(57)【要約】    （Ｚ）−Ｎ−（４−ヒドロキシベンジリデン）プロパン−２−アミンオキシドと式  【化１】2020525406.tif 000013  の化合物との組み合わせを含むメラニン形成阻害剤の組み合わせが提供され、式中、Ｒ１およびＲ２は独立して、水素原子および３〜２０個の炭素原子を有するアシル基から選択され、ここで、本組み合わせは、皮膚科学的に許容される担体に分散されている。  【選択図】なし
2020525406.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
メラニン形成阻害剤の組み合わせであって、
（Ｚ）−Ｎ−（４−ヒドロキシベンジリデン）プロパン−２−アミンオキシドと、
式Ｉの化合物との組み合わせを含み、
【化１】
2020525406.tif 000012
式中、Ｒ１およびＲ２は独立して、水素原子および３〜２０個の炭素原子を有するアシル基から選択され、
ここで、前記組み合わせが、皮膚科学的に許容される担体に分散されている、メラニン形成阻害剤の組み合わせ。
【請求項２】
前記式Ｉの化合物が、コウジ酸、コウジ酸モノブチレート、コウジ酸モノカプレート、コウジ酸モノパルミテート、コウジ酸モノステアレート、コウジ酸モノシンナモエート、コウジ酸モノベンゾエート、コウジ酸ジブチレート、コウジ酸ジパルミテート、コウジ酸ジステアレート、コウジ酸ジオレエートからなる群から選択される、請求項１に記載のメラニン形成阻害剤の組み合わせ。
【請求項３】
Ｒ１が、−ＯＨ基である、請求項２に記載のメラニン形成阻害剤の組み合わせ。
【請求項４】
前記組み合わせが、０．００１〜＜０．０１重量％のｐＨＢｚ−ＩＰＨＡを含有する、請求項３に記載のメラニン形成阻害剤の組み合わせ。
【請求項５】
前記式Ｉの化合物が、コウジ酸である、請求項１に記載のメラニン形成阻害剤の組み合わせ。
【請求項６】
前記式Ｉの化合物が、コウジ酸である、請求項４に記載のメラニン形成阻害剤の組み合わせ。
【請求項７】
前記皮膚科学的に許容される担体が、乳液、クリーム、水溶液、油、軟膏、ペースト、ゲル、ローション、ミルク泡、懸濁液、および粉末のうちの少なくとも１つからなる群から選択される、請求項１に記載のメラニン形成阻害剤の組み合わせ。
【請求項８】
皮膚を有する動物のメラニン形成活性およびメラニン生成を阻害して、前記皮膚の外観を改善する、請求項１に記載のメラニン形成阻害剤の組み合わせを前記皮膚に局所適用することを含む、方法。
【請求項９】
前記皮膚に局所適用される前記メラニン形成阻害剤の組み合わせが、０．００１〜＜０．０１重量％のｐＨＢｚ−ＩＰＨＡを含有する、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記皮膚に局所適用される前記メラニン形成阻害剤の組み合わせが、０．００１〜＜０．０１重量％のｐＨＢｚ−ＩＰＨＡおよびコウジ酸を含有する、請求項８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メラニン形成阻害剤に関する。特に、本発明は、（Ｚ）−Ｎ−（４−ヒドロキシベンジリデン）プロパン−２−アミンオキシドと式Ｉの化合物との組み合わせを含むメラニン形成阻害剤の組み合わせに関し、式中、Ｒ１およびＲ２は独立して、水素原子および３〜２０個の炭素原子を有するアシル基から選択され、ここで、本組み合わせは、皮膚科学的に許容される担体に分散されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００２】
メラニンは、人間の皮膚の色の主要な決定要因である。表皮のメラニン細胞は、ある特定の環境的誘因（例えば、日光への曝露の増加）に応答して皮膚にメラニンを生成する。
【０００３】
化粧品の分野では、個人が年齢を重ねると日光および日焼けライトへの長時間の曝露により悪化することがあるため、例えば、皮膚に現れる老化斑、肝斑、そばかす、色素沈着斑の脱色に効果がある製品への関心が高まっている。明るい顔色を好むファッション現象も増加している。
【０００４】
メラニン細胞内の酸化反応により、メラニンの形成がもたらされる。これらの酸化反応は、チロシナーゼにより触媒され得る。結果として生じる色素は、表皮全体に均一に分布するが、メカニズムが破壊されて、局所領域にメラニンが蓄積する場合を除く。
