(57)【要約】本発明は、限定はされないがＰＣＲなどの反応の促進のための、急速かつ試料において使いやすい熱サイクリングまたは温度変化のためのデバイス、システム、および方法を提供する。2020508043.tif 000003
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
薄い流体試料層をアッセイするためのデバイスであって、
第１のプレートと、第２のプレートと、スペーサと、クランプとを備え、
ｉ．前記第１のプレートおよび前記第２のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成になるように互いに対して移動可能であり、
ｉｉ．前記プレートの各々が、そのそれぞれの表面上に、流体試料と接触するための試料接触領域を備え、
ｉｉｉ．前記プレートのうちの一方または両方が、それぞれのプレートに固定された前記スペーサを備え、
ｉｖ．前記スペーサが、２００ミクロン以下である所定の実質的に均一な高さを有し、前記スペーサのうちの少なくとも１つが前記試料接触領域内にあり、
ｖ．前記クランプが、前記第１のプレートおよび前記第２のプレートを圧縮して、前記２つのプレートを一緒に前記閉鎖構成で固定し、前記プレート上に挿入された前記クランプの圧力が、０．０１ｋｇ／ｃｍ＾２以上であり、
開放構成では、前記２つのプレートが部分的または完全に分離されており、前記プレート間の間隔は前記スペーサによって調整されず、前記試料が前記プレートのうちの一方または両方の上に付着され、
前記開放構成で前記試料が付着された後に構成される閉鎖構成では、前記試料の少なくとも一部が、前記２つのプレートによって圧縮されて実質的に均一な厚さの層になり、かつ前記プレートに対して実質的に停滞し、前記層の前記均一な厚さが、前記２つのプレートの前記試料接触領域によって制限され、かつ前記プレートおよび前記スペーサによって調整される、デバイス。
【請求項２】
薄い流体試料層の温度を急速に変化させるためのデバイスであって、
第１のプレートと、第２のプレートと、スペーサと、クランプとを備え、
ｉ．前記第１のプレートおよび前記第２のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成になるように互いに対して移動可能であり、
ｉｉ．前記プレートの各々が、そのそれぞれの表面上に、流体試料と接触するための試料接触領域を備え、
ｉｉｉ．前記プレートのうちの一方または両方が、それぞれのプレートに固定された前記スペーサを備え、
ｉｖ．前記スペーサが、２００ミクロン以下である所定の実質的に均一な高さを有し、前記スペーサのうちの少なくとも１つが前記試料接触領域内にあり、
ｖ．前記クランプが、前記第１のプレートおよび前記第２のプレートを圧縮して、前記２つのプレートを一緒に前記閉鎖構成で固定し、前記プレート上に挿入された前記クランプの圧力が、０．０１ｋｇ／ｃｍ＾２以上であり、
開放構成では、前記２つのプレートが部分的または完全に分離されており、前記プレート間の間隔は前記スペーサによって調整されず、前記試料が前記プレートのうちの一方または両方の上に付着され、
前記開放構成で前記試料が付着された後に構成される閉鎖構成では、前記試料の少なくとも一部が、前記２つのプレートによって圧縮されて実質的に均一な厚さの層になり、かつ前記プレートに対して実質的に停滞し、前記層の前記均一な厚さが、前記２つのプレートの前記試料接触領域によって制限され、かつ前記プレートおよび前記スペーサによって調整され、
前記プレートおよび前記クランプが、前記試料の温度を１０℃／秒以上の速度で変化させることを可能にするように構成されている、デバイス。
【請求項３】
薄い流体試料層の温度を急速に変化させるためのデバイスであって、
第１のプレートと、第２のプレートと、スペーサとを備え、
ｉ．前記第１のプレートが、１００μｍ（ミクロン）以下の厚さを有し、
ｉｉ．前記第１のプレートおよび前記第２のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成になるように互いに対して移動可能であり、
ｉｉｉ．前記プレートの各々が、そのそれぞれの表面上に、流体試料と接触するための試料接触領域を備え、
ｉｖ．前記プレートのうちの一方または両方が、それぞれのプレートに固定された前記スペーサを備え、
ｖ．前記スペーサが、２００ミクロン以下である所定の実質的に均一な高さを有し、
ｖｉ．前記スペーサのうちの少なくとも１つが前記試料接触領域内にあり、
開放構成では、前記２つのプレートが部分的または完全に分離されており、前記プレート間の間隔は前記スペーサによって調整されず、前記試料が前記プレートのうちの一方または両方の上に付着され、
前記開放構成で前記試料が付着された後に構成される閉鎖構成では、前記試料の少なくとも一部が、前記２つのプレートによって圧縮されて実質的に均一な厚さの層になり、かつ前記プレートに対して実質的に停滞し、前記層の前記均一な厚さが、前記２つのプレートの前記試料接触領域によって制限され、かつ前記プレートおよび前記スペーサによって調整され、
前記プレートおよび前記クランプが、前記試料の少なくとも一部の温度を１０℃／秒以上の速度で変化させることを可能にするように構成されている、デバイス。
【請求項４】
薄い流体試料層の温度を急速に変化させるためのデバイスであって、
第１のプレートと、第２のプレートと、クランプとを備え、
ｉ．前記第１のプレートおよび前記第２のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成になるように互いに対して移動可能であり、
ｉｉ．前記プレートの各々が、そのそれぞれの表面上に、アッセイされる流体試料と接触するための試料接触領域を備え、
ｉｉｉ．前記クランプが、前記第１のプレートおよび前記第２のプレートを圧縮して、前記プレートを前記閉鎖構成で固定し、前記プレート上に挿入された前記クランプの圧力が、０．０１ｋｇ／ｃｍ＾２以上であり、
開放構成では、前記２つのプレートが部分的または完全に分離されており、前記プレート間の平均間隔が２５０μｍ以上であり、前記試料が前記プレートのうちの一方または両方の上に付着され、
前記開放構成で前記試料が付着された後に構成される閉鎖構成では、前記試料の少なくとも一部が、前記２つのプレートによって圧縮されて実質的に均一な厚さの層になり、かつ前記プレートに対して実質的に停滞し、前記層の前記均一な厚さが、前記２つのプレートの前記試料接触領域によって制限され、かつ２００μｍ以下の厚さである、デバイス。
【請求項５】
均一な厚さの前記試料の前記少なくとも一部の近くに放射線吸収層をさらに備え、前記試料の前記少なくとも一部および前記放射線吸収層の領域が、前記均一な厚さよりも実質的に大きい、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項６】
前記試料の前記少なくとも一部および前記放射線吸収層の前記領域が、前記試料の前記均一な厚さよりも実質的に大きい、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項７】
前記デバイスの前記プレートのうちの１つの厚さが１００μｍ以下である、請求項１、２、および４のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項８】
均一な厚さの前記試料の前記少なくとも一部の近くに放射線吸収層をさらに備え、前記デバイスの前記プレートのうちの１つの厚さが１００μｍ以下である、請求項１、２、および４のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項９】
前記第１のプレートおよび前記第２のプレートを前記閉鎖構成において一緒に圧縮するクランプをさらに備え、前記プレート上に挿入された前記クランプの圧力が０．０１ｋｇ／ｃｍ＾２以上である、請求項３に記載のデバイス。
【請求項１０】
前記第１のプレートおよび前記第２のプレートを前記閉鎖構成において一緒に圧縮するクランプをさらに備え、かつ均一な厚さの前記試料の前記少なくとも一部の近くに放射線吸収層をさらに備え、前記プレート上に挿入された前記クランプの圧力が０．０１ｋｇ／ｃｍ＾２以上である、請求項３に記載のデバイス。
【請求項１１】
薄い流体試料層の温度を急速に変化させるためのシステムであって、
ｉ．前記請求項のいずれか１項に記載のデバイスと、
ｉｉ．前記放射線吸収層が著しく吸収する電磁波を放射するように構成された、放射線源と、
ｉｉｉ．前記放射線源を制御し、前記試料の前記温度を変化させるように構成されたコントローラと
を備える、システム。
【請求項１２】
薄い流体試料層の温度を急速に変化させるための方法であって、
ｉ．前記請求項のいずれか１項に記載のデバイスまたはシステムを提供するステップと、
ｉｉ．前記デバイスの前記プレートのうちの一方または両方の上に流体試料を付着させるステップと、
ｉｉｉ．ｉｉの後、前記プレートを閉鎖構成になるように押圧するステップであって、前記プレートが前記試料の少なくとも一部を圧縮して２００μｍ未満の厚さの薄層にする、ステップと、
ｉｖ．前記放射線源からの前記電磁波の存在、強度、波長、周波数、および／または角度を変化させることによって、前記試料層の前記温度を変化させかつ維持するステップと
を含む、方法。
【請求項１３】
前記クランプが、前記クランプと前記プレートとの間の熱伝導を低減するための断熱層を備えるように構成され、前記断熱層が、２Ｗ／ｍ−Ｋの熱伝導率の材料を含む、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項１４】
前記クランプが、前記試料を加熱または冷却する必要がある熱質量を低減するための断熱層を備えるように構成され、前記断熱層が、２Ｗ／ｍ−Ｋの熱伝導率の材料を含む、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項１５】
前記プレートの閉鎖構成において、前記クランプが、前記プレートのある位置から前記プレートの別の位置への前記試料の流動の少なくとも一部を防止するまたは低減する、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項１６】
前記プレートの閉鎖構成において、前記クランプが、前記プレートの表面の一部と熱伝導接触するように構成されている、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項１７】
前記プレートの閉鎖構成において、前記クランプが、前記プレートの周辺表面領域のみと熱伝導接触する、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項１８】
前記プレートの閉鎖構成において、前記クランプが、前記プレートの表面領域のみと熱伝導接触し、前記表面領域が、核酸が増幅される前記試料の一部分の外側にある、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項１９】
前記クランプが、外側の光が前記プレートに入ることまたはプレートの内側の光が外に出ることを可能にする透明な窓を備える、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項２０】
前記クランプが、外側の光が前記プレートに入ることまたはプレートの内側の光が外に出ることを可能にする透明な窓を備え、透明度が、３０％超、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％であるか、またはそれらの値のうちのいずれか２つの間の範囲である、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項２１】
前記クランプが、前記第１のプレートおよび前記第２のプレートを圧縮するために圧力を導入し、前記圧力が、０．０１ｋｇ／ｃｍ２、０．１ｋｇ／ｃｍ２、０．５ｋｇ／ｃｍ２、１ｋｇ／ｃｍ２、２ｋｇ／ｃｍ２、ｋｇ／ｃｍ２、５ｋｇ／ｃｍ２、１０ｋｇ／ｃｍ２、２０ｋｇ／ｃｍ２、３０ｋｇ／ｃｍ２、４０ｋｇ／ｃｍ２、５０ｋｇ／ｃｍ２、６０ｋｇ／ｃｍ２、１００ｋｇ／ｃｍ２、１５０ｋｇ／ｃｍ２、２００ｋｇ／ｃｍ２、４００ｋｇ／ｃｍ２であるか、またはそれらの値のうちのいずれか２つの間の範囲である、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項２２】
前記クランプが、前記第１のプレートおよび前記第２のプレートを圧縮するために圧力を導入し、前記圧力が０．１ｋｇ／ｃｍ２〜２０ｋｇ／ｃｍ２である、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項２３】
前記クランプが、前記第１のプレートおよび前記第２のプレートを圧縮するために圧力を導入し、前記圧力が０．１ｋｇ／ｃｍ２〜２０ｋｇ／ｃｍ２である、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項２４】
前記クランプが、前記第１のプレートおよび前記第２のプレートを圧縮するために圧力を導入し、前記圧力が０．５ｋｇ／ｃｍ２〜４０ｋｇ／ｃｍ２である、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項２５】
前記第１のプレートおよび前記第２のプレートを前記閉鎖構成において一緒に圧縮するクランプをさらに備え、かつ前記第１のプレートの少なくとも一部と前記第２のプレートの間に密封材料をさらに備え、前記プレート上に挿入された前記クランプの圧力が０．０１ｋｇ／ｃｍ＾２以上である、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項２６】
前記試料の温度を変化させることが、温度を周期的に上下に変化させる熱サイクリングである、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項２７】
前記試料の温度を変化させることが、ポリメラーゼ連鎖動作（ＰＣＲ）を使用した核酸の増幅のための熱サイクリングである、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項２８】
前記試料の前記温度の前記変化が、核酸の等温増幅のためである、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項２９】
前記試料の前記少なくとも一部および前記放射線吸収層の領域が、前記均一な厚さよりも実質的に大きい、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項３０】
前記放射線吸収層が、ディスク結合ドットオンピラーアンテナ（ｄｉｓｋ−ｃｏｕｐｌｅｄ  ｄｏｔｓ−ｏｎ−ｐｉｌｌａｒ  ａｎｔｅｎｎａ）（Ｄ２ＰＡ）アレイ、シリコンサンドイッチ、グラフェン、超格子、または他のプラズモン材料、それらの他の組み合わせを含む、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項３１】
前記放射線吸収層が、カーボンもしくはブラックナノ構造またはそれらの組み合わせを含む、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項３２】
前記放射線吸収層が、放射線エネルギーを吸収するように構成されている、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項３３】
前記放射線吸収層が、放射線エネルギーを吸収した後、熱の形態でエネルギーを放射するように構成されている、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項３４】
前記放射線吸収層が、前記試料層の下に、かつ前記試料層と直接接触して位置付けられている、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項３５】
前記放射線吸収層が、電波、マイクロ波、赤外線波、可視光、紫外線波、Ｘ線、ガンマ線、および熱放射からなる群から選択される電磁波を吸収するように構成されている、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項３６】
前記プレートのうちの少なくとも１つは、前記放射線吸収層が吸収する放射線を遮断しない、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項３７】
前記プレートのうちの一方または両方が、低い熱伝導率を有する、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項３８】
前記試料層の前記均一な厚さが、前記プレートのうちの一方または両方に固定された１つ以上のスペーサによって調整される、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項３９】
前記試料が、予混合されたポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）媒体である、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項４０】
前記デバイスが、所定のプログラムに従って前記試料の温度を変化させるためのＰＣＲアッセイを促進するように構成されている、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項４１】
前記デバイスが、診断試験、健康管理、環境試験、および／または法医学的試験を行うように構成されている、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項４２】
前記デバイスが、ＤＮＡ増幅、ＤＮＡ定量化、選択的ＤＮＡ単離、遺伝分析、組織適合検査、癌遺伝子同定、感染症試験、遺伝子指紋法、および／または父子鑑定を行うように構成されている、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項４３】
前記試料層が、試料蒸発を低減するために横方向に密封されている、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス。
【請求項４４】
前記電磁波の存在、強度、波長、周波数、および／または角度を制御するように構成されたコントローラをさらに備える、前記請求項のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項４５】
前記試料接触領域またはその近傍の温度を測定し、前記測定された温度に基づいて前記コントローラに信号を送信するように構成された温度計をさらに備える、前記請求項のいずれか１項に記載のシステム。
【請求項４６】
前記温度計が、光ファイバ温度計、赤外線温度計、液晶温度計、高温計、水晶温度計、シリコンバンドギャップ温度センサ、温度ストリップ、サーミスタ、および熱電対からなる群から選択される、前記請求項のいずれか１項に記載のシステムまたは方法。
【請求項４７】
前記コントローラが、前記放射線源からの前記電磁波の存在、強度、波長、周波数、および／または角度を制御するように構成されている、前記請求項のいずれか１項に記載のシステムまたは方法。
【請求項４８】
前記電磁波が少なくとも１０℃／秒の平均昇温速度傾斜を生じさせ、前記電磁波の除去が少なくとも５℃／秒の平均降温速度傾斜をもたらすように、前記放射線源および前記放射線吸収層が構成されている、前記請求項のいずれか１項に記載のシステムまたは方法。
