(57)【要約】  効能のあるオオアザミ抽出物の製造方法が本明細書に記載される。前記方法は、油をオオアザミ抽出物に添加する工程を含み、これにより植物性薬物の放出率が上昇する。更に、効能のあるオオアザミ抽出物の製造方法によって得られた生成物及び前記生成物の使用が本明細書に記載される。
2020535132.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
(a) オオアザミ果実を脱脂することによって得られる油状オオアザミ抽出物を用意する工程と、
(b) (a)の前記油状抽出物を有機溶媒に溶かして、溶液を形成する工程と、
(c) 脱脂されたオオアザミ果実から更なる抽出物を得る工程であって、前記更なる抽出物が、前記脱脂されたオオアザミ果実を溶媒で洗浄し、その後前記溶媒を除去することによって得られる工程と、
(d) (c)の前記の更なる抽出物を溶媒に溶かして溶液を形成する工程と、
(e) (f)の最終生成物中の(a)の油状抽出物の量が0.5〜10.0質量%になるように、(b)の前記の溶液を(d)の前記の溶液と混合して混合抽出物溶液を形成する工程と、
(f) (e)の前記の混合抽出物溶液の溶媒を除去して固形物を得て、任意選択により場合によっては前記固形物を粉砕する工程と
を含み、前記生成物が90%以上のシリマリン放出率を有する方法
によって得られる、効能のあるオオアザミ抽出物。
【請求項２】
(c)の乾燥された抽出物が、工程(d)の前に、有機溶媒中で再溶媒和され、任意選択により場合によっては濃縮され、及び／又は任意選択により場合によっては濾過及び乾燥され、かつ任意選択により場合によっては粉砕される、請求項１に記載の効能のあるオオアザミ抽出物。
【請求項３】
(a)の前記の油状オオアザミ抽出物が、オオアザミ果実をコールドプレスすることによって得られたものである、請求項１に記載の効能のあるオオアザミ抽出物。
【請求項４】
(b)の前記の溶媒がアルコールである、請求項１に記載の効能のあるオオアザミ抽出物。
【請求項５】
(c)の前記の溶媒が、酢酸エチル、エタノール、メタノール、又はアセトンである、請求項１に記載の効能のあるオオアザミ抽出物。
【請求項６】
(d)の前記の溶媒がアルコールである、請求項１に記載の効能のあるオオアザミ抽出物。
【請求項７】
(e)における油状抽出物の量が0.5〜6.0質量%である、請求項１に記載の効能のあるオオアザミ抽出物。
【請求項８】
90%以上のシリマリン放出率を有するオオアザミ果実抽出物を調製するための方法であって、
(a) オオアザミ果実を脱脂することによって得られる油状オオアザミ抽出物を用意する工程と、
(b) (a)の前記の油状抽出物を有機溶媒に溶かして溶液を形成する工程と、
(c) 脱脂されたオオアザミ果実から更なる抽出物を得る工程であって、前記の更なる抽出物が、前記の脱脂されたオオアザミ果実を溶媒で洗浄し、その後前記溶媒を除去することによって得られる工程と、
(d) (c)の前記の更なる抽出物を溶媒に溶かして溶液を形成する工程と、
(e) (f)の最終生成物中の(a)の油状抽出物の量が0.5〜10.0質量%になるように、(b)の前記の溶液を(d)の前記の溶液と混合して混合抽出物溶液を形成する工程と、
(f) (e)の前記の混合抽出物溶液の溶媒を除去して固形物を得て、任意選択により場合によっては前記固形物を粉砕する工程と
を含む、方法。
【請求項９】
(b)の前記の溶液が濃縮及び／又は濾過される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
(d)の前記の溶液が濃縮及び／又は濾過される、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
(e)の前記の溶液が濃縮及び／又は濾過される、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
(c)及び／又は(f)の乾燥された抽出物が粉砕される、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
(c)の前記の乾燥された抽出物が、工程(d)の前に、有機溶媒中で再溶媒和され、任意選択により場合によっては濃縮され、及び／又は任意選択により場合によっては濾過及び乾燥され、かつ任意選択により場合によっては粉砕される、請求項８に記載の方法。
【請求項１４】
(a)の前記の得られる油状オオアザミ抽出物が、オオアザミ果実をコールドプレスすることによって得られる、請求項８に記載の方法。
【請求項１５】
(a)の前記得られる油状オオアザミ抽出物が未加工オオアザミ果実の5〜35質量%であり、その残りの65〜95質量%が脱脂されたオオアザミ果実である、請求項８に記載の方法。
【請求項１６】
(b)の前記の溶媒がアルコールである、請求項８に記載の方法。
【請求項１７】
(c)の前記の溶媒が、酢酸エチル、エタノール、又はメタノールである、請求項８に記載の方法。
【請求項１８】
(d)の前記の溶媒がアルコールである、請求項８に記載の方法。
【請求項１９】
(e)における油状抽出物の量が0.5〜6.0質量%である、請求項８に記載の方法。
【請求項２０】
(e)における油状抽出物の量が1〜3質量%である、請求項８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
相互参照
本出願は、参照により本明細書に組み込まれる、2017年9月22日に出願された米国特許仮出願第62/562,293号の利益を主張する。
【背景技術】
【０００２】
様々な形態の肝臓及び胆嚢機能障害の処置及び防止における、オオアザミ果実から抽出される薬物シリマリンの効能が公知である。オオアザミ抽出物の一般的な調製としては、まずオオアザミ果実を脱脂し、続いて植物性薬物(シリマリン)を抽出し、精製、乾燥する。植物性薬物を含むフラボノリグナンは、水溶性がほとんど又は全くないことが公知である。この溶解特性によってこの化合物の放出率が低下するため、ヒト又は哺乳動物の体内での化合物のバイオアベイラビリティ／吸収性は不十分である。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Remington: The Science and Practice of Pharmacy，第21版、Lippincott Williams & Wilkins: Philadelphia，PA，2005年
【非特許文献２】Handbook of Pharmaceutical Excipients，第5版，Roweら編，The Pharmaceutical Press and the American Pharmaceutical Association: 2005年
【非特許文献３】Handbook of Pharmaceutical Additives，第3版，Ash and Ash編，Gower Publishing Company: 2007年
【非特許文献４】Pharmaceutical Preformulation and Formulation，第2版，Gibson編，CRC Press LLC: Boca Raton，FL，2009年
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
(a) オオアザミ果実を脱脂することによって得られる油状オオアザミ抽出物を用意する工程と、
(b)  (a)の油状抽出物を有機溶媒に溶かして溶液を形成する工程と、
(c) 脱脂されたオオアザミ果実から更なる抽出物を得る工程であって、更なる抽出物が、脱脂されたオオアザミ果実を溶媒で洗浄し、その後前記溶媒を除去することによって得られる工程と、
(d)  (c)の更なる抽出物を溶媒に溶かして溶液を形成する工程と、
(e)  (f)の最終生成物中の(a)の油状抽出物の量が0.5〜10.0質量%になるように、(b)の溶液を(d)の溶液と合わせて混合抽出物溶液を形成する工程と、
(f)  (e)の混合抽出物溶液の溶媒を除去して固形物を得、任意選択で場合によりその固形物を粉砕する工程と
を含み、生成物が90%以上のシリマリン放出率を有する方法によって得られる、効能のあるオオアザミ抽出物が本明細書に開示される。
【０００５】