【０００５】
脱色作用（メラニン形成阻害）を伴う周知の物質の１つは、コウジ酸である。しかし、いくつかの製剤ではコウジ酸のレベルを低減することに関心がもたれている。
【０００６】
したがって、皮膚美白製剤に使用されるコウジ酸の量の低減を促進するメラニン形成阻害を有する組成物の必要性が残っている。
【０００７】
本発明は、（Ｚ）−Ｎ−（４−ヒドロキシベンジリデン）プロパン−２−アミンオキシドと式Ｉの化合物との組み合わせを含むメラニン形成阻害剤の組み合わせを提供し、
【化１】
2020525406.tif 000003
式中、Ｒ１およびＲ２は独立して、水素原子および３〜２０個の炭素原子を有するアシル基から選択され、ここで、本組み合わせは、皮膚科学的に許容される担体に分散されている。
【０００８】
本発明は、（Ｚ）−Ｎ−（４−ヒドロキシベンジリデン）プロパン−２−アミンオキシドと、コウジ酸、コウジ酸モノブチレート、コウジ酸モノカプレート、コウジ酸モノパルミテート、コウジ酸モノステアレート、コウジ酸モノシンナモエート、コウジ酸モノベンゾエート、コウジ酸ジブチレート、コウジ酸ジパルミテート、コウジ酸ジステアレート、およびコウジ酸ジオレエートからなる群から選択される式Ｉの化合物との組み合わせを含むメラニン形成阻害剤の組み合わせを提供し、ここで、本組成物は、皮膚科学的に許容される担体に分散されている。
【０００９】
本発明は、（Ｚ）−Ｎ−（４−ヒドロキシベンジリデン）プロパン−２−アミンオキシドと、コウジ酸、コウジ酸モノブチレート、コウジ酸モノカプレート、コウジ酸モノパルミテート、コウジ酸モノステアレート、コウジ酸モノシンナモエート、コウジ酸モノベンゾエート、コウジ酸ジブチレート、コウジ酸ジパルミテート、コウジ酸ジステアレート、およびコウジ酸ジオレエートからなる群から選択される式Ｉの化合物との組み合わせを含むメラニン形成阻害剤の組み合わせを提供し、ここで、本組成物は、乳液、クリーム、水溶液、油、軟膏、ペースト、ゲル、ローション、ミルク、泡、懸濁液、および粉末のうちの少なくとも１つからなる群から選択される皮膚科学的に許容される担体に分散されている。
【００１０】
本発明は、皮膚を有する動物のメラニン形成活性およびメラニン生成を阻害して、皮膚の外観を改善する方法を提供し、本方法は、本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせを皮膚に局所適用することを含む。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
驚くべきことに、特に式Ｉの化合物と組み合わせた場合、ｐＨＢｚ−ＩＰＨＡが、著しいメラニン形成阻害活性を有することが見出された。
【００１２】
他に示されない限り、比率、パーセンテージ、部などは、重量による。
【００１３】
本明細書および添付で使用される場合、「美容上許容可能な」という用語は、パーソナルケア組成物に典型的に使用される成分を指し、パーソナルケア組成物中に典型的に見られる量で存在する場合に有毒である材料は、本発明の一部として企図されないことを強調することが意図される。
【００１４】
好ましくは、本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせは、（Ｚ）−Ｎ−（４−ヒドロキシベンジリデン）プロパン−２−アミンオキシド（ｐＨＢｚ−ＩＰＨＡ）（好ましくは０．０００１〜５重量％、より好ましくは０．０００１〜＜０．０１、最も好ましくは０．００１〜＜０．０１重量％）と、式Ｉの化合物（好ましくは０．０５〜５重量％、より好ましくは０．１〜２．５重量％、最も好ましくは０．５〜２重量％）との組み合わせを含み、
【化２】
2020525406.tif 000004
式中、Ｒ１およびＲ２は独立して、水素原子および３〜２０個の炭素原子を有するアシル基から選択され、ここで、本組み合わせは、皮膚科学的に許容される担体に分散されている。
【００１５】
好ましくは、本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせは、以下の構造を有する（Ｚ）−Ｎ−（４−ヒドロキシベンジリデン）プロパン−２−アミンオキシド（ｐＨＢｚ−ＩＰＨＡ）を含む組み合わせを含む。
