(57)【要約】  本発明は、結核の治療において有用である、新規な組み合わせに関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の有効成分：
（ｉ）ＰＺＡまたはその薬学的に許容される塩；および
（ｉｉ）シトクロムｂｃ１阻害剤またはその薬学的に許容される塩
からなる組み合わせ。
【請求項２】
前記シトクロムｂｃ１阻害剤は、Ｑ２０３またはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の組み合わせ。
【請求項３】
追加の抗菌薬をさらに含む、請求項１または２に記載の組み合わせ。
【請求項４】
前記また別の抗菌薬は：
−  ＡＴＰシンターゼの直接的阻害剤、ｎｄｈ２の阻害剤を含む結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）の呼吸鎖を妨害することが知られている薬剤；
−  電子輸送鎖を標的とし得る、例えばシトクロムｂｄオキシダーゼを標的とする他の抗菌薬（例えば、Ａｕｒａｃｈｉｎ  Ｄ類似体）；
−  他のマイコバクテリア剤、例えば、リファンピシン（＝リファンピン）；イソニアジド；ピラジナミド；アミカシン；エチオナミド；エタンブトール；ストレプトマイシン；パラ−アミノサリチル酸；シクロセリン；カプレオマイシン；カナマイシン；チオアセタゾン；ＰＡ−８２４；デラマニド；キノロン／フルオロキノロン、（例えば、モキシフロキサシン、ガチフロキサシン、オフロキサシン、シプロフロキサシン、スパルフロキサシン）；マクロライド（例えば、クラリスロマイシン、クラブラン酸を伴うアモキシシリン）；リファマイシン；リファブチン；リファペンチン；デラナミドおよび／またはプレトナミドから選択される抗結核薬である、請求項３に記載の組み合わせ。
【請求項５】
−  前記ＡＴＰシンターゼの直接的阻害剤はベダキリンであり；および／または
−  ｎｄｈ２の前記阻害剤はクロファジミンである、
請求項４に記載の組み合わせ。
【請求項６】
ＰＺＡ（またはその薬学的に許容される塩）の前記１日量は、１５〜３０ｍｇ／ｋｇ（２ｇまで）である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組み合わせ。
【請求項７】
シトクロムｂｃ１阻害剤（またはその薬学的に許容される塩）の１日量は、１．５〜１５ｍｇ／ｋｇ（１ｇまで）である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組み合わせ。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の組み合わせおよび薬学的に許容される担体または希釈剤を含む医薬調製物。
【請求項９】
薬剤として使用するための、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組み合わせ。
【請求項１０】
マイコバクテリア感染症（特に、結核（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ））の治療において使用するための、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組み合わせ。
【請求項１１】
マイコバクテリア感染症（特に、結核（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ））の治療における薬剤の製造における、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組み合わせの使用。
【請求項１２】
有効量の請求項１〜７のいずれか一項に記載の組み合わせを投与する工程を含む、患者を治療する方法。
【請求項１３】
前記結核が潜在性結核である、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の組み合わせ、使用または方法。
【請求項１４】
請求項８に定義した医薬調製物を調製するための方法であって、本発明の前記組み合わせの有効成分の任意の１種（またはそれ以上、例えば前記２種の不可欠な有効成分、および任意選択的に本明細書に規定したまた別の抗菌薬）を１種（またはそれ以上）の薬学的に許容される賦形剤または担体と関連付ける工程を含む方法。
【請求項１５】
さらに、本明細書に規定した組み合わせ製品を調製するための方法であって：
−  請求項１〜７のいずれか一項に記載の前記組み合わせ製品の前記構成成分（例えば、別個の医薬調製物として）のそれぞれを関連付け、（例えば、パーツのキットとして）共包装する、または意図された使用が（他の構成成分との）組み合わせにあることを示す工程；および／または
−  そのような成分を含む医薬調製物の前記調製において請求項１〜７のいずれか一項に記載の前記組み合わせ製品の前記構成成分のそれぞれを関連付ける工程
を含む方法。
【請求項１６】
細菌感染症の治療における同時、別個または連続的使用のための組み合わせ製剤としての、請求項１〜７のいずれか一項に規定の組み合わせ製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な組み合わせに関する。本発明はさらに、例えば、病原性マイコバクテリア、例えば結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）を原因とする疾患を含む細菌性疾患の治療において、医薬品として使用するためのそのような組み合わせに関する。そのような組み合わせは、結核の治療において有利であり得る。
【背景技術】
【０００２】
結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）は、全世界に分布する、重篤で致死的となり得る感染症である結核（ＴＢ）の病原体である。世界保健機関（Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ）の推定によると、毎年８００万人を超える人々がＴＢに罹患し、年間２００万人が結核のために死亡している。最近の１０年間で、ＴＢの症例は世界中で２０％増加しており、最も貧困な地域で負担が最も大きくなっている。これらの傾向が継続すると、ＴＢ発生率は次の２０年で４１％増加することになる。有効な化学療法の導入以来５０年が経過したが、ＴＢは依然として、世界でＡＩＤＳに次いで成人の感染による主要な死亡原因の主たるものである。ＴＢの蔓延を複雑化するのは、多剤耐性株が増加する潮流とＨＩＶとの極めて致命的な共生関係である。ＨＩＶ陽性であってＴＢに感染した人々は、ＨＩＶ陰性である人々よりも活動性ＴＢを発症する可能性が３０倍を超えて高く、世界中でＨＩＶ／ＡＩＤＳ患者の３人に１人がＴＢのために死亡している。
【０００３】
結核の治療に対する既存のアプローチは全て、複数薬剤の組み合わせを含む。例えば、米国公衆衛生局（Ｕ．Ｓ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ）により推奨されるレジメンは、イソニアジド、リファンピシンおよびピラジンアミドの２ヶ月間の併用と、それに続くイソニアジドおよびリファンピシンのみによるさらに４ヶ月間の併用である。これらの薬物は、ＨＩＶに感染した患者ではさらに７ヶ月間継続される。結核菌（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）の多剤耐性株に感染した患者の場合には、エタンブトール、ストレプトマイシン、カナマイシン、アミカシン、カプレオマイシン、エチオナミド、サイクロセリン、シプロフォキサシン（ｃｉｐｒｏｆｏｘａｃｉｎ）およびオフロキサシンなどの薬剤が、この併用療法に加えられる。結核の臨床治療に有効である単一薬剤は存在せず、継続期間が６ヶ月間未満で済む療法の可能性を提供する薬剤の任意の組み合わせも存在しない。
【０００４】
患者および提供者のコンプライアンスを容易にするレジメンを可能にすることによって現行の治療を改善する、新規な薬物または薬物の新規な組み合わせに対しては、医療上の高い必要性が存在する。これを達成するための最良の方法は、より短期間のレジメンおよび監視の必要性が少ないレジメンである。治療による恩恵の大部分は、４種の薬物が一緒に投与され、細菌負荷が大きく減少して患者が非感染性となる、強化期（ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ  ｐｈａｓｅ）または殺菌期（ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ  ｐｈａｓｅ）中の最初の２ヶ月間以内に得られる。残存する細菌を排除して再発のリスクを最小限に抑えるためには、４〜６ヶ月間の維持期（ｃｏｎｔｉｎｕａｔｉｏｎ  ｐｈａｓｅ）または滅菌期（ｓｔｅｒｉｌｉｚｉｎｇ  ｐｈａｓｅ）が必要とされる。治療を２ヶ月間以下に短縮する可能性のある新規な薬物または組み合わせがあれば、極めて有益であろう。さらに、必要とされる薬物の数を減らすこともまた有益であろう。集中的監視をあまり必要としないことによってコンプライアンスを容易にすることもまた有益であろう。明らかに、治療の全期間および薬物の投与頻度の両方を低減する新規な薬物または薬物の新規な組み合わせは、最も大きな恩恵を提供するであろう。
【０００５】
ＴＢの蔓延を複雑化させるのは、多剤耐性株またはＭＤＲ−ＴＢの発生の増加である。世界中の全症例の最大４パーセントまでが、ＭＤＲ−ＴＢ、すなわち、４種の標準薬中の最も効果的な薬物であるイソニアジドおよびリファンピンに耐性な菌株であるとみなされている。ＭＤＲ−ＴＢは、治療しないと致死的であり、標準療法によっては十分に治療することができないので、そのため、治療には２年間までの「第二選択」薬が必要となる。これらの薬物は、多くの場合、毒性があり、高価で、さらに有効性もわずかである。有効な療法が存在しない状態で、感染性ＭＤＲ−ＴＢ患者がこの疾患を蔓延させ続けており、ＭＤＲ−ＴＢ株による新規な感染を生み出している。そこで薬剤耐性株、特にＭＤＲ株に対して活性を示す可能性が高い新規な療法（例えば、併用療法）に対する医療上の高い必要性が存在する。
【０００６】
本明細書の上記または下記で使用する用語「薬剤耐性」は、微生物分野の当業者には明確に理解されている用語である。薬剤耐性マイコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）は、少なくとも１種の以前に有効であった薬物に対してもはや感受性を示さず、少なくとも１種の以前に有効であった薬物による抗菌性攻撃に耐える能力を発達させたマイコバクテリウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）である。薬剤耐性株は、その耐性力をその子孫に受け継がせることができる。前記耐性は、単一薬物または種々の薬物に対する感受性を変化させる、細菌細胞におけるランダムな遺伝子突然変異によるものであり得る。
【０００７】
ＭＤＲ結核は、現在最も強力な２種の抗ＴＢ薬である少なくともイソニアジドおよびリファンピシンに対して耐性を有する（他の薬物に対する耐性を伴うかまたは伴わない）細菌による特異的形態の薬剤耐性結核である。したがって、本明細書の上記または下記で使用する場合は常に、「薬剤耐性」には多剤耐性が含まれる。
【０００８】
ＴＢの蔓延を制御することにおけるまた別の要因は、潜在性ＴＢの問題である。数十年に及ぶ結核（ＴＢ）制御プログラムにも関わらず、約２０億の人が無症候性ではあるが結核菌（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）に感染している。これらの個体の約１０％は、一生の間に活動性ＴＢを発症するリスクを有している。ＴＢの世界的な蔓延は、ＨＩＶ患者のＴＢ感染および多剤耐性ＴＢ株（ＭＤＲ−ＴＢ）の増加により加速される。潜在性ＴＢの再活性化は、疾患発症の高リスク要因であり、ＨＩＶ感染個体の死亡の３２％を占める。ＴＢの蔓延を制御するためには、休眠状態または潜在状態の細菌を殺滅できる新規な薬物を発見する必要がある。休眠状態のＴＢは、腫瘍壊死因子αまたはインターフェロン−γに対する抗体のような免疫抑制剤の使用によって宿主の免疫が抑制されるなどのいくつかの要因によって再活性化されて疾患を引き起こし得る。ＨＩＶ陽性患者の場合、潜在性ＴＢに利用可能な唯一の予防的治療は、リファンピシン、ピラジンアミドの２種の３ヶ月間のレジメンである。この治療レジメンの効力はまだ明白ではなく、さらに、資源が限定されている環境下では、治療期間が重大な制約となる。したがって、潜在性ＴＢ細菌を保持する個体に対して、化学予防薬として作用し得る新規な薬物を特定する必要性が大いにある。