【請求項４９】
前記放射線源および前記放射線吸収層が、少なくとも１０℃／秒の平均昇温速度傾斜および少なくとも５℃／秒の平均降温速度傾斜をもたらすように構成されている、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項５０】
前記放射線源および前記放射線吸収層が、ＰＣＲ中に初期化ステップ、変性ステップ、および／または延伸／伸長ステップに到達するために少なくとも１０℃／秒の平均昇温速度傾斜をもたらし、かつＰＣＲ中にアニーリングステップおよび／または最終冷却ステップに到達するために少なくとも５℃／秒の平均降温速度傾斜をもたらすように構成されている、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項５１】
ＰＣＲの試料が、鋳型ＤＮＡ、プライマーＤＮＡ、カチオン、ポリメラーゼ、および緩衝剤を含む、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項５２】
前記プレートを閉鎖形態になるように押圧するステップが、前記プレートを厳密でない押圧力で押圧することを含む、前記請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５３】
前記プレートを閉鎖形態になるように押圧するステップが、前記プレートを人間の手で直接押圧することを含む、前記請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５４】
非常に均一な厚さの前記層が、１０％未満の厚さの変動を有する、前記請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５５】
前記試料の温度を変化させることが熱サイクリングであり、前記熱サイクリングが、ホットスタートＰＣＲ、ネステッドＰＣＲ、タッチダウンＰＣＲ、逆転写ＰＣＲ、ＲＡＣＥ  ＰＣＲ、およびデジタルＰＣＲの群から選択されるポリメラーゼ連鎖動作（ＰＣＲ）を使用した核酸の増幅のためである、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項５６】
前記試料の前記温度の前記変化が、ループ介在等温増幅、鎖置換増幅、ヘリカーゼ依存性増幅、ニッキング酵素増幅、ローリングサークル増幅、およびリコンビナーゼポリメラーゼ増幅の群から選択される核酸の等温増幅のためである、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項５７】
ＤＮＡ鋳型、プライマー、ＤＮＡポリメラーゼ、デオキシヌクレオシド三リン酸（ｄＮＴＰ）、二価カチオン（例えば、Ｍｇ２＋）、一価カチオン（例えば、Ｋ＋）、および緩衝液から選択される試薬をさらに含む、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項５８】
前記スペーサが、実質的に平坦な頂部を有する、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【請求項５９】
前記プレートのうちの１つが５０μｍ以下である、前記請求項のいずれか１項に記載のデバイス、システム、または方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
相互参照
本願は、２０１７年２月１６日出願のＵＳＰＡ（以下「ＵＳＰＡ」）第６２／４６０，０８８号（０５３ＰＲＶ）、２０１７年２月１６日出願のＵＳＰＡ第６２／４６０，０８３号（０３５ＰＲＶ３）、２０１７年２月１６日出願のＵＳＰＡ第６２／４６０，０７６号（０４０ＰＲＶ２）、２０１７年２月１６日出願のＵＳＰＡ第６２／４６０，０７５号（０２６ＰＲＶ３）、２０１７年２月１６日出願のＵＳＰＡ第６２／４６０，０６９号（０５２ＰＲＶ２）、２０１７年２月１６日出願のＵＳＰＡ第６２／４６０，０６２号（０４５ＰＲＶ２）、２０１７年２月１６日出願のＵＳＰＡ第６２／４６０，０４７号（０２９ＰＲＶ２）、２０１７年２月１６日出願のＵＳＰＡ第６２／４５９，９７２号（００２ＰＲＶ２）、２０１７年２月１６日出願のＵＳＰＡ第６２／４５９，９２０号（０５０ＰＲＶ）、２０１７年２月１５日出願のＵＳＰＡ第６２／４５９，６０２号（０５２ＰＲＶ）、２０１７年２月１５日出願のＵＳＰＡ第６２／４５９，５９８号（０３５ＰＲＶ２）、２０１７年２月１５日出願のＵＳＰＡ第６２／４５９，５７７号（０５１ＰＲＶ）、２０１７年２月１５日出願のＵＳＰＡ第６２／４５９，５５４号（０２６ＰＲＶ２）、２０１７年２月１５日出願のＵＳＰＡ第６２／４５９，４９６号（０１４ＰＲＶ２）、２０１７年２月１５日出願のＵＳＰＡ第６２／４５９，３３７号（０３３ＰＲＶ２）、２０１７年２月１５日出願のＵＳＰＡ第６２／４５９，３０３号（０２７ＰＲＶ２）、２０１７年２月１５日出願のＵＳＰＡ第６２／４５９，２６７号（０１７ＰＲＶ２）、２０１７年２月１５日出願のＵＳＰＡ第６２／４５９，２３２号（０４８ＰＲＶ）、２０１８年２月１４日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ１８／１８１０８号（１８Ｆ１４）、２０１８年２月１３日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ１８／１８００７号（１８Ｆ１１Ｂ）、２０１８年２月９日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ１８／１７７１６号（１８Ｆ０８）、２０１８年２月９日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ１８／１７７１３号（１８Ｆ０７）、２０１８年２月９日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ１８／１７７１２号（１８Ｆ１６）、２０１８年２月８日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ１８／１７５０４号（１８Ｆ０２）、２０１８年２月８日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ１８／１７４９９号（１８Ｆ１７）、２０１８年２月８日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ１８／１７４８９号（１８Ｆ１８）、２０１８年２月８日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ１８／１７４９２号（１８Ｆ１０）、２０１８年２月８日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ１８／１７４９４号（１８Ｆ０２）、２０１８年２月８日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ１８／１７５０２号（１８Ｆ０９）、および２０１８年２月７日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ１８／１７３０７号（１８Ｆ１５Ａ）の利益を主張し、それらの各々は、あらゆる目的で参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
背景
ある特定の化学、生物学、および／または医学アッセイでは、繰り返される熱サイクルおよび迅速かつ正確な温度制御が実行される必要がある。１つの特定の例は、１つ以上の試料中の所定のヌクレオチド（例えば、ＤＮＡ）を増幅させるためのポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）である。ＰＣＲでは、事前に設定された熱制御サイクルに従って、試料が特定の温度に繰り返し加熱および冷却される。ある特定のシナリオでは、試料の温度を迅速かつ均一に変化させることができることが望ましい。
【発明の概要】
【０００３】
以下の概要は、本発明の全ての特徴および態様を含むことを意図したものではない。本発明は、限定されないがＰＣＲなどの反応の促進のための、急速な試料の熱サイクル変化のためのデバイス、システム、および方法を提供する。本発明の一態様は、液体試料を圧縮して均一な薄層にするために２つの移動可能な薄いプレートを使用することである。
【０００４】
本発明の別の態様は、試料温度の傾斜速度を加速することであり、ＱＭＡＸアッセイのプレートのうちの１つは、１００μｍ（ミクロン）以下の厚さに低減される。
【０００５】
本発明の別の態様は、急速な温度変化またはサイクリングの下でＱＭＡＸカード内の非常に薄いプレートに関連する問題の解決策を提供することである。その問題には、プレートの大きい変形、試料の厚さの変化、気泡の形成などが含まれ、それらの各々が、ＰＲＣまたは等温核酸増幅の失敗をもたらす可能性がある。したがって、本発明によると、解決策のうち１つが、温度変化中に２つのプレートを一緒に固定して保持するある特定の設計を有するクランプの使用を含むことが非常に重要である。確実に、本発明のクランプは、試料温度を変化させる必要がないＱＭＡＸカードに使用され得る。
【０００６】
本発明は、ある領域（または関連する領域）、試料ホルダの低熱吸収および低熱容量、ならびに領域ヒータ要素にわたって、試料を均一な超薄の薄型部分にすることによって、試料の温度を急速に変化させるためのデバイスおよび方法を提供する。
【０００７】
背景
ある特定の化学的、生物学的、および／または医学的アッセイでは、繰り返される熱サイクルおよび迅速かつ正確な温度制御が実行される必要がある。１つの特定の例は、１つ以上の試料中の所定のヌクレオチド（例えば、ＤＮＡ）を増幅させるためのポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）である。ＰＣＲでは、事前に設定された熱制御サイクルに従って、試料が特定の温度に繰り返し加熱および冷却される。ある特定のシナリオでは、試料の温度を迅速かつ均一に変化させることができることが望ましい。
【０００８】
本発明は、急速な熱サイクル変化のためのデバイスおよび方法を提供し、本明細書に開示されるデバイスおよび方法は、ＰＣＲなどであるがこれに限定されない反応の促進に適している。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
当業者は、以下に記載される図面が例示のみを目的としていることを理解するであろう。図面は、決して本教示の範囲を限定することを意図していない。場合によっては、図面は、縮尺通りではない。実験データ点を示す図面中、データ点を接続する線は、データの表示のみを誘導するためのものであり、他の手段はない。
【００１０】
【図１】本発明のデバイスの一実施形態の斜視図および断面図を示す。パネル（Ａ）は、開放構成にあるデバイスの実施形態を示し、パネル（Ｂ）は、試料ユニットが閉鎖構成にあるときのデバイスの実施形態を示し、２つのプレート間で薄層へと圧縮される試料の温度は、電磁波を試料上に発射するように位置付けられた放射線源によって急速に変化する。
【図２】本発明のシステムの一実施形態の斜視図および断面図を示す。パネル（Ａ）は、デバイス（システムの試料ユニット）が開放構成にあるときのシステムの斜視図を示し、パネル（Ｂ）は、試料ユニットが閉鎖構成にあるときのシステムの断面図を示す。
【図３】本発明のシステムの一実施形態の断面図を示し、システムを実証し、温度変化および制御を促進する追加の要素を示す。
【図４】本発明の別の実施形態の斜視図を示し、プレート上に複数の試料接触領域があり、複数の試料の処理および分析を可能にする。
【図５】本発明の例示的な実施形態の断面図を示し、試料がどのように添加および圧縮されるかを実証する。
【図６】本発明の例示的な実施形態の断面図を示し、ＰＣＲプロセスを実証する。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
例示的な実施形態の詳細な説明
以下の詳細な説明は、限定ではなく一例として本発明のいくつかの実施形態を示す。存在する場合、本明細書で使用されるセクションの見出しおよび副題は、体系化のみを目的とし、決して記載される主題を制限するものとして解釈されるべきではない。セクションの見出しおよび／または副題の下の内容は、セクションの見出しおよび／または副題に限定されず、本発明の説明全体に適用される。
【００１２】
いかなる出版物の引用も、出願日前のその開示に関し、本特許請求の範囲が、先行発明によりそのような出版物に先行する権利がないことを認めるものと解釈されるべきではない。さらに、提供される出版日は、実際の出版日とは異なる可能性があり、個別に確認される必要があり得る。
【００１３】
図面は、厳密な比率で要素を示すことを意図していないことに留意されるべきである。明確にするために、要素の一部は、図面に示されるときに拡大されている。要素の寸法は、参照により本明細書に提供され組み込まれる説明から詳細に描写されるべきである。
【００１４】
ＱＭＡＸデバイス
「ＣＲＯＦカード（またはカード）」、「ＣＯＦカード」、「ＱＭＡＸカード」、「Ｑカード」、「ＣＲＯＦデバイス」、「ＣＯＦデバイス」、「ＱＭＡＸデバイス」、「ＣＲＯＦプレート」、「ＣＯＦプレート」、および「ＱＭＡＸプレート」という用語は、いくつかの実施形態においてはＣＯＦカードがスペーサを備えていないことを除いて互換性があり、これらの用語は、異なる構成（開放構成および閉鎖構成を含む）になるように互いに対して移動可能である第１のプレートおよび第２のプレートを備え、かつプレート間の間隔を調整するスペーサ（ＣＯＦのいくつかの実施形態を除く）を備えるデバイスを指す。「Ｘプレート」という用語は、ＣＲＯＦカード内の２つのプレートのうちの１つを指し、スペーサは、このプレートに固定されている。ＣＯＦカード、ＣＲＯＦカード、およびＸプレートのさらなる説明は、２０１７年２月７日出願の仮出願第６２／４５６０６５号に記載され、これは、あらゆる目的でその全体が本明細書に組み込まれる。
【００１５】
図１は、本発明のデバイスの一実施形態の斜視図および断面図を示す。パネル（Ａ）は、開放構成にあるデバイス（システムの「試料ユニット」とも呼ばれる）１００を示す。パネル（Ａ）に示されるように、試料ユニット１００は、第１のプレート１０と、第２のプレート２０と、間隔機構（図示せず）とを備える。第１のプレート１０および第２のプレート２０はそれぞれ、外面（それぞれ１１および２１）と、内面（それぞれ１２および２２）とを含む。各内面は、デバイスによって処理および／または分析される流体試料と接触するための試料接触領域（図示せず）を有する。
【００１６】
第１のプレート１０および第２のプレート２０は、異なる構成になるように互いに対して移動可能である。構成のうちの１つは、開放構成であり、この構成では、図１のパネル（Ａ）に示されるように、第１のプレート１０および第２のプレート２０が部分的または全体的に分離されており、第１のプレート１０と第２のプレート２０との間の間隔（すなわち、第１のプレートの内面１１と第２のプレートの内面２１との間の距離）は、間隔機構によって調整されない。開放構成は、試料が試料接触領域内の第１のプレート、第２のプレート、または両方の上に付着することを可能にする。
【００１７】
図１のパネル（Ａ）に示されるように、第１のプレート１０は、試料接触領域に放射線吸収層１１２をさらに備える。また、第２のプレート２０が、代替的にまたは加えて、放射線吸収層１１２を備えることが可能である。いくつかの実施形態では、放射線吸収層１１２は、その上に発せられる放射線（例えば、電磁波）を効率的に吸収するように構成されている。吸収率は、５０％以上、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、１００％以下、８５％以下、７５％以下、６５％以下、もしくは５５％以下、またはそれらの２つの値のうちのいずれかの間の範囲内である。放射線吸収層１１２は、吸収された放射線エネルギーの少なくとも実質的な部分を熱（熱エネルギー）に変換するようにさらに構成されている。例えば、放射線吸収層１１２は、電磁波からエネルギーを吸収した後、熱の形態で放射線を放出するように構成されている。本明細書で使用される場合、「実質的な部分」または「実質的に」という用語は、５０％以上、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、９９％以上、または９９．９％以上である割合を指す。
【００１８】
いくつかの実施形態では、放射線吸収層１１２は、金属プラズモン表面、メタマテリアル、ブラックシリコン、グラファイト、カーボンナノチューブ、シリコンサンドイッチ、グラフェン、超格子、プラズモン材料、電磁波を効率的に吸収しかつ吸収されたエネルギーを熱エネルギーに変換することが可能である任意の材料／構造、およびそれらの任意の組み合わせなどであるがこれらに限定されない材料／構造を含む。ある特定の実施形態では、放射線吸収層１１２は、カーボンナノチューブを含む。
【００１９】
いくつかの実施形態では、放射線吸収層は、２０１０年５月２１日出願の米国仮特許出願第６１／３４７，１７８号、２０１２年４月１０日出願の米国仮特許出願第６１／６２２，２２６、２０１３年３月１５日出願の米国仮特許出願第６１／８０１，４２４号、２０１３年３月１５日出願の米国仮特許出願第６１／８０１，０９６号、２０１３年３月１５日出願の米国仮特許出願第６１／８０１，９３３号、２０１３年３月１５日出願の米国仮特許出願第６１／７９４，３１７号、２０１４年１２月１０日出願の米国仮特許出願第６２／０９０，２９９号、２０１２年１０月１日出願の米国仮特許出願第６１／７０８，３１４号、２０１１年５月２０日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０３７４５５号、２０１３年３月１５日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１３／０３２３４７号、２０１４年３月１５日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１４／０２９９７９号、２０１４年３月１４日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１４／０２８４１７号、２０１４年３月１６日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１４／０３０１０８号、２０１３年１０月１日出願のＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１３／０６２９２３号、２０１３年６月１３日出願の米国特許出願第１３／６９９，２７０号、２０１４年８月１３日出願の米国特許出願第１４／４５９，２３９号、２０１５年９月３０日出願の米国特許出願第１４／８７１，６７８号、２０１３年３月１５日出願の米国特許出願第１３／８３８，６００号、２０１４年８月１３日出願の米国特許出願第１４／４５９，２５１号、２０１５年３月２５日出願の米国特許出願第１４／６６８，７５０号、２０１５年９月１１日出願の米国特許出願第１４／７７５，６３４号、２０１５年９月１１日出願の米国特許出願第１４／７７５，６３８号、２０１４年３月１６日出願の米国特許出願第１４／８５２，４１２号、２０１５年１２月９日出願の米国特許出願第１４／９６４，３９４号、２０１５年１０月５日出願の米国特許出願第１４／４３１，２６６号に記載されるＤ２ＰＡアレイなどであるがこれに限定されない、ドット結合ドットオンピラーアンテナ（ｄｏｔ−ｃｏｕｐｌｅｄ−ｄｏｔｓ−ｏｎ−ｐｉｌｌａｒ  ａｎｔｅｎｎａ）（Ｄ２ＰＡ）アレイを含み、これらの完全な開示は、あらゆる目的で参照により本明細書に組み込まれる。
