(57)【要約】本発明は、シス−（Ｅ）−４−（３−フルオロフェニル）−２’，３’，４’，９’−テトラヒドロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２’−（１−オキソ−３−フェニル−２−プロペニル）−スピロ［シクロヘキサン−１，１’［１Ｈ］−ピリド［３，４−ｂ］インドール］−４−アミンを含む医薬組成物に関する。医薬組成物は特に、膀胱痛の治療法における膀胱内投与のための局所投与に適している。【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも５．０μｇ／ｍＬの濃度で、シス−（Ｅ）−４−（３−フルオロフェニル）−２’，３’，４’，９’−テトラヒドロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２’−（１−オキソ−３−フェニル−２−プロペニル）−スピロ［シクロヘキサン−１，１’［１Ｈ］−ピリド［３，４−ｂ］インドール］−４−アミンまたはその生理学的に許容される塩を含む、水性医薬組成物。
【請求項２】
前記濃度が、少なくとも２０μｇ／ｍＬ、好ましくは少なくとも４０μｇ／ｍＬ、より好ましくは少なくとも８０μｇ／ｍＬ、さらに好ましくは少なくとも１２０μｇ／ｍＬである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
ｐＨ値がｐＨ２．０〜ｐＨ１２、好ましくはｐＨ２．５〜ｐＨ８、より好ましくはｐＨ３．０〜ｐＨ７．０、さらに好ましくはｐＨ３．５〜ｐＨ６．５の範囲内である、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
緩衝液、好ましくはリン酸に由来する緩衝液を含有する、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
抗酸化剤、界面活性剤及び抗酸化特性を有する界面活性剤から選択された添加剤含む、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
前記添加剤が
非イオン性であり、及び／または
ＨＬＢ値が９〜１８、好ましくは１０〜１７、より好ましくは１１〜１６、さらに好ましくは１２〜１５の範囲内である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記添加剤がポリエチレングリコール残基を含む、請求項５または６に記載の組成物。
【請求項８】
前記添加剤がビタミンＥ残基を含む、請求項５から７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
前記添加剤がビタミンＥポリエチレングリコールコハク酸塩である、請求項５から８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記添加剤の濃度が、いずれの場合も前記組成物の総重量に対して、０．１〜５．０重量％、好ましくは０．５〜４．０重量％、より好ましくは１．０〜３．０重量％の範囲内である、請求項５から９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１】
シス−（Ｅ）−４−（３−フルオロフェニル）−２’，３’，４’，９’−テトラヒドロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２’−（１−オキソ−３−フェニル−２−プロペニル）−スピロ［シクロヘキサン−１，１’［１Ｈ］−ピリド［３，４−ｂ］インドール］−４−アミンをその遊離塩基の形態で含む、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１２】
少なくとも６ヶ月の貯蔵安定性を有する、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１３】
膀胱痛症候群の治療法において使用するための、先行請求項のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記組成物が局所的に、好ましくは膀胱内に投与される、請求項１３に記載の使用するための組成物。
【請求項１５】
膀胱痛症候群の治療法において使用するための、シス−（Ｅ）−４−（３−フルオロフェニル）−２’，３’，４’，９’−テトラヒドロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２’−（１−オキソ−３−フェニル−２−プロペニル）−スピロ［シクロヘキサン−１，１’［１Ｈ］−ピリド［３，４−ｂ］インドール］−４−アミンまたはその生理学的に許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、シス−（Ｅ）−４−（３−フルオロフェニル）−２’，３’，４’，９’−テトラヒドロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２’−（１−オキソ−３−フェニル−２−プロペニル）−スピロ［シクロヘキサン−１，１’［１Ｈ］−ピリド［３，４−ｂ］インドール］−４−アミンを含む医薬組成物に関する。医薬組成物は特に、膀胱痛の治療法における膀胱内投与のための局所投与に適している。
【０００２】
膀胱痛症候群（ＢＰＳ）は間質性膀胱炎としても知られており、膀胱に影響を及ぼす一種の慢性疼痛である。症状には、尿意切迫感及び頻繁な尿意、ならびに性交痛が挙げられる。ＢＰＳは、うつ病と生活の質の低下に関与している。また、ＢＰＳを患っている多くの患者は、過敏性腸症候群や線維筋痛にも罹患している。
【０００３】
ＢＰＳの原因は不明であり、ＢＰＳの治療法は存在しない。症状を改善し得る従来の治療法としては、生活様式の変更、薬物投与または治療手技が挙げられる。生活様式の変更には、禁煙、ストレスの軽減が挙げられ得る。薬物投与には、イブプロフェン、ポリ硫酸ペントサンまたはアミトリプチリンが挙げられ得る。治療手技には、膀胱拡張、神経刺激または外科手術が挙げられ得る。
【０００４】
米国泌尿器科学会は、診断のための合意に基づくガイドラインと、以下の治療法として、
第一選択の治療法：患者教育、セルフケア（食事改善）、ストレス管理、
第二選択の治療法：理学療法、経口薬物投与（アミトリプチリン、シメチジンまたはヒドロキシジン、ポリ硫酸ペントサン）、膀胱内注入（ＤＭＳＯ、ヘパリンまたはリドカイン）、
第三選択の治療法：ハンナ潰瘍の治療法（レーザー、高周波療法またはトリアムシノロン注射）、水圧拡張術（低圧、短期間）、
第四選択の治療法：神経調節（仙骨または陰部神経）、
第五選択の治療法：シクロスポリンＡ、ボツリヌス毒素（ＢＴＸ−Ａ）及び
第六選択の治療法：外科的介入（尿路変更術、排尿促進法、膀胱切除術）を包含するＢＰＳの治療法を発表した。
【０００５】
ＡＵＡガイドラインには、長期にわたる抗生物質の経口投与、カルメットゲラン桿菌の膀胱内投与、レシニフェラトキシンの膀胱内投与、高圧及び長期間の水圧拡張術ならびにグルココルチコイドの全身投与を包含する、いくつかの中止された治療法が同様に示されている。
【０００６】
薬物投与の膀胱内注入は、ＢＰＳの治療法における１つの形態である。単剤または混合剤は、一般的に膀胱内注入製剤において用いられる。このような製剤は、一般的に水性であり、かつ最終製品が確実に滅菌された状態で調製されなければならない。
【０００７】
ＢＰＳを治療するために膀胱内注入に使用される薬剤には、ＤＭＳＯ、ヘパリン、リドカイン、コンドロイチン硫酸塩、ヒアルロン酸、ポリ硫酸ペントサン、オキシブチニン及びボツリヌス毒素Ａが挙げられる。予備的エビデンスは、これらの薬剤がＢＰＳの症状の軽減に有効であることを示唆している。アミトリプチリンは、ＢＰＳに罹患する多くの患者の慢性骨盤痛及び夜間頻尿などの症状の軽減に有効であることが示された。抗うつ薬のデュロキセチンは、神経障害性疼痛を緩和することが知られているが、治療法として効果がないことが明らかになった（Ｃｈ．Ｐａｐａｎｄｒｅｏｕ  ｅｔ  ａｌ．Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｕｒｏｌｏｇｙ．２００９：１−９）。カルシニューリン阻害剤のシクロスポリンＡは、その免疫抑制性の特性からＢＰＳの治療法としての試験が行われた。前向き無作為化試験では、シクロスポリンＡがＢＰＳの症状の治療に対してポリ硫酸ペントサンより有効であることが認められたが、同様に副作用の増大もみられた。経口用のポリ硫酸ペントサンは、膀胱を覆っている保護膜的なグリコサミノグリカンを修復すると考えられているが、プラセボと比較したときの効果において統計的有意性の有無を決定しようとしたところ、試験の結果は結論の一致しないものとなった。
【０００８】
