(57)【要約】  【解決手段】    本明細書には、対象の癌を治療するための組成物および方法が開示される。いくつかの実施形態では、方法は、異常な（増殖性などの）細胞の表面上で新抗原の発現を誘導することにより、個体において免疫応答を生成することを含む。一実施形態において、対象の癌を治療する方法は、チェックポイント阻害剤、免疫共刺激分子、ＴＬＲアゴニスト、およびＴＮＦＲスーパーファミリーアゴニストなどの免疫調節剤と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。一実施形態では、チェックポイント阻害剤は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４に対する抗体から選択される。  【選択図】      図４
2020525434.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
それを必要とする対象において癌を治療する方法であって、治療有効量のアンレキサノクスと治療有効量の少なくとも１つのチェックポイント阻害剤を投与する工程を含む、方法。
【請求項２】
請求項１記載の方法において、前記少なくとも１つのチェックポイント阻害剤は、抗−ＰＤ−１抗体、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体、抗−ＣＴＬＡ−４抗体、抗−Ａ２ＡＲ抗体、抗−ＫＩＲ抗体、抗−ＬＡＧ３抗体、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、方法。
【請求項３】
請求項１記載の方法において、前記方法は、抗−ＰＤ−１および抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む、方法。
【請求項４】
請求項１記載の方法において、前記方法は、抗−ＰＤ−Ｌ１および抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む、方法。
【請求項５】
請求項１記載の方法において、前記アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、方法。
【請求項６】
請求項１記載の方法において、前記チェックポイント阻害剤は、３日ごとに約３ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、方法。
【請求項７】
請求項１記載の方法において、前記投与の経路が、経口、局所、皮下、筋肉内、腹腔内、腔内、くも膜下腔内、経皮、および静脈内注射からなる群より選択される、方法。
【請求項８】
請求項１記載の方法において、前記癌は、結腸癌腫、乳癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、扁平上皮がん、基底細胞がん、腺がん、汗腺がん、皮脂腺がん、乳頭がん、乳頭腺がん、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、肝癌、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胚性がん、ウィルムス腫瘍、子宮頸がん、精巣腫瘍、肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、上皮がん、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽腫、メルケル細胞がん、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体、血管芽腫、アコースティック神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、慢性白血病、真性赤血球増加症、リンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンストロームのマクログロブリン血症、重鎖疾患、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、方法。
【請求項９】
請求項１記載の方法は、タモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、ヨードキシフェン、酢酸メゲストロール、アナスフロゾール、レトラゾール、ボラゾール、エキセメスタン、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、酢酸シプロテロン、酢酸ゴセレリン、ルプロリド、フィナステリド、ハーセプチン、メトトレキサート、５−フルオロウラシル、シトシンアラビノシド、ドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシン、イダルビシン、マイトマイシン−Ｃ、ダクチノマイシン、ミトラマイシン、シスプラチン、カルボプラチン、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、シクロホスファミド、イホスファミド、ニトロソウレア、チオテファン、ビンクリスチン、タキソール、タキソテール、エトポシド、テニポシド、アムサクリン、イリノテカン、トポテカン、エポチロン、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ソラフェニブ、血管新生阻害剤、ＥＧＦ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、ＣＤＫ阻害剤、サイトカイン、Ｈｅｒ１及びＨｅｒ２阻害剤、モノクローナル抗体からなる群から選択される抗癌剤を投与する工程を含む、方法。
【請求項１０】
請求項１記載の方法であって、さらに、免疫共刺激分子、ＴＬＲアゴニスト、ＴＮＦＲスーパーファミリーアゴニスト、環状ジヌクレオチド、Ｔ細胞アゴニスト、サイトカイン、ケモカイン、腫瘍溶解性ウイルス、およびそれらの組み合わせから選択される免疫調節剤を投与する工程を含む、方法。
【請求項１１】
請求項１記載の方法であって、さらに、ボリノスタット、ロミデプシン、デシタビン、５−アゾシチジン、パノビノスタット、ベリノスタット、およびそれらの組み合わせから選択されるエピジェネティック調節化合物を投与する工程を含む、方法。
【請求項１２】
癌細胞を死滅させる方法であって、癌細胞を、少なくとも１つのチェックポイント阻害剤と組み合わせてアンレキサノクスを含む組成物と接触させる工程を含む、方法。
【請求項１３】
請求項１２記載の方法において、前記少なくとも１つのチェックポイント阻害剤は、抗−ＰＤ−１抗体、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体、抗−ＣＴＬＡ−４抗体、抗−Ａ２ＡＲ抗体、抗−ＫＩＲ抗体、抗−ＬＡＧ３抗体、抗−Ｂ７−Ｈ３抗体、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、方法。
【請求項１４】
請求項１２記載の方法において、前記癌細胞は、結腸直腸癌、乳癌、卵巣癌、膵臓癌、頭頸部癌、膀胱癌、肝臓癌、腎癌、メラノーマ、胃腸癌、前立腺癌、小癌細胞肺がん、非小細胞肺がん、肉腫、膠芽腫、Ｔ細胞およびＢ細胞リンパ腫、子宮内膜がん、子宮頸がん、およびそれらの組み合わせから選択される、方法。
【請求項１５】
癌幹細胞を死滅させる方法であって、癌幹細胞を、少なくとも１つのチェックポイント阻害剤と組み合わせてアンレキサノクスを含む組成物と接触させる工程を含む、方法。
【請求項１６】
請求項１５記載の方法において、前記少なくとも１つのチェックポイント阻害剤は、抗−ＰＤ−１抗体、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体、抗−ＣＴＬＡ−４抗体、Ａ２ＡＲ抗体、抗−ＫＩＲ抗体、抗−ＬＡＧ３抗体、抗−Ｂ７−Ｈ３抗体、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、方法。
【請求項１７】
癌細胞の表面上で新抗原の発現を誘導することにより個体において免疫応答を生成する方法であって、少なくとも１つのチェックポイント阻害剤と組み合わせて治療有効量のアンレキサノクスを投与する工程を含む、方法。
【請求項１８】
請求項１７記載の方法において、前記少なくとも１つのチェックポイント阻害剤は、抗−ＰＤ−１抗体、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体、抗−ＣＴＬＡ−４抗体、抗−Ａ２ＡＲ抗体、抗−ＫＩＲ抗体、抗−ＬＡＧ３抗体、抗−Ｂ７−Ｈ３抗体、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、方法。
【請求項１９】
請求項１７記載の方法において、前記方法は、抗−ＰＤ−１および抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせてアンレキサノクスを投与する工程を含む、方法。
【請求項２０】
請求項１７記載の方法において、前記方法は、抗−ＰＤ−Ｌ１および抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせてアンレキサノクスを投与する工程を含む、方法。
【請求項２１】
請求項１７記載の方法において、前記アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、方法。
【請求項２２】
請求項１７記載の方法において、前記チェックポイント阻害剤は、３日ごとに約３ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、方法。
【請求項２３】
請求項１７記載の方法において、前記投与の経路は、経口、局所、皮下、筋肉内、腹腔内、腔内、くも膜下腔内、経皮、および静脈内注射からなる群より選択される、方法。
【請求項２４】
請求項１７記載の方法において、前記癌細胞は、結腸直腸癌、乳癌、卵巣癌、膵臓癌、頭頸部癌、膀胱癌、肝臓癌、腎癌、メラノーマ、胃腸癌、前立腺癌、小癌細胞肺がん、非小細胞肺がん、肉腫、膠芽腫、Ｔ細胞およびＢ細胞リンパ腫、子宮内膜がん、子宮頸がん、およびそれらの組み合わせから選択される、方法。
【請求項２５】
請求項１７記載の方法において、さらに、免疫共刺激分子、ＴＬＲアゴニスト、ＴＮＦＲスーパーファミリーアゴニスト、環状ジヌクレオチド、Ｔ細胞アゴニスト、サイトカイン、ケモカイン、腫瘍溶解性ウイルス、およびそれらの組み合わせから選択される免疫調節剤を投与する工程を含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１７年６月２２日付け出願の「アンレキサノクス及び免疫調節剤を含む組成物で癌を治療する方法」という名称の米国仮出願第６２／５２３，５３７号の優先権を主張し、その参照が本明細書に組み込まれる。
【発明の概要】
【０００２】
本明細書には、対象の癌を治療するための組成物および方法が開示される。いくつかの実施形態では、方法は、異常な（増殖性などの）細胞の表面上で新抗原の発現を誘導することにより、個体において免疫応答を生成することを含む。これは、ｍＲＮＡの未熟な終止コドン（ＰＴＣ）のリードスルーを促進すること、および／またはｍＲＮＡのナンセンス媒介減衰（ＮＭＤ）を阻害することによって達成できる。
【０００３】
一実施形態では、癌を有する対象を治療する方法は、ｍＲＮＡにおける早期終止コドン（ＰＴＣ）のリードスルーを促進し、ｍＲＮＡのナンセンス介在性崩壊（ＮＭＤ）を阻害する化合物の治療有効量を投与することを含み得る。一部の実施形態では、化合物はアンレキサノクスである。いくつかの実施形態では、この方法は、免疫チェックポイントタンパク質を阻害する分子を投与することをさらに含む。
【０００４】
一実施形態において、対象の癌を治療する方法は、チェックポイント阻害剤、免疫共刺激分子、ＴＬＲアゴニスト、ＴＮＦＲスーパーファミリーアゴニスト、環状ジヌクレオチド、Ｔ細胞アゴニスト、サイトカイン、ケモカイン、および腫瘍溶解性ウイルスなどの免疫調節剤と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。
【０００５】
一実施形態において、対象の癌を治療する方法は、本明細書に開示される少なくとも１つの免疫チェックポイントタンパク質を阻害する分子と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。一実施形態では、チェックポイントタンパク質は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４から選択される。いくつかの実施形態では、この方法は、アンレキサノクスを抗−ＰＤ−１抗体と組み合わせて投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、アンレキサノクスを抗−ＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせて投与することを含む。一部の実施形態では、方法は、抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、抗−ＰＤ−１および抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、アンレキサノクスを抗−ＰＤ−Ｌ１および抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせて投与することを含む。
【０００６】
別の実施形態では、癌細胞を死滅させる方法は、癌細胞を、少なくとも１つの免疫チェックポイントタンパク質を阻害する分子と組み合わせてアンレキサノクスを含む組成物と接触させることを含み得る。いくつかの実施形態では、方法はインビトロまたはインビボであり得る。
【０００７】
さらなる態様において、癌幹細胞を死滅させる方法は、癌幹細胞を、少なくとも１つの免疫チェックポイントタンパク質を阻害する分子と組み合わせてアンレキサノクスを含む組成物と接触させることを含み得る。いくつかの実施形態では、方法はインビトロまたはインビボであり得る。
【０００８】
さらなる態様において、異常細胞の表面上の１つまたは複数の新抗原の発現を誘導する方法は、少なくとも１つの免疫チェックポイントタンパク質を阻害する分子と組み合わせて異常細胞をアンレキサノクスと接触させることを含む。いくつかの実施形態では、方法はインビトロまたはインビボであり得る。
【０００９】
別の実施形態では、治療を必要とする個体に免疫応答を生じさせる方法は、ｍＲＮＡに早期終止コドン（ＰＴＣ）リードスルーを促進し、ｍＲＮＡのナンセンス媒介崩壊（ＮＭＤ）を阻害する治療有効量の化合物を個体に投与することを含む。一部の実施形態では、化合物はアンレキサノクスである。いくつかの実施形態では、この方法は、免疫チェックポイントタンパク質を阻害する分子を投与することをさらに含む。いくつかの実施形態では、チェックポイントタンパク質は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４である。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１は、腫瘍体積（ｍｍ３）に対する抗−ＰＤ−１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせたＰＴＣ１２４（アタルレン）およびＮＭＤＩ１４の投与の効果を比較するグラフを示す。
【図２】図２は、腫瘍体積（ｍｍ３）に対するＰＴＣ１２４（アタルレン）およびＮＭＤＩ１４および／または抗−ＰＤ−１投与の効果を比較するグラフを示す。
【図３】図３は、治療後の免疫細胞浸潤を示す切片腫瘍組織の顕微鏡写真の画像を示す。
【図４】腫瘍体積（ｍｍ３）に対する抗−ＰＤ−１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせたアンレキサノクスの投与の効果を比較するグラフを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
癌免疫療法に対するチェックポイント遮断の有効性に対する主要な障害は、広範な免疫編集を受けた後期癌によって発現される強力な腫瘍新生抗原の不足に関する。このプロセスは、腫瘍のライフサイクルの初期に行われ、免疫原性または強力な腫瘍特異的抗原を発現し、したがって細胞傷害性Ｔ細胞の標的となった腫瘍細胞の集団が削除される。したがって、成熟腫瘍は主に、弱い腫瘍抗原のみの発現など、複数の免疫回避戦略を進化させた腫瘍細胞で構成されるため、細胞傷害性Ｔ細胞によって効果的に標的とされる可能性は低くなる。癌の免疫療法としてのチェックポイント遮断の最近の成功にもかかわらず、これらの薬の有効性は、強力な腫瘍新抗原の入手可能性と非常に相関する。特に、これらの薬物が最も効果的である腫瘍は、メラノーマや非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）などの突然変異負荷が最も高い腫瘍であり、どちらもＵＶ損傷と喫煙の強力な環境誘発突然変異の特徴を持つ。
【００１２】
したがって、本明細書に開示されるのは、それらの細胞の表面に１つまたは複数の新生抗原の発現を誘導することにより、早期終止コドン（ＰＴＣ）を持つ１つまたは複数のメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）分子を発現する細胞を有する個体において免疫応答を生成するための方法および組成物である。この方法は、ナンセンス介在性崩壊（ＮＭＤ）の調節に関連する分子経路の阻害が、ＰＴＣを保有するｍＲＮＡの  対応するかなり多くの場合、野生型タンパク質から異なるアミノ酸配列を有するポリペプチドへの「リードスルー」およびその後の翻訳をもたらすことに一部基づくものである。理論に縛られることなく、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）分子を介した細胞表面でのこれらのペプチドのタンパク質分解および提示は、免疫系の構成要素、たとえばＴ細胞による攻撃の非常に抗原性の高い標的をもたらす。以下でさらに説明するように、ＰＴＣリードスルーを促進し、ＮＭＤを阻害する化合物の組み合わせは、ｉｎ  ｖｉｖｏモデルで腫瘍細胞の複製を効果的に阻害するだけでなく、１つ以上の免疫チェックポイント分子に特異的な化合物を治療計画は相乗的に抗増殖効果を高める。したがって、本明細書に開示される方法は、例えば、急速に分裂する細胞の超変異性に起因する癌などの過剰増殖性細胞によって特徴付けられる疾患の治療に特に有用である。がん細胞は、表面に弱抗原性または非抗原性ペプチドのみを表示することにより、免疫系による検出を部分的に回避する。したがって、本明細書に開示される組成物および方法は、癌細胞の表面上で新抗原の発現を誘導し、それにより免疫系による攻撃に対して脆弱化する効果的な方法を提供する。
【００１３】
免疫療法の進歩と並行した腫瘍ワクチン開発の取り組みにより、腫瘍サンプルで実行されるＲＮＡｓｅｑ／エキソーム配列決定が変異転写物を特定し、堅牢な新抗原として機能する能力について選択され、ワクチン開発の基礎としてその後使用される。これらの突然変異検出法の性質により、検出されるｍＲＮＡ種の圧倒的多数は、ヌクレオチドの遷移と変換によって生成されるコーディング配列にミスセンス突然変異を含むものであり、サイレントまたは単一のアミノ酸置換のいずれかにつながる。これらのタンパク質は、ネオ抗原として機能する能力を持つが、複数のアミノ酸の違いがある変異体ｍＲＮＡ種を特定することは、はるかに強力なネオ抗原として機能する可能性がある。
【００１４】
堅牢な腫瘍新抗原を誘導する腫瘍ｍＲＮＡのより望ましいプールは、早期終止コドン（ＰＴＣ）を含むものである。これらのｍＲＮＡ種には、挿入、削除、ナンセンス突然変異、ノンストップ（遅延終了）突然変異など、はるかに有害な突然変異が含まれる。しかし逆説的に、これらの同じＰＴＣ含有種は非常に不安定であり、ナンセンス媒介崩壊（ＮＭＤ）経路によって急速に分解され、したがって、それらはその存在量が非常に低いか完全に存在しないため、一般にＲＮＡシーケンスでは検出できず、タンパク質に翻訳されることはほとんどない。ＰＴＣ含有ｍＲＮＡは、リーディングフレームのシフトおよび／または代替終止コドンの使用により、野生型配列から多くの異なるアミノ酸をコードする可能性がある。タンパク質がＰＴＣを含むｍＲＮＡ種から転写される場合、それらは非常に多様な配列を持つタンパク質をエンコードできるため、非常に強力な腫瘍新抗原の供給源となる。ＮＭＤ経路をブロックし、腫瘍内でＰＴＣのリードスルーを促進することを目的とした治療的アプローチにより、ＰＴＣを含む転写物を翻訳し、強力な新抗原をｉｎ  ｖｉｖｏで発現させることができる。
【００１５】
早期終止コドン（ＰＴＣ）変異は、塩基置換またはフレームシフト変異によりセンスコドンが３つの終止コドン（ＵＡＡ、ＵＡＧ、またはＵＧＡ）のいずれかに変化するものである。酵母、ヒトの遺伝的障害、および免疫グロブリンファミリー遺伝子発現の研究により、このような連鎖停止変異を含むナンセンスＲＮＡの翻訳を最小限に抑え、ＲＮＡの安定性を調節するＲＮＡ監視メカニズムが特定された。この監視メカニズムは「ナンセンス媒介ｍＲＮＡ崩壊」（「ＮＭＤ」）と呼ばれる。ＮＭＤは、正常細胞（例：ＢおよびＴ細胞）と遺伝子変異を有する細胞（例：細胞増殖を制御する遺伝子に変異を有する細胞）の両方で機能する転写後メカニズムである。
【００１６】
ＮＭＤに関与するタンパク質の多くは種間で保存されていないが、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ（酵母）において、ＮＭＤには、ＮＭＤ経路の保存されたコアを構成するＵＰＦ１、ＵＰＦ２、およびＵＰＦ３（ヒトではＵＰＦ３ＡおよびＵＰＦ３Ｂ）の３つの主な要因がある。これら３つの要因はすべて、アップフレームシフト（ＵＰＦ）タンパク質と呼ばれるトランス作用要素である。哺乳動物では、ＵＰＦ２およびＵＰＦ３は、ＮＭＤでも機能する他のタンパク質とともにスプライシング後にｍＲＮＡに結合する「エクソン−エクソン接合複合体」（ＥＪＣ）の一部である。ＵＰＦ１のリン酸化は、タンパク質ＳＭＧ−１、ＳＭＧ−５、ＳＭＧ−６およびＳＭＧ−７によって制御される。
【００１７】
異常な転写物を検出するプロセスは、ｍＲＮＡの翻訳中に発生する。哺乳類の異常な転写産物の検出のための一般的なモデルは、翻訳の最初のラウンドの間に、リボソームがスプライシングの発生後にｍＲＮＡに結合したエクソン−エクソン接合複合体を除去することを示唆する。この最初の翻訳後、これらのタンパク質のいずれかがｍＲＮＡに結合したままであれば、ＮＭＤが活性化される。ＰＴＣの下流に位置するエクソン−エクソン接合複合体は、リボソームが到達する前に放出されるため、転写物から除去されない。翻訳の終結は、ｍＲＮＡ上でＵＰＦ１、ＳＭＧ１および放出因子ｅＲＦ１およびｅＲＦ２から構成される複合体のアセンブリをもたらす。転写産物にＰＴＣが含まれているためにＥＪＣがｍＲＮＡに残っている場合、ＵＰＦ１はＵＰＦ２およびＵＰＦ３と接触し、ＵＰＦ１のリン酸化を引き起こす。
【００１８】
脊椎動物では、通常、終止コドンに対する最後のエクソン接合部複合体の位置が、転写産物がＮＭＤを受けるかどうかを決定する。終止コドンが最終エキソン接合複合体の下流または約５０ヌクレオチド内にある場合、転写物は正常に翻訳される。ただし、終止コドンがエクソン接合複合体の約５０ヌクレオチド上流にある場合、転写産物はＮＭＤによってダウンレギュレートされる。リン酸化されたＵＰＦ１は、ＳＭＦ−５、ＳＭＧ−６およびＳＭＧ−７と相互作用し、ＵＰＦ１の脱リン酸化を促進する。ＳＭＧ−７は、ｍＲＮＡ崩壊の細胞質部位であるＰボディに蓄積するため、ＮＭＤの終端エフェクターであると考えられる。酵母細胞とヒト細胞の両方で、ｍＲＮＡ崩壊の主な経路は、エキソリボヌクレアーゼ酵素であるＸＲＮ１による分解が続く５'キャップの除去によって開始される。ｍＲＮＡが分解されるもう１つの経路は、３'−５'からの脱デニル化である。
【００１９】
したがって、理論に縛られることなく、ＰＴＣを持つｍＲＮＡのポリペプチドへの翻訳を誘導するために、ＮＭＤ経路を回避する少なくとも２つの方法がある。１）ＰＴＣのリードスルーを促進する化合物を提供すること、したがって、リボソームによる翻訳の最初のラウンド中に、ｍＲＮＡに関連するすべてのＥＪＣの削除が保証され、および／または２）（ＵＰＦ１、ＵＰＦ２、ＵＰＦ３、ｅＩＦ４ＡＩＩＩ、ＭＬＮ５１、Ｙ１４／ＭＡＧＯＨヘテロダイマー、ＳＭＧ−１、ＳＭＧ−５など）ＳＭＧ−６および／またはＳＭＧ−７のような）ＮＭＤ分解複合体に関連する１つまたは複数のタンパク質の阻害。
【００２０】
本発明は、記載される特定のプロセス、組成、または方法論に限定されず、これらは変化する可能性があるためである。説明で使用される用語は、特定のバージョンまたは実施形態を説明することのみを目的としており、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。特に定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書のいかなるものも、本発明が先行発明のおかげでそのような開示に先行する権利を与えられないことの承認として解釈されるべきではない。
【００２１】
本明細書で使用する「早期終止コドン」（ＰＴＣ）または「早期終止コドン」は、突然変異の結果としてｍＲＮＡに（内因性終止コドンの前に）終止コドンを導入することを指す。
【００２２】
本明細書で使用する「ナンセンス突然変異」は、転写されたｍＲＮＡ、およびトランケートされた、不完全な、通常は機能しないタンパク質産物をもたらす、ＰＴＣまたはナンセンスコドンをもたらすＤＮＡ配列の点突然変異である。ナンセンス突然変異とは、さまざまな病気、特に遺伝的に受け継がれている病気の根底にある遺伝的突然変異である。例えば、癌では、ナンセンス変異が一般的に獲得されるか、腫瘍の体細胞変異です。いくつかの実施形態では、ナンセンス突然変異は体細胞突然変異である。別の実施形態では、ナンセンス突然変異は生殖系列突然変異ではない。
【００２３】
「ノンストップ突然変異」とは、ｍＲＮＡの３'非翻訳領域への継続的かつ不適切な翻訳を引き起こす内因性終止コドンの点突然変異である。ノンストップ変異は、異常なアミノ酸配列の組み込みと下流の終止コドンの利用をもたらす。いくつかの実施形態では、ノンストップ突然変異は体細胞突然変異である。別の実施形態では、ノンストップ突然変異は生殖系列突然変異ではない。
【００２４】
「フレームシフト変異」とは、コード領域のリーディングフレームが１つまたは２つのヌクレオチドによってシフトするような、オープンリーディングフレーム内の１つまたは複数のヌクレオチドの欠失または挿入、例えば単一ヌクレオチドまたはジヌクレオチドの欠失または挿入を指す。したがって、フレームシフト変異を有するｍＲＮＡから翻訳されたポリペプチドのアミノ酸配列は、対応する野生型配列と非常に異なる。いくつかの実施形態では、フレームシフト変異はＰＴＣを生成する。いくつかの実施形態では、フレームシフト変異は、＋１または＋２フレームシフト変異をもたらすヌクレオチドまたはジヌクレオチドの欠失である。ただし、フレームシフト変異の結果が得られれば、任意の数のヌクレオチド欠失が発生する可能性がある。あるいは、１つまたは複数のヌクレオチドの挿入はフレームシフトを引き起こす可能性があり、そのような突然変異も本発明の一部を形成する。フレームシフトを引き起こす他の遺伝的修飾も、本発明の一部を形成する。例えば、エクソンスキッピングまたはイントロン配列の保持または異なる位置からの翻訳開始をもたらすヌクレオチド配列の変化をもたらすスプライス部位突然変異またはイントロンまたは５'または３'非翻訳領域内など、コーディング領域外の突然変異である。この突然変異により、翻訳ミスおよび突然変異タンパク質の産生が生じる可能性があります。このタイプの遺伝子変異では、変異タンパク質は完全に変異アミノ酸配列であり、野生型配列は含まない。いくつかの実施形態において、フレームシフト変異は、早期終止コドン（ｍＲＮＡの初期に発生する場合）または遅延終止コドン（内因性終止コドンの近くに発生する場合）をもたらす可能性がある。別の実施形態では、フレームシフト変異は生殖系列変異ではない。
