(57)【要約】  本発明は、４−硫黄置換ポドフィロトキシン誘導体、その製造方法及び使用を開示する。本発明は、リジッドな芳香族複素環式化合物、４−トリフルオロメチルピリジル−２−メルカプタン、４−トリフルオロメチル−２−メルカプトピリミジン、４−フルオロベンゼンチオールなどを置換基としてポドフィロトキシンまたは４’−デメチルエピポドフィロトキシンのＣ環４位にそれぞれ導入することにより、抗腫瘍活性が明らかに向上し、毒性及び副作用が低減している式（Ｖ）のポドフィロトキシン系誘導体を得る。インビトロ腫瘍細胞活性阻害試験によって、本発明の式（Ｖ）に示す化合物は、ポドフィロトキシンまたは４’−デメチルエピポドフィロトキシンよりも抗腫瘍活性が明らかに向上していることが証明されている。2020534265.tif 000009  式（Ｖ）【選択図】なし
2020534265.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
2020534265.tif 000007
式（Ｖ）
［式中、Ｒ１は、
2020534265.tif 000008
から選ばれ、
Ｒ２は、水素または−ＣＨ３である］
の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項２】
求核置換反応により、反応性モノマーをポドフィロトキシンのＣ環４位に導入するかまたは４’−デメチルエピポドフィロトキシンのＣ環４位に導入するルステップを含み、前記反応性モノマーは、４−トリフルオロメチルピリジル−２−メルカプタン、４−トリフルオロメチル−２−メルカプトピリミジン、４−フルオロベンゼンチオール、５−フルオロベンゾチアゾリル−２−メルカプタン、５−フルオロベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−フェニルベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−メチルベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、６−クロロベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−ジフルオロメトキシベンゾイミダゾリル−２−メルカプタン、２−メルカプトナフタレン、１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジル−２−メルカプタン、１−フェニルテトラゾリル−５−メルカプタン、３−フェニル−１，３，４−チアジアゾリル−２（３Ｈ）チオンポタシオ−５−メルカプタンまたは４−（４−ピリジル）チアゾリル−２−メルカプタンであってもよいことを特徴とする請求項１に記載の化合物の製造方法。
【請求項３】
前記求核置換反応は、ポドフィロトキシンまたは４’−デメチルエピポドフィロトキシンを有機溶媒に溶解し、前記反応性モノマーを加えて攪拌するように行われ、前記有機溶媒は求核試薬であってもよく、前記求核試薬はトリフルオロ酢酸、メタンスルホニルクロリドまたはトリフルオロボラン・ジエチルエーテルから選ばれてもよいことを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項４】
ポドフィロトキシンまたは４’−デメチルエピポドフィロトキシンと前記反応性モノマーとのモル比は１：１〜１０であってもよく、例えば１：１〜８であり、さらには１：１であることを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記求核置換反応の温度は−２０〜４０℃であり、例えば−２０〜２０℃であることを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記求核置換反応の温度は−１０〜１０℃であり、例えば０〜１０℃であることを特徴とする請求項５に記載の方法。
【請求項７】
求核置換反応後、反応液を脱イオン水に注入し、析出させて濾過し、濾過ケーキを乾燥させることにより４−硫黄置換ポドフィロトキシン系誘導体の粗生成物を得るステップをさらに含み、前記脱イオン水の体積は求核置換後の反応液の体積の２０〜５０倍であってもよいことを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項８】
順にシリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して前記粗生成物を分離させることにより、精製された４−硫黄置換ポドフィロトキシン系誘導体生成物を得るステップをさらに含むことを特徴とする請求項７に記載の方法。
【請求項９】
抗腫瘍薬物を製造するための請求項１に記載の化合物またはその塩の使用。
【請求項１０】
有効量の請求項１に記載の化合物またはその塩と、薬学的に許容される担体とを含むことを特徴とする抗腫瘍医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ポドフィロトキシン系誘導体の分野に属し、より詳しく言えば、４−硫黄置換ポドフィロトキシン系誘導体及びその製造方法に関し、さらに、抗腫瘍薬物を製造するための当該４−硫黄置換ポドフィロトキシン系誘導体の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ポドフィロトキシン（Ｐｏｄｏｐｈｙｌｌｏｔｏｘｉｎ）及び４’−デメチルエピポドフィロトキシン（４’−Ｄｅｍｅｔｈｙｌｅｐｉｐｏｄｏｐｈｙｌｌｏｔｏｘｉｎ）の構造はそれぞれ図１の式（Ｉ）及び式（ＩＩ）に示すとおりである。ポドフィロトキシン及び４’−デメチルエピポドフィロトキシンはポドフィロトキシン系植物（例えば、メギ科植物ヒマラヤハッカクレン、サンカヨウ、ハッカクレンなど）から抽出された独特な抗腫瘍活性を有する天然活性リード化合物である。その強烈な毒性、副作用及び生物学的利用能の低さなどの欠点から、臨床上の使用が制限されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明の第１の目的は、良好な抗腫瘍活性を有する４−硫黄置換ポドフィロトキシン系誘導体を提供することである。
本発明の第２の目的は、前記４−硫黄置換ポドフィロトキシン系誘導体の製造方法を提供することである。
本発明の第３の目的は、前記４−硫黄置換ポドフィロトキシン系誘導体を臨床用抗腫瘍薬物の製造に使用することである。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明の上述した目的は、以下の技術的解決手段により達成される。
抗腫瘍活性を有する４−硫黄置換ポドフィロトキシン系誘導体またはその薬学的に許容される塩であって、前記ポドフィロトキシン系誘導体は、下記の式（Ｖ）に示す構造を有し、
2020534265.tif 000003
式（Ｖ）
ただし、Ｒ１は、
2020534265.tif 000004
から選ばれ、
Ｒ２は、水素または−ＣＨ３である。
【０００５】
本発明で使用される４−トリフルオロメチルピリジル−２−メルカプタン、４−トリフルオロメチル−２−メルカプトピリミジン、４−フルオロベンゼンチオール、５−フルオロベンゾチアゾリル−２−メルカプタン、５−フルオロベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−フェニルベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−メチルベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、６−クロロベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−ジフルオロメトキシベンゾイミダゾリル−２−メルカプタン、２−メルカプトナフタレン、１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジル−２−メルカプタン、１−フェニルテトラゾリル−５−メルカプタン、３−フェニル−１，３，４−チアジアゾリル−２（３Ｈ）チオンポタシオ−５−メルカプタン及び４−（４−ピリジル）チアゾリル−２−メルカプタンなどの化合物はリジッドな芳香族複素環式化合物である。図２に示すように、これらを置換基として用いることで、ポドフィロトキシン及び４’−デメチルエピポドフィロトキシンのＣ環４位にβ配置を形成しやすくなる。
【０００６】
本発明に係る上記の式（Ｖ）に示す化合物の製造方法は、
求核置換反応により、反応性モノマーをポドフィロトキシンのＣ環４位に導入するかまたは４’−デメチルエピポドフィロトキシンのＣ環４位に導入するステップを含み、前記反応性モノマーは、４−トリフルオロメチルピリジル−２−メルカプタン、４−トリフルオロメチル−２−メルカプトピリミジン、４−フルオロベンゼンチオール、５−フルオロベンゾチアゾリル−２−メルカプタン、５−フルオロベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−フェニルベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−メチルベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、６−クロロベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−ジフルオロメトキシベンゾイミダゾリル−２−メルカプタン、２−メルカプトナフタレン、１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジル−２−メルカプタン、１−フェニルテトラゾリル−５−メルカプタン、３−フェニル−１，３，４−チアジアゾリル−２（３Ｈ）チオンポタシオ−５−メルカプタンまたは４−（４−ピリジル）チアゾリル−２−メルカプタンであってもよい。
【０００７】
本発明において、前記求核置換反応は、ポドフィロトキシンまたは４’−デメチルエピポドフィロトキシンを有機溶媒に溶解し、前記反応性モノマーを加えて攪拌するように行われてもよく、前記有機溶媒は求核試薬であってもよく、前記求核試薬はトリフルオロ酢酸、メタンスルホニルクロリドまたはトリフルオロボラン・ジエチルエーテルから選ばれてもよい。
【０００８】
本発明において、前記求核置換反応で、ポドフィロトキシンまたは４’−デメチルエピポドフィロトキシンと前記反応性モノマーとのモル比は、１：１〜１０であってもよく、例えば１：１〜８であり、さらには１：１である。
【０００９】
本発明において、前記求核置換反応の温度は−２０〜４０℃であってもよく、例えば−２０〜２０℃である。
【００１０】
本発明において、さらに、前記求核置換反応の温度は−１０〜１０℃であってもよく、例えば０〜１０℃である。
【００１１】
上記製造方法は、求核置換反応後、反応液を脱イオン水に注入し、析出させて濾過し、濾過ケーキを乾燥させることにより４−硫黄置換ポドフィロトキシン系誘導体の粗生成物を得るステップをさらに含み、前記脱イオン水の体積は求核置換後の反応液の体積の２０〜５０倍であってもよい。
【００１２】
さらに、順にシリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して前記粗生成物を分離させることにより、精製された４−硫黄置換ポドフィロトキシン系誘導体生成物を得るステップを含む。
【００１３】
好ましくは、前記シリカゲルカラムクロマトグラフィー分離方法は、以下の（１）と、（２）とを含む。（１）シリカゲルカラムクロマトグラフィーには順相シリカゲルカラムクロマトグラフィーまたは逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィーを利用し、順相シリカゲルに低極性有機溶媒を加えて均一に攪拌してカラムに充填し、溶離剤で平衡化し、前記溶離剤は体積比４０：１のクロロホルムとアセトンとからなるのが好ましく、逆相シリカゲルにメタノールを加えて均一に攪拌してカラムに充填し、溶離剤で平衡化し、前記溶離剤は体積比６０：１のメタノールと水とからなるのが好ましい。（２）分離精製用の試料を溶離液で溶解し、ローディングして吸着させ、次に溶離剤で溶離し、溶離液を回収し、試料を自然乾燥させて再結晶を行う。
好ましくは、前記ゲルカラムクロマトグラフィー分離方法は、以下の（１）と、（２）とを含む。（１）メタノールでゲルを浸漬し、処理済みのゲルをカラムに充填し、メタノールで平衡化する。（２）シリカゲルカラムクロマトグラフィーによる一次分離後の試料をメタノールに溶解し、ローディングして吸着させ、次にメタノールで溶離し、溶離液を回収し、試料中の溶媒を完全に揮発させて再結晶を行う。
【発明の効果】
【００１４】
インビトロＨｅｐＧ２、ＨｅＬａ、ＨＬ−７７０２細胞活性阻害試験によって、本発明で製造された式（Ｖ）の化合物は、ポドフィロトキシンまたは４’−デメチルエピポドフィロトキシンよりも抗腫瘍活性が明らかに向上していることが証明されている。試験結果によって、本発明の式（Ｖ）に示す化合物から抗腫瘍薬物を製造することで、臨床で抗腫瘍治療に使用できることが示されている。
【００１５】
本発明に係る抗腫瘍医薬組成物は、有効量の式（Ｖ）に示す化合物またはその塩と、薬学的に許容される担体とを含み、即ち薬学的に許容される用量の式（Ｖ）の化合物と薬学的に許容される担体とを配合して、本分野の通常の製剤方法に従って任意のタイプの適当な医薬組成物を製造する。一般に、当該医薬組成物は経口投与及び注射投与に適し、経皮投与などその他の投与方法にも適する。当該医薬組成物は、錠剤、カプセル、粉剤、顆粒、トローチ剤、坐剤、経口液または無菌経腸懸濁液などの液体製剤の形態であってもよい。当該組成物は高容量または低容量の注射剤、凍結乾燥粉末注射剤、無菌粉末再包装などの製剤形態であってもよい。なお、投与の一致性のために、本発明の医薬組成物は単剤形態が好ましい。経口投与用の単剤形態は錠剤とカプセルであってもよく、さらに、シロップ、アラビアガム、ゼラチン、ソルビトール、トラガカントゴムまたはポリビニルピロリドンなどの粘着剤、ラクトース、砂糖、コーンスターチ、リン酸カルシウム、ソルビトールまたはグリシンなどの充填剤、ステアリン酸マグネシウムなどの打錠潤滑剤、デンプン、ポリビニルピロリドン、デンプングリコール酸ナトリウムまたは微結晶セルロースなどの崩壊剤、またはドデシル硫酸ナトリウムなどの薬学的に許容される湿潤剤など通常の添加剤を含むことができる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１は、ポドフィロトキシン及び４’−デメチルエピポドフィロトキシンの構造式である。