先行技術のＢＰＳの治療法における選択肢はあらゆる面で十分とはいえず、ＢＰＳを治療するための新たな薬剤の需要が存在する。
【０００９】
薬理活性成分であるシス−（Ｅ）−４−（３−フルオロフェニル）−２’，３’，４’，９’−テトラヒドロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２’−（１−オキソ−３−フェニル−２−プロペニル）−スピロ［シクロヘキサン−１，１’［１Ｈ］−ピリド［３，４−ｂ］インドール］−４−アミンは、ＷＯ２０１２／０１３３４３によって知られている鎮痛薬である。
【００１０】
シス−（Ｅ）−４−（３−フルオロフェニル）−２’，３’，４’，９’−テトラヒドロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２’−（１−オキソ−３−フェニル−２−プロペニル）−スピロ［シクロヘキサン−１，１’［１Ｈ］−ピリド［３，４−ｂ］インドール］−４−アミンは水に対する溶解性が低く、従来の溶解促進剤の存在下にあっても水溶液中の濃度は低い。さらに、シス−（Ｅ）−４−（３−フルオロフェニル）−２’，３’，４’，９’−テトラヒドロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２’−（１−オキソ−３−フェニル−２−プロペニル）−スピロ［シクロヘキサン−１，１’［１Ｈ］−ピリド［３，４−ｂ］インドール］−４−アミンは、水溶液の貯蔵安定性が低く、貯蔵寿命が短いといったように、化学的分解に対する影響を受けやすい。
【００１１】
本発明の目的は、特に膀胱痛症候群（間質性膀胱炎に起因する疼痛）を治療するために、間質性膀胱炎に関与する疾患及び症状の改善に有用であり、先行技術と比較して有益である医薬組成物を提供することである。さらに、本発明の目的は、局所投与、好ましくは膀胱内投与に有用であり、かつ先行技術と比較して有益であるシス−（Ｅ）−４−（３−フルオロフェニル）−２’，３’，４’，９’−テトラヒドロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２’−（１−オキソ−３−フェニル−２−プロペニル）−スピロ［シクロヘキサン−１，１’［１Ｈ］−ピリド［３，４−ｂ］インドール］−４−アミンまたはその生理学的に許容される塩の医薬組成物を提供することである。医薬組成物は十分に高濃度で溶解した形態においてシス−（Ｅ）−４−（３−フルオロフェニル）−２’，３’，４’，９’−テトラヒドロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２’−（１−オキソ−３−フェニル−２−プロペニル）−スピロ［シクロヘキサン−１，１’［１Ｈ］−ピリド［３，４−ｂ］インドール］−４−アミンを含有し、滅菌製剤の要件に従い、十分な貯蔵安定性と貯蔵寿命を有していなければならない。
【００１２】
これらの目的は、特許請求の範囲の内容によって達成されている。
【００１３】
驚くべきことに、シス−（Ｅ）−４−（３−フルオロフェニル）−２’，３’，４’，９’−テトラヒドロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２’−（１−オキソ−３−フェニル−２−プロペニル）−スピロ［シクロヘキサン−１，１’［１Ｈ］−ピリド［３，４−ｂ］インドール］−４−アミンまたはその生理学的に許容される塩（以下「ＡＰＩ」とも呼ぶ）を十分に高濃度で含有し、特に膀胱痛症候群（間質性膀胱炎に起因する疼痛）を治療するために、間質性膀胱炎に関与する疾患及び症状の改善に有用である医薬組成物が調製され得ることが明らかになっている。本発明による医薬組成物は、膀胱内への適用後に患者に対して良好な忍容性を示す安定した滅菌組成物として提供され得る。
【００１４】
ＡＰＩは水への溶解度が低いものの、溶解促進添加剤を溶液に添加できることが明らかになった。
【００１５】
驚くべきことに、特定の添加剤と緩衝液の組み合わせは、ＡＰＩの水性医薬組成物の調製を良好な回収率及び安定性特性をもって行うために有用であることが明らかになった。さらに驚くべきことに、ＡＰＩの安定性は添加剤濃度の関数であるのに対し、ＡＰＩの溶解度はｐＨ値及び添加剤濃度の関数であることが明らかになった。さらに驚くべきことに、ＡＰＩは光による分解の影響を受けやすく、褐色ガラス容器は他の一次包装材料と比較して有益であることが明らかになった。
【００１６】
組成物の酸化耐性を増強するために、抗酸化剤としてアスコルビン酸と保護ガスとして窒素の存在による影響を評価した。しかし、アスコルビン酸と窒素の両方の存在による影響で安定性が増大するエビデンスは得られなかった。アスコルビン酸はｐＨシフトの発生によりｐＨ調整を必要とし、さらに２５℃での安定性に悪影響を及ぼす。
【００１７】
医薬組成物の安定性について、組成物を１２１℃及び２バールで２０分間処理したオートクレーブ実験によって評価した。
【００１８】
さらに、微粒子化したＡＰＩを用いることにより、特にＡＰＩの溶解率の向上に関して有益な医薬組成物を調製し得ることが明らかになっている。医薬組成物の調製に関するプロセスは、好ましくは、ＡＰＩ及び添加剤の溶解物を調製し、続いて溶解液に水性緩衝液を添加し、膜フィルターを介して濾過することにより、無菌条件下において実施され得る。
【００１９】
本発明の第一の態様は、少なくとも５．０μｇ／ｍＬ、より好ましくは少なくとも１０μｇ／ｍＬ、より好ましくは少なくとも２０μｇ／ｍＬの濃度でシス−（Ｅ）−４−（３−フルオロフェニル）−２’，３’，４’，９’−テトラヒドロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２’−（１−オキソ−３−フェニル−２−プロペニル）−スピロ［シクロヘキサン−１，１’［１Ｈ］−ピリド［３，４−ｂ］インドール］−４−アミンまたはその生理学的に許容される塩を含む水性医薬組成物に関する。
【００２０】
本発明による医薬組成物は、以下の構造を有するＡＰＩ、シス−（Ｅ）−４−（３−フルオロフェニル）−２’，３’，４’，９’−テトラヒドロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２’−（１−オキソ−３−フェニル−２−プロペニル）−スピロ［シクロヘキサン−１，１’［１Ｈ］−ピリド［３，４−ｂ］インドール］−４−アミンまたはその生理学的に許容される塩を含有する。
【００２１】
【化１】
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【００２２】
ＡＰＩの生理学的に許容される塩には、クエン酸塩及び塩酸塩が挙げられるが、これらに限定されない。ＡＰＩは、非塩形態、すなわち、その遊離塩基の形態で医薬組成物に含有されることが好ましい。しかしながら、当業者は、医薬組成物及びその成分のｐＨ値に依存して、酸付加塩がその場で形成され得ることを認識している。本発明による医薬組成物の調製の過程で、ＡＰＩは好ましくは非塩形態、すなわち、その遊離塩基の形態で添加される。
【００２３】
特に明記されていない限り、すべてのパーセンテージは重量％である。さらに、特に明記されていない限り、ＡＰＩのすべての重量及びパーセンテージは、ＡＰＩの非塩形態の重量に相当するという意味で表される。特に明記されていない限り、すべての特性は相対湿度５０％及び２３℃において決定される。
【００２４】
本発明による医薬組成物は水性である。好ましくは、医薬組成物は室温において液体であり、好ましくは低粘度の液体である。好ましくは、医薬組成物の含水率は、組成物の総重量に対する各場合において、少なくとも９０重量％、より好ましくは少なくとも９５重量％であり、最も好ましくは少なくとも９７重量％である。
【００２５】
水に加えて、本発明による組成物は、さらに溶媒を含有してもよい。さらに適切な溶媒には、好ましくはエタノール、グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブタンジオール及びマクロゴール３００からなる群から選択される、生理学的に許容される親水性溶媒のすべての種類が包含される。
【００２６】
しかし、本発明による医薬組成物中において、水が唯一の溶媒として含有されることが好ましい。
【００２７】
好ましくは、本発明による医薬組成物は、局所投与、好ましくは膀胱内投与に適しており、したがって、このような組成物の規制要件を満たすものである。医薬組成物は無菌条件下で調製され、したがって無菌とみなされ得ることが好ましい。
【００２８】
本発明による医薬組成物は、少なくとも５．０μｇ／ｍＬ、より好ましくは少なくとも１０μｇ／ｍＬ、より好ましくは少なくとも２０μｇ／ｍＬの濃度でＡＰＩを含有する。
【００２９】