【００２５】
本明細書で使用する「非機能性」ポリペプチドとは、１つまたは複数の変異により、対応する非変異（野生型）ポリペプチドと比較して細胞状況で機能を発揮できないポリペプチドを指す。「機能的」ポリペプチドは、対応する非変異（野生型）ポリペプチドと比較して１つまたは複数の変異アミノ酸を有していても、少なくともある程度細胞機能を果たすことができるポリペプチドである。
【００２６】
本明細書における「リードスルー」という用語は、リボソーム翻訳における未熟な終止コドンをスキップすること、またはアミノ酸を置換すること、または未熟な終止コドンを含むｍＲＮＡの分解を抑制することを意味する。
【００２７】
本明細書で使用する「ポリペプチド」という用語には、タンパク質、ペプチド、ポリペプチドの断片、および融合ポリペプチドが含まれる。
【００２８】
本明細書で使用される「動物」、「患者」、または「対象」という用語には、ヒトおよび野生動物、家畜動物、農場動物などの非ヒト脊椎動物が含まれるが、これらに限定されない。好ましくは、この用語は人間を指す。「対象」、「患者」または「個体」という用語は、本明細書では互換的に使用され、治療される哺乳動物の対象を指す。いくつかの実施形態では、患者はヒトである。場合によっては、これらの方法は、実験動物、獣医用途、およびマウス、ラット、ハムスター、及び霊長類等のげっ歯類を含むがこれらに限定されない疾患の動物モデルの開発に使用できる。いくつかの実施形態では、患者はそれを必要とする患者である。
【００２９】
「含む」、「含有する」、または「によって特徴付けられる」と同義の移行用語「含む」は、包括的または無制限であり、追加の、列挙されていない要素または方法のステップを除外しない。対照的に、移行句「からなる」は、クレームで指定されていない要素、ステップ、または成分を除外する。「から本質的になる」という移行句は、クレームの範囲を、クレームされた発明の「基本的かつ新規な特性に実質的に影響を与えない」特定の材料またはステップに限定する。用語「含む」が移行句として使用される実施形態または請求項において、そのような実施形態は、用語「含む」を用語「からなる」または「から本質的になる」に置き換えることも想定され得る。
【００３０】
本明細書で特に定義されていない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が関係する当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。
【００３１】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈からそうでないことが明確に示されない限り、複数の参照を含む。したがって、例えば、「抗酸化剤」への言及は、当業者に知られている１つまたは複数の抗酸化剤およびその同等物などへの言及である。
【００３２】
治療と併用する場合の「投与」とは、治療薬を患者に投与することを意味し、それにより治療薬が標的とする組織にプラスの影響を与える。本明細書に記載の化合物は、単独で、または他の医薬品と組み合わせて（同時にまたは連続して）投与することができる。例えば、化合物は、他の抗癌剤または抗腫瘍剤と組み合わせて、または化学療法以外の他の癌療法、例えば手術または放射線療法と組み合わせて投与することができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の化合物は、他の治療薬と組み合わせて（すなわち、組み合わせた製剤として、または別個の製剤として）投与することもできる。
【００３３】
組成物の「治療有効量」または「有効量」は、所望の効果を達成するために、すなわち患者の望ましくない状態、疾患または症状を改善、予防または改善するために計算される所定量である。本方法によって企図される活性は、必要に応じて、治療的処置および／または予防的処置の両方を含み得る。治療および／または予防効果を得るために本発明に従って投与される化合物の特定の用量は、もちろん、例えば投与される化合物、投与経路、および治療される状態を含むそのケースにある特別な環境によって決定される。投与される有効量は、治療される状態、投与される化合物の選択、および選択される投与経路を含む関連する状況に照らして医師によって決定され得る。本発明の化合物の治療有効量は、典型的には、生理学的に許容される賦形剤組成物で投与される場合、標的組織で有効な全身濃度または局所濃度を達成するのに十分な量である。
【００３４】
本明細書で使用する場合、「治療薬」という用語は、患者の望ましくない状態、疾患、または症状を阻止、戦闘、改善、予防、または改善するために利用される薬剤を意味する。
【００３５】
「薬学的に許容される」とは、担体、希釈剤または賦形剤が製剤の他の成分と適合性でなければならず、そのレシピエントに有害であってはならないことを意味する。
【００３６】
用語「調節する」とは、言及された活性のいずれかが、例えば、増加、増強、増加、アゴニスト化（アゴニストとして作用）、または促進されることを意味する。変調は、ベースライン値よりも１倍、２倍、３倍、５倍、１０倍、１００倍など、活性を増加させる可能性がある。変調は、その活性をベースライン値以下に低下させ、拮抗薬または阻害薬として作用することもある。変調は、活性をベースライン値に正規化することもできる。
【００３７】
「免疫調節剤」という用語には、チェックポイント阻害剤、免疫共刺激分子、ＴＬＲアゴニスト、ＴＮＦＲスーパーファミリーアゴニスト、環状ジヌクレオチド、Ｔ細胞アゴニスト、サイトカイン、ケモカイン、腫瘍溶解性ウイルス、および免疫応答を刺激または阻害するその他の薬剤が含まれるが、これらに限定されない。
【００３８】
本明細書で使用する「それを必要とする」という語句は、患者が特定の方法または治療の必要があると特定されたことを意味する。いくつかの実施形態では、識別は診断の任意の手段によるものであり得る。本明細書に記載の方法および治療のいずれにおいても、動物または哺乳動物はそれを必要としている可能性がある。いくつかの実施形態では、動物または哺乳動物は、特定の疾患、障害、または状態が広まった環境にいるか、またはその環境に移動することになる。
【００３９】
「治療」とは、障害の発症を予防するか、病状または症状を変化させることを意図して行われる介入である。したがって、「治療」とは、治療的治療または予防的または予防的手段を指し得る。いくつかの実施形態では、治療は治療的治療のためである。いくつかの実施形態では、治療は予防的または予防的治療のためのものである。治療を必要とする人には、すでに障害を患っている人、および障害を予防する人が含まれる。
【００４０】
本明細書で使用する場合、「癌の治療」という語句は、癌細胞の複製の阻害、アポトーシス、癌の広がりの阻害（転移）、腫瘍成長の阻害、癌細胞数または腫瘍成長の減少、癌悪性（例、分化の増加）グレードの減少または癌関連症状の改善を指す。
【００４１】
本明細書で使用される「アルキル」という用語は、直鎖または分岐鎖である飽和炭化水素基を意味する。アルキルはヘテロアルキルであっても良い。
【００４２】
本明細書で使用される場合、「置換アルキル」という用語は、アルキルの炭素に結合した１つまたは複数の水素原子が別の基で置き換えられたアルキルを指す。
【００４３】
本明細書で使用される場合、「ヘテロアルキル」という用語は、１つまたは複数のＣ原子が酸素、窒素、硫黄またはそれらの組み合わせで置き換えられたアルキル基を指す。
【００４４】
本明細書で使用される場合、「アルケニル」という用語は、１つまたは複数の二重炭素−炭素結合を有する直鎖または分岐アルキル基を意味する。アルケニルはヘテロアルケニルであっても良い。
【００４５】
本明細書で使用される場合、「置換アルケニル」という用語は、アルケニルの炭素に結合した１つまたは複数の水素原子が別の基で置き換えられたアルケニルを指す。
【００４６】
本明細書で使用される場合、「ヘテロアルケニル」という用語は、１つまたは複数のＣ原子が酸素、窒素、硫黄またはそれらの組み合わせで置き換えられたアルケニル基を指す。
【００４７】
本明細書で使用される場合、「アルキニル」という用語は、１つまたは複数の三重炭素−炭素結合を有する直鎖または分岐鎖アルキル基を意味する。アルキニルはヘテロアルキニルであり得る。
【００４８】
本明細書で使用される場合、「置換アルキニル」という用語は、アルキニルの炭素に結合した１つまたは複数の水素原子が別の基で置き換えられたアルキニルを指す。
【００４９】
本明細書で使用される場合、「ヘテロアルキニル」という用語は、１つまたは複数のＣ原子が酸素、窒素、硫黄またはそれらの組み合わせで置き換えられたアルキニル基を指す。
【００５０】
本明細書で使用される「アリール」という用語は、単環式、二環式、または多環式（例えば、２、３、または４つの縮合環を有する）芳香族炭化水素を意味する。いくつかの実施形態において、アリール基は、６〜２０個の炭素原子または６〜１０個の炭素原子を有する。アリール基の例には、フェニル、ビフェニル、ベンジル、ナフチル、アントラセニル、フェナントレニル、インダニル、インデニル、テトラヒドロナフチルなどが含まれるが、これらに限定されない。アリールはヘテロアリールであっても良い。
【００５１】
本明細書で使用される場合、「置換アリール」という用語は、任意の炭素原子に結合した１つまたは複数の水素原子が１つまたは複数の官能基で置き換えられたアリールを指す。
【００５２】
本明細書で使用する「ヘテロアリール」という用語は、最大２０個の環形成原子（例えば、Ｃ）を有し、硫黄、酸素、または窒素などの少なくとも１個のヘテロ原子環員（環形成原子）を有する芳香族複素環を意味する。一部の実施形態では、ヘテロアリール基は、少なくとも１つ以上のヘテロ原子環形成原子を有し、そのそれぞれが、独立して、硫黄、酸素、または窒素である。
【００５３】
本明細書で使用される「アリールアルキル」という用語は、アリールにより置換されたＣ１−６アルキルを意味する。
【００５４】
本明細書で使用される場合、「複素環」という用語は、以下からなる、５〜７員の単環または二環または７〜１０員の二環複素環系炭素原子を意味し、いずれかの環が飽和または不飽和であって良く、Ｎ、ＯおよびＳから選択される１から３個のヘテロ原子、およびＮおよびＳヘテロ原子は任意に酸化されても良く、Ｎヘテロ原子は任意に四級化されても良く、上記で定義された任意の二環式基を含む複素環はベンゼン環に縮合する。
【００５５】
本明細書には、癌を有する対象を治療する方法が開示される。いくつかの実施形態では、癌を有する対象を治療する方法は、ｍＲＮＡの早期終止コドン（ＰＴＣ）のリードスルーを促進し、ｍＲＮＡのナンセンス媒介崩壊（ＮＭＤ）を阻害する化合物の治療有効量を投与することを含み得る。いくつかの実施形態では、これらの特性の両方を有する化合物はアンレキサノクスである。
【００５６】
いくつかの態様において、癌を有する対象を治療する方法は、治療有効量のアムレキサノクス化合物を投与することを含んでも良い。
【００５７】
いくつかの態様において、アンレキサノクス（（２−アミノ−７−イソプロピル−５−オキソ−５Ｈ−クロメノ［２，３−ｂ］ピリジン−３−カルボン酸）は、以下の式Ｉで表され、
【化１】
2020525434.tif 000003
またはその塩、溶媒和物、包接化合物、水和物または多形である。
【００５８】
いくつかの実施形態では、アンレキサノクスまたはそのホモログは式ＩＩで表され、
【化２】
2020525434.tif 000004
式中、Ｒ１は水素、アルキル、フェニル、カルボキシル、ヒドロキシル、アルコキシル、カルボキシアルキル、例えば、エステル、シアノ、アシルアミノ、または非置換または２個までのアルキル基で置換されても良いアミノであり、
ｍは０、１、または２であり、
Ｒ２はアルキル、アルケニル、アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、ヒドロキシ、カルボキシル、ブタジエニレン（−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−）であり、隣接する炭素原子、少なくとも１つのアルキル基によって置換または非置換され得るシアノ、カルボキシアルキル、トリフルオロメチル、またはアミノとベンゼン環を形成し、及び
Ｒ３は少なくとも１つのアルキル基によって置換または非置換され得るカルボキシル、シアノ、アリールアルコキシカルボニル、アルコキシカルボニル、またはカルボキサミドである。
【００５９】
いくつかの態様において、アンレキサノクスは、以下の式ＩＩＩで表される重水素化アンレキサノクスであっても良く：
【化３】
2020525434.tif 000005
またはその薬学的に許容される塩、式中、Ｘ、Ｙ、またはＺは、重水素（Ｄ）を含む基である。いくつかの実施形態では、ＸはＤを含む基であり、いくつかの実施形態では、ＸおよびＹはＤを含む基である。いくつかの実施形態では、Ｘ、Ｙ、およびＺはＤを含む基である。いくつかの実施形態では、Ｘ、Ｙ、またはＺはＣＤ３を含むか、またはＣＤ３である。いくつかの実施形態では、Ｘ、Ｙ、またはＺはＤを含むか、またはＤである。いくつかの実施形態では、Ｘ、Ｙ、またはＺはＣＨ２ＣＤＨ２を含むか、ＣＨ２ＣＤＨ２である。いくつかの実施形態では、ＸおよびＹはＣＤ３を含むかまたはＣＤ３であり、ＺはＤを含むかＤである。いくつかの実施形態では、ＸおよびＹはＣＨ３を含むかまたはＣＨ３であり、ＺはＤを含むかＤである。いくつかの実施形態では、ＸはＣＨ３を含むかまたはＣＨ３であり、ＹはＣＨ２Ｄを含むかまたはＣＨ２Ｄであり、ＺはＤを含むかまたはＤである。
【００６０】
いくつかの実施形態において、アンレキサノクスは、結腸癌腫、乳癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、扁平上皮がん、基底細胞がん、腺がん、汗腺がん、皮脂腺がん、乳頭がん、乳頭腺がん、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、肝癌、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胚性がん、ウィルムス腫瘍、子宮頸がん、精巣腫瘍、肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、上皮がん、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽腫、メルケル細胞がん、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体、血管芽腫、アコースティック神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、白血病、例えば、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、慢性白血病、真性赤血球増加症、リンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンストロームのマクログロブリン血症、重鎖疾患からなる群から選択される癌を有する対象に投与される。いくつかの実施形態において、アンレキサノクスの投与は、これらの癌において新抗原の発現を誘導し、それにより対象において免疫応答を誘発するだろう。
【００６１】
理論に束縛されることを望まないが、ナンセンス変異の頻度が高い癌は、アンレキサノクス、ＮＭＤ複合体の阻害剤、および本明細書に開示される他の薬剤に対してより感受性が高いと考えられる。このような癌には、子宮体部類内膜がん（ＵＣＥＣ）、膀胱尿路上皮がん（ＢＬＣＡ）、胃がん、頭頸部がん、腎臓腎細胞がん、結腸腺がん、食道がん、肺扁平上皮がん、直腸腺がん、膵臓腺癌、肺腺癌、皮膚皮膚メラノーマ、肝臓肝細胞癌などが含まれるが、これらに限定されない。そのような癌は、アンレキサノクスまたは他のＮＭＤ複合阻害剤で治療した場合、および標準的な化学療法レジメンと比較した場合、寛解率が高い可能性がある。いくつかの実施形態では、これらのナンセンス突然変異は腫瘍抑制遺伝子に存在しない。いくつかの実施形態において、アンレキサノクスの投与は、これらの癌において新抗原の発現を誘導し、それにより対象において免疫応答を誘発するだろう。
【００６２】
いくつかの態様において、対象の癌を治療する方法は、本明細書に開示されるＰＴＣリードスルーを促進する化合物と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象の癌を治療する方法は、本明細書に開示されるＮＭＤ複合体を阻害する化合物と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、ＰＴＣのリードスルーを促進する化合物およびＮＭＤ複合体を阻害する化合物と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法は、異常な（増殖性などの）細胞または癌細胞の表面で新抗原の発現を誘導することにより、個体に免疫応答を生じさせることを含む。
【００６３】
いくつかの態様において、対象の癌を治療する方法は、本明細書に開示される少なくとも１つの免疫チェックポイントタンパク質を阻害する分子と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、治療有効量のアンレキサノクスおよび治療有効量の少なくとも１つのチェックポイント阻害剤を投与することを含む。
【００６４】
免疫チェックポイントは、免疫系内のタンパク質であり、シグナル（共刺激分子）を上げるか、シグナルを下げる。チェックポイント変調器は、がん細胞が免疫系による検出を回避する主要な方法の１つを克服するように設計される。Ｔリンパ球は、病気の徴候について細胞を定期的に監視する。細胞の表面の抗原が細胞の異常を示唆している場合、Ｔ細胞は追加の分子の発現を増加させる免疫応答を開始し、免疫応答が体内の正常組織を損傷するのを防ぐ。これらのタンパク質は、免疫チェックポイントとして知られる。
【００６５】
がん細胞はしばしば免疫チェックポイントタンパク質を使用して、免疫系による攻撃を回避または抑制する。したがって、癌細胞の表面での免疫チェックポイントタンパク質の発現は、Ｔ細胞などの免疫細胞がそれらを「外来」または「異常」として認識することを防ぐ。その結果、チェックポイント阻害剤は、Ｔ細胞認識による免疫システムである。
【００６６】
１つまたは複数の免疫チェックポイントタンパク質を阻害することができる任意の分子を、本明細書で開示される方法で使用することができる。そのような分子はチェックポイント阻害剤と呼ばれる。これらには、抗体またはその機能的断片、阻害性ポリペプチド、小分子化合物、および／または阻害性核酸（アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子阻害性ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡなど）、および／またはリボザイムなどの触媒核酸が含まれるが、これらに限定されない。本明細書に開示される方法のいずれかにおける使用のためのチェックポイント阻害剤によるターゲティングに適した免疫チェックポイントタンパク質には、アデノシンＡ２Ａ受容体（Ａ２ＡＲ）、Ｂ７−Ｈ３（別名ＣＤ２７６；例えばＭＧＡ２７１）、細胞傷害性Ｔ−リンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ４；別名ＣＤ１５２；例：イピリムマブ、ＡＧＥＮ−１８８４（Ａｇｅｎｕｓ））、プログラム細胞死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１；別名ＣＤ２７４；例：ＭＤＸ−１１０５（Ｂｒｉｓｔｏｌ  Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＷＢＰ−３１５５（Ｃ−ｓｔｏｎｅ）、ＬＹ３３０００５４（Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ））、プログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ−１；別名ＣＤ２７９；例えば、ペンブロリズマブ、ＳＨＲ−１２１０（Ｉｎｃｙｔｅ）、ＳＴＩ−Ａ１１１０（Ｓｏｒｒｅｎｔｏ）、ＲＥＧＮ２８１０（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）、ＣＴ−０１１（ｐｉｄｉｌｉｚｕｍａｂ；Ｃｕｒｅｔｅｃｈ）、ＰＤＲ−００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＢＧＢ−Ａ３１７（ＢｅｉＧｅｎｅ）、ＴＳＲ−０４２（Ｔｅｓａｒｏ）、ＥＮＵＭＣ−８（Ｅｎｕｍｅｒａｌ）、ＭＧＤ−０１３（Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ、ＰＤ１およびＬａｇ３の二重特異性抗体）、Ｂ７−Ｈ４（別名ＶＴＣＮ１）、Ｔ細胞免疫グロブリンおよびムチンドメイン含有３（ＴＩＭ３；別名ＨＡＶＣＲ２）、ＢおよびＴリンパ球減衰器（ＢＴＬＡ；別名ＣＤ２７２）、インドールアミン−ピロール２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）、キラー細胞免疫グロブリンウリン様受容体（ＫＩＲ；例：リリルマブ）、リンパ球活性化遺伝子３（ＬＡＧ−３；例：ＢＭＳ−９８６０１６）、ＩｇおよびＩＴＩＭドメインを持つＴ細胞免疫受容体（ＴＩＧＩＴ；別名ＷＵＣＡＭおよびＶｓｔｍ３）、ＩＬＴ−３、ＩＬＴ−４、および／またはＴ細胞活性化のＶドメインＩｇサプレッサー（ＶＩＳＴＡ）の１つかそれ以上を含むが、これらに限定されない。
【００６７】
いくつかの態様において、チェックポイント阻害剤は、イピリムマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ニボルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ペンブロリズマブ（Ｍｅｒｃｋ）デュルバルマブ（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）、アテゾリズマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）、トレメリムマブ（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）、および／またはアベルマブ（Ｐｆｉｚｅｒ）等のうちの１つまたはそれ以上の拮抗抗体であるが、これらに限定されない。
【００６８】
いくつかの態様において、免疫共刺激分子は、アンレキサノクスおよびチェックポイント阻害剤と組み合わせて使用することができる。免疫共刺激分子は免疫調節因子であり、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体スーパーファミリーおよびＢ７−ＣＤ２８スーパーファミリーのメンバーに属する。非限定的な例には、ＣＤ２７、ＧＩＴＲ、Ｂ７−Ｈ３、ＣＤ２８、ＣＤ４０、インターロイキン−２受容体サブユニットベータ（ＩＬＲ２Ｐ；別名ＣＤ１２２；例えばＮＫＴＲ−２１４）、ＣＤ１３７（別名ＴＮＦＲＳＦ９、４−１ＢＢ）、およびリンパ球活性化（ＩＬＡ）によって誘導される）、ＩＣＯＳ、および／またはＯＸ４０（別名ＣＤ１３４およびＴＮＦＲＳＦ４）の活性化剤が含まれるが、これらに限定されない。これらのアクチベーターの多くは、ＣＤＸ−１１２７、ＴＧＮ１４１２、ＭＥＤＩ０５６２、ＭＥＤＩ６４６９、ＭＥＤＩ６３８３などのアゴニスト抗体である。
【００６９】
いくつかの態様において、対象の癌を治療する方法は、本明細書に開示される１つのチェックポイント阻害剤と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。いくつかの実施形態において、方法は、本明細書に開示される２つのチェックポイント阻害剤と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、本明細書に開示される１つのチェックポイント阻害剤及び１つの免疫共刺激分子と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、表１に記載のチェックポイント阻害剤の１つおよび表１に記載の免疫共刺激分子の１つと組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。
【表１】
2020525434.tif 000006
【００７０】
いくつかの態様において、対象の癌を治療する方法は、本明細書に開示される１つの免疫共刺激分子と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、本明細書に開示される２つの免疫共刺激分子と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。
【００７１】
この方法は、手術前、手術中、または手術後に、および特定の非限定的な実施形態、、がんを治療する手術において、少なくとも１つのチェックポイントタンパク質を阻害する分子と組み合わせて有効量のアンレキサノクスを投与することを含む術後合併症のリスクを低減する方法も提供する。
【００７２】
本開示はまた、本明細書に記載の有効量のアンレキサノクスを少なくとも１つのチェックポイントタンパク質阻害する分子と組み合わせて、それを必要とする患者に直接投与することを含む、癌の発生の予防、再発の予防または遅延、または癌の再発率の低下のための方法を提供する。いくつかの実施形態では、アンレキサノクスとチェックポイント阻害剤の組み合わせをアジュバント療法として使用することができる。
【００７３】
本開示はまた、少なくとも１つのチェックポイントタンパク質を阻害する分子と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む、腫瘍または癌を１つまたは複数の他の抗癌剤に対して感作する方法を提供する。抗癌剤は、アンレキサノクスおよびチェックポイント阻害剤の投与の前、重複、同時、および／または後に投与することができる。いくつかの実施形態において、アンレキサノクスおよびチェックポイント阻害剤は、癌治療の前、癌治療と同時に、治療後、または癌の寛解中に対象に投与される。同時に投与される場合、アンレキサノクス／チェックポイント阻害剤および他の抗癌剤は、単一の製剤または別個の製剤で投与されても良く、別個の場合、場合により、異なる投与様式によって投与されても良い。したがって、アンレキサノクス／チェックポイント阻害剤と１つまたは複数の他の抗癌剤の組み合わせは、相乗的に作用して腫瘍または癌と戦う可能性がある。
【００７４】
実際、そのような治療を必要とする患者に有効量のアンレキサノクスおよび／またはチェックポイント阻害剤を投与すると、臨床的に有意な効力を有する別の抗癌剤の投与量が減少する場合がある。アンレキサノクスおよび／またはチェックポイント阻害剤の投与がない場合、他の抗癌剤の減量のそのような有効性は観察されない可能性がある。したがって、本発明は、腫瘍または癌を治療するための方法を提供し、１つまたは複数の他の抗癌剤の低減された用量を投与することを含む。
【００７５】