【０００９】
結核菌（ｔｕｂｅｒｃｌｅ  ｂａｃｉｌｌｉ）は、吸入によって健常個体に侵入し、肺の肺胞マクロファージにより貪食される。これにより、強力な免疫応答および肉芽腫の形成がもたらされるが、肉芽腫は、Ｔ細胞により取り囲まれた結核菌（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）感染マクロファージからなる。６〜８週間後、宿主免疫応答は、周辺でマクロファージ、類上皮細胞およびリンパ組織の層によって取り囲まれた、特定の細胞外細菌を備える乾酪性物質の壊死および蓄積によって感染細胞の死を引き起こす。健常個体の場合には、マイコバクテリアの大部分は、これらの環境下で死滅するが、少ない比率の細菌はなお生き残り、非複製性の代謝低下状態で存在すると考えられ、イソニアジドのような抗ＴＢ薬による殺菌に対して耐性である。これらの細菌は、疾患の臨床徴候を何ら示すことなく、生理的環境の変化がある中で、個体の生涯にわたってさえ残存し得る。しかし、症例の１０％では、これらの潜在性細菌が再活性化して疾患を引き起こすことがある。これらの持続性細菌の発生に関する仮説の１つは、ヒト病変における病態生理学的な環境、すなわち、酸素分圧の低下、栄養制限および酸性ｐＨである。これらの要因が、これらの細菌を主要な抗マイコバクテリア薬に対して表現型的に耐性にさせると仮定されている。
【００１０】
ＴＢ蔓延の管理に加えて、第一選択の抗生物質に対する耐性の問題が出現しつつある。重要な例の一部としては、ペニシリン耐性肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、バンコマイシン耐性腸球菌（ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｉ）、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、多剤耐性サルモネラ菌（ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｅ）が挙げられる。
【００１１】
抗生物質に対する耐性は、重大な結果をもたらしている。耐性菌を原因とする感染は、治療に応答せず、その結果、病気が長期にわたり、また死のリスクが高まる。治療の不成功により、感染力のある期間が延長され、それによって、地域社会の中を移動する感染した人の数が増加し、したがって、一般住民が耐性菌感染に罹患するリスクに曝される。
【００１２】
病院は、世界中で抗菌薬耐性問題の重要な構成要素である。感受性が高い患者、集中的かつ長期間の抗菌薬の使用および交差感染が組み合わさって、高度に耐性の病原菌による感染を生じさせてきた。
【００１３】
抗菌薬による自己治療は、耐性に寄与するまた別の主要な要因である。自己治療の抗菌薬は、不必要なことがあり、不適切に投与されることが多い、または適正な量の活性薬物を含有していないことがある。
【００１４】
患者の推奨治療のコンプライアンスが、また別の主要な問題である。患者は、気分がよくなり始めると薬物の服用を忘れ、治療を中断するか、または全コースを行うことができなくなり、それによって、微生物が殺滅されるよりむしろ順応するのに理想的な環境が築かれることがある。
【００１５】
複数の抗生物質に対する耐性が出現しつつあるため、医師は、有効な治療法が存在しない感染症に直面している。そのような感染症の罹患率、死亡率および財政的費用により、世界中で医療制度に対する負担が増大している。
【００１６】
このため、細菌感染症、特にマイコバクテリア感染症を治療するための新規な療法に対する高い必要性がある。
【００１７】
上述したように、結核を治療するためには既に数種の薬物、例えば、ピラジンアミド（ＰＺＡと略記されることが多い）が存在する。この薬物は、静菌性であることが知られているが、さらに活動性の複製結核菌（ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ  ｂａｃｔｅｒｉａ）に対しては殺菌性でもある。この薬物は、単一薬剤としては使用されないが、一般に結核を治療するためにイソニアジドおよびリファンピシンと併用される。
【００１８】
結核を治療するためには、異なる作用機序を介して作用し得る数種の他の公知の薬物が存在する。例えば、Ｐｅｔｈｅ  ｅｔ  ａｌ．による雑誌論文Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１９，１１５７−１１６０（２０１３）の“Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｑ２０３，ａ  ｐｏｔｅｎｔ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｃａｎｄｉｄａｔｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ”は、結核菌（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）に対して試験された特定化合物を同定している。この化合物Ｑ２０３を以下に示す。
【化１】
2020509040.tif 000002
【００１９】
Ｑ２０３は、結核菌（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）中でＡＴＰシンターゼを妨害することにより作用する、およびシトクロムｂｃ１活性の阻害が主な作用機序であると想定されている。シトクロムｂｃ１は、ＡＴＰ合成のために必要とされる電子伝達系の不可欠な構成成分である。
【００２０】
この臨床候補は、雑誌論文Ｊ．Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１４，５７（１２），ｐｐ５２９３−５３０５においても考察されている。Ｑ２０３は、ＭＤＲ結核に対する活性を有し、マクロファージの内部で結核菌（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）株のＨ３７Ｒｖに対して０．２８ｎＭのＭＩＣ５０の活性を有すると記述されている。（既知の抗ＴＢ化合物であるベダキリン、イソニアジドおよびモキシフロキサシンを使用した）陽性コントロールデータも報告されている。この文献は、突然変異体を用いた研究に基づいて、作用機序についても示唆している。Ｑ２０３は、複製細菌および非複製細菌の両方に対して高度に活性であることが明らかになった。
【００２１】
Ｑ２０３および類似体に関連するまた別の文献には、特許文献である国際公開第２０１１／１１３６０６号パンフレットおよび同第２０１５／０１４９９３号パンフレットが含まれる。国際公開第２０１２／１４３７９６号パンフレットは、炎症の治療において使用するための様々な化合物を開示している。
【００２２】
シトクロムｂｃ１活性の阻害において有用な可能性がある化合物を開示している他の文献には、国際特許出願の国際公開第２０１７／００１６６０号パンフレットおよび同第２０１７／００１６６１号パンフレットが含まれ、それらの開示は参照により本明細書に含まれる。
【００２３】
上述したように、結核治療薬の併用もまた公知であり、特定の併用がＷＨＯによって使用するために推奨されている。併用療法は、リファンピシンおよび／またはエタンブトール、アモキシシリンおよび／またはエチオナミドならびにイソニアジドおよび／またはリファンピシンと組み合わせて試験されている、特に、大環状分子を含む結核治療薬の併用を開示している国際公開第２０１５／１０７４８２号パンフレットを含む数種の文献に記載されている。この文献はさらに、大員環が、可能性のある結核治療薬のリストの中でピラジンアミドまたはＱ２０３を含む多数の他の薬物と組み合わせられることもまた開示している。一部の雑誌論文、例えば、中でも特に、例えばクロファザミン（ｃｌｏｆａｚａｍｉｎｅ）およびベダキリンなどの他の結核治療薬と組み合わせてＱ２０３を試験している、Ｎａｔｕｒｅ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｌａｍｐｒｅｃｈｔ  ａｎｄ  ｃｏ．，２０１６，７，１２３９３もまた結核治療薬の様々な組み合わせについて開示している。
【００２４】
公知の薬物の新規な組み合わせおよび／またはより優れた組み合わせを見出せることは、−  組み合わせが依然として治療ガイドライン（例えば、所定の薬剤耐性細菌形）である可能性が高い；および−  最善の組み合わせを入手することが最終的には患者の転帰を前進させるであろうことを前提に、大きな利益が得られる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００２５】
結核を治療する際に使用するための特定の組み合わせは、（下記の生物学的試験結果において記載するように）特に効果的であることが見出されていることが見出されている。そのような組み合わせは、相乗作用性であることが見出されているので、したがって、本発明の範囲内に含まれる。一般に、ピラジンアミド（ＰＺＡ）およびシトクロムｂｃ１阻害剤（例えば、上記に定義したＱ２０３または本明細書で記載した別の薬剤）の組み合わせは、結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）を殺滅する際の極めて強力な活性をもたらすことが見出された。
【００２６】
したがって、本発明の１つの態様では、
−  下記を含む組み合わせ：
（ｉ）ＰＺＡまたはその薬学的に許容される塩；および
（ｉｉ）シトクロムｂｃ１阻害剤またはその薬学的に許容される塩
が提供され、
その組み合わせは、「本発明の組み合わせ」と呼ぶことができる。
【００２７】
ＰＺＡおよびシトクロムｂｃ１阻害剤の組み合わせを用いて見られる強力な活性に関する結果を前提にすると、さらに
−  下記の有効成分：
（ｉ）ＰＺＡまたはその薬学的に許容される塩；および
（ｉｉ）シトクロムｂｃ１阻害剤またはその薬学的に許容される塩からなる（例えば、本質的になる）組み合わせ
もまた提供されるが、その組み合わせもまた、「本発明の組み合わせ」と呼ぶことができる。
【００２８】
そのような本発明の組み合わせは、薬剤として有用である。例えば、そのような組み合わせは、特に、マイコバクテリア感染症（特に、本明細書では、「結核」と呼ぶこともできる結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ））の治療において有用な可能性がある。本発明のためには、結核は、例えば活動性形または潜在性形などの任意の形態の結核を意味する。潜在性（または休眠性）形（ｆｏｒ）については、以下で詳細に説明する。この形態は、さらに結核の薬剤耐性形（例えば、多剤耐性形、広範な多剤耐性形を含むＭＤＲ形）もまた含み得る。本発明の組み合わせは、ＭＤＲが（他の薬物に対して耐性を有する、または有していないが）少なくともイソニアジドおよび／またはリファンピシンに対して耐性である細菌に起因する耐性を意味することを前提に、ＭＤＲ結核に対して有効である、したがってピラジンアミド（ＰＺＡ）および（シトクロムｂｃ１阻害剤の一例としての）Ｑ２０３は、このため本発明の組み合わせは、依然としてＭＤＲ結核の治療において有用であると予想することができる。
【００２９】
しかし、この組み合わせの２種の薬物はそれら自体で十分であり得る（例えば、十分に効力がある）と考えられるが、本発明のそのような組み合わせは、追加の抗菌（例えば、抗結核）薬をさらに含み得る。例えば、任意の１種以上（例えば、１種または２種）の以下の抗菌（例えば、抗結核）薬（またはその薬学的に許容される塩）は、不可欠な２種の薬剤に加えて言及され得る（したがって、例えば、３剤または４剤の併用などを形成する）：
−  結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）の呼吸鎖を妨害することが知られている、例えば、ＡＴＰシンターゼの直接的阻害剤（例えば、ベダキリン、例えば、フマル酸ベダキリン、または先行技術に開示されていた可能性がある任意の他の化合物）、ｎｄｈ２の阻害剤（例えば、クロファジミン）を含む他の抗菌薬；
−  電子輸送鎖を標的とし得る、例えばシトクロムｂｄオキシダーゼを標的とする他の抗菌薬（例えば、Ａｕｒａｃｈｉｎ  Ｄ類似体）；