一実施形態では、(b)の溶液は濃縮及び／又は濾過される。一実施形態では、(d)の溶液は濃縮及び／又は濾過される。一実施形態では、(e)の溶液は濃縮及び／又は濾過される。一実施形態では、(c)及び／又は(f)の乾燥抽出物は粉砕される。一実施形態では、(c)の乾燥抽出物は、工程(d)の前に有機溶媒中で再溶媒和され、任意選択で場合により濃縮され、及び／又は任意選択で場合により濾過及び乾燥され、任意選択で場合により粉砕される。一実施形態では、(a)の油状オオアザミ抽出物は、オオアザミ果実をコールドプレスすることによって得られる。一実施形態では、(a)の油状オオアザミ抽出物は、オオアザミ果実を有機溶媒で洗浄することによって得られる。一実施形態では、溶媒は炭化水素溶媒である。一実施形態では、(a)の油状オオアザミ抽出物は、超臨界ガス又は超臨界流体で抽出することによって得られる。一実施形態では、抽出は、超臨界二酸化炭素を用いて実施される。一実施形態では、(a)の得られる油状オオアザミ抽出物は、未加工オオアザミ果実の5〜35質量%であり、残りの65〜95質量%は脱脂されたオオアザミ果実である。一実施形態では、(b)の溶媒はアルコールである。一実施形態では、溶媒はエタノールである。一実施形態では、(c)の溶媒は酢酸エチル、エタノール、メタノール、又はアセトンである。一実施形態では、(c)の溶媒は酢酸エチルである。一実施形態では、(d)の溶媒はアルコールである。一実施形態では、溶媒はエタノールである。一実施形態では、(e)中の油状抽出物の量は0.5〜6.0質量%である。一実施形態では、(e)中の油状抽出物の量は1〜3質量%である。一実施形態では、生成物は91%以上のシリマリン放出率を有する。
【０００６】
オオアザミ抽出物及び油を含むオオアザミ生成物が本明細書に開示される。一実施形態では、オオアザミ抽出物は、脱脂されたオオアザミ果実を溶媒で洗浄し、その後前記溶媒を除去することによって得られる。一実施形態では、脱脂されたオオアザミ果実は、コールドプレスすることによってオオアザミ油を除去することによって得られる。一実施形態では、油は、植物性油、動物性油、石油、又はそれらの任意の組合せである。一実施形態では、油は、植物油、精油、ハーブ油、又はそれらの任意の組合せである。一実施形態では、油はオオアザミ油である。一実施形態では、オオアザミ油はオオアザミの果実を脱脂することによって得られる。一実施形態では、脱脂方法はコールドプレスである。一実施形態では、オオアザミ抽出物は、脱脂されたオオアザミ果実を、酢酸エチル、エタノール、又はメタノールで洗浄し、その後前記溶媒を除去することによって得られる。一実施形態では、生成物は、オオアザミ油を、溶媒和されたオオアザミ抽出物と混合し、すべての溶媒を除去することによって得られる。
【０００７】
治療有効量の、本明細書に開示される任意の方法による生成物を含有する医薬組成物が本明細書に開示される。一実施形態では、医薬組成物は少なくとも1つの薬学的に許容される担体を含む。一実施形態では、医薬組成物は、錠剤、ドラジェ、カプセル剤、丸剤、顆粒剤、坐剤、液剤、シロップ剤、懸濁液、又はエマルションである。
【０００８】
本明細書に開示される生成物のいずれかを投与することによって、対象における肝臓、胃又は胆嚢の疾患を処置又は防止するための方法が、本明細書に開示される。一実施形態では、肝臓疾患は、中毒性肝損傷、肝臓症、急性肝不全、肝壊死、肝ジストロフィー、肝硬変、肝線維症、肝腫大、脂肪肝変性、肝不全、及び肝炎である。一実施形態では、肝臓疾患は、肝蛭症、肝炎、線維症を伴う又は伴わない非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)、脂肪性肝疾患(FLD)、非アルコール性脂肪性肝疾患(NAFLD)、アルコール性肝疾患、アラジール症候群、胆道閉鎖、ガラクトース血症、胆石、ヘモクロマトーシス、肝臓がん、リソソーム酸リパーゼ欠損症(LALD)、ポルフィリン症、アセトアミノフェン肝毒性、ライ症候群、サルコイドーシス、チロシン血症、ウィルソン病、ジルベール症候群、硬変症、及び原発性硬化性胆管炎からなる群から選択される。一実施形態では、肝炎はC型肝炎である。一実施形態では、肝臓疾患は非アルコール性脂肪性肝疾患である。
【０００９】
90%以上のシリマリン放出率を有するオオアザミ果実抽出物を調製するための方法であって、
(a) オオアザミ果実を脱脂することによって得られる油状オオアザミ抽出物を用意する工程と、
(b) (a)の油状抽出物を有機溶媒に溶かして溶液を形成する工程と、
(c) 脱脂されたオオアザミ果実から更なる抽出物を得る工程であって、更なる抽出物が、脱脂されたオオアザミ果実を溶媒で洗浄し、その後前記溶媒を除去することによって得られる工程と、
(d) (c)の更なる抽出物を溶媒に溶かして溶液を形成する工程と、
(e) (f)の最終生成物中の(a)の油状抽出物の量が0.5〜10.0質量%になるように、(b)の溶液を(d)の溶液と合わせて混合抽出物溶液を形成する工程と、
(f) (e)の混合抽出物溶液の溶媒を除去して固形物を得、任意選択で場合により固形物を粉砕する工程と
を含む方法が、本明細書に開示される。
【００１０】
一実施形態では、(b)の溶液は濃縮及び／又は濾過される。一実施形態では、(d)の溶液は濃縮及び／又は濾過される。一実施形態では、(e)の溶液は濃縮及び／又は濾過される。一実施形態では、(c)及び／又は(f)の乾燥抽出物は粉砕される。一実施形態では、(c)の乾燥抽出物は、工程(d)の前に、有機溶媒中で再溶媒和され、任意選択で場合により濃縮され、及び／又は任意選択で場合により濾過及び乾燥され、任意選択で場合によって粉砕される。一実施形態では、(a)の油状オオアザミ抽出物は、オオアザミ果実をコールドプレスすることによって得られる。一実施形態では、(a)の油状オオアザミ抽出物は、オオアザミ果実を有機溶媒で洗浄することによって得られる。一実施形態では、溶媒は炭化水素溶媒である。一実施形態では、(a)の油状オオアザミ抽出物は、超臨界ガス若しくは緒臨海流体で、又は超臨界ガス若しくは流体との組合せで抽出することによって得られる。一実施形態では、抽出は超臨界二酸化炭素を用いて実施される。一実施形態では、(a)の得られる油状オオアザミ抽出物は、未加工オオアザミ果実の5〜35質量%であり、残りの65〜95質量%は脱脂されたオオアザミ果実である。一実施形態では、(b)の溶媒はアルコールである。一実施形態では、溶媒はエタノールである。一実施形態では、(c)の溶媒は酢酸エチル、エタノール、又はメタノールである。一実施形態では、(c)の溶媒は酢酸エチルである。一実施形態では、(d)の溶媒はアルコールである。一実施形態では、溶媒はエタノールである。一実施形態では、(e)における油状抽出物の量は0.5〜6.0質量%である。一実施形態では、(e)における油状抽出物の量は1〜3質量%である。
【００１１】
本明細書に開示される方法のいずれかによる生成物であって、91%以上のシリマリン放出率を有する生成物が本明細書に開示される。
【００１２】
オオアザミ抽出物及び油を含む、強化されたオオアザミ抽出物を調製するための方法であって、前記オオアザミ抽出物への前記油の添加が、シリマリン放出率の上昇をもたらす方法が本明細書に開示される。
【００１３】
一実施形態では、上記の油は、植物、動物、又は石油化学供給源由来である。一実施形態では、油は植物由来である。一実施形態では、油は、果実、種子、又は葉由来である。一実施形態では、油は、オオアザミの果実及び／又は種子由来である。一実施形態では、放出率は1.0%以上改善される。一実施形態では、放出率は5.0%以上改善される。一実施形態では、放出率は10.0%以上改善される。一実施形態では、放出率は20.0%以上改善される。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１は、効能のあるオオアザミ抽出物の走査電子顕微鏡画像を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
一実施形態では、本発明は、上昇した放出率を有するオオアザミ果実抽出物、特にフラボノリグナン調製物を調製するための方法、及びその使用、特に肝臓疾患の処置及び防止のための使用に関する。本開示はまた、本明細書に記載されるオオアザミ抽出物が、多くは異性体である天然の化合物の混合物を含有することを考慮して、それを作る方法による生成物について記載する。
【００１６】
一実施形態では、本開示は、シリマリン放出率が向上したオオアザミ果実抽出物を製造するための方法を提供する。いくつかの場合では、抽出物は、本質的に添加剤、補助剤、担体物質、又は湿潤剤なしで調製される。本明細書に記載される本発明の一実施形態では、オオアザミ果実成分のみを使用して、90%以上のシリマリン放出率を有するオオアザミ抽出物を調製するための方法が提供される。
【００１７】
一般的に、オオアザミ果実抽出物を調製するには、まずオオアザミ果実に含まれる油状画分を除去することが必要である。いくつかの調製では、この油状画分は廃棄されるか、又は未関連製品中の油として使用され、その一方、脱脂されたオオアザミ植物は有機溶媒で洗浄されて、シリマリン薬物が抽出される。洗浄物はその後加工されて、固形抽出物が製造される。
【００１８】