【図２】図２は、４−トリフルオロメチルピリジル−２−メルカプタン、４−トリフルオロメチル−２−メルカプトピリミジン、４−フルオロベンゼンチオール、５−フルオロベンゾチアゾリル−２−メルカプタン、５−フルオロベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−フェニルベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−メチルベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、６−クロロベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−ジフルオロメトキシベンゾイミダゾリル−２−メルカプタン、２−メルカプトナフタレン、１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジル−２−メルカプタン、１−フェニルテトラゾリル−５−メルカプタン、３−フェニル−１，３，４−チアジアゾリル−２（３Ｈ）チオンポタシオ−５−メルカプタン、４−（４−ピリジル）チアゾリル−２−メルカプタンの構造式である。
【図３】図３は、本発明に係る式（Ｖ）の化合物の構造式である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、具体的な実施例を用いて本発明の技術的解決手段をさらに説明する。
【００１８】
本発明で使用される材料及び装置は、特記がない限り、いずれも市販品または本技術分野で通常使用されるものである。実施例に記載の方法は、特記がない限り、いずれも本技術分野の通常方法である。
【００１９】
試験材料：
１．ポドフィロトキシン及び４’−デメチルエピポドフィロトキシン：いずれも西安和霖生物工程有限公司から購入した。
２．  ４−トリフルオロメチルピリジル−２−メルカプタン、４−トリフルオロメチル−２−メルカプトピリミジン、４−フルオロベンゼンチオール、５−フルオロベンゾチアゾリル−２−メルカプタン、５−フルオロベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−フェニルベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−メチルベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、６−クロロベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−ジフルオロメトキシベンゾイミダゾリル−２−メルカプタン、２−メルカプトナフタレン、１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジル−２−メルカプタン、１−フェニルテトラゾリル−５−メルカプタン、３−フェニル−１，３，４−チアジアゾリル−２（３Ｈ）チオンポタシオ−５−メルカプタン、４−（４−ピリジル）チアゾリル−２−メルカプタン：いずれもアラジン社から購入した。
【００２０】
実施例１：４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリジル−２）−ポドフィロトキシン（化合物１）の合成及び精製
（１）４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリジル−２）−ポドフィロトキシンの合成：
ポドフィロトキシン４１４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、４−トリフルオロメチルピリジル−２−メルカプタン１７９ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍｌを溶媒として、常圧下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリジル−２）−ポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して以下のとおりに分離及び精製を行った。
（Ａ）順相シリカゲルカラム（順相シリカゲル：中国青島海洋化工有限公司製、ＨＧ／Ｔ２３５４−９２；分離システム：スイスビュッヒ（Ｂｕｃｈｉ）社製アイソメトリック高速液体クロマトグラフィーシステム：カラム：スイスビュッヒ（Ｂｕｃｈｉ）社製ガラスカラムＣ−６９０、長さ４６０ｍｍ、内径１５ｍｍ）または類似極性のカラムを利用して分離させた。クロロホルムとアセトン（４０：１）系を溶離液とし、ローディング量を２ｍｌとし、１．０ｍｌ／ｍｉｎの一定流速として、溶離液２ｍｌが得られるたびにフラクションとして回収した。順相シリカゲル薄層（独メルク社製高速シリカゲル薄層）または類似極性の薄層を利用して各フラクションを検証した。クロロホルムとアセトン（２：１）系を展開溶媒として使用し、Ｒｆ値０．５のフラクションを合併し、合併された試料を真空下で乾燥させ、暗所条件で４℃の冷蔵庫に保存して精製された試料とした。
（Ｂ）ゲルカラムクロマトグラフィー（ゲル：Ｓｅｐｈａｄｅｘ（セファデックス）ＬＨ−２０；分離カラム：ガラスカラム、長さ４８０ｍｍ、内径３０ｍｍ）を利用して分離させた。処理済みのＳｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０ゲルをカラムに湿式充填し、メタノールで平衡化した。精製された試料をメタノール６ｍｌに溶解し、０．６ｍｌ／ｍｉｎの流速でローディングして吸着させ、次にメタノール６００ｍｌを使用して０．６ｍｌ／ｍｉｎの流速で溶離し、溶離液１０ｍｌが得られるたびに容器に回収して、順相シリカゲル薄層（ドイツメルク社製高速シリカゲル薄層）または類似極性の薄層を利用して各フラクションを検証した。クロロホルムとアセトン（２：１）系を展開溶媒として使用し、Ｒｆ値０．５のフラクションを合併し、真空下で乾燥させることにより、白色の粉末状の４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリジル−２）−ポドフィロトキシン試料を得た。
【００２１】
化合物１：４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリジル−２）−ポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２８Ｈ２４Ｆ３ＮＯ７Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．６５（ｓ，１Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），６．９０（ｓ，１Ｈ），６．４７（ｓ，１Ｈ），６．３２（ｓ，１Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９４（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，１Ｈ），５．５７（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６０（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），４．４０−３．８１（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．７６（ｓ，６Ｈ），３．３０−３．３３（ｍ，１Ｈ），３．１７（ｄｄ，Ｊ＝１３．８，５．２Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．４０，１６２．７８，１５２．４８（２Ｃ），１４８．０６，１４７．３１，１４６．０７，１３７．１１，１３５．３８，１３３．０６，１３２．４７，１２７．５５，１２３．４５（ｑ，Ｊ＝２０２．５Ｈｚ），１２３．３５，１２１．１５，１０９．８８（２Ｃ），１０８．２０（２Ｃ），１０１．４８，７０．６８，６０．６７，５６．１７（２Ｃ），５３．３５，４６．２１，４３．６４，４２．４８．ＭＳ−ＥＳＩ：５７６．１３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００２２】
実施例２：４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリジル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（化合物２）の合成及び精製
（１）４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリジル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成：４’−デメチルエピポドフィロトキシン４００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、４−トリフルオロメチルピリジル−２−メルカプタン１７９ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍｌを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリジル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００２３】
化合物２：４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリジル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２７Ｈ２２Ｆ３ＮＯ７Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．８０（ｄ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），６．９３（ｓ，１Ｈ），６．４８（ｓ，１Ｈ），６．３３（ｓ，２Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９５（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），５．３９（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），４．４０−３．８２（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．３−３．２８（ｍ，１Ｈ），３．２２（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．１Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．１３，１７２．８５，１５９．７８，１５２．５１，１４８．２５，１４７．４０，１３７．２５，１３５．３０，１３２．５９，１２６．６７，１２０．３５（ｄ，Ｊ＝２２１．２Ｈｚ），１１２．６３，１１０．０２，１０８．３６，１０１．５４，７０．３０，６０．６６，５６．２４，４７．７２，４３．６２，４２．３１，３６．８６．ＭＳ−ＥＳＩ：５７７．１２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００２４】
実施例３：４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリミジニル−２）−ポドフィロトキシン（化合物３）の合成及び精製
（１）４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリミジニル−２）−ポドフィロトキシンの合成：ポドフィロトキシン４１４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、４−（トリフルオロメチル）−２−メルカプトピリミジン１４７２ｍｇ（８ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍｌを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリミジニル−２）−ポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００２５】
化合物３：４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリミジニル−２）−ポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２７Ｈ２３Ｆ３Ｎ２Ｏ７Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．８０（ｄ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），６．９３（ｓ，１Ｈ），６．４８（ｓ，１Ｈ），６．３３（ｓ，２Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９５（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），５．３９（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），４．４０−３．８２（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．３−３．２８（ｍ，１Ｈ），３．２２（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．１Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．１３，１７２．８５，１５９．７８，１５２．５１（２Ｃ），１４８．２５，１４７．４０，１３７．２５，１３５．３０，１３２．５９，１２６．６７，１２０．３５（ｑ，Ｊ＝２２１．２Ｈｚ），１１２．６３，１１０．０２（２Ｃ）１０８．３６（２Ｃ），１０１．５４，７０．３０，６０．６６，５６．２４（２Ｃ），４７．７２，４３．６２，４２．３１，３６．８６．ＭＳ−ＥＳＩ：５６３．１１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００２６】
実施例４：４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリミジニル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（化合物４）の合成及び精製
（１）４−β−Ｓ−（５−トリフルオロメチルピリミジニル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成：４’−デメチルエピポドフィロトキシン４００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、４−（トリフルオロメチル）−２−メルカプトピリミジン１８０ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍｌを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリミジニル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００２７】