−  他のマイコバクテリア薬、例えば、リファンピシン（＝リファンピン）；イソニアジド；ピラジンアミド；アミカシン；エチオナミド；エタンブトール；ストレプトマイシン；パラ−アミノサリチル酸；シクロセリン；カプレオマイシン；カナマイシン；チオアセタゾン；ＰＡ−８２４；デラマニド；キノロン／フルオロキノロン（例えば、モキシフロキサシン、ガチフロキサシン、オフロキサシン、シプロフロキサシン、スパルフロキサシンなど）；マクロライド（例えば、クラリスロマイシン、アモキシシリン／クラブラン酸など）；リファマイシン；リファブチン；リファペンチン；ならびに現在開発中（しかし未上市であり得る；例えば、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｅｗｔｂｄｒｕｇｓ．ｏｒｇ／ｐｉｐｅｌｉｎｅ．ｐｈｐを参照）、例えば、デラナミド、プレトナミドなどの他の抗菌薬。
【００３０】
本明細書ではシトクロムｂｃ１阻害剤について言及するが、より詳細には、結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）のＥＴＣにおいてシトクロムｂｃ１を阻害し、それによりＡＴＰ合成を妨害し、その結果としてその細菌が複製することを防止する、またはその細菌を殺滅する化合物であると言うことができる。１つの実施形態では、そのような化合物のシトクロムｂｃ１阻害は、その主要な（結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）に対する）作用機序である。これに関連して、「阻害する」は、この化合物が例えば、例えば以下で記載するような関連試験またはアッセイにおいて、（シトクロムｂｃ１を）阻害する、または阻害することが公知であることを意味する。例えば、この化合物を以下で記載する薬理学的試験１〜４のいずれか１つにおいて抗菌活性について試験することができ、１つの実施形態では、抗菌活性が測定された場合、例えばＩＣ５０値が１０μＭ未満である場合（またはｐＩＣ５０値が５超である場合）は、本発明に関連して「阻害剤」の範囲内に含まれると理解される。ある化合物が（主としてその作用機序を介して作用する）シトクロムｂｃ１阻害剤であるかどうかを明確に決定するために、その化合物に対して耐性である突然変異体の生成および全ゲノムの詳細なシーケンシングは、本明細書で参照したＮａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅの雑誌論文（すなわち、参照によりその内容が本明細書に組み込まれる、特に化合物をシトクロムｂｃ１阻害剤であると同定することに関する詳細を提供した、Ｐｅｔｈｅ  ｅｔ  ａｌ．による雑誌論文Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１９，１１５７−１１６０（２０１３））において実施されたように実施することができる。例えば、ＭＩＣ５０値は、結核菌（Ｍｙｃｏｂａｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）の突然変異株に対して試験され得る。突然変異体が試験対象の化合物についてＭＩＣ５０の増加（例えば、例えば１０倍または５０倍、または１つの実施形態では、１００倍以上などの数桁分の増加）を示すが、他の、または標準抗結核薬に対して感受性のままである場合、この化合物は、突然変異がシトクロムｂサブユニット（ｑｃｒＢ、シトクロムｂｃ１錯体のＲｖ２１９６としても公知である）である場合に「ｂｃ１阻害剤」である。（例えばｑｃｒＢの）配列分析は、さらに、アラニンまたはイソロイシンいずれかへのＴｈｒ３１３の突然変異が試験化合物への耐性に関連していることを確証することができ、それによりさらに、試験化合物が「ｂｃ１阻害剤」であることも確証している。さらになお、親結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）Ｈ３７Ｒｖ中での同種組換えによる突然変異Ａｌａ３１３の再導入は、それが試験対象の化合物に対する耐性を付与するかどうかを見るために試験することができ、それはさらにその置換が耐性の機序に直接的および特異的に関与することを証明することができ、さらに試験化合物が「ｂｃ１阻害剤」であることを確証する。呼吸鎖を標的とする任意の化合物は、潜在的にＡＴＰの生成を阻害することができるので、したがって、シトクロムｂｃ１阻害剤はさらに、ＡＴＰ合成を妨害することができ、例えば、ＡＴＰレベル（例えば、細胞内ＡＴＰ）の低減を誘発することができる。したがって、細胞内ＡＴＰレベルを（試験化合物がＡＴＰレベルを低減するかどうかを決定するために）測定する適切な試験を実施することができ、その後に例えば、関連化合物がＡＴＰシンターゼ（例えば、ベダキリンは、ＡＴＰシンターゼ阻害剤である）またはシトクロムｂｃ１阻害剤を標的とするかどうかを決定するために、また別の試験、例えば、上記に定義した突然変異試験を実施することができる。
【００３１】
現在、「ｂｃ１阻害剤」についての酵素アッセイは存在せず、これについての理由は、ｂｃｃ錯体（これに関するより多くの情報は、ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｐｍｃ／ａｒｔｉｃｌｅｓ／ＰＭＣ４２０５５４３／に見いだすことができる）が、（電子伝達を達成するために）他の酵素と直接的に相互作用すると示唆されており、超錯体として機能することにある。
【００３２】
１つの実施形態では、言及され得る特定のｂｃ１阻害剤には：
Ｑ２０３（例えば、非塩形）；
それらの開示がどちらも参照により本明細書に組み込まれる国際特許出願の国際公開第２０１１／１１３６０６号パンフレットおよび同第２０１５／０１４９９３号パンフレットに開示された化合物のいずれか；
それらの開示がどちらも参照により本明細書に組み込まれる国際特許出願の国際公開第２０１７／００１６６０号パンフレットおよび同第２０１７／００１６６１号パンフレットに開示された化合物のいずれかが含まれる。
【００３３】
例えば、シトクロムｂｃ１阻害剤は、下記の一般式（Ｉ）：
【化２】
2020509040.tif 000003
（例えば、式中：
環Ａは、１個以上（例えば、１または２個）のヘテロ原子（例えば、窒素）を含有する５員の芳香族環であり；
環Ｂは、１個以上（例えば、１または２個）のヘテロ原子（例えば、窒素）を含有する６員の芳香族環であり；
環Ａおよび環Ｂは、一緒に、１〜４個（例えば、２または３個）のヘテロ原子（例えば、窒素原子）を含有する６，５−縮合芳香族二環であり；
環Ａおよび環Ｂは、Ｘａから選択される１つ以上の置換基で任意選択的に置換され；
Ｌ１は、リンカー基−Ｃ（Ｒａ）（Ｒｂ）−を表し；
ＲａおよびＲｂは、独立してＨまたはＣ１〜３アルキルを表し、または一緒に連結されて３〜５員の炭素環式環を形成し；
Ｘ１は、Ｘｂから選択される１つ以上の置換基で任意選択的に置換された芳香族リンカー基を表し；
Ｌ２は、Ｘｃから選択された１つ以上の置換基で任意選択的に置換されたリンカー環（例えば、本明細書に記載した単環式環、二環式環またはスピロ環）を含有する窒素を表し；
Ｘ２は、−Ｓ（Ｏ）２−Ｙ１、−Ｃ（Ｏ）−Ｙ２、−Ｙ３または−Ｏ−Ｙ４を表し；
Ｙ３およびＹ４は、独立してハロ（例えば、フルオロ；例えば、Ｙ３の場合のみ）、Ｃ１〜６アルキル（任意選択的に１個以上のフルオロ原子によって置換されている；例えば、Ｙ３の場合には、ビニル基を形成し得る；すなわち、＝Ｃ直接的に付着しており、および任意選択的にさらに置換されている）またはＸｄから選択された１つ以上の置換基で任意選択的に置換された芳香族基を表し；
Ｙ１およびＹ２は、独立してＣ１〜６アルキル（１つ以上のフルオロ原子で任意選択的に置換されている）または芳香族基（Ｘｅから選択された１つ以上の置換基で任意選択的に置換されている）を表し；
Ｘａ、Ｘｂ、Ｘｃ、ＸｄおよびＸｅは、独立して、ハロ（例えば、クロロまたはフルオロ）、−ＣＮ、Ｃ１〜６アルキル（フルオロおよび−ＯＣ１〜３アルキルから選択される１つ以上の置換基で任意選択的に置換されており、ここで後者のアルキル基はそれ自体が１つ以上のフルオロ原子で任意選択的に置換されていてよい）および−ＯＣ１〜６アルキル（１つ以上のフルオロ原子で任意選択的に置換されている）を表す）の化合物であり得る。
疑義を回避するために述べると、２つ以上のＸａ〜Ｘｅ置換基（例えば、Ｘ１部分上に２つのＸｂ置換基）が存在する場合は、それらのＸｂ置換基は、同一であっても異なっていてもよい。
【００３４】
１つの実施態様では、式（Ｉ）の化合物は：（式中、
Ｘ２が−Ｓ（Ｏ）２−Ｙ１または−Ｃ（Ｏ）−Ｙ２を表す）の化合物であってよく、その場合、そのような基は、Ｌ２窒素含有リンカー基（Ｌ２基の例は、下記で説明され得る）のヘテロ原子（例えば、窒素原子）に結合している。
【００３５】
１つの実施態様では、式（Ｉ）の化合物は：（式中、
Ｌ１が存在しない；または
Ｌ１が−ＣＨ２−を表す）化合物であり得る。
【００３６】
１つの実施態様では、式（Ｉ）の化合物は：（式中、
ＲａおよびＲｂは、独立してＨまたはＣ１〜３アルキルを表す（および、１つの実施形態では、Ｈを表す））化合物を表す。
【００３７】
１つの実施態様では、式（Ｉ）の化合物は：（式中、
Ｘ１芳香族リンカー基は、フェニル、ナフチルまたは二環式６，６−もしくは６，５−縮合ヘテロアリール（ｈｅｔｅｒａｒｙｌ）基（１〜３個、例えば１もしくは２個のヘテロ原子を含有する）を表し；
Ｘ１芳香族リンカー基は、炭素環（例えば、フェニレン、ナフチレン）または複素環（例えば、二環式６，６−もしくは６，５−縮合）リンカーのいずれかを表すので、下記の部分（第１波線はＬ１基への結合点を表す）：
−  フェニレン−（特に１，４−フェニレン）、例えば：
【化３】
2020509040.tif 000004
−  ナフチレン、例えば：
【化４】
2020509040.tif 000005
−  キノリレン（例えば、２−キノリレン）、例えば：
【化５】
2020509040.tif 000006
−  キノキサリニル（例えば、２−キノリレンなど）、例えば：
【化６】
2020509040.tif 000007
を表し；
１つの実施形態では、Ｘ１部分は、炭素環式芳香族リンカー基（例えば、上記に描出したように、例えば、フェニレンもしくはナフチレン）を表し；および／または
１つの実施形態では、Ｘ１芳香族リンカー基は、（可能性のあるＸｂ置換基によって）置換されていない）化合物であり得る。
【００３８】
１つの実施態様では、式（Ｉ）の化合物は：（式中、
Ｌ２窒素含有リンカー基は、例えば、窒素原子がＸ１に直接的に連結している、および窒素環がまた別の環（例えば、また別の３〜８員もしくは４〜６員環）の一部を形成し得るので、例えば、スピロ環もしくは縮合環を形成する３〜８員（例えば、４〜６員）の窒素含有環であり；
次のＬ２基は、本明細書で特に言及され得る（ここで上方の波線は、Ｘ１への結合点を表し、下方の波線はＸ２への結合点を表す）：
【化７】
2020509040.tif 000008
；および／または
Ｌ２窒素含有リンカー基（もしくは環）は、（Ｘｃから選択される１つ以上の置換基で）置換されていない）化合物であり得る。
【００３９】
１つの実施態様では、式（Ｉ）の化合物は：（式中、
Ｘ２は、−Ｙ３または−Ｏ−Ｙ４を表し；
Ｙ３およびＹ４は、独立して、それらの全部が例えば、本明細書で定義したように任意選択的に置換されている（例えば、Ｙ３およびＹ４は、例えばパラ位置で、Ｘｄによって任意選択的に置換されたフェニルを表す場合がある）フェニル、ナフチルまたは二環式６，６−もしくは６，５−縮合ヘテロアリール（ｈｅｔｅｒａｒｙｌ）基（１〜３個、例えば、１もしくは２個のヘテロ原子を含有する）である芳香族基を表し；
Ｘｄは、Ｃ１〜３アルキルおよび−ＯＣ１〜３アルキル（それらのどちらも後者のアルキル部分はそれら自体が１つ以上のフルオロ原子によって任意選択的に置換されているので、例えば、−ＣＦ３もしくは−ＯＣＦ３置換基を形成する）から選択された１つ以上（例えば、１つ）の置換基を表す）の化合物を表す。
【００４０】
１つの実施態様では、式（Ｉ）の化合物は：（式中、
Ｘ２は、−Ｓ（Ｏ）２−Ｙ１または−Ｃ（Ｏ）−Ｙ２を表し；および
１つの態様では、Ｙ１およびＹ２は、独立して、１つ以上のフルオロ原子によって任意選択的に置換された（そこで、例えば、−ＣＦ３基を形成する）Ｃ１〜６（例えば、Ｃ１〜３）アルキルを表し；または