医薬組成物は、溶解形態、分散形態（懸濁及び／または乳化）またはそれらの組み合わせにおいてＡＰＩを含有し得る。本明細書の目的のために、濃度は組成物の非固体、好ましくは液体水相中に含有されるＡＰＩの量に関する。好ましくは、組成物は、このような液体水相からなる。
【００３０】
したがって、医薬組成物が、例えばＡＰＩ（固相）の沈殿物より上にある水性の上部溶液（液体水相）の形態で飽和溶液である場合、液体水相に含有されるＡＰＩの実際の溶解量（または分散量）のみが濃度に寄与する。医薬組成物が、例えば、ＡＰＩを液体水相中に懸濁した懸濁液である場合、懸濁されたＡＰＩの量が濃度に寄与する。同様に、医薬組成物が、例えばＡＰＩが液体水相中で乳化されるエマルジョンである場合、乳化したＡＰＩの量が濃度に寄与する。
【００３１】
好ましくは、本発明による医薬組成物に含有されるＡＰＩの総量は２３℃で溶解する。
【００３２】
好ましくは、２３℃において医薬組成物は透明である。すなわち、目視検査において濁っていないか、または不透明ではない。
【００３３】
好適な実施形態では、医薬組成物中のＡＰＩの濃度は、少なくとも３０μｇ／ｍＬ、または少なくとも４０μｇ／ｍＬ、または少なくとも５０μｇ／ｍＬ、または少なくとも６０μｇ／ｍＬ、または少なくとも７０μｇ／ｍＬ、または少なくとも８０μｇ／ｍＬ、または少なくとも９０μｇ／ｍＬ、少なくとも１００μｇ／ｍＬ、または少なくとも１１０μｇ／ｍＬ、または少なくとも１２０μｇ／ｍＬ、または少なくとも１３０μｇ／ｍＬ、または少なくとも１４０μｇ／ｍＬ、または少なくとも１５０μｇ／ｍＬ、または少なくとも１６０μｇ／ｍＬ、または少なくとも１７０μｇ／ｍＬ、または少なくとも１８０μｇ／ｍＬ、または少なくとも１９０μｇ／ｍＬ、または少なくとも２００μｇ／ｍＬである。
【００３４】
好適な実施形態では、医薬組成物中のＡＰＩの濃度は、最大３００μｇ／ｍｌ、または最大２９０μｇ／ｍｌ、または最大２８０μｇ／ｍｌ、または最大２７０μｇ／ｍｌ、または最大２６０μｇ／ｍｌ、または最大２５０μｇ／ｍｌ、または最大２４０μｇ／ｍｌ、または最大２３０μｇ／ｍｌ、または最大２２０μｇ／ｍｌ、または最大２１０μｇ／ｍｌ、または最大２００μｇ／ｍｌ、または最大１９０μｇ／ｍｌ、または最大１８０μｇ／ｍｌ、または最大１７０μｇ／ｍｌ、または最大１６０μｇ／ｍｌ、または最大１５０μｇ／ｍｌである。
【００３５】
好適な実施形態では、医薬組成物中のＡＰＩ濃度は、４０±３０μｇ／ｍＬ、または６０±３０μｇ／ｍＬ、または８０±５０μｇ／ｍＬ、または８０±３０μｇ／ｍＬ、または１００±５０μｇ／ｍＬ、または１００±３０μｇ／ｍＬ、または１２０±１００μｇ／ｍＬ、または１２０±５０μｇ／ｍＬ、または１２０±３０μｇ／ｍＬ、または１４０±１００μｇ／ｍＬ、または１４０±５０μｇ／ｍＬ、または１４０±３０μｇ／ｍＬ、または１６０±１００μｇ／ｍＬ、または１６０±５０μｇ／ｍＬ、または１６０±３０μｇ／ｍＬ、または１８０±１００μｇ／ｍＬ、または１８０±５０μｇ／ｍＬ、または１８０±３０μｇ／ｍＬ、または２００±１００μｇ／ｍＬ、または２００±５０μｇ／ｍＬ、または２００±３０μｇ／ｍＬの範囲内である。
【００３６】
医薬組成物中のＡＰＩの濃度は、好ましくは、所与の条件下（同じｐＨ、同じ性質及び残り成分の含有量）で２３℃において飽和溶液濃度の６０〜１００％、より好ましくは６５〜９５％、さらに好ましくは７０〜９０％、よりさらに好ましくは７５〜８５％の範囲内である。例えば、所定の条件下におけるＡＰＩの飽和溶液濃度が１８８μｇ／ｍＬである場合、前記飽和溶液濃度の６０〜１００％の範囲は、１１２．８μｇ／ｍＬ（すなわち１８８μｇ／ｍＬの６０％）〜１８８μｇ／ｍＬ（すなわち１８８μｇ／ｍＬの１００％）の範囲内の濃度を意味する。
【００３７】
好適な実施形態では、本発明による医薬組成物は、少なくともｐＨ２．０、または少なくともｐＨ２．５、または少なくともｐＨ３．０、または少なくともｐＨ３．５、または少なくともｐＨ４．０、または少なくともｐＨ４．５のｐＨ値を有する。
【００３８】
好適な実施形態では、本発明による医薬組成物は、最大ｐＨ８．０、または最大ｐＨ７．５、または最大ｐＨ７．０、または最大ｐＨ６．５、または最大ｐＨ６．０、または最大ｐＨ５．５のｐＨ値を有する。
【００３９】
医薬組成物のｐＨ値は、好ましくはｐＨ２．０〜ｐＨ１２、より好ましくはｐＨ２．５〜ｐＨ８の範囲内であり、さらに好ましくはｐＨ３．０〜ｐＨ７．０の範囲内であり、よりさらに好ましくはｐＨ３．５〜ｐＨ６．５、最も好ましくはｐＨ４．０〜ｐＨ６．０、特にｐＨ４．５〜ｐＨ５．５の範囲内である。
【００４０】
驚くべきことに、約ｐＨ４〜約ｐＨ６の範囲内にあるｐＨ値は、一方ではＡＰＩの溶解度と、他方では化学的安定性との間で特に有益な妥協点を提供することが見出されている。
【００４１】
好ましくは、本発明による組成物は緩衝化され、すなわち、各々１つまたは複数の緩衝液及び緩衝系（すなわち、共役酸塩基対）を含有する。好ましい緩衝系は、以下の酸として、酢酸、プロピオン酸、マレイン酸、フマル酸、乳酸、マロン酸、リンゴ酸、マンデル酸、クエン酸、酒石酸、コハク酸などの有機酸、またはリン酸などの無機酸に由来する。緩衝系が上記の酸のいずれかに由来する場合、緩衝系は、前記酸及びその共役塩基によって構成される。酢酸、クエン酸、乳酸、コハク酸またはリン酸に由来する緩衝系が特に好ましく、リン酸由来の緩衝液が特に好ましい。
【００４２】
驚くべきことに、同じｐＨ値において、リン酸由来の緩衝液（リン酸塩緩衝液）が、クエン酸由来の緩衝液（クエン酸塩緩衝液）と比較して有益性をもたらすことが明らかになっている。
【００４３】
当業者は、単一の緩衝系よりもマルチプロトン酸をより多く形成し得ることを十分に認識している。例えば、リン酸は、共役酸塩基対とリン酸−リン酸二水素塩、リン酸二水素塩−リン酸水素塩及びリン酸水素塩−リン酸塩を形成するようなトリプロトン酸である。言い換えれば、リン酸、リン酸二水素塩及びリン酸水素塩のいずれかが共役塩基を有する緩衝系の酸であり得る。本明細書の目的のために、「緩衝液及び緩衝系」という表現は、好ましくは、酸及びその共役塩基の両方に対する量を指す。さらに、当業者は、緩衝系、例えば共役系リン酸／リン酸二水素カリウムは、リン酸と適切な量の水酸化カリウム、またはリン酸カリウムと適切な量のリン酸、またはリン酸とリン酸二水素カリウムそのものを加えることのいずれかによって確立されることを十分に認識している。
【００４４】
緩衝液及び緩衝系はそれぞれ、リン酸由来であることが好ましく、その濃度が十分な緩衝能力を提供するように調整されることが好ましい。
【００４５】
好適な実施形態では、緩衝液及び緩衝系はそれぞれ、リン酸由来であることが好ましく、その含有量は、組成物の総重量に基づいて、０．０００１〜５．０重量％、より好ましくは０．０００２〜２．５重量％、さらに好ましくは０．０００５〜１．０重量％、よりさらに好ましくは０．００１〜０．５重量％、最も好ましくは０．００５〜０．２５重量％、特に０．０１〜０．１重量％の範囲内である。
【００４６】
本発明による医薬組成物は、抗酸化剤、界面活性剤及び抗酸化特性を有する界面活性剤（両親媒性特性を有する抗酸化剤）から選択された添加剤を含むことが好ましい。したがって、添加剤は複数の目的を果たし得る。一実施形態では、医薬組成物は、互いに異なる抗酸化剤及び／または界面活性剤を含む。別の実施形態では、医薬組成物は、抗酸化特性を有する界面活性剤である（すなわち、代替的に両親媒性特性を有する抗酸化剤とみなすことができる）１つの添加剤を含む。
【００４７】
本明細書の目的のために、用語「界面活性剤」は、少なくとも１つの疎水基及び少なくとも１つの親水基を含有するため、両親媒性特性を有する任意の化合物を指す。好ましくは、界面活性剤は、少なくとも１つの末端疎水基（尾）及び少なくとも１つの末端親水基（頭）を含有する。疎水基は、好ましくは、炭化水素、アルキルエーテル、フルオロカーボン及びシロキサン基からなる群から選択される。
【００４８】
好適な実施形態では、添加剤は、少なくとも３つの炭素原子、より好ましくは少なくとも４つの炭素原子、さらに好ましくは少なくとも６つの炭素原子、よりさらに好ましくは６〜３０の炭素原子、最も好ましくは８〜２４の炭素原子を含む、少なくとも１つの脂肪族基を含有する。脂肪族基は、飽和または不飽和基であってもよく、分岐鎖または非分岐鎖（直鎖）、末端または内部脂肪族基であってもよい。
【００４９】
添加剤は、ポリエチレングリコール残基を含むことが好ましい。
【００５０】
添加剤は、好ましくは飽和もしくは不飽和脂肪酸または不飽和脂肪族アルコールに由来する少なくとも１つの基を含有し、その基がエーテル、カルボン酸エステルまたは硫酸エステル基であることが好ましい。飽和もしくは不飽和脂肪酸または脂肪族アルコールは、好ましくは、少なくとも６個の炭素原子、よりさらに好ましくは６〜３０個の炭素原子、最も好ましくは８〜２４個の炭素原子を含有する。