【００２０】
図１のパネル（Ｂ）は、閉鎖構成にあるときの試料ユニット１００の斜視図および断面図を示す。断面図は、試料ユニット１００または間隔機構の全体を示すことなく、デバイスの一部を示す。パネル（Ｂ）に示されるように、試料ユニット１００は、第１のプレート１０と、第２のプレート２０と、間隔機構（図示せず）とを備える。
【００２１】
図１のパネル（Ｂ）中、第１のプレート１０および第２のプレート２０は、閉鎖構成にある。閉鎖構成では、２つのプレートの内面１１および２１は、互いに向かい合い、２つのプレート間の間隔１０２は、間隔機構によって調整される。その結果、図に示されるように、２つのプレートは、プレートのうちの一方または両方に付着した流体試料９０を圧縮して層にし、層の厚さは、間隔機構（図示せず）によって調整される。
【００２２】
ＮＮ１  薄い流体試料層の温度を急速に変化させるためのデバイスであって、
第１のプレートと、第２のプレートとを備え、
ｉ．プレートの各々は、そのそれぞれの表面上に、流体試料と接触するための試料接触領域を備え、
ｉｉ．プレートは、試料の温度を急速に変化させるための構成を有し、この構成では、
ａ．試料接触領域は、互いに向かい合い、有意に平行であり、
ｂ．接触領域間の平均間隔は、２００ミクロン以下であり、
ｃ．２つのプレートは、試料の少なくとも一部を、非常に均一な厚さの層になるように、かつプレートに対して実質的に停滞するように調整（または制限）し、
ｄ．放射線吸収層は、均一な厚さの試料の少なくとも一部の近くにあり、
ｅ．試料の少なくとも一部および放射線吸収層の領域は、均一な厚さよりも実質的に大きい、デバイス。
【００２３】
本発明のいくつかの実施形態では、２つのプレート間にスペーサがある。
【００２４】
いくつかの実施形態では、加熱中に液体の蒸気がカードから逃げることを防止または低減する「蒸発防止リング」が液体領域（例えば、試料領域）の外側にある。
【００２５】
いくつかの実施形態では、加熱中にＱＭＡＸカードをその閉鎖構成に固定するために、ＱＭＡＸカードの外側にクランプがある。
【００２６】
いくつかの実施形態では、試料中の高速かつ均一な熱変化を達成するために、試料は圧縮されて薄層にされる。層の厚さは、５００μｍ以下、２００μｍ以下、１００μｍ以下、５０μｍ以下、２０μｍ以下、１０μｍ以下、５μｍ以下、２μｍ以下、１μｍ以下、５００ｎｍ以上、１．５μｍ以上、２．５μｍ以上、７．５μｍ以上、１５μｍ以上、３０μｍ以上、７５μｍ以上、１５０μｍ以上、または２５０μｍ以上である。試料層の厚さが薄いと、試薬の拡散がより速くなり、熱の変換がより速くなる。いくつかの実施形態では、２つのプレートは、厳密なレベルに設定されることもなく実質的に均一でもない厳密でない押圧力によって圧縮される。ある特定の実施形態では、２つのプレートは、人間の手で直接押圧される。
【００２７】
いくつかの実施形態では、プレートとスペーサとを含むＱＭＡＸカードは、カード自体による熱吸収を低減するために、低熱伝導率を有する材料でできている。
【００２８】
いくつかの実施形態では、加熱中にＱＭＡＸカードをその閉鎖構成に固定するために、ＱＭＡＸカードの外側にクランプがある。
クランプはまた、カード自体による熱吸収を低減するために、低熱伝導率を有する材料でできている。
【００２９】
「被覆する」という用語は、クランプと熱伝導接触しているプレート上の領域を意味する。例えば、クランプがＱＭＡＸカードの表面の一部を閉鎖構成において被覆することは、クランプがＱＭＡＸカードのプレート表面の一部と熱伝導接触していることを意味する。
【００３０】
クランプによる「密封」という用語は、プレートの閉鎖構成において、クランプが、プレートのある位置からプレートの別の位置への試料の流動の少なくとも一部を防止または低減することを意味する。
【００３１】
例えば、クランプは、試料の一部または試料全体を密封するように構成され得る。
【００３２】
「クランプ」という用語は、圧縮力を導入して第３の要素またはより多くの要素を一緒に保持する２つの要素を備えるデバイスを指す。例えば、クランプは、２つのプレートを一緒に保持する。
これらの材料としては、ポリマー（例えば、プラスチック）または非晶質有機材料が挙げられるが、これらに限定されない。ポリマー材料としては、アクリレートポリマー、ビニルポリマー、オレフィンポリマー、セルロースポリマー、非セルロースポリマー、ポリエステルポリマー、ナイロン、環状オレフィンコポリマー（ＣＯＣ）、ポリ（メチルメタクリレート）（ＰＭＭＡ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、環状オレフィンポリマー（ＣＯＰ）、液晶ポリマー（ＬＣＰ）、ポリアミド（ＰＡ）、ポリエチレン（ＰＥ）、ポリイミド（ＰＩ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、ポリ（フェニレンエーテル）（ＰＰＥ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリオキシメチレン（ＰＯＭ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、ポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）、ポリ（エチレンフタレート）（ＰＥＴ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、ポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）、ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）、ポリブチレンテレフタレート（ＰＢＴ）、フッ化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ペルフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）、ゴム、またはそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
これらの材料としては、酸化ケイ素、磁器、オルセレン（セラミック）、マイカ、ガラス、様々な金属の酸化物などの誘電材料を含む無機材料が挙げられるが、これらに限定されない。
これらの材料としては、酸化アルミニウム、塩化アルミニウム、硫化カドミウム、窒化ガリウム、金塩化物、ヒ化インジウム、水素化ホウ素リチウム、臭化銀、塩化ナトリウムなどの無機化合物が挙げられるが、これらに限定されない。
これらの材料には、水、エタン、メタン、油、ベンゼン、ヘキサン、ヘプタン、シリコーン油、ポリ塩化ビフェニル、液体空気、液体酸素、液体窒素などが挙げられるが、これらに限定されない液体が含まれる。
これらの材料には、空気、アルゴン、ヘリウム、窒素、酸素、二酸化炭素などが挙げられるが、これらに限定されないガスが含まれる。
材料は、上記の材料の組み合わせである。
【００３３】
いくつかの実施形態では、プレートのうちの少なくとも１つの平均厚さは、１〜１０００μｍ、１０〜９００μｍ、２０〜８００μｍ、２５〜７００μｍ、２５〜８００μｍ、２５〜６００μｍ、２５〜５００μｍ、２５〜４００μｍ、２５〜３００μｍ、２５〜２００μｍ、３０〜２００μｍ、３５〜２００μｍ、４０〜２００μｍ、４５〜２００μｍ、または５０〜２００μｍの範囲である。
【００３４】
いくつかの実施形態では、プレートのうちの少なくとも１つの平均厚さは、５０〜７５μｍ、７５〜１００μｍ、１００〜１２５μｍ、１２５〜１５０μｍ、１５０〜１７５μｍ、または１７５〜２００μｍの範囲である。
【００３５】
いくつかの実施形態では、プレートのうちの少なくとも１つの平均厚さは、約５０μｍ、約７５μｍ、約１００μｍ、約１２５μｍ、約１５０μｍ、約１７５μｍ、または約２００μｍである。
【００３６】
スペーサの高さは、プレート間の所望の調整された間隔、ならびに／または調整された最終試料の厚さおよび残留試料の厚さによって選択される。スペーサの高さ（所定のスペーサの高さ）、プレート間の間隔、および／または試料の厚さは、３ｎｍ以下、１０ｎｍ以下、５０ｎｍ以下、１００ｎｍ以下、２００ｎｍ以下、５００ｎｍ以下、８００ｎｍ以下、１０００ｎｍ以下、１μｍ以下、２μｍ以下、３μｍ以下、５μｍ以下、１０μｍ以下、２０μｍ以下、３０μｍ以下、５０μｍ以下、１００μｍ以下、１５０μｍ以下、２００μｍ以下、３００μｍ以下、５００μｍ以下、８００μｍ以下、１ｍｍ以下、２ｍｍ以下、４ｍｍ以下、またはそれらの値のうちのいずれか２つの間の範囲である。
【００３７】
スペーサの高さ、プレート間の間隔、および／または試料の厚さは、１つの好ましい実施形態では１ｎｍ〜１００ｎｍ、別の好ましい実施形態では１００ｎｍ〜５００ｎｍ、別の好ましい実施形態では５００ｎｍ〜１０００ｎｍ、別の好ましい実施形態では１μｍ（すなわち、１０００ｎｍ）〜２μｍ、別の好ましい実施形態では２μｍ〜３μｍ、別の好ましい実施形態では３μｍ〜５μｍ、別の好ましい実施形態では５μｍ〜１０μｍ、および別の好ましい実施形態では１０μｍ〜５０μｍ、別の好ましい実施形態では５０μｍ〜１００μｍである。
【００３８】
いくつかの実施形態では、ＱＭＡＸデバイスは、カード自体による熱吸収を低減するために完全に透明であるかまたは部分的に透明である。透明度は、３０％超、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％であるか、またはそれらの値のうちのいずれか２つの間の範囲である。
【００３９】
いくつかの実施形態では、ＱＭＡＸデバイスは、カード自体による熱吸収を低減するために部分的に反射性である。表面の反射率は、３０％超、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％であるか、またはそれらの値のうちのいずれか２つの間の範囲である。
【００４０】
いくつかの実施形態では、ＱＭＡＸおよびクランプは、カード自体による熱吸収を低減するためにコーティングされた断熱層である。断熱層は、上記の低熱伝導率材料を含む材料を含む。
【００４１】
いくつかの実施形態では、クランプは、閉鎖構成においてＱＭＡＸカード全体を被覆および密封する。
【００４２】
いくつかの実施形態では、クランプは、閉鎖構成におけるＱＭＡＸカードの表面の一部を被覆する。
【００４３】
いくつかの実施形態では、クランプは、光がＱＭＡＸカードの内側に入ることおよびＱＭＡＸカードから外に出ることを可能にするための透明な窓を有する。
【００４４】
いくつかの実施形態では、クランプは、光がＱＭＡＸカードの内側に入ることおよびＱＭＡＸカードから外に出ることを可能にするために、完全に透明である。
クランプの透明度は、３０％超、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％であるか、またはそれらの値のうちのいずれか２つの間の範囲である。
【００４５】
いくつかの実施形態では、閉鎖構成においてクランプとＱＭＡＸデバイスとの間に空気または液体が存在する。
液体としては、水、エタン、メタン、油、ベンゼン、ヘキサン、ヘプタン、シリコーン油、ポリ塩化ビフェニル、液体空気、液体酸素、液体窒素などが挙げられるが、これらに限定されない。
ガスとしては、空気、アルゴン、ヘリウム、窒素、酸素、二酸化炭素などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４６】
いくつかの実施形態では、クランプを閉鎖した後、クランプによって加えられたＱＭＡＸカード表面の圧力は、０．０１ｋｇ／ｃｍ２、０．１ｋｇ／ｃｍ２、０．５ｋｇ／ｃｍ２、１ｋｇ／ｃｍ２、２ｋｇ／ｃｍ２、ｋｇ／ｃｍ２、５ｋｇ／ｃｍ２、１０ｋｇ／ｃｍ２、２０ｋｇ／ｃｍ２、３０ｋｇ／ｃｍ２、４０ｋｇ／ｃｍ２、５０ｋｇ／ｃｍ２、６０ｋｇ／ｃｍ２、１００ｋｇ／ｃｍ２、１５０ｋｇ／ｃｍ２、２００ｋｇ／ｃｍ２、またはそれらの値のうちのいずれか２つの間の範囲、および０．１ｋｇ／ｃｍ２〜０．５ｋｇ／ｃｍ２、０．５ｋｇ／ｃｍ２〜１ｋｇ／ｃｍ２、１ｋｇ／ｃｍ２〜５ｋｇ／ｃｍ２、５ｋｇ／ｃｍ２〜１０ｋｇ／ｃｍ２（圧力）の好ましい範囲である。
【００４７】
図１のデバイスの断面図に示されるように、放射線吸収層１１２は、試料接触領域にわたって広がる。しかしながら、放射線吸収層の横方向領域が、試料接触領域の一部のみを約１％以上、５％以上、１０％以上、２０％以上、５０％以上、８０％以上、９０％以上、９５％以上、９９％以上、８５％以下、７５％以下、５５％以下、４０％以下、２５％以下、８％以下、２．５％以下の割合で占めることが可能であることも留意されるべきである。いくつかの実施形態では、試料の温度変化を促進するために、いくつかの実施形態では、放射線吸収層の横方向領域は、試料９０が試料接触領域上で試料９０の横寸法にわたって実質的に均一に、放射線吸収層１１２からの熱放射を受容するように構成されている。
【００４８】
いくつかの実施形態では、放射線吸収領域は、全プレート領域の１０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれらの値のうちのいずれか２つの間の範囲である。
【００４９】
いくつかの実施形態では、放射線吸収層１１２は、１０ｎｍ以上、２０ｎｍ以上、５０ｎｍ以上、１００ｎｍ以上、２００ｎｍ以上、５００ｎｍ以上、１μｍ以上、２μｍ以上、５μｍ以上、１０μｍ以上、２０μｍ以上、５０μｍ以上、１００μｍ以上、７５μｍ以下、４０μｍ以下、１５μｍ以下、７．５μｍ以下、４μｍ以下、１．５μｍ以下、７５０ｎｍ以下、４００ｎｍ以下、１５０ｎｍ以下、７５ｎｍ以下、４０ｎｍ以下、１５ｎｍ以下、またはそれらの２つの値のうちのいずれかの間の範囲の厚さを有する。ある特定の実施形態では、放射線吸収層１１２は、１００ｎｍ以下の厚さを有する。
【００５０】
いくつかの実施形態では、試料層および放射線吸収層１１２の領域は、均一な厚さよりも実質的に大きい。ここで、「実質的に大きい」という用語は、試料層および／または放射線吸収層の一般的な直径または対角線距離が少なくとも１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、３０倍、３５倍、４０倍、４５倍、５０倍、５５倍、６０倍、６５倍、７０倍、７５倍、８０倍、８５倍、９０倍、９５倍、１００倍、１５０倍、２００倍、２５０倍、３００倍、３５０倍、４００倍、４５０倍、５００倍、５５０倍、６００倍、６５０倍、７００倍、７５０倍、８００倍、８５０倍、９００倍、９５０倍、１０００倍、１５００倍、２０００倍、２５００倍、３０００倍、３５００倍、４０００倍、４５００倍、もしくは５０００倍、またはそれらの２つの値のうちのいずれかの間の範囲であることを意味する。
【００５１】
ＱＭＡＸデバイスを含むシステム
図２は、本発明のシステムの一実施形態の斜視図および断面図を示す。パネル（Ａ）および（Ｂ）に示されるように、システムは、試料ユニット１００と熱制御ユニット２００とを備え、試料ユニット１００は、第１のプレート１０と、第２のプレート２０と、間隔機構（図示せず）とを備え、熱制御ユニット２００は、放射線源２０２とコントローラ２０４とを備える。図２のパネル（Ａ）および（Ｂ）は、システムの試料ユニット１００が閉鎖構成にあるときのシステムの斜視図および断面図を示す。
【００５２】
図１のパネル（Ｂ）に示されるように、熱制御ユニット２００は、放射線源２０２とコントローラ２０４とを備える。いくつかの実施形態では、熱制御ユニット２００は、試料の温度変化のために、電磁波の形態でエネルギーを提供する。
【００５３】
図２のパネル（Ａ）および（Ｂ）の両方を参照すると、放射線源２０２は、電磁波２１０を吸収しかつ電磁波２１０の実質的な部分を熱に変換するように構成されている試料ユニット１００の放射線吸収層１１２に、電磁波２１０を発射し、放射線吸収層１１２の近傍にある試料９０の一部分の温度を上昇させる熱放射をもたらすように構成されている。言い換えれば、放射線源２０２および放射線吸収層１１２の結合は、試料９０の温度変化を促進するために必要とされる熱エネルギーを発生させるように構成されている。
【００５４】
いくつかの実施形態では、放射線源２０２からの放射は、電波、マイクロ波、赤外線波、可視光、紫外線波、Ｘ線、ガンマ線、もしくは熱放射、またはそれらの任意の組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、放射線吸収層１１２は、放射線吸収層１１２が最高の吸収効率を有する光波長の好ましい範囲を有する。いくつかの実施形態では、放射線源２０２は、放射線吸収層１１２の好ましい波長範囲内の、それと重複する、またはそれを取り囲む波長範囲で電磁波を発射するように構成されている。他の実施形態では、温度変化を促進するために、波長は、放射線吸収層の好ましい波長から離れて合理的に設計される。
【００５５】
いくつかの実施形態では、放射線源２０２は、狭い波長範囲内のレーザー光を提供するレーザー源を含む。他の実施形態では、放射線源２０２は、その複数のＬＥＤ（発光ダイオード）を含む。
【００５６】
図２のパネル（Ａ）および（Ｂ）を参照すると、コントローラ２０４は、試料の温度変化のために、放射線源２０２から発射される電磁波２１０を制御するように構成されている。コントローラ２０４が制御する電磁波２１０のパラメータとしては、存在、強度、波長、入射角、およびそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、コントローラは、手動で操作され、例えば、それは、放射線源のオンおよびオフ、したがって放射線源から発射される電磁波の存在を制御する手動スイッチと同じくらい簡単である。他の実施形態では、コントローラは、１つまたは複数の所定のプログラムに従って電磁波を自動的に制御するように構成されたハードウェアおよびソフトウェアを含む。
【００５７】
いくつかの実施形態では、所定のプログラムは、電磁波２１０のパラメータ（複数可）（例えば、存在、強度、および／または波長）が、それぞれの所定の期間にわたって所定のレベルに設定されるスケジュールを指す。他の実施形態では、所定のプログラムは、試料９０の温度が、それぞれの所定の期間にわたって所定のレベルに設定され、ある所定のレベルから別の所定のレベルへの試料温度の変化のための期間もまたそれぞれ設定される、スケジュールを指す。いくつかの実施形態では、コントローラ２０４は、プログラム可能であるように構成されており、これは、コントローラ２０４が、システムのオペレータによって送達されるシステムのための所定のプログラムを受信および実行するように構成されたハードウェアおよびソフトウェアを含むことを意味する。
【００５８】
本発明のサーマルサイクラーシステムおよび関連方法は、化学的、生物学的、または医学的アッセイまたは反応を促進するために使用される。いくつかの実施形態では、反応は、温度変化を必要とする。いくつかの実施形態では、反応は、非特異的反応を回避し、かつ／または待ち時間を短縮するために、急速な温度変化を必要とするか、または好む。ある特定の実施形態では、本発明のシステムおよび方法は、流体試料中のヌクレオチドの増幅のために周期的な温度変化を必要とする反応を促進するために使用され、そのような反応としては、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）が挙げられるが、これに限定されない。以下の説明では、本発明のサーマルサイクラーシステムおよび方法の能力および利用を例示するために、ＰＣＲを一例として使用する。しかしながら、本明細書に記載されるデバイス、システム、および方法のいくつかの実施形態は、温度制御および変化を必要とする他のアッセイおよび／または反応にも適用されることに留意されるべきである。