化合物４：４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリミジニル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２６Ｈ２１Ｆ３Ｎ２Ｏ７Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．８２（ｄ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４０（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｓ，１Ｈ），６．４９（ｓ，１Ｈ），６．３５（ｓ，２Ｈ），５．９９（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），５．４８（ｓ，１Ｈ），５．３９（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６２（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），４．４３−３．８２（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｓ，６Ｈ），３．３５−３．２５（ｍ，１Ｈ），３．２１（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．１Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．２０，１７２．８７，１５９．７７，１４８．２４，１４７．３５，１４６．３６（２Ｃ），１３４．１２，１３２．８６，１３２．７８，１３０．８０，１２６．６８，１１９．８８（ｑ，Ｊ＝２０５．５Ｈｚ），１１２．６２，１１０．１３，１０９．９８，１０８．０２（２Ｃ），１０１．５１，７０．２８，５６．４５（２Ｃ），４７．７３，４３．４６，４２．４１，３６．７９．ＭＳ−ＥＳＩ：５２５．１３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００２８】
実施例５：４β−Ｓ−（４−フルオロフェニル−１）−ポドフィロトキシン（化合物５）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（４−フルオロフェニル−１）−ポドフィロトキシンの合成：ポドフィロトキシン４１４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、４−フルオロベンゼンチオール１２７ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、−１０℃でトリフルオロ酢酸１５ｍｌを溶媒として、常圧下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（４−フルオロフェニル−１）−ポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００２９】
化合物５：４β−Ｓ−（４−フルオロフェニル−１）−ポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２８Ｈ２５ＦＯ７Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３４−７．２９ｍ，１Ｈ），７．１０−７．０４（ｍ，２Ｈ），６．９５−６．９２（ｍ，１Ｈ），６．９４（ｓ，１Ｈ），６．４６（ｓ，１Ｈ），６．２７（ｓ，２Ｈ），５．９８（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），５．９６（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），４．８５（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．５８（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），４．１８−４．０９（ｍ，２Ｈ），３．７８（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｓ，６Ｈ）３．３３（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．１Ｈｚ，１Ｈ），３．２４−３．２１（ｍ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．２６，１６２．９３（ｄ，１Ｊ＝２４８Ｈｚ），１５２．５４（２Ｃ），１４８．１５，１４７．３２，１３８．３５（ｄ，３Ｊ＝５Ｈｚ），１３７．２２，１３５．３９，１３２．０７，１３０．８５，１２７．９０，１２４．２２，１１５．５５（ｄ，２Ｊ＝２３Ｈｚ），１１４．０１（ｄ，２Ｊ＝１９Ｈｚ），１０９．９７（２Ｃ），１０８．２４（２Ｃ），１０１．５７，６９．４０，６０．３７，５６．２２（２Ｃ），４９．３７，４３．５６，４１．８８，３７．７３．ＭＳ−ＥＳＩ：５２５．１３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００３０】
実施例６：４β−Ｓ−（４−フルオロフェニル−１）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（化合物６）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（４−フルオロフェニル−１）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成：４’−デメチルエピポドフィロトキシン４００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、４−フルオロベンゼンチオール１２７ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、１５℃でトリフルオロ酢酸１５ｍｌを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（４−フルオロフェニル−１）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００３１】
化合物６：４β−Ｓ−（４−フルオロフェニル−１）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２７Ｈ２３ＦＯ７Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３０（ｔｄ，Ｊ＝８．１，６．０Ｈｚ，１Ｈ），７．１３−７．０３（ｍ，２Ｈ），６．９７−６．９２（ｍ，１Ｈ），６．９３（ｓ，１Ｈ），６．４６（ｓ，１Ｈ），６．２９（ｓ，２Ｈ），５．９８（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），５．９５（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），５．４２（ｓ，１Ｈ），４．８４（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．５７（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），４．１７−４．１５（ｍ，２Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．３２（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．１Ｈｚ，１Ｈ），３．２７−３．１５（ｍ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．３６，１６２．８３（ｄ，１Ｊ＝２４９Ｈｚ），１４８．１５，１４７．２９，１４６．３９（２Ｃ），１３８．３９（ｄ，３Ｊ＝８Ｈｚ），１３４．０９，１３２．２６，１３０．８，１３０．７，１２７．９３，１２４．２５，１１５．５（ｄ，２Ｊ＝２３Ｈｚ），１１４．０５（ｄ，２Ｊ＝２１Ｈｚ），１１０．０，１０９．９７，１０７．９３（２Ｃ），１０１．５８，６９．４３，５６．４６（２Ｃ），４９．４１，４３．４５，４２．０３，３７．７３．ＭＳ−ＥＳＩ：５１１．１４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００３２】
実施例７：４β−Ｓ−（５−フルオロベンゾチアゾリル−２）−ポドフィロトキシン（化合物７）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（５−フルオロベンゾチアゾリル−２）−ポドフィロトキシンの合成：ポドフィロトキシン４１４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、５−フルオロベンゾチアゾリル−２−メルカプタン１８４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、４℃でトリフルオロ酢酸１５ｍｌを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（５−フルオロベンゾチアゾリル−２）−ポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００３３】
化合物７：４β−Ｓ−（５−フルオロベンゾチアゾリル−２）−ポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２９Ｈ２４ＦＮＯ７Ｓ２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．７６（ｄｄ，Ｊ＝８．９，４．７Ｈｚ，１Ｈ），７．４５（ｄｄ，Ｊ＝７．９，２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．１５（ｔｄ，Ｊ＝８．９，２．５Ｈｚ，１Ｈ），６．９８（ｓ，１Ｈ），６．４７（ｓ，１Ｈ），６．３２（ｓ，２Ｈ），５．９６（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，１Ｈ），５．９４（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，１Ｈ），５．７０（ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，１Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．４４−３．９７（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），３．７５（ｓ，６Ｈ），３．４３−３．２７（ｍ，１Ｈ），３．１８（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．２Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．２７，１６４．８６（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ），１６１．２５，１５８．８１，１５２．５８，１４９．２７（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ），１４８．４７，１４７．５１，１３７．２３，１３６．１５（ｄ，Ｊ＝１１．１Ｈｚ），１３５．２６，１３２．７０，１２６．７９，１２２．１７（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ），１１４．８１，１１４．５６，１１０．０４（ｄ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ），１０８．２７，１０７．９２，１０７．６５，１０１．６８，７０．７３，６０．７４，５６．２５，４９．８６，４３．６９，４２．５５，３７．１１．ＭＳ−ＥＳＩ：５８２．１５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００３４】
実施例８：４β−Ｓ−（５−フルオロベンゾチアゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（化合物８）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（５−フルオロベンゾチアゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成：４’−デメチルエピポドフィロトキシン４００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、５−フルオロベンゾチアゾリル−２−メルカプタン１８４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍｌを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（５−フルオロベンゾチアゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００３５】
化合物８：４β−Ｓ−（５−フルオロベンゾチアゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２８Ｈ２２ＦＮＯ７Ｓ２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．７７（ｄｄ，Ｊ＝８．９，４．７Ｈｚ，１Ｈ），７．４６（ｄｄ，Ｊ＝８．０，２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．１７（ｔｄ，Ｊ＝８．９，２．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９８（ｓ，１Ｈ），６．４８（ｓ，１Ｈ），６．３２（ｓ，２Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９５（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．７１（ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，１Ｈ），５．５０（ｓ，１Ｈ），４．６０（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），４．４３−３．８８（ｍ，２Ｈ），３．７８（ｓ，６Ｈ），３．４２−３．２８（ｍ，１Ｈ），３．１７（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．２Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．３１，１６４．９０（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ），１６１．２７，１５８．８２，１４９．３０，１４８．４６，１４７．４６，１４６．４５，１３６．１６（ｄ，Ｊ＝１１．１Ｈｚ），１３４．１５，１３２．９１，１３０．７２，１２６．８１，１２２．１７（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ），１１４．８１，１１４．５７，１１０．０３（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ），１０７．９４（ｄ，Ｊ＝４．７Ｈｚ），１０７．６５，１０１．６５，７０．７０，５６．４８，４９．８７，４３．５３，４２．６６，３７．０４．ＭＳ−ＥＳＩ：５６８．７５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００３６】