【００５１】
好適な実施形態では、添加剤は、飽和または不飽和脂肪酸、好ましくはＣ６〜Ｃ３０脂肪酸、より好ましくはＣ８〜Ｃ２４脂肪酸及び最も好ましくはＣ１２〜Ｃ２２脂肪酸に由来する少なくとも１つの基を含有する。適切な脂肪酸の例としては、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ベヘン酸、リグノセリン酸、１２−ヒドロキシステアリン酸、オレイン酸及びリシノール酸などがある。
【００５２】
別の好適な実施形態では、添加剤は、飽和または不飽和脂肪族アルコール、好ましくはＣ６〜Ｃ３０脂肪族アルコール、より好ましくはＣ８〜Ｃ２４脂肪族アルコール及び最も好ましくはＣ１２〜Ｃ２２脂肪族アルコールに由来する少なくとも１つの基を含有する。適切な脂肪族アルコールの例としては、セチルアルコール、ステアリルアルコール、２−オクチルドデカン−１−オール及び２−ヘキシルデカン−１−オールである。
【００５３】
好ましくは、添加剤の分子量は、最大２０，０００ｇ／ｍｏｌ、より好ましくは最大１５，０００ｇ／ｍｏｌ、さらに好ましくは最大１０，０００ｇ／ｍｏｌ、よりさらに好ましくは最大５，０００ｇ／ｍｏｌ、より一層好ましくは最大４，０００ｇ／ｍｏｌ、最も好ましくは最大３，０００ｇ／ｍｏｌ、特に１００ｇ／ｍｏｌ〜２，５００ｇ／モル、好ましくは１０００〜２０００ｇ／ｍｏｌである。
【００５４】
好適な実施形態では、医薬組成物は単一の添加剤を含有する。別の好適な実施形態では、医薬組成物は、２つ以上の添加剤の混合物を含有する。
【００５５】
好ましくは、医薬組成物は、少なくとも８または少なくとも９の親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）を有する添加剤を含有する。より好ましくは、親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）は少なくとも１０または少なくとも１１または少なくとも１２、及び／または最大１８または最大１７または最大１６である。最も好ましくは、親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）は９〜１８、好ましくは１０〜１７、より好ましくは１１〜１６、さらに好ましくは１２〜１５の範囲内である。
【００５６】
好適な実施形態では、添加剤のＨＬＢ値は、１０±３、または１０±２、または１０±１、または１１±３、または１１±２、または１１±１、または１２±３、または１２±２、または１２±１、または１３±３、または１３±２、または１３±１、または１４±３、または１４±２、または１４±１、または１５±３、または１５±２、または１５±１、または１６±３、または１６±２、または１６±１、または１７±３、または１７±２、または１７±１の範囲内である。
【００５７】
添加剤は、イオン性、両性または非イオン性であり得る。
【００５８】
好適な実施形態では、医薬組成物は、イオン性添加剤、特にアニオン性添加剤を含有する。
【００５９】
適切なアニオン性添加剤には、ラウリル硫酸ナトリウム（ドデシル硫酸ナトリウム、例えば、Ｔｅｘａｐｏｎ（登録商標）Ｋ１２）、セチル硫酸ナトリウム（例えば、Ｌａｎｅｔｔｅ  Ｅ（登録商標））、セトステアリル硫酸ナトリウム、ステアリル硫酸ナトリウム、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム（ドキュセートナトリウム）などの硫酸エステル及びそれらの対応するカリウムまたはカルシウム塩が挙げられるがこれらに限定されない。
【００６０】
好ましくは、アニオン性添加剤は一般式（Ｉ）を有し、
ＣｎＨ２ｎ＋１Ｏ−ＳＯ３−Ｍ＋（Ｉ）、
式中、ｎは８〜３０、好ましくは１０〜２４、より好ましくは１２〜１８の整数であり、Ｍは、Ｌｉ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、ＮＨ４＋１／２Ｍｇ２＋及び１／２Ｃａ２＋から選択される。
【００６１】
さらに適切なアニオン性添加剤には、グリココール酸ナトリウム（例えば、Ｋｏｎａｋｉｏｎ（登録商標）ＭＭ、Ｃｅｒｎｅｖｉｔ（登録商標））、タウロコール酸ナトリウム及び対応するカリウムまたはアンモニウム塩を包含するコール酸の塩が挙げられる。
【００６２】
別の好適な実施形態では、医薬組成物は非イオン性添加剤を含有する。適切な非イオン性添加剤には、以下のものが挙げられるが、これらに限定されない。
セチルアルコール、ステアリルアルコール、セトステアリルアルコール、２−オクチルドデカン−１−オール及び２−ヘキシルデカン−１−オールなどの、直鎖または分岐鎖であり得る脂肪族アルコール、
コレステロールなどのステロール、
ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノパルミテート、ソルビタンモノステアレート、ソルビタントリステアレート、ソルビタンモノオレエート、ソルビタンセスキオレエート及びソルビタントリオレエートなどのソルビタンの部分脂肪酸エステル、
ポリオキシエチレンソルビタンの部分脂肪酸エステル（ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル）、好ましくはポリオキシエチレンソルビタンの脂肪酸モノエステル、ポリオキシエチレンソルビタンの脂肪酸ジエステルまたはポリオキシエチレンソルビタンの脂肪酸トリエステル、例えば、モノ−及びトリ−ラウリル、パルミチル、ステアリル及びオレイルエステルで「ポリソルベート」の名称で知られている種類などのもの、また、「Ｔｗｅｅｎ」の商標名で市販されているＴｗｅｅｎ（登録商標）２０［ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート］、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）  ２１  ［ポリオキシエチレン（４）ソルビタンモノラウレート］、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）４０［ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノパルミテート］、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）６０［ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート］、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）６５［ポリオキシエチレン（２０）ソルビタントリステアレート］、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０［ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート］、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８１［ポリオキシエチレン（５）ソルビタンモノオレエート］及びＴｗｅｅｎ（登録商標）８５［ポリオキシエチレン（２０）ソルビタントリオレエート］、好ましくは、一般式（ＩＩ）によるポリオキシエチレンソルビタンの脂肪酸モノエステル、
【００６３】
【化２】
2020508332.tif 000003
【００６４】
式中（ｗ＋ｘ＋ｙ＋ｚ）は、１５〜１００、好ましくは１６〜８０、より好ましくは１７から６０、さらに好ましくは１８〜４０、最も好ましくは１９〜２１の範囲内であり、
また、アルキレンは、６〜３０個の炭素原子、より好ましくは８〜２４個の炭素原子、最も好ましくは１０〜１６個の炭素原子を含む、選択的に不飽和化したアルキレン基であり、
グリセリンのモノ−、ジ−、及びトリエステルならびに２００〜４０００ｇ／ｍｏｌの範囲内の分子量を有するマクロゴールのジ−及びモノエステル、例えば、マクロゴールグリセロールカプリロカプレート、マクロゴールグリセロールラウレート、マクロゴールグリセロールココエート、マクロゴールグリセロールリノレート、マクロゴール−２０−グリセロールモノステアレート、マクロゴール−６−グリセロールカプリロカプレート、マクロゴールグリセロールオレエート、マクロゴールグリセロールステアレート、マクロゴールグリセロールヒドロキシステアレート（例えば、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＲＨ４０）及びマクロゴールグリセロールリジノレエート（例えば、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）ＥＬ）の混合物などのポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、