また別の態様では、Ｙ１およびＹ２は、独立して、本明細書で定義したように任意選択的に置換された芳香族基（例えば、炭素環式芳香族基）を表す（例えば、Ｙ１およびＹ２は、１つ以上のＸｅ置換基で任意選択的に置換されたフェニルを表し；Ｘｅは、Ｃ１〜３アルキルまたは−Ｏ−Ｃ１〜３アルキルを表すが、そのアルキル部分はそれら自体が１個以上のフルオロ原子によって任意選択的に置換されているので、例えば、−ＣＦ３基を形成する））化合物を表す。
【００４１】
特に、式Ｉの化合物は、環Ａおよび環Ｂによって定義された下記の二環：
【化８】
2020509040.tif 000009
（式中、「ＳＵＢ」は、それぞれが二環の各環の利用できる位置のいずれか１つに位置する（本明細書に定義した）１つ以上の置換基を表し；および
１つの実施形態では、環Ａおよび環Ｂは一緒に、描出した第１構造（イミダゾピリジン）を表す）を含有し得る。
【００４２】
特に、シトクロムｂｃ１阻害剤は、本明細書に定義した特定の化合物である。
【図面の簡単な説明】
【００４３】
【図１】下記で説明するように、治療の終了後の１４試験群におけるＣＦＵの測定を示す図である（１１試験群は、ＢＤＱ、Ｑ２０３、ＰＺＡ、Ｃｐｄ  Ｘまたは上記の薬剤の様々な組み合わせを含む治療レジメンを含み、３試験群は、コントロール群である；詳細については下記の実施例を参照されたい）。
【発明を実施するための形態】
【００４４】
本発明の組み合わせの有効成分（例えば、不可欠なＰＺＡおよびシトクロムｂｃ１阻害剤、および／または任意選択的なまた別の抗菌薬）は、さらにまた薬学的に許容される塩の形態にあってもよい。薬学的に許容される塩としては、酸付加塩および塩基付加塩が挙げられる。そのような塩は、従来の手段によって、例えば、関連する有効成分（例えば、ＰＺＡ、シトクロムｂｃ１阻害剤または他の任意選択的抗菌薬）の遊離酸または遊離塩基形態と１当量以上の適切な酸または塩基との、任意選択的に溶媒中または塩が不溶性である媒体中での反応、それに続く標準的技術を用いての（例えば、真空中での、凍結乾燥または濾過による）前記溶媒または前記媒体の除去によって生成し得る。塩はまた、例えば好適なイオン交換樹脂を用いて、塩の形態にある本発明の化合物の対イオンを別の対イオンと交換することによっても調製し得る。
【００４５】
上述したような薬学的に許容される酸付加塩は、関連する有効成分（例えば、ＰＺＡ、シトクロムｂｃ１阻害剤または他の任意選択的抗菌薬）を生成できる治療的活性を有する無毒の酸付加塩の形態を含むことが意図されている。これらの薬学的に許容される酸付加塩は、塩基の形態をそのような適切な酸で処理することにより容易に得ることができる。適切な酸には、例えば、無機酸、例えば、塩酸または臭化水素酸などのハロゲン化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの酸；または有機酸、例えば、酢酸、プロパン酸、ヒドロキシ酢酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸（すなわち、エタン二酸）、マロン酸、コハク酸（すなわち、ブタン二酸）、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、パモ酸などの酸が含まれる。
【００４６】
本発明の目的のためには、関連する有効成分（例えば、ＰＺＡ、シトクロムｂｃ１阻害剤または他の任意選択的抗菌薬）の溶媒和物、プロドラッグ、Ｎ−オキシドおよび立体異性体もまた本発明の範囲内に含まれる。
【００４７】
本発明の関連化合物の「プロドラッグ」という用語は、経口または非経口投与後に、インビボで代謝されて、実験的に検出可能な量で、定義の時間内（例えば、６〜２４時間（すなわち、１日１〜４回）の投与間隔内）に形成される任意の化合物を包含する。疑義を回避するために述べると、「非経口」投与という用語は、経口投与以外のあらゆる投与形態を包含する。
【００４８】
本発明で言及した（例えば、式（Ｉ）の）化合物のプロドラッグは、そのようなプロドラッグが哺乳動物対象に投与されると修飾がインビボで切断されるような方法で当該化合物上に存在する官能基を修飾することによって調製することができる。この修飾は、通常、プロドラッグ置換基を有する親化合物を合成することによって達成される。プロドラッグには、本明細書で言及した（例えば、式（Ｉ）の）化合物であって、その化合物中のヒドロキシル基、アミノ基、スルフヒドリル基、カルボキシ基またはカルボニル基が、それぞれ遊離のヒドロキシル基、アミノ基、スルフヒドリル基、カルボキシ基またはカルボニル基を再生するようにインビボで切断され得る任意の基に結合している化合物が含まれる。
【００４９】
プロドラッグの例としては、ヒドロキシ官能基のエステルおよびカルバメート、カルボキシル官能基のエステル基、Ｎ−アシル誘導体およびＮ−マンニッヒ塩基が挙げられるが、これらに限定されない。プロドラッグに関する一般的な情報は、例えばＢｕｎｄｅｇａａｒｄ，Ｈ．“Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ”ｐ．１−９２，Ｅｌｅｓｅｖｉｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ−Ｏｘｆｏｒｄ（１９８５）の中に見出すことができる。
【００５０】
式（Ｉ）の化合物は、二重結合を含有することができるので、したがってそれぞれ個々の二重結合に関してＥ（ｅｎｔｇｅｇｅｎ）およびＺ（ｚｕｓａｍｍｅｎ）幾何異性体として存在し得る。位置異性体もまた、式（Ｉ）の化合物に包含され得る。全てのそのような異性体（例えば、本発明の化合物が二重結合または縮合環を含む場合は、シス型およびトランス型が包含される）およびそれらの混合物は、本発明の範囲に含まれる（例えば、単一の位置異性体および位置異性体の混合物は、本発明の範囲に含まれ得る）。
【００５１】
式（Ｉ）の化合物はまた、互変異性を示し得る。全ての互変異性形態（または互変異性体）およびそれらの混合物は、本発明の範囲に含まれる。「互変異性体」または「互変異性形態」という用語は、低エネルギー障壁を介して相互変換可能な、異なるエネルギーの構造異性体を指す。例えば、プロトン互変異性体（プロトトロピー互変異性体としても知られる）には、プロトンの移動を介した相互変換、例えば、ケト−エノールとイミン−エナミンの異性化が含まれる。原子価互変異性体には、結合電子のうちのいくつかの再編成による相互変換が含まれる。
【００５２】
式（Ｉ）の化合物はまた、１個以上の不斉炭素原子を含有し得、したがって、光学異性および／またはジアステレオ異性を示し得る。ジアステレオ異性体は、従来の技術、例えば、クロマトグラフィーまたは分別結晶化を用いて分離し得る。種々の立体異性体は、従来の、例えば分別結晶化またはＨＰＬＣ技術を用いて、化合物のラセミ混合物または他の混合物を分離することにより単離し得る。または、所望の光学異性体は、ラセミ化もしくはエピマー化を引き起こさない条件下における適切な光学的に活性な出発物質の反応（すなわち、「キラルプール」法）により、適切な出発物質と後に適切な段階で除去され得る「キラル補助剤」との反応により、例えばホモキラル酸を用いた誘導体化（すなわち、動的分割などの分割）、それに続く従来の手段（例えば、クロマトグラフィー）によるジアステレオマー誘導体の分離により、または適切なキラル試薬またはキラル触媒を用いた反応により、いずれも当業者に知られている条件下において調製し得る。
【００５３】
全ての立体異性体（ジアステレオ異性体、鏡像異性体およびアトロプ異性体が挙げられるが、これらに限定されない）およびそれらの混合物（例えば、ラセミ混合物）は、式（Ｉ）の範囲に含まれる。
【００５４】
本明細書に示す構造において、任意の特定のキラル原子の立体化学が指定されていない場合、全ての立体異性体が企図されており、式（Ｉ）の化合物として包含される。立体化学が特定の配置を示す実線の楔または破線で指定されている場合、その立体異性体はそのように指定され、定義される。
【００５５】
式（Ｉ）の化合物は、非溶媒和形態および薬学的に許容される溶媒、例えば、水、エタノールなどとの溶媒和形態で存在し得、溶媒和形態および非溶媒和形態の両方が包含されることが意図されている。
【００５６】
式（Ｉ）の化合物はまた、１個以上の原子が自然界で通常見られる原子質量または質量数（または自然界で見られる最も豊富なもの）とは異なる原子質量または質量数を有する原子により置換されている以外は、本明細書に記載の化合物と同一である同位体標識された化合物も包含する。本明細書で定義された任意の特定の原子または元素の全ての同位体は、式（Ｉ）の範囲内にあると企図されている。式（Ｉ）の化合物に含まれ得る同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、塩素およびヨウ素、例えば２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ、１７Ｏ、１８Ｏ、３２Ｐ、３３Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、３６Ｃｌ、１２３Ｉおよび１２５Ｉなどの同位体が挙げられる。式（Ｉ）の特定の同位体標識化合物（例えば、３Ｈおよび１４Ｃで標識されたもの）は、化合物において、および基質組織分布アッセイにとって有用である。トリチウム化同位体（３Ｈ）および炭素１４同位体（１４Ｃ）は、それらの調製容易性および検出可能性のために有用である。さらに、重水素（すなわち、２Ｈ）などのより重い同位体による置換は、より大きな代謝安定性の結果としてもたらされる特定の治療上の利点（例えば、インビボ半減期の増加または投薬必要量の減少）をもたらし得、したがって、好ましい場合があり得る。例えば１５Ｏ、１３Ｎ、１１Ｃおよび１８Ｆなどの陽電子放射性同位体は、基質受容体占有率を調べるための陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）の研究に有用である。式（Ｉ）の同位体標識化合物は、一般に、下記の記述／実施例で開示されているものと類似の手順にしたがって、非同位体標識試薬の代わりに同位体標識試薬を用いることによって調製することができる。
【００５７】
特に断らない限り、本明細書で定義したＣ１〜ｑアルキル基（ここで、ｑは範囲の上限である）は、直鎖であるか、または十分な数（すなわち、妥当な値として最低２個または３個）の炭素原子が存在する場合は、分岐鎖、および／もしくは環状（したがって、Ｃ３〜ｑ−シクロアルキル基を形成している）であり得る。そのようなシクロアルキル基は、単環式または二環式であってよく、さらに架橋されている場合もある。さらに、十分な数（すなわち、最低４個）の炭素原子が存在する場合は、そのような基はまた、部分的に環状であり得る。そのようなアルキル基はまた、飽和であるか、または十分な数（すなわち、最低２個）の炭素原子が存在する場合は、不飽和（例えば、Ｃ２〜ｑアルケニル基またはＣ２〜ｑアルキニル基を形成している）であり得る。
【００５８】
用語「ハロ」は、本明細書で使用する場合、好ましくは、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを包含する。
【００５９】
芳香族基は、アリールまたはヘテロアリールであり得る。芳香族基が炭素環式であると定義されている場合は、そのような基は、「アリール」基と呼ぶこともできる。言及され得るアリール基としては、例えばＣ６〜１２（例えばＣ６〜１０）などのＣ６〜２０アリール基が含まれる。そのような基は、単環式、二環式または三環式であってよく、少なくとも１個の環は芳香族である６〜１２個（例えば、６〜１０個）の環炭素原子を有し得る。Ｃ６〜１０アリール基には、フェニル、ナフチルなど、例えば１，２，３，４−テトラヒドロナフチルが含まれる。アリール基の結合点は、環系の任意の原子を介してでもよい。例えば、アリール基が多環式である場合、結合点は、非芳香族環の原子を含む原子を介してでもよい。しかし、アリール基が多環式（例えば、二環式または三環式）である場合、それらは芳香族環を介して分子の残部に連結されることが好ましい。本明細書において言及され得る最も好ましいアリール基は、「フェニル」基である。
【００６０】