いくつかの実施形態では、抗癌剤は、タモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、ヨードキシフェン、酢酸メゲストロール、アナスフロゾール、レトラゾール、ボラゾール、エキセメスタン、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、酢酸シプロテロン、酢酸ゴセレリン、ルプロリド、フィナステリド、ハーセプチン、メトトレキサート、５−フルオロウラシル、シトシンアラビノシド、ドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシン、イダルビシン、マイトマイシン−Ｃ、ダクチノマイシン、ミトラマイシン、シスプラチン、カルボプラチン、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、シクロホスファミド、イホスファミド、ニトロソウレア、チオテファン、ビンクリスチン、タキソール、タキソテール、エトポシド、テニポシド、アムサクリン、イリノテカン、トポテカン、エポチロン、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ソラフェニブ、血管新生阻害剤、ＥＧＦ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、ＣＤＫ阻害剤、サイトカイン、Ｈｅｒ１及びＨｅｒ２阻害剤、モノクローナル抗体であっても良い。
【００７６】
別の実施形態において、アンレキサノクスおよびチェックポイント阻害剤は、放射線療法のレジメンと組み合わせて投与される。治療は、手術および／または化学療法も含み得る。例えば、アンレキサノクスおよびチェックポイント阻害剤は、放射線療法およびシスプラチン（プラチノール）、フルオウラシル（５−ＦＵ、アドルシル）、カルボプラチン（パラプラチン）、及び／またはパクリタキセル（タキソール）と組み合わせて投与することができる。アンレキサノクス／チェックポイント阻害剤による治療により、低線量の放射線治療および／または低頻度の放射線治療の使用が可能になり、例えば、嚥下機能を妨げて望ましくない体重減少または脱水を引き起こす可能性のある重度の咽頭痛の発生率を減らすことが可能である。
【００７７】
本明細書に開示するいくつかの実施形態では、免疫チェックポイントタンパク質を阻害するアンレキサノクスおよび１つまたは複数の分子（抗体、例えばモノクローナル抗体など）を投与することにより、個体の腫瘍成長を阻害する方法がある。免疫チェックポイント阻害剤に追加されたアンレキサノクスの組み合わせは、アンレキサノクスの組み合わせなしで投与される２つ以上の抗体ベースの免疫チェックポイント阻害療法の組み合わせと比較して、腫瘍成長の抑制に効果的またはより効果的である。加えて、本明細書に記載の方法に従って免疫チェックポイントタンパク質を阻害するアンレキサノクスと分子の組み合わせの投与は、副作用および有害事象の減少をもたらす（例えば、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％のいずれかは、２つ以上の抗体ベースの免疫チェックポイント阻害療法（例えば、抗−ＰＤ−１抗体と抗−ＣＴＬＡ−４抗体の組み合わせ）のみとなる。
【００７８】
いくつかの態様において、方法は、以下：ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４のうちの１つまたは複数を阻害する分子と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。一部の実施形態では、式Ｉのアンレキサノクスは、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４のうちの１つ以上を阻害する分子と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、式ＩＩのアンレキサノクスは、ＰＤ−１およびＣＴＬＡ−４のうちの１つまたは複数を阻害する分子と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、式ＩＩＩのアンレキサノクスは、以下：ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４の１つ以上を阻害する分子と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４を阻害する分子は抗体である。
【００７９】
いくつかの態様において、方法は、抗−ＰＤ−１抗体と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、アンレキサノクスを抗−ＰＤ−１および抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせて投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、アンレキサノクスを抗−ＰＤ−Ｌ１および抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせて投与することを含む。
【００８０】
いくつかの態様において、アンレキサノクスは、以下の範囲：約０．５〜約１ｍｇ／ｋｇ、約０．５〜約２ｍｇ／ｋｇ、約０．５〜約３ｍｇ／ｋｇ、約０．５〜約４ｍｇ／ｋｇ、約０．５〜約５ｍｇ／ｋｇ、約０．５〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．５〜約２０ｍｇ／ｋｇ、約０．５〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約１〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約１〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約１０〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約１０〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、約５０〜約１７５ｍｇ／ｋｇ、約１７５〜約２００ｍｇ／ｋｇ、約２００〜約２２５ｍｇ／ｋｇ、約２２５〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、約２５０〜約３００ｍｇ／ｋｇ、約３００〜約３５０ｍｇ／ｋｇ、約３５０〜約４００ｍｇ／ｋｇ、約４００〜約４５０ｍｇ／ｋｇ、または約４５０から約５００ｍｇ／ｋｇのいずれかで個体に投与される。投与量は、寛解するまで毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、毎週、２週間ごと、３週間ごと、４週間ごとであっても良い。
【００８１】
いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１．３ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１１ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１３ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１６ｍｇ／ｋｇ、１７ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、１９ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２１ｍｇ／ｋｇ、２２ｍｇ／ｋｇ、２３ｍｇ／ｋｇ、２４ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、２６ｍｇ／ｋｇ、２７ｍｇ／ｋｇ、２８ｍｇ／ｋｇ、２９ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３１ｍｇ／ｋｇ、３２ｍｇ／ｋｇ、３３ｍｇ／ｋｇ、３３．３ｍｇ／ｋｇ、３４ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ、３６ｍｇ／ｋｇ、３７ｍｇ／ｋｇ、３８ｍｇ／ｋｇ、３９ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、４１ｍｇ／ｋｇ、４２ｍｇ／ｋｇ、４３ｍｇ／ｋｇ、４４ｍｇ／ｋｇ、４５ｍｇ／ｋｇ、４６ｍｇ／ｋｇ、４７ｍｇ／ｋｇ、４８ｍｇ／ｋｇ、４９ｍｇ／ｋｇ、または５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【００８２】
好ましい態様において、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＣＴＬＡ−４に対する抗体は、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１１ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１３ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１６ｍｇ／ｋｇ、１７ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、１９ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２１ｍｇ／ｋｇ、２２ｍｇ／ｋｇ、２３ｍｇ／ｋｇ、２４ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、２６ｍｇ／ｋｇ、２７ｍｇ／ｋｇ、２８ｍｇ／ｋｇ、２９ｍｇ／ｋｇ、または３０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。投与量は、寛解するまで毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、毎週、２週間ごと、３週間ごと、４週間ごとなどであっても良い。
【００８３】
一実施形態では、アンレキサノクスは約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は３日ごとに約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与される。
【００８４】
一実施形態では、アンレキサノクスは約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は毎週約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与される。
【００８５】
一実施形態では、アンレキサノクスは約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は１０日ごとに約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与される。
【００８６】
一実施形態では、アンレキサノクスは約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は２週間ごとに約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇからの用量でそれぞれ投与される。
【００８７】
一実施形態では、アンレキサノクスは約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は３週間ごとに約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与される。
【００８８】
一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇから５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は４週間ごとに約１ｍｇ／ｋｇから約１５ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与される。
【００８９】
一実施形態では、アンレキサノクスは約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は８週間ごとに約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与される。
【００９０】
一実施形態では、アンレキサノクスは約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は１２週間ごとに約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与される。
【００９１】
一実施形態では、アンレキサノクスは毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は３日ごとに約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与される。
【００９２】
一実施形態では、アンレキサノクスは約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は毎週約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与される。
【００９３】
一実施形態では、アンレキサノクスは約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は１０日ごとに約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与される。
【００９４】
一実施形態では、アンレキサノクスは毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は２週間ごとに約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与される。
【００９５】
一実施形態において、アンレキサノクスは、約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は３週間ごとに約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与される。
【００９６】
一実施形態では、アンレキサノクスは約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は４週間ごとに約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与される。
【００９７】
一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は８週間ごとに約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与される。
【００９８】
一態様において、アンレキサノクスは、約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は１２週間ごとに約１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ投与される。
【００９９】
ある態様において、アンレキサノクスは毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体は３日ごとに約１００ｍｇ〜ら約１５００ｍｇの用量で投与される。一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は、それぞれ３日ごとに約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。
【０１００】
１つの態様において、アンレキサノクスは毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体は毎週約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は、それぞれ毎週約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。
【０１０１】
一態様において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体は、２週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は、それぞれ２週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。
【０１０２】
ある態様において、アンレキサノクスは毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体は４週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は、それぞれ４週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。
【０１０３】
一態様において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体は、８週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は、それぞれ８週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。
【０１０４】
一態様において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体は、１２週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は、それぞれ１２週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。
【０１０５】
一態様において、アンレキサノクスは毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体は３日ごとに約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。一実施形態では、アンレキサノクスは、約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体はそれぞれ、３日ごとに約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。
【０１０６】
ある態様において、アンレキサノクスは毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体は毎週約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。一実施形態では、アンレキサノクスは、約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体はそれぞれ毎週、約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。
【０１０７】
一実施形態では、アンレキサノクスは毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体は２週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。一実施形態では、アンレキサノクスは、約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体はそれぞれ２週間ごとに、約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。
【０１０８】
ある態様において、アンレキサノクスは毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体は４週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。一実施形態では、アンレキサノクスは、約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体はそれぞれ４週間ごとに、約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。
【０１０９】
一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体は、８週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。一実施形態では、アンレキサノクスは、約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体はそれぞれ８週間ごとに、約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。
【０１１０】
一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体は、１２週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。一実施形態では、アンレキサノクスは、約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体はそれぞれ１２週間ごとに、約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇの用量で投与される。
【０１１１】
ある態様において、アンレキサノクスは毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＣＴＬＡ−４抗体は３日ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇから５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体は、３日ごとに約１００ｍｇから約１５００の用量で投与される。一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体は、３日ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。
【０１１２】
一態様において、アンレキサノクスは毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＣＴＬＡ−４抗体は毎週約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。一実施形態では、アンレキサノクスは毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体は毎週約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。一実施形態では、アンレキサノクスは毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体は毎週約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。
【０１１３】
ある態様において、アンレキサノクスは毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＣＴＬＡ−４抗体は２週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体は、２週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体は、２週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。
【０１１４】
ある態様において、アンレキサノクスは毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＣＴＬＡ−４抗体は４週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体は、４週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体は、４週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。
【０１１５】
ある態様において、アンレキサノクスは毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＣＴＬＡ−４抗体は８週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。一実施形態において、アンレキサノクスは、約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で毎日投与され、抗−ＰＤ−１抗体は、８週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体は、８週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。
【０１１６】
一態様において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＣＴＬＡ−４抗体は、１２週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−１抗体は、１２週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。一実施形態において、アンレキサノクスは、毎日約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与され、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体は、１２週間ごとに約１００ｍｇ〜約１５００の用量で投与される。
【０１１７】
別の実施形態において、本明細書に開示される方法のいずれかに従って投与される１つ以上の免疫チェックポイントタンパク質を阻害する分子と組み合わせたアンレキサノクスは、少なくとも約１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３３．３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の腫瘍抑制効果アンレキサノクスおよびチェックポイント阻害剤で治療されていない腫瘍に対して提供する。
【０１１８】
本明細書に開示される化合物および分子は、それらが活性である任意の経路により従来の方法で投与することができる。投与は、全身、非経口、局所、または経口であり得る。例えば、投与は、非経口、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、経皮、経口、頬側、または眼内経路、または膣内、吸入、デポ注射、またはインプラントによるものであり得るが、これらに限定されない。したがって、本開示の分子の投与様式（単独または他の医薬品との組み合わせのいずれか）は、舌下、注射可能（皮下または筋肉内に注射される短時間作用型、デポー、インプラントおよびペレット形態を含む）であり得るが、これらに限定されない）、または膣クリーム、座薬、ペッサリー、膣リング、直腸座薬、子宮内器具、およびパッチやクリームなどの経皮剤の使用による。いくつかの実施形態において、アンレキサノクスおよびチェックポイント阻害剤は、腫瘍部位に直接投与することができる。
【０１１９】
いくつかの態様において、アンレキサノクスおよびチェックポイント阻害剤は腫瘍部位に直接投与することができる。いくつかの実施形態において、アンレキサノクスは腫瘍部位に投与され、チェックポイント阻害剤は静脈内に投与される。いくつかの実施形態において、アンレキサノクスは腫瘍部位に投与され、続いてアンレキサノクスの経口投与およびチェックポイント阻害剤の静脈内投与が続く。
【０１２０】