ポリオキシエチレン脂肪酸エステルで、好ましくは脂肪酸が約８〜約１８の炭素原子、例えばマクロゴールオレエート、マクロゴールステアレート、マクロゴール−１５−ヒドロキシステアレート、１２−ヒドロキシステアリン酸のポリオキシエチレンエステルで「Ｓｏｌｕｔｏｌ  ＨＳ１５」の商標名で知られ、市販されている種類などのもの、好ましくは、一般的な式（ＩＩＩ）による
ＣＨ３ＣＨ２−（ＯＣＨ２ＣＨ３）ｎ−Ｏ−ＣＯ−（ＣＨ２）ｍＣＨ３（ＩＩＩ）、
式中、ｎは６〜５００、好ましくは７〜２５０、より好ましくは８〜１００、さらに好ましくは９〜７５、よりさらに好ましくは１０〜５０、より一層好ましくは１１〜３０、最も好ましくは１２〜２５、特に１３〜２０の整数であり、また、
式中、ｍは６〜２８、より好ましくは６〜２６、さらに好ましくは８〜２４、よりさらに好ましくは１０〜２２、より一層好ましくは１２〜２０、最も好ましくは１４〜１８の整数、特に１６であり、
ポリオキシエチレン脂肪アルコールエーテル、例えば、マクロゴールセチルステアリルエーテル、マクロゴールラウリルエーテル、マクロゴールオレイルエーテル、マクロゴールステアリルエーテル、
ポリオキシプロピレン−ポリオキシエチレンブロック共重合体（ポロキサマー）、
スクロースの脂肪酸エステル、例えば、スクロースジステアレート、スクロースジオレエート、スクロースジパルミテート、スクロースモノステアレート、スクロースモノオレエート、スクロースモノパルミテート、スクロースモノミリステート及びスクロースモノラウレート、
ポリグリセリンの脂肪酸エステル、例えば、ポリグリセリンオレエート、
α−トコフェロールコハク酸塩のポリオキシエチレンエステル、例えば、Ｄ−α−トコフェロール−ＰＥＧ−１０００−コハク酸塩（ＴＰＧＳ）、
「Ｇｅｌｕｃｉｒｅ４４／１４」、「Ｇｅｌｕｃｉｒｅ５０／１３」及び「Ｌａｂｒａｓｏｌ」という商標名で知られ、市販されている種類などのポリグリコール化グリセリド、
商標名「Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ」で知られ、市販されている様々な液体界面活性剤などの、天然または硬化ヒマシ油とエチレンオキシドの反応生成物、
グリセリン脂肪酸エステルなどの多官能性アルコールの部分脂肪酸エステル、例えばモノ−及びトリ−ラウリル、パルミチル、ステアリル及びオレイルエステル、例えば、グリセロールモノステアレート、グリセロールモノオレエート、例えば、「Ｐｅｃｅｏｌ」という商標名で知られ、市販されているグリセリルモノオレエート４０、グリセロールジベヘネート、グリセロールジステアレート、グリセロールモノリノレート、エチレングリコールモノステアレート、エチレングリコールモノパルミトステアレート、ペンタエリスリトールモノステアレート。
【００６５】
本発明による医薬組成物に含有されるこのクラスの特に好ましい添加剤は、少なくとも８の親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）を有する非イオン性添加剤であり、特に少なくとも９のＨＬＢ値を有する非イオン性添加剤であり、その中でも特に１２〜１５の範囲内にＨＬＢ値を有する非イオン性添加剤である。
【００６６】
好適な実施形態では、添加剤の含有量は、医薬組成物の総重量に基づいて、少なくとも０．００１重量％または少なくとも０．００５重量％、より好ましくは、少なくとも０．０１重量％または少なくとも０．０５重量％、さらに好ましくは、少なくとも０．１重量％、少なくとも０．２重量％または少なくとも０．３重量％、よりさらに好ましくは、少なくとも０．４重量％、少なくとも０．５重量％または少なくとも０．６重量％、及び、特に少なくとも０．７重量％、少なくとも０．８重量％、少なくとも０．９重量％または少なくとも１．０重量％である。
【００６７】
好適な実施形態では、添加剤は抗酸化剤である。好適な抗酸化剤には、アスコルビン酸、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、アスコルビン酸塩、モノチオグリセロール、亜リン酸、ビタミンＣ、ビタミンＥ及びその誘導体、安息香酸コニフェリル、ノルジヒドログアイアレチン酸、没食子酸エステル、亜硫酸水素ナトリウム、特に好ましくはビタミンＥ及びその誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６８】
好適な実施形態では、添加剤はビタミンＥ誘導体であり、すなわち、ビタミンＥ残基を含み、好ましくは天然ビタミンＥに属さない別の残基に結合される。好ましくは、前記の別の残基は、コハク酸塩を介してビタミンＥ残基に共有結合され得るポリエチレングリコール残基である。この種類のビタミンＥ誘導体（コハク酸ジエステル）は、本発明により特に好ましい添加剤であるビタミンＥポリエチレングリコールコハク酸塩としても知られている。
【００６９】
ビタミンＥポリエチレングリコールコハク酸塩は、抗酸化特性を有する界面活性剤である（すなわち、両親媒性特性を有する抗酸化剤とみなすことができる）、本発明による添加剤の一例である。
【００７０】
通常、添加剤の濃度は、医薬組成物中のＡＰＩにおける所望の濃度に依存する。
【００７１】
好適な実施形態では、添加剤、好ましくはビタミンＥポリエチレングリコールコハク酸塩の濃度は、いずれの場合も組成物の総重量に対して、少なくとも０．０１重量％、または少なくとも０．０５重量％、または少なくとも０．１重量％、または少なくとも０．２重量％、または少なくとも０．３重量％、または少なくとも０．４重量％、または少なくとも０．５重量％、または少なくとも０．６重量％、または少なくとも０．７重量％、または少なくとも０．８重量％、または少なくとも０．９重量％、または少なくとも１．０重量％、または少なくとも１．１重量％、または少なくとも１．２重量％、または少なくとも１．３重量％、または少なくとも１．４重量％、または少なくとも１．５重量％である。
【００７２】
好適な実施形態では、添加剤、好ましくはビタミンＥポリエチレングリコールコハク酸塩の濃度は、最大５．０重量％、または最大４．５重量％、または最大４．０重量％、または最大３．９重量％、または最大３．８重量％、または最大３．７重量％、または最大３．６重量％、または最大３．５重量％、または最大３．４重量％、または最大３．３重量％、または最大３．２重量％、または最大３．１重量％、または最大３．０重量％、または最大２．９重量％、または最大２．８重量％、または最大２．７重量％、または最大２．６重量％、または最大２．５重量％である。
【００７３】
好ましくは、添加剤、好ましくはビタミンＥポリエチレングリコールコハク酸塩の濃度は、いずれの場合も組成物の総重量に対して、０．１〜５．０重量％、好ましくは０．５〜４．０重量％、より好ましくは１．０〜３．０重量％の範囲内である。
【００７４】
本発明による医薬組成物は、従来、水性医薬組成物の調製に使用され、等張化剤、保存剤、増粘剤、キレート剤などの当業者に既知の追加的な医薬補助物質を含有し得る。
【００７５】
好ましくは、組成物は保存剤を含まない。本明細書の目的のために、「保存剤」は、好ましくは、微生物の分解または微生物の増殖に対して医薬組成物を保護するために、それらに通常添加される任意の物質を指す。これに関して、微生物の増殖は、通常極めて重要な役割を果たす。すなわち、保存剤は、微生物の汚染を回避するという主な目的を果たす。別の観点から、活性成分及び添加剤のそれぞれに関する微生物のあらゆる影響を回避すること、すなわち微生物の分解を回避することも同様に望ましい可能性がある。
【００７６】
保存剤の代表例としては、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、安息香酸、安息香酸ナトリウム、ベンジルアルコール、ブロノポール、セトリミド、塩化セチルピリジニウム、クロルヘキシジン、クロロブタノール、クロロクレゾール、クロロキシレノール、クレゾール、エチルアルコール、グリセリン、ヘキセチジン、イミドウレア、フェノール、フェノキシエタノール、フェニルエチルアルコール、硝酸フェニル水銀、プロピレングリコール、プロピオン酸ナトリウム、チメロサール、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン、イソブチルパラベン、ベンジルパラベン、ソルビン酸及びソルビン酸カリウムが挙げられる。
【００７７】
好ましくは、本発明による医薬組成物は、本質的に、
−水、
−ＡＰＩ、
−緩衝液、好ましくはリン酸に由来するもの、
−添加剤、好ましくはビタミンＥポリエチレングリコールコハク酸塩、及び
−選択的に、液体に溶解させることができるガスからなる。
【００７８】
本発明による医薬組成物は、好ましくはＩＣＨガイドライン、好ましくは２０１７年に有効となったバージョンに従って、少なくとも６ヶ月の貯蔵安定性を有する。