【化３】
2020525406.tif 000005
好ましくは、本発明のメラニン形成阻害剤組成物は、０．０００１〜５重量％のｐＨＢｚ−ＩＰＨＡを含む組み合わせを含む。より好ましくは、本発明のメラニン形成阻害剤組成物は、０．０００１〜＜０．０１重量％のｐＨＢｚ−ＩＰＨＡを含む組み合わせを含む。最も好ましくは、本発明のメラニン形成阻害剤組成物は、０．００１〜＜０．０１重量％のｐＨＢｚ−ＩＰＨＡを含む組み合わせを含む。
【００１６】
（Ｚ）−Ｎ−（４−ヒドロキシベンジリデン）プロパン−２−アミンオキシド（ｐＨＢｚ−ＩＰＨＡ）は、既知の合成技法を使用して当業者により容易に調製され得る。
【００１７】
好ましくは、本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせは、式Ｉの化合物を含む組み合わせを含み、
【化４】
2020525406.tif 000006
式中、Ｒ１およびＲ２は独立して、水素原子および３〜２０個の炭素原子を有するアシル基から選択される。より好ましくは、本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせは、０．０５〜５重量％の式Ｉの化合物を含む組み合わせを含み、式中、Ｒ１およびＲ２は独立して、水素原子および３〜２０個の炭素原子を有するアシル基から選択される。さらにより好ましくは、本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせは、０．１〜２．５重量％の式Ｉの化合物を含む組み合わせを含み、式中、Ｒ１およびＲ２は独立して、水素原子および３〜２０個の炭素原子を有するアシル基から選択される。最も好ましくは、本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせは、０．５〜２重量％の式Ｉの化合物を含む組み合わせを含み、式中、Ｒ１およびＲ２は独立して、水素原子および３〜２０個の炭素原子を有するアシル基から選択される（好ましくは、Ｒ１は、−ＯＨ基である）。
【００１８】
好ましくは、本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせは、式Ｉの化合物を含む組み合わせを含み、
【化５】
2020525406.tif 000007
式Ｉの化合物は、コウジ酸、コウジ酸モノブチレート、コウジ酸モノカプレート、コウジ酸モノパルミテート、コウジ酸モノステアレート、コウジ酸モノシンナモエート、コウジ酸モノベンゾエート、コウジ酸ジブチレート、コウジ酸ジパルミテート、コウジ酸ジステアレート、およびコウジ酸ジオレエートからなる群から選択される。
【００１９】
好ましくは、本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせは、式Ｉの化合物を含む組み合わせを含み、
【化６】
2020525406.tif 000008
式Ｉの化合物は、コウジ酸、コウジ酸モノブチレート、コウジ酸モノカプレート、コウジ酸モノパルミテート、コウジ酸モノステアレート、コウジ酸モノシンナモエート、コウジ酸モノベンゾエート、コウジ酸ジブチレート、コウジ酸ジパルミテート、コウジ酸ジステアレート、およびコウジ酸ジオレエートからなる群から選択され、式中、Ｒ１は、−ＯＨ基である。
【００２０】
好ましくは、本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせは、式Ｉの化合物を含む組み合わせを含み、ここで、式Ｉの化合物は、コウジ酸を含む。より好ましくは、本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせは、式Ｉの化合物を含む組み合わせを含み、ここで、式Ｉの化合物は、コウジ酸である。
【００２１】
好ましくは、本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせは、皮膚科学的に許容される担体を含み、ここで、本組み合わせは、皮膚科学的に許容される担体に分散されている。より好ましくは、本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせは、５０〜９９．９９重量％の皮膚科学的に許容される担体を含み、ここで、本組み合わせは、皮膚科学的に許容される担体に分散されている。