実施例９：４β−Ｓ−（５−フルオロベンゾオキサゾリル−２）−ポドフィロトキシン（化合物９）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（５−フルオロベンゾオキサゾリル−２）−ポドフィロトキシンの合成：ポドフィロトキシン４１４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、５−フルオロベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン１６９ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍｌを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（５−フルオロベンゾオキサゾリル−２）−ポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００３７】
化合物９：４β−Ｓ−（５−フルオロベンゾオキサゾリル−２）−ポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２９Ｈ２４ＦＮＯ８Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４０（ｄｄ，Ｊ＝８．９，４．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｄｄ，Ｊ＝８．１，２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．０３（ｄｄ，Ｊ＝９．１，２．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９９（ｓ，１Ｈ），６．５０（ｓ，１Ｈ），６．３１（ｓ，２Ｈ），５．９９（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９８（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．５５（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６３（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．５０（ｄｄ，Ｊ＝９．１，７．４Ｈｚ，１Ｈ），３．９５（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，９．３Ｈｚ，１Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．４３−３．３３（ｍ，１Ｈ），３．１７（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．２Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７３．９９，１６５．７０，１５８．９２，１５５．０３，１４８．６７，１４８．１３，１４７．５９，１４６．４６，１４２．０８，１３４．１８，１３２．９１，１３０．５２，１２６．３１，１１２．０７，１１１．８１，１１０．４１，１１０．０２，１０７．８９，１０５．４０，１０５．１４，１０１．７３，７０．３２，６０．７６，５６．２５，４９．９２，４３．６９，４２．４５，３６．８９，２９．６９．ＭＳ−ＥＳＩ：５６６．２５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００３８】
実施例１０：４β−Ｓ−（５−フルオロベンゾオキサゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（化合物１０）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（５−フルオロベンゾオキサゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成：４’−デメチルエピポドフィロトキシン４００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、５−フルオロベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン１６９ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍｌを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（５−フルオロベンゾオキサゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００３９】
化合物１０：４β−Ｓ−（５−フルオロベンゾオキサゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２８Ｈ２２ＦＮＯ８Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４０（ｄｄ，Ｊ＝８．９，４．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｄｄ，Ｊ＝８．２，２．５Ｈｚ，１Ｈ），７．０２（ｄｄ，Ｊ＝９．１，２．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９９（ｓ，１Ｈ），６．５０（ｓ，１Ｈ），６．３１（ｓ，２Ｈ），５．９９（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．５５（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），５．４４（ｓ，１Ｈ），４．６２（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．４８（ｄｄ，Ｊ＝９．１，７．４Ｈｚ，１Ｈ），３．９５（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，９．３Ｈｚ，１Ｈ），３．７９（ｓ，６Ｈ），３．４３−３．３１（ｍ，１Ｈ），３．１７（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．２Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７３．９９，１６５．７０，１５８．９２，１５５．０３，１４８．６７，１４８．１３，１４７．５９，１４６．４６，１４２．０８，１３４．１８，１３２．９１，１３０．５２，１２６．３１，１１２．０７，１１１．８１，１１０．４１，１１０．０２，１０７．８９，１０５．４０，１０５．１４，１０１．７３，７０．３０，５６．４６，４９．９２，４３．５３，４２．５６，３６．８２．ＭＳ−ＥＳＩ：５５２．６８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００４０】
実施例１１：４β−Ｓ−（５−フェニルベンゾオキサゾリル−２）−ポドフィロトキシン（化合物１１）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（５−フェニルベンゾオキサゾリル−２）−ポドフィロトキシンの合成：ポドフィロトキシン４１４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、５−フェニルベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン１８１６ｍｇ（８ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、−１０℃でトリフルオロ酢酸１５ｍＬを溶媒として、常圧下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（５−フェニルベンゾオキサゾリル−２）−ポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００４１】
化合物１１：４β−Ｓ−（５−フェニルベンゾオキサゾリル−２）−ポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ３５Ｈ２９ＦＮＯ８Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．７８（ｔ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６１−７．５７（ｍ，２Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），７．４１−７．３４（ｍ，１Ｈ），７．０２（ｓ，１Ｈ），６．５０（ｓ，１Ｈ），６．３２（ｓ，２Ｈ），５．９９（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，１Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．６０（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６３（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．５５−３．９８（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．４６−３．３４（ｍ，１Ｈ），３．２１（ｄｄ，Ｊ＝１３．８，５．２Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．０１，１６４．３２，１５２．６４，１５１．３５，１４８．６４，１４７．６２，１４１．９０，１４０．７３，１３８．６６，１３７．２８，１３５．１０，１３２．７２，１２８．９１，１２７．４１，１２６．４５，１２４．１０，１１６．９７，１１０．２９，１０９．９１，１０８．２２，１０１．７４，７０．４２，６０．７７，５６．２５，４９．８３，４３．７１，４２．４６，３６．９５．ＭＳ−ＥＳＩ：６６４．６１［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【００４２】
実施例１２：４β−Ｓ−（５−フェニルベンゾオキサゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（化合物１２）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（５−フェニルベンゾオキサゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成：４’−デメチルエピポドフィロトキシン４００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、５−フェニルベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン２２７ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、２０℃でトリフルオロ酢酸１５ｍＬを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（５−フェニルベンゾオキサゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００４３】
化合物１２：４β−Ｓ−（５−フェニルベンゾオキサゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ３４Ｈ２７ＦＮＯ８Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．７８（ｔ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６１−７．５７（ｍ，２Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，２Ｈ），７．４６（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），７．４１−７．３４（ｍ，１Ｈ），７．０２（ｓ，１Ｈ），６．５０（ｓ，１Ｈ），６．３２（ｓ，２Ｈ），５．９９（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，１Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．６０（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６３（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．５５−３．９８（ｍ，２Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．４６−３．３４（ｍ，１Ｈ），３．２１（ｄｄ，Ｊ＝１３．８，５．２Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．０１，１６４．３２，１５２．６４，１５１．３５，１４８．６４，１４７．６２，１４１．９０，１４０．７３，１３８．６６，１３７．２８，１３５．１０，１３２．７２，１２８．９１，１２７．４１，１２６．４５，１２４．１０，１１６．９７，１１０．２９，１０９．９１，１０８．２２，１０１．７４，７０．４２，６０．７７，５６．２５，４９．８３，４３．７１，４２．４６，３６．９５．ＭＳ−ＥＳＩ：６６４．６１［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【００４４】
実施例１３：４β−Ｓ−（５−メチルベンゾオキサゾリル−２）−ポドフィロトキシン（化合物１３）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（５−メチルベンゾオキサゾリル−２）−ポドフィロトキシンの合成：ポドフィロトキシン４１４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、５−メチルベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン１３２０ｍｇ（８ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、−１０℃でトリフルオロ酢酸１５ｍＬを溶媒として、常圧下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（５−メチルベンゾオキサゾリル−２）−ポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００４５】