芳香族複素環基は、「ヘテロアリール」基とも呼ぶことができ、本明細書で使用する場合は、好ましくはＮ、ＯおよびＳから選択される１個以上のヘテロ原子（例えば、１〜４個のヘテロ原子）を含有する芳香族基を意味する。ヘテロアリール基には、５〜２０員（例えば、５〜１０員）のヘテロアリール基が含まれ、環の中の少なくとも１つが芳香族環である（したがって、例えば、単環式、二環式または三環式ヘテロ芳香族基を形成する）ことを前提に、単環式、二環式または三環式であり得る。ヘテロアリール基が多環式である場合、結合点は、非芳香族環の原子を含む任意の原子を介してでもよい。しかし、ヘテロアリール基が多環式（例えば、二環式または三環式）である場合、それらは、芳香族環を介して分子の残部に連結されることが好ましい。さらに、ヘテロアリールが多環式である場合は、個々の環のそれぞれが芳香族であることもまた好ましい。言及することのできるヘテロアリール基としては、３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリニル、１，３−ジヒドロイソインドリル、１，３−ジヒドロイソインドリル（例えば、３，４−ジヒドロ−１Ｈ−イソキノリン−２−イル、１，３−ジヒドロイソインドール−２−イル、１，３−ジヒドロイソインドール−２−イル；すなわち非芳香族環を介して連結されているヘテロアリール基）、または、好ましくは、アクリジニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾジオキサニル、ベンゾジオキセピニル、ベンゾジオキソリル（１，３−ベンゾジオキソリルを含む）、ベンゾフラニル、ベンゾフラザニル、ベンゾチアジアゾリル（２，１，３−ベンゾチアジアゾリルを含む）、ベンゾチアゾリル、ベンズオキサジアゾリル（２，１，３−ベンズオキサジアゾリルを含む）、ベンズオキサジニル（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−ベンズオキサジニルを含む）、ベンズオキサゾリル、ベンゾモルホリニル、ベンゾセレナジアゾリル（２，１，３−ベンゾセレナジアゾリルを含む）、ベンゾチエニル、カルバゾリル、クロマニル、シンノリニル、フラニル、イミダゾリル、イミダゾ［１，２−ａ］ピリジル、インダゾリル、インドリニル、インドリル、イソベンゾフラニル、イソクロマニル、イソインドリニル、イソインドリル、イソキノリニル、イソチアジオリル、イソチオクロマニル、イソキサゾリル、ナフチリジニル（１，６−ナフチリジニル、または、好ましくは、１，５−ナフチリジニルおよび１，８−ナフチリジニルを含む）、オキサジアゾリル（１，２，３−オキサジアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリルおよび１，３，４−オキサジアゾリルを含む）、オキサゾリル、フェナジニル、フェノチアジニル、フタラジニル、プテリジニル、プリニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、キノリジニル、キノキサリニル、テトラヒドロイソキノリニル（１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリニルおよび５，６，７，８−テトラヒドロイソキノリニルを含む）、テトラヒドロキノリニル（１，２，３，４−テトラヒドロキノリニルおよび５，６，７，８−テトラヒドロキノリニルを含む）、テトラゾリル、チアジアゾリル（１，２，３−チアジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリルおよび１，３，４−チアジアゾリルを含む）、チアゾリル、チオクロマニル、チオフェネチル、チエニル、トリアゾリル（１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリルおよび１，３，４−トリアゾリルを含む）などが挙げられる。ヘテロアリール基上の置換基は、適切な場合は、ヘテロ原子を含む環系の任意の原子上に位置し得る。ヘテロアリール基の結合点は、（適切な場合は）ヘテロ原子（例えば、窒素原子）を含む環系の任意の原子、または環系の一部として存在し得る任意の縮合炭素環式環上の原子を介してでもよい。ヘテロアリール基はまた、ＮまたはＳ酸化形態であり得る。本明細書において言及したヘテロアリール基は、単環式または二環式であると明示的に述べることができる。ヘテロアリール基が非芳香族環の存在する多環式である場合、その非芳香族環は、１つ以上の＝Ｏ基で置換され得る。本明細書で言及され得る最も好ましいヘテロアリール基は、１、２または３個のヘテロ原子（例えば、窒素、酸素および硫黄から選択されることが好ましい）を含有する、５または６員の芳香族基である。
【００６１】
ヘテロアリール基が単環式または二環式であることは、明示的に述べることができる。ヘテロアリールが二環式であると指定されている場合、それは、別の５員、６員または７員の環（例えば、単環式のアリール環またはヘテロアリール環）と縮合した、５員、６員または７員の単環式環（例えば、単環式ヘテロアリール環）からなり得る。
【００６２】
言及され得るヘテロ原子としては、リン、ケイ素、ホウ素、ならびに、好ましくは、酸素、窒素および硫黄が挙げられる。
【００６３】
本明細書において「芳香族」基と言及される場合、それらはアリールまたはヘテロアリールであり得る。本明細書において「芳香族リンカー基」と言及される場合、それらは、本明細書において定義したように、アリールまたはヘテロアリールであってよく、単環式（または、また別の実施形態では多環式）であり、そのリンカー基の任意の考えられる基を介して分子の残部に結合している。しかし、具体的に炭素環式芳香族リンカー基と言及される場合、そのような芳香族基はヘテロ原子を含有することはあり得ない、すなわち、それらはアリールであり得る（が、ヘテロアリールではないこともある）。
【００６４】
疑義を回避するために述べると、ある基が１つ以上の置換基（例えば、Ｃ１〜６アルキル基から選択される）で置換され得ると本明細書で記載された場合、そのような置換基（例えば、アルキル基）は互いに独立している。すなわち、そのような基は、同一の置換基（例えば、同一のアルキル置換基）または異なる（例えば、アルキル）置換基で置換され得る。
【００６５】
本明細書において言及した全ての個々の特徴（例えば、好ましい特徴）は、単独で、または本明細書において言及される任意の他の特徴（好ましい特徴を含む）と組み合わせて解釈され得る（したがって、好ましい特徴は、他の好ましい特徴に関連して、またはそれらから独立して解釈され得る）。
【００６６】
当業者であれば、本発明の主題である式（Ｉ）の化合物には安定性である化合物が含まれることを理解するであろう。すなわち、式（Ｉ）の化合物には、例えば反応混合物から有用な程度の純度への単離に十分に耐え得る強固な化合物が含まれる。
【００６７】
本発明の組み合わせは、活動性結核の治療において有用な可能性があり、さらに潜在性または休眠性結核の治療においても有用な可能性がある。この組み合わせは、静菌性作用を有することにより効果的であり得るが、さらに殺菌性作用も有し得る。それらは、この組み合わせ（または組み合わせの不可欠な構成成分のいずれか１種、例えばｂｃ１阻害剤、例えばＱ２０３）が潜在性結核菌（ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ  ｂａｃｉｌｌｉ）にもまた大きな影響を及ぼし得るＡＴＰシンターゼを妨害することによって作用できるために、潜在性結核の治療においても有用な可能性があると指摘されている。活動性結核に対して、および潜在性結核に対しても有効である、例えば、潜在性結核菌（ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ  ｂａｃｉｌｌｉ）に大きな影響を及ぼし得る、または殺滅できる組み合わせを有することは有益である。結核の蔓延を制御するために、潜在性結核が再活性化され得ると活動性結核を誘発し得る、および例えば免疫抑制剤（例えば、腫瘍壊死因子αまたはインターフェロン−γに対する抗体など）の使用による宿主免疫の抑制などのいくつかの因子がこの事件に影響を及ぼし得るので、この組み合わせを有することが重要である。組み合わせ（および組み合わせの各有効成分）の用量は、組み合わせが活動性結核または潜在性結核のどちらを治療するために使用されるのかに影響を受ける可能性がある。
【００６８】
各薬物の量は、生物学的または医学的応答を引き出すための有効量でなければならない。薬物の１日量は、当然ながら、例えば、−  既に（例えば、ＥＭＡまたはＵＳ  ＦＤＡなどの適切な規制機関によって）承認された推奨１日量；−  既に承認された（または臨床試験で試験中である）用量より低い用量の有効性；−  患者の忍容性；−  関連組み合わせの一部を形成する他の薬物（または複数の薬物）の１日量；−  組み合わせの構成成分間の任意の相乗作用；−  投与方法などの因子に依存して変動し得る。
【００６９】
用量に関して、一般に、満足できる結果は、本発明の組み合わせの関連化合物が１〜２ｇ（グラム）を超えない１日投与量、例えば１〜５０ｍｇ／ｋｇ（体重）または１０〜５０ｍｇ／ｋｇ（体重）の範囲内で投与される場合に得られるであろう。しかし、用量は、奏効率に依存して調整することができる。
【００７０】
ＰＺＡ（もしくはその薬学的に許容される塩）についての１日量は、例えば、１５〜３０ｍｇ／ｋｇ（２ｇまで）、または週２回の５０〜７５ｍｇ／ｋｇ（３ｇまで）の代替投与レジメンであり得る。したがって、１日量は、例えば、５００ｍｇ〜２０００ｍｇ（例えば、約１０００、約１５００もしくは約２０００ｍｇ）であり得る。
【００７１】
シトクロムｂｃ１阻害剤（例えば、Ｑ２０３もしくはその薬学的に許容される塩）についての１日量は、例えば、１．５〜１５ｍｇ／ｋｇ（１ｇまで）であり得る。したがって、１日量は、例えば、５０ｍｇ〜１０００ｍｇであり得、１つの実施形態では、５０ｍｇ〜２５０ｍｇ（例えば、約５０、７５、１００、１５０または２００ｍｇ）であり得、また別の態様では５０ｍｇ〜８００ｍｇ（例えば、１００ｍｇ〜８００ｍｇ、例えば、約１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００または８００ｍｇ）であり得る。
【００７２】
本発明の組み合わせに含めることのできる任意選択的なまた別の抗菌薬は、（例えば、他の抗菌薬との組み合わせで承認されている場合は）規制機関によって推奨された１日量で投与することができ、１または２ｇを超えない、例えば１〜５０ｍｇ／ｋｇ（体重）（例えば、１〜２５ｍｇ／ｋｇ、１．５〜２５ｍｇ／ｋｇまたは２〜１５ｍｇ／ｋｇ（体重）の範囲内）で投与されるのが好ましい。
【００７３】
本発明の組み合わせが有利である（例えば、実施例の項で例示するように、相乗作用性）と見なされる場合、そのような組み合わせは、１つの実施形態では、治療段階で必要とされる他の抗菌薬（抗結核薬）がより少数である、または全く必要とされない可能性があるという長所、および／またはまた別の実施形態では、本組み合わせの２種の不可欠な構成成分のいずれか１種（ＰＺＡもしくはシトクロムｂｃ１阻害剤）および／または追加の任意選択的（本明細書に定義した）抗菌薬の用量（例えば、１日量）が予想より少ない（例えば、リファンピン／イソニアジドおよび／またはエタンブトールなどの他の抗菌薬と組み合わせて使用するために標識された場合に、規制官庁によって推奨された用量より少ない、または臨床試験において試験された用量より少ない）可能性があるという長所を有すると想定されている。したがって、ＰＺＡ、またはその薬学的に許容される塩の予想１日量は、７．５〜１５ｍｇ／ｋｇ（１ｇまで）であり得る。したがって、１日量は、例えば、２５０ｍｇ〜１０００ｍｇ（例えば、約２５０、５００、約７５０または約１０００ｍｇ）であり得る。および、シトクロムｂｃ１阻害剤（例えば、Ｑ２０３またはその薬学的に許容される塩）の予想１日量は、０．７５〜７．５ｍｇ／ｋｇ（５００ｍｇまで）であり得る。したがって、１日量は、２５ｍｇ〜５００ｍｇであり得、１つの実施形態では、２５ｍｇ〜１２５ｍｇ（例えば、約２５、５０、７５または１００ｍｇ）であり得る。
【００７４】
本開示で言及した量は全て、遊離形態（すなわち非塩形態）についてのものである。下記に提示した数値は、遊離形態の同等物、すなわち遊離形態が投与された場合の量を示す。塩が投与される場合、その量は、塩と遊離形態との分子量比に応じて算出する必要がある。
【００７５】
本明細書に記載した用量（例えば、１日量）は定義の平均体重に対して算出されており、小児用の場合、または定義とは実質的に異なる体重を有する患者に使用する場合は、計算し直さなければならない。
【００７６】