本明細書に開示される発明では、オオアザミ果実を脱脂することによって得られる油状画分は、固形抽出物の加工時に再添加される。予期せぬことに、0.5〜10質量%の油状画分を抽出物に添加すると、顕著に優れた溶解特性を有する生成物が製造される。主成分の溶解性が低い抽出物に油を添加することにより、前記溶解性が上昇することは予想し得ないことであろう。油を別の物質に添加すると、多くの場合、その物質に疎水性が付与される。また、油を添加すると、抽出粉末の粘着性が増強され、又はその流動性が低下し、抽出物の物性に悪影響を及ぼすことも予想され得る。しかし、そのような観察はなされておらず、固形抽出物は優れた配合特性を有する。
【００１９】
本発明の一実施形態では、オオアザミ抽出物の加工前、加工時、又は加工後に油を添加して、抽出物のシリマリン放出率を向上させることができる。いくつかの実施形態では、油状画分は、オオアザミ果実自体を脱脂することによって得られる。更なる実施形態では、油はオオアザミ果実と関連のない供給源からもたらされ、例えば、植物性油、動物性油、石油、又はそれらの任意の組合せである。いくつかの場合では、植物性油は、植物油、精油、ハーブ補助油（ハーブサプリメント油）、又はそれらの任意の組合せである。
【００２０】
用語及び定義
「溶液」という用語は、材料と溶媒の均一及び／又は不均一な混合物の両方を指す。
【００２１】
「炭化水素溶媒」という用語は、水素及び炭素原子から構成される溶媒を指す。溶媒の例としては、以下のものに限定されないが、直鎖、分岐、又は環状のC5〜C11アルカン、例えば、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン、オクタン、ノナン、デカン、シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロヘプタン、シクロオクタン、又はC6〜C10アリール若しくはアリールアルカン、例えば、ベンゼン、トルエン、キシレン、又はエチルベンゼンを含む任意の溶媒又は溶媒混合物が挙げられる。この用語は、酸素、窒素、及びフッ素などのヘテロ原子を含有する、認めうるほどには極性ではない溶媒にも当てはまる。例としては、以下のものに限定されないが、ジエチルエーテル、1,4-ジクロロベンゼン、及びメチルt-ブチルエーテルが挙げられる。
【００２２】
「超臨界ガス又は液体」という用語は、明確な液相又はガス相が存在しない、その臨界点を上回る温度又は圧力にある物質を指す。したがって、「超臨界ガス又は液体」という用語は、「超臨界液体」及び「超臨界ガス」と等価である。更に、「超臨界液体」及び「超臨界ガス」という用語は交換可能に使用され、物体の同じ物理的状態を指すことを意図している。超臨界ガス又は液体として使用できる物質の例としては、二酸化炭素、水、メタン、エタン、ブタン、プロパン、エチレン、プロペン、ブテン、エタノール、メタノール、プロパノール、亜酸化窒素、及び二窒素が挙げられる。
【００２３】
「アルコール」という用語は、好ましくはC1〜C4アルコール、特に好ましくはエタノール、例えば純度99%又は更には99.5%のものを含む。
【００２４】
本開示の範囲では、「シリマリン」は（少なくとも）4つの物質である、シリビニン、シリジアニン、シリクリスチン、及びイソシリビニンを様々な濃度で含有する物質混合物を指す。
【００２５】
「90%以上のシリマリン放出率」は、その活性物質が水溶液に少なくとも90%可溶性であることを意図する。
【００２６】
「油」という用語は、加温すると液体であり、又は容易に液化し、且つエーテルには可溶性であるが水には不溶性である、油性の可燃性物質をいう。油は、その起源によって動物性、植物性、又は石油化学系として記載され得る。この用語はまた、長鎖の脂肪酸、エステル、アルコール、又はアルカンを含む。この用語には更に、シリコーン、炭化水素、グルコシド、グルタメート、グリセリド、グリセリルエステル、及びワックスが含まれる。
【００２７】
「栄養補助剤」という用語は、食事を補う製品を指す。栄養補助剤は、販売前に広範な試験を受けてFDAに事前承認されなければならない薬物とは明確に異なる。いくつかの場合には、栄養補助剤は、疾患又は状態に影響を及ぼすと表示され得る。栄養補助剤は、従来の食品として、又は食べ物若しくは食事の単一品目として使用するためのものではない。栄養補助剤は、典型的に補助剤と適合性がある、つまり個体が食事で摂取する1つ又は複数の栄養成分に添加される。
【００２８】
「効能のあるオオアザミ抽出物」という用語は、油が添加される方法によって得られ、油を添加する工程を含まない方法によって得られるオオアザミ抽出物と比較して、放出率又は溶解率が向上したオオアザミ抽出物をいう。
【００２９】
「有効量」又は「治療有効量」という用語は、本明細書で使用される場合、処置される疾患又は状態の症状の1つ又は複数をある程度緩和する、投与される薬剤又は化合物の十分な量を指す。その結果は、疾患の兆候、症状、又は原因の低減、及び／若しくは軽減、又は生体系の任意の他の所望の変更であり得る。例えば、治療的使用の「有効量」は、疾患症状を臨床的に顕著に減少させることが要求される、本明細書に開示される化合物を含む組成物の量である。任意の個々の場合における適切な「有効」量は、用量漸増試験等の手法を使用して決定され得る。
【００３０】
「任意選択」又は「任意選択で」という用語は、その後に記載される事象又は状況が起こっても起こらなくてもよいことを意図し、この記載は前記の事象又は状況が起こる事例及び起こらない事例を含む。
【００３１】
「対象」又は「患者」という用語は、哺乳動物を包含する。哺乳動物の例としては、これに限定されないが、ヒトが挙げられる。一実施形態では、哺乳動物はヒトである。
【００３２】
「処置する」「処置すること」又は「処置」という用語は、本明細書で使用される場合、疾患又は状態の少なくとも1つの症状を軽減させること、減弱させること又は回復させること、更なる症状を防止すること、疾患又は状態を阻害すること、例えば、疾患又は状態の発症を抑止すること、疾患又は状態を緩和すること、疾患又は状態を退行させること、疾患によって生じる状態又は状態を緩和すること、疾患又は状態の症状を予防的及び／又は治療的に停止させることを含む。
【００３３】
「薬学的に許容される担体」、「薬学的に許容される賦形剤」、「生理学的に許容される担体」、又は「生理学的に許容される賦形剤」という用語は、薬学的に許容される材料、組成物、又はビヒクル、例えば液体又は固体充填剤、希釈剤、溶媒、又はカプセル化材を指す。一実施形態では、各成分は、医薬製剤の他の成分と適合性があり、過度の毒性、刺激、アレルギー応答、免疫原性、又は他の問題若しくは合併症を伴わずにヒト及び動物の組織又は臓器と接触して使用するのに好適であり、合理的なベネフィット/リスク比に見合うという意味で「薬学的に許容」される。Remington: The Science and Practice of Pharmacy，第21版，Lippincott Williams & Wilkins: Philadelphia，PA，2005年；Handbook of Pharmaceutical Excipients，第5版，Roweら編，The Pharmaceutical Press and the American Pharmaceutical Association: 2005年；及びHandbook of Pharmaceutical Additives，第3版，Ash and Ash編，Gower Publishing Company: 2007年；Pharmaceutical Preformulation and Formulation，第2版，Gibson編，CRC Press LLC: Boca Raton，FL，2009年を参照されたい。
【００３４】
「約」又は「およそ」という用語は、当業者によって決定される特定の値の許容される誤差を意図し、部分的には、値がどのように測定される又は決定されるかに左右される。ある特定の実施形態では、「約」又は「およそ」という用語は、1、2、3、又は4標準偏差以内を意味する。ある特定の実施形態では、「約」又は「およそ」という用語は、所定の値又は範囲の50%、20%、15%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%、0.5%、又は0.05%以内を意味する。
【００３５】
調製方法及びその方法による生成物
オオアザミ果実抽出物を調製するための方法であって、
(a) オオアザミ果実を脱脂することによって得られる油状オオアザミ抽出物を用意する工程と、
(b) (a)の油状抽出物を有機溶媒に溶かして溶液を形成する工程と、
(c) 脱脂されたオオアザミ果実から更なる抽出物を得る工程であって、その更なる抽出物が、脱脂されたオオアザミ果実を溶媒で洗浄し、その後、前記の溶媒を除去することによって得られる工程と、