化合物１３：４β−Ｓ−（５−メチルベンゾオキサゾリル−２）−ポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ３０Ｈ２７ＦＮＯ８Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．３９−７．２７（ｍ，２Ｈ），７．０９（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１．１Ｈｚ，１Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），６．４８（ｓ，１Ｈ），６．３１（ｓ，２Ｈ），５．９８（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９６（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．５６（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．５−３．９６（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．７６（ｓ，６Ｈ），３．４３−３．３０（ｍ，１Ｈ），３．１９（ｄｄ，Ｊ＝１３．８，５．２Ｈｚ，１Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．０２，１６３．５４，１５２．６２，１５０．０６，１４８．５９，１４７．５８，１４１．４４，１３７．３２，１３５．１３，１３４．５８，１３２．６８，１２６．５６，１２５．５１，１１８．４８，１１０．０４，１０９．５３，１０８．２７，１０１．７０，７０．３９，６０．７４，５６．２４，４９．６３，４３．７１，４２．４１，３６．９４．ＭＳ−ＥＳＩ：５６２．１５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００４６】
実施例１４：４β−Ｓ−（５−メチルベンゾオキサゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（化合物１４）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（５−メチルベンゾオキサゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成：４’−デメチルエピポドフィロトキシン４００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、５−メチルベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン１６５ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍＬを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（５−メチルベンゾオキサゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００４７】
化合物１４：４β−Ｓ−（５−メチルベンゾオキサゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２９Ｈ２５ＦＮＯ８Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．４１−７．２９（ｍ，２Ｈ），７．１０（ｄｄ，Ｊ＝８．３，１．５Ｈｚ，１Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），６．４９（ｓ，１Ｈ），６．３２（ｓ，２Ｈ），５．９９（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．５６（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），５．４４（ｓ，１Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），４．４９−３．９３（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｓ，６Ｈ），３．４５−３．２８（ｍ，１Ｈ），３．１８（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．２Ｈｚ，１Ｈ），２．４６（ｓ，３Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．０９，１６３．５８，１５２．３４，１５０．０６，１４８．５８，１４７．５４，１４６．４６，１４１．４４，１３４．５９，１３４．１６，１３２．８６，１３０．６３，１２６．５７，１２５．５１，１１８．４８，１１０．０３，１０９．５３，１０７．９１，１０１．６７，７０．３７，５６．４６，４９．６４，４３．５５，４２．５３，３６．８７．ＭＳ−ＥＳＩ：５４８．３２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００４８】
実施例１５：４β−Ｓ−（６−クロロベンゾオキサゾリル−２）−ポドフィロトキシン（化合物１５）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（６−クロロベンゾオキサゾリル−２）−ポドフィロトキシンの合成：ポドフィロトキシン４１４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、６−クロロベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン２０１ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍＬを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（６−クロロベンゾオキサゾリル−２）−ポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００４９】
化合物１５：４β−Ｓ−（６−クロロベンゾオキサゾリル−２）−ポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２９Ｈ２４ＣｌＮＯ７Ｓ２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．５３−７．４３（ｍ，２Ｈ），７．３０（ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．１Ｈｚ，１Ｈ），６．９９（ｓ，１Ｈ），６．４８（ｓ，１Ｈ），６．３０（ｓ，２Ｈ），５．９８（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９６（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．５３（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．４９（ｄｄ，Ｊ＝９．１，７．４Ｈｚ，１Ｈ），３．９５（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，９．３Ｈｚ，１Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．７５（ｓ，６Ｈ），３．４１−３．３２（ｍ，１Ｈ），３．１８（ｄｄ，Ｊ＝１３．８，５．２Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７３．８７，１６４．５４，１５２．６４，１５１．８９，１４８．６９，１４７．６４，１４０．０７，１３７．３７，１３５．０１，１３２．７４，１３０．２３，１２６．２８，１２５．３１，１１８．８６，１１０．８８，１１０．０３，１０８．２８，１０１．７４，７０．２９，６０．７４，５６．３０，５０．０２，４３．６８，４２．４４，３６．９０．ＭＳ−ＥＳＩ：５８３．１４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００５０】
実施例１６：４β−Ｓ−（６−クロロベンゾオキサゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（化合物１６）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（６−クロロベンゾオキサゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成：４’−デメチルエピポドフィロトキシン４００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、６−クロロベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン１４７２ｍｇ（８ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、−１０℃でトリフルオロ酢酸１５ｍＬを溶媒として、常圧下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（６−クロロベンゾオキサゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００５１】
化合物１６：４β−Ｓ−（６−クロロベンゾオキサゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２８Ｈ２２ＣｌＮＯ７Ｓ２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．５３−７．４２（ｍ，２Ｈ），７．３０（ｄｄ，Ｊ＝８．３，２．２Ｈｚ，１Ｈ），６．９９（ｓ，１Ｈ），６．４９（ｓ，１Ｈ），６．３１（ｓ，２Ｈ），５．９９（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．５３（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），５．４６（ｓ，１Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．４７（ｄｄ，Ｊ＝９．１，７．４Ｈｚ，１Ｈ），３．９５（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，９．３Ｈｚ，１Ｈ），３．７８（ｓ，６Ｈ），３．４４−３．２９（ｍ，１Ｈ），３．１７（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．２Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７３．９４，１６４．５８，１５１．８９，１４８．６９，１４７．６０，１４６．４９，１４０．０７，１３４．２３，１３２．９３，１３０．５２，１３０．２４，１２６．２９，１２５．３１，１１８．８６，１１０．８９，１１０．０２，１０７．９４，１０１．７２，７０．２７，５６．４４，５０．０３，４３．５３，４２．５５，３６．８３．ＭＳ−ＥＳＩ：５６９．２１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００５２】
実施例１７：４β−Ｓ−（５−ジフルオロメトキシベンゾイミダゾリル−２）−ポドフィロトキシン（化合物１７）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（５−ジフルオロメトキシベンゾイミダゾリル−２）−ポドフィロトキシンの合成：ポドフィロトキシン４１４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、５−ジフルオロメトキシベンゾイミダゾリル−２−メルカプタン２１６ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍＬを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（５−ジフルオロメトキシベンゾイミダゾリル−２）−ポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００５３】
化合物１７：４β−Ｓ−（５−ジフルオロメトキシベンゾイミダゾリル−２）−ポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ３０Ｈ２６Ｆ２Ｎ２Ｏ８Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ９．９７（ｄ，Ｊ＝２０．４Ｈｚ，１Ｈ）７．５６−７．５３，７．２６−７．２４（ｍ，１Ｈ），７．１１，７．３９（ｄｄ，１Ｈ），７．０３−６．９９（ｍ，１Ｈ），６．９９（ｓ，１Ｈ），６．６７−６．４８（ｍ，１Ｈ），６．４６（ｓ，１Ｈ），６．３０（ｓ，２Ｈ），５．９６（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，１Ｈ），５．９４（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，１Ｈ），５．７１（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ），４．６０（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．４３（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），３．９０（ｔ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，１Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．７３（ｓ，６Ｈ），３．４５−３．２９（ｍ，１Ｈ），３．２１（ｄｄ，Ｊ＝１３．８，５．２Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．８２，１５２．５１，１５０．９４，１５０．２０，１４８，．３７，１４７．４５，１４６．６３，１４３．７８，１４１．０９，１３６．９３，１３５．３１，１３４．９１，１３２．４０，１２７．１１，１１８．８８，１１８．４５，１１６．２９，１１６．２１，１１５．８９，１１５．１８，１１３．８９，１１０．５９，１１０．００，１０９．８４，１０９．４３，１０８．０３，１０２．４３，１０１．６２，７０．８０，６０．７２，５６．１２，５３．３８８，４８．７９，４３．６９，４２．５４，３６．９５．ＭＳ−ＥＳＩ：６３５．３４［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【００５４】