【００５９】
図２のパネル（Ｂ）を参照すると、いくつかの実施形態では、試料９０は、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）用の予混合された反応媒体である。例えば、ある特定の実施形態では、反応媒体は、ＤＮＡ鋳型、２種類のプライマー、ＤＮＡポリメラーゼ（例えば、Ｔａｑポリメラーゼ）、デオキシヌクレオシド三リン酸（ｄＮＴＰ）、二価カチオン（例えば、Ｍｇ２＋）、一価カチオン（例えば、Ｋ＋）、および緩衝液などであるが、これらに限定されない構成成分を含む。特定の構成成分、各構成成分の濃度、および全体の体積は、反応の合理的な設計によって異なる。
【００６０】
いくつかの実施形態では、ＰＣＲアッセイは、以下のステップの間に試料温度の多くの変化／変更を必要とする：（ｉ）試料を９２〜９８℃に加熱することを必要とする任意の初期化ステップ、（２）試料を９２〜９８℃に加熱することを必要とする変性ステップ、（３）試料温度を５０〜６５℃に低下させることを必要とするアニーリングステップ、（４）試料を７５〜８０℃に加熱することを必要とする延伸（または伸長）ステップ、（５）ステップ（２）〜（４）を約２０〜４０回繰り返すこと、ならびに（６）アッセイの完了、および試料の温度を周囲温度（例えば、室温）に低下させること、または約４℃に冷却すること。各ステップのための特定の温度および特定の期間は変化し、標的配列の長さ、プライマーの長さ、カチオン濃度、および／またはＧＣ百分率が挙げられるが、これらに限定されない様々な要因に依存する。
【００６１】
本発明のサーマルサイクラーシステムは、ＰＣＲアッセイのための急速な温度変化を提供する。例えば、図１のパネル（Ａ）および（Ｂ）ならびに図２のパネル（Ｂ）を参照すると、いくつかの実施形態では、試料９０（例えば、予混合された反応媒体）は、開放構成におけるプレート１０および２０のうちの一方または両方に添加され、プレートは、閉鎖構成に切り替えられて、試料９０を圧縮して、間隔機構（図示せず）によって調整される厚さ１０２を有する薄層にし、放射線源２０２は、電磁波２１０を第１のプレート１０に（例えば、具体的には放射線吸収層１１２に）発射し、放射線吸収層１１２は、電磁波２１０を吸収しかつ前述の電磁波２１０の少なくとも実質的な部分を熱に変換するように構成されており、これは、試料の温度を上げ、電磁波２１０の除去は、試料９０の温度の低下をもたらす。
【００６２】
いくつかの実施形態では、電磁波２１０を放射線吸収層１１２に発射するか、または電磁波の強度を増加させることによって、サーマルサイクラーシステムは、初期化ステップ、変性ステップ、および／または延伸／伸長ステップのうちのいずれかまたは全てに対して急速な加熱を提供し（温度を上げ）、いくつかの実施形態では、放射線源２０２から発射される電磁波の除去または電磁波の強度の減少により、アニーリングステップおよび／または最終冷却ステップへの冷却が急速に達成される。いくつかの実施形態では、電磁波２１０または電磁波２１０の強度の増加は、少なくとも５０℃／秒、４５℃／秒、４０℃／秒、３５℃Ｃ／秒、３０℃／秒、２５℃／秒、２０℃／秒、１８℃／秒、１６℃／秒、１４℃／秒、１２℃／秒、１０℃／秒、９℃／秒、８℃／秒、７℃／秒、６℃／秒、５℃／秒、４℃／秒、３／秒、もしくは２℃／秒、またはそれらの２つの値のうちのいずれかの間の範囲の昇温傾斜速度をもたらす。ある特定の実施形態では、ＰＣＲアッセイの平均昇温傾斜速度は、１０℃／秒以上である。いくつかの実施形態では、電磁波２１０の除去または電磁波２１０の強度の低減は、少なくとも５０℃／秒、４５℃／秒、４０℃／秒、３５℃Ｃ／秒、３０℃／秒、２５℃／秒、２０℃／秒、１８℃／秒、１６℃／秒、１４℃／秒、１２℃／秒、１０℃／秒、９℃／秒、８℃／秒、７℃／秒、６℃／秒、５℃／秒、４℃／秒、３／秒、もしくは２℃／秒、またはそれらの２つの値のうちのいずれかの間の範囲の降温傾斜速度をもたらす。ある特定の実施形態では、ＰＣＲアッセイの平均降温傾斜速度は、５℃／秒以上である。ここで使用される場合、「傾斜速度」という用語は、２つの事前設定温度の間の温度変化の速度を指す。いくつかの実施形態では、各ステップへの平均上昇温度または下降温度は異なる。
【００６３】
ＰＣＲ中、目標温度に達した後の任意のステップ内で、試料は、ある特定の期間にわたって目標温度で維持される必要がある。本発明のサーマルサイクラーシステムは、（１）電磁波２１０の強度を調節し、温度が目標まで上昇した場合は強度を低下させるか、もしくは温度が目標まで低下した場合は強度を上昇させること、および／または（２）試料に供給される熱と試料から除去される熱のバランスを取ることによって目標温度を維持することによって、温度維持機能を提供する。
【００６４】
図３は、本発明の一実施形態の断面図を示し、サーマルサイクラーシステムを実証し、温度変化および制御を促進する追加の要素を示す。図２に示されるように、サーマルサイクラーシステムは、試料ユニット１００と熱制御ユニット２００とを備える。試料ユニット１００は、第１のプレート１０と、第２のプレート２０と、間隔機構４０と、密封要素３０とを備え、熱制御ユニット２００は、放射線源２０２と、コントローラ２０４と、温度計２０６と、エキスパンダ２０８とを備える。
【００６５】
図３は、閉鎖構成にある試料ユニット１００を示し、この構成では、第１および第２のプレート１０および２０の内面１１および２１は、互いに向かい合い、２つのプレート間の間隔１０２は、間隔機構４０によって調整される。試料９０が開放構成におけるプレートのうちの一方または両方の上に付着している場合、閉鎖構成に切り替えると、第１のプレート１０および第２のプレート２０は、人間の手または他の機構によって押圧され、したがって、試料９０は、２つのプレートによって圧縮されて薄層になる。いくつかの実施形態では、層の厚さは均一であり、２つのプレート間の間隔１０２と同じである。ある特定の実施形態では、間隔１０２（したがって試料層の厚さ）は、間隔機構４０によって調整される。いくつかの実施形態では、間隔機構は、プレートのうちの１つに固定された密閉スペーサを含む。いくつかの実施形態では、間隔機構４０は、プレートのうちの一方または両方に固定された複数の柱状スペーサを含む。ここで、「固定された」という用語は、スペーサ（複数可）がプレートに取り付けられ、その取り付けが少なくともプレートの使用中に維持されることを意味する。
【００６６】
いくつかの実施形態では、試料ユニット１０は、２０１５年８月１０日出願の米国仮特許出願第６２／２０２，９８９号、２０１５年９月１４日出願の米国仮特許出願第６２／２１８，４５５号、２０１６年２月９日出願の米国仮特許出願第６２／２９３，１８８号、２０１６年３月８日出願の米国仮特許出願第６２／３０５，１２３号、２０１６年７月３１日出願の米国仮特許出願第６２／３６９，１８１号、２０１６年９月１５日出願の米国仮特許出願第６２／３９４，７５３号、２０１６年８月１０日出願のＰＣＴ出願（米国指定）第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０４５４３７号、２０１６年９月１４日出願のＰＣＴ出願（米国指定）第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０５１７７５号、２０１６年９月１５日出願のＰＣＴ出願（米国指定）第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０５１７９４号、および２０１６年９月２７日出願のＰＣＴ出願（米国指定）第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０５４０２５号に記載されたＣＲＯＦデバイスなどであるがこれに限定されない、圧縮調整オープンフロー（ＣＲＯＦ、ＱＭＡＸとしても知られる）デバイスであり、これらの完全な開示は、あらゆる目的で参照により本明細書に組み込まれる。
【００６７】
いくつかの実施形態では、試料ユニット１００は、閉鎖構成において、媒体接触領域の外側で第１のプレート１０と第２のプレート２０との間の間隔１０２を密封するように構成された密封要素３０を備える。ある特定の実施形態では、密封要素３０は、試料９０の全体の横方向領域が十分に画定され、かつ測定可能であるように、ある特定の領域（例えば、試料受容領域）内に試料９０を密閉する。ある特定の実施形態では、密封要素３０は、試料９０の均一性、特に試料層の厚さを改善する。
【００６８】
いくつかの実施形態では、密封要素３０は、閉鎖構成で第１のプレート１０と第２のプレート２０との間に塗布された接着剤を含む。接着剤は、デンプン、デキストリン、ゼラチン、アスファルト、瀝青、ポリイソプレン天然ゴム、樹脂、シェラック、セルロースおよびその誘導体、ビニル誘導体、アクリル誘導体、反応性アクリル塩基、ポリクロロプレン、スチレン−ブタジエン、スチレン−ジエン−スチレン、ポリイソブチレン、アクリロニトリル−ブタジエン、ポリウレタン、ポリスルフィド、シリコーン、アルデヒド縮合樹脂、エポキシ樹脂、アミン塩基樹脂、ポリエステル樹脂、ポリオレフィンポリマー、可溶性ケイ酸塩、リン酸塩セメント、もしくは任意の他の接着剤材料、またはそれらの任意の組み合わせなどであるが、これらに限定されない材料から選択される。いくつかの実施形態では、接着剤は、乾燥接着剤、感圧接着剤、接触接着剤、高温接着剤、または一液型もしくは多液型反応性接着剤、またはそれらの任意の組み合わせである。いくつかの実施形態では、糊は、天然接着剤もしくは合成接着剤であるか、または他の起源由来であるか、またはそれらの任意の組み合わせである。いくつかの実施形態では、接着剤は、自然硬化、熱硬化、紫外線硬化、もしくは任意の他の処理、またはそれらの任意の組み合わせによって硬化される。
【００６９】
いくつかの実施形態では、密封要素３０は、密閉スペーサ（ウェル）を含む。例えば、密閉スペーサは、上面図から見て円形（または任意の他の密閉形状）を有し、試料９０を包囲し、第１のプレート１０および第２のプレート２０と共に試料９０を本質的に制限する。ある特定の実施形態では、密閉スペーサ（ウェル）は、間隔機構４０としても機能する。そのような実施形態では、密閉スペーサは、試料９０の横方向の境界を密封すると同時に、試料層の厚さを調整する。
【００７０】
いくつかの実施形態では、コントローラ２０４は、所定のプログラムに従って、試料９０を伴うアッセイおよび／または反応を促進するために、試料の温度を調節するように構成されている。いくつかの実施形態では、アッセイおよび／または反応は、ＰＣＲである。ある特定の実施形態では、コントローラ２０４は、放射線源２０６からの電磁波の存在、強度、および／または周波数を制御するように構成されている。
【００７１】
図３に示されるように、いくつかの実施形態では、熱制御ユニット２００は、温度計２０６を備える。いくつかの実施形態では、温度計２０６は、試料９０の温度を制御／監視／調節するための監視および／またはフィードバック機構を提供する。例えば、いくつかの実施形態では、温度計２０６は、試料接触領域またはその近傍の温度を測定するように構成されている。ある特定の実施形態では、温度計２０６は、試料９０の温度を直接測定するように構成されている。いくつかの実施形態では、温度計２０６は、光ファイバ温度計、赤外線温度計、液晶温度計、高温計、水晶温度計、シリコンバンドギャップ温度センサ、温度ストリップ、サーミスタ、および熱電対からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、温度計２０６は、赤外線温度計である。
【００７２】
いくつかの実施形態では、温度計２０６は、信号をコントローラ２０４に送信するように構成されている。そのような信号は、コントローラ２０４が対応する変化をもたらすように、試料９０の温度に関する情報を含む。例えば、ＰＣＲ中、変性ステップに関して、目標温度は９５℃に設定され、測定後、温度計は、試料９０の測定温度が実際には９４．８℃であることを示す信号をコントローラ２０４に送信し、したがって、コントローラ２０４は、電磁波を発射する放射線源２０２の出力を変更するか、または既存の電磁波の特定のパラメータ（例えば、強度もしくは周波数）を調節し、これにより、試料９０の温度は、９５℃に上昇する。そのような測定−シグナル伝達−調節ループは、あらゆる反応／アッセイのあらゆるステップに適用される。
【００７３】
図３に示されるように、熱制御ユニット２００は、放射線源２０２からの電磁波を、より小さい直径からより大きい直径に拡大するように構成されたビームエキスパンダ２０８を備える。いくつかの実施形態では、放射線源２０２から発射される電磁波は、試料接触領域全体を被覆するのに十分である。しかしながら、いくつかの実施形態では、放射線源２０２から発射される電磁波の被覆領域を拡大して、拡大された電磁波２１０をもたらし、全ての試料接触領域（複数可）に熱源を提供する必要がある。ビームエキスパンダ２０８は、米国特許第４，５４５，６７７号、同第４，２１４，８１３号、同第４，１２７，８２８号、および同第４，０１６，５０４号、ならびに米国特許公開第２００８／０２９７９１２号および同第２０１０／０２１４６５９号に記載されるビームエキスパンダが挙げられるが、これらに限定されない任意の既知の技術を用い、これらは、あらゆる目的で参照によりそれらの全体が組み込まれる。
【００７４】
多重化
図４は、本発明の別の実施形態の斜視図を示し、プレート上に複数の試料接触領域があり、複数の試料の処理および分析を可能にする。図３のパネル（Ａ）および（Ｂ）に示されるように、本発明のサーマルサイクラーシステムは、試料ユニット１００と熱制御ユニット２００とを備え、試料ユニット１００は、第１のプレート１０と、複数の第２のプレート２０と、複数の間隔機構（図示せず）とを備え、熱制御ユニット２００は、放射線源２０２とコントローラ２０４とを備える。
【００７５】
図４のパネル（Ａ）を参照すると、プレートのうちの一方または両方（例えば、第１のプレート１０）は、複数の試料接触領域（印が付けられていない）を備える。いくつかの実施形態では、プレートのうちの一方または両方（例えば、第１のプレート１０）は、複数の放射線吸収層１１２を備える。図４のパネル（Ａ）は、開放構成にある試料ユニット１００を示し、この構成では、第１のプレート１０および第２のプレート２０は、部分的または全体的に分離されており、プレートのうちの一方または両方の上に１つ以上の試料が付着することを可能にする。開放構成では、第１のプレート１０と第２のプレート２０との間の間隔は、間隔機構によって調整されない。
【００７６】
図４のパネル（Ｂ）は、閉鎖構成にある試料ユニット１００を示し、この構成では、２つのプレートの内面は、互いに向かい合い、２つのプレート間の間隔１０２は、間隔機構（図示せず）によって調整される。１つ以上の試料がプレート上に付着している場合、プレートは、各試料を圧縮して層にするように構成されており、層の厚さは、間隔機構によって調整される。
【００７７】
図４のパネル（Ｂ）に示されるように、複数の第２のプレート２０は、第１のプレート１０の一部を被覆するために使用される。例えば、各第２のプレート２０は、試料が付着する単一の試料接触領域を被覆する。各試料接触領域に対して間隔機構が存在し、間隔機構は異なる高さを有し、各試料接触領域のためのおよび各試料層の異なる厚さのための異なる間隔１０２をもたらす。例えば、間隔機構は、柱状スペーサであり、各試料接触領域は、均一な高さのスペーサのセットを有し、スペーサの異なるセットは、同じまたは異なる高さを有し、異なる試料に対して同じまたは異なる試料層の厚さをもたらす。
【００７８】
図４のパネル（Ａ）および（Ｂ）を参照すると、いくつかの実施形態では、コントローラ２０４は、電磁波２１０を第１のプレート１０（したがって放射線吸収層１１２）に発射するように放射線源２０２を誘導し、電磁波２１０は、放射線吸収層１１２によって吸収され、熱に変換され、試料中の温度の変化をもたらす。いくつかの実施形態では、複数の試料接触領域が存在する場合、複数の試料が処理および分析される。例えば、ある特定の実施形態では、試料の各々は、異なる構成成分を有する予混合されたＰＣＲ反応媒体である。同じヌクレオチドを増幅するための、および／または同じもしくは異なる条件で異なるヌクレオチドを増幅するための異なる条件を試験するために、１つの試料ユニット１００が使用される。
【００７９】
例示的な実施形態
図５は、ＱＭＡＸカードデバイスを使用した核酸増幅のための例示的な手順の断面図を示す。ステップの例としては、（Ａ）核酸を含有する試料を第１のプレート（基板）の内側に導入すること、（Ｂ）第２のプレート（ＱＭＡＸカード）を第１のプレートの内面へ押圧して、デバイスの閉鎖構成を形成することであって、核酸増幅に必要な試薬が第２のプレートの内面上で乾燥されている、形成すること、（ｃ）第１および第２のプレートによって密閉されたチャンバ内に核酸増幅産物を蓄積することが挙げられる。
【００８０】
図５は、ＱＭＡＸカードデバイスを使用した核酸増幅のための例示的な手順の断面図を示す。
【００８１】
より具体的には、ステップ（Ａ）において、「試料」は、全血、血漿、血清、尿、唾液、および汗などのヒト体液、ならびに細胞培養物（哺乳類、植物、細菌、真菌）が挙げられるが、これらに限定されない試料を含有するか、または含有しない任意の核酸であってもよい。試料は、新たに得られ得るか、あるいは任意の望ましいまたは便利な方法で、例えば、希釈、または緩衝剤または他の溶液もしくは溶媒の添加によって保管または処理され得る。試料中には、ヒト細胞、動物細胞、植物細胞、細菌細胞、真菌細胞、ウイルス粒子などの細胞構造が存在することができる。
【００８２】
本明細書で使用される場合、「核酸」という用語は、任意のＤＮＡもしくはＲＮＡ分子、またはＤＮＡ／ＲＮＡハイブリッド、またはＤＮＡおよび／もしくはＲＮＡの混合物を指す。したがって、「核酸」という用語は、ゲノムまたは染色体ＤＮＡ、プラスミドＤＮＡ、増幅ＤＮＡ、ｃＤＮＡ、全ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、および小分子ＲＮＡを含むことを意図しているが、これらに限定されない。「核酸」という用語は、天然ＤＮＡおよび／もしくはＲＮＡ分子、または合成ＤＮＡおよび／もしくはＲＮＡ分子を含むことも意図している。無細胞核酸が試料中に存在するいくつかの実施形態では、本明細書で使用される場合、「無細胞」は、核酸がいかなる細胞構造中にも含有されていないことを示す。いくつかの他の実施形態では、核酸は、ヒト細胞、動物細胞、植物細胞、細菌細胞、真菌細胞、および／またはウイルス粒子が挙げられるが、これらに限定されない細胞構造内に含有される。無細胞核酸の形態の、もしくは細胞構造内のいずれか、またはそれらの組み合わせの核酸は、試料中に存在することができる。いくつかのさらなる実施形態では、核酸は、第１のプレートの内面に導入される前に精製される。なおさらなる実施形態では、核酸は、タンパク質および脂質などの他の分子に関連する複合体内に存在することができる。
【００８３】
