【０２０２】
【数３】
2020515323.tif 000010
【０２０３】
【表７】
2020515323.tif 000011
【０２０４】
各画分ｉについて、Ｍｏｌでの濃度を、該画分の化合物分子数（ｎｉ）の値とし、対応するアミノ酸の分子量をＭｉとする。そうすると、nの合計値は76.7、n*Mの合計値は57.5、n*M2の合計値は200.8となる。これらの数値を、式（１）及び式（２）に当てはめると、Ｍｗ＝0.137ｋＤ、Ｍｎ＝0.130ｋＤを算出する。
【０２０５】
溶液３の５．７５％糖類ポリマーと１％アミノ酸混合物の組成物のＭｗとＭｎを計算する。
【０２０６】
【数４】
2020515323.tif 000012
【０２０７】
［実施例４：生理的緩衝液中の本願請求項の浸透圧活性組成物の浸透圧］
【０２０８】
実施例２の中間糖類ポリマー調製物１及び３に対して、ゴノテック社製凍結点浸透圧計オズモメータ（OSMOMAT 030 Gonotec Cryoscopic Osmometer）で氷点法を用いて、０、１、２及び４％マルトースの存在下にて異なる濃度での浸透圧を測定した（結果をmOsmol/kgで示す）。すべての場合において、イコデキストリンと比較して高い浸透圧が見られた。
【０２０９】
［実験結果］
すべての中間調製物、調製物、及び、該調製物の溶液を、ｐＨ５．５で、１×バッファー（５．４g/lのNaCl、４．５g/lの乳酸ナトリウム、０．２５７g/lのCaCl2、０．０５１g/lのMgCl2）に連続的に保持した。マルトースを、異なる濃度で中間糖類ポリマー調製物に添加した。従って、浸透圧の変化は、中間糖類ポリマー調製物の濃度の変化によるものだけである（表８〜１１）。
【０２１０】
【表８】
2020515323.tif 000013
【０２１１】
【表９】
2020515323.tif 000014
【０２１２】
【表１０】
2020515323.tif 000015
【０２１３】
【表１１】
2020515323.tif 000016
【０２１４】
得られた実験結果を正規化及び外挿し、３つの溶液に対して、本出願により請求される濃度範囲にわたる浸透圧を推定した（表１２〜１５）。
【０２１５】
本発明の溶液に対する正規化及び外挿した浸透圧
【表１２】
2020515323.tif 000017
【０２１６】
【表１３】
2020515323.tif 000018
【０２１７】
【表１４】
2020515323.tif 000019
【０２１８】
【表１５】
2020515323.tif 000020
【０２１９】
当業者は、他の溶液を、溶液１及び３よりもＭｗ、Ｍｎが低い中間糖類ポリマー調製物を用いて調製できることを理解する。このような溶液は、４％マルトースの存在下で、同等の濃度で最大５００mOsmol/kgもの高い浸透圧を示すであろう。
【０２２０】
また、アミノ酸混合物（組成は実施例３を参照）、マルトース、スクロース、グルコース、グリセロール、カルニチン、又はカルニソールを１％添加して、生理的緩衝液中の、溶液３糖類ポリマー５．７５％とイコデキストリン７．５％両方の浸透圧を測定した（表１６）。
【０２２１】
【表１６】
2020515323.tif 000021
【０２２２】
［実施例５：動物モデルにおける限外ろ過及びＣＨＯ吸収の評価］
【０２２３】
腹膜透析貯留時間は、例えば自動腹膜透析（ＡＤＰ）の場合の２時間未満から、例えば継続的外来腹膜透析（ＣＡＰＤ）の場合の４〜６時間を経て；終日又は夜間貯留等の長時間透析貯留での８〜１２時間まで様々である。本出願では、６時間までの貯留を短いＰＤ貯留と呼び、８時間以上の貯留を長い貯留と呼ぶ。
【０２２４】
我々の糖類ポリマー調製物の１つ（溶液３、５．７５重量％グルカン）に１％マルトースを補って、総ＣＨＯ濃度６．７５％Ｍ、浸透圧３２９mOsmol/kgの溶液４（実施例３、Ｍｗ＝３．０３ｋＤ、Ｍｎ＝１．１９ｋＤ）を作り、７．５％イコデキストリンを含む市販のエクストラニール（登録商標）との比較のために、レイポルドら（２０１３、ＰＤＩ  ３３巻、１２４〜１３１ページ）が記載するウサギモデルに投与した。６匹のウサギをＡ及びＢの２つのグループに分けた。２つの溶液を交差試験の枠組みで両方のグループにテストした。