いくつかの態様において、方法は、腫瘍溶解性アデノウイルス、ＣＤＮ、ＴＬＲアゴニスト、ＴＮＦＲスーパーファミリーアゴニスト、およびエピジェネティック調節化合物から選択される免疫調節剤の腫瘍内注射と組み合わせてアンレキサノクスを経口投与することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、免疫調節剤（腫瘍溶解性アデノウイルス、ＣＤＮ、ＴＬＲアゴニスト、ＴＮＦＲスーパーファミリーアゴニスト、およびエピジェネティック調節化合物）の腫瘍内注射と組み合わせてアンレキサノクスを経口投与すること、およびチェックポイント阻害剤のさらなる静脈内投与を含む。いくつかの実施形態では、方法は、免疫調節剤（腫瘍溶解性アデノウイルス、ＣＤＮ、ＴＬＲアゴニスト、ＴＮＦＲスーパーファミリーアゴニスト、およびエピジェネティック調節化合物）の腫瘍内注射と組み合わせてアンレキサノクスを経口投与すること、および免疫共刺激分子を静脈内にさらに投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、化学療法および免疫調節剤の腫瘍内注射と組み合わせてアンレキサノクスを経口投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、放射線療法および免疫調節剤の腫瘍内注射と組み合わせてアンレキサノクスを経口投与することを含む。
【０１２１】
いくつかの態様において、アンレキサノクスおよびチェックポイント阻害剤は静脈内投与される。いくつかの実施形態では、アンレキサノクスは経口投与され、チェックポイント阻害剤は静脈内投与される。いくつかの実施形態では、アンレキサノクスおよびチェックポイント阻害剤は経口投与される。いくつかの実施形態において、アンレキサノクスおよびチェックポイント阻害剤は、同時にまたは連続して投与される。例えば、アンレキサノクスを最初に投与し、続いてＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４に対する抗体を投与することができる。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４に対する抗体を最初に投与し、続いてアンレキサノクスを投与することができる。
【０１２２】
特定の投与様式は適応症に依存する。特定の投与経路および投与計画の選択は、最適な臨床反応を得るために、臨床医に知られている方法に従って臨床医によって調整または滴定されるものである。投与される化合物の量は、治療的に有効な量である。投与される投与量は、治療される対象の特性、例えば、治療される特定の動物または人間、年齢、体重、健康、もしあれば同時治療の種類、および治療の頻度に依存し、容易に決定することができる。当業者による（例えば、臨床医による）。
【０１２３】
別の実施形態では、癌細胞を死滅させる方法は、癌細胞を、少なくとも１つの免疫チェックポイントタンパク質を阻害する分子と組み合わせてアンレキサノクスを含む組成物と接触させることを含み得る。いくつかの実施形態では、方法はインビトロまたはインビボであり得る。いくつかの実施形態では、チェックポイントタンパク質を阻害する分子は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４に対する抗体であり得る。いくつかの実施形態では、癌細胞は、結腸癌腫、乳癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、扁平上皮がん、基底細胞がん、腺がん、汗腺がん、皮脂腺がん、乳頭がん、乳頭腺がん、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、肝癌、胆管癌、絨毛癌、セミノーマ、胚性がん、ウィルムス腫瘍、子宮頸がん、精巣腫瘍、肺がん、小細胞肺がん、膀胱がん、上皮がん、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽腫、メルケル細胞がん、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体、血管芽腫、アコースティック神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、白血病、例えば、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、慢性白血病、真性赤血球増加症、リンパ腫、多発性骨髄腫、ワルデンストロームのマクログロブリン血症、重鎖疾患から選択される。
【０１２４】
さらなる態様において、癌幹細胞を死滅させる方法は、癌幹細胞を、少なくとも１つの免疫チェックポイントタンパク質を阻害する分子と組み合わせてアンレキサノクスを含む組成物と接触させることを含み得る。いくつかの実施形態では、方法はインビトロまたはインビボであり得る。いくつかの実施形態では、チェックポイントタンパク質を阻害する分子は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４に対する抗体であり得る。いくつかの実施形態では、この方法は、癌幹細胞をアンレキサノクスおよびＴＮＦ受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）アゴニストなどの分子アジュバント、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）リガンド、および環状ジヌクレオチド（ＣＤＮｓ）及びＣｐＧモチーフなどの細胞内ＤＮＡセンサーアゴニストと接触させることを含む。
【０１２５】
さらなる態様において、異常細胞の表面上の１つまたは複数の新生抗原の発現を誘導する方法は、少なくとも１つの免疫チェックポイントタンパク質を阻害する分子と組み合わせて異常細胞をアンレキサノクスと接触させることを含む。いくつかの実施形態では、方法はインビトロまたはインビボであり得る。いくつかの実施形態では、式Ｉのアンレキサノクスは、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４のうちの１つ以上を阻害する分子と組み合わせて接触される。いくつかの実施形態において、式ＩＩのアンレキサノクスは、以下ＰＤ−１およびＣＴＬＡ−４のうちの１つ以上を阻害する分子と組み合わせて接触される。いくつかの実施形態において、式ＩＩＩのアンレキサノクスは、以下：ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４のうちの１つ以上を阻害する分子と組み合わせて接触される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４を阻害する分子は抗体である。
【０１２６】
別の実施形態において、それを必要とする個体において免疫応答を生じさせる方法は、ｍＲＮＡにおける早期終止コドン（ＰＴＣ）のリードスルーを促進し、かつ、ｍＲＮＡのナンセンス媒介崩壊（ＮＭＤ）を阻害する。一部の実施形態では、化合物はアンレキサノクスである。いくつかの実施形態では、この方法は、免疫チェックポイントタンパク質を阻害する分子を投与することをさらに含む。いくつかの実施形態では、チェックポイントタンパク質はＰＤ−１およびＣＴＬＡ−４である。いくつかの実施形態において、方法は、以下のＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４のうちの１つ以上を阻害する分子と組み合わせてアンレキサノクスを投与することを含む。一部の実施形態では、式Ｉのアンレキサノクスは、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４のうちの１つ以上を阻害する分子と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、式ＩＩのアンレキサノクスは、ＰＤ−１およびＣＴＬＡ−４のうちの１つまたは複数を阻害する分子と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、式ＩＩＩのアンレキサノクスは、以下のＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４の１つ以上を阻害する分子と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＣＴＬＡ−４を阻害する分子は抗体である。
【０１２７】
いくつかの態様において、それを必要とする個体において免疫応答を生じさせる方法は、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物の治療的有効量を個体に投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象の癌を治療する方法は、ＰＴＣリードスルーを促進する治療有効量の化合物を個体に投与することを含む。
【０１２８】
ＰＴＣを有するｍＲＮＡのリードスルーを促進することができる任意の化合物は、本方法での使用に適する。現在までに、哺乳類細胞で活性のあるほとんどの報告されたＰＴＣリードスルー化合物は、抗生物質のアミノグリコシドクラスに属していた。特定の種類のアミノグリコシドは、ほぼ同種の転移ＲＮＡ（ｔＲＮＡ）によるランダムなアミノ酸の挿入を介して、リボソームにＰＴＣ変異をリードスルーさせることができる。アミノグリコシドの治療の可能性は、嚢胞性線維症などのさまざまな遺伝的モデルについて研究室で評価される。いくつかの実施形態では、ＰＴＣリードスルー化合物は、アタルレン（以前はＰＴＣ１２４として知られる）である。
【０１２９】
いくつかの態様において、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物は、式ＩＶの１，２，４−オキサジアゾール安息香酸化合物：
【化４】
2020525434.tif 000007
またはそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ体または立体異性体の混合物を含む、薬学的に許容される塩、水和物、包接化合物、プロドラッグ、多形体、立体異性体であり、
Ｚは、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換複素環、置換または非置換アリールアルキルであり、
Ｒ１は水素、置換または非置換アルキル、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、−（ＣＨ２ＣＨ２）ｎＯＲ６または任意の生体加水分解性基であり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、独立して、水素、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルキニル、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＯＣＨＦ２、ＣＮ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲ７、ＳＯ２Ｒ７、ＮＯ２、ＮＨ２、またはＮ（Ｒ７）２であり；
Ｒ７の各出現は、独立して、水素、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルキニル；置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ハロゲンまたはＣＦ３であり；及び
ｎは１〜７の整数である。
【０１３０】
さらなる態様において、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物は、３−［５−（２−フルオロフェニル）−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル］安息香酸である。
【０１３１】
特定の態様において、本明細書に開示される方法で使用するためのＰＴＣリードスルーを促進するための化合物は：
【化５】
2020525434.tif 000008
である。
【０１３２】
いくつかの態様において、本明細書に開示される方法のいずれかにおける使用に適したＰＴＣリードスルーを促進する化合物は、これらに限定されないが、アミカシン、Ｇ４１８（ジェネティシン）、ゲンタマイシン、またはパロモマイシンなどのアミノグリコシドである。他の実施形態において、ＰＴＣリードスルー化合物は、これらに限定されないが、ＮＢ５４、ＮＢ７４、ＮＢ８４、またはＴＣ００７などのアミノグリコシド誘導体である。さらなる実施形態では、ＰＴＣリードスルーを促進するための化合物は、これらに限定されないが、ネガマイシンまたはタイロシンなどの非アミノグリコシドである。
【０１３３】
さらなる態様において、本明細書に開示される方法で使用するためのＰＴＣリードスルーを促進するための化合物は：
【化６】
2020525434.tif 000009
である。
【０１３４】
本明細書に開示される方法での使用に適したさらなるＰＴＣリードスルー薬には、限定されるものではないが、イセパマイシン、トブラマイシン、ＲＴＣ＃１、ＲＴＣ＃２、ＲＴＣ＃３、ＲＴＣ＃４、ＲＴＣ＃７、ＲＴＣ＃９、ＲＴＣ＃１０、ＲＴＣ＃１１、ＲＴＣ＃１６、ＲＴＣ＃１７、クリトシン、マクロライドスピラマイシン、マクロライドジョサマイシン、マクロライドタイロシン、ＮＢ３０、ストレプトマイシン、ハイグロマイシン、プロミコン、リビドマイシン、ＴＣ００１、ＴＣ００３、ＴＣ０３２、ＪＬ０２２、ＪＬ０２３、ハイグロマイシンＢ、カナマイシンＡ、カナマイシンＢおよびその「ＪＬ」誘導体、ネオマイシンおよびその「ＴＣ」誘導体、パロアミンおよびその合成誘導体、パロモマイシンおよびその「ＮＢ」誘導体、またはオレアンドミコン、ネガマイシン、シソマイシン、ガラミン、２−デオキシストレプタミン、ゲンタマイシン、ゲンタマイシンＢ１、ゲンタマイシンＣ１、ゲンタマイシンＣ１ａ、ゲンタマイシンＣ２、ゲンタマイシンＣ２ａ、およびゲンタマイシンＣ２ｂを含む。
【０１３５】
さらに他の実施形態では、本明細書に開示される方法で使用するためのＰＴＣリードスルーを促進するための化合物は、これらに限定されないが、
【化７】
2020525434.tif 000010
のようなネガマイシン誘導体であり得る。
【０１３６】
いくつかの実施形態では、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物は、式Ｖ：
【化８】
2020525434.tif 000011
である。
【０１３７】
式中：
Ａ１はＣ、ＣＨまたはＮであり、
ＶおよびＸは、ＮまたはＣから独立して選択され、
ＷはＮ、Ｃ、またはＣＨから選択され、
ここで、Ｖ、Ｗ、またはＸの少なくとも１つはＮであり、ＷがＮである場合、ＶまたはＸの少なくとも１つもＮであり；
ＹおよびＺは、Ｎ、Ｃ、Ｃ−Ｒｃ、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓから独立して選択され、ＲｃはＨ、ＣＨ３、またはＮＨ２であり、ただし、ＹまたはＺの一方がＣ＝ＯまたはＣ＝Ｓである場合、他方はＮＨ、Ｓ、またはＯから選択することもでき、
Ｒ１は、カルボキシ、シアノ、またはＣ１−Ｃ４アルコキシ基で任意に置換されたカルボニル基であり、
Ｒ２は不在またはニトロであり、
Ａｒ１は、Ｒ基で任意に置換されたＣ１〜Ｃ４アルキルであり；任意に１、２または３個の独立して選択されるＲ基で置換されているＣ６からＣ１０アリール；任意に１、２または３個の独立に選択されたＲ基で置換されている５〜１０員の複素環；Ａｒ２およびＡｒ１およびＡｒ２が結合する複素環と一緒に、Ａｒ１−２から選択される環構造を形成し、または、Ａｒ３およびＡｒ１およびＡｒ３が結合する複素環と共に、Ａｒ１−３から選択される環構造を形成し、
Ａｒ２は存在しないか、またはＡｒ１およびＡｒ１およびＡｒ２が結合する複素環と一緒になって、Ａｒ１−２から選択される環構造を形成し、
Ａｒ３は存在しないか、またはＡｒ１およびＡｒ１およびＡｒ３が結合している複素環と一緒になって、Ａｒ１−３から選択される環構造を形成し、
Ａｒ４は存在しないか、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、またはＣ１−Ｃ４チオアルキルであり、これらのいずれもＡ１と一緒に４から７員の炭素環または複素環を形成し、
Ｒは水素であり；ａ−Ｒａグループ、または、２つのＲ基（Ｒはオキシ基を含んでも良い）は、それらが結合しているフェニルまたは複素環と一緒になって、ＲＲから選択される環構造を形成し；
式中：
Ａｒ１−２およびＡｒ１−３は、１つ以上のハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルキル基、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル基、ハロゲンで任意に置換されたＣ１−Ｃ４アルコキシ基で任意に置換された１１〜１４員のヘテロ三環式環構造から選択され、または、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ基、Ｃ１−Ｃ４ハロアルコキシ基、またはＣ１−Ｃ４アルキル基で置換されたカルボニル基で置換されていても良いアミノ基であり、
ＲＲは、１つ以上のハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルキル基、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル基、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ基、オキソ基、またはＣ１−Ｃ４ハロアルコキシ基で任意に置換された９〜１０員の二環式環構造であり、
Ｒａは、以下からなる群から選択される；ヒドロキシ基；ハロゲン；任意に１つ以上の独立して選択されたハロゲンまたはヒドロキシ基で置換されたＣ１−Ｃ４アルキル；任意に１つ以上の独立して選択されたハロゲンまたはフェニル基で置換されたＣ１−Ｃ４アルコキシ；１つ以上の独立して選択されたＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換されたＣ４−Ｃ８シクロアルキル；−Ｒｂグループ；−Ｏ−Ｒｂグループ；任意に１つ以上の独立して選択されるＣ１−Ｃ４アルキル、オキソ、または−Ｒｂ基で置換されている４〜６員の複素環；２つの環構造を有する９〜１０員の複素環；ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、またはＣ１−Ｃ４アルコキシ基で任意に置換されたカルボニル；１または２個のＣ１−Ｃ４アルキル基で任意に置換されたカルバモイル；ニトロ基；シアノ基；ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、または−Ｒｂ基で任意に置換されたチオ；ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、または−Ｒｂ基で任意に置換されたスルホニル；または、アミノスルホニル基がヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、または−Ｒｂ基で置換されていても良い１つまたは２つの独立して選択されるＣ１−Ｃ４アルキル、スルホニル、またはカルボニル基で置換されていても良い、アミノ、およびアミノカルボニル基Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル、ベンゾキシ、または−Ｒｂ基で置換されていても良く、アミノ基で置換されていても良く、
−Ｒｂは、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ４アルキル基、Ｃ１−Ｃ４ハロアルキル基、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ基、または任意に１つ以上のＣ１−Ｃ４アルキル基で置換されたアミノ基であり；
またはその化合物の薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、クラスレート、ラセミ体、立体異性体、または多形であり、
【０１３８】
いくつかの実施形態では、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物は、
【化９】
2020525434.tif 000012
によって表され、
式中：
Ａは窒素または炭素であり、炭素はアリールまたはヘテロアリール基、アルキルまたは置換アルキル、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル、官能化アルキルまたはアリール（またはヘテロアリール）基で置換され、
Ｂは窒素または炭素であり、炭素は非置換であるか、ハロ、擬ハロ、アルキル、アルコキシ、またはチオアルコキシ基で置換され、
Ｄは窒素または炭素であり、炭素は非置換であるか、ハロ、擬ハロ、アルキル、アルコキシ、またはチオアルコキシ基で置換され、
Ｒ１は、任意のアリールまたはヘテロアリール基、任意のアルキルまたは置換アルキル、任意のアリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル、任意の官能化アルキルまたはアリール（またはヘテロアリール）基であり、
Ｒ２はメチレン単位（ＣＨ２）ｎで、ｎは１、２、または３であり、または炭素原子または炭素原子または複素環のいずれかの３〜１０原子の環の原子であり、
Ｒ３は、任意のアリールまたはヘテロアリール基、任意のアルキルまたは置換アルキル、任意のアリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル、任意の官能化アルキルまたはアリール（またはヘテロアリール）基、ヒドロキシ、アルコキシ、または−ＮＲ６Ｒ６ａであり、
Ｒ４は、任意のアリールまたはヘテロアリール基、アルキルまたは置換アルキル、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル、官能化アルキルまたはアリール（またはヘテロアリール）基であり、
Ｒ５は任意の、アリールまたはヘテロアリール基、アルキルまたは置換アルキル、アリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル、官能化アルキルまたはアリール（またはヘテロアリール）基、または−ＮＲ５ａＲ５ｂであり、
Ｒ５ａは水素またはアルキルであり、
Ｒ５ｂは、アルキル、アルコキシアルキル、アルケニル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、またはヘテロアリールアルキルであり、アリールおよびヘテロアリールは、単独でまたはアリールアルキルおよびヘテロアリールアルキルの一部として、アルキル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシ、およびアルコキシから独立して選択される１、２、または３個の基で任意に置換され、
Ｒ６は水素またはアルキルであり、
Ｒ６ａは、−ＮＨＣ（Ｏ）（アリールアルキル）、アルキル、ヒドロキシアルキル、シクロアルキル、ヘテロアリール、またはアリールであり、アリール、アリールアルキル、およびヘテロアリールは、ヒドロキシ、ハロ、ハロアルキル、アルキル、アルコキシ、カルボキシ、またはアルコキシカルボニルから選択される１、２、または３個の基で任意に置換され、
Ｘは、酸素、硫黄、ＮＨまたはＮ置換であり、及び
Ｙは、酸素、硫黄、ＮＨまたはＮ−置換基、または置換または非置換の炭素からなる群から選択され、及び
Ｚは、酸素、硫黄、ＮＨまたはＮ置換であり、または
薬学的に許容されるその塩である。
【０１３９】
いくつかの態様において、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物は式ＶＩ：
【化１０】
2020525434.tif 000013
またはそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ体または立体異性体の混合物を含む、薬学的に許容される塩、水和物、包接化合物、プロドラッグ、多形体、立体異性体、によって表され、、
Ｚは、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換ヘテロ環、置換または非置換アリールアルキル、またはアリールオキシアルキルであり、及び、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４は独立してＨまたはＯＨであり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３またはＸ４の少なくとも１つはＯＨである。
【０１４０】
特定の態様において、Ｚは置換アリールである。別の実施形態において、Ｚはハロ置換アリールである。別の実施形態において、Ｚはフルオロ置換アリールである。別の実施形態において、Ｚは置換フェニルである。別の実施形態において、Ｚはハロ置換フェニルである。別の実施形態において、Ｚはフルオロ置換フェニルである。
【０１４１】
いくつかの態様において、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物は式ＶＩＩ：
【化１１】
2020525434.tif 000014
またはその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、包接化合物、ラセミ体または立体異性体、によって表され、
Ｚは、置換または非置換アルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロ、置換または非置換アリールアルキル、置換または非置換ヘテロアリールアルキル、置換または非置換シクロアルキルアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキル、置換または非置換アリールカルボニルであり、
ＸはＣＨ２、Ｏ、ＳまたはＮＨであり、
Ｒ１は水素、置換または非置換アルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロ、置換または非置換アリールアルキル、置換または非置換ヘテロアリールアルキル、置換または非置換シクロアルキルアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキルであり、
Ｒ２は置換または非置換のアルキル、カルボキシ、アミド、アシル、アルキルカルボニル、ハロゲン、生物加水分解性基、ＯＰ（Ｏ）３２−、Ｏ［Ｐ（Ｏ）３］２３−、Ｏ［Ｐ（Ｏ）３］３４−、Ｎ３、ＣＨ２−ＮＲ６Ｒ７またはＣＨ２−ＯＲ６であり、
Ｒ３、Ｒ３'、Ｒ４、およびＲ４'は、出現ごとに独立して、ＯＲ７、ＯＲ８、水素、ハロゲン、置換または非置換アルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロ、置換または非置換であるアリールアルキル、置換または非置換ヘテロアリールアルキル、置換または非置換シクロアルキルアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキル、置換または非置換アリールカルボニル、置換または非置換アルキルカルボニル、生加水分解性基、またはＲ３とＲ４が一緒になって結合、またはＲ３とＲ４が原子と結合それらが結合している置換または非置換ヘテロシクロ、またはＲ３およびＲ３'および／またはＲ４およびＲ４'は、それらが結合している炭素と一緒になってＣ（＝Ｏ）を形成し、及び
Ｒ６、Ｒ７およびＲ８は、各出現において独立して、水素、置換または非置換アルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロ、置換または非置換アリールアルキル、置換または非置換ヘテロアリールアルキル、置換または非置換であるシクロアルキルアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキル、置換または非置換アリールカルボニル、置換または非置換アルキルカルボニル、生加水分解性基、またはＲ３とＲ４がそれらが結合している原子と一緒になって置換または非置換ヘテロシクロを形成する。