本発明の方法は、ある範囲の体積の試料に適している。異なる体積を有する試料が、異なる寸法を有するプレートに導入され得る。
【００８４】
試料は、第１のプレートもしくは第２のプレートのいずれかの上、または必要に応じて両方の上にさえ導入され得る。本明細書の図５は、試料を第１のプレートの内面上に導入する一例を提供する。
【００８５】
より具体的には、ステップ（ｂ）において、第２のプレートは、試料と接触して第１のプレートの内面へ押圧されて、デバイスの閉鎖構成を形成する。本明細書で使用される場合、「第２のプレート」は、試料に接触する内面に周期的なスペーサを備えたＱＭＡＸカードを指す。
【００８６】
本明細書で使用される場合、「核酸増幅」には、試料中の標的分子を増幅すること（その多数のコピーを生成すること）によって核酸を検出するために使用される任意の技術が含まれ、本明細書では、「標的」は、対象の核酸の配列または部分配列を指す。好適な核酸増幅技術としては、ホットスタートＰＣＲ、ネステッドＰＣＲ、タッチダウンＰＣＲ、逆転写ＰＣＲ、ＲＡＣＥ  ＰＣＲ、デジタルＰＣＲなどの異なるポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）方法、および等温増幅方法、例えば、ループ介在等温増幅（ＬＡＭＰ）、鎖置換増幅、ヘリカーゼ依存性増幅、ニッキング酵素増幅、ローリングサークル増幅、およびリコンビナーゼポリメラーゼ増幅などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８７】
本明細書で使用される場合、「必要な試薬」としては、プライマー、デオキシヌクレオチド（ｄＮＴＰ）、二価カチオン（例えば、Ｍｇ２＋）、一価カチオン（例えば、Ｋ＋）、緩衝液、酵素、およびレポーターが挙げられるが、これらに限定されない。核酸増幅に必要な試薬は、第１のプレートもしくは第２のプレートまたは両方の内面上で乾燥形態、あるいは例えば、パラフィンなどの温度が上昇すると融解する材料に閉じ込められたか、埋め込まれたか、またはそれによって包囲された液体形態のいずれかであってもよい。
【００８８】
本明細書で使用される場合、「プライマー」は、いくつかの実施形態では、一対の順方向プライマーおよび逆方向プライマーを指し得る。いくつかの実施形態では、プライマーは、複数のプライマーまたはプライマーセットを指し得る。本明細書で使用される場合、核酸増幅に適した酵素としては、ＤＮＡ依存性ポリメラーゼ、またはＲＮＡ依存性ＤＮＡポリメラーゼ、またはＤＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８９】
本明細書で使用される場合、「レポーター」という用語は、核酸分子に結合するか、もしくは核酸分子内にインターカレートすることができるか、または増幅プロセスの副産物によって活性化されて、核酸分子または増幅プロセスの可視化を可能にすることができる、任意のタグ、標識、または染料を指す。好適なレポーターとしては、蛍光標識もしくはタグもしくは染料、インターカレート剤、分子ビーコン標識、もしくは生物発光分子、またはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【００９０】
いくつかの他の実施形態では、本明細書で使用される場合、「必要な試薬」はまた、細胞溶解試薬も含むことができ、これは細胞構造の破壊を促進する。細胞溶解試薬としては、塩、洗剤、酵素、および他の添加剤が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書における「塩」という用語には、リチウム塩（例えば、塩化リチウム）、ナトリウム塩（例えば、塩化ナトリウム）、カリウム（例えば、塩化カリウム）が含まれるが、これらに限定されない。本明細書における「洗剤」という用語は、アニオン性およびカチオン性、非イオン性または双性イオン性を含む、イオン性であり得る。本明細書で使用される場合、「イオン性洗剤」という用語は、水に溶解したときに部分的または全体的にイオン形態である任意の洗剤を含む。好適なアニオン性洗剤としては、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）もしくは他のアルカリ金属アルキル硫酸塩もしくは同様の洗剤、サルコシル、またはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。本明細書における「酵素」という用語には、リゾチーム、セルラーゼ、およびプロテイナーゼが含まれるが、これらに限定されない。加えて、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、および他のポリアミノカルボン酸が挙げられるが、これらに限定されないキレート剤、ならびにジチオトレイトール（ｄＴＴ）などのいくつかの還元剤も細胞溶解試薬に含まれ得る。本明細書における必要な試薬の組成は、異なる増幅反応の合理的な設計に従って異なる。
【００９１】
より具体的には、ステップ（ｃ）において、デバイスが閉鎖構成にあるとき、放射線源は、第１のプレートもしくは第２のプレートまたは両方の内面または外面上の放射線吸収層に電磁波を発射する。放射線吸収層は、電磁波を吸収し、かつ前述の電磁波からのエネルギーの少なくとも実質的な部分を熱の形態に変換し、それが閉鎖したチャンバ内の試料に伝達されるように構成されている。いくつかの実施形態では、放射線源は、周囲温度から９８℃の範囲で前述の試料の温度を調節するようにプログラムされている。いくつかの実施形態では、例えば、従来のＰＣＲについて、試料は、最初に９８℃に加熱され、次いで１５〜４０回にわたって９４℃、５０〜６５℃、および７２℃の繰り返しサイクルを受ける。いくつかの実施形態では、例えば、等温増幅について、試料の温度は、一定温度に維持される。いくつかの実施形態では、例えば、ＬＡＭＰを介して等温増幅を行う場合、試料は、約１〜７０分間６０〜６５℃に加熱される。
【００９２】
本明細書で使用される場合、「核酸増幅産物」は、核酸増幅技術によって生成される様々な核酸を指す。本明細書における核酸増幅産物のタイプとしては、一本鎖ＤＮＡ、一本鎖ＲＮＡ、二本鎖ＤＮＡ、直鎖状ＤＮＡ、または環状ＤＮＡなどが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、核酸増幅産物は、同じ長さおよび構成を有する同一の核酸であってもよい。いくつかの他の実施形態では、核酸増幅産物は、異なる長さおよび構成を有する複数の核酸であってもよい。
【００９３】
いくつかの実施形態では、核酸増幅後に蓄積された核酸は、レポーターを使用して定量化される。上記で定義および使用されるように、レポーターは、閉鎖したチャンバ内に蓄積された核酸アンプリコンの有無または量と相関する定量化可能な特徴を有する。
【００９４】
図６は、ＱＭＡＸカードデバイスを使用した核酸抽出および増幅を組み合わせた例示的なアッセイ手順の断面図を示す。ステップの例としては、（ａ）捕捉プローブを第１のプレート（基板）の内面上に固定化すること、（ｂ）試料を第１のプレートの内面上に導入すること、（ｃ）第２のプレート（ＱＭＡＸカード１）を第１のプレートの内面へ押圧して、デバイスの閉鎖構成を形成することであって、核酸の放出および捕捉を促進するための必要な試薬１が第２のプレートの内面上で乾燥されている、形成すること、（ｄ）前述の試料からの核酸を第１のプレートの内面上に捕捉すること、（ｅ）第２のプレートを取り外し、スポンジを使用して第１のプレートの内面を洗浄すること、（ｆ）第３のプレート（ＱＭＡＸカード２）を第１のプレートの内面へ押圧することであって、核酸増幅のための必要な試薬２が第３のプレートの内面上で乾燥されている、押圧すること、（ｇ）第１および第３のプレートによって密閉されたチャンバ内に核酸増幅産物を蓄積することが挙げられる。
【００９５】
より具体的には、ステップ（ａ）において、捕捉プローブは、第１のプレートの内面上に固定化される。本明細書で使用される場合、「捕獲プローブ」は、１〜２００ｂｐ、好ましくは５〜５０ｂｐ、より好ましくは１０〜２０ｂｐの長さを有するオリゴヌクレオチドを指す。捕獲プローブは、試料中の対象の核酸配列に相補的な配列を有する。いくつかの実施形態では、同一の捕捉プローブが第１のプレートの表面に固定化される。いくつかの他の実施形態では、異なる塩基対組成を有する異なる捕捉プローブが、第１のプレートの表面に固定化される。捕獲プローブは、ＤＮＡもしくはＲＮＡまたは両方であってもよいが、一本鎖ＤＮＡであることが好ましい。本明細書で使用される場合、「固定化する」とは、プレート表面に捕捉プローブを固定するためのプロセスを指す。いくつかの実施形態では、捕捉プローブは、共有結合を介して固定され、例えば、捕捉プローブの５’または３’末端のいずれかが、プレート表面上のコーティングを促進するように修飾される。一般的に使用される３’末端修飾としては、チオール、ジチオール、アミン、ビオチンなどが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの他の実施形態では、捕捉プローブは、基板表面に受動的に吸収され得る。
【００９６】
捕捉プローブで固定化された後、プレート表面は、ブロッカー溶液で遮断される。好適なブロッカーとしては、６−メルカプト−ヘキサノール、ウシ血清アルブミンなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００９７】
図６のステップ（ｂ）に示されるように、「試料」は、全血、血漿、血清、尿、唾液、および汗などのヒト体液、ならびに細胞培養物（哺乳類、植物、細菌、真菌）が挙げられるが、これらに限定されない試料を含有するか、または含有しない任意の核酸であってもよい。試料は、新たに得られ得るか、あるいは任意の望ましいまたは便利な方法で、例えば、希釈、または緩衝剤または他の溶液もしくは溶媒の添加によって保管または処理され得る。試料中には、ヒト細胞、動物細胞、植物細胞、細菌細胞、真菌細胞、ウイルス粒子などの細胞構造が存在することができる。
【００９８】
本明細書で使用される場合、「核酸」という用語は、任意のＤＮＡもしくはＲＮＡ分子、またはＤＮＡ／ＲＮＡハイブリッド、またはＤＮＡおよび／もしくはＲＮＡの混合物を指す。したがって、「核酸」という用語は、ゲノムまたは染色体ＤＮＡ、プラスミドＤＮＡ、増幅ＤＮＡ、ｃＤＮＡ、全ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、および小分子ＲＮＡを含むことを意図しているが、これらに限定されない。「核酸」という用語は、天然ＤＮＡおよび／もしくはＲＮＡ分子、または合成ＤＮＡおよび／もしくはＲＮＡ分子を含むことも意図している。無細胞核酸が試料中に存在するいくつかの実施形態では、本明細書で使用される場合、「無細胞」は、核酸がいかなる細胞構造中にも含有されていないことを示す。いくつかの他の実施形態では、核酸は、ヒト細胞、動物細胞、植物細胞、細菌細胞、真菌細胞、および／またはウイルス粒子が挙げられるが、これらに限定されない細胞構造内に含有される。無細胞核酸の形態の、もしくは細胞構造内のいずれか、またはそれらの組み合わせの核酸は、試料中に存在することができる。いくつかのさらなる実施形態では、核酸は、第１のプレートの内面に導入される前に精製される。なおさらなる実施形態では、核酸は、タンパク質および脂質などの他の分子に関連する複合体内に存在することができる。
【００９９】
本発明の方法は、ある範囲の体積の試料に適している。異なる体積を有する試料が、異なる寸法を有するプレートに導入され得る。
【０１００】
試料は、第１のプレートもしくは第２のプレートのいずれかの上、または必要に応じて両方の上にさえ導入され得る。本明細書の図６は、試料を第１のプレートの内面上に導入する一例を提供する。
【０１０１】
より具体的には、ステップ（ｃ）において、第２のプレート（ＱＭＡＸカード１）は、試料と接触して第１のプレート（基板）の内面へ押圧されて、デバイスの閉鎖構成を形成する。核酸増幅に必要な試薬１は、第１のプレートもしくは第２のプレートまたは両方の内面上で乾燥形態、あるいは例えば、パラフィンなどの温度が上昇すると融解する材料に閉じ込められたか、埋め込まれたか、またはそれによって包囲された液体形態のいずれかであってもよい。
【０１０２】
本明細書で使用される場合、「必要な試薬１」は、細胞溶解試薬、もしくはハイブリダイゼーション試薬、またはそれらの組み合わせを指す。
【０１０３】
本明細書で使用される場合、「細胞溶解試薬」は、塩、洗剤、酵素、および細胞構造の破壊を促進する他の添加剤を含むことを意図しているが、これらに限定されない。本明細書における「塩」という用語には、リチウム塩（例えば、塩化リチウム）、ナトリウム塩（例えば、塩化ナトリウム）、カリウム（例えば、塩化カリウム）が含まれるが、これらに限定されない。本明細書における「洗剤」という用語は、アニオン性およびカチオン性、非イオン性または双性イオン性を含む、イオン性であり得る。本明細書で使用される場合、「イオン性洗剤」という用語は、水に溶解したときに部分的または全体的にイオン形態である任意の洗剤を含む。好適なアニオン性洗剤としては、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）もしくは他のアルカリ金属アルキル硫酸塩もしくは同様の洗剤、サルコシル、またはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。本明細書における「酵素」という用語には、リゾチーム、セルラーゼ、およびプロテイナーゼが含まれるが、これらに限定されない。加えて、ＥＤＴＡ、ＥＧＴＡ、および他のポリアミノカルボン酸が挙げられるが、これらに限定されないキレート剤、ならびにジチオトレイトール（ｄＴＴ）などのいくつかの還元剤も細胞溶解試薬に含まれ得る。本明細書における必要な試薬の組成は、異なる増幅反応の合理的な設計に従って異なる。
【０１０４】
本明細書で使用される場合、「ハイブリダイゼーション試薬」は、固定化捕捉プローブと試料中の対象の核酸との間のハイブリダイゼーションを促進する試薬を指し、本明細書において、塩化ナトリウム、酢酸ナトリウム、フィコール、デキストラン、ポリビニルピロリドン、ウシ血清アルブミンなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０５】
より具体的には、ステップ（ｄ）において、前述の試料と接触した後、乾燥した必要な試薬１は、試料に溶解する。破壊された細胞構造から放出された対象の核酸、もしくは無細胞核酸としての存在、またはそれらの組み合わせは、プレート表面の相補的な捕捉プローブにハイブリダイズする。ハイブリダイゼーションに使用される時間は、主にＱＭＡＸカード１の内面のスペーサの仕様によって異なる。いくつかの実施形態では、例えば、高さが３０μｍのスペーサを有するＱＭＡＸカード１が使用される場合、実験データは、２分後に、対象の核酸と固定化捕捉プローブとの間のハイブリダイゼーションが平衡に達したことを示した。本明細書の図６（ｄ）で使用される場合、「ハイブリダイズされていない核酸」は、固定化された捕獲プローブによって捕獲されない核酸を指す。
【０１０６】
より具体的には、ステップ（ｅ）において、第２のプレート（ＱＭＡＸカード１）が第１のプレート（基板）から取り外され、第１のプレート（基板）の表面がスポンジを使用して洗浄される。本明細書で使用される場合、「スポンジ」は、異なる圧力下で孔径を変化させる可撓性の多孔質材料の種類を指す。洗浄緩衝剤を含むスポンジは、汚染物質を除去するために第１のプレート表面と接触している。いくつかの実施形態では、スポンジは第１のプレート表面と１回接触している。他のいくつかの実施形態では、スポンジは、第１のプレート表面と２回または３回以上接触している。本明細書で使用される場合、「汚染物質」は、核酸増幅反応に有害である細胞残屑、タンパク質、非特異的核酸などが挙げられるが、これらに限定されない化合物を指す。
【０１０７】
より具体的には、ステップ（ｆ）において、第３のプレート（ＱＭＡＸカード２）は、試料と接触して第１のプレートの内面へ押圧されて、デバイスの閉鎖構成を形成する。核酸増幅に必要な試薬２は、第１のプレートもしくは第３のプレートまたは両方の内面上で乾燥形態、あるいは例えば、パラフィンなどの温度が上昇すると融解する材料に閉じ込められたか、埋め込まれたか、またはそれによって包囲された液体形態のいずれかであってもよい。
【０１０８】
本明細書で使用される場合、「核酸増幅」には、試料中の標的分子を増幅すること（その多数のコピーを生成すること）によって核酸を検出するために使用される任意の技術が含まれ、本明細書では、「標的」は、対象の核酸の配列または部分配列を指す。好適な核酸増幅技術としては、ホットスタートＰＣＲ、ネステッドＰＣＲ、タッチダウンＰＣＲ、逆転写ＰＣＲ、ＲＡＣＥ  ＰＣＲ、デジタルＰＣＲなどの異なるポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）方法、および等温増幅方法、例えば、ループ介在等温増幅、鎖置換増幅、ヘリカーゼ依存性増幅、ニッキング酵素増幅、ローリングサークル増幅、およびリコンビナーゼポリメラーゼ増幅などが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０９】
本明細書で使用される場合、「必要な試薬２」としては、プライマー、デオキシヌクレオチド（ｄＮＴＰ）、二価カチオン（例えば、Ｍｇ２＋）、一価カチオン（例えば、Ｋ＋）、緩衝液、酵素、およびレポーターが挙げられるが、これらに限定されない。核酸増幅に必要な試薬２は、第１のプレートもしくは第２のプレートまたは両方の内面上で乾燥形態、あるいは例えば、パラフィンなどの温度が上昇すると融解する材料に閉じ込められたか、埋め込まれたか、またはそれによって包囲された液体形態のいずれかであってもよい。
【０１１０】
本明細書で使用される場合、「プライマー」は、いくつかの実施形態では、一対の順方向プライマーおよび逆方向プライマーを指し得る。いくつかの実施形態では、プライマーは、複数のプライマーまたはプライマーセットを指し得る。本明細書で使用される場合、核酸増幅に適した酵素としては、ＤＮＡ依存性ポリメラーゼ、またはＲＮＡ依存性ＤＮＡポリメラーゼ、またはＤＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１１】
本明細書で使用される場合、「レポーター」という用語は、核酸分子に結合するか、もしくは核酸分子内にインターカレートすることができるか、または増幅プロセスの副産物によって活性化されて、核酸分子または増幅プロセスの可視化を可能にすることができる、任意のタグ、標識、または染料を指す。好適なレポーターとしては、蛍光標識もしくはタグもしくは染料、インターカレート剤、分子ビーコン標識、もしくは生物発光分子、またはそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１２】
より具体的には、ステップ（ｇ）において、デバイスが閉鎖構成にあるとき、放射線源は、第１のプレートもしくは第３のプレートまたは両方の内面または外面上の放射線吸収層に電磁波を発射する。放射線吸収層は、電磁波を吸収し、かつ前述の電磁波からのエネルギーの少なくとも実質的な部分を熱の形態に変換し、それが閉鎖したチャンバ内の試料に伝達されるように構成されている。いくつかの実施形態では、放射線源は、周囲温度から９８℃の範囲で前述の試料の温度を調節するようにプログラムされている。いくつかの実施形態では、例えば、従来のＰＣＲについて、試料は、最初に９８℃に加熱され、次いで１５〜４０回にわたって９４℃、５０〜６５℃、および７２℃の繰り返しサイクルを受ける。いくつかの実施形態では、例えば、等温増幅について、試料の温度は、一定温度に維持される。いくつかの実施形態では、例えば、ＬＡＭＰを介して等温増幅を行う場合、試料は、約１〜７０分間６０〜６５℃に加熱される。