【００７９】
ＩＣＨ及びＦＤＡのガイドラインによる薬物の安定性を決定するために一般的に承認されている加速試験は、薬物を含有する医薬組成物の保存（例えば、その容器及び包装について）に関する。ＩＣＨガイドラインによれば、いわゆる加速貯蔵試験は医薬組成物に対し、４０±２℃、７５％ＲＨ±５％において、最短期間で６ヶ月間にわたり実施しなければならない。さらに、いわゆる長期保存試験は医薬組成物に対し、２５±２℃、６０％ＲＨ±５％以上において、最短期間で１２ヶ月間にわたり実施しなければならない。６ヶ月の期間中、加速貯蔵試験と長期保存試験の条件においてすべての基準が満たされている場合は、長期保存試験を６ヶ月に短縮し、対応するデータを２倍にして１２ヶ月間の推定データを得ることができる。
【００８０】
医薬組成物のサンプルは、保存期間中に指定された時間間隔で回収され、その薬物含有量、不純物の有無及び適用可能な場合は他のパラメータに関して分析される。ＩＣＨガイドラインによれば、すべてのサンプルにおいて、薬物の純度≧９８％、薬物含有量は９５〜１０５％（ＦＤＡガイドライン：９０〜１１０％）でなければならない。
【００８１】
好適な実施形態では、医薬組成物を密閉ガラス容器内に長期保存条件下（２５℃及び相対湿度６０％）で６ヶ月間保存した後、ＡＰＩの分解は２．０％、より好ましくは１．５％、さらに好ましくは１．０％、最も好ましくは０．５％を超えない。
【００８２】
別の好適な実施形態では、医薬組成物を密閉ガラス容器内に加速貯蔵条件下（４０℃及び相対湿度７５％）で６ヶ月間保存した後、ＡＰＩの分解は４％、より好ましくは３％、さらに好ましくは２％、よりさらに好ましくは１％、最も好ましくは０．５％を超えない。
【００８３】
本発明の別の態様は、間質性膀胱炎に関与する疾患及び症状の改善に使用するため、特に膀胱痛症候群の治療法において使用するために、上記の本発明による水性医薬組成物に関する。これに関して、本発明は同様に、間質性膀胱炎に関与する疾患及び症状の改善に使用するため、特に膀胱痛症候群の治療法において使用するために、上記の本発明による水性医薬組成物を製造するためのＡＰＩの使用法に関する。さらに、本発明は同様に、間質性膀胱炎に関与する疾患及び症状を改善するための、特に膀胱痛症候群を治療するための、上記の本発明による水性医薬組成物をそれを必要とする対象に投与することを含む方法に関する。
【００８４】
本発明の別の態様は、シス−（Ｅ）−４−（３−フルオロフェニル）−２’，３’，４’，９’−テトラヒドロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２’−（１−オキソ−３−フェニル−２−プロペニル）−スピロ［シクロヘキサン−１，１’［１Ｈ］−ピリド［３，４−ｂ］インドール］−４−アミンもしくはその生理学的に許容される塩、またはシス−（Ｅ）−４−（３−フルオロフェニル）−２’，３’，４’，９’−テトラヒドロ−Ｎ，Ｎ−ジメチル−２’−（１−オキソ−３−フェニル−２−プロペニル）−スピロ［シクロヘキサン−１，１’［１Ｈ］−ピリド［３，４−ｂ］インドール］−４−アミンもしくはその生理学的に許容される塩を含む医薬製剤に関し、いずれの場合も間質性膀胱炎に関与する疾患及び症状の改善、特に膀胱痛症候群の治療法における使用を目的とする。
【００８５】
好ましくは、本発明による医薬組成物は局所的に、好ましくは膀胱内に投与される。
【００８６】
好ましくは、本発明による医薬組成物は、１日１回またはそれより少ない頻度、例えば週２回または週１回投与される。
【００８７】
本発明の別の態様は、上記の本発明による水性医薬組成物を含む容器に関する。
【００８８】
好ましくは、容器は透明ガラス容器または褐色ガラス容器であり、いずれの場合もアルミニウム箔で覆われていてもよい。
【００８９】
本発明の別の態様は、上記の本発明による水性医薬組成物を調製するためのプロセスに関し、
（ａ）高温でＡＰＩを添加剤と混合してプレブレンドを調製するステップと、
（ｂ）ステップ（ａ）で得たプレブレンドを、選択的に緩衝液を含有した水性組成物と混合し、それによって医薬組成物を提供するステップとを含む。
【００９０】
プレブレンドが溶解物になるように、ステップ（ａ）は添加剤の溶融温度を超える温度で実行することが好ましい。好ましくは、温度は５０℃〜８０℃の範囲内であり、より好ましくは５５℃〜７５℃の範囲内であり、さらに好ましくは６０℃〜７０℃の範囲内である。
【００９１】
ステップ（ａ）では、ＡＰＩが微粒子化した形態で使用されることが好ましい。驚くべきことに、本発明による水性医薬組成物の工業規模での調製においては、ＡＰＩを微粒子化した形態で使用し、プレブレンドを、好ましくは溶融物として調製する際に、高温でＡＰＩを添加剤と混合することによって、次いで前記プレブレンドに水性緩衝液を加えることによって、十分な時間枠内で十分な結果を達成できることが明らかになった。
【００９２】
好ましくは、ＡＰＩは、
ｄ１０値が、最大２０μｍ、好ましくは最大１５μｍ、より好ましくは最大１０μｍ、さらに好ましくは最大５．０μｍであり、及び／または
ｄ５０値が、最大５０μｍ、好ましくは最大３０μｍ、より好ましくは最大１０μｍ、さらに好ましくは最大５．０μｍであり、及び／または
ｄ９０値が、最大１００μｍ、好ましくは最大５０μｍ、より好ましくは最大２５μｍ、さらに好ましくは最大１０μｍであることを特徴とする粒子径分布を有する。
【００９３】
好ましくは、ＡＰＩは、
ｄ１０値が、０．１５〜１．０５μｍの範囲内、好ましくは０．３０〜０．９０μｍの範囲内、より好ましくは０．４５〜０．７５μｍの範囲内であり、及び／または
ｄ５０値が、０．３０〜２．１０μｍの範囲内、好ましくは０．６０〜１．８０μｍの範囲内、より好ましくは０．９０〜１．５０μｍの範囲内であり、及び／または
ｄ９０値が、０．５０〜４．００μｍの範囲内、好ましくは１．００〜３．５０μｍの範囲内、より好ましくは１．５０〜３．００μｍの範囲内であることを特徴とする粒子径分布を有する。
【００９４】
粒子径分布を測定するための適切な方法は、当業者に知られている。好ましくは、粒子径分布はレーザー回折法によって、好ましくはＭａｌｖｅｒｎの粒子径分析装置、例えば、Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ３０００などを用いて測定され、好ましくはドライモードで操作される。
【００９５】
好ましくは、本発明によるプロセスは、以下の追加のステップ、
（ｃ）ステップ（ｂ）で得られた医薬組成物の容器内への包装、及び
（ｄ）選択的に、医薬組成物を含有する容器のオートクレーブを含む。
【００９６】
好ましくは、本発明によるプロセスのすべてのステップは、無菌条件下で行われる。
【００９７】
以下の実施例は、本発明をさらに説明するが、その範囲を限定して解釈すべきではない。
【実施例】
【００９８】
実施例１：ｐＨ４．５の２つの異なる緩衝液中における種々の添加剤における可溶化効果
異なる添加剤を共に使用した緩衝液中において、ＡＰＩの溶解度を評価した。１００ｇの緩衝液中に異なる量の非微粒子化ＡＰＩ（すなわち、１ｍｇ、４ｍｇ、１０ｍｇまたは１５ｍｇ）を含有するバッチを、飽和溶液を得るために調製した。２つの異なる緩衝液（クエン酸塩緩衝液及びリン酸塩緩衝液）が選択された。最終組成物の十分な溶解度及び忍容性に関して、ｐＨ値を４．５に調整した。ＡＰＩの溶解度の低さを改善するため、異なる溶解促進添加剤を緩衝系に０．１〜２重量％の濃度範囲で添加した。
【００９９】
【表１】
2020508332.tif 000004
【０１００】
最初に、ヨーロッパ薬局方に従って緩衝液を調製した。ｐＨ調整後、対応する添加剤を緩衝液に溶解させた。緩衝液を含有する添加剤（すなわち１００ｇ）にＡＰＩを１ｍｇ添加し、撹拌した。ＡＰＩが完全に溶解したら、緩衝液／添加剤の混合物１００ｍｇ中においてＡＰＩの最終量が１０ｍｇになるように、さらに９ｍｇを添加した。得られた組成物は、０．４５μｍのフィルターを介して濾過及び分析を行う前に一晩撹拌され、それぞれＡＰＩを１ｍｇまたは１０ｍｇ含有した。以下の組成物を調製し、以下の溶解度の値が達成された。
【０１０１】
【表２】
2020508332.tif 000005
【図面の簡単な説明】
【０１０２】
図１は、クエン酸塩緩衝液中の溶解促進添加剤の存在下における、ＡＰＩの溶解度及び不純物を示す。図２は、リン酸塩緩衝液中の溶解促進添加剤の存在下における、ＡＰＩの溶解度及び不純物を示す。
【０１０３】