【０１４２】
いくつかの態様において、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物は式ＶＩＩＩ：
【化１２】
2020525434.tif 000015
によって表され、
式中、
ＸはＮ、ＣＲ８または無水塩基Ｎ＋Ｒ８を表し、
式中、Ｒ８は水素原子、ヒドロキシル基またはフェニル基で任意に置換されたアルキル基またはメトキシ基を表し、好ましくはＲ８は水素原子を表し、
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は独立して、水素原子またはハロゲン原子、または任意に置換されたアルキル、アミン、アルケン、エステル、スルホンアミド、メトキシまたはトリフルオロメトキシなどのエーテル基、またはベンジル基を表し、
Ｒ５は、水素原子または置換されても良い飽和または不飽和アルキル基、アミン、ベンジル基を表し、
Ｒ６は、置換されても良いＣ１−Ｃ３アルキル基、好ましくはメチルまたはエチル基を表し、より好ましくはＲ６はメチル基を表し、
Ｒ７は、水素原子または置換されても良いＣ１−Ｃ３アルキル基を表し、環Ａがｂ位にある場合、Ｒ７は存在せず、
Ｒ９およびＲ１０は一緒に炭素結合を表すか、独立して水素原子、Ｒ１１、ＯＲ１１、ＳＲ１１、ＮＲ１１Ｒ１２基を表し、
式中、Ｒ１１およびＲ１２は独立して、水素原子、酸素原子、置換されても良い飽和または不飽和のＣ１−Ｃ３アルキル基を表し、１つ以上の硫黄、酸素または窒素原子を含んでも良く、好ましくは、Ｒ１１および／またはＲ１２が置換アルキル基を表す場合、アルキル基はハロゲン、好ましくはフッ素で置換される。
【０１４３】
いくつかの態様において、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物は式ＩＸ：
【化１３】
2020525434.tif 000016
によって表され、
式中、Ｒ１はＣ１−１０アルキルを表し；Ｒ２およびＲ３は、水素原子および置換基を有しても良いＣ１−１０アルキルから独立して選択され；Ｒ４およびＲ５は、水素原子およびＣ１−１０アルキルから独立して選択され；Ｘ１は、カルボキシ、置換基を有しても良い低級アルコキシカルボニル、置換基を有しも良いカルバモイル、または置換基を有しても良いヒドラジノカルボニルを表す。
【０１４４】
ある態様において、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物は式Ｘ：
【化１４】
2020525434.tif 000017
またはそれらのエナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ体または立体異性体の混合物を含む、薬学的に許容される塩、水和物、包接化合物、プロドラッグ、多形体、立体異性体、によって表し、
Ｘは酸素、硫黄、ＣＯ、ＳＯまたはＳ（Ｏ）２であり、
Ｙは酸素または硫黄であり、
Ｚは、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、置換または非置換シクロアルキルであり、
ｎは０〜４の整数であり、
Ｒ１は水素、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルキニルであり、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、ＳＯ２Ｒ７、ＣＦ３、ＣＮ、ＣＯＯＨ、ＣＯＲ７、またはＣＯＯＲ７であり、
Ｒ０は水素であるか、またはＲ１およびそれらが結合している原子と一緒になって、置換されても良い５〜７員の複素環またはヘテロアリール環を形成し、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、独立して、水素、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルキニルであり、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ハロゲン、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＯＣＨＦ２、ＣＮ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲ７、ＳＯ２Ｒ７、ＮＯ２、ＮＨ２Ｎ（Ｒ７）２であり、
Ｒ６は、水素、置換または非置換アルキル、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、または任意の生体加水分解性基であり、及び
Ｒ７の各出現は、独立して、水素、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルキニルであり；置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、ハロゲンまたはＣＦ３であり、
ただし、ＸがＯ、ＹがＯ、ｎが０、Ｒ１が水素の場合、Ｚは４−クロロフェニル、４−メチルフェニル、３−クロロフェニル、または２，４−ジクロロフェニルではなく、ただし、ＸがＯ、ＹがＯ、ｎが０、Ｒ１が水素、Ｚが非置換フェニルである場合、Ｒ２〜Ｒ５の少なくとも１つは水素ではなく、ただし、Ｒ３がＣＯＯＨの場合、Ｒ２、Ｒ４、およびＲ５はすべてハロゲンではない。
【０１４５】
いくつかの態様において、以下の化合物は、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物：
【化１５】
2020525434.tif 000018
またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、多形、水和物、エステル、異性体、立体異性体、または互変異性体を表し、
Ｗは−ＮＲａＲｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４、−Ｃ（Ｏ）ＮＲａＲｂ、または−ＨｅｔＡｒであり、
ＡはＣ（Ｏ）からＷへの結合、−（ＣＨ２）ｆＣＨ（Ｒ１）（ＣＨ２）ｇ−、−（ＣＨ２）ｆＣ（ＲａＲｂ）（ＣＨ２）ｇ−、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｈ（ＣＨ２）ｔ−、−（ＣＨ２）ｔ（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｈ−、−（ＣＨ２）ｔＮ（Ｒｅ）ＣＨ２ＣＨ２Ｚ、または
【化１６】
2020525434.tif 000019
または、代わりに、ＡとＷを組み合わせて、
【化１７】
2020525434.tif 000020
を形成し、
Ｒ１は、−Ｈ、−（ＣＨ２）ｎＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＦ３、−ＣＨ２（Ａｒ）、−ＣＨ２（ＨｅｔＡｒ）、−ＣＨ２Ｓ（Ｏ）ｍＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２Ｓ（Ｏ）ｍＣＨ３、−ＣＨ２（ＣＨ２）ｎＮＲｅＲｄ、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ（ＣＨ３）ＯＨ、または−（ＣＨ２）ｔＣＯＯＨであり、
Ｒ２は−Ｈ、−ＣＨ３、−ＯＨ、または−ＣＦ３であり、
ＲａおよびＲｂはそれぞれ独立してＲｅである。または、代替として、ＲａおよびＲｂは、それらが結合している窒素または炭素原子と一緒になって、Ｏ、ＮＲｇ、およびＳ（Ｏ）ｍから選択される追加のヘテロ原子を任意に含む４〜７員環の複素環を形成し、
Ｒｃは−Ｈ、−ＣＨ３、−（ＣＨ２）ｎＣＨ３、−ＣＨ（Ｒ２）ＣＨ３、−ＣＨ２−ピリジル、またはＣＨ２−イミダゾリルであり、
Ｒｄは−Ｈ、−ＣＨ３、または−（ＣＨ２）ｎＣＨ３であり、または、ＲｃおよびＲｄは、それらが結合する窒素原子と一緒になって、Ｏ、ＮＲｅ、およびＳ（Ｏ）ｍから選択される追加のヘテロ原子を任意に含む４〜７員の複素環を形成し、
各Ｒｅは独立して、−Ｈ、−（ＣＨ２）ｎＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＲ３、またはＣＨ２ＨｅｔＡｒであり、各Ｒｇは、独立して、−Ｈ、−（ＣＨ２）ｎＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ３、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｐＲ３、−ＣＨ２−フェニル、またはＦ、Ｃｌ、−で任意に置換された−ＣＨ２−フェニルであるＣＨ３、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、またはＨｅｔＡｒであり、
各Ｒ３は独立して−Ｈ、−ＣＨ３、−ＯＨ、または−ＣＦ３であり、あるいは、各Ｒ３は独立して−Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ２−ＯＨ、または−ＣＦ３であり、
各Ｒ４は独立して−Ｈまたは−（ＣＨ２）ｎＮＲｃＲｄであり、
各ＨｅｔＡｒは、独立して、ピリジル、ピリミジル、Ｃ−イミダゾリルおよびＮ−イミダゾリルから場合により選択されるヘテロアリール基であり、
ＤはＣＨまたはＮであり、
Ｑは、−Ｏ−、−ＮＲａ−、−Ｓ（Ｏ）ｍ−、または−ＣＨ−Ｗ−であり、
各ｋは独立して１、２、３または４であり、
各ｕは独立して１、２または３であり、
各ｖは独立して１、２または３であり、
各ｐは独立して１または２であり、
各ｆは独立して０、１または２であり、
各ｇは独立して０、１または２であり、
各ｈは独立して１または２であり。
各ｎは独立して０、１、２、３、または４であり、
各ｍは独立して０、１または２であり、
ｑ１およびｑ２はそれぞれ独立して０、１、２、または３であり、
各ｓは独立して０、１、２、または３であり、及び
各ｔは独立して０、１、２、または３である。
【０１４６】
ある態様において、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物は式ＸＩ：
【化１８】
2020525434.tif 000021
またはその薬学的に許容される塩、水和物、包接化合物、多形、プロドラッグまたは立体異性体によって表され、
ＸはＣ（＝Ｏ）、Ｃ（＝Ｓ）、Ｓ，Ｓ（＝Ｏ）またはＳ（Ｏ）２であり、
Ｙは、置換または非置換アルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロであり、
Ｒは水素、置換または非置換アルキル、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロ、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、置換または非置換アリールアルキル、置換または非置換ヘテロアリールアルキル、置換または非置換シクロアルキルアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキルであり、
ｎは０〜４の範囲の整数であり、
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立して、水素、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルキニル、−（ＣＨ２）ｍ−Ｗ、カルボキシアルキル、アルキルカルボニル、アルキルオキシアルキル、アルキルオキシカルボニル、アリールアルキル、スルホニル、アミドまたはＲ１およびＲ２であり、それらが結合する原子は、置換されても良い５−７員の複素環、置換されても良い５−７員のヘテロアリール環、またはＲ１およびＲ２が一緒になり：
【化１９】
2020525434.tif 000022
Ｗは、各出現において独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシ、カルボキシ、アルデヒド、ＮＨ２、ＮＲ１４Ｒ１４'ニトロ、シクロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキルであり；
（ｉ）Ｒ''およびＲ１４'の各出現は、水素、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルキニル、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換から独立して選択される非置換ヘテロアリールまたはＣＦ３；または（ｉｉ）Ｒ１４およびＲ１４'は、それらが結合している窒素原子と一緒になり、１〜３がヘテロ原子である５〜８の環原子を含む任意に置換された複素環を形成し、
ｍは１〜４の範囲の整数であり、
Ｒ３−Ｒ６は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルキニル、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロ、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、置換または非置換アリールアルキル、置換または非置換ヘテロアリールアルキル、置換または非置換シクロアルキルアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキル、アルキルアミノ、アミノアルキル、アルコキシ、アリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、シクロアルコキシ、ヘテロシクロアルキルオキシ、アミド、ハロアルキル（例、ＣＦ３）、ハロアルコキシ（例、ＯＣＦ３またはＯＣＨＦ２）、ＯＨ、ＣＮ、ＣＯＯＨ、ＣＯＯＲ１５、ＳＯ２Ｒ１５、ＮＯ２、ＮＨ２、またはＮＲ１４Ｒ１４'およびＲ１５は、水素、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルキニル、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキル、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリールまたはＣＦ３から選択される。
【０１４７】
ある態様において、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物は式ＸＩＩ：
【化２０】
2020525434.tif 000023
その立体異性体、薬学的に許容される塩、酸化物、溶媒和物、またはエステル、ここで：
Ａは以下−Ｏ−、−ＣＲ１１＝ＣＨ−、−Ｓ−、−ＣＨＲ１２ＮＨ−、−ＮＲ１３−、置換または非置換Ｃ３−８シクロアルキレン、置換または非置換アリーレン、置換または非置換ヘテロシクリレン、Ａの置換基がハロゲンからなる群から選択される置換または非置換ヘテロアリーレン、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ（Ｏ）、ＮＨ２、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、−ＣＯＯＨで置換されたＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ４−７シクロアルキルアルキル、および単環式アリールからなる群から選択され、
Ｂは、以下−Ｏ−、−ＣＲ１４＝ＣＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−、−Ｎ＝ＣＨ−、置換または非置換Ｃ３−８シクロアルキレン、置換または非置換アリーレン、置換または非置換ヘテロシクリレン、および置換または非置換ヘテロアリーレンから成るグループから選択される。ここで、Ｂの置換基は、ハロゲン、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ（Ｏ）、ＮＨ２、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、−ＣＯＯＨで置換されたＣ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ４−７シクロアルキルアルキル、および単環式アリールからなる群から選択され、
Ｌ１からＬ４は、以下−Ｓ０−１−Ｃ１−６アルキレン−Ｓ０−１−、−Ｓ０−１−Ｃ２−４アルケニレン−Ｓ０−１−、−Ｓ０−１−Ｃ２−４アルキニレン−Ｓ０−１−、および−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−、および−ＮＨ−から成るグループから独立して選択され、
ＸはＣまたはＮであり、
ＺはＣ、Ｏ、またはＳであり、
ＹはＣまたは不在であり、
Ｒ１はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ＯＲ１６、Ｃ（Ｏ）ＮＲ１７Ｒ１８、ＮＲ１９Ｃ（Ｏ）Ｒ２０であり；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ＯＲ１６、ＮＯ２、Ｃ（Ｏ）Ｎ１７Ｒ１８、ＮＲ１９Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、窒素、硫黄、及び酸素からなる群から選択される１−５個のヘテロ原子を含むヘテロシクリルまたはヘテロアリールであり、
Ｒ３はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ハロゲン、ＯＲ１６、Ｃ（Ｏ）ＮＲ１７Ｒ１８、Ｃ（Ｏ）ＯＲ１６、ＮＲ１９Ｃ（Ｏ）Ｒ２０であり、
Ｒ４は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ＯＲ１６、Ｃ（Ｏ）ＯＲ１６、Ｃ（Ｏ）ＮＲ１７Ｒ１８、ＮＲ１９Ｃ（Ｏ）Ｒ１６、窒素、硫黄、及び酸素からなる群から選択される１−５個のヘテロ原子を含むヘテロアリールであり、
Ｒ５はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ハロゲン、ＯＲ１６、Ｃ（Ｏ）ＯＲ１６であり、
Ｒ６は、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ハロゲン、ＯＲ１６、ＮＲ１７Ｒ１８、窒素、硫黄、及び酸素からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含むヘテロアリールまたはヘテロシクリルであり、Ｎ＝ＮＲ１５であり、
Ｒ７はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ハロゲン、ＯＲ１６、ＮＯ２、ＮＲ１９Ｃ（Ｏ）Ｒ２０、Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１７Ｒ１８であり、
Ｒ８はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ハロゲン、ＯＲ１６、ＮＲ１９Ｃ（Ｏ）Ｒ２０であり、
Ｒ９はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ハロゲン、ＮＯ２、ＯＲ１６、Ｓ（Ｏ）２ＮＲ２１Ｒ２２であり、
Ｒ１０はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、ハロゲン、ＮＲ１７Ｒ１８、ＯＲ１６であり、
Ｒ１からＲ１０はそれぞれ、ハロゲン、−ＯＨ、−ＯＲ２１、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２１、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２１、Ｃ（Ｏ）ＮＲ２１Ｒ２２、−ＮＨＲ２１、−ＮＲ２１Ｒ２２、−ＳＲ２１、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２１、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２１、ＮＨ２、ＣＮ、ＮＯ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ４−７シクロアルキルアルキル、単環式または多環式アリール、からなる群から選択される置換基で１から３回置換されても良く、および窒素、硫黄および酸素からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含む単環式または多環式ヘテロアリール、ならびに任意にオキシ置換され、
Ｒ１１はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、ＮＲ１９Ｃ（Ｏ）Ｒ２０であり；
Ｒ１２はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ３−６アルキニル、Ｃ（Ｏ）ＯＲ１６であり、
Ｒ１３はＮＨＮＨであり、
Ｒ１４はＣ（Ｏ）ＯＲ２１であり、
Ｒ１０とＲ１２は結合して−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−基を形成でき、
Ｒ１３とＲ１５は結合して−Ｎ−Ｎ＝Ｎ−基を形成することができ、
Ｒ１５からＲ２２は独立してＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ４−７シクロアルキルアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、カルボキシ、単環式または多環式アリール、または単環式または多環式ヘテロシクリルまたは、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含むヘテロアリール、各Ｒ１５〜Ｒ２２は、ハロゲン、オキシ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、−Ｃ（Ｏ）、ＮＨ２、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ４−７シクロアルキルアルキル、Ｃ１−６アルキルで置換されたＯ−アリール、１〜５個の酸素、硫黄、または窒素ヘテロ原子を有するＣ（Ｏ）ＮＨＣＨ２−ヘテロシクリル、酸素、硫黄、または窒素ヘテロ原子からなる群から選択される１〜５個のヘテロ原子を含むヘテロアリール、−Ｓ−Ｃ１−６アルキル、および単環式アリールからなる群から選択される置換基で１〜３回置換されても良い。
Ｒ２１およびＲ２２は結合して、窒素、硫黄、および酸素からなる群より選択される１〜５個のヘテロ原子をそれぞれ含む３〜７員の単環式または多環式ヘテロ環または単環式または多環式ヘテロアリールを形成することができ、ハロゲン、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、ＮＨ２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ４−７シクロアルキルアルキルからなる群から選択される置換基で１から３回置換されている、単環式アリール、および単環式ヘテロアリール、及び
薬学的に許容される担体であり得る。
【０１４８】
本発明で使用するためのＰＴＣリードスルーを促進するのに適した他の化合物は、米国特許出願公開第２０１５／０２７４６７４、２０１５／００５１２５１、２０１３／０２１７７１７、２０１２／００８７８９６、２０１１／００４６１３６、２０１１／０００３８４３、２０１０／００９３８６７、２００８／０２０７５３８、２００７／０２０３１２３、２００６／０１６６９２６、２００６／０１６７２６３；国際出願公開番号ＷＯ２０１５／１３４７１１、ＷＯ２０１５／１０９２４８、ＷＯ２０１３／１４２３４６、ＷＯ２０１２／０１６９３０、ＷＯ２００８／１０１９３５、ＷＯ２００４／００９５５８、ＷＯ２００４／００９６１０、ＷＯ２００４／００９５３３、およびＷＯ２０１４／０５５６４４、及び米国特許第８，１６３，７８２号および第６，９９２，０９６号に見出すことができ、これらのそれぞれの開示は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１４９】
いくつかの実施形態において、対象の癌を治療する方法は、本明細書に開示される少なくとも１つの免疫チェックポイントタンパク質を阻害する分子と組み合わせて、本明細書に開示されるＰＴＣリードスルーを促進する化合物を投与することを含む。いくつかの実施形態において、この方法は、ＰＴＣリードスルーを促進する治療有効量の化合物および少なくとも１つのチェックポイント阻害剤の治療有効量を投与することを含む。
【０１５０】
いくつかの態様において、方法は、抗−ＰＤ−１抗体と組み合わせてＰＴＣリードスルーを促進する化合物を投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせてＰＴＣリードスルーを促進する化合物を投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせてＰＴＣリードスルーを促進する化合物を投与することを含む。いくつかの実施形態では、この方法は、抗−ＰＤ−１および抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせてＰＴＣリードスルーを促進する化合物を投与することを含む。いくつかの実施形態において、方法は、抗−ＰＤ−Ｌ１および抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせてＰＴＣリードスルーを促進する化合物を投与することを含む。
【０１５１】
いくつかの態様において、個体に投与されるＰＴＣリードスルーを促進するための化合物の量は、以下の範囲：約０．５〜約５ｍｇ／ｋｇ、約５〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約１０〜約１５ｍｇ／ｋｇ、約１５〜約２０ｍｇ／ｋｇ、約２０〜約２５ｍｇ／ｋｇ、約２０〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約２５〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約５０〜約７５ｍｇ／ｋｇ、約５０〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約７５〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約１００〜約１２５ｍｇ／ｋｇ、約１２５〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、約１５０〜約１７５ｍｇ／ｋｇ、約１７５〜約２００ｍｇ／ｋｇ、約２００〜約２２５ｍｇ／ｋｇ、約２２５〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、約２５０〜約３００ｍｇ／ｋｇ、約３００〜約３５０ｍｇ／ｋｇ、約３５０〜約４００ｍｇ／ｋｇ、約４００から約４５０ｍｇ／ｋｇ、または約４５０から約５００ｍｇ／ｋｇいずれかに含まれる。
【０１５２】
いくつかの態様において、チェックポイント阻害剤は、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１．３ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１１ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１３ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１６ｍｇ／ｋｇ、１７ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、１９ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２１ｍｇ／ｋｇ、２２ｍｇ／ｋｇ、２３ｍｇ／ｋｇ、２４ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、２６ｍｇ／ｋｇ、２７ｍｇ／ｋｇ、２８ｍｇ／ｋｇ、２９ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３１ｍｇ／ｋｇ、３２ｍｇ／ｋｇ、３３ｍｇ／ｋｇ、３３．３ｍｇ／ｋｇ、３４ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ、３６ｍｇ／ｋｇ、３７ｍｇ／ｋｇ、３８ｍｇ／ｋｇ、３９ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、４１ｍｇ／ｋｇ、４２ｍｇ／ｋｇ、４３ｍｇ／ｋｇ、４４ｍｇ／ｋｇ、４５ｍｇ／ｋｇ、４６ｍｇ／ｋｇ、４７ｍｇ／ｋｇ、４８ｍｇ／ｋｇ、４９ｍｇ／ｋｇ、または５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【０１５３】