【０１１３】
本明細書で使用される場合、「核酸増幅産物」は、核酸増幅技術によって生成される様々な核酸を指す。本明細書における核酸増幅産物のタイプとしては、一本鎖ＤＮＡ、一本鎖ＲＮＡ、二本鎖ＤＮＡ、直鎖状ＤＮＡ、または環状ＤＮＡなどが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、核酸増幅産物は、同じ長さおよび構成を有する同一の核酸であってもよい。いくつかの他の実施形態では、核酸増幅産物は、異なる長さおよび構成を有する複数の核酸であってもよい。
【０１１４】
いくつかの実施形態では、核酸増幅後に蓄積された核酸は、レポーターを使用して定量化される。上記で定義および使用されるように、レポーターは、閉鎖したチャンバ内に蓄積された核酸アンプリコンの有無または量と相関する定量化可能な特徴を有する。
【０１１５】
ＱＭＡＸのいくつかの実施形態では、プレートのうちの一方または両方の試料接触領域は、ＣＯＦ後にどれだけの流動が生じたかを監視するように構成された圧縮オープンフロー監視表面構造（ＭＳＳ）を含む。例えば、ＭＳＳは、いくつかの実施形態では、試料中の構成成分（例えば、血液中の血球）に摩擦を引き起こす浅い正方形のアレイを備える。試料の一部の構成成分の分布を確認することによって、試料およびその構成成分のＣＯＦの下での流動に関する情報を取得することができる。
【０１１６】
ＭＳＳの深さは、スペーサの高さの１／１０００、１／１００、１／１００、１／５、１／２、または任意の２つの値の範囲であってもよく、かつ突出部またはウェルのいずれかの形態であってもよい。
【０１１７】
いくつかの実施形態では、薄い流体試料層をアッセイするためのデバイスであって、
第１のプレートと、第２のプレートと、スペーサと、クランプとを備え、
ｉ．第１のプレートおよび第２のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成になるように互いに対して移動可能であり、
ｉｉ．プレートの各々が、そのそれぞれの表面上に、流体試料と接触するための試料接触領域を備え、
ｉｉｉ．プレートのうちの一方または両方が、それぞれのプレートに固定されたスペーサを備え、
ｉｖ．スペーサが、２００ミクロン以下である所定の実質的に均一な高さを有し、スペーサのうちの少なくとも１つが試料接触領域内にあり、
ｖ．クランプが、第１のプレートおよび第２のプレートを圧縮して、２つのプレートを一緒に閉鎖構成で固定し、プレート上に挿入されたクランプの圧力が、０．０１ｋｇ／ｃｍ＾２以上であり、
開放構成では、２つのプレートが部分的または完全に分離されており、プレート間の間隔はスペーサによって調整されず、試料がプレートのうちの一方または両方の上に付着され、
開放構成で試料が付着された後に構成される閉鎖構成では、試料の少なくとも一部が、２つのプレートによって圧縮されて実質的に均一な厚さの層になり、かつプレートに対して実質的に停滞し、層の均一な厚さが、２つのプレートの試料接触領域によって制限され、かつプレートおよびスペーサによって調整される、デバイス。
【０１１８】
いくつかの実施形態では、薄い流体試料層の温度を急速に変化させるためのデバイスであって、
第１のプレートと、第２のプレートと、スペーサと、クランプとを備え、
ｖｉ．第１のプレートおよび第２のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成になるように互いに対して移動可能であり、
ｖｉｉ．プレートの各々が、そのそれぞれの表面上に、流体試料と接触するための試料接触領域を備え、
ｖｉｉｉ．プレートのうちの一方または両方が、それぞれのプレートに固定されたスペーサを備え、
ｉｘ．スペーサが、２００ミクロン以下である所定の実質的に均一な高さを有し、スペーサのうちの少なくとも１つが試料接触領域内にあり、
ｘ．クランプが、第１のプレートおよび第２のプレートを圧縮して、２つのプレートを一緒に閉鎖構成で固定し、プレート上に挿入されたクランプの圧力が、０．０１ｋｇ／ｃｍ＾２以上であり、
開放構成では、２つのプレートが部分的または完全に分離されており、プレート間の間隔はスペーサによって調整されず、試料がプレートのうちの一方または両方の上に付着され、
開放構成で試料が付着された後に構成される閉鎖構成では、試料の少なくとも一部が、２つのプレートによって圧縮されて実質的に均一な厚さの層になり、かつプレートに対して実質的に停滞し、層の均一な厚さが、２つのプレートの試料接触領域によって制限され、かつプレートおよびスペーサによって調整され、
プレートおよびクランプが、試料の温度を１０℃／秒以上の速度で変化させることを可能にするように構成されている、デバイス。
【０１１９】
いくつかの実施形態では、薄い流体試料層の温度を急速に変化させるためのデバイスであって、第１のプレートと、第２のプレートと、スペーサとを備え、
ｉｉｉ．第１のプレートが、１００μｍ（ミクロン）以下の厚さを有し、
ｉｖ．第１のプレートおよび第２のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成になるように互いに対して移動可能であり、
ｖ．プレートの各々が、そのそれぞれの表面上に、流体試料と接触するための試料接触領域を備え、
ｖｉ．プレートのうちの一方または両方が、それぞれのプレートに固定されたスペーサを備え、
ｖｉｉ．スペーサが、２００ミクロン以下である所定の実質的に均一な高さを有し、
ｖｉｉｉ．スペーサのうちの少なくとも１つが試料接触領域内にあり、
開放構成では、２つのプレートが部分的または完全に分離されており、プレート間の間隔はスペーサによって調整されず、試料がプレートのうちの一方または両方の上に付着され、
開放構成で試料が付着された後に構成される閉鎖構成では、試料の少なくとも一部が、２つのプレートによって圧縮されて実質的に均一な厚さの層になり、かつプレートに対して実質的に停滞し、層の均一な厚さが、２つのプレートの試料接触領域によって制限され、かつプレートおよびスペーサによって調整され、
プレートおよびクランプが、試料の少なくとも一部の温度を１０℃／秒以上の速度で変化させることを可能にするように構成されている、デバイス。
【０１２０】
いくつかの実施形態では、薄い流体試料層の温度を急速に変化させるためのデバイスであって、
第１のプレートと、第２のプレートと、クランプとを備え、
ｉ．第１のプレートおよび第２のプレートが、開放構成および閉鎖構成を含む異なる構成になるように互いに対して移動可能であり、
ｉｉ．プレートの各々が、そのそれぞれの表面上に、アッセイされる流体試料と接触するための試料接触領域を備え、
ｉｉｉ．クランプが、第１のプレートおよび第２のプレートを圧縮して、プレートを閉鎖構成で固定し、プレート上に挿入されたクランプの圧力が、０．０１ｋｇ／ｃｍ＾２以上であり、
開放構成では、２つのプレートが部分的または完全に分離されており、プレート間の平均間隔が２５０μｍ以上であり、試料がプレートのうちの一方または両方の上に付着され、
開放構成で試料が付着された後に構成される閉鎖構成では、試料の少なくとも一部が、２つのプレートによって圧縮されて実質的に均一な厚さの層になり、かつプレートに対して実質的に停滞し、層の均一な厚さが、２つのプレートの試料接触領域によって制限され、かつ２００μｍ以下の厚さである、デバイス。
【０１２１】
いくつかの実施形態では、均一な厚さの試料の少なくとも一部の近くに放射線吸収層をさらに備え、試料の少なくとも一部および放射線吸収層の領域が、均一な厚さよりも実質的に大きい、いずれかの先行する実施形態のデバイス。
【０１２２】
いくつかの実施形態では、試料の少なくとも一部および放射線吸収層の領域が、試料の均一な厚さよりも実質的に大きい、いずれかの先行する実施形態のデバイス。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、デバイスのプレートのうちの１つの厚さが、１００μｍ以下である。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、均一な厚さの試料の少なくとも一部の近くに放射線吸収層をさらに備え、デバイスのプレートのうちの１つの厚さが１００μｍ以下である。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、第１のプレートおよび第２のプレートを閉鎖構成において一緒に圧縮するクランプをさらに備え、プレート上に挿入されたクランプの圧力が０．０１ｋｇ／ｃｍ＾２以上である。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、第１のプレートおよび第２のプレートを閉鎖構成において一緒に圧縮するクランプをさらに備え、かつ均一な厚さの試料の少なくとも一部の近くに放射線吸収層をさらに備え、プレート上に挿入されたクランプの圧力が０．０１ｋｇ／ｃｍ＾２以上である。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、薄い流体試料層の温度を急速に変化させるためのシステムであって、
ｉ．いずれかの先行する実施形態のデバイスと、
ｉｉ．放射線吸収層が著しく吸収する電磁波を放射するように構成された、放射線源と、
ｉｉｉ．放射線源を制御し、試料の温度を変化させるように構成されたコントローラと
を備える、システム。
【０１２８】
いくつかの実施形態では、薄い流体試料層の温度を急速に変化させるための方法であって、
ｉ．いずれかの先行する実施形態のデバイスまたはシステムを提供するステップと、
ｉｉ．デバイスのプレートのうちの一方または両方の上に流体試料を付着させるステップと、
ｉｉｉ．ｉｉの後、プレートを閉鎖構成になるように押圧するステップであって、プレートが試料の少なくとも一部を圧縮して２００μｍ未満の厚さの薄層にする、ステップと、
ｉｖ．放射線源からの電磁波の存在、強度、波長、周波数、および／または角度を変化させることによって、試料層の温度を変化させかつ維持するステップと
を含む、方法。
【０１２９】
いくつかの実施形態では、クランプが、クランプとプレートとの間の熱伝導を低減するための断熱層を備えるように構成され、断熱層が、２Ｗ／ｍ−Ｋの熱伝導率の材料を含む、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、クランプが、試料を加熱または冷却する必要がある熱質量を低減するための断熱層を備えるように構成され、断熱層が、２Ｗ／ｍ−Ｋの熱伝導率の材料を含む、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、閉鎖構成において、クランプが、ＱＭＡＸカード全体を密封するように構成されている、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１３２】
いくつかの実施形態では、閉鎖構成において、クランプが、プレートの表面の一部と熱伝導接触するように構成されている、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１３３】
いくつかの実施形態では、閉鎖構成において、クランプが、プレートの周辺表面領域のみと熱伝導接触する、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１３４】
いくつかの実施形態では、閉鎖構成において、クランプが、プレートの表面領域のみと熱伝導接触し、表面領域は、核酸が増幅される試料の一部分の外側にある、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、クランプが、外側の光がプレートに入ることまたはプレートの内側の光が外に出ることを可能にする透明な窓を備える、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１３６】
いくつかの実施形態では、クランプが、外側の光がプレートに入ることまたはプレートの内側の光が外に出ることを可能にする透明な窓を備え、透明度が、３０％超、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％であるか、またはそれらの値のうちのいずれか２つの間の範囲である、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１３７】
いくつかの実施形態では、クランプが、第１のプレートおよび第２のプレートを圧縮するために圧力を導入し、圧力が、０．０１ｋｇ／ｃｍ２、０．１ｋｇ／ｃｍ２、０．５ｋｇ／ｃｍ２、１ｋｇ／ｃｍ２、２ｋｇ／ｃｍ２、ｋｇ／ｃｍ２、５ｋｇ／ｃｍ２、１０ｋｇ／ｃｍ２、２０ｋｇ／ｃｍ２、３０ｋｇ／ｃｍ２、４０ｋｇ／ｃｍ２、５０ｋｇ／ｃｍ２、６０ｋｇ／ｃｍ２、１００ｋｇ／ｃｍ２、１５０ｋｇ／ｃｍ２、２００ｋｇ／ｃｍ２、４００ｋｇ／ｃｍ２であるか、またはそれらの値のうちのいずれか２つの間の範囲である、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、クランプが、第１のプレートおよび第２のプレートを圧縮するために圧力を導入し、圧力が０．１ｋｇ／ｃｍ２〜２０ｋｇ／ｃｍ２である、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１３９】
いくつかの実施形態では、クランプが、第１のプレートおよび第２のプレートを圧縮するために圧力を導入し、圧力が０．１ｋｇ／ｃｍ２〜２０ｋｇ／ｃｍ２である、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１４０】
いくつかの実施形態では、クランプが、第１のプレートおよび第２のプレートを圧縮するために圧力を導入し、圧力が０．５ｋｇ／ｃｍ２〜４０ｋｇ／ｃｍ２である、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１４１】
いくつかの実施形態では、第１のプレートおよび第２のプレートを閉鎖構成において一緒に圧縮するクランプをさらに備え、かつ第１のプレートの少なくとも一部と第２のプレートの間に密封材料をさらに備え、プレート上に挿入されたクランプの圧力が０．０１ｋｇ／ｃｍ＾２以上である、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１４２】
いくつかの実施形態では、スペーサが、実質的に平坦な頂部を有する、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１４３】
いくつかの実施形態では、プレートのうちの１つが５０μｍ以下である、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。いくつかの実施形態では、試料の温度を変化させることが、温度を周期的に上下に変化させる熱サイクリングである、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１４４】
いくつかの実施形態では、試料の温度を変化させることが、ポリメラーゼ連鎖動作（ＰＣＲ）を使用した核酸の増幅のための熱サイクリングである、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、試料の温度の変化が、核酸の等温増幅のためである、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、試料の少なくとも一部および放射線吸収層の領域が、均一な厚さよりも実質的に大きい、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、放射線吸収層が、ディスク結合ドットオンピラーアンテナ（ｄｉｓｋ−ｃｏｕｐｌｅｄ  ｄｏｔｓ−ｏｎ−ｐｉｌｌａｒ  ａｎｔｅｎｎａ）（Ｄ２ＰＡ）アレイ、シリコンサンドイッチ、グラフェン、超格子、または他のプラズモン材料、それらの他の組み合わせを含む、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１４８】
いくつかの実施形態では、放射線吸収層が、カーボンもしくはブラックナノ構造またはそれらの組み合わせを含む、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１４９】
いくつかの実施形態では、放射線吸収層が、放射線エネルギーを吸収するように構成されている、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１５０】
いくつかの実施形態では、放射線吸収層が、放射線エネルギーを吸収した後、熱の形態でエネルギーを放射するように構成されている、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、放射線吸収層が、試料層の下に、かつ試料層と直接接触して位置付けられている、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１５２】
いくつかの実施形態では、放射線吸収層が、電波、マイクロ波、赤外線波、可視光、紫外線波、Ｘ線、ガンマ線、および熱放射からなる群から選択される電磁波を吸収するように構成されている、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１５３】
いくつかの実施形態では、プレートのうちの少なくとも１つは、放射線吸収層が吸収する放射線を遮断しない、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１５４】
いくつかの実施形態では、プレートのうちの一方または両方が、低い熱伝導率を有する、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１５５】
いくつかの実施形態では、試料層の前記均一な厚さが、プレートのうちの一方または両方に固定された１つ以上のスペーサによって調整される、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１５６】
いくつかの実施形態では、試料が、予混合されたポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）媒体である、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１５７】
いくつかの実施形態では、デバイスが、所定のプログラムに従って試料の温度を変化させるためのＰＣＲアッセイを促進するように構成されている、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１５８】
いくつかの実施形態では、デバイスが、診断試験、健康管理、環境試験、および／または法医学的試験を行うように構成されている、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１５９】
いくつかの実施形態では、デバイスが、ＤＮＡ増幅、ＤＮＡ定量化、選択的ＤＮＡ単離、遺伝分析、組織適合検査、癌遺伝子同定、感染症試験、遺伝子指紋法、および／または父子鑑定を行うように構成されている、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１６０】