(d) (c)の更なる抽出物を溶媒に溶かして溶液を形成する工程と、
(e) (f)の最終生成物中の(a)の油状抽出物の量が0.5〜10.0質量%になるように、(b)の溶液の一部分を(d)の溶液と混合して混合された抽出物溶液を形成する工程と、
(f) (e)の混合された抽出物溶液の溶媒を除去して固形物を得、任意選択により場合によってはその固形物を粉砕する工程と、を含み、生成物が90%以上のシリマリン放出率を有する方法が本明細書に開示される。
【００３６】
一実施形態では、オオアザミ抽出物を調製するための方法であって、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が上昇する方法が本明細書に開示される。いくつかの実施形態では、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が1%以上上昇する。いくつかの実施形態では、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が2%以上上昇する。いくつかの実施形態では、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が5%以上上昇する。いくつかの実施形態では、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が10%以上上昇する。いくつかの実施形態では、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が15%以上上昇する。いくつかの実施形態では、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が20%以上上昇する。いくつかの実施形態では、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が30%以上上昇する。いくつかの実施形態では、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が50%以上上昇する。
【００３７】
別の実施形態では、向上したシリマリン放出率を示す生成物が本明細書に開示される。いくつかの実施形態では、生成物は、油を添加する工程を含む方法によって製造される。生成物は、油を添加する工程を含まない方法によって得られる生成物と比較される。いくつかの実施形態では、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が1%以上上昇する。いくつかの実施形態では、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が2%以上上昇する。いくつかの実施形態では、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が5%以上上昇する。いくつかの実施形態では、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が10%以上上昇する。いくつかの実施形態では、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が15%以上上昇する。いくつかの実施形態では、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が20%以上上昇する。いくつかの実施形態では、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が30%以上上昇する。いくつかの実施形態では、油をオオアザミ抽出物に添加することによって、シリマリン放出率が50%以上上昇する。
【００３８】
また、
(a) オオアザミ果実を脱脂することによって得られる油状オオアザミ抽出物を用意する工程と、
(b) (a)の油状抽出物を有機溶媒に溶かして溶液を形成する工程と、
(c) 脱脂されたオオアザミ果実から更なる抽出物を得る工程であって、更なる抽出物が、脱脂されたオオアザミ果実を溶媒で洗浄し、その後前記の溶媒を除去することによって得られる工程と、
(d) (c)の更なる抽出物を溶媒に溶かして溶液を形成する工程と、
(e) (f)の最終生成物中の(a)の油状抽出物の量が0.5〜10.0質量%になるように、(b)の溶液を(d)の溶液と混合して混合された抽出物溶液を形成する工程と、
(f) (e)の混合された抽出物溶液の溶媒を除去して固形物を得て、任意選択で場合よってはその固形物を粉砕する工程と、
を含み、生成物が90%以上のシリマリン放出率を有する方法によって製造される、効能のあるオオアザミ抽出物も本明細書に開示される。
【００３９】
いくつかの実施形態では、(b)の溶液は濃縮及び／又は濾過される。いくつかの実施形態では、(d)の溶液は濃縮及び／又は濾過される。いくつかの実施形態では、(e)の溶液は濃縮及び／又は濾過される。いくつかの実施形態では、(c)及び／又は(f)の乾燥抽出物は粉砕される。いくつかの実施形態では、(c)の乾燥抽出物は、工程(d)の前に有機溶媒中で再溶媒和され、任意選択で場合によっては濃縮され、及び／又は任意選択で場合によっては濾過及び乾燥され、任意選択で場合によっては粉砕される固形物が得られる。
【００４０】
いくつかの実施形態では、(a)の油状オオアザミ抽出物は、オオアザミ果実をコールドプレスすることによって得られる。いくつかの実施形態では、(a)の油状オオアザミ抽出物は、オオアザミ果実を有機溶媒で洗浄することによって得られる。
【００４１】
いくつかの実施形態では、(a)の溶媒は炭化水素溶媒である。いくつかの実施形態では、(a)の油状オオアザミ抽出物は、超臨界ガス若しくは流体で、又は超臨界ガス若しくは流体との組合せで抽出することによって得られる。いくつかの実施形態では、抽出は超臨界二酸化炭素を用いて実施される。いくつかの実施形態では、(b)の溶媒はアルコールである。いくつかの実施形態では、(b)の溶媒はエタノールである。いくつかの実施形態では、(c)の溶媒は、酢酸エチル、エタノール、メタノール、又はアセトンである。いくつかの実施形態では、(c)の溶媒は酢酸エチルである。いくつかの実施形態では、(d)の溶媒はアルコールである。いくつかの実施形態では、その溶媒はエタノールである。
【００４２】
いくつかの実施形態では、(e)における油状抽出物の量は0.5〜6.0質量%である。いくつかの実施形態では、(e)における油状抽出物の量は1〜3質量%である。
【００４３】
別の実施形態では、
(a) 植物の果実を、機械的コールドプレス又は炭化水素溶媒若しくは超臨界流体で洗浄することのいずれかによって脱脂する。炭化水素溶媒が使用される場合、溶媒はその後除去される。いくつかの場合には、油状画分は濾過又は濃縮される。単離された油状画分は、典型的には未加工オオアザミ果実の5〜35質量%である。脱脂されたオオアザミ果実は、残りの質量を含む。
(b) (a)の油状画分を有機溶媒と混合して溶液を形成し、有機溶媒の非限定的な例としては、エタノール、プロパノール、ジエチルエーテル、ヘキサン、及び酢酸エチルが挙げられる。この溶液は、任意選択で場合により、濃縮及び／又は濾過される。
(c) 脱脂されたオオアザミ果実を有機溶媒で洗浄し、有機溶媒の非限定的な例としては、酢酸エチル、エタノール、アセトン、及びメタノールが挙げられる。得られる溶液は、任意選択で場合によっては水性画分を含む。溶液は、任意選択で場合によってはヘキサン又は別の非極性溶媒で洗浄される。溶液は更に、任意選択で場合により濃縮及び／又は濾過される。溶液は、任意選択で場合により撹拌しながら真空下で乾燥させる。得られる未処理抽出物は、任意選択で場合によっては、熱水で洗浄され、乾燥され、及び／又は任意選択で場合によって粉砕される。
(d) (c)で得られた未処理抽出物を有機溶媒中に再溶解し、有機溶媒の非限定的な例としては、アルコール、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、及びブタノールが挙げられる。得られる溶液は、任意選択により場合によって濃縮及び／又は濾過される。
(e) 工程(f)の最終生成物が0.5〜10.0質量%の(a)で得られた油状画分を含むような比で、(d)の溶液を(b)の溶液と混合する。溶液は、任意選択で濃縮及び／又は濾過される。
(f) (e)の混合された抽出物溶液の溶媒を除去して固形物を得て、任意選択で場合によってその固形物を粉砕する工程
を含み、生成物が90%以上のシリマリン放出率を有する方法において、オオアザミ果実抽出物を調製するための方法が記載される。
【００４４】
別の実施形態では、効能のあるオオアザミ抽出物は、