好ましい態様において、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＣＴＬＡ−４に対する抗体は、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１１ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１３ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１６ｍｇ／ｋｇ、１７ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、１９ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２１ｍｇ／ｋｇ、２２ｍｇ／ｋｇ、２３ｍｇ／ｋｇ、２４ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、２６ｍｇ／ｋｇ、２７ｍｇ／ｋｇ、２８ｍｇ／ｋｇ、２９ｍｇ／ｋｇ、または３０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。投与量は、寛解するまで毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、毎週、２週間ごと、３週間ごと、４週間ごとなどである。
【０１５４】
いくつかの態様において、それを必要とする個体において免疫応答を生じさせる方法は、ＮＭＤ複合体を阻害する化合物の治療的有効量を個体に投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象の癌を治療する方法は、ＮＭＤ複合体を阻害する化合物の治療的有効量を個体に投与することを含む。
【０１５５】
本明細書で使用する「ＮＭＤ分解複合体」という語句は、ＰＴＣ（ＵＰＦ１、ＵＰＦ２、ＵＰＦ３、ＵＰＦ３ＢＩ、ＲＮＰＳ１、ｅＩＦ４ＡＩＩＩ、ＭＬＮ５１、Ｙ１４／ＭＡＧＯＨヘテロダイマー、ＲＥＮＴ１、ＲＥＮＴ２、ＳＭＧ−１、ＳＭＧ−５、ＳＭＧ−６および／またはＳＭＧ−７の１つ以上などが含まれるが、これらに限定されない）を持つｍＲＮＡのＮＭＤに関与する細胞内タンパク質のいずれか１つを指す。そのようなものとして、化合物は１つまたは複数のＮＭＤ分解複合体タンパク質の機能を阻害し、それによりＰＴＣ保有ｍＲＮＡがポリペプチドに翻訳されることを可能にする。
【０１５６】
候補化合物は、限定するものではないが、小分子化学化合物（上記の小分子のいずれかなど）、抗体、タンパク質、またはそれらの任意の組み合わせであり得る。
【０１５７】
ある態様において、ＮＭＤ複合体の阻害剤は式ＸＩＩＩの化合物：
【化２１】
2020525434.tif 000024
であり、
式中、
Ｒ１は（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、
Ｒ２は（Ｃ１−Ｃ１０）直鎖または分岐アルキル、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルまたはフェノキシ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルであり、フェノキシ基は置換または非置換フェノキシで置換され、及び
Ｒ３は水素または薬理学的に許容される塩である。
【０１５８】
ある態様において、ＮＭＤ複合体の阻害剤は式ＸＩＶの化合物：
【化２２】
2020525434.tif 000025
であり、
式中、ＸはＮ、Ｓ、Ｓ＝Ｏ、Ｓ（＝Ｏ）２またはＣＲ３Ｒ４であり、
ＡおよびＢはそれぞれ独立してＣＲ５Ｒ６であるか、一緒になってＣＲ７＝ＣＲ８であり、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、ニトロ、シアノ、硫酸、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルキニル、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロ、置換または非置換アリールアルキル、置換または非置換ヘテロアリールアルキル、置換または非置換シクロアルキルアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキル、アルコキシ、アルキルチオエーテル、カルボキシアルキル、カルボニルアルキル、アミノ、ＮＲ９Ｒ９'、アミド、またはアルコキシカルボニルであり、
Ｒ７およびＲ８は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、ニトロ、シアノ、スルフェート、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルキニル、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換非置換ヘテロシクロ、置換または非置換アリールアルキル、置換または非置換ヘテロアリールアルキル、置換または非置換シクロアルキルアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキル、アルコキシ、アルキルチオエーテル、カルボキシアルキル、カルボニルアルキル、アミノ、ＮＲ９Ｒ９'、アミド、またはアルコキシカルボニル；または、一緒になって、置換または非置換アリール、ヘテロシクロまたはヘテロアリール環を形成し、及び
Ｒ９およびＲ９'は、それぞれ独立して、水素、置換または非置換アルキル、置換または非置換アルケニル、置換または非置換アルキニル、置換または非置換アリール、置換または非置換ヘテロアリール、置換または非置換シクロアルキル、置換または非置換ヘテロシクロ、置換または非置換アリールアルキル、置換または非置換ヘテロアリールアルキル、置換または非置換シクロアルキルアルキル、置換または非置換ヘテロシクロアルキル、ここで、置換基は、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アロイル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヒドロキシ、アルコキシ、アルキルチオエーテル、シクロアルキルオキシ、ヘテロシクロオキシ、オキソ、アルカノイル、アリール、アリールアルキル、アルキルアリール、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、アルキルヘテロアリール、アリールオキシ、アルカノイルオキシ、アミノ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アリールアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、ヘテロシクロアミノ、一または二置換アミノ、アルカノイラミンｏ、アロイルアミノ、アラルカノイルアミノ、アルカノイルアミノ、アリールアミノ、アラルカノイルアミノ、チオール、アルキルチオ、アリールチオ、アリールアルキルチオ、シクロアルキルチオ、ヘテロシクロチオ、アルキルチオノ、アリールチオノ、アリールアルキルチオノ、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリールアルキルスルホニル、スルホンアミド、ニトロ、シアノ、カルボキシ、カルバミル、アルコキシカルボニル、グアニドヘテロシクロアルキルからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で独立して置換される。
【０１５９】
ＮＭＤ複合阻害剤の他の非限定的な例には以下が含まれる：
【化２３】
2020525434.tif 000026
【０１６０】
ある態様において、化合物は、阻害性核酸（アンチセンスオリゴヌクレオチドまたは低分子阻害性ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）などであるが、これらに限定されない）ではない。別の実施形態では、化合物は、米国特許出願公開第２０１３／０２２４２３７号に開示されている化合物のいずれかである。
【０１６１】
本発明の実施形態は、ナンセンス媒介減衰経路に関連する分子の発現および機能を調節する標的特異的ドメインおよび少なくとも１つのドメインを含むマルチドメイン分子の生成を含む。
【０１６２】
患者を治療する方法は、治療有効量のマルチドメイン生物活性分子の投与を含む。好ましい実施形態では、マルチドメイン分子は、オリゴヌクレオチド、例えば、干渉ＲＮＡ（ＲＮＡｉ）を生体内の目的の細胞に特異的に標的化するために、腫瘍間質中の細胞（例えば内皮細胞、線維芽細胞または免疫細胞など）に結合する細胞結合リガンドを含む。細胞結合リガンドは、例えばインテグリン、グルコース調節タンパク質７８、ニューロピリン、成長因子受容体など、例えば、ＶＥＧＦ受容体、およびオリゴヌクレオチドは、ナンセンス媒介崩壊経路および関連分子の阻害に特異的である標的細胞によって発現される特定の産物に対して生成される。ナンセンス媒介減衰経路の阻害により、既存の抗原の上方制御および／または標的細胞および／または標的細胞の抗原性の誘導または増強をもたらす新規抗原の以前に発現されていない新しい抗原の誘導が可能になる最終的に免疫系による破壊につながる。
【０１６３】
他の実施形態では、インビボで患者のナンセンス介在性崩壊（ＮＭＤ）経路を阻害する組成物は、腫瘍間質の少なくとも１つの腫瘍細胞標的または正常細胞標的に特異的に結合する少なくとも１つの第１ドメインおよび少なくとも１つのナンセンス媒介減衰経路の分子成分に特異的な第二ドメインを含む。ここで、第二ドメインは、アンチセンスオリゴヌクレオチド分子、ペプチド、タンパク質、核酸、有機または無機分子を含み、ナンセンス媒介減衰経路を阻害する。
【０１６４】
いくつかの態様において、第二ドメインのオリゴヌクレオチド分子は、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、マイクロ干渉ＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、小さな一時的なＲＮＡ（ｓｔＲＮＡ）、短い、ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、またはその組み合わせの少なくとも１つを含む。
【０１６５】
いくつかの態様において、第２ドメインのオリゴヌクレオチド分子は、ＲＥＮＴ１、ＲＥＮＴ２、ｅＩＦ４Ａ、ＵＰＦ１、ＵＰＦ２、ＵＰＦ３Ｂ、ＲＮＰＳ１、Ｙ１４、ＭＡＧＯＨ、ＮＭＤ１、ＳＭＧ、またはそれらの組み合わせを有する少なくとも１つを含むＮＭＤ経路に関連する少なくとも１つの因子の機能および／または発現を阻害する。
【０１６６】
いくつかの態様において、第１ドメインは、所望の任意の標的に特異的または選択的に結合する。好ましくは、標的は腫瘍細胞標的、正常細胞標的、腫瘍間質中の細胞またはそれらの組み合わせである。好ましくは、第１ドメインは、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ−２）、Ｔｉｅ２；フィブロネクチン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン、線維芽細胞抗原、線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）、グルコース調節タンパク質７８（ＧＲＰ７８）、間質由来因子１（ＳＤＦ−１）、ＭＣＰ−１、ＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１β、ＲＡＮＴＥＳ、エキソタキシンＩＬ−８、Ｃ３ａ、Ｐ−セレクチン、Ｅ−セレクチン、ＬＦＡ−１、ＶＬＡ−４、ＶＬＡ−５、ＣＤ４４、ＭＭＰ活性化、ＶＥＧＦ、ＥＧＦ、ＰＤＧＦ、ＶＣＡＭ、ＥＣＡＭ、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＳＣＦ、ＥＰＯ、テネイシン、ニューロフィリン、ＭＡｄＣＡＭ−１、ニューロピリン−１、α４インテグリン、α５インテグリン、またはベータデフェンシン３および４を有する腫瘍または正常細胞標的に特異的に結合する。
【０１６７】
いくつかの局面において、１つ以上のＮＭＤ分解複合体タンパク質（ＵＰＦ１、ＵＰＦ２、ＵＰＦ３、ＵＰＦ３ＢＩ、ＲＮＰＳ１、ｅＩＦ４ＡＩＩＩ、ＭＬＮ５１、Ｙ１４など）に結合する（優先的に結合するなど）化合物／ＭＡＧ０Ｈヘテロダイマー、ＲＥＮＴ１、ＲＥＮＴ２、ＳＭＧ−１、ＳＭＧ−５、ＳＭＧ−６および／またはＳＭＧ−７）は抗体である。一部の実施形態では、抗体はＮＭＤ分解複合体タンパク質アンタゴニストであり、ＮＭＤを阻害することができる。
【０１６８】
抗体の変異体は、抗体の活性に実質的に影響を与えることなく、当技術分野で知られている情報に基づいて作成することもできる。例えば、抗体変異体は、抗体分子内の少なくとも１つのアミノ酸残基が異なる残基で置き換えられる可能性がある。抗体の場合、置換変異誘発に最も関心のある部位には一般に超可変領域が含まれるが、フレームワーク領域（ＦＲ）の変更も考えられる。
【０１６９】
抗体の場合、１つのタイプの置換変異体は、親抗体（例えば、ヒト化抗体またはヒト抗体）の１つまたは複数の超可変領域残基の置換を伴う。一般に、さらなる開発のために選択された結果として生じる変異体は、それらが生成される親抗体と比較して改善された生物学的特性を有するだろう。そのような置換変異体を生成する便利な方法は、ファージディスプレイを使用した親和性成熟を伴う。簡単に説明すると、いくつかの超可変領域部位（６−７部位など）を突然変異させて、各部位で可能なすべてのアミノ酸置換を生成する。このようにして生成された抗体は、各粒子内にパッケージされたＭ１３の遺伝子ＩＩＩ産物への融合物として繊維状ファージ粒子から提示される。次いで、ファージディスプレイされた変異体は、本明細書に開示されるように、それらの生物学的活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。修飾のための候補超可変領域部位を識別するために、アラニンスキャニング突然変異誘発を実行して、抗原結合に著しく寄与する超可変領域残基を識別することができる。
【０１７０】
抗体のアミノ酸配列変異体をコードする核酸分子は、当技術分野で公知の様々な方法により調製することができる。これらの方法には、天然源からの単離（天然に存在するアミノ酸配列変異体の場合）またはオリゴヌクレオチド媒介（または部位特異的）突然変異誘発、ＰＣＲ突然変異誘発、および初期に準備された抗体のバリアントまたは非バリアントバージョンカセット突然変異誘発による調製が含まれるが、これらに限定されない。
【０１７１】
本発明の免疫グロブリンポリペプチドのＦｃ領域に１つ以上のアミノ酸修飾を導入し、それによりＦｃ領域変異体を生成することが望ましい場合がある。Ｆｃ領域変異体は、ヒンジシステインのアミノ酸位置を含む１つ以上のアミノ酸位置にアミノ酸修飾（例えば、置換）を含むヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４  Ｆｃ領域）を含み得る。
【０１７２】
いくつかの側面において、１つ以上のＮＭＤ分解複合体タンパク質（ＵＰＦ１、ＵＰＦ２、ＵＰＦ３、ＵＰＦ３ＢＩ、ＲＮＰＳ１、ｅＩＦ４ＡＩＩＩ、ＭＬＮ５１、Ｙ１４など）に結合する（優先的に結合するなど）化合物／ＭＡＧＯＨヘテロダイマー、ＲＥＮＴ１、ＲＥＮＴ２、ＳＭＧ−１、ＳＭＧ−５、ＳＭＧ−６および／またはＳＭＧ−７）は、非抗体結合ポリペプチドである。いくつかの実施形態では、非抗体結合ポリペプチドはＮＭＤ分解複合体タンパク質アンタゴニストであり、ＮＭＤを阻害することができる。
【０１７３】
結合ポリペプチドは、既知のポリペプチド合成方法論を使用して化学的に合成するか、組換え技術を使用して調製および精製することができる。結合ポリペプチドは通常、長さが少なくとも約５アミノ酸、あるいは少なくとも約６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、または１００であるアミノ酸以上の長さであり、ＮＭＤ分解複合体の任意の成分などの標的に結合することができるそのような結合ポリペプチドがここで議論される。
【０１７４】
いくつかの実施形態において、対象の癌を治療する方法は、本明細書に開示される少なくとも１つの免疫チェックポイントタンパク質を阻害する分子と組み合わせて、本明細書に開示されるＮＭＤ複合体を阻害する化合物を投与することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、治療有効量のＮＭＤ複合体阻害剤と治療有効量の少なくとも１つのチェックポイント阻害剤を投与することを含む。
【０１７５】
いくつかの態様において、方法は、抗−ＭＤ−１抗体と組み合わせてＮＭＤ複合体を阻害する化合物を投与することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、抗−ＰＤ−Ｌ１抗体と組み合わせてＮＭＤ複合体を阻害する化合物を投与することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせてＮＭＤ複合体を阻害する化合物を投与することを含む。いくつかの実施形態において、方法は、抗−ＰＤ−１および抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせてＮＭＤ複合体を阻害する化合物を投与することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、抗−ＰＤ−Ｌ１および抗−ＣＴＬＡ−４抗体と組み合わせてＮＭＤ複合体を阻害する化合物を投与することを含む。
【０１７６】
いくつかの態様において、個体に投与されるＮＭＤ複合体を阻害する化合物の量は、以下の範囲：約０．５〜約５ｍｇ／ｋｇ、約５〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約１０〜約１５ｍｇ／ｋｇ、約１５〜約２０ｍｇ／ｋｇ、約２０〜約２５ｍｇ／ｋｇ、約２０〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約２５〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約５０〜約７５ｍｇ／ｋｇ、約５０〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約７５〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約１００〜約１２５ｍｇ／ｋｇ、約１２５〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、約１５０〜約１７５ｍｇ／ｋｇ、約１７５〜約２００ｍｇ／ｋｇ、約２００〜約２２５ｍｇ／ｋｇ、約２２５〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、約２５０〜約３００ｍｇ／ｋｇ、約３００〜約３５０ｍｇ／ｋｇ、約３５０〜約４００ｍｇ／ｋｇ、約４００から約４５０ｍｇ／ｋｇ、または約４５０から約５００ｍｇ／ｋｇのいずれかに含まれる。
【０１７７】
いくつかの実施形態では、チェックポイント阻害剤は、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１．３ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１１ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１３ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１６ｍｇ／ｋｇ、１７ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、１９ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２１ｍｇ／ｋｇ、２２ｍｇ／ｋｇ、２３ｍｇ／ｋｇ、２４ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、２６ｍｇ／ｋｇ、２７ｍｇ／ｋｇ、２８ｍｇ／ｋｇ、２９ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３１ｍｇ／ｋｇ、３２ｍｇ／ｋｇ、３３ｍｇ／ｋｇ、３３．３ｍｇ／ｋｇ、３４ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ、３６ｍｇ／ｋｇ、３７ｍｇ／ｋｇ、３８ｍｇ／ｋｇ、３９ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、４１ｍｇ／ｋｇ、４２ｍｇ／ｋｇ、４３ｍｇ／ｋｇ、４４ｍｇ／ｋｇ、４５ｍｇ／ｋｇ、４６ｍｇ／ｋｇ、４７ｍｇ／ｋｇ、４８ｍｇ／ｋｇ、４９ｍｇ／ｋｇ、または５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【０１７８】
好ましい態様において、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＣＴＬＡ−４に対する抗体は、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１１ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１３ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１６ｍｇ／ｋｇ、１７ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、１９ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２１ｍｇ／ｋｇ、２２ｍｇ／ｋｇ、２３ｍｇ／ｋｇ、２４ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、２６ｍｇ／ｋｇ、２７ｍｇ／ｋｇ、２８ｍｇ／ｋｇ、２９ｍｇ／ｋｇ、または３０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。投与量は、寛解するまで毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、毎週、２週間ごと、３週間ごと、４週間ごとなどである。
【０１７９】
いくつかの態様において、癌を有する対象を治療する方法は、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物の治療的有効量を投与することを含んでも良い。いくつかの実施形態では、癌を有する対象を治療する方法は、ＮＭＤ複合体を阻害する治療有効量の化合物を投与することを含み得る。いくつかの実施形態では、癌を有する対象を治療する方法は、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物とＮＭＤ複合体を阻害する化合物の組み合わせを投与することを含んでも良い。一部の実施形態では、癌を有する対象を治療する方法は、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物とＮＭＤ複合体を阻害する化合物の組み合わせを投与すること、および本明細書に開示される少なくとも１つのチェックポイント阻害剤をさらに投与することを含み得る。
【０１８０】
いくつかの態様において、本明細書で提供されるのは、それを必要とする個体において免疫応答を生成するための方法および／または異常細胞の表面上の１つ以上の新生抗原の発現を誘導する方法である。ＮＭＤは、真核細胞における進化的に保存されたｍＲＮＡ監視経路であり、早期終止コドン（ＰＴＣ）を内包するｍＲＮＡを検出および除去する。理論に縛られることを望まないが、腫瘍細胞でＮＭＤが阻害されるときの遺伝子発現のアップレギュレーションは、治療的に有用な腫瘍抗原性の増強、すなわち、新製品が有効な腫瘍抗原として機能し、免疫応答を誘発できる腫瘍拒絶に貢献する。阻害は、上記のＰＴＣリードスルーおよびＮＭＤ分解複合体の阻害を促進する化合物の一方または両方の有効量を、それを必要とする個体に投与することにより達成される。一実施形態では、ＰＴＣリードスルーおよびＮＭＤ分解複合体の阻害後にｍＲＮＡから翻訳されたタンパク質は非機能性タンパク質である。有効量は、以下および本明細書で説明される機能性をもたらし得る。
【０１８１】
いくつかの態様において、個体に投与されるＰＴＣリードスルーを促進する化合物の量およびＮＭＤ複合体を阻害する化合物の量は、以下：約０．５〜約５ｍｇ／ｋｇ、約５〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約１０〜約１５ｍｇ／ｋｇ、約１５〜約２０ｍｇ／ｋｇ、約２０〜約２５ｍｇ／ｋｇ、約２０〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約２５〜約５０ｍｇ／ｋｇ、約５０〜約７５ｍｇ／ｋｇ、約５０〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約７５〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約１００〜約１２５ｍｇ／ｋｇ、約１２５〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、約１５０〜約１７５ｍｇ／ｋｇ、約１７５〜約２００ｍｇ／ｋｇ、約２００〜約２２５ｍｇ／ｋｇ、約２２５〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、約２５０〜約３００ｍｇ／ｋｇ、約３００〜約３５０ｍｇ／ｋｇ、約３５０から約４００ｍｇ／ｋｇ、約４００から約４５０ｍｇ／ｋｇ、または約４５０から約５００ｍｇ／ｋｇの範囲のいずれかに含まれる。いくつかの実施形態では、個体（例えば、単位剤形）に投与される治療有効量のテロメラーゼ阻害剤の量は、約５ｍｇから約５００ｍｇの範囲、例えば約３０ｍｇから約３００ｍｇ、または約５０ｍｇから約２００ｍｇまたは約１０ｍｇから約１００ｍｇの範囲である。
【０１８２】