結核に対する治療期間は、１年間を超える可能性がある。しかし、治療期間は、本発明の組み合わせを用いると減らし得ると想定されている。例えば、治療期間は、３６週間以下、例えば２４週間以下であり得る。特定の実施形態では、治療期間は、２０週間未満、例えば１６週間以下または１２週間以下であり得る。
【００７７】
本発明の態様では、本明細書に記載したように、薬剤または医薬品として使用するための、本発明の組み合わせが提供される。そのような組み合わせは、結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）を原因とする疾患の治療において（例えば、結核の治療において）有用な可能性がある。
【００７８】
したがって、薬学的に許容される担体、および有効成分として、治療有効量の本発明の組み合わせを含む医薬組成物（または調製物）もまた提供される。そのような組み合わせは、下記で説明するように、医薬組成物に製剤化することができる。
【００７９】
したがって、本発明のまた別の態様では、結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）を原因とする疾患（結核）に罹患している、またはリスク状態にある患者を治療する方法であって、治療有効量の本発明の組み合わせまたは本発明の医薬組成物を投与する工程を含む方法が提供される。１つの実施形態では、患者は、ヒトである。
【００８０】
また別の実施形態では、本明細書に定義した治療方法であって、本明細書に定義した治療持続期間（例えば、３６週間以下、２４週間以下の治療期間、または特定の実施形態では、１６週間以下または１２週間以下の治療期間）をさらに含む方法が提供される。または、本明細書に記載したように使用するための組み合わせであって、その使用が特定の治療持続期間（例えば、３６週間以下、２４週間以下の治療期間、または特定の実施形態では、１６週間以下または１２週間以下の治療期間）にわたる組み合わせが提供される。
【００８１】
本発明の組み合わせ（組み合わせの２種の不可欠な抗菌薬およびまた別の任意選択的薬物を含む）の構成成分もしくは抗菌薬は、（例えば、本明細書に定義したように）別個に製剤化できる、または一緒に製剤化して、例えば、一定用量の調製物を形成することができる。後者は、コンプライアンスに関する長所を有し得る。一部の実施形態では、本発明の組み合わせの２種（もしくは任意選択的にそれ以上）の抗菌薬は共投与することができ、他の実施形態では、（組み合わせの）抗菌薬は、連続的に投与することができるが、さらに他の実施形態では、それらは実質的に同時に投与することができる。後者の実施形態の一部では、投与は、互いに３０分間以内に、一部の実施形態では、互いに１５分間以内にそのような抗菌薬を摂取することを必要とする。一部の実施形態では、抗菌薬は、１日１回、毎日ほぼ同時刻に投与される。例えば、抗菌薬は、第１日の投与の最初の時間から４時間、すなわち、±２時間もしくは±１時間、またはさらに他の実施形態では、最初の投与日の時間から±３０分間の時間範囲内で投与される。
【００８２】
一部の実施形態では、本発明の抗菌薬は、別個の経口カプセルまたは経口錠剤として投与される。他の調製物は、固体分散体を含み得る。
【００８３】
したがって、本明細書で組み合わせについて言及する場合、そのような組み合わせは、本発明の組み合わせの全ての抗菌薬（すなわち、本明細書で言及した２種の不可欠な抗菌薬、および任意選択的に１種以上のまた別の抗菌薬）を含む単一調製物であり得る、または組み合わせ製品（そのようなパーツのキット）であって、本発明の組み合わせの抗菌薬のそれぞれが別個の形態（それぞれが抗菌薬の１種を含む）または２種以上の形態（本発明の組み合わせにおける抗菌薬の総数に依存する）のいずれかとして一緒に包装され得る。１つの実施形態では、本発明の組み合わせの各抗菌薬は、別個に製剤化される、および／またはさらに別個に包装されるが、本発明の組み合わせの他の抗菌薬の１種以上と併用するためであると表示することができる。（本明細書で記載した）組み合わせの抗菌薬は、共投与する、連続的に投与する、または実質的に同時に投与することができる。したがって、抗菌薬のそれぞれの個々の剤形は、本明細書に記載したように別個の形態として（例えば、別個の錠剤もしくはカプセル剤として）投与することができ、または、他の実施形態では、全３種の活性物質を含有する単一形として、または２種の形態（一方は活性物質のいずれか２種を含有し、他方は残りの活性物質を含有する）として投与されてよい。
【００８４】
本発明の組み合わせの抗菌薬は、投与する目的で様々な医薬品形に製剤化され得る。本明細書で言及したように、この製剤化は、個別の抗菌薬または本発明の組み合わせの部分を形成する抗菌薬の組み合わせを対象に実施することができる。必要に応じて、組成物は、通常は薬物を全身性で投与するために使用される組成物を含み得る。医薬組成物を調製するために、関連抗菌薬（または関連抗菌薬の組み合わせ）は、薬学的に許容される担体と均質に混合されて組み合わされるが、その担体は、投与のために望ましい調製物の形態に依存して、多種多様な形態を取ることができる。これらの医薬組成物は、特に、経口投与または非経口注射による投与に好適な単位投与形態が望ましい。例えば、経口投与形態の組成物を調製する際には、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤および液剤などの経口液体製剤の場合には、例えば水、グリコール、油、アルコールなどの通常の医薬媒体のいずれかを使用することができ、または散剤、丸剤、カプセル剤および錠剤の場合には、例えばデンプン、糖、カオリン、希釈剤、潤滑剤、結合剤、崩壊剤などの固体担体を使用し得る。投与が容易であるために、錠剤およびカプセル剤が最も有利な経口単位剤形であり、この場合は、言うまでもなく固体医薬担体が使用される。非経口組成物の場合、担体は、通常、滅菌水を少なくとも大部分含むことになるが、例えば溶解性を助ける他の成分が含まれ得る。例えば、担体が生理食塩水、ブドウ糖溶液または生理食塩水とブドウ糖溶液との混合物を含む注射用溶液を調製することができる。注射用懸濁剤も調製することができるが、その場合、適切な液体担体および懸濁化剤などが使用され得る。また、使用直前に液体形態の製剤に変換することを意図した固体形態の製剤も含まれる。
【００８５】
投与方法に応じて、医薬組成物は、好ましくは０．０５〜９９重量％、より好ましくは０．１〜７０重量％、よりいっそう好ましくは０．１〜５０重量％の有効成分を含み、および１〜９９．９５重量％、より好ましくは３０〜９９．９重量％、よりいっそう好ましくは５０〜９９．９重量％の薬学的に許容される担体を含むであろう（全てのパーセンテージは組成物の総重量に基づく）。
【００８６】
本明細書で言及した任意の医薬組成物（例えば、１種の抗菌薬または本発明の組み合わせの抗菌薬の組み合わせを含む医薬組成物）は、追加して当分野において知られている様々な他の成分、例えば、潤滑剤、安定化剤、緩衝剤、乳化剤、粘度調節剤、界面活性剤、保存剤、フレーバー剤または着色剤を含有し得る。
【００８７】
投与を容易にして投与量を均一にするために、前述の医薬組成物を単位剤形に製剤化することは特に有利である。本明細書で使用される単位剤形とは、単位用量として好適である物理的に個別の単位を指し、各単位は、必要な医薬担体と共同して所望の治療効果を生じるように計算された定義量の有効成分を含有する。そのような単位剤形の例は、錠剤（分割錠剤またはコーティング錠剤を含む）、カプセル剤、丸剤、粉末パケット、ウエハー、坐剤、注射液または懸濁剤など、およびそれらの分離複合剤である。
【００８８】
本明細書で言及したように、本明細書に記載した抗菌薬の組み合わせは、共投与する、連続的に投与する、または（本明細書に記載したように）実質的に同時に投与することができる。したがって、抗菌薬のそれぞれの個々の剤形は、本明細書に記載したように別個の形態として（例えば、別個の錠剤もしくはカプセル剤として）投与することができ、また別の実施形態では、全活性物質を含有する単一形として、または２種以上の形態（例えば、３種の抗菌薬が存在する場合、１種は任意の２種を含有し、他方は残りの１種を含有する）として投与されてよい。
【００８９】
さらに本明細書に定義した医薬調製物を調製するための方法であって、本発明の組み合わせの有効成分のいずれか１種（またはそれ以上、例えば２種の不可欠な有効成分、および任意選択的に、本明細書に定義したまた別の抗菌薬）を１種（またはそれ以上）の薬学的に許容される賦形剤または担体と関連付ける方法が提供される。
【００９０】
さらに、本明細書に定義した組み合わせ製品を調製するための方法であって：
−  組み合わせ製品の構成成分（例えば、別個の医薬調製物として）のそれぞれを関連付け、（例えば、パーツのキットとして）共包装する、または意図された使用が（他の構成成分との）併用にあることを表示する工程；および／または
−  そのような構成成分を含む医薬調製物の調製においてそれらの構成成分のそれぞれを関連付ける工程
を含む方法も提供される。
【００９１】
一般的調製
本発明による化合物は、一般に、そのそれぞれは当業者に知られている一連の工程により調製することができる。
【実施例】
【００９２】
実験の部
Ｑ２０３は、上記で言及した文献、例えば、特許文献の国際公開第２０１１／１１３６０６号パンフレットおよび／または雑誌論文のＪ．Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１４，５７（１２），ｐｐ５２９３−５３０５またはＰｅｔｈｅ  ｅｔ  ａｌ．によるＮａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１９，１１５７−１１６０（２０１３），“Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｑ２０３，ａ  ｐｏｔｅｎｔ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｃａｎｄｉｄａｔｅｆ  ｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ”に記載された方法にしたがって調製することができる。例えば、国際公開第２０１１／１１３６０６号パンフレットでは、１２６頁に記載の化合物（２８９）は、Ｑ２０３についての特徴データを提供しており、調製方法は、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅの１７〜３０頁に記載され、この化合物の合成は、添付の“Ｏｎｌｉｎｅ  Ｍｅｔｈｏｄｓ”ならびにＪ．Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ論文の実験の章に記載されている。
【００９３】
シトクロムｂｃ１活性の他の阻害剤は、どちらもこれにより参照により本明細書に組み込まれる国際特許出願の国際公開第２０１７／００１６６０号パンフレットおよび同第２０１７／００１６６１号パンフレットにおいて開示された（および開示された方法を用いて調製された）阻害剤である。
【００９４】
化合物Ｘ  −  これは、国際公開第２０１７／００１６６０号パンフレットに記載され、その中に記載された手順にしたがって調製される化合物２８である。
【化９】
2020509040.tif 000010
【００９５】
化合物Ｘの合成
【化１０】
2020509040.tif 000011
中間体Ａの調製
ＤＭＳＯ（４０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル−２，７−ジアザスピロ［３．５］ノナン−７−カルボキシレート（ＣＡＳ［８９６４６４−１６−７］、２．６ｇ、１１．４９ｍｍｏｌ）、４−フルオロベンゾニトリル（ＣＡＳ［１１９４−０２−１］、２．７８ｇ、２２．９８ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（７．９４ｇ、５７．４４ｍｍｏｌ）の懸濁液を、１２０℃でシングルモードマイクロ波（Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ６０）を使用して、０〜４００Ｗの範囲の出力で３０分間［固定保持時間］加熱した。この混合物をＥｔＯＡｃ中で希釈し、水（３×）、塩水（３×）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾別し、蒸発させた。粗生成物を分取ＬＣ（不定形シリカ、１５〜４０μｍ、２４ｇ、Ｇｒａｃｅ、液体装填、移動相勾配：ヘプタン／ＥｔＯＡｃ  ９０／１０〜８０／２０）により精製した。生成物を含有する画分を結合し、溶媒を真空中で除去すると２．９ｍｇの中間体Ａが白色固体として得られた（７７％）。