(a) その植物の果実を、機械的コールドプレス又は炭化水素溶媒若しくは超臨界流体で洗浄することのいずれかによって脱脂する。炭化水素溶媒が使用される場合、溶媒はその後除去される。いくつかの場合では、油状画分は濾過又は濃縮される。単離された油状画分は、典型的には未加工オオアザミ果実の5〜35質量%である。脱脂されたオオアザミ果実は、その質量の残りの部分を含む。
(b) (a)の油状画分を有機溶媒と混合して溶液を形成し、有機溶媒の非限定的な例としては、エタノール、プロパノール、ジエチルエーテル、ヘキサン、及び酢酸エチルが挙げられる。この溶液は、任意選択で場合により濃縮及び／又は濾過される。
(c) 脱脂されたオオアザミ果実を有機溶媒で洗浄し、有機溶媒の非限定的な例としては、酢酸エチル、エタノール、アセトン、及びメタノールが挙げられる。得られる溶液は、任意選択で場合により水性画分を含む。その溶液は、任意選択で場合によりヘキサン又は別の非極性溶媒で洗浄される。溶液は更に、任意選択で場合により濃縮及び／又は濾過される。溶液は、任意選択で場合により撹拌しながら真空下で乾燥される。得られる未処理抽出物は、任意選択で場合により熱水で洗浄され、乾燥され、及び／又は任意選択で場合により粉砕される。
(d) (c)で得られた未処理抽出物を有機溶媒中に再溶解し、有機溶媒の非限定的な例としては、アルコール、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、及びブタノールが挙げられる。得られる溶液は、任意選択で場合により濃縮及び／又は濾過される。
(e) 工程(f)の最終生成物が0.5〜10.0質量%の(a)で得られた油状画分を含むような比で、(d)の溶液を(b)の溶液と混合する。溶液は、任意選択で場合により濃縮及び／又は濾過される。
(f) (e)の混合した抽出物溶液の溶媒を除去して固形物を得て、任意選択で場合によりその固形物を粉砕する工程
を含み、生成物が90%以上のシリマリン放出率を有する方法によって製造される。
【００４５】
いくつかの実施形態では、工程(c)の抽出は40〜80℃で実施される。別の実施形態では、抽出は50〜70℃で実施される。
【００４６】
いくつかの実施形態では、工程(c)の溶液は60℃未満の温度で乾燥される。別の実施形態では、溶液は40℃未満の温度で乾燥される。
【００４７】
いくつかの実施形態では、工程(d)で使用されるエタノールは、96%以上のエタノールである。いくつかの実施形態では、混合された溶液は1〜100mbarの圧力で濃縮される。
【００４８】
一実施形態では、オオアザミ果実抽出物を調製するための方法が、
(a) オオアザミ果実をコールドプレスすることによって得られる油状オオアザミ抽出物を用意する工程と、
(b) (a)の油状抽出物をエタノールに溶かして溶液を形成する工程と、
(c) 脱脂されたオオアザミ果実から更なる抽出物を得る工程であって、その更なる抽出物が、脱脂されたオオアザミ果実を酢酸エチルで洗浄し、その後前記の溶媒を除去することによって得られる工程と、
(d) (c)の更なる抽出物をエタノールに溶かして溶液を形成する工程と、
(e) (f)の最終生成物中の(a)の油状抽出物の量が1.0〜3.0質量%になるように、(b)の溶液を(d)の溶液と混合して混合された抽出物溶液を形成する工程と、
(f) (e)の混合された抽出物溶液の溶媒を除去して固形物を得て、任意選択で場合によっては固形物を粉砕する工程と
を含み、生成物が90%以上のシリマリン放出率を有する方法において記載される。
【００４９】
一実施形態では、効能のあるオオアザミ抽出物は、
(a) オオアザミ果実をコールドプレスすることによって得られる油状オオアザミ抽出物を用意する工程と、
(b) (a)の油状抽出物をエタノールに溶かして溶液を形成する工程と、
(c) 脱脂されたオオアザミ果実から更なる抽出物を得る工程であって、更なる抽出物が、脱脂されたオオアザミ果実を酢酸エチルで洗浄し、その後前記の溶媒を除去することによって得られる工程と、
(d) (c)の更なる抽出物をエタノールに溶かして溶液を形成する工程と、
(e) (f)の最終生成物中の(a)の油状抽出物の量が1.0〜3.0質量%になるように、(b)の溶液を(d)の溶液と混合して混合された抽出物溶液を形成する工程と、
(f) (e)の混合された抽出物溶液の溶媒を除去して固形物を得て、任意選択により場合によっては固形物を粉砕する工程と、
を含み、生成物は90%以上のシリマリン放出率を有する方法によって製造される。
【００５０】
本開示のいくつかの実施形態では、オオアザミ抽出物のシリマリン放出率は85%以上である。いくつかの実施形態では、シリマリン放出率は90%以上である。いくつかの実施形態では、シリマリン放出率は91%以上である。
【００５１】
いくつかの実施形態では、工程(a)においてオオアザミ果実を脱脂するために超臨界ガス及び／又は流体が使用される。いくつかの実施形態では、オオアザミ果実は、刻まれ、製粉され、砕かれ、又はその他の方法でペーストへと粉砕される。そのペーストを、超臨界流体の存在下で撹拌又はかき混ぜて脱脂を促進させることができる。いくつかの実施形態では、二酸化炭素が脱脂プロセスにおける超臨界ガスである。他の実施形態では、超臨界ガス又は流体の非限定的な例としては、メタン、エタン、ブタン、プロパン、エチレン、プロペン、ブテン、エタノール、メタノール、プロパノール、水、亜酸化窒素、及び二窒素が挙げられる。
【００５２】
いくつかの実施形態では、オオアザミ果実を脱脂するために炭化水素溶媒が使用される。いくつかの場合では、オオアザミ果実は刻まれ、製粉され、砕かれ、又はその他の方法で粉砕されてペーストにされる。そのペーストを、炭化水素溶媒の存在下で撹拌又はかき混ぜて脱脂を促進することができる。炭化水素溶媒としては、直鎖、分岐、又は環状のC5〜C11アルカン、例えば、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン、オクタン、ノナン、デカン、シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロヘプタン、シクロオクタン、又はC6〜C10アリール若しくはアリールアルカン、例えば、ベンゼン、トルエン、キシレン、又はエチルベンゼンが挙げられる。いくつかの実施形態では、前記炭化水素溶媒は、ヘテロ原子、例えば、酸素、窒素、及びフッ素を含むが、その分子ははっきりと極性ではなく、あるいは2未満の双極子モーメントを有する。いくつかの実施形態では、双極子モーメントは1.5未満である。例としては、以下のものに限定されないが、ジエチルエーテル、1,4-ジクロロベンゼン、及びメチルt-ブチルエーテルが挙げられる。
【００５３】
いくつかの実施形態では、油状画分の抽出物はコールドプレスによって得られる。いくつかの実施形態では、コールドプレスするプロセスは、オオアザミ果実原料を刻む、砕く、製粉する、又は粉砕することを含む。これにより、半固形ペーストが形成される。その後、材料を機械的にプレスして固形材料から油状画分を取りわける。いくつかの実施形態では、その画分は1又は複数のフィルターを通す。いくつかの実施形態では、製粉する、プレスする、又は濾過する間、プロセスに外部からの熱は適用されない。
【００５４】
いくつかの実施形態では、オオアザミ果実をコールドプレスすることによって得られる油状画分を、脱脂されたオオアザミ果実を洗浄することによって得られる抽出物に再添加する。オオアザミ油を抽出物に再添加することにより、最終生成物におけるシリマリン放出率が上昇する。代替の実施形態では、オオアザミ油以外の植物性油が添加されて、シリマリン放出率が上昇する。ここで開示するのは、添加剤として利用される植物由来の油の非限定的な例であり、例えば、ココナッツ油、コーン油、綿実油、オリーブ油、パーム油、落花生油、ナタネ油、キャノーラ油、サフラワー油、ゴマ油、大豆油、ヒマワリ油、アーモンド油、ブナ油、ブラジルナッツ油、カシュー油、ヘーゼルナッツ油、マカダミア油、モンゴンゴナッツ油、ペカン油、マツの実油、ピスタチオ油、クルミ油、グレープフルーツ種子油、レモン油、オレンジ油、ニガウリ油、バッファローカボチャ油、バターナッツスクワッシュ種子油、カボチャ種子油、スイカ種子油、アサイー油、ブラックシード油、カシス種子油、ルリジサ種子油、亜麻仁油、アマランス油、アプリコット油、リンゴ種子油、アルガン油、アボカド油、ババス油、ベン油、ボルネオタローナッツ油、カロブポッド油(アルガロバ油)、テオブロマ油として公知でもあるカカオバター油、オナモミ油、コフネヤシ油、コリアンダー種子油、デーツ種子油、ディーカ油、アマナズナ油、ブドウ種子油、ヘンプ油、カポック種子油、ケナフ種子油、ラレマンチア油、マフラ油、マルーラ油、メドウフォーム種子油、マスタード油、ニガー種子油、ナツメグ油、オクラ種子油、シソの実油、柿種子油、ペクイ油、ピリナッツ油、ザクロ種子油、ケシ油、プラカシ油、プルーン油、キノア油、ヌグ油、米ぬか油、ロイル油、サチャインチ油