一部の実施形態では、チェックポイント阻害剤は、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１．３ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１１ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１３ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１６ｍｇ／ｋｇ、１７ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、１９ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２１ｍｇ／ｋｇ、２２ｍｇ／ｋｇ、２３ｍｇ／ｋｇ、２４ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、２６ｍｇ／ｋｇ、２７ｍｇ／ｋｇ、２８ｍｇ／ｋｇ、２９ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３１ｍｇ／ｋｇ、３２ｍｇ／ｋｇ、３３ｍｇ／ｋｇ、３３．３ｍｇ／ｋｇ、３４ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ、３６ｍｇ／ｋｇ、３７ｍｇ／ｋｇ、３８ｍｇ／ｋｇ、３９ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、４１ｍｇ／ｋｇ、４２ｍｇ／ｋｇ、４３ｍｇ／ｋｇ、４４ｍｇ／ｋｇ、４５ｍｇ／ｋｇ、４６ｍｇ／ｋｇ、４７ｍｇ／ｋｇ、４８ｍｇ／ｋｇ、４９ｍｇ／ｋｇ、または５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【０１８３】
好ましい態様において、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＣＴＬＡ−４に対する抗体は、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１１ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１３ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１６ｍｇ／ｋｇ、１７ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、１９ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２１ｍｇ／ｋｇ、２２ｍｇ／ｋｇ、２３ｍｇ／ｋｇ、２４ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、２６ｍｇ／ｋｇ、２７ｍｇ／ｋｇ、２８ｍｇ／ｋｇ、２９ｍｇ／ｋｇ、または３０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。投与量は、寛解するまで毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、毎週、２週間ごと、３週間ごと、４週間ごとなどである。
【０１８４】
さらなる実施形態において、本明細書に開示される方法のいずれかによる、アンレキサノクス、ＰＴＣリードスルー化合物、ＮＭＤ複合体阻害剤、およびチェックポイント阻害剤を含む１つ以上の化合物による治療は、本明細書に開示される化合物で治療されていない腫瘍と比較した場合の腫瘍サイズの少なくとも約１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３３．３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８、９９％、または１００％の減少となった。
【０１８５】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法のいずれかによる、アンレキサノクス、ＰＴＣリードスルー化合物、ＮＭＤ複合阻害剤、およびチェックポイント阻害剤を含む１つ以上の化合物による治療は、本明細書に開示される化合物で治療されていない腫瘍のＴ細胞応答と比較した場合、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ３＋、および／またはＣＤ４５＋エフェクターＴ細胞応答（例えば、腫瘍内Ｔ細胞浸潤）のいずれかの少なくとも約１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２１％、２２％、２３％、２４％、２５％、２６％、２７％、２８％、２９％、３０％、３１％、３２％、３３％、３３．３％、３４％、３５％、３６％、３７％、３８％、３９％、４０％、４１％、４２％、４３％、４４％、４５％、４６％、４７％、４８％、４９％、５０％、５１％、５２％、５３％、５４％、５５％、５６％、５７％、５８％、５９％、６０％、６１％、６２％、６３％、６４％、６５％、６６％、６７％、６８％、６９％、７０％、７１％、７２％、７３％、７４％、７５％、７６％、７７％、７８％、７９％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％を示す。
【０１８６】
一実施形態では、ＰＴＣリードスルー阻害剤はアタルレン（ＰＴＣ１２４）であり、ナンセンス媒介減衰を阻害する化合物はＮＭＤＩ１４である。別の実施形態において、ＰＴＣリードスルー阻害剤（例えば、アタルレン）およびナンセンス媒介性崩壊を阻害する化合物（例えば、ＮＭＤＩ１４）は、ＰＤ−１に対する抗体と組み合わせて投与される。別の実施形態では、ＰＴＣリードスルー阻害剤（例えば、アタルレン）及びナンセンス媒介性崩壊を阻害する化合物（例えば、ＮＭＤＩ１４）は、ＣＴＬＡ−４に対する抗体と組み合わせて投与される。さらなる実施形態では、ＰＴＣリードスルー阻害剤（例えば、アタルレン）とナンセンス媒介性崩壊を阻害する化合物（例えば、ＮＭＤＩ１４）と、免疫チェックポイントタンパク質を阻害する単一の化合物（例えば、抗−ＰＤ）との組み合わせ−１抗体または抗−ＣＴＬＡ−４抗体）は、免疫チェックポイントタンパク質を阻害する２つ以上の化合物の組み合わせ（例えば、抗−ＰＤ−１の組み合わせ）と比較して、腫瘍成長の阻害において有効またはより有効である抗体および抗−ＣＴＬＡ−４抗体）のみ阻害する。
【０１８７】
エピジェネティック調節化合物
本明細書に開示する方法のいずれかのいくつかの態様において、方法は、１つまたは複数の後成的調節化合物の投与をさらに含む。本明細書で使用される「後成的」とは、染色体および遺伝子に細胞で課される物理的変化を指し、変化はＤＮＡの機能および染色体内の遺伝子に影響し、遺伝子におけるＤＮＡのヌクレオチド配列を変化させないことを意味する。エピジェネティックな変調の代表例には、メチル化やアセチル化などのＤＮＡの共有化学修飾、およびＤＮＡ−ＤＮＡのスーパーコイリングやヒストンなどの染色体タンパク質との結合の非共有結合および非化学修飾が含まれるが、これらに限定されない。エピジェネティックな変化の結果の代表的な非限定的な例には、ＲＮＡのレベルの増加または減少が含まれ、それによって特定の遺伝子によって生成されるタンパク質産物、および／または転写因子が遺伝子プロモーターに結合する方法の変化が含まれる。
【０１８８】
本発明の方法で使用するのに適したエピジェネティック調節化合物には、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤、アゾシチジン、ＢＥＴ阻害剤、ＥＺＨ２阻害剤、および／またはｄｏｔｌＬの１つまたは複数が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、エピジェネティック調節化合物は、ボリノスタット（メルク）、ロミデプシン（セルジーン）、デシタビン（大塚）、及び５−アゾシチジン（セルジーン）、パノビノスタット（ノバルティス）、またはベリノスタット（スペクトル）のうちの１つ以上である。
【０１８９】
癌治療
本発明の方法は、アジュバント環境で実施することができる。「アジュバント設定」とは、個人が増殖性疾患、特に癌の病歴を有し、一般に（必ずしもではないが）治療で治療された臨床設定を指し、これには、手術、放射線療法、および／または化学療法を含む。ただし、増殖性疾患の病歴があるため、これらの個人はその疾患を発症するリスクがあると考えられているか、検出可能な疾患および／または微視的な疾患を抱えている可能性がある。「アジュバント設定」での治療または投与は、その後の治療モードを指す。
【０１９０】
本明細書で提供される方法は、「ネオアジュバント設定」で実施することもでき、すなわち、この方法は、一次／決定的療法の前に実施することができる。いくつかの側面では、個人は以前に治療されている。他の側面では、個人は以前に治療されてない。一部の態様では、治療は第一選択療法である。
【０１９１】
いくつかの態様では、本明細書に記載の方法のいずれかは、それを必要とする個体への治療有効量の抗癌療法の投与を含む。本明細書で使用される場合、抗癌療法の「治療有効量」または「治療有効用量」は、有益なまたは所望の結果をもたらすのに十分な量である。治療用途の場合、有益または望ましい結果には、がんに起因する１つ以上の症状の軽減、がんに苦しむ人々の生活の質の向上、がんの治療に必要な他の薬物の用量の減少、ターゲティングのような別の薬物の効果の強化、病気の進行の遅延、及び／または生存期間の延長などの臨床結果が含まれる。有効投与量は、１回以上の投与で投与することができる。本発明の目的のために、抗癌療法の有効用量は、直接的または間接的に治療的処置を達成するのに十分な量である。臨床の文脈で理解されているように、抗癌療法の治療的有効量は、別の抗癌療法と組み合わせて達成される場合とされない場合がある。
【０１９２】
いくつかの態様において、本明細書に記載の治療方法のいずれかは、１つまたは複数の追加の抗癌療法を個体に投与することをさらに含むことができる。さまざまな種類の抗がん剤を使用できる。非限定的な例には、放射線療法、アルキル化剤（シスプラチン、カルボプラチン、またはオキサリプラチンなど）、代謝拮抗薬（アザチオプリンまたはメルカプトプリンなど）、アントラサイクリン、植物アルカロイド（ビンカアルカロイド（ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビンなど）またはビンデシン）およびタキサン（パクリタキセル、タキソール、またはドセタキセルなど））、トポイソメラーゼ阻害剤（カンプトテシン、イリノテカン、トポテカン、アムサクリン、エトポシド、エトポシドリン酸、またはテニポシドなど）、ポドフィロトキシン（およびエトポシドなど及びテニポシドなどの誘導体）、抗体（例、モノクローナルまたはポリクローナル）、チロシンキナーゼ阻害剤（例、メシル酸イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（商標登録）またはＧｌｉｖｅｃ（商標登録）））、ホルモン治療、可溶性受容体および他の抗腫瘍薬（例、ダクチノマイシン、ドキソルビシン、エピルビシン、ブレオマイシン、メクロレタミン、シクロホスファミド、クロラムブシル、またはイホスファミド）が含まれる。
【０１９３】
Ｔ細胞アゴニスト
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの態様において、方法は、Ｔ細胞を活性化する１つまたは複数の化合物の投与をさらに含む。これらは通常アゴニスト抗体であり、多くの場合、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体スーパーファミリーおよびＢ７−ＣＤ２８スーパーファミリーのメンバーなどの免疫共刺激分子を対象とする。本発明での使用に適したＴ細胞アゴニストの非限定的な例には、ＣＤ２７のアクチベーター（例えば、ＣＤＸ−１１２７（Ｃｅｌｌｄｅｘ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ））、ＧＩＴＲ、Ｂ７−Ｈ３、ＣＤ２８（例えば、ＴＧＮ１４１２）、ＣＤ４０、インターロイキン−２受容体サブユニットベータ（ＩＬＲ２Ｐ；別名ＣＤ１２２；たとえばＮＫＴＲ−２１４）、ＣＤ１３７（別名ＴＮＦＲＳＦ９、４−１ＢＢ、およびリンパ球活性化（ＩＬＡ）により誘導）、ＩＣＯＳ、および／またはＯＸ４０（別名ＣＤ１３４およびＴＮＦＲＳＦ４；ＭＥＤＩ０５６２、ＭＥＤＩ６４６９、およびＭＥＤＩ６３８３（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ））が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、免疫共刺激分子は、ＯＸ４０−ＩｇＧなどのＩｇ融合タンパク質でもあり得る。
【０１９４】
分子アジュバント
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの態様において、方法は、１つまたは複数の分子アジュバントの投与をさらに含む。本明細書で使用される「分子アジュバント」は、樹状細胞を活性化する薬剤を含むがこれらに限定されない免疫応答を増強する分子を指す。分子アジュバントには、タンパク質、脂質、核酸、炭水化物、または樹状細胞がその占有により細胞内シグナル伝達および抗原提示細胞表現型の変化をもたらす受容体を有する化合物を含み得るが、これに限定されず、結果として生じる免疫応答の量または質の改善をもたらす。分子アジュバントの非限定的な例には、ＴＮＦ受容体スーパーファミリーのアゴニスト、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）リガンド、および細胞内ＤＮＡセンサーアゴニストが含まれる。
【０１９５】
分子アジュバントとしてのＴＮＦＲアゴニスト
ＴＮＦＲスーパーファミリーには、樹状細胞、マクロファージ、およびＴ細胞上の多くの重要な受容体が含まれています。例えば、分化のクラスター４０（ＣＤ４０）は、抗原提示細胞に見られる共刺激タンパク質であり、その活性化に必要である。ＴＨ細胞上のＣＤ１５４（ＣＤ４０Ｌ）のＣＤ４０への結合は、抗原提示細胞を活性化し、さまざまな下流効果を誘発する。ＣＤ４０Ｌは、ＤＣ上のＣＤ８０およびＣＤ８６の発現を強力にアップレギュレートし、ＣＤ４＋Ｔ細胞をＴｈ１細胞に向かって分化させる。
【０１９６】
分子アジュバントとして重要な可能性があることが示される他のＴＮＦＲアゴニストには、４−１ＢＢ、ＣＤ３０、ヘルペスウイルス侵入メディエーター、ＣＤ４０、ＣＤ２７、ＯＸ４０、およびグルココルチコイド誘発ＴＮＦＲ関連タンパク質（ＧＩＴＲ）が含まれるが、これらに限定されず、そのリガンドは４−１ＢＢＬ、ＣＤ３０Ｌ、ＬＩＧＨＴ、ＣＤ２７Ｌ／ＣＤ７０、ＧＩＴＲＬ、およびＩＣＯＳである。
【０１９７】
ＴＬＲアゴニスト
本明細書で使用される「トール様受容体」（または「ＴＬＲ」）という用語は、微生物産物を感知し、および／または適応免疫応答を開始するタンパク質のＴｏｌｌ様受容体ファミリーのメンバーまたはその断片を指す。一実施形態では、ＴＬＲは樹状細胞（ＤＣ）を活性化する。Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）は、微生物病原体を認識する自然免疫系のセンサーとして最初に特定されたパターン認識受容体のファミリーである。ＴＬＲは、ロイシンリッチリピートの外部ドメイン、膜貫通ドメイン、および細胞内ＴＩＲ（Ｔｏｌｌ／ＩＬ−ＩＲ）ドメインを含む保存された膜貫通分子のファミリーを構成する。ＴＬＲは、「ＰＡＭＰ」（病原体に関連する分子パターン）と呼ばれることが多い微生物の異なる構造を認識する。ＴＬＲへのリガンド結合は、炎症と免疫に関与する因子の産生を誘導する細胞内シグナル伝達経路のカスケードを呼び出す。
【０１９８】
ヒトでは、１０個のＴＬＲが特定される。細胞の表面で発現されるＴＬＲにはＴＬＲ−１、−２、−４、−５、および−６が含まれるが、ＴＬＲ−３、−７／８、および−９はＥＲコンパートメントで発現される。ヒト樹状細胞サブセットは、異なるＴＬＲ発現パターンに基づいて特定できる。例として、ＤＣ（ｍＤＣ）の骨髄または「従来の」サブセットは、刺激されるとＴＬＲ１〜８を発現し、活性化マーカーのカスケード（ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＭＨＣクラスＩおよびＩＩ、ＣＣＲ７）、炎症誘発性サイトカイン、ケモカインが生成される。この刺激と結果として生じる発現の結果は、抗原特異的ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞プライミングである。これらのＤＣは、抗原を取り込み、適切な形でＴ細胞に提示する能力を強化する。対照的に、ＤＣの形質細胞様サブセット（ｐＤＣ）は、活性化時にＴＬＲ７とＴＬＲ９のみを発現し、ＮＫ細胞とＴ細胞の活性化をもたらす。死にかけている腫瘍細胞はＤＣ機能に悪影響を及ぼす可能性があるため、ＴＬＲアゴニストでＤＣを活性化することは、癌治療の免疫療法アプローチにおける抗腫瘍免疫の準備に有益である可能性が示唆される。また、放射線と化学療法を使用した乳癌の治療を成功させるには、ＴＬＲ４の活性化が必要であることが示唆される。
【０１９９】
当技術分野で公知であり、本発明で使用されるＴＬＲアゴニストには、以下：Ｐａｍ３Ｃｙｓ、ＴＬＲ−１／２アゴニスト、ＣＬＲ、ＴＬＲ−２アゴニスト、ＴＬＲ−２アゴニストであるＭＡＬＰ２、Ｐａｍ２Ｃｙｓ、ＴＬＲ−２アゴニスト、ＴＳＬ−２アゴニストであるＦＳＬ−１、ＴＬＲ−２アゴニストであるＨｉｂ−ＯＭＰＣ、ポリリボシン：ポリリボシチジン酸（ポリＩ：Ｃ）、ＴＬＲ−３アゴニスト、ＴＬＲ−３アゴニストであるポリアデノシン−ポリウリジル酸（ポリＡＵ）、ポリ−Ｌ−リジンおよびＴＬＲ−３アゴニストであるカルボキシメチルセルロース（Ｈｉｌｔｏｎｏｌ（商標登録））で安定化されたポリイノシン−ポリシチジル酸、ＴＬＲ−４アゴニストであるモノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）、ＬＰＳ、ＴＬＲ−４アゴニスト、細菌フラジェリン、ＴＬＲ−５アゴニスト；シアリル−Ｔｎ（ＳＴｎ）、多くのヒト癌細胞のＭＵＣ１ムチンに関連する炭水化物およびＴＬＲ−４アゴニスト、ＴＬＲ−７アゴニストであるイミキモド、ＴＬＲ−７／８アゴニストであるレシキモド、ロキソリビン、ＴＬＲ−７／８アゴニスト、および非メチル化ＣｐＧジヌクレオチド（ＣｐＧ−ＯＤＮ）、ＴＬＲ−９アゴニストが含まれるが、これらに限定されない。
【０２００】
細胞内ＤＮＡセンサーアゴニスト
ｃＧＡＳ−ＳＴＩＮＧ経路は、サイトゾルＤＮＡの存在を検出し、それに応じて炎症性遺伝子の発現を誘発するように機能する自然免疫系のコンポーネントである。ＤＮＡは通常、細胞の核にある。ＤＮＡのサイトゾルへの局在は、腫瘍形成またはウイルス感染に関連する。ｃＧＡＳ−ＳＴＩＮＧ経路は、サイトゾルＤＮＡを検出し、免疫応答を誘導するように作用する。
【０２０１】
ＤＮＡと結合すると、タンパク質サイクリックＧＭＰ−ＡＭＰシンターゼ（ｃＧＡＳ）はＡＭＰとＧＭＰの二量体化を引き起こし、サイクリックＧＭＰ−ＡＭＰ（ｃＧＡＭＰ）を形成する。ｃＧＡＭＰおよび他の環状ジヌクレオチドは、インターフェロン遺伝子の刺激因子（ＳＴＩＮＧ）に結合し、ＴＢＫ１をトリガーして、１型ＩＦＮ応答を誘導する下流転写因子ＩＲＦ３をリン酸化し、ＳＴＡＴ６は、ＩＲＦ３とは独立してＣＣＬ２やＣＣＬ２０などのケモカインを誘導する（Ｂｕｒｄｅｔｔｅ  ｅｔ  ａｌ．、２０１１、Ｎａｔｕｒｅ  ４７８、５１５−１８）。ＳＴＩＮＧによって活性化されたシグナル伝達経路は、サイトゾルに異所性ＤＮＡを持つ細胞への自然免疫応答を誘発するために結合する。ＳＴＩＮＧ活性の喪失は、マウス胚性線維芽細胞が特定のウイルスによる感染と戦う能力を阻害し、より一般的には、導入されたサイトゾルＤＮＡに対する１型ＩＦＮ応答に必要である。
【０２０２】
ＤＮＡは、ワクチンによってコードされる抗原に対する免疫応答を高める強力なアジュバントであることが示す。ｃＧＡＭＰは、ＳＴＩＮＧのＩＲＦ３活性化を通じて、インターフェロンの転写を刺激する。これにより、ｃＧＡＭＰは炎症反応を促進できる潜在的なワクチンアジュバントとなる。ニワトリ抗原である卵白アルブミン（ＯＶＡ）をｃＧＡＭＰと組み合わせてエンコードしたワクチンは、ｉｎ  ｖｉｖｏでＳＴＩＮＧ依存的に抗原特異的ＴおよびＢ細胞を活性化できることが研究により示す。ＯＶＡペプチドで刺激した場合、ＯＶＡ＋ｃＧＡＭＰを接種したマウスのＴ細胞は、ＯＶＡのみを投与した動物と比較して、ＩＦＮ−ｇおよびＩＬ−２が上昇することが示された。さらに、ユニークな２'−５'ホスホジエステル結合により、ｃＧＡＭＰの安定性が向上しているため、ｉｎ  ｖｉｖｏでの用途に適したＤＮＡのアジュバントとなる可能性がある。
【０２０３】
マイクロ環境変調器
本明細書に開示される方法のいずれかの他の実施形態では、方法は、１つまたは複数の微小環境調節剤の投与をさらに含む。「微小環境調節剤」とは、腫瘍の成長をサポートする免疫抑制性の腫瘍微小環境を生成できる因子を指す。そのような調節剤の１つは、チェックポイントタンパク質としても同定されたインドールアミン（２，３）−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）である（上記参照）。ＩＤＯは、必須アミノ酸トリプトファンを分解する代謝経路の最初のステップで作用する２つのアイソフォーム（ＩＤＯ１およびＩＤＯ２）を持つ酵素である。ＩＤＯは、免疫系のエフェクターＴ細胞をシャットダウンすることにより、免疫調節効果を発揮する。ＩＤＯ発現は、免疫反応の終了時にＴ細胞媒介性免疫を遮断することが主な機能であるＴ細胞のサブセットである調節性Ｔ細胞も直接活性化する。
【０２０４】
別の微小環境調節剤は、トリプトファン２，３−ジオキシゲナーゼ（ＴＤＯ）である。ＴＤＯは、人体のトリプトファンフラックスの生理学的調節において中心的な役割を果たす。それは、キヌレニン経路に沿ったトリプトファン分解の最初の律速段階を触媒し、それによって全身のトリプトファンレベルを調節する。トリプトファン２，３−ジオキシゲナーゼは、かなりの割合のヒト腫瘍で発現することが示される。同じ研究で、腫瘍によるトリプトファン２，３−ジオキシゲナーゼ発現は、免疫マウスによる拒絶を防いだ。グループによって開発されたトリプトファン２，３−ジオキシゲナーゼ阻害剤は、これらのマウスがトリプトファン２，３−ジオキシゲナーゼ発現腫瘍を拒否する能力を回復し、トリプトファン２，３−ジオキシゲナーゼ阻害剤が癌治療に潜在性を示すことを示す。
【０２０５】
本発明の方法での使用に適した他の微小環境調節剤には、ＩＤＯ、ＴＤＯ、ＣＤ７３、ＣＯＸ２阻害剤、ＣＤ３９阻害剤、およびＡ２Ａ受容体アゴニスト、ならびにＣＤ７３、ＣＤ３９、およびＡ２Ａ受容体に対する抗体が含まれる。
【０２０６】
ケモカイン受容体拮抗薬
本明細書に開示される方法のいずれかのさらに他の実施形態では、方法は、１つ以上のケモカイン受容体アンタゴニストの投与をさらに含む。ケモカイン受容体は、主に白血球の表面にある７つの膜貫通ドメインを含むＧタンパク質共役受容体である。ケモカイン受容体は、ＣＸＣケモカイン受容体、ＣＣケモカイン受容体、ＣＸ３Ｃケモカイン受容体、および結合するケモカインの４つの異なるサブファミリーに対応するＸＣケモカイン受容体の異なるファミリーに分類される。
【０２０７】
いくつかの態様において、本発明の方法は、ＣＸＣケモカイン受容体ファミリーのケモカイン受容体に対する１つまたは複数のアンタゴニストを含む。適切なＣＸＣファミリーメンバーのターゲットには、腫瘍の生存に必要な細胞増殖と血管新生に関与すると考えられるＣＸＣＲ１（ＩＬ８ＲＡまたはＣＤ１８１）およびＣＸＣＲ４（別名フシンまたはＣＤ  １８４）が含まれる。
【０２０８】
他の実施形態では、本発明の方法は、ＣＣＲ２、ＣＣＲ５、および／またはＣＣＲ４を含むがこれらに限定されないＣＣケモカイン受容体（またはベータケモカイン受容体）ファミリーのケモカイン受容体に対する１つまたは複数のアンタゴニストを含む。
【０２０９】
サイトカイン療法
本明細書に開示される方法のいずれかの他の実施形態では、方法は、１つまたは複数のサイトカイン療法の投与をさらに含む。サイトカインは、腫瘍内に存在する多くのタイプの細胞によって産生されるタンパク質の幅広いグループであり、免疫応答を調節する能力を持つ。これらの免疫調節効果により、免疫応答を引き起こす薬として使用できる。サイトカインの２つの一般的に使用されるグループは、インターフェロンとインターロイキンである。
【０２１０】
本発明での使用に適したサイトカイン療法の非限定的な例には、Ｉ型ＩＦＮ（ＩＦＮα）、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１５、ＩＦＮγ、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−２１、ＩＬ−３３、ＩＬ−３５、ＦＬＴ３、および／または抗−ＴＧＦβが含まれるが、これらに限定されない。これらのタンパク質の受容体（ＩＬ−２Ｒ、ＩＬ−７Ｒ、ＩＬ−１５Ｒ、ＩＬ−１０Ｒ、ＩＬ−１２Ｒ、ＩＬ−２１Ｒなど）も（例えば、（小さい分子）、抗体、またはポリペプチド）などの活性剤に標的にすることができる。
【０２１１】
その他の免疫療法
本明細書に開示される方法での使用に適した他の免疫療法には、免疫原性化学療法、ＸＲＴ、腫瘍溶解性ウイルス、凍結療法、ＴＡＣＥ、免疫調節剤の腫瘍内注射、発癌経路の標的療法（ＭＡＰＫ、βカテニン、ＰＩ３Ｋ／ＰＴＥＮ、ＦＧＦＲ３など）、エピジェネティック療法、ＣＳＦ１／ＣＳＦＲ１枯渇抗体および抗−ＣＣＲ４（例：モガムリズマブ、協和）、抗−ＩＬ−８／ＩＬ−８Ｒ、抗−ＣＣＲ２、抗−ＣＣＲ５、抗−ＣＸＣＲ１／ＣＸＣＲ２、抗−ＣＴＬＡ４、抗−ＣＣＲ４、抗−ＣＣＲ８、抗−ＣＤ２５、抗−ＫＩＲ、抗−ＮＫＧ２ａ、抗−ＮＫＧ２ＤＬ（ＭＩＣＡ）、アルギナーゼ、ＩＤＯ／ＴＤＯ、アデノシン、Ａ２ＡＲ、ＣＤ３９、ＣＤ７３、ＰＩ３Ｋガンマ、抗−ＮＫＧ２Ｄ、ＣＤ９４、およびＣＤ４７／ＳＩＲＰａ、Ｍｅｒ／Ａｘｌ／Ｔｙｒｏ３、ＴＩＭ３、ＭＦＧ−Ｅ８／ＧＡＳ６、および／またはＤＤ１ａｌｐｈａの１つまたは複数を活性化または阻害するための療法を含む。
【０２１２】
いくつかの態様において、本明細書に開示される方法は、当技術分野で公知の任意のＣＡＲ−Ｔ療法と組み合わせて使用することができる。キメラ抗原受容体（キメラＴ細胞受容体としても知られるＣＡＲ）は、宿主Ｔ細胞またはＮＫ細胞で発現し、特定の標的抗原およびその抗原を発現する細胞に対する免疫応答を誘導するように設計された合成構築物である。ＣＡＲは通常、細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、および細胞内ドメインを含む。細胞外ドメインは、通常、ｓｃＦｖまたはＦａｂフラグメントなどの抗体フラグメントであり、任意の抗原への結合を標的とすることができる。膜貫通ドメインは、Ｔ細胞受容体のアルファ、ベータまたはゼータ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、またはＣＤ１５４に由来し得る。細胞内ドメインは通常、ＣＤ３−ζ、ＣＤ２８、ＩＣＯＳ、ＣＴＬＡ４、ＰＤ１、ＰＴＬＡ、ＨＶＥＭ、ＣＤ２７、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＤＲ３、ＤｃＲ３、ＦＡＳ（ＣＤ９５）、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＳＬＡＭ、ＣＤ２、２Ｂ４、ＴＩＭ１、ＴＩＭ２、ＴＩＭ３、ＴＩＭ４、ＴＮＦＲ１（ＣＤ１２０ａ）、ＴＮＦＲ２（ＣＤ１２０ｂ）、ＬＴβＲ、Ｌｙ１０８、ＣＤ８４、Ｌｙ９、ＣＲＡＣＣ、ＢＴＮ１、ＢＴＮ２、ＢＴＮ３、ＴＩＧＩＴ、ＣＤ２２６、ＣＲＴＡＭ（ＣＤ３５５）、ＣＤ９６、ＣＤ１６０、ＬＡＧ３、ＬＡＩＲ１、Ｂ７−１、ＲＡＮＫ（ＣＤ２６５）、ＴＡＣＩ、ＢＡＦＦＲ、ＢＣＭＡ、ＴＷＥＡＫＲ、ＥＤＡＲ、ＸＥＤＡＲ、ＲＥＬＴ、ＤＲ６、ＴＲＯＹ、ＮＧＦＲ、ＯＰＧ、ＴＲＡＩＬＲ１−４およびＢ７−Ｈ１のエンドドメインを含む選択的Ｔ細胞活性化部分である。細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、および細胞内ドメインのさまざまな組み合わせをＣＡＲの構築に使用できる。
【０２１３】