上記データから、ＡＰＩは、その不純物がＧｅｌｕｃｉｒｅ（登録商標）４４／１４の存在下で増加したが、ＳＬＳ（クエン酸塩緩衝液中）、Ｌａｂｒａｓｏｌ（登録商標）、ビタミンＥ  ＴＰＧＳ及びＧｅｌｕｃｉｒｅ（登録商標）４４／１４の存在下で良好な溶解度を示したことが明らかになった。ＡＰＩは、ＳＬＳ、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ（登録商標）４４／１４、Ｌａｂｒａｓｏｌ（登録商標）及びビタミンＥ  ＴＰＧＳ存在下のクエン酸塩緩衝液中において、良好な溶解度を示した。リン酸塩緩衝液では、Ｇｅｌｕｃｉｒｅ（登録商標）４４／１４、Ｌａｂｒａｓｏｌ（登録商標）及びビタミンＥ  ＴＰＧＳにおいて溶解度が良好であったことが認められた。ＡＰＩの不純物は、溶解度が高くなるにつれ増加するように見えた。
【０１０４】
可溶化効果を効率化し、不純物濃度をより低下させるため、さらに行う実験に使用する界面活性剤としてビタミンＥ  ＴＰＧＳ、ＳＬＳ（クエン酸塩緩衝剤のみ）、及びＬａｂｒａｓｏｌ（登録商標）（リン酸塩緩衝液のみ）を選択した。ビタミンＥ  ＴＰＧＳはＨＬＢ値が約１３、ＳＬＳはＨＬＢ値が約４０及びＬａｂｒａｓｏｌ（登録商標）はＨＬＢ値が約１４である。
【０１０５】
実施例２‐光安定性：
予備的試験では、光感受性がＡＰＩの分解において推定される原因であり、ＡＰＩが十分に可溶化するように数時間撹拌したため、このステップの間におけるＡＰＩの安定性をさらに調査した。異なる３つの遮光依存性に関して、２４時間の撹拌を
透明ガラス容器、
褐色ガラス容器、及び
アルミニウム箔で覆った透明ガラス容器の中で行い、撹拌のプロセスを調査した。
【０１０６】
ＳＬＳまたはビタミンＥ  ＴＰＧＳを含有するクエン酸塩緩衝液と、Ｌａｂｒａｓｏｌ（登録商標）またはビタミンＥ  ＴＰＧＳを含有するリン酸塩緩衝液が溶媒として選択された。組成物は、緩衝液１００ｇ中にＡＰＩを１０ｍｇ含有し、濾過及び分析を行う前に４８時間撹拌した（２４時間後に追加のサンプリングを行う）。
【０１０７】
図３は、クエン酸塩緩衝液及びＳＬＳまたはビタミンＥ  ＴＰＧＳ中での遮光依存性に関する安定性アッセイの結果を示す。図４は、クエン酸塩緩衝液及びＳＬＳまたはビタミンＥ  ＴＰＧＳ中での遮光依存性に関する純度を示す。
【０１０８】
図５は、リン酸塩緩衝液及びＬａｂｒａｓｏｌ（登録商標）またはビタミンＥ  ＴＰＧＳ中での遮光依存性に関する安定性アッセイの結果を示す。図６は、リン酸塩緩衝液及びＬａｂｒａｓｏｌ（登録商標）またはビタミンＥ  ＴＰＧＳ中での遮光依存性に関する純度を示す。
【０１０９】
図３〜６に示されるデータから、すべての場合において、遮光したサンプル（褐色ガラス及び覆われた透明ガラス）がアッセイ及び純度のプロファイルにおいて優れた結果をもたらしたことが明らかになった。褐色ガラスと覆われた透明ガラスとの間に大幅な差はみられず、ＡＰＩが褐色ガラスに対して一般的不適合性を有さないことを示している。遮光した場合は、クエン酸塩緩衝液の使用により、ＳＬＳ及びビタミンＥ  ＴＰＧＳとの組み合わせにおいて十分なアッセイ及び純度の結果が得られた（図３及び図４）。しかし、ＡＰＩがリン酸塩緩衝液及びＬａｂｒａｓｏｌ（登録商標）中で撹拌された場合、遮光されているにも関わらず、アッセイにおいて有意な減少が示された（図５）。対照的に、リン酸塩緩衝液とビタミンＥ  ＴＰＧＳとの組み合わせでは、遮光されなくても大幅に分解することがなく、十分なアッセイ及び純度の結果が得られた（図５及び図６）。
【０１１０】
実施例３：‐オートクレーブ後の安定性：
定められた緩衝系及び添加剤におけるＡＰＩの安定性の評価を目的として、オートクレーブ実験を実施した。アルミニウム箔で覆った透明ガラスは、材料に対する遮光性を十分に有し、褐色ガラスよりも相互作用のリスクが小さいことが予想されたため、一次包装材として選択された。不純物のプロファイルの分析に続いて、バッチを１２１℃及び２ｂａｒで２０分間オートクレーブした。
【０１１１】
図７は、クエン酸塩緩衝液及びＳＬＳまたはビタミンＥ  ＴＰＧＳ中、ならびにリン酸塩緩衝液及びＬａｂｒａｓｏｌ（登録商標）またはビタミンＥ  ＴＰＧＳ中での、オートクレーブ後における不純物を示す。
【０１１２】
図７に示されるデータから、オートクレーブはＡＰＩの大量分解につながることが明らかになり（すべての不純物の合計は１３％（ａ／ａ）〜７６％（ａ／ａ）の範囲）、クエン酸塩緩衝液及びＳＬＳで分解率が最も高いことが認められ、ＡＰＩはリン酸塩緩衝液及びビタミンＥ  ＴＰＧＳで分解率が最も低かった。
【０１１３】
実施例４−界面活性剤の濃度依存性に関するＡＰＩの溶解度及び安定性：
膀胱内への局所投与後において、刺激性または毒性作用を引き起こし得る界面活性剤の過剰濃度を防ぐため、より低濃度で評価が行われた。クエン酸塩及びリン酸塩緩衝液中で、ＡＰＩの新規のバッチを調製した。クエン酸塩緩衝液に対してＳＬＳ及びビタミンＥ  ＴＰＧＳを、また、リン酸塩緩衝液に対してＬａｂｒａｓｏｌ（登録商標）及びビタミンＥ  ＴＰＧＳを、それぞれ０．５％及び０．２５％の濃度において選択した。組成物は、濾過及び分析を行う前に一晩撹拌した。
【０１１４】
図８は、クエン酸塩緩衝液、それぞれ０．２５及び０．５％のＳＬＳ及びビタミンＥ  ＴＰＧＳにおけるアッセイ及び不純物の結果をそれぞれ示す。図９は、リン酸塩緩衝液、それぞれ０．２５及び０．５％のＬａｂｒａｓｏｌ（登録商標）及びビタミンＥ  ＴＰＧＳにおけるアッセイ及び不純物の結果を示す。
【０１１５】
図８及び９に示されるデータから、両方の緩衝液及び試験されたすべての界面活性剤に対し、ＡＰＩのアッセイにおいて界面活性剤の濃度依存性による大幅な増加が認められたことが明らかになった。対照的に、界面活性剤の濃度がより高くなった場合に、不純物がより減少した。リン酸塩緩衝液と０．５０％のビタミンＥ  ＴＰＧＳの組み合わせにより、アッセイ値が最大、不純物値が最小になった。
【０１１６】
実施例５−界面活性剤の濃度依存性及び抗酸化剤としてのアスコルビン酸の影響によるＡＰＩの溶解度及び安定性：
ＡＰＩを十分に溶解させるために必要な界面活性剤の最小濃度をさらに評価するため、いくつかのバッチを調製した。ＡＰＩの溶解度及び安定性のプロファイルに関して、クエン酸塩緩衝液及びＳＬＳならびにリン酸塩緩衝液及びビタミンＥ  ＴＰＧＳを選択した。界面活性剤の濃度を異なる４段階（０．１％、０．２５％、０．５％及び１．０％）に変化させた。さらに、ＡＰＩの不純物が酸化分解に関与していたため、抗酸化剤としてのアスコルビン酸１％の影響を評価した。調製したバッチは、分析を行う前に遮光して６日間撹拌した。
【０１１７】
図１０は、アスコルビン酸の存在下及び非存在下での、クエン酸塩緩衝液及びＳＬＳ（０．１％、０．２５％、０．５％及び１．０％）におけるアッセイ及び不純物の結果を示す。図１１は、アスコルビン酸の存在下及び非存在下での、クエン酸塩緩衝液及びＳＬＳ（０．１％、０．２５％、０．５％及び１．０％）におけるｐＨを示す（＋＋＋＝非常に濁っている、＋＋＝濁っている、−＝透明、（＊）＝黄色）。
【０１１８】
図１２は、アスコルビン酸の存在下及び非存在下での、リン酸塩緩衝液及びビタミンＥ  ＴＰＧＳ（０．１％、０．２５％、０．５％及び１．０％）におけるアッセイ及び不純物の結果を示す。図１３は、アスコルビン酸の存在下及び非存在下での、リン酸塩緩衝液及びビタミンＥ  ＴＰＧＳ（０．１％、０．２５％、０．５％及び１．０％）におけるｐＨを示す（＋＝わずかに濁っている、−＝透明、（“）＝結晶が目視可能）。
【０１１９】
図１０〜１３に示されるデータからも、緩衝液／界面活性剤の両方の組み合わせに対し、ＡＰＩのアッセイにおける界面活性剤の濃度依存性による増加と、同時に不純物の減少が認められたことが明らかになった（図１０及び図１２）。アスコルビン酸１％を含有する製剤では、ｐＨ値の減少が示され（図１１及び図１３）、クエン酸塩緩衝液／ＳＬＳではほんのわずかな（ｐＨ４．６〜４．２）、リン酸塩緩衝液／ビタミンＥ  ＴＰＧＳではより強いシフトが起こった（ｐＨ４．７〜３．０）。アスコルビン酸１％を含む製剤では、調査した組成物の不純物のプロファイルにおいて大幅な有益性を示さなかった一方で、アスコルビン酸存在下のリン酸塩緩衝液では、ＡＰＩのアッセイにおいて増加がみられ、これは組成物のｐＨがより低いことによって起こりやすくなる。
【０１２０】
また、クエン酸塩緩衝液及びより低濃度のＳＬＳ（０．１％及び０．２５％）を含有する組成物が濁って見えた（アスコルビン酸の非存在下及び存在下で）一方で、クエン酸塩緩衝液、ＳＬＳ及びアスコルビン酸のすべての組み合わせは、黄色の組成物をもたらした。界面活性剤濃度がより低い状態ではアッセイ値が低いことが示され、これはＡＰＩの溶解度がより低かった結果である可能性が高く、これらの組成物が濁って見えるか、またはＡＰＩの結晶が目視可能であったためである（図１１及び図１３）。
【０１２１】
リン酸塩緩衝液ならびにビタミンＥ  ＴＰＧＳ０．５％及び１％中のＡＰＩは、酸性条件下であっても不純物の濃度が非常に低いことを示した（図１２）。
【０１２２】