いくつかの実施形態では、試料層が、試料蒸発を低減するために横方向に密封されている、いずれかの先行する実施形態のデバイス。
【０１６１】
いくつかの実施形態では、電磁波の存在、強度、波長、周波数、および／または角度を制御するように構成されたコントローラをさらに備える、いずれかの先行する実施形態のシステム。
【０１６２】
いくつかの実施形態では、試料接触領域またはその近傍の温度を測定し、測定された温度に基づいてコントローラに信号を送信するように構成された温度計をさらに備える、いずれかの先行する実施形態のシステム。
【０１６３】
いくつかの実施形態では、温度計が、光ファイバ温度計、赤外線温度計、液晶温度計、高温計、水晶温度計、シリコンバンドギャップ温度センサ、温度ストリップ、サーミスタ、および熱電対からなる群から選択される、いずれかの先行する実施形態のシステムまたは方法。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、コントローラが、放射線源からの電磁波の存在、強度、波長、周波数、および／または角度を制御するように構成されている、いずれかの先行する実施形態のシステムまたは方法。
【０１６５】
いくつかの実施形態では、電磁波が少なくとも１０℃／秒の平均昇温速度傾斜を生じさせ、電磁波の除去が少なくとも５℃／秒の平均降温速度傾斜をもたらすように、放射線源および放射線吸収層が構成されている、いずれかの先行する実施形態のシステムまたは方法。
【０１６６】
いくつかの実施形態では、放射線源および放射線吸収層が、少なくとも１０℃／秒の平均昇温速度傾斜および少なくとも５℃／秒の平均降温速度傾斜をもたらすように構成されている、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１６７】
いくつかの実施形態では、放射線源および放射線吸収層が、ＰＣＲ中に初期化ステップ、変性ステップ、および／または延伸／伸長ステップに到達するために少なくとも１０℃／秒の平均昇温速度傾斜をもたらし、かつＰＣＲ中にアニーリングステップおよび／または最終冷却ステップに到達するために少なくとも５℃／秒の平均降温速度傾斜をもたらすように構成されている、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１６８】
いくつかの実施形態では、ＰＣＲの試料が、鋳型ＤＮＡ、プライマーＤＮＡ、カチオン、ポリメラーゼ、および緩衝剤を含む、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１６９】
いくつかの実施形態では、プレートを閉鎖形態になるように押圧するステップが、プレートを厳密でない押圧力で押圧することを含む、いずれかの先行する実施形態の方法。
【０１７０】
いくつかの実施形態では、プレートを閉鎖形態になるように押圧するステップが、プレートを人間の手で直接押圧することを含む、いずれかの先行する実施形態の方法。
【０１７１】
いくつかの実施形態では、非常に均一な厚さの層が、１０％未満の厚さの変動を有する、いずれかの先行する実施形態の方法。
【０１７２】
ＤＮＡ鋳型、プライマー、ＤＮＡポリメラーゼ、デオキシヌクレオシド三リン酸（ｄＮＴＰ）、二価カチオン（例えば、Ｍｇ２＋）、一価カチオン（例えば、Ｋ＋）、および緩衝液から選択される試薬をさらに含む、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１７３】
いくつかの実施形態では、試料の温度を変化させることが、熱サイクリングであり、熱サイクリングが、ホットスタートＰＣＲ、ネステッドＰＣＲ、タッチダウンＰＣＲ、逆転写ＰＣＲ、ＲＡＣＥ  ＰＣＲ、およびデジタルＰＣＲの群から選択されるポリメラーゼ連鎖動作（ＰＣＲ）を使用した核酸の増幅のためである、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１７４】
いくつかの実施形態では、試料の温度の変化が、ループ介在等温増幅、鎖置換増幅、ヘリカーゼ依存性増幅、ニッキング酵素増幅、ローリングサークル増幅、およびリコンビナーゼポリメラーゼ増幅の群から選択される核酸の等温増幅のためである、いずれかの先行する実施形態のデバイス、システム、または方法。
【０１７５】
柱状ペーサの平坦頂部
本発明のある特定の実施形態では、スペーサは、１つのプレート上に固定された平坦な頂部と足部とを有する柱であり、平坦な頂部は、小さい表面変動を伴う平滑度を有し、変動は、５、１０ｎｍ、２０ｎｍ、３０ｎｍ、５０ｎｍ、１００ｎｍ、２００ｎｍ、３００ｎｍ、４００ｎｍ、５００ｎｍ、６００ｎｍ、７００ｎｍ、８００ｎｍ、１０００ｎｍ未満、またはそれらの値のうちのいずれか２つの間の範囲である。好ましい平坦な柱状頂部の平滑度は、５０ｎｍ以下の表面変動である。
【０１７６】
さらに、表面変動は、スペーサの高さと相対的であり、スペーサの高さに対する柱状の平坦頂面の変動の比率は、０．５％、１％、３％、５％、７％、１０％、１５％、２０％、３０％、４０％未満、またはそれらの値のうちのいずれか２つの間の範囲である。好ましい平坦な柱状頂部の平滑度は、２％、５％、または１０％未満であるスペーサの高さに対する柱状の平坦頂面の変動の比率を有する。
【０１７７】
柱状スペーサの側壁角
本発明のある特定の実施形態では、スペーサは、側壁角を有する柱である。いくつかの実施形態では、側壁角は、５度（表面の法線から測定）、１０度、２０度、３０度、４０度、５０度、７０度未満、またはそれらの値のうちのいずれか２つの間の範囲である。好ましい実施形態では、側壁角は、５度、１０度、または２０度未満である。
【０１７８】
厳密でない力押圧による均一な薄い流体層の形成
本発明のある特定の実施形態では、厳密でない力での押圧を使用することによって、均一な薄い流体試料層が形成される。詳細を追加することなく、次いで厳密でない押圧力の定義を追加することなく、「厳密でない押圧力」という用語。本明細書で使用される場合、力の文脈における「厳密でない」という用語（例えば、「厳密でない押圧力」）は、（ａ）力が加えられた時点で厳密に分かっていないか、または厳密に予測できない大きさを有し、（ｂ）０．０１ｋｇ／ｃｍ２（センチメートル平方）〜１００ｋｇ／ｃｍ２の範囲の圧力を有し、（ｃ）力を加える毎に大きさが変化し、（ｄ）（ａ）および（ｃ）の力の非厳密さ（すなわち、変動）が、実際に加えられる力全体の少なくとも２０％である、力を指す。
【０１７９】
厳密でない力は、例えば、親指と人差し指との間で物体を一緒につまむことによって、または親指と人差し指との間で物体を一緒につまみ、擦り合わせることによって、人間の手で加えられ得る。
【０１８０】
いくつかの実施形態では、手の押圧による厳密でない力は、０．０１ｋｇ／ｃｍ２、０．１ｋｇ／ｃｍ２、０．５ｋｇ／ｃｍ２、１ｋｇ／ｃｍ２、２ｋｇ／ｃｍ２、ｋｇ／ｃｍ２、５ｋｇ／ｃｍ２、１０ｋｇ／ｃｍ２、２０ｋｇ／ｃｍ２、３０ｋｇ／ｃｍ２、４０ｋｇ／ｃｍ２、５０ｋｇ／ｃｍ２、６０ｋｇ／ｃｍ２、１００ｋｇ／ｃｍ２、１５０ｋｇ／ｃｍ２、２００ｋｇ／ｃｍ２、またはそれらの値のうちのいずれか２つの間の範囲、および０．１ｋｇ／ｃｍ２〜０．５ｋｇ／ｃｍ２、０．５ｋｇ／ｃｍ２〜１ｋｇ／ｃｍ２、１ｋｇ／ｃｍ２〜５ｋｇ／ｃｍ２、５ｋｇ／ｃｍ２〜１０ｋｇ／ｃｍ２（圧力）の好ましい範囲の圧力を有する。
【０１８１】
スペーサ充填率
「スペーサ充填率」または「充填率」という用語は、総プレート領域に対するスペーサ接触領域の比率を指し、スペーサ接触領域は、閉鎖構成で、スペーサの頂面がプレートの内面に接触する接触範囲を指し、総プレート領域は、スペーサの平坦頂部が接触するプレートの内面の全領域を指す。２つのプレートが存在し、各スペーサが、各々が１つのプレートに接触する２つの接触面を有するため、充填率は、最小の充填率である。
【０１８２】
例えば、スペーサが正方形（１０μｍ×１０μｍ）の平坦頂部、ほぼ均一な断面、および２μｍの高さを有する柱であり、スペーサが１００μｍの周期で周期的である場合、スペーサの充填率は、１％である。上記の例で、柱状スペーサの足部が１５μｍ×１５μｍの正方形である場合、充填率は、定義によって１％のままである。
【０１８３】
スペーサが、柱形状およびほぼ均一な断面を有する、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０１８４】
スペーサ間距離（ＳＤ）が、約１２０μｍ（マイクロメートル）以下である、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０１８５】
スペーサ間距離（ＳＤ）が、約１００μｍ（マイクロメートル）以下である、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０１８６】
可撓性プレートの厚さ（ｈ）およびヤング率（Ｅ）で割ったスペーサ間距離（ＩＳＤ）の４乗（ＩＳＤ４／ｈＥ））が、５×１０６μｍ３／ＧＰａ以下である、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０１８７】
可撓性プレートの厚さ（ｈ）およびヤング率（Ｅ）で割ったスペーサ間距離（ＩＳＤ）の４乗（ＩＳＤ４／ｈＥ））が、５×１０５μｍ３／ＧＰａ以下である、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０１８８】
スペーサが、柱形状、実質的に平坦な頂面、所定の実質的に均一な高さ、および分析物のサイズより少なくとも約２倍大きい所定の一定のスペーサ間距離を有し、スペーサのヤング率×スペーサの充填率が、２ＭＰａ以上であり、充填率が、全プレート領域に対するスペーサ接触領域の比率であり、各スペーサについて、スペーサの横寸法対その高さ比率が、少なくとも１である、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０１８９】
スペーサが、柱形状、実質的に平坦な頂面、所定の実質的に均一な高さ、および分析物のサイズより少なくとも約２倍大きい所定の一定のスペーサ間距離を有し、スペーサのヤング率×スペーサの充填率が、２ＭＰａ以上であり、充填率が、全プレート領域に対するスペーサ接触領域の比率であり、各スペーサについて、スペーサの横寸法対その高さ比率が、少なくとも１であり、可撓性プレートの厚さ（ｈ）およびヤング率（Ｅ）で割ったスペーサ間距離（ＩＳＤ）の４乗（ＩＳＤ４／ｈＥ））が、５×１０６μｍ３／ＧＰａ以下である、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０１９０】
スペーサの平均幅に対するスペーサの間隔間距離の比率が、２以上であり、スペーサのヤング率を乗じたスペーサの充填率が、２ＭＰａ以上である、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０１９１】
分析物が、タンパク質、ペプチド、核酸、ウイルス、細菌、細胞、ナノ粒子、分子、合成化合物、または無機化合物である、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０１９２】
試料が、羊水、房水、硝子体液、血液（例えば、全血、分画血液、血漿、または血清）、母乳、脳脊髄液（ＣＳＦ）、耳垢（ｃｅｒｕｍｅｎ）（耳垢（ｅａｒｗａｘ））、乳糜、糜汁（ｃｈｉｍｅ）、内リンパ液、外リンパ液、糞便、呼気、胃酸、胃液、リンパ液、粘液（鼻漏および痰を含む）、心膜液、腹膜液、胸膜液、膿、粘膜の分泌物、唾、呼気凝縮液、皮脂、精液、唾液、汗、関節液、涙、嘔吐物、および尿から選択される生体試料である、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０１９３】
スペーサが、柱の形状を有し、柱の幅対高さの比率が、１以上である、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０１９４】
プレートのうちの一方または両方の上に付着した試料が、未知の体積を有する、いずれかの先行する請求項に記載の方法。
【０１９５】
スペーサが、柱の形状を有し、柱が、ほぼ均一な断面を有する、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０１９６】
試料が、ある特定の疾患の段階と相関する化合物または生体分子の検出、精製、および定量化のためである、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０１９７】
試料が、感染症および寄生虫症、怪我、心血管疾患、がん、精神障害、神経精神障害、肺疾患、腎疾患、および他の器質性疾患に関連する、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０１９８】
試料が、微生物の検出、精製、および定量化に関連する、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０１９９】
試料が、環境、例えば、水、土壌、または生体試料からのウイルス、真菌、および細菌に関連する、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０２００】
試料が、食品安全または国家安全保障に危害を及ぼす化学物質または生体試料、例えば、毒性廃棄物、炭疽の検出、定量化に関連する、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０２０１】
試料が、医療用モニターまたは生理学的モニターのバイタルパラメータの定量化に関連する、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０２０２】
試料が、グルコース、血液、酸素レベル、全血球数に関連する、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０２０３】
試料が、バイオ試料からの特定のＤＮＡまたはＲＮＡの検出および定量化に関連する、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０２０４】
試料が、ゲノム分析のための染色体およびミトコンドリアにおけるＤＮＡの遺伝子配列の配列決定および比較に関連する、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０２０５】
試料が、例えば、医薬品の合成または精製中に反応生成物を検出することに関連する、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０２０６】
試料が、細胞、組織、体液、および糞便である、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０２０７】
試料が、ヒト、獣医学、農業、食品、環境、および薬物試験の分野の試料である、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０２０８】
試料が、髪、指の爪、耳垢、呼気、結合組織、筋肉組織、神経組織、上皮組織、軟骨、癌性試料、または骨から選択される生体試料である、いずれかの先行する請求項に記載の方法またはデバイス。
【０２０９】
スペーサ間距離が、５μｍ〜１２０μｍの範囲である、いずれかの先行する請求項に記載のデバイスまたは方法。
【０２１０】
スペーサ間距離が、１２０μｍ〜２００μｍの範囲である、いずれかの先行する請求項に記載のデバイスまたは方法。
【０２１１】
可撓性プレートが、２０〜２５０μｍの範囲の厚さおよび０．１〜５ＧＰａの範囲のヤング率を有する、いずれかの先行するデバイスの請求項に記載のデバイス。
【０２１２】
可撓性プレートについて、可撓性プレートの厚さ×可撓性プレートのヤング率が、６０〜７５０ＧＰａ−μｍの範囲である、いずれかの先行するデバイスの請求項に記載のデバイス。
【０２１３】
均一な厚さの試料の層が、少なくとも１ｍｍ２である横方向領域にわたって均一である、いずれかの先行するデバイスの請求項に記載のデバイス。
【０２１４】
均一な厚さの試料の層が、少なくとも３ｍｍ２である横方向領域にわたって均一である、いずれかの先行するデバイスの請求項に記載のデバイス。
【０２１５】
均一な厚さの試料の層が、少なくとも５ｍｍ２である横方向領域にわたって均一である、いずれかの先行するデバイスの請求項に記載のデバイス。
【０２１６】
均一な厚さの試料の層が、少なくとも１０ｍｍ２である横方向領域にわたって均一である、いずれかの先行するデバイスの請求項に記載のデバイス。
【０２１７】
均一な厚さの試料の層が、少なくとも２０ｍｍ２である横方向領域にわたって均一である、いずれかの先行するデバイスの請求項に記載のデバイス。
【０２１８】
均一な厚さの試料の層が、２０ｍｍ２〜１００ｍｍ２の範囲である横方向領域にわたって均一である、いずれかの先行するデバイスの請求項に記載のデバイス。
【０２１９】
均一な厚さの試料の層が、最大＋／−５％以上の厚さの均一性を有する、いずれかの先行するデバイスの請求項に記載のデバイス。
【０２２０】
均一な厚さの試料の層が、最大＋／−１０％以上の厚さの均一性を有する、いずれかの先行するデバイスの請求項に記載のデバイス。
【０２２１】
均一な厚さの試料の層が、最大＋／−２０％以上の厚さの均一性を有する、いずれかの先行するデバイスの請求項に記載のデバイス。
【０２２２】
均一な厚さの試料の層が、最大＋／−３０％以上の厚さの均一性を有する、いずれかの先行するデバイスの請求項に記載のデバイス。
【０２２３】
本発明は、試料中の１つ以上の分析物の有無の決定および／または定量化が望まれる様々な分野において、様々な異なる用途で利用される。例えば、本発明は、原子、分子、タンパク質、ペプチド、核酸、合成化合物、無機化合物、有機化合物、細菌、ウイルス、細胞、組織、ナノ粒子などの検出で利用される。試料は、ヒト、獣医学、農業、食品、環境、健康、ウェルネス、美容などが挙げられるが、これらに限定されない様々な分野の試料であってもよい。
【０２２４】
関連文書
本発明は、様々な構成要素が互いに矛盾しない限り、複数の方法で組み合わされ得る、様々な実施形態を含む。実施形態は、単一の発明ファイルと見なされるべきであり、各提出書類は、個別の独立したものとしてではなく、参照として他の提出書類を有し、また、その全体があらゆる目的で参照される。これらの実施形態は、本ファイルの開示だけではなく、本明細書で参照されるか、組み込まれるか、または優先権が主張される文書も含む。
【０２２５】
（１）定義
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法の説明で使用される用語は、本出願、またはそれぞれ２０１６年８月１０日および２０１６年９月１４日出願のＰＣＴ出願（米国指定）第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０４５４３７号および同第ＰＣＴ／ＵＳ０２１６／０５１７７５号、２０１７年２月７日出願の米国仮出願第６２／４５６０６５号、２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６２８７号、ならびに２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６５０４号で定義され、これらの出願は全て、あらゆる目的でそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０２２６】