実施例１８：４β−Ｓ−（５−ジフルオロメトキシベンゾイミダゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（化合物１８）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（５−ジフルオロメトキシベンゾイミダゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成：４’−デメチルエピポドフィロトキシン４００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、５−ジフルオロメトキシベンゾイミダゾリル−２−メルカプタン２１６ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてメタンスルホニルクロリド１５ｍＬを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（５−ジフルオロメトキシベンゾイミダゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００５５】
化合物１８：４β−Ｓ−（５−ジフルオロメトキシベンゾイミダゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２９Ｈ２４Ｆ２Ｎ２Ｏ８Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１２．９１（ｓ，１Ｈ），８．３５（ｓ，１Ｈ），７．５８−７．５６，（ｍ，１Ｈ），７．４５−７．４３（ｍ，１Ｈ），７．１０（ｓ，１Ｈ），７．０２（ｓ，１Ｈ），６．９９（ｓ，１Ｈ），６．２０（ｓ，２Ｈ），５．７８（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，１Ｈ），５．７７（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，１Ｈ），５．６６（ｄ，Ｊ＝３．５Ｈｚ，１Ｈ），４．５５（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．４０−３．８６（ｍ，１Ｈ），３．６７（ｓ，６Ｈ），３．４５−３．２９（ｍ，１Ｈ），３．２１（ｄｄ，Ｊ＝１３．８，５．２Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．３８，１５１．９３，１５１．１３，１４７．８５，１４７．４８，１４６．９３，１４６．５８，１４４．１１，１４１．３２，１３５．８８，１３５．０３，１３３．３６，１３３．１５，１３０．７４，１２８．２２，１１８．４６，１１７．３１，１１４．７５，１１４．０７，１１１．５２，１１０．１９，１０９．８４，１０９．４０，１０８．７７，１０８．３９，１０２．０１，１０１．７７，７０．４２，５６．３２，４８．７３，４３．１２，４１．９５，３１．０４．ＭＳ−ＥＳＩ：６２１．１３［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【００５６】
実施例１９：４β−Ｓ−（ナフチル−２）−ポドフィロトキシン（化合物１９）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（ナフチル−２）−ポドフィロトキシンの合成：ポドフィロトキシン４１４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、２−メルカプトナフタレン１６０ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍＬを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（ナフチル−２）−ポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００５７】
化合物１９：４β−Ｓ−（ナフチル−２）−ポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ３２Ｈ２８Ｏ７Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．８６−７．６９（ｍ，４Ｈ），７．５７−７．４０（ｍ，３Ｈ），７．０３（ｓ，１Ｈ），６．４７（ｓ，１Ｈ），６．３１（ｓ，２Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９５（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），４．９７（ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，１Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．３９−４．０９（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），３．７５（ｓ，６Ｈ），３．４１（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．２Ｈｚ，１Ｈ），３．３１−３．１９（ｍ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．４９，１５２．５４，１４８．０５，１４７．３０，１３７．２０，１３５．５８，１３３．７０，１３３．３２，１３２．１０，１３２．０６，１２９．１８，１２８．５１，１２７．８２，１２７．４５，１２７．１１，１２７．０５，１２７．０４，１２６．３９，１１０．０６，１０８．３１，１０１．５６，６９．５８，６０．７５，５６．２６，４９．６４，４３．６８，４２．０１，３８．０１．ＭＳ−ＥＳＩ：５８６．１４［Ｍ＋Ｋ］＋。
【００５８】
実施例２０：４β−Ｓ−（ナフチル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（化合物２０）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（ナフチル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成：４’−デメチルエピポドフィロトキシン４００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、２−メルカプトナフタレン１６０ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてメタンスルホニルクロリド１５ｍＬを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（ナフチル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００５９】
化合物２０：４β−Ｓ−（ナフチル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ３１Ｈ２６Ｏ７Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．８２−７．７３（ｍ，４Ｈ），７．５８−７．３９（ｍ，３Ｈ），７．０３（ｓ，１Ｈ），６．４７（ｓ，１Ｈ），６．３２（ｓ，２Ｈ），５．９８（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，１Ｈ），５．９４（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，１Ｈ），５．４５（ｓ，１Ｈ），４．９６（ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，１Ｈ），４．５８（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．３３−４．１２（ｍ，２Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．４０（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．２Ｈｚ，１Ｈ），３．３０−３．１７（ｍ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．５７，１５２．７３，１４８．０４，１４７．２５，１４６．３９，１３４．０８，１３３．７０，１３３．３６，１３２．１５，１３２．１０  １３１．０６，１２９．１７，１２８．５３，１２７．８２，１２７．４６，１２７．１１，１２７．０４，１２６．３８，１１０．１２，１０９．９８，１０７．９９，１０１．５４，６９．５８，５６．４８，４９．６７，４３．５２，４２．１２，３７．９４．ＭＳ−ＥＳＩ：５９９．５２［Ｍ＋Ｋ］＋。
【００６０】
実施例２１：４β−Ｓ−（１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジル−２）−ポドフィロトキシン（化合物２１）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジル−２）−ポドフィロトキシンの合成：ポドフィロトキシン４１４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジル−２−メルカプタン１５１ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍＬを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジル−２）−ポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００６１】
化合物２１：４β−Ｓ−（１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジル−２）−ポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２８Ｈ２５Ｎ３Ｏ７Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．２３（ｓ，１Ｈ），８．０８（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．３０（ｓ，１Ｈ），６．９５（ｓ，１Ｈ），６．４７（ｓ，１Ｈ），６．３０（ｓ，２Ｈ），５．９８（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．７３（ｄ，Ｊ＝３．９Ｈｚ，１Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），４．４６−３．８５（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．７５（ｓ，６Ｈ），３．４４−３．２７（ｍ，１Ｈ），３．１５（ｄｄ，Ｊ＝１３．８，５．１Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７５．０８，１５９．３８，１５０．２２，１４８．５７，１４７．４８，１４７．２１，１３６．４５，１３４．５４，１３３．２０，１３２．４４，１３０．５８，１２６．７０，１２４．６２，１１７．７４，１０９．５３，１０９．４７，１０８．０４，１０１．６９，７０．５７，５５．３７，４９．１１，４３．３１，４２．１９，３７．１８．ＭＳ−ＥＳＩ：５７０．５３［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【００６２】
実施例２２：４β−Ｓ−（１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（化合物２２）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成：４’−デメチルエピポドフィロトキシン４００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジル−２−メルカプタン１５１ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍＬを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００６３】
化合物２２：４β−Ｓ−（１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２７Ｈ２３Ｎ３Ｏ７
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ８．３７（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），８．２２（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４８（ｄｄ，Ｊ＝８．０，５．７Ｈｚ，１Ｈ），７．０２（ｓ，１Ｈ），６．４７（ｓ，１Ｈ），６．３４（ｓ，２Ｈ），５．９９（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．７７（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），４．６０（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．５０−３．９３（ｍ，２Ｈ），３．７３（ｓ，６Ｈ），３．５１−３．３５（ｍ，１Ｈ），３．３３（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．２Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ１７５．０８，１５９．３８，１５０．２２，１４８．５７，１４７．４８，１４７．２１，１３６．４５，１３４．５４，１３３．２０，１３２．４４，１３０．５８，１２６．７０，１２４．６２，１１７．７４，１０９．５３，１０９．４７，１０８．０４，１０１．６９，７０．５７，５５．３７，４９．１１，４３．３１，４２．１９，３７．１８．ＭＳ−ＥＳＩ：５５６．４１［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【００６４】
実施例２３：４β−Ｓ−（１−フェニルテトラゾリル−５）−ポドフィロトキシン（化合物２３）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（１−フェニルテトラゾリル−５）−ポドフィロトキシンの合成：ポドフィロトキシン４１４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、１−フェニルテトラゾリル−５−メルカプタン１７８ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロボラン・ジエチルエーテル１５ｍＬを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（１−フェニルテトラゾリル−５）−ポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００６５】