【００９６】
中間体Ｂの調製
ＣＰＭＥ（２２．１ｍＬ、８８．６ｍｍｏｌ）中の３ＭのＨＣｌをメタノール（５０ｍＬ）中の中間体Ａ（２．９ｇ、８．８６ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で添加した。生じた混合物が室温へ加温するに任せ、５時間にわたり撹拌した。この溶液を蒸発させ、残渣をＭｅＯＨにより（２回）共沸混合すると、４．２２ｇの粗化合物が得られた。粗化合物を分取ＬＣ（不定形ＳｉＯＨ、１５〜４０μｍ、４０ｇ  Ｇｒａｃｅ、乾式充填（シリカ）、移動相勾配：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／水性ＮＨ３  １００／０／０〜９０／１０／１）により精製した。生成物を含有する画分を結合し、溶媒を真空中で除去すると１．２５ｇの中間体Ｂが白色固体として得られた（６２％）。
【００９７】
中間体Ｃの調製
シュレンク（Ｓｃｈｌｅｎｃｋ）内で、１，４−ジオキサン（７０ｍＬ）中の中間体Ｂ（１ｇ、４．４０ｍｍｏｌ）、４−ブロモトリフルオロメトキシベンゼン（ＣＡＳ［４０７−１４−７］、０．９８１ｍＬ、６．６０ｍｍｏｌ）およびナトリウムｔ−ブトキシド（１．６９ｇ、１７．６ｍｍｏｌ）の混合物をＮ２バブリングにより１０分間脱気してから、酢酸パラジウム（０．０９９ｇ、０．４４μｍｏｌ）およびキサントホス（０．２５５ｇ、０．４４μｍｏｌ）を添加した。生じた混合物を１００℃で一晩撹拌し、その後に室温に冷却し、そしてＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドに通して濾過した。ケーキをＥｔＯＡｃで洗浄し、濾液を蒸発乾固させた。残渣をＥｔＯＡｃ中で溶解させ、塩水（２×）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮乾固させた。粗生成物を分取ＬＣ（定形ＳｉＯＨ、１５〜４０μｍ、２４ｇ、Ｇｒａｃｅ、乾式充填（ＳｉＯＨ）、移動相勾配：ヘプタン／ＥｔＯＡｃから、９５：５〜７０：３０）によって精製した。生成物を含有する画分を結合し、真空中で溶媒を除去すると、中間体Ｃが１．０７ｍｇのオフホワイト色の固体として得られた。
【００９８】
中間体Ｄの調製
オートクレーブ内で、ＭｅＯＨ中の７Ｎのアンモニア（７０ｍＬ）中の中間体Ｃ（３．７３ｇ、９．６３ｍｍｏｌ）の溶液に、ラネーニッケル（２．４５ｇ、４１．８ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温の３バールのＨ２下で３時間撹拌した。この混合物をＥｔＯＡｃ中に取り上げ、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）パッド上で濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を真空中で蒸発させると、３．６８ｇの中間体Ｄがオフホワイト色の固体（８７％）として得られたので、これをそのまま次の工程で使用した。
【００９９】
化合物Ｘの調製
ジイソプロピルエチルアミン（１．７４ｍＬ、１０．２ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１．９４ｍｇ、５．１０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（４０ｍＬ）中の６−クロロ−２−エチルイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン−３−カルボン酸（ＣＡＳ［１２１６１４２−１８−５］、０．８ｇ、３．４０ｍｍｏｌ）の溶液に連続的に添加した。生じた混合物を室温で２０分間撹拌し、その後にＤＭＦ（１ｍＬ）中の中間体Ｄ（１．４７ｇ、３．７４ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、混合物を室温で２日間撹拌した。ＥｔＯＡｃ、塩水、ＮａＨＣＯ３の水溶液および水を添加し、水層をＥｔＯＡｃで（２回）抽出した。結合有機相を水／塩水（１／９比；４回）で洗浄し、ＭｇＳＯ４に通して乾燥させ、濾過して濃縮すると粗化合物が得られた。この残渣を分取ＬＣ（不定形ＳｉＯＨ、１５〜４０μｍ、８０ｇ、Ｇｒａｃｅ、乾式充填（ＳｉＯＨ上）、移動相勾配：ヘプタン／ＥｔＯＡｃから：７０／３０〜２０／８０）によって精製した。生成物を含む画分を結合し、真空中で溶媒を除去すると、１．５０ｇのベージュ色の固体が得られた。この固体をＥｔＯＨを用いて共蒸発させ（４回）、ＥｔＯＨ中で粉砕し、濾別し、ＥｔＯＨを用いて洗浄すると（３回）、１．１８ｇが白色固体として得られた。この固体を５０℃の高真空下で５時間にわたって乾燥させると、１．１７ｇの化合物Ｘが白色の固体（５８％）として得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ｐｐｍ  ９．０６（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ）８．３９（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ）７．６６（ｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，１Ｈ）７．４５（ｄｄ，Ｊ＝９．５，２．２Ｈｚ，１Ｈ）７．１９（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）７．１７（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ）７．０２（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ）６．４２（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）４．４１（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ）３．５７（ｓ，４Ｈ）３．１７−３．１９（ｍ，４Ｈ）２．９６（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）１．７９−１．８９（ｍ，４Ｈ）１．２５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）
融点：１８２．７７℃／−６５．９８Ｊ／ｇ（ＤＳＣ：２５℃〜３５０℃／１０℃  ｍｉｎ／４０μＬ  Ａｌ）
ＬＣ−ＭＳ：ＲＴ：３．８４，ＵＶ  面積％：  ９８．２３，ＭＷ：５９７．２０，ＢＰＭ１：５９８．６，ＢＰＭ２：５９６．４
【０１００】
化合物Ｙ
この化合物Ｙは、国際特許出願の国際公開第２０１７／００１６６０号パンフレットに記載された手順（化合物７２を参照されたい）にしたがって調製した：
【化１１】
2020509040.tif 000012
化合物Ｙの合成
【化１２】
2020509040.tif 000013
【０１０１】
中間体Ｅの調製
トルエン（１０ｍＬ）中のＤＩＡＤ（１．４０ｇ、６．９２ｍｍｏｌ）をトルエン（４０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル６−ヒドロキシ−２−アザスピロ［３．３］ヘプタン−２−カルボキシレート（ＣＡＳ［１１４７５５７−９７−８］、１．２ｇ、５．６３ｍｍｏｌ）、４−（トリフルオロメチル）フェノール（ＣＡＳ［４０２−４５−９］、１．１０ｇ、６．７５ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（２．３１ｇ、８．８０ｍｍｏｌ）の溶液に０℃でＮ２流下で添加した。この混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによりシリカゲル（石油エーテル／酢酸エチル  １／０〜３／１）上で精製した。所望の画分を収集し、濃縮して、中間体Ｅを２ｇ、９９％で得た。
【０１０２】
中間体Ｆの調製
ギ酸（１０ｍＬ）中の中間体Ｅ（２ｇ、５．６０ｍｍｏｌ）の混合物を１２時間撹拌した。混合物を濃縮して中間体Ｆを１．４ｇ、９７％で得た。
【０１０３】
中間体Ｇの調製
トルエン（５０ｍＬ）中の中間体Ｆ（１．４ｇ、５．４４ｍｍｏｌ）、４−ヨードベンゾニトリル（ＣＡＳ［３０５８−３９−７］、０．９９ｇ、５．４４ｍｍｏｌ）、ＢＩＮＡＰ（０．２０３ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（０．１ｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１．５７ｇ、１６．３３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．３８ｍＬ）の溶液を１１０℃のＮ２流下で一晩撹拌した。混合物を濃縮した。残渣をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）中で溶解させた。有機層を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによりシリカゲル（酢酸エチル／石油エーテル  ０〜１／５）上で精製した。所望の画分を収集し、濃縮し、中間体Ｇを１．８ｇ、９２％で得た。
【０１０４】
中間体Ｈの調製
メタノール（２０ｍＬ）中の７Ｎのアンモニア中の中間体Ｇ（０．２ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）の混合物を触媒としてのラネーニッケル（２０ｍｇ）により２５℃で１６時間にわたり水素化（１５ｐｓｉ）した。Ｈ２の取り込み後、触媒を濾別し、濾液を濃縮して、中間体Ｈを０．２ｇ、９９％で得た。
【０１０５】
化合物Ｙの調製
【化１３】
2020509040.tif 000014
したがって、化合物Ｙは、６−クロロ−２−エチルイミダゾ［３，２−ａ］ピリジン−３−カルボン酸ＣＡＳ［１２１６１４２−１８−５］および中間体Ｈ（カップリング反応は、標準条件下、例えば、カルボン酸、ＨＡＴＵおよびジイソプロピルアミンのＤＭＦ溶液中で実施することができ、中間体Ｈを添加し、室温で２時間にわたり攪拌し、生じた生成物を標準方法を用いて単離／精製することができる）から出発して調製して０．０３５ｇ、２８％を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ  ｐｐｍ  ９．５２（ｓ，１Ｈ）７．５３（ｄ，Ｊ＝８．３８Ｈｚ，３Ｈ）７．２９（ｄｄ，Ｊ＝９．４８，１．９８Ｈｚ，１Ｈ）７．２３（ｄ，Ｊ＝８．３８Ｈｚ，２Ｈ）６．８６（ｄ，Ｊ＝８．８２Ｈｚ，２Ｈ）６．４６（ｄ，Ｊ＝８．３８Ｈｚ，２Ｈ）５．９９（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）４．６４−４．７０（ｍ，１Ｈ）４．５８（ｄ，Ｊ＝５．２９Ｈｚ，２Ｈ）３．９５（ｓ，２Ｈ）３．９０（ｓ，２Ｈ）２．９４（ｑ，Ｊ＝７．５０Ｈｚ，２Ｈ）２．８０（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．４７，６．９５，２．８７Ｈｚ，２Ｈ）２．４３（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．２５，６．７３，３．３１Ｈｚ，２Ｈ）１．３８（ｔ，Ｊ＝７．５０Ｈｚ，３Ｈ）
【０１０６】
ピラジンアミド（ＰＺＡ）は、このため広範に利用可能である古い薬物である。
【０１０７】
薬理学的実施例
結核菌（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）に対して化合物を試験するためのＭＩＣ測定
試験１