「ＣＲＯＦカード（またはカード）」、「ＣＯＦカード」、「ＱＭＡＸカード」、「Ｑカード」、「ＣＲＯＦデバイス」、「ＣＯＦデバイス」、「ＱＭＡＸデバイス」、「ＣＲＯＦプレート」、「ＣＯＦプレート」、および「ＱＭＡＸプレート」という用語は、いくつかの実施形態においてはＣＯＦカードがスペーサを備えていないことを除いて互換性があり、これらの用語は、異なる構成（開放構成および閉鎖構成を含む）になるように互いに対して移動可能である第１のプレートおよび第２のプレートを備え、かつプレート間の間隔を調整するスペーサ（ＣＯＦカードのいくつかの実施形態を除く）を備えるデバイスを指す。「Ｘプレート」という用語は、ＣＲＯＦカード内の２つのプレートのうちの１つを指し、スペーサは、このプレートに固定されている。ＣＯＦカード、ＣＲＯＦカード、およびＸプレートのさらなる説明は、２０１７年２月７日出願の仮出願第６２／４５６０６５号に示され、これは、あらゆる目的でその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２２７】
（２）Ｑカード、スペーサ、および均一な試料厚さ
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法は、試料検出、分析、および定量化のために、Ｑカード、スペーサ、および均一な試料厚さの実施形態を含むか、または使用することができる。いくつかの実施形態では、Ｑカードは、試料の少なくとも一部を均一性の高い層にするのに役立つスペーサを備える。スペーサの構造、材料、機能、バリエーション、および寸法、ならびにスペーサおよび試料層の均一性は、本明細書に開示されるか、またはそれぞれ２０１６年８月１０日および２０１６年９月１４日出願のＰＣＴ出願（米国指定）第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０４５４３７号および同第ＰＣＴ／ＵＳ０２１６／０５１７７５号、２０１７年２月７日出願の米国仮出願第６２／４５６０６５号、２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６２８７号、ならびに２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６５０４号に列挙、記載、および要約され、これらの出願は全て、あらゆる目的でそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０２２８】
（３）ヒンジ、開口ノッチ、凹型縁部、およびスライダ
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法は、試料検出、分析、および定量化のために、Ｑカードを含むか、または使用することができる。いくつかの実施形態では、Ｑカードは、Ｑカードの操作および試料の測定を容易にするのに役立つヒンジ、ノッチ、凹部、およびスライダを備える。ヒンジ、ノッチ、凹部、およびスライダの構造、材料、機能、バリエーション、および寸法は、本明細書に開示されるか、またはそれぞれ２０１６年８月１０日および２０１６年９月１４日出願のＰＣＴ出願（米国指定）第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０４５４３７号および同第ＰＣＴ／ＵＳ０２１６／０５１７７５号、２０１７年２月７日出願の米国仮出願第６２／４５６０６５号、２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６２８７号、ならびに２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６５０４号に列挙、記載、および要約され、これらの出願は全て、あらゆる目的でそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０２２９】
（４）Ｑカード、スライダ、およびスマートフォン検出システム
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法は、試料検出、分析、および定量化のために、Ｑカードを含むか、または使用することができる。いくつかの実施形態では、Ｑカードは、カードがスマートフォン検出システムによって読み取られることを可能にするスライダと共に使用される。Ｑカード、スライダ、およびスマートフォン検出システムの構造、材料、機能、バリエーション、寸法、および接続は、本明細書に開示されるか、またはそれぞれ２０１６年８月１０日および２０１６年９月１４日出願のＰＣＴ出願（米国指定）第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０４５４３７号および同第ＰＣＴ／ＵＳ０２１６／０５１７７５号、２０１７年２月７日出願の米国仮出願第６２／４５６０６５号、２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６２８７号、ならびに２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６５０４号に列挙、記載、および要約され、これらの出願は全て、あらゆる目的でそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０２３０】
（５）検出方法
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法は、様々なタイプの検出方法を含むことができるか、またはそれらの方法で使用され得る。検出方法は、本明細書に開示されるか、またはそれぞれ２０１６年８月１０日および２０１６年９月１４日出願のＰＣＴ出願（米国指定）第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０４５４３７号および同第ＰＣＴ／ＵＳ０２１６／０５１７７５号、２０１７年２月７日出願の米国仮出願第６２／４５６０６５号、２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６２８７号、ならびに２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６５０４号に列挙、記載、および要約され、これらの出願は全て、あらゆる目的でそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０２３１】
（６）標識
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法は、分析物検出に使用される様々なタイプの標識を用いることができる。標識は、本明細書に開示されるか、またはそれぞれ２０１６年８月１０日および２０１６年９月１４日出願のＰＣＴ出願（米国指定）第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０４５４３７号および同第ＰＣＴ／ＵＳ０２１６／０５１７７５号、２０１７年２月７日出願の米国仮出願第６２／４５６０６５号、２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６２８７号、ならびに２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６５０４号に列挙、記載、および要約され、これらの出願は全て、あらゆる目的でそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０２３２】
（７）分析物
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法は、様々なタイプの分析物（バイオマーカーを含む）の操作および検出に適用され得る。分析物は、本明細書に開示されるか、またはそれぞれ２０１６年８月１０日および２０１６年９月１４日出願のＰＣＴ出願（米国指定）第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０４５４３７号および同第ＰＣＴ／ＵＳ０２１６／０５１７７５号、２０１７年２月７日出願の米国仮出願第６２／４５６０６５号、２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６２８７号、ならびに２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６５０４号に列挙、記載、および要約され、これらの出願は全て、あらゆる目的でそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０２３３】
（８）用途（分野および試料）
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法は、様々な用途（分やおよび試料）に使用され得る。用途は、本明細書に開示されるか、またはそれぞれ２０１６年８月１０日および２０１６年９月１４日出願のＰＣＴ出願（米国指定）第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０４５４３７号および同第ＰＣＴ／ＵＳ０２１６／０５１７７５号、２０１７年２月７日出願の米国仮出願第６２／４５６０６５号、２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６２８７号、ならびに２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６５０４号に列挙、記載、および要約され、これらの出願は全て、あらゆる目的でそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０２３４】
（９）クラウド
本明細書に開示されるデバイス、システム、および方法は、データ転送、記憶、および／または分析のために、クラウド技術を用いることができる。関連するクラウド技術は、本明細書に開示されるか、またはそれぞれ２０１６年８月１０日および２０１６年９月１４日出願のＰＣＴ出願（米国指定）第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０４５４３７号および同第ＰＣＴ／ＵＳ０２１６／０５１７７５号、２０１７年２月７日出願の米国仮出願第６２／４５６０６５号、２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６２８７号、ならびに２０１７年２月８日出願の米国仮出願第６２／４５６５０４号に列挙、記載、および要約され、これらの出願は全て、あらゆる目的でそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０２３５】
追加の注意事項
本開示に従った本発明の主題のさらなる例は、以下に列挙される段落に記載される。
【０２３６】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈がそうではないと明確に指示しない限り、例えば、「単一」という語が使用される場合を除き、複数の指示対象を含むことに留意しなければならない。例えば、「分析物」への言及は、単一の分析物および複数の分析物を含み、「捕捉剤」への言及は、単一の捕捉剤および複数の捕捉剤を含み、「検出剤」への言及は、単一の検出剤および複数の検出剤を含み、「薬剤」への言及は、単一の薬剤および複数の薬剤を含む。
【０２３７】
本明細書で使用される「適合される」および「構成される」という用語は、要素、構成要素、または他の主題が所与の機能を実行するように設計および／または意図されることを意味する。したがって、「適合される」および「構成される」という用語の使用は、所与の要素、構成要素、またはその他の主題が所与の機能を実行することが単に「可能である」ことを意味すると解釈されるべきではない。同様に、特定の機能を実行するように構成されているものとして列挙される主題は、追加的または代替的に、その機能を実行するように動作するものとして説明され得る。
【０２３８】
本明細書で使用される場合、「例えば」という語句、「一例として」という語句、ならびに／または本開示に従った１つ以上の構成要素、特徴、詳細、構造、実施形態、および／もしくは方法に関して使用される場合の「実施例」および「例示的な」という用語は、記載された構成要素、特徴、詳細、構造、実施形態、および／または方法が、本開示に従った構成要素、特徴、詳細、構造、実施形態、および／または方法の実例となる非排他的な例であることを伝えることを意図している。したがって、記載された構成要素、特徴、機能、詳細、構造、実施形態、および／または方法は、限定的、必須、または排他的／網羅的であることを意図せず、構造的および／または機能的に同様および／または同等の構成要素、特徴、機能、詳細、構造、実施形態、および／または方法を含む他の構成要素、特徴、機能、詳細、構造、実施形態、および／または方法も、本開示の範囲内である。
【０２３９】
本明細書で使用される場合、２つ以上の実体のリストに関して「のうちの少なくとも１つ」および「のうちの１つ以上」という語句は、実体のリスト内の実体のうちの１つ以上を意味し、実体のリスト内に具体的に列挙される１つ１つの実体のうちの少なくとも１つに限定されない。例えば、「ＡおよびＢのうちの少なくとも１つ」（または同等に「ＡまたはＢのうちの少なくとも１つ」、あるいは同等に「Ａおよび／またはＢのうちの少なくとも１つ」）は、Ａ単独、Ｂ単独、またはＡおよびＢの組み合わせを指し得る。
【０２４０】
本明細書で使用される場合、第１の実体と第２の実体との間に置かれる「および／または」という用語は、（１）第１の実体、（２）第２の実体、ならびに（３）第１の実体および第２の実体のうちの１つを意味する。「および／または」と共に列挙される複数の実体は、同じように、すなわち、そのように等位結合された実体のうちの「１つ以上」と解釈されるべきである。具体的に特定された実体に関連するかどうかに関係なく、「および／または」という句で具体的に特定された実体以外の他の実体が任意に存在し得る。
【０２４１】
数値範囲が本明細書で言及される場合、本発明は、エンドポイントが含まれる実施形態、両方のエンドポイントが除外される実施形態、および一方のエンドポイントが含まれ、他方が除外される実施形態を含む。別途記載のない限り、両方のエンドポイントが含まれると想定されるべきである。さらに、別途記載のない限り、または文脈および当業者の理解から明白でない限り。
【０２４２】
任意の特許、特許出願、または他の参考文献が参照により本明細書に組み込まれ、本開示の組み込まれていない部分、または他の組み込まれた参考文献のうちのいずれか、のいずれかと（１）矛盾する方法で用語を定義する場合、および／または（２）別様に矛盾している場合、本開示の組み込まれていない部分が優先するものとし、その中の用語または組み込まれた開示は、その用語が定義され、かつ／または組み込まれた開示が元々存在していた参考文献に関してのみ優先するものである。
【０２４３】
追加の注意事項
本開示に従った本発明の主題のさらなる例は、以下に列挙される段落に記載される。
【０２４４】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈がそうではないと明確に指示しない限り、例えば、「単一」という語が使用される場合を除き、複数の指示対象を含むことに留意しなければならない。例えば、「分析物」への言及は、単一の分析物および複数の分析物を含み、「捕捉剤」への言及は、単一の捕捉剤および複数の捕捉剤を含み、「検出剤」への言及は、単一の検出剤および複数の検出剤を含み、「薬剤」への言及は、単一の薬剤および複数の薬剤を含む。
【０２４５】
本明細書で使用される「適合される」および「構成される」という用語は、要素、構成要素、または他の主題が所与の機能を実行するように設計および／または意図されることを意味する。したがって、「適合される」および「構成される」という用語の使用は、所与の要素、構成要素、またはその他の主題が所与の機能を実行することが単に「可能である」ことを意味すると解釈されるべきではない。同様に、特定の機能を実行するように構成されているものとして列挙される主題は、追加的または代替的に、その機能を実行するように動作するものとして説明され得る。
【０２４６】
本明細書で使用される場合、「例えば」という語句、「一例として」という語句、ならびに／または本開示に従った１つ以上の構成要素、特徴、詳細、構造、実施形態、および／もしくは方法に関して使用される場合の「実施例」および「例示的な」という用語は、記載された構成要素、特徴、詳細、構造、実施形態、および／または方法が、本開示に従った構成要素、特徴、詳細、構造、実施形態、および／または方法の実例となる非排他的な例であることを伝えることを意図している。したがって、記載された構成要素、特徴、機能、詳細、構造、実施形態、および／または方法は、限定的、必須、または排他的／網羅的であることを意図せず、構造的および／または機能的に同様および／または同等の構成要素、特徴、機能、詳細、構造、実施形態、および／または方法を含む他の構成要素、特徴、機能、詳細、構造、実施形態、および／または方法も、本開示の範囲内である。
【０２４７】
本明細書で使用される場合、２つ以上の実体のリストに関して「のうちの少なくとも１つ」および「のうちの１つ以上」という語句は、実体のリスト内の実体のうちの１つ以上を意味し、実体のリスト内に具体的に列挙される１つ１つの実体のうちの少なくとも１つに限定されない。例えば、「ＡおよびＢのうちの少なくとも１つ」（または同等に「ＡまたはＢのうちの少なくとも１つ」、あるいは同等に「Ａおよび／またはＢのうちの少なくとも１つ」）は、Ａ単独、Ｂ単独、またはＡおよびＢの組み合わせを指し得る。
【０２４８】
本明細書で使用される場合、第１の実体と第２の実体との間に置かれる「および／または」という用語は、（１）第１の実体、（２）第２の実体、ならびに（３）第１の実体および第２の実体のうちの１つを意味する。「および／または」と共に列挙される複数の実体は、同じように、すなわち、そのように等位結合された実体のうちの「１つ以上」と解釈されるべきである。具体的に特定された実体に関連するかどうかに関係なく、「および／または」という句で具体的に特定された実体以外の他の実体が任意に存在し得る。
【０２４９】
数値範囲が本明細書で言及される場合、本発明は、エンドポイントが含まれる実施形態、両方のエンドポイントが除外される実施形態、および一方のエンドポイントが含まれ、他方が除外される実施形態を含む。別途記載のない限り、両方のエンドポイントが含まれると想定されるべきである。さらに、別途記載のない限り、または文脈および当業者の理解から明白でない限り。
【０２５０】
任意の特許、特許出願、または他の参考文献が参照により本明細書に組み込まれ、本開示の組み込まれていない部分、または他の組み込まれた参考文献のうちのいずれか、のいずれかと（１）矛盾する方法で用語を定義する場合、および／または（２）別様に矛盾している場合、本開示の組み込まれていない部分が優先するものとし、その中の用語または組み込まれた開示は、その用語が定義され、かつ／または組み込まれた開示が元々存在していた参考文献に関してのみ優先するものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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