【００２２】
好ましくは、皮膚科学的に許容される担体は、乳液、クリーム、水溶液、油、軟膏、ペースト、ゲル、ローション、ミルク、泡、懸濁液、および粉末のうちの少なくとも１つからなる群から選択される。皮膚科学的に許容される担体は、典型的には、皮膚に著しい刺激を引き起こさず、本組成物中の組み合わせのメラニン形成阻害剤活性を無効にしないビヒクルまたは希釈剤として特徴付けられる。本発明で使用される皮膚科学的に許容される担体には、水、増粘剤、皮膚軟化剤、乳化剤、保湿剤、界面活性剤、懸濁剤、膜形成剤、泡形成剤、防腐剤、消泡剤、芳香剤、低級モノアルコールポリオール、高沸点溶媒、噴射剤、着色剤、色素、グリセリン、鉱油、シリコン感触改質剤、防腐剤、皮膚軟化剤、およびそれらの混合物が含まれ得る。
【００２３】
本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせは、例えば、化粧品およびスキンケア（例えば、ローション、クリーム、オイル、局所薬）を含む様々なパーソナルケア用途に使用され得る。
【００２４】
好ましくは、本発明の皮膚を有する動物のメラニン形成活性およびメラニン生成を阻害して、皮膚の外観を改善する方法は、本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせを皮膚に局所適用することを含む。より好ましくは、本発明の皮膚を有する動物のメラニン形成活性およびメラニン生成を阻害して、皮膚の外観を改善する方法は、本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせを皮膚に局所適用することを含み、ここで、皮膚に局所適用されるメラニン形成阻害剤の組み合わせは、０．００１〜＜０．０１重量％のｐＨＢｚ−ＩＰＨＡを含有する。最も好ましくは、本発明の皮膚を有する動物のメラニン形成活性およびメラニン生成を阻害して、皮膚の外観を改善する方法は、本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせを皮膚に局所適用することを含み、ここで、皮膚に局所適用されるメラニン形成阻害剤の組み合わせは、０．００１〜＜０．０１重量％のｐＨＢｚ−ＩＰＨＡおよびコウジ酸を含有する。
【００２５】
本発明のメラニン形成阻害剤の組み合わせは、当技術分野で周知のプロセスを使用して、例えば、従来の混合、溶解、造粒、乳化、カプセル化、封入、および凍結乾燥プロセスにより製造され得る。
【００２６】
本発明のいくつかの実施形態をこれより以下の実施例において詳細に説明する。
【００２７】
本発明のいくつかの実施形態をこれより以下の実施例において詳細に説明する。
ＶＡＮ−ＩＰＨＡの合成
【化７】
2020525406.tif 000009
【００２８】
１００ｍＬの１口フラスコに磁気撹拌機およびゴム製セプタムを取り付けた。フラスコに（３．８０ｇ、約０．０２５モル）のバニリン、（１．８８ｇ、約０．０２５モル）のイソプロピルヒドロキシアミン、および２５ｍＬのメタノールを入れた。溶液を週末にかけて室温で撹拌し、その間に、ニトロンは白色結晶として分離した。生成物であるニトロン、（Ｚ）−Ｎ−（４−ヒドロキシ−３−メトキシベンジリジン（ｍｅｔｈｏｘｙｂｅｎｚｙｌｉｄｉｎｅ））プロパン−２−アミンオキシド（ＶＡＮ−ＩＰＨＡ）をろ過により分離した。次いで、生成物をフィルター上で少量のメタノールで洗浄し、風乾させた。
ｐＨＢｚ−ＩＰＨＡの合成
【化８】
2020525406.tif 000010
【００２９】
１００ｍＬの１口フラスコに磁気撹拌機およびゴム製セプタムを取り付けた。フラスコに（３．０５ｇ、約０．０２５モル）のｐ−ヒドロキシベンズアルデヒド、（１．８８ｇ、約０．０２５モル）のイソプロピルヒドロキシルアミン、および２５ｍＬのメタノールを入れた。溶液を週末にかけて室温で撹拌し、その間に、ニトロンは白色結晶として分離した。生成物であるニトロン、（Ｚ）−Ｎ−（４−ヒドロキシベンジリデン）プロパン−２−アミンオキシドオキシド（ｐＨＢｚ−ＩＰＨＡ）をろ過により分離した。次いで、生成物をフィルター上で少量のメタノールで洗浄し、風乾させた。