化合物２３：４β−Ｓ−（１−フェニルテトラゾリル−５）−ポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２９Ｈ２６Ｎ４Ｏ７Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．６３−７．４６（ｍ，５Ｈ），６．９２（ｓ，１Ｈ），６．４６（ｓ，１Ｈ），６．２７（ｓ，２Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９４（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，１Ｈ），５．７０（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．５８（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），４．５７−３．８１（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），３．７４（ｓ，６Ｈ），３．４６−３．３２（ｍ，１Ｈ），３．１５（ｄｄ，Ｊ＝１３．８，５．２Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７３．７８，１５３．４１，１５２．６５，１４８．８１，１４７．６２，１３７．２９，１３４．８０，１３３．２３，１３２．８６，１３０．４８，１２９．９９，１２６．０２，１２３．５７，１１０．０５，１０８．１０，１０１．８０，７６．７２，７０．４７，６０．７６，５６．１８，５１．００，４３．６４，４２．４３，３６．９０．ＭＳ−ＥＳＩ：５７５．１２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００６６】
実施例２４：４β−Ｓ−（１−フェニルテトラゾリル−５）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（化合物２４）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（１−フェニルテトラゾリル−５）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成：４’−デメチルエピポドフィロトキシン４００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、１−フェニルテトラゾリル−５−メルカプタン１７８ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍＬを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（１−フェニルテトラゾリル−５）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００６７】
化合物２４：４β−Ｓ−（１−フェニルテトラゾリル−５）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２８Ｈ２４Ｎ４Ｏ７Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．６０−７．５０（ｍ，５Ｈ），６．９２（ｓ，１Ｈ），６．４６（ｓ，１Ｈ），６．２７（ｓ，２Ｈ），５．９９（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９８（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．６９（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６２−４．４８（ｍ，２Ｈ），３．８４−３．７９（ｍ，１Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．４３−３．３２（ｍ，１Ｈ），３．１３（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．２Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７３．８５，１５３．４５，１４８．７９，１４７．５７，１４６．５０，１３４．２１，１３３．２５，１３３．０６，１３０．４７，１３０．３０，１２９．９９，１２６．０４，１２３．５９，１１０．０３，１０７．８０，１０１．７８，７７．０５，７６．７３，７０．４６，５６．４５，５１．０１，４３．４９，４２．５５，３６．８４．ＭＳ−ＥＳＩ：５６１．４１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００６８】
実施例２５：４β−Ｓ−（３−フェニル−１，３，４−チアジアゾリル−２（３Ｈ）チオンポタシオ−５）−ポドフィロトキシン（化合物２５）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（３−フェニル−１，３，４−チアジアゾリル−２（３Ｈ）チオンポタシオ−５）−ポドフィロトキシンの合成：ポドフィロトキシン４１４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、３−フェニル−１，３，４−チアジアゾリル−２（３Ｈ）チオンポタシオ−５−メルカプタン２６５ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロボラン・ジエチルエーテル１５ｍＬを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（３−フェニル−１，３，４−チアジアゾリル−２（３Ｈ）チオンポタシオ−５）−ポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００６９】
化合物２５：４β−Ｓ−（３−フェニル−１，３，４−チアジアゾリル−２（３Ｈ）チオンポタシオ−５）−ポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ３０Ｈ２７ＫＮ２Ｏ７Ｓ３
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．７０−７．６４（ｍ，２Ｈ），７．５５−７．４１（ｍ，３Ｈ），６．９４（ｓ，１Ｈ），６．４８（ｓ，１Ｈ），６．２５（ｓ，２Ｈ），５．９９（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９８（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．３２（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，１Ｈ），５．２８（ｓ，１Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），４．４７−４．０３（ｍ，２Ｈ），３．７８（ｓ，３Ｈ），３．７３（ｓ，６Ｈ），３．３１−３．１９（ｍ，１Ｈ），３．１４（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．１Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１８５．５５，１７３．６５，１５４．９７，１５２．６３，１４８．８３，１４７．６９，１３８．１５，１３７．３８，１３４．８５，１３２．９２，１２９．４５，１２９．２４，１２５．８１，１２５．７３，１１０．１２，１０９．９７，１０８．２５，１０１．８４，７０．２７，６０．７３，５６．３０，５０．２２，４３．５５，４２．４５，３６．９４．ＭＳ−ＥＳＩ：６８１．１３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７０】
実施例２６：４β−Ｓ−（３−フェニル−１，３，４−チアジアゾリル−２（３Ｈ）チオンポタシオ−５）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（化合物２６）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（３−フェニル−１，３，４−チアジアゾリル−２（３Ｈ）チオンポタシオ−５）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成：４’−デメチルエピポドフィロトキシン４００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、３−フェニル−１，３，４−チアジアゾリル−２（３Ｈ）チオンポタシオ−５−メルカプタン２６５ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍＬを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（３−フェニル−１，３，４−チアジアゾリル−２（３Ｈ）チオンポタシオ−５）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの分離及び精製：シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００７１】
化合物２６：４β−Ｓ−（３−フェニル−１，３，４−チアジアゾリル−２（３Ｈ）チオンポタシオ−５）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２９Ｈ２５ＫＮ２Ｏ７Ｓ３
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．７２−７．６４（ｍ，２Ｈ），７．５５−７．４１（ｍ，３Ｈ），６．９３（ｓ，１Ｈ），６．４７（ｓ，１Ｈ），６．２６（ｓ，２Ｈ），５．９９（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９８（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．４４（ｓ，１Ｈ），５．３２（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，１Ｈ），５．２９（ｓ，１Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），４．４７−４．０３（ｍ，２Ｈ），３．７６（ｓ，６Ｈ），３．２９−３．１９（ｍ，１Ｈ），３．１２（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．１Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１８５．５７，１７３．７２，１５５．００，１４８．８２，１４７．６４，１４６．４５，１３８．１６，１３４．２５，１３３．１０，１３０．３４，１２９．４６，１２９．２５，１２５．７７，１１０．１３，１０９．９１，１０７．９１，１０１．８２，７０．２５，５６．５１，５０．２４，４３．３９，４２．５５，３６．８８．ＭＳ−ＥＳＩ：６６７．０１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７２】
実施例２７：４β−Ｓ−（４−（４−ピリジル）チアゾリル−２）−ポドフィロトキシン（化合物２７）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（４−（４−ピリジル）チアゾリル−２）−ポドフィロトキシンの合成：ポドフィロトキシン４１４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、４−（４−ピリジル）チアゾリル−２−メルカプタン１９４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍＬを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（４−（４−ピリジル）チアゾリル−２）−ポドフィロトキシンの分離及び精製：シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００７３】
化合物２７：４β−Ｓ−（４−（４−ピリジル）チアゾリル−２）−ポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ３０Ｈ２８Ｎ２Ｏ７Ｓ２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．６４（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），７．７２（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｓ，１Ｈ），６．９９（ｓ，１Ｈ），６．４８（ｓ，１Ｈ），６．３２（ｓ，２Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９５（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．５７（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．４８−４．０４（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），３．７６（ｓ，６Ｈ），３．４１−３．３１（ｍ，１Ｈ），３．２２（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．２Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．２４，１６４．７２，１５２．５９，１５２．３６，１５０．４７，１４８．４５，１４７．４９，１４０．４４，１３７．３２，１３５．２８，１３２．５６，１２７．００，１２０．２７，１１６．４１，１１０．１３，１１０．００，１０８．３８，１０１．６８，７０．６９，６０．７５，５６．３３，５０．６３，４３．６７，４２．４５，３７．２６，ＭＳ−ＥＳＩ：５９３．１３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７４】
実施例２８：４β−Ｓ−（４−（４−ピリジル）チアゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（化合物２８）の合成及び精製