、サポーテ油、セジェ油、シアー油、ルッコラ種子油、茶実油、タイガーナット油(又はショクヨウガヤツリ油)、タバコ種子油、トマト種子油、小麦胚芽油、寒天油、アジョワン油、アンゼリカ根油、アニス油、阿魏油、バジル油、ベイ油、ベルガモット油、ブラックペッパー油、ブッコ油、バーチ油、樟脳油、カンナビス精油、カラモンディン油、カラマンシー精油、カラウェー油、カルダモン種子油、ニンジン種子油、セダー油(又はセダーウッド油)、カミツレ油、カラマス油、ケイヒ油、シトロン油、シトロネラ油、サルビアセージ油、ココナッツ油、アラビアコーヒーノキ種子油、コリアンダー油、コストマリー油(バイブルリーフ油)、木香油、クランベリー種子油、クベブ油、クミン油、イタリアイトスギ油、シプリオール油、カレーリーフ油、アルテミシアパレンス花油、オオグルマ油、エレミ油、ユーカリ油、ウイキョウ種子油、コロハ油、ファーニードル油、オリバナム油、ガランガ根油、ガルバナム油、ゼラニウム油、ショウガ油、アキノキリンソウ油、ムギワラギク油、ヒッコリー実油、セイヨウワサビ油、ジャスミン油、杜松子油、ラベンダー油、メラルーカシーティーツリー油、メリッサ油、薄荷油、モリンガ油、ヨモギ油、ミルラ油、ミルテ油、ニーム油又はインドセンダン油、オレガノ油、オリス油、オランダセリ油、パチュリー油、シソ精油、ペニローヤル油、セイヨウハッカ油、パイン油、バラ油、ローズヒップ油、ローズマリー���、ボアドローズ油、セージ油、サッサフラス油、セイバリー油、ノコギリヤシ油、チョウセンゴミシ油、スペアミント油、トウヒ油、ダイウイキョウ油、タラゴン油、ティーツリー油、タイム油、ベチベル油(クス油)及びセイヨウノコギリソウ油である。
【００５５】
いくつかの実施形態では、開示する方法で使用するための動物由来の油の例としては、以下のものに限定されないが、骨油、タラ肝油、魚油、ガチョウ脂、ハリバ肝油、ラード油、メンハーデン油、牛脚油、オレオ油、サケ油、いわし油、サメ油、ウール油、及びタロー油が挙げられる。いくつかの実施形態では、開示する方法で使用するための石油化学由来の油の例としては、以下のものに限定されないが、鉱油、シリコーン油、ペトロラタム、及びC9〜20アルカンの混合物が挙げられる。
【００５６】
いくつかの実施形態では、乾燥抽出物に対する要件は、好ましくは35〜70質量%のシリマリン含有量であり、そのシリマリン部分は、40〜65質量%のシリビニンA及びB (ジアステレオマー混合物、C25H22O10、MW482.4)、10〜20質量%のイソシリビニンA及びB (ジアステレオマー混合物、C25H22O10、MW482.4)、及び20〜45質量%のシリダニン及びシリクリスチン (C25H22O10、MW482.4)の画分を含有する。
【００５７】
使用及び医薬組成物
また、有効量の、本明細書に開示されるオオアザミ果実抽出物を含む医薬製剤が本明細書に開示される。
【００５８】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるオオアザミ果実抽出物を含む医薬製剤は、肝臓及び胆嚢機能障害、特に中毒性肝損傷（脂肪肝、アルコール）、肝臓症、例えばキノコ中毒、急性肝不全、肝壊死、肝ジストロフィー、肝臓疾患、肝硬変、肝線維症、肝腫大、及び脂肪肝変性、肝不全及び肝炎、特にC型肝炎の処置及び防止のために使用される。
【００５９】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるオオアザミ果実抽出物を含む医薬製剤は、肝臓疾患、例えば、肝蛭症、肝炎、線維症を伴う又は伴わない非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）、急性脂肪肝、脂肪性肝疾患（FLD）、非アルコール性脂肪性肝疾患（NAFLD）、アルコール性肝疾患、アラジール症候群、胆道閉鎖、ガラクトース血症、胆石、ヘモクロマトーシス、肝臓がん、リソソーム酸リパーゼ欠損症（LALD）、ポルフィリン症、アセトアミノフェン肝毒性、ライ症候群、サルコイドーシス、チロシン血症、ウィルソン病、ジルベール症候群、硬変症、及び原発性硬化性胆管炎の処置及び防止のために使用される。
【００６０】
本明細書に開示されるオオアザミ果実抽出物は、単位剤形の医薬調製物の形態で提供されてもよい。いくつかの実施形態では、調製物は、個別の部分、例えば、錠剤、ドラジェ、カプセル剤、丸剤、坐剤、及びアンプルの形態で存在してもよく、その活性物質の含有量は、任意選択により単一用量の一部分又は複数の単一用量に相当する。単位剤形は、例えば1、2、3、又は4単一用量を含んでいてもよい。単一用量は、好ましくは1回の投与で分配される量の活性物質を含み、この量は典型的には、一日用量全体、又は一日用量の半分、3分の1、又は4分の1に相当する。
【００６１】
非毒性、不活性な薬学的に好適な担体物質は、あらゆる種類の固形、半固形、又は液体の希釈剤、充填剤、及び製剤化アジュバントを意図すると理解される。
【００６２】
好ましい医薬製剤として、錠剤、ドラジェ、カプセル剤、丸剤、顆粒剤、坐剤、液剤、シロップ剤、懸濁液、及びエマルションが挙げられる。錠剤、ドラジェ、カプセル剤、丸剤、及び顆粒剤は、通例の担体物質、例えばa) 充填剤及び増量剤、例えば、デンプン類、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニット、及びケイ酸、b) 結合剤、例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、及びポリビニルピロリドン、c) 保水剤、例えば、グリセリン、d) 崩壊剤、例えば、寒天、炭酸カルシウム、及び炭酸ナトリウム、e) 溶解遅延剤、例えば、パラフィン、f) 吸収促進剤、例えば、第四級アンモニウム化合物、g) 湿潤剤、例えば、セチルアルコール及びグリセリンモノステアリン酸エステル、h) 吸着剤、例えば、カオリン及びベントナイト、並びにi) 潤滑剤、例えば、タルク、ステアリン酸カルシウム及びマグネシウム、並びに固体ポリエチレングリコール、又はa)からi)で述べられた物質の混合物の他に、1又は複数の活性物質を含んでいてもよい。
【００６３】
錠剤、ドラジェ、カプセル剤、丸剤、及び顆粒剤は、任意選択で乳白剤を含む通例のコーティング剤及びシェルを用いて提供されてもよく、更に腸管又は好ましくはその特定の部分のみに、任意選択により、遅延された様式で1又は複数の活性物質を送達するように組成物を含んでもよく、ここで例えばポリマー物質及びワックスが、カプセル化化合物として使用され得る。
【００６４】
また、1又は複数の活性物質は、任意選択により、上で言及された担体物質のうちの1又は複数とともに、マイクロカプセル化形態で存在してもよい。
【００６５】
坐剤は、1又は複数の活性物質に加え、通例の水溶性又は水不溶性担体物質、例えばポリエチレングリコール、油脂、例えばカカオバター及び高級エステル（例えば、C14アルコールとC16脂肪酸）、又はこれらの物質の混合物を含んでもよい。
【００６６】
液剤及びエマルションは、1又は複数の活性物質に加え、通例の担体物質、例えば溶媒、可溶化剤、及び乳化剤、例えば、水、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、1,3-ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油、特に綿実油、落花生油、トウモロコシ胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油及びゴマ油、グリセリン、グリセリンホルマール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール及びソルビタンの脂肪酸エステル、又はこれらの物質の混合物を含んでもよい。
【００６７】
懸濁液は、1又は複数の活性物質に加え、通例の担体物質、例えば、液体希釈剤、例えば、水、エチルアルコール、及びプロピレングリコール、懸濁剤、例えば、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルバイト、及びソルビタンエステル、微結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天、及びトラガカントゴム、又はこれらの物質の混合物を含んでもよい。言及された製剤形態は、色素、保存剤並びに香料添加剤及び味覚増強添加剤、例えば、セイヨハッカ油及びユーカリ油、並びに甘味剤、例えばサッカリンを含んでもよい。
【００６８】