レイポルドらは、２４０分の１回の貯留後に限外ろ過を計算し、蛍光ボリュームマーカーで残留量（resting volume）を補正していた。その代わりに、我々は、３、３０、６０、１２０及び２４０分で1日に5回の貯留を実施した。３分の貯留は、1回の貯留で腹膜から回収できない体積を満たし、３０分の貯留に対し腹膜内に新鮮なＰＤ液のみが存在することを保証するための、プレフラッシング貯留として機能した。さらなる貯留が１日をとおして連続的に行われた。各貯留の終わりに、透析液が回収され、重さを量って透析液量を求めて、正味限外濾過体積を計算した。各透析液の試料に、総ＣＨＯ濃度測定を施した。実施例２に記載のＣＨＯ定量化法を用いた。合計６匹のウサギに透析を行って、本発明に対応する実験的透析溶液をイコデキストリンと比較した。３匹のウサギはテスト溶液で始め、他の３匹のウサギはイコデキストリン対照溶液で始めた。２日間の透析後、ウサギを２日間回復させてから、それぞれ他方の透析溶液に切り替えた。合計９６の透析貯留を実行し、各ウサギに１６の貯留を行った。ウサギが開始した溶液に応じた貯留量の違いは観察されなかった。統計的評価のために、テストした両方のグループに独立分散を持つ片側t検定を適用した。各貯留を独立した事象とみなし、多重検定（multiple testing）の修正は行わなかった。表１７は、各貯留の正味限外ろ過量（ml）の結果を示す。（* ＜５％で統計的に有意）。
【０２２５】
【表１７】
2020515323.tif 000022
【０２２６】
平均ＣＨＯ吸収及びＮＵＦ／ＣＨＯ吸収の割合を表１８に算出する。
【表１８】
2020515323.tif 000023
【０２２７】
要約すると、以下のことが判明した。
−３０分の貯留後、本発明に基づく溶液の平均ＮＵＦは９．３ml/１２０mlであるのに対し、エクストラニールでは−２ml/１２０mlである。
−６０分の貯留後の我々の組成物の平均ＮＵＦは３４ml/１２０mlであるのに対し、エクストラニールでは１２．３ml/１２０mlである。
−１２０分の貯留後の我々の組成物の平均ＮＵＦは４６ml/１２０mlであるのに対し、エクストラニールでは１３ml/１２０mlである。
−２４０分の貯留後の我々の組成物の平均ＮＵＦは５０ml/１２０mlであるのに対し、エクストラニールでは２８ml/１２０mlである。
【０２２８】
これらの結果は我々にとって非常に驚くべきものであった。レイポルドらによって報告されたデータに基づいて、我々は、ＮＵＦ値は２０分でエクストラニールに対し約５０ml/１２０mlだと予想した。モデルの実現における最もありそうな小さな違い、つまり、我々は、１回の貯留ではなく、１日を通して４回の実際の貯留で作業し、貯留後の残留量の補正をせずに、ウサギから回収した量を検討しただけであるという事実が、この差を説明する。一方、残留量は、１日に複数回貯留を行ったため、我々の研究では問題にならないはずである。それにもかかわらず、すべての時点で我々の組成物のパフォーマンスがイコデキストリンよりも比較的高いが、人間の短い貯留に対応するこのモデルの６０、１２０及び２４０の時点でより極端であり、我々の予想をはるかに上回った。このモデルは、我々の組成物が、この動物実験で適用された濃度よりも低濃度であっても、任意の一般的な医療用途、及び具体的には腹膜透析にとって、非常に効率的な浸透推進剤となるであろうことを示す。
【０２２９】
さらに、テスト溶液のＮＵＦ／ＣＨＯ吸収の割合は、各時点でより高い。さらに重要なことは、この割合の３つの最良の値はすべて、テスト溶液に対するものであり、これは、先に長い貯留に相当すると特徴付けた２４０分での事象に対するものである。
【国際調査報告】
2020515323.tif 000024
2020515323.tif 000025