いくつかの態様において、本明細書に開示される方法は、任意の養子細胞移植（ＡＣＴ）療法と組み合わせて使用することができる。ＡＣＴは免疫療法の非常に効果的な形態であり、抗腫瘍活性を持つ免疫細胞をがん患者に移植することを伴う。ＡＣＴは、抗腫瘍活性を持つリンパ球のｉｎ  ｖｉｔｒｏでの同定、これらの細胞のｉｎ  ｖｉｔｒｏでの大量増殖、および担癌宿主への注入を含む。養子免疫伝達に使用されるリンパ球は、切除された腫瘍の間質（腫瘍浸潤リンパ球またはＴＩＬ）に由来する。抗腫瘍Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）またはキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するように遺伝子操作されている場合、混合リンパ球腫瘍細胞培養（ＭＬＴＣ）で強化されている場合、または自己抗原提示細胞および腫瘍由来ペプチドを使用してクローン化ｃされている場合、血液由来または血液由来でもある。リンパ球が注入される癌を有する宿主に由来するＡＣＴは、自己ＡＣＴと呼ばれる。
【０２１４】
本明細書全体で与えられるすべての最大数値制限には、あたかもそのような低い数値制限が本明細書で明示的に書かれているかのように、すべての低い数値制限が含まれることが意図される。本明細書全体で与えられるすべての最小数値制限には、あたかもそのようなより高い数値制限が本明細書で明示的に書かれているかのように、より高い数値制限がすべて含まれる。本明細書を通して与えられるすべての数値範囲は、あたかもそのような狭い数値範囲がすべて本明細書で明示的に書かれているかのように、そのようなより広い数値範囲内に入るあらゆるより狭い数値範囲を含む。
【０２１５】
医薬組成物
また、本明細書で提供されるのは、アンレキサノクス、ＰＴＣリードスルー化合物、ＮＭＤ複合体阻害剤、およびチェックポイント阻害剤を含む、本明細書で開示される化合物のいずれかを含む医薬組成物である。本発明の医薬組成物は、錠剤、カプセル、顆粒、粉末、ペレット、カプレット、ミニタブレット、ロゼンジ、ミニタブレットおよび／またはペレットで充填されたカプセル、多層錠剤、懸濁用顆粒、小袋に入った顆粒または粉末の１つ以上を含み得る。他の実施形態では、本発明の組成物をコーティングして、フィルムコーティングされた錠剤を得ることができる。
【０２１６】
本発明の組成物は、薬学的賦形剤を混合し、場合により他の薬学的に許容される賦形剤と共に糖と共に化合物の水溶液またはアルコール溶液で造粒することにより調製することができる。顆粒を乾燥させ、滑らかにし、適切な剤形に変換しても良い。
【０２１７】
アンレキサノクス、ＰＴＣリードスルー化合物、ＮＭＤ複合阻害剤、およびチェックポイント阻害剤などの化合物の安定な固体医薬組成物は、直接圧縮、湿式または乾式造粒、スラッギング、ホットメルト造粒、ホットメルト押出、流動層造粒、押出球形化、噴霧乾燥および溶媒蒸発などの製薬技術の当業者に知られているプロセスによって調製することができる。一実施形態において、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物およびＮＭＤ複合体またはその薬学的に許容される塩を阻害する化合物の安定な組成物は、１つ以上の糖および１つ以上の薬学的に許容可能な化合物で化合物を乾式／湿式造粒することにより調製される。賦形剤、および任意で顆粒を他の賦形剤と混合する。
【０２１８】
薬学的に許容される賦形剤には、１つ以上の結合剤、充填剤、潤滑剤、可溶化剤、安定剤、崩壊剤、流動促進剤などが含まれ得る。
【０２１９】
適切な「希釈剤」には、ラクトース、微結晶性セルロース、リン酸カルシウム、デキストリン、デキストロース、デキストレート、マンニトール、ソルビトール、スクロースなどの１つまたは複数が含まれ得る。特に、希釈剤は乳糖と微結晶セルロースである。希釈剤は、組成物の顆粒外および／または顆粒内部分に存在しても良い。
【０２２０】
適切な「崩壊剤」は、クロスポビドン（ポリプラスドン）、低置換ヒドロキシプロピルセルロース、カルメロース、カルボキシデンプンナトリウム、カルメロースカルシウム、コーンスターチ、部分アルファ化デンプン、クロスカルメロースナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウムなどの１つまたは複数を含み得る。特に、崩壊剤はクロスポビドンである。崩壊剤は、組成物の顆粒外および／または顆粒内部分に存在しても良い。
【０２２１】
適切な「結合剤」には、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン（ポビドンＫ３０）、ポリビニルアルコール、これらの部分けん化物、デンプンなどの１つまたは複数が含まれ得る。特に、バインダーはポリビニルピロリドンである。
【０２２２】
適切な「可溶化剤」には、ポロキサマー、ポリエチレングリコール、ポリソルベート、ラウリル硫酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセリル、モノオレイン酸グリセリル、レシチン、ポリオキシエチレンアルキルエステル、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレン脂肪酸エステルなどが含まれる。特に、可溶化剤はポロキサマーとモノオレイン酸グリセリルである。
【０２２３】
適切な「安定剤」には、クエン酸、酒石酸、フマル酸、マレイン酸、ビタミンＥアセテートなどの１つまたは複数が含まれ得る。特に、安定剤は酢酸ビタミンＥである。
【０２２４】
適切な「潤滑剤／流動促進剤」には、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、フマル酸ステアリルナトリウム、ベヘン酸グリセリル、タルクなどの１つまたは複数が含まれる。
【０２２５】
本発明による化合物のいずれかは、１つまたは複数の薬学的に許容される担体または賦形剤を使用して従来の方法で製剤化することができる。いくつかの実施形態では、所定の治療計画での薬物投与に複数の投与経路を使用することができる。例えば、ＰＴＣリードスルーを促進する化合物は経口投与でき、ＮＭＤを阻害する化合物は静脈内投与できる。したがって、本発明による使用のための化合物は、例えば、経口、舌下、頬側、非経口、直腸、膣、または鼻腔内投与の１つまたは複数のために、または（口または鼻を介して）吸入または吹送による投与に適した形態、または局所投与に適した形態で、好ましくは目の局所適用で、製剤化することができる。別の実施形態では、化合物は局所または皮下投与用に製剤化される。
【０２２６】
経口投与の場合、医薬組成物は、例えば、結合剤（例えば、アルファ化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、充填剤（例えば、乳糖、微結晶性セルロースまたはリン酸カルシウム）；潤滑剤（ステアリン酸マグネシウム、タルク、シリカなど）；崩壊剤（例えば、ジャガイモ澱粉または澱粉グリコール酸ナトリウム）；または湿潤剤（例：ラウリル硫酸ナトリウム）などの薬学的に許容される賦形剤とともに従来の手段により調製される錠剤またはカプセルの形態をとっても良い。錠剤は、当該分野で周知の方法によりコーティングされ得る。経口投与用の液体製剤は、例えば、溶液、シロップまたは懸濁液の形態をとっても良く、または使用前に水または他の適切なビヒクルで構成するための乾燥製品として提供されても良い。そのような液体調製物は、懸濁化剤（例えば、ソルビトールシロップ、メチルセルロースまたは水素化された食用脂肪）、乳化剤（レシチンやアカシアなど）；非水性ビヒクル（アーモンド油、油性エステル、エチルアルコールなど）；防腐剤（例：メチルまたはプロピル−ｐ−ヒドロキシ安息香酸またはソルビン酸）などの薬学的に許容される添加剤を用いて従来の手段によって調製され得る。
【０２２７】
口腔投与の場合、組成物は、従来の方法で製剤化された錠剤またはロゼンジの形態をとっても良い。
【０２２８】
アムレキサノックス、ＰＴＣリードスルー化合物、ＮＭＤ複合阻害剤、チェックポイント阻害剤などの化合物は、注射、都合良い静脈内、筋肉内、腫瘍内、または皮下注射、例えばボーラス注射または連続静脈内注射による非経口投与用に製剤化することができる。注射用製剤は、単位剤形で提示されても良く、例えば、必要に応じて防腐剤を添加したアンプルまたは複数回投与用容器に入れる。非経口投与のための組成物は、油性または水性ビヒクル中の懸濁液、溶液または乳濁液などの形態をとっても良く、懸濁剤、安定剤および／または分散剤などの製剤化剤を含んでも良い。あるいは、活性成分は、粉末、結晶性または凍結乾燥固体などの乾燥形態であっても良く、適切な媒剤、例えば、使用前に、発熱物質を含まない滅菌水または等張食塩水であっても良い。それらは、例えば、滅菌アンプルまたはバイアルに入れて提示されても良い。
【０２２９】
化合物はまた、例えばココアバターまたは他のグリセリドなどの従来の座薬基剤を含む坐剤または停留腸などの直腸用組成物、鼻腔内に処方されても良い。
【０２３０】
舌下投与用の錠剤は、従来の方法で製剤化することができる。
【０２３１】
鼻腔内投与の場合、化合物は、例えば、スプレー、ドロップの形態で提供される、例えば、溶液、懸濁液、またはエマルジョンの形態の液体として、または粉末として使用され得る。好ましくは、鼻腔内投与のための調製物は、適切な噴射剤を使用して、吹送器から、または加圧パックまたはネブライザーからスプレーまたはエアロゾルの形態で送達される。
【０２３２】
吸入による投与の場合、化合物は、適切な噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、テトラフルオロエタン、ヘプタフルオロプロパン、二酸化炭素またはその他の適切なガスを使用して、噴霧器、加圧パックまたはネブライザーからエアロゾルスプレー形態で便利に送達し得る。加圧エアロゾルの場合、計量単位を送達するためのバルブを提供することにより、投与単位を決定することができる。カプセルとカートリッジ本発明の化合物とラクトースまたはデンプンなどの適切な粉末基剤との粉末混合物を含む、吸入器または吹送器で使用するためのゼラチンを処方することができる。
【０２３３】
局所投与の場合、医薬組成物は、目への局所適用に適したクリーム、ゲル、ローション、フォームまたはドロップの形態で提示される液体、例えば溶液、懸濁液またはエマルジョン（ナノ粒子またはリポソーム含有エマルジョンなど）であっても良い。
【０２３４】
組成物は、各投与量が約５ｍｇ〜約１００ｍｇ以上、例えば約１ｍｇ〜約５ｍｇ、１ｍｇ〜約１０ｍｇ、約１ｍｇ〜約２０ｍｇ、約１ｍｇ〜約３０ｍｇ、約１ｍｇ〜約４０ｍｇ、約１ｍｇ〜約５０ｍｇ、約１ｍｇ〜約６０ｍｇ、約１ｍｇ〜約７０ｍｇ、約１ｍｇ〜約８０ｍｇ、または約１ｍｇから約９０ｍｇのいずれか、これらの値の間の任意の範囲を含む有効成分を含む単位剤形に製剤化することができる。「単位剤形」という用語は、個々の単位用量として適切な物理的に個別の単位を指し、各単位は、適切な医薬賦形剤または担体と関連して、所望の治療効果をもたらすように計算された所定量の活性物質を含む。
【０２３５】
本発明は、以下の実施例を参照することによりさらに理解することができ、これらは例示として提供され、限定することを意味しない。
【実施例１】
【０２３６】
例１：ＰＴＣリードスルー化合物、ＮＭＤ阻害剤、チェックポイント阻害剤を使用した生体内研究
【０２３７】
材料および方法
動物：６〜８週齢の雌（接種時の推定年齢）Ｃ５７ＢＬ／６マウスは、Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｌｉｎｇｃｈａｎｇ  Ｂｉｏ−Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｏ．Ｌｔｄ（ＬＣ、上海、中国）から入手した。動物を２０〜２６℃で飼育し、１２時間の明暗サイクルで１２時間飼育した。
【０２３８】
細胞培養：ＭＣ３８腫瘍細胞は、空気中５％ＣＯ２の雰囲気で３７°Ｃで１０％ウシ胎児血清を追加したＤＭＥＭ培地で単層培養としてｉｎ  ｖｉｔｒｏで維持された。腫瘍細胞は、通常週に２回継代培養された。対数増殖期の細胞を採取し、腫瘍接種についてカウントした。
【０２３９】
治療化合物：抗−ＰＤ−１および抗−ＣＴＬＡ−４抗体は、抗−ＣＤ８抗体と同様にＢｉｏＸＣｅｌｌから入手した。ナンセンス媒介崩壊阻害剤ＮＭＤＩ１４（４，５−ジメチル１−２−［［２−（１，２，３，４−テトラヒドロ−６，７−ジメチル−３−オキソ−２−キノキサリニル）アセチル］アミノ］−３−チオフェンカルボン酸エチルエステル、エチル２−｛［（（６，７−ジメチル−３−オキソ−１，２，３，４−テトラヒドロ−２−キノキサリニル）アセチル）アミノ］−４，５−ジメチル−３−チオフェンカルボキシレート｝ＣｈｅｍＢｒｉｄｇｅ  Ｃｏｒｐ．（カリフォルニア州ラホーヤ）から入手した。ＲＴＣ  Ａｔａｌｕｒｅｎ（ＰＴＣ１２４）は、Ｓｅｌｌｅｃｋ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（テキサス州、ヒューストン）から入手した。化合物は、表２に示すように配合した。
表２：治療用化合物製剤。
【表２】
2020525434.tif 000027
【０２４０】
腫瘍接種：各マウスの腫瘍発生のために、０．１ｍＬのＰＢＳ中のＭＣ３８腫瘍細胞（１ｘ１０６）を右下脇腹領域に皮下接種した。平均腫瘍サイズが約５０ｍｍ３に達したときに治療を開始した。化合物を投与し、各研究グループの動物数を表２に示す。腫瘍細胞接種の日付を０日目と表記した。
【０２４１】
グループ割り当て：グループ分けおよび治療の前に、すべての動物の体重を測定し、ノギスを使用して腫瘍体積を測定した。系統誤差を最小限に抑えるために、選択された動物を特定のグループにランダム化するための数値パラメーターとして腫瘍体積が使用された。グループ化は、ＳｔｕｄｙＤｉｒｅｃｔｏｒ(tm)ソフトウェア（Ｓｔｕｄｙｌｏｇ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｉｎｃ．カリフォルニア州、米国）を使用して実行された。腫瘍体積の最小のグループ間変動を示す１つの最適なランダム化設計（一致分布によって生成）がグループ割り当てに選択された。
表３：各研究グループの試験品と動物数の投与
【表３】
2020525434.tif 000028
Ｎ：動物番号；投与量は１０μｌ／ｇであった。ＰＴＣ１２４およびＮＭＤＩ１４には、ランダム化で最初の用量が投与された（腫瘍サイズ〜５０ｍｍ３）。ＣＴＬＡ−４およびＰＤ−１抗体は、ＰＴＣ１２４およびＮＭＤＩ１４を投与してから３〜４日後の腫瘍サイズ（７５〜１００ｍｍ３）に達したときに日常的に投与された。試験化合物と抗体を同日に投与した場合、ＰＴＣ１２４とＮＭＤＩ１４は午前中に投与され、抗体は午後に投与された。
【０２４２】
ＦＡＣＳ分析：腫瘍細胞を各処置群から単離し、当技術分野で周知の方法に従ってＦＡＣＳ分析を実施した。ＦＡＣＳ分析に使用される試薬を以下の表４に示す。
表４：腫瘍細胞のＦＡＣＳ分析に使用される試薬。
【表４】
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【０２４３】
免疫組織化学（ＩＨＣ）：腫瘍サンプルからのホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ）組織を４μｍに切片化した。抗原回復（ＡＲ）は、ＥＤＴＡバッファー、ｐＨ９．０で２０分間、１００°Ｃで実施した。一次抗体（有効濃度で希釈）、ＲＴ６０分＋二次抗体（すぐに使用可能）、ＲＴ６０分＋Ｂｏｎｄ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｒｅｆｉｎｅ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ。使用した抗体と試薬を表５に示す。
表５：ＩＨＣ実験で使用された抗体と試薬。
【表５】
2020525434.tif 000030
【０２４４】
腫瘍細胞接種後、動物の罹患率と死亡率、ならびに腫瘍の成長と治療が可動性、食物と水の消費量の視覚的推定、体重増加／減少、眼／ヘアマットおよびその他の異常な効果が毎日チェックされた。腫瘍体積は、キャリパーを使用して少なくとも２次元で週に２回測定され、体積は式を使用してｍｍ３で表す：Ｖ＝０．５ａｘｂ２ここで、ａとｂはそれぞれ腫瘍の長径と短径である。
【０２４５】
研究期間中の各治療群の平均腫瘍体積を表６に示し、腫瘍体積の阻害率を表７に示す。
表６：平均腫瘍体積（ｍｍ３）（＋／−平均の標準誤差）
【表６】
2020525434.tif 000031
表７：各治療グループの腫瘍体積の阻害率（負の値は腫瘍体積の増加を示す）。
【表７】
2020525434.tif 000032
【０２４６】
表７に示すように、ＰＴＣ１２４とナンセンス媒介崩壊阻害剤と抗−ＰＤ−１および抗−ＣＴＬＡ−４免疫療法の併用により、腫瘍体積がほぼ７５％阻害された（図１も参照）、これは免疫療法単独またはそれらの組み合わせのいずれかによって達成される結果よりも大きい（図２）。
【０２４７】
図３に示すように、免疫組織化学分析により、ＰＴＣリードスルー阻害剤とＮＭＤを阻害する化合物の併用により、かなりの数のＣＤ３＋免疫細胞が腫瘍組織に浸潤することが示された。図３はまた、治療がＰＤ−１およびＣＴＬＡ−４に対する抗体と組み合わされたときにこの効果が増強されたことを示す。
【実施例２】
【０２４８】
例２：ａｍｌｅｘａｎｏｘとチェックポイント阻害剤を使用したｉｎ  ｖｉｖｏ研究
動物および細胞培養物を実施例１に記載のように維持した。腫瘍発達のために、Ｃ５７ＢＬ／６マウスの０．１ｍＬのＰＢＳ中のＭＣ３８腫瘍細胞（１×１０６）を右下腹部に皮下接種した。平均腫瘍サイズが約５０ｍｍ３に達したときに治療を開始した。化合物を投与し、各試験グループの動物数を表８に示す。腫瘍細胞接種の日付は０日目として示された。すべての化合物を腹腔内投与した。
表８
【表８】
2020525434.tif 000033
【０２４９】
腫瘍細胞接種後、動物の罹患率と死亡率、ならびに腫瘍の成長と治療が運動、食物と水の消費量の視覚的推定、体重増加／減少、眼／ヘアマットおよびその他の異常な効果が毎日チェックされた。腫瘍体積は、キャリパーを使用して少なくとも２次元で週に２回測定され、体積は式を使用してｍｍ３で表される：Ｖ＝０．５ａ  ｘ  ｂ２ここで、ａとｂはそれぞれ腫瘍の長径と短径である。試験期間中の各治療グループの平均腫瘍体積を表９に示し、腫瘍体積の阻害率を表１０に示す。
表９
【表９】
2020525434.tif 000034
表１０各治療グループの腫瘍体積の阻害率（負の値は腫瘍体積の増加を示す）。
【表１０】
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【０２５０】
表１０に示すように、アンレキサノクスと抗−ＰＤ−１および抗−ＣＴＬＡ−４免疫療法の併用により、腫瘍体積がほぼ８４％阻害され（図４も参照）、ＰＴＣ１２４およびＰＤ−１／ＣＴＬＡ−４の組み合わせで比較される。
【実施例３】
【０２５１】
実施例３：他の癌細胞株を用いた異種移植研究
同系免疫コンピテント腫瘍モデルは、マウスがん細胞株で作成でき、実施例は、膵臓（Ｐａｎ０２）、前立腺（ＲＭ１）、結腸（ＣＴ−２６、Ｃｏｌｏｎ−２６、ＭＣ３８−２６）、腎臓（Ｒｅｎｃａ）、膀胱（ＭＢＴ−２）、肺（ＬＬ／２、ＫＬＮ２０５）、黒色腫（Ｂ１６ＢＬ６、Ｂ１６Ｆ１０、Ｓ９１）、乳房（４Ｔ１、ＥＭＴ６、ＪＣ）、線維肉腫（ＷＥＨＩ−１６４）、白血病（Ｃ１４９８、Ｌ１２１０）、肝臓（Ｈ２２、Ｈｅｐａｌ−６）、リンパ腫（Ａ２０、ＥＬ−４、Ｅ．Ｇ&−ＯＶＡ、Ｌ５１７８−Ｒ、Ｐ３８８Ｄ１）、肥満細胞腫（Ｐ８１５）、骨髄腫（ＭＰＣ−１１）、神経芽細胞腫（Ｎｅｕｒｏ−２ａ）などが含まれる。実施例１および２に示すように、マウスは皮下注射された腫瘍細胞の懸濁液を受け、それは注射の約４〜６週間後に腫瘍に発展する。
【０２５２】
早期に確立されたマウス腫瘍に対する治療の有効性をテストするために、グループあたり１０匹のマウスのコホートは、３〜７日目または腫瘍が触知できるときに薬物（または偽コントロール）を受ける。薬物は、１日２回、１週間に数回、またはマウスが４−６週間で屠殺されるか、腫瘍が３〜５ｃｍに達するか潰瘍になるまで継続的に投与される。治療中、腫瘍の体積は、キャリパーによる週３回の３次元測定を使用して決定される。実施例１および２に示すように、腫瘍は屠殺後に採取され、最終的な腫瘍体積を決定するために計量される。
【実施例４】
【０２５３】
実施例４：アメルキサノックスと後成的調節薬の併用
この実施例は、アンレキサノクスとエピジェネティック調節薬の投与を示す。１つまたは複数の後成的調節薬の追加は、新抗原の免疫認識を高める可能性がある。
【０２５４】
実施例１および２に示すように、マウスは皮下注射された腫瘍細胞の懸濁液を受け取り、注射後約４〜６週間で腫瘍に発達する。薬物の投与、腫瘍サイズの評価、腫瘍内免疫応答、ＣＤ４およびＣＤ８エフェクターＴ細胞応答、およびＴｒｅｇ応答は上記のように実施される。
【０２５５】
エピジェネティック調節剤による腫瘍の治療は、免疫応答に関与する遺伝子の抑制を取り除くことができる。ＲＴＣおよびＮＭＤＩとエピジェネティックな調節薬との組み合わせにより、新抗原の認識が強化される。エピジェネティック調節薬の非限定的な例には、ＨＤＡＣ阻害剤、アゾシチジン、ＢＥＴ阻害剤、ＥＺＨ２阻害剤、および／またはｄｏｔ１Ｌ阻害剤（ピノメトスタットなど）、およびＤＮＡメチルトランスフェラーゼ（ＤＮＭＴ）阻害剤が含まるが、これらに限定されない。
【実施例５】
【０２５６】
例５：アンレキサノクスと放射線療法の併用
この実施例は、アンレキサノクスと放射線療法の併用による同系免疫コンピテントマウスの腫瘍治療の効果を示す。放射線療法（ＲＴ）の前にアンレキサノクス薬で治療すると、免疫刺激細胞死の前に腫瘍内の新抗原の発現が増加し、新抗原提示が強化される。
【０２５７】
実施例１および２に示すように、マウスは皮下注射された腫瘍細胞の懸濁液を受け取り、注射後約４〜６週間で腫瘍に発達する。薬物の投与、腫瘍サイズの評価、腫瘍内免疫応答、ＣＤ４およびＣＤ８エフェクターＴ細胞応答、およびＴｒｅｇ応答は上記のように実施される。
【０２５８】
腫瘍を標的とした放射線療法（ＲＴ）中にアンレキサノクスを継続的に治療すると、突然変異誘発およびＤＮＡ損傷を介して新抗原が生成される可能性がある。腫瘍特異的Ｔ細胞を活性化する免疫応答を誘発する炎症誘発性シグナルと関連した細胞死中のこれらの抗原の放出。放射線療法は、腫瘍の微小環境に影響を与え、活性化Ｔ細胞の浸潤を促進し、腫瘍拒絶の障壁を克服する。アンレキサノクスと免疫療法薬およびＲＴの併用は、新抗原の発現を高めることにより、個々の患者の免疫応答のプライミング（抗原提示）およびエフェクター段階の両方に対する放射線の影響を高めるでしょう。
【実施例６】
【０２５９】
実施例６：アンレキサノクスと化学療法の併用
この実施例は、ＲＴＣとＮＭＤＩの組み合わせおよび化学療法による同系免疫コンピテントマウスの腫瘍治療の効果を示す。化学療法の前にＲＴＣおよびＮＭＤＩ薬で治療すると、免疫刺激細胞死の前に腫瘍内の新抗原の発現が増加し、新抗原の提示が強化される。
【０２６０】
実施例１および２に示すように、マウスは皮下注射された腫瘍細胞の懸濁液を受け取り、注射後約４〜６週間で腫瘍に発達する。薬物の投与、腫瘍サイズの評価、腫瘍内免疫応答、ＣＤ４およびＣＤ８エフェクターＴ細胞応答、およびＴｒｅｇ応答は上記のように実施される。
【０２６１】
化学療法中のアンレキサノクスによる継続的治療は、突然変異誘発およびＤＮＡ損傷を介して新抗原を生成する可能性があり、腫瘍特異的Ｔ細胞を活性化する免疫応答を引き起こす炎症誘発性シグナルと併せて細胞死中にこれらの抗原を放出する可能性がある。化学療法は腫瘍の微小環境に影響を与え、活性化Ｔ細胞の浸潤を促進し、腫瘍拒絶の障壁を克服する。アンレキサノクスと免疫療法薬（例１）の化学療法との併用は、新抗原の発現を増強することにより、個々の患者の免疫応答のプライミングおよびエフェクター期の両方に対する化学療法の効果を増強する。
【実施例７】
【０２６２】
例７：腫瘍溶解性ウイルスのａｍｌｅｘａｎｏｘの組み合わせ
この実施例は、アンレキサノクスと腫瘍溶解性ウイルスの組み合わせによる同系免疫コンピテントマウスの腫瘍治療の効果を示す。
【０２６３】
実施例１および２に示されるように、マウスは皮下注射された腫瘍細胞の懸濁液を受け取り、それは注射の約４〜６週間後に腫瘍に発達する。薬物の投与、腫瘍サイズの評価、腫瘍内免疫応答、ＣＤ４およびＣＤ８エフェクターＴ細胞応答、およびＴｒｅｇ応答は上記のように実施される。
【０２６４】
免疫原性細胞死を誘導する他のアプローチには、腫瘍細胞を選択的に殺すための腫瘍溶解性ウイルスの使用が含まれる。したがって、アンレキサノクスによる患者の事前治療は、腫瘍溶解性ウイルスが誘導された新抗原の抗原提示を改善し、その後Ｔ細胞応答を増強することを可能にする。
【実施例８】
【０２６５】
例８：アンレキサノクスとワクチン療法の組み合わせ
この実施例は、アンレキサノクスとワクチン療法の併用による同系免疫コンピテントマウスの腫瘍治療の効果を示す。
【０２６６】
実施例１および２に示されるように、マウスは皮下注射された腫瘍細胞の懸濁液を受け取り、注射後約４〜６週間で腫瘍に発達する。薬物の投与、腫瘍サイズの評価、腫瘍内免疫応答、ＣＤ４およびＣＤ８エフェクターＴ細胞応答、およびＴｒｅｇ応答は上記のように実施される。
【０２６７】
新抗原ワクチン接種は、がんにおける潜在的に有効なワクチンアプローチとして浮上する。現在まで、これらの新抗原にはアミノ酸置換が含まれるが、アンレキサノクスは単一のアミノ酸置換を超えて新抗原の範囲を広げる。アンレキサノクスまたはこれらの製品をコードするＤＮＡまたはＲＮＡから生成される異常なペプチドは、個別のワクチンの構成要素である。アンレキサノクスで治療された患者の腫瘍の転写プロファイリングは、そのようなワクチンを生成するために使用できる候補の異常なリードスルータンパク質を提供する。アンレキサノクスで治療した腫瘍全体は、全細胞ワクチンの基礎としても使用できる。誘導された新抗原に対するそのようなワクチンは、他のワクチンに加えて、これらの実施例の薬剤のいずれかと組み合わせることができる。
【実施例９】
【０２６８】
実施例９：アンレキサノクスとＣＡＲ−Ｔ細胞または患者由来の腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）との組み合わせ
この実施例は、アンレキサノクスとＣＡＲ−Ｔ細胞の組み合わせ、または患者由来の腫瘍浸潤リンパ球による同系免疫コンピテントマウスの腫瘍治療の効果を示す。
【０２６９】
実施例１および２に示すように、マウスは皮下注射された腫瘍細胞の懸濁液を受け取り、注射後約４〜６週間で腫瘍に発達する。薬物の投与、腫瘍サイズの評価、腫瘍内免疫応答、ＣＤ４およびＣＤ８エフェクターＴ細胞応答、およびＴｒｅｇ応答は上記のように実施される。
【０２７０】
アンレキサノクスで治療された患者で誘発されるＴ細胞は、これらの薬物によって生成される新抗原を認識するように誘導される。これらの特定のＴ細胞は、ｅｘ  ｖｉｖｏで拡大し、患者に直接再注入するか、そのＴＣＲをクローン化し、再注入用にＣＡＲ−Ｔ細胞を操作するために使用できる。
【実施例１０】
【０２７１】
例１０：ａｍｌｅｘａｎｏｘと免疫調節剤の組み合わせ
この実施例は、ＣＤＮ、ＴＬＲアゴニスト、ＴＮＦＲスーパーファミリーアゴニスト、およびエピジェネティック調節化合物などのアンレキサノクスと免疫調節剤の組み合わせによる同系免疫コンピテントマウスの腫瘍治療の効果を示す。
【０２７２】
実施例１および２に示すように、マウスは皮下注射された腫瘍細胞の懸濁液を受け取り、注射後約４〜６週間で腫瘍に発達する。薬物の投与、腫瘍サイズの評価、腫瘍内免疫応答、ＣＤ４およびＣＤ８エフェクターＴ細胞応答、およびＴｒｅｇ応答は上記のように実施される。
【０２７３】
免疫原性細胞死を誘導する他のアプローチには、腫瘍細胞を選択的に殺すためのＣＤＮ、ＴＬＲアゴニスト、ＴＮＦＲスーパーファミリーアゴニスト、およびエピジェネティック調節化合物などの免疫調節剤の使用が含まれる。したがって、アンレキサノクスを用いた患者の事前治療により、免疫調節剤は誘導された新抗原の抗原提示を改善し、その後Ｔ細胞応答を高めることができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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