本明細書で記載される方法のいずれか1つによる生成物を含む栄養補助組成物が、本明細書に開示される。いくつかの実施形態では、栄養補助組成物は、錠剤、ドラジェ、カプセル剤、丸剤、顆粒剤、液剤、シロップ剤、懸濁液又はエマルションである。いくつかの実施形態では、栄養補助組成物は、肝機能の変更における使用のためのものである。いくつかの実施形態では、栄養補助組成物は、肝臓疾患、例えば、肝蛭症、肝炎、線維症を伴う又は伴わない非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）、急性脂肪肝、脂肪性肝疾患（FLD）、非アルコール性脂肪性肝疾患（NAFLD）、アルコール性肝疾患、アラジール症候群、胆道閉鎖、ガラクトース血症、胆石、ヘモクロマトーシス、肝臓がん、リソソーム酸リパーゼ欠損症（LALD）、ポルフィリン症、アセトアミノフェン肝毒性、ライ症候群、サルコイドーシス、チロシン血症、ウィルソン病、ジルベール症候群、硬変症及び原発性硬化性胆管炎の処置及び防止のために使用される。
【００６９】
更なる実施形態
実施形態１：
(a) オオアザミ果実を脱脂することによって得られる油状オオアザミ抽出物を用意する工程と、
(b)  (a)の油状抽出物を有機溶媒に溶かして溶液を形成する工程と、
(c) 脱脂されたオオアザミ果実から更なる抽出物を得る工程であって、更なる抽出物が、脱脂されたオオアザミ果実を溶媒で洗浄し、その後、前記溶媒を除去することによって得られる工程と、
(d)  (c)の更なる抽出物を溶媒に溶かして溶液を形成する工程と、
(e)  (f)の最終生成物中の(a)の油状抽出物の量が0.5〜10.0質量%になるように、(b)の溶液を(d)の溶液と混合して混合抽出物溶液を形成する工程と、
(f)  (e)の混合した抽出物溶液の溶媒を除去して固形物を得て、任意選択により場合によっては固形物を粉砕する工程と、
を含み、生成物が90%以上のシリマリン放出率を有する方法によって得られる、効能のあるオオアザミ抽出物が本明細書で開示される。
【００７０】
実施形態２: (b)の溶液が濃縮及び／又は濾過される、実施形態１に記載の生成物。
【００７１】
実施形態３: (d)の溶液が濃縮及び／又は濾過される、実施形態１又は２に記載の生成物。
【００７２】
実施形態４: (e)の溶液が濃縮及び／又は濾過される、実施形態１から３のいずれかに記載の生成物。
【００７３】
実施形態５: (c)及び／又は(f)の乾燥抽出物が粉砕される、実施形態１から４のいずれかに記載の生成物。
【００７４】
実施形態６: (c)の乾燥抽出物が、工程(d)の前に有機溶媒に再溶媒和され、任意選択で場合によっては濃縮され、及び／又は任意選択で場合によっては濾過及び乾燥され、任意選択で場合によっては粉砕される、実施形態１から５のいずれかに記載の生成物。
【００７５】
実施形態７: (a)の油状オオアザミ抽出物が、オオアザミ果実をコールドプレスすることによって得られる、実施形態１から６のいずれかに記載の生成物。
【００７６】
実施形態８: (a)の油状オオアザミ抽出物が、オオアザミ果実を有機溶媒で洗浄することによって得られる、実施形態１から６のいずれかに記載の生成物。
【００７７】
実施形態９: 溶媒が炭化水素溶媒である、実施形態８に記載の生成物。
【００７８】
実施形態１０: (a)の油状オオアザミ抽出物が、超臨界ガス又は超臨界流体で抽出することによって得られる、実施形態１から６のいずれかに記載の生成物。
【００７９】
実施形態１１: 抽出が超臨界二酸化炭素を用いて実施される、実施形態１０に記載の生成物。
【００８０】
実施形態１２: (a)の得られる油状オオアザミ抽出物が、未加工オオアザミ果実の5〜35質量%であり、その残りの65〜95%質量が脱脂されたオオアザミ果実である、実施形態１から１１のいずれかに記載の生成物。
【００８１】
実施形態１３: (b)の溶媒がアルコールである、実施形態１から１２のいずれかに記載の生成物。
【００８２】
実施形態１４: 溶媒がエタノールである、実施形態１３に記載の生成物。
【００８３】
実施形態１５: (c)の溶媒が、酢酸エチル、エタノール、メタノール、又はアセトンである、実施形態１から１４のいずれかに記載の生成物。
【００８４】
実施形態１６: (c)の溶媒が酢酸エチルである、実施形態１５に記載の生成物。
【００８５】
実施形態１７: (d)の溶媒がアルコールである、実施形態１から１６のいずれかに記載の生成物。
【００８６】
実施形態１８: 溶媒がエタノールである、実施形態１７に記載の生成物。
【００８７】
実施形態１９: (e)中の油状抽出物の量が0.5〜6.0質量%である、実施形態１から１８のいずれかに記載の生成物。
【００８８】
実施形態２０: (e)中の油状抽出物の量が1〜3質量%である、実施形態１９に記載の生成物。
【００８９】
実施形態２１: 91%以上のシリマリン放出率を有する、実施形態１から２０のいずれかに記載の生成物。
【００９０】
実施形態２２: オオアザミ抽出物及び油を含む、オオアザミ生成物。
【００９１】
実施形態２３: オオアザミ抽出物が、脱脂されたオオアザミ果実の溶媒で洗浄し、その後前記溶媒を除去することによって得られる、実施形態２２に記載のオオアザミ生成物。
【００９２】
実施形態２４: 脱脂されたオオアザミ果実が、コールドプレスすることによってオオアザミ油を除去することによって得られる、実施形態２２又は２３に記載のオオアザミ生成物。
【００９３】
実施形態２５: 前記の油が、植物性油、動物性油、鉱油、又はそれらの任意の組合せである、実施形態２２から２４のいずれかに記載のオオアザミ生成物。
【００９４】
実施形態２６: 油が、植物油、精油、ハーブ油、又はそれらの任意の組合せである、実施形態２２から２５のいずれかに記載のオオアザミ生成物。
【００９５】
実施形態２７: 油がオオアザミ油である、実施形態２２から２６のいずれかに記載のオオアザミ生成物。
【００９６】
実施形態２８: オオアザミ油が、オオアザミ果実を脱脂することによって得られる、実施形態２２から２７のいずれかに記載のオオアザミ生成物。
【００９７】
実施形態２９: 脱脂方法がコールドプレスである、実施形態２２から２８のいずれかに記載のオオアザミ生成物。
【００９８】
実施形態３０: オオアザミ抽出物が、脱脂されたオオアザミ果実を、酢酸エチル、エタノール、又はメタノールで洗浄し、その後前記溶媒を除去することによって得られる、実施形態２２から２９のいずれかに記載のオオアザミ生成物。
【００９９】
実施形態３１: 生成物が、オオアザミ油を溶媒和されたオオアザミ抽出物と混合し、すべての溶媒を除去することによって得られる、実施形態２２から３０のいずれかに記載のオオアザミ生成物。
【０１００】
実施形態３２:実施形態１から３１のいずれかに記載の生成物を治療有効量で含む医薬組成物。
【０１０１】
実施形態３３: 少なくとも1つの薬学的に許容される担体を含む、実施形態３２に記載の医薬組成物。
【０１０２】
実施形態３４: 医薬組成物が、錠剤、ドラジェ、カプセル剤、丸剤、顆粒剤、坐剤、液剤、シロップ剤、懸濁液、又はエマルションである、実施形態３２に記載の医薬組成物。
【０１０３】
実施形態３５: 実施形態１から３１のいずれかに記載の生成物を投与することによって、対象における肝臓、胃又は胆嚢の疾患を処置又は防止するための方法。
【０１０４】
実施形態３６: 肝臓疾患が、中毒性肝損傷、肝臓症、急性肝不全、肝壊死、肝ジストロフィー、肝硬変、肝線維症、肝腫大、脂肪肝変性、肝不全、及び肝炎である、実施形態３５に記載の肝臓疾患を処置又は防止するための方法。
【０１０５】
実施形態３７: 肝臓疾患が、肝蛭症、肝炎、線維症を伴う又は伴わない非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）、急性脂肪肝、脂肪性肝疾患（FLD）、非アルコール性脂肪性肝疾患（NAFLD）、アルコール性肝疾患、アラジール症候群、胆道閉鎖、ガラクトース血症、胆石、ヘモクロマトーシス、肝臓がん、リソソーム酸リパーゼ欠損症（LALD）、ポルフィリン症、アセトアミノフェン肝毒性、ライ症候群、サルコイドーシス、チロシン血症、ウィルソン病、ジルベール症候群、硬変症及び原発性硬化性胆管炎からなる群から選択される、実施形態３５に記載の方法。
【０１０６】
実施形態３８: 肝炎がC型肝炎である、実施形態３６に記載の方法。
【０１０７】
実施形態３９: 肝臓疾患が非アルコール性脂肪性肝疾患である、実施形態３７に記載の方法。
【０１０８】
実施形態４０: 90%以上のシリマリン放出率を有するオオアザミ果実抽出物を調製するための方法であって、
(a) オオアザミ果実を脱脂することによって得られる油状オオアザミ抽出物を用意する工程と、
(b) (a)の油状抽出物を有機溶媒に溶かして溶液を形成する工程と、
(c) 脱脂されたオオアザミ果実から更なる抽出物を得る工程であって、更なる抽出物が、脱脂されたオオアザミ果実を溶媒で洗浄し、その後前記溶媒を除去することによって得られる工程と、
(d) (c)の更なる抽出物を溶媒に溶かして溶液を形成する工程と、