実施例６−アスコルビン酸の存在下及び非存在下におけるＡＰＩの短期安定性：
リン酸塩緩衝液及びビタミンＥ  ＴＰＧＳを含有する組成物を短期安定性試験において調査した。アスコルビン酸の存在によって得られる、潜在的な抗酸化作用の有益性における評価を目的とした。６日間撹拌した組成物は、遮光してさらに１５日間撹拌し、撹拌期間は全部で２１日間であった。サンプルを１４日後及び２１日後（さらにｔ＝６日間）に分析した（アッセイ及び不純物）。外観及びｐＨ値は１４日後のみを評価した。
【０１２３】
図１４は、アスコルビン酸の存在下及び非存在下での、リン酸塩緩衝液ならびにビタミンＥ  ＴＰＧＳ０．５％及び１％におけるＡＰＩの短期安定性として、ｔ＝６、１４及び２１日目のアッセイを示す。図１５は、アスコルビン酸の存在下及び非存在下での、リン酸塩緩衝液ならびにビタミンＥ  ＴＰＧＳ０．５％及び１％におけるＡＰＩの短期安定性として、ｔ＝６、１４及び２１日目の不純物を示す。図１６は、アスコルビン酸の存在下及び非存在下での、リン酸塩緩衝液ならびにビタミンＥ  ＴＰＧＳ０．５％及び１％におけるＡＰＩの短期安定性として、ｔ＝６、１４及び２１日目のｐＨ及び外観を示す（−＝透明、（＊）＝黄色）。
【０１２４】
図１４及び図１５に示されるように、ＡＰＩのアッセイ及び不純物の両方について、アスコルビン酸の効果は２１日間にわたり明確に認められなかった。ｐＨ値も依然として一定である中、アスコルビン酸を含有する製剤にわずかな黄変が生じた（図１６）。
【０１２５】
実施例７−アスコルビン酸がｐＨに及ぼす影響：
抗酸化剤としてアスコルビン酸を導入した後、ｐＨのシフト及びそれによるＡＰＩの溶解度の差が認められた（図１２及び図１３参照）。ｐＨ依存性に関する組成物のアッセイ及び純度に対してアスコルビン酸の影響を調査するために、新規のバッチを調製し、ＡＰＩの溶解及び撹拌を一晩行う前にｐＨ値を特定の値（ｐＨ３、５及び７）に調整した。アッセイ及び不純物の即時測定を行った他、１日後にｐＨ値を測定した。
【０１２６】
図１７は、アスコルビン酸の存在下及び非存在下での、リン酸塩緩衝液及びビタミンＥ  ＴＰＧＳ０．５％におけるＡＰＩのアッセイ、不純物及びｐＨの結果を示す。
【０１２７】
図１７に示されるデータから、アスコルビン酸を組成物に添加することがｐＨの減少につながり、それによって特定のｐＨ値を維持するためにｐＨ調整が必要であることが明らかになった。ＡＰＩの溶解度はｐＨ依存性であるため、ｐＨ値がより低い場合、アッセイの結果だけでなく不純物もより高い値を示した（図１７）。不純物の値がより高くなるのは、酸性条件下でのＡＰＩにおいて推定される不安定性による結果であることが考えられた。データからＡＰＩの溶解度と安定性の間に良好な妥協点が得られたため、さらに調査を行うための値としてｐＨ５が選択された。
【０１２８】
実施例８−ＡＰＩの酸化安定性に対する窒素ガス処理の有益性の評価：
製造中及び保存中の窒素ガス処理における潜在的に有益な効果を評価した。選択した組成物を、２４時間撹拌することによりＡＰＩを溶解して調製し、２５℃または６℃で窒素を使用して／使用せずに処理した後、最大２８日間保存した。
【０１２９】
図１８は、窒素ガス処理の影響を評価するためのフローチャートを示す。
【０１３０】
調製したバッチは、リン酸塩緩衝液及びビタミンＥ  ＴＰＧＳからなり、さらに、アスコルビン酸１％を含有する組成物と比較した。ＡＰＩは、０．０１重量％、０．０２重量％または０．０４重量％で使用された。０．５重量％、１重量％または２重量％のビタミンＥ  ＴＰＧＳを含有する緩衝液１００ｇ中に、ＡＰＩをそれぞれ１０ｍｇ、２０ｍｇまたは４０ｍｇ溶解させることにより、組成物を飽和させた。組成物をポリスチレンボトルに移し、２５℃または６℃で保存した。調製中に組成物の一部を窒素で処理し、密封前に窒素を用いてガス処理を行った（図１８を参照のこと）。調製後のＡＰＩのアッセイ及び純度に関して、７日、１４日及び２８日後と同様に組成物の試験を行った。
【０１３１】
次の表は、窒素の非存在下及び存在下で保存された組成物のアッセイの結果を示す（Ａｓｃ．＝アスコルビン酸、−＝非存在、１％＝存在、Ｎ２＝窒素、−＝非存在、＋＝存在）。
【０１３２】
【表３】
2020508332.tif 000006
【０１３３】
次の表は、窒素の非存在下及び存在下で保存された組成物の純度の結果を示す（Ａｓｃ．＝アスコルビン酸、−＝非存在、１％＝存在、Ｎ２＝窒素、−＝非存在、＋＝存在）。
【０１３４】
【表４】
2020508332.tif 000007
【０１３５】
上記の表のデータから、ＡＰＩの溶解度は界面活性剤濃度に依存し、したがって、ビタミンＥ  ＴＰＧＳの０．５重量％が最も低く、２重量％が最も高いアッセイ値となったことが明らかになった。０．５重量％及び１重量％のビタミンＥ  ＴＰＧＳならびにアスコルビン酸を含む組成物は、保存温度に関わらず、アスコルビン酸を含まない組成物よりもアッセイ値がわずかに高いことを示した。これは、ＡＰＩの溶解度がｐＨに依存するため、アスコルビン酸の存在下でｐＨがわずかに低下した結果であり得る。窒素を用いた処理は、ＡＰＩのアッセイに関して明らかな効果をもたらさず、調査期間の２８日間にわたり一定のままであった。しかし、２５℃の保存温度において不純物のプロファイルの増加傾向が明らかになった。特に、０．５重量％及び１重量％のビタミンＥ  ＴＰＧＳを含んだアスコルビン酸含有組成物は、経時的なＡＰＩの分解がより多いことを示し、一方、ビタミンＥ  ＴＰＧＳを１重量％及び２重量％を含み、アスコルビン酸を含まない組成物は安定したままであった。
【０１３６】
不純物の形成は６℃において比較的安定したままであり、アスコルビン酸の非存在下及び存在下において、差は生じなかった。保存温度が６℃の時、すべての不純物の合計は、すべての組成物に対して１％（ａ／ａ）未満のままであった。ここでも、保存温度に関わらず、窒素を用いた処理による明らかな有益性は得られなかった。
【０１３７】
実施例９−予備的安定性試験：
ＡＰＩにおいて４０μｇ／ｍＬ及び１５０μｇ／ｍＬの２つの力価が指定された。これらの濃度は、以前の実験中に得られた飽和溶解度の値の８０％未満を維持するために決定された。ＡＰＩを溶解可能にするために、４０μｇ／ｍＬ及び１５０μｇ／ｍＬのＡＰＩに対して０．５重量％及び２重量％のビタミンＥ  ＴＰＧＳをそれぞれ使用した（２４時間撹拌）。組成物を窒素を用いて処理し、５°Ｃ、２５°Ｃ及び４０°Ｃで保存した。以前の試験では、アスコルビン酸との組み合わせにおいて２５°ＣのＡＰＩの安定性に悪影響が示されたため（図１５を参照のこと）、並行して、１重量％のアスコルビン酸を含有する組成物を調製し、５°Ｃのみにおいて保存した。
【０１３８】
以下の表は、ＡＰＩの膀胱内注入溶液に関する予備的安定性試験でのアッセイの結果を示す（Ａｓｃ．＝アスコルビン酸、−＝非存在、ｎ．ｄ．＝未決定）。
【０１３９】
【表５】
2020508332.tif 000008
【０１４０】
以下の表は、ＡＰＩの膀胱内注入溶液に関する予備的安定性試験での純度の結果を示す（Ａｓｃ．＝アスコルビン酸、−＝非存在、ｎ．ｄ．＝未決定）。
【０１４１】
【表６】
2020508332.tif 000009
【０１４２】
上記の表のデータから、調査されたすべての組成物のアッセイ値は、６°Ｃまたは２５°Ｃで保存した時の３ヶ月の期間中に安定したままであったことが明らかになった。しかし、４０°Ｃではアッセイ値が大幅に減少した。２５°ＣではＡＰＩの分解が増加する傾向がみられ、３ヶ月後の４０℃においてはさらに顕著であった。
【０１４３】
上記の実験データにより、添加剤がＡＰＩの溶解度及び安定性に対して濃度依存性の有益な効果をもたらし、リン酸塩緩衝液とビタミンＥ  ＴＰＧＳの組み合わせによって最も有望な結果を得たことが示された。さらに、組成物の調製及び保存中に遮光することで、ＡＰＩの分解を抑制する可能性がある。アスコルビン酸の抗酸化剤としての実施態様は、より酸性のｐＨ値へｐＨシフトが発生し、さらに２５℃において安定性に悪影響を及ぼすため、ｐＨの調節を必要とした。窒素の保護ガスとしての使用については、３ヶ月の保存期間に対して明らかな有益性が示されなかった。保存温度が６℃の時、試験を行った組成物の安定性について有益な効果が得られた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
2020508332.tif 000025
【図１７】
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【図１８】
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【国際調査報告】
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