（１）４β−Ｓ−（４−（４−ピリジル）チアゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成：４’−デメチルエピポドフィロトキシン４００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、４−（４−ピリジル）チアゾリル−２−メルカプタン１９４ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍＬを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４β−Ｓ−（４−（４−ピリジル）チアゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの分離及び精製：シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【００７５】
化合物２８：４β−Ｓ−（４−（４−ピリジル）チアゾリル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ２９Ｈ２６Ｎ２Ｏ７Ｓ２
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ８．６４（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），７．７２（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７１（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｓ，１Ｈ），６．９９（ｓ，１Ｈ），６．４８（ｓ，１Ｈ），６．３２（ｓ，２Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９５（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．７２（ｓ，１Ｈ），５．５７（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），４．６１（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．４７−４．０４（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｓ，６Ｈ），３．４２−３．３０（ｍ，１Ｈ），３．２１（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．１Ｈｚ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．３１，１６４．７６，１５２．４０，１５０．５０，１４８．４４，１４７．４４，１４６．５１，１４０．４２，１３４．３０，１３２．７８，１３０．６９，１２７．０２，１２０．２７，１１６．３３，１１０．０５，１０８．０６，１０１．６６，７０．６８，５６．５５，５０．６６，４３．５１，４２．５８，３７．１８．ＭＳ−ＥＳＩ：５７９．２４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７６】
試験例１：本発明の実施例で製造された化合物の腫瘍細胞阻害活性試験
一．試験材料：
１．被験化合物：実施例１〜実施例２８で製造された化合物を、それぞれ化合物１〜化合物２８と番号を割り当てた。
２．対照化合物：西安和霖生物工程有限公司から購入した純度９８％のポドフィロトキシン及び４’−デメチルエピポドフィロトキシン、エトポシド。
３．細胞株：武漢博士得生物科技有限公司から購入したＨｅｐＧ２、ＨｅＬａ細胞株及びヒト正常肝細胞ＨＬ−７７０２。
【００７７】
二．試験方法：
対数増殖期にあるＨｅｐＧ２、ＨｅＬａ細胞株及びヒト正常肝細胞ＨＬ−７７０２を１０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、上清を捨て、適量の培地に懸濁させ、細胞濃度を３．５×１０４個／ウェルに調整し、細胞を９６ウェルマイクロプレートに接種し、以下のとおりに試験群を設定した。
１つの陰性対照群、２８の濃度同一の試験群（即ち化合物１〜化合物２８群）、３つの対照群としてポドフィロトキシン群、４’−デメチルエピポドフィロトキシン群及びエトポシド群。
各ウェルに細胞０．１０ｍＬを加え、仔ウシ血清１０％含有ＲＰＭＩ１６４０を培養液として使用し、３７℃、５％ＣＯ２及び飽和湿度下で２４時間培養し、ほぼコンフルエント状態に達したら、培養液を捨て、２８の試験群にそれぞれ同一量の化合物１〜化合物２８を含む仔ウシ血清１０％含有ＲＰＭＩ１６４０培地０．１０Ｍを加え、ポドフィロトキシン群、４’−デメチルエピポドフィロトキシン群及びエトポシド群にそれぞれポドフィロトキシン、４’−デメチルエピポドフィロトキシンまたはエトポシドを含む仔ウシ血清１０％含有ＲＰＭＩ１６４０培地０．１０Ｍを加え、ポドフィロトキシン、４’−デメチルエピポドフィロトキシンまたはエトポシドの用量は、化合物１〜化合物２８の用量と同一であった。陰性対照群に最終濃度０．５％のＤＭＳＯを加えた。各群にいずれも３連ウェルを設置し、引き続き４８時間培養して各ウェルに５ｍｇ／ｍｌのＭＴＴ１０μＬを加え、３７Ｃで４時間静置した。各ウェルにＤＭＳＯ１００μｌを加え、３７℃で３０分間振盪し、４９２ｎｍにて吸光度（ＯＤ）を測定し、薬物群ＯＤ値／陰性対照群ＯＤ値によりＭＴＴ比を算出した。
【００７８】
三．試験結果：
試験結果を表１に示す。表１から分かるように、化合物１〜化合物２８は、ポドフィロトキシン、４’−デメチルエピポドフィロトキシン及び抗腫瘍薬物として市販されているポドフィロトキシン系誘導体エトポシドのいずれよりもＨｅｐＧ２、ＨｅＬａ及びＨＬ−７７０２細胞株に対する抗腫瘍活性が明らかに向上している。この中で、化合物８〜化合物１０のＨＬ−７７０２細胞株に対する毒性は、ポドフィロトキシン、４’−デメチルエピポドフィロトキシン及びエトポシドより明らかに低減している。
【００７９】
「表１」４−硫黄置換ポドフィロトキシン系誘導体のインビトロ腫瘍株及び正常細胞株に対するＩＣ５０値
2020534265.tif 000005
【００８０】
活性評価によって、２つの低毒性化合物として化合物８及び化合物１０が選択された。当該２つの化合物に正常細胞株としてヒト子宮頸部不死化細胞Ｈ８、ヒト胎児肺細胞ＭＲＣ−５、ヒト乳腺上皮細胞ＨＭＥＣ、対応する腫瘍細胞としてヒト肺癌細胞Ａ５４９、乳癌細胞ＭＣＦ７を加えることにより化合物の毒性及び活性についてさらに検討した。
【００８１】
表２から分かるように、化合物８及び化合物１０はエトポシドよりＡ５４９、ＭＣＦ７細胞株に対する抗腫瘍活性が明らかに向上しており、エトポシドより正常細胞株Ｈ８、ＭＲＣ−５及びＨＭＥＣに対する毒性が明らかに低減している。
【００８２】
「表２」化合物８及び化合物１０のインビトロ腫瘍株及び正常細胞株に対するＩＣ５０値
2020534265.tif 000006
【図１】
2020534265.tif 000010
【図２】
2020534265.tif 000011
【図３】
2020534265.tif 000012
【手続補正書】
【提出日】令和2年5月18日(2020.5.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
2020534265.tif 000013
式（Ｖ）
［式中、Ｒ１は、
2020534265.tif 000014
から選ばれ、
Ｒ２は、水素または−ＣＨ３である］
の化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項２】
求核置換反応により、反応性モノマーをポドフィロトキシンのＣ環４位に導入するかまたは４’−デメチルエピポドフィロトキシンのＣ環４位に導入するルステップを含み、前記反応性モノマーは、４−トリフルオロメチルピリジル−２−メルカプタン、４−トリフルオロメチル−２−メルカプトピリミジン、４−フルオロベンゼンチオール、５−フルオロベンゾチアゾリル−２−メルカプタン、５−フルオロベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−フェニルベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−メチルベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、６−クロロベンゾオキサゾリル−２−メルカプタン、５−ジフルオロメトキシベンゾイミダゾリル−２−メルカプタン、２−メルカプトナフタレン、１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジル−２−メルカプタン、１−フェニルテトラゾリル−５−メルカプタン、３−フェニル−１，３，４−チアジアゾリル−２（３Ｈ）チオンポタシオ−５−メルカプタンまたは４−（４−ピリジル）チアゾリル−２−メルカプタンであってもよいことを特徴とする請求項１に記載の化合物の製造方法。
【請求項３】
前記求核置換反応は、ポドフィロトキシンまたは４’−デメチルエピポドフィロトキシンを有機溶媒に溶解し、前記反応性モノマーを加えて攪拌するように行われ、前記有機溶媒は求核試薬であってもよく、前記求核試薬はトリフルオロ酢酸、メタンスルホニルクロリドまたはトリフルオロボラン・ジエチルエーテルから選ばれてもよいことを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項４】
ポドフィロトキシンまたは４’−デメチルエピポドフィロトキシンと前記反応性モノマーとのモル比は１：１〜１０、例えば１：１〜８、例えば１：１であることを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記求核置換反応の温度は−２０〜４０℃であり、例えば−２０〜２０℃であることを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記求核置換反応の温度は−１０〜１０℃であり、例えば０〜１０℃であることを特徴とする請求項５に記載の方法。
【請求項７】
求核置換反応後、反応液を脱イオン水に注入し、析出させて濾過し、濾過ケーキを乾燥させることにより４−硫黄置換ポドフィロトキシン系誘導体の粗生成物を得るステップをさらに含み、前記脱イオン水の体積は求核置換後の反応液の体積の２０〜５０倍であってもよいことを特徴とする請求項３に記載の方法。
【請求項８】
順にシリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して前記粗生成物を分離させることにより、精製された４−硫黄置換ポドフィロトキシン系誘導体生成物を得るステップをさらに含むことを特徴とする請求項７に記載の方法。
【請求項９】
抗腫瘍薬物を製造するための請求項１に記載の化合物またはその塩の使用。
【請求項１０】
有効量の請求項１に記載の化合物またはその塩と、薬学的に許容される担体とを含むことを特徴とする抗腫瘍医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００４】
本発明の上述した目的は、以下の技術的解決手段により達成される。
抗腫瘍活性を有する４−硫黄置換ポドフィロトキシン系誘導体またはその薬学的に許容される塩であって、前記ポドフィロトキシン系誘導体は、下記の式（Ｖ）に示す構造を有し、
2020534265.tif 000015
式（Ｖ）
ただし、Ｒ１は、
2020534265.tif 000016
から選ばれ、
Ｒ２は、水素または−ＣＨ３である。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２６】
実施例４：４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリミジニル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン（化合物４）の合成及び精製
（１）４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリミジニル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの合成：４’−デメチルエピポドフィロトキシン４００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、４−（トリフルオロメチル）−２−メルカプトピリミジン１８０ｍｇ（１ｍｍｏｌ）を真空下で１時間乾燥させ、氷浴においてトリフルオロ酢酸１５ｍｌを溶媒として、真空下で１〜３時間攪拌し、クロロホルム−アセトンを展開溶媒として使用して、反応終点を検出した。反応系を２０〜５０倍の体積の脱イオン水に加え、濾過して濾過ケーキを回収し、洗浄して乾燥させることにより粗生成物を得た。
（２）４−β−Ｓ−（４−トリフルオロメチルピリミジニル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシンの分離及び精製：
シリカゲルカラムクロマトグラフィー及びゲルカラムクロマトグラフィーを利用して、実施例１と同じ方法で、分離及び精製を行った。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５９】
化合物２０：４β−Ｓ−（ナフチル−２）−４’−デメチルエピポドフィロトキシン、白色の粉末、Ｃ３１Ｈ２６Ｏ７Ｓ
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．８２−７．７３（ｍ，４Ｈ），７．５８−７．３９（ｍ，３Ｈ），７．０３（ｓ，１Ｈ），６．４７（ｓ，１Ｈ），６．３２（ｓ，２Ｈ），５．９８（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，１Ｈ），５．９４（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，１Ｈ），５．４５（ｓ，１Ｈ），４．９６（ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，１Ｈ），４．５８（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．３３−４．１２（ｍ，２Ｈ），３．７７（ｓ，６Ｈ），３．４０（ｄｄ，Ｊ＝１３．７，５．２Ｈｚ，１Ｈ），３．３０−３．１７（ｍ，１Ｈ）．１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１７４．５７，１５２．７３，１４８．０４，１４７．２５，１４６．３９，１３４．０８，１３３．７０，１３３．３６，１３２．１５，１３２．１０，１３１．０６，１２９．１７，１２８．５３，１２７．８２，１２７．４６，１２７．１１，１２７．０４，１２６．３８，１１０．１２，１０９．９８，１０７．９９，１０１．５４，６９．５８，５６．４８，４９．６７，４３．５２，４２．１２，３７．９４．ＭＳ−ＥＳＩ：５９９．５２［Ｍ＋Ｋ］＋。
【手続補正５】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図２】
2020534265.tif 000017
【国際調査報告】
2020534265.tif 000018
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