【００３０】
チロシナーゼ阻害
０．１重量％の活性濃度でのＶＡＮ−ＩＰＨＡおよびｐＨＢｚ−ＩＰＨＡのチロシナーゼ阻害活性を、０．１重量％のコウジ酸により示される活性と比較した。ＶＡＮ−ＩＰＨＡは、無視できるほどのチロシナーゼ阻害活性を示した。ｐＨＢｚ−ＩＰＨＡは、コウジ酸と比較して約６０％のチロシナーゼ阻害活性を示した。
【００３１】
比較例Ｃ１〜Ｃ６および実施例１〜２：インビトロメラニン形成阻害
表１に記載したように、比較例Ｃ１〜Ｃ６および実施例１〜２の製剤のための皮膚脱色活性を、インビトロ共培養分化表皮皮膚モデル（ＭａｔＴｅｋ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能なＭｅｌａｎｏＤｅｒｍ（商標）組織モデルＭＥＬ−３００−Ｂ）を使用して三重に試験した。
【００３２】
１日目：最初の組織サンプルの条件付け
１日目に、８枚の別々の４ｘ６のウェル滅菌プレートに９００μＬのアッセイ培地（Ｋｕｒａｂｏ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能なＥＰＩ−１００ＮＭＭ−１１３）を充填した。滅菌鉗子を使用して、３つの皮膚組織（ＭａｔＴｅｋ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから入手可能なＭｅｌａｎｏＤｅｒｍ（商標）組織モデル番号ＭＥＬ−３００−Ｂ）を、事前にアッセイ培地を充填した４ｘ６のウェル滅菌プレートの各１つの最上列に移した。次いで、ウェルを３７℃で５％ＣＯ２雰囲気下で１６時間インキュベートした。
【００３３】
２日目：最初の組織サンプル処理
２日目に、ウェルプレートをインキュベーターから取り出し、５ｍＬのアッセイ培地を８つの別々の４ｘ６のウェル滅菌プレートの各々に添加した。次いで、ウェルプレートの各々の最上列の３つの皮膚組織の各々に、比較例Ｃ１〜Ｃ６および実施例１〜２の製剤のうちの１つを２５μＬで局所投与した。次いで、投与後、ウェルプレートを３７℃で５％ＣＯ２雰囲気下で４８時間インキュベートした。
【００３４】
その後の組織サンプルの洗浄および処理
４、６、８、１０、および１２日目の各日において、ウェルプレートをインキュベーターから取り出し、次いで、ウェルプレートの各々の最上列の３つの皮膚組織を滅菌１Ｘダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水（１Ｘ  ＤＰＢＳ）で洗浄した。次いで、滅菌１Ｘ  ＤＰＢＳを皮膚組織から吸引除去し、次いで、滅菌ペーパータオルを使用してブロット乾燥させた。次いで、ウェルプレートの各々の最上列の３つの皮膚組織の各々に、次いで、比較例Ｃ１〜Ｃ６および実施例１〜２の製剤のうちの１つを２５μＬで局所投与した。次いで、投与後、ウェルプレートを３７℃で５％ＣＯ２雰囲気下で４８時間インキュベートした。
【００３５】
１４日目：メラニンアッセイ
１４日目；ウェルプレートをインキュベーターから取り出し、次いで、ウェルプレートの各々の最上列の３つの皮膚組織を滅菌１Ｘ  ＤＰＢＳで洗浄した。次いで、滅菌１Ｘ  ＤＰＢＳを皮膚組織から吸引除去し、次いで、滅菌ペーパータオルを使用してブロット乾燥させた。メラニン比色アッセイを使用して、合成メラニン溶液（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能）に対する組織インサートのメラニン濃度を計算することにより、ウェルプレートの各々の最上列の３つの皮膚組織の各々のメラニン含有量を決定した。アッセイを、水性ベースの可溶化剤（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒから入手可能なＳｏｌｖａｂｌｅ（商標）組織可溶化剤）を使用して組織抽出物を採取し、６０°Ｃで一晩インキュベートし、次いで、９６のウェルプレートリーダーで４９０ｎｍの吸光度を測定することにより行った。次いで、各製剤についての平均値を表１に報告する。
【表１】
2020525406.tif 000011
【国際調査報告】
2020525406.tif 000014
2020525406.tif 000015