実験化合物および参照化合物の適切な溶液は、７Ｈ９培地を有する９６ウェルプレート中で作製する。結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）株Ｈ３７Ｒｖの試料を対数増殖期にある培養物から採取する。これらを最初に希釈して６００ｎｍの波長における０．３の光学密度を得、次に１／１００に希釈すると、１ウェル当たり約５×１０５個のコロニー形成単位の接種材料が得られる。蒸発を防ぐためにプレートをプラスチックバッグに入れて３７℃でインキュベートする。７日後、レサズリンを全てのウェルに添加する。２日後、５４３ｎｍの励起波長および５９０ｎｍの発光波長でＧｅｍｉｎｉ  ＥＭマイクロプレートリーダー上で蛍光を測定し、ＭＩＣ５０および／またはｐＩＣ５０値（または同様の数値、例えば、ＩＣ５０、ＩＣ９０、ｐＩＣ９０など）を計算する（または計算した）。
【０１０８】
試験２
プラスチック製滅菌丸底９６ウェルマイクロタイタープレートに１００μＬのＭｉｄｄｌｅｂｒｏｏｋ（１×）７Ｈ９ブロス培地を満たす。続いて、さらに１００μＬの培地を列２に添加する。化合物のストック液（最終試験濃度の２００倍）を、細菌増殖に対するそれらの効果を評価できるように、列２の一連の２つずつのウェルに２μＬの容量で加える。マルチピペットを使用して、列２〜１１のマイクロタイタープレート内で直接的に、連続２倍の希釈を行う。ピペットチップは、高疎水性の化合物に伴うピペッティング誤差を最小限に抑えるために、希釈３回毎に交換する。各マイクロタイタープレートには、接種材料を含む（列１）および含まない（列１２）未処理コントロール試料を含める。Ｍｉｄｄｌｅｂｒｏｏｋ（１×）７Ｈ９ブロス培地中の１００μＬの容量で、１ウェル当たり約１００００ＣＦＵの結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）（Ｈ３７ＲＶ株）を、列１２を除く行Ａから行Ｈに添加する。接種菌を含まない同一容量のブロス培地を列１２の行Ａ〜Ｈに添加する。培養物は、３７℃で７日間、加湿雰囲気下でインキュベートする（インキュベーターは、空気弁を開き、連続的に換気する）。７日目に、目視により細菌の増殖を確認する。
９０％最小発育阻止濃度（ＭＩＣ９０）は、目視で細菌増殖が認められない濃度であると決定されている。
【０１０９】
試験３：タイム・キル・アッセイ
化合物の殺菌または静菌活性は、ブロス希釈法を使用して、タイム・キル・アッセイで測定することができる。結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）（Ｈ３７ＲＶ株）のタイム・キル・アッセイでは、結核菌（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）の出発接種材料は、Ｍｉｄｄｌｅｂｒｏｏｋ（１ｘ）７Ｈ９ブロス中の１０６ＣＦＵ／ｍＬである。抗菌化合物は、ＭＩＣ９０の０．１〜１０倍の濃度で使用する。抗菌薬を入れていないチューブを培養増殖コントロールとする。微生物および試験化合物を含有するチューブを３７℃でインキュベートする。０、１、４、７、１４および２１日間のインキュベーション後、Ｍｉｄｄｌｅｂｒｏｏｋ  ７Ｈ９培地中での連続希釈（１０−１〜１０−６）およびＭｉｄｄｌｅｂｒｏｏｋ  ７Ｈ１１寒天培地上への播種（１００μＬ）による生菌数の決定のために試料を取り出す。プレートを３７℃で２１日間インキュベートし、コロニー数を測定する。時間に対して１ｍＬ当たりのｌｏｇ１０ＣＦＵをプロットすることにより、殺菌曲線を作成することができる。殺菌効果は、一般に、未処理接種材料と比較して、１ｍＬ当たりのＣＦＵ数が３ｌｏｇ１０減少することであると定義されている。薬物の持ち越し効果の可能性は、連続希釈および播種に使用した最高希釈でのコロニーの計数により除去される。
【０１１０】
試験４（上記の試験１も参照；この試験では結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）株の異なる株を使用する）
実験化合物および参照化合物の適切な溶液は、７Ｈ９培地を有する９６ウェルプレート中で作製する。結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）株ＥＨ４．０（３６１．２６９）の試料を定常期中に培養から取り出した。これらを最初に希釈して６００ｎｍの波長で０．３の光学密度を得、次に１／１００に希釈すると、１ウェル当たりおよそ５×１０５個のコロニー形成単位の接種材料が得られた。蒸発を防ぐためにプレートをプラスチックバッグに入れて３７℃でインキュベートする。７日後、レサズリンを全てのウェルに添加する。２日後、蛍光をＧｅｍｉｎｉ  ＥＭ  Ｍｉｃｒｏｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒ上で５４３ｎｍ励起波長および５９０ｎｍの発光波長で測定し、ＭＩＣ５０および／またはｐＩＣ５０値（など、例えば、ＩＣ５０、ＩＣ９０、ｐＩＣ９０、など）を計算する（または計算した）。ｐＩＣ５０値は、下記でμｇ／ｍＬの単位で記録され得る。
【０１１１】
結果
化合物は、上述した試験１、２、３および／または４で（「薬理学的実施例」の項において）試験され得る／試験される。
【０１１２】
生物学的実施例−組み合わせ
プロトコール
使用した化合物は、下記の通りであった：
−  ベダキリン−「ＢＤＱ」
−  下記の「ｂｃ１阻害剤」：−Ｑ２０３−化合物「Ｘ」（実験の部を参照されたい）
−  ピラジンアミド（ＰＺＡ）
【０１１３】
試験の設計
試験群は１４あり、１群当たりマウス６匹から構成した。
【０１１４】
【表１】
2020509040.tif 000015
【０１１５】
一般に、上記の表から明らかなように、下記の用量の関連化合物および調製物濃度を投与した：
−  ベダキリン（ＢＤＱ）−３ｍｇ／ｋｇの用量で投与した；調製物濃度は０．３ｍｇ／ｍＬである
−  「ｂｃ１阻害剤」であるＱ２０３または化合物Ｘのいずれか−それぞれを３ｍｇ／ｋｇの用量で投与した；調製剤濃度は２ｍｇ／ｍＬである
−  ピラジンアミド（ＰＺＡ）−１５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与した；調製物濃度は１５０ｍｇ／ｍＬである
【０１１６】
方法
全治療は、実験用株Ｈ３７Ｒｖ上で評価した。全調製物は２０％のＨＰ−Ｂ−ＣＤ中で調製し、５例の治療について使用した（１週間）。各投与週について、新規な調製物を調製した。全調製物は液剤であり、試験中は４℃で保存した。
【０１１７】
調製物中のＢＤＱおよびＱ２０３の安定性は、ＰＺＡおよび化合物Ｘについて事前に試験し、安定性については、１週間後に試験し、どちらの化合物についても許容可能であると見出された。
【０１１８】
マウスの感染後の工程表
【０１１９】
【表２】
2020509040.tif 000016
【０１２０】
マウスを結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）株に感染させた。ＭＴＢ（ストック８）の薬剤感受性Ｈ３７Ｒｖ株を周囲温度で解凍し、マウスに接種するためにＰＢＳ中で１３倍に希釈した。この希釈液０．２ｍＬを注射すると、各マウスは１０６個の細菌を受容することになる。９０匹（追加の６匹）の雌性５週齢の異系交配したＳｗｉｓｓ系マウス、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒの尾静脈に±１０６コロニー形成単位（ＣＦＵ）を含有する０．２ｍＬの細菌懸濁液を静脈内接種した。
所見：マウスは１２日間の感染期中に１匹も死ななかったので、残りのマウス６匹を「剖検コントロール３」として使用した（第４１日）。
【０１２１】
投与（非コントロール群について）
投与は、第１２日に開始した。全群について体重を週１回計量し、平均体重／群を使用して用量を計算した。全マウスには、治療を受けなかったコントロール群を除いて、１０ｍＬ／ｋｇの適切な調製物を経口投与した。全群を連続４週間にわたり（就業日に）１日１回試験した（したがって、週５回、総計すると１例の治療当たり投与２０回）。最終投与／治療は、第３７日に実施した。
【０１２２】
剖検
感染後第１日に、６匹のコントロール群マウスを犠死させ、肺および脾臓を収集し、−８０℃で急速冷凍した。感染後第１２日に、６匹のコントロール群マウスを犠死させ、肺および脾臓を収集し、−８０℃で急速冷凍した。第４１日に、全てのコントロール群および治療群動物を犠死させ、肺および脾臓を収集し、−８０℃で急速冷凍した。全脾臓を計量し、冷凍バイアル中にバックアップ器官として−８０℃で保存した。肺全部を均質化チューブ内に収集した。
【０１２３】
感染および治療の評価
感染の重症度および治療の有効性は、肺におけるコロニー形成単位（ＣＦＵ）を計数することによって評価した。肺を解凍し、２．５ｍＬのＰＢＳ（＋Ｃａ／Ｍｇ）を各チューブに添加した。肺を均質化し、５本の１０倍連続希釈液をＰＢＳ（＋Ｃａ／Ｍｇ）中で１１１μＬのホモジネート＋１ｍＬのＰＢＳを作製した。各個別の肺からの２００μＬの未希釈懸濁液および５本の１０倍連続希釈液を、汚染防止用の抗生物質および抗真菌薬を含有する７Ｈ１１寒天プレート（６ウェル）上でプレーティングした。ＣＦＵ数は、３週間にわたる３７℃でのインキュベーション後に計数した。治療の殺菌作用は、治療前値と比較した治療群におけるＣＦＵの平均数の有意な減少であると定義された。
【０１２４】
培地の調製
７Ｈ１１寒天＋０．４％の木炭＋抗生物質
＊  ２．０ｍＬのグリセロールを含有する３６０ｍＬの蒸留水（ＡｎａｌａＲ  ＮＯＲＭＡＰＵＲ、２４３８８．２９５）中に８．４ｇのＭｉｄｄｌｅｂｒｏｏｋ  ７Ｈ１１寒天（ＢＤ２８３８１０）を溶解させる
＊  ０．４％または１．６ｇの活性炭（ＳＩＧＭＡ  Ｃ９１５７）を添加する
＊  １５分間にわたり１２１℃でオートクレーブにかけ、５５℃に冷却する
＊  ４０ｍＬのＭｉｄｄｌｅｂｒｏｏｋ  ＯＡＤＣ  Ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ（ＢＤ  ２１１８８６）を添加する
＊  ５５℃で保持する
＊  抗生物質を添加する
アムホテリシンＢ：水中の１０ｍｇ／ｍＬのストック４．０ｍＬを添加する（＝１００μｇ／ｍＬ、最終）
ポリミキシンＢ：水中の２５ｍｇ／ｍＬのストック０．４ｍＬを添加する（＝２５μｇ／ｍＬ、最終）
カルベネシリン（Ｃａｒｂｅｎｅｃｉｌｌｉｎ）：水中の５０ｍｇ／ｍＬのストック０．４ｍＬを添加する（＝５０μｇ／ｍＬ、最終）
トリメトプリム：ＤＭＳＯ中の２０ｍｇ／ｍＬのストック０．４ｍＬを添加する（＝２０μｇ／ｍＬ、最終）
＊  ４ｍＬの寒天溶液／６ウェルをピペットで移す
＊  層流空気流（カバーを半分開けておく）中で４５分間凝固させる
＊  使用準備が整うまで（最大１ヶ月間）４℃で保存する
【０１２５】
結果
【０１２６】
【表３】
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【０１２７】
上記の結果は、１４試験群のそれぞれのＣＦＵについての平均ｌｏｇ１０値のそれぞれを示している図１を参照すると明らかである。これはさらに、本質的に、ＣＦＵ（または細菌感染）が極めて少ないために正確には測定できない、またはＣＦＵが検出可能なレベルより下である数値である１．１０の「カットオフ」値もまた示している。
【０１２８】
コントロール群と比較して、下記のことが明らかである：
−  単一薬剤（ベダキリン単独、ｂｃ１阻害剤単独またはピラジンアミド単独）の投与は、それでも相当に高い平均ｌｏｇ１０  ＣＦＵを生じさせ、その中でピラジンアミドは平均ｌｏｇ１０の３．４７への低下を誘発する最高の効果を有していた。
−  ベダキリンとｂｃ１阻害剤との「２剤」の組み合わせは、ＣＦＵにおける有意ではない（４．２９および４．２４への）平均ｌｏｇ１０の低下を生じさせた。
−  ピラジンアミドとの「２剤の」組み合わせは、単なる付加作用より大きい、ＣＦＵにおける驚くべき減少を生じさせた；ピラジンアミドとの「２剤の」組み合わせは、ＣＦＵにおける平均ｌｏｇ１０の低下から解明できるように相乗作用を示す；特に、ピラジンアミドと「ｂｃ１阻害剤」（Ｑ２０３または化合物Ｘのいずれか）との組み合わせは、試験した２剤の組み合わせの全部から最低平均ｌｏｇ１０値を生じさせた。
−  最高の相乗作用性の２剤の組み合わせ（ピラジンアミド＋ｂｃ１阻害剤）をさらにベダキリンと併用した場合、これら３剤の組み合わせは、１．１０のカットオフ値を達成したマウスにおいて全ての検出可能なＣＦＵを効果的に排除した。
【図１】
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【国際調査報告】
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