(e) (f)の最終生成物中の(a)の油状抽出物の量が0.5〜10.0質量%になるように、(b)の溶液を(d)の溶液と混合して混合抽出物溶液を形成する工程と、
(f) (e)の混合抽出物溶液の溶媒を除去して固形物を得て、任意選択により場合によっては固形物を粉砕する工程と、
を含む、方法。
【０１０９】
実施形態４１: (b)の溶液が濃縮及び／又は濾過される、実施形態４０に記載の方法。
【０１１０】
実施形態４２: (d)の溶液が濃縮及び／又は濾過される、実施形態４０又は４１に記載の方法。
【０１１１】
実施形態４３: (e)の溶液が濃縮及び／又は濾過される、実施形態４０から４２のいずれかに記載の方法。
【０１１２】
実施形態４４: (c)及び／又は(f)の乾燥抽出物が粉砕される、実施形態４０から３２のいずれかに記載の方法。
【０１１３】
実施形態４５: (c)の乾燥抽出物が、工程(d)の前に有機溶媒中で再溶媒和され、任意選択により場合によっては濃縮され、及び／又は任意選択により場合によっては濾過及び乾燥され、任意選択により場合によっては粉砕される、実施形態４０から４４のいずれかに記載の方法。
【０１１４】
実施形態４６: (a)の油状オオアザミ抽出物が、オオアザミ果実をコールドプレスすることによって得られる、実施形態４０から４５のいずれかに記載の方法。
【０１１５】
実施形態４７: (a)の油状オオアザミ抽出物が、オオアザミ果実を有機溶媒で洗浄することによって得られる、実施形態４０から４５のいずれかに記載の方法。
【０１１６】
実施形態４８: 溶媒が炭化水素溶媒である、実施形態４７に記載の方法。
【０１１７】
実施形態４９: (a)の油状オオアザミ抽出物が、超臨界ガス若しくは超臨界流体で、又は超臨界ガス若しくは超臨界流体との組合せで抽出することによって得られる、実施形態４０から４５のいずれかに記載の方法。
【０１１８】
実施形態５０: :抽出が超臨界二酸化炭素を用いて実施される、実施形態４９に記載の方法。
【０１１９】
実施形態５１: (a)の得られる油状オオアザミ抽出物が、未加工オオアザミ果実の5〜35質量%であり、その残りの65〜95質量%が脱脂されたオオアザミ果実である、実施形態４０から５０のいずれかに記載の方法。
【０１２０】
実施形態５２: (b)の溶媒がアルコールである、実施形態４０から５１のいずれかに記載の方法。
【０１２１】
実施形態５３: 溶媒がエタノールである、実施形態５２に記載の方法。
【０１２２】
実施形態５４: (c)の溶媒が、酢酸エチル、エタノール、又はメタノールである、実施形態４０から５３のいずれかに記載の方法。
【０１２３】
実施形態５５: (c)の溶媒が酢酸エチルである、実施形態５４に記載の方法。
【０１２４】
実施形態５６: (d)の溶媒がアルコールである、実施形態４０から５５のいずれかに記載の方法。
【０１２５】
実施形態５７: 溶媒がエタノールである、実施形態５６に記載の方法。
【０１２６】
実施形態５８: (e)中の油状抽出物の量が0.5〜6.0質量%である、実施形態４０から５７のいずれかに記載の方法。
【０１２７】
実施形態５９: (e)中の油状抽出物の量が1〜3質量%である、実施形態５８に記載の方法。
【０１２８】
実施形態６０: 91%以上のシリマリン放出率を有する、実施形態４０から５９のいずれかに記載の生成物。
【０１２９】
実施形態６１: オオアザミ抽出物及び油を含む、強化されたオオアザミ抽出物を調製するための方法であって、前記油を前記オオアザミ抽出物に添加することによってシリマリン放出率が上昇する、方法。
【０１３０】
実施形態６２: 油が、植物、動物、又は石油化学供給源由来である、実施形態６１に記載の方法。
【０１３１】
実施形態６３: 油が植物由来である、実施形態６１又は６２に記載の方法。
【０１３２】
実施形態６４: 油が、果実、種子、又は葉由来である、実施形態６１から６３のいずれかに記載の方法。
【０１３３】
実施形態６５: 油がオオアザミ果実及び／又は種子由来である、実施形態６１から６４のいずれかに記載の方法。
【０１３４】
実施形態６６: 放出率が1.0%以上改善される、実施形態６１から６５のいずれかに記載の方法。
【０１３５】
実施形態６７: 放出率が5.0%以上改善される、実施形態６１から６６のいずれかに記載の方法。
【０１３６】
実施形態６８: 放出率が10.0%以上改善される、実施形態６１から６７のいずれかに記載の方法。
【０１３７】
実施形態６９: 放出率が20.0%以上改善される、実施形態６１から６８のいずれかに記載の方法。
【０１３８】
実施形態７０: 実施形態１から３１のいずれかに記載の生成物を含む栄養補助組成物。
【０１３９】
実施形態７１: 錠剤、ドラジェ、カプセル剤、丸剤、顆粒剤、液剤、シロップ剤、懸濁液又はエマルションである、実施形態７０に記載の栄養補助組成物。
【０１４０】
実施形態７２: 肝機能を変えるのに使用するための、実施形態７０又は７１に記載の栄養補助組成物。
【実施例】
【０１４１】
（実施例１）
オオアザミ生成物のシリマリン異性体の溶解を、欧州薬局方（Ph. Eur.）及び米国薬局方（USP）の要件に適合する溶解装置を使用して判定した。溶解装置はパドルの構造を有しており、溶解媒体はpH7.5の緩衝溶液（脱気済み）である。
【０１４２】
抽出物1を、上記の調製方法及び方法による生成物の段落（段落００３５）の工程に従い、工程(e)において工程(a)及び(b)の油状画分を添加することなく調製した。抽出物2を、上記の調製方法及び方法による生成物の段落（段落００３５）の工程(a)から(f)のすべてに従い調製した。
【０１４３】
【表１】
2020535132.tif 000003
【０１４４】
（実施例２）
抽出物2のガスクロマトグラフィー分析により、脂肪酸の含有量は3.8質量%であった。抽出物1のガスクロマトグラフィー分析により、脂肪酸の含有量は1.0質量%であった。
【０１４５】
本発明の好ましい実施形態を本明細書で示し記載したが、そのような実施形態が例のみとして提供されることは当業者には明白である。本発明から逸脱することなく、多数の変形形態、変更、及び置換が今や当業者に想到されるであろう。本発明を実施する上で、本明細書に記載される本発明の実施形態の様々な代替が採用され得ることを理解されたい。以下の特許請求の範囲が本発明の範囲を定義し、この特許請求の範囲内の方法及び構造並びにそれらの等価物がそれによって包含されることが意図される。
【０１４６】
（実施例３）
臨床試験１
シリマリン又はビタミン補助剤が投与されるように、参加者を無作為に割り当てる。参加者は、C型肝炎に感染した個体群（cohort）から募集され、補助剤を18カ月間毎日摂取し、測定は6カ月ごとに得る。210mgのシリマリンを含む錠剤を毎日1錠摂取する。評価する測定は以下を含む: 試験参加意識維持継続、試験アサインメントへのコンプライアンス、自己記述の症状、アラニンアミノトランスフェラーゼレベル、血清コラーゲンマーカー、腹部超音波検査、ウイルス負荷量及びクリアランス、並びに生活の質。
【０１４７】
臨床試験２
試験は二重盲検プラセボ対照試験である。400mgのシリマリンを含むシリマリン錠剤及び低用量ビタミン製剤（プラセボ）を毎日投与する4週間にわたる治療を比較し、計8週間のフォローアップ研究を行い、処置に対する反応を評価する。本発明者らの無作為化対照試験のアウトカムは、症状及び兆候の改善、肝機能の正常化、通常の活動を再開するまでの時間、及びウェルビーイングの感覚である。収集したばかりの血清を、抗HAV IgM、抗HBc Igm、抗HBs、HBs Ag、抗HCV抗体、HCV-RNA、抗HDV IgM、抗HEV IgM、CMV及びEBV、並びにアラニンアミノトランスフェラーゼ(ALT)、AST、直接及び総ビリルビンについて試験する。
【０１４８】
臨床試験３
本試験は、オープンラベルの無作為化用量設定試験である。3つの異なるIdB 1016用量：314mg、624mg、及び942mgを1日3回、に対応する3つの群が存在する。各グループは慢性C型肝炎と診断された15名の患者を有し、患者を線維化ステージII（門脈周囲線維症）5名、線維化ステージIII（架橋線維症）5名、及び線維化ステージIV（代償性肝硬変）5名に層別化する。処置期間は12週間である。患者に、処置終了後更に4週間フォローアップ研究を行い、測定したパラメーターの残留効果について評価する。患者は、-21日目（スクリーニング）、1日目（処置開始）、29日目、57日目、85日目（処置終了）、及び113日目（休薬後フォローアップ）に来院する。
【図１】
2020535132.tif 000004
【国際調査報告】
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2020535132.tif 000006
2020